PT93085A - Processo para a preparacao de 2,3,23-tri-hidroxi-12-urseno, dos seus derivados e de composicoes farmaceuticas que os contem - Google Patents

Description

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Descrição da patente de invenção de H0ECHS5! AKTIENGESEL-ISCHAPíD, alemã, industrial e comercial, com sede em D-6230 Prankfurt am Main 80, República Pederal Alemã, (inventoresi Dr. Roei John de Souza, Virba-la Shah, Dr. Premanand Dur-garao Desai, Dr. Prabhaker Krishnaji Inamdar, Dr. Adolf D’Sa, Dr. ladhakrishna Amma-namanchi, Dr, Alihussein Eomanbhai Dohadwalla, Dr.

Aftab Dawoodbhai Lakdawala, Sadashiv Shantaram Mandrekar e Dr. Jurgen Blumbach), residentes na Índia, para «PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO DE 2,3« 23-5)RI-HIDROXI-12-URSEEO. DOS SEUS DERIVADOS E DE COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS QUE OS COMEM"

Descrição A presente invenção refere-se a 2,3,23--tri-hidroxi-12-urseno e aos seus derivados, processos para a sua preparação e o seu uso para o tratamento de pertur-baçSes do conhecimento, doenças vasculares cerebrais e doen- 1 ças do sistema nervoso central.

De entre as perturbações humanas do conheoimento mais importantes estão o atraso mental, as incapacidades de aprendizagem ou as demências (demência degenerativa primária DDP ou doença de Alzheimer), conservação da memória moderada ou mínima(esquecimento senil benigno) ou demência de infarto múltiplo (DIM). Ião foram identificadas claramente ainda quaisquer produtos farma-ticos que séjam eficazes no tratamento ou na prevenção dessas perturbações.

Oonhecem-se vários tipos de compostos que tem efeitos de aetivação do conhecimento em modelos animais para perturbações do conhecimento. Entre os mais conhecidos estão os agentes nootrópicos que são principal-mente derivados da pirrolidona tais Gomo o piracetam e compostos azotados que actuam no sistema colinérgico para atenuar a deficiência colinárgica na demência, nomeadamen-te agentes misearínicos ou nieotínicos, inibidores da co-lenesterase, agentes de libertação colinórgieos. /“Ref. E. M. Hersheusom, J. C. Mancott e ¥. H. Hoss, Ann. Rep.

Med. Chem. 21, 31 (1966)J.

Yerificou-se agora que a administração de compostos pertencentes à série do 2,3,23-tri--hidroxi-12-urseno tem como resultado uma melhoria na função de conhecimentos debilitada em mamíferos e deste modo estes compostos são substâncias úteis para a prevenção e para 0 tratamento de perturbações do conhecimento. Os compostos da presente invenção também apresentam uma acção de inibição da permeabilidade capilar e de antagonismo da serotonina, propriedades que são úteis nas doenças vasculares cerebrais e em geral nas doenças do sistema nervoso central. Enquanto alguns do compostos da presente invenção são conhecidos e são usados como agentes eicatrizantes de feridas, a sua utilidade no tratamento de perturbação descri - 2 -

tas atrás, nomeadamente perturbaçães do conhecimento, doen ças vasculares cerebrais e doenças do sistema nervoso central, não é conhecida até agora.

A presente invenção diz respeito a deriva-· dos de 2,3,23-tri-hidroxi-12-urseno da fórmula I

t I

(D em que

Rj_, B-2 e Rj que podem ser iguais ou diferentes representam hidrogénio, alquilo, aralquilo, acilo, aminoacilo substituído ou mono- ou poliglieosilo, R4 representa hidrogénio, hidroxilo, alcoxi, aralcoxi, aciloxi ou um grupo éter mono- ou poliglicosiloxi, * b' simboliza uma ligação adicional opcional entre os átomos de carbono 05 e 06$ R^ pode também representar um grupo oxo quando 'b· não simboliza uma ligação adicional entre 05 e 06, R^ representa um grupo COORg, em que Rg representa hidrogénio, alquilo, alquilo substituído ou mono- ou poliglieosilo, ou 0 grupo: 0H20Ry em que R^ representa hidrogénio, alquilo, alquilo substituído, acilo ou mono- ou poliglieosilo, - 3 - (\ ou ο grupo CONRgRçj, em que RQ e R^, quando estes grupos são iguais, representam hidrogénio, alquilo ou alquilo substituído; quando Rg representa hidrogénio, R^ representa alquilo, alquilo ou arilo substituídos; quando Rg e R^ em conjunto com o átomo de azoto ao qual estes grupos se encontram ligados formam uBKheterocíclico, que pode eonter mais do que um heteroátomo e é opcionalmente substituído numa ou mais posiçães por grupos tal como, alquilo, hidroxilo, alcoxi, arilo ou um outro grupo heterooíolioo e ’ a' simboliza uma ligação adicional opcional entre os átomos de carbono C12 e 013, com a excepção daqueles compostos em que ao mesmo tempo Rp Rg e R^ são B ou Ep Rg e R^ são aoetilo, R^ é H ou OH e Rcj é 000H ou OOOOH^ ou em que ao mesmo tempo R^ e R^ são aoetilo, Rg é H ou R-^ é acetilo e Rg e R^ são H, R^ é H e Rçj é GOOH ou COOOH^ ou em que simultaneamente R^, Rg e R^ são H, E| é H ou OH e Rpj é um resíduo de 0-6-desoxi- Gs--L-manopirasonil-(l- ^ 4)-0- G -D-glucopiranosil-(l- )> 6)·· - Q -D-gluoopiranosil-oxicarbonilo ou em que ao mesmo tem- po R^, Rg e R^ são H, Rg é CH^ e R^ é 3 * C00CH,

Para além disso, a presente invenção diz respeito a 2,3,23-tri-hidroxi-12-urseno e aos seus derivados da fórmula 1' - 4 -

em que R-p R2 e 4ue P^dem «r iguais ou diferentes representam hidrogénio, alquilo, aralquilo, acilo, aminoacilo subs-tituido ou mono- ou poliglioosilo, R^ representa hidrogénio, hidroxilo, alooxi, aralooxi, aciloxi ou um grupo éter mono- ou poli-glicosiloxi, 'b' simboliza uma ligação adicional opcional entre os átomos de carbono 5 e 65 R^ também pode representar um grupo oxo quando 'b1 não simboliza uma ligação adicional entre 05 e 06.

Rpj representa 0 grupo: GOORg, em que Rg representa hidrogénio, alquilo, alquilo substituido ou mono- ou poliglioosilo, ou 0 grupo

Cl^OR^ em que ϋη representa hidrogénio, alquilo, alquilo substituido, acilo ou mono- ou poliglicosilo, ou 0 grupo CORRgRg em que Rg e Rg, quando estes grupos são iguais, representam hidrogénio, alquilo ou alquilo substituido; quando Rg representa hidrogénio, Rg representa alquilo, alquilo substituido ou arilo; quando Rg e Rg em conjunto com 0 átomo de azoto ao qual estão ligados formam um heterocí-clico, que pode conter mais que um heteroátomo e é opcional-

I

mente substituído numa ou duas posiçães por grupos tal como alquilo, hidroxilo, alcoxi, arilo ou outro grupo heterocí-clioo e 'a' representa uma ligação adicional opcional entre os átomos de carbono C12 e 013., para o tratamento ou para a profilaxia das perturbaçSes do conhecimento, doenças vasculares cerebrais e doenças do sistema nervoso central.

Quando os compostos da fórmula I ou da fórmula 1' são capazes de formar sais, a presente invenção também inclui todos esses seus sais farmacêuticamente aceitáveis. 0 termo alquilo refere-se a radicais de bldrocarbonetos saturados lineares ou ramificados que tem de 1 a 8 átomos de carbono, tais como por exemplo me-tilo, etilo, propilo, 2-metilpropilo, 1-pentilo, 3-hexilo ou 2-octilo e semelhantes. Os grupos alquilo preferidos tem de 1 a 6 átomos de carbono, especialmente de 1 a 4 átomos de carbono.

Exemplos adequados de grupos alquilo substituídos são grupos hidroxialquilo, tais como propileno--glicol.

Um grupo aralquilo adequado pode ser um grupo fenilalquilo, de preferencia fenil-alquilo-C^-C^ por exemplo um grupo benzilo em que o grupo fenilo possui um ou vários substituintes seleecionados de entre halogénid, alquilo-C^-C^, alcoxi-C-^-C^, hidroxilo, nitro, amino ou trifluorometilo.

Um grnpo arilo adequado pode ser um grupo fenilo que pode possuir um ou vários substituintes tais como halogéneo, alquilo-C-^-C^, alcoxi-0-^-0^, hidro-xilo, nitro, amino ou trifluorometilo.

Um grupo acilo adequado pode ser um grupo alcanoilo-Gj_-Cg, aleenoílo-Cg-Cg, alcinoílo-C^-Cg, - 6 - ,ί-· aroílo, aralcanoílo, heteroalcanoilo ou um grupo hetero-aroílo que tem um máximo de 10 átomos de carbono, sendo possível que um ou vários átomos de carbono sejam substi-tuidos por oxigénio, azoto e/ou enxofre.

Um grupo acilo adequado pode ser um grupo cloroacilaminoacilo ou acilo heteroeíclico tal como piperidinoacilo, morfolinoacilo, imidazoliniacilo, etc.,

Exemplos de grupos alcanoílo são formilo, aoetilo, propionilo, butirilo, isobutirilo, valerilo, palmitilo e bromoisobutirilo.

Os grupos alcenoílo podem conter uma ou mais ligações duplas podendo ser por exemplo um grupo acri-loílo, estearilo ou oleoílo. Os grupos alcinoílo /“?podes também conter uma ou mais ligações triplas bem como uma ou mais ligações duplas. Um exemplo de grupo alcinoílo deste tipo é o grupo propargilo.

Um representante de grupos aroílo é o grupo benzoílo no qual o grupo fenilo é substituido uma ou várias vezes por substituintes tal como alquilo-C^-C^, alcoxi-Gj-C^, Mdroxilo, balogénio, nitro, amino ou trifluo-rometilo.

Exemplos de grupos aralcanoílo e hetero-aroílo são fenilacetilo e piridina-3-carbonilo.

Exemplos de grupos heteroalcanoilo são 2-pirrolidona-5-alcanoílos representados pela férmula Á em que η - 1 a 3 e 2-azetidinona-4-aloanoilos representados pela fórmula B em que η = 1 a 3. - 7 - J ο' ο

2'η

(οη2)^ ^ ^ Η η 0 m (CHo)

Fórmula A

Fórmula B

Exemplos de monoglioosilo são glu- oosilo ou ramnosilo.

Exemplos de grupos poliglicosilo são -glucosil-ramnosilo ou -gluoosil-ramnosil-gluoosilo.

Exemplos de heterooíolos são piperidi-na, morfolina, piperazina, pirrolidina, tiomorfolina, oada uma das quais pode opcionalmente conter substituintes em uma ou várias posiçães oonstituidos por alquil-C^-C^, βίο oxi-C^-0^, arilo e aril-alquilo-C^-C^, hidroxilo, amino ou alquilo-C-j_-C^ substituido.

Exemplos adequados de sais de compostos de aoordo oom a presente invenção oom ácidos inorgânicos ou orgânicos são cloridratos, bromidratos, sulfatos, fosfatos, acetatos, oxalatos, tartaratos, citratos, malea-tos ou fumaratos quando o oomposto tem um grupo básico, ou sais tais como sais de sódio ou potássio quando o composto tem um grupo áoido.

Especificamente, a presente invenção diz respeito a compostos da fórmula II - 8 -

em que R^ a R^ representam H, aloanoilo-O^-Gg, 2-ceto-pirrolidi-nil-5-alcanoilo ou 2-ceto-azetidinoílo-aleanoílo, R^ representa hidrogénio ou hidroxi e

Rg representa H, gluoosilo, diglucosilo, ramnosilo ou um grupo -glueosil-glucosil-ramnosilo para o tratamento ou para a profilaxia de perturbaçSes do oonheimento, doenças vasculares cerebrais e doenças do sistema nervoso central.

Mais espeeificamente, a presente invenção diz respeito aos compostos asiaticosido (III), madecas-soido (IV), ácido asiático (V) e ácido madeeássido (VI) e aos seus derivados que sejam abrangidos pelo âmbito das fórmulas I e 1' da presente invenção para o tratamento ou para a profilaxia das perturbaçães do conhecimento, doenças vasculares cerebrais e doenças do sistema nervoso central. - 9 -

III - 71

Asianticosido III, R^

H

Aeido Asiático V, R^ =

H

E6 = H

Rg = -glu-glu-ram

Madecassosido IV,

R^ = OH Áoido Madecássico VI,R^ = OH

Rg = -glu-glu-ram Rg = H

0 substituinte Rg nos compostos das fórmulas III e IV ê de preferência um substituinte da fórmula C

(0) (um resíduo de 0-6-desoxi- GL/-L-manopiranosilo-(l- ^ 4)--0-3 -D-glueopiranosilo-(l- > 6)- 3 -D-glucopiranosilo) - 10 -

A presente invenção também se refere a processos para isolar os compostos a partir das suas origens tais como plantas ou caldos de fermentação microbianos e a processos para sintetizar os compostos.

Os compostos da fórmula I da presente invenção em que R·^ a R^ representam H, R^ representa H ou OH e Rcj representa COORg em que Rg representa H ou trigli-cosidos são conhecidos como sendo constituintes de plantas tais como Stemonoporus oblongifolius, Vateria indica, Dipterocarpus zeylanicus, Dipterocarpus pilosus, Doona congestiflora, Doona miorophylla, Rhododendron japanieum e Oentella asiatioa. Estes compostos são obtidos por extrac-ção destas plantas e purificação dos seus extractos de acordo com os processos descritos na literatura, /"por exemplo, Bíyto-Ohem. 8,917-21 (1969), Boll. Chim. Earm 120 570-605 (1981)^7 ouppor modificaçães destes processos.

Os compostos da fórmula I, em que R·^ a R^ representam H, R^ representa H, ou OH e R^ representa GOOH /_VII_7 são em alternativa preparados por saponifica-ção dos ésteres correspondentes da fórmula VIII, seguindo processos conhecidos descritos na literatura.

‘OOORg

R^*. H, OH VIII

Rg a alquil0,mono-ou , poliglicosilo “ 1

VII

COOH

R4 = H, OH

Os compostos da fórmula I em que R^ a R^ representam acilo, R^ representa H e Rg representa H ou mono- ou poliglioosido são preparados de preferência por acilação de compostos da fórmula VIII em que R^ = H e Rg = mono ou poliglioisido seguindo processos normais de acilação descritos em Reagents for Organic Synthesis por Rieser & Rieser, John Wiley, Hew York,

Os compostos da fórmula I em que R^ a Rj representam H, R^ representa H ou OH, R^ representa COORg e Rg representa mono- ou poliglicosidos são preparados de preferência por glioosidação de compostos da fórmula II, em que R^ a R^ representam grupos de protecção hidroxilo normais tais como acilo, benzilo etc., R^ representa H ou um grupo hidroxilo protegido e Rg representa H por tratamento com halo-açúcares adequados seguindo os processos descritos na literatura /“Ref. H. Paulsen Angew. Chem Int. Ed. Engl., 21, 155 (1982) e R. R. Schmidt, Angew Chem. Int. Ed. Engl., 25, 212 (1986)^7 e em particular na presença de carbonato de prata e de um hidrocarhoneto aromático tal como benzeno, tolueno como solventes e removendo a protecção dos grupos hidroxilo protegidos. - 12 -

Dum modo semelhante, os compostos da fórmula I em que R^ a R^ representam H e R^ representa H ou OH, R^ representa OOORg e Rg representa alquilo são preparados de preferência a partir de compostos de fórmula VII em que R^_ representa H ou OH por esterificação com um álcool apropriado na presença de um ácido tal como H01 ou HgSO^ ou por tratamento com um diazoaloano seguindo métodos descritos na literatura.

Os compostos da fórmula I em que Rj_ a R^ representam H, R^ representa H ou OH e R^ representa 0Η20Η são preparados de preferência a partir de compostos da fórmula II, em que R^ a R^ representam H, R^ representa H ou OH e Rg representa um grupo alquilo, por tratamento em solventes orgânicos tal como éter dietílico ou dioxano ou tetra-hidrofurano anidros.

Os compostos da fórmula I em que R-^ a R^ representam H, alquilo, acilo ou aralquilo, R^ representa H, OH, alcoxi, aciloxi ou aralcoxi, R^ representa OOORg e Rg representa alquilo, acilo, aralquilo, mono- ou poli-glico-sido são preparados de preferência a partir de compostos da fórmula II em que Rg representa H ou OH por alquilação ou aoilação usando métodos conhecidos descritos na literatura. A administração de compostos da presente invenção melhora as funçães cognitivas perturbadas em mamíferos e deste modo são substâncias úteis para a preparação e para o tratamento de perturbaçães do conhecimento. Estes compostos também apresentam uma actividade inibitória na permèabilidade capilar e na actividade antagonista da serotonina.

Os métodos adoptados para avaliação farmacológica dos compostos da presente invenção são descritos abaixo. - 13 -

Demência induzida pela escopolamina no rato.

Foi usado o método de Schindler /tf. Schindler et al, Drug Dev. Ees. 4:567-76 (1984)_7 para avaliar a actividade anti-amnésica oom algumas modificações.

Em seguida desorevem-se as modificações 0 composto em estudo é administrado uma vez por dia durante três dias. Io 4fi dia a administração tem lugar 60 minutos antes e 30 minutos depois da administração de escoplamina (5 mg/kg, s.c.). AXmA, aplica-se um choque na pata durante 2 segundos.

Calcula-se a./percentagem de animais que apresentavam um aumento significativo no período de la-tênoia do grupo tratado com o composto em comparação com o grupo tratado com escopolamina. A significação estatística é analisada pelo teste de Eisher, o valor de p menor que 0.05 é escolhido como nível da signifioância.

Quadro 1

Efeitos de asiaticosido na demência induzida por escoplamina no rato

Composto Dose mg/kg p.o. </o de actividade Valor de P Asiaticosido 15 53 Ião significativo Asiaticosido 30 92 inf a 0,01 60 69 inf a 0,01 - 14 - ί « 0 asiatioosido antagonisa de modo significativo a demência induzida por eseopolamina no rato a uma dose de 30 e 60 mg/kg p.o. durante quatro dias de tratamento. (Quadro 1).

Teste de permeabilidade capilar.

Raparam-se no lado dorsal ratos Charles Rostfcr de ambos os sexos com pesos de 120 a 140 g e deixam--se sem alimento de um dia para o outro. Depois de 16 a 18 horas os animais foram divididos em diferentes grupos (6 animais por grupo) e foram tratados oralmente quer com o veículo quer com a substância em ensaio. Uma hora mais tarde, cada grupo de animais reGebeu por via intradérmica 0,1 ml de salina e 0,9 % e 0,1 ml de ^Composto 48/80 a 0,01% (produto de condensarão de I-metil-metoxi-fenetilamina eom formaldeído) ou 0,1 ml de bradiquinina a 0,05% ou 0,01 ml de 5-hidroxi-triptamina (5-HT) a 0,001 % em dois locais diferentes. Imediatamente depois das injecçães intradérmicas, administrou-se a cada animal 0,2 ml de corante azul^

Evans a 1 % por via intravenosa. Os animais foram mortos depois de 30 minutos e a pele foi removida da parte dorsal. 0 escoamento do corante foi quantificado especèrofotometri-camente usando o método de Kayama /“Kayama S. et al, Jap. J. Pharmacol. 25, 103 (1975)_7.

Ia experiência presente, asiatioosido numa dose de 200 mg/kg administrado oralmente inibe o composto 48/80 e a permeabilidade capilar induzida por 5--hidroxi-triptamina em 33,7 % e 32 % respectivamente. Ião tea efeito na permeabilidade capilar induzida por bradiquinina (Quadro 2). - 15 - h «g: I 1 1 •Η 1 1 Μ ο 1 1 Μ Η 1 1 •Η λ 1 1 1 o LCA KA KA LCA LTV 1 1 oo c— C- 1 KA O \ • • • • * 1 1 oo CM O 1 CO D- W m 1 1 Ή* H- +1 CM +1 Ν__' 1 1 ctí 1 H 1 G ca •Η i o 1 G o •Η 1 i—1 1 \ σ> 1 &U0 1 •Η d ,—V 'd 1 — • 1 ce P4 EH R 1 Φ • f W 00 OA 1 KA CM & -P P 1 o 00 CO OA I G 1 LCA • ê | * • R Ctí + CM t—1 KA ο 1 R 1 ISA +1 « CM +1 Pt o ctí 1 o •H| ctí •d 1 o Ntíl •H d s 1 —*\ d m •d 1 Φ RI £3 CO o •H I o> Ptl R ctí 1 R Ol aS •P *d CM 00 LCA LCA rH 1 G •Hl cn 1 C— LCA Ή Φ 8 W • • • • Pt 1 o íál P KA r—1 1 f- KA ctí G 'd H +1 I-1 +1 o 1 o Gl O •H Φ 1 1 •d aS 1 1 t3 •H • 1 rd O •H CO 1 £> \ as 00 1 Φ H- a 1 r O ® += 1 Pt CG O 1 ÍCQ ctí Pt Φ • 6tD M £3 a 1 ca O M \ o o * \ ttO O o 1 P Pt H s 'd a •H Φ 1 o ra o o o 1 Hl CM o EH •H w 1 -P 1 Ctí LCA 1 O •H '—' o $ 1 -P •H as G CQ o α 1 Φ O O OJ •d •H a H O a 1 ctí d •H ο o ctí •P o -P R 49 -p 1 Ctí VH ctí 'd •H Pt R Φ •H C0 Φ •H 1 EH i> CQ d <H r <y -P 1

KA

ISA <M

KA

O o κβ ζ> •Η & •Η £3 Η Φ - 16 - íleo de cobaia isolado

Sacrificaram-se cobaias de ambos os sexos com pesos de 350 a 400 g e removeu-se uma porção de íleo. Cortaram-se 3 a 4 om de íleo, limpou-se e ooloeou-se pum banho de órgão contendo solução de lyrode, 0 "banho foi mantido a 37°0 e foi arejado eom ar comprimido. As contrac-çães agonistas (induzidas por 5-HT e bradiquinina) foram medidas através dum transdutor isométrico K-30 (Hugo Sachs) e foram registadas num registador potenciométrico (R) Digilog de 4 canais. 0 asiaticosido em doses de 10, 30 e 100 ug/ml mostra 10,2, 19,7 e 34,5 1° de inibição da con-tracção induzida por 5-ΗΪ enquanto a eontraoção induzida por bradiquinina do íleo da cobaia não é afectada (Quadro 3).

Quadro 3

Efeito do asiaticosido no íleo da cobaia isolado

Agonistas Concejntração Ug/ml Dose de Asiaticosido jug/ ml 1 de inibição (Média + D.P.) bradiquinina 0.2-0.3 100 0 5-HT 2-10 10 10.2 + 11.9 30 19.7 + 6 100 34.5 + 9

Os resultados acima indicam que o asiaticosido tem um efeito antagonista sobre os receptores serotonérgieos. - 17 -

Devido às acções que tem sido indicadas os compostos das fórmulas I e 1’ são adequadas para o tra-tamento e para a profilaxia das perturbações do conhecimento, doenças vasculares cerebrais e doenças do sistema nervoso central.

As especialidades farmacêuticas de acordo com a presente invenção contém os compostos das fórmulas I e 1' como composto activo, quando apropriado em combinação com outros compostos activos.

As especialidades farmacêuticas são preparadas por métodos conhecidos em si e familiares para os especialistas. As especialidades farmacêuticas são utilizadas sob a forma de comprimidos, comprimidos revestidos, cápsulas, supositórios, emulsões, suspensões ou soluções com uma quantidade eficaz do referido composto activo quer isolado ou, de preferência, em combinação com adjuvantes farmacêuticos adequados, sendo o eonteádo do composto aetivo até eerca de 95$, de preferência entre 10 e 75 $. Os adjuvantes adequados para a formulação do medicamento pretendido são familiares para o especialista na base do seu conhecimento da especialidade. Adicionalmente aos auxiliares de compressão, solventes, agentes que formaà gel, bases de supositórios e outros veículos para compostos activos é possível usar, por exemplo, antioxidantes, dispersantes, emulsionantes, agentes antiespuma, aromatizantes, conservantes, solubilizantes ou corantes. 0 composto activo pode ser administrado por via oral, parenteral, intravenoso ou rectal, sendo a administração oral a preferida. Para uma forma para uso oral, o referido composto activo é misturado, quando apropriado com compostos activos adicionais, com os aditivos adequados para este fim, tais eomo exeipientes, estabilizan-tes ou diluentes inertes, e é convertido pelos métodos usuais em apresentações adequadas tais como comprimidos, cápsulas - 18 - de gelatina dura e suspensões ou soluções aquosas, alcoólicas ou oleosas. Exemplos de veículos inertes que podem ser usados são a goma arábica, magnésio, laotose, glucose ou amido, em particular amido de milho. Podem ser usados para esta preparação grânulos secos ou húmidos. Exemplos de ex-cipientes oleosos ou solventes adequados são óleos vegetais ou animais, tal eomo óleo de girassol ou óleo de fígado de peixe.

Para administração subcutânea ou intravenosa, o composto activo é convertido numa solução, suspensão ou emulsão se desejado oom substâncias habituais para este fim, tais oomo solubilizantes, emulsionantes ou outros adjuvantes. Exemplos de solventes adequados são água, solução salina fisiológica ou álcoois, por exemplo, etanol, propanol ou glicerol, bem como soluções de açúcar, tais como soluções de glucose ou manitol, ou uma mistura dos vários solventes mencionados.

Os exemplos que se seguem ilustram a presente invenção mas não limitam o seu âmbito.

Exemplo 1

Isolamento de Asiaticosido 0 procedimento seguido foi semelhante ao descrito na literatura /“Boll. Ghim. Parm., 120, 570--605 (1981)_7 com a modificação descrita abaixo.

Extraíu-se material da planta Gentella asiatica reduzido a pó (11,5 kg) a uma temperatura de 45 a 47°0 com 2x7 litros de metanol aquoso (90 $>) durante oito horas cada vez. Os extraetos combinados foram concentrados a 1/10 do volume e deixados em repouso a 0°C. Centrifugou--se o sólido que se separou e lavou-se com água fria, obtendo-se 475 g de sólido seco. - 19 - C ί * Μ

A solução sobrenadante obtida durante a centrifugação foi extraída com n-butanol (5 x 3 1). 0 extracto de butanol foi lavado com HaOEE a 5 $ e depois com água até o pH das lavagens ser neutro. 0 extracto de butanol foi concentrado sob pressão reduzida a fim de se obter uma massa gomosa a qual, triturada oom éter de petró-leo (p.e. 60-80°C), deu um resíduo sélido resinoso de aproximadamente 500 g. A purificação foi feita pelos dois métodos seguintes: Método 1

Cristalização do produto bruto usando acetona aquosa deu 66 g de asiaticosido, p.f. 230-240°C. Método 2

Cromatografia de coluna sobre gel de sílica de 75 g de produto bruto deu 18 g de asiaticosido, p.f. 238-240°C, usando como eluente uma mistura de metanol__ _acetato de etilo.

Exemplo 2

Isolamento de Madeeassosido

Seguindo o processo descrito no Exemplo 1, obtiveram-se 500 g de produto bruto a partir de 11,5 kg de material vegetal seco. Submeteram-se 55 g de produto bruto a cromatografia em ooluna sobre gel de silica usando clorofórmio:metanol:água (6,5í3,5íO,5) para obter 20 g de madeeassosido. Por recristalização do composto a partir de metanol acetona obtiveram-se cristais puros de madecassosi-. do p.f. 221-225°0. - 20 -

Exemplo 3

Preparação de ácido Asiatieo

Iratou-se uma solução de asiaticosido (2,0 g) em metanol (40 ml) oom solução de hidroxido de sddio 5 ΪΓ e aqueceu-se a mistura aquecida a uma temperatura de 70 a 80°0 durante 2 a 5 horas, A mistura reaooional foi então concentrada sob vácuo e neutralizada com ácido clorídrico 2 U frio, 0 áólido branco 4ue se separou foi ftlirado e seco para obter 0,9 g de áoido asiatieo, p.f. 306-310°C,

Exemplo 4

Preparação de ácido Madecássioo

Agitou-se a 75°C durante 1,5 horas uma mistura de madeoassosido (4,0 g) e hidróxido de sódio a 10 io (200 ml), A mistura reaeeional foi arrefecida e acidificou-se com ácido clorídrico diluído, 0 sólido branco que se separou foi filtrado e seco para se obter 1,86 g de produto sólido. Por recristalização do sólido a partir de metanol obteve-se ácido madecássioo, p.f. 265-268°C.

Exemplo 5

Aoetilação de Asiaticosido

Adicionou-se anidrido acético (5 ml) a uma solução de asiaticosido (0,5 g) em piridina (5 ml) e agitou-se a solução à temperatura ambiente durante 3,5 horas. Diluiu-se a mistura reaeeional com acetato de etilo, lavou-se oom ácido clorídrico 2 I frio e salmoura (seeou--se oom E^SO^) e concentrou-se sob vácuo. Purificou-se o resíduo por eromatografia relâmpago usando acetato de etilo e éter do petróleo (p.e. 40-60°0) lsl como eluente para obter o composto A poliacetilado (0,275 g) p.f. 150-1°0 - 21 -

^”a J/ -8,14° l_ EtOHJ e o composto B poliacetilado (0,175 g) p.f. 155-6°( Z'a_7b -10.9° /""EtOHJ. Aumentando o tempo

Jr de reacção de 3,5 horas para 26 horas, o composto A poliacetilado poderia ser obtido numa quantidade de 0,64-4 g.

Exemplo 6

Acetilação de Medacassosido

Obteve-se madecassosido poliaoetilado seguindo o processo de acetilação descrito no Exemplo 5 com o rendimento de 90 ¢. P.f. 161-162°C.

Exemplo 7 Ácido madecássido anidro

Uma solução de 0,5 g de ácido madecássido em 25 ml de metanol e 10 ml de ácido clorídrico concentrado foi submetida a refluxo durante 3 horas. Evaporou-se o solvente. 0 resíduo obtido foi suspenso em H^O e extraído com acetato de edsilo. A camada orgânica foi evaporada à secura e o resíduo foi purificado por oromatografia sobre gel de silioa usando clorofórmio-metanol a 2 $ como eluente. Rendimento 430 mg, p.f. 182-92°0.

Ester metílico do áGido madecássico

Dissolveu-se ácido madecássico 1,15 g em 50 ml de metanol e arrefeceu-se a 0°0. Adicionou-se um excesso de diazometano em eter dietílico até a mistura reac-cional adquirir uma cor amarelo pálido. Depois de manter durante 1 hora à temperatura ambiente, evaporado o solvente para obter um resíduo. Por cristalização a partir do etanol obteve-se o composto puro 1,2 g p.f. 162-168°C. 22

Claims (1)

1. Exemplo 9 Ester metílioo de ácido asiatico 0 éster metílioo do ácido asiatico foi obtido seguindo o processo descrito no Exemplo 8. p.f. 162-166°C. REIVINDICAÇÕES - 1* - Processo para a preparação de derivados de 2,3,25-tri-hidroxi-12-urseno da fdrmula I

   (I) na qual R, ‘a’ simboliza uma ligação adicional entre os átomos de carbono C12 e C13 e 'b* simboliza uma ligação adicinnal opcional entre os átomos de carbono 05 e 06, e na qual R^, R2 e R^ significam grupos acilo, R^ significa H e R^ significa COO - 23 -

   ./X em que Eg significa um monoglieósido ou um poliglicósido caraeterizado por compreender a aoilação de compostos da fórmula VIII

   (VIII) na qual E^ é H e Eg é um monogliodsido ou um poliglicósido de um modo conhecido em si, ou de compostos da fórmula I na qual E·^, Eg e E^ significam H, E^ significa H ou OH, E^ significa OOOEg e Eg significa um monoglioósido ou um poliglicósido caraeterizado por compreender a glicosidação de compostos

   - 24 - na qual Rp e ^3 significam grupos proteetores de hidro-xilo habituais, R^ significa H ou um grupo hidroxilo protegido e Rg significa H, por tratamento com açúcares ha-logenados apropriados de um modo conhecido em si, e a remoção dos grupos proteetores dos grupos hidroxilo protegidos, ou de compostos da fórmula I na qual Rp R^ e R^ significam H, R^ significa H ou OH, R^ significa GOORg e Rg significa um grupo alquilo caracterizado por compreender a esterifioação de compostos da fórmula VII

   na qual R^ significa H ou OH, com um álcool apropriado na presença de um ácido de um modo conhecido em si ou de compostos da fórmula I na qual Rp R2 e R^ significam H, R4 significa H ou OH e R^ significa 0H20H caracterizado por compreender o tratamento de compostos da fórmula II, na qual Rp R2 e R^ significam H, R^ significa H ou OH e Rg significa um grupo alquilo, com um hidreto metálico ou de compostos da fórmula I na qual Rp R2 e R^ significam H, alquilo, acilo ou aralquilo, R^ significa H, OH, alooxi, aciloxi ou aralcoxi, R^ significa OOORg e Rg significa um grupo alquilo, acilo ou aralquilo ou um mono - 25 - I < « glicdsido ou poliglicósido caraeterizado por compreender a alljuilação ou a acilaçSode compostos da fórmula II na qual Rg significa um aonogliedsido ou um poligliedsido e R^* R2 e a3 significam E e significa H ou OH, de um modo conhecido em si. Processo para a preparação de uma composição farmacêutica útil para o tratamento ou para a profilaxia de distúrbios cognitivos, de doenças vasculares cerebrais e de doenças do sistema nervoso central caraeterizado por se incorporar corno principio activo 2,3,23-tri-hidroxi--12-u.rseno ou pelo menos um dos seus derivados quando preparado de acordo cora a reivindicação i opcionalmente em conjunto com excipientes faraaoeuticamente aceitáveis adequada para a administração. A requerente reivindica a prioridade do pedido de patente europeia apresentado em 11 de fevereiro de 1989, sob 0 12 39 102 392.1, Lisboa, 8 de fevereiro de 1990

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