PT2242749E - Novas piridinonas e piridazinonas - Google Patents

Description

DESCRIÇÃO

NOVAS PIRIDINONAS E PIRIDAZINONAS A presente invenção tem por objecto a utilização de novos derivados que inibem tcB e que são úteis para o tratamento de doenças auto-imunes e inflamatórias causadas pela activação anómala de células B. Os novos derivados de 5-fenil-lH-piridin-2-ona e 6-fenil-2H-piridazin-3-ona aqui descritos são úteis para o tratamento de artrite.

As proteina-cinases constituem uma das maiores famílias das enzimas humanas e regulam muitos processos diferentes de sinalização por meio da adição de grupos fosfato às proteínas (Hunter, Cell 1987 50: 823-829). Especificamente, as tirosina-cinases fosforilam proteínas no radical fenólico dos resíduos de tirosina. A família da tirosina-cinase inclui elementos que controlam o crescimento, a migração e a diferenciação das células. A actividade anormal da cinase tem sido implicada numa certa variedade de doenças humanas incluindo cancros, doenças auto-imunes e inflamatórias. Dado que as proteina-cinases estão entre os reguladores-chave da sinalização de células, providenciam um alvo para regular a função celular com inibidores de cinase de baixo peso molecular e, assim, constituem bons alvos para conceber fármacos. Para além dos processos para o tratamento de doenças mediadas pela cinase, os inibidores selectivos e eficazes da actividade de cinase são também úteis para investigar processos de sinalização de células e para identificar outros alvos celulares de interesse terapêutico. Há boas evidências de que as células B desempenham um papel-chave na patogénese de doenças auto-imunes e/ou inflamatórias. As terapêuticas à base de proteínas que 1 destroem células B, tal como, o rituxano, são eficazes contra doenças inflamatórias orientadas por auto-anticorpos, tais como, a artrite reumatóide (Rastetter et al., Annu Rev Med 2004 55: 477). Por isso, os inibidores de proteína-cinases que desempenham um papel na activação de células B deverão ser agentes terapêuticos úteis para a patologia de doenças mediadas pelas células B tal como a produção de auto-anticorpos . A sinalização através do receptor de células B (RCB) controla uma gama de respostas das células B incluindo a proliferação e a diferenciação em células que produzem anticorpos maduros. O RCB é um ponto regulador-chave para a actividade das células B e a sinalização anómala pode desregular a proliferação de células B e a formação de auto-anticorpos patogénicos que levam a múltiplas doenças auto-imunes e/ou inflamatórias. A tirosina-cinase de Bruton (tcB) é uma cinase não associada ao RCB que está na membrana proximal e imediatamente a jusante do RCB. A falta de tcB tem demonstrado bloquear a sinalização de RCB e, por isso, a inibição da tcB pode ser uma abordagem terapêutica útil para bloquear processos de doenças mediados por células B.

A tcB é um elemento da familia Tec das tirosina-cinases e tem demonstrado ser um regulador critico do desenvolvimento precoce de células B e da activação de células B maduras e da sua sobrevivência (Khan et al., Immunity 1995 3: 283; Ellmeier et al., J. Exp. Med. 2000 192: 1611). A mutação de tcB em seres humanos leva a um estado clinico de agamaglobulinémia ligada a X (ALX) (revisto em Rosen et al., New Eng. J. Med. 1995 333: 431 e Lindvall et al., Immunol. Rev. 2005 203: 200). Estes doentes estão imuno-comprometidos e mostram uma maturação deficiente de células B, uma imunoglobulina diminuída e níveis diminuídos de células B 2 periféricas, respostas imunitárias diminuídas, independentes das células T, assim como, uma mobilização atenuada do cálcio no seguimento da estimulação do RCB. A evidência do papel da tcB em doenças auto-imunes e inflamatórias, também tem sido dada por modelos de murganhos deficientes em tcB. Em modelos pré-clínicos de lúpus eritematoso sistémico (LES) em murinos, os ratos com deficiência de tcB mostram uma melhoria marcada da progressão da doença. Além disso, os murganhos deficientes em tcB são resistentes a artrite induzida por colagénio (Jansson e Holmdahl Clin. Exp. Immunol. 1993 94: 459). Um inibidor selectivo de tcB tem demonstrado uma eficácia dependente da dose em modelos de artrite em murganhos (Pan et al., Chem. Med Chem. 2007 2: 58-61).

As tcB são também expressas por células diferentes das células B que podem estar envolvidas em processos de doenças. Por exemplo, a tcB é expressa por mastócitos e mastócitos derivados de medula-óssea deficientes em tcB demonstram uma desgranulação prejudicada induzida por antigénio (Iwaki et al., J. Biol. Chem. 2005 280: 40261). Isto mostra que as tcB podem ser úteis para tratar respostas patológicas de mastócitos, tais como, alergia e asma. Do mesmo modo, monócitos de doentes com ALX, nos quais não existe a actividade de tcB, mostram uma produção diminuída de FNT-alfa no seguimento da estimulação (Horwood et al., J Exp Med 197: 1603, 2003) . Por isso, a inflamação mediada por FNT-alfa pode ser regulada por inibidores de tcB de baixo peso molecular. Do mesmo modo, a tcB tem sido referida como desempenhando um papel na apoptose (Islam e Smith Immunol. Rev. 2000 178: 49,) e, assim, os inibidores de tcB serão úteis para o tratamento de alguns linfomas de células B e leucemias (Feldhahn et al. J. Exp. Med. 2005 201: 1837,). 3 0 presente pedido de patente tem por objecto compostos inibidores de tcB, de fórmulas I-III, os processos para a sua utilização, tal como se descreve aqui a seguir: 0 presente pedido de patente tem por objecto um composto de fórmula I:

(I) em que r representa H, -R1, -R1-R2-R3 ou -R2-R3; r1 representa arilo, heteroarilo, cicloalquilo ou heterocicloalquilo e está eventualmente substituído com alquilo inferior, hidroxi, alcoxi inferior, halogéneo, nitro, amino, ciano ou halogeno-alquilo inferior; r2 representa -C(=0), -C(=0)0, -C(=0)NH ou -S(=0)2; r3 representa H ou R4; em que R4 representa alquilo inferior, arilo, arilalquilo, alquilarilo, heteroarilo, alquil-heteroarilo, heteroaril-alquilo, cicloalquilo, alquil-cicloalquilo, cicloalquil-alquilo, heterocicloalquilo, alquil-heterocicloalquilo ou heterocicloalquil-alquilo e está eventualmente substituído com alquilo inferior, hidroxi, alcoxi inferior, halogéneo, nitro, amino, ciano ou halogeno-alquilo inferior; X representa CH ou N; 4 Υ1 cada Υ2 η Υ3 m Υ4 representa Η ou alquilo inferior; representa, independentemente, halogéneo ou alquilo inferior, em que o alquilo inferior está eventualmente substituído com um ou mais substituintes seleccionados no grupo que consiste em hidroxi, alcoxi inferior e halogéneo; representa 0, 1, 2 ou 3; representa H, halogéneo ou alquilo inferior, em que o alquilo inferior está eventualmente substituído com um ou mais substituintes seleccionados no grupo que consiste em hidroxi, alcoxi inferior, amino e halogéneo; representa 0 ou 1; representa Y4a, Y4b, Y4c ou Y4cl; em que Y4a representa H ou halogéneo; Y4b representa alquilo inferior, eventualmente substituído com um ou mais substituintes seleccionados no grupo que consiste em halogenoalquilo inferior, halogéneo, hidroxi, amino e alcoxi inferior; Y4c representa cicloalquilo inferior, eventualmente substituído com um ou mais substituintes seleccionados no grupo que consiste em alquilo inferior, halogenoalquilo inferior, halogéneo, hidroxi, amino e alcoxi inferior; e Y4d representa amino, eventualmente substituído com um ou mais alquilo inferior; ou um seu sal aceitável sob o ponto de vista farmacêutico. O presente pedido de patente também tem por objecto um composto de fórmula I, 5

em que: R representa H, -R1, -R1-R2-R3, -R1-R3 ou -R2-R3; R1 representa arilo, heteroarilo, cicloalquilo ou heterocicloalquilo e está eventualmente substituído com um ou mais alquilo inferior, hidroxi, hidroxi-alquilo inferior, alcoxi inferior, halogéneo, nitro, amino, amido, ciano, oxo ou halogeno-alquilo inferior; R2 representa -C (=0) , -C(=0)0, -C(=0)NR2, -NHC(=0)0, -C(=NH)NR2 ou -S (=0) 2; em que R2 representa H ou alquilo inferior; R3 representa H ou R4; em que R4 representa alquilo inferior, amino, arilo, arilalquilo, alquilarilo, heteroarilo, alquil-heteroarilo, heteroaril-alquilo, cicloalquilo, alquil-cicloalquilo, cicloalquil-alquilo, heterocicloalquilo, alquil-heterociclo-alquilo ou heterocicloalquil-alquilo e está eventualmente substituído com um ou mais alquilo inferior, hidroxi, alcoxi inferior, hidroxi-alquilo inferior, hidroxi-alcoxi inferior, (alquil inferior)-sulfonilo, (alquil inferior)-sulfonamida, carbamato, carboxi, éster, amido, acilo, halogéneo, nitro, amino, ciano, oxo ou halogeno-alquilo inferior; X representa CH ou N; 6 Υ1 cada Υ2 η Υ3 m Υ4 representa Η, alquilo inferior ou halogenoalquilo inferior; representa, independentemente, halogéneo, oxima ou alquilo inferior, em que o alquilo inferior está eventualmente substituído com um ou mais substituintes seleccionados no grupo que consiste em hidroxi, alcoxi inferior, halogenoalcoxi inferior, halogenoalquilo inferior, carboxi, amino e halogéneo; representa 0, 1, 2 ou 3; representa H, halogéneo ou alquilo inferior, em que o alquilo inferior está eventualmente substituído com um ou mais substituintes seleccionados no grupo que consiste em hidroxi, alcoxi inferior, amino e halogéneo; representa 0 ou 1; representa Y4a, Y4b, Y4c ou Y4d; em que Y4a representa H ou halogéneo; Y4b representa alquilo inferior, eventualmente substituído com um ou mais substituintes seleccionados no grupo que consiste em halogenoalquilo inferior, halogéneo, hidroxi, amino, ciano e alcoxi inferior; Y4c representa cicloalquilo inferior, eventualmente substituído com um ou mais substituintes seleccionados no grupo que consiste em alquilo inferior, halogenoalquilo inferior, halogéneo, hidroxi, amino, ciano e alcoxi inferior; e Y4cl representa amino, eventualmente substituído com um ou mais alquilo inferior, alcoxi-alquilo inferior ou hidroxi-alquilo inferior; ou um seu sal aceitável sob o ponto de vista farmacêutico. Numa variante da fórmula I, Y1 representa metilo.

Numa variante da fórmula I, X representa CH. 7 n representa 1 e m

Numa variante da fórmula I representa 0.

Numa variante da fórmula I,

Numa variante da fórmula I,

Numa variante da fórmula I,

Numa variante da fórmula I,

Numa variante da fórmula I,

Numa variante da fórmula I, Y3 representa H. Y2 representa metilo. Y2 representa hidroximetilo. o Y representa hidroxietilo. Y2 representa halogéneo. Y4 representa Y5

em que Y5 representa halogéneo, alquilo inferior ou halogenoalquilo inferior. Numa variante da fórmula I, Y4 representa

OH -f-Y5

V em que Y5 e Y6 representam, independentemente, H, alquilo inferior ou halogenoalquilo inferior. Numa variante da fórmula I, Y4 representa 5

Y em que Y5 e Y6 representam, independentemente, H ou alquilo inferior. Numa variante da fórmula I, Y4 representa

Y5 Y6

H em que Y5 e Y6 representam, independentemente, H, alquilo inferior ou halogenoalquilo inferior.

Numa variante da fórmula I, R representa -R1-R2-R3; em que R1 representa fenilo ou piridilo; R2 representa -C(=0); R3 representa R4; e R4 representa morfolina ou piperazina eventualmente substituídas com um ou mais alquilo inferior.

Numa variante, a fórmula I representa 6-dimetilamino-2-(2-hidroximetil-3-{l-metil-5-[5-(morfolino-4-carbonil)-piri-din-2-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il}-fenil)-3, 4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona (1-2) de fórmula

6-Dimetilamino-2-(2-metil-3-{l-metil-5-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il}-fenil)-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona (1-3) de fórmula 9 çh3

ou 6-dimetilamino-2-(3-{l-metil-5-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il}-fenil)-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona (1-1) de fórmula CH, i 3

3

CH O presente pedido de patente também tem por objecto um composto de fórmula II, 10

em que: R R1 representa H, -R1, -R1-R2-R3 ou -R2-R3; representa arilo, heteroarilo, cicloalquilo ou heterocicloalquilo e está eventualmente substituído com alquilo inferior, hidroxi, alcoxi inferior, halogéneo, nitro, amino, ciano ou halogeno-alquilo inferior; R2 R3 X Y1 cada Y2 representa -C(=0), -C(=0)0, -C(=0)NH ou -S(=0)2; representa H ou R4; em que R4 representa alquilo inferior, arilo, arilalquilo, alquilarilo, heteroarilo, alquil-heteroarilo, heteroaril-alquilo, cicloalquilo, alquil-cicloalquilo, cicloalquil-alquilo, heterocicloalquilo, alquil-heterocicloalquilo ou heterocicloalquil-alquilo e está eventualmente substituído com alquilo inferior, hidroxi, alcoxi inferior, halogéneo, nitro, amino, ciano ou halogeno-alquilo inferior; representa CH ou N; representa H ou alquilo inferior; representa, independentemente halogéneo ou alquilo inferior, em que o alquilo inferior está eventualmente substituído com um ou mais substituintes seleccionados no grupo que consiste em hidroxi, alcoxi inferior e halogéneo; 11 n representa Ο, 1, 2 ou 3; Υ3 representa Η, halogéneo ou alquilo inferior, em que o alquilo inferior está eventualmente substituído com um ou mais substituintes seleccionados no grupo que consiste em hidroxi, alcoxi inferior, amino e halogéneo; m representa 0 ou 1;

Y4 representa Y4a, Y4b, Y4c ou Y4cl; em que Y4a representa H ou halogéneo; Y4b representa alquilo inferior, eventualmente substituído com um ou mais substituintes seleccionados no grupo que consiste em halogenoalquilo inferior, halogéneo, hidroxi, amino e alcoxi inferior; Y4c representa cicloalquilo inferior, eventualmente substituído com um ou mais substituintes seleccionados no grupo que consiste em alquilo inferior, halogenoalquilo inferior, halogéneo, hidroxi, amino e alcoxi inferior; e Y4d representa amino, eventualmente substituído com um ou mais alquilo inferior; ou um seu sal aceitável sob o ponto de vista farmacêutico. 0 presente pedido de patente também tem por objecto um composto de fórmula II,

12 em que: R representa H, -R1, -R3-R2-R3, -R3-R3 ou -R2-R3; R1 representa arilo, heteroarilo, cicloalquilo ou heterocicloalquilo e está eventualmente substituído com um ou mais alquilo inferior, hidroxi, hidroxi-alquilo inferior, alcoxi inferior, halogéneo, nitro, amino, amido, ciano, oxo ou halogeno-alquilo inferior; R2 representa -C (=0) , -C(=0)0, -C(=0)NR2 ou -S (=0) 2! em que R2 representa H ou alquilo inferior; R3 representa H ou R4; em que R4 representa alquilo inferior, amino, arilo, arilalquilo, alquilarilo, heteroarilo, alquil-heteroarilo, heteroaril-alquilo, cicloalquilo, alquil-cicloalquilo, cicloalquil-alquilo, heterocicloalquilo, alquil-hetero-ciclo-alquilo ou heterocicloalquil-alquilo e está eventualmente substituído com um ou mais alquilo inferior, hidroxi, hidroxi-alquilo inferior, alcoxi inferior, halogéneo, nitro, amino, ciano ou halogeno-alquilo inferior; X representa CH ou N; Y1 representa H, alquilo inferior ou halogenoalquilo inferior; cada Y2 representa, independentemente, halogéneo ou alquilo inferior, em que o alquilo inferior está eventualmente substituído com um ou mais substituintes seleccionados no grupo que consiste em hidroxi, alcoxi inferior, halogenoalcoxi inferior, halogenoalquilo inferior, carboxi, amino e halogéneo; n representa 0, 1, 2 ou 3; Y3 representa H, halogéneo ou alquilo inferior, em que o alquilo inferior está eventualmente substituído com um ou mais substituintes seleccionados no grupo que 13 consiste em hidroxi, alcoxi inferior, amino e halogéneo; m representa 0 ou 1;

Y4 representa Y4a Y4b, Y4c ou Y4d; em que Y4a representa H ou halogéneo; Y4b representa alquilo inferior, eventualmente substituído com um ou mais substituintes seleccionados no grupo que consiste em halogenoalquilo inferior, halogéneo, hidroxi, amino, ciano e alcoxi inferior; Y4c representa cicloalquilo inferior, eventualmente substituído com um ou mais substituintes seleccionados no grupo que consiste em alquilo inferior, halogenoalquilo inferior, halogéneo, hidroxi, amino, ciano e alcoxi inferior; e Y4d representa amino, eventualmente substituído com um ou mais alquilo inferior, alcoxi-alquilo inferior ou hidroxi-alquilo inferior; ou um seu sal aceitável sob o ponto de vista farmacêutico.

Numa variante da fórmula II, Y1 representa metilo.

Numa variante da fórmula II, X representa CH.

Numa variante do composto anterior, n representa 1 e m representa 0.

Numa variante da fórmula II, Y3 representa H.

Numa variante da fórmula II, Y2 representa metilo.

Numa variante da fórmula II, Y2 representa hidroxi-metilo.

Numa variante da fórmula II, Y2 representa hidroxietilo. 14

Numa variante da fórmula II, Y2 representa halogéneo.

Numa variante da fórmula II, Y4 representa

em que Y5 representa halogéneo, alquilo inferior ou halogenoalquilo inferior. Numa variante da fórmula II, Y4 representa

em que Y5 e Y6 representam, independentemente, H, alquilo inferior ou halogenoalquilo inferior. Numa variante da fórmula II, Y4 representa

yS

N em que Y5 e Y6 representam, independentemente, H ou alquilo inferior. Numa variante da fórmula II, Y4 representa

N f·— γβ em que, Y5 e Y6 representam, independentemente, H, alquilo inferior ou halogenoalquilo inferior. 15

Numa variante da fórmula II, R representa -R1-R2-R3; R1 representa fenilo ou piridilo; R2 representa -C(=0); R3 representa R4; e R4 representa morfolina ou piperazina, eventualmente substituídas com um ou mais alquilo inferior.

Numa variante, a fórmula II representa 7-dimetilamino-3-(2-metil-3-{l-metil-5-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2-il-amino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il}-fenil)-lH-quinolin-4-ona (II—2) de fórmula <fH3

N, CH3 de fórmula CH~ i 3

K CHâ 16 ou 7-terc-butil-3-(3-{l-metil-5-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il}-fenil)-lH-quinolin-4-ona (II-I) de fórmula

0 presente pedido de patente também tem por objecto um composto de fórmula III,

em que: R representa H, -R1, -R1-R2-R3 ou -R2-R3; R1 representa arilo, heteroarilo, cicloalquilo ou heterocicloalquilo e está eventualmente substituído com alquilo inferior, hidroxi, alcoxi inferior, 17 halogéneo, nitro, amino, ciano ou halogeno-alquilo inferior; R2 R3 X Y1 cada Y2 representa -C(=0), -C(=0)0, -C(=0)NH ou -S (=0)2; representa H ou R4; em que R4 representa alquilo inferior, arilo, arilalquilo, alquilarilo, hetero-arilo, alquil-heteroarilo, heteroaril-alquilo, ciclo-alquilo, alquil-cicloalquilo, cicloalquil-alquilo, heterocicloalquilo, alquil-heterocicloalquilo ou heterocicloalquil-alquilo e está eventualmente substituído com alquilo inferior, hidroxi, alcoxi inferior, halogéneo, nitro, amino, ciano ou halogeno-alquilo inferior; representa CH ou N; representa H ou alquilo inferior; n Y3 representa, independentemente, halogéneo ou alquilo inferior, em que o alquilo inferior está eventualmente substituído com um ou mais substituintes seleccionados no grupo que consiste em hidroxi, alcoxi inferior e halogéneo; representa 0, 1, 2 ou 3; m Y4 representa H, halogéneo ou alquilo inferior, em que o alquilo inferior está eventualmente substituído com um ou mais substituintes seleccionados no grupo que consiste em hidroxi, alcoxi inferior, amino e halogéneo; representa 0 ou 1; representa Y4a, Y4b, Y4c ou Y4d; Y4a representa H ou halogéneo; Y4b representa alquilo inferior, eventualmente substituído com um ou mais substituintes seleccionados no grupo que consiste em halogenoalquilo inferior, halogéneo, hidroxi, amino e alcoxi inferior; Y4c representa cicloalquilo inferior, eventualmente substituído com um ou mais substituintes seleccionados no grupo que consiste em 18 halogenoalquilo inferior alquilo inferior, . halogéneo, hidroxi, amino e alcoxi inferior; e Y4d representa amino, eventualmente substituído com um ou mais alquilo inferior; ou um seu sal aceitável sob o ponto de vista farmacêutico. 0 presente pedido de patente também tem por objecto um composto de fórmula III,

em que: R representa H, -R1, -R1-R2-R3, -R1-R3 ou -R2-R3; R1 representa arilo, heteroarilo, cicloalquilo ou heterocicloalquilo e está eventualmente substituído com um ou mais alquilo inferior, hidroxi, hidroxi-alquilo inferior, alcoxi inferior, halogéneo, nitro, amino, amido, ciano, oxo ou halogeno-alquilo inferior; R2 representa -C(=0), -0, -C(=0)0, -C(=0)NR2 ou -S(=0)2; em que R2 representa H ou alquilo inferior; R3 representa H ou R4; em que R4 representa alquilo inferior, amino, arilo, arilalquilo, alquilarilo, heteroarilo, alquil-heteroarilo, heteroaril-alquilo, cicloalquilo, alquil-cicloalquilo, cicloalquil- 19 X Υ1 cada Υ2 η Υ 3 m Υ4 alquilo, heterocicloalquilo, alquil-heterociclo-alquilo ou heterocicloalquil-alquilo e está eventualmente substituído com um ou mais alquilo inferior, hidroxi, hidroxi-alquilo inferior, alcoxi inferior, haloqéneo, nitro, amino, amido, acilo, ciano ou halogeno-alquilo inferior; representa CH ou N; representa H, alquilo inferior ou halogenoalquilo inferior; representa, independentemente, halogéneo ou alquilo inferior, em que o alquilo inferior está eventualmente substituído com um ou mais substituintes seleccionados no grupo que consiste em hidroxi, alcoxi inferior, halogenoalcoxi inferior, halogenoalquilo inferior, carboxi, amino e halogéneo; representa 0, 1, 2 ou 3; representa H, halogéneo ou alquilo inferior, em que o alquilo inferior está eventualmente substituído com um ou mais substituintes seleccionados no grupo que consiste em hidroxi, alcoxi inferior, amino e halogéneo; representa 0 ou 1; representa Y4a, Y4b, Y4c ou Y4cl; Y4a representa H ou halogéneo; Y4b representa alquilo inferior, eventualmente substituído com um ou mais substituintes seleccionados no grupo que consiste em halogenoalquilo, halogéneo, hidroxi, amino, ciano e alcoxi inferior; Y4c representa cicloalquilo inferior, eventualmente substituído com um ou mais substituintes seleccionados no grupo que consiste em alquilo inferior, halogenoalquilo inferior, halogéneo, hidroxi, hidroxi-alquilo inferior, amino, ciano e alcoxi inferior; e Y4d representa amino, eventualmente substituído com um ou mais alquilo 20 inferior, alcoxi alquilo inferior ou hidroxi-alquilo inferior; ou um seu sal aceitável sob o ponto de vista farmacêutico.

Numa variante da fórmula III, Y1 representa metilo.

Numa variante da fórmula III, X representa CH.

Numa variante da fórmula III representa 0. Numa variante da fórmula III, Y3 Numa variante da fórmula III, Y2 Numa variante da fórmula III, metilo. Numa variante da fórmula III, n representa 1 e m representa H. representa metilo. Y2 representa hidroxi- Y2 representa hidroxi- etilo.

Numa variante da fórmula III, Y2 representa halogéneo. Numa variante da fórmula III, Y4 representa Y5 em que Y5 representa halogéneo, alquilo inferior ou halogenoalquilo inferior. Numa variante da fórmula III, Y4 representa 21

OH

em que Y5 e Y6 representam, independentemente, H, alquilo inferior ou halogenoalquilo inferior. Numa variante da fórmula III, Y4 representa / -fcj

V em que Y5 e Y6 representam, independentemente, H ou alquilo inferior. Numa variante da fórmula III, Y4 representa

,N

f5 em que, Y5 e Y6 representam, independentemente, H, alquilo inferior ou halogenoalquilo inferior.

Numa variante da fórmula III, R representa -R1-R2-R3; R1 representa fenilo ou piridilo; R2 representa -C(=0); R3 representa R4; e R4 representa morfolina ou piperazina, eventualmente substituídas com um ou mais alquilo inferior.

Numa variante, o composto de fórmula III representa 6-dimetilamino-2-(2-hidroximetil-3-{l-metil-5-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il}-fenil)-2H-isoquinolin-l-ona (III-3) de fórmula 22

6-Dimetilamino-2-(2-metil-3-{l-metil-5-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il}-fenil)-2H-isoquinolin-l-ona (III-2) de fórmula

ou 6-dimetilamino-2-(3-{l-metil-5-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il}-fenil)-2H-isoquinolin-l-ona (III-l) de fórmula 23

CH3 0 presente pedido de patente tem por objecto um processo para tratar um estado clínico inflamatório e/ou auto-imune, que consiste em administrar a um doente que disso necessite de uma quantidade eficaz sob o ponto de vista terapêutico, de um composto inibidor de tcB com qualquer uma das fórmulas anteriores os as suas variantes. 0 presente pedido de patente tem por objecto um processo para tratar uma artrite, que consiste em administrar a um doente que disso necessite de uma quantidade eficaz sob o ponto de vista terapêutico, de um composto inibidor de tcB com qualquer uma das fórmulas anteriores os as suas variantes. 0 presente pedido de patente tem por objecto um processo para a inibição da proliferação de células B, que consiste em administrar a um doente que disso necessite de uma quantidade eficaz sob o ponto de vista terapêutico, de um composto inibidor de tcB com qualquer uma das fórmulas anteriores os as suas variantes. 24 0 presente pedido de patente tem por objecto um processo para a inibição da actividade de tcB, que consiste em administrar o composto inibidor de tcB com qualquer uma das fórmulas anteriores os as suas variantes, em que o composto inibidor de tcB exibe uma CI5o de 50 micromolar ou inferior num ensaio bioquímico in vitro da actividade de tcB.

Numa variante do processo anterior, o composto inibidor de tcB exibe uma CI5o de 100 nanomolar ou inferior num ensaio bioquímico in vitro da actividade de tcB.

Numa variante do processo anterior, o composto exibe uma CI50 de 10 nanomolar ou inferior num ensaio bioquímico in vitro da actividade de tcB. 0 presente pedido de patente tem por objecto um processo para tratar um estado clínico inflamatório, que compreende a co-administração a um doente que dela necessite de uma quantidade eficaz sob o ponto de vista terapêutico de um composto anti-inflamatório em combinação com o composto inibidor de tcB, de acordo com uma qualquer das fórmulas anteriores ou das suas variantes. O presente pedido de patente tem por objecto um processo para tratar a artrite, que compreende a co-administração a um doente que dela necessite de uma quantidade eficaz sob o ponto de vista terapêutico de um composto anti-inflamatório em combinação com o composto inibidor de tcB, de acordo com uma qualquer das fórmulas anteriores ou das suas variantes. O presente pedido de patente tem por objecto um processo para tratar um linfoma ou células de leucemia RCB-ABL1"1", que compreende a co-administração a um doente que dela necessite de uma quantidade eficaz sob o ponto de vista terapêutico de 25 um composto anti-inflamatório em combinação com o composto inibidor de tcB, de acordo com uma qualquer das fórmulas anteriores ou das suas variantes. 0 presente pedido de patente tem por objecto uma composição farmacêutica que contém o composto inibidor de tcB, de acordo com uma qualquer das fórmulas anteriores ou das suas variantes, misturado com, pelo menos, um veiculo, excipiente ou diluente, aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico. 0 presente pedido de patente tem por objecto compostos de fórmulas genéricas I-III, em que as variáveis R, X, Y1, Y2, Y3, Y4, nem têm os significados definidos aqui.

Numa modalidade da presente invenção, providencia-se um composto de acordo com a fórmula genérica I, que contém os compostos inibidores de tcB exemplificados, de fórmulas 1-1 a I- 155. Numa modalidade da presente invenção, providencia-se um composto de acordo com a fórmula genérica II, que contém os compostos inibidores de tcB exemplificados, de fórmulas II- l e II-2. Numa modalidade da presente invenção, providencia-se um composto de acordo com a fórmula genérica III, que contém os compostos inibidores de tcB exemplificados, de fórmulas III-l to III-36.

0 presente pedido de patente tem por objecto derivados de 5-fenil-lH-piridin-2-ona e 6-fenil-2H-piridazin-3-ona de acordo com as fórmulas genéricas I-III 26

A expressão "tal como definido aqui antes" refere-se à definição mais ampla para cada grupo, conforme é dada aqui, ou a reivindicação mais ampla. Em todos os outros aspectos, as variações e as modalidades indicadas, os substituintes que podem estar presentes em cada modalidade e que não estão explicitamente definidos, retêm a definição mais ampla dada no sumário da presente invenção.

Os compostos de fórmulas genéricas I-III inibem a tirosina-cinase de Bruton (tcB). A activação de tcB por cinases a montante resulta na activação de fosfolipase-Ci que, por sua vez, estimula a libertação de mediadores pró-inflamatórios. Os compostos de fórmulas genéricas I-III, que incorporam cadeias laterais de lH-quinolin-4-ona, 3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona e 2H-isoquinolin-l-ona nos sistemas de anéis de 5-fenil-lH-piridin-2-ona e 6-fenil-2H-piridazin-3-ona, exibem actividade inibidora inesperadamente aumentada em comparação com análogos com outras cadeias laterais. Os compostos de fórmula I-III são úteis no tratamento de artrite e de outras doenças anti-inflamatórias e auto-imunes. Os compostos de acordo com as fórmulas I-III são, de acordo com isto, úteis para o tratamento de artrite. Os compostos de fórmulas I-III para a inibição de tcB em células e para a regulação do desenvolvimento de células B. A presente invenção ainda tem por objecto composições farmacêuticas contendo os compostos de fórmulas I-III 27 misturados com veículos, excipientes ou diluentes aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico. 0 termo "um" ou "uma", é uma entidade utilizada aqui, que se refere a uma ou mais dessas entidades; por exemplo, um composto refere-se a um ou mais compostos ou, pelo menos, um composto. Assim, os termos "um" (ou "uma"), "um ou mais" e "pelo menos um", podem ser utilizados aqui de forma intermutável. A expressão "tal como definido aqui antes" refere-se à definição mais ampla para cada grupo conforme é indicado no sumário da presente invenção ou na reivindicação mais ampla. Em todas as outras modalidades dadas a seguir, os substituintes que podem estar presentes em cada modalidade e que não são explicitamente definidos retêm a definição mais ampla dada na presente invenção.

Tal como utilizado na presente memória descritiva, quer numa frase transitória ou no corpo da reivindicação, os termos "compreende" e "compreendendo" devem ser interpretados como tendo um significado aberto. Isto é, os termos devem ser interpretados como sinónimos das frases "tendo pelo menos" ou "incluindo pelo menos". Quando utilizado no contexto de um processo, o termo "compreendendo" significa que o processo inclui, pelo menos, as etapas citadas, mas pode incluir etapas adicionais. Quando utilizado no contexto de um composto ou de uma composição, o termo "compreendendo" significa que o composto ou a composição incluem pelo menos as características ou os componentes citados, mas podem também incluir características ou componentes adicionais.

Tal como se utiliza aqui, salvo indicação específica em contrário, a palavra "ou" é utilizada no sentido de 28 "inclusive" de "e/ou" e não no sentido de "exclusiva" de "ou/ou". 0 termo "independentemente", é utilizado aqui para indicar uma variável que é aplicada em qualquer um dos exemplos independentemente na presença ou na ausência de uma variável que tem uma definição igual ou diferente dentro do mesmo composto. Assim, num composto em que R" aparece duas vezes e é definido como "independentemente carbono ou azoto", ambos os R" podem ser carbono, ambos os R" podem ser azoto ou um R" pode ser carbono e o outro azoto.

Quando qualquer variável ocorre mais do que uma vez em qualquer radical da forma descrita e que descreve compostos utilizados ou reivindicados na presente invenção, a sua definição, em cada ocorrência, é independente da sua definição em qualquer outra ocorrência. Do mesmo modo, combinações de substituintes e/ou de variáveis são permitidas apenas se esses compostos resultarem em compostos estáveis.

Os símbolos no fim de uma ligação ou "------" desenhado por cima de uma ligação referem-se cada um a um ponto da ligação de um grupo funcional ou de outro radical quimico ao resto da molécula à qual fazem parte. Assim, por exemplo:

MeC (=0) OR4 em que R4

* ~ou -fO

MeC(=0)0

Uma ligação desenhada num sistema de anéis (em oposição a ligada num vértice distinto) indica que a ligação pode estar ligada a qualquer um dos átomos do anel. 29 0 termo "eventual" ou "eventualmente", tal como se utiliza aqui, significa que um evento ou uma circunstância descritos na sua sequência podem ocorrer, mas não é obrigatório que ocorram, e que a descrição inclui exemplos em que o evento ou a circunstância ocorrem e exemplos em que não ocorrem. Por exemplo, "eventualmente substituído" significa que o radical eventualmente substituído pode incorporar um hidrogénio ou um substituinte. A expressão "ligação eventual" significa que a ligação pode ou não estar presente e que a descrição inclui ligações simples, duplas ou triplas. Se um substituinte é designado como sendo uma "ligação" ou "ausente", os átomos ligados aos substituintes estão então directamente ligados. 0 termo "cerca de" é utilizado aqui para significar aproximadamente, na região de, grosseiramente ou à volta de. Quando o termo "cerca de" é utilizado em conjunto com um intervalo numérico, modifica esse intervalo estendendo as suas fronteiras para cima e para baixo dos valores numéricos já estabelecidos. Em geral, o termo "cerca de" é utilizado aqui para modificar um valor numérico acima e abaixo do valor estabelecido por uma variância de 20 %.

Alguns compostos de fórmulas I-III podem exibir tautomerismo. Os compostos tautoméricos podem existir como duas ou mais espécies interconvertiveis. Os tautómeros prototrópicos resultam da migração de um átomo de hidrogénio ligado covalentemente entre dois átomos. Os tautómeros geralmente existem em equilíbrio e tentativas para isolar os tautómeros individuais normalmente produzem uma mistura, cujas propriedades quimicas e fisicas são consistentes com uma mistura de compostos. A posição de equilíbrio depende das 30 características químicas dentro da molécula. Por exemplo, em muitos aldeídos e cetonas alifáticos, tais como, acetaldeído, a forma ceto predomina; nos fenóis, a forma enol predomina. Os tautómeros prototrópicos comuns incluem tautómeros de ceto/enol (-C(=0)-CH- « -C(-OH)=CH-), amida/ácido imídico (-C (=0) -NH- «. -C(-0H)=N-) e amidina (-C(=NR)-NH- « -C(-NHR)=N-) . Estes dois últimos são comuns em anéis de heteroarilo e heterocíclicos e a presente invenção engloba todas as formas tautoméricas dos compostos.

Os termos científicos e técnicos utilizados aqui têm o significado que normalmente é entendido por um especialista na técnica à qual a presente invenção pertence, salvo indicação em contrário. Faz-se aqui referência a várias metodologias e materiais conhecidos dos especialistas na matéria. Trabalhos-padrão de referência estabelecidos para princípios gerais da farmacologia incluem Goodman e Gilman's, The Pharmacological Basis of Therapeutics, 10a Ed., McGraw Hill Companies Inc., Nova Iorque (2001). Quaisquer materiais e/ou processos apropriados conhecidos dos especialistas da matéria podem ser utilizados na realização da presente invenção. Contudo, descrevem-se os materiais e os processos preferidos. Os materiais, reagentes e similares aos quais se faz referência na descrição e nos exemplos que se seguem podem obter-se de fontes comerciais, salvo indicação em contrário.

As definições aqui descritas podem ser adicionadas para formar combinações relevantes sob o ponto de vista químico, tais como, "heteroalquilarilo", "halogenoalquil-heteroarilo", "arilalquil-heterociclilo", "alquilcarbonilo", "alcoxi-alquilo" e similares. Quando o termo "alquilo" é utilizado como um sufixo a seguir a outro termo, tal como, em "fenilalquilo" ou "hidroxialquilo" entende-se a que se refere 31 a um grupo alquilo, tal como definido antes, substituído com um ou dois substituintes seleccionados noutros grupos nomeadamente especificados. Assim, por exemplo, "fenilalquilo" refere-se a um grupo alquilo que tem um ou dois substituintes de fenilo e assim inclui benzilo, feniletilo e bifenilo. Um "alquilaminoalquilo" é um grupo alquilo que tem um ou dois substituintes de alquilamino. "Hidroxialquilo" inclui 2-hidroxietilo, 2-hidroxipropilo, 1-(hidroximetil)-2-metilpropilo, 2-hidroxibutilo, 2,3-di-hidroxibutilo, 2-(hidroximetilo), 3-hidroxipropilo etc. De acordo com isto, tal como se utiliza aqui, o termo "hidroxialquilo" é utilizado para definir um subconjunto de grupos heteroalquilo definidos a seguir. 0 termo -(ar)alquilo refere-se quer a um grupo alquilo quer a um grupo aralquilo insubstituídos. 0 termo (hetero)arilo ou (het)arilo refere-se quer a um grupo arilo quer um grupo heteroarilo. 0 termo "acilo", tal como se utiliza aqui, indica um grupo de fórmula -C(=0)R, em que R representa hidrogénio ou alquilo inferior, tal como definido aqui. 0 termo "alquilcarbonilo", tal como se utiliza aqui, indica um grupo de fórmula C(=0)R, em que R representa alquilo, tal como definido aqui. 0 termo acilo Ci_6, refere-se a um grupo -C(=0)R, em que R representa hidrogénio ou alquilo C1-5. 0 termo "arilcarbonilo", tal como se utiliza aqui, significa um grupo de fórmula C(=0)R, em que R representa um grupo arilo; o termo "benzoílo", tal como se utiliza aqui, representa um grupo "arilcarbonilo", em que R representa fenilo. 0 termo "alquilo", tal como se utiliza aqui, indica um resíduo de hidrocarboneto monovalente, saturado, de cadeia ramificada ou não-ramifiçada, contendo 1 a 10 átomos de carbono. A expressão "alquilo inferior" indica um resíduo de hidrocarboneto, de cadeia linear ou ramificada, contendo 1 a 32 6 átomos de carbono. "Alquilo Ci-io", tal como se utiliza aqui, refere-se a um alquilo composto por 1 a 10 átomos de carbono. Exemplos de grupos alquilo incluem, mas não se limitam a, grupos alquilo inferior que incluem metilo, etilo, propilo, i-propilo, n-butilo, i-butilo, t-butilo ou pentilo, isopentilo, neopentilo, hexilo, heptilo e octilo.

Quando o termo "alquilo" é utilizado como um sufixo que se segue a outro termo, como em "fenilalquilo" ou "hidroxialquilo" entende-se que se refere a um grupo alquilo, tal como definido antes, sendo substituído com um a dois substituintes seleccionados em outros grupos especificamente nomeados. Assim, por exemplo, "fenilalquilo" indica um radical R'R"-, em que R' representa um radical fenilo e R" representa um radical alquileno, tal como definido aqui, com o entendimento de que o ponto de ligação do radical fenilalquilo estará no radical alquileno. Exemplos de radicais arilalquilo incluem, mas não se limitam a, benzilo, feniletilo, 3-fenilpropilo. Os termos "arilalquilo" ou "aralquilo" são interpretados do mesmo modo excepto no facto de R' representar um radical arilo. Os termos "(het)arilalquilo" ou "(het)aralquilo" são interpretados do mesmo modo excepto no facto de R' ser, eventualmente, um radical arilo ou um radical heteroarilo.

Os termos "halogenoalquilo" ou "halogeno-alquilo inferior" ou "halogenoalquilo inferior" referem-se a um resíduo de hidrocarboneto, de cadeia linear ou ramificada, contendo 1 a 6 átomos de carbono, em que um ou mais átomos de carbono estão substituídos com um ou mais átomos de halogéneo.

Os termos "alquileno" ou "alquilenilo", tal como se utiliza aqui, indica um radical de hidrocarboneto, divalente, 33 saturado, linear, com 1 a 10 átomos de carbono (por exemplo, (CH2) n) ou um radical de hidrocarboneto, divalente, saturado, ramificado, com 2 a 10 átomos de carbono (por exemplo, -CHMe-ou -CH2CH(i-Pr)CH2-) , salvo indicação em contrário. Excepto no caso de metileno, as valências abertas de um grupo alquileno não estão ligadas ao mesmo átomo. Exemplos de radicais alquileno incluem, mas não se limitam a, metileno, etileno, propileno, 2-metil-propileno, 1,1-dimetil-etileno, butileno e 2-etil-butileno. O termo "alcoxi", tal como se utiliza aqui, significa um grupo -O-alquilo, em que alquilo tem o significado definido antes, tal como, metoxi, etoxi, n-propiloxi, i-propiloxi, n-butiloxi, i-butiloxi, t-butiloxi, pentil-oxi, hexiloxi, incluindo os seus isómeros. "Alcoxi inferior", tal como se utiliza aqui, indica um grupo alcoxi com um grupo "alquilo inferior" como definido previamente. "Alcoxi Ci-io", tal como se utiliza aqui, refere-se a um -O-alquilo, em que alquilo é Ci-io · 0 termo "hidroxialquilo", tal como se utiliza aqui, indica um radical alquilo, tal como definido aqui, em que um a três átomos de hidrogénio nos diferentes átomos de carbono estão substituídos por grupo hidroxilo.

Os termos "alquilsulfonilo" e "arilsulfonilo", tal como se utiliza aqui, referem-se a um grupo de fórmula -S(=0)2R, em que R representa alquilo ou arilo, respectivamente, e alquilo e arilo têm os significados definidos aqui. O termo "heteroalquilsulfonilo", tal como se utiliza aqui, refere-se a um grupo de fórmula -S(=0)2R, em que R representa "heteroalquilo", tal como definido aqui. 34

Os termos "alquilsulfonilamino" e "arilsulfonilamino", tal como se utilizam aqui, referem-se a um grupo de fórmula -NR'S(=0)2R, em que R representa alquilo ou arilo, respectivamente, R' representa hidrogénio ou alquilo C1-3 e alquilo e arilo têm os significados definidos aqui. 0 termo "cicloalquilo", tal como se utiliza aqui, refere-se a um anel carbociclico saturado, contendo 3 a 8 átomos de carbono, isto é, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclo-hexilo, ciclo-heptilo ou ciclo-octilo. "Cicloalquilo C3-7", tal como se utiliza aqui, refere-se a um cicloalquilo composto por 3 a 7 carbonos no anel carbociclico. 0 termo "carboxi-alquilo", tal como se utiliza aqui, refere-se a um radical alquilo em que um átomo de hidrogénio tenha saído substituído por um carbociclo com o entendimento de que o ponto de ligação do radical heteroalquilo se faz através de um átomo de carbono. 0 termo "carboxi" ou "carboxilo" refere-se a um radical -CO2H. 0 termo "heteroarilo" ou "heteroaromático", tal como se utiliza aqui, significa um radical monocíclico ou bicíclico, com 5 a 12 átomos no anel, tendo pelo menos um anel aromático contendo 4 a 8 átomos por anel, incorporando um ou mais heteroátomos de N, 0 ou S, sendo os átomos remanescentes do anel átomos de carbono, com o entendimento que o ponto de ligação do radical heteroarilo estará num anel aromático. Como é bem sabido pelos especialistas na matéria, os anéis de heteroarilo têm um caracter menos aromático do que as suas contrapartes só com átomos de carbono. Assim, para os fins da presente invenção, um grupo heteroarilo necessita de ter apenas algum grau de caracter aromático. Exemplos de radicais heteroarilo incluem heterociclos monocíclicos, aromáticos, 35 com 5 a 6 átomos no anel e 1 a 3 heteroátomos incluindo, mas não se limitando a, piridinilo, pirimidinilo, pirazinilo, pirrolilo, pirazolilo, imidazolilo, oxazol, isoxazol, tiazol, isotiazol, triazolina, tiadiazol e oxadiaxolina, que podem estar eventualmente substituídos com um ou mais, preferencialmente, um ou dois substituintes seleccionados entre hidroxi, ciano, alquil, alcoxi, tio, halogenoalcoxi inferior, alquiltio, halogéneo, halogenoalquilo inferior, alquilsulfinilo, alquilsulfonilo, halogéneo, amino, alquil-amino, dialquilamino, aminoalquilo, alquilaminoalquilo e dialquilaminoalquilo, nitro, alcoxicarbonilo e carbamoílo, alquilcarbamoílo, dialquilcarbamoílo, arilcarbamoílo, alquil-carbonilamino e arilcarbonilamino. Exemplos de radicais bicíclicos incluem, mas não se limitam a, quinolinilo, isoquinolinilo, benzofurilo, benzotiofenilo, benzoxazol, benzisoxazol, benzotiazol e benzisotiazol. Os radicais bicíclicos podem estar, eventualmente, substituídos em qualquer um dos anéis; contudo, o ponto de ligação está num anel contendo um heteroátomo. 0 termo "heterociclilo", "heterocicloalquilo" ou "heterociclo", tal como se utiliza aqui, indica um radical cíclico, saturado, monovalente, que consiste em um ou mais anéis, preferencialmente, 1 a 2 anéis, incluindo os sistemas de anéis espirocíclicos, de 3 a 8 átomos por anel, incluindo um ou mais heteroátomos no anel (escolhidos entre N, 0 ou S (0)0-2) e que podem estar eventualmente e independentemente substituídos com um ou mais, preferencialmente, um ou dois substituintes seleccionados entre hidroxi, oxo, ciano, alquilo inferior, alcoxi inferior, halogenoalcoxi inferior, alquiltio, halogéneo, halogenoalquilo inferior, hidroxi-alquilo, nitro, alcoxicarbonilo, amino, alquilamino, alquil-sulfonilo, arilsulfonilo, alquilamino-sulfonilo, aril-amino-sulfonilo, alquilsulfonilamino, arilsulfonilamino, alquil- 36 aminocarbonilo, arilaminocarbonilo, alquilcarbonilo-amino, arilcarbonilamino, salvo indicação em contrário. Exemplos de radicais heterociclicos incluem, mas não se limitam a, azetidinilo, pirrolidinilo, hexa-hidroazepinilo, oxetanilo, tetra-hidrofuranilo, tetra-hidrotiofenilo, oxazolidinilo, tiazolidinilo, isoxazolidinilo, morfolinilo, piperazinilo, piperidinilo, tetra-hidropiranilo, tiomorfolinilo, quinuclidinilo e imidazolinilo.

As abreviaturas normalmente utilizadas incluem: acetilo (Ac) , azo-bis-isobutirilnitrilo (AIBN), atmosferas (Atm), 9-borabiciclo[3,3,1]nonano (9-BBN ou BBN), terc-butoxicarbonilo (Boc), pirocarbonato de di-terc-butilo ou anidrido de Boc (BOC2O) , benzilo (Bn), butilo (Bu), número de registo do Chemical Abstracts (NRCAS), benziloxicarbonilo (CBZ ou Z) , carbonil-di-imidazol (CDI), 1,4-diazabiciclo[2,2,2]octano (DABCO), trifluoreto de dietilamino-enxofre (DAST), dibenzilidenoacetona (dba), 1,5-diazabiciclo[4,3,0]non-5-eno (DBN), 1,8-diazabiciclo[5,4,0]undec-7-eno (DBU), N,N'-diciclo-hexilcarbodi-imida (DCC), 1,2-dicloroetano (DCE), diclorometano (DCM), azodicarboxilato de dietilo (DEAD), di-iso-propilazodicarboxilato (DIAD), hidreto de di-iso-butil-alumínio (DIBAL ou DIBAL-H), di-iso-propiletilamina (DIPEA), N,N-dimetil-acetamida (DMA), 4-N,N-dimetilaminopiridina (DMAP), N,N-dimetilformamida (DMF), sulfóxido de dimetilo (DMSO), 1,1'-bis-(difenilfosfino)etano (dppe), 1,1'-bis-(difenil-fosfino)ferroceno (dppf), cloridrato de 1- (3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodi-imida (EDCI), etilo (Et), acetato de etilo (EtOAc), etanol (EtOH) , éster etilico do ácido 2-etoxi-2fí-quinolino-l-carboxilico (EEDQ), éter de dietilo (Et20) , hexafluorofosfato de O- (7-azabenzotriazol-l-il)-Ν,Ν,Ν'Ν'-tetra-metilurónio do ácido acético (HATU), ácido acético (HOAc), 1-N-hidroxibenzotriazol (HOBt), cromatografia liquida de alta resolução (CLAR), iso-propanol (IPA), 37 hexametilo-disilazano de lítio (LiHMDS), metanol (MeOH), ponto de fusão (pf) , MeS02~ (mesilo ou Ms) , metilo (Me) , acetonitrilo (MeCN), ácido m-cloroperbenzóico (MCPBA), espectro de massa (em), éter metil-t-butílico (MTBE), N-bromo-succinimida (NBS), N-carboxianidrido (NCA), N-cloro-succinimida (NCS), N-metilmorfolina (NMM), N-metilpirrolidona (NMP), clorocromato de piridínio (PCC), dicromato de piridínio (PDC), fenilo (Fen), propilo (Pr), isopropilo (i-Pr) , libras por polegada quadrada (psi), piridina (pir), temperatura ambiente (ta ou TA), terc-butildimetilsililo ou t-BuMe2Si (TBDMS), trietilamina (TEA ou Et3N) , 2,2,6,6- tetrametilpiperidino-l-oxilo (TEMPO), triflato ou CF3SO2-(Tf), ácido trifluoroacético (TFA), 1,1'-bis-2,2,6,6- tetrametil-heptano-2, 6-diona (TMHD), tetrafluoroborato de 0-benzotriazol-l-il-N,N,Ν',N'-tetrametilurónio (TBTU), cromatografia em camada fina (CCF), tetra-hidrofurano (THF), trimetilsililo ou Me3Si (TMS), mono-hidrato do ácido p-tolueno-sulfónico (TsOH ou pTsOH), 4-Me-C6H4S02- ou tosilo (Ts), N-uretano-N-carboxi-anidrido (UNCA). A nomenclatura convencional, incluindo os prefixos normal (n) , iso (i-) , secundário (sec-), terciário (terc-) e neo tem o seu significado habitual quando utilizados qualquer radical alquilo. (Rigaudy e Klesney, Nomenclature in Organic Chemistry, IUPAC, 1979, Pergamon Press, Oxford.).

Exemplos de compostos representativos englobados pela presente invenção e dentro do âmbito da presente invenção estão indicados no quadro que se segue. Estes exemplos e as preparações que se seguem são dados para permitir aos especialistas na matéria compreender de forma mais clara e praticar a presente invenção. Não devem ser considerados como limitativos do âmbito da invenção, mas como sendo meramente ilustrativos e representativos dela. 38

Em geral, a nomenclatura utilizada neste pedido de patente de invenção baseia-se no sistema computorizado AUTONOM™ v.4.0, do Beilstein Institute para a geração da nomenclatura sistemática da IUPAC. Se houver alguma discrepância entre uma estrutura descrita e o nome dado a essa estrutura, deve-se dar mais peso à estrutura descrita. Além disso, se a estereoquímica de uma estrutura ou de uma parte de uma estrutura não estiver indicada com, por exemplo, a negrito ou a linhas a tracejado, a estrutura ou a porção dessa estrutura devem ser interpretadas como englobando todos os seus estereoisómeros. 0 quadro I descreve exemplos de piridinona de acordo com as fórmulas genéricas I-III, em que X representa quer CH, quer N. Os compostos podem ser preparados de acordo com os procedimentos descritos nos exemplos. QUADRO I.

Nomenclatura (M+H) * I-l 6-Dimetilamino-2- (3 - {l-metil-5 - [5 - (morf olino-4-carbonil) -piriclin-2-ilamino] -6-oxo-1, 6-cli-hidro-piridin-3-il) -fenil) - 3,4-di-hidro-2H-isoquino-lin-l-ona 579,2 1-2 6-Dimetilamino-2-(2-hidroximetil-3-{l-metil-5-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il(-fenil)-3,4-di-hi-dro-2H-isoquinolin-l-ona 609, 1 1-3 6-Dimetilamino-2-(2-metil-3-(l-metil-5-[5-(mor-folino-4-carbonil)-piridin-2-ilamino]-6-oxo-l, 6-di-hidro-piridin-3-il(-fenil)-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona 593,3 II-l 7-terc-Butil-3-(3-{l-metil-5-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2-il-amino]-6-oxo-l,6-di-hi-dro-piridin-3-il(-fenil)-lH-quinolin-4-ona 590,1 II-2 7-Dimetilamino-3-(2-metil-3-{l-metil-5-[5-(mor-folino-4-carbonil)-piridin-2-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il(-fenil)-lH-quinolin-4-ona 591,1 III-l 6-Dimetilamino-2-(3-{l-metil-5-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il(-fenil)-2H-isoquinolin-l-ona 577,1 III-2 6-Dimetilamino-2-(2-metil-3-(l-metil-5-[5-(mor-folino-4-carbonil)-piridin-2-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il(-fenil)-2H-isoquinolin-l-ona 591,1 111-3 6-Dimetilamino-2-(2-hidroximetil-3-(l-metil-5-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il)-fenil)-2H-isoqui-nolin- 1-ona 607,2 1-4 1-{5-[3-(6-Dimetilamino-1-oxo-3,4-di-hidro-lH-isoquinolin-2-il)-2-hidroximetil-fenil]-l-metil-2-oxo-l,2-di-hidro-piridin-3-il}-3-etil-ureia 1-5 6-Dimetilamino-2-{2-hidroximetil-3- [l-metil-5 - (l-metil-lfí-pirazol-3-ilamino) - 6-oxo-l, 6-di-hidro-piridin-3-il] -fenil ( -3,4-di-hidro-2/í- 39 QUADRO I.

Nomenclatura (M+H) + isoquinolin-1-ona 1-6 6-Ciclopropil-2- (2-hidroximetil-3- (l-metil-5- [5 - (morf olino-4-carbonil) -pirlclln-2-1 lamino] - 6-oxo-l, 6-di-hiclro-piridin-3-ll ]-fenil)-3,4-di-hidro-2/í-isoquinolin-l-ona 1-7 2-(2-Dlfluorometoxl-3-(l-metil-5-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2-ilamino]-6-oxo-l, 6-di-hi-dro-piridin-3-il}-fenil)-6-dimetilamino-3,4-di-hidro-2/í-isoquinolin-l-ona 1-8 6-Dimetilamino-2-{2-hidroximetil-3-[l-metil-5-(5-morfolin-4-il-metil-piridin-2-ilamino)-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il]-fenil)-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona 1-9 6-Dimetilamino-2-(2-hidroximetil-3-(l-metil-5-[5-(4-metil-piperazino-l-carbonil)-piridin-2-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il}-fe-nil)-3,4-di-hidro-2/í-isoquinolin-l-ona 1-10 2-(2-Hidroximetil-3-(l-metil-5-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2-ilamino]-6-oxo-l, 6-di-hidro-piridin-3-il]-fenil) -6-metilamino-3,4-di-hidro-2/í-isoquinolin-l-ona 1-11 2 - { 3 - [5 - (l-terc-Butil-l/í-pirazol-3-ilamino) -1-metil-6-oxo-l, 6-di-hidro-piridin-3-il] - 2-hidro-ximetil-fenil )-6-ciclopropil-3,4-di-hidro-2/í-isoquinolin-l-ona 1-12 6-Ciclopropil-2-{3-[5-(l-etil-lH-pirazol-3-il-amino)-1-metil-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il]-2-hidroximetil-fenil)-3,4-di-hidro-2H-isoquino-lin-l-ona 1-13 2 - { 3 - [5 - (l-Ciclo-hexil-lfí-pirazol-3-ilamino) -1-metil-6-oxo-l, 6-di-hidro-piridin-3-il] - 2-hidro-ximetil-fenil )-6-ciclopropil-3,4-di-hidro-2/í- isoquinolin-l-ona 1-14 6-Ciclopropil-2-(2-hidroximetil-3 - {1-metil-6-oxo-5-[1-(2,2,2-tri-fluoro-etil)-lH-pirazol-3-ilamino]-1,6-di-hidro-piridin-3-il}-fenil·)-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona 1-15 6-Ciclopropil-2-{3-[5-(l-ciclopropil-lH-pirazol-S-ilamino)-1-metil-6-oxo-1,6-di-hidro-piridin-3-il]-2-hidroximetil-fenil·}-3,4-di-hidro-2H-iso- quinolin-l-ona 1-16 6-Dimetilamino-2-(2-hidroximetil-3-{l-metil-5-[5-(4-metil-piperazin-l-il)-piridin-2-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il}-fenil)-3,4-di-hidro-2/í- isoquinolin-l-ona 1-17 6-Ciclopropil-2-{2-hidroximetil-3-[l-metil-5-(l-metil-lH-pirazol-S-ilamino)-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il]-fenil}-3,4-di-hidro-2H-isoquino-lin-l-ona 1-18 6-Ciclopropil-2-{2-hidroximetil-3-[5-(2-isopro-pil-2H-[1,2,3]triazol-4-ilamino)-1-metil-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il]-fenil}-3,4-di-hidro-2#-isoquinolin-l-ona 1-19 6-Ciclopropil-2 - (2-hidroximetil-3 - [5 - (l-isopro-pil-líí-pirazol-3-il-amino) -1-metil-6-oxo-1, 6-di-hidro-piridin-3-il] - fenil]-3,4-di-hidro-2/í-iso-quinolin-1-ona 1-20 6-(1-Fluoro-ciclopropil)-2-(2-hidroximetil-3-{l-metil-5-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2-il-amino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il}-fenil)-3,4-di-hidro-2/í-isoquinolin-l-ona 1-21 6-Dimetilamino-2-{2-hidroximetil-3-[l-metil-5-(5-morfolin-4-il-piridin-2-ilamino)-6-oxo-l, 6-di-hidro-piridin-3-il]-fenil]-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona 1-22 6-(Etil-metil-amino)-2-(2-hidroximetil-3-{l-me-til-5-[5-(morfolino-4- 40 QUADRO I.

Nomenclatura (M+H) + carbonil) -piriclin-2-ilami-no] - 6-oxo-l, 6-di-hidro-piriclin-3-il) -fenil) -3,4-di-hldr o-2 77-1 soqulnolln-1-ona 1-23 6-terc-Butil-2-(2-hidroximetil-3-{l-metil-5-[5-(morfolino-4-carbon-il)-plrldln-2-llamino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il}-fenil)-3,4-di-hi-dro-277-isoquinolin-l-ona 1-24 6-(1-Difluorometll-clclopropll)-2-(2-hidroxlme-tll-3-{l-metil-5-[5-(morfolino-4-carbonil)-piri-din-2-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il} -fenll) -3,4-di-hidro-277-isoquinolin-l-ona 1-25 6-Ciclopropil-2-(2-hidroximetil-3-{l-metil-5-[5-(4-metil-piperazin-l-il) -piridin-2-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il}-fenil)-3,4-di-hi-dro-277-isoquinolin-l-ona 1-26 6-Fluoro-2-(2-hidroximetil-3-{l-metil-5-[5-(mor-folino-4-carbonil)-piridin-2-ilamino] -6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il}-fenil)-3,4-di-hidr 0-277-isoquinolin-l-ona 1-27 6-terc-Butil-2-(2-hidroximetil-3-{l-metil-5-[5-(4-metil-piperazin-l-il)-piridin-2-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il)-fenil)-3,4-di-hi-dro-277-isoquinolin-l-ona 1-28 6-Ciclopropil-2-(2-hidroximetil-3-{l-metil-5-[6-(4-metil-piperazin-l-il) -piridazin-3-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il)-fenil)-3,4-di-hi-dro-2T7-isoquinolin-l-ona 1-29 2—(3—{5—[5—(4,4-Difluoro-pipendino-1-carbonil)-piridin-2-ilamino]-1-metil-6-oxo-1,6-di-hidro-piridin-3-il)-2-hidroximetil-fenil)-6-di-metil-amino-3,4-di-hidro-27í-isoquinolin-l-ona 1-30 6-Dimetilamino-2-{2-hidroximetil-3-[l-metil-5-(l-metil-5-oxo-4,5-di-hidro-177- [ 1,2,4 ] triazol-3-ilamino) - 6-oxo-l, 6-di-hidro-piridin-3-il ] -fe-nil)-3,4-di-hidro-27í-isoquinolin-l-ona 1-31 6-Dimetilamino-2-(2-hidroximetil-3-(l-metil-5-[5-(2-oxa-6-aza-espiro[3,3]heptano-6-carbonil)-piridin-2-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il) -fenil) -3,4-di-hidro-277-isoquinolin-l-ona 1-32 6-Dimetilamino-2-(2-hidroximetil-3-{l-metil-5-[6-(4-metil-piperazin-l-il)-piridazin-3-ilami-no]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il}-fenil)-3,4-di-hidro-27í-isoquinolin-l-ona 1-33 6-Dimetilamino-2-(3-(5-[5- (1,l-dioxo-lÀb-tiomor-folino-4-carbonil)-piridin-2-ilamino]-1-metil-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il}-2-hidroxi-metil-fenil)-3,4-di-hidro-2Tí-isoquinolin-l-ona 1-34 6-Ciclopropil-2- (2-hidroximetil-3-{5- [ 1- (2-hi-droxi-2-metil-propil) -177-pirazol-3-ilamino]-1-metil-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il]-fenil)-3,4-di-hidro-277-isoquinolin-l-ona 1-35 6-Dimetilamino-2-{3-[5-(5-etoximetil-piridin-2-ilamino)-1-metil-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il]-2-hidroximetil-fenil)-3,4-di-hidro-277-iso-quinolin-l-ona 1-36 6-Dimetilamino-2-(2-hidroximetil-3-{5-[5-(2-me-toxi-etoximetil)-piridin-2-ilamino]-l-metil-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il}-fenil)-3,4-di-hidro-2T7-isoquinolin-l-ona 1-37 6-Dimetilamino-2-(3-{5-[5-(2-hidroxi-etoxime-til)-piridin-2-il-amino]-1-metil-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il}-2-hidroximetil-fenil)-3,4-di-hidro-277-isoquinolin-l-ona 1-38 6-Ciclopropil-2-(3-{5-[l-(2-hidroxi-etil) -177-pirazol-3-ilamino] -1-metil-6- 41 QUADRO I.

Nomenclatura (M+H) + oxo-1, 6-cli-hiclro-piridin-3-il} -2-hidroximetil-fenil) -3,4-di-hi-dro-2fí-isoquinolin-l-ona 1-39 6-Dimetilamino-2-{2-hidroximetil-3-[5-(5-metano-sulfonilmetil-piridin-2-1lamino)-l-metil-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il]-fenil]-3,4-di-hidro-2fí-isoquinolin-l-ona 1-40 6-Dlmetllamlno-2-(2-hidroximetil-3-(l-metll-6-oxo-5-[5-(2-oxo-pirrolidin-l-ilmetil)-piridln-2-ilamino]-1,6-di-hidro-piridin-3-il}-fenil)-3,4-di-hidro-2íf-isoquinolin-l-ona 1-41 6- {5 - [3 - (6-Dimetllamino-1-oxo-3,4-di-hidro-l/í-isoquinolin-2-il) -2-hldroxlmetll-fenll]-l-metil-2-oxo-1,2-di-hidro-piridin-3-ilamino}-N-(2-meto-xi-etil)-N-metil-nicotinamida 1-42 2-(3-(5-[5-(4,4-Difluoro-pipendin-l-ilmetil)-plrldln-2-llamlno]-l-metil-6-oxo-1,6-di-hidro-piridin-3-il)-2-hldroximetll-fenll)-6-dl-metll-amlno-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona 1-43 6-Ciclopropil-2-(3-(5-[1-(2-hldroxi-3-metoxl-propll)-líf-pirazol-3-il-amino]-l-metil-6-oxo-l,6-dl-hidro-pirldln-3-ll)-2-hidroximetil-fe-nil)-3,4-dl-hldro-2/í-lsoquinolin-l-ona 1-44 6-Clclopropll-2-(2-hidroximetil-3-{1-metil-5-[1-(2-morfolin-4-il-metil)-1H-pirazol-3-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il)-fenil)-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona 1-45 6-Dimetilamino-2-[3—(5—(5—[4—(2-hidroxi-etil)-piperazin-l-il]-piridin-2-ilamino}-l-metil-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il)-2-hidroximetil-fenil]-3,4- di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona 1-46 2-(2-Hidroximetil-3-{l-metil-5-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il]-fenil)-6-(1-metil-ciclo-propil)-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona 1-47 6-Dimetilamino-2-(3-{5-[5-(4-etoxi-piperidino-l-carbonil)-piridin-2-ilamino]-1-metil-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il}-2-hidroximetil-fenil)-3,4-di-hidro-2fí-isoquinolin-l-ona 1-48 6-Dimetilamino-2-(2-hidroximetil-3-{5-[5-(4-me-toximetil-piperidino-l-carbonil)-piridin-2-ila-mino]-1-metil-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il}-fenil) -3,4-di-hidro-2fí-isoquinolin-l-ona 1-49 2-(3—{5—[5-(Azetidino-l-carbonil)-piridin-2-il-amino]-l-metil-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il}-2-hidroximetil-fenil)-6-dimetilamino-3,4-di-hi-dro-2H-isoquinolin-l-ona 1-50 2—(3—{5—[5—(3,3-Difluoro-azetidino-l-carbonil)-piridin-2-ilamino]-1-metil-6-oxo-1,6-di-hidro-piridin-3-il]-2-hidroximetil-fenil)-6-di-metil-amino-3,4-di-hidro-27í-isoquinolin-l-ona 1-51 6-Dimetilamino-2-(3—{5—[5—(1,l-dioxo-lÀb-isotia-zolidin-2-ilmetil)-piridin-2-ilamino]-1-metil-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il)-2-hidroxi-metil-fenil)-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona 1-52 6-terc-Butil-2-{2-hidroximetil-3-[l-metil-5-(5-morfolin-4-il-piridin-2-ilamino)-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il]-fenil}-3,4-di-hidro-2H-iso-quinolin-1-ona 1-53 6-terc—Butil-2-(2-hidroximetil-3-(l-metil-5-[5-(2-oxa-6-aza-espiro[3,3]-heptano-6-carbonil)-piridin-2-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il)-fenil) -3,4-di-hidro-2/í-isoquinolin-l-ona 1-54 6-Dimetilamino-2-(3-(5-[5-(4-etil-piperazin-l-il)-piridin-2-ilamino]-1- 42 QUADRO I.

Nomenclatura (M+H) * metil-6-oxo-l, 6-cli-hidro-piridin-3-il) -2-hidroximetil-fenil) -3,4-di-hidro-2if-isoquinolin-l-ona 1-55 6-Dimetilamino-2-(3—{5—[5-(4-etil-piperazin-l-il)-piridin-2-ilamino]-1-metil-6-oxo-1,6-di-hi-dro-piridin-3-il}-2-hidroximetil-fenil)-3,4-di-hidro- 2H-isoquinolin-l-ona 1-56 6-Dimetilamino-2-(2-hidroximetil-3-(5-[5-(4-hi-droxi-4-metil-piperidino-l-carbonil)-piridin-2-ilamino]-l-metil-6-oxo-l,6-di-hidro-pirldln-3-ll}-fenil) -3,4-di-hidro-2fí-isoquinolin-l-ona 1-57 N- (6-{5-[3-(6-Dimetilamino-1-oxo-3,4-di-hidro-lH-isoquinolin-2-il)-2-hidroximetil-fenil]-l-metil-2-oxo-l,2-di-hidro-piridin-3-ilamlno}-plrldin-3-ilmetil)-metano-sulfonamida 1-58 Éster metílico do ácido (6-{5-[3-(6-dimetilamino-l-oxo-3,4-di-hidro-lH-isoquinolin-2-il)-2-hidroximetil-fenil]-l-metil-2-oxo-l,2-di-hidro-piridin-3-ilamino}-piridin-3-ilmetil)-carbâmico 1-59 6-Ciclopropil-2-(2-hidroximetil-3-{l-metil-5-[5-(2-oxa-6-aza-espiro-[3,3]heptano-6-carbonil)-piridin-2-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il]-fenil)-3,4-di-hidro-2fí-isoquinolin-l-ona 1-60 6-Ciclopropil-2-(3 —{5 —[5-(1,l-dioxo-lÀ6-tiomor-folino-4-carbonil)-piridin-2-ilamino]-1-metil-6-oxo-1,6-di-hidro-piridin-3-il]-2-hidroxi-metil-fenil)-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona 1-61 6-(Etil-metil-amino)-2-{2-hidroximetil-3-[l-me-til-5-(5-morfolin-4-il-piridin-2-ilamino)-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il]-fenil}-3,4-di-hidro-2í/-isoquinolin-l-ona 1-62 6-Ciclopropil-2-(3-{5-[l-(2-dimetilamino-etil)-lH-pirazol-3-ilamino]-1-metil-6-oxo-l, 6-di-hi-dro-piridin-3-il] - 2-hidroxiinetil-fenil) -3,4-di-hidro- 2H-isoquinolin-l-ona 1-63 6-(1-Hidroxi-l-metil-etil)-2-(2-hidroximetil-3-{l-metil-5-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il)-fe-nil)-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona 1-64 6-[(2-Hidroxi-etil)-metil-amino]-2-(2-hidroxime-til-3-(l-metil-5-[5-(morfolino-4-carbonil)-piri-din-2-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il}-fenil) -3,4-di-hidro-2íf-isoquinolin-l-ona 1-65 6-Dimetilamino-2-[3-(5-(5-[(2-hidroxi-etil)-me-til-amino]-piridin-2-ilamino}-1-metil-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il)-2-hidroximetil-fenil]-3,4-di-hidro-2fí-isoquinolin-l-ona 1-66 6-Dimetilamino-2 - {2-hidroximetil-3 - [5 - (4-hidro-xi-3,4,5, 6-tetra-hidro-2/í-[1,3']bipiridinil-6'-ilamino)-l-metil-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il]-fenil]-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona 1-67 6-Dimetilamino-2-(3—{5—[5—(1,l-dioxo-l-tiomorfo-lin-4-il)-piridin-2-ilamino]-l-metil-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il]-2-hidroximetil-fenil)-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona 1-68 2-(3—{5-[5-(3,3-Difluoro-azetidin-l-il)-piridin-2-ilamino]-l-metil-6-οχο-1,6-di-hidro-piridin-3-il]-2-hidroximetil-fenil)-6-dimetilamino-3,4-di-hidro-2/í-isoquinolin-l-ona 1-69 6-Dimetilamino-2-(3—{5—[5-(3-hidroxi-azetidin-l-il)-piridin-2-ilamino]-1-metil-6-oxo-l, 6-di-hi-dro-piridin-3-il]-2-hidroximetil-fenil)-3,4-di-hidro-2/í-isoquinolin-l-ona 1-70 2-(3-[5-(5-Dietilamino-piridin-2-ilamino)-l-me-til-6-oxo-l,6-di-hidro- 43 QUADRO I.

Nomenclatura (M+H) + piridin-3-il]-2-hidroxi-metil-fenil}-6-dimetilamino-3,4-di-hidro-2íí-isoquinolin-l-ona 1-71 2-{2-Hidroximetil-3-[l-metil-5-(5-morfolin-4-il-piridin-2-ilamino)-6-oxo-1,6-di-hidro-piridin-3-il]-fenil}-6-(1-metll-clclopropil)-3,4-di-hidro-2fí-isoquinolin-l-ona 1-72 2 -(3 -[5 - (4,4-Difluoro-3,4,5,6-tetra-hidro-2ff-[l,3']bipiridinil-6' - ilamlno) -l-metll-6-oxo-l,6-di-hidro-pirldln-3-ll]-2-hidroximetil-fenil}-6-di-metilamino-3,4-dl-hldro-2H-isoqulnolin-l-ona 1-73 6-Dimetllamlno-2-{2-hidroximetil-3-[5-(1-metano-sulfonilmetil-lH-pirazol-3-ilamino)-l-metil-6-oxo-l,6-di-hidro-plridin-3-il]-fenll}-3,4-di-hidro-2H-lsoquinolin-1-ona 1-74 6-Dlmetllamino-2-{2-hldroxlmetil-3-[l-metil-6-oxo-5-(2-propil-2H- [1,2,3]trlazol-4-ilamino)-1,6-di-hidro-piridin-3-il]-fenil]-3,4-di-hidro-2H- isoquinolln-l-ona 1-75 6-Dimetilamino-2-(2-hidroximetll-3-{l-metil-6-oxo-5-[5-(2-oxo-pirrolidin-l-11)-piridin-2-il-amino]-1,6-di-hldro-piridin-3-il}-fenil)-3,4-di-hidro-2H-lsoqulnolln-1-ona 1-76 6'-(5-[3-(6-Dlmetilamlno-l-oxo-3,4-di-hidro-lH-isoquinolin-2-il)-2-hidroximetll-fenll]-l-metll-2-oxo-l,2-di-hidro-piridln-3-ilamino]-3,4,5,6-tetra-hidro-[1,3']bipiridinil-2-ona 1-77 6-Dimetilamino-2-(3—{5—[5—(1,l-dloxo-lÀ6-[1,2]-tiazinan-2-il)-piridin-2-ilamino]-l-metil-6-oxo-l,6-di-hldro-piridin-3-il]-2-hidroximetll-fe-nil)-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona 1-78 6-Dimetilamino-2-(3—{5—[5—(1,l-dioxo-lÀ6-iso-tiazolidin-2-il)-piridin-2-1lamino]-l-metil-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il}-2-hidroximetil-fenil)-3,4-di-hidro-2fí-isoquinolin-l-ona 1-79 2 — (6—{5 — [3— ( 6-Dimetilamino-1-oxo-3,4-di-hidro-lfí-isoquinolin-2-il) -2-hidroximetil-fenil]-l-metil-2-oxo-l,2-di-hidro-piridin-3-ilamino]-piridin-3-iloxi)-acetamida 1-80 6-Ciclopropil-2-(2-hidroximetil-3-{l-metil-5-[5-(2-oxa-6-aza- espiro[3,3]hept-6-il)-piridin-2-il-amino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il}- fenil)-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona 1-81 1- ( 6 — { 5 — [3 - (6-Ciclopropil-l-oxo-3,4-di-hidro-líí-isoquinolin-2-il) -2-hidroximetil-fenil]-l-metil-2-oxo-l,2-di-hidro-piridin-3-ilamino]-piridino-3-carbonil)-piperidino-4-carbonitrilo 1-82 6-Ciclopropil-2-(3-{5-[5-(3-etoxi-pirrolidino-l-carbonil)-piridin-2-il-amino]-l-metil-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il}-2-hidroximetil-fenil)-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona 1-83 6-Dimetilamino-2-(2-hidroximetil-3-(5-[5-(3-me-tano-sulfonil-propoxi)-piridin-2-ilamino]-l-me-til-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il]-fenil)-3,4-di-hidro-2íí-isoquinolin-l-ona 1-84 6-Dimetilamino-2-(3-(5-[5-(2-hidroxi-etoxi)-pi-ridin-2-ilamino]-l-metil-6-oxo-1,6-di-hidro-pi-ridin-3-il}-2-hidroximetil-fenil)-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-1-ona 1-85 2-(3-(5-[5-(4-Acetil-piperazin-l-il)-piridin-2-ilamino]-l-metil-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il]-2-hidroximetil-fenil)-6-dimetilamino-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona 1-86 1-(6-(5-(3- (6-Ciclopropil-l-oxo-3,4-di-hidro-l/í-isoquinolin-2-il) -2- 44 QUADRO I.

Nomenclatura (M+H) * hiclroximetil-fenil] -l-metil-2-oxo-l, 2-dl-hlclro-piridin-3-ilamino ) -piridino-3-carbonil)-piperldino-3-carbonltrilo 1-87 2-(2-Acetaldeído-oximo-3-{1-meti1-5-[5-(morfo-lino-4-carbonil)-plrldln-2-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hidro-plrldin-3-ll}-fenil)-6-dimetilamino-3,4-di-hldro-2/í-lsoquinolin-l-ona 1-88 2 - [ 6- (1-Cloro-ciclopropil) - l-oxo-3,4-dl-hldro-líí-isoquinolin-2-ll ] - 6-(1-metll-5-[5-(morfolino-4-carbonil)-plrldln-2-llamino]-6-oxo-l,6-dl-hl-dro-piridin-3-il]-benzaldeído 1-89 6-(1-Cloro-ciclopropil)-2-(2-hidroximetil-3-(l-metil-5-[5-(morfolino-4-carbonll)-plridin-2-il-amino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il}-fenil)-3,4-dl-hldro-2/í-isoquinolin-l-ona 1-90 6-Dlmetllamlno-2-{2-hidroximetil-3-[5-(4-hldro-xi-4-metil-3,4,5,6-tetra-hldro-2/í-[l,3'] bipiri-dinil-6' -1 lamino) -1-met 11- 6-oxo-l, 6-di-hldro-plrldln-3-ll]-fenll|-3,4-di-hidro-2/í-isoquino-lin-l-ona 1-91 2-[2-(2-Hldroximetil-3-{1-met11-5-[5-(morfolino-4-carbonil)-plrldln-2-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hi-dro-piridin-3-il)-fenil)-1-oxo-l,2,3,4-tetra-hi-dro-isoquinolin-6-il]-2-metil-propionitrilo 1-92 6-(1-Cloro-ciclopropil)-2-{2-hidroximetil-3-[l-metil-5-(5-morfolin-4-il-piridin-2-ilamino) -6-oxo-l, 6-di-hidro-piridin-3-il] -fenil}-3,4-di-hidro-2/í-isoquinolin-l-ona 1-93 6-Dimetilamino-2-(2-hidroximetil-3-(l-metil-5-[5-(2-oxa-6-aza- espiro[3,3]hept-6-il)-piridin-2-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il|- fe-nil)-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona 1-94 1-(2-{2-Hidroximetil-3-[l-metil-5-(5-morfolin-4-il-piridin-2-il-amino)-6-oxo-1,6-di-hidro-piri-din-3-il]-fenil]-1-oxo-l,2,3,4-tetra-hidro-iso-quinolin-6-il·)-ciclopropanocarbonitrilo 1-95 2-(2-{2-Hidroximetil-3-[l-metil-5-(5-morfolin-4-il-piridin-2-il-amino)-6-oxo-1,6-di-hidro-piri-din-3-il]-fenil}-1-oxo-l,2,3,4-tetra-hidro-iso-quinolin-6-il)-2-metil-propionitrilo 1-96 6-Dimetilamino-2-{2-hidroximetil-3-[l-metil-6-oxo-5-(5-piperazin-l-il-piridin-2-ilamino)-1,6-di-hidro-piridin-3-il]-fenil}-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona 1-97 6-Dimetilamino-2-{2-hidroximetil-3-[5-(5-hidro-ximetil-piridin-2-ilamino)-1-metil-6-oxo-l,β-di-hidro-piridin-3-il]-fenil}-3,4-di-hidro-2H-iso-quinolin-1-ona 1-98 6-Dimetilamino-2-{2-hidroximetil-3-[l-metil-5-(β-morfolin-4-il-pirimidin-4-ilamino)-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il]-fenil}-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona 1-99 6-Dimetilamino-2-{2-hidroximetil-3-[l-metil-5-(S-metil-isoxazol-S-ilamino)-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il]-fenil}-3,4-di-hidro-2H-isoquino-lin-l-ona 1-100 6-Dimetilamino-2-{2-hidroximetil-3-[5-(isoxazol-3-ilamino)-1-metil-6-οχο-1,6-di-hidro-piridin-3-il]-fenil·}-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona 1-101 6-(l-Cloro-ciclopropil)-2-[3-(5 —{5 —[4-(2-hidro-xi-etil)-piperazin-l-il]-piridin-2-ilamino}-1-metil-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il)-2-hidro-xi-metil-fenil]-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona 1-102 1-[2-(2-Hidroximetil-3-{l-metil-5-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hi-dro-piridin-3-il}-fenil)-1-oxo-l,2,3,4-tetra-hidro-isoquinolin-6-il]-ciclopropanocarbonitrilo 45 QUADRO I.

Nomenclatura (M+H) * 1-103 2- (6— {5— [3- (6-Dimetilamino-l-oxo-3,4-di-hidro-lH-isoquinolin-2-il) -2-hidroximetil-fenil]-1-meti1-2-oxo-1,2-di-hidro-piridin-3-ilamino]-piridin-3-iloxi)-N, N-dimetil-acetamida 1-104 6-(1-Hidroxi-l-metil-etil)-2-(2-hidroximetil-3-[l-metil-5-(5-morfolin-4-il-piridin-2-ilamino)-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il]-fenil1-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona 1-105 6-Dimetilamino-2-(2-hidroximetil-3-(5-[5-(2-hi-droxi-propoxi-metil)-piridin-2-ilamino] -l-metil-6-oxo-l, 6-di-hidro-piridin-3-il}-fenil) -3,4-di-hidro-2/í-isoquinolin-l-ona 1-106 Éster benzilico do ácido (2-( 5-[3-(6-dimetilamino-l-oxo-3,4-di-hidro-líí-isoquinolin-2-il)-2-hidroximetil-fenil]-l-metil-2-oxo-1,2-di-hidro-piridin-3-ilamino}-piridin-4-il)-carbâ-mico 1-107 2-(3-[5-(4-Amino-piridin-2-ilamino)-1-metil-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il]-2-hidroximetil-fenil}-6-dimetilamino-3,4-di-hidro-2íf-isoquino-lin-l-ona 1-108 N—(2—{5—[3—(6-Dimetilamino-l-oxo-3,4-di-hidro-lH-isoquinolin-2-il)-2-hidroximetil-fenil] - l-me-til-2-oxo-l, 2-di-hidro-piridin-3-ilamino 1 -piri-din-4-il)-acetamida 1-109 6-Dimetilamino-2-(2-hidroximetil-3-(l-metil-5-[6-(4-metil-piperazin-l-il)-pirimidin-4-ilami-no]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il}-fenil)-3,4-di-hidro-2fí-isoquinolin-l-ona 1-110 6-[(2-Hidroxi-etil)-metil-amino]-2-{2-hidroxime-til-3-[l-metil-5-(5- morfolin-4-il-piridin-2-il-amino)-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il]-fenil}- 3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona 1-111 2-(3-(1-Difluorometil-5-[5-(morfolino-4-carbo-nil)-piridin-2-ilamino]-6-oxo-1,6-di-hidro-piri-din-3-il}-2-hidroximetil-fenil)-6-dimetil-amino-3,4-di-hidro-2fí-isoquinolin-l-ona 1-112 6-Dimetilamino-2-(2-hidroximetil-3-{5-[5-(2-me-toxi-etoxi)-piridin-2-ilamino] -1-metil-6-oxo-l, 6-di-hidro-piridin-3-il]-fenil)-3,4-di-hidro-2/í-isoquinolin-l-ona 1-113 2—(3—{5—[5—(3,3-Difluoro-azetidin-l-ilmetil)-pi-ridin-2-ilamino]-1-metil-6-oxo-1,6-di-hidro-pi-ridin-3-il}-2-hidroximetil-fenil)-6-di-metilami-no-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona 1-114 6-Dimetilamino-2-(3—{5—[5—(1,l-dioxo-lX6-tiomor-folin-4-ilmetil)-piridin-2-ilamino]-1-metil-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il]-2-hidroxi-metil-fenil)-3,4-di-hidro-2fí-isoquinolin-l-ona 1-115 1- (5 -{3 - [6- (1-Cloro-ciclopropil) - l-oxo-3,4-di-hidro-l/í-isoquinolin-2-il] -2-hidroximetil-fe-nil}-l-metil-2-oxo-1,2-di-hidro-piridin-3-il)-3-etil-ureia 1-116 6-Dimetilamino-2-{2-hidroximetil-3-[1-metil-6-oxo-5-(5-trifluoro-metil-isoxazol-3-ilamino)-1,6-di-hidro-piridin-3-il]-fenil}-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona 1-117 1-{ 5-[3- ( 6-terc-Butil-1-oxo-3,4-di-hidro-líí-iso-quinolin-2-il) -2-hidroximetil-fenil] -l-metil-2-oxo-1,2-di-hidro-piridin-3-il}-3-metil-ureia 1-118 6-Dimetilamino-2-(2-hidroximetil-3-(5-[5-(3-hi-droxi-3-metil-azetidin-l-il) -piridin-2-ilamino]-1-metil-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il)-fenil)-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona 1-119 6-(1-Cloro-ciclopropil)-2-{2-hidroximetil-3-[5-(4-hidroxi-4-metil-3,4,5,6-tetra-hidro-2/ί- [1,3' ] bipiridinil-6' - ilamino) -1-metil-6-oxo-l, 6-di-hidro-piridin-3-il] -fenil) -3,4-di-hidro-2íí-isoquinolin-l-ona 46 QUADRO I.

Nomenclatura (M+H) + 1-120 2 - (3-{5-[5-(4-Acetil-piperazin-l-il)-piridin-2-ilamino]-1-metil-6-oxo-l, 6-di-hidro-piridin-3-il} -2-hidroximetil-fenil) -6- (1-cloro-ciclo-pro-pil) -3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona 1-121 6-(1-Cloro-clclopropll)-2-{2-hidroximetil-3-[1-metil-6-oxo-5-(5-piperazin-l-il-piriclin-2-ilami-no )-l,6-di-hidro-piridin-3-il]-fenil}-3,4-di-hidro-2fí-isoquinolin-l-ona 1-122 1-{5-[3-(6-terc-Butil-l-oxo-3,4-di-hidro-lH-iso-quinolin-2-il)-2-hidroxi-metil-fenil]-l-metil-2-oxo-l,2-di-hidro-piridin-3-il]-3-etil-ureia 1-123 6-[Bis-(2-hidroxi-etil)-amino]-2-{2-hidroxime-til-3-[l-metil-5-(5-morfolin-4-il-piridin-2-ila-mino)-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il]-fenil}-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona 1-124 Ácido 2-(β-dimetilamino-1-oxo-3,4-di-hidro-lH-isoqui-nolin-2-il)-6-{1-metil-5-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il}-benzóico 1-125 6-Dimetilamino-2-{5-fluoro-2-hidroximetil-3-[l-metil-5-(5-morfolin-4-il-piridin-2-ilamino)-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il]-fenil}-3,4-di-hi-dro-2fí-isoquinolin-l-ona 1-126 Éster metílico do ácido 1-(6-{5-[3-(6-dimetilamino-l-oxo-3,4-di-hidro-lH-isoquinolin-2-il)-2-hidroximetil-fenil]-l-metil-2-oxo-l,2-di-hidro-piridin-3-ilamino]-piridin-3-il)-pirro-lidino-3-carboxílico 1-127 Ácido 1—(6—{5—[3—(6-dimetilamino-l-oxo-3,4-di-hidro-lH-isoquinolin-2-il) -2-hidroximetil-fe-nil]-l-metil-2-oxo-l,2-di-hidro-piridin-3-ilami-no}-piridin-3-il)-pirrolidino-3-carboxilico 1-128 6-Dimetilamino-2-(2-hidroximetil-3-{5-[6-(2-me-toxi-l-metil-etil-amino)-piridin-2-ilainino] -1-metil-6-oxo-l, 6-di-hidro-piridin-3-il]-fenil)-3,4-cli-hidro-2íí-isoquinolin-l-ona 1-129 6-Dimetilamino-2-{2-hidroximetil-3-[5-(lH-imida-zol-2-ilamino)-l-metil-6-oxo-1,6-di-hidro-piri-din-3-il]-fenil]-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona 1-130 Éster butil-quanidínico do ácido N-{5-[3-(6-dimetilamino-l-oxo-3,4-di-hidro-lH-isoquinolin-2-il)-2-hidroximetil-fenil]-l-metil-2-oxo-l,2-di-hidro-piridin-3-il]-N'-carboxílico 1-131 N-{5-[3-(6-Dimetilamino-l-oxo-3,4-di-hidro-lH-isoquinolin-2-il)-2-hidroximetil-fenil]-l-metil-2-oxo-l,2-di-hidro-piridin-3-il}-guanidina 1-132 2-(2-ftminometil-3-{l-metil-5-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2-ilamino]-6-oxo-1, 6-di-hidro-piridin-3-il (-fenil) -6-dimetilamino-3,4-di-hi-dro-2íí-isoquinolin-l-ona 1-133 6-Dimetilamino-2-(2-dimetilaminometil-3-(l-me-til-5-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2-ilami-no]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il)-fenil)-3,4-di-hidro-2íí-isoquinolin-l-ona 1-134 1-(5-{2-Hidroximetil-3-[6-(1-hidroxi-l-metil-etil)-l-oxo-3,4-di-hidro-lH-isoquinolin-2-il]-fenil}-l-metil-2-oxo-l,2-di-hidro-piridin-3-il)-3-metil-ureia 1-135 1- (5-{3- [6- (2-Ciano-l, 1-dimetil-etil) -l-oxo-3,4-di-hidro-líí-isoquinolin-2-il]-2-hidroximetil-fenil}-l-metil-2-oxo-l,2-di-hidro-piridin-3-il)-3-metil-ureia 1-136 2-[2-Hidroximetil-3-(5—{5—[4-(2-metoxi-etil)-pi-perazin-l-il]-piridin-2-ilamino}-l-metil-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il)-fenil]-6-(1-metil-ciclopropil)-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona 47 QUADRO I.

Nomenclatura (M+H) + 1-137 6-Dimetilamino-2- (2-hidroximetil-3 - {5 - [ 6- ( (R) -3-hidroxi-pirrolidin-l-il) -piridin-2-ilamino]-l-metil-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il}-fenil)-3,4-di-hidro-2/í-isoquinolin-l-ona 1-138 6-Dlmetllamlno-2-{3-[5-(5-etil-isoxazol-3-ilami-no)-l-metll-6-oxo-l,6-di-hldro-plrldln-3-11 ] -2-hidroximetil-fenll) -3,4-di-hidro-2/í-isoquinolin-l-ona 1-139 6-Clclopropll-2-(2-hidroximetil-3-[1-meti1-5-(5-morfolln-4-ll-plrldln-2-Ilamlno) -6-oxo-l, 6-di-hidro-piridin-3-il] -fenil}-3,4-di-hidro-2/í-iso-qulnolln-l-ona 1-140 6-Azetldln-l-ll-2-(2-hidroximetil-3-{l-metil-5-[5-(morfollno-4-carbonll)-plrldln-2-1 lamino] - 6-oxo-l, 6-di-hidro-piridin-3-il }-fenil)-3,4-di-hi-dro-2/í-lsoqulnolln-1-ona 1-141 1- { 5 - [ 3 - (6-Dimetilamino-l-oxo-3,4-di-hidro-lH-isoquinolin-2-il) -4-fluoro-2-hidroximetil-fe-nil]-l-metil-2-oxo-l,2-di-hidro-piridin-3-il}-3-metil-ureia 1-142 6-terc-Butil-2-{2-hidroximetil-3-[l-metil-6-oxo-5-(5-piperazin-l-il-piridin-2-ilamino)-1,6-di-hidro-piridin-3-il]-fenil}-3,4-di-hidro-2H-iso-quinolin-l-ona 1-143 2-Ciano-N-{5-[3-(6-dimetilamino-l-oxo-3,4-di-hi-dro-lH-isoquinolin-2-il)-2-hidroximetil-fenil]-l-metil-2-oxo-l,2-di-hidro-piridin-3-il}-aceta-mida 1-144 6-[2-(2-Hidroxi-etoxi)-1,1-dimetll-etil]-2-{2-hidroximetil-3-[l-metil-5-(5-morfolin-4-il-piri-din-2-ilamino)-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il]-fenll)-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona 1-145 6-(1-Cloro-ciclopropil)-2-(2-hidroximetil-3-{l-metil-5-[5 - (4-metil-piperazin-l-il)-piridin-2-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il}-fe-nil)-3,4-di-hidro-2fí-isoquinolin-l-ona 1-146 6-(1-Hidroxi-l-metil-etil)-2-(2-hidroxlmetll-3-(1-meti1-5-[5-(4-metil-piperazin-l-il)-piridin-2-ilamlno]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il}-fe-nil)-3,4-di-hidro-2fí-isoquinolin-l-ona 1-147 6-(2-Hidroxi-l,1-dimetil-etil)-2-(2-hidroxlme-tll-3-(1-meti1-5-[5-(morfolino-4-carbonil)-piri-din-2-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hIdro-plrldlη-3-il[-fenil)-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona 1-148 2-[2-(2-Hidroximetil-3-{l-metil-5-[5-(4-metil-piperazin-l-il)-piridin-2-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il[-fenil)-l-oxo-1,2,3,4-tetra-hidro- isoquinolin-6-il]-2-metil-propionitrilo 1-149 N- { 5- [3 - ( 6-Dimetilammo-1-oxo-3,4-di-hidro-l/í-isoquinolin-2-il) -2-hidroximetil-fenil]-l-metil-2-oxo-l,2-di-hidro-piridin-3-il}-3-oxo-butirami-da 1-150 6-Dimetilamino-2-[2-hidroximetil-3-(5-(5-[(2-metoxi-etilamino)-metil]-piridin-2-ilamino}-1-metil-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il)-fenil]-3,4-di-hidro-2fí-isoquinolin-l-ona 1-151 6-Dimetilamino-2- { 3 — [ 5 — (5-etil-4-oxo-4,5-di-hi-dro-l/í-imidazol-2-il-amino) -1-metil-6-oxo-1,6-di-hidro-piridin-3-il]-2-hidroximetil-fenil}-3,4-di-hidro-2fí-isoquinolin-l-ona 1-152 1- { 5 - [3 - ( 6-terc-Butil-l-oxo-3,4-di-hidro-líí-iso-quiolin-2-il) -2-hidroximetil-fenil] -l-metil-2-oxo-1,2-di-hidro-piridin-3-il)-3-(3-dimetil-ami-no-propil)-ureia 1-153 6-Dimetilamino-2-{3 —[5 —(5-etil-lH-imidazol-2-il-amino)-1-metil-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il] - 2-hidroximetil-fenil} —3,4-di-hidro-2/í-isoquino-lin-l-ona 1-154 6-Ciclopropil-2-(2-hidroximetil-3-{l-metil-5-[5-(morfolino-4-carbonil)- 48 QUADRO I.

Nomenclatura (M+H) + piridin-2-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridazin-3-il}-fenil)-3,4-di-hi-dro-2H-isoquinolin-l-ona 1-155 6-Ciclopropil-2-{ 2-hidroximetil-3- [ l-metil-5- (l-metil-lH-pirazol-3-ilamino) -6-oxo-l,6-di-hidr o-pirida zin-3-il]-fenil}-3,4-di-hidr o-2 ff-isoquino-lin-l-ona III-4 6-Dimetilainino-2-{2-hidroximetil-3-[l-metil-5-(l-metil-lH-pirazol-3-ilamino)-6-oxo-l,6-di-hi-dro-piridin-3-il]-fenil}-2H-isoquinolin-l-ona III-5 1-{5-[3-(6-Dimetilamino-l-oxo-lH-isoquinolin-2-il)-2-hidroximetil-fenil]-1-metil-2-oxo-l,2,-cli-hidro-piridin-3-il}-3-etil-ureia III-6 2-(2-Hidroximetil-3-{l-metil-5-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il}-fenil)-6-(1-metil-ciclo-propil)-2H-isoquinolin-l-ona 111 - 7 2-{2-Hidroximetil-3-[l-metil-5-(5-morfolin-4-il-metil-piridin-2-ilamino)-β-οχο-1, 6-di-hidro-pi-ridin-3-il]-fenil}-6-(1-metil-ciclo-propil)-2H-isoquinolin-l-ona 111 - 8 2-(2-Hidroximetil-3-{l-metil-5-[5-(4-metil-pipe-razino-l-carbonil)-piridin-2-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il}-fenil)-6-(1-metil-ciclo-propil)-2H-isoquinolin-l-ona III-9 6-Ciclopropil-2-{2-hidroximetil-3-[l-metil-5-(5-morfolin-4-il-metil-piridin-2-ilamino)-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il]-fenil}-2H-isoquino-lin-l-ona III- 10 6-Ciclopropil-2-(2-hidroximetil-3-{l-metil-5-[5-(4-metil-piperazino-l-carbonil)-piridin-2-ilami-no]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il}-fenil)-2H- isoquinolin-l-ona III- 11 6-Ciclopropil-2-(2-hidroximetil-3-{l-metil-5-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il)-fenil)-2ff-isoquino-lin-1-ona III- 12 6-Ciclopropil-2-{2-hidroximetil-3-[l-metil-5-(5-morfolin-4-il-piridin-2-ilamino)-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il]-fenil·}-2H-isoquinolin-l-ona III- 13 6-Ciclopropil-2-(2-hidroximetil-3-{l-metil-5-[5-(morfolino-4-carbonil) -piridin-2-ilamino] -6-oxo-l, 6-di-hidro-piridin-3-il}-fenil) -3-metil-2/í- isoquinolin-l-ona III- 14 2-{2-Hidroximetil-3-[l-metil-5-(5-morfolin-4-il-piridin-2-ilamino)-6-oxo-1,6-di-hidro-piridin-3-il]-fenil}-6-(1-metil-ciclopropil)-2H-isoquino-lin-l-ona III- 15 6-Dimetilamino-2-{2-hidroximetil-3-[l-metil-5-(5-morfolin-4-il-piridin-2-ilamino) -6-oxo-l, 6-di-hidro-piridin-3-il] -fenil}-2íí-isoquinolin-l-ona III- 16 6-terc-Butil-2-(2-hidroximetil-3-(l-metil-5-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2-ilamino] -6-oxo-l, 6-di-hidro-piridin-3-il}-fenil) -2íí-isoquino-lin-1-ona III- 17 6-Ciclopropil-3-hidroximetil-2-(2-hidroximetil-3-(l-metil-5-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il}-fe-nil)-2H-isoquinolin-l-ona III- 18 6-Ciclopropil-3-hidroximetil-2-(2-hidroximetil-3-[l-metil-5-(5-morfolin-4-il-piridin-2-ilami-no) - 6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il]-fenil[-2íí-isoquinolin-l-ona III- 19 β-Cicl·oρroρil·-3-dimetil·aminometil-2-{2-hidroxi-metil-3-[l-metil-5-(5-morfolin-4-il-piridin-2-ilamino)-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il]-fe-nil·}-2fí-isoquinolin-l-ona III- 3-terc-Butoximetil-6-ciclopropil-2-(3-[5-(6-fluoro-piridin-2-ilamino)-1- 49 QUADRO I.

Nomenclatura (M+H) + 20 metil-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il] - 2-hidroximetil-fenil )-2fí-isoquinolin-1-ona III- 21 6-Dimetilamino-2- { 2-hidroximetil-3- [ l-metil-5- ( 6-metilamino-piridin-2-ilamino) -6-oxo-l,6-di-hidr o-piridin-3-il]-fenil(-2fí-isoquinolin-l-ona III- 22 6-Dimetilamino-2-(2-hidroximetil-3-{l-metil-5-[6-(4-metil-piperazin-l-il)-piridin-2-ilamino] -6-oxo-l,6-di-hidr o-piridin-3-il(-fenil)-2fí-iso-quinolin-1-ona III- 23 2-{3-[5-(6-Amino-piridin-2-ilamino)-l-metil-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il] - 2-hidroximetil-fenil) -6-dimetilamino-2fí-isoquinolin-l-ona III- 24 2— (6—{5— [3— (6-Dimetilamino-l-oxo-lií-isoquinolin-2-il) -2-hidroxi-metil-fenil]-l-metil-2-oxo-1,2-di-hidro-piridin-3-ilamino}-piridin-3-iloxi)-N-metil-acetamida III- 25 2-{3-[5-(5,6-Dimetoxi-piridin-2-ilamino)-1-me-til-6-oxo-1,6-di-hidro-piridin-3-il] - 2-hidroxi-metil-fenil} -6-dimetilamino-2fí-isoquinolin-l-ona III- 26 6-Dimetilamino-2-(2-hidroximetil-3-{5-[5-metoxi-6-(2-metoxi-etoxi)-piridin-2-ilamino] -l-metil-6-oxo-l, 6-di-hidro-piridin-3'-il}-fenil)-2fí-iso-quinolin-1-ona III- 27 6-Dimetilamino-2-(2-hidroximetil-3-{5-[6-metoxi-5-(2-metoxi-etoxi)-piridin-2-ilamino]-l-metil-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il)-fenil)-2H-isoqui-nolin-1-ona III- 28 2-(3-{5-[5,6-Bis-(2-metoxi-etoxi)-piridin-2-il-amino]-l-metil-β-οχο-Ι,6-di-hidro-piridin-3-il}-2-hidroximetil-fenil)-β-dimetil·amino-2ií-isoqui-nol·in-l- ona III- 29 6-Dimetilamino-2-{2-hidroximetil-3-[l-metil-5-(2-morfolin-4-il-pirimidin-4-ilamino)-6-oxo-l, 6-di-hidro-piridin-3-il]-fenil}-2H-isoquinolin-l-ona III- 30 6-Dimetilamino-2-(2-hidroximetil-3-{l-metil-5-[2-(4-metil-piperazin-l-il)-pirimidin-4-ilami-no]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il)-fenil)-2H-isoquinolin-l-ona III- 31 2-[4-(6—{5—[3-(ô-Dimetilamino-l-oxo-lH-isoquino-lin-l-il)-2-hidroxi-metil-fenil·] -l-metil-2-oxo-1,2-di-hidro-piridin-3-ilamino}-piridin-3-il)-piperazin-l-il]-isobutiramida III- 32 2—(3—{5—[6—(4-Acetil-piperazin-l-il)-piridin-2-ilamino]-1-metil-6-oxo-l, 6-di-hidro-piridin-3-il}-2-hidroximetil-fenil)-6-dimetilamino-2H-iso-quinolin-1-ona III- 33 6-Dimetilamino-2- { 3- [5- (5-etil-líí-pirazol-3-il-amino) -l-metil-6-oxo-l, 6-di-hidro-piridin-3-il ] -2-hidroximetil-fenil) -2/í-isoquinolin-l-ona III- 34 6-Dimetilamino-2-(3-(5-[5-(2-hidroxi-etoxi)-6-(2-metoxi-etoxi)-piridin-2-ilamino]-1-metil-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il[-2-hidroxi-metil-fenil)-2H-isoquinolin-l-ona III- 35 6-Ciclopropil-2-(2-hidroximetil-3-(l-metil-5-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2-ilamino] -6-oxo-l, 6-di-hidro-piridazin-3-il (-fenil) -2íí-isoquino-lin-l-ona III- 36 2-(2-Hidroximetil-3-{l-metil-5-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridazin-3-il(-fenil)-6-(1-metil-ciclo-propil)-2H-isoquinolin-l-ona 50

Os derivados de piridinona e de piridazinona aqui descritos são inibidores de cinase, em particular, inibidores de tcB. Estes inibidores podem ser úteis para o tratamento de uma ou mais doenças que respondem à inibição da cinase, incluindo doenças que respondem à inibição de tcB e/ou à inibição da proliferação de células B, em mamiferos. Sem pretender estar ligada a qualquer teoria em particular, crê-se que a interacção dos compostos da presente invenção com tcB resulta na inibição da actividade de tcB e assim na utilidade farmacêutica destes compostos. De acordo com isto, a presente invenção inclui um processo de tratamento de um mamifero, por exemplo, um ser humano, que tenha uma doença que responda à inibição da actividade de tcB E/ou à inibição da proliferação das células B, compreendendo a administração a esse mamifero que tem essa doença, de uma quantidade eficaz de, pelo menos, uma entidade quimica aqui providenciada. Uma concentração eficaz pode ser acertada experimentalmente, por exemplo, fazendo o ensaio da concentração do composto no sangue ou teoricamente por meio do cálculo da biodisponibilidade. Outras cinases que podem ser afectadas na adição a tcB incluem, mas não se limitam, a outras tirosina-cinases e serina/treonina-cinases.

As cinases desempenham papéis relevantes na sinalização de vias que controlam processos celulares fundamentais, tais como, proliferação, diferenciação e morte (apoptose). A actividade anómala das cinases tem sido implicada numa vasta gama de doenças incluindo cancros múltiplos, doenças auto-imunes e/ou inflamatórias e reacções inflamatórias agudas. 0 papel multifacetado das cinases na sinalização-chave das vias de sinalização celular providencia uma oportunidade significativa para identificar novos fármacos que atingem as cinases e as vias de sinalização. 51

Uma modalidade, inclui o processo para tratar um doente que tenha uma doença auto-imune e/ou inflamatória ou uma resposta reactiva inflamatória aguda à inibição da actividade de tcB e/ou à proliferação de células B.

As doenças auto-imunes e/ou inflamatórias que podem ser afectadas utilizando os compostos e as combinações de acordo com a presente invenção incluem, mas não se limitam a: psoriase, alergia, doença de Crohn, síndroma do intestino irritável, doença de Sjogren, rejeição do enxerto de tecidos e rejeição hiper-aguda de órgãos transplantados, asma, lúpus eritematoso sistémico (e glomerulonefrite associada), dermatomiosite, esclerose múltipla, escleroderma, vasculite (associada a ANCA e outras vasculites), estados hemolíticos e trombocitopénicos auto-imunes, síndroma de Goodpasture (e glomerulonefrite e hemorragia pulmonar associadas) , aterosclerose, artrite reumatóide, purpura trombocitopénica idiopática crónica (PIT), doença de Addison, doença de Parkinson, doença de Alzheimer, diabetes, choque séptico e miastenia gravis.

Incluem-se os processos de tratamento em que pelo menos uma entidade química providenciada aqui é administrada em combinação com um agente anti-inflamatório. Os agentes anti-inflamatórios incluem, mas não se limitam a, FAINE, inibidores da enzima ciclo-oxigenase não-específicos e específicos de COX-2, compostos de ouro, corticosteróides, metotrexato, antagonistas dos receptores do factor da necrose do tumor (FNT), imunossupressores e metotrexato.

Exemplos de FAINE incluem, mas não se limitam a, ibuprofeno, flurbiprofeno, naproxeno e naproxeno sódico, diclofenac, combinações de diclofenac sódico e misoprostol, sulindac, oxaprozina, diflunisal, piroxicam, indometacina, etodolac, fenoprofeno cálcico, cetoprofeno, nabumetona 52 sódica, sulfasalazina, tolmetina sódica e hidroxicloroquina. Exemplos de FAINE também incluem inibidores específicos de COX-2, tais como, celecoxib, valdecoxib, lumiracoxib e/ou etoricoxib.

Nalgumas modalidades, o agente anti-inflamatório é um salicilato. Os salicilatos incluem, mas não se limitam a, ácido acetilsalicílico ou aspirina, salicilato de sódio e salicilatos de colina e magnésio. 0 agente anti-inflamatório pode também ser um corticosteróide. Por exemplo, o corticosteróide pode ser cortisona, dexametasona, metilprednisolona, prednisolona, fosfato de prednisolona e sódio ou prednisona.

Noutras modalidades, o agente anti-inflamatório é um composto de ouro, tal como tiomalato de ouro e sódio ou auranofina. A presente invenção também inclui modalidades em gue o agente anti-inflamatório é um inibidor metabólico, tal como um inibidor de di-hidrofolato-redutase, tal como metotrexato ou um inibidor de di-hidro-orotato-desidrogenase, tal como leflunomida.

Outras modalidades da presente invenção incluem combinações em gue pelo menos um composto anti-inflamatório é um anticorpo monoclonal anti-C5 (tal como, eculizumab ou pexelizumab), um antagonista de FNT, tal como entanercept ou infliximab, gue é um anticorpo monoclonal anti-FNT alfa.

Ainda outras modalidades da presente invenção têm por objecto combinações em gue pelo menos um agente activo é um composto imunossupressor, tal como um composto 53 imunossupressor escolhido entre metotrexato, leflunomida, ciclosporina, tacrolimus, azatioprina e micofenolato de mofetilo.

As células B e os precursores de células B que expressam tcB têm sido implicados na patologia de estados malignos das células B incluindo, mas não se limitando a, linfoma das células B, linfoma (incluindo linfoma de Hodgkin e linfoma de não-Hodgkin) , linfoma das células pilosas, mieloma múltiplo, leucemia mielogénica crónica e aguda e leucemia linfocitica crónica e aguda.

As tcB têm demonstrado ser inibidores do complexo de sinalização da morte de Fas/APO-1 (CD-95) (CSIM) em células linfóides da linha B. 0 destino das células de leucemia/linforna pode residir no equilibro entre os efeitos pró-apoptóticos oposto de caspases activadas por CSIM e um mecanismo regulador anti-apoptótico a montante, envolvendo tcB e/ou os seus substratos (Vassilev et al., J. Biol. Chem. 1998, 274, 1646-1656).

Também se tem verificado que os inibidores de tcB são úteis como agentes de quimio-sensibilização e assim são úteis em combinações com outros fármacos quimioterapêuticos, em particular, fármacos que induzem a apoptose. Exemplos de outros fármacos quimioterapêuticos que podem ser utilizados em combinação com inibidores de tcB de quimio-sensibilização incluem inibidores de topoisomerase I (camptotecina ou topotecano), inibidores de topoisomerase II (por exemplo, daunomicina e etopósido), agentes de alquilação (por exemplo, ciclofosfamida, melfalano e BCNU), agentes dirigidos à tubulina (por exemplo, taxol e vinblastina) e agentes biológicos (por exemplo, anticorpos, tais como, um anticorpo anti-CD20, IDEC 8, imunotoxinas e citocinas). 54 A actividade de tcB também tem sido associada com algumas leucemias que expressam o gene de fusão bcr-abl o que resulta na translocação de partes do cromossoma 9 e 22. Esta anomalia é vulgarmente observada na leucemia mielogénica crónica. A tcB, é, constitutivamente, fosforilada pela cinase bcr-abl que inicia sinais de sobrevivência a jusante, que circunscrevem a apoptose a células bcr-abl. (Feldhahn et al. J. Exp. Med. 2005 201 (11): 1837-1852).

Os compostos da presente invenção podem ser formulados numa vasta variedade de formas farmacêuticas de administração oral e veículos. A administração oral pode ser feita sob a forma de comprimidos, comprimidos revestidos, drageias, capsulas de gelatina dura e mole, soluções, emulsões, xaropes ou suspensões. Os compostos da presente invenção são eficazes quando são administrados por outras vias de administração, incluindo a administração parentérica tópica (gotejamento intravenoso) , intramuscular, intravenosa, subcutânea, trans-dérmica (que pode incluir um agente de melhoria de penetração), bucal, nasal, administração por inalação e por supositórios, entre outras vias de administração. A forma de administração preferida é, geralmente, a forma oral utilizando um regime diário de dosagem conveniente, que pode ser ajustado, de acordo com o grau de aflição e a resposta do doente ao princípio activo.

Um composto ou os compostos da presente invenção, assim como os seus sais utilizáveis sob o ponto de vista farmacêutico, em conjunto com um ou mais excipientes, veículos ou diluentes convencionais podem ser transformados sob a forma de composições farmacêuticas e doses unitárias. As composições farmacêuticas e as formas de doses unitárias podem conter ingredientes convencionais nas proporções 55 convencionais, com ou sem a adição de compostos ou princípios activos adicionais e as formas farmacêuticas unitárias podem conter qualquer quantidade eficaz apropriada do princípio activo, modulada no intervalo de dosagem diária pretendido a ser utilizado. As composições farmacêuticas podem ser utilizadas sob a forma de sólidos, tal como, sob a forma de comprimidos ou cápsulas cheias, semi-sólidos, pós, formulações de libertação sustentada ou liquidos, tais como, soluções, suspensões, emulsões, elixires ou cápsulas cheias para administração oral; ou sob a forma de supositórios para administração rectal ou vaginal; ou sob a forma de soluções injectáveis esterilizadas para utilização parentérica. Uma preparação tipica conterá cerca de 5 % a cerca de 95 % do composto ou dos compostos activos (p/p). 0 termo "preparação" ou "forma de dosagem" incluem tanto as formulações sólidas como as liquidas de composto activo e um especialista na matéria entenderá que um principio activo pode existir em diferentes preparações consoante o órgão ou o tecido-alvo e na dose desejada e com os parâmetros farmacocinéticos desej ados. 0 termo "excipiente", tal como se utiliza aqui, refere-se a um composto que é útil na preparação de uma composição farmacêutico, de uma forma geral seguro, não tóxico e sem quaisquer outros efeitos biológicos e ainda outros indesejáveis e inclui excipientes que são aceitáveis para utilização veterinária, assim como, para utilização farmacêutica em seres humanos. Os compostos da presente invenção podem ser administrados isoladamente, mas serão geralmente administrados em mistura com um ou mais excipientes, diluentes ou veículos aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico, que se seleccionam consoante a via de administração pretendida e as práticas farmacêuticas normalizadas. 56 "Aceitável sob o ponto de vista farmacêutico" significa que é útil na preparação de uma composição farmacêutica, que é geralmente segura, não tóxica e sem quaisquer efeitos biológicos ou outros indesejáveis e inclui ainda que é aceitável para utilização veterinária, assim como, utilização farmacêutica em seres humanos.

Uma forma de "sal aceitável sob o ponto de vista farmacêutico", de um princípio activo, pode também conferir inicialmente uma propriedade farmacocinética desejável no principio activo que estariam ausentes numa forma de que não fosse um sal e podem mesmo afectar positivamente a farmacodinâmica do princípio activo no que respeita à sua actividade terapêutica no corpo. A expressão "sal aceitável sob o ponto de vista farmacêutico" de um composto, significa um sal que é aceitável sob o ponto de vista farmacêutico e que possui a desejada actividade farmacológica do composto parental. Esses sais incluem: (1) sais de adição de ácido formados com ácidos inorgânicos, tais como, ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido fosfórico e similares; ou formados com ácidos orgânicos, tais como, ácido acético, ácido propiónico, ácido hexanóico, ácido ciclopentanopropiónico, ácido glicólico, ácido pirúvico, ácido láctico, ácido malónico, ácido succínico, ácido málico, ácido maleico, ácido fumárico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido benzóico, ácido 3-(4-hidroxibenzoil)benzóico, ácido cinâmico, ácido mandélico, ácido metano-sulfónico, ácido etano-sulfónico, ácido 1,2-etano-di-sulfónico, ácido 2-hidroxietano-sulfónico, ácido benzeno-sulfónico, ácido 4-clorobenzeno-sulfónico, ácido 2-naftaleno-sulfónico, ácido 4-tolueno-sulfónico, ácido canfor-sulfónico, ácido 4-metilbiciclo[2,2,2]-oct-2-eno-l-carboxílico, ácido glico-heptónico, ácido 3-fenilpropiónico, ácido trimetilacético, 57 ácido butilacético terciário, ácido lauril-sulfúrico, ácido glucónico, ácido glutâmico, ácido hidroxinaftóico, ácido salicilico, ácido esteárico, ácido mucónico e similares; ou (2) sais formados quando um protão ácido presente no composto parental ou é substituído por um ião metálico, por exemplo, um ião de metal alcalino, um ião de metal alcalino-terroso ou um ião de alumínio; ou coordena-se com uma base orgânica, tal como, etanolamina, dietanolamina, trietanolamina, tro-metamina, N-metilglucamina e similares.

As preparações sob a forma sólida incluem pós, comprimidos, pílulas, cápsulas, hóstias, supositórios e grânulos dispersáveis. Um veículo sólido pode ser uma ou mais substâncias que possam também actuar como diluentes, agentes de aromatização, solubilizantes, lubrificantes, agentes de suspensão, ligantes, conservantes, agentes de desintegração de comprimidos ou material de encapsulação. Nos pós, o veículo geralmente é um sólido finamente dividido, que é uma mistura com o componente activo finamente dividido. Nos comprimidos, o componente activo geralmente mistura-se com o veículo, com a necessária capacidade ligação, em proporções apropriadas e compactado na forma e com a dimensão desejadas. Os veículos apropriados incluem, mas não se limitam a, carbonato de magnésio, estearato de magnésio, talco, açúcar, lactose, pectina, dextrina, amido, gelatina, tragacanto, metil-celulose, carboximetil-celulose sódica, cera de baixo ponto de fusão, manteiga de cacau e similares. As preparações sob a forma sólida podem conter, para além do princípio activo, corantes, aromatizantes, estabilizantes, tampões, adoçantes artificiais e naturais, dispersantes, espessantes, agentes de solubilização e similares.

As formulações líquidas que são também apropriadas para administração oral incluem formulações líquidas incluindo 58 emulsões, xaropes, elixires, soluções aquosas e suspensões aquosas. Estas incluem preparações sob a forma sólida que se pretende que sejam convertidas em preparações sob a forma liquida imediatamente antes da sua utilização. As emulsões podem ser preparadas em soluções, por exemplo, em soluções aquosas de propileno-glicol ou podem conter agentes emulsionantes, tais como, lecitina, mono-oleato de sorbitano ou acácia. As soluções aquosas podem ser preparadas por dissolução do componente activo em água e adição de corantes, aromatizantes, estabilizantes e agentes de espessamento apropriados. As suspensões aquosas podem ser preparadas por dispersão do componente activo finamente dividido em água com um material viscoso, tal como, gomas naturais ou sintéticas, resinas, metil-celulose, carboximetil-celulose sódica e outros agentes de suspensão bem conhecidos.

Os compostos da presente invenção podem ser formulados para administração parentérica (por exemplo, por injecção, por exemplo, injecção em bólus ou infusão continua) e podem estar presentes numa forma de dosagem unitária em ampolas, seringas pré-cheias, contentores de infusão de pequenos volumes ou em multi-doses com um conservante adicionado. As composições podem ter a forma de suspensões, soluções ou emulsões em veiculos oleosos ou aquosos, por exemplo, soluções em polietileno-glicol aquoso. Exemplos de veiculos, diluentes ou dissolvente oleosos ou não-aquosos incluem propileno-glicol, polietileno-glicol, óleos vegetais (por exemplo, azeite) e ésteres orgânicos injectáveis (por exemplo, oleato de etilo) e podem conter agentes de formulação, tais como, conservantes, agentes de molhagem, emulsionantes ou agentes de suspensão, estabilizantes e/ou agentes de dispersão. Alternativamente, o princípio activo pode estar sob a forma de pó, obtido por isolamento asséptico do sólido esterilizado ou por liofilização a partir de uma 59 solução para reconstituição antes da sua utilização com um veiculo apropriado, por exemplo, água esterilizada isenta de pirogénio.

Os compostos da presente invenção podem ser formulados para administração tópica à epiderme sob a forma de pomadas, cremes ou loções ou como adesivos transdérmicos. As pomadas e os cremes podem ser formulados, opor exemplo, com uma base aquosa ou oleosa, com adição de agentes espessantes e/ou de gelificação apropriados. As loções podem ser formuladas com uma base aquosa ou oleosa e geralmente conterão um ou mais agentes emulsionantes, agentes de estabilização, agentes dispersantes, agentes de suspensão, agentes de espessamento ou agentes corantes. As formulações apropriadas para administração tópica na boca incluem pastilhas contendo agentes activos com uma base aromatizada, normalmente, sacarose e acácia ou tragacanto; pastilhas contendo o principio activo numa base inerte, tal como gelatina e glicerina sacarose e acácia; e colutórios contendo o principio activo num veiculo liquido apropriado.

Os compostos da presente invenção podem ser formulados para administração como supositórios. Primeiro funde-se uma cera de baixo ponto de fusão, tal como uma mistura de glicéridos de ácido gordo ou manteiga de cacau e o componente activo é disperso homogeneamente, por exemplo, por agitação. A mistura homogénea fundida é então vertida em moldes com a dimensão convencional, que se deixam arrefecer e solidificar.

Os compostos da presente invenção podem ser formulados para administração vaginal. Supositórios vaginais, tampões, cremes, géis, pastas, espumas ou aerossóis contendo o principio activo, veículos que são conhecidos na técnica como sendo apropriados. 60

Os compostos da presente invenção podem ser formulados para administração nasal. As soluções ou suspensões são aplicadas directamente na cavidade nasal por meios convencionais, por exemplo, com um conta-gotas, uma pipeta ou um pulverizador. As formulações podem ser providenciadas sob a forma de doses simples ou múltiplas. Neste último caso, de um conta-gotas ou de uma pipeta, isto pode ser feito por meio da administração apropriada ao doente de um volume pré-determinado da solução ou suspensão. No caso de uma pulverização, pode conseguir-se, por exemplo, por meio de uma bomba medidora de pulverização por atomização.

Os compostos da presente invenção podem ser formulados para administração por aerossóis, particularmente para o trato respiratório e incluindo a administração intranasal. 0 composto terá normalmente uma dimensão de partícula pequena, por exemplo, da ordem de cinco (5) microns ou menos. Essa dimensão de partícula pode ser obtida por meios conhecidos na técnica, por exemplo, por micronização. 0 princípio activo é fornecido numa embalagem pressurizada com um propelente apropriado, tal como, clorofluorocarbono (CFC), por exemplo, diclorodifluorometano, triclorofluorometano ou dicloro-tetrafluoroetano ou dióxido de carbono ou outro gás apropriado. 0 aerossol pode também conter, de forma conveniente, um tensioactivo, tal como, lecitina. A dose de fármaco pode ser controlada por uma válvula medidora. Alternativamente, os princípios activos podem ser fornecidos sob a forma de um pó anidro, por exemplo, uma mistura do pó do composto numa base em pó apropriada, tal como, lactose, amido, derivados de amido, tal como, hidroxipropilmetil-celulose e polivinilpirrolidina (PVP). 0 veículo em pó vai formar um gel na cavidade nasal. A composição em pó pode apresentar-se sob a forma de dose unitária, por exemplo, em 61 cápsulas ou bolsas de, por exemplo, gelatina ou embalagens em blister a partir das quais o pó pode ser administrado por meio de um inalador.

Quando desejado, as formulações podem ser preparadas com revestimentos entéricos adaptados para administração com uma libertação sustentada ou controlada do principio activo. Por exemplo, os compostos da presente invenção podem ser formulados em dispositivos de administração de fármacos transdérmicos ou subcutâneos. Estes sistemas de administração são vantajosos quando é necessária a administração sustentada do composto e quando a tolerância do doente para um determinado regime de tratamento é crucial. Os compostos nos sistemas de libertação transdérmicos estão frequentemente ligados a um suporte sólido adesivo da pele. 0 composto de interesse pode também ser combinado com um melhorador da penetração, por exemplo, Azone (l-dodecilaza-ciclo-heptan-2-ona) . Os sistemas de administração por libertação sustentada são inseridos subcutaneamente na camada subdérmica por cirurgia ou injecção. Os implantes subdérmicos encapsulam o composto numa membrana solúvel de lípido, por exemplo, borracha de silicone ou um polimero biodegradável, por exemplo, ácido poliláctico.

As formulações apropriadas em conjunto com os veiculos, diluentes e excipientes farmacêuticos estão descritos em Remington: The Science and Practice of Pharmacy 1995, editado por Martin, Mack Publishing Company, 19a edição, Easton, Pennsylvania. Um cientista competente em formulações pode modificar as formulações com os ensinamentos da presente memória descritiva para providenciar numerosas formulações para uma via de administração particular sem tornar as composições da presente invenção instáveis e sem comprometer a sua identidade terapêutica. 62 A modificação dos compostos da presente invenção para os tornar solúveis em água ou noutros veículos, pode ser facilmente conseguida, por exemplo, por modificações menores (formulação de sais, esterificação, etc.), gue estão bem dentro das competências dos especialistas na técnica. Está também dentro das competências dos especialistas nesta técnica, modificar a via de administração e o regime de dosagem de um composto particular, de modo a gerir a farmacocinética dos compostos da presente invenção para obter um efeito benéfico máximo nos doentes. A expressão "quantidade eficaz sob o ponto de vista terapêutico", tal como se utiliza aqui, significa uma quantidade necessária para reduzir sintomas da doença num indivíduo. A dose será ajustada às necessidades individuais, em cada caso particular. Essa dose pode variar dentro de amplos limites consoante numerosos factores, tais como, gravidade da doença a ser tratada, idade e estado geral de saúde do doente, outros medicamentos com os quais o doente está a ser tratado, via e forma de administração e preferências e experiência do clínico envolvido. Para administração oral, pode ser apropriada uma dose diária entre cerca de 0,01 e cerca de 1.000 mg/kg de peso corporal por dia em monoterapia e/ou terapia de combinação. Uma dose diária preferida está entre cerca de 0,1 e cerca de 500 mg/kg de peso corporal, mais preferencialmente, 0,1 e cerca de 100 mg/kg de peso corporal e, ainda mais preferencialmente, 1,0 e cerca de 10 mg/kg de peso corporal por dia. Assim, para administração a uma pessoa com 70 kg, o intervalo da dose estará entre cerca de 7 mg a 0,7 g por dia. A dose diária pode ser administrada como uma dose única ou em doses divididas, normalmente entre 1 e 5 doses por dia. Geralmente, o tratamento é iniciado com doses mais pequenas que são 63 inferiores à dose óptima do composto. Depois, a dose é aumentada através de incrementos pequenos até se atingir um efeito óptimo para o doente. Um técnico no tratamento de doenças aqui descritas será capaz, sem experimentação desnecessária e baseando-se no seu conhecimento pessoal, na sua experiência e na descrição do presente pedido de patente, de acertar uma quantidade eficaz sob o ponto de vista terapêutico dos compostos da presente invenção para uma dada doença e um dado doente.

As preparações farmacêuticas estão preferencialmente em formas de dosaqem unitárias. Nessas formas, a preparação subdivide-se em doses unitárias contendo as quantidades apropriadas do componente activo. A forma de dosagem unitária pode ser uma preparação embalada, contendo essa embalagem quantidades discretas da preparação, tais como, comprimidos, cápsulas e pós embalados em frascos ou ampolas. A forma de dosagem unitária pode também ser uma cápsula, comprimido, hóstia ou pastilha ou pode estar sobre um certo número apropriado de qualquer uma destas formas numa forma embalada.

EXEMPLOS

Exemplo 1: Éster etilico do ácido 2-(3-bromo-fenil)-3-(3 — t — butil-fenilamino)-acrílico

Dissolveu-se o éster benzílico do ácido (3-bromo-fenil)-acético (1 g, 4,12 mmole) , em formato de etilo (8 mL, 99 mmole) . Adicionou-se hidreto de sódio (60 %, 660 mg, 16,5 mmole). Depois de se agitar durante a noite, parou-se a reacção com HC1 aquoso 2 M. Repartiu-se a reacção entre acetato de etilo e água. Lavou-se a camada de acetato de etilo com água, lavou-se com salmoura, secou-se com sulfato de magnésio anidro e concentrou-se in vacuo. 64

Agitou-se este material (0,65 g) e 3-t-butil-anilina (0,37 mL, 2,48 mmole), em 1 mL de etanol, durante 18 horas. Concentrou-se in vacuo e purificou-se por cromatografia rápida (gradiente de eluição com acetato de etilo/hexanos de 5 a 20 %), para se obter o éster etílico do ácido 2-(3-bromo-fenil)-3-(3-t-butil-fenilamino)-acrílico (0,5 mg). EM (ESI) 402 (M+H) +.

Exemplo 2: 3-(3-Bromo-fenil)-7-terc-butil-lH-quinolin-4-ona

Adicionou-se 10 g de ácido polifosfórico ao éster etílico do ácido 2-(3-bromo-fenil)-3-(3-terc-butil-fenilamino)-acrílico (151 mg, 0,388 mmole). Aqueceu-se a mistura resultante, a 140 °C, durante 90 minutos. Adicionou-se 80 mL de água. Agitou-se a mistura, durante 40 minutos. Filtrou-se o precipitado resultante, lavou-se com água e secou-se ao ar, durante 3 dias, para se obter 3-(3-bromo-fenil) -7-terc-butil-lH-quinolin-4-ona (123 mg, 0,345 mmole). EM (ESI) 356 (M+H)+.

Exemplo 3: 7-terc-Butil-3-[3-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]- dioxaborolan-2-il)-fenil]-lH-quinolin-4-ona

Colocou-se num recipiente selado 3-(3-bromo-fenil)-7-terc-butil-lH-quinolin-4-ona (119 mg, 0,334 mmole), bis-(pinacolato)diboro (102 mg, 0,401 mmole) e acetato de potássio (98 mg, 1,0 mmole) com 2 mL de DMSO. Fez-se borbulhar árgon através da mistura, durante 1 minuto. Adicionou-se um complexo de [1,1'-bis(difenilfosfino)-ferroceno]dicloropaládio(II), com DCM (8,0 mg, 0,0098 mmole). Fez-se borbulhar árgon através da mistura, durante um minuto e selou-se o recipiente. Aqueceu-se a mistura resultante, a 80 °C, durante 18 horas, antes de a repartir entre acetato de 65 etilo e água. Lavou-se a camada de acetato de etilo com salmoura, secou-se com sulfato de magnésio anidro, concentrou-se in vacuo e purificou-se por cromatografia rápida (gradiente de eluição com acetato de etilo/hexanos de 25 a 50 %) , para se obter a 7-terc-butil-3-[3- (4,4,5,5- tetrametil-[1,3,2]dioxaborolan-2-il)-fenil]-lH-quinolin-4-ona (77 mg, 0,19 mmole). EM (ESI) 404,1 (M+H)+.

Exemplo 4: 7-terc-Butil-3-(3-{l-metil-5-[5-(morfolino-4- carbonil)-piridin-2-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-i1}-fenil)-lH-quinolin-4-ona (11 — 1)

Levou-se a um microondas, a 170 °C, durante 12,5 minutos, uma solução de 5-bromo-l-metil-3-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2-ilamino]-lH-piridin-2-ona (19 mg, 0,050 mmole), 7-terc-butil-3-[3-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioxabo-rolan-2-il)-fenil]-lH-quinolin-4-ona (20 mg, 0,05 mmole), tetraquis(trifenilfosfino)paládio(0) (6,0 mg, 0,0052 mmole) e carbonato de sódio (16 mg, 0,15 mmole), em 2 mL de 1,2-dimetoxietano e 1 mL de água. Repartiu-se a mistura resultante entre acetato de etilo e água. Lavou-se a camada de acetato de etilo com salmoura, secou-se com sulfato de magnésio anidro, concentrou-se in vacuo e purificou-se por CCF preparativa (metanol/DCM a 5 %) , para se obter 7-terc-butil-3-(3-{l-metil-5-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il]-fenil)-lH-quinolin-4-ona (5,7 mg, 0,0085 mmole). EM (ESI) 590,1 (M+H)+.

Exemplo 5: Éster etílico do ácido 2-(3-bromo-2-metil-fenil)-3-(3-dimetilamino-fenilamino)-acrílico

Dissolveu-se o éster benzílico do ácido (3-bromo-2-metil-fenil)-acético (421 mg, 1,32 mmole), em formiato de etilo (2,5 mL, 31 mmole). Adicionou-se hidreto de sódio (95 66 %, 67 mg, 2,6 mmole) . Depois de se agitar, durante 30 minutos, parou-se a reacção com HC1 aquoso 1 M. Repartiu-se entre acetato de etilo e água. Lavou-se a camada de acetato de etilo com água, lavou-se com salmoura, secou-se com sulfato de magnésio anidro e concentrou-se in vacuo. Agitou-se uma porção deste material e N,N-dimetil-benzeno-1,3-diamina (96 mg, 0,70 mmole), em 1 mL de etanol, durante 18 horas. Concentrou-se in vacuo e purificou-se por cromatografia rápida (gradiente de eluição com acetato de etilo/hexanos de 5 a 20 %), para se obter o éster etilico do ácido 2-(3-bromo-2-metilfenil)-3-(3-dimetilamino-fenilamino)-acrilico (164 mg, 0,407 mmole). EM (ESI) 405,0 (M+H)+.

Exemplo 6: 3-(3-Bromo-2-metil-fenil)-7-dimetilamino-lH- quinolin-4-ona

Adicionou-se 4 g do ácido polifosfórico ao éster etilico do ácido 2-(3-bromo-2-metil-fenil)-3-(3-dimetilamino- fenilamino) -acrilico (100 mg, 0,248 mmole). Agitou-se, a 140 °C, durante 10 minutos. Adicionou-se 50 mL de água e agitou-se a mistura. Filtrou-se o precipitado resultante e lavou-se com água. Extraiu-se o filtrado com uma solução de metanol/DCM a 10 %. Secou-se a camada orgânica com sulfato de magnésio anidro e concentrou-se in vacuo. Combinou-se o resíduo resultante com o precipitado e purificou-se por cromatografia rápida (gradiente de eluição com metanol/DCM de 2 a 5 %) , para se obter 3-(3-bromo-2-metil-fenil)-7- dimetilamino-lH-quinolin-4-ona (22 mg, 0,062 mmole). EM (ESI) 357,0 (M+H) +.

Exemplo 7: l-Metil-3-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2- ilamino]-5-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioxaborolan-2-il)-1H-piridin-2-ona 67

Dissolveu-se 5-bromo-l-metil-3-[5-(morfolino-4-carbo-nil)-piridin-2-ilamino]-lH-piridin-2-ona (1,00 g, 2,55 mmole), bis (pinacolato)diboro (1,94 g, 7,64 mmole), acetato de potássio (750 mg, 7,64 mmole), 2-(diciclo-hexilfosfino) -2',4',6'-tri-i-propil-1,1'-bifenilo (121 mg, 0,254 mmole) e bis (dibenzilidinoacetona)paládio(0) (73 mg, 0,13 mmole), em 15 mL de 1,4-dioxano desgaseifiçado. Esvaziou-se a parte superior do recipiente e voltou a encher-se com árgon 5 vezes. Aqueceu-se a 110 °C, durante 3 horas. Repartiu-se entre acetato de etilo e água. Lavou-se a camada de acetato de etilo com salmoura, secou-se com sulfato de magnésio anidro, concentrou-se in vacuo e purificou-se por cromatografia rápida (gradiente de eluição com metanol/DCM de 2 a 8 %) , para se obter l-metil-3-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2-ilamino]-5-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioxaborolan-2-il)-lH-piridin-2-ona (0,798 g, 1,81 mmole). EM (ESI) 441,2 (M+H)+.

Exemplo 8: 7-Dimetilamino-3-(2-metil-3-{l-metil-5-[5- (morfolino-4-carbonil)-piridin-2-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il}-fenil)-lH-quinolin-4-ona (II-2) A l-metil-3-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2- ilamino]-5-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioxaborolan-2-il)-1H-piridin-2-ona (27 mg, 0,062 mmole), 3-(3-bromo-2-metil-fenil)-7-dimetilamino-lH-quinolin-4-ona (22 mg, 0,062 mmole), fosfato de potássio (26 mg, 0,12 mmole), 2-(diciclo-hexilfosfino)-2',4',6'-tri-i-propil-1,1'-bifenilo (1,7 mg, 0,0036 mmole) e bis-(dibenzilidinoacetona)paládio(0) (1,0 mg, 0,0018 mmole), adicionou-se 4 mL de água/n-butanol a 1:3 desgaseifiçado. Esvaziou-se a parte superior do recipiente e voltou a encher-se com árgon 4 vezes. Aqueceu-se a 100 °C, durante 1 hora. Repartiu-se entre acetato de etilo e água. Lavou-se a camada de acetato de etilo com salmoura, secou-se 68 com sulfato de magnésio anidro, concentrou-se in vacuo e purificou-se por CCF preparativa (metanol/DCM a 5 %), para se obter 7-dimetil-amino-3-(2-metil-3-{l-metil-5-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il}-fenil)-lH-quinolin-4-ona (14 mg, 0,024 mmole). EM (ESI) 591,1 (M+H) +.

Exemplo 9: 6-Fluoro-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona

Dissolveu-se 5-fluoro-indan-l-ona (4,00 g, 26,6 mmole), em 40 mL de DCM e 40 mL de ácido metano-sulfónico. Arrefeceu-se para 0 °C e adicionou-se azida de sódio (3,46 g, 53,2 mmole). Passadas 2 horas, tornou-se a solução básica pela adição, lentamente, de hidróxido de sódio aquoso a 20 %.

Repartiu-se a mistura resultante entre DCM e água. Secou-se a camada de DCM com sulfato de magnésio anidro, concentrou-se in vacuo e purificou-se por cromatografia rápida (gradiente de eluição com acetato de etilo/hexanos de 50 a 100 %), para se obter 6-fluoro-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona (2,72 g, 16,5 mmole). EM (ESI) 166,1 (M+H)+.

Exemplo 10: 6-Dimetilamino-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona

Colocou-se num recipiente fechado 6-fluoro-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona (1,56 g, 9,45 mmole) com 25 mL de dimetilamina em etanol a 33 %. Aqueceu-se a 150 °C, durante 7 horas. Repartiu-se a solução resultante entre acetato de etilo e água. Lavou-se a camada de acetato de etilo com salmoura, secou-se com sulfato de magnésio anidro, concentrou-se in vacuo e purificou-se por cromatografia rápida (eluição com acetato de etilo), para se obter 6-dimetilamino-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona (787 mg, 4,14 mmole). EM (ESI) 191,1 (M+H)+. 69

Exemplo 11: 2-(3-Bromo-fenil)-6-dimetilamino-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona

Colocou-se num recipiente selado 6-dimetilamino-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona (762 mg, 4,01 mmole), iodeto cuproso (153 mg, 0,802 mmole) e carbonato de potássio (554 mg, 4,01 mmole) . Adicionou-se 6 mL de DMSO e 1,3-dibromobenzeno (1,89 g, 8,01 mmole). Fez-se borbulhar árgon através da mistura, durante 2 minutos e fechou-se, cuidadosamente, o recipiente. Aqueceu-se a 150 °C, durante 24 horas. Adicionou-se iodeto cuproso (153 mg, 0,802 mmole) e aqueceu-se a mistura, a 150 °C, durante mais 24 horas.

Diluiu-se com diclorometano e filtrou-se através de uma almofada de celite. Repartiu-se o filtrado entre DCM e hidróxido de amónio aquoso a 5 %. Secou-se a camada de DCM com sulfato de magnésio anidro, concentrou-se in vacuo e purificou-se por cromatografia rápida (gradiente de eluição com acetato de etilo/hexanos de 25 a 100 %), para se obter 2-(3-bromo-fenil)-6-dimetilamino-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona (939 mg, 2,72 mmole). EM (ESI) 345,0 (M+H)+.

Exemplo 12: 6-Dimetilamino-2-[3-(4,4,5, 5-tetrametil-[1,3,2]-dioxaborolan-2-il)-fenil]-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona

Colocou-se num recipiente selado 2-(3-bromo-fenil)-6-dimetilamino-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona (163 mg, 0,472 mmole), bis(pinacolato)diboro (144 mg, 0,567 mmole) e acetato de potássio (138 mg, 1,42 mmole) com 2 mL de DMSO. Fez-se borbulhar árgon através da mistura, durante 1 minuto. Adicionou-se um complexo de [1,1'-bis(difenilfosfino)-ferroceno]dicloropaládio(II) com DCM (12 mg, 0,015 mmole). Continuou-se a fazer borbulhar o árgon através da mistura, 70 durante mais um minuto e fechou-se, cuidadosamente, o recipiente. Aqueceu-se, a 80 °C, durante 18 horas. Repartiu-se a mistura entre acetato de etilo e água. Lavou-se a camada de acetato de etilo com salmoura, secou-se com sulfato de magnésio anidro, concentrou-se in vacuo e purificou-se por cromatografia rápida (acetato de etilo/hexanos a 30 %) , para se obter 6-dimetilamino-2-[3-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]-dioxaborolan-2-il)-fenil]-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona (137 mg, 0,349 mmole). EM (ESI) 393,2 (M+H)+.

Exemplo 13: 6-Dimetilamino-2-(3-{l-metil-5-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-i1}-fenil)-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona (I — 1)

Aqueceu-se, a 170 °C, durante 12,5 minutos, num microondas, 5-bromo-l-metil-3-[5-(morfolino-4-carbonil)- piridin-2-ilamino]-lH-piridin-2-ona (67 mg, 0,17 mmole), 6-dimetilamino-2-[3-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioxaborolan-2-il)-fenil]-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona (67 mg, 0,17 mmole), tetraquis(trifenilfosfino)paládio(0) (20 mg, 0,017 mmole) e carbonato de sódio (54 mg, 0,51 mmole), em 2 mL de 1,2-dimetoxietano e 1 mL de água. Repartiu-se a mistura resultante entre acetato de etilo e água. Lavou-se a camada de acetato de etilo com salmoura, secou-se com sulfato de magnésio anidro, concentrou-se in vacuo e purificou-se por cromatografia rápida (gradiente de eluição com metanol/DCM de 2 a 5 %) , para se obter 6-dimetilamino-2-(3-{l-metil-5-[5- (morfolino-4-carbonil)-piridin-2-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il}-fenil)-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona (40 mg, 0,069 mmole). EM (ESI) 579,2 (M+H)+.

Exemplo 14: 6-Fluoro-2H-isoquinolin-l-ona 71

Dissolveu-se 6-fluoro-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona (149 mg, 0,903 mmole) em 3 mL de 1,4-dioxano. Fez-se borbulhar árgon através desta solução, durante 1 minuto e adicionou-se 2,3-dicloro-5,6-diciano-p-benzoquinona (205 mg, 0,903 mmole). Aqueceu-se, a 100 °C, durante 24 horas.

Repartiu-se a mistura resultante entre acetato de etilo e hidróxido de sódio aquoso 1 M. Lavou-se a camada de acetato de etilo com salmoura, secou-se com sulfato de magnésio anidro, concentrou-se in vacuo e purificou-se por cromatografia rápida (acetato de etilo/hexanos a 50 %), para se obter 6-fluoro-2H-isoquinolin-l-ona (54 mg, 0,33 mmole). EM (ESI) 164,1 (M+H)+.

Exemplo 15: 6-Dimetilamino-2H-isoquinolin-l-ona

Colocou-se num tubo selado 6-fluoro-2H-isoquinolin-l-ona (54 mg, 0,33 mmole) com 5 mL de dimetilamina, em etanol a 33 %. Aqueceu-se, a 150 °C, durante 3,5 horas. Concentrou-se in vacuo e purificou-se por cromatografia rápida (gradiente de eluição com acetato de etilo/hexanos de 50 a 100 %), para se obter 6-dimetilamino-2H-isoquinolin-l-ona (39 mg, 0,21 mmole). EM (ESI) 189,1 (M+H)+.

Exemplo 16: 2-(3-Bromo-fenil)-6-dimetilamino-2H-isoquinolin- 1-ona

Colocou-se num recipiente selado 6-dimetilamino-2H-isoquinolin-l-ona (39 mg, 0,21 mmole), iodeto cuproso (8,0 mg, 0,041 mmole) e carbonato de potássio (29 mg, 0,21 mmole). Adicionou-se 3 mL de DMSO e 1,3-dibromobenzeno (98 mg, 0,42 mmole). Fez-se borbulhar árgon através da mistura, durante 2 minutos e fechou-se cuidadosamente. Aqueceu-se, a 150 °C, durante 5 horas. Repartiu-se a mistura resultante entre acetato de etilo e água. Lavou-se a camada orgânica com 72 salmoura, secou-se com sulfato de magnésio anidro, concentrou-se in vacuo e purificou-se por cromatografia rápida (acetato de etilo/hexanos a 25 %), para se obter 2 —(3 — bromo-fenil)-6-dimetil-amino-2H-isoquinolin-l-ona (45 mg, 0,13 mmole). EM (ESI) 345,0 (M+H)+.

Exemplo 17: 6-Dimetilamino-2-(3-{l-metil-5-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il}-fenil)-2H-isoquinolin-l-ona (III-l) A l-metil-3-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2-il- amino]-5-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioxaborolan-2-il)-1H-piridin-2-ona (58 mg, 0,13 mmole), 2-(3-bromo-fenil)-6-dimetilamino-2H-isoquinolin-l-ona (45 mg, 0,13 mmole), fosfato de potássio (56 mg, 0,26 mmole), 2-(diciclo-hexilfosfino)-2',4',6'-tri-i-propil-1,1'-bifenilo (3,7 mg, 0, 0078 mmole) e bis (dibenzilidinoacetona)paládio(0) (2,2 mg, 0,0038 mmole), adicionou-se 4 mL de água/n-butanol a 1:3 desgaseifiçada. Esvaziou-se a parte superior do recipiente e encheu-se novamente com árgon 4 vezes. Aqueceu-se, a 100 °C, durante 2 horas. Repartiu-se entre acetato de etilo e água. Lavou-se a camada de acetato de etilo com salmoura, secou-se com sulfato de magnésio anidro, concentrou-se in vacuo e purificou-se por CCF preparativa (metanol/DCM a 5 %), para se obter 6-dimetilamino-2-(3-{l-metil-5-[5-(morfolino-4- carbonil)-piridin-2-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il}-fenil)-2H-isoquinolin-l-ona (45 mg, 0,078 mmole). EM (ESI) 577,1 (M+H)+.

Exemplo 18: 1,3-Dibromo-2-bromometil-benzeno

Dissolveu-se 2,6-dibromotolueno (2,50 g, 10,0 mmole), em 20 mL de tetracloreto de carbono. Adicionou-se N-bromo- 73 succinimida (1,87 g, 10,5 mmole) , seguido de peróxido de benzoílo (73 mg, 0,30 mmole). Aqueceu-se a mistura resultante, à temperatura de refluxo, durante 90 minutos. Adicionou-se 50 mL de éter de petróleo. Filtrou-se e concentrou-se in vacuo, para se obter 1,3-Dibromo-2-bromometil-benzeno (3,52 g, 10,7 mmole). RMN do XH (300 MHz, CDC13) δ 4,83 (s, 3H) , 7,02 (t, J = 8 Hz, 1H) e 7,55 (d, J = 8 Hz, 2H).

Exemplo 19: Éster 2,6-dibromo-benzilico do ácido acético A 1,3-dibromo-2-bromometil-benzeno (3,35 g, 10,2 mmole), adicionou-se acetato de potássio (4,00 g, 40,8 mmole) e 25 mL de N,N-dimetilformamida. Aqueceu-se, a 70 °C, durante 20 minutos. Repartiu-se a mistura resultante entre água e acetato de etilo. Lavou-se a camada de acetato de etilo com água, lavou-se com salmoura, secou-se com sulfato de magnésio anidro, concentrou-se in vacuo e purificou-se por cromatografia rápida (gradiente de eluição com acetato de etilo/hexanos de 0 a 5 %), para se obter o éster 2,6-dibromo-benzilico do ácido acético (1,92 g, 6,23 mmole) . RMN do XH (300 MHz, CDCI3) δ 2,12 (s, 3H), 5,42 (s, 2H), 7,08 (t, J = 8

Hz, 1H) e 7,58 (d, J = 8 Hz, 2H) .

Exemplo 20: Éster 2-bromo-6-(6-dimetilamino-l-oxo-lH- isoquinolin-2-il)-benzílico do ácido acético

Colocou-se num recipiente selado 6-dimetilamino-2H-isoquinolin-l-ona (50 mg, 0,27 mmole), éster 2,6-dibromo-benzilico do ácido acético (164 mg, 532 mmole), iodeto cuproso (10 mg, 0,053 mmole) e carbonato de potássio (37 mg, 0,27 mmole). Adicionou-se 3 mL de DMSO. Fez-se borbulhar árgon através da mistura, durante 2 minutos e fechou-se cuidadosamente. Aqueceu-se, a 150 °C, durante 5 horas. 74

Repartiu-se a mistura resultante entre acetato de etilo e água. Lavou-se a camada orgânica com salmoura, secou-se com sulfato de magnésio anidro, concentrou-se in vacuo e purificou-se por cromatografia rápida (gradiente de eluiçao com acetato de etilo/hexanos de 30 a 40 %) , para se obter o éster 2-bromo-6-(6-dimetilamino-l-oxo-lH-isoquinolin-2-il)-benzílico do ácido acético (48 mg, 0,12 mmole) . EM (ESI) 417,0 (M+H) +.

Exemplo 21: Éster 2-(6-dimetilamino-l-oxo-lH-isoquinolin-2-il)-6-(l-metil-5-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2-ilami-no]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il}-benzílico do ácido acético A l-metil-3-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2-il-

amino]-5-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioxaborolan-2-il)-1H-piridin-2-ona (43 mg, 0,097 mmole), éster 2-bromo-6-(6-dimetil-amino-l-oxo-lH-isoquinolin-2-il)-benzílico do ácido acético (40 mg, 0,097 mmole), fosfato de potássio (41 mg, 0,19 mmole), 2-(diciclo-hexilfosfino)-2',4',6'-tri-i-propil-1,1'-bifenilo (2,7 mg, 0,0057 mmole) e bis(dibenzilidin-oacetona)paládio(0) (1,6 mg, 0,0028 mmole), adicionou-se 4 mL de água/n-butanol a 1:3 desgaseifiçada. Esvaziou-se a parte superior do recipiente e encheu-se novamente com árgon 4 vezes. Aqueceu-se, a 100 °C, durante 110 minutos. Repartiu-se entre acetato de etilo e água. Lavou-se a camada de acetato de etilo com salmoura, secou-se com sulfato de magnésio anidro, concentrou-se in vacuo e purificou-se por cromatografia rápida (gradiente de eluição com metanol/DCM de 2 a 5 %) , para se obter o éster 2-(6-dimetilamino-l-oxo-lH-isoquinolin-2-il)-6-{l-metil-5-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il}-benzílico do ácido acético (33 mg, 0,051 mmole). EM (ESI) 649,2 (M+H)+. 75

Exemplo 22: 6-Dimetilamino-2-(2-hidroximetil-3-{l-metil-5-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2-ilamino]-6-oxo-l, 6-di-hidro-piridin-3-il}-fenil)-2H-isoquinolin-l-ona (III-3)

Ao éster 2-(6-dimetilamino-l-oxo-lH-isoquinolin-2-il)-6-{l-metil-5-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2-ilamino]-6-oxo-1,6-di-hidro-piridin-3-il}-benzilico do ácido acético (29 mg, 0,045 mmole) , em 2 mL de THF, 1 mL de metanol e 1 mL de água, adicionou-se uma solução aquosa de hidróxido de litio 1 M (0,13 mL, 0,13 mmole). Depois de se agitar, durante 18 horas, repartiu-se entre acetato de etilo e água. Lavou-se a camada de acetato de etilo com salmoura, secou-se com sulfato de magnésio anidro, concentrou-se in vacuo e purificou-se por CCF preparativa (metanol/DCM a 5 %) , para se obter 6-dimetilamino-2-(2-hidroximetil-3-{l-metil-5-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il}-fenil)-2H-isoquinolin-l-ona (20 mg, 0,033 mmole). EM (ESI) 607,2 (M+H)+.

Exemplo 23: 2-(3-Bromo-2-metil-fenil)-6-dimetilamino-2H- isoquinolin-l-ona

Colocou-se num recipiente selado 6-dimetilamino-2H-isoquinolin-l-ona (50 mg, 0,27 mmole), iodeto cuproso (10 mg, 0,053 mmole) e carbonato de potássio (37 mg, 0,27 mmole). Adicionou-se 3 mL de DMSO e 2,6-dibromotolueno (133 mg, 0,532 mmole). Fez-se borbulhar árgon através da mistura, durante 2 minutos e fechou-se cuidadosamente. Aqueceu-se, a 150 °C, durante 5 horas. Repartiu-se a mistura resultante entre acetato de etilo e água. Lavou-se a camada orgânica com salmoura, secou-se com sulfato de magnésio anidro, concentrou-se in vacuo e purificou-se por cromatografia rápida (acetato de etilo/hexanos a 30 %), para se obter 2 —(3 — 76 bromo-2-metil-fenil)-6-dimetil-amino-2H-isoquinolin-l-ona (43 mg, 0,12 mmole). EM (ESI) 357 (M+H)+.

Exemplo 24: 6-Dimetilamino-2-(2-metil)-3-{l-metil-5-[5- (morfolino-4-carbonil)-piridin-2-ilamino]-6-oxo-l, 6-di-hidro-piridin-3-il}-fenil)-2H-isoquinolin-l-ona (III-2) A l-metil-3-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2-il- amino]-5-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioxaborolan-2-il) -1H-piridin-2-ona (69 mg, 0,16 mmole), 2-(3-bromo-2-metil-fenil)-6-dimetilamino-2H-isoquinolin-l-ona (36 mg, 0,10 mmole), fosfato de potássio (43 mg, 0,20 mmole), 2-(diciclo-hexilfosfino)-2',4',6'-tri-i-propil-1,1'-bifenilo (2,9 mg, 0,0061 mmole) e bis-(dibenzilidinoacetona)paládio(0) (1,7 mg, 0,0030 mmole), adicionou-se 4 mL de água/n-butanol a 1:3 desgaseifiçada. Esvaziou-se a parte superior do recipiente e encheu-se novamente com árgon 4 vezes. Aqueceu-se, a 100 °C, durante 110 minutos. Repartiu-se entre acetato de etilo e água. Lavou-se a camada de acetato de etilo com salmoura, secou-se com sulfato de magnésio anidro, concentrou-se in vacuo e purificou-se por cromatografia rápida (gradiente de eluição com metanol/DCM a 2 a 10 %) , para se obter 6-dimetilamino-2-(2-metil-3-{l-metil-5-[5-(morfolino-4-carbo-nil)-piridin-2-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il}-fenil) -2H-isoquinolin-l-ona (46 mg, 0,078 mmole). EM (ESI) 591,1 (M+H) +.

Exemplo 25: 2-(3-Bromo-2-metil-fenil)-6-dimetilamino-3,4-di- hidro-2H-isoquinolin-l-ona

Colocou-se num recipiente selado 6-dimetilamino-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona (150 mg, 0,789 mmole), iodeto cuproso (30 mg, 0,16 mmole) e carbonato de potássio (109 mg, 0,789 mmole). Adicionou-se 3 mL de DMSO e 2, 6-dibromotolueno 77 (395 mg, 1,58 mmole). Fez-se borbulhar árgon através da mistura, durante 2 minutos e fechou-se cuidadosamente. Aqueceu-se, a 150 °C, durante 24 horas. Adicionou-se iodeto cuproso (30 mg, 0,16 mmole) e aqueceu-se a mistura, a 150 °C, durante mais 24 horas. Diluiu-se com diclorometano e filtrou-se através de uma almofada de celite. Repartiu-se o filtrado entre DCM e hidróxido de amónio aquoso a 5 %. Lavou-se a camada de DCM com salmoura. Lavaram-se as camadas aquosas combinadas com DCM. Secaram-se as camadas de DCM combinadas com sulfato de magnésio anidro, concentraram-se in vacuo e purificaram-se por cromatografia rápida (gradiente de eluição com acetato de etilo/hexanos de 25 a 50 %), para se obter 2-(3-bromo-2-metil-fenil)-6-dimetilamino-3,4-di-hidro-2H-iso-quinolin-l-ona (181 mg, 0,504 mmole). EM (ESI) 361,1 (M+H)+.

Exemplo 26: 6-Dimetilamino-2-(2-metil-3-{l-metil-5-[5-(mor-folino-4-carbonil)-piridin-2-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il}-fenil)-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona (1—3) A l-metil-3-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2-ilami-no]-5-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioxaborolan-2-il)-1H-piridin-2-ona (77 mg, 0,18 mmole), 2-(3-bromo-2-metil-fenil)-6-dimetilamino-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona (63 mg, 0,18 mmole), fosfato de potássio (74 mg, 0,35 mmole), 2-(diciclo-hexilfosfino)-2',4',6'-tri-i-propil-1,1'-bifenilo (5,0 mg, 0,010 mmole) e bis(dibenzilidinoacetona)paládio(0) (3,0 mg, 0,0052 mmole), adicionou-se 4 mL de água/n-butanol a 1:3 desgaseifiçada. Esvaziou-se a parte superior do recipiente e encheu-se novamente com árgon 4 vezes. Aqueceu-se, a 100 °C, durante 110 minutos. Repartiu-se entre acetato de etilo e 78 água. Lavou-se a camada de acetato de etilo com salmoura, secou-se com sulfato de magnésio anidro, concentrou-se in vacuo e purificou-se por cromatografia rápida (gradiente de eluição com metanol/DCM de 2 a 5 %), para se obter 6-dimetil-amino-2-(2-metil-3-{l-metil-5-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il}-fe-nil)-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona (33 mg, 0,056 mmole). EM (ESI) 593, 3 (M+H)\

Exemplo 27: Éster 2-bromo-6-(6-dimetilamino-l-oxo-3, 4-di-hidro-lH-isoquinolin-2-il)-benzílico do ácido acético

Colocou-se num recipiente selado 6-dimetilamino-3, 4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona (150 mg, 0,789 mmole), éster 2,6-dibromo-benzílico do ácido acético (487 mg, 1,58 mmole), iodeto cuproso (30 mg, 0,16 mmole) e carbonato de potássio (109 mg, 0,789 mmole). Adicionou-se 3 mL de DMSO. Fez-se borbulhar árgon através da mistura, durante 2 minutos e fechou-se cuidadosamente. Aqueceu-se, a 150 °C, durante 24 horas. Adicionou-se iodeto cuproso (30 mg, 0,16 mmole) e aqueceu-se a mistura, a 150 °C, durante mais 24 horas.

Diluiu-se com diclorometano e filtrou-se através de uma almofada de celite. Repartiu-se o filtrado entre DCM e hidróxido de amónio aquoso a 5 %. Secou-se a camada de DCM com sulfato de magnésio anidro, concentrou-se in vacuo e purificou-se por cromatografia rápida (gradiente de eluição com acetato de etilo/hexanos de 25 a 50 %) , para se obter o éster 2-bromo-6-(6-dimetilamino-l-oxo-3,4-di-hidro-lH- isoquinolin-2-il)-benzílico do ácido acético (93 mg, 0,22 mmole). EM (ESI) 417,1 (M+H)+.

Exemplo 28: 6-Dimetilamino-2-(2-hidroximetil-3-{l-metil-5-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il}-fenil)-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona (1-2) 79 A l-metil-3-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2-ilami-no]-5-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioxaborolan-2-il)-lH-piri-din-2-ona (60 mg, 0,14 mmole), éster 2-bromo-6-(6-dimetil-amino-l-oxo-3,4-di-hidro-lH-isoquinolin-2-il)-benzílico do ácido acético (46 mg, 0,11 mmole), fosfato de potássio (47 mg, 0,22 mmole), 2-(diciclo-hexilfosfino)-2', 4', 6'-tri-i-propil-1,1'-bifenilo (3,1 mg, 0,0065 mmole) e bis(di- benzilidinoacetona)paládio(0) (1,9 mg, 0033 mmole), adicionou-se 4 mL de água/n-butanol a 1:3 desgaseifiçada. Esvaziou-se a parte superior do recipiente e encheu-se novamente com árgon 4 vezes. Aqueceu-se, a 100 °C, durante 110 minutos. Repartiu-se entre acetato de etilo e água. Lavou-se a camada de acetato de etilo com salmoura, secou-se com sulfato de magnésio anidro e concentrou-se in vacuo. Dissolveu-se em 2 mL de THF, 1 mL de metanol e 1 mL de água. Adicionou-se uma solução aquosa de hidróxido de litio 1 M (0,33 mL, 0,33 mmole). Depois de se agitar, durante 18 horas, repartiu-se a mistura resultante entre acetato de etilo e água. Lavou-se a camada de acetato de etilo com salmoura, secou-se com sulfato de magnésio anidro, concentrou-se in vacuo e purificou-se por cromatografia rápida (gradiente de eluição com metanol/DCM de 2 a 5 %) , para se obter 6- dimetilamino-2-(2-hidroximetil-3-{l-metil-5-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il}-fenil)-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona (36 mg, 0,059 mmole). EM (ESI) 609,1 (M+H)+.

Exemplo 29: Éster 2-bromo-6-(6-metilamino-l-oxo-3,4-di-hidro-lH-isoquinolin-2-il)-benzílico do ácido acético A uma solução de éster 2-bromo-6-(6-dimetilamino-l-oxo-3,4-di-hidro-lH-isoquinolin-2-il)-benzílico do ácido acético (224 mg, 0,482 mmole), em 5 mL de 1,4-dioxano, adicionou-se 80 2,3-dicloro-5, β-diciano-p-benzoquinona (109 mg, 0,48 iranole). Depois de se agitar, durante 4 horas, repartiu-se entre acetato de etilo e NaOH aquoso 1 M. Lavou-se a camada orgânica com água, lavou-se com salmoura, secou-se com sulfato de magnésio anidro, concentrou-se in vacuo e purificou-se por cromatografia rápida (gradiente de eluição com acetato de etilo/hexanos de 40 a 50 %), para se obter o éster 2-bromo-6-(6-metilamino-l-oxo-3,4-di-hidro-lH-isoquino-lin-2-il)-benzílico do ácido acético (93 mg, 0,23 mmole). EM (ESI) 404, 8 (M+H)+.

Exemplo 30: 2-(2-Hidroximetil-3-{l-metil-5-[5-(morfolino-4- carbonil)-piridin-2-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il)-fenil)-6-metilamino-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona

A l-metil-3-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2-ilami-no]-5-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioxaborolan-2-il)-lH-piri-din-2-ona (96 mg, 0,22 mmole), éster 2-bromo-6-(6-metilamino- 81 1- oxo-3,4-di-hidro-lH-isoquinolin-2-il)-benzílico do ácido acético (88 mg, 0,22 mmole), fosfato de potássio (46 mg, 0,22 mmole), 2-(diciclo-hexilfosfino)-2',4',6'-tri-i-propil-1,1'- bifenilo (6,2 mg, 0,013 mmole) e bis(dibenzilidinoacetona)-paládio(0) (3,7 mg, 0064 mmole), adicionou-se 4 mL de água/n- butanol a 1:3 desgaseifiçada. Esvaziou-se a parte superior do recipiente e encheu-se novamente com árgon 4 vezes. Aqueceu-se, a 100 °C, durante 2 horas. Repartiu-se entre acetato de etilo e água. Lavou-se a camada de acetato de etilo com salmoura, secou-se com sulfato de magnésio anidro e concentrou-se in vacuo. Dissolveu-se em 2 mL de THF, 1 mL de metanol e 1 mL de água. Adicionou-se uma solução aquosa de hidróxido de litio 1 M (0,65 mL, 0,65 mmole). Depois de se agitar durante 18 horas, repartiu-se a mistura resultante entre acetato de etilo e água. Lavou-se a camada de acetato de etilo com salmoura, secou-se com sulfato de magnésio anidro, concentrou-se in vacuo e purificou-se por CCF preparativa (metanol/DCM a 5 %), para se obter 2—(2— hidroximetil-3-{l-metil-5-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin- 2- ilamino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il}-fenil)-6-metil-amino-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona (43 mg, 0,072 mmole). EM (ESI) 595 (M+H)+.

Exemplo 31: Éster 2-(6-dimetilamino-l-oxo-3,4-di-hidro-lH-isoquinolin-2-il)-6-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioxaborolan-2-il)-benzílico do ácido acético

Ao éster 2-bromo-6-(6-dimetilamino-l-oxo-3, 4-di-hidro-lH-isoquinolin-2-il)-benzílico do ácido acético (422 mg, 1,01 mmole), bis(pinacolato)diboro (308 mg, 1,21 mmole) e acetato de potássio (298 mg, 3,03 mmole), num tubo selado, adicionou-se 5 mL de sulfóxido de dimetilo. Fez-se borbulhar árgon através da mistura, durante 3 minutos. Adicionou-se um complexo de [1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]-dicloro- 82 paládio(II) com DCM (25 mg, 0,030 mmole). Continuou-se a fazer borbulhar árgon através da mistura, durante mais um minuto e fechou-se cuidadosamente. Aqueceu-se, a 80 °C, durante 18 horas. Repartiu-se entre acetato de etilo e água. Lavou-se a camada de acetato de etilo com salmoura, secou-se com sulfato de magnésio anidro, concentrou-se in vacuo e purificou-se por cromatografia rápida (gradiente de eluição com acetato de etilo/hexanos de 30 a 50 %) , para se obter o éster 2-(6-dimetilamino-l-oxo-3,4-di-hidro-lH-isoquinolin-2-il)—6—(4,4,5,5-tetrametil-[l,3,2]dioxaborolan-2-il)-benzilico do ácido acético (251 mg, 0,541 mmole) . EM (ESI) 487,2 (M+Na)+.

Exemplo 32: 6-Dimetilamino-2-{2-hidroximetil-3-[l-metil-5-(1-metil-lH-pirazol-3-ilamino)-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il]-fenil}-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona

Dissolveu-se 5-bromo-l-metil-3-(l-metil-lH-pirazol-3-il-amino)-lH-piridin-2-ona (35 mg, 0,13 mmole), éster 2 —(6 — dimetilamino-l-oxo-3,4-di-hidro-lH-isoquinolin-2-il) -6-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioxaborolan-2-il)-benzilico do ácido acético (58 mg, 0,13 mmole), tetraquis(trifenilo-fosfino)paládio(0) (14 mg, 0,012 mmole) e carbonato de sódio (40 mg, 0,38 mmole), em 2 mL de 1,2-dimetoxietano e 1 mL de água. Levou-se a um microondas, a 120 °C, durante 30 minutos. Repartiu-se entre acetato de etilo e água. Lavou-se a camada orgânica com salmoura, secou-se com sulfato de magnésio 83 anidro e concentrou-se in vácuo. Dissolveu-se em 3 mL de THF, 1,5 mL de metanol e 1,5 mL de água. Adicionou-se uma solução aquosa de hidróxido de litio 1 M (0,38 mL, 0,38 mmole). Agitou-se durante 3 horas. Repartiu-se entre acetato de etilo e água. Lavou-se a camada orgânica com salmoura, secou-se com sulfato de magnésio anidro, concentrou-se in vacuo e purificou-se por CCF preparativa (metanol/DCM a 5 %), para se obter 6-dimetilamino-2-{2-hidroximetil-3-[l-metil-5-(1-metil-lH-pirazol-3-ilamino)-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il]-fe-nil}-3, 4-di-hidro-2H-isoqui-nolin-l-ona (39 mg, 0,078 mmole). EM (ESI) 499,2 (M+H)+.

Exemplo 33: l-Metil-4-(6-nitro-piridin-3-il)-piperazina A 5-bromo-2-nitro-piridina (2,00 g, 9,85 mmole), em 10 mL de sulfóxido de dimetilo, adicionou-se carbonato de potássio (2,72 g, 19,7 mmole), 1-metilpiperazina (1,64 mL, 14,8 mmole) e iodeto de tetra-butilamónio (36 mg, 0,097 mmole) e aqueceu-se, a 120 °C, durante 18 horas. Acidificou-se a mistura com HC1 aquoso 1 M e repartiu-se entre DCM e água. Tornou-se a camada aquosa básica com carbonato de sódio aquoso 2 M e extraiu-se com DCM. Secou-se a camada orgânica com sulfato de magnésio anidro, concentrou-se in vacuo e triturou-se com água, para se obter l-metil-4-(6-nitro-piridin-3-il)-piperazina (1,82 g, 8,19 mmole). EM (ESI) 223, 1 (M+H)+.

Exemplo 34: 5-(4-Metil-piperazin-l-il)-piridin-2-ilamina

Agitou-se l-metil-4-(6-nitro-piridin-3-il)-piperazina (1,748 g, 7,865 mmole), em 30 mL de metanol, com 175 mg de paládio em carvão a 10 %, em atmosfera de hidrogénio gasoso, durante 5 horas. Filtrou-se e concentrou-se in vacuo, para se 84 obter 5-(4-metil-piperazin-l-il)-piridin-2-ilamina (1,485 g, 7,724 iranole). EM (ESI) 193,1 (M+H)+.

Exemplo 35: 5-Bromo-l-metil-3-[5-(4-metil-piperazin-l-il)- piridin-2-ilamino]-lH-piridin-2-ona

A 5-(4-metil-piperazin-l-il)-piridin-2-ilamina (1,06 g, 5,53 mmole), 3,5-dibromo-l-metil-lH-piridin-2-ona (1,23 g, 4,61 mmole), 4,5-bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilfosfina (400 mg, 0,691 mmole) e carbonato de césio (4,50 g, 13,8 mmole), adicionou-se 45 mL de 1,4-dioxano e tris(dibenzilidinoaceto-na)dipaládio(0) (422 mg, 0,461 mmole). Aqueceu-se, a 120 °C, num banho de óleo, durante 6 horas, em atmosfera de árgon. Repartiu-se entre acetato de etilo e bicarbonato de sódio aquoso diluído. Lavou-se a camada orgânica com salmoura, secou-se com sulfato de magnésio anidro, concentrou-se in vacuo e purificou-se por cromatografia rápida (gradiente de eluição com metanol/DCM de 2 a 5 %), para se obter 5-bromo-l-metil-3-[5-(4-metil-piperazin-l-il)-piridin-2-ilamino]-lH-pi-ridin-2-ona (484 mg, 1,28 mmole). EM (ESI) 380,0 (M+H)+.

Exemplo 36: 5-Bromo-l-metil-3-(5-morfolin-4-il-piridin-2- ilamino)-lH-piridin-2-ona

Br 85

Preparou-se este composto de uma forma análoga a 5-bromo-l-metil-3-[5-(4-metil-piperazin-l-il)-piridin-2-ilami-no]-lH-piridin-2-ona. EM (ESI) 365,0 (M+H)+.

Exemplo 37: 6-(Etil-metil-amino)-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin- 1-ona

Colocou-se num tubo selado 6-fluoro-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona (2,00 g, 12,1 mmole) com N-etilmetilamina (4,0 mL, 47 mmole). Aqueceu-se, a 150 °C, durante 24 horas. Concentrou-se in vacuo e purificou-se por cromatografia rápida (eluição com acetato de etilo), para se obter 6- (etil-metil-amino) -3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona (2,10 g, 10,3 mmole). EM (ESI) 205,1 (M+H)+.

Exemplo 38: Éster 2-bromo-6-[6-(etil-metil-amino)-l-oxo-3, 4-di-hidro-lH-isoquinolin-2-il]-benzilico do ácido acético

Colocou-se num recipiente selado 6-(etil-metil-amino)-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona (2,07 g, 10,1 mmole), éster 2,6-dibromo-benzilico do ácido acético (6,25, 20,3 mmole), iodeto cuproso (386 mg, 2,03 mmole) e carbonato de potássio (1,40, 10 , 1 mmole) . Adicionou-se 30 mL de DMSO. Fez- •se borbulhar árgon através da mistura, durante 3 minutos e fechou-se cuidadosamente. Aqueceu-se, a 150 ° C, durante 24 86 horas. Adicionou-se iodeto cuproso (386 mg, 2,03 mmole) e aqueceu-se a mistura, a 150 °C, durante mais 24 horas. Diluiu-se com 300 mL de acetato de etilo e 300 mL de água. Depois de se agitar, durante 20 minutos, filtrou-se através de uma almofada de celite. Separaram-se as camadas. Secou-se a camada de acetato de etilo com sulfato de magnésio anidro, concentrou-se in vacuo e purificou-se por cromatografia rápida (gradiente de eluição com acetato de etilo/hexanos de 25 a 50 %) , para se obter o éster 2-bromo-6-[6-(etil-metil-amino)-l-oxo-3,4-di-hidro-lH-isoquinolin-2-il]-benzílico do ácido acético (1,21 g, 2,81 mmole). EM (ESI) 433,0 (M+H)+.

Exemplo 39: 5-Bromo-l-metil-3-(l-metil-lH-pirazol-3-ilamino)-lH-piridin-2-ona

Colocou-se num recipiente selado 3,5-dibromo-l-metil-lH-piridin-2-ona (469 mg, 1,76 mmole), l-metil-lH-pirazol-3-ilamina (205 mg, 2,11 mmole), tris(dibenzilidinoacetona)-dipaládio(O) (80 mg, 0,087 mmole), 2,2'-bis(difenilfosfino-1, 1' -binaftaleno (82 mg, 0,13 mmole) e carbonato de césio (801 mg, 2,46 mmole) com 10 mL de tolueno. Aqueceu-se, a 130 °C, durante 18 horas. Verteu-se a mistura resultante em 50 mL de água. Extraiu-se com acetato de etilo. Lavou-se a camada de acetato de etilo com salmoura, secou-se com sulfato de magnésio anidro, filtrou-se, concentrou-se in vacuo e purificou-se por cromatografia rápida (eluição com acetato de etilo/hexanos), para se obter 5-bromo-l-metil-3-(1-metil-lH-pirazol-3-ilamino)-lH-piridin-2-ona (271 mg, 0,957 mmole). EM (ESI) 284, 9 (M+H)+.

Exemplo 40: Éster 2-(6-dimetilamino-l-oxo-lH-isoquinolin-2-il)—6—(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioxaborolan-2-il)-benzilico do ácido acético 87

Ao éster 2-bromo-6-(6-dimetilamino-l-oxo-lH-isoquinolin-2-il)-benzílico do ácido acético (420 mg, 1,01 mmole), bis-(pinacolato)diboro (308 mg, 1,21 mmole) e acetato de potássio (298 mg, 3,03 mmole), num tubo selado, adicionou-se 5 mL de sulfóxido de dimetilo. Fez-se borbulhar árgon através da mistura, durante 3 minutos. Adicionou-se um complexo de [1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaládio(II) com DCM (25 mg, 0,030 mmole). Continuou-se a fazer borbulhar árgon através da mistura, durante mais um minuto e fechou-se cuidadosamente. Aqueceu-se, a 80 °C, durante 18 horas.

Repartiu-se entre acetato de etilo e água. Lavou-se a camada de acetato de etilo com salmoura, secou-se com sulfato de magnésio anidro, concentrou-se in vacuo e purificou-se por cromatografia rápida (gradiente de eluição com acetato de etilo/hexanos de 25 a 50 %) , para se obter o éster 2 — (6 — dimetil-amino-l-oxo-lH-isoquinolin-2-il)-6-(4,4,5,5-tetrame-til-[1,3,2]dioxaborolan-2-il)-benzilico do ácido acético (183 mg, 0,396 mmole). EM (ESI) 463,1 (M+H)+.

Exemplo 41: 6-Dimetilamino-2-{2-hidroximetil-3-[l-metil-5-(1-metil-lH-pirazol-3-ilamino)-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il]-fenil}-2H-isoquinolin-l-ona

Dissolveu-se 5-bromo-l-metil-3-(l-metil-lH-pirazol-3-ilamino)-lH-piridin-2-ona (47 mg, 0,17 mmole), éster 2-(6-dimetilamino-l-oxo-lH-isoquinolin-2-il)-6-(4,4,5,5-tetrame- 88 til-[1,3,2]dioxa-borolan-2-il)-benzílico do ácido acético (77 mg, 0,17 mmole), tetraquis(trifenilfosfino)paládio(0) (19 mg, 0,016 mmole) e carbonato de sódio (53 mg, 0,50 mmole), em 2 mL de 1,2-dimetoxietano e 1 mL de água. Levou-se a um microondas, a 120 °C, durante 30 minutos. Repartiu-se entre acetato de etilo e água. Lavou-se a camada orgânica com salmoura, secou-se com sulfato de magnésio anidro e concentrou-se in vacuo. Dissolveu-se em 3 mL de THF, 1,5 mL de metanol e 1,5 mL de água. Adicionou-se uma solução aquosa de hidróxido de litio 1 M (0,5 mL, 0,5 mmole). Agitou-se, durante 3 horas. Repartiu-se entre acetato de etilo e água. Lavou-se a camada orgânica com salmoura, secou-se com sulfato de magnésio anidro, concentrou-se in vacuo e purificou-se por CCF preparativa (eluição com metanol/DCM a 5 %) , para se obter 6-dimetilamino-2-{2-hidroximetil-3-[l-metil-5-(1-metil-lH-pirazol-3-ilamino)-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il]-fe-nil}-2H-isoquinolin-l-ona (37 mg, 0,075 mmole). EM (ESI) 497, 1 (M+H) +.

Exemplo 42: 1-{5-[ 3-( 6-Dimetilamino-l-oxo-lH-isoquinolin-2- il)-2-hidroximetil-fenil]-l-metil-2-oxo-l,2-di-hidro-piridin-3-il}-3-etil-ureia

A l-etil-3-[l-metil-2-oxo-5-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]— dioxaborolan-2-il)-1,2-di-hidro-piridin-3-il]-ureia (50 mg, 0,16 mmole), éster 2-bromo-6-(6-dimetilamino-l-oxo-lH-iso-quinolin-2-il)-benzílico do ácido acético (65 mg, 0,16 89 mmole), fosfato de potássio (66 mg, 0,31 mmole) , 2-(diciclo-hexilfosfino)-2',4',6'-tri-i-propil-1,1'-bifenilo (4,4 mg, 0,0092 mmole) e bis-(dibenzilidinoacetona)paládio(0) (2,6 mg, 0,0045 mmole), adicionou-se 4 mL de água/n-butanol a 1:3 desgaseifiçada. Esvaziou-se a parte superior do recipiente e encheu-se novamente com árgon 4 vezes. Aqueceu-se a 100 °C, durante 2 horas. Repartiu-se entre acetato de etilo e água. Lavou-se a camada de acetato de etilo com salmoura, secou-se com sulfato de magnésio anidro e concentrou-se in vacuo. Dissolveu-se em 2 mL de THF, 1 mL de metanol e 1 mL de água. Adicionou-se uma solução aquosa de hidróxido de litio 1 M (0,47 mL, 0,47 mmole). Depois de se agitar, durante 3 horas, repartiu-se a mistura resultante entre acetato de etilo e água. Lavou-se a camada de acetato de etilo com salmoura, secou-se com sulfato de magnésio anidro, concentrou-se in vacuo e purificou-se por CCF preparativa (metanol/DCM a 5 %), para se obter 1-{5-[3-(6-dimetilamino-l-oxo-lH-isoquinolin-2-il)-2-hidroximetil-fenil]-l-metil-2-oxo-l,2-di-hidro-piridin-3-il{-3-etil-ureia (33 mg, 0,068 mmole). EM (ESI) 488,1 (M+H)+.

Exemplo 43: 5-Bromo-l-metil-3-(5-morfolin-4-ilmetil-piridin-2-ilamino)-lH-piridin-2-ona

Dissolveu-se 5-bromo-l-metil-3-[5-(morfolino-4-carbo-nil)-piridin-2-ilamino]-lH-piridin-2-ona (2,3 g, 5,9 mmole), em 30 mL de THF. Adicionou-se um complexo de borano e THF (2,5 g, 29 mmole). Depois de se agitar, durante 18 horas, concentrou-se in vacuo. Adicionou-se etanol. Fez-se o 90 refluxo, durante uma hora. Concentrou-se in vacuo e purificou-se por cromatografia rápida, para se obter 5-bromo-l-metil-3-(5-morfolin-4-ilmetil-piridin-2-ilamino)-lH-piri-din-2-ona (500 mg, 1,32 mmole). EM (ESI) 381,0 (M+H)+.

Exemplo 44: (6-Cloro-piridin-3-il)-(4-metil-piperazin-l-il)-metanona A uma solução de ácido 6-cloro-nicotinico (3,00 g, 19,0 mmole), em 30 mL de dimetilformamida, adicionou-se hexa-fluorofosfato de (benzotriazol-l-iloxi)tripirrolidino- fosfónio (10,9 g, 20,9 mmole), 1-metilpiperazina (2,30 g, 22,1 mmole) e trietilamina (2,18 g, 21,5 mmole). Depois de se agitar durante 18 horas, repartiu-se entre acetato de etilo e água. Secou-se a camada de acetato de etilo com sulfato de sódio anidro, concentrou-se in vacuo e purificou-se por cromatografia rápida (eluição com metanol/DCM a 3 %), para se obter (6-cloro-piridin-3-il)-(4-metil-piperazin-l-il)-metanona (2,50 g, 9,33 mmole) .

Exemplo 45: 5-Bromo-l-metil-3-[5-(4-metil-piperazino-l- carbonil)-piridin-2-ilamino]-lH-piridin-2-ona

A uma solução de (6-cloro-piridin-3-il)-(4-metil-piperazin-l-il) -metanona (2,00 g, 7,46 mmole), em 10 mL de dimetilformamida, adicionou-se 3-amino-5-bromo-l-metil-lH-piridin-2-ona (1,80 g, 8,95 mmole) e hidreto de sódio (537 mg, 22,4 mmole). Depois de se agitar durante 18 horas, parou-se a reacção com água. Extraiu-se com acetato de etilo. 91

Secou-se a camada de acetato de etilo com sulfato de sódio anidro, concentrou-se in vacuo e purificou-se por cromatografia rápida (gradiente de eluição com metanol/DCM de 0 a 5 %) , para se obter 5-bromo-l-metil-3-[5-(4- metilpiperazino-l-carbonil)-piridin-2-ilamino]-lH-piridin-2-ona (900 mg, 1,94 mmole). EM (ESI) 406,0 (M+H)+.

Exemplo 56: 6-Cloro-piridazin-3-ilamina

Dissolveu-se 3,6-dicloro-piridazina (7,5 g, 50,35 mmole) em amónia etanólica (100 mL) e aqueceu-se, a 130 °C, durante a noite numa caldeira. Depois o etanol evaporou-se a pressão reduzida e purificou-se o produto impuro por cromatografia rápida em gel de silica (230-400 mesh), utilizando EtOAc/hexano (6:4), para se obter o composto do titulo (4 g, 61 %), sob a forma de um sólido.

Exemplo 57: 4-Bromo-6-cloro-piridazin-3-ilamina A uma solução de 6-cloro-piridazin-3-ilamina (4 g, 31 mmole), em metanol (60 mL) , adicionou-se NaHCCç (5,2 g, 62 mmole). Agitou-se a mistura reaccional, durante 30 minutos, à TA e depois adicionou-se, gota-a-gota, Br2 (4,9 g, 31 mmole). Depois, agitou-se a mistura resultante durante mais 16 h, à TA. Depois de a reacção estar completa, concentrou-se a massa reaccional a pressão reduzida, purificou-se o produto impuro por cromatografia em gel de silica (100-200 mesh), utilizando EtOAc/hexano (8:2), para se obter 4-bromo-6-cloro-piridazin-3-ilamina (2,3 g, 36 %), sob a forma de um sólido.

Exemplo 58: 4-Bromo-6-cloro-2íí-piridazin-3-ona A uma solução arrefecida (0-5 °C) de NaN02 (1 g, 13,20 mmole), em H2S04 concentrado (15 mL), adicionou-se 4-bromo-6-cloro-piridazin-3-ilamina (2,3 g, 11 mmole), em 50 mL de 92 ácido acético. Depois agitou-se a mistura reaccional, durante 1 h, a 20 °C, seguida da adição de água (75 mL) e agitou-se continuamente, durante 5 h, à TA. Extraiu-se a mistura reaccional com EtOAc, secou-se com Na2SC>4, concentrou-se a pressão reduzida e purificou-se o produto impuro por cromatografia em gel de silica (100-200 mesh), utilizando EtOAc/hexano (8:2), para se obter 4 (2,2 g, 95 %) , sob a forma de um sólido amarelado.

Exemplo 59: 4-Bromo-6-cloro-2-metil-2H-piridazino-3-ona

Dissolveu-se 4-bromo-6-cloro-2H-piridazin-3-ona (5,02 g, 23,97 mmole), em 40 mL de dimetilformamida. Adicionou-se carbonato de césio (9,37 g# 28,76 mmole). Passados 5 min, adicionou- se, gota-a-gota, iodometano (5,103 g, 35,95 mmole), durante 20 min. Agitou-se a mistura reaccional, durante 3 horas, à TA. Filtrou-se o precipitado e concentrou-se e tratou-se o residuo resultante com 20 mL de DCM. Filtrou-se o material insolúvel novamente e lavou-se com DCM. Concentrou-se o filtrado in vacuo, para se obter 4-bromo-6-cloro-2-metil-2H-piridazino-3-ona (5,223 g, 23,37 mmole). EM (ESI) 224, 9 (M+H) +.

Exemplo 60: 6-Cloro-2-metil-4-(l-metil-lH-pirazol-3-ilamino)-2H-piridazin-3-ona

Dissolveu-se l-metil-lH-pirazol-3-amina (806 mg, 8,3 mmole), em 40 mL de dioxano. Adicionou-se terc-butóxido de potássio (1,793 g, 15,98 mmole). Finalmente, adicionou-se 4-bromo-6-cloro-2-metil-2H-piridazino-3-ona (1,7 g, 7,61 mmole) e agitou-se a mistura, durante 3 horas, à TA. Transferiu-se a mistura reaccional para um tubo de Erlenmeyer de 150 mL e acidificou-se com 15 mL de uma solução aquosa de ácido clorídrico 1 M, depois tratou-se com uma solução saturada de 93 bicarbonato de sódio, até se atingir um pH próximo de 8. Extraiu-se, duas vezes, com 100 mL de DCM de cada vez; e secou-se a fase orgânica com sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se in vacuo, para se obter 1,5 g de um sólido cor-de-laranja claro. Triturou-se este material impuro com uma mistura de DCM e hexano. Filtrou-se a suspensão e secou-se o bolo do filtro resultante em vácuo forte, para se obter 6-cloro-2-metil-4-(l-metil-lH-pirazol-3-ilamino)-2H-piridazin-3-ona (967 mg, 4,03 mmole). EM (ESI) 240,0 (M+H)+.

Exemplo 61: Éster 2-(6-ciclopropil-l-oxo-3,4-di-hidro-lH- isoquinolin-2-il)-6-[l-metil-5-(l-metil-lH-pirazol-3-ilami-no)-6-oxo-l,6-di-hidro-piridazin-3-il]-benzilico do ácido acético

Tratou-se 6-cloro-2-metil-4-(l-metil-lH-pirazol-3-ilami-no)-2H-piridazin-3-ona (0,09 g, 0,376 mmole), éster 2 —(6 — ciclopropil-l-oxo-3,4-di-hidro-lH-isoquinolin-2-il)-6-(4, 4,5-tetrametil-[1,3,2]dioxaborolan-2-il)-benzilico do ácido acético (0, 191 g, 0,414 mmo1e) e carbonato de césio (0, 428 g, 1,31 mmole ) com uma solução desgaseifiçada de 2 mL de dioxano/0,2 mL de água. Depois de se agitar, durante 5 min, adicionou-se um complexo [1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]-dicloropaládio(II) (0,031 g, 0,038 mmole) e aqueceu-se, a 135 °C, durante 30 min, num microondas. Filtrou-se a mistura reaccional com celulose, lavou-se com 10 mL de dioxano e concentrou-se in vacuo. Purificou-se o residuo por cromatografia em gel de silica (gradiente de eluição com metanol em DCM a 0-10 %, durante 20 min) , para se obter um éster 2- ( 6-ciclopropil-l-oxo-3,4-di-hidro-lH-isoquinolin-2-il)-6-[l-metil-5-(l-metil-lH-pirazol-3-ilamino)-6-oxo-l, 6-di-hidro-piridazin-3-il]-benzilico do ácido acético impuro (0,200 g, 0,371 mmole). EM (ESI) 540,1 (M+H)+. 94

Exemplo 62: 6-Ciclopropil-2-{2-hidroximetil-3-[l-metil-5-(l-metil-lH-pirazol-3-ilamino-6-oxo-1,6-di-hidro-piridazino-3-il)-fenil}-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona

Dissolveu-se éster 2-(6-ciclopropil-l-oxo-3,4-di-hidro-lH-isoquinolin-2-il)-6-[l-metil-5-(l-metil-lH-pirazol-3-il-amino)-6-oxo-l,6-di-hidro-piridazin-3-il]-benzílico do ácido acético (0,200 g, 0,371 mmole), em 2 mL de THF, 1 mL de água e 1 mL de metanol. Adicionou-se uma solução aquosa de hidróxido de litio 1 M (1,1 mL, 1,11 mmole) e agitou-se, durante várias horas, à TA. Extraiu-se com uma solução de DCM/cloreto de amónio e lavou-se a fase orgânica com salmoura, secou-se com sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se. Purificou-se o residuo por cromatografia em gel de silica (gradiente de eluição com metanol em DCM a 0-10 %, durante 20 min), para se obter 6-ciclopropil-2-{2-hidroximetil-3-[l-metil-5-(l-metil-lH-pirazol-3-ilamino-6-oxo-1,6-di-hidro-piridazino-3-il)-fe-nil}-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona (0,087 g, 0,175 mmole). EM (ESI) 597,2 (M+H)+.

Exemplo 63: Éster 2-(6-ciclopropil-l-oxo-3,4-di-hidro-lH- isoquinolin-2-il)-6-{l-metil-5-[5-(morfolino-4-carbonil)-pi-ridin-2-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridazin-3-il}-benzílico do ácido acético

Tratou-se 6-cloro-2-metil-4-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2-ilamino]-2H-piridazin-3-ona (0,070 g, 0,2 mmole), 95 éster 2- ( 6-ciclopropil-l-oxo-3,4-di-hidro-lH-isoquinolin-2-il) -6-(4,4,5-tetrametil-[l,3,2]dioxaborolan-2-il)-benzilico do ácido acético (0,102 g, 0,221 mmole) e carbonato de césio (0,228 g, 0,7 mmole) com uma solução desgaseifiçada de 1 mL de dioxano/0,1 mL de água. Após 5 min de agitação, adicionou-se um complexo de [1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloro-paládio(II) (0,016 g, 0,02 mmole) e aqueceu-se a mistura, a 135 °C, durante 30 min, num microondas. Filtrou-se a mistura reaccional com celulose; lavou-se com 5 mL de dioxano e concentrou-se in vacuo. Purificou-se o residuo por cromatografia em gel de silica (gradiente de eluição com metanol em DCM a 0-10 %, durante 20 min), para se obter o éster 2- ( 6-ciclopropil-l-oxo-3,4-di-hidro-lH-isoquinolin-2-il)-6-{l-metil-5-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2-ilamino] -6-oxo-l,6-di-hidro-piridazin-3-il}-benzilico do ácido acético impuro (0,121 g, 0,187 mmole). EM (ESI) 671,1 (M+Na)+.

Exemplo 64: 6-Ciclopropil-2-(2-hidroximetil-3-{l-metil-5-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2-ilamino]-6-1,6-di-hidro-pi-ridazin-3-il}-fenil)-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona

Dissolveu-se o éster 2-(6-ciclopropil-l-oxo-3,4-di-hidro-lH-isoquinolin-2-il)-6-{l-metil-5-(5-(morfolino-4-car-bonil)-piridin-2-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridazin-3-il}-benzilico do ácido acético (0,121 g, 0,187 mmole), em 2 mL de 96 THF, 1 mL de água e 1 mL de metanol. Adicionou-se uma solução aquosa de hidróxido de litio 1 M (0,560 mL, 0,561 mmole) e agitou-se durante várias horas, à TA. Extraiu-se com uma solução de DCM/cloreto de amónio e lavou-se a fase orgânica com salmoura, secou-se com sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se. Purificou-se o resíduo por cromatografia em gel de sílica (gradiente de eluição com metanol em DCM a 0-10 %, durante 20 min), para se obter 6-ciclopropil-2-(2-hidroximetil-3-{l-metil-5-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2-ilamino]-6-1,6-di-hidro-piridazin-3-il}-fenil)-3,4-di-hi-dro-2H-isoquinolin-l-ona (0,070 g, 0,115 mmole). EM (ESI) 607,2 (M+H) +.

Exemplo 65: Éster metílico do ácido 4-isopropenil-2-metil-benzóico

Tratou-se o éster metílico do ácido 4-bromo-2-metil-benzóico (4 g, 17,46 mmole), éster pinacólico do ácido iso-propenilborónico (3,228 g, 19,21 mmole) e carbonato de césio (19,913 g, 61,11 mmole) com uma solução desgaseifiçada de 15 mL de dioxano/5 mL de água. Após 5 min de agitação, adicionou-se um complexo de [1,1'-bis(difenilfosfino)-ferroceno]dicloropaládio(II) (0,718 g, 0,873 mmole) e aqueceu-se, a 120 °C, durante 40 min, num microondas.

Filtrou-se a mistura reaccional através de celulose, lavou-se com 20 mL de dioxano e concentrou-se in vacuo. Purificou-se do resíduo por cromatografia em 120 g gel de sílica (gradiente de eluição com acetato de etilo em hexano a 0-50 %, durante 50 min) , para se obter o éster metílico do ácido 4-isopropenil-2-metil-benzóico (2,94 g, 15,45 mmole). EM (ESI) 191,3 (M+H)+. 97

Exemplo 66: Éster metílico do ácido 2-metil-4-(1-metil-ciclo-propil)-benzóico

Formação de diazometano: Adicionou-se N-nitroso-N- metilureia (9,1 g, 61,8 mmole), sob agitação, em porções, a uma mistura de duas fases de 50 mL de uma solução de hidróxido de potássio (23,9 g, em 50 mL de água) e 50 mL de éter dietilico, a 0 °C. A cor da fase orgânica mudou de incolor para amarelo. Misturou-se, vigorosamente, a mistura de duas fases, durante 40 min, a 0 °C. A camada orgânica que continha diazometano separou-se. Fez-se uma ciclopropanação pela adição de uma solução de diazometano a metil-estireno: dissolveu-se éster metilico do ácido 4-isopropenil-2-metil-benzóico (2,94 g, 15,45 mmole), em 15 mL de éter dietilico e arrefeceu-se para 0 °C. Adicionou-se acetato de paládio(II) (0,173 g, 0,773 mmole). Adicionou-se, gota-a-gota, a fase orgânica amarela (contendo diazometano). No total, adicionou-se 20 mL da fase orgânica (aproximadamente 4 equivalentes de diazometano) até a reacção estar completa. Observou-se a libertação de azoto por meio da adição de diazometano ao produto intermédio de metil-estireno. Filtrou-se a mistura reaccional através de celulose; lavou-se com éter dietilico; concentrou-se; purificou-se o residuo (liquido castanho) por cromatografia em 40 g de gel de silica (gradiente de eluição com acetato de etilo em hexano a 0-100 %, durante 15 min) , obtendo-se 2,9 g de um líquido amarelo claro impuro. A RMN mostrou éster metílico do ácido 2-metilbenzóico a 8 %. Purificou-se o resíduo impuro novamente por cromatografia rápida em 110 g (gradiente de eluição com EtOAc em hexanosa 0-20 %, durante 30 min) , para se obter o éster metílico do ácido 2-metil-4-(1-metil-ciclopropil)-benzóico (2,75 g, 13,46 mmole). EM (ESI) 268, 9 (M+Na+ ACN) .

Exemplo 67: Ácido 2-metil-4-(1-metil-ciclopropil)-benzóico 98

Tratou-se o éster metílico do ácido 2-metil-4-(1-metil-ciclopropil)-benzóico (2,75 g, 13,46 mmole) com metanol e uma solução aquosa de hidróxido de sódio 5 M (20,46 mL, 102,32 mmole). Aqueceu-se a solução, a 80 °C, durante 4 horas. Concentrou-se a mistura reaccional até se evaporar o metanol. Obteve-se um sólido branco. Dissolveu-se o sólido em 50 mL água sob aquecimento e depois arrefeceu-se com um banho de gelo; acidificou-se com 10 mL de ácido cloridrico concentrado. Formou-se um precipitado branco; filtrou-se; lavou-se com água; secou-se em vácuo forte, durante a noite, para se obter o ácido 2-metil-4-(1-metil-ciclopropil)-benzóico (2,18 g, 11,46 mmole). EM (ESI) 189,1 (M-H)~.

Exemplo 68: Cloreto de 2-metil-4-(1-metil-ciclopropil)- benzoílo

Carregou-se o ácido 2-metil-4-(1-metil-ciclopropil)-benzóico (2,139 g, 11,243 mmole) e penta-cloreto fosforoso (2,575 g, 12,37 mmole) num frasco de 50 mL, com agitação. Os dois sólidos dissolveram-se a 100 °C. Agitou-se a mistura reaccional, durante 2 horas, a 120 °C, com um condensador de refluxo, em atmosfera de N2. Depois disto, destilou-se o oxicloreto fosforoso resultante, a 140 °C, a partir da mistura reaccional. Arrefeceu-se toda a mistura reaccional até à TA e a mistura reaccional permaneceu ainda sob a forma de uma solução. Destilou-se o produto desejado por meio de uma destilação de Kugelrohr (150 °C/4 mbar) , para se obter cloreto de 2-metil-4-(1-metil-ciclopropil)-benzoilo (1,92 g, 9,2 mmole).

Exemplo 69: N-[3-Bromo-2-(terc-butil-dimetil-silaniloxime-til)-fenil]-2-metil-4-(1-metil-ciclopropil)-benzamida 99

Dissolveu-se 3-bromo-2-(terc-butil-dimetil-silaniloxi-metil)-fenilamina (2,91 g, 9,2 mmole), cloreto de 2-metil-4-(1-metil-ciclopropil)-benzoílo (1,92 g, 9,2 mmole), N,N-di-isopropiletilamina (2,41 mL, 13,8 mmole) e 4-dimetilaminopiridina (0,112 g, 0,92 mmole), em 20 mL de THF anidro. Fez-se o refluxo da mistura reaccional, durante a noite; filtrou-se o precipitado; concentrou-se e extraiu-se com acetato de etilo; lavou-se com tampão de fosfato 2 M a pH 5,5, depois com água e salmoura; secou-se com sulfato de sódio; filtrou-se; concentrou-se. Obteve-se 4,69 g de um óleo. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em 80 g de gel de silica (gradiente de eluição com acetato de etilo em hexano a 0-20 %, durante 25 min, depois acetato de etilo em hexano a 20-100 %, durante 30 min), para se obter N-[3-bromo-2-(terc-butil-dimetil-silaniloximetil)-fenil]-2-metil-4-(1-metil-ciclopropil)-benzamida (3,51 g, 7,185 mmole). EM (ESI) 510 (M+Na+) .

Exemplo 70: 2-[3-Bromo-2-(terc-butil-dimetil-silaniloxi- metil)-fenil]-3-hidroxi-7-(1-metil-ciclopropil)-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona

Dissolveu-se 2,2,6,6-tetrametilpiperidina (2,28 g, 16,17 mmole), em 13 mL de THF anidro sob agitação; arrefeceu-se por meio de uma mistura num banho de etileno-glicol/gelo, a -15 °C. Adicionou-se, gota-a-gota, butil-litio, em hexanos 2,5 M (6,16 mL, 15,4 mmole) e manteve-se a temperatura próxima de -15 °C e agitou-se, durante mais 30 min, a -15 °C. Adicionou-se, gota-a-gota, uma solução de N-[3-bromo-2-(terc-butil-dimetil-silaniloximetil)-fenil]-2-metil-4-(1-metil-ciclopro-pil)-benzamida, em 20 mL de THF anidro, durante um periodo de 10 minutos, à mistura reaccional, a -15 °C. Agitou-se a mistura reaccional, durante 2 horas. Depois disso, adicionou- 100 se, numa só porção, 3,55 mL de dimetilformamida. Deixou-se a mistura reaccional aquecer para a TA. Agitou-se, durante 2 horas, à TA, depois arrefeceu-se para 0 °C, parou-se a reacção com 25 mL de uma solução de hidrogeno-sulf ato de potássio 1 M; extraiu-se com acetato de etilo/água; lavou-se a fase orgânica com salmoura; secou-se com sulfato de sódio; filtrou-se e concentrou-se. Obteve-se 2,71 g de um óleo castanho. A cristalização com DCM e hexano, originou 2 — [3 — bromo-2-(terc-butil-dimetil-silaniloximetil)-fenil]-3-hidro-xi-7-(1-metil-ciclopropil)-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona (1,134 g, 2,2 mmole). EM (ESI) 516,0 (M-H)“.

Exemplo 71: 2-[3-Bromo-2-(terc-butil-dimetil-silaniloxi- metil)-fenil]-7-(1-metil-ciclopropil)-2H-isoquinolin-l-ona

Dissolveu-se 2-[3-bromo-2-(terc-butil-dimetil-silanilo-ximetil)-fenil]-3-hidroxi-7-(1-metil-ciclopropil)-3,4-di-hi-dro-2H-isoquinolin-l-ona (1,134 g, 2,2 mmole), em 13 mL de DCM, à TA; adicionou-se trietilamina (1,31 mL, 9,44 mmole) seguida da adição de cloreto de metano-sulfonilo (0,478 g, 4,171 mmole). Agitou-se, durante 1,5 horas, à TA, mas a reacção estava completa ao fim de 10 minutos, de acordo com CLEM. Extraiu-se a mistura reaccional com DCM/água; lavou-se a fase orgânica com salmoura; secou-se com sulfato de sódio; filtrou-se; concentrou-se, para se obter 2-[3-bromo-2-(terc-butil-dimetil-silaniloximetil)-fenil]-7-(1-metil-ciclopropil) -2H-isoquinolin-l-ona (1,094 g, 2,2 mmole). EM (ESI) 520,0 (M+Na+) .

Exemplo 72: 2-(2-terc-Butil-dimetil-silaniloximetil)-3-{1- metil-5-(5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2-ilamino]-6-oxo-1,6-di-hidro-piridin-3-il}-fenil)-6-(1-metil-ciclopropil)-2H-isoquinolin-l-ona 101

Dissolveu-se 2-[3-bromo-2-(terc-butil-dimetil-silanilo-ximetil)-fenil]-7-(1-metil-ciclopropil)-2H-isoquinolin-l-ona (0,102 g, 0,205 mmole) e l-metil-3-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2-ilamino]-5-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioxaborolan-2-il)-lH-piridin-2-ona (0,1 g, 0,227 mmole), em 2,5 mL de dioxano, sob aquecimento; adicionou-se 0,5 mL de água seguido de carbonato de césio (0,259 g, 0,795 mmole). Depois, adicionou-se um complexo de [1,1'-bis(difenilfosfino)-ferroceno]dicloro-paládio(II) (0,019 g, 0,023 mmole) e aqueceu-se, até 135 °C, durante 30 min, num microondas.

Filtrou-se a mistura reaccional através de celulose; lavou-se com dioxano; concentrou-se; purificou-se o residuo por cromatografia em 24 g de gel de silica (gradiente de eluição com DCM, durante 5 min, depois metanol em DCM a 0-10 %, durante 25 min, depois DCM/metanol a 9:1, durante 10 min), para se obter 2-(2-terc-butil-dimetil-silaniloximetil)-3-{1-metil-5-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2-ilamino]-6-oxo-1,6-di-hidro-piridin-3-il}-fenil)-6-(1-metil-ciclopropil)-2H-isoquinolin-l-ona (0,095 g, 0,13 mmole). EM (ESI) 732,2 (M+H)+.

Exemplo 73: 2-(2-Hidroximetil-3-{l-metil-5-[5-(morfolino-4- carbonil)-piridin-2-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il}-fenil) -6- (1-metil-ciclopropil) -2fí-isoquinolin-l-ona

Dissolveu-se 2-(2-terc-butil-dimetil-silaniloximetil)-3-{l-metil-5-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2-ilamino]-6- 102 oxo-1,6-di-hidro-piridin-3-il}-fenil)-6-(1-metil-ciclopro-pil)-2H-isoquinolin-l-ona (0,095 g, 0,13 mmole) , em 3 mL de dioxano. Adicionou-se uma solução aquosa de ácido clorídrico 3 M (0,22 mL, 0,39 mmole), à TA. Agitou-se, durante 30 min, depois extraiu-se com uma solução de acetato de etilo/bicarbonato de sódio; lavou-se a fase orgânica com salmoura; secou-se com sulfato de sódio; concentrou-se. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em 12 g de gel de sílica (gradiente de eluição com metanol em DCM a 0-10 %, durante 30 min), para se obter 2-(2-hidroximetil-3-{1-metil-5-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2-ilamino]-6-oxo-1,6-di-hidro-piridin-3-il}-fenil)-6-(1-metil-ciclopropil)-2H-isoquinolin-l-ona (0,045 g, 0,0728 mmole). EM (ESI) 618,3 (M+H) +.

Exemplo 74: 6-Bromo-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona

Adicionou-se ácido metano-sulfónico (100 mL) a uma solução de 5-bromoindanona (25 g, 46 mmole) , em CH2CI2 (200 mL), a 0 °C. Adicionou-se, lentamente, em porções, à mistura, azida sódica (10,5 g, 162 mmole). Depois da adição da azida sódica estar completa, agitou-se a mistura durante mais 30 min e adicionou-se uma mistura aquosa de NaOH (20 % em peso) até a mistura estar ligeiramente básica. Extraiu-se a mistura com cloreto de metileno e as camadas orgânicas combinadas evaporaram-se a pressão reduzida. A purificação de uma mistura por cromatografia rápida em coluna de gel de sílica (EtOAc/hexanos de 0 % a 50 %, depois MeOH/CH2Cl2 de 0 % a 7 %), originou 11,5 g de 6-bromo-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-1-ona. EM (ESI) 226,1 (M+H)+.

Exemplo 75: 6-Ciclopropil-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona 103 A um frasco de fundo redondo carregado com 6-bromo-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona (16,9 g, 74,7 mmole), ácido ciclopropilborónico (9,45 g, 1,5 equivalentes), triciclo-hexilfosfina (1,04 mg, 0,025 equivalentes) e hexa-hidrato de K3PO4 (50 g, 2 equivalentes), em tolueno (210 mL) e H2O (15 mL) , adicionou-se Pd(OAc)2 (100 mg, 0,05 equivalentes). Aqueceu-se a mistura combinada, durante 4 h, a 100 °C.

Arrefeceu-se a mistura reaccional, filtrou-se e lavou-se com tolueno. Repartiu-se a fase orgânica e lavou-se com água e salmoura, secou-se com Na2S04, filtrou-se e concentrou-se até se obter um óleo. A adição de hexanos produziu 6-ciclopropil-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona, sob a forma de um sólido acastanhado (13,6 g). EM (ESI) 187,1 (M+H)+.

Exemplo 76: 2-Bromo-6-(6-ciclopropil-l-oxo-3,4-di-hidro-lH-isoquinolin-2-il)-benzaldeido

Carregou-se um frasco de fundo redondo com 6- ciclopropil-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona (13,4 g, 5 mmole), 2,6-dibromo-benzaldeido (47,5 g, 72,0 mmole),

Pd2 (dba) 3.CHCI3 (660 mg, 0,72 mmole), xantfos (832 mg, 1,44 mmole) e carbonato de césio (46,8 g, 144 mmole). Fez-se borbulhar árgon no frasco, adicionou-se 140 mL de dioxano e aqueceu-se a mistura reaccional, a 110 °C, durante 4 h.

Arrefeceu-se a mistura reaccional até à TA e adicionou-se 30 mL de água e 60 mL de acetato de etilo antes de se filtrar com Solkaflok. Separou-se a fase orgânica e lavou-se com salmoura, seguida da secagem com Na2S04. Após a filtração, eliminou-se o dissolvente triturou-se a massa castanha obtida com cloreto de metileno e éter dietilico, para se obter 6,5 gramas de 2-bromo-6-(6-ciclopropil-l-oxo-3,4-di-hidro-lH-iso-quinolin-2-il)-benzaldeido. Obteve-se uma segunda colheita de 104 7,5 gramas do material pela adição de mais éter dietilico. EM (ESI) 370,0 (M+H)+.

Exemplo 77: 2-(3-bromo-2-hidroximetil-fenil)-6-ciclopropil- 3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona A uma solução de 2-bromo-6-(6-ciclopropil-l-oxo-3,4-di-hidro-lH-isoquinolin-2-il)-benzaldeido (5,0 g, 13,5 mmole), em 60 mL de tolueno e 10 mL de THF, a -10 °C, adicionou-se, em porções, boro-hidreto de sódio (740 mg, 20 mmole). Passados 30 minutos, parou-se a mistura reaccional com água e repartiu-se em éter dietilico. Lavou-se a fase orgânica com salmoura, secou-se com sulfato de sódio e filtrou-se. Após a concentração a pressão reduzida e a purificação por cromatografia em gel de silica, originou 3,7 g de 2-(3-bromo-2-hidroximetil-fenil)-6-ciclopropil-3,4-di-hidro-2H-isoquino-lin-l-ona, sob a forma de um sólido incolor. EM (ESI) 372,0 (M+H)+.

Exemplo 78: 6-Ciclopropil-2-(2-hidroximetil-3-{l-metil-6-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2-ilamino]-2-oxo-l, 2-di-hidro-piridin-4-il}-fenil)-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona

105 A um frasco carregado com 2-(3-bromo-2-hidroximetil-fenil)-6-ciclopropil-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona (3,70 g, 9,9 mmole), l-metil-6-[4-(morfolino-4-carbonil)-fenilamino]-4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioxaborolan-2-il)-lH-piridin-2-ona (4,38 g, 9,9 mmole), Pd2 (dba) 3 *CHCI3 (229 mg, 0,25 mmole), 2-diciclo-hexilfosfino-2',4',6'-tri-i-propil-1,1'-bifenilo (238 mg, 0,50 mmole) e hexa-hidrato de K3PO4 (7,5 g, 20 mmole), adicionou-se 40 mL de dioxanorágua a 4:1 e aqueceu-se a mistura até à temperatura de refluxo, durante 4 h, arrefeceu-se e filtrou-se com Solka-Floc®, lavando-se com acetato de etilo. Repartiu-se e lavou-se a fase orgânica com água e salmoura. Secou-se com sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se, para se obter um óleo escuro. A purificação por cromatografia em gel de silica (cloreto de metileno/metanol), originou 3,2 g de 6-ciclopropil-2-(2-hidroximetil-3-{l-metil-6-[4-(morfolino-4-carbonil)-fenilami-no]-2-oxo-l,2-di-hidro-piridin-4-il}-fenil)-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona, sob a forma de um sólido incolor. EM (ESI) 606, 1 (M+H) +.

Exemplo 80: 1-(4-terc-Butil-fenil)-3-cloro-propan-l-ona A cloreto de aluminio (29,33 g, 220 mmole), em DCM (300 mL) , a 0 °C, adicionou-se, com agitação, gota-a-gota, uma solução de t-butil-benzeno (31 mL, 200 mmole) e cloreto de 3-cloropropionilo (19 mL, 200 mmole) , em DCM. Após a adição estar completa, agitou-se a mistura reaccional desde 0 °C até à TA, durante a noite. Na manhã seguinte, a CCF indicou que todo o t-butil-benzeno tinha sido consumido e arrefeceu-se a mistura reaccional para 0 °C. Com agitação, adicionou-se, gota-a-gota água (cerca de 120 mL) até cessar a efervescência. Finalmente, separaram-se as camadas e lavou-se a camada orgânica com água (3 x 150 mL) e depois salmoura (1 x 150 mL). Secou-se a camada de DCM com sulfato de magnésio, 106 filtrou-se, concentrou-se e bombeou-se até à secagem, para se obter o composto do título, sob a forma de um pó castanho claro (45,6 g) .

Exemplo 81: 5-terc-Butil-indan-l-ona

Colocou-se 1- (4-terc-butil-fenil)-3-cloro-propan-l-ona (45,6 g, 447 mmole) em ácido sulfúrico concentrado (200 mL) e aqueceu-se a mistura resultante, até 100 °C, com agitação, durante 2,5 horas. A CCF indicou que todo o material inicial tinha sido consumido. Depois de se arrefecer para a TA, verteu-se, cuidadosamente, a mistura reaccional em cerca de 1 Kg de gelo moído. Depois adicionou-se éter dietílico e agitou-se, cuidadosamente, a mistura até arrefecer até cerca da TA. Adicionou-se acetato de etilo (1.200 mL) e, após a repartição, separaram-se as camadas. Extraiu-se então a camada ácida com acetato de etilo (2 x 200 mL). Lavaram-se as camadas combinadas de acetato de etilo com bicarbonato de sódio saturado (5 x 300 mL). Finalmente, secou-se a camada de acetato de etilo com sulfato de magnésio, filtrou-se, concentrou-se e bombeou-se até à secagem, para se obter o composto do título, sob a forma de um óleo incolor (15,764 g).

Exemplo 82: 6-terc-Butil-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona A 5-terc-butil-indan-l-ona (15,7 g, 83,4 mmole), em DCM (150 mL), adicionou-se ácido metano-sulfónico (100 mL) e arrefeceu-se a mistura resultante para 0 °C. Depois,

adicionou-se, cuidadosamente, rem porções, azida sódica (10,83 g, 2 equivalente), durante 15 minutos. Agitou-se a mistura resultante, a 0 °C, durante cerca de 2,5 horas. A análise por CCF confirmou que toda a 5-terc-butil-indan-l-ona tinha sido consumida. Adicionou-se, com agitação, a 0 °C, 107 muito cuidadosamente, uma solução aquosa de hidróxido de sódio (20 %), a pH = 14. Depois adicionou-se DCM (1.000 mL) e água (500 mL), o que resultou numa grande emulsão. Separaram-se as camadas e extraiu-se a camada aquosa com diclorometano (2 x 200 mL). Finalmente, lavaram-se as camadas combinadas de DCM com salmoura (9 x 200 mL) , secaram-se com sulfato de magnésio e filtraram-se através de uma almofada de celite. Após a concentração e bombagem até à secagem, obteve-se 13,5 g de produto impuro, sob a forma de um sólido acastanhado. A purificação numa coluna de 400 g de Analogix, eluição com um gradiente de acetato de etilo em hexano de 10 % a 60 %, originou um isómero correcto, sob a forma de um pó branco (7,22 g) ( (M+H)+ = 204) e um isómero indesejado (1,555 g) , sob a forma de um pó branco.

Exemplo 83: Éster 2-bromo-6-(6-terc-butil-l-oxo-3,4-di-hidro-lH-isoquinolin-2-il)-benzílico do ácido acético

Colocou-se 6-terc-butil-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona (4 g, 19,67 mmole) , éster 2,6-dibromo-benzilico do ácido acético (12,1 g, 2 equivalentes), fosfato de potássio tribásico (8,35 g, 2 equivalentes) e iodeto de cobre (787 mg, 0,2 equivalentes) em dioxano (40 mL) . Finalmente, adicionou-se N,N'-dimetil-ciclo-hexano-1,2-diamina (1,24 mL, 0,4 equivalentes) e aqueceu-se a mistura resultante, à temperatura de refluxo, durante 24 horas, tempo ao fim do qual se adicionou mais iodeto de cobre (394 mg, 0,1 equivalentes) e N,Ν'-dimetil-ciclo-hexano-1,2-diamina (0,62 mL, 0,2 equivalentes). Agitou-se durante mais 64 horas e depois adicionou-se mais iodeto de cobre (400 mg, 0,1 equivalentes). Continuou-se a agitação, até à temperatura de refluxo, durante um total de 168 horas. Arrefeceu-se para a TA e depois adicionou-se acetato de etilo (300 mL) e água 108 (100 mL) , repartiram-se e separaram-se as camadas. Lavou-se com mais água (2 x 100 mL) e depois, finalmente, lavou-se com salmoura (100 mL). Secou-se a camada de acetato de etilo com sulfato de magnésio, filtrou-se e concentrou-se, para se obter 4,45 g de produto impuro. A purificação numa coluna de 240 g de Analogix, originou o composto do titulo, sob a forma de um sólido espumoso branco (516 mg) ((M+H)+ = 431) e recuperou-se 6-terc-butil-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona (2,188 g) .

Exemplo 84: Éster 2-(6-terc-butil-l-oxo-3,4-di-hidro-lH- isoquinolin-2-il)-6-(l-metil-5-[5-(morfolino-4-carbonil)-pi-ridin-2-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il}-benzilico do ácido acético

Carregou-se l-metil-3-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2-ilamino]-5-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioxa-borolan-2-il)-lH-piridin-2-ona (208 mg, 1 equivalente), éster 2-bromo-6-(6-terc-butil-l-oxo-3,4-di-hidro-lH-isoquinolin-2-il)-benzilico do ácido acético (203 mg, 0,472 mmole), X-fos (14 mg, 0,06 equivalentes), fosfato de potássio tribásico (200 mg, 2 equivalentes), n-butanol (2,8 mL) e água (0,93 mL) num frasco de fundo redondo de 50 mL e depois fez-se borbulhar azoto gasoso através da mistura, durante 10 minutos, antes de se adicionar Pd(dba)2 (8 mg, 0,03 equivalentes). Aqueceu-se a mistura resultante, a 100 °C, durante 40 minutos e a análise por CCF indicou que não havia material inicial remanescente. Arrefeceu-se a mistura reaccional para a TA e depois adicionou-se acetato de etilo (150 mL) e água (40 mL) . Repartiram-se e separaram-se as camadas e lavaram-se com mais água (2 x 40 mL) e depois com salmoura (1 x 40 mL) . Finalmente, secou-se a camada de acetato de etilo com sulfato de magnésio, filtrou-se e concentrou-se e bombeou-se até à 109 secagem, para se obter o composto do título, que se utilizou na etapa seguinte sem mais purificação ((M+H)+ = 664).

Exemplo 85: 6-terc-Butil-2-(2-hidroximetil-3-{l-metil-5-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il}-fenil)-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona

Colocou-se o éster 2-(6-terc-butil-l-oxo-3,4-di-hidro-lH-isoquinolin-2-il)-6-{l-metil-5-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il}-benzílico do ácido acético (0,472 mmole) em THF (7 mL) e metanol (3 mL) e água (5 mL) e depois adicionou-se mono-hidrato de hidróxido de lítio (40 mg, 2 equivalentes). Agitou-se a mistura resultante, à TA, durante a noite. Na manhã seguinte, a reacção estava completa como verificado por CCF e a maior parte do THF e do metanol tinha sido eliminada a pressão reduzida, a 55 °C. Depois, adicionou-se acetato de etilo (75 mL) e água (30 mL) e repartiram-se e separaram-se as camadas. A seguir, lavou-se a camada de acetato de etilo com água (2 x 30 mL) , salmoura (1 x 30 mL) e depois secou-se com sulfato de magnésio, filtrou-se e concentrou-se, para se obter 286 mg de produto impuro. A purificação por cromatografia preparativa em camada fina e a eluição feita em duas placas de 2 0 x 4 0 cm, com 1.000 μΜ de metanol em 110 diclorometano a 6 %, originou o composto do titulo (99 mg), sob a forma de um pó branco ((M+H)+ = 622) .

Exemplo 86: Éster terc-butilico do ácido [2-(4-metoxi-benzil)-1-oxo-l,2,3,4-tetra-hidro-isoquinolin-6-il]-acético (I)

Adicionou-se 6-bromo-2-(4-metoxi-benzil)-3, 4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona (1,9 g, 5,5 mmole), Q-fos (0,0632 g, 0,11 mmole) e Pd(dba) 2 (0,0781 g, 0,11 mmole), em 10 mL de THF a cloreto de 2-terc-butoxi-2-oxoetilzinco (15 mL, 0,55 M) , em atmosfera de árgon. Agitou-se a mistura reaccional, à TA, durante 16 horas. Em seguida, adicionou-se um terço da quantidade inicial de Q-fos, Pd(dba)2 e enolato de zinco e aqueceu-se a mistura, durante 1 hora, a 70 °C, para que a reacção ficasse completo. Isolou-se o produto desejado (2 g; rendimento de 95,6 %) por cromatografia rápida utilizando cromatografia em coluna de gel de sílica com acetato de etilo em hexano a 10 % - 40 % como eluente.

Exemplo 87: Ácido 2-(4-metoxi-benzil)-1-oxo-l,2,3,4-tetra- hidro-isoquinolin -6-il]- acético (II) Dissolveu-se éster terc-butilico (I) d g, 5, 7 mmole), em 40 mL de metanol e adicionou-se a esta solução mono- hidrato de LiOH (0,72 g, 17,3 mmole) , em 6 mL de água. Agitou-se a mistura, à TA, durante 16 horas , depois concentrou-se in vacuo, acidificou-se com HC1 2 N e extraiu- se com acetato de etilo. Lavou-se a camada orgânica com salmoura, secou-se com sulfato de sódio e concentrou-se in vacuo. Utilizou-se o resíduo (1,8 g; rendimento de 97 %) na etapa seguinte sem mais purificação. 111

Exemplo 88: 2-[2-(4-Metoxi-benzil)-1-oxo-l,2,3,4-tetra-hidro-isoquinolin-6-il]-acetamida (III)

Ao ácido carboxílico (II) (2,3 g, 7 mmole), em 22 mL de clorofórmio, adicionou-se EEDQ (2,07 g, 8,4 mmole) e bicarbonato de amónio (1,66 g, 21 mmole). Depois de se agitar a mistura, à TA, durante 16 horas, a amida precipitou pela adição de água (20 mL) . Filtrou-se o sólido, lavou-se com água e secou-se in vacuo. Triturou-se o residuo com acetato de etilo em hexano a 50 %, filtrou-se e secou-se in vacuo, para se obter 1,4 g da amida (III), com um rendimento de 63 %.

Exemplo 89: [2-(4-Metoxi-benzil)-1-oxo-l,2,3,4-tetra-hidro- isoquinolin-6-il]-acetonitrilo (IV)

Fez-se uma suspensão da amida (III) (1,3 g, 4 mmole) em 5 mL de THF e 10 mL de DMF. Adicionou-se a esta mistura cloreto de cianúrico (0,370 g, 2 mmole) e depois de se agitar, à TA, durante 0,5 horas, repartiu-se a mistura reaccional entre acetato de etilo e salmoura; lavou-se a camada orgânica com bicarbonato de sódio a 5 %, seguida com salmoura e depois secou-se com sulfato de sódio. A purificação por cromatografia rápida em coluna de gel de sílica, utilizando acetato de etilo em hexano a 75 % como eluente, originou 1,2 g (rendimento de 98 %) de nitrilo (IV).

Exemplo 90: 1-[2-(4-Metoxi-benzil)-1-oxo-l, 2,3, 4-tetra-hidro-isoquinolin-6-il]-ciclopropanocarbonitrilo (V)

A uma suspensão de hidrato de sódio (0,228 g, 60 %, 5,72 mmole), em 15 mL de DMF, adicionou-se nitrilo (IV) (1,2 g, 3, 9 mmole) e depois de se agitar, durante 15 minutos, à TA, adicionou-se 1,2-dibromo-etano (1,1 g, 5,8 mmole), em 1,5 mL 112 de DMF. Agitou-se a mistura resultante, durante 0,5 horas, à TA e depois adicionou-se mais hidrato de sódio (0,114 g, 2,86 mmole) e aqueceu-se a mistura reaccional, durante cerca de 10 minutos, a 30-35 °C. Depois de se arrefecer a mistura, repartiu-se entre acetato de etilo e salmoura, secou-se a camada orgânica com acetato de sódio e concentrou-se in vacuo. A purificação por cromatografia em coluna de gel de silica, com acetato de etilo em hexano a 30 % - 50 %, originou o composto (V) (1 g; rendimento de 77 %).

Exemplo 91: 1-[2-(4-Metoxi-benzil)-1-oxo-l,2,3,4-tetra-hidro-isoquinolin-6-il]-ciclopropanocarbaldeido (VI) A uma solução de nitrilo (V) (0,722 g, 2,17 mmole), em 3 mL de DCM e 9 mL de tolueno, arrefecida a -50 °C, adicionou-se, gota-a-gota, DIBAH (4,8 mL, 4,77 mmole). Depois de se agitar, durante 1 hora, a -50 °C, parou-se a mistura reaccional com 5 mL de HCl 1 N, deixou-se aquecer para a TA e agitou-se, durante 0,5 horas. Em seguida, extraiu-se a mistura com acetato de etilo; lavou-se a camada orgânica com HCl 0,5 N, uma solução de carbonato de sódio a 5 %, salmoura, em seguida, secou-se com sulfato de sódio e concentrou-se in vacuo. Purificou-se o resíduo por cromatografia em coluna de gel de sílica, utilizando acetato de etilo em hexano a 30 %-60 %, para se obter o aldeído (VI) (0,075 g; rendimento de 10,3 %) .

Exemplo 92: 6-(1-Difluorometil-ciclopropil)-2-(4-metoxi- benzil)-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona (VII) A uma solução de DAST (0,042 g, 0,26 mmole), em 1,5 mL de diclorometileno, adicionou-se o aldeído (VI) (0,075 g, 0,22 mmole), em 0,5 mL de diclorometileno. Agitou-se a mistura, à TA, durante 16 horas. Depois de se arrefecer num 113 banho de gelo, adicionou-se 5 mL de água à mistura reaccional seguida de acetato de etilo. Lavou-se a camada orgânica com uma solução de bicarbonato de sódio a 5 % e salmoura, depois secou-se com sulfato de sódio e concentrou-se in vacuo. Purificou-se o resíduo por CCF preparativa em gel de sílica, para se obter o composto (VII) (0,068 g, rendimento de 87 %).

Exemplo 93: 6-(1-Difluorometil-ciclopropil)-3, 4-di-hidro-2H- isoqinolin-l-ona (VIII)

Dissolveu-se o composto (VII) (0,068 g, 0,19 mmole), em 1 mL de TFA e aqueceu-se, a 7 0 °C, durante 1,5 horas. Arrefeceu-se a mistura reaccional, para a TA, adicionou-se acetato de etilo e lavou-se a solução com salmoura seguida de uma solução de bicarbonato de sódio a 5 % e depois com salmoura. Secou-se a camada orgânica com sulfato de sódio e concentrou-se in vacuo. Purificou-se o resíduo por CCF preparativa em gel de sílica, com metanol em diclorometileno a 5 %, para se obter o composto (VIII), 0,030 g, rendimento de 66 %.

Exemplo 94: 2-Bromo-6-[6-(1-difluorometil-ciclopropil)-1-oxo-3,4-di-hidro-lH-isoquinolin-benzaldeído (IX) A uma mistura do composto (VIII) (0,030 g, 0,12 mmole), 2,6-dibromo-benzaldeído (0,064 g, 0,25 mmole), carbonato de césio (0,054 g, 0,16 mmole) e Xantfos (0,002 g, 0,004 mmole), num tubo de microondas, em atmosfera de árgon, adicionou-se Pd(dba)2 (0,0014 g, 0,0024 mmole). Selou-se o tubo e aqueceu-se a mistura reaccional, a 100° C, durante 16 horas. Depois de se arrefecer a mistura, repartiu-se entre acetato de etilo e salmoura, secou-se a camada orgânica com sulfato de sódio e concentrou-se in vacuo. Purificou-se o resíduo por CCF preparativa em gel de sílica, com acetato de etilo em hexano 114 a 40 % como eluente, para se obter 0,024 g, rendimento de 48

Exemplo 95: 2-[6-(1-Difluorometil-ciclopropil)-l-oxo-3,4-di- hidro-lH-isoquinolin-2-il]-6-{l-metil-5-[5-(morfolino-4-car-bonil)-piridin-2-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il}-benzaldeído (X)

Dissolveu-se l-metil-3-[5-(morfolino-4-carbonil)-piri-din-2-ilamino]-5-(4,4,5,5-tetrametil-[l,3,2]dioxa-borolan-2-il)-lH-piridin-2-ona (0,025 g, 0,057 mmole) e o benzaldeido IX (0,024 g, 0,057 mmole), em 0,5 mL de n-butanol. Adicionou-se a esta solução, em atmosfera de árgon, K3P04 (0,024 g, 0,114 mmole), 0,150 mL de água, X-fos (0,0027 g, 0,0057 mmole) e Pd(dba)2 (0,0016 g, 0,0028 mmole). Aqueceu-se a mistura, durante 1 hora, a 100 °C e, depois de se arrefecer, repartiu-se entre acetato de etilo e salmoura. Secou-se a camada orgânica com sulfato de sódio, concentrou-se in vacuo e purificou-se o residuo por CCF preparativa em gel de silica, para se obter 0,025 g (rendimento de 67 %) de X.

Exemplo 96: 6-(1-Difluorometil-ciclopropil)-2-(2-hidroxime- til-3-{l-metil-5-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2-ilamino] -6-oxo-l, 6-di-hidro-piridin-3-il}-fenil)-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona (XI) % /

115

Dissolveu-se 2-[6-(1-difluorometil-ciclopropil)-1-oxo- 3,4-di-hidro-lH-isoquinolin-2-il]-6-{l-metil-5-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il} -benzaldeído (0,025 g, 0,038 mmole), em THF (2 mL) .

Adicionou-se a esta solução NaBH4 (0,006 g, 0,015 mmole) e agitou-se a mistura, à TA, durante 0,5 horas, depois parou-se a reacção com água gelada (4 mL) e extraiu-se com acetato de etilo. Lavou-se a camada orgânica com salmoura, secou-se com sulfato de sódio e concentrou-se in vacuo. Purificou-se o residuo por CCF preparativa, para se obter 6-(1-difluorometil-ciclopropil) -2-(2-hidroximetil-3-{l-metil-5-[5-(morfolino-4-carbonil)-piridin-2-ilamino]-6-oxo-l,6-di-hidro-piridin-3-il}-fenil)-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-l-ona (XI), 0,020 g (rendimento de 80 %) .

Exemplo 97: Ensaio de inibição de tirosina-cinase de Bruton (tcB) O ensaio é uma captura de um produto fosforilado com 33P radioactivo através de filtração. As interacções de tcB, substrato de um péptido SH2 biotinilado (homologia com Src) e ATP levam à fosforilação do substrato de péptido. O produto biotinilado liga-se a pérolas de estreptavidina e sefarose. Os produtos marcados com rádio, todos ligados, são detectados por um contador de cintilação.

As placas do ensaio são placas de polipropileno de 96 poços (Greiner) e placas de filtro PVDF hidrofilico, de 1,2 ym de 96 poços (Millipore). As concentrações aqui referidas são concentrações finais do ensaio: compostos 10-100 μΜ em DMSO (Burdick and Jackson), enzima tcB 5-10 nM (marcada com His, de comprimento completo), substrato de péptido 30 μΜ 116 (Biotina-Aca-AAAEEIYGEI-NH2) , ΑΤΡ 100 μΜ (Sigma), imidazol 8 mM (Sigma, pH 7,2), glicerol-2-fosfato 8 mM (Sigma), EGTA 200 μΜ (Roche Diagnostics), MnCl2 1 mM (Sigma), MgCl2 20 mM (Sigma), 0,1 mg/mL de ASB (Sigma), DTT 2 mM (Sigma), 33P ATP 1 pCi (Amersham), pérolas de estreptavidina e sefarose a 20 % (Amersham) , EDTA 50 mM (Gibco) , NaCl 2 M (Gibco) , NaCl 2 M/ácido fosfórico a 1 % (Gibco), microscint-20 (Perkin

Elmer).

As determinações de CI50 foram calculadas para 10 pontos por cada composto utilizando os dados produzidos a partir de uma matriz de um ensaio com placas-padrão com 96 poços. Fez-se a análise de um composto de controlo e sete inibidores desconhecidos em cada placa e cada placa foi tratada duas vezes. Normalmente, diluiram-se os compostos começando numa escala semi-logarítmica a 100 μΜ e terminando a 3 nM. O composto de controlo foi o stauro-esporina. Contou-se o valor inicial na ausência de substrato de péptido Determinou a actividade total na presença de substrato de péptido. 0 protocolo que se segue foi utilizado para determinar a inibição de tcB. 1) Preparação da amostra: Os compostos do ensaio foram diluidos a incrementos semi-logaritmicos no tampão de ensaio (imidazol, glicerol-2-fosfato, EGTA, MnCl2, MgCl2, ASB) . 2) Preparação das pérolas a. ) limpeza das pérolas por centrifugação a 500 g b. ) reconstituição das pérolas com SBF e EDTA para produzir uma pasta de pérolas a 20 % 3) Pré-incubação da mistura reaccional sem substrato (tampão de ensaio, DTT, ATP, 33P ATP) e mistura com 117 substrato (tampão de ensaio, DTT, ATP, 33P ATP, substrato de péptido), a 30 °C, durante 15 min. 4) Para iniciar o ensaio, pré-incubou-se 10 yL de tcB em tampão de enzima (imidazol, glicerol-2-fosfato, ASB) e 10 yL dos compostos do ensaio, durante 10 min, à TA. 5) Adição de 30 yL da mistura reaccional, sem ou com substrato, a tcB e aos compostos. 6) Incubação de 50 yL da mistura total do ensaio, durante 30 min, a 30 °C. 7) Transferência de 40 yL da mistura de ensaio para 150 yL do aglomerado de pérolas numa placa de filtro para parar a reacção. 8) Lavagem da placa de filtro passados 30 min, com as etapas seguintes a. 3 x 250 yL de NaCl b. 3 x 250 yL de NaCl contendo ácido fosfórico a 1 %

c. 1 x 250 yL de H2O

9) Secagem da placa, durante 1 h, a 65 °C ou durante a noite, à TA 10) Adição de 50 yL de microscrnt-20 e contagem de P, em cpm, num contador de cintilação. Calculou-se a actividade percentual para os dados obtidos em cpm

Actividade percentual = (amostra - bkg)/(actividade total - bkg) x 100 Cálculo da CI50, a partir da actividade percentual utilizando um modelo sigmiodal de resposta à dose num sitio y = A + ( (B - A) / (1 + ( (x/C) D) ) ) ) x = concentração do composto, y = % de actividade, A = min, B = max, C = CI5cu D = 1 (inclinação da recta) 118

Os resultados representativos estão no quadro 2 a seguir: QUADRO II.

Composto CI50 de inibição de tcB (pM) 1-1 0,42 1-2 0,04 II-2 0,37 III-l 1,08 III-2 2,76

Exemplo 98: Inibição da activação das células B - Ensaio de FLIPR para as células B em células Ramos A inibição da activação de células B por compostos da presente invenção é demonstrada pela determinação dos efeitos dos compostos do ensaio em respostas das células B estimuladas por anti-IgM. 0 ensaio por FLIPR de células B é um processo funcional à base de células para determinar o efeito de potenciais inibidores do aumento do cálcio intracelular a partir da estimulação por meio de um anticorpo anti-IgM. Fez-se uma cultura de células de Ramos (linha de células humanas de linfoma de Burkitt. ATCC-N°. CRL-1596) em meio de crescimento (descrito a seguir). Um dia antes do ensaio, fez-se uma nova suspensão de células de Ramos em meio de crescimento fresco (semelhante ao anterior) e uma concentração de 0,5 x 106/mL em frascos de cultura de tecidos. No dia dos ensaios, contaram-se as células e fixaram-se numa concentração de 1 x 106/mL em meio de crescimento complementado com FLUO-3AM 1 μΜ 119 (TefLabs Cat-N°. 0116, preparado em DMSO anidro e ácido plurónico a 10 %) num frasco de cultura de tecidos e incubou-se a 37 °C (CO2 a 4 %) , durante uma hora. Para eliminar o corante extracelular, recolheram-se as células por centrifugação (5 min, 1.000 rpm), suspenderam-se novamente em tampão de FLIPR (descrito a seguir), a 1 x 106 células/mL e depois distribuíram-se em 96 poços de placas escuras/claras revestidas com poli-D-lisina (BD Cat-N°. 356692) a 1 x 105 células por poço. Adicionaram-se os compostos de ensaio em várias concentrações variando de 100 μΜ a 0,03 μΜ (7 concentrações, descritas a seguir) e deixou-se a incubação com células, durante 30 min, à TA. A sinalização de Ca2+ de células de Ramos foi estimulada pela adição de 10 pg/mL de anti-IgM (Southern Biotech, Cat-N°. 2020-01) e mediu-se num FLIPR (Molecular Devices, captura de imagens de placas de 96 poços utilizando uma câmara CCD, com um laser de árgon a uma excitação de 480 nM).

Meio/tampões:

Meio de Crescimento: meio RPMI 1640 com L-glutamina (Invitrogen, Cat-N°. 61870-010), soro bovino fetal a 10 % (SBF, Summit Biotechnology Cat-N°. FP-100-05); piruvato de sódio 1 mM (Invitrogen Cat. N°. 11360-070).

Tampão de FLIPR: HBSS (Invitrogen, Cat-N°. 141175-079), CaCl2 2 mM (Sigma Cat-N°. C-4901), HEPES (Invitrogen, Cat-N°. 15630-080), probenecid 2,5 mM (Sigma, Cat-N°. P-8761), ASB a 0,1 % (Sigma, Cat-N°. A-7906), glicose 11 mM (Sigma, Cat-N°. G-7528) .

Detalhes da diluição do composto: para se conseguir a mais alta concentração do ensaio de 100 μΜ, adicionou-se 24 pL de uma solução concentrada do composto 10 mM (preparada em 120 DMSO) directamente a 57 6 yL de tampão de FLIPR. Diluiram-se os compostos do ensaio em tampão de FLIPR (utilizando um robot de pipetagem Biomek 2000) resultando no seguinte esquema de diluição: veiculo, 1,00 x 10~4 M, 1,00 x 10“5, 3,16 x IO-6, 1,00 x IO"6, 3,16 x IO"7, 1,00 x IO-7, 3,16 x IO-8.

Os aumentos intracelulares no cálcio foram relatados utilizando uma estatística de max - min (subtracção do valor inicial remanescente do pico causado pela adição do anticorpo estimulador, utilizando um controlo de FLIPR da Molecular Devices e um programa informático de exportação estatística. Determinou-se a CI5o utilizando um ajustamento de uma curva não-linear (programa informático Prism da GraphPad).

Exemplo 99: Composições farmacêuticas

Composição para administração oral (A)

Ingrediente % p/p Principio activo 20,0 % Lactose 79,5 % Estearato de magnésio 0,5 %

Misturam-se os ingredientes e distribuem-se em cápsulas contendo cerca de 100 mg cada; uma cápsula totalizará, aproximadamente, uma dose diária.

Composição para administração oral (B)

Ingrediente % p/p

Principio activo 20,0 Estearato de magnésio 0,5 % Croscarmelose sódica 2,0% Lactose 76, 5 121

Ingrediente % p/p PVP (polivinilpirrolidina) 1,0 %

Combinam-se os ingredientes e faz-se a sua granulação utilizando um dissolvente, tal como metanol. Seca-se então a formulação e transforma-se em comprimidos (contendo cerca de 20 mg de composto activo) com uma máquina apropriada para fazer comprimidos.

Composição para administração oral (C)

Ingrediente % p/p

Composto activo 1, 0 g Ácido Fumárico 0, 5 g Cloreto de sódio 2, 0 g Metil-parabeno 0, 15 g Propil-parabeno 0, 05 g Açúcar granulado 25 ,5 g Sorbitol (solução a 70 %) 12 , 85 g Veegum K (Vanderbilt Co.) 1, 0 g Aromatizante 0, 035 mL Corantes 0, 5 mg Água destilada q· s. até

Misturam-se os ingredientes para formar uma suspensão para administração oral.

Formulação parentérica (D)

Ingrediente % p/p Princípio activo 0,25 g Cloreto de sódio qs para tornar a solução isotónica Água para injecção até 100 mL 122

Dissolve-se o princípio activo numa porção de água para injecção. Depois adiciona-se uma quantidade suficiente de cloreto de sódio, com agitação, para tornar a solução isotónica. Leva-se a solução até ao peso com a água de injecção remanescente, filtra-se através de um filtro de membrana de 0,2 micron e embala-se em condições esterilizadas.

Formulação para supositórios (E)

Ingrediente % p/p Princípio activo 1,0% Polietileno-glicol 1000 74,5 % Polietileno-glicol 4000 24,5 %

Fundem-se os ingredientes em conjunto e misturam-se num banho de vapor e vertem-se em moldes de 2,5 g de peso total.

Formulação tópica (F)

Ingredientes

Composto activo Span 60 Tween 60 Óleo mineral Petrolato Metil-parabeno Propil-parabeno HAB (hidroxi-anisol gramas 0,2-2 2 2 5 10 0,15 0,05 butilado) 0,01 123 Água q. s . 100

Exemplo 100: Artrite induzida por colagénio em murganhos (AI Cm)

No dia 0 injectaram-se os murganhos na base da cauda ou em diversos pontos nas costas com uma emulsão de colagénio do tipo II (i.d.) em adjuvante de Freund completo (AFC) . No seguimento da imunização com colagénio, os animais desenvolveram artrite por volta do 21° até ao 35° dia. 0 inicio da artrite é sincronizado (reforçado) pela administração sistémica de colagénio em adjuvante de Freund incompleto (AFI; i.d.) no 21° dia. Examinaram-se os animais todos os dias a partir do 20° dia para observar qualquer inicio de artrite ligeira (pontuação de 1 ou 2; ver descrição da pontuação a seguir) que é o sinal para o reforço. No seguimento do reforço, fez-se a pontuação dos murganhos e deu-se uma dose com os agentes terapêuticos candidatos durante o tempo prescrito (normalmente 2-3 semanas) e a frequência da dose foi de, diária (QD) ou de duas vezes por dia (DVD).

Exemplo 101: Artrite induzida por colagénio em ratos (AlCr)

No dia 0, inj ectaram-se os ratos com uma emulsão de colagénio do tipo II de bovino, em adjuvante de Freund incompleto (AFI), injectada intradermicamente (i.d.) em vários locais nas costas. Dá-se uma injecção de reforço da emulsão de colagénio por volta do 7o dia (i.d.), na base da cauda ou em sitios alternativos nas contas. Observa-se normalmente a artrite 12-14 dias após a injecção inicial de colagénio. Os animais podem ser avaliados quanto ao desenvolvimento da artrite conforme se descreve a seguir (avaliação da artrite) a partir do 14° dia desde o inicio. 124 Dá-se aos animais doses com os agentes terapêuticos candidatos num modo preventivo, principiando no momento do segundo reforço e durante o tempo prescrito (normalmente 2—3 semanas) e a frequência da dose foi de, diária (QD) ou de duas vezes por dia (DVD).

Exemplo 102: Avaliação da artrite

Em ambos os modelos, o desenvolvimento da inflamação das patas e das articulações dos membros é quantificada utilizando um esquema de pontuação que envolve a avaliação das 4 patas seguindo os critérios descritos a seguir:

Pontuação: 1= edema e/ou vermelhidão da pata ou de um dedo. 2= edema em duas ou mais articulações. 3= grande edema da pata com mais do que duas articulações envolvidas. 4= artrite grave de toda a pata e dos dedos.

As avaliações são feitas no dia 0 para medir a linha de base e começam novamente nos primeiros sinais ou no edema, durante, pelo menos, três vezes por semana até ao fim da experiência. 0 indice artrítico para cada murganho obtém-se por adição de quatro pontuações das patas individuais, dando uma pontuação máxima de 16 por animal. A invenção anterior tem sido descrita com algum detalhe a titulo ilustrativo e exemplificativo, para fins de clarificação e entendimento. Será óbvio para um especialista na matéria que podem praticar-se alterações e modificações dentro do âmbito das reivindicações em anexo. Por isso, deve entender-se que a descrição anterior é feita a titulo ilustrativo e não restritivo. 0 âmbito da presente invenção 125 referência à memória deve ser determinado que se seguem. deve por isso ser determinado não com descritiva anterior mas, em vez disso, com referência às reivindicações anexas

Lisboa, 8 de Julho de 2013. 126

Claims (14)

1. REIVINDICAÇÕES 1. Composto de fórmula I, II ou III

   caracterizado pelo facto de: R representar H, -R1, -R1-R2-R°, -R1_R3 ou -R2-R3; R1 representar arilo, heteroarilo, cicloalquilo ou heterocicloalquilo e está eventualmente substituído com um ou mais alquilo Ci-6, hidroxi, hidroxi-alquilo Ci-6, alcoxi Ci-6 r haloqéneo, nitro, amino, amido, ciano, oxo ou haloqeno-alquilo Ci-6; R2 representar -C (=0) , -C(=0)0, -C(=0)NR2, -NHC (=0) 0, -C (=NH) NR2 ou -S(=0)2; em que R2 representa H ou alquilo Ci-e; R3 representar H ou R4; em que R4 representa alquilo Ci_6, amino, arilo, arilalquilo, alquil-arilo, heteroarilo, alquil-heteroarilo, hetero-aril-alquilo, cicloalquilo, alquil-cicloalquilo, cicloalquil-alquilo, heterocicloalquilo, alquil-heterocicloalquilo ou heterocicloalquil-alquilo e está eventualmente substituído com um ou mais alquilo Ci-6, hidroxi, alcoxi Ci_6, hidroxi-alquilo Ci-6, hidroxi-alcoxi Ci-6, (alquil Ci_6) -sulfonilo, (alquil Ci-6)-sulf onamida, carbamato, 1 carboxi, éster, amido, acilo, halogéneo, nitro, amino, ciano, oxo ou halogeno-alquilo Ci-ε; X representar CH ou N; Y1 representar H, alquilo Ci-6 ou halogenoalquilo Ci_6; cada Y2 representar, independentemente, halogéneo, oxima ou alquilo Ci_6, em que o alquilo Ci-6 está eventualmente substituído com um ou mais substituintes seleccionados no grupo que consiste em hidroxi, alcoxi Ci_6, halogenoalcoxi Ci-6, halogenoalquilo Ci-e, carboxi, amino e halogéneo; n representar 0, 1, 2 ou 3; Y3 representa H, halogéneo ou alquilo Ci-β, em que o alquilo Ci-6 está eventualmente substituído com um ou mais substituintes seleccionados no grupo que consiste em hidroxi, alcoxi Ci-β, amino e halogéneo; m representar 0 ou 1; Y4 representar Y4a, Y4b, Y4c ou Y4cl; em que Y4a representa H ou halogéneo; Y4b representa alquilo Ci-6, eventualmente substituído com um ou mais substituintes seleccionados no grupo que consiste em halogenoalquilo Ci_6, halogéneo, hidroxi, amino, ciano e alcoxi Ci-6; Y4c representa cicloalquilo Ci-β, eventualmente substituído com um ou mais substituintes seleccionados no grupo que consiste em alquilo Ci-6, halogenoalquilo Ci-6, halogéneo, hidroxi, amino, ciano e alcoxi Ci-β; e Y4d representa amino, eventualmente substituído com um ou mais alquilo Ci-6/ alcoxi-alquilo Ci-6 ou hidroxi-alquilo Ci-6; 2 ou um seu sal aceitável sob o ponto de vista farmacêutico.
2. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo facto de ter a fórmula I.
3. 3 em que Y5 representa halogéneo, alquilo Ci-6 ou halogenoalquilo Ci_6;

   em que Y5 e Y6 representam, independentemente, H, alquilo Ci-6 ou halogenoalquilo Ci_6, Y5 /

   em que Y5 e Y6 representam, independentemente, H ou alquilo Ci-6 ou N V6

   em que Y5 e Y6 representam, independentemente, H, alquilo Ci-6 ou halogenoalquilo Ci-6.

   3. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo facto de ter a fórmula II.
4. 4. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo facto de ter a fórmula III.
5. 5. Composto, de acordo com a reivindicação 2, 3 ou 4, caracterizado pelo facto de Y1 representar metilo.
6. 6. Composto, de acordo com a reivindicação 2, 3 ou 4, caracterizado pelo facto de X representar CH.
7. 7. Composto, de acordo com a reivindicação 2, 3 ou 4, caracterizado pelo facto de n representar 1 e m representar 0.
8. 8. Composto, de acordo com a reivindicação 2, 3 ou 4, caracterizado pelo facto de Y3 representar H.
9. 9. Composto, de acordo com a reivindicação 2, 3 ou 4, caracterizado pelo facto de Y2 representar metilo, hidroximetilo, hidroxietilo ou halogéneo.
10. 10. Composto, de acordo com a reivindicação 2, 3 ou 4, caracterizado pelo facto de Y4 representar
11. 11. Composto, de acordo com a reivindicação 2, 3 ou 4, caracterizado pelo facto de R representar -R1-R2-R3; em que R1 representa fenilo ou piridilo; R2 representa -C (=0); R3 representa R4; e R4 representa morfolina ou piperazina, eventualmente substituídas com um ou mais alquilo Ci-6.
12. 12. Composto, de acordo com uma qualquer das reivindicações 1-11, caracterizado pelo facto de se utilizar no tratamento de estados clínicos inflamatórios e/ou auto- 4 imunes, por exemplo, artrite ou na inibição da proliferação das células B.
13. 13. Composição farmacêutica, caracterizada pelo facto de conter um composto inibidor de tcB, de acordo com uma qualquer das reivindicações 1-11, misturado com pelo menos um veiculo, excipiente ou diluente aceitável sob o ponto de vista farmacêutico.
14. 14. Utilização de um composto de fórmula I, de acordo com uma qualquer das reivindicações 1-11, caracterizada pelo facto de se destinar à preparação de um medicamento para o tratamento de um estado clinico inflamatório e/ou auto-imune. Lisboa, 8 de Julho de 2013. 5