PT98306B

PT98306B - Processo para a preparacao de de sais de 1r-cis, 1'r-cis atracurio com efeitos de bloqueamento neuromuscular

Info

Publication number: PT98306B
Application number: PT98306A
Authority: PT
Inventors: Derek Anthony Hill; George Lloyd Turner
Original assignee: Wellcome Found
Priority date: 1990-07-13
Filing date: 1991-07-12
Publication date: 1999-01-29
Also published as: PT98306A; MX9203220A; LV10432B; FI103507B1; HU211169A9; SA91120073B1; DK0539470T3; AU8190491A; DE69119768T2; BE1003407A3; SK279907B6; FI925894L; ITRM910518A1; MY113017A; AU1134695A; HU218766B; ES2083315A1; DE69119768D1; RU2104005C1; WO1992000965A1

Description

DA

PATENTE DE INVENÇÃO

N.° 98 306

REQUERENTE: WELLCOME EOUNDATION LIMITED, britânica com sede em Unicom House, 160 Euston Road, London NW1 2BP, Inglaterra

EPÍGRAFE: · PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO DE AGENTES DE BLOQUEAMEUTO NEUROMUSOULAR

INVENTORES: Derek Anthony Hill e George Lloyd Turner

Reivindicação do direito de prioridade ao abrigo do artigo 4.° da Convenção de Paris dc 20 dc Março de 1883.

Reino Unido, 13 de Julho de 1990, sob o R9 9015473.3.

INPI MOD 113 RF 16732 t

Descrição da patente de invenção de THE WED100ME POUUDATIOU LIMITED, britânica, industrial e oomeroial,com sede em Unicom House,160 Euston Road, Dondon W1 2BP, Inglaterra, (inventores: Derek Anthony Hill e George Lloyd Turner, residentes na Inglaterra), para

PROCESSO PAPA A PREPARAÇÃO DE SAIS DE 1R-0IS, 1’R-ÇISATRACURIO COM EFEITOS DE BLOQUEAMEUTO ÍJEUROMUS CUBAR»

Descrição

A presente invenção refere-se a um composto de isoquinolina útil como agente bloqueador neuromuscular.

Os agentes bloqueadores neuromusculares são muito utilizados em anestesia cirúrgica para relaxar os músculos do esqueleto e auxiliar o trabalho do cirurgião. Esses agentes são muito utilizados também em unidades de Tratamento Intensivo (UTI) dos hospitais para proporcionar uma relaxação dos músculos de longa duração em pacientes que tenham sido intubados para proporcionar uma ventilação controlada do paoiente.

besilato de atracdrio (isto é o dibesilato de 2,2’-(3,ll-dioxo-4,10-dioxatrideoileno)-bis-(1,2,3,4-tetrahidro-6,7-dimetoxi-2-metil-l~veratrilisoquinolínio) é um agente bloqueador neuromusoular não despolarisante que se tornou em primeiro lugar disponível para cirurgia humana no Reino Unido em Dezembro de 1982 e um ano depois nos Estados Unidos da Améríoa, 0 composto é descrito na Especificação de Patente Britânica N2 1579822 e na Especificação de Patente Norte-Americana N2 4179507. 0 medicamento é actualmente muito utilizado em cirurgia e terapia de -iSil, 0 medicamento foi concebido para sofrer apenas degradação espontânea por eliminação de ”Hofmann” a um valor de pH e temperatura fisiológica e por uma hidrólise de éster que se dá independentemente das funções hepática e renal, Para a utilização em cirurgia humana, é utilizado 0 besilato de atracdrio 00mo mistura de dez isómeros ópticos e geométricos. Em Eur, J. Med₀Ohem-Ghem. Thea. 1948-19, N^s. 5, páginas 441-450 são referidos os isómeros geométricos e ópticos do besilato de atracdrio.

Os agentes bloqueadores neuromusoulares como por exemplo o besilato de atraodrio actuam por bloqueamento do receptor para a acetiloolina na junção neuromuscular, Contudo, eles podem também bloquear a transmissão oolinérgica no sistema nervoso autónomo e produzir efeitos laterais cardiovasculares indesejáveis. Por exen pio, 0 bloqueamento parassimpático resulta no aparecimento de taquioárdia e hipertensão enquanto que 0 bloqueamento dos gahglios do simpático provocará a bradioárdia e hipotensão. Os agentes bloqueadores neuromusculares também tem a tendência para libertar histamina que pode produzir reacções anafilactóides com risco de vida em alguns pacientes. 0 grupo antigénico nos medicamentos relaxantes dos músculos esqueletieos é a estrutura de amónio quaternário ou terciário que também confere propriedades bloqueadoras neuromusculares a estes agentes. Neste aspecto 0 atraed2 rio é um libertado; fraoo de histamina e, tal como outros agentes bloqueadores neuromusculares, tem sido referido ooasionalment© como provocando reacções anafilaotóides atribuídas do medicamento.

Eoi agora descoberto que os sais de atracúrio em que o radical de atraoúrio tem uma configuração isomérica geométrica e óptiea particular tem uma combi nação especialmente vantajosa de propriedades farmacológicas que tornam esses sais de interesse excepeional como agentes bloqueadores neuromusculares.

Á configuração isomérica geométrica e éptioa particular para o radical de atracúrio acima referido é a configuração lR-ois, PR-cis. Os sais de atracú rio que possuem estes configurações podem ser designadas por sais de lR-eis, PR-ois, 2’,2'-(3,ll-dioxo-4,10-dioxatrideeileno)-bis-(1,2,3,4-tetrabidro-6,7-dimetoxi-2-metil-l-veratrilisoquinòlínio). Esses sais serão de agora em diante referidos oomo sais de lR-cis, PR-ois-atraoúrio

De aoordo oom uma das características da presente invenção é proporcionado um sal de lR-cis, PR-ois atraoúrio essencialmente isentos dos seus outros isómeros geométricos e éptieos.

Os sais de lR-ois, lR’-çis. atracúrio da invenção são essencialmente isentos de outros isómeros geométricos e ópticos no sentido de eles se encontrarem geralmente misturados com menos de 5$ em peso, de preferên cia menos de 2$ em peso desses outros isómeros, com base no peso total da mistura relevante. Em particular os sais de lR-ois, PR-ois acima mencionados de acordo oom a invenção contém vantajosamente (a) menos de 1% em peso dos correspondentes isómeros o_is, trans e/ou menos de 0,5/® em peso dos isómeros trans, trans e/ou (b) geralmente menos de 5% em peso, de preferência menos de 2% em peso dos isó- 3 meros S correspondentes.

Para administração humana, por exemplo para utilização cirúrgica ou médica, por exemplo em anestesia, os sais de lR-eis, llU-cis atraoúrio, de acordo com a invenção incluem um anião fisiologicamente aceitável, de preferência aniões que inoluem o halogeneto, por exemplo os aniões de cloreto, brometo ou iodeto, sulfato, fosfato, hidrogeno fosfato, acetato, propionato, suooinato, maleato e organossulfonato, por exemplo metanossulfonato (mesilato), benpenossulfonato (besilato),ρ-toluenossulfonato (tosilato) e naftalenossulfonato, sendo espeoialmente preferidos os aniões mesilato e besilato. Esses sais contêm um anião fisiologicamente aceitável serão de agora em diante referidos como sais de lR-ois, 1E¹-cis atraoúrio fisiologicamente aceitáveis.

Os sais de atraoúrio incluindo um anião não fisiologicamente aceitável podem ser utilizados na síntese de um sal fisiologicamente aceitável correspondente.

Em relação à combinação especialmente vantajosa das propriedades farmacológicas acima referidas, foi descoberto a partir de experiências aoima referidas, foi descoberto a partir de experiências em animais, que os sais de IB-cis, lR'-ois atraoúrio tem uma potência de bloqueamento neuromuseular significativamente maior do que o besilato dê atraoúrio sob a forma de uma mistura de isómeros, geométricos e óptioos embora tenham uma duração de acçâo semelhante .

Os sais de lE-eis, ΙΕ’-ois atraeúrio também apresentam efeitos potenciais adversos do sistema nervoso autónomo menos intensos incluindo o bloqueamento do simpático e o bloqueamento do parassimpatico, e oom menor probabilidade de produzir efeitos cardiovasculares

- 4 do tipo da histamina para dosagens terapêuticas, proporcionando assim uma maior segurança do paciente, em comparação com o besilato de atracúrio sob a forma de uma mistura de isómeros geométricos e óptioos.

Uma outra vantagem dos sais de lR-ois, 1‘R-çis atracúrio de acordo com a invenção é a de eles proporcionarem um bloqueamento neuromuscular mais eficaz com a formação de menores quantidades de produtos de degradação do que a mistura acima mencionada de isómeros de besilato de atracúrio. Esta vantagem é particularmente desejável para operaçães cirúrgicas mais longas e para a utilização em UTI envolvendo estas doses e/ou longos períodos de tratamento.

A presente invenção proporciona ainda:

a) sais de IR-cis, W-ois atracúrio fisiologioamente aceitável de acordo com a invenção para utilização em cirurgia ou terapia médica, por exemplo em anestesia, particularmente para induzir o bloqueamento neuromuscular num animal, por exemplo um mamífero como por exemplo o homem;

b) a utilização de sais de IR-cis, IR*-ois atracúrio fisiologioamente aceitáveis de acordo com a invenção para a preparação de uma composição farmacêutica para induzir o bloqueamento neuromuscular e

c) um processo para induzir o bloqueamento neuromuscular num animal, por exemplo um mamífero como por exemplo o homem que compreende a administração ao referido animal de uma quantidade eficaz para o bloqueamento neuromuscular de um sal de IR-cis,

IR*-ois atracúrio fisiologioamente aceitável de acordo oom a invenção.

- 5 Os sais de IR-cis, IR*-eis atracúrio fisiologicamente aceitáveis de acordo com a invenção são geralmente utilizados, em cirurgia ou em terapia médica, por exemplo em anestesia, por administração dos sais ao pacientê relevante, por exemplo o homem, por uma via adequada a uma dosagem adequada para oonseguir o nível pretendido de bloqueamento neuromuscular. Os sais são geralmente administrados por injecção pela via intravenosa ou intramuscular, ou, se necessário, por infusão intravenosa contínua. A dosagem precisa a que serão administrados os sais variará oom o grau de bloqueamento neuromuscular pretendido idade e oondição do paciente. Contudo, quando administrados .pela via intravenosa, os sais são geralmente utilizados numa dosagem de 0.1 a 0,6 mg/kg, de preferência de 0,2 a 0,4 mg/kg. Ro easo de administração por infusão, os sais são geralmente utilizados numa dosagem de 0,1 a 0,6 mg/kg/ /hora, de preferência 0,2 a 0,4 mg/kg/hora.

Os sais de lR-ois, llU-ois atracúrio de acordo com a invenção são geralmente utilizados em cirurgia ou t erapia médica sob a forma de uma eomposição farmaceutiea compreendido esse sal em associação com um veículo farmaceuticamente aceitável. Essas composições são de preferência adaptadas para administração por injecção ou infusão, por exemplo como uma solução, emulsão ou suspensão do sal num líquido aquoso ou não aquoso farmaceuticamente aceitável, por exemplo água esterilizada que pode também conter, se desejado, um ou mais outros excipientes adequados como por exemplo agentes bacteriostáticos, antioxidantes, tampões, agentes espessantes, ou agentes de suspensão. Essas composições líquidas contém geralmente o sal numa quantidade de 5 a 15, de preferência de 5 a 10 mg/ml. Alternativamente, os sais podem apresentar-se como sólidos liofilizados para reconstituição com água para injecção ou com dextrose ou com, soluções salinas. As composições de acordo com invenção são geralmente apresentadas em formas de unidades de dosagem tais como ampolas ou dispositivos

- 6 de injecção descartáveis ou em formas de multidose como por exemplo um frasco a partir do qual se pode retirar a dose adequada: todas essas composições devem ser esterilizadas, Bsas formas de unidade de dosagem contém geralmente de 10 a 250 mg, de preferência de 25 a 50 mg, de um sal de acordo com a invenção em solução ou oomo sólido liofilizado.

Os sais de IR-cis, IR*-eis atracúrio de acordo com a invenção podem ser preparados submetendo o sal de IR-cis, lR’-cis atracúrio correspondente a condições ou reagentes .que servem para efectuar o isolamento do isórnero IR-ois, PR-ois dos isómeros geométricos correspondentes contidos no referido sal de IR-cis, IR^cls atracúrio.

isolamento do sal de IR-ois, lR’-çis atracúrio desejado de acordo com o processo acima referido é vantajosamente efectuado por cromatografia, em particular cromatografia líquida de alto rendimento (ciar) embora possam também ser utilizados a cromatografia líquida em contra-corrente, cromatografia de coluna ou cromatografia de permuta iónica. 0 isolamento particularmente efioaz do sal desejado tem sido conseguido por olar utilizando uma coluna contendo sílioa ou alumina e uma fase móvel constituída por uma mistura adequada de solvente, por exemplo uma mistura de um hidrocarboneto clorado tal como o cloreto de metileno, ou o acetonitrilo; um álcool por exemplo um álcool alifático de cadeia pequena tal como o metanol, etanol ou propanol; e um ácido forte tal oomo o ácido benzenossulfónico, ácido metanossulfónieo, ácido p-toluenosulfónico ou áoido fosfórico. Verificou-se que uma mistura de cloreto de metileno: metanol: ácido metanossulfónieo, de preferência numa proporção de 80:20:0,5, era especialmente vantajosa, resultando na eluição do sal metanossulfonato (mesilato) da coluna. De forma semelhante para a eluição do sal metanossulfonato (mesilato) da ooluna. De for ma semelhante para a eluição do sal benzenossulfonato

- 7 (besilato) ê preferível uma mistura de solventes de cloreto de metileno: metanol: ácido benzenossulfónico (4000:500:0,25). A solução salina eluída pode ser posteriormente lavada para remover solventes tal oomo o metanol e qualquer ácido em excesso e depois isolado por evaporação do hidrocarboneto clorado, 0 sal pretendido pode ser obtido como sólido por liofilização de uma solução aquosa do sal ou por dissolução num solvente tal oomo o éter e em seguida precipitação por adição de um solvente não polar tal como o éter de petróleo ou o oiclohexano.

sal de IR-ois, W-ois atracúrio utilizado oomo matéria prima no processo acima referido pode ser preparado a partir de (R)-1,2,5,4-tetrahidropapaverina de forma convencional, por exemplo pelo processo desorito em Eur. J. Med. Ghem.-Ghim. Ther. 1984-19, N-.

5, páginas 441-450.

Os seguintes Exemplos ilustram a presen te invenção:

Exemplo 1

a) Siacrilato de 1,5-pentametileno

Eoi aquecido 1,5-pentanodiol (15,6 g) em tolueno sob refluxo (500 ml) com ácido 5-bromo propiónioo (50,5 g) e um traço de ácido p-toluenosulfónieo durante 4 horas. A solução arrefecida de tolueno foi em seguida lavada com solução aquosa de acetato de sódio e tratada oom trietilamina (50 ml) sob refluxo. A mistura reaoeional arrefecida foi bem lavada oom agua para remover a trietilamina e o bromidrato de trietilamina e em seguida foi removido o tolueno a pressão reduzida,

Eoi obtido o produto, diacrilato de 1,5-pentametileno (24,0 g, rendimento de 75%) sob

- 8 a forma de um líquido olaro por destilação em alto vazio (p.b. 9O-95°C, 13 Pa).

b) (R)-Tetrahidropapaverina

Foi dissolvido o (+) cloridrato de tetrahidro papaverina (105 g) em água e a solução foi tornada alcalina com uma solução aquosa diluída de amoníaoo, A base de (^)-tetrahidropapaverina precipitada foi dissolvida em tolueno e em seguida o solvente separado foi evaporado para se obter a base sob a forma de um óleo amarelo pálido, 0 ólio foi dissolvido em metanol (1575 ml) e tratado oom R-aoetil-L-leucina (47,5 g). A solução foi tratada com éter dietílico (274 ml) e o U-acetil-I-leucinato de (S)-tetrahidropapaverina (35,5 g) cristalizou gradualmente. Após os cristais terem sido filtrados as águas mães foram evaporadas a pequeno volume para produzir um sólido (100 g), que foi em seguida reoristalizado de acetona ebuliente (50 volumes). Após arrefecimento ocorreu a cristalização (74 g, 83$ de (R)-diastereoisómero, 17$ de (S)-diastereoisómero) que foram separados por filtração. 0 sólido foi reoristalizado mais uma vez de acetona ebuliente (50 volumes) para se obterem 58,7 g de N-acetil-L-leucinato de (R)-tetrahidropapaverina (97$ de (R)-isómero, 3$ do (S)-isómero).

o) Dioxalato de (1Ε,1^<Ε)-2,2'-(3,11-ϋοχο-4,10-ό-ίοχΒtrideoametileno)-bis-(1,2,3.4-tetrah.idro-6,7-dimetoxi-l-veratrilisoquinolina)

Foi dissolvido o R-acetil-leucinato de (R)-l, 2,3,4-tetrah.idropapaverina (58,7 g) em água e tratado oom amoníaoo aquoso. A base precipitada foi extraída em tolueno (600 ml), e, após o solvente ter sido evaporado, ele foi obtida como um óleo (39,0 g). Foi aquecida a base de (R)-l,2,3,4-tetrahidropapaverina oom diacrilato de 1,5-pentametileno

- 9 e áoido acético glacial (3,0 tal) a 70°0 durante 4 horas. A mistura reaccional foi dissolvida em tolueno (400 ml) e agitada com um gel de sílica 60 (Merk, de qualidade para cromatografia de coluna, 70-230 malhas), filtrada e evaporada para se obter um óleo amarelo. 0 produto foi dissolvido em acetona (600 ml), tratado com ácido oxálico (9,3 g) e 0 sal de dioxalato de (lR,l*R)-2,2’-(3,ll-dioxo, 4,10-dioxatridecametileno)-bis-(1,2,3,4-tetrahidro-6,7-dimetoxi-l-veratrilisoquinolina) precipitsu sob a forma de um sólido branco (54,2 g, rendimento de 99$)₅ p.f. 125°0, c.l.a.r. (cromatografia líquida de alto rendimento)-97,8^.

d) (IR,1¹R)-2,2¹-(3,ll-Dioxo-4,10-dioxatridecametileno)

-bis-(l,2,3,4-tetrahidro-6,7-dimetoxi-2-metil-l-veratrilisoquinolinio)benzenossulfonato ((1R,1'R) besilato de atraoúrio

dioxalato de (lR,l’R)-2,2’-(3,ll-dioxo-4,10-dioxatridecametileno )-bis-(1,2,3,4-tetrahidro-6,7-dimetoxi-l-veratrilisoquinolina) (54,0 g) foi dissolvido em água (1,6 litros) e tratou-se com carbonato de sódio para levar 0 valor do pH a 7,0. A base precipitada foi extraída em tolueno (600 ml) e o sol vente foi em seguida evaporado para se obter um óleo amarelo viscoso (42,7 g). 0 óleo foi tratado com benzenossulfonato de metilo (75 ml) à temperatura ambiente durante a noite. Foi isolado 0 produto (IR,l’R)-2,2’-(3,ll-dioxo-4,10-dioxatridecametileno) -bis-(1,2,3,4-tetrahidro-6,7-dimetoxi~2-metil-l-veratrilisoquinolinio)benzenosulfonato por repartição entre água e tolueno. A fase aquosa foi ainda lavada com duas alíquotas de tolueno e em seguida foi submetida a liofilização, 0 produto (49»7 g» rendimento de 80$) foi obtido sob a forma de um sólido amarelo pálido.

0 produto é uma mistura dos isómeros de (1R,1’R) besilato de atraoúrio, nomeadamente IR-cis, 1'R-ois

IR-cis, PR-trans e lR-trans, PR-trans numa proporção de 58;34;6 respectivamente.

e) lR-ois, PR-ois-2,2*-(3 , ll-I)ioxo-4,10-dioxatrideoametileno)-bis-(l, 2,3,4-tetrahidro-6 ,7-dimetoxi-2-metll-l-veratrilisoquinolinio)-metanossulfonato ((lR-ois, PR-ois-mesilato de atraoúrio) i

Foi dissolvido uma mistura de isómeros de (1R,PR) besilato de atraoúrio (10 g) obtida na fase d) em diclorometano (50 ml) e foi enviada por bombagem para uma ooluna de cromatografia axialmente comprimida de 500 mm x 50 mm contendo 520 g de silioa irregular com 20 a 45 micrometros, e a coluna foi eluída oom uma mistura de diclorometano, metanol e doido metanossulfónico (80:20:0,5)· As fraoçbes do eluído da ooluna foram recolhidas, e as fracçSes contendo o isómero IR-cis, PR-ois pretendido foram oombinadas e lavadas com uma solução salina a . 10$. A solução de diclorometano foi evaporada à secura, o óleo residual incolor foi dissolvido em água e o pH da solução foi ajustado a 4,0 com ácido metanossulfónico. A fase aquosa foi liofilizada para se obter o oomposto do título (5 g) sob a forme de um sólido branco que foi identificado oomo sendo essencialmente isento de outros isómeros geométri cos e ópticos do composto, nomeaâamente uma mistura com menos de 5$ em peso desse isómeros, particularmente menos do que 3$ etn peso do isómero correspondente lR-ois, PS-trans e menos do que 0,3$ em peso do isómero correspondente IR-cis, PR-trans.

- 11 Exemplo 2

IR-ois, IR*-ois-2,2¹-(5,ll-Dioxo-4,10-dioxatridecileno)-bis-(l,2,5,4-tetrahidro-6,7-dimetoxi-2-metil-l-veratriliBoq.ulnolínio)benzenossulfonato ((1R,1'R) besilato âe atracúrio

Foram repetidas as fases a), b), o) e

a) ao Exemplo 1. 0 produto obtiao na fase d) foi isolaao aa forma aesorita ou foi oromatografaao aa forma a seguir aesorita.

Foi dissolvida uma mistura aos isómeros ae (lR,l’R)-besilato ae atracúrio (1,5 g aos isómeros isolados na fase a) ou 5,5 g da mistura reacoional obtida na fase d)) em diclorometano (10 ml) e foi enviada por bombagem para uma eoluna de cromatografia axialmente comprimida com 500 mm x 25 mm contendo 80 g de silioa esférica com 10 miorometros, e a coluna foi eluída oom uma mistura de metanol e áeido benzenossulfónieo 4000:500:0,25. As fraoções do eluído da coluna foram recolhidas, e as fracções contendo os isómeros lR-ois, 1'R-ois foram combinadas e lavadas com uma solução salina a 10% ou água. A solução de diclorometano foi evaporada à secura, e o óleo ou semi-sólido residual incolor foi dissolvido em água e o pH da solução foi ajustada a cerca de 4,0 com uma solução aquosa de áoido benzenossulfónioo. A solução aquosa foi liofilizada para se obter o oomposto do título (0,5 g) oomo um sólido branoo que foi identificado como sendo essenoialmente isento de outros isómeros geométricos e ópticos do composto estando nomeadamente em mistura oom menos de 5% em peso destes isómeros, particularmente menos de 5% em peso do isómero IR-cis, 1'R-trans correspondente a menos do que 0,5% em peso do isómero IR-cis, 1’trans correspondente.

produto foi analisado por H RMN (CLCLp e deu os valores seguintes:

£ l,52(m, 70H₂-trideca), 1.63(m,60H₂-trÍGLeca, 8CH₂-trideca), 2,84(m, l/2-4OH₂,1/2-0¾-ver atril), 3.15(m,1/2-4CH₂, 3,22(s,N0H₅), 3,26(m,20H₂-trideca, 120H₂-trideca), ,34(8,00¾), 3,47(m, l/2-30H₂, 1/2-0¾-veratril),

3,58(s, 00H₅), 3,73(2s,00H₅,00H₅), 3,84(^,1/2,30¾), 3,95-4,24(fii,5CH₂-trideoa, 9CH₂-trideca, 10H₂-trideca, 130H₂-trideca) 4.86(dd,J=3,8Hz, 1H), 5,87(s, 8H), 6.36(dd, J= =8,2Hz, 6H-veratril), 6.42(d, J=2Hz, 2H-veratril),

6,48(s, 5H), 6,59(d, J=8Hz, 5H-veratril), 7.24(m, meta & para besilato), 7.78(m, orto, besilato).

Os seguintes exemplos ilustram oomposiçdes farmaoeutioas de aoordo oom a invenção em que o ingrediente activo é o sal de lR-ois, 1'R-oís besilato de atracúrio de acordo com a invenção.

Exemplo 3

Dosesunitárias da solução de injecção

Ingrediente activo 50 mg ácido benzenosulfónioo q.b. para pH 3 a 4

Água para injecções para perfazer 5 ml ingrediente activo é dissolvido na água para injecçães e o pH da solução resultante é ajustado da forma necessária oom o ácido, A solução é esterilizada por filtração e introduzida em ampolas de 5 ml esterilizadas.

Exemplo 4

Solução de injecção de multidose

Ingrediente activo		100	mg
Acido benzenossulfónico	q.b.para pH	3 a	4
Álcool benzílioo		90	mg
Água para injecções	para perfazer	10	ml
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ingrediente activo e o álcool benzílioo são dissolvidos na água para injeoçães e o pH da solução resultante é ajustado da forma necessária oom o ácido, A solução é esterilizada por filtração e introduzida em ampolas de 10 ml esterilizadas.

Exemplo 5

Solução de injecção liofilizada

Ingrediente aotivo 50 mg

Áoido benzenossulfónioo q.b. para pH 5 a 4 Manitol 62,5 mg

Água para injeoçães para perfazer 2,5 ml ingrediente aotivo.e o manitol são dissolvidos em água para injeoções e o pH da solução resultante é ajustado da forma necessária com o áoido metanossulfónioo, A solução é esterilizada por filtração e introduzida em frasoos esterilizados e liofilizada.

Avaliação Farmaoeutioa

Foa avaliado da forma a seguir descrita o lR-ois, VR-ois mesilato de atracúrio (identificado a seguir oomo Composto A) em comparação oom a mistura conven oional de isómeros geométricos e óptioos (identificados a seguir como besilato de atraoúrio) para determinar a potência bloqueadora neuromuscular e o efeito no bloqueamento simpático e do parassimpatioo.

a) Processo e materiais

Foram anestesiados gatos maohos Mongrel (Southeastern Laboratories Animal Farm), pesando

2,2-4,25 kg, oom uma mistura de pentobarbital de sódio, mg/kg i.p. e alfa-olorarose 80 mg/kg i.p., Foram mantidos — 14 os níveis adequados de anestesia oom doses suplementares de alfa-clorolose administrada intravenosamente da forma necessária. A traqueia foi oanulada e os animais foram ventilados oom 20 ml/kg de ar ambiente através de uma bomba de respiração do tipo dispositivo de Harvard ajustada para debitar 20 pulsaçães/mifiuto. Poi medida a tensão arterial por meio de uma cânula na artéria femural direita ligada a uma sonda de Statham P23. Poi determinado o ritmo cardíaco utilizando um BOG (eleotrooardiograma) oom um taco grafo de Grass. Poi exposto.o nervo simpático cervical direito, cortou-se aproximadamente 5 om próximo do gânglio cervical superior e oolooou-se num eleotrodo de platina bipolar protegido. 0 vagus direito foi exposto, cortado aproximadamente 2 om distai em relação aos gânglios nodosos e oolooado num eléctrodo de platina bipolar protegido. 0 nervo simpático cervical e o vagus foram estimulados durante 10 segundos em cada 5 minutos oom estimulador de Grass S88 utilizando os seguintes parâmetros: 20 Hz, 0,5 mseg de duração, e voltagem supramáxima (10-15 volt). As oonoentraçães isométrioas da membrana nictitante foram registadas durante uma tensão de repouso de 5 gramas oom uma sonda de deslocamento da força PT.03 e um registador de Grass. A tensão de repouso na membrana niotioante era de 5 gramas.

membro esquerdo foi rigidamente seguro de força de Grasse PT_;. 03. Após se ter seccionado o tronco do nervo ciático, foi colocado o nervo do perónio num eléotrodo bipolar de platina protegido. Poram aplicados estímulos oom a duração de 0,2 mseg e a,uma tensão supramáxima ao nervo ao ritmo de 0,15 Hz utilizando um estimulador de Grass S88. A tensão de oontraoção museular na tíbia anterior foi registada durante uma tensão de repouso 50 gramas.

Os compostos de ensaio foram dissolvidos numa solução salina tamponada a pH de 3,0 e em seguida

- 15 foram mantidos em gelo e administrados através de uma oânu la na veia femural direita. Foi monitorada a temperatura do esófago oom uma sonda termistor de Yellow Springs e a temperatura interior foi mantida entre 37 e 38°G com calor radiante, Todos os registos foram feitos num registador Grass Modelo 7. No final das experiênoias, foram submetidos os gatos a eutanásia com a administração intravenosa de

KOI saturada ou pentobarbital de sódio.

b) Resultados obtidos

valor de para a potênoia de bloqueamento neuromusoular foi calculado a partir de curvas de dose-resposta.

Os valores de ED^q e EDg^ para o efeito inibidor dos compostos na estimulação respectiva dos nervos parassimpátioo (vagus) e simpático foram calculados de forma semelhante.

Os resultados obtidos são resumidos na

seguinte	Tabela.
TABELA
Composto	GALO.*
	^BD95
	(mg/kg)

Proporção de 50$ de inibição do vagus vs. ED₉₅

Proporção de 25$ de inibição do simpático vs. ^ED95

Besilato de 0,092+ 0,010 17 atracúrio

Composto A 0,062+ 0,008 27 &EDgcj calculado em mg/kg oomo base livre, do catião de atracúrio.

com base no peso

Claims

- 1& Processo para a preparação de um sal de lR-ois, 1 ’-ois atraoúrio essencialmente isento de outros seus isómeros geométricos e óptioos, caracterizado por se submeter um sal de 1R,1R' atraoúrio correspondente a condições ou reagentes que sirvam para efectuar o isolamento do isómero de LR-ois, 1’R-cis dos isómeros geométricos correspondentes contidos no referido sal de 1R,1R’ atraoúrio.

- 2a Processo de acordo com a reivindicação 1 caracterizado por se obter um sal de lR-cis, 1'R-ois atraoúrio que se encontra misturado com menos de 5$ em peso de outros seus isómeros geométricos e óptioos.

Processo de acordo com a reivindicação 2 caracterizado por se obter um sal de lR-cis, 1’R-cis atraeúrio que se encontra misturado com menos de 2$ em peso de outros seus isómeros geométricos e ópticos.

- 4& Processo de acordo oom qualquer das reivindicações anteriores caracterizado por se obter um sal delR-ois, 1’R-cis atraeúrio fisiologicamente aceitável.

- 17 _ 5a _

Processo de acordo com a reivindicação 4 caracterizado por se obter 0 sal de mesilato ou besilato de lR-cis, 1'R-ois atracúrio.

- 6ã -

Processo de acordo com a reivindicação 5 caracterizado por 0 isolamento do isómero lR-cis, PR-ois ser efectuado por cromatografia líquida de alto rendimento.

A requerente reivindica a prioridade do pedido de patente no Reino Unido apresentado em 15 de Julho de 1990, sob 0 R2 9015473.5.

Lisboa, 12 de Julho de 1991

0EMUL M ggQPglElDAB® OBSTEM

RESUMO

PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO PE SAIS PE 1R-OIS, 1'R-ÇIS-ANTRAOURIO OOM EFEITOS PE BLOQUEAMENTO NEUROMUSOULAR

A invenção refere-se a um processo para a preparação de um sal de lR-ois, PR-ois atraodrio essencialmente isento de outros seus isómeros geométricos e ópticos, que compreende submeter-se um sal de IR, IR’ atraodrio correspondente a condições ou reagentes que sirvam para efectuar o isolamento do isómero lR-ois, PR-cis dos isómeros geométricos correspondentes contidos no referido sal de IR, IR* atracdrio.