JP3585045B2 - ミトコンドリア疾病の処置におけるリルゾールの適用 - Google Patents

Description

本発明はリルゾール（riluzole）またはこの化合物の薬剤的に許容しうる塩の新規な治療的適用に関する。
リルゾール、すなわち２−アミノ−６−トリフルオロメトキシベンゾチアゾールは抗痙攣薬、不安解消薬および睡眠薬製品として（EP特許50 551）、分裂病の処置において（EP 305 276）、睡眠障害および鬱病の処置において（EP 305 277）、脳血管障害の処置において並びに麻酔薬として（EP 282 971）有用である。
驚くべきことに、この化合物をミトコンドリア疾病の処置においても使用できることが今回見いだされた。
ミトコンドリア疾病は、例えばミトコンドリアDNAの異常（欠失、点変異、重複）、ミトコンドリア酵素もしくは複合高分子量ミトコンドリア成分をコードづけする細胞DNAの異常、有毒物質（例えばMPTPもしくはCO）によりまたは医薬製品（例えばクロラムフェニコール、AZTもしくはアセチルサリチル酸）により引き起こされる後天性症状の如き種々の機構と関連する変性疾病である。ミトコンドリア疾病として挙げられるものはカーンズ−セイレ（Kearns−Sayre）症候群、MERRF症候群（不完全赤色腺維と関連する間代性筋痙攣癲癇）、MELAS症候群、（ミトコンドリア脳障害、筋障害、乳酸アシドーシスおよび発作様状態）並びにレーバー病（Leber's disease）（I.Nonaka,Current Opinion in Neurology and Neurosurgery,5（1992）622）である。
ミトコンドリア疾病の処置におけるリルゾールの活性はシアン化物試験におけるその保護効果により示される。シアン化カリウムがミトコンドリア水準における電子移送配列中の末端酵素であるチトクロームオキシダーゼaa3の抑制により毒性効果を与えることは実際に知られている。それ故、マウスではシアン化カリウム（3mg/kg、静脈内）は20秒以内の死亡を伴う異常な収縮および強直性発作を誘発する。
調節された温度および光条件下で飼育された体重が22−25gの雄の成体マウス（CD1 COBS、チャールス・リバー）に食料および飲料水を随時与える。試験しようとする賦形剤または製品を６匹の動物群に、致死薬用量（3mg/kg）のシアン化カリウムの静脈内大型丸剤投与の30分前に腹腔内にまたはシアン化カリウムの投与の１時間前に経口的に与える。対照群では全てのマウスが死亡したが、腹腔内リルゾールに関するED₅₀は4.5mg/kgでありそして経口的リルゾールに関するED₅₀は7.8mg/kgである。
ミトコンドリア疾病の処置におけるリルゾールの活性はラットの肝臓のミトコンドリア代謝に対するその効果によっても示される。
ミトコンドリアの代謝活性をクラーク電極（Bioblockにより販売されている）を用いるポーラログラフィにより酸素の消費量によって監視する。実験設定は熱水システムにより27℃に温度が自動調節されたガラス室からなっている。室内に置かれた磁気棒により反応培地の連続的撹拌が可能になりそして溶解された酸素と電極膜中に拡散する気体との間の平衡設定が促進される。ミトコンドリア、基質（琥珀酸塩）およびADP（アデノシン二燐酸）を装置上部に配置された小さい口を通して反応室に加える。クラーク電極をスクリューストッパーにより気密性密封されている開口部を介して反応培地の中に浸す。酸素の消費量をYSI Model 5300 Biological Oxygen Monitor（Bioblockにより販売されている）と連結されている記録計によりプロットする。
雄SDラットの肝臓からのミトコンドリアを＋４℃においてAppelmans et al.,Biochem.J.,59（1955）438−445により記載されている方法に従い分画遠心法により単離する。ミトコンドリア顆粒を１〜3mlの0.25Mスクロース緩衝液の中に加えそしてピペットを用いて均質化処理する。
ミトコンドリアの酸素消費量（ml当たり1.2mgの蛋白質）を12mMのNaF、26mMのNaCl、58mMのKClおよび3mMの琥珀酸塩基質からなる5mlのチャンス緩衝液の中に加えて、チャンス−ウィリアムスの代謝４期（すなわちミトコンドリアレドックス４期、チャンスＢ、Energy liked functions of mitochondria,New York,Acad.Press 1963）をもたらす。27℃の温度は約250μＭの酸素濃度に相当する。チャンス−ウィリアムスの代謝３期は250nMのリルゾールを含有する対照調剤中への0.25mMのアデノシン二燐酸の添加によりもたらされる。
対照である肝性ミトコンドリアの平均酸素消費量は1.63μモル／分/mgの蛋白質である（３回の試験）。試験管内でミトコンドリアに加えられた250nMのリルゾールの存在下では、平均酸素消費量は2.12μモル／分/mgの蛋白質である（３回の試験）。これらの結果は、リルゾールが対照と比べて約30％ほどミトコンドリア呼吸を刺激することを示す。
特に挙げられる薬剤的に許容しうる塩は、無機酸との付加塩、例えば塩酸塩、硫酸塩、硝酸塩もしくは燐酸塩、または有機酸との付加塩、例えば酢酸塩、プロピオン酸塩、琥珀酸塩、シュウ酸塩、安息香酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、メタンスルホン酸塩、イセチオン酸塩、テオフィリン酢酸塩、サリチル酸塩、フェノールフタリネート（phenolphtalinate）もしくはメチレンビス（β−ヒドロキシナフトエ酸塩）、或いはこれらの誘導体の置換誘導体である。
医薬製品は少なくとも、遊離形態または薬剤的に許容しうる酸との付加塩の形態のリルゾールを、純粋な状態でまたはそれが不活性もしくは薬理学的に活性であってよい他の薬剤的に相容性である生成物と組み合わされた組成物の形態で含んでいる。本発明に従う医薬製品は経口的に、非経口的に、直腸にまたは局所的に使用することができる。
経口的投与のために使用できる固体組成物は錠剤、丸剤、粉剤（ゼラチンカプセル、ウエファーカプセル）または粒剤である。これらの組成物においては、本発明に従う活性成分を１種もしくはそれ以上の不活性希釈剤、例えば澱粉、セルロース、スクロース、ラクトースまたはシリカとアルゴン流下で混合する。これらの組成物は希釈剤以外の物質、例えば１種もしくはそれ以上の潤滑剤、例えばステアリン酸マグネシウムもしくは滑石、着色剤、コーテイング（コーテイング錠剤）またはワニスを含んでいてもよい。
経口的投与のために使用できる液体組成物は、例えば水、エタノール、グリセロール、植物油または液体パラフィンの如き不活性希釈剤を含有する薬剤的に許容可能な溶液、懸濁液、乳化液、シロップ剤およびエリキシル剤である。これらの組成物は希釈剤以外の物質、例えば湿潤化用、甘味用、濃稠化用、矯味・矯臭用または安定化用の生成物を含んでなっていてもよい。
非経口的投与のための殺菌性組成物は好適には、溶液、水性もしくは非水性の懸濁液または乳化液であってよい。溶媒または賦形剤としては、水、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、植物油、特にオリーブ油、注射用有機エステル類、例えばオレイン酸エチル、または他の適当な有機溶媒を使用できる。これらの組成物は添加剤、特に湿潤剤、等張化剤、乳化剤、分散剤および安定剤を含有することもできる。安定化は数種の方法で、例えば無菌濾過により、組成物中への安定剤の加入によりまたは加熱により、行うことができる。それらを殺菌性固体組成物の形態で製造することもでき、それらを使用時に殺菌水または他の殺菌性注射媒体の中に溶解させることができる。
直腸投与のための組成物は、活性生成物および賦形剤、例えばココアバター、半合成グリセリド類またはポリエチレングリコール類、の両者を含有する坐薬または直腸カプセルである。
局所的投与のための組成物は例えば、クリーム、ローション、口腔洗浄剤、点鼻剤またはアエロゾルであってよい。
薬用量は、所望する効果、処置期間および使用する投与方式に依存しており、それらは一般的には成人に関して経口的方式によると１日当たり50〜400mgであり、単一薬用量は25〜200mgの活性物質の範囲である。
一般的に述べると、処置しようとする対象に関して特異的な年令、体重および他の全ての因子に応じて医師が適当な薬用量を決定するであろう。
以下の実施例は本発明に従う医薬製品を説明するものである。
実施例Ａ
一般的技術を使用して50mg薬用量の活性生成物を含有しそして下記の組成を有する錠剤を製造する：
− ２−アミノ−６−トリフルオロメトキシ−ベンゾチアゾール 50mg
− マンニトール 64mg
− 微結晶性セルロース 50mg
− ポリビドン賦形剤 12mg
− ナトリウムカルボキシメチル澱粉 16mg
− 滑石 4mg
− ステアリン酸マグネシウム 2mg
− 無水コロイド状シリカ 2mg
− メチルヒドロキシプロピルセルロース、ポリエチレングリコール6000および二酸化チタンの（72:3.5:24.5）混合物
245mgの重量の１個の完成されたフィルムコーテイング錠剤にするのに十分な量
実施例Ｂ
一般的技術を使用して50mg薬用量の活性生成物を含有しそして下記の組成を有する硬質ゼラチンカプセルを製造する：
− ２−アミノ−６−トリフルオロメトキシ−ベンゾチアゾール 50mg
− セルロース 18mg
− ラクトース 55mg
− コロイド状シリカ 1mg
− ナトリウムカルボキシメチル澱粉 10mg
− 滑石 10mg
− ステアリン酸マグネシウム 1mg
実施例Ｃ
10mg薬用量の活性生成物を含有しそして下記の組成を有する注射溶液を製造する：
− ２−アミノ−６−トリフルオロメトキシ−ベンゾチアゾール 10mg
− 安息香酸 80mg
− ベンジルアルコール 0.06cm³
− 安息香酸ナトリウム 80mg
− エタノール、95％ 0.4cm³
− 水酸化ナトリウム 24mg
− プロピレングリコール 1.6cm³
− 水 4cm³にするのに十分な量
本発明は、リルゾールまたはこの化合物の薬剤的に許容しうる塩を１種もしくはそれ以上の相容性があり且つ薬剤的に許容しうる希釈剤および／または添加剤と混合することからなるミトコンドリア疾病の処置において使用できる医薬製品の製造方法にも関する。

Claims (4)

1. リルゾールまたはその製薬学的に許容しうる塩を有効成分として含有することを特徴とするミトコ ンドリア疾患の処置剤。
2. カーンズ−セイレ（Kearns−Sayre）症候群、MERRF症候群、MELAS症候群またはレーバー病（Leber's disease）の処置のための請求の範囲第１項に記載の薬剤。
3. 25〜200mgのリルゾールを含んでなる請求の範囲第１項または第２項に記載の薬剤。
4. リルゾールまたはその製薬学的に許容しうる塩を１種もしくはそれ以上の相容性があり且つ製薬学的に許容しうる希釈剤および／または添加剤と混合することを特徴とするミトコンドリア疾患の処置剤の製造方法。