PT2430035E

PT2430035E - Nucleosídeos de espirooxetano de uracilo

Info

Publication number: PT2430035E
Application number: PT107182073T
Authority: PT
Inventors: Abdellah Tahri; Lili Hu; Tim Hugo Maria Jonckers; Pierre Jean-Marie Bernard Raboisson; Koen Vandyck; Steven Maurice Paula Van Hoof
Original assignee: Medivir Ab; Janssen Products Lp
Priority date: 2009-05-14
Filing date: 2010-05-11
Publication date: 2013-05-22
Also published as: CY1115383T1; MY157018A; MX2011012027A; TWI461432B; SG175981A1; IL215955A; DK2511282T3; CO6440533A2; ES2477598T3; ME01478B; IL215955A0; EP2511282B1; AP2783A; CY1114081T1; EP2430035A1; CR20120297A; ECSP11011461A; CL2011002859A1; JP2012526764A; UY32642A

Description

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DESCRIÇÃO "NUCLEOSÍDEOS DE ESPIROOXETANO DE URACILO" Antecedentes da Invenção

Esta invenção relaciona-se com nucleosideos de espirooxetano de uracilo que são inibidores do virus da hepatite C (VHC). 0 VHC é um virus de ARN de sentido positivo e cadeia única que pertence à familia de virus Flaviviridae no género dos hepacivirus. A região NE5B do poligene de ARN codifica uma polimerase de ARN dependente de ARN (pAdA) , a qual é essencial para a replicação virai. Depois da infeção aguda inicial, uma maioria dos indivíduos infetados desenvolve hepatite crónica porque o VHC se replica preferencialmente em hepatócitos mas não é diretamente citopático. Em particular, a falta de uma resposta vigorosa dos linfócitos-T e a alta propensão do virus para mutar parecem promover uma alta taxa de infeção crónica. A hepatite crónica pode progredir para fibrose cistica, levando a cirrose, a doença do figado de fase terminal, e a CHC (carcinoma hepatocelular) , tornando-a a principal causa de transplantes de figado. Existem seis genótipos do VHC principais e mais do que 50 subtipos, os quais estão diferentemente geograficamente distribuídos. O genótipo 1 do VHC é o genótipo predominante na Europa e nos E.U.A.. A extensa heterogeneidade genética do VHC tem importantes implicações de diagnóstico e clinicas, explicando talvez as dificuldades no desenvolvimento de vacinas e a falta de resposta à terapia corrente. A transmissão do VHC pode ocorrer através do contacto com sangue ou produtos sanguíneos contaminados, por exemplo 2 depois de transfusão de sangue ou do uso de drogas intravenosas. A introdução de testes de diagnóstico usados no rastreio de sangue tem levado a uma tendência decrescente na incidência do VHC após transfusão. No entanto, dada a lenta progressão até à doença de figado de fase terminal, as infeções existentes continuarão a apresentar uma carga médica e económica séria durante décadas. A terapia corrente contra o VHC é baseada no interferão-alfa (IFN-α) (peguilado) em combinação com a ribavirina. Esta terapia de combinação origina uma resposta virológica sustentada em mais do que 40% dos pacientes infetados pelo VHC do genótipo 1 e em cerca de 80% daqueles infetados pelos genótipos 2 e 3. Para além da eficácia limitada contra o genótipo 1 do VHC, esta terapia de combinação tem efeitos secundários significativos e é fracamente tolerada em muitos pacientes. Efeitos secundários principais incluem sintomas tipo gripe, anormalidades hematológicas, e sintomas neuropsiquiátricos. Consequentemente existe uma necessidade de tratamentos mais eficazes, convenientes e mais bem tolerados. A experiência com fármacos contra o VHC, em particular com inibidores da protease do VIH, tem ensinado que uma farmacocinética subotimal e regimes de dosagem complexos resultam rapidamente em falhas de conformidade inadvertidas. Isto significa por seu turno que a concentração minima em 24 horas (concentração minima no plasma) para os respetivos fármacos num regime contra o VIH fica frequentemente abaixo do limite da CI90 ou da DE90 durante grandes períodos do dia. Considera-se que um nível mínimo em 24 horas de pelo menos a CI50, e mais 3 realisticamente, da CI90 ou da DE90, é essencial para atrasar o desenvolvimento de mutantes de escape do fármaco. 0 alcance da farmacocinética e do metabolismo do fármaco necessários para permitir tais niveis minimos proporciona um desafio estringente para o desenho do fármaco. A pAdA da NE5B é essencial para a replicação do genoma do ARN do VHC de sentido positivo e cadeia única. Esta enzima tem gerado interesse significativo entre os químicos medicinais. São conhecidos inibidores quer de nucleosídeos, quer de não nucleosídeos da NE5B. Os inibidores de nucleosídeo podem atuar como um terminador da cadeia ou como um inibidor competitivo, ou como ambos. De modo a serem ativos, os inibidores de nucleosídeo têm de ser captados pela célula e convertidos in vivo num trifosfato. Esta conversão ao trifosfato é comummente mediada por cinases celulares, o que concede requisitos estruturais adicionais a um potencial inibidor de nucleosídeo da polimerase. Adicionalmente, isto limita a avaliação direta dos nucleosídeos como inibidores da replicação do VHC em ensaios baseados em células capazes de fosforilação in situ. Têm sido feitas várias tentativas para desenvolver nucleosídeos como inibidores da pAdA do VHC, mas embora uma mão-cheia de compostos tenha entrado em desenvolvimento clínico, nenhum tem prosseguido todo o caminho até ao registo. De entre os problemas que os nucleosídeos direcionados para o VHC têm encontrado estão toxicidade, mutagenicidade, falta de seletividade, fraca eficácia, fraca biodisponibilidade, regimes de dosagem subótimos e consequente elevada carga de comprimidos, e custo dos bens. 4

Existe uma necessidade para inibidores do VHC que possam ultrapassar as desvantagens da terapia corrente contra o VHC tais como efeitos secundários, eficácia limitada, o surgimento de resistência, e falhas de conformidade, bem como melhorar a reposta virai sustentada. A presente invenção diz respeito a um grupo de derivados de 1-(8-hidroxi-7-(hidroximetilo)-1,6-dioxaespiro[3.4]octan-5-ilo)pirimidina-2,4-diona inibidores do VHC com propriedades úteis no que toca a um ou mais dos seguintes parâmetros: eficácia antiviral, perfil favorável de desenvolvimento de resistência, falta de toxicidade e de genotoxicidade, farmacocinética e farmacodinâmica favoráveis e facilidade de formulação e de administração. Os nucleosídeos de espirooxetano, em particular a 1-(2-0,2-C-etano-p-D-ribofuranosilo)timina e o 1-(2-0,2-C-etano-p-D- ribofuranosilo)uracilo, foram descritos em Org. Biomol. Chem, 2003, 3514-3526. Estes compostos foram testados contra o VIH, mas não foi descoberta nenhuma atividade. Vários exemplos de fosforamidatos de nucleosideo antivirais são divulgados na W0 2006/012078, na WO 2007/095269 e na WO 2007/020193. Os compostos da invenção podem ser também atrativos devido ao facto de não terem atividade contra outros virus, em particular contra o VIH. Pacientes infetados com VIH sofrem frequentemente de coinfeções tais como VHC. O tratamento de tais pacientes com um inibidor do VHC que também iniba o VIH pode levar ao surgimento de estirpes de VIH resistentes.

Descrição da Invenção

Num aspeto, a presente invenção proporciona compostos que podem ser representados pela fórmula (I): 5

incluindo quaisquer seus estereoisómeros possiveis, em que: R4 é um éster de monofosfato, de difosfato ou de trifosfato; ou R4 é um grupo da fórmula R9

OU

R7 é fenilo, opcionalmente substituído por 1, 2, ou por 3 substituintes, cada um independentemente selecionado de halo, alquilo Ci-C6, alquenilo C3-C6, alcoxi Ci-C6, hidroxi, e amino; ou R7 é naftilo, opcionalmente substituído por 1, 2, ou por 3 substituintes, cada um independentemente selecionado de halo, alquilo C1-C6, alquenilo C3-Ce, alcoxi Ci-C6, hidroxi, e amino; ou R7 é indolilo, opcionalmente substituído por um grupo alquiloxi Ci-C6-carbonilo e opcionalmente adicionalmente por 1, 2, ou por 3 substituintes, cada um independentemente selecionado de halo, alquilo Ci~Cç, alquenilo C3-C6, alcoxi Ci-C6, hidroxi, e amino; R8 é hidrogénio, alquilo Ci-Cer benzilo, ou fenilo; R8' é hidrogénio, alquilo Ci-C6, benzilo, ou fenilo; ou 6 R8 e R8 em conjunto com o átomo de carbono ao qual eles estão anexados formam cicloalquilo C3-C7; R9 é alquilo C1-C10, cicloalquilo C3-C7, fenilo ou fenilo-alquilo C1-C6/ em que a fração de fenilo no fenilo ou no fenilo-alquilo C1-C6 está opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 substituintes, cada um independentemente selecionado de hidroxi, alcoxi Ci-C6, amino, mono e dialquiloamino Ci-Cg; ou os seus sais ou solvatos farmaceuticamente aceitáveis.

Num aspeto adicional, a invenção diz respeito ao uso dos compostos da fórmula I, como especificado aqui, na inibição do VHC. Alternativamente é proporcionado o uso para o fabrico de um medicamento de um composto da fórmula I, como especificado aqui, para a inibição do VHC. 0 grupo -NH-C(R8) (R8,)-C(=0)- pode formar um residuo de aminoácido, o qual inclui residuos de aminoácidos naturais e não naturais. De interesse são a glicina (Gly) e a glicina de dimetilo (Dmg). Também de interesse são aqueles residuos de aminoácidos em que R8 é hidrogénio. Se no último caso R8 for outro que não hidrogénio, o residuo de aminoácido tem um centro quiral e a configuração no átomo de carbono assimétrico pode ser aquela de um L-aminoácido. Exemplos incluem residuos de alanina (Ala), de valina (Vai), de isoleucina (Ile), de ácido α-aminobutírico (ABA, também denominado ácido 2-aminobutírico ou etiloglicina), de fenilalanina (Phe) e de feniloglicina (Phg), em particular L-Ala, L-Val, L-Ile, L-ABA, L-Phe e L-Phg. Um exemplo de um residuo de aminoácido em que R e R em conjunto com o átomo de carbono ao qual eles estão anexados 7 formam cicloalquilo C3-C7 é o ácido 1,1-ciclopropiloamino. Similarmente, o grupo

O forma um residuo de prolina, preferencialmente um resíduo de L-prolina.

Subgrupos de compostos da fórmula I são aqueles compostos da fórmula I, ou subgrupos de compostos da fórmula I, como definido aqui, em que R4 é um grupo da fórmula

Subgrupos de compostos da fórmula I são aqueles compostos da fórmula I, ou subgrupos de compostos da fórmula I, como definido aqui, em que (a) R7 é fenilo, opcionalmente substituído por 1, 2, ou por 3 substituintes, cada um independentemente selecionado de halo, alquilo Ci-C6, alquenilo C3-C6, alcoxi Ci-C6, hidroxi, e amino; ou R7 é naftilo, opcionalmente substituído por halo, alquilo C1-C6, ou alcoxi Ci-C6; ou R7 é indolilo; (b) R7 é fenilo, opcionalmente substituído por 1, por 2, ou por 3 substituintes, cada um independentemente 8 selecionado de halo, alquilo C1-C6, alquenilo C3-C6, alcoxi Ci-C6, hidroxi, e amino; ou R7 é naftilo; ou R7 é indolilo; (c) R7 é fenilo, opcionalmente substituído por 1 ou por 2 substituintes, cada um independentemente selecionado de halo, alquilo Ci-C6, alquenilo C3-C6, alcoxi Ci-C6, hidroxi, e amino; ou R7 é naftilo; ou R7 é indolilo; (d) R7 é fenilo, opcionalmente substituído por 1 ou por 2 substituintes, cada um independentemente selecionado de halo, alquilo Ci-C6, alquenilo C3-C6, e alcoxi Ci~Ce, ou R7 é naftilo; (e) R7 é fenilo, opcionalmente substituído por halo ou por 1 ou 2 radicais de alquilo Ci-C6, ou R7 é naftilo; (f) R7 é fenilo, halofenilo, dialquilofenilo C1-C4, ou naftilo; (g) R7 é fenilo; (h) R7 é naftilo; (i) R7 é 5-indolilo.

Numa forma de realização, R7 é indolilo, opcionalmente substituído no seu átomo de nitrogénio por um grupo alquiloxi Ci-C6-carbonilo e opcionalmente nos seus átomos de carbono adicionalmente por 1, 2, ou por 3 substituintes, cada um independentemente selecionado de halo, alquilo Ci-C6, alquenilo C3-C6, alcoxi C1-C6, hidroxi, e amino;

Numa forma de realização adicional, o grupo R7 sendo indolilo nos compostos da fórmula I ou em qualquer um dos seus subgrupos é 5-indolilo ou o grupo R7 sendo N-alquiloxi Ci-C6-carboniloindolilo é N-t.butiloxicarbonilo-5-indolilo, em particular N-t.butiloxicarbonilo-5-indolilo. 9 0 grupo indolilo quando ligado na sua posição 5 pode ser representado como se segue: R7a /

em que R7a é hidrogénio ou alquiloxi Ci-C6-carbonilo, ou em particular R7a é hidrogénio, alquiloxi Ci-C/j-carbonilo, ou mais em particular R7a é hidrogénio ou t-butiloxicarbonilo. Numa forma de realização adicional, o grupo indolilo nos compostos da fórmula I ou qualquer um dos seus subgrupos é 5-indolilo (i.e. em que R7a é hidrogénio).

Subgrupos de compostos da fórmula I são aqueles compostos da fórmula I, ou subgrupos de compostos da fórmula I, como definido aqui, em que (a) R8 é metilo e R8 é metilo; ou (b) R é hidrogénio e R é fenilo, alquilo Ci-C6 ou alquilo C1-C4, tal como metilo, etilo, isopropilo ou isobutilo. Subgrupos de compostos da fórmula I são aqueles compostos da fórmula I, ou subgrupos de compostos da fórmula I, como definido aqui, em que a fração

10 é glicilo, dimetiloglicilo, a-aminobutirilo, feniloglicina, isoleucilo, alanilo, fenilalanilo ou valilo (respetivamente Gly, Dmg, ABA, Phg, Ile, Ala, Phe ou Vai; em particular L-ABA, L-Phg, L-Ile, L-Ala, L-Phe ou L-Val).

Subgrupos de compostos da fórmula I são aqueles compostos da fórmula I, ou subgrupos de compostos da fórmula I, como definido aqui, em que R8 é hidrogénio, alquilo Ci-C6, Q ' benzrlo, ou fenilo; e R é hidrogénio, alquilo C1-C6, benzilo, ou fenilo.

Subgrupos de compostos da fórmula I são aqueles compostos da fórmula I, ou subgrupos de compostos da fórmula I, como definido aqui, em que a fração

tem a estrutura

em que R8 é hidrogénio e R8 é hidrogénio, fenilo, alquilo Ci-C6, benzilo; ou R8 é hidrogénio e R8 é hidrogénio ou alquilo Ci-C6; R8 é hidrogénio e R8 é alquilo Ci-C2; R8 é hidrogénio e R8 é metilo. 11

Numa forma de realização, R8 e R8 em conjunto com o átomo de carbono ao qual eles estão anexados formam cicloalquilo C3-C7; ou em particular formam cicloalquilo C3-C4; ou em particular formam ciclopropilo.

Subqrupos de compostos da fórmula I são aqueles compostos da fórmula I, ou subqrupos de compostos da fórmula I, como definido aqui, em que (a) R9 é alquilo C1-C6, benzilo, ou fenilo opcionalmente substituído por 1, 2 ou 3 substituintes, cada um independentemente selecionado de hidroxi, alcoxi

Ci-C6, amino, mono e dialquiloamino Ci-Ce; (b) R9 é alquilo C1-C6 ou benzilo; (c) R9 é alquilo Ci-C6; (d) R9 é alquilo 0 1 0 (e) R9 é metilo, etilo, ou t-butilo; (f) R9 é cicloalquilo C3-C7.

De interesse são os compostos 12a, 12b, 12c, 12d, 12e, 12f, 12g, 12h, 12i, 12 j, 12k, 121, 12m mencionados na secção "Exemplos" bem como os sais de adição ácida farmaceuticamente aceitáveis destes compostos. De particular interesse são os compostos 12a, 12c, 12d e 12k, quer na forma livre (i.e. forma de não sal) destes compostos quer como um seu sal de adição ácida farmaceuticamente aceitável.

Os compostos da fórmula I têm vários centros de quiralidade, em particular nos átomos de carbono 1', 3', e 4". Embora a estereoquimica nestes átomos de carbono seja fixa, os compostos podem apresentar pelo menos 75%, preferencialmente pelo menos 90%, tal como um excesso de 12

A quiralidade pode estar também presente nos substituintes, tal como onde R4 seja

o qual pode ter quiralidade no carbono carregando R8 (onde R8 e R8 sejam diferentes) e no átomo de fósforo. 0 centro de fósforo pode estar presente como RP ou SP, ou uma mistura de tais estereoisómeros, incluindo racematos. Podem existir igualmente diastereoisómeros resultando do centro de fósforo quiral e de um átomo de carbono quiral.

Num aspeto adicional, a invenção proporciona um composto da fórmula I ou um seu sal, hidrato, ou solvato farmaceuticamente aceitável, para uso no tratamento ou na profilaxia (ou no fabrico de um medicamente para o tratamento ou a profilaxia) da infeção pelo VHC. Genótipos representativos do VHC no contexto de tratamento ou de profilaxia de acordo com a invenção incluem o genótipo lb (prevalente na Europa) ou la (prevalente na América do 13

Norte). A invenção proporciona também um método para o tratamento ou a profilaxia da infeção pelo VHC, em particular do genótipo la ou lb.

Os compostos da fórmula I são representados como um estereoisómero definido, exceto para o estereoisomerismo no átomo de fósforo do grupo fosforamidato. A configuração absoluta de tais compostos pode ser determinada usando métodos conhecidos na técnica tais como, por exemplo, difração por raios X ou RMN e/ou envolvimento de materiais de partida de estereoquimica conhecida. As composições farmacêuticas de acordo com a invenção irão preferencialmente compreender formas estereoisomericamente puras do estereoisómero indicado do composto particular da fórmula I.

Formas estereoisoméricas puras dos compostos e intermediários como mencionado aqui são definidas como isómeros substancialmente isentos de outras formas enantioméricas ou diastereoméricas da mesma estrutura molecular básica dos referidos compostos ou intermediários. Em particular, o termo "estereoisomericamente puro" diz respeito a compostos ou intermediários tendo um excesso estereoisomérico de pelo menos 80% (i.e. minimo de 90% de um isómero e máximo de 10% dos outros isómeros possíveis) até um excesso estereoisomérico de 100% (i.e. 100% de um isómero e nenhum do outro), mais em particular, compostos ou intermediários tendo um excesso estereoisomérico de 90% até 100%, ainda mais em particular tendo um excesso estereoisomérico de 94% até 100% e o mais em particular tendo um excesso estereoisomérico de 97% até 100%, ou de 98% até 100%. Os termos "enantiomericamente puro" e "diastereomericamente puro" devem ser entendidos de uma 14 maneira similar, mas dizendo então respeito ao excesso enantiomérico, e ao excesso diastereomérico, respetivamente, da mistura em questão.

Formas estereoisoméricas puras dos compostos e intermediários desta invenção podem ser obtidas pela aplicação de procedimentos conhecidos na técnica. Por exemplo, os enantiómeros podem ser separados uns dos outros pela cristalização seletiva dos seus sais diastereoméricos com ácidos ou bases oticamente ativos. Exemplos deles são ácido tartárico, ácido dibenzoílotartárico, ácido ditoluoílotartático e ácido canforsulfónico. Alternativamente, os enantiómeros podem ser separados por técnicas cromatográficas usando camadas estacionárias quirais. As referidas formas estereoquimicamente isoméricas puras podem ser também derivadas das correspondentes formas estereoquimicamente isoméricas puras dos materiais de partida apropriados, contanto que a reação ocorra estereoespecificamente. Preferencialmente, se é desejado um estereoisómero especifico, o referido composto é sintetizado por métodos de preparação estereoespecificos. Estes métodos irão vantajosamente empregar materiais de partida enantiomericamente puros.

Os racematos diastereoméricos dos compostos da fórmula podem ser obtidos separadamente por métodos convencionais. Métodos de separação fisica apropriados que podem ser vantajosamente empregues são, por exemplo, cristalização seletiva e cromatografia, e.g. cromatografia em coluna.

Os sais de adição farmaceuticamente aceitáveis compreendem as formas de sal de adição ácida ou básica não tóxicas terapeuticamente ativas dos compostos da fórmula I. De 15 interesse são as formas livres, i.e. de não sal, dos compostos da fórmula I, ou de qualquer subgrupo de compostos da fórmula I especificado aqui.

Os sais de adição ácida farmaceuticamente aceitáveis podem ser convenientemente obtidos pelo tratamento da forma básica com tal ácido apropriado. Ácidos apropriados compreendem, por exemplo, ácidos inorgânicos tais como ácidos hidrohálicos, e.g. ácido clorídrico ou bromídrico, ácido sulfúrico, nítrico, fosfórico e similares; ou ácidos orgânicos tais como, por exemplo, ácido acético, propiónico, hidroxiacético, láctico, pirúvico, oxálico (i.e. etanodioico), malónico, succínico (i.e. ácido butanodioico), maleico, fumárico, málico (i.e. ácido hidroxilo-butanodioico), tartárico, cítrico, metanosulfónico, etanosulfónico, benzenosulfónico, p-toluenosulfónico, ciclâmico, salicílico, p-aminosalicílico, pamoico e similares. Reciprocamente, as referidas formas de sal podem ser convertidas por tratamento com um base apropriada na forma básica livre.

Os compostos da fórmula I contendo um protão ácido podem ser também convertidos nas suas formas de sal de adição metálica ou amínica não tóxica pelo tratamento com bases orgânicas e inorgânicas apropriadas. Formas de sal básicas apropriadas compreendem, por exemplo, os sais de amónio, os sais de metal alcalino ou alcalinoterrosos, e.g. os sais de lítio, de sódio, de potássio, de magnésio, de cálcio e similares, sais com bases orgânicas, e.g. os sais de benzatina, de N-metilo-D-glucamina, de hidrabamina, e sais com aminoácidos tais como, por exemplo, arginina, lisina e similares. 16 0 termo "solvatos" abrange quaisquer solvatos farmaceuticamente aceitáveis que os compostos da fórmula I, bem como os seus sais, sejam capazes de formar. Tais solvatos são por exemplo hidratos, alcoolatos, e.g. etanolatos, propanolatos, e similares.

Alguns os compostos da fórmula I podem também existir na sua forma tautomérica. Por exemplo, as formas tautoméricas dos grupos amida (-C(=0)-NH-) são iminoálcoois (-C(OH)=N-), os quais podem tornar-se estáveis em anéis com caráter aromático. A base de uridina é um exemplo de uma tal forma. Tais formas, embora não explicitamente indicadas nas fórmulas estruturais representadas aqui destinam-se a estar incluídas no âmbito da presente invenção.

Como usado aqui, "alquilo C1-C4" como um grupo ou parte de um grupo define radicais de hidrocarboneto de cadeia linear ou ramificada tendo de 1 a 4 átomos de carbono tais como por exemplo metilo, etilo, 1-propilo, 2-propilo, 1-butilo, 2-butilo, 2-metilo-l-propilo, 2-metilo-2-propilo. "Alquilo Ci-C6" engloba radicais de alquilo C1-C4 e os seus homólogos superiores tendo 5 ou 6 átomos de carbono tais como, por exemplo, 1-pentilo, 2-pentilo, 3-pentilo, 1-hexilo, 2-hexilo, 2-metilo-l-builo, 2-metilo-l-penilo, 2-etilo-l-butilo, 3-metilo-2-pentilo, e similares. De interesse entre alquilo C1-C6 é alquilo C1-C4. "Alquilo C1-C10" engloba radicais de alquilo C1-C6 e os seus homólogos superiores tendo 7, 8, 9 ou 10 átomos de carbono tais como, por exemplo, heptilo, 2-heptilo, 3-heptilo, 2-metilohexilo, octilo, 2-octilo, 3-octilo, nonilo, 2-nonilo, 3-nonilo, 2-butilopentilo, decilo, 2-decilo, e similares. De interesse entre alquilo C1-C10 é alquilo C1-C6. Alquilo C1-C2 define metilo e etilo. 17 "Alcoxi Ci~Ce" significa um radical de-O-alquilo C1-C6 em que o alquilo C1-C6 é como definido acima. Exemplos de alcoxi C1-C6 são metoxi, etoxi, n-propoxi, ou isopropoxi. "Cicloalquilo C3-C6" inclui ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo e ciclohexilo. De interesse é ciclopropilo. 0 termo "alquenilo C3-C6" como um grupo ou parte de um grupo define radicais de hidrocarboneto de cadeia linear ou ramificada tendo ligações carbono-carbono saturadas e pelo menos uma ligação dupla, e tendo de 3 a 6 átomos de carbono tais como por exemplo 1-propenilo, 2-propenilo (ou alilo) , 1- butenilo, 2-butenilo, 3-butenilo, 2-metilo-2-propenilo, 2- pentenilo, 3-pentenilo, 2-hexenilo, 3-hexenilo, 4-hexenilo, 2-metilo-2-butenilo, 2-metilo-2-pentenilo e similares. De interesse entre alquenilo C3-C6 é alquenilo C3-C4. De interesse entre alquenilo C3-C6 ou alquenilo C3-C4 são aqueles radicais tendo uma ligação dupla. 0 termo "halo" é genérico a flúor, a cloro, a bromo e a iodo.

Numa forma de realização, o termo "fenilo-alquilo C1-C6" é benzilo.

Como usado aqui, o termo "(=0)" ou "oxo" forma uma fração de carbonilo quando anexado a um átomo de carbono. Deve ser notado que um átomo pode estar somente substituído por um grupo oxo quando a valência desse átomo assim o permita. 0 termo "éster de monofosfato, de difosfato ou de trifosfato" refere-se a grupos: 18 O jj O Íi O ti 0 O 0 li ii -0-f?—OH . ií 0—0” fi T -OH ’ l -Οτ- Ι O -o—|—o— Ιί —OH 1 OH OH i OH OH OH OH Onde a posição de um radical numa fração molecular não é especificada (por exemplo, um substituinte em fenilo) ou é representada por uma ligação flutuante, tal radical pode estar posicionado em qualquer átomo de uma tal fração, desde que a estrutura resultante seja quimicamente estável. Quando qualquer variável está presente mais do que uma vez na molécula, cada definição é independente.

Sempre que usado aqui, o termo "compostos da fórmula I", ou "os presentes compostos" ou termos similares destina-se a incluir os compostos da fórmula I, incluindo as possíveis formas estereoquimicamente isoméricas, e os seus sais e solvatos farmaceuticamente aceitáveis. A presente invenção inclui também compostos da fórmula I ou qualquer subgrupo da fórmula I marcados com isótopos, em que um ou mais dos átomos está substituído por um isótopo que difere do(s) tipicamente encontrado(s) na natureza. Exemplos de tais isótopos incluem isótopos de hidrogénio, tais como 2H e 3H; de carbono, tais como nC, 13C e 14C; de nitrogénio, tais como 13N e 15N; de oxigénio, tais como 150, 170 e 180; de fósforo, tais como 31P e 32P, de enxofre, tais como 35S; de flúor, tais como 18F; de cloro, tais como 36C1; de bromo tais como 75Br, 76Br, 77Br e 82Br; e de iodo, tais como I, I, I, e I. Compostos da invenção marcados com isótopos podem ser preparados por processos análogos daqueles descritos aqui pelo uso dos reagentes ou materiais de partida marcados com isótopos apropriados, ou por técnicas conhecidas na técnica. A escolha do isótopo 19 incluído num composto marcado com isótopo depende da aplicação específica desse composto. Por exemplo, para ensaios de distribuição em tecido é incorporado um isótopo radioativo tal como 3H ou 14C. Para aplicações de radioimagiologia, será útil um isótopo emissor de positrões tal como nC, 18F, 13N ou 150. A incorporação de deutério pode proporcionar maior estabilidade metabólica, resultando e.g. numa meia-vida in vivo aumentada do composto ou requisitos de dosagem reduzidos.

Procedimentos de Síntese 0 material de partida 1-[(4R,5R,7R,8R)-8-hidroxi-7-(hidroximetilo)-1,6-dioxa-espiro[3.4]octan-5-ilo]pirimidina-2,4(1H, 3H)-diona 10 pode ser preparado como se segue. 0 intermediário 4 pode ser obtido como descrito em Org. Lett., 2007, 9, 3009-3012 e é feito reagir com brometo de alilomagnésio até ao intermediário 5. O grupo hidroxi neste último é benzoilado com cloreto de benzoílo na presença de uma base, por exemplo uma trialquiloamina tal como trietiloamina, ou I7,I7-dimetilopiridina-4-amina (DMAP), resultando no intermediário 6. Este último intermediário é ativado com um ácido de Lewis, em particular com SnCl4, e feito reagir com um uracilo sililado, obtido por exemplo por reação do uracilo com Ν,Ο-bis[Trimetilosililo]acetamida (BSA). Esta reação origina o intermediário 7 no qual a ligação dupla no grupo alilo é oxidada com tetróxido de ósmio na presença de periodato até um aldeído, o qual é subsequentemente reduzido ao correspondente álcool 8. A mesilação deste último com cloreto de mesilo na presença de uma base, por exemplo piridina, seguida de tratamento com uma base forte tal como hidreto de sódio resulta na formação de oxetano. A remoção dos grupos benzilo em 9, e.g. com hidrogénio na presença de 20 um catalisador de metal nobre, e.g. hidróxido de paládio, origina o intermediário 10. Este último pode ser feito reagir com um éster de ácido fosforamidoclorídico 11a ou 11b na presença de uma base, e.g. IV-metiloimidazol (NMI) . 20

O

As reações acima descritas estão ilustradas no esquema seguinte. HO'

HÔ OH \ T8AI, BnCI, β nBnO SnClj

HaH 1 BnO\_/ XBnO OH3 * φ c > BnO OBn 2

X

Dess-Martin

t J Uracilo, BSA, SnCl4 Z) NaMeO, MeOH 21

12 0 éster de ácido fosforamidoclorídico 11a ou 11b pode ser preparado pela reação de um álcool la com POCI3 na presença de uma base, obtendo-se assim dicloreto de fosforilo lb, o qual é feito reagir adicionalmente com o aminoácido lc ou ld.

11b 22

Num aspeto adicional, a presente invenção diz respeito a uma composição farmacêutica compreendendo uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da fórmula I como especificado aqui, e um transportador farmaceuticamente aceitável. A referida composição pode conter de 1% a 50%, ou de 10% a 40% de um composto da fórmula I e o restante da composição é o referido transportador. Uma quantidade terapeuticamente eficaz neste contexto é uma quantidade suficiente para atuar de uma maneira profilática contra a infeção pelo VHC, para inibir o VHC, para estabilizar ou para reduzir a infeção pelo VHC, em sujeitos infetados ou em sujeitos estando em risco de ficarem infetados. Num ainda aspeto adicional, esta invenção relaciona-se com um processo de preparação de uma composição farmacêutica como especificado aqui, a qual compreende a mistura intima de um transportador farmaceuticamente aceitável com uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da fórmula I, como especificado aqui.

Os compostos da fórmula I ou de qualquer seu subgrupo podem ser formulados em várias formas farmacêuticas para propósitos de administração. Como composições apropriadas podem ser citadas todas as composições usualmente empregues na administração sistémica de fármacos. Para preparar as composições farmacêuticas desta invenção, uma quantidade eficaz do composto particular, opcionalmente na forma de sal de adição ou de complexo metálico, como o ingrediente ativo é combinada em mistura intima com um transportador farmaceuticamente aceitável, cujo transportador pode tomar uma ampla variedade de formas dependendo da forma de preparação desejada para administração. Estas composições farmacêuticas são desejáveis na forma de dosagem unitária adequada, particularmente, para administração oral, retal, 23 percutânea, ou por injeção parenteral. Por exemplo, na preparação das composições na forma de dosagem oral pode ser empregue qualquer um dos meios farmacêuticos usuais tais como, por exemplo, água, glicóis, óleos, álcoois e similares no caso de preparações liquidas orais tais como suspensões, xaropes, elixires, emulsões e soluções; ou transportadores sólidos tais como amidos, açúcares, caolina, lubrificantes, ligantes, agentes desintegrantes e similares no caso de pós, pílulas, cápsulas, e comprimidos. Devido à sua facilidade na administração, os comprimidos e as cápsulas representam as formas unitárias de dosagem oral o mais vantajosas, caso em que são obviamente empregues transportadores farmacêuticos sólidos. Para composições parenterais, o transportador irá usualmente compreender água estéril, pelo menos em grande parte, embora possam ser incluídos outros ingredientes, por exemplo, para auxiliar a solubilidade. Podem ser preparadas soluções injetáveis, por exemplo, nas quais o transportador compreende solução salina, solução de glucose ou uma mistura de solução salina e de glucose. Podem ser também preparadas suspensões injetáveis, caso em que podem ser empregues transportadores líquidos apropriados, agentes de suspensão e similares. Também incluídas estão preparações de forma sólida destinadas a serem convertidas, pouco tempo antes do uso, em preparações de forma líquida. Nas composições adequadas para administração percutânea, o transportador compreende opcionalmente um agente intensificador da penetração e/ou agente molhante adequado, opcionalmente combinado com aditivos adequados de qualquer natureza em proporções mínimas, cujos aditivos não introduzem um efeito deletério significativo na pele. Os compostos da presente invenção podem ser também administrados através de inalação oral ou insuflação na forma de uma solução, uma suspensão ou um pó 24 seco usando qualquer sistema de distribuição conhecido na técnica. É especialmente vantajoso formular as composições farmacêuticas acima mencionadas na forma de dosagem unitária para facilidade de administração e uniformidade de dosagem. Forma de dosagem unitária como usada aqui refere-se a unidades fisicamente discretas adequadas como dosagens unitárias, contendo cada unidade uma quantidade predeterminada de ingrediente ativo calculada para produzir o efeito terapêutico desejado em associação com o transportador farmacêutico requerido. Exemplos de tais formas de dosagem unitária são comprimidos (incluindo comprimidos sulcados ou revestidos), cápsulas, pílulas, supositórios, saquetas de pó, bolachas, soluções ou suspensões injetáveis e similares, e seus múltiplos segregados.

Os compostos da fórmula I mostram atividade contra o VHC e podem ser usados no tratamento e na profilaxia de infeção pelo VHC ou de doenças associadas com o VHC. Estas últimas incluem fibrose progressiva do fígado, inflamação e necrose levando a cirrose, doença do fígado de fase terminal, e CHC. Acredita-se além do mais que um número dos compostos desta invenção seja ativo contra estirpes mutadas do VHC. Adicionalmente, muitos dos compostos desta invenção mostram um perfil farmacocinético favorável e têm propriedades atrativas em termos de biodisponibilidade, incluindo uma meia-vida, valores de ASC (área sob a curva) e de pico aceitáveis e sem fenómenos desfavoráveis tais como inicio rápido insuficiente e retenção no tecido. 25 A atividade antiviral in vivo contra o VHC dos compostos da fórmula I pode ser testada nem sistema de replicação de VHC celular baseado em Lohmann et al. (1999) Science 285: 110-113, com as modificações adicionais descritas por Krieger et al. (2001) Journal of Virology 75: 4614-4624 (incorporado aqui por referência), o qual é adicionalmente exemplificado na secção dos exemplos. Este modelo, embora não seja um modelo de infeção completo para o VHC, é amplamente aceite como o mais robusto e eficaz modelo de replicação autónoma do ARN do VHC correntemente disponível. Será apreciado que é importante que se distinga entre compostos que interferem especificamente com funções do VHC e aqueles que exercem efeitos citotóxicos ou citostáticos no modelo de replicão do VHC, e como consequência causam uma diminuição no ARN do VHC ou na concentração da enzima repórter ligada. São conhecidos ensaios na área para a avaliação da citotoxicidade celular baseados na atividade de enzimas mitocondriais usando corantes redox fluorogénicos tais como resazurina. Além disso, existem rastreios de contagem celular para a avaliação da inibição não seletiva da atividade do gene repórter ligado, tais como luciferase de pirilampo. Tipos de célula apropriados podem ser equipados pela transfeção estável com um gene repórter da luciferase cuja expressão seja dependente de um promotor de gene constitutivamente ativo, e tais células podem ser usadas como um contrarastreio para eliminar inibidores não seletivos.

Devido às suas propriedades anti-VHC, os compostos da fórmula I, incluindo quaisquer possíveis estereoisómeros, os seus sais ou solvatos farmaceuticamente aceitáveis, são úteis no tratamento de animais de sangue quente, em particular humanos, infetados com o VHC, ou na profilaxia 26 de infeções pelo VHC. Os compostos da presente invenção podem portanto ser usados como um medicamento, em particular como um medicamento anti-VHC ou inibidor do VHC. A presente invenção relaciona-se também com o uso dos presentes compostos no fabrico de um medicamento para o tratamento ou a prevenção de infeção pelo VHC. Num aspeto adicional, a presente invenção relaciona-se com um método de tratamento de um animal de sangue quente, em particular humano, infetado pelo VHC, ou estando em risco de ficar infetado pelo VHC, compreendendo o referido método a administração de uma quantidade anti-VHC eficaz de um composto da fórmula I, como especificado aqui. 0 referido uso como um medicamento ou método de tratamento compreende a administração sistémica a sujeitos infetados pelo VHC ou a sujeitos suscetíveis a infeção pelo VHC de uma quantidade eficaz para combater as condições associadas com a infeção pelo VHC.

No geral, é contemplado que uma quantidade diária antiviral eficaz seria de cerca de 1 a cerca de 200 mg/kg, ou cerca de 5 a cerca de 175 mg/kg, ou cerca de 10 a cerca de 150 mg/kg, ou cerca de 20 a cerca de 100 mg/kg, ou cerca de 50 a cerca de 75 mg/kg de peso corporal. Doses diárias médias podem ser obtidas pela multiplicação destas quantidades diárias por cerca de 70. Pode ser apropriado administrar a dose requerida como duas, três, quatro ou mais subdoses a intervalos apropriados ao longo do dia. As referidas subdoses podem ser formulados como formas de dosagem unitária, por exemplo, contendo cerca de 1 a cerca de 5000 mg, ou cerca de 50 a cerca de 3000 mg, ou cerca de 100 a cerca de 1000 mg, ou cerca de 200 a cerca de 600 mg, ou cerca de 100 a cerca de 400 mg de ingrediente ativo por forma de dosagem unitária. 27

Como usado aqui, o termo "cerca de" tem o significado conhecido da pessoa perita na técnica. Em certas formas de realização, o termo "cerca de" pode ser deixado de fora e entende-se a quantidade exata. Noutras formas de realização, o termo "cerca de" significa que o numérico depois do termo "cerca de" está na fama de ± 15%, ou de ± 10%, ou de ± 5%, ou de ± 1%, do referido valor numérico.

Exemplos

Os seguintes esquemas destinam-se apenas a ser ilustrativas e não limitam de modo nenhum o âmbito.

Foi feita análise de CL-EM usando qualquer um dos métodos seguintes. Os dados da RMN foram registados num espetómetro de 400 MHz da Bruker.

Condição da CLAR A

Sistema: Waters Alliance 2695

Coluna: Water Xterra 2,5 ym 4,6 x 50 mm; Temp. da coluna: 55°C; Caudal: 2 mL/min

Fase móvel A: acetato de amónio a 10 mM + HCOOH a 0,1% em H20

Fase móvel B: CH3CN

Tempo %A %B 0,00 85 15 3, 00 5 95 4,20 5 95 4,30 85 15 5, 40 85 15 28

Condição da CLAR B

Sistema: Waters Alliance 2695

Coluna: Hypercarb 3 μ 4,6 x 50 mm; Temp. da coluna: 50°C; Caudal: 2 mL/min

Fase móvel A: acetato de amónio a 10 mM em H20/CH3CN 1/9 Fase móvel B: acetato de amónio a 10 mM em H2O/CH3CN 9/1

Tempo %A %B 0,00 0 100 3, 00 100 0 4,20 100 0 4,30 0 100 5,40 0 100

Exemplo_lj_ (2S, 3R, 4R, 5R) -3-alilo-4- (benziloxi) -5- (benziloximetilo)-2-metoxitetrahidrofuran-3-ol (5)

4 5

Sob atmosfera de árgon, a uma solução de 4 (obtida como em Org. Lett., 2007, 9, 3009-3012) em tetrahidrofurano seco (THF; 400 mL) a -78°C, foi adicionado brometo de alilomagnésio (400 mL, 400 mmol; 1,0 M em dietiloéter) . Após agitação da mistura reacional a -78°C durante 4 horas, permitiu-se que a mistura reacional agitasse à temperatura ambiente durante 2 horas. A reação foi cuidadosamente temperada com cloreto de amónio aquoso saturado. A mistura 29 foi extraída com diclorometano, e a camada orgânica foi lavada com salmoura. 0 solvente foi removido, e o resíduo foi purificado por cromatografia em sílica gel (600 g de sílica), por gradiente de eluição com acetato de etilo a 15% a 20% em hexano para dar o produto da reação 5 como um óleo incolor (32,9 g, 70%) . Condição da CLAR A, Tr: 2,97 min, m/z = 402 (M + nh4) + . ΧΗ RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 7,38 - 7,20 (m, 10 H) , 5,84 - 5, 97 (m, 1 H) , 5,12 (d, 1 H, J = 10,2 Hz), 5,01 (d, 1 H, J = 17,2 Hz), 4,74 (d, 1 H, J = 12,3 Hz) , 4,56 (s, 1 H), 4, 53 - 4,40 (m, 3 H), 4, 05 - 4,11 (m, 1 H) , 3,32 - 3,53 (m, 4 H) , 3,44 (s, 3 H) , 2,37 (dd, 1 H, J = 14,3, 6,7 Hz), 2,25 (dd, 1 H, J = 14,3, 7,6 Hz).

Exemplo 2: benzoato de (2S,3R,4R,SR)-3-alilo-4-(benziloxi)-5-(benziloximetilo)-2-metoxitetrahidrofuran-3-ilo (6)

5 6 A uma solução de 5 (26,6 g, 69,2 mmol) em diclorometano seco (500 mL) à temperatura ambiente, foram adicionados A/,i\f-dimetilopiridin-4-amina (DMAP; 2,113 g, 17,30 mmol), trietiloamina (217 mL, 1557 mmol) e cloreto de benzoílo (18,05 mL, 156 mmol). Após 1 hora, foram adicionados cloreto de benzoílo (6 mL) e DMAP (2,1 g) adicionais. A mistura foi agitada durante 5 dias. A mistura reacional foi depois agitada com HC1 a 1 N e extraída com diclorometano. As camadas orgânicas foram 30 combinadas e lavadas com NaHC03 aquoso saturado seguida de salmoura. Após secagem com MgSC>4, filtração e evaporação dos voláteis, o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (400 g de sílica) eluindo com heptano a acetato de etilo a 15% em heptano para dar o produto da reação como um óleo (como uma mistura com o composto 5) . A mistura foi purificada novamente com CH2C12 como eluente (400 g de sílica). As frações puras foram recolhidas e o intermediário 6 foi obtido como um óleo incolor (13,05 g, 39%). Condição da CLAR A, Tr: 3,41 min, m/z = 457 (M-0Me)+. RMN (400 MHz, , CDC1 3) δ ppm 8,1 (d, 2 H, J = 7, 9 Hz ), 7, 68 - 7,28 (m, 13 H) , 5 , 84 [ - 5, 77 (m, 1 H), 5, 12 (d, 1 H, J = 16 Hz) , 4,95 (d, 1 H, J = 16 Hz) , 4, 92 (d, 1 H, J = 12 , 3 Hz ), 4, 56 (d, 1 H, J = 12,3 Hz) , 4,48 (d, 1 H, J = 11 , 6 Hz ), 4, 40 (d, 1 H, J = 11, 6 Hz) , 4,2 (m, 1 H) , 3, 85 (d , 1 H , J = 6, 2 Hz ) , 3,. 53 (d, 1 H, J = 10, 8 Hz) , 3,7 (s, 3 H) , 3,45 (dd , 1 H, J = 10, 8, 6, 2 Hz) , 3,25 (dd, 1 H, J = 15 ,5, 7 , 3 Hz) , 2 ,45 (dd, 1 H, J = 1 5,5, 7,3 H :z) . Ex emplo 3 1 -[ ( 2R , 3R ,4R,5R)- 3-alilo-4- (benz ilox: D- 5- (benziloximetilo)-3-hidroxitetrahidrofuran-2-ilo]pirimidina-2,4(lH,3H)-diona (7)

Bis(trimetilosililo)acetamida (BSA; 29,2 mL, 118 mmol) foi adicionada a uma mistura de 6 (14,0 g, 23,1 mmol) e uracilo (5,99 g, 53,4 mmol) em acetonitrilo anidro (300 mL) . A mistura reacional foi submetida a refluxo durante 1 hora e permitiu-se que a solução límpida arrefecesse até à 31 temperatura ambiente. Foi adicionado cloreto de estanho (11,55 mL, 99 mmol) gota a gota à temperatura ambiente e a mistura foi agitada adicionalmente durante 1 hora. A mistura foi depois agitada a refluxo durante 1,5 hora e novamente arrefecida até à temperatura ambiente. Foi adicionado acetato de etilo (250 mL) , seguido de NaHCCb aquoso saturado (250 mL) e a mistura foi agitada durante 15 minutos. Após filtração através de Celite, a camada orgânica foi separada e lavada com NaHCCb aquoso saturado (250 mL). A camada aquosa combinada foi extraida com acetato de etilo (250 mL) e a camada orgânica combinada foi seca (MgSCg) , filtrada e evaporada até à secura sob pressão reduzida. O óleo amarelo resultante foi dissolvido em metanol e metanolato de sódio a 25% (25 mL) foi adicionado. A agitação continuou durante a noite. Foi adicionado mais metanolato de sódio a 25% (15 mL) e a agitação continuou durante a noite. Foi adicionado ácido acético (30 mL) e o solvente foi removido. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna com heptano/acetato de etilo 50:50 até acetato de etilo a 100% . 0 intermediário 7 (9,38 g, 76%) foi obtido como um óleo incolor. Condição da CLAR A, Tr: 2,49 min, m/ z = 465 (M + H) + . 2H RMN (400 MHz, CDC13) δ ppm 8,39 (1 Η, NH), 7 ,75 (d, 1 H, J = 8,0 Hz), 7,22 - 7, 43 (m, 10 H) , 6,05 (s, 1 H) , 5,71 - 5,84 (m, 1 H) , 5,35 (d, 1 H, J = 8,0 Hz) , 5, 00 - 5, 11 (m, 2 H) , 4,70 (d, 1 H, J = 11,5 Hz), 4,53 (d, 1 H, J = 11,5 Hz), 4,47 (d, 1 H, J = 11,1 Hz), 4,47 (d, 1 H, J = 11,1 Hz), 4,11 - 4,16 (m, 1 H) , 4,04 (d, 1 H, J = 8,0 Hz), 3,81 - 3,87 (m, 1 H) , 3,45 -3,52 (m, 1 H), 3,17 (sl, OH), 2,15 - 2,33 (m, 2 H).

Exemplo_4^_ 1- [ (2R, 3R, 4R, 5R) -4- (benziloxi) -5- (benziloximetilo)-3-hidroxi-3-(2- 32 hidroxietilo)tetrahidrofuran-2-ilo]pirimidina-2,4(1H,3H)-diona (8)

7 * A uma solução agitada de 7 (7,8 g, 16,79 mmol) numa mistura de THF (10 mL) e H20 (10 mL) foi adicionado periodato de sódio (11,17 g, 52,2 mmol) seguida de tetróxido de ósmio (VIII) (2 mL, 2,5 p/v % em tert-Butanol, 0,168 mmol) e a agitação foi continuada durante 2 horas à temperatura ambiente. Foi adicionada água (100 mL) e a extração foi realizada com acetato de etilo (2 x 50 mL) . A camada orgânica foi lavada com NaHC03 aquoso saturado (2 x 30 mL). A camada aquosa combinada foi extraída com acetato de etilo e a camada orgânica combinada foi seca sobre (Na2SC>4) , filtrada e evaporada até à secura sob pressão reduzida. O resíduo oleoso obtido foi dissolvido numa mistura de THF (100 mL) e foram adicionados H20 (20 mL) e boroidreto de sódio (1,361 g, 36,0 mmol). A mistura reacional foi agitada durante a noite à temperatura ambiente, após o que foi adicionada água (100 mL) e a extração foi realizada com acetato de etilo (2 x 50 mL) . A camada orgânica combinada foi lavada com NaHCCL aquoso saturado, a camada aquosa combinada foi extraída com acetato de etilo, e a camada orgânica combinada foi seca sobre (Na2SC>4) , filtrada e evaporada até à secura sob pressão reduzida. O resíduo oleoso obtido foi purificado por cromatografia em coluna (metanol a 0-10% (v/v) em CH2C12 depois isocrático a 10%) originando o produto de reação 8 como uma espuma branca 33 (4,8 g, 57%) . Condição da CLAR A, Tr: 2 ,12 min, m/z = 469 (M + H) + . XH RMN (400 MHz, CDC13) δ ppm 9, , 85 d H, NH) , 7,85 (d, 1 H, J = 8,0 Hz) , 7,22 - 7,4 3 (m, 10 H) , 6, 05 (s, 1 H), 5,35 (d, 1 H , J = 8,0 Hz) , 4,75 (d , 1 H, J = 11,5 Hz) , 4,53 (d, 1 H, J = 11,5 Hz) , 4,4! 5 (d, 1 : H, J = 11, 3 Hz) , 4, 35 (d, 1 H, J = 11, 3 Hz), 4, 27 (d, , 1 H, j = 6,6 Hz) , 4,2 (s, 1 H), 4,1 (d, 1 H, J = 6, 6 Hz) , 3, 95 (d, 1 H, J = 10,8 Hz) , 3,75 - 3, 7 (m -, 1 H) , 3,62 (d, 1 H, J = 10,8 Hz), 3, 17 (sl , OH), 1,8 - 1, 7 (m , 2 H) .

Exemplo_5j_ 1- [ (4R, SR, 7R, 8R) -8- (benziloxi) -7- (benziloximetilo)-1,6-dioxaespiro[3.4]octan-5-ilo]pirimidina-2,4(1H,3H)-diona (9)

8

Cloreto de metanosulfonilo (0,800 mL, 10,34 mmol) foi adicionado a 8 (4,32 g, 9,22 mmol) em piridina seca (100 mL) . Após 1 hora e 15 minutos, foram adicionados 0,1 equivalentes de mais cloreto de metanosulfonilo e a mistura foi adicionalmente agitada à temperatura ambiente durante 45 minutos. Depois, uma pequena quantidade de metanol foi adicionada e a mistura foi evaporada até à secura. 0 resíduo foi dissolvido em acetato de etilo (100 mL) e lavado com NaHC03 saturado (2 x 50 mL) . A camada aquosa combinada foi extraída com acetato de etilo . A camada orgânica combinada foi depois seca sobre Νθ-2 S04 e concentrada in vacuo. O resíduo obtido foi dissolvido em 34 THF seco e foi adicionado NaH a 95% (932 mg, 36,9 mmol) de uma vez à temperatura ambiente. Após agitação durante 2 horas à temperatura ambiente, a mistura reacional foi vertida numa solução aquosa saturada de NH4C1 (30 mL) seguida da adição de CH2CI2 (250 mL) . A camada orgânica

separada foi lavada com NaHCCb (2 x 100 mL) e a camada aquosa combinada foi extraida com CH2CI2 (250 mL) . A camada orgânica combinada foi seca (Na2SC>4) , filtrada e evaporada até à secura sob pressão reduzida. O residuo obtido foi purificado por cromatografia em coluna eluindo primeiramente com heptano, depois com acetato de etilo para originar 9 (3,27 g, 79%) como uma espuma. Condição da CLAR A, Tr: 2,33 min, m/z = 451 (M + H) + . 1R RMN (400 MHz, CDC13) δ ppm 2,20 - 2,38 (m, 1 H) 2,38 - 2,52 (m, 1 H) 3,62 - 3,73 (m, 1 H) 3,89 - 4,13 (m, 3 H) 4,38 - 4,56 (m, 3 H) 4,56 -4,68 (m, 1 H) 4,70 - 4,88 (m, 2 H) 5,25 (d, J = 8,00 Hz, 1 H) 6,25 (s, 1 H) 7,18 - 7,47 (m, 10 H) 7,87 (d, J = 8,20

Hz, 1 H) 8, 90 (s la, 1 H) .

Exemplo 6: 1-[(4R,SR,7R,8R)-8-hidroxi-7-(hidroximetilo)- 1,6-dioxaespiro[3.4]octan-5-ilo]pirimidina-2,4(1H, 3H)-diona (10)

10 35

Uma mistura de 9 (50 mg, 0,111 mmol) em metanol (1 mL) e

Pd (OH) 2 (8 mg) foi agitada sob uma atmosfera de hidrogénio à temperatura ambiente. Após 4 horas, foram adicionados mais Pd (OH) 2 (30 mg) e metanol (1 mL) . A mistura foi agitada vigorosamente sob atmosfera de H2 durante a noite. 0 catalisador foi removido por filtração sobre decalite, e 0 solvente foi removido por evaporação. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia em sílica gel eluído com metanol a 10% em acetato de etilo para dar o intermediário 10 como pó branco (16,8 mg; 56%). Condição da CLAR B, Tr: 1,98 min, m/z = 271 (Μ + H) + . H RMN (400 MHz, D2O) δ ppm 7,65 (d, 1 H, J = 8,0 Hz), 6,11 (s, 1 H) , 5,82 (d, 1 H, J = 8,0 Hz), 4,46 - 4,61 (m, 2 H) , 4,06 - 4,13 (m, 1 H) , 3, 87 - 3, 95 (m, 1 H) , 3, 69 - 3,77 (m, 2 H) , 2,62 - 2,73 (m, 1 H), 2,48 - 2,58 (m, 1 H).

Exemplo_7j_ 2- (cloro (fenoxi) fosforiloamino) -2- metilopropionato de metilo (11)

Uma solução de fenilofosforodicloridato (1,0 eq., 13,0 mmol, 1,9 mL) e hidrocloreto de α-aminoisobutirato de metilo (1,0 eq., 13,0 mmol, 2,0 g) em CH2CI2 (80 mL) foi arrefecida até -80°C. Foi adicionada N,N-diisopropiloetiloamina (DIPEA; 2,0 eq., 26,0 mmol, 4,3 mL) gota a gota. Após 2 horas, a reação foi arrefecida até à 36 temperatura ambiente e o solvente foi removido sob pressão reduzida. Foi adicionado éter de dietilo seco e o precipitado foi filtrado e lavado duas vezes com éter de dietilo seco sob uma atmosfera de árgon. 0 filtrado foi evaporado até à secura para dar 11 o qual foi armazenado como uma solução a 0,90 M em tetrahidrofurano (THF) seco a -18 °C.

Exemplo_8j_ 2- [ [ [ (4R, 5R, 7R, 8R) -5- (2,4-dioxo-3, 4- diidropirimidin-1(2H)-ilo)-8-hidroxi-l, 6- dioxaespiro[3.4]octan-7-ilo]metoxi](fenoxi)fosforiloamino]-2-metilopropanoato de metilo (12e)

A uma solução de 10 (1,0 eq., 0,28 mmol, 75 mg) em THF seco (3 mL) foi adicionado 1-metiloimidazol (NMI; 12,0 eq., 3,33 mmol, 0,27 mL) à temperatura ambiente. Uma solução do intermediário 11 (1,4 eq., 0,39 mmol, 0,43 mL) foi adicionada gota a gota e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. A mistura reacional foi lavada três vezes com HC1 a 0,5 Μ. A camada orgânica foi seca sobre MgSCb e concentrada in vacuo. O residuo foi purificado por cromatografia em coluna em silica gel (metanol a 0-10% em CH2C12) para dar o composto 12e (24 mg, rendimento = 15%, pureza = 95%) como uma mistura de diastereómeros. Condição da CLAR A, Tr: 1,49 min, m/z = 526 (M + H) + . 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,33 (s, 3 H) , 37 1, 37 (s, 3 H) , 2 ,42 - 2,43 (m, 2 H) , 3,56 (s, 3 H) , 3 ,70 - 3, 79 (m, 1 H) , 3 , 80 - 3, 88 (m, 0 ,4 H) , 3, 88 - 3 , 96 (m , o , 6 H) r 4 ,09 - 4, 20 (m, 1 H), 4, , 2 6 - 4,48 (m, 3 H), 5,50 - 5, 56 (m r 1 H) , 5, 61 - 5, 69 (m, 1 H) , 5, 88 - 5, 97 (m r 1 H) , 5, 97 - 6, 04 (m, 1 H) , 7, 12 - 7, 24 (m , 3 H), 7,31 - 7,41 (m, 2 H) r 7 ,44 (d, J = 8,22 Hz, 0, ,4 H) , 7,52 (d, J = 8 , 02 Hz , o , 6 H) r 11,49 (s la, 1 H) .

Exemplo 9

Usando um procedimento similar como delineado acima, foram preparados os seguintes compostos. Em cada caso, a análise foi feita em misturas de diastereómeros.

O

Condição da CLAR A, Tr: 2,00 min, m/z = 602 (Μ + H)+; XH RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0,71 - 0,83 (m, 3 H) , 1,45 - 1.73 (m, 2 H) , 2,33 - 2,48 (m, 2 H) , 3,59 - 3, 80 (m, 2 H) , 3,79 - 3, 96 (m, 1 H) , 4,04 - 4,19 (m, 1 H) , 4,24 - 4, 47 (m, 3 H) , 4,98 - 5,14 (m, 2 H) , 5,47 - 5,57 (m, 1 H) , 5,58 - 5.73 (m, 1 H) , 5, 96 - 6, 03 (m, 1 H) , 5, 96 - 6, 03 (m, 1 H) , 7, 09 - 7,22 (m, 3 H) , 7,27 - 7,39 (m, 7 H) , 7,44 (d, J = 8,02 Hz, 0,5 H) , 7,48 (d, J= 8,22 Hz, 0,5 H) , 11,50 (s la, 1 H) . 38

Condição da CLAR A, Tr: 1,92 min, m/z = 588 (M + RMN (400 MHz, : DMSO-d6: ) δ ppm 1 ,19 - 1, 29 (m, 3 H) , 2, 46 (m, 2 H) , 3,53 - 3, 97 (m, 3 H), 4 ,06 - 4 ,20 (m 4, 26 - 4, .46 (m, 3 H) , 5,05 - 5, 14 (m, 2 H) , 5, 49-5 1 H) , 5, 61 - 5 ,73 (m, 1 H) , 5 , 88 - 6, 05 (m, 1 H) , 6, 18 (m, 1 H) , 7,09 - 7,23 (m, 3 H) , 7, 30 - 7, 40 (m, 7, 43 - 7, . 51 (m, 1 H), 11,51 (s la, 1 H) φ H)+; 2,38 -, 1 H) , ,59 (m, 6, 07 -7 H),

12b

Condição da CLAR A, Tr: 2,00 min, m/z = 568 (M + RMN (400 MHz, : DMSO-d6) δ ppm 0 ,79 1 — 0, 93 (m, 9 H) r 1, 32 (m, 3 H) , 2,33 - 2,50 (m, 2 H) , 3 , 63 - 3 ,70 (m 3, 71 - 3 , 80 (m, 2 H), 3, 80 - - 3, 93 (m, 2 H) , 4, 04 - 4 1 H) , 4, 23 - 4 ,46 (m, 3 H) , 5, ,49 - 5, 59 (m, 1 H) r 5, 72 (m, 1 H) , 5, 94 - 6, 03 (m, 1 H) , 6 , 02 - 6 ,14 (m H)+; 1,20 -r 1 H) , ,21 (m, 5,58 -r 1 H) , 39 7,11 - 7,25 (m, 3 Η), 7,32 1 Η), 11,51 (s la, 1Η). 7,39 (m, 2 Η), 7,41 7,53 (m,

Condição da CLAR A, Tr: 1,88 min, m/z = 554 (Μ + H)+; RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0,77 - 0, 93 (m, 3 H) , 1,14 -1,25 (m, 3 H) , 1,24 - 1,37 (m, 2 H) , 1,41 - 1,62 (m, 2 H) , 2,35 - 2,47 (m, 2 H) , 3, 63 - 3, 92 (m, 3 H) , 3, 92 - 4, 06 (m, 2 H) , 4,05 - 4,21 (m, 1 H) , 4,23 - 4,46 (m, 3 H) , 5,48 -5,59 (m, 1 H) , 5,59 - 5,72 (m, 1 H) , 5,89 - 6,15 (m, 2 H) , 7, 09 - 7,25 (m, 3 H) , 7,31 - 7,41 (m, 2 H) , 7,43 - 7,52 (m, 1 H) , 11,51 (s la, 1 H) .

O

12f 40

Condição da CLAR A, Tr: 3,46 min, m/z = 644 (Μ + H)+; RMN (400 MHz, DMS0-d6) δ ppm 11,37 - 11,61 (1 H, m) 7,40 - 7.46 (1 H, m) 7,27 - 7,39 (5 H, m) 7,09 - 7,19 (2 H, m) 6, 89 - 6, 96 (1 H, m) 6, 07 - 6, 20 (1 H, m) 5, 98 - 6, 03 (1 H, m) 5,58 - 5,72 (1 H, m) 5,45 - 5, 52 (1 H, m) 5,02 - 5,15 (2 H, m) 4,23 - 4,45 (3 H, m) 4,05 - 4,18 (1 H, m) 3,82 - 3,98 (2 H, m) 3, 69 - 3,78 (1 H, m) 3,13 - 3,26 (1 H, m) 2,37 - 2.47 (2 H, m) 2,15 - 2,23 (3 H, m) 1,24 - 1,32 (3 H, m) I, 06 -1,15 (6 H, m) .

O

Condição da CLAR A, Tr: 2,08 & 2,21 min (vistos

diastereómeros individuais), m/z = 540 (Μ + H)+; RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 11,39 - 11, 60 (1 H, m) 7,44 - 7,52 (1 H, m) 7,31 - 7,40 (2 H, m) 7,12 - 7,24 (3 H, m) 5,95 -6,07 (2 H, m) 5,59 - 5,71 (1 H, m) 5,51 - 5,58 (1 H, m) 4,78 - 4,91 (1 H, m) 4,26 - 4,44 (3 H, m) 4, 06 - 4,20 (1 H, m) 3, 84 - 3, 95 (1 H, m) 3, 68 - 3, 83 (2 H, m) 2,37 - 2,58 (2 H, m) 1,16 - 1,25 (3 H, m) 1,11 - 1,16 (6 H,m). 41 Ο

Condição da CLAR A, Tr: 3,03 min, m/z = 650 (M + H)+; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 11,34 - 11, 62 (1 H, m) 7,05 -7,46 (16 H, m) 6,71 - 6,84 (1 H, m) 5, 95 - 6, 03 (1 H, m) 5,56 - 5,71 (1 H, m) 5,46 - 5,53 (1 H, m) 4,95 - 5,16 (3 H, m) 4,23 - 4,45 (3 H, m) 4,05 - 4,21 (1 H, m) 3,77 - 3, 88 (1 H, m) 3, 68 - 3,77 (1 H, m) 2,35 - 2,45 (2 H, m) .

O

Condição da CLAR A, Tr: 2,38 & 2,48 min (vistos

diastereómeros individuais), m/z = 554 (M + H)+; 1H RMN (400 MHz, DMSO-de) δ ppm 11,38 - 11,61 (1 H, m) 7,43 - 7,53 (1 H, m) 7,31 - 7,41 (2H, m) 7,11 - 7.25 (3 H, m) 5,90 - 6,06 (2 H, m) 5,59 - 5,71 (1 H, m) 5,50 - 5,59 (1 H, m) 4,79 - 4, 93 (1 H, m) 4,27 - 4,46 (3 H, m) 4,03 - 4,21 (1 H, 3, 81 (1 H, m) 3,52 - 3, 66 (1 m) 3, 82 - 3, 95 (1 H, m) 3,68 - 42 H, m) 2, 38 - 2,51 (2 H, m) 1,44 - 1,72 (2 H, m) 1,09 - 1,21 (6 H, m) 0, 72 - 0, 89 (3 H, m) .

Condição da CLAR A, Tr: 2,84 & 2,94 min (vistos

diastereómeros individuais), m/z = 622 (Μ + H)+; XH RMN (400 MHz, CDC13) δ ppm 1,38 (d, J = 8,59 Hz, 3 H) , 2,38 - 2,57 (m, 1 H) , 2, 66 - 2,84 (m, 1 H) , 3,25 (s la, 1 H) , 3,78 (s la, 1 H) , 3,81 - 3,94 (m, 1 H) , 3,95 - 4,15 (m, 2 H) , 4,23 - 4,42 (m, 1 H), 4,42 - 4,58 (m, 2 H), 4,60 - 4,72 (m, 1 H) , 5,14 (s, 2 H) , 5,68 (d, J= 8,00 Hz, 1 H) , 6,07 (s, 0 H) , 7,01 - 7,19 (m, 2 H) , 7,20 - 7,43 (m, 7 H) , 8,76 (s la, 1 H) .

Ο

O

12k 43

Condição da CLAR A, Tr : 3,06 min, m/z = 638 (M + H)+; XH RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 1,23 - 1,41 (m, 2 H) , 1, 66 (s la, 0 H) , 1,93 (s la, 1 H), 2,37 (m, J = 12,56, 12, 56, 8, 63, 6, 24 Hz, 1 Η), 2,54 - 2,75 (m, 1 Η), 3,44 - 3, 67 (m, 1 Η), 3,78 (dd, J= 9, 27, 1,85 Hz, 1 H) , 3, 86 - 4,03 (m, 1 H) , 4,05 - 4,17 (m, 1 H) , 4,18 - 4,28 (m, 1 H) , 4,31 - 4,41 (m, 1 H) , 4,41 - 4,66 (m, 3 H) , 4,96 - 5,16 (m, 2 H) , 5,32 (d, J= 8,20 Hz, 0 H) , 5,44 (d, J= 8,20 Hz, 0 H) , 6,11 (s, 1 H) , 7,08 (d, J = 8,19 Hz, 0 H) , 7,18 - 7,41 (m, 6 H) , 7,44 - 7,57 (m, 3 H) , 7,64 (d, J = 8,00 Hz, 1 H) , 7,78 - 7,89 (m, 1 H) , 8,01 - 8,18 (m, 1 H) , 9,37 (s la, 1 H) .

121

Condição da CLAR A, Tr: 2,48 & 2,59 min (vistos

diastereómeros individuais), m/z = 554 (M + H)+; XH RMN (400 MHz, CDC13) δ ppm 0,92 (d, J = 5,46 Hz, 5 H) 1,28 -1,45 (m, 2 H) 1,48 - 2,02 (m, 2 H) 2,38 - 2,56 (m, 1 H) 2, 64 - 2,87 (m, 1 H) 3,67 - 4,17 (m, 5 H) 4,28 - 4,58 (m, 2 H) 4,66 (s la, 1 H) 5, 60 - 5,70 (m, 1 H) 6,19 (s, 1 H) 7,10 - 7,49 (m, 6 H) 8,56 (s la, 1 H) .

Ο, Ν 12*η Ο

Condição da CLAR A, Tr: 2,61 min, m/z = 608 (M + H)+; 1H RMN (400 MHz, CDC13) δ ppm 2,40 - 2,56 (m, 1 H) , 2,67 - 2, 82 (m, 1 H) , 3,29 (s la , : 1 H) , 3,71 - 3,97 (m, 4 H) , r 3, 97 - 4, 10 (m, 1 H) , 4,32 - 4, 44 (m, 1 H) , 4,45 - 4, 59 (m, 2 H) r 4,61 - 4,70 (m, 1 H) , . 5 ',16 (s, 2 H) , 5,68 (d, J -- = 7, 80 Hz r 1 H) , 6,10 (d, J = 6, 44 Hz, 1 H), 7 ,10 - 7,19 (m, 2 H), 7, 24 - 7,30 (m, 3 H) , 7, 30 - 7 ,42 (m, 5 H) , 8,82 (s la, 1 H) .

Exemplos biológicos Ensaio de replicão

Os compostos da fórmula I foram examinados quanto à atividade na inibição da replicação do ARN do VHC num ensaio celular. O ensaio foi usado para demonstrar que os compostos da fórmula I inibiram uma linha celular replicante funcional do VHC, também conhecida como replicões do VHC. O ensaio celular foi baseado num constructo de expressão bicistrónica, como descrito por Lohmann et al. (1999) Science vol. 285 pp. 110-113 com modificações descritas por Krieger et al. (2001) Journal of Virology 75: 4614-4624, numa estratégia de rastreio multialvos. 45

Na essência, o método foi como se segue. 0 ensaio utilizou a linha celular estavelmente transfetada Huh-7 luc/neo (doravante referida como Huh-Luc). Esta linha celular abriga um ARN codificando um constructo de expressão bicistrónica compreendendo as regiões NE3-NE5B de tipo selvagem do tipo lb do VHC traduzidas a partir do local de entrada do ribossoma interno (LERI) do virus da encefalomiocardite (VEMC), precedidas por uma porção repórter (FfL-luciferase) , e uma porção de marcador selecionável (neoR, fosfotransferase de neomicina). 0 constructo é bordejado por RNTs (regiões não traduzidas) 5' e 3' do genótipo lb do VHC. A cultura continua das células do replicão na presença de G418 (neoR) é dependente da replicação do ARN do VHC. As células do replicão estavelmente transfetadas que expressam o ARN do VHC, o qual se replica autonomamente e para altos niveis, codificando inter alia luciferase, foram usadas para o rastreio dos compostos antivirais.

As células do replicão foram replicadas em placas de 384 poços na presença dos compostos de teste e de controlo os quais foram adicionados em várias concentrações. Depois de uma incubação de três dias, a replicação do VHC foi medida pela avaliação da atividade da luciferase (usando substratos e reagentes de ensaio da luciferase padrão e um imageador de microplacas ultraHTS ViewLux™ da Perkin Elmer). As células do replicão nas culturas de controlo têm alta expressão da luciferase na ausência de qualquer inibidor. A atividade inibidora do composto na atividade da luciferase foi monitorizada nas células Huh-Luc, permitindo uma curva de resposta à dose para cada composto de teste. Foram depois calculados os valores da CE50, cujo valor representa a quantidade do composto requerida para diminuir 46 o nível da atividade da luciferase detetada em 50%, ou mais especificamente, a capacidade do ARN do replicão do VHC geneticamente ligado em se replicar.

Resultados A Tabela 1 mostra os resultados do replicão (CE50, replicão) e os resultados da citotoxicidade (CC50 (μΜ) (Huh-7)) obtidos para compostos dos exemplos dados acima. Também é dada a atividade do VIH (CE50 do VIH (μΜ) ) e a toxicidade celular na linha celular do VIH (CC50 (μΜ) (MT-4) ) Número do CE50 (μΜ) CC50 (μΜ) ce50 (μΜ) o 0 O (μΜ) composto (VHC) (Huh-7) (VIH) (MT4) 12a 3,4 > 98 > 98 > 98 12b 3,7 > 98 > 98 > 98 12c 5, 6 > 98 > 98 > 98 12d 5, 5 > 98 > 98 > 98 12e 23,4 > 98 > 98 > 98 12f 8,7 18 ,7 > 98 1 ,3 I2g 17,8 > 98 > 98 > 98 12h 79, 64 > 88 > 98 > 98 12i > 96 > 98 > 98 > 98 12j 0,7 > 98 > 98 > 98 12k 2,0 > 98 > 76, 9 > 98 121 0,44 > 98 > 98 > 98 12m 7,17 > 98 > 98 > 98

Lisboa, 15 de Maio de 2013

Claims

1 REIVINDICAÇÕES 1

incluindo quaisquer seus estereoisómeros possíveis, em que: R4 é um éster de monofosfato, de difosfato ou de trifosfato; ou R4 é um grupo da fórmula

r8 RS' OR7 i! Η O O R7 é fenilo, opcionalmente substituído por 1, 2, ou por 3 substituintes, cada um independentemente selecionado de halo, alquilo Ci-Cô, alquenilo C3-C6, alcoxi Ci-C6, hidroxi, e amino; ou R7 é naftilo, opcionalmente substituído por 1, 2, ou por 3 substituintes, cada um independentemente selecionado de halo, alquilo Ci-Cô, alquenilo C3-C6, alcoxi C1-C6, hidroxi, e amino; ou R7 é indolilo, opcionalmente substituído por um grupo alquiloxi Ci-Cg-carbonilo e opcionalmente adicionalmente por 1, 2, ou por 3 2 substituintes, cada um independentemente selecionado de halo, alquilo C1-C6, alquenilo C3-C6, alcoxi C1-C6, hidroxi, e amino; R e hidrogénio, alquilo C1-C6, benzilo, ou fenilo; R e hidrogénio, alquilo C1-C6, benzilo, ou fenilo; ou R8 e R8 em conjunto com o átomo de carbono ao qual eles estão anexados formam cicloalquilo C3-C7; R9 é alquilo C1-C10, cicloalquilo C3-C7, fenilo ou fenilo-alquilo C1-C6, em que a fração de fenilo no fenilo ou no fenilo-alquilo C1-C6 está opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 substituintes, cada um independentemente selecionado de hidroxi, alcoxi Cq-C6, amino, mono e dialquiloamino C1-C6; ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável.

2. Um composto de acordo com a reivindicação 1, em que R4 é um grupo da fórmula

o

3. Um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-2, em que R7 é fenilo, opcionalmente substituído por halo ou por um ou dois grupos alquilo Cq-C6, ou R7 é naftilo ou indolilo. 3

4. Um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-2, em que R7 é fenilo, opcionalmente substituído por halo, ou por dois grupos alquilo C1-C6, ou R7 é naftilo.

5. Um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 - 2, em que R7 é fenilo ou naftilo.

6. Um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-5, em que R8 é hidrogénio, e R8 é hidrogénio ou alquilo C1-C6.

7. Um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-6, em que R8 é hidrogénio e R8 é metilo ou etilo.

8. Um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-7, em que R9 é alquilo C1-C6 ou benzilo.

9. Um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-7, em que R9 é n.butilo ou benzilo.

10. Um composto de acordo com a reivindicação 1, em que R4 é um éster de monofosfato, de difosfato ou de trifosfato.

11. Um composto de acordo com a reivindicação 1 em que o composto da fórmula I é: 4

ο

12. Um composto de acordo com a reivindicação 1 em que o composto da fórmula I é:

compreendendo uma de um composto da qualquer uma das um transportador

13. Uma composição farmacêutica quantidade antiviralmente eficaz fórmula I como definido em reivindicações 1 - 12 e farmaceuticamente aceitável. 5

14. Um composto reivindicações de acordo com qualquer uma das 1-12 para uso como um inibidor do VHC. Lisboa, 15 de Maio de 2013