PT793667E - Complexos trinucleares platina cationica com actividade antitumor e composicoes farmaceuticas que os contem - Google Patents

Description

Descrição “Complexos trinucleares de platina catiónica com actividade antitumor e composições farmacêuticas que os contêm” A presente invenção diz respeito a complexos de platina com actividade antitumor. uos processos para a sua preparação e às composições farmacêuticas que os contém

Antecendentes tecnológjcos A utilização de complexos de platina tais como a cisplatina e a carboplatirja na quimioterapia do cancro encontra-se bem estabelecida na técnica Utiliza-se um número de complexos de platina, tais como a cisplatina, para tratar carcinomas dos testículos, dos ovários, da cabeça e do pescoço e das células pequenas do pulmão. No entanto, do tratamento com cisplatina pode resultar uma grave nefrotoxicidacje. Uma outra desvantagem clínica reside no problema da resistência adquirida aos fármacos que resulta do facto do tumor se tomar refractário ao tratamento, pjelo agente.

Julga-se, de uma maneira geral, que os complexos de platina, tais como a cisplatina, manifestam a sua actividade biológica através da interaeção covalente com o ADN. Em particular, a cisplatina induz a formação de uma gama de produtps de adição no ADN que inclui produtos de adição monodentados, produtos de adição bidentados, tais como GG ou AG e reticulações intracordão de GNG [Reedijk et aj., Structure and Bonding, (1987) 67, 53-89], Numa menor extensão, a cisplatina tem também como resultado reticulações intercordão GG e reticulações de ADty--proteína [Rahmouni et al., Biochemistry, (1987) 26, 7229-7234]. Estas lesões do ADN têm como resultado modificações de conformação que se reflectem na dobragem e na distorção local do ADN. Estas lesões do ADN têm sido referidas como sendo inibidoras da actividade de diversas polimerases de ADN [Vallan et al., Nucl. Acids Res., (1988) 16, 4407-4418; Pinto et al., Proc. Natl. Acad. Sei., (1985) 82, 4616-4619; Gralla et al., Câncer Res., (1987) 47, 5092-5096],

As reticulaçòcs intercordão entre duas bases de guanina adjacentes têm sido igualmente ilustradas para inibir a função da polimerase do ARN [Lemaire et aj., Proc. Natl. Acad Sei., (1991) 88, 1982-1985], Por consequência, os efeitos citotóxicos da cisplatina são muito presumivelmente atribuíveis aos efeitps combinados destas lesões do ADN, em vez de serem o resultado de uma qualquer lesão específica.

Os complexos dc mono(platma) e bis(platina), respectivamente, que contêm um ou dois átomos de platina são conhecidos na especialidade (patentes de invenção norte-americanas N.“ 4 225 529, 4 250 189, 4 533 502, 4 565 884, 4 571 335 e 4 797 393). Por exemplo, os complexos de mono(platina) incluem compostos monoméricos de cloramina quadrados-planos Pt(II) que são tetracoordenados. Ç) número relativo de grupos cloreto e amoníaco em tais compostos pode variar e esses compostos podem, por consequência, ser descritos pela fórmula gçral:

[PtClm(NH3)4-mf~mK

Deste modo, a estrutura destes compostos pode variar entre [Pt(NH3)4]2+ na qual m=0 e PtCU2 em que m=4. Dado que o cloro constitui a substituição mais lábil em comparação com o amoníaco, os complexos de [PtCl2(NH3)2] e [PtCl(NH3)3]Cl são considerados bifimeionais e monofuncionais, respectivamente, em que ps s prefixos “bis” e “mono” se referem ao número de ligandos elimináveis. A carga dos complexos é obtida considerando que o catião Pt(H) possui uma carga formal de +2 e requer assim uma carga negativa de -2 para a neutralização da carga. Por exemplo, quando m=0, a neutralização é proporcionada pela presença de dois aniões cloreto fora da esfera de coordenação. A formação da ligação entre a platina e o amoníaco, que é um ligando neutro, pode ser descrita como uma doação electrão-par a partir de NHj para esvaziar a órbitas no átomo de Pt(II). Deste modo, não tem lugar qualquer partilha electróniça entre a Pt e o grupo NH3. Devido a esta ausência de partilha electrónica, o número de ligandos neutros não afecta a carga global na esfera de coordenação da platina. Deste modo [Pt(NH3)4]2+ é formalménte um catião 2+ que requer anião ou aniões de não coordenação, ou contra-iões, tendo uma carga líquida negativa de 2- para a neutralização do complexo. Por exemplo, pode proporcionar-se a neutralização através de aniões carregados mononegativamente (por exemplo, N03', Cl', PF6', BF4‘ e mono-carboxilaíos tendo a fórmula geral RCOO') ou um anião simples carregado dinegativamente (por exemplo S042', dicarboxilatos de fórmula geral [R(COO)2]2"). Por consequência, para os mesmos princípios, [PtCl2(NH3)2] é um complexo neutro.

Estas considerações podem aplicar-se não somente ao amoníaco mas também a ligandos neutros, tais como aminas primárias ou secundárias.

De salientar que os ligandos aniónicos tais como Cl' podem ser ligados quer coordenadamente (isto é, com formação de uma ligação Pt-Cl) ou podem actuar como um contra-anião sem qualquer necessidade de formação de uma ligação covalente. A forma exacta desses aniões tais como Cl' encontra-se compreendida num dado complexo de platina e depende tanto de considerações teóricas (cinética vs. efeitos termodinâmicos) como dos processos sintéticos actuais utilizados para preparar o complexo (por exemplo, a extensão da reacção, a acidez, a concentração do anião particular, tal como a concentração do anião Cl' que se encontra contido na mistura rcaccional. Estas considerações são aplicáveis igualmente a outros ligandos aniõnicos e neutros. O facto de a carga global dos complexos de monoplatina depender c|o número relativo de ligandos neutros e aniónicos que se encontram bgados ao metal Pt(ll 1 c iguaimenie aplicável para complexos polinucleares (que contêm mais do que uma esfera coordenada de Pt(II)) e para complexos que contêm Pt(IV) em que o estado de oxidação do radical de platina é 4+. Por exemplo, os complexps dinucleares em que duas esferas de coordenação equivalentes de Pt(II) se encontram ligadas por um agente de formação de ponte de diamina podem ser representados pela fórmula geral [(PtClB1(NH3)3.[B)2 (dtamina)]2^

Deste modo, quando m=2 e se encontram presentes duas esferas ^e coordenação bifuncionais, o composto é neutro. Pelo contrário, quando m=l, apenas se encontram presentes esferas de coordenação monofúncionais e o radical platina tem uma carga formal de 2+ que tem de ser contrabalançada por um ou mais contra--aniões com uma cara líquida de 2-,

Exemplos de complexos trinucleares da platina (também denominados ppr complexos tri-platínicos) foram recentemente referidos na literatura [Yun Qu et al., Inorg. Chem., 32, 2591-2593 (1993)]. Tais compostos, em que os ligandos têm urqa configuração cis, são complexos neutros ou que comportam uma carga global de 2+ e podem ser representados pelas fórmulas gerais seguintes: 5

/X Pt m/ ^nh2-r

x x\ /X

Pt R 2

m/ ^NHj— R—mf ^NH

em que o símbolo X representa um ligando lábil (tal como um átomo de cloro) e o símbolo R representa uma cadeia alquilénica. Do que se disse anteriormente, é óbvio que, no caso dos complexos com uma carga global de 2+, a referida carga encontra--se localizada no átomo de platina central, que comporta quatro ligandos neutros, enquanto que os dois átomos de platina periféricos são formalmente neutros e, tal como definido anteriormente, bifuncionais.

Exemplos de complexos trinucleares de platina encontram-se igualmente referidos na patente de invenção WO 95/26968. Nos referidos compostos, os ligandos encontram-se na configuração trans. Eles podem ser representados p^las fórmulas gerais seguintes: α \ /NH3Pt

NH^ yWr-R)n—NH2 R

m/ >Η—(CHJI—MV / α 4+ 4/mZ^ NHa na qual o símbolo n representa um número inteiro compreendido entre 2 e 7 inclusive; o símbolo Z'm representa um anião escolhido de entre cloreto, brorqeto, íodeto, nitrato, sulfato (m=2); 6 r. o símbolo m representa o número inteiro 1 ou 2.

Descrição da invenção A presente invenção diz respeito a complexos tri-platínicos em que os tr^s átomos de platina se encontram ligados por cadeias de diamina e em que o átomo de platina central se coordena com quatro ligandos neutros, enquanto que os dois átomos de platina periféricos se coordenam ambos com três ligandos neutros e com um ligando com uma carga -1.

Por consequência, os compostos de acordo com a presente invenção, sàjo diferentes dos compostos da técnica anterior e têm uma carga global de +4 e em particular têm um átomo de platina central com uma carga formal de +2 e os dois átomos de platina periféricos cada um com uma carga formal de +1. Além disso, conforme evidenciado anteriormente, os dois átomos de platina periféricos são monofúncionais. A presença de três átomos de platina ligados por cadeias de diamina pode ter como resultado um aumento da formação de produtos de adição com ADN relativamente aos complexos de mono(platina) e bis(platina) e, como consequência, um aumento do efeito citotóxico.

Em particular, a presente invenção diz respeito a complexos de tri-platma de fórmula geral (I): [PtCl(NH3)2NH2.(CH2)n-NH2Pt(NH3)2NH2-(CH2)n-NH2PtCl(NH3)2]4+4/qiZ-m na qual pelo menos um dos três átomos de platina se encontra na configuração cis; o símbolo n representa um número inteiro compreendido entre 2 e 7; o -símbQlo_Z~m representa um anião balogeneto (cloreto, -brometo, íodeto, jn=l), um anião nitrato (m=l) ou um anião sulfato (m=2). 7

Mais particularmente, a presente invenção diz respeito a complexos de triplatina de fórmulas gerais (Ia), (Ib), (Ic), (Id) e (Ie):

Ϊ 8

X o cm

α> E « Nl E + ^

o z \ / K

„/Λ « rw X

o

10 a (0 M

(0 H U

CM X o

n X \ / ε f>'\ (0 ,rM ϋ o X X z zV/ £ _/ v O 2

ta C rt 5-i •U 9

/<’ r f? em que os símbolos n e Z'm têm os significados definidos antes e a estereoquímica dos átomos de platina é tal como definida nas fórmulas gerais anteriores.

Na descrição que se segue, a expressão “compostos de fórmula geral (1)” significa, de uma maneira geral, os compostos de fórmula gerais (Ia), (Ib), (Ic), (Id) e (le). Os compostos de fórmula geral (Ia) serão igualmente descritos como compostos de fórmula geral (t,c,t)-[PtCl(NH3)2NH2-(CH2)n-NH2Pt(NH3)2NH2--(CH2)nNH2PtCl(NH ,);]4 4/mZ m Analogamente, os compostos de fórmulas gerais (Ib), (1c), (Id) e (le) serão descritos como compostos de fórmulas gerais (c,c,c)-, (c,t,c)-, (c,c,t)- e (t.t>c)-[PtCl(NH3)2NH2(CH2)n-NH2Pt(NH3)2NH2-(CH2)nPtCl- (NH3)2]4*.4/mZ'm, respectivamente.

Os compostos preferidos de fórmula geral (I) são aqueles em que o símbojo n representa o número inteiro 6.

Os compostos particularmente preferidos de fórmula geral (I) são aqueles em que o símbolo n representa o número inteiro 6, o símbolo Z'm representa um anião cloreto ou nitrato e o símbolo m representa o número inteiro 1. A presente invenção refere-se também aos processos para a preparação dos compostos de fórmula geral (I).

Um processo para a preparação dos compostos de fórmula geral (Ia) (t,c,^)--[PtCl(NH3)2NH2-(CH2)n-NH2Pt(NH3)2-NH2-(CH2)n-NH2PtCl(NHj)2]4+.4/mZ'm é tal que envolve a síntese do intermediário de fórmula geral (ΠΙ) a partir de trans-platina, activada previamente mediante substituição de um átomo de cloro cc|m dimeti lformam i da, mediante reacção com uma amina de fórmula geral (II), conforme se indica no esquema seguinte: 10

AaW03 ^ΝΗ,

ΝΗ, χα DMF trans-platina

Cl kjh>C NIÍ> NHj—(CHj)n—NH-P

(HO NO3- em que o símbolo P representa um grupo protector apropriado convencional tal como terc.-butoxicarbonilo ou p-metoxibenziloxicarbomlo e o símbolo n tem os significados definidos antes. O intermediário de fórmula geral (ΠΙ) permite obtçr, j após cisão do grupo protector representado pelo símbolo P, o intermediário de fórmula geral (IV): V'"'· NH3 XNH£—(CH2)n—NHj 2+ 2/m Q’m (»V) na qual o símbolo n tem os significados definidos antes e, o símbolo Q m representa um contra-ião que depende das condições de cisão do grupo representado pejo símbolo P. Por exemplo, se o símbolo P representa um grupo terc.-butoxicarbonilo, 0 símbolo Q-m pode representar um anião cloreto ou um anião trifluoroacetato.

Transforma-se então o intermediário de fórmula geral (IV) no intermediário de fórmula geral (V): 2+ 11 α -ΝΗ, ,ΡΧ NHg ^ΝΗ2-(CH^n—NHg 2Ν03· (V) na qual ο símbolo η tem os significados definidos antes, por meio de uma reacção de permuta entre o ião Q'm.._e o ião nitrato. Pode jealizar-se .a referida.xeacção de permuta, quando o símbolo Q’m representar um aniâo cloreto, na presença de nitrato de prata e no seio de solventes tais como água ou álcoois (metanol, etanol). Faz-^e então reagir o intermediário de fórmula geral (V) com meia mole de cisplatina, previamente activada mediante substituição de ambos os átomos de cloro com cjuas moléculas de dimctilformamida, para se obter os compostos de fórmula geral (Ia):

V"4 _NHa NH^-CCFyn—NH 2 NOr 0.5 NH3 NH^ "Pt 2+ DMF(O) ^03 (V)

NaOH 'NHj-(Chyn-

Cl /NH, NH, NH3 ^NH, ‘NH, 4+ —(0Η,)η NH, /01 /R NhL, XNH, (la) 4/m Z"m çm o símbolo Z'm representa um anião nitrato. 12

ά

Analogamente, pode preparar-se os compostos de fórmula geral (Ib) mediante substituição de trans-platina por cisplatina na primeira fase da síntese, obtendo-se o intermediário de fórmula geral (Illb):

Cl (O)DMF NHa NH, NO3- a\Sa a9no3 -»·

NHj NKj DMF cis-platina NHj(C*yn—NH-P (»> -

Cl (CHjín—NH-P NHj NO3· (Illb) que se pode fazer reagir, conforme descrito anteriormente, de acordo com as seguintes fases de síntese: i) cisão do grupo protector representado pelo símbolo P, ii) jeacção de permuta do anião Q'm com umnaião nitrato; iii) reacção do intermediário obtido na fase ii) com meia mole de cisplatina, previamente activada com duas moléculas de dimetilformarmda.

Pode preparar-se os compostos de fórmula geral (Ic) a partir do intermediário anterior de fórmula geral (Illb), de acordo com as seguintes fases de síntese: i) cisão do grupo protector representado pelo símbolo Pj ii) reacção de permuta do anião Q’m com um anião nitrato; iii) reacção do intermediário obtido na fase ii) com meia mole de trans-platina, previamente activada com duas moléculas de dimetilformamida.

Pode preparar-se os compostos de fórmula geral (Ie) (t,t,c)-[PtCl(NH3)2-NH2- -(CH2)n-NH2PT(NH3)2NH2-(CH2)n-NH2PlCl(N¾)2]4+.4/mZ,,, a partir do intermediário de fórmula geral (III), conforme descrito no esquema seguijite:

Cl\ ^NH3 NH3 NHg—(CHj)n—NHrP (III) NO.

AflN03

OMF 2+ 2NO. DMF (O)^ ^Nh3

NHj NHj-’ (CHjJrv—NH-P 2* 2NO3' °\ ^nh3 /Pt NH3 -(CH-^n—NH3 (V)

NaOH

Cl\ / NH3 3+

NHj—(CH^n NHj ^NHj—(C^rv—NH-P NH, NH^ 3N03‘ (VI)

Faz-se reagir o intermediário de fórmula geral (ΠΙ), activado medianje substituição do átomo de cloro com uma molécula de dimetilformamida, com o intermediário de fórmula geral (V), preparado conforme descrito anteriormente, papa se obter o intermediário de fórmula geral (VI), a qual, por sua vez, se converte nos compostos de fórmula geral (Ie) por meio das seguintes fases de síntese: i) cisão do grupa protector representado pelo símbolo P; ϋ) rçacção (te permuta do anião Q m com um arnão nitrato; iii) reacção do intermediário obtido na fase ii) com uma mola de cisplatina, previamente activada com uma molécula de dimetilformamida.

Analogamente, pode preparar-se os compostos de fórmula geral (Id) (c,c,t)--[PtCl(NH3)2NH2-(CH2)n-NH2Pt(NH3)2NH2-(CH2)n-NH2PtCl-(NH3)2]4+.4/mZ'm a partir do intermediário de fórmula geral (Illb) seguindo um esquema de síntese idêntico ao descrito anteriormente, residindo a única diferença na estequiometria dos diferentes átomos de platina: 15

ll_ 5 Ο £ χ-/\_ ζ ο

J Ζ £ Λ. + Ο Ζ

L

I ο

( Α > δ α Ζ

L

\ / £ £*

16

/ .V /<Α,

X A

Faz-se reagir o intermediário de fórmula geral (VIb) de acordo com as seguintes fases de síntese, para se obter os compostos de fórmula geral (Id): i) cisão do grupo protector representado pelo símbolo P; ii) reacção de permuta do anião Q'ra com um anião nitrato; iii) reacção do intermediário obtido na fase ii) com uma mola de trans-platina, pre\ iamentc acm ada com uma molécula de dimetilformamida.

Um outro processo para a preparação dos compostos de fórmula geral (I) consiste na síntese dc um intermediário que comporta no átomo de platina central duas cadeias de diamina e fazendo reagir um tal intermediário, conforme o caso, com dois equivalentes de trans- ou cis-platina monoactivada com dimetilformamida.

Por exemplo, pode obter-se os compostos de fórmula geral (Ia) de acordo com este método fazendo reagir inicialmente duas moles de uma amina de fórmula geral (II) com cisplatina, previamente activada mediante substituição de ambos os átomos de cloro por duas moléculas de dimetilformamida, para se obter o intermediário de fórmula geral (VII): P-NH-(CH2)n- NH3 ^NH, -NH, :pt \ NH: -CCH^n-

NH-P 2+ 2N03- <Vll) na qual o símbolo P tem os significados definidos antes. Mediante cisão dos grupps protectores representados pelo símbolo P, obtém-se o intermediário de fórmula geral (VIII), na qual o símbolo Q'm tem os significados definidos antes. Converte-se sucessivamente um tal intermediário no intermediário de fórmula geral (IX): 4+ 17 ΝΗ; (C^n- ΝΗ, ^ΝΗ, •NHj, ΝΗ^- (CHyn-ΝΗ, 4Jm Q-™- (VIII)

NHj NH3 ^NHj (CH^n-NHj NH^-(CH^n-NHj 4+ 4N03" (IX)

Realiza-se a referida transformação por meio de uma reacção de permuta entre o ião Q'm e o ião nitrato. Realiza-se uma tal reacção da permuta, quando o / símbolo Q'm representa um anião çlorçto, pa presença de nitrato de prata e no seio de solventes tais como água ou álcoois (metanol, etanol).

Faz-se então reagir o intermediário de fórmula geral (IX) com duas moles de trans-platina, previamente activada mediante substituição de um átomo de cloro com dimetilformamida, para se obter os compostos de fórmula geral (Ia): 18

4 Γ“ Νε * ♦ ·»γ η ο ζ ’Τ Ε' ζΓ'V ζ ζ C υ ζΓ ο A? £ r> x f z z e/ I V £ \ / £ étL /V C ο ? ο ζ I-1U. ο Λ -Τ—1 Μ Ιτ- X ο α ζ 19 em que o símbolo Z m representa um anião nitrato.

Analogamente, utilizando átomos de platina com estereoquímica apropriacja (trans- ou cis-platina) nas diversas fases de síntese, prepara-se todos os outros compostos de fórmula geral (I), ou seja os compostos de fórmulas gerais (Ib), (Ic), (Id)e(Ie).

Pode então transformar-se os compostos de fórmula geral (I) na qual o símbolo Z‘m representa um anião nitrato, preparados de acordo com os métodos descritos anteriormente, nos compostos de fórmula geral I na qual o símbolo Z-"1 representa um anião halogeneto ou sulfato mediante reacções de permuta convencionais, largamente referidas na literatura, tais como tratamento cop halogenetos ou sulfatos de metais alcalinos ou de metais alcalino-terrosos. Como alternativa, pode obter-se os compostos de fórmula geral (I) na qual o símbolo Z-™ representa um anião sulfato a partir dos compostos correspondentes de fórmula geral (I) na qual o símbolo Z"m = halogeneto, mediante tratamento com sulfato de prata. Métodos possíveis para a eliminação dos grupos protectores representados pelo símbolo P envolvem o tratamento com ácidos inorgânicos (tais como ácijio clorídrico aquoso ou no seio de uma solução alcoólica ou etérea) ou ácidos orgânicos (tais como o ácido trifluoroacético). Quando o símbolo P representa um grupo terc.-butoxicarbonilo, as condições preferidas para a sua cisão são as que têm em vista o uso de cloreto de hidrogénio em solução alcoólica. Neste caso, conforme indicado anteriormente, o contra-ião representado pelo símbolo Q"m será o ião cloreto.

Os compostos de acordo com a presente invenção apresentam, de uma maneira geral, uma boa solubilidade em água, em solventes fisiológicos e em solventes miscíveis com a água.

Os compostos de acordo com a presente invenção não só possuem acen actividade antitumor, mas também apresentam uma baixa toxicidade, e portanto o seu índice terapêutico é particularmente favorável.

Além disso, a elevada solubilidade em água dos complexos de triplatina de acordo com a presente invenção, toma fácil a preparação das formas farmacêuticas parenténcas e orais.

Ensaiou-se os compostos de acordo com a presente invenção quanto ao spu efeito citotóxico in vitro sobre diversas linhas de células de tumor, de entre as quais a leucemia murina L-1210, o carcinoma de ovários humanos A2780 oi| as respectivas sub-linhas resistentes à cisplatina L-1210/CDDP e A2780/CDDP. O ensaio sobre a linha de células A2780 constitui um método bem assente para a avaliação de complexos de platina como agentes antitumor. Além disso, os compostos de acordo com a presente invenção foram ensaiados num ensaio in viyo em que se inocularam por via intraperitoneal células de tumor L-1210 num murganho e se administrou o composto por via intraperitoneal 24, 120 e 216 horas após a inoculação do tumor. Os compostos de acordo com a presente invenção evidenciaram um elevado efeito antitumor nos modelos experimentais anteriores.

Os complexos de platina de acordo com a presente invenção foram particularmente activos quando administrados em associação com outros complexos da platina tendo actividade antitumor, mostrando um efeito sinergístico. 21 21

Uma composição farmacêutica que contém pelo menos um composto de fórmula geral (I) em associação com um complexo de platina com activicjade antitumor constitui um outro objecto da presente invenção.

Os compostos de fórmula geral (I), quando administrados a seres humanos e a animais que possuem tumores que podem ser tratados com complexos de platina, para doses compreendidas entre 1 mg e 1,2 g por metro quadrado de área do corpo, são susceptiveis de induzir a regressão dos referidos rumores.

Por consequência, um outro aspecto da presente invenção diz respeito à utilização dos compostos de fórmula geral (I) para a preparação de um medicamento útil para o tratamento de tumores. A dosagem eficaz dos compostos de acordo com a presente invenção poc|e ser determinada pelos clínicos assistentes de acordo com métodos convencionais. A relação entre as dosagens usadas para os animais de diferentes espécies e tamanhos e as para os seres humanos (com base em mg/m2 de área do empo) encontra-se descrita por Freirech, E.J. et al., Quantitaíive Comparison of Toxicity of Anticancer Agents in Mouse, Rat, Hamster, Dog, Monkey and Man, Câncer Chemother. Rpp., 50, N. 4,219-244(1966).

Habitualmente, no entanto, o paciente receberá doses compreendidas entre 1 e 1200 mg/kg de peso do corpo do complexo, com um regime de dosagem que variará dependendo de diversos factores que são conhecidos dos clínicos assistente^.

Por vezes, pode verificar-se ser vantajoso administrar os complexos de platina de acordo com a presente invenção em conjunto com um ou mais agentes que melhoram a actividade antitumor ou aliviam os efeitos secundários indesejáveis do complexo de platina. 22 r

Por exemplo, pode administrar-se os complexos de platina de acordo com a presente invenção conjuntamente com glutationa reduzida, conforme se encontra descrito nas patentes de invenção GB 2174905 e U.S. 4 871 528.

Os tumores em pacientes que podem ser tratados com os complexos jie platina de acordo com a presente invenção, são os tumores conhecidos como sendo susceptiveis à terapia com cisplatina. Os complexos de acordo com a presente invenção são também activos contra alguns tumores resistentes à cisplatina.

Mais geralmente, pode utilizar-se os compostos de acordo com a presente invenção para o tratamento das mesmas formas patológicas para as quais se utiliza a cisplatina. Isto inclui o tratamento de tumores, a sensibilização ou o aumento £e radiações [Douple et al., Cisplatin Current Status and Developments, Ed. A.W. Prestayk et al., Academi Press, 125 (1980); Douple et al., Platinum Metals Res., 29, 118 (1985)] e o tratamento de doenças parasíticas tais como a doença do sono africana [Farrell et al. Biochem. Pharmacol., 33, 961 (1984)]. O regime de tratamento pode ser variado apropriadamente, conforme é bem conhecido do clínico assistente, de acordo com o tipo de tumor a tratar e o estado do paciente.

Um outro objecto da presente invenção são as composições farmacêuticas que contêm uma quantidade eficaz sob o ponto de vista terapêutico de pelo menos um composto de fórmula geral (I) em mistura com veículos e excipientes convencionais.

Os compostos de acordo com a presente invenção são administrados de preferência como soluções aquosas estéreis, que contêm eventualmente cloreto de sódio em uma concentração apropriada (0,1-0,9 mg/ml). Administra-se de 23

preferência as soluções pelas vias intravenosa ou intra-arterial, muito embora se possam utilizar, em casos particulares, outras formas de administração.

As composições farmacêuticas para administração parentérica compreendem soluções salinas estéreis, tal como definidas anteriormente, ou pós estéreis p^ra preparação extemporânea de soluções, bem como preparações oleosas para administração intramuscular ou intraperitoneal.

Outras composições farmacêuticas úteis podem ser xaropes ou formas líquidas semelhantes, bem como formas sólidas tais como comprimidos, cá e similares.

Prepara-sc as composições farmacêuticas de acordo com a presente invençjlo de acordo com métodos conhecidos, tais como os referidos em Remington’s Pharmaceutical Sciences Handbook, XVII Ed., Mack Pub., N. Y., U.Sf.A..

Os exemplos seguintes ilustram ainda a invenção. PREPARAÇÃO 1

Prepara-se a N-BOC hexanodiamina a partir do seu sal cloridrato, o qual é um produto do comércio.

Dissolve-se 2,1 g de cloridrato de N-BOC hexanodiamina em 20 ml de éter dietílico e trata-se sob agitação com 16 ml de uma solução aquosa 1 N de hidróxido

Lava-se então a fase orgânica com salmoura, seca-se sobre sulfato de sódic| e elimina-se o solvente mediante evaporação sob pressão reduzida para se obter a N-BOC hexanodiamina, base livre, com um rendimento ' co. PREPARAÇÃO 2

Preparação do trans-[PtCl(NHj)2H2N-(CH2)6-NH-BOC]+N03-mtermediário (ΙΠ) 34 ;s

Dissolve-se 2 g de trans-platina em 133 ml de dimetilformamida anidra (DMF) e adiciona-se 1,13 g de nitrato de prata de uma só vez. Mantém-se a mistura reaccional sob agitação ao abrigo da luz durante 18 horas. Em seguida, elimina-se o cloreto de prata precipitado mediante filtração e arrefece-se o filtrado límpido at^ à temperatura de -20°C e adiciona-se a uma solução de N-BOC-l,6-hexanodiamina (1,36 g) em 40 ml de DMF anidra. A adição dura cerca de 30 minutos. Mantém-se a solução sob agitação à temperatura de -20°C durante 3 horas e durante 1 hora à temperatura ambiente. Evapora-se então o solvente sob pressão reduzida mantendo a temperatura da solução não superior a 40°C e retoma-se o resíduo com 200 ml de éter dietílico, mantendo-se sob agitação durante 20 minutos^ e depois filtra-sje. Dissolve-se o sólido resultante em 200 ml de metanol e mantém-se sob agitação durante 15 horas para precipitar quaisquer vestígios de trans-platina Elimina-^e mediante filtração a trans-platina separada e trata-se a solução com 1 g de carvão activado, filtra-se de novo e finalmente elimina-se o solvente mediante evaporação sob pressão reduzida. Purifica-se o resíduo suspendendo-o em 100 ml de acetona sob agitação durante 30 minutos. Após filtração, obtém-se 2,3 g de produto.

Análise elementar (calculada/encontrada %): C 24,33/24,05; H 5,57/5,64, N 12,90/12,84; Cl 6,53/6,40;

Pt 35,93/36,06. RMN-195Pt em DMF/d7-DMF: ^2433 ppm. PREPARAÇÃO 3

Preparação de trans-[PtCl(NH3)2H2N-(CH2)6-(CH2)6-NH3]2+2N03-intennediário (V) A uma solução de 1,5 g de trans-fPtClfNHsijHjN-fCHjie-NH-BOCl^íOj-em 150 ml de metanol adiciona-se 21 ml de uma solução 6,5 M de cloreto de hidrogénio em etanol. Mantém-se a mistura reaccional sob agitação durante 24 horas á temperatura ambiente, filtra-se em seguida o sólido, lava-se o filtro com metanol e éter dietilico e finalmente seca-se.

Dissohe-se o sólido resultante em 180 ml de metanol e adiciona-se a uryia solução de nitrato de prata (0,825 g) em 45 ml de metanol. Mantém-se a mistura reaccional sob agitação à temperatura ambiente durante 30 minutos, elimina-se o cloreto de prata mediante filtração e evapora-se o filtrado límpido até à secura. Rctoma-se o resíduo com acetona, mantém-se sob agitação durante 15 mimjtos, filtra-sc c seca-se. para se obter 0,925 g de produto.

Análise elementar (calculada/encontrada %): C 14,16/14.19; H 4,58/4,66; N 16,61/16,62; Cl 7,01/6,91;

Pt 38,57/36,10. RMN-,95Pt em DMF/d7-DMF: -2433 ppm. PREPARAÇÃO 4

Preparação de trans-[BOC-NH-(CH2)6-NH2-Pt(NH3)2H2N-(ÇH2)6-NH-BOC]2+ 2N03‘ A uma suspensão de 1,028 g de trans-platina em 35 ml de DMF anidra adiciona-se 1,16 g de nitrato de prata. Aquece-se a mistura reaccional até 60°C, ao abrigo da luz, durante 5 horas e em seguida elimina-se mediante filtração o cloreto de prata que precipitou. Em seguida, adiciona-se uma solução de N-BOC-1,6--hexanodiamina (1,48 g) em 5 ml de DMF e mantém-se a mistura reaccional resultante à temperatura ambiente durante a noite. Mediante diluição com 300 ml de éter dietilico separa-se um sólido branco, que se filtra, dissolve em metanol e filtra através de um filtro de 0,2 micrómetro para eliminar quaisquer vestígios dos sais de prata. Diluiu-se então a solução metanólica com éter dietílico. Cristaliza um sólido branco que se filtra e seca, para se obter 1,94 g de produto.

Análise elementar (calculada/encontrada %): C 33,63/33,44; H 6,93/7,00; N 14,26/14,30;

Pt 24,83/25,06. RMN-195Pt em DMF/d7-DMF: -2687 ppm. PREPARAÇÃO 5

Preparação de trans-[NH3-(CH2)6-NH2-Pt(NH3)2H2N-(CH2)6-N03]4+ 40'

Dissolve-se 500 mg de trans-[BOC-NH-(CH2)6-NH2-Pt(NH3)2H2N-(CH2)6--NH-BOC]2+ 2N03' em Sfrml de metanol e adicionà-se 5 ml de uma solução 6,5 M de cloreto de hidrogénio em etanol. Mantém-se a mistura reaccional sob agitação à temperatura ambiente durante 42 horas, filtra-se então o produto sólido e lava-se com éter dietílico, para se obter 340 ml de produto.

Análise elementar (calculada/encontrada %): C 23,81/23,14, H 6,66/6,73, N 13,88/13,51; Cl 23,42/22,03; Pt 32,23/31,68. RMN-195Pt em água: -2674 ppm. PREPARAÇÃO 6

Preparação de cis-ÍBOÇ-^-(CH2)é-NH2-Pt(NH3)2H2N-(CH2)6-NH-BOC]2T 2N03--intermediário (VII) A uma solução de cis-platma (3 g) em 100 ml de DMF, mantida à temperatura ambiente, sob agitação e atmosfera de um gás inerte, adiciona-se 3,4 g de nitrato de prata. Decorridas 19 horas à temperatura ambiente, elimina-se o cloreto de prata precipitado mediante filtração utilizando para a filtração do mesmo um filtro de microfibras duplo. Mantém-se então a solução amarela que foi obtida sob 27

/ S X Ό agitação e adiciona-se a uma solução de 4,54 g de N-BOC-l,6-hexanodiamina em 12 ml de DMF. Trata-se a solução avermelhada resultante, mantida sob agitação durante a noite, com 1,5 g de carvão activado, filtra-se e evapora-se então o solvente sob pressão reduzida. Dissolve-se o resíduo (óleo amarelo escuro) em 60 ml fie metanol e filtra-se através de um filtro de 0,2 micrómetro. Elimina-se o solvente mediante evaporação e retoma-se o resíduo oleoso amarelo com 350 ml de étpr dietílico. Filtra-se o precipitado e seca-se numa estufa, para se obter 6,94 g de produto.

Análise elementar (calculada/encontrada %): C 33,63/33,48; H 6,93/6,99; N 14,26/14,14; Pt 24,83/25,13. RMN-195Pt em DMF/d7-DMF: -2681 ppm. PREPARAÇÃO 7

Preparação de cis-[ NH3-(CH2)6-NH2-Pt(NH3)2H2N-(CH2)6-]SlH3]4+ 4C1‘ A uma solução de cis-[BOC-NH-(CH2)6-NH2Pt(NH3)2H2N-(CH2)6-NH--BOÇ]2 2NCV (100 mg) em 1,5 ml de metanol, mantida à temperatura ambiente e sob agitação, adiciona-se 1,39 ml de uma solução 4,11 N de cloreto de hidrogénio em etanol. Decorrida 1 hora forma-se um precipitado sólido branco que se torija cada vez mais amarelado. Decorridas 23 horas elimina-se o sólido mediante filtração, lava-se no filtro com as águas mães e em seguida com éter dietílico e s^ca--se finalmente numa estufa durante a noite. Obtém-se 62 mg de produto.

Análise elementar (calculada/encontrada %): C 23,81/23,10; H 6,66/6,21; N 13,88/13,57; Cl 23,42/22,69; Pt 32,23/32,92. EXEMPLO 1

Preparação de (t,c,t)-[PtCl(NH3)2NH2-(CH2)6-NH2Pt-(NH3)2NH2-(CH2)6-NH2PtCl-(NHafcT 4NQj' e de (tAt)-[PlO(NH3)2NH2-XCH2)6-J4HíPt-ÍNH})2NHr(C«2)6--NH2PtCl-(NH3)2]4+ 4Cr A uma solução de cis-platina (140 mg) em 4,6 ml de DMF, mantida sob agitação e numa atmosfera de gás inerte, adiciona-se 158 mg do nitrato de prata. Decorridas 18 horas elimina-se o cloreto de prata precipitado mediante filtração e à solução resultante adiciona-se rapidamente, gota a gota, uma solução de 472 mg de trans-[PtCl(NH3)2H2N-(CH2)6-NH3)]2+ 2N03' (intermediário (V) - preparação 3) em 4,5 ml de DMF e 1,04 ml de uma solução 0,89 N de hidróxido de sódio em metanol. Mantém-se a solução sob agitação durante a noite, filtra-se então sob vazio e diluiu--se com 30 ml de acetona. Separa-se um óleo amarelado, que se isola medianje decantação a partir da fase liquida. Retoma-se o óleo com 10 ml de metanol e mantém-se sob agitação durante 3 horas. Em seguida, elimina-se mediante filtração o sólido cor de rosa que se separa, obtendo-se 384 mg de (t,c,t)--[PtCl(NH3)2NH2-(CH2)6-NH2Pt-(NH3)2NH2-(CH2>6-NH2PtCl-(NH3)2]4+4N03·. Análise elementar (calculada/encontrada %): C 11,63/11,51; H 4,07/4,08; N 15,83/15,48; Cl 5,72/5,34;

Pt 47,24/46,08 RMN-19SPt em água: -2415 ppm; -2660 ppm.

Dissolve-se 350 mg de (t,c,t)-[PtCl(NH3)2NH2-(CH2)6-NH2Pt-(NH3)2NFl2--(CH2)6-NH2PtCl(NH3)2]4+ 4N03' em 175 ml de soro fisiológico (cloreto de sódio a 0,9%). Decorrida 1 hora à temperatura ambiente, filtra-se a solução através de um filtro de papel em repouso por cima de um filtro Millex de 0,2 micrómetro e 29 elimina-se o solvente mediante evaporação sob pressão reduzida até que o produto comece a cristalizar (volume residual de cerca de 10 ml). Após 2 horas elimina-se o sólido mediante filtração, lava-se sobre o filtro com uma pequena quantidade de soro fisiológico, em seguida com metanol e com éter dietílico. Após secagem na estufa à temperatura de 40°C durante a noite, obtém-se 195 mg de produto.

Análise elementar (calculada/encontrada %): CC 12,73/12.53; H 4.45/4,49; N 12,37/12,08; Cl 18,78/18,44; Pt 51,68/50,63. RMN-l9íPt ern em água: -2667 ppm. EXEMPLO 2

Preparação de (c,t,c)-[PtCl(NH3)2NH2-(CH2)6-NH2Pt-(NH3)2NH2-(NH2)6-NH2PtCl-(ΝΗ^Γ 4NOf

Dissolve-se 200 mg de trans-[NH3-(CH2)6-NH2-Pt(NH3)2H2N-(CH2)6-NH3]4+ 4C1' (preparação 5) em 10 ml de água destilada e trata-se com 224 mg de nitrato de prata. Mantém-se a suspensão resultante à temperatura ambiente e sob agitação durante 10 minutos e remove-se, mediante filtração, o cloreto de prata qpe precipitou. Concentrou-se o filtrado quase até à secura e em seguida diluiu-se com acetona. Separa-se um sólido branco que se filtra, lava com acetona e seca, par^ se obter 204 mg de tmns-[NH3<CH,)6-NHrP(íNH3)2H,N-(CH2)6-NHJ4t 4NQ3'

Dissolve-se 84 ml de cis-platina em 10 ml de DMF e à solução resultante adiciona-se 48 mg de nitrato de prata; precipita subitamente o cloreto de pratp. Mantém-se a suspensão sob agitação à temperatura ambiente e ao abrigo da luz durante 1 hora e 15 minutos, centnfuga-se em seguida e filtra-se através de um filtro Millex de 0,2 micrómetro. Ao filtrado adiciona-se uma solução de trans--[NH3(CH2>6-NH2-Pt(NH3)2H?N-(CH2)6JMH3]4+ 4N03‘ (100 mg) em 1 ml de DMF e 0,14 ml de uma solução 1 N hidróxido de sódio em metanol. Decorridas 2 horas sob agitação, trata-se a solução com carvão activado, filtra-se e dilui-se com étpr dietílico. Separa-se um óleo avermelhado, que se isola mediante decantação a partir das águas mães. Retoma-se o resíduo com 5 ml de metanol e mantém-se sob agitação durante 3 horas. Em seguida, filtra-se o sólido que se separa, obtendo-se 90 mg de prodqto. RMN-l95Pt em água -2416 ppm; -2678 ppm. EXEMPLO 3

De acordo com os processos descritos nos exemplos 1 ou 2 e nas preparações 2-7, a partir da diamina apropriada, prepara-se os seguintes complexos de tri-platina: (t,c4HPtCl(NHJ)2H;N-(CH2)5-NHI-Pt(NH5)2H2N-(jCH2)5-NH2PtCl(NH3)2]4+4N03· (t,c,t)-[PtCl(NH3):H:N-(CH2)4-NH2-Pt(NH3)2H2N-(CH2)4-NH2PtCl(NH3)2]4+4N03' (t,c,t)-[PtCl(NH3)2H2N-(CH2)3-NH2-Pt(NH3)2H2N-(CH2)3-NH2PtCl(NH3)2]4+4N03' (t,cd)-[PtCl(NH3)2H2N-(CH2)2-NH2-Pt(NH3)2H2N-XCH2)2-NH2PtCl(NH3)2]4+4N03-(t,c,t)-[PtCl(NH3)2H^-(CH2)7-NH2-Pt(NH3)2H2N-(CH2)7-NH2PtCl(NH3)2]4i4N03‘ (t,c,t)-[PtCl(NH3)2H2N-(CH2)5-NH2-Pt(NH3)2H2N-(CH2)5-NH2PtCl(NH3)2]4+4Cr (t,c,t)-[PtCl(NH3)2H2N-(CH2)4-NH2-Pt(NH3)2H2N-(CH2)4-NH2PtClCNH3)2]4+ 4C1' (t,c,t)-IPtCl(NH3)2H2N-(CH2)3-J^2-Pt(NH3)2H2N-(CH2)3-NH2PtCl(NH3)2]4+ 40' (t,c,t)-IPtCl(NH3)2H2N-(CH2)2-Md2-Pt(NH3)2H2N-(CH2)2-NH2PtCl(NH3)2]4+4Cr (t,c,t)-[PtCl(NH3)2H2N-(CH2)7-NH2-Pt(NH3)2H2N-(CH2)7-NH2PtCl(NH3)2]4+4Cr (c,t,c)-[PtCl(NH3)2H2N-(CH2)5-NH2-Pt(NH3)2H2N-(CH2)J-NH2PtCl(NH3)2]4+4N03· (c,t,c)-[PtCKNH3)2H2N-(CH2)4-J^H2-Pt(NH3)2H2N-(CH2)4-NH2PtCl(NH3)2j4+4N03· (c,t,c)-[PtCl(NH3)2H2N-(CH2)3-NH3-Pt(NH3)2H2N-(CH2)3-NH2PtClCNH3)234+4N03-(c,t,Q)-[PtCl(NH3)2H2N-(CH2)2-NH2-Pt(NH3)2H2N-(CH2)2-NH2PtCl(NH3)2]4+4N03· 31 (c,t,cHPtCl(NH3)2H2N-(CH2>rNH2-Pt(NH3)2HaN-(CH2)rNHaPtCl(NH3)jr4N03' (c,t,ç)-[Pta(NH3)2H2N-(CH2)5-NH2-Pt(NHj)zH2N-CCH2)5-NH2PtCl(NH3)J4+4Çr (c;t,c)-[PtCl(NH3)2H2N-(CH2)4*NHrPt(NH3)2H2N-(CH2VNH2PtCl(NH3)2l4+4Cr íc,tx)-[PtCl(NH3)2H2N-(CH2)3-NH2-Pt(NHj)2H2N-(CH2>3-NH2PtCl(NH3)2]4+4Çr (c,t,c)-[PtCl(NH3)2H2N-(CH2)2-NH2-Pt(NH3)2H2N-(CH2)2-NH2PtCl(NH3)2]4" 4Cr (c,t,cHPtCI(NH3)2H2N-(CH2)7-NH2-Pt(NH3)2H2N-(CH2)7-NH2PtCl(NH3)2]4+4Cr (c,c,c)-[PtCl(NH^)2H2N-(CH2)s-NH2-Pt(NHj)2H2N-(CH2)3-NH2PtGl(NH3)234+ 4N93' 0 (c,c,c)-[PtCl(NHj)2H2N-(CH2)4-NH2-Pt(NH3)íH2N-<CH2)4-NH2PtCl(NH3)2]4+4N93· (c,c,c)-[PtCl(NH3)2H2N-(CH2)3-NH2-Pt(NH3)2H2N-(CH2)3-NH2Pta(NH3)2]4+4N03' (c,c,c)-[PtCl(NH3)2H2N-(CH2)rNH2-Pt(NH3)2H2N-(CH2)2-NH2PtCl(NH3)2r4N03· (c,c,c)-[PtCl(NH3)2H2N-(CH2)rNH2-Pt(NH3)2H2N-(CH2.)rNHiPtCl(NH3)234+ 4N03-(c,c,c)-[PtCl(NH3)2H2N-(CH2)5-NH2-Pt(NH3)2H2N-(CH2)5-NH2PtCl(NH3)2]4+ 4Ç1' (c,c,c)-[PtCl(NH3)2H2N-(CH2)4-NH2-Pt(NH3)2H2N-(CH2)4-NH2PtCl(NH3)2r 4C1*

(c5c,ç)-[PtCl(NH3)2H2N-(CH2)j-NH2-Pt(NH3)2H2N-(CH2)3-NH2PtÇl(NH3)2]4+4Cr (c,c,c)-[PtCl(NH3)2H2N-(CH2)2-NH2^Pt(NH3)2H2N-(CH2)2-NH2PtCl(NH3)234+ 4Cr • (c,c5c)-[PtCl(NH3)2H2N-(CH2)7-NHrPt(NH3)2H2N-(CH2>rNH2PtCl<NH3>2]4+ 4GT

Lisboa, 27 de Setembro de 2001 1 7 //"'

Claims (10)

1 Reivindicações 1. Complexos de tri-platina de fórmula geral (I): [PlCRM l, ):N I l:.(CH2)IrNH2Pt(NH3)2NH2-(CH2)n-NH2PtCl(NH3)2]4+4/mZ-m na qual pelo menos um dos três átomos de platina se encontra na configuração cis; o símbolo n representa um número inteiro compreendido entre 2 e 7; o símbolo Z'm representa um halogeneto escolhido de entre cloreto, brometo, iodeto; (m= I). um união nitrato (m=l) ou um anião sulfato (m=2).

2 Complexos de acordo com a reivindicação 1, de fórmula geral (Ia): CL /NH3 NH3 NHf trans NHj ^NH3 Λ -(CH2)n-ΝΗ^ NHj-(CH2)n— çis 4+ MH, NH, .Cl —NH, trans . 4/m Z'm (|a) 3. Complexos de acordo com a reivindicação 1, de fórmula geral (Ib): 2

3 XNH, /Pt. ΝΗ3 /NH3 ci NHj-(CHj)n cis NH NHj NHj-(CH^fV CIS 4+ nh3 xnh3 —NHj ci . 4/mZ -m (fb) CIS —

4. Complexos de acordo com a reivindicação 1, de fórmula geral (Ic): NH, ,NH3 ct nh2—-(CRJn cis NH3 -(Chyn— Na, nh3 tr^ns 4+ NH2 ^Cl >V NH* NH3 . 4/m Z'm (Ic) CIS

5. Complexos de acordo com a reivindicação 1, de fórmula geral (Id): 3 NH3 /NHj ΝΗ3 /ΝΗ3 /«V /V α NHj—-(CHj)n-ΝΗ, NHj—-(CH^n— 4+ νη3 „ci •R —NHj ΝΗ3 trans . 4/mZ m (ld)

6. Complexos de acordo com a reivindicação 1, de fórmula geral (Ie): C| /NH3nh3 nh^-—(caon trans NH3 NH; NHj NH3 (ci-yn— ns 4+ NH, ΝΚ, Cl ""•Pt ‘NK 4/m z'ra (le) C1S _

7 Complexos de acordo com uma qualquer das reivindicações 1 a 6, em que o símbolo n representa o número inteiro 6.

8. Complexos de acordo com uma qualquer das reivindicações 1 a 6, em que o símbolo Z'm representa um anião cloreto ou nitrato. 4

9. Composições farmacêuticas que contêm um composto de acordo com as reivindicações 1 a 8 como ingrediente activo, em mistura com um veícjulo apropriado.

10. Composições farmacêuticas de acordo com a reivindicação 8 em q^ie I se combina um complexo de tri-platina de acordo com as reivindicações 1 a 8 com um complexo de platina com actividade antitumor. Lisboa, 27 de Setembro de 2001 ·*.·/ O Agestfe Oficiei * JLt '