PT2897945T - Compostos de bis(fluoroalquil)-1,4-benzodiazepinona como inibidores de notch - Google Patents

Compostos de bis(fluoroalquil)-1,4-benzodiazepinona como inibidores de notch Download PDF

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V Delucca George
O'malley Daniel
Gill Patrice
A Quesnelle Claude
Zhao Yufen
Y Lee Francis
E Fink Brian
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Description

DESCRIÇÃO
COMPOSTOS DE BIS(FLUOROALQUIL)-1,4-BENZODIAZEPINONA COMO
INIBIDORES DE NOTCH A presente invenção de uma forma geral refere-se a compostos de benzodiazepinona úteis como inibidores de Notch. A invenção refere-se ainda às composições farmacêuticas compreendendo pelo menos um composto de acordo com a invenção, que é útil para o tratamento de condições relacionadas com a via de Notch, tais como o cancro e outras doenças proliferativas. A sinalização de Notch tem sido implicada numa variedade de processos celulares, tais como a especificação, diferenciação, proliferação, apoptose e angiogénese do destino celular. ±Bray, Nature Reviews Molecular Cell Biology, 7:678-689 +2006Ç; Fortini,
Developmental Cell 16:633-647 +2009ÇÇ. As proteínas de
Notch são moléculas da transmembrana heterodiméricas de única passagem. A família Notch inclui 4 recetores, NOTCH 1-4, que se tornam ativadas após a ligação aos ligandos da família DSL ±1, 3, 4 e Jagged 1 e 2 semelhante a DeltaÇ. A ativação e maturação de NOTCH requer uma série de etapas de processamento, incluindo uma etapa de clivagem proteolítica mediada por gama-secretase, um complexo de múltiplas proteínas contendo presenilina 1 ou presenilina 2, nicastrina, APH1 e PEN2. Assim que NOTCH é clivado, o domínio intracelular de NOTCH +NICDÇ é libertado da membrana. 0 NICD libertado desloca-se para o núcleo, onde funciona como um ativador da transcrição de comum acordo com os membros da família CSL ±RBPSUH, "supressor de hairless" e LAG1Ç. Os genes alvos de NOTCH incluem os membros da família HES, tais como HES-1. HES-1 funciona como repressores da transcrição de genes como HERP1 ±também conhecido como HEY2Ç, HERP2 rtambém conhecido como HEY1Ç e ΗΑΤΗ1 ±também conhecidos como AT0H1Ç. A ativação aberrante da via de Notch contribui para a tumorigénese. A ativação da sinalização de Notch foi implicada na patogénese de diversos tumores sólidos, incluindo do ovário, do pâncreas, assim como o cancro da mama e tumores hematológicos tais como leucemias, linfornas e mielomas múltiplos. 0 papel da inibição de Notch e a sua utilidade no tratamento de vários tumores sólidos e hematológicos são descritos em Miele, L. et al., Current Câncer Drug Targets, 6:313-323 +2006Ç; Bolos, V. et al. , Endocrine Reviews, 28:339-363 +2007Ç; Shih, I-M. et al. , Câncer Research, 67: 1879-1882 +2007Ç; Yamaguchi, N. et al. , Câncer Research, 68: 1881-1888 +20Q8Ç; Miele, L.,
Expert Review Anti-cancer Therapy, 8:1197-1201 +2008Ç;
Purow, B., Current Pharmaceutical Biotechnology, 10:154-160 +2009Ç; Nefedova, Y. et al. , Drug Resistance Updates, 11:210-218 +2008Ç; Dufraine, J. et al., Oncogene, 27:5132-5137 ±2008Ç; e Jun, Η.T. et al., Drug Development Research, 69:319-328 ±2008Ç.
Continua a existir uma necessidade de compostos que são úteis como inibidores de Notch e que possuam estabilidade metabólica suficiente para fornecer níveis eficazes de exposição ao medicamento. Além disso, continua a existir uma necessidade de compostos úteis como inibidores de Notch que possam ser administrados por via oral ou intravenosa a um paciente. O documento de Patente U.S. N.° 7.053.084 BI divulga compostos de succinoilamino benzodiazepina úteis para o tratamento de distúrbios neurológicos como a doença de Alzheimer. A referência divulga que estes compostos de succinoilamino benzodiazepina inibem a atividade de gama-secretase e o processamento da proteína precursora da amiloide associados com a formação de depósitos neurológicos de proteína amiloide.
Os requerentes descobriram potentes compostos que possuem atividade como inibidores de Notch e possuem estabilidade metabólica suficiente para fornecer níveis de eficácia de exposição ao medicamento após administração intravenosa ou oral. Estes compostos são fornecidos para serem úteis como produtos farmacêuticos com estabilidade desejável, biodisponibilidade, índice terapêutico e valores de toxicidade que são importantes para a sua capacidade medicamentosa.
SUMÁRIO DA INVENÇÃO A presente invenção preenche a necessidade anterior ao fornecer compostos de bis(fluoroalquil) 1,4-benzodiazepinona que são úteis como inibidores seletivos da via de sinalização de Notch, incluindo profármacos dos mesmos identificados no presente documento. A presente invenção também fornece composições farmacêuticas compreendendo um portador farmaceuticamente aceitável; e pelo menos um composto de Fórmula (I). A presente invenção também fornece pelo menos um composto de Fórmula (I) para utilização no tratamento de uma doença ou distúrbio associado com a atividade do recetor de Notch num paciente mamífero. A presente invenção também fornece processos e intermediários para a preparação dos compostos de Fórmula (I) . A presente invenção também fornece os compostos de Fórmula (I) para utilização em terapêutica. A presente invenção também divulga a utilização dos compostos de Fórmula (I) para o fabrico de um medicamento para o tratamento de cancro.
Os compostos de Fórmula (I) e as composições compreendendo os compostos podem ser utilizados no tratamento, prevenção ou cura de várias condições relacionadas com o recetor de Notch. As composições farmacêuticas que compreendem estes compostos são úteis no tratamento, prevenção ou atraso da progressão de doenças ou distúrbios numa variedade de áreas terapêuticas, como o cancro.
Estes e outros aspetos da invenção serão apresentados de forma expandida à medida que a divulgação continua.
BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS A invenção é ilustrada com referência aos desenhos anexos descritos abaixo. A figura 1 mostra a eficácia antitumoral do Exemplo 1 contra a leucemia linfoblástica aguda de células T humana TALL1. Doses orais em dias indicados por (t); PO, QDxlO. Cada símbolo representa a carga tumoral mediana de um grupo de 8 ratinhos.
Controlo; (0) Exemplo 1, 0,625 mg® kg® adm
Exemplo 1, 1,2 5 mg® kg® adm,*DX Exemplo 1, 2,5 mg® kg® admxemplo 1, 10 mg® kg.
A figura 2 mostra
a eficácia antitumoral do Exemplo 1 no carcinoma da mama humano MDA-MB-157. Doses orais em dias indicados por (i); PO, BIDxl5 (10 dias em tratamento, 2 dias livres; 5 dias em tratamento). Cada símbolo representa a carga tumoral mediana de um grupo de 8 ratinhos.
controlo; Exemplo 1, 2,5 mg® kg® adm, BID; (□) Exemplo 1, 5 mg® kg® adm, BID;
Exemplo 1, 7,5 mg® kg® adm, BID. A figura 3 mostra a eficácia antitumoral do Exemplo 1 no carcinoma da mama humano MDA-MB-157. Doses orais em dias indicados por (t); PO, QDxl5 (10 dias em tratamento, 2 dias livres; 5 dias em tratamento). Cada símbolo representa a carga tumoral mediana de um grupo de 8 ratinhos.
controlo; (0) Exemplo 1, 5 mg® kg® adm, QD;
Exemplo 1, 10 mg® kg® adm, QD; ΠΧ Exemplo 1, 20 mg® kg® adm, QD.
A figura 4 mostra a eficácia antitumoral do Exemplo 3 contra a leucemia linfoblástica aguda de células T humana TALL1. Doses orais em dias indicados por (t); PO, QDxlO. Cada símbolo represer*^ a carga tumoral mediana de um grupo de 8 ratinhos. Controlo; (0) Exemplo 1, 0,625 mgS kgS adir
Exemplo 1, 1,25 mgE3 kgS adm,-D£ Exemplo 1, 2,5 mgE3 kgl3 adm
Exemplo 1, 10 mgl3 kg.
A figura 5 mostra a eficácia antitumoral do Exemplo 1 no carcinoma da mama negativo triplo humano HCC-1599 com um deslocamento de Notch 1. Doses orais em dias indicados por ±rÇ; PO, QDxl5 +10 dias em tratamento, 2 dias livres; cinco dias em tratamentoÇ. Cada símbolo representaa carga tumo^31 mediana de um grupo de 8 ratinhos,
controlo; : Exemplo 1, 5 mg0 kgEI adm, QD;Exemplo 1,
10 mgS kgS aam, QD
Exemplo 1, 20 mg0 kgS adm, QD. A figura 6 mostra a eficácia antitumoral sinérgica pela quimioterapia combinada com o Exemplo 1 e o paclitaxel no carcinoma da mama humano MDA-MB-468. Cada símbolo representa a carga tumoral mediana de um grupo de 8 ratinhos.ntrolo;
2 paclitaxel, 12 mgêkgêadm, Q7d x 3, IV; ±HÇ
Exemplo 1, 2,5 mgêkgêadm, PO, BID x 15 +10 dias em tratamento; 2 dias livres; 5 dias em tratamentoÇ;
Exemplo 1, 5 mgêkgêadm, PO, BID x 15 +10 dias em tratamento; 2 dias livres; 5 dias em tratamentoÇ; Combinação de paclitaxel e Exemplo 1, 2,5 mgêkgêadm; ±AÇ Combinação de Paclitaxel e Exemplo 1, 5 mgêkgêadm.
DESCRI0 ÃO DETALHADA 0 primeiro aspeto da presente invenção fornece pelo menos um composto de Fórmula +IÇ:
eêou pelo menos um sal do mesmo; em que:
Ri é -CH2CH2CF3 ; R2 é -CH2CH2CF3 OU -CH2CH2CH2CF3; R3 é H, -CH3, ou Rx; R4 é H OU Ry;
ou 0 anel A é fenilo ou piridinilo; cada Ra é independentemente Cl, alquilo Ci_3, -CH2OH, -CF3, ciclopropilo, -OCH3, eêou -0±ciclopropiloÇ; cada Rb é independentemente F, Cl, - CH3, -CH2OH, -CF3, ciclopropilo, eêou -QCH3; y é zero, 1 ou 2; e z é zero, 1 ou 2; desde que se o anel A for fenilo e z for zero, então y é 1 ou 2 e pelo menos um Ra é alquilo C1-3, -CF3, ciclopropilo, ou -O+ciclopropiloÇ; desde que se R3 for Rx então R4 é H; e desde que se R4 for Ry então R3 é H ou -CH3.
Uma forma de realização fornece pelo menos um composto de Fórmula +IÇ em que R3 é H ou -CH3; R4 é H; e Ri, R2, anel A, Ra, Rb, y e z são definidos no primeiro aspeto. Esta forma de realização inclui os compostos de Fórmula ±IIÇ na qual R3 é H e R4 é H:
e os compostos de fórmula +IIIÇ na qual R3 é -CH3 e R4 é H:
Os compostos de Fórmula +IIÇ e Fórmula +11IÇ são úteis como inibidores seletivos da via de sinalização de Notch.
Uma forma de realização fornece pelo menos um composto de Fórmula ±IÇ eêou pelo menos um sal do mesmo, em que ±iÇ R3 ê Rx e R4 e H; ou +iiÇ R4 e Ry e R3 e H ou -CH3; e R3, R2, anel A, Ra, Rb/ Rx/ Ry/ y e z são definidos no primeiro aspeto. Esta forma de realização inclui os compostos de Fórmula +IVÇ na qual R3 é Rx e R4 é H:
e os compostos de Fórmula +VÇ na qual R4 é Ry e R3 é H ou -CH3 :
vV).
Os compostos desta forma de realização são úteis como profãrmacos dos compostos de Fórmula +IIÇ e Fórmula +IIIÇ.
Uma forma de realização fornece pelo menos um composto de Fórmula +IVÇ eêou pelo menos um sal do mesmo, em que R3 é Rx e R4 é H; e Ri, R2, Rx, anel A, Ra, Rb/ y, e z são definidos no primeiro aspeto. Incluídos nesta forma de realização estão os compostos em que o anel A é fenilo. Os compostos desta forma de realização são úteis como profármacos dos compostos de Fórmula +IIÇ e Fórmula +IIIÇ.
Uma forma de realização fornece pelo menos um composto de Fórmula ±VÇ eêou pelo menos um sal do mesmo, em que R4 é Ry e R3 é H ou -CH3; e Ri, R2, Ry, anel A, Ra, Rb, y, e z são definidos no primeiro aspeto. Incluídos nesta forma de realização estão os compostos em que R3 é H e o anel A é fenilo. Também incluídos nesta forma de realização estão os compostos em que R3 é -CH3 e o anel A é fenilo. Os compostos desta forma de realização são úteis como profármacos dos compostos de Fórmula ±IIÇ e Fórmula +IIIÇ.
Uma forma de realização fornece pelo menos um composto de Fórmula +IÇ eêou pelo menos um sal do mesmo, em que o anel A é fenilo; e Ri, R2, R3, R4, Rx, Ry, Ra, Rb, y, e z são definidos no primeiro aspeto. Incluídos nesta forma de realização estão os compostos em que R3 é H. Também incluídos nesta forma de realização estão os compostos em que R3éHezélou2.
Uma forma de realização fornece pelo menos um composto de Fórmula ±IÇ, em que o anel A é fenilo; R3 é H ou CH3; R4 é H; e R],, R2, Ra, Rb, y, e z são definidos no primeiro aspeto. Incluídos nesta forma de realização estão os compostos em que R3 é H. Também incluídos nesta forma de realização estão os compostos em que R3éHezélou2.
Uma forma de realização fornece pelo menos um composto de Fórmula +IÇ eêou pelo menos um sal do mesmo, em que R2 é -CH2CH2CF3 e Ri, R3, R4, anel A, Rx, Ry, Ra, Rb, y, e z são definidos no primeiro aspeto. Incluídos nesta forma de realização estão os compostos em que o anel A é fenilo. Também incluídos nesta forma de realização estão os compostos em que z é 1 ou 2.
Uma forma de realização fornece pelo menos um composto de Fórmula +IÇ eêou pelo menos um sal do mesmo, em que R2 é -CH2CH2CH2CF3 e Ri, R3, R4, anel A, Ra, Rb, y e z são definidos no primeiro aspeto. Incluídos nesta forma de realização estão os compostos em que o anel A é fenilo. Também incluídos nesta forma de realização estão os compostos em que z é 1 ou 2.
Uma forma de realização fornece pelo menos um composto de Fórmula ±IÇ eêou pelo menos um sal do mesmo, em que o anel A é piridinilo; e R4, R2, R3( R4, Ra, Rb, y, e z são definidos no primeiro aspeto. Incluídos nesta forma de realização estão os compostos em que R3 é H. Também incluídos nesta forma de realização estão os compostos em que R3éHezélou2.
Uma forma de realização fornece pelo menos um composto de Fórmula +IÇ eêou pelo menos um sal do mesmo, em que R2 é -CH2CH2CF3; o anel A é fenilo; Ra é alquilo C1-3 ou -CH2OH; cada Rb é independentemente F eêou Cl; y é 1; z é 1 ou 2; e Ri, R3 e R4 são definidos no primeiro aspeto.
Uma forma de realização fornece pelo menos um composto de Fórmula +IÇ eêou pelo menos um sal deste, em que y é 1, z é 1 ou 2, e Ri, R2, R3, R4, anel A, Ra, e Rb são definidos no primeiro aspeto. Incluídos na forma de realização estão os compostos em que o anel A é fenilo. Também incluídos nesta forma de realização estão os compostos em que o anel A é fenilo e z é 1.
Uma forma de realização fornece pelo menos um composto de Fórmula +IÇ eêou pelo menos um sal do mesmo, tendo a estrutura:
em que:
Ri é -CH2CH2CF3; R2 é -CH2CH2CF3 ou -CH2CH2CH2CF3; R3 é H, -CH3/ OU Rx; R4 é H OU Ry;
Ry é: -SCH2CH±NH2ÇC±OÇOH, -SCH2CH±NH2ÇC±OÇOCH3, OU SCH2CH±NH2ÇC±OÇOC±CH3Ç3;
Ra é Cl, -CH3, -CH±CH3Ç2, -CH2OH, -CF3, ciclopropilo, -OCH3, ou -0±ciclopropiloÇ; cada Rb é independentemente F, Cl, -CH2OH, -CF3, ciclopropilo, eêou -OCH3 ; y é zero ou 1 ; z é zero, 1 ou 2; desde que se z for zero, então y é 1 e Ra é -CH3, -CH2OH, -CF3, ciclopropilo, ou -0±ciclopropiloÇ. Incluídos na forma de realização estão os compostos em que y é 1; e z é zero, 1 ou 2. Também incluídos nesta forma de realização estão os compostos em que y é 1 e z é 1.
Uma forma de realização fornece pelo menos um composto de Fórmula ±IÇ eêou pelo menos um sal do mesmo, tendo a estrutura:
em que Rx, R2í R3, R4, Ra, e Rb são definidos no primeiro aspeto. Incluídos nesta forma de realização estão os compostos em que Ra ê Cl, -CH2OH, ou alquilo Ci_3 e Rb é F, Cl, -CH3, -CF3, ciclopropilo ou -OCH3. Também incluídos nesta forma de realização estão os compostos em que Ra é metilo e Rb é F, Cl ou CF3.
Uma forma de realização fornece pelo menos um composto de Fórmula ±IÇ eêou pelo menos um sal do mesmo, tendo a estrutura:
em que Ra é alquilo Ci._3; Rb é F ou Cl; e Ri, R2, R3 e R4 são definidos no primeiro aspeto. Incluídos nesta forma de realização estão os compostos em que R2 é -CH2CH2CF3. Também incluídos nesta forma de realização estão os compostos em que R2 é -CH2CH2CF3, Ra é metilo e Rb é F ou Cl.
Uma forma de realização fornece pelo menos um composto de Fórmula +IÇ eêou pelo menos um sal do mesmo, tendo a estrutura:
’ 'U
em que y é zero e Ri, R2, R3, R4 e Rb são definidos no primeiro aspeto. Incluídos nesta forma de realização estão os compostos em que Rb é -CH3, -CH2OH ou -OCH3. Também incluídos nesta forma de realização estão os compostos em que R3 é H ou -CH3 e R4 é H.
Uma forma de realização fornece pelo menos um composto de Fórmula +IÇ eêou pelo menos um sal do mesmo, tendo a estrutura:
em que R3 e R4 sao aenniaos no primeiro aspeto. Incluídos nesta forma de realização estão os compostos em que R3 é H ou -CH3 e R4 é H.
Uma forma de realização fornece pelo menos um composto de Fórmula ±IÇ eêou pelo menos um sal do mesmo, tendo a estrutura:
em que R3 é H, -CH3 ou Rx, em que Rx é definido no primeiro aspeto. Também incluídos nesta forma de realização estão os compostos em que R3 é Rx.
Uma forma de realização fornece pelo menos um composto de Fórmula +IÇ eêou pelo menos um sal do mesmo, tendo a estrutura:
em que R3 é H ou -CH3 e Ry é definido no primeiro aspeto. Incluídos nesta forma de realização estão os compostos em que R3 é H. Também incluídos nesta forma de realização estão os compostos em que R3 é -CH3.
Uma forma de realização fornece pelo menos um composto de Fórmula ±IÇ eêou pelo menos um sal do mesmo, tendo a estrutura:
em que Ra é -CH3 ou -CH2OH; R3 é H ou -CH3, e Ry é definido no primeiro aspeto. Incluídos nesta forma de realização estão os compostos em que R3 é H. Também incluídos nesta forma de realização estão os compostos em que R3 é -CH3.
Uma forma de realização fornece pelo menos um composto de Fórmula +IÇ eêou sal do mesmo, tendo a estrutura:
em que R3 é H ou Rx; R4 é H ou Ry; desde que se R3 for Rx então R4 é H; e desde que se R4 for Ry então R3 é H; e em que Rx e Ry são definidos no primeiro aspeto.
Uma forma de realização fornece pelo menos um composto de Fórmula ±IÇ tendo a estrutura:
em que R3 é H ou -CH3.
Uma forma de realização fornece um composto de Fórmula +IÇ tendo a estrutura:
Uma forma de realização fornece um composto de Fórmula +IÇ tendo a estrutura:
ou um composto de Fórmula +IÇ tendo uma estrutura:
ou qualquer mistura dos dois compostos.
Uma forma de realização fornece pelo menos um composto de Fórmula ±IÇ eêou sal do mesmo, tendo a estrutura
em que Rx é definido no primeiro aspeto.
Uma forma de realização fornece pelo menos um composto de Fórmula ±IÇ eêou sal do mesmo, tendo a estrutura:
em que R3 é H ou -CH3; e Ry é definido no primeiro aspeto.
Uma forma de realização fornece uma composição que compreende: ±iÇ pelo menos um composto de Fórmula ±IÇ tendo a estrutura:
eêou sal do mesmo; ±iiÇ um composto de Fórmula ±IÇ tendo a estrutura:
ou ±iiiÇ um mistura de ±iÇ e ±iiÇ; em que R3 é H ou Rx; R4 é H ou Ry; desde que se R3 for Rx então R4 é H; e desde que se R4 for Ry então R3 é H; e em que Rx e Ry são definidos no primeiro aspeto.
Uma forma de realização fornece pelo menos um composto de Fórmula +IC eêou sal do mesmo, tendo a estrutura:
em que R3 é H ou Rx; R4 é H ou Ry; desde que se R3 for Rx então R4 é H; e desde que se R4 for Ry então R3 é H; e em que Rx e Ry são definidos no primeiro aspeto. Incluídos nesta forma de realização estão os compostos em que R3 é H ou -CH3; e R4 é H. Também incluídos nesta forma de realização estão os compostos em que R3 é H e R4 é H.
Uma forma de realização fornece pelo menos um composto de Fórmula ±IÇ eêou pelo menos um sal do mesmo, em que R:L, R2/ R3, R4, anel A, Ra, Rb, y e z são definidos no primeiro aspeto e desde que se o anel A for fenilo e z for zero, então y é 1 ou 2 e pelo menos um Ra é meti lo, isopropilo, -CH2OH, ciclopropilo eêou -O+ciclopropiloÇ.
Uma forma de realização fornece pelo menos um composto de Fórmula +IÇ eêou pelo menos um sal do mesmo, em que R3 é H; e R:1, R2, R4, Ra, Rb/ y e z são definidos no primeiro aspeto. Incluídos nesta forma de realização estão os compostos em que R3 é deutério ±DÇ ou trítio +TÇ. Também incluídos nesta forma de realização estão os compostos em que R2 é -CH2CH2CF3.
Uma forma de realização fornece pelo menos um composto de Fórmula +IÇ eêou pelo menos um sal do mesmo, em que R3 é -CH3; e R:l, R2, R4, Ra, Rb, y e z são definidos no primeiro aspeto. R3 inclui grupos metilo em que um ou mais átomos de hidrogénio são isotopicamente substituídos com deutério +DÇ eêou trítio ±TÇ. Num exemplo desta forma de realização, R3 é -CD3. Também incluídos nesta forma de realização estão os compostos em que R2 é -CH2CH2CF3.
Uma forma de realização fornece pelo menos um composto de Fórmula +IÇ eêou pelo menos um sal do mesmo, em que Ri, R2, R3, R4, anel A, Ra, Rb, y e z são definidos no primeiro aspeto, com a condição de que o composto de Fórmula +IÇ ou sal do mesmo r
Uma forma de realização fornece pelo menos um composto de Fórmula +IÇ em que R3 é H ou -CH3; R4 é H; Ri, R2, anel A, Ra, Rb, y e z são definidos no primeiro aspeto, com a COndiçãO de rinmnnahri Ho ffnymiil a j-TP o·
Uma forma de realização fornece um composto de Fórmula +IÇ selecionado a partir de: +2R,3SÇ-N-++3SÇ-5-+3- fluorofenilÇ-9-metil-2-oxo-2,3-dihidro-1H-1,4 -benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis±3,3,3 - trifluoropropilÇsuccinamida +1Ç; ±2R,3SÇ-N-±±3SÇ-5-±3- clorofenilÇ-9-etil-2-oxo-2,3-dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-3-Í1Ç-2,3-bis±3,3,3-trifluoropropilÇsuccinamida ±2Ç; ±2R,3SÇ-N-±±3SÇ-5-±3-clorofenilÇ-9-isopropil-2-oxo-2,3-dihidro-lH-1,4-benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis±3,3,3- trifluoropropilÇsuccinamida ±3Ç; ±2R,3SÇ-N-±9-cloro-5-±3,4-dimetilfenilÇ-2-oxo-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-ilÇ-3-+4,4,4-trifluorobutilÇ-2-+3,3,3- trifluoropropilÇsuccinamida +4Ç; +2R,3SÇ-N-+9-cloro-5-+3,5-dimetilfenilÇ-2-oxo-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-ilÇ-3-+4,4,4-trifluorobutilÇ-2-+3,3,3- trifluoropropilÇsuccinamida + 5Ç; +2R,3SÇ-N-++3SÇ-9-etil-5- +3-metilfenilÇ-2-oxo-2,3-dihidro-lH-1,4-benzodiazepin-3 -ilÇ-2,3-bis+3,3,3-trifluoropropilÇsuccinamida +6Ç; +2R,3SÇ-N-+±3SÇ-5-±3-clorofenilÇ-9-metil-2-oxo-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis+3,3,3- trifluoropropilÇsuccinamida ±7Ç; ±2R,3SÇ-N-±±3SÇ-5-±3- clorofenilÇ-9-metil-2-oxo-2,3-dihidro-lH-1,4-benzodiazepin-3-ilÇ-3-±4,4,4 -trifluorobutilÇ-2- + 3,3,3- trifluoropropilÇsuccinamida ±8Ç; +2R,3SÇ-N-++3SÇ-5-+3- metilfenilÇ-2-οχο-9-+trifluorometilÇ-2,3-dihidro-lH-l,4 -benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis±3,3,3- trifluoropropilÇsuccinamida +9Ç; +2R,3SÇ-N-++3SÇ-9-cloro-5-+3,5-dimetilfenilÇ-2-oxo-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-Í1Ç-2,3-bis±3,3,3-trifluoropropilÇsuccinamida ±10Ç; +2R,3SÇ-N-++3SÇ-5-+3-metilfenilÇ-2-oxo-9-+trifluorometilÇ- 2.3- dihidro-lH-1,4-benzodiazepin-3-ilÇ-3-+4,4,4- trifluorobutilÇ-2-±3,3,3 -1ri fluoropropilÇsuccinamida +11Ç; +2R,3SÇ-N-++3SÇ-9-isopropil-5-+3-metilfenilÇ-2-oxo-2,3-dihidro-lH-1,4-benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis+3,3,3-tri fluoropropilÇsuccinamida +12Ç; +2R,3SÇ-N-++3SÇ-9- isopropil-2-oxo-5-fenil-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis+3,3,3-trifluoropropilÇsuccinamida +13Ç; +2R,3SÇ-N-++3SÇ-9-+ciclopropiloxiÇ-5-+3-metilfenilÇ-2-oxo- 2.3- dihidro-lH-1,4-benzodiazepin-3-ilÇ-3-+4,4,4- trifluorobutilÇ-2-±3,3,3-trifluoropropilÇsuccinamida ±14Ç; +2R,3SÇ-N-++3SÇ-9-±ciclopropiloxiÇ-5-+3-metilfenilÇ-2-oxo- 2.3- dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis+3,3,3- trifluoropropilÇsuccinamida ±15Ç; ±2R,3SÇ-N-±±3SÇ-9- +ciclopropiloxiÇ-2-oxo-5-fenil-2,3-dihidro-1H-1,4 - benzodiazepin-3-ilÇ-3-±4,4,4-trifluorobutilÇ-2-±3,3,3-tri fluoropropilÇsuccinamida ±16Ç; ±2R,3SÇ-N-±±3SÇ-9-cloro- 5 -+3-metilfenilÇ-2-oxo-2,3-dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-3 -Í1Ç-3-+4,4,4-trifluorobutilÇ-2-+3,3,3- trifluoropropilÇsuccinamida + 17Ç; ±2R,3SÇ-N-+±3SÇ-9-metil- 2-oxo-5-±3-±trifluorometilÇfenilÇ-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-ilÇ-3-±4,4,4-trifluorobutilÇ-2-+3,3,3-trifluoropropilÇsuccinamida + 18Ç; ±2R,3SÇ-N-++3SÇ-9- ±ciclopropiloxiÇ-2-oxo-5-fenil-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis±3,3,3- trifluoropropilÇsuccinamida + 19Ç; ±2R,3SÇ-N-+±3SÇ-9-metil- 2-oxo-5-±3-±trifluorometilÇfenilÇ-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis±3,3,3- trifluoropropilÇsuccinamida +20Ç; ±2R,3SÇ-N-+±3SÇ-9-cloro- 5-±2-metilfenilÇ-2-oxo-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3 -ilÇ-2,3-bis+3,3,3 -trifluoropropilÇsuccinamida ±21Ç; +2R,3SÇ-N-±±3SÇ-5-±4-fluorofenilÇ-9-metil-2-oxo-2,3-dihidro-lH-1,4-benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis±3,3,3-trifluoropropilÇsuccinamida +22Ç; +2R,3SÇ-N-±±3SÇ-9-metil- 2-οχο-5-fenil-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis±3,3,3 -trifluoropropilÇsuccinamida +23Ç; +2R,3SÇ-N- ++3SÇ-9-ciclopropil-2-οχο-5-fenil-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis±3,3,3- trifluoropropilÇsuccinamida ±24Ç; ±2R,3SÇ-N-±±3SÇ-9-cloro- 5 -±3 -ciclopropilfenilÇ-2-oxo-2,3-dihidro-1H-1,4 -benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis±3,3,3- trifluoropropilÇsuccinamida ±25Ç; ±2R,3SÇ-N-±±3SÇ-5-±3- clorofenilÇ-9-met.oxi-2- oxo-2,3- dihidro- 1H-1,4-benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis + 3,3,3- trifluoropropilÇsuccinamida ±26Ç; ±2R,3SÇ-N-±±3SÇ-5-±4- clorofenilÇ -9-met.oxi-2- oxo-2,3- dihidro - 1H-1,4-benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis+3,3,3- trifluoropropilÇsuccinamida +27Ç; ±2R,3SÇ-N-±±3SÇ-9-cloro- 5-±3-metilfenilÇ-2-oxo-2,3-dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-3 -ilÇ-2,3-bis±3,3,3-trifluoropropilÇsuccinamida +28Ç; ±2R,3SÇ-N-±±3SÇ-5-±3-metilfenilÇ-9-metoxi-2-oxo-2,3-dihidro-lH-1,4-benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis±3,3,3-trifluoropropilÇsuccinamida +29Ç; ±2R,3SÇ-N-++3SÇ-5-+4- ihidroximetilÇfenilÇ-2-oxo-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis±3,3,3- trifluoropropilÇsuccinamida +30Ç; ±2R,3SÇ-N-±+3SÇ-5-±2- metilfenilÇ-2-oxo-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-ilÇ- 2.3- bis±3,3,3-trifluoropropilÇsuccinamida ±31Ç; ±2R,3SÇ-N- ±±3SÇ-5-±3-metilfenilÇ-2-oxo-2,3-dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis+3,3,3- trifluoropropilÇsuccinamida ±32Ç; +2R,3SÇ-N-±±3SÇ-9-metoxi-2-oxo-5-±5-±trifluorometilÇ-2-piridinilÇ-2,3-dihidro-1H- 1.4- benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis±3,3,3- trifluoropropilÇsuccinamida +33Ç; ±2R,3SÇ-N-++3SÇ-5-+5- cloro-2-piridinilÇ-9-metoxi-2-oxo-2,3-dihidro-1H-1,4 -benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis±3,3,3- trifluoropropilÇsuccinamida +34Ç; ±2R,3SÇ-N-++3SÇ-5-+4- metoxifenilÇ-2-oxo-2,3-dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis±3,3,3-trifluoropropilÇsuccinamida +35Ç; +2R,3SÇ-N- ±±3SÇ-5-±4-metilfenilÇ-2-oxo-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis+3,3,3- trifluoropropilÇsuccinamida ±36Ç; ±2R,3SÇ-N-±±3SÇ-5-+3- fluorofenilÇ-9-±hidroximetilÇ-2-oxo-2,3-dihidro-1H-1,4 -benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis±3,3,3- trifluoropropilÇsuccinamida +37Ç; L-valinato de ++3SÇ-3-+ + + 2R,3SÇ-3-carbamoil-6,6,6 -trifluoro-2- + 3,3,3-trifluoropropilÇhexanoilÇaminoÇ-5-±3-fluorofenilÇ-9-metil-2-oxo-2,3-dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-l-ilÇmetilo +38Ç; L-alaninato de ±±3SÇ-3-±±±2R,3SÇ-3-carbamoil-6,6,6-trifluoro-2-±3,3,3 -trifluoropropilÇhexanoilÇaminoÇ-5-±3-fluorofenilÇ-9-metil-2-oxo-2,3-dihidro-1H-1,4 -benzodiazepin-l-ilÇmetilo +39Ç; S-±±±2S,3RÇ-6,6,6- trifluoro-3-±+±3SÇ-5-±3-fluorofenilÇ-9-metil-2-oxo-2,3 -dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-3-ilÇcarbamoilÇ-2 -±3,3,3-trifluoropropilÇhexanoilÇaminoÇ-L-cisteína ±40Ç; S- ±±±2S,3RÇ-6,6,6 -trifluoro-3-±±±3SÇ-5-±3-fluorofenilÇ-9 -metil-2-oxo-2,3-dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-3-ilÇcarbamoilÇ-2-+3,3,3 -1ri fluoropropilÇhexanoiIÇaminoÇ-L-cisteinato de terc-butil ±41Ç; S-±±±2S,3RÇ-6,6,6-trifluoro-3- + + + 3SÇ-5 -±3 -fluorofenilÇ-9-metil-2-oxo-2,3-dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-3-ilÇcarbamoilÇ-2 -±3,3,3-trifluoropropilÇhexanoilÇaminoÇ-L-cisteinato de metilo +42Ç; +4-+fosfonoóxiÇfenilÇacetato de ++3SÇ-3-+++2R,3SÇ-3- carbamoil- 6,6,6 -trifluoro-2-±3,3,3- trifluoropropilÇhexanoiIÇaminoÇ-5 -±3 -fluorofenilÇ-9-metil-2-oxo-2,3-dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-l-ilÇmetilo ±43Ç; L-valil-L-valinato de ++3SÇ-3-+++2R,3SÇ-3-carbamoil- 6,6,6-trifluoro-2-±3,3,3-trifluoropropilÇhexanoilÇaminoÇ- 5-±3 - fluorofenilÇ-9-metil-2-oxo-2,3-dihidro-1H-1,4 -benzodiazepin-1-ilÇmetilo ±44Ç; e sais do mesmo.
Uma forma de realização fornece um composto de Fórmula ±IÇ selecionado a partir de: ±2R,3SÇ-N-++3SÇ-5-+3- fluorofenilÇ-9-metil-2-oxo-2,3-dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis±3,3,3- trifluoropropilÇsuccinamida ±1Ç; L-valinato de ±±3SÇ-3-+++2R,3SÇ-3-carbamoil-6,6,6-trifluoro-2-±3,3,3-trifluoropropi1Ç hexanoilÇaminoÇ-5-±3-fluorofenilÇ-9-metil-2-oxo-2,3-dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-1-ilÇmetilo ±38Ç; L-alaninato de ++3SÇ-3-±±±2R,3SÇ-3-carbamoil-6,6,6-trifluoro-2-±3,3,3-trifluoropropilÇhexanoilÇaminoÇ-5-±3-fluorofenilÇ-9-metil-2-oxo-2,3-di-hidro-1H-1,4-benzodiazepin-1-ilÇmetilo ±39Ç; S-+++2S,3RÇ-6,6,6-trifluoro-3-±±±3SÇ-5-±3- fluorofenilÇ-9-metil-2-oxo-2,3-di-hidro-1H-1,4 -benzodiazepin-3-ilÇcarbamoilÇ-2 -±3,3,3 -1ri fluoropropi1Ç hexanoilÇaminoÇ-l-cisteína ±40Ç; S-±±±2S,3RÇ-6,6,6- trifluoro-3-±±±3SÇ-5-±3-fluorofenilÇ-9-metil-2-oxo-2,3 -dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-3-ilÇcarbamoilÇ-2 - + 3,3,3-trifluoropropilÇhexanoiIÇaminoÇ-L-cisteinato de terc-butilo +41Ç; S- + + + 2S,3RÇ-6,6,6 -trifluoro-3 -+ + + 3SÇ-5 -+3 - fluorofenilÇ-9-metil-2-oxo-2,3-dihidro-1H-1,4 - benzodiazepin-3-ilÇcarbamoilÇ-2-±3,3,3-trifluoropropilÇ hexanoilÇaminoÇ-l-cisteinato de metilo ±42Ç; ±4 - ifosfonoóxiÇfenilÇacetato de ++3SÇ-3-+++2R,3SÇ-3-carbamoil- 6,6,6 -trifluoro-2-±3,3,3 -1 ri fluoropropi1Çhexanoi1Çami noÇ- 5 -±3 -fluorofenilÇ-9-metil-2-oxo-2,3-di-hidro-1H-1,4 -benzodiazepin-l-ilÇmetilo +43Ç; ++3SÇ-3-+++2R,3SÇ-3- carbamoil-6,6,6-trifluoro-2-±3,3,3- trifluoropropi1ÇhexanoilÇaminoÇ-5 -±3 -fluorofenilÇ-9-metil-2-oxo-2,3-di-hidro-1H-1,4-benzodiazepin-1-ilÇmetil de L- valil-L-vaiinato +44Ç; e sais do mesmo.
Uma forma de realização fornece pelo menos um composto de Fórmula +IÇ em que R3 é H ou -CH3; e R4 é H; em que o composto de Fórmula +IÇ possui um valor de semivida metabólica de pelo menos 45 minutos como medido no ensaio de semivida de estabilidade metabólica aqui descrito.
Uma forma de realização fornece pelo menos um composto de Fórmula ±IÇ em que R3 é H ou -CH3; e R4 é H; em que o composto de Fórmula +IÇ possui um valor de semivida metabólica de pelo menos 60 minutos como medido no ensaio de semivida de estabilidade metabólica humana aqui descrito.
Uma forma de realização fornece pelo menos um composto de Fórmula +IÇ em que R3 é H ou -CH3; e R4 é H; em que o composto de Fórmula +IÇ possui um valor de semivida metabólica de pelo menos 70 minutos como medido no ensaio de semivida de estabilidade metabólica humana aqui descrito. A presente invenção abrange todas as combinações dos aspetos eêou formas de realização da invenção aqui mencionadas. Fica entendido que qualquer uma e todas as formas de realização da presente invenção podem ser tomadas em conjunto com qualquer outra forma, de realização ou formas de realização para descrever a adição de mais formas de realização. Também deve ficar entendido que cada elemento individual das formas de realização se destina a ser combinado com qualquer um e todos os elementos de qualquer forma de realização para descrever uma forma de realização adicional.
DEFINIÇÕES
Os aspetos e vantagens da invenção podem ser mais facilmente compreendidos pelos peritos na especialidade após a leitura da seguinte descrição detalhada. Deve ser observado que certas caracterlsticas da invenção que são, por razões de clareza, descritas acima e abaixo no contexto das formas de realização separadas, também podem ser combinadas para formar uma única forma de realização. Inversamente, várias características da invenção que são, por razões de brevidade, descritas no contexto de uma única forma de realização, também podem ser combinadas de modo a formar as suas sub-combinações. As formas de realização aqui identificadas como exemplares ou preferidas destinam-se a ser ilustrativas e não limitativas. A não ser que especificamente mencionado aqui de outra maneira, as referências feitas no singular também podem incluir o plural. Por exemplo, "um" e "uma" podem referir-se a um, ou um ou mais. A não ser que de outra maneira indicado, assume-se que qualquer heteroátomo com valências não satisfeitas possui átomos de hidrogénio suficientes para satisfazer as valências.
As definições aqui apresentadas prevalecem sobre as definições apresentadas em qualquer patente, pedido de patente e/ou publicação de pedido de patente aqui incorporados por referência.
Listadas abaixo estão às definições de vários termos utilizados para descrever a presente invenção. Estas definições aplicam-se aos termos como eles são utilizados ao longo da memória descritiva (a não ser que sejam de outro modo limitados em casos específicos) individualmente ou como parte de um grupo maior.
Em toda a memória descritiva, os grupos e seus substituintes podem ser selecionados por um perito na área para fornecer frações e compostos estáveis.
Os termos "halo" e "halogéneo", como aqui utilizados, referem-se a F, Cl, Br ou I. 0 termo "alquilo" como aqui utilizado, refere-se aos grupos de hidrocarboneto alifáticos saturados de cadeia tanto ramificada quanto linear contendo, por exemplo, de 1 a 12 átomos de carbono, de 1 a 6 átomos de carbono, e de 1 a 4 átomos de carbono. Exemplos de grupos alquilo incluem, mas não são limitados a, metilo ±MeÇ, etilo ±EtÇ, propilo ±por exemplo, n-propilo e i-propiloÇ, butilo ±por exemplo, n-butilo, i-butilo, sec-butilo e t-butiloÇ e pentilo +por exemplo, n-pentilo, isopentilo, neopentiloÇ, n-hexilo, 2-metilpentilo, 2-etilbutilo, 3-metilpentilo e 4-metilpentilo. Quando os números aparecem num subscrito após o símbolo "C", o subscrito define com maior especificidade o número de átomos de carbono que um grupo particular pode conter. Por exemplo, "alquilo Ci-3" significa grupos de alquilo de cadeia linear e ramificada com um a três átomos de carbono. A frase "farmaceuticamente aceitável" é aqui empregue para se referir àqueles compostos, materiais, composições, e/ou formas farmacêuticas que estão dentro do âmbito da perfeita avaliação médica, adequados para utilização em contacto com os tecidos de seres humanos e animais sem toxicidade, irritação, resposta alérgica excessiva, ou outro problema ou complicação, comensurável com uma relação benefício/risco razoável.
Os compostos de Fórmula ±IÇ podem formar sais que também estão dentro do âmbito da presente invenção. A não ser que de outra maneira indicada, referência a um composto da invenção é compreendida como incluindo a referência a um ou mais dos seus sais. 0 termo "sal+saisÇ" significa sais ácidos e/ou básicos formados com ácidos e bases inorgânicos eêou orgânicos. Além disso, o termo ísal±saisÇí pode incluir zwitteriões ±sais internosÇ, por exemplo, quando um composto de Fórmula +IÇ contiver tanto uma fração básica, como uma amina ou um anel piridina ou imidazol, como um componente ácido, como um ácido carboxS lico. Os sais farmaceuticamente aceitáveis ±isto é, não tóxicos, fisiologicamente aceitáveisÇ são preferidos, como, por exemplo, os sais de metal e amina aceitáveis em que o catião não contribui significativamente para a toxicidade ou atividade biológica do sal. No entanto, outros sais podem ser úteis, por exemplo, nas etapas de isolamento ou purificação que podem ser empregues durante a preparação, e assim, são contemplados dentro do âmbito da invenção. Os sais dos compostos da fórmula +IÇ podem ser formados, por exemplo, através da reação de um composto da Fórmula ±IÇ com uma quantidade de ácido ou base, como uma quantidade equivalente, num meio tal como um no qual o sal se precipita ou num meio aquoso seguido pela liofilização.
Os sais de adição de ácido exemplares incluem acetatos ±tais como aqueles formados com ácido acético ou ácido trialoacético, por exemplo, ácido trifluoroacéticoÇ, adipatos, alginatos, ascorbatos, aspartatos, benzoatos, benzenossulfonatos, bissulfatos, boratos, butiratos, citratos, canforatos, canforsulfonatos, ciclopentanopropionatos, digluconatos, dodecilsulfatos, etanossulfonatos, fumaratos, gluco-heptanoatos, glicerofosfatos, hemissulfatos, heptanoatos, hexanoatos, cloridratos ±formados com ácido clorS dricoÇ, bromidatos ±formados com brometo de hidrogE nioÇ, iodidratos, aleatos ±formados com ácido maleicoÇ, 2-hidroxietanossulfonatos, lactatos, metanossulfonatos ±formados com ácido metanossulfõnicoÇ, 2-naftalenossulfonatos, nicotinatos, nitratos, oxalatos, pectinatos, persulfatos, 3 -fenilpropionatos, fosfatos, picratos, pivalatos, propionatos, salicilatos, succinatos, sulfatos ±tais como aqueles formados com ácido sulfúrico ácidoÇ, sulfonatos ±tais como aqueles aqui mencionadosÇ tartaratos, tiocianatos, toluenossulfonatos, tais como tosilatos, undecanoatos e semelhantes.
Os sais básicos exemplares incluem sais de amónio, sais de metal alcalino tais como sais de sódio, lítio e potássio; sais de metal alcalinoterroso tais como sais de cálcio e magnésio; sais de bário, zinco e alumínio; sais com bases orgânicas ±por exemplo, aminas orgânicasÇ tais como as trialquilaminas tais como a trietilamina, procaína, dibenzilamina, N-benzil-^-fenetilamina, 1-efenamina, N,N'~ dibenziletileno-diamina, desidroabietilamina, N-etilpiperidina, benzilamina, dicicloexilamina ou aminas e sais semelhantes farmaceuticamente aceitáveis com aminoácidos tais como arginina, lisina e semelhantes. Grupos contendo azoto básico podem ser quaternizados com agentes tais como haletos de alquilo inferior ±por exemplo, cloretos, brometos e iodetos de metilo, etilo, propilo e butiloÇ, sulfatos de dialquilo ±por exemplo, sulfatos de dimetilo, dietilo, dibutilo e diamiloÇ, haletos de cadeia longa ±por exemplo, cloretos, brometos e iodetos de decilo, laurilo, miristilo e esteariloÇ, haletos de aralquilo ±por exemplo, brometos de benzilo e fenetiloÇ e outros. Os sais preferidos incluem sais de monocloridrato, hidrogenossulfato, metanossulfonato, fosfato ou nitrato.
Os compostos de Fórmula ±IÇ podem ser fornecidos como sólidos amorfos ou sólidos cristalinos. A liofilização pode ser empregue para fornecer os compostos de Fórmula +IÇ como um sólido.
Deve ainda ser compreendido que os solvatos ±por exemplo, hidratosÇ dos Compostos de Fórmula ±IÇ também estão dentro do âmbito da presente invenção. 0 termo "solvato" significa uma associação física de um composto de Fórmula +IÇ com uma ou mais moléculas de solvente, quer orgânicas quer inorgânicas. Esta associação física inclui ligações de hidrogénio. Em certos casos, o solvato será capaz de isolamento, por exemplo, quando uma ou mais moléculas de solvente forem incorporadas na rede cristalina do sólido cristalino. íSolvatoí abrange os solvatos tanto da fase de solução quanto os isoláveis. Os solvatos exemplares incluem hidratos, etanolatos, metanolatos, isopropanolatos, solvatos de acetonitrilo e solvatos de acetato de etilo. Os métodos de solvatação são conhecidos na técnica.
Qualquer composto que possa ser convertido in vivo para fornecer o agente bioativo ±isto é, o composto de Fórmula ±IÇÇ é um profármaco. Os compostos de Fórmula ±IÇ em que R3 é Rx ou R4 é Ry são úteis como profármacos dos compostos de Fórmula +IÇ na qual R3 é H ou -CH3 e R4 é H. Várias formas de profármacos são bem conhecidas na técnica e são descritas em: aÇ Wermuth, C.G. et al, The Practice of Medicinal Chemistry, Capítulo 31, Academic Press +1996Ç; bÇ Bundgaard, H. ed., Design of Prodrugs, Elsevier ± 19 8 5 Ç ; cÇ Bundgaard, H,, Capítulo 5, 0 Design and Applicatõn of ProdrugsS , Krosgaard-Larsen, P.et al. , eds., A Textbook of Drug Design and Development, pp. 113-191, Harwood Academic Publishers +1991Ç; e dÇ Testa, B. et al. , Hydrolysis in Drug and Prodrug Metabolism, Wiley- VCH ±2003Ç.
Além disso, os compostos de Fórmula +IÇ, após a sua preparação, podem ser isolados e purificados para obter uma composição contendo uma quantidade em peso igual ou maior do que 99 Ú de um composto de Fórmula ±IÇ ±0 substancialmente puroS Ç, que é então utilizada ou formulada como aqui descrita. Tais compostos 0 substancialmente purosS de Fórmula +IÇ também sãcaqui contemplados como parte da presente invenção. § Composto estávelS e S estrutura estávelS pretendem indicar um composto que é suficientemente robusto para sobreviver ao isolamento até um grau útil de pureza a partir de uma mistura de reação, e formulação num agente terapêutico eficaz. A presente invenção destina-se a incorporar compostos estáveis. íQuantidade terapeuticamente eficazí destina-se a incluir uma quantidade de um composto da presente invenção isoladamente ou uma quantidade da combinação de compostos reivindicados ou uma quantidade de um composto da presente invenção em combinação com outros ingredientes ativos eficazes para atuar como um inibidor para um recetor de NOTCH, ou eficaz para tratar ou prevenir doenças proliferativas tais como o cancro.
Como aqui utilizado, ítratarí ou ítratamentoí cobrem o tratamento de um estado de doença num mamífero, particularmente num ser humano, e incluem: ±aÇ prevenir que o estado de doença ocorra num mamífero, em particular, quando tal mamífero está predisposto ao estado de doença, mas ainda não foi diagnosticado como tendo-o; ±bÇ inibir o estado de doença, isto é, interromper o seu desenvolvimento; e® ou ±cÇ aliviar o estado de doenç, isto é, provocando a regressão do estado de doença.
Os compostos da presente invenção destinam-se a incluir todos os isótopos de átomos que ocorrem nos presentes compostos. Os isótopos incluem os átomos tendo o mesmo número atómico, mas números de massa diferentes. Por meio de um exemplo geral e sem limitação, os isótopos de hidrogénio incluem deutério +DÇ e trítio ±TÇ. Os isótopos de carbono incluem ~3C e 14C. Os compostos isotopicamente marcados da presente invenção podem geralmente ser preparados por técnicas convencionais conhecidas para os peritos na especialidade ou por processos análogos àqueles aqui descritos, utilizando um reagente isotopicamente marcado apropriado em lugar do reagente não marcado empregue de outra forma.
Os compostos de acordo com a Fórmula ±IÇ eêou os sais dos mesmos podem ser administrados por qualquer meio adequado para a condição ser tratada, a qual pode depender da necessidade de um tratamento sítio-específico ou da quantidade do composto de Fórmula ±IÇ a ser administrada.
Também englobada dentro desta invenção está uma classe de composições farmacêuticas compreendendo o composto de Fórmula +IÇ eH ou um sal do mesmo; e um ou maisportadores eB ou diluentes eEI ou adjuvantes farmaceuticamente aãtãveis ±coletivamente referidos aqui como materiais "portadores"Ç e, se desejável, outros ingredientes ativos. Os compostos de Fórmula +IÇ podem ser administrados por qualquer via adequada, de preferência na forma de uma composição farmacêutica adaptada a uma tal via, e numa dose eficaz para o tratamento pretendido. Os compostos e composições da presente invenção podem, por exemplo, ser administrados por via oral, mucosa ou parentérica incluindo por via intravascular, intravenosa, intraperitoneal, subcutânea, intramuscular e intraesternal nas formulações de dosagem unitária contendo portadores, adjuvantes e veículos convencionais farmaceuticamente aceitáveis. Por exemplo, o portador farmacêutico pode conter uma mistura de manitol ou lactose e celulose microcristalina. A mistura pode conter componentes adicionais tais como um agente lubrificante, por exemplo, estearato de magnésio e um agente de desintegração tal como crospovidona. A mistura de portador pode ser carregada numa cápsula de gelatina ou comprimida como um comprimido. A composição farmacêutica pode ser administrada como uma forma farmacêutica oral ou uma infusão, por exemplo.
Para a administração oral, a composição farmacêutica pode estar na forma de, por exemplo, um comprimido, cápsula, cápsula de líquido, suspensão ou líquido. A composição farmacêutica é preferivelmente produzida sob a forma de uma unidade de dosagem contendo uma quantidade particular do ingrediente ativo. Por exemplo, a composição farmacêutica pode ser fornecida como um comprimido ou cápsula compreendendo uma quantidade de ingrediente ativo no intervalo de cerca de 1 a 2000 mg, de preferência de cerca de 1 a 500 mg, e mais preferivelmente desde cerca de 5 a 150 mg. Uma dose diária adequada para um ser humano ou outro mamífero pode variar amplamente dependendo da condição do paciente e de outros fatores, mas pode ser determinada utilizando métodos de rotina.
Qualquer composição farmacêutica aqui contemplada pode, por exemplo, ser administrada por via oral através de quaisquer preparações orais aceitáveis e adequadas. As preparações orais exemplares incluem, mas não são limitadas a, por exemplo, comprimidos, trociscos, pastilhas, suspensões aquosas e oleosas, pós ou grânulos dispersíveis, emulsões, cápsulas sólidas e macias, cápsulas de líquido, xaropes e elixires. As composições farmacêuticas destinadas a administração oral podem ser preparadas de acordo com quaisquer métodos conhecidos na técnica para o fabrico de composições farmacêuticas destinadas para a administração oral. A fim de fornecer preparações farmaceuticamente palatáveis, uma composição farmacêutica de acordo com a invenção pode conter pelo menos um agente selecionado de agentes edulcorantes, agentes flavorizantes, agentes de coloração, emolientes, antioxidant.es e agentes conservantes.
Um comprimido pode, por exemplo, ser preparado pela mistura de pelo menos um composto de Fórmula ±IÇ com pelo menos um excipiente não tóxico farmaceuticamente aceitável adequado para o fabrico de comprimidos. Os excipientes exemplares incluem, mas não são limitados a, por exemplo, diluentes inertes, tais como, por exemplo, carbonato de cálcio, carbonato de sódio, lactose, fosfato de cálcio e fosfato de sódio; agentes de granulação e desintegração, tais como, por exemplo, celulose microcristalina, croscarmelose de sódio, amido de milho e acido algínico; agentes de ligação, tais como, por exemplo, amido, gelatina, polivinil-pirrolidona e goma de acácia; e agentes lubrificantes, tais como, por exemplo, estearato de magnésio, ácido esteárico e talco. Adicionalmente, um comprimido pode ser não revestido ou revestido por técnicas conhecidas para mascarar o mau gosto de um medicamento de sabor desagradável, ou retardar a desintegração e a absorção do ingrediente ativo no trato gastrointestinal, sustentando assim os efeitos do ingrediente ativo durante um longo período. Os materiais de mascaramento do sabor solúveis em água exemplares incluem, mas não são limitados a, hidroxipropil-metilcelulose e hidroxipropil-celulose. Os materiais de retardo de tempo exemplares incluem, mas não são limitados a, etil celulose e acetato butirato de celulose. Cápsulas de gelatina sólidas podem ser, por exemplo, preparadas através da mistura de pelo menos um composto de Fórmula +IÇ com pelo menos um diluente sólido inerte, tal como, por exemplo, carbonato de cálcio; fosfato de cálcio; e caulino.
As cápsulas de gelatina macias podem, por exemplo, ser preparadas através da mistura de pelo menos um composto de Fórmula ±IÇ com o pelo menos um portador solúvel em água, tal como, por exemplo, polietileno glicol; e pelo menos um meio oleoso, tal como, por exemplo, óleo de amendoim, parafina líquida e azeite.
Uma suspensão aquosa pode ser preparada, por exemplo, através da mistura de pelo menos um composto de Fórmula ±IÇ com pelo menos um excipiente adequado para o fabrico de uma suspensão aquosa. Os excipientes exemplares adequados para o fabrico de uma suspensão aquosa incluem, mas não são limitados a, por exemplo, agentes de suspensão, tais como, por exemplo, carboximetilcelulose de sódio, metilcelulose, hidroxipropilmetilcelulose, alginato de sódio, ácido algínico, polivinil-pirrolidona, goma tragacanto e goma acácia; agentes dispersantes ou humectantes, tais como, por exemplo, um fosfatídeo de ocorrência natural, por exemplo, lecitina; produtos de condensação de óxido de alquileno com ácidos gordos, tais como, por exemplo, estearato de polioxietileno; produtos de condensação de óxido de etileno com álcoois alifãticos de cadeia longa, tais como, por exemplo, heptadecaetileno-oxicetanol; produtos de condensação de óxido de etileno com ésteres parciais derivados de ácidos gordos e hexitol, tais como, por exemplo, monooleato de polioxietileno sorbitol; e produtos de condensação de óxido de etileno com ésteres parciais derivados de ácidos gordos e anidridos de hexitol, tais como, por exemplo, monooleato de polietileno sorbitano. Uma suspensão aquosa também pode conter pelo menos um conservante, tal como, por exemplo, p-hidroxibenzoato de etilo e n-propilo; pelo menos um agente corante; pelo menos um agente flavorizante; eêou pelo menos um agente edulcorante incluindo, mas não limitado a, por exemplo, sacarose, sacarina e aspartame.
As suspensões oleosas podem, por exemplo, ser preparadas através da suspensão de pelo menos um composto de Fórmula +IÇ num óleo vegetal, tal como, por exemplo, óleo de amendoim; azeite; óleo de gergelim e óleo de coco; ou num óleo mineral, tal como, por exemplo, parafina líquida. Uma suspensão oleosa também pode conter pelo menos um agente de espessamento, tal como, por exemplo, cera de abelha; parafina sólida e álcool cetílico. A fim de fornecer uma suspensão oleosa palatável, pelo menos um dos agentes adoçantes já descritos mais acima eêou pelo menos um agente flavorizante pode ser adicionado à suspensão oleosa. Uma suspensão oleosa pode ainda conter pelo menos um conservante, incluindo, mas não limitado a, por exemplo, um antioxidante, tal como, por exemplo, hidroxianisol butilado e alfa-tocoferol.
Os pós e grânulos dispersíveis, podem, por exemplo, ser preparados pela mistura de pelo menos um composto de Fórmula +IÇ com pelo menos um agente dispersante eêou humectante; pelo menos um agente de suspensão; eêou pelo menos um conservante. Os agentes dispersantes, agentes humectantes e agentes de suspensão adequados são como já descritos acima. Os conservantes exemplares incluem, mas não são limitados a, por exemplo, antioxidantes, por exemplo, ácido ascórbico. Além disso, os pós e grânulos dispersíveis também podem conter pelo menos um excipiente, incluindo, mas não limitados a, por exemplo, agentes edulcorantes; agentes flavorizantes e agentes corantes.
Uma emulsão de pelo menos um composto de Fórmula ±IÇ pode, por exemplo, ser preparada como uma emulsão de óleo em água. A fase oleosa das emulsões compreendendo compostos de Fórmula ±IÇ pode ser constituída a partir de ingredientes conhecidos de uma forma conhecida. A fase oleosa pode ser fornecida por, mas não é limitada a, por exemplo, um óleo vegetal, tal como, por exemplo, azeite e óleo de amendoim; um óleo mineral tal como, por exemplo, parafina líquida; e suas misturas. Embora a fase possa compreender simplesmente um emulsificante, ela pode compreender uma mistura de pelo menos um emulsificante com uma gordura ou um óleo ou com tanto uma gordura quanto um óleo. Os agentes emulsificantes adequados incluem, mas não são limitados a, por exemplo, fosfatídeos de ocorrência natural, por exemplo, lecitina de feijão de soja; ésteres ou ésteres parciais derivados de ácidos gordos e anidridos de hexitol, tais como, por exemplo, monooleato de sorbitano; e produtos de condensação de ésteres parciais com óxido de etileno, tais como, por exemplo, monooleato de polioxietileno sorbitano. Preferivelmente, um emulsificante hidrófilo é incluído juntamente com um emulsificante lipofílico que atua como um estabilizante. Também é preferido incluir tanto um óleo quanto uma gordura. Juntos, os emulsificantes com ou sem estabilizantes formam a chamada cera emulsificante, e a cera juntamente com o óleo e a gordura formam a chamada base de pomada emulsificante que forma a fase oleosa dispersa das formulações em creme. Uma emulsão também pode conter um agente edulcorante, um agente flavorizante, um conservante eêou um antioxidante. Os emulsificantes e estabilizantes de emulsão adequados para utilização na formulação da presente invenção incluem Tween 60, Span 80, álcool cetoestearílico, álcool miristílico, monoestearato de glicerilo, lauril sulfato de sódio, diestearato de glicerilo isoladamente ou com uma cera, ou outros materiais bem conhecidos na técnica.
Os compostos de Fórmula ±IÇ também podem, por exemplo, ser administrados por via intravenosa, por via subcutânea eêou por via intramuscular através de qualquer forma injetável farmaceuticamente aceitável e adequada. As formas injetáveis exemplares incluem, mas não são limitadas a, por exemplo, soluções aquosas estéreis compreendendo os veículos e solventes aceitáveis, tais como, por exemplo, água, solução de Ringer e solução de cloreto de sódio isotónica; microemulsões estéreis de óleo em água; e suspensões aquosas ou oleaginosas.
As formulações para a administração parentérica podem estar sob a forma de soluções ou suspensões para injeção estéril isotónica aquosa ou não aquosa. Estas soluções e suspensões podem ser preparadas de pós ou grânulos estéreis, utilizando um ou mais dos portadores ou diluentes mencionados para utilização nas formulações para a administração oral ou através da utilização de outros agentes dispersantes ou humectantes adequados e agentes de suspensão. Os compostos podem ser dissolvidos em água, polietileno glicol, propileno glicol, etanol, óleo de milho, óleo de semente de algodão, óleo de amendoim, óleo de gergelim, álcool benzílico, cloreto de sódio, goma tragacanto eêou vários tampões. Outros adjuvantes e modos de administração são bem e amplamente conhecidos na técnica farmacêutica. 0 ingrediente ativo também pode ser administrado por injeção como uma composição com portadores adequados incluindo solução salina, dextrose ou água, ou com ciclodextrina ±isto é, CAPTISOL®Ç, solubilização de co-solvente ±isto é, propileno glicolÇ ou solubilização micelar +isto é, Tween 80Ç. A preparação injetável estéril também pode ser uma solução ou suspensão injetável estéril num diluente ou solvente não tóxico parentericamente aceitável, por exemplo, como uma solução em 1,3-butanodiol. Entre os veículos e solventes aceitáveis que podem ser empregues estão a água, solução de Ringer e solução de cloreto de sódio isotónica. Além disso, os óleos fixos estéreis são convencionalmente empregues como um meio solvente ou de suspensão. Para este propósito qualquer óleo fixo suave pode ser empregue, incluindo mono ou diglicéridos sintéticos. Além disso, os ácidos gordos tais como ácido oleico encontram utilização na preparação de injetáveis.
Uma microemulsão de óleo em água injetável estéril pode, por exemplo, ser preparada por 1Ç dissolução de pelo menos um composto de Fórmula +IÇ numa fase oleosa como, por exemplo, uma mistura de óleo de soja e lecitina; 2Ç combinação da Fórmula +IÇ contendo a fase oleosa com uma mistura de água e glicerol; e 3Ç processamento da combinação para formar uma microemulsão.
Uma suspensão aquosa ou oleaginosa estéril pode ser preparada de acordo com métodos jã conhecidos na técnica. Por exemplo, uma solução ou suspensão aquosa estéril pode ser preparada com um diluente ou solvente não tóxico parentericamente aceitável, tal como, por exemplo, 1,3-butanodiol; e uma suspensão oleaginosa estéril pode ser preparada com um solvente ou meio de suspensão estéril não tóxico aceitável, tal como, por exemplo, óleos fixos estéreis, por exemplo, mono ou diglicéridos sintéticos; e ácidos gordos, tais como, por exemplo, ácido oleico.
Os portadores, adjuvantes e veículos farmaceuticamente aceitáveis que podem ser utilizados nas composições farmacêuticas desta invenção incluem, mas não são limitados a, permutadores iónicos, alumina, estearato de alumínio, lecitina, sistemas de libertação de fármacos auto-emulsificantes +SEDDSÇ tais como d-alfa-tocoferol polietilenoglicol 1000 succinato, tensioativos utilizados nas formas de dosagem farmacêuticas tais como Tweens, óleo de rícino polietoxilado tal como tensioativo CREMOPHOR® +BASFÇ, ou outras matrizes de administração poliméricas semelhantes, proteínas do soro, tais como a albumina do soro humana, substâncias tamponantes tais como fosfatos, glicina, ácido sórbico, sorbato de potássio, misturas de glicérido parciais de ácidos gordos vegetais saturados, água, sais ou eletrólitos, tais como sulfato de protamina, fosfato de hidrogénio dissódico, fosfato de hidrogénio potássico, cloreto de sódio, sais de zinco, sílica coloidal, trissilicato de magnésio, polivinil pirrolidona, substâncias à base de celulose, polietileno glicol, carboximetilcelulose de sódio, poliacrilatos, ceras, polímeros em bloco de polietileno-polioxipropileno, polietileno glicol e lanolina. As ciclodextrinas tais como alfa-, beta- e gama-ciclodextrina, ou derivados quimicamente modificados tais como hidroxialquilciclodextrinas, incluindo 2- e 3-hidroxipropil-ciclodextrinas, ou outros derivados solubilizantes também podem ser vantajosamente utilizados para acentuar a libertação de compostos das fórmulas aqui descritas.
Os compostos farmaceuticamente ativos desta invenção podem ser processados de acordo com métodos convencionais de farmácia para produzir agentes medicinais para a administração a pacientes, incluindo seres humanos e outros mamíferos. As composições farmacêuticas podem ser submetidas a operações farmacêuticas convencionais tais como esterilização elEI ou podem conter adjuvantes convencionais, tais como conservantes, estabilizantes, agentes humectantes, emulsificantes, tampões, etc. Os comprimidos e pílulas podem adicionalmente ser preparados com revestimentos entéricos. Tais composições também podem compreender adjuvantes, tais como agentes humectantes, edulcorantes, aromatizantes e perfumantes.
As quantidades de compostos que são administrados e o regime de dosagem para tratar uma condição de doença com os compostos eEl ou composições desta invenção dependem de uma variedade de fatores, incluindo a idade, peso, sexo, a condição médica do indivíduo, o tipo de doença, a gravidade da doença, a via e frequência de administração e o composto particular empregue. Assim, o regime de dosagem pode variar amplamente, mas pode ser determinado rotineiramente utilizando métodos padrão. Uma dose diária de cerca de 0,001 a 100 mgE3 kg de peso corporal, de preferência entre cerca de 0,005 e cerca de 50 mg§ kg de peso corporale mais preferivelmente entre cerca de 0,01 a 10 mgS kg de pso corporal, pode ser apropriada. A dose diária pode ser administrada de uma a quatro doses por dia.
Para propósitos terapêuticos, os compostos ativos desta invenção são habitualmente combinados com um ou mais adjuvantes apropriados para a via de administração indicada. Se administrados por via oral, os compostos podem ser misturados com lactose, sacarose, amido em pó, ésteres de celulose de ácidos alcanoicos, ésteres alquílicos de celulose, talco, ácido esteárico, estearato de magnésio, óxido de magnésio, sais de sódio e cálcio de ácidos fosfórico e sulfúrico, gelatina, goma acácia, alginato de sódio, polivinilpirrolidona, e§ ou álcool polivinílio, e depois transformados em comprimidos ou encapsulados para a administração conveniente. Tais cápsulas ou comprimidos podem conter uma formulação de libertação controlada como pode ser fornecida numa dispersão de composto ativo em hidroxipropilmetil celulose.
As composições farmacêuticas desta invenção compreendem pelo menos um composto de Fórmula ±IÇ eS ou pelo menos um sal do mesmo e opcionalmente um agente adicional selecionado a partir de qualquer um de portador, adjuvante e veículo farmaceuticamente aceitáveis. As composições alternativas desta invenção compreendem um composto da Fórmula ±IÇ aqui descrito, ou um profármaco do mesmo aqui identificado, e um portador, adjuvante ou veículo farmaceuticamente aceitável.
UT X Li X DADE
Os compostos de Fórmula ±IÇ são úteis para o tratamento de cancro, por exemplo, os cancros dependentes da ativação de Notch. A ativação de Notch tem sido implicada na patogénese de vários tumores sólidos incluindo cancro do ovário, pâncreas, assim como da mama e tumores hematológicos tais como leucemias, linfomas e mieloma múltiplo.
Numa forma de realização, um composto de Fórmula ±IÇ eE ou um sal do mesmo é utilizado para o tratamento de cancro num mamífero em necessidade do mesmo. Esta forma de realização pode ser utilizada para tratar uma variedade de cancros, incluindo, mas não limitado a, cancro da bexiga, cancro da mama, cancro colorretal, cancro gástrico, cancro da cabeça e pescoço, cancro do rim, cancro do fígado, cancro do pulmão incluindo cancro de pulmão de células não pequenas +N5CLCÇ, cancro de ovário, cancro do pâncreas, cancro da vesícula biliar, cancro de próstata, cancro de tireoide, osteossarcoma, rabdomiossarcoma, fibroistiocitoma maligno ±MFHÇ, fibrossarcoma, glioblastomasS astrociomas, neuroblastoma, melanoma, leucemia linfoblãstica aguda de células T +T-ALLÇ, e mesotelioma. Por exemplo, esta forma de realização é utilizada para tratar cancro da mama, cancro do cólon, ou cancro do pâncreas. De preferência, o mamífero é um ser humano. Por exemplo, uma quantidade terapeuticamente eficaz para o tratamento de cancro pode ser administrada na presente forma de realização. Esta forma de realização inclui a administração do composto tendo a estru4-"^^ -
eêou pelo menos um sal do mesmo. As vias de administração na presente forma de realização incluem a administração parentérica e a administração oral.
Numa forma de realização, pelo menos um composto de Fórmula ±IÇ eêou pelo menos um sal do mesmo é utilizado para o tratamento de cancro num mamífero em necessidade do mesmo, em que o dito cancro é cancro colorretal. De preferência, o mamífero é um ser humano. Por exemplo, uma quantidade terapeuticamente eficaz para o tratamento de cancro pode ser administrada na presente forma de realização. As vias de administração na presente forma de realização incluem a administração parentérica e a administração oral.
Numa forma de realização, pelo menos um composto de Fórmula +IÇ eêou pelo menos um sal do mesmo é utilizado para o tratamento de cancro num mamífero em necessidade do mesmo, em que o dito cancro é cancro da mama negativo triplo. De preferência, o mamífero é um ser humano. Por exemplo, uma quantidade terapeuticamente eficaz para o tratamento de cancro pode ser administrada na presente forma de realização. As vias de administração na presente forma de realização incluem a administração parentérica e a administração oral.
Numa forma de realização, pelo menos um composto de Fórmula +IÇ eS ou pelo menos um sal do mesmo é utiliado para o tratamento de cancro num mamífero em necessidade do mesmo, em que o dito cancro possui uma translocação de pelo menos um dos recetores de Notch. Por exemplo, o carcinoma da mama negativo triplo humano HCC-1599 possui uma translocação Notch 1.
Numa forma de realização, pelo menos um composto de Fórmula +IÇ eEEI ou pelo menos um sal do mesmo é utiliado para o tratamento de cancro num mamífero em necessidade do mesmo, em que o dito cancro é cancro do pulmão de células não pequenas. De preferência, o mamífero é um ser humano. Por exemplo, uma quantidade terapeuticamente eficaz para o tratamento de cancro pode ser administrada na presente forma de realização. As vias de administração na presente forma de realização incluem a administração parentérica e administração oral.
Numa forma de realização, pelo menos um composto de Fórmula ±IÇ eS ou pelo menos um sal do mesmo é utiliado para o tratamento de cancro num mamífero em necessidade do mesmo, em que o dito cancro é cancro pancreático. De preferência, o mamífero é um ser humano. Por exemplo, uma quantidade terapeuticamente eficaz para o tratamento de cancro pode ser administrada na presente forma de realização. As vias de administração na presente forma de realização incluem a administração parentérica e a administração oral.
Numa forma de realização, pelo menos um composto de Fórmula +IÇ eEEI ou pelo menos um sal do mesmo é utiliado para o tratamento de cancro num mamífero em necessidade do mesmo, em que o dito cancro é cancro do ovário. De preferência, o mamífero é um ser humano. Por exemplo, uma quantidade terapeuticamente eficaz para o tratamento de cancro pode ser administrada na presente forma de realização. As vias de administração na presente forma de realização incluem a administração parentérica e a administração oral.
Numa forma de realização, pelo menos um composto de Fórmula +IÇ eêou pelo menos um sal do mesmo é utilizado para o tratamento de cancro num mamífero em necessidade do mesmo, em que o dito cancro é melanoma. De preferH ncia, o mamífero é um ser humano. Por exemplo, uma quantidade terapeuticamente eficaz para o tratamento de cancro pode ser administrada na presente forma de realização. As vias de administração na presente forma de realização incluem a administração parentérica e a administração oral. A utilização de pelo menos um composto de Fórmula ±IÇ eêou pelo menos um sal do mesmo, no fabrico de um medicamento para o tratamento de cancro é divulgado. De preferi ncia, na presente forma de realização, os cacros submetidos ao tratamento incluem um ou mais de cancro da bexiga, cancro da mama, cancro colorretal, cancro gástrico, cancro da cabeça e pescoço, cancro do rim, cancro do fígado, cancro do pulmão, incluindo o cancro do pulmão de células não pequenas +NSCLCÇ, cancro de ovário, cancro de pâncreas, cancro de vesícula biliar, cancro de próstata, cancro de tireoide, osteossarcoma, rabdomiossarcoma, fibroistiocitoma maligno +MFHÇ, fibrossarcoma, glioblastomasêastrocitomas, neuroblastoma, melanoma, leucemia linfoblástica aguda de células T +T-ALLÇ e mesotelioma. Os medicamentos adequados da presente forma de realização incluem medicamentos para a administração parentérica como, por exemplo, soluções e suspensões e medicamentos para a administração oral como, por exemplo, comprimidos, cápsulas, soluções e suspensões.
Uma forma de realização fornece pelo menos um composto de Fórmula +IÇ eêou pelo menos um sal do mesmo, para utilização em terapKI utica no tratamento de cancro. Na presente forma de realização, os cancros submetidos ao tratamento incluem um ou mais de cancro de bexiga, cancro de mama, cancro colorretal, cancro gástrico, cancro de cabeça e pescoço, cancro de rim, cancro de fígado, cancro de pulmão, incluindo o cancro de pulmão de células não pequenas ±NSCLCÇ, cancro de ovário, cancro de pâncreas, cancro de vesícula biliar, cancro de próstata, cancro de tireoide, osteossarcoma, rabdomiossarcoma, fibroistiocitoma maligno ±MFHÇ, fibrossarcoma, glioblastomasêastroeitomas, neuroblastoma, melanoma, leucemia linfoblástica aguda de células T +T-ALLÇ e mesotelioma.
Numa forma de realização pelo menos um composto de Formula +IÇ eêou pelo menos um sal do mesmo é utilizado para o tratamento de cancro num mamífero em que o cancro é dependente da ativação de Notch. Esta forma de realização pode ser utilizada para tratar uma variedade de cancros, incluindo, mas não limitado a, cancro da bexiga, cancro da mama, cancro colorretal, cancro gástrico, cancro da cabeça e pescoço, cancro do rim, cancro do fígado, cancro do pulmão, incluindo o cancro de pulmão de células não pequenas ±NSCLCÇ, cancro de ovário, cancro de pâncreas, cancro da vesícula biliar, cancro de próstata, cancro de tireoide, osteossarcoma, rabdomiossarcoma, fibroistiocitoma maligno +MFHÇ, fibrossarcoma, glioblastomasêastrocitomas, neuroblastoma, melanoma, leucemia linfoblástica aguda de células T +T-ALLÇ e mesotelioma. De preferi ncia, efea forma de realização é utilizada para tratar o cancro da mama, cancro do cólon ou cancro do pâncreas. Preferivelmente, o mamífero é um ser humano. Por exemplo, uma quantidade terapeuticamente eficaz para o tratamento de cancro pode ser administrada na presente forma de realização. As vias adequadas de administração incluem a administração parentérica e a administração oral.
No tratamento de cancro, uma combinação de agentes quimioterapB uticos eêou outros tratamentos ±por exmplo, terapia de radiaçãoÇ é muitas vezes vantajosa. 0 segundo ±ou terceiroÇ agente pode ter o mesmo ou diferente mecanismo de ação do que o agente terapUS utico prinópal. Por exemplo, combinações de fármacos podem ser empregues em que os dois ou mais fármacos que são administrados atuam de diferentes maneiras ou em diferentes fases do ciclo celular, eêou onde os dois ou mais fármacos possuem toxicidades ou efeitos secundários não sobrepostos, eêou onde os medicamentos a serem combinados têm cada um, uma eficácia demonstrada no tratamento do estado de doença particular manifestado pelo paciente.
Numa forma de realização, pelo menos um composto de Fórmula +IÇ eêou pelo menos um sal do mesmo; e um ou mais agentes anti-cancro adicionais são utilizados para o tratamento do cancro. A frase "agente anti-cancro adicional" refere-se a um fármaco selecionado de qualquer um ou mais dos seguintes: agentes alquilantes ±incluindo mostardas de azoto, sulfonatos de alquilo, nitrosoureias, derivados de etilenimina e triazenosÇ; anti-angiogénicos ±incluindo os inibidores da metaloproteinase de matrizÇ; antimetabolitos +incluindo inibidores da adenosina desaminase, antagonistas de ácido fólico, análogos de purina e análogos de pirimidinaÇ; antibióticos ou anticorpos +incluindo anticorpos monoclonais, anticorpos CTLA-4, antraciclinasÇ; inibidores de aromatase; modificadores da resposta do ciclo celular; enzimas; inibidores da proteína farnesil transferase; agentes e esteroides hormonais e anti-hormonais ±incluindo análogos sintéticos, glicocorticoides, estrogénioslEI anti-estrogénios [por exemplo, SERMs], androgéniossE anti-androgénios, progestinas, agonis&s do recetor de progesterona, e agonistas e antagonistas de libertação da hormona luteinizante [LHRH]Ç; fator de crescimento semelhante à insulina ±IGFÇêmoduladore s do sistema de recetor do fator de crescimento semelhante a insulina +IGFRÇ +incluindo os inibidores de IGFR1Ç; inibidores da sinalização de integrina; inibidores da cinase ±incluindo inibidores de múltiplas cinases eêou inibidores da cinase Src ou Srcêabl, inibidores da cinase dependente da ciclina [CDK], anticorpos panHer, Her-1 e Her-2, inibidores de VEGF, incluindo anticorpos anti-VEGF, inibidores de EGFR, inibidores da proteína ativados por mitogénio [MAP], inibidores de Met, inibidores de MEK, inibidores da Aurora cinase, inibidores de PDGF, e outros inibidores da tirosina cinase ou inibidores da serina0 treonina cinase, agentes disruptores de microtúbulos, tais como ecteinascidinas ou seus análogos e derivados; agentes estabilizantes de microtúbulos tais como taxanos, e as epotilonas de ocorrência natural e os seus análogos sintéticos e semissintéticos; agentes desestabilizadores de ligação a microtúbulos ±incluindo alcaloides da vincaÇ; inibidores da topoi somerase ,- inibidores da prenil-proteína transferase; complexos de coordenação de platina; inibidores da transdução de sinal; e outros agentes utilizados como agentes anti-cancro e agentes citotóxicos tais como modificadores da resposta biológica, fatores de crescimento e imunomodu1adores.
Consequentemente, os compostos da presente invenção podem ser administrados em combinação com outros tratamentos anti-cancro úteis no tratamento de cancro ou outras doenças proliferativas. A invenção do presente documento divulga adicionalmente a utilização de pelo menos um composto de Fórmula +IÇ eH ou pelo menos um sal d mesmo, na preparação de medicamentos para o tratamento de cancro, eB ou compreende o acondicionamento de um composto d Fórmula ±IÇ incluso juntamente com instruções para que o composto seja utilizado em combinação com outros agentes e agentes anti-cancro ou citotóxicos e tratamentos para o cancro. A presente invenção ainda compreende as combinações de pelo menos um composto de Fórmula +IÇ eH ou pelomenos um sal do mesmo; e pelo menos um agente adicional na forma de kit, por exemplo, onde eles são acondicionados em conjunto ou colocados em embalagens separadas para serem vendidos em conjunto como um kit, ou onde são acondicionados para serem formulados em conjunto.
Numa forma de realização, pelo menos um composto de Fórmula +IÇ eêou pelo menos um sal do mesmo,· dasatinib e opcionalmente, um ou mais agentes anti-cancro adicionais são utilizados para o tratamento de cancro.
Numa forma de realização, pelo menos um composto de Fórmula ±IÇ eêou pelo menos um sal do mesmo; paclitaxel e opcionalmente, um ou mais agentes anti-cancro adicionais são utilizados para o tratamento de cancro.
Numa forma de realização, pelo menos um composto de Fórmula +IÇ eêou pelo menos um sal do mesmo,· tamoxifeno e opcionalmente, um ou mais agentes anti-cancro adicionais são utilizados para o tratamento de cancro.
Numa forma de realização, pelo menos um composto de Fórmula +IÇ eêou pelo menos um sal do mesmo; um glucocorticoide e opcionalmente, um ou mais agentes anti-cancro adicionais são utilizados para o tratamento de cancro. Um exemplo de um glucocorticoide adequado é dexametasona.
Numa forma de realização, pelo menos um composto de Fórmula ±IÇ eêou pelo menos um sal do mesmo; carboplatina e opcionalmente, um ou mais agentes anti-cancro adicionais são utilizados para o tratamento de cancro.
Os compostos da presente invenção podem ser formulados ou coadministrados com outros agentes terapêuticos que são selecionados pela sua utilidade particular no tratamento de efeitos secundários associados com as condições anteriormente mencionadas. Por exemplo, os compostos da invenção podem ser formulados com agentes para prevenir náusea, hipersensibilidade e irritação gástrica, como antieméticos e anti-histamínicos Hi e H2.
Numa forma de realização, as composições farmacêuticas são fornecidas compreendendo pelo menos um composto de Fórmula ±IÇ eS ou pelo menos um sal do mesmo; um oumais agentes adicionais selecionados de um agente inibidor da cinase ±pequena molécula, polipéptido e anticorpoÇ, um imunossupressor, um agente anti-cancro, um agente antiviral, agente anti-inflamatório, agente antifúngico, antibiótico ou um composto de hiperproliferação anti-vascular; e qualquer portador, adjuvante ou veículo farmaceuticamente aceitável.
Os outros agentes terapêuticos anteriores, quando empregues em combinação com os compostos da presente invenção, podem ser utilizados, por exemplo, naquelas quantidades indicadas na Physicians' Desk Reference +PDRÇ ou como de outro modo determinado por um perito na especialidade. Nos métodos da presente invenção, tais outros agentes terapêuticos podem ser administrados antes, simultaneamente ou após a administração dos compostos da invenção. 0 nível de dose específico e a frequência de dosagem para qualquer indivíduo particular, no entanto, podem ser variados e geralmente dependem de uma variedade de fatores, incluindo, mas não limitados, por exemplo, à biodisponibilidade do composto específico de Fórmula +IÇ na forma administrada, estabilidade metabólica e duração da ação do composto específico de Fórmula +IÇ, espécie, peso corporal, saúde geral, sexo, dieta do indivíduo, o modo e tempo de administração, a taxa de excreção, combinação de fârmacos e gravidade da condição particular. Por exemplo, uma dose diária de cerca de 0,001 a 100 mglEI kg de peo corporal, de preferência entre cerca de 0,005 e cerca de 50 mgIS kg de peso corporal e mais preferivelmente entre cerca de 0,01 a 10 mgíH kg de peso corporal, pode ser apropiada. A dose diária pode ser administrada numa a quatro doses por dia. A administração pode ser contínua, isto é, todos os dias, ou intermitentemente. Os termos íintermitenteí ou íintermitentementeí como aqui utilizados significam interromper e iniciar a intervalos regulares ou irregulares. Por exemplo, a administração intermitente inclui a administração um a seis dias por semana; administração em ciclos ±por exemplo, administração diária de dois a oito semanas consecutivas, seguido de um período de repouso sem administração de até uma semanaÇ; ou administração em dias alternados.
Numa forma de realização, o pelo menos um composto de Fórmula ±IÇ eêou o pelo menos um sal do mesmo é administrado continuamente a um paciente em necessidade do mesmo, uma ou mais vezes por dia. Por exemplo, uma quantidade terapeuticamente eficaz do composto de Fórmula +IÇ é administrada a um paciente em necessidade da mesma, uma ou mais vezes por dia durante dias consecutivos.
Numa forma de realização, pelo menos um composto de Fórmula +IÇ eêou pelo menos um sal do mesmo é administrado de forma intermitente a um paciente em necessidade do mesmo, uma ou mais vezes por dia. Por exemplo, uma quantidade terapeuticamente eficaz do composto de Fórmula +IÇ é administrada a um paciente em necessidade da mesma, uma ou mais vezes ao dia, de acordo com um esquema intermitente.
Numa forma de realização, pelo menos um composto de Fórmula ±IÇ eêou pelo menos um sal do mesmo é administrado a um paciente em necessidade do mesmo, uma ou mais vezes por dia, durante dias consecutivos, seguido por um ou mais dias sem administração. De preferi ncia, uma quantidde terapeuticamente eficaz do composto de Fórmula ±IÇ é administrada. Exemplos de dosagem contínua com suspensão do fãrmaco são ciclos de: 7 dias de tratamento seguidos por 7 dias sem tratamento; 14 dias de tratamento seguidos por 7 dias sem tratamento; e 7 dias de tratamento seguidos por 14 dias sem tratamento. Um ciclo de em tratamentoêsem tratamento pode ser repetido várias vezes conforme necessário para tratar um paciente.
Numa forma de realização, pelo menos um composto de Fórmula ±IÇ eêou pelo menos um sal do mesmo é administrado a um paciente em necessidade do mesmo, de acordo com um esquema de dosagem intermitente. Esquemas de dosagem intermitentes são esquemas repetidos incluindo os dias nos quais o paciente é administrado com o composto de Fórmula +IÇ e os dias nos quais o paciente não é administrado com o composto de Fórmula ±IÇ. Exemplos de esquemas de dosagem intermitentes são: dosagem de quatro dias por semana durante três semanas consecutivas, seguido de uma semana sem dosagem, e repetição num intervalo de quatro semanas; dosagem de cinco dias por semana durante duas semanas consecutivas, seguido de uma semana sem dosagem, e repetição num intervalo de três semanas; e dosagem de quatro dias por semana durante uma semana, seguido por duas semanas sem dosagem, e repetição num intervalo de três semanas. De preferência, é administrada uma quantidade terapeuticamente eficaz do composto de Fórmula +IÇ.
Numa forma de realização, pelo menos um composto de Fórmula +IÇ eêou pelo menos um sal do mesmo é administrado no dia um, seguido por 6 dias de repouso e repetido num esquema semanal.
Numa forma de realização, pelo menos um composto de Fórmula +IÇ eêou pelo menos um sal do mesmo é administrado num dia, seguido por 6 dias de repouso, e repetido num esquema semanal durante 1 a 4 semanas, e depois seguido por uma semana ou descanso. Por exemplo, o composto de Fórmula + IÇ é administrado num dia, seguido por 6 dias de repouso durante trIEI s semanas, e depois seguido por uma semaa de descanso. Este ciclo de quatro semanas pode ser repetido uma ou mais vezes.
Numa forma de realização, pelo menos um composto de Fórmula +IÇ eêou pelo menos um sal do mesmo é administrado em dois dias consecutivos, seguido por 5 dias de repouso e repetido num esquema semanal.
Numa forma de realização, pelo menos um composto de Fórmula +IÇ eêou pelo menos um sal do mesmo é administrado em três dias consecutivos seguido de quatro dias de repouso e repetido num esquema semanal.
Numa forma de realização, pelo menos um composto de Fórmula ±IÇ eêou pelo menos um sal do mesmo é administrado num dia, seguido por 10 a 13 dias de repouso.
Numa forma de realização, pelo menos um composto de Fórmula ±IÇ eêou pelo menos um sal do mesmo é administrado uma vez por dia +QDÇ. Esta forma de realização inclui a administração oral de uma vez ao dia.
Numa forma de realização, pelo menos um composto de Fórmula +IÇ eêou pelo menos um sal do mesmo é administrado duas vezes por dia +BIDÇ. Esta forma de realização inclui a administração oral de duas vezes ao dia.
Numa forma de realização, pelo menos um composto de Fórmula +IÇ eêou pelo menos um sal do mesmo é administrado em dias alternados: num dia seguido por um dia de descanso. Este ciclo de dois dias pode ser repetido uma ou mais vezes.
MÉTODOS DE PREPARAS ÃO
Os compostos da presente invenção podem ser preparados de várias maneiras bem conhecidas para um perito na especialidade da síntese orgânica. Os compostos da presente invenção podem ser sintetizados utilizando os métodos descritos abaixo, juntamente com métodos sintéticos conhecidos na técnica de química orgânica sintética, ou as suas variações como observado pelos peritos na especialidade. Os métodos preferidos incluem, mas não são limitados, aqueles descritos abaixo. Todas as referências aqui citadas são aqui incorporadas na sua totalidade por referência.
Os compostos da presente invenção podem ser preparados utilizando as reações e técnicas descritas nesta secção. As reações são executadas em solventes apropriados para os reagentes e materiais empregues e são adequadas para as transformações que são efetuadas. Da mesma forma, na descrição dos métodos sintéticos descritos abaixo, deve ficar entendido que todas as condições de reação propostas, incluindo a escolha do solvente, atmosfera de reação, temperatura de reação, duração da experiência e os procedimentos de preparação, são selecionadas para serem as condições padrão para essa reação, que devem ser facilmente reconhecidas por um perito na especialidade. É compreendido por um perito na especialidade da síntese orgânica que a funcionalidade presente em várias partes da molécula deve ser compatível com os reagentes e reações propostas. Tais restrições aos substituintes que sejam compatíveis com as condições de reação serão facilmente evidentes para um perito na especialidade e métodos alternativos devem então ser utilizados. Isto às vezes irá requerer uma avaliação para modificar a ordem das etapas sintéticas ou para selecionar um esquema de processo particular em relação a outro, de modo obter um composto desejado da invenção. Será também reconhecido que outra consideração importante no planeamento de qualquer via sintética nesta área é a escolha judiciosa do grupo de proteção utilizado para proteção dos grupos funcionais reativos presentes nos compostos descritos nesta invenção. Um relato de autoridade que descreve as muitas alternativas para o profissional treinado é Greene et al. ±Protective Groups in Organic Synthesis, Terceira Edição, Wiley and Sons +1999ÇÇ.
Os compostos de Fórmula +IÇ podem ser preparados por referência aos métodos ilustrados nos seguintes Esquemas. Como mostrado nestes, o produto final é um composto que possui a mesma fórmula estrutural que a Fórmula ±IÇ. Deve ser entendido que qualquer composto de Fórmula ±IÇ pode ser produzido pelos esquemas através da seleção adequada dos reagentes com a substituição apropriada. Solventes, temperaturas, pressões, e outras condições de reação podem ser facilmente selecionadas por um perito na especialidade. Os materiais de partida estão comercialmente disponíveis ou são facilmente preparados por um perito na especialidade. Os constituintes dos compostos são como aqui definidos ou em outro lugar na memória descritiva. A síntese dos compostos de Fórmula +IÇ pode ser preparada utilizando os métodos resumidos nos Esquemas de 1 a 7.
Esquema 1
A preparação de benzodiazepinona ±ivÇ pode ser executada por um grande número de métodos conhecidos de um perito na especialidade. Por exemplo, como mostrado no Esquema 1, uma 2-aminobenzofenona apropriadamente substituída +iÇ ±por exemplo, de Walsh, D.A., Synthesis, 677 +1980Ç; e referências aí citadas, ou outros métodos conhecidos de um perito na especialidadeÇ pode ser acoplada ao derivado de glicina protegido ±iiÇ ±PG = grupo de proteção, por exemplo PG = CBz, veja-se Katritzky, A.R. et al., Org. Chem., 55:2206-2214 +1990ÇÇ, tratada com um reagente tal como amónia e submetida à ciclização para proporcionar a benzodiazepinona ±iiiÇ, de acordo com o procedimento descrito na literatura ±por exemplo, Sherrill, R.G. et al. , J. Org . Chem., 60:730 +19 95Ç; ou outras vias conhecidas de um perito na especialidadeÇ. A mistura racémica resultante pode ser separada ±utilizando procedimentos conhecidos de um perito na especialidadeÇ para proporcionar os enantiómeros individuais, ou utilizada como um racemato. Além disso, se R3 for H, +iiiÇ pode ser, por exemplo, tratado com um reagente tal como Mel e uma base tal como K2C03 num solvente tal como DMF para preparar R3 é metilo.
Etapa 2: A desproteção de ±iiiÇ pode ser executada de várias formas conhecidas de um perito na especialidade. Por exemplo, com PG = CBz, o Composto ±iiiÇ pode ser tratado com um reagente tal como HBr, num solvente tal como AcOH. 0 Composto ±ivÇ pode ser utilizado como um racemato. Alternativamente, o composto ±ivÇ pode ser submetido à resolução enantiomérica utilizando métodos padrão ±por exemplo, cromatografia preparativa quiralÇ.
Esquema 2
0 Composto ±xiiÇ no Esquema 2 pode ser preparado por uma sequência sintética delineada no Esquema 2.
Etapa 1: 0 ácido ±vÇ pode ser convertido no composto ±viiÇ de várias formas conhecidas de um perito na especialidade. Por exemplo, o tratamento de ácido ±vÇ com um reagente tal como cloreto de oxalilo num solvente tal como DCM fornece o cloreto de ácido ±viÇ. 0 composto ±viÇ pode ser tratado com uma oxazolidinona ±aÇ sob condições padrão para fornecer o composto ±viiÇ +Evans, D.A. et al., J. Am Chem Soe, 112:4011 +1990ÇÇ.
Etapa 2: A segunda etapa do Esquema 2 é alcançada através do tratamento do composto ±viiÇ com uma base tal como bis+trimetilsililÇ-amida de sódio ou diisopropil amida de lítio num solvente tal como THF a baixa temperatura como -78 °C sob uma atmosfera inerte. O enolato resultante de ±viiÇ é tratado com um reagente tal como bromoacetato de terc-butilo para fornecer o composto ±viii, Ry = t-ButiloÇ.
Etapa 3: A conversão do composto ±viiiÇ em ±ixÇ pode ser alcançada mediante o tratamento do composto ±viiiÇ com peróxido de hidrogénio e hidróxido de lítio a uma temperatura apropriada utilizando uma mistura de solventes tal como THF§ água.
Etapa 4: O composto ±ixÇ pode ser convertido numa mistura de composto ±xÇ e composto ±xiÇ através da geração do enolato de ±ixÇ com uma base tal como LDA num solvente tal como THF em baixa temperatura tal como -78 °C sob uma atmosfera inerte, e outro tratamento com um reagente ±R2-LGÇ que carrega um grupo abandonante apropriado +por exemplo, LG = triflatoÇ. A mistura resultante de diastereõmeros ±xêxiÇ pode então ser utilizada nas etapas sintéticas subsequentes.
Etapa 5: Alternativamente, a mistura ±x0 xiÇ pode se submetida às condições de epimerização, por exemplo, mediante o tratamento com LDA e cloreto de dietilalumínio, seguido pela extinção com metanol ou ácido acético para enriquecer o diastereõmero desejado. A mistura resultante diastereomericamente enriquecida do composto ±xêxiÇ pode então ser utilizada nas etapas sintéticas subsequentes ou a mistura de diastereoisómeros pode ser separada, se desejável, empregando condições adequadas tais como a HPLC preparativa, HPLC quiral preparativa ou a cromatografia em sílica gel, e o diastereoisõmero desejado puro resultante ±xiÇ utilizado nas etapas subsequentes.
Etapa 6: Alternativamente, a mistura de ácidos diastereoméricos ±xÇ e ±xiÇ pode ser protegida mediante o tratamento com, por exemplo, brometo de benzilo na presença de uma base como K2C03 num solvente como DMF. A mistura resultante de diastereoisómeros pode ser separada, se desejável, empregando condições apropriadas como HPLC preparativa, HPLC quiral preparativa ou cromatograf ia em gel de sílica e o composto de diastereoisõmero desejado puro resultante ±xiiç utilizado na etapa subsequente.
Etapa 7: A última etapa do Esquema 2 é uma etapa de desproteção e pode ser alcançada de várias maneiras conhecidas de um perito na especialidade. Por exemplo, para Rw = benzilo no composto ±xiiÇ, o tratamento sob condições de hidrogenação utilizando um catalisador tal como paládio sobre carbono nm solvente tal como MeOH sob uma atmosfera de hidrogénio pode fornecer o composto ±xiç que pode subsequentemente ser utilizado.
Alternativamente, o composto ±xiÇ pode ser preparado de acordo com a sequência das etapas encontradas no Esquema 3.
Etapa 1: A primeira etapa do Esquema 3 é alcançada mediante a conversão do composto ±xiiiÇ num éster ±xvÇ, empregando uma das múltiplas maneiras conhecidas de um perito na especialidade, tal como o tratamento com um acetimidato substituído como o composto ±xivÇ na presença de um reagente como eterato de trifluoreto de boro a uma temperatura apropriada num solvente tal como THF.
Etapa 2: 0 ácido ±vÇ pode ser convertido no composto ±viÇ de várias formas conhecidas de um perito na especialidade. Por exemplo, o tratamento do ácido ±vÇ com um reagente tal como cloreto de oxalilo num solvente tal como DCM fornece o cloreto de ácido ±viÇ. 0 composto ±viÇ pode ser tratado com uma oxazolidinona ±aÇ sob condições padrão para fornecer o composto ±viiÇ ±Evans, D.A. et al., J. Am Chem Soe, 112:4011 +1990ÇÇ.
Etapa 3: 0 composto ±viiÇ pode ser convertido numa mistura de diastereómeros ±xviÇ de diversas formas ±Baran, P. et al., J. AM. Chem. Soc., 130+34Ç:11546 +2008ÇÇ. Por exemplo, o composto ±xvÇ é tratado com uma base tal como LDA num solvente tal como tolueno, a temperatura baixa tal como -78 °C sob uma atmosfera inerte como N2. A mistura resultante é adicionada a uma solução de composto ±viiÇ tratada com cloreto de lítio e uma base tal como LDA num solvente como tolueno sob uma atmosfera inerte tal como N2. À mistura resultante dos enolatos de compostos ±xvÇ e +viiÇ é adicionado bis+2-etilexanoiloxiÇ cobre a uma temperatura baixa tal como -78 °C sob uma atmosfera inerte como N2 e aquecida até à temperatura ambiente para fornecer o composto +xviÇ.
Etapa 4: A conversão do composto +xviÇ numa mistura do composto ±xÇ e composto ±xiÇ pode ser alcançada através do seu tratamento com peróxido de hidrogénio e hidróxido de lítio a uma temperatura apropriada utilizando uma mistura de solventes tal como THF/água. A mistura resultante de diastereómeros pode então ser utilizada nas etapas sintéticas subsequentes. Se necessário, a mistura resultante de diastereómeros pode ser separada neste ponto através da cromatografia em gel de sílica ou por HPLC preparativa.
Etapa 5: Alternativamente, a mistura ±xB xiÇ pode se submetida às condições de epimerização, por exemplo, mediante o tratamento com LDA e cloreto de dietilalumínio, seguido pela extinção com metanol ou ácido acético para enriquecer o diastereómero desejado. A mistura resultante diastereomericamente enriquecida do composto pode então ser utilizada nas etapas sintéticas subsequentes ou a mistura de diastereoisõmeros pode ser separada, se desejável, empregando condições adequadas como HPLC preparativa, HPLC quiral preparativa ou a cromatografia em gel de sílica, e o diastereoisómero desejado puro resultante ±xiÇ utilizado nas etapas subsequentes.
Etapa 6: Alternativamente, a mistura de ácidos diastereoméricos ±xÇ e ±xiÇ pode ser protegida mediante o tratamento com, por exemplo, brometo de benzilo na presença de uma base tal como K2C03 num solvente tal como DMF. A mistura resultante de diastereoisõmeros pode ser separada, se desejável, empregando condições apropriadas como a HPLC preparativa, HPLC quiral preparativa ou cromatograf ia em gel de sílica, e o composto de diastereoisómero desejado puro resultante ±xiiÇ utilizado nas etapas subsequentes.
Etapa 7: A última etapa do Esquema 3 é uma etapa de desproteção e pode ser alcançada de várias maneiras conhecidas de um perito na especialidade. Por exemplo, para Rw = benzilo no composto ±xiiÇ, o tratamento sob condições de hidrogenação utilizando um catalisador tal como paládio sobre carbono num solvente tal como MeOH sob uma atmosfera de hidrogénio pode fornecer o composto ±xiÇ que pode subsequentemente ser utilizado, por exemplo, na etapa 1 do Esquema 4.
Esauema 4
Etapa 1: Os compostos de estrutura ±ivÇ podem ser acoplados ao composto de diastereómero puro ±xiÇ ou uma mistura diastereomérica de compostos ±xêxiÇ na presença de um reagente de acoplamento tal como TBTU e uma base tal como TEA, num solvente tal como DMF para fornecer o composto ±xiiiç ou um composto diastereomericamente puro ou como uma mistura de diastereoisómeros, como apropriado, dependendo da pureza enantiomérica eêou diastereomérica dos parceiros de acoplamento. Esta mistura pode ser utilizada como tal na etapa subsequente, ou se desejável, pode ser purificada usando uma técnica de separação apropriada, tal como a cromatografia preparativa quiral para fornecer os compostos diastereomericamente puros.
Etapa 2: 0 tratamento do composto ±xiiiÇ com um ácido tal como TFA a uma temperatura apropriada tal como 0 °C, num solvente tal como DCM, fornece o composto ±xivÇ como um composto diastereomericamente puro ou como uma mistura de de diastereoisómeros. Esta mistura pode ser utilizada como tal na etapa subsequente, ou se desejável, pode ser purificada utilizando uma técnica de separação apropriada, como a cromatografia preparativa quiral para fornecer os compostos diastereomericamente puros.
Etapa 3: A conversão do composto ±xivÇ no composto ±xv, R4 = HÇ pode ser alcançada através de acoplamento do composto ±xivÇ com uma fonte de amina apropriada tal como cloreto de amónio ou amónia, uma carbodiimida tal como EDC, HOBT e uma base tal como TEA num solvente tal como DMF. Se necessário, a mistura diastereomérica pode ser separada utilizando uma técnica de separação apropriada., tal como a cromatografia preparativa quiral.
Os compostos adicionais da presente invenção podem ser preparados a partir do composto xv ±R4 = HÇ, de acordo com o Esquema 5.
Esquema 5
Etapa 1: Um ácido carboxílico apropriadamente funcionalizado +PG-L-C02HÇ ou sal de carboxilato ±xviÇ pode ser tratado com um agente de alquilação, tal como clorossulfato de clorometilo, na presença de uma base, como Na2C03, e um sal de amónio quaternário, tal como sulfato de tetrabutil amónio numa mistura bifásica de água e de um solvente orgânico apropriado, como DCM a temperatura baixa, tal como 0 °C, para proporcionar o composto xvii.
Etapa 2: Tratamento do composto xv com o composto xvii num solvente apropriado, tal como DCM, na presença de uma base, tal como K2C03, proporciona o composto xviii.
Etapa 3: A desproteção do composto xviii pode ser alcançada de várias maneiras conhecidas de um perito na especialidade. Por exemplo, onde PG = tBu ou Boc, o composto xviii pode ser tratado com um reagente tal como ácido trifluoroacético num solvente tal como DCM, para proporcionar o composto xix ±-CH2OC±OÇL = RXÇ.
Alternativamente, os compostos xix podem ser preparados como descrito no Esquema 6.
Esquema 6
Etapa 1: Vários métodos conhecidos na técnica podem ser empregues para preparar os compostos xix. Por exemplo, como mostrado no Esquema 6, uma benzodiazepina apropriadamente substituída ±xvÇ pode ser tratada com um tioéter de haloalquilo tal como ±clorometilDZmetilÇsulfano na presença de uma base, tal como carbonato de césio num solvente apropriado tal como N,N-dimetilformamida +DMFÇ para proporcionar compostos de fórmula xx.
Etapa 2: Tratamento do composto xx com um reagente tal como cloreto de sulfurilo na presença de um sal de amina, tal como o cloreto de trietilamónio num solvente aprõtico tal como diclorometano +DCMÇ pode ser utilizado para efetuar a transformação para compostos de formula xxi ±Hal = cloroÇ.
Etapa 3: Os compostos de fórmula xviii podem então ser preparados a partir do composto xxi, mediante o tratamento com um ácido carboxílico ou sal de carboxilato apropriadamente substituído na presença de uma base ±quando se inicia a partir de um ácido carboxílicoÇ, tal como carbonato de potássio num solvente aprótico tal como acetonitrilo ou DMF.
Etapa 4: A desproteção do composto iv pode ser executada de várias maneiras conhecidas de um perito na especialidade. Por exemplo, onde PG = tBu ou Boc, o composto xviii pode ser tratado com um reagente tal como ácido trifluoroacético num solvente como DCM, para proporcionar o composto xix ±-CH2OC±OÇL = RXÇ. A preparação de profãrmacos à base de sulfenamida do composto de origem xv é apresentada no Esquema 7. F.smietna 7
Etapa 1: Uma mistura de um sal de prata, tal como nitrato de prata, e um dissulfeto, tal como 2,2'- dissulfanodiilbis±etano-2,1-diilÇdicarbamato de terc- butilo num solvente alcoólico, tal como MeOH, pode ser tratada com o composto i na presença de uma base, tal como trietilamina, para proporcionar o composto xxii. Etapa 2: A desproteção do composto xxii pode ser alcançada de várias maneiras conhecidas de um perito na especialidade. Por exemplo, onde PG = tBu ou Boc, o composto xxii pode ser tratado com um reagente tal como ácido trifluoroacético num solvente tal como DCM, para proporcionar o composto xxiii +-S-M = RyÇ.
EXEMPLOS A invenção é ainda definida nos Exemplos que se seguem. Deve ficar entendido que os Exemplos são fornecidos apenas a título de ilustração. A partir da discussão acima e dos Exemplos, um perito na especialidade pode averiguar as características essenciais da invenção, e sem se afastar do seu espírito e âmbito, pode fazer várias alterações e modificações para adaptar a invenção às várias utilizações e condições. Como um resultado, a invenção não é limitada pelos exemplos ilustrativos apresentados mais abaixo, mas de preferência é definida pelas reivindicações anexas a ela.
ABREVIATURAS ACN acetonitrilo
AcOH ácido acético AIMe3 trimetil alumínio
Aq aquoso BN benzilo
Boc terc-butoxicarbonilo
Boc20 dicarbonato de di-terc-butilo CBz benz iloxicarbonilo DCC 1, 3-dicicloexilcarbodiimida DCM diclorometano
DlEA di-isopropiletilamina DMAP dimetilaminopiridina DME 1,2-dimetoxietano DMF dimetilformamida DMSO dimetilsulfóxido
Pd±dppfÇ2C12 [1,1'-
Jbis+dif enilfosf inoÇf erroceno] dicloropaládio+II Ç EDC cloridrato de 1+3-dimetilaminopropilÇ-3- etilcarbodiimida
Et2Al Cloreto de dietil-alumínio
Et3N trietilamina
Et20 éter dietílico
EtOH etanol
EtOAc acetato de etilo equiv. equivalS ncia±sÇ g grama±sÇ h hora+sÇ HOBt hidroxibenzotriazol HPLC cromatografia líquida de alta pressão iPrOH álcool isopropílico
KotBu terc-butóxido LCMS Cromatografia Líquida-Espectroscopia de Massa LDA di-isopropilamida de lítio
LiHMDS bis+trimetilsililÇamida de lítio
Me metilo
Mel lodeto de metilo
MeOH metanol min minuto+sÇ ml mililitro+sÇ mmol milimolar MTBE éter metil t-butílico
NaHMDS bis±trimetilsililÇamida de sódio n-BuLi n-butil lítio NH40 acetato de amónio NMP N-metilpirrolidinona
Pd±OAcÇ2 acetato de paládio RT ou Rt tempo de retenção sat saturado t-Bu butilo terciário t-BuLi t-butil lítio tBuOH álcool butílico terciário tBuOMe éter terc-butil metílico TBTU tetrafluoroborato de 0-±lH-benzotriazol-l-ilÇ- Ν,Ν,Ν' ,N' -tetrametilurónio TEA trietilamina TFA ácido trifluoroacético
Tf20 anidrido de trifluorometilsulfónico THF tetrahidrofurano
Intermediário S-l: ácido ±2R,3SÇ-3-±terc-butoxicarbonilÇ- 6,6,6 -trifluoro-2-±3,3,3 -trifluoropropilÇhexanoico
Intermediário S-1A: trifluorometanossulfonato de 3,3,3-trifluoropropilo
A uma solução agitada gelada ±-25 °CÇ de 2,6-lutidina ±18,38 ml, 158 mmolÇ em DCM ±120 mlÇ foi adicionado Tf20 ±24,88 ml, 147 mmolÇ durante 3 min, e a mistura foi agitada durante 5 min. À mistura de reação foi adicionado 3,3,3-trifluoropropan-1-ol ±12 g, 105 mmolÇ durante um intervalo de 3 min. Após 2 h, a mistura de reação foi aquecida até à temperatura ambiente e agitada durante 1 h. A mistura de reação foi concentrada para metade do seu volume, depois purificada carregando-se diretamente numa coluna de gel de sílica ±330 g ISCOÇ e o produto foi eluído com DCM para proporcionar o Intermediário S-1A +13,74 g, 53 ÚÇ como um óleo incolor. XH RMN ±400 MHz, CDC13Ç δ ppm 4,71 ±2 H, t, J - 6,15 HzÇ, 2,49-2,86 ±2 H, mÇ.
Intermediário S-1B: ±4SÇ-4-Benzil-3-±5,5,5-trifluoropentanoilÇ-1,3-oxazolidin-2-ona
A uma solução em agitação de ácido 5,5,5-trifluoropentanoico ±14,76 g, 95 mmolÇ e DMF ±0,146 mlÇ em DCM ±50 mlÇ foi lentamente adicionado cloreto de oxalilo ±8,27 ml, 95 mmolÇ. Após 2 h, a mistura foi concentrada até à secura. Um frasco separado foi alterado com ±SÇ-4-benziloxazolidin-2-ona ±16,75 g, 95 mmolÇ em THF ±100 mlÇ e depois arrefecido até -78 °C. À solução foi lentamente adicionado n-BuLi ±2,5 M, 37,8 ml, 95 mmolÇ durante 10 min, agitada durante 10 min, e depois uma solução do cloreto de ácido acima em THF ±50 mlÇ foi lentamente adicionada durante 5 min. A mistura foi agitada durante 30 min, e depois aquecida até à temperatura ambiente. A reação foi extinta com NH4C1 sat aq. Em seguida, LiCl aq a 10 Ú foi depois adicionado na mistura, e a mistura foi extraída com Et20. A camada orgânica foi lavada com NaHC03 sat aq e depois com salmoura, seca ±MgS04Ç, filtrada e concentrada até à secura. 0 resíduo foi purificado por cromatografia de Si02 ±ISCO, coluna de 330 g, eluição com um gradiente de 100 Ú hexano para 100 Ú EtOAcÇ para proporcionar o produto Intermediário S-1B; ±25,25 g, 85 ÚÇ: XH RMN ±400 MHz, CDC13Ç δ ppm 7,32 - 7,39 ±2 H, mÇ, 7,30 ±1 H, d, J = 7,05 HzÇ, 7,18 - 7,25 ±2 H, mÇ, 4,64 - 4,74 ±1 H, mÇ, 4,17 - 4,27 ±2 H, mÇ, 3,31 ±1 H, dd, J = 13,35, 3,27 HzÇ, 3,00 - 3,11 ±2 H, mÇ, 2,79 ±1 Η, dd, J = 13,35, 9,57 HzÇ, 2,16 - 2,28 ±2 H, mÇ, 1,93 - 2,04 ±2 H, mÇ.
Intermediário S-1C: ±3RÇ-3-±±±4SÇ-4-benzil-2-oxo-l,3- oxazolidin-3-ilÇ carbonilÇ-6,6,6-trifluoroexanoato de terc-butilo
A uma solução agitada gelada ±-78 °CÇ de Intermediário S-1B +3,03 g, 9,61 mmolÇ em THF +20 mlÇ foi adicionado NaHMDS ±1,0 M em THFÇ ±10,6 ml, 10,60 mmolÇ sob uma atmosfera de azoto. Após 2 horas, 2-bromoacetato de terc-butilo ±5,62 g, 28,8 mmolÇ foi adicionado puro através de seringa em -78 °C e a agitação manteve-se na mesma temperatura. Após 6 horas, a mistura de reação foi aquecida até à temperatura ambiente. A mistura de reação foi dividida entre NH4C1 saturado e EtOAc. A fase orgânica foi separada e a fase aquosa foi extraída com EtOAc +3xÇ. Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura, secos ±Na2s04Ç, filtrados e concentrados sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado por cromatografia flash +Teledyne ISCO CombiFlash Rf, 5 % a 100 % solvente AêB hexanosêEtOAc, REDISEP® Si02 120 gÇ. A concentração das frações apropriadas forneceu o Intermediário S-1C ±2,79 g, 67,6 %Ç como um óleo viscoso incolor: 1H RMN ±400 MHz, CDCljÇ δ ppm 7,34 ±2 H, d, J = 7,30 HzÇ, 7,24 - 7,32 ±3 H, mÇ, 4,62 - 4,75 ±1 H, m, J = 10,17, 6,89, 3,43, 3,43 HzÇ, 4,15 - 4,25 +3 H, mÇ, 3,35 ±1 H, dd, J = 13,60, 3,27 HzÇ, 2,84 +1 H, dd, J = 16,62, 9,57 HzÇ, 2,75 +1 H, dd, J = 13,35, 10,07 HzÇ, 2,47 ±1 H, dd, J = 16,62, 4,78 HzÇ, 2,11 - 2,23 +2 H, mÇ, 1,90 - 2,02 +1 H, mÇ, 1,72 - 1,84 +1 H, mÇ, 1,44 ±9 H, sÇ.
Intermediário S-1D: ácido +2RÇ-2-+2-terc-butoxi-2-oxoetilÇ- 5.5.5- trifluoropentanoico
A uma solução agitada gelada ±0°CÇ de Intermediário S-1C ±2,17 g, 5,05 mmolÇ em THF ±50 mlÇ e água ±15 mlÇ foi adicionada uma solução de LiOH ±0,242 g, 10,11 mmolÇ e H202 ±2,065 ml, 20,21 mmolÇ em H20 ±2 mlÇ. Após 10 min, a mistura de reação foi removida do banho de gelo, agitada durante 1 h, e depois arrefecida até 0 °C. NaHC03 saturado aquoso ±2 5 mlÇ e Na2s03 saturado aquoso ±25 mlÇ foram adicionados à mistura de reação, e a mistura foi agitada durante 10 min, e depois parcialmente concentrada. A mistura resultante foi extraída com DCM ±2xÇ, arrefecida com gelo e tornou-se ácida com HC1 conc. até pH 3. A mistura foi saturada com NaCl sólido, extraída com EtOAc ±3xÇ e depois seca sobre MgS04, filtrada e concentrada até um óleo incolor para proporc ionar o Intermediário S-1D, 1,2514 g, 92 %Ç: XH RMN ±400 MHz, CDCI3Ç δ ppm 2,83 - 2,95 ±1 H, mÇ, 2,62 - 2,74 ±1 H, mÇ, 2,45 ±1 H, dd, J = 16,62, 5,79 HzÇ, 2,15 - 2,27 ±2 H, mÇ, 1,88 - 2,00 ±1 H, mÇ, 1,75 - 1,88 ±1 H, mÇ, 1,45 ±9 H, sÇ.
Intermediário S-l: ácido ±2R,3SÇ-3-±terc-butoxicarbonilÇ- 6.6.6- trifluoro-2-±3,3,3-trifluoropropilÇhexanoico, e Intermediário S-1E: ácido ±2R,3RÇ-3-±terc-butoxicarbonilÇ- 6.6.6- trifluoro-2-±3,3,3-trifluoropropilÇ hexanoico
A uma solução agitada gelada ±-78 °CÇ de Intermediário S-1D ±5 g, 18,50 mmoiç em THF +60 mlÇ foi lentamente adicionado LDA ±22,2 ml, 44,4 mmol, 2,OMÇ durante 7 min. Após agitação durante 2 h, o Intermediário S-1A ±6,38 g, 25,9 mmolÇ foi adicionado à mistura de reação durante 3 min. Após 60 min, a mistura de reação foi aquecida até -25 °C ±geloêMeOHêgelo secoÇ e agitada durante 60 min adicionais em cujo tempo NH4C1 aq sat foi adicionado. A fase aquosa separada foi acidificada com HC1 IN até pH 3, e depois extraída com Et20. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura ±2xÇ, secas sobre MgS04, filtradas e concentradas para fornecer uma mistura de 1:4 ±11:I1EÇ ±como determinado por 1H RMNÇ de Intermediário S-l e Intermediário S-1E ±6,00 g, 89 ÚÇ como um sólido amarelo claro. ΧΗ RMN ±500 MHz, CDC13Ç δ ppm 2,81 ±1 H, ddd, J = 10,17, 6,32, 3,85 HzÇ, 2,63 - 2,76 ±1 H, mÇ, 2,02 - 2,33 ±4 H, mÇ, 1,86 - 1,99 ±2 H, mÇ, 1,68 - 1,85 ±2 H, mÇ, 1,47 ±9 H, sÇ. A uma solução agitada gelada ±-78 °CÇ de uma mistura de Intermediário S-l e Intermediário S-1E ±5,97 g, 16,30 mmolÇ em THF ±91 mlÇ foi adicionado LDA ±19 ml, 38,0 mmol, 2,0 M em THFêhexanoêetil benzenoÇ por goteio através de seringa durante 10 min ±a temperatura interna nunca excedeu -65 °C, sonda J-KEM® em solução de reaçãoÇ. A mistura foi agitada durante 15 min, e depois aquecida até à temperatura ambiente ±24 °C banho de águaÇ, agitada durante 15 min, e depois arrefecida para -78 °C durante 15 min. À mistura de reação foi adicionado Et2AlCl ±41 ml, 41,0 mmol, 1 M em hexanoÇ através de seringa ±a temperatura interna nunca excedeu -55 °CÇ, e a mistura foi agitada durante 10 min, e depois aquecida até à temperatura ambiente ±banho de 24 °CÇ durante 15 min e depois voltou para -78 °C durante 15 min. Entretanto, um frasco de fundo redondo de 1000 ml foi carregado com MeOH +145 mlÇ e pré-arrefecido para -78 °C. Com agitação vigorosa a mistura de reação foi transferida através de cânula durante 5 min ao MeOH. 0 frasco foi removido do banho, gelo foi adicionado seguido pela adição lenta de HC1 1 N ±14 7 ml, 14 7 mmolÇ. Evolução de gás foi observada quando o HC1 foi adicionado. A mistura de reação foi deixada aquecer até à temperatura ambiente durante a qual a evolução de gás diminuída. A mistura de reação foi diluída com EtOAc ±750 mlÇ, saturada com NaCl, e a fase orgânica foi separada, lavada com uma solução de fluoreto de potássio ±8,52 g, 147 mmolÇ e HC1 1 N ±41 ml, 41,0 mmolÇ em água ±291 mlÇ, salmoura ±100 mlÇ, e depois seca ±Na2S04Ç, filtrada e concentrada sob vácuo. A LH RMN mostrou que o produto foi uma mistura a 9:1 de Intermediário S-l e Intermediário S-1E. A mistura enriquecida de Intermediário S-l e o Intermediário S-1E ±6,12 g, >99 Ú de rendimentoÇ foi obtido como um solido âmbar escuro: XH RMN ±400 MHz, CDC13Ç δ ppm 2,64 - 2,76 ±2 H, mÇ, 2,04 - 2,35 ±4 H, mÇ, 1,88 - 2,00 ±2 H, mÇ, 1,71 - 1,83 ±2 H, mÇ, 1,48 ±9 H, sÇ.
Procedimento Alternativo para produzir o Intermediário S-l :
Intermediário S-1F: 4-terc-butil-2,3-bis±3,3,3-trifluoro- propilÇsucinato de ±2R,3SÇ-l-benzilo
A uma solução agitada de uma mistura enriquecida a 9:1 de Intermediário S-l e Intermediário S-1E ±5,98 g, 16,33 mmolÇ em DMF ±63 mlÇ foram adicionados carbonato de potássio +4,06 g, 29,4 mmolÇ e brometo de benzilo ±2,9 ml, 24,38 mmolÇ, a mistura foi depois agitada durante a noite à temperatura ambiente. A mistura de reação foi diluída com EtOAc ±1000 mlÇ, lavada com LiCl a 10 Ú ±3 x 200 mlÇ, salmoura ±200 mlÇ, seca ±Na2S04Ç, filtrada, concentrada, e depois seca sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de Si02 utilizando um gradiente de tolueno:hexano. O Intermediário S-1F diastereomericamente purificado ±4,81g, 65 ÚÇ foi obtido como um sólido incolor: 1H RMN ±400 MHz, clorofõrmio-dÇ δ 7,32 - 7,43 ±m, 5HÇ, 5,19 ±d, J = 12,10 Hz, 1HÇ, 5,15 ±d, J = 12,10 Hz, 1HÇ, 2,71 ±dt, J = 3,52, 9,20 Hz, 1HÇ, 2,61 ±dt, J = 3,63, 9,63 Hz, 1HÇ, 1,96 - 2,21 ±m, 4HÇ, 1,69 - 1,96 ±m, 3HÇ, 1,56 - 1,67 ±m, 1HÇ, 1,45 ±s, 9HÇ.
Intermediário S-l: ácido ±2R,3SÇ-3-±terc-butoxicarbonilÇ- 6,6,6 -trifluoro-2-±3,3,3 -trifluoropropilÇhexanoico
A uma solução de Intermediário S-1F ±4,81 g, 10,54 mmolÇ em MeOH ±100 mlÇ foi adicionado paládio em carbono a 10 Ú ±húmido, tipo Degussa, 568,0 mg, 0,534 mmolÇ num frasco de pressão de H2. 0 recipiente foi purgado com N2 ±4xÇ, depois purgado com H2 ±2xÇ, e finalmente, pressurizado até 50 psi e agitado durante a noite. O recipiente de reação foi despressurizado e purgado com azoto. A mistura foi filtrada através de CELITE®, lavada com MeOH e depois concentrada e seca sob vácuo. O Intermediário S-l ±3,81 g, 99 Ú de rendimentoÇ foi obtido como um sólido incolor: ‘Ή RMN ±400 MHz, clorofórmio-dÇ δ 2,62 - 2,79 ±m, 2HÇ, 2,02-2,40 ±m, 4HÇ, 1,87 - 2,00 ±m, 2HÇ, 1,67 - 1,84 ±m, 2HÇ, 1,48 ±s, 9HÇ.
Procedimento alternativo para produzir o Intermediário S-l :
Intermediário S-l: ácido ±2R,3SÇ-3-±terc-butoxicarbonilÇ- 6,6,6 -trifluoro-2-±3,3,3 -trifluoropropilÇhexanoico
0 Intermediário S-l como uma mistura com o Intermediário S-1E foi preparado num procedimento semelhante como acima do Intermediário S-1D para proporcionar uma mistura a 1:2,2 de Intermediário S-l e Intermediário S-1E ±8,60 g, 23,48 mmolÇ, que foi enriquecida utilizando LDA ±solução a 2,0 M em THF, etil benzeno e heptano, 28,2 ml, 56,4 mmolÇ e cloreto de dietil alumínio ±solução a 1,0 M em hexano, 59 ml, 59,0 mmolÇ em THF ±91 mlÇ. Após a preparação como descrito acima, o resíduo resultante foi observado como sendo uma mistura a 13,2:1 ±por XH RMNÇ de Intermediário S-l e Intermediário S-1E, a qual foi tratada como se segue: 0 material bruto foi dissolvido em MTBE ±43 mlÇ. Hexanos ±26 mlÇ foram lentamente carregados à mistura de reação enquanto se mantinha uma temperatura abaixo de 30 °C. A mistura de reação foi agitada durante 10 min. Logo depois, terc-butilamina ±2,7 ml, 1,1 eqÇ foi carregada lentamente durante um período de 20 minutos enquanto se mantém uma temperatura abaixo de 30 °C. Esta adição foi observada como sendo exotérmica. A mistura de reação foi agitada durante 2 h abaixo de 30 °C e depois filtrada. 0 material sólido foi lavado com 5:3 MTBE: hexano ±80 mlÇ e o filtrado foi concentrado e reservado. 0 sólido filtrado foi dissolvido em diclorometano ±300 mlÇ, lavado com HC1 1 N ±100 mlÇ, e a camada orgânica foi lavada com salmoura ±100 ml x 2Ç, e depois concentrada sob pressão reduzida abaixo de 45 °C para proporcionar o Intermediário S-l ±5,46 g, 64 ÚÇ.
Um segundo procedimento alternativo para a preparação do Intermediário S-l:
Intermediário S-1G: 5,5,5-trifluoropentanoato de fcerc- butilo
A uma solução agitada de ácido 5,5,5-trif luoropentanoico ±5 g, 32,0 mmolÇ em THF ±30 mlÇ e hexano +30 mlÇ a 0 °C, foi adicionado 2,2,2- tricloroacetimidato de terc-butilo ±11,46 ml, 64,1 mmolÇ. A mistura foi agitada durante 15 min a 0 °C. Eterato de trifluoreto de boro ±0,406 ml, 3,20 mmolÇ foi adicionado e a mistura de reação foi deixada aquecer até à temperatura ambiente durante a noite. À mistura de reação transparente foi adicionado NaHCQ3 sólido ±5 gÇ e agitada durante 30 min. A mistura foi filtrada através de MgS04 e lavada com hexanos ±200 mlÇ. A solução foi deixada repousar durante 45 min e o material sólido resultante foi removido por filtração no mesmo filtro de MgS04 outra vez, lavado com hexanos ±100 mlÇ e concentrado sob pressão reduzida sem calor. 0 volume foi reduzido para cerca de 30 ml, filtrado através de um funil calcinado transparente, lavado com hexano ±5 mlÇ, e depois concentrado sob pressão reduzida sem calor. 0 óleo puro resultante foi filtrado através de um disco de filtro de membrana de nylon de 0,45 pm para fornecer o Intermediário S-1G ±6,6 g, 31,4 mmol 98 Ú de rendimentoÇ como um óleo incolor: 1H RMN ±400 MHz, CDC13Ç δ ppm 1,38 ±s, 9 HÇ 1,74 - 1,83 ±m, 2 HÇ 2,00 - 2,13 ±m, 2 HÇ 2,24 ±t, J = 7,28 Hz, 2 HÇ.
Intermediário S-1H: ±4SÇ-4-±Propan-2-ilÇ-3-±5,5,5- trifluoropentanoilÇ-1,3-oxazolidin-2-ona
A uma solução agitada de ácido 5,5,5- trifluoropentanoico +5,04 g, 32,3 mmolÇ em DCM +50 mlÇ e DMF +3 gotasÇ foi adicionado cloreto de oxalilo ±3,4 ml, 38,8 mmolÇ por goteio durante 5 min. A solução foi agitada até que toda a formação de bolhas cessou. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um óleo amarelo claro. A um frasco separado carregado com uma solução de ±4SÇ-4-±propan-2-ilÇ-l,3-oxazolidin-2-ona +4,18 g, 32,4 mmolÇ em THF +100 mlÇ a -78 °C foi adicionado n-BuLi +2,5 M em hexanoÇ +13,0 ml, 32,5 mmolÇ por goteio através de seringa durante 5 min. Após agitação durante 10 min, o cloreto de ácido acima, dissolvido em THF +20 mlÇ, foi adicionado através de cânula durante 15 min. A mistura de reação foi aquecida até 0 °C e foi deixada aquecer até à temperatura ambiente à medida que o banho aquecia e agitada durante a noite. Ã mistura de reação foi adicionado NH4C1 saturado, e a mistura foi extraída com EtOAc ±2xÇ, Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura, secos ±Na2s04Ç, filtrados e concentrados sob pressão reduzida. 0 material bruto foi purificado por cromatografia flash ±Teledyne ISCO CombiFlash Rf, 5 % a 60 % solvente A/B = hexanos/EtOAc, REDISEP® Si02 12 0 gÇ. A concentração das frações apropriadas forneceu o Intermediário S-1H ±7,39 g, 86 %Ç como um óleo incolor: lH RMN ±4 00 MHz, CDC13Ç δ ppm 4,44 ±1 H, dt, J = 8,31, 3,53 HzÇ, 4,3 0 ±1 H, t, J = 8,69 HzÇ, 4,23 ±1 H, dd, J = 9,06, 3,02 HzÇ, 2,98 - 3,08 ±2 H, mÇ, 2,32 - 2,44 ±1 H, m, J = 13,91, 7,02, 7,02, 4,03 HzÇ,
2,13 - 2,25 ±2 H, mÇ, 1,88 - 2,00 ±2 H, mÇ, 0,93 ±3 H, d, J = 7,05 HzÇ, 0,88 ±3 H, d, J = 6,80 HzÇ.
Intermediário S-1I: 6,6,6-trifluoro-3-±±SÇ-4-isopropil-2- oxooxazolidina-3-carbonilÇ-2-±3,3,3- trifluoropropilÇhexanoato de ±2S,3RÇ-terc-butilo e
Intermediário 5-1J: ±6,6,6-trifluoro-3-±±SÇ-4-isopropil-2- oxooxazolidina-3-carbonilÇ-2-±3,3,3 -trifluoropropilÇ hexanoato de ±2R,3RÇ-terc-Butil
A uma solução agitada gelada ±-78 °CÇ de di-isopropilamina ±5,3 ml, 37,2 mmolÇ em THF ±59 mlÇ sob uma atmosfera de azoto foi adicionado n-BuLi ±2,5 M em hexanoÇ ±14,7 ml, 36,8 mmolÇ. A mistura foi depois aquecida até 0 °C para fornecer uma solução de LDA a 0,5 M. Um recipiente separado foi carregado com Intermediário S-1H ±2,45 g, 9,17 mmolÇ. 0 material foi azeotropado duas vezes com benzeno ±a entrada de ar por RotoVap foi ajustada com uma entrada de azoto para excluir completamente a humidadeÇ, e depois tolueno ±15,3 mlÇ foi adicionado. Esta solução foi adicionada a um frasco contendo cloreto de lítio seco ±1,96 g, 46,2 mmolÇ. À mistura resultante, arrefecida até -78 °C, foi adicionada a solução de LDA ±21,0 ml, 10,5 mmolÇ e a mistura foi agitada a -78 °C durante 10 min, depois aquecida para 0 °C durante 10 min., e depois arrefecida até -78 °C. A um recipiente de reação separado contendo o Intermediário S-1G ±3,41 g, 16,07 mmolÇ, também azeotropado duas vezes com benzeno, foi adicionado tolueno ±15,3 mlÇ, arrefecido até -78 °C e LDA ±37,0 ml, 18,5 mmolÇ foi
adicionado. A solução resultante foi agitada a -78 °C durante 25 min. Neste momento o enolato derivado do éster foi transferido através de cânula para dentro da solução do enolato de oxazolidinona e agitado a -78 °C durante 5 min adicionais, em cujo tempo o septo foi removido e bis±2-etilexanoiloxiÇcobre sólido em pó ±9,02 g, 25,8 mmolÇ foi rapidamente adicionado ao recipiente de reação e o septo foi substituído. 0 recipiente foi imediatamente removido do banho gelado e imerso num banho de água quente ±40 °CÇ com rotação rápida e com uma alteração de cor concomitante do azul-turquesa inicial para castanho. A mistura de reação foi agitada durante 20 min, foi depois vertida em NH40H 5 Ú aquoso ±360 mlÇ e extraída com EtOAc ±2xÇ. Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura, secos ±Na2s04Ç, filtrados e concentrados sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia flash ±Teledyne ISCO CombiFlash Rf, 0 tJ a 60 Ú solvente AêB = hexanosêEtOAc, REDISEP® Si02 120 gÇ. A concentração das frações apropriadas forneceu uma mistura de Intermediário S-1I e Intermediário S-1J ±2,87 g, 66 ÚÇ como um óleo viscoso amarelo claro. A 1H RMN mostrou que o produto foi uma mistura 1,6:1 de diastereómeros S-1I:S-1J como determinado pela integração dos multipletos em 2,74 e 2,84 ppm: RMN ±400 MHz, CDCI3Ç δ ppm 4,43 - 4,54 ±2 H, mÇ, 4,23 - 4,35 ±5 H, mÇ, 4,01 ±1 H, ddd, J = 9,54, 6,27, 3,51 HzÇ, 2,84 ±1 H, ddd, J = 9,41, 7,28, 3,64 HzÇ, 2,74 ±1 H, ddd, J = 10,29, 6,27, 4,02 HzÇ, 2,37 - 2,48 ±2 H, m, J = 10,38, 6,98, 6,98, 3,51, 3,51 HzÇ, 2,20 - 2,37 ±3 H, mÇ, 1,92 - 2,20 ±8 H, mÇ, I, 64 - 1,91 ±5 H, mÇ, 1,47 ±18 H, sÇ, 0,88 - 0,98 ±12 H, mÇ.
Intermediário S-l: ácido ±2R,3SÇ-3-±terc-butoxicarbonilÇ-6, 6, 6 -trifluoro-2-±3,3,3 -trifluoropropilÇhexanoico e Intermediário S-IE: ácido ±2R,3RÇ-3-±terc-butoxicarbonilÇ-6 , 6 , 6-trifluoro-2-±3,3,3-trifluoropropilÇhexanoico
A uma solução agitada gelada ±0 °CÇ de Intermediário S-1I e Intermediário S-1J ±4,54 g, 9,51 mmolÇ em THF ±140 mlÇ e água ±42 mlÇ foram sequencialmente adicionados peróxido de hidrogénio ±30 Ú em águaÇ ±10,3 g, 91 mmolÇ e LiOH ±685,3 mg, 28,6 mmolÇ. A mistura foi agitada durante 1 h. Neste momento o recipiente de reação foi removido do banho gelado e depois agitado durante 1,5 h. À mistura de reação foram adicionados NaHC03 saturado ±45 mlÇ e Na2s03 saturado ±15 mlÇ, e depois a mistura foi parcialmente concentrada sob pressão reduzida. A solução bruta resultante foi extraída com D CM ±3xÇ. A fase aquosa foi acidificada até pH ~1 a 2 com HC1 a 1 N, extraída com DCM ±3xÇ e depois EtOAc ±lxÇ. Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura, secos ±Na2s04Ç, filtrados e concentrados sob pressão reduzida para fornecer uma mistura de Intermediários S-l e S-IE ±3,00 g, 86 ÚÇ como um óleo incolor: RMN ±400 MHz, CDC13Ç δ ppm 2,76 - 2,84 ±1 H, m,
diastereómero 2Ç, 2,64 - 2,76 ±3 H, mÇ, 2,04 - 2,35 ±8 H, mÇ, 1,88 - 2,00 ±4 H, mÇ, 1,71 - 1,83 ±4 H, mÇ, 1,48 ±9 H, s, diastereómero 1Ç, 1,46 ±9 H, s, diastereómero 2Ç; a 1H RMN apresentou uma mistura 1,7:1 de S-1E:S-1F através da integração dos picos para os grupos de t-butilo. Intermediário S-l: ácido ±2R,3SÇ-3-±terc-butoxicarbonilÇ- 6.6.6- trifluoro-2-±3,3,3-trifluoropropilÇhexanoico e Intermediário S-1F: ácido ±2R,3RÇ-3-±terc-butoxicarbonilÇ- 6.6.6- trifluoro-2-±3,3,3-trifluoropropilÇhexanoico
A uma solução agitada gelada ±-78 °CÇ de diisopropilamina ±1,7 ml, 11,93 mmolÇ em THF ±19 mlÇ sob uma atmosfera de azoto foi adicionado n-BuLi ±2,5 M em hexanosÇ ±4,8 ml, 12,00 mmolÇ. A mistura foi agitada durante 5 min e depois aquecida até 0 °C. Num recipiente separado, a uma solução agitada gelada ±-78 °CÇ da mistura de Intermediários S-l e S-1E ±1,99 g, 5,43 mmolÇ em THF ±18 mlÇ foi adicionada a solução de LDA preparada acima através de cânula lentamente durante 25 min. A mistura foi agitada durante 15 min, depois aquecida até à temperatura ambiente ±colocada num banho de água a 24 °CÇ durante 15 min, e depois novamente arrefecida até -78 °C durante 15 min. À mistura de reação foi adicionado Et2AlCl ±1 M em hexanoÇ ±11,4 ml, 11,40 mmolÇ através de seringa. A mistura foi agitada durante 10 min, aquecida até à temperatura ambiente durante 15 min e depois arrefecida de volta para -78 °C durante 15 min. Metanol ±25 mlÇ foi rapidamente adicionado, girado vigorosamente enquanto se aquece até à temperatura ambiente, e depois concentrada para ~lê4 do volume original. A mistura foi dissolvida em EtOAc e lavada com HC1 1 N ±50 mlÇ e gelo ±75 gÇ. A fase aquosa foi separada e extraída com EtOAc ±2xÇ. Os orgânicos combinados foram lavados com uma mistura de KF ±2,85 g em 75 ml de águaÇ e HC1 1 N ±13 mlÇ [solução resultante pH 3 a 4] , depois com salmoura, secos ±Na2s04Ç, filtrados e concentrados sob pressão reduzida para fornecer uma mistura diastereomérica enriquecida 9:1 ±S-1:S-1EÇ ±como determinado pela 1H RMNÇ do Intermediário S-l e Intermediário S-1E ±2,13 g, >99 ÚÇ como um óleo viscoso amarelo claro: 1H RMN ±400 MHz, CDC1?1Ç δ ppm 2,64 - 2,76 ±2 H, mÇ, 2,04 - 2,35 ±4 H, mÇ, 1,88 -2,00 ±2 H, mÇ, 1,71 - 1,83 ±2 H, mÇ, 1,48 +9 H, sÇ. Intermediário S-2: ácido +2R,3SÇ-3-±terc-butoxicarbonilÇ- 6,6,6 -1 r i fluoro-2 -± 3 -fluoroprop i1Çhexanoi co
Intermediário S-2: ácido ±2R,3SÇ-3-±terc-butoxicarbonilÇ- 7,7,7-trifluoro-2-±3,3,3 -trifluoropropilÇheptanoico e
Intermediário S-2A: +2R,3RÇ-3-±terc-ButoxicarbonilÇ-7,7,7- trifluoro-2-±3,3,3-trifluoropropilÇheptanoico
A uma solução agitada gelada +-78 °CÇ de Intermediário S-1D ±1,72 g, 6,36 mmolÇ em THF ±30 mlÇ foi lentamente adicionado LDA ±7,32 ml, 14,6 mmolÇ durante 7 min. Após agitação durante 1 h, 4,4,4- t ri fluorobut i11 ri fluorometanos sulfonato ±2,11 g, 8,11 mmolÇ foi adicionado à mistura de reação durante 2 min. Após 15 min, a mistura de reação foi aquecida até -25 °C ±geloêMeOHêgelo secoÇ durante 1 h, e depois arrefecida até -78 °C. Após 80 min, a reação foi extinta com uma solução aquosa saturada de NH4C1 ±10 mlÇ. A mistura de reação foi ainda diluída com salmoura e a solução foi ajustada para o pH 3 com HC1 IN. A camada aquosa foi extraída com éter. Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura, secos por sulfato de magnésio anidro, e concentrados sob pressão reduzida para fornecer uma mistura de Intermediários S-2 e S-2A +2,29 g, 95 ÚÇ como um óleo incolor. 1H RMN +400 MHz, clorofórmio-dÇ δ 2,83 - 2,75 +m, 1HÇ, 2,64 ±ddd, J = 9,9, 6,7, 3,6 Hz, 1HÇ, 2,32 - 2,03 +m, 5HÇ, 1,98 - 1,70 ±m, 3HÇ, 1,6 9 - 1,52 ±m, 3HÇ, 1,50 - 1,42 +m, 9HÇ. A XH RMN apresentou uma mistura 1:4,5 ±S-2:S-2AÇ de diastereómeros através da integração dos picos para os grupos de t-Bu. Intermediário S-2: ácido +2R,3SÇ-3-+terc-butoxicarbonilÇ- 7.7.7- trifluoro-2-±3,3,3 -1ri fluoropropilÇheptanoi co e Intermediário S-2A: ácido +2R,3RÇ-3-+terc-butoxicarbonilÇ- 7.7.7- trifluoro-2-+3,3,3 -trifluoropropilÇheptanoico
Uma mistura de Intermediário S-2 e Intermediário S-2A +2,29 g, 6,02 mmolÇ foi dissolvida em THF +38 mlÇ para fornecer uma solução incolor a qual foi arrefecida para -78 °C. Depois, LDA +7,23 ml, 14,5 mmolÇ +2,0 M em heptanoêTHFêetilbenzenoÇ foi lentamente adicionado à mistura de reação durante 3 min. Após agitação durante 15 min, a mistura de reação foi colocada num banho de água à temperatura ambiente. Após 15 min a mistura de reação foi colocada de volta num banho de -78 °C e depois cloreto de dietilalumínio +14,5 ml, 14,5 mmolÇ +1M em hexanoÇ foi adicionado lentamente durante 5 min. A mistura de reação foi agitada a -78 °C. Após 15 min, a mistura de reação foi colocada num banho de água à temperatura ambiente durante 10 min, e depois arrefecida de volta para -78 °C. Após 15 min, a reação foi extinta com MeOH +30,0 ml, 741 mmolÇ, removida do banho de -78 °C e concentrada. Â mistura de reação foi adicionado gelo e HC1 ±6 0,8 ml, 6 0,8 mmolÇ e a mistura resultante foi extraída com EtOAc ±2 x 2 00 miç. A camada orgânica foi lavada com fluoreto de potássio ±3,50 g, 60,3 mmolÇ em 55 ml de H20 e 17,0 ml de HC1 IN. Os orgânicos foram secos por sulfato de magnésio anidro e concentrados sob pressão reduzida para fornecer uma mistura enriquecida de Intermediário S-2 e Intermediário S-2A ±2,25 g, 98 Ú de rendimentoÇ como um óleo amarelo claro. ΧΗ RMN ±400 MHz, clorofórmio-dÇ δ 2,83 - 2,75 ±m, 1HÇ, 2,64 ±ddd, J = 9,9, 6,7, 3,6 Hz, 1HÇ, 2,32 - 2,03 ±m, 5HÇ, 1,98 - 1,70 ±m, 3HÇ, 1,69 - 1,52 ±m, 3HÇ, 1,50 - 1,42 ±m, 9HÇ. A XH RMN apresentou uma relação de 9:1 a favor do diastereómero Intermediário S-2 desejado.
Intermediário S-2B: 4-terc-butil-2,3-bis±4,4,4-trifluo-robutilÇsuccinato de +2R,3SC-1
-benzilo A uma mistura agitada 9:1 de Intermediário S-2 e Intermediário S-2A ±2,24 g, 5,89 mmolÇ e carbonato de potássio ±1,60 g, 11,58 mmolÇ em DMF ±30 mlÇ foi adicionado brometo de benzilo ±1,20 ml, 10,1 mmolÇ. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 19 h. A mistura de reação foi diluída com acetato de etilo ±400 mlÇ e lavada com solução de LiCl a 10 Ú ±3 x 100 mlÇ, salmoura ±50 mlÇ, e depois seca por sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada até à secura sob \^ácuo. 0 resíduo foi purificado por cromatografia flash ±Teledyne ISCO CombiFlash 0 Ú a 100 Ú solvente AêB = hexanoêEtOAc, REDISEP® Si02 220 g, deteção a 254 nm e monitorização a 220 nmÇ. A concentração das frações apropriadas forneceu o
Intermediário S-2B ±1,59 g, 57,5 ÚÇ. HPLC: RT = 3,863 min ±coluna CHROMOLITHH® SpeedROD 4,6 x 50 mm, metanol aquoso a 10 a 90 ϋ durante 4 minutos contendo TFA a 0,1 Ú, 4 mlêmin, monitorização a 220 nmÇ, 1H RMN ±400 MHz, clorofórmio-dÇ δ 7,40 - 7,34 ±m, 5HÇ, 5,17 ±d, J = 1,8 Hz, 2HÇ, 2,73 - 2,64 ±m, 1HÇ, 2,55 ±td, J = 10,0, 3,9 Hz, 1HÇ, 2,16 - 1,82 ±m, 5HÇ, 1,79 - 1,57 ±m, 3HÇ, 1,53 - 1,49 ±m, 1HÇ, 1,45 ±S, 9HÇ, 1,37 - 1,24 ±m, 1HÇ.
Intermediário S-2: ácido ±2R,3SÇ-3-±terc-butoxicarbonilÇ- 6,6,6 -trifluoro-2-±4,4,4 -trifluorobutilÇhexanoico
A uma solução agitada de Intermediário S-2B ±1,59 g, 3,37 mmoLÇ em MeOH ±10 mlÇ e EtOAc ±10 mlÇ sob azoto foi adicionado PdêC a 10 Ú ±510 mgÇ. A atmosfera foi substituída com hidrogénio e a mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante 2,5 h. O catalisador de paládio foi extraído por filtração através de uma película de policarbonato a 4 y.M e enxaguado com
MeOH. 0 filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para fornecer o intermediário S-2 ±1,28 g, 99 ÚÇ. 1H RMN ±400 MHz, clorofÓrmio-dÇ δ 2,76 - 2,67 ±m, 1HÇ, 2,65 - 2,56 ±m, 1HÇ, 2,33 - 2,21 ±m, 1HÇ, 2,17 - 2,08 ±m, 3HÇ, 1,93 ±dtd, J = 14,5, 9,9, 5,2 Hz, 1HÇ, 1,84 - 1,74 ±m, 2HÇ, 1,70 - 1,52 ±m, 3HÇ, 1,48 ±s, 9HÇ.
Intermediário A-l: ±2-Amino-3-metilfenilDZ3- fluorofenilÇmetanona
Intermediário A-IA: 2-Amino-N-metoxi-N,3-dimetilbenzamida
Num frasco de fundo redondo de 1 1 foi adicionado ácido 2-amino-3-metilbenzoico +11,2 g, 74,1 mmolÇ e cloridrato de N,O-dimetilidroxilamina ±14,45 g, 148 mmolÇ em DCM +500 mlÇ para fornecer uma suspensão castanho claro. A mistura de reação foi tratada com Et3N +35 mlÇ, HOBT + 11,35 g, 74,1 mmolÇ e EDC ±14,20 g, 74,1 mmolÇ e depois agitada à temperatura ambiente durante 24 horas. A mistura foi depois lavada com LiCl a 10 Ú, e depois acidificada com HC1 1 N. A camada orgânica foi lavada de forma sucessiva com LiCl a 10 Ú e NaHC03 aq. A camada orgânica foi descolorida com carvão vegetal, filtrada e o filtrado foi seco por MgS04. A mistura foi filtrada e concentrada para fornecer 13,22 g ±92 Ú de rendimentoÇ de Intermediário ΑΙΑ. MS±ESÇ: mêz = 195,1 [M + H+] ; HPLC: RT = 1,118 min. ±H20êMe0H com TFA, CHROMOLITHH® ODS S5 4,6 x 50 mm, gradiente = 4 min, comprimento de onda = 22 0 nmÇ; LH RMN ±500 MHz, clorofórmio-dÇ δ 7,22 ±dd, J = 7,8, 0,8 Hz, 1HÇ, 7,12 - 7,06 ±m, 1HÇ, 6,63 ±t, J = 7,5 Hz, 1HÇ, 4,63 ±s. 1., 2HÇ, 3,61 ±S, 3HÇ, 3,34 ±s, 3HÇ, 2,17 ±s, 3HÇ.
Intermediário A-l: ±2-Amino-3-metilfenilDZ3- fluorofenilÇmetanona
Num frasco de fundo redondo de 500 ml, uma solução de l-fluoro-3-iodobenzeno +13,61 ml, 116 mmolÇ em THF +120 mlÇ foi arrefecida num banho de -78 °C. Uma solução de n-BuLi, + 2,5 M em hexano, 46,3 ml, 116 mmolÇ foi adicionada por goteio durante 10 minutos. A solução foi agitada a -78 °C durante 30 minutos e depois tratada com uma solução de Intermediário A-1A ±6,43 g, 33,1 mmolÇ em THF +30 mlÇ. Após 1,5 hora, a mistura de reação foi adicionada a uma mistura de gelo e HC1 a 1 N +149 ml, 149 mmolÇ e o frasco de reação foi enxaguado com THF +5 mlÇ e combinado com a mistura aquosa. A mistura resultante foi diluída com LiCl aq a 10 Ú e o pH foi ajustado até 4 com NaOH 1 N. A mistura foi depois extraída com Et20, lavada com salmoura, seca por MgS04, filtrada e concentrada. 0 resíduo resultante foi purificado por cromatografia em gel de sílica +220 g ISCOÇ, eluição com um gradiente de 10 Ú EtOAcêhexano a 30 Ú EtOAcêhexano para proporcionar o Intermediário A-l +7,11 g, 94 Ú de rendimentoÇ como um óleo. MS+ESÇ: mêz = 230,1 [M + H+] ; HPLC: RT = 2,820 min Pureza = 99 Ú. +H2OêMeOH com TFA, CHROMOLITH® ODS S5 4,6 x 50 mm, gradiente = 4 min, comprimento de onda = 220 nmÇ.
Os compostos listados abaixo do Quadro 1 ±Intermediários A-2 a A-9Ç foram preparados de acordo com o procedimento sintético geral descrito para o Intermediário A-l, utilizando a anilina e o reagente organometálico apropriados.
Intermediário A-10: ±2-Amino-3-isopropilfenilDZ3- clorofenilÇmetanona
2-Isopropilanilina ±3 ml, 21,19 mmolÇ foi adicionada por goteio a uma solução de tricloroborano ±1 M em diclorometanoÇ +23,31 ml, 23,31 mmolÇ e dicloroetano ±50 mlÇ a 0 °C e a mistura foi agitada durante 10 min. Logo depois, 3-clorobenzonitrilo +5,83 g, 42,4 mmolÇ, seguido por tricloreto de alumínio +3,11 g, 23,31 mmolÇ foram adicionados e a mistura foi agitada a 0 °C durante 25 minutos. 0 banho de gelo foi removido e a mistura foi aquecida até 75 °C durante a noite. A mistura foi depois arrefecida até à temperatura ambiente. Logo depois, HC1 6 N ±60 ml, 10 eqÇ foi adicionado e a mistura foi aquecida até 75 °C. Após 4 h, HC1 12 N ±10 mlÇ foi adicionado e o aquecimento continuou durante a noite a 75 °C. A mistura foi arrefecida até à temperatura ambiente, transferida para um frasco Erlenmeyer, diluída com acetato de etilo, arrefecida até 0 °C, e cuidadosamente elevada até pH 10 com
NaOH aquoso a 50 Ú. A mistura resultante foi extraída com acetato de etilo +4XÇ. Os extratos de acetato de etilo foram combinados, lavados com salmoura, secos por sulfato de sódio anidro, filtrados e concentrados para fornecer um óleo âmbar transparente. O óleo foi colocado em suspensão num mínimo de heptano e purificado num sistema de cromatografia associado ISCO ±cartucho de sílica de 220 g, eluição com 0 a 20 Ú acetato de etiloêheptano, 150 mlêminÇ para fornecer o Intermediário A-10 ±2,85 g, 10,41 mmol, 49,1 Ú de rendimentoÇ. HPLC RT = 3,876 min 10ê90 a 90êl0 +MeOHêH2OêTFA a 0,1 Ú, Waters Sunfire C18 3,5 pm, 2,1x3Omm, 1 mlêmin, gradiente de 4 min, comprimento de onda = 254 nmÇ; MS+ESÇ: mêz = 274 [M + H+] ; XH RMN ±400 MHz, clorofórmio-dÇ δ 7,63 ±t, J = 1,7 Hz, 1HÇ, 7,55 - 7,48 ±m, 2HÇ, 7,44 - 7,29 ±m, 3HÇ, 6,65 ±t, J = 7,7 Hz, 1HÇ, 6,43 ±S. 1., 2HÇ, 3,11 - 2,87 ±m, 1HÇ, 1,34 ±d, J = 6,8 Hz, 6HÇ.
Os compostos listados abaixo no Quadro 2 +Intermediários A-lll a A- 14Ç foram preparados de acordo com o procedimento sintético geral descrito para o Intermediário A-10, utilizando a anilina e aril nitrilo appropriados, obtidos por métodos conhecidos de um perito na especialidade.
Intermediário A-15: ±2-Amino-3-ciclopropoxifenilDZm- tolilÇmetanona
Intermediário A-15A: ácido 3-hidroxi-2-nitrobenzoico
A um frasco de 250 ml foram adicionados ácido 3-cloro-2-nitrobenzoico ±10 g, 49,6 mmolÇ e uma solução de hidróxido de potássio ±40 g, 727 mmolÇ em água ±70 mlÇ. A pasta fluida espessa foi aquecida em refluxo durante 12 horas. A solução foi arrefecida em gelo e cuidadosamente levada até pH 3 com HC1 concentrado. A mistura aquosa foi extraída com EtOAc ±3xÇ. As camadas orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura, secas com sulfato de sódio e concentradas in vacuo. A mistura de produto bruto foi dissolvida em diclorometano e o precipitado amarelo resultante foi filtrado para proporcionar o Intermediário A-15A ±6 g, 32,8 mmol, 66,0 Ú de rendimentoÇ. HPLC: RT = 0,85 min ±H2OêMeOH com TFA, Sunfire Cl8 3,5 pm, 2,1 x 3 0 mm, gradiente = 4 min, comprimento de onda = 220 nmÇ; MS+ESÇ: mêz = 206 [M + Na]+; XH RMN +400 MHz, clorofórmio-dÇ δ 7,56 - 7,35 ±m, 1HÇ, 7,23 ±dd, J = 7,9, 1,5 Hz, 1HÇ. Intermediário A-15B: 3-hidroxi-2-nitrobenzoato de metilo
A um frasco de 100 ml contendo MeOH ±60 mlÇ a 0 °C foi lentamente adicionado cloreto de tionilo ±9,96 ml, 137 mmolÇ. A solução foi agitada a 0 °C durante 30 minutos, e depois o Intermediário A-15A ±10 g, 54,6 mmolÇ foi adicionado. A solução de reação foi aquecida em refluxo durante 6 h. A mistura de reação foi concentrada até à secura para fornecer um resíduo amarelo brilhante. A mistura de produto bruto foi purificada através da cromatografia em gel de sílica ±0 Ú a 100 Ú de EtOACêheptano durante 15 minutos, coluna de 80 gÇ fornecendo o produto desejado ±10,2 g, 95 Ú de rendimentoÇ. HPLC: RT = 1,75 min ±H20êMe0H com TFA, Sunfire C18 3,5 pm, 2,1 x 30 mm, gradiente = 4 min, comprimento de onda = 220 nmÇ; MS±ESÇ: mêz = 220 [M + Na] + ; XH RMN ±400 MHz, clorofórmio-dÇ δ 7,60 ±dd, J = 8,5, 7,4 Hz, 1HÇ, 7,33 - 7,22 ±m, 5HÇ, 7,10 ±dd, J = 7,5, 1,3 Hz, 1HÇ, 3,96 ±s, 3HÇ. Intermediário A-15C: 2-nitro-3-±viniloxiÇbenzoato de metilo
Uma mistura de acetato de cobre +IIÇ ±11,98 g, 65,9 mmolÇ e diclorometano ±80 mlÇ foi agitada à temperatura ambiente durante 10 minutos, antes da adição do composto de 2,4,6-trivinil-l,3,5,2,4,6-trioxatriborinano:piridina ±1:1Ç ±10,63 g, 44,2 mmol, 0,67 eqÇ, Intermediário A-15B ±13 g, 65,9 mmolÇ, piridina ±26,7 ml, 330 mmolÇ, e peneiras moleculares ±1 gÇ. A mistura azul escura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 5 dias, com a mistura de reação aberta para o ar. A mistura de reação foi filtrada através de um tampão de CELITE® e lavada com diclorometano. 0 filtrado foi lavado com acetato de amónio aquoso 3 M ±2xÇ, água, salmoura e depois seco e concentrado in vacuo. A mistura de produto bruto foi purificada por meio da cromatografia em gel de sílica ±0 Ú a 20 Ú de EtOACêDCM durante 15 minutos, coluna de 120 gÇ para
fornecer o Intermediário A-15C ±7,42 g, 33,2 mmol, 50,4 U de rendimentoÇ. HPLC: RT = 2,487 min ±H20êMe0H com TFA, Sunf ire C18 3,5 pm, 2,1 x 30 mm, gradiente = 4 min, comprimento de onda = 220 nmÇ; MS±ESÇ: mêz = 246 [M + Na]+ ; XH RMN ±400 MHz, clorof órmio-dÇ δ 7,77 ±dd, J = 7,8, 1,2
Hz, 1HÇ, 7,55 ±t, J = 8,1 Hz, 1HÇ, 7,38 ±dd, J = 8,4, 1,3 Hz, 1HÇ, 6,61 ±dd, J = 13,6, 5,9 Hz, 1HÇ, 4,95 ±dd, J = 13,6, 2,4 Hz, 1HÇ, 4,69 ±dd, J = 5,9, 2,4 Hz, 1HÇ, 3,93 ±s, 3HÇ, 1,56 ±s, 1HÇ, 0,03 ±S, 1HÇ.
Intermediário A-15D: 3-ciclopropoxi-2-nitrobenzoato de metilo
Uma solução de ácido 2,2,2-tricloroacético ±16,30 g, 100 mmolÇ em diclorometano ±100 mlÇ foi lentamente adicionada através de um funil de adição a uma solução de dietilzinco ±hexanos a 1 M, 100 ml, 100 mmolÇ a -10 °C sob uma atmosfera de azoto. A mistura de reação foi agitada durante 10 min, e depois diiodometano ±8 ml, 100 mmolÇ foi adicionado por goteio através de seringa, e a mistura de reação foi agitada durante 10 min. Uma solução de Intermediário A-15C ±7,42 g, 33,2 mmolÇ em diclorometano ±20 mlÇ foi adicionada lentamente através de um funil de adição. A solução foi deixada aquecer até à temperatura ambiente durante a noite. A mistura de reação foi depois arrefecida para 0 °C e extinta com HC1 1 Μ. A mistura de reação foi transferida para um funil de separação, e a camada aquosa foi extraída com diclorometano ±3xÇ. Os extratos combinados foram lavados com bicarbonato de sódio saturado, água e salmoura, secos por sulfato de sódio anidro, filtrados e concentrados. A mistura de produto bruto foi purificada por cromatografia em gel de sílica ±0 % de EtOACêheptano durante 15 minutos, coluna de 220 gÇ para fornecer o Intermediário A-15D ±4,7 g, 19,81 mmol, 60,0 % de rendimentoÇ. HPLC: RT = 2,66 min ±H2OêMeOH com TFA, Sunf ire C18 3,5 ym, 2,1 x 30 mm, gradiente = 4 min, comprimento de onda = 220 nmÇ; MS±ESÇ: mêz = 260 [M + Na]+; XH RMN ±400 MHz, clorofórmio-dÇ δ 7,68 - 7,57 ±m, 2HÇ, 7,57 - 7,41 ±m, 1HÇ, 4,03 - 3,82 ±m, 4HÇ, 0,94 - 0,78 ±m, 4HÇ. Intermediário A-15E: ácido 3-ciclopropoxi-2-nitrobenzoico
Uma solução de Intermediário A-15D ±4,7 g, 19,81 mmolÇ em THF ±30 mlÇ e MeOH ±30 mlÇ foi tratada com uma solução de hidróxido de lítio ±2,88 g, 120 mmolÇ em água ±15 ml, 833 mmolÇ. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas. Os solventes orgânicos foram removidos sob pressão reduzida. A pasta fluida aquosa resultante foi diluída com água, acidificada com HC1 a 1 M e extraída com acetato de etilo +3XÇ. Os extratos foram combinados e lavados com salmoura, secos sobre sulfato de sódio anidro, filtrados e concentrados para fornecer o Intermediário A-15E ±4,35 g, 19,8 mmol, 98 Ú de rendimentoÇ. HPLC: RT = 2,186 min ±H2OêMeOH com TFA, Sunf ire C18 3,5 pm, 2,1 x 30 mm, gradiente = 4 min, comprimento de onda = 220 nmÇ; MS+ESÇ: mêz = 246 [M + Na]+; XH RMN ±400 MHz, clorofórmio-dÇ δ 7,76 ±dd, J = 7,7, 1,8 Hz, 1HÇ, 7,68 - 7,46 ±m, 2HÇ, 4,02 ±tt, J = 6,0, 2,9 Hz, 1HÇ, 1,00 - 0,52 ±m, 4HÇ. Intermediário A-15F: ácido 2-amino-3-ciclopropoxibenzoico
Uma mistura de Intermediário A-15E ±420 mg, 1,882 mmolÇ, zinco ±1230 mg, 18,82 mmolÇ, e cloreto de amónio ±1007 mg, 18,82 mmolÇ em etanol ±10 mlÇ e água ±5 mlÇ foi agitada à temperatura ambiente durante 5 minutos. A mistura de reação foi concentrada in vacuo e depois a mistura de reação foi diluída com água. A mistura tornou-se levemente ácida e depois extraída com DCM ±2XÇ. Os orgânicos combinados foram secos por Na2S04, e concentrados para fornecer o Intermediário A-15F como um óleo de cor castanha amarelada. HPLC: RT = 1,96 min ±H20êMe0H com TFA, Sunf ire C18 3,5 pm, 2,1 x 30 mm, gradiente = 4 min, comprimento de onda = 220 nmÇ; MS±ESÇ: mêz = 194,12 [Μ + Η] +; ΧΗ RMN ±400 MHz, metanol-d4Ç δ 7,67 - 7,43 ±m, 1HÇ, 7,23 ±dd, J = 7,9, 1,1 Hz, 1HÇ, 6,62 ± s, 1HÇ, 3,82 ± s, 1HÇ, 0,82 - 0,63 ±m, 4HÇ.
Intermediário A- 15G: 8-Ciclopropoxi-2-metil-4H- benzo[d][1,3]oxazin-4-ona
Uma solução de Intermediário A-15F +1 g, 5,18 mmolÇ e anidrido acético ±4,88 ml, 51,8 mmolÇ foi aquecida até 140 °C durante 1 hora. A mistura de reação foi arrefecida e concentrada in vácuo, e o resíduo foi diluído com tolueno e concentrado para proporcionar o Intermediário A-15G. HPLC: RT = 1,22 min ±H20êMe0H com TFA, Sunfire C18 3,5 μΐϊΐ, 2,1 x 30 mm, gradiente = 4 min, comprimento de onda = 220 nmÇ; MS + ESÇ: rnêz = 218,12 [M + H]+; RMN ±400 MHz, clorofórmio-dÇ δ 7,82 ±dd, J = 7,9, 1,3 Hz, 1HÇ, 7,71 ±dd, J = 8,1, 1,3 Hz, 1HÇ, 7,55 - 7,37 ±m, 1HÇ, 4,02 - 3,75 ±m, 1HÇ, 2,52 ±s, 3HÇ, 1,08 - 0,74 ±m, 4HÇ.
Intermediário A-15H: N-±2-Ciclopropoxi-6-±3-metilbenzoilÇfenilÇ acetamida
Uma solução de Intermediário A-15G ±1 g, 4,60 mmolÇ em éter ±5 mlÇ e tolueno ±10 mlÇ foi arrefecida até -10 °C ±metanolêgeloÇ. Uma solução de brometo de m-tolilmagnésio ±5,06 ml, 5,06 mmolÇ foi adicionada por goteio durante um período de 10 minutos. Após a adição ter sido concluída, o frasco foi removido do banho de gelo e agitado à temperatura ambiente durante 1,5 h. A solução foi depois arrefecida até -10 °C e 40 ml de HC1 1 N foram adicionados. A mistura foi diluída com acetato de etilo ±50 mlÇ. A fase orgânica foi lavada com NaOH a 0,5 M, depois com água, e depois concentrada in vácuo. 0 resíduo foi utilizado tal e qual na próxima reação. HPLC: RT = 2,808 min ±H20êMe0H com TFA, Sunfire C18 3,5 ym, 2,1 x 30 mm, gradiente = 4 min, comprimento de onda = 22 0 nrrtÇ; MS+ESÇ: mêz = 310,05 [M + H] + .
Intermediário A-15: ±2-Amino-3-ciclopropoxifenilDZm-tolilÇmetanona
Uma solução de Intermediário A-15H ±495 mg, 1,6 mmolÇ em etanol ±10 mlÇ e HC1 a 6 N ±5 mlÇ foi aquecida a 90 °C durante 4,5 horas. A mistura de reação foi concentrada, e depois diluída com 10 ml de água e extraída com acetato de etilo ±3 X 50 mlÇ. As fases orgânicas reunidas foram lavadas com hidróxido de sódio a 1 N, secas por Na2s04 e concentradas in vacuo. A mistura de produto bruto foi purificada por meio da cromatografia em gel de sílica ±0 Ú a 100 Ú de EtOACêheptano durante 10 minutos, coluna de 12 gÇ para isolar o Intermediário A-15 ±250 mg, 0,935 mmol, 58,4 Ú de rendimentoÇ como um óleo amarelo. HPLC: RT = 3,58 min ±H20êMe0H com TFA, Sunfire C18 3,5 ym, 2,1 x 30 mm, gradiente = 4 min, comprimento de onda = 22 0 nmÇ; MS±ESÇ: mêz = 268,02 [Μ + H]+.
Os compostos listados abaixo no Quadro 3 ilntermediãrios A-16 a A- 17Ç foram preparados de acordo com o procedimento sintético geral descrito para o Intermediário A-15, utilizando a anilina e o reagente organometálico apropriados, obtidos por métodos conhecidos de um perito na especialidade.
1H20êCH3CN com NH4OAc, PUROSPHER® STAR RP-18 3,5 μπι, 4 x 55 mm, gradiente = 2 min, comprimento de onda = 220 nm.
Intermediário A-18: ±2-Amino-3-clorofenilDZm-tolilÇmetanona
Intermediário A-1SA: ±3-Cloro-2-nitrofenilDZm- tolilÇmetanona
Uma solução de ácido 3-cloro-2-nitrobenzoico ±2,5 g, 12,40 mmolÇ em tetrahidrof urano ±50 mlÇ foi tratada com cloreto de oxalilo ±1,194 ml, 13,64 mmolÇ seguido por DMF ±0,096 ml, 1,240 mmolÇ. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 2 h. Após o arrefecimento até 0 °C, uma solução de brometo de m-tolilmagnésio a 1 M ±24,81 ml, 24,81 mmolÇ foi adicionada. Após 1 h outra parte de brometo de m-tolilmagnésio ±24,81 ml, 24,81 mmolÇ foi adicionada. Após 1 hora, a mistura de reação foi dividida entre acetato de etilo ±200 mlÇ e HC1 a 1 N ±150 mlÇ. A camada aquosa foi extraída com acetato de etilo ±2 x 100 mlÇ. As fases orgânicas combinadas foram secas sobre Na2s04, filtradas e concentradas. 0 material bruto foi purificado por cromatografia flash ±Teledyne ISCO CombiFlash Rf, 0 Ú a 100 Ú solvente AêB = acetato de etiloêheptano, REDISEP® Si02 120 gÇ para fornecer o Intermediário A-ISA ±0,700 g, 21 ÚÇ. RMN ±400 MHz, DMSO-d6Ç δ 8,04 ±dd, J = 8,1, 1,1
Hz, 1HÇ, 7,82 ±t, J = 7,9 Hz, 1HÇ, 7,71 ±dd, J = 7,7, 1,1
Hz, 1HÇ, 7,66-7,54 ±m, 3HÇ, 7,52 - 7,46 ±m, 1HÇ, 2,40 ±s, 3HÇ.
Intermediário A-18:
Uma mistura de Intermediário A-18A ±0,710 g, 2,58 mmolÇ em THF ±7,5 mlÇ, etanol ±14,75 mlÇ e água ±3,7 mlÇ foi tratada com cloreto de amónio aquoso saturado ±4 mlÇ e pó de ferro ±0,647 g, 11,59 mmolÇ. A mistura foi depois aquecida até 100 °C com agitação. Após 2 horas, a mistura de reação foi filtrada através de CELITE® e o filtrado foi dividido entre acetato de etilo ±100 mlÇ e NaHC03 sat aq ±75 mlÇ. A camada aquosa foi extraída com acetato de etilo ±1 x 50 mlÇ. As fases orgânicas combinadas foram secas com Na2S04, filtradas e concentradas. 0 material bruto foi purificado por cromatografia flash ±Teledyne ISCO CombiFlash Rf, 0 Ú a 100 Ú solvente AêB = acetato de etiloêheptano, REDISEP® Si02 24 gÇ para fornecer o Intermediário A-18 ±0,417 g, 66 ÚÇ. ΧΗ RMN ±400 MHz, DMSO-d6Ç δ 7,56 ±dd, J = 7,8, 1,4 Hz, 1HÇ, 7,47 - 7,35 ±m, 4HÇ, 7,31 ±dd, J = 8,0, 1,4 Hz, 1HÇ, 7,01 ±S, 2HÇ, 6,61 ±t, J = 7,9 Hz, 1HÇ, 2,39 ±s, 3HÇ.
Intermediário A-19: ±2-Amino-3-metoxifenilDZm- tolilÇmetanona
0 Intermediário Α-19 foi preparado a partir de ácido 3-metoxi-2-nitrobenzoico de acordo com o procedimento geral descrito para o Intermediário A-18. HPLC RT = 2,21 min ±H20êCH3CN com TFA, Sunfire C 18 3,5 pm, 2,1 x 30 mm, gradiente = 2 min, comprimento de onda = 220 nmÇ. [Μ + H+] = 246.
Intermediário A-20: ±2-Amino-3-clorofenilDZo-tolilÇmetanona
Intermediário A-20A: 7-Cloro-3-hidroxi-3-±o-tolilÇindolin-2 -ona
Num frasco de fundo redondo de 100 ml, uma solução de 7 -cloroindolina-2,3 -diona ±1 g, 5,51 mmolÇ em THF ±10 mlÇ foi arrefecida num banho de geloêágua. Uma solução de brometo de o-tolilmagnésio ±2 M, 5,51 ml, 11,01 mmolÇ foi adicionada, e a mistura de reação foi removida do banho de arrefecimento e aquecida até à temperatura ambiente. Após 1 hora, a mistura de reação foi extinta com NH4C1 saturado aquoso e extraída com EtOAc. A camada orgânica foi seca por MgS04, filtrada e concentrada para fornecer o Intermediário A-20A. MS+ESÇ: m/z = 272 [Μ-ΕΓ] ; HPLC: RT = 2,478 min ±H20êMe0H com TFA, CHROMOLITH® ODS S5 4,6 x 50 mm, gradiente = 4 min, comprimento de onda = 220 nmÇ. Intermediário A-20:
Num frasco de fundo redondo de 250 ml, uma solução de ferrocianeto de potássio ±5,28 g, 14,33 mmolÇ, NaHC03 ±1,25 g, 14,88 mmolÇ e NaOH ±0,22 g, 5,51 mmolÇ em água ±45 mlÇ foi aquecida até 100 °C. Após 30 min, uma solução de Intermediário A-2 0A ±1,5 g, 5,51 mmolÇ em THF ±2 mlÇ foi adicionada por goteio durante um período de 5 min e a mistura de reação foi aquecida a 100 °C durante 17 horas, e depois arrefecida até à temperatura ambiente. A mistura foi diluída com NaHC03 saturado aquoso e extraída com EtOAc. A camada orgânica foi tratada com carvão vegetal ativado, seca por MgS04, filtrada e concentrada para fornecer o Intermediário A-20 ±1,208 g, 89 ÚÇ. MS±ESÇ: m/z = 246 [M + H+] ; HPLC: RT = 3,208 min ±H2OêMeOH com TFA, CHROMOLITH® ODS S5 4,6 x 50 mm, gradiente = 4 min, comprimento de onda = 220 nmÇ. XH RMN ±500 MHz, DMSO-d6Ç δ 7,55 ±dd, J = 7,6, 1.5 Hz, 1HÇ, 7,48 - 7,37 ±m, 3HÇ, 7,33 ±d, J = 7,5 Hz, 1HÇ, 7,29 ±t, J = 7,5 Hz, 1HÇ, 7,22 ±dd, J = 7,6, 1,2 Hz, 1HÇ, 7.05 ±dd, J = 8,2, 1,5 Hz, 1HÇ, 6,54 ±t, J = 7,9 Hz, 1HÇ, 2,16 ±S, 3HÇ.
Os compostos listados abaixo no Quadro 4 ±Intermediário A-21 a A-22Ç foram preparados de acordo com o procedimento sintético geral descrito para o Intermediário A-20 utilizando a isatina e o reagente organometálico apropriados.
Intermediário A-23: +2-AminofenilDZm-tolilÇmetanona
A um frasco de fundo redondo de 250 ml carregado com magnésio +0,947 g, 39,0 mmolÇ e éter dietílico ±50,0 mlÇ foram adicionadas 2 gotas de dibromoetano. A mistura de reação foi aquecida até 6 0 °C durante 5 min e depois removida do calor. Logo depois, l-bromo-3- metilbenzeno ±5 g, 29,2 mmolÇ em éter dietílico ±50 mlÇ foi adicionado lentamente aos poucos até ao refluxo ser alcançado. 0 brometo remanescente foi adicionado por goteio para manter o refluxo. Após a adição, a mistura de reação foi submetida a refluxo durante 3 h. Logo depois, 2 -aminobenzoni trilo ±1,151 g, 9,74 mmolÇ em éter dietílico ±50,0 mlÇ foi adicionado lentamente durante 10 min. A mistura resultante foi submetida a refluxo durante a noite. 0 volume da mistura de reação foi reduzido para lê3 e 100 g de gelo triturado e 50 ml de HC1 a 6 N foram adicionados enquanto se agita. Após 3 h à temperatura ambiente, o pH foi ajustado para pH 8 com NaOH 5 N e a reação foi diluída com NaHC03 saturado ±50 mlÇ. As duas fases foram separadas e a camada aquosa foi extraída com acetato de etilo ±2 x 200 mlÇ. As camadas orgânicas combinadas foram secas com MgS04, filtradas e concentradas. 0 material bruto foi purificado por cromatografia flash ±Teledyne ISCO CombiFlash Rf, 0 Ú a 70 Ú solvente AêB = acetato de etiloêheptano, REDISEP® Si02 80 gÇ para fornecer o Intermediário A-23 ±1,84 g, 89 ÚÇ. 1H RMN ±400 MHz, DMS0-d6Ç δ 7,44 - 7,23 ±m, 6HÇ, 7,08 ±s. 1., 2HÇ, 6,86 ±d, J = 8,1 Hz, 1HÇ, 6,50 ±t, J - 7,5 Hz, 1HÇ, 2,38 ±s, 3HÇ.
Os compostos listados abaixo no Quadro 5 ±Intermediários A-24 a A-27Ç foram preparados de acordo com o procedimento sintético geral descrito para o Intermediário A-23, utilizando o haleto de arilo e o aril nitrilo apropriados.
1H20êCH3CN com TFA, Sunfire C18 3,5 μιη, 2,1 x 30 mm, gradiente = 2 min, comprimento de onda = 220 nm.
Intermediário A-28: ±2-Amino-3-metoxifenilDZ5- ±trifluorometilÇpiridin-2-ilÇ metanona
Intermediário A-28A: ±2-metoxi-6-±5- ±trifluorometilÇpicolinoilÇ fenilÇ carbamato de terc-butilo
A uma solução agitada gelada ±-23 °CÇ de 2-metoxifenilcarbamato de terc-butilo ±443,3 mg, 1,986 mmolÇ em éter +5 mlÇ sob N2 foi adicionado t-BuLi ±2,6 ml, 4,42 mmolÇ. A mistura de reação foi agitada durante 2 h, e depois arrefecida até -78 °C. À mistura de reação foi
adicionada uma solução de 5-±trifluorometilÇpicolinato de metilo ±501,3 mg, 2,44 mmolÇ em éter ±10 mlÇ por goteio através de cânula durante 5 min. Após 2 h, a mistura de reação foi aquecida até à temperatura ambiente, agitada durante uma hora adicional e depois a reação foi extinta pela adição de água com agitação vigorosa. A mistura de reação foi diluída com EtOAc, a fase orgânica foi separada, lavada com NaCl sat depois seca ±Na2s04Ç, filtrada e concentrada para produzir um sólido amarelo. 0 resíduo foi purificado por cromatografia flash ±Teledyne ISCO CombiFlash Rf, 0 % a 100 % solvente AêB = hexanoêEtOAc, REDISEP® Si02 40 gÇ para obter o Intermediário A-28A ±546,8 mg, 69,5 % de rendimentoÇÇ como um sólido amarelo: LH RMN ±400 ΜΗζ, clorofórmio-dÇ δ ppm 8,83 - 8,88 ±1 Η, mÇ, 8,24 ±1 Η, d, J = 8,4 HzÇ, 8,07 ±1 H, dd, J = 8,4, 1,8 HzÇ, 7,25 +1 H, d, J = 1,5 HzÇ, 7,18 - 7,24 ±1 H, mÇ, 7,09 ±1 H, dd, J = 8,0, 1,7 HzÇ, 6,95 ±1 H, sÇ, 3,93 ±3 H, sÇ, 1,25 ±9 H, SÇ.
Intermediário A-28:
A uma solução agitada de Intermediário A-28A +545 mg, 1.375 mmolÇ em D CM ±15 mlÇ foi adicionado TFA ±0,106 ml, 1.375 mmolÇ. Após 2 h, a mistura de reação foi diluída com tolueno ±30 mlÇ e depois concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia flash ±Teledyne ISCO CombiFlash Rf, 0 Ú a 20 Ú solvente AêB = DCMêMeOH, REDISEP® Si02 40 g, carregado como solução de DCMÇ para fornecer o produto Intermediário A-28 ±376,8 mg, 93 Ú de rendimentoÇÇ: ΧΗ RMN ±400 MHz, clorofórmio-dÇ δ ppm 8,94 - 8,99 ±1 H, mÇ, 8,11 ±1 H, dt, J = 8,1, 1,1 HzÇ, 7,86 ±1 H, d, J = 8,1 HzÇ, 7,17 ±1 H, dd, J = 8,4, 1,1 HzÇ, 6,89 ±1 H, dd, J = 7,9, 1,1 HzÇ, 6,55 ±1 H, m, J = 16,1 HzÇ, 3,92 ±3 H, sÇ. Intermediário A-29: ±2-Amino-3-metoxifenilDZ5-cloropiridin-2-ilÇ metanona
Intermediário A-28A: ±2-±5-cloropicolinoilÇ-6- metoxifenilÇcarbamato de terc-butilo
A uma solução agitada gelada ±-23 °CÇ de 2-metoxifenilcarbamato de terc-butilo ±548 mg, 2,454 mmolÇ em éter ±6 mlÇ sob N2 foi adicionado t-BuLi ±3,2 ml, 5,44 mmolÇ. Após agitação durante 2,5 h, a mistura de reação foi arrefecida até -78 °C. À mistura de reação foi adicionada uma solução de 5-cloropicolinato de etilo ±564,5 mg, 3,04 mmolÇ em éter ±12 mlÇ por goteio através de cânula durante 5 min. A mistura de reação foi agitada durante 60 min, e depois aquecida até a temperatura ambiente. Após 1,5 h, à mistura de reação foi adicionada H20 com agitação vigorosa. A mistura de reação foi diluída com EtOAc e a fase orgânica foi separada, lavada com NaCl sat depois seca ±Na2s04Ç, filtrada e concentrada para produzir o produto Intermediário A-29A ±511,5 mg, 57,4 % de rendimentoÇÇ como um sólido amarelo: 1H RMN ±400 MHz, clorofórmio-dÇ δ ppm 8,55 ±1 H, dd, J = 2,3, 0,6 HzÇ, 8,08 ±1 H, dd, J = 8,4, 0,7 HzÇ, 7,80 ±1 H, dd, J = 8,4, 2,4 HzÇ, 7,16 - 7,25 ±2 H, mÇ, 7,06 ±1 H, dd, J = 7,5, 2,2 HzÇ, 6,90 ±1 H, sÇ, 3,92 ±3 H, sÇ, 1,28 ±9 H, sÇ.
Intermediário A-29: A uma solução agitada de Intermediário A-29A ±511,5 mg, 1,410 mmolÇ em DCM ±14 mlÇ foi adicionado TFA ±14 ml, 182 mmolÇ. Após 60 min, a mistura de reação foi concentrada in vacuo, dissolvida novamente em DCM, lavada com NaHC03 sat., seca ±MgS04Ç, filtrada e concentrada para fornecer o Intermediário A-29 ±402,1 mg, 100 % de rendimentoÇÇ como um sólido âmbar: HPLC RT = 2,763 min. ±Waters Sunfire C18 2,5 pm 2, lx 30 mm, Me0HêH20êTFA, gradiente de 4 min, comprimento de onda = 254 nmÇ, ΧΗ RMN ±400 MHz, clorofórmio-dÇ δ ppm 8,66 ±1 H, dd, J = 2,4, 0,7 HzÇ, 7,85 ±1 H, dd, J = 8,4, 2,4 HzÇ, 7,75 ±1 H, dd, J = 8,4, 0,7
HzÇ, 7,25 ±1 H, dd, J = 8,4, 1,1 HzÇ, 6,89 ±1 H, dd, J = 7,7, 1,1 HzÇ, 6,55 ±1 H, dd, J = 8,3, 7,8 HzÇ, 4,74 ±2 H, s. l.Ç, 3,91 ±3 H, sÇ. MS+ESÇ: m/z = 263 [M + H+] . Intermediário B-l: ±SÇ-3-Amino-5-±3-fluorofenilÇ-9-metil- ΙΗ-benzo[e] [1,4] diazepin-2±3HÇ-ona
Intermediário B-1A: ±5-±3-fluorofenilÇ-9-metil-2-oxo-2,3-di-hidro be~""'ΓΊ -11 ^ = _-i t cr! ^nzilo
Num frasco de fundo redondo de 1 1, uma solução de ácido 2-±lH-benzo[d] [1,2,3]triazol-l-ilÇ-2- ±±fenoxicarbonilÇaminoÇacético ±J. Org. Chem., 55:2206-2214 +1990ÇÇ ±19,37 g, 62,0 mmolÇ em THF +135 mlÇ foi arrefecida num banho de geloêágua e tratada com cloreto de oxalilo ±5,43 ml, 62,0 mmolÇ e 4 gotas de DMF. A mistura de reação foi agitada durante 4 horas. Logo depois, uma solução de Intermediário A-l ±7,11 g, 31,0 mmolÇ em THF ±35 mlÇ foi adicionada e a solução resultante foi removida do banho de geloêágua e agitada à temperatura ambiente durante 1,5 horas. A mistura foi depois tratada com uma solução de amónia, ±7 M em MeOHÇ ±19,94 ml, 140 mmolÇ. Após 15 min, outra porção de amónia, ±7 M em MeOHÇ ±19,94 ml, 140 mmolÇ foi adicionada e a mistura resultante foi selada sob N2 e agitada durante a noite à temperatura ambiente. A mistura de reação foi depois concentrada para ~lê2 volume e depois diluída com AcOH ±63 mlÇ e agitada à temperatura ambiente durante 4 horas. A mistura de reação foi depois concentrada, e o resíduo foi diluído com 500 ml de água para fornecer um precipitado. Hexano e Et20 foram adicionados e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora para formar um sólido de cor laranja. 0 Et20 foi removido sob uma corrente de azoto e a camada aquosa foi decantada. 0 resíduo foi triturado com 40 ml de iPrOH e agitado à temperatura ambiente para fornecer um precipitado branco. 0 sólido foi filtrado e lavado com iPrOH, depois seco num filtro sob uma corrente de azoto para fornecer o Intermediário B-1A racémico ±5,4 g, 41,7 Ú de rendimentoÇ. 0 Intermediário B-1A racémico ±5,9 g, 14,3 mmolÇ foi determinado utilizando as condições Chiral SFC descritas abaixo. 0 estereoisómero desejado foi recolhido como o segundo pico na ordem de eluição: Instrumento: Berger SFC MGIII, Coluna: CHIRALPAK® IC 25 x 3 cm, 5 cm; temp da coluna: 45 °C; Fase Móvel: C02êMe0H ±45ê55Ç; Taxa de fluxo: 160 mlêmin; Deteção a 220 nm.
Após a evaporação do solvente, o Intermediário B-1A ±2,73 g, 46 tJ de rendimentoÇ foi obtido como um sólido branco. HPLC: RT = 3,075 min. ±H20êMe0H com TFA, CHROMOLITH® ODS S5 4,6 x 50 mm, gradiente = 4 min, comprimento de onda = 220 nmÇ. Chiral HPLC RT: 8,6 61 min ±AD, 60 Ú ±EtOHêMeOHÇêheptanoÇ > 99 Úee. MS±ESÇ: m/z = 418,3 [M + H+]; RMN ±500 MHz, DMS0-d6Ç δ 10,21 ±s, 1HÇ, 8,38 ±d, J = 8,3 Hz, 1HÇ, 7,57 - 7,47 ±m, 2HÇ, 7,41 - 7,29 ±m, 8HÇ, 7,25 - 7,17 ±m, 2HÇ, 5,10 - 5,04 ±m, 3HÇ, 2,42 ±s, 3HÇ.
Intermediário B-l: ±SÇ-3-Amino-5-±3-fluorofenilÇ-9-metil-ΙΗ-benzo[e] [1,4] diazepin-2±3HÇ-ona.
Num frasco de fundo redondo de 100 ml, uma solução de Intermediário B-1A ±2,73 g, 6,54 mmolÇ em ácido acético ±12 mlÇ foi tratada com HBr, 33 Ú em HOAc ±10,76 ml, 65,4 mmolÇ e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. A solução foi diluída com Et20 para fornecer um precipitado amarelo. O sólido amarelo foi filtrado e enxaguado com Et20 sob azoto. 0 sólido foi transferido para o frasco de fundo redondo de 100 ml e agua foi adicionada ±formou-se precipitado brancoÇ. A pasta fluida tornou-se básica lentamente com NaHC03 saturado. 0 precipitado pegajoso resultante foi extraído com EtOAc. A camada orgânica foi lavada com água, seca por MgS04 e depois filtrada e concentrada até à secura para fornecer o Intermediário B-l ±1,68 g, 91 % de rendimentoÇ como um sólido espumoso branco. MS+ESÇ: mêz = 284,2 [M + H+] ; HPLC: RT = 1,72 rnin ±H20êMe0H com TFA, CHROMOLITH® ODS S5 4,6 X 50 mm, gradiente = 4 min, comprimento de onda = 220 nmÇ. 1H RMN ±400 MHz, DMS0-d6Ç δ 10,01 ±S. 1., 1HÇ, 7,56 - 7,44 ±m, 2HÇ, 7,41 - 7,26 ±m, 3HÇ, 7,22 - 7,11 ±m, 2HÇ, 4,24 ±s, 1HÇ, 2,55 ±S. 1., 2HÇ, 2,41 ±s, 3HÇ.
Os compostos listados abaixo no Quadro 6 ±Intermediários B-2 a B-3Ç foram preparados de acordo com o procedimento sintético geral descrito para o Intermediário B-l, utilizando os materiais de partida, Intermediário A-10 e Intermediário A-4, respetivamente.
___2±3HÇ-ona___ 1 MeOHêH2OêO, 1 ÚTFA, Waters Sunfire Cl 8 3,5 μιπ, 2,1 x 3 0 mm, 1 mlêmin, gradiente de 4 min, comprimento de onda = 254 nm. 2 H20êCH3CN com TFA a 0, 05 Ú, BEH C18 1,7 μπι, 2,1 x 50 mm, gradiente ±2 Ú a 98 ÚÇ = 1 min, comprimento de onda =220 nm. Condições de Separação Quiral: * Instrumento: Berger SFC MGIII; Coluna: Lux Cell-4, 250 X 30 mm ID, 5 μη, temp da coluna: 45 °C; Fase Móvel: C02êMe0H ±70ê30Ç; Taxa de Fluxo: 200 mlêmin; Deteção 220 nm. b Instrumento: Berger SFC MGIII, Coluna: CHIRALPAK® IC 25 x 3 cm, 5 μπί; temp da coluna: 45 °C; Fase Móvel: C02êMe0H ±55ê45Ç; Taxa de fluxo: 180 mlêmin; Deteção a 220 nm,_
Intermediário B-4: ±SÇ-3-Amino-9-metil-5-fenil-lH-benzo[e] [1,4]diazepin-2±3HÇ-ona
Intermediário B-4A: ±9-metil-2-oxo-5-fenil-2,3-di-hidro-lH-benzo[e][1,4]diazepin-3- lÇcarbamato de ±SÇ-benzilo
Uma mistura de ácido 2-±lH-benzo[d][1,2,3]triazol-1-ilÇ-2-±±±benziloxiÇcarbonilÇaminoÇacético ±5,50 g, 16,87 mmolÇ foi colocada em suspensão em THF ±40,9 mlÇ e arrefecida até 0 °C. Cloreto de oxalilo ±1,477 ml, 16,87 mmolÇ foi adicionado, seguido pela adição de 50 μΐ de DMF.
Evolução de gás foi observada. Após 2 h, uma solução de Intermediário A-9 +1,62 g, 7,67 mmolÇ e N-metilmorfolina ±2,53 ml, 23,00 mmolÇ em THF ±20 mlÇ foi adicionada, e a mistura de reação foi deixada aquecer gradualmente. Após 3,5 h, amónia ±7 M em MeOHÇ ±21,29 ml, 14 9 mmolÇ foi adicionada e a mistura de reação foi deixada agitar à temperatura ambiente durante a noite. A esta mistura foram adicionados 5 ml de amónia a 7 M e a mistura de reação foi agitada durante 5 horas. A mistura foi depois diluída com EtOAc, lavada com H20, NaOH a 1 M e salmoura. A camada orgânica foi concentrada e depois colocada em suspensão em ácido acético +15,34 mlÇ e acetato de amónio +2,96 g, 38,3 mmolÇ foi adicionado. Após 4,5 horas, H20 foi adicionado para precipitar o produto. 0 precipitado foi recolhido por filtração, lavado com água, e seco com ar para proporcionar o Intermediário B-4A +2,48 g, 81 ÚÇ. HPLC: RT = 1,01 min ±H20êCH3CN com TFA, BEH C18 1,75 pm, 2,1 x 50mm, gradiente = 2 min, comprimento de onda = 220 nmÇ; MS+ESÇ: m/z = 400,3 [Μ + H] + . 0 Intermediário B-4A racémico ±10,8 g, 27,0 mmolÇ foi determinado utilizando as condições Chiral SFC descritas abaixo. 0 estereoisómero desejado foi recolhido como o primeiro pico na ordem de eluição: Instrumento: Berger SFC MGIII, Coluna: OJ-H 25 X 3 cm, 5 cm; temp da coluna: 45 °C; Fase Móvel: C02êMe0H ±70ê30Ç; Taxa de fluxo: 200 mlêmin; Deteção a 220 nm. Após evaporação do solvente, o Intermediário B-4A ±2,67 g, 6,68 mmolÇ foi obtido como um sólido branco. HPLC: RT = 2,761 min ±H20êMe0H com TFA, CHROMOLITH® SpeedROD 4,6 x 50 mm, gradiente = 4 min, comprimento de onda = 220 nmÇ. MS+ESÇ: mêz = 400,3 [M + H] + .
Intermediário B-4:
Uma solução de Intermediário B-4A +2,6 g, 6,51 mmolÇ em HBr a 33 Ú com HOAc +10,71 ml, 65,1 mmolÇ foi agitada à temperatura ambiente durante 2 h. Éter dietílico foi adicionado e o sólido amarelo resultante, foi recolhido por filtração e enxaguado com éter. 0 sólido higroscópico foi dissolvido em MeOH, concentrado e seco sob vácuo para proporcionar o Intermediário B-4 ±2,59 g, 93 ÚÇ. HPLC: RT = 1,433 min ±H2OêMeOH com TFA, CHROMOLITH® SpeedROD 4,6 x 50 mm, gradiente = 4 min, comprimento de onda = 220 nmÇ. MS+ESÇ: m/z = 266,0 [Μ + H] +.
Intermediário B-5: 3-Amino-5-±4-±±±terc- butildimetilsililÇóxiÇmetilÇfenilÇ-lH-benzo[e][1,4]diazepin-2±3HÇ-ona
Intermediário B-5A: ±5-±4-±±±terc- butildimetilsililÇoxiÇmetilÇfenilÇ-2-oxo-2,3-di-hidro-lH-benzo[e][1,4]diazepin-3-ilÇcarbamato de benzilo
Num frasco de fundo redondo de 100 ml, uma suspensão de ácido 2-±lH-benzo[d] [1,2,3]triazol-l-ilÇ-2- ±benz iloxicarboni1aminoÇ acético ±0,952 g, 2,92 mmolÇ e Intermediário A-27 ±0,83 g, 2,430 mmolÇ em DCM ±20 mlÇ foi tratada com uma solução de DCC ±0,602 g, 2,92 mmolÇ em DCM ±5 mlÇ. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente sob azoto durante a noite. À mistura de reação foi adicionado Na2C03 saturado ±25 mlÇ e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h. A suspensão foi filtrada, as camadas foram separadas e a fase orgânica foi concentrada até à secura. A mistura de reação bruta foi diluída com MeOH +10 mlÇ e amónia a 2 N em metanol +14,58 ml, 29,2 mmolÇ foi adicionada. A mistura de reação foi depois agitada à temperatura ambiente durante a noite. AcOH +13,91 ml, 243 mmolÇ foi depois adicionado diretamente à mistura de reação e a mistura foi agitada à temperatura ambiente sob azoto durante 72 h. 0 pH da reação foi ajustado para pH 12 com NaHC03 saturado. A mistura de reação foi dividida entre DCM +100 mlÇ e salmoura +50 mlÇ. A camada aquosa foi outra vez extraída com DCM +2x50 mlÇ. As fases orgânicas combinadas foram secas com Na2S04, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. O material bruto foi purificado por cromatografia flash +Teledyne ISCO CombiFlash Rf, 0 Ú a 75 Ú solvente AêB = acetato de etiloêheptano, REDISEP® Si02 80 gÇ. A concentração das frações apropriadas forneceu uma amostra que foi purificada novamente por cromatografia flash ±Teledyne ISCO CombiFlash Rf, 0 Ú a 60 Ú solvente AêB = acetato de etiloêheptano, REDISEP® Si02 40 gÇ. A concentração das frações apropriadas forneceu o Intermediário B-5A +0,368 g, 29 ÚÇ. LCêMS RT = 2,472 min 10ê90 a 90êl0 +Me0HêH20êTFA a 0,1 Ú, Waters Sunfire C18 3,5 pm, 2,1 x 30 mm, 1 mlêmin, gradiente de 2 min, comprimento de onda = 220 nmÇ; MS+ESÇ: m/z = 530 [M+l] ; ]'H RMN +400 MHz, DMS0-dsÇ δ 10,84 ±s, 1HÇ, 8,39 ±d, J = 8,6 Hz, 1HÇ, 7,64 ±t, J = 7,7 Hz, 1HÇ, 7,50-7,43 ±m, 1HÇ, 7,43 - 7,28 ±m, 10HÇ, 7,29 - 7,21 ±m, 1HÇ, 5,09 ±S, 1HÇ, 5,05 ±d, J - 8,4 Hz, 1HÇ, 4,98 ±S, 1HÇ, 4,78 ±S, 2HÇ, 0,95 - 0,88 ±m, 9HÇ, 0,13 - 0,03 ±m, 6HÇ.
Intermediário B-5:
Uma solução de Intermediário B-5A ±330 mg, 0,623 mmolÇ em acetato de etilo ±20 mlÇ foi tratada com 20 Ú PdêC ±50 Ú de águaÇ +200 mg, 0,623 mmolÇ para fornecer uma suspensão. A mistura de reação foi purgada 3 vezes com vácuo e azoto depois purgada trB s vezes com vácuo e hidrogénio. Amistura foi agitada sob uma atmosfera de hidrogénio durante 4 h. A mistura de reação foi filtrada em CELITE® e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para proporcionar o Intermediário B-5 ±0,190 g, 77 ÚÇ. HPLC: RT = 2,0,3 min +H20êCH3CN com TFA, Sunf ire C18 3,5 μιη, 2,1 x 30 mm, gradiente = 2 min, comprimento de onda = 220 nmÇ. LCêMS: M + H = 396 ; λΪΙ RMN ±400 MHz, DMS0-d6Ç δ 10,66 ±s. 1., 1HÇ, 7,59 ±ddd, J = 8,3, 7,1, 1,5 Hz, 1HÇ, 7,49 - 7,43 ±m, 2HÇ, 7,41 - 7,34 ±m, 2HÇ, 7,30 - 7,24 ±m, 3HÇ, 7,24 - 7,17 ±m, 1HÇ, 4,77 ± s, 1HÇ, 4,71 ±s, 1HÇ, 4,24 ±s, 2HÇ, 0,94 - 0,91 ±m, 9HÇ, 0,10 ±s, 6HÇ.
Os compostos listados abaixo no Quadro 7 ±Intermediários B-6 a B-26Ç foram preparados de acordo com o procedimento sintético geral descrito para o Intermediário B-l e Intermediários B-4 até B-5, utilizando o material de partida indicado.
Intermediário B-28: 3-Amino-9-ciclopropil-5-fenil-lH- benzo[e] [1,4] diazepin-2±3HÇ-ona
Intermediário B-28A: ±9-bromo-2-oxo-5-fenil-2,3-di-hidro- ΙΗ-benzo[e][1,4]diazepin-3-ilÇcarbamato de benzilo
0 Intermediário B-28A foi preparado a partir do Intermediário A-22 pelos procedimentos gerais fornecidos para o Intermediário B-l. HPLC: RT = 2,048 min ±H20êMe0H com TFA, Ascentis Express C18 2,7 pm, 2,1 x 50mm, gradiente = 4 min, comprimento de onda = 220 nmÇ; MS+ESÇ: mêz = 464 [M + H+] .
Intermediário B-28B: ±9-ciclopropil-2-oxo-5-fenil-2,3-di-hidro-lH-benzo[e][1,4]diazepin-3-ilÇcarbamato de benzilo
A uma mistura agitada de Intermediário B-28A ±2,00 g, 4,31 mmolÇ, Pd+dppf Ç2C12 ±946 mg, 1,29 mmolÇ, fosfato de potássio dibásico ±2,25 g, 12,9 mmolÇ e éster de ácido metiliminodiacético de ácido ciclopropilborónico ±1,70 g, 8,61 mmolÇ em dioxano +12 mlÇ sob azoto foi adicionada água ±3 mlÇ, A mistura de reação foi aquecida a 85 °C durante 20 h e depois arrefecida até à temperatura ambiente. A mistura foi diluída com EtOAc ±40 mlÇ e filtrada através de um tampão de gel de sílica de 1 polegada que foi coberto por um tampão CELITE® de lê2 polegada. Esta foi ainda eluída com EtOAc. 0 filtrado foi concentrado sob pressão reduzida e purificado por cromatografia flash ±Teledyne ISCO CombiFlash 0 % a 17 % solvente AêB = DCMêacetona, REDISEP® Si02 120 g, deteção a 254 nM, e monitorização a 220 nMÇ. A concentração das frações apropriadas forneceu o Intermediário B-28B ±1,20 g, 65 %Ç. HPLC: RT = 3,246 min ±CHROMOLITH® SpeedROD coluna 4,6 x 50 mm, metanol aquoso a 10 a 90 % durante 4 minutos contendo TFA 0,1%, 4 mlêmin, monitorização a 220 nmÇ. MS±ESÇ: mêz = 426,1 [Μ + H+] ; ΧΗ RMN ±400 MHz, DMSO-dgÇ δ 10,29 ±S, 1HÇ, 8,38 ±d, J = 8,6 Hz, 1HÇ, 7,57-7,32 ±m, 10HÇ, 7,30 ±d, J = 7,5 Hz, 1HÇ, 7,20 ±t, J = 7,6 Hz, 1HÇ, 7,11 ±d, J = 7,3 Hz, 1HÇ, 5,08 ±s, 2HÇ, 5,04 ±d, J = 8,4 Hz, 1HÇ, 2,26 - 2,13 ±m, 1HÇ, 1,09 -0,95 ±m, 2HÇ, 0,87 - 0,78 ±m, 1HÇ, 0,61 - 0,52 ±m, 1HÇ. Intermediário B-28: 0 Intermediário B-28 foi preparado a partir do
Intermediário B-28A mediante o tratamento com 33 Ú HBrêácido acético de acordo com o procedimento geral detalhado para o Intermediário B-l. HPLC: RT = 2,085 min +CHROMOLITH® SpeedROD coluna 4,6 x 50 mm, metanol a 10 a 90 Ú aquoso durante 4 minutos contendo TFA a 0,1 Ú, 4 mlêmin, monitorização a 220 nmÇ. LCêMS: Μ + H = 292,1. RMN ±400 MHz, DMS0-d6Ç δ 10,78 ±S, 1HÇ, 9,01 ±s. 1., 3HÇ, 7,65 - 7,48 ±m, 5HÇ, 7,38 ±dd, J = 7,6, 1,2 Hz, 1HÇ, 7,26 ±t, J = 7,8 Hz, 1HÇ, 7,19 - 7,14 ±m, 1HÇ, 2,27 - 2,16 ±m, 1HÇ, 1,14 - 0,98 ±m, 2HÇ, 0,91 - 0,80 ±m, 1HÇ, 0,67 - 0,56 ±m, 1HÇ.
Os seguintes Intermediários ±B-29 a B-30Ç foram preparados pelos métodos gerais descritos para o Intermediário B-5 a partir do material de partida indicado.
Exemplo 1 ±2R, 3SÇ-N-±±3SÇ-5-±3-FluorofenilÇ-9-metil-2-oxo-2,3-di-hidro-lH-1,4-benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis±3,3,3- trifluoropropilÇsuccinamida
Intermediário ia: b, b, b-crirruoro-u-±±±t>v-5-±3-f luoro-fenilÇ-9-metil-2-oxo-2,3-di-hidro-lH-benzo[e][1,4]diazepin-3-ilÇcarbamoilÇ-2-±3,3,3 -1ri fluoropropilÇhexanoato de ±2S,3RÇ-terc-butilo
Num frasco de fundo redondo de 100 ml, uma solução de Intermediário B-1 +1683 mg, 5,94 mmolÇ, Et3N ±1,656 ml, 11,88 mmolÇ e Intermediário S-l em DMF ±20 mlÇ foi tratada com tetraf luoroborato de o-benzotriazol-l-il-N,N,N' ,N’~ tetrametilurónio ±3815 mg, 11,88 mmolÇ e agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. A mistura de reação foi diluída com água e NaHC03 saturado aquoso. Um precipitado esbranquiçado formou-se e foi filtrado e lavado com água. 0 sólido resultante foi seco no filtro sob uma corrente de azoto para fornecer o Intermediário IA ±3,7 g, 99 % de rendimentoÇ. MS±ESÇ: mêz = 632,4 [M + H+] ; HPLC: RT = 3,635 min Pureza = 98 %. ±H2OêMeOH com TFA, CHROMOLITH® ODS S5 4,6 x 50 mm, gradiente = 4 min, comprimento de onda = 220 nmÇ. lH RMN ±400 MHz, metanol-d4Ç δ 7,53 ±t, J = 4,5 Hz, 1HÇ, 7,46 - 7,30 ±m, 3HÇ, 7,28 - 7,23 ±m, 1HÇ, 7,23 -7,18 ±m, 2HÇ, 5,37 ±s, 1HÇ, 2,88 ±td, J = 10,4, 3,4 Hz, 1HÇ, 2,60 ±td, J = 10,2, 4,1 Hz, 1HÇ, 2,54 - 2,40 ±m, 1HÇ, 2,47 + s, 3 HÇ, 2,33 - 2,12 ±m, 3HÇ, 1,98 - 1,69 ±m, 4HÇ, I, 51 ±s, 9HÇ.
Intermediário 1B : ácido +2S,3RÇ-6,6,6-Trifluoro-3-±±±SÇ-5~ ±3-fluorofenilÇ-9-metil-2-oxo-2,3-di-hidro-1H-benzo[e][1,4]diazepin-3-ilÇcarbamoilÇ-2-±3,3,3-trifluoropropilChexanoico
Num frasco de fundo redondo de 250 ml, uma solução de Intermediário IA ±3,7 g, 5,86 mmolÇ em D CM ±25 mlÇ foi tratada com TFA +25 mlÇ e a solução laranja clara resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 1,5 hora. A mistura de reação foi depois concentrada para fornecer o Intermediário 1B. HPLC: RT = 3,12 min ±H2OêMeOH com TFA, CHROMOLITH® ODS S5 4,6 x 50 mm, gradiente = 4 min, comprimento de onda = 220 nmÇ. MS+ESÇ: mêz = 576,3 ±M + HÇ+. XH RMN ±400 MHz, metanol-d4Ç δ 7,54 ±t, J = 4,5 Hz, 1HÇ, 7,49 - 7,29 ±m, 3HÇ, 7,28 - 7,15 ±m, 3HÇ, 5,38 ±s. 1., 1HÇ, 2,89 ±td, J = 10,3, 3,7 Hz, 1HÇ, 2,67 ±td, J = 9,9, 4,2 Hz, 1HÇ, 2,56 - 2,38 ±m, 1HÇ, 2,48 ±s, 3 HÇ, 2,34 - 2,13 ±m, 3HÇ, 2,00 - 1,71 ±m, 4HÇ.
Exemplo 1:
Num frasco de fundo redondo de 250 ml, uma solução de Intermediário 1B ±4,04 g, 5,86 mmolÇ em THF ±50 mlÇ foi tratada com amónia ±2 M em iPrOHÇ ±26,4 ml, 52,7 mmolÇ, seguido por HOBT ±1,795 g, 11,72 mmolÇ e EDC ±2,246 g, II, 72 mmolÇ. A suspensão branca resultante foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. A mistura de reação foi diluída com água e NaHC03 saturado aquoso. 0 sólido resultante foi filtrado, enxaguado com água e depois seco no filtro sob uma corrente de azoto. 0 produto bruto foi colocado em suspensão em 20 ml de iPrOH e agitado à temperatura ambiente durante 20 min e depois filtrado e lavado com iPrOH e seco sob vácuo para fornecer 2,83 g de sólido. 0 sólido foi dissolvido sob refluxo em EtOH +100 miç e lentamente tratado com 2 00 mg de carvão vegetal ativado adicionado em pequenas porções. A mistura quente foi filtrada através de CELITE® e enxaguada com EtOH quente. 0 filtrado foi reduzido para metade do volume, deixado arrefecer e o precipitado branco formado foi filtrado e enxaguado com EtOH para fornecer 2,57 g de sólido branco. Uma segunda recristalização a partir de EtOH +70 mIÇ proporcionou o Exemplo 1 +2,39 g, 70Ú de rendimentoÇ como um sólido branco. HPLC: RT = 10,859 min +H20êCH3CN com TFA, Sunf ire C18 3,5 pm, 3,0 x 150 mm, gradiente = 15 min, comprimento de onda = 22 0 e 2 54 nmÇ; MS+ESÇ: mêz = 575,3 [M + H+] ; XH RMN +400 MHz, metanol-d4Ç δ 7,57 - 7,50 +m, 1HÇ, 7,47 - 7,30 +m, 3HÇ, 7,29 - 7,15 +m, 3HÇ, 5,38 +s, 1HÇ, 2,85 - 2,75 ±m, 1HÇ, 2,59 +td, J = 10,5, 4,0 Hz, 1HÇ, 2,53 - 2,41 ±m, 4HÇ, 2,31 - 2,10 ±m, 3HÇ, 1,96 - 1,70 +m, 4HÇ.
Exemplo 2 +2R,3SÇ-N-++3SÇ-5-+3-ClorofenilÇ-9-etil-2-oxo-2,3-di-hidro-1H-1,4-benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis+3,3,3-tri fluoropropilÇsucc inamida
Intermediário 2A: 3-++5-±3-clorofenilÇ-9-etil-2-oxo-2,3-di-hidro-1H-benzo[e][1,4]diazepin-3-ilÇcarbamoilÇ-6,6,6-trifluoro-2-+3,3,3-trifluoropropiIÇhexanoato de ±2S,3RÇ- terc-butilo
(2A) A uma solução de bromidrato de Intermediário B-7 +130 mg, 0,273 mmolÇ, Intermediário S-l ±100 mg, 0,273 mmolÇ e TBTU ±105 mg, 0,328 mmolÇ em DMF ±2 mlÇ foi adicionado TEA ±0,190 ml, 1,367 mmolÇ por goteio. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 16 h. A mistura de reação foi lentamente vertida numa solução agitada de água com um pouco de NaHC03 sat. A mistura de produto foi extraída com DCM, lavada com solução de LiCl a 10 %, seca e concentrada in vacuo. A mistura de produto bruto foi purificada por meio da cromatografia em gel de sílica ±ISC0, 0 % a 50 % de EtOACêheptano durante 10 minutos, utilizando uma coluna de 12 gÇ para fornecer o Intermediário 2A ±116 mg, 0,175 mmol, 64,1 % de rendimentoÇ. HPLC RT = 1,20 min H20êCH3CN com TFA, BEH C18 1,75 pm, 2,1 x 50 mm, gradiente = 2 min, comprimento de onda = 22 0 nm. MS±ESÇ: m/z = 6 62,3 [M + H+] . Intermediário 2B: ácido ±2S,3RÇ-3-±±5-±3-clorofenilÇ-9-etil-2-oxo-2,3-di-hidro-1H-benzo[e][1,4]diazepin-3-ilÇcarbamoilÇ-6,6,6 -trifluoro-2-±3,3,3-trifluoropropilÇhexanoico
(2B)
Uma solução de Intermediário 2A ±115 mg, 0,174 mmolÇ em DCM ±3 mlÇ foi tratada com TFA +0,668 ml, 1,737 mmolÇ. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas e depois concentrada até à secura. A mistura bruta foi diluída com tolueno e novamente concentrada até à secura para proporcionar o Intermediário 2B ±87 mg, 0,144 mmol, 83 Ú de rendimentoÇ. HPLC RT = 3,695 ±H20êCH3CN com TFA, Waters Sunf ire C18 2,1 x 30 mm 3,5 μηι, gradiente de 4 min, deteção a 220 nmÇ. MS±ESÇ: m/z = 606,1 [M + H+] .
Exemplo 2:
Uma solução de Intermediário 2B ±101 mg, 0,167 mmolÇ, HOBT ±77 mg, 0,500 mmolÇ e EDC ±96 mg, 0,500 mmolÇ em THF ±2381 plÇ foi tratada com amónia a 2 N em IPA ±583 μΐ, 1,167 mmolÇ. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas. A mistura de reação foi depois diluída com água ±5 mlÇ e extraída com D CM. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas e depois concentradas in vacuo. A mistura de produto bruto foi purificada por cromatografia em gel de sílica ±ISC0, 0 Ú a 100 Ú de EtOACêheptano durante 15 minutos, utilizando uma coluna de 12 gÇ. Após a separação dos diastereómeros ±Berger SFC MGII, Chiral IC, 25 X 3 cm ID, 5 pm, 920 8 CO20 MeOH, 85 ml0 min, deteção a 220 nmÇ, o Exemplo 2 83mg, 38 ÚÇ foi obtido. HPLC: RT = 9,656 min ±H20êCH3CN com TFA, Sunf ire C18 3,5 pm, 4,6 x 150 mm, gradiente = 15 min, comprimento de onda = 220 e 254 nmÇ; MS±ESÇ: mêz = 605,1 [M + H+] ; :lH RMN ±400 MHz, metanol-d4Ç δ 7,70 - 7,63 ±m, 1HÇ, 7,61 - 7,56 ±m, 1HÇ, 7,55 - 7,45 ±m, 2HÇ, 7,44 - 7,37 ±m, 1HÇ, 7,33 - 7,19 ±m, 2HÇ, 5,38 ±s, 1HÇ, 3,38 - 3,26 ±m, 2HÇ, 3,08 - 2,88 ±m, 1HÇ, 2,87 - 2,70 ±m, 2HÇ, 2,69 - 2,40 ±m, 2HÇ, 2,36 - 2,02 ±m, 3HÇ, 2,01 - 1,69 ±m, 3HÇ, 1,34 ±t, J = 7,5 Hz, 3HÇ.
Os seguintes Exemplos foram preparados de acordo com os métodos gerais descritos para o Exemplo 1 e o Exemplo 2.
Exemplo 3 + 2R,3SÇ-N- + + 3SÇ-5-±3-ClorofenilÇ-9 -isopropil-2-oxo-2,3 -dihidro-lH-l,4-benzodiazep-3-ilÇ-2,3-bis±3,3,3-trifluoropropilÇsuccinamida
(3) 0 Exemplo 3 foi preparado a partir do Intermediário B-2 e Intermediário S-l quiral de acordo com os procedimentos gerais descritos acima. 0 Exemplo 3 foi obtido. HPLC: RT -10,134 min ±H20êCH3CN com TFA, Sunfire C1S 3,5 pm, 4,6 x 150 mm, gradiente = 15 min, comprimento de onda = 220 e 254 nmÇ; MS±ESÇ: mêz = 619 [M + H+] ; 1H RMN ±400 MHz, metanol-d4Ç δ 7,67 ±m, 2HÇ, 7,48 ±m, 2HÇ, 7,42 ±m, 1HÇ, 7,33 ±m, 1HÇ, 7,23 ±m, 1HÇ, 5,38 ±s, 1HÇ, 3,56 - 3,38 ±m, 1HÇ, 2,92 - 2,74 ±m, 1HÇ, 2,68 - 2,42 ±m, 2HÇ, 2,38 - 2,09 ±m, 3HÇ, 2,00 - 1,69 ±m, 4HÇ, 1,41 ±d, J = 6,6 Hz, 3HÇ, 1,29 ±d, J = 6,8 Hz, 3HÇ.
Exemplo 4 +2R,3SÇ-N-+9-Cloro-5-+3,4-dimetilfenilÇ-2-oxo-2,3-di-hidro-1H-1,4-benzodiazepin-3-ilÇ-3-±4,4,4 -trifluorobutilÇ-2-±3,3,3-trifluoropropilÇ succinamida
0 Exemplo 4 foi preparado a partir do Intermediário B-6 e do Intermediário S-2 de acordo com os procedimentos gerais descritos acima. Após a separação dos diastereómeros por SFC quiral ±Instrumento: Berger SFC MGII, Coluna: Chiral IC 25 x 3 cm, 5 μηΐ; Fase Móvel: 88êl2 C02êMe0H Taxa de fluxo: 85 mlêmin; Deteção a 220 nmÇ, 0 Exemplo 4 foi obtido. HPLC: RT = 9,771 min ±H20êCH3CN com TFA, Sunfire C18 3,5 pm, 4,6 x 150 mm, gradiente = 15 min, comprimento de onda - 220 e 254 nmÇ; MS+ESÇ: m/z = 619 [Μ + H+] ; XH RMN +400 MHz, metanol-d4Ç δ 7,76 ±dd, J = 7,8, 1,7 Hz, 1HÇ, 7,39 ±s, 1HÇ, 7,34 - 7,15 ±m, 4HÇ, 5,35 ±s, 1HÇ, 2,75 ±td, J = 10,6, 4,3 Hz, 1HÇ, 2,58 - 2,48 ±m, 1HÇ, 2,32 ±s, 3HÇ, 2,28 ±s, 3HÇ, 2,25 - 2,05 ±m, 3HÇ, 1,86 - 1,66 ±m, 4HÇ, 1,65 - 1,45 ±m, 3HÇ.
Exemplo 5 +2R,3SÇ-N-±9-Cloro-5-±3,5-dimetilfenilÇ-2-oxo-2,3-di-hidro-1H-1,4-benzodiazepin-3-ilÇ-3-±4,4,4-trifluorobutilÇ-2-+3,3,3 -1ri fluoroDroDilCsucc inamida
5) 0 Exemplo 5 foi preparado a partir do Intermediário B-2 7 e do Intermediário S-2 de acordo com os procedimentos gerais descritos acima. Após separação dos diastereómeros por SFC quiral +Instrumento: Berger SFC MGII, Coluna: RR Whelk 01 25 x 3 cm, 5 pm; Fase Móvel: 85êl5 C02êMe0H Taxa de fluxo: 85 mlêrnin; Deteção a 220 nmÇ, o Exemplo 5 foi obtido. HPLC: RT = 9,824 min ±H20êCH3CN com TFA, Sunfire C18 3,5 pm, 4,6 x 150 mm, gradiente = 15 min, comprimento de onda = 220 e 254 nmÇ; MS+ESÇ: mêz = 619 [Μ + H+] ; ΧΗ RMN ±400 MHz, metanol-d4Ç δ 7,76 ±dd, J = 7,7, 1,8 Hz, 1HÇ, 7,32 - 7,23 ±m, 2HÇ, 7,16 ±S, 3HÇ, 5,36 ±s, 1HÇ, 2,81 - 2,71 ±m, 1HÇ, 2,53 ±d, J = 10,3 Hz, 1HÇ, 2,31 ±s, 6HÇ, 2,24 - 2,04 ±m, 3HÇ, 1,84 - 1,69 ±m, 3HÇ, 1,62 - 1,47 ±m, 3HÇ, 1,29 ±s, 1HÇ.
Exemplo 6 +2R,3SÇ-N-±±3SÇ-9-Etil-5-±3-metilfenilÇ-2-oxo-2,3-di-hidro-1H-1,4-benzodiazepin-3-il-2,3-bis±3,3,3-tri f iuoropropiIÇsucc inamida
(6) 0 Exemplo 6 foi preparado a partir do Intermediário B-8 e do Intermediário S-l de acordo com os procedimentos gerais descritos acima. A separação dos diastereómeros ±Berger SFC MGII, CHIRALPAK® IC, 25 X 3 cm ID, 5 pm, 92ê8 C02êMe0H, 85 mlêrnin, deteção a 220 nmÇ proporcionou o Exemplo 6. HPLC: RT = 9,556 min ±H20êCH3CN com TFA, Sunfire C18 3,5 pm, 4,6 x 150 mm, gradiente = 15 min, comprimento de onda = 220 e 254 nmÇ; MS+ESÇ: m/z 585,2 = [Μ + H+] ; ΧΗ RMN ±4 00 MHz, metanol -d4Ç δ 7,60 - 7,52 ±m, 1HÇ, 7,4 9 - 7,43 ±m, 1HÇ, 7,38 - 7,16 ±m, 5HÇ, 5,37 ±s, 1HÇ, 3,04 - 2,89 ±m, 1HÇ, 2,87 - 2,71 ±m, 2HÇ, 2,68 - 2,39 ±m, 2HÇ, 2,37 ± s, 3HÇ, 2,33 - 2,09 ±m, 3HÇ, 1,99 - 1,65 ±m, 4HÇ, 1,34 ±t, J = 7,5 Hz, 3HÇ.
Exemplo 7 ±2R,3SÇ-N-±±3SÇ-5-±3-ClorofenilÇ-9-metil-2-oxo-2,3-di-hidro-lH-1,4-benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis±3,3,3-trifluoropropilÇsuccinamida
. ) 0 Exemplo 7 foi preparado a partir do Intermediário B-3 e do Intermediário S-l de acordo com os procedimentos gerais descritos acima. A separação dos diastereómeros por cromatografia SFC preparativa ±Instrumento: Berger SFC MGII, Coluna: Chiral OD-H 25x3 cm, 5 mm; Fase Móvel: 90êl0 C02êMe0H Taxa de fluxo: 85 mlêmin; Deteção a 220 nm.Ç proporcionou o Exemplo 7. HPLC: RT = 9,328 min +H20êCH3CN com TFA, Sunfire C18 3,5 um, 3,0 x 150 mm, gradiente = 15 min, comprimento de onda = 220 e 254 nmÇ; MS+ESÇ: mêz = 591,2 [M + H+] ; XH RMN ±400 MHz, metanol-d4Ç δ 7,65 ±t, J = 1,9 Hz, 1HÇ, 7,59 - 7,50 ±m, 2HÇ, 7,50 - 7,44 ±m, 1HÇ, 7,44 - 7,37 ±m, 1HÇ, 7,27 - 7,20 ±m, 2HÇ, 5,39 ±S, 1HÇ, 2,86 -2,76 ±m, 1HÇ, 2,66 - 2,56 ±m, 1HÇ, 2,56 - 2,46 ±m, 4HÇ, 2,33 - 2,14 ±m, 3HÇ, 1,95 - 1,74 ±m, 4HÇ.
Exemplo 8 ±2R,3SÇ-N-±±3SÇ-5-±3-ClorofenilÇ-9-metil-2-oxo-2,3-di-hidro-lH-1,4-benzodiazepin-3-ilÇ-3-±4,4,4 -trifluorobutilÇ-2-±3,3,3-trifluoropropilÇ succinamida
;s) 0 Exemplo 8 foi preparado a partir do Intermediário B-3 e do Intermediário S-2 de acordo com os procedimentos gerais descritos acima. A separação dos diastereómeros por cromatografia SFC preparativa +Instrumento: Berger SFC MGII, Coluna: Regis Welk-0 R,R 25 x 3 cm, 5 mm; Fase Móvel: 85êl5 C02êMe0H Taxa de fluxo: 85 mlêmin; Deteção a 220 nm.Ç proporcionou o Exemplo 8. HPLC: RT = 9,531 min ±H20êCH3CN com TFA, Sunfire C18 3,5 pm, 3,0 x 150 mm, gradiente = 15 min, comprimento de onda = 220 e 254 nmÇ; MS+ESÇ: m/z = 605,2 [M + H+] ; XH RMN ±400 MHz, metanol-d4Ç δ 7,69 ±d, J = 1,8 Hz, 1HÇ, 7,58 - 7,50 ±m, 2HÇ, 7,47 - 7,40 ±m, 2HÇ, 7,27 - 7,19 ±m, 2HÇ, 5,37 ±s, 1HÇ, 2,78 ±td, J = 10,3, 4,0 Hz, 1HÇ, 2,60 - 2,46 ±m, 5HÇ, 2,30 - 2,11 ±m, 3HÇ, 1,89 - 1,71 ±m, 3HÇ, 1,67 - 1,50 ±m, 3HÇ.
Exemplo 9 +2R,3SÇ-N~±±3SÇ-5-±3-MetilfenilÇ-2-oxo-9-±trifluorometilÇ- 2,3-di-hidro-lH-1,4-benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis±3,3,3-trifluoropropilÇsuccinamida
(9) 0 Exemplo 9 foi preparado a partir do Intermediário B-9 e do Intermediário S-l de acordo com os procedimentos gerais descritos acima. A separação dos diastereómeros por cromatografia SFC preparativa ±Instrumento: Berger SFC MGII, Coluna: Chiral OD-H 25 x 3 cm, 5 μιη; Fase Móvel: 92ê8 C02êMe0H Taxa de fluxo: 85 mlêmin; Deteção a 220 nm.Ç proporcionou o Exemplo 9. HPLC: RT = 9,488 min ±H20êCH3CN com TFA, Sunfire C18 3,5 pm, 3,0 x 150 mm, gradiente = 15 min, comprimento de onda = 220 e 254 nmÇ; MS+ESÇ: m/z = 625,3 [M + H+] ; XH RMN ±400 MHz, metanol-d4Ç δ 8,03 ±d, J = 6,8 Hz, 1HÇ, 7,68 - 7,62 ±m, 1HÇ, 7,53 - 7,45 ±m, 2HÇ, 7,40 - 7,30 ±m, 3HÇ, 5,47 ±s, 1HÇ, 2,82 ±td, J = 10,5, 4,0 Hz, 1HÇ, 2,60 ±td, J = 10,5, 3,7 Hz, 1HÇ, 2,53 - 2,41 ±m, 1HÇ, 2,38 ±s, 3HÇ, 2,32 - 2,14 ±m, 3HÇ, 1,99 - 1,71 ±m, 4HÇ. Exemplo 10 ±2R,3SÇ-N-±±3SÇ-9-Cloro-5-±3,5-dimetilfenilÇ-2-oxo-2,3-di-hidro-lH-1,4-benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis±3,3,3-trifluoropropilÇsuccinamida
(10) 0 Exemplo 10 foi preparado a partir do Intermediário B-27 e do Intermediário S-l de acordo com os procedimentos gerais descritos acima. A separação dos diastereómeros por SFC quiral ±Instrumento: Berger SFC MGIII, Coluna: CHIRALCEL® OD-H 25 x 3 cm, 5 pm; Fase Móvel: 92êl8 C02êMe0H Taxa de fluxo: 150 mlêmin; Deteção a 220 nmÇ proporcionou o Exemplo 10. HPLC: RT = 10,878 nain ±H20êCH3CN com TFA, Sunfire C18 3,5 pm, 4,6 x 150 mm, gradiente = 15 min, comprimento de onda = 220 e 254 nmÇ; MS+ESÇ: m/z =605 [M + H+] ; XH RMN ±400 MHz, metanol-d4Ç δ 7,76 ±dd, J = 7,7, 1,5 Hz, 1HÇ, 7,33 - 7,23 ±m, 2HÇ, 7,15 ±S, 3HÇ, 5,39 ±s, 1HÇ, 2,84 - 2,75 ±m, 1HÇ, 2,59 ±td, J = 10,3, 4,2 Hz, 1HÇ, 2,51- 2,39 ±m, 1HÇ, 2,30 ±s, 6HÇ, 2,26 - 2,12 ±m, 3HÇ, 1,95 -1,70 ±m, 4HÇ.
Exemplo 11 +2R,3SÇ-N-±±3SÇ-5-±3-MetilfenilÇ-2-oxo-9-±trifluorometilÇ- 2,3-di-hidro-lH-1,4-benzodiazepin-3-ilÇ-3-4,4,4-trifluorobutilÇ-2-±3,3,3 -1ri fluoropropilÇsucc inamida
(11) 0 Exemplo 11 foi preparado a partir do Intermediário B-9 e do Intermediário S-2 de acordo com os procedimentos gerais descritos acima. A separação dos diastereómeros por cromatografia SFC preparativa ±Instrumento: Berger SFC MGII, Coluna: Chiral OD-H 25 x 3 cm, 5 pm; Fase Móvel: 92ê8 C02êMe0H Taxa de fluxo: 85 mlêmin; Deteção a 220 nmÇ proporcionou o Exemplo 11. HPLC: RT = 9,699 min ±H20êCH3CN com TFA, Sunfire C18 3,5 pm, 3,0 x 150 mm, gradiente = 15 min, comprimento de onda = 22 0 e 2 54 nmÇ; MS±ESÇ: mêz = 63 9,3 [M + H+] ; 1H RMN ±400 MHz, metanol-d4Ç δ 8,03 ±d, J = 6,8 Hz, 1HÇ, 7,67 - 7,61 ±m, 1HÇ, 7,52 - 7,44 ±m, 2HÇ, 7,41 - 7,31 ±m, 3HÇ, 5,45 ±s, 1HÇ, 2,83 - 2,74 ±m, 1HÇ, 2,61 - 2,42 ±m, 2HÇ, 2,39 ±s, 3HÇ, 2,35 - 2,05 ±m, 3HÇ, 1,90 - 1,69 ±m, 3HÇ, 1,68 - 1,48 ±m, 3HÇ.
Exemplo 12 + 2R,3SÇ-N-++3SÇ-9-Isopropil- 5-±3-metilfenilÇ-2-oxo-2,3-di-hidro-lH-1,4-benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis±3,3,3-
j— 1 U Q ^ Q p 2” ^ VN 1 Ί /"Ί rn 1 /N 1 ·»% (12) 0 Exemplo 12 foi preparado a partir do Intermediário B-10 e do Intermediário S-l de acordo com os procedimentos gerais descritos acima. A separação dos diastereómeros ±Instrumento: Berger SFC MGIII, Coluna: Lux Cell-4, 250 x 30 mm, 5 μιη,* Temp da coluna: 45°C, Fase Móvel: 8SIES 12 C02êMe0H; Deteção a 220 nmÇ proporcionou o Exemplo 12. HPLC: RT = 15,924 min ±Me0HêH20 com TFA, Sunfire C18 3,5 pm, 4,6 x 150 mm, gradiente - 15 min, comprimento de onda = 220 e 254Ç; MS + ESÇ: mêz = 599 [Μ + H+] ; ]Ή RMN ±400 MHz, metanol-d4Ç δ 7,63 ±dd, J = 7,7, 1,3 Hz, 1HÇ, 7,45 ±s, 1HÇ, 7,37 - 7,24 ±m, 4HÇ, 7,19 ±d, J = 1,5 Hz, 1HÇ, 5,36 ±s, 1HÇ, 3,52 - 3,37 ±m, 1HÇ, 2,86 - 2,74 ±m, 1HÇ, 2,64 - 2,42 ±m, 2HÇ, 2,36 ±s, 3HÇ, 2,32 - 2,11 ±m, 3HÇ, 1,96 - 1,69 ±m, 4HÇ, 1,39 ±d, J = 6,8 Hz, 3HÇ, 1,28 ±d, J = 6,8 Hz, 3HÇ. Exemplo 13 +2R,3SÇ-N-±±3SÇ-9-Isopropil-2-oxo-5-fenil-2,3-di-hidro-lH- 1,4-benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis±3,3,3- trifluoropropilÇsuccinamida
(13) O Exemplo 13 foi preparado a partir do Intermediário B-11 e do Intermediário S-l de acordo com os procedimentos gerais descritos acima. A separação dos diastereómeros ilnstrumento: Berger SFC MGII, Coluna: CHIRALPAK® IC 250 x 30 mm, 5 y.m; Fase Móvel: 90êl0 C02êMe0H Taxa de fluxo: 85 mlêmin; Deteção a 220 nmÇ proporcionou o Exemplo 13. HPLC: RT = 15,481 min ±H20êCH3CN com TFA, Sunfire C18 3,5 mm, 4,6 x 150mm, gradiente = 15 min, comprimento de onda = 220 e 254 nmÇ; MS+ESÇ: m/z = 586 [Μ + H+] ; RMN ±400 MHz, metanol-d4ç δ 7,70 - 7,56 ±m, 3HÇ, 7,56 - 7,47 ±m, 1HÇ, 7,47 - 7,36 ±m, 2HÇ, 7,36 - 7,25 ±m, 1HÇ, 7,25 - 7,12 ±m, 1HÇ, 5,39 ±s, 1HÇ, 3,53 - 3,38 ±m, 1HÇ, 2,83 ±m, 1HÇ, 2,70 - 2,41 ±m, 2HÇ, 2,37 - 2,05 ±m, 3HÇ, 2,00 - 1,69 ±m, 4HÇ, 1,40 ±d, J = 6,6 Hz, 3HÇ, 1,35 - 1,21 ±m, 3HÇ.
Exemplo 14 ±2R,3SÇ-N-±±3SÇ-9-±CiclopropiloxiÇ-5-±3-metilfenilÇ-2-oxo- 2,3-di-hidro-lH-1,4-benzodiazepin-3-ilÇ-3-±4,4,4-trifluorobutilÇ-2-±3,3,3 -1ri fluoropropilÇsuccinamida
V- -) 0 Exemplo 14 foi preparado a partir do Intermediário B-12 e do Intermediário S-2 de acordo com os procedimentos gerais descritos acima. A separação dos diastereómeros ±Berger SFC MGII, Chiral AS-H 25 X 3 cm ID, 5 pm, 80ê20 C02êMe0H, 85 mlêmin, deteção a 220 nmÇ proporcionou o Exemplo 14. HPLC: RT = 10,064 min ±H20êCH3CN com TFA,
Sunfire C18 3,5 pm, 4,6 x 150 mm, gradiente = 15 min, comprimento de onda = 220 e 254 nmÇ; MS+ESÇ: m/z = 627,20 [M + H+] ; 1H RMN ±400 MHz, metanol-d4Ç δ 7,65 - 7,56 ±m, 1HÇ, 7,46 - 7,39 ±m, 1HÇ, 7,37 - 7,16 ±m, 4HÇ, 7,00 - 6,84 ±m, 1HÇ, 5,37 ±s, 1HÇ, 4,06 - 3,91 ±m, 1HÇ, 2,87 - 2,68 ±m, 1HÇ, 2,64 - 2,44 ±m, 2HÇ, 2,37 ±s, 3HÇ, 2,32 - 2,00 ±m, 3HÇ, 1,98 - 1,50 ±m, 4HÇ, 1,50 - 1,22 ±m, 2HÇ, 1,05 - 0,84 ±m, 4HÇ.
Exemplo 15 ±2R,3SÇ-N-±±3SÇ-9-±CiclopropiloxiÇ-5-±3-metilfenilÇ-2-oxo- 2,3-di-hidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis±3,3,3-trifluoropropilÇsuccinamida
(15) 0 Exemplo 15 foi preparado a partir do Intermediário B-12 e do Intermediário S-l de acordo com os procedimentos gerais descritos acima. A separação dos diastereómeros ±Berger SFC MGII, Chiral AS-H 25 X 3 cm ID, 5 pm, 80ê20 C02êMe0H, 85 mlêmin, deteção a 220 nmÇ proporcionou o Exemplo 15. HPLC: RT = 9,844 min ±H20êCH3CN com TFA, Sunfire C18 3,5 pm, 4,6 x 150 mm, gradiente = 15 min, comprimento de onda = 220 e 254 nmÇ; MS±ESÇ: m/z = 613,25 [M + H+] ; ^ RMN ±400 MHz, metanol-d4Ç δ 7,63 - 7,58 ±m, 1HÇ, 7,47 - 7,39 ±m, 1HÇ, 7,38 - 7,20 +m, 4HÇ, 6,98 - 6,91 ±m, 1HÇ, 5,40 ±S, 1HÇ, 4,04 - 3,94 ±m, 1HÇ, 2,88 - 2,75 ±m, 1HÇ, 2,66 - 2,55 ±m, 1HÇ, 2,55 - 2,39 ±m, 1HÇ, 2,39 - 2,33 ±m, 2HÇ, 2,32 - 2,09 ±m, 3HÇ, 2,01 - 1,65 ±m, 3HÇ, 1,52 - 1,23 ±m, 3HÇ, 1,03 - 0,84 ±m, 4HÇ.
Exemplo 16 +2R,3SÇ-N-±±3SÇ-9-±CiclopropilóxiÇ-2-oxo-5-fenil-2,3-di-hidro-lH-1,4-benzodiazepin-3-ilÇ-3-±4,4,4-trifluorobutilÇ-2-±3,3,3 -1ri fluoropropi1Çsucc inamida
\16) O Exemplo 16 foi preparado a partir do Intermediário B-13 e do Intermediário S-2 de acordo com os procedimentos gerais descritos acima. A separação dos diastereómeros ±Berger SFC MGII, Chiral AS-H 25 X 3 cm ID, 5 μιη, 80ê20 C02êMe0H, 85 mlêmin, deteção a 220 nmÇ proporcionou o Exemplo 16. HPLC: RT = 9,74 min ±H2OêCH3CN com TFA, Sunfire C18 3,5 ym, 4,6 x 150 mm, gradiente = 15 min, comprimento de onda = 220 e 254 nmÇ; MS+ESÇ: mêz = 613,2 [M + H+] ; RMN ±400 MHz, metanol-d4Ç δ 7,64 - 7,55 ±m, 3HÇ, 7,55 - 7,49 ±m, 1HÇ, 7,44 ±d, J = 7,5 Hz, 2HÇ, 7,26 ±s, 1HÇ, 6,98 - 6,91 ±m, 1HÇ, 5,38 ±S 1HÇ, 4,04 - 3,96 ±m, 1HÇ, 2,81 -2,71 ±m, 1HÇ, 2,62 - 2,41 ±m, 2HÇ, 2,18 ±s, 4HÇ, 1,90 - 1,68 ±m, 3HÇ, 1,68 - 1,33 ±m, 3HÇ, 0,93 - 0,86 ±m, 4HÇ. Exemplo 17 +2R,3SÇ-N-±±3SÇ-9-Cloro-5-±3-metilfenilÇ-2-oxo-2,3-di-hidro-lH-1,4-benzodiazepin-3-ilÇ-3-±4,4,4-trifluorobutilÇ-2-±3,3,3-trifluoropropilÇ succinamida
0 Exemplo 17 foi preparado a partir do Intermediário B-14 e do Intermediário S-2 de acordo com os procedimentos gerais descritos acima. Este sólido foi purificado por cromatografia SFC preparativa ±Berger SFC MGII, AD-H 250 X 3 0 mm ID, 5 cm, 75ê2 5 C02êIPA, 150 mlêminÇ para proporcionar o Exemplo 17. HPLC: RT = 11,04 min +H20êCH3CN com TFA, Sunfire C18 3,5 um, 4,6 x 150 mm, gradiente = 15 min, comprimento de onda = 220 e 254 nmÇ; MS+ESÇ: m/z = 605,3 [Μ + H+] ; ΧΗ RMN +400 MHz, DMS0-dsÇ δ 10,45 ±s, 1HÇ, 9,45 ±d, J = 6,8 Hz, 1HÇ, 7,84 ±dd, J = 5,9, 3,3 Hz, 1HÇ, 7,62 ±s. 1., 1HÇ, 7,41 ±s, 1HÇ, 7,38 - 7,34 ±m, 2HÇ, 7,33 -7,26 ±m, 3HÇ, 7,03 ±s, 1HÇ, 5,21 ±d, J = 6,8 Hz, 1HÇ, 2,79 - 2,70 ±m, 1HÇ, 2,69 - 2,59 ±m, 1HÇ, 2,46 - 2,38 ±m, 1HÇ, 2,34 ±s, 3HÇ, 2,31 - 2,19 ±m, 2HÇ, 2,18 - 2,07 ±m, 1HÇ, 1,65 - 1,53 ±m, 3HÇ, 1,49 - 1,41 ±m, 1HÇ, 1,39 - 1,29 ±m, 2HÇ.
Exemplo 18 +2R, 3SÇ-N-±±3SÇ-9-Metil-2-oxo-5-±3-±trifluorometilÇfenilÇ- 2,3-di-hidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-ilÇ-3-±4,4,4-trifluorobutilÇ-2-±3,3,3 -trifluoropropilÇsuccinamida
0 Exemplo 18 foi preparado a partir do Intermediário B-15 e do Intermediário S-2 de acordo com os procedimentos gerais descritos acima. A separação dos diastereómeros por cromatografia SFC preparativa ±Instrumento: Berger SFC MGII, Coluna: Regis Welk-0 R,R 25 x 3 cm, 5 mm; Fase Móvel: 90êl0 C02êMe0H Taxa de fluxo: 85 mlêmin; Deteção a 220 nm.Ç proporcionou o Exemplo 18. HPLC: RT = 9,678 min ±H2OêCH3CN com TFA, Sunfire C1S 3,5 pm, 3,0 x 150 mm, gradiente = 15 min, comprimento de onda = 220 e 254 nmÇ; MS+ESÇ: mêz = 639,4 [M + H+] ; XH RMN ±400 MHz, metanol-d4Ç δ 8,01 ±s, 1HÇ, 7,83 ±d, J = 7,7 Hz, 1HÇ, 7,77 ±d, J = 7,7 Hz, 1HÇ, 7,68 - 7,60 ±m, 1HÇ, 7,57 ±d, J = 7,0 Hz, 1HÇ, 7,28 - 7,17 ±m, 2HÇ, 5,40 ±s, 1HÇ, 2,79 ±td, J = 10,5, 4,0 Hz, 1HÇ, 2,62 - 2,45 ±m, 5HÇ, 2,35 - 2,18 ±m, 2HÇ, 2,16 - 2,03 ±m, 1HÇ, 1,91 - 1,70 ±m, 3HÇ, 1,69 - 1,48 ±m, 3HÇ.
Exemplo 19 +2R,3SÇ-N-±±3SÇ-9-±CiclopropiloxiÇ-2-οχο-5-fenil-2,3-di-hidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis±3,3,3-trifluoroprooilCsucc inamida
(19) 0 Exemplo 19 foi preparado a partir do Intermediário B-13 e do Intermediário S-l de acordo com os procedimentos gerais descritos acima. A separação dos diastereómeros ±Berger SFC MGII, Chiral AS-H 25 X 3 cm ID, 5 pm, 80ê20 C02êMe0H, 85 mlêmin, deteção a 220 nmÇ proporcionou o Exemplo 19. HPLC: RT = 14,967 min ±H20êCH3CN com TFA,
Sunfire C18 3,5 pm, 4,6 x 150mm, gradiente = 15 min, comprimento de onda = 220 e 254 nmÇ; MS+ESÇ: m/z = 599,1 [M + H+] ; ΧΗ RMN ±400 MHz, metanol-d4Ç δ 7,61 ±dd, J = 8,1, 1,3 Hz, 1HÇ, 7,59 - 7,54 ±m, 2HÇ, 7,54 - 7,47 ±m, 1HÇ, 7,47 -7,37 ±m, 2HÇ, 7,25 ±t, J = 8,0 Hz, 1HÇ, 6,95 ±dd, J = 7,9, 1,1 Hz, 1HÇ, 5,41 ±s, 1HÇ, 4,00 ±t, J = 4,4 Hz, 1HÇ, 2,82 ±d, J = 4,0 Hz, 1HÇ, 2,61 ±d, J = 3,7 Hz, 1HÇ, 2,55 - 2,38 ±m, 1HÇ, 2,36 - 2,11 ±m, 3HÇ, 2,07 - 1,70 ±m, 4HÇ, 0,91 ±d, J = 4,4 Hz, 4HÇ.
Exemplo 20 +2R,3SÇ-N-±±3SÇ-9-Metil-2-oxo-5-±3-±trifluorometilÇfenilÇ- 2,3-di-hidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis±3,3,3-trifluoropropilÇsuccinamida
(20) O Exemplo 20 foi preparado a partir do Intermediário B-15 e do Intermediário S-l de acordo com os procedimentos gerais descritos acima. A separação dos diastereómeros por cromatografia SFC preparativa +Instrumento: Berger SFC MGII, Coluna: PHENOMENEX® Lux Cellulose 2 25 x 3 cm, 5 pm; Fase Móvel: 92ê8 C02êMe0H Taxa de fluxo: 85 mlêmin; Deteção a 220 nmÇ proporcionou o Exemplo 20. HPLC: RT = 9,483 min ±H20êCH3CN com TFA, Sunfire C18 3,5 μπι, 3,0 x 150 mm, gradiente = 15 min, comprimento de onda = 220 e 254 nmÇ; MS+ESÇ: m/z = 625,1 [M + H+] ; RMN ±400 MHz, metanol-d4Ç δ 7,97 ±s, 1HÇ, 7,81 ±dd, J = 13,1, 7,8 Hz, 2HÇ, 7,67 - 7,60 ±m, 1HÇ, 7,57 ±dd, J = 6,8, 1,3 Hz, 1HÇ, 5,43 ±S, 1HÇ, 2,83 ±td, J = 10,5, 4,0 Hz, 1HÇ, 2,61 ±td, J = 10,3, 3,5 Hz, 1HÇ, 2,57 - 2,46 ±m, 4HÇ, 2,32 - 2,12 ±m, 3HÇ, 1,98 - 1,74 ±m, 4HÇ.
Exemplo 21 ±2R,3SÇ-N-±±3SÇ-9-Cloro-5-±2-metilfenilÇ-2-oxo-2,3-di-hidro-lH-1,4-benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis±3,3,3-trifluoroprooilCsuccinamida
(21) 0 Exemplo 21 foi preparado a partir do Intermediário B-16 e do Intermediário S-l de acordo com os procedimentos gerais descritos acima. O estereoisõmero desejado foi recolhido como o segundo pico na ordem de eluição utilizando a cromatografia SFC ±Instrumento: Berger SFC MGII, Coluna: Chiral OD-H 25 x 3 cm, 5 mm; Fase Móvel: 85êl5 C02êMe0H Taxa de fluxo: 85 mlêmin; Deteção a 220 nmÇ, para proporcionar o Exemplo 21. HPLC: RT = 11,11 min ±H20êCH3CN com TFA, Sunfire C18 3,5 um, 4,6 x 150 mm, gradiente - 15 min, comprimento de onda - 22 0 e 2 54 nmÇ; MS±ESÇ: m/z = 591 [Μ + H+] ; XH RMN ±500 MHz, metanol-d4Ç δ 7,73 ±dd, J = 8,0, 1,4 Hz, 1HÇ, 7,40 - 7,32 ±m, 1HÇ, 7,29 -7,21 ±m, 3HÇ, 7,18 ±t, J = 7,9 Hz, 1HÇ, 7,08 ±dd, J = 7,9, 1,5 Hz, 1HÇ, 5,45 ±s, 1HÇ, 2,79 ±td, J = 10,5, 4,0 Hz, 1HÇ, 2,59 ±td, J = 10,4, 3,9 Hz, 1HÇ, 2,51 - 2,38 ±m, 1HÇ, 2,30 - 2,08 ±m, 3HÇ, 2,04 ±s, 3HÇ, 1,94 - 1,67 ±m, 4HÇ.
Exemplo 22 +2R,3SÇ-N-±±3SÇ-5-±4-FluorofenilÇ-9-metil-2-oxo-2,3-di-hidro-lH-1,4-benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis±3,3,3-trifluoropropilÇsuccinamida
(22) O Exemplo 22 foi preparado a partir do Intermediário B-17 e do Intermediário S-l de acordo com os procedimentos gerais descritos acima. A separação dos diastereómeros por cromatografia SFC preparativa ±Instrumento: Berger SFC MGII, Coluna: Chiral IC 2 5 x 3 cm, 5 pm; Fase Móvel: 92ê8 C02êMe0H Taxa de fluxo: 85 mlêmin; Deteção a 220 nm.Ç proporcionou o Exemplo 22. HPLC: RT = 9,016 min ±H20êCH3CN com TFA, Sunfire C18 3,5 um, 3,0 x 150 mm, gradiente = 15 min, comprimento de onda = 220 e 254 nmÇ; MS+ESÇ: mêz = 575.1 [M + H+] ; 1H RMN ±400 MHz, metanol-d4Ç δ 7,69 - 7,60 ±m, 2HÇ, 7,53 ±dd, J = 5,8, 2,5 Hz, 1HÇ, 7,24 - 7,18 ±m, 2HÇ, 7,17 - 7,09 ±m, 2HÇ, 5,36 ±s, 1HÇ, 2,80 ±td, J = 10,4, 4.1 Hz, 1HÇ, 2,58 ±td, J = 10,5, 3,6 Hz, 1HÇ, 2,53 - 2,43 ±m, 4HÇ, 2,31 - 2,11 ±m, 3HÇ, 1,95 - 1,73 ±m, 4HÇ.
Exemplo 23 +2R,3SÇ-N-++3SÇ-9-Metil-2-oxo-5-fenil-2,3-di-hidro-lH-1,4 -benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis-trifluoropropilÇsuccinamida
23) 0 Exemplo 23 foi preparado a partir do Intermediário B-4 e do Intermediário S-l de acordo com os procedimentos gerais descritos acima. HPLC: RT = 7,843 min ±H20êCH3CN com TFA, Sunfire C18 3,5 pm, 4,6 x 150 mm, gradiente = 15 min, comprimento de onda = 220 e 254 nmÇ; MS+ESÇ: m/z = 557,4 [M + H+] ; 1H RMN ±400 MHz, metanol-d4Ç δ 7,63 - 7,57 ±m, 1HÇ, 7,56 - 7,47 ±m, 1HÇ, 7,46 - 7,37 ±m, 1HÇ, 7,25 - 7,18 ±m, 1HÇ, 5,39 ±s, 1HÇ, 2,82 ±td, J = 10,5, 4,0 Hz, 1HÇ, 2,61 ±td, J = 10,5, 3,5 Hz, 1HÇ, 2,56 - 2,40 ±m, 4HÇ, 2,36 - 2,07 ±m, 3HÇ, 1,99 - 1,70 ±m, 4HÇ.
Exemplo 24 ±2R,3SÇ-N-++3SÇ-9-Ciclopropil-2-oxo-5-fenil-2,3-di-hidro-1H-1,4-benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis+3,3,3-trifluoropropilÇsuccinamida
(24)
0 Exemplo 24 foi preparado a partir do Intermediário B-28 e do Intermediário S-l de acordo com os procedimentos gerais descritos acima. Este sólido foi purificado por cromatografia SFC preparativa ±Berger SFC MGII, Chiral IC 250 X 30 mm ID, 5 pm, 85êl5 C02êMe0H, 85 mlêminÇ para proporcionar o Exemplo 24. HPLC: RT = 11,56 min ±H20êCH3CN com TFA, Sunfire C18 3,5 um, 4,6 x 150 mm, gradiente = 15 min, comprimento de onda = 220 e 254 nmÇ; MS+ESÇ: mêz = 583,2 [Μ + ΗΊ ; XH RMN ±400 MHz, DMSO-d6Ç δ 10,28 ±s, 1HÇ, 9,45 ±d, J = 7,3 Hz, 1HÇ, 7,65 ±s. 1., 1HÇ, 7,56 - 7,49 ±m, 3HÇ, 7,47 - 7,40 ±m, 2HÇ, 7,28 ±dd, J = 7,7, 1,3 Hz, 1HÇ, 7,20 ±t, J = 7,7 Hz, 1HÇ, 7,15 - 7,08 ±m, 2HÇ, 5,24 ±d, J = 7,3 Hz, 1HÇ, 2,81 ±td, J = 9,8, 5,1 Hz, 1HÇ, 2,54 ±s. 1., 1HÇ, 2,31 - 2,07 ±m, 4HÇ, 1,78 - 1,53 ±m, 5HÇ, 1,11 - 0,96 ±m, 2HÇ, 0,84 - 0,76 ±m, 1HÇ, 0,71 - 0,62 ±m, 1HÇ.
Exemplo 25 ±2R,3SÇ-N-++3SÇ-9-Cloro-5-±3-ciclopropilfenilÇ-2-oxo-2,3 -di-hidro-lH-1,4-benzodiazepin-3-lÇ-2,3-bis±3,3,3-trifluoropropilÇsuccinamida
(25) 0 Exemplo 25 foi preparado a partir do Intermediário B-18 e do Intermediário S-l de acordo com os procedimentos gerais descritos acima. A separação dos diastereómeros ±Instrumento: Berger SFC MGII, Chiral IC 25 X 3 cm ID, 5 ym, 90êl0 C02êMe0H, 85 mlêmin, deteção a 220 nmÇ proporcionou o Exemplo 25. HPLC: RT = 8,81 min ±H20êCH3CN com TFA, Sunfire C18 3,5 ym, 4,6 x 150 mm, gradiente = 15 min, comprimento de onda = 220 e 254 nmÇ; MS+ESÇ: m/z = 617,0 [M + H+] ; XH RMN ±400 MHz, metanol-d4Ç δ 7,88 - 7,70 ±m, 1HÇ, 7,45 - 7,11 ±m, 6HÇ, 5,46 - 5,31 ±m, 1HÇ, 2,82 ±td, J = 10,4, 4,1 Hz, 1HÇ, 2,69 - 2,40 ±m, 2HÇ, 2,36 - 2,06 ±m, 3HÇ, 2,00 - 1,58 ±m, 5HÇ, 1,06 - 0,94 ±m, 2HÇ, 0,80 - 0,62 ±m, 2HÇ.
Exemplo 26 ±2R,3SÇ-N-±±3SÇ-5-±3-ClorofenilÇ-9-metoxi-2-oxo-2,3-di-hidro-lH-1,4-benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis+3,3,3-trifluoropropilÇsuccinamida
v26) 0 Exemplo 26 foi preparado a partir do Intermediário B-19 e do Intermediário S-l de acordo com os procedimentos gerais descritos acima, 0 sólido foi purificado por cromatografia SFC preparativa ±Instrumento: Berger SFC MGII, AS-H 250 X 30 mm ID, 5 pm, 82êl8 C02êMe0H, 85 mlêminÇ para proporcionar o Exemplo 26. HPLC: RT = 9,32 min ±H20êCH3CN com TFA, Sunfire C18 3,5 pm, 4,6 x 150 mm, gradiente = 15 min, comprimento de onda = 220 e 254 nmÇ; MS+ESÇ: mêz = 607 [Μ + H+] ; XH RMN ±400 MHz, metanol-d4Ç δ 10,13 ±s, 1HÇ, 9,51 ±d, J = 7,3 Hz, 1HÇ, 7,68 - 7,59 ±m, 3HÇ, 7,52 - 7,45 ±m, 1HÇ, 7,42 - 7,32 ±m, 2HÇ, 7,30 - 7,24 ±m, 1HÇ, 7,13 + s, 1HÇ, 6,92 ±dd, J = 7,9, 1,1 Hz, 1HÇ, 5,25 ±d, J = 7,3 Hz, 1HÇ, 3,94 ±s, 3HÇ, 2,85 - 2,75 ±m, 1HÇ, 2,63 - 2,54 ±m, 1HÇ, 2,31 - 2,09 ±m, 4HÇ, 1,75 - 1,52 ±m, 4HÇ.
Exemplo 27 +2R,3SÇ-N-±±3SÇ-5-±4-ClorofenilÇ-9-metoxi-2-oxo-2,3-di-hidro-lH-1,4-benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis+3,3,3-trifluoropropilÇsuccinamida
(27) 0 Exemplo 27 foi preparado a partir do Intermediário B-20 e do Intermediário S-l de acordo com os procedimentos gerais descritos acima, 0 sólido foi purificado por cromatografia SFC preparativa ±Instrumento: Berger SFC MGII, AS-H 250 X 30 mm ID, 5 pm, 82êl8 C02êMe0H, 85 mlêminÇ para proporcionar o Exemplo 27. HPLC: RT = 9,44 min ±H20êCH3CN com TFA, Sunfire C18 3,5 pm, 4,6 x 150 mm, gradiente = 15 min, comprimento de onda = 22 0 e 2 54 nmÇ; MS + ESÇ: rn/z = 607 [M + H+] ; XH RMN ±400 MHz, DIVISO-d6Ç δ 10,12 ±s, 1HÇ, 9,51 ±d, J = 7,3 Hz, 1HÇ, 7,66 ±s. 1., 1HÇ, 7,58 - 7,50 ±m, 4HÇ, 7,36 - 7,31 ±m, 1HÇ, 7,30 - 7,22 ±m, 1HÇ, 7,14 ±s, 1HÇ, 6,90 ±dd, J = 7,8, 1,2 Hz, 1HÇ, 5,24 ±d, J = 7,3 Hz, 1HÇ, 3,93 ±s, 3HÇ, 2,82 - 2,74 ±m, 1HÇ, 2,64 -2,55 ±m, 1HÇ, 2,30 - 2,08 ±m, 4HÇ, 1,76 - 1,51 ±m, 4HÇ. Exemplo 28 +2R,3SÇ-N-±±3SÇ-9-Cloro-5-±3-metilfenilÇ-2-oxo-2,3-di-hidro-lH-1,4-benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis±3,3,3-trifluoropropilÇsuccinamida
(28) 0 Exemplo 28 foi preparado a partir do Intermediário B-14 e do Intermediário S-l de acordo com os procedimentos gerais descritos acima. 0 sólido foi purificado por cromatografia SFC preparativa ±Instrumento: Berger SFC MGII, IC-H 250 X 30 mm ID, 5 pm, 92ê8 C02êMe0H, 85 mlêminÇ para proporcionar o Exemplo 28. HPLC: RT = 9,36 min ±H20êCH3CN com TFA, Sunf ire C18 3,5 μηι, 4,6 x 150 mm, gradiente = 15 min, comprimento de onda = 22 0 e 2 54 nmÇ; MS+ESÇ: mêz = 591 [Μ + H+] ; XH RMN +400 MHz, DMS0-dsÇ δ 10,48 ±s. 1., 1HÇ, 9,40 ±S. 1., 1HÇ, 7,87 - 7,60 ±m, 2HÇ, 7,47 - 7,04 ±m, 5HÇ, 5,15 ±S. 1., 1HÇ, 4,15 ±dd, J = 5,7, 3,3 Hz, 1HÇ, 2,81 ±td, J = 9,9, 4,8 Hz, 1HÇ, 2,40-2,02 ±m, 5HÇ, 1,83 - 1,53 ±m, 4HÇ, 1,45 - 1,18 ±m, 3HÇ, 0,98 - 0,79 ±m, 2HÇ.
Exemplo 29 ±2R,3SÇ-N-±±3SÇ-5-±3-MetilfenilÇ-9-metoxi-2-oxo-2,3-di-hidro-lH-1,4-benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis±3,3,3-trifluoropropilÇsuccinamida
(29) O Exemplo 29 foi preparado a partir do Intermediário B-21 e do Intermediário S-l de acordo com os procedimentos gerais descritos acima. 0 material bruto foi purificado por meio de HPLC preparativa com as seguintes condições: Coluna: Waters XBridge Cl8, 19 x 250 mm, 5 pm de partículas; Guard Column: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, 5 pm de partículas; Fase Móvel A: 5:95 acetonitrilo: água com acetato de amónio a 10 mM; Fase Móvel B:95:5 acetonitrilo: água com acetato de amónio a 10 mM; Gradiente: 15-100 tJ B durante 25 minutos, depois um controlo de 5 minutos em 100 Ú B; Fluxo: 20 mlêmin. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e secas por meio da evaporação centrífuga. O material foi ainda purificado por meio de HPLC preparativa com as seguintes condições: Coluna: Waters XBridge C18, 19 x 250 mm, partículas de 5 μιη; GuardColumn: Waters XBridge Cl 8, 19 x 10 mm, partículas de 5 μιη; Fase Móvel A: 5:95 acetonitrilo:água com acetato de amónio 10 mM; Fase Móvel B:95:5 acetonitrilo: água com acetato de amónio a 10 mM; Gradiente: 20-55 Ú B durante 40 minutos, depois um controlo de 15 minutos em 55 Ú B; Fluxo: 20 mlêmin. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e secas por meio da evaporação centrífuga. 0 material foi ainda purificado através da HPLC preparativa com as seguintes condições: Coluna: Waters XBridge C18, 19 x 100 mm, partículas de 5 pm; GuardColumn: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, partículas de 5 pm; Fase Móvel A: 5:95 acetonitrilo:água com acetato de amónio a 10 mM; Fase Móvel B :95:5 acetonitrilo:água com acetato de amónio a 10 mM; Gradiente: 5-100 Ú B durante 10 minutos, depois um controlo de 5 minutos em 100 Ú B; Fluxo: 20 mlêmin. As frações contendo o produto desejado foram combinadas e secas por meio da evaporação centrífuga para proporcionar o Exemplo 29. HPLC: RT = 2,3 8 min ±H20êCH3CN com TFA, SUPELCO®
Ascentis Express C1S, 4,6 x 50 mm, 2,7 pm, gradiente = 4 min, comprimento de onda = 220Ç; MS+ESÇ: m/z = 586 [M + H+] ; 1H RMN ±500 MHz, DMS0-d6Ç δ 10,12 ±s. 1., 1HÇ, 9,53 ±d, J = 7,4 Hz, 1HÇ, 7,69 ±d, J = 1,5 Hz, 1HÇ, 7,43 - 7,10 ±m, 7HÇ, 6,87 ±dd, J = 7,9, 1,0 Hz, 1HÇ, 5,24 ±d, J = 7,4 Hz, 1HÇ, 3,93 ±s, 3HÇ, 2,80 ±td, J = 10,0, 4,7 Hz, 1HÇ, 2,63 - 2,54 ±m, 1HÇ, 2,33 +s, 3HÇ, 2,30 - 2,09 ±m, 3HÇ, 1,78 -1,53 ±m, 4HÇ.
Exemplo 30 +2R,3SÇ-N-±±3SÇ-5-±4-±HidroximetilÇfenilÇ-2-oxo-2,3-di- hidro-lH-1,4-benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis±3,3,3-trifluoropropilÇsuccinamida
(30) O Exemplo 30 foi preparado a partir do Intermediário B-5 e do Intermediário S-l de acordo com os procedimentos gerais descritos acima. 0 sólido foi purificado por cromatografia SFC preparativa ±Instrumento: Berger SFC MGII, Lux Cellulose-2 250 X 30 mm ID, 5 pm, 85êl5 C02êMe0H, 85 mlêminÇ para proporcionar o Exemplo 30. HPLC: RT = 6,91 min ±H20êCH3CM com TFA, Sunf ire C18 3,5 um, 4,6 x 150 mm, gradiente = 15 min, comprimento de onda = 220 e 254 nmÇ; MS+ESÇ: mêz = 573 [Μ + H+] ; XH RMN ±400 MHz, DMSO-deÇ δ 10,84 ± s, 1HÇ, 9,49 ±d, J = 7,3 Hz, 1HÇ, 7,70 - 7,60 ±m, 2HÇ, 7,51 - 7,43 ±m, 2HÇ, 7,42 - 7,36 ±m, 2HÇ, 7,36 - 7,29 ±m, 2HÇ, 7,29 - 7,22 ±m, 1HÇ, 7,14 ±s. 1., 1HÇ, 5,30 ±t, J = 5,7 Hz, 1HÇ, 5,25 ±d, J = 7,5 Hz, 1HÇ, 4,57 ±d, J = 5,7
Hz, 2HÇ, 2,88 - 2,73 ±m, 1HÇ, 2,64 - 2,54 ±m, 2HÇ, 2,31 - 2,00 ±m, 3HÇ, 1,85 - 1,43 ±m, 4HÇ.
Exemplo 31 ±2R,3SÇ-N-+±3SÇ-5-±2-MetilfenilÇ-2-oxo-2,3-di-hidro-1H-1,4 -benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis-trifluoropropilÇsuccinamida
(31) 0 Exemplo 31 foi preparado a partir do Intermediário B-29 e do Intermediário S-l de acordo com os procedimentos gerais descritos acima. 0 sólido foi purificado por cromatografia SFC preparativa ±Instrumento: Berger SFC MGII, Lux Cellulose-2 250 X 30 mm ID, 5 pm, 90êl0 C02êMe0H, 85 mlêminÇ para proporcionar o Exemplo 31. HPLC: RT = 8,68 min ±H20êCH3CN com TFA, Sunf ire C18 3,5 pm, 4,6 x 150 mm, gradiente = 15 min, comprimento de onda = 220 e 254 nmÇ; MS + ESÇ: m/z = 557 [Μ + H+] ; ΧΗ RMN ±400 MHz, DMSO-deÇ δ 10.94 ±s. 1., 1HÇ, 9,47 ±d, J = 7,5 Hz, 1HÇ, 7,69 - 7,55 ±m, 2HÇ, 7,41 - 7,21 ±m, 4HÇ, 7,20 - 7,11 ±m, 3HÇ, 7,05 ±dd, J = 7,9, 1,3 Hz, 1HÇ, 5,29 ±d, J = 7,5 Hz, 1HÇ, 2,78 ±td, J = 10,0, 4,7 Hz, 1HÇ, 2,31 - 2,07 ±m, 3HÇ, 2,02 - 1.94 ±m, 3HÇ, 1,76 - 1,51 ±m, 4HÇ.
Exemplo 32
±2R,3SÇ-N-±±3SÇ-5-±3-MetilfenilÇ-2-oxo-2,3-di-hidro-lH-1,4-benzodiazepir’-'5-·'1 o-o t-k-í v-í ei n^^r^v^m-L]_çguccinamida (32) 0 Exemplo 32 foi preparado a partir do Intermediário B-22 e do Intermediário S-l de acordo com os procedimentos gerais descritos acima. Este sólido foi purificado por cromatografia SFC preparativa ±Instrumento: Berger SFC MGII, PHENOMENEX® Lux Cellulose-2 250 X 30 mm ID, 5 ym, 90êl0 C02êMe0H, 85 mlêminÇ para proporcionar o Exemplo 32. HPLC: RT = 9,35 min ±H2OêCH3CN com TFA, Sunf ire Cl 8 3,5 ym, 4,6 x 150 mm, gradiente = 15 min, comprimento de onda = 220 e 254 nnaÇ; MS±ESÇ: mêz = 557 [M + H+] ; XH RMN ±400 MHz, DMSO-dgÇ δ 10,84 ±s, 1HÇ, 9,50 ±d, J = 7,5 Hz, 1HÇ, 7,69 - 7,61 ±m, 2HÇ, 7,40 - 7,18 +m, 7HÇ, 7,14 ±s. 1., 1HÇ, 5,26 ±d, J = 7,3 Hz, 1HÇ, 2,87 - 2,75 ±m, 1HÇ, 2,55 ±d, J = 2,0 Hz, 2HÇ, 2,33 ±s, 3HÇ, 2,30 - 2,06 ±m, 3HÇ, 1,80 - 1,50 ±m, 4HÇ.
Exemplo 33 ±2R,3SÇ-N-±±3SÇ-9-Metoxi-2-oxo-5-±5-±trifiuorometilÇ-2-piridinilÇ-2,3-di-hidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-
(33) 0 Exemplo 33 foi preparado a partir do Intermediário B-24 e do Intermediário S-l de acordo com os procedimentos gerais descritos acima. Após a separação dos diastereómeros ±Instrumento: Berger SFC MGII, AS-H 250 X 46 mm ID, 5 ym, 80ê20 C02êMe0H, 85 mlêminÇ, o Exemplo 33 foi obtido. HPLC: RT = 9,364 min ±H20êCH3CN com TFA, Sunfire C18 3,5 ym, 4,6 x 150 mm, gradiente = 15 min, comprimento de onda = 220 e 254 nmÇ; MS±ESÇ: m/z = 642 [M + H+] ; XH RMN ±400 MHz, DMSO-dgÇ δ ppm 10,19 ±1 H, sÇ, 9,58 ±1 H, d, J = 7,5 HzÇ, 8,98 ±1 H, d, J - 0,9 HzÇ, 8,40 ±1 H, dd, J = 8,4, 2,0 HzÇ, 8,15 ±1 H, d, J = 8,4 HzÇ, 7,65 ±1 H, s. l.Ç, 7,30 ±1 H, dd, J = 8,4, 1,1 HzÇ, 7,20 ±1 H, t, J = 8,0 HzÇ, 7,14 ±1 H, s. l.Ç, 6,93 ±1 H, dd, J = 7,9, 1,1 HzÇ, 5,35 ±1 H, d, J = 7,3 HzÇ, 3,92 ±3 H, sÇ, 2,74 - 2,85 ±1 H, mÇ, 2,55 - 2,65 ±1 H, mÇ, 2,05 - 2,31 ±4 H, mÇ, 1,47 - 1,77 ±4 H, mÇ.
Exemplo 34
±2R,3SÇ-N-±±3SÇ-5-±5-Cloro-2-piridinilÇ-9-metoxi-2-oxo-2,3-di-hidro-lH-1,4-benzodiazepin-3-ilÇ-2 ,3-bis±3,3,3-trif luoropr>—’1 ----- ^ J4) O Exemplo 34 foi preparado a partir do Intermediário B-26 e do Intermediário S-l de acordo com os procedimentos gerais descritos acima. Este sólido foi purificado por cromatografia SFC preparativa ±Instrumento: Berger SFC MGII, AS-H 250 X 46 mm ID, 5 pm, 75ê25 C02êMe0H, 85 mlêminÇ para proporcionar o Exemplo 34. HPLC: RT = 8,43 min ±H20êCH3CN com TFA, Sunfire C18 3,5 pm, 4,6 x 150 mm, gradiente = 15 min, comprimento de onda = 22 0 e 2 54 nmÇ; MS+ESÇ: m/z = 587 [Μ + H+] ; ΧΗ RMM +400 MHz, DMSO-dgÇ δ 10,14 ±s, 1HÇ, 9,55 ±d, J = 7,5 Hz, 1HÇ, 8,68 - 8,58 ±m, 1HÇ, 8,11 ±dd, J = 8,5, 2,5 Hz, 1HÇ, 7,99 ±d, J = 8,6 Hz, 1HÇ, 7,66 ±s. 1., 1HÇ, 7,33 - 7,26 ±m, 1HÇ, 7,21 ±t, J = 8,0 Hz, 1HÇ, 7,14 ±s. 1., 1HÇ, 6,93 ±dd, J = 7,9, 1,1 Hz, 1HÇ, 5,30 ±d, J = 7,3 Hz, 1HÇ, 3,92 ±s, 3HÇ, 2,84 - 2,72 ±m, 1HÇ, 2,65 - 2,56 ±m, 1HÇ, 2,31 - 2,04 ±m, 3HÇ, 1,76 -1,47 ±m, 4HÇ.
Exemplo 35 ±2R,3SÇ-N-±±3SÇ-5-±4-MetoxifenilÇ-2-oxo-2,3-di-hidro-1H- 1,4-benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis±3,3,3- trif luoroprop-5 Ί ----
(35) 0 Exemplo 35 foi preparado a partir do Intermediário B-25 e do Intermediário S-l de acordo com os procedimentos gerais descritos acima. Os diastereómeros foram separados por Chiral HPLC +CHIRALPAK® AD 5 cm x 50 cm 10 μΜ isocrãtico 30 Ú i-propanol: heptano 100 mlêminÇ para proporcionar o Exemplo 35. HPLC: RT = 8,68 min ±H20êCH3CN com TFA, Sunfire C18 3,5 pm, 4,6 x 150 mm, gradiente = 15 min, comprimento de onda = 220 e 254 nmÇ; MS±ESÇ: mêz = 573 [M + H+] ; XH RMN ±400 MHz, DMSO-d6Ç δ 10,81 ±d, J = 6,6 Hz, 1HÇ, 9,48 ±d, J = 5,5 Hz, 1HÇ, 7,64 ±t, J = 6,4 Hz, 1HÇ, 7,46 ±dd, J = 8,7, 4,1 Hz, 2HÇ, 7,39 - 7,22 ±m, 3HÇ, 7,00 ±dd, J = 8,8, 3,3 Hz, 2HÇ, 5,22 ±dd, J = 9,4, 7,6 Hz, 1HÇ, 3,82 ±s, 3HÇ, 2,97 - 2,84 ±m, 1HÇ, 2,37 - 2,08 ±m, 4HÇ, 1,85 - 1,55 ±m, 4HÇ, 1,43 - 1,32 ±m, 3HÇ.
Exemplo 36 +2R,3SÇ-N-±±3SÇ-5-±4-MetilfenilÇ-2-oxo-2,3-di-hidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis±3,3,3-trifluoropropilÇsuccinamida
0 Exemplo 36 foi preparado a partir do Intermediário B-23 e do Intermediário S-l de acordo com os procedimentos gerais descritos acima. 0 diastereómeros foram separados por Prep Chiral HPLC +CHIRALPAK® AD 5 cm x 50 cm 10 μΜ isocrático 20 Ú i-propano-heptano 100 mlêminÇ para proporcionar o Exemplo 36. HPLC: RT = 9,32 min ±H20êCH3CN com TFA, Sunf ire C18 3,5 pm, 4,6 x 150 mm, gradiente = 15 min, comprimento de onda = 220 e 254 nmÇ; MS+ESÇ: m/z = 557 [Μ + H+] ; XH RMN ±400 MHz, DMS0-d6Ç δ 10,80 ±S, 1HÇ, 9,46 ±d, J - 7,5 Hz, 1HÇ, 7,70 - 7,57 ±m, 2HÇ, 7,39 ±d, J - 8,1 Hz, 2HÇ, 7,35 - 7,19 ±m, 5HÇ, 7,12 ±s, 1HÇ, 5,23 ±d, J = 7,3 Hz, 1HÇ, 2,84 - 2,74 ±m, 1HÇ, 2,36 ±s, 3HÇ, 2,27 - 2,07 ±m, 3HÇ, 1,77 - 1,52 ±m, 5HÇ.
Exemplo 37
+2R,3SÇ-N-++3SÇ-5-+3-FluorofenilÇ-9-±hidroximetilÇ-2-oxo-2,3-di-hidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis±3,3,3-trif luoro] »7)
Intermediário 37A: N-Metoxi-N,3-dimetil-2-nitrobenzamida
A uma suspensão de ácido 3-metil-2-nitrobenzoico ±5 g, 27,6 mmoiç em DCM +50 mlÇ foi adicionado cloreto de oxalilo +4,83 ml, 55,2 mmolÇ seguido por 2 gotas de DMF. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1,5 h e depois concentrada e azeotropada com DCMêtolueno, o que resulta num sólido branco que foi seco sob vácuo elevado durante a noite. A uma mistura de N,O-dimetilidroxilamina, HC1 +5,38 g, 55,2 mmolÇ e TEA +11,54 ml, 83 mmolÇ em DCM +80 mlÇ a 0 °C foi lentamente adicionada uma solução do cloreto ácido acima em DCM +20 mlÇ. A reação foi depois agitada durante 30 min, e depois extinta com água e extraída com DCM. A camada orgânica foi separada, lavada com HC1 1 N, NaHC03 sat. e salmoura e depois seca e concentrada para fornecer o Intermediário 37A ±6,05 g, 98 %Ç. HPLC: RT - 1,27 min +CHR0M0LITH® SpeedROD coluna 4,6 x 50 mm, metanol aquoso a 10 a 90 % durante 4 minutos contendo TFA a 0,1 %, 4 mlêmin, monitorização a 220 nmÇ, 1H RMN ±400 MHz, clorofórmio-dÇ δ 7,52 - 7,45 +m, 1HÇ, 7,42 - 7,35 +m, 2HÇ, 3,48 ±s. 1., 3HÇ, 3,33 ±s, 3HÇ, 2,51 +s, 3HÇ.
Intermediário 37B: 3-+BromometilÇ-N-metoxi-N-metil-2-nitro-benzamida
Uma mistura de Intermediário 37A ±5,5 g, 24,53 mmolÇ, NBS ±5,24 g, 29,4 mmolÇ e peróxido de benzoílo ±0,594 g, 2,453 mmolÇ em CC14 ±80 mlÇ foi purgada com azoto e depois aquecida até 80 °C durante 4,5 h. A mistura de reação foi arrefecida até à temperatura ambiente e depois extinta com água. A mistura foi extraída com DCM e os extratos combinados foram lavados com NaHC03 saturado e salmoura e depois secos ±Na2s04Ç, filtrados e concentrados até à secura. 0 material bruto foi purificado por cromatografia flash ±Si02, coluna de 80 g, EtOAcêhexano = 0 - 100 ÚÇ para proporcionar o Intermediário 37B.
Intermediário 37C: 3-±HidroximetilÇ-N-metoxi-N-metil-2- nitrobenzamida
Uma mistura de Intermediário 37B ±3,7 g, 4,88 mmolÇ e carbonato de cálcio ±2,93 g, 29,3 mmolÇ em dioxano ±25 mlÇêágua ±25 mlÇ foi agitada em refluxo durante 5 h. A mistura foi depois arrefecida até à temperatura ambiente, o sólido foi removido por filtração e o filtrado foi extraído com EtOAc. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas ±MgS04Ç, filtradas e concentradas até à secura. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia flash ±Si02, coluna de 80 g, EtOAcêhexano = 20 - 100 ÚÇ para proporcionar o Intermediário 37C ±1,079 g, 78 ÚÇ. HPLC: RT = 0,75 min ±CHROMOLITH® SpeedROD coluna 4,6 x 50 mm, metanol aquoso a 10-90 Ú durante 4 minutos contendo TFA a 0,1 Ú, 4 mlêmin, monitorização a 220 nmÇ, MS±ESÇ: m/z = 241,0 [M + H+] .
Intermediário 37D: 3-±±±terc-ButildimetilsililÇoxiÇmetilÇ- N-metoxi-N-m'·'4··5 Ί ° ---
A uma solução de Intermediário 37C ±1,079 g, 4,49 mmolÇ e TBDMS-C1 ±1,016 g, 6,74 mmolÇ em DMF ±4 mlÇ foi adicionado imidazol ±0,612 g, 8,98 mmolÇ. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h. Água foi adicionada e a mistura foi extraída com EtOAc. Os extratos combinados foram lavados com LiCl a 10 % e salmoura, secos por MgS04, filtrados e concentrados até à secura. 0 material bruto foi purificado por cromatografia flash ±Si02, coluna de 40 g, EtOAcêhexano = 0 - 30 %Ç para proporcionar o Intermediário 37D ±1,25 g, 79 %Ç. HPLC: RT = 3,05 min ±CHR0M0LITH® SpeedROD coluna 4,6 x 50 mm, metanol aquoso a 10 - 90 % durante 4 minutos contendo TFA 0,1 %, 4 mlêmin, monitorização a 220 nmÇ, MS±ESÇ: mêz = 355,0 [M + H+] . -1¾ RMN ±400 MHz, clorof órmio-dÇ δ 7,90 ±d, J = 7,7 Hz, 1HÇ, 7,70 - 7,62 ±m, 1HÇ, 7,47 ±d, J = 7,7 Hz, 1HÇ, 4,98 ±s, 2HÇ, 3,46 ±s. 1., 3HÇ, 3,36 ±S. 1., 3HÇ, 0,98 ±S, 9HÇ, 0,15 ±s, 6HÇ.
Intermediário 37E: 2-Amino-3-±±±terc- butildimetilsililÇóxiÇmetilÇ-N-metoxi-N-metilbenzamida
Uma mistura de Intermediário 37D +1,25 g, 3,53 mmolÇ e PdêC a 10 Ú ±200 mg, 0,188 mmolÇ em EtOAc +50 mlÇ foi purgada com hidrogénio. A mistura foi depois agitada sob uma atmosfera de hidrogénio durante 1,5 h. A suspensão foi filtrada e o filtrado foi concentrado até à secura. 0 material bruto foi purificado por cromatografia flash +Si02, coluna de 24 g, EtOAcêhexano = 0 - 4 0 ÚÇ para proporcionar o Intermediário 37E +939 mg, 82 ÚÇ. HPLC: RT = 2,986 min +CHROMOLITH® SpeedROD coluna 4,6 x 50 mm, metanol aquoso a 10 - 90 Ú durante 4 minutos contendo TFA a 0,1 Ú, 4 mlêmin, monitorização a 220 nmÇ, MS+ESÇ: m/z = 325,2 [M + H+] ; XH RMN +400 MHz, clorof Órmio-dÇ δ 7,32 +dd, J = 7,7, 1,5 Hz, 1HÇ, 7,1 1 +dd, J = 7,5, 1,5 Hz, 1HÇ, 6,68 - 6,62 +m, 1HÇ, 5,21 +s. 1., 2HÇ, 4,71 +s, 2HÇ, 3,61 ±s, 3HÇ, 3,36 + s, 3HÇ, 0,92 +s, 9HÇ, 0,09 +S, 6HÇ.
Intermediário 37F: +2-Amino-3-+++terc- butildimetilsililÇoxiÇmetilÇfenilÇ+3-fluorofenilÇmetanona
A uma solução de 1-fluoro-3 -iodobenz eno ±0,782 ml, 6,66 rnrnolÇ em THF +6 mlÇ a -78 °C foi adicionado nBuLi ±2,5 M em hexano, 2,66 ml, 6,66 mmolÇ por goteio. Após a adição ter sido concluída, a mistura foi agitada a -78 °G durante 40 min. Depois uma solução de Intermediário 37E ±540 mg, 1,6 64 mmolÇ em THF ±2,5 mlÇ foi adicionada por goteio. A mistura foi depois agitada a -78 °C durante 2 h. A mistura resultante foi vertida em gelo com HC1 ±7,49 ml, 7,49 mmolÇ e extraída com EtOAc. Os extratos combinados foram lavados com salmoura, secos e concentrados. 0 material bruto foi purificado por cromatografia flash ±Si02, coluna de 12 g, EtOAcêhexano = 0 - 15 ÚÇ para proporcionar o Intermediário 37F ±271 mg, 45 ÚÇ HPLC: RT = 3,70 min ±CHROMOLITH®
SpeedROD coluna 4,6 x 50 mm, metanol aquoso a 10-90 Ú durante 4 minutos contendo TFA a 0,1 Ú, 4 mlêmin, monitorização a 220 nmÇ, MS±ESÇ: mêz = 360,4 [M + H+] ; 1H RMN ±400 MHz, clorofórmio-dÇ d 7,49 - 7,33 ±m, 4HÇ, 7,27 -7,20 ±m, 2HÇ, 6,84 ±s. 1., 2HÇ, 6,57 ±t, J = 7,6 Hz, 1HÇ, 4,77 ±s, 2HÇ, 0,95 ±s, 9HÇ, 0,13 ±s, 6HÇ.
Intermediário 37G: ±Benzil ±9-±±±terc- butildimetilsililÇoxiÇmetilÇ-5-±3-fluorofenilÇ-2-oxo-2,3 -di-hidro-1H-benzo[e][1,4]diazepin-3-ilÇcarbamato
A uma solução de ácido 2-±lH-benzo[d] [1,2,3]triazol-1-ilÇ-2-±±±benziloxiÇcarbonilÇaminoÇacético +608 mg, 1,864 mmoiç em THF ±7 mlÇ arrefecida a 0 °C foi adicionado cloreto de oxalilo +0,157 ml, 1,789 mmolÇ, seguido por DMF ±0,02 mlÇ. A mistura resultante foi agitada a 0 °C durante 1,5 h. Depois uma solução de Intermediário 37F +268 mg, 0,745 mmolÇ e 4-metilmorfolina +0,246 ml, 2,236 mmolÇ em THF +3 mlÇ foi lentamente adicionada. Após a adição, a mistura de reação foi aquecida até à temperatura ambiente e agitada durante 1 h. Logo depois, amónia a 7 N em MeOH +4 ml, 28,0 mmolÇ foi adicionada e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. A mistura resultante foi concentrada e o resíduo foi tratado com EtOAc e água. A camada orgânica foi separada, e a camada aquosa foi extraída com EtOAc. Os extratos orgânicos combinados foram lavados com NaOH a 1 N, NaHC03 sat e salmoura e depois secos por MgS04, filtrados e concentrados. 0 resíduo foi depois dissolvido em ácido acético ±1,5 ml, 26,2 mmolÇ, e tratado com acetato de amónio ±287 mg, 3,73 mmolÇ. A mistura foi agitada a 40 °C durante 2 h. A mistura de reação foi depois tratada com água e extraída com EtOAc. Os extratos combinados foram lavados com água, NaHC03 saturado, e salmoura e depois secos e concentrados. 0 material bruto foi purificado por cromatografia flash ±Si02, coluna de 12 g, EtOAcêhexano = 0 - 4 0 ÚÇ para proporcionar o Intermediário 37G ±256 mg, 63 ÚÇ. HPLC: RT = 3,61 min +CHROMOLITH® SpeedROD coluna 4,6 x 50 mm, metanol aquoso a 10-90 Ú durante 4 minutos contendo TFA a 0,1 Ú, 4 mlêmin, monitorização a 22 0 nmÇ, MS+ESÇ: m/z = 54 8,5 [M + H+] .
Intermediário 37H: 3-Amino-5-±3-fluorofenilÇ-9-±hidroximetilÇ-lHΓλ1 m
ona
Uma mistura de Intermediário 37G ±255 mg, 0,466 mmolÇ em HBr a 33 Ú em HOAc +1149 μΐ, 6,98 mmolÇ foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h. Éter foi adicionado e o precipitado sólido resultante foi recolhido por filtração e enxaguado com éter. 0 sólido foi dissolvido em MeOH ±10 mlÇ e K2C03 ±1,3 gÇ foi adicionado. A mistura foi agitada durante 40 min. e depois filtrada e concentrada até à secura para proporcionar o Intermediário 37H ±133 mgÇ. HPLC: RT = 1,102 min +CHR0M0LITH® SpeedROD coluna 4,6 x 50 mm, 10-90 Ú metanol aquoso durante 4 minutos contendo TFA a 0,1 Ú, 4 mlêmin, monitorização a 220 nmÇ, MS+ESÇ: m/z = 300,2 [M + H+] .
Intermediário 371: 6,6,6-trifluoro-3-±±5-±3-fluorofenilÇ-9-±hidroximetilÇ-2-oxo-2,3-di-hidro-lH-benzo[e][1,4]diazepin- 3-ilÇcarbamoilÇ-2-±3,3,3-trifluoropropilÇhexanoato de ±2S,3RÇ-terc-butilo
A uma solução de Intermediário 37H ±130 mg, 0,434 mmolÇ, Intermediário S-l ±159 mg, 0,434 mmolÇ e TBTU ±167 mg, 0,521 mmolÇ em DMF ±1,5 mlÇ foi adicionado TEA ±0,133 ml, 0,956 mmolÇ. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 45 min. Água foi adicionada e o sólido foi recolhido por filtração, enxaguado com água e seco. 0 sólido resultante foi purificado por cromatografia flash ±Si02, coluna de 12 g, EtOAcêhexano = 0-80 ÚÇ para proporcionar o Intermediário 371 ±66 mg, 23 ÚÇ. HPLC: RT = 3,27 min ±CHROMOLITH® SpeedROD coluna 4,6 x 50 mm, metanol aquoso a 10-90 Ú durante 4 minutos contendo TFA a 0,1 Ú, 4 mlêmin, monitorização a 220 nmÇ, MS±ESÇ: m/z = 648,3 [M + H+] .
Intermediário 37J: ácido ±2S,3RÇ-6,6,6-trifluoro-3-±±5-±3-fluorofenilÇ-9-±hidroximetilÇ-2-oxo-2,3-di-hidro-lH-benzo[e][1,4]diazepin-3-ilÇcarbamoilÇ-2-±3,3,3-trifluoropropilÇhexanoico
A uma solução de Intermediário 371 ±65 mg, 0,100 mmolÇ em DCM ±2 mlÇ foi adicionado TFA ±2 mlÇ. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 3 h e depois concentrada até à secura. 0 material bruto foi purificado por HPLC de fase reversa preparativa ±MeOH aq. , contendo TFA a 0,1 ÚÇ. As frações desejadas foram combinadas e concentradas até à secura para proporcionar o Intermediário 37J ±30 mg, 51 ÚÇ. HPLC: RT = 2,680 min +CHR0M0LITH®
SpeedROD coluna 4,6 x 50 mm, metanol aquoso a 10-90 Ú durante 4 minutos contendo TFA a 0,1 Ú, 4 mlêmin, monitorização a 220 nmÇ, MS+ESÇ: m/z = 592,3 [M + H+] . Exemplo 37: A uma mistura de Intermediário 37J ±30 mg, 0,051 mmolÇ, EDC ±34,0 mg, 0,178 mmolÇ e HOBT ±27,2 mg, 0,178 mmolÇ em THF ±2 mlÇ foi adicionada amónia a 2 M em IPA ±0,507 ml, 1,014 mmolÇ. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante a noite e depois concentrada. Água foi adicionada ao resíduo e a mistura foi extraída com EtOAc. Os extratos orgânicos combinados foram lavados com NaHC03 saturado e salmoura e depois secos ±MgS04Ç e concentrados para proporcionar 30 mg do produto bruto como uma mistura de dois diastereómeros. Os diastereómeros foram separados por SFC quiral ±Berger SFC MGII, Chiral ID 25 X 3 cm ID, 5 μιη, 85êl5 C02êMe0H, 85 mlêmin, deteção a 220 nmÇ para proporcionar o Exemplo 3 7 ±10 mg, 3 5 ÓÇ. HPLC: RT = 7,44 min ±H20êCH3CN com TFA, Xbridge Fenil 3,5 μία, 4,6 x 150 mm, gradiente = 15 min, comprimento de onda = 220 e 254 nmÇ; MS±ESÇ: m/z = 591,2 [M + H+] ; :LH RMN ±400 MHz, metanol-d4Ç δ 7,68 - 7,62 ±m, 1HÇ, 7,46 - 7,39 ±m, 1HÇ, 7,38 - 7,20 ±m, 5HÇ, 5,43 ± s, 1HÇ, 4,94 - 4,88 ±m, 1HÇ, 4,80 - 4,73 ±m, 1HÇ, 2,80 ±td, J - 10,3, 4,0 Hz, 1HÇ, 2,59 ±td, J - 10,5, 3,7 Hz, 1HÇ, 2,54 - 2,39 ±m, 1HÇ, 2,31 - 2,10 ±m, 3HÇ, 1,96 - 1,70 ±m, 4HÇ.
Exemplo 38 L-valinato de ±±3SÇ-3-±±±2R,3SÇ-3-Carbamoil-6,6,6- trifluoro-2-±3,3,3 -1 r i f1uoroprop i1Çhexano i1Çami noÇ- 5 -± 3 -fluorofenilÇ-9-metil-2-oxo-2,3-di-hidro-1H-1,4 -benzodiazepin-1-ilÇmetilo
Intermediário 38A: 2-±±Cerc-butoxicarbonilÇaminoÇ-3- metilbutanc ~ ‘ ~ '
1 ^ _ A uma mistura vigorosamente agitada de ácido +SÇ-2-±±terc-butoxicarbonilÇaminoÇ-3-metilbutanoico ±4 g, 18,41 mmolÇ, hidrogenosulfato de tetrabutilamónio ±1,25 g, 3,68 mmolÇ e Na2C03 ±9,76 g, 92 mmolÇ em DCM 80 ±mlÇ e água ±80 mlÇ, arrefecida num banho de geloêágua, foi lentamente adicionado clorossulfato de clorometilo ±3,8 ml, 36,8 mmolÇ durante 4 min. Após agitação no banho de geloêágua durante 30 min, o banho gelado foi removido e a mistura de reação foi deixada a agitar à temperatura ambiente. Após agitação de 16 h à temperatura ambiente, a mistura de reação foi diluída com água e extraída com DCM. A camada aquosa foi outra vez extraída com DCM e as camadas orgânicas combinadas foram secas por MgS04, filtradas e concentradas para proporcionar o Intermediário 38A ±5,45 gÇ.
Intermediário 38B: 2-±±terc-butoxicarbonilÇaminoÇ-3- metilbutanoato de ±SÇ-±±SÇ-3-±±2R,3SÇ-3-carbamoil-6,6,6- trifluoro-2-±3,3,3 -trifluoropropilÇhexanamidoÇ-5-±3-fluorofenilÇ-9-metil-2-oxo-2,3-di-hidro-lH-benzo[e] [1,4]diazepin-l-lÇmetilo
A uma mistura agitada do Exemplo 1 ±400 mg, 0,696 mmolÇ e K2C03 ±289 mg, 2,089 mmolÇ em DMF ±4 mlÇ foi lentamente adicionado o Intermediário 38A ±555 mg, 2,089 mmolÇ em DMF ±3 mlÇ. Após agitação à temperatura ambiente durante 22 h, a mistura de reação foi diluída com EtOAc e lavada 3 vezes com solução aquosa de LiCl a 10 Ú. A camada orgânica foi seca por MgS04, filtrada e concentrada. 0 material bruto foi purificado por cromatografia flash ±Teledyne ISCO CombiFlash 20 Ú a 70 Ú solvente AêB hexanoêacetona, REDISEP® Si02 120 g, deteção a 254 nm, e monitorização a 220 nmÇ para proporcionar o Intermediário 38B ±213,3 mg, 38,1 ÚÇ. HPLC: RT = 3,428 min ± CHROMOLI TH® SpeedROD coluna 4,6 x 50 mm, metanol aquoso a 10-90 Ú durante 4 minutos contendo TFA a 0,1 Ú, 4 mlêmin, monitorização a 220 nmÇ, MS±ESÇ: m/z = 804,5 [M + H+] . Exemplo 38:
A uma mistura agitada de Intermediário 38B ±213,3 mg, 0,265 mmolÇ em DCM ±6 mlÇ foi adicionado HC1 a 4 N em dioxano ±0,663 ml, 2,65 mmolÇ à temperatura ambiente. Após agitação 1,5 h, a mistura de reação foi concentrada e o material bruto foi purificado por HPLC Preparativa ±YMC C18, 30 x 100, metanol aquoso a 10-90 Ú durante 12 minutos contendo TFA a 0,1 tJ, 30 mlêmin, deteção e monitorização a 220 nMÇ. As frações contendo produto foram combinadas e depois concentradas por meio de liofilização para proporcionar o Exemplo 38 ±154 mg, 70,3 ÚÇ como um sal de TFA. HPLC: RT = 10,854 min ±H20êCH3CN com TFA, Sunfire C18 3,5 pm, 4,6 x 150mm, gradiente = 15 min, comprimento de onda = 220 e 254 nmÇ; MS+ESÇ: mêz = 704,6 [M + H+] ; XH RMN ±500 MHz, DMSO-d6Ç δ 9,46 ±d, J = 6,7 Hz, 1HÇ, 8,14 ±s. 1., 3HÇ, 7,72 - 7,62 ±m, 2HÇ, 7,57 - 7,50 ±m, 1HÇ, 7,47 - 7,37 ±m, 4HÇ, 7,27 ±d, J = 7,8 Hz, 1HÇ, 7,13 ±s, 1HÇ, 6,15 ±d, J = 10,3 Hz, 1HÇ, 5,50 ±d, J = 10,3 Hz, 1HÇ, 5,38 ±d, J = 6,7 Hz, 1HÇ, 2,83 ±td, J = 10,2, 4,3 Hz, 1HÇ, 2,45 ±S, 4HÇ, 2,29 - 2,18 ±m, 1HÇ, 2,17 - 2,06 ±m, 2HÇ, 1,81 - 1,72 ±m, 1HÇ, 1,72 - 1,48 ±m, 4HÇ, 0,66 ±d, J = 6,9 Hz, 3HÇ, 0,62 ±d, J - 6,9 Hz, 3HÇ.
Exemplo 39 L-alaninato de ±±3SÇ-3-±±±2R,3SÇ-3-carbamoil-6,6,6- trifluoro-2-±3,3,3 -1ri fluoropropilÇhexanoilÇaminoÇ-5 - ±3 -fluorofenilÇ-9-metil-2-oxo-2,3-di-hidro-lH-l,4- benzodiazepin-1-ilCmetilo
Intermediário 39A: 2-±±terc-butoxicarbonilÇaminoÇ propanoato de ±SÇ-clorometilo
A uma mistura vigorosamente agitada de ácido ±SÇ-2-±±terc-butoxicarbonilÇaminoÇpropanoico ±1 g, 5,29 mmolÇ, hidrogenosulfato de tetrabutilamónio ±0,359 g, 1,057 mmolÇ, e Na2C03 ±2,80 g, 26,4 mmolÇ em DCM 20 ±mlÇ e água ±20 mlÇ, arrefecida num banho de geloêágua, foi lentamente adicionado clorossulfato de clorometilo ±1,09 ml, 10,57 mmolÇ durante um período de 4 min. Após agitação num banho de geloêágua durante 30 min, o banho gelado foi removido e a mistura de reação foi deixada agitar à temperatura ambiente. Após agitação de 16 h à temperatura ambiente a mistura de reação foi diluída com água e extraída com DCM. A camada aquosa foi outra vez extraída com DCM e as camadas orgânicas combinadas foram secas por MgS04, filtradas e concentradas. 0 material bruto ±1,64 gÇ foi utilizado tal qual sem mais purificação.
Exemplo 39: 0 Exemplo 39 foi preparado a partir do Exemplo 1 e do Intermediário 39A de acordo com o procedimento geral mostrado para o Exemplo 38. HPLC: RT = 7,443 min ±H20êCH3CN com TFA, Sunfire C18 3,5 pm, 4,6 x 150 mm, gradiente = 15 min, comprimento de onda = 220 e 254 nmÇ; MS±ESÇ: m/z = 676 [Μ + H+] ; λΕ RMN ±500 MHz, DMS0-d6Ç δ 9,45 ±d, J = 6,7 Hz, 1HÇ, 8,17 ±s. 1., 3HÇ, 7,72 - 7,63 ±m, 2HÇ, 7,58 - 7,49 ±m, 1HÇ, 7,48 - 7,36 ±m, 4HÇ, 7,25 ±d, J = 6,9 Hz, 1HÇ, 7,14 ±s. 1., 1HÇ, 6,15 ±d, J = 10,3 Hz, 1HÇ, 5,50 ±d, J = 10,3 Hz, 1HÇ, 5,38 ±d, J = 6,7 Hz, 1HÇ, 2,83 ±td, J = 10,1, 4,2
Hz, 1HÇ, 2,45 ±s, 3HÇ, 2,29 - 2,06 ±m, 3HÇ, 1,77 - 1,48 ±m, 4HÇ, 0,94 ±d, J = 7,2 Hz, 3HÇ.
Exemplo 40 S-±±±2S,3RÇ-6,6,6-Trifluoro-3-±±±3SÇ-5-±3-fluorofenilÇ-9-metil-2-oxo-2,3-di-hidro-ΙΗ-1,4-benzodiazepin-3-ilÇcarbamoilÇ-2-±3,3,3 -1 ri f1uoropropi1Çhexanoi1ÇaminoÇ-L- cisteína
Intermediário 40A: 3,3'-dissulfanodiilbis+2-±±terc- butoxicarbonilÇaminoÇpropanoatoÇ de +2R,2'RÇ-di-terc-butilo
Uma suspensão de dicloridrato de 3,3'-dissulf anodiilbis+2-aminopropanoatoÇ de ±2R,21RÇ-di-terc- butilo ±1,9 g, 4,47 mmolÇ em DMF ±50 mlÇ à temperatura ambiente foi tratada com TEA ±1,555 ml, 11,17 mmolÇ, seguido por dicarbonato de di-terc-butilo ±2,437 g, 11,17 mmolÇ. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. A mistura de reação foi vertida em EtOAc ±100 mlÇ e lavada com HC1 a 0,1 N ±2 x 100 mlÇ, seguido por NaHC03 sat. aq. ±100 mlÇ e salmoura ±100 mlÇ. A camada orgânica foi seca ±Na2s04Ç filtrada e concentrada até à secura. 0 produto bruto foi dissolvido numa pequena quantidade de DCM e purificado por cromatografia flash ±Si02, 0 % acetato de etiloêhexanos a 20 % acetato de etiloêhexanos, coluna de 12 0 g, gradiente de 30 minÇ para proporcionar o Intermediário 40A ±1,65 g, 66,8 %Ç. 1H RMN ±400 MHz, clorofórmio-dÇ δ 5,34 ±d, J = 5,9 Hz, 2HÇ, 4,46 ±d, J = 5,9 Hz, 2HÇ, 3,27 - 3,07 ±m, 4HÇ, 1,49 ±s, 18HÇ, 1,46 ±s, 18HÇ. Intermediário 40B : 2-±± terc-butoxicarbonilÇaminoÇ-3- ±±±2S,3RÇ-6,6,6 -trifluoro-3-±±±SÇ-5-±3-fluorofenilÇ-9 - metil-2-oxo-2,3-di-hidro-lH-benzo[e][1,4]diazepin-3-ilÇcarbamoilÇ-2-±3,3,3 -1ri fluoropropi1Ç hexanamidoÇtioÇpropanoato de +RÇ-terc-butilo
Uma suspensão leve de nitrato de prata ±118 mg, 0,696 mmolÇ em metanol ±18 mlÇ foi tratada com Intermediário 40A ±385 mg, 0,696 mmolÇ. A mistura de reação foi agitada durante 30 min e depois o Exemplo 1 ±100 mg, 0,174 mmolÇ e TEA ±97 μΐ, 0,696 mmolÇ foram adicionados. A reação foi agitada à temperatura ambiente durante a noite e depois concentrada até à secura. 0 produto bruto foi dissolvido numa pequena quantidade de DCM e purificado por cromatografia flash ±Si02, 0 % acetato de etiloêhexanos a 100 % acetato de etiloêhexanos, coluna de 24 g, gradiente de 3 0 minÇ para proporcionar o Intermediário 4 0B ±78 mg, 52,7 %Ç. HPLC TR - 3,443 min ±CHR0M0LITH® SpeedROD, 5,0 um, 4,6 mm x 50 mm, metanol aquoso a 10-90 % contendo TFA a 0,1 %, gradiente de 4 min, monitorizada a 220 nmÇ. [Μ + H+] = 850,5.
Exemplo 40:
Uma solução de Intermediário 40B ±78 mg, 0,092 mmolÇ em DCM ±5 mlÇ a 0 °C foi tratada com TFA ±0,5 ml, 6,4 9 mmolÇ e lentamente aquecida até à temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante a noite e depois concentrada até à secura. 0 produto de reação bruto foi dissolvido numa pequena quantidade de MeOH e purificado por HPLC de fase reversa ±YMC ODS C18 5 um 30 x 100 mm, metanol aquoso a 10-90 % contendo TFA a 0,1 Ú, 15 mlêmin, gradiente de 30 min, monitorizada a 220 nmÇ. O produto ±tempo de retenção = 24,980 minutosÇ foi isolado e liofilizado até à secura. 0 sólido resultante foi colocado em suspensão em água e tratado com HC1 a 0,1 N ±1 mlÇ a 0 °C. A solução foi novamente liofilizada até à secura para proporcionar o Exemplo 4 0 como um sal de HC1 ±2 9 mg, 41,5 ÚÇ. HPLC RT: = 9,328 min ±Sunfire C18 3,5 çim, 3 x 150 mm, 10 Ú 95ê5 águaêACN com TFA a 0,05 Ú a 100 Ú 5ê95 águaêACN com TFA a 0,05 Ú, gradiente de 15 minutos, taxa de fluxo = 0,5 mlêmin, monitorizada a 220 e 254 nmÇ. MS+ESÇ: m/z = 694,4 [Μ + H+] . XH RMN ±400 MHz, DMS0-d5Ç δ 10,23 +s, 1HÇ, 9,65 ±S, 1HÇ, 9,52 ±d, J = 7,5 Hz, 1HÇ, 8,44 ±s. 1., 2HÇ, 7,55 ±dd, J = 6,6, 1,5 Hz, 1HÇ, 7,51 - 7,44 ±m, 1HÇ, 7,42 - 7,33 ±m, 2HÇ, 7,28 - 7,23 ±m, 1HÇ, 7,22 - 7,17 ±m, 2HÇ, 5,25 ±d, J = 7,3 Hz, 1HÇ, 4,02 - 3,94 ±m, 1HÇ, 3,27 ±dd, J = 15,1, 4,1 Hz, 1HÇ, 3,02 ±dd, J = 15,1, 8,9 Hz, 1HÇ, 2,92 ±td, J = 10,6, 3,3 Hz, 1HÇ, 2,74 - 2,65 ±m, 1HÇ, 2,28 - 2,11 ±m, 4HÇ, 1,85 - 1,74 ±m, 1HÇ, 1,73 - 1,64 ±m, 1HÇ, 1,64 - 1,54 ±m, 1HÇ, 1,48 - 1,36 ±m, 1HÇ.
Exemplo 41 S-±±±2S,3RÇ-6,6,6 -trifluoro-3-±±±3SÇ-5-±3-fiuorofenilÇ-9-metil-2-oxo-2,3-di-hidro-lH-1,4-benzodiazepin-3 -ilÇcarbamoilÇ-2-±3,3,3 -trifluoropropilÇhexanoilÇaminoÇ-L- cisteinato de terc-butilo
Uma solução de Intermediário 40B ±417 mg, 0,491 mmolÇ em DCM ±20 mlÇ foi tratada com TFA ±2 ml, 26,0 mmolÇ e agitada à temperatura ambiente durante 24 h. A solução resultante foi concentrada até à secura. 0 produto de reação bruto foi dissolvido numa pequena quantidade de MeOH e purificado por HPLC de fase reversa +YMC ODS C18 5 um 20 x 100 mm, metanol aquoso a 10-90 Ú contendo TFA a 0,1 Ú, 15 mlêmin, gradiente de 30 min, monitorizada a 220 nmÇ. 0 produto ±tempo de retenção = 27,037 minutosÇ foi isolado e liofilizado até à secura. 0 material resultante foi tratado com bases livres com NaHC03 sat. aq. para proporcionar o Exemplo 41 ±12 mg, 3,03 ÚÇ. HPLC: RT = 8,726 min ±Xbridge Phenyl 3,5 pm, 3 x 150 mm, 10 Ú 95ê5 águaêACN com 0,05 Ú TFA a 100 Ú 5ê95 águaêACN com 0,05 Ú TFA, 15 minutos gradiente, taxa de fluxo = [taxa de fluxo], monitorizada em 220 e 254 nmÇ. MS±ESÇ: mêz = 750,4,4 [Μ + Η*] . ΧΗ RMN +400 MHz, DMS0-d6Ç δ 10,25 ±s, 1HÇ, 9,62 ±s, 1HÇ, 9,54 ±d, J = 7,3 Hz, 1HÇ, 8,46 +s. 1., 3HÇ, 7,56 ±dd, J = 6,6, 1,8 Hz, 1HÇ, 7,53 - 7,45 ±m, 1HÇ, 7,43 - 7,33 ±m, 2HÇ, 7,29 - 7,24 ±m, 1HÇ, 7,23 - 7,17 +m, 2HÇ, 5,26 ±d, J = 7,3 Hz, 1HÇ, 3,98 ±s. 1., 1HÇ, 3,24 ±dd, J = 15,0, 4,2 Hz, 1HÇ, 3,03 ±dd, J = 15,0, 9,0 Hz, 1HÇ, 2,94 ±td, J - 10,3, 3,4 Hz, 1HÇ, 2,76 - 2,66 +m, 1HÇ, 2,48 - 2,44 ±m, 1HÇ, 2,29 - 2,12 ±m, 3HÇ, 1,87 - 1,77 ±m, 1HÇ, 1,75 - 1,67 ±m, 1HÇ, 1,65 - 1,54 ±m, 1HÇ, 1,49 +d, J = 2,2 Hz, 1HÇ, 1,46 ±s, 9HÇ. Exemplo 42 S-±±±2S,3RÇ-6,6,6-trifluoro-3-±±±3SÇ-5-±3-fiuorofenilÇ-9-metil-2-di-hidro-1H-1,4-benzodiazepin-3-ilÇcarbamoilÇ-2-±3,3,3 -trifluoropropilÇ hexanoilÇaminoÇ-1-cisteinato de metilo
Intermediário 42A: 2-±±terc-butoxicarbonilÇaminoÇ-3- ±±±2S,3RÇ-6,6,6-trifluoro-3-±±±SÇ-5-±3-fluorofenilÇ-9 -metil-2-oxo-2,3-di-hidro-lH-benzo[e][1,4]diazepin-3-ilÇcarbamoilÇ-2-±3,3,3 -trifluoropropilÇ hexanamidoÇtioÇpropanoato de ±RÇ-metilo
Uma solução de nitrato de prata ±118 mg, 0,696 mmolÇ em metanol ±9 mlÇ foi tratada com 3,3'-disulfanodiilbis±2-±±terc-butoxicarbonilÇaminoÇpropanoatoÇ de ±2R,2'RÇ-dimetilo ±326 mg, 0,696 mmolÇ. A mistura de reação foi agitada durante 30 minutos e depois o Exemplo 1 ±100 mg, 0,174 mmolÇ e TEA ±0,097 ml, 0,696 mmolÇ foram adicionados. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante a noite e depois concentrada até à secura. 0 produto bruto foi dissolvido numa pequena quantidade de CH2C12 e purificado por cromatografia flash ±Si02, 0 Ú acetato de etiloêhexanos a 80 Ú acetato de etiloêhexanos, coluna de 4 gÇ para proporcionar o Intermediário 42A. ±80 mg, 57 ÚÇ. HPLC RT = 3,20 min ±CHR0M0LITH® SpeedROD, 5,0 μη\, 4,6 mm x 50 mm, 10 - metanol aquoso a 90 Ú contendo TFA a 0,1 Ú, gradiente de 4 min, monitorizada em 220 nmÇ. MS±ESÇ: mêz = 808,3 [M + H+] .
Exemplo 42: A uma solução de Intermediário 42A ±80 mg, 0,099 mmolÇ em DCM ±2 mlÇ a 0 °C foi adicionado TFA ±0,5 mlÇ. A mistura foi agitada durante 2,5 h enquanto se aquece até à temperatura ambiente. A mistura de reação foi depois concentrada e o resíduo foi purificado por cromatografia flash em gel de sílica ±coluna de 4 g, 0 - 8 Ú MeOHêDCM com 0,1 Ú NH40HÇ para fornecer um sólido branco, o qual foi ainda tratado com éter para fornecer o produto purificado ±29,5 mg, 41 ÚÇ. HPLC RT = 2,570 min ±CHROMOLITH® SpeedROD, 5,0 um, 4,6 mm x 50 mm, metanol aquoso a 10 - 90 Ú contendo TFA a 0,1 Ú, gradiente de 4 min, monitorizada em 220 nmÇ. MS+ESÇ: mêz = 708,2 [M + H+] . XH RMN ±400 MHz, metanol-d4Ç δ 7,58 - 7,52 ±m, 1HÇ, 7,48 - 7,32 ±m, 3HÇ, 7,30 - 7,19 ±m, 3HÇ, 5,39 ±s, 1HÇ, 3,75 ±S, 3HÇ, 3,63 ±dd, J = 8,7, 4,1 Hz, 1HÇ, 3,30 - 3,24 ±m, 1HÇ, 2,90 ±td, J = 10,4, 3,6 Hz, 1HÇ, 2,78 ±dd, J = 14,3, 8,6 Hz, 1HÇ, 2,69 ±td, J = 10,0, 3,6 Hz, 1HÇ, 2,57-2,38 ±m, 4HÇ, 2,36 - 2,06 ±m, 3HÇ, 2,05 - 1,90 ±m, 1HÇ, 1,89 - 1,74 ±m, 2HÇ, 1,63 ±tt, J = 12,5, 4,3
Hz, 1HÇ.
Exemplo 43 +4-±fosfonoóxiÇfenilÇacetato de ±±3SÇ-3-±±±2R,3SÇ-3-
Carbamoil-6,6,6-trifluoro-2-±3,3,3- trifluoropropilÇhexanoilÇaminoÇ-5-±3-fluorofenilÇ-9-metil-2-0X0-2,3-di-hidro-lH-l,4-benzodiazepin-1-ilÇmetilo
13)
Intermediário 43A: ±2R,3SÇ-3-±TrifluoropropilÇ-Nl-±±S,ZÇ-1-±metiltiometilÇ-2-oxo-5-±3-fluorofenilÇ-9-metil-2,3-di-hidro-lH-benzo[e][1,4]diazepin-3-ilÇmetil-2-±3,3,3-trifluoropropilÇsuccinamida
A uma mistura de Exemplo 1 ±278 mg, 0,484 mmolÇ em DMF +2,75 mlÇ foi adicionado Cs2C03 ±315 mg, 0,968 mmolÇ e ±clorometilDZmetilÇsulfano ±0,081 ml, 0,919 mmolÇ sob azoto. Esta mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 110 min e depois diluída com água. A camada aquosa foi extraída com EtOAc. Os extratos de EtOAc combinados foram lavados com salmoura. A camada orgânica foi seca sobre sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para fornecer o produto bruto. 0 material bruto foi purificado por cromatografia flash ±Teledyne ISCO CombiFlash 0 Ú a 100 Ú solvente AêB hexanoêEtOAc, REDISEP® Si02 40 g, deteção a 254 nM, e monitoração em 220 nMÇ. A concentração das frações apropriadas forneceu o Intermediário 43A ±198 mg, 64,5 ÚÇ. HPLC: RT = 3,205 min ±CHR0M0LITH® SpeedROD coluna 4,6 x 50 mm, metanol aquoso a 10 - 90 Ú durante 4 minutos contendo TFA a 0,1 Ú, 4 mlêmin, monitorização a 220 nmÇ, MS±ESÇ: mêz = 635,4 [Μ + H+] ; XH RMN ±400 MHz, DMS0-d6Ç δ 9,49 ±d, J = 7,3 Hz, 1HÇ, 7,63 ±d, J = 8,4 Hz, 2HÇ, 7,57 - 7,51 ±m, 1HÇ, 7,49 - 7,36 ±m, 4HÇ, 7,23 ±d, J = 7,5 Hz, 1HÇ, 7,13 ±s, 1HÇ, 5,57 ±d, J = 14,1 Hz, 1HÇ, 5,33 ±d, J = 7,0 Hz, 1HÇ, 4,38 ±d, J = 14,3 Hz, 1HÇ, 2,80 ±td, J = 9,8, 4,1 Hz, 1HÇ, 2,61 - 2,54 ±m, 1HÇ, 2,46 - 2,44 ±m, 1HÇ, 2,42 ±s, 3HÇ, 2,30 - 2,06 ±m, 4HÇ, 1,68 ±s, 3HÇ, 1,64 - 1,48 ±m, 3HÇ. Intermediário 43B: 2-±4-±di-terc- butoxifosforiloxiÇfenilÇacetato de metilo
Uma solução agitada de 2-±4-hidroxifenilÇacetato de metilo ±1,80 g, 10,83 mmolÇ foi combinada com lH-tetrazol em MeCN ±65 ml, 10,83 mmolÇ e depois dietilfosforamidita de di-terc-butilo ±5,91 g, 23,70 mmolÇ foi adicionada. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 35 min e depois concentrada até à secura. 0 material bruto foi dissolvido em 50 ml de DCM e H202 a 30 Ú ±30 mlÇ foi adicionado. Após agitação à temperatura ambiente durante 3 0 min, a mistura foi diluída com DCM e lavada com água, solução de NaHC03 saturada, e depois salmoura. A camada orgânica foi concentrada e purificada por cromatografia flash ±Teledyne ISCO CombiFlash 0 Ú a 100 Ú solvente AêB = hexanoêEtOAc, REDISEP® Si02 80 g, deteção a 254 nM, e monitorização a 220 nMÇ. A concentração das frações apropriadas proporcionou o Intermediário 43B ±3,94 g, rendimento quantitativoÇ. ΧΗ RMN +400 MHz, clorofórmio-dÇ δ ppm 7,25 - 7,14 ±m, 4HÇ, 3,69 ±s, 3HÇ, 3,59 ±s, 2HÇ, 1,51 ±S, 18HÇ.
Intermediário 43C: ácido 2 -±4 -±di-terc- butoxifosforiloxiÇfenilÇacético
A uma solução agitada de Intermediário 43B ±0,635 g, 1,772 mmolÇ em THF ±12,0 mlÇ e água ±3,00 mlÇ foi adicionado hidróxido de lítio ±0,122 g, 2,14 mmolÇ. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 2 h e depois os orgânicos foram removidos sob pressão reduzida. A mistura resultante foi diluída com 10 ml de solução de fosfato pH 4. A mistura resultante foi extraída com EtOAc. O extratos de EtOAc combinados foram lavados com salmoura, secos com sulfato de magnésio anidro, filtrados e concentrados para proporcionar o Intermediário 43C ±0,462 g, 76 ÚÇ. RMN ±400 MHz, DMSO-dsÇ δ ppm 12,30 ±s. 1., 1HÇ, 7,25 ±d, J = 8,4 Hz, 2HÇ, 7,13 - 7,03 ±m, 2HÇ, 3,55 ±S, 2HÇ, 1,44 ±s, 1HÇ.
Intermediário 43D: 2-±4-±di-terc-buto-xifosforilóxiÇfenilÇacetato de ±±S,ZÇ-3-±±RÇ-2-±±SÇ-l-Amino-3-trifluoro-l-oxopropan-2-ilÇ-5,5,5- trifluoropentanamidoÇ-2-oxo-5-±3-fluorofenilÇ-9-metil-2,3-di-hidro-ΙΗ-benzo[e][1,4]diazepin-l-ilÇmetilo
A uma mistura agitada de Intermediário 43A ±195 mg, 0,307 mmolÇ e cloridrato de trietilamina ±85,0 mg, 0,615 mmolÇ em DCM ±3,00 mlÇ sob azoto foi adicionado cloreto de sulfurilo ±0,037 ml, 0,461 mmolÇ. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 25 min e depois concentrada até à secura para fornecer um sólido amarelo. 0 Intermediário 43C ±221 mg, 0,640 mmolÇ e Cs2C03 ±417 mg, 1,281 mmolÇ foram combinados em DMF ±1,50 mlÇ à temperatura ambiente sob azoto. A esta mistura foi adicionada uma solução do sólido amarelo acima em DMF ±2,00 mlÇ. A mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 148 minutos e depois diluída com água e EtOAc. A camada orgânica foi separada e lavada com solução de LiCl a 10 Ú e depois salmoura. A camada orgânica foi seca com sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada até à secura. 0 produto bruto foi purificado por cromatografia flash ±Teledyne ISCO CombiFlash 0 Ú a 100 Ú solvente AêB hexanoêEtOAc, REDISEP® Si02 24 g, deteção a 254 nM, e monitorização a 220 nMÇ. A concentração das frações apropriadas forneceu o Intermediário 43D ±152 mg, 53,5 ÚÇ. HPLC: RT = 3,640 min +CHROMOLITH® SpeedROD coluna 4,6 x 50 mm, metanol aquoso a 10 - 90 Ú durante 4 minutos contendo TFA a 0,1 Ú, 4 mlêmin, monitorização a 220 nmÇ, MS+ESÇ: mêz = 931,6 [Μ + H+] ; λΉ RMN ±400 MHz, DMS0-d6Ç δ 9,47 ±d, J = 6,8 Hz, 1HÇ, 7,68 - 7,60 ±m, 2HÇ, 7,54 - 7,46 ±m, 1HÇ, 7,44 - 7,33 ±m, 4HÇ, 7,20 ±d, J = 7,5 Hz, 1HÇ, 7,13 ±s. 1., 1HÇ, 6,97 - 6,91 ±m, 2HÇ, 6,87 - 6,80 ±m, 2HÇ, 6,05 ±d, J = 10,3
Hz, 1HÇ, 5,38 ±d, J = 4,0 Hz, 1HÇ, 5,36 ±s, 1HÇ, 3,22 ±t, J = 1,0 Hz, 2HÇ, 2,81 ±dt, J = 9,8, 5,0 Hz, 1HÇ, 2,45 ±d, J = 3.3 Hz, 1HÇ, 2,41 ±s, 3HÇ, 2,30 - 2,20 ±m, 1HÇ, 2,18 - 2,06 ±m, 3HÇ, 1,69 ±d, J = 10,6 Hz, 1HÇ, 1,63 - 1,51 ±m, 3HÇ, 1,43 ±S, 18HÇ.
Exemplo 43: A uma solução agitada de Intermediário 43D ±148 mg, 0,159 mmolÇ em D CM ±1,64 mlÇ foi adicionado TFA ±0,16 ml, 2,077 mmolÇ a 0 °C. A mistura foi agitada a 0 °C durante 10 min e depois à temperatura ambiente durante 40 min, e depois concentrada sob pressão reduzida para proporcionar o Exemplo 43 ±126,6 mg, 94 ÚÇ. HPLC: RT = 9,95 min ±H20êCH3CN com TFA, Sunfire C18 3,5 pm, 4,6 x 150 mm, gradiente = 15 min, comprimento de onda = 220 e 254 nmÇ; MS±ESÇ: mêz = 819,5 [M + H+] ; XH RMN ±400 MHz, DMSO-dsÇ δ 9,51 ±d, J = 5,7
Hz, 1HÇ, 7,66 ±d, J = 7,7 Hz, 2HÇ, 7,54 - 7,49 ±m, 1HÇ, 7,48 - 7,40 ±m, 3HÇ, 7,37 ±d, J = 7,7 Hz, 1HÇ, 7,22 ±d, J = 8.4 Hz, 1HÇ, 7,15 ±s. 1., 1HÇ, 6,97 ±d, J = 8,6 Hz, 2HÇ, 6,84 ±d, J = 8,4 Hz, 2HÇ, 6,07 ±d, J = 10,6 Hz, 1HÇ, 5,40 ±s, 1HÇ, 5,38 ±s, 1HÇ, 3,32 - 3,15 ±m, 2HÇ, 2,83 ±s. 1., 1HÇ, 2,58 - 2,56 ±m, 1HÇ, 2,43 ±S, 3HÇ, 2,15 ±dd, J = 19,7, 8.5 Hz, 4HÇ, 2,01 ±s, 1HÇ, 1,71 ±s, 2HÇ, 1,67 - 1,51 ±m, 3HÇ.
Exemplo 44 L-valil-1-vaiinato de ±±3SÇ-3-±±±2R,3SÇ-3-Carbamoil-6,6,6-trifluoro-2-±3,3,3 -tri fluoropropilÇhexanoilÇaminoÇ-5 - ±3 -fluorofenilÇ-9-metil-2-oxo-2,3-di-hidro-lH-l,4-benzodiazepin-l-ilÇmetilo
Intermediário 44A: ±2R,3SÇ-3-±TrifluoropropilÇ-Nl-±±S,ZÇ-1-±metiltiometilÇ-2-oxo-5-±3-fluorofenilÇ-9-metil-2,3-di-hidro-ΙΗ-benzo[e][1,4]diazepin-3-ilÇmetil-2-±3,3,3-trifluoropropilCsuccinamida
, ) A uma mistura de Exemplo 1 ±278 mg, 0,484 mmolÇ em DMF ±2,75 mlÇ foi adicionado Cs2C03 ±315 mg, 0,968 mmolÇ e ±clorometilDZmetilÇsulfano ±0,081 ml, 0,919 mmolÇ sob azoto. Esta mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 110 min, e depois diluída com água. A camada aquosa foi extraída com EtOAc. Os extratos de EtOAc combinados foram lavados com salmoura. A camada orgânica foi seca por sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para fornecer o produto bruto. Ela foi purificada por cromatografia flash ±Teledyne ISCO CombiFlash 0 Ú a 100 Ú solvente AêB = hexanoêEtOAc, REDISEP® Si02 40 g, deteção a 254 nM, e monitorização a 220 nMÇ. A concentração das frações apropriadas forneceu o Intermediário 44A +198 mg, 64,5 ÚÇ. HPLC: RT = 3,205 min +CHR0M0LITH® SpeedROD coluna 4,6 x 50 mm, metanol aquoso a 10 - 90 Ú durante 4 minutos contendo TFA a 0,1 Ú, 4 mlêmin, monitorização a 220 nmÇ, MS+ESÇ: mêz = 635,4 [M + H+] ; ΧΗ RMN +400 MHz, DMS0-dsÇ δ 9,49 +d, J = 7,3 Hz, 1HÇ, 7,63 ±d, J = 8,4 Hz, 2HÇ, 7,57 - 7,51 ±m, 1HÇ, 7,49 - 7,36 +m, 4HÇ, 7,23 ±d, J = 7,5 Hz, 1HÇ, 7,13 +s, 1HÇ, 5,57 +d, J = 14,1
Hz, 1HÇ, 5,33 +d, J = 7,0 Hz, 1HÇ, 4,38 ±d, J = 14,3 Hz, 1HÇ, 2,80 ±td, J = 9,8, 4,1 Hz, 1HÇ, 2,61 - 2,54 +m, 1HÇ, 2,46 - 2,44 +m, 1HÇ, 2,42 ±s, 3HÇ, 2,30 - 2,06 ±m, 4HÇ, 1,68 +s, 3HÇ, 1,64 - 1,48 +m, 3HÇ,
Intermediário 44B: 2-±±SÇ-2-±±terc-butoxicarbonilÇaminoÇ-3-metilbutanamidoÇ-3-metilbutanoato de +SÇ-++SÇ-3-++2R,3SÇ-3-Carbamoil-6,6,6-trifluoro-2-+3,3,3- trifluoropropilÇhexanamidoÇ-5-+3-fluorofenilÇ-9-metil-2 -oxo-2,3-di-hidro-lH-benzo[e][1,4]diazepin-l-ilÇmetilo
A uma mistura agitada de Intermediário 44A +157 mg, 0,247 mmolÇ e cloridrato de trietilamina ±68,1 mg, 0,495 mmolÇ em DCM ±3,00 mlÇ sob azoto foi adicionado cloreto de sulfurilo ±0,030 ml, 0,371 mmolÇ. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 60 min e depois concentrada até à secura para fornecer um sólido amarelo. 0 resíduo foi dissolvido em DMF ±2 mlÇ e adicionado a uma mistura agitada de ácido +SÇ-2-±±SÇ-2-±±terc-butoxicarbonilÇaminoÇ-3-metilbutanamidoÇ-3-metilbutanoico ±313 mg, 0,989 mmolÇ e CS2C03 ±4 03 mg, 1,23 6 mmolÇ em DMF ±2,0 mlÇ à temperatura ambiente sob azoto. A mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 2,5 h, depois água e NaHC03 saturado aquoso foram adicionados. Formou-se um precipitado branco o qual foi recolhido por filtração, enxaguado com água e seco sob vácuo. 0 material bruto foi purificado por cromatografia flash ±Teledyne ISCO CombiFlash 20 Ú a 70 Ú solvente AêB = hexanoêacetona, REDISEP® Si02 80 g, deteção a 254 nM, e monitorização a 220 nMÇ. A concentração das frações apropriadas forneceu o Intermediário 44B ±148,4 mg, 66,5 ÚÇ. HPLC: RT = 3,486 min ±CHROMOLITH® SpeedROD coluna 4,6 x 50 mm, metanol aquoso a 10 a 90 Ú durante 4 minutos contendo TFA a 0,1 Ú, 4 mlêmin, monitorização a 220 nmÇ, MS±ESÇ: mêz = 903,7 [M + H+] .
Exemplo 44: A uma solução agitada de Intermediário 44B ±148 mg, 0,164 mmolÇ em DCM ±4,00 mlÇ sob azoto foi adicionado HC1 a 4 N em dioxano ±0,410 ml, 1,639 mmolÇ. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 60 min e depois concentrada até à secura para fornecer o Exemplo 44 ±148 mg, 97 ÚÇ. HPLC: RT = 8,038 min ±CHROMOLITH® SpeedROD coluna 4,6 x 50 mm, metanol aquoso a 10 - 90 Ú durante 4 minutos contendo TFA a 0,1 Ú, 4 mlêmin, monitorização a 220 nmÇ, MS±ESÇ: mêz = 803,6 [Μ + H+] ; ΧΗ RMN ±500 MHz, DMSO-deÇ δ 9,49 ±d, J = 6,9 Hz, 1HÇ, 8,35 ±d, J = 7,8 Hz, 1HÇ, 8,02 ±d, J = 4,4 Hz, 3HÇ, 7,69 - 7,62 ±m, 2HÇ, 7,55 - 7,48 ±m, 1HÇ, 7,45 - 7,35 ±m, 4HÇ, 7,24 ±d, J = 6,9 Hz, 1HÇ, 7,12 +S. 1., 1HÇ, 6,03 +d, J = 10,3 Hz, 1HÇ, 5,41 - 5,34 ±m, 2HÇ, 3,93 ±dd, J = 7,6, 5,4 Hz, 1HÇ, 3,66 - 3,62 +m, 1HÇ, 2,82 ±td, J = 10,2, 4,3 Hz, 1HÇ, 2,43 ±s, 4HÇ, 2,29 - 2,07 ±m, 3HÇ, 1,99 ±dq, J = 13,2, 6,8 Hz, 1HÇ, 1,76 - 1,66 ±m, 2HÇ, 1,63 - 1,49 ±m, 3HÇ, 0,88 ±dd, J = 10,0, 6,9 Hz, 6HÇ, 0,61 ±d, J = 6,9 Hz, 3HÇ, 0,57 ±d, J = 6,7 Hz, 3HÇ. Compostos Comparativos de 45 a 48
Os Compostos Comparativos 45 a 48 podem ser preparados de acordo com os procedimentos descritos no documento de Patente U.S. N.° 7.053.084 para os Exemplos 8, 12a, 38, e A^zi rpcinph -i iramoni-o
Exemplo 49
Formulação Farmacêutica compreendendo ±2R,3SÇ-N-±±3SÇ-5-±3-FluorofenilÇ-9-metil-2-oxo-2,3-di-hidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis±3,3,3-tri fluoropropilÇsucc inamida
Um produto farmacológico para injeção foi formulado compreendendo +2R,3SÇ-N-±±3SÇ-5-±3-fluorofenilÇ-9-metil-2-oxo-2,3-di-hidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis±3,3,3-trifluoropropilÇsuccinamida, Exemplo 1, como uma solução estéril pronta para utilização de única aplicação +RTUÇ para administração intravenosa ±IVÇ. Uma mistura de veículo foi preparada através da mistura de 80 % vB v de Polietileno glicol 4 00 e 20 % v0 v de água à temperatura ambienfe. 0 Exemplo 1 ±0,2 mgB mlÇ foi adicionado à mistura de eículo preparada. A formulação foi sonicada durante cerca de 20 minutos até que o Exemplo 1 foi dissolvido.
Exemplo 50
Formulação Farmacêutica compreendendo +2R,3SÇ-N-++3SÇ-5-+3-FluorofenilÇ-9-metil-2-oxo-2,3-di-hidro-lH-l,4 -benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis±3,3,3-trifluoropropilÇsuccinamida
Um produto farmacológico foi formulado compreendendo +2R,3SÇ-N-±±3SÇ-5-±3-fluorofenilÇ-9-metil-2-oxo-2,3-di-hidro-lH-1,4-benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis±3,3,3-trifluoropropilÇsuccinamida, Exemplo 1, adequado para a administração oral como uma solução ou cápsula. A formulação oral compreendia 70 % v0 v de polietilenoglicol 300, 10 % vl3 v de etanol, 10 % vl v de TPGS, 10 % vE de CREMOPHOR® RH40, e o Exemplo 1 ±até a concentração de fármaco de 4 mglEI mlÇ. TPGS sólido e CREMOPHOR® foram pré-aquecidos para liquefazer os materiais. A quantidade apropriada de cada um dos excipientes foi depois medida e misturada à temperatura ambiente. A quantidade requerida de Exemplo 1 foi adicionada à mistura de veículo preparada. A formulação foi sonicada durante cerca de 20 minutos até que o Exemplo 1 foi dissolvido.
Exemplo 51
Formulação Farmacêutica compreendendo ±2R,3SÇ-N-±±3SÇ-5-±3-FluorofenilÇ-9-metil-2-oxo-2,3-di-hidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis+3,3,3-trifluoropropilÇsuccinamida
Um produto farmacológico foi formulado compreendendo +2R,3SÇ-N-+±3SÇ-5-±3-fluorofenilÇ-9-metil-2-oxo-2,3-di-hidro-lH-1,4-benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis±3,3,3-trifluoropropilÇsuccinamida, Exemplo 1, adequado para a administração oral como uma solução ou cápsula. A formulação oral compreendia 80 Ú vl3 v de polietilenoglicol 3 00, 10 Ú vl v de etanol, 10 Ú vE3 v de TPGS, e o ExpÉho 1 ±até a concentração de fármaco de 4 mg0 mlÇ. TPGS sólido foi pré-aquecido para liquefazer o material. A quantidade apropriada de cada um dos excipientes foi depois medida e misturada à temperatura ambiente. A quantidade requerida de Exemplo 1 foi adicionada à mistura de veículo preparada. A formulação foi sonicada durante cerca de 20 minutos até que o Exemplo 1 foi dissolvido.
ENSAIOS BIOLÓGICOS
As propriedades farmacológicas dos compostos desta invenção podem ser confirmadas por vários ensaios biológicos. Os ensaios biológicos exemplificados, que se seguem, foram realizados com os compostos da invenção. Ensaio de Transativação de Notch-CBFl 0 ensaio de transativação baseado na célula de Notch-CBF1 +fator de ligação I ao C-promotorÇ baseia-se na capacidade dos fragmentos de domínio intracelular Notch libertados ±NICDsÇ de funcionar como fatores de transcrição em conjunto com CBF1 e outros fatores nucleares. Os ensaios de luciferase foram utilizados para medir o antagonismo da atividade de transcrição de Notch-CBFl. As células cancerosas do colo do útero HeLa são co-transfetadas transitoriamente com plasmídeos pCDNA3,lêHygro contendo recetores truncados de Notch 1, Notch 2, Notch 3 ou Notch 4 e um vetor repórter luciferase PGL3 contendo 4 cópias do sítio de ligação do CBF1. As células foram então testadas quanto à atividade de Notch-CBFl na ausl3 ncia ou na presença de compostos de teste. As células HeLa, mantidas em DMEM ±alto teor de glicose com HEPESÇ, IX glutaminaêpenicilinaê estreptomicina e soro fetal bovino a 10 Ú, foram transientemente transfetadas num Frasco T175 ±4,5 x 106 célulasêfrascoÇ utilizando o Monster Transfection Kit ±Mirus #MIR2 906Ç de acordo com as especificações do fabricante. 0 Quadro 9 indica a respetiva quantidade de ADN para as transfeções.
Seis horas após a transfeção, as células foram tripsinizadas e colocadas numa placa de cultura de tecido revestida com poli-D-lisina preta de 384 poços a uma densidade de 5 x 103 célulasêpoço em 95 ul de meio de ensaio +DMEM ±elevado teor de glicose com HEPESÇ, IX glutaminaêpenicilinaêestreptomicina, BSA a 0,0125 Ú, IX aminoácidos não essenciaisÇ. Meios de ensaio ±5 plÇ contendo compostos de teste em concentrações finais que variam de 5 a 8,4 x 10“b μΜ +diluições em série de 3 vezesÇ foram adicionados às células e as placas de células foram depois incubadas durante 18 horas a 37 0C e 5 % de C02 - Os poços de controlo continham veículo de DMSO ±contagens totaisÇ ou 0,5 μΜ de um inibidor interno de molécula pequena ±contagens de fundoÇ. Os duplicados foram utilizados para cada amostra. A atividade da luciferase foi medida após uma incubação de 20 minutos com 50 μΐ de reagentes de luciferase STEADY-GLO® de acordo com as especificações do fabricante ±Promega, Cat. #E2550Ç e analisada pela leitora de placas Envision ±PerkinElmer, Boston, MAÇ. O efeito antagonista dos compostos foi expresso como 100 x [l-±amostra média-formação médiaÇ/±média total-fundo médioÇ] onde a amostra é a atividade de luciferase na presença do composto de teste, o fundo é igual à atividade da luciferase na presença do controlo de inibidor de molécula pequena e o total é o sinal induzido nos poços de DMSO. Os dados foram representados graficamente utilizando uma equação de ajuste logístico de quatro parâmetros e o valor de CI50 foi definido como a concentração de composto que inibiu 50 % da atividade da luciferase. 0 Quadro 10 abaixo lista os valores de CI50 de Notch 1 e Notch 3 para os Exemplos de 1 a 37 desta invenção e os Compostos Comparativos 45 a 48 medidos no Ensaio de Transativação de Notch-CBFl mais acima. Em alguns casos, o valor é uma média de várias experiências em que N é o número de experiências conduzidas. Os compostos da presente invenção, como exemplificados pelos Exemplos de 1 a 37 apresentaram valores de Notch 1 de 12,2 nM ou menos e valores de CI50 de Notch 3 de 15,0 nM ou menos.
Painel de Estabilidade Metabólica de Alto Rendimento +HTÇ
Os compostos administrados por via parentérica entram na corrente sanguínea e passam por uma ou mais passagens através do fígado. Os compostos que não são facilmente metabolizados pelo fígado podem ser administrados em níveis plasmáticos terapeuticamente eficazes durante períodos de tempo terapeuticamente eficazes.
Os compostos administrados por via oral são tipicamente absorvidos através das paredes intestinais para a corrente sanguínea e passam por uma primeira passagem através do fígado. Os compostos que não são facilmente metabolizados nesta primeira passagem através do fígado podem ser distribuídos para outras áreas do corpo em quantidades terapeuticamente eficazes. 0 ensaio de estabilidade metabólica avaliou a estabilidade metabólica mediada por CYP in vítro utilizando microssomas de ser humano, rato, ratinho, cão eêou macaco após uma incubação de dez minutos. Cada composto foi testado em duplicado.
Os resultados destes ensaios foram expressos como a fração de composto de origem que permanece na mistura de reação após uma incubação de dez minutos +Percentagem RemanescenteÇ. Em geral, estes resultados foram utilizados para avaliar apenas a extensão do metabolismo mediado por CYP ou dependente de NADPH do composto de teste. Quando o composto foi significativamente metabolizado ±< 40 a 50 Ú remanescenteÇ, isto indicou elevada depuração do composto in vivo devido ao metabolismo mediado por CYP. No entanto, se o composto demonstrou metabolismo moderado ±50 a 80 tJÇ ou baixo ±> 85 ÚÇ nestes ensaios in vítro, uma elevada depuração foi ainda possível in vivo por meio de outras vias de metabolismo e eliminação. A percentagem remanescente que resulta destes ensaios foi preditiva da depuração do composto in vivo, assumindo que o metabolismo mediado por CYP foi uma via de eliminação predominante. Em diferentes espécies microssomais, os intervalos de resultados foram aproximadamente como mostrados no Quadro 11.
Métodos e Materiais
Incubação com microssomas do fígado 0 composto de teste foi recebido como uma solução-mãe a 3,5 mM em DMSO a 100 por cento. O composto do teste foi diluído para criar uma solução de acetonitrilo +ACNÇ a 50 μΜ contendo DMSO a 1,4 Ú, que foi então utilizado como uma solução-mãe de lOOx para a incubação com microsomas. Cada composto foi testado em duplicado separadamente em cada uma das três espécies no conjunto de ensaios de Estabilidade Metabólica em ser humano, rato e ratinho ou como espécies individuais nos conjuntos de Estabilidade Metabólica em cão ou de Estabilidade Metabólica em macaco. 0 composto, NADPH, e as soluções de microssoma hepático foram combinadas para incubação em três etapas: 1. 152 μΐ de suspensão de microssoma do fígado, concentração de proteína de 1,1 mg® ml em Nap a 100 mM, pH 7,4, tampão de MgC12 a 5 mM, foram pré-aquecidos a 37 °C. 2. 1,7 μΐ de composto a 50 μΜ +ACN a 98,6 %, DMSO a 1,4 %Ç foram adicionados ao mesmo tubo e pré-incubados a 37 °C durante 5 minutos. 3. A reação foi iniciada pela adição de 17 μΐ de solução de NADPH pré-aquecida a 10 mM em NaPi a 100 mM, pH 7,4.
Os componentes da reação foram bem misturados, e 75 μΐ da mistura da reação foram imediatamente transferidos para dentro de 150 μΐ de solução de extinção® interrupção ±ponto de tempo zero, T0Ç. As reações foram incubadas a 37 °C durante 10 minutos e depois uma alíquota adicional de 75 μΐ foi transferida para dentro de 150 μΐ de solução de extinção. Acetonitrilo contendo DMN a 100 μΜ ±um padrão UV para o controlo de qualidade da injeçãoÇ foi utilizado como solução de extinção para terminar as reações metabólicas.
As misturas extintas foram centrifugadas a 1500 rpm +-500 X gÇ numa centrífuga ALLEGRA® X-12, rotor SX4750 ±Beckman Coulter, Inc., Fullerton, CAÇ durante quinze minutos para sedimentar os microssomas desnaturados. Um volume de 90 μΐ de extrato de sobrenadante, contendo a mistura de composto de origem e os seus metabolitos, foi então transferido para uma placa de 96 poços separada para análise de UV-LC® MS-MS para determinar a percentagm de composto de origem que permaneceu na mistura.
Quadro 12
Instrumentação de Análise da Amostra HPLC: Pump-Thermo Surveyor; Autosampler-CTCêLEAP HTS ; UV detetor-Thermo Surveyor PDA plus; Co1umn-VARIAN® C18, 3 pm, 2 x 20 mm com um filtro em linha de 0,5 pm; Fase móvel para a pré-análise de integridade estrutural: +AÇ 98 Ú de água, 2 Ú de acetonitrilo com acetato de amónio a 10 mM; +BÇ 10 Ú de água, 90 Ú de acetonitrilo com acetato de amónio a 10 mM; Fase móvel para a análise da amostra de reação: ±AÇ 98 Ú de água, 2 Ú de acetonitrilo com ácido fórmico a 0,1 Ú; ±BÇ 2 Ú de água, 98 Ú de acetonitrilo com ácido fórmico a 0,1 Ó; ±CÇ hidróxido de amónio a 0,1 Ú em água; +DÇ hidróxido de amónio a 0,1 Ú em acetonitrilo. Espectrómetro de Massa: Thermo TSQ QUANTUM® Ultra Triple-Quadrapole Mass Spectrometer.
Análise de Amostra- Pré-Análise da Integridade Estrutural A pré-análise de integridade estrutural da
Estabilidade Metabólica foi utilizada para avaliar a pureza dos compostos a serem testados. Os compostos foram recebidos em placas de 96 poços como 57 μΐ de uma solução de DMSO a 3,5 mM. As soluções-mãe de composto DMSO a 3,5 mM foram diluídas 18 vezes com uma solução contendo volumes iguais de acetonitrilo, isopropanol e MilliQ-H20. As soluções resultantes ±200 pMÇ foram analisadas quanto à integridade estrutural por LC-UVêMS num espectrómetro de massa de captura de iões Thermo LCQ Deca XP Plus, utilizando uma coluna Waters XBridge C18, 5 pm, 2 x 50 mm com uma coluna protetora Waters Sentry 2,1 mm, e as condições de LC descritas no quadro abaixo, com uma injeção de 5 μΐ e uma taxa de fluxo de 1 mlêmin. Os dados adquiridos refletiram a pureza por absorvância de UV em 220 nm. Apenas os resultados para aqueles compostos com pureza maior do que 50 Ú foram relatados.
Análise das Amostras-Amostras Incubadas
A otimização da condição MSêMS foi conduzida num espectrómetro de massa triplo-quadrípolo Thermo TSQ QUANTUM® equipado com uma fonte aquecida-eletropulverização +H-ESIÇ através da infusão automatizada para obter as transições de SRM e os seus valores de energia de colisão correspondentes. As soluções de composto a uma concentração de 2 0 μΜ em 1:1 metanol:água foram infundidas a uma taxa de fluxo de 90 ulêmin, depois combinadas com a fase móvel a uma taxa de fluxo de 50 plêmin antes de serem introduzidas na fonte. Todos os compostos foram otimizados em primeiro lugar utilizando a fase móvel A e B ±50 Ú A e 50 Ú BÇ e, se necessário, utilizando a fase móvel C e D ±também com uma composição de 50:50Ç. Os parâmetros otimizados, incluindo a polaridade, transição de SRM e energia de colisão, foram armazenados numa base de dados MICROSOFT ACCESS®.
As condições espectrométricas de massa obtidas a partir da infusão automatizada foram utilizadas para analisar as amostras de incubação do ensaio de Estabilidade Metabólica. 0 volume de injeção foi de 5 μΐ e a taxa de fluxo foi de 0,8 mlêmin. 0 gradiente utilizado foi apresentado no quadro abaixo. Todas as amostras foram injetadas com o gradiente utilizando a fase móvel A e B em primeiro lugar. Se necessário ±por exemplo, por razões de cromatografiaÇ, as amostras foram reinjetadas com o mesmo gradiente, mas utilizando a fase móvel C e D. Todos os parâmetros de análise LC-MSêMS foram capturados eletronicamente nos ficheiros de dados originais.
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Análise de Dados A integração de pico foi executada com o software XCALIBUR®. O cálculo da percentagem remanescente foi executado mediante a comparação das áreas de pico de LC-MSêMS das amostras de Tionunutos com aquelas das amostras Tominutos para cada composto.
Controlo de Qualidade
Um conjunto de três compostos foi testada juntamente com o composto de teste em cada placa de ensaio. Os dados foram aceites e enviados apenas se os resultados para estes compostos de controlo caiam dentro dos intervalos previstos mostrados abaixo.
Painel de Semivida de Estabilidade Metabólica A taxa de metabolismo e semivida determinada in vitro nos microssomas de fígado humano ou animal foi utilizadas para determinar a depuração intrínseca (CLint) e a depuração hepática (CLh,b) de um composto. Estes parâmetros foram úteis para prognosticar a depuração humana in vivo, que define o nível de exposição ao medicamento in vivo (Obach et al., 1997, 1999) . 0 painel de ensaio de semivida de estabilidade metabólica avalia o curso de tempo e a taxa de metabolismo mediado por CYP ±dependente de NADPHÇ in vitro em microssomas de ser humano, rato, ratinho, cão e macaco. 0 decurso de tempo abrange uma incubação de 45 minutos, e inclui momentos de 0, 5, 10, 15, 30 e 45 minutos, em cada um dos quais a quantidade de composto de teste que permanece na mistura foi medida.
Diretrizes de Interpretação do Resultado
Os resultados do ensaio de semivida de estabilidade metabólica são expressos como uma semivida ±Ti§2, minÇ. Em geral, estes resultados devem ser utilizados para avaliar apenas a extensão do metabolismo mediado por CYP ou dependente de NADPH do composto de teste. Quando o composto foi significativamente metabolizado ±Tiê2 < 14 minutosÇ, isto indicou uma alta depuração in vivo devido ao metabolismo mediado por CYP. No entanto, se o composto demonstrou metabolismo moderado ±14 a 70 minutosÇ ou baixo ±> 70 minutosÇ nestes ensaios in vitro, a depuração elevada foi ainda possível in vivo por meio de outras vias de metabolismo e eliminação.
Os resultados destes ensaios foram preditivos da depuração de composto in vivo, assumindo que o metabolismo mediado por CYP foi uma via de eliminação predominante. Nos microssomas humanos, os intervalos de resultados foram aproximadamente como mostrados no quadro que se segue:
Métodos e Materiais
Os microssomas do fígado foram adquiridos da BD-
Biosciences ±Woburn, MAÇ e NADPH da AppliChem Inc; todos os outros reagentes foram obtidos de Sigma.
Incubação com Microssomas do Fígado 0 composto de teste foi recebido como uma solução-mãe a 3,5 mM em DMSO a 100 por cento. 0 composto de teste foi diluído para criar uma solução de acetonitrilo a 50 μΜ +ACNÇ contendo DMSO a 1,4 Ú, que foi então utilizada como uma solução-mãe de 100 vezes para a incubação com microssomas. Cada composto foi testado em microssomas do fígado de ser humano, rato, ratinho, cão e macaco. Composto, NADPH e soluções de microssoma do fígado foram combinadas para incubação em três etapas: 1. 450 μΐ de suspensão de microssoma do fígado, concentração de proteína de 1,1 mgS ml em Nap a 100 mM, pH 7,4, MgCl2 a 5 mM, foram pré-aquecidos a 37 °C. 2. 5 μΐ de composto a 50 μΜ +ACN a 98,6 Ú, DMSO a 1,4 ÚÇ foram adicionados no mesmo tubo e pré-incubados a 37 °C durante 5 minutos. 3. A reação foi iniciada pela adição de 50 μΐ de solução de NADPH a 10 mM pré-aquecida em NaP± a 100 mM, pH 7,4.
Os componentes de reação foram bem misturados e 65 μΐ foram imediatamente transferidos para 130 μΐ de solução de extinção^ interrupção ±ponto de tempo zero, gÇ. As reações foram incubadas a 37 °C durante 5, 10, 15, 30 e 45 minutos e em cada momento uma alíquota de 65 μΐ foi transferida para 130 μΐ de solução de extinção. Acetonitrilo contendo padrão interno ±100 ngH mlÇ foi utilizado como soluço de extinção para terminar as reações metabólicas.
As misturas extintas foram centrifugadas a 1500 rpm +-500 X gÇ numa centrífuga ALLEGRA® X-12, rotor SX4750 ±Beckman Coulter, Inc., Fullerton, CAÇ durante quinze minutos para granular os microssomas desnaturados. Um volume de 90 μΐ de extrato de sobrenadante, contendo a mistura de composto de origem e dos seus metabolitos, foi então transferido para uma placa de 96 poços separada para analise de LCêMS-MS para determinar a percentagem de composto de origem remanescente na mistura.
Análise da Amostra-Instrumentação HPLC: Pump-Shimadzu LC-20 AD Series Binary Pumps;
Autosampler-CTCêLEAP HTS 0 Quadro 18 abaixo lista o valor de semivida metabólica mediada por CYP para os Exemplos 1 a 37 da presente invenção e os compostos comparativos 45 a 48 medidos no ensaio de semivida da estabilidade metabólica no ser humano. Em alguns casos, o valor é uma média de múltiplas experiências onde N é o número de experiências conduzidas. Os compostos da presente invenção, como exemplificados pelos Exemplos 1 a 37 tiveram valores de semivida de estabilidade metabólica de 31 minutos ou mais. Ao contrário, os Compostos Comparativos 45 a 48 tiveram valores de semivida de estabilidade metabólica de 8 minutos ou menos.
Os compostos exemplificados da invenção mostraram a surpreendente vantagem de baixa depuração devido ao metabolismo mediado pelo CYP no ensaio de semivida de estabilidade metabólica no ser humano. Os compostos da presente invenção, como exemplificados pelos Exemplos 1 a 37, tiveram semividas metabólicas no intervalo de 31 minutos a mais do que 120 minutos no ensaio de semivida de estabilidade metabólica no ser humano. Em contraste, os Compostos Comparativos 45 a 48 tiveram semividas metabólicas de 8 minutos ou menos no ensaio de estabilidade metabólica no ser humano. Os Compostos Comparativos 45 a 48 mostraram alta depuração no ensaio de estabilidade metabólica no ser humano, indicando que os compostos foram removidos pelos microssomas do fígado.
Os compostos da presente invenção +Exemplos de 1 a 37Ç foram comparados com os Compostos Comparativos 45 a 48 descritos no documento de Patente U.S. N. 0 7.456.172, e verificou-se que eram especialmente vantajosos. Os compostos da presente invenção tiveram a surpreendente vantagem da combinação de atividade como inibidores de
Notch 1 e Notch 3 e uma estabilidade metabólica superior para os microssomas hepáticos. Como mostrado nos Quadros 10 e 18, nos testes relatados, os Exemplos 1 a 37 da presente invenção tiveram valores de CI50 de Notch 1 de 12,2 nM ou menos e valores de CI5o de Notch 3 de 15,0 nM ou menos; e as semividas de estabilidade metabólica no ser humano de 31 minutos ou mais longas no ensaio de semivida de estabilidade metabólica no ser humano. Ao contrário, em testes semelhantes, os Compostos Comparativos 45 a 48 tiveram valores de CI50 de Notch 1 no intervalo de 5,1 nM a 64,1 nM e valores de CI5o de Notch 3 no intervalo de 12,5 nM a 74,5 nM; e semividas de estabilidade metabólica no ser humano de 8 minutos ou menos.
Modelos de Xenoenxerto de Tumor Humano em Ratinhos
Todos os roedores foram obtidos da Harlan Sprague Dawley Co. ±Indianapolis, IndianaÇ, e mantidos num ambiente livre de amónia numa colónia definida e livre de agentes patogénicos. Todos os ratinhos foram colocados em quarentena aproximadamente 1 semana antes da sua utilização para a propagação do tumor e teste de eficácia do medicamento. Os ratinhos foram alimentados com comida e água ad libitum. 0 programa de cuidados com os animais do Bristol-Myers Squibb Pharmaceutical Research Institute é totalmente credenciado pela American Association for Accreditation of Laboratory Animal Care +AAALACÇ. Todas as experiências foram executadas em conformidade com os métodos e diretrizes de testes em animais da Bristol-Myers Squibb +BMSÇ.
Os xenoenxertos de tumor foram cultivados e mantidos subcutaneamente +SCÇ em ratinhos balb0 c nuS nu nus ou NOD-SCID imunocomprometidos +Harlan Sprague DawleyÇ. Os tumores foram propagados como transplantes subcutâneos na estirpe de ratinho apropriada ±Quadro 19Ç utilizando fragmentos de tumor obtidos de ratinhos dadores.
Ensaios de quimioterapia pré-clínica
Os números de animais necessários para detetar uma resposta significativa foram reunidos no início da experiência e a cada um foi fornecido um implante subcutâneo de um fragmento tumoral ±~20 mgÇ com um trocarte de calibre 13. Os tumores foram deixados crescer até à janela de tamanho predeterminada +tumores fora do intervalo foram excluídosÇ e os animais foram distribuídos uniformemente em vários grupos de tratamento e de controlo. Existiram tipicamente 8 ratinhos por grupos de tratamento e de controlo, com a exceção das experiências efetuadas no modelo de tumor SAL-IGF ±este não está incluído no Quadro 19Ç, em que haviam tipicamente 5 ratinhos por grupo de tratamento e controlo. 0 tratamento de cada animal baseou-se no peso corporal individual. Os animais tratados foram verificados diariamente quanto à toxicidade^ mortaldade relacionada com o tratamento. Cada grupo de animais foi pesado antes do início do tratamento ±WtiÇ e depois novamente após a última dose de tratamento ±Wt2Ç. A diferença no peso corporal ±Wt2-WtiÇ fornece uma medida da toxicidade relacionada com o tratamento. A resposta do tumor foi determinada pela medição de tumores com um calibre duas vezes por semana, até que os tumores atingiram um tamanho "alvo" predeterminado de 0,5 gm ou 1 g, dependendo do tipo de tumor. Os pesos dos tumores ±mgÇ foram estimados a partir da fórmula:
Peso do tumor = ±comprimento x largura2Ç + 2
Os critérios de resposta tumoral são expressos em termos de inibição do crescimento tumoral +ÚTGIÇ. 0 atraso no crescimento do tumor é definido como a diferença de tempo ±diasÇ necessária para os tumores tratados +TÇ alcançarem um tamanho alvo predeterminado em comparação com aqueles do grupo de controlo ±CÇ. Para este propósito, o peso do tumor de um grupo é expresso como o peso médio do tumor +MTWÇ. A inibição do crescimento do tumor é calculada como se segue:
onde,
Ct = tamanho médio do tumor de controlo no final do tratamento C0 = tamanho médio do tumor de controlo no início do tratamento
Tt = tamanho médio do tumor do grupo tratado no final do tratamento T0 = tamanho médio do tumor do grupo tratado no início do tratamento A atividade é definida como o alcance de uma inibição do crescimento tumoral durável de 50 Ú ou superior ±isto é, TG1 > 50 ÚÇ ou log da morte de células de 0,5 ou superior +LCK > 0,5Ç durante um período equivalente a pelo menos 1 tempo de duplicação do volume tumoral e o tratamento farmacológico deve ser durante um período equivalente a pelo menos 2 tempos de duplicação do volume tumoral. A resposta tumoral também foi expressa em termos de atraso do crescimento do tumor +valor de TGDÇ, definido como a diferença de tempo ±diasÇ necessário para os tumores tratados +TÇ atingirem um tamanho alvo predeterminado em comparação com aqueles do grupo de controlo +CÇ.
Sempre que possível, a atividade anti-tumoral foi determinada num intervalo de níveis de dose até à dose máxima tolerada +MTDÇ, que é definida como o nível de dose imediatamente abaixo do qual a toxicidade excessiva ±isto é, mais do que uma morteÇ ocorreu. Quando a morte ocorreu, o dia da morte foi registado. Os ratinhos tratados que morrem antes dos seus tumores atingirem o tamanho alvo foram considerados como tendo morrido da toxicidade ao fãrmaco. Nenhum ratinho de controlo morreu portando tumores menores do que o tamanho alvo. Os grupos de tratamento com mais do que uma morte provocada pela toxicidade do medicamento foram considerados como tendo tido tratamentos excessivamente tóxicos e os seus dados não foram incluídos na avaliação de uma eficácia antitumoral do composto. A interação potencial de toxicidade ao fãrmaco que afeta a tolerabilidade de tratamento é uma consideração importante nos ensaios de quimioterapia de combinação. A interpretação dos resultados terapêuticos de combinação deve ser baseada na comparação da atividade antitumoral da melhor resposta possível para os agentes individuais frente à combinação em doses comparativamente toleradas. Portanto, o sinergismo terapêutico foi definido como um efeito terapêutico alcançado com um regime tolerado dos agentes combinados que excediam o efeito ideal conseguido em qualquer dose tolerada de monoterapia. As avaliações estatísticas dos dados foram executadas utilizando o teste Wilcoxon generalizado de Gehan. A significância estatística foi declarada em P < 0,05.
Administração de fármaco
Em estudos in vitro, todos os agentes foram dissolvidos em DMSO a 100 Ú e diluídos em série em meiosêsoro fetal bovino a 10 Ú. Os seguintes excipientes foram utilizados para a administração dos inibidores de Notch em roedores: ET0HêTPGSêPEG300 ±10:10:80Ç. Inibidores de Notch foram tipicamente administrados por via oral num esquema de QDxl5, 10 dias em tratamento-2 dias livres -5 dias em tratamento, embora outros esquemas também fossem avaliados e demonstrados como sendo eficazes. Por exemplo, 0 regime de dosagem que consiste de QDxl2, 4 dias em tratamento-3 dias livres foi mostrado como sendo igualmente eficaz como o QDxl5, 10 dias em tratamento-2 dias livres-5 dias em tratamento. Nos estudos BID, a segunda dose foi administrada 6 a 12 horas após a primeira dose.
Atividade Antitumoral In Vivo A atividade antitumoral do Exemplo 1 administrado por via oral +P0Ç foi avaliada em xenoenxertos de tumores humanos implantados em ratinhos. Como mostrado nas Figuras 1 a 4, o Exemplo 1 apresentou uma atividade antitumoral. 0 Quadro 20 abaixo lista a atividade antitumoral dos exemplos desta invenção medida nos modelos de xenoenxerto de tumor humano em ratinhos. Os compostos da presente invenção, como exemplificados pelos Exemplos 1 e 3, apresentaram uma atividade antitumoral com a administração oral +P0Ç.
Avaliação de Profármaco: Farmacocinética de Dose Única em
Ratinhos
Ratos SPRAGUE DAWLEY® machos +250 a 300 gÇ foram utilizados para os estudos farmacocinéticos. Os ratos foram mantidos em jejum durante a noite antes da dosagem e alimentados 4 h após a administração da dose. Em cada estudo, os grupos de animais +N = 2 a 3Ç receberam o composto de teste por sonda oral. As amostras de sangue ±~0,3 mlÇ foram recolhidas da veia jugular em tubos contendo K2EDTA às 0,5, 1, 3, 5, 7 e 24 h pós-dose. As amostras de plasma, obtidas pela centrifugação a 4 °C ±1500 a 2000xgÇ, foram armazenadas a -20 °C até a análise por LCêMSêMS.
Análise de Dados para os Ensaios Farmacocinéticos
Os parâmetros farmacocinéticos foram obtidos pela análise não compartimentai da concentração plasmática ±determinada por LCêMSêMSÇ frente aos dados de tempo ±ThermoKinetica Software versão 5.0Ç. A concentração de pico ±CmaxÇ e o tempo para Cmax, Tmax, foram registados diretamente a partir de observações experimentais. A área sob a curva a partir do tempo zero até ao último tempo de amostragem ±AUC0_tÇ foi calculada utilizando uma combinação de somatórios lineares e log trapezoidais. A depuração total do plasma ±CLTpÇ, volume em estado estacionário de distribuição ±VssÇ, semivida de eliminação aparente ±ti§2Ç e tempo médio de resid0 ncia +MRTÇ foram estimados apé a administração IV. A estimativa de t].ê2 foi feita utilizando um mínimo de 3 pontos de tempo com concentrações quantificáveis. A biodisponibilidade oral absoluta F foi estimada como a razão dos valores de AUC normalizados pela dose após as doses orais e IV. As exposições plasmãticas do Exemplo 1 ±AUC0~24h ou AUC0-7hÇ após a administração dos profármacos foram comparadas com a exposição depois da administração do Exemplo 1. As biodisponibilidades relativas dos profármacos para o Exemplo 1 foram estimadas +Quadro 21Ç.
DOCUMENTOS REFERIDOS NA DESCRIÇÃO
Esta lista de documentos referidos pelo autor do presente pedido de patente foi elaborada apenas para informação do leitor. Não ê parte integrante do documento de patente europeia. Não obstante o cuidado na sua elaboração, ο IEP não assume qualquer responsabilidade por eventuais erros ou omissões.
Documentos de patente referidos na descrição • US 7053084 BI [0006] • US 7053084 B [0405] • US 7456172 B [0440]
Documentos de não patente citados na descrição • BRAY. Nature Reviews Molecular Cell Biology, 2006, vol. 7, 678-689 [0002] • FORTINI. Developmental Cell, 2009, vol. 16, 633-647 [0002] • MIELE, L. et al. Current Câncer Drug Targets, 2006, vol. 6, 313-323 [0004] • BOLOS, V. et al. Endocrine Reviews, 2007, vol. 28, 339-363 [0004] • SHIH, I-M. et al. Câncer Research, 2007, vol. 67, 1879-1882 [0004] • YAMAGUCHI, N. et al. Câncer Research, 2008, vol. 68, 1881-1888 [0004] • MIELE, L. Expert Review Anti-cancer Therapy, 2008, vol. 8, 1197-1201 [0004] • PUROW, B. Current Pharmaceutical Biotechnology, 2009, vol. 10, 154-160 [0004] • NEFEDOVA, Y. et al. Drug Resistance Updates, 2008, vol. 11, 210-218 [0004] • DUFRAINE, J. et al. Oncogene, 2008, vol. 27, 5132-5137 [00043 • JUN, H.T. et al. Drug Development Research, 2008, vol. 69, 319-328 [0004] • WEEMUTH, C.G. et al. The Practice of Medicinal Chemistry. Academic Press, 1996 [0071] • Design of Prodrugs. Elsevier, 1985 [0071] • Design and Application of Prodrugs. BUNDGAARD, H. et al. A Textbook of Drug Design and Development. Harwood Academic Publishers, 1991, 113-191 [0071] • TESTA, B. et al. Hydrolysis in Drug and Prodrug Metabolism. Wiley-VCH, 2003 [0071] • GREENE et al. Protective Groups in Organic Synthesis. Wiley and Sons, 1999 [0137] • WALSH, D.A. Synthesis, 1980, 677 [0140] • KATRITZKY, A.R. et al. Org. Chem., 1990, vol. 55, 2206-2214 [0140] • SHERRILL, R.G. et al. J. Org. Chem., 1995, vol. 60, 730 [0140] • EVANS, D.A. et al. J. Am. Chem Soc. , 1990, vol. 112, 4011 [0142] [0143] • BARAN, P. et al. J. Am. Chem. Soc., 2008, vol. 130 ±34Ç, 111546 [0143] • J. Org. Chem., 1990, vol. 55, 2206-2214 [0243]

Claims (7)

  1. REIVINDICAÇÕES
    1. Um composto de Fórmula +IÇ:
    eêou pelo menos um sal do mesmo, em que: Ri é -CH2CH2CF3; R2 é -CH2CH2CF3 ou -CH2CH2CH2CF3; R3 é H, -CH3j ou Rx; R4 é H OU Ry ; Rx é: -CH2OC±OÇCH±CH3ÇNH2, -CH2OC±OÇCH±NH2ÇCH±CH3Ç2; ch2oc±oçch±±ch±ch3ç2çnhc±oçch+nh2çch±ch3ç2,
    Ry é: - SCH2CH±NH2ÇC±OÇOH, -SCH2CH±NH2ÇC+OÇOCH3, OU SCH2CH±NH2ÇC±0Ç0C±CH3Ç3 ; 0 Anel A é fenilo ou piridinilo; cada Ra é independentemente Cl, alquilo Ci_3, -CH2OH, -CF3, ciclopropilo, -OCH3, eêou -O+ciclopropilÇ; cada Rb é independentemente F, Cl, -CH3, -CH2OH, -CF?1, ciclopropilo eêou -OCH3; y é zero, 1 ou 2; e z é zero, 1 ou 2; desde que se o Anel A for fenilo e z for zero, então y é 1 ou 2 e pelo menos um Ra é alquilo Ci_3, -CH2OH, -CF3, ciclopropilo, ou -O+ciclopropilÇ; desde que se R3 for Rx então R4 é H; e desde que se R4 for Ry então R3 é H ou -CH3. 2. 0 composto de acordo com a reivindicação 1 eêou pelo menos um sal do mesmo, em que: o Anel A é fenilo; R3 é H; e z é 1 ou 2. 3. 0 composto de acordo com a reivindicação 1 eêou pelo menos um sal do mesmo, em que: R2 é -CH2CH2CF3 ; o Anel A é fenilo; e z é 1 ou 2. 4. 0 composto de acordo com a reivindicação 1 eêou pelo menos um sal do mesmo, em que: R2 é -CH2CH2CF3; o Anel A é fenilo; Ra é alquilo Ci_3 ou -CH2OH; cada Rb é independentemente F eêou Cl; y é 1; e z é 1 ou 2. 5. 0 composto de acordo com a reivindicação 4, que possui a estrutura:
    6. 0 composto de acordo com a reivindicação 1 eêou pelo menos um sal do mesmo, que possui a estrutura:
    em que: R3 é H ou Rx; R4 é H ou Ry; desde que se R3 for Rx então R4 é H; e desde que se R4 for Ry então R3 é H.
    7. 0 composto de acordo com a reivindicação 1. que possui a estrutura: 8. 0 composto de acordo com a reivindicação 1, selecionado a partir de: ±2R,3SÇ-N-±±3SÇ-5-±3-fluorofenilÇ-9-metil-2-oxo-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-ilÇ-2,3 -bis±3,3,3-trifluoropropilÇsuccinamida ±1Ç; + 2R,3SÇ-N-++3SÇ-5-±3-clorofenilÇ-9-etil-2-oxo-2,3-dihidro-1H-1,4 -benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis±3,3,3- trifluoropropilÇsuccinamida ±2Ç; ±2R,3SÇ-N-±±3SÇ-5-±3- clorofenilÇ-9-isopropil-2-oxo-2,3-dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis±3,3,3- trifluoropropilÇsuccinamida ±3Ç; ±2R,3SÇ-N-±9-cloro-5-±3,4- dimetilf enilÇ-2 -oxo-2,3 -d.ihid.ro-1H-1,4-benzodiazepin-3-ilÇ-3-+4,4,4 -trifluorobutilÇ-2-±3,3,3- trifluoropropilÇsuccinamida ±4Ç; + 2R,3SÇ-N-±9-cloro-5-±3,5-dimetilfenilÇ-2-oxo-2,3-dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-3 -ilÇ-3-+4,4,4 -trifluorobutilÇ-2- + 3,3,3- trifluoropropilÇsuccinamida + 5Ç; +2R,3SÇ-N-±+3SÇ-9-etil-5- +3-metilfenilÇ-2-oxo-2,3-dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis±3,3,3-trifluoropropilÇsuccinamida + 6Ç; +2R,3SÇ-N-++3SÇ-5-+3-clorofenilÇ-9-metil-2-oxo-2,3-dihidro-1H-1,4 -benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis+3,3,3- trifluoropropilÇsuccinamida ±7Ç; +2R,3SÇ-N-++3SÇ-5-±3- clorofenilÇ-9-metil-2-oxo-2,3-dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-3-ilÇ-3-+4,4,4 -trifluorobutilÇ-2- + 3,3,3- trifluoropropilÇsuccinamida ±8Ç; +2R,3SÇ-N-++3SÇ-5-+3- metilfenilÇ-2-οχο-9-+trifluorometilÇ-2,3-dihidro-1H-1,4 -benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis+3,3,3- trifluoropropilÇsuccinamida +9Ç; +2R,3SÇ-N-++3SÇ-9-cloro-5-+3,5-dimetilfenilÇ-2-oxo-2,3-dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-3-Í1Ç-2,3-bis±3,3,3-trifluoropropilÇsuccinamida +10Ç; +2R,3SÇ-N-++3SÇ-5-±3-metilfenilÇ-2-oxo-9-±trifluorometilÇ- 2.3- dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-3-ilÇ-3 -+4,4,4- trifluorobutilÇ-2-±3,3,3-trifluoropropilÇsuccinamida +11Ç; +2R,3SÇ-N-++3SÇ-9-isopropil-5-+3-metilfenilÇ-2-oxo-2,3-dihidro-lH-1,4-benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis+3,3,3-trifluoropropilÇsuccinamida +12Ç; +2R,3SÇ-N-++3SÇ-9- isopropil-2-oxo-5-fenil-2,3-dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis+3,3,3-trifluoropropilÇsuccinamida ±13Ç; +2R,3SÇ-N-++3SÇ-9-+ciclopropiloxiÇ-5-+3-metilfenilÇ-2-oxo- 2.3- dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-3-ilÇ-3-+4,4,4- trifluorobutilÇ-2-+3,3,3 -1ri fluoropropilÇsuccinamida +14Ç; +2R,3SÇ-N-++3SÇ-9-±ciclopropiloxiÇ-5-±3-metilfenilÇ-2-oxo- 2.3- dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis+3,3,3- trifluoropropilÇsuccinamida +15Ç; +2R,3SÇ-N-++3SÇ-9- +ciclopropiloxiÇ-2-oxo-5-fenil-2,3-dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-3-ilÇ-3-+4,4,4 -trifluorobutilÇ-2-±3,3,3- trifluoropropilÇsuccinamida +16Ç; +2R,3SÇ-N-±±3SÇ-9-cloro- 5-±3-metilfenilÇ-2-oxo-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-ilÇ-3-±4,4,4-trifluorobutilÇ-2-+3,3,3- trifluoropropilÇsuccinamida +17Ç; +2R,3SÇ-N-++3SÇ-9-metil- 2-oxo-5-+3-±trifluorometilÇfenilÇ-2,3-dihidro-lH-1,4 -benzodiazepin-3-ilÇ-3-±4,4,4-trifluorobutilÇ-2-±3,3,3-trifluoropropilÇsuccinamida +18Ç; ±2R,3SÇ-N-±±3SÇ-9- +ciclopropiloxiÇ-2-oxo-5-fenil-2,3-dihidro-lH-l,4 -benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis±3,3,3- trifluoropropilÇsuccinamida +19Ç; +2R,3SÇ-N-+±3SÇ-9-metil- 2-oxo-5-±3-±trifluorometilÇfenilÇ-2,3-dihidro-lH-1,4 -benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis±3,3,3- trifluoropropilÇsuccinamida +20Ç; +2R,3SÇ-N-+±3SÇ-9-cloro- 5-±2-metilfenilÇ-2-oxo-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis±3,3,3-trifluoropropilÇsuccinamida +21Ç; +2R,3SÇ-N-±±3SÇ-5-±4-fluorofenilÇ-9-metil-2-oxo-2,3-dihidro-lH-1,4-benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis±3,3,3-trifluoropropilÇsuccinamida +22Ç; ±2R,3SÇ-N-±±3SÇ-9-metil- 2 - oxo - 5-fenil-2,3-dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-3-ilÇ-2,3 -bis±3,3,3-trifluoropropilÇsuccinamida ±23Ç; ±2R,3SÇ-N- ±±3SÇ-9-ciclopropil-2-οχο-5-fenil-2,3-dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis±3,3,3- trifluoropropilÇsuccinamida ±24Ç; ±2R,3SÇ-N-±±3SÇ-9-cloro- 5-±3-ciclopropilfenilÇ-2-oxo-2,3-dihidro-1H-1,4 -benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis±3,3,3- trifluoropropilÇsuccinamida +25Ç; ±2R,3SÇ-N-±±3SÇ-5-±3- clorofenilÇ-9-metoxi-2-oxo-2,3-dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis±3,3,3- trifluoropropilÇsuccinamida +26Ç; ±2R,3SÇ-N-++3SÇ-5-+4- clorofenilÇ-9-metoxi-2-oxo-2,3-dihidro-1H-1,4 -benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis±3,3,3- trifluoropropilÇsuccinamida +27Ç; +2R,3SÇ-N-±±3SÇ-9-cloro- 5-±3-metilfenilÇ-2-oxo-2,3-dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis±3,3,3-trifluoropropilÇsuccinamida ±28Ç; ±2R,3SÇ-N-±±3SÇ-5-±3-metilfenilÇ-9-metoxi-2-oxo-2,3 - dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis±3,3,3-trifluoropropilÇsuccinamida + 29Ç; +2R,3SÇ-N-++3SÇ-5-+4- ±hidroximetilÇfenilÇ-2-oxo-2,3-dihidro-1H-1,4 -benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis+3,3,3- trifluoropropilÇsuccinamida ±30Ç; +2R,3SÇ-N-±±3SÇ-5-+2- metilfenilÇ-2-oxo-2,3-dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-3-ilÇ- 2.3- bis±3,3,3-trifluoropropilÇsuccinamida ±31Ç; ±2R,3SÇ-N- ++3SÇ-5-+3- metilfenilÇ-2-oxo-2,3-dihidro-1H-1,4 -benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis+3,3,3- trifluoropropilÇsuccinamida ±32Ç; +2R,3SÇ-N-±±3SÇ-9-metoxi-2-oxo-5-±5-±trifluorometilÇ-2-piridinilÇ-2,3-dihidro-1H- 1.4- benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis+3,3,3- trifluoropropilÇsuccinamida ±33Ç; ±2R,3SÇ-N-+±3SÇ-5-±5- cloro-2-piridinilÇ-9-metoxi-2-oxo-2,3-dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis+3,3,3- trifluoropropilÇsuccinamida ±34Ç; + 2R,3SÇ-N-±±3SÇ-5-±4- metoxifenilÇ-2-oxo-2,3-dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-3-ilÇ- 2,3-bis±3,3,3-trifluoropropilÇsuccinamida +35Ç; ±2R,3SÇ-N- ±±3SÇ-5-±4-metilfenilÇ-2-oxo-2,3-dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis±3,3,3- trifluoropropilÇsuccinamida +36Ç; +2R,3SÇ-N-±+3SÇ-5-±3- fluorofenilÇ-9-±hidroximetilÇ-2-oxo-2,3-dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-3-ilÇ-2,3-bis+3,3,3- trifluoropropilÇsuccinamida +37Ç; L-valinato de ++3SÇ-3-+++2R,3SÇ-3-carbamoil-6,6,6-trifluoro-2-+3,3,3-trifluoropropilÇhexanoilÇaminoÇ-5-+3-fluorofenilÇ-9-metil-2-oxo-2,3-dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-l-ilÇmetilo +38Ç; L-alaninato de ++3SÇ-3-+++2R,3SÇ-3-carbamoil-6,6,6-trifluoro-2-+3,3,3-trifluoropropilÇhexanoilÇaminoÇ-5-±3-fluorofenilÇ-9-metil-2-oxo-2,3-dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-l-ilÇmetilo +39Ç; S-±±±2S,3RÇ-6,6,6-trifluoro-3-+±+3SÇ-5-±3- fluorofenilÇ-9-metil-2-oxo-2,3-dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-3-ilÇcarbamoilÇ-2-+3,3,3- trifluoropropilÇhexanoilÇaminoÇ-L-cisteína +40Ç; S- ±++2S,3RÇ-6,6,β-trifluoro-3-+++3SÇ-5-+3-fluorofenilÇ-9- metil-2-oxo-2,3-dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-3 -ilÇcarbamoilÇ-2-±3,3,3 -1ri fluoropropilÇhexanoiIÇaminoÇ- L -cisteinato de terc-butil +41Ç; S-+++2S,3RÇ-6,6,6 -trifluoro-3-±±±3SÇ-5-±3-fluorofenilÇ-9-metil-2-oxo-2,3-dihidro-1H- 1,4-benzodiazepin-3-ilÇcarbamoilÇ-2-±3,3,3 -tri fluoropropilÇhexanoiIÇaminoÇ-L-c i steinato de metilo ±42Ç; +4-+fosfonoóxiÇfenilÇacetato de ++3SÇ-3-+++2R,3SÇ-3- carbamoil-6,6,6 -trifluoro-2-±3,3,3- trifluoropropilÇhexanoilÇaminoÇ-5-±3-fluorofenilÇ-9-metil-2-oxo-2,3-dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-1-ilÇmetilo ±43Ç; L-valil-L-valinato de ±±3SÇ-3-±±+2R,3SÇ-3-carbamoil-6,6,6-trifluoro-2-+3,3,3-trifluoropropilÇhexanoilÇaminoÇ- 5-±3- fluorofenilÇ-9-metil-2-oxo-2,3-dihidro-1H-1,4 -benzodiazepin-1-ilÇmetilo ±44Ç; e sais do mesmo.
  2. 9. Uma composição farmacêutica, que compreende um composto de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 8 eS ou pelo menos um sal do mesmo; e um portador farmaceuticamente aceitável.
  3. 10. Uma composição que compreende: ±iÇ pelo menos um composto de Fórmula +IÇ tendo a estrutura:
    eE3 ou pelo menos um sal do mesmo,· ±iiÇ um composto de Fórmula ±IÇ tendo a estrutura:
    ou ±iiiÇ uma mistura de +iÇ e ±iiÇ; em que: R3 é H ou Rx; R4 é H OU Ry; -I
    desde que se R3 for Rx então R4 é H; e desde que se R4 for Ry então R3 é H.
  4. 11. Um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 8 ou sais f armaceuticamente aceitáveis do mesmo, para utilização em terapêutica.
  5. 12. Um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 8 ou sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo, para utilização no tratamento de cancro.
  6. 13. Um composto que possui a estrutura
    ou sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo, para utilização no tratamento de cancro.
  7. 14. Um composto de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 8 ou sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo, para utilização com um ou mais agentes adicionais selecionados a partir de dasatinib, paclitaxel, tamoxifeno, dexametasona e carboplatina administrados sequencial ou simultaneamente, para o tratamento de cancro.
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Families Citing this family (27)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9187434B2 (en) 2012-09-21 2015-11-17 Bristol-Myers Squibb Company Substituted 1,5-benzodiazepinones compounds
JP2015531792A (ja) 2012-09-21 2015-11-05 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ １，４−ベンゾジアゼピノン化合物のプロドラッグ
JP2015533811A (ja) 2012-09-21 2015-11-26 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ Ｎ−置換ビス（フルオロアルキル）１，４−ベンゾジアゼピノン化合物
CN105308030A (zh) 2012-09-21 2016-02-03 百时美施贵宝公司 烷基、氟烷基-1,4-苯并二氮杂*酮化合物
US9133126B2 (en) 2012-09-21 2015-09-15 Bristol-Myers Squibb Company Fluoroalkyl dibenzoazepinone compounds
UA110688C2 (uk) 2012-09-21 2016-01-25 Пфайзер Інк. Біциклічні піридинони
WO2014047390A1 (en) 2012-09-21 2014-03-27 Bristol-Myers Squibb Company Tricyclic heterocyclic compounds as notch inhibitors
EP2897954B1 (en) 2012-09-21 2016-10-26 Bristol-Myers Squibb Company Fluoroalkyl-1,4-benzodiazepinone compounds
WO2014047397A1 (en) 2012-09-21 2014-03-27 Bristol-Myers Squibb Company Fluoroalkyl and fluorocycloalkyl 1,4-benzodiazepinone compounds as notch|inhibitors
US9492469B2 (en) 2013-04-04 2016-11-15 Bristol-Myers Squibb Company Combination therapy for the treatment of proliferative diseases
BR112017015693A2 (pt) 2015-02-03 2018-03-20 Pfizer ciclopropabenzofuranil piridopirazinadionas
WO2019215585A1 (en) * 2018-05-06 2019-11-14 Ayala Pharmaceuticals Inc. Compositions comprising cd20 inhibitors and bisfluoroalkyl-1,4-benzodiazepinone compounds and methods of use thereof
MX2020011826A (es) * 2018-05-06 2021-01-15 Ayala Pharmaceuticals Inc Composiciones de combinacion que comprenden compuestos de bisfluoroalquil-1,4-benzodiazepinona y metodos de uso de las mismas.
JP2021523190A (ja) * 2018-05-15 2021-09-02 アヤラ ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド 腺様嚢胞癌を治療するためのビスフルオロアルキル−１，４−ベンゾジアゼピノン化合物を含む組成物
AU2019271151A1 (en) * 2018-05-15 2021-01-07 Ayala Pharmaceuticals Inc. Compositions comprising bisfluoroalkyl-1,4-benzodiazepinone compounds and methods of use thereof
CN112203661A (zh) * 2018-05-24 2021-01-08 艾雅拉制药公司 包含双氟烷基-1,4-苯并二氮杂*酮化合物与免疫治疗剂的组合物和其使用方法
EP3860562A1 (en) 2018-10-02 2021-08-11 Frequency Therapeutics, Inc. Pharmaceutical compositions comprising otic therapeutic agents and related methods
EP3952854A1 (en) 2019-04-08 2022-02-16 Frequency Therapeutics, Inc. Combination of chir99021 and valproic acid for treating hearing loss
JP2023513731A (ja) * 2020-02-16 2023-04-03 アヤラ ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド キラルベンゾジアゼピノン誘導体の調製方法
JP2023540092A (ja) 2020-09-03 2023-09-21 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー ビス（フルオロアルキル）－１，４－ベンゾジアゼピノン化合物の多形体及びその使用
CN112142629B (zh) * 2020-10-10 2021-09-14 西北工业大学 3-氨基磺酰基丙氨酸的制备方法
EP4008324A1 (en) 2020-12-07 2022-06-08 Cellestia Biotech AG Combinations comprising an inhibitor of an anti-apoptotic protein, such as bcl-2, bcl-xl, bclw or mcl-1, and a notch signaling pathway inhibitor for treating cancer
EP4255409A1 (en) 2020-12-07 2023-10-11 Cellestia Biotech AG Pharmaceutical combinations for treating cancer
WO2022253794A2 (en) 2021-06-02 2022-12-08 Cellestia Biotech Ag Method for treating an autoimmune and inflammatory disease
WO2023079132A1 (en) 2021-11-08 2023-05-11 Cellestia Biotech Ag Pharmaceutical combinations for treating cancer
EP4223292A1 (en) 2022-02-07 2023-08-09 Cellestia Biotech AG Pharmaceutical combinations for treating cancer
WO2024036097A1 (en) 2022-08-12 2024-02-15 Nuvalent, Inc. Heteroaromatic macrocyclic ether compounds and isotopologues thereof

Family Cites Families (34)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5324726A (en) 1989-12-18 1994-06-28 Merck & Co., Inc. Benzodiazepine analogs
US5852010A (en) 1996-04-03 1998-12-22 Merck & Co., Inc. Inhibitors of farnesyl-protein transferase
WO1997036879A1 (en) 1996-04-03 1997-10-09 Merck & Co., Inc. Inhibitors of farnesyl-protein transferase
US6635632B1 (en) 1996-12-23 2003-10-21 Athena Neurosciences, Inc. Cycloalkyl, lactam, lactone and related compounds, pharmaceutical compositions comprising same, and methods for inhibiting β-amyloid peptide release and/or its synthesis by use of such compounds
HRP990246A2 (en) * 1998-08-07 2000-06-30 Du Pont Pharm Co Succinoylamino benzodiazepines as inhibitors of a beta protein production
NZ525513A (en) * 1998-08-07 2004-09-24 Pont Pharmaceuticals Du Succinoylamino lactams as inhibitors of Abeta protein production
US6737038B1 (en) 1998-11-12 2004-05-18 Bristol-Myers Squibb Company Use of small molecule radioligands to discover inhibitors of amyloid-beta peptide production and for diagnostic imaging
DE69926254D1 (de) * 1998-11-12 2005-08-25 Bristol Myers Squibb Pharma Co Verwendung von radioliganden zum screening von inhibitoren der herstellung von beta-amyloid peptiden
CA2347671A1 (en) 1998-12-24 2000-07-06 Dupont Pharmaceuticals Company Succinoylamino benzodiazepines as inhibitors of a.beta. protein production
ES2214273T3 (es) 1999-04-30 2004-09-16 The Regents Of The University Of Michigan Utilizacion de benzodiazepinas para el tratamiento de enfermedades autoinmunes inducidas por apoptosis.
US6503902B2 (en) 1999-09-13 2003-01-07 Bristol-Myers Squibb Pharma Company Hydroxyalkanoylaminolactams and related structures as inhibitors of a β protein production
US6960576B2 (en) 1999-09-13 2005-11-01 Bristol-Myers Squibb Pharma Company Hydroxyalkanoylaminolactams and related structures as inhibitors of Aβ protein production
EP1218377A1 (en) 1999-10-08 2002-07-03 Bristol-Myers Squibb Pharma Company AMINO LACTAM SULFONAMIDES AS INHIBITORS OF A$g(b) PROTEIN PRODUCTION
WO2001053255A1 (en) 2000-01-24 2001-07-26 Merck Sharp & Dohme Limited Gamma-secretase inhibitors
US6525044B2 (en) 2000-02-17 2003-02-25 Bristol-Myers Squibb Company Succinoylamino carbocycles and heterocycles as inhibitors of a-β protein production
US6495540B2 (en) 2000-03-28 2002-12-17 Bristol - Myers Squibb Pharma Company Lactams as inhibitors of A-β protein production
JP2003529594A (ja) 2000-03-31 2003-10-07 ブリストル−マイヤーズ スクイブ ファーマ カンパニー Ａβタンパク質産生の阻害剤としてのサクシノイルアミノ複素環
CN1436175A (zh) 2000-04-03 2003-08-13 布里斯托尔-迈尔斯斯奎布药品公司 作为Aβ－蛋白生产抑制剂的环状内酰胺
EP1268434A1 (en) 2000-04-03 2003-01-02 Bristol-Myers Squibb Pharma Company Cyclic lactams as inhibitors of a-beta protein production
GB0008710D0 (en) 2000-04-07 2000-05-31 Merck Sharp & Dohme Therapeutic compounds
US6632812B2 (en) 2000-04-11 2003-10-14 Dupont Pharmaceuticals Company Substituted lactams as inhibitors of Aβ protein production
AU2001261728A1 (en) 2000-05-17 2001-11-26 Bristol-Myers Squibb Pharma Company Use of small molecule radioligands for diagnostic imaging
GB0012671D0 (en) 2000-05-24 2000-07-19 Merck Sharp & Dohme Therapeutic agents
AU783857B2 (en) 2000-06-01 2005-12-15 Bristol-Myers Squibb Pharma Company Lactams substituted by cyclic succinates as inhibitors of a beta protein production
US7001901B2 (en) 2002-08-27 2006-02-21 Bristol-Myers Squibb Company Tetrazolylpropionamides as inhibitors of Aβ protein production
BR0314595A (pt) 2002-09-20 2005-08-09 Arrow Therapeutics Ltd Uso de um derivado de benzodiazepina ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, inalador ou nebulisador, produto, usos de um produto e de um composto ou sal farmaceuticamente aceitável deste, derivado de benzodiazepina, composto, e, composição farmacêutica
CA2514267C (en) 2003-02-04 2011-05-17 F. Hoffmann-La Roche Ag Malonamide derivatives as gamma-secretase inhibitors
GB0312365D0 (en) 2003-05-30 2003-07-02 Univ Aston Novel 3-substituted-1, 4-benzodiazepines
SI1711470T1 (sl) 2003-09-09 2009-08-31 Hoffmann La Roche Derivati malonamida, ki blokirajo aktivnost gama-sekretaze
EP1795198A1 (en) 2005-12-09 2007-06-13 Hubrecht Laboratorium Treatment of Barret's esophagus
MX2010001754A (es) 2007-08-14 2010-05-14 Lilly Co Eli Derivados de azepina como inhibidores de gamma secretasa.
MA33076B1 (fr) 2008-01-11 2012-03-01 Hoffmann La Roche Utilisation d'un inhibiteur de la gamma-secretase pour le traitement du cancer
TWI530489B (zh) * 2011-03-22 2016-04-21 必治妥美雅史谷比公司 雙（氟烷基）－１，４－苯二氮呯酮化合物
JP2015533811A (ja) * 2012-09-21 2015-11-26 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ Ｎ−置換ビス（フルオロアルキル）１，４−ベンゾジアゼピノン化合物

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