PT738147E - Aplicacao do riluzolo no tratamento das doencas mitocondriais - Google Patents

Description

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DESCRICÀO “Aplicação do riluzolo no tratamento das doenças mitocondriais” O presente invento refere-se a uma nova aplicação terapêutica do riluzolo e dos sais farmaceuticamente aceitáveis deste composto. O riluzolo ou amino-2 trifluorometoxi-6 benzotiazolo é útil como medicamento anti-convulsivo, ansiolítico e hipnótico (patente EP 50551), no tratamento da esquizofrenia (EP 305276) e no tratamento das perturbações do sono e da depressão (EP 305277), no tratamento de desordens cérebro-vasculares e como anestésico (EP 282971).

De maneira surpreendente verificou-se agora que este composto também pode ser utilizado no tratamento das doenças mitocondriais.

As doenças mitocondriais são doenças degenerativas ligadas a diferentes mecanismos como, por exemplo, anomalias do ADN (elisões, mutações pontuais, esgotamentos, duplicações) anomalias do ADN celular codificador para enzimas mitocondríacos ou elementos complexos macromoleculares mitocondríacos, causas tóxicas adquiridas (MPTP, CO por exemplo) ou medicamentosas (cloranfenicol, AZT, ácido acetilsalicílico, por exemplo). Entre as doenças mitocondriais pode ser citado o síndroma de KEARNS-SAYRE, o síndroma MERRF (Myoclonic Epilepsy with Ragged Red Fibers), o síndroma MELAS (Mitochondrial Encephalopathy, Myopathy, Lactic Acidosis and Stroke-like episodes) e a doença de LEBER (I. NONAKA, Current Opinion in Neurology and Neurosurgery, 5, 622 (1992)). A acção do riluzolo no tratamento das doenças mitocondriais é demonstrada pelo seu efeito protector no teste do cianeto. Com efeito, é conhecido que o cianeto de potássio exerce um efeito tóxico por inibição da citocromo-oxidase aa3, o enzima terminal da cadeia de transporte de electrões ao nível mitocondríaco. Assim, em ratinhos o cianeto de potássio (3 mg/kg IV) induz contrações abdominais e ataques tónicos seguidos da morte em 20 segundos.

Ratinhos machos adultos de 22-25 g (CD1 COBS, Charles River) engaiolados com temperatura e iluminação controladas, recebem alimentação e água de beber ad libitum. A grupos de 6 animais dá-se o veículo ou o produto a estudar quer por via intraperitoneal 30 minutos antes da administração intravenosa de uma dose letal (3 mg/kg) de cianeto de potássio, quer por via oral 1 hora antes da administração do cianeto de potássio. No grupo de

84 271 ΕΡ Ο 738 147/ΡΤ 2 controlo, todos os ratinhos morrem em 20 segundos ao passo que a DE50 do riluzolo por via IP é de 4,5 mg/kg e a DE50 do riluzolo por via oral é de 7,8 mg/kg. A acção do riluzolo no tratamento das doenças mitocondriais é igualmente demonstrada pelo seu efeito sobre o metabolismo mitocondríaco do fígado do rato. A actividade metabólica da mitocôndria é seguida pelo consumo de oxigénio por polarografia por meio de um eléctrodo de Clark (comercializado por BIOBLOCK). O dispositivo experimental é constituído por uma câmara de vidro, com temperatura regulada a 27°C por um sistema de água quente. Uma barra magnética colocada na câmara permite a agitação contínua do meio de reacção, e facilita o estabelecimento de um equilíbrio entre o oxigénio dissolvido e o gás que se difunde através da membrana do eléctrodo. As mitocôndrias, o substrato (succinato) e o ADP (difosfato de adenosina) são introduzidos na câmara de reacção por uma pequena abertura situada na parte superior do aparelho. Um eléctrodo de Clark é mergulhado no meio de reacção por um orifício hermeticamente fechado por um tampão roscado. O consumo de oxigénio é traçado por um registador ligado ao monitor tipo YSI BIOLOGICAL OXYGEN MONITOR modelo 5300 (comercializado por BIOBLOCK).

As mitocôndrias de fígado de rato macho SD são isoladas a +4°C por centrifugação diferencial conforme o método descrito por APPELMANS et ai, Biochem. J., 59, 438-445 (1955). O depósito de mitocôndrias é retomado com 1 a 3 ml de tampão de sacarose 0,25 M e homogeneizado com a pipeta. O consumo de oxigénio pelas mitocôndrias (1,2 mg de proteínas por ml) é medido em 5 ml de tampão de Chance composto por 12 mM de NaF, 26 mM de NaCl, 58 mM de KC1, 3 mM de substrato de succinato, para se encontrar no estado metabólico 4 de Chance-Williams (ou estado 4 de óxido-redução das mitocôndrias, CHANCE B., Energy liked functions of mitochondria, New York, Acad. Press (1963)). A temperatura de 27°C corresponde a uma concentração de oxigénio de cerca de 250 μΜ. O estado metabólico 3 de Chance-Williams é desencadeado por adição de 0,25 mM de difosfato de adonosina em preparações-testemunha que contêm 250 nM de riluzolo. O consumo médio de oxigénio pelas mitocôndrias hepáticas testemunha é de 1,63 pmoles/min/mg de proteínas (3 ansaios). Na presença de 250 nM de riluzolo adicionado in vitro às mitocôndrias, o consumo de oxigénio é, em média, igual a 2,12 pmoles/min/mg de proteínas (3 ensaios). Estes resultados demonstram que o riluzolo estimula a respiração mitocondríaca em cerca de 30% em relação aos controlos.

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Como sais farmaceuticamente aceitáveis podem ser citados, nomeadamente, os sais de adição com ácidos inorgânicos tais como cloridrato, sulfato, nitrato e fosfato ou orgânicos tais como acetato, propionato, succinato, oxalato, benzoato, fumarato, maleato, metanossulfonato, isetionato, teofilina-acetato, salicilato, fenolftalinato, metileno-bis-β-oxinaftoato ou seus derivados de substituição.

Os medicamentos são constituídos pelo menos pelo riluzolo sob a forma livre ou sob a forma de um sal de adição com um ácido farmaceuticemente aceitável, no estado puro ou sob a forma de uma composição na qual está associado a qualquer outro produto farmaceuticamente compatível, que pode ser inerte ou fisiologicamente activo. Os medicamentos de acordo com o invento podem ser administrados por via oral, parentérica, rectal ou tópica.

Como composições sólidas para administração oral, podem ser utilizados comprimidos, pílulas, pós (cápsulas de gelatina, hóstias) ou granulados. Nestas composições, o princípio activo de acordo com o invento é misturado com um ou mais diluentes inertes tais como amido, celulose, sacarose, lactose ou sílica, sob atmosfera de árgon. Estas composições podem compreender igualmente outras substâncias além dos diluentes, por exemplo um ou mais lubrificantes, tais como estearato de magnésio ou talco, um corante, um revestimento (drageias) ou um verniz.

Como composições líquidas para administração oral podem ser utilizadas soluções, suspensões, xaropes e elixires farmaceuticamente aceitáveis contendo diluentes inertes tais como água, etanol, glicerol, óleos vegetais ou óleo de parafina. Estas composições podem compreender outras substâncias além dos diluentes, por exemplo produtos molhantes, edulcorantes, espessantes, aromatizantes ou estabilizadores.

As composições estéreis para administração parentérica podem ser preferivelmente soluções aquosas ou não aquosas, suspensões ou emulsões. Como solvente ou veículo pode ser empregada água, propilenoglicol, polietilenoglicol, óleos vegetais, em particular o azeite, ésteres orgânicos injectáveis, por exemplo o oleato de etilo ou outros solventes orgânicos convenientes. Estas composições podem conter igualmente adjuvantes, em particular agentes molhantes, isotonisantes, emulsionantes, dispersantes e estabilizadores. A esterilização pode ser feita de diversas maneiras, por filtração asséptica, incorporando na composição agentes esterilizadores, por irradiação ou por aquecimento. Podem igualmente ser preparadas sob a forma de composições sólidas estéreis que podem ser dissolvidas, no momento da utilização, em água estéril ou em qualquer outro meio estéril injectável.

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As composições para administração rectal são os supositórios ou as cápsulas rectais que contêm, além do produto activo, excipientes como manteiga de cacau, glicéridos semi-sintéticos ou polietilenoglicóis.

As composições para administração tópica podem ser, por exemplo, cremes, loções, colutórios, gotas nasais ou aerossóis. i

As doses dependem do efeito desejado, da duração do tratamento ou da via de administração usada; geralmente compreendem entre 50 e 400 mg por dia por via oral para um adulto, com doses unitárias que vão de 25 a 200 mg de substância activa.

De uma maneira geral, o médico determinará a posologia apropriada em função da idade, peso e de todos os factores próprios do indivíduo a tratar.

Os exemplos seguintes ilustram os medicamentos de acordo com o invento:

Exemnlo A

Preparam-se, de acordo com a técnica habitual, comprimidos doseados a 50 mg de produto activo que têm a composição seguinte: - Amino-2-trifluorometoxi-6-benzotiazolo... 5 0 mg - Manitol.................................................. 64 mg - Celulose microcristalina........................... 50 mg - Polividona excipiente............................... 12 mg - Carboximetilamido sódico........................ 16 mg - Talco..................................................... 4 mg - Estearato de magnésio.............................. 2 mg - Sílica coloidal anidra................................ 2 mg - Mistura de metil-hidroxipropilcelulose, polietilenoglicol 6000, dióxido de titânio (72-3,5-24,5), q.s.p. 1 comprimido com película, terminado a 245 mg.

Exemplo B

Preparam-se, segundo a técnica habitual, cápsulas doseadas a 50 mg de produto activo, que têm a composição seguinte: 5 84 271 ΕΡ Ο 738 147/ΡΤ - Amino-2-trifluorometoxi-6-benzotiazol.....50 mg -Celulose................................................ 18 mg - Lactose.................................................. 55 mg - Sílica coloidal........................................ 1 mg - Carboximetilamido sódio......................... 10 mg -Talco.................................................... 10 mg - Estearato de magnésio............................. 1 mg

Exemplo C

Prepara-se uma solução injectável contendo 10 mg do produto activo que tem a composição seguinte: - Amino-2-trifluorometoxi-6-benzotiazol...... 50 mg - Ácido benzóico........................................ 80 mg - Álcool benzílico......................................0,06 cm3 - Benzoato de sódio....................................80 mg - Etanol a 95%...........................................0,4 cm3 - Hidróxido de sódio................................... 24 mg - Propilenoglicol......................................... 1,6 cm3 - Água......................................................q.s.p. 4 cm3 O processo de preparação de medicamentos úteis no tratamento das doenças mitocondriais consiste em misturar o riluzolo, ou os sais farmaceuticamente aceitáveis deste composto, com um ou mais diluentes e/ou adjuvantes compatíveis e farmaceuticamente aceitáveis.

Lisboa, 15. MÃf 2000

Por RHONE-POULENC RORER S.A. - O AGENTE OFICIAL -

ADJUSIO Ag. 0|. Pr. Ind. gyo das Flores, 74 - 4.' ieOO LISBOA

Claims (3)

1. 84 271 - ΕΡ Ο 738 147/ΡΤ 1/1 REIVINDICAÇÕES 1 - Aplicação do riluzolo ou dos sais farmaceuticamente aceitáveis deste composto na preparação de medicamentos destinados ao tratamento de doenças mitocondriais.
2. 2 - Aplicação de acordo com a reivindicação 1, para o tratamento do síndroma de KEARNS-SAYRE, do síndroma de MERRF, do síndroma de MELAS e da doença de LEBER.
3. 3 - Aplicação de acordo com uma das reivindicações 1 e 2, para obter um medicamento compreendendo 25 a 200 mg de riluzolo. Lisboa, 15. m 2000 Por RHONE-POULENC RORER S.A. - O AGENTE OFICIAL -