PT2125792E

PT2125792E - Derivados de purina como imunomoduladores

Info

Publication number: PT2125792E
Application number: PT08716859T
Authority: PT
Inventors: Linos Lazarides; Stephen Allan Smith; Richard Stocker; Colin Jack Theobald
Original assignee: Glaxosmithkline Llc
Priority date: 2007-02-19
Filing date: 2008-02-15
Publication date: 2011-03-01
Also published as: TW200843779A; PL2125792T3; ATE490249T1; JP2010519186A; SI2125792T1; DK2125792T3; EP2125792B1; US20110269781A1; US20120283438A1; US20100120799A1; CY1111281T1; CL2008000496A1; HRP20110115T1; US20090131458A1; AR065372A1; WO2008101867A1; US7977344B2; EP2125792A1; DE602008003764D1

Description

DESCRIÇÃO "DERIVADOS DE PURINA COMO IMUNOMODULADORES"

Antecedentes da Invenção A presente invenção refere-se a compostos, a processos para a sua preparação, a composições contendo-os, à sua utilização no tratamento de vários distúrbios, em particular, doenças infecciosas, cancro e doenças alérgicas e outros estados inflamatórios, por exemplo, rinite alérgica e asma, e como adjuvantes de vacinas.

Os vertebrados são constantemente ameaçados pela invasão de microrganismos e desenvolveram mecanismos de defesa imunitária para eliminar agentes patogénicos infecciosos. Nos mamíferos, este sistema imunitário compreende dois ramos; a imunidade inata e a imunidade adquirida. A primeira linha de defesa do hospedeiro é o sistema imunitário inato, o qual é mediado por macrófagos e células dendríticas. A imunidade adquirida envolve a eliminação dos agentes patogénicos nas etapas tardias da infecção e também possibilitam a geração de memória imunológica. A imunidade adquirida é extremamente específica, devido ao vasto reportório de linfócitos com receptores específicos para o antigénio que sofreram rearranjo de gene.

Inicialmente pensou-se que a resposta imunológica inata era não específica, mas sabe-se agora que é capaz de discriminar entre o próprio e uma diversidade de agentes patogénicos. 0 sistema imunitário inato reconhece micróbios via um número 1 limitado de receptores de reconhecimento de padrões codificados por linhas germinais (PRR) os quais têm um número de caracteristicas importantes. Os PRR reconhecem componentes microbianos, conhecidos como padrões moleculares associados a agentes patogénicos (PAMP), os quais são essenciais para a sobrevivência do microrganismo. Os PRR são constitutivamente expressos no hospedeiro em todas as células de um dado tipo e são independentes da memória imunológica. Estes receptores incluem os receptores de tipo Toll (TLR) recentemente identificados, os receptores do tipo domínio de oligomerização de nucleótidos (NLR) e receptores tipo gene indutíveis por ácido retinóico (RLR) (Creagh EM, 0'Neill LA., Trends Immunol. 2006 27(8) :352-7) .

Fundamentais para a geração de uma resposta imunológica inata eficaz em mamíferos são os mecanismos que determinam a indução de interferões e outras citocinas que actuam nas células para induzir um número de efeitos. Estes efeitos podem incluir a activação da expressão de genes anti-infecciosos, a activação da apresentação de antigénios em células para impelir uma imunidade específica para o antigénio forte e a promoção de fagocitose em células fagocitárias. 0 interferão foi descrito pela primeira vez como uma substância que podia proteger as células de infecção virai (Isaacs & Lindemann, J. Vírus Interference. Proc. R. Soc. Lon. Ser. B. Bíol. Sei. 1957, 147:258-267). No homem, os interferões de tipo I são uma família de proteínas relacionadas codificadas por genes no cromossoma 9 e que codificam pelo menos 13 isoformas de interferão alfa (IFNa) e uma isoforma de interferão beta (ΙΕΝβ). 0 IFNa foi o primeiro agente terapêutico biológico aprovado e tornou-se uma terapia importante em infecções virais 2 e no cancro. Além da actividade antiviral directa nas células, os interferões são conhecidos como sendo moduladores potentes da resposta imunológica, actuando nas células do sistema imunitário.

Como uma terapia de primeira linha para a doença do vírus da hepatite C (HCV), as associações de interferão podem ser extremamente eficazes na redução da carga virai e, em alguns indivíduos, na eliminação da replicação virai. No entanto, muitos doentes não são capazes de mostrar uma resposta virai sustentada e nestes doentes a carga virai não é controlada. Além disso, a terapia com interferão injectável pode estar associada a um número de efeitos prejudiciais indesejados os quais se demonstrou que afectam a adesão à terapia (Dudley T, 0'Donnell K, Haydon G, Mutímer D. Gut. 2006 55 (9) : 1362-3) . A administração de um composto de molécula pequena que pudesse estimular a resposta imunológica inata, incluindo a activação de interferões de tipo I e outras citocinas, poderia tornar-se uma estratégia importante para o tratamento ou prevenção de doenças humanas incluindo infecções virais. Este tipo de estratégia imunomoduladora tem o potencial de identificar compostos que podem ser úteis não só em doenças infecciosas mas em cancro (Kríeg. Curr. Oncol. Rep. 2004; 6(2):88-95), doenças alérgicas (Moisan et al., Am. J. Physiol. Lung Cell Mol. Physiol. 2005; 290(5):L987-95), outros estados inflamatórios, tal como doença do intestino irritável (Rakoff-Nahoum S., Cell. 2004, 23;118(2):229-41) e como adjuvantes de vacinas (Persing et al. Trends Microbiol. 2002; 10(10 Suppl) :S32-7) . 3

Os mecanismos que conduzem à indução de interferões de tipo I são apenas parcialmente compreendidos. Um mecanismo que pode conduzir à indução de interferão em muitos tipos de células é o reconhecimento de ARN virai de hélice dupla pelas ARN-helicases RIG-I e MDA5. Pensa-se que este mecanismo seja o mecanismo primário pelo qual os interferões são induzidos por infecção de células pelo vírus Sendai.

Outros mecanismos para a indução de interferões são via eventos de sinalização dependentes de TLR. No homem, as células dendríticas plasmocitárias (pDC) são células produtoras de interferão profissionais, capazes de produzir grandes quantidades de interferões em resposta a, por exemplo, infecção virai. Estas pDC expressam, de um modo preferido, TLR7 e TLR9 e a estimulação destes receptores com ARN ou ADN virai, respectivamente, pode induzir a expressão de interferão alfa.

Foram descritos agonistas oligonucleotídicos de TLR7 e TLR9 e agonistas de molécula pequena à base de purina de TLR7 que podem induzir o interferão alfa a partir destes tipos de células em animais e no homem (Takeda K. et al, Annu. Rev. Immunol., 2003, 21:335-76). Os agonistas de TLR7 incluem compostos de imidazoquinolina, tais como imiquimod e resiquimod, análogos de oxoadenina e também análogos de nucleósidos, tais como loxoribina e 7-tia-8-oxoguanosina os quais se sabe desde há longa data que induzem o interferão alfa.

Permanece por esclarecer como é que compostos de molécula pequena tipo purina podem induzir interferões de tipo I e outras citocinas uma vez que não foram identificados os alvos moleculares destes indutores conhecidos. No entanto, desenvolveu-se uma estratégia de ensaio para caracterizar 4 indutores de molécula pequena do interferão humano IFNa (independentemente do mecanismo) a qual se baseia na estimulação de células doadoras humanas primárias com compostos, e é aqui descrita.

Breve Descrição da Invenção

Foi demonstrado que os compostos da invenção são indutores de interferão humano e podem possuir um perfil melhorado em relação a indutores conhecidos do interferão humano, por exemplo, potência melhorada. Os compostos que induzem o interferão humano podem ser úteis no tratamento de vários distúrbios, por exemplo, no tratamento de doenças infecciosas, cancro e doenças alérgicas e outros estados inflamatórios, por exemplo, rinite alérgica e asma, e também podem ser úteis como adjuvantes de vacinas.

Sumário da Invenção

Num primeiro aspecto são proporcionados compostos de fórmula (I):

em que 5 R1 é alquilCi_8amino, alcoxiloCi_8^ cicloalquilC3-7alquilCi-6amino, cicloalquilC3-7alcoxiloCi_6/· alcoxiCi-3alcoxiloC2_3 ou

Hetb-alcoxiloCi_3;

Hetb é um heterociclo alifático saturado de 5 ou 6 membros contendo um átomo de oxigénio; R2 é - (CH2) n-Het; n é um número inteiro possuindo um valor de 1 a 4;

Het é um heterociclo alifático saturado de 5 ou 6 membros contendo um heteroátomo de oxigénio, heterociclo esse que pode estar substituído com um ou dois grupos alquiloCi-4; e os seus sais e solvatos.

Numa outra forma de realização, R1 é alquilCi_6amino, alcoxiloCi-87 cicloalquilC3_7alquilCi_6amino, cicloalquilC3_7alcoxiloCi_6, alcoxiCi_3alcoxiloC2-3 ou

Hetb-alcoxiloCi_3.

Numa outra forma de realização, R1 é n-butoxilo, n-butilamino, 2,2-dimetilpentiloxilo, n-pentilamino, 3-metilbutoxilo, 2-metilbutoxilo, 1-metilbutoxilo, 2-metilbutilamino, 3-metilbutilamino, 1-metilbutilamino, 2-(ciclopropil)etoxilo, 2-(etoxi)etoxilo, (l-metil-2-metoxi)etoxilo, ciclo-hexilmetilamino, ciclopentilmetilamino, 2-(ciclopropil)etilamino, 2-(metil)propoxilo, ciclo-hexilmetoxilo, metoxietoxilo, (2-tetra-hidrofuranil)metoxilo, (2-tetra-hidro-2H-piranil)metoxilo ou 2-(iso-propoxi)etoxilo. 6

Numa outra forma de realização, R1 é n-butilamino, n-butoxilo ou 2-(ciclopropil)etoxilo.

Numa outra forma de realização, R1 é n-butilamino, n-butoxilo, (R)-1-metilbutiloxilo, (S)-1-metilbutiloxilo ou 2- (ciclopropil)etoxilo.

Numa outra forma de realização, n é 1.

Numa outra forma de realização, n é 2.

Numa outra forma de realização, n é 3.

Numa outra forma de realização, n é 4.

Numa outra forma de realização, Het é tetra-hidrofuran-3-ilo, tetra-hidro-2H-piran-3-ilo, tetra-hidro-2H-piran-4-ilo, tetra-hidrofuran-2-ilo, 2,2-dimetiltetra-hidro-2tf-piran-4-ilo ou tetra-hidro-2/í-piran-2-ilo.

Numa outra forma de realização, Het é tetra-hidro-2H-piran-4-ilo, tetra-hidrofuran-2-ilo, tetra-hidro-2H-piran-3-ilo, tetra-hidro-2/í-piran-2-ilo ou tetra-hidrofuran-3-ilo.

Numa outra forma de realização, Het é tetra-hidro-2H-piran- 3- ilo.

Numa outra forma de realização, Het é tetra-hidro-2H-piran- 4- ilo, tetra-hidro-2H-piran-3-ilo, tetra-hidro-2H-piran-2-ilo, 2,2-dimetiltetra-hidro-2H-piran-4-ilo, tetra-hidrofuran-3-ilo ou tetra-hidro-2H-piran-2-ilo. 7

Numa outra forma de realização, quando n é 1, então Het é tetra-hidrofuran-3-ilo, tetra-hidro-2H-piran-3-ilo, tetra-hidro-2H-piran-4-ilo, tetra-hidrofuran-2-ilo, 2,2-dimetiltetra-hidro-2H-piran-4-ilo ou tetra-hidro-2H-piran-2-ilo.

Numa outra forma de realização, quando n é 2, então Het é tetra-hidro-2H-piran-4-ilo, tetra-hidrofuran-2-ilo, tetra-hidro-2H-piran-3-ilo, tetra-hidro-2H-piran-2-ilo ou tetra-hidrof uran-3-ilo.

Numa outra forma de realização, quando n é 3, então Het é tetra-hidro-2H-piran-3-ilo.

Numa outra forma de realização, quando n é 4, então Het é tetra-hidro-2H-piran-3-ilo.

Numa outra forma de realização, quando n é 1, então R2 é tetra-hidro-2tf-piran-4-ilo ou tetra-hidrofuran-3-ilo.

Numa outra forma de realização, quando n é 2, então Het é tetra-hidro-2H-piran-4-ilo, tetra-hidro-2H-piran-3-ilo, tetra- hidro-2H-piran-2-ilo, 2,2-dimetiltetra-hidro-2H-piran-4-ilo, tetra-hidrofuran-3-ilo ou tetra-hidrofuran-2-ilo.

Numa outra forma de realização, quando n é 3, então Het é tetra-hidro-2H-piran-4-ilo, tetra-hidro-2H-piran-3-ilo, tetra- hidro-2H-piran-2-ilo, 2,2-dimetiltetra-hidro-2H-piran-4-ilo, tetra-hidrofuran-3-ilo ou tetra-hidrofuran-2-ilo.

Numa outra forma de realização, quando n é 4, então Het é tetra-hidro-2H-piran-4-ilo, tetra-hidro-2H-piran-3-ilo, tetra- hidro-2H-piran-2-ilo, 2,2-dimetiltetra-hidro-2H-piran-4-ilo, tetra-hidrofuran-3-ilo ou tetra-hidrofuran-2-ilo.

Num outro aspecto da invenção é proporcionado um subconjunto de compostos de fórmula (I), que são compostos de fórmula (I') : NH.

em que R1' é n-butilamino, n-butoxilo ou ciclopropiletoxilo; R2' é - (CH2) n-Het'; n' é 1 ;

Het' é tetra-hidro-2H-piran-4-ilo ou tetra-hidro-3-furanilo; e os seus sais e solvatos.

Num outro aspecto da invenção, é proporcionado um subconjunto de compostos de fórmula (I), que são compostos de fórmula (I") :

NH

R (r) 9 em que R1 é n-butilamino, n-butoxilo, (R)-1-metilbutiloxilo, (S)-1-metilbutiloxilo ou 2-(ciclopropil)etoxilo; R2" é - (CH2) nn-Het"; n" é 2, 3 ou 4;

Het" é tetra-hidro-2/í-piran-4-ilo, tetra-hidro-2/í-piran-3-ilo, tetra-hidro-2ff-piran-2-ilo, 2,2-dimetiltetra-hidro-2.fi-piran-4-ilo, tetra-hidrofuran-3-ilo ou tetra-hidrofuran-2-ilo; e os seus sais e solvatos.

Num outro aspecto da invenção é proporcionado um subconjunto de compostos de fórmula (I), que são compostos de fórmula (IA):

em que R1a é alquilCi-6amino ou alcoxiloCi_6; R2a é - (CH2)nA-HetA; nA é um número inteiro possuindo um valor de 1 a 4;

HetA é um heterociclo alifático saturado de 5 ou 6 membros contendo um heteroátomo de oxiqénio; 10 e os seus sais e solvatos.

Numa outra forma de realização, R1A é n-butoxilo ou n-butilamino.

Numa outra forma de realização, nA é 1 ou 2,

Numa outra forma de realização, quando nA é 1, então HetA é tetra-hidrofuran-3-ilo, tetra-hidro-2ií-piran-3-ilo ou tetra-hidro-2fí-piran-4-ilo.

Exemplos de compostos de fórmula (I) são proporcionados na lista seguinte e formam um outro aspecto da invenção: 6-amino-2-butoxi-9- (tetra-hidro-2ff-piran-4-ilmetil) -7, 9-di-hidro-8H-purin-8-ona; 6-amino-2-butoxi-9-(tetra-hidro-2H-piran-2-ilmetil)-7,9-di-hidro-8f7-purin-8-ona; 6-amino-2-butoxi-9-(tetra-hidrofuran-2-ilmetil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona; 6-amino-2-butilamino-9-(tetra-hidro-2H-piran-4-ilmetil)- 7.9- di-hidro-8H-purin-8-ona; 6-amino-2-butilamino-9-(tetra-hidro-2H-piran-2-ilmetil)-7, 9-di-hidro-8H-purin-8-ona; 6-amino-2-butilamino-9-(tetra-hidrofuran-2-ilmetil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona; 6-amino-2-butilamino-9-[2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)etil]- 7.9- di-hidro-8H-purin-8-ona; 6-amino-2-butilamino-9-(tetra-hidrofuran-3-ilmetil)-7,9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2-butilamino-9-(tetra-hidro-2H-piran-3-ilmetil)- 7.9- di-hidro-8H-purin-8-ona; 11 6-amino-2-butoxi-9-(tetra-hidrofuran-3-ilmetil)-7,9-di-hidro-8fí-purin-8-ona; 6-amino-2-butoxi-9- [2- (tetra-hidro-2f7-piran-4-il) etil] -7, 9 di-hidro-8H-purin-8-ona; 6-amino-2-butoxi-9-(tetra-hidro-2H-piran-3-ilmetil)-7,9-di hidro-8fí-purin-8-ona; 6-amino-2-butoxi-9-[2-(tetra-hidrofuran-2-il)etil]-7,9-di-hidro-8£f-purin-8-ona; 6-amino-2-butilamino-9-[2-(tetra-hidrofuran-2-il)etil] -7, 9 di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2-butoxi-9- [2- (tetra-hidro-2f7-piran-3-il) etil] -7, 9 di-hidro-8H-purin-8-ona; 6-amino-2-butilamino-9- [2- (tetra-hidro-2fí-piran-3-il) etil] 7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona; 6-amino-2-[(2,2-dimetilpentil)oxi]-9-(tetra-hidro-2H-piran 4-ilmetil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona; 6-amino-2-(pentilamino)-9-(tetra-hidro-2fí-piran-4-ilmetil) 7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2-[(3-metilbutil)oxi]-9-(tetra-hidro-2H-piran-4-ilmetil) -7, 9-di-hidro-8íf-purin-8-ona; 6-amino-2- [ (2-metilbutil) oxi] -9- (tetra-hidro-2H-piran-4-ilmetil) -7,9-di-hidro-8íí-purin-8-ona; 6-amino-2- [ (1-metilbutil) oxi] -9- (tetra-hidro-2/í-piran-4-ilmetil) -7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2-[(2-metilbutil)amino]-9-(tetra-hidro-2íf-piran-4-ilmetil) -7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2-[(3-metilbutil)amino]-9-(tetra-hidro-2H-piran-4-ilmetil) -7,9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2-[(1-metilbutil)amino]-9-(tetra-hidro-2H-piran-4-ilmetil) -7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-9-(tetra-hidro-3-f uranilmetil) -7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 12 6-amino-2-butiloxi-9-[2-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)etil]- 7.9- di-hidro-8H-puin-8-ona; 6-amino-2-butiloxi-9-[(2,2-dimetiltetra-hidro-2i7-piran-4-il)metil]-7, 9-di-hidro-8H-purin-8-ona; 6-amino-2-(butilamino)-9-[(2,2-dimetiltetra-hidro-2ií-piran 4-il)metil]-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona; 6-amino-2-butiloxi-9-[2-(tetra-hidro-3-furanil)etil] -7, 9-di-hidro-8íf-purin-8-ona; 6-amino-2-(butilamino)-9-[2-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)etil]-7, 9-di-hidro-8H-purin-8-ona; 6-amino-2-(butilamino)-9-[2-(tetra-hidro-3-furanil)etil]- 7.9- di-hidro-8H-purin-8-ona; 6-amino-2-(butiloxi)-9-(tetra-hidro-3-furanilmetil)-7,9-di hidro-8H-purin-8-ona, isómero 1; 6-amino-2-(butiloxi)-9-(tetra-hidro-3-furanilmetil)-7, 9-di hidro-8H-purin-8-ona, isómero 2; 6-amino-2-{ [2- (etiloxi) etil] oxi}-9- (tetra-hidro-2íí-piran-4 ilmetil) -7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2-{[l-metil-2-(metoxi)etil]oxi}-9-(tetra-hidro-2/ί-piran-4-ilmetil) -7, 9-di-hidro-8íí-purin-8-ona; 6-amino-2-{ [2 - (etiloxi) etil] oxi}-9- (tetra-hidro-2fí-piran-3 ilmetil) -7, 9-di-hidro-8f7-purin-8-ona; 6-amino-2-{[l-metil-2-(metoxi)etil]oxi}-9-(tetra-hidro-2/ί-piran-3-ilmetil) -7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2- [ (ciclo-hexilmetil) amino] -9- (tetra-hidro-2fí-piran-4-ilmetil) -7, 9-di-hidro-8f7-purin-8-ona; 6-amino-2-[(ciclopentilmetil)amino]-9-(tetra-hidro-2H-piran-4-ilmetil) -7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2-[(2-ciclopropiletil)amino]-9-(tetra-hidro-2H-piran-4-ilmetil) -7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2-(butilamino)-9-(tetra-hidro-3-furanilmetil)-7,9-di-hidro-8i7-purin-8-ona, isómero 1; 13 6-amino-2-(butilamino)-9-(tetra-hidro-3-furanilmetil)-7,9-di-hidro-8Jí-purin-8-ona, isómero 2; 6-amino-2- [ (2-metilpropil) oxi] -9- (tetra-hidro-2fí-piran-4-ilmetil) -7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona; 6-amino-2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-9-(tetra-hidro-2H-piran 4-ilmetil) -7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona; 6-amino-2- [ (ciclo-hexilmetil) oxi] -9- (tetra-hidro-2fí-piran-4-ilmetil) -7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2-{[2-(metoxi)etil]oxi}-9-(tetra-hidro-2H-piran-4-ilmetil) -7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona; 6-amino-2-{[2-(metoxi)etil]oxi}-9-(tetra-hidro-3-furanilmetil) - 7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2-[(tetra-hidro-2-furanilmetil)oxi]-9-(tetra-hidro 2fí-piran-4-ilmetil) -7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2- (butilamino) -9- [3- (tetra-hidro-2ií-piran-3-il)propil] -7, 9-di-hidro-8íf-purin-8-ona; 6-amino-9-(tetra-hidro-2H-piran-4-ilmetil)-2-[(tetra-hidro 2H-piran-2-ilmetoxi]-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona; 6-amino-2-({2-[(1-metiletil)oxi]etil}oxi)-9-(tetra-hidro-2H-piran-4-ilmetil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona; 6-amino-2- (butilamino) - 9- [4 - (tetra-hidro-2ií-piran-3-il) butil] -7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2-[(2-ciclopropiletil)amino]-9-(tetra-hidro-3-furanilmetil) -7, 9-di-hidro-8il-purin-8-ona; 6-amino-2-[(2-ciclopropiletil)amino]-9-(tetra-hidro-2ií-piran-3-ilmetil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona; 6-amino-2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-9-(tetra-hidro-3-furanilmetil)-7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona, isómero 1, e; 6-amino-2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-9-[tetra-hidro-3-furanilmetil]-7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona, isómero 2; e os seus sais e solvatos. 14

Os seguintes compostos de fórmula (I) formam um outro aspecto da invenção: 6-amino-2-(butiloxi)-9-(tetra-hidro-3-furanilmetil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona, isómero 1; 6-amino-2-butilamino-9-(tetra-hidro-2fí-piran-4-ilmetil)-7, 9-di-hidro-8/í-purin-8-ona; 6-amino-2-(butiloxi)-9-(tetra-hidro-3-furanilmetil)-7, 9-di-hidro-8H-purin-8-ona, isómero 2; 6-amino-2-(butilamino)-9-(tetra-hidro-3-furanilmetil)-7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona, isómero 1; 6-amino-2-(butilamino)-9-(tetra-hidro-3-furanilmetil)-7,9-di-hidro-8fí-purin-8-ona, isómero 2; 6-amino-2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-9-(tetra-hidro-3-furanilmetil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona, isómero 1, e; 6-amino-2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-9-[tetra-hidro-3-furanilmetil]-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona, isómero 2; e os seus sais e solvatos.

Os seguintes compostos de fórmula (I) formam um outro aspecto da invenção: 6-amino-2-butoxi-9-[2-(tetra-hidrofuran-2-il)etil]-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona, isómero 1; 6-amino-2-butoxi-9-[2-(tetra-hidrofuran-2-il)etil]-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona, isómero 2; 6-amino-2-butilamino-9-[2-(tetra-hidro-2H-piran-3-il)etil]-7, 9-di-hidro-8H-purin-8-ona. isómero 1; 6-amino-2-butilamino-9-[2-(tetra-hidro-2H-piran-3-il)etil]-7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona. isómero 2; 15 6-amino-2-butiloxi-9-[2-(tetra-hidro-2i7-piran-2-il)etil]-1, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona, isómero 1; 6-amino-2-butiloxi-9- [2- (tetra-hidro-2i7-piran-2-il) etil] -7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona, isómero 2; 6-amino-2-butiloxi-9-[(2,2-dimetiltetra-hidro-2H-piran-4-il) metil ]-7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona, isómero 1; 6-amino-2-butiloxi-9-[(2,2-dimetiltetra-hidro-2i7-piran-4-il) metil ]-7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona, isómero 2; 6-amino-2-(butilamino)-9-[3-(tetra-hidro-2-furanil)propil] 7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona; 6-amino-2-(butilamino)-9-[4-(tetra-hidro-2-furanil)butil]-7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2-(butilamino)—9 — {2—[(3S)-tetra-hidro-3-furanil]etil}-7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona; 6-amino-2-(butilamino)—9 — {2—[(3R)-tetra-hidro-3-furanil]etil}-7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2-(butilamino)-9-[3-(tetra-hidro-3-furanil)propil] 7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2-(butilamino)-9-[4-(tetra-hidro-3-furanil)butil]-7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2- (butilamino) -9- [3- (tetra-hidro-2fí-piran-2-il)propil] -7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2- (butilamino) -9- [4- (tetra-hidro-2/í-piran-2-il) butil] - 7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2- (butilamino) -9- [3- (tetra-hidro-2fí-piran-4-il) propil] -7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2- (butilamino) -9- [4- (tetra-hidro-2il-piran-4-il) butil ] - Ί, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2- (butilamino) - 9- [2 - (2,2-dimetiltetra-hidro-2fí-piran-4-il)etil]-7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2- (butilamino) - 9- [3 - (2,2-dimetiltetra-hidro-2i7-piran-4-il)propil] -Ί, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 16 6-amino-2-(butilamino)-9-[4-(2,2-dimetiltetra-hidro-2i7-piran-4-il) butil] - 7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona; 6-amino-2-(butiloxi)-9-[3-(tetra-hidro-2-furanil)propil]-7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2-(butiloxi)-9-[4-(tetra-hidro-2-furanil)butil]-7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona; 6-amino-2-(butiloxi)—9 — {2—[(3S)-tetra-hidro-3-furanil]etil}-7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona; 6-amino-2-(butiloxi)—9 — {2—[(3R)-tetra-hidro-3-furanil]etil}-7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona; 6-amino-2-(butiloxi)-9-[3-(tetra-hidro-3-furanil)propil]-7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona; 6-amino-2-(butiloxi)-9-[4-(tetra-hidro-3-furanil)butil]-7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona; 6-amino-2- (butiloxi) -9- [3- (tetra-hidro-2fí-piran-2-il) propil] -7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2- (butiloxi) -9- [4- (tetra-hidro-2fí-piran-2-il) butil] -7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2- (butiloxi) -9- [3- (tetra-hidro-2i7-piran-3-il) propil] -7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2- (butiloxi) -9- [4- (tetra-hidro-2fí-piran-3-il) butil] -7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2- (butiloxi) -9- [3- (tetra-hidro-2/í-piran-4-il) propil] -7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2- (butiloxi) -9- [4- (tetra-hidro-2fí-piran-4-il) butil] - 7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2- (butiloxi) -9- [2- (2,2-dimetiltetra-hidro-2ií-piran 4-il) etil] -Ί, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2- (butiloxi) -9- [3- (2,2-dimetiltetra-hidro-2fí-piran 4-il)propil] -7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2- (butiloxi) -9- [4- (2,2-dimetiltetra-hidro-2i7-piran 4-il) butil ] - Ί, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 17 6-amino-2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-9-[2-(tetra-hidro-2-furanil) etil] -7, 9-di-hidro-8f7-purin-8-ona; 6-amino-2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-9-[3-(tetra-hidro-2-furanil) propil] -7, 9-di-hidro-8ií-purin-8-ona; 6-amino-2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-9-[4-(tetra-hidro-2-furanil) butil] -7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona; 6-amino-2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-9-[2-(tetra-hidro-3-furanil) etil] -7, 9-di-hidro-8ií-purin-8-ona; 6-amino-2-[(2-ciclopropiletil)oxi]— 9 — {2 —[(3S)-tetra-hidro 3-furanil]etil}-7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona; 6-amino-2-[(2-ciclopropiletil)oxi]— 9 — {2 —[(3R)-tetra-hidro 3-furanil]etil}-7, 9-di-hidro-8ií-purin-8-ona 6-amino-2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-9-[3-(tetra-hidro-3-furanil) propil] -7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona; 6-amino-2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-9-[4-(tetra-hidro-3-furanil) butil] -7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2- [ (2-ciclopropiletil) oxi] -9- [2- (tetra-hidro-2.fi-piran-2-il) etil] - 7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2- [ (2-ciclopropiletil) oxi] -9- [3- (tetra-hidro-2.fi-piran-2-il)propil] -7, 9-di-hidro-8ii-purin-8-ona; 6-amino-2- [ (2-ciclopropiletil) oxi] -9- [4- (tetra-hidro-2.fi-piran-2-il) butil] - 7, 9-di-hidro-8fi-purin-8-ona; 6-amino-2- [ (2-ciclopropiletil) oxi] -9- [2- (tetra-hidro-2ff-piran-3-il)etil]-7, 9-di-hidro-8ii-purin-8-ona; 6-amino-2- [ (2-ciclopropiletil) oxi] -9- [4- (tetra-hidro-2fi-piran-3-il)butil] - 7, 9-di-hidro-8fi-purin-8-ona; 6-amino-2- [ (2-ciclopropiletil) oxi] -9- [2- (tetra-hidro-2ii-piran-4-il)etil]-7, 9-di-hidro-8ii-purin-8-ona; 6-amino-2- [ (2-ciclopropiletil) oxi] -9- [3- (tetra-hidro-2fi-piran-4-il)propil]-7,9-di-hidro-8h-purin-8-ona; 6-amino-2- [ (2-ciclopropiletil) oxi] -9- [4- (tetra-hidro-2.fi-piran-4-il) butil] - Ί, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 18 6-amino-2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-9-[2-(2,2-dimetiltetra hidro-2H-piran-4-il) etil] -7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona; 6-amino-2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-9-[3-(2,2-dimetiltetra hidro-2fí-piran-4-il)propil] -7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-9-[4-{2,2-dimetiltetra hidro-2íí-piran-4-il) butil] -7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona; 6-amino-2-{[(15)-1-metilbutil]oxi}-9-[2-(tetra-hidro-2-furanil) etil] -7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2-{[(15)-1-metilbutil]oxi}-9-[3-(tetra-hidro-2-furanil)propil]-7,9-di-hidro-85-purin-8-ona; 6-amino-2-{[(15)-1-metilbutil]oxi}-9-{2-[(35)-tetra-hidro 3-furanil]etil}-7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2-{[(15)-1-metilbutil]oxi}-9-{2-[(3R)-tetra-hidro 3-furanil]etil}-7,9-di-hidro-85-purin-8-ona; 6-amino-2-{[(15)-1-metilbutil]oxi}-9-[3-(tetra-hidro-3-furanil)propil]-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona; 6-amino-2-{[(1S)-1-metilbutil]oxi}-9-[4-(tetra-hidro-3-furanil) butil] -7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2-{[(15)-1-metilbutil]oxi}-9-[2-(tetra-hidro-2H-piran-2-il) etil] -7, 9-di-hidro-8íf-purin-8-ona; 6-amino-2-{ [ (IS) -1-metilbutil] oxi}- 9- [3 - (tetra-hidro-2fí-piran-2-il)propil] -7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2-{ [ (15) -1-metilbutil] oxi}-9- [4- (tetra-hidro-2/ί-piran-2-il) butil] -7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2-{ [ (IS) -1-metilbutil] oxi}- 9- [2 - (tetra-hidro-2ií-piran-3-il) etil] -7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2-{[(15)-1-metilbutil]oxi}-9-[4-(tetra-hidro-2H-piran-3-il) butil] - 7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2-{[(15)-1-metilbutil]oxi}-9-[2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)etil]-7,9-di-hidro-85-purin-8-ona; 6-amino-2-{[(15)-1-metilbutil]oxi}-9-[3-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)propil] -7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 19 6-amino-2-{[(IS)-1-metilbutil]oxi}-9-[4-(tetra-hidro-2H-piran-4-il) butil] - 7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona; 6-amino-9- [2- (2, 2-dimetiltetra-hidro-2fi-piran-4-il) etil] -2 { [ (IS) -1-metilbutil] oxi} - 7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona; 6-amino-9-[3-(2,2-dimetiltetra-hidro-2H-piran-4-il)propil] 2 -{ [ (IS) -1-metilbutil] oxi} - 7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona; 6-amino-9- [4 - (2,2-dimetiltetra-hidro-2h-piran-4-il) butil] -2 -{ [ (IS) -1-metilbutil] oxi} - 7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona; 6-amino-2-{[(IR)-1-metilbutil]oxi}-9-[2-(tetra-hidro-2-furanil) etil] -7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona; 6-amino-2-{[(1R)-1-metilbutil]oxi}-9-[3-(tetra-hidro-2-furanil) propil] -7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona; 6-amino-2-{[(1R)-1-metilbutil]oxi}-9-{2-[(3S)-tetra-hidro-3-furanil]etil}-7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona; 6-amino-2-{ [ (1R) -1-metilbutil] oxi) — 9 — {2 — [ (3í?) -tetra-hidro-3-furanil]etil}-7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2-{[{IR)-1-metilbutil]oxi}-9-[3-(tetra-hidro-3-furanil)propil] -7, 9-di-hidro-8il-purin-8-ona; 6-amino-2-{ [ (lí?) -1-metilbutil] oxi}-9- [4- (tetra-hidro-3-furanil) butil] -7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2-{ [ (1R) -1-metilbutil] oxi}-9- [2- (tetra-hidro-2fí-piran-2-il) etil] - 7, 9-di-hidro-8il-purin-8-ona; 6-amino-2-{ [ (1J?) -1-metilbutil] oxi}-9- [3- (tetra-hidro-2/ί-piran-2-il)propil] -7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2-{ [ (1R) -1-metilbutil] oxi}-9- [4- (tetra-hidro-2fí-piran-2-il) butil] - 7, 9-di-hidro-8il-purin-8-ona; 6-amino-2-{ [ (lí?) -1-metilbutil] oxi}-9- [2- (tetra-hidro-2il-piran-3-il)etil]-7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2-{ [ (1R) -1-metilbutil] oxi}-9- [4- (tetra-hidro-2fí-piran-3-il) butil] - 7, 9-di-hidro-8il-purin-8-ona; 6-amino-2-{ [ (1R) -1-metilbutil] oxi}-9- [2- (tetra-hidro-2.fi-piran-4-il)etil]-7, 9-di-hidro-8S-purin-8-ona; 20 6-amino-2-{[(1R)-1-metilbutil]oxi}-9-[3-(tetra-hidro-2i7-piran-4-il)propil] -7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona; 6-amino-2-{ [ (1R) -1-metilbutil] oxi}-9- [4- (tetra-hidro-2il-piran-4-il) butil] - 7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona; 6-amino-9- [2- (2,2-dimetiltetra-hidro-2i7-piran-4-il) etil] -2-{ [ (1.R) -1-metilbutil] oxi}- 7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona; 6-amino-9- [3- (2,2-dimetiltetra-hidro-2fí-piran-4-il)propil] -2-{ [ (1R) -1-metilbutil] oxi}-7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona; 6-amino-9- [4 - (2,2-dimetiltetra-hidro-2i7-piran-4-il) butil] -2-{ [ (1R) -1-metilbutil] oxi}-7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona; e os seus sais e solvatos. É assim proporcionado como um outro aspecto da invenção, um composto de fórmula (I), ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável, para ser utilizado como um agente terapêutico activo.

Também é, por conseguinte, proporcionado um composto de fórmula (I), ou um seu sal ou solvato f armaceuticamente aceitável, para ser utilizado no tratamento de doenças infecciosas, cancro, doenças alérgicas e outros estados inflamatórios.

Também é, por conseguinte, proporcionado um composto de fórmula (I), ou um seu sal ou solvato f armaceuticamente aceitável, para ser utilizado como um adjuvante de vacina. É ainda proporcionada a utilização de um composto de fórmula (I), ou um seu sal ou solvato f armaceuticamente aceitável, para o fabrico de um medicamento para o tratamento de 21 doenças infecciosas, cancro, doenças alérgicas e outros estados inflamatórios.

Num outro aspecto da invenção é proporcionado um método para o tratamento de doenças infecciosas, cancro, doenças alérgicas e outros estados inflamatórios, método esse que compreende administrar uma quantidade eficaz de um composto de fórmula (I), ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável.

Assim, a invenção proporciona, num outro aspecto, uma associação compreendendo pelo menos um composto de fórmula (I), ou os seus sais ou solvatos farmaceuticamente aceitáveis, em conjunto com pelo menos um outro agente terapeuticamente activo. É ainda proporcionada uma composição farmacêutica compreendendo um composto de fórmula (I), ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável, e opcionalmente um ou mais diluentes ou veiculos farmaceuticamente aceitáveis.

Também é proporcionado um processo de preparação de uma composição farmacêutica o qual compreende misturar um composto de fórmula (I), ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável, com um ou mais diluentes ou veiculos farmaceuticamente aceitáveis.

Os compostos de fórmula (I) e os seus sais e solvatos podem ser preparados pela metodologia aqui descrita e constitui um outro aspecto desta invenção. 22

Por conseguinte, é proporcionado um processo para a preparação de um composto de fórmula (I), processo esse que compreende a desprotecção de um composto de fórmula (IIA):

em que R1 e R2 são como definidos acima para um composto de fórmula (I) e R3 é alquiloCi-6, e depois disso, se necessário, realizar um ou mais dos passos opcionais seguintes: (i) . converter um composto de fórmula (I) num outro composto de fórmula (I); (ii) . preparar um sal ou solvato do composto assim obtido.

Num aspecto da invenção, um composto de fórmula (IIA) pode ser preparado por reacção de um composto de fórmula (II):

(II) em que R1 é como definido acima para um composto de fórmula (I) e R3 é como definido acima para um composto de fórmula (IIA), com um composto de fórmula (IIB): R2-L (IIB) 23 em que R2 é como definido acima para um composto de fórmula (I) e L é um grupo de saida adequado, por exemplo, um grupo alquilsulfoniloxilo, tal como um grupo metanossulfoniloxilo, ou um átomo de halogéneo, tal como bromo.

Num aspecto da invenção, um composto de fórmula (II) é utilizado na forma de um sal, por exemplo, o sal de trifluoroacetato Este sal resulta da desprotecção de um composto de fórmula (III) com, por exemplo, ácido trifluoroacético, como se descreve abaixo.

Alternativamente, um composto de fórmula (I) pode ser preparado por reacção de um composto de fórmula (II) como definido acima, tipicamente como um sal, por exemplo, o sal de trifluoroacetato, com um composto de fórmula (IIB) como definido acima, sem isolamento do composto intermediário (IIA).

Num aspecto da invenção, um composto de fórmula (II) pode ser preparado por reacção de um composto de fórmula (III) :

(III) em que R1 é como definido acima para um composto de fórmula (I), P é um grupo de protecção, tipicamente um grupo tetra-hidro-2H-piran-2-ilo, e R3 é como definido acima para um composto de fórmula (IIA), com um agente de desprotecção adequado, por exemplo, ácido trifluoroacético (a utilização de ácido 24 trifluoroacético resulta num composto de fórmula (II) que se forma como um sal de trifluoroacetato).

Num aspecto da invenção, um composto de fórmula (IIB) em que L é um átomo de halogéneo pode ser preparado por reacção de um composto de fórmula (IX): R2-OG (IX) em que R2 é como definido acima para um composto de fórmula (I) e OG é um grupo de saida, por exemplo, um grupo alcanossulfonato, tal como um grupo metanossulfonato, com um halogeneto de metal alcalino anidro, tal como brometo de litio anidro.

Num aspecto da invenção, um composto de fórmula (IX), ou um composto de fórmula (IIB) em que L é um grupo alquilsulfonilo, pode ser preparado por reacção de um composto de fórmula (X): R2-OH (X) em que R2 é como definido acima para um composto de fórmula (I), com um agente de activação adequado, por exemplo, um halogeneto de alquilsulfonilo, tal como cloreto de metanossulfonilo.

Num aspecto da invenção, um composto de fórmula (X) pode ser preparado por reacção de um composto de fórmula (XI):

Het-(CH2) (n-ι;-C00alquiloCi-6 (XI) em que Het e n são como definidos acima para um composto de fórmula (I) com um agente de redução adequado, tal como hidreto de alumínio e litio. 25

Num aspecto da invenção, um composto de fórmula (X) em que Het é 3-tetra-hidropiranilo e n é um número inteiro possuindo um valor de 2 pode ser preparado por reacção do composto de fórmula (XII):

Het-(CH2)-CHO (XII) em que Het é 3-tetra-hidropiranilo, com um agente de redução adequado, por exemplo, boro-hidreto de sódio.

Num aspecto da invenção, um composto de fórmula (XII) pode ser preparado por reacção de um composto de fórmula (XIII):

Het-CH=CH (OalquiloCi-6) (XIII) em que Het é 3-tetra-hidropiranilo, com um ácido mineral adequado, por exemplo, ácido clorídrico.

Num aspecto da invenção, um composto de fórmula (XIII) pode ser preparado por reacção do composto de fórmula (XIV):

Het-CHO (XIV) em que Het é 3-tetra-hidropiranilo, com um composto de fórmula (XV): alcoxiCi-6- (CH2) -P+ (Ph) 3 Cl" (XV) 26

Num aspecto da invenção, um composto de fórmula (XIV) pode ser preparado por hidrogenação do composto de fórmula (XVI):

Num aspecto da invenção, um composto de fórmula (III) pode ser preparado por reacção de um composto de fórmula (IV):

NfHj

p (IV) em que R1 é como definido acima para um composto de fórmula (I), P é como definido acima para um composto de fórmula (III), e X é um átomo de halogéneo, por exemplo, bromo, com um alcóxido de metal alcalino, por exemplo, metóxido de sódio.

Num aspecto da invenção, um composto de fórmula (IV) podem ser preparados por reacção de um composto de fórmula (V): nh2

27 em que R1 é como definido acima para um composto de fórmula (I) e P é como definido acima para um composto de fórmula (III), com um agente de halogenação adequado, por exemplo, N-bromos succinimida.

Num aspecto da invenção, um composto de fórmula (V), em que R1 é alcoxiloCi_8, cicloalquilC3-7alcoxiloCi_6, alcoxiCi_6alcoxiloCi_6 ou Hetb-alcoxiloCi_3, pode ser preparado por reacção de um composto de fórmula (VI):

(VI) em que P é como definido acima para um composto de fórmula (III) e Y é um átomo de halogéneo, por exemplo, cloro, com um composto de fórmula (VIA): R^H (VIA) em que R1 é alcoxiloCi-8, cicloalquilC3-7alcoxiloCi_6, alcoxiCi-6alcoxiloCi_6 ou Hetb-alcoxiloCi_3, na presença de uma base forte de força apropriada, por exemplo, sódio metálico, hidreto de sódio ou terc-butóxido de sódio.

Num aspecto da invenção, um composto de fórmula (V), em que R1 é alquilCi_8amino ou cicloalquilC3_7alquilCi_6amino pode ser preparado por reacção de um composto de fórmula (VI) como definido acima, com um composto de fórmula (VIB): 28 R1—Η (VIB) em que R1 é alquilCi-6amino ou cicloalquilC3_7Ci_6amino.

Num aspecto da invenção, um composto de fórmula (VI) pode ser preparado por reacção de um composto de fórmula (VII):

(VII) em que P é como definido acima para um composto de fórmula (III), Y é como definido acima para um composto de fórmula (VI) e Z é um átomo de halogéneo, por exemplo, cloro, com uma solução alcoólica de amónia.

Num aspecto da invenção, um composto de fórmula (VII) pode ser preparado a partir de um composto de fórmula (VIII):

em que Y é como definido acima para um composto de fórmula (VI) e Z é como definido acima para um composto de fórmula (VII), por 29 reacção com um reagente de protecção adequado, por exemplo, 3,4-di-hidro-2íí-pirano. É ainda proporcionado, num outro aspecto da invenção, um processo para a preparação de um composto de fórmula (I), processo esse que compreende a hidrólise de um composto de fórmula (XXI):

em que R1 e R2 são como definidos acima para um composto de fórmula (I) e X é como definido acima para um composto de fórmula (IV).

Num aspecto da invenção, um composto de fórmula (XXI) em que pode ser preparado por halogenação de um composto de fórmula (XX) :

em que R1 e R2 são como definidos acima para um composto de fórmula (I). 30

Num aspecto da presente invenção, um composto de fórmula (XX), em que R1 é alcoxiloCi_8, cicloalquilC3_7alcoxiloCi_6, alcoxiCi_6alcoxiloCi_6 ou Hetb-alcoxiloCi_3 pode ser preparado por reacção de um composto de fórmula (XIX):

(XIX) em que Y é como definido acima para um composto de fórmula (VI) e R2 é como definido acima para um composto de fórmula (I), com um composto de fórmula (VIA) como definido acima.

Num aspecto da invenção, um composto de fórmula (XIX) pode ser preparado por reacção de um composto de fórmula (XVIII):

em que Y é como definido acima para um composto de fórmula (VI), Z é como definido acima para um composto de fórmula (VII) e R2 é como definido acima para um composto de fórmula (I), com amónia.

Um composto de fórmula (XIX) também pode ser preparado por reacção de um composto de fórmula (XVII): 31 (XVII)

em que Y é como definido acima para um composto de fórmula (VI), com um composto de fórmula (IIB) como definido acima.

Num aspecto da invenção, um composto de fórmula (XVIII) pode ser preparado por reacção de um composto de fórmula (VIII) como definido acima com um composto de fórmula R2-OH, em que R2 é como definido acima para um composto de fórmula (I).

Num aspecto da invenção, um composto de fórmula (XVII) pode ser preparado por reacção de um composto de fórmula (VIII) como definido acima com amónia.

Num outro aspecto da invenção, um composto de fórmula (I), em que R1 é alquilCi_8amino ou cicloalquilC3-7alquilCi-6amino, pode ser preparado por reacção de um composto de fórmula (XXIII):

em que Y é como definido acima para um composto de fórmula (VI), R2 é como definido acima para um composto de fórmula (I) e R3 é 32 como definido acima para um composto de fórmula (IIA), com um composto de fórmula (VIB) como definido acima.

Num aspecto da invenção, um composto de fórmula (XXIII) pode ser preparado por reacção de um composto de fórmula (XXII):

em que X é como definido acima para um composto de fórmula (IV), Y é como definido acima para um composto de fórmula (VI) e R2 é como definido acima para um composto de fórmula (I), com uma fonte de anião alcóxido. A presente invenção abrange todas as combinações das formas de realização e aspectos aqui descritos.

Descrição Detalhada da Invenção A presente invenção é descrita em termos conhecidos e reconhecidos pelos especialistas na técnica. Para facilidade de referência determinados termos são definidos a seguir. No entanto, o facto de determinados termos serem definidos não deverá ser considerado como indicativo de que os termos definidos são utilizados de um modo incoerente com o significado corrente ou, alternativamente, que qualquer termo que não esteja definido seja indefinido ou não utilizado dentro do significado corrente e aceite. Em vez disso, julga-se que todos os termos 33 aqui utilizados descrevem a invenção de modo a que um especialista possa compreender o âmbito da presente invenção. As definições seguintes pretendem clarificar, mas não limitar, os termos definidos.

As referências a "alquilo" incluem referências a isómeros alifáticos tanto de cadeia linear como de cadeia ramificada do alquilo correspondente, contendo adequadamente até oito átomos de carbono, por exemplo, até quatro átomos de carbono ou até três átomos de carbono. Tais referências a "alquilo" também são aplicáveis quando um grupo alquilo faz parte de outro grupo, por exemplo, um grupo alquilamino ou alcoxilo. Exemplos de tais grupos alquilo e grupos contendo grupos alquilo são alquiloCi-4, alquilCi-6amino, alcoxiloCi-g, cicloalquilC3-7alquilCi-6amino, cicloalquilC3-7alcoxiloCi_6 e alcoxiCi-3alcoxiloC2-3.

As referências a "heterociclo" ou "heterociclilo" referem-se a anéis alifáticos heterocíclicos monocíclicos saturados contendo 5 ou 6 átomos de carbono, e um heteroátomo, heteroátomo esse que é oxigénio. São exemplos de tais anéis heterocíclicos os tetra-hidrofuranilo e tetra-hidropiranilo.

As referências a "cicloalquilo" referem-se a grupos alquilo monocíclicos contendo entre três e sete átomos de carbono, por exemplo, três átomos de carbono, ou cinco átomos de carbono, ou seis átomos de carbono. São exemplos de tais grupos cicloalquilo os ciclopropilo, ciclopentilo e ciclo-hexilo.

As referências a "halogéneo" referem-se a iodo, bromo, cloro ou flúor, tipicamente bromo ou cloro. 34

Deve entender-se que as referências abaixo a compostos da invenção significam um composto de fórmula (I) como uma base livre, ou como um sal, ou com um solvato.

Entender-se-á do anterior que estão incluídos no âmbito da invenção todos os solvatos, hidratos, complexos, isómeros e formas polimórficas dos compostos de fórmula (I) e os seus sais e solvatos.

Os sais dos compostos de fórmula (I ) incluem sais farmaceuticamente aceitáveis e sais que podem não ser farmaceuticamente aceitáveis mas que podem ser úteis na preparação de compostos de fórmula (I) e os seus sais farmaceuticamente aceitáveis. Os sais podem ser derivados de determinados ácidos inorgânicos ou orgânicos, ou determinadas bases inorgânicas ou orgânicas. A invenção inclui no seu âmbito todas as formas estequiométricas e não estequiométricas possíveis dos sais dos compostos de fórmula (I).

Exemplos de sais são os sais farmaceuticamente aceitáveis. Os sais farmaceuticamente aceitáveis incluem sais de adição de ácido e sais de adição de base. Para uma revisão sobre sais adequados ver Berge et al., J. Pharm. Sei., 66:1-19 (1977) .

Exemplos de sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis de um composto de fórmula (I) incluem os sais de bromidrato, cloridrato, sulfato, p-toluenossulfonato, metanossulfonato, naftalenossulfonato e fenilsulfonato. 35

Exemplos de sais de base farmaceuticamente aceitáveis incluem os sais de metais alcalinos, tais como os de sódio e potássio, e os sais de metais alcalino-terrosos, tais como os de cálcio e magnésio.

Os sais podem ser preparados utilizando técnicas bem conhecidas na técnica, por exemplo, por precipitação da solução seguida de filtração, ou por evaporação do solvente.

Tipicamente, um sal de adição de ácido farmaceuticamente aceitável pode ser preparado por reacção de um composto de fórmula (I) com um ácido forte adequado (tais como ácido bromidrico, clorídrico, sulfúrico, p-toluenossulfónico, metanossulfónico ou naftalenossulfónico), opcionalmente num solvente adequado, tal como um solvente orgânico, para dar o sal que é geralmente isolado, por exemplo, por cristalização e filtração.

Entender-se-á que muitos compostos orgânicos podem formar complexos com os solventes nos quais são feitos reagir ou dos quais são precipitados ou cristalizados. Estes complexos são conhecidos como "solvatos". Por exemplo, um complexo com água é conhecido como um "hidrato". Solventes com pontos de ebulição elevados e/ou solventes com uma propensão elevada para formar ligações de hidrogénio, tais como água, etanol, álcool iso-propílico e W-metilpirrolidinona podem ser utilizados para formar solvatos. Os solvatos dos compostos de fórmula (I) estão no âmbito da invenção. Como aqui utilizado, o termo solvato abrange solvatos de um composto de base livre e de qualquer seu sal. 36

Alguns dos compostos da invenção podem conter átomos quirais e/ou ligações múltiplas e, por isso, podem existir em uma ou mais formas estereoisoméricas. A presente invenção abrange todos os estereoisómeros dos compostos da invenção, incluindo os isómeros geométricos e isómeros ópticos, como estereoisómeros individuais ou como as suas misturas, incluindo modificações racémicas. Qualquer estereoisómero pode conter menos do que 10% em peso, por exemplo, menos do que 5% em peso, ou menos do que 0,5% em peso, de qualquer outro estereoisómero. Por exemplo, qualquer isómero óptico pode conter menos do que 10% em peso, por exemplo, menos do que 5% em peso, ou menos do que 0,5% em peso, do seu antípoda.

Como aqui utilizados, os termos "Isómero 1" e "Isómero 2" e "Diastereoisómero 1" e "Diastereoisómero 2" referem-se ao isómero ou diastereoisómero que elui em primeiro e segundo lugares, respectivamente, quando as separações são realizadas utilizando as condições cromatográficas especificadas no texto relevante. Entender-se-á que a ordem de eluição pode mudar dependendo das condições cromatográficas particulares utilizadas.

Alguns dos compostos da invenção podem existir em formas tautoméricas. Entender-se-á que a presente invenção abrange todos os tautómeros dos compostos da invenção como tautómeros individuais ou como as suas misturas.

Os compostos da invenção podem estar na forma cristalina ou amorfa. Além disso, algumas das formas cristalinas dos compostos da invenção podem existir como polimorfos, os quais estão todos incluídos no âmbito da presente invenção. São de interesse 37 particular a forma ou formas polimórficas termodinamicarnente mais estáveis dos compostos da invenção.

Exemplos de estados patológicos nos quais os compostos de fórmula (I) e os seus sais ou solvatos f armaceuticamente aceitáveis têm efeitos potencialmente benéficos incluem doenças infecciosas, cancro, doenças alérgicas e outros estados inflamatórios. Os compostos de fórmula (I) e os seus sais ou solvatos farmaceuticamente aceitáveis também são de utilidade potencial como adjuvantes de vacinas.

Por conseguinte, os compostos de fórmula (I) e os seus sais ou solvatos farmaceuticamente aceitáveis podem ser úteis no tratamento de vários distúrbios, em particular no tratamento de doenças infecciosas incluindo, mas não se limitando às provocadas pelos virus da hepatite (e. g., virus da hepatite B, virus da hepatite C), virus da imunodeficiência humana, papilomavirus, herpesvirus, virus respiratórios (e. g., vírus da gripe, vírus sincicial respiratório, rhinovírus, metapneumovírus, vírus da parainfluenza, SARS) e vírus do Nilo Ocidental. Os compostos de fórmula (I) e os seus sais ou solvatos farmaceuticamente aceitáveis também podem ser úteis no tratamento de infecções microbianas provocadas, por exemplo, por bactérias, fungos ou protozoários. Estas incluem, mas não se limitam a, tuberculose, pneumonia bacteriana, aspergilose, histoplasmose, candidíase, pneumocistose, lepra, clamídia, doença criptocócica, criptosporidiose, toxoplasmose, leishmaniose, malária e tripanossomíase.

Como moduladores potentes da resposta imunológica, os compostos de fórmula (I) e os seus sais ou solvatos farmaceuticamente aceitáveis podem, por isso, ser úteis no 38 tratamento de inflamação, incluindo mas não se limitando a doenças inflamatórias ou alérgicas, tais como asma, rinite alérgica, doenças de hipersensibilidade pulmonar, pneumonite eosinofilica, hipersensibilidade de tipo retardado, aterosclerose, pancreatite, gastrite, osteoartrite, psoriase, sarcoidose, fibrose pulmonar, sindrome de insuficiência respiratória, bronquiolite, doença pulmonar obstrutiva crónica, sinusite, fibrose quistica e dermatite.

Os compostos de fórmula (I) e os seus sais ou solvatos farmaceuticamente aceitáveis também podem ser úteis no tratamento de doenças auto-imunes incluindo mas não se limitando a artrite reumatóide, artrite psoriática, lúpus eritematoso disseminado, doença de Sjõegrens, espondilite anquilosante, esclerodermia, diabetes, rejeição de enxerto, incluindo doença do enxerto contra o hospedeiro, doença inflamatória do intestinos incluindo, mas não se limitando a, doença de Crohn e colite ulcerosa.

Os compostos de fórmula (I) e os seus sais ou solvatos farmaceuticamente aceitáveis também podem ser úteis no tratamento de vários cancros, em particular no tratamento de cancros que são conhecidos como sendo sensíveis a imunoterapia e incluindo, mas não se limitando a, carcinoma das células renais, cancro do pulmão, cancro da mama, cancro colorrectal, cancro da bexiga, melanoma, leucemia, linfornas e cancro do ovário.

Será compreendido pelos especialistas na técnica que as referências aqui a tratamento ou terapia se alargam à profilaxia, bem como ao tratamento de estados estabelecidos. 39

Como aqui mencionado, os compostos de fórmula (I) e os seus sais ou solvatos farmaceuticamente aceitáveis podem ser úteis como agentes terapêuticos.

Como indicado, a presente invenção inclui um composto de fórmula (I), ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável, para ser utilizado como um agente terapêutico activo.

Por conseguinte, fórmula (I), ou um aceitável, para ser infecciosas, cancro, inflamatórios. também é proporcionado um composto de seu sal ou solvato farmaceuticamente utilizado no tratamento de doenças doenças alérgicas e outros estados

Por conseguinte, também é proporcionado um composto de fórmula (I), ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável, para ser utilizado como um adjuvante de vacina.

Por conseguinte, também é proporcionado um composto de fórmula (I), ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável, para ser utilizado no tratamento de rinite alérgica.

Por conseguinte, também é proporcionado um composto de fórmula (I), ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável, para ser utilizado no tratamento de asma. E ainda proporcionada a utilização de um composto de fórmula (I), ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável, para o fabrico de um medicamento para o tratamento de doenças infecciosas, cancro, doenças alérgicas e outros estados inflamatórios. 40 A presente invenção também inclui um método para o tratamento de doenças infecciosas, cancro, doenças alérgicas e outros estados inflamatórios, método esse que compreende administrar uma quantidade eficaz de um composto de fórmula (I), ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável. É ainda proporcionada a utilização de um composto de fórmula (I), ou um seu sal ou solvato f armaceuticamente aceitável, para o fabrico de um medicamento para o tratamento de rinite alérgica. A presente invenção também inclui um método para o tratamento de rinite alérgica, método esse que compreende administrar uma quantidade eficaz de um composto de fórmula (I), ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável. É ainda proporcionada a utilização de um composto de fórmula (I), ou um seu sal ou solvato f armaceuticamente aceitável, para o fabrico de um medicamento para o tratamento de asma. A presente invenção também inclui um método para o tratamento de asma, método esse que compreende administrar uma quantidade eficaz de um composto de fórmula (I), ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável.

Os compostos de acordo com a invenção, e os seus sais e solvatos farmaceuticamente aceitáveis, podem ser formulados para administração de qualquer modo conveniente.

Os compostos de acordo com a invenção, e os seus sais e solvatos farmaceuticamente aceitáveis, podem ser, por exemplo, 41 formulados para administração oral, tópica, inalada, intranasal, bucal, parentérica (por exemplo, intravenosa, subcutânea, intradérmica ou intramuscular) ou rectal. Num aspecto, os compostos de fórmula (I), e os seus sais e solvatos farmaceuticamente aceitáveis, são formulados para administração oral. Num outro aspecto, os compostos de fórmula (I), e os seus sais e solvatos farmaceuticamente aceitáveis, são formulados para administração tópica, por exemplo, administração intranasal.

Os comprimidos e cápsulas para administração oral podem conter excipientes convencionais, tal como aglutinantes, por exemplo, xarope, goma-arábica, gelatina, sorbitol, tragacanta, mucilagem de amido, celulose ou polivinilpirrolidona; enchimentos, por exemplo, lactose, celulose microcristalina, açúcar, amido de milho, fosfato de cálcio ou sorbitol; lubrificantes, por exemplo, estearato de magnésio, ácido esteárico, talco, polietilenoglicol ou silica; desintegrantes, por exemplo, amido de batata, croscarmelose sódica ou amidoglicolato de sódio; ou humectantes, tal como laurilsulfato de sódio. Os comprimidos podem ser revestidos de acordo com métodos bem conhecidos na técnica.

As preparações liquidas orais podem estar na forma de, por exemplo, suspensões aquosas ou oleosas, soluções, emulsões, xaropes ou elixires, ou podem ser apresentadas como um produto seco para constituição com água ou outro veiculo adequado antes da utilização. Tais preparações liquidas podem conter aditivos convencionais, tal como agentes de suspensão, por exemplo, xarope de sorbitol, metilcelulose, xarope de glucose/açúcar, gelatina, hidroximetilcelulose, carboximetilcelulose, gel de estearato de alumínio ou gorduras comestíveis hidrogenadas; 42 emulsionantes, por exemplo, lecitina, monooleato de sorbitano ou goma-arábica; veiculos não aquosos (os quais podem incluir óleos comestíveis), por exemplo, óleo de amêndoa, óleo de coco fraccionado, ésteres oleosos, propilenoglicol ou álcool etílico; ou conservantes, por exemplo, p-hidroxibenzoatos de metilo ou propilo, ou ácido sórbico. As preparações também podem conter sais tampão, aromatizantes, corantes e/ou edulcorantes (e. g., manitol) consoante apropriado.

As formulações para administração intranasal incluem formulações aquosas administradas no nariz através de gotas ou por bomba pressurizada. As formulações adequadas contêm água como o diluente ou veículo para este fim. As formulações aquosas para administração no pulmão ou nariz podem ser proporcionadas com excipientes convencionais, tais como agentes tamponizantes, agentes de modificação da tonicidade e semelhantes. As formulações aquosas também podem ser administradas no nariz ou outras regiões do aparelho respiratório por nebulização.

As formulações for administração inalada incluem formulações aquosas, orgânicas ou misturas aquosas/orgânicas, de pó seco ou cristalinas administradas no aparelho respiratório por bomba pressurizada ou inalador. As formulações adequadas contêm água como o diluente ou veículo para este fim e podem ser proporcionadas com excipientes convencionais, tais como agentes tamponizantes, agentes de modificação da tonicidade e semelhantes. As formulações aquosas também podem ser administradas no nariz e outras regiões do aparelho respiratório por nebulização. Tais formulações podem ser soluções ou suspensões aquosas ou aerossoles fornecidos a partir de embalagens pressurizadas, tal como um inalador de dose medida, com a utilização de um propulsor liquefeito adequado. As 43 composições de aerossol adequadas para inalação podem ser uma suspensão ou uma solução e podem conter um composto de fórmula (I) ou um seu sal ou solvato e um propulsor adequado, tal como um fluorocarboneto ou clorofluorocarboneto contendo hidrogénio ou suas misturas, em particular hidrofluoroalcanos, especialmente 1,1,1,2-tetrafluoroetano, 1,1,1,2,3,3,3- heptafluoro-n-propano ou uma sua mistura. A composição de aerossol pode conter opcionalmente excipientes de formulação adicionais bem conhecidos na técnica, tal como tensioactivos, e. g., ácido oleico, lecitina ou um ácido oligoláctico ou seu derivado, e. g., como descrito nos documentos WO 94/21229 e WO 98/34596 (Minnesota Mining and Manufacturing Conmpany) e co-solventes, e. g., etanol.

As pomadas, cremes e geles podem ser, por exemplo, formuladas com uma base aquosa ou oleosa com a adição de espessante e/ou agente gelificante e/ou solventes adequados. Assim, essas bases podem, por exemplo, incluir água e/ou um óleo, tal como parafina líquida ou um óleo vegetal, tais como óleo de amendoim ou óleo de rícino, ou um solvente, tal como polietilenoglicol. Os espessantes e gelificantes que podem ser utilizados de acordo com a natureza da base incluem parafina mole, estearato de alumínio, álcool cetostearílico, polietilenoglicóis, lanolina, cera de abelhas, carboxipolimetileno e derivados de celulose, e/ou monoestearato de glicerilo e/ou emulsionantes não iónicos.

As loções podem ser formuladas com uma base aquosa ou oleosa e, em geral, também conterão um ou mais emulsionantes, estabilizantes, dispersantes, agentes de suspensão ou espessantes. 44

Os pós para aplicação externa podem ser preparados com a ajuda de qualquer base em pó adequada, por exemplo, talco, lactose ou amido. As gotas podem ser formuladas com uma base aquosa ou não aquosa compreendendo também um ou mais dispersantes, solubilizantes, agentes de suspensão ou conservantes.

Os compostos de acordo com a invenção e os seus sais ou solvatos farmaceuticamente aceitáveis podem ser, por exemplo, formulados para administração transdérmica por formulação em adesivos ou outros dispositivos (e. g., dispositivos de gás pressurizado) que administram o componente activo na pele.

Para administração bucal as composições podem tomar a forma de comprimidos ou pastilhas formuladas de modo convencional.

Os compostos e os seus sais ou solvatos farmaceuticamente aceitáveis também podem ser formulados como supositórios, e. g., contendo bases convencionais para supositórios, tais como manteiga de cacau ou outros glicéridos.

Os compostos de acordo com a invenção ou os seus sais ou solvatos farmaceuticamente aceitáveis também podem ser formulados para administração parentérica por injecção bolus ou infusão continua e podem ser apresentados na forma de dose unitária, por exemplo, como ampolas, frasquinhos, infusões de volume pequeno ou seringas pré-cheias, ou em recipientes multidose com um conservante adicionado. As composições podem tomar formas, tais como soluções, suspensões ou emulsões em veiculos aquosos ou não aquosos, e podem conter agentes de formulação, tais como antioxidantes, tampões, agentes antimicrobianos e/ou agentes de ajuste da tonicidade. 45

Alternativamente, o ingrediente activo pode estar na forma de pó para constituição com um veiculo adequado, e. g., água apirogénica, estéril, antes da utilização. A apresentação de sólido seco pode ser preparada enchendo assepticamente um pó estéril em recipientes individuais estéreis ou enchendo assepticamente uma solução estéril em cada recipiente e liofilizando.

Os compostos de acordo com a invenção ou os seus sais ou solvatos farmaceuticamente aceitáveis também podem ser formulados com vacinas como adjuvantes para modular a sua actividade. Tais formulações podem conter anticorpo(s) ou fragmento(s) de anticorpo ou um componente antigénico incluindo mas não se limitando a proteína, ADN, bactérias e/ou vírus vivos ou mortos ou partículas tipo vírus, em conjunto com um ou mais componentes com actividade adjuvante incluindo mas não se limitando a sais de alumínio, óleo e emulsões em água, proteínas de choque térmico, preparações e derivados de lípido A, glicolípidos, outros agonistas de TLR, tal como CpG ADN ou agentes semelhantes, citocinas, tal como g-CSF ou IL-12 ou agentes semelhantes.

Os compostos da presente invenção ou os seus sais ou solvatos farmaceuticamente aceitáveis podem ser utilizados sozinhos ou em associação com outros agentes terapêuticos. O(s) composto (s) da presente invenção ou os seus sais ou solvatos farmaceuticamente aceitáveis e o(s) outro(s) agente(s) farmaceuticamente activo(s) podem ser administrados em conjunto ou separadamente e, quando administrados separadamente, a administração pode ocorrer simultaneamente ou sequencialmente, por qualquer ordem. As quantidades do composto(s) da presente invenção e os seus sais ou solvatos farmaceuticamente aceitáveis 46 e dos outro(s) agente(s) farmaceuticamente activo(s) e os tempos relativos de administração serão seleccionados para se conseguir o efeito terapêutico associado desejado. A administração em associação de um composto da presente invenção e os seus sais ou solvatos farmaceuticamente aceitáveis com outros agentes de tratamento pode ser em associação por administração simultânea numa composição farmacêutica unitária incluindo ambos os compostos, ou em composições farmacêuticas separadas cada incluindo um dos compostos. Alternativamente, a associação pode ser administrada separadamente de uma maneira sequencial em que um agente de tratamento é administrado em primeiro lugar e o outro em segundo lugar ou vice-versa. Esta administração sequencial pode ser próxima no tempo ou afastada no tempo. A presente invenção pode ser utilizada em associação com um ou mais agentes úteis na prevenção ou tratamento de infecções virais. Exemplos de tais agentes incluem; inibidores da polimerase, tais como os divulgados no documento WO 2004/037818-Al, bem como os descritos nos documentos WO 2004/037818 e WO 2006/045613; JTK-003, JTK-019, NM-283, HCV-796, R-803, R1728, R1626, bem como os descritos nos documentos WO 2006/018725, WO 2004/074270, WO 2003/095441, US2005/0176701, WO 2006/020082, WO 2005/080388, WO 2004/064925, WO 2004/065367, WO 2003/007945, WO 02/04425, WO 2005/014543, WO 2003/000254, EP 1065213, WO 01/47883, WO 2002/057287, WO 2002/057245 e agentes semelhantes; inibidores da replicação, tais como aciclovir, famciclovir, ganciclovir, cidofovir, lamivudina e agentes semelhantes; inibidores de protease, tais como os inibidores de protease de HIV saquinavir, ritonavir, indinavir, nelfinavir, amprenavir, fosamprenavir, brecanavir, atazanavir, tipranavir, palinavir, lasinavir, e os inibidores de protease de HCV BILN2061, VX-950, SCH503034; e agentes semelhantes; inibidores 47 da transcriptase inversa de nucleósidos e nucleótidos, tais como zidovudina, didanosina, lamivudina, zalcitabina, abacavir, estavudina, adefovir, adefovir dipivoxil, fozivudina, todoxil, emtricitabina, alovudina, amdoxovir, elvucitabina e agentes semelhantes; inibidores da transcriptase inversa não nucleosidica (incluindo um agente possuindo actividade antioxidante, tal como os immunocal, oltipraz etc.), tais como nevirapina, delavirdina, efavirenz, lovirida, immunocal, oltipraz, capravirina, TMC-278, TMC-125, etravirina e agentes semelhantes; inibidores de entrada, tais como enfuvirtida (T—2 0), T-1249, PRO-542, PRO-140, TNX-355, BMS-806, 5-Helix e agentes semelhantes; inibidores de integrase, tais como L-870,180 e agentes semelhantes; inibidores de enxerto, tais como PA-344 e PA-457, e agentes semelhantes; inibidores do receptor de quimiocina, tais como vicriviroc (Sch-C), Sch-D, TAK779, maraviroc (UK-427,857), TAK449, bem como os divulgados nos documentos WO 02/74769, WO 2004/054974, WO 2004/055012, WO 2004/055010, WO 2004/055016, WO 2004/055011 e WO 2004/054581, e agentes semelhantes; inibidores de neuraminidase, tais como zanamivir, oseltamivir, peramivir e agentes semelhantes; bloqueadores de canais de iões, tais como amantadina ou rimantadina e agentes semelhantes; e ARN de interferência e oligonucleótidos antimensageiros e tal como o ISIS-14803 e agentes semelhantes; agentes antivirais de mecanismo de acção indeterminado, por exemplo, os divulgados nos documentos WO 2005/105761, WO 2003/085375 e WO 2006/122011, e agentes semelhantes. A presente invenção também pode ser utilizada em associação com um ou mais de outros agentes que possam ser úteis na prevenção ou tratamento de infecções virais, por exemplo, terapias imunológicas (e. g., interferão ou outras citocinas/quimiocinas, moduladores do receptor de citocina/quimiocina, agonistas ou antagonistas de citocinas e 48 agentes semelhantes); e vacinas terapêuticas, agentes antifibróticos, agentes anti-inflamatórios, tais como corticoesteróides ou NSAID e agentes semelhantes. 0 âmbito das associações dos compostos desta invenção e os seus sais ou solvatos farmaceuticamente aceitáveis com agentes antivirais não está restringido às mencionadas acima, mas inclui em principio qualquer associação com qualquer composição farmacêutica útil para o tratamento de doença virai. Como indicado, em tais associações os compostos da presente invenção e os seus sais ou solvatos farmaceuticamente aceitáveis e os outros agentes antivirais podem ser administrados separadamente ou conjuntamente. Além disso, um agente pode ser administrado antes, simultaneamente ou subsequentemente à administração de outro(s) agente(s).

Os compostos da presente invenção e os seus sais ou solvatos farmaceuticamente aceitáveis podem ser utilizados em associação com um ou mais de outros agentes que possam ser úteis na prevenção ou tratamento de doença alérgica, doença inflamatória, doença auto-imune ou semelhante, por exemplo; imunoterapia de antigénio, anti-histaminicos, esteróides, agentes anti-inflamatórios não esteróides, broncodilatadores (e. g., agonistas de beta 2, agonistas adrenérgicos, agentes anticolinérgicos, teofilina), metotrexato, moduladores de leucotrienos e agentes semelhantes; terapia com anticorpo monoclonal, tais como anti-IgE, anti-TNF, anti-IL-5, anti-IL-6, anti-IL-12, anti-IL-1 e agentes semelhantes; terapias de receptor, e. g., entanercept e agentes semelhantes; imunoterapias não especificas de antigénio (e. g., interferão ou outras citocinas/quimiocinas, moduladores do receptor de 49 citocina/quimiocina, agonistas ou antagonistas de citocinas, agonistas de TLR e agentes semelhantes).

Os compostos da presente invenção e os seus sais ou solvatos farmaceuticamente aceitáveis podem ser utilizados em associação com um ou mais de outros agentes que possam ser úteis na prevenção ou tratamento de cancro, por exemplo, agentes quimioterapêuticos, tais como agentes alquilantes, inibidores de topoisomerase, antimetabolitos, agentes antimitóticos, inibidores de cinase e agentes semelhantes; terapia com anticorpo monoclonal, tais como trastuzumab, gemtuzumab e outros agentes semelhantes; imunoterapias (e. g., interferão ou outras citocinas/quimiocinas, moduladores do receptor de citocina/quimiocina, agonistas ou antagonistas de citocinas, agonistas de TLR e agentes semelhantes); e terapia hormonal, tais como tamoxifeno, goserrelina e agentes semelhantes.

As composições farmacêuticas de acordo com a invenção também podem ser utilizadas sozinhas ou em associação com pelo menos um outro agente terapêutico em outras áreas terapêuticas, por exemplo, doença gastrointestinal. As composições de acordo com a invenção também podem ser utilizadas em associação com terapia de substituição génica. A invenção inclui uma associação compreendendo pelo menos um composto de fórmula (I), ou (um) seu(s) sal/sais farmaceuticamente aceitável/aceitáveis, em conjunto com pelo menos um outro agente terapeuticamente activo.

As associações referidas acima podem ser convenientemente apresentadas para utilização na forma de uma formulação farmacêutica e, assim, as formulações farmacêuticas 50 compreendendo uma associação como definida acima em conjunto com pelo menos um seu diluente ou veiculo farmaceuticamente aceitável representam um outro aspecto da invenção.

Uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da presente invenção ou os seus sais ou solvatos farmaceuticamente aceitáveis dependerá de um número de factores. Por exemplo, a espécie idade e peso do receptor, o estado exacto que requer tratamento e a sua gravidade, a natureza da formulação e a via de administração são todos factores a serem considerados. Em última análise, a quantidade terapeuticamente eficaz deveria estar à discrição do médico assistente. De qualquer forma, uma quantidade eficaz de um composto da presente invenção para o tratamento de humanos que sofrem de fraqueza deveria estar, em termos gerais, na gama de 0,01 a 100 mg/kg de peso corporal do receptor (mamífero) por dia. Mais em geral, a quantidade eficaz deveria estar na gama de 0,1 a 10 mg/kg de peso corporal por dia. Assim, para um mamífero adulto de 70 kg, um exemplo de uma quantidade efectiva por dia seria, em termos gerais, de 7 a 700 mg. Esta quantidade pode ser administrada numa única dose por dia ou num número (tais como duas, três, quatro, cinco ou mais) de subdoses por dia de modo a que a dose diária total seja a mesma. Uma quantidade eficaz de um sal ou solvato farmaceuticamente aceitável de um composto de fórmula (I) pode ser determinada como uma proporção da quantidade eficaz do composto da presente invenção per se. Dosagens semelhantes deveriam ser apropriadas para o tratamento dos outros estados aqui referidos.

Os compostos de fórmula (I) e os seus sais ou solvatos farmaceuticamente aceitáveis também podem ser administrados em qualquer frequência apropriada, e. g., 1-7 vezes por semana. O 51 regímen de dosagem exacto dependerá, evidentemente, de factores, tais como a indicação terapêutica, a idade e estado do doente, e a via de administração particular escolhida.

As formulações farmacêuticas podem ser apresentadas em formas de dose unitária contendo uma quantidade predeterminada de ingrediente activo por dose unitária. Uma tal unidade pode conter, como um exemplo não limitativo, de 0,5 mg a 1 g de um composto de fórmula (I) ou os seus sais ou solvatos farmaceuticamente aceitáveis, dependendo do estado a ser tratado, da via de administração e da idade, peso e estado do doente. As formulações de dosagem unitária preferidas são aquelas que contêm uma dose diária ou subdose, como indicada acima, ou uma sua fracção apropriada, de um ingrediente activo. Tais formulações farmacêuticas podem ser preparadas por qualquer dos métodos bem conhecidos na técnica de farmácia.

Assim, é ainda proporcionada uma composição farmacêutica compreendendo um composto de fórmula (I), ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável, e opcionalmente um ou mais diluentes ou veículos farmaceuticamente aceitáveis.

Também é proporcionado um processo de preparação de uma tal composição farmacêutica, o qual compreende misturar um composto de fórmula (I), ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável, com um ou mais diluentes ou veículos farmaceuticamente aceitáveis.

Ao longo da descrição e das reivindicações que se seguem, a menos que o contexto requeira de outro modo, a palavra "compreendem" e variações, tais como "compreende" e "compreendendo", será entendida como implicando a inclusão de um 52 número inteiro ou passo ou grupo de número inteiros especificado mas sem a exclusão de qualquer outro número inteiro ou passo ou grupo de número inteiros ou passos.

Os compostos de fórmula (I) e os seus sais e solvatos podem ser preparados pela metodologia descrita a seguir, constituindo aspectos adicionais desta invenção.

(HA) em que R1 e R2 são como definidos acima para um composto de fórmula (I) e R3 é alquiloCi_6 e, depois disso, se necessário, realizar um ou mais dos seguintes passos opcionais: (i) . converter um composto de fórmula (I) num outro composto de fórmula (I); (ii) . preparar um sal ou solvato do composto assim obtido.

Por exemplo, um composto de fórmula (IIA) é dissolvido num solvente adequado, por exemplo, metanol, e tratado com uma solução de um ácido mineral adequado num solvente adequado, por exemplo, cloreto de hidrogénio 4 N em 1,4-dioxano. A reacção é agitada a uma temperatura adequada, por exemplo, temperatura 53 ambiente, durante um intervalo de tempo adequado, por exemplo, 4-18 horas, e o solvente removido sob pressão reduzida para dar um material que é então suspenso em água. Pode ser adicionada uma quantidade suficiente de um álcool adequado, por exemplo, metanol, até ser obtida uma solução. É adicionada uma base aquosa adequada, por exemplo, solução de hidróxido de sódio 2 N, para trazer a mistura até pH 7 e a solução pode ser concentrada até se formar uma suspensão. 0 sólido é então filtrado e lavado com água antes de ser seco para dar um composto de fórmula (I) . Alternativamente, a mistura reaccional pode ser neutralizada sem remoção prévia do solvente, e o produto resultante recuperado por filtração antes ou após remoção de uma proporção do solvente.

Um composto de fórmula (IIA) pode ser preparado por reacção de um composto de fórmula (II):

em que R1 é como definido acima para um composto de fórmula (I) e R3 é como definido acima para um composto de fórmula (IIA), com um composto de fórmula (IIB): R2-L (IIB) 54 em que R2 é como definido acima para um composto de fórmula (I) e L é um grupo de saída adequado, por exemplo, um grupo alquilsulfoniloxilo, tal como um grupo metanossulfoniloxilo, ou um átomo de halogéneo, tal como bromo.

Por exemplo, o sal de trifluoroacetato de um composto de fórmula (II) é aquecido até uma temperatura adequada, por exemplo, 60 °C, durante um intervalo de tempo adequado, por exemplo, 1 hora, com carbonato de potássio anidro num solvente seco adequado, por exemplo, DMF seca, e deixado arrefecer até à temperatura ambiente antes de ser adicionado um composto de fórmula (IIB) . A reacção pode ser agitada à temperatura ambiente durante um intervalo de tempo adequado, por exemplo, 20-40 horas, e pode ser aquecida, se necessário, durante um intervalo de tempo adequado, por exemplo, 1-2 horas, a uma temperatura adequada, por exemplo, até 90 °C. A mistura reaccional é vertida para água e extraída para um solvente adequado, por exemplo, acetato de etilo. Os extractos de solvente são secos, evaporados até à secura sob pressão reduzida e purificados. Entender-se-á que os tempos de reacção e temperaturas de reacção necessários para efectuar a reacção de um composto de fórmula (II) com um composto de fórmula (IIB) para dar um composto de fórmula (IIA) variarão dependendo da natureza exacta dos reagentes individuais utilizados, por exemplo, os tempos de reacção e temperaturas de reacção têm de ser escolhidas para garantir que é obtido um composto de fórmula (IIA), mas que seja minimizada ou evitada a N-alquilação na posição 7.

Um composto de fórmula (II) pode ser utilizado na forma de um sal, por exemplo, o sal de trifluoroacetato. Este sal resulta 55 da desprotecção de um composto de fórmula (III) com, por exemplo, ácido trifluoroacético, como se descreve abaixo. Alternativamente, um composto de fórmula (I) pode ser preparado por reacção de um composto de fórmula (II) como definido acima, tipicamente como um sal, por exemplo, o sal de trifluoroacetato, com um composto de fórmula (IIB) como definido acima, sem isolamento do composto intermediário (IIA).

Por exemplo, ao sal de trif luoroacetato de um composto de fórmula (II) num solvente adequado, por exemplo, N,N-dimetilformamida (DMF) seca, é adicionada uma base adequada, por exemplo, carbonato de potássio anidro. A mistura é aquecida até uma temperatura adequada, por exemplo, 60 °C, durante um intervalo de tempo adequado, por exemplo, 1 hora, e arrefecida até à temperatura ambiente. É então adicionado um composto de fórmula (UB) e a mistura reaccional aquecida até uma temperatura adequada, por exemplo, 50 °C, durante um intervalo de tempo adequado, por exemplo, 12-18 horas. A reacção é desactivada com água e extraida com um solvente adequado, por exemplo, acetato de etilo. A fase orgânica é separada e seca. A evaporação da fase orgânica e purificação do óleo assim preparado produz um produto que é então dissolvido num solvente adequado, por exemplo, metanol, tratado com uma solução de um ácido mineral adequado num solvente adequado, por exemplo, cloreto de hidrogénio 4 N em 1,4-dioxano, e agitado, de um dia para o outro, à temperatura ambiente. A mistura reaccional é evaporada até à secura sob pressão reduzida para dar um composto de fórmula (I), o qual pode ser purificado. Entender-se-á que os tempos de reacção e temperaturas de reacção necessários para efectuar a reacção de um sal de trif luoroacetato de um composto de fórmula (II) com um composto de fórmula (IIB) para dar um composto de fórmula (IIA) variarão dependendo da natureza exacta 56 dos reagentes individuais utilizados, por exemplo, os tempos de reacção e temperaturas de reacção têm de ser escolhidos de modo a garantir que é obtido um composto de fórmula (IIA), mas que seja minimizada ou evitada a N-alquilação na posição 7.

Um composto de fórmula (II) pode ser preparado por reacção de um composto de fórmula (III) :

(III) em que R1 é como definido acima para um composto de fórmula (I), P é um grupo de protecção, tipicamente um grupo tetra-hidro-2íí-piran-2-ilo, e R3 é como definido acima para um composto de fórmula (IIA), com um agente de desprotecção adequado, por exemplo, ácido trifluoroacético (a utilização de ácido trifluoroacético resulta num composto de fórmula (II) que é preparado como um sal de trifluoroacetato).

Por exemplo, a uma solução de um composto de fórmula (111) num solvente adequado, por exemplo, metanol seco, é adicionado um agente de desprotecção adequado, por exemplo, ácido trifluoroacético. A mistura é agitada a uma temperatura adequada, por exemplo, temperatura ambiente, durante 24-48 horas. A mistura reaccional é concentrada até uma pasta antes de ser diluída com um solvente adequado, por exemplo, acetato de etilo. A pasta é filtrada e lavada com um volume pequeno de solvente, por exemplo, acetato de etilo, até o filtrado ser 57 incolor. 0 sólido remanescente é seco ao ar e em seguida in vacuo para dar, no caso em que é utilizado ácido trifluoroacético como o agente de desprotecção, o sal de trifluoroacetato de um composto de fórmula (II). 0 filtrado anteriormente obtido pode ser concentrado para dar uma pasta que é então diluida com um volume pequeno de solvente, por exemplo, acetato de etilo e em seguida filtrado e seco para produzir uma segunda colheita do sal de trifluoroacetato de um composto de fórmula (II) .

Alternativamente, a mistura reaccional pode ser concentrada sob pressão reduzida para produzir um sólido, sólido esse que pode ser então triturado na presença de um solvente adequado, por exemplo, éter dietilico.

Um composto de fórmula (IIB) em que L é um átomo de halogéneo pode ser preparado por reacção de um composto de fórmula (IX): R2-OG (IX) em que R2 é como definido acima para um composto de fórmula (I) e OG é um grupo de saida, por exemplo, um grupo alcanossulfonato, tal como um grupo metanossulfonato, com um halogeneto de metal alcalino anidro, tal como brometo de litio anidro.

Por exemplo, um composto de fórmula (IX) e um agente de halogenação adequado, por exemplo, brometo de litio anidro, num solvente adequado, por exemplo, acetona, são aquecidos a refluxo sob agitação durante um intervalo de tempo adequado, por exemplo, 3 horas. Depois de deixar arrefecer, o solvente é removido sob pressão reduzida, o residuo é tratado com água e 58 extraído com um solvente adequado, por exemplo, diclorometano. Os extractos de solvente combinados são lavados, secos e o solvente removido sob pressão reduzida para dar um composto de fórmula (IIB).

Um composto de fórmula (IX), ou um composto de fórmula (IIB) em que L é um grupo alquilsulfonilo, pode ser preparado por reacção de um composto de fórmula (X): R2-OH (X) em que R2 é como definido acima para um composto de fórmula (I), com um agente de activação adequado, por exemplo, um halogeneto de alquilsulfonilo, tal como cloreto de metanossulfonilo.

Por exemplo, a uma solução sob agitação, arrefecida em gelo de um composto de fórmula (X) e uma base adequada, por exemplo, trietilamina, num solvente seco adequado, por exemplo, diclorometano seco, é adicionado, gota a gota, um agente de activação adequado, por exemplo, cloreto de metanossulfonilo. A mistura é deixada aquecer lentamente até à temperatura ambiente ao longo de um intervalo de tempo adequado, por exemplo, 16 horas, em seguida lavada com hidrogenocarbonato de sódio saturado. A camada aquosa é ainda extraída com um solvente orgânico adequado, por exemplo, diclorometano, e os extractos orgânicos lavados, secos e o solvente removido sob pressão reduzida para dar um composto de fórmula (IX).

Um composto de fórmula (X) pode ser preparado por reacção de um composto de fórmula (XI):

Het-(CH2) (n_i)-COOalquiloCi_6 (XI) 59 em que Het e n são como definidos acima para um composto de fórmula (I) com um agente de redução adequado, tal como hidreto de alumínio e lítio.

Por exemplo, uma solução, sob agitação, de um composto de fórmula (XI) num solvente seco adequado, por exemplo, tetra- hidrofurano seco, é arrefecida, por exemplo, utilizando um banho de gelo, e adicionada, gota a gota, uma solução de hidreto de alumínio e lítio num solvente adequado, por exemplo, tetra- hidrofurano seco, sob uma atmosfera adequada, por exemplo, uma atmosfera de azoto, a uma temperatura adequada, por exemplo, inferior a 15 °C. A reacção é deixada aquecer até à temperatura ambiente e, após um intervalo de tempo adequado, por exemplo, 3 horas, arrefecida novamente utilizando, por exemplo, um banho de gelo, e adicionada uma base adequada, por exemplo, hidróxido de sódio 5 N enquanto era mantida uma temperatura adequada, por exemplo, inferior a 10 °C. É então adicionado um solvente orgânico adequado, por exemplo, éter dietílico, e o sólido resultante filtrado e lavado com mais solvente orgânico, por exemplo, éter dietílico. O filtrado combinado é então evaporado para dar um composto de fórmula (X).

Um composto de fórmula (X) em que Het é 3-tetra- hidropiranilo e n é um número inteiro possuindo um valor de 2 pode ser preparado por reacção do composto de fórmula (XII):

Het-(CH2)-CHO (XII) em que Het é 3-tetra-hidropiranilo, com um agente de redução adequado, por exemplo, boro-hidreto de sódio. 60

Por exemplo, uma suspensão de um agente de redução adequado, por exemplo, boro-hidreto de sódio, num solvente adequado, por exemplo, etanol, é arrefecida, por exemplo, utilizando um banho de gelo, e adicionada, gota a gota, uma solução do composto de fórmula (XII) num solvente adequado, por exemplo, etanol, sob agitação ao longo de um intervalo de tempo adequado, por exemplo, 10 minutos. Após um intervalo de tempo adequado, por exemplo, 15 minutos, o banho de gelo é retirado e após um intervalo de tempo adicional, por exemplo, 3 horas, a mistura é aquecida a uma temperatura adequada, por exemplo, 50 °C durante um intervalo de tempo adequado, por exemplo, 1 hora. Depois de arrefecer, o solvente é evaporado e o resíduo tratado com água e extraído com um solvente orgânico adequado, por exemplo, diclorometano. Os extractos combinados foram lavados, secos e evaporados para dar o composto de fórmula (X) em que Het é 3-tetra-hidropiranilo e n é um número inteiro possuindo um valor de 2. O composto de fórmula (XII) pode ser preparado por reacção de um composto de fórmula (XIII):

Por exemplo, a uma solução, sob agitação, de um composto de fórmula (XIII) num solvente adequado, por exemplo, tetra-hidrofurano, é adicionado um ácido mineral adequado, por

exemplo, ácido clorídrico 2 N. Após um intervalo de tempo adequado, por exemplo, 1 hora, a mistura é diluída com água e extraída com um solvente orgânico adequado, por exemplo, éter. O 61 extracto orgânico é então lavado, seco e evaporado para dar o composto de fórmula (XII) .

Um composto de fórmula (XIII) pode ser preparado por reacção do composto de fórmula (XIV):

Het-CHO (XIV) em que Het é 3-tetra-hidropiranilo, com um composto de fórmula (XV): alcoxiCi_6- (CH2) -P+ (Ph) 3 Cl (XV)

Por exemplo, uma suspensão de um composto de fórmula (XV) num solvente seco adequado, por exemplo, tetra-hidrofurano seco, é arrefecida até uma temperatura adequada, por exemplo, menos 40 °C utilizando, por exemplo, um banho de arrefecimento contendo uma mistura de gelo seco e acetona, e adicionada, gota a gota, uma solução de uma base forte adequada, por exemplo, terc-butóxido de potássio num solvente seco adequado, por exemplo, tetra-hidrofurano seco, sob agitação sob uma atmosfera adequada, por exemplo, uma atmosfera de azoto. Após um intervalo de tempo adequado, por exemplo, 45 minutos, a mistura é ainda arrefecida até menos 65 °C utilizando, por exemplo, um banho de arrefecimento contendo uma mistura de gelo seco e acetona, e é adicionada, gota a gota, uma solução do composto de fórmula (XIV) num solvente seco adequado, por exemplo, tetra-hidrofurano seco. O banho de arrefecimento é retirado e a mistura reaccional deixada aquecer até à temperatura ambiente. A mistura reaccional é então agitada durante um intervalo de tempo adicional, por exemplo, 30 minutos, e em seguida desactivada vertendo sobre gelo. A mistura é então extraída com um solvente adequado, por 62 secos e exemplo, éter, e os extractos combinados lavados, evaporados para dar um composto em bruto de fórmula (XIII), o qual pode ser purificado, por exemplo, por cromatografia. 0 composto de fórmula (XIV) pode ser preparado por hidrogenação do composto de fórmula (XVI):

Por exemplo, o composto de fórmula (XVI) num solvente adequado, por exemplo, etanol, é tratado com catalisador de paládio a 10% sobre carvão húmido sob uma atmosfera adequada, por exemplo, uma atmosfera de azoto, em seguida hidrogenado à temperatura e pressão ambientes durante um intervalo de tempo adequado, por exemplo, 30 minutos. O catalisador é removido por filtração e o filtrado evaporado para dar o composto de fórmula (XIV). O composto de fórmula (XVI) pode ser preparado a partir de acroleina.

Por exemplo, é adicionado ácido clorídrico concentrado a água seguido de acroleina e um solvente adequado, por exemplo, tolueno. A mistura, mantida sob agitação, é aquecida sob refluxo a 75 °C durante um intervalo de tempo adequado, por exemplo, 1 hora, altura em que o refluxo diminuirá gradualmente. Depois de deixar arrefecer, é adicionada uma base adequada, por exemplo, carbonato de potássio, até a mistura ser básica e a mistura é extraída com um solvente orgânico adequado, por exemplo, éter 63 dietílico. Os extractos orgânicos são lavados com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secos e evaporados para produzir um produto em bruto. 0 composto de fórmula (XVI) é obtido da mistura em bruto por destilação.

Um composto de fórmula (III) pode ser preparado por reacção de um composto de fórmula (IV):

Por exemplo, um composto de fórmula (IV) é aquecido até uma temperatura adequada, por exemplo, à temperatura de refluxo ou imediatamente abaixo da temperatura de refluxo, com uma solução alcoólica de um alcóxido de metal alcalino, por exemplo, metóxido de sódio a 25% em metanol, num solvente adequado, por exemplo, metanol, durante um intervalo de tempo adequado, por exemplo, 2-8 horas. A mistura reaccional é concentrada sob pressão reduzida e partilhada entre fases aquosas e não aquosas adequadas, por exemplo, acetato de etilo e solução saturada de cloreto de amónio. A fase orgânica é separada e a fase aquosa extraída repetidamente para acetato de etilo. As fases orgânicas 64 combinadas são lavadas, secas, evaporadas e em seguida colocadas sob pressão reduzida para dar um composto de fórmula (III).

Um composto de fórmula (IV) pode ser preparado por reacção de um composto de fórmula (V):

P (V) em que R1 é como definido acima para um composto de fórmula (I) e P é como definido acima para um composto de fórmula (III), com um agente de halogenação adequado, por exemplo, N-bromossuccinimida.

Por exemplo, um composto de fórmula (V) é dissolvido num solvente adequado, por exemplo, clorofórmio, e arrefecido até uma temperatura adequada, por exemplo, 0 °C. A esta solução é adicionada em porções N-bromossuccinimida, enquanto se mantinha uma temperatura adequada, por exemplo, inferior a 3 °C. A mistura resultante é agitada a uma temperatura adequada, por exemplo, 2-3 °C, durante um intervalo de tempo adequado, por exemplo, 30 minutos, antes de ser deixada aquecer até à temperatura ambiente e em seguida agitada durante um intervalo de tempo adicional, por exemplo, 6 horas. A mistura reaccional é então lavada com água. A fase orgânica é seca/separada utilizando um filtro poroso hidrófobo e evaporada para dar um composto em bruto de fórmula (IV), o qual pode ser purificado. 65

Um composto de fórmula (V) , em que R1 é alcoxiloCi_8, cicloalquilC3_7alcoxiloCi_6, alcoxiCi_6alcoxiloCi_6 ou

Hetb-alcoxiloCi_3, pode ser preparado por reacção de um composto de fórmula (VI):

em que P é como definido acima para um composto de fórmula (III) e Y é um átomo de halogéneo, por exemplo, cloro, com um composto de fórmula (VIA): R1-]! (VIA) em que R1 é alcoxiloCi_8, cicloalquilC3_7alcoxiloCi_6, alcoxiCi_6alcoxiloCi_6 ou Hetb-alcoxiloCi_3, na presença de uma base forte de força apropriada, por exemplo, sódio metálico, hidreto de sódio ou terc-butóxido de sódio.

Por exemplo, a um composto de fórmula (VIA), por exemplo, butan-l-ol, é adicionada em porções uma base forte, por exemplo, terc-butóxido de sódio. A mistura é agitada até ser homogénea antes de ser adicionado um composto de fórmula (VI) à solução. A mistura reaccional é então aquecida até uma temperatura adequada, por exemplo, 100 °C, durante um intervalo de tempo adequado, por exemplo, 12-18 horas. A mistura reaccional é colocada sob pressão reduzida para remover o mais possivel de um composto de fórmula (VIA) antes de ser partilhada entre um 66 solvente orgânico adequado, por exemplo, éter dietílico, e água. A fase orgânica é separada e a fase aquosa pode ser reextraida com mais solvente orgânico. As fases orgânicas combinadas são secas sobre um agente de secagem adequado, por exemplo, sulfato de magnésio anidro. 0 agente de secagem é removido por filtração e o filtrado evaporado sob pressão reduzida para dar um composto de fórmula (V) em que R1 é alcoxiloCi_6, o qual pode ser então adicionalmente tratado, por exemplo, por evaporação azeotrópica com tolueno e colocado sob pressão reduzida.

Um composto de fórmula (V), em que R1 é alquilCi-samino ou cicloalquilC3_7alquilCi_6amino pode ser preparado por reacção de um composto de fórmula (VI) como definido acima, com um composto de fórmula (vib):

Rx-H (VIB) em que R1 é alquilCi-6amino ou cicloalquilC3-7Ci-6amino.

Por exemplo, a uma solução de um composto de fórmula (VI) num solvente seco adequado, por exemplo, etilenoglicol seco, a uma temperatura adequada, por exemplo, temperatura ambiente, e sob uma atmosfera adequada, por exemplo, uma atmosfera de azoto, é adicionado um composto de fórmula (VIB). A reacção é aquecida a uma temperatura adequada, por exemplo, 120 °C, durante um intervalo de tempo adequado, por exemplo, 12-18 horas. A reacção é arrefecida até à temperatura ambiente, diluída com um solvente adequado, por exemplo, acetato de etilo, e lavada com água. A camada orgânica é seca sobre um agente de secagem adequado, por exemplo, sulfato de magnésio anidro, filtrada e concentrada in vacuo para proporcionar um composto de fórmula (V) em que R1 é alquilCi_6amino. 67

Um composto de fórmula (VI) pode ser preparado por reacção de um composto de fórmula (VII):

P (VII) em que P é como definido acima para um composto de fórmula (III), Y é como definido acima para um composto de fórmula (VI) e z é um átomo de halogéneo, por exemplo, cloro, com uma solução alcoólica de amónia.

Por exemplo, um composto de fórmula (VII) é aquecido com solução de amónia 2 M num álcool adequado, por exemplo, álcool iso-propílico, a uma temperatura adequada, por exemplo, 50 °C, durante um intervalo de tempo adequado, por exemplo, 5 horas. Depois de repousar à temperatura ambiente durante um intervalo de tempo adequado, por exemplo, 12-18 horas, é adicionada uma quantidade adicional do amónia alcoólico para destruir o bolo resultante e a mistura reaccional aquecida durante um intervalo de tempo adicional, adequado, por exemplo, 9 horas, até a reacção estar concluída. À mistura reaccional é adicionada água e o produto sólido filtrado. 0 sólido é então lavado, por exemplo, com uma mistura de álcool iso-propílico e água, e em seguida seco ao ar sob sucção para dar uma primeira colheita. O filtrado pode ser refiltrado depois de repousar durante 12-18 horas para proporcionar uma segunda colheita e as colheitas então secas in vacuo. 68

Um composto de fórmula (VII) pode ser preparado a partir de um composto de fórmula (VIII):

H (VIII) em que Y é como definido acima para um composto de fórmula (VI) e Z é como definido acima para um composto de fórmula (VII), por reacção com um reagente de protecção adequado, por exemplo, 3, 4-di-hidro-2/í-pirano.

Por exemplo, a um composto de fórmula (VIII) é adicionado um solvente adequado, por exemplo, acetato de etilo, seguido de ácido p-toluenossulfónico. A mistura é aquecida até uma temperatura adequada, por exemplo, 50 °C, e em seguida adicionado 3, 4-di-hidro-2fí-pirano. A mistura reaccional é então aquecida a uma temperatura adequada, por exemplo, 50 °C, durante um intervalo de tempo adequado, por exemplo, 4 horas. A mistura reaccional é então evaporada in vácuo para dar um composto de fórmula (VII). A presente invenção inclui um processo para a preparação de um composto de fórmula (I), processo esse que compreende a hidrólise de um composto de fórmula (XXI): 69 (XXI)

em que R1 e R2 são como definidos acima para um composto de fórmula (I) e X é como definido acima para um composto de fórmula (IV) .

Por exemplo, a uma solução de um composto de fórmula (XXI) num solvente adequado, por exemplo, n-butanol seco, é adicionado um ácido mineral concentrado adequado, por exemplo, ácido cloridrico concentrado a uma temperatura adequada, por exemplo, temperatura ambiente. A reacção é então aquecida até uma temperatura adequada, por exemplo, 80-120 °C durante um intervalo de tempo adequado, por exemplo, 0,5-8 horas. O volume da mistura reaccional é então reduzido, por exemplo, por concentração in vacuo, adicionada água e a mistura neutralizada pela adição de uma base aquosa adequada, por exemplo, solução de hidróxido de sódio. O produto é então isolado e purificado por meios convencionais, por exemplo, o produto pode ser isolado por filtração e purificado por cromatografia. 70

Um composto de fórmula (XXI) pode ser preparado por halogenação de um composto de fórmula (XX):

em que R1 e R2 são como definidos acima para um composto de fórmula (I) .

Quando R1 é alquilCi_8amino ou cicloalquilC3_7alquilCi-6amino, a halogenação de um composto de fórmula (XX) pode ser realizada, por exemplo, como se segue: A uma solução de um composto de fórmula (XX) num solvente seco adequado, por exemplo, clorofórmio seco, a uma temperatura adequada, por exemplo, temperatura ambiente é adicionada N-bromossuccinimida. A mistura reaccional é agitada a uma temperatura adequada, por exemplo, temperatura ambiente, durante um intervalo de tempo adequado, por exemplo, uma hora. A mistura reaccional é então diluída com um solvente adequado, por exemplo, diclorometano e lavada com água. A fase orgânica é então seca, por exemplo, por passagem através de um filtro poroso hidrófobo, e concentrada.

Quando R1 é alcoxiloCi-s, cicloalquilC3_7alcoxiloCi_6, alcoxiCi_3alcoxiloC2-3 ou Hetb-alcoxiloCi-3, a halogenação de um composto de fórmula (XX) pode ser realizada, por exemplo, como se segue: 71

Um composto de fórmula (XX) é dissolvido em ácido acético glacial antes de ser adicionado acetato de sódio. A mistura é então arrefecida até uma temperatura adequada, por exemplo, num banho de gelo, e adicionado gradualmente bromo. A mistura reaccional é aquecida a uma temperatura adequada, por exemplo, temperatura ambiente, antes de ser aquecida até uma temperatura adequada, por exemplo, num dispositivo de aquecimento a uma temperatura de 60-80 °C durante um intervalo de tempo adequado, por exemplo, 3-6 horas. A mistura reaccional é desactivada com solução de tiossulfato de sódio e em seguida o pH ajustado a 6-7 pela adição de uma base adequada, por exemplo, solução aquosa de hidróxido de sódio. A mistura é então extraída para um solvente orgânico adequado, por exemplo, acetato de etilo, a camada orgânica separada, seca e o solvente removido.

Um composto de fórmula (XX), em que R1 é alcoxiloCi_8^ cicloalquilC3_7alcoxiloCi_6, alcoxiCi-6alcoxiloCi_6 ou Hetb-alcoxiloCi-3 pode ser preparado por reacção de um composto de fórmula (XIX):

em que Y é como definido acima para um composto de fórmula (VI) e R2 é como definido acima para um composto de fórmula (I), com um composto de fórmula (VIA) como definido acima. 72

Por exemplo, um composto de fórmula (XIX) é adicionado a uma suspensão de um composto de fórmula (VIA) e uma base forte, por exemplo, terc-butóxido de sódio. A mistura reaccional é então aquecida, por exemplo, num forno de microondas, durante um intervalo de tempo adequado, por exemplo, 20-45 minutos a uma temperatura adequada, por exemplo, 90-120 °C. A mistura reaccional é então diluída com um solvente adequado, por exemplo, acetato de etilo, e lavada com áqua. A fase orqânica é separada e seca, por exemplo, por passaqem através de um filtro poroso hidrófobo, e concentrada. O composto de fórmula (XX) pode ser isolado por meios convencionais, por exemplo, trituração seguida de filtração.

Um composto de fórmula (XX), em que R1 é alquilCi-8amino, cicloalquilC3-7alquilCi_6amino, pode ser preparado por reacção de um composto de fórmula (XIX) com um composto de fórmula (VIB) como definido acima.

Por exemplo, uma solução de um composto de fórmula (XIX) num solvente adequado, por exemplo, ciclo-hexilamina, é aquecida, por exemplo, num forno de microondas, a uma temperatura adequada, por exemplo, 150-180 °C, durante um intervalo de tempo adequado, por exemplo, cinco minutos. A mistura reaccional em bruto é então purificada, por exemplo, por cromatografia. 73

Um composto de fórmula (XIX) pode ser preparado por reacção de um composto de fórmula (XVIII):

em que Y é como definido acima para um composto de fórmula (VI), Z é como definido acima para um composto de fórmula (VII), e R2 é como definido acima para um composto de fórmula (I), com amónia.

Por exemplo, um composto de fórmula (XVIII) (o qual pode conter óxido de trifenilfosfina residual como uma impureza da síntese de um composto de fórmula (XVIII), é aquecido com uma solução alcoólica de amónia, por exemplo, amónia 2 M em álcool iso-propilico, a uma temperatura adequada, por exemplo, 40-60 °C, durante um intervalo de tempo adequado, por exemplo, 12-18 horas. A mistura reaccional é então evaporada até à secura e o produto purificado por recristalização de um solvente adequado, por exemplo, metanol.

Um composto de fórmula (XIX) também pode ser preparado por reacção de um composto de fórmula (XVII):

74 (XVII) em que Y é como definido acima para um composto de fórmula (VI), com um composto de fórmula (IIB) como definido acima.

Por exemplo, a uma suspensão de um composto de fórmula (XVII) e uma base adequada, por exemplo, carbonato de potássio, num solvente adequado, por exemplo, N,N-dimetilformamida, é adicionado um composto de fórmula (IIB). A mistura é agitada a uma temperatura adequada, por exemplo, 80-100 °C, durante um intervalo de tempo adequado, por exemplo, 12-18 horas. A mistura reaccional é então refeita num solvente adequado, por exemplo, uma mistura de clorofórmio e álcool íso-propilico e extraida com água. A fase orgânica é então separada, seca, por exemplo, por passagem através de um filtro poroso hidrófobo, e concentrada.

Um composto de fórmula (XVIII) pode ser preparado por reacção de um composto de fórmula (VIII) como definido acima com um composto de fórmula R2-OH, em que R2 é como definido acima para um composto de fórmula (I).

Por exemplo, uma mistura de um composto de fórmula (VIII) e um composto de fórmula R2-OH é dissolvida num solvente seco adequado, por exemplo, tetra-hidrofurano seco. A esta solução é adicionada trifenilfosfina, seguida de azodicarboxilato de diisopropilo (gota a gota). A temperatura da mistura reaccional é mantida abaixo de cerca de 45 °C por arrefecimento, por exemplo, com um banho-maria. A mistura reaccional é então agitada durante um intervalo de tempo adequado, por exemplo, 12-18 horas, a uma temperatura adequada, por exemplo, temperatura ambiente, desactivada com água e extraída para um solvente orgânico adequado, por exemplo, acetato de etilo. A fase orgânica é separada, lavada com água e em seguida seca, por exemplo, por passagem através de um filtro poroso hidrófobo, e 75 concentrada sob pressão reduzida. 0 produto em bruto pode ser purificado por meios convencionais, por exemplo, cromatografia.

Um composto de fórmula (XVII) pode ser preparado por reacção de um composto de fórmula (VIII) como definido acima com amónia.

Por exemplo, uma mistura de um composto de fórmula (VIII) e solução de amónia num solvente adequado, por exemplo, álcool íso-propílico, é agitada e aquecida a uma temperatura adequada, por exemplo, 100-140 °C num autoclave durante um intervalo de tempo adequado, por exemplo, 12-18 horas. A reacção é então arrefecida e concentrada para dar um composto de fórmula (XVII). A presente invenção inclui um processo de sintese para um composto de fórmula (I), em que R1 é alquilCi_8amino ou cicloalquilC3_7alquilCi_6amino, o qual pode ser preparado por reacção de um composto de fórmula (XXIII):

(XXIII) em que Y é como definido acima para um composto de fórmula (VI), R2 é como definido acima para um composto de fórmula (I) e R3 é como definido acima para um composto de fórmula (IIA), com um composto de fórmula (VIB) como definido acima. 76

Por exemplo, uma mistura de um composto de fórmula (XXIII) e um composto de fórmula (VIB) é aquecida, por exemplo, num forno de microondas, a uma temperatura adequada, por exemplo, 150-190 °C, durante um intervalo de tempo adequado, por exemplo, 10-20 minutos. A mistura reaccional é então concentrada para produzir um produto em bruto, o qual é purificado por meios convencionais, por exemplo, cromatografia.

Um composto de fórmula (XXIII) pode ser preparado por reacção de um composto de fórmula (XXII):

em que X é como definido acima para um composto de fórmula (IV), Y é como definido acima para um composto de fórmula (VI) e R2 é como definido acima para um composto de fórmula (I), com uma fonte de anião alcóxido.

Por exemplo, a uma solução de um composto de fórmula (XXII) num solvente adequado, por exemplo, metanol seco, foi adicionada uma base adequada, por exemplo, solução aquosa de hidróxido de sódio e a mistura foi agitada a refluxo durante um intervalo de tempo adequado, por exemplo, 15-45 minutos. A mistura reaccional é arrefecida até uma temperatura adequada, por exemplo, temperatura ambiente, e concentrada. O residuo obtido é triturado com água e extraído com um solvente adequado, por exemplo, acetato de etilo. A camada orgânica é separada, lavada, 77 seca, filtrada e concentrada para dar um produto sólido o qual pode ser purificado por meios convencionais, por exemplo, cromatografia.

Um composto de fórmula (XXII) pode ser preparado por reacção de um composto de fórmula (XIX) como definido acima, com um agente de halogenação.

Por exemplo, a uma solução de um composto de fórmula (XIX) num solvente seco adequado, por exemplo, clorofórmio, a uma temperatura adequada, por exemplo, temperatura ambiente, é adicionado um agente de halogenação adequado, por exemplo, N-bromossuccinimida. A mistura reaccional é agitada a uma temperatura adequada, por exemplo, 50-70 °C, durante um intervalo de tempo adequado, por exemplo, 5-7 horas. A mistura reaccional é arrefecida, por exemplo, até à temperatura ambiente, refeita num solvente adequado, por exemplo, diclorometano, e lavada com água. A fase orgânica é então seca, por exemplo, por passagem através de um filtro poroso hidrófobo, e concentrada.

Abreviaturas A lista seguinte proporciona definições de determinadas abreviaturas como aqui utilizadas. Entender-se-á que a lista não é exaustiva, mas o significado das abreviaturas que não estão definidas a seguir serão prontamente evidentes para os especialistas na técnica. 78 DCM Diclorometano DME 1,2-Dimetoxietano DMF N,N-Dimetilformamida AcOEt Acetato de etilo Et20 Éter dietílico h horas HC1 Ácido clorídrico HPLC Cromatografia líquida de alta eficiência ISCO Companion Equipamento automático de cromatografia flash com análise de fracção por absorção no UV disponível de Presearch Limited, Basingstoke, Hants., RG24 8PZ, UK MDAP HPLC HPLC de fase inversa numa coluna Ci8 utilizando uma eluição por gradiente de dois solventes com (A) água contendo ácido fórmico (0,1%) e (B) acetonitrilo-água (95:5 v/v) contendo ácido fórmico (0,05%) como eluentes e análise das fracções por espectroscopia de massa de electrospray. MeOH Metanol min minutos NBS N-Bromossuccinimida Levada Remoção do solvente sob pressão reduzida TBME Éter terc-butílico e metílico TFA Ácido trifluoroacético iPr iso-Propilo t-Bu terc-Butilo Ms Mesilo AC Acetilo n-Bu n-Butilo Ph Fenilo 79

Os processos de síntese descritos acima são resumidos no Esquema 1.

Esquema 1

80 A seguir são proporcionadas as condições reaccionais típicas para cada dos passos de síntese do Esquema 1: A Di-hidropirano/ácido paratoluenossulfónico, e. g., 50 °C durante 4 horas. B Amónia/iPrOH, e. g., 50 °C durante 5 horas, em seguida temperatura ambiente durante 12-18 horas, em seguida 50 °C durante 9 horas; ou 60 °C durante 4 horas. C Para X = NH:- RANH2/etilenoglicol, e. g., 120 °C durante 12-18 horas.

Para X = 0:- RAOH/KOtBu/dimetoxietano, e. g., 93-110 °C durante 12-18 horas.

Ra0H / KOtBu ou NaH, e. g., 50 °C durante 72 horas; ou 12-18 horas, em seguida 72 horas, ou 80-90 °C durante 2-4 horas, ou 100 °C durante 12-18 horas. D NBS em CH2C12 ou CHC13, e. g., 0-20 °C durante 10 minutos a 6,5 horas ou temperatura ambiente durante 0,25 - 2 horas. E NaOMe/MeOH, e. g., refluxo 1-18 horas ou 60 °C durante 12-48 horas. F TFA/MeOH, e. g., temperatura ambiente durante 18-65 horas. G K2C03/DMF em seguida R2L em que L = halogéneo - Br, e. g., 60 °C durante 1-1,5 horas, depois; a) 50 °C durante 2-18 horas, ou; b) 60 °C durante 2-16 horas, ou; 81 c) 50 °C durante 12-18 horas, em seguida 70 °C durante 8 horas, ou; d) temperatura ambiente durante 39 horas, em seguida 50 °C durante 2 horas, ou e) 50 °C durante 12-18 horas, em seguida 70 °C durante 8 horas, ou; f) 50 °C durante 12-18 horas, em seguida 90 °C durante 2 horas, ou em que L = OMs, e. g., 60 °C durante 1-1,5 horas depois; a) 90 °C durante 2-3,5 horas, ou; b) 50 °C 5 h, temperatura ambiente 16 horas, LiBr a 90 °C durante 8 horas, ou; c) 60 °C durante 3-16 horas. H HC1/1,4-dioxano, e. g., temperatura ambiente durante 1-18 horas. I Amónia/iPrOH, e. g., 120 °C durante 12-18 horas. J K2C03/DMF em seguida R2L em que L = halogéneo, por exemplo, 90 °C durante 12-18 horas. K X = 0: R^OH/KOtBu, e. g., 30 min. A 105 °C num forno de microondas. X = NH: R1NH2, e. g., 170 °C em forno de microondas durante 2-5 min. L X = O: Br2/AcOH, e. g.r banho de gelo - temperatura ambiente, em seguida 70 °C durante 4 horas. 82 X = NH: NBS em CHCI3, e. g., temperatura ambiente durante 40 min - 1 hora.

M R2OH/PPh3/azodicarboxilato de diisopropilo, e. g., temperatura ambiente - 43 °C N Amónia/iPrOH, e. g., 50 °C durante 12-18 horas. O NBS em CHCI3, e. g., 60 °C durante 6 horas. P NaOH MeOH, e. g., refluxo 0,5 horas. Q R1NH2 pura, e. g., 170 °C em forno de microondas durante 10 - 15 min. R1NH2/etilenoglicol, e. g., 170 °C em forno de microondas durante 2 X 30 min., em seguida 180 °C em forno de microondas durante 30 min. R c.HCl/nBuOH, e. g., 100 °C durante 0,5-6 horas.

Os compostos de fórmulas (VIA), (VIB), (VIII), (X), (XI), (xii), (xiii), (Xiv), xv), (xvi) e acroleína estão comercialmente disponíveis e podem ser obtidos de, por exemplo, Sigma-Aldrich, UK; TCI Europe, Bélgica; ABCR gbH & Co. KG, Alemanha; PharmaCore Inc., EUA; Chemical Block Ltd., Rússia; Lancaster Synthesis (Alfa Aesar), UK, ou podem ser preparados por analogia com processos conhecidos, por exemplo, os divulgados em textos de referência correntes sobre metodologias de síntese, tal como J. March, Advanced Organic Chemistry, 4a Edição (1992), Wiley Interscience, ou Comprehensive Organic Synthesis (Trost B.M. e Fleming I., (Eds.), Pergamon Press, 1991), cada incorporado aqui por referência no que se refere a tais processos. 83

Exemplos de outros grupos de protecção que podem ser utilizados nas vias de sintese aqui descritas e os meios para a sua remoção podem ser encontrados em T. W. Greene Protective Groups in Organic Synthesis', 3a edição, J. Wiley and Sons, 1999, incorporado aqui por referência no que se refere a tais processos.

Para qualquer das reacções ou dos processos descritos acima pode ser utilizados métodos convencionais de aquecimento e arrefecimento, por exemplo, banhos de óleo de temperatura regulada ou blocos de aquecimento de temperatura regulada, e banhos de gelo/sal ou banhos de gelo seco/acetona respectivamente. Podem ser utilizados métodos convencionais de isolamento, por exemplo, extracção de ou para solventes aquosos ou não aquosos. Podem ser utilizados métodos convencionais de secagem de solventes orgânicos, soluções ou extractos, tais como agitação com sulfato de magnésio ou sulfato de sódio, ou passagem através de um filtro poroso hidrófobo. Podem ser utilizados métodos convencionais de purificação, por exemplo, cristalização e cromatografia, por exemplo, cromatografia sobre sílica ou cromatografia de fase inversa, conforme necessário. A cristalização pode ser realizada utilizando solventes convencionais, tais como metanol, etanol ou butanol, ou as suas misturas aquosas. Entender-se-á que os tempos e temperaturas de reacção específicos podem ser tipicamente determinados por técnicas de monitorização de reacção, por exemplo, cromatografia em camada fina e LC-MS.

Quando apropriado, as formas isoméricas individuais dos compostos de fórmula (I) podem ser preparadas como isómeros individuais utilizando processos convencionais, tal como a 84 cristalização fraccionada de derivados diastereoisoméricos ou cromatografia liquida de alta eficiência quiral (HPLC quiral). A estereoquimica absoluta dos compostos pode ser determinada utilizando métodos convencionais, tal como cristalografia de raios X. A invenção é ilustrada por referência aos, mas não é de modo algum limitada pelos Exemplos seguintes.

Detalhes Experimentais

Os detalhes experimentais dos sistemas de LCMS A e B como aqui referidos são como se segue:

Sistema A

Coluna: 3,3 cm x 4,6 mm ID, 3 pm ABZ+PLUS da Supelco Caudal: 3 mL/min.

Volume de injecção: 5pL Temp: t.a.

Gama de Detecção no UV: 215 a 330 nm

Solventes: A: 0,1% de ácido fórmico + acetato de amónio 10 mM B: 95% de acetonitrilo + 0,05% de ácido fórmico 85

Gradiente :

Tempo (min.) A% B% 0 100 0 0,7 100 0 4,2 0 100 5, 3 0 100 5, 5 100 0

Sistema B

Coluna: 50 Mm X 2,1 mm ID, 1,7 μιη Acquity UPLC BEH Cig Caudal: 1 mL/min.

Volume de Injecção: 0,5 pL Temp: 40 °C

Gama de Detecção no UV: 220 a 330 nm

Solventes: A: 0,1% de ácido fórmico + acetato de amónio 10 mM B: 95% de acetonitrilo + 0,05% de ácido fórmico

Tempo (min.) A% B% 0 97 3 0,7 97 3 4,2 0 100 5, 3 0 100 5, 5 97 3

Para os Intermediários 219-292 e Exemplos 61-141, a purificação cromatográfica foi efectuada como detalhado abaixo. 86 A purificação cromatográfica foi tipicamente realizada utilizando cartuchos pré-embalados de silica gel. O Flashmaster II é um sistema automático de cromatografia flash de utilizador múltiplo, disponível de Argonaut Technologies Ltd, o qual utiliza cartuchos de Extracção em Fase Sólida (SPE) de fase normal, descartáveis (2 g a 100 g). Proporciona mistura quaternária de solventes em linha para permitir que sejam corridos métodos de gradiente. As amostras são colocadas por ordem utilizando o software de acesso aberto multifuncional, que gere os solventes, caudais, perfil de gradiente e condições de colheita. O sistema está equipado com um detector de UV de comprimento de onda variável Knauer e dois colectores de fracções Gilson FC204 que permitem o corte, recolha e localização automática de picos.

Para os Intermediários 219-292 e Exemplos 61-141, os espectros de RMN foram registados como detalhado abaixo.

Os espectros de RMN de ΧΗ foram registados em CDCI3 ou DMSO-dç num espectrómetro Bruker DPX 400 ou Bruker Avance DRX ou Varian Unity 400 todos a trabalhar a 400 MHz. O padrão interno utilizado foi tetrametilsilano ou o solvente protonado residual a 7,25 ppm para o CDCI3 ou 2,50 ppm para o DMSO-dí?.

Para os Intermediários 219-292 foi efectuada uma preparação automática orientada por massa nas condições dadas abaixo. A HPLC autopreparativa orientada por massa foi realizada numa coluna XBridge C18 (100 mm x 19 mm i.d. 5 pm de diâmetro de enchimento) à temperatura ambiente. Os solventes utilizados foram: 87 A = Bicarbonato de Amónio aquoso 10 mM ajustado a pH 10 com solução de Amónia. B = Acetonitrilo. Foi utilizado um caudal foi:

Tempo (min.) A% 0 70 1 70 10 15 11 1 15 1 A detecção de UV foi um de 210 nm em relação a 350 registados num espectrómetro electrospray com varrimento negativo. de 20 mL/min. Um gradiente típico B% 30 30 85 99 99 sinal médio do comprimento de onda nm e os espectros de massa foram de massa utilizando ionização por alternado no modo positivo e

Exemplos

Intermediário 1: 2,6-Dicloro-9-(tetra-hidro-2fl-piran-2-il) - 9H-purina

88 A 2,6-dicloropurina (25,0 g) foi adicionado acetato de etilo (260 mL), seguido de ácido p-toluenossulfónico (0,253 g) . A mistura foi aquecida a 50 °C e em seguida foi adicionado 3,4-di-hidro-2lí-pirano (16,8 g) . A mistura reaccional foi então aquecida a 50 °C durante 4 horas. A mistura reaccional foi evaporada in vacuo para dar o composto em epígrafe como um sólido amarelo (36,9 g) . RMN de ΧΗ (CDC13) : 8,35 (1H, s), 5,77 (1H, dd), 4,20 (1H, m), 3,79 (1H, m), 2,20-1, 65 (6H, m) .

Intermediário 2: 2-Cloro-9-(tetra-hidro-2fl-piran-2-il)-9H- purin-6-amina NHj

2, 6-Dicloro-9- (tetra-hidro-2H-piran-2-il) -9ií-purina (36,9 g) foi aquecida com amónia 2 M em isopropanol (250 mL) a 50 °C durante 5 horas. Depois de repousar à temperatura ambiente, de um dia para o outro, foi adicionada uma quantidade adicional de amónia 2 M em isopropanol (100 mL) para destruir o bolo resultante e a mistura reaccional foi aquecida durante mais 9 horas até a reacção estar concluída. À mistura reaccional foi adicionada água (70 mL) e o sólido amarelo filtrado. O sólido foi lavado com álcool isopropílico: água (5:1 (v/v), 60 mL) e em seguida seco ao ar sob sucção para dar uma primeira colheita. O 89 filtrado foi refiltrado depois de repousar, de um dia para o outro, para isolar precipitado e ambos os sólidos foram secos ín vácuo. A primeira colheita era pura com o material da segunda colheita a mostrar uma impureza muito pequena (sinal largo isolado a 3,5 ppm não observado na primeira colheita) mas era em tudo o resto idêntico. Sólido da primeira colheita (28,4 g), sólido da segunda colheita (3,42 g) . RMN de 1H (CDC13) : 8,01 (1H, s), 5,98 (2H, s largo), 5,70 (1H, dd) , 4,16 (1H, m), 3,78 (1H, m), 2,15-1,60 (6H, m com sobreposição).

Intermediário 2 (método alternativo): 2-Cloro-9-(tetra-hidro-2fí-piran-2-il) -9fí-purin-6-amina

A uma solução de 2,6-dicloropurina (25 g) em acetato de etilo seco (200 mL) foi adicionado ácido p-toluenossulfónico mono-hidratado (235 mg) . A reacção foi aquecida a 50 °C e foi adicionado de uma vez 3,4-di-hidro-2f7-pirano (18,1 mL) . A reacção foi deixada a agitar a 50 °C durante 1 hora e o solvente foi removido sob pressão reduzida. Isto proporcionou um sólido amarelo. Uma suspensão deste sólido (—36 g) em amónia 2,0 M em 90 isopropanol (460 mL) foi aquecida sob azoto a 60 °C durante 4 horas com um condensador ligado. A reacção foi vertida para água (50 mL) e deixada arrefecer, de um dia para o outro. O precipitado foi filtrado e seco num evaporador rotativo (60 °C) durante 30 minutos para proporcionar o composto em epígrafe como um sólido esbranquiçado (31 g, 93%, 2 passos). MS calculado para (Ci0Hi2C1N5O) + = 254, 256 MS encontrado (electrospray): (M) + = 254, 256 (3:1) RMN de ( (CD3) 2SO) : δ 8,43 (1H, s), 7,82 (2H, s) , 5,55 1H, dd), 4,00 (1H, m), 3,69 (1H, m) , 2,21 (1H, m), 1,95 (2H, m), l,74 (ÍH, m), 1,56 (2H, m).

Intermediário 3: 2-(Butoxi)-9-(tetra-hidro-2fl-piran-2-il)- 9H-purin-6-amina

A butan-l-ol (76 mL) foi adicionado em porções terc-butóxido de sódio (15,2 g) (Nota: a mistura reaccional fica quente). O anterior foi agitado até ficar homogéneo (~ 15 min) 91 antes de ser então adicionada 2-cloro-9-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-9#-purin-6-amina (10,0 g) à solução amarela pálida resultante. A mistura reaccional foi então aquecida a 100 °C, de um dia para o outro. A mistura reaccional foi diminuída para remover o mais possível de butan-l-ol antes de ser partilhada entre éter dietílico e água. A fase de éter dietílico foi separada e a aquosa extraída outra vez com éter dietílico, . As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre sulfato de magnésio (anidro). 0 sulfato de magnésio foi filtrado e o filtrado removido para dar um óleo viscoso castanho que foi submetido a evaporação azeotrópica com tolueno (3 vezes ) e colocado sob alto vácuo de um dia para o outro, transferido para um novo balão com diclorometano e levado, colocado sob alto vácuo para dar o composto em epígrafe como um vidro castanho (9,45 g) . RMN de ΧΗ (CDC13) : 7,85 (1H, s), 5,92 (2H, s largo), 5,64 (1H, d), 4,32 (2 H, t), 4,14 (1H, m) , 3,75 (1H, m) , 2,10-1,95 (3H, m com sobreposição), 1,81-1,58 (5H, m com sobreposição), 1,50 (2H, m), 0,97 (3H, t) .

Intermediário 4: 8-Bromo-2-butoxi-9-(tetra-hidro-2fí-piran-2-il)-9ff-purin-6-amina

92 2-Butoxi-9-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-9i7-purin-6-amina (9,45 g) foi dissolvida em clorofórmio (50 mL) e arrefecida até 0 °C (banho de gelo). A esta solução foi adicionada N-bromossuccinimida (6,07 g) em porções, mantendo a temperatura abaixo de 3 °C. Isto deu uma solução verde escura, agitada a 2,5 °C durante 30 minutos antes de ser deixada aquecer até à temperatura ambiente e em seguida agitada durante 6 horas. A mistura reaccional foi então lavada com água (100 mL, duas vezes). A fase orgânica foi seca/separada utilizando um filtro poroso hidrófobo e evaporada para dar uma goma castanha escura que foi purificada por cromatografia sobre sílica (120 g) (ISCO) utilizando uma eluição por gradiente de 0-50% de acetato de etilo: ciclo-hexano para proporcionar o composto em epígrafe como um sólido amarelo pálido (8,37 g) . RMN de (CDC13) : 5,61 (1H, dd), 5,49 (2H, s largo), 4,32 (2 H, m), 4,17 (1H, m), 3,71 (1H, m) , 3,04 (1H, m), 2,11 (1H, d largo), 1, 89-1, 45 (6H, m com sobreposição), 1,50 (2H, m), 0,97 (3H, t) .

Intermediário 5: 2-Butoxi-8-metoxi-9-(tetra-hidro-2fl-piran-2-il)-9ff-purin-6-amina

8-Bromo-2-butoxi-9-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-9ií-purin-6-amina (8,37 g) foi aquecida a refluxo com metóxido de sódio a 93 25% em metanol (14,4 mL) e metanol (65 mL) durante 4,5 horas. A mistura reaccional foi concentrada sob pressão reduzida e partilhada entre acetato de etilo e solução saturada de cloreto de amónio. A fase orgânica foi separada e repetida a extracção para acetato de etilo. As fases orgânicas foram combinadas e lavadas com solução aquosa saturada de cloreto de sódio (duas vezes). A fase orgânica foi feita passar através de um filtro poroso hidrófobo depois de separar a aquosa e foi evaporada para dar uma goma castanha clara que foi colocada sob alto vácuo para dar uma espuma (7,52 g) que colapsou numa goma (7,34 g) à pressão ambiente e solidificou, de um dia para o outro, para dar o composto em epígrafe como um sólido amorfo amarelo MS calculado para (C15H23N5O3)+ = 321 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 322 RMN de (CDCI3): 5, 50 (1H, dd), 5,17 (2H, s largo), 4,29 (2H, t), 4, 12 (3H, s e 1H; , m), 3,70 (1H, m), 2,77 (1H, m), 2,05 (1H, m), 1, 82-1, 63 (6 H, m com sobreposição), 1,50 (2H, m), 0,97 (3H, t).

Intermediário 6: Sal de trifluoroacetato de 2-butoxi-8-metoxi-9ff-purin-6-amina

N '

F 94 A uma solução de 2-butoxi-8-metoxi-9-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-amina (7,34 g) em metanol (100 mL) foi adicionado ácido trifluoroacético (10 mL) . A mistura foi agitada à temperatura ambiente ao longo do fim-de-semana para dar uma suspensão. A mistura reaccional foi concentrada até um volume pequeno (lama espessa) antes de ser diluída com acetato de etilo (50 mL) . A suspensão resultante foi filtrada e lavada com um volume pequeno de acetato de etilo até o filtrado ser incolor. O sólido remanescente foi seco por ar e em seguida in vácuo para dar o composto em epígrafe como um sólido (6,20 g) . O filtrado anteriormente obtido foi concentrado para dar uma lama que foi diluída com um volume pequeno de acetato de etilo (10 mL) e em seguida filtrada e seca como acima. Esta segunda colheita foi isolada como um sólido branco (0,276 g) . Ambas as colheitas foram idênticas por RMN. MS calculado para (CioH15N502) + = 237 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 238 RMN de 1H (CD3OD) : 4,47 (2H, t), 4,15 (3H, s), 1,80 (2H, m), 1,50 (2H, m), 0,99 (3H, t) (protões permutáveis de NH2, NH e COOH não observados).

Intermediário 7: 2-Butoxi-8-metoxi-9-(tetra-hidro-2fl-piran-4-ilmetil)-9ff-purin-6-amina

95

Sal de trifluoroacetato de 2-butoxi-8-metoxi-9H-purin-6-amina (0,5 g) foi aquecido a 60 °C durante 1 hora com carbonato de potássio anidro (0,79 g) em DMF seca (10 mL) e deixado arrefecer até à temperatura ambiente antes de ser adicionado 4-(bromometil) tetra-hidro-2fí-pirano (0,26 g) . A reacção foi agitada à temperatura ambiente durante 39 horas e aquecida durante 2 horas a 50 °C. A reacção foi vertida para água e extraída para acetato de etilo (duas vezes). Os extractos de acetato de etilo combinados foram secos através de um filtro poroso hidrófobo, levados até à secura e purificados primeiro por cromatografia sobre sílica (ISCO) (40 g) eluindo com 0-100% de acetato de etilo:ciclo-hexano, em seguida 0-20% de metanol:acetato de etilo e em seguida por cromatografia de fase inversa (43 g, C-18) (ISCO) eluindo com 20-60% de acetonitrilo (0,05% de ácido fórmico): água (0,1% de ácido fórmico) para dar o composto em epígrafe como um sólido branco. MS calculado para (C16H25N5O3)+ = 335 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 336 RMN de XH (CD3OD) : 4,29 (2H, t), 4,13 (3H, s), 3,92 (2H, m), 3,81 (2H, dd), 3,36 (2H, m), 2,12 (1H, m), 1,74 (2H, m), 1,52-1,47 (4H, m) , 1,37 (2H, m), 0,98 (3H, t) (troca de NH2) . 96

Intermediário 8: 2-Butoxi-8-metoxi-9-(tetra-hidro-2ff-piran-2-ilmetil)-9fl-purin-6-amina

Sal de trif luoroacetato de 2-butoxi-8-metoxi-9/í-purin-6-amina (0,20 g) foi aquecido com carbonato de potássio anidro (0,315 g) em DMF seca (5 mL) a 60 °C durante 1 hora e arrefecido até à temperatura ambiente. Foi adicionado 2-(bromometil)tetra-hidro-2/í-pirano (73 uL) e a mistura reaccional aquecida a 50 °C, de um dia para o outro. A mistura reaccional foi desactivada em água (50 mL) e extraída para acetato de etilo (25 mL, 3 vezes) . As camadas orgânicas reunidas foram separadas e feitas passar através de um filtro poroso hidrófobo para secar, em seguida levadas até à secura e a goma amarela pálida (145 mg), que se transformou num sólido branco quando triturada com metanol, foi purificada por MDAP para dar o composto em epígrafe (6 mg) (~85% pura). MS calculado para (C16H25N5O3)+ = 335 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 336. 97

Intermediário 9: N2-Butil-9-(tetra-hidro-2fl-piran-2-il)-9H-purina-2,6-diamina

A uma solução de 2-cloro-9-(tetra-hidro-2fí-piran-2-il)-9H-purin-6-amina (10 g) em etilenoglicol seco (50 mL) à temperatura ambiente e sob azoto foi adicionada n-butilamina (16 mL) de uma única vez. A reacção foi aquecida a 120 °C, de um dia para o outro. A reacção foi arrefecida até à temperatura ambiente, diluida com acetato de etilo (150 mL) e lavada com água (2 x 50 mL). A camada orgânica foi seca sobre MgSCq, filtrada e concentrada in vacuo. Isto proporcionou o composto em epígrafe como um óleo verde viscoso (10,2 g) que foi utilizado no passo seguinte sem mais purificação. MS calculado para (Ci4H22n60)+ = 290 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 291 RMN de (( cd3) 2SO) : δ 7, 8 (1H, s), 6,6 (2H, s), 6,2 (1H, t), 5,4 (1H, dd) , 4, 0 (1H , m) , 3,6 (1H, m), 3,2 (2H, m), 2,2 (1H, m), 1,9 (1H, m), 1,8 (1H, m), 1, 7 (1H, m), 1,5 (2 H, m), 1,4 (2 H, m), 1,3 (2 H, m), 0,9 ( 3H, t) . 98

Intermediário 10: Sal de ácido trifluoroacético de N2-butil 8-metoxi-9ff-purina-2, 6-diamina

CFjCOjH A uma solução de li2-butil-9-(tetra-hidro-2ú-piran-2-il) -9H-purina-2,6-diamina em bruto (-10,2 g) em clorofórmio seco (100 mL) à temperatura ambiente foi adicionada N-bromossuccinimida (6,3 g) em porções ao longo de 5 minutos. A solução escura foi deixada a agitar à temperatura ambiente durante 30 minutos. A mistura reaccional foi lavada com água (20 mL) . A fase orgânica foi feita passar através de um filtro poroso hidrófobo e concentrada in vacuo. Isto proporcionou um sólido bege que foi dissolvido em metanol seco (100 mL) e, à temperatura ambiente sob azoto, foi adicionada solução de metóxido de sódio (25% em peso em metanol, 24 mL) de uma única vez. A reacção foi aquecida a 65 °C, com um condensador ligado, de um dia para o outro. A reacção foi arrefecida e concentrada in vacuo. O resíduo laranja resultante foi tomado em acetato de etilo (150 mL) e vertido para cloreto de amónio aquoso saturado (50 mL) . A camada orgânica foi separada e lavada adicionalmente com água (50 mL). A camada orgânica foi seca sobre MgSCú, filtrada e concentrada in vacuo. A este material em metanol seco (70 mL) à temperatura ambiente foi adicionado ácido trif luoroacético (7 mL) de uma única vez. A reacção foi agitada durante 30 horas e concentrada in vacuo para produzir um sólido castanho-escuro. Este foi tomado em éter dietilico (20 mL) e 99 triturado. 0 sólido foi filtrado para proporcionar o composto em epígrafe como um sólido bege (3,3 g, 35%, 4 passos). MS calculado para (Ci0Hi6N6O)+ = 236 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 237 RMN de 1ti ( (CD3) 2S0) : δ 13,3-12,3 (1H, m.l), 8,6-7,3 (2H,

(3h, t) (protoes permutáveis remanescentes não evidentes).

Intermediário 11: N2-Butil-8-metoxi-9-(tetra-hidro-2ff-piran-4-ilmetil)-9fl-purina-2,6-diamina

A uma solução de sal de ácido trifluoroacético de IV2-butil-8-metoxi-9H-purina-2,6-diamina (500 mg) em N,N-dimetilformamida seca (8 mL) à temperatura ambiente e sob azoto foi adicionado carbonato de potássio (1,17 g) de uma única vez. A reacção foi agitada a 60 °C durante 1,5 horas e em seguida arrefecida até à temperatura ambiente. Foi adicionado 4-(bromometil)tetra-hidro-2i7-pirano (0,3 mL) de uma única vez e a reacção aquecida a 50 °C, de um dia para o outro. A reacção foi diluída com acetato de etilo (20 mL) e lavada com água (10 mL) . A camada orgânica foi separada e concentrada in vacuo. O produto foi purificado por cromatograf ia de fase inversa em Ci8 utilizando água 100 (contendo 0,1% de ácido fórmico)-acetonitrilo (contendo 0,05% de ácido fórmico) como eluente (10-45%) para proporcionar o composto em epigrafe como um óleo viscoso amarelo (315 mg, 90% limpo). MS calculado para (Ci6H26N602)+ = 334 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 335 RMN de XH ((CD3)2SO) : δ 6,29 (2H, s), 6,17 (1H, t), 4,00 (3H, S), 3,81 (2H, m), 3,66 (2H, d), 3,20 (4H, 2xm), 2,01 (1H, m), 1,47 (2H, m), 1,40 (2H, m ), i, 31 (2H, m) , 1,22 (2H, m), 0,89 (3H, t) .

Intermediário 11, processo alternativo: i72-Butil-8-(metoxi) -9- (tetra-hidro-2fl-piran-4-ilmetil) -9ff-purina-2, 6-diamina

Uma mistura de trifluoroacetato de N2-butil-8-(metoxi)-3H-purina-2,6-diamina (12,89 g) e carbonato de potássio anidro (20,58 g) em dmf anidra (175 mL) foi aquecida a 60 °C (externos) durante 1,5 horas sob azoto. A mistura reaccional foi arrefecida até à temperatura ambiente antes de ser adicionado metanossulfonato de tetra-hidro-2fí-piran-4-il-metilo (7,571 g) e em seguida a reacção foi aquecida a 90 °C durante 2,5 horas. A 101 mistura reaccional foi examinada por LCMS e mostrou reacção incompleta e assim a temperatura de reacção foi reduzida até 50 °C (externos) e a mistura reaccional foi aquecida, de um dia para o outro, sob azoto. A mistura reaccional foi então partilhada entre água (300 mL) e acetato de etilo (300 mL) . A orgânica foi separada e a camada aquosa foi reextraida com mais acetato de etilo (300 mL) . Os extractos orgânicos foram combinados e lavados com solução aquosa saturada de cloreto de sódio (500 mL). A orgânica foi seca passando através de um filtro poroso hidrófobo (depois de separar a camada de solução aquosa saturada de cloreto de sódio). A orgânica foi evaporada sob pressão reduzida para dar um óleo castanho móvel em bruto (16,01 g) que solidificou num sólido húmido (ao longo de 2 dias). Este material em lotes de ~ 3 g foi purificado utilizando cromatografia de fase inversa {ISCO [coluna (Cl8) 330 g] (20 - 60% de acetonitrilo: água)}. As fracções puras apropriadas de todas as purificações foram combinadas e evaporadas sob pressão reduzida para dar o composto em epígrafe limpo como um sólido pulverulento castanho-amarelado claro (5,1530 g). MS calculado para (Ci6H26N602)+ = 334 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 335 RMN de (CDC13) : 6,95 (2H, s largo), 6,52 (1H, s largo), 4,10 (3 H, s), 4,01-3,92 (2H, m) , 3,80-3, 73 (2H, m), 3,44-3,29 (4H, m com sobreposição), 2,14-2,00 (1H, m), 1,65-1,34 (8H, m com sobreposição), 0,98-0,91 (3H, m).

Nota: contém ácido fórmico residual. 102

Intermediário 12: i^-Butil-S-metoxi-i?-(tetra-hidro-2fl-piran-2-ilmetil)-9i7-purina-2,6-diamina

A uma solução de sal de ácido trifluoroacético de A^-butil-8-metoxi-9ií-purina-2, 6-diamina (400 mg) em N,N-dimetilformamida seca (6 mL) à temperatura ambiente e sob azoto foi adicionado carbonato de potássio (630 mg) de uma única vez. A reacção foi agitada a 60 °C durante 1,5 horas e em seguida arrefecida até 50 °C. Foi adicionado 2-(bromometil) tetra-hidro-2/í-pirano (175 pL) de uma única vez e a reacção aquecida a 50 °C, de um dia para o outro, e em seguida a 90 °C durante 2 horas. A reacção foi diluida com acetato de etilo (20 mL) e lavada com água (10 mL) . A camada orgânica foi separada e concentrada in vacuo. O produto foi semi-purificado por MDAP para proporcionar uma mistura do composto em epígrafe e um isómero. Esta mistura foi utilizada sem mais purificação. MS calculado para (Ci6H26N602) + = 334 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 335. 103

Intermediário 13: 3-(Bromometil)tetra-hidro-2ff-pirano

Br A tetra-hidro-2H-piran-3-ilmetanol (1 g) em diclorometano seco (28 mL) a 0 °C e sob azoto, foi adicionada trietilamina (2,7 mL) de uma única vez, seguida de cloreto de metanossulfonilo (0,87 mL), gota a gota, ao longo de 1 minuto. A reacção foi deixada aquecer até à temperatura ambiente e deixada a esta temperatura, de um dia para o outro. A mistura reaccional foi diluida com diclorometano (20 mL) e lavada com bicarbonato de sódio aquoso saturado (20 mL) . A camada orgânica foi feita passar através de um filtro poroso hidrófobo para secar e concentrada in vacuo para produzir um óleo amarelo. A este óleo em acetona seca (40 mL) e à temperatura ambiente foi adicionado brometo de litio (3 g) de uma única vez. A reacção foi aquecida a refluxo durante 1 hora. A reacção foi deixada arrefecer até à temperatura ambiente e refeita em diclorometano (60 mL) e lavada com água (20 mL) . A camada orgânica foi feita passar através de um filtro poroso hidrófobo para secar e concentrada in vacuo. O produto foi purificado por cromatografia sobre sílica (40 g) (ISCO) utilizando uma eluição por gradiente de 0-50% de ciclo-hexano:acetato de etilo para proporcionar o composto em epígrafe como um óleo amarelo (340 mg). RMN de XH (CDC13) : δ 3,99 (2H, m) , 3,84 (1H, m), 3,41 (1H, m), 3,35-3,21 (2H, m), 2, 05-1, 90 (2H, m) , 1,71-1,59 (2H, m) , 1,38 (1H, m). 104

Intermediário 14: i\72-Butil-8-metoxi-9-(tetra-hidro-2#-piran-3-ilmetil) -9fi-purina-2, 6-diamina

A uma solução de sal de ácido trifluoroacético de A^-butil-8-metoxi-9lí-purina-2, 6-diamina (100 mg) em N,N-dimetilformamida seca (1 mL) à temperatura ambiente e sob azoto foi adicionado carbonato de potássio (158 mg) de uma única vez. A reacção foi agitada a 60 °C durante 1,5 horas e em seguida arrefecida até 50 °C. Foi adicionada uma solução de 3-(bromometil)tetra-hidro-2íí-pirano (56 mg) em N, N-dimetilf ormamida seca (0,3 mL) de uma vez e a reacção aquecida a 50 °C durante 16 horas. A reacção foi diluída com acetato de etilo (15 mL) e lavada com água (5 mL). A camada orgânica foi separada, seca sobre sulfato de magnésio, filtrada e concentrada in vacuo. O produto foi purificado por cromatografia de fase inversa em Ci8 utilizando água (contendo 0,1% de ácido fórmico)-acetonitrilo (contendo 0,05% de ácido fórmico) como eluente (20-60%) para proporcionar o composto em epígrafe como um óleo amarelo (45 mg). MS calculado para (Ci6H26N602) + = 334 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 335. 105

Intermediário 15: 3-(Bromometil)tetra-hidrofurano

Br

O A tetra-hidrofuran-3-ilmetanol (1 g) em diclorometano seco (30 mL) a 0 °C e sob azoto, foi adicionada trietilamina (2,7 mL) de uma única vez, seguida de cloreto de metanossulfonilo (1 mL), gota a gota, ao longo de 3 minutos. A reacção foi agitada a 0 °C até o gelo do banho ter fundido e depois deixada à temperatura ambiente, de um dia para o outro. A mistura reaccional foi lavada com bicarbonato de sódio aquoso saturado (10 mL). A camada orgânica foi feita passar através de um filtro poroso hidrófobo para secar e concentrada in vacuo para produzir um óleo amarelo (1,7 g) . A este óleo em acetona seca (50 mL) e à temperatura ambiente foi adicionado brometo de litio (3,3 g) de uma única vez. A reacção foi aquecida a refluxo durante 20 horas. A reacção foi deixada arrefecer até à temperatura ambiente e concentrada in vacuo. O resíduo foi tomado em diclorometano (50 mL) e lavado com água (25 mL). A camada orgânica foi feita passar através de um filtro poroso hidrófobo para secar e concentrada in vacuo. O produto foi purificado por cromatografia sobre sílica (40 g) (ISCO) utilizando uma eluição por gradiente de 0-50% de ciclo-hexano:acetato de etilo para proporcionar o composto em (890 mg). epígrafe como um óleo incolor RMN de XH ( (CD3) 2SO) : δ 3, 81-3,73 (2H, m), 3,66 (1H, m), 3,54 (2H, m), 3,42 (1H, m), 2,61 (1H, m), 2,02 (1H, m), 1,60 (1H, m) . 106

Intermediário 16: 2-Butoxi-8-metoxi-9-(tetra-hidrofuran-3-ilmetil) -9fl-purin-6-amina

Sal de trif luoroacetato de 2-butoxi-8-metoxi-9fí-purin-6-amina (0,20g) foi dissolvido em N,N-dimetilformamida anidra (5 mL) foi tratado com carbonato de potássio anidro (0,315 g), aquecido até 60 °C durante 1 hora e em seguida arrefecido até à temperatura ambiente. Ao anterior foi adicionado 3-(bromometil)tetra-hidrofurano (0,103 g) e a mistura reaccional aquecida a 50 °C, de um dia para o outro. A mistura reaccional foi desactivada com água (25 mL) e extraída para acetato de etilo (3 vezes, 100 mL de volume total combinado). A fase orgânica combinada foi separada e feita passar através de um filtro poroso hidrófobo para secar. A fase orgânica foi diminuída para dar uma goma que foi purificada por cromatografia de fase inversa em Ci8 utilizando água (contendo 0,1% de ácido fórmico)-acetonitrilo (contendo 0,05% de ácido fórmico) como eluente (20-60%) para proporcionar o composto em epígrafe como um sólido branco (97 mg). MS calculado para (C15H23N5O3)+ = 321 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 322 107 RMN de XH (CDC13) : 5,39 (2H, s), 4,24 (2H, t), 4,08 (3H, s), 3, 96-3, 85 (3H, m com sobreposição), 3,71 (2H, m), 3,60 (1H, m), 2,81 (1H, m), 1,93 (1H, m), 1,76-1,63 (3H, m com sobreposição), 1,46 (2H, m), 0,93 (3H, t).

Intermediário 16, processo alternativo: 2-(Butiloxi)-8-(metiloxi)-9-(tetra-hidro-3-furanilmetil)-9H-purin-6-amina

Uma solução de sal de trifluoroacetato de 2-butoxi-8-metoxi-9fí-purin-6-amina (4,5 g), metanossulfonato de tetra-hidro-3-furanilmetilo (2,77 g) e carbonato de potássio (5,31 g) em dimetilsulfóxido (45 mL) foi agitada e aquecida a 60 °C durante 1,5 horas, seguida de aquecimento a 90 °C durante 2,5 horas. A reacção foi deixada arrefecer e a mistura diluída com água e solução aquosa saturada de cloreto de sódio e agitada com acetato de etilo. O sólido insolúvel presente foi filtrado (209 mg de produto) e a camada orgânica separada. A camada aquosa foi ainda extraída quatro vezes com acetato de etilo. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água e em seguida com solução aquosa saturada de cloreto de sódio. A camada orgânica foi seca passando através de um filtro poroso hidrófobo e concentrada in vácuo para produzir um sólido castanho claro (4,18 g) . Este foi recristalizado de acetonitrilo (25 mL) para proporcionar o produto (2,28 g). Este foi ainda purificado 108 dissolvendo em diclorometano e lavando com ácido clorídrico 1 M, solução aquosa saturada de cloreto de sódio e hidrogenocarbonato de sódio saturado. A camada orgânica foi seca através de um filtro poroso hidrófobo e concentrada in vacuo para produzir o produto como um sólido de cor creme (2,03 g) . MS calculado para (C15H23N5O3)+ = 321 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ =322 RMN de (CDC1 3) : δ 5,32 (2H, s largo), , 4,27 (2H, t) , 4, 12 3H, S), 4, 00- -3,88 (3 H, m), 3, 76 (2H, m), 3,63 (1H, m), 2, 85 1H, m), 1, 97 (1H, m), 1,81- 1,66 (3H, m), 1,49 (2H, m), 0, 96 (3H, t).

Intermediário 17: 2-Butoxi-8-metoxi-9-[2-(tetra-hidro-2fl-piran-4-il)etil]-9H-purin-6-amina

Sal de trifluoroacetato de 2-butoxi-8-metoxi-9H-purin-6-amina (0,2 g) em N,N-dimetilformamida anidra (5 mL) foi tratado com carbonato de potássio anidro (0,315 g) e em seguida aquecido até 60 °C durante 1 hora. Ao arrefecer até à temperatura ambiente, ao anterior foi adicionado 4-(2-bromoetil)tetra-hidro-2fí-pirano (0,110 g) e a reacção foi aquecida a 50 °C, de um dia 109 para o outro. A mistura reaccional foi desactivada com água (5 mL) e extraída para acetato de etilo (3 vezes, 100 mL de volume total combinado). As camadas orgânicas separadas foram combinadas e feitas passar através de um filtro poroso hidrófobo para secar. A fase orgânica foi reduzida para dar uma goma que foi purificada por cromatograf ia de fase inversa em Cig utilizando água (contendo 0,1% de ácido fórmico)-acetonitrilo (contendo 0,05% de ácido fórmico) como eluente (20-60%) para proporcionar o composto em epígrafe como um sólido branco (111 mg). MS calculado para (C17H27N5O3)+ = 349 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 350 RMN de XH (CDCI3) : 5,20 (2H, s), 4,24 (2H, t), 4,10 (3H, s), 3,94 (4H, m com sobreposição), 3,31 (2H, m), 1, 78-1, 65 (6H, m com sobreposição), 1,52-1,39 (3H, m com sobreposição), 1,30 (2H, m), 0,95 (3H, t) .

Intermediário 18:_2-Butoxi-8-metoxi-9-(tetra-hidro-2fl- piran-3-ilmetil)-9fl-purin-6-amina

Sal de amina (0,2 g) trifluoroacetato de 2-butoxi-8-metoxi-9H-purin-6-em N,N-dimetilformamida seca (5 mL) foi aquecido a 110 60 °C com carbonato de potássio anidro (0,315 g) durante 1 hora e deixado arrefecer até à temperatura ambiente antes de ser adicionado 3-(bromometil)tetra-hidro-2H-pirano (0,112 g). A mistura reaccional foi aquecida a 50 °C, de um dia para o outro. A mistura reaccional foi desactivada com água (20 mL) e extraída para acetato de etilo (3 vezes, 75 mL de volume combinado) . A fase orgânica foi separada, combinada e feita passar através de um filtro poroso hidrófobo para secar. A fase orgânica foi evaporada sob pressão reduzida para dar um óleo amarelo que foi purificado por cromatografia de fase inversa em Ci8 utilizando água (contendo 0,1% de ácido fórmico)-acetonitrilo (contendo 0,05% de ácido fórmico) como eluente (20-60%) para proporcionar o composto em epígrafe como um sólido branco (105,4 mg). MS calculado para (C16H25N5O3)+ = 335 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 336 RMN de H (CDCI3) : 5,14 (2H, s), 4,26 (2H, t), 4,10 (3H, s) 3,88-3,72 (4H, m com sobreposição), 3,42 (1H, m), 3,27 (1H, dd) 2,18 (1H, m), 1,80-1,63 (4H, m com sobreposição), 1,61-1,42 (3H m com sobreposição), 1,33-1,18 (1H, m), 0,95 (3H, t) .

Intermediário 19: 2-(Tetra-hidrofuran-2-il)etanol

Uma solução, sob agitação, de tetra-hidrofuran-2-ilacetato de etilo (2,5 g) em THF seco (25 mL) foi arrefecida (banho de 111 gelo) e adicionado, gota a gota, hidreto de alumínio e lítio 1 M em tetra-hidrofurano sob azoto abaixo de 15 °C. A reacção foi deixada aquecer até à temperatura ambiente e após 3 h arrefecida novamente (banho de gelo) e cuidadosamente adicionado hidróxido de sódio 5 N (5,5 mL) abaixo de 10 °C. Foi então adicionado éter dietílico (50 mL) e após 10 min o sólido resultante filtrado e bem lavado com éter. O filtrado combinado foi evaporado para dar o composto em epígrafe como um óleo transparente, rendimento 1,9 g. RMN de XH (CDC13) : δ 4,03 (1H, m) , 3,91 (1H, m), 3,79 (2H, m), 3,74 (1H, m), 2,82 (1H, s), 2,03 (1H, m), 1,98-1, 84 (2H, m), 1, 84-1, 70 (2H, m), 1, 63-1, 50 (1H, m) .

Intermediário 20: Metanossulfonato de 2-(tetra-hidrofuran-2-il)etilo

A uma solução gelada, mantida sob agitação, de 2-(tetra-hidrofuran-2-il)etanol (1,9 g) e trietilamina (4,4 mL) em diclorometano seco (30 mL) foi adicionado,, gota a gota, ao longo de 5 min, cloreto de metanossulfonilo (1,59 mL). A mistura foi deixada aquecer lentamente até à temperatura ambiente ao longo de 16 h, em seguida lavada com hidrogenocarbonato de sódio saturado. A camada aquosa foi ainda extraída com diclorometano e os extractos combinados lavados com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secos passando através de um cartucho de 112 separação de fases e removidos para dar o composto em epígrafe como um óleo castanho claro, rendimento 3,1 g. RMN de (CDC13) : δ 4,36 (2H, t), 3, 96 (1H, m), 3,86 (1H, m), 3,74 (1H, m), 3,02 (3H, s), 2,01- 1,84 (4H, m), 1,58-1,40 (2H, m).

Intermediário 21: 2-(2-Bromoetil)tetra-hidrofurano Ç^-^Br

Metanossulfonato de 2-(tetra-hidrofuran-2-il)etilo (3,1 g) e brometo de lítio anidro (6,57 g) em acetona (50 mL) foram aquecidos a refluxo sob agitação durante 3 h. Depois de deixar arrefecer, o solvente foi removido e o resíduo tratado com água e extraído três vezes com diclorometano. Os extractos combinados foram lavados com hidrogenocarbonato de sódio saturado, secos passando através de um cartucho de separação de fases e removidos para dar o composto em epígrafe como um óleo laranja, rendimento 1,99 g. RMN de 'ή (CDCI3) : δ 3,98 (1H, m) , 3,85 (1H, m), 3, 74 (1H m), 3, 50 (2H, m), 2,12-1,96 (3H, m), 1,96-1,85 (2 H, m), 1,54 1, 43 (1H, m) . 113

Intermediário 22 : 2-Butoxi-8-metoxi-9-[2-(tetra-hidrofuran 2-il) etil] -9ff-purin-6-amina

Uma mistura, mantida sob agitação, de sal de trifluoroacetato de 2-butoxi-8-metoxi-lH-purin-6-amina (200 mg) e carbonato de potássio (236 mg) em Ν,Ν-dimetilformamida seca (2 mL) foi aquecida sob agitação a 60 °C durante 1 h. Foi adicionado 2-(2-bromoetil)tetra-hidrofurano (122 mg) e a mistura, mantida sob agitação, aquecida a 50 °C durante 4 h. Depois de deixar arrefecer, foi adicionada água e a mistura extraída três vezes com acetato de etilo. Os extractos combinados foram lavados com água, em seguida com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secos passando através de um cartucho de separação de fases e removidos para dar um óleo castanho. Este foi purificado por cromatografia de fase inversa em C18 utilizando água (contendo 0,1% de ácido fórmico)-acetonitrilo (contendo 0,05% de ácido fórmico) como eluente (20-60%) e as fracções apropriadas combinadas e evaporadas para remover o acetonitrilo. A mistura aquosa remanescente foi basificada com hidrogenocarbonato de sódio saturado, extraída três vezes com diclorometano e os extractos combinados secos passando através de um cartucho de separação de fases, em seguida evaporados para proporcionar o composto em epígrafe como um óleo transparente, rendimento 122 mg). MS calculado para (C16H25N5O3)+ = 335 114 336 MS encontrado (electrospray): (M+H) RMN de (CDC13) : δ 5,10 (2H, S), 4,28 (2H, m) , 4,12 (3H, s), 4,04 (2H, m), 3,85 (2H, m), 3,71 (1H, m), 1,98 (3H, m), 1,88 (2H, m), 1,77 (2H, m), 1,51 (3H, m), 0,97 (3H, t) .

Intermediário 23: i72-Butil-8-metoxi-9-[2-(tetra-hidrofuran-2-il)etil]-9H-purina-2,6-diamina

Uma mistura, mantida sob agitação, de sal de ácido trif luoroacético de N2-butil-8-metoxi-9fí-purina-2,6-diamina (200 mg) e carbonato de potássio (236 mg) em N,N-dimetilformamida seca (2 mL) foi aquecida sob agitação a 60 °C durante 1 h. Foi adicionado 2-(2-bromoetil)tetra-hidrofurano (122 mg) e a mistura, mantida sob agitação, aquecida a 50 °C durante 4 h. Depois de deixar arrefecer, foi adicionada água e a mistura extraída três vezes com acetato de etilo. Os extractos combinados foram lavados com água, em seguida com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secos passando através de um cartucho de separação de fases e removidos para dar um óleo castanho. Este foi purificado por cromatografia de fase inversa em Ci8 utilizando água (contendo 0,1% de ácido fórmico)-acetonitrilo (contendo 0,05% de ácido fórmico) como eluente (20-60%) e as fracções apropriadas combinadas e 115 evaporadas para remover o acetonitrilo. A mistura aquosa remanescente foi basificada com hidrogenocarbonato de sódio saturado, extraída três vezes com diclorometano e os extractos combinados secos passando através de um cartucho de separação de fases, em seguida evaporados para proporcionar o composto em epígrafe, rendimento 107 mg. MS calculado para (Ci6H26N602) + = 334 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 335 RMN de (CDC13) : δ 4,90 (2H, s), 4,58 (1H, t 1.), 4,09 (3H, s), 3,98 (2h, m), 3,86 (2H, m), 3,72 (1H, m), 3,38 (2H, m), 1,99 (3H, m), 1,88 (2H, m), 1,57 (2H, m), 1,52-1,36 (3H, m), 0,95 (3H, t) .

Intermediário 24: 5, 6-Di-hidro-2lf-pirano-3-carbaldeído

CHO

Foi adicionado ácido clorídrico conc. (5,5 mL) a água (28 mL) seguida de acroleína (33,8 mL) e tolueno (15 mL) . A mistura, mantida sob agitação, foi aquecida sob refluxo a 75 °C durante 1 h, altura em que o refluxo diminuiu gradualmente. Depois de deixar arrefecer, foi adicionado carbonato de potássio até ficar básico e a mistura extraída duas vezes com éter. Os extractos combinados foram lavados com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secos (Na2S04) e evaporados até um óleo castanho. A destilação a 6 mbar de pressão deu o produto como um 116 líquido amarelo pálido móvel, p.e. 76-9 °C, rendimento 4 g (14%). RMN de XH (CDC13) : δ 9,42 (1H, s), 6,94 (1H, m) , 4,35 (2H m), 3,82 (2H, m), 2,46 (2H, m).

Intermediário 25: Tetra-hidro-2H-pirano-3-carbaldeído

5, 6-Di-hidro-2H-pirano-3-carbaldeído (2,98 g) em etanol (70 mL) foi tratado com catalisador de paládio a 10% sobre carvão húmido sob azoto, em seguida hidrogenado à temperatura e pressão ambiente durante 30 min. O catalisador foi filtrado através de Celite e o filtrado evaporado, em seguida evaporado novamente de tolueno para dar o produto como um óleo, rendimento 2,58 g. RMN de H (CDCI3) : δ 9,72 (1H, s), 3,98 (1H, m), 3,82 (1H, m), 3,73 (1H, m), 3,58 (1H, m), 2,49 (1H, m), 1,95 (1H, m), 1,87 (1H, m), 1,70 (1H, m), 1,61 (1H, m). 117

Intermediário 26: 3-[(E, Z)-2-(Metoxi)etenil]tetra-hidro-2fl- pirano

Intermediário 26: 3-[(E, Z)-2-(Metoxi)etenil]tetra-hidro-2fl-

I o

Uma suspensão de cloreto de metoximetiltrifenilfosfónio (15,5 g) em THF seco (40 mL) foi arrefecida até -40 °C e adicionada, gota a gota, uma solução de terc-butóxido de potássio (5,08 g) em THF seco (40 mL) sob agitação, sob azoto. Após 45 min a mistura foi ainda arrefecida até -65 °C e adicionada, gota a gota, uma solução de tetra-hidro-2H-pirano-3- carbaldeído (2,58 g) em THF seco (15 mL). 0 banho de arrefecimento foi removido e depois de deixar aquecer até à temperatura ambiente a reacção foi agitada durante mais 30 min. A mistura foi então desactivada sobre gelo, extraída três vezes com éter e os extractos combinados lavados com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secos (Na2S04) e evaporados, em seguida evaporado novamente com tolueno. O produto em bruto foi purificado por cromatografia flash (sílica, 0-20% de acetato de etilo-ciclo-hexano) para dar o composto em epígrafe como um óleo incolor, rendimento 2,22 g (69%). RMN de XH (CDC13) : δ 6,36 + 5,89 (1H, m), 4, 53 + 4,12 (1H, m), 3,88 (1H, m), 3,78 (1H, m) , 3,58 + 3,51 ( 3H, s), 3, 34 (1H, m), 3,10 (1H, m), 2,73 + 2,20 (1H, m) , 1,84 ( 1H, m), 1, 63 (2 H, m), 1,30 (1H, m). 118

Intermediário 27: Tetra-hidro-2fl-piran-3-ilacetaldeído çrr A uma solução, mantida sob agitação, de 3-[2-(metoxi) etenil] tetra-hidro-2íí-pirano (2,22 g) em THF (15 mL) foi adicionado ácido clorídrico 2 N (15 mL) . Após lha mistura foi diluída com água e extraída três vezes com éter. Os extractos combinados foram lavados com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secos (Na2S04) e evaporados para dar o produto em epígrafe como um óleo amarelo pálido, rendimento 1,79 g. RMN de XH (CDC13) : δ 9,77 (1H, s), 3,85 (2H, m), 3,43 (1H, m), 3,17 (1H, m), 2,34 (2H, m), 2,23 (1H, m), 1,90 (1H, m), 1,64 (2H, m), 1,27 (1H, m).

Intermediário 28: 2-(Tetra-hidro-2fí-piran-3-il) etanol

Uma suspensão de boro-hidreto de sódio (554 mg) em etanol (20 mL) foi arrefecida (banho de gelo) e adicionada, gota a gota, uma solução de tetra-hidro-2i7-piran-3-ilacetaldeído (1,88 g) em etanol (8 mL) sob agitação ao longo de 10 min. Após 15 min, o banho de gelo foi removido e após mais 3 h a mistura foi aquecida a 50 °C durante 1 h. Depois de arrefecer, o solvente foi evaporado e o resíduo tratado com água e extraído três vezes com diclorometano. Os extractos combinados foram 119 lavados com solução aquosa diluída de cloreto de sódio, secos passando através de um filtro poroso hidrófobo e evaporados para dar o produto em epígrafe como um óleo. Foi obtido um outro lote de produto acidificando a solução aquosa com ácido clorídrico 2 N, saturando com cloreto de sódio e extraindo três vezes com diclorometano. Estes extractos foram tratados como acima e os lotes combinados para dar um rendimento total de 1,54 g (81%). RMN de ΧΗ (CDC13) : δ 3,88 (2H, m), 3,70 (2H, m), 3,38 (1H, m), 3,11 (1H, t), 1,89 (1H, m), 1,76 (1H, m), 1,61 (1H, m), 1,45 (2H, m), 1,22 (2H, m). OH não visível. intermediário 29: Metanossulfonato de 2-(tetra-hidro-2fl- piran-3-il)etilo

o o

Uma solução de 2-(tetra-hidro-2H-piran-3-il)etanol (1,54 g) e trietilamina (3,3 mL) em diclorometano (25 mL) foi arrefecida (banho de gelo) e adicionado, gota a gota, cloreto de

metanossulfonilo (1,19 mL) sob agitação ao longo de 5 min. A reacção foi lentamente aquecida até à temperatura ambiente à medida que o banho de gelo fundia. Após 16 h, a mistura foi lavada com hidrogenocarbonato de sódio aq. saturado, a camada aquosa extraída duas vezes com diclorometano e os extractos combinados lavados com solução aquosa diluída de cloreto de sódio, secos passando através de um filtro poroso hidrófobo e evaporados para dar o composto em epígrafe como um óleo castanho, rendimento 2,38 g. 120 RMN de XH (CDC13) : δ 4,27 (2H, t), 3,86 (2H, m), 3,41 (1H, m), 3,14 (1H, m), 3,02 (3H, s), 1,91 (1H, m) , 1,8 (1H, m), 1,71 (1H, m), 1,63 (3H, m), 1,23 (1H, m).

Intermediário 30: 2-Butoxi-8-metoxi-9-[2-(tetra-hidro-2ff-piran-3-il) etil] -9i7-purin-6-amina

Uma mistura, mantida sob agitação, de sal de trifluoroacetato de 2-butoxi-8-metoxi-9fí-purin-6-amina (200 mg) e carbonato de potássio (236 mg) em N,N-dimetilformamida seca (2 mL) foi aquecida sob agitação a 60 °C durante 1 h. Foi adicionado metanossulfonato de 2-(tetra-hidro-2ií-piran-3-il)etilo (142 mg) e a mistura, mantida sob agitação, aquecida a 60 °C durante 3 h. Foi adicionada água e a mistura extraída três vezes com acetato de etilo. Os extractos combinados foram lavados com água, em seguida com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secos passando através de um cartucho de separação de fases e removidos para dar um óleo castanho. Este foi purificado por cromatograf ia de fase inversa em Ci8 utilizando água (0,1% de ácido fórmico)-acetonitrilo (0,05% de ácido fórmico) como eluente (20-70%) e as fracções apropriadas combinadas e evaporadas para remover o acetonitrilo. A mistura aquosa remanescente foi basificada com hidrogenocarbonato de sódio saturado, extraída três vezes com diclorometano e os extractos combinados secos passando através de um cartucho de 121 separação de fases, em seguida evaporados para proporcionar o composto em epígrafe como um óleo castanho, rendimento 108 mg. MS calculado para (C17H27N5O3)+ = 349 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 350 RMN de (CDC1 3) : δ 5,10 (2 H, S), 4,28 (2H, t), 4, 12 (3 H, s), 3,96 (2h, t; 1 , 3, 87 (2 H, m), 3,38 (1H , m), 3,12 (1H, m) , 1,96 (1H, m), 1,77 (2 H, m), 1,71-1, . 44 ( 6H, m), 1,21 (2H, m) , 0,97 (3H, t) .

Intermediário 31: Aí2-Butil-8-metoxi-9-[2-(tetra-hidro-2fl-piran-3-il) etil] -9fí-purina-2, 6-diamina NH,

nV

H

Uma mistura, mantida sob agitação, de sal de ácido trif luoroacético de W2-butil-8-metoxi-9íí-purina-2,6-diamina (200 mg) e carbonato de potássio (236 mg) em N,N-dimetilformamida seca (2 mL) foi aquecida sob agitação a 60 °C durante 1 h. Foi adicionado metanossulfonato de 2-(tetra-hidro-2íí-piran-3-il) etilo (142 mg) e a mistura, mantida sob agitação, aquecida a 60 °C durante 3 h. Foi adicionada água e a mistura extraída três vezes com acetato de etilo. Os extractos combinados foram lavados com água, em seguida com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secos passando através de um cartucho de separação de fases e removidos para dar um óleo 122 castanho. Este foi purificado por cromatografia de fase inversa em Cie utilizando água (0,1% de ácido fórmico)-acetonitrilo (0,05% de ácido fórmico) como eluente (20-60%) e as fracções apropriadas combinadas e evaporadas para remover o acetonitrilo. A mistura aquosa remanescente foi basificada com hidrogenocarbonato de sódio saturado, extraída três vezes com diclorometano e os extractos combinados secos passando através de um cartucho de separação de fases, em seguida evaporados para proporcionar o composto em epígrafe como um sólido castanho, rendimento 138 mg. MS calculado para (0ι7Η28Ν602)+ = 348 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 349 RMN de (CDC13) : δ 4,89 (2H, s 1.), 4,57 (1H, t 1.), 4,08 (3 H, s), 3,88 (4H, m), 3,36 (3H, m), 3,12 (1H, m), 1,97 (1H, m), 1, 68-1,52 (7H, m), 1,40 (2H, m), 1,20 (1H, m), 0,94 (3H, t).

Intermediário 32: 2-(Tetra-hidro-2ff-piran-4-il) etanol

IH 0' A uma solução gelada de hidreto de alumínio e lítio (12,6 mL, solução 2,3 M em tetra-hidrofurano) em tetra-hidrofurano seco (20 mL) e sob azoto, foi adicionada, gota a gota, ao longo de 10 minutos uma solução de tetra-hidro-2 H- 123

piran-4-ilacetato de etilo (5 g) em tetra-hidrofurano seco. Após a adição, a reacção foi aquecida a refluxo, de um dia para o outro. A reacção foi arrefecida e diluida com éter dietílico (100 mL) . Foi adicionada cuidadosamente uma solução aquosa 5 M de hidróxido de sódio (~10 mL) à mistura reaccional até a efervescência parar. O precipitado branco que se formou foi filtrado. O filtrado resultante foi seco sobre carbonato de potássio, filtrado e concentrado in vacuo. Isto produziu o composto em epígrafe como um óleo incolor (3,3 g). MS calculado para (07Ηι402)+ = 130 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 131 3,80 (2H, m), 3,43 (2H, m), (2H, m), 1,35 (2 H, m) , 1,13 RMN de XH (DMSO): 4,35 (1H, t) 3,25 (2 H, m), 1,60 (1H, m) , 1,54 (2H, m) .

Intermediário 33: Metanossulfonato de 2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)etilo

124 A 2-(tetra-hidro-2fí-piran-4-il) etanol (3,3 g) em diclorometano seco (100 mL) a 0 °C e sob azoto foi adicionada trietilamina (4,6 mL), seguida de cloreto de metanossulfonilo (2,6 mL), gota a gota, ao longo de 5 minutos. A reacção foi agitada até o gelo do banho ter fundido e deixada, de um dia para o outro, à temperatura ambiente. A reacção foi lavada com bicarbonato de sódio aquoso saturado (40 mL) . A camada orgânica foi seca passando através de um filtro poroso hidrófobo e concentrada in vacuo para produzir o composto em epígrafe como um óleo amarelo (5,4 g). RMN de ΧΗ (DMSO): 4,24 (2H, t), 3,82 (2H, m), 3,80 (3H, s), 3,27 (2H, m), 2,50 (5H, m), 1,60 (2H, m).

Intermediário 34: 4-(2-Bromoetil) tetra-hidro-2ff-pirano

O A metanossulfonato de 2-(tetra-hidro-2i7-piran-4-il) etilo (5,4 g) em acetona seca à temperatura ambiente foi adicionado brometo de lítio (9 g) de uma única vez. A reacção foi aquecida a refluxo durante 4 horas, sob azoto. A reacção foi arrefecida até à temperatura ambiente e concentrada in vacuo. O resíduo foi tomado em diclorometano (100 mL) e lavado com água (50 mL) . A camada orgânica foi seca passando através de um filtro poroso 125 hidrófobo, e concentrada in vacuo. 0 produto foi purificado por cromatografia sobre sílica (40 g) (ISCO) utilizando uma eluição por gradiente de 0-50% de ciclo-hexano:acetato de etilo para proporcionar o composto em epígrafe como um óleo incolor (3,5 g) . RMN de XH (DMSO): 3,82 (2H, m), 3,56 (2H, t), 3,26 (2H, m), 1,75 (2H, m), 1,65 (1H, m), 1,57 (2H, m) , 1,16 (2H, m) .

Intermediário 35:_2-[(2, 2-Dimetilpentil)oxi]-9-(tetra- hidro-2fí-piran-2-il) -9H-purin-6-amina

A uma suspensão de 2-cloro-9-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-amina (500 mg) e 2,2-dimetilpentanol (3,8 mL) a 50 °C foi adicionado hidreto de sódio (396 mg, dispersão a 60%) em porções. À espuma viscosa resultante foi adicionada mais uma porção de 2,2-dimetilpentanol (1,5 mL). A reacção foi agitada a 50 °C durante 72 h. A mistura reaccional foi arrefecida, em seguida cuidadosamente desactivada com água (10 mL) e extraída com AcOEt (3 x 25 mL). Os orgânicos foram combinados, lavados com solução aquosa saturada de cloreto de sódio (30 mL), secos sobre MgS04, filtrados e concentrados in vacuo para dar um óleo amarelo. Este foi submetido a evaporação azeotrópica com tolueno (x 3) e óleo amarelo viscoso resultante foi purificado por cromatografia de fase inversa em Ci8 (ISCO) utilizando água (0,1% 126 de ácido fórmico)-acetonitrilo (0,05% de ácido fórmico) como eluente (30-80%) para proporcionar o composto em epígrafe como um sólido castanho (372 mg). MS calculado para (C17H27N5O2)+ = 333 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 334

Intermediário 36: 8-Bromo-2-[(2,2-dimetilpentil)oxi]-9- (tetra-hidro-2fl-piran-2-il)-9fl-purin-6-amina

A 2-[(2,2-dimetilpentil)oxi]-9-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-9A-purin-6-amina (372 mg) em clorofórmio seco (4,05 mL) a 0 °C foi adicionada nbs (209 mg) numa única porção. A reacção foi aquecida até à temperatura ambiente e foi agitada durante 5 h. A mistura foi tomada em DCM (20 mL) e lavada com água (30 mL) . Os orgânicos foram separados e secos utilizando um filtro poroso hidrófobo, em seguida concentrados in vacuo para proporcionar o composto em epigrafe como uma espuma viscosa verde/castanha (475 mg). MS calculado para (Ci7H26BrN502)+ = 411/413 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 412/414 127 RMN de XH ( (CD3) 2S0) : δ 7,48 (2H, 1, s), 5,52 (1H, dd), 4, 08-3, 89 (3H, m) , 3,70 (1H, m), 2,97-2,83 (1H, m), 2,04-1,94 (1H, m), 1,89-1,51 (4H, m), 1,35-1,21 (4H, m), 0,99-0,91 (6H, s), 0, 90-0, 84 (3H, m).

Intermediário 37: 2-[(2,2-Dimetilpentil)oxi]-8-metoxi-9- (tetra-hidro-2fí-piran-2-il) -9fí-purin-6-amina

A uma solução de 8-bromo-2-[(2,2-dimetilpentil)oxi]-9- (tetra-hidro-2fí-piran-2-il)-9fí-purin-6-amina (475 mg) em MeOH seco (3,92 mL) foi adicionada solução de metóxido de sódio

(0,649 mL, 30% em peso em MeOH). A mistura reaccional foi agitada a refluxo durante 5 h. A reacção foi arrefecida e concentrada in vacuo para dar um residuo cor de laranja. O resíduo foi tomado em solução saturada de cloreto de amónio (25 mL) e foi extraido com AcOEt (25 mL) . A camada orgânica foi separada e lavada com água (15 mL) . Os orgânicos foram separados, secos sobre MgS04, filtrados e concentrados in vacuo para dar o composto em epígrafe como um sólido cor de laranja (323 mg). MS calculado para (C18H29N5O3)+ = 363 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 364 128 RMN de XH ( (CD3) 2S0) : δ 6,85 (2H, s), 5,37 (1H, dd) , 4,05 (3H, s), 4,02-3,83 (3H, m) , 3, 63-3, 54 (1H, m), 2, 72-2,58 (1H, m), 1,97-1,91 (1H, m), 1, 77-1, 46 (4H, m) , 1,31-1,23 (4H, m), 0,93 (6H, s), 0,89-0,83 (3H, m).

Intermediário 38: Sal de ácido trifluoroacético de 2—[(2,2— dimetilpentil)oxi]-8-metoxi-9#-purin-6-amina

A uma solução de 2-[(2,2-dimetilpentil)oxi]-8-metoxi-9-(tetra-hidro-2#-piran-2-il)-9H-purin-6-amina (323 mg) em MeOH seco (3,23 mL) foi adicionado TFA (0,323 mL) e a reacção foi agitada à temperatura ambiente durante 48 h. A reacção foi concentrada in vacuo para dar um resíduo amarelo. O resíduo foi triturado com Et20 e foi filtrado para dar o composto em epígrafe como um sólido esbranquiçado (252 mg). MS calculado para (C13H21N5O2)+ = 279 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 280 129

Intermediário 39: 2-[(2, 2-Dimetilpentil)oxi]-8-metoxi-9- (tetra-hidro-2ff-piran-4-ilmetil) -9ff-purin-6-amina

A uma solução de sal de ácido trifluoroacético de 2—[ (2,2 — dimetilpentil) oxi]-8-metoxi-9fí-purin-6-amina (252 mg) em DMF seca (3,97 mL) foi adicionado carbonato de potássio (356 mg). A mistura foi agitada a 60 °C durante 90 min. A reacção foi arrefecida e foi adicionado 4-(bromometil) tetra-hidro-2ií-pirano (127 mg). A mistura foi agitada a 50 °C durante 6 h. A reacção foi arrefecida e tomada em AcOEt (40 mL) . A mistura foi lavada com água (2 x 20 mL) e os orgânicos foram separados, secos sobre MgS04 e concentrados in vacuo para dar um óleo viscoso. O material em bruto foi purificado por cromatografia de fase inversa em Ci8 (ISCO) utilizando água (0,1% de ácido fórmico)-acetonitrilo (0,05% de ácido fórmico) como eluente (30-80%) para proporcionar o composto em epígrafe como um sólido esbranquiçado (116 mg). MS calculado para (C19H31N5O3)+ = 377 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 378 130

Intermediário 40: N2-Pentil-9-(tetra-hidro-2fl-piran-2-il) 9ff-purina-2, 6-diamina

A uma solução de 2-cloro-9-(tetra-hidro-2fí-piran-2-il) -9H-purin-6-amina (500 mg) em etilenoglicol seco (2,3 mL) foi adicionada 1-pentilamina (689 mg). A solução foi agitada a refluxo (120 °C), de um dia para o outro. A reacção foi arrefecida, tomada em AcOEt (30 mL) e lavada com água (2 x 20 mL). Os orgânicos foram separados, secos sobre MgS04, filtrados e concentrados in vacuo para dar o composto em epígrafe como um óleo castanho viscoso (561 mg). MS calculado para (Ci5H24N60) + = 304 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 305 RMN de XH ((CD3)2SO) : δ 7,85 (1H, s), 6,62 (2H, s), 6 ,22 (1H, t) , 5,40 (1H, dd), 4,01 -3, 95 (1H, m), 3,63- -3,55 (1H, m), 3,26 -3,19 (2H, m), 2,25-2,13 (1H, m), 1,95 (1H, m) , 1,85 ( 1H, m), 1,66 (1H, m), 1,60-1,15 ( 8H, m) , o, 87 (3H, m) . Evidência de protões adicionais entre 0,8-1,6 - gordura ou fragmentos de hidrocarboneto. 131

Intermediário 41: 8-Bromo-i\72-pentil-9-(tetra-hidro-2ff-piran-2-il) -9ff-purina-2,6-diamina

Uma solução de N2-pentil-9-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-9H-purina-2,6-diamina (543 mg) em clorofórmio seco (4,6 mL) foi arrefecida até 0 °C e foi adicionada NBS (334 mg). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 10 min. A reacção foi tomada em DCM (30 mL) e foi lavada com água (30 mL). Os orgânicos foram separados, secos utilizando um filtro poroso hidrófobo e concentrados in vacuo para dar o composto em epígrafe como um residuo castanho viscoso (627 mg) que foi utilizado em bruto no passo seguinte. MS calculado para (Ci5H23BrN60)+ = 382/384 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 383/385

Intermediário 42: S-Metoxi-fl^-pentil-g-(tetra-hidro-2#- piran-2-il)-9fl-purina-2,6-diamina

132 A uma solução de 8-bromo-W2-pentil-9-(tetra-hidro-2fí-piran-2-il)-9f7-purina-2,6-diamina (607 mg) em MeOH seco (4,75 mL) foi adicionada solução de metóxido de sódio (0, 906 mL, 30% em peso em MeOH) e a mistura foi agitada a 60 °C durante 48 h. A reacção foi concentrada in vacuo. O resíduo foi tomado em AcOEt (25 mL) e lavado com cloreto de amónio saturado (25 mL) . Os orgânicos foram separados, secos sobre MgS04, filtrados e concentrados in vacuo para dar o composto em epígrafe como um óleo viscoso vermelho/castanho (520 mg) que foi utilizado em bruto no passo seguinte. MS calculado para (0ΐ6Η26Ν602)+ = 334 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 335

Intermediário 43: Sal de ácido trifluoroacético de 8-metoxi-N2-pentil-9fí-purina-2, 6-diamina NH.

F A uma solução de 8-metoxi-l72-pentil-9-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-9fí-purina-2,6-diamina (520 mg) em MeOH seco (5,2 mL) foi adicionado TFA (0,52 mL) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 48 h. A reacção foi concentrada in vacuo para dar um resíduo cor de laranja que foi triturado com Et20 e 133 filtrado para dar o composto em epígrafe como um sólido esbranquiçado (223 mg). MS calculado para (CnHi8N60)+ = 250 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 251 RMN de XH ( (CD3) 2SO) : δ 13,02-12,15 (1H, d.l), 8,33-7,18 (2H, m.l), 4,04 (3H, s), 3,32-3,17 (2H, m), 1,59-1,47 (2H, m), 1,38-1,20 (4H, m), 0,88 (3H, t), não foi observado um protão permutável.

Intermediário 44: S-Metoxi-J^-pentil-O-(tetra-hidro-2fl- piran-4-ilmetil)-9fl-purina-2,6-diamina

A uma solução de sal de ácido trifluoroacético de 8-metoxi-N2-pentil-9H-purina-2,6-diamina (223 mg) em DMF seca (3,85 mL) foi adicionado carbonato de potássio (339 mg) a 60 °C e a mistura foi agitada durante 90 min. A mistura foi arrefecida até à temperatura ambiente e foi adicionado 4-(bromometil)tetra-hidro-2il-pirano (121 mg) numa porção. A reacção foi agitada a 50 °C, de um dia para o outro, e foi então arrefecida e tomada em AcOEt (20 mL). Os orgânicos foram lavados com água (2 x 10 mL), separados, secos sobre MgS04, filtrados e concentrados in vacuo para dar um sólido esbranquiçado. O material em bruto foi 134 purificado por cromatografia de fase inversa em Ci8 (ISCO) utilizando água (0,1% de ácido fórmico)-acetonitrilo (0,05% de ácido fórmico) como eluente (20-60%) para proporcionar o composto em epígrafe como um sólido esbranquiçado (140 mg). MS calculado para (Ci7H28N602)+ = 348 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 349

Intermediário 45: 2-[(3-Metilbutil)oxi]-9-(tetra-hidro-2fl- piran-2-il)-9#-purin-6-amina

A 3-metil-l-butanol (1,03 mL) em DME (5 mL) foi adicionado terc-butóxido de sódio (912 mg) em porções ao longo de 5 min sob agitação. A mistura foi agitada à temperatura ambiente até ficar homogénea. Foi adicionada 2-cloro-9-(tetra-hidro-2ff-piran-2-il) -9H-purin-6-amina (600 mg) seguida de DME (4,6 mL). A reacção foi aquecida a 110 °C, de um dia para o outro. A reacção foi deixada arrefecer, foi tomada em água (20 mL) e lavada com AcOEt (2 x 20 mL). Os orgânicos foram extraídos com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, separados, secos sobre MgS04, filtrados e concentrados in vacuo para dar um óleo amarelo viscoso. O material em bruto foi purificado por cromatografia de fase inversa em Ci8 (ISCO) utilizando água (0,1% de ácido fórmico)-acetonitrilo (0,05% de ácido fórmico) como eluente (30-80%) para 135 proporcionar o composto em epígrafe como um resíduo amarelo (266 mg). MS calculado para (C15H23N5O2)+ = 305 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 306

Intermediário 46: 8-Bromo-2-[(3-metilbutil)oxi]-9-(tetra-hidro-2fí-piran-2-il) -9ff-purin-6-amina

A uma solução de 2-[ (3-metilbutil) oxi]-9-(tetra-hidro-2ií-piran-2-il)-9fí-purin-6-amina (266 mg) em clorofórmio seco (3,15 mL) a 0 °C foi adicionada NBS (163 mg). A reacção foi aquecida até à temperatura ambiente e foi agitada durante 5 h. A reacção foi tomada em DCM (20 mL) e extraída com água (20 mL) . Os orgânicos foram separados, secos utilizando um filtro poroso hidrófobo e concentrados in vacuo para dar o composto em epígrafe como um sólido verde/castanho (314 mg). MS calculado para (Cisí^BrNsC^) + = 383/385 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 384/386 RMN de XH ( (CD3) 2SO) : δ 7,38 (2H, s.l), 5,49 (1H, dd) , 4,24 (2 H, t), 4,03 (1H, d), 3, 68-3, 57 (1H, m), 3,03-2, 90 (1H, m), 2,03-1,50 (8H, m), 0,92 (6H, d). 136

Intermediário 47: 2-[(3-Metilbutil)oxi]-8-metoxi-9-(tetra-hidro-2fí-piran-2-il) -9fí-purin-6-amina

A uma solução de 8-bromo-2-[(3-metilbutil)oxi]-9-(tetra-hidro-2i7-piran-2-il)-9i7-purin-6-amina (314 mg) foi adicionada solução de metóxido de sódio (0,460 mL, 30% em peso em MeOH) e a mistura foi agitada a refluxo durante 4 h. A reacção foi deixada arrefecer e foi concentrada in vacuo para dar um resíduo cor de laranja. O resíduo foi tomado em AcOEt (20 mL) e foi extraído com solução saturada de cloreto de amónio (20 mL), seguida de água (20 mL) . Os orgânicos foram separados, secos sobre MgS04, filtrados e concentrados in vacuo para dar o composto em epígrafe como um sólido cor de laranja claro (210 mg). MS calculado para (C16H25N5O3)+ = 335 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 336 RMN de :Η ((CD3) 2SO) : δ 6,81 (2H, s.l), 5,34 (1H, dd), 4,26- 4, 15 (2 H, m), 4,05 (3 H, s), 3,96 \—1 d), 3,61-3,52 (1H, m) , 2, 77- -2,66 (1H, m) , 1, 98-1,90 (1H, m), 1, 79-1, 46 (7H, m), 0,92 (6H, d). 137

Intermediário 48: Sal de ácido trifluoroacético de 2—[(3— metilbutil) oxi] -8-metoxi-9ff-purin-6-amina

uma solução de 2-[(3-metilbutil)oxi]-8-metoxi-9-(tetra-hidro-2/í-piran-2-il)-9/í-purin-6-amina (210 mg) em MeOH seco (2,1 mL) foi adicionado TFA (0,21 mL) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 24 h. A reacção foi concentrada in vacuo para dar um residuo amarelo que foi triturado com Et20 (15 mL) e filtrado sob pressão reduzida para dar o composto em epigrafe como um sólido esbranquiçado (143 mg). MS calculado para (C11H17N5O2)+ = 251 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 252 RMN de ( (CD3) 2SO) : δ 7,90 (1H, br), 4,38-4,30 (2H, m), 4,05 (3H, s), 1, 79-1, 68 (1H, m), 1, 65-1, 56 (2H, m), 0,93 (6H, d) não foram observados dois protões permutáveis. 138

Intermediário 49: 2-[(3-Metilbutil)oxi]-8-(metoxi)-9- (tetra-hidro-2ff-piran-4-ilmetil) -9ff-purin-6-amina

A uma solução de sal de ácido trifluoroacético de 2 —[(3 — metilbutil) oxi] -8-metoxi-9H-purin-6-amina (143 mg) em DMF seca (2,42 mL) foi adicionado carbonato de potássio (217 mg) e a mistura foi agitada a 60 °C durante 90 min. A reacção foi arrefecida e foi adicionado 4-(bromometil)tetra-hidro-2H-pirano (77 mg). A reacção foi agitada a 50 °C, de um dia para o outro, e foi arrefecida até à temperatura ambiente. A mistura foi tomada em AcOEt (30 mL) e extraida com água (2 x 15 mL) . Os orgânicos foram separados, secos sobre MgS04 e concentrados in vácuo para dar um óleo amarelo viscoso. O material em bruto foi purificado por cromatografia de fase inversa em Ci8 (ISCO) utilizando água (0,1% de ácido fórmico)-acetonitrilo (0,05% de ácido fórmico) como eluente (20-60%) para proporcionar o composto em epígrafe como um óleo viscoso transparente (52 mg). MS calculado para (Ci7H27N503)+ = 349 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 350 139

Intermediário 50: 2-[(2-Metilbutil)oxi]-9-(tetra-hidro-2fl- piran-2-il) -9fí-purin-6-amina

A 2-metil-l-butanol (0,855 mL) em DME (4 mL) foi adicionado terc-butóxido de sódio (760 mg). A mistura foi agitada à temperatura ambiente até ficar homogénea. Foi adicionada 2-cloro-9-(tetra-hidro-2/í-piran-2-il)-9H-purin-6-amina (500 mg) seguida de DME (4 mL) . A reacção foi aquecida a 110 °C, de um dia para o outro. A mistura foi arrefecida e concentrada in vacuo para dar um residuo amarelo. 0 resíduo foi tomado em água (30 mL) e extraído com AcOEt (2 X 30 mL). Os orgânicos foram separados e lavados com solução aquosa saturada de cloreto de sódio (30 mL) . Os orgânicos foram separados, secos sobre MgS04, filtrados e concentrados in vacuo para dar o composto em epígrafe como um resíduo amarelo/castanho. Este material foi utilizado no passo seguinte sem mais purificação. MS calculado para (C15H23N5O2)+ = 305 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 306 140

Intermediário 51: 8-Bromo-2-[(2-metilbutil)oxi]-9-(tetra hidro-2ff-piran-2-il) -9ff-purin-6-amina

Uma solução de 2-[ (2-metilbutil) oxi] -9-(tetra-hidro-2íf-piran-2-il)-9H-purin-6-amina (245 mg) em clorofórmio seco (2,9 mL) foi arrefecida até 0 °C e foi adicionada NBS (150 mg) para dar uma solução verde/castanha. A mistura reaccional foi agitada à temperatura ambiente durante 6 h. A mistura foi tomada em DCM (20 mL) e foi lavada com água (20 mL). Os orgânicos foram separados, secos passando através de um filtro poroso hidrófobo e concentrados in vácuo para dar o composto em epígrafe como um sólido verde (292 mg). MS calculado para (Ci5H22BrN502)+ = 383/385 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 384/386 RMN de XH ( (CD3) 2SO) : δ 7,39 (2H, br), 5,50 (1H, dd), 4,15-4,07 (1H, m), 4, 06-3, 95 (2H, m), 3, 70-3,57 (1H, m), 3,02-2,88 (1H, m), 2,03-1,40 (7H, m), 1,27-1,13 (1H, m), 0,99-0, 84 (6H, m) . 141

Intermediário 52: 2-[(2-Metilbutil)oxi]-8-metoxi-9-(tetra hidro-2fí-piran-2-il) -9ff-purin-6-amina

A uma solução de 8-bromo-2-[(2-metilbutil)oxi]-9-(tetra-hidro-2i7-piran-2-il)-9H-purin-6-amina (284 mg) em MeOH seco (2,54 mL) foi adicionada solução de metóxido de sódio (0,416 mL, 30% em peso em MeOH) e a mistura foi agitada a refluxo durante 1 h. A reacção foi deixada arrefecer e foi concentrada in vacuo. O residuo resultante foi dissolvido em AcOEt (15 mL) e foi vertido para solução saturada de cloreto de amónio (15 mL) . Os orgânicos foram separados, secos sobre MgS04, filtrados e concentrados in vacuo para dar o composto em epígrafe como uma espuma cor de laranja (199 mg) . MS calculado para (C16H25N5O3)+ = 335 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 336 RMN de ( (CD3) 2SO) : δ 6,87 (2H, s), 5,35 (1H, dd) , 4,13- 3,91 (6 H, m), 3, 66-3, 50 (1H, m) , 2,77-2,62 (1H, m), 1,98-1,42 (7H, m), 1,26-1,13 (1H, m) , 0, 98-0, 85 (6H, m) . 142

Intermediário 53: Sal de ácido trifluoroacético de 2-[(2-metilbutil) oxi] -8- (metoxi) -9ff-purin-6-amina

A uma solução de 2-[(2-metilbutil)oxi]-8-metoxi-9-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-9A-purin-6-amina (199 mg) em MeOH seco (1,99 mL) foi adicionado TFA (0,199 mL). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 24 h. A reacção foi concentrada in vacuo para dar um resíduo amarelo. O resíduo foi triturado com Et20 e foi filtrado para dar o composto em epígrafe como um sólido esbranquiçado (111 mg). MS calculado para (CnHi7N502)+ = 251 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 252 RMN de XH ( (CD3) 2SO) : δ 8,01-7,46 (2H, br), 4, 20-4,00 (6H, m), 1,88-1, 73 (1H, m), 1, 54-1, 40 (1H, m) , 1,28-1,12 (1H, m) , 0,99-0,84 (6H, m). 143

Intermediário 54: 2-[(2-Metilbutil)oxi]-8-metoxi-9-(tetra hidro-2fí-piran-4-ilmetil) -9fí-purin-6-amina

A uma solução de 2-[(2-metilbutil)oxi]-8-metoxi-9A-purin-6-amina (109 mg) em DMF seca (1,86 mL) foi adicionado carbonato de potássio (165 mg) e a mistura foi agitada a 60 °C durante 90 min. A mistura foi arrefecida até à temperatura ambiente e foi adicionado 4-(bromometil) tetra-hidro-2íf-pirano (59 mg). A reacção foi agitada a 50 °C, de um dia para o outro, e foi arrefecida até à temperatura ambiente. A mistura foi tomada em AcOEt (15 mL) e lavada com água (2 x 10 mL) . Os orgânicos foram separados, secos sobre MgS04, filtrados e concentrados in vacuo para dar um óleo viscoso amarelo. O material foi purificado por cromatografia de fase inversa em Ci8 (ISCO) utilizando água (0,1% de ácido fórmico)-acetonitrilo (0,05% de ácido fórmico) como eluente (20-60%) para proporcionar o composto em epígrafe como um óleo amarelo (41 mg). MS calculado para (C17H27N5O3)+ = 349 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 350 144

Intermediário 55: 2-[(1-Metilbutil)oxi]-9-(tetra-hidro-2fl- piran-2-il) -9ff-purin-6-amina

A 2-pentanol (3,65 mL) foi adicionado terc-butóxido de sódio (760 mg) em porções ao longo de 5 min. A mistura foi agitada à temperatura ambiente até ficar homogénea. Foi adicionada 2-cloro-9- (tetra-hidro-2A-piran-2-il) -9ff-purin-6-amina (500 mg) e a reacção foi aquecida a 50 °C de um dia para o outro, em seguida durante mais 72 h. A mistura reaccional foi arrefecida e desactivada com água (10 mL) e foi extraída com AcOEt (3 x 25 mL) . Os orgânicos foram combinados, lavados com solução aquosa saturada de cloreto de sódio (30 mL), secos sobre MgS04, filtrados e concentrados in vacuo para dar composto em bruto em epígrafe como um óleo amarelo viscoso.

Num balão separado, uma suspensão de 2-cloro-9-(tetra-hidro-2ií-piran-2-il)-9íí-purin-6-amina (500 mg) e 2-pentanol (3,8 mL) foi aquecida até 50 °C. Foi adicionado hidreto de sódio (396 mg, dispersão a 60%) em porções e a reacção foi agitada a 50 °C durante 72 h. A reacção foi arrefecida e desactivada com água (10 mL) e foi extraída com AcOEt (3 x 25 mL) . Os orgânicos combinados foram lavados com solução aquosa saturada de cloreto de sódio (30 mL), secos sobre MgS04, filtrados e concentrados in vacuo para dar composto em bruto em epígrafe como um óleo amarelo. 145

Os dois produtos reaccionais em bruto foram combinados e purificados por cromatografia de fase inversa em Ci8 (ISCO) utilizando água (0,1% de ácido fórmico)-acetonitrilo (0,05% de ácido fórmico) como eluente (20-60%) para proporcionar o composto em epígrafe como um óleo castanho (382 mg). MS calculado para (C15H23N5O2)+ = 305 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 306

Intermediário 56: 8-Bromo-2-[(l-metilbutil)oxi]-9-(tetra-hidro-2ff-piran-2-il)-9fl-purin-6-amina

A uma solução de 2-[ (1-metilbutil) oxi]-9-(tetra-hidro-2íf-piran-2-il)-9i?-purin-6-amina (382 mg) em clorofórmio seco (4,52 mL) a 0 °C foi adicionada NBS (234 mg) numa única porção. A reacção foi aquecida até à temperatura ambiente e agitada durante 5 h. A mistura reaccional foi tomada em DCM (20 mL) e foi lavada com água (30 mL). Os orgânicos foram separados, secos passando através de um filtro poroso hidrófobo e concentrados in vacuo para dar uma espuma verde/castanha (493 mg). MS calculado para (Ci5H22BrN502)+ = 383/385 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 384/386 146 RMN de XH ( (CD3) 2S0) : δ 7,44 (2H, 1), 5,48 (1H, dd), 5,09- 4,98 (1H, m), 4, 07-3, 98 (1H, m), 3,68-3,57 (1H, m), 3,02-2,88 (1H, m), 2,03-1,91 (1H, m) , 1, 87-1, 79 (1H, m), 1, 74-1, 45 (5H, m), 1, 44-1,20 (5H, m), 0, 95-0, 85 (3H, m).

Intermediário 57: 2-[(l-Metilbutil)oxi]-8-metoxi-9-(tetra-hidro-2ff-piran-2-il)-9#-purin-6-amina

A uma solução de 8-bromo-2-[(1-metilbutil)oxi]-9-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-amina (493 mg) em MeOH seco (4,37 mL) foi adicionada solução de metóxido de sódio (0,722 mL, 30% em peso em MeOH) e a mistura foi agitada a refluxo durante 6 h. Foi adicionada mais uma porção de solução de metóxido de sódio (0,120 mL, 30% em peso em MeOH) e a reacção continuou durante 90 min. A reacção foi arrefecida e concentrada in vácuo para dar um residuo cor de laranja. O resíduo foi tomado em cloreto de amónio saturado (25 mL) e lavada com AcOEt (25 mL) . Os orgânicos foram separados e lavados com água (15 mL) . Os orgânicos foram separados, secos sobre MgS04, filtrados e concentrados in vacuo para dar o composto em epígrafe como uma espuma cor de laranja (313 mg) . MS calculado para (Ci6H25N503) + = 335 147 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 336 RMN de :Η ( (CD3) 2S0) : δ 6,78 (2H, s), 5,33 (1H, d), 5,07- 4,96 (1H, m), 4, 09-3, 92 (4H, m) , 3,62-3, 49 (1H, m), 2,80-2,64 (1H, m), 1,97-1,88 (1H, m) , 1, 77-1, 43 (6H, m) , 1,42-1,19 (5H, m), 0, 95-0,84 (3H, m).

Intermediário 58: Sal de ácido trifluoroacético de 2-[(l-metilbutil) oxi] -8-metoxi-9A-purin-6-amina

A uma solução de 2-[(1-metilbutil)oxi]-8-metoxi-9-(tetra-hidro-2íf-piran-2-il)-9íf-purin-6-amina (313 mg) em MeOH seco (3,13 mL) foi adicionado TFA (0,313 mL) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 48 h. A mistura reaccional foi concentrada in vacuo para dar um resíduo amarelo que foi triturado com Et20 e filtrado para dar o composto em epígrafe como um sólido esbranquiçado (218 mg). MS calculado para (0ιιΗι7Ν5Ο2)+ = 251 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 252 148 RMN de XH ( (CD3) 2S0) : δ 8,12 (2H, 1), 5,20-5, 09 (1H, m), 4,05 (3 H, s), 1, 74-1, 52 (2H, m) , 1,45-1,27 (5H, m) , 0,94-0,85 (3H, m), não foi observado um protão permutável.

Intermediário 59: 2-[(l-Metilbutil)oxi]-8-metoxi-9-(tetra-hidro-2ff-piran-4-ilmetil)-9fl-purin-6-amina

A uma solução de sal de ácido trifluoroacético de 2 —[(1 — metilbutil) oxi]-8-metoxi-9íí-purin-6-amina (218 mg) em DMF seca (3,71 mL) foi adicionado carbonato de potássio (330 mg). A mistura foi agitada a 60 °C durante 90 min. A reacção foi arrefecida e foi adicionado 4-(bromometil)tetra-hidro-2H-pirano (118 mg) . A reacção foi agitada a 50 °C durante 6 h e foi arrefecida até à temperatura ambiente. A mistura foi tomada em AcOEt (40 mL) e lavada com água (2 x 20 mL) . Os orgânicos foram separados, secos sobre MgS04 e concentrados in vacuo para dar um óleo amarelo viscoso. O material foi purificado por cromatografia de fase inversa em Ci8 (ISCO) utilizando água (0,1% de ácido fórmico)-acetonitrilo (0,05% de ácido fórmico) como eluente (20-60%) para proporcionar o composto em epígrafe como um óleo transparente (92 mg). MS calculado para (C17H27N5O3)+ = 349 149 350 MS encontrado (electrospray): (M+H)

Intermediário 60: 2-Cloro-lff-purin-6-amina

Uma mistura de 2,6-dicloro-lfí-purina (5 g) e amónia (79,2 mL, 2 M em (isopropanol) foi agitada 120 °C num autoclave, de um dia para o outro. A arrefecida e concentrada in vacuo para dar o epígrafe como um sólido esbranquiçado com quantitativo. MS calculado para (C5H4C1N5)+ = 169/171 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 170/172 RMN de ( (CD3) 2SO) : δ 8,14 (1H, s), 7,66 (2H, observado um protão permutável. solução de e aquecida a reacção foi composto em rendimento s), não foi 150

Intermediário 61: 2-Cloro-9-(tetra-hidro-2fl-piran-4- ilmetil) -9i7-purin-6-amina

A uma suspensão de 2-cloro-lií-purin-6-amina (1,57 g) e carbonato de potássio (2,57 g) em DMF (55 mL) foi adicionado 4-(bromometil)tetra-hidro-2H-pirano (2,0 g) numa porção. A mistura foi agitada a 90 °C, de um dia para o outro. A mistura reaccional foi tomada em clorofórmio/isopropanol (3:1, 100 mL) e foi extraída com água (100 mL). Os orgânicos foram separados e a aquosa foi extraída com clorofórmio/isopropanol (3:1, 2 x 50 mL) . Os orgânicos foram combinados, secos passando através de um filtro poroso hidrófobo e concentrados in vacuo para dar o composto em epígrafe como um sólido esbranquiçado (1,30 g, 52%). MS calculado para (ChHi4C1N50) + = 267/269 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 268/270 RMN de :Η ( (CD3) 2SO) : δ 8,13 (1H, s), 7,73 (2H, S.l), 4,00 (2H, d), 3,81 (2H, dd), 3,28-3,17 (2H, m), 2,14-1,99 (1H, m), 1, 43-1,33 (2H, m) , 1,33-1,17 (2H, m) . 151

Intermediário 62: 8-Bromo-2-cloro-9-(tetra-hidro-2fl-piran 4-ilmetil) -9ff-purin-6-amina

A uma solução de 2-cloro-9-(tetra-hidro-2A-piran-4-ilmetil)-9H-purin-6-amina (1,30 g) em clorofórmio seco (32 mL) à temperatura ambiente foi adicionada NBS (2,16 g). A reacção foi agitada a 60 °C durante 6 h. A mistura foi arrefecida, tomada em DCM (50 mL) e lavada com água (50 mL). Os orgânicos foram feitos passar através de um filtro poroso hidrófobo e concentrados in vacuo para dar o composto em epígrafe como um sólido castanho (1,36 g). MS calculado para (CnHi3BrClN50)+ = 345/347/349 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 346/348/350 3,82 (5H, RMN de ΧΗ ( (CD3) 2SO) : δ 7,91 (2H, 1), 4, 04-3, 94 (1H, m), (2H, dd), 3,31-3,15 (2H, m), 2,19-2,01 (1H, m), 1,48-1,15 m) . 152

Intermediário 63: 2-Cloro-8-metoxi-9-(tetra-hidro-2A-piran 4-ilmetil) -9ff-purin-6-amina

A uma solução de 8-bromo-2-cloro-9-(tetra-hidro-2A-piran-4-ilmetil)-9A-purin-6-amina (1,36 g) em MeOH seco (27,5 mL) foi adicionada solução de hidróxido de sódio 1 M (27,5 mL) e a mistura foi agitada a refluxo durante 30 min. A reacção foi arrefecida até à temperatura ambiente e concentrada in vacuo. O resíduo obtido foi triturado com água (60 mL) e extraído com

AcOEt (120 mL) . A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio (60 mL), seca sobre MgS04, filtrada e concentrada in vacuo para dar um sólido rosa/branco. O material foi tomado em MeOH/DMSO (1:1) e formou-se um precipitado da solução. O sólido foi filtrado e o filtrado foi purificado por cromatografia de fase inversa em Cis (ISCO) utilizando água (0,1% de ácido fórmico)-acetonitrilo (0,05% de ácido fórmico) como eluente (10-45%) . O sólido filtrado foi combinado com o material obtido da purificação para dar o composto em epígrafe (192 mg). MS calculado para (Ci2Hi6C1N502) + = 297/299 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 298/300 153 RMN de XH ( (CD3) 2S0) : δ 7, 45-7, 28 (2H, m), 4,10 (3H, s), 3, 87-3, 73 (3H, m) , 3,22 (3H, t), 2,07-1,93 (1H, m), 1,46-1,36 (2H, m), 1,33-1,14 (2H, m) .

Intermediário 64:_2-[(2-Ciclopropiletil)oxi]-9-(tetra- hidro-2fí-piran-2-il) -9H-pirin-6-amina

A uma mistura de 2-ciclopropiletanol (3,45 g) em DME (20 mL) foi adicionado gradualmente terc-butóxido de sódio (3, 86 g) . A reacção foi agitada sob azoto durante 30 min, em seguida foram adicionados 2-cloro-9-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-9£f-purin-6-amina (2,54 g) e DME (20 mL) . A reacção foi aquecida a refluxo (110 °C) de um dia para o outro, em seguida durante mais 8 h. A reacção foi desactivada em água (100 mL) e extraída com AcOEt (2 x 100 mL) . Os orgânicos foram combinados e lavados com solução aquosa saturada de cloreto de sódio (100 mL) e secos utilizando um filtro poroso hidrófobo. O óleo resultante foi submetido a evaporação azeotrópica com tolueno (x 2) para dar uma goma. Esta foi triturada com Et20 (banho arrefecido de C02/acetona) até ter sido obtido o composto em epígrafe como um pó amarelo (1,579 g) que foi colocado sob alto vácuo durante 24 h. MS calculado para (C15H21N5O2)+ = 303 154 304 MS encontrado (electrospray): (M+H) RMN de :H (CDC13) : δ 7,85 (1H, s), 5,64 (1H, dd), 5,51 (2H, 1), 4,39 (2 H, dt), 4,19-4,11 (1H, m), 3,80-3,71 (1H, m), 2,13-1,94 (3 H, m), 1, 83-1, 59 (5H, m) , 0,94-0,82 (1H, m) , 0,53-0,43 (2H, m), 0,16-0, 09 (2H, m) .

Intermediário 65: 8-Bromo-2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-9- (tetra-hidro-2fi-piran-2-il) -9A-purin-6-amina

2- [ (2-Ciclopropiletil)oxi]-9-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-9fí-purin-6-amina (1, 579 g) foi dissolvida em clorofórmio (15 mL) e foi arrefecida num banho de gelo a 1 °C. Foi gradualmente adicionada NBS (1,02 g), mantendo a temperatura de reacção abaixo de 2 °C. A reacção foi agitada durante 30 min (com arrefecimento num banho de gelo) antes de ser deixada aquecer até à temperatura ambiente. A reacção foi então agitada durante 6 h. Foi adicionado clorofórmio (50 mL) e a mistura foi partilhada com água (50 mL) e foi separada utilizando um filtro poroso hidrófobo. Os orgânicos foram evaporados sob pressão reduzida para dar o composto em epígrafe como uma espuma castanha (1,867g). MS calculado para (Ci5H2oBrN502)+ = 381/383 155 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 382/384 RMN de :Η (CDCI3) : δ 5,62 (1H, dd) , 5,45 (2 H, 1), 4,44-4,34 (2 H, m) , 4,22- -4,14 (1H, m), 3 ,72 (1H, dt), 3, 11- -2,99 (1H, m), 2,16- -2,07 (1H, m), 1,90- -1,58 ( 6H, m), O 1 co 03 0 , 82 (1H, m), 0,53- 0, 46 (2 H, m), O Λ-1 O 1 Λ-1 o (2H, m) #

Intermediário 66: 2-[(2-Ciclopropiletil)oxi]-8-metoxi-9- (tetra-hidro-2fí-piran-2-il) -9fí-purin-6-amina

Uma solução de 8-bromo-2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-9-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-9i7-purin-6-amina (1,867 g) em MeOH seco (14 mL) foi tratada com solução de metóxido de sódio (3,1 mL, 25% em peso em MeOH) e foi aquecida a refluxo durante 5 h. A reacção foi concentrada sob pressão reduzida antes de ser partilhada entre AcOEt (100 mL) e cloreto de amónio (100 mL). Os orgânicos foram separados e a aquosa foi reextraida com AcOEt (100 mL) . Os orgânicos combinados foram lavados com solução aquosa saturada de cloreto de sódio (100 mL), separados e secos utilizando um filtro poroso hidrófobo. Os orgânicos foram evaporados sob pressão reduzida para dar o composto em epígrafe como uma espuma castanha (845 mg). MS calculado para (C16H23N5O3)+ = 333 156 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 334 RMN de XH (CDC13) : δ 5,51 (1H, dd) , 5,13 (2H, 1), 4,36 (2H, t), 4,13 (3H, t), 3,70 (1H, dt), 2, 84-2, 72 (1H, m) , 2,10-2,01 (1H, m), 1,82-1,53 (7H, m), 0, 93-0, 82 (1H, m), 0,52-0, 45 (2H, m), 0,16-0,09 (2H, m).

Intermediário 67: Sal de ácido trifluoroacético de 2 — [ (2 — cicloproniletil) oxi] -8-metoxi-9fí-purin-6-amina

OH 2-[(2-Ciclopropiletil)oxi]-8-metoxi-9-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-9íí-purin-6-amina (845 mg) foi dissolvida em MeOH (10 mL) e foi adicionado TFA (1 mL) . A reacção foi agitada ao longo de um f im-de-semana e foi evaporada até à secura sob pressão reduzida para dar um sólido castanho. Foi adicionado AcOEt e o sólido foi filtrado e lavado com mais AcOEt (15 mL de AcOEt utilizados no total). O sólido foi então lavado com Et20 (5 mL) e seco ao ar sob sucção para dar o composto em epígrafe como um sólido esbranquiçado (937 mg). MS calculado para (C11H15N5O2)+ = 249 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 250 157 RMN de XH (CDC13) : δ 7,91 (2H, 1), 4,24 (2H, t), 3,93 (3H, s), 1,53-1,45 (2H, m), 0,71-0,60 (1H, m) , 0,34-0,27 (2H, m) , 0, 02- -0, 04 (2H, m), não foi observado um protão permutável, vestígio de ião amónio presente.

Intermediário 68: Metanossulfonato de tetra-hidro-3- furanilmetilo

A tetra-hidro-3-furano-metanol (25 g) em DCM seco (250 mL) a 0 °C sob azoto foi adicionada trietilamina (68 mL) numa única porção. Foi adicionado cloreto de metanossulfonilo (24,7 mL), gota a gota, ao longo de 15 min. A reacção foi aquecida até à temperatura ambiente e foi deixada ao longo de um fim-de-semana. A mistura foi tomada em DCM (50 mL) e lavada com solução saturada de bicarbonato de sódio (100 mL) . Os orgânicos foram secos utilizando um filtro poroso hidrófobo e concentrados in vácuo para dar o composto em epígrafe como um óleo castanho com rendimento quantitativo. RMN de 1H ( (CD3) 2SO) : δ 4,19-4,08 (2H, m), 3, 77-3,69 (2H, m), 3, 66-3, 59 (1H, m), 3,46 (1H, dd), 3,19 (3H, s), 2,64-2,53 (1H, m), 2,03-1, 92 (1H, m) , 1,63-1,53 (1H, m) . 158

Intermediário 69: 2-[(2-Ciclopropiletil)oxi]-8-metoxi-9- (tetra-hidro-3-furanilmetil)-9fl-purin-6-amina

A uma solução de sal de ácido trifluoroacético de 2 —[(2 — ciclopropiletil)oxi]-8-metoxi-9i7-purin-6-amina (300 mg) em DMF seca (5 mL) foi adicionado carbonato de potássio anidro (457 mg) e a mistura foi aquecida a 60 °C durante 1,5 h. A reacção foi arrefecida até à temperatura ambiente e foi adicionado metanossulfonato de tetra-hidro-3-furanilmetilo (164 mg) . A reacção foi aquecida a 90 °C durante 3,5 h e foi então desactivada em água (50 mL) e extraída com AcOEt (3 x 50 mL) . Os orgânicos foram separados, secos passando através de um filtro poroso hidrófobo e evaporados sob pressão reduzida para dar um sólido vítreo. O material foi purificado por cromatografia de fase inversa em Ci8 (ISCO) utilizando água (0,1% de ácido fórmico)-acetonitrilo (0,05% de ácido fórmico) como eluente (20-60%) para dar o composto em epígrafe (103,8 mg). MS calculado para (C16H23N5O3)+ = 333 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 334 RMN de XH (CDCI3) : δ 5,37 (2H, 1), 4,22 (2H, t), 4,00 (3H, s), 3, 89-3,77 (3 H, m), 3,69-3,61 (2H, m), 3,52 (1H, dd) , 2,80- 159 2,67 (1Η, m), 1,91-1,81 (1H, m), 1,65-1,53 (3H, m), 0,80-0,69 (1H, m), 0,39-0,32 (2H, m), 0,02--0,04 (2H, m).

Intermediário 70: 2-[ (E/Z) -2-metoxietenil] tetra-hidro-2fl- pirano

Uma solução de cloreto de oxalilo (5,33 mL) em DCM (30 mL) foi arrefecida até -60 °C e foi adicionada, gota a gota, sob agitação, uma solução de DMSO (7,4 mL) em DCM (100 mL), mantendo a temperatura entre -55 °C e -60 °C. Após 20 min foi adicionado, gota a gota, tetra-hidro-2H-piran-2-ilmetanol (6 g). Após 30 min foi adicionada, gota a gota, trietilamina (36 mL) e após mais 30 min a mistura foi deixada aquecer até à temperatura ambiente. Após 30 min, a mistura foi tratada com água, a mistura foi agitada e as camadas separadas. A camada aquosa foi extraída com DCM (x 2) e os extractos combinados foram lavados com solução aquosa diluída de cloreto de sódio, secos utilizando um filtro poroso hidrófobo e evaporados até um óleo pálido (3,8 g) . O material foi purificado por cromatografia de fase normal (ISCO) utilizando ciclo-hexano/AcOEt como eluente (0-40%) para dar um óleo transparente (780 mg).

Uma suspensão de cloreto de (metoximetil)trifenilfosfónio (4,69 g) em THF seco foi arrefecida até -40 °C e foi adicionada,, gota a gota, sob agitação, uma solução de terc-butóxido de potássio (1,54 g) em THF seco. Após 45 min, a reacção foi arrefecida até -65 °C e foi adicionado, gota a gota, 160 o óleo transparente (780 mg, preparado acima) em THF seco, mantendo a temperatura entre -60 °C e -65 °C. A mistura foi deixada aquecer até à temperatura ambiente e após mais 30 min foi desactivada com gelo/água. A mistura foi extraída com Et20 (x 3) e os extractos combinados foram lavados com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secos sobre sulfato de sódio, evaporados in vácuo, em seguida evaporados novamente in vacuo com tolueno para dar material em bruto (3,71 g) . O material foi purificado por cromatografia de fase normal (ISCO) utilizando ciclo-hexano/AcOEt como eluente (0-20%) para dar o composto em epígrafe como um óleo transparente (581 mg). RMN de ΧΗ (CDC13) : δ 6,58 + 5,91 (1H d+d), 4,81 + 4,45 (1H, dd+dd), 4,31-4,23 + 3,76-3,69 + 3,52-3,44 (2H, m + m + m), 4,04-3,95 (1H, m), 3,61 + 3,56 (3H, s + s), 1,89-1,77 (1H, m), 1,67-1/32 (5H, m), mistura de isómeros numa proporção aproximadamente de 60:40.

Intermediário 71: Tetra-hidro-2i7-piran-2-ilacetaldeído

A uma solução de 2-[ (E/Z) -2-(Metoxi) etenil] tetra-hidro-2H-pirano (581 mg) em THF (4 mL) foi adicionado HC1 2 N (4 mL) sob agitação. Após 2 h, a mistura foi diluída com água e foi extraída com DCM (x 3), Os orgânicos combinados foram lavados com solução aquosa diluída de cloreto de sódio, secos através de um filtro poroso hidrófobo e evaporados para dar o composto em epígrafe como um óleo transparente (528 mg). 161 RMN de XH (CDC13) : δ 9,80 (1H, t), 4,01-3,93 (1H, m), 3,88-3,79 (1H, m), 3,51-3,43 (1H, m) , 2,63-2,54 (1H, m), 2,50-2,42 (1H, m), 1,91-1,80 (1H, m), 1, 68-1, 48 (4H, m), 1,44-1,31 (1H, m) .

Intermediário 72: 2-(Tetra-hidro-2fí-piran-2-il) etanol

OH A uma solução, mantida sob agitação, de tetra-hidro-2íí-piran-2-ilacetaldeído (528 mg) em etanol (5 mL) foi adicionado boro-hidreto de sódio granulado (156 mg). A mistura foi aquecida a 50 °C durante 2 h sob azoto. Depois de arrefecer, o solvente foi evaporado e o resíduo tratado com solução aquosa saturada de cloreto de sódio. A mistura foi acidificada por adição cuidadosa de HC1 2 N e esta mistura foi extraída com dcm (x 3) . Os orgânicos combinados foram lavados com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secos utilizando um filtro poroso hidrófobo e evaporados para dar o composto em epígrafe como um óleo transparente (465 mg). RMN de ΧΗ (CDC13) : δ 4, 02-3, 93 (lH, m), 3, 83-3, 73 (2H, m), 3,57-3,38 (2H, m), 2, 83-2, 74 (1H, m), 1, 88-1, 32 (7H, m), não foi observado o protão de hidroxilo. 162

Intermediário 73: Metanossulfonato de 2-(tetra-hidro-2ff-piran-2-il)etilo

2-(Tetra-hidro-2/í-piran-2-il) etanol (465 mg) foi dissolvido em DCM seco (10 mL) e foi adicionada trietilamina (996 mg) . A solução agitada foi arrefecida num banho de gelo sob azoto e foi adicionado,, gota a gota, ao longo de 5 min, cloreto de metanossulfonilo (359 mg) . A reacção foi deixada aquecer até à temperatura ambiente à medida que o banho de gelo fundia e foi deixada durante 16 h. A mistura foi então agitada com solução saturada de bicarbonato de sódio e a camada aquosa foi extraída com DCM (x 2) . Os extractos orgânicos combinados foram lavados com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secos utilizando um filtro poroso hidrófobo e evaporados para dar o composto em epígrafe como um óleo castanho (718 mg). RMN de 1H (CDC13) : δ 4, 43-4,27 (2H, m), 4, 00-3, 92 (1H, m), 3, 47-3,35 (2H, m) , 3,01 (3H, s), 1,93-1, 78 (3H, m), 1,64-1,44 (4H, m), 1,37-1,24 (1H, m). 163

Intermediário 74: 2-Butiloxi-8-metoxi-9-[2-(tetra-hidro-2H-piran-2-il) etil] -9A-purin-6-amina

Uma mistura de sal de trifluoroacetato de 2-butoxi-8-metoxi-9i7-purin-6-amina (200 mg) e carbonato de potássio (236 mg) em DMF seca (2 mL) foi aquecida a 60 °C sob agitação durante 1 h. Foi adicionado metanossulfonato de 2-(tetra-hidro-2fí-piran-2-il) etilo (142 mg) e a reacção continuou durante 16 h a 60 °C. A mistura foi desactivada com água e extraída com AcOEt (x 3). Os orgânicos combinados foram lavados com água e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secos utilizando um filtro poroso hidrófobo e evaporados para dar material em bruto (540 mg). O material foi purificado por cromatografia de fase normal (ISCO) utilizando 0-20% de metanol/AcOEt como eluente para dar o composto em epígrafe como um sólido branco (88 mg). MS calculado para (C17H27N5O3)+ = 349 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 350 RMN de ΧΗ (CDC13) : δ 5,12 (2H, s), 4,29 (2H, t), 4,12 (3H, s), 4,05 (2H, dt), 3,99-3,92 (1H, m), 3,36 (1H, dt), 3,27-3,19 (1H, m), 1,88 (2H, quarteto), 1, 84-1, 66 (5H, m), 1,63-1,37 (4H, m), 1,36-1,23 (1H, m), 0,97 (3H, t) . 164

Intermediário 75: (2,2-Dimetiltetra-hidro-2fl-piran-4- il)metanol

Intermediário 75: (2,2-Dimetiltetra-hidro-2fl-piran-4- .OH

Uma solução de 2,2-dimetiltetra-hidro-2íí-pirano-4 carbaldeido (2,5 g) em etanol (30 mL) foi arrefecida (banho de gelo) e foi adicionado boro-hidreto de sódio (665 mg) sob agitação. O banho de gelo foi retirado e a mistura foi deixada aquecer até à temperatura ambiente. Após 2 h, a reacção foi aquecida a 50 °C durante 1 h, em seguida deixada arrefecer até à temperatura ambiente. O solvente foi evaporado e o residuo foi tratado com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, acidificado e extraído para DCM (x 3). Os orgânicos combinados foram secos através de um filtro poroso hidrófobo e evaporados para dar um óleo transparente (2,54 g). RMN de ΧΗ (CDC13) : δ 3, 87-3,62 (2H, m) , 3,47 (2H, d), 1,99-1,87 (1H, m), 1,67-1,55 (3H, m), 1,28-1,06 (8H, m).

Intermediário 76: Metanossulfonato de (2,2-dimetiltetra-hidro-2i7-piran-4-il) metilo

(2,2-Dimetiltetra-hidro-2fí-piran-4-il)metanol (2,54 g) foi dissolvido em DCM seco (40 mL) e foi adicionada trietilamina 165 (4,9 mL) sob agitação. A solução foi arrefecida (banho de gelo) sob azoto e foi adicionado cloreto de metanossulfonilo (1,77 mL), gota a gota, ao longo de 5 min. A mistura foi deixada aquecer lentamente até à temperatura ambiente à medida que o banho de gelo fundia e foi deixada durante 16 h. A mistura foi agitada com solução saturada de bicarbonato de sódio e a camada aquosa foi extraida com DCM (x 2). Os orgânicos combinados foram lavados com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secos utilizando um filtro poroso hidrófobo e evaporados para dar o composto em epigrafe (3,93 g) . RMN de :Η (CDC13) : δ 4,03 (2H, d), 3,82-3, 75 (1H, m) , 3,68 (1H, dt), 3,02 (3H, s), 2,25-2,12 (1H, m), 1, 70-1, 55 (3H, m), 1,33-1,13 (7H, m).

Intermediário 77: 4- (Bromometil) -2,2-dimetiltetra-hidro-2ff-pirano

Uma mistura de metanossulfonato de (2,2-dimetiltetra-hidro-2fí-piran-4-il)metilo (1,5 g) e brometo de litio anidro (2,72 g) em acetona (40 mL) foi aquecido a refluxo sob azoto durante 4 h. A reacção foi deixada arrefecer e o solvente foi evaporado. O resíduo foi tratado com solução saturada de bicarbonato de sódio e foi extraído com DCM (x 3). Os orgânicos combinados foram lavados com solução aquosa diluída de cloreto de sódio, secos 166 passando através de um filtro poroso hidrófobo e evaporados para dar o composto em epígrafe como um óleo castanho (1,23 g) . RMN de XH (CDC13) : δ 3, 82-3, 75 (1H, m), 3,71-3,62 (1H, m), 3,26 (2 H, d), 2,11-1,98 (1H, m) , 1,80-1,66 (2H, m), 1,29-1,08 (8H, m) .

Intermediário 78: 2-Butiloxi-9-[(2,2-dimetiltetra-hidro-2fl-piran-4-il)metil]-8-metoxi-9ff-purin-6-amina

Uma mistura de sal de trifluoroacetato de 2-butoxi-8-metoxi-9i7-purin-6-amina (223 mg) e carbonato de potássio (264 mg) em DMF seca (2 mL) foi aquecida a 60 °C sob azoto, sob agitação durante 1 h. Foi adicionado 4-(bromometil)-2,2-dimetiltetra-hidro-2fí-pirano (158 mg) e a reacção foi agitada durante 16 h a 60 °C. A mistura foi desactivada com água e extraída com AcOEt (X 3) . Os orgânicos combinados foram lavados com água e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secos utilizando um filtro poroso hidrófobo e evaporados para dar um óleo castanho. O material em bruto foi purificado por cromatografia de fase normal (ISCO) utilizando 5-20% de metanol/AcOEt como eluente para dar um óleo pálido (181 mg) . O material foi purificado novamente por cromatografia de fase normal (ISCO) utilizando 0-15% de metanol/AcOEt como eluente para dar o composto em epígrafe (161 mg). 167 MS calculado para (C18H29N5O3)+ = 363 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 364

Intermediário 79: A^-Butil-S-[(2,2-dimetiltetra-hidro-2fl-piran-4-il)metil]-8-metoxi-9fl-purina-2, 6-diamina

N H

Uma mistura de sal de ácido trifluoroacético de W2-Butil-8-metoxi-9H-purina-2,6-diamina (200 mg) e carbonato de potássio (236 mg) em DMF seca (2 mL) foi aquecida a 60 °C sob azoto, sob agitação durante 1 h. Foi adicionado metanossulfonato de (2,2-dimetiltetra-hidro-2i7-piran-4-il) metilo (152 mg) e a agitação continuou durante 5 h a 50 °C. A reacção foi arrefecida até à temperatura ambiente e agitada durante 16 h. Foi adicionado brometo de litio (50 mg) e 0 aquecimento continuou durante 5 h a 50 °C, em seguida 8 h a 90 °C. A mistura foi desactivada com água e extraida com AcOEt (X 3). Os orgânicos combinados foram lavados com água e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secos utilizando um filtro poroso hidrófobo e evaporados para dar material em bruto (210 mg). Este foi purificado por cromatografia de fase inversa em Ci8 (ISCO) utilizando água (0,1% de ácido fórmico)-acetonitrilo (0,05% de ácido fórmico) como eluente (20-60%) para dar o composto em epígrafe (75 mg). 168 362 MS calculado para (Ci8H3oN602) MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 363 RMN de XH (CDC13) : δ 4,92 (2H, 1), 4,60 (1H, t), 4,09 (3H, s), 3, 79-3,68 (3H, m), 3,65-3,55 (1H, m), 3,43-3,33 (2H, m), 2,36-2,23 (1H, m), 1,62-1,53 (2H, m), 1,51-1,13 (12H, m), 0,99-0,91 (3H, m).

Intermediário 80: 3-[(E/Z)-2-metoxietenil]tetra-hidrofurano

Uma suspensão de cloreto de (metoximetil)trifenilfosfónio (13,71 g) em THF seco (40 mL) foi arrefecida até -40 °C e foi adicionada,, gota a gota, sob agitação, uma solução de terc- butóxido de potássio (4,94 g) em THF seco (40 mL) . Após 45 min, a reacção foi arrefecida até -65 °C. Entretanto, uma solução de tetra-hidro-3-furanocarbaldeído (8 mL, 50% em água) foi tratada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio para dar uma suspensão turva. Esta foi extraída com Et20 (x 3) e os orgânicos combinados foram secos sobre sulfato de sódio e a solução foi adicionada, gota a gota, à reacção a -60 °C até -65 °C. A mistura foi então deixada aquecer até à temperatura ambiente.

Após 30 min, a mistura foi vertida para água e foi extraída com

Et20 (x 3). Os extractos combinados foram lavados com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secos sobre sulfato de sódio e removidos para dar um óleo. Este foi dissolvido numa pequena quantidade de DCM e foi carregado num cartucho de sílica 169 ISCO, e o solvente foi removido sob pressão reduzida. 0 material em bruto foi purificado por cromatografia de fase normal (ISCO) utilizando 0-20% de AcOEt/ciclo-hexano como eluente para dar o composto em epígrafe (460 mg). RMN de XH (CDC13) : δ 6,37 (0, 75H, d), 5,92 (0,25H, d), 4,67 (0,75H, dd), 4,32 (0,25H, dd), 3,97-3, 85 (2H, m), 3, 84-3, 75 (1H, m), 3,60 (0, 75H, s), 3,52 (2,25H, s), 3,38- -3,31 (1H, m), 3, 28 3,19 (0,25H, m), 2,81-2,69 (0,75H, m) , 2,16' -2, 03 (1H, m), 1, 71 1,58 (1H, m), mistura de isómeros numa proporção aproximadamente de 1:3.

Intermediário 81: 2- (Tetra-hidro-3-furanil)etanol

OH 3-[(E/Z)-2-metoxietenil]tetra-hidrofurano (460 mg) foi tratado com etanol (2 mL) e HC1 2 N (2 mL), e a solução transparente foi agitada durante 4 h. A solução foi aquecida a 50 °C durante 1 h, em seguida deixada à temperatura ambiente durante 16 h. O ácido foi neutralizado adicionando solução de hidróxido de sódio 2 N (2 mL) e foi diluído com etanol (3 mL) . Foi adicionado boro-hidreto de sódio (136 mg) sob agitação. Após 3 h, o solvente foi levado e o resíduo foi tratado com solução aquosa saturada de cloreto de sódio e cuidadosamente acidificado com HC1 2 N. A mistura foi extraída com DCM (x 3), foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca utilizando um filtro poroso hidrófobo e evaporada até um óleo transparente (200 mg) . As camadas aquosas foram combinadas, saturadas com 170

NaCl sólido, extraídas com DCM (x 3), secas utilizando um filtro poroso hidrófobo e evaporadas para dar uma segunda colheita de material (100 mg). Este foi combinado com a primeira colheita de óleo transparente (200 mg) e foi purificado por cromatografia de fase normal (ISCO) utilizando 0-20% de MeOH/AcOEt como eluente para dar o composto em epígrafe (230 mg). RMN de (CDC13) : δ 3,98-3,83 (2H, m), 3, 82-3, 64 (3H, m), 3, 42-3, 35 (1H, m), 2,39-2,27 (1H, m), 2,14-2,03 (1H, m), 1,72 1,64 (2H, m), 1,58-1,51 (1H, m), não foi observado o protão de hidroxilo.

Intermediário 82: Metanossulfonato de 2-(tetra-hidro-3-furanil)etilo

2-(Tetra-hidro-3-furanil)etanol (230 mg) foi dissolvido em DCM seco (5 mL) e foi adicionada trietilamina (0,552 mL) . A solução agitada foi arrefecida (banho de gelo) sob azoto e foi adicionadp cloreto de metanossulfonilo (0,199 mL), gota a gota, ao longo de 5 min. A mistura foi deixada aquecer lentamente até à temperatura ambiente à medida que o banho de gelo fundia e foi deixada durante 16 h. A mistura foi agitada com solução saturada de bicarbonato de sódio e a camada aquosa foi extraída com DCM (x 2). Os orgânicos combinados foram lavados com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secos utilizando um filtro poroso hidrófobo e evaporados para dar o composto em epígrafe (364 mg). 171 RMN de ΧΗ (CDC13) : δ 4,32-4,22 (2H, m) , 3, 98-3, 73 (4H, m) , 3, 44-3,37 (1H, m) , 3,03 (3H, s), 2,40-2,30 (1H, m), 2,18-2,06 (1H, m), 1,95-1,79 (2H, m).

Intermediário 83: 3-(2-Bromoetil)tetra-hidrofurano

Uma mistura de metanossulfonato de 2-(tetra-hidro-3-furanil) etilo (364 mg) e brometo de litio anidro (780 mg) foi aquecida a refluxo sob agitação em acetona (10 mL) sob azoto durante 4 h. A mistura foi deixada arrefecer e o solvente foi evaporado. O resíduo foi tratado com solução saturada de bicarbonato de sódio e foi extraído com DCM (x 3) . Os orgânicos combinados foram lavados com solução aquosa diluída de cloreto de sódio, secos utilizando um filtro poroso hidrófobo e evaporados para dar o composto em epígrafe (308 mg). RMN de XH (CDC13) : δ 3, 97-3, 84 (2H, m), 3,81-3,74 (1H, m), 3, 46-3,36 (3Η, m), 2, 47-2,36 (1H, m), 2,16-2,06 (1H, m), 2,01- 1,92 (2Η, m), 1,56-1, 49 (1H, m) . 172

Intermediário 84: 2-Butiloxi-8-metoxi-9-[2-(tetra-hidro-3-furanil)etil]-9fl-purin-6-amina

Uma mistura de sal de trifluoroacetato de 2-butoxi-8-metoxi-9ií-purin-6-amina (200 mg) e carbonato de potássio (236 mg) em DMF seca (2 mL) foi aquecida a 60 °C sob agitação durante 1 h. Foi adicionado 3-(2-bromoetil)tetra-hidrofurano (123 mg) e a reacção continuou durante 2 h. A mistura foi desactivada com água e extraída com AcOEt (x 3) . Os orgânicos combinados foram lavados com água e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secos utilizando um filtro poroso hidrófobo e evaporados para dar um óleo (265 mg) . O material em bruto foi purificado por cromatografia de fase normal (ISCO) utilizando 0-15% de MeOH/AcOEt como eluente para dar o composto em epígrafe (102 mg). MS calculado para (C16H25N5O3)+ = 335 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 336 RMN de (CDCI3) : δ 5,15 (2H, 1), 4,32 CM 1 (2 H, m), 4,12 (3 H, s), 3,99- -3,94 (2 H, m), 3 ,93-3,82 (2H, m), 3,77- 3,69 (1H, m), 3,39 (1H, dd), 2,19-2,06 ( 2H, m), 1, 90- 1, 72 (4H, m), 1,59- 1,45 (3H, m), 0,97 (3H, t) . 173

Intermediário 85: Metanossulfonato de tetra-hidro-2H-piran 3-ilmetilo

P \ A tetra-hidro-2fí-piran-3-ilmetanol (4,92 g) em diclorometano seco (140 mL) a 0 °C e sob azoto, foi adicionada trietilamina anidra (13,6 mL) de uma única vez, seguida de cloreto de mesilo (4,3 mL), gota a gota, ao longo de 5 minutos. A reacção foi deixada aquecer até à temperatura ambiente e agitada a esta temperatura, de um dia para o outro. A reacção foi desactivada com bicarbonato de sódio aquoso saturado (50 mL) . A camada orgânica foi separada, feita passar através de um filtro poroso hidrófobo para secar e concentrada in vacuo para produzir um óleo vermelho (8,8 g). RMN de ΧΗ (CDC13) : δ 4,18 1 0 co (2 H, m), 3, 94- 1 CO co co (1H, m), 3,81 (1H, m), 3,51-3, 43 (1H, m), 3, • 37-3 ,31 (1H, m), 3,01 (3H, s), 2,07 (1H, m), 1, 85 (1H, m), 1, , 72-1 ,56 (2 H, m), 1,47-1,36 (1H, m) . 174

Intermediário 86: Metanossulfonato de tetra-hidro-2H-piran 4-ilmetilo

A tetra-hidro-2tí-piran-4-ilmetanol (6,2 g) em diclorometano seco (226,3 mL) a 0 °C e sob azoto, foi adicionada trietilamina (18,1 mL), seguida de cloreto de mesilo (5,4 mL) . A reacção foi deixada aquecer até à temperatura ambiente e deixada a esta temperatura, de um dia para o outro. A mistura reaccional foi lavada com bicarbonato de sódio aquoso saturado (200 mL) . A camada orgânica foi separada, feita passar através de um filtro poroso hidrófobo para secar e concentrada in vacuo para produzir um sólido grumoso castanho claro (10,17 g) . RMN de (DMSO): δ 4,06 (2H, d), 3,85 (2H, m), 3,35-3,25 1H, m), 3,17 (3H, s), 2,50 (1H, m), 2,00-1,87 (1H, m), 1,58 (2H, m), 1,32-1,20 (2H, m) .

Intermediário 87: I\72-Butil-8-(metoxi)-9-[2-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)etil]-9H-purina-2,6-diamina

Uma mistura de sal de ácido trifluoroacético de N2-butil-8-metoxi-9fí-purina-2,6-diamina (200 mg) e carbonato de potássio 175 (236 mg) em DMF seca (2 mL) foi aquecida a 60 °C sob agitação durante 1 h. Foi adicionado metanossulfonato de 2-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)etilo (142 mg) e a reacção continuou durante 3 h a 60 °C. A mistura foi desactivada com água e extraída com AcOEt (x 3) . Os orgânicos combinados foram lavados com água e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secos utilizando um filtro poroso hidrófobo e evaporados para dar material em bruto (250 mg) . O material foi purificado por cromatografia de fase inversa em Ci8 utilizando água (contendo 0,1% de ácido fórmico)-acetonitrilo (contendo 0,05% de ácido fórmico) como eluente (20-60%) e as fracções apropriadas combinadas e evaporadas para remover o acetonitrilo. A mistura aquosa remanescente foi basificada com hidrogenocarbonato de sódio saturado, extraída três vezes com diclorometano e os extractos combinados secos passando através de um cartucho de separação de fases, em seguida evaporados para dar 75 mg de material que foi recristalizado de éter/éter de petróleo produzindo o composto em epígrafe como um sólido, 54 mg. RMN de XH (CDC13) : δ 4, 92 1 (2 H, s), 4,59 (1H, m), 4,10 (3 H, S), 3,99 (3H, m), 3,38 (3H, , m) , 3,25 (1H, m), 1,93-1,37 (11H, m), 1,37-1,23 i ;1H, m), 0,96 (3 H, t) . 176

Intermediário 88: N2-Butil-8-(metoxi)-9-[2-(tetra-hidro-3 furanil)etil]-9H-purina-2,6-diamina

Uma mistura de sal de ácido trifluoroacético de J^-butil-S-metoxi-9fí-purina-2,6-diamina (200 mg) e carbonato de potássio (236 mg) em DMF seca (2 mL) foi aquecida a 60 °C sob agitação durante 1 h. Foi adicionado 3-(2-bromoetil)tetra-hidrofurano, Intermediário 83 (123 mg) e a reacção continuou durante 2 h a 60 °C. A mistura foi desactivada com água e extraida com AcOEt (X 3) . Os orgânicos combinados foram lavados com água e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secos utilizando um filtro poroso hidrófobo e evaporados até um óleo (261 mg). Este material foi purificado por cromatografia flash (sílica, 5-20% de metanol:acetato de etilo) e as fracções apropriadas combinadas e evaporadas para dar o composto em epígrafe, rendimento 181 mg. MS calculado para (Ci6H26N602)+ = 334 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ =335 RMN de ΧΗ (CDC13) : δ 4,96 (2H, s), 4,60 (1H, t.l), 4,10 (3H, s), 3,88 (4H, m) , 3,73 (1H, m), 3,38 (3H, m), 2,12 (1H, m), 1,85 (3H, m), 1,57 (3H, m), 1,41 (2H, m), 0,95 (3H, t). 177

Intermediário 89 e Intermediário 90: Enantiómeros de 2-butoxi-8-metoxi-9-(tetra-hidrofuran-3-ilmetil)-9fl-purin-6-amina

2-Butoxi-8-metoxi-9-(tetra-hidrofuran-3-ilmetil)-9H-purin-6-amina (0,5 g) foi separada nos respectivos enantiómeros utilizando uma coluna Chiralpak AD l"x25 cm, eluindo com heptano:IPA 90:10. As fracções contendo o material que elui mais depressa foram combinadas e evaporadas até um sólido para produzir o isómero 1, Intermediário 89, 176 mg. MS calculado para (C15H23N5O3)+ = 321 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 322 RMN de (CDCIs) : 5,20 (2H, s), 4,28 (2H, t), 4,13 (3H, s), 4,01-3,89 (3H, m com sobreposição), 3,77 (2H, m), 3,64 (1H, m), 2,85 (1H, m), 1,97 (1H, m), 1,81-1,67 (3H, m com sobreposição), 1,50 (2H, m), 0,96 (3H, t) .

As fracções contendo o material que elui mais devagar foram combinadas e evaporadas até um sólido para produzir o isómero 2, Intermediário 90 178 mg. MS calculado para (C15H23N5O3)+ = 321 178 322 MS encontrado (electrospray): (M+H) RMN de ΧΗ (CDC13) : 5,15 (2H, s), 4,27 (2H, t), 4,13 (3H, s), 4, 01- -3,89 (3H, m com sobreposição), 3,77 (2H, m), 3,64 (1H, m), 2,85 (1H, m), 1,97 (1H, m), 1,81-1,67 (3H, m com sobreposição), 1, 50 (2H, m), 0,96 (3H, t) .

Intermediário 89, processo alternativo: 2-(Butiloxi)-8-(metiloxi)-9-(tetra-hidro-3-furanilmetil)-9H-purin-6-amina (Isómero 1)

Uma mistura, mantida sob agitação, de sal de ácido trifluoroacético de W2-butil-8-metoxi-9H-purina-2,6-diamina (3,25 g) e carbonato de potássio (3,83 g) em N,N-dimetilformamida seca (30 mL) foi aquecida sob agitação a 60 °C durante 1 h. Foi adicionado metanossulfonato de tetra-hidro-3-furanilmetilo (2 g, Isómero 1) e a mistura, mantida sob agitação, aquecida a 90 °C durante 3 h. O solvente foi evaporado, foi adicionada água e a mistura extraída três vezes com acetato de etilo. Os extractos combinados foram lavados com água, em seguida com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secos passando através de um filtro poroso hidrófobo e removidos para dar um sólido cor de laranja. Este foi purificado por cromatografia de fase inversa em Ci8 utilizando água (0,1% de ácido fórmico)-acetonitrilo (0,05% de ácido fórmico) como eluente (20-60%) e as fracções apropriadas combinadas e 179 evaporadas para dar o composto em epígrafe como um sólido cor de laranja claro, rendimento 1,56 g. MS calculado para (C15H23N5O3)+ = 321 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 322

Intermediário 90, processo alternativo: 2-(Butiloxi)-8-(metoxi)-9-(tetra-hidro-3-furanilmetil)-9H-purin-6-amina (Isómero 2)

Uma mistura, mantida sob agitação, de sal de ácido trifluoroacético de N2-butil-8-metoxi-9íí-purina-2,6-diamina (3,25 g) e carbonato de potássio (3,83 g) em N,N-dimetilformamida seca (30 mL) foi aquecida sob agitação a 60 °C durante 1 h. Foi adicionado metanossulfonato de tetra-hidro-3-furanilmetilo (2 g, Isómero 2) e a mistura, mantida sob agitação, aquecida a 90 °C durante 3 h. O solvente foi evaporado, foi adicionada água e a mistura extraída três vezes com acetato de etilo. Os extractos combinados foram lavados com água, em seguida com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secos passando através de um filtro poroso hidrófobo e removidos para dar um sólido cor de laranja. Este foi purificado por cromatografia de fase inversa em Ci8 utilizando água (0,1% de ácido fórmico)-acetonitrilo (0,05% de ácido fórmico) como eluente (20-60%) e as fracções apropriadas combinadas e 180 evaporadas para dar o composto em epígrafe como um sólido cor de laranja claro, rendimento 2,2 g. MS calculado para (C15H23N5O3)+ = 321 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 322

Intermediário 91: 2-{ [2-(Etiloxi)etil]oxi}-9-(tetra-hidro- 2ff-piran-2-il) -9A-purin-6-amina

A uma solução, mantida sob agitação, de t.butóxido de potássio (9,3 g, 82,8 mmol) em l-etoxi-2-etanol (70 mL) foi adicionada 2-cloro-9-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-amina (7 g, 27,6 mmol). A mistura foi aquecida a 80-90 °C durante 2 h. A maior parte do solvente foi removida por evaporação sob pressão reduzida. O resíduo foi partilhado entre água e diclorometano. A camada de diclorometano foi separada, concentrada para dar um sólido castanho claro, o qual foi lavado com éter de petróleo e seco in vacuo (7,8 g, 92%). RMN de ΧΗ (CDCI3) : 7,86 (1H, s), 6 ,0-5,8 (2 H, s D, 5,61 (1H, d), 4, 49 (2 H, m), 4,3-4 ,1 (1H, m), 3,80 (2 H, t) , 3, 8-3, 7 (1H, m), 3,60 i (2 H, t), 2,15-1, ,9 (3H, m), 1,85-1,55 ( 3H, m) , 1,23 (3 H, t) . Picos de impurezas a 3,75, 3,55, 1,2, 0,85. 181

Intermediário 92: 8-Bromo-2-{[2-(etiloxi)etil]oxi}-9 (tetra-hidro-2fl-piran-2-il)-9fl-purin-6-amina

A uma solução, mantida sob agitação, de 2-{[2-(etiloxi)etil]oxi}-9-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-amina (7,8 g, 25,4 mmol) em diclorometano (100 mL) e foi adicionada NBS (5 g, 27,9 mmol) sob agitação. Após 2 h, o solvente foi removido. O produto foi purificado através de uma coluna de sílica utilizando éter de petróleo: acetato de etilo 2:1 como eluente, o qual era um sólido amarelo pálido (7,8 g, 79,6%) . RMN de ΧΗ (CDC13) : 5,9-5,7 (2H, s.l), 5,57 (1H, d), 4,55-4,4 (2 H, m), 4,2-4,1 (1H, m), 3,78 (2H, t), 3,75-3,6 (1H, m), 3,58 (2 H, q), 2,9-3,1 (1H, m), 2,15-2,0 (1H, m), 1,9-1,5 (4H, m), 1,21 (3H, t) . 182

Intermediário 93: 2-{ [2-(Etiloxi)etil]oxi}-8-(metiloxi)-9- (tetra-hidro-2ff-piran-2-il) -9ff-purin-6-amina

Sódio (1,25 g, 54,4 mmol) foi dissolvido em metanol 40 mL). ApÓS 10 min foi adicionada 8-bromo-2-{[2- (etiloxi)etil]oxi}-9-(tetra-hidro-2ií-piran-2-il)-9H-purin-6-amina (7 g, 18 mmol) sob agitação. A mistura foi aquecida a refluxo durante 2 h. 0 solvente foi removido. 0 resíduo numa coluna de sílica utilizando DCM: MeOH 100:1 como eluente para dar o produto como um sólido amarelo (4,78 g, 78,4%). RMN de ΧΗ (CD3OD) : 5,6-5,5 (1H, m), 4,55-4,4 (2H, m), 4,18 (3 H, s), 4,15-4,05 (1H, m), 3,9-3,8 (2H, 2xm), 3,8-3,7 (1H, m), 3,7-3,6 (2H, q), 2,9-2,75 (1H, m), 2,15-2,05 (1H, m), 1,9-1,55 (4H, m), 1,25 (3H, t). Não foram observados os protões permutáveis. 183

Intermediário 94: Sal de ácido trifluoroacético de 2-{\2 (etiloxi) etil] oxi }-8- (metiloxi) -lff-purin-6-amina NH.

2-{[2-(Etiloxi)etil]oxi}-8-(metiloxi)-9-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-amina (4,78 g, 14,2 mmol) foi dissolvida em MeOH (30 mL) e foi adicionado TF A (7,5 mL) sob agitação a 0 °C. A mistura foi deixada em repouso à temperatura ambiente durante 1 dia. Formou-se um sólido branco. O sólido foi filtrado e lavado com acetato de etilo e seco in vacuo. Isto deu produto (4 g, 80,5%). RMN de XH (CD30D): 4,6-4,55 (2H, m), 4,15 (3H, s), 3,85-3,75 (2H, m), 3,37 (2 H, q), 1,18 (3 H, d). Não foram observados os protões permutáveis. 184

Intermediário 95: 2-(2-Etoxietoxi)-8-metoxi-9-(tetra-hidro 2fl-piran-4-ilmetil)-9fl-purin-6-amina

A uma solução de sal de ácido trifluoroacético de 2-[2-(etiloxi) etil] oxi-8-(metoxi)-9fí-purin-6-amina (500 mg) em N,N-dimetilformamida seca (4,5 mL) à temperatura ambiente e sob azoto foi adicionado carbonato de potássio (0,75 g) de uma única vez. A reacção foi agitada a 60 °C durante 1,5 horas. Foi adicionado metanossulfonato de tetra-hidro-2fí-piran-4-ilmetilo (0,29 g) numa porção e a reacção aquecida a 90 °C durante 3 horas. A reacção foi arrefecida até à temperatura ambiente e em seguida diluída com acetato de etilo (20 mL) e lavada com água (15 mL). A camada orgânica foi seca sobre sulfato de magnésio, filtrada e concentrada in vacuo. O produto foi purificado por cromatografia de fase inversa em Ci8 utilizando água (contendo 0,1% de ácido fórmico)-acetonitrilo (contendo 0,05% de ácido fórmico) como eluente (10-45%) para proporcionar o composto em epígrafe como um sólido branco (240 mg). MS calculado para (C16H25N5O4)+ = 351 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 352 RMN de XH ( (CD3) 2SO) : δ 6,81 (2H, s), 4,27 (2H, m) , 4,05 (3H, s), 3,81 (2 H, m), 3,73 (2H, d), 3,64 (2H, m), 3,48 (2H, q), 185 3,22 (2Η, m), 2,01 (1H, m), 1,41 (2H, m) , 1,23 (2H, m), 1,12 (3H, t) .

Intermediário 96: 2-{[2-(Etiloxi)etil]oxi}-8-(metoxl)-9- (tetra-hidro-2fl-piran-3-ilmetil) -9#-purin-6-amina

A uma solução de sal de ácido trifluoroacético de 2-{[2-(etiloxi)etil]oxi}-8-(metoxi)-9H-purin-6-amina (500 mg) em N, N-dimetilformamida seca (6,0 mL) à temperatura ambiente e sob azoto foi adicionado carbonato de potássio (0,75 g) de uma única vez. A reacção foi agitada a 60 °C durante 1,5 horas. Foi adicionada uma solução de metanossulfonato de tetra-hidro-2H-piran-3-ilmetilo (0,29 g) em N,N-dimetilformamida seca (1,0 mL) de uma vez e a reacção aquecida a 90 °C durante 2 horas. A reacção foi arrefecida até à temperatura ambiente e em seguida diluida com acetato de etilo (20 mL) e lavada com água (10 mL) . A camada orgânica foi concentrada in vácuo. O produto foi purificado por cromatografia de fase inversa em Ci8 utilizando água (contendo 0,1% de ácido fórmico)-acetonitrilo (contendo O, 05% de ácido fórmico) como eluente (10-60%) para proporcionar o composto em epígrafe como um óleo viscoso transparente que cristaliza à temperatura ambiente (245 mg). MS calculado para (C16H25N5O4)+ = 351 186 352 MS encontrado (electrospray): (M+H)

Intermediário 97: 2-{[l-Metil-2-(metoxi)etil]oxi}-9-(tetra-hidro-2fl-piran-2-il) -9il-purin-6-amina

A uma solução, mantida sob agitação, de t.butóxido de potássio (9,3 g, 82,8 mmol) em l-metoxi-2-propanol (70 mL) foi adicionada 2-cloro-9- (tetra-hidro-2£f-piran-2-il) -9H-purin-6-

amina (7 g, 27,6 mmol). A mistura foi aquecida até 80-90 °C durante 4 h. A maior parte do solvente foi removido por evaporação sob pressão reduzida. O resíduo foi partilhado entre água e diclorometano. A camada de diclorometano foi separada, concentrada para dar um óleo castanho (7,2 g, 84,7%). RMN de (CDC13) : 7,84 (1H, s), 5,8-5,55 (2H, s.l + 1H, m) , 5,45-5,3 (1H, m), 4,2-4,05 (1H, m) , 3,8-3,6 (2H, 2xm), 3,5-3,42 (1H, m), 3,40 (3 H, s), 2,1-1,9 (3H, m) , 1,8-1,55 (3H, m) , 1,35 (3H, dd). Picos de impurezas a 5,05, 3,38, 1,21, 1,12. 187

Intermediário 98: 8-Bromo-2-{[1-metil-2-(metoxi)etil]oxi}- 9- (tetra-hidro-2ff-piran-2-il) -9fi-purin-6-amina

A uma solução, mantida sob agitação, de 2-{[l-metil-2-(metoxi)etil]oxi}-9-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-amina (7,2 g, 23,4 mmol) em diclorometano (100 mL) foi adicionada NBS (4,6 g, 25,8 mmol). Após 4 h, o solvente foi removido. O produto foi purificado numa coluna de silica utilizando éter de petróleo: acetato de etilo 2:1 como eluente. Isto deu o produto (7,3 g, 81,1%) . RMN de (CDCls) : 5,9-5,65 (2H, s.l), 5, 65-5, 55 (1H, m), 5,4-5,2 (1H, m), 4,2-4,05 (1H, m), 3,8-3,6 (2H, m), 3,55-3,42 (1H, m), 3,40 (3H, 2Xs), 2,9-3,1 (1H, m), 2,15-2,0 (1H, m), 1,ΟΙ,5 (4H, m), 1,37 (3H, dd). 188

Intermediário 99: 2-{[1-Metil-2-(metoxi)etil]oxi}-8 (metoxi) -9- (tetra-hidro-2fí-piran-2-il) -9fí-purin-6-amina

Sódio (1,16 g, 50,5 mmol) foi dissolvido em metanol (40 mL) e adicionada 8-bromo-2-{[l-metil-2-(metoxi)etil]oxi}-9-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-amina (6,5 g, 16,8 mmol) sob agitação. A mistura foi aquecida a refluxo durante 2 h. O solvente foi removido por evaporação. O residuo foi purificado numa coluna de silica utilizando DCM: MeOH 150:1 como eluente. Isto deu produto (4,7 g, 82,9%). RMN de (CD3OD) : 5,6-5,5 (1H, m) , 5,4-5,3 (1H, m) , 4,20 (3 H, s), 4,2-4,1 (1H, m) , 3,8-3,6 (2H, 2Xm) , 3,6-3,5 (1H, m) , 3,45 (3 H, 2xs), 2,95-2,8 (1H, m), 2,2-2,05 (1H, m), 1,9-1,6 (4 H, m), 1,40 (3H, dd). Não foram observados os protões permutáveis. 189

Intermediário 100: Sal de ácido trifluoroacético de 2-{[l-metil-2-(metoxi)etil]oxi}-8-(metoxi)-9H-purin-6-amina

Intermediário 100: Sal de ácido trifluoroacético de

Foi adicionado TFA (7,5 mL) a uma solução de 2-{[l-metil-2-(metoxi)etil]oxi}-8-(metoxi)-9-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-amina (4,7 g, 13,9 mmol) em MeOH (30 mL) sob agitação. A mistura foi deixada repousar à temperatura ambiente durante 1 dia. Formou-se um sólido branco que foi filtrado e lavado com acetato de etilo. Isto deu o produto (3,7 g, 76,1%) RMN de ΧΗ (CD3OD) : 5,55-5,4 (1H, m), 4,16 (3H, s), 3,7-3,55 (2 H, m), 3,39 (3 H, s), 1,40 (3 H, d). Não foram observados os protões permutáveis.

Intermediário_101;_2-{ [1-Metil-2- (metoxi) etil] oxi}-8- (metoxi) -9- (tetra-hidro-2fí-piran-4-ilmetil) -9fí-pirin-6-amina NH.

A uma solução de sal de ácido trifluoroacético de 2-{[l-metil-2-(metoxi)etil]oxi}-8-(metoxi)-9H-purin-6-amina (500 mg) em N,N-dimetilformamida seca (4,5 mL) à temperatura 190 ambiente e sob azoto foi adicionado carbonato de potássio (0,75 g) de uma única vez. A reacção foi agitada a 60 °C durante 1,5 horas. Foi adicionado metanossulfonato de tetra-hidro-2íí-piran-4-ilmetilo (0,29 g) de uma vez e a reacção aquecida a 90 °C durante 3 horas. A reacção foi arrefecida até à temperatura ambiente e em seguida diluida com acetato de etilo (20 mL) e lavada com água (15 mL) . A camada orgânica foi seca sobre sulfato de magnésio, filtrada e concentrada in vacuo. O produto foi purificado por cromatografia de fase inversa em Ci8 utilizando água (contendo 0,1% de ácido fórmico)-acetonitrilo (contendo 0,05% de ácido fórmico) como eluente (10-45%) para proporcionar o composto em epígrafe como um óleo transparente viscoso (260 mg). MS calculado para (C16H25N5O4)+ = 351 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 352. RMN de XH ((CD3)2SO) : δ 6,77 ( 2H, s) , 5,16 (1H, m), 4, 05 (3 H, s), 3,81 ( 2H, m), 3, 72 ( 2H, d), 3,48 (2H, m), 3,28 (3 H, s), 3,22 (2 H, m), 2,01 (1H, m), 1,41 1 ;2H, m) , 1,24 (2 H, m), 1,21 (3H, d) . 191

Intermediário 102: 2-{[l-Metil-2-(metiloxi)etil]oxi}-8- (metoxi)-9-(tetra-hidro-2fl-piran-3-ilmetil)-9fl-purin-6-amina

A uma solução de sal de ácido trifluoroacético de 2-{ [1-metil-2-(metoxi) etil] oxi}-8-(metoxi) -9i7-purin-6-amina (500 mg) em Ν,Ν-dimetilformamida seca (6,0 mL) à temperatura ambiente e sob azoto foi adicionado carbonato de potássio (0,75 g) de uma única vez. A reacção foi agitada a 60 °C durante 1,5 horas. Foi adicionada uma solução de metanossulfonato de tetra-hidro-2H-piran-3-ilmetilo (0,29 g) em Ν,Ν-dimetilformamida seca (1,0 mL) de uma vez e a reacção aquecida a 90 °C durante 2 horas. A reacção foi arrefecida até à temperatura ambiente e em seguida diluída com acetato de etilo (20 mL) e lavada com água (10 mL) . A camada orgânica foi concentrada in vacuo. O produto foi purificado por cromatografia de fase inversa em Ci8 utilizando água (contendo 0,1% de ácido fórmico)-acetonitrilo (contendo 0,05% de ácido fórmico) como eluente (10-60%) para proporcionar o composto em epígrafe como um óleo viscoso transparente (300 mg). MS calculado para (Ci6H25N504) + = 351 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 352 192

Intermediário 103: (2-Ciclopropiletil)amina A uma solução 1,0 M de hidreto de alumínio e lítio em éter dietilico (40 mL) a 0 °C foi adicionado, gota a gota, ácido sulfúrico concentrado (1,09 mL) ao longo de 12 minutos. A reacção foi aquecida até à t.a. e agitada durante 1 hora. Foi adicionada, gota a gota, uma solução de ciclopropilacetonitrilo (1,06 g) em éter dietilico (5 mL) à reacção ao longo de 10 minutos. A reacção foi aquecida a refluxo durante 2 horas, arrefecida até 0 °C e desactivada com adição lenta de água. Foi adicionada uma solução de hidróxido de sódio (2 g) em água (18 mL) e a fase orgânica decantada do precipitado branco resultante. O precipitado foi lavado com éter dietilico (2x20 mL) . Os orgânicos combinados foram concentrados in vacuo (30 °C, 300 mbar) para proporcionar o composto em epígrafe como um óleo incolor (1,10 g). RMN de ( (CD3)2SO): δ 2,58 (2H, t) , 1,23 (2H, q) , 0,68 m), 0,36 (2 H, m), -0,01 (2 H, m) . Não foram observados os protões de NH2. 193

Intermediário 104: Ciclopentilmetilamina

nh2 A uma solução 1,0 M de hidreto de aluminio e litio em éter dietílico seco (27 mL) à t.a. foi adicionada uma solução de ciclopentanocarbonitrilo (2 g) em éter dietílico seco (10 mL), gota a gota, ao longo de 10 minutos. A solução púrpura foi agitada à t.a. durante 24 horas. A solução rosa resultante foi arrefecida até 0 °C e foi adicionada lentamente solução de hidróxido de sódio 5,0 M (10 mL) até a efervescência parar. A reacção foi filtrada do precipitado branco que se formou. O filtrado foi seco sobre sulfato de magnésio, filtrado e concentrado in vacuo (t.a., 200 mbar) para proporcionar o composto em epígrafe como um óleo transparente (1,6 g). RMN de :Η ( (CD3)2S0): δ 2,63 (2H, d), 1,92 (1H, m), 1,77 m) , 1,57 (4H, m), 1,18 (2 H, m) . Não foram observados os protões de NH2. 194

Intermediário 105: S-Bromo-N2-(ciclopentilmenthil)-9-(tetra-hidro-2fí-piran-4-ilmetil) -9fl-purina-2, 6-diamina

Uma solução de 2-cloro-9-(tetra-hidro-2H-piran-4-ilmetil)-9fí-purin-6-amina (150 mg) em ciclopentilamina (276 mg) foi aquecida no microondas a 170 °C durante dois minutos. A mistura reaccional foi concentrada in vacuo. Ao resíduo amarelo resultante em clorofórmio seco (2 mL) à temperatura ambiente, foi adicionada NBS (120 mg) de uma única vez. A reacção foi agitada à t.a. durante 10 minutos. Foi adicionado mais NBS (15 0 mg) e a reacção agitada durante mais 30 minutos à t.a. A reacção foi concentrada in vacuo e o produto foi purificado por cromatografia de fase inversa em Ci8 utilizando água (contendo 0,1% de ácido fórmico)-acetonitrilo (contendo 0,05% de ácido fórmico) como eluente (20-60%) para proporcionar o composto em epígrafe como um sólido branco (40 mg). MS calculado para (Ci7H25BrN60)+ = 409/410 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 410/411 195

Intermediário 106: N2-(Ciclo-hexilmetil)-9-(tetra-hidro-2fl- piran-4-ilmetil)-9ff-purina-2,6-diamina

Uma solução de 2-cloro-9-(tetra-hidro-2A-piran-4-ilmetil)-9fí-purin-6-amina (150 mg) em ciclo-hexilamina (363 uL) foi aquecida no microondas a 170 °C durante cinco minutos. A mistura reaccional em bruto foi submetida a cromatografia de fase inversa em Ci8 utilizando água (contendo 0,1% de ácido fórmico)-acetonitrilo (contendo 0,05% de ácido fórmico) como eluente (20-60%) para proporcionar um sólido branco (98 mg) . MS calculado para (Ci8H28N60)+ = 344 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 345 RMN de XH ((CD3)2SO) : δ 7,64 (1H, s), 6,54 (2H, s), 6,20 m), 3,84 ( 4H, m), 3, 21 (2H, m) , 3,08 (2H, m), 2,09 (1H, m), 1,52 (6H, m), 1,40 (2H, m), 1,30-1,10 (5 H, m) , 0,89 (2H, m) . 196

Intermediário 107: 8-Bromo-i\72-(ciclo-hexilmetil)-9-(tetra- hidro-2fí-piran-4-ilmetil) -9A-purina-2, 6-diamina NH,

A uma solução de N2-(ciclo-hexilmetil)-9-(tetra-hidro-2H-piran-4-ilmetil)-9fí-purina-2, 6-diamina (90 mg) em clorofórmio seco (1 mL) à temperatura ambiente foi adicionada NBS (46 mg) de uma única vez. A reacção castanha escura foi agitada à t.a. durante 1 hora. A reacção foi diluida com DCM (15 mL) e lavada com água (5 mL) . Os orgânicos foram feitos passar através de um filtro poroso hidrófobo e concentrados in vacuo. MS calculado para (Ci8H27BrN60)+ = 422/424 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 423/425

Intermediário 108: Tetra-hidro-2ff-piran-4-ilmetanol (

Foi adicionado, gota a gota, tetra-hidro-2H-piranocarboxilato de metilo (SC/143233, Aldrich) (5,0 g) em THF seco (10 mL) a uma solução arrefecida de hidreto de alumínio e 197 lítio 1 M em THF (32 mL), mantendo a temperatura abaixo de 10 °C. No final da adição, a exotérmica foi deixada ceder antes de se deixar aquecer a mistura reaccional até à temperatura ambiente. A reacção foi então agitada durante 2 horas. A reacção foi desactivada com água (2 mL) adicionada muito cuidadosamente e com arrefecimento, seguida de hidróxido de sódio 2 N (2 mL). À suspensão resultante foi então adicionada água (100 mL) e em seguida extraida com diclorometano (100 mL, 3 vezes). A camada orgânica foi separada, combinada e seca passando através de um filtro poroso hidrófobo. A orgânica foi evaporada sob pressão reduzida para dar um óleo móvel incolor que foi então colocado sob alto vácuo durante 30 minutos à temperatura ambiente. Isto deu o composto em epígrafe como um óleo móvel incolor (2,4367 g). RMN de (CDC13) : 4, 04-3, 96 (2H, m), 3, 54-3, 47 (2H, m), 3, 46-3,36 (2H, m), 1,82-1,61 (3H, m), 1, 57-1, 50 (1H, m), 1,40- 1,27 (2H, m)

Intermediário 109: 2,6-Dicloro-9-(tetra-hidro-2A-piran-4- ilmetil) -9il-purina

(2,44 g) e (25 mL). A

Uma mistura de tetra-hidro-2il-piran-4-ilmetanol 2,6-dicloropurina (1,97 g) foi dissolvida em THF seco 198 esta solução foi adicionada trifenilfosfina (5,51 g), seguida de azodicarboxilato de diisopropilo (4,14 mL) adicionado gota a gota. A temperatura da reacção foi mantida abaixo de 43 °C (foi necessário algum arrefecimento com um banho-maria). A reacção foi agitada, de um dia para o outro, à temperatura ambiente antes de ser desactivada com água (100 mL) e extraída para acetato de etilo (50 mL, duas vezes). A camada orgânica separada e combinada foi então lavada com água (100 mL). A camada orgânica foi separada e em seguida seca passando através de um filtro poroso hidrófobo, antes da evaporação sob pressão reduzida para dar um óleo viscoso amarelo pálido. O material foi parcialmente purificado por cromatografia sobre sílica (ISCO) utilizando 0-100% de acetato de etilo: ciclo-hexano. O produto desejado eluiu como dois picos. O pico 1 eluiu a 70% de acetato de etilo: ciclo-hexano. O pico 2 eluiu com 100% de acetato de etilo. A RMN (CD3OD) mostrou que ambos os lotes eram idênticos à excepção de que o segundo pico continha marginalmente mais óxido de trifenilfosfina como impureza.

Pico 1: RMN de XH (CD3OD): 8,56 (1H, s), 4,24-4,20 (2H, m), 3, 96-3, 90 (2H, m), 3, 42-3,33 (2H, m), 2,30-2,17 (1H, m), 1,55-1,34 (5H, m com sobreposição).

[7,69-7,52 (15H, m com sobreposição) - impureza de óxido de trifenilfosfina]. Composto em epígrafe:impureza de óxido de trifenilfosfina (1: 0,92). 199

Pico 2: RMN de XH (CD3OD) : RMN de XH (CD3OD) : 8,56 (1H, s), 4,24-4,20 (2H, m), 3, 96-3,90 (2H, m), 3, 42-3,33 (2H, m), 2,30- 2,17 (1H, m), 1,55-1,34 (5H, m com sobreposição).

[7, 69-7,52 (15H, m com sobreposição) - impureza de óxido de trifenilfosfina]. Composto em epígrafe:impureza de óxido de trifenilfosfina (1: 0,54).

Ambos os lotes foram combinados para dar o composto em epígrafe (3,0833 g, em bruto) e trifenilfosfina como impureza. MS calculado para (CnHi2Cl2 mO) + = 286, 288, 290 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 287, 289, 291

Intermediário_110 :_2-Cloro-9- (tetra-hidro-2ff-piran-4- ilmetil) -9íf-purin-6-amina

2, 6-dicloro-9- (tetra-hidro-2H-piran-4-ilmetil) -9ií-purina (3,08 g, contendo óxido de trifenilfosfina) foi aquecida com amónia 2 M em IPA (50 mL) a 50 °C, de um dia para o outro. A mistura reaccional foi então evaporada até à secura para dar um sólido amarelo. Este material (3,2089 g) foi recristalizado utilizando metanol (50 mL) e depois de arrefecer o sólido 200 resultante foi filtrado e lavado com metanol (5 mL) para dar o composto em epígrafe (1,5554 g). 0 filtrado foi evaporado e recristalizado de metanol (25 mL) e depois de arrefecer o sólido resultante foi filtrado para dar uma segunda colheita (0,2324 g) e era coerente com o primeiro lote por RMN e LCMS. RMN de XH (CD3OD) : 8,06 (1H, s), 4,10-4,05 (2H, m) , 3,96- 3,88 (2 H, m), 3,41-3,32 (2H, m) , 2,23-2,10 (1H, m), 1,53-1,45 (2H, m), 1,43-1,30 (2H, m) (troca de NH2) . MS calculado para (C11H14CIN5O)+ = 267, 269 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 268, 270

Intermediário 111: 2-[(2-Metilpropil)oxi]-9-(tetra-hidro- 2fí-piran-4-ilmetil) -9ff-purin-6-amina

Foi adicionada 2-cloro-9-(tetra-hidro-2fí-piran-4-ilmetil)-9i7-purin-6-amina (0,20 g) a uma suspensão de 2-metil-l-propanol (2 mL) e terc-butóxido de sódio (0,288 g). A mistura foi aquecida num microondas durante 30 minutos a 105 °C. A mistura reaccional foi lavada com água de pois de diluir com acetato de etilo (50 mL) . A orgânica foi separada e seca passando através de um filtro poroso hidrófobo, antes dos voláteis terem sido 201 levados sob pressão reduzida para dar um sólido rosado. Este material foi triturado com éter dietilico e filtrado para dar o composto em epígrafe como um sólido rosado (91,1 mg). RMN de XH ( (CD3)2S0) : 7,89 (1H, s), 7,14 (2H, s largo), 4, 02-3, 90 (4H, m), 3, 85-3,76 (2H, m), 3,31-3,13 (2H, m), 2,15-1,92 (2H, m com ligeira sobreposição), 1,43-1,35 (2H, m), 1,29-1,16 (2H, m), 1, 00-0, 92 (6H, m). MS calculado para (C15H23N5O2)+ = 305 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 306

Intermediário 112: 8-Bromo-2-[(2-metilpropil)oxi]-9-(tetra-hidro-2fí-piran-4-ilmetil) -9fl-purin-6-amina

2-[(2-Metilpropil)oxi]-9-(tetra-hidro-2H-piran-4-ilmetil)-9ií-purin-6-amina (88 mg) foi dissolvida em ácido acético glacial (1,5 mL) antes de ser adicionado acetato de sódio (355 mg). O anterior foi então arrefecido num banho de gelo, antes do bromo (0,2 mL) que foi adicionado gradualmente. A mistura reaccional foi aquecida até à temperatura ambiente antes de ser aquecida a 70 °C (temperatura externa) durante 4 horas. A mistura reaccional foi desactivada com solução de tiossulfato de sódio a 202 10% (p/v) (até uma cor amarela pálida sem mais alteração) e em seguida o pH foi ajustado a 6-7 pela adição de hidróxido de sódio 2 M. Esta foi então extraída para acetato de etilo (20 mL, 3 vezes). A camada orgânica foi separada, combinada e seca passando através de um filtro poroso hidrófobo. A camada orgânica foi evaporada sob pressão reduzida e em seguida submetida a evaporação azeotrópica com tolueno para dar o composto em epígrafe como um sólido amarelo pálido (0,10 g).

Este material foi então utilizado na etapa seguinte sem necessidade de purificação RMN de (CD3OD) : 4,11-4,07 (2H, m), 4, 05- -4,01 (2 H, m), 3, 96-3, 86 (2 H, m), 3, 40-3,25 (2 H, m) (ligeiramente tapado por protões residuais de CHD2OD), 2,29-2,16 (1H, m), 2,14-2,00 (1H, m), 1,55-1,37 ( 4H, m), 1, 06-0, 90 (6H, m) (troca de NH2) . MS calculado para (Ci5H22BrN502)+ = 383, 385 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 384, 386 203

Intermediário 113: 2-[(2-Ciclopropiletil)oxi]-8-(metiloxi) 9- (tetra-hidro-2fí-piran-4-ilmetil) -9ff-purin-6-amina

0 sal de ácido trifluoroacético de 2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-8-metoxi-9H-purin-6-amina (0,30 g) foi aquecido com carbonato de potássio (anidro, 0,46 g) em DMF anidra (5 mL) a 60 °C durante 1 hora. A reacção foi arrefecida até à temperatura ambiente, antes de ter sido adicionado 4-(bromometil)tetra-hidro-2H-pirano (0,16 g) em DMF anidra (1 mL). A mistura reaccional foi então aquecida até 50 °C, de um dia para o outro. A reacção foi desactivada em água (50 mL) e extraída com acetato de etilo (50 mL, 3 vezes). A camada orgânica foi combinada e lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio (50 mL) . A camada orgânica foi separada e seca passando através de um filtro poroso hidrófobo antes de ser evaporada sob pressão reduzida para dar um óleo) . Este material foi purificado por cromatograf ia de fase inversa em Ci8 utilizando água (contendo 0,1% de ácido fórmico)-acetonitrilo (contendo 0,05% de ácido fórmico) como eluente (20-60%). Este material foi purificado por cromatografia de fase inversa (20 - 60% de acetonitrilo: água). Isto deu o composto em epígrafe como um sólido branco (0,1279 g). RMN de XH (CDC13) : 5,14 (2H, s largo), 4,39-4,32 (2H, m), 4,12 (3 H, m), 4, 00-3, 92 (2H, m) , 3,85-3,79 (2H, m), 2,19-2,07 204 (1Η, m), 1,80-1,62 (representando 2H, m [água subjacente]), 1, 54-1,34 (4H, m), 0,91-0,81 (1H, m), 0,91-0,81 (2H, m), 0,50- 0,08 (2H, m), 0,14-0,08 (2H, m). MS calculado para (C17H25N5O3)+ = 347 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 348

Intermediário 114:_2-[(Ciclo-hexilmetil)oxi]-9-(tetra- hidro-2il-piran-2-il) -9fl-purin-6-amina

Ciclo-hexilmetanol (4,5784 g) foi diluído com 1,2-dimetoxietano (+ de 99%) 1 ;20 mL) antes de ter sido adicionado gradualmente terc-butóxido de sódio (3,853 g) sob agitação sob azoto. Foi observada uma exotérmica ao adicionar o terc-butóxido de sódio. Foi adicionada 2-cloro-9-(tetra-hidro-2ií-piran-2-il)-9il-purin-6-amina (2, 5428 g) e a mistura resultante foi aquecida a refluxo a 93 °C (internos). Foi adicionada uma quantidade adicional de 1,2-dimetoxietano (+ de 99%) (20 mL) para ajudar a dissolução e aquecido a refluxo, de um dia para o outro. A mistura reaccional foi dissolvida em água (100 mL) e extraída com acetato de etilo (100 mL, duas vezes) . Os extractos orgânicos combinados foram lavados com solução aquosa saturada de cloreto de sódio (100 mL) antes de a camada orgânica ter sido separada e seca passando através de um filtro 205 poroso hidrófobo. Os voláteis foram evaporados sob pressão reduzida e em seguida submetidos a evaporação azeotrópica com tolueno (50 mL, duas vezes) para dar um óleo âmbar móvel. Este material foi purificado por cromatografia sobre sílica (ISCO) eluindo com 0 - 100% de acetato de etilo: ciclo-hexano) . Isto deu o composto em epígrafe, depois de ter sido colocado sob vácuo, como uma espuma amarela pálida (1,0364 g) (94% de pureza por LCMS, 6% de 2-cloro-9-(tetra-hidro-2fí-piran-2-il) -9i7-purin-6-amina) e foi utilizada no passo seguinte sem mais purificação. RMN de (CDC13) : 7,85 (1H, s), 5,69-5,61 (1H, m) , 5,45 (2H, s largo), 4,20-4,07 (3H, m com sobreposição), 3,82-3,72 (1H, m), 2,14-1,59 (12H, m com sobreposição), 1,36-1,01 (5H, m com sobreposição). MS calculado para (C17H25N5O2)+ = 331 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 332

Intermediário 115: 8-Bromo-2-[(ciclo-hexilmetil)oxi]-9- (tetra-hidro-2i7-piran-2-il) -9f7-purin-6-amina

2- [ (Ciclo-hexilmetil) oxi] -9- (tetra-hidro-2fí-piran-2-il) -9H-purin-6-amina (1,0364 g) foi dissolvida em clorofórmio (20 mL) e 206

arrefecida até 0 °C, antes de ter sido gradualmente adicionada N-bromossuccinimida (0,5852 g) (não excedendo a temperatura de reacção 1,9 °C durante a adição de N-bromossuccinimida). A mistura reaccional foi agitada a ~2 °C durante 15 minutos antes de ser aquecida até à temperatura ambiente, a qual foi agitada durante 6 horas (sob azoto). Foi adicionada água (100 mL) à mistura reaccional e agitada rapidamente, antes da camada orgânica ter sido separada utilizando um filtro poroso hidrófobo. A fase orgânica foi evaporada sob pressão reduzida para dar um óleo castanho-escuro. Este material foi purificado por cromatografia sobre silica eluindo com 0 - 50% de acetato de etilo; ciclo-hexano para dar o composto em epígrafe como um sólido amarelo pálido (0,8200 g). RMN de XH (CDC13): 5,64-5,58 (1H, m), 5,50-5,37 (2H, s largo), 4, 20-4, 06 (3H, m com sobreposição), 3, 75-3, 66 (1H, m), 3, 09-2, 97 (1H, m), 2,15-2,06 (1H, m), 1,93-1, 57 (10H, m com sobreposição), 1,35-1,01 (5H, m com sobreposição). MS calculado para (Ci7H24BrN502)+ = 409, 411 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 410, 412 207

Intermediário 116: 2-[(Ciclo-hexilmetil)oxi]-8-(metoxi)-9- (tetra-hidro-2fl-piran-2-il) -9ff-purin-6-amina

8-Bromo-2-[(ciclo-hexilmetil)oxi]-9-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-amina (0,8151 g) foi aquecida a refluxo com metóxido de sódio a 30% (p/v) em metanol (1,1 mL) diluído com metanol anidro (6,0 mL) . A suspensão foi aquecida a refluxo (70 °C externos), de um dia para o outro. A reacção foi partilhada entre acetato de etilo (50 mL) e solução aquosa saturada de cloreto de amónio (50 mL) . A camada orgânica foi separada e a camada aquosa foi reextraída com acetato de etilo (50 mL) . As camadas orgânicas foram combinadas e lavadas com solução aquosa saturada de cloreto de sódio (50 mL) e separadas, antes de terem sido depois secas passando através de um filtro poroso hidrófobo. A evaporação sob pressão reduzida deu o composto em epígrafe em bruto como uma espuma (0,7132 g) utilizada sem purificação. RMN (CDC13) coerente, mas mistura de mais do que um composto. MS calculado para (C18H27N5O3)+ = 361 observado com outros iões parentais (e. g., 404) MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 362 208

Intermediário 117: Sal de trifluoroacetato de 2-[(ciclo-hexilmetil) oxi] -8- (metiloxi) -9ff-pirin-6-amina

2-[(Ciclo-hexilmetil)oxi]-8-metoxi-9-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-9fí-purin-6-amina (0,7132 g, em bruto) foi dissolvida em metanol (5 mL). A esta solução foi adicionado ácido trifluoroacético puro (0,5 mL). A mistura reaccional foi agitada à temperatura ambiente ambiente durante 18 horas. O solvente foi evaporado sob pressão reduzida e o residuo triturado com acetato de etilo (50 mL) . O sólido branco resultante foi filtrado, lavado utilizando éter dietilico (10 mL) e em seguida seco sob sucção. Isto deu o composto em epígrafe limpo como um sólido branco (0,2799 g) . RMN de (CD3OD) : 4,29-4,24 (2H, m) , 4,14 (3H, s), 1,89-1,66 (6H, m com sobreposição), 1,39-1, 03 (5H, m com sobreposição) [NH2 e NH de N-9 são trocados]. MS calculado para (C13H19N5O2)+ = 277 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 278 209

Intermediário 118: 2-[(Ciclo-hexilmetil)oxi]-8-(metoxi)-9 (tetra-hidro-2fí-piran-4-ilmetil) -9ff-purin-6-amina

0 sal de trifluoroacetato de 2-[(ciclo-hexilmetil)oxi]-8-(metoxi)-9fí-purin-6-amina (0,28 g) foi aquecido com carbonato de potássio anidro (0,3957 g) em DMF anidra (5 mL) sob azoto durante 1 hora a 60 °C (externos) . A mistura reaccional foi arrefecida até à temperatura ambiente antes de ser adicionado 4-(bromometil)tetra-hidro-2H-pirano (0,14 g) em DMF anidra (1 mL) . A mistura reaccional foi aquecida até 50 °C, de um dia para o outro. A mistura reaccional foi desactivada em água (20 mL) e extraída para acetato de etilo (20 mL, 3 vezes). As camadas orgânicas foram separadas, combinadas e em seguida lavadas com solução aquosa saturada de cloreto de sódio (20 mL) . A camada orgânica foi separada e em seguida seca passando através de um filtro poroso hidrófobo. A evaporação sob pressão reduzida deu um óleo amarelo pálido que solidificou em repouso. Este foi purificado por cromatografia de fase inversa em Ci8 utilizando água (contendo 0,1% de ácido fórmico)-acetonitrilo (contendo 0,05% de ácido fórmico) como eluente (30-80%) para dar o composto em epígrafe como um sólido branco (0,1677 g). RMN de (CDC13) : 5,11 (2H, s), 4,11 (3H, s), 4,10-4,06 (2 H, m), 3,99-3,91 (2H, m), 3, 85-3, 79 (2H, m), 3,38-3,29 (2H, 210 m), 2,19-2,06 (1H, m), 1, 94-1, 63 (representando 5H, sobreposição de água), 1, 54-1, 00 (1 OH, m com sobreposição). MS calculado para (C19H29N5O3)+ = 375 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 376

Intermediário 119: 2-{[2-(Metoxi)etil]oxi}-9-(tetra-hidro- 2fí-piran-2-il)-9ff-purin-6-amina (Método A)

2-Metoxietanol (3,2 mL) foi diluído com 1,2-dimetoxietano (20 mL) . A este foi gradualmente adicionado terc-butóxido de sódio (3,9 g) e a mistura reaccional foi agitada sob azoto até ser homogénea. Foi então adicionada 2-cloro-9-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-amina (2,5376 g) à mistura reaccional, seguida de 1,2-dimetoxietano (20 mL) . A mistura reaccional foi então aquecida a refluxo (110 °C, externos), de um dia para o outro. A reacção foi desactivada com água (100 mL) e extraída com acetato de etilo (100 mL, duas vezes) . As camadas orgânicas combinadas foram então lavadas com solução aquosa saturada de cloreto de sódio (100 mL) . A camada orgânica foi então seca passando através de um filtro poroso hidrófobo e em seguida evaporada sob pressão reduzida (seguida de evaporação azeotrópica com tolueno (100 mL, duas vezes)). Isto deu um óleo âmbar que, sob alto vácuo, deu uma espuma gomosa. Este material 211 foi triturado com éter dietílico (com arrefecimento) até isto dar o composto em epígrafe, um sólido amarelo pálido. RMN de XH (CDC13) : 7,86 (1H, s), 5, 66-5,59 (1H, m) , 5,47 (2 H, s largo), 4, 54-4, 46 (2H, m), 4,19-4,10 (1H, m), 3,80-3,65 (3H, m com sobreposição), 3,43 (3H, s), 2,13-1,93 (3H, m com sobreposição), 1,81-1,58 (representando 3H, m com sobreposição, [sobreposição de água]). MS calculado para (Ci3H19N503)+ = 293 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 294

Intermediário 119: 2-{[2-(Metoxi)etil]oxi}-9-(tetra-hidro- 2ff-piran-2-il)-9ff-purin-6-amina (Método B)

Foi adicionado terc.-butóxido de potássio (46,5 g, 475 mmol) a 2-metoxietanol (200 mL) em 20 min à temperatura ambiente, em seguida foi adicionada 2-cloro-9-(tetra-hidro-2fí-piran-2-il)-9il-purin-6-amina (30 g) e a mistura resultante foi aquecida a 80-90 °C durante cerca de 3 h. Evaporação da maior parte do solvente, ao resíduo foram adicionados 100 mL de água, agitados durante 1 h a 0 °C, filtrados e secos. Isto deu produto 212 (30 g, 87%) que era quase idêntico ao do Intermediário 119, método A. RMN de XH (CDC13) : 7,84 (1H, s), 5, 66-5, 59 (1H, m) , 4,48 (2H, t), 4,18-4,08 (1H, m), 3, 80-3,65 (3H, m com sobreposição), 3,43 (3H, s), 2,1-1,85 (3H, m), 1,80-1,55 (3H, m).

Intermediário_120 :_8-Bromo-2-{ [2 - (metoxi) etil] oxi}-9- (tetra-hidro-2-il) -9fí-purin-6-amina

2-{ [2- (Metoxi) etil] oxi}-9- (tetra-hidro-2tf-piran-2-il) -9H-purin-6-amina (1,61 g) foi dissolvida em clorofórmio (20 mL) e arrefecida até 0 °C. A esta solução foi então gradualmente adicionada N-bromossuccinimida (1,02 g), mantendo a temperatura a ~2 °C. A reacção foi agitada a 2 °C durante cerca de 15 minutos antes de ser deixada aquecer até à temperatura ambiente. A mistura reaccional foi então agitada sob azoto durante 5 horas. A mistura reaccional foi desactivada com água (100 mL) e agitada rapidamente, antes da camada orgânica ter sido separada utilizando um filtro poroso hidrófobo. A orgânica foi evaporada sob pressão reduzida para dar uma goma castanha 213 escura. Este material foi purificado por cromatografia sobre sílica (ISCO) eluindo inicialmente com 0 - 70% de acetato de etilo: ciclo-hexano, mantendo isocrático a 70% de acetato de etilo; ciclo-hexano até ter sido eluída uma impureza minoritária. O gradiente foi então retomado de 70% - 95% de acetato de etilo: ciclo-hexano. Isto deu o composto em epígrafe como um sólido branco (1,4489 g) RMN de 1H (CDC13) : 5, 65-5,56 (1H, m) 5,44 (2H, s largo), 4,52-4, 43 (2H, m), 4,20-4,12 (1H, m), 3, 79-3, 65 (3 H, m com sobreposição), 3,43 (3H, s), 3, 09-2, 96 (1H, m), 2,14-2,03 (1H, m), 1,89-1,56 (representando 4H, m com sobreposição, [água subjacente]). MS calculado para (Ci3Hi8BrN503)+ = 371, 373 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 372, 374

Intermediário 121: 8-(Metoxi)-2-{[2-(metiloxi)etil]oxi}-9- (tetra-hidro-2fl-piran-2-il)-9ff-purin-6-amina NH.

8-Bromo-2- { [2 - (metoxi) etil ] oxi } - 9- (tetra-hidro-2fí-piran-2-il) -9f7-purin-6-amina (1, 4489 g) foi suspensa em metanol seco (11,5 mL) e em seguida tratada com metóxido de sódio a 25% (p/v) em metanol (2,5 mL). A mistura reaccional foi aquecida a refluxo 214 (65 °C, externamente) tendo sido obtida uma solução. Após 4 horas, a mistura reaccional foi concentrada sob pressão reduzida e foi adicionado cloreto de amónio aquoso saturado (100 mL) . Esta foi então extraída com acetato de etilo (100 mL, duas vezes). As camadas orgânicas foram separadas, combinadas e lavadas com solução aquosa saturada de cloreto de sódio (100 mL) . A camada orgânica foi separada e em seguida seca passando através de um filtro poroso hidrófobo. Esta foi então evaporada sob pressão reduzida para dar o composto em epígrafe como um sólido branco (1,2032 g) depois de ter sido colocado sob alto vácuo, de um dia para o outro. RMN de 1H (CDC13) : 5,53-5,45 (1H, m), 5,16 (2H, s largo), 4,50-4, 40 (2h, m), 4,16-4,40 (1H, m) com sobreposição de 4,12 (3H, s), 3,80-3,62 (3H, m com sobreposição), 3,43 (3H, s), 2,83-2,69 (1H, m), 2, 05-1, 99 (1H, m), 1,82-1,51 (4H, m com sobreposição). MS calculado para (C14H21N5O4)+ = 323 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 324

Intermediário 122: Sal de trifluoroacetato de 8-(metoxi)-2-{ [2-(metoxi)etil]oxi}-9H-purin-6-amina

NH

F 215 8-(Metoxi)-2-{[2-(metiloxi)etil]oxi}-9-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-9fí-purin-6-amina (1,2032 g) foi dissolvida em metanol (10 mL), a qual foi tratada com ácido trifluoroacético puro (1 mL) e em seguida agitada durante 2 dias. A mistura reaccional foi evaporada sob pressão reduzida e o sólido resultante suspenso em acetato de etilo (25 mL) antes de ser filtrado para dar o composto em epígrafe (1,1310 g) como um sólido branco. RMN de 1ii ( (CD3) 2SO) : 7,50 (2H, s largo), 4, 42-4,34 (2H, m), 4,04 (3H, s) 3,67-3,61 (2H, m), 3,30 (3H, s) (não foi observado o protão N9). MS calculado para (C9H13N5O3)+ = 239 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 240

Intermediário 123: 8-(Metoxi)-2-{[2-(metiloxi)etil]oxi}-9-(tetra-hidro-2fl-piran-4-ilmetil)-9#-purin-6-amina NH.

O sal de trifluoroacetato de 8-(metoxi)-2-{[2-(metoxi)etil]oxi}-9A-purin-6-amina (0,30 g) foi aquecido com carbonato de potássio anidro (0,4698 g) em DMF anidra (5 mL) a 60 °C durante 1 hora. A mistura reaccional foi arrefecida até à 216 temperatura ambiente, antes de ter sido adicionado 4-(bromometil)tetra-hidro-2H-pirano (0,1669 g) em DMF anidra (1 mL) . A mistura reaccional foi então agitada, de um dia para o outro, a 50 °C. A mistura reaccional foi desactivada em água (20 mL) e extraída para acetato de etilo (20 mL, 3 vezes).

As camadas orgânicas separadas, combinadas foram então lavadas com solução aquosa saturada de cloreto de sódio (20 mL). A camada orgânica separada foi seca passando através de um filtro poroso hidrófobo antes de ser evaporada sob pressão reduzida para dar um óleo amarelo pálido que solidificou em repouso. Este foi purificado por cromatografia de fase inversa em Cie utilizando água (contendo 0,1% de ácido fórmico)-acetonitrilo (contendo 0,05% de ácido fórmico) como eluente (10— 45%) para dar o composto em epígrafe como um sólido branco (0,1454 g). RMN de ΧΗ (CDC13) : 5,12 (2H, s largo), 4,47-4,41 (2H, m), 4,12 (3H, s), 4,00-3,91 (2H, m), 3, 85-3, 73 (4H, m parcialmente com sobreposição), 3,43 (3H, s), 3, 38-3, 28 (2H, m) , 2,18-2,06 (1H, m), 1,53-1,33 (4H, m com sobreposição). MS calculado para (C15H23N5O4)+ = 337 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 338 217

Intermediário 124: 8-(Metoxi)-2-{[2-(metiloxi)etil]oxi}-9- (tetra-hidro-3-furanilmetil) -9ff-purin-6-amina

Intermediário 124: 8-(Metoxi)-2-{[2-(metiloxi)etil]oxi}-9- NH.

^—0 / \ O sal de trifluoroacetato de 8-(metoxi)-2-{ [2- (metoxi) etil] oxi}-9íí-purin-6-amina (0,30 g) foi dissolvido em DMF seca (5 mL) . A este foi adicionado carbonato de potássio anidro (0,47 g) e em seguida aquecido até 60 °C durante 1,5 horas. A mistura reaccional foi arrefecida até à temperatura ambiente e foi adicionado metanossulfonato de tetra-hidro-3-furanilmetilo (0,168 g). A mistura reaccional foi então aquecida até 90 °C durante 3,5 horas. A mistura reaccional foi então desactivada em água (100 mL) e extraída para acetato de etilo (50 mL, 3 vezes). A orgânica foi separada e seca passando através de um filtro poroso hidrófobo e em seguida evaporada sob pressão reduzida para dar um sólido vítreo. Este foi purificado por cromatograf ia de fase inversa em Ci8 utilizando água (contendo 0,1% de ácido fórmico)-acetonitrilo (contendo 0,05% de ácido fórmico) como eluente (10-45%) . Isto deu o composto em epígrafe como um sólido branco (0,1233 g). RMN de (CDC13) : 5,46 (2H, s largo), 4, 48-4,39 (2H, m), 4,12 (3H, s), 4,01-3,87 (3H, m com sobreposição), 3,79-3,70 (4H, m com sobreposição), 3,65-3,59 (1H, m), 3,43 (3H, s), 2,91-2,78 (1H, m), 2,02-1, 90 (1H, m), 1, 76-1, 64 (1H, m). MS calculado para (C14H21N5O4)+ = 323 218 324 MS encontrado (electrospray): (M+H)

Intermediário 125: 2-[(Tetra-hidro-2-furanilmetil)oxi]-9- (tetra-hidro-2fl-piran-2-il)-9fl-purin-6-amina

NH

Álcool tetra-hidrofurfurílico (4,09 g) foi diluído com 1,2-dimetoxietano (20 mL) . A esta solução foi gradualmente adicionado terc-butóxido de sódio (3,84 g) . A mistura reaccional resultante foi agitada até ficar homogénea (solução cor de laranja), antes de ter sido adicionada 2-cloro-9-(tetra-hidro-2fí-piran-2-il)-9H-purin-6-amina (2,53 g) . A mistura reaccional foi então aquecida até 110 °C (externos), de um dia para o outro, sob azoto. A mistura reaccional foi desactivada com água (100 mL) e extraída com acetato de etilo (100 mL, 3 vezes) . A camada orgânica foi separada, combinada e em seguida seca passando através de um filtro poroso hidrófobo. Esta foi evaporada sob pressão reduzida e o material resultante foi então purificado por cromatografia sobre sílica eluindo com 0 - 100% de acetato de etilo: ciclo-hexano seguido de metanol. Foi detectada uma falha na bomba ISCO durante a eluição com metanol, esta linha tinha anteriormente transportado acetato de etilo e não se sabia se a falha existia durante a eluição com acetato de etilo: ciclo-hexano. As fracções apropriadas foram evaporadas 219 para dar o composto em epígrafe como um sólido (1, 7258 g) . Este material foi utilizado na etapa seguinte sem mais purificação. RMN de XH (CDC13) : 7,87 (1H, m), 6,69 (2H, m largo), 5,68-5,54 (1H, m), 4, 45-4,36 (1H, m), 4,35-4,21 (2H. m com sobreposição), 4,17-4,08 (1H, m), 3, 98-3,89 (1H, m), 3,85-3,68 (2H, m com sobreposição), 2,15-1,55 (10H, m com sobreposição).

Intermediário_126 :_8-Bromo-2- [ (tetra-hidro-2- furanilmetil)oxi]-9-(tetra-hidro-2ff-piran-2-il)-9fl-pirin-6-amina

2- [ (Tetra-hidro-2-furanilmetil) oxi] -9- (tetra-hidro-2ií-piran-2-il)-9H-purin-6-amina (1,7202 g) foi dissolvida em clorofórmio (15 mL) e arrefecida até ~1 °C, antes de ter sido adicionada N-bromossuccinimida (1,056 g) mantendo a temperatura de reacção abaixo de 2 °C. A mistura reaccional foi então agitada a ~1 °C durante 30 minutos, antes de ser deixada aquecer até à temperatura ambiente, após o que a mistura reaccional foi agitada durante 3 horas. A mistura reaccional foi então deixada em repouso, de um dia para o outro, à temperatura ambiente, antes de ter sido partilhada com água (50 mL) e a fase orgânica separada utilizando um filtro poroso hidrófobo. A fase orgânica foi evaporada sob pressão reduzida para dar uma goma castanha que foi purificada utilizando cromatografia sobre sílica (ISCO) 220 eluindo com 0-100% de acetato de etilor ciclo-hexano. Isto deu o composto em epígrafe como um sólido espumoso branco (1,3748 g). RMN de (CDCI3) : 5,63-5,56 (1H, m) , 5,43 (2H, s largo), 4,45-4,36 (1H, m), 4,34-4,10 (3H, m com sobreposição), 4,98-3,89 (1H, m), 3,85-3,77 (1H, m), 3, 74-3, 66 (1H, m), 3,09-2, 97 (1H, m), 2,15-1,56 (representando 9H [sobreposição de água]) MS calculado para (Ci5H2oBrN503)+ = 397, 399 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 398, 400

Intermediário_127 :_8- (Metoxi) -2- [ (tetra-hidro-2- furanilmetil)oxi]-9-(tetra-hidro-2fl-piran-2-il)-9fl-purin-6-amina

8-Bromo-2-[(tetra-hidro-2-furanilmetil)oxi]-9-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-amina (1,3748 g) foi dissolvida em metanol (10,2 mL) e tratada com metóxido de sódio a 25% (p/v) em metanol (2,2 mL). isto foi aquecido a refluxo sob azoto durante 3,5 horas. A mistura reaccional foi evaporada sob pressão reduzida até à secura e foi adicionada solução saturada de cloreto de amónio (100 mL) . Esta foi então extraída com acetato de etilo (100 mL, 3 vezes) . As camadas orgânicas foram combinadas e lavadas com solução aquosa saturada de cloreto de sódio (100 mL) e em seguida seca passando através de um filtro 221 poroso hidrófobo, depois de separar a camada aquosa. A orgânica foi evaporada sob pressão reduzida para dar o composto em epígrafe como uma espuma branca (1,1614 g) e utilizada na etapa seguinte sem requerer purificação. RMN de *Η (CDCI3) : 5,52-5,46 (1H, m) , 5,15 (2H, s largo), 4, 43-4,36 (1H, m), 4, 33-4,26 (1H, m) , 4,23-4,17 (1H, m), 4,16- 4,09 (1H, m sobreposto com 4,13 (3H, s)), 3,97-3, 90 (1H, m), 3,84-3, 76 (1H, m), 3, 73-3,65 (1H, m), 2,83-2,71 (1H, m), 2,13- 1,53 (representando 9H, m com sobreposição [sobreposição de água]). MS calculado para (C16H23N5O4)+ = 349 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 350

Intermediário 128: Sal de trifluoroacetato de 8-(metoxi)-2-[ (tetra-hidro-2-furanilmetil) oxi] -9Jf-purin-6-amina

8-(Metoxi)-2-[(tetra-hidro-2-furanilmetil)oxi]-9-(tetra-hidro-2ií-piran-2-il)-9H-purin-6-amina (1,1614 g) foi dissolvida em metanol (20 mL) e tratada com ácido trifluoroacético puro (2 mL) . A mistura reaccional foi agitada durante 24 horas para dar uma suspensão branca. A mistura reaccional foi então evaporada até à secura sob pressão reduzida. O sólido branco resultante foi suspenso utilizando acetato de etilo (10 mL) e em 222 seguida isolado por filtração, lavando com acetato de etilo (2 mL). 0 sólido foi seco ao ar sob sucção e em seguida seco sob vácuo a 50 °C. Isto deu o composto em epígrafe como um sólido branco (1, 0602 g) . RMN de XH ( (CD3) 2SO) : 7,76 (2H, s largo), 4,35-4,11 (3H, m com sobreposição), 4,05 (3H, s), 3,82-3,73 (1H, m), 3,73-3,63 (1H, m), 2, 05-1, 77 (3H, m com sobreposição), 1, 70-1, 59 (1H, m) (NH de N-9 não é evidente no espectro - indicação de sinal extremamente largo a 12,7 ppm (mas poderia ser um artefacto das FT)) . MS calculado para (C11H15N5O3)+ = 265 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 266

Intermediário_129 :_8- (Metoxi) -2- [ (tetra-hidro-2- furanilmetil)oxi]-9-(tetra-hidro-2fl-piran-4-ilmetil)-9ff-purin-6- amina

O sal de trifluoroacetato de 8-(metoxi)-2-[(tetra-hidro-2-furanilmetil)oxi]-9H-purin-6-amina (0,30 g) foi dissolvido em DMF seca (5 mL) . A esta solução foi adicionado carbonato de potássio anidro (0,4376 g) e em seguida a mistura reaccional foi 223 aquecida até 60 °C sob azoto durante 1 hora. A mistura reaccional foi então arrefecida até à temperatura ambiente antes de ser adicionado metanossulfonato de tetra-hidro-2i?-piran-4-ilmetilo (0,1690 g) e em seguida a mistura reaccional resultante foi aquecida até 90 °C durante 2,5 horas. A mistura reaccional foi arrefecida e em seguida desactivada com água (50 mL), seguida de extracção para acetato de etilo (50 mL, 3 vezes) . Após separação, as camadas orgânicas foram combinadas e secas passando através de um filtro poroso hidrófobo. A evaporação sob pressão reduzida deu um óleo móvel que foi então purificado por cromatografia de fase inversa em Ci8 utilizando água (contendo 0,1% de ácido fórmico)-acetonitrilo (contendo 0,05% de ácido fórmico) como eluente (10-45%). Isto deu o composto em epígrafe como um sólido branco (0, 1560 g) . RMN de (CDC13) : 5,17 (2H, s largo), 4, 40-4,26 (2H, m próximo), 4,23-4,17 (1H, m) , 4,11 (3H, s), 3, 99-3, 89 (3H, m com sobreposição), 3,84-3,76 (3H, m com sobreposição), 3,37-3,29 (2H, m), 2,18-1,66 (representando 5H [pico de água subjacente]), 1,52-1,33 (4H, m com sobreposição). MS calculado para (C17H25N5O4)+ = 363 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 364 224

Intermediário 130: (2E) -3- (5, 6-Di-hidro-2i7-piran-3-il) -2- propenoato de etilo

O o^ A 5,6-di-hidro-2fí-pirano-3-carbaldeído (5,0 g) em diclorometano seco (150 mL) a 0 °C foi adicionado carbetoximetileno-trifenilfosforano (15,53 g). A reacção foi deixada aquecer até à temperatura ambiente e agitada, de um dia para o outro. A reacção foi diluída com diclorometano (150 mL) e lavada com água (150 mL) e uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio (150 mL) . A camada orgânica foi seca passando através de um filtro poroso hidrófobo e concentrada in vacuo para proporcionar um óleo amarelo. O produto foi purificado por cromatografia sobre sílica (120 g) (ISCO) utilizando uma eluição por gradiente de 0-10% de ciclo-hexano:acetato de etilo para proporcionar o composto em epígrafe como um óleo transparente (5,59 g). RMN de XH (CDCls): δ 7,27 (1H, t), 6,33 (1H, m), 5,67 (1H, d), 4,35 (2H, m), 4,26 (2H, q), 3,84 (2H, t), 2,39 (2H, m), 1,35 (3H, t) . 225

Intermediário 131: 3-(Tetra-hidro-2ff-piran-3-il)propanoato de etilo

Uma solução de (2E)-3-(5,6-di-hidro-2fí-piran-3-il) -2-propenoato de etilo (3 g) e paládio sobre carvão (170 mg, 10%, húmido) em acetato de etilo (75 mL) foi hidrogenada à pressão atmosférica e temperatura ambiente. A captação de hidrogénio (~825 mL) estava concluída após 30 minutos. O catalisador foi filtrado através de celite e o filtrado concentrado in vacuo para proporcionar um óleo amarelo pálido (2,90 g) . O anterior foi repetido exactamente do mesmo modo com um segundo lote. Assim, uma solução de (2E)-3-(5,6-di-hidro-2H-piran-3-il)-2-propenoato de etilo (2,59 g) e paládio sobre carvão (147 mg, 10% húmido) em acetato de etilo (65 mL) foi hidrogenada à pressão atmosférica e temperatura ambiente. A captação de

hidrogénio (~715 mL) estava concluída após 15 minutos. O catalisador foi filtrado através de celite e o filtrado concentrado in vacuo para proporcionar um óleo amarelo pálido que foi combinado com o do primeiro lote (5,34 g) . Este foi purificado por cromatografia sobre sílica (120 g) (ISCO) utilizando uma eluição por gradiente de 0-10% de ciclo- 226 hexano:acetato de etilo para proporcionar o composto em epígrafe como um óleo transparente (4,61 g) . RMN de XH (CDC13) : δ 4,13 (2H, q) , 3,86 (2H, m), 3,35 (1H, m), 3,06 (1H, m), 2,31 (2H, m), 1,87 (1H, m), 1,64-1,41 (5H, m) 1,26 (3H, t), 1,15 (1H, m).

Intermediário 132: 3-(Tetra-hidro-2#-piran-3-il)-1-propanol

A uma solução, mantida sob agitação, de hidreto de alumínio e lítio (24,8 mL, 1,0 M em éter dietílico) em éter dietílico seco (77 mL) a 0 °C foi adicionada,, gota a gota, ao longo de 20 minutos, uma solução de 3-(tetra-hidro-2H-piran-3-il)propanoato de etilo (4,61 g) em éter dietílico seco (77 mL). Após 15 minutos a 0 °C a mistura reaccional foi aquecida até à temperatura ambiente e agitada durante mais nove horas. A reacção foi desactivada pela adição, gota a gota, de água ao longo de um período de uma hora, enquanto era arrefecida sobre gelo. Os sólidos resultantes foram filtrados da mistura e lavados com éter dietílico. A camada orgânica foi decantada da camada aquosa, seca sobre sulfato de magnésio, filtrada e concentrada in vacuo para dar um óleo transparente (3,33 g) . O produto foi purificado por cromatografia sobre sílica (40 g) (ISCO) utilizando uma eluição por gradiente de 0-50% de ciclo-hexano:acetato de etilo para proporcionar o composto em epígrafe como um óleo transparente (2,64 g). 227 RMN de XH (CDC13) : δ 3,87 (2H, m) , 3,64 (2H, m) , 3,35 (1H, m), 3,05 (1H, m), 1,88 (1H, m), 1,66-1,51 (5H, m), 1,39 (1H, t), 1,31-1,08 (3H, m) . 228

Intermediário 133: Metanossulfonato de 3-(tetra-hidro-2i7-piran-3-il)propilo

A uma solução de 3-(tetra-hidro-2fí-piran-3-il)-1-propanol (2,64 g) em diclorometano seco (78 mL) a 0 °C foi adicionada trietilamina (6,21 mL) seguida de cloreto de mesilo (1,85 mL). A mistura reaccional foi deixada aquecer até à temperatura ambiente à medida que o gelo fundia e deixada a agitar durante três horas. A mistura reaccional foi lavada com hidrogenocarbonato de sódio. , A camada orgânica foi separada, seca passando através de um filtro poroso hidrófobo e concentrada in vácuo para dar um óleo amarelo (4,42 g) · 0 produto foi purificado por cromatografia sobre sílica (80 g) (ISCO) utilizando uma eluição por gradiente de 0-50% de ciclo-hexano:acetato de etilo para proporcionar o composto em epígrafe como um óleo transparente (3,79 g). RMN de XH (CDC13) : δ 4,22 (2H, t), 3,86 (2H, m) , 3,36 (1H, m), 3,07 (1H, m), 3,01 (3H, s), 1,87 (1H, m), 1,82-1, 69 (2H, m), 1, 65-1,54 (3H, m), 1,36-1,10 (3H, m). 229

Intermediário 134: N2-Butil-8-(metoxi)-9-[3-(tetra-hidro-2i7-piran-3-il)propil] -9fí-purina-2, 6-diamina

A uma solução de sal de ácido trifluoroacético de W2-butil-8-metoxi-9H-purina-2,6-diamina (300 mg) em N,N-dimetilformamida seca (5,3 mL) foi adicionado carbonato de potássio (474 mg). A reacção foi agitada a 60 °C durante noventa minutos. A reacção foi arrefecida e foi adicionado metanossulfonato de 3-(tetra-hidro-2íí-piran-3-il)propilo (209 mg) e a reacção aquecida a 90 °C durante três horas. A reacção foi arrefecida, diluída com acetato de etilo e lavada com água (2x). A camada orgânica foi separada, seca sobre sulfato de magnésio, filtrada e concentrada in vacuo para proporcionar um óleo amarelo. O produto foi purificado por cromatografia de fase inversa em Cis (43 g) (ISCO) utilizando água (0,1% de ácido fórmico)-acetonitrilo (0,05% de ácido fórmico) como eluente (30-80%) para proporcionar o composto em epígrafe como um resíduo oleoso amarelo (198 mg). MS calculado para (C18H30N6O2)+ = 362 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 363 RMN de (DMSO) : δ 6,23 (2H, s), 6,01 (1H, t), 3,99 (3H, s), 3, 77-3, 67 (4H, m) , 3,26-3,15 (3H, m), 2,91 (1H, m), 1,76 230 (1Η, m), 1,71- 1,60 (2H, m) , 1,54-1, 40 (5H, m) , 1, 36-1,26 (2H, m), 1,16-0,96 (3H, m), 0,88 (3H, m) .

Intermediário 135: 9-(Tetra-hidro-2j7-piran-2-il)-2-[(tetra-hidro-2fí-piran-2-ilmetoxi] -9ff-purin-6-amina

Tetra-hidropirano-2-metanol (ex. Aldrich) (4,66 g) foi diluido com 1,2-dimetoxietano (20 mL) . Foi adicionado gradualmente terc-butóxido de sódio (3,85 g) ao anterior e agitado até ficar homogéneo (solução cor de laranja). Foi adicionada 2-cloro-9- (tetra-hidro-2fí-piran-2-il) -9i7-purin-6- amina (2,54 g) à anterior e em seguida aquecida a refluxo (110 °C, externos), de um dia para o outro, e sob azoto. A mistura reaccional foi desactivada em água (100 mL) e extraida utilizando acetato de etilo (100 mL, 3 vezes). A fase orgânica foi separada e em seguida feita passar através de um filtro poroso hidrófobo. A evaporação sob pressão reduzida deu uma goma que foi então purificada por ISCO (120 g, Si02) eluindo com 0-50% de metanol: DCM para dar o composto em epígrafe como uma espuma amarela pálida (2,1732 g) . MS calculado para (Ci6H23N503) + = 333 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 334 231 RMN de (CDC13): 7, 85 (1H, s), 5,66-5,49 (sobreposto com 1H, m e 2H, s largo), 4, 41 -4,34 (1H, m), 4,25 -4,19 (1H, m), 4,18· -4,11 (1H, m), 4,06 -4,00 (1H, m), 3,78-3,69 (2H, m), 3, 54- 3, 45 (1H, m), 2 ,12-1,83 (4H, m com sobreposição), 1,83-1,36 ( 8H, m com sobreposição) .

Intermediário 136: 8-Bromo-9-(tetra-hidro-2fl-piran-2-il)-2-[(tetra-hidro-2fl-piran-2-ilmetoxi]-9fl-purin-6-amina

A uma solução de 9-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-2-[(tetra-hidro-2fí-piran-2-ilmetoxi]-9fí-purin-6-amina (2,17 g) em clorofórmio seco (23,5 mL), arrefecida até 0 °C, foi adicionada N-bromossuccinimida (1,22 g) . A reacção foi deixada regressar até à temperatura ambiente e agitada durante 4 horas. A reacção foi diluida com DCM (50 mL) e lavada com água (50 mL) e em seguida com solução aquosa saturada de cloreto de sódio (50 mL). A camada orgânica foi separada, seca passando através de um filtro poroso hidrófobo e concentrada in vácuo. Isto proporcionou o produto em epígrafe como um sólido espumoso castanho (2,76 g). MS calculado para (Ci6H22BrN503)+ = 412, 413 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 413, 414 232

Intermediário 137: 8-(Metoxi)-9-(tetra-hidro-2ff-piran-2 il) -2- [ (tetra-hidro-2fí-piran-2-ilmetoxi] -9fl-purin-6-amina

A uma solução de 8-bromo-9-(tetra-hidro-2íí-piran-2-il) -2-[ (tetra-hidro-2tf-piran-2-ilmetoxi]-9fí-purin-6-amina (2,76 g) em metanol seco (22,6 mL) à temperatura ambiente, foi adicionado metóxido de sódio (4,6 mL, 25% em peso em metanol). A reacção foi aquecida a refluxo durante 4 horas. A reacção foi arrefecida e concentrada in vacuo para produzir um resíduo cor de laranja. Este foi tomado em solução de cloreto de amónio (100 mL) e extraído com acetato de etilo (100 mL) . A camada orgânica foi separada e lavada com água (50 mL) . A camada orgânica foi seca sobre sulfato de magnésio, filtrada e concentrada in vacuo. Isto proporcionou o composto em epígrafe como um sólido espumoso cor de laranja (2,06 g). MS calculado para (C17H25N5O4)+ = 363 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 364 233

Intermediário 138: Sal de trifluoroacetato de 8-(metoxi)-2 [(tetra-hidro-2ff-piran-2-ilmetoxi]-9ff-purin-6-amina

A uma solução de 8-(metoxi)-9-(tetra-hidro-2fí-piran-2-il) -2-[ (tetra-hidro-2íf-piran-2-ilmetoxi] -9i7-purin-6-amina (2,06 g) em metanol seco (20,6 mL) foi adicionado ácido trifluoroacético (2,06 mL) . A reacção foi agitada à temperatura ambiente durante 24 horas. A mistura reaccional foi concentrada in vacuo e o resíduo resultante triturado em éter dietílico. Isto resultou num sólido esbranquiçado após filtração (1,59 g) . MS calculado para (C12H17N5O3)+ = 279 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 280 234

Intermediário 139: 8-(Metoxi)-9-(tetra-hidro-2fl-piran-4- ilmetil)-2-[(tetra-hidro-2ff-piran-2-ilmetoxi]-9fl-purin-6-amina

A uma solução de sal de trifluoroacetato de 8-(metoxi)-2-[ (tetra-hidro-2ff-piran-2-ilmetoxi]-9ff-purin-6-amina (1,59 g) em N,N-dimetilformamida seca (25 mL) foi adicionado carbonato de potássio (2,24 g). A reacção foi agitada a 60 °C durante 1,5 horas. A reacção foi arrefecida e foi adicionado metanossulfonato de tetra-hidro-2íf-piran-4-ilmetilo (866 mg) . A reacção foi agitada a 90 °C durante 5 horas. A reacção foi arrefecida e tomada em acetato de etilo e lavada duas vezes com água. A camada orgânica foi separada, seca sobre sulfato de magnésio, filtrada e concentrada in vacuo para produzir um sólido amarelo. O produto foi purificado por cromatografia de fase inversa em Cie utilizando água (contendo 0,1% de ácido fórmico)-acetonitrilo (contendo 0,05% de ácido fórmico) como eluente (20-50%) para proporcionar o composto em epígrafe como um sólido esbranquiçado (704 mg). MS calculado para (C18H27N5O4)+ = 377 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 378 235

Intermediário 140: 2-({2-[(1-Metiletil)oxi]etil}oxi)-8- (metoxi) -9- (tetra-hidro-2ff-piran-4-ilmetil) -9ff-purin-6-amina

A uma solução de sal de trifluoroacetato de 2—({2—[(l— metiletil)oxi]etiljoxi)-8-(metoxi)-9íí-purin-6-amina (400 mg) em N,N-dimetilformamida seca (6,4 mL) foi adicionado carbonato de potássio (579 mg). A reacção foi agitada a 60 °C durante 1,5 horas. A reacção foi arrefecida e foi adicionado metanossulfonato de tetra-hidro-2íí-piran-4-ilmetilo (224 mg) . A reacção foi agitada a 90 °C durante 4 horas. A reacção foi arrefecida e tomada em acetato de etilo e lavada duas vezes com água. A camada orgânica foi separada, seca sobre sulfato de magnésio, filtrada e concentrada in vacuo para produzir um óleo amarelo (432 mg). O produto foi purificado por cromatografia de fase inversa em Ci8 utilizando água (contendo 0,1% de ácido fórmico)-acetonitrilo (contendo 0,05% de ácido fórmico) como eluente (20-50%) para proporcionar o composto em epígrafe como um óleo viscoso transparente (166 mg) . MS calculado para (C17H27N5O4)+ = 365 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 366 236

Intermediário 141: 5-{4-[(Fenilmetil)oxi]-1-buten-l-il} 3,6-di-hidro-2ff-pirano

A uma suspensão de brometo de (3-benziloxipropil)trifenilfosfónio (9,90 g) em tetra-hidrofurano seco (30,5 mL) a -15 °C foi adicionado, gota a gota, butil-litio (8,06 mL, 2,5 M em hexanos) para dar uma solução cor de laranja escura. A temperatura de reacção foi aumentada até 0 °C e a agitação continuou durante 30 minutos. Foi adicionada, gota a gota, uma solução de 5, 6-di-hidro-2/í-pirano-3-carbaldeído (2,26 g) em tetra-hidrofurano seco (3 mL) a 0 °C. A mistura reaccional foi agitada à temperatura ambiente durante 20 horas. A mistura reaccional foi filtrada através de celite e lavada com éter dietilico. O filtrado foi concentrado in vacuo para dar um óleo cor de laranja. O produto foi purificado por cromatografia sobre sílica utilizando uma eluição por gradiente de 0-25% de acetato de etilo/ciclo-hexano para proporcionar o composto em epígrafe como um óleo incolor (2,04 g) . RMN de 'ή (CDC13) : Mistura de cis e trans δ O 1 N) (5 H, m), 6,02 (0,60H, d), 5,76 (1,36H, m), 5,49-5,37 (1H, m), 4,53 (2 H, m) , 4, 29 (1, 2 3 H), 4, 22 (0, 74H, m) , 3,77 (2H, t), 3,51 (2H, m), 2,52 (0, 78H, m), 2,40 (1,29H, m), 2,24 (2H, m). 237

Intermediário 142: 4-(Tetra-hidro-2fl-piran-3-il)-1-butanol

OH 0

Uma solução de 5-{4-[(fenilmetil)oxi]-1-buten-l-il}-3, 6-di-hidro-2H-pirano (2,03 g) e paládio a 10% sobre carvão (88 mg) em acetato de etilo (83 mL) foi hidrogenada à pressão atmosférica e temperatura ambiente. A captação de hidrogénio (—500 mL) estava concluída após 15 horas. O catalisador foi filtrado através de celite e o filtrado concentrado in vacuo para proporcionar um óleo incolor. A análise por RMN de mostrou que o grupo benzilo estava presente na maioria do composto. A hidrogenação continuou nas mesmas condições durante mais 24 horas com captação adicional de hidrogénio de ~300 mL. O catalisador foi filtrado através de celite e o filtrado concentrado in vacuo para proporcionar o composto em epígrafe como um óleo incolor (1,21 g) . RMN de ΧΗ (CDC13) : δ 3,86 (2H, m) , 3,63 (2H, t), 3,34 (1H, m), 3,04 (1H, t), 1,86 (1H, m), 1,75 (1H, s), 1,66-1,47 (5H, m), 1, 45-1,27 (2H, m) , 1,26-1, 06 (3H, m). 238

Intermediário 143: Metanossulfonato de 4-(tetra-hidro-2fl-piran-3-il)butilo

A uma solução de 4-(tetra-hidro-2fí-piran-3-il) -1-butanol (1,20 g) em diclorometano seco (30,3 mL), arrefecida até 0 °C, foi adicionada trietilamina (2,43 mL) e cloreto de metanossulfonilo (0,77 mL) para dar uma solução amarela. A mistura reaccional foi agitada à temperatura ambiente, de um dia para o outro. A mistura reaccional foi lavada com uma solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio (25 mL). A camada orgânica foi separada, seca passando através de um filtro poroso hidrófobo e concentrada in vacuo para proporcionar um óleo amarelo (1,80 g). O produto foi purificado por cromatografia sobre silica utilizando uma eluição por gradiente de 0-40% de acetato de etilo/ciclo-hexano para proporcionar o composto em epigrafe como um óleo amarelo (1,58 g) .

RMN de (CDC13) : δ 4,23 (2H, t), 3,86 (2H, m), 3,35 (1H m), 3,05 (1H, m), 3,01 (3H, s), 1,86 (1H, m), 1,79-1,67 (2H, m) 1, 64-1,52 (3H, m) , 1, 47-1, 34 (2H, m) , 1, 28-1, 05 (3H, m) . 239

Intermediário 144: N2-butil-8-(metoxi)-9-[4-(tetra-hidro-2H-piran-3-il)butil]-9H-purina-2,6-diamina nh2

A uma solução de N2-butil-8-(metoxi)-9H-purina-2,6-diamina (250 mg) em N,N-dimetilformamida seca (4,46 mL) à temperatura ambiente foi adicionado carbonato de potássio (395 mg). A mistura reaccional foi agitada a 60 °C durante 90 min. A reacção foi arrefecida até à temperatura ambiente e foi adicionado metanossulfonato de 4-(tetra-hidro-2H-piran-3-il)butilo (186 mg) e a reacção agitada a 90 °C durante 2 horas. A mistura reaccional foi tomada em acetato de etilo (50 mL) e lavada com água (2X50 mL) . A camada orgânica foi separada, seca sobre sulfato de magnésio, filtrada e concentrada in vacuo para dar um óleo cor de laranja (366 mg) . O produto foi purificado por cromatografia de fase inversa em Ci8 utilizando água (contendo 0,1% de ácido fórmico)-acetonitrilo (contendo 0,05% de ácido fórmico) como eluente (30-70%) para proporcionar o composto em epigrafe como uma goma cor de laranja (172 mg). MS calculado para (C19H32 N6O2)+ = 376 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 377 240

Intermediário 145: N2-(2-Ciclopropiletil)-9-(tetra-hidro-2ff-piran-2-il)-9fl-purina-2,6-diamina

A uma suspensão de 2-cloro-9-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-amina (3,49 g) em etilenoglicol (17 mL) à temperatura ambiente foi adicionada ciclopropiletilamina (4,69 g). A mistura reaccional foi aquecida até 120 °C com condensador de refluxo de um dia para o outro, resultando numa solução amarela/castanha. A reacção foi deixada arrefecer, tomada em acetato de etilo (100 mL) e lavada com água (2x100 mL) . A camada orgânica foi separada, seca sobre sulfato de magnésio, filtrada e concentrada in vacuo para dar uma goma castanha escura (4,17 g) MS calculado para (Ci5H22N60)+ = 302 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 303 241

Intermediário 146: S-Bromo-N2-(2-ciclopropiletil)-9-(tetra hidro-2ff-piran-2-il) -9fl-purina-2, 6-diamina

A uma solução de N2- (2-ciclopropiletil) -9-(tetra-hidro-2ií-piran-2-il)-9fí-purina-2,6-diamina (4,17 g) em clorofórmio (46,0 mL) a 0 °C, foi adicionada N-bromossuccinimida (2,58 g) para dar uma suspensão verde escura. A mistura reaccional foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h. A mistura reaccional foi tomada em diclorometano (100 mL) e lavada com água (1X100 mL). A camada orgânica foi separada, seca passando através de um filtro poroso hidrófobo e concentrada in vacuo para dar uma goma verde (5,50 g, 80% pura). MS calculado para (Ci5H2iBrN60)+ = 380, 382 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 381, 383 242

Intermediário 147:

Ar- (2-Ciclopropiletil) -8- (metoxi) -9- [tetra-hidro-2fi-piran-2-il) -9A-purina-2, 6-diamina

A uma solução de 8-bromo-N2-(2-ciclopropiletil)-9-(tetra-hidro-2A-piran-2-il)-9A-purina-2,6-diamina (5,50 g) em metanol (48,1 mL) à temperatura ambiente foi adicionado metóxido de sódio (9,9 mL, 25% em peso, em metanol) para dar uma solução castanha. A mistura reaccional foi agitada a refluxo durante 24 horas. A reacção foi deixada arrefecer antes de ser adicionada solução de cloreto de amónio (100 mL) e extraída com acetato de etilo (150 mL) . A camada orgânica foi separada e lavada com água (100 mL) . A camada orgânica foi separada, seca sobre sulfato de magnésio, filtrada e concentrada in vacuo para dar um sólido castanho (3,79 g) . O produto foi purificado por cromatografia de fase inversa em Ci8 utilizando água (contendo 0,1% de ácido fórmico)-acetonitrilo (contendo 0,05% de ácido fórmico) como eluente (20-60%) para proporcionar o composto em epígrafe como uma goma castanha (3,3 g, 79% pura). MS calculado para (Ci6H24 Νδ02)+ = 332 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 333 243

Intermediário 148:

Trifluoroacetato de N2- (2- ciclopropiletil) -8- (metoxi) -9ff-purina-2, 6-diamina

A uma solução de N2-(2-ciclopropiletil)-8-(metoxi)-9-(tetra-hidro-2il-piran-2-il)-9ii-purina-2,6-diamina (3,30 g) em metanol (33,0 mL) à temperatura ambiente foi adicionado ácido trifluoroacético (3,30 mL) para dar uma solução cor de laranja. A mistura reaccional foi agitada à temperatura ambiente durante 70 horas. A mistura reaccional foi concentrada in vacuo para dar um sólido amarelo que foi então triturado em éter dietilico (100 mL) e filtrado sob vácuo para dar um sólido esbranquiçado (2,4 g) . MS calculado para (CnHi6N60)+ = 248 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 249 244

Intermediário 149: N2-(2-Ciclopropiletil)-8-(metoxi)-9- 149: (tetra-hidro-3-furanilmetil)-9fl-purina-2,6-diamina

A uma solução de trifluoroacetato de N2-(2-ciclopropiletil)-8-(metoxi)-9fí-purina-2, 6-diamina (400 mg) em N,N-dimetilformamida (6,90 mL) à temperatura ambiente foi adicionado carbonato de potássio (610 mg) e a mistura reaccional agitada a 60 °C durante 90 minutos. A reacção foi arrefecida até à temperatura ambiente e foi adicionado metanossulfonato de tetra-hidro-3-furanilmetilo (219 mg), a agitação continuou a 50 °C durante 20 h. A temperatura de reacção foi aumentada até 90 °C e a agitação continuou. A reacção foi arrefecida e tomada em acetato de etilo (50 mL) e lavada com água (2X50 mL). A camada orgânica foi separada, seca sobre sulfato de magnésio, filtrada e concentrada in vacuo para dar um óleo cor de laranja. O produto foi purificado por cromatografia de fase inversa em Cis utilizando água (contendo 0,1% de ácido fórmico)-acetonitrilo (contendo 0,05% de ácido fórmico) como eluente (10-45%) para proporcionar o composto em epígrafe como um óleo amarelo (209 mg, 84% puro). MS calculado para (Ci6H24 N602)+ = 332 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 333 245

Intermediário 150: N2-(2-Ciclopropiletil)-8-(metiloxi)-9 (tetra-hidro-2fl-piran-3-ilmetil)-9ff-purina-2,6-diamina

A uma solução de trifluoroacetato de N2-(2-ciclopropiletil)-8-(metoxi)-9fí-purina-2, 6-diamina (400 mg) em N,N- dimetilformamida (6,90 mL) à temperatura ambiente foi adicionado carbonato de potássio (610 mg) e a reacção agitada a 60 °C durante 90 minutos. A mistura reaccional foi arrefecida até à temperatura ambiente e foi adicionado metanossulfonato de tetra-hidro-2/í-piran-3-ilmetilo (236 mg) . A agitação continuou a 50 °C durante 20 horas. A temperatura de reacção foi aumentada até 90 °C e a agitação continuou. A reacção foi arrefecida e tomada em acetato de etilo (50 mL) e lavada com água (2x50 mL). A camada orgânica foi separada, seca sobre sulfato de magnésio, filtrada e concentrada in vacuo para dar um óleo cor de laranja. O produto foi purificado por cromatografia de fase inversa em Ci8 utilizando água (contendo 0,1% de ácido fórmico)-acetonitrilo (contendo 0,05% de ácido fórmico) como eluente (10-50%) para proporcionar o composto em epígrafe como um óleo incolor (198 mg, 88% puro). MS calculado para (Ci7H26N602)+ = 346 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 347 246

Intermediário 151: 8-Bromo-2-({2—[(1— metiletil)oxi]etil}oxi)-9-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-amina

Foi adicionada 2-cloro-9-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-amina (5 g, 20 mmol) a uma solução, sob agitação, de terc.-butóxido de potássio em 2-[(1-metiletil)oxi]etanol (50 mL) . A mistura foi aquecida até 80-90 °C durante 4 h. O álcool foi removido sob pressão reduzida. O residuo foi adicionado a acetato de etilo e foi lavado com água três vezes, seco, filtrado e concentrado para dar o produto em bruto. Este produto foi semipurifiçado por cromatografia sobre sílica gel eluindo com acetato de etilo:éter de petróleo 1:1 para dar material (3,3 g) . Este e um material preparado de modo análogo foram utilizados na etapa seguinte. A este material (6,8 g, 21,2 mmol) em DCM foi adicionada NBS (4,15 g, 23,3 mmol).

Agitado durante 16 h à temperatura ambiente e lavado duas vezes com bicarbonato de sódio aquoso. O produto em bruto foi purificado através de sílica gel eluindo com acetato de etilo:éter de petróleo 1:2 para dar o composto em epígrafe (5,6 g) . RMN de XH (CDC13) : 6,15-5,95 (2H, s 1.), 5,52 (1H, m) , 4,38 (2H, m), 4,15-4,0 (1H, m), 3,73 (2H, t), 3,7-3,55 (2H, m), 3,05-2,85 (1H, m), 2,1-1,95 (1H, m), 1,85-1, 45 (4H, m com sobreposição), 1,12 (6H, d). 247

Intermediário 152: 2-({2-[(1-Metiletil)oxi]etil}oxi)-8- (metoxi)-9-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-amina

A metanol (120 mL) foi adicionado sódio (0,966 g). Quando o metal estava dissolvido foi adicionada 8-bromo-2-({2-[(1-metiletil)oxi]etiljoxi)-9-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-amina (5,69 g, 21,2 mmol), aquecida a refluxo e a solução agitada durante 16 h, arrefecida até à temperatura ambiente. O solvente foi removido. Extraído com acetato de etilo após adição de água, seco e concentrado para dar o produto em bruto que foi purificado através de silica gel eluindo com acetato de etilo:éter de petróleo 2:1 para dar o composto em epígrafe (4,8 g) . RMN de XH (CDC13) : 5,47 (1H, m) , 5,33 (2H, s 1.), 4,41 (2H, m), 4,2-4,0 (4H, s 1.), 3,76 (2H, m), 3,7-3,55 (2H, m), 2,85- 2,65 (1H, m), 2,1-1,9 (1H, m), 1, 85-1, 45 (4H, m com sobreposição), 1,17 (6H, d). 248

Intermediário 153: Trifluoroacetato de 2 —({2 —[(1 metiletil)oxi]etil}oxi)-8-(metoxi)-9H-purin-6-amina

Intermediário 153: Trifluoroacetato de 2 —({2 —[(1 NH.

A 2-({2-[(1-metiletil)oxi]etil}oxi)-8-(metoxi)-9-(tetra- hidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-amina (4,5 g, 14 mmol) em metanol (30 mL) foi adicionado ácido trifluoroacético (8 mL), agitado durante 10 min e mantido à temperatura ambiente durante 2 dias. Filtrado para dar o produto em bruto que foi purificado por HPLC preparativa (instrumento Gilson GX-281 com coluna YMC C18 5,0um (250 X 20 mm) eluindo com água contendo TFA (0,1%):acetonitrilo 30-60%. Isto deu 2,1 g o composto em epígrafe. RMN de XH (CD130D) : 4,55 (2H, m) , 4,13 (3H, s), 3,78 (2H, t), 3,67 (1H, m), 1,14 (6H, d). Não foram observados os protões permutáveis.

Intermediário 154: Cloreto de tetra-hidro-3-furanocarbonilo

A ácido tetra-hidro-3-furanocarboxílico (24,3 g) em diclorometano anidro (299 mL) à temperatura ambiente e sob azoto 249 foi adicionado cloreto de oxalilo (27,5 mL), gota a gota, ao longo de 10 minutos seguido de algumas gotas de DMF. A reacção foi deixada a agitar, de um dia para o outro. A reacção foi concentrada ín vacuo para produzir um óleo cor de laranja (28 g). RMN de XH (CDC13) : δ 4,11 (1H, dd), 4,01 (1H, m), 3,93 (1H, m), 3,84 (1H, m), 3,57 (1H, m), 2,34 (1H, m), 2,23 (1H, m).

Intermediário 155 (diastereoisómero 1) e Intermediário 156 (diastereoisómero 2) : (4A)-4-(Fenilmetil)-3-[(3S)-tetra-hidro-3- furanilcarbonil]-1,3-oxazolidin-2-ona e (4A)-4-(fenilmetil)-3-[(35)-tetra-hidro-3-furanilcarbonil]-1,3-oxazolidin-2-ona

A uma solução de (4R)-4-(fenilmetil)-1, 3-oxazolidin-2-ona (31 g) em tetra-hidrofurano anidro (583 mL) a -78 °C e sob azoto, foi adicionado n-butil-litio (115 mL), gota a gota, ao longo de 30 minutos, mantendo a temperatura interna abaixo de -65 °C. A reacção foi agitada a -78 °C durante 25 minutos e em seguida foi adicionada,, gota a gota, ao longo de 20 minutos, uma solução de cloreto de tetra-hidro-3-furanocarbonilo (28,2 g) em tetra-hidrofurano anidro (20 mL) mantendo a temperatura abaixo de -65 °C. Após a adição, a reacção foi aquecida ao longo de 30 minutos até à temperatura ambiente. A reacção foi 250 desactivada com cloreto de amónio aquoso saturado (50 mL) e em seguida concentrada in vacuo. O resíduo foi tomado em diclorometano (400 mL) e lavado com solução aquosa saturada de cloreto de sódio (2 X 50 mL). A camada orgânica foi seca através de um filtro poroso hidrófobo e concentrada in vacuo. O produto foi purificado por cromatografia sobre sílica (1,5 kg) (ISCO) utilizando uma eluição por gradiente de 2% de acetato de etilo:diclorometano. Isto produziu 15 g do produto mais rápido (Diastereoisómero 1 semi-puro) e 15 g do produto mais lento (Diastereoisómero 2 semi-puro). Também foram recolhidos cerca de 20 g de fracções mistas. O diastereoisómero 1 semi-puro foi cristalizado de ciclo-hexano/5% de acetato de etilo. Os cristais foram recolhidos por filtração sob sucção e secos num evaporador rotativo a 50 °C durante 15 minutos. A RMN de indicou a presença do outro diastereoisómero. O produto foi ainda purificado por cromatografia sobre sílica (-800 g, Tolueno/5% de Éter dietílico) para proporcionar o diastereoisómero 1 como um sólido branco (6,85 g, 98,4:1,56 por HPLC quiral). O diastereoisómero 2 semi-puro foi recristalizado de ciclo-hexano/5% de acetato de etilo. Os cristais foram recolhidos por filtração sob sucção e secos num evaporador rotativo a 50 °C durante 15 minutos. A RMN de XH indicou a presença do outro diastereoisómero. O produto foi purificado por cromatografia sobre sílica (~800 g, Tolueno/5% de Éter dietílico) para proporcionar um sólido branco (96:4 por HPLC quiral). Este foi recristalizado de ciclo-hexano/15% de 251 acetato de etilo para proporcionar o diastereoisómero 2 como cristais brancos (6,2 g, 96,4:3,6 por HPLC quiral).

As fracções mistas (~20 g) foram purificadas por cromatografia sobre silica ISCO (1,5 kg) (ISCO) utilizando uma eluição por gradiente de 5% de TBME/Tolueno para proporcionar o diastereoisómero 1 semi-puro, como um óleo transparente que cristaliza (7,3 g, 95,2:4,80 por HPLC quiral) e diastereoisómero 2 semi-puro como um óleo transparente que cristaliza (6,7 g, 96,1:3,80 por HPLC quiral).

Os dois lotes de sólido de diastereoisómero 1 foram combinados e recristalizados de ciclo-hexano:acetato de etilo, 5:1. Os cristais foram filtrados. Este processo de recristalização foi repetido 3 vezes para proporcionar o diastereoisómero 1 (10,7 g, 98,5:1,5 por HPLC quiral).

Os dois lotes de sólido de diastereoisómero 2 foram combinados. Os sólidos combinados foram recristalizados de Ciclo-hexano:acetato de etilo, 5:1. Os cristais foram filtrados. Este processo de recristalização foi repetido 3 vezes para proporcionar o diastereoisómero 2 (9,6 g, 99,5:0,5 por HPLC quiral).

Intermediário 155 (diastereoisómero 1) RMN de ΧΗ (CDC13) : δ 7, 43- -7,31 (3H, m), 7,29-7,23 (2H, m), 4,75 (1H, m), 4,33-4,25 (2H, m), 4, 23-4,12 (2H, m), 4,07- -4,00 (2H, m), 3,90 (1H, m), 3,33 (1H, dd), 2,86 (1H, dd), 2,39 (1H, m), 2 ,19 (1H, m ) · Intermediário 156 (diastereoisómero 2) : RMN de 1h (CDC13): δ 7,43- -7,31 (3H, m), 7,29-7,23 (2H, m), 4,74 (1H, m), 4,32-4,19 252 (3Η, m), 4,10-4,03 (2H, m), 4,00 (1H, m), 3,90 (1H, m), 3,36 (1H, dd), 2,84 (1H, dd), 2,31 (2H, m).

Intermediário 155 e Intermediário 156, processo alternativo:_(4R) -4- (Fenilmetil) -3- [ (35) -tetra-hidro-3- furanilcarbonil]-1,3-oxazolidin-2-ona e (4.R)-4-(fenilmetil) -3-[ (3-R) -tetra-hidro-3-furanilcarbonil] -1, 3-oxazolidin-2-ona

A ácido tetra-hidro-3-furóico (13 g) em tolueno seco (90 mL) à temperatura ambiente e sob azoto, foi adicionada (4R)-4-(fenilmetil)-1,3-oxazolidin-2-ona (10 g) de uma única vez seguida de trietilamina seca (31,5 mL) de uma única vez. A reacção foi aquecida até 80 °C e à solução transparente foi adicionado cloreto de pivaloilo (13,9 mL), gota a gota, ao longo de cinco minutos, após o que a reacção ficou turva e viscosa. A reacção foi aquecida até 115 °C, de um dia para o outro. A reacção foi arrefecida até à temperatura ambiente e diluída com acetato de etilo (150 mL) . Esta mistura foi lavada com HC1 2 M (50 mL), água (50 mL) e uma solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio (50 mL) . A camada orgânica foi seca sobre sulfato de magnésio, filtrada e concentrada in vacuo para produzir um óleo viscoso castanho. O produto foi purificado por cromatografia sobre silica (-750 g) utilizando uma eluição por gradiente de tolueno/10% de éter dietilico para proporcionar 253 4,6 g do produto mais rápido (Diastereoisómero 1, 99,5:0,5 por HPLC quiral) e 4,3 g do produto mais lento (Diastereoisómero 2, 91,8:8,2 por HPLC quiral). RMN de XH (CDC13) : Como para o primeiro processo. Intermediário 157: Tetra-hidro-3-furanilmetanol (Isómero 1)

A uma solução de (4J?)-4-(fenilmetil)-3-[tetra-hidro-3-furanilcarbonil]-1,3-oxazolidin-2-ona, Diastereómero 1 (4,6 g) em éter dietílico (320 mL, qualidade AR) e água (0,33 mL), a 0 °C, foi adicionado boro-hidreto de lítio (9,2 mL, solução 2 M em tetra-hidrofurano), gota a gota, ao longo de 5 minutos, mantendo a temperatura entre 0-5 °C. A reacção foi deixada a agitar durante 30 minutos a esta temperatura e em seguida aquecida até à temperatura ambiente durante 3 horas. Forma-se um precipitado branco durante a reacção. Foi então adicionado hidróxido de sódio 2 M (8,4 mL) gota a gota. A reacção fica transparente e é agitada durante 20 minutos à temperatura ambiente. A camada orgânica foi decantada, seca sobre MgSCt, filtrada através de celite e concentrada ín vacuo. O produto foi purificado por cromatografia sobre silica (120 g) (ISCO) utilizando uma eluição por gradiente de ciclo-hexano:acetato de etilo, 0-70%, para proporcionar o composto em epígrafe como um óleo transparente (1,3 g). 254 RMN de XH (CDC13) : δ 3,90-3,81 (2H, m), 3,74 (1H, m), 3,67-3,55 (3H, m), 2,47 (1H, m), 2,03 (lH, m), 1,64 (1H, m) . Não foram observados os protões permutáveis.

Intermediário 157, processo alternativo: Tetra-hidro-3-furanilmetanol (Isómero 1)

HO

Ácido 2-{[(tetra-hidro-3-furanilmetil)oxi]carboniljbenzóico (isómero 2, 3,65 g) foi dissolvido em THF (25 mL) e adicionado hidróxido de sódio 4 N (10,94 mL) . A mistura foi aquecida a refluxo sob agitação vigorosa durante 2 h, em seguida deixada arrefecer. Após 16 h, foram adicionados alguns mL de solução aquosa saturada de cloreto de sódio e a mistura extraída 3 vezes com acetato de etilo, e os extractos combinados lavados com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secos passando através de um filtro poroso hidrófobo e evaporados a >10 mbar de pressão, banho-maria a 40 °C para dar o composto em epígrafe como um óleo turvo, rendimento 1,3 g. RMN de XH (CDCI3) : δ 3,91-3,81 (2H, m), 3,79-3,71 (1H, m), 3, 68-3, 55 (3H, m), 2,53-2,42 (1H, m), 2, 09-1, 99 (1H, m), 1,68- 1,60 (1H, m). Não foram observados os protões permutáveis. 255

Intermediário 158: Tetra-hidro-3-furanilmetanol (Isómero 2)

HO

A uma solução de (4R)-4-(fenilmetil)-3-[tetra-hidro-3-furanilcarbonil]-1,3-oxazolidin-2-ona, Diastereómero 2 (4,3 g) em éter dietilico (310 mL, AR grade) e água (0,31 mL), a 0 °C, foi adicionado boro-hidreto de litio (8,6 mL, solução 2 M em tetra-hidrofurano), gota a gota, ao longo de 5 minutos, mantendo a temperatura entre 0-5 °C. A reacção foi deixada a agitar durante 30 minutos a esta temperatura e em seguida aquecida até à temperatura ambiente durante 3 horas. Foi então adicionado hidróxido de sódio 2 M (7,6 mL) ao longo de 5 minutos e a reacção foi agitada durante 20 minutos à temperatura ambiente. A camada orgânica foi decantada, seca sobre MgS04, filtrada e concentrada in vacuo. O produto foi purificado por cromatografia sobre sílica (120 g) (ISCO) utilizando uma eluição por gradiente de ciclo-hexano:acetato de etilo, 0-100%, para proporcionar o composto em epígrafe como um óleo transparente (1,4 g). RMN de ΧΗ (CDC13) : δ 3,90-3,81 (2H, m), 3,74 (1H, m), 3,67-3,55 (3H, m), 2,47 (1H, m), 2,03 (1H, m), 1,64 (1H, m) . Não foram observados os protões permutáveis. 256

Intermediário 158, processo alternativo: Tetra-hidro-3-furanilmetanol (Isómero 2)

Ácido 2-{[(tetra-hidro-3-furanilmetil)oxi]carboniljbenzóico (isómero 1, 4,89 g) foi dissolvido em THF (30 mL) e adicionado hidróxido de sódio 4 N (14,7 mL) . A mistura foi aquecida a refluxo sob agitação vigorosa durante 2 h, em seguida deixada arrefecer. Após 16 h, foram adicionados alguns mL de solução aquosa saturada de cloreto de sódio e a mistura extraida 3 vezes com DCM. Os extractos combinados foram secos passando através de um filtro poroso hidrófobo e evaporados a >10 mbar de pressão, banho-maria a 40 °C para dar o composto em epigrafe como um óleo rosado, rendimento 1,77 g. RMN de (CDC13) : δ 3,89-3,82 (2H, m), 3,77-3,71 (1H, m), 3, 67-3, 56 (3H, m), 2,52-2,42 (1H, m), 2, 07-1, 99 (1H, m), 1,68- 1,61 (1H, m). Não foram observados os protões permutáveis. 257

Intermediário 159: Metanossulfonato de tetra-hidro-3- furanilmetilo (Isómero 1)

O A tetra-hidro-3-furanilmetanol, Isómero 1 (1,3 g) em diclorometano seco (40 mL) a 0 °C e sob azoto, foi adicionada trietilamina (4,09 mL) seguida de cloreto de metanossulfonilo (1,29 mL) . A reacção foi agitada à temperatura ambiente, de um dia para o outro. A solução cor de laranja foi diluída com diclorometano (80 mL) e lavada com bicarbonato de sódio aquoso saturado (40 mL) . A camada orgânica foi separada, seca através de um filtro poroso hidrófobo e concentrada in vacuo para produzir o composto em epígrafe como um óleo amarelo (2,2 g). RMN de ΧΗ ( (CD3) 2SO) : δ 4,13 (2H, m) , 3, 77-3, 68 (1H, m) , 3,62 (1H, m), 3,46 (1H, m), 3,19 (3H, s), 2,58 (1H, m) , 1,97 (1H, m), 1,57 (1H, m). 258

Intermediário 160: Metanossulfonato de tetra-hidro-3- furanilmetilo (Isómero 2)

Intermediário 160: Metanossulfonato de tetra-hidro-3-

o

A (3S)-tetra-hidro-3-furanilmetanol, Isómero 2 (1,4 g) em diclorometano seco (40 mL) a 0 °C e sob azoto, foi adicionada trietilamina (3,83 mL) seguida de cloreto de metanossulfonilo (1,39 mL) . A reacção foi agitada à temperatura ambiente, de um dia para o outro. A solução cor de laranja foi diluída com diclorometano (50 mL) e lavada com bicarbonato de sódio aquoso saturado (20 mL) . A camada orgânica foi separada, seca através de um filtro poroso hidrófobo e concentrada in vacuo para produzir o composto em epígrafe como um óleo laranja (2,6 g). RMN de 1H ((CD3)2SO) : δ 4,13 (2H, m), 3,77-3,68 (1H, m), 3,62 (1H, m) , 3,46 (1H, m), 3,19 (3H, s), 2,58 (1H, m), 1,97 (1H, m), 1,57 (1H, m). 259

Intermediário 161: i\72-Butil-8-(metoxi)-9-[tetra-hidro-3- furanilmetil ] -9ff-purina-2, 6-diamina (Isómero 1)

A uma solução de sal de ácido trifluoroacético de I^-butil-8-metoxi-9H-purina-2,6-diamina (3,89 g) em N,N-dimetilformamida seca (46 mL) à temperatura ambiente e sob foi adicionado carbonato de potássio (6,14 g) de uma única vez. A reacção foi aquecida até 60 °C, sob azoto, durante 1,5 horas. Foi adicionada uma solução de metanossulfonato de tetra-hidro-3-furanilmetilo, Isómero 1 (2,2 g) em N,N-dimetilformamida seca (2 mL) via uma pipeta Pasteur e a reacção aquecida a 70 °C durante 16 horas. A reacção foi arrefecida até à temperatura ambiente, diluída com acetato de etilo (100 mL) e lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio (20 mL) . A camada orgânica foi concentrada in vacuo. O produto foi purificado por cromatografia de fase inversa em Cis utilizando água (0,1% de ácido fórmico)-acetonitrilo (0,05% de ácido fórmico) como eluente (10-50%) para proporcionar o composto em epígrafe como um óleo viscoso transparente (2,79 g). MS calculado para (Ci5H24 N602)+ = 320 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 321 260

Intermediário 162: N2-Butil-8-(metoxi)-9-[tetra-hidro-3- furanilmetil]-9ff-purina-2, 6-diamina (Isómero 2)

A uma solução de sal de ácido trifluoroacético de W2-butil-8-metoxi-9ií-purina-2, 6-diamina (4,60 g) em N,N-dimetilformamida seca (55 mL) à temperatura ambiente e sob foi adicionado carbonato de potássio (7,25 g) de uma única vez. A reacção foi aquecida até 60 °C durante 1,5 horas. Foi adicionada uma solução de metanossulfonato de tetra-hidro-3-furanilmetilo, Isómero 2 (2,6 g) em N,N-dimetilformamida seca (3 mL) via uma pipeta Pasteur e a reacção aquecida a 70 °C durante 16 horas. A reacção foi arrefecida até à temperatura ambiente, diluída com acetato de etilo (100 mL) e lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio (20 mL) . A camada orgânica foi concentrada in vacuo. O produto foi purificado por cromatografia de fase inversa em Ci8 utilizando água (0,1% de ácido fórmico)-acetonitrilo (0,05% de ácido fórmico) como eluente (10-60%) para proporcionar o composto em epígrafe como um óleo viscoso transparente (3 g). MS calculado para (Ci5H24 N6O2)+ = 320 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 321 261

Intermediário 163: Ácido 2-{ [ (tetra-hidro-3- furanilmetil)oxi]carbonil}benzóico

o

Uma mistura de anidrido ftálico (7,41 g) e tetra-hidro-3-furano-metanol foi aquecida sob agitação a 130 °C sob azoto. Após 1,5 h, o líquido transparente foi deixada arrefecer, tratado com água e extraído com AcOEt (x 3) . Os orgânicos combinados foram secos passando através de um filtro poroso hidrófobo e evaporados até um óleo transparente que cristalizou por trituração com éter de petróleo. O sólido foi filtrado, lavado e seco, rendimento 11,93 g. MS calculado para (Ci3Hi405)+ = 250 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 251

Intermediário 164 e Intermediário 165: Ácido 2-{[(tetra-hidro-3-furanilmetil)oxi]carboniljbenzóico, (Isómeros 1 e 2) o

o Ácido 2-{[(tetra-hidro-3-furanilmetil)oxi]carbonil}benzóico (11,93 g) foi separado em porções de 250 mg por HPLC quiral 262 utilizando uma coluna de 5 cm x 20 cm Chiralpak AD, eluindo com heptano:etanol contendo 0,1% de ácido trifluoroacético (80:20). As fracções mistas foram evaporadas e novamente separadas como descrito acima. As fracções contendo o material que eluiu mais cedo puro foram combinadas e evaporadas para dar um sólido branco, rendimento 4,89 g, Isómero 1, Intermediário 164. RMN de XH (CDC13) : 7,99 (1H, s largo), 7, 93-7, 86 (1H, m), 7, 74-7, 65 (1H, m), 7, 65-7,53 (2H, m com sobreposição), 4,44-4,34 (1H, m), 4,29-4,18 (1H, m), 4,00-3,88 (2H, m), 3,85-3,67 (2H, m com sobreposição), 2,81-2,66 (1H, m), 2,17-2,05 (1H, m), 1,80- 1,68 (1H, m).

As fracções contendo o material que migra mais devagar foram tratadas de modo análogo para dar um sólido branco, rendimento 3,65 g, Isómero 2, Intermediário 165. RMN de XH (CDCI3) : 7, 92-7, 84 (1H, m) , 7, 74-7, 66 (1H, m), 7, 63-7, 52 (2H, m com sobreposição), 7,38 (1H, s largo), 4,43- 4,33 (1H, m), 4,27-4,17 (1H, m) , 3,98-3,87 (2H, m), 3,83-3,65 (2H, m) , 2,79-2,65 (1H, m), 2,16-2,03 (1H, m), 1, 78-1, 65 (1H, m) . 263

Intermediário 166: 2-[(2-Ciclopropiletil)oxi]-9-(tetra- hidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-amina

A uma solução, mantida sob agitação, de terc-butóxido de sódio (13,45 g) em DME (80 mL) foi adicionada, gota a gota, sob azoto uma solução de 2-ciclopropiletanol (12,1 g) em DME (40 mL) ao longo de 5 min. Após 30 min foi adicionada 2-cloro-9-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-amina (11,84 g) e a mistura, mantida sob agitação, aquecida a refluxo durante 20 h. Depois de arrefecer, a mistura foi tratada com água e extraída duas vezes com acetato de etilo. Os extractos combinados foram lavados com água, em seguida com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secos passando através de um filtro poroso hidrófobo e evaporados até um óleo castanho. Este foi evaporado novamente duas vezes de tolueno, em seguida purificado numa coluna de sílica utilizando um ISCO Companion, eluindo com metanol:acetato de etilo (0-12%) para dar o composto em epígrafe. Rendimento 6,53 g. MS calculado para (C15H21N5O2)+ = 303 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 304 264

Intermediário 167: 8-Bromo-2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-9 (tetra-hidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-amina

A uma solução gelada, mantida sob agitação, de 2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-9-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-amina (6,53 g) em clorofórmio (75 mL), foi adicionada N-bromossuccinimida (4,02 g). A mistura reaccional foi deixada aquecer até à temperatura ambiente e após 16 h tratada com água e extraida duas vezes com DCM. Os extractos combinados foram lavados com metabissulfito de sódio diluído, em seguida com solução aquosa diluida de cloreto de sódio, secos passando através de um filtro poroso hidrófobo e evaporados para dar o composto em epigrafe como uma espuma cor de laranja, rendimento 7,96 g. MS calculado para (Ci5H2oBrN502)+ = 381, 383 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 382, 384 265

Intermediário 168: 2-[(2-Ciclopropiletil)oxi]-8-(metoxi)-9- (tetra-hidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-amina

Uma suspensão, mantida sob agitação, de 8-bromo-2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-9-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-amina (7,96 g) em metanol (80 mL) foi tratada com metóxido de sódio a 25% em peso em metanol (14,29 mL) e aquecida a refluxo sob azoto durante 3,5 h. Depois de deixar arrefecer ao longo de 16 h o solvente foi evaporado e o resíduo tratado com cloreto de amónio saturado e extraído duas vezes com acetato de etilo. Os extractos combinados foram lavados com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secos passando através de um filtro poroso hidrófobo e evaporados para dar o composto em epígrafe como um sólido castanho, rendimento 6,49 g. MS calculado para (C16H23N5O3)+ = 333 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 334 266

Intermediário 169: Sal de trifluoroacetato de 2— [ (2 — ciclopropiletil)oxi]-8-(metoxi)-lH-purin-6-amina

2-[(2-Ciclopropiletil)oxi]-8-(metoxi)-9-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-amina (6,49 g) foi tratada com metanol (65 mL) e a suspensão resultante agitada e arrefecida em gelo enquanto era adicionado TFA (6,5 mL) . A mistura foi deixada aquecer até à temperatura ambiente e após 72 h os solventes foram evaporados e o sólido cor de laranja remanescente triturado com acetato de etilo frio (50 mL), filtrado, lavado e seco sob vácuo, para dar o composto em epígrafe, rendimento 4,78 g. MS calculado para (C11H15N5O2)+ = 249 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 250

Foi obtida uma segunda colheita por evaporação do filtrado e trituração do resíduo com éter, rendimento 0,99 g.

Ligeiramente menos puro do que a primeira colheita. 267

Intermediário 170: 2-[(2-Ciclopropiletil)oxi]-8-(metoxi)-9- (tetra-hidro-3-furanilmetil)-9H-purin-6-amina (Isómero 1)

Uma mistura, mantida sob agitação, de sal de ácido trifluoroacético de 2-[ (2-ciclopropiletil)oxi]-8-(metoxi)-1H- purin-6-amina (2,89 g), carbonato de potássio (4,41 g) e DMF seca (32 mL) foi aquecida a 60 °C sob azoto durante 90 minutos. Foi então adicionado metanossulfonato de tetra-hidro-3-furanilmetilo (1,869 g, isómero 1) e a agitação continuou a 70 °C durante 1 h, em seguida a 90 °C durante 2 h. O solvente foi evaporado e o resíduo tratado com água e extraído três vezes com acetato de etilo. Os extractos combinados foram lavados com água, em seguida com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secos passando através de um filtro poroso hidrófobo e evaporados até um óleo castanho. Este foi purificado sobre uma coluna C18 de 360 g utilizando água (+0,1% de ácido fórmico)/acetonitrilo (+0,05% de ácido fórmico). As fracções apropriadas foram combinadas e evaporadas, rendimento 814 mg. MS calculado para (C16H23N5O3)+ = 333 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 334 268

Intermediário 171: 2-[ (2-Ciclopropiletil)oxi]-8-(metoxi)-9 [tetra-hidro-3-furanilmetil]-9ff-purin-6-amina (Isómero 2)

A uma solução de sal de ácido trifluoroacético de 2 —[(2— ciclopropiletil)oxi]-8-(metoxi)-lH-purin-6-amina (2,89 g) em N,N-dimetilformamida seca (32 mL) sob azoto e à temperatura ambiente, foi adicionado carbonato de potássio (4,41 g) de uma única vez. A reacção foi aquecida até 60 °C e agitada durante 90 minutos. Foi então gradualmente adicionada uma solução de metanossulfonato de tetra-hidro-3-furanilmetilo, Isómero 2 (1,869 g) em DMF seca (3 mL) via pipeta. A reacção foi aquecida até 70 °C e deixada a agitar, de um dia para o outro. Ainda estava presente 22% de material de partida por LCMS, pelo que a temperatura foi aumentada para 90 °C e agitada durante mais 3 horas a esta temperatura. A reacção foi arrefecida e diluída com acetato de etilo (100 mL) e lavada com água (50 mL) e solução aquosa saturada de cloreto de sódio (50 mL) . A camada orgânica foi concentrada in vacuo para produzir um óleo cor de laranja. O produto foi purificado por cromatografia de fase inversa em Ci8 utilizando água (0,1% de ácido fórmico)- acetonitrilo (0,05% de ácido fórmico) como eluente (10-60%) para proporcionar o composto em epígrafe como um óleo viscoso cor de laranja (1,45 g) . MS calculado para (C16H23N5O3)+ = 333 269 334 MS encontrado (electrospray): (M+H)

Intermediário 172: N2-Butil-8-(metoxi)-9-(tetra-hidro-3- furanilmetil)-9H-purina-2,6-diamina

Sal de ácido trif luoroacético de i^-butil-e-(metoxi) -3H-purina-2,6-diamina (0,25 g) e carbonato de potássio anidro (0, 395 g) em DMF anidra (3 mL) foram aquecidos durante 1 hora a 60 °C (externos) sob azoto, antes de serem deixados arrefecer até à temperatura ambiente. À mistura reaccional foi então adicionado 3-(bromometil)tetra-hidrofurano (0,236 g) e a mistura reaccional aquecida sob azoto a 50 °C (externos) durante 18,5 horas. A mistura reaccional foi então diluída com água (15 mL) e extraída com éter dietílico (15 mL, 3 vezes) . As camadas orgânicas foram combinadas e secas sobre sulfato de sódio anidro. O sulfato de sódio foi filtrado e o filtrado evaporado sob pressão reduzida para dar um óleo. Este óleo foi triturado com ciclo-hexano e um pouco de éter dietílico para dar um sólido. O ciclo-hexano e éter dietílico foram evaporados sob pressão reduzida para dar um sólido branco. O sólido (0,2606 g) foi dissolvido em etanol quente (2 mL). A esta solução foi então adicionada água (8 mL) e a suspensão resultante foi aquecida a refluxo (93 °C, externos) dando uma solução. A solução foi então deixada arrefecer lentamente (não removendo o balão do bloco de aquecimento e desligando a corrente do bloco de aquecimento). 270

Isto deu uma goma sólida ao arrefecer, que quando submetida a ultrassons deu um sólido branco. Este sólido foi isolado por filtração sob sucção e em seguida seco sob vácuo a 50 °C, de um dia para o outro. Isto deu o composto em epígrafe (0, 1043 g) como um sólido branco. MS calculado para (C15H24 N6O2)+ = 320 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 321 RMN de (CDCI3) : δ 4,94 (2H, s 1), 4, 64-4,55 (1H, m), 4,1 (3 H, s), 3,98-3,82 (3H, m), 3,81-3,72 (2H, m), 3, 68-3, 62 (1H, m), 3,37 (2H, q), 2, 89-2, 76 (1H, m) , 2,02-1,91 (1H, m),1,79-1,68 (1H, m), 1,62-1,52 (2H, m), 1, 48-1, 36 (2H, m) , 0,95 (3H, t).

Intermediário 172, processo alternativo: N2-Butil-8- (metoxi)-9-(tetra-hidro-3-furanilmetil)-9H-purina-2,6-diamina

Sal de ácido trifluoroacético de í^-butil-e-(metoxi)-3H-purina-2,6-diamina (0,25 g) e carbonato de potássio anidro (0,395 g) em DMF anidra (3 mL) foram aquecidos sob azoto a 60 °C (externos) durante 1 hora. Depois de deixar a mistura reaccional arrefecer até à temperatura ambiente ambiente, foi adicionado metanossulfonato de tetra-hidro-2-furanilmetilo (0,257 g) e a 271 mistura reaccional foi aquecida a 70 °C (externos) durante 18,5 horas sob azoto. A mistura reaccional [N2420-15-D3] foi diluída com água (15 mL) e extraída com éter dietílico (15 mL, 3 vezes). As camadas orgânicas foram combinadas e secas sobre sulfato de sódio anidro. O sulfato de sódio foi filtrado e o filtrado evaporado sob pressão reduzida para dar uma goma oleosa. Este material foi então triturado com ciclo-hexano e éter dietílico, raspando até se obter um sólido amarelo pálido. O ciclo-hexano e éter dietílico foram removidos por evaporação sob pressão reduzida para dar um sólido amarelo pálido (0,2123 g) . Este foi dissolvido em etanol quente (2 mL) . A esta solução foi adicionada água (8 mL) para dar uma suspensão oleosa que foi então aquecida a refluxo (90 °C, externos) dando uma solução. A solução resultante foi deixada arrefecer lentamente, não removendo o balão do bloco de aquecimento e desligando a corrente do bloco de aquecimento. Ao arrefecer até à temperatura ambiente, a goma resultante foi submetida a ultrassons e raspada para dar um sólido. Este sólido foi filtrado sob sucção e o bolo de filtração resultante foi lavado com água (2 mL) . O sólido branco resultante foi então seco ao ar sob sucção antes de ser adicionalmente seco sob vácuo a 50 °C até peso constante para dar o composto em epígrafe como um sólido ligeiramente esbranquiçado (0,109 g). MS calculado para (Ci5H24 Ν6θ2)+ = 320 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 321 RMN de ΧΗ (CDC13) : δ 4,93 (2H, s 1), 4, 64-4,53 (1H, m) , 4,1 (3H, s), 3,98-3,82 (3H, m), 3,81-3,71 (2H, m), 3,69-3,61 (1H, m), 3,37 (2H, q), 2, 89-2, 76 (1H, m), 2,03-1,91 (1H, m),1,79-1,68 (1H, m), 1,63-1,51 (2H, m), 1,48-1,36 (2H, m), 0,95 (3H, t) . 272

Intermediário 173: 2-[(3S)-Tetra-hidro-3-furanil]etanol

Foi adicionado,, gota a gota, ao longo de uma hora, complexo de borano-tetra-hidrofurano, 1 M em THF (50 mL, 50,0 mmol) a uma solução, mantida sob agitação, de ácido (3R)-tetra-hidro-3-furanilacético (2,4 g, 18,44 mmol) (J. Med Chem., 1993, 36, 2300) em thf seco (35 mL) arrefecido até -5 °C sob uma atmosfera de azoto. A mistura reaccional foi aquecida até à temperatura ambiente e deixada a agitar sob atmosfera de azoto durante 16 horas. A mistura reaccional foi arrefecida até -5 °C e foi adicionado metanol (15 mL) gota a gota, mantendo a temperatura abaixo de 5 °C. A solução foi concentrada sob vácuo e o resíduo foi dissolvido em DCM e purificado por cromatografia sobre silica (100 g) utilizando um gradiente de diclorometano:acetato de etilo (0-100% de gradiente ao longo de 40 min). As fracções desejadas foram combinadas e concentradas sob vácuo para dar o composto em epígrafe como um óleo incolor (1,4 g) . RMN de XH (400 MHz, DMSO-d5) δ ppm 1,38 - 1, 52 (m, 3 H) 1,91 - 2,01 (m, 1 H) 2,11 - 2,24 (m, 1 H) 3,17 - 3,23 (m, 1 H) 3,35 - 3,46 (m, 2 H) 3,56 - 3,63 (m, 1 H) 3,66 - 3,72 (m, 2 H em excesso) 3,75 - 3,80 (m, 2 H em excesso) OH não observado 273

Intermediário 174: (3R)-3-(2-Bromoetil)tetra-hidrofurano

Uma solução de trifenilfosfina (6,32 g, 24,11 mmol) em diclorometano seco (10 mL) foi adicionada, gota a gota, ao longo de 30 minutos a uma solução, mantida sob agitação, de 2 —[(35) — tetra-hidro-3-furanil]etanol (1,4 g, 12,05 mmol) e tetrabrometo de carbono (7,99 g, 24,11 mmol) em diclorometano seco (20 mL) a -2 °C sob uma atmosfera de azoto. A mistura reaccional foi aquecida até à temperatura ambiente e deixada a agitar sob atmosfera de azoto durante 20 horas. A mistura reaccional foi filtrada sobre celite e o sólido branco foi lavado com éter e DCM. O filtrado cor de laranja foi concentrado sob vácuo. O residuo foi dissolvido em DCM e purificado por cromatografia sobre silica (100 g) utilizando um gradiente de ciclo- hexano:acetato de etilo (0-25% de gradiente ao longo de 40 min). As fracções desejadas foram combinadas e concentradas sob vácuo para dar o composto em epigrafe como um óleo incolor (1,4 g). RMN de (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1, 43 - 1,54 (m, 1 H) 1,84 - 1,91 (m, 2 H) 1, 94 - 2,03 (m, 1 H) 2,23 - 2,31 (m, 1 H) 3,24 - 3,28 (m, 1 H) 3, 49 - 3,56 (m, 2 H) 3,58 - 3,65 (m, 1 H) 3,68 - 3,74 (m, 1 H) 3,75 - 3,80 (m, 1 H) [a]=-9,01 (c=l em AcOEt, 20 °C) 274

Intermediário 175: 2-[(3R)-Tetra-hidro-3-furanil]etanol

Uma solução de ácido (3S)-tetra-hidro-3-furanilacético (1,8 g, 13,83 mmol) (J. Med Chem., 1993, 36, 2300) em THF seco (35 mL) foi agitada e arrefecida até -5 °C sob atmosfera de azoto. Foi adicionado hidreto de alumínio e lítio, 1 M em Éter (20,75 mL, 20,75 mmol) mantendo a temperatura abaixo de 0 °C. A mistura reaccional foi então aquecida até à temperatura ambiente e deixada a agitar sob atmosfera de azoto durante 3 horas. A mistura reaccional foi arrefecida até -5 °C e foi adicionado mais hidreto de alumínio e lítio, 1 M em éter (20,75 mL, 20,75 mmol), mantendo a temperatura abaixo de 0 °C. A mistura reaccional foi novamente aquecida até à temperatura ambiente e deixada a agitar sob uma atmosfera de azoto durante 16 horas. A mistura reaccional foi arrefecida até -5 °C e desactivada com solução aquosa saturada de NH4CI (15 mL) que foi adicionada, gota a gota, mantendo a temperatura abaixo de 5 °C. Depois foi adicionado éter (100 mL) . A mistura foi filtrada e o sólido branco obtido foi lavado com éter (50 mL) e solução aquosa saturada de NH4CI (50 mL) . As fases do filtrado foram separadas e a camada orgânica foi seca passando através de um filtro poroso hidrófobo e concentrada sob vácuo. 0 sólido branco foi então lavado com solução aquosa saturada de NH4CI (50 mLi ) e AcOEt (50 mL). As fases do filtrado foram separadas e a camada orgânica foi seca e concentrada sob vácuo. As fases aquosas foram combinadas e extraídas com AcOEt (4 X 100 mL). Todos os 275 extractos orgânicos foram combinados, secos utilizando um filtro poroso hidrófobo e concentrados sob vácuo para dar o composto em epígrafe como um óleo incolor (1 g). RMN de XH (400 MHz, DMSO-dç ) δ ppm 1,38 - 1,52 (m, 3 H) 1,92 - 2,02 (m, 1 H) 2, 11 - 2,24 (m, 1 H) 3,17 - 3,23 (m, 1 H) 3,34 - 3,47 (m, 2 H) 3,55 - 3,64 (m, 1 H) 3, 65 - 3,73 (m, 1 H) 3, 74 - 3,81 (m, 1 H) 4,35 - 4,41 ( m, 1 H)

Intermediário 176: (35)-3-(2-Bromoetil)tetra-hidrofurano

Br

Preparado de modo análogo ao Intermediário 174 de 2-[(3R)-tetra-hidro-3-furanil]etanol. RMN de XH (400 MHz, DMSO-de) δ ppm 1,44 - 1,54 (m, 1 H) 1, 84 - 1,91 (m, 2 H) 1, 94 - 2,03 (m, 1 H) 2,21 - 2,33 (m, 1 H) 3,24 - 3,28 (m, 1 H) 3,50 - 3,57 (m, 2 H) 3,58 - 3,65 (m, 1 H) 3,68 - 3,75 (m, 1 H) 3,77 (dd, J= 8, 28, 7,28 Hz, 1 H) [a]=+9,01 (c=l em AcOEt, 20 °C) 276

Intermediário 177 : Ácido 3- (tetra-hidro-3 furanil)propanóico

Uma solução de (4,75 g, 34,4 mmol) e 3,44 mmol) em acetato pressão atmosférica e ácido (2E)-3-(3-furanil)-2-propenóico paládio a 10% sobre carvão (0,366 g, de etilo (100 mL) foi hidrogenada à temperatura ambiente durante 72 horas.

Captação de hidrogénio ~1,4 L (esperado 2,4 L). O catalisador foi filtrado através de Celite e concentrado in vacuo para dar um óleo castanho. A análise por RMN de XH mostrou que algum material continuava a conter o anel de furano. A hidrogenação continuou nas mesmas condições com catalisador fresco durante mais 24 horas com captação adicional de hidrogénio de 400 mL. O catalisador foi filtrado através de Celite e o filtrado concentrado in vacuo para proporcionar 0 composto em epígrafe como um óleo incolor (4,73 g). RMN de XH (400 MHz, DMSO-dç) δ ppm 1,37 - 1,48 (m, 1 H) 1, 50 - 1,63 (m, 2 H) 1,90 - 2,01 (m, 1 H) 2, 04 - 2,17 (m, 1 H) 2,17 - 2,29 (m, 2 H) 3,18 - 3,25 (m, 1 H) 3,56 - 3,65 (m, 1 H) 3,67 - 3,79 (m, 2 H) 12,00 (s. 1., 1 H) 277

Intermediário 178: 3-(Tetra-hidro-3-furanil)-1-propanol

OH A uma solução de ácido 3-(tetra-hidro-3-furanil)propanóico (1 g, 6,94 mmol) em THF seco (20 mL) a 0 °C foi adicionada,, gota a gota, ao longo de 2 min, uma solução 1 M de complexo de boro THF (21,16 mL, 21,16 mmol) em THF. A mistura foi agitada a 0 °C durante 1 hora, em seguida deixada aquecer até à temperatura ambiente e agitada durante 18 h. A mistura reaccional foi cuidadosamente desactivada com metanol (~20 mL) e 0 solvente removido in vacuo. O resíduo foi redissolvido em metanol e concentrada in vacuo quatro vezes para dar o composto em epígrafe como um óleo incolor (3,37 g) RMN de ΧΗ (400 MHz, DMSO~d6) δ ppm 1,26 - 1, 50 (m, 5 H) 1,90 - 2,01 (m, 1 H) 2,09 (spt, J=7,28 Hz, 1 H) 3,13 - 3,22 (m, 1 H) 3,34 - 3,43 (m, 2 H) 3,56 - 3,65 (m, 1 H) 3,66 - 3,74 (m, 1 H) 3,74 - 3,81 (m, 1 H) 4,33 (s 1., 1 H) 278

Intermediário 179: 3-(3-Bromopropil)tetra-hidrofurano

3-(Tetra-hidro-3-furanil)-1-propanol (1 g, 7,68 mmol) foi dissolvido em dmf (10 mL) e adicionado tetrabrometo de carbono (5,09 g, 15,36 mmol). A solução ficou amarela. A solução foi arrefecida até 0 °C e adicionada, gota a gota, trifenilfosfina (4,03 g, 15,36 mmol) como uma solução em DMF (20 mL) (~30 min, temperatura mantida <2 °C durante todo o tempo). A mistura reaccional foi agitada a 0 °C durante 1 hora, antes de ser deixada aquecer gradualmente até à temperatura ambiente e agitada durante mais 2 horas. O solvente foi removido in vacuo. A tentativa de trituração do óleo castanho resultante com dcm ou ciclo-hexano não teve sucesso. O solvente foi removido e o óleo diluído com DCM e foi purificado por cromatografia sobre sílica (100 g) utilizando 0-25% de acetato de etilo-ciclo-hexano ao longo de 40 min, utilizando um Flashmaster II. As fracções apropriadas foram combinadas e secas para dar o composto em epígrafe como um óleo amarelo (0, 676 g) . RMN de ΧΗ (400 MHz, DMSO-de) δ ppm 1,37 - - 1 ,49 (m, 5 H, em exces SO) 1,74 - - 1,88 (m, 2 H) 1,93 - 2,02 ( m, J= 12,20, 7, 58, 7, 58, 4, 77 Hz, 1 H) 2,13 (spt, J=7,36 Hz, 1 H) 3/ , 18 - 3,24 (m , 1 H) 3, 50 - 3,56 (m, 1 H) 3,57 - 3,65 (m, 1 H) 3, 67 - 3,74 (m , 1 H) 3, 75 - 3,81 (m, 1 H) 279

Intermediário 180: 3-{(1E/Z)-4-[(Fenilmetil)oxi]-1-buten-l- il}furano

Intermediário 180: 3-{(1E/Z)-4-[(Fenilmetil)oxi]-1-buten-l- A

brometo de (3-benziloxipropil)trifenilfosfónio (25,6 g, 52,0 mmol) em THF seco (60 mL) a -15 °C foi adicionado butil-lítio (32,5 mL, 1,6 M em hexanos), gota a gota, para dar uma solução. Foi adicionada, gota a gota, uma solução de 3-furanocarbaldeído (5 g, 52,0 mmol) em THF (20 mL) para formar uma solução laranja escura/vermelha. A mistura reaccional foi agitada a -10 °C durante 30 min, antes de ter sido adicionado, gota a gota, 3-furanocarbaldeído (5 g, 52,0 mmol) como uma solução em tetra-hidrofurano (20 mL) para dar uma solução castanha. A mistura reaccional foi então deixada aquecer até à temperatura ambiente e agitada, de um dia para o outro. Formou-se um precipitado castanho pálido, pelo que a mistura reaccional foi filtrada através de Celite e lavada com éter dietílico. O filtrado foi concentrado in vacuo para dar um óleo cor de laranja escuro que foi carregado em DCM e purificado em dois lotes por cromatografia sobre sílica (100 g) utilizando um gradiente de 0-25% de acetato de etilo-ciclo-hexano ao longo de 40 min, utilizando um Flashmaster II. As fracções apropriadas foram combinadas e evaporadas in vacuo para dar o composto em epígrafe como um óleo amarelo pálido (6,11 g). LCMS (Método B) : tRET = 1,31 min; MH+ 229 280

Intermediário 181: 4-(Tetra-hidro-3-furanil)-1-butanol

Uma solução de 3-{4-[(fenilmetil)oxi]-1-buten-l-il}furano (6,11 g, 26,8 mmol) e paládio a 10% sobre carvão (0, 285 g, 2,68 mmol) em acetato de etilo (150 mL) e ácido acético (15 mL) foi hidrogenada à pressão atmosférica e temperatura ambiente durante 24 horas. O catalisador foi filtrado através de Celite e o filtrado concentrado in vacuo. A RMN de 1H mostrou que não tinha ocorrido qualquer redução, pelo que a mistura reaccional foi hidrogenada nas mesmas condições durante mais 72 horas. O catalisador foi filtrado através de Celite e o filtrado concentrado in vacuo, a RMN de ΧΗ mostrou que a ligação dupla tinha sido reduzida mas que os anéis de benzilo e furano continuavam intactos. O resíduo foi hidrogenado nas mesmas condições durante mais 2 dias. O catalisador foi filtrado através de Celite e o filtrado concentrado in vacuo.

Uma porção do material (500 mg) foi dissolvida em acetato de etilo (5 mL) e hidrogenada utilizando um cubo H de Thales (parâmetros: t.a., 20 bar, caudal de 1 mL/min) utilizando paládio a 10% sobre carvão como o catalisador. A solução resultante foi concentrada, a RMN de 1H não mostrou qualquer alteração.

Todos os lotes de material foram combinados, carregados em diclorometano e purificados sobre sílica (100 g) utilizando um 281 gradiente de 0-25% de acetato de etilo-ciclo-hexano ao longo de 40 min, utilizando um Flashmaster II. As fracções apropriadas foram combinadas e evaporadas in vacuo, uma solução do residuo (3,42 g, 14,9 mmol) e paládio a 10% sobre carvão (684 mg) em acetato de etilo (100 mL) foi hidrogenada à pressão atmosférica e temperatura ambiente durante 24 horas. O catalisador foi filtrado através de Celite e o filtrado concentrado in vacuo para dar o composto em epigrafe como um óleo amarelo (2,22 g). RMN de 1n (400 MHz, DMSO-de) δ ppm 1,21 - 1,47 (m, 7 H) 1,88 - 2,01 (m, 1 H) 2,01 - 2,15 (m, 1 H) 3,13 - 3,22 (m, 1 H) 3,33 - 3,42 (m, 2 H) 3,60 (q, J=7,78 Hz, 1 H) 3,65 - 3,81 (m, 2 H) 4,30 - 4,36 (m, 1 H)

Intermediário 182: 3-(4-Bromobutil)tetra-hidrofurano

Preparado de modo análogo ao Intermediário 174 de 4-(tetra-hidro-3-furanil)-1-butanol. RMN de XH (400 MHz, DMSO-dè) δ ppm 1,30 - 1,46 (m, 8 H) 1, 76 - 1,85 (m, 2 H) 1,92 - 2,01 (m, 1 H) 2, 05 - 2,15 (m, 1 H) 3,16 - 3,22 (m, 1 H) 3,50 - 3,55 (m, 2 H) 3,57 - 3,64 (m, 1 H) 3,67 - 3,74 (m, 1 H) 3,74 - 3,80 (m, 1 H) 282

Intermediário 183: 2-(2-Bromoetil)tetra-hidro-2fl-pirano

Br

Uma solução de trifenilfosfina (1,93 g, 7,37 mmol) em DCM (10 mL) foi adicionada, gota a gota, a uma solução de intermediário 72 (0,80 g, 6,15 mmol) e tetrabrometo de carbono (2853 mg, 8,60 mmol) em DCM (40 mL) a 0 °C sob azoto. A solução foi agitada a 0 °C durante 15 min, foi adicionado ciclo-hexano (30 mL) e a mistura foi evaporada suavemente para remover o DCM. A solução em ciclo-hexano resultante foi decantada do precipitado gomoso directamente para um cartucho de sílica (50 g) (pré-humedecido com ciclo-hexano) e eluído com ciclo-hexano - DCM 1:1 para dar o composto em epígrafe como um óleo incolor (0,68 g). RMN de ΧΗ (400 MHz, CDC13) ppm 1,23 - 1,35 (m, 1 H) 1, 48 - 1,62 (m, 4 H) 1, 80 - 1, 96 (m, 2 H) 1, 98 - 2, 08 (m, 1 H) 3,39 - 3,58 (m, 4 H) 3,93 - 4,00 (m, 1 H)

Intermediário 184: 2-(3-Bromopropil)tetra-hidro-2fl-pirano

Br

Preparado de modo análogo ao Intermediário 174 de 3-(tetra-hidro-2fí-piran-2-il)-1-propanol (documento WO 2007/70201). 283 RMN de XH (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,08 - 1,21 (m, 1 H) 1,36 - 1,57 (m, 8 H em excesso) 1,70 - 1,95 (m, 3 H) 3,17 - 3,32 (m, 2 H) 3,43 - 3,57 (m, 2 H) 3,49 - 3,56 (m, 2 H) 3,80 - 3,87 (m, 1 H)

Intermediário 185: 2-(4-Bromobutil) tetra-hidro-2fí-pirano

O

Br

Preparado de modo análogo ao Intermediário 174 de 4-(tetra-hidro-2fí-piran-2-il)-1-butanol (J. Am. Chem. Soc, 2005, 127, 12180) . RMN de (400 MHz, CDC13) δ ppm 1,20 - 1,32 (m, 1 H) 1, 37 - 1, 6 4 (m, 11 H em excesso) 1,78 - 1,93 (m, 2 H) 3, 20 - 3, 28 (m, 1 H) 3,38 - 3,46 (m, 3 H) 3,94 - - 4,00 (m, 1 H)

Intermediário 186: 2-(Tetra-hidro-2ff-piran-3-il) etanol

O

OH

Uma solução de hidreto de aluminio e litio em Et20 (4,16 mL, 4,16 mmol) foi adicionada, gota a gota, a uma solução de ácido tetra-hidro-2H-piran-3-ilacético (Tet. Lett. 2003, 44, 6355) (0,6 g, 4,16 mmol) em THF (5 mL) à temperatura ambiente sob 284 azoto. A mistura foi agitada durante 1 hora e foi tratada muito lentamente, gota a gota, com água (1 mL) . Depois de a reacção ter sido desactivada, foi adicionado hidróxido de sódio aquoso (2 N, 1 mL) e a mistura foi agitada durante 5 min. A suspensão foi filtrada através de Hyflo e evaporada até ao composto em epígrafe como um óleo incolor (0,3 g). RMN de XH (400 MHz, CDC13) δ ppm 1,12 - 1,94 (m, 9 H em excesso) 3,06 - 3,15 (m, 1 H) 3,33 - 3,42 (m, 1 H) 3,63 - 3,72 (m, 2 H) 3,83 - 3,91 (m, 2 H)

Intermediário 187: 3-(2-Bromoetil)tetra-hidro-2ff-pirano (X.

Uma solução de trifenilfosfina (725 mg, 2,77 mmol) em DCM (4 mL) foi adicionada gota a gota, com arrefecimento em banho-maria, a uma solução de 2-(tetra-hidro-2/í-piran-3-il) etanol (300 mg, 2,304 mmol) e tetrabrometo de carbono (917 mg, 2,77 mmol) em DCM (6 mL) . A solução foi agitada à temperatura ambiente durante 2 hora e foi evaporada sobre Florisil e aplicada a um cartucho de sílica (20 g) pré-humedecida com ciclo-hexano. A eluição com ciclo-hexano-DCM (3:1) deu o composto em epígrafe como um óleo incolor (0,42 g). RMN de XH (400 MHz, CDC13) δ ppm 1,13 - 1,26 (m, 1 H) X59 - 1, 94 (m, 6 H) CO o co 1 3,16 (m, 1 H) 3,35 - 3,48 (m, 3 H) 3,82 - 3,91 (m, 2 H) 285

Intermediário 188: 3-(3-Bromopropil)tetra-hidro-2i7-pirano

Preparado de modo análogo ao Intermediário 174 de 3-(tetra-hidro-2H-piran-3-il) -1-propanol. RMN de ΧΗ (400 MHz, CDC13) δ ppm 1,09 - 1,40 (m, 5 H em excesso) 1,56 - 1,67 (m, 3 H em excesso) 1,81 - 1,92 (m, 4 H) 3,02 - 3,11 (m, 1 H) 3,32 - 3,45 (m, 3 H) 3,82 - 3,92 (m, 2 H)

Intermediário 189: 3-(4-Bromobutil) tetra-hidro-2fí-pirano

4-(tetra-

Preparado de modo análogo ao Intermediário 174 de hidro-2ii-piran-3-il) -1-butanol. RMN de (400 MHz, CDC13) δ ppm 1, 05 - 1,30 (m, 1,36 - 1,65 (m, 8 H em excesso) 1,79 - 1,92 (m, 3 (m, 1 H) 3,30 - 3, 4 6 (m, 3 H) 3, 81 - 3,92 (m, 2 H) 3 H) 3,10 286

Intermediário 190: 4-(3-Bromopropil)tetra-hidro-2fl-pirano

C

Br

Preparado de modo análogo ao Intermediário 174 de 3-(tetra-hidro-2H-piran-4-il) -1-propanol. RMN de ΧΗ (400 MHz, DMSO~d6) δ ppm 1,04 - 1,19 (m, 2 H) 1,25 - 1,36 (m, 2 H) 1,41 - 1,60 (m, 3 H) 1, 75 - 1, 86 (m, 2 H) 3,20 - 3,34 (m, 2 H) 3,47 - 3,56 (m, 2 H) 3,76 - 3,85 (m, 2 H)

Intermediário 191: 4-{(ΙΕ/Z)-4-[(Fenilmetil)oxi]-1-buten-l- il} tetra-hidro-2ff-pirano

A uma suspensão de brometo de (3-benziloxi-propil)trifenil-fosfónio (21,57 g, 43,8 mmol) em THF seco (67 mL) a -15 °C foi adicionado,, gota a gota, durante uma hora, BuLi 1,6 M em hexanos (27,4 mL, 43,8 mmol) para dar uma solução cor de laranja escura. A reacção foi aumentada até 0 °C e a agitação continuou durante 30 minutos. Foi adicionada uma solução de tetra-hidro-2H-pirano-4-carbaldeído (5 g, 43,8 mmol) em THF seco (7 mL), gota a gota, a 0 °C durante 15 minutos. A mistura reaccional foi agitada à temperatura ambiente durante 20 horas. Esta foi 287 filtrada através de celite pré-empacotada (10 g) e lavada com éter dietílico. O filtrado foi concentrado in vacuo para dar um óleo cor de laranja. O material em bruto foi dividido em dois lotes e cada um pré-absorvido sobre sílica e purificado por cromatografia sobre silica (50 g) utilizando um gradiente de 0-25% de acetato de etilo-ciclo-hexano ao longo de 60 min utilizando o Flashmaster II. As fracções apropriadas foram combinadas e evaporadas in vacuo para dar o composto em epigrafe como um óleo incolor (4,5059 g). RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,22 - 1,35 (m, 2 H) 1,40 (s, 5 H em excesso) 2,29 - 2,36 (m, 1 H) 3,27 - 3,37 (m, 2 H) 3,39 - 3,46 (m, 2 H) 3, 74 - 3,84 (m, 2 H) 4,46 (s, 2 H) 5,21 - 5,46 (m, 2 H) 7,22 - 7,42 (m, 5 H)

Intermediário 192: 4-(Tetra-hidro-2fl-piran-4-il)-1-butanol

Uma solução de 4-{(1E)-4-[(fenilmetil)oxi]-1-buten-l-il}tetra-hidro-2A-pirano (4,5059 g, 18,29 mmol) e paládio sobre carvão (0,195 g, 0,183 mmol) em acetato de etilo (140 mL) foi hidrogenada à pressão atmosférica e temperatura ambiente. Esta foi deixada a agitar, de um dia para o outro, em hidrogénio. A mistura foi então filtrada através de celite pré-empacotada 288 (10 g) para remover o paládio e lavada com éter (~30 mL) . A camada orgânica foi concentrada in vacuo, foi realizada RMN de no óleo resultante para mostrar que ainda estavam presentes grupo benzilo e ligações duplas.

Uma solução do material e paládio sobre carvão (0,3 g) em acetato de etilo (140 mL) foi hidrogenada à pressão atmosférica e temperatura ambiente. Esta foi deixada a agitar, de um dia para o outro, em atmosfera de hidrogénio. A mistura foi então colocada através de celite pré-empacotada (10 g) para remover o paládio e lavada com éter (—30 mL) . O filtrado orgânico foi concentrado in vacuo para dar o composto em epígrafe como um óleo incolor (2,27 g) RMN de *Η (400 MHz, DMSO-de) δ ppm 0,80 - 0,92 (m, 1 H) 1,01 - 1,60 (m, 10 H) 3,17 - 3,42 (m, 4 H) 3,74 - 3,87 (m, 2 H) 4,32 (s, 0,6 H)

Intermediário 193: 4-(4-Bromobutil)tetra-hidro-2fl-pirano

Br

Preparado de modo análogo ao Intermediário 174 de 4-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)-1-butanol. 289 RMN de XH (400 MHz, DMSO-dè) δ ppm 1,04 - 1,27 (m, 4 H) 1, 33 - 1, 60 (m, 5 H) 1, 72 - 1, 84 (m, 2 H) 3,20 - 3,33 (m, 2 H) 3, 49 - 3, 57 (m, 2 H) 3,77 - 3,86 (m, 2 H)

Intermediário 194: 2,2-Dimetil-4-[(E)-2-(metiloxi)etenil]tetra-hidro-2#-pirano

A uma suspensão, mantida sob agitação, de cloreto de [(metiloxi)metil](trifenil)fosfónio (24,1 g, 70,3 mmol) em THF seco (70 mL) a -40 °C sob azoto foi adicionado t-butóxido de potássio, solução 1 M em THF, (70 mL, 70,0 mmol), gota a gota, ao longo de 30 min. Depois de agitar durante 40 min, a mistura foi arrefecida até -70 °C e adicionada uma solução de 2,2-dimetiltetra-hidro-2H-pirano-4-carbaldeído (2,5 g, 17,58 mmol) em THF seco (10 mL), gota a gota, ao longo de 10 min. A mistura foi agitada a esta temp durante 10 min e o banho de arrefecimento foi retirado. A mistura foi agitada durante mais 30 min à ambiente, em seguida desactivada vertendo sobre gelo. A fase aquosa foi extraída com Et20 (3 x 100 mL) , os extractos orgânicos combinados e lavados com solução saturada de NaCl (100 mL), secos (Na2SC>4) filtrados e evaporados até à secura para dar um óleo âmbar (19 g) . 2 g do produto em bruto foi carregado em éter dietílico e purificado sobre sílica 50 g utilizando 0-25% de acetato de etilo-ciclo-hexano ao longo de 40 min, utilizando Flashmaster II. As fracções foram seguidas 290 revelando num tanque de iodo e as fracções apropriadas foram combinadas e evaporadas in vacuo para dar o produto requerido como um óleo incolor. A maioria da mistura em bruto foi então purificada do mesmo modo: ao residuo foi adicionado ciclo-hexano seguido de éter, a mistura foi filtrada e o filtrado purificado sobre silica 2 X 100 g utilizando um gradiente de 0-25% de acetato de etilo-ciclo-hexano ao longo de 40 min, num Flashmaster II. As fracções apropriadas foram identificadas por revelação com iodo e combinadas e evaporadas in vacuo. Isto foi combinado com o produto obtido na primeira purificação de pequena escala para dar o composto em epígrafe como um líquido incolor (2,96 g) . RMN de XH (400 MHz, CDC13) δ ppm 1,17 - 1,25 (m, 8 H em excesso) 1,25 - 1,39 (m, 2 H) 1,48 - 1,59 (m, 2 H) 2,22 - 2,34 (m, 0,6 H) 2, 76 - 2, 88 (m, 0,3 H) 3,50 (s, 2 H) 3,58 (s, 1 H) 3,62 - 3,77 (m, 2 H) 4,14 (dd, J=8,53, 6,27 Hz, 0,3 H) 4,61 (dd, J=12,67, 7,65 Hz, 0,6 H) 5,82 (dd, J=6,27, 1,00 Hz, 0,3 H) 6,32 (d, J=12,80 Hz, 0,6 H)

Intermediário 195:_(2,2-Dimetiltetra-hidro-2ff-piran-4- il)acetaldeído

O =0 A uma solução, mantida sob agitação, de 2,2-dimetil-4-[(E)— 2-(metiloxi)etenil]tetra-hidro-2H-pirano (2,93 g, 17,21 mmol) em 291 THF (15 mL) foi adicionado HC1 2 N (15 mL, 30,0 mmol) e a mistura foi agitada a 20 °C. Após 1 hora, a mistura foi extraída com éter dietílico (3 x 25 mL) ; os extractos etéreos combinados foram secos (Na2S04), filtrados e evaporados in vácuo (a 50 mbar e banho-maria a 15 °C) para dar o composto em epígrafe como um óleo amarelo pálido (2,56 g). RMN de (400 MHz, CDC13) δ ppm 1,19 - 1,29 (m, 9 H em excesso) 1,53 - 1,65 (m, 4 H) 1,83 - 1,88 (m, 1 H) 2,25 - 2,38 (m, 2 H) 3,65 - 3,77 (m, 2 H) 9, 77 - 9, 79 (m, 1 H)

Intermediário 196: 2-(2,2-Dimetiltetra-hidro-2ff-piran-4-il)etanol

Uma suspensão, mantida sob agitação, de boro-hidreto de sódio (0,620 g, 16,39 mmol) em etanol seco (20 mL) foi arrefecida até 0 °C (banho de gelo) sob azoto e foi adicionada uma solução de (2,2-dimetiltetra-hidro-2íí-piran-4-il)acetaldeído (2,56 g, 16,39 mmol) em etanol (20 mL), gota a gota, ao longo de um período de 20 min. A mistura foi então agitada no frio durante mais 1 hora, em seguida deixada aquecer até à ambiente e agitada durante 72 horas. O solvente foi removido por evaporação e o óleo residual foi vertido para gelo e extraído com DCM (3 x 30 mL). Os extractos orgânicos foram combinados e secos passando através de um filtro poroso hidrófobo e evaporados in vacuo para dar um óleo incolor que continha o composto em epígrafe. 292 RMN de 1H (400 MHz, CDC13) δ ppm 1,04 - 1,27 (m, 11 H em excesso) 1,43 - 1,64 (m, 5 H em excesso) 1,77 - 1,93 (m, 1 H) 3,44 - 3,55 (m, 1 H) 3,59 - 3,77 (m, 4 H)

Intermediário 197: 4-(2-Bromoetil)-2,2-dimetiltetra-hidro- 2ff-pirano

O

Br

Preparado de modo análogo ao Intermediário 174 de 2-(2,2-dimetiltetra-hidro-2íí-piran-4-il) etanol. RMN de 1H (400 MHz, CDCI3) δ ppm 1,04 - 1,12 (m, 1 H) 1,14 - 1, 20 (m, 1 H) 1,20 - 1,25 (m, 6 H) 1,54 - 1,64 (m, 6 H em excesso) 1, 71 - 1, 83 (m, 2 H) 1,87 - 2,01 (m, 1 H) 3,42- 3, 49 (m, 2 H) 3,62 - 3,80 (m, 1 H)

Intermediário_198 :_(4E/Z) -2,2-dimetil-4 - {3- [ (fenilmetil) oxi] propilideno}tetra-hidro-2il-pirano

293 A uma suspensão, mantida sob agitação, de brometo de trifenil{3-[(fenilmetil)oxi]propil}fosfónio (23,00 g, 46,8 mmol) em THF (60 mL) a -15 °C sob atmosfera de azoto foi adicionado n-butil-litio, 1,6 M em hexano (29,3 mL, 46,8 mmol), gota a gota, ao longo de 30 min. A solução cor de laranja/vermelha foi agitada a -10 °C durante 30 min. Foi adicionada uma solução de 2,2-dimetiltetra-hidro-4fí-piran-4-ona (6 g, 46,8 mmol) em THF (10 mL), gota a gota, a -10 °C ao longo de 25 min. A mistura reaccional foi então agitada a -10 °C durante 15 min e em seguida deixada aquecer gradualmente até à temperatura ambiente, enquanto era agitada sob atmosfera de azoto durante 20 horas. Foram adicionados 10 mL de éter e a suspensão foi filtrada sobre Celite. A Celite foi lavada com éter (2 x 40 mL). O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia sobre sílica (2 x 100 g) utilizando um gradiente de Ciclo-hexano:Acetato de Etilo 0->25% ao longo de 40 min num Flashmaster II. As fracções foram analisadas por TLC (revelada mergulhando em permanganato). As fracções desejadas foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto em epígrafe como um óleo incolor (5,98 g). RMN de XH (400 MHz, DMSO-de) δ ppm 1,97 - 2,01 (m, 1 H) 2, 01 - 2,14 (m, 3 H) 2,19 - 2,33 l X 2 H) 3,36 - 3,44 (m, 2 H) 3, 48 - 3,58 (m, 2 H) 4,45 (s, 2 H) 5 ,09 - 5,19 (m, 0, 6H) 5,26 - 5,33 (m, 0,4 H) 7,22 - 7,38 (m, 5 H) 294

Intermediário 199: 3- (2, 2-Dimetiltetra-hidro-2iI-piran-4 il)-1-propanol

Intermediário 199: 3- (2, 2-Dimetiltetra-hidro-2iI-piran-4

OH

Uma solução de 2,2-dimetil-4-{3- [ (fenilmetil)oxi]propilideno} tetra-hidro-2/í-pirano (5,98 g, 22,97 mmol) em acetato de etilo (70 mL) foi hidrogenada sobre paládio a 10% sobre carvão activado (0,733 g, 0,689 mmol) à pressão atmosférica e temperatura ambiente. Após 16 horas, a mistura foi filtrada sob vácuo através de Celite, lavada com AcOEt (2 x 50 mL) e o filtrado foi evaporado até à secura para dar um óleo móvel amarelado. A RMN de ΧΗ mostrou que a maioria dos grupos benzilo tinha sido hidrogenada mas que a ligação dupla continuava presente. O resíduo foi dissolvido em acetato de etilo (70 mL) e foi hidrogenado sobre paládio a 10% sobre carvão activado (1,1 g) à pressão atmosférica e temperatura ambiente. Após 16 horas, a mistura foi filtrada sob vácuo através de Celite, lavada com AcOEt (2 x 50 mL) e o filtrado foi evaporado até à secura para dar um óleo móvel amarelado. O resíduo foi purificado por cromatografia sobre sílica (100 g) utilizando um gradiente de ciclo-hexano:acetato de etilo 0->50% ao longo de 40 min num Flashmaster II. As fracções desejadas (analisadas mergulhando em permanganato) foram combinadas e concentradas sob vácuo para dar o composto em epígrafe como um óleo amarelo pálido (2,17 g). 295 RMN de XH (400 MHz, CDC13) δ ppm 1,01 - 1,31 (m, 12 H em excesso) 1,50 - 1,74 (m, 6 H em excesso) 3,59 - 3,69 (m, 3 H) 3, 70 - 3,78 (m, 1 H)

Intermediário_200 :_4- (3-Bromopropil) -2,2-dimetiltetra- hidro-2fí-pirano

Preparado de modo análogo ao Intermediário 174 de 4 — (3 — bromopropil) -2,2-dimetiltetra-hidro-2i7-pirano. RMN de 1h (400 MHz, CDCI3) δ ppm 0,98 - 1,27 (m, 9 H em excesso) 1,27 - 1,37 (m, 2 H) 1,45 - 1,71 (m, 3H) 1,79 - 1,91 (m, 2 H) 3,31 - 3, 43 (m, 4 H) 3,56-3,66 (m, 2 H) 3,67 - 3, 75 (m, 2 H) 296

Intermediário 201: 2, 2-Dimetil-4-{(1E)-4-[(fenilmetil)oxi]- 1-buten-l-il} tetra-hidro-2ff-pirano

A uma suspensão, mantida sob agitação, de brometo de trifenil{3-[(fenilmetil)oxi]propil}fosfónio (20,74 g, 42,2 mmol) em THF (60 mL) a -15 °C sob uma atmosfera de azoto foi adicionado n-butil-litio, 1,6 M em hexano (26,4 mL, 42,2 mmol),, gota a gota, ao longo de 30 min. A solução cor de laran ja/vermelha foi agitada a -10 °C durante 30 min. Foi adicionada uma solução de 2,2-dimetiltetra-hidro-2tf-pirano-4-carbaldeido (6 g, 42,2 mmol) em THF (10 mL), gota a gota, a -10 °C ao longo de 25 min. A mistura reaccional foi então agitada a —10 °C durante 15 min e em seguida deixada aquecer gradualmente até à temperatura ambiente, enquanto era agitada sob atmosfera de azoto durante 16 horas. Foi adicionado éter (10 mL) e a suspensão foi filtrada sobre Celite. A Celite foi lavada com éter (2 x 40 mL) . O filtrado foi concentrado sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia sobre sílica (2 x 100 g) utilizando um gradiente de ciclo-hexano:acetato de etilo 0->25% ao longo de 40 min num Flashmaster II. As fracções foram analisadas por TLC (reveladas mergulhando em permanganato). As fracções desejadas foram combinadas e concentradas sob vácuo para produzir o composto em epígrafe como um óleo incolor (7,46 g). 297 RMN de XH (400 MHz, DMSO-dç) δ ppm 1,01 - 1,20 (m, 8 H) 1,31 - 1,40 (m, 2 H) 2,27 - 2,36 (m, 2 H) 2, 59 - 2, 72 (m, 1 H) 3,39 - 3,47 (m, 2 H) 3,51 - 3,58 (m, 2 H) 4, 42 - 4,48 (m, 2 H) 5,13 - 5,42 (m, 2 H) 7,23 - 7,38 (m, 5 H)

Intermediário 202: 4-(2,2-Dimetiltetra-hidro-2fl-piran-4- il)-1-butanol

Uma solução de 2,2-dimetil-4-{4-[(fenilmetil)oxi]-1-buten-l-il}tetra-hidro-2H-pirano (7,46 g, 27,2 mmol) em acetato de etilo (70 mL) foi hidrogenada sobre paládio a 10% sobre carvão activado (1,447 g, 1,359 mmol) à pressão atmosférica e temperatura ambiente. Após 16 horas, a mistura foi filtrada sob vácuo através de Celite, lavada com AcOEt (2 x 50 mL) e o filtrado foi evaporado até à secura para dar um óleo móvel amarelado (4,8 g) . O residuo foi purificado por cromatografia sobre silica (70 g) utilizando um gradiente de ciclo-hexano:acetato de etilo 0->50% ao longo de 40 min, usando um Flashmaster II. As fracções desejadas (analisadas mergulhando em permanganato) foram combinadas e concentradas sob vácuo para dar o composto em epígrafe como um óleo amarelo (1,675 g). RMN de XH (400 MHz, CDC13) δ ppm 1, 00 - 1,29 (m, 10 H) 1,33 - 1,44 (m, 2 H) 1,50 - 1, 71 (m, 5 H) 3, 62 -3,68 (m, 3 H) 3, 70 - 3,76 (m, 1 H) 298

Intermediário 203 r 4-(4-Bromobutil)-2, 2-dimetiltetra-hidro 2H-pirano

Preparado de modo análogo ao Intermediário 174 de 4-(2,2-dimetiltetra-hidro-2fí-piran-4-il) -1-butanol. RMN de (400 MHz, CDC13) δ ppm 1, 00 - 1,29 (m, 10 H) 1,39 - 1,71 (m, 5 H) 1, 79 - 1, 90 (m, 2 H) 3,37 - 3,47 (m, 2 H) 3,59 - 3,78 (m, 2 H)

Intermediário 204: 2-{[(l-R)-l-Metilbutil]oxi}-9-(tetra- hidro-2ff-piran-2-il) -9fl-purin-6-amina

Foi adicionado t-butóxido de sódio (27,3 g, 284 mmol) em porções a (R)-2-pentanol (140 mL) à temperatura ambiente, a mistura foi agitada até ficar homogénea. Foi adicionada 2-cloro-9-(tetra-hidro-2ií-piran-2-il)-9ií-purin-6-amina (18,0 g, 71,0 mmol) e a mistura reaccional aquecida a 50 °C durante 160 horas. A reacção foi arrefecida até à temperatura ambiente e 299 partilhada entre acetato de etilo (500 mL) e água (500 mL) . A fase orgânica foi lavada com solução saturada de cloreto de sódio (100 mL), seca (MgSCh), filtrada e evaporada. O residuo foi triturado com éter e o material sólido filtrado. O precipitado foi lavado com éter e os filtrados combinados e evaporados. O material em bruto (ca. 10 g) foi dissolvido em DMSO:metanol (1:1) e purificado sobre uma coluna de fase inversa (Cl8) (330 g) utilizando um gradiente de 25-65% de acetonitrilo (+ 0,1% de TFA)-água (+ 0,1% de TFA) ao longo de 8 volumes de coluna, as fracções foram imediatamente neutralizadas com solução aquosa saturada de carbonato de sódio. As fracções apropriadas foram combinadas e partilhadas entre diclorometano e hidrogenocarbonato de sódio aquoso saturado. A fase orgânica foi seca (MgSCh), filtrada e evaporada para dar o composto em epígrafe como uma espuma creme pálida (5,05 g) . LCMS (Método A): tRET = 2,95 min; MH+ 306

Intermediário 205: 8-Bromo-2-{[(IR)-1-metilbutil]oxi}-9- (tetra-hidro-2fí-piran-2-il) -9fí-purin-6-amina

2-{[(IR)-1-metilbutil]oxi}-9-(tetra-hidro-2A-piran-2-il)-9A-purin-6-amina (5,05 g, 16,54 mmol) foi dissolvida em clorofórmio (30 mL) e arrefecida até 0 °C. A esta solução foi 300 adicionada N-bromossuccinimida (3,24 g, 18,19 mmol) em porções mantendo a temperatura abaixo de 2 °C. Isto deu uma solução verde escura que foi agitada a 0 °C durante 30 minutos antes de ser deixada aquecer até à temperatura ambiente e agitada durante 6 horas. A mistura reaccional foi lavada com água (2 x 50 mL) e as camadas separadas utilizando um filtro poroso hidrófobo. A camada orgânica foi concentrada para dar uma goma castanha escura que foi dissolvida em diclorometano e purificada por cromatografia sobre silica (100 g) utilizando um gradiente 0-50% de acetato de etilo-ciclo-hexano ao longo de 60 min num Flashmaster II. As fracções apropriadas foram combinadas e evaporadas in vacuo para dar o composto em epígrafe como uma espuma amarela (5,23 g). LCMS (Método B) : TRET = 1,21 min; MH+ 384/386

Intermediário 206: 2-{[(IR)-1-Metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)- 9-(tetra-hidro-2ff-piran-2-il)-9fl-purin-6-amina NH,

8-Bromo-2-{[(1R)-1-metilbutil]oxi}-9-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-9iI-purin-6-amina (5,23 g, 13,61 mmol) foi aquecida a refluxo com metóxido de sódio a 25% em metanol (8,8 mL, 13,61 mmol) e metanol (40 mL) durante 4 horas. A mistura reaccional foi concentrada sob pressão reduzida e partilhada 301 entre cloreto de amónio saturado (100 mL) e diclorometano (100 mL). A mistura aquosa foi lavada com mais diclorometano (100 mL) e os orgânicos combinados feitos passar através de um filtro poroso hidrófobo e concentrados para dar o composto em epígrafe como uma espuma amarela pálida (4,80 g) . LCMS (Método B) : tRET = 1,14 Min; MH+ 336

Intermediário 207: Trifluoroacetato de 2-{[(ΐΑ)-1- metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)-lH-purin-6-amina

A uma solução de 2-{[(IR)-1-metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)-9-(tetra-hidro-2fí-piran-2-il)-9fí-purin-6-amina (4,8 g, 14,31 mmol) em metanol (100 mL) foi adicionado ácido trifluoroacético (8 mL, 104 mmol). A mistura reaccional foi agitada à temperatura ambiente durante 72 horas. O solvente foi removido in vacuo para dar um sólido amarelo pálido que foi suspenso em acetato de etilo (30 mL) . O precipitado foi filtrado e lavado com mais acetato de etilo até o filtrado ficar incolor. O sólido remanescente foi seco ao ar e em seguida in vacuo para dar o composto em epígrafe como um sólido creme (3,85 g). LCMS (Método B) : tRET = 0,82 min; MH+ 252 302

Intermediário 208: 2-{[(15)-l-Metilbutil]oxi}-9-(tetra- hidro-2fl-piran-2-il) -9ff-purin-6-amina

Intermediário 208: 2-{[(15)-l-Metilbutil]oxi}-9-(tetra-

Preparada de modo análogo ao Intermediário 204 utilizando (2S)-pentanol. LCMS (Método A): tRET = 2,95 min; MH+ 306

Intermediário 209: 8-Bromo-2-{[(lS)-l-metilbutil]oxi}-9- (tetra-hidro-2ff-piran-2-il) -9fl-purin-6-amina NH.

Preparada de modo análogo ao Intermediário 205 de 2-{[(lS)-1-Metilbutil] oxi}-9- (tetra-hidro-2fí-piran-2-il) -9fí-purin-6-amina. LCMS (Método A): W = 3,30 min; MH+ 384/386 303

Intermediário 210: 2-{[(15)-1-Metilbutil]oxi}-8-(metiloxi) 9- (tetra-hidro-2fí-piran-2-il) -9ff-purin-6-amina

Preparada de modo análogo ao Intermediário 206 de 8-Bromo-2-{ [ (IS) -1-metilbutil] oxi}-9- (tetra-hidro-2ií-piran-2-il) -9H-purin-6-amina. LCMS (Método A): tRET = 3,08 min; MH+ 336

Intermediário 211: Trifluoroacetato de 2-{[(15)-1- metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)-lfl-purin-6-amina

Preparado de modo análogo ao Intermediário 207 de 2-{[(IS) 1-Metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)-9-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-9H-purin-6-amina. LCMS (Método A): TRET = 2,31 min; MH+ 252 304

Intermediário 212: N2-Butil-8-(metiloxi)-9-[3-(tetra-hidro 2-furanil)propil]-9fl-purina-2, 6-diamina

Preparada de modo análogo ao Intermediário 216 de trifluoroacetato de i^-butil-e-(metiloxi)-3H-purina-2, β-diamina e 2-(3-bromopropil)tetra-hidrofurano. LCMS (Método A): tRgT = 2,53 min; MH+ = 349

Intermediário 213: N2-Butil-8-(metiloxi)-9-[4-(tetra-hidro-2-furanil) butil] -9A-purina-2, 6-diamina

Trif luoroacetato de 2-(butiloxi)-8-(metiloxi)-líf-purin-6-amina (120 mg, 0,342 mmol) foi aquecido com carbonato de potássio (189 mg, 1,366 mmol) em DMF seca (5 mL) a 60 °C durante 1 hora e em seguida arrefecido até à temperatura ambiente. Foi adicionado 2-(4-bromobutil)tetra-hidrofurano (82 mg, 0,394 mmol) e a mistura reaccional aquecida a 50 °C sob azoto durante 16 horas e em seguida partilhada entre água (2 mL) e DCM (5 mL). A camada aquosa foi ainda extraída com DCM (2x5 mL) e as 305 camadas orgânicas combinadas foram secas por passagem através de um filtro poroso hidrófobo e evaporadas até à secura utilizando um unidade de evaporação com azoto. 0 resíduo foi dissolvido em metanol (0,6 mL) e purificado por autopreparação orientada por massa. As fracções contendo produto foram combinadas e evaporadas até à secura num aparelho de evaporação sob corrente de azoto para dar o composto em epígrafe (76 mg). LCMS (Método B) : tRET = 1,20 min; MH+ = 363

Intermediário 214: i\T2-Butil-8-(metiloxi)-9-{2-[ (35)-tetra-hidro-3-furanil]etil}-9h-purina-2,6-diamina

Preparada de modo análogo ao Intermediário 215 de trif luoroacetato de I72-butil-8-(metiloxi)-3H-purina-2, 6-diamina e (3R)-3-(2-Bromoetil)tetra-hidrofurano. LCMS (Método B) : tRET = 1,07 min; MH+ = 335 306

Intermediário 215: jV2-Butil-8-(metiloxi)-9-{2-[(3-R)-tetra-hidro-3-furanil] etil}-9A-purina-2, 6-diamina

N2-Butil-8-(metiloxi)-3ií-purina-2,6-diamina (157 mg, 0, 447 mmol) foi aquecida em DMF seca (3 mL) com carbonato de potássio (232 mg, 1,675 mmol) a 60 °C durante uma hora. Foi adicionado (3S)-3-(2-bromoetil)tetra-hidrofurano (100 mg, 0,558 mmol) em DMF seca (2 mL) e a mistura agitada e aquecida até 60 °C sob azoto durante 4 horas. A mistura foi arrefecida até à temperatura ambiente, desactivada em água (40 mL) e extraida com acetato de etilo (3 X 25 mL). Os extractos orgânicos foram combinados, secos por passagem através de um filtro poroso hidrófobo e concentrados sob vácuo. O residuo foi dissolvido em MeOH:DMSO 1:1 e purificado por autopreparação orientada por massa. As fracções desejadas foram combinadas e concentradas utilizando uma unidade de evaporação sob corrente de azoto para dar o composto em epígrafe como um sólido branco (119 mg) . LCMS (Método B) : tRET = 1,00 min; MH+ = 335 307

Intermediário 216: N2-Butil-8-(metiloxi)-9-[3-(tetra-hidro-3-furanil)propil] -9ff-purina-2, 6-diamina

Trifluoroacetato de I72-butil-8-(metiloxi)-3i7-purina-2,6- diamina (150 mg, 0,428 mmol) foi aquecida em DMF seca (2,5 mL) a 60 °C durante 1 hora com carbonato de potássio (237 mg, 1,713 mmol). A mistura reaccional foi arrefecida até à temperatura ambiente e foi adicionado 3-(3-bromopropil)tetra-hidrofurano (99 mg, 0,514 mmol). A mistura foi então aquecida a 50 °C, de um dia para o outro. A mistura reaccional foi desactivada com água (50 mL) e extraída com acetato de etilo (3 x 25 mL). As camadas orgânicas combinadas foram separadas e em seguida secas por passagem através de um filtro poroso hidrófobo e evaporadas até à secura. O residuo foi dissolvido em MeOH:DMSO 1:1 (2,8 mL) e purificado por autopreparação orientada por massa. As fracções contendo produto foram evaporadas sob uma corrente de azoto num aparelho de evaporação para dar o composto em epigrafe como uma goma transparente (84 mg). LCMS (Método B) : tRET = 1,14 min; MH+ = 349 308

Intermediário 217: N2-Butil-8-(metiloxi)-9-[4-(tetra-hidro-3-furanil)butil]-9fl-purina-2,6-diamina

Preparada de modo análogo ao Intermediário 216 de trifluoroacetato de I72-butil-8-(metiloxi) -3fí-purina-2, 6-diamina e 3-(4-bromobutil)tetra-hidrofurano. LCMS (Método B) : tRET = 1,05 min; MH+ = 363

Intermediário 218: N2-Butil-8-(metiloxi)-9-[3-(tetra-hidro-2ff-piran-2-il)propil] -9fl-purina-2, 6-diamina

Preparada de modo análogo ao Intermediário 216 de trifluoroacetato de f^-butil-e-(metiloxi)-3H-purina-2,6-diamina e 2-(3-bromopropil)tetra-hidro-2íf-pirano. LCMS (Método B) : tRET = 1,16 min; MH+ = 363 309

Intermediário 219: N2-Butil-8-(metiloxi)-9-[4-(tetra-hidro-2fl-piran-2-il)butil]-9fl-purina-2,6-diamina NH.

Preparada de modo análogo ao Intermediário 220 de trifluoroacetato de N2-butil-8-(metiloxi)-3H-purina-2,6-diamina e 2- (4-bromobutil) tetra-hidro-2il-pirano. LCMS (Método B) : tRET = 1,50 min; MH+ = 377

Intermediário 220: N2-Butil-8-(metiloxi)-9-[3-(tetra-hidro-2fl-piran-4-il)propil] -9fl-purina-2, 6-diamina

Uma mistura de l/2-butil-8-(metiloxi)-3i7-purina-2, 6-diamina (150 mg, 0,429 mmol) e carbonato de potássio (237 mg, 1,718 mmol) em DMF seca (5 mL) foi agitada a 60 °C durante 1 hora sob uma atmosfera de azoto e em seguida arrefecida até à temperatura ambiente. Foi adicionado 4-(3-bromopropil)tetra-hidro-2i7-pirano (0, 087 mL, 0,515 mmol) e a mistura agitada a 50 °C, de um dia para o outro. A mistura foi arrefecida e partilhada entre acetato de etilo:DCM 1:1 (10 mL) e água 310 (10 mL). A fase orgânica foi separada utilizando um filtro poroso hidrófobo e evaporada sob uma corrente de azoto utilizando um aparelho de evaporação. O resíduo foi dissolvido em metanol:DCM 1:1 (2,8 mL) e purificado por autopreparação orientada por massa. As fracções contendo produto foram evaporadas sob uma corrente de azoto para dar o composto em epígrafe como um sólido branco (93,13 mg). LCMS (Método B) : t^ = 1,27 min; MH+ = 363

Intermediário 221: N2-Butil-8-(metiloxi)-9-[4-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)butil]-9ff-purina-2,6-diamina NH,

Preparada de modo análogo ao Intermediário 220 de trifluoroacetato de I^-butil-S-(metiloxi)-3i7-purina-2, 6-diamina e 4-(4-bromobutil)tetra-hidro-2H-pirano. LCMS (Método B) : tRET = 1,38 min; MH+ = 377 311

Intermediário 222: N2-Butil-9-[2-(2,2-dimetiltetra-hidro-2fl-piran-4-il)etil]-8-(metiloxi)-9fl-purina-2, 6-diamina NH.

Uma mistura de trifluoroacetato de i^-butil-e-(metiloxi)-3H-purina-2,6-diamina, (0,2 g, 0,571 mmol) e carbonato de potássio anidro (0,316 g, 2,284 mmol) em DMF (2,5 mL) foi aquecida a 50 °C durante 1 hora. A mistura foi arrefecida até à temperatura ambiente e foi adicionado 4-(2-bromoetil)-2,2-dimetiltetra-hidro-2f7-pirano (0,152 g, 0, 685 mmol) e a mistura aquecida a 50 °C durante 18 horas. A mistura foi desactivada com água (2 mL) e em seguida extraída com DCM (2x5 mL) . O DCM foi separado através de um filtro poroso hidrófobo e evaporado por sopro sob uma corrente de azoto. Foi adicionado DMSO:MeOH (1:1) ao resíduo e o precipitado resultante foi recolhido por filtração, lavado com metanol e seco in vacuo para dar o composto em epígrafe como um sólido branco (136 mg) . LCMS (Método A): tRET = 2,65 min; MH+ = 377 312

Intermediário 223: N2-Butil-9-[3-(2,2-dimetiltetra-hidro-2fl-piran-4-il)propil] -8- (metiloxi) -9A-purina-2, 6-diamina

Uma mistura de trifluoroacetato de iv2-butil-8-(metiloxi)-3H-purina-2,6-diamina (149 mg, 0,425 mmol) e carbonato de potássio (294 mg, 2,126 mmol) em DMF (2 mL) foi agitada e aquecida a 60 °C sob azoto durante uma hora. Foi adicionado 4 — (3 — bromopropil) -2,2-dimetiltetra-hidro-2fí-pirano (125 mg, 0,532 mmol) em DMF seca (1 mL) e a mistura aquecida a 60 °C sob azoto durante mais 2,5 horas. A mistura reaccional foi arrefecida até à temperatura ambiente, desactivada em água (10 mL) e extraída com DCMrAcOEt (1:1, 2 x 20 mL) . Os extractos orgânicos foram combinados, secos por passagem através de um filtro poroso hidrófobo e concentrados sob vácuo. O resíduo foi purificado por autopreparação orientada por massa. As fracções contendo produto foram combinadas e evaporadas para dar o composto em epígrafe (40 mg). LCMS (Método A): tRET = 2,81 min; MH+ = 391 313

Intermediário 224: N2-Butil-9-[4-(2,2-dimetiltetra-hidro-2H-piran-4-il)butil]-8-(metiloxi)-9fl-purina-2,6-diamina

223 de diamina e mas [3- (tetra-

Preparada de modo análogo ao Intermediário trifluoroacetato de Z^-butil-e-(metiloxi)-3H-purina-2, 6 4- ( 4-bromobutil) -2,2-dimetiltetra-hidro-2fí-pirano, realizando a alquilação ao longo de 1,5 horas a 60 °C. LCMS (Método A): tRET = 2,95 min; MH+ = 405

Intermediário 225: 2-(Butiloxi)-8-(metiloxi)-9- hidro-2-furanil)propil]-9H-purin-6-amina

216 de 6-amina e

Preparada de modo análogo ao Intermediário trif luoroacetato de 2-(butiloxi)-8-(metiloxi)-líí-purin-2-(3-bromopropil)tetra-hidrofurano. LCMS (Método A): tRET = 2,96 min; MH+ = 350 314

Intermediário 226: 2-(Butiloxi)-8-(metiloxi)-9-[4-(tetra- hidro-2-furanil)butil] -9ff-purin-6-amina

Intermediário 226: 2-(Butiloxi)-8-(metiloxi)-9-[4-(tetra-

Preparada de modo análogo ao Intermediário 213 de trifluoroacetato de 2-(butiloxi)-8-(metiloxi)-líf-purin-6-amina e 2-(4-bromobutil)tetra-hidrofurano. LCMS (Método B) : tRET = 1,14 min; MH+ = 364

Intermediário 227: 2-(Butiloxi)-8-(metiloxi)-9-{2-[(35)- tetra-hidro-3-furanil]etil}-9ff-purin-6-amina NH.

Preparada de modo análogo ao Intermediário 215 de trifluoroacetato de 2-(butiloxi)-8-(metiloxi)-lff-purin-6-amina e (3R)-3-(2-bromoetil)tetra-hidrofurano. LCMS (Método B): ^ = 0,99 min; MH+ = 336 315

Intermediário 228: 2-(Butiloxi)-8-(metiloxi)-9-{2-[(3R)- tetra-hidro-3-furanil] etil} -9fí-purin-6-amina

Intermediário 228: 2-(Butiloxi)-8-(metiloxi)-9-{2-[(3R)-

Preparada de modo análogo ao Intermediário 215 de trifluoroacetato de 2-(butiloxi)-8-(metiloxi)-lfí-purin-6-amina e (3S)-3-(2-bromoetil)tetra-hidrofurano. LCMS (Método B) : t^ = 0,99 min; MH+ = 336

Intermediário 229: 2-(Butiloxi)-8-(metiloxi)-9-[3-(tetra- hidro-3-furanil)propil]-9fl-purin-6-amina NH.

Preparada de modo análogo ao Intermediário 216 de trif luoroacetato de 2-(butiloxi)-8-(metiloxi)-lfí-purin-6-amina e 3-(3-bromopropil)tetra-hidrofurano. LCMS (Método B) : tRET = 1,04 min; MH+ = 350 316

Intermediário 230: 2-(Butiloxi)-8-(metiloxi)-9-[4-(tetra hidro-3-furanil)butil]-9fl-purin-6-amina

Preparada de modo análogo ao Intermediário 216 de trifluoroacetato de 2-(butiloxi)-8-(metiloxi)-lH-purin-6-amina e 3-(4-bromobutil)tetra-hidrofurano. LCMS (Método B) : tRET = 1,11 min; MH+ = 364 intermediário 231: 2-(Butiloxi)-8-(metiloxi)-9-[3-(tetra- hidro-2JI-piran-2-il)proil] -9H-purin-6-amina

Preparada de modo análogo ao Intermediário 216 de trifluoroacetato de 2-(butiloxi)-8-(metiloxi)-lH-purin-6-amina e 2- (3-bromopropil) tetra-hidro-2f?-pirano. LCMS (Método B) : tRET = 1,19 min; MH+ = 364 317

Intermediário 232: 2-(Butiloxi)-8-(metiloxi)-9-[4-(tetra- hidro-2ff-piran-2-il)butil]-9fl-purin-6-amina

Preparada de modo análogo ao Intermediário 216 de trifluoroacetato de 2-(butiloxi)-8-(metiloxi)-lH-purin-6-amina e 2- ( 4-bromobutil) tetra-hidro-2fí-pirano. LCMS (Método B) : tRET = 1,25 min; MH+ = 378

Intermediário 233: 2-(Butiloxi)-8-(metiloxi)-9-[3-(tetra-hidro-2#-piran-3-il)propil]-9fl-purin-6-amina NH.

Preparada de modo análogo ao intermediário 213 de trifluoroacetato de 2-(butiloxi)-8-(metiloxi)-lH-purin-6-amina e 3-(3-bromopropil)tetra-hidro-2H-pirano. LCMS (Método B) : tRET = 1,13 min; MH+ = 364 318

Intermediário 234: 2-(Butiloxi)-8-(metiloxi)-9-[4-(tetra hidro-2ff-piran-3-il) butil] -9fí-purin-6-amina

Preparada de modo análogo ao Intermediário 243 de trifluoroacetato de 2-(butiloxi)-8-(metiloxi)-lfí-purin-6-amina e 3- (4-bromobutil) tetra-hidro-2íí-pirano. LCMS (Método A): tRET = 3,27 min; MH+ = 378

Intermediário 235: 2-(Butiloxi)-8-(metiloxi)-9-[3-(tetra-hidro-2ff-piran-4-il)propil] -9fí-purin-6-amina

Preparada de modo análogo ao Intermediário 216 de trif luoroacetato de 2-(butiloxi) -8-(metiloxi) -líf-purin-6-amina e 4-(3-bromobutil)tetra-hidro-2H-pirano. LCMS (Método B): W = 1,11 min; MH+ = 364 319

Intermediário 236: 2-(Butiloxi)-8-(metiloxi)-9-[4-(tetra- hidro-2H-piran-4-il)butil]-9fl-purin-6-amina

Intermediário 236: 2-(Butiloxi)-8-(metiloxi)-9-[4-(tetra- NH.

Preparada de modo análogo ao Intermediário 216 de trif luoroacetato de 2-(butiloxi) -8-(metiloxi) -líf-purin-6-amina e 4-(4-bromobutil)tetra-hidro-2H-pirano. LCMS (Método B) : tRET = 1,18 min; MH+ = 378

Intermediário 237: 2-(Butiloxi)-9-[2-(2,2-dimetiltetra- hidro-2fí-piran-4-il) etil] -8- (metiloxi) -9fl-purin-6-amina NH.

Uma mistura de trifluoroacetato de 2-(butiloxi)-8-(metiloxi)-lfí-purin-6-amina (0,2 g, 0, 569 mmol) e carbonato de potássio anidro (0,315 g, 2,277 mmol) em DMF foi aquecida a 60 °C durante 1 hora. A mistura foi arrefecida até à temperatura ambiente e foi adicionado 4-(2-bromoetil)-2,2-dimetiltetra-hidro-2fí-pirano (0,151 g, 0, 683 mmol) e a mistura aquecida a 50 °C durante 18 horas. A mistura foi desactivada com água (2 mL) e extraída com DCM (2X5 mL). O DCM foi separado através de um filtro poroso hidrófobo e evaporado por sopro sob uma 320 corrente de azoto. A adição de DMSO :MeOH (1:1) deu um precipitado que foi recolhido por filtração, lavado com metanol e seco in vacuo para dar o composto em epígrafe (29 mg). LCMS (Método A): W = 3,10 min; MH+ = 378 A evaporação do filtrado até à secura e trituração do resíduo com DMSOrMeOH (1:1, 0,5 mL) deu um segundo lote de material (101 mg). LCMS (Método A): tRET = 3,10 min; MH+ = 378

Intermediário 238: 2-(Butiloxi)-9-[3-(2,2-dimetiltetra- hidro-2ff-piran-4-il)propil]-8-(metiloxi)-9ff-purin-6-amina

Preparada de modo análogo ao Intermediário 224 de trifluoroacetato de 2-(butiloxi)-8-(metiloxi) -lfí-purin-6-amina e 4-(3-bromopropil)-2,2-dimetiltetra-hidro-2H-pirano. LCMS (Método A): tRET = 3,25 min; MH+ = 392 321

Intermediário 239: 2-(Butiloxi)-9-[4-(2,2-dimetiltetra- hidro-2ff-piran-4-il) butil] -8- (metiloxi) -9ff-purin-6-amina

Intermediário 239: 2-(Butiloxi)-9-[4-(2,2-dimetiltetra- NH.

Preparada de modo análogo ao intermediário 224 de trifluoroacetato de 2-(butiloxi)-8-(metiloxi)-lH-purin-6-amina e 4-(4-bromobutil)-2,2-dimetiltetra-hidro-2íf-pirano mas realizando a alquilação ao longo de 1,5 horas a 60 °C. LCMS (Método A): tRET = 3,43 min; MH+ = 406

Intermediário 240: 2-[(2-Ciclopropiletil)oxi]-8-(metiloxi)- 9-[2-(tetra-hidro-2-furanil)etil]-9fl-purin-6-amina NH.

Preparada de modo análogo ao Intermediário 213 de trifluoroacetato de 2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-8-(metiloxi)-1H-purin-6-amina e 2-(2-bromoetil)tetra-hidrofurano. LCMS (Método B) : tRET = 1,05 min; MH+ = 348 322

Intermediário 241: 2-[(2-Ciclopropiletil)oxi]-8-(metiloxi)- 9- [3- (tetra-hidro-2-furanil)propil] -9ff-purin-6-amina NH,

Preparada de modo análogo ao Intermediário 216 de trifluoroacetato de 2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-8-(metiloxi)~1H~ purin-6-amina e 2-(3-bromopropil)tetra-hidrofurano. LCMS (Método A): tRET = 2,98 min; MH+ = 362

Intermediário 242: 2-[(2-Ciclopropiletil)oxi]-8-(metiloxi)- 9- [4- (tetra-hidro-2-furanil)butil] -9fl-purin-6-amina NH.

Preparada de modo análogo ao Intermediário 213 de trifluoroacetato de 2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-8-(metiloxi)-1H-purin-6-amina e 2-(4-bromobutil)tetra-hidrofurano. LCMS (Método B): t^T = 1,15 min; MH+ = 376 323

Intermediário 243: 2-[(2-Ciclopropiletil)oxi]-8-(metiloxi) 9-[2-(tetra-hidro-3-furanil)etil]-9fl-purin-6-amina NH,

Uma mistura de trifluoroacetato de 2— [ (2— ciclopropiletil)oxi]-8-(metiloxi)-lH-purin-6-amina (0,16 g, 0,450 mmol) e carbonato de potássio anidro (0,243 g, 1,762 mmol) em DMF (2,5 mL) foi aquecida a 50 °C durante 1 hora. A mistura foi arrefecida até à temperatura ambiente e foi adicionado 3—(2— bromoetil)tetra-hidrofurano (0,095 g, 0,528 mmol) e a mistura aquecida a 50 °C durante 18 horas. A mistura foi desactivada com água (2 mL) e extraída com DCM (2 x 5 mL) . O DCM foi separado através de um filtro poroso hidrófobo e evaporado por sopro sob uma corrente de azoto. A amostra foi dissolvida em MeOHrDMSO 1:1 (3 x 0,5 mL) e purificada por autopreparação orientada por massa. As fracções contendo produto foram evaporadas sob uma corrente de azoto num aparelho de evaporação para dar o composto em epígrafe como um sólido branco (98 mg). LCMS (Método A): Lret = 2,80 min; MH+ = 348 324

Intermediário 244: 2-[(2-Ciclopropiletil)oxi]-8-(metiloxi)- 9—{2— [ (35) -tetra-hidro-3-furanil] etil}-9ff-purin-6-amina

Preparada de modo análogo ao Intermediário 215 de trifluoroacetato de 2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-8-(metiloxi)-1H-purin-6-amina e (3.R)-3-(2-bromoetil)tetra-hidrofurano. LCMS (Método B) : tRET = 1,00 min; MH+ = 348

Intermediário 245: 2-[ (2-Ciclopropiletil)oxi]-8-(metiloxi)- 9 -{ 2 - [ (3R) - tetra-hidro-3-f uranil] etil} -9iI-purin-6-amina

Preparada de modo análogo ao Intermediário 215 de trifluoroacetato de 2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-8-(metiloxi)-1H-purin-6-amina e (3S)-3-(2-bromoetil)tetra-hidrofurano. LCMS (Método A): íret = 2,80 min; MH+ = 348 325

Intermediário 246: 2-[(2-Ciclopropiletil)oxi]-8-(metiloxi)- 9- [3- (tetra-hidro-3-furanil)propil] -9Jí-purin-6-amina

Intermediário 246: 2-[(2-Ciclopropiletil)oxi]-8-(metiloxi)-

o

Preparada de modo análogo ao Intermediário 216 de trifluoroacetato de 2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-8-(metiloxi)-1H-purin-6-amina e 3-(3-bromopropil)tetra-hidrofurano. LCMS (Método B) : tRET = 1,04 min; MH+ = 362

Intermediário 247: 2-[(2-Ciclopropiletil)oxi]-8-(metiloxi)- 9-[4-(tetra-hidro-3-furanil)butil]-9fl-purin-6-amina

Preparada de modo análogo ao Intermediário 216 de trifluoroacetato de 2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-8-(metiloxi)—li?— purin-6-amina e 3-(4-bromobutil)tetra-hidrofurano. LCMS (Método B) : tRET = 1,11 min; MH+ = 376 326

Intermediário 248: 2-[(2-Ciclopropiletil)oxi]-8-(metiloxi)- 9- [2- (tetra-hidro-2fí-piran-2-il) etil] -9ff-purin-6-amina

Preparada de modo análogo ao Intermediário 216 de trifluoroacetato de 2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-8-(metiloxi)—li?— purin-6-amina e 2-(2-bromoetil)tetra-hidro-2il-pirano. LCMS (Método A): tRET = 3,12 min; MH+ = 362

Intermediário 249: 2-[(2-Ciclopropiletil)oxi]-8-(metiloxi)- 9- [3- (tetra-hidro-2ff-piran-2-il)propil] -9ff-purin-6-amina

Preparada de modo análogo ao Intermediário 216 de trifluoroacetato de 2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-8-(metiloxi)-1H-purin-6-amina e 2-(3-bromopropil) tetra-hidro-2£f-pirano. LCMS (Método B): íret = 1,18 min; MH+ = 376 327

Intermediário 250: 2-[(2-Ciclopropiletil)oxi]-8-(metiloxi)- 9-[4-(tetra-hidro-2fl-piran-2-il)butil]-9fl-purin-6-amina

Preparada de modo análogo ao Intermediário 213 de trifluoroacetato de 2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-8-(metiloxi)-1H-purin-6-amina e 2-(4-bromobutil)tetra-hidro-2H-pirano. LCMS (Método A): tRET = 3,27 min; MH+ = 390

Intermediário 251: 2-[(2-Ciclopropiletil)oxi]-8-(metiloxi)- 9- [2- (tetra-hidro-2ii-piran-3-il) etil] -9fl-purin-6-amina

Preparada de modo análogo ao Intermediário 216 de trifluoroacetato de 2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-8-(metiloxi)-1H-purin-6-amina e 3-(2-bromoetil)tetra-hidro-2ií-pirano. LCMS (Método A): t^T = 2,99 min; MH+ = 362 328

Intermediário 252: 2-[(2-Ciclopropiletil)oxi]-8-(metiloxi)- 9 - [ 4 - (tetra-hidro-2fí-piran-3-il) butil] -9fí-purin-6-amina

Intermediário 252: 2-[(2-Ciclopropiletil)oxi]-8-(metiloxi)- NH,

Preparada de modo análogo ao Intermediário 243 de trifluoroacetato de 2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-8-(metiloxi)-1H-purin-6-amina e 3-(4-bromobutil)tetra-hidro-2fí-pirano. LCMS (Método A): tRET = 3,28 min; MH+ = 390

Intermediário 253: 2-[(2-Ciclopropiletil)oxi]-8-(metiloxi)- 9-[2-(tetra-hidro-2ff-piran-4-il)etil]-9A-purin-6-amina NH,

Preparada de modo análogo ao Intermediário 215 de trifluoroacetato de 2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-8-(metiloxi)-1H-purin-6-amina e 4-(2-bromoetil)tetra-hidro-2A-pirano. LCMS (Método B) : tRET = 1,04 min; MH+ = 362 329

Intermediário 254: 2-[ (2-Ciclopropiletil)oxi]-8-(metiloxi)- 9- [3- (tetra-hidro-2fí-piran-4-il)propil] -9ff-purin-6-amina

Intermediário 254: 2-[ (2-Ciclopropiletil)oxi]-8-(metiloxi)-

Preparada de modo análogo ao Intermediário 220 de trifluoroacetato de 2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-8-(metiloxi)-1H-purin-6-amina e 4-(3-bromopropil)tetra-hidro-2H-pirano. LCMS (Método B) : tRET = 1,12 min; MH+ = 376

Intermediário 255: 2-[ (2-Ciclopropiletil)oxi]-8-(metiloxi)- 9 - [ 4 - (tetra-hidro-2fl-piran-4-il) butil] -9fl-purin-6-amina NH.

Preparada de modo análogo ao Intermediário 220 de trifluoroacetato de 2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-8-(metiloxi)-1H-purin-6-amina e 4-(4-bromobutil) tetra-hidro-2/í-pirano . LCMS (Método B) : tRET = 1,19 min; MH+ = 390 330

Intermediário 256: 2-[(2-Ciclopropiletil)oxi]-9-[2-(2,2- dimetiltetra-hidro-2ff-piran-4-il) etil] -8- (metiloxi) -9ff-purin-6-amina

Intermediário 256: 2-[(2-Ciclopropiletil)oxi]-9-[2-(2,2-

de modo análogo ao Intermediário 216 de trifluoroacetato de 2-[ (2-ciclopropiletil)oxi]-8-(metiloxi)-lH-purin-6-amina e 4-(2-bromoetil) -2,2-dimetiltetra-hidro-2fí-pirano. LCMS (Método A): W = 3,12 min; MH+ = 390

Intermediário 257: 2-[(2-Ciclopropiletil)oxi]-9-[3-(2,2- dimetiltetra-hidro-2fí-piran-4-il)propil] -8- (metiloxi) -9/f-purin-6-amina NH.

Preparada de modo análogo ao Intermediário 223 de trifluoroacetato de 2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-8-(metiloxi)-1H-purin-6-amina e 4-(3-bromopropil)-2,2-dimetiltetra-hidro-2fí-pirano. LCMS (Método A): tRET = 3,26 min; MH+ = 404 331

Intermediário 258: 2-[(2-Ciclopropiletil)oxi]-9-[4-(2,2- dimetiltetra-hidro-2fl-piran-4-il)butil]-8-(metiloxi)-9ff-purin-6-amina

Preparada de modo análogo ao Intermediário 223 de trifluoroacetato de 2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-8-(metiloxi)-1H-purin-6-amina e 4-(4-bromobutil)-2,2-dimetiltetra-hidro-2í?-pirano mas realizando a alquilação ao longo de 1,5 horas a 60 °C. LCMS (Método A): tRET = 3,43 min; MH+ = 418

Intermediário 259: 2-{[(15)-1-Metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)- 9-[2-(tetra-hidro-2-furanil)etil]-9ff-purin-6-amina

Preparada de modo análogo ao Intermediário 243 de trifluoroacetato de 2-{ [(15) -1-metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)-1H-purin-6-amina e 2-(2-bromoetil)tetra-hidrofurano. LCMS (Método A): t^T = 3,07 min; MH+ = 350 332

Intermediário 260: 2-{[(15)-1-Metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)- 9- [3- (tetra-hidro-2-furanil)propil] -9ff-purin-6-amina

Preparada de modo análogo ao Intermediário 215 de trifluoroacetato de 2-{ [ (15) -1-metilbutil] oxi}-8-(metiloxi) —li?— purin-6-amina e 2-(3-bromopropil)tetra-hidrofurano mas realizando a alquilação ao longo de 1 hora a 60 °C. LCMS (Método A): tRET = 3,00 min; MH+ = 364

Intermediário 261: 2-{[(15)-1-Metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)- 9—{2—[(35)-tetra-hidro-3-furanil]etil}-9ff-purin-6-amina

Preparada de modo análogo ao Intermediário 216 de trif luoroacetato de 2-{ [ (15) -1-metilbutil] oxi}-8-(metiloxi) — li?— purin-6-amina e (3R)-3-(2-bromoetil)tetra-hidrofurano. LCMS (Método A): tRET = 2,81 min; MH+ = 350 333

Intermediário 262: 2-{[(15)-1-Metilbutil]oxi}-8-(metiloxi) 9 -{ 2 - [ (3R) - tetra-hidro-3-furanil] etil} -9fí-purin-6-amina NH,

Preparada de modo análogo ao Intermediário 215 de trifluoroacetato de 2-{[(IS)-1-metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)-1H-purin-6-amina e (3S)-3-(2-bromoetil)tetra-hidrofurano mas realizando a alquilação ao longo de 1 hora a 60 °C. LCMS (Método A): tRET = 2,96 min; MH+ = 350

Intermediário 263: 2-{[(15)-1-Metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)- 9- [3- (tetra-hidro-3-furanil)propil] -9iI-purin-6-amina

Preparada de modo análogo ao Intermediário 220 de trifluoroacetato de 2-{[(IS)-1-metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)-1H-purin-6-amina e 3-(3-bromopropil)tetra-hidrofurano. LCMS (Método B) : tRET = 1,13 min; MH+ = 364 334

Intermediário 264: 2-{[(15)-1-Metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)- 9- [4- (tetra-hidro-3-furanil)butil] -9fí-purin-6-amina

Intermediário 264: 2-{[(15)-1-Metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)- NH.

Preparada de modo análogo ao Intermediário 220 de trifluoroacetato de 2-{[(IS)-1-metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)-1H-purin-6-amina e 3-(4-bromobutil)tetra-hidrofurano. LCMS (Método B) : tRET = 1,19 min; MH+ = 378

Intermediário 265: 2-{[(15)-1-Metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)- 9- [2- (tetra-hidro-2fl-piran-2-il) etil] -9i7-purin-6-amina NH,

Preparada de modo análogo ao Intermediário 243 de trifluoroacetato de 2-{[(IS)-1-metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)-1H-purin-6-amina e 2-(2-bromoetil)tetra-hidro-2H-pirano. LCMS (Método A): tRET = 3,27 min; MH+ = 364 335

Intermediário 266: 2-{[(15)-1-Metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)- 9-[3-(tetra-hidro-2fl-piran-2-il)propil]-9fl-purin-6-amina

Preparada de modo análogo ao Intermediário 220 de trif luoroacetato de 2-{ [ (IS) -1-metilbutil] oxi}-8-(metiloxi) -liJ-purin-6-amina e 2-(3-bromopropil) tetra-hidro-2fí-pirano. LCMS (Método B) : tRET = 1,26 min; MH+ = 378

Intermediário 267: 2-{[(15)-1-Metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)- 9-[4-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)butil]-9#-purin-6-amina

Preparada de modo análogo ao Intermediário 213 de trifluoroacetato de 2-{[(IS)-1-metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)-1H-purin-6-amina e 2-(4-bromobutil) tetra-hidro-2fí-pirano . LCMS (Método A): tRET = 3,33 min; MH+ = 392 336

Intermediário 268: 2-{[(15)-1-Metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)- 9- [2- (tetra-hidro-2fí-piran-3-il) etil] -9fí-purin-6-amina

Intermediário 268: 2-{[(15)-1-Metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)- NH.

Preparada de modo análogo ao Intermediário 243 de trifluoroacetato de 2-{[(IS)-1-metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)-1H-purin-6-amina e 3-(2-bromoetil) tetra-hidro-2ií-pirano . LCMS (Método A): tRET = 3,13 min; MH+ = 364

Intermediário 269: 2-{[(15)-1-Metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)- 9 - [ 4 - (tetra-hidro-2ff-piran-3-il) butil] -9ff-purin-6-amina

Preparada de modo análogo ao Intermediário 243 de trifluoroacetato de 2-{[(15)-1-metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)-15-purin-6-amina e 3-(4-bromobutil) tetra-hidro-25-pirano . LCMS (Método A): tRET = 3,42 min; MH+ = 392 337

Intermediário 270: 2-{[(15)-1-Metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)- 9- [2- (tetra-hidro-2ff-piran-4-il) etil] -9fl-purin-6-amina

Preparada de modo análogo ao Intermediário 215 de trifluoroacetato de 2-{[(IS)-1-metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)-1H-purin-6-amina e 4-(2-bromoetil) tetra-hidro-2fí-pirano mas realizando a alquilação ao longo de 1 hora a 60 °C. LCMS (Método A): tRET = 2,97 min; MH+ = 364

Intermediário 271: 2-{[(IS)-1-Metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)- 9- [3- (tetra-hidro-2ff-piran-4-il)propil] -9fl-purin-6-amina

Preparada de modo análogo ao Intermediário 216 de trifluoroacetato de 2-{[(IS)-1-metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)-1H-purin-6-amina e 4-(3-bromopropil) tetra-hidro-2fí-pirano. LCMS (Método B) : tRET = 1,19 min; MH+ = 378 338

Intermediário 272: 2-{[(15)-1-Metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)- 9- [4- (tetra-hidro-2ff-piran-4-il)butil] -9ff-purin-6-amina

Preparada de modo análogo ao Intermediário 216 de trifluoroacetato de 2-{[(IS)-1-metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)-1H-purin-6-amina e 4-(4-bromobutil)tetra-hidro-2fí-pirano. LCMS (Método B): t^T = 1,26 min; MH+ = 392

Intermediário 273: 9-[2-(2, 2-Dimetiltetra-hidro-2iI-piran-4- il)etil]-2-{[(15)-1-metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)-9fl-purin-6-amina

Preparada de modo análogo ao Intermediário 243 de trifluoroacetato de 2-{[(IS)-1-metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)-1H-purin-6-amina e 4-(2-bromoetil)-2,2-dimetiltetra-hidro-2H-pirano. LCMS (Método A): tRET = 3,26 min; MH+ = 392 339

Intermediário 274: 9-[3-(2, 2-Dimetiltetra-hidro-2fl-piran-4 il)propil]-2-{[(15)-1-metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)-9fl-purin-6-amina

Preparada de modo análogo ao Intermediário 215 de trifluoroacetato de 2-{[(IS)-1-metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)-1H-purin-6-amina e 4-(3-bromopropil) -2,2-dimetiltetra-hidro-2.fi-pirano mas realizando a alquilação ao longo de 1 hora a 60 °C. LCMS (Método A): tRET = 3,37 min; MH+ = 406

Intermediário 275: 9-[4-(2, 2-Dimetiltetra-hidro-2H-piran-4- il)butil]-2-{[(15)-1-metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)-9fl-purin-6- amina

Preparada de modo análogo ao Intermediário 215 de trifluoroacetato de 2-{[(IS)-1-metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)-1H-purin-6-amina e 4-(4-bromobutil)-2,2-dimetiltetra-hidro-2fí-pirano mas realizando a alquilação ao longo de 1 hora a 60 °C. LCMS (Método A): tRET = 3,44 min; MH+ = 420 340

Intermediário 276: 2-{ [ {IR)-1-metilbutil] oxi}-8-(metiloxi) 9- [2- (tetra-hidro-2-furanil) etil] -9il-purin-6-amina

Preparada de modo análogo ao Intermediário 290 de trifluoroacetato de 2-{ [ (IR) -1-metilbutil] oxi}-8-(metiloxi)-1H-purin-6-amina e 2-(2-bromoetil)tetra-hidrofurano. LCMS (Método B) : tRET = 1,11 min; MH+ = 350

Intermediário 277: 2-{[{IR)-1-Metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)- 9-[3-(tetra-hidro-2-furanil)propil]-9fl-purin-6-amina

Preparada de modo análogo ao intermediário 223 de trif luoroacetato de 2-{ [ (lf?)-1-metilbutil] oxi}-8-(metiloxi)-1H-purin-6-amina e 2-(3-bromopropil)tetra-hidrofurano mas realizando a alquilação ao longo de 1 hora a 60 °C. LCMS (Método A): tRET = 3,00 min; MH+ = 364 341

Intermediário 278: 2-{[(IR)-1-Metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)- 9—{2—[(35)-tetra-hidro-3-furanil]etil}-9fl-purin-6-amina

Intermediário 278: 2-{[(IR)-1-Metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)- NH.

Preparada de modo análogo ao Intermediário 216 de trifluoroacetato de 2-{ [ (IR) -1-metilbutil] oxi}-8-(metiloxi) — li?— purin-6-amina e (3R)-3-(2-bromoetil)tetra-hidrofurano. LCMS (Método A): tRET = 2,81 min; MH+ = 350

Intermediário 279: 2-{[(IR)-1-Metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)- 9 — {2— [ (3R) -tetra-hidro-3-furanil] etil}-9ff-purin-6-amina MH,

Preparada de modo análogo ao Intermediário 223 de trifluoroacetato de 2-{[(IR)-1-metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)-1H-purin-6-amina e (3S)-3-(2-bromoetil)tetra-hidrofurano mas realizando a alquilação ao longo de 1 hora a 60 °C. LCMS (Método A): tRET = 2,81 min; MH = 350 342

Intermediário 280: 2-{[(IR)-1-Metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)- 9- [3- (tetra-hidro-3-furanil)propil] -9ff-purin-6-amina

Intermediário 280: 2-{[(IR)-1-Metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)-

o

Preparada de modo análogo ao Intermediário 216 de trifluoroacetato de 2-{[(IR)-1-metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)-1H-purin-6-amina e 3-(3-bromopropil)tetra-hidrofurano. LCMS (Método B): t^T = 1,09 min; MH+ = 364

Intermediário 281: 2-{[(IP)-1-Metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)- 9- [4- (tetra-hidro-3-furanil)butil] -9i7-purin-6-amina

Preparada de modo análogo ao Intermediário 216 de trif luoroacetato de 2-{[(IP)-1-metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)-1H-purin-6-amina e 3-(4-bromobutil)tetra-hidrofurano. LCMS (Método B) : tRET = 1,16 min; MH+ = 378 343

Intermediário 282: 2-{[(IR)-1-Metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)- 9- [2- (tetra-hidro-2fí-piran-2-il) etil] -9fí-purin-6-amina

Intermediário 282: 2-{[(IR)-1-Metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)- NH.

Preparada de modo análogo ao Intermediário 213 de trifluoroacetato de 2-{[(IR)-1-metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)-1H-purin-6-amina e 2-(2-bromoetil) tetra-hidro-2ií-pirano. LCMS (Método B) : tRET = 1,21 min; MH+ = 364

Intermediário 283: 2-{[{IR)-1-Metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)- 9- [3- (tetra-hidro-2ff-piran-2-il)propil] -9ff-purin-6-amina

NH

Preparada de modo análogo ao Intermediário 216 de trifluoroacetato de 2-{[(IR)-1-metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)-1H-purin-6-amina e 2-(3-bromopropil) tetra-hidro-2fí-pirano . LCMS (Método B) : tRET = 1,25 min; MH+ = 378 344

Intermediário 284: 2-{ [ (IR)-1-Metilbutil] oxi}-8-(metiloxi) - 9 - [ 4 - (tetra-hidro-2ff-piran-2-il) butil] -9ff-purin-6-amina

Intermediário 284: 2-{ [ (IR)-1-Metilbutil] oxi}-8-(metiloxi) - NH,

Preparada de modo análogo ao intermediário 213 de trifluoroacetato de 2-{ [ (IR) -1-metilbutil] oxi}-8-(metiloxi) — lfí— purin-6-amina e 2-(4-bromobutil) tetra-hidro-2íí-pirano . LCMS (Método A): tRET = 3,33 min; MH+ = 392?

Intermediário 285: 2-{[(IR)-1-Metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)- 9- [2- (tetra-hidro-2lf-piran-3-il) etil] -9fl-purin-6-amina NH.

Preparada de modo análogo ao intermediário 213 de trifluoroacetato de 2-{[(IP)-1-metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)-1H-purin-6-amina e 3-(2-bromoetil)tetra-hidro-2H-pirano. LCMS (Método B) : tRET = 1,13 min; MH+ = 364 345

Intermediário 286: 2-{[(IR)-1-Metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)- 9-[4-(tetra-hidro-2ff-piran-3-il)butil]-9fl-purin-6-amina

Preparada de modo análogo ao Intermediário 213 de trifluoroacetato de 2-{[{IR)-1-metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)-1H-purin-6-amina e 3-(4-bromobutil) tetra-hidro-2£f-pirano . LCMS (Método B) : tRET = 1,26 min; MH+ = 392

Intermediário 287: 2-{[{IR)-1-Metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)- 9- [2- (tetra-hidro-2fl-piran-4-il) etil] -9fí-purin-6-amina

Preparada de modo análogo ao Intermediário 223 de trif luoroacetato de 2-{ [ {IR) -1-metilbutil] oxi}-8-(metiloxi) — li?— purin-6-amina e 4-(2-bromoetil) tetra-hidro-2/í-pirano mas realizando a alquilação ao longo de 1 hora a 60 °C. LCMS (Método A): tRET = 2,94 min; MH+ = 364 346

Intermediário 288: 2-{[(IR)-1-Metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)- 9- [3- (tetra-hidro-2ff-piran-4-il) propil] -9fí-purin-6-amina

Intermediário 288: 2-{[(IR)-1-Metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)-

Preparada de modo análogo ao Intermediário 216 de trifluoroacetato de 2-{ [ (IR) -1-metilbutil] oxi}-8-(metiloxi) — li?— purin-6-amina e 4-(3-bromopropil) tetra-hidro-2H-pirano. LCMS (Método B) : tRET = 1,16 min; MH+ = 378

Intermediário 289: 2-{[(IR)-1-Metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)- 9- [4- (tetra-hidro-2i7-piran-4-il) butil] -9ff-purin-6-amina

NH,

Preparada de modo análogo ao Intermediário 216 de trifluoroacetato de 2-{[(IR)-1-metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)-1H-purin-6-amina e 4-(4-bromobutil)tetra-hidro-2H-pirano. LCMS (Método B) : tRET = 1,24 min; MH+ = 392 347

Intermediário 290: 9-[2-(2, 2-Dimetiltetra-hidro-2fl-piran-4- il) etil] -2-{ [ (IR) -1-metilbutil] oxi}-8- (metiloxi) -9fl-purin-6-amina

Intermediário 290: 9-[2-(2, 2-Dimetiltetra-hidro-2fl-piran-4- Trifluoroacetato

de 2-{[(1R)-1-metilbutil]oxi}-8- (metiloxi)-lA-purin-6-amina (100 mg, 0,274 mmol) foi aquecido com carbonato de potássio (37,8 mg, 0,274 mmol) em DMF seca (2 mL) a 60 °C sob azoto durante 1 hora e em seguida arrefecido até à temperatura ambiente. Foi adicionado 4-(2-bromoetil)-2,2-dimetiltetra-hidro-2H-pirano (72,6 mg, 0,328 mmol) e a mistura reaccional aquecida a 50 °C, durante 16 horas. A LCMS indicou que a reacção estava incompleta e foi adicionado mais 4-(2-bromoetil)-2,2-dimetiltetra-hidro-2H-pirano (35 mg), e a reacção agitada a 50 °C durante mais 5 horas e em seguida partilhada entre água (2 mL) e DCM (5 mL) . A camada aquosa foi adicionalmente extraída com DCM (2 x 5 mL). As camadas orgânicas combinadas foram combinadas e secas passando através de um filtro poroso hidrófobo e em seguida evaporadas até à secura utilizando uma unidade de evaporação sob corrente de azoto. O resíduo foi dissolvido em metanol (0,6 mL) e purificado por autopreparação orientada por massa. A evaporação das fracções contendo produto sob uma corrente de azoto num aparelho de evaporação deu o composto em epígrafe como um sólido branco (92 mg). LCMS (Método B): W = 1,19 min; MH+ = 392 348

Intermediário 291: 9-[3-(2, 2-Dimetiltetra-hidro-2fl-piran-4- il)propil] -2-{ [ (1-R) -1-metilbutil] oxi}-8- (metiloxi) -9H-purin-6-amina

Preparada de modo análogo ao Intermediário 223 de trifluoroacetato de 2-{[(IP)-1-metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)-1H-purin-6-amina e 4-(3-bromopropil)-2,2-dimetiltetra-hidro-2fí-pirano mas realizando a alquilação ao longo de 1 hora a 60 °C. LCMS (Método A): tRET = 3,27 min; MH+ = 406

Intermediário 292: 9-[4-(2,2-Dimetiltetra-hidro-2fl-piran-4- il)butil]-2-{[(IR)-1-metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)-9H-purin-6-amina

Preparada de modo análogo ao Intermediário 223 de trifluoroacetato de 2-{[(IR)-1-metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)-1H-purin-6-amina e 4-(4-bromobutil) -2,2-dimetiltetra-hidro-2fí-pirano mas realizando a alquilação ao longo de 1 hora a 60 °C. LCMS (Método A): tRET = 3,44 min; MH+ = 420 349

Exemplo_lj_6-Amino-2-butoxl-9- (tetra-hidro-2fl-piran-4- ilmetll) -7, 9-di-hidro-8fi-purin-8-ona

2-Butoxi-8-metoxi-9-(tetra-hidro-2íí-piran-4-ilmetil)-9H-purin-6-amina (0,22 g) foi dissolvida em metanol (10 mL) e tratada com cloreto de hidrogénio 4 N em 1,4-dioxano (1 mL) . A reacção foi agitada à temperatura ambiente durante 16 horas e levada para dar um sólido que foi suspenso em água (2 mL), antes de ter sido adicionado metanol suficiente até ser obtida uma solução. Foi adicionada solução de hidróxido de sódio 2 N para trazer a pH 7 e a solução concentrada até se formar uma suspensão. O sólido branco foi filtrado e lavado com água (2 mL, duas vezes para completar a transferência e lavar). Este foi seco sob sucção e em seguida sob vácuo a 50 °C para dar o composto em epígrafe como um sólido branco (0,189 g). MS calculado para (C15H23N5O3)+ = 321 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 322 RMN de ( (CD3) 2SO) : 9,86 (1H, s), 6,41 (2H, s), 4,14 (2H, t), 3,81 (2H, m), 3,55 (2H, d), 3,22 (2H, m), 2,03 (1H, m), 1,64 (2H, m), 1,49-1,33 (4H, m com sobreposição), 1,22 (2H, m), 0,92 (3H, t) . 350

Exemplo 2: 6-Amino-2-butoxi-9-(tetra-hidro-2i7-piran-2 ilmetil) -7, 9-di-hidro-8ff-purin-8-ona

2-Butoxi-8-metoxi-9-(tetra-hidro-2i7-piran-2-ilmetil)-9H- purin-6-amina (6 mg, ~85% pura) foi dissolvida em metanol (1 mL), tratada com cloreto de hidrogénio 4 N em 1,4-dioxano (0,5 mL) e agitada durante 5 horas à temperatura ambiente. A mistura foi levada até à secura para dar o composto em epígrafe (77,8:10,8 por LCMS) como uma goma incolor (8 mg). MS calculado para (C15H23N5O3)+ = 321 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 322 RMN de (CD3OD) : 4,54 (2H, t), 4, 06-3, 65 (5H, m com sobreposição), 1,87-1,83 (3H, m com sobreposição), 1,69 (1H, d), 1,52 (4H, m com sobreposição), 1,35 (2H, m), 1,01 (3H, t) (protões de NH2 & NH sofreram troca). 351

Exemplo 3: 6-Amino-2-butoxi-9-(tetra-hidrofuran-2-ilmetil)-7,9-di-hidro-8A-purin-8-ona

A sal de trifluoroacetato de 2-butoxi-8-metoxi-9ií-purin-6-amina (0,20 g) em dmf seca (5 mL) foi adicionado carbonato de potássio anidro (0,315 g) . Isto foi aquecido a 60 °C durante 1 hora e em seguida arrefecido até à temperatura ambiente. Foi adicionado brometo de tetra-hidrofurfurilo (65 uL) e a mistura reaccional foi então aquecida até 50 °C, de um dia para o outro. A reacção foi desactivada com água e extraída com acetato de etilo (duas vezes). A fase orgânica foi separada, combinada e seca passando através de um filtro poroso hidrófobo. A evaporação da fase orgânica e purificação do óleo assim obtido por cromatografia sobre sílica (40 g) (ISCO) eluindo com 0-100% de acetato de etilo:ciclo-hexano e em seguida 0-10% de metanol:acetato de etilo, em seguida metanol deu uma goma. Esta goma foi dissolvida em metanol (5 mL) e tratada com cloreto de hidrogénio 4 N em 1,4-dioxano (1 mL) e agitada, de um dia para o outro, à temperatura ambiente. A mistura reaccional foi levada até à secura para dar uma goma ( — 44 mg) que foi purificada por MD AP para dar o composto em epígrafe (isómero que migra mais lentamente por LCMS) como um sólido branco (15,2 mg). MS calculado para (C14H21N5O3)+ = 307 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 308 352 RMN de XH (CD3OD): 4,36 (1H, m), 4,27 (2H, t), 3,90 (2H, m), 3,75 (2H, d), 2,00 (2H, m), 1,90 (1H, m), 1,73 (3H, m com sobreposição), 1,48 (2H, m), 0,98 (3H, t) (NH2 e NH sofreram troca).

Exemplo 4: 6-Amino-2-butilamino-9-(tetra-hidro-2A-piran-4-ilmetil) -7, 9-di-hidro-8A-purin-8-ona

A uma solução de N2-butil-8-metoxi-9-(tetra-hidro-2ií-piran-4-ilmetil)-9íí-purina-2,6-diamina (310 mg) em metanol seco (30 mL) à temperatura ambiente e sob azoto foi adicionado cloreto de hidrogénio 4,0 M em 1,4-dioxano (5,5 mL) de uma única vez. A reacção foi deixada a agitar à temperatura ambiente durante 16 horas. A reacção foi neutralizada pela adição de solução de hidróxido de sódio 2,0 M e concentrada in vacuo. O resíduo foi tomado em água (10 mL) e o sólido filtrado e seco no evaporador rotativo (60 °C) durante 30 minutos. Isto proporcionou o composto em epígrafe como um sólido (170 mg). MS calculado para (C15H24 Νβ02)+ = 320 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 321 RMN de XH ( (CD3) 2SO) : δ 9,82 (1H, s), 6,16 (1H, t), 6,09 (2H, s), 3,81 (2H, m), 3,50 (2H, d), 3,21 (2H, m), 3,16 (2H, m), 353 2,03 (1Η, m), 1,44 (4H, m), 1,29 (2H, m) , 1,22 (2H, m) , 0,88 (3H, t) .

Exemplo 4, processo alternativo: 6-Amino-2-(butilamino)-9-(tetra-hidro-2fi-piran-4-ilmetil) -7, 9-di-hidro-8fl-purin-8-ona

Ii2-Butil-8- (metoxi) -9- (tetra-hidro-2fí-piran-4-ilmetil) -9H-purina-2,6-diamina (5,16 g) foi dissolvida em metanol (50 mL) para dar uma solução cor de laranja. A esta solução foi então adicionado cloreto de hidrogénio 4 N em 1,4-dioxano (5 mL) . A solução resultante cor de laranja foi agitada à temperatura ambiente (—22 °C) durante ~17 horas. A mistura reaccional foi examinada por LCMS e isto mostrou que a reacção não tinha prosseguido até à conversão total. À mistura reaccional foi então adicionada mais uma aliquota de cloreto de hidrogénio 4 N em 1,4-dioxano (5 mL) e a mistura reaccional foi agitada durante mais 5,25 horas. O exame da mistura reaccional por LCMS mostrou que a reacção estava quase completa com uma pequena quantidade de N2-butil-8-(metoxi)-9-(tetra-hidro-2H-piran-4-ilmetil)-9 H-purina-2,β-diamina remanescente. A reacção foi evaporada sob pressão reduzida para dar um sólido castanho-amarelado claro para evitar reacção/decomposição indesejada ao deixar a reacção sem vigilância ao longo do fim-de-semana. Ao retomar a experiência, o material foi redissolvido em metanol (50 mL) para dar uma solução cor de laranja à qual foi então adicionado 354 cloreto de hidrogénio 4 N em 1,4-dioxano (5 mL) . A mistura reaccional foi então agitada à temperatura ambiente (—20 °C) durante 1,6 horas após o que a reacção foi encontrada completa por LCMS. A mistura reaccional foi então evaporada sob pressão reduzida para dar um sólido castanho-amarelado claro. O material foi suspenso numa mistura de água (10 mL) e metanol (60 mL) e em seguida submetido a ultrassons para dar uma suspensão finamente dividida, antes de ter sido gradualmente adicionada solução de hidróxido de sódio 2 M para neutralizar (foi adicionado um volume adicional de água (10 mL) quando a suspensão começou a ficar espessa). A suspensão resultante foi filtrada sob sucção e o bolo de filtração lavado com água (30 mL) antes de ser seco ao ar sob sucção para dar um sólido esbranquiçado. O filtrado foi evaporado sob sucção para dar um sólido castanho-amarelado claro que foi suspenso em água (10 mL) e isolado por filtração sob sucção. Este sólido foi então lavado com água: metanol (10 mL, 1:1 v/v) para dar um sólido castanho-amarelado claro que foi seco ao ar sob sucção para dar ( — 0,3 g) . Os sólidos combinados foram então secos sob vácuo (50 °C), de um dia para o outro, até ser obtido um sólido esbranquiçado solto (4,69 g).

Este material (4,69 g) foi adicionado a um balão de fundo redondo (250 mL) munido com uma barra de agitação magnética. Ao balão de fundo redondo foi então adicionado etanol absoluto (94 mL). A suspensão resultante foi aquecida suavemente sob agitação até o sólido ter sido dissolvido. Foi então adicionada água (94 mL) e formou-se um precipitado. A suspensão resultante foi então aquecida (balão de fundo redondo agora munido com um 355 condensador de refluxo) (exterior, 95 °C) até o sólido ter sido redissolvido. 0 aquecimento continuou durante 5 minutos, antes da fonte de aquecimento ter sido retirada e deixada arrefecer sob agitação. 0 sólido resultante foi então isolado por filtração e lavado utilizando etanol absoluto: água (50 mL, 1:1 v/v) . O bolo de filtração resultante foi então seco ao ar sob sucção antes de ser seco até peso constante sob vácuo (50 °C) ao longo de ~24 horas, isto deu o composto em epígrafe como um sólido esbranquiçado (3,57 g). MS calculado para (C15 H24 N6O2)+ — 320 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 321 RMN de ( (CD3) 2SO) : 10 ,56 (1H, s), 7,77 (3H, s largo), 3, 87-3, 78 (2 H, m), 3,61-3,53 (2 H, m), 3,34-3,26 (2H, m) , 3,26- 3,18 (2 H, m), 2,09-1,94 ( 1H, m), 1,59-1,44 (4H, m com sobreposição), 1,40-1,29 (2H, m), 1,29-1,14 (2H, m), 0, 95-0,87 (3H, m).

Exemplo 5: 6-Amino-2-butilamino-9-(tetra-hidro-2fl-piran-2-ilmetil)-7,9-di-hidro-8fl-purin-8-ona

A uma solução de I72-butil-8-metoxi-9-(tetra-hidro-2H-piran-2-ilmetil)-9fí-purina-2, β-diamina em metanol seco (5 mL) à 356 temperatura ambiente e sob azoto foi adicionado cloreto de hidrogénio 4,0 M em 1,4-dioxano (1,5 mL) de uma única vez. A reacção foi deixada a agitar à temperatura ambiente, de um dia para o outro. A reacção foi concentrada in vacuo e o produto purificado por MDAP. Isto proporcionou o composto em epígrafe 6 mg (migra mais lentamente em MDAP). MS calculado para (C15H24 Ν602)+ = 320 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 321 RMN de XH ( (CD3) 2SO) : δ 10,71 (1H, s), 7,91 (3H, s 1.), 3, 79-3,85 (1H, m), 3,71-3,78 (1H, m), 3,62-3,71 (1H, m), 3,54-3,60 (1H, m), 3,26-3,38 (2H, m) , 3,19-3,27 (1H, m), 1,70-1,80 (1H, m), 1,53-1, 59 (1H, m), 1, 49-1, 54 (2H, m), 1,43 (3H, s), 1,29-1,39 (2H, m), 1,12-1,25 (1H, m), 0,90 (3H, t).

Exemplo_6j_6-Amino-2-butilamino-9- (tetra-hidrofuran-2- ilmetil)-7,9-di-hidro-8fl-purin-8-ona

A uma solução de sal de ácido trifluoroacético de N2-butil-8-metoxi-9H-purina-2,6-diamina (400 mg) em N,N-dimetilformamida seca (6 mL) à temperatura ambiente e sob azoto foi adicionado carbonato de potássio (630 mg) de uma única vez. A reacção foi agitada a 60 °C durante 1,5 horas e em seguida arrefecida até 357 40 °C. Foi adicionado 2-(bromometil)tetra-hidrofurano (156 pL) de uma vez e a reacção aquecida até 50 °C, de um dia para o outro, e em seguida a 90 °C durante 2 horas. A reacção foi diluída com acetato de etilo (20 mL) e lavada com água (10 mL) . A camada orgânica foi separada e concentrada in vacuo. O produto foi semi-purifiçado por MDAP para proporcionar uma mistura. A esta mistura, em metanol seco (5 mL) à temperatura ambiente e sob azoto foi adicionado cloreto de hidrogénio 4,0 M em 1,4-dioxano (1,5 mL) de uma única vez. A reacção foi deixada a agitar à temperatura ambiente, de um dia para o outro. A reacção foi concentrada in vacuo e o produto purificado por MDAP (isómero que migra mais lentamente). Isto proporcionou o composto em epígrafe como um sólido branco (15 mg). MS calculado para (C14H22 N6O2)+ = 306 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ =307 RMN de XH ((CD3)2SO) : δ 10,69 (1H, s), 7, 82 ( 3H, s OO \—1 1—1 (1H, m), 3 , 67-3, 79 (2H, m), 3,56- -3, 64 (2H, m), 3,28 (2H, s) , 1,76-1,92 ( 3H, m), 1,65 (1H, m), 1, 52 (2 H, m), 1,32 (2H, m) , 0,88 (3H, t) . 358

Exemplo 7: 6-Amino-2-butilamino-9-[2-(tetra-hidro-2ff-piran-4-11)etil] -7, 9-di-hidro-8ff-purin-8-ona

A uma solução de sal de ácido trifluoroacético de W2-butil-8-metoxi-9.fí-purina-2, 6-diamina (100 mg) em N,N-dimetilformamida seca (1 mL) à temperatura ambiente e sob azoto foi adicionado carbonato de potássio (158 mg) de uma única vez. A reacção foi agitada a 60 °C durante 1,5 horas e em seguida arrefecida até 50 °C. Foi adicionada uma solução de 4-(2-bromoetil)tetra-hidro-2fí-pirano (60 mg) em N, N-dimetilf ormamida seca (0,5 mL) de uma vez e a reacção aquecida a 50 °C, de um dia para o outro. A reacção foi diluída com acetato de etilo (15 mL) e lavada com água (5 mL) . A camada orgânica foi separada e concentrada in vacuo. O produto foi purificado por cromatografia de fase inversa em Ci8 utilizando água (0,1% de ácido fórmico)-acetonitrilo (0,05% de ácido fórmico) como eluente (20-60%) para proporcionar um óleo viscoso amarelo (47 mg) que foi dissolvido em metanol seco (4 mL) à temperatura ambiente e sob azoto, foi adicionado cloreto de hidrogénio 4,0 M em 1,4-dioxano (0,8 mL) de uma única vez. A reacção foi deixada a agitar à temperatura ambiente, de um dia para o outro. A reacção foi neutralizada pela adição de solução de hidróxido de sódio 2,0 M e concentrada in vacuo. O resíduo foi tomado em água (5 mL) e o sólido filtrado e seco in vacuo (60 °C) durante 30 minutos. Isto proporcionou o composto em epígrafe como um sólido bege (23 mg). 359 334 MS calculado para (Ci6H26N602) MS encontrado (electrospray): (M+H)+ =335 RMN de XH ((CD3) 2SO) : δ 9,78 (1H, s), Oh O co 1 Oh 21 (3H, s 1.), 3,80 (2H, m), 3, 65 (2H, t), 3,21 (2H, m) , 3,16 (2H, m) , 1,66 (2H, m), 1,57 (2 H, m), 1,36-1,49 (3H, m) , 1,29 (2H, m), 1,13 (2H, m), 0,88 (3H, t)

Exemplo 8 :_6-Amino-2-butilamino-9-(tetra-hidrofuran-3- ilmetil) -7, 9-di-hidro-8fl-purin-8-ona

A uma solução de sal de ácido trifluoroacético de N2-butil-8-metoxi-9fí-purina-2,6-diamina (100 mg) em N,N-dimetilformamida seca (1 mL) à temperatura ambiente e sob azoto foi adicionado carbonato de potássio (158 mg) de uma única vez. A reacção foi agitada a 60 °C durante 1,5 horas e em seguida arrefecida até 50 °C. Foi adicionada uma solução de 3-(bromometil)tetra-hidrofurano (52 mg) em N,N-dimetilformamida seca (0,5 mL) de uma vez e a reacção aquecida a 50 °C, de um dia para o outro. A reacção foi diluída com acetato de etilo (15 mL) e lavada com água (5 mL) . A camada orgânica foi separada e concentrada in vacuo. O produto foi semi-purifiçado por cromatografia de fase inversa em Cis utilizando água (contendo 0,1% de ácido fórmico)- 360 acetonitrilo (contendo 0,05% de ácido fórmico) como eluente (10-45%) para dar um óleo amarelo (32 mg) que foi dissolvido em metanol seco (3 mL) à temperatura ambiente e sob azoto, foi adicionado cloreto de hidrogénio 4,0 M em 1,4-dioxano (0,6 mL) de uma única vez. A reacção foi deixada a agitar à temperatura ambiente, de um dia para o outro. A reacção foi neutralizada pela adição de solução de hidróxido de sódio 2,0 M e concentrada in vacuo. O resíduo foi tomado em água (5 mL) e o sólido filtrado e seco in vacuo (60 °C) durante 15 minutos. Isto proporcionou o composto em epígrafe como um sólido branco (20 mg). MS calculado para (C14H22 Νβ02)+ = 306 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 307 RMN de ^ ((CD3)2SO) : δ 9, 73 (1H, s) , 6, 17 (1H, m), 6,04 1H, m), 3, 74 (2 H, m), 3, 56-3, 64 (4H, m), 3, 53 (1H, m), 3,16 2H, m), 2,69 ( 1H, m), 1,85 (1H, m) , 1, 64 (1H, m), 1, 46 (2H, m), ,29 (2H, m), 0 ,87 (3H, t) . 361

Exemplo 8, método alternativo: 6-Amino-2-(butilamino)-9-(tetra-hidro-3-furanilmetil) -7, 9-di-hidro-8fi-purin-8-ona

N2-Butil-8-(metoxi)-9-(tetra-hidro-3-furanilmetil)-9H-purina-2,6-diamina (98 mg) foi dissolvida em metanol (2 mL) . À solução resultante foi adicionado cloreto de hidrogénio 4 N em 1,4-dioxano (0,5 mL) . A mistura reaccional foi então agitada à temperatura ambiente até à conversão total (seguida por LCMS) ao longo de 2,5 horas. A mistura reaccional foi então evaporada sob pressão reduzida para dar um óleo. A este óleo foi adicionada água (2 mL) e metanol (2 mL) . A solução resultante foi então neutralizada utilizando solução de hidróxido de sódio 2 M. Foi adicionada mais água (5 mL) quando o produto precipitou (pH 4-5). O sólido branco foi isolado por filtração sob sucção e em seguida lavado com água (5 mL). O bolo de filtração foi então seco ao ar sob sucção para dar (68 mg) que foi dissolvido em etanol (2 mL) . A esta solução foi adicionada água (2 mL) para dar um precipitado. A suspensão resultante foi aquecida (90 °C, externos) a refluxo para dar uma solução. A solução resultante foi aquecida a refluxo durante alguns minutos antes de ser deixada arrefecer até à temperatura ambiente para dar um sólido branco em flocos. Este sólido foi isolado por filtração sob sucção e os resíduos transferidos utilizando água (8 mL). 0 bolo de filtração foi seco ao ar sob sucção e foi em seguida seco sob vacuo a 50 °C durante 4 horas para dar um sólido branco que foi 362 então transferido para um frasquinho e seco adicionalmente a 50 °C (16 horas) para dar 55 mg do composto em epígrafe como um sólido branco. MS calculado para (Ci4H22 Νδ02)+ = 306 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 307 RMN de ΧΗ ((CD3)2SO) : δ 9 ,55 (1H, s ! D. 6,11- -6,19 (1H, m), 5,95 (2H, s 1), , 3,80-3,70 (1H, m), 3,66 -3, 56 (4H, m), 3, 56- -3, 49 (1H, m), 3,16 (2H, q), 2, r 76- 2, 63 (1H, m), 1,91- -1,80 (1H, m), 1, 69- -1,59 (1H, m), 1,52-1, ,41 (2H, m), 1,36- 1,22 (2H, m), 0,88 (3 H, t) .

Exemplo 9: 6-Amino-2-butilamino-9-(tetra-hidro-2ff-piran-3-ilmetil) -7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona

A uma solução de li2-butil-8-metoxi-9-(tetra-hidro-2fí-piran-3-ilmetil)-9f7-purina-2,6-diamina (45 mg) em metanol seco (3 mL) à temperatura ambiente e sob azoto foi adicionado cloreto de hidrogénio 4,0 M em 1,4-dioxano (0,7 mL) de uma única vez. A reacção foi deixada a agitar à temperatura ambiente durante 3 horas. A reacção foi neutralizada pela adição de solução de hidróxido de sódio 2,0 M e concentrada in vacuo. O resíduo foi tomado em água (5 mL) e o sólido filtrado e seco in vacuo 363 (60 °C) durante 30 minutos. Isto proporcionou o composto em epígrafe como um sólido (25 mg). MS calculado para (Οι5Η24 N602)+ = 320 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 321 RMN de ΧΗ ((CD3)2SO) : : δ 9,59 (1H, S), 6,17 (1H, t), 5,90 (2H, t) , 3,65 (2H, m), 3 ,42- -3,67 (2H, m), 3,31 (1H, m), 3,10- 3,20 (3H, m), 2,14 (1H, m), 1, 64 (2H, m), 1,36 -1,50 (3H, m), 1,30 (2H, m), 1 ,22 (1H, m) , o, ,88 (3H, t)

Exemplo_lOj_6-Amino-2-butoxi-9- (tetra-hidrofuran-3- ilmetil) -7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona

2-Butoxi-8-metoxi-9-(tetra-hidrofuran-3-ilmetil)-9i7-purin-6-amina (97 mg) foi dissolvida em metanol (2 mL) e tratada com cloreto de hidrogénio 4 N em 1,4-dioxano (1 mL) . A mistura reaccional foi agitada durante 4 horas. A reacção foi levada até à secura. Foram adicionados água (2 mL) e metanol (15 mL) ao resíduo e em seguida neutralizados pela adição de solução de hidróxido de sódio 2 N. O anterior foi levado até quase à secura (pequena quantidade de água remanescente) e 0 sólido assim obtido foi filtrado (transferindo e lavando o sólido com água (2 mL, 3 vezes)). O sólido foi seco sob sucção antes de ser seco 364 adicionalmente in vacuo (50 °C) durante 2 horas. Isto proporcionou o composto em epígrafe como um sólido branco (62 mg). MS calculado para (C14H21N5O3)+ = 307 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 308 RMN de ΧΗ ( (CD3) 2SO) : 9,88 (1H, s), 6,42 (2H, s), 4,13 (2H, t), 3,75 (1H, m), 3, 65-3, 56 (4H, m com sobreposição), 3,51 (1H, m), 2,68 (1H, m), 1,87 (1H, m), 1, 66-1, 57 (3H, m com sobreposição), 1,38 (2H, m), 0,90 (3H, t).

Exemplo 11: 6-Amino-2-butoxi-9-[2-(tetra-hidro-2fl-piran-4-il)etil] -7, 9-di-hidro-8ff-purin-8-ona

2-Butoxi-8-metoxi-9- [2- (tetra-hidro-2fí-piran-4-il) etil] -9H-purin-6-amina (0,11 g) foi dissolvida em metanol (2 mL) e tratada com cloreto de hidrogénio 4 N em 1,4-dioxano (1 mL) . A mistura reaccional foi agitada durante 4 horas e foi levada até à secura. Foram adicionados água (2 mL) e metanol (15 mL) ao resíduo e em seguida neutralizados pela adição de solução de hidróxido de sódio 2 N. O anterior foi levado até quase à secura (pequena quantidade de água remanescente) e o sólido assim 365 obtido foi filtrado (transferindo e lavando o sólido com água (3 mL)). 0 sólido foi seco sob sucção antes de ser seco adicionalmente in vacuo para proporcionar o composto em epígrafe como um sólido branco (82 mg). MS calculado para (C16H25N5O3)+ = 335 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 336 RMN de ΧΗ ( (CD3) 2S0) : 9,84 (1H, s), 6,40 (2H, s), 4,13 (2H, t), 3,79 (2H, dd), 3,70 (2H, d), 3,21 (2H, t), 1,70-1,53 (6H, m com sobreposição), 1,46-1,32 (3H, m com sobreposição), 1,14 (2H, m), 0,91 (3H, t) .

Exemplo 12: 6-Amino-2-butoxi-9-(tetra-hidro-2ff-piran-3- ilmetil) -7, 9-di-hidro-8ff-purin-8-ona

2-Butoxi-8-metoxi-9- (tetra-hidro-2fí-piran-3-ilmetil) -9H-purin-6-amina (105 mg) foi dissolvida em metanol (2 mL) e tratada com cloreto de hidrogénio 4 N em 1,4-dioxano (1 mL) . A mistura reaccional foi agitada durante 4 horas e levada até à secura. Foram adicionados água (2 mL) e metanol (15 mL) ao resíduo e em seguida neutralizados pela adição de solução de hidróxido de sódio 2 N. O anterior foi levado até quase à secura (pequeno volume de água remanescente) e o sólido assim obtido 366 foi filtrado sob sucção (transferindo e lavando com água (2 mL, 3 vezes)). 0 sólido foi seco sob sucção antes de ser seco adicionalmente in vácuo para proporcionar o composto em epígrafe como um sólido branco (71,5 mg). MS calculado para (C15H23N5O3)+ = 321 MS encontrado (electrospray): (M+H)' = 322 RMN de XH ((CD3)2SO) : 9, 85 (1H, s), 6,40 (2H, s), 4,13 (2H, t), 3, 65 (2H, m), 3,54 (2 H, m), 3,32 (1H, m), 3,15 (1H, dd), 2, 02 (1H, m), 1,69-1,56 (4H, m com sobreposição), 1,45- -1,32 (3H, m com sobreposição), 1,21 (1H, m), 0,91 (3H, t).

Exemplo_13j_6-Amino-2-butoxi-9- [2- (tetra-hidrofuran-2- il) etil] -7, 9-di-hidro-8ff-purin-8-ona

2-Butoxi-8-metoxi-9- [2- (tetra-Mdrofuran-2-il) etil] -9H-purin-6-amina (122 mg) foi dissolvida em metanol (2 mL) e adicionado cloreto de hidrogénio 4 N em dioxano (1 mL) . Após 4 h, a mistura reaccional foi basificada com hidróxido de sódio 2 N (2,2 mL), em seguida os solvente orgânicos removidos. Foram adicionadas algumas gotas de ácido clorídrico 2 N e o pH ajustado de novo a 7-8 com hidrogenocarbonato de sódio saturado. 367 0 sólido resultante foi filtrado, lavado e seco para dar o composto em epígrafe como um sólido, rendimento 65 mg. MS calculado para (C15H23N5O3)+ = 321 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 322 RMN de ( (CD3) 2S0) : δ 9,83 (1H, s), 6,39 (2H, s), 4,14 (2H, t), 3,72 (4H, m), 3,56 (1H, m), 1,96 (1H, m), 1,80 (4H, m), 1,64 (2H, m), 1,38 (3H, m), 1,91 (3H, t) . 25 mg desta mistura de enantiómeros foi resolvido por HPLC quiral numa coluna de 2 x 25cm Chiralpak AS eluída com heptano:etanol 7:3 com um caudal de 15 mL/min ao longo de 30 min para proporcionar o Exemplo 13, Isómero 1 (9,9 mg) e o Exemplo 13, Isómero 2 (10,8 mg).

Exemplo 13, isómero 1: HPLC quiral analítica (coluna de 25 x 0,46 cm Chiralpak AS, heptano:etanol 7:3 eluindo a 1 mL/min, processada 30 min): t^T = 10,8 min. LCMS (Método A): tRET = 2,78 min; MH+ = 322

Exemplo 13, Isómero 2: HPLC quiral analítica (coluna de 25 x 0,46 cm Chiralpak AS, heptano:etanol 7:3 eluindo a 1 mL/min, processada 30 min): óret = 15,8 min. LCMS (Método A): tRET = 2,78 min; MH+ = 322 368

Exemplo 14: 6-Amino-2-butilamino-9-[2-(tetra-hidrofuran-2 il) etil] -7, 9-di-hidro-8ff-purin-8-ona

I72-Butil-8-metoxi-9-[2-(tetra-hidrofuran-2-il)etil]-9H-purina-2,6-diamina (107 mg) foi dissolvida em metanol (2 mL) e adicionado cloreto de hidrogénio 4 N em dioxano (1 mL) . Após 4 h, os solventes foram levados e o resíduo tomado em água e basifiçado com hidróxido de sódio 2 N. Foram adicionadas algumas gotas de ácido clorídrico 2 N e o pH ajustado a 7-8 por adição de hidrogenocarbonato de sódio saturado. O sólido resultante foi filtrado, lavado e seco para dar o composto em epígrafe como um sólido, rendimento 101 mg. MS calculado para (Ci5H24 N602)+ = 320 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 321 RMN de 2Η ((CD3)2SO): δ 9, 51 (1H, s) , 6,17 (1H, m) , 5, 94 (2H, s), 3, 77-3,53 (5H, m), 3,16 (2H, m), 1,96 (1H, m), 1,80 (4H, m), 1,51-1,24 (5H, m) , 0,88 (3H, t) . 369

Exemplo 15: 6-Amino-2-butoxi-9-[2-(tetra-hidro-2H-piran-3-il)etil]-7,9-di-hidro-8fl-purin-8-ona NH,

2-Butoxi-8-metoxi-9- [2- (tetra-hidro-2fí-piran-3-il) etil] -9H-purin-6-amina (108 mg) foi dissolvida em metanol (2 mL) e adicionado cloreto de hidrogénio 4 N em dioxano (1 mL) . Após 16 h, a mistura reaccional foi levada, desactivada com água em seguida adicionado hidrogenocarbonato de sódio saturado, quando precipitou um sólido. Este foi filtrado, lavado com água e seco. O sólido foi tratado com metanol quente e foi filtrado depois de deixar arrefecer para produzir 66 mg do composto em epígrafe. MS calculado para (C16H25N5O3)+ = 335 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 336 RMN de XH ( (CD3) 2SO) : δ 9,85 (1H, s), 6,40 (2H, s 1.), 4,15 (2H, t), 3,79 (1H, m), 3,68 (3H, m), 3,25 (1H, m), 2,99 (1H, m), 1,87 (1H, m), 1,64 (2H, m), 1, 58-1, 34 (7H, m), 1,14 (1H, m) , 0,91 (3H, t) . 370

Exemplo 16: 6-Amino-2-butilamino-9-[2-(tetra-hidro-2H- plran-3-11) etil] -7, 9-di-hidro-8ff-purin-8-ona

N2-Butil-8-metoxi-9-[2-(tetra-hidro-2H-piran-3-il)etil] -9H-purina-2,6-diamina (138 mg) foi dissolvida em metanol (2 mL) e adicionado cloreto de hidrogénio 4 N em dioxano (1 mL) . Após 4 h, a mistura reaccional foi levada, desactivada com água, em seguida basifiçada com hidrogenocarbonato de sódio saturado. 0 sólido resultante foi filtrado, lavado e seco para dar o composto em epígrafe, rendimento 105 mg. MS calculado para (Ci6H26N602)+ = 334 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 335 RMN de ΧΗ ( (CD3) 2SO) : δ 9,52 (1H, s), 6,14 (1H, t), 5,94 (2H, s 1.), 3,78 (1H, m), 3,71 (1H, m), 3,62 (2H, m), 3,24 (1H, m), 3,16 (2H, m), 2,98 (1H, m), 1,87 (1H, m), 1,57-1,36 (7H, m), 1,29 (2H, m), 1,12 (1H, m), 0,88 (3H, t).

Uma amostra desta mistura de enantiómeros foi resolvida por HPLC quiral numa coluna de 2 x 25cm Chiralpak AS eluída com heptano: etanol 85:15 com um caudal de 15 mL/min ao longo de 60 min para proporcionar o Exemplo 16, Isómero 1 (7,6 mg) e o

Exemplo 16, Isómero 2 (7,5 mg). 371 (coluna de

Exemplo 16, Isómero 1: HPLC quiral analítica 25 x 0,46 cm Chiralpak AS, heptano: etanol 85:15 eluindo a 1 mL/min, processada 40 min) : íret = 24,2 min. LCMS (Método A): tRET = 2,51 min; MH+ = 335

Exemplo 16, Isómero 2: hplc quiral analítica (coluna de 25 x 0,46 cm Chiralpak AS, heptano:etanol 85:15 eluindo a 1 mL/min, processada 40 min): órei = 29,0 min. LCMS (Método A): tRET = 2,51 min; MH+ = 335

Exemplo 17: 6-Amino-2-[(2,2-dimetilpentil)oxi]-9-(tetra- hidro-2fí-piran-4-ilmetil) -7, 9-di-hidro-8ff-purin-8-ona

A uma solução de 2-[(2, 2-dimetilpentil)oxi]-8-metoxi-9-(tetra-hidro-2ií-piran-4-ilmetil) -9íf-purin-6-amina (116 mg) em MeOH seco (14,5 mL) foi adicionado HC1 4 N em 1,4-dioxano (2,48 mL) . A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 3 h. A reacção foi neutralizada até pH 7 com solução de hidróxido de sódio 2 M e foi concentrada in vacuo para dar um sólido esbranquiçado. O sólido foi triturado com água (30 mL) e foi filtrado sob pressão reduzida para dar o composto em epígrafe como um sólido esbranquiçado (76 mg). MS calculado para (C18H29N5O3)+ = 363 372 364 MS encontrado (electrospray): (M+H) RMN de XH ( (CD3) 2S0) : δ 9,86 (1H, s), 6,42 (2H, S), 3,87 (2H, s), 3,81 (2H, br. d), 3,60-3,52 (2H, m), 3,29-3,15 (2H, m), 2,10-1,96 (1H, m), 1, 50-1,40 (2H, m), 1,31-1,16 (6H, m), 0,96- 0, 81 (9H, m).

Exemplo_18 :_6-Amino-2- (pentilamino) -9- (tetra-hidro-2ff- piran-4-ilmetil)-7,9-di-hidro-8fl-purin-8-ona NH, IX >=

A uma solução de S-metoxi-T^-pentil-O-(tetra-hidro-2H-piran-4-ilmetil)-9fí-purina-2,6-diamina (140 mg) em MeOH seco (15,7 mL) foi adicionado HC1 4 N em 1,4-dioxano (2,65 mL) . A mistura reaccional foi agitada à temperatura ambiente durante 3 h e foi então neutralizada com solução de hidróxido de sódio 2 Μ. A mistura foi concentrada in vacuo e 0 resíduo foi tomado em água (20 mL) . A mistura foi filtrada sob pressão reduzida para dar o composto em epígrafe (95 mg) como um sólido esbranquiçado. MS calculado para (Ci6H26N602)+ = 334 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 335 RMN de XH ( (CD3) 2SO) : δ 9,55 (1H, s), 6,19 (1H, s), 5,96 (2H, s), 3,81 (2 H, d), 3,50 (2H, d), 3,27-3, 07 (4H, m) , 2,10- 373 1,96 (1Η, m), 1, 55-1, 37 (4H, m) , 1,35-1,13 (6H, m), 0,92-0,79 (3H, m).

Exemplo 19: 6-Amino-2-[(3-metilbutil)oxi]-9-(tetra-hidro-2ff-piran-4-ilmetil) -7, 9-di-hidro-8ff-purin-8-ona

A uma solução de 2-[(3-metilbutil)oxi]-8-metoxi-9-(tetra-hidro-2H-piran-4-ilmetil)-9H-purin-6-amina (52 mg) em MeOH seco (5,7 mL) foi adicionado HC1 4 N em 1,4-dioxano (0,971 mL) e a mistura reaccional foi agitada à temperatura ambiente durante 3 h, A reacção foi neutralizada até pH 7 com solução de hidróxido de sódio 2 M e concentrada in vacuo para dar um sólido branco. O sólido foi lavado com água (20 mL) e foi filtrado sob pressão reduzida para dar o composto em epígrafe como um sólido esbranquiçado (31 mg). MS calculado para (C16H25N5O3)+ = 335 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 336 RMN de ( (CD3) 2SO) : δ 9,86 (1H, s), 6,40 (2H, s), 4,18 (2H, t), 3,81 (2H, dd), 3,55 (2H, t), 3,22 (2H, t), 2,09-1,95 (1H, m), 1, 78-1,64 (1H, m), 1,61-1,51 (2H, m), 1,49-1, 40 (2H, m), 1,29-1,15 (2H, m), 0,91 (6H, d). 374

Exemplo 20: 6-Amino-2-[(2-metilbutil)oxi]-9-(tetra-hidro 2fl-piran-4-ilmetil) -7, 9-di-hidro-8ff-purin-8-ona

A uma solução de 2-[(2-metilbutil)oxi]-8-metoxi-9-(tetra-hidro-2H-piran-4-ilmetil)-9H-purin-6-amina (41 mg) em MeOH seco (4,5 mL) foi adicionado HC1 4 N em 1,4-dioxano (0, 766 mL) e a mistura reaccional foi agitada à temperatura ambiente durante 3 h. A reacção foi neutralizada com solução de hidróxido de sódio 2 M e concentrada in vacuo. O resíduo branco resultante foi tomado em água (20 mL) e foi filtrado sob pressão reduzida para dar o composto em epígrafe como um sólido esbranquiçado (20 mg). MS calculado para (C16H25N5O3)+ = 335 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 336 RMN de 1H ( (CD3)2SO) : δ 9,88 (1H, D, 6,41 (2H, s), 1 OO O 4,00 (1H, m), 3,97-3,90 (1H, m), 3,85 -3, 76 (2H, m) , 3,56 (2H, d), 3,22 (2H, t), 2,10-1,95 (1H, m), 1,82- •1,68 (1H, m), 1, 50- 1,39 (3H, m), 1,29-1,12 (3H, m), 0,97-0,84 (6H, m). 375

Exemplo 21: 6-Amino-2-[(1-metilbutil)oxi]-9-(tetra-hidro-2H-piran-4-ilmetil)-7, 9-di-hidro-8fl-purin-8-ona

A uma solução de 2-[(1-metilbutil)oxi]-8-metoxi-9-(tetra-hidro-2íí-piran-4-ilmetil)-9i7-purin-6-amina (92 mg) em MeOH seco (9,9 mL) foi adicionado HC1 4 N em 1,4-dioxano (1,7 mL) e a mistura reaccional foi agitada à temperatura ambiente durante 3 h. A reacção foi neutralizada até pH 7 com solução de hidróxido de sódio 2 M e concentrada in vacuo para dar um sólido esbranquiçado. 0 sólido foi triturado com água (30 mL) e filtrado sob pressão reduzida para dar o composto em epígrafe como um sólido esbranquiçado (55 mg). MS calculado para (C16H25N5O3)+ = 335 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 336 RMN de XH ( (CD3)2SO): δ 9,84 (1H, s), 6,36 (2H, s), 5, 04- 4,94 (1H, m), 3, 86-3, 76 (2H, m), 3,53 (2 H, d), 3,21 (2H, t) , 2,08-1,96 (1H, m) , 1,68-1,55 (1H, m), 1,53-1,14 (1 OH, m), 0,92- 0,83 (3H, m). 376

Exemplo 22: 6-Amino-2-[(2-metilbutil)amino]-9-(tetra-hidro 2ff-piran-4-ilmetil)-7, 9-di-hidro-8ff-purin-8-ona

Uma mistura de 2-cloro-8-metoxi-9-(tetra-hidro-2u-piran-4-ilmetil)-9H-purin-6-amina (40 mg) em 2-metil-l-butilamina (117 mg) foi aquecida num microondas a 170 °C durante 15 min. A mistura foi concentrada in vacuo para dar um residuo oleoso verde que foi purificado por cromatografia de fase inversa em Cie (ISCO) utilizando água (0,1% de ácido fórmico)-acetonitrilo (0,05% de ácido fórmico) como eluente (20-60%) para dar o composto em epígrafe como um sólido esbranquiçado (9 mg). MS calculado para (Ci6H26N602)+ = 334 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 335 RMN de XH ((CD3)2SO): δ 9,60 (1H, 1), 6,18 (1H, t), 5,95 (2 Η, 1), 3, 86-3, 77 (2H, m) , 3,50 (2H, d), 3,27-3, 09 (3H, m) , 3, 00-2, 89 (1H, m), 2,11-1,98 (1H, m), 1, 67-1,55 (1H, m), 1,49- 1,33 (3 H, m), 1,28-1, 02 (3H, m) , 0,91-0,80 (6H, m). 377

Exemplo 23: 6-amino-2-[(3-metilbutil)amino]-9-(tetra-hidro-2ff-piran-4-ilmetil) -7, 9-di-hidro-8ff-purin-8-ona

Uma mistura de 2-cloro-8-metoxi-9-(tetra-hidro-2il-piran-4-ilmetil)-9H-purin-6-amina (45 mg) em 3-metil-l-butilamina (0, 234 mL) foi aquecida num microondas a 170 °C durante 10 min. A mistura foi concentrada in vácuo para dar um residuo oleoso verde. Este foi purificado por cromatografia de fase inversa em Cie (ISCO) utilizando água (0,1% de ácido fórmico)-acetonitrilo (0,05% de ácido fórmico) como eluente (20-60%) para dar o composto em epígrafe como um sólido branco (10 mg) . MS calculado para (Ci6H26N602)+ = 334 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 335 RMN de ΧΗ ( (CD3) 2SO) : δ 9,61 (1H, s), 6,12 (1H, t), 5,97 (2H, s), 3, 86-3, 77 (2H, m) , 3,50 (2H, d), 3,27-3,14 (4H, m) , 2,13-1,95 (1H, m), 1,68-1,12 (7H, m), 0,96-0,79 (6H, m). 378

Exemplo 24: 6-Amino-2-[(1-metilbutil)amino]-9-(tetra-hidro-2ff-piran-4-ilmetil) -7, 9-di-hidro-8ff-purin-8-ona

A uma solução de 2-cloro-8-metoxi-9-(tetra-hidro-2íí-piran-4-ilmetil)-9fí-purin-6-amina (40 mg) em etilenoglicol (1,5 mL) foi adicionado 2-aminopentano (0,16 mL) e a mistura foi aquecida num microondas a 170 °C durante 2 x 30 min. Foi adicionada mais uma porção de 2-aminopentano (0,08 mL) e a reacção foi aquecida num microondas a 180 °C durante 30 min. A mistura foi tomada em AcOEt (15 mL) e foi lavada com água (3 x 15 mL) . Os orgânicos foram separados, secos sobre MgS04, filtrados e concentrados in vacuo para dar um resíduo castanho. Este foi tomado em DCM e concentrado numa estufa de vácuo para dar o composto em epígrafe como um sólido castanho (18 mg) . MS calculado para (Ci6H26N602)+ = 334 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 335 RMN de ΧΗ ( (CD3)2SO) : δ 9,56 (1H, D, 5,93 (2H, s), 5, 88 (1H, d), 3,85-3,76 (2H, m), 3,50 (2H, d), 3,26-3,14 (2H, m), 2,09-1,97 (1H, m), 1, 54-1,12 (9H, m), 1,05 (3H, d), 0,91-0,82 (3H, m). 379

Exemplo 25: 6-Amino-2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-9-(tetra hldro-3-furanilmetll)-7,9-di-hidro-8fl-purin-8-ona

A uma solução de 2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-8-metoxi-9-(tetra-hidro-3-furanilmetil)-9i7-purin-6-amina (103,8 mg) em metanol (5 mL) foi adicionado HC1 4 N em 1,4-dioxano (2 mL) e a mistura reaccional foi agitada à temperatura ambiente durante 4 h. A reacção foi evaporada sob pressão reduzida para dar uma goma. Foi adicionada água (3 mL) para dar um sólido branco. A mistura foi ajustada a pH 7 adicionando solução de hidróxido de sódio 2 N e o sólido branco foi filtrado sob sucção, em seguida lavado com algumas gotas de MeOH. O material foi seco ao ar sob sucção e em seguida numa estufa de vácuo (50 °C) para dar o composto em epigrafe como um sólido branco (77 mg). MS calculado para (C15H21N5O3)+ = 319 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 320 RMN de XH ((CD3) 2SO): δ 9,89 (1H, s), 6,44 (2H, s), 4,19 (2H t), 3,80-3,72 (1H, m), 3,69-3, 56 (4H, m), 3,55-3,49 (1H, m), 2, 75-2, 63 (1H, m), 1, 94-1,82 (1H, m), 1, 68-1,53 (3H, m), 0,83-0,72 (1H, m), 0, 47-0,37 (2H, m) , 0,13-0,06 (2H, m) . 380

Exemplo 26: 6-Amino-2-butiloxi-9-[2-(tetra-hidro-2ff-piran 2-il) etil] -7, 9-di-hidro-8ff-purin-8-ona

Uma solução de 2-butiloxi-8-metoxi-9-[2-(tetra-hidro-2/ί-piran-2-il)etil]-9i7-purin-6-amina (88 mg) em metanol (2 mL) foi tratada com HC1 4 N em 1,4-dioxano (1 mL) durante 1 h. A reacção foi evaporada e o residuo tratado com água, em seguida basifiçado com solução saturada de bicarbonato de sódio. 0 sólido branco resultante foi filtrado, lavado com água e seco para dar o composto em epígrafe (78,1 mg). MS calculado para (C16H25N5O3)+ = 335 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 336 RMN de ( (CD3) 2S0) : δ 9,80 (1H, s), 6,37 (2H, s), 4,14 (2H, t), 3,87-3,62 (3H, m), 3,30-3,16 (2H, m), 1,80-1,50 (6H, m), 1,48-1,31 (5H, m), 1,23-1,10 (1H, m), 0,91 (3H, t). 24 mg desta mistura de enantiómeros foi resolvido por HPLC quiral numa coluna de 2 x 25 cm Chiralpak AD eluída com heptano:etanol 90:10 com um caudal de 15 mL/min ao longo de 40 min para proporcionar o Exemplo 26, Isómero 1 (12,2 mg) e o

Exemplo 26, Isómero 2 (9,4 mg).

Exemplo 26, Isómero 1: HPLC quiral analítica (coluna de 25 x 0,46 cm Chiralpak AD, heptano:etanol 90:10 eluindo a 381 1 mL/min, processada 30 min) : tRET 12,3 min. LCMS (Método A) : tRET = 2,97 min; MH+ = 336 Exemplo 26, Isómero 2: HPLC quiral analítica (coluna de 25 X 0,46 cm Chiralpak AD, heptano:etanol 90:10 eluindo a 1 mL/min, processada 30 min) : tRET 15,4 min. LCMS (Método A) : tRET = 2,97 min; MH+ = 336

Exemplo 27: 6-Amino-2-butiloxi-9-[(2,2-dimetiltetra-hidro-2ff-piran-4-il) metil] - 7, 9-di-hidro-8Jf-ourin-8-ona

Uma solução de 2-butiloxi-9-[ (2,2-dimetiltetra-hidro-2ií-piran-4-il)metil]-8-metoxi-9i7-purin-6-amina (161 mg) em metanol (1 mL) foi tratada com HC1 4 N em 1,4-dioxano (0,5 mL) durante 1 h. A reacção foi evaporada e o resíduo tratado com água, em seguida basifiçado com solução saturada de bicarbonato de sódio. O sólido resultante foi filtrado, lavado com água e seco para dar o composto em epígrafe (122 mg). MS calculado para (C17H27N5O3)+ = 349 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 350 RMN de 1H ( (CD3) 2SO) : δ 9,85 (1H, s), 6,40 (2H, s), 4,21-4,10 (2 H, m), 3, 62-3, 42 (4H, m) , 2,27-2,14 (1H, m), 1,69-1,59 382 (2Η, m), 1,46-1,33 (4H, m), 1,14-0,98 (8H, m), 0, 95-0, 88 (3H, m) .

Uma amostra desta mistura de enantiómeros foi resolvida por HPLC quiral numa coluna de 2 x 25cm Chiralpak AS eluida com heptano:etanol 95:5 com um caudal de 15 mL/min ao longo de 60 min para proporcionar o Exemplo 27, Isómero 1 (9,07 mg) e o

Exemplo 27, Isómero 2 (7,7 mg) • Exemplo 27, Isómero 1: HPLC quiral analítica (coluna de 25 x 0,46 cm Chiralpak AS, heptano:etanol 95:5 eluindo 3. 1 mL/min, processada 40 min) : TRET = 18,6 min. LCMS (Método A) : tRET = 2,81 min; MH+ = 350 Exemplo 27, Isómero 2: HPLC quiral analitica (coluna de 25 x 0,46 cm Chiralpak AS, heptano:etanol 95:5 eluindo a 1 mL/min, processada 40 min) : tRET — 23,5 min. LCMS (Método A): TRET = 2,81 min; MH+ = 350

Exemplo 28: 6-Amino-2-(butilamino)-9-[(2,2-dimetiltetra- hidro-2ff-piran-4-il)metil]-7, 9-di-hidro-8fl-purin-8-ona

Uma solução de W2-butil-9-[(2,2-dimetiltetra-hidro-2ií-piran-4-il)metil]-8-metoxi-9H-purina-2,6-diamina (73 mg) em MeOH (2 mL) foi tratada com HC1 4 N em 1,4-dioxano (1 mL) e foi 383 agitada durante 4 h. A reacção foi evaporada e o resíduo tratado com água, em seguida basificado com solução saturada de bicarbonato de sódio. 0 sólido resultante foi filtrado, lavado com água e seco. 0 sólido foi reprecipitado de éter/éter de petróleo para dar o composto em epígrafe (37 mg). MS calculado para (C17H28N6O2)+ = 348 MS encontrado (electrospray): (M+H) + = 349 RMN de XH ( (CD3) 2SO) : δ 9,54 (1H, s), 6,17 ( ;ih, t.i), 5,95 (2 Η, 1), 3,62-3,54 (1H, m), 3,52- -3, 39 (3H, m), 3,23-3,12 (2H, m), 2,29-2,14 (1H, m), 1,52-1,37 (4H, m) , 1,36 -1,23 (2H, m) , 1,14-0,95 (8H, m), 0,92-0,83 (3H, m).

Exemplo_29j_6-Amino-2-butiloxi-9- [2- (tetra-hidro-3- furanil)etil]-7, 9-di-hidro-8fl-purin-8-ona

Uma solução de 2-butiloxi-8-metoxi-9-[2-(tetra-hidro-3-furanil)etil]-9A-purin-6-amina (102 mg) em metanol (1 mL) foi tratada com HC1 4 N em 1,4-dioxano (0,5 mL) durante 1,5 h. A reacção foi evaporada e o resíduo tratado com água, em seguida basificado com solução saturada de bicarbonato de sódio. O sólido resultante foi filtrado, lavado com água e seco para dar o composto em epígrafe (65 mg). 384 321 MS calculado para (C15H23N5O3) MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 322 RMN de XH ( (CD3)2S0) : δ 9,86 (1H, s), 6,41 (2H, s), 4,19- 4,09 (2H, m), 3,83-3,53 (5H, m) , 3,25-3,17 (1H, m), 2,12-1,94 (2H, m), 1,77-1,58 (4H, m), 1,51-1,31 (3H, m), 0,91 (3H, t) .

Exemplo 30: 6-Amino-2-(butilamino)-9-[2-(tetra-hidro-2H- piran-2-il)etil]-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona NH,

vV

H

Uma solução de N2-butil-8-(metoxi)-9-[2-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)etil]-9H-purina-2,6-diamina (54 mg) em metanol (1 mL) foi tratada com HC1 4 N em dioxano (0,5 mL) e deixada em repouso durante 1,5 h. Os solventes foram levados e o resíduo tratado com água e basifiçado com bicarbonato de sódio aquoso saturado. O material precipitado foi filtrado, lavado com água e seco para dar o composto em epígrafe como um sólido, rendimento 22,5 mg. MS calculado para (Ci6H26N602)+ = 334 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ =335 RMN de ΧΗ ((CD3)2SO) : δ 9,49 (1H, s) , 6,14 (1H, m), 5,93 m), 3, 83 (1H, m), 3, 78 -3,58 (2H, m), 3,34-3,12 (4H, m), 1,10 (12H, m), 0,87 (3H, t) . 385

Exemplo 31: 6-Amino-2-(butilamino)-9-[2-(tetra-hidro-3 furanil)etil]-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona NH,

N ^ yV H

Uma solução de N2-butil-8-(metoxi)-9-[2-(tetra-hidro-3-furanil)etil]-9H-purina-2,6-diamina (181 mg) em metanol (1 mL) foi tratada com HC1 4 N em 1,4-dioxano (0,5 mL) durante 1,5 h. A reacção foi evaporada e o resíduo tratado com água, em seguida basifiçado com solução saturada de bicarbonato de sódio. O sólido resultante foi filtrado, lavado com água e seco para dar o composto em epígrafe (111 mg). MS calculado para (Ci5H24 N6O2)+ = 320 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 321 RMN de ( (CD3) 2SO) : δ 9,54 (1H, s), 6,17 (1H, t.l), 5,97 (2H, s), 3,79 (1H, m), 3,74-3,54 (4H, m), 3,18 (3H, m) , 2,02 (2H, m), 1,70 (2H, m), 1,45 (3H, m), 1,28 (2H, m) , 0,87 (3H, t). 386

Exemplo 32: 6-Amino-2-(butiloxi)-9-(tetra-hidro-3- furanilmetil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona, Isómero 1

Exemplo 32 (Isómero 1): 2-Butoxi-8-metoxi-9-(tetra-hidrofuran-3-ilmetil)-9H-purin-6-amina (isómero 1, 176 mg) foi suspensa em metanol (2 mL) e adicionado HC1 4 N em dioxano (1 mL) . A solução transparente resultante foi levada e o resíduo tratado com água e basificado com bicarbonato de sódio aquoso saturado. 0 sólido obtido foi filtrado, lavado com água e seco para dar o composto em epígrafe, rendimento 145 mg. MS calculado para (C14H21N5O3)+ = 307 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 308 RMN de ( (CD3) 2SO) : 9,88 (1H, s), 6,43 (2H, s), 4,14 (2H, t), 3,76 (1H, m), 3, 68-3,57 (4H, m), 3,52 (1H, m), 2,69 (1H, m), 1,88 (1H, m), 1,64 (3H, m), 1,38 (2H, m) , 0,92 (3H, t). 387

Exemplo 32, processo alternativo: 6-Amino-2-(butiloxi)-9-(tetra-hldro-3-furanvlmetil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona (Isómero 1) nh2

2-(Butiloxi)-8-(metoxi)-9-(tetra-hidro-3-furanilmetil)-9H-purin-6-amina (Isómero 1, 1,54 g) foi suspensa em metanol (20 mL) e adicionado HC1 4 N em dioxano (4 mL) sob agitação para dar uma solução transparente. Após 6,5 h, os solventes foram evaporados até um volume pequeno e adicionada água sob agitação, seguida de neutralização com bicarbonato de sódio saturado. O sólido esbranquiçado resultante foi filtrado, lavado com água e seco, rendimento 1,26 g. Este material foi adicionado em porções a metanol em ebulição (130 mL), adicionando mais 20 mL de metanol. A suspensão foi filtrada e o sólido tratado com metanol em ebulição (20 mL) e adicionado ao filtrado. Este foi novamente levado à ebulição, em seguida deixado arrefecer sob agitação, altura em que cristalizou um sólido branco. Este foi filtrado, lavado com metanol e seco, para dar o composto em epígrafe, rendimento 932 mg. MS calculado para (C14H21N5O3)+ = 307 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 308 RMN de ΧΗ ( (CD3) 2SO) : δ 9,89 (1H, s), 6,43 (2H, s), 4,14 (2H, m), 3,81-3,72 (1H, m), 3, 70-3,55 (4H, m), 3,55-3, 48 (1H, 388 m), 2, 75-2,64 (1H, m), 1, 94-1, 83 (1H, m), 1, 70-1,58 (3H, m) , 1,45-1,33 (2H, m), 0,96-0,88 (3H, q).

Exemplo_33 :_6-Amino-2- (butiloxi) -9- (tetra-hidro-3- furanilmetil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona, Isómero 2: 2-Butoxi-8-metoxi-9-(tetra-hidrofuran-3-ilmetil)-9H-purin-6-amina (Isómero 2, 178 mg) foi suspensa em metanol (2 mL) e adicionado HC1 4 N em dioxano (1 mL) . A solução transparente resultante foi levada e o resíduo tratado com água e basificado com bicarbonato de sódio aquoso saturado. O sólido obtido foi filtrado, lavado com água e seco para dar o composto em epígrafe (isómero 2), rendimento 72 mg (baixo devido a perdas mecânicas). MS calculado para (C14H21N5O3)+ = 307 MS encontrado (electrospray) : (M+H)+ = 308 RMN de XH ( (CD3)2SO) : 9,88 ( 1H, s), 6,42 ( :2h, S), 4, 15 (2 H, t), 3,76 (1H, m), 3,68-3,57 (4H, m), 3,52 (1H, m), 2,69 ( 1H, m), 1,88 (1H, m), 1,64 (3H, m), 1,38 (2H, m), 0,92 (3H, t) . 389

Exemplo 33, processo alternativo: 6-Amino-2-(butiloxi)-9-(tetra-hidro-3-furanllmetil)-7,9-dl-hidro-8H-purln-8-ona (Isómero 2)

2-(Butiloxi)-8-(metoxi)-9-(tetra-hidro-3-furanilmetil)-9H-purin-6-amina (Isómero 2, 1,96 g) foi suspensa em metanol (20 mL) e adicionado HC1 4 N em dioxano (10 mL) sob agitação para dar uma solução transparente. Após 1,5 h, os solventes foram evaporados até um volume pequeno e adicionada água sob agitação, seguida de neutralização com bicarbonato de sódio saturado. O sólido esbranquiçado resultante foi filtrado, lavado com água e seco, rendimento 1,73 g. Tentativas iniciais para recristalizar de metanol ou etanol não tiveram sucesso. O material recuperado foi dissolvido em ácido acético glacial (10 mL) com aquecimento, mas precipitou imediatamente ao adicionar água (10 mL) . A adição de mais ácido acético (4 mL) e aquecimento deu uma solução transparente, a partir da qual o produto cristalizou ao deixar arrefecer. O sólido foi filtrado, lavado e seco, rendimento 1,06 g (Colheita 1). Foi obtida uma segunda colheita do filtrado em repouso, rendimento 460 mg, a qual foi dissolvida em hidróxido de sódio e precipitada pela adição de ácido acético e em seguida o sólido recuperado foi aquecido em metanol (20 mL) com mais adições de metanol (15 mL) à mistura em ebulição para dar uma solução turva, a qual foi deixada arrefecer. O sólido resultante foi filtrado, rendimento 257 mg. Este foi combinado com o primeiro lote de sólido (Colheita 1) e adicionado em porções a metanol em ebulição 390 (130 mL) para dar uma solução ligeiramente turva. Ao deixar arrefecer sob agitação, cristalizou um sólido branco que foi filtrado, lavado com metanol e seco, para dar o composto em epígrafe, rendimento 1,02 g. ms calculado para (C14H21N5O3)+ = 307 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 308 RMN de *Η ((CD3) 2SO) : δ 9,89 (1H, s) , 6,43 (2H, s), 4,15 (2H, m), 3,81- •3,72 (1H, m), 3,70-3,55 (4H, m), 3,55-3,48 (1H, m), 2, 75- -2,64 (1H, m), 1, 94-1, 83 (1H, m), 1, 70 -1,58 (3H, m), 1,45- -1,33 (2H, m), 0,96-0,88 (3H, q).

Exemplo 34:_6-Amino-2-{[2-(etiloxi)etil]oxi}-9-(tetra- hidro-2fl-piran-4-ilmetil) -7, 9-di-hidro-8ff-purin-8-ona

A uma solução de 2-(2-etoxietoxi)-8-metoxi-9-(tetra-hidro-2/í-piran-4-ilmetil)-9/í-purin-6-amina (240 mg) em metanol seco (10 mL) à temperatura ambiente e sob azoto foi adicionado cloreto de hidrogénio 4,0 M em 1,4-dioxano (4,0 mL) . A reacção foi deixada a agitar à temperatura ambiente durante 3 horas. A reacção foi neutralizada pela adição de solução de hidróxido de 391 sódio 2,0 M e concentrada in vacuo. 0 resíduo foi tomado em água (15 mL) e o sólido filtrado e lavado com água (2x5 mL) . O sólido foi seco in vacuo (60 °C) durante 30 minutos. Isto proporcionou o composto em epígrafe como um sólido esbranquiçado (129 mg). MS calculado para (C15H23N5O4)+ = 337 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 338 RMN de ΧΗ ( (CD3) 2SO) : δ 9,92 (1H, s), 6,44 (2H, s), 4,25 (2H, s), 3,81 (2H, m), 3,63 (2H, m), 3,55 (2H, d), 3,47 (2H, q), 3,22 (2H, m), 2,03 (1H, m), 1,45 (2H, m) , 1,22 (2H, m) , 1,12 (3H, t) .

Exemplo_35 :_6-Amino-2- { [ l-metil-2- (metoxi) etil] oxi} -9- (tetra-hidro-2fí-piran-4-ilmetil) -7, 9-di-hidro-8#-purin-8-ona

A uma solução de 2-{[l-metil-2-(metoxi)etil]oxi}-8-(metoxi)-9-(tetra-hidro-2f!-piran-4-ilmetil)-9A-purin-6-amina (260 mg) em metanol seco (10 mL) à temperatura ambiente e sob azoto foi adicionado cloreto de hidrogénio 4,0 M em 1,4-dioxano (4,0 mL) . A reacção foi deixada a agitar à temperatura ambiente durante 3 horas. A reacção foi neutralizada pela adição de solução de hidróxido de sódio 2,0 M e concentrada in vacuo. O resíduo foi tomado em água (15 mL) e o sólido filtrado e lavado 392 com água (2X5 mL) . 0 sólido foi seco in vacuo (60 °C) durante 30 minutos. Isto proporcionou o composto em epígrafe como um sólido esbranquiçado (70 mg). MS calculado para (C15H23N5O4)+ = 337 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 338 RMN de ΧΗ ( (CD3) 2S0) : δ 9,89 (1H, s), 6,41 (2H, s 1.), 5,13 (1H, m), 3,81 (2H, m), 3,55 (2H, d), 3,43 (2H, m), 3,27 (3H, s), 3,22 (2 H, m), 2,02 (1H, m), 1,46 (2H, m), 1,24 (2H, m), 1,21 (3H, d) .

Exemplo 36:_6-Amino-2-{[2-(etiloxi)etil]oxi}-9-(tetra- hidro-2fl-piran-3-ilmetil) -7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona

A uma solução de 2-(2-etoxietoxi)-8-metoxi-9-(tetra-hidro-2íí-piran-3-ilmetil)-9ií-purin-6-amina (245 mg) em metanol seco (10 mL) à temperatura ambiente e sob azoto foi adicionado cloreto de hidrogénio 4,0 M em 1,4-dioxano (4,0 mL) . A reacção foi deixada a agitar à temperatura ambiente durante 1 hora. A reacção foi concentrada in vacuo e o resíduo resultante purificado por cromatografia de fase inversa em Ci8 utilizando água (contendo 0,1% de ácido fórmico)-acetonitrilo (contendo 393 0,05% de ácido fórmico) como eluente (10-45%) para proporcionar um sólido branco. Este foi tomado em água (15 mL) e neutralizado pela adição de solução de hidróxido de sódio 2,0 Μ. O sólido foi filtrado e seco no evaporador rotativo (60 °C) durante 30 minutos (90 mg). MS calculado para (C15H23N5O4)+ = 337 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 338 RMN de ((CD3)2SO) : δ 9,90 (1H, s) , 6,45 (2H, s) , 4,25 m), 3, 70-3,61 (5H, m), 3,55 (1H, m), 3, 47 (2H, q) / 3,30 (1H, m), 3,16 (1H, m), 2,03 (1H, m), 1,64 (2H, m), 1,40 (1H, m), 1,22 (1H, m), 1,11 (3H, t).

Exemplo_37 :_6-Amino-2-{ [ l-metil-2- (metoxi) etil] oxi} -9- (tetra-hidro-2il-piran-3-ilmetil) -7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona

A uma solução de 2-{[l-metil-2-(metoxi)etil]oxi}-8-(metiloxi) -9- (tetra-hidro-2fí-piran-3-ilmetil) -9fí-purin-6-amina (290 mg) em metanol seco (12 mL) à temperatura ambiente e sob azoto foi adicionado cloreto de hidrogénio 4,0 M em 1,4-dioxano (5,0 mL) . A reacção foi deixada a agitar à temperatura ambiente durante 1 hora. A reacção foi concentrada in vacuo e o residuo 394 resultante purificado por cromatografia de fase inversa em Ci8 utilizando água (contendo 0,1% de ácido fórmico)-acetonitrilo (contendo 0,05% de ácido fórmico) como eluente (10-45%) para proporcionar um sólido branco. Este foi tomado em água (15 mL) e neutralizado pela adição de solução de hidróxido de sódio 2,0 M. O sólido foi filtrado e seco no evaporador rotativo (60 °C) durante 30 minutos (50 mg). MS calculado para (C15H23N5O4)+ = 337 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 338 RMN de ΧΗ ( (CD3)2SO): δ 9,90 ( 1H, s), 6,43 (2H, s), 5,12 (1H, m), 3,66 ( ;2H, m), 3,55 (2H, m) , 3,47 (1H, m), 3,38 (1H, m), 3,30 (1H, m), 3,27 (3 H, s), 3,16 1 [1H, m), 2,02 (1H, m), 1,63 (2H, m), 1,40 ( 1H, m), 1,23 ( 1H, m) , 1,20 (3H, t).

Exemplo 38: 6-Amino-2-[(ciclo-hexilmetil)amino]-9-(tetra-hidro-2fl-piran-4-ilmetil)-7,9-di-hidro-8fl-purin-8-ona

0^/ A uma solução de 8-bromo-W2-(ciclo-hexilmetil)-9-(tetra-hidro-2ff-piran-4-ilmetil)-9H-purina-2, 6-diamina (110 mg) em n-butanol seco (1,5 mL) foi adicionado ácido clorídrico a 37% (1,5 mL) à t.a. A reacção foi aquecida a 100 °C durante 395 seis horas. A reacção foi concentrada in vacuo, tomada em água (5 mL) e neutralizada pela adição de solução de hidróxido de sódio 2,0 Μ. O precipitado branco resultante foi filtrado. Este foi purificado por cromatograf ia de fase inversa em Ci8 utilizando água (contendo 0,1% de ácido fórmico)-acetonitrilo (contendo 0,05% de ácido fórmico) como eluente (20-60%) para proporcionar um sólido branco (20 mg). MS calculado para (Ci8H28N602) + = 360 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 361 RMN de 2Η ( (CD3) 2SO) : δ 9,59 (1H, s), 6,21 (1H, s), 5,97 (2 H, s), 3,81 i (2H, m), 3,51 (2H, d) , 3,21 (2H, m), 3,01 (2H, m), 2,04 (1H, m), 1, 74-1, 54 (5H, m) , 1,52 (1H, m), 1,44 (2H, m), 1,28- -1,04 (5H, m) , 0,84 (2H, m) .

Exemplo 39: 6-Amino-2-[(ciclopentilmetil)amino]-9-(tetra-hidro-2fl-piran-4-ilmetil)-7,9-di-hidro-8fl-purin-8-ona

A uma solução de 8-bromo-f/2- (ciclopentilmetil)-9-(tetra-hidro-2fí-piran-4-ilmetil)-9fí-purina-2, 6-diamina (40 mg) em n-butanol seco (0,5 mL) foi adicionado ácido clorídrico a 37% (1,5 mL) de uma única vez e à t.a. A reacção foi aquecida a 100 396 °C durante trinta minutos. A reacção foi concentrada in vacuo e o produto foi purificado por cromatografia de fase inversa em Ci8 utilizando água (contendo 0,1% de ácido fórmico)-acetonitrilo (contendo 0,05% de ácido fórmico) como eluente (20-60%) para proporcionar o composto em epígrafe como um sólido branco (10 mg). MS calculado para (Ci7H26N602) + = 346 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 347 RMN de XH ( (CD3) 2SO) : δ 9,55 (1H, s), 6,19 (1H, s), 5,95 (2H, s), 3,81 (2H, m), 3,50 (2H, d), 3,21 (2H, m), 3,10 (2H, t), 2,13 (1H, m), 2,04 (1H, m) , 1, 69-1,59 (2H, m), 1,59-1, 50 (2H, m), 1,50-1,40 (4H, m), 1,21 (4H, m) .

Exemplo 40: 6-Amino-2-[(2-ciclopropiletil)amino]-9-(tetra-hidro-2fí-piran-4-ilmetil) -7, 9-di-hidro-8fl-purin-8-ona

Δ—A

A uma solução de 2-cloro-9-(tetra-hidro-2fí-piran-2-il)-9H-purin-6-amina (550 mg) em etilenoglicol seco (27 mL) à temperatura ambiente foi adicionada 2-ciclopropiletilamina (740 mg). A reacção foi aquecida a 120 °C, de um dia para o outro. A reacção foi arrefecida até à t.a., diluída com acetato 397 de etilo (70 mL) e lavada com água (3 x 20 mL). A camada orgânica foi seca sobre MgS04, filtrada e concentrada in vacuo. Isto proporcionou um óleo viscoso castanho (580 mg) que foi utilizado no passo seguinte sem mais purificação. A uma solução deste óleo (580 mg) em clorofórmio seco (6,5 mL) à t.a. foi adicionada NBS (320 mg) e a reacção foi agitada durante 15 minutos. A reacção foi diluida com DCM (20 mL) e lavada com água (10 mL). Os orgânicos foram feitos passar através de um filtro poroso hidrófobo e concentrados in vacuo. Isto proporcionou um óleo castanho claro que foi dissolvido em metanol seco (5 mL) e à temperatura ambiente foi adicionada solução de metóxido de sódio (25% em peso em metanol, 1,3 mL) . A reacção foi aquecida a 60 °C, com um condensador ligado, de um dia para o outro. A reacção foi arrefecida e concentrada in vacuo. O residuo laranja resultante foi tomado em acetato de etilo (30 mL) e lavado com cloreto de amónio aquoso saturado (20 mL). A camada orgânica foi separada e lavada adicionalmente com água (2x15 mL). A camada orgânica foi seca sobre MgSCh, filtrada e concentrada in vacuo. A este material em metanol seco (3,5 mL) à t.a. foi adicionado ácido trifluoroacético (0,35 mL) de uma única vez. A reacção foi agitada à t.a. durante 16 horas e concentrada in vacuo. Este foi tomado em éter dietilico e triturado para proporcionar um sólido castanho (227 mg) . A uma solução deste sólido (160 mg) em N,N-dimetilformamida seca (1,5 mL) à temperatura ambiente e sob azoto foi adicionado carbonato de potássio (240 mg) . A reacção foi agitada a 60 °C durante 1,5 horas e em seguida arrefecida até 50 °C. Foi adicionado 4-(bromometil)tetra-hidro-2H-pirano (59 uL) e a reacção aquecida a 50 °C, de um dia para o outro. Foi adicionada uma quantidade adicional de 4-(bromometil)tetra-hidro-2/í-pirano (29 uL) e a reacção aquecida a 70 °C durante 8 horas. A reacção foi arrefecida até à t.a. e diluida com 398 acetato de etilo (20 mL) e lavada com água (5 mL) . A camada orgânica foi seca sobre MgS04, filtrada e concentrada in vacuo para proporcionar um óleo castanho. Este foi purificado por cromatografia de fase inversa em Cis utilizando água (contendo 0,1% de ácido fórmico)-acetonitrilo (contendo 0,05% de ácido fórmico) como eluente (20-60%). O óleo viscoso transparente resultante (50 mg) foi dissolvido em metanol seco (1,8 mL) à t.a. e sob azoto. A este foi adicionado cloreto de hidrogénio 4,0 M em 1,4-dioxano (0,8 mL) . A reacção foi deixada a agitar à t.a. durante 3 horas. A reacção foi neutralizada pela adição de solução saturada de NaHCCb e concentrada in vacuo. O resíduo branco foi tomado em água (15 mL) e o sólido filtrado. O sólido foi seco in vacuo (60 °C) durante 30 minutos. Isto proporcionou o composto em epígrafe como um sólido bege (33 mg). MS calculado para (Ci6H24 N6O2)+ = 332 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 333 RMN de XH ((CD3)2SO) : δ 9,55 ( 1H, s), 6,16 (1H, s), 5,97 (2H, s), 3,81 ( 2H, m), 3, 50 ( ;2H, d), 3,21 (4H, m), 2,03 (1H, m), 1,40 (4H, m), 1,21 (2 H, m), 0,69 1 (1H, m) , 0,38 (2H, m), 0,03 (2H, m) . 399

Exemplo 41 e Exemplo 42: Isómeros de 6-Amino-2- (butilamino)-9-(tetra-hidro-3-furanilmetil)-7,9-di-hidro-8fl-purin-8-ona

Os enantiómeros de 6-amino-2-(butilamino)-9-(tetra-hidro-3-furanilmetil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona foram separados por cromatografia quiral (Chiralpak AS) utilizando heptano-IPA (contendo 0,15% de trietilamina) como eluente (20%). Assim, a 6-amino-2-(butilamino)-9-(tetra-hidro-3-furanilmetil)-7, 9-di-hidro-8H-purin-8-ona racémica (700 mg) proporcionou ambos os enantiómeros como líquidos amarelo/laranja. Estes foram triturados com água (15 mL) para produzir sólidos esbranquiçados, que foram filtrados e secos num evaporador rotativo (60 °C) durante 15 minutos. Isto proporcionou o Enantiómero 1 (163 mg) e o Enantiómero 2 (145 mg) contendo ambos alguma trietilamina. Estes foram adicionalmente purificados por cromatografia de fase inversa em Cis utilizando água (contendo 0,1% de ácido fórmico)-acetonitrilo (contendo 0,05% de ácido fórmico) como eluente (10-45%) para proporcionar o isómero 1 (40 mg) como um sólido branco e o isómero 2 (55 mg) como um sólido branco. 400

Exemplo 41 (Isómero 1): MS calculado para (C14H22 N6O2)+ = 306 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 307 RMN de XH ( (CD3) 2SO) : δ 9,67 (1H, s), 6,43 (1H, m) , 6,21 (1H, m) , 3,75 (2H, m) , 3,61 (4H, m), 3,53 (1H, m), 3,18 (2H, m) , 2,68 (1H, m), 1,86 (1H, m) , 1,64 (1H, m) , 1,47 (2H, m) , 1,30 (2H, m), 0,88 (3H, t) .

Exemplo 42 (Isómero 2): MS calculado para (C14H22 N6O2)+ = 306 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 307 RMN de XH ((CD3)2SO) : δ 9,69 (1H, s), 6,44 (1H, m) , 6,22 (1H, m) , 3,75 (2H, m) , 3, 61 (4H, m) , 3,52 (1H, m), 3,18 (2 H, m), 2,68 (1H, m), 1,86 (1H, m) , 1,64 (1H, m), 1,47 (2 H, m) , 1,30 (2H, m), 0,88 (3H, t). 401

Exemplo 41, método alternativo: 6-Amino-2-(butilamino)-9-[tetra-hidro-3-furanilmetil]-7, 9-di-hidro-8fl-purin-8-ona,

Isómero 1 NH.

A uma solução de i^-butil-e-(metoxi)-9-[tetra-hidro-3-furanilmetil]-9ff-purina-2, 6-diamina, Isómero 1 (2,79 g) em metanol seco (100 mL) à temperatura ambiente e sob azoto foi adicionado ácido clorídrico 4,0 M em 1,4-dioxano (28 mL). A reacção foi deixada a agitar à temperatura ambiente durante 2 horas. A reacção foi neutralizada pela adição de solução de hidróxido de sódio 2,0 M e concentrada in vacuo para produzir um resíduo esbranquiçado. 0 resíduo foi tomado em água (30 mL) e o sólido filtrado e lavado com água (15 mL) . O sólido bege foi seco num evaporador rotativo (60 °C) durante 30 minutos. Este foi cristalizado de água/etanol (1:1, 35 mL) para produzir um sólido branco (1,3 g) . Este era apenas parcialmente cristalino. A recristalização deste composto com água/etanol (1:1, 80 mL) proporcionou um sólido esbranquiçado que foi seco no evaporador rotativo (60 °C) durante 1 hora (1,2 g, 100% e.e.). MS calculado para (C14H22 N6O2)+ = 306 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 307

RMN de XH ((CD3)2SO): δ 9,57 (1H (2 H, m), 3,75 (1H, m), 3,64-3,56 (4H s) m) 6,18 (1H, m), 5,97 3,52 (1H, m), 3,16 402 (2Η, m), 2,69 (1H, m), 1,86 (1H, m), 1,64 (1H, m), 1,46 (2H, m), 1,29 (2H, m), 0,88 (3H, t) .

Exemplo 42, método alternativo: 6-Amino-2-(butilamino)-9-[tetra-hidro-3-furanilmetil] -7, 9-di-hidro-8fl-purin-8-ona,

Isómero 2

A uma solução de W2-butil-8-(metoxi)-9-[tetra-hidro-3-furanilmetil] -9#-purina-2,6-diamina, Isómero 2 (3 g) em metanol seco (100 mL) à temperatura ambiente e sob azoto foi adicionado ácido clorídrico 4,0 M em 1,4-dioxano (30 mL) . A reacção foi deixada a agitar à temperatura ambiente durante 2 horas. A reacção foi neutralizada pela adição de solução de hidróxido de sódio 2,0 Me concentrada in vacuo para produzir um resíduo esbranquiçado. O resíduo foi tomado em água (30 mL) e o sólido filtrado e lavado com água (15 mL) . O sólido bege foi seco num evaporador rotativo (60 °C) durante 30 minutos. Este foi recristalizado de água/etanol (1:1, 40 mL) para produzir um sólido branco (1,5 g) . Este era apenas parcialmente cristalino. A recristalização deste composto com água/etanol (1:1, 80 mL) proporcionou um sólido esbranquiçado que foi seco no evaporador rotativo (60 °C) durante 1 hora (1,3 g). Este era apenas parcialmente cristalino. A recristalização repetida deste composto com água/etanol (1: 1, 80 mL) proporcionou um sólido 403 esbranquiçado que foi seco no evaporador rotativo (60 °C) durante 1 hora (1,3 g, 91% e.e.). MS calculado para (C14H22 N6O2)+ = 306 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 307 RMN de ( (CD3) 2SO) : δ 9, 57 (1H, s) , 6,19 (1H, m) , 5, 97 2H, m) , 3,75 (1H, m), 3,67-3, 48 (5H, m) , 3,16 (2H, m), 2,68 1H, m), 1,85 ( 1H, m), 1,64 (1H, m) , 1, 46 (2H, m), 1,29 (2H, m), 0,87 (3H, t) .

Exemplo 43: 6-Amino-2-[(2-metilpropil)oxi]-9-(tetra-hidro-2ff-piran-4-ilmetil) -7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona

8-Bromo-2-[(2-metilpropil)oxi]-9-(tetra-hidro-2H-piran-4-ilmetil)-9H-purin-6-amina (100 mg) em n-butanol (2 mL) foi aquecida a refluxo com ácido clorídrico concentrado (2 mL) a 100 °C (temperatura externa) durante 3 horas. A mistura reaccional foi evaporada sob pressão reduzida até à secura. À mistura reaccional foi então adicionado um volume pequeno de água e um volume equivalente de metanol para dar uma suspensão, que foi então neutralizada pela adição de hidróxido de sódio 2 M (de pH -3 a 7) . Esta foi então evaporada sob pressão reduzida 404 para dar um sólido bege que foi purificado por cromatografia de fase inversa em Ci8 utilizando água (contendo 0,1% de ácido fórmico)-acetonitrilo (contendo 0,05% de ácido fórmico) como eluente (20-60%) . Isto deu o composto em epígrafe (13 mg) como um sólido branco. RMN de XH ( (CD3)2SO) : 9,95 (1H, s), 6,50 (2H, s largo), 3, 96-3, 92 (2H, m), 3,85-3, 78 (2H, m), 3, 57-3, 55 (2H, m, [sobreposto com água]), 3,27-3,18 (2H, m), 2,09-1,92 (2H, m), 1,50-1, 42 (2H, m), 1,29-1,15 (2H, m), 0, 98-0, 92 (6H, m). MS calculado para (C15H23N5O3)+ = 321 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 322

Exemplo 44: 6-Amino-2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-9-(tetra- hidro-2ff-piran-4-ilmetil)-7, 9-di-hidro-8fl-purin-8-ona

2- [ (2-Ciclopropiletil) oxi] -8- (metoxi) -9- (tetra-hidro-2.fi-piran-4-ilmetil)-9fí-purin-6-amina (0, 1259 g) foi dissolvida em metanol (5 mL) e adicionado cloreto de hidrogénio 4 N em 1,4-dioxano (2 mL) . A reacção foi agitada à temperatura ambiente durante 4 horas. A mistura reaccional foi evaporada sob pressão reduzida para dar um sólido que foi então suspenso em água 405 (1 mL) e numa pequena quantidade de metanol (2-3 mL) . Esta foi então neutralizada (até pH 7) pela adição de hidróxido de sódio 2 N. A suspensão foi evaporada até quase à secura sob pressão reduzida e em seguida o sólido suspenso em água (3 mL). 0 sólido foi filtrado sob sucção e lavado com algumas gotas de metanol antes de ser seco ao ar sob sucção. Este material foi então seco até peso constante sob vácuo a 50 °C para dar o composto em epígrafe (94 mg). RMN de XH ( (CD3) 2SO) : 9,87 (1H, s), 6,42 (2H, s), 4,25-4,16 (2H, m), 3,86-3, 78 (2H, m), 3,59-3,53 (2H, m), 3,27-3,18 (2H, m) 2,09-1,96 (1H, m), 1,61-1,53 (2H, m) 1,50-1, 41 (2H, m), 1,29- 1,14 (2H, m), 0,82-0,72 (1H, m), 0,45-0,39 (2H , m) 0,13-0,07 (2H, m). LCMS HE101125-2 MS calculado para (C16H23N5O3)+ = 333 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 334 406

Exemplo 45: 6-Amino-2-[(ciclo-hexilmetil)oxi]-9-(tetra- hidro-2ff-piran-4-ilmetil) -7, 9-di-hidro-8ff-purin-8-ona

2-[(Ciclo-hexilmetil)oxi]-8-(metoxi)-9-(tetra-hidro-2H-piran-4-ilmetil)-9fí-purin-6-amina (RS105369-181A2) (0, 1657 g) foi dissolvida em metanol (5 mL) e em seguida adicionado cloreto de hidrogénio 4 N em 1,4-dioxano (2 mL) . A mistura reaccional foi agitada à temperatura ambiente durante 4 horas. A mistura reaccional foi então evaporada sob pressão reduzida para dar um sólido que foi então suspenso em água (1 mL) e metanol (~2 - 3 mL) antes de ser neutralizado (to pH 7) pela adição de hidróxido de sódio 2 N. A mistura resultante foi evaporada até quase à secura antes de ser suspensa em água (3 mL) e o sólido é filtrado sob sucção. Este sólido foi então lavado com algumas gotas de metanol e em seguida seco ao ar sob sucção, antes de ter sido finalmente seco até peso constante sob vácuo a 50 °C. Isto deu o composto em epígrafe como um sólido branco (134 mg). RMN de XH ( (CD3) 2S0) : 9,86 (1H, s), 6,41 (2H, s), 3,99-3,93 (2 H, m), 3,85-3,78 (2H, m), 3,59-3, 52 (2H, m), 3,27-3,18 (2H, m), 2, 09-1,96 (1H, m), 1, 79-1, 60 (6 H, m com sobreposição), 1,50-1,41 (2H, m), 1,29-1, 09 (5H, m com sobreposição), 1, 06-0, 93 (2H, m) . MS calculado para (C18H27N5O3)+ = 361 407 362 MS encontrado (electrospray): (M+H)

Exemplo 46: 6-Amino-2-{[2-(metoxi)etil]oxi}-9-(tetra-hidro-2i7-piran-4-ilmetil)-7, 9-di-hidro-8H-purin-8-ona NH,

8- (Metoxi) -2-{ [2 - (metoxi) etil] oxi}-9 - (tetra-hidro-2ií-piran-4-ilmetil)-9H-purin-6-amina (0,1434 g) foi dissolvida em metanol (5 mL) e tratada com cloreto de hidrogénio 4 N em 1,4-dioxano (2 mL) . A mistura reaccional foi agitada à temperatura ambiente durante 4 horas. A mistura reaccional foi evaporada sob pressão reduzida para dar um sólido, que foi suspenso em água (1 mL) e metanol (2-3 mL) antes de ter sido adicionado hidróxido de sódio 2 N para neutralizar (até pH 7) . Depois de evaporar a suspensão até quase à secura sob pressão reduzida, o sólido foi suspenso em água (3 mL) e filtrado sob sucção e em seguida lavado com algumas gotas de metanol. Este sólido foi seco até peso constante sob vácuo a 50 °C, depois de ter sido inicialmente seco ao ar sob sucção. Isto deu o composto em epigrafe como um sólido branco (94 mg). RMN de :Η ( (CD3) 2SO) : 9,89 (1H, S), 6,44 (2H, s largo), 4,30-4,22 (2H, m) 3,86-3,77 (2H, m), 3,65-3,87 (4H, m com sobreposição), 3,29 (3H, s), 3,27-3,17 (2H, m), 2,10-1,96 (1H, m), 1,50-1,40 (2H, m), 1,29-1,15 (2H, m) . 408 323 MS calculado para (C14H21N5O4) MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 324

Exemplo 47: 6-Amino-2-{[2-(metoxi)etil]oxi}-9-(tetra-hidro- 3-furanilmetil)-7,9-di-hidro-8fl-purin-8-ona

8-(Metoxi)-2-{[2-(metoxi)etil]oxi}-9-(tetra-hidro-3-f uranilmetil)-9fí-purin-6-amina (0, 1233 g) foi dissolvida em metanol (5 mL) . A esta solução foi adicionado hidrogénio 4 N dioxano (2 mL), agitado à temperatura ambiente durante 4 horas. A mistura reaccional foi evaporada sob pressão reduzida para dar uma goma. A este material foi adicionada água (3 mL) para dar uma solução, a qual foi então neutralizada (até pH 7) utilizando hidróxido de sódio 2 N. Isto deu um sólido branco que foi filtrado sob sucção e em seguida lavado com algumas gotas de metanol. O sólido foi então seco ao ar sob sucção antes de ser seco sob vácuo a 50 °C durante 2 horas. Isto deu o composto em epigrafe como um sólido branco (86 mg). RMN de XH ( (CD3) 2SO) : 9,92 (1H, s), 6,46 (2H, s), 4,29-4,23 (2H, m) , 3,80-3, 72 (1H, m), 3, 69-3,56 (6H, m com sobreposição), 3, 55-3, 48 (1H, m) , 3,28 (3H, s), 2, 75-2,63 (1H, m), 1,94-1,83 (1H, m), 1,68-1,58 (1H, m). 409 309 MS calculado para (C13H19N5O4) MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 310

Exemplo 48: 6-Amino-2-[(tetra-hidro-2-furanilmetil)oxi]-9-(tetra-hidro-2fí-piran-4-ilmetil) -7, 9-di-hidro-8A-purin-8-ona

8-(Metoxi)-2-[(tetra-hidro-2-furanilmetil)oxi]-9-(tetra-hidro-2A-piran-4-ilmetil)-9f?-purin-6-amina (0, 1500 g) foi dissolvida em metanol (10 mL) . A esta solução foi adicionado cloreto de hidrogénio 4 N em 1,4-dioxano (2 mL) . A mistura reaccional foi agitada durante 5 horas à temperatura ambiente. A mistura reaccional foi evaporada sob pressão reduzida e em seguida foram adicionados água (3 mL) e metanol (3 mL) ao resíduo para dar uma suspensão finamente dividida. Esta foi neutralizada (até pH 7) pela adição de hidróxido de sódio 2 N e em seguida evaporada sob pressão reduzida até à secura. Foi então adicionada água (3 mL) ao resíduo e a suspensão de sólido branco resultante foi isolada por filtração sob sucção. O sólido foi lavado com metanol (1 mL) e em seguida seco ao ar sob sucção. O sólido foi então seco adicionalmente até peso constante sob vácuo a 50 °C (~1 hora) . Isto deu o composto em epígrafe como um sólido branco (0,1130 g) 410 RMN de ( (CD3) 2SO) : 9,88 (1H, s), 6,44 (2H, s), 4,15-4,06 (3H, m com sobreposição + s), 3,86-3, 73 (3H, m com sobreposição), 3,69-3,62 (1H, m) , 3, 59-3,53 1 ;2h, m), 3,28-3,15 (2Η, m), 2,10-1,76 (4H, m) , 1, 67-1, 56 (1H, m) , 1,50-1,41 (2H, m), 1,29-1,16 (2H, m). MS calculado para (C16H23N5O4)+ = 349 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 350

Exemplo 49: Sal cloridrato de 6-amino-2-(butiloxi)-9-(tetra-hidro-3-furanilmetil)-7,9-di-hidro-8ff-purin-8-ona

A 6-Amino-2-(propiloxi)-9-(tetra-hidro-3-furanilmetil)-7,9-di-hidro-8ií-purin-8-ona (52,6 mg) foi adicionado um excesso de cloreto de hidrogénio 4 N em 1,4-dioxano (1 mL) . A solução resultante foi evaporada sob pressão reduzida (após 5 minutos) para dar uma goma incolor contendo alguns cristais. A este material foi adicionado éter dietilico para triturar de 1,4-dioxano, dando um sólido solto ao raspar. Após evaporação até à secura sob pressão reduzida durante 2 horas (banho-maria a 411 50 °C, vácuo mínimo ~38 mbar) deu o composto em epígrafe (61 mg) como um sólido esbranquiçado solto. RMN de XH ( (CD3) 2SO) : 10,37 (1H, s), 6,88 (1H, s muito largo), 5,46 (representando 1H, s muito largo [parece que desviou o pico da água por interferência de DMSO]), 4,26-4,19 (2H, m) , 3, 80-3, 72 (1H, m), 3,71-3,56 (4H, m com sobreposição), 3, 54-3, 48 (1H, m), 2, 74-2,63 (1H, m), 1, 94-1, 84 (1H, m), 1,71- 1,59 (3H, m com sobreposição), 1,46-1,34 (2H, m), 0,96-0,88 (3H, m) . MS calculado para (C14H21N5O3)+ = 307 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 308

Análise elementar

Calculada (%) Encontrada (%) Média Encontrada (%) c 48,91 C 48,60 48, 46 C 48,53 H 6,45 H 6,29 6,30 H 6, 30 N 20,37 N 19, 90 19, 77 N 19,84 Cl 10,31 Cl 10, 48 10, 0* Cl 10,24

Peso da amostra Peso da amostra < 3 mg 412

Exemplo 50: 6-Amino-2-(butilamino)-9-[3-(tetra-hidro-2H- piran-3-il)propil] -7, 9-di-hidro-8ff-purin-8-ona

A uma solução de N2-butil-8-(metoxi)-9-[3-(tetra-hidro-2A-piran-3-il)propil]-9fí-purina-2,6-diamina (198 mg) em metanol seco (20,8 mL) foi adicionado ácido clorídrico 4,0 M em 1,4-dioxano (3,6 mL) de uma única vez. A reacção foi deixada a agitar à temperatura ambiente durante 4 horas. A reacção foi neutralizada pela adição de solução de hidróxido de sódio 2,0 M e concentrada in vácuo para dar um sólido esbranquiçado. A este sólido foi adicionada água, triturado e o sólido filtrado sob vácuo até ficar seco. Isto proporcionou o composto em epígrafe como um sólido esbranquiçado (151 mg). MS calculado para (Ci7H28N602)+ = 348 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 349 RMN de XH (DMSO) : δ 9,52 (1H, s), 6,15 (1H, s), 5,94 (2H, s), 3,71 (2H, m), 3,58 (2H, m), 3,27-3,12 (3H, m), 2,91 (1H, m), 1,77 (1H, m), 1,69- 1,55 (2H, m) , 1, 54-1,39 (5H, m), 1,35-1,22 (2H, m), 1,16-0,99 (3H, m), 0,88 (3H, m). 413

Exemplo 51: 6-Amino-9-(tetra-hidro-2H-piran-4-ilmetil)-2 [(tetra-hidro-2H-piran-2-ilmetoxi]-7,9-dl-hldro-8H-purin-8-ona

A uma solução de 8-(metoxi)-9-(tetra-hidro-2H-piran-4- ilmetil)-2-[(tetra-hidro-2H-piran-2-ilmetoxi]-9íf-purin-6-amina (704 mg) em metanol seco (71 mL) foi adicionado cloreto de hidrogénio 4,0 M em 1,4-dioxano (12,2 mL) . A reacção foi deixada a agitar à temperatura ambiente durante 6 horas. A reacção foi neutralizada pela adição de solução de hidróxido de sódio 2,0 M e concentrada in vacuo para dar um residuo esbranquiçado. O resíduo foi triturado em água e o sólido filtrado para dar um sólido castanho (588 mg) . O produto foi purificado por cromatografia de fase inversa em Ci8 utilizando água (contendo 0,1% de ácido fórmico)-acetonitrilo (contendo 0,05% de ácido fórmico) como eluente (10-45%) para proporcionar o composto em epígrafe como um sólido branco (145 mg). MS calculado para (C17H25N5O4)+ = 363 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 364 RMN de :Η ( (CD3) 2SO) : δ 9,88 (1H, s), 6,43 (2H, s), 4,07 (2H, d), 3,87 (1H, m), 3,81 (2H, m), 3,57 (1H, m), 3,55 (2H, d), 414 3,36 (1Η, m), 3,22 (2H, m), 2,02 (1H, m), 1,79 (1H, m), 1,60 (1H, m), 1,51-1,41 (5H, m), 1,31-1,15 (3H, m).

Exemplo 52: 6-Amino-2-({2-[(1-metiletil)oxi]etil}oxi)-9- (tetra-hidro-2H-piran-4-ilmetil) -7, 9-di-hidro-8H-purin-8-ona

A uma solução de 2-({2-[(1-metiletil)oxi]etil}oxi)-8-(metoxi) -9- (tetra-hidro-2fí-piran-4-ilmetil) -9£f-purin-6-amina (165 mg) em metanol seco (17 mL) foi adicionado cloreto de hidrogénio 4,0 M em 1,4-dioxano (2,95 mL) de uma única vez. A reacção foi deixada a agitar à temperatura ambiente durante 5 horas. A reacção foi neutralizada pela adição de solução de hidróxido de sódio 2,0 M e concentrada in vacuo para dar um sólido esbranquiçado. 0 sólido foi triturado em água e filtrado sob vácuo, lavando com mais água, para dar um sólido esbranquiçado (120 mg). MS calculado para (C16H25N5O4)+ = 351 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 352 RMN de ΧΗ ((CD3) 2 :SO) : δ 9, 88 (1H, s), 6,43 (2H, s) , 4,22 2H, m), 3,81 (2H, m] ), 3, 68-3, 50 (5H, m), 3,22 (2H, m) , 2,03 1H, m), 1,45 (2H, m), 1,22 (2H, m) , 1,09 (6H , d) · 415

Exemplo 53: 6-Amino-2-(butilamino)-9-[4-(tetra-hidro-2fl- piran-3-11) butil] -7, 9-di-hidro-8ff-purin-8-ona

A uma solução de N2-butil-8-(metoxi)-9-[4-(tetra-hidro-2H-piran-3-il)butil]-9H-purina-2, 6-diamina (172 mg) em metanol (15,2 mL) à temperatura ambiente foi adicionado cloreto de hidrogénio 4,0 M em 1,4-dioxano (2,86 mL, 11,42 mmol) para dar uma solução incolor. A mistura reaccional foi agitada à temperatura ambiente durante 5 horas. A mistura reaccional foi neutralizada com NaOH 2 M e concentrada in vácuo para dar um sólido branco. Este sólido foi triturado em água e filtrado sob vácuo para dar um sólido esbranquiçado (85 mg). MS calculado para (<3ι8Η30Ν6θ2)+ = 362 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 363 RMN de ((CD3)2SO) : δ 9,51 (1H, s), 6,14 (1H, m), 5,94 (2H, S) , 3, 70 (2H, m) , 3, 59 (2H, m), 3,26-3,11 (3H, m), 2,90 (1H, m) , 1, 74 (1H, m) , 1, 60 (2H, m), 1,54-1,35 (5H, m), 1,35- 0,96 (7H, m) , o ,88 (3H, t). 416

Exemplo 54: 6-Amino-2-[(2-ciclopropiletil)amino]-9-(tetra hidro-3-furanilmetil)-7, 9-di-hidro-8fl-purin-8-ona NH,

A uma solução de N2-(2-ciclopropiletil)-8-(metoxi)-9-(tetra-hidro-3-furanilmetil)-9H-purina-2,6-diamina (209 mg) em metanol (21 mL) à temperatura ambiente foi adicionado cloreto de hidrogénio 4,0 M em 1,4-dioxano (3,93 mL) para dar uma solução incolor. A mistura reaccional foi agitada à temperatura ambiente durante 4 horas. A mistura reaccional foi neutralizada com NaOH 2 M e concentrada in vácuo. O sólido resultante foi tomado em água (50 mL) e filtrado para dar um sólido branco. Este sólido foi recristalizado de etanol:água (1:1) e filtrado para proporcionar um sólido cristalino esbranquiçado (105 mg). MS calculado para (Ci5H22 Νβ02)+ = 318 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 319 RMN de ((CD3)2SO) : δ 9, 57 (1H, S) , 6,17 (1H, m) , 5, 98 (2H, s), 3,75 (1H, m), 3, 65 -3, 55 (4H, m) , 3,53 (1H, m), 3,22 (2H, m), 2,69 ( 1H, m), 1,85 ( 1H, m) , , 1,64 (1H, m), 1,38 (2H, m), 0,68 (1H, m) , 0 ,38 (2H, m), 0 ,02 (2 H , m) . 417

Exemplo 55: 6-Amino-2-[(2-ciclopropiletil)amino]-9-(tetra-hidro-2ff-piran-3-ilmetil) -7, 9-di-hidro-8ff-purin-8-ona

A uma solução de N2-(2-ciclopropiletil)-8-(metoxi)-9-(tetra-hidro-2H-piran-3-ilmetil)-9H-purina-2,6-diamina (198 mg) em metanol (19,1 mL) à temperatura ambiente foi adicionado cloreto de hidrogénio 4,0 M em 1,4-dioxano (3,57 mL) para dar uma solução incolor. A mistura reaccional foi agitada à temperatura ambiente durante 4 horas. A mistura reaccional foi neutralizada com NaOH 2 M e concentrada in vacuo. O sólido resultante foi tomado em água (50 mL) e filtrado para dar um sólido branco. Este sólido foi recristalizado de etanol:água (1:1) e filtrado para proporcionar um sólido cristalino esbranquiçado (113 mg). MS calculado para (CieH24 N6O2)+ = 332 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 333 RMN de ( (CD3) 2SO) : δ 9,55 (1H, s), 6,15 (1H, m), 5, 97 (2 H, S), 3,72-3,61 ( 2H, m), 3,58- -3, 43 (2H, m), 3,29 (1H, m), 3,22 (2 H, m), 3,15 ( :ih, m), 2, 03 (1H, m), 1,71- -1,57 (2H, m) , 1,39 (3H, m), 1,21 ( 1H, m), 0,69 (1H, m), 0,38 (2 H, m), 0,03 (2H, m) . 418

Exemplo 56: 6-Amino-2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-9-(tetra hidro-3-furanilmetil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona (Isómero 1)

A uma suspensão, mantida sob agitação, de 2 — [ (2 — ciclopropiletil)oxi]-8-(metiloxi)-9-(tetra-hidro-3-furanilmetil)-9H-purin-6-amina (814 mg) em metanol (3 mL) foi adicionado HC1 4 N em dioxano (3 mL) . Após 3 h, os solventes foram evaporados e o residuo tratado com água e neutralizado por adição de bicarbonato de sódio saturado sob agitação. 0 sólido de cor creme resultante foi filtrado, lavado com água e seco. 0 material foi suspenso em etanol:água 1:1 (42 mL) mas não se dissolveu com ebulição/agitação. Foi obtida uma solução completa ao adicionar mais 10 mL de etanol. Foi adicionada mais água (3 mL) e a solução transparente deixada arrefecer até à temperatura ambiente sob agitação. O sólido de cor creme resultante foi filtrado, lavado com etanol:água 1:1 (10 mL) e seco, rendimento 537 mg. MS calculado para (C15H21N5O3)+ = 319 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 320 RMN de ( (CD3)2SO) : δ 9,89 (1H, s), 6,43 (2H, s), 4,23- 4,15 (2H, m), 3,79-3,71 (1H, m) , 3,69-3, 55 (4H, m), 3,54-3,48 (1H, m), 2, 76-2,63 (1H, m), 1, 94-1, 82 (1H, m), 1,68-1,51 (3H, m), 0,83-0,71 (1H, m), 0,0,47-0,36 (2H, m), 0,14-0,04 (2H, m). 419

Exemplo 57: 6-Amino-2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-9-[tetra hidro-3-furanilmetil]-7, 9-di-hidro-8fl-purin-8-ona (Isómero 2) NHj

1 H

A 2- [ (2-ciclopropiletil)oxi]-8-(metoxi)-9-[tetra-hidro-3-furanilmetil]-9íí-purin-6-amina, Isómero 2 (1,45 g) em metanol seco (50 mL) à temperatura ambiente e sob azoto, foi adicionado ácido clorídrico 4,0 M em 1,4-dioxano (14 mL) de uma única vez. A reacção foi agitada à temperatura ambiente durante 4 horas. A reacção foi neutralizada pela adição de solução aquosa de hidróxido de sódio 2 M e concentrada in vacuo para produzir um resíduo esbranquiçado. Este foi tomado em água (40 mL) e filtrado para proporcionar um sólido de cor de areia. Este foi recristalizado de águaretanol, 1:1 (75 mL) para proporcionar um sólido bege (765 mg). MS calculado para (C15H21N5O3)+ = 319 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 320 RMN de ( (CD3)2SO): δ 9, 79 ( 1H, s) , 6,33 (2H, s), 4, 09 2H, t) , 3,66 (1H, m), 3,58 -3, 47 ( 4H, m) , 3,42 (1H, m), 2,60 1H, m), 1,78 ( 1H, m), 1,53 ( 1H, m) , 1, 47 (2H, q), 0,67 (1H, m), ,32 (2 H, m) , 0 (2H, m). 420

Exemplo 58: Cloridrato de hidrato de 6-amino-2- (butilamino) -9- (tetra-hidro-2ff-piran-4-ilmetil) -7, 9-di-hidro-8.fi-purin-8-ona

6-Amino-2- (butilamino) -9- (tetra-hidro-2H-piran-4-ilmetil) -7,9-di-hidro-8íf-purin-8-ona (1,00 g) num balão de fundo redondo (100 mL) foi dissolvida (submetendo a ultrassons para fragmentar o sólido) num excesso de cloreto de hidrogénio 4 N em 1,4-dioxano (15 mL) . A solução formou rapidamente uma suspensão que foi agitada à temperatura ambiente ambiente (21 °C) durante 30 minutos antes de ser evaporada até à secura sob pressão reduzida. Ao sólido resultante foi então adicionado éter dietilico (—40 mL) para dar uma suspensão, que foi então evaporada sob pressão reduzida a 18 mbar (banho-maria, 50 °C) para dar um sólido esbranquiçado (1,11 g). Este sólido foi transferido para um balão de fundo redondo (250 mL) munido com agitador magnético e condensador de refluxo. Ao balão foi adicionada 2-butanona (111 mL) e a suspensão resultante aquecida a refluxo (aquecimento externo, 95 °C). Foi então adicionado 2-butanol (racémico) em porções (1 mL por adição) deixando a suspensão regressar ao refluxo. Após a adição de 14 mL de 2-butanol foi obtida uma solução castanha-amarelada clara que foi aquecida a refluxo durante alguns minutos, antes ter sido retirada a fonte de aquecimento e a solução foi deixada arrefecer sob agitação ao longo de um periodo de 21 horas. A 421 suspensão resultante foi então filtrada sob sucção e o bolo de filtração resultante então lavado com um volume mínimo de acetona. 0 bolo de filtração foi inicialmente seco sob sucção, antes de ser adicionalmente seco sob vácuo a 50 °C até estar isento de solvente. Isto deu o composto em epígrafe (Lote A) como um sólido branco (470 mg). MS calculado para (Ci5H24 N602)+ = 320 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 321 RMN de ((CD3)2SO): 12,20 (1H, s muito largo), 10,55 (1H, s), 7,77 (2H, s largo) 3,87-3, 77 (2H, m), 3,61-3,53 (2H, m), 3,34-3,15 (4H, m parcialmente com sobreposição), 2,07-1, 94 (1H, m), 1,59-1,43 (4H, m com sobreposição), 1,40-1,28 (2H, m), 1,28-1,15 (2H, m), 0,97-0, 85 (3H, m). Não foram observados alguns dos protões permutáveis.

Uma segunda colheita (Lote B) foi isolada do filtrado por filtração sob sucção e o bolo de filtração resultante foi seco sob sucção antes de ser seco adicionalmente sob vácuo a 50 °C. O produto ligeiramente impuro resultante (349 mg) foi lavado com acetona (4 mL) e em seguida seco sob vácuo a 50 °C (18 horas) .

Isto deu uma pequena ou nenhuma alteração na pureza. Este material (338 mg) foi suspenso em 2-butanona (35 mL) num balão de fundo redondo (100 mL) munido com agitador magnético e condensador de refluxo. A suspensão resultante foi aquecida a refluxo sob agitação (aquecimento externo, 95 °C) antes de ter sido adicionado 2-butanol (racémico) (4 vezes, 1 mL) e a suspensão resultante foi deixada regressar a refluxo. Após a adição de mais 2-butanol (racémico, 0,26 mL) a solução resultante foi aquecida a refluxo durante 5 minutos antes da 422 fonte de aquecimento ter sido retirada e a solução foi deixada arrefecer até à temperatura ambiente ao longo de 21 horas. Isto deu uma suspensão espessa que foi arrefecida num frigorífico a 3 °C durante 2,5 horas. A suspensão foi filtrada sob sucção e o bolo de filtração lavado com acetona (8 mL). 0 bolo de filtração foi seco ao ar sob sucção e em seguida seco adicionalmente sob vácuo a 50 °C até estar isento de solvente. Isto deu o composto em epígrafe (Lote B) (167 mg). MS calculado para (Ci5H24 N602)+ = 320 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 321 RMN ((CD3) 2SO) : coerente com o Lote A. Dados de Apoio Adicionais: Lote A Lote B Encontrado% Encontrado% C: 48,36,48,43 (48,40) C: 48,54, 48,58 (48,56) H: 7,02, 6,99 (7,01) H: 6,95, 6,97 (6,96) N: 22,35, 22,33 (22,34) N: 22,39, 22,35 (22,37) Cl: 9,07, 9,19 (9,13) Cl: 9,13, 9,03 (9,08)

Melhores ajustes: Ci5H24N602. HC1. H20 Calculado% C: 48,06, H: 7,26, N: 22,42, Cl: 9,46 423

Exemplo 59: Sal cloridrato de 6-amino-2-(butilamino)-9-(tetra-hidro-3-furanilmetil)-7, 9-di-hidro-8H-purin-8-ona Isómero 1

A 6-amino-2-(butilamino)-9-(tetra-hidro-3-furanilmetil)-7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona (isómero 1) (1,0 g) à temperatura ambiente e sob azoto, foi adicionado ácido clorídrico 4,0 M em 1,4-dioxano (10,61 mL) e a reacção agitada durante 30 minutos. A reacção foi então concentrada in vacuo e deixada no evaporador rotativo durante 2 horas a 50 °C. O sólido bege foi recristalizado, de um dia para o outro, de 2-butanona (18 mL) . Os cristais foram recolhidos por filtração sob sucção e secos in vacuo a 50 °C durante 30 minutos (850 mg). MS calculado para (Ci4H22 Νδ02) + = 306 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 307 RMN de XH ( (CD3) 2SO) : δ 12 r 37 (1H, s 1), 10, 64 (1H, s D, 7, 85 (2 H, br m), 3,75 (1H, m), 3,69 -3,56 (4H, m), 3,51 (1H, m), 3,30 (2H, m) , 2 ,66 (1H, m), 1, ,90 (1H, m) , 1. ,63 (1H, m), 1 ,53 (2H, m), 1, 34 (2H, m), 0,90 (3H, t) . Não foi observado um permutável. 424

Exemplo 60: Sal cloridrato de 6-amino-2-(butilamino)-9-(tetra-hidro-3-furanilmetil)-7, 9-di-hidro-8-purin-8-ona Isómero 2

A 6-amino-2-(butilamino)-9-(tetra-hidro-3-furanilmetil)-7,9-di-hidro-8£f-purin-8-ona (isómero 2) (1,2 g) à temperatura ambiente e sob azoto foi adicionado ácido clorídrico 4,0 M em 1,4-dioxano (12,73 mL) e a reacção agitada durante 30 minutos. A reacção foi então concentrada in vacuo e deixada no evaporador rotativo durante 2 horas a 50 °C. O sólido bege foi recristalizado, de um dia para o outro, de 2-butanona (18 mL) . Os cristais foram recolhidos por filtração sob sucção e secos in vacuo a 50 °C durante 30 minutos (960 mg). MS calculado para (C14H22 N6O2)+ = 306 MS encontrado (electrospray): (M+H)+ = 307 RMN de ΧΗ ( (CD3) 2SO) : δ 12,36 (1H, s 1), 10,62 (1H, s 1), 7,82 (2H, br m), 3,75 (1H, m), 3, 69-3,58 (4H, m) , 3,51 (1H, m), 3,30 (2H, m), 2,66 (1H, m), 1,90 (1H, m), 1,63 (1H, m), 1,53 (2H, m), 1,34 (2H, m), 0,90 (3H, t) . Não foi observado um permutável. 425

Exemplo 61: 6-Amino-2-(butilamino)-9-[3-(tetra-hidro-2- furanil) propil] -7, 9-di-hidro-8ff-purin-8-ona

Exemplo 61: 6-Amino-2-(butilamino)-9-[3-(tetra-hidro-2- NH.

Preparada de modo análogo ao Exemplo 97 de N2-butil-8-(metiloxi) -9- [3- (tetra-hidro-2-furanil)propil] -9fí-purina-2,6-diamina. LCMS (Método A): tRET = 2,50 min; MH+ = 335

Exemplo 62: 6-Amino-2-(butilamino)-9-[4-(tetra-hidro-2- furanil) butil] -7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona

A uma solução de i^-butil-e-(metiloxi)-9-[4-(tetra-hidro-2-furanil)butil]-9H-purina-2,6-diamina (75 mg, 0,207 mmol) em metanol (10 mL) à temperatura ambiente foi adicionado HC1 4 M em 1,4-dioxano (1,324 mL, 5,30 mmol) para dar uma solução de cor palha pálida. A mistura reaccional foi agitada à temperatura ambiente, de um dia para o outro, (16 horas), altura em que a LCMS mostrou que a reacção não tinha prosseguido até à conversão total. 0 solvente foi removido, de um dia para o outro, 426 (16 horas) utilizando uma unidade de evaporação sob corrente de azoto, altura em que a LCMS confirmou a presença do produto desejado. Este produto em bruto foi carregado em metanol num cartucho de SPE de aminopropilo de 5 g e eluido com metanol ao longo de 20 min. As fracções apropriadas foram combinadas e evaporadas sob uma corrente de azoto para dar o composto em epígrafe como um pó branco (49 mg). LCMS (Método B) : tRET = 1,06 min; MH+ = 349

Exemplo 63: 6-Amino-2-(butilamino)-9-{2-[ (3.S)-tetra-hidro-3-f uranil] etil} - 7, 9-di-hidro-8ff-purin-8-ona NH,

Preparada de modo análogo ao Exemplo 73 de N2-butil-8-(metiloxi) —9 — {2— [ (3S) -tetra-hidro-3-furanil] etil}-9ií-purina-2,6-diamina. LCMS (Método B): W = 0,94 min; MH+ = 321 427

Exemplo 64: 6-Amino-2-(butilamino)—9—{2—[(3R)-tetra-hidro- 3-furanil] etil}-7,9-di-hidro-8ff-purin-8-ona NH.

Preparada de modo análogo ao Exemplo 73 de N2-butil-8-(metiloxi)—9 — {2—[{3R)-tetra-hidro-3-furanil]etil}-9H-purina-2, 6- diamina. LCMS (Método B) : tRET = 0,93 min; MH+ = 321

Exemplo 65: 6-Amino-2-(butilamino)-9-[3-(tetra-hidro-3- furanil)propil]-7,9-di-hidro-8fl-purin-8-ona

Preparada de modo análogo ao Exemplo 129 de W2-butil-8-(metiloxi)-9-[3-(tetra-hidro-3-furanil)propil]-9H-purina-2,6- diamina. LCMS (Método B) : tRET = 0,97 min; MH+ = 335 428

Exemplo 66: 6-Amino-2-(butilamino)-9-[4-(tetra-hidro-3- furanil) butil] -7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona

Preparada de modo análogo ao Exemplo 129 de I72-butil-8-(metiloxi)-9-[4 - (tetra-hidro-3-furanil) butil] -9i7-purina-2, 6-diamina. LCMS (Método B) : tRET = 1,02 min; MH+ = 349

Exemplo 67: 6-Amino-2-(butilamino)-9-[3-(tetra-hidro-2i7- piran-2-il)proail] -7, 9-di-hidro-8il-purin-8-ona

Preparada de modo análogo ao Exemplo 129 de N2-butil-8 (metiloxi) -9- [3- (tetra-hidro-2i7-piran-2-il)propil] -9i7-purina-2,6-diamina. LCMS (Método B) : tRET = 1,02 min; MH+ = 349 429

Exemplo 68: 6-Amino-2-(butilamino)-9-[4-(tetra-hidro-2H· piran-2-il) butil] - 7, 9-di-hidro-8fi-purin-8-ona

Preparada de modo análogo ao Exemplo 69 de N2-butil-8-(metiloxi)-9-[4 - (tetra-hidro-2/í-piran-2-il) butil] -9i7-purina-2, 6-diamina. LCMS (Método B) : tRET = 1,26 min; MH+ = 363

Exemplo 69: 6-Amino-2-(butilamino)-9-[3-(tetra-hidro-2H- piran-4-il)propil] -7, 9-di-hidro-8f7-purin-8-ona

A uma solução de N2-butil-8-(metiloxi)-9-[3-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)propil]-9fí-purina-2, 6-diamina (93,13 mg, 0,257 mmol) em metanol (10 mL) foi adicionado HC1 4 M em dioxano (1,5 mL, 6 mmol) e a mistura agitada à temperatura ambiente, de um dia para o outro. O solvente foi evaporado sob uma corrente de azoto e o resíduo foi redissolvido em metanol (5 mL) e carregado num cartucho de SPE de aminopropilo de 5 g e eluído com metanol. O eluente foi evaporado sob uma corrente de azoto para dar o composto em epígrafe (64 mg). 430

LCMS (Método B): tRET

= 1,10 min; MH 349

Exemplo 70: 6-Amino-2-(butilamino)-9-[4-(tetra-hidro-2H- piran-4-il)butil] 7, 9-di-hidro-8-H-purin-8-ona

Preparada de modo análogo ao Exemplo 69 de N2-butil-8-(metiloxi)-9-[4-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)butil]-9H-purina-2, 6- diamina. LCMS (Método B) : tRET = 1,19 min; MH+ = 363

Exemplo 71: 6-Amino-2-(butilamino)-9-[2-(2,2-dimetiltetra-hidro-2H-piran-4-il)etil]-7,9-di-hidro-8ff-purin-8-ona

A uma solução de U2-butil-9-[2-(2,2-dimetiltetra-hidro-2fí-piran-4-il)etil]-8-(metiloxi)-9H-purina-2,6-diamina (135 mg, 0,359 mmol) em metanol (10 mL) foi adicionada solução de HC1 4 M em dioxano (2,241 mL, 8,96 mmol) e a mistura foi deixada em repouso a 20 °C. Após 6 horas o solvente foi evaporado sob uma 431 corrente de azoto. 0 resíduo foi carregado em metanol num cartucho de SPE de aminopropilo de 10 g e eluído com metanol. O solvente foi removido por evaporação para dar o composto em epígrafe (129 mg). LCMS (Método A): tRET = 2,63 min; MH+ = 363

Exemplo 72: 6-Amino-2-(butilamino)-9-[3-(2,2-dimetiltetra-hidro-2ff-piran-4-il)propil] -7, 9-di-hidro-8ff-purin-8-ona

Foi adicionado HC1 4 M em 1,4-dioxano (3 mL, 12,00 mmol) numa porção a uma solução, mantida sob agitação, de I^-butil-g-[3- (2,2-dimetiltetra-hidro-2íí-piran-4-il) propil] -8- (metiloxi) -9A-purina-2,6-diamina (40 mg, 0,102 mmol) em metanol (3 mL) à temperatura ambiente e a mistura agitada sob azoto, de um dia para o outro. A mistura foi então concentrada e o resíduo dissolvido em MeOH:DCM (1:1 5 mL) e carregado num cartucho de SPE de aminopropilo de 2 g. O cartucho foi lavado com MeOHrDCM (1:1, 3 volumes de coluna) e as fracções desejadas foram

concentradas in vacuo para dar material com ca. 80% de pureza. Este material foi dissolvido em DCM:MeOH (1:1), aplicado numa coluna de SCX de 2 g e eluído em primeiro lugar com MeOH: DCM (3 volumes de coluna) e o produto em seguida libertado por amónia 2 M em metanol: DCM (1:1, 3 volumes de coluna). O 432 solvente foi removido para produzir o composto em epígrafe como um sólido amarelo (14 mg). LCMS (Método A): tRET = 2,77 min; MH+ = 377

Exemplo 73: 6-Amino-2-(butilamino)-9-[4-(2,2-dimetiltetra-hidro-2#-piran-4-il)butil]-7,9-di-hidro-8ff-purin-8-ona NH.

HC1 4 M em 1,4-dioxano (3 mL, 12,00 mmol) foi adicionado numa porção a uma solução, mantida sob agitação, de N2-butil-9-[4-(2,2-dimetiltetra-hidro-2H-piran-4-il)butil]-8-(metiloxi)-9H-purina-2,6-diamina (130 mg, 0,321 mmol) em metanol (3 mL) à temperatura ambiente e a mistura agitada sob azoto, de um dia para o outro. A mistura foi então concentrada e o resíduo dissolvido em MeOH:DCM (1:1 5 mL) e carregado num cartucho de SPE de aminopropilo de 2 g. O cartucho foi lavado com MeOH:DCM (1:1, 3 volumes de coluna) e as fracções desejadas foram concentradas ín vacuo para dar o composto em epígrafe como um sólido amarelo (102 mg). LCMS (Método A): Íret = 2,93 min; MH+ = 391 433

Exemplo 6-Amino-2-(butiloxi)-9-[3-(tetra-hidro-2- 74 : furanil) propil] -7, 9-di-hidro-8ff-purin-8-ona

Preparada de modo análogo ao Exemplo 97 de 2-(butiloxi)-8-(metiloxi)-9-[3-(tetra-hidro-2-furanil)propil]-9£f-purin-6-amina. LCMS (Método A): tRET = 2,85 min; MH+ = 336

Exemplo_75j_6-Amino-2- (butiloxi) -9- [4- (tetra-hidro-2- furanil) butil] -7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona

Preparada de modo análogo ao Exemplo 62 de 2-(butiloxi)-8-(metiloxi)-9-[4-(tetra-hidro-2-furanil)butil]-9/í-purin-6-amina. LCMS (Método B) : tRET = 1,02 min; MH+ = 350 434

Exemplo 76: 6-Amino-2-(butiloxi)-9-{2-[(3 S)-tetra-hidro-3-furanll]etil}-7,9-di-hidro-8fl-purin-8-ona

o u>

Preparada de modo análogo ao Exemplo 73 de 2-(butiloxi)-8-(metiloxi)—9 — {2—[(3S)-tetra-hidro-3-furanil]etil}-9H-purin-6-amina. LCMS (Método B) : t^ = 0,90 min; MH+ = 322

Exemplo 77: 6-Amino-2-(butiloxi)-9-{2-[ (37?)-tetra-hidro-3-furanil] etil} - 7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona

Preparada de modo análogo ao Exemplo 73 de 2-(butiloxi)-8-(metiloxi) —9 — {2— [ (3R) -tetra-hidro-3-furanil] etil} -9i7-purin-6-amina. LCMS (Método B) : tRET = 0,90 min; MH+ = 322 435

Exemplo 78 : 6-Amino-2-(butiloxi)-9-[3-(tetra-hidro-3- furanil) -propil] -7, 9-di-hidro-8ff-purin-8-ona NH.

O A uma solução de 2-(butiloxi)-8-(metiloxi)-9-[3-(tetra-hidro-3-furanil)propil]-9ií-purin-6-amina (110 mg, 0,315 mmol) em metanol (9 mL) à temperatura ambiente foi adicionado HC1 4 M em dioxano (1,89 mL). A solução amarela pálida foi agitada à temperatura ambiente durante 18 h e em seguida neutralizada com solução de hidróxido de sódio 2 M e evaporada para dar um sólido branco. A trituração com água e filtração proporcionou o composto em epígrafe como um sólido creme (74 mg). LCMS (Método B) : tRET = 0,94 min; MH+ = 336

Exemplo_79j_6-Amino-2- (butiloxi) -9- [4- (tetra-hidro-3- furanil) butil] -7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona NH.

Preparada de modo análogo ao Exemplo 129 de 2-(butiloxi)-8-(metiloxi)-9-[4-(tetra-hidro-3-furanil)butil]-9A-purin-6-amina. 436

LCMS (Método B) : tRET

= 1,00 min; MH 350

Exemplo_80j_6-Amino-2- (butiloxi) -9- [3- (tetra-hidro-2ff- piran-2-il)propil]-7,9-di-hidro-8fl-purin-8-ona

Preparada de modo análogo ao Exemplo 129 de 2-(butiloxi)-8-(metiloxi)-9-[3-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)propil]-9ií-purin-6- amina. LCMS (Método B) : tRET = 1,06 min; MH+ = 350

Exemplo_81j_6-Amino-2- (butiloxi) -9- [4- (tetra-hidro-2.fi- piran-2-il)butil]-7, 9-di-hidro-8fl-purin-8-ona

Preparada de modo análogo ao Exemplo 69 de 2-(butiloxi)-8-(metiloxi)-9-[4-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)butil]-9H-purin-6- amina. LCMS (Método B) : tRET = 1,10 min; MH+ = 364 437

Exemplo 82: 6-Amino-2-(butiloxi)-9-[3-(tetra-hidro-2H piran-3-ll)propll] -7, 9-di-hidro-8ff-purin-8-ona

Preparada de modo análogo ao Exemplo 62 de 2-(butiloxi)-8-(metiloxi)-9-[3-(tetra-hidro-2H-piran-3-il)propil]-9H-purin-6- amina. LCMS (Método B) : tRET = 1,01 min; MH+ = 350

Exemplo 83:_6-Amino-2-(butiloxi)-9-[4-(tetra-hidro-2fl- piran-3-il)butil]-7,9-di-hidro-8fl-purin-8-ona

A uma solução de 2-(butiloxi)-8-(metiloxi)-9-[4-(tetra-hidro-2H-piran-3-il)butil]-9H-purin-6-amina (135 mg, 0,358 mmol) em metanol (10 mL) foi adicionado HC1 4 M em dioxano (2,235 mL, 8,94 mmol) e a mistura foi deixada em repouso a 20 °C durante 18 horas. O solvente foi evaporado in vacuo para dar um sólido branco que foi carregado em metanol num cartucho de SPE de aminopropilo de 10 g e eluido com metanol. As fracções apropriadas foram combinadas e evaporadas in vacuo para dar o composto em epígrafe como um sólido branco (50 mg). 438 364

LCMS (Método A): tRET = 3,14 min; MH

Exemplo_8_4j_6-Amino-2- (butiloxi) -9- [3- (tetra-hidro-2ff- plran-4-il)proail]-7, 9-di-hidro-8H-purln-8-ona

Preparada de modo análogo ao Exemplo 69 de 2-(butiloxi)-8-(metiloxi) -9- [3- (tetra-hidro-2fl-piran-4-il)propil] -9A-purin-6-amina. LCMS (Método B) : tRET = 0,99 min; MH+ = 350

Exemplo 85:_6-Amino-2-(butiloxi)-9-[4-(tetra-hidro-2H- piran-4-il)butil]-7, 9-di-hidro-8fl-purin-8-ona

Preparada de modo análogo ao Exemplo 69 de 2-(butiloxi)-8-(metiloxi)-9-[4-(tetra-hidro-2tf-piran-4-il)butil]-9i7-purin-6-amina. LCMS (Método B) : tRET = 1,05 min; MH+ = 364 439

Exemplo 86: 6-Amino-2-(butiloxi)-9-[2-(2,2-dimetiltetra- hidro-2fí-piran-4-il) etil] -7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona

Exemplo 86: 6-Amino-2-(butiloxi)-9-[2-(2,2-dimetiltetra- NH.

Preparada de modo análogo ao Exemplo 71 de 2-(butiloxi)-9-[2-(2,2-dimetiltetra-hidro-2i7-piran-4-il)etil]-8-(metiloxi)-9H-purin-6-amina. LCMS (Método A): tRET = 2,99 min; MH+ = 364

Exemplo 87: 6-Amino-2-(butiloxi)-9-[3-(2,2-dimetiltetra- hidro-2ff-piran-4-il)propil] -7, 9-di-hidro-8ff-purin-8-ona

Preparada de modo análogo ao Exemplo 72 de 2-(butiloxi)-9-[3-(2,2-dimetiltetra-hidro-2i7-piran-4-il)propil]-8-(metiloxi)-9i7-purin-6-amina. LCMS (Método A): tRET = 3,12 min; MH+ = 378 440

Exemplo 88: 6-Amino-2-(butiloxi)-9-[4-(2,2-dimetiltetra- hidro-2fí-piran-4-il) butil] -7, 9-di-hidro-8ff-purin-8-ona

Preparada de modo análogo ao Exemplo 73 de 2-(butiloxi)-9-[4-(2,2-dimetiltetra-hidro-2fí-piran-4-il) butil]-8-(metiloxi)-9H-purin-6-amina. LCMS (Método A): tRET = 3,30 min; MH+ = 392

Exemplo 89: 6-Amino-2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-9-[2-(tetra-hidro-2-furanil) etil] -7, 9-di-hidro-8i3-purin-8-ona

A uma solução de 2-[ (2-ciclopropiletil)oxi]-8-(metiloxi)-9- (88 mg [2-(tetra-hidro-2-furanil)etil]-9H-purin-6-amina 0,253 mmol) em metanol (10 mL) à temperatura ambiente foi adicionado HC1 4 M em 1,4-dioxano (2,106 mL, 8,42 mmol) para dar uma solução de cor palha pálida. A mistura reaccional foi agitada à temperatura ambiente, de um dia para o outro, (16 horas) e em seguida carregada em metanol num cartucho de SPE de aminopropilo de 5 g e eluido com metanol. O filtrado foi 441 evaporado numa unidade de evaporação sob corrente de azoto para dar o composto em epígrafe como um sólido branco (41 mg). LCMS (Método B): t^i = 0,95 min; MH+ = 334

Exemplo 90: 6-Amino-2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-9-[3-(tetra-hidro-2-furanil)propil]-7,9-di-hidro-8ff-purin-8-ona

Preparada de modo análogo ao Exemplo 97 de 2 —[(2— ciclopropiletil)oxi]-8-(metiloxi)-9-[3-(tetra-hidro-2-f uranil) propil] -9fí-purin-6-amina. LCMS (Método A): tRET = 2,86 min; MH+ = 348

Exemplo 91: 6-Amino-2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-9-[4-(tetra-hidro-2-furanil)butil]-7,9-di-hidro-8#-purin-8-ona NH.

Preparada de modo análogo ao Exemplo 62 de 2 —[(2— ciclopropiletil)oxi]-8-(metiloxi)-9-[4-(tetra-hidro-2-furanil)butil]-9H-purin-6-amina. 442

LCMS (Método B) : tRET

= 1,03 min; MH 362

Exemplo 92: 6-Amino-2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-9-[2-(tetra-hidro-3-furanil)etil]-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona NH.

Preparada de modo análogo ao Exemplo 71 de 2 —[(2— ciclopropiletil)oxi]-8-(metiloxi)-9-[2-(tetra-hidro-3-furanil)etil]-9H-purin-6-amina. LCMS (Método A): tRET = 2,72 min; MH+ = 334

Exemplo 93: 6-Amino-2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-9-{2-[(35)-tetra-hidro-3-furanil]etil}-7, 9-di-hidro-8ff-purin-8-ona

Preparada de modo análogo ao Exemplo 73 de 2—[(2— ciclopropiletil)oxi]-8-(metiloxi)—9—{2—[(35)-tetra-hidro-3-furanil]etil}-9H-purin-6-amina. LCMS (Método B) : tRET = 0,90 min; MH+ = 334 443

Exemplo 94: 6-Amino-2-[ (2-ciclopropiletil) oxi] -9-{2-[ (3-R) -tetra-hidro-3-furanil] etll}-7, 9-di-hidro-8fl-purin-8-ona

Preparada de modo análogo ao Exemplo 73 de 2 — [ (2 — ciclopropiletil)oxi]-8-(metiloxi)—9 — {2—[(3R)-tetra-hidro-3-furanil] etil} -9fí-purin-6-amina. LCMS (Método B) : tRET = 0,90 min; MH+ = 334

Exemplo 95: 6-Amino-2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-9-[3-(tetra-hidro-3-furanil)propil]-7,9-di-hidro-8fl-purin-8-ona

Preparada de modo análogo ao Exemplo 78 de 2 —[(2 — ciclopropiletil)oxi]-8-(metiloxi)-9-[3-(tetra-hidro-3-furanil)propil]-9H-purin-6-amina. LCMS (Método B) : tRET = 0,94 min; MH+ = 348 444

Exemplo 96: 6-Amino-2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-9-[4-(tetra hidro-3-furanil) butil] -7, 9-di-hidro-8fi-purin-8-ona

Preparada de modo análogo ao Exemplo 129 de 2 — [ (2 — ciclopropiletil)oxi]-8-(metiloxi)-9-[4-(tetra-hidro-3-furanil)butil]-9H-purin-6-amina. LCMS (Método B) : tRET = 1,00 min; MH+ = 362

Exemplo 97: 6-Amino-2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-9-[2-(tetra-hidro-2fí-piran-2-il) etil] -7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona NH,

A uma solução de 2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-8-(metiloxi)-9-[2-(tetra-hidro-2H-piran-2-il) etil]-9fí-purin-6-amina (84,7 mg, 0,234 mmol) em metanol (7,9 mL) à temperatura ambiente foi adicionado HC1 4,0 M em 1,4-dioxano (1,46 mL) para dar uma solução de cor palha pálida. A mistura reaccional foi agitada à temperatura ambiente, de um dia para o outro, (20 horas), e em seguida evaporada in vacuo para dar um óleo/goma incolor. Este material foi redissolvido em metanol e feito passar através de cartucho de SPE de aminopropilo de 5 g (pré-condicionado em 445 metanol), eluído com metanol e evaporado para dar o composto em epígrafe como um sólido branco (58,5 mg). LCMS (Método A): tRET = 3,00 min; MH+ = 348

Exemplo 98: 6-Amino-2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-9-[3-(tetra-hidro-2ff-piran-2-il)propil]-7, 9-di-hidro-8ff-purin-8-ona NH.

Preparada de modo análogo ao Exemplo 129 de 2 —[(2— ciclopropiletil)oxi]-8-(metiloxi)-9-[3-(tetra-hidro-2H-piran-2- il)propil] -9fí-purin-6-amina. LCMS (Método B) : tRET = 1,06 min; MH+ = 362

Exemplo 99: 6-Amino-2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-9-[4-(tetra-hidro-2ff-piran-2-il) butil] -7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona

Preparada de modo análogo ao Exemplo 84 de 2 — [ (2 — ciclopropiletil) oxi] -8- (metiloxi) -9- [4- (tetra-hidro-2fí-piran-2-il)butil]-9H-purin-6-amina. 446

LCMS (Método A) : tRET

= 3,25 min; MH 376

Exemplo_100 :_6-Amino-2- [ (2-ciclopropiletil) oxi] -9 - [2- (tetra-hidro-2ff-piran-3-il)etil]-7, 9-di-hidro-8H-purin-8-ona NH,

Preparada de modo análogo ao Exemplo 97 de 2 — [ (2 — ciclopropiletil) oxi] -8- (metiloxi) -9- [2- (tetra-hidro-2fí-piran-3-il)etil]-9A-purin-6-amina. LCMS (Método A): tRET = 2,89 min; MH+ = 348.

Exemplo_101:_6-Amino-2- [ (2-ciclopropiletil) oxi] -9-[4- (tetra-hidro-2i7-piran-3-il) butil] - 7,9-di-hidro-8i7-purin-8-ona NH,

Preparada de modo análogo ao Exemplo 84 de 2 — [ (2 — ciclopropiletil)oxi]-8-(metiloxi)-9-[4-(tetra-hidro-2H-piran-3-il) butil ] -9fí-purin-6-amina . LCMS (Método A): tRET = 3,15 min; MH+ = 3376 447

Exemplo 102: 6-Amino-2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-9-[2 (tetra-hidro-2fí-piran-4-il) etil] -7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona nh2 N ^ Ar

Preparada de modo análogo ao Exemplo 73 de 2-[(2-ciclopropiletil) oxi] -8- (metiloxi) -9- [2- (tetra-hidro-2i7-piran-4-il) etil] -9ií-purin-6-amina. LCMS (Método B) : tRET = 0,94 min; MH+ = 348

Exemplo_103 :_6-Amino-2- [ (2-ciclopropiletil) oxi] —9— [3 — (tetra-hidro-2i7-piran-4-il)propil] -7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona

Preparada de modo análogo ao Exemplo 69 de 2 — [ (2 — ciclopropiletil)oxi]-8-(metiloxi)-9-[3-(tetra-hidro-2il-piran-4-il)propil]-9A-purin-6-amina. LCMS (Método B) : tRET = 0,99 min; MH+ = 362 448

Exemplo 104: 6-Amino-2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-9 - [4 (tetra-hidro-2fí-piran-4-il) butil] - 7,9-di-hidro-8fí-purin-8-ona

Preparada de modo análogo ao Exemplo 69 de 2 — [ (2 — ciclopropiletil) oxi] -8- (metiloxi) -9- [4- (tetra-hidro-2fí-piran-4-il) butil ] -9fí-purin-6-amina. LCMS (Método B) : tRET = 1,05 min; MH+ = 376

Exemplo 105: 6-Amino-2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-9-[2-(2,2-dimetiltetra-hidro-2i7-piran-4-il) etil] -7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona

Preparada de modo análogo ao Exemplo 71 de 2 — [ (2 — ciclopropiletil) oxi] -9- [2- (2,2-dimetiltetra-hidro-2fí-piran-4-il) etil] -8- (metiloxi) -9i7-purin-6-amina. LCMS (Método A): tRET = 3,00 min; MH+ = 376 449

Exemplo 106: 6-Amino-2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-9-[3-(2,2-dimetiltetra-hidro-2fí-piran-4-il) propil] 7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona NH.

Preparada de modo análogo ao Exemplo 72 de 2 — [ (2 — ciclopropiletil) oxi] -9- [3- (2,2-dimetiltetra-hidro-2fí-piran-4-il)propil] -8- (metiloxi) -9i7-purin-6-amina. LCMS (Método A): tRET = 3,13 min; MH+ = 390

Exemplo 107: 6-Amino-2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-9-[4-(2,2-dimetiltetra-hidro-2i7-piran-4-il) butil] -7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona NH,

Preparada de modo análogo ao Exemplo 73 de 2 — [ (2 — ciclopropiletil) oxi] -9- [4- (2,2-dimetiltetra-hidro-2i7-piran-4-il)butil]-8-(metiloxi)-9A-purin-6-amina. LCMS (Método A): tRET = 3,30 min; MH+ = 404 450

Exemplo 108: 6-Amino-2-{[(IS)-1-metilbutil]oxi}-9-[2 (tetra-hidro-2-furanil)etil]-7, 9-di-hidro-8fl-purin-8-ona

Preparada de modo análogo ao Exemplo 84 de 2-{[(15)-1-metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)-9-[2-(tetra-hidro-2-furanil)etil]-9f7-purin-6-amina. LCMS (Método A): tRET = 2,91 min; MH+ = 336

Exemplo_109 :_6-Amino-2- { [ (15) -1-metilbutil] oxi}-9- [3- (tetra-hidro-2-furanll)propil]-7,9-di-hidro-85-purin-8-ona

Preparada de modo análogo ao Exemplo 73 de 2—{[(15)-1-metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)-9-[3-(tetra-hidro-2-furanil)propil]-95-purin-6-amina. LCMS (Método A): tRET = 3,01 min; MH+ = 350 451

Exemplo 110: 6-Amino-2-{[(15)-1-metilbutil]oxi}-9-{2-[(35) - tetra-hidro-3-furanil] etil}- 7, 9-di-hidro-8fi-purin-8-ona NH.

Preparada de modo análogo ao Exemplo 97 de 2-([(15)-1-metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)-9-{2-[(35)-tetra-hidro-3-furanil] etil}-9fí-purin-6-amina. LCMS (Método A): tRET = 2,73 min; MH+ = 336

Exemplo 111: 6-Amino-2-{ [ (15)-1-metilbutil] oxi}-9-{2-[ (3.R) - tetra-hidro-3-furanil]etil}-7,9-di-hidro-85-purin-8-ona

Preparada de modo análogo ao Exemplo 73 de 2—{[(15)-1-metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)—9—{2—[(3R)-tetra-hidro-3-furanil]etil}-9f7-purin-6-amina. LCMS (Método A): tRET = 2,75 min; MH+ = 336 452

Exemplo 112: 6-Amino-2-{[(15)-1-metilbutil]oxi}-9-[3 (tetra-hidro-3-furanil)propil]-7,9-di-hidro-8fl-purin-8-ona

Preparada de modo análogo ao Exemplo 69 de 2—{[(15)-1-metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)-9-[3-(tetra-hidro-3-furanil)propil] -9f?-purin-6-amina. LCMS (Método B) : tRET = 0,99 min; MH+ = 350

Exemplo_113 :_6-Amino-2- { [ (15) -1-metilbutil] oxi }-9- [4- (tetra-hidro-3-furanil)butil]-7,9-di-hidro-8ff-purin-8-ona

Preparada de modo análogo ao Exemplo 69 de 2-{[(lS)-l-metilbutil)oxi}-8-(metiloxi)-9-[4-(tetra-hidro-3-furanil)butil]-9H-purin-6-amina. LCMS (Método B) : tRET = 1,05 min; MH+ = 364 453

Exemplo 114: 6-Ami no-2-{[(15)-1-metilbutil]oxi}-9-[2 (tetra-hidro-2H-piran-2-il)etil] -7, 9-di-hidro-8A-purin-8-ona

Preparada de modo análogo ao Exemplo 84 de 2—{[(15)-1-metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)-9-[2-(tetra-hidro-2íf-piran-2-il) etil] -9/í-purin-6-amina. LCMS (Método A): tRET = 3,03 min; MH+ = 350

Exemplo_115 :_6-Amino-2 - { [ (15) -1-metilbutil] oxi}-9- [3- (tetra-hidro-2ff-piran-2-il)propil] -7, 9-di-hidro-8ff-purin-8-ona

Preparada de modo análogo ao Exemplo 69 de 2-{[(15)-1-metilbutil] oxi}-8- (metiloxi) -9- [3- (tetra-hidro-2fí-piran-2-il)propil] -9fí-purin-6-amina. LCMS (Método B) : tRET = 1,11 min; MH+ = 364 454

Exemplo 116: 6-Amino-2-{[(15)-1-metilbutil]oxi}-9-[4- (tetra-hidro-25-piran-2-il)butil]-7,9-di-hidro-8#-purin-8-ona

Preparada de modo análogo ao Exemplo 84 de 2-{[(15)-1-metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)-9-[4-(tetra-hidro-2#-piran-2-il)butil]-95-purin-6-amina. LCMS (Método A): t^T = 3,29 min; MH+ = 378

Exemplo_117 :_6-Amino-2-{ [ (15) -1-metilbutil] oxi}-9-[2- (tetra-hidro-2fl-piran-3-il)etil] -7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona

Preparada de modo análogo ao Exemplo 84 de 2-{[(15)-1-metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)-9-[2-(tetra-hidro-2H-piran-3-il)etil]-95-purin-6-amina. LCMS (Método A): tRET = 2,91 min; MH+ = 350 455

Exemplo_118 :_6-Amino-2- { [ (15) -1-metilbutil] oxi}-9- [ 4- (tetra-hidro-2ff-piran-3-il)butil]-7,9-di-hidro-8fl-purin-8-ona

Preparada de modo análogo ao Exemplo 84 de 2—{[(15)-1-metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)-9-[4-(tetra-hidro-2H-piran-3-il) butil] -9i?-purin-6-amina. LCMS (Método A): tRET = 3,17 min; MH+ = 378

Exemplo_119 :_6-Amino-2- { [ (15) -1-metilbutil] oxi }-9- [2- (tetra-hidro-2i7-piran-4-il) etil] -7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona

Preparada de modo análogo ao Exemplo 73 de 2-{[(15)-1-metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)-9-[2-(tetra-hidro-2A-piran-4-il) etil] -9i7-purin-6-amina. LCMS (Método A): tRET = 2,85 min; MH+ = 350 456

Exemplo 120: 6-Amino-2-{[(15)-1-metilbutil]oxl}-9-[3- (tetra-hidro-2ff-piran-4-il)propil]-7,9-di-hidro-8ff-purin-8-ona

Preparada de modo análogo ao Exemplo 69 de 2-{[(15)-1-metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)-9-[3-(tetra-hidro-2£f-piran-4-il)propil]-9H-purin-6-amina. LCMS (Método B) : tRET = 1/04 min; MH+ = 364

Exemplo_121:_6-Amino-2- { [ (15) -1-metilbutil] oxi }-$- [4- (tetra-hidro-2fl-piran-4-il)butil]-7,9-di-hidro-8fl-purin-8-ona

Preparada de modo análogo ao Exemplo 69 de 2—{[(15)-1-metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)-9-[4-(tetra-hidro-2H-piran-4-il) butil] -9fí-purin-6-amina. LCMS (Método B) : tRET = 1,10 min; MH+ = 378 457

Exemplo 122: 6-Amino-9-[2-(2,2-dimetiltetra-hidro-2i7-piran-4-il)etil]-2-{ [ (IS) -1-metilbutil] oxi}-7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona

Preparada de modo análogo ao Exemplo 84 de 9—[2—(2,2— dimetiltetra-hidro-2/í-piran-4-il) etil] -2-{ [ (1S)-1-metilbutil ] oxi }-8-(metiloxi) -9i7-purin-6-amina. LCMS (Método A): tRET = 3,24 min; MH+ = 378

Exemplo 123: 6-Amino-9-[3-(2,2-dimetiltetra-hidro-2ff-piran-4-il)propil] -2-{ [ (15) -1-metilbutil] oxi}-7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona NH.

Preparada de modo análogo ao Exemplo 73 de 9-[3-(2,2-dimetiltetra-hidro-2i7-piran-4-il)propil] -2-{ [ (IS) -1-metilbutil ] oxi }-8-(metiloxi) -9fí-purin-6-amina. LCMS (Método A): tRET = 3,15 min; MH+ = 392 458

Exemplo 124: 6-Amino-9-[4-(2,2-dimetiltetra-hidro-2fl-piran-4-il)butil] -2-{ [ (15) -1-metllbutil] oxi}-7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona NH,

Preparada de modo análogo ao Exemplo 73 de 9-[4-(2,2-dimetiltetra-hidro-2íf-piran-4-il)butil] -2-{ [ (1S)-1-metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)-9H-purin-6-amina. LCMS (Método A): tRET = 3,32 min; MH+ = 406

Exemplo_125 :_6-Amino-2-{ [ (IA) -1-metilbutil] oxi}-9 [f2- (tetra-hidro-2-furanil)etil]-7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona nh2

A uma solução de 2-{[(IP)-1-metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)-9-[2-(tetra-hidro-2-furanil)etil]-9H-purin-6-amina (50 mg, 0,143 mmol) em metanol (10 mL) à temperatura ambiente foi adicionado HC1 4 M em 1,4-dioxano (0,894 mL, 3,58 mmol) para dar uma solução de cor palha pálida. A mistura reaccional foi agitada a 37 °C durante 3 horas, e o solvente removido numa unidade de evaporação sob corrente de azoto, de um dia para o outro. O residuo foi dissolvido em metanol e carregado num cartucho de SPE de aminopropilo de 2 g e eluido com metanol. As 459 fracções apropriadas foram combinadas e secas sob uma corrente de azoto num aparelho de evaporação para dar o composto em epigrafe como um sólido branco (26 mg). LCMS (Método B) : tRET = 0,99 min; MH+ = 336

Exemplo_126 :_6-Amino-2- { [ (1R) -1-metilbutil] oxi} — 9 — [3— (tetra-hidro-2-furanil) -propil] -7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona

Preparada de modo análogo ao Exemplo 73 de 2— { [ (1-R) —1 — metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)-9-[3-(tetra-hidro-2-furanil)propil] -9i7-purin-6-amina. LCMS (Método A): tRET = 2,90 min; MH+ = 350 460

Exemplo 127: 6-Amino-2-{[(IR)-1-metilbutil]oxi}-9-{2-[(35)- tetra-hidro-3-furanil]etil}-7, 9-di-hidro-8fl-purin-8-ona

Preparada de modo análogo ao Exemplo 97 de 2-{[(lí?)-l-metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)—9—{2—[(3S)-tetra-hidro-3-furanil] etil} -9/í-purin-6-amina. LCMS (Método A): tRET = 2,72 min; MH+ = 336

Exemplo 128: 6-Amino-2-{ [ (1.R)-1-metilbutil] oxi}-9-{2-[ (3.R) - tetra-hidro-3-furanil] etil}- 7, 9-di-hidro-8ff-purin-8-ona

Preparada de modo análogo ao Exemplo 73 de 2— { [ (1-R) —1 — metilbutil] oxi}-8- (metiloxi) —9— {2— [ (3-R) -tetra-hidro-3-furanil]etil}-9H-purin-6-amina. LCMS (Método A): tRET = 2,73 min; MH+ = 336 461

Exemplo 129: 6-Amino-2-{[(IR)-1-metilbutil]oxi}-9[3-(tetra hldro-3-furanil)propil] -7, 9-di-hidro-8ff-purin-8-ona

A uma solução de 2-{[(IR)-1-metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)-9-[3-(tetra-hidro-3-furanil) propil]-9i7-purin-6-amina (52 mg, 0,143 mmol) em metanol (5 mL) à temperatura ambiente foi adicionado HC1 4 M em dioxano (0, 894 mL, 3,58 mmol). A mistura reaccional foi agitada à temperatura ambiente durante 18 h e concentrada in vacuo para dar um sólido branco. Este material foi dissolvido em metanol e carregado num cartucho de SPE de aminopropilo de 2 g, eluindo com metanol. O solvente foi removido para dar o composto em epígrafe como um sólido branco (36 mg). LCMS (Método B) : tRET = 0,99 min; MH+ = 350 462

Exemplo 130: 6-Amino-2- { [ (11?) -1-metilbutil] oxi }-9- [4- (tetra-hidro-3-furanil)butil]-7,9-di-hidro-8fl-purin-8-ona NH,

Preparada de modo análogo ao Exemplo 129 de 2 — { [ (IA?) —1— metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)-9-[4-(tetra-hidro-3-furanil)butil]-9f?-purin-6-amina. LCMS (Método B) : tRET = 1,05 min; MH+ = 364

Exemplo_131:_6-Amino-2- { [ (1R) -1-metilbutil] oxi}-9- [2- (tetra-hidro-2ff-piran-2-il) etil] -7, 9-di-hidro-8ff-purin-8-ona

Preparada de modo análogo ao Exemplo 125 de 2 — { [ (IA?) —1— metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)-9-[2-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)etil]-9H-purin-6-amina. LCMS (Método B) : tRET = 1,08 min; MH+ = 350 463

Exemplo 132: 6-Amino-2- { [ (IR) -1-metilbutil] oxi} —9— [3 — (tetra-hidro-2fl-piran-2-il)propil] -7, 9-di-hidro-8ff-purin-8-ona

Preparada de modo análogo ao Exemplo 129 de 2-{[(lf?)-l-metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)-9-[3-(tetra-hidro-2/í-piran-2-il)propil] -9£f-purin-6-amina. LCMS (Método B) : tRET = 1,11 min; MH+ = 364

Exemplo_133 :_6-Amino-2-{ [ (1R) -1-metilbutil] oxi}-9- [4- (tetra-hidro-2A-piran-2-il) butil] - 7,9-di-hidro-8lf-purin-8-ona

Preparada de modo análogo ao Exemplo 84 de 2-{[(lA)-l-metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)-9-[4-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)butil]-9H-purin-6-amina. LCMS (Método A): tRET = 3,26 min; MH+ = 378 464

Exemplo_134 :_6-Amino-2-{ [ (IR) -1-metilbutil] oxj}-g_ [2_ (tetra-hidro-2fí-piran-3-il) etil] -7, 9-di-hidro-8ff-purin-8-ona NH,

uO

Preparada de modo análogo ao Exemplo 125 de 2— { [ (lí?} —1_ metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)-9-[2-(tetra-hidro-2íí-piran-3-il) etil] -9fí-purin-6-amina. LCMS (Método B) : tRET = 1,02 min; MH+ = 350

Exemplo_135 :_6-Amino-2- { [ (IR) -1-metilbutil] oxi }-9- Γ4- (tetra-hidro-2A-piran-3-il) butil] -7,9-di-hidro-8ff-purin-8-ona

Preparada de modo análogo ao Exemplo 125 de 2 — { [ (IA?) —1 — metilbutil] oxi}-8- (metiloxi) -9- [4- (tetra-hidro-2fí-piran-3-il) butil ] -9fí-purin-6-amina . LCMS (Método B): t^T = 1,13 min; MH+ = 378 465

Exemplo 136: 6-Amino-2-{[(1R)-1-metilbutil]oxi}-9-[2- (tetra-hidro-2fí-piran-4-il) etil] -7, 9-di-hidro-8-ff-purin-8-ona

A

Preparada de modo análogo ao Exemplo 73 de 2-{[(lP)-l-metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)-9-[2-(tetra-hidro-2/í-piran-4-il) etil] -9ff-purin-6-amina. LCMS (Método A): t^ = 2,84 min; MH+ = 350

Exemplo_137 r_6-Amino-2- { [ (1R) -1-metilbutil] oxi} —9— [3 — (tetra-hidro-2i7-piran-4-il)propil] -7, 9-di-hidro-8fl-purin-8-ona

Preparada de modo análogo ao Exemplo 129 de 2-{[(lP)-l-metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)-9-[3-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)propil]-9H-purin-6-amina. LCMS (Método B) : tREi = 1,04 min; MH+ = 364 466

Exemplo 138: 6-Amino-2-{[{IR)-1-metilbutil]oxi}-9-[4- (tetra-hidro-2H-piran-4-il)butil] -7,9-di-hidro-8ff-purin-8-ona

Exemplo 138: 6-Amino-2-{[{IR)-1-metilbutil]oxi}-9-[4-

Preparada de modo análogo ao Exemplo 129 de 2-{[(lf?)-l-metilbutil] oxi}-8- (metiloxi) -9- [4- (tetra-hidro-2i7-piran-4-il)butil]-9H-purin-6-amina. LCMS (Método B) : tRET = 1,10 min; MH+ = 378

Exemplo 139: 6-Amino-9-[2-(2,2-dimetiltetra-hidro-2fl-piran-4-il)etil]-2-{[(1R)-1-metilbutil]oxi}-7, 9-di-hldro-8f7-purin-8-ona NH.

Preparada de modo análogo ao Exemplo 125 de 9—[2—(2,2— dimetiltetra-hidro-2f7-piran-4-il) etil] -2-{ [ (IR) -1-metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)-9H-purin-6-amina. LCMS (Método B) : tRET = 1,07 min; MH+ = 378 467

Exemplo 140: 6-Amino-9-[3-(2,2-dimetiltetra-hidro-2i7-piran 4-il)propil]-2{ [ (1R) -1-metilbutil] oxi}- 7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona

Preparada de modo análogo ao Exemplo 73 de 9-[3-(2,2-dimetiltetra-hidro-2fí-piran-4-il)propil] -2-{ [ (1R) -1-metilbutil ] oxi )-8-( me tiloxi) -9i7-purin-6-amina. LCMS (Método A): tRET = 3,16 min; MH+ = 392

Exemplo 141: 6-Amino-9-[4-(2,2-dimetiltetra-hidro-2i7-piran-4-il) butil] -2-{ [ (1-R) -1-metilbutil] oxi} - 7, 9-di-hidro-8ff-purin-8-ona

Preparada de modo análogo ao Exemplo 73 de 9-[4-(2,2-dimetiltetra-hidro-2fí-piran-4-il) butil]-2-{ [ (1A)-1-metilbutil]oxi}-8-(metiloxi)-9A-purin-6-amina. LCMS (Método A): tRET = 3,33 min; MH+ = 406 468

Polimorfismo

Foram realizadas difracção de raios X (XRPD) e calorimetria de varrimento diferencial (DSC) em amostras de determinados compostos da invenção de acordo com os métodos seguintes.

XRPD

Os dados de difracção de raios X foram adquiridos num difractómetro PANalytical X'Pert Pro, modelo PW3040/60, número de série DY1850 utilizando um detector XCelerator. As condições de aquisição foram: radiação: Ka de Cu, voltagem do gerador: 40 kv, corrente do gerador: 45 mA, ângulo inicial 20° 2Θ, Ângulo final: 40° 2Θ, tamanho do passo:0,0167o 2Θ, tempo por passo: 31,75 segundos. A amostra foi preparada colocando alguns miligrama de amostra em placas de pastilha de Si (fundo nulo), resultando numa camada fina de pó.

DSC

Os termogramas de DSC foram obtidos utilizando um calorimetro TA Q1000, número de série 1000-0126. A amostra foi pesada num cadinho de alumínio, colocada uma tampa de cadinho no topo e amassada ligeiramente sem selar o cadinho. A experiência foi realizada utilizando uma taxa de aquecimento de 10 °C min-1.

Difractogramas de XRPD representativos de determinados compostos da invenção são mostrados nas Fig. 1-7. Termogramas de DSC representativos de determinados compostos da invenção são mostrados nas Fig. 8-12. 469

Dados Biológicos

Os compostos da invenção foram testados em relação à actividade biológica in vitro de acordo com os ensaios que se seguem:

Ensaios para a Indução de Interferão a partir de Células Mononucleares Humanas de Sangue Periférico (PBMC)

Foram desenvolvidos ensaios baseados na estimulação de células mononucleares de sangue periférico (PBMC) provenientes de sangue de doador humano com compostos de ensaio. Após incubação dos compostos de ensaio com PBMCs isoladas de fresco, os sobrenadantes das células foram avaliados em relação ao interferão alfa utilizando um imunoensaio com especificidade alargada para a maioria das isoformas de iFNa.

Foi observada alguma variabilidade do doador em resposta a indutores conhecidos de interferão, pelo que se inclui resiquimod nestes ensaios para efeitos de normalização.

Ensaio "A" de Indução de Interferão

Preparação do Composto

Os compostos foram dissolvidos em DMSO. Foram preparadas diluições sucessivas de 3 ordens de grandeza para cada composto em meio de cultura (meio RPMI 1640 suplementado com 10% (v/v) de soro fetal de vitelo (FCS), 100 U/mL de penicilina G, 100 pg/mL de estreptomicina, L-glutamina 10 mM e aminoácidos não 470 essenciais IX) em placas de cultura de tecido de 96 poços estéreis. Cada composto é analisado em duplicado para cada doador de PBMC.

Cada ensaio incluiu um controlo positivo (resiquimod) e um controlo negativo (meio de cultura). Os dados são exprimidos para cada composto como EC50 (calculada como a concentração de composto necessária para dar 50% de indução máxima de interferão alfa) e como actividade relativa em comparação com uma EC50 calculada para 0 resiquimod no mesmo doador e na mesma experiência.

Preparação de PBMC

Foram obtidas amostras de sangue de dois doadores humanos. Volumes de 25 mL de sangue inteiro foram aplicados sobre 15 mL de Histopaque em tubos Accuspin, centrifugados a 2100 rpm durante 20 min e a banda na interface plasma/histopaque cuidadosamente removida. As células recolhidas foram lavadas duas vezes com PBS (centrifugadas a 2100 rpm durante 10 min) e ressuspensas em 10 mL de meio de cultura. Foi preparada uma diluição a 1:20 das células em azul de tripano e contadas. As PBMCs foram então diluídas para dar uma concentração final em cada poço de 2xl06 células/mL em 100 pL/poço quando adicionadas aos compostos diluídos.

As preparações de células foram incubadas durante 24 h a 37 °C em 5% de CO2. O meio das células de cada poço foi então transferido para uma placa de filtração de 96 poços e o sobrenadante isento de células foi recolhido numa nova placa de 471 96 poços sob vácuo. Estes sobrenadantes foram conservados a -20 °C antes da análise.

Ensaio para Interferão alfa

Foi utilizado um ensaio de múltiplas isoformas para quantificar o interferão alfa nos sobrenadantes de PBMC. Para quantificação directa do interferão alfa foi incluída uma curva padrão de interferão alfa 2a humano recombinante (PBL laboratories) em cada ensaio.

Um anticorpo policlonal de coelho contra o iFN-alfa humano (número de catálogo 31101, Stratech Scientific) foi diluído a 1:6400 em soro fisiológico tamponado com fosfato (PBS) e foram adicionados 20 pL a cada poço de uma placa GAR de 96 poços de mancha pequena única Meso-Scale Discovery (MSD). A placa foi incubada durante 1 h à temperatura ambiente com agitação vigorosa. Após três lavagens com PBS foram adicionados 20 pL de sobrenadante das células a cada poço da placa. A placa foi então incubada durante 1 h à temperatura ambiente sob agitação vigorosa. Um par de anticorpos monoclonais contra o iFN-alfa (números de catálogo 21100 e 21112, Stratech Scientific), marcados com sulfo-TAG foi diluído a 1:500 em meio de cultura e 20 pL adicionados a cada poço da placa. A placa foi ainda incubada durante 1 h à temperatura ambiente sob agitação vigorosa. Após três lavagens com PBS foram adicionados 150 pL de Tampão T x2 (MSD) a cada poço e a placa foi então lida num leitor de placas MSD Sector 6000.

As concentrações de IFNa nos sobrenadantes foram quantificadas a partir de uma curva padrão construída utilizando 472 IFNa 2a recombinante. O limite de detecção neste ensaio é aproximadamente de 1 pg/mL.

Ensaio "B" de Indução de Interferão

Preparação de PBMC

Foram obtidas amostras de sangue de até 200 mL de doadores humanos saudáveis. Sangue inteiro em volumes de 25 mL foi colocado sobre 15 mL de gradientes de Ficoll em tubos Leucosep, e centrifugado a 1000 g durante 20 min. As células na banda de interface plasma/histopaque foram cuidadosamente removidas e lavadas duas vezes com pbs (centrifugadas a 400 g durante 5 min para colher) . O sedimento final foi ressuspenso em meio de congelação (90% de soro termicamente inactivado, 10% de DMSO) até uma concentração de células de 4xl07 células/mL. As células ressuspensas foram em seguida crioconservadas (congeladas) utilizando um congelador de velocidade controlada e conservadas a -140 °C durante até 4 meses.

Ensaio para Interferão alfa

Imediatamente antes do ensaio, frasquinhos de PBMCs crioconservadas (congeladas) foram descongelados rapidamente num banho-maria a 37 °C. Foi preparada uma diluição a 1:10 das células em azul de tripano e contadas. As PBMC foram então diluidas em meio de cultura [RPMI 1640 contendo 10% de soro fetal de vitelo (invitrogen), Penicilina+Estreptavidina (Gibco N° de cat. 25030-024, 1:50), L-Glutamina 2 mM e 1000 unidades/mL de IFN-gama humano recombinante (Preprotech N° de catálogo 300— 473 02)] a uma densidade de 1X106 células/mL e transferidas para placas de 384 poços em polipropileno transparente Greiner contendo 0,25 pL de DMSO ou composto de ensaio dissolvido em DMSO puro. A concentração final máxima de composto foi tipicamente de 50 μΜ. As placas foram incubadas durante 24 h a 37 °C em 5% de C02.

Foi utilizado um imunoensaio de múltiplas isoformas para quantificar o interferão-alfa nos sobrenadantes de PBMC. O anticorpo policlonal de coelho contra iFN-alfa humano (número de catálogo 31101, Stratech Scientific) foi diluído a 1:10000 em tampão de ensaio (RPMI 1640 contendo 10% de soro fetal de vitelo, Invitrogen) e foram adicionados 20 pL a cada poço de uma placa GAR (revestida com anticorpo anti-coelho de cabra) de 384 poços de mancha pequena MSD (Meso-Scale Discovery). A placa foi incubada durante 1 h à temperatura ambiente sob agitação vigorosa. Após três lavagens com PBS foram adicionados 20 pL de sobrenadante das células a cada poço da placa. A placa foi então incubada durante 1 h à temperatura ambiente sob agitação vigorosa. Um par de anticorpos monoclonais contra IFN-alfa (números de catálogo 21100 e 21112, Stratech Scientific) foi marcado com sulfo-TAG (MSD), diluído a 1:1000 em tampão de ensaio e adicionados 20 pL a cada poço da placa. A placa foi ainda incubada durante 1 h à temperatura ambiente sob agitação vigorosa. Após três lavagens com PBS foram adicionados 30 pL de tampão T x2 (MSD) a cada poço e a placa foi lida num leitor de placas MSD Sector 6000.

Os dados foram normalizados a controlos internos da placa de resiquimod 1 uM (n=16) e DMSO (n=16). Os valores de pEC50 foram derivados por adaptação de curva de 4 parâmetros com IRLS 474 na ActivityBase, a partir da diluição sucessiva de duas ordens de grandeza em 11 pontos de compostos de ensaio.

Inibição da Replicação do Vírus da hepatite C por Sobrenadantes de Células Mononucleares Humanas de Sangue Periférico (PBMC) Estimuladas com Composto.

Foi estabelecido um ensaio para medir a actividade antiviral em sobrenadantes de PBMC humanas que foram previamente estimuladas com compostos.

Os ensaios de actividade foram realizados utilizando uma linha de células Huh-7 transfectadas de modo estável com um replicão dicistrónico, compreendendo a construção HCV Conl-ET (Pietschmann et al., 2002 J. Virol. 2002 76(8):4008-21) e o gene da luciferase de pirilampo (Photinus piralis), obtidos de ReBLikon gbH, Alemanha.

Foram cultivadas l,5xl04 células de replicão HCV ET por poço em placas de 96 poços, de um dia para o outro, em 90 microlitros de meio de cultura de células. Foram adicionados dez microlitros de diluições em três ordens de grandeza dos sobrenadantes de PBMC gerados acima (estimulação de células mononucleares de sangue periférico (PBMC) provenientes de sangue de doador humano com compostos de ensaio) às células ET. Após uma incubação de 48 horas, o meio de ensaio foi removido e a actividade da luciferase medida nas monocamadas de células utilizando o sistema de ensaio Steadilite (Perkin Elmer). Os valores de ec50 foram calculados como a concentração de composto que origina um sobrenadante de PBMC que foi capaz de inibir a replicação do HCV 475 em 50% por comparação com um sobrenadante de culturas de PBMC não estimuladas.

Inibição de Ovalbumina (OVA) - Inflamação Pulmonar Aguda Induzida.

Ratinhos BALB/c fêmeas (18-20g) foram inoculados nos dias 0 e 14, com 10 pg de OVA adsorvida em 2 mg de hidróxido de alumínio num volume de 0,2 mL de soro fisiológico tamponado com fosfato (PBS) através da via intra-peritoneal. Nos dias 24-26, os ratinhos foram postos à prova por via intranasal com 50 pL de soro fisiológico ou OVA (formulada como acima) sob anestesia geral.

Os compostos de ensaio indutores de interferão foram administrados a 5 mg/kg por via oral num veículo consistindo de 0,2% de Tween 80 em soro fisiológico. As doses foram administradas uma vez por dia nos dias 23 a 27 com a dose inicial 24 h antes da primeira prova. Nos dias de prova, os animais foram administrados com composto ou veículo uma hora após a prova. Por conseguinte, os animais receberam um total de 5 doses.

Foi utilizada dexametasona como um controlo positivo a 10 mg/kg por via oral no mesmo veículo uma vez por dia nos dias 24 a 27 com a dose inicial 1 h antes da primeira prova. Por conseguinte, os animais receberam um total de 4 doses.

Os animais foram mortos no dia 28 (48 horas após o último soro fisiológico ou prova com OVA) e foi realizada lavagem broncoalveolar (BAL) com 5 x 1 mL (0,1% de albumina de soro 476 bovino, EDTA 10 mM em PBS) e combinada. Os números de linfócitos, macrófagos, eosinófilos e neutrófilos na BAL foram identificados por citometria de fluxo com dispersão de luz e quantificados.

Resultados

No Ensaio "A" de Indução de Interferão, os Exemplos 1 a 60 tiveram uma ec50 média entre 0,01 a 19 uM.

No Ensaio "B" de Indução de Interferão, o Exemplo 13 Isómero 1, Exemplo 13 Isómero 2, Exemplo 16 Isómero 1, Exemplo 16 Isómero 2, Exemplo 26 Isómero 1, Exemplo 26 Isómero 2, Exemplo 27 Isómero 1, Exemplo 27 Isómero 2 e Exemplos 61-141 também tiveram uma EC50 média entre 0,01 a 10 uM.

Ensaio de Replicão

No ensaio de replicão acima, os Exemplos 1 e 4 tiveram uma EC50 média de 0,043 uM e 1,05 uM, respectivamente.

Modelo de Inflamação Pulmonar Aguda induzida por Ovalbumina

No modelo de inflamação pulmonar aguda induzida por ovalbumina acima, ao comparar com os controlos tratados com soro fisiológico, o Exemplo 4 reduziu as contagens de linfócitos, eosinófilos e neutrófilos na BAL em 66%, 72% e 50%, respectivamente. Na mesma experiência a dexametasona reduziu as 477 contagens de linfócitos, eosinófilos e neutrófilos na BAL em 87%, 92% e 68%, respectivamente.

No modelo de inflamação pulmonar aguda induzida por ovalbumina acima, ao comparar com os controlos tratados com soro fisiológico, o Exemplo 12 reduziu as contagens de linfócitos, eosinófilos e neutrófilos na BAL em 68%, 67% e 58%, respectivamente. Na mesma experiência a dexametasona reduziu as contagens de linfócitos, eosinófilos e neutrófilos na BAL em 86%, 86% e 65%, respectivamente.

Lisboa, 21 de Fevereiro de 2011 478

Claims

REIVINDICAÇÕES 1. Composto de fórmula (I):

em que: R1 é alquilCi_8amino, alcoxiloCi_8, cicloalquilC3-7alquilCi_6amino. cicloalquilC3_7alco- xiloCi_6^ alcoxiCi_3alcoxiloC2-3 ou Hetb-alcoxiloCi_3; Hetb é um heterociclo alifático saturado de 5 ou 6 membros contendo um átomo de oxigénio; R2 é - (CH2) n-Het; n é um número inteiro possuindo um valor de 1 a 4; Het é um heterociclo alifático saturado de 5 ou 6 membros contendo um heteroátomo de oxigénio, heterociclo esse que pode estar substituído substituído com um ou dois grupos alquiloCi-4; ou um seu sal ou solvato.
2/6 Fig. 3 Difractograma de XRPD de 6-amino-2-(butiloxi)-9-(tetra-hidro-3 furanilmetil)-7, 9-di-hidro-8íí-purin-8-ona, Isómero 2

Fig. 4 Difractograma de XRPD de 6-amino-2-(butilamino)-9-(tetra-hidro 3-furanilmetil)-7,9-di-hidro-8R-purin-8-ona, Isómero 1

2. Composto de acordo com a reivindicação 1, ou um seu sal ou solvato, em que R1 é n-butilamino, n-butoxilo, (R)-1-metilbutiloxilo, (S)-1-metilbutiloxilo ou 2-(ciclopropil)etoxilo. 1
3/6 Fig. 5 Difractograma de XRPD de 6-amino-2-(butilamino)-9-(tetra-hidro-3-furanilmetil)-7, 9-di-hidro-8i?-purin-8-ona, Isómero 2

Isómero 1 Fig. 6 Difractograma de XRPD de 6-amino-2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-9-(tetra-hidro-3-furanilmetil)-7,9-di-hidro-8fí-purin-8-ona,

3. Composto de acordo com a reivindicação 1 ou reivindicação 2, ou um seu sal ou solvato, em que n é 2.

4. Composto de acordo com a reivindicação 1 ou reivindicação 2, ou um seu sal ou solvato, em que n é 3.

5. Composto de acordo com a reivindicação 1 ou reivindicação 2, ou um seu sal ou solvato, em que n é 4.

6. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, ou um seu sal ou solvato, em que Het é tetra-hidro-2i7-piran-4-ilo, tetra-hidrofuran-2-ilo, tetra-hidro-2fí-piran-3-ilo, tetra-hidro-2fí-piran-2-ilo ou tetra-hidrof uran-3-ilo.

7. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, ou um seu sal ou solvato, seleccionado da lista consistindo de: 6-amino-2-butoxi-9- (tetra-hidro-2íf-piran-4-ilmetil) -7, 9-di-hidro-8ií-purin-8-ona; 6-amino-2-butoxi-9-(tetra-hidro-2tf-piran-2-ilmetil)-7, 9-di-hidro-8H-purin-8-ona; 6-amino-2-butoxi-9-(tetra-hidrofuran-2-ilmetil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona; 6-amino-2-butilamino-9-(tetra-hidro-2H-piran-4-ilmetil)-7, 9-di-hidro-8£f-purin-8-ona; 6-amino-2-butilamino-9-(tetra-hidro-2#-piran-2-ilmetil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona; 6-amino-2-butilamino-9-(tetra-hidrofuran-2-ilmetil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona; 2 6-amino-2-butilamino-9-[2-(tetra-hidro-2i7-piran-4-il)etil]-7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona; 6-amino-2-butilamino-9-(tetra-hidrofuran-3-ilmetil)-7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2-butilamino-9-(tetra-hidro-2H-piran-3-ilmetil)-7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona; 6-amino-2-butoxi-9-(tetra-hidrofuran-3-ilmetil)-7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2-butoxi-9- [2- (tetra-hidro-2i7-piran-4-il) etil] -1, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona; 6-amino-2-butoxi-9- (tetra-hidro-2i7-piran-3-ilmetil) - 7, 9-di-hidro-8ií-purin-8-ona; 6-amino-2-butoxi-9-[2-(tetra-hidrofuran-2-il)etil]-7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona; 6-amino-2-butoxi-9-[2-(tetra-hidrofuran-2-il)etil]-7,9-di-hidro-8il-purin-8-ona, Isómero 1; 6-amino-2-butoxi-9-[2-(tetra-hidrofuran-2-il)etil]-7,9-di-hidro-8i7-purin-8-ona, Isómero 2; 6-amino-2-butilamino-9-[2-(tetra-hidrofuran-2-il)etil]-7,9-di-hidro-8ii-purin-8-ona; 6-amino-2-butoxi-9-[2-(tetra-hidro-2H-piran-3-il)etil] -7, 9-di-hidro-8ií-purin-8-ona; 6-amino-2-butilamino-9-[2-(tetra-hidro-2H-piran-3-il)etil]-7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2-butilamino-9-[2-(tetra-hidro-2H-piran-3-il)etil]-7, 9-di-hidro-8ií-purin-8-ona, Isómero 1; 6-amino-2-butilamino-9-[2-(tetra-hidro-2H-piran-3-il)etil]-7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona, Isómero 2; 6-amino-2- [ (2,2-dimetilpentil) oxi] -9- (tetra-hidro-2fí-piran-4-ilmetil) -7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2-(pentilamino)-9-(tetra-hidro-2ií-piran-4-ilmetil)-7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 3 6-amino-2-[(3-metilbutil)oxi]-9-(tetra-hidro-2i!-piran-4-ilmetil) - 7, 9-di-hidr o-8fi-purin-8-ona; 6-amino-2- [ (2-metilbutil) oxi] -9- (tetra-hidro-2fi-piran-4-ilmetil) - 7, 9-di-hidr o-8.fi-purin-8-ona; 6-amino-2-[(1-metilbutil)oxi]-9-(tetra-hidro-2fi-piran-4-ilmetil) - 7, 9-di-hidr o-8fi-purin-8-ona; 6-amino-2- [ (2-metilbutil) amino] -9- (tetra-hidro-2fi-piran-4-ilmetil) - 7, 9-di-hidro-8.fi-purin-8-ona; 6-amino-2- [ (3-metilbutil) amino] -9- (tetra-hidro-2ii-piran-4-ilmetil) - 7, 9-di-hidro-8.fi-purin-8-ona; 6-amino-2- [ (1-metilbutil) amino] -9- (tetra-hidro-2fi-piran-4-ilmetil) - 7, 9-di-hidro-8.fi-purin-8-ona; 6-amino-2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-9-(tetra-hidro-3-f uranilmetil) - 7, 9-di-hidro-8.fi-purin-8-ona; 6-amino-2-butiloxi-9- [2- (tetra-hidro-2fi-piran-2-il) etil] -7, 9-di-hidro-8ii-purin-8-ona; 6-amino-2-butiloxi-9- [2- (tetra-hidro-2fi-piran-2-il) etil] -7, 9-di-hidro-8fi-purin-8-ona, Isómero 1; 6-amino-2-butiloxi-9- [2- (tetra-hidro-2fi-piran-2-il) etil] -7, 9-di-hidro-8ii-purin-8-ona, Isómero 2; 6-amino-2-butiloxi-9- [ (2,2-dimetiltetra-hidro-2fi-piran-4-il)metil] -7, 9-di-hidro-8fi-purin-8-ona; 6-amino-2-butiloxi-9- [ (2,2-dimetiltetra-hidro-2fi-piran-4-il) metil]-7, 9-di-hidro-8ii-purin-8-ona, Isómero 1; 6-amino-2-butiloxi-9- [ (2,2-dimetiltetra-hidro-2fi-piran-4-il)metil]-7, 9-di-hidro-8fi-purin-8-ona, Isómero 2; 6-amino-2- (butilamino) - 9- [ (2,2-dimetiltetra-hidro-2fí-piran-4-il)metil] -Ί, 9-di-hidro-8ii-purin-8-ona; 6-amino-2-butiloxi-9-[2-(tetra-hidro-3-furanil)etil]-7,9-di-hidro-8fi-purin-8-ona; 6-amino-2-(butilamino)-9-[2-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)etil]-Ί, 9-di-hidro-8H-purin-8-ona; 4 6-amino-2-(butilamino)-9-[2-(tetra-hidro-3-furanil)etil]-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona; 6-amino-2-(butiloxi)-9-(tetra-hidro-3-furanilmetil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona, Isómero 1; 6-amino-2-(butiloxi)-9-(tetra-hidro-3-furanilmetil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona, Isómero 2; 6-amino-2- { [2 - (etiloxi) etil ] oxi} - 9- (tetra-hidro-2tf-piran-4-ilmetil) - 7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2-{ [1-meti 1-2- (metoxi) etil]oxi}-9 - (tetra-hidro-2i7-piran-4-ilmetil) -7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona; 6-amino-2-{ [2 - (etiloxi) etil] oxi} - 9- (tetra-hidro-2íí-piran-3-ilmetil) - 7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2-{ [1-meti 1-2- (metoxi) etil]oxi}-9 - (tetra-hidro-2fí-piran-3-ilmetil) -7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona; 6-amino-2- [ (ciclo-hexilmetil) amino] -9- (tetra-hidro-2fí-piran 4-ilmetil) -7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona; 6-amino-2-[(ciclopentilmetil)amino]-9-(tetra-hidro-2ií-piran 4-ilmetil) -7, 9-di-hidro-8íí-purin-8-ona; 6-amino-2-[(2-ciclopropiletil)amino]-9-(tetra-hidro-2H-piran-4-ilmetil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona; 6-amino-2-(butilamino)-9-(tetra-hidro-3-furanilmetil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona, Isómero 1; 6-amino-2-(butilamino)-9-(tetra-hidro-3-furanilmetil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona, Isómero 2; 6-amino-2- [ (2-metilpropil) oxi] -9- (tetra-hidro-2ií-piran-4-ilmetil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona; 6-amino-2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-9-(tetra-hidro-2H-piran-4-ilmetil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona; 6-amino-2-[(ciclo-hexilmetil)oxi]-9-(tetra-hidro-2H-piran-4 ilmetil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona; 6-amino-2-{ [2 - (metoxi) etil] oxi }-9- (tetra-hidro-2£f-piran-4-ilmetil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona; 5 6-amino-2-{[2-(metoxi)etil]oxi}-9-(tetra-hidro-3-furanilmetil)-7, 9-di-hidro-8H-purin-8-ona; 6-amino-2-[(tetra-hidro-2-furanilmetil)oxi]-9-(tetra-hidro-2H-piran-4-ilmetil) -7, 9-di-hidro-8£f-purin-8-ona; 6-amino-2- (butilamino) -9- [3- (tetra-hidro-2ií-piran-3-il)propil] -7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona; 6-amino-9-(tetra-hidro-2H-piran-4-ilmetil)-2-[(tetra-hidro-2H-piran-2-ilmetoxi]-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona; 6-amino-2-({2-[(1-metiletil)oxi]etiljoxi)-9-(tetra-hidro-2H-piran-4-ilmetil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona; 6-amino-2- (butilamino) -9- [4- (tetra-hidro-2i7-piran-3-il)butil]-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona; 6-amino-2-[(2-ciclopropiletil)amino]-9-(tetra-hidro-3-furanilmetil) -7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona; 6-amino-2-[(2-ciclopropiletil)amino]-9-(tetra-hidro-2H-piran-3-ilmetil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona; 6-amino-2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-9-(tetra-hidro-3-furanilmetil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona, Isómero 1; 6-amino-2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-9-[tetra-hidro-3-furanilmetil]-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona, Isómero 2; 6-amino-2-(butilamino)-9-[3-(tetra-hidro-2-furanil)propil]-7, 9-di-hidro-8ií-purin-8-ona; 6-amino-2-(butilamino)-9-[4-(tetra-hidro-2-furanil)butil]-7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2-(butilamino)-9-(2-[(3S)-tetra-hidro-3-furanil]etil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona; 6-amino-2- (butilamino) —9— (2— [ (3í?) -tetra-hidro-3-furanil]etil}-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona; 6-amino-2-(butilamino)-9-[3-(tetra-hidro-3-furanil)propil]-7, 9-di-hidro-8ií-purin-8-ona; 6-amino-2-(butilamino)-9-[4-(tetra-hidro-3-furanil)butil]-7, 9-di-hidro-8ií-purin-8-ona; 6 6-amino-2-(butilamino)-9-[3-(tetra-hidro-2i7-piran-2-il) propil] -7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona; 6-amino-2- (butilamino) -9- [4- (tetra-hidro-2i7-piran-2-il) butil] -7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2-(butilamino)-9-[3-(tetra-hidro-2H-piran-4-il) propil] -7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona; 6-amino-2- (butilamino) -9- [4- (tetra-hidro-2fí-piran-4-il) butil] -7, 9-di-hidro-8ií-purin-8-ona; 6-amino-2- (butilamino) -9- [2- (2,2-dimetiltetra-hidro-2i7-piran-4-il) etil] -7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona; 6-amino-2- (butilamino) -9- [3- (2,2-dimetiltetra-hidro-2i7-piran-4-il)propil] -7, 9-di-hidro-8ií-purin-8-ona; 6-amino-2- (butilamino) -9- [4- (2,2-dimetiltetra-hidro-2fí-piran-4-il) butil] - 7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona; 6-amino-2-(butiloxi)-9-[3-(tetra-hidro-2-furanil)propil]-7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2-(butiloxi)-9-[4-(tetra-hidro-2-furanil)butil]-7,9 di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2-(butiloxi)—9—{2—[(3S)-tetra-hidro-3-furanil] etil] 7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2-(butiloxi)—9—{2—[(3R)-tetra-hidro-3-furanil] etil] 7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2-(butiloxi)-9-[3-(tetra-hidro-3-furanil)propil]-7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2-(butiloxi)-9-[4-(tetra-hidro-3-furanil)butil]-7,9 di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2- (butiloxi) -9- [3- (tetra-hidro-2il-piran-2-il) propil] -7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2- (butiloxi) - 9- [4 - (tetra-hidro-2fí-piran-2-il) butil] 7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2- (butiloxi) -9- [3- (tetra-hidro-2il-piran-3-il) propil] -7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 7 6-amino-2-(butiloxi)-9-[4-(tetra-hidro-2i7-piran-3-il)butil] 7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona; 6-amino-2- (butiloxi) -9- [3- (tetra-hidro-2i7-piran-4-il) propil] -7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2-(butiloxi)-9-[4-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)butil] 7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona; 6-amino-2- (butiloxi) -9- [2- (2,2-dimetiltetra-hidro-2i7-piran-4-il) etil] -7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2- (butiloxi) -9- [3- (2,2-dimetiltetra-hidro-2i7-piran-4-il)propil] -7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona; 6-amino-2- (butiloxi) -9- [4- (2,2-dimetiltetra-hidro-2i7-piran-4-il) butil] - 7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-9-[2-(tetra-hidro-2-furanil)etil]-7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona; 6-amino-2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-9-[3-(tetra-hidro-2-furanil)propil] -7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-9-[4-(tetra-hidro-2-furanil) butil] - 7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-9-[2-(tetra-hidro-3-furanil)etil]-7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-9-{2-[(3S)-tetra-hidro-3 furanil] etil}-7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-9-{2-[(3R)-tetra-hidro-3 furanil]etil}-7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-9-[3-(tetra-hidro-3-furanil)propil] -7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-9-[4-(tetra-hidro-3-furanil) butil] - Ί, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2- [ (2-ciclopropiletil) oxi] -9- [2- (tetra-hidro-2fí-piran-2-il) etil] -7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2- [ (2-ciclopropiletil) oxi] -9- [3- (tetra-hidro-2.fi-piran-2-il)propil] -Ί, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 8 6-amino-2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-9-[4-(tetra-hidro-2i7-piran-2-il)butil] - 7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona; 6-amino-2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-9-[2-(tetra-hidro-2H-piran-3-il)etil]-7,9-di-hidro-8#-purin-8-ona; 6-amino-2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-9-[4-(tetra-hidro-2H-piran-3-il) butil] - 7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona; 6-amino-2- [ (2-ciclopropiletil) oxi] -9- [2- (tetra-hidro-2.fi-piran-4-il)etil]-7, 9-di-hidro-8H-purin-8-ona; 6-amino-2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-9-[3-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)propil] -7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona; 6-amino-2- [ (2-ciclopropiletil) oxi] -9- [4- (tetra-hidro-2ií-piran-4-il) butil ] - 7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona; 6-amino-2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-9-[2-(2,2-dimetiltetra-hidro-2íí-piran-4-il) etil] -7, 9-di-hidro-8ff-purin-8-ona; 6-amino-2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-9-[3-(2,2-dimetiltetra-hidro-2tf-piran-4-il)propil] -7, 9-di-hidro-8H-purin-8-ona; 6-amino-2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-9-[4-(2, 2-dimetiltetra-hidro-2íí-piran-4-il)butil] -7, 9-di-hidro-8íi-purin-8-ona; 6-amino-2-{[(1S)-1-metilbutil]oxi}-9-[2-(tetra-hidro-2-furanil)etil]-7, 9-di-hidro-8H-purin-8-ona; 6-amino-2-{[(IS)-1-metilbutil]oxi}-9-[3-(tetra-hidro-2-furanil) propil] -7, 9-di-hidro-8ií-purin-8-ona; 6-amino-2-{[(IS)-1-metilbutil]oxi}-9-{2-[(3S)-tetra-hidro-3 furanil]etil}-7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2-{[(1S)-1-metilbutil]oxi}-9-{2-[(3R)-tetra-hidro-3 furanil]etil}-7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2-{[(1S)-1-metilbutil]oxi}-9-[3-(tetra-hidro-3-furanil)propil] -Ί, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2-{[(1S)-1-metilbutil]oxi}-9-[4-(tetra-hidro-3-furanil) butil] - 7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2-{ [ (1S) -1-metilbutil] oxi}-9- [2- (tetra-hidro-2fí-piran-2-il) etil] -7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 9 6-amino-2-{[(IS)-1-metilbutil]oxi}-9-[3-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)propil] -7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona; 6-amino-2-{ [ (IS) -1-metilbutil] oxi}- 9- [4 - (tetr a-hidr o-2fí-piran-2-il) butil ] - 7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2-{[(IS)-1-metilbutil]oxi}-9-[2-(tetr a-hidr o-2íf-piran-3-il) etil] -7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona; 6-amino-2-{ [ (IS) -1-metilbutil] oxi} - 9- [4 - (tetr a-hidr o-2.fi-piran-3-il) butil ] - 7, 9-di-hidro-8ii-purin-8-ona; 6-amino-2-{[(IS)-1-metilbutil]oxi}-9-[2-(tetr a-hidr o-2íf-piran-4-il)etil]-7,9-di-hidro-8ff-purin-8-ona; 6-amino-2-{[(IS)-1-metilbutil]oxi}-9-[3-(tetra-hidrο-2ϋ-piran-4-il)propil] -7, 9-di-hidro-8ii-purin-8-ona; 6-amino-2-{[(IS)-1-metilbutil]oxi}-9-[4-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)butil]-7,9-di-hidro-8h-purin-8-ona; 6-amino-9-[2-(2,2-dimetiltetra-hidro-2h-piran-4-il)etil]-2-{ [ (IS) -1-metilbutil] oxi} - 7, 9-di-hidro-8ii-purin-8-ona; 6-amino-9-[3-(2,2-dimetiltetra-hidro-2h-piran-4-il)propil]-2-{ [ (IS) -1-metilbutil] oxi}-7, 9-di-hidro-8fi-purin-8-ona; 6-amino-9-[4-(2, 2-dimetiltetra-hidro-2h-piran-4-il)butil]-2 { [ (IS) -1-metilbutil] oxi} - 7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2-{[(1R)-1-metilbutil]oxi}-9-[2-(tetra-hidro-2-furanil) etil] -7, 9-di-hidro-8íf-purin-8-ona; 6-amino-2-{ [ (1J?) -1-metilbutil] oxi}- 9- [3 - (tetra-hidro-2-furanil)propil] -7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2-{[(1R)-1-metilbutil]oxi}-9-{2-[(3S)-tetra-hidro-3 furanil]etil}-7, 9-di-hidro-8íf-purin-8-ona; 6-amino-2-{[(1R)-1-metilbutil]oxi}-9-{2-[(3R)-tetra-hidro-3 furanil]etil}-7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2-{[(1R)-1-metilbutil]oxi}-9-[3-(tetra-hidro-3-furanil)propil] -7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona; 6-amino-2-{[(1R)-1-metilbutil]oxi}-9-[4-(tetra-hidro-3-furanil) butil] - Ί, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 10 6-amino-2-{[(IR)-1-metilbutil]oxi}-9-[2-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)etil]-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona; 6-amino-2-{[(1R)-1-metilbutil]oxi}-9-[3-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)propil]-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona; 6-amino-2-{[(1R)-1-metilbutil]oxi}-9-[4-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)butil]-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona; 6-amino-2-{[(1R)-1-metilbutil]oxi}-9-[2-(tetra-hidro-2H-piran-3-il)etil]-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona; 6-amino-2-{[(1R)-1-metilbutil]oxi}-9-[4-(tetra-hidro-2ií-piran-3-il)butil]-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona; 6-amino-2-{[(1R)-1-metilbutil]oxi}-9-[2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)etil]-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona; 6-amino-2-{ [ (1R) -1-metilbutil] oxi}-9- [3- (tetra-hidro-2ií-piran-4-il)propil]-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona; 6-amino-2-{[(1R)-1-metilbutil]oxi}-9-[4-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)butil]-7, 9-di-hidro-8tf-purin-8-ona; 6-amino-9-[2-(2,2-dimetiltetra-hidro-2fí-piran-4-il) etil]-2-{ [ (1R) -1-metilbutil] oxi}-7,9-di-hidro-8ií-purin-8-ona; 6-amino-9- [3- (2,2-dimetiltetra-hidro-2/í-piran-4-il)propil] -2-{ [ (IR)-1-metilbutil] oxi]-7, 9-di-hidro-8íf-purin-8-ona, e; 6-amino-9-[4-(2,2-dimetiltetra-hidro-2fí-piran-4-il)butil]-2-{ [ (1R) -1-metilbutil] oxi}-7, 9-di-hidro-8ií-purin-8-ona; e os seus sais e solvatos.

8. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, ou um seu sal ou solvato, seleccionado da lista consistindo de: 6-amino-2-(butiloxi)-9-(tetra-hidro-3-furanilmetil)-7,9-di-hidro-8£f-purin-8-ona; sal de cloridrato; 11 Cloridrato de hidrato de 6-amino-2-(butilamino)-9-(tetra-hidro-2fí-piran-4-ilmetil) -7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona; sal de cloridrato de 6-amino-2-(butilamino)-9-(tetra-hidro-3-furanilmetil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona, Isómero 1, e; sal de cloridrato de 6-amino-2-(butilamino)-9-(tetra-hidro-3-furanilmetil)-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona, Isómero 2.

9. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, ou um seu sal ou solvato, seleccionado da lista consistindo de: 6-amino-2- (butiloxi) - 9- [ 4 - (tetra-hidro-2íí-piran-3-il) butil] - 7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona; 6-amino-2- (butiloxi) -9- [3- (tetra-hidro-2fí-piran-4-il)propil]-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona; 6-amino-2-(butiloxi)-9-[4-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)butil]-7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona; 6-amino-2- [ (2-ciclopropiletil) oxi] -9- [3- (tetra-hidro-2íí-piran-4-il)propil] -7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona; 6-amino-2-{ [ (IS) -1-metilbutil] oxi}-9- [2- (tetra-hidro-2íí-piran-4-il) etil] -7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona; 6-amino-2-{[(IS)-1-metilbutil]oxi}-9-[3-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)propil] -7, 9-di-hidro-8/í-purin-8-ona, e; 6-amino-2-{ [ (IS) -1-metilbutil] oxi}-9- [4- (tetra-hidro-2i7-piran-4-il) butil] - 7, 9-di-hidro-8íí-purin-8-ona; 6-amino-2- [ (2-ciclopropiletil) oxi] -9- [2- (tetra-hidro-2íí-piran-4-il) etil] -7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona, e; 6-amino-2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-9-[4-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)butil]-7,9-di-hidro-8H-purin-8-ona; e os seus sais e solvatos. 12

10. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9 como um sal ou solvato farmaceuticamente aceitável.

11. Composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 9, ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável, para ser utilizado como um agente terapêutico activo.

12. Composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 9, ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável, para ser utilizado no tratamento de doenças infecciosas, cancro, doenças alérgicas e outros estados inflamatórios.

13. Composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 9, ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável, para ser utilizado como um adjuvante de vacina. Utilização de um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 9, ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável, para o fabrico de um medicamento para o tratamento de doenças infecciosas, cancro, doenças alérgicas e outros estados inflamatórios.

15. Utilização de um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 9, ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável, para o fabrico de um medicamento para o tratamento de rinite alérgica.

16. Utilização de um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 9, ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável, para o fabrico de um medicamento para o tratamento de asma. 13

17. Composição farmacêutica compreendendo um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 9, ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável, e opcionalmente um ou mais diluentes ou veículos farmaceuticamente aceitáveis. Lisboa, 21 de Fevereiro de 2011 14 1/6 Fig. 1 Difractograma de XRPD de 6-amino-2-butilamino-9-(tetra-hidro-2fí-piran-4-ilmetil) -7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona

Fig. 2 Difractograma de XRPD de 6-amino-2-(butiloxi)-9-(tetra-hidro-3-furanilmetil)-7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona, Isómero 1
4/6 Fig. 7 Difractograma de XRPD de 6-amino-2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-9-(tetra-hidro-3-furanilmetil)-7,9-di-hidro-8i7-purin-8-ona, Isómero 2

Fig. 8 Termograma de DSC de 6-amino-2-butilamino-9-(tetra-hidro-2fí- piran-4-ilmetil) -7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona

Exo para baixo Temperatura (°C) Urwtrsal Vi BB TA Inslruments 5/6 Fig. 9 Termograma de DSC de 6-amino-2-(butiloxi)-9-(tetra-hidro-3 furanilmetil)-7, 9-di-hidro-8íí-purin-8-ona, Isómero 1 20 15 c» I. 10 0 υ Endotérmica: Início: 317.8 CC Entalpia: 145 j/g J 1 ω h- 05 c T3 5 13 co υ 0 -5 0 50 100 150 200 250 300 350 Exo para baixo Temperatura (°C) Universal V3.8B TA Instruments Fig. 10 Termograma de DSC de 6-amino-2-(butiloxi)-9-(tetra-hidro-3 furanilmetil)-7, 9-di-hidro-8fí-purin-8-ona, Isómero 2 0 Exo para baixo 150 200 Temperatura (°C) Endotérrpica: inicie: 317,6 °C Entalpia: 1393¾ J 300 350 Universal V3.8B TA Instruments β/β Fig. 11 Termograma de DSC de 6-amino-2-(butilamina)-9-(tetra-hidro-3-furanilmetil)-7, 9-di-hidro-8i7-purin-8-ona, Isómero 2

txc psra baixo Temperatura (°C) Universel V3.88TAlnsirumenis Fig. 12 Termograma de DSC de 6-amino-2-[(2-ciclopropiletil)oxi]-9-(tetra-hidro-3-furanilmetil)-7,9-di-hidro-8i7-purin-8-ona, Isómero 1