PT2461700E - Conservante de água e alimentação - Google Patents

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Description

DESCRIÇÃO "CONSERVANTE DE ÁGUA E ALIMENTAÇÃO"
ANTECEDENTES DA INVENÇÃO CAMPO DA INVENÇÃO A presente invenção refere-se a um método para estender a vida útil da água, alimentação e ingredientes de alimentação principais por tratamento por pulverização ou mistura por adição de uma mistura de ácidos orgânicos que contêm ácido pelargónico.
ANTECEDENTES
As doenças transmitidas pelos alimentos são problemas comuns para milhões de pessoas por todo o mundo. As doenças transmitidas por alimento são causadas por muitos micro-organismos diferentes, que incluem infeções por
Campylobacter spp., Shigella spp., Listeria monocytogenes, Yersenia enterolitica, Salmonella spp. e E. coli, que são prevalentes em muitos países. As estatísticas de CDC nos Estados Unidos sugerem que 76 milhões de pessoas ficam doentes anualmente devido ao consumo de carne mal cozinhada, ovos, marisco, produtos lácteos não pasteurizados e vegetais não lavados. Os animais produtores de alimento representam o reservatório principal de sorotipos não typhi de Salmonella enterica, que causa uma estimativa de 1,4 milhão de doenças, 16.400 hospitalizações e 580 mortes/ano nos EUA. A Salmonela é um patógeno intracelular intermitente com a capacidade de infetar humanos e animais resultando numa infeção. Após a ingestão, a Salmonela pode escapar dos limites do intestino, pode penetrar no intestino e pode ser transportada pelo sangue para órgãos internos (Henderson, S. et. al., 1999, Early events in the pathogenesis of avian salmonellosis, Infec. Immun. 67(7): 3.580 a 3.586). A maioria dos casos de salmonelose em humanos parece ser devido ao consumo de ovos de galinhas. Dois dias após as galinhas serem estimuladas oralmente com Salmonela, as bactérias podem ser detetadas no baço, figado, coração, tecidos de vesícula biliar, tecidos intestinais e várias secções do oviduto (Humphrey, T.J. et. al, 1994, Contamination of egg shell and contents with Salmonella enteritidis, Int. J. Food Microbiol 21 (1-2): 31 a 40). Alguns fatores presentes em ovos ajudam a manter os níveis de salmonela baixos em ovos frescos (0,6% de incidência) embora os ovos do oviduto da mesma galinha mostrassem níveis de salmonela superiores (29% de incidência); esses fatores podem incluir anticorpos, enzimas antibacterianas e proteínas inibidoras de protease bacteriana e de sequestro de ferro em gema e albúmen (Keller, L.H. et. al., 1995, Salmonella enteritidis colonization of the reproductive tract and forming and freshly laid eggs of chickens. Infec. Immun. 63(7): 2.443 a 2.449) A incidência de Salmonela, E coll e Enterococcus varia dependendo do tipo de ingredientes usados na fabricação de alimentação animal. Há uma maior incidência de Salmonela em alimentos de origem animal (35%) do que em alimentos de origem vegetal (5%). A incidência de E. coli é semelhante em ambos os produtos derivados de animal e vegetal (40%), mas a incidência de Enterococcus é 80% em alimentos derivados de animal e 91% em alimentos derivados de vegetal. A incidência de contaminação por Salmonela na alimentação animal é maior na forma de puré do que na forma de pélete. A peletização sob condições de alta temperatura e alta pressão reduz não apenas a quantidade de Salmonela, como também de outras bactérias. Um problema com a peletização simples é que não há proteção contra a recontaminação microbiana da alimentação antes de ser consumida pelo animal, como na embalagem, transporte e alimentadores. A presença de diarreias brancas em vitelos tem importância económica. Mais de 90% das diarreias brancas em vitelos é produzida por E. coll e Salmonella e Clostridia. Os métodos preventivos são conhecidos, como (1) vacinação das mães a fim de transferir de forma passiva os anticorpos no colostro; (2) uso de suplementos imunológicos para substituidores de leite; (3) uso de probióticos para criar um ambiente saudável no trato gastrointestinal, e (4) mudanças na pecuária. Nenhumas dessas medidas de proteção são 100% eficazes. A incidência de diarreia em recém-nascidos e leitões desmamados também é muito alta. Novamente, E. coli e Salmonella são os micro-organismos principais envolvidos na diarreia em suínos. Um dos métodos preferenciais para evitar esse problema é o desmame precoce segregado (SEW). A base do desmame precoce é que quanto mais cedo os leitões forem desmamados da porca, menores são as probabilidades de passagem de doenças entre a porca e os leitões. Em ambas as diarreias brancas de vitelo e leitão, o método preferencial de tratamento é com antibióticos. A Comunidade Europeia (UE) baniu o uso de cinco antibióticos e o FDA nos Estados Unidos está a banir o uso de fluoroquinolona em animais devido ao desenvolvimento de resistência a esse antibiótico. A resistência bacteriana encorajou o desenvolvimento de produtos com antibiótico alternativo. Todos os estados da UE baniram o uso de antibióticos como promotores de crescimento, e isso estendeu-se a todos os parses que exportam carne ou seus derivados para a UE.
Muitos produtos foram desenvolvidos para a conservação de água e alimentação para usos animais, incluindo aditivos de água como produtos de amónio quaternário, produtos à base de clorito, clorinação, dióxido de cloro e ácidos orgânicos (acético, sorbato, ascórbico, citrico, fórmico).
Os métodos de conservação para a alimentação incluem tratamento térmico, ácidos orgânicos, formaldeido, óleos essenciais e irradiação. A eliminação de Salmonela com ácidos orgânicos requer níveis altos de tratamento, o que implica um alto custo à indústria animal. A irradiação da alimentação não tem uma boa relação custo-benefício e não é de fácil utilização para o consumidor. 0 percarbonato de sódio é um oxidante potente que é usado como um antimicrobiano na alimentação em níveis de 1 a 2% da dieta. 0 tratamento com cloreto é recomendado para E coli e Salmonella visto que essas bactérias têm a enzima nitrato redutase que reduz o clorato para clorito, que tem propriedades antimicrobianas. Ao administrar iões clorato através da água aos porcos estimulados com Salmonela antes do abate reduzem-se as contagens de bactérias no conteúdo do intestino e tecido linfático (Anderson, R.C. et. al. 2004, Effect of drinking-water administration of experimental chlorate ion preparations on Salmonella enterica serovar Typhimurium colonization in weaned and finished pigs, Vet.
Res. Comm. 28(3): 179 a 189).
Os ácidos orgânicos foram um aditivo principal para reduzir a incidência de infeções transmitidas pelo alimento. 0 uso de ácidos gordos de cadeia curta, média e longa, por exemplo, fórmico, propiónico, butirico, láctico, citrico, málico e outros foi relatado como bem-sucedido em alguns casos. Os ácidos gordos de cadeia curta exercem a sua atividade antimicrobiana devido ao facto de que grupos de ácido RCOOH não dissociado (não ionizado) são permeáveis a lípidos e, portanto, podem cruzar a parede celular microbiana e dissociar-se no interior mais alcalino do micro-organismo (RCOOH -> RCOO" + H+) tornando o citoplasma instável para a sobrevivência. 0 uso dos ácidos orgânicos, especialmente ácido fórmico e propiónico, é bem documentado na técnica. Mas o ácido pelargónico é referido como um herbicida e um fungicida apenas para usos em vegetais, não para a conservação de água e alimentação animal. 0 ácido pelargónico é um ácido gordo de ocorrência natural encontrado em quase todas as espécies de animais e vegetais. Devido ao facto de que contém nove átomos de carbono, também é chamado de ácido nonanoico e tem a fórmula química CH3 (CH2) 7COOH. É encontrado, em níveis baixos, em muitos alimentos comuns e é prontamente fragmentado no ambiente. É um fluido incolor oleoso que solidifica a temperaturas baixas. Tem um odor rançoso desagradável e é quase insolúvel em água. 0 ácido pelargónico é usado como um herbicida não seletivo. 0 Scythe (57% de ácido pelargónico, 3% de ácidos gordos relacionados e 40% de material inerte) é um herbicida dessecante pós-aparecimento de amplo espectro produzido por
Mycogen/Dow Chemicals. 0 modo de ação herbicida do ácido pelargónico é devido, em primeiro lugar, ao vazamento de membrana no escuro ou na luz, e, em segundo lugar, à peroxidação acionada por radicais formados na luz por clorofila sensibilizada deslocada da membrana de tilacoide (B. Lederer, T. Fujimori., Y. Tsujino, K. Wakabayashi e P Boger; Phytotoxic activity of middle-chain fatty acids II: peroxidation and membrane effects. Pesticide Biochemistry and Physiology 80:151 a 156)
Chadeganipour e Haims (Antifungal activities of pelargonic and capric acid on Microsporum gypseum Mycoses Vol. 44, Número 3-4 páginas 109 a 112, 2001) mostraram que a concentração inibitória minima (MIC) para prevenir a proliferação de M. gypseum em meios sólidos era 0,02 mg/ml de ácido cáprico, e 0,04 mg/mL para ácido pelargónico. Em meios líquidos era 0,075 mg/mL de ácido cáprico, e 0,05 mg/mL de ácido pelargónico. Esses ácidos foram testados independentemente e não como uma mistura. N. Hirazawa, et al. (Antiparasitic effect of medium-chain fatty acid against ciliated Crptocaryon irritans infestation is the red sea bream Pagrus major, Aquaculture, 198:219 a 228, 2001) constatou que o ácido nonanoico bem como os ácidos gordos C6 a Cio foram eficazes no controlo da proliferação do parasita C. irritans e que Cs, C9 e Cio foram os mais potentes.
Constatou-se que Trichoderma harzianum, um biocontrolo para plantas de cacau, produz ácido pelargónico como um de entre muitos produtos químicos, e foi eficaz no controlo da germinação e proliferação de patógenos de cacau. (M. Aneja, T. Gianfagna e P. Hebbar, Trichoderma harzianum produces nonanoic acid, an inhibitor of spore germination and mycelial growth of two cacao pathogens, Physiological and Molecular Plant Pathology 67:304 a 307, 2005). O Pedido de Patente publicado N° US2004/0266852 revela um fungicida para usos agrícolas composto por um ou mais ácidos gordos e um ou mais ácidos orgânicos diferentes do ácido gordo. Na mistura dos ácidos orgânicos com o ácido gordo, o ácido orgânico age como um potente sinergista para o ácido gordo como um fungicida. A Patente N° U.S. 5.366.995, revela um método para erradicar as infeções fúngicas ou bacterianas em vegetais e para acentuar a atividade de fungicidas e bactericidas em vegetais por ácidos gordos e seus derivados com uma formulação que contém 80% de ácido pelargónico ou seus sais para o controlo de fungos de vegetais. Os ácidos gordos usados têm, em primeiro lugar, 9 a 18 cadeias de carbono. A Patente N° U.S. 5,342,630 revela um pesticida para usos em vegetais que contém um sal inorgânico que acentua a eficácia de ácidos gordos com 8 a 22 cadeias de carbono. Um dos exemplos mostra um produto de pó com 2% de ácido pelargónico, 2% de ácido cáprico, 80% de talco, 10% de carbonato de sódio e 5% de carbonato de potássio. A Patente N° U.S. 5,093,124 revela o fungicida e artropodicida para vegetais compreendidos por ácidos mono alfa carboxílicos e seus sais que têm uma fitotoxicidade reduzida. De preferência, um fungicida com 9 a 10 cadeias de carbono pelo menos parcialmente neutralizado por um metal alcalino ativo como potássio. A mistura compreende 40% de ingrediente ativo dissolvido em água e inclui 10% de ácido pelargónico, 10% de ácido cáprico e 20% de ácidos gordos de coco, todos os quais são neutralizados com hidróxido de potássio. A Patente N° U.S. 6,596,763 revela um método para controlar a infeção de pele compreendido por ácidos gordos com 6 a 18 cadeias de carbono e seus derivados. A Patente N° U.S. 6,103,768 e a Patente N° U.S. 6,136,856 revelam a utilidade única dos ácidos gordos e derivados para erradicar infeções bacterianas e fúngicas existentes nos vegetais. Esse método não é preventivo, mas mostrou eficácia nas infeções estabelecidas. Sharpshooter, um produto comercialmente disponível, com 80% de ácido pelargónico, 2% de emulsificante e 18% de tensioativo mostrou uma eficácia contra Penicillium e Botrytis spp. A Patente N° U.S. 6,638,978 revela um conservante antimicrobiano composto por um éster de ácido gordo de glicerol, uma mistura binária de ácidos gordos (6 a 18 cadeias de carbono) e um segundo ácido gordo (6 a 18 cadeias de carbono) em que o segundo ácido gordo é diferente do primeiro ácido gordo, para conservação do alimento. O documento WO 01/97799 revela o uso de ácidos gordos de cadeia média como agentes antimicrobianos. O mesmo mostra que um aumento em pH de 6,5 para 7,5 aumentou o MIC dos ácidos gordos de cadeia curta que contêm 6 a 8 cadeias de carbono. O ácido pelargónico é usado como um componente nas soluções de sanitização da superfície de contacto de alimentos nos estabelecimentos de manuseio de alimentos. Um produto da EcoLab contém 6, 9% de ácido pelargónico como ingrediente ativo a ser usado como sanitizante para todas as superfícies de contacto de alimentos (12 CFR 178.1010 b). O FDA aprovou o ácido pelargónico como um agente aromatizante de alimentos sintéticos (21 CFR 172.515), como um adjuvante, auxiliador de produção e sanitizante a ser usado no contacto de alimentos (12 CFR 178.1010 b) e na lavagem ou para auxiliar no descascamento de frutas e vegetais (12 CFR 173.315). O ácido pelargónico está listado pelo USDA na lista da USDA de Substâncias Autorizadas, 1990, secção 5.14, Fruit and Vegetable Washing Compounds . O documento US-A-2003/0176500 revela o uso de um ou mais ácidos gordos de cadeia média com C6-Cio (MCFA) escolhidos a partir do grupo que consiste em ácido caproico, ácido heptanoico, ácido caprílico, ácido nonanoico, e ácido cáprico, sais, derivados ou misturas ou emulsões dos mesmos para inibição de contaminação microbiana, proliferação e a produção de toxina subsequente.
SUMÁRIO DA INVENÇÃO
Um objetivo da invenção é fornecer uma composição antibacteriana para estender a vida útil da água, alimentação ou ingredientes de alimentação, que compreende: 1% a 99% em peso de ácidos orgânicos em solução aquosa, que é uma mistura de C2:C9 ou C3:C9 dos ácidos orgânicos tamponados para um pH = 1 a 5; 0 a 20% em peso de terpenos, e 0,5 a 10% de tensioativos; em que a concentração de ácido é C9 2 to 20% em peso, com base no teor de ácido orgânico total.
Outro objetivo da invenção é fornecer um método para estender a vida útil de água, alimentação ou ingredientes de alimentação, que compreende: tratamento por pulverização ou mistura por adição da água, alimentação ou ingredientes de alimentação principais, uma quantidade eficaz de uma composição que compreende 1% a 99% em peso de ácidos orgânicos em solução aquosa, que é uma mistura C2:C9 ou C3:C9 de ácidos orgânicos tamponados para um pH = 1 a 5; 0 a 20% em peso de terpenos, e 0,5 a 10% de tensioativos; em que a concentração de ácido Cg é 2 a 20% em peso, com base no teor de ácido orgânico total.
DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO
Definições:
Um "ácido orgânico" da invenção é um composto de ácido carboxilico que tem cadeia de hidrocarboneto Ci a Cis linear ou ramificada, por exemplo, ácido fórmico, ácido acético, ácido propiónico, ácido butirico e ácido pelargónico.
Uma "solução tamponada" é uma que resiste a mudanças no pH quando quantidades pequenas de um ácido ou um álcali são adicionados. A capacidade de tampão é uma medida quantitativa da resistência de uma solução tampão para a mudança de pH mediante a adição de iões de hidróxido. Sistemas de tamponagem da invenção incluem HC1, Citrato de sódio pH = 1 a 5 Ácido cítrico, Citrato de sódio pH = 2,5 a 5,6 Ácido acético, Acetato de sódio pH = 3,7 a 5,6 NH4CI, NH4OH pH = 1 a 11
Um "terpeno antimicrobiano" da invenção pode ser dissulfito de alil, citral, pineno, nerol, geraniol, carvacrol, eugenol, carvona, anetol, cânfora, mentol, limoneno, farnesol, caroteno, timol, borneol, mirceno, terpenono, linalool, ou misturas dos mesmos. Os terpenos preferenciais são dissulfito de alil, timol, citral, eugenol, carvacrol, e carvona, ou misturas dos mesmos. 0 termo "quantidade eficaz" de um composto significa aquela quantidade que tem a capacidade para realizar a função do composto ou propriedade para que a quantidade eficaz seja expressa, como uma quantidade não tóxica, mas suficiente para fornecer um efeito antimicrobiano. Portanto, uma quantidade eficaz pode ser determinada por uma pessoa versada na técnica com o uso da experimentação de rotina.
As formulações podem variar não apenas na concentração de componentes principais, isto é, ácidos orgânicos, mas também no tipo de terpenos, tipo de tensioativo e concentração de água usada. A invenção pode ser modificada ao adicionar ou deletar terpenos e tensioativos das formulações. 0 termo "efeito sinergístico" ou "sinergia" significa um efeito de conservação aprimorado quando os ingredientes forem usados como uma mistura em comparação ao efeito de aditivo esperado com base em cada componente usado sozinho.
As composições da presente invenção compreendem ácidos orgânicos que têm 1 a 18 carbonos, que contêm uma quantidade eficaz de uma mistura de C2:C9 ou C3:Cç>, resultando num efeito de conservação sinergistico. Em geral, uma solução aquosa dos ácidos de cadeia curta é tamponada para um pH entre 1 e 5, de preferência entre pH 1 e 3, então o ácido C9 (Pelargónico) é adicionado numa quantidade de 2 a 20% em peso em conjunto com os terpenos e tensioativos opcionais e outros aditivos.
Os terpenos antimicrobianos, extratos vegetais ou óleos essenciais que contêm terpenos podem ser usados na invenção, bem como os terpenos mais purificados. Os terpenos estão comercialmente disponíveis ou podem ser produzidos por vários métodos conhecidos na técnica, como extração de solvente ou extração/destilação de vapor ou sintetizado quimicamente. O tensioativo pode ser não iónico, catiónico ou aniónico. Os exemplos de tensioativos incluem polissorbato 20, polissorbato 80, polissorbato 40, polissorbato 60, éster poliglicerílico, mono-oleato de poligricerila, monocaprilato de decagricerila, dicaprilato de propileno glicol, monostearato de triglicerol, Tween™ 20, Span™ 20, Span™ 40, Span™ 60, Span™ 80, tensioativos de óleo de rícino etoxilados ou misturas dos mesmos. A composição total pode compreender 1% a 100% em peso de ácidos orgânicos, de preferência 20 a 95%. Do componente de ácido orgânico, 2% a 20% em peso é o ácido pelargónico e os restantes 98% a 80% em peso é o ácido acético, ácido propiónico ou uma mistura dos mesmos. A composição pode conter 0 a 20% em peso de terpenos, de preferência 0,5 a 10%, e 0 a 20% em peso de tensioativo, de preferência 0,5 a 5%. A composição total pode conter 0 a 99% em peso de água. A presente invenção é eficaz contra qualquer uma dessas classificações de agentes ineficazes presentes na água, alimentação e ingredientes de alimentação principais, em particular, bactérias, micoplasma, virus e fungos. Os exemplos desses agentes infeciosos são Staphylococcus aureus, Aspergillius fumigatus. Mycoplasma iowae, Sclerotinta homeocarpa, Rhizoctonia solani, Colletotrichum graminicola, Penicillum sp. , Mycoplasma pneumoniae, E. coli, Salmonella sp., Clostridia sp., Campylobacter sp. e outros. As composições e métodos da presente invenção são eficazes ao prevenir muitas, se não todas, dessas infeções numa grande variedade de indivíduos, incluindo seres humanos, outros mamíferos e aves. A presente invenção inclui um método para desinfetar água, alimentação e ingredientes de alimentação. 0 método compreende administrar a composição por uma variedade de meios. Por exemplo, pulverizada na alimentação, pulverizada na água, misturada na água para beber, aplicada a superfícies em que a água e a alimentação são armazenadas para usos futuros ou consumidas diariamente, adicionada em gotas através de um medicador padrão ou aparelho de desinfeção de água, por exemplo, nos alojamentos animais iniciais, de crescimento e finais. A composição da presente invenção pode ser usada com segurança e eficácia como um conservante para água e alimentação para todos os animais comercialmente adultos, para consumo humano e uso externo, para animais domesticados, e outros animais numa concentração microbiana baixa é desejada na alimentação ou abastecimento de água.
Ao longo deste pedido, várias publicações são referenciadas. As revelações dessas publicações são aqui incorporadas a título de referência nas suas totalidades neste pedido. EXEMPLO 1 - Avaliação de Ácidos Orgânicos Tamponados
Propósito: Determinar o efeito de pH sobre a atividade antimicrobiana de ácido acético e propiónico
Tratamentos; 1) controlo (controlo negativo) 2) Ácido fórmico: Ácido propiónico (razão de 90:10; controlo positivo) 3) Ácido acético (pH 1) 4) Ácido acético (pH 2) 5) Ácido acético (pH 3) 6) Ácido acético (pH 4) 7) Ácido acético (pH 5) 8) Ácido acético (pH 6) 9) Ácido acético (pH 7) 10) Ácido propiónico (pH 1) 11) Ácido propiónico (pH 2) 12) Ácido propiónico (pH 3) 13) Ácido propiónico (pH 4) 14) Ácido propiónico (pH 5) 15) Ácido propiónico (pH 6) 16) Ácido propiónico (pH 7)
Procedimento:
Os ácidos propiónico e acético foram tamponados com hidróxido de amónio para pHs na faixa de 1 a 7. Os teores de ácido das soluções tamponadas foram determinados por um cálculo de razão entre peso e peso a fim de obter o mesmo teor de ácido nas soluções de teste. As soluções foram adicionadas à água desionizada estéril para fornecer uma solução ácida a 0,025%, 0,05%, 0,075% e 0,1%. Os pHs das soluções de água desionizada foram registados e quaisquer problemas com a solubilidade observados . 100 uL de uma cultura de caldo de nutriente de Salmonella typhimurium (ATTC 14028) foram adicionados a cada tubo de diluição. Após a diluição, os tubos foram centrifugados e deixados em repouso. Em 4 e 24 horas após a adição do inoculo, 100 uL da solução foram transferidos para placas em Placa de Ágar Padrão (placas em triplicado) . As placas foram incubadas a 37°C por 24 horas antes da enumeração. A dose eficaz mínima de cada ácido foi determinada pela regressão linear.
Resultados:
Conclusões: A tamponagem de ácido acético ou ácido propiónico com amónio reduziu a eficácia do produto para a Salmonela. 0 ponto de rutura parece estar entre um pH de 3 a 4.
Exemplo 2 - Avaliação de Ácidos Orgânicos Individuais
Propósito: Determinar o comprimento da cadeia de carbono dos ácidos orgânicos em atividade antimicrobiana
Tratamentos: 1) Controlo 2) Ácido fórmico: Ácido propiónico (razão de 90:10; controlo positivo) 3) Ácido fórmico 4) Ácido acético 5) Ácido propiónico 6) Ácido butirico 7) Ácido valérico 8) Ácido caproico 9) Ácido enântico 10) Ácido caprilico 11) Ácido pelargónico 12) Ácido láurico 13) Hidróxido de potássio
Procedimento :
Neste experimento, o efeito de ácidos gordos livres foi avaliado. Vários ácidos gordos de cadeia longa (caprílico, pelargónico e láurico) não eram solúveis em água e KOH foi usado para colocar esses ácidos na solução em água (a solução final continha quantidades iguais em peso de ácido e KOH. 0 teor de ácido das soluções foi determinado por um cálculo de razão entre peso e peso (peso de ácido/peso da solução tamponada)). As soluções foram adicionadas à água desionizada estéril para fornecer uma solução ácida a 0,025%, 0,05%, 0,075% e 0,1%. O pH das soluções de água desionizada foi registado e quaisquer problemas com a solubilidade observados. 100 uL de uma cultura de caldo de nutriente de Salmonella typhimurium (ATTC 14028) foram adicionados a cada tubo de diluição. Após a diluição, os tubos foram centrifugados e deixados em repouso. Em 4 e 24 horas após a adição do inoculo, 100 uL da solução foram transferidos para placas em Ágar (placas em triplicado). As placas foram incubadas a 37°C por 24 horas antes da enumeração. A dose eficaz minima de cada ácido foi determinada pela regressão linear.
Conclusões: Não se observou relação direta alguma entre a eficácia contra Salmonela e o comprimento de cadeia de ácido orgânico. Isso contrasta os efeitos relatados para comprimento de cadeia de ácido e a eficácia antifúngica. A atividade de caprílico, pelargónico e láurico não pode ser comparada com os ácidos de cadeia mais curta devido ao uso de KOH. EXEMPLO 3 - Misturas de Ácidos Orgânicos Tamponados
Propósito: De entre os ácidos orgânicos de cadeia longa, foi observado que pelargónico é o mais eficaz com base em estudos anteriores. Esse experimento tem como objetivo determinar se há um efeito sinergistico quando o ácido propiónico ou acético é combinado com o ácido pelargónico.
Produtos de Teste: 1) Controlo 2) Ácido fórmico: Ácido propiónico (razão de 90:10, controlo positivo) 3) Ácido acético 4) Ácido acético: ácido pelargónico (80:20: p/p) 5) Ácido acético: ácido pelargónico (60:40: p/p) 6) Ácido acético: ácido pelargónico (40:60: p/p) 7) Ácido acético: ácido pelargónico (20:80: p/p) 8) Ácido propiónico 9) Ácido propiónico: ácido pelargónico (80:20: p/p) 10) Ácido propiónico: ácido pelargónico (60:40: p/p) 11) Ácido propiónico: ácido pelargónico (40:60: p/p) 12) Ácido propiónico: ácido pelargónico (20:80: p/p) 13) Ácido pelargónico
Procedimento: Os ácidos propiónico e acético foram tamponados com hidróxido de amónio para um pH de 3 e combinados com pelargónico nas razões acima. O teor de ácido das soluções tamponadas foi determinado por um cálculo de razão entre peso e peso (peso de ácido/peso total da solução tamponade) e ajustado para fornecer um valor de ácido igual para cada tratamento. Os tratamentos acima foram adicionados à água desionizada estéril para produzir soluções ácidas totais a 0,025%, 0,05%, 0,075% e 0,1%. Os pHs das soluções de água desionizada foram registados e quaisquer problemas com a solubilidade observados. 100 uL de uma cultura de caldo de nutriente de Salmonella typhimurium (ATTC 14028) foram adicionados a cada tubo de diluição. Após a adição, os tubos foram centrifugados e deixados em repouso. Em 4 e 24 horas após a adição do inoculo, 100 uL da solução foram transferidos para placas em Placa de Ágar Padrão (placas em triplicado). As placas foram incubadas a 37°C por 24 horas antes da enumeração. A dose eficaz minima de cada ácido foi determinada pela regressão linear.
Conclusão A adição de ácido pelargónico ao ácido propiónico ou acético resultou num aumento na eficácia. ESTUDO 4
Os ácidos propiónico e acético foram tamponados com hidróxido de amónio para um pH de 3 e combinados com pelargónico nas razões listadas. 0 teor de ácido das soluções tamponadas foi determinado por um cálculo de razão entre peso e peso (peso de ácido/peso total da solução tamponada) e ajustado para um valor de ácido igual para cada tratamento. Os tratamentos acima foram adicionados à água desionizada estéril para produzir soluções ácidas totais a 0,025% e 0,05%. Os pHs das soluções de água desionizada foram registados e quaisquer problemas com a solubilidade observados. 100 uL de uma cultura de caldo de nutriente de Salmonella typhimurium (ATTC 14028) foram adicionados a cada tubo de diluição. Após a adição, os tubos foram centrifugados e deixados em repouso. Em 4 e 24 horas após a adição do inoculo, 100 uL da solução foram transferidos para placas em Placa de Ágar Padrão (placas em triplicado). As placas foram incubadas a 37°C por 24 horas antes da enumeração.
Conclusão: A adição de ácido pelargónico ao ácido propiónico (1 a 20%) ou acético resultou num aumento na eficácia contra a Salmonela. ESTUDO 5
Os ácidos propiónico, acético e pelargónico sozinhos ou em combinação, conforme listado, foram adicionados à agua desionizada estéril para produzir soluções ácidas totais a 0,05%, 0,04%, 0,03%, 0,02% e 0,01%. Os pHs das soluções de água desionizada foram registados e quaisquer problemas com a solubilidade observados. 100 uL de uma cultura de caldo de nutriente de Salmonella typhimurium (ATTC 14028) foram adicionados a cada tubo de diluição. Após a diluição, os tubos foram centrifugados e deixados em repouso. Em 24 horas após a adição do inoculo, 100 uL da solução foram transferidos para placas em Placa de Ágar Padrão (placas em triplicado). As placas foram incubadas a 37°C por 24 horas antes da enumeração.
Conclusão: 0 teste mostrou uma maior eficácia ao misturar
Propiónico/Pelargónico (95/5) e Acético/Pelargónico (95/5) 24 horas após o tratamento. ESTUDO 6 O ácido cáprico (5%, 10% ou 20%) diluido em ácido acético ou ácido propiónico foi testado para determinar a sua eficácia contra a salmonela na alimentação. A alimentação de aves domésticas comercial alterada com Salmonella typhimurium (ATTC 14028) foi tratada com 1 ou 3 kg/MT das soluções listadas abaixo. Vinte e quatro horas após o tratamento, 10 gr de alimentação foram adicionados a 90 mL de tampão Butterfield, misturados e então 100 uL da solução foram transferidos para placas em Placa de Ágar Padrão (placas em triplicado). As placas foram incubadas a 37°C por 24 horas antes da enumeração.
A adição de ácido cáprico a ácido acético ou propiónico em concentrações de 5 a 20% não pareceu aprimorar de forma significativa a eficácia do ácido orgânico contra a Salmonela na alimentação. ESTUDO 7 0 ácido miristico (5%, 10% e 20%) diluído em ácido propiónico foi testado para determinar a sua eficácia contra a salmonela na alimentação. O ácido miristico não era solúvel em ácido acético. A alimentação de aves domésticas comercial alterada com Salmonella typhimurium (ATTC 14028) foi tratada com 1 ou 3 kg/MT das soluções listadas abaixo. Vinte e quatro horas após o tratamento, 10 gr de alimentação foram adicionados a 90 mL de tampão Butterfield, misturados e então 100 uL da solução foram transferidos para placas em Placa de Ágar Padrão (placas em triplicado). As placas foram incubadas a 37°C por 24 horas antes da enumeração.
Nenhum efeito benéfico na eficácia foi observado quando o ácido miristico foi adicionado em 5 a 20% ao ácido propiónico em comparação com a combinação de ácido propiónico padrão. ESTUDO 8 O ácido láurico (5%, 10%, 20%) diluído com ácido propiónico foi testado para determinar a sua eficácia contra a salmonela na alimentação. A alimentação de aves domésticas comercial alterada com Salmonella typhimurium (ATTC 14028) foi tratada com 1 ou 2 kg/MT das soluções listadas abaixo. Vinte e quatro horas após o tratamento, 10 gr de alimentação foram adicionados a 90 mL de tampão Butterfield, misturados e então 100 uL da solução foram transferidos para placas em Placa de Ágar Padrão (placas em triplicado). As placas foram incubadas a 37°C por 24 horas antes da enumeração.
Nenhum efeito benéfico foi observado quando o ácido láurico (5 a 20%) foi adicionado ao ácido propiónico em comparação com a combinação de ácido propiónico padrão.
Lisboa,

Claims (15)

  1. REIVINDICAÇÕES
    1. Composição antimicrobiana para estender a vida útil de água, alimentação ou ingredientes de alimentação, sendo que a composição é caracterizada por compreender: 1% a 99% em peso de ácidos orgânicos em solução aquosa, que é uma mistura de C2.C9 ou C3:C9 de ácidos orgânicos, tamponados para o pH = 1 a 5, 0 a 20% em peso de terpenos, e 0. 5 a 10% de tensioativos, em que a concentração de ácido C9 é 2 a 20% em peso, com base no teor de ácido orgânico total.
  2. 2. Composição antimicrobiana, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada por ser tamponada para o pH = 1 a 3.
  3. 3. Composição antimicrobiana, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada por o tensioativo ser polissorbato 20, polissorbato 80, polissorbato 40, polissorbato 60, éster poliglicerilico, mono-oleato de poligricerila, monocaprilato de decagricerila, dicaprilato de propileno glicol, monostearato de triglicerol, Tween™ 20, Span™ 20, Span™ 40, Span™ 60, Span™ 80, tensioativos de óleo de ricino etoxilados ou misturas dos mesmos.
  4. 4. Composição antimicrobiana, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada por a concentração de tensioativo ser 0,5 a 5% em peso.
  5. 5. Composição antimicrobiana, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada por o terpeno ser selecionado a partir do grupo que consiste em dissulfito de alil, citral, pineno, nerol, geraniol, carvacrol, eugenol, carvona, anetol, cânfora, mentol, limoneno, farnesol, caroteno, timol, borneol, mirceno, terpenono, linalool, ou misturas dos mesmos.
  6. 6. Composição antimicrobiana, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada por o terpeno ser selecionado a partir do grupo que consiste em dissulfito de alil, timol, citral, eugenol, carvacrol e carvona, ou misturas dos mesmos.
  7. 7. Composição antimicrobiana, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada por o teor de terpeno ser 0,5 a 10% em peso.
  8. 8. Método para estender a vida útil de água, alimentação ou ingredientes de alimentação, sendo que o método é caracterizado por compreender: tratamento por pulverização ou mistura por adição à água, alimentação ou ingredientes de alimentação, de uma quantidade eficaz de uma composição que compreende 1% a 99% em peso de ácidos orgânicos em solução aquosa, que é uma mistura de C2:C9 ou C3:C9 dos ácidos orgânicos tamponados para um pH = 1 a 5 ; 0 a 20% em peso de terpenos, e 0,5 a 10% de tensioativos, em que a concentração de ácido C9 é 2 a 20% em peso, com base no teor de ácido orgânico total
  9. 9. Método, de acordo com a reivindicação 8, caracterizado por a composição ser tamponada para pH = 1 a 3.
  10. 10. Método, de acordo com a reivindicação 8, caracterizado por o tensioativo ser polissorbato 20, polissorbato 80, polissorbato 40, polissorbato 60, éster poliglicerílico, mono-oleato de poligricerila, monocaprilato de decagricerila, dicaprilato de propileno glicol, monostearato de triglicerol, Tween™ 20, Span™ 20, Span™ 40, Span™ 60, Span™ 80, tensioativos de óleo de rícino etoxilados ou misturas dos mesmos.
  11. 11. Método, de acordo com a reivindicação 8, caracterizado por a concentração de tensioativo ser 0,5 a 5 % em peso.
  12. 12. Método, de acordo com a reivindicação 8, caracterizado por o terpeno ser selecionado a partir do grupo que consiste em dissulfito de alil, citral, pineno, nerol, geraniol, carvacrol, eugenol, carvona, anetol, cânfora, mentol, limoneno, farnesol, caroteno, timol, borneol, mirceno, terpenono, linalool, ou misturas dos mesmos.
  13. 13. Método, de acordo com a reivindicação 8, caracterizado por o terpeno ser selecionado a partir do grupo que consiste em dissulfito de alil, timol, citral, eugenol, carvacrol e carvona, ou misturas dos mesmos.
  14. 14. Método, de acordo com a reivindicação 8, caracterizado por o teor de terpeno ser 0,5 a 10% em peso.
  15. 15. Método, de acordo com a reivindicação 8, caracterizado por a composição ser eficaz contra bactérias, vírus, micoplasmas ou fungos presentes na água para beber, alimentação e ingredientes de alimentação. Lisboa,
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