PT804410E - Metodo para a preparacao de intermediarios de inibidores da protease retroviral - Google Patents

Metodo para a preparacao de intermediarios de inibidores da protease retroviral Download PDF

Info

Publication number
PT804410E
PT804410E PT96903641T PT96903641T PT804410E PT 804410 E PT804410 E PT 804410E PT 96903641 T PT96903641 T PT 96903641T PT 96903641 T PT96903641 T PT 96903641T PT 804410 E PT804410 E PT 804410E
Authority
PT
Portugal
Prior art keywords
acid
amino
alkyl
aralkyl
radical
Prior art date
Application number
PT96903641T
Other languages
English (en)
Inventor
John S Ng
Claire A Przybyla
Shu-Hong Zhang
Original Assignee
Searle & Co
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Searle & Co filed Critical Searle & Co
Publication of PT804410E publication Critical patent/PT804410E/pt

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/30—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C213/00—Preparation of compounds containing amino and hydroxy, amino and etherified hydroxy or amino and esterified hydroxy groups bound to the same carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C213/00—Preparation of compounds containing amino and hydroxy, amino and etherified hydroxy or amino and esterified hydroxy groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C213/10—Separation; Purification; Stabilisation; Use of additives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C215/00—Compounds containing amino and hydroxy groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C215/02—Compounds containing amino and hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having hydroxy groups and amino groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton
    • C07C215/04—Compounds containing amino and hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having hydroxy groups and amino groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton the carbon skeleton being saturated
    • C07C215/06—Compounds containing amino and hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having hydroxy groups and amino groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton the carbon skeleton being saturated and acyclic
    • C07C215/18—Compounds containing amino and hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having hydroxy groups and amino groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton the carbon skeleton being saturated and acyclic with hydroxy groups and at least two amino groups bound to the carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C215/00—Compounds containing amino and hydroxy groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C215/02—Compounds containing amino and hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having hydroxy groups and amino groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton
    • C07C215/22—Compounds containing amino and hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having hydroxy groups and amino groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton the carbon skeleton being unsaturated
    • C07C215/26—Compounds containing amino and hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having hydroxy groups and amino groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton the carbon skeleton being unsaturated and containing rings other than six-membered aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C215/00—Compounds containing amino and hydroxy groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C215/02—Compounds containing amino and hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having hydroxy groups and amino groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton
    • C07C215/22—Compounds containing amino and hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having hydroxy groups and amino groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton the carbon skeleton being unsaturated
    • C07C215/28—Compounds containing amino and hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having hydroxy groups and amino groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton the carbon skeleton being unsaturated and containing six-membered aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C271/00—Derivatives of carbamic acids, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atom not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C271/06—Esters of carbamic acids
    • C07C271/08—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C271/10—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to acyclic carbon atoms with the nitrogen atoms of the carbamate groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C07C271/20—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to acyclic carbon atoms with the nitrogen atoms of the carbamate groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms to carbon atoms of hydrocarbon radicals substituted by nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C275/00—Derivatives of urea, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C275/04—Derivatives of urea, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups having nitrogen atoms of urea groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C275/20—Derivatives of urea, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups having nitrogen atoms of urea groups bound to acyclic carbon atoms of an unsaturated carbon skeleton
    • C07C275/24—Derivatives of urea, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups having nitrogen atoms of urea groups bound to acyclic carbon atoms of an unsaturated carbon skeleton containing six-membered aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
    • C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D211/06—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
    • C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D211/06—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D211/08—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms
    • C07D211/18—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D211/26—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms with hydrocarbon radicals, substituted by nitrogen atoms

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Heterocyclic Compounds Containing Sulfur Atoms (AREA)

Description

. 1.
DESCRIÇÃO "MÉTODO PARA A PREPARAÇÃO DE INTERMEDIÁRIOS DE INIBIDORES DA PROTEASE RETROVIRAL" A síntese de muitos inibidores da protease retroviral e de renina contendo um isóstero de hidroxietilamina, hidroxietilureia ou hidroxietil-sulfonamida inclui a preparação de um intermediário amina quiral chave. A síntese da amina quiral chave requere uma síntese em vários passos partindo de um aminoácido quiral, como seja L-fenilalanina. O intermediário amina quiral chave pode ser preparado por redução diastereo-selectiva de um intermediário aminoclorometilcetona ou abertura com amina de um intermediário epóxido quiral. O presente invento está relacionado com um método eficaz, em termos de custos, para a obtenção de um intermediário amina quiral enantiomericamente, diastereomericamente e quimicamente puro. Este método é aplicável em produções de larga escala (vários quilogramas).
Roberts et al. (Science. 248. 358 (1990)), Krohn et al. (J. Med. Chem. 344, 3340 (1991)) e Getman et al. (J. Med. Chem., 346, 288 (1993)) descreveram a síntese de inibidores de proteases contendo o isóstero hidroxietilamina ou hidroxietilureia, a qual inclui a abertura de um epóxido gerado numa síntese em vários passos partindo de um aminoácido. Estes métodos também possuem passos que incluem diazometano e a redução de um intermediário aminoclorometilcetona para um aminoálcool antes da formação do epóxido. O rendimento global destas sínteses é baixo e a utilização de diazometano explosivo evita ainda que tais métodos sejam comercialmente aceitáveis. -2- AC-uUi
Tinkcr et al. (Patente U.S. N°. 4 268 688) descreve um processo catalítico de hidroformilação assimétrica para preparar aldeídos, opticamente activos, a partir de olefinas insaturadas. De modo semelhante, Reetz et al., (Patente U.S. N°. 4 990 669) descreve a formação de alfa-aminoaldeídos, opticamente activos, através da redução de ácidos alfa-aminocarboxílicos ou seus ésteres com hidreto de alumínio e lítio, seguido de oxidação do beta-aminoálcool protegido resultante com dimetilsulfóxido/cloreto de oxalilo ou trióxido de crómio/piridina. Como alternativa, os ácidos alfa-aminocarboxílicos protegidos, ou seus ésteres, podem ser reduzidos com hidreto de diisobutilalumínio para formar os aminoaldeídos protegidos.
Reetz et al., ÍTet. Lett.. 30. 5425 (1989) descrevem a utilização de iletos de sulfónio e arsónio e suas reacções de α-aminoaldeídos protegidos para formar aminoalquilepóxidos. Este método sofre da utilização de compostos de arsónio altamente tóxicos ou da utilização da combinação de hidreto de sódio e dimetilsulfóxido que é extremamente perigosa em larga escala. Hidreto de sódio e DMSO são incompatíveis (Sax, N.I., "Dangerous Properties of Industrial Materials", 6a Ed., Van Nostrand Reinhold Co., 1984, p. 433). Foram descritas explosões violentas quando da reacção de hidreto de sódio e excesso de DMSO ("Handbook of Reactive Chemical Hazards", 3a Ed., Butterworths, 1985, p. 295).
Matteson et al., (Svnlett.. 1991, 631) descreveram a adição de clorometil-litío a aldeídos racémicos. J. Ng et al. (WO 93/23388 e PCT/US94/12201, ambos aqui incluídos como referência na sua totalidade) descrevem métodos de preparação de epóxido quiral, cianidrina quiral, amina quiral e outros intermediários quirais úteis na preparação de inibidores de proteases retro virais. Vários inibidores de enzimas, tais como inibidores de renina e -3-inibidores da protease do HIV, têm sido preparados usando os métodos descritos atrás ou variações dos mesmos. EP 468641, EP 223437, EP 389898 e US 4 599 198, por exemplo, descrevem a preparação de inibidores de renina contendo isósteros de hidroxietilamina. US 5 157 041, WO 94/04492 e WO 92/08701 (cada um deles é aqui incluído como referência na sua totalidade), por exemplo, descrevem a preparação de inibidores da protease do HIV contendo isósteros de hidroxietilamina, hidroxietilureia ou hidroxietilsulfonamida. W095/14653 reivindica uma prioridade de 23.11.93, mas publicada em 01.06.95, que descreve um método para a preparação de aminoálcoois da fórmula H*
e, de um modo geral, seus sais farmaceuticamente aceitáveis, sem indicação de sais específicos.
SUMÁRIO DO INVENTO O vírus da imunodeficiência humana (HIV), o agente causador do síndrome da imunodeficiência adquirida (SIDA), codifica três enzimas, incluindo a proteinase bem caracterizada pertencente à família de proteinases de aspártico, a protease do HTV. A inibição desta enzima é encarada como uma abordagem promissora para o tratamento da SIDA. Uma estratégia potencial para o desenvolvimento de inibidores envolve a introdução de análogos do estado de transição hidroxietileno nos inibidores. Encontrou-se que os inibidores adaptando um isóstero de hidroxietilamina, hidroxietilureia ou hidroxietilsulfonamida são -4-
Aí c—J inibidores altamente potentes das proteases do HIV. Apesar da importância clínica potencial destes compostos, a sua síntese é díficil e dispendiosa devido ao número de centros de quiralidade. São necessários processos eficazes para a preparação em larga escala (quantidades de vários quilogramas) de tais inibidores para o desenvolvimento de preparações farmacêuticas eficazes e para os estudos clínicos.
Este invento melhora a síntese de intermediários que são facilmente acessíveis para preparação em larga escala de inibidores quirais de hidroxietilamina, hidroxietilureia ou hidroxietilsulfonamida da protease retroviral, da renina ou de outras proteases aspartilo. Especificamente, o método inclui precipitação, cristalização ou recristalização de um sal do intermediário amina quiral pretendido.
DESCRICÂO DETALHADA DO INVENTO
Este invento está relacionado com um método para a preparação de. inibidores de proteases retrovirais, o qual permite a preparação de quantidades comerciais de intermediários das fórmulas
em que R1, R3, P1 e P2 são como definidos abaixo. Preparações típicas de um -5- diastcrcómcro a partir de materiais enantiomericamcntc puros, tais como L-fenilalanina ou D-fenilalanina, usando métodos como os descritos aqui e noutros locais, resultam em misturas enantioméricas do carbono do álcool (-CHOH-) variando entre cerca de 50:50 e cerca de 90:10. O isolamento do enantiómero pretendido envolve geralmente separação cromatográfica. Como alternativa, a mistura enantiomérica é usada sem separação e o material enantiomericamente puro é obtido num passo posterior da síntese dos inibidores. Estas abordagens aumentam o tempo e custo envolvidos na produção de uma preparação farmacêutica. As separações cromatográficas aumentam o custo da produção. A utilização de materiais impuros aumenta a quantidade de outros reagentes usados em passos posteriores da síntese de inibidores e aumenta a quantidade de produtos secundários e lixos produzidos nos últimos passos. Ainda, estes compostos muitas vezes apresentam indicações de fraca estabilidade e podem não ser adequados para armazenamento e embalagem em grandes quantidades (vários quilogramas) durante largos períodos de tempo. A estabilidade no armazenamento e embalagem de tais compostos é particularmente importante quando a produção da preparação farmacêutica é realizada em locais e/ou ambientes diferentes. Como alternativa, a amina pode ser protegida com um grupo protector de aminas, como seja tert-butoxicarbonilo e benziloxicarbonilo, como descrito abaixo e purificada, por exemplo por cromatografia, cristalização e similares, seguido de desprotecção da amina. Esta alternativa adiciona mais passos à síntese global dos inibidores e aumenta os custos de produção. O presente invento está relacionado com um processo simples e económico de isolamento de formas substancialmente puras da Fórmula I do ponto de vista enantiomérico e/ou diastereomérico. O processo envolve a formação e isolamento de um sal da Fórmula I a partir de misturas de reacção brutas. O sal pode ser formado na mistura de reacção através de precipitação. O precipitado pode ser então cristalizado ou recristalizado a partir do sistema solvente adequado, como seja etanol, metanol, heptano, hexano, éter dimetílico, -6- metil-tert-butiléter, acetato de etilo ou suas misturas. Como alternativa, o solvente da mistura de reacção pode ser removido, por exemplo in vacuo e dissolvido num solvente ou misturas de solventes mais apropriados, tais como metanol, etanol, tolueno, xileno, cloreto de metileno, tetracloreto de carbono, hexano, heptano, éteres de petróleo, éter dimetílico, acetato de etilo, metil-tert-butiléter, tetra-hidrofurano ou suas misturas. Isto pode também permitir a remoção, como seja por filtração ou extraeção, dos materiais indesejáveis presentes na mistura de reacção, tais como sais e produtos secundários.
Após a mistura de reacção bruta estar dissolvida, caso se pretenda ou seja necessário, o sal da Fórmula I pode ser precipitado ou cristalizado e recristalizado. A formação, precipitação, cristalização e/ou recristalização de tais sais podem também ser conseguidas usando água e misturas de solventes orgânicos miscíveis ou solúveis em água, tais como água/metanol, água/etanol.
Um sal da Fórmula I é preparado através da adição de um ácido orgânico ou inorgânico, de preferência pelo menos em quantidades equilomares e mais preferencialmente em quantidades superiores à equimolar, directamente à mistura de reacção ou à mistura de reacção bruta em solução, como descrito atrás. Tais sais podem ser sais de ácidos monovalentes, divalentes ou trivalentes, podem ser monopróticos, dipróticos ou tripróticos, podem ser sais mistos ou complexos, ou suas combinações. Os ácidos orgânicos preferidos que podem ser empregues para formar sais da Fórmula I incluem, mas não estão limitados aos seguintes: ácido acético, ácido aconítico, ácido adípico, ácido algínico, ácido cítrico, ácido aspártico, ácido benzóico, ácido benzenossulfónico, ácido butírico, ácido canfórico, ácido canforsulfónico, ácido diglucónico, ácido isocítrico, ácido ciclopentilpropiónico, ácido undecanóico, ácido malónico, ácido dodecilsulfónico, ácido etanossulfónico, ácido málico, ácido gluco-heptanóico, ácido hexanóico, ácido fumárico, ácido 2-hidroxietanossulfónico, ácido láctico, ácido maleico, ácido mandélico, ácido metanossulfónico, ácido nicotínico, ácido -7- oxalacético, ácido 2-naflalenossulfónico, ácido oxálico, ácido palnútico, ácido pectínico, ácido fenilpropiónico, ácido pícrico, ácido piválico, ácido propiónico, ácido succínico, ácido glicerofosfórico, ácido tânico, ácido trifluoroacético, ácido toluenossulfónico, ácido tartárico, ácido diacetiltartáríco, ácido dibenzoil-tartárico, ácido ditoluiltartárico. Os ácidos orgânicos mais preferidos incluem ácido acético, ácido canforsulfónico, ácido toluenossulfónico, ácido málico, ácido tartárico, ácido mandélico, ácido trifluoroacético e ácido oxálico. Os ácidos orgânicos mais preferidos incluem ácido acético, ácido oxálico e ácido tartárico. Podem ser usadas misturas racémicas ou isómeros opticamente puros de um ácido orgânico, tais como isómeros D, L, DL, meso-isómeros, eritrómeros, treómeros. Os ácidos inorgânicos preferidos que podem ser empregues para formar sais da Fórmula I incluem, mas não estão limitados aos seguintes: ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido fosfórico, ácido sulfuroso, ácido sulfurico e similares. Um ácido inorgânico mais preferido é o ácido clorídrico.
Os sais da Fórmula I e, em particular, os sais cristalinos da Fórmula I do presente invento são tipicamente mais estáveis em condições de armazenamento e embalagem do que o composto da Fórmula I. A Fórmula I do presente invento significa as fórmulas
-8-em que R1 2 representa radicais alquilo, arilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo ou aralquilo, os quais são facultativamente substituídos com alquilo, halogénio, N02) OR9 ou SR9, em que R9 representa hidrogénio, alquilo, arilo ou aralquilo. De preferência, R1 é um radical alquilo, cicloalquilo ou aralquilo, que é facultativamente substituído com alquilo, halogénio, N02, OR9 ou SR9, em que R9 representa hidrogénio, alquilo, arilo ou aralquilo. Mais preferencialmente, R1 é um radical 2-(metiltio)etilo, feniltiometilo, benzilo, (4-fluorofenil)metilo, 2-naftilmetilo ou ciclo-hexilmetilo. R3 representa um radical hidrogénio, alquilo, alcenilo, alcinilo, hidroxialquilo, alcoxialquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, heterocicloalquilo, heteroarilo, heterocicloalquilalquilo, arilo, aralquilo, heteroaralquilo, aminoal-quilo ou aminoalquilo N-mono- ou N,N-di-substituído, em que os referidos substituintes são radicais alquilo, arilo, aralquilo, cicloalquilo, ciclo-alquilalquilo, heteroarilo, heteroaralquilo, heterocicloalquilo ou heterocicloalquilalquilo, ou, no caso de um radical aminoaquilo di-substituído, os referidos substituintes juntamente com o átomo de azoto a que estão ligados formam um radical heterocicloalquilo ou heteroarilo. De preferência, R3 representa um radical hidrogénio, alquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo ou aralquilo. Mais preferencialmente, R3 representa um radical hidrogénio, propilo, butilo, isobutilo, isoamilo, ciclo-pentilo, ciclo-hexilo, ciclo-heptilo, ciclo-hexilmetilo, ciclopentilmetilo, feniletilo ou benzilo. Mais preferencialmente, R3 representa radicais, conforme definidos atrás, que não possuem ramificação em alfa, e.g. como num radical isopropilo ou num radical t-butilo. Os radicais preferidos são aqueles que possuem um grupo -CH2- entre o azoto e o restante radical. Tais grupos preferidos incluem, mas não estão limitados a benzilo, isobutilo, n-butilo, isoamilo, ciclo-hexilmetilo e ciclopentilmetilo. 1 1 2 P e P são independentemente grupos protectores de hidrogénio ou -9- amina, incluindo mas não estando limitados a aralquilo, aralquilo substituído, cicloalcenilalquilo e cicloalcenilalquilo substituído, alilo, alilo substituído, acilo, alcoxcarbonilo, aralcoxicarbonilo e sililo. Exemplos de alquilo incluem, mas não estão limitados a benzilo, 1-feniletilo, orto-metilbenzilo, tritilo e benzidrilo, os quais podem ser facultativamente substituídos com halogénio, alquilo CpC8, alcóxido, hidróxido, nitro, alquileno, acilamino e acilo. Exemplos de grupos arilo incluem fenilo, naftalenilo, indanilo, antracenilo, durenilo, 9-(9-fenilfluqrofenilo) e fenantrenilo, os quais podem ser facultativamente substituídos com halogénio, alquilo CpQ, alcóxido, hidróxido, nitro, alquileno, acilamino e acilo. Grupos acilo adequados incluem carbobenzoxilo, t-butoxicarbonilo, iso-butoxicarbonilo, benzoílo, benzoílo substituído, tal como 2-metilbenzoílo, 2,6-dimetilbenzoílo, 2,4,6-trimetilbenzoílo e 2,4,6-tri-isopropilbenzoílo, 1-nafitoílo, 2-naftoilbutirilo, acetilo, tri-fluoroacetilo, tri-cloroacetilo, ftaloilo.
Ainda, os grupos protectores P1 e P2 podem formar um sistema de anel heterocíclico com o azoto a que estão ligados, por exemplo, l,2-bis(me-tileno)benzeno (i.e. 2-isoindolinilo), ftalimidilo, succinimidilo, maleimidilo e estes grupos heterocíclicos podem ainda incluir anéis arilo e cicloalquilo adjacentes. Ainda, os grupos heterocíclicos podem ser mono-, di- ou tri-substituídos, e.g., nitroftalimidilo.
Grupos protectores de carbamato adequados incluem, mas não estão limitados a metilo e carbamato de etilo; 9-fluorenilmetilcarbamato; 9-(2-sulfo)fluorenilmetilcarbamato; 9-(2,7-dibromo)fluorenilmetilocarbamato; 2,7-di-t-butil-(9-( 10,10-dioxo)-10,10,10-tetra~hidrotioxantil)metilcarbamato; 4-metoxi-fenacilcarbamato; 2,2,2-tricloroetilcarbamato; 2-trimetilsililetilcarbamato; 2-feniletilcarbamato; 1 -(1 -adamantil)-1 -metiletilcarbamato; 1 ,f-dimetil-2-haloetil-carbamato; 1,1 -dimetil-2,2-dibromoetilcarbamato; 1,1 -dimetil-2,2,2-tricloroetil-carbamato; 1 -metil-1 -(4-bifenilil)-etilcarbamato; 1 -(3,5-di-t-butilfenil)-1 -metil- -10- /<K CL~——<,( «-a etilcarbamato; 2-(2’- e 4'-piridil)etilcarbamato; 2-(N,N-diciclo-hexilcarboxami-do)etilcarbamato; t-butilcarbamato; 1-adamantilcarbamato; vinilcarbamato; alil-carbamato; 1-isopropilalilcarbamato; cinamilcarbamato; 4-nitrocinalcarbamato; 8-quinolilcarbamato; N-hidroxipiperidinilcarbamato; alquilditiocarbamato; ben-zilcarbamato; p-metoxibenzilcarbamato; p-nitrobenzilcarbamato; p-bromoben-zilcarbamato; p-clorobenzilcarbamato; 2,4-diclorobenzilcarbamato; 4-metilsul-finilbenzilcarbamato; 9-antrilmetilcarbamato; difenilmetilcarbamato; 2-metil-tíoetilcarbamato; 2-metilsulfoniletilcarbamato; 2-(p-toluenossulfonil)etilcarba-mato; [2-( 1,3-ditianil)metilcarbamato; 4-metiltiofenil-2,4-dimetiltiofenilo, 2-fosfonioetilcarbamato; 2-trifenilfosfonioisopropilcarbamato; l,l-dimetil-2-cia-noetilcarbamato; m-cloro-p-aciloxibenzilocarbamato; p-(di-hidroxiboril)benzil-carbamato; 5-benzoisoxazolilmetilcarbamato; 2-(trifluorometil)-6-cromonilmetil-carbamato; m-nitrofenilcarbamato; 3,5-dimetoxibenzilcarbamato; o-nitroben-zilcarbamato; 3,4-dimetoxi-6-nitrobenzilcarbamato; fenil(o-nitrofenil)metilcarba-mato; derivado de fenotiazinil-(10)-carbonilo; derivado de N'-p-toluenossulfo-nilaminocarbonilo; derivado de Ν'-fenilaminotiocarbonilo t-amilcarbamato; S-benziltiocarbamato; p-cianobenzilcarbamato; ciclobutilcarbamato; ciclo-hexil-carbamato; cicíopentilcarbamato; ciclopropilmetilcarbamato; p-deciloxibenzil-carbamato; diisopropilmetilcarbamato; 2,2-dimetoxicarbonilvinilcarbamato; o-(N,N-dimetilcarboxamido)benzilcarbamato; 1,1 -dimetil-3-(N,N-dimetilcarboxa-mido)propilcarbamato; 1,1 -dimetilpropinilcarbamato; di(2-piridil)metilcarbama-to; 2-furanilmetilcarbamato; 2-iodoetilcarbamato; isobomilcarbamato; isobu-tilcarbamato; isonicotilcarbamato; p-(p'-metoxifenilazo)benzilcarbamato; 1-me-tilciclobutilcarbamato; 1 -metilciclo-hexilcarbamato; 1 -metil-1 -ciclopropilmetilcarbamato; 1 -metil-1 -(3,5-dimetoxifenil)etilcarbamato; 1 -metil-1 -(p-fenilazofe-nil)etilcarbamato; e 1-metil-1-feniletilcarbamato. T. Greene e P. Wuts ("Protective Groups In Organic Synthesis", 2a Ed., John Wiley & Sons, Inc. (1991) descrevem a preparação e clivagem de tais grupos protectores de car-bamato. -11 - h*. Cl.—( cí O termo sililo refere-se a um átomo de silício substituído com um ou mais grupos alquilo, arilo e aralquilo. Grupos protectores de sililo adequados incluem, mas não estão limitados a trimetilsililo, trietilsililo, tri-isopropilsililo, tert-butildimetilsililo, dimetilfenilsililo, 1,2-bis (dimetilsilil)etano e difenil-metilsililo. A sililação das funções amina para dar mono- ou bis-di-sililamina pode proporcionar derivados de aminoálcool, aminoácido, ésteres de aminoácido e amida de aminoácido. No caso de aminoácidos, ésteres de aminoácidos e amidas de aminoácidos, a redução da função carbonilo proporciona o mono- ou bis-sililaminoálcool. A sililação do aminoálcool pode conduzir ao derivado Ν,Ν,Ο-tri-sililo. A remoção da função sililo da função éter de sililo é facilmente conseguida por tratamento, por exemplo, com um hidróxido de metal ou reagente de fluoreto de amónio, quer como um passo de reacção discreto ou in situ durante a preparação do reagente aminoaldeído. São agentes de siliação adequados, por exemplo, cloreto de trimetilsililo, cloreto de tert-butil-dimetilsililo, cloreto de fenildimetilsililo, cloreto de difenilmetilsililo ou os produtos de combinação com imidazol ou DMF. Os métodos de sililação de aminas e remoção de grupos protectores de sililo são bem conhecidos dos familiarizados com a matéria. Os métodos de preparação destes derivados de amina a partir dos aminoácidos, amidas de aminoácidos ou ésteres de aminoácido correspondentes são bem conhecidos dos familiarizados com a área da química orgânica, incluindo a química de aminoácidos/ésteres de aminoácidos ou de aminoálcoois.
Preferencialmente P1 é aralquilo, aralquilo substituído, alquilcar-bonilo, aralquilcarbonilo, arilcarbonilo, alcoxicarbonilo ou aralcoxicarbonilo, e P é aralquilo ou aralquilo substituído. Como alternativa, quando P é alcoxi-carbonilo ou aralcoxicarbonilo, P pode ser hidrogénio. Mais preferencialmente, P1 é t-butoxicarbonilo, fenilmetoxicarbonilo, (4-metoxifenil)metoxicarbonilo ou benzilo, e P2 é hidrogénio ou benzilo.
At Wh -12-
Devido aos mesmos processos de síntese e purificação serem aplicados à preparação de cada um dos quatro diastereómeros possíveis da Fórmula I, desde que seja utilizado o aminoácido de partida com a quiralidade adequada, a Fórmula I apesar de apresentada numa configuração destina-se a englobar os quatro diastereómeros individuais. Assim, os processos de preparação aqui descritos e as definições de R1, R3, P1 e P2 também se aplicam aos outros três isómeros configuracionais
NHR3
NHRJ IC e p1 P2
ID São igualmente aqui descritos epóxidos com o grupo amínico protegido da fórmula
(IV) alfa-hidroxicianetos com o grupo amínico protegido e ácidos da fórmula /4í CL—^{t,x -13- R1
X em que X é -CN, -CH2NO2 ou -COOH, intermediários de alfa-aminoaldeído protegidos da fórmula
R1 N
H (III) e alfa-aminoálcoois quirais protegidos da fórmula
Rl
OH
N (II) em que P1, P2 e R1 são como definidos atrás.
Tal como aqui é utilizado, o termo "aminoepóxido", sozinho ou em combinação, significa um alquilepóxido substituído no grupo amínico, em que o grupo amínico pode ser um grupo amínico primário ou secundário, contendo substituintes seleccionados entre radicais hidrogénio, alquilo, arilo, aralquilo, alcenilo, alcoxicarbonilo, aralcoxicarbonilo, cicloalcenilo, sililo, cicloalquil-alcenilo e o epóxido pode ser alfa relativamente à amina. O termo "aminoaldeído", sozinho ou em combinação, significa um alquilaldeído em que o grupo amina pode ser um grupo amínico primário ou secundário, contendo substituintes seleccionados entre radicais hidrogénio, alquilo, arilo, aralquilo, alcenilo, aralcoxicarbonilo, cicloalcenilo, sililo e cicloalquilalcenilo e o aldeído pode ser alfa relativamente à amina. O termo "alquilo", sozinho ou em combinação, significa um radical alquilo de cadeia linear ou ramificada contendo entre 1 e 10, de preferência entre 1 e 8, mais preferencialmente entre 1 e 5 átomos de carbono. Exemplos de tais radicais incluem metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, sec-butilo, tert-butilo, pentilo, isso-amílico, hexilo, octilo. O termo "alcenilo", sozinho ou em combinação, significa um radical hidrocarboneto, de cadeia linear ou ramificada, tendo uma ou mais ligações duplas e contendo entre 2 e 10 átomos de carbono, de preferência entre 2 e 8, mais preferencialmente entre 2 e 5 átomos de carbono. Exemplos de radicais alcenilo adequados incluem etenilo, propenilo, alilo e 1,4-butadienilo. O termo "alcinilo", sozinho ou em combinação, significa um radical hidrocarboneto de cadeia linear tendo uma ou mais ligações triplas e contendo entre 2 e 10, de preferência entre 2 e 8, mais preferencialmente entre 2 e 5 átomos de carbono. Exemplos de radicais alcinilo incluem etinilo, propinilo, (propargilo), butinilo. O termo "alcóxido", sozinho ou em combinação, significa um radical éter de alquilo em que o termo alquilo é como definido atrás. Exemplos de radicais éter de alquilo incluem metóxido, etóxido, n-propóxido, isopropóxido, n-butóxido, isso-butóxido, sec-butóxido, tert-butóxido. O termo "cicloalcenilo", sozinho ou em combinação significa um radical alquilo que contem entre 5 e 8, de preferência 5 a 6 átomos de carbono, é cíclico e possui pelo menos uma ligação dupla no anel que tem carácter não aromático. Exemplos de tais radicais cicloalcenilo incluem ciclopropenilo, ciclobutenilo, ciclopen-tenilo, ciclo-hexenilo, di-hidrofenilo. O termo "cicloalcenilalquilo" significa um radical cicloalcenilo, como definido atrás, que está ligado a um radical alquilo, -15-como definido atrás. O termo "cicloalquilo", sozinho ou em combinação, significa um radical alquilo cíclico que possui 3 a 8, de preferência 3 a 6, mais preferencialmente 5 a 6 átomos de carbono. O termo "cicloalquilalquilo" significa um radical alquilo, conforme definido atrás, que é substituído por um radical cicloalquilo, como definido atrás. Exemplos de tais radicais cicloalquilo incluem ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclo-hexilo. O termo "arilo", sozinho ou em combinação significa um radical fenilo ou naftilo, qualquer um deles sendo facultativamente substituído com um ou mais grupos alquilo, alcóxido, halogénio, hidroxilo, amínico, nitrosoílo; assim como p-tolilo, 4-metoxifenilo, 4-(tert-butoxi)fenilo, 4-fluorofenilo, 4-clorofenilo, 4-hidroxifenilo, 1-naftilo, 2-nafitilo. O termo "aralquilo", sozinho ou em combinação, significa um radical alquilo, conforme definido atrás, substituído por um radical arilo, conforme definido atrás, como sejabenzilo e 1-feniletilo.
Exemplos de aralquilo substituído incluem 3,5-dimetoxibenzilo, 3,4—dimetoxibenzilo, 2,4-dimetoxibenzilo, 3,4,5-trimetoxibenzilo, 4-nitroben-zilo, 2,6-diclorobenzilo, 4-(clorometil)benzilo, 2-(bromometil)benzilo, 3-(clorometil)benzilo, 4-clorobenzilo, 3-clorobenzilo, 2-(clorometil)benzilo, 6-cloropiperonilo, 2-clorobenzilo, 4-cloro-2-nitrobenzilo, 2-cloro-6-fluorobenzilo, 2-(clorometil)-4,5-dimetilbenzilo, 6-(clorometil)duren-3-ilmetil, 10-(clorometil)-antracen-9-ilmetilo, 4-(clorometil)-2,5-dimetilbenzilo, 4-(clorometil)-2,5-dime-toxibenzilo, 4-(clorometil)anisol-2-il-metilo, 5-(clorometil)-2,4-dimetilbenzilo, 4-(clorometil)mesitilen-2-ilmetilo, 4-acetil-2,6-diclorobenzilo, 2-cloro-4-metil-benzilo, 3,4-diclorobenzilo, 6-clorobenzo-l,3-dioxan-8-ilmetilo, 4-(2,6-dicloro-benzilsulfonil)benzilo, 4-cloro-3-nitrobenzilo, 3-cloro-4-metoxibenzilo, 2-hi-droxi-3-(clorometil)-5-metilbenzilo. O termo "aralcoxicarbonilo" significa um grupo aralcóxido ligado a um carbonilo. Carbobenzóxido é um exemplo de aralcoxicarbonilo. O termo "heterocíclico" significa um heterociclo monocíclico, bicíclico ou tricíclico, saturado ou parcialmente insaturado, tendo 5 a 6 elementos
CL_J -16-em cada anel e que contem um ou mais heteroátomos como átomos de anel, seleccionados entre azoto, oxigénio, silício e enxofre, o qual é facultativamente substituído num ou mais átomos de carbono por halogénio, alquilo, alcóxido, oxo e/ou num átomo de azoto secundário (i.e., -NH-) por alquilo, aralcoxicarbonilo, alcanoilo, fenilo ou fenilalquilo ou num átomo de azoto terciário (i.e. =N-) por óxido. "Heteroarilo" significa um heterociclo aromárico monocíclico, bicíclico ou tricíclico que contem os heteroátomos e é facultativamente substituído, conforme definido atrás relativamente à definição de arilo. São exemplos de tais grupos heterocíclicos pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, morfolinilo, tia-morfolinilo, pirrolilo, ftalimida, succinimida, maleimida. Também estão incluídos heterociclos contendo dois átomos de silício simultaneamente ligados ao azoto e ligados por átomos de carbono. O termo "alquilamino" sozinho ou em combinação, significa um grupo alquilo substituído no grupo amínico em que o grupo amínico pode ser um grupo amínico primário ou secundário contendo substituintes seleccionados entre os radicais hidrogénio, alquilo, arilo, aralquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo. O termo "halogénio" significa flúor, cloro, bromo ou iodo. O termo di-haloalquilo significa dois átomos de halogénio, iguais ou diferentes, substituídos no mesmo átomo de carbono. O termo "agente oxidante" inclui um agente simples ou uma mistura de reagentes oxidantes. Exemplos de misturas de reagentes oxidantes incluem trióxido de enxofre-piridina/dimetilsulfóxido, cloreto de oxalilo/dimetilsulfóxido, cloreto de acetilo/dimetilsulfóxido, cloreto de trifluoroacetilo/dimetilsulfóxido, brometo de toluenossulfonilo/dimetilsulfóxido, pentacloreto fosforoso/dimetilsulfóxido e isobutilcloroformato/dimetilsulfóxido.
Um Esquema geral para a preparação de aminoepóxidos, úteis como intermediários na síntese de inibidores da protease do HIV, está apresentado no Esquema 1 abaixo. -17-
Ath^rh CL—j ί,χ
Esquema I R1
+ R1 pl^
U X
p2 ÕH
Um método de larga escala, económico e seguro, para preparação de inibidores de proteases do presente invento pode, em alternativa, utilizar aminoácidos ou aminoálcoois para formar um alfa-aminoálcool N,N-protegido da fórmula R1
P
OH
P2 em que P1, P2 e R1 estão descritos atrás. (II)
Caso os compostos da Fónmula II sejam formados a partir de aminoácidos ou aminoálcoois, tais compostos possuem a amina protegida com grupos P1 e P2, conforme anteriormente identificados. O átomo de azoto pode ser alquilado, por exemplo pela adição de agentes de alquilação adequados num solvente apropriado na presença de base.
As bases alternativas usadas na alquilação incluem hidróxido de sódio, bicarbonato de sódio, hidróxido de potássio, hidróxido de lítio, carbonato de potássio, carbonato de sódio, hidróxido de césio, hidróxido de magnésio, hidróxido de cálcio ou óxido de cálcio, ou bases de aminas terciárias, tais como trietilamina, diisopropiletilamina, piridina, N-metilpiperidina, dimetilamino-piridina e azabiciclononano. As reacções podem ser homogéneas ou heterogéneas. Os solventes adequados são a água e solventes próticos ou solventes miscíveis com água, tais como metanol, etanol, álcool isopropílico, tetra-hidrofurano com ou sem adição de água. Os solventes apróticos dipolares podem também ser usados com ou sem adição de solventes próticos, incluindo água. Exemplos de solventes apróticos dipolares incluem acetonitrilo, dimetilfor-mamida, dimetilacetamida, acetamida, tetrametilureia e o seu análogo cíclico, dimetilsulfóxido, N-metilpirrolidona, sulfolano, nitrometano e similares. A temperatura de reacção pode variar entre cerca de -20°C e 100°C, sendo a temperatura preferida de cerca de 25-85°C. A reacção pode ser realizada numa atmosfera inerte como seja de azoto ou argon, ou ar normal ou seco, sob pressão atmosférica ou num vaso de reacção selado sob pressão positiva. Os agentes de alquilação mais preferidos são brometo de benzilo ou cloreto de benzilo ou haletos de aralquilo mono-substituídos ou haletos de aralquilo poli-substituídos. Os ésteres de sulfato ou de sulfonato são também reagentes adequados para proporcionar os análogos de benzilo correspondentes e podem ser pré-formados a partir do álcool benzílico correspondente, ou formados in situ por métodos bem conhecidos dos familiarizados com a matéria. Grupos tritilo, benzidrilo, tritilo -19- /<k h*. rh —u ( substituído e benzidrilo substituído, independentemente, são também grupos protectores de amina eficazes (P1 e P2) tal como os grupos alilo e alilo substituído. Os seus derivados de haleto podem igualmente ser preparados a partir dos álcoois correspondentes pelos métodos bem conhecidos dos familiarizados a matéria, tais como tratamento com cloreto ou brometo de tionilo ou com tri- ou pentacloreto, brometo ou iodeto fosforoso ou o tri-haleto de fosforilo correspondente. Exemplos de grupos que podem ser substituídos no anel arilo incluem alquilo, alcóxido, nitroilo, halo e alcileno, amínico, mono e di-alquilamínico, acilo e grupos solubulizáveis em água, tais como sais de fosfónio e sais de amónio. O anel arilo pode derivar por exemplo de benzeno, naftaleno, indano, antraceno, 9-fenilfluorenilo, dureno, fenantreno. Ainda, haletos de 1,2-bis (alquileno substituído) arilo ou ésteres de sulfonato podem ser usados para formar um arilo contendo azoto ou derivado heterocíclico não aromático ( P1 e P2) ou bis-heterociclos. Os radicais cicloalquilenoalquilo ou cicloalquileno substituídos contendo 6-10 átomos de carbono e radicais alquileno constituem uma outra classe de substituintes aceitáveis para o azoto, preparados como descrito atrás incluindo, por exemplo, ciclo-hexilenometileno.
Os compostos da Fórmula II podem ser igualmente preparados por alquilação redutora, por exemplo, por compostos e intermediários formados pela adição de um aldeído com a amina e um agente redutor, redução de uma base de Schiff, carbinolamina ou enamina ou redução de um derivado de amina acilada. Os agentes redutores incluem metais (platina, paládio, hidróxido de paládio, paládio em carbono, óxido de platina, ródio) na presença de hidrogénio ou de moléculas transferidoras de hidrogénio, tais como ciclo-hexeno ou ciclo-hexadieno ou agentes hidreto tais como hidreto de lítio e alumínio, boro-hidreto de sódio, boro-hidreto de lítio, cianoboro-hidreto de sódio, hidreto de di-isobutilalumínio ou hidreto de lítio tri-tert-butoxi-alumínio.
Aditivos, tais como brometo de sódio ou de potássio, podem catalisar ou acelerar a velocidade de alquilação da amina, especialmente quando é usado cloreto de benzilo como agente de alquilação de azoto. A catálise de transferência de fases em que a amina a ser protegida e o agente de alquilação de azoto reagem com uma base, numa mistura de solventes, na presença de um reagente, catalisador ou promotor de transferência de fases. A mistura pode consistir, por exemplo, em tolueno, benzeno, cloreto de etileno, ciclo-hexano, cloreto de metileno em água ou uma solução aquosa de um solvente orgânico miscível em água, como seja THF. Exemplos de catalisadores ou reagentes de transferência de fases incluem cloreto, iodeto ou brometo de tetrabutilamónio, hidróxido de tetrabutilamónio, cloreto de tri-butiloctilamónio, hidróxido de dodeciltri-hexilamónio, cloreto de metiltri-hexilamónio.
Um método preferido de formação de aminas substituídas envolve a adição aquosa de cerca de 3 moles de haleto orgânico ao aminoácido ou cerca de 2 moles ao aminoálcool. Num método mais preferido de formação de um aminoálcool protegido, usa-se cerca de 2 moles de haleto de benzilo numa solução aquosa básica. Num método ainda mais preferido, a alquilação ocorre entre 50°C e 80°C com carbonato de potássio em água, etanol/água ou estanol desnaturado/água. Num método mais preferido de formação de um éster de aminoácido protegido, cerca de 3 moles de haleto de benzilo são adicionadas a uma solução contendo o aminoácido. O éster de aminoácido protegido é ainda reduzido para dar o aminoálcool protegido num solvente orgânico. Os agentes redutores preferidos incluem hidreto de lítio alumínio, boro-hidreto de lítio, boro-hidreto de sódio, borano, hidreto de lítio tri-tert-butoxialumínio, complexo borano-THF. Mais (2~^( -21 - preferencialmente, o agente redutor é hidreto de di-isobutilalumínio (DiBAL-H) em tolueno. Estas condições de redução proporcionam uma alternativa à redução com hidreto de lítio alumínio. É possível a purificação por cromatografia. No método de purificação preferido o alfa-aminoálcool pode ser purificado por uma paragem da reacção com ácido, como seja ácido clorídrico, e o sal resultante pode ser removido por filtração como um sólido e o aminoálcool pode ser libertado por exemplo por extracção com ácido/base. O alfa-aminoálcool protegido é oxidado para formar um aminoaldeído quiral da fórmula R1
Reagentes oxidantes adequados incluem, por exemplo, complexo de trióxido de enxoffe-piridina e DMSO, cloreto de oxalilo e DMSO, cloreto ou anidrido de acetilo e DMSO, cloreto ou anidrido de trifluoroacetilo e DMSO, cloreto de metanossulfonilo e DMSO ou tetra-hidrotiafeno-S-óxido, brometo de toluenos-sulfonilo e DMSO, anidrido de trifluorometanossulfonilo (anidrido tríflico) e DMSO, pentacloreto fosforoso e DMSO, cloreto de dimetilfosforilo e DMSO e isobutilcloroformato e DMSO. As condições de oxidação descritas por Reetz et al., [Angew Chem.. 99, p. 1186, (1987)], Angew Chem. Int. Ed. Engl., 26, p. 1141,1987) empregam cloreto de oxalilo e DMSO a -78°C. -22-
f ( ιΆ 0 método de oxidação preferido, descrito neste invento, é o do complexo de trióxido de enxofre piridina, trietilamina e DMSO à temperatura ambiente. Este sistema proporciona rendimentos excelentes do aminoaldeído quiral protegido pretendido sem necessidade de purificação para ser utilizado, i.e., a necessidade de purificar quilogramas de intermediários por cromatografia é eliminada e as operações em larga escala são menos perigosas. A reacção à temperatura ambiente também elimina a necessidade de usar um reactor de temperaturas baixas, o que toma o processo mais adequado à produção comercial. A reacção pode ser realizada numa atmosfera inerte como seja azoto ou árgon, ou ar normal ou seco, à pressão atmosférica ou num vaso de reacção fechado, sob pressão positiva. Prefere-se uma atmosfera de azoto. Bases de aminas alternativas incluem, por exemplo, tributilamina, tri-isopropilamina, N-metilpiperidina, N-metilmorfolina, azabiciclononano, si-isopropiletilamina, 2,2,6,6-tetrametilpiperidina, Ν,Ν-dimetilaminopiridina ou misturas destas bases. Trietilamina é a base preferida. Alternativas ao DMSO puro como solvente incluem misturas de DMSO com solventes não próticos ou halogenados tais como tetra-hidrofurano, acetato de etilo, tolueno, xileno, diclorometano, dicloreto de etileno. Co-solventes apróticos dipolares incluem acetonitrilo, dimetilfor-mamida, dimetilacetamida, acetamida, tetrametilureia e o seu análogo cíclico, N-metilpirrolidona e sulfolano.
Em lugar do Ν,Ν-dibenzilfenilalaninol como precursor aldeído, os derivados fenilalaninol discutidos atrás podem ser usados para proporcionar o correspondente aldeído N-mono-substituído (P1 ou P2= H) ou N,N-di-substituído.
Ainda, a redução com hidreto de um derivado amida ou éster da -23- CL— correspondente fenilalanina protegida no azoto com alquilo, benzilo ou ciclo-acenilo, fenilalanina substituída ou análogo de cicloalquilo do derivado de fenilalanina, pode ser realizada de forma a proporcionar um composto da Fórmula III. A transferência de hidreto é um método adicional de síntese de aldeídos em condições onde são evitadas as condensações de aldeídos, cf, oxidação de Oppenauer.
Os aldeídos deste processo podem ser também preparados por métodos de redução de fenilalaninas protegidas e de análogos de fenilalaninas, ou seus derivados de amida ou éster por, e.g., amálgama de sódio com HC1 em etanol ou lítio ou sódio ou potássio ou cálcio em amónia. A temperatura de reacção pode ser entre -20°C e 45°C, e de preferência entre 5°C e 25°C. Dois métodos adicionais de obtenção de aldeído com o azoto protegido incluem oxidação do álcool correspondente com hipoclorito de sódio, na presença de uma quantidade catalítica do radical livre 2,2,6,6-tetrametil-l-piridiloxilo. Num segundo método, a oxidação do álcool para aldeído é conseguida através de uma quantidade catalítica de perrutenato de tetrapropilamónio na presença de N-metilmorfolino-N-óxido.
Em alternativa, um derivado de cloreto ácido de uma fenilalanina protegida ou derivado de fenilalanina, conforme descrito atrás, pode ser reduzido com hidrogénio e um catalisador como seja Pd em carbonato de bário ou sulfato de bário, com ou sem um agente adicional moderador da catálise como seja enxofre ou um tiol (redução de Rosenmund).
Um aspecto importante do presente invento é uma reacção que envolve a adição de clorometil-lítio ou bromometil-lítio ao a-aminoaldeído. Embora conhecida a adição de clorometil-lítio ou bromometil-lítio aos aldeídos, -24- -24-
At CL a adição de tais espécies aos aminoaldeidos racémicos ou quirais para formar aminoepóxidos da fórmula
(IV) é nova. A adição de clorometil-lítio ou bromometil-lítio a um aminoaldeído quiral, com grupos protectores do radical amínico adequados, é muito selectivo do ponto de vista diastereomérico. De preferência, o clorometil-lítio ou bromometil-lítio é gerado in situ a partir da reacção do di-halometano e n-butil-litio. Halometanos de metilenação aceitáveis incluem cloroiodometano, bromoclorometano, dibromometano, di-iodometano, bromofluorometano. O éster de sulfonato do produto de adição de, por exemplo, brometo de hidrogénio a formaldeído é também um agente de metilenação. Tetra-hidroíurano é o solvente preferido, no entanto solventes alternativos tais como tolueno, dimetoxietano, dicloreto de etileno, cloreto de metileno podem ser usados como solventes puros ou como uma mistura. Solventes apróticos dipolares, tais como acetonitrilo, DMF e N-metilpirrolidona, são úteis como solventes ou como parte de uma mistura de solventes. A reacção pode ser realizada numa atmosfera inerte, como seja azoto ou argon. Outros reagentes organometálicos, como sejam metil-lítio, tert-butil-lítio, sec-butil-lítio, fenil-lítio, sódio fenílico, lítio di-isopropilamina, Htio bis(trimetilsilil)amida e outras bases de amidas, podem substituir n-butil-lítio. A reacção pode ser realizada a temperaturas entre cerca de -80°C e 0°C mas de preferência entre -80°C e -20°C. As temperaturas de reacção mais -25-
At^rb C~—cUi preferidas são entre —40°C e -15°C. Os reagentes podem ser adicionados de uma só vez, mas são preferidas várias adições em determinadas condições. A pressão preferida da reacção é a atmosférica. No entanto, uma pressão positiva é importante em certas condições, tais como um ambiente de humidade elevada. Métodos alternativos de conversão nos epóxidos deste invento incluem substituição de outras espécies carregadas precursoras de metilenação, seguido de tratamento com base para formar o anião análogo. Exemplos destas espécies incluem tosilato ou triflato de trimetilsulfoxónio, haleto de tetrametil-amónio, haleto de metildifenilsulfoxónio em que o haleto é cloreto, brometo ou iodeto. A conversão dos aldeídos deste invento nos seus derivados epóxido pode também ser realizada em vários passos. Por exemplo, a adição do anião de tioanisol preparado, por exemplo, a partir de um reagente de lítio butílico ou arílico, ao aminoaldeído protegido, oxidação do álcool amino-sulfito protegido resultante com agentes de oxidação bem conhecidos tais como peróxido de hidrogénio, hipoclorito de tert-butilo, hipoclorito de sódio ou periodato de sódio para dar um sulfóxido. A alquilação do sulfóxido, por exemplo, com iodeto ou brometo de metilo, tosilato de metilo, mesilato de metilo, triflato de metilo, brometo de etilo, brometo de isopropilo, cloreto de benzilo na presença de uma base orgânica ou inorgânica. Como alternativa, o álcool de amino-sulfito protegido pode ser alquilado, por exemplo, com os agentes de alquilação acima referidos, para proporcionar sais de sulfónio que são subsequentemente convertidos nos presentes epóxidos com bases tert-aminas ou minerais.
Os epóxidos pretendidos formam-se, usando as condições mais preferidas, de modo selectivo em relação aos diasteriómeros, em proporções -26- y^t Ιί}*. quantitativas de pelo menos aproximadamente 85:15 (S:R). O produto pode ser purificado por cromatografia para dar o produto puro em termos de diastere-ómeros e enantiómeros, mas é mais convenientemente usado directamente, sem purificação, para preparar os inbidores da protease do HIV. O epóxido reage então, num sistema solvente adequado, com igual
quantidade ou, preferencialmente, com um excesso de R3NH2 para formar o . aminoálcool da Fórmula I
(I) em que R3 é como definido atrás. A reacção pode ser conduzida numa larga gama de temperaturas,
e.g., desde 10°C até 100°C, mas é de preferência, mas não necessariamente, conduzida a uma temperatura a que o solvente inicie o refluxo. Os sistemas de solventes adequados incluem aqueles em que o solvente é um álcool, como seja metanol, etanol, isopropanol, éteres tais como tetra-hidrofurano, dioxana e tolueno, Ν,Ν-dimetilformamida, dimetilsulfóxido e suas misturas. Um solvente preferido é o isopropanol. Exemplos de aminas correspondentes à Fórmula R3NH2 incluem benzilamina, isobutilamina, n-butilamina, isopentilamina, isoamilamina, ciclo-hexilmetilamina, ciclopentilmetilamina, naftilmetilamina. Nalguns casos, R3NH2pode ser usado como solvente, como seja iso-butilamina.
Como alternativa, o aminoaldeído protegido da Fórmula III pode também reagir com um sal cianeto, como seja cianeto de sódio ou cianeto de
-27- potássio para formar uma cianidrina quiral da fórmula
CN
De preferência, um acelerador da velocidade de reacção, como seja
bissulfito de sódio, é usado para potenciar a velocidade de formação de cianidrina. Como alternativa, trimetilsililnitrilo pode ser usado para formar um intermediário trimetilsililoxiciano, que pode ser facilmente hidrolisado na cianidrina. A reacção pode ser realizada a temperaturas entre cerca de -5°C e
5°C, mas de preferência entre 0°C e 5°C. As cianidrinas pretendidas formam-se, usando cianeto de sódio e bissulfito de sódio, de forma selectiva relativamente aos diasteriómeros em proporções quantitativas de pelo menos aproximadamente 88:12 (S:R). O produto pode ser purificado por cromatografia para dar o produto puro em termos de diasteriómeros e enantiómeros.
O grupo nitrilo pode ser reduzido na amina da Fórmula V
(V) A redução pode ser conseguida usando uma variedade de reagentes redutores, como os de transferência de hidreto, os de reduções com metais e os de
At h*.rfr
-28-hidrogenação catalítica, os quais são bem conhecidos dos familiarizados com a matéria. Exemplos de reagentes de hidreto com e sem um ou mais metais pesados ou sais de metais pesados como reagentes auxiliares incluem, por exemplo, hidreto de lítio alumínio, hidreto de lítio tri-tert-butoxialumínio, hidreto de lítio trimetoxi-alumínio, hidreto de alumínio, diborano (ou borano), borano/THF, borano/dimetilsulfito, borano/piridina, boro-hidreto de sódio, boro-hidreto de lítio, boro-hidreto de sódio/sais de cobalto, boro-hidreto de sódio/níquel de Raney, boro-hidreto de sódio/ácido acético. Os solventes da reacção incluem, para os hidretos mais reactivos, THF, éter dietílico, dimetoxi-etano, diglime, tolueno, heptano, ciclo-hexano, éter metílico de tert-butilo.
Os solventes ou misturas de solventes para reduções, usando reagentes tais como boro-hidreto de sódio para além dos solventes não próticos enumerados atrás, podem incluir etanol, n-butanol, álcool tert-butílico, etileno-glicol.
As reduções de metais incluem, por exemplo, sódio e etanol. As temperaturas de reacção podem variar entre refluxo do solvente e -20°C. Geralmente prefere-se uma atmosfera inerte como seja azoto ou árgon em que é possível a produção/libertação de gás inflamável ou solvente. A hidrogenação catalítica (catalisador metálico mais hidrogénio) pode ser realizada nos mesmos solventes descritos atrás com metais ou sais de metais como sejam níquel, cloreto de paládio, platina, ródio, óxido de platina ou paládio em carbono ou outros catalisadores conhecidos dos familiarizados com a matéria. Estes catalisadores podem ser também modificados, por exemplo, com ligandos fosfino, enxofre ou compostos contendo enxofre ou aminas, tais como quinolina. As hidrogenações podem scr realizadas à pressão atmosférica ou a pressões elevadas para 1500 psi, -29- a temperaturas entre 0o e 250°C. O agente redutor mais preferido é diborano · tetra-hidrofurano, de preferência à temperatura ambiente numa atmosfera de azoto e pressão atmosférica. A amina da Fórmula V pode então reagir com R3L, em que L é um grupo migrante seleccionado entre halogénio, tosilato, mesolato e similares, e R3 representa alquilo, alcenilo, alcinilo, hidroxialquilo, alcoxialquilo, eicloalquilo, cicloalqulalquilo, heterocicloalquilo, heterocicloalquilalquilo, aralquilo ou heteroaralquilo. Como alternativa, o grupo amínico primário da Fórmula V pode ser alquilado, por redução com um aldeído, para introduzir o grupo R3. Por exemplo, quando R3 é um grupo isobutilo, o tratamento da Fórmula V com isobutiraldeído, em condições de aminação redutoras, dá a Fórmula I pretendida. De forma semelhante, quando R3 é um grupo isoamílico, o tratamento da Fórmula V com isovaleraldeído, em condições de aminação redutoras, dá a Fórmula I pretendida. Outros aldeídos podem ser usados para introduzir vários grupos R3. A aminação redutora pode ser realizada usando uma variedade de condições de reacção bem conhecidas dos familiarizados com a matéria. Por exemplo, a aminação redutora da Fórmula V com um aldeído pode ser realizada com um agente redutor, como seja cianoboro-hidreto de sódio ou boro-hidreto de sódio, num solvente adequado, como seja metanol, etanol e tetra-hidrofurano. Como alternativa, a aminação redutora pode ser realizada usando hidrogénio na presença de um catalisador, tal como paládio ou platina, paládio em carbono ou platina em carbono, ou vários outros catalisadores metálicos conhecidos dos familiarizados com a matéria, num solvente adequado como seja metanol, etanol, tetra-hidrofurano, acetato de etilo e tolueno.
Como alternativa, a amina da Fórmula I pode ser preparada por -30- c
Mr l redução do aminoácido protegido da fórmula
Rl
(disponível comercialmente ria NipponKáyakri, Japan) no álcool correspondente da fórmula P1 P2
N
OH
OH A redução pode ser conseguida usando uma variedade de reagentes e condições redutoras. Um reagente de redução preferido é diborano · tetra-hidrofurano. O álcool é então convertido num grupo migrante (L') por tosilação, mesilação ou conversão num grupo de halogénio, tal como cloro ou bromo: R1
L ‘
Finalmente, o grupo migrante (L') reage com R3NH2 como descrito atrás para formar o aminoálcool da Fórmula I. Como alternativa, o tratamento do álcool com bases pode resultar na formação do aminoepóxido da Fórmula IV. A preparação acima de aminoálcool da Fórmula I é aplicável a misturas de isómeros ópticos, assim como a compostos resolvidos. Caso se -31 -pretenda um isómero óptico particular, ele pode ser seleccionado através da escolha do material de partida, e.g., L-fenilalanina, D-fenilalanina, L-fenilalaninol, D-fenilalaninol, D-hexa-hidrofenilalaninol, ou a resolução pode ocorrer em passos intermédios ou no passo final. Os auxiliares quirais tais como um ou dois equivalentes de ácido canforsulfónico, ácido cítrico, ácido canfórico ou ácido 2-metoxifenilacético podem ser usados para formar sais, ésteres ou amidas dos compostos deste invento. Estes compostos ou derivados podem ser cristalizados ou separados por cromatografia usando uma coluna quiral ou aquiral como é bem conhecido dos familiarizados com a matéria. Uma outra vantagem do presente processo é que os materiais podem ser levados ao longo dos passos descritos, sem purificação dos produtos intermediários. No entanto, caso se opte pela purificação, os intermediários descritos podem ser preparados e guardados num estado puro. A síntese prática e eficaz aqui descrita tem sido transporta para escalas maiores com êxito para preparar grandes quantidades de intermediários para a preparação de inibidores da protease do HIV. Ela oferece várias vantagens para a preparação de vários quilogramas: (1) não requere a utilização de reagentes perigosos tais como diazometano, (2) não requere modificação por cromatografia, (3) é curta e eficiente, (4) utiliza reagentes baratos e facilmente adquiridos por via comercial, (5) produz alfa-aminoepóxidos enantiomerica-mente puros. Em particular, o processo do invento produz epóxido enantiomeri-camente puro, conforme necessário para a preparação do intermediário enantio-mericamente puro para síntese de outros inibidores da protease do HIV.
Os aminoepóxidos foram preparados utilizando o processo que se segue conforme descrito no Esquema II abaixo. -32-
Esquema II
(9)
No Esquema II, está apresentada uma síntese para o epóxido, N,N-a-S-tris(fenilmetil)-2S-oxiranometan-amina quiral. A síntese começa a partir de L-fenilalanina. O aldeído é preparado em três passos a partir de L-fenilalanina ou fenilalaninol. L-fenilalanina é convertida em éster benzílico do ácido N,N- -33-dibcnzilamino, usando brometo de benzilo cm condições aquosas. A redução do éster benzílico é realizada usando hidreto de di-isobutilalumínio (DIBAL-H) em tolueno. Como alternativa, pode ser usado hidreto de lítio alumínio. Em vez da purificação por cromatografia, o produto é purificado por paragem da reacção com um ácido (ácido clorídrico), o sal hidrocloreto é removido por filtração como um sólido branco e depois isolado através de uma extraeção ácido/base. Após recristalização, obtem-se um álcool química e opticamente puro. Como alternativa, e de preferência, o álcool pode ser obtido num passo com 88% de rendimento por benzilação de L-fenilalaninol usando benzilbrometo em condições aquosas. A oxidação do álcool para aldeído é também modificada para permitir uma operação mais conveniente durante o aumento de escala. Em vez dos processos Swem convencionais, usando cloreto de oxalilo e DMSO em cloreto de metileno a temperaturas baixas (reacção muito exotérmica), usou-se trióxido de enxoffe-piridina/DMSO (Parikh, J., Doering, W., J. Am. Chem. Soc.. 89. p. 5505, 1967) que pode ser convenientemente realizado à temperatura ambiente com rendimentos excelentes do aldeído pretendido e pureza química e enantiomérica elevada não requerendo purificação.
Uma reacção importante envolve a adição de clorometil-lítio ou bromometil-lítio ao aldeído. Apesar da adição de clorometil-lítio ou bromometil-lítio aos aldeídos ter sido descrita anteriormente, a adição de tais espécies aos a-aminoaldeídos quirais para formar aminoepóxidos quirais pensamos que seja nova. Agora, clorometil-lítio ou bromometil-lítio é gerado in situ a partir de cloroiodometano (ou bromoclorometano) ou dibromometano e n-butil-lítio, a uma temperatura numa gama entre cerca de -78°C e cerca de -10°C, em THF na presença de aldeído. A cloro-hidrina ou bromo-hidrina formada é evidenciada por análise de TLC. Após aquecimento até à temperatura ambiente, o epóxido pretendido é formado selectivamente em relação aos diasteriómeros num proporção de 85:15 (S:R). O produto pode ser purificado por cromatografia para dar o produto diastereomericamente puro, como um óleo incolor, mas é mais -34-convenientemente usado directamente sem purificação. O Esquema III ilustra a preparação da aminopropilureia (9) usando amina protegida mista de fenilalaninol, onde BOC é t-butoxicarbonilo e Bn é benzilo.
Esquema III
(BOQ2Q.solvent^
QCH2U
BnBOCN
Isobutilamina ""BnBOCN OH (6)
Isocianato de t-bu+il (5)
-35- O esquema IV ilustra uma preparação alternativa de aminoepóxido (5) utilizando um ílideo de enxofre.
Esquema IV
PbCHO, N*BH3CN ou Hidrogénio, catalisador, PhCHO
(BOCY2Q. solvente
DMSO.EÚW. S03.piridina ou líxivia/TEMPO
Trimetilsulfónio ou Haleto de Trimetilsulfonio, Base, Solvente 0
BnBOCN (5) A aminopropilureia (9) foi também preparada usando um processo como descrito no Esquema V abaixo.
Esquema V
PhCHO. NaBH3CN
ou Hidrogénio, H2N'^CH2OH c“tali°“dor'PhCHO BnHN^CI^OH 0) (2) fBOCnO solvente
(3)
CHO
NnHSm, KCN BnBOCN
BnBOCN CH20H
DMSO.B3N, t S03.piridina ou iíxívío/τέμρο BnBOCN (4)
No Esquema V uma amina protegida mista de fenilalanina, em que BOC é t-butoxicarbonilo e Bn é benzilo, reagiu com cianeto de potássio para formar a cianidrina estereoisomérica pretendida (12) com rendimento elevado. -37- /^sf. C.—-<_(
Para além da especificidade da ícacção cm termos dc estercoisómcros, este processo tem ainda a vantagem de ser mais fácil e menos dispendioso devido às temperaturas de reacção não necessitarem de ser inferiores a -5°C. A amino-ureia (9) foi também preparada usando o processo como descrito no Esquema VI abaixo.
Esquema VI
O processo do Esquema VI requere apenas um grupo protector, BOC, para a amina do hidroxiaminoácido. Este processo tem a vantagem de ter a estereoquímica pretendida dos grupos benzilo e hidroxilo no material de partida. Assim, a quilaridade não necessita de ser introduzida com a resultante perda de material devido à preparação de diastereómeros. EXEMPLO 1 P-2-[Bis(fenilmetil)amino]benzenopropanol MÉTODO 1: pS-2-[Bis(fenilmetil)amino]benzenopropanol a partir da redução DIBAL do éster fenilmetílico de N,N-bis(fenilmetil)-L-fenilalanina
Passo 1:
Uma solução de L-fenilalanina (50,0 g, 0,302 mol), hidróxido de sódio (24,2 g, 0,605 mol) e carbonato de potássio (83,6 g, 0,605 mol) em água (500 ml) foi aquecida a 97°C. Brometo de benzilo (108,5 ml, 0,605 mol) foi então adicionado lentamente (tempo de adição - 25 min). A mistura foi agitada a 97°C durante 30 minutos numa atmosfera de azoto. A solução foi arrefecida à temperatura ambiente e extraída com tolueno (2 x 250 ml). As fases orgânicas combinadas foram lavadas com água e solução saturada de cloreto de sódio, secas sobre sulfato de magnésio, filtradas e concentradas para se obter um óleo. A identidade do produto foi confirmada como se segue. TLC analítica (10% de acetato de etilo/hexano, gel de sílica) mostrou que um componente principal com um valor de Rf = 0,32 é o composto tribenzilado pretendido, éster fenilmetílico de N,N-bis(fenilmetil)-L-fenilalanina. Este composto pode ser purificado por cromatografia em coluna (gel de sílica, 15% de acetato de etilo/hexano). Geralmente o produto é suficientemente puro para ser usado directamente no passo seguinte sem posterior purificação. O espectro de 'H NMR esteve de acordo com a literatura publicada. *H NMR (CDC13) δ, 3,00 r 3,14 (Sistema ABX, 2H, Jab=14,1 Hz, Jax=7,3 Hz e JBX= 5,9 Hz), 3,54 e 3,92 (Sistema AB, 4H, Jab=13,9 Hz), 3,71 (t, 1H, J=7,6 Hz), 5,11 e 5,23 (Sistema AB, 2 H, Jab=12,3 Hz) e 7,18 (m, 20H). EIMS: m/z 434 (M-l). -39-
Passo 2: O éster fenilmetílico benzilado de fenilalanina (0,302 mol) da reacção anterior foi dissolvido em tolueno (750 ml) e arrefecido a -55°C. Uma solução 1,5M de DIBAL em tolueno (443,9 ml, 0,666 mol) foi adicionada a uma velocidade que permitiu manter a temperatura entre -55 e -50°C (tempo de adição - 1 hr). A mistura foi agitada durante 20 minutos numa atmosfera de azoto e depois parada a -55°C através da adição lenta de metanol (37 ml). A solução fria foi então vertida sobre uma solução fria (5°C) de HC1 1,5 N (1,8 1). O sólido precipitado (cerca de 138 g) foi removido por filtração e lavado com tolueno. O material sólido foi suspenso numa mistura de tolueno (400 ml) e água (100 ml). A mistura foi arrefecida a 5°C e tratada com NaOH 2,5 N (186 ml) e depois agitada à temperatura ambiente até o sólido se dissolver. A fase de tolueno foi separada da fase aquosa e lavada com água e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio, filtrada e concentrada para um volume de 75 ml (89 g). Adicionou-se ao resíduo acetato de etilo (25 ml) e hexano (25 ml) começando então a cristalizar o produto álcool pretendido. Após 30 minutos, adicionou-se mais 50 ml de hexano para promover mais cristalização. O sólido foi removido por filtração e lavado com 50 ml de hexano para dar 34,9 g da primeira colheita de produto. Um produto da segunda colheita (5,6 g) foi isolado por nova filtração do líquor mãe. As duas colheitas foram combinadas e recristalizadas a partir de acetato de etilo (20 ml) e hexano (30 ml) para dar 40 g de β-2-[ΒΪ8(ί6ηΐ^βΙί1)3ΐηϊηο^βηζ6ηορΓορ3ηο1, 40% de rendimento a partir de L-fenilalanina. Mais 7 g do produto (7%) pode ser obtido a partir de recristalização do líquor mãe concentrado. TLC do produto Rf = 0,23 (10% de acetato de etilo/hexano, gel de sílica); 'H NMR (CDC13) δ 2,44 (m, 1H), 3,09 (m, 2H), 3,33 (m, 1H), 3,48 e 3,92 (Sistema AB, 4H, Jab=13,3 Hz), 3,52 (m, ÍH) e 7,23 (m, 15H); [a]D25 +42,4 (c 1,45, CH2C12); DSC 77,67°C; Anál. Cale. Para C23H25ON: C, 83,34; H, 7,60; N, 4,23. Encontrado: C, 83,43; H, 7,59; N, -40- η 4,22. HPLC na fase estacionária quiral: coluna Cyelobond I SP (250 x 4,6 mm D.I.), fase móvel: metanol/tampão trietilacetato de amónio pH 4,2 (58:42, v/v), fluxo de 0,5 ml/min, detecção com detector a 230 nm e uma temperatura de 0°C. Tempo de retenção: 11,25 min., tempo de retenção do enantiómero do produto pretendido: 12,5 min. MÉTODO 2: Preparação de P-2-[Bis(fenilmetil)amino] benzenopropanol a partir de Ν,Ν-dibenzilação de L-fenilalaninol L-fenilalaninol (176,6 g, 1,168 mol) foi adicionado a uma solução, em agitação, de carbonato de potássio (484,6 g, 3,506 mol) em 710 ml de água. A mistura foi aquecida a 65°C numa atmosfera de azoto. Uma solução de brometo de benzilo (400 g, 2,339 mol) em etanol 3A (305 ml) foi adicionada a uma velocidade que manteve a temperatura entre cerca de 60 e 68°C. A solução bifásica foi agitada a 65°C, durante 55 minutos, e depois deixada a arrefecer a 10°C com agitação vigorosa. O produto oleoso solidificou em grânulos pequenos. O produto foi diluído com 2,0 1 de água da torneira e agitado durante 5 minutos para dissolver os produtos secundários inorgânicos. O produto foi isolado por filtração sob pressão reduzida e lavado com água até o pH ser de 7. O produto bruto obtido foi seco ao ar durante a noite para dar um sólido semi-seco (407 g) que foi recristalizado entre 1,1 1 de acetato de etilo/heptano (1:10 por volume). O produto foi isolado por filtração (a -80°C), lavado com 1,6 1 de acetato de etilo/heptano frio (-10°C) (1:10 por volume) e seco ao ar para dar 339 g (88% de rendimento) de p-2-[Bis(fenilmetil)amino]benzenopropanol, Pf = 71,5-73,0°C. Se necessário, pode ser obtido mais produto a partir do líquor mãe. A outra caracterização analítica foi idêntica à do composto preparado como descrito no Método 1. -41 -At
EXEMPLO 2 aS-[Bis(fenilmetil)amino]benzenopropanaldeído MÉTODO 1: P-2-[Bis(fenilmetil)amino]benzenopropanol (200 g, 0,604 mol) foi dissolvido em trietilamina (300 ml, 2,15 mol). A mistura foi arrefecida a 12°C e uma solução do complexo trióxido de enxofre/piridina (380 g, 2,39 mol) em DMSO (1,6 1) foi adicionada a uma velocidade que manteve a temperatura entre 8 e 17°C (tempo de adição - 1,0 h). A solução foi agitada à temperatura ambiente numa atmosfera de azoto durante 1,5 horas, altura em que a reacção estava completa, segundo análise por TLC (33% de acetato de etilo/hexano, gel de sílica). A mistura de reacção foi arrefecida com mistura de água e gelo e parada com 1,6 1 de água fria (10-15°C) durante 45 minutos. A solução resultante foi extraída com acetato de etilo (2,0 1), lavada com 5% de ácido cítrico (2,0 1) e solução aquosa saturada de cloreto de sódio (2,2 1), seca sobre MgSC>4 (280 g) e filtrada. O solvente foi removido num evaporador rotativo a 35-40°C e depois seco sob vácuo para dar 198,8 g de aS-[Bis(fenilmetíl)amino] benzenopro-panaldeído como um óleo amarelo pálido (99,9%). O produto bruto obtido estava suficientemente puro para ser usado directamente no passo seguinte sem purificação. Os dados analíticos do composto foram consistentes com a literatura publicada. [α]ο25 = -92,9° (c 1,87, CH2C12); Ή NMR (400 MHz, CDC13) δ, 2,94 e 3,15 (Sistema ABX, 2H, Jab= 13,9 Hz, Jax= 7,3 Hz e JBX= 6,2 Hz), 3,56 (t, 1H, 7,1 Hz), 3,69 e 3,82 (Sistema AB, 4H, JAB= 13,7 Hz), 7,25 (m, 15H), 9,72 (s, 1H); HRMS Cale. Para (M+l) C23H24NO 330,450, encontrado: C23H23NO: C, 83,86; H, 7,04; N, 4,25. Encontrado: C, 83,64; H, 7,42; N, 4,19. HPLC em fase estacionária quiral: (S,S) coluna Pirkle-Whelk-0 1 (250 x 4,6 mm D.I.), fase móvel: hexano/isopropanol (99,5:0,5, v/v), fluxo:l,5 ml/min, detecção com -42- detector de UV a 210 nm. Tempo de retenção do isómero S pretendido: 8,75 in., tempo de retenção do enantiómero R 10,62 min. MÉTODO 2:
Uma solução de cloreto de oxalilo (8,4 ml, 0,096 mol) em diclorometano (240 ml) foi arrefecido a -74°C. Uma solução de DMSO (12,0 ml, 0,155 mol) em diclorometano(50 ml) foi então adicionada lentamente a uma velocidade que manteve a temperatura a -74°C ) tempo de adição « 1,25 hr). A mistura foi agitada durante 5 min. seguido da adição de uma solução de p-2-[Bis(fenilmetil)amino]benzenopropanol (0,074 mol) em lOOml de diclorometano (tempo de adição de -20 min., temp. -75°C a -68°C). A solução foi agitada a -78°C durante 35 minutos numa atmosfera de azoto. Adicionou-se então trietilamina (41,2 ml, 0,295 mol) durante 10 min. (temp. -78°C a -68°C) precipitando então o sal de amónio. A mistura fria foi agitada durante 30 min. e depois adcionou-se água (225 ml). A fase de diclorometano foi separada da fase aquosa e lavada com água, solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio, filtrada e concentrada. O resíduo foi diluído com acetato de etilo e hexano e depois filtrado para remover mais sal de amónio. O filtrado foi concentrado para dar aS-[bis(fenilmetil)amino] benzenopropanaldeído. O aldeído foi levado para o passo seguinte sem purificação. MÉTODO 3:
A uma mistura de 1,0 g (3,0 mmoles) de PS-2-[bis(fenilmetil)amino]benzenopropanol, 0,531 g (4,53 mmoles) de N-metilmorfolina, 2,27 g de crivos moleculares (4A) e 9,1 ml de acetonitrilo foi adicionado 53 mg (0,15 mmoles) de perrutenato de tetrapropilamónio (TPAP). A -43- C-— mistura foi agitada durante 40 minutos à temperatura ambiente e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi suspenso em 15 ml de acetato de etilo, filtrado através de uma almofada de gel de sílica. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para dar um produto contendo aproximadamente 50% de aS-2-[bis(fenilmetil)amino] benzenopropanaldeído como um óleo amarelo pálido. MÉTODO 4: A uma solução de 1,0 g (3,02 mmoles) de PS-2-[bis(fenilmetil)amino]benzenopropanol em 9,0 ml de tolueno foi adicionado 4,69 mg (0,03 mmoles) de 2,2,6,6-tetrametil-l-piperidiniloxilo, radical livre (TEMPO), 0,32 g (3,11 mmoles) de brometo de sódio, 9,0 ml de acetato de etilo e 1,5 ml de água. A mistura foi arrefecida a 0°C e adicionou-se lentamente, ao longo de 25 minutos, uma solução aquosa de 2,87 ml de lixívia doméstica a 5%, contendo 0,735 g (8,75 mmoles) de bicarbonato de sódio e 8,53 ml de água. A mistura foi agitada a 0°C durante 60 minutos. Fez-se mais duas adições (1,44 ml cada) de lixívia seguido de agitação durante 10 minutos. A mistura de duas fases foi deixada em repouso para se dar a separação. A fase aquosa foi extraída duas vezes com 20 ml de acetato de etilo. A fase orgânica combinada foi lavada com 4,0 ml de uma solução contendo 25 mg de iodeto de potássio e água (4,0 ml), 20 ml de solução aquosa de tiossulfato de sódio a 10% e depois com solução aquosa saturada de cloreto de sódio. A solução orgânica foi seca sobre sulfato de magnésio, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para dar 1,34 g de óleo bruto contendo uma pequena quantidade do produto aldeído pretendido, aS-[bis(fenilmetil)amino]benzenopropanaldeído MÉTODO 5:
Seguindo os mesmos processos descritos no Exemplo 2 (Método 1)
-44- excepto serem usados 3,0 equivalentes do complexo trióxido de enxofre piridina, isolou-se aS-[Bis(fenilmetil)amino]benzenopropanaldeído com rendimentos comparáveis. EXEMPLO 3 N,N,aS-Tris(fenilmetil)-2S-oxiranometanamina MÉTODO 1:
Uma solução de aS-[bis(fenilmetil)amino]benzenopropanaldeído (191,7 g, 0,58 mol) e cloroiodometano (56,4 ml, 0,77 mol) em tetra-hidrofurano (1,8 1) foi arrefecida até -30 a -35°C (temperaturas mais baixas como seja -70°C também funcionam bem, mas temperaturas mais altas são mais facilmente conseguidas em operações em larga escala) num reactor de aço inoxidável. Uma solução de n-butil-lítio em hexano (1,6 M, 365 ml, 0,58 mol) foi então adicionada a uma velocidade que permitiu manter a temperatura abaixo de -25°C. Após adição, a mistura foi agitada entre -30°C e -35°C durante 10 minutos. Mais adições de reagentes foram realizadas como se segue: (1) adicionou-se mais cloroiodometano (17 ml), seguido de n-butil-lítio (110 ml) a <-25°C. Após adição a mistura foi agitada entre -30°C e -35°C durante 10 minutos. Isto foi repetido mais uma vez. (2) Adicionou-se mais cloroiodometano (8,5 ml, 0,11 mol), seguido de n-butil-lítio (55 ml, 0,088 mol) a <-25°C. Após adição a mistura foi agitada entre -30°C e -35°C durante 10 minutos. Isto foi repetido 5 vezes. (3) Adicionou-se mais cloroiodometano (8,5 ml, 0,11 mol), seguido de n-butil-lítio (37 ml, 0,059 mol) a <-25°C. Após adição a mistura foi agitada entre -30 e -35°C durante 10 minutos. Isto foi repetido uma vez. O arrefecimento externo foi parado e a mistura aquecida até à temperatura ambiente durante 4 a 16 horas, quando TLC (gel de sílica, 20% de acetato de etilo/hexano) -45- indicou que a reacção estava completa. A mistura de reacção foi arrefecida a 10°C e parada com 1452 g de solução a 16% de cloreto de amónio (preparado por dissolução de 232 g de cloreto de amónio em 1220 ml de água), mantendo a temperatura abaixo de 23°C. A mistura foi agitada durante 10 minutos e as fases orgânica e aquosa foram separadas. A fase aquosa foi extraída com acetato de etilo (2x 500 ml). A fase de acetato de etilo foi combinada com a fase de tetra-hidrofurano. A solução combinada foi seca sobre sulfato de magnésio (220 g), filtrada e concentrada num evaporador rotativo a 65°C. O resíduo de óleo castanho foi seco a 70°C in vacuo (0,8 bar) durante 1 h para dar 222,8 g de material bruto. (O peso do produto bruto foi >100%. Devido à instabilidade relativa do produto em gel de sílica, o produto bruto é geralmente usado directamente no passo seguinte sem purificação). A proporção de diastereómeros da mistura bruta foi determinada por NMR de protões: (2S)/(2R): 86:14. Os diastereómeros de epóxido menos e mais abundantes foram caracterizados nesta mistura por análise de tlc (gel de sílica, 10% de acetato de etilo/hexano), Rf = 0,29 & 0,32, respectivamente. Uma amostra analítica de cada um dos diastereómeros foi obtida por purificação por cromatografia em gel de sílica (3% de acetato de etilo/hexano) e caracterizada como se segue: N,N,aS-Tris(fenilmetil)-2S-oxiranometanamina !H NMR (400 MHz, CDCl·,) δ 2,49 e 2,51 (Sistema AB, 1H, JAB=2,82), 2,76 e 2,77 (Sistema AB, 1H, Jab= 4,03), 2,83 (m, 2H), 2,99 & 3,03 (Sistema AB, 1H, JAB= 10,1 Hz), 3,15 (m, 1H), 3,73 & 3,84 (Sistema AB, 4H, Jab= 14,00), 7,21 (m, 15H); 13C NMR (400 MHz, CDC13) δ 139,55, 129,45, 128,42, 128,14, 128,09, 126,84, 125,97, 60,32, 54,23, 52,13, 45,99, 33,76; HRMS Cale. para C24H26NO (M+l) 344,477, encontrado 344,2003. N,N,aS-Tris(fenilmetil)-2R-oxiranometanamina -46- 'h NMR (300 MHz, CDCI3) δ 2,20 (m, 1H), 2,59 (m, 1H), 2,75 (m, 2H), 2,97 (m, 1H), 3,14 (m, 1H), 3,85 (Sistema AB, 4H), 7,25 (m, 15H). HPLC na fase estacionária quiral: coluna Pirkle-Whelk-0 1 (250 x 4,6 mm D.I.), fase móvel: hexano/isopropanol (99,5:0,5, v/v), fluxo: 1.5 ml/min, detecção com detector de UV a 210 nm. Tempo de retenção de (8): 9,38 min., tempo de retenção do enantiómero de (4): 13,75 min. MÉTODO 2:
Uma solução do aldeído bruto 0,074 mol e cloroiodometano (7,0 ml, 0,096 mol) em tetra-hidrofurano (285 ml) foi arrefecida a -78°C, numa atmosfera de azoto. Uma solução de n-butil-lítio 1,6M em hexano (25 ml, 0,040 mol) foi então adicionada a uma velocidade que permitiu manter a temperatura a -75°C (tempo de adição - 15 min.). Após a primeira adição, foi novamente adicionado mais cloroiodometano (1,6 ml, 0,022 mol), seguido de n-butil-lítio (23 ml, 0,037 mol), mantendo a temperatura a -75°C. A mistura foi agitada durante 15 min. Cada um dos reagentes, cloroiodometano (0,70 ml, 0,010 mol) e n-butil-lítio (5 ml, 0,008 mol) foram adicionados mais 4 vezes durante 45 minutos a -75°C. O banho de arrefecimento foi então removido e a solução aquecida a 22°C durante 1,5 horas. A mistura foi vertida sobre 300 ml de solução aquosa saturada de cloreto de amónio. A fase de tetra-hidrofurano foi separada. A fase aquosa foi extraída com acetato de etilo (1 x 300 ml). As fases orgânicas foram lavadas com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secas sobre sulfato de magnésio, filtradas e concentradas para dar um óleo castanho (27,4 g). O produto pode ser usado no passo seguinte sem mais purificação. O diastereómero pretendido pode ser purificado por recristalização num passo subsequente.O produto pode ser também purificado por cromatografia. MÉTODO 3:
Uma solução de aS-[bis(fenilmetil)amino]benzenopropanaldeído (178,84 g, 0,54 mol) e bromoclorometano (46 ml, 0,71 mol) em tetra-hidrofurano (1,8 1) foi arrefecida até -30 a -35°C (temperaturas mais baixas, como seja -70°C, também funcionam bem mas temperaturas mais altas são mais facilmente conseguidas em operações de larga escala) num reactor de aço inoxidável numa atmosfera de azoto. Uma solução de n-butil-lítio em hexano (1,6 M, 340 ml, 0,54 mol) foi então adicionada a uma velocidade que manteve a temperatura abaixo de -25°C. Após adição a mistura foi agitada entre -30°C e -35°C durante 10 minutos, Mais adições de reagentes foram realizadas como se segue: (1) adicionou-se mais clorobromometano (14 ml), seguido de n-butil-lítio (102 ml) a <-25°C. Após adição a mistura foi agitada entre -30°C e -35°C durante 10 minutos. Isto foi repetido mais uma vez. (2) Adicionou-se mais bromoclorometano (7 ml, 0,11 mol), seguido de n-butil-lítio (51 ml, 0,082 mol) a <-25°C. Após adição a mistura foi agitada entre -30°C e -35°C durante 10 minutos. Isto foi repetido 5 vezes. (3) Adicionou-se mais bromoclorometano (7 ml, 0,11 mol), seguido de n-butil-lítio (51 ml, 0,082 mol) a <-25°C. Após adição a mistura foi agitada entre -30 e -35°C durante 10 minutos. Isto foi repetido uma vez. O arrefecimento externo foi parado e a mistura aquecida até à temperatura ambiente durante 4 a 16 horas quando TLC (gel de sílica, 20% de acetato de etilo/hexano) indicou que a reacção estava completa. A mistura de reacção foi arrefecida a 10°C e parada com 1452 g de solução a 16% de cloreto de amónio (preparada por dissolução de 232 g de cloreto de amónio em 1220 ml de água), mantendo a temperatura abaixo de 23°C. A mistura foi agitada durante 10 minutos e as fases orgânica e aquosa foram separadas. A fase aquosa foi extraída com acetato de etilo (2x 500 ml). A fase de acetato de etilo foi combinada com a fase de tetra-hidrofurano. A solução combinada foi seca sobre sulfato de magnésio (220 g), filtrada e concentrada num evaporador rotativo a 65°C. O -48-resíduo de óleo castanho foi seco a 70°C, in vacuo, (0,8 bar) durante 1 h para dai 222,8 g de material bruto. MÉTODO 4:
Seguindo o mesmo processo descrito no Exemplo 3 (Método 3), excepto as temperaturas de reacção serem de -20°C, a N,N,aS-tris(fenilmetil)-2S-oxiranometanamina consistiu numa mistura diastereomérica de menor pureza do que a do Método 3. MÉTODO 5:
Seguindo os mesmos processos descritos no Exemplo 3 (Método 3), excepto as temperaturas de reacção serem de -70 a -78°C, a N,N,aS-tris(fenilmetil)-2S-oxiranometanamina resultante consistiu numa mistura diastereomérica, que foi usada directamente nos passos subsequentes sem purificação. MÉTODO 6:
Seguiu-se os mesmos processos descritos no Exemplo 3 (Método 3), excepto usar-se uma adição contínua de bromoclorometano e n-butil-lítio entre -30 e -35°C. Após a reacção e os procedimentos de processamento descritos no Exemplo 3 (Método 3), a N,N,aS-tris(fenilmetil)-2S-oxiranometanamina pretendida foi isolada com rendimentos e purezas comparáveis. MÉTODO 7:
Seguiu-se os mesmos processos descritos no Exemplo 3 (Método -49- h*- £2-™——u ( «Ά 2), excepto ser usado dibromometano em vez de cloroiodometano. Após a reacção e os procedimentos de processamento descritos no Exemplo 3 (Método 2), isolou-se a N,N,aS-tris(fenilmetil)-2S-oxiranometanamina. EXEMPLO 4 N-[3-(S)-[N,N-bis(fenilmetil)amino]-2R-hidroxi-4-fenilbutil]-N- isobutilamina A uma solução de N,N-dibenzil-3(S)-amino-1,2(S)-epoxi-4-fenilbutano (388,5 g, 1,13 mol) em isopropanol (2,7 1) (ou acetato de etilo) adicionou-se isobutilamina (1,7 Kg, 23,1 mol) durante 2 min. A temperatura aumentou de 25°C para 30°C. A solução foi aquecida a 82°C e agitada a esta temperatura durante 1,5 horas. A solução aquecida foi concentrada sob pressão reduzida a 65°C. O resíduo de óleo castanho foi transferido para um frasco de 3 1 e seco sob vácuo (0,8 mm Hg), durante 16 h, para dar 450 g de 3S-[N,N-bis(fenilmetil)amino-4-fenilbutan-2R-ol como um óleo bruto.
Uma amostra analítica do principal produto diastereomérico pretendido foi obtida por purificação de uma pequena amostra do produto bruto por cromatografia em gel de sílica (40% de acetato de etilo/hexano). Análise por tlc: gel de sílica, 40% de acetato de etilo/hexano; Rf = 0,28; análise por HPLC: coluna ODS Ultrasphere, 25% trietilamino-/tampão fosfato pH 3 - acetonitrilo, fluxo 1 ml/min, detector de UV; tempo de retenção 7,49 min.; HRMS Cale. para C28H27N2O (M+l) 417,616, encontrado 417,2887. Uma amostra analítica do produto diastereomérico menos abundante, 3S-[N,N-bis(fenilmetil)amino]l-(2-metilpropil)amino-4-fenilbutan-2S-ol foi também obtida, por purificação de uma pequena amostra do produto bruto, por cromatografia em gel de sílica (40% de acetato de etilo/hexano). -50-
h^rh CL—J EXEMPLO 5 N-[3(S)-[N,N-bis(fenilmetil)amino]-2(R)-hidroxi-4-fenilbutil]-N-isobutilamina-sal do ácido oxálico A uma solução de ácido oxálico (8,08 g, 89,72 mmol) em metanol (76 ml) adicionou-se uma solução de 3(S)-[N,N-bis(fenilmetil)amino]-l-(2-metilpropil)amino-4-fenilbutan-2R-ol {39,68 g, que contem cerca de 25,44 g (61,06 mmol) do isómero 3(S),2(R) e cerca de 4,49 g (10,78 mmol) do isómero 3(S), 2(S)} em acetato de etilo (90 ml), durante 15 minutos. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante cerca de 2 horas. O sólido foi isolado por filtração, lavado com acetato de etilo (2 x 20 ml) e seco in vacuo durante cerca de 1 hora para dar 21,86 g (70,7% de recuperação do isómero) de sal 97% diastereomericamente puro (baseado nas áreas do pico de HPLC). Análise por HPLC: Coluna "Vydec-peptide/protein" Cl8, detector de UV 254 nm, fluxo 2 ml/min., gradiente {A = 0,05% de ácido trifluoroacético em água, B= 0,05% de ácido trifluoroacético em acetonitrilo, 0 min. 75% A/25% B, 30 min. 10% A/90%B, 35 min. 10% A/90% B, 37 min. 75% A/25% B9; Tempo de retenção 10,68 min. (isómero 3(S), 2(R)) e 9,73 min. (isómero 3(S), 2(S)). Pf = 174,99°C; Microanálise: Cale.: C 71,05%, 7,50%, N 5,53%; Encontrado: C 71,71%, H 7,75%, N 5,39%.
Como alternativa, o di-hidrato do ácido oxálico (119 g, 0,94mole) foi adicionado a um frasco de fundo redondo de 5000 ml, adaptado a um agitador mecânico e com um fenil de gotejamento. Adicionou-se metanol (1000 ml) e a mistura foi agitada até a dissolução estar completa. Uma solução de 3(S)-8N,N-bis(fenilmetil)amino]-l-(2-metilpropil)amino-4-fenilbutan-2R-ol em acetato de etilo (1800 ml, 0,212 g de isómeros de aminoálcool/ml, 0,9160 moles) foi adicionada ao longo de vinte minutos. A mistura foi agitada durante 18 horas e o produto sólido foi isolado por centrifugação em seis porções de 400 g. Cada uma das porções foi lavada com 125 ml de acetato de etilo. O sal foi então colhido e seco, durante a noite, a 1 torr para dar 336,3 g de produto (71% baseado no amino-álcool total). HPLC/MS (electrovaporizador) foi consistente com o produto pretendido (m/z 417 [M+H]*).
Como alternativa, 3(S)-[N,N-bis(fenilmetil)amino]-l-(2-metilpro-pil)amino-4-fenilbutan-2R-ol (5 g) foi dissolvido em metil-tert-butiléter (MTBE) (10 ml) e adicionou-se ácido oxálico (1 g) em metanol (4 ml). A mistura foi agitada durante cerca de 2 horas. O sólido resultante foi removido por filtração, lavado com MTBE frio e seco para dar 2,1 g de sólido branco aproximadamente 98,9% diastereomericamente puro (Baseado nas áreas dos picos de HPLC). EXEMPLO 6 N-[3(S)-[N,N-bis(fenilmetil)amino]-2(R)-hidroxi-4-fenilbutil]-N-isobutilaminasal do ácido acético A uma solução de 3(S)-[N,N-bis(fenilmetil)amino]-l-(2-metilpro-pil)amino-4-fenilbutan-2R-ol em metil-tert-butiléter (MTBE) (45 ml, 1,1 g de isómeros de amino-álcool/ml) adicionou-se, gota a gota, ácido acético (6,9 ml). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante cerca de 1 hora. O solvente foi removido in vacuo para dar um óleo castanho cerca de 85% diastereomericamente puro (baseado nas áreas dos picos de HPLC). O óleo castanho foi cristalizado como se segue: 0,2 g do óleo foi dissolvido no primeiro solvente com aquecimento para se obter uma solução límpida, o segundo solvente foi adicionado até a solução ficar turva, a mistura foi aquecida novamente para ficar límpida, semeada com cerca de 99% de produto diastereomericamente puro, arrefecida até à temperatura ambiente e depois guardada num frigorífico durante r
-52-a noite. Os cristais foram filtrados, lavados com o segundo solvente e secos. A pureza diastereomérica dos cristais foi calculada a partir das áreas dos picos de HPLC. Os resultados estão apresentados na Tabela 1. TABELA 1
Primeiro solvente Segundo solvente Proporção de solventes Peso recuperado (g) Pureza diastereomérica (%) MTBE Heptano 1:10 0,13 98,3 MTBE Hexano 1:10 0,03 99,6 Metanol Água 1:1,5 0,05 99,5 Tolueno Heptano 1:10 0,14 98,7 Tolueno Hexano 1:10 0,10 99,7
Como alternativa, o 3(S)-pSf,N-bis(fenilmetil)amino]-l-(2-metilpro-pil)amino-4-fenilbutan-2R-ol (50,0 g), que contem cerca de 30,06 g (76,95 mmol) do isómero 3(S),2(R) e cerca de 5,66 g (13,58 mmol) do isómero 3(S), 2(S) foi dissolvido em metil-tert-butiléter (45,0 ml). A esta solução adicionou-se ácido acético (6,90 ml, 120,6 mmol) durante um período de cerca de 10 min. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante cerca de 1 hora e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo oleoso foi purificado por recristalização a partir de metil-tert-butiléter (32 ml) e heptano (320 ml). O sólido foi isolado por filtração, lavado com heptano frio e seco in vacuo durante cerca de 1 horas para dar 21,34 g (recuperação de 58,2% do isómero) do sal do ácido monoacético 96% diastereomericamente puro (baseado nas áreas dos picos de HPLC). Pf = 105-106°C; Microanálise: Cal.: C 75,53%, H 8,39%, N, 5,87%; Encontrado: C EXEMPLO 7 N-[3(S)-[N,N-bis(fenilmetil)amino]-2(R)-hidroxi-4-fenilbutil]-N-isobutilamina-sal do ácido L-tartárico 3(S)-[N,N-Bis(fenilmetil)amino]-1 -(2-metilpropil)amino-4-fenilbutan-2(R)-ol bruto (10,48 g, que contem cerca de 6,72 g (16,13 mmol) do isómero 3(S), 2(R) e cerca de 1,19 g (2,85 mmol) do isómero 3(S), 2(S) foi dissolvido em tetra-hidrofurano (10,0 ml). A esta solução adicionou-se uma solução de ácido L-tartárico (2,58 g, 19 mmol) em metanol (5,0 ml) durante um período de aproximadamente 5 min. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante cerca de 10 min. e concentrada sob pressão reduzida. Adicionou-se metil-tert-butiléter (20,0 ml) ao resíduo oleoso e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante cerca de 1 hora. O sólido foi isolado por filtração para dar 7,50 g do sal bruto. O sal bruto foi purificado por recristalização, a partir de acetato de etilo e heptano, à temperatura ambiente para dar 4,13 g (45,2% de recuperação do isómero) do sal do ácido L-tartárico 95% diastereomericamente puro (baseado nas áreas dos picos de HPLC). Microanálise: Cale.: C 67,76%, H 7,41%, N 4,94%; Encontrado: C 70,06%, H 7,47%, N 5,07%. EXEMPLO 8 N-[3(S)-[N,N-Bis(fenilmetil)amino]-2(R)-hidroxi-4-fenilbutil]-N-isobutilamina sal do ácido di-hidroclorídrico 3(S)-[N,N-Bis(fenilmetil)amino]-l-(2-metilpropil)amino-4-feni!butan-2(R)-ol bruto (10,0 g, que contem cerca de 6,41 g (15,39 mmol) de isómero 3(S),2(R) e cerca de 1,13 g (2,72 mmol) de isómero 3(S), 2(S) foi -54- dissolvido em tetra-hidrofurano (20,0 ml). A esta solução adicionou-se ácido clorídrico (20 ml, 6,0 N) durante um perído de cerca de 5 min. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante cerca de 1 hora e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi recristalizado a partir de etanol a 0°C para dar 3,20g (42,7% de recuperação do isómero) do sal de ácido di-hidroclorídrico 98% diastereomericamente puro (baseado nas áreas dos picos de HPLC). Microanálise: alc.: C 68,64%, H 7,76%, N 5,72%; Encontrado: C 68,79%, H 8,07%, N 5,55%. EXEMPLO 9 N-[3(S)-[N,N-Bis(fenilmetil)amino]-2(R)-hidroxi-4-fenilbutil]-N-isobutilamina’sal do ácidotoluenossulfónico 3(S)-[N,N-Bis(fenilmetil)amino]-l-(2-metilpropil)amino-4-fenilbutan-2(R)-ol bruto (5,0 g, que contem cerca de 3,18 g (7,63 mmol) do isómero 3(S),2(R) e cerca de 0,56 g (1,35 mmol) do isómero 3(S), 2(S) foi dissolvido em metil-tert-butiléter (10,0 ml). A esta solução adicionou-se ácido toluenossulfónico (2,28 g, 12 mmol) em metil-tert-butiléter (2 ml) e metanol (2,0 ml) durante um perído de cerca de 5 min. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante cerca de 2 horas e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi recristalizado a partir de metil-tert-butiléter e heptano a 0°C para dar 1,85 g (40,0 % de recuperação do isómero) de sal do ácido monotoluenossulfónico 97 % diastereomericamente puro (baseado nas áreas dos picos de HPLC). EXEMPLOS 10 3(S)-[N,N-Bis(fenilmetil)amino]-1 -(2-metilpropil)amino-4-fenilbutan-2(R)-ol bruto (10,68 g, que contem cerca de 6,85 g (16,44 mmol) do -55- -55-
M b*.r<n isómero 3(S),2(R) e cerca de 1,21 g (2,90 mmol) do isómero 3(S), 2(S) foi dissolvido em tetra-hidrofurano (10,0 ml). A esta solução adicionou-se ácido metanossulfónico (1,25 ml, 19,26 mmol). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante cerca de 2 horas e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo oleoso foi recristalizado a partir de metanol e água a 0°C, filtrado, lavado com metanol/água frio (1:4) e seco in vacuo para dar 2,40 g (28,5% de recuperação do isómero) de sal do ácido monometanossulfónico 98% diastereomericamente puro (baseado nas áreas dos picos de HPLC).
EXEMPLOU 3(S)-[N,N-Bis(fenilmetil)amino]-l-(3-metilbutil)amino-4- fenilbutan-2(R)-ol
Seguiu-se o Exemplo 4 usando isoamilamina em vez de isobutilamina para preparar 3(S)-[N,N-bis(fenilmetil)amino]-l-(2-metilpropil)-amino-4-fenilbutan-2(R)-ol e 3(S)- [N,N-bis(fenilmetil)amino]-1 -(2-metilpropil)-amino-4-fenilbutan-2(S)-ol com rendimentos comparáveis aos do Exemplo 4. A amina bruta foi usada no passo seguinte sem outra purificação. EXEMPLO 12 N-[3S-[N,N-Bis(fenilmetil)amino]-2R-hidroxi-4-fenilbutil]-N'-(l,l- dimetiletil)-N-(2-metilpropil)ureia
Uma solução de 3(S)-[N,N-bis(fenilmetil)amino]-l-(2-metilpro-pil)amino-4-fenilbutan-2(R)-ol (446,0 g, 1,1 mol) do F.xemplo 4 em tetra- -56-hidrofurano (6 1) (ou acetato de etilo) foi arrefecida a 8°C. Isocianato t-butílico (109,5 g, 1,1 mol) foi então adicionado à solução da amina, a partir de um funil adicional, a uma velocidade que manteve a temperatura entre 10-12°C (o tempo de adição foi de cerca de 10 min). O arrefecimento externo foi parado e a reacção foi aquecida a 18°C após 30 min. A solução foi transferida directamente do reactor para um balão de evaporador rotativo (101) através de um tubo de teflon usando vácuo e depois concentrada. O balão foi aquecido num banho maria a 50°C durante as 2 horas necessárias para a destilação do solvente. O resíduo castanho foi dissolvido em acetato de etilo (3 1), lavado com uma solução aquosa a 5% de ácido cítrico (1 x 1,21), água (2 x 500 ml), solução aquosa saturada (1 x 400 ml), seco sobre sulfato de magnésio (200 g) e filtrado. O volume da solução do produto foi reduzido para 671 ml durante 2 h num evaporador rotativo a 50°C. O concentrado foi agitado e diluído com 1,61 de hexano. A mistura foi arrefecida a 12°C e agitada durante 15 horas. Os cristais do produto foram isolados por filtração, lavados com 10% de acetato de etilo/hexano (1 x 500 ml), hexano (1 x 200 ml) e seca in vacuo (2 mm) a 50-°C durante 1 hora para dar 248 g de N-[3S-[N,N-Bis(fenilmetil)amino]-2R-hidroxi-4-fenilbutil]-N'-(l,l-dimetiletil)-N-(2-metilpropil)ureia. O líquor mãe e lavagens foram combinados e concentrados num evaporador rotativo para dar 270 g de um óleo castanho. Este material foi dissolvido em acetato de etilo (140 ml) a 50°C e diluído com hexano (280 ml) e semeado com cristais do produto da primeira colheita (20 mg). A mistura foi arrefecida num banho de gelo e agitada durante 1 h. O sólido foi isolado por filtração, lavado com 10% de acetato de etilo/hexano (1 x 200 ml) e seco in vacuo (2 mm) a 50°C durante 1 h para dar 55,7 g de 11 como segunda colheita (49% de rendimento global). Pf 126 °C; [a]D25 = -59,0° (c = 1,0, CH2CI2), TLC: Rf 0,31 (gel de sílica, 25% de acetato de etilo/hexano).
Uma amostra analítica do diastereómero menos abundante, N-[3S- -57- C-«-Ui [N,N-bis(fenilmetil)aminoJ-2S-hidroxi-4-fenilbutil]-N,-(l,l-dimetiletil)-N-(2-metilpropil)ureia foi isolada por cromatografia em gel de sílica (10-15% de acetato de etilo/hexano) numa experiência anterior e caracterizada. EXEMPLO 13 N-[3S-[N,N-Bis(fenilmetil)amino]-2R-hidroxi-4-fenilbutil]-N'-(l,l- dimetiletil)-N-(3-metilbutil)ureia O produto bruto do Exemplo 11 reagiu com t-butilisocianato, seguindo o método do Exemplo 12, para preparar N-[3S-[N,N-bis(fenil-metil)amino]-2R-hidroxi-4-fenilbutil]-N'-(l,l-dimetiletil)-N-(3-metilbutil)ureia e N-[3 S-[N,N-Bis(fenilmetil)amino]-2S-hidroxi-4-fenilbutil]-N'-( 1, 1-dimetiletil)-N-(3-metilbutil)ureia com rendimentos comparáveis aos do Exemplo 12. EXEMPLO 14 N-[3S-Amino-2R-hidroxi-4-fenilbutil)amino]-N,-(l,l-dimetiletil)- N-(2-metilpropil)ureia N-[3S-Amino-2R-hidroxi-4-fenilmetil)amino]-2R-hidroxi-4-fenil-butil]-N'-(l,l-dimetiletil)-N-(2-metilpropil)ureia (125,77 g, 0,244 mol) do Exemplo 12 foi dissolvido em etanol (1,5 1) (ou metanol) e 20% de hidróxido de paládio em carbono (18,87 g) (ou 4% de paládio em carbono) foi adicionado à solução sob atmosfera de azoto. A mistura foi agitada à temperatura ambiente, numa atmosfera de hidrogénio, a 60 psi durante aproximadamente 8 horas. O catalisador foi removido por filtração e o filtrado foi concentrado para dar 85 g de N-[3S-amino-2R-hidroxi-4-fenilbutil)aminol-N'-( 1,1 -dimetiletil)-N-(2-metil-propil)ureia como um óleo incolor. -58- EXEMPLO 15 N-[3S-Amino-2R-hidroxi-4-fenilbutil]-N'-(l,l-dimetiletil)-N-(3- metilbutil)ureia N-[3S-[N,N-Bis(fenilmetil)amino]-2R-hidroxi-4-fenilbutil]-N'-(l,l-dimetiletil)-N-(3-metilbutil)ureia do Exemplo 13 foi hidrogenado seguindo o método do Exemplo 14 para preparar N-[3S-Amino-2R-hidroxi-4-fenilbutil]-N'-(l,l-dimetiletil)-N-(3-metilbutil)ureia com rendimentos comparáveis aos do Exemplo 14. EXEMPLO 16 N-benzil-L-fenilalaninol MÉTODO 1: L-Fenilalaninol (9,51 g, 0,592 moles) foi dissolvido em 375 ml de metanol numa atmosfera inerte, adicionou-se 35,52 g (0,592 moles) de ácido acético glacial e 50 ml de metanol seguido de uma solução de 62,83 g (0,592 moles) de benzaldeído em 100 ml de metanol. A mistura foi arrefecida até aproximadamente 15°C e uma solução de 134,6 g (2,14 moles) de cianoboro-hidreto de sódio em 700 ml de metanol foi adicionado em aproximadamente 40 minutos, mantendo a temperatura entre 15°C e 25°C. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 18 horas. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida e separada entre 1 1 de solução de hidróxido de amónio 2M e 2 1 de éter. A fase de éter foi lavada com 1 1 de solução de hidróxido de amónio 1M, duas vezes com 500 ml de água, 500 ml de solução aquosa saturada de cloreto de sódio e seca sobre sulfato de magnésio durante 1 hora. A fase de éter foi filtrada, -59- concentrada sob pressão reduzida e o produto sólido bruto foi rccristalizado a partir de 110 ml de acetato de etilo e 1,3 1 de hexano para dar 115 g (81% de rendimento) de N-benzil-L-fenilalaninol como um sólido branco. MÉTODO 2: L-Fenilalaninol (5 g, 33 moles) e 3,59 g (33,83 mmoles) de benzaldeído foram dissolvidos em 55 ml de etanol 3A, numa atmosfera inerte, num agitador de Parr e a mistura foi aquecida a 60°C durante 2,7 horas. A mistura foi arrefecida até aproximadamente 25°C e adicionou-se 0,99 g de 5% de platina em carbono e a mistura foi hidrogenada a 60 psi de hidrogénio e 40°C durante 10 horas. O catalisador foi removido por filtração, o produto foi concentrado sob pressão reduzida e o produto sólido bruto foi recristalizado a partir de 150 ml de heptano para dar 3,83 g (48% de rendimento) de N-benzil-L-fenilalaninol como um sólido branco. EXEMPLO 17 N-(t-Butoxicarbonil)-N-benzil-L-fenilalaninol N-benzil-L-fenilalaninol (2,9 g, 12 mmoles) do Exemplo 16 foi . dissolvido em 3 ml de trietilamina e 27 ml de metanol e adicionou-se 5,25 g (24,1 mmoles) de dicarbonato di-tert-butílico. A mistura foi aquecida a 60°C durante 35 minutos e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em 150 ml de acetato de etilo e lavado duas vezes com 10 ml de ácido clorídrico diluído, frio 0-5°C) (pH 2,5 a 3), 15 ml de água, 10 ml de solução aquosa de cloreto de sódio, seco sobre sulfato de magnésio, filtrado e concentrado sob pressão reduzida. O óleo produto bruto foi purificado por cromatografia em gel de sílica (acetato de etilo:hexano, 12:3 como solvente de eluição) para dar 3,98 g -60-Λί Wb
(97% de rendimento) de óleo incolor. EXEMPLO 18 N-(t-butoxicarbonil)-N-benzil-L-fenilalaninal MÉTODO 1: A uma solução de 0,32 g (0,94 mmoles) de N-(t-butoxicarbonil)-N-benzil-L-fenilalaninol do Exemplo 17 em 2,8 ml de tolueno adicionou-se 2,4 mg (0,015 mmoles) de 2,2,6,6-tetrametil-l-piperidiniloxilo, radical livre (TEMPO), 0,1 g (0,97 mmoles) de brometo de sódio, 2,8 ml de acetato de etilo e 0,34 ml de água. A mistura foi arrefecida a 0°C e adicionou-se, lentamente ao longo de 30 minutos, uma solução aquosa de 4,2 ml de lixívia doméstica a 5% contendo 0,23 g (3,0 ml, 2,783 mmoles) de bicarbonato de sódio. A mistura foi agitada a 0°C durante 10 minutos. Fizeram-se mais três adições (0,4 ml cada) de lixívia seguidas de agitação durante 10 minutos após cada adição para consumir todo o material de partida. A mistura de duas fases permaneceu em repouso para separar. A fase aquosa foi extraída duas vezes com 8 ml de tolueno. A fase orgânica combinada foi lavada com 1,25 ml de uma solução contendo 0,075 g de iodeto de potássio, bissulfato de sódio (0,125 g) e água (1,1 ml), 1,25 ml de solução aquosa de tiossulfato de sódio a 10%, 1,25 ml de tampão de fosfatos a pH 7 e 1,5 ml de solução aquosa saturada de cloreto de sódio. A solução orgânica foi seca sobre sulfato de magnésio, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para dar 0,32 g (100% de rendimento) de N-(t-butoxicarbonil)-N-benzil-L-fenilalaninal. MÉTODO 2: A uma solução de 2,38 g (6,98 mmoles) de N-(t-butoxicarbonil)-N-benzil-L-fenilalaninol do Exemplo 17 em 3,8 ml de trietilamina a 10°C adicionou-se uma solução de 433 g (27,2 mmoles) do complexo trióxido de enxofre piridina em 17 ml de dimetilsulfóxido. A mistura foi aquecida até à temperatura ambiente e agitada durante uma hora. Adicionou-se água (16 ml) e a mistura foi extraída com 20 ml de acetato de etilo. A fase orgânica foi lavada com 20 ml de ácido cítrico a 5%, 20 ml de água, 20 ml de solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio e filtrada. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para dar 2,37 g (100% de rendimento) de N-(t-butoxicarbonil)-N-benzil-L-fenilalaninal. EXEMPLO 19 N,aS-Bis(fenilmetil)-N-(t-butoxicarbonil)-2S-oxiranometanamina MÉTODO 1:
Uma solução de 2,5 g (7,37 mmoles) de N-(t-butoxicarbonil)-N-benzil-L-fenilalaninal do Exemplo 18 e 0,72 ml de cloroiodometano em 35 ml de THF foi arrefecida para -78°C. Adicionou-se lentamente 4,64 ml de uma solução de n-butil-lítio (1,6 M em hexano, 7,42 mmoles), mantendo a temperatura abaixo de -70°C. A mistura foi agitada durante 10 minutos entre -70°C e 75°C. Duas porções adicionais de 0,22 ml de cloroiodometano e 1,4 ml de n-butil-lítio foram adicionadas sequenciadamente e a mistura foi agitada durante 10 minutos entre -70°C e -75°C após cada adição. Quatro porções adicionais de 0,11 ml de cloroiodometano e 0,7 ml de n-butil-lítio foram adicionadas sequenciadamente e a mistura foi agitada durante 10 minutos entre -70°C e -75°C após cada adição. ( -62- A mistura foi aquecida até à temperatura ambiente durante 3,5 horas. O produto foi passado para menos de 5°C com 24 ml de água arrefecida em gelo. As fases bifásicas foram separadas e a fase aquosa foi extraída duas vezes com 30 ml de acetato de etilo. As fases orgânicas combinadas foram lavadas três vezes com 10 ml de água, depois com 10 ml de solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar 2,8 g de um óleo bruto amarelo. Este óleo bruto (>100% de rendimento) é uma mistura dos epóxidos diastereoméricos N,aS-Bis(fenilmetil)-N-(t-butoxi-carbonil)-2S-oxiranometanamina e N,aS-Bis(fenilmetil)-N-(t-butoxicarbonil)-2R-oxiranometanamina. A mistura bruta foi usada directamente no passo seguinte sem purificação. MÉTODO 2: A uma suspensão de 2,92 g (13,28 mmoles) de iodeto de trime-tilsulfoxónio em 45 ml de acetonitrilo adicinionou-se 1,49 g (13,28 mmoles) de t-butóxido de potássio. Uma solução de 3,0 g (8,85 mmoles) de N-(t-butoxicarbonil)-N-benzil-L-fenilalaninal do Exemplo 18 em 18 ml de acetonitrilo foi adicionada e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante uma hora. A mistura foi diluída com 150 ml de água e extraída duas vezes com 200 ml de acetato de etilo. As fases orgânicas foram combinadas e lavadas com 100 ml de água, 50 ml de solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar 3,0 g de um óleo bruto amarelo. O produto bruto foi purificado por cromatografia em gel de sílica (acetato de etilo/hexano 1:8 como solvente de eluição) para dar 1,02 g(32,7% de rendimento) de uma mistura dos dois diastereómeros N,aS-Bis(fenilmetil)-N-(t-butoxicarbonil)-2S-oxiranometanamina e N,aS-Bis(fenilmetil)-N-(t-butoxicarbo-nil)-2R-oxiranometanamina.
At h^rb C- -63- MÉTODO 3: A uma suspensão de 0,90 g (4,42 mmoles) de iodeto de trimetilsulfónio em 18 ml de acetonitrilo, adicionou-se 0,495 g (4,42 mmoles) de t-butóxido de potássio. Uma solução de 1,0 g (2,95 mmoles) de N-(t-butoxicarbonil)-N-benzil-L-fenilalaninal do Exemplo 18 em 7 ml de acetonitrilo e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante uma hora. A mistura foi diluída com 80 ml de água e extraída duas vezes com 80 ml de acetato de etilo. As fases orgânicas foram combinadas e lavadas com 100 ml de água, 30 ml de solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar 1,04 g de um óleo bruto amarelo. O produto bruto foi uma mistura dos dois diastereómeros de N,aS-Bis(fenilmetil)-N-(t-butoxicarbonil)-2S-oxiranometanamina e N,aS-Bis(fenilme-til)-N-(t-butoxicarbonil)-2R-oxiranometanamina. EXEMPLO 20 3 S-[N-(t-Butoxicarbonil)-N-(fenilmetil)amino]-1 -(2-metilpropil)amino-4-fenilbutan-2R-ol A uma solução de 500 mg (1,42 mmoles) do epóxido bruto do Exemplo 19 em 0,98 ml de isopropanol foi adicionado 0,71 ml (7,14 mmoles) de isobutilamina. A mistura foi aquecida até refluxo entre 85°C e 90°C durante 1,5 horas. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida e o óleo produzido foi purificado por cromatografia em gel de sílica (clorofórmio.metanol, 100:6 como solventes de eluição) para dar 330 mg de 3S-[N-(t-butoxicarbonil)-N-(fenilme-til)amino]-l-(2-metilpropil)amino-4-fenilbutan-2R-ol como um óleo incolor (54,5% de rendimento). Isolou-se também 3S-[N-(t-Butoxicarbonil)-N-(fenilme-til)amino]-l-(2-metilpropil)amino-4-fenilbutan-2S-ol. Quando se usou N,aS- -64- bis(fenilmetil)-N-(t-butoxicarbonil)-2S-oxiranometanamÍua purificada como material de partida, isolou-se 3S-[N-(t-Butoxicarbonil)-N-(fenilmetil)amino]-l-(2-metilpropil)amino-4-fenilbutan-2R-ol após purificação por cromatografia com um rendimento de 86%. EXEMPLO 21 N-[3S-[N-(t-Butoxicarbonil)-N-(fenilmetil)amino]-2R-hidroxi-4-fenilbutil]-N'-(l, 1 -dimetiletil)-N-(2-metilpropil)ureia A uma solução de 309 mg (0,7265 mmoles) de 3S-[N-(t-Butoxicarbonil)-N-(fenilmetil)amino]-l-(2-metilpropil)amino-4-fenilbutan-2R-ol do Exemplo 20 em 5 ml de THF adicionou-se 0,174 ml (1,5 mmoles) de t-butilisocianato. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1,5 horas. O produto foi concentrado sob pressão reduzida para dar 350 mg (92% de rendimento) de um produto sólido branco bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em gel de sílica (acetato de etilo/hexano: 1:4 como solventes de eluição) para dar 324 mg de N-[3S-[N-(t-butoxicarbonil)-N-(fenilmetil)-amino]-2R-hidroxi-4-fenilbutil]-N'-( 1,1 -dimetiletil)-N-(2-metilpropil)ureia como um sólido branco (85,3% de rendimento). EXEMPLO 22 3S-[N-(t-Butoxicarbonil)-N-(fenilmetil)amino]-2S-hidroxi-4- fenilbutironitrilo
Uma solução de 7,0 g (20,65 mmoles) de N-(t-butoxicarbonil)-N-benzil-L-fenilalaninal do Exemplo 18 em 125 ml de THF foi arrefecida a -5°C. Uma solução de 12,96 g de bissulfito de sódio em 68 ml de água foi adicionada -65-durante 40 minutos, mantendo a temperatura abaixo de 5°C. A mistura foi agitada durante 3 horas entre 0 e 5°C. Adicionou-se mais 1,4 g de bissulfito de sódio e a mistura foi agitada durante mais duas horas. Adicionou-se cianeto de sódio (3,3 g, 82,56 mmoles) ao produto bissulfito entre 0 e 5°C e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 16 horas. A mistura bifásica foi extraída com 150 ml de acetato de etilo. A fase aquosa foi extraída duas vezes com 100 ml de acetato de etilo. As fases orgânicas combinadas foram lavadas duas vezes com 30 ml de água, duas vezes com 25 ml de solução aquosa concentrada de cloreto de sódio, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar 7,5 g (100% de rendimento bruto de ambos os diastereómeros) de óleo bruto. O óleo bruto foi purificado por cromatografia em gel de sílica (acetato de etilorhexano, 1:4 como solventes de eluição) para dar 5,725 g (76% de rendimento) de 3S-[N-(t-butoxicarbonil)-N-(fenilmetil)amino]-2S-hidroxi-4-fenilbutironitrilo como o principal diastereómero e 0,73 g (9,6% de rendimento) de 3S-[N-(t-butoxicarbonil)-N-(fenilmetil)amino]-2R-hidroxi-4-fenilbutironitrilo como um diastereómero menos abundante. O rendimento combinado de ambos os isómeros de cianidrinas é de 85,6%. EXEMPLO 23 3 S-[N-(t-Butoxicarbonil)-N-(fenilmetil)amino]-1 -amino-4-fenilbutan-2R-ol A uma solução de 205,5 mg (0,56 mmoles) de 3S-[N-(t-butoxi-carbonil)-N-(fenilmetil)amino]-2S-hidroxi-4-fenilbutironitrilo do Exemplo 22 em 4 ml de THF adicionou-se 2,4 ml de uma solução de borano em THF (1,0M, 4 mmoles). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos. Adicionou-se mais 1,4 ml de borano em THF e a mistura foi agitada durante mais 30 minutos. A mistura foi arrefecida a 0°C e adicionou-se lentamente 2,0 ml de -66- água fria (0-5°C). A mistura foi aquecida à temperatura ambiente e agitada durante 30 minutos. O produto foi extraído duas vezes com 30 ml de acetato de etilo. A fases orgânicas foram combinadas e lavadas com 4 ml de água, 4 ml de solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secas sobre sulfato de sódio filtradas e concentradas sob pressão reduzida para dar 200 mg de 3S-[N-(t-Butoxicarbonil)-N-(fenilmetil)amino]-1 -amino-4-fenilbutan-2R-ol como um sólido branco (96,4% de rendimento). EXEMPLO 24 3 S- [N-(t-Butoxicarbonil)-N-(fenilmetil)amino]-1 -(2-metilpropil)amino-4-fenilbutan-2R-ol A uma solução de 2,41 g (5,522 mmoles) de 3S-[N-(t-butoxicar-bonil)-N-(fenilmetil)amino]-l-amino-4-fenilbutan-2R-ol do Exemplo 23 em 40 ml de metanol adicionou-se 0,592 ml (6,522 mmoles) de isobutiraldeído e 0,373 ml (6,522 mmoles) de ácido acético. A mistura foi agitada durante 10 minutos. Adicionou-se cianoboro-hidreto de sódio (1,639 g, 26 mmoles) e a mistura foi agitada durante 16 horas à temperatura ambiente. A mistura do produto foi concentrada sob pressão reduzida e separada entre 150 ml de acetato de etilo e 50 ml de hidróxido de amónio 1,5 Μ. A fase orgânica foi lavada duas vezes com 20 ml de água, duas vezes com 20 ml de solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada para dar um óleo amarelo. O produto bruto foi purificado por cromatografia em gel de sílica (clorofórmiormetanol, 100:6 como solventes de eluição) para dar 2,326 g de 3S-[N-(t-butoxicarbonil)-N-(fenilmetil)amino]-l-(2-metilpropil)amino-4-fenilbutan-2R-ol como óleo incolor (88,8% de rendimento). -67- /4^ h*.yfr EXEMPLO 25 N-[3S-[N-(t-Butoxicarbonil)-N-(fenilmetil)amino]-2R-hidroxi-4-fenilbutil]-N'-( 1,1 -dimetiletil)-N-(2-metilpropil)ureia A uma solução de 309 mg (0,7265 mmoles) de 3S-[N-(t-butoxicarbonil)-N-(fenilmetil)amino]-l-(2-metilpropil)amino-4-fenilbutan-2R-ol do Exemplo 24 em 5 ml de THF adicionou-se 0,174 ml (1,5 mmoles) de t-butilisocianato. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1,5 horas. O produto foi concentrado sob pressão reduzida para dar 350 mg (92% de rendimento) de um produto sólido branco bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em gel de sílica (acetato de etilo/hexano: 1:4 como solventes de eluição) para dar 324 mg de N-[3S-[N-(t-butoxicarbonil)-N-(fenilmetil)-amino]-2R-hidroxi-4-fenilbutil]-N'-(l,l-dimetiletil)-N-(2-metilpropil)ureia como um sólido branco (85,3% de rendimento). EXEMPLO 26 N-[3S-[N-(Fenilmetil)amino]-2R-hidroxi-4-fenilbutil]-N'-( 1,1-dimetiletil)-N-(2-metilpropil)ureia A uma solução de 210 mg (0,4 mmoles) de N-[3S-[N-(t-butoxi-carbonil)-N-(fenilmetil)amino]-2R-hidroxi-4-fenilbutil]-N'-(l,l-dimetiletil)-N-(2-metilpropil)ureia do Exemplo 25 em 0,5 ml de THF adicionou-se 5 ml de ácido clorídrico 4N. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante duas horas. Os solventes foram removidos sob pressão reduzida para dar 200 mg (100%) de N-[3S-[N-(fenilmetil)amino]-2R-hidroxi-4-fenilbutil]-N'-(l ,1-dime-tiletil)-N-(2-metilpropil)ureia como um sólido branco. -68- EXEMPLO 27 N-[3S-Amino-2R-hidroxi-4-fenilbutil]-N'-( 1,1 -dimetiletil)-N-(2-metilpropil)ureia A uma solução de 200 mg (0,433 mmoles) de N-[3S-[N-(fenil-metil)amino]-2R-hidroxi-4-fenilbutil]-N'-(l, 1 -dimetiletil)-N-(2-metilpropil)ureia do Exemplo 26, em 7 ml de etanol 3A, foi adicionado 0,05 g de 20% de paládio em carbono. A mistura foi hidrogenada a 40°C durante 1,8 horas a 5 psi, seguido de hidrogenação a 60 psi, à temperatura ambiente, durante 22 horas. O catalisador foi removido por filtração e o solvente e produtos secundários foram removidos sob pressão reduzida para dar 150 mg (93,4% de rendimento) de N-[3S-amino-2R-hidroxi-4-fenilbutil]-N'-( 1,1 -dimetiletil)-N-(2-metilpropil)ureia como um sólido branco. EXEMPLO 28 3S-(N-t-Butoxicarbonil)amino-4-fenilbutan-1,2R-diol A uma solução de lg (3,39 mmoles) de ácido 2S-(N-t-butoxi-carbonil)amino-lS-hidroxi-3-fenilbutanóico (comprado à Nippon Kayaku, Japão) em 60 ml de THF a 0°C foi adicionado 50 ml do complexo borano-THF (líquido, 1,0 M em THF), mantendo as temperaturas abaixo de 5°C. A mistura de reacção foi aquecida à temperatura ambiente e agitada durante 16 horas. A mistura foi arrefecida a 0°C e adicionou-se lentamente 10 ml de água para destruir o excesso de BH3 e para parar a mistura de reacção, mantendo a temperatura abaixo de 12°C. A mistura foi então agitada durante 20 minutos e concentrada sob pressão -69- /4{ fa^rfr C—u( μ reduzida. A mistura de produtos foi extraída três vezes com 60 ml de acetato de etilo. As fases orgânicas foram combinadas e lavadas com 20 ml de água, 25 ml de solução saturada de cloreto de sódio e concentrada sob pressão reduzida para dar 1,1 g de óleo bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em gel de sílica (clorofórmio/metanol, 10:6 como solventes de eluição) para dar 900 mg (94,4% de rendimento) de 3S-(N-t-butoxicarbonil)amino-4-fenilbutan-l,2R-diol como um sólido branco. EXEMPLO 29
Toluenossulfonato de 3S-(N-t-butoxicarbonil)amino-2R-hidroxi-4- fenilbut-l-ilo A uma solução de 744,8 mg (2,65 mmoles) de 3S-(N-t-butoxicar-bonil)amino-4-fenilbutan-l,2R-diol do Exemplo 28, em 13 ml de piridina a 0°C, adicionou-se 914 mg de cloreto de toluenossulfonilo de uma só vez. A mistura foi agitada entre 0°C e 5°C durante 5 horas. Uma mistura de 6,5 ml de acetato de etilo e 15 ml de solução aquosa de bicarbonato de sódio a 5% foi adicionada à mistura de reacção e agitada durante 5 minutos. A mistura do produto foi extraída três vezes com 50 ml de acetato de etilo. As fases orgânicas foram combinadas e lavadas com 15 ml de água, 10 ml de solução aquosa saturada de cloreto de sódio e concentradas sob pressão reduzida para dar cerca de 1,1 g de um sólido amarelo espesso. O produto bruto foi purificado por cromatografia em gel de sílica (acetato de etilo/hexano 1:3 como solventes de eluição) para dar 850 mg (74% de rendimento) de toluenossulfonato de 3S-(N-t-butoxicarbonil)amino-2R-hidroxi-4-fenilbut-l-ilo como um sólido branco. -70- EXEMPLO 30 3S-[N-(t-Butoxicarbonil)amino]-l-(2-metilpropil)amino-4-fenilbu- tan-2R-ol A uma solução de 90 mg (0,207 mmoles) de toluenossulfonato de 3S-(N-t-butoxicarbonil)amino-2R-hidroxi-4-fenilbut-l-ilo do Exemplo 29, em 0,143 ml de isopropanol e 0,5 ml de tolueno, foi adicionado 0,103 ml (1,034 mmoles) de isobutilamina. A mistura foi aquecida entre 80 e 85°C e agitada durante 1,5 horas. A mistura de produto foi concentrada sob pressão reduzida a uma temperatura entre 40 e 50°C e purificada por cromatografia em gel de sílica (clorofórmio/metanol, 10:1 como solventes de eluição) para dar 54,9 mg (76,8% de rendimento) de 3S-[N-(t-butoxicarbonil)amino]-l-(2-metilpropil)amino-4-fenilbutan-2R-ol como um sólido branco. EXEMPLO 31 N-[3S-[N-(t-Butoxicarbonil)amino-2R-hidroxi-4-fenilbutil]-N'-(1,1 -dimetiletil)-N-(2-metilpropil)ureia A uma solução de 0,1732 g (0,516 mmoles) de 3S-[N-(t-butoxi-carbonil)amino]-l-(2-metilpropil)amino-4-fenilbutan-2R-ol do Exemplo 30, em 5 ml de acetato de etilo, a 0°C, foi adicionado 1,62 ml (12,77 mmoles) de t-butilisocianato e a mistura foi agitada durante uma hora. O produto foi concentrado sob pressão reduzida e purificado por cromatografia em gel de sílica (clorofórmio/metanol, 100:1,5 como solventes de eluição) para dar 96 mg (42,9% -71- -71-
/4< C- de rendimento) de N-[3S-[N-(t-butoxicarbonil)amino-2R-hidroxi-4-fenilbutil]-N'-(l,l-dimetiletil)-N-(2-metilpropil)ureia como um sólido branco. EXEMPLO 32 N-[3S-Amino-2R-hidroxi-4-fenilbutil]-N'-(l,l-dimetiletil)-N-(2- metilpropil)ureia
A uma solução de 10 mg (0,023 mmoles) de N-[3S-[N-(t-buto-
xicarbonil)amino-2R-hidroxi-4-fenilbutil]-N'-( 1,1 -dimetiletil)-N-(2-metilpropil)-ureia a partir do Exemplo 31, em 1 ml de metanol, a 0°C, foi adicionado 1,05 ml de ácido clorídrico 4M em metanol e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 45 minutos. O produto foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em 5 ml de metanol e concentrado sob pressão reduzida. Esta operação foi repetida três vezes para remover água do produto, após o que se obteve 8,09 mg (95,2% de rendimento) de N-[3S-amino-2R-hidroxi-4-fenilbutil]-N'-(l,l-dimetiletil)-N-(2-metilpropil)ureia como um sólido branco. EXEMPLO 33 3S-(N,N-Dibenzil)amino-2S-hidroxi-4-fenilbutironitrilo, éter de O- trimetilsililo A uma solução de 24,33 g (73,86 mmol) de 2S-(N,N-dibenzil)amino-3-fenilpropanol, em 740 ml de cloreto de metileno anidro, a -20C sob atmosfera de azoto, foi adicionado 11,8 ml (8,8 g, 88,6 mmol) de -72- trimetilsililcianeto, seguido de 19,96 g (88,6 mmol) de brometo de zinco anidro. Após 4 horas a -15°C e 18 horas à temperatura ambiente, o solvente foi removido sob pressão reduzida, adicionou-se acetato de etilo, lavou-se com água, solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secou-se sobre sulfato de magnésio, filtrou-se e concentrou-se para dar 31,3 g de um óleo castanho, o qual foi identificado como uma mistura de 95:5, respectivamente, de 3S-(N,N-dibenzil)amino-2S-hidroxi-4-fenilbutironitrilo, éter de O-trimetilsililo, m/e=429 (M+H) e 3S-(N,N-dibenzil)amino-2R-hidroxi-4-fenilbutironitrilo, éter de O-trimetilsililo. EXEMPLO 34 3 S-(N,N-Dibenzil)amino-2S-hidroxi-4-fenilbutironitrilo
Uma solução de 10,4 g (24,3 mmol) da mistura bruta de 3S-(N,N-dibenzil)amino-2S-hidroxi-4-fenilbutironitrilo, éter de O-trimetilsililo e 3S-(N,N-dibenzil)amino-2R-hidroxi-4-fenilbutironitrilo, éter de O-trimetilsililo do Exemplo 33, em 40 ml de metanol, foi adicionada a 220 ml de ácido clorídrico IN com agitação forte. O sólido resultante foi colhido, dissolvido em acetato de etilo, lavado com bicarbonato de sódio aquoso, solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seco sobre sulfato de magnésio anidro, filtrado e concentrado para dar 8,04 g de produto bruto. Este foi recristalizado a partir de acetato de etilo e hexano para dar 3S-(N,N-dibenzil)amino-2S-hidroxi-4-fenilbutironitriIo, m/e=357 (M+H). -73-
At EXEMPLO 35 3S-(N,N-Dibenzil)amino-2R-hidroxi-4-fenilbutilamina MÉTODO 1:
Uma solução de 20,3 g (47,3 mmol) da mistura bruta 95:5 de 3S-(N,N-dibenzil)amino-2S-hidroxi-4-fenilbutironitrilo, éter de O-trimetilsililo e 3S-(N,N-dibenzil)amino-2R-hidroxi-4-fenilbutironitrilo, éter de O-trimetilsililo do Exemplo 34, em 20 ml de éter dietílico anidro, adicionou-se 71 ml (71 mmol) de uma solução 1M de hidreto de lítio alumínio em éter dietílico sob refluxo. Após adição, a reacção foi sujeita a refluxo durante 1 hora, arrefecida até 0°C, e parada pela adição cuidadosa de 2,7 ml de água, 2,7 ml de hidróxido de sódio aquoso a 15% e 8,1 ml de água. Os sólidos resultantes foram removidos por filtração e o filtrado lavado com água, solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seco sobre sulfato de magnésio, filtrado e concentrado a partir de 13,8 g de tetra-hidrofurano e iso-octano para dar 10,6 g de 3S-(N,N-dibenzil)amino-2R-hidroxi-4-fenilbutilamina, pf = 46-49 C, m/e=361 (M+H), a qual estava contaminada por aproximadamente 2% de 3S-(N,N-Dibenzil)amino-2S-hidroxi-4-fenilbutilamina. MÉTODO 2: A 15,6 ml (60,4 mmol) de hidreto de sódio bis(metoxie-toxi)alumínio a 70% em tolueno, adicionou-se 15 ml de tolueno anidro, e depois, após arrefecimento a 0°C, uma solução de 20,0 g (46 mmol) da mistura bruta de 95:5 de 3S-(N,N-dibenzil)amino-2S-hidroxi-4-fenilbutironitrilo, éter de O-trimetilsililo e 3S-(N,N-dibenzil)amino-2R-hidroxi-4-fenilbutironitrilo, éter de O-trimctilsililo do Exemplo 34 em 10 ml de tolueno anidro, a uma velocidade Αίΐ3- C— -u( *-i -74- que manteve a temperatura abaixo de 15°C. Após 2,5 horas à temperatura ambiente, a reacção foi parada pela adição cuidadosa de 200 ml de hidróxido de sódio aquoso a 5%. A solução foi diluída com acetato de etilo, lavada com 5% de hidróxido de sódio, solução de tartrato de sódio, solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio, filtrada e concentrada para dar 16,6 g de produto bruto, o qual foi testado por HPLC e se demonstrou conter 87% de 3S-(N,N-dibenzil)amino-2R-hidroxi-4-fenilbutilamina. EXEMPLO 36 N-[3S-(N,N-Dibenzil)amino-2R-hidroxi-4-fenilbutil]-N'-(l,l- dimetiletil)-N-(3-metilbutil)ureia
Passo 1: A uma solução de 1,0 g (2,77 mmol) de 3S-(N,N-dibenzil)amino-2R-hidroxi-4-fenilbutilamina do Exemplo 35, em 4,6 ml de etanol, adicionou-se 0,3 ml (0,24 g, 2,77 mmol) de isovaleraldeído. Após 1 hora à temperatura ambiente, o etanol foi removido sob pressão reduzida, adicionou-se 4 ml de acetato de etilo e a solução foi gaseada com azoto. A solução adicionou-se 360mg do catalisador 5% de platina em carbono, a solução foi gaseada com 40 psig de hidrogénio e depois mantida sob 40 psig de hidrogéno, durante 20 horas. A solução foi gaseada com azoto, o catalisador foi removido por filtração e o solvente foi removido sob pressão reduzida para dar 473 mg do produto bruto.
Passo 2: O produto bruto do Passo A foi directamente dissolvido em 5,4 ml de acetato de etilo e adicionou-se 109 mg (1,1 mmol) de isocianato tert-butílico. -75- 9
Após 1 hora à temperatura ambiente, a solução foi lavada com ácido cítrico a 5%, solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio, filtrada e concentrada para dar 470 mg de produto bruto. O produto bruto foi recristalizado a partir de acetato de etilo e isso-octano para dar 160 mg de N-[3 S-(N,N-dibenzil)amino-2R-hidroxi-4-fenilbutil]-N,-( 1,1 -dimetiletil)-N-(3-metilbutil)ureia, pf = 120,4-121,7°C, m/e = 530 (M+H). A partir da descrição detalhada anterior, os familiarizados com a matéria podem facilmente avaliar as características essenciais deste invento, e sem se afastar do espírito e âmbito do mesmo, podem fazer várias alterações e modificações ao invento para o adaptar a várias utilizações e condições.
Lisboa, 16 de Outubro de 2001 /wiwv c—
ALBERTO CANELAS Agente Oficial da Propriedade Industrial RUA VICTOR CORDON, 14 1200 LISBOA

Claims (10)

  1. -1 - Af. .....- x, ( REIVINDICAÇÕES 1. Método de purificação de diastereómeros compreendendo (a) preparação de um sal de ácido orgânico ou de um ácido inorgânico de um composto amínico da fórmula
    em que R1 representa radicais alquilo, arilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo ou aralquilo, os quais são facultativamente substituídos com alquilo, halogénio, NO2, OR9 ou SR9, em que R9 representa radicais hidrogénio, alquilo, arilo ou aralquilo; R3 representa um radical hidrogénio, alquilo, alcenilo, alcinilo, hidroxialquilo, alcoxialquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, heterocicloalquilo, heteroarilo, heterocicloalquilalquilo, arilo, aralquilo, heteroaralquilo, aminoal-quilo ou aminoalquilo N-mono- ou N,N-di-substituído, em que os referidos substituintes são radicais alquilo, arilo, aralquilo, ciclo-alquilo, ciclo-alquilal-quilo, heteroarilo, heteroaralquilo, heterocicloalquilo ou heterocicloalquilalquilo, -2- ( i-A ou no caso de um radical aminoaquilo di-substituído, os referidos substituintes juntamente com o átomo de azoto a que estão ligados formam um radical heterocicloalquilo ou heteroarilo; e P1 e P2 são independentemente radicais hidrogénio, acilo, aralquilo, sililo, aralcoxicarbonilo, alcoxicarbonilo, alquilearbonilo, aralquilcarbonilo, arilearbonilo ou cicloalcenilalquilo; ou PI e P2 em conjunto com o átomo de azoto a que estão ligados formam um sistema de anel heterocíclico; e (b) precipitação ou cristalização do referido sal a partir de uma solução.
  2. 2. Método da Reivindicação 1, em que R1 representa radicais alquilo, cicloalquilalquilo ou aralquilo, os quais são facultativamente substituídos com alquilo, halogénio, N02, OR9 ou SR9, em que R9 representa radicais hidrogénio, alquilo, arilo ou aralquilo; R1 2 3 4 5 representa hidrogénio, alquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo ou aralquilo; P1 representa radicais aralquilo, alquilearbonilo, aralquilcarbonilo, arilearbonilo, alcoxicarbonilo ou aralcoxicarbonilo; e P2 representa um radical aralquilo; ou quando P1 for um radical alcoxicarbonilo, aralcoxicarbonilo, alquilearbonilo, aralquilcarbonilo ou arilearbonilo, P2 representa radicais hidrogénio ou aralquilo; ou P1 e P2 em conjunto com o átomo de azoto a que estão ligados formam radicais 2-isoindolinilo, ftalimidilo, suecinimidilo ou maleimidilo. 1 O método da Reivindicação 2, em que R1 é um radical 2- 2 (metiltio)etilo, feniltiometilo, benzilo, (4-fluorofenil)metilo, 2-naftilmetilo ou 3 ciclo-hexilmetilo; R1 representa um radical hidrogénio, propilo, butilo, isobutilo, 4 isoamilo, ciclopentilo, ciclo-hexilo, ciclo-heptilo, ciclo-hexilmetilo, ciclopentil- 5 metilo, feniletilo ou benzilo; P1 representa radicais t-butoxicarbonilo, fenil- -3- -3-
    ( metoxicarbonilo, (4-metoxifenil)metoxicarbonilo ou benzilo; e P representa 1 hidrogénio ou benzilo, desde que quando P for benzilo, P é benzilo.
  3. 4. O método da Reivindicação 1, em que o referido ácido orgânico é ácido acético, ácido canforsulfónico, ácido toluenossulfónico, ácido metanossulfónico, ácido málico, ácido tartárico, ácido mandélico, ácido trifluoro-acético ou ácido oxálico; e o referido ácido inorgânico é ácido clorídrico; ácido bromídrico, ácido fosfórico, ácido sulfuroso ou ácido sulfurico.
  4. 5. O método da Reivindicação 4, em que o referido ácido orgânico é ácido acético, ácido oxálico ou ácido tartárico; e o referido ácido inorgânico é ácido clorídrico.
  5. 6. O método da Reivindicação 1, em que a referida solução compreende uma mistura do referido sal e pelo menos um solvente seleccionado do grupo constituído por metanol, etanol, tolueno, xileno, cloreto de metileno, tetracloreto de carbono, hexano, heptano, éter de petróleo, éter dimetílico, acetato de etilo, metil-tert-butiléter ou tetra-hidrofurano.
  6. 7. Método de purificação de diastereómeros compreendendo (a) preparação de um sal de ácido acético, ácido oxálico ou ácido clorídrico de um composto amínico da fórmula
    At (t-A -4- em que R1 representa radicais alquilo, arilo, cieloalquilu, cicloalquilalquilo ou aralquilo, os quais são facultativamente substituídos com alquilo, halogénio, NO2, OR9 ou SR9, em que R9 representa radicais hidrogénio, alquilo, arilo ou aralquilo; R3 representa um radical hidrogénio, alquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo ou aralquilo; P1 representa um radical benzilo; e P2 representa um radical benzilo; ou P1 e P2 em conjunto com o átomo de azoto a que estão ligados formam radicais 2-isoindolinilo; e (b) precipitação ou cristalização do referido sal a partir de tuna solução.
  7. 8. O método da Reivindicação 7, em que R1 é um radical 2-(metiltio)etilo, feniltiometilo, benzilo, (4-fluorofenil)metilo, 2-naftilmetilo ou ciclo-hexilmetilo; e R3 representa um radical hidrogénio, propilo, butilo, isobutilo, isoamilo, ciclopentilo, ciclo-hexilo, ciclo-heptilo, ciclo-hexilmetilo, ciclopentilmetilo, feniletilo ou benzilo; e a referida solução compreende uma mistura do referido sal e pelo menos um solvente seleccionado do grupo constituído por metanol, etanol, tolueno, xileno, cloreto de metileno, tetracloreto de carbono, hexano, heptano, éter de petróleo, éter dimetílico, acetatode etilo, metil-tert-butiléter ou tetra-hidrofurano. 9. Composto da fórmula -5- Atb.fh C—J «-1
    em que R1 representa radicais alquilo, arilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo ou aralquilo, os quais são facultativamente substituídos com alquilo, halogénio, NO2, OR9 ou SR9, em que R9 representa radicais hidrogénio, alquilo, arilo ou aralquilo; R3 representa um radical hidrogénio, alquilo, alcenilo, alcinilo, hidroxialquilo, alcoxialquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, heterocicloalquilo, heteroarilo, heterocicloalquilalquilo, arilo, aralquilo, heteroaralquilo, amino-alquilo ou aminoalquilo N-mono- ou N,N-di-substituído, em que os referidos substituintes são radicais alquilo, arilo, aralquilo, ciclo-alquilo, cicloalquilalquilo, heteroarilo, heteroaralquilo, heterocicloalquilo ou heterocicloalquilalquilo, ou no caso de um radical amino-aquilo di-substituído, os referidos substituintes juntamente com o átomo de azoto a que estão ligados formam um radical heterocicloalquilo ou heteroarilo; e P1 e P2 são independentemente radicais hidrogénio, acilo, aralquilo, sililo, aralcoxicarbonilo, alcoxicarbonilo, alquilcarbonilo, aralquilcarbonilo, arilcarbonilo ou cicloalcenilalquilo; ou PI e P2 em conjunto com o átomo de azoto a que estão ligados formam um sistema de anel heterocíclico; e em que o referido composto é um sal de ácido orgânico ou inorgânico. -6-
  8. 10. Composto da fórmula
    em que R1 representa radicais alquilo, arilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo ou aralquilo, os quais são facultativamente substituídos com alquilo, halogénio, NO2, OR9 ou SR9, em que R9 representa radicais hidrogénio, alquilo, arilo ou aralquilo; R3 representa um radical hidrogénio, alquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo ou aralquilo; P1 representa um radical aralquilo, alquilcarbonilo, aralquilcarbonilo, arilcarbonilo, alcoxicarbonilo ou aralcoxicarbonilo; e P2 representa um radical aralquilo; ou quando P1 for um radical alcoxicarbonilo, aralcoxicarbonilo, alquilcarbonilo, aralquilcarbonilo ou arilcarbonilo, P2 representa radicais hidrogénio ou aralquilo; ou P1 e P2 em conjunto com o átomo de azoto a que estão ligados formam radicais 2-isoindolinilo, ftalimidilo, succinimidilo ou maleimidilo, e em que o referido composto é um sal orgânico ou inorgânico seleccionado entre um ácido acético, canforsulfónico, ácido toluenossulfónico, ácido metanos-sulfónico, ácido málico, ácido tartárico, ácido mandélico, ácido trifluoroacético ou ácido oxálico; e o referido ácido inorgânico é ácido clorídrico; ácido -7- h*- ?Ή ( bromidrico, ácido fosfórico, ácido sulfuroso ou ácido sulfiírico.
  9. 11. Composto da Reivindicação 10, em que R1 é 2-(metiltio)-etilo, feniltiometilo, benzilo, (4-fluorofenil)metilo, 2-naftilmetilo ou ciclo-hexilmetílico; e R3 representa um radical hidrogénio, propilo, butilo, isobutilo, isoamílico, ciclopentilo, ciclo-hexilo, ciclo-heptilo, ciclo-hexilmetilo, ciclopentilmetilo, feniletilo ou benzilo; P1 representa um radical t-butoxicarbonilo, fenilmetoxicarbonilo, (4-metoxi-fenil)metoxicarbonilo ou benzilo; e P2 representa hidrogénio ou benzilo, desde que quando P1 for benzilo, P2 é benzilo; e em que o referido sal é um sal de ácido acético, ácido oxálico, ácido tartárico ou ácido clorídrico.
  10. 12. Composto da Fórmula 10 que é N-[3(S)-[N,N-bis(fenilme-til)amino]-2(R)-hidroxi-4-fenilbutil]-N-isobutilamina · sal do ácido oxálico; N-[3(S)-[N,N-bis(fenilmetil)amino]-2(R)-hidroxi-4-fenilbutil]-N-isobutilamina · sal do ácido tartárico; N-[3(S)-[N,N-bis(fenilmetil)amino]-2(R)-hidroxi-4-fenilbutil]-N-isobutilamina · sal do ácido di-hidroclorídrico; N-[3(S)-[N,N-bis(fenilmetil)amino]-2(R)-hidroxi-4-fenilbutil]-N- -8- isobutilamina · sal do ácido toluenossulfónico; N-[3(S)-[N,N-bis(fenilmetil)amino]-2(R)-hidroxi-4-fenilbutil]-N-isobutilamina · sal do ácido acético; ou N-[3(S)-[N,N-bis(fenilmetil)amino]-2(R)-hidroxi-4-fenilbutil]-N-isobutilamina · sal do ácido metanossulfónico. Lisboa, 16 de Outubro de 2001 ALBERTO CANELAS Agente Oficial da Propriedade Industrial RUA VICTOR CORDON, 14 1200 LISBOA
PT96903641T 1995-01-20 1996-01-18 Metodo para a preparacao de intermediarios de inibidores da protease retroviral PT804410E (pt)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US08/376,340 US5831117A (en) 1995-01-20 1995-01-20 Method of preparing retroviral protease inhibitor intermediates

Publications (1)

Publication Number Publication Date
PT804410E true PT804410E (pt) 2002-01-30

Family

ID=23484633

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PT96903641T PT804410E (pt) 1995-01-20 1996-01-18 Metodo para a preparacao de intermediarios de inibidores da protease retroviral

Country Status (16)

Country Link
US (7) US5831117A (pt)
EP (1) EP0804410B1 (pt)
JP (1) JP3978229B2 (pt)
KR (1) KR100385013B1 (pt)
CN (1) CN1623977A (pt)
AT (1) ATE204851T1 (pt)
AU (1) AU692062B2 (pt)
BR (1) BR9606981A (pt)
CA (1) CA2210973C (pt)
DE (1) DE69614824T2 (pt)
DK (1) DK0804410T3 (pt)
ES (1) ES2162650T3 (pt)
HU (1) HUP9702403A3 (pt)
NZ (1) NZ302072A (pt)
PT (1) PT804410E (pt)
WO (1) WO1996022275A1 (pt)

Families Citing this family (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5831117A (en) * 1995-01-20 1998-11-03 G. D. Searle & Co. Method of preparing retroviral protease inhibitor intermediates
DE60124080T2 (de) 2000-03-23 2007-03-01 Elan Pharmaceuticals, Inc., San Francisco Verbindungen und verfahren zur behandlung der alzheimerschen krankheit
US6992081B2 (en) 2000-03-23 2006-01-31 Elan Pharmaceuticals, Inc. Compounds to treat Alzheimer's disease
US6846813B2 (en) * 2000-06-30 2005-01-25 Pharmacia & Upjohn Company Compounds to treat alzheimer's disease
EP1666452A2 (en) 2000-06-30 2006-06-07 Elan Pharmaceuticals, Inc. Compounds to treat Alzheimer's disease
PE20020276A1 (es) 2000-06-30 2002-04-06 Elan Pharm Inc COMPUESTOS DE AMINA SUSTITUIDA COMO INHIBIDORES DE ß-SECRETASA PARA EL TRATAMIENTO DE ALZHEIMER
CN1217920C (zh) 2000-06-30 2005-09-07 艾兰制药公司 治疗早老性痴呆的化合物
US20030096864A1 (en) * 2000-06-30 2003-05-22 Fang Lawrence Y. Compounds to treat alzheimer's disease
BR0210721A (pt) 2001-06-27 2004-07-20 Elan Pharm Inc Composto, sal ou éster farmaceuticamente aceitável, método para fabricar um composto, e, método para tratar um paciente que tem, ou para evitar que o paciente adquira uma doença ou condição
US20070213407A1 (en) * 2001-06-29 2007-09-13 Elan Pharmaceuticals And Pharmacia & Upjohn Company Llc Compounds to treat Alzheimer's disease
US6867302B2 (en) * 2001-07-13 2005-03-15 Board Of Trustees Of Michigan State University Process for the catalytic synthesis of biaryls and polymers from aryl compounds
ATE443043T1 (de) 2002-11-12 2009-10-15 Merck & Co Inc Phenylcarboxamide als beta-sekretase-hemmer zur behandlung von alzheimer
TWI385173B (zh) 2005-11-28 2013-02-11 Tibotec Pharm Ltd 作為ｈｉｖ蛋白酶抑制劑之經取代的胺基苯基磺醯胺化合物
CN102099331A (zh) * 2008-05-19 2011-06-15 杏林制药株式会社 光学活性氨基醇衍生物的制备方法
CN116675613B (zh) * 2023-08-03 2023-10-10 北京元延医药科技股份有限公司 手性拆分制备重酒石酸去甲肾上腺素的方法

Family Cites Families (53)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4268688A (en) 1973-02-16 1981-05-19 Monsanto Company Asymmetric hydroformylation process
JPS5825677B2 (ja) 1977-09-26 1983-05-28 武田薬品工業株式会社 ３−テトラゾ−ル−１−アザキサントン誘導体およびその製造法
US5142056A (en) 1989-05-23 1992-08-25 Abbott Laboratories Retroviral protease inhibiting compounds
US4477414A (en) 1981-05-20 1984-10-16 Fumakilla Limited Evaporative container
EP0068378B1 (en) * 1981-06-26 1986-03-05 Schering Corporation Novel imidazo(1,2-a)pyridines and pyrazines, processes for their preparation and pharmaceutical compositions containing them
EP0104041B1 (en) 1982-09-15 1988-07-27 Aktiebolaget Hässle Enzyme inhibitors
US4668770A (en) 1982-12-27 1987-05-26 Merck & Co., Inc. Renin inhibitory tripeptides
WO1984003044A1 (en) 1983-02-07 1984-08-16 Ferring Ab Enzyme inhibitors
JPS59227851A (ja) 1983-06-09 1984-12-21 Sankyo Co Ltd レニン阻害作用を有するペプチド類
US4514391A (en) 1983-07-21 1985-04-30 E. R. Squibb & Sons, Inc. Hydroxy substituted peptide compounds
US4477441A (en) 1983-09-14 1984-10-16 Merck & Co., Inc. Renin inhibitors containing a C-terminal disulfide cycle
US4645759A (en) 1984-06-22 1987-02-24 Abbott Laboratories Renin inhibiting compounds
US4749792A (en) * 1984-09-26 1988-06-07 E. R. Squibb & Sons, Inc. Diamino ketones and alcohols as analgesic agents
US4616088A (en) 1984-10-29 1986-10-07 E. R. Squibb & Sons, Inc. Amino acid ester and amide renin inhibitor
CN1003504B (zh) 1984-12-03 1989-03-08 三井东圧化学有限公司 氯气制备方法
US4826815A (en) * 1985-05-17 1989-05-02 Abbott Laboratories Renin inhibiting compounds
US4599198A (en) 1985-08-02 1986-07-08 Pfizer Inc. Intermediates in polypeptide synthesis
US4668769A (en) 1985-08-02 1987-05-26 Hoover Dennis J Oxa- and azahomocyclostatine polypeptides
CA1282549C (en) 1985-11-12 1991-04-02 Eric M. Gordon Aminocarbonyl renin inhibitors
US4757050A (en) 1985-12-23 1988-07-12 E. R. Squibb Sons, Inc. Ureido renin inhibitors
CA1297631C (en) 1985-12-23 1992-03-17 Sesha I. Natarajan Ureido renin inhibitors
US4857507A (en) * 1986-04-11 1989-08-15 Abbott Laboratories Angiotensinogen analogs
US4880938A (en) * 1986-06-16 1989-11-14 Merck & Co., Inc. Amino acid analogs
DE3635907A1 (de) 1986-10-22 1988-04-28 Merck Patent Gmbh Hydroxy-aminosaeurederivate
DE3800591A1 (de) 1987-01-21 1988-08-04 Sandoz Ag Neue peptidderivate, ihre herstellung und verwendung
GB2200115B (en) * 1987-01-21 1990-11-14 Sandoz Ltd Novel peptide derivatives, their production and use
USH725H (en) 1987-02-26 1990-01-02 E. R. Squibb & Sons, Inc. Ureido amino and imino acids, compositions and methods for use
GB8707412D0 (en) 1987-03-27 1987-04-29 Fujisawa Pharmaceutical Co Peptide compounds
DE3711911A1 (de) 1987-04-08 1988-10-20 Bayer Ag Optisch aktive (alpha)-aminoaldehyde, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung zur stereoselektiven herstellung optisch aktiver ss-aminoalkohole
DE3830825A1 (de) 1987-09-15 1989-03-23 Sandoz Ag Hydrophile reninhemmer, ihre herstellung und verwendung
DE3800059A1 (de) * 1988-01-04 1989-07-13 Paul Merkle Modulo-10-zaehler fuer beide zaehl-richtungen
IL89900A0 (en) 1988-04-12 1989-12-15 Merck & Co Inc Hiv protease inhibitors useful for the treatment of aids and pharmaceutical compositions containing them
US4977277A (en) 1988-05-09 1990-12-11 Abbott Laboratories Functionalized peptidyl aminodiols and -triols 4-amino-5-cyclohexyl-3-hydroxy-1,2-oxopentane and derivatives thereof
IL90218A0 (en) 1988-05-13 1989-12-15 Abbott Lab Retroviral protease inhibitors
CA1340588C (en) 1988-06-13 1999-06-08 Balraj Krishan Handa Amino acid derivatives
IL91307A0 (en) 1988-08-24 1990-03-19 Merck & Co Inc Hiv protease inhibitors and pharmaceutical compositions for the treatment of aids containing them
CA2012306A1 (en) 1989-03-28 1990-09-28 Werner Neidhart Amino acid derivatives
DE3912829A1 (de) 1989-04-19 1990-10-25 Bayer Ag Verwendung von renininhibitorischen peptiden als mittel gegen retroviren
TW225540B (pt) 1990-06-28 1994-06-21 Shionogi & Co
EP0538366A1 (en) 1990-07-06 1993-04-28 Smithkline Beecham Corporation Retroviral protease inhibitors
ATE164839T1 (de) * 1990-11-19 1998-04-15 Monsanto Co Retrovirale proteaseinhibitoren
DK0641333T3 (da) 1992-05-20 1996-09-02 Monsanto Co Fremgangsmåde til fremstilling af mellemprodukter, som er anvendelige ved syntese af retrovirus- protease-inhibitorer
KR100336699B1 (ko) 1992-08-25 2002-05-13 윌리암스 로저 에이 레트로바이러스 프로테아제 저해제로서 유용한히드록시에틸아미노 술폰아미드
IS2334B (is) 1992-09-08 2008-02-15 Vertex Pharmaceuticals Inc., (A Massachusetts Corporation) Aspartyl próteasi hemjari af nýjum flokki súlfonamíða
ES2061380B1 (es) 1992-11-23 1995-07-01 Boehringer Ingelheim Espana Empleo del factor de crecimiento fibroblastico y sus derivados como neuroprotectores y neuromoduladores.
US5484926A (en) * 1993-10-07 1996-01-16 Agouron Pharmaceuticals, Inc. HIV protease inhibitors
US5514801A (en) * 1992-12-29 1996-05-07 Monsanto Company Cyclic sulfone containing retroviral protease inhibitors
ATE172970T1 (de) * 1993-07-15 1998-11-15 Hoffmann La Roche Verfahren zur herstellung eines n-tert.butylamids
DK0855388T3 (da) * 1993-11-23 2002-04-29 Searle & Co Fremgangsmåde til fremstilling af mellemprodukter, der kan anvendes til syntese af retrovirale proteaseinhibitorer
JP2996459B2 (ja) * 1994-07-14 1999-12-27 ダイワ精工株式会社 ゴルフクラブヘッド
US5831117A (en) * 1995-01-20 1998-11-03 G. D. Searle & Co. Method of preparing retroviral protease inhibitor intermediates
DE60115194T2 (de) * 2000-07-19 2006-08-10 Tokuyama Corp., Shunan Photohärtbares material für zahnreparaturen
AU2003234498A1 (en) 2002-05-03 2003-11-17 Stowers Institute For Medical Research Method for predicting gene potential and cell commitment

Also Published As

Publication number Publication date
US20010047111A1 (en) 2001-11-29
NZ302072A (en) 1999-01-28
EP0804410B1 (en) 2001-08-29
HUP9702403A3 (en) 1999-10-28
DK0804410T3 (da) 2001-11-26
US5831117A (en) 1998-11-03
ES2162650T3 (es) 2002-01-01
AU4765396A (en) 1996-08-07
CN1623977A (zh) 2005-06-08
WO1996022275A1 (en) 1996-07-25
US6201150B1 (en) 2001-03-13
DE69614824D1 (de) 2001-10-04
JPH10512571A (ja) 1998-12-02
US20030171612A1 (en) 2003-09-11
BR9606981A (pt) 1997-11-04
US6515162B2 (en) 2003-02-04
HUP9702403A2 (hu) 1999-09-28
KR100385013B1 (ko) 2003-08-19
EP0804410A1 (en) 1997-11-05
US7060851B2 (en) 2006-06-13
JP3978229B2 (ja) 2007-09-19
DE69614824T2 (de) 2002-04-11
ATE204851T1 (de) 2001-09-15
CA2210973A1 (en) 1996-07-25
KR19980701545A (ko) 1998-05-15
US20070015818A1 (en) 2007-01-18
US6849760B2 (en) 2005-02-01
CA2210973C (en) 2007-08-07
US20060270855A1 (en) 2006-11-30
US20050131075A1 (en) 2005-06-16
AU692062B2 (en) 1998-05-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US20060270855A1 (en) Methods of preparing retroviral proteases inhibitor intermediates
AU676479B2 (en) Method for making intermediates useful in synthesis of retroviral protease inhibitors
US5872298A (en) Method of preparing intermediates for retroviral protease inhibitors
US6388094B1 (en) Method for making intermediates useful in synthesis of retroviral protease inhibitors
ES2207760T3 (es) Preparacion de aminoepoxidos a partir de aminoaldehidos y un reactivo organometalico de halometilo formado in situ.
EP0730570B1 (en) Method for making intermediates useful in synthesis of retroviral protease inhibitors
US5583238A (en) Method for making intermediates useful in synthesis of retroviral protease inhibitors
MXPA99006189A (en) Aminoepoxides from aminoaldehydes and in-situ formed halomethyl organometallic reagent