PT2029549E - Derivados de fenil-pirazole como ligandos não esteróides do receptor de glucocorticóides - Google Patents

Description

DESCRIÇÃO "DERIVADOS DE FENIL-PIRAZOLE COMO LIGANDOS NÃO ESTERÓIDES DO RECEPTOR DE GLUCOCORTICÓIDES" A presente invenção refere-se a compostos não esteróides de ligação ao receptor de glucocorticóides e a composições farmacêuticas compreendendo os compostos, a intermediários e à utilização dos compostos para o fabrico de um medicamento para tratamento terapêutico, em particular para o tratamento de inflamação, alergia e/ou estados auto-imunes.

Os receptores nucleares são uma classe de proteínas estruturalmente relacionadas envolvidas na regulação da expressão de genes. Os receptores de hormonas esteróides são um subconjunto desta família cujos ligandos naturais compreendem tipicamente esteróides endógenos tais como estradiol (receptor de estrogénios), progesterona (receptor de progesterona) e cortisol (receptor de glucocorticóides). Os ligandos sintetizados pelo homem para estes receptores desempenham um papel importante na saúde humana, em particular a utilização de agonistas de glucocorticóides para tratar uma grande variedade de estados inflamatórios.

Os glucocorticóides exercem as suas acções no receptor de glucocorticóides (GR) através de pelo menos dois mecanismos intracelulares, transactivação e transrepressão (ver: Schacke, H., Docke, W-D. & Asadullah, K. (2002) Pharmacol and Therapeutics 96:23-43; Ray, A., Siegel, M.D., Prefontaine, K.E. & Ray, P. (1995) Chest 107:139S; e Konig, H., Ponta, H., 1

Rahmsdorf, H.J. & Herrlich, P. (1992) EMBO J 11:2241-2246). A transactivação envolve a ligação directa do receptor de glucocorticóides a elementos de resposta a glucocorticóides (GRE) de ácido desoxirribonucleico (ADN) distintos nos promotores de genes, aumentando em geral, mas nem sempre, a transcrição do produto génico a jusante. Recentemente, foi demonstrado que o GR também pode regular a expressão de genes através de uma via adicional (transrepressão) na qual o GR não se liga directamente ao ADN. Este mecanismo envolve a interacção do GR com outros factores de transcrição, em particular NFkB e APl, levando à inibição da sua actividade pró-transcrição (Schacke, H., Docke, W-D. & Asadullah, K. (2002) Pharmacol and Therapeutics 96:23-43; e Ray, A., Siegel, M.D., Prefontaine, K.E. & Ray, P. (1995) Chest 107:139S). Muitos dos genes envolvidos na resposta inflamatória são activados de modo transcricional através das vias de NFkB e APl e, portanto, a inibição desta via por glucocorticóides pode explicar o seu efeito anti-inflamatório (ver: Barnes, P.J. & Adcock, I. (1993) Trend Pharmacol Sei 14: 436-441; e Cato, A.C. & Wade, E. (1996) Bioessays 18: 371-378).

Apesar da eficácia dos glucocorticóides no tratamento de uma grande variedade de estados, um número de efeitos secundários estão associados a aumentos patológicos no cortisol endógeno ou à utilização de glucocorticóides exógenos e, particularmente administrados por via sistémica.

Estes incluem redução da densidade mineral óssea (Wong, C.A., Walsh, L.J., Smith, C.J. et al. (2000) Lancet 355:1399-1403), abrandamento do crescimento (Allen, D.B. (2000) Allergy 55: suppl 62, 15-18), formação de pisaduras cutâneas (Pauwels, R.A., Lofdahl, C.G., Latinen, L.A. et al. (1999) N Engl J Med 2 340:1948-1953 ), desenvolvimento de cataratas (Cumming, R.G., Mitchell, P. & Leeder, S.R. (1997) N Engl J Med 337:8- 14) e desregulação do metabolismo de lípidos e da glucose (Faul, J.L., Tormey, W., Tormey, V. & Burke, C. (1998) BMJ 317:1491; e Andrews, R.C, . & Walker, B.R. (1999) Clin Sei 96:513-523 ) . Os efeitos secundários são suficientemente graves muitas vezes limitando a dose de glucocorticóide que pode ser utilizada para tratar a patologia subjacente conduzindo a uma eficácia reduzida do tratamento.

Foi sugerido que a activação excessiva da via GRE de transactivação pode mediar alguns daqueles efeitos secundários (ver Schacke, H., Docke, W-D. & Asadullah, K. (2002) Pharmacol and Therapeutics 96:23-43). O desenvolvimento de glucocorticóides que modulam selectivamente a via de transrepressão relativamente à via de transactivação pode ter, por conseguinte, um índice terapêutico anti-inflamatório em relação ao efeito secundário superior, permitindo um tratamento mais eficaz e mais seguro do doente. Esta nova classe de glucocorticóides poderia ser utilizada para tratar de modo mais eficaz e mais seguro o espectro total de doenças presentemente tratadas pelos actuais glucocorticóides.

Os glucocorticóides actuais conhecidos demonstraram ser úteis no tratamento de inflamação, rejeição de tecido, auto-imunidade, diversas malignidades, tais como leucemias e linfomas, síndrome de Cushing, febre reumática, poliarterite nodosa, poliarterite granulomatosa, inibição de linhas de células mielóides, proliferação imune/apoptose, supressão e regulação do eixo HPA, hipercortisolemia, modulação do equilíbrio das citocinas Thl/Th2, doença renal crónica, hipercalcemia, hiperglicemia, insuficiência supra-renal aguda, 3 insuficiência supra-renal primária crónica, insuficiência supra-renal secundária, hiperplasia supra-renal congénita, edema cerebral, trombocitopenia, sindrome de Little, alopecia inflamatória do couro cabeludo, paniculite, psoriase, lúpus eritematoso discóide, quistos inflamados, dermatite atópica, pioderma gangrenoso, pênfigo vulgar, penfigóide bulhoso, dermatomiosite, herpes gestacional, fascite eosinofilica, policondrite recorrente, vasculite inflamatória, sarcoidose, doença de Sweet, lepra reactiva de tipo 1, hemangiomas capilares, dermatite de contacto, dermatite atópica, líquen plano, dermatite esfoliativa, eritema nodoso, acne, hirsutismo, necrólise epidérmica tóxica, eritema multiforme e linfoma cutâneo de células T.

Os glucocorticóides são especialmente úteis em estados patológicos que envolvem inflamação sistémica tais como doença inflamatória do intestino, poliarterite nodosa, granulomatose de Wegener, arterite de células gigantes, artrite reumatóide, osteoartrite, rinite sazonal, rinite alérgica, rinite vasomotora, urticária, edema angioneurótico, doença pulmonar obstrutiva crónica, asma, tendinite, higroma, doença de Crohn, colite ulcerosa, hepatite crónica activa auto-imune, transplante de órgãos, hepatite e cirrose. Os glucocorticóides também foram utilizados como imunoestimulantes e repressores e como agente de cicatrização de feridas e reparação de tecidos.

Um número de estados nos quais um componente chave da patologia é uma inflamação no sistema nervoso central (SNC) é presentemente tratado com doses elevadas de agentes glucocorticóides. Entende-se que estas doses elevadas são principalmente necessárias porque os agentes esteróides são activamente removidos do cérebro por transportadores específicos 4 e, portanto, têm de ser conseguidas concentrações sistémicas elevadas para se atingir doses terapêuticas no SNC. Agentes que mostrassem uma maior propensão para se repartir para o interior do cérebro permitiriam que se atingissem estas concentrações terapêuticas no SNC com uma redução significativa na carga sistémica de glucocorticóides, resultando num risco reduzido dos efeitos sistémicos de glucocorticóides (tais como osteoporose, diabetes, miopatia, adelgaçamento da pele e aumento de peso).

Os estados inflamatórios ou auto-imunes do sistema nervoso, nos quais esta abordagem pode demonstrar-se valiosa incluem mas não se limitam a esclerose múltipla, vasculite cerebral, neurossarcoidose, sindrome de Sjogren, lúpus eritematoso sistémico, polirradiculopatia inflamatória aguda ou crónica, doença de Alzheimer, doenças neoplásicas do sistema nervoso incluindo meningioma, linfoma e meningite maligna, e traumatismo e doenças infecciosas do sistema nervoso tal como tuberculose. Outras condições incluem lesão da medula espinal e lesão cerebral, por exemplo após enfarte (acidente vascular cerebral). PCT/EP2006/006246 fenil-pirazole de 0 Pedido Internacional N° (W02007/000334A1) descreve derivados de fórmula (A)

5 como ligandos não esteróides do receptor de glucocorticóides.

Continua a existir a necessidade de encontrar compostos adicionais que se liguem ao receptor de glucocorticóides.

Numa forma de realização, a presente invenção proporciona compostos de fórmula (I):

* = centro quíral em que R1 é seleccionado de hidrogénio, metilo, etilo e 2-fluoroetilo; R2 e R3 são, cada, independentemente seleccionados de bromo, cloro, flúor, -CHF2, -CF3 e -OCHF2, ou R2 é -S02CH3 e R3 é hidrogénio; n é um número inteiro seleccionado desde 0, 1 e 2, quando n é 1, X é seleccionado de cloro e flúor, e quando n é 2, cada X é flúor; e os seus sais e solvatos (daqui em diante "compostos da invenção") . 6

Numa outra forma de realização, a presente invenção proporciona compostos de fórmula (IA):

* = centro quiral (IA) em que R1 é seleccionado de hidrogénio, metilo e etilo; e quando R1 é hidrogénio ou metilo, R2 e R3 são, cada, independentemente seleccionados de cloro e flúor, ou quando R1 é etilo, R2 e R3 são, cada, independentemente seleccionados de cloro e flúor, ou R2 é -S02CH3 e R3 é hidrogénio; e os seus sais e solvatos.

Os compostos de fórmula (I) contêm, cada, um centro quiral e existem dois enantiómeros possíveis de cada composto de fórmula (I).

Os termos Enantiómero 1 e Enantiómero 2 são aqui utilizados para referir os enantiómeros de um composto de fórmula (I), com base na ordem da sua eluição utilizando a metodologia de cromatografia quiral aqui descrita. 0 Enantiómero 1 refere-se ao 7 primeiro enantiómero a eluir, e Enantiómero 2 refere-se ao segundo enantiómero a eluir.

Os especialistas na técnica compreenderão que, embora o tempo de retenção absoluto em cromatografia possa ser variável, a ordem de eluição permanece a mesma quando são utilizadas a mesma coluna e condições. No entanto, a utilização de uma coluna de cromatografia e condições diferentes pode alterar a ordem de eluição.

Os especialistas na técnica compreenderão que pelo menos um isómero (e. g. um enantiómero do racemato) tem a actividade descrita. Os outros isómeros podem ter actividade semelhante, menos actividade, nenhuma actividade ou podem ter alguma actividade antagonista num ensaio funcional.

Pode preferir-se uma mistura de enantiómeros, tal como uma mistura racémica. Assim, numa forma de realização da invenção o composto de fórmula (I) é a mistura racémica (o racemato).

Alternativamente, pode ser preferido um único enantiómero, por exemplo o enantiómero 1. Assim, numa forma de realização da invenção, o composto de fórmula (I) é o enantiómero 1. Numa outra forma de realização da invenção, o composto de fórmula (I) é o enantiómero 2.

Os especialistas na técnica compreenderão que, para compostos de fórmula (I) em que a rotação da ligação aril-carbonilo se torna menos fácil devido à substituição orto no anel aromático, por exemplo quando R1 é metilo ou etilo, R2 é cloro e R3 é flúor, pode observar-se um eixo de simetria, introduzindo assim atropisomerismo no composto e criando a possibilidade de quatro isómeros nomeadamente atropisómero 1, enantiómero 1 (AlEl); atropisómero 1, enantiómero 2 (AlE2); atropisómero 2, enantiómero 1 (A2E1); e atropisómero 2, enantiómero 2 (A2E2). Qualquer comentário relacionado com a actividade biológica de um isómero ou estereoisómero deverá ser considerado como incluindo estes atropisómeros. Os especialistas na técnica compreenderão que quando existe uma proporção diferente de 1:1 de atropisómeros, que esta proporção pode mudar dependendo da semivida de interconversão.

Será ainda compreendido pelos especialistas na técnica que, para compostos de fórmula (I) em que a rotação está restringida em torno da ligação CfOJ-NR1 devido a substituição da amida, por exemplo quando R1 é etilo ou 2-fluoroetilo, pode observar-se rotâmeros. Qualquer comentário relacionado com a actividade biológica de um isómero ou estereoisómero deverá ser considerado como incluindo estes rotâmeros. Os especialistas na técnica compreenderão que pode não haver uma proporção 1:1 de rotâmeros já que a proporção pode mudar dependendo da semivida de interconversão.

Os termos "estereoisómero" e "isómero" como aqui utilizados abrangem enantiómero, atropisómero e/ou rotâmero.

Os compostos da invenção são ligantes dos receptores de glucocorticóides. Por conseguinte, verificou-se que pelo menos um dos enantiómeros possíveis de cada um dos compostos de fórmula (I) se liga ao receptor de glucocorticóides.

Além disso, parece que pelo menos um dos enantiómeros possíveis de cada um dos compostos de fórmula (I) tem actividade agonista do receptor de glucocorticóides. Por conseguinte, pelo 9 menos um dos enantiómeros possíveis de cada composto de fórmula (I) modula o receptor de glucocorticóides. 0 termo "modulador", como aqui utilizado, refere-se a um composto que se liga ao receptor de glucocorticóides e actua como um agonista, um agonista parcial ou um antagonista do receptor de glucocorticóides.

Os compostos da invenção podem proporcionar agonismo do receptor de glucocorticóides.

Além disso, parece que um ou mais dos enantiómeros possíveis de alguns dos compostos de fórmula (I) possuem selectividade vantajosa em relação à manutenção da actividade de transrepressão, enquanto reduzem a actividade de transactivação. Julga-se que estas observações sejam indicativas de que os compostos da invenção proporcionam propriedades anti-inflamatórias com menos efeitos secundários ou efeitos secundários menos graves.

Determinados compostos da invenção podem apresentar uma propensão para se repartir para o cérebro. Os agentes que mostrem uma propensão mais elevada para se repartir para o cérebro podem permitir que sejam atingidas concentrações terapêuticas no SNC com uma redução significativa na carga sistémica de glucocorticóides, resultando num risco reduzido dos efeitos sistémicos conhecidos dos glucocorticóides (tais como osteoporose, diabetes, miopatia, adelgaçamento da pele e aumento de peso).

Numa forma de realização, R1 é seleccionado de hidrogénio, metilo e etilo. Noutra forma de realização, R1 é seleccionado de metilo e etilo. Noutra forma de realização, R1 é seleccionado de 10 hidrogénio e etilo. Noutra forma de realização, R1 é hidrogénio. Numa outra forma de realização, R1 é etilo.

Numa forma de realização, quando R1 é hidrogénio ou metilo, R2 e R3 são, cada, independentemente seleccionados de cloro e flúor. Numa outra forma de realização, quando R1 é etilo, R2 e R3 são, cada, independentemente seleccionados de cloro e flúor, ou R2 é -SO2CH3 e R3 é hidrogénio.

Numa forma de realização, R2 e R3 são, cada, cloro. Noutra forma de realização, R2 e R3 são, cada, flúor. Noutra forma de realização, R2 é cloro e R3 é flúor. Noutra forma de realização, R2 é -SO2CH3 e R3 é hidrogénio. Noutra forma de realização, R2 e R3 são, cada, bromo. Numa outra forma de realização, R2 é bromo e R3 é cloro.

Numa forma de realização R2 é flúor e R3 é bromo. Noutra forma de realização R2 é cloro e R3 é -OCHF2. Noutra forma de realização R2 e R3 são ambos -CHF2. Noutra forma de realização R2 e R3 são, cada, independentemente seleccionados de flúor, cloro, bromo, - OCHF2 e -CHF2. Numa outra forma de realização R2 é flúor e R3 é -OCHF2.

Numa forma de realização, n é 1.

Numa forma de realização, quando n é 1, X é flúor. Numa outra forma de realização, o flúor está na posição para do anel de fenilo.

Entender-se-á que a presente invenção abrange todas as combinações de grupos substituintes descritos acima. 11

Numa outra forma de realização, a presente invenção proporciona compostos de fórmula (IB):

s centro quiral (IB) em que R1 é seleccionado de hidrogénio e etilo; R2 e R3 são, cada, independentemente seleccionados de flúor, cloro, bromo, -OCHF2 e - CHF2; e e os seus sais e solvatos.

Numa forma de realização, o composto de fórmula (I) é: 5-amino-N-(2-{[[(2,6-diclorofenil)carbonil](metil)amino]metil}- 3.3.3- trif luoro-2-hidroxipropil) -1- (4-f luorof enil) -lfí-pirazole- 4- carboxamida; 5- amino-N-(2 — {[[(2, 6-diclorofenil)carbonil] (metil)amino]metil}- 3.3.3- trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4-fluorofenil)-lH-pirazole- 4- carboxamida (Enantiómero 1); 5- amino-N-(2-{[[(2, 6-diclorofenil)carbonil] (metil)amino]metil}- 3.3.3- trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4-fluorofenil)-lfí-pirazole-4-carboxamida (Enantiómero 2); 12 5-amino-N-(2-{[[(2, 6-diclorofenil)carbonil] (etil)aminojmetil}- 3.3.3- trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4-fluorofenil)-lH-pirazole- 4- carboxamida; 5- amino-N- (2-{[[(2,6-diclorofenil)carbonil] (etil)amino]metil}- 3.3.3- trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4-fluorofenil)-lH-pirazole- 4- carboxamida (Enantiómero 1); 5- amino-W- (2 — {[[(2,6-diclorofenil)carbonil] (etil)amino]metil}- 3.3.3- trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4-fluorofenil)-lff-pirazole- 4- carboxamida (Enantiómero 2); 5- amino-N-[2-({[(2,6-diclorofenil)carbonil]amino}metil)-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil]-1-(4-fluorofenil)-ltf-pirazole-4-carboxamida; 5-amino-W-[2-({[(2,6-diclorofenil)carbonil]aminojmetil)-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil]-1-(4-fluorofenil)-lH-pirazole-4- carboxamida (Enantiómero 1); 5-amino-N-[2-({[(2,6-diclorofenil)carbonil]amino}metil)-3, 3,3-trifluoro-2-hidroxipropil]-1-(4-fluorofenil)-lfí-pirazole-4-carboxamida (Enantiómero 2); 5-amino-N-(2 — {[[(2-cloro-6-fluorofenil)carbonil] (etil)amino]me-til}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4-fluorofenil)-1H-pirazole-4-carboxamida; 5-amino-N-(2 — {[[(2-cloro-6-fluorofenil)carbonil] (etil)amino]me-til}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4-fluorofenil)—li?— pirazole-4-carboxamida (Enantiómero 1); 5-amino-W-(2 — {[[(2-cloro-6-fluorofenil)carbonil] (etil)amino]me-til}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4-fluorofenil)-1H-pirazole-4-carboxamida (Enantiómero 2); 5-amino-N- (2 — {[[(2,6-difluorofenil)carbonil] (etil)amino]metil}- 3.3.3- trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4-fluorofenil)-lií-pirazole-4-carboxamida; 13 5-amino-W-(2 — {[[(2, 6-difluorofenil)carbonil] (etil)amino]metil}- 3.3.3- trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4-fluorofenil)-lH-pirazole- 4- carboxamida (Enantiómero 1); 5- amino-W- (2 — {[[(2,6-difluorofenil)carbonil] (etil)amino]metil}- 3.3.3- trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4-fluorofenil)-lH-pirazole- 4- carboxamida (Enantiómero 2); 5- amino-N-[2-({[(2,6-difluorofenil)carbonil]aminojmetil)-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil]-1-(4-fluorofenil)-lH-pirazole-4-carboxamida; 5-amino-N-[2-({[(2-cloro-6-fluorofenil)carbonil]aminojmetil)- 3.3.3- trif luoro-2-hidroxipropil ] -1- (4-f luorofenil) -líí-pirazole- 4- carboxamida; 5- amino-U-[2-({[(2-cloro-6-fluorofenil)carbonil]amino}metil)- 3.3.3- trifluoro-2-hidroxipropil]-1-(4-fluorofenil)-lfí-pirazole- 4- carboxamida (Enantiómero 1); 5- amino-.il-[2-({[(2-cloro-6-fluorofenil)carbonil]amino]metil)- 3.3.3- trifluoro-2-hidroxipropil]-1-(4-fluorofenil)-lH-pirazole- 4- carboxamida (Enantiómero 2); 5- amino-W- (2-{[[(2,6-difluorofenil)carbonil] (metil)amino]metil} 3.3.3- trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4-fluorofenil)-líf-pirazole- 4- carboxamida; 5- amino-W-(2—{[[(2-cloro-6-fluorofenil)carbonil](metil)amino]me til}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4-fluorofenil)-1H-pirazole-4-carboxamida; 5-amino-N-{2-[(etil{[2-(metilsulfonil)fenil]carbonil]amino)metil] -3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil}-1-(4-fluorofenil)-1H-pirazole-4-carboxamida; 5-amino-N-{2-[(etil{[2-(metilsulfonil)fenil]carbonil]amino)metil] -3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil]-l-(4-fluorofenil)-1H-pirazole-4-carboxamida (Enantiómero 1); 14 5-amino-N-{2 —[(etil{[2-(metilsulfonil)fenil]carbonil}amino)me-til]-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil}-1-(4-fluorofenil)-1H-pirazole-4-carboxamida (Enantiómero 2); 5-amino-N-[2-({[(2,6-dibromofenil)carbonil]amino}metil)-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil]-1-(4-fluorofenil)-lH-pirazole-4-carboxamida; 5-amino-N- [2- ({ [ (2, 6-dibromof enil) carbonil] aminojmetil) -3,3,3-trif luoro-2-hidroxipropil] -1- (4-f luorof enil) -lfí-pirazole-4-carboxamida (Enantiómero 1); 5-amino-U-[2-({[(2,6-dibromofenil)carbonil]aminojmetil)-3,3,3-trif luoro-2-hidroxipropil] -1- (4-f luorof enil) -líí-pirazole-4-carboxamida (Enantiómero 2); 5-amino-U-[2-({[(2-bromo-6-clorofenil)carbonil]aminojmetil)- 3.3.3- trif luoro-2-hidroxipropil ] -1- (4-f luorof enil) -lfí-pirazole 4- carboxamida; 5- amino-N-[2-({[(2-bromo-6-clorofenil)carbonil]aminojmetil)- 3.3.3- trif luoro-2-hidroxipropil ] -1- (4-f luorof enil) -lfí-pirazole 4- carboxamida (Enantiómero 1); 5- amino-i7- [2- ({ [ (2-bromo-6-clorofenil) carbonil] aminojmetil) - 3.3.3- trif luoro-2-hidroxipropil ] -1- (4-f luorof enil) -líf-pirazole 4- carboxamida (Enantiómero 2); 5- amino-i7- [2- ({ [ (2-bromo-6-fluorofenil) carbonil] aminojmetil) - 3.3.3- trif luoro-2-hidroxipropil ] -1- (4-f luorof enil) -1/í-pirazole 4- carboxamida; 5- amino-U-[2-({[(2-bromo-6-fluorofenil)carbonil]amino}metil)- 3.3.3- trif luoro-2-hidroxipropil ] -1- (4-f luorof enil) -líí-pirazole 4- carboxamida (Enantiómero 1); 5- amino-N-[2-({[(2-bromo-6-fluorofenil)carbonil]aminojmetil)- 3.3.3- trif luoro-2-hidroxipropil ] -1- (4-f luorof enil) -lfí-pirazole 4-carboxamida (Enantiómero 2); 15 5-amino-N-(2 — {[({2-cloro-6-[(difluorometil)oxi]fenil}carbonil ) amino] metil } -3, 3,3-trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4-f luorof enil) -líí-pirazole-4-carboxamida; 5-amino-N-(2 — {[({2-cloro-6-[(difluorometil)oxi]fenil}carbonil)a mino]metil}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4-fluorofenil)-lH-pirazole-4-carboxamida (Enantiómero 1); 5-amino-N-(2 — {[({2-cloro-6-[(difluorometil)oxi]fenil}carbonil)a mino]metil}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4-fluorofenil)-líf-pirazole-4-carboxamida (Enantiómero 2); 5-amino-N-{2-[({[2,6-bis(trifluorometil)fenil]carbonil]a-mino)metil]-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil}-l-(4-fluorofenil)-lfí-pirazole-4-carboxamida; 5-amino-N-{2-[({[2,6-bis(trifluorometil)fenil]carbonil]a-mino)metil]-3,3,3-tifluoro-2-hidroxipropil}-1-(4-fluorofenil)-lfí-pirazole-4-carboxamida (Enantiómero 1); 5-amino-N-{2- [ ({ [2, 6-bis (trifluorometil) fenil] carbonil]a-mino)metil]-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil}-1-(4-fluorofenil)-lfí-pirazole-4-carboxamida (Enantiómero 2); 5-amino-N-(2 — {[[(2-bromo-6-clorofenil)carbonil] (metil)amino]me-til}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4-fluorofenil)-1H-pirazole-4-carboxamida; 5-amino-N-(2 — {[[(2,6-difluorofenil)carbonil] (2-fluoroetil)amino]metil}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4-f luorof enil) -lfí-pirazole-4-carboxamida; 5-amino-1-(4-fluorofenil)-N-{3, 3,3-trifluoro-2-[((2-fluoroetil){[2-fluoro-6-(trifluorometil)fenil]carbonil]amino)me til] -2-hidroxipropil}-llí-pirazole-4-carboxamida; 5-amino-l-(4-fluorofenil)-N-{3,3,3-trifluoro-2-[({[2-fluoro-6-(trifluorometil)fenil]carbonil]amino)metil]-2-hidroxipropil}-lH pirazole-4-carboxamida; 16 5-amino-l-(4-fluorofenil)-N-{3, 3,3-trifluoro-2-[({[2—fluoro-6-(trifluorometil)fenil]carbonil}amino)metil]-2-hidroxipropil}—1 fí pirazole-4-carboxamida (Enantiómero 1); 5-amino-l-(4-fluorofenil)-N-{3,3,3-trifluoro-2-[({[2—fluoro-6-(trifluorometil)fenil]carbonil}amino)metil]-2-hidroxipropil}-1H pirazole-4-carboxamida (Enantiómero 2); 5-amino-N-(2-{[({2,6-bis[(difluorometil)oxi]fenil}carbonil)a-mino]metil}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4-fluorofenil)-lN-pirazole-4-carboxamida; 5-amino-l-(4-fluorofenil)-N- (3,3,3-trifluoro-2-{[{[2-fluoro-6-(trifluorometil)fenil]carbonil}(metil)amino]metil}-2-hidroxipropil)-lfí-pirazole-4-carboxamida; 5-amino-N-(2-{[{[2, 6-bis(trifluorometil)fenil]carbonil}(metil) amino]metil}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4-fluorofenil)-lN-pirazole-4-carboxamida; 5-amino-N- {2-[(etil{[2—fluoro-β-(trifluorometil)fenil]carbonil} amino)metil]-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil}-1-(4-f luorof enil) -líí-pirazole-4-carboxamida; 5-amino-N-(2 — {[[(2-bromo-6-clorofenil)carbonil] (etil)amino]metil} -3, 3, 3-trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4-fluorofenil)-1H-pirazole-4-carboxamida; 5-amino-N-(2 — {[({2-cloro-6-[(difluorometil)oxi]fenil}carbonil )(etil)amino]metil}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4-fluorofenil)-lN-pirazole-4-carboxamida; 5-amino-N- (2 — {[({2,6-bis[(difluorometil)oxi]fenil}carbo-nil)(etil)amino]metil}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4-t luorof enil) -lfí-pirazole-4-carboxamida; 5-amino-N-(2 — {[{[2,6-bis(trifluorometil)fenil]carbonil} (etil)amino]metil}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4-fluorofenil)-lN-pirazole-4-carboxamida; 17 5-amino-N-(2—{[[(2,6-diclorofenil)carbonil](2-fluoroetil)amino]metil}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4-f luorofenil) -ltf-pirazole-4-carboxamida; 5-amino-N-(2 — {[[(2-cloro-6-fluorofenil)carbonil] (2-fluoroetil)amino]metil}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4-fluorofenil) -lfí-pirazole-4-carboxamida; 5-amino-f7- (2 — { [ [ (2-bromo-6-clorofenil) carbonil] (2-fluoroetil)amino]metil}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4-fluorofenil)-lH-pirazole-4-carboxamida; 5-amino-N-(2 — {[({2-cloro-6-[(difluorometil)oxi]fenil}carbonil )(2-fluoroetil)amino]metil}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil)-1- (4-fluorofenil) -lfí-pirazole-4-carboxamida; 5-amino-N- (2 — {[({2, 6-bis[(difluorometil)oxi]fenil}carbonil) (2-fluoroetil)amino]metil}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4-fluorofenil)-lH-pirazole-4-carboxamida; 5-amino-1-(3,4-difluorofenil)-N-(2-{[[(2,6- difluorofenil)carbonil](etil)amino]metil}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil) -lil-pirazole-4-carboxamida; 5-amino-l-(2,4-difluorofenil)-N-(2-{[[(2,6- difluorofenil)carbonil](etil)amino]metil}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil) -lfí-pirazole-4-carboxamida; 5-amino-l-(3,5-difluorofenil)-N-(2-{[[(2,6- difluorofenil)carbonil](etil)amino]metil}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil) -líí-pirazole-4-carboxamida; 5-amino-l-(2,5-difluorofenil)-N- (2—( [ [ (2,6 — difluorofenil)carbonil](etil)amino]metil}-3,3,3-trifluoro-2- hidroxipropil) -lií-pirazole-4-carboxamida; 5-amino-l-(2,6-difluorofenil)-N-(2—{[[(2,6— difluorofenil)carbonil](etil)amino]metil}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil) -lil-pirazole-4-carboxamida; 18 5-amino-W- (2-{[[(2,6-difluorofenil)carbonil] (etil)amino]metil} 3.3.3- trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(3-fluorofenil)-lH-pirazole 4- carboxamida; 5- amino-l-(4-clorofenil)-N-(2 —{[[(2,6- difluorofenil)carbonil](etil)amino]metil}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil) -lfí-pir azole-4-carboxamida; 5-amino-l-(2-clorofenil)-N-(2 —{[[(2,6- difluorofenil)carbonil](etil)amino]metil}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil)-lH-pirazole-4-carboxamida; 5-amino-l-(3-clorofenil)-N-(2-{[[(2,6— difluorofenil)carbonil] (etil)amino]metil}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil)-lH-pirazole-4-carboxamida; 5-amino-W- (2-{[[(2,6-difluorofenil)carbonil] (etil)amino]metil] 3.3.3- trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(2-fluorofenil)-lH-pirazole 4- carboxamida; 5- amino-W-{2-[({[2,6-bis(difluorometil)fenil]carbonil]amino)me til]-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil}-1-(4-fluorofenil)-1H-pirazole-4-carboxamida; 5-amino-N-{2-[({[2,6-bis(difluorometil)fenil]carbonil}amino)me til]-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil}-1-(4-fluorofenil)-1H-pirazole-4-carboxamida (Enantiómero 1); 5-amino-N-{2-[({[2, 6-bis(difluorometil)fenil]carbonil}amino)me til]-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil}-1-(4-fluorofenil)-1H-pirazole-4-carboxamida (Enantiómero 2); 5-amino-N-{2-[({[2-cloro-6-(trifluorometil)fenil]carbonilja-mino)metil]-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil}-1-(4-fluorofenil) lH-pirazole-4-carboxamida; 5-amino-N-{2-[({[2-cloro-6-(trifluorometil)fenil]carbonil}a-mino)metil]-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil}-1-(4-fluorofenil) lH-pirazole-4-carboxamida (Enantiómero 1); 19 5-amino-N-{2-[({[2-cloro-6-(trifluorometil)fenil]carbonil}ami-no)metil]-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil}-1-(4-fluorofenil)-1H pirazole-4-carboxamida (Enantiómero 2); 5-amino-N-{2-[({[2-bromo-6-(trifluorometil)fenil]carbonil}ami-no)metil]-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil}-1-(4-fluorofenil)-1H pirazole-4-carboxamida; 5-amino-N-{2-[({[2-bromo-6-(trifluorometil)fenil]carbonil}ami-no)metil]-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil}-l-(4-fluorofenil)-1H pirazole-4-carboxamida (Enantiómero 1); 5-amino-N-{2-[({[2-bromo-6-(trifluorometil)fenil]carbonil}ami-no)metil]-3, 3,3-trifluoro-2-hidroxipropil}-l-(4-fluorofenil)-1H pirazole-4-carboxamida (Enantiómero 2); 5-amino-N- (2 — {[({2-[(difluorometil)oxi]-6-fluorofenil}carbonil)amino]metil}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4-fluorofenil)-lH-pirazole-4-carboxamida; 5-amino-N-(2 — {[({2-[(difluorometil)oxi]-6-fluorofenil}carbonil)amino]metil} -3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4-fluorofenil)-lN-pirazole-4-carboxamida (Enantiómero 1); 5-amino-N-(2 — {[({2-[(difluorometil)oxi]-6- fluorofenil}carbonil)amino]metil}-3,3,3-trifluoro-2- hidroxipropil)-1-(4-fluorofenil)-lN-pirazole-4-carboxamida (Enantiómero 2); ou um seu sal ou solvato.

Noutra forma de realização, o composto de fórmula (I) é: 5-amino-N-[2-({[(2,β-diclorofenil)carbonil]amino}metil)-3,3,3-trif luoro-2-hidroxipropil] -1- (4-f luorof enil) -lfí-pirazole-4-carboxamida; 20 5-amino-N-[2-({[(2, 6-diclorofenil)carbonil]aminojmetil)-3,3,3-trif luoro-2-hidroxipropil] -1- (4-f luorofenil) -lfí-pirazole-4-carboxamida (Enantiómero 1); 5-amino-N- [2-({[(2,6-diclorofenil)carbonil]amino}metil)-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil]-1-(4-fluorofenil)-lH-pirazole-4-carboxamida (Enantiómero 2); 5-amino-N- (2 - { [ [ (2, 6-dif luorof enil) carbonil] (etil) amino] metil}- 3.3.3- trif luoro-2-hidroxipropil) -1- (4-f luorof enil) -lfí-pirazole- 4- carboxamida; 5- amino-N-(2-{[[(2, β-difluorofenil)carbonil] (etil)amino]metil}- 3.3.3- trif luoro-2-hidroxipropil) -1- (4-f luorof enil) -líí-pirazole- 4- carboxamida (Enantiómero 1); 5- amino-N-(2-{[[(2, 6-difluorofenil)carbonil] (etil)amino]metil}- 3.3.3- trif luoro-2-hidroxipropil) -1- (4-f luorof enil) -lfí-pirazole- 4- carboxamida (Enantiómero 2); 5- amino-N-[2-({[(2-cloro-6-fluorofenil)carbonil]aminojmetil)- 3.3.3- trif luoro-2-hidroxipropil ] -1- (4-f luorof enil) -lfí-pirazole- 4- carboxamida; 5- amino-f7- [2- ({ [ (2-cloro-6-fluorofenil) carbonil] aminojmetil) - 3.3.3- trifluoro-2-hidroxipropil]-1-(4-fluorofenil)-Ιϋ-pirazole- 4- carboxamida (Enantiómero 1); 5- amino-N-[2-({[(2-cloro-6-fluorofenil)carbonil]aminojmetil)- 3.3.3- trif luoro-2-hidroxipropil ] -1- (4-f luorof enil) -1/í-pirazole- 4- carboxamida (Enantiómero 2); 5- amino-N-[2-({[(2-bromo-6-fluorofenil)carbonil]aminojmetil)- 3.3.3- trif luoro-2-hidroxipropil ] -1- (4-f luorof enil) -líí-pirazole- 4- carboxamida; 5- amino-N-[2-({[(2-bromo-6-fluorofenil)carbonil]aminojmetil)- 3.3.3- trifluoro-2-hidroxipropil]-1-(4-fluorofenil)-lfí-pirazole-4-carboxamida (Enantiómero 1); 21 5-amino-N-[2-({[(2-bromo-6-fluorofenil)carbonil]amino}metil)-3,3,3-trif luoro-2-hidroxipropil] -1- (4-f luorof enil) -lfí-pirazole- 4- carboxamida (Enantiómero 2); 5- amino-W-(2 — {[({2-cloro-6-[(difluorometil)oxi]fenil}carbonil)a-mino]metil}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4-fluorofenil)-lH-pirazole-4-carboxamida; 5-amino-W-(2 — {[({2-cloro-6-[(difluorometil)oxi]fenil}carbonil)a-mino]metil}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4-fluorofenil)-líf-pirazole-4-carboxamida (Enantiómero 1); 5-amino-N-(2-{[({2-cloro-6-[(difluorometil)oxi]fenil}carbonil)a-mino]metil}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4-fluorofenil)-líí-pirazole-4-carboxamida (Enantiómero 2); 5-amino-W-{2-[({[2,6-bis(difluorometil)fenil]carbonil}amino)metil] -3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil}-1-(4-fluorofenil)-1H-pirazole-4-carboxamida; 5-amino-W-{2-[({[2, 6-bis(difluorometil)fenil]carbonil}ami-no)metil]-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil}-l-(4-fluorofenil)-1H-pirazole-4-carboxamida (Enantiómero 1); 5-amino-N-{2-[({[2,6-bis(difluorometil)fenil]carboniljami-no)metil]-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil}-1-(4-fluorofenil)-1H-pirazole-4-carboxamida (Enantiómero 2); 5-amino-N-(2—{[({2—[(difluorometil)oxi]-6-fluorofenil}carbonil)amino]metil}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4-fluorofenil)-lH-pirazole-4-carboxamida; 5-amino-N-(2—{[({2—[(difluorometil)oxi]-6-fluorofenil}carbonil)amino]metil]-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4-fluorofenil)-lfí-pirazole-4-carboxamida (Enantiómero 1); 5-amino-W- (2-{[({2-[(difluorometil)oxi]-6-fluorofenil}carbonil)amino]metil}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4-fluorofenil)-lfí-pirazole-4-carboxamida (Enantiómero 2); 22 ou um seu sal ou solvato.

Noutra forma de realização, o composto de fórmula (I) é: 5-amino-N-[2-({[(2, 6-diclorofenil)carbonil]aminojmetil)-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil] -1- (4-f luorof enil) -lfí-pirazole-4-carboxamida; 5-amino-N-[2-({[(2, 6-diclorofenil)carbonil]aminojmetil)-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil]-1-(4-fluorofenil)-l#-pirazole-4-carboxamida (Enantiómero 1); 5-amino-N-[2-({[(2, 6-diclorofenil)carbonil]aminojmetil)-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil]-1-(4-fluorofenil)-lH-pirazole-4-carboxamida (Enantiómero 2); ou um seu sal ou solvato.

Numa outra forma de realização o composto de fórmula (I) 5-amino-N-[2-({[(2,6-diclorofenil)carbonil]aminojmetil)-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil]-1-(4-fluorofenil)-lH-pirazole-4-carboxamida (Enantiómero 2); ou um seu sal ou solvato.

Noutra forma de realização, o composto de fórmula (I) é: 5-amino-N-(2 — {[[(2, 6-difluorofenil)carbonil] (etil)aminojmetil} 3.3.3- trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4-fluorofenil)-lH-pirazole 4- carboxamida; 5- amino-N-(2 — {[[(2, 6-difluorofenil)carbonil] (etil)amino]metilj 3.3.3- trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4-fluorofenil)-lH-pirazole 4- carboxamida (Enantiómero 1); 5- amino-N- (2 — {[[(2,6-difluorofenil)carbonil] (etil)amino]metilj 3.3.3- trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4-fluorofenil)-lH-pirazole 4-carboxamida (Enantiómero 2); ou um seu sal ou solvato. 23

Noutra forma de realização, o composto de fórmula (I) é: 5-amino-lV- (2 — {[[(2,6-difluorofenil)carbonil] (etil)amino]me-til}-3, 3,3-trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4-fluorofenil)—li?— pirazole-4-carboxamida (Enantiómero 2); ou um seu sal ou solvato.

Noutra forma de realização, o composto de fórmula (I) é: 5-amino-N- [2-({[(2-cloro-6-fluorofenil)carbonil]amino}metil)- 3.3.3- trifluoro-2-hidroxipropil]-1-(4-fluorofenil)-liJ-pirazole- 4- carboxamida; 5- amino-N-[2-({[(2-cloro-6-fluorofenil)carbonil]amino}metil)- 3.3.3- trifluoro-2-hidroxipropil]-1-(4-fluorofenil)-lH-pirazole- 4- carboxamida (Enantiómero 1); 5- amino-N-[2-({[(2-cloro-6-fluorofenil)carbonil]amino}metil)- 3.3.3- trifluoro-2-hidroxipropil]-1-(4-fluorofenil)-lH-pirazole- 4- carboxamida (Enantiómero 2); ou um seu sal ou solvato.

Noutra forma de realização, o composto de fórmula (I) é: 5- amino-N-[2-({[(2-bromo-6-fluorofenil)carbonil]aminojmetil)- 3.3.3- trifluoro-2-hidroxipropil]-1-(4-fluorofenil)-1/í-pirazole- 4- carboxamida; 5- amino-N-[2-({[(2-bromo-6-fluorofenil)carbonil]aminojmetil)- 3.3.3- trifluoro-2-hidroxipropil]-1-(4-fluorofenil)-lfí-pirazole- 4- carboxamida (Enantiómero 1); 5- amino-N-[2-({[(2-bromo-6-fluorofenil)carbonil]aminojmetil)- 3.3.3- trifluoro-2-hidroxipropil]-1-(4-fluorofenil)-lH-pirazole-4-carboxamida (Enantiómero 2); ou um seu sal ou solvato. 24

Noutra forma de realização, o composto de fórmula (I) é: 5-amino-N-(2-{[({2-cloro-6-[(difluorornetil)oxi]fenil}carbo-nil)amino]metil}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4-fluorofenil)-lH-pirazole-4-carboxamida; 5-amino-N- (2 — {[({2-cloro-6-[(difluorometil)oxi]fenil}carbo-nil)amino]metil}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4-fluorofenil) -lfí-pirazole-4-carboxamida (Enantiómero 1); 5-amino-N-(2 — {[({2-cloro-6-[(difluorometil)oxi]fenil}carbo-nil)amino]metil}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4-fluorofenil) -líí-pirazole-4-carboxamida (Enantiómero 2); ou um seu sal ou solvato.

Noutra forma de realização, o composto de fórmula (I) é: 5-amino-N-{2-[({[2,6-bis(difluorometil)fenil]carboniljami- no)metil]-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil}-l-(4-fluorofenil)-1H- pirazole-4-carboxamida; 5-amino-N-{2-[({[2,6-bis(difluorometil)fenil]carboniljami-no)metil]-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil}-l-(4—fluorofenil)-1H-pirazole-4-carboxamida (Enantiómero 1); 5-amino-N-{2-[({[2, 6-bis(difluorometil)fenil]carbonil}ami-no)metil]-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil}-l-(4—fluorofenil)-1H-pirazole-4-carboxamida (Enantiómero 2); ou um seu sal ou solvato.

Numa outra forma de realização, o composto de fórmula (I) é: 5-amino-N-(2 — {[({2-[(difluorometil)oxi]-6-fluorofenil}carbonil)amino]metil}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4-fluorofenil)-lH-pirazole-4-carboxamida; 25 5-amino-W-(2—{[({2—[(difluorometil)oxi]-6-fluorofenil}carbonil)amino]metil}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4-fluorofenil)-lil-pirazole-4-carboxamida (Enantiómero 1); õ-amino-N-(2—{[({2—[(difluorometil)oxi]-6-fluorofenil}carbonil)aminoJmetil}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4-fluorofenil)-lff-pirazole-4-carboxamida (Enantiómero 2); ou um seu sal ou solvato.

Uma forma de realização da invenção abrange compostos de fórmula (I) e os seus sais e solvatos. Outra forma de realização da invenção abrange compostos de fórmula (I) e os seus sais. Outra forma de realização da invenção abrange compostos de fórmula (I) e seus solvatos. Uma outra forma de realização da invenção abrange compostos de fórmula (I) como uma base livre.

Os sais e solvatos dos compostos de fórmula (I) que são adequados para utilização em medicina são aqueles em que o contra-ião ou solvente associado é farmaceuticamente aceitável. No entanto, os sais e solvatos possuindo contra-iões ou solventes associados não farmaceuticamente aceitáveis estão no âmbito da presente invenção, por exemplo, para serem utilizados como intermediários na preparação de outros compostos de fórmula (I) e os seus sais e solvatos farmaceuticamente aceitáveis.

Os sais adequados de acordo com a invenção incluem aqueles preparados com ácidos ou bases orgânicos e inorgânicos. Os sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis podem incluir aqueles preparados dos ácidos clorídrico, bromídrico, sulfúrico, fosfórico, trifluoroacético, sulfâmico, sulfanílico, metanossulfónico, etanossulfónico, fórmico e arilsulfónico (por 26 exemplo, p-toluenossulfónico, benzenossulfónico, naftalenossulfónico ou naftalenodissulfónico). Os sais de base farmaceuticamente aceitáveis podem incluir sais de metais alcalinos tais como os de sódio e potássio e sais de metais alcalino-terrosos, tal como os de cálcio.

Os exemplos de solvatos incluem os hidratos.

Os compostos da invenção podem ter a capacidade de cristalizar em mais do que uma forma. Isto é uma caracteristica conhecida como polimorfismo, e entende-se que tais formas polimórficas ("polimorfos") estão no âmbito da presente invenção. 0 polimorfismo pode geralmente ocorrer como uma resposta a alterações da temperatura ou pressão ou ambos e também pode resultar de variações no processo de cristalização. Os polimorfos podem ser distinguidos por várias caracteristicas físicas conhecidas na técnica tais como padrões de difracção de raios X, solubilidade e ponto de fusão.

Espera-se que os compostos da invenção tenham efeitos anti-inflamatórios e/ou anti-alérgicos e/ou auto-imunes benéficos, em particular por administração oral, demonstrados, por exemplo, pela sua capacidade para se ligar ao receptor de glucocorticóides e para desencadear uma resposta via esse receptor. Assim, os compostos da invenção podem ser úteis no tratamento de um distúrbio inflamatório e/ou alérgico e/ou estado auto-imune.

Os exemplos de estados patológicos associados à actividade do receptor de glucocorticóides incluem doenças cutâneas tais como eczema, psoríase, dermatite alérgica, neurodermite, prurido, dermatite esfoliativa, pênfigo e reacções de 27 hipersensibilidade; estados inflamatórios do nariz, garganta ou pulmões tais como asma (incluindo reacções asmáticas induzidas por alergénios), rinite (incluindo sazonal (febre dos fenos), alérgica e vasomotora), pólipos nasais, doença pulmonar obstrutiva crónica (COPD), doença pulmonar intersticial, e fibrose; condições inflamatórias do intestino tais como colite ulcerosa e doença de Crohn; doenças auto-imunes tais como artrite reumatóide, arterite temporal, poliarterite nodosa, polimiosite, espondilite anquilosante, sarcoidose, hepatite auto-imune; cancros tais como leucemia aguda e linfática, mieloma, linfoma; sindrome nefrítica; choque séptico; insuficiência supra-renal; inflamação oftálmica e conjuntivite alérgica; obesidade; diabetes; dor inflamatória crónica incluindo dor musculoesquelética; dor lombar e do pescoço; entorses e luxações; dor neuropática; dor mantida simpaticamente; miosite; dor associada a cancro e fibromialgia; dor associada a enxaqueca; dor associada a gripe ou outras infecções virais, tal como a constipação; febre reumática; dor associada a distúrbios funcionais do intestino tais como dispepsia não ulcerosa, dor no peito não cardíaca e sindrome do intestino irritável; dor associada a isquemia do miocárdio; dor pós-operatória; dor de cabeça; dor de dentes; e dismenorreia; doença psiquiátrica por exemplo esquizofrenia, depressão (este termo é aqui utilizado para incluir depressão bipolar, depressão unipolar, episódios depressivos major isolados ou recorrentes com ou sem caracteristicas psicóticas, características catatónicas, características melancólicas, características atípicas ou de aparecimento pós-parto, distúrbio afectivo sazonal, distúrbios distímicos com aparecimento precoce ou tardio e com ou sem características atípicas, depressão neurótica e fobia social, depressão associada a demência por exemplo do tipo Alzheimer, distúrbio esquizoafectivo ou do tipo 28 deprimido e distúrbios depressivos resultantes de condições médicas gerais incluindo, mas não se limitando a, enfarte do miocárdio, diabetes, aborto espontâneo ou interrupção voluntária da gravidez, etc), distúrbios da ansiedade (incluindo distúrbio da ansiedade generalizada e distúrbio da ansiedade social), distúrbio de pânico, agorafobia, fobia social, distúrbio obsessivo-compulsivo e distúrbio pós-stress traumático, distúrbios da memória, incluindo demência, distúrbios mnésicos e perda de memória associada à idade, distúrbios do comportamento alimentar, incluindo anorexia nervosa e bulimia nervosa, distúrbios do sono (incluindo perturbações do ritmo circadiano, dissónia, insónia, apneia do sono e narcolepsia), abstinência do abuso de drogas tais como de cocaína, etanol, nicotina, benzodiazepinas, álcool, cafeína, fenciclidina (compostos tipo fenciclidina), opiáceos (e. g. canabis, heroína, morfina), anfetamina ou drogas relacionadas com a anfetamina (e. g. dextroanfetamina, metilanfetamina) ou uma associação destas. Os compostos com actividade para o receptor de glucocorticóides também podem ter utilidade na indução de supressão do sistema imunitário durante o transplante de órgãos, na rejeição aguda de transplantes, angioedema do aparelho respiratório superior e choque anafiláctico.

Exemplos de estados patológicos em que se espera que os compostos da presente invenção tenham utilidade incluem artrite reumatóide, asma, COPD, alergia e rinite.

Exemplos adicionais de estados patológicos incluem esclerose múltipla, vasculite cerebral, neurossarcoidose, síndrome de Sjogren, lúpus eritematoso sistémico, polirradiculopatia inflamatória aguda ou crónica, doença de Alzheimer, doenças neoplásicas do sistema nervoso incluindo 29 meningioma, linfoma e meningite maligna, e traumatismo e doenças infecciosas do sistema nervoso tal como tuberculose. Outros estados incluem lesão da medula espinal e lesão cerebral, por exemplo após enfarte (acidente vascular cerebral).

Um exemplo de um estado patológico em que se espera que os compostos da presente invenção tenham utilidade inclui neurossarcoidose.

Os especialistas na técnica compreenderão que a referência aqui a tratamento se alarga à profilaxia bem como ao tratamento de estados estabelecidos.

Como mencionado acima, espera-se que os compostos de fórmula (I) e os seus sais e solvatos farmaceuticamente aceitáveis sejam úteis em medicina humana e veterinária, em particular como agentes anti-inflamatórios e/ou anti-alérgicos. Espera-se também que os compostos de fórmula (I) e os seus sais e solvatos farmaceuticamente aceitáveis sejam úteis no tratamento de doentes com um estado inflamatório e/ou auto-imune.

Assim, é proporcionado como um aspecto da invenção um composto de fórmula (I) ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável para ser utilizado em terapia.

Noutro aspecto da invenção é proporcionado um composto de fórmula (I) ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável para ser utilizado no tratamento de doentes com um estados inflamatório e/ou alérgico. 30

Noutro aspecto da invenção é proporcionado um composto de fórmula (I) ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável para ser utilizado no tratamento de doentes com artrite reumatóide, asma, COPD, alergia e/ou rinite.

Noutro aspecto da invenção é proporcionado um composto de fórmula (I) ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável para ser utilizado no tratamento de doentes com artrite reumatóide.

Noutro aspecto da invenção é proporcionado um composto de fórmula (I) ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável para ser utilizado no tratamento de doentes com doença cutânea.

Noutro aspecto da invenção é proporcionado um composto de fórmula (I) ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável para ser utilizado no tratamento de doentes com eczema, psoríase, dermatite alérgica, neurodermite, prurido e/ou reacções de hipersensibilidade.

Noutro aspecto da invenção é proporcionado um composto de fórmula (I) ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável para ser utilizado no tratamento de doentes com um estado inflamatório e/ou auto-imune.

Noutro aspecto da invenção é proporcionado um composto de fórmula (I) ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável para ser utilizado no tratamento de doentes com inflamação no sistema nervoso central.

Noutro aspecto da invenção é proporcionado um composto de fórmula (I) ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável 31 para ser utilizado no tratamento de doentes com esclerose múltipla, vasculite cerebral, neurossarcoidose, sindrome de Sjogren, lúpus eritematoso sistémico, polirradiculopatia inflamatória aguda ou crónica, doença de Alzheimer, doenças neoplásicas do sistema nervoso incluindo meningioma, linfoma e meningite maligna, traumatismo ou doenças infecciosas do sistema nervoso tal como tuberculose, lesão da medula espinal ou lesão cerebral tal como após enfarte (acidente vascular cerebral).

Num outro aspecto da invenção é proporcionado um composto de fórmula (I) ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável para ser utilizado no tratamento de doentes com neurossarcoidose.

De acordo com outro aspecto da invenção, é proporcionada a utilização de um composto de fórmula (I) ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável para o fabrico de um medicamento para o tratamento de doentes com um estado inflamatório e/ou alérgico.

De acordo com outro aspecto da invenção, é proporcionada a utilização de um composto de fórmula (I) ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável para o fabrico de um medicamento para o tratamento de doentes com artrite reumatóide, asma, COPD, alergia e/ou rinite.

De acordo com outro aspecto da invenção, é proporcionada a utilização de um composto de fórmula (I) ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável para o fabrico de um medicamento para o tratamento de doentes com artrite reumatóide. 32

De acordo com outro aspecto da invenção, é proporcionada a utilização de um composto de fórmula (I) ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável para o fabrico de um medicamento para o tratamento de doentes com doença cutânea.

De acordo com outro aspecto da invenção, é proporcionada a utilização de um composto de fórmula (I) ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável para o fabrico de um medicamento para o tratamento de doentes com eczema, psoriase, dermatite alérgica, neurodermite, prurido e/ou reacções de hipersensibilidade.

De acordo com outro aspecto da invenção, é proporcionada a utilização de um composto de fórmula (I) ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável para o fabrico de um medicamento para o tratamento de doentes com um estado inflamatório e/ou auto-imune.

De acordo com outro aspecto da invenção, é proporcionada a utilização de um composto de fórmula (I) ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável para o fabrico de um medicamento para o tratamento de doentes com inflamação no sistema nervoso central.

De acordo com outro aspecto da invenção, é proporcionada a utilização de um composto de fórmula (I) ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável para o fabrico de um medicamento para o tratamento de doentes com esclerose múltipla, vasculite cerebral, neurossarcoidose, sindrome de Sjogren, lúpus eritematoso sistémico, polirradiculopatia inflamatória aguda ou crónica, doença de Alzheimer, doenças neoplásicas do sistema nervoso incluindo meningioma, linfoma e meningite maligna, 33 traumatismo ou doenças infecciosas do sistema nervoso, tais como tuberculose, lesão da medula espinal ou lesão cerebral tal como após enfarte (acidente vascular cerebral).

De acordo com um outro aspecto da invenção, é proporcionada a utilização de um composto de fórmula (I) ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável para o fabrico de um medicamento para o tratamento de doentes com neurossarcoidose.

Noutro aspecto da presente invenção, é proporcionado um composto de fórmula (I) ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável para ser utilizado no tratamento de um indivíduo humano ou animal com um estado inflamatório e/ou alérgico.

Num outro aspecto, é proporcionado um composto de fórmula (I) ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável para ser utilizado no tratamento de um indivíduo humano ou animal com artrite reumatóide, asma, COPD, alergia e/ou rinite.

Noutro aspecto, é proporcionado um composto de fórmula (I) ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável para ser utilizado no tratamento de um indivíduo humano ou animal com artrite reumatóide.

Noutro aspecto, é proporcionado um composto de fórmula (I) ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável para ser utilizado no tratamento de um indivíduo humano ou animal com doença cutânea. 34

Noutro aspecto, é proporcionado um composto de fórmula (I) ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável para ser utilizado no tratamento de um indivíduo humano ou animal com eczema, psoríase, dermatite alérgica, neurodermite, prurido e/ou reacções de hipersensibilidade.

Noutro aspecto, é proporcionado um composto de fórmula (I) ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável para ser utilizado no tratamento de um indivíduo humano ou animal com um estado inflamatório e/ou auto-imune.

Noutro aspecto, é proporcionado um composto de fórmula (I) ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável para ser utilizado no tratamento de um indivíduo humano ou animal com uma condição envolvendo inflamação no sistema nervoso central.

Noutro aspecto, é proporcionado um composto de fórmula (I) ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável para ser utilizado no tratamento de um indivíduo humano ou animal com esclerose múltipla, vasculite cerebral, neurossarcoidose, síndrome de Sjogren, lúpus eritematoso sistémico, polirradiculopatia inflamatória aguda ou crónica, doença de Alzheimer, doenças neoplásicas do sistema nervoso incluindo meningioma, linfoma e meningite maligna, traumatismo ou doenças infecciosas do sistema nervoso, tais como tuberculose, lesão da medula espinal ou lesão cerebral tal como após enfarte (acidente vascular cerebral).

Num outro aspecto, é proporcionado um composto de fórmula (I) ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável para ser utilizado no tratamento de um indivíduo humano ou animal com neurossarcoidose. 35

Os compostos de fórmula (I) ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável podem ser formulados para administração de qualquer modo conveniente e, por conseguinte, a invenção também inclui no seu âmbito composições farmacêuticas compreendendo um composto de fórmula (I) ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável em conjunto, se desejável, misturado com um ou mais diluentes ou veículos farmaceuticamente aceitáveis.

Além disso, é proporcionado um processo de preparação de tais composições farmacêuticas que compreende misturar os ingredientes .

Os compostos de fórmula (I) ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável podem ser, por exemplo, formulados para administração oral, nasal, inalada, bucal, sublingual, parentérica, rectal tópica ou outra administração tópica.

Para administração sistémica, os compostos de acordo com a invenção podem ser, por exemplo, formulados de modo convencional para administração oral, parentérica ou rectal. As formulações para administração oral incluem soluções, xaropes, elixires, pós, granulados, comprimidos e cápsulas que contêm tipicamente excipientes convencionais tais como aglutinantes, enchimentos, lubrificantes, desintegrantes, humectantes, agentes de suspensão, emulsionantes, conservantes, sais tampões, aromatizantes, corantes e/ou edulcorantes, consoante apropriado. Podem ser preferidas formas unitárias de dosagem, como se descreve a seguir. 36

Por exemplo, para administração oral na forma de um comprimido ou cápsula, o componente farmacológico activo pode ser combinado com um veiculo inerte farmaceuticamente aceitável, não tóxico, oral tais como etanol, glicerol, água e semelhantes. Os comprimidos também podem conter excipientes tais como celulose microcristalina, lactose, citrato de sódio, carbonato de cálcio, fosfato de cálcio dibásico e glicina, desintegrantes tais como amido (de um modo preferido amido de milho, batata ou tapioca), amidoglicolato de sódio, croscarmelose sódica e determinados silicatos complexos e aglutinantes de granulação tais como polivinilpirrolidona, hidroxipropilmetilcelulose (HPMC), hidroxipropilcelulose (HPC), sacarose, gelatina e goma-arábica. Adicionalmente podem ser incluídos lubrificantes tais como estearato de magnésio, ácido esteárico, be-henato de glicerilo e talco.

Composições sólidas de um tipo semelhante também podem ser utilizadas como enchimentos em cápsulas de gelatina. Exemplos de excipientes relacionados incluem lactose, amido, uma celulose, lactose ou polietileno glicóis de peso molecular elevado. Para suspensões e/ou elixires aquosos, o agente pode ser combinado com vários edulcorantes ou aromatizantes, matéria colorante ou corantes, com emulsionantes e/ou agentes de suspensão e com diluentes tais como água, etanol, propilenoglicol e glicerina e as suas combinações.

Os pós são preparados pulverizando o composto até um tamanho fino adequado e misturando com um veiculo farmacêutico analogamente triturado tal como um hidrato de carbono comestível, como, por exemplo, amido ou manitol. Também podem estar presentes aromatizantes, conservantes, dispersantes e corantes. 37

As cápsulas podem ser feitas preparando uma mistura em pó como se descreveu acima, e enchendo invólucros de gelatina moldados. Podem ser adicionados deslizantes e lubrificantes tais como sílica coloidal, talco, estearato de magnésio, estearato de cálcio ou polietilenoglicol sólido à mistura em pó antes da operação de enchimento. Também pode ser adicionado um desintegrante ou solubilizante, tais como agar-agar, carbonato de cálcio ou carbonato de sódio para melhorar a disponibilidade do medicamento quando a cápsula é ingerida.

Além do mais, quando desejado ou necessário, também podem ser incorporados aglutinantes, lubrificantes, desintegrantes e corantes adequados na mistura. Os aglutinantes adequados incluem amido, gelatina, açúcares naturais, tais como glucose ou beta-lactose, edulcorantes de milho, gomas naturais e sintéticas tais como goma-arábica, tragacanta ou alginato de sódio, carboximetilcelulose, polietilenoglicol, ceras e semelhantes. Os lubrificantes utilizados nestas formas de dosagem incluem oleato de sódio, estearato de sódio, estearato de magnésio, benzoato de sódio, acetato de sódio, cloreto de sódio e semelhantes. Os desintegrantes incluem, sem limitação, amido, metilcelulose, agar, bentonite, goma de xantana e semelhantes.

Os comprimidos são formulados, por exemplo, preparando uma mistura em pó, granulando ou amassando, adicionando um lubrificante e desintegrante e prensando em comprimidos. Uma mistura em pó é preparada misturando o composto, adequadamente triturado, com um diluente ou base como descrito acima, e opcionalmente, com um aglutinante tal como carboximetilcelulose, um alginato, gelatina ou polivinilpirrolidona, um retardante de dissolução tal como parafina, um acelerador da reabsorção tal como um sal quaternário e/ou um agente de absorção, tais como 38 bentonite, caulino ou difosfato de cálcio. A mistura em pó pode ser granulada, humidificando com um aglutinante, tais como xarope, pasta de amido, mucilagem de goma-arábica ou soluções de materiais celulósicos ou poliméricos e fazendo passar através de uma grelha. Como uma alternativa à granulação, a mistura em pó pode ser feita passar através de uma máquina de comprimidos e o resultado são aglomerados imperfeitos que se quebram em grânulos. Os grânulos podem ser lubrificados para prevenir a aderência aos moldes de formação de comprimidos por meio de adição de ácido esteárico, um sal de estearato, talco ou óleo mineral. A mistura lubrificada é então prensada em comprimidos. Os compostos da presente invenção também podem ser combinados com um veiculo inerte fluido e prensado directamente em comprimidos sem se passar através dos passos de granulação ou formação de pasta. Pode ser proporcionado um revestimento protector transparente ou opaco consistindo de um revestimento de selagem de goma-laca, um revestimento de açúcar ou material polimérico e um revestimento de polimento de cera. Podem ser adicionados corantes a estes revestimentos para distinguir dosagens unitárias diferentes.

Os fluidos orais tais como soluções, xaropes e elixires podem ser preparados na forma unitária de dosagem de modo a que uma dada quantidade possua uma quantidade predeterminada de composto. Os xaropes podem ser preparados dissolvendo o composto numa solução aquosa adequadamente aromatizada, enquanto os elixires são preparados através da utilização de um veiculo alcoólico não tóxico. As suspensões podem ser formuladas dispersando o composto num veiculo não tóxico. Também podem ser adicionados solubilizantes e emulsionantes tais como álcoois isostearilicos etoxilados e éteres de polioxietileno sorbitol, conservantes, aromatizantes tais como óleo de hortelã-pimenta ou 39 sacarina, e semelhantes. Quando apropriado, as formulações unitárias de dosagem para administração oral podem ser microencapsuladas. A formulação também pode ser preparada para prolongar ou suster a libertação como, por exemplo, por revestimento ou incorporando material particulado em polímeros, cera ou semelhantes.

Os compostos de fórmula (I) ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável também podem ser administrados na forma de sistemas de administração de emulsão de lipossomas, tais como vesiculas unilamelares pequenas, vesículas unilamelares grandes e vesículas multilamelares. Os lipossomas podem ser preparados de uma diversidade de fosfolípidos, tais como colesterol, estearilamina ou fosfatidilcolinas.

Numa forma de realização o composto de fórmula (I) ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável está na forma de um comprimido ou cápsula para administração oral para o tratamento de artrite reumatóide. Noutra forma de realização o composto de fórmula (I) ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável está na forma de um comprimido ou cápsula para administração oral para o tratamento de neurossarcoidose.

Numa forma de realização o composto de fórmula (I) ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável está na forma de uma solução, xarope ou elixir para administração oral para o tratamento de artrite reumatóide. Noutra forma de realização o composto de fórmula (I) ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável está na forma de uma solução, xarope ou elixir para administração oral para o tratamento de neurossarcoidose. 40

Administração tópica, como aqui utilizada, inclui administração por insuflação e inalação. Exemplos de vários tipos de preparação para administração tópica incluem pomadas, loções, cremes, géis, espumas, preparações para administração por adesivos transdérmicos, pós, formulações para pulverização, aerossóis, cápsulas ou cartuchos para serem utilizados num inalador ou insuflador ou gotas (e. g. colírios ou nasais), soluções/suspensões para nebulização, supositórios, pessários, enemas de retenção e comprimidos ou pastilhas para mastigar ou chupar (e. g. para o tratamento de úlceras aftosas) ou preparações de lipossomas ou microencapsulação.

As formulações para administração por via tópica no nariz, por exemplo, para o tratamento de rinite, incluem formulações pressurizadas de aerossol e formulações aquosas administradas no nariz por bomba pressurizada. Têm um interesse particular as formulações que não estão pressurizadas e que estão adaptadas para serem administradas por via tópica na cavidade nasal. As formulações adequadas contêm água como o diluente ou veículo para este efeito. As formulações aquosas para administração no pulmão ou nariz podem ser proporcionadas com excipientes convencionais tais como tampões, agentes modificadores da tonicidade e semelhantes. As formulações aquosas também podem ser administradas ao nariz por nebulização.

Numa forma de realização, os compostos de fórmula (I) ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável podem ser formulados para administração por via tópica ao nariz como uma formulação fluida para administração a partir de um distribuidor de fluidos, por exemplo um distribuidor de fluidos possuindo um bico distribuidor ou orifício distribuidor através do qual é administrada uma dose medida da formulação fluida por aplicação 41 de uma força aplicada pelo utilizador a um mecanismo de bomba do distribuidor de fluidos. Estes distribuidores de fluidos são geralmente proporcionados com um reservatório de doses medidas múltiplas da formulação fluida, sendo as doses administradas por actuações sequenciais da bomba. 0 bico ou orifício distribuidor pode ser configurado para ser inserido nas narinas do utilizador para administração por pulverização da formulação fluida na cavidade nasal. Um distribuidor de fluidos do tipo anteriormente mencionado é descrito e ilustrado no documento WO05/044354, cujo seu conteúdo total é aqui incorporado por referência. 0 distribuidor tem um alojamento que alberga um dispositivo de descarga de fluido possuindo uma bomba de compressão montada num recipiente para conter uma formulação fluida. 0 alojamento tem pelo menos uma alavanca lateral accionável com um dedo que se pode mover para o interior em relação ao alojamento para levantar o recipiente para cima no alojamento para fazer com que a bomba comprima e bombeie uma dose medida da formulação para o exterior da haste da bomba através de um bico nasal do alojamento. Numa forma de realização, o distribuidor de fluidos é do tipo geral ilustrado nas Figuras 30-40 do documento WO05/044354.

As pomadas, cremes e geles podem ser, por exemplo, formuladas com uma base aquosa ou oleosa com a adição de um espessante e/ou agente de gelificação e/ou solventes adequados. Assim, estas bases podem, por exemplo, incluir água e/ou um óleo tal como parafina líquida ou um óleo vegetal tal como óleo de amendoim ou óleo de rícino, ou um solvente tal como polietilenoglicol. Os espessantes e agentes de gelificação que podem ser utilizados de acordo com a natureza da base incluem parafina mole, estearato de alumínio, álcool cetostearílico, polietileno glicóis, lanolina, cera de abelhas, 42 carboxipolimetileno e derivados de celulose, e/ou monoestearato de glicerilo e/ou emulsionantes não iónicos.

As loções podem ser formuladas com uma base aquosa ou oleosa e também irão conter, em geral, um ou mais emulsionantes, estabilizantes, dispersantes, agentes de suspensão ou espessantes.

Os pós para aplicação externa, por exemplo na pele, podem ser preparados com a ajuda de qualquer base em pó adequada, por exemplo, talco, lactose ou amido. As gotas podem ser formuladas com uma base aquosa ou não aquosa compreendendo também um ou mais dispersantes, solubilizantes, agentes de suspensão ou conservantes.

Numa forma de realização os compostos de fórmula (I) ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável podem ser formulados como um pó seco para administração por inalação.

Opcionalmente, em particular para as composições inaláveis de pó seco, uma composição adequada para administração por inalação pode ser incorporada numa multiplicidade de recipientes de dosagem selados (e. g. contendo a composição de pó seco) montados longitudinalmente numa tira ou cinta dentro de um dispositivo de inalação adequado. 0 recipiente pode ser rompido ou aberto por desprendimento quando se pretende e a dose, e. g. da composição de pó seco, pode ser administrada por inalação via

TM um dispositivo tal como o dispositivo DISKUS , comercializado por GlaxoSmithKlme. 0 dispositivo de malaçao DISKUS e, por exemplo, descrito no documento GB2242134A, e num tal dispositivo é definido pelo menos um recipiente para a composição na forma de pó (sendo, o recipiente ou recipientes de um modo preferido 43 uma multiplicidade de recipientes de dosagem selados montados longitudinalmente numa tira ou cinta) entre dois membros separáveis ligados um ao outro; o dispositivo compreende: um meio para definir uma estação de abertura para o referido recipiente ou recipientes; um meio para separar os membros na estação de abertura para abrir o recipiente; e uma saida, que comunica com o recipiente aberto, através da qual um utilizador pode inalar a composição na forma de pó a partir do recipiente aberto.

As composições de pulverização para inalação podem ser, por exemplo, formuladas como soluções ou suspensões aquosas ou como aerossoles administrados de recipientes pressurizados, tal como um inalador dosificador, com a utilização de um propulsor liquefeito adequado. As composições de aerossol adequadas para inalação podem ser uma suspensão ou uma solução e contêm geralmente um composto de fórmula (I) ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável e um propulsor adequado, tais como um fluorocarboneto ou clorofluorocarboneto contendo hidrogénio ou misturas destes, em particular hidrofluoroalcanos, especialmente 1,1,1,2-tetrafluoroetano, 1,1,1,2,3,3,3-heptafluoro-n-propano ou uma mistura destes. A composição de aerossol pode conter opcionalmente excipientes de formulação adicionais bem conhecidos na técnica tais como surfactantes e. g. ácido oleico, lecitina ou um derivado de ácido oligoláctico, e. g. como descrito nos documentos W094/21229 e W098/34596 e co-solventes e. g. etanol.

Assim, é proporcionado como um outro aspecto da invenção uma formulação farmacêutica de aerossol compreendendo um composto de fórmula (I) ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável e um fluorocarboneto ou 44 clorofluorocarboneto contendo hidrogénio como propulsor, opcionalmente em associação com um surfactante e/ou um co-solvente.

De acordo com outro aspecto da invenção, é proporcionada uma formulação farmacêutica de aerossol em que o propulsor é seleccionado de 1,1,1,2-tetrafluoroetano, 1,1,1,2, 3,3,3-heptafluoro-n-propano e as suas misturas.

As formulações da invenção podem ser tamponadas pela adição de tampões adequados.

As formulações de aerossol são, de um modo preferido, arranjadas de modo a que cada dose medida ou "descarga" de aerossol contenha desde 20 pg a 10 mg, de um modo preferido desde 20 pg a 2000p g, de um modo mais preferido desde cerca de 20 pg a 500 pg de um composto de fórmula (I). A administração pode realizar-se uma vez por dia ou várias vezes por dia, por exemplo 2, 3, 4 ou 8 vezes, administrando, por exemplo 1, 2 ou 3 doses de cada vez. A dose diária total com um aerossol será na gama desde 100 pg a 10 mg, de um modo preferido desde 200 pg a 2000 pg. A dose diária total e a dose medida administrada por cápsulas e cartuchos num inalador ou insuflador será geralmente o dobro da administrada com formulações de aerossol.

No caso de formulações de aerossol em suspensão, o tamanho de partícula do fármaco particulado (e. g., micronizado) deve ser tal de modo a permitir a inalação de substancialmente todo o fármaco para os pulmões após administração da formulação de aerossol e, deste modo, será inferior a 100 mícrons, desejavelmente inferior a 20 mícrons, e em particular na gama 45 desde 1 a 10 mícrons, tal como desde 1 a 5 mícrons, de um modo mais preferido de 2 a 3 mícrons.

As formulações da invenção podem ser preparadas por dispersão ou dissolução do medicamento e um composto da invenção no propulsor seleccionado num recipiente apropriado, por exemplo, com a ajuda de ultrassons ou um misturador de alto cisalhamento. O processo é desejavelmente realizado em condições de humidade controlada. A estabilidade química e física e a aceitabilidade farmacêutica das formulações de aerossol de acordo com a invenção podem ser determinadas por técnicas bem conhecidas dos especialistas na técnica. Assim, por exemplo, a estabilidade química dos componentes pode ser determinada através de análise por HPLC, por exemplo, após conservação prolongada do produto. Os dados da estabilidade física podem ser obtidos com outras técnicas analíticas convencionais tais como, por exemplo, por análise de fugas, pelo ensaio de administração por válvula (peso médio por actuação), pelo ensaio de reprodutibilidade da dose (ingrediente activo por actuação) e análise de distribuição de pulverização. A estabilidade das formulações de aerossol em suspensão de acordo com a invenção pode ser medida por técnicas convencionais, por exemplo, medindo a distribuição do tamanho de floculação utilizando um instrumento de retrodispersão de luz ou medindo a distribuição dos tamanhos das partículas por impacto em cascata ou pelo processo analítico "impactor duplo". Como aqui utilizada, a referência ao ensaio de "impactor duplo" significa "Determinação da deposição da dose emitida em inalações pressurizadas utilizando o aparelho A" como definido 46 na British Pharmacopaeia 1988, páginas A204-207, Apêndice XVII C. Estas técnicas permitem calcular a "fracção respirável" das formulações de aerossol. Um método utilizado para calcular a "fracção respirável" é fazendo referência à "fracção de partículas finas" que é a quantidade de ingrediente activo recolhido na câmara inferior de colisão por actuação expressa como uma percentagem da quantidade total de ingrediente activo administrada por actuação utilizando o método do impactor duplo descrito acima.

Os cartuchos de MDI compreendem geralmente um recipiente capaz de suportar a pressão de vapor do propulsor utilizado tal como um frasco de plástico ou vidro revestido a plástico ou de um modo preferido uma caixa metálica, por exemplo, alumínio ou uma sua liga que pode estar opcionalmente anodizada, revestida com uma laca e/ou revestida com um plástico (por exemplo, aqui incorporado por referência no documento WO96/32099, em que parte ou todas as superfícies internas estão revestidas com um ou mais polímeros de fluorocarbonetos opcionalmente em associação com um ou mais polímeros diferentes de fluorocarbonetos), recipiente esse que está fechado com uma válvula doseadora. A tampa pode ser fixa na caixa por soldadura por ultrassons, fixação com parafusos ou encastramento. Os MDI aqui ensinados podem ser preparados por métodos da técnica (e. g. ver Byron, acima e documento WO96/32099). De um modo preferido, o cartucho está munido de um conjunto de tampa, em que a válvula doseadora do fármaco está situada na tampa, e a referida tampa em encastrada no seu sítio. 0 termo "inalador dosificador" ou MDI significa uma unidade compreendendo um receptáculo, uma tampa fixa que cobre o receptáculo e uma válvula doseadora da formulação situada na 47 tampa. 0 sistema de MDI inclui um dispositivo de canais adequados. Os dispositivos de canais adequados compreendem, por exemplo, um actuador de válvula e uma passagem cilíndrica ou tipo cone através da qual o medicamento pode ser administrado a partir do cartucho cheio através da válvula doseadora até ao nariz ou boca de um doente, tal como um bocal actuador.

Numa forma de realização da invenção, a superfície interna metálica da caixa é revestida com um fluoropolímero, de um modo muito preferido misturado com um que não seja um fluoropolímero. Noutra forma de realização da invenção, a superfície interna metálica do receptáculo é revestida com uma mistura polimérica de politetrafluoroetileno (PTFE) e poliéter-sulfona (PES). Numa outra forma de realização da invenção, a totalidade da superfície interna metálica do receptáculo é revestida com uma mistura polimérica de politetrafluoroetileno (PTFE) e poliéter-sulfona (PES) .

As válvulas doseadoras são concebidas para administrar uma quantidade medida da formulação por actuação e incorporam uma junta para impedir a fuga do propulsor através da válvula. A junta pode compreender qualquer material elastómero adequado, tais como, por exemplo, polietileno de baixa densidade, clorobutilo, bromobutilo, EPDM, borrachas brancas e pretas de butadieno-acrilonitrilo, borracha de butilo e neopreno. As válvulas adequadas estão comercialmente disponíveis de fabricantes bem conhecidos na indústria de aerossoles, por exemplo, de Valois, França (e. g. DF10, DF30, DF60), Bespak plc, UK (e. g. BK300, BK357) e 3M-Neotechnic Ltd, UK (e. g. , ΓΜ

Spraymiser ) . 48

Em várias formas de realização, os MDIs também podem ser utilizados em conjunto com outras estruturas tais como, sem limitação, recipientes com sobre-envolvimento para armazenar e conter os MDI, incluindo os descritos nas Patentes U.S. N° 6119853; 6179118; 6315112; 6352152; 6390291; e 6679374, bem como unidades contadoras de doses tais como, mas não se limitando às descritas na Patente U.S. N° 6360739 e 6431168. Métodos de fabrico a granel convencionais e maquinarias bem conhecidas dos especialistas na técnica de fabrico de aerossoles farmacêuticos podem ser utilizados para a preparação de lotes em grande escala para a produção comercial de cartuchos cheios. Assim, por exemplo, num método de fabrico a granel para preparar formulações de aerossol em suspensão, a válvula doseadora é encastrada num receptáculo de alumínio para formar um cartucho vazio. 0 medicamento particulado é adicionado a um recipiente de carga e o propulsor liquefeito em conjunto com os excipientes opcionais é introduzido à pressão através do recipiente de carga para o interior de um recipiente de fabrico. A suspensão de fármaco é misturada antes da recirculação para uma máquina de enchimento e uma alíquota da suspensão do fármaco é então transferida através da válvula doseadora para o cartucho. Num método ilustrativo de fabrico a granel para preparar formulações de aerossol em solução, a válvula doseadora é encastrada no receptáculo de alumínio para formar um cartucho vazio. O propulsor liquefeito em conjunto com os excipientes opcionais e o medicamento dissolvido é introduzido à pressão através do recipiente de carga para um recipiente de fabrico.

Num processo alternativo, uma alíquota da formulação liquefeita é adicionada a um cartucho aberto em condições que são suficientemente frias para garantir que a formulação não 49 vaporiza, e em seguida a válvula doseadora é encastrada no cartucho.

Tipicamente, em lotes preparados para utilização farmacêutica, é verificado o peso de cada cartucho cheio, codificado com um número de lote e colocado num tabuleiro para armazenamento antes do ensaio de libertação.

As cápsulas e cartuchos para utilização num inalador ou insuflador, por exemplo, de gelatina, podem ser formuladas contendo uma mistura em pó para inalação de um composto da invenção e uma base em pó adequada tal como lactose ou amido. Em geral, cada cápsula ou cartucho pode conter desde 20 pg a 10 mg do composto de fórmula (I) ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável. Alternativamente, o composto de fórmula (I) ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável pode ser apresentado sem excipientes tal como lactose. A proporção do composto activo de fórmula (I) ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável nas composições locais de acordo com a invenção depende do tipo exacto de formulação a ser preparada mas será geralmente na gama desde 0,001 a 10% em massa. Em geral, para a maioria dos tipos de preparações, a proporção utilizada estará na gama desde 0,005 a 1%, por exemplo de 0,01 a 0,5%. No entanto, em pós para inalação ou insuflação a proporção utilizada será normalmente na gama desde 0,1 a 5%.

As preparações tópicas podem ser administradas por uma ou mais aplicações por dia na área afectada; sobre áreas cutâneas podem ser vantajosamente utilizados pensos oclusivos. A administração contínua ou prolongada pode ser conseguida por um sistema de adesivo reservatório. 50

Tipicamente, um médico determinará a dosagem efectiva que será mais adequada para um indivíduo particular. 0 nível de dosagem específico e a frequência de dosagem para qualquer indivíduo particular será variada e dependerá de uma diversidade de factores incluindo a actividade do composto específico utilizado, da estabilidade metabólica e da duração da acção desse composto, da idade, peso corporal, estado físico geral, género, dieta, modo e tempo de administração, taxa de excreção, associação de fármacos, da gravidade do estado particular e do indivíduo submetido a terapia.

Para administração oral em humanos, o nível de dosagem diário do agente pode ser em doses únicas ou divididas.

Para administração sistémica, a dose diária como utilizada para tratamento humano adulto irá variara desde 0,5-100 mg/kg de peso corporal, de um modo preferido 0,5-60 mg/kg de peso corporal, a qual pode ser administrada, por exemplo, em 1 a 4 doses diárias, dependendo da via de administração e do estado do doente. Quando a composição compreende unidades de dosagem, cada unidade conterá, de um modo preferido, 5 mg a 1 g de ingrediente activo. A duração do tratamento será ditada pela velocidade da resposta em vez de por números arbitrários de dias.

Em geral, os compostos da invenção podem ser dados por administração interna em casos em que é indicada uma terapia sistémica com agonistas do receptor de glucocorticóides.

As formulações de libertação lenta ou com revestimento entérico podem ser vantajosas, em particular para o tratamento de distúrbios inflamatórios do intestino. 51

Nalgumas formas de realização, os compostos da invenção serão formulados para administração oral. Noutras formas de realização, os compostos da invenção serão formulados para administração inalada. Noutras formas de realização, os compostos da invenção serão formulados para administração intranasal.

Os compostos e formulações farmacêuticas de acordo com a invenção podem ser utilizados em associação com ou incluem um ou mais de outros agentes terapêuticos, por exemplo quando os compostos da invenção são administrados por via intranasal ou por inalação. Os outros agentes terapêuticos adequados podem ser seleccionados, por exemplo, de agentes anti-inflamatórios, agentes anticolinérgicos (particularmente, um antagonista do receptor Mi/M2/M3), agonistas do receptor adrenérgico β2, agentes anti-infecciosos tais como antibióticos ou antivirais, ou anti-histaminicos (por exemplo, um antagonista de Hl ou um antagonista de H1/H3). É assim descrito, num outro aspecto, a associação compreendendo um composto da invenção em conjunto com um ou mais de outros agentes terapeuticamente activos, por exemplo seleccionados de um agente anti-inflamatório, tais como um corticoesteróide ou um NSAID, um agente anticolinérgico, um agonista do receptor adrenérgico β2, um agente anti-infeccioso tal como um antibiótico ou um antiviral, ou um anti-histamínico. Uma forma de realização abrange associações compreendendo um composto da invenção em conjunto com um agonista do receptor adrenérgico β2, e/ou um anticolinérgico, e/ou um inibidor de PDE-4, e/ou um anti-histamínico.

Uma forma de realização abrange associações compreendendo um ou dois de outros agentes terapêuticos. 52

Será evidente para um especialista na técnica que, quando apropriado, o(s) outro(s) ingrediente(s) terapêutico(s) pode(m) ser utilizado (s) na forma de sais, por exemplo como sais de metais alcalinos ou aminas ou como sais de adição de ácido, ou profármacos, ou como ésteres, por exemplo ésteres de alquilo inferior, ou como solvatos, por exemplo hidratos, para optimizar a actividade e/ou estabilidade e/ou características físicas, tal como a solubilidade, do ingrediente terapêutico. Também será evidente que, quando apropriado, os ingredientes terapêuticos podem ser utilizados numa forma opticamente pura.

Numa forma de realização, é descrita uma associação compreendendo um composto da invenção em conjunto com um agonista do receptor adrenérgico β2.

Os exemplos de agonistas do receptor adrenérgico β2 incluem salmeterol (e. g. como o racemato ou um único enantiómero, tal como o enantiómero R), salbutamol (e. g. como o racemato ou um único enantiómero, tal como o enantiómero R), formoterol (e. g. como o racemato ou um único diastereómero, tal como o diastereómero R,R), salmefamol, fenoterol, carmoterol, etanterol, naminterol, clenbuterol, pirbuterol, flerobuterol, reproterol, bambuterol, indacaterol ou terbutalina e os seus sais, por exemplo o sal de xinafoato (l-hidroxi-2-naftalenocarboxilato) de salmeterol, o sal de sulfato ou base livre de salbutamol ou o sal de fumarato de formoterol. Numa forma de realização, os agonistas do receptor adrenérgico β2 são agonistas de acção prolongada do receptor adrenérgico β2, por exemplo compostos que proporcionam broncodilatação eficaz durante cerca de 12 horas ou mais. 53

Os exemplos de agonistas do receptor adrenérgico β2 podem incluir os descritos nos documentos WO02/066422A, WO02/070490, WO02/076933, WO03/024439, WO03/072539, W003/091204, W004/016578, WO04/022547, W004/037807, WO04/037773, WO04/037768, WO04/039762, WO04/039766, WOOl/42193 e WO03/042160.

Os exemplos de agonistas do receptor adrenérgico β2 incluem: 3—(4—{[6 —({(2R)-2-hidroxi-2-[4-hidroxi-3-(hidroximetil)fenil]etil}amino)hexil]oxi}butil) benzenossulfonamida; 3— (3— { [7— ({ (2.R)-2-hidroxi-2-[4-hidroxi-3-hidroximetil)fenil]etil}amino)heptil]oxi}propil) benzenossulfonamida; 4- {(IR)-2-[(6 — {2 —[(2,6- diclorobenzil)oxi]etoxi}hexil)amino]-1-hidroxietil]-2- (hidroximetil)fenol; 4- {(IR)-2-[(6—(4—[3— (ciclopentilsulfonil)fenil]butoxijhexil)amino] -1-hidroxietil}-2-(hidroximetil)fenol; N-[2-hidroxi-5-[(1R)-l-hidroxi-2-[[2-4-[[(2R)2-hidroxi-2-feniletil]amino]fenil]etil]amino]etil]fenil]foramida, N—2{2—[4—(3—feni1-4-metoxifenil)aminofenil]etil)-2-hidroxi-2-(8-hidroxi-2(1H)-quinolinon-5-il)etilamina, e 5- [(R)-2-(2—{4—[4-(2-amino-2-metil-propoxi)-fenilamino]-fenil}-etilamino)-1-hidroxi-etil]-8-hidroxi-lH-quinolin-2-ona e os seus sais. 0 agonista do receptor adrenérgico β2 pode estar na forma de um sal preparado com um ácido farmaceuticamente aceitável seleccionado de ácido sulfúrico, clorídrico, fumárico, hidroxinaftóico (por exemplo, 1- ou 3-hidroxi-2-naftóico), 54 cinâmico, cinâmico substituído, trifenilacético, sulfâmico, sulfanílico, naftalenoacrílico, benzóico, 4-metoxibenzóico, 2- ou 4-hidroxibenzóico, 4-clorobenzóico e 4-fenilbenzóico.

Os agentes anti-inflamatórios adequados incluem corticoesteróides. São exemplos de corticoesteróides que podem ser utilizados em associação com os compostos da invenção os corticoesteróides orais e inalados e os seus profármacos que têm actividade anti-inflamatória. Os exemplos incluem metilprednisolona, prednisolona, dexametasona, propionato de fluticasona, éster de S-fluorometilo do ácido 6a,9a-difluoro-ΐβ-hidroxi-16a-metil-17a-[(4-metil-l,3-tiazole-5-carbonil)oxi]-3-oxo-androsta-1,4-dieno-17p-carbotióico, éster de S-fluorometilo do ácido 6a,9a-difluoro-17a-[(2-furanilcarbonil)oxi]-11β-hidroxi-16a-metil-3-oxo-androsta-l,4-dieno-17p-carbotióico (furoato de fluticasona), éster S-(2-oxo-tetra-hidro-furan-3S-ílico) do ácido 6a,9a-difluoro-llp-hidroxi-16a-metil-3-oxo-17a-propioniloxi-androsta-1,4-dieno-17p-carbotióico, éster S-cianometílico do ácido 6a,9a-difluoro-llp-hidroxi-16a-metil-3-oxo-17a-(2,2,3,3-tetrametilciclopropilcarbonil)oxi-androsta-1, 4-άίθηο-17β-θ3^οίίόίοο e éster S-f luorometílico do ácido 6a,9a-difluoro-llp-hidroxi-16a-metil-17a-(1-metilciclopropilcarbonil)oxi-3-oxo-androsta-l,4-dieno-17p-carbotióico, ésteres de beclometasona (por exemplo, o éster de 17-propionato ou o éster de 17,21-dipropionato), budesonida, flunisolida, ésteres de mometasona (por exemplo, furoato de mometasona), triamcinolona acetonido, rofleponida, ciclesonida (16a,17-[[(R)-ciclo-hexilmetileno]bis(oxi)]-llp,21-di-hidroxi-pregna-1,4-dieno-3,20-diona), propionato de butixocort, RPR-106541, e ST-126. Numa forma de realização os corticoesteróides incluem propionato de fluticasona, éster S-fluorometílico do ácido 6a,9a-difluoro-lip-hidroxi-16a-metil- 55 17α-[(4-metil-l,3-tiazole-5-carbonil)oxi]-3-oxo-androsta-l, 4-dieno-17p-carbotióico, éster de S-fluorometilo do ácido 6a,9a-difluoro-17a-[(2-furanilcarbonil)oxi]-llp-hidroxi-16a-metil-3-oxo-androsta-l,4-dieno-17p-carbotióico, éster de S-cianometilo do ácido 6a,9a-difluoro-lip-hidroxi-16a-metil-3-oxo-17a-(2,2,3,3-tetrametilciclopropilcarbonil)oxi-androsta-1,4-dieno-17p-carbotióico e éster de S-fluorometilo do ácido 6a,9a-difluoro-11p-hidroxi-16a-metil-17a-(1-metilciclopropilcarbonil)oxi-3-oxo-androsta-l,4-dieno-17p-carbotióico. Numa forma de realização, o corticoesteróide é o éster de S-fluorometilo do ácido 6a,9a-difluoro-17a-[(2- furanilcarbonil)oxi]-lip-hidroxi-16a-metil-3-oxo-androsta-l, 4-dieno-17p-carbotióico.

Os exemplos de corticoesteróides podem incluir os descritos nos documentos W002/088167, W002/100879, WO02/12265, WO02/12266, WO05/005451, WO05/005452, WO06/072599 e WO06/072600.

Os compostos não esteróides possuindo agonismo glucocorticóide que podem possuir selectividade para a transrepressão em relação à transactivação e que podem ser úteis em terapia de associação incluem os incluídos nos seguintes pedidos de patentes e patentes publicados: W02006/000398 e W02006/015870. W01998/54159, WO2003/104195, W02003/101932, W02003/086294, W02006/000401, W02004/005229, WO2003/082787, W02002/02565, W02004/026248, W02004/009017, W02003/082280, W02001/16128, W02003/061651, W02003/082827, WO2004/018429, WO2003/059899, W02000/66590, W02003/08277,

Exemplos de agentes anti-inflamatórios incluem fármacos anti-inflamatórios não esteróides (NSAID). 56

Os exemplos de NSAID incluem cromoglicato de sódio, nedocromil sódico, inibidores da fosfodiesterase (PDE) (por exemplo, teofilina, inibidores de PDE4 ou inibidores mistos de PDE3/PDE4), antagonistas de leucotrienos, inibidores da síntese de leucotrienos (por exemplo, montelucaste), inibidores de iNOS, inibidores da triptase e elastase, antagonistas da integrina beta-2 e agonistas ou antagonistas do receptor de adenosina (por exemplo, agonistas de adenosina 2a), antagonistas de citocinas (por exemplo, antagonistas de quimiocina, tal como um antagonista de CCR3) ou inibidores da síntese de citocina, ou inibidores da 5-lipoxigenase. Um iNOS (inibidor da óxido nítrico-sintase induzível) é de um modo preferido para administração oral. Os inibidores iNOS adequados incluem os divulgados nos documentos WO93/13055, WO98/30537, WO02/50021, W095/34534 e W099/62875. Os inibidores de CCR3 adequados incluem os divulgados no documento WO02/26722. Os agonistas de adenosina 2a incluem os discutidos no documento W005/116037.

Numa forma de realização, é descrita a utilização dos compostos da invenção em associação com um inibidor da fosfodiesterase 4 (PDE4), por exemplo no caso de uma formulação adaptada para inalação. 0 inibidor específico de PDE4 pode ser qualquer composto que se sabe que inibe a enzima PDE4 ou que se identificou que actua como um inibidor de PDE4, e que são apenas inibidores da PDE4, e não compostos que inibam outros membros da família de PDE, tais como as PDE3 e PDE5, além da PDE4.

Os compostos incluem o ácido cis-4-ciano-4-(3- ciclopentiloxi-4-metoxifenil)ciclo-hexan-l-carboxílico, 2-carbometoxi-4-ciano-4-(3-ciclopropilmetoxi-4- difluorometoxifenil)ciclo-hexan-l-ona e cis-[4-ciano-4-(3- ciclopropilmetoxi-4-difluorometoxifenil)ciclo-hexan-l-ol]. Um 57 outro composto é o ácido cis-4-ciano-4-[3-(ciclopentiloxi)-4-metoxifenil]ciclo-hexano-l-carboxílico (também conhecido como cilomilast) e os seus sais, ésteres, profármacos ou formas físicas, que é descrito na Patente U.S. 5552438 publicada em 3 de Setembro de 1996; esta patente e os compostos divulgados são aqui incorporados por referência na sua totalidade.

Outros compostos incluem AWD-12-281 (N-(3,5-dicloro-4- piridinil)-1-[4-fluorofenil)metil]-5-hidroxi-a-oxo-lH-indol-3-acetamida) de Elbion (Hofgen, N. et al. 15th EFMC Int Symp Med Chem (Sept 6-10, Edinburgh) 1998, Abst P.98; N° referência CAS 247584020-9); um derivado de 9-benziladenina designado NCS-613 (INSERM); D-4418 de Chiroscience e Schering-Plough; uma benzodiazepina inibidora de PDE4 identificada como Cl-1018 (PD-168787) e atribuída à Pfizer; um derivado de benzodioxole descrito por Kyowa Hakko no documento W099/16766; K-34 de Kyowa Hakko; V-11294A de Napp (Landells, L.J. et al. Eur Resp J [Annu Cong Eur Resp Soc (Sept 19-23, Geneva) 1998] 1998, 12 (Supl. 28): Abst P2393); roflumilast (N° referência CAS 162401-32-3) e uma ftalazinona (documento WO99/47505, cuja descrição é aqui incorporada por referência) de Byk-Gulden; Pumafentrina, (-)-p-[(4aR*,10bS*)-9-etoxi-l,2,3,4,4a,10b-hexa-hidro-8-metoxi-2-metilbenzo[c][1,6]naftiridin-6-il]-N,N-diisopropilbenzamida a qual é um inibidor misto de PDE3/PDE4 que foi preparado e publicado por Byk-Gulden, agora Altana; arofilina em desenvolvimento por Almirall-Prodesfarma; VM554/UM565 de Vernalis; ou T-440 (Tanabe Seiyaku; Fuji, K. et al. J Pharmacol Exp Ther, 1998, 284(1): 162), e T2585. 58

Compostos adicionais são divulgados nos pedidos internacionais de patente publicados WO04/024728 (Glaxo Group Ltd), WO04/056823 (Glaxo Group Ltd) e W004/103998 (Glaxo Group Ltd) . São exemplos de agentes anticolinérgicos os compostos que actuam como antagonistas nos receptores muscarinicos, em particular os compostos que são antagonistas dos receptores Μχ ou M3, antagonistas duplos dos receptores Μχ/Μ3 ou M2/M3 ou pan-antagonistas dos receptores Μχ/Μ2/Μ3. Os compostos ilustrativos para administração por inalação incluem ipratrópio (por exemplo, como o brometo, CAS 22254-24-6, vendido sob o nome Atrovent), oxitrópio (por exemplo, como o brometo, CAS 30286-75-0) e tiotrópio (por exemplo, como o brometo, CAS 136310-93-5, vendido sob o nome Spiriva) . Também são de interesse o revatropato (por exemplo, como o bromidrato, CAS 262586-79-8) e LAS-34273 que é divulgado no documento WO01/04118. Os compostos ilustrativos para administração oral incluem pirenzepina (por exemplo, CAS 28797-61-7), darifenacina (por exemplo, CAS 133099-04-4, ou CAS 133099-07-7 para o bromidrato vendido sob o nome Enablex), oxibutinina (por exemplo, CAS 5633-20-5, vendido sob o nome Ditropan), terodilina (por exemplo, CAS 15793-40-5), tolterodina (por exemplo, CAS 124937-51-5, ou CAS 124937-52-6 para o tartrato, vendido sob o nome Detrol), otilónio (por exemplo, como o brometo, CAS 26095-59-0, vendido sob o nome Spasmomen), cloreto de tróspio (por exemplo, CAS 10405-02-4) e solifenacina (por exemplo, CAS 242478-37-1, ou CAS 242478-38-2, ou o succinato também conhecido como YM-905 e vendido sob o nome Vesicare). 59

Compostos adicionais são divulgados nos documentos WO 2005/037280, WO 2005/046586 e WO 2005/104745, aqui incorporados por referência. As presentes associações incluem, mas não se limitam a: iodeto de (3-encto)-3-(2,2-di-2-tieniletenil)-8, 8-dimetil-8- azoniabiciclo[3.2.1]octano; brometo de (3-endo)-3-(2-ciano-2,2-difeniletil)-8, 8-dimetil-8-azoniabiciclo[3.2.1]octano; brometo de 4-[hidroxi(difenil)metil]—1—{2— [(fenilmetil)oxi]etil}-1-azoniabiciclo[2.2.2]octano; e brometo de (IR,5S)-3-(2-ciano-2,2-difeniletil)-8-metil-8-[2-[(fenilmetil)oxi]etil}-8-azoniabiciclo[3.2.1]octano.

Outros agentes anticolinérgicos incluem compostos de fórmula (XXX), os quais são divulgados no pedido de patente US 60/487981:

(XXX) na qual a orientação preferida da cadeia alquilo ligada ao anel de tropano é endo; R e R são, independentemente, seleccionados do grupo consistindo de grupos alquilo inferiores de cadeia linear ou ramificada possuindo de um modo preferido desde 1 a 6 átomos de carbono, grupos cicloalquilo possuindo desde 5 a 6 átomos de carbono, cicloalquil-alquilo possuindo desde 6 a 10 átomos de 60 carbono, 2-tienilo, 2-piridilo, fenilo, fenilo substituído com um grupo alquilo que não tem mais do que 4 átomos de carbono e fenilo substituído com um grupo alcoxilo que não tem mais do que 4 átomos de carbono; X~ representa um anião associado à carga positiva do átomo de N. pode ser, mas não se limita a cloreto, brometo, iodeto, sulfato, benzenossulfonato e toluenossulfonato, incluindo, por exemplo: brometo de {3-endo)-3-(2,2-di-2-tieniletenil)-8,8-dimetil-8-azoniabiciclo[3.2.1]octano; brometo de (3-endo)-3-(2,2-difeniletenil)-8,8-dimetil-8-azoniabiciclo[3.2.1]octano; 4-metilbenzenossulfonato de (3-endo)-3-(2,2-difeniletenil)-8,8-dimetil-8-azoniabiciclo[3.2.1]octano; brometo de (3-endo)-8,8-dimetil-3-[2-fenil-2-(2- tienil)etenil]-8-azoniabiciclo[3.2.1]octano; e/ou brometo de (3-endo)-8,8-dimetil-3-[2-fenil-2-(2- piridinil)etenil]-8-azoniabiciclo[3.2.1]octano.

Os agentes anticolinérgicos adicionais incluem os compostos de fórmula (XXXI) ou (XXXII), os quais são divulgados no pedido de patente US 60/511009: /

,43 ,44 R R ,42 (XXXI)

R ,43 R ,44 R (XXXII) ,42 61 em que: o átomo H indicado está na posição exo; R41- representa um anião associado à carga positiva do átomo de N; R41- pode ser, mas não se limita a cloreto, brometo, iodeto, sulfato, benzenossulfonato e toluenossulfonato; R42 e R43 são independentemente seleccionados do grupo consistindo de grupos alquilo inferiores de cadeia linear ou ramificada (possuindo de um modo preferido desde 1 a 6 átomos de carbono), grupos cicloalquilo (possuindo desde 5 a 6 átomos de carbono), cicloalquil-alquilo (possuindo desde 6 a 10 átomos de carbono), heterocicloalquilo (possuindo desde 5 a 6 átomos de carbono) e N ou O como o heteroátomo, heterocicloalquil-alquilo (possuindo desde 6 a 10 átomos de carbono) e N ou O como o heteroátomo, arilo, arilo opcionalmente substituído, heteroarilo e heteroarilo opcionalmente substituído; R44 é seleccionado do grupo consistindo de alquilo(Ci-C6), cicloalquilo(C3-Ci2), heterocicloalquilo(C3-C7), alquil (Ci-C6) cicloalquilo (C3-Ci2), alquil (Ci-C6) heterocicloalquilo (C3-C7), arilo, heteroarilo, alquil(Ci—C6)-arilo, alquil (Ci-C6) -heteroarilo, -OR45, -CH2OR45, -CH2OH, -CN, -CF3, -CH20(C0)R46, -co2r47, -ch2nh2, -CH2N(R47) S02R45, -S02N(R47) (R48) , -CON (R47) (R48) , -CH2N(R48)CO(R49) , -CH2N (R48) S02 (R46) , -CH2N (R48) C02 (R45) , -CH2N (R48) CONH (R47) ; R45 é seleccionado do grupo consistindo de alquilo(C2—C6), alquil (Ci-C6) cicloalquilo (C3-Ci2), alquil (Ci-C6) heterocicloal quilo (C3-C7), alquil (Ci-C6)-arilo, alquil (Ci—C6) -heteroarilo; R46 é seleccionado do grupo consistindo de alquilo(Ci-C6), cicloalquilo (C3-Ci2), heterocicloalquilo (C3-C7) , alquil (Ci-C6) cicloalquilo (C3-Ci2), alquil (Ci-C6) heterocicloalquilo (C3-C7), arilo, heteroarilo, alquil (Ci-C6)-arilo, alquil (Ci-Cê) -heteroarilo; 62 Λ 7 A Ο R e R sao, mdependentemente, seleccionados do grupo consistindo de H, alquilo (Ci-C6), cicloalquilo (C3-C12) , heterocicloalquilo (C3-C7), alquil (Ci-Ce) cicloalquilo (C3-C12), alquil (Ci-C6) heterocicloalquilo (C3-C7) , alquil (Ci-C6) -arilo e alquil(Ci-C6)-heteroarilo, incluindo, por exemplo: iodeto de (endo)-3-(2-metoxi-2,2-di-tiofen-2-il-etil)-8, 8-dimetil-8-azoniabiciclo[3.2.1]octano; 3-((endo)-8-meti1-8-aza-biciclo[3.2.1]oct-3-il)-2,2-difenil-propionitrilo; (endo)-8-metil-3-(2,2,2-trifenil-etil)-8-aza- biciclo[3.2.1]octano; 3-((endo)-8-meti1-8-aza-biciclo[3.2.1]oct-3-il)-2,2-difenil-propionamida; ácido 3-((endo)-8-metil-8-aza-biciclo[3.2.1]oct-3-il)-2,2-difenil-propiónico; iodeto de (endo)-3-(2-ciano-2,2-difenil-etil)-8,8-dimetil-8-azonia-biciclo[3.2.1]octano; brometo de (endo)-3-(2-ciano-2,2-difenil-etil)-8,8-dimetil-8-azonia-biciclo[3.2.1]octano; 3-((endo)-8-meti1-8-aza-biciclo[3.2.1]oct-3-il)-2,2-difenil-propan-l-ol; N-benzil-3-((endo)-8-metil-8-aza-biciclo[3.2.1]oct-3-il)- 2.2- difenil-propionamida; iodeto de (endo)-3-(2-carbamoil-2,2-difenil-etil)-8,8-dimetil-8-azonia-biciclo[3.2.1]octano; 1-benzi1-3-[3-((endo)-8-metil-8-aza-biciclo[3.2.1]oct-3-il)-2,2-difenil-propil]-ureia; l-etil-3-[3-((endo)-8-metil-8-aza-biciclo[3.2.1]oct-3-il)- 2.2- difenil-propil]-ureia; N-[3-((endo)-8-metil-8-aza-biciclo[3.2.1]oct-3-il)-2,2-difenil-propil]-acetamida; 63 Ν-[3-((endo)-8-metil-8-aza-biciclo[3.2.1]oct-3-il)-2,2-difenil-propil]-benzamida; 3-((endo)-8-meti1-8-aza-biciclo[3.2.1]oct-3-il)-2,2-di-tiofen-2-il-propionitrilo; iodeto de (endo)-3-(2-ciano-2,2-di-tiofen-2-il-etil)-8,8 dimetil-8-azonia-biciclo[3.2.1]octano; N-[3-((endo)-8-metil-8-aza-biciclo[3.2.1]oct-3-il)-2,2-difenil-propil]benzenossulfonamida; [3-((endo)-8-metil-8-aza-biciclo[3.2.1]oct-3-il)-2,2-difenil-propil]-ureia; N-[3-((endo)-8-metil-8-aza-biciclo[3.2.1]oct-3-il)-2,2-difenil-propil]-metanossulfonamida; e/ou brometo de (endo)-3-(2,2-difenil-3-[(1-fenil-metanoil) amino]-propil)-8,8-dimetil-8-azoniabiciclo[3.2.1]octano.

Outros compostos incluem: iodeto de (endo)-3-(2-metoxi-2,2-di-tiofen-2-il-etil)-8, 8 dimetil-8-azoniabiciclo[3.2.1]octano; iodeto de (endo)-3-(2-ciano-2,2-difenil-etil)-8,8-dimetil 8-azonia-biciclo[3.2.1]octano; brometo de (endo)-3-(2-ciano-2,2-difenil-etil)-8,8-dimetil 8-azonia-biciclo[3.2.1]octano; iodeto de (endo)-3-(2-carbamoil-2,2-difenil-etil)-8,8 dimetil-8-azonia-biciclo[3.2.1]octano; iodeto de (endo)-3-(2-ciano-2,2-di-tiofen-2-il-etil)-8,8 dimetil-8-azonia-biciclo[3.2.1]octano; e/ou brometo de (endo)—3—{2,2-difenil-3-[(1-fenil-metanoil) amino]-propil}-8,8-dimetil-8-azoniabiciclo[3.2.1]octano.

Exemplos de anti-histamínicos (também referidos como antagonistas do receptor Hl) incluem qualquer um ou mais dos numerosos antagonistas conhecidos que inibem os receptores Hl e que são seguros para utilização humana. Os antagonistas de primeira geração, incluem derivados de etanolaminas, etilenodiaminas e alquilaminas, tais como difenil-hidramina, pirilamina, clemastina, clorofeniramina. Os antagonistas de segunda geração, que não são sedativos, incluem loratidina, desloratidina, terfenadina, astemizole, acrivastina, azelastina, levocetirizina, fexofenadina e cetirizina.

Os exemplos de anti-histaminicos incluem loratidina, desloratidina, fexofenadina, cetirizina, levocabastina, olopatadina, amlexanox e epinastina.

Os antagonistas de Hl adequados incluem, sem limitação, amelexanox, astemizole, azatadina, azelastina, acrivastina, bromfeniramina, cetirizina, levocetirizina, efletirizina, clorfeniramina, clemastina, ciclizina, carebastina, ciproheptadina, carbinoxamina, descarboetoxiloratadina, doxilamina, dimetindeno, ebastina, epinastina, efletirizina, fexofenadina, hidroxizina, cetotifeno, loratadina, levocabastina, mizolastina, mequitazina, mianserina, noberastina, meclizina, norastemizole, olopatadina, picumast, pirilamina, prometazina, terfenadina, tripelenamina, temelastina, trimeprazina e triprolidina, em particular cetirizina, levocetirizina, efletirizina e fexofenadina. Outra associação de interesse é uma associação compreendendo um composto de fórmula (I), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável em conjunto com um antagonista de H3 (e/ou agonista inverso) . Os antagonistas de H3 adequados incluem, por exemplo, os compostos divulgados nos documentos WO2004/035556 e 65 W02006/045416. Outros antagonistas do receptor de histamina que podem ser utilizados em associação com os compostos da presente invenção incluem antagonistas (e/ou agonista inversos) do receptor H4, por exemplo, os compostos divulgados em Jablonowski et al., J. Med. Chem. 46:3957-3960 (2003). Numa outra forma de realização, é descrita uma associação compreendendo um composto de fórmula (I) ou um seu sal f armaceuticamente aceitável em conjunto com um antagonista duplo de H1/H3. Exemplos de antagonistas duplos de H1/H3 incluem 4-[ (4-clorofenil)metil]-2-({ (2R) —1— [4 — (4 — { [ 3-(hexa-hidro-lfí-azepin-l-il)propil]oxi}fenil)butil]-2-pirrolidinil}metil)-1(2H)-ftalazinona ou um seu sal farmaceuticamente aceitável como descrito no pedido inicial GB0607839.8.

Num outro aspecto, é descrita uma associação compreendendo um composto da invenção em conjunto com um inibidor de PDE4.

Num outro aspecto, é descrita uma associação compreendendo um composto da invenção em conjunto com um agonista do receptor adrenérgico β2.

Num outro aspecto, é descrita uma associação compreendendo um composto da invenção em conjunto com um corticoesteróide.

Num outro aspecto, é descrita uma associação compreendendo um composto da invenção em conjunto com outro agonista não esteróide de GR.

Num outro aspecto, é descrita uma associação compreendendo um composto da invenção em conjunto com um anticolinérgico. 66

Num outro aspecto, é descrita uma associação compreendendo um composto da invenção em conjunto com um anti-histaminico.

Num outro aspecto, é descrita uma associação compreendendo um composto da invenção em conjunto com um antagonista de Hl.

Num outro aspecto, é descrita uma associação compreendendo um composto da invenção em conjunto com um antagonista de H1/H3.

Num outro aspecto, é descrita uma associação compreendendo um composto da invenção em conjunto com um inibidor de PDE4 e um agonista do receptor adrenérgico β2.

Num outro aspecto, é descrita uma associação compreendendo um composto da invenção em conjunto com um anticolinérgico e um inibidor de PDE-4 .

As associações referidas acima podem ser convenientemente apresentadas para serem utilizadas na forma de uma composição farmacêutica e, deste modo, são descritas composições farmacêuticas compreendendo uma associação como definida acima em conjunto com um diluente ou veículo farmaceuticamente aceitável.

Os compostos individuais de tais associações podem ser administrados sequencial ou simultaneamente em composições farmacêuticas separadas ou associadas. Numa forma de realização, os compostos individuais podem ser administrados simultaneamente numa composição farmacêutica associada. As doses apropriadas dos agentes terapêuticos conhecidos serão facilmente determinadas pelos especialistas na técnica. 67

Num outro aspecto, é descrita uma composição farmacêutica compreendendo uma associação de um composto da invenção em conjunto com outro agente terapeuticamente activo.

Num outro aspecto, é descrita uma composição farmacêutica compreendendo uma associação de um composto da invenção em conjunto com um inibidor de PDE4.

Num outro aspecto, é descrita uma composição farmacêutica compreendendo uma associação de um composto da invenção em conjunto com um agonista do receptor adrenérgico β2.

Num outro aspecto, é descrita uma composição farmacêutica compreendendo uma associação de um composto da invenção em conjunto com um corticoesteróide.

Num outro aspecto, é descrita uma composição farmacêutica compreendendo uma associação de um composto da invenção em conjunto com outro agonista não esteróide de GR.

Num outro aspecto, é descrita uma composição farmacêutica compreendendo uma associação de um composto da invenção em conjunto com um anticolinérgico.

Num outro aspecto, é descrita uma composição farmacêutica compreendendo uma associação de um composto da invenção em conjunto com um anti-histaminico.

Num outro aspecto, é descrita uma composição farmacêutica compreendendo uma associação de um composto da invenção em conjunto com um antagonista de Hl. 68

Num outro aspecto, é descrita uma composição farmacêutica compreendendo uma associação de um composto da invenção em conjunto com um antagonista de H1/H3.

Num outro aspecto, é descrita uma composição farmacêutica compreendendo uma associação de um composto da invenção em conjunto com um inibidor de PDE4 e um agonista do receptor adrenérgico β2.

Num outro aspecto, é descrita uma composição farmacêutica compreendendo uma associação de um composto da invenção em conjunto com um anticolinérgico e um inibidor de PDE-4.

Os compostos da invenção podem ser preparados pelos processos descritos a seguir.

Um processo de preparação de compostos de fórmula (I) compreende a reacção de uma amina de fórmula (II)

em que R1, X e n são como definidos acima para os compostos de fórmula (I), com um composto de fórmula (III) 69

em que R2 e R3 são como definidos acima para os compostos de fórmula (I) e Y é cloro ou hidroxilo.

Quando Y é cloro, a reacção pode ser realizada num solvente orgânico convencional, por exemplo tetra-hidrofurano, na presença de uma base, por exemplo carbonato de potássio, trietilamina, piridina ou diisopropiletilamina. Numa forma de realização, a reacção é realizada na presença de diisopropiletilamina. A reacção pode ser realizada a uma temperatura de desde -10 °C a 100 °C, por exemplo, à temperatura ambiente.

Alternativamente, quando Y é hidroxilo, a reacção pode ser realizada num solvente orgânico convencional, por exemplo dimetilformamida, na presença de um agente de ligação, tal como os descritos em Tetrahedron 2005, 61, 10827, por exemplo hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotriazol-l-il)-Ν,Ν,Ν',N'-tetrametilurónio (HATU), e uma base, por exemplo trietilamina ou diisopropiletilamina. Numa forma de realização, a reacção é realizada na presença de diisopropiletilamina. A reacção pode ser realizada a uma temperatura de desde -10 °C a 100 °C, por exemplo, à temperatura ambiente.

Os compostos de fórmula (II) em que R1 representa hidrogénio, metilo, etilo ou 2-fluoroetilo podem ser preparados por reacção de um composto de fórmula (IV) 70

em que X e n são como definidos acima para os compostos de fórmula (I), com amónia, metilamina, etilamina ou 2-fluoroetilamina (a qual pode ser gerada a partir do sal de cloridrato e trietilamina) consoante apropriado. A reacção pode ser realizada num solvente orgânico convencional, por exemplo acetonitrilo ou tetra-hidrofurano, e a uma temperatura de desde -10 °C a 100 °C, por exemplo, à temperatura ambiente.

Numa outra forma de realização, um composto de fórmula (II) em que R1 é hidrogénio pode ser preparado hidrogenando um composto de fórmula (XXVI)

(XXVI) sobre paládio a 10% sobre carvão. 71

Um composto de fórmula (XXVI) pode ser preparado tratando um composto de fórmula (IV) como acima, com benzilamina. A reacção pode ser realizada em dioxano à temperatura ambiente.

Alternativamente, um composto de fórmula (II) em que R1 é hidrogénio pode ser preparado fazendo reagir um composto de fórmula (V)

(V) em que X e n são como definidos acima para os compostos de fórmula (I), com um composto de fórmula (VI)

ou alternativamente com um composto de fórmula (XIX)

72 em que R1, R2 e R3 são como definidos acima para os compostos de fórmula (I). A reacção pode ser realizada num solvente orgânico convencional, por exemplo dimetilformamida, na presença de um agente de ligação tais como os descritos em Tetrahedron 2005, 61, 10827, por exemplo hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotriazol-l-il)-Ν,Ν,Ν',N'-tetrametilurónio (HATU); e uma base, por exemplo trietilamina ou diisopropiletilamina. Numa forma de realização, a reacção é realizada na presença de diisopropiletilamina. A reacção pode ser realizada a uma temperatura de desde -10 °C a 100 °C, por exemplo, à temperatura ambiente.

Exemplos de ácidos de fórmula (V) adequados para serem utilizados nesta reacção de ligação incluem: ácido 5-amino-ácido 5-amino-ácido 5-amino-ácido 5-amino-ácido 5-amino-ácido 5-amino-ácido carboxilico; ácido carboxilico; ácido carboxilico; ácido carboxilico; 73 1 (2-fluorofenil) -líí-pirazole-4-carboxilico; 1- (3-f luorof enil) -lff-pirazole-4-carboxilico; 1- (4-f luorof enil) -lil-pirazole-4-carboxilico; 1- (4-clorofenil) -lfí-pirazole-4-carboxílico; 2 1-(3-clorofenil)-lA-pirazole-4-carboxilico; 3 1- (2-clorofenil) -l/i-pirazole-4-carboxílico; 5-amino-l- (2,3-dif luorof enil) -lií-pirazole-4- 5-amino-l- (2, 4-difluorofenil) -lf7-pirazole-4- 5-amino-l- (2,5-dif luorof enil) -lH-pirazole-4- 5-amino-l- (2, 6-dif luorof enil) -lH-pirazole-4- ácido carboxílico; ácido 5-amino-l- (3,4-dif luorofenil) -lií-pirazole-4 5-amino-l- (3,5-difluorofenil) -liJ-pirazole-4 carboxilico; e ácido 5-amino-1-fenil-lH-pirazole-4-carboxilico.

Os ácidos de fórmula (V) podem ser preparados, por exemplo, por reacção de uma aril-hidrazina adequada com 2-ciano-3-etoxiacrilato de etilo seguida de conversão do éster etílico resultante no ácido correspondente por tratamento com, por exemplo, hidróxido de lítio num solvente tal como etanol aquoso.

Alternativamente, um composto de fórmula (II) pode ser preparado tratando um composto de fórmula (vil)

(VII) em que R1, X e n são como definidos acima para os compostos de fórmula (I), com um catalisador de metal de transição, por exemplo hidróxido de paládio sobre carvão, na presença de uma atmosfera de hidrogénio. A reacção pode ser realizada num solvente orgânico convencional, por exemplo etanol. A reacção pode ser realizada a uma temperatura de desde -10 °C a 100 °C, por exemplo, à temperatura ambiente.

Um composto de fórmula (VII) pode ser preparado tratando um composto de fórmula (V) como definido acima, com um composto de fórmula (VIII) 74

(viii) em que R1 é como definido acima para os compostos de fórmula (I), por exemplo metilo, etilo ou 2-fluoroetilo. A reacção pode ser realizada utilizando condições semelhantes às descritas acima para a reacção de um composto de fórmula (V) com um composto de fórmula (VI).

Um composto de fórmula (VIII) pode ser preparado tratando um composto de fórmula (IX) o.,?

(IX) inicialmente com uma N-alquilbenzilamina. A reacção pode ser realizada num solvente orgânico convencional, por exemplo 1,4-dioxano. A reacção pode ser realizada a uma temperatura de desde -10 °C a 100 °C, por exemplo, à temperatura ambiente. Subsequentemente, a mistura reaccional pode ser depois tratada com uma solução de amónia em 1,4-dioxano. Esta reacção pode ser realizada a uma temperatura de desde -10 °C a 100 °C, por exemplo a 100 °C.

Um composto de fórmula (IV) pode ser preparado tratando um composto de fórmula (X) 75

(X)

H,C em que X e n são como definidos acima para os compostos de fórmula (I), com uma resina de carbonato suportada em polímero. A reacção pode ser realizada num solvente orgânico convencional, por exemplo tetra-hidrofurano. A reacção pode ser realizada a uma temperatura de desde -10 °C a 100 °C, por exemplo, à temperatura ambiente.

Um composto de fórmula (X) pode ser preparado tratando um composto de fórmula (XI)

(XI) em que X e n são como definidos acima para os compostos de fórmula (I), com cloreto de 4-metilbenzenossulfonilo. A reacção pode ser realizada num solvente orgânico convencional, por exemplo diclorometano, na presença de uma base orgânica, por exemplo piridina. A reacção pode ser realizada a uma temperatura de desde -10 °C a 100 °C, por exemplo, à temperatura ambiente. 76

Um composto de fórmula (XI) pode ser preparado fazendo reagir um composto de fórmula (V) como definido acima, com um composto de fórmula (XII) h2n

OH (XII) A reacção pode ser realizada utilizando condições semelhantes às descritas acima para a reacção de um composto de fórmula (V) com um composto de fórmula (VI).

Um composto de fórmula (XII) pode ser preparado tratando um composto de fórmula (XIII)

(XIII) com um catalisador de metal de transição, por exemplo hidróxido de paládio sobre carvão, na presença de uma atmosfera de hidrogénio. A reacção pode ser realizada num solvente orgânico convencional, por exemplo etanol. A reacção pode ser realizada a uma temperatura de desde -10 °C a 100 °C, por exemplo, à temperatura ambiente.

Um composto de fórmula (XIII) pode ser preparado tratando um composto de fórmula (IX) como definido acima com benzilamina, seguido de tratamento com uma base, por exemplo hidróxido de sódio. A reacção pode ser realizada num solvente orgânico 77 convencional, por exemplo 1,4-dioxano. 0 tratamento com benzilamina pode ser realizado a uma temperatura de desde -10 °C a 100 °C, por exemplo, à temperatura ambiente e o tratamento com base pode ser realizada a uma temperatura de desde -10 °C a 100 °C, por exemplo, a cerca de 90 °C.

Um composto de fórmula (IX) pode ser preparado tratando um composto de fórmula (XIV)

(XIV) com uma resina de carbonato suportada em polímero. A reacção pode ser realizada num solvente orgânico convencional, por exemplo diclorometano. Os processos em lote ou processos contínuos são equipamentos adequados para esta ciclização. A reacção pode ser realizada a uma temperatura de desde -10 °C a 100 °C, por exemplo, à temperatura ambiente durante um processo em lote ou a cerca de 50 °C para um processo contínuo.

Um composto de fórmula (XIV) pode ser preparado tratando um composto de fórmula (XV)

3 (XV) com cloreto de 4-metilbenzenossulfonilo na presença de uma base orgânica, por exemplo piridina. A reacção pode ser realizada a 78 uma temperatura de desde -10 °C a 100 °C, por exemplo, à temperatura ambiente. Alternativamente, quando é utilizado um processo continuo, o composto de fórmula (XV) pode ser tratado com cloreto de 4-metilsulfonilo na presença de uma base orgânica, por exemplo Ν,Ν,Ν' ,Ν'-tetrametil-l,6-hexanodiamina, em diclorometano à temperatura ambiente.

Um composto de fórmula (XV) pode ser preparado tratando um composto de fórmula (XVI)

com um catalisador de metal de transição, por exemplo paládio a 5% sobre carvão, na presença de uma atmosfera de hidrogénio. A reacção pode ser realizada num solvente orgânico convencional, por exemplo etanol. A reacção pode ser realizada a uma temperatura de desde -10 °C a 100 °C, por exemplo, à temperatura ambiente para um processo em lote ou a cerca de 80 °C para um processo continuo. Os processos em lote ou processos contínuos são adequados para esta hidrogenação.

Um composto de fórmula (XVI) pode ser preparado tratando um composto de fórmula (XVII)

79 com trimetil(trifluorometil)silano e fluoreto de tetra-n-butilamónio. A reacção pode ser realizada num solvente orgânico convencional, por exemplo tetra-hidrofurano ou diclorometano. A reacção pode ser realizada a uma temperatura de desde -10 °C a 100 °C, por exemplo a 0 °C aumentando até à temperatura ambiente. Os processos em lote ou processos contínuos são adequados para esta transformação.

Um composto de fórmula (XVII) pode ser preparado por oxidação de 1,3-dibenzilglicerol. Numa forma de realização, a oxidação pode ser realizada utilizando peneiros moleculares de 3 A, N-óxido de N-metilmorfolina e per-rutenato de tetrapropilamónio em diclorometano a 0 °C a refluxo, por exemplo, à temperatura ambiente. Noutra forma de realização, a oxidação pode ser realizada utilizando hipoclorito de sódio aquoso, solução saturada de bicarbonato de sódio e radical livre de 2,2,6,6-tetrametil-l-piperidiniloxilo em tolueno a 0 °C até 50 °C, por exemplo, à temperatura ambiente. Numa outra forma de realização, a oxidação pode ser realizada utilizando complexo de trióxido de enxofre-piridina na presença de base tal como trietilamina em dimetilsulfóxido a 10 °C até 50 °C, por exemplo, à temperatura ambiente. Os processos em lote ou processos contínuos são adequados para esta oxidação.

Um composto de fórmula (VI) pode ser preparado tratando um composto de fórmula (XVIII)

80 (XVIII) com um catalisador de metal de transição, por exemplo hidróxido de paládio sobre carvão, na presença de uma atmosfera de hidrogénio. A reacção pode ser realizada num solvente orgânico convencional, por exemplo etanol. A reacção pode ser realizada a uma temperatura de desde -10 °C a 100 °C, por exemplo, à temperatura ambiente.

Um composto de fórmula (XVIII) pode ser preparado tratando um composto de fórmula (IX) como definido acima com benzilamina. A reacção pode ser realizada num solvente orgânico convencional, por exemplo 1,4-dioxano. A reacção pode ser realizada a uma temperatura de desde -10 °C a 100 °C, por exemplo, à temperatura ambiente e em seguida a cerca de 100 °C.

Alternativamente, um composto de fórmula (I) pode ser preparado acoplando um composto de fórmula (V) como definido acima com um composto de fórmula (XIX)

em que R1, R2 e R3 são como definidos acima para os compostos de fórmula (I) .

Este processo alternativo é particularmente adequado para a preparação de compostos de fórmula (I) em que R2 e R3 não são cloro. A reacção pode ser realizada num solvente orgânico 81 convencional, por exemplo dimetilformamida, na presença de um agente de ligação tais como os descritos em Tetrahedron 2005, 61, 10827, por exemplo hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotriazol-l-il)-N,N, N',N'-tetrametilurónio (HATU), e uma base, por exemplo trietilamina ou diisopropiletilamina. Numa forma de realização, a reacção é realizada na presença de diisopropiletilamina. A reacção pode ser realizada a uma temperatura de desde -10 °C a 100 °C, por exemplo, à temperatura ambiente.

Exemplo de ácidos de fórmula (V) adequados para serem utilizados nesta reacção de ligação incluem: ácido 5-amino-l ácido 5-amino-l ácido 5-amino-l ácido 5-amino-l ácido 5-amino-l ácido 5-amino-l ácido carboxílico; ácido carboxílico; ácido carboxílico; ácido carboxílico; ácido carboxílico; ácido carboxílico; e ácido 5-amino-l -(2-fluorofenil)-lH-pirazole-4-carboxílico; - (3-f luorof enil) -llf-pirazole-4-carboxílico; - (4-f luorof enil) -lff-pirazole-4-carboxílico; -(4-clorofenil)-lH-pirazole-4-carboxílico; -(3-clorofenil)-lH-pirazole-4-carboxílico; - (2-clorofenil)-lH-pirazole-4-carboxílico; 5-amino-l- (2,3-difluorofenil) -líf-pirazole-4- 5-amino-l- (2,4-difluorofenil) -líí-pirazole-4- 5-amino-l-(2,5-difluorofenil)-lH-pirazole-4- 5-amino-l-(2,6-difluorofenil)-lH-pirazole-4- 5-amino-l- (3, 4-dif luorofenil) -lií-pirazole-4- 5-amino-l- (3,5-dif luorofenil) -lií-pirazole-4- -fenil-li7-pirazole-4-carboxílico. 82

Os ácidos de fórmula (V) podem ser preparados, por exemplo, por reacção de uma aril-hidrazina adequada com 2-ciano-3-etoxiacrilato de etilo, seguida de conversão do éster etílico resultante no ácido correspondente por tratamento com, por exemplo, hidróxido de lítio num solvente tal como etanol aquoso.

Um composto de fórmula (XIX) pode ser preparado hidrogenando um composto de fórmula (XX)

H

(XX) em que R1, R2 e R3 são como definidos acima para os compostos de fórmula (I). A reacção pode ser realizada num solvente orgânico tal como etanol na presença de um ácido tal como ácido clorídrico 2 M e um catalisador tal como hidróxido de paládio sobre carvão. A reacção pode ser realizada a uma temperatura de desde 0 °C a 60 °C, por exemplo, à temperatura ambiente.

Um composto de fórmula (XX) pode ser preparado por reacção de benzilamina com um epóxido de fórmula (XXI). 83

(XXI) em que R1, R2 e R3 são como definidos acima para os compostos de fórmula (I) . A reacção pode ser realizada num solvente orgânico tal como tetra-hidrofurano a uma temperatura de desde 0 °C a 65 °C, por exemplo, à temperatura ambiente.

Um composto de fórmula (XXI) pode ser preparado de um composto de fórmula (XXII) .2

(XXII) em que R1, R2 e R3 são como definidos acima para os compostos de fórmula (I), e um composto de fórmula (IX) como definido acima. A reacção pode ser realizada num solvente polar tal como tetra-hidrofurano, dimetilformamida ou dimetoxietano, de um modo preferido dimetoxietano na presença de uma base forte tal como 84 hidreto de sódio. A reacção pode ser realizada a uma temperatura de desde -70 °C a + 65 °C, por exemplo, à temperatura ambiente.

Um composto de fórmula (XXII) pode ser preparado por métodos correntes a partir da amina e ácido ou cloreto ácido correspondentes.

Os compostos de fórmula (I) podem ser preparados na forma de misturas de enantiómeros quando são utilizadas misturas de isómeros como intermediários na sintese. Por exemplo, a utilização de um composto de fórmula (II) como uma mistura racémica de enantiómeros conduzirá a uma mistura racémica de enantiómeros no produto final. Se desejado, estes enantiómeros podem ser separados por métodos convencionais (e. g. HPLC numa coluna quiral).

Alternativamente, a separação de enantiómeros pode ser realizada mais cedo durante a síntese, por exemplo nos enantiómeros individuais de compostos de fórmula (II) ou intermediários anteriores. Isto pode obviar a necessidade de realizar uma separação de enantiómeros como uma etapa final da síntese. O último processo é, teoricamente, mais eficiente e é por isso preferido.

Um método quiral de preparação de um composto de fórmula (IV) é mostrado no Esquema 1: 85 1,3-dibenzilglicerol

ΤΡΑΡ NMO

O

OB OBn

TMSCF, TBAF

3n cf3 (XVI) (XVII)

h2 Pd-C HO.

TsCI piridina - DCM (XXIV) I) PS-CO,. THF U) PhCHjNHj

""Y

H\,-CF3 OvA^H

lipase butirato de vinilo - HO

CF, (XV) (XXV) o HO CF, H °V^X^N.

Ph HCI5M boh (XXIII)

.CF,

(iv)

Esquema 1

Abreviaturas TPAP Per-rutenato de tetrapropilamónio Bn Benzilo Ph Fenilo NMO N-óxido de N-metilmorfolina tmscf3 Trimetil(trifluorometil)silano 86 TBAF Fluoreto de tetrabutilamónio TsCl Cloreto de p-toluenossulfonilo DCM Diclorometano PS-CO3 Resina de carbonato suportada em polímero THF Tetra-hidrofurano HC1 Ácido clorídrico EtOH Etanol HATU Hexafluorofosfato 0-(7-azabenzotriazol-l-il)-Ν,Ν,Ν',Ν' - tetrametilurónio DIPEA Diisopropiletilamina DMF Dimetilformamida pir Piridina

Determinados compostos de fórmula (II), (IV), (VI), (VII), (VIII), (IX), (X), (XI), (XII), (XIII), (XIV), (XVI), (XVIII), (XIX), (XX) e (XXI) são novos e formam um aspecto da presente invenção.

Além disso, são descritos processos de preparação de formulações incluindo um ou mais compostos de fórmula (I).

As composições compreendendo um composto da invenção também constituem um aspecto da invenção.

Os solvatos de compostos de fórmula (I) ou seus sais, que não são farmaceuticamente aceitáveis, podem ser úteis como intermediários na preparação de outros compostos de fórmula (I), seus solvatos ou sais. 87 A invenção será agora ilustrada através dos seguintes exemplos não limitativos.

EXEMPLOS

Os seguintes Exemplos não limitativos ilustram a invenção:

GERAL

Abreviaturas DMF dimetilformamida DMSO dimetilsulfóxido h horas LCMS cromatografia liquida/espectrometria de massa MD AP HPLC autopreparativa dirigida por massa Me metilo MeCN acetonitrilo min minutos TA temperatura ambiente SPE extracção em fase sólida TFA ácido trifluoroacético TEMPO radical livre de 2,2,6,6,-tetrametil-l-piperidiniloxilo NaOCl hipoclorito de sódio NaHC03 bicarbonato de sódio Na2S205 metabissulfito de sódio HC1 ácido clorídrico MgS04 sulfato de magnésio AIBN azoisobutironitrilo 88 THF tetra-hidrofurano TBAF fluoreto de tetrabutilamónio AcOEt acetato de etilo TBME éter 1,1-dimetiletílico e metílico tBuOH 2-metil-propan-2-ol

Cromatografia A purificação cromatográfica foi realizada utilizando cartuchos de silica gel Bond pré-empacotados disponíveis de Varian. 0 Flashmaster 2 é um sistema de cromatografia flash de múltiplos utilizadores automatizado que utiliza cartuchos descartáveis de SPE (2 g a 100 g) . Proporciona a mistura em linha de solventes quaternários para permitir que sejam realizados métodos gradientes. As amostras são sequenciadas utilizando o software multifuncional de livre acesso que gere caudais, perfis de gradientes e condições de recolha. O sistema está munido de um detector de UV de comprimento de onda variável Knauer e de 2 colectores de fracções Gilson FC204 que permite o corte automático, recolha e rastreio do pico. HPLC Autopreparativa Dirigida por Massa (MDAP)

Equipamento LC/MSD Agilent 1100 series, utilizando o modo de electropulverização positivo (ES +ve) com um software de purificação chemstation 32. 89

Coluna: Zorbax Eclipse XDB-C18 prep HT (dimensões 212 x 100 mM, enchimento de 5 pm), com caudal de solvente de 20 mL/min.

Solvente aquoso = Água + 0,1% de TFA Solvente orgânico = MeCN + 0,1% de TFA

Gradientes específicos utilizados:

Gradiente 1 (colheitas desencadeadas por uv / massa iónica)

1 min 70% Água (0,1% de TFA):30% MeCN (0,1% de TFA) aumentando ao longo de 9 min até 5% Água (0,1%TFA): 95% MeCN (0,1%TFA) para eluir os compostos.

Gradiente 2 (recolha apenas em uv) 1 min 70% Agua (0,1% de TFA):30% MeCN (0,1%TFA) aumentando ao longo de 9 min até 5% Água (0,1%TFA): 95% MeCN (0,1%TFA) para eluir os compostos.

Sistema CAT MDAP

Detalhes da coluna: Zorbax Eclipse XDB-C18 prep HT (dimensões 212 x 100 mM, enchimento de 5 um). 90 Método Cat_norm, faz a colheita desencadeada por uv/Massa iónica.

Equipamento de LC/MSD Agilent 1100 series, com um software de purificação chemstation 32. 20 mL/min de caudal de solvente, eluição gradiente: 1 min 90% água (0,1% de TFA):10% MeCN (0,1%TFA) aumentando ao longo de 9 min até 5% água (0,1%TFA) :95%MeCN (0,1%TFA) para eluir os compostos. Método Cat_gr, faz a colheita desencadeada por uv/massa iónica. 1 min 70% água (0,1% de TFA):30% MeCN (0,1%TFA) aumentando ao longo de 9 min até 5% água (0,1%TFA) :95% MeCN (0,1%TFA) para eluir os compostos. Método de uv Cat_lipo é igual ao Cat_gr, recolhendo apenas com base no uv.

Sistema de LCMS O sistema de LCMS utilizado foi como se segue: • Coluna: 3,3 cm X 4,6 mM ID, 3 pm ABZ+PLUS de Supelco • Caudal: 3 mL/min

• Volume de Injecção: 5 pL • Temp: T.A. • Gama de Detecção de UV: 215 a 330 nm 91

Solventes: A: 0,1% Ácido Fórmico + Acetato de amónio 10 mmolar. 95% Acetonitrilo + 0,05% Ácido Fórmico Tempo %A %B 0,00 100 0 0, 70 100 0 4,20 0 100 5,30 0 100 5,50 100 0

RMN

Os espectros de RMN de 1E foram registados em DMSO-d6 ou clorofórmio-d ou MeOD num Bruker DPX 400, num Bruker AV 400 a trabalhar a 400 MHz ou num Bruker DPX 250 a trabalhar a 250 MHz. O padrão interno utilizado foi tetrametilsilano ou o solvente protonado residual a 2,50 ppm para o DMSO-d6 ou a 7,27 ppm para o clorofórmio-d ou a 3,35 ppm para o MeOD.

Dicroísmo Circular O Dicroismo circular foi realizado num espectrofotómetro Applied Photophysics Chirascan à temperatura ambiente, utilizando acetonitrilo como solvente, na gama desde 200-350 nm. 92

Intermediário 1: 1,3-Bis[(benzil)oxi]-2-propanona

Peneiros moleculares de 3A em pó (50 g) foram secos a 100 °C numa estufa de vácuo. Os peneiros e N-óxido de N-metilmorfolina (35,1 g, 300 mmol) foram suspensos em diclorometano seco (700 mL) antes de ter sido adicionado 1,3-dibenziloxi-2-propanol (41 mL, 165 mmol) em diclorometano (100 mL) à suspensão, mantida sob agitação. A mistura foi agitada sob uma atmosfera de azoto durante 90 minutos, antes de ter sido adicionado per-rutenato de tetrapropilamónio (3 g, 8,53 mmol). (A reacção foi suficientemente exotérmica para provocar a ebulição do diclorometano, pelo que foi adaptado um condensador de refluxo.) A reacção foi agitada a 21 °C durante 23 horas antes de ser filtrada através de celite. Foi então lavada com ácido clorídrico 2 M (400 mL) e solução aquosa saturada de cloreto de sódio (500 mL). As lavagens aquosas combinadas foram filtradas através de celite e re-extraídas com diclorometano (500 mL) e em seguida este foi lavado com solução aquosa saturada de cloreto de sódio (200 mL). Os extractos orgânicos foram combinados, secos sobre sulfato de magnésio e concentrados sob pressão reduzida para dar um óleo escuro (43,6 g) . Foi adicionado éter dietílico (ca. 200 mL) e o sólido preto resultante foi filtrado. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para dar o composto em epígrafe (42 g) como um sólido branco acinzentado. RMN de (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 7,31 - 7,40 (m, 10H) 4,59 (s, 4H) 4,26 (s, 4H). 93 LC-MS Tempo de retenção 3,27 min, MNH4+ 288.

Preparação Alternativa A do Intermediário 1

Uma mistura de hipoclorito de sódio (100 mL, 13% p/v) e bicarbonato de sódio saturado (25 mL) foi adicionada numa carga a uma solução, mantida sob agitação, de 1,3-dibenziloxi-2-propanol (10 g) e radical livre de 2,2,6,6-tetrametil-l-piperidiniloxilo, (TEMPO) (0,3 g) em tolueno (40 mL) . A mistura bifásica foi agitada a 20-25 °C durante 15 minutos, quando a análise por HPLC mostrou que a reacção estava completa. A mistura reaccional foi agitada durante um total de 25 minutos a 23 °C. A mistura reaccional foi separada e o extracto orgânico foi lavado com solução de tiossulfato de sódio a 5% p/v (40 mL) e separado. O extracto orgânico foi lavado com solução de cloreto de sódio a 1% p/v (2 x 25 mL) . O extracto orgânico foi então concentrado in vacuo para dar um óleo que cristalizou em repouso para dar 8,8 g de 1,3-dibenziloxi-2-propanona com 88,7% de rendimento. O espectro de RMN do produto foi concordante com uma amostra de referência.

Preparação Alternativa B do Intermediário 1

Uma mistura de complexo de trióxido de enxofre/piridina (2,33 g, 4 equivalentes) em DMSO (3 mL) e trietilamina (2,05 mL, 4 equivalentes) foi agitada para dar uma solução amarela pálida. A esta foi adicionada uma solução de 1,3-dibenziloxi-2-propanol (1 g) em DMSO (1 mL) ao longo de 2 minutos. (A mistura reaccional foi mantida em banho-maria). A temperatura da mistura reaccional atingiu 30 °C. Após 10 minutos, o banho-maria foi 94 retirado e a mistura reaccional foi agitada à temperatura ambiente (ca 20 - 25 °C) durante 3 horas. A mistura reaccional foi diluída com acetato de etilo (15 mL) e água (15 mL), agitada e o extracto orgânico foi separado. O extracto orgânico foi lavado com cloreto de sódio a 5% p/v (2 x 10 mL) e água (10 mL). O extracto orgânico separado foi concentrado in vacuo para dar um óleo que solidificou para proporcionar 0,75 g de 1,3-dibenziloxi-2-propanona com 75,8% de rendimento. Um espectro de RMN do produto foi concordante com uma amostra de referência.

Preparação Alternativa C do Intermediário 1 O composto em epígrafe foi preparado via um processo "contínuo" utilizando os seguintes materiais de partida e solventes. 0 composto em epígrafe foi preparado via um Sistema CPC Cytos Lab constituído por um bloco reactor de 47 mL com duas bombas de HPLC Jasco PU - 2080Plus. A temperatura do reactor foi mantida a 60 °C via uma unidade Huber Unistat 360.

Foram preparadas duas soluções. Solução A -1,3-dibenziloxi-2-propanol (120 g, 440 mmol) em acetonitrilo (489 mL). Solução B - per-rutenato de tetrapropilamónio (7,72 g, 22 Mmol, 5% molar) e N-óxido de N-metilmorfolina (87,5 g, 748 mmol) em acetonitrilo (611 mL) . As soluções A e B foram bombeadas através do sistema Cytos Lab na proporção de solução A para solução B de 1: 1,25 com um caudal total de 7,8 mL/min e tempo de residência de 6 minutos. Isto deu um tempo de reacção total de 2 horas e 21 minutos. A solução reaccional total foi dividida igualmente em 2 lotes e cada um foi concentrado 95 in vacuo. Foi adicionado éter dietilico (250 mL) antes de ser lavada com sulfito de sódio, solução aquosa saturada de cloreto de sódio e sulfato cúprico e em seguida filtrada através de celite, seca e evaporada. Os lotes foram recombinados para dar após evaporação in vacuo o composto em epígrafe (71,64 g).

Preparação Alternativa D do Intermediário 1

Uma solução de 1,3-dibenziloxi-2-propanol (500 g, 1,84 mol, 1,0 eq.), TEMPO (5,5 g, 0,034 mol) em diclorometano (1,25 L) foi colocada num balão de rebordo de 10 L munido com um agitador suspenso. Foi adicionada uma solução de brometo de potássio (48 g, 0,40 mol) em água (185 mL) e a reacção agitada e arrefecida até -10 °C. Uma solução aquosa de NaOCl a 14% foi diluída até 1 M (2145 g diluído até 4050 mL). O pH desta solução foi então ajustado a 9,5 dissolvendo NaHC03 (80 g) imediatamente antes da utilização. Esta solução de NaOCl foi adicionada ao longo de 1 hora, mantendo a temperatura da mistura reaccional entre 10-15 °C. A mistura foi então agitada durante 60 minutos. A fase orgânica de cor laranja foi separada e a camada aquosa foi extraída com diclorometano (5,0 L, 2,0 L) . Os orgânicos combinados foram lavados com HC1 aq. a 10% (10,75 L) contendo iodeto de potássio (143 g), Na2S205 aq. a 10% (5,0 L) e água (5,0 L) . Os orgânicos foram secos sobre MgS04 e concentrados sob pressão reduzida para dar o composto em epígrafe em bruto (893 g, 90%). Este composto foi transferido para o passo seguinte sem mais purificação. 96

Intermediário 2: 1,1,1-Trifluoro-3-[(benzil)oxi]-2 {[(benzil)oxi]metil}-2-propanol

Intermediário 2: 1,1,1-Trifluoro-3-[(benzil)oxi]-2

O

F3C OH

A uma solução de 1,3-bis[(benzil)oxi]-2-propanona (42 g, 155 mmol) em tetra-hidrofurano anidro (600 mL) foi adicionado trimetil(trifluorometil)silano (35 mL, 236 mmol) sob azoto. A mistura foi então arrefecida num banho de gelo/etanol a -3 °C, antes de ter sido adicionado fluoreto de tetrabutilamónio (1 M em THF, 180 mL, 180 mmol) gota a gota (a adição inicial de 10 mL resultou numa ligeira exotérmica com a temperatura a aumentar até 9 °C antes de ter sido deixada arrefecer até 6 °C e em seguida a adição continuou, caindo a temperatura para a gama de -1 °C a +3 °C) . A adição foi concluída após 30 minutos. A mistura foi agitada durante mais 4 horas no decurso das quais se libertou gás durante todo o tempo e em seguida foi adicionado ácido clorídrico 2 M (750 mL) sob agitação. Foi adicionado éter dietílico (600 mL) e a fase aquosa separada foi reextraída com éter dietílico (1 x 600 mL, 1 x 300 mL) e os extractos orgânicos combinados foram lavados com solução aquosa saturada de cloreto de sódio (1 x 300 mL), secos sobre sulfato de sódio e concentrados sob pressão reduzida para dar um óleo (52,9 g) . Este óleo foi purificado via cromatografia flash (Sílica, 800 g) utilizando ciclo-hexano:acetato de etilo (9:1) como eluente. Isto deu o composto em epígrafe como um óleo amarelo (39,5 g) . RMN de (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 7, 29 - 7,39 (m, 10H) 4,60 (s, 4H) 3,72 (s, 4H) 3,38 (s, 1H). 97 LC-MS Tempo de retenção 3,69 min, MNH4+ 358.

Preparação Alternativa A do Intermediário 2

Uma mistura de 1,3-dibenziloxi-2-propanona (2 g) e (trifluorometil)trimetilsilano (2,56 mL, 2,3 equivalentes) em diclorometano (20 mL) foi agitada e arrefecida até 0 °C. Foi adicionada, gota a gota ao longo de 3 minutos, uma solução de fluoreto de tetrabutilamónio 1 M em thf (4 mL). A adição inicial de algumas gotas deu uma exotérmica de 10 °C. Ao longo da adição a temperatura do lote foi mantida abaixo de 10 °C. Uma vez concluída a adição, a mistura castanha escura foi agitada a +5 °C durante 5 minutos quando a análise por HPLC indicou que a reacção estava concluída. A mistura reaccional foi agitada durante mais 5 minutos e em seguida lavada com ácido clorídrico aquoso 1 M (15 mL), bicarbonato de sódio saturado (15 mL) e solução aquosa de cloreto de sódio a 1% p/v (2 x 15 mL) . O extracto orgânico foi concentrado in vacuo para dar 2,5 g do produto desejado como um óleo escuro com 99,3% de rendimento. O espectro de RMN do produto foi concordante com uma amostra de referência.

Preparação Alternativa B do Intermediário 2

Fluoreto de tetrabutilamónio tri-hidratado (TBAF 3H20) (2,9 g, 0,5 equivalentes) foi dissolvido em THF (5 mL). Isto foi adicionado cuidadosamente a uma solução, mantida sob agitação e arrefecida (+15 °C), de 1,3-dibenziloxi-2-propanona em tolueno (24,65 g, equivalente a 5 g da cetona) e (trifluorometil)trimetilsilano (7,5 mL) . Houve uma exotérmica e 98 uma grande libertação de gás ao adicionar o primeiro 1 mL de solução de TBAF. A temperatura subiu de 18 para 40 °C. A adição de TBAF foi realizada ao longo de 3 minutos e em seguida a mistura foi agitada a 15-30 °C durante mais 2 minutos e depois arrefecida até +10 °C, enquanto se realizava uma análise por HPLC. A mistura reaccional foi sequencialmente lavada com ácido clorídrico aquoso 1 M (50 mL), solução aquosa de cloreto de sódio a 1% (2 x 25 mL) e uma mistura de cloreto de sódio a 1% (25 mL) e solução saturada de bicarbonato de sódio (5 mL) . O extracto orgânico separado foi concentrado in vacuo para dar 6,41 g do produto desejado como um óleo castanho-escuro com 101,8% de rendimento. O espectro de RMN mostrou a presença de tolueno (8,8%) e material de partida (ca 3%) residuais.

Preparação Alternativa C do Intermediário 2 O composto em epígrafe foi preparado via um processo "continuo" utilizando os seguintes materiais de partida e solventes. O composto em epigrafe foi preparado via um Sistema CPC Cytos Lab constituído por um bloco reactor de 32 mL com duas bombas de HPLC Jasco PU - 2080Plus. A temperatura do reactor foi mantida a 22 °C via uma unidade Huber Unistat 360. A saída do reactor foi munida com um regulador de refluxo de 100 psi.

Foram preparadas duas soluções. Solução A -1,3-dibenziloxi-2-propanona (71,64 g, 265 mmol) e trimetil(trifluorometil)silano (86,7 g, 96 mL, 609,5 mmol) em tetra-hidrofurano (99 mL). Solução B - fluoreto de tetrabutilamónio (0,5 M em THF, 265 mL, 132,5 mmol). 99

As soluções A e B foram bombeadas através do sistema Cytos Lab com um caudal de 6,4 mL/min e um tempo de residência de 5 minutos, originando um tempo de reacção total de 82 minutos. A mistura reaccional foi desactivada com ácido clorídrico 2 M (560 mL) e em seguida dividida em 2 lotes iguais (2 x 280 mL) . Foi adicionado éter dietílico (100 mL) a cada lote, extraído e em seguida lavado com solução aquosa saturada de cloreto de sódio (2 X 100 mL), seco (MgS04) e evaporado para dar um resíduo (82,99 g). Parte do resíduo foi refeito em diclorometano e aplicado em cartuchos de SPE de sílica. O composto em epígrafe foi obtido utilizando 10% de hexano em diclorometano como eluente e concentração das fracções de 15 mL relevantes. A carga da amostra em bruto foi purificada sobre Combiflash Companion XL. Foi corrido 8 g de material numa coluna de 120 g com um gradiente de solvente de 10%-70% de diclorometano em hexano como eluente. Quaisquer fracções mistas de cada ensaio foram combinadas e repurifiçadas de um modo idêntico. Todas as fracções puras foram combinadas e evaporadas para dar o composto em epígrafe (68,68 g).

Preparação Alternativa D do Intermediário 2

Uma solução de 1,3-dibenziloxi-2-propanona (310 g, 1,15 mol, 1,0 eq.) foi colocada num balão de 10 L com rebordo, munido de agitador magnético, condensador sob árgon, seguido de THF (3,5 L) . Isto foi agitado a 15 °C. Foi adicionado trimetil(trifluorometil)silano (TMS-CF3) (Matriz, 231 g, 1,62 mol, 1,41 eq.) gota a gota ao longo de 1 hora. A solução foi então arrefecida até 0 °C utilizando um banho de água gelada e foi adicionado, gota a gota, fluoreto de tetrabutilamónio 100 (TBAF) (337 g, 1,29 L, 1 M em THF, 1,29 mol, 1,12 eq.) mantendo a temperatura na gama desde 0-8 °C (exotérmicas iniciais acentuadas, atrasadas). Uma vez concluída a adição, a temperatura foi aumentada cuidadosamente até 20 °C e a reacção agitada a 27 °C de um dia para o outro (banho de óleo) . (TLC Rf material de partida=0,3, produto=0,4, 80:20 éter de petróleo/acetato de etilo mostrou que a reacção estava essencialmente concluída). A mistura reaccional foi então arrefecida até 15 °C utilizando um banho de água gelada, em seguida desactivada pela adição lenta de HCl 1 M (10,5 L) (transferir para um separador de 20 L depois de ter sido adicionado 1,0 L). A mistura foi extraida com éter dietilico (3x 5,0 L). Os orgânicos combinados foram lavados com água (2,5 L) e solução aquosa saturada de cloreto de sódio (2,5 L) . Os orgânicos foram secos sobre MgSCg e concentrados sob pressão reduzida para produzir um óleo castanho (388 g com THF).

Intermediário 3: 2-(Trifluorometil)-1,2,3-propanotriol

Foi adicionada uma solução de 1,1,l-trifluoro-3- [ (benzil)oxi]-2-{[(benzil)oxi]metil}-2-propanol (98,9 g, 290,9 mmol) em etanol (1750 mL) a paládio a 5% sobre carvão (9,73 g, húmido, Degussa, E101 No/w) sob azoto. A mistura foi então agitada sob uma atmosfera de hidrogénio utilizando uma válvula de Wright num recipiente de hidrogenação de 5 litros. Após aproximadamente 3 horas a maior parte do volume teórico de hidrogénio tinha sido captado. Depois de agitar sob hidrogénio de um dia para o outro (aproximadamente mais 1 litro de 101 hidrogénio foi captado de um dia para o outro), o catalisador foi filtrado através de uma almofada de celite e a almofada lavada com etanol. 0 filtrado e lavagens foram então concentrados sob pressão reduzida e o resíduo submetido a evaporação azeotrópica (x2) com diclorometano, após o que o resíduo ficou sólido. Este material foi deixado na bomba de vácuo para dar o composto em epígrafe (48,56 g) como um sólido esbranquiçado. RMN de ΧΗ (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 5,65 (s, 1H) 4,89 (t, 2H) 3,54 (d, J=5,8 Hz, 4H). LC-MS Tempo de retenção 0,42 min, ES-159.

Preparação Alternativa A do Intermediário 3 O composto em epígrafe foi preparado utilizando o hidrogenador de Thales Η-Cube e bomba milligat em modo total de hidrogénio. Foi preparada uma solução de 1,1,1-trifluoro-3-[(fenilmetil)oxi]-2-{[(fenilmetil)oxi] metil}-2-propanol (58 g) em etanol (580 mL) . O caudal foi 1,3 mL/min, a temperatura foi ajustada a 80 °C e o cartucho utilizado foi um 10%Pd/C Cat Cart 70 que foi substituído a cada 2 horas. Quaisquer fracções que continuassem a conter material de partida e o intermediário monobenzilo foram reprocessadas. Todas as fracções puras foram combinadas e evaporadas para dar o composto em epígrafe (26,48 g). 102

Preparação Alternativa B do Intermediário 3 1,1,1-Trifluoro-3-[(benzil)oxi]—2—{[(benzil)oxi]metil}-2-propanol (1,3 kg, 3,82 mol, 1,0 eq.) foi colocado num balão de 10 L com rebordo munido com um agitador suspenso, seguido de etanol (4,5 L). Foi adicionado paládio a 10% sobre carvão (27 g) sob atmosfera de árgon. A reacção foi então submetida a hidrogenólise à pressão atmosférica (6 balões) e agitada de um dia para o outro a 50 °C (os balões foram colocados virados para cima repetidamente durante o dia) . O RMN de 1R mostrou que a reacção estava concluída após 1 semana, requereu mais paládio a 10% sobre carvão (4 g). A mistura reaccional foi filtrada através de uma almofada de celite e lavada com etanol (2,5 L). O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para dar um óleo. Este foi colocado sob alto vácuo de um dia para o outro para se obter um material sólido. Foi adicionado tolueno (1,5 L) e a mistura aquecida até o sólido se dissolver (—60 °C), foram observadas 2 camadas. A mistura foi agitada utilizando um agitador magnético e arrefecida utilizando um banho de água gelada, onde precipitou um sólido. O sólido foi fragmentado e agitado durante mais 30 minutos, em seguida isolado por filtração. O sólido foi lavado com tolueno (250 mL) e éter de petróleo (250 mL) . O sólido foi seco sob alto vácuo de um dia para o outro para produzir o produto desejado (465 g). 103

Intermediário 4: 4-Metilbenzenossulfonato de 3,3,3-trifluoro-2-hidroxi-2-({[(4-metilfenil) sulfonil]oxi}metil)propilo

A uma solução, mantida sob agitação, de 2-(trifluorometil)-1,2,3-propanotriol (18,9 g, 118 mmol) em piridina (200 mL) que tinha sido arrefecida num banho de gelo foi adicionado cloreto de p-toluenossulfonilo (67 5/ 351 mmol) para dar uma solução laranja. 0 banho de gelo foi removido após 45 minutos e a agitação continuou durante 21 horas, no decurso das quais se formou um sólido. A maioria da piridina foi removida sob pressão reduzida e o resíduo foi partilhado entre acetato de etilo (500 mL) e água (300 mL) . A fase aquosa separada foi ainda extraída com acetato de etilo (1 X 250 mL) e os extractos orgânicos combinados foram lavados com ácido clorídrico 2 M (1 x 200 mL), água (1 x 200 mL), bicarbonato de sódio saturado (1 x 200 mL), água (1 x 200 mL) e solução aquosa saturada de cloreto de sódio (1 x 200 mL) antes de ser seca sobre sulfato de sódio e concentrada sob pressão reduzida para dar um óleo (72,8 g) . Este óleo foi purificado sobre uma coluna Flash de sílica (800 g) eluindo com ciclo-hexano:acetato de etilo (5:1) para dar o produto em epígrafe (49 g, 95%) como um óleo que cristalizou em repouso. RMN de XH (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 7,78 (d, J=8,3 Hz, 4H) 7,38 (d, J=8,3Hz, 4 H) 4,18 (s, 4H) 3,66 (s, 1H) 2,48 (s, 6H) . 104 LC-MS Tempo de retenção, 3,62 min, MNH4+ 486, ES 467.

Preparação Alternativa A do Intermediário 4 0 composto em epígrafe foi preparado via um processo "contínuo" utilizando os seguintes materiais de partida e solventes.

Foram preparadas duas soluções. Solução A 2-(trifluorometil)-1,2, 3-propanotriol (4,5 g, 27,8 mmol), N,N,N',N'-tetrametil-1, 6-hexanodiamina (30 mL, 139 mmol), diclorometano (550 mL). Solução B - cloreto de p-toluenossulfonilo (21,4 g, 111 mmol), diclorometano (550 mL) .

As soluções A e B foram bombeadas através de um reactor CPC Cytos (volume do reactor de 47 mL) a um caudal cada de 2,35 mL/min. Notou-se que a pressão da bomba contendo a solução B variava. Após 110 minutos, a reacção foi abandonada já que foi evidente que as bombas não estavam a funcionar a 1:1. O material recolhido foi extraído com diclorometano (x3) antes de ser lavado com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seco (MgS04), filtrado e concentrado para dar um resíduo que foi rejeitado. A bomba foi substituída e o remanescente dos reagentes foram feitos reagir. O material recolhido foi extraído com diclorometano (x3) antes de ser lavado com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seco (MgS04), filtrado e concentrado para dar um resíduo. Este foi adsorvido sobre sílica e eluído sobre uma coluna de sílica (12 g) com diclorometanorhexano (1:1). Foram eluídas quatro fracções e a fracção 4 deu o composto em epígrafe (2,31 g). 105

Preparação Alternativa B do Intermediário 4 2-(Trifluorometil)-1,2,3-propanotriol (300 g, 1,86 mol, 1,0 eq.) foi dissolvido em piridina (2,0 L) num balão de 10 L com rebordo munido com um agitador suspenso e sonda térmica, sob árgon. isto foi arrefecido até 0 °C com um banho de CO2 sólido-acetona. Foi adicionado cloreto de tosilo (809 g, 4,1 mol, 2,2 eq) em porções, mantendo a temperatura <10 °C. Ao concluir a adição, o banho frio foi removido e mistura reaccional deixada agitar à temperatura ambiente de um dia para o outro. A mistura reaccional foi filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O óleo castanho resultante foi partilhado entre AcOEt (4,0 L) e HC1 2 M (4,0 L), agitado durante 5 minutos e separado. A camada aquosa foi ainda extraída com AcOEt (2 X 2,5 L) . Os orgânicos combinados foram lavados com NaHCCb saturado (3,5 L, período de agitação de 5 min), solução aquosa saturada de cloreto de sódio (2,5 L) e secos sobre MgS04. Este foi concentrado sob pressão reduzida para dar um óleo castanho espesso. O material em bruto foi transferido para o passo seguinte sem mais purificação (950 g, excesso de peso, assumir 100%).

Intermediário_5j_4-Metilbenzenossulf onato_de [2-(trifluorometil)-2-oxiranil]metilo

Uma solução de 4-metilbenzenossulfonato de 3,3, 3-trifluoro-2-hidroxi-2-({[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}metil)propilo 106 (186,5 g, 398,5 mmol) em diclorometano (2500 mL) foi agitada sob azoto enquanto era adicionada resina de carbonato suportada em polímero (ex Fluka, ca. 3,5 mmoles carbonato/g de resina) (232 g) . A mistura foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro. A resina foi filtrada e a resina foi lavada com diclorometano. O filtrado e as lavagens combinados foram concentrados sob pressão reduzida para dar o composto em epígrafe (116,2 g) como um óleo castanho. RMN de XH (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 7,80 (d, J=8,3 Hz, 2H) 7,38 (d, J=8, 0 Hz, 2H) 4,41 (d, J=ll,9 Hz, 1H) 4,29 (d, J=ll, 9 Hz, 1H) 3,14 (d, J=4,8 Hz, 1H) 3,01 (dd, J=4,5, 1,5 Hz, 1H) 2,47 (s, 3H). LC-MS Tempo de retenção 3,2 min, MNH/ 314.

Preparação Alternativa A do Intermediário 5 4-Metilbenzenossulfonato de 3,3,3-trifluoro-2-hidroxi-2-({[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}metil)propilo (14,29 g, 29 mmol) em diclorometano (75 mL) foi bombeado através de um cartucho contendo PS-resina de carbonato (não pré-dilatada) (3 mmol/g, 25 g, 75 mmol) a 675 microlitros/min. A temperatura foi ajustada a aprox. 50 °C envolvendo um aquecedor de película fina Whatman em torno do cartucho. A pressão foi regulada a 40 psi. Depois de todo o reagente ter sido aspirado, a coluna foi lavada com diclorometano - nesta altura a coluna começou a ter uma fuga ligeira e o regulador de contrapressão teve de ser removido para reduzir a pressão. A solução recolhida foi concentrada ín vácuo para proporcionar o composto em epígrafe (7,25 g) . 107

Preparação Alternativa B do Intermediário 5

Bis-tosilato, 4-metilbenzenossulfonato de 3,3,3-trifluoro-2-hidroxi-2-({[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}metil)-propilo (1,047 kg, 2,24 mol, 1,0 eq.) foi dissolvido em diclorometano (9,0 L) num balão com rebordo de 20 L, munido de agitador suspenso sob árgon. Foi adicionado carbonato de potássio (1,24 kg, 8,95 mol, 4,0 eq.) em porções ao longo de 8 horas e agitado de um dia para o outro à temperatura ambiente. A RMN de 1H mostrou ~41% de conversão da reacção. Foi adicionado mais carbonato de potássio (600 g, 2,0 eq.) ao longo de 8 horas e agitado de um dia para o outro. A RMN de mostrou 89% de conversão da reacção. Foi adicionado mais carbonato de potássio (300 g, 1,0 eq.) ao longo de 8 horas e agitado de um dia para o outro. A RMN de XH mostrou que a reacção tinha sido completa. A mistura reaccional foi filtrada em dois filtros de vidro sinterizado com uma almofada de celite e lavada com diclorometano. O filtrado foi lavado com NaHC03 (3,5 L), solução aquosa saturada de cloreto de sódio (2,5 L) e seco sobre MgS04. O filtrado foi então concentrado sob pressão reduzida para dar um óleo vermelho escuro. O produto em bruto foi purificado por cromatografia de sucção (—13 cm de silica sobre um filtro de vidro sinterizado de 4 L, recolhidas fracções de ~1,5 L, começando com éter de petróleo/AcOEt 95:5 como eluente até ter 108 sido removido todo o cloreto de tosilo, a polaridade do eluente foi então aumentada lentamente até 90:10, 80:20 e 70:30. A TLC desenvolvida corrida com Éter de petróleo/AcOEt 70:30 dando Rf cloreto de tosilo=0,55, Produto=0,5, impureza=0,3. Foram obtidas algumas fracções mistas, que foram novamente aplicadas na coluna utilizando as mesmas condições como acima.

Isto deu um produto limpo (417 g, 63%) como um óleo laranja, que solidificou sob alto vácuo de um dia para o outro.

Intermediário 6: 3,3,3-Trifluoro-2-{[(fenilmetil)amino]me-til}—1,2-propanodiol

A uma solução, mantida sob agitação, de 4-metilbenzenossulfonato de [2-(trifluorometil)-2-oxiranil]metilo (10,07 g, 34 mmol) em 1,4-dioxano anidro (70 mL) arrefecida num banho de gelo sob azoto foi adicionada benzilamina (4,1 mL, 37,4 mmol) em pequenas porções ao longo de 10 minutos. A mistura foi agitada à temperatura de um banho de gelo durante mais uma hora antes de ser deixada aquecer até 21 °C e em seguida agitada durante 18 horas. Foram adicionados hidróxido de sódio 2 M (50 mL) e 1,4-dioxano (50 mL) e agitados durante 2 horas à temperatura ambiente antes de serem aquecidos a 90 °C durante 22 horas. A mistura foi deixada arrefecer antes de ser concentrada até um volume pequeno e partilhada entre acetato de etilo (250 mL) e água (100 mL). A camada aquosa 109 separada foi ainda extraída com acetato de etilo (1 x 250 mL) e os extractos orgânicos combinados foram lavados com água (1 x 100 mL), solução aquosa saturada de cloreto de sódio (1 X 100 mL), secos sobre sulfato de sódio e concentrados sob pressão reduzida para dar um óleo (9,4 g) . Este foi purificado sobre cartuchos de SPE 3 x 100 g utilizando um gradiente de 0-100% ciclo-hexano-acetato de etilo ao longo de 60 min. Isto deu após concentração das fracções relevantes sob pressão reduzida, o composto em epígrafe (5,09 g) como um óleo. RMN de XH (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) c 3 ppm 7,30 - 7,35 (m, 2H) 7, 23 - 7, . 29 (m, 3H) 3,75 - 3,86 (m, 4H) 3,57 (d, J=ll,6 Hz, 1H) 3, 06 (d, J= =13,1 Hz, 1H) 2,86 (d, J=13, 1 Hz, 1H) , OH & NH são muito largos 2,5-3,0 ppm. LC-MS Tempo de retenção 1,45 min, MH+ 250.

Intermediário 7: 2-(Aminometil)-3,3,3-trifluoro-1,2-propanodiol

Uma solução de 3,3,3-trifluoro-2- {[(fenilmetil)amino]metil}-1,2-propanodiol (8,33 g, 33,4 mmol) em etanol (550 mL) contendo hidróxido de paládio sobre carvão (20%, 800 mg) foi agitada sob uma atmosfera de hidrogénio durante 24 horas. O catalisador foi filtrado através de uma almofada de celite, o filtrado foi concentrado sob pressão 110 reduzida, foi adicionado tolueno e a solução novamente evaporada sob pressão reduzida para dar o composto em epígrafe (5,06 g) como um óleo. RMN de XH (400 MHz, MeOD) δ ppm 3, 69 - 3,69 (m, 2 H) 2,96 (d, J=13,5 Hz, 1 H) 2,87 (d, J=13,5 Hz, 2 H). LC-MS Tempo de retenção 0,32 min, MH+ 160.

Intermediário 8: 5-Amino-l-(4-fluorofenil)-lH-pirazole-4- carboxilato de etilo

A uma suspensão, mantida sob agitação, de cloridrato de 4-fluorofenil-hidrazina (9,76 g, 60 mmol) em etanol (250 mL) foi adicionada trietilamina (9,2 mL, 62 mmol) e à solução âmbar resultante foi adicionado 2-ciano-3-etoxiacrilato de etilo (10,15 g, 60 mmol). A solução foi aquecida à temperatura de refluxo durante 3,5 horas. A solução foi deixada arrefecer até à temperatura ambiente e depois de repousar de um dia para o outro o sólido resultante foi filtrado, lavado com uma quantidade pequena de etanol e em seguida éter antes de ser seco sob vácuo para dar o composto em epígrafe (12,1 g) como um sólido esbranquiçado. 111 RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7,70 (s, 1 H) 7,55 (s, J=5,0 Hz, 2 H) 7,34 - 7,41 (m, 2 H) 6,34 (s. 1., 2 H) 4,21 (q, J=7,0, 7,0 Hz, 2 H) 1,26 (t, J=7,0 Hz, 3 H) . 112

Intermediário 9: Ácido 5-amino-l-(4-fluorofenil)-1H- pirazole-4-carboxílico

A uma suspensão de 5-amino-l-(4-fluorofenil)-lA-pirazole-4-carboxilato de etilo (12,1 g, 48,5 mmol) em etanol (250 mL) foi adicionada uma solução de hidróxido de litio (5,8 g, 242 mmol) em água (100 mL). A mistura foi agitada a refluxo durante 2,5 horas. Foi deixada arrefecer e concentrada até 50% do seu volume antes de ter sido adicionado ácido clorídrico 5 M (47 mL) . Depois de agitar durante 15 minutos, o sólido branco resultante foi filtrado e foi adicionado mais ácido clorídrico 5 M (3 mL) ao filtrado e o sólido resultante foi filtrado e os sólidos combinados foram lavados com água e éter dietílico e em seguida secos sob vácuo para dar o composto em epígrafe (10,27 g). RMN de (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12,09 (s. 1., 1H) 7,67 (s, 1H) 7, 54 - 7, 60 (m, 2H) 7,34 - 7,41 (m, 2H) 6,29 (s. 1., 2H) . LC-MS Tempo de retenção 2,20 min, MH+ 222. 113

Intermediário 10: 5-Amino-l-(4-fluorofenil)-N-[3,3,3- trifluoro-2-hidroxi-2-(hidroximetil)propil]-lH-pirazole-4-carboxamida

OH

Uma solução de ácido 5-amino-l-(4-fluorofenil)-líf-pirazole-4-carboxílico (5,86 g, 26,5 mmol) em dimetilformamida anidra (60 mL) e diisopropiletilamina (17,5 mL, 100 mmol) foi arrefecida num banho de gelo durante 5 minutos, antes de ter sido adicionado hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotriazol-l-il)-N,N,N',N'-tetrametilurónio (HATU) (11,1 g, 29,2 mmol). Após 5 minutos, a solução foi retirada do banho de gelo e agitada sob azoto durante 20 minutos. A mistura, mantida sob agitação, foi rearrefecida em gelo durante 5 minutos, antes de ter sido adicionada uma solução da amina, 2-(aminometil)-3,3,3-trifluoro-1,2-propanodiol (5 g, 31,4 mmol) em dimetilformamida anidra (20 mL) . O banho de gelo foi novamente retirado e a agitação prosseguida durante 2,5 horas. A mistura foi então partilhada entre acetato de etilo (500 mL) e água (500 mL) e a fase aquosa separada foi reextraida com acetato de etilo (300 mL). Os extractos orgânicos combinados foram lavados com água (1 X 500 mL, 1 X 300 mL), ácido clorídrico 1 Μ (1 X 400 mL), cloreto de lítio concentrado (2 x 200 mL), hidrogenocarbonato de sódio saturado (1 X 200 mL), água (200 mL) e solução aquosa saturada de cloreto de sódio (2 x 200 mL) antes de ser seca sobre sulfato de sódio e concentrada sob vácuo para dar uma espuma 114 (9,5 g). Foi adicionado acetato de etilo (5 mL) seguido de diclorometano (50 mL) e a mistura foi agitada em rotação para iniciar a cristalização. Foi deixada repousar no frigorifico durante 15 horas e o sólido resultante foi filtrado e lavado com pequenas quantidades de diclorometano e depois heptano antes de ser seco sob vácuo para dar o composto em epígrafe (7,0 g, 73%) como um sólido branco. RMN de ΧΗ (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8,17 (t, J= 6,1 Hz, 1H) 7,99 (s, 1H) 7,54 - 7, 60 (m, 2H) 7, 33 - 7, 40 (m, 2H) 6,37 (s. 1., 2H) 6,30 (s, 1H) 5,19 (t, J=6,4 Hz, 1H) 3,51 - 3,69 (m, 2H) 3,38 - 3,50 (m, 2H). LC-MS Tempo de retenção 2,20 min, MH+363.

Intermediário_llj_4-Metilbenzenossulf onato_de 2-[({[5-amino-l-(4-fluorofenil)-lff-pirazol-4- il]carbonil}amino)metil]-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropilo

5-amino-l-(4- (2,47 g, A uma solução, mantida sob agitação, de fluorofenil)-N-[3,3,3-trifluoro-2-hidroxi-2-(hidroximetil) propil] -lfí-pirazole-4-carboxamida 115 6,82 mmol) em diclorometano anidro (20 mL) e piridina anidra (20 mL) arrefecida num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto foi adicionado cloreto de p-toluenossulfonilo (1,7 g, 8,9 mmol). A mistura foi agitada durante 6 horas à temperatura de um banho de gelo, antes de ser deixada aquecer até à temperatura ambiente e agitada de um dia para o outro. A solução foi evaporada sob vácuo e o resíduo foi partilhado entre acetato de etilo (100 mL) e água (30 mL) . A fase orgânica separada foi lavada com ácido clorídrico 2 M (2 x 30 mL), água (30 mL), hidrogenocarbonato de sódio saturado (30 mL), água (30 mL) e solução aquosa saturada de cloreto de sódio (50 mL) antes de ser seca sobre sulfato de sódio e evaporada sob pressão reduzida para dar uma espuma (3,45 g) . Esta espuma foi purificada sobre uma coluna de sílica Flashmaster (100 g) utilizando um gradiente de 0-100% de acetato de etilo em ciclo-hexano ao longo de 1 hora. Isto proporcionou o composto em epígrafe (2,8 g, 79%) como uma espuma. RMN de ΧΗ (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8,04 (t, J= 6,3 Hz, 1H) 7,90 (s, 1H) 7,78 (d, J=8,l Hz, 2H) 7, 55 - 7, 60 (m, 2H) 7,45 (d, J=8,1 Hz, 2H) 7,34 - 7,41 (m, 2H) 3, 97 - 4, 06 (m, 2H) 3,63 (dd, J=14,7, 6,6 Hz, 1H) 3,45 (dd, 1H) 2,38 (s, 3H). LC-MS Tempo de retenção 3,41 min, MH+ 517. 116

Intermediário 12: 5-Amino-l-(4-fluorofenil)-N-{[2 (trifluorometil)-2-oxiranil]metil}-lff-pirazole-4-carboxamida

Uma solução de 4-metilbenzenossulfonato de 2-[({[5-amino-l-(4-fluorofenil)-lU-pirazol-4-il]carbonil}amino)metil]-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropilo (2,8 g, 5,4 mmol) em tetra- hidrofurano anidro (150 mL) foi agitada com resina de carbonato suportada em polímero (ex Fluka, 5 g, 3,5 mmol/g, 17,5 mmol) que tinha sido pré-lavada com tetra-hidrofurano (5x). Depois de agitar durante 15 horas, a resina foi filtrada e o filtrado foi evaporado sob pressão reduzida para dar um semi-sólido (1, 986 g) . Foi adicionado éter dietilico (ca 10 mL) e depois de repousar durante 3 horas, o sólido cristalizado resultante (1 g) foi filtrado e lavado com heptano. O filtrado e precipitado foram evaporados sob pressão reduzida e o resíduo, dissolvido em diclorometano, foi purificado sobre uma coluna de sílica Flashmaster (100 g) eluindo com 0-100% de acetato de etilo em ciclo-hexano ao longo de 60 minutos para proporcionar um sólido creme (0,46 g) . Este foi combinado com o sólido cristalizado para dar o composto em epígrafe (1,46 g) . RMN de :Η (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8,15 (t, J=6,l Hz, 1H) 7,94 (s, 1H) 7,53 - 7,60 (m, 2H) 7,36 (t, J=8,8 Hz, 2H) 6,38 (s, 2H) 3,88 (dd, J=14,9, 6,1 Hz, 1H) 3,69 (dd, J=14,8, 6,0 Hz, 1H) 3,17 (d, J=4,3 Hz, 1H) 2, 90 - 2,98 (m, J=4,0 Hz, 1H) . 117 LC-MS Tempo de retenção 2,83 min, MH+ 345.

Intermediário 13: 1,1,1-Trifluoro-3-[(fenilmetil)amino]-2- {[(fenilmetil)amino]metil}-2-propanol

OH A uma solução de 4-metilbenzenossulfonato de [2-(trifluorometil)-2-oxiranil]metilo (17,3 g, 58,4 mmol) em dioxano anidro (130 mL) agitada, sob uma atmosfera de azoto num banho de gelo/água, foi adicionada benzilamina (8,8 mL, 80 mmol) em porções ao longo de 20 minutos. O banho de arrefecimento foi retirado e a solução foi agitada durante 23 horas. Foram adicionados hidróxido de sódio 2 M (90 mL, 180 mmol) e dioxano (70 mL) à suspensão e agitados durante 1 hora para dar uma solução amarela turva. Foi então aquecida a 100 °C durante 23 horas, antes de ser concentrada sob pressão reduzida e o resíduo partilhado entre acetato de etilo (2 x 250 mL) e água (100 mL). Os extractos orgânicos combinados foram lavados com água (100 mL), solução aquosa saturada de cloreto de sódio (100 mL), secos sobre sulfato de sódio e concentrados sob pressão reduzida para dar um óleo amarelo (17 g). Este foi purificado sobre uma coluna Biotage (800 g) com ciclo-hexano:acetato de etilo (2:1) como eluente para dar o composto em epígrafe (8,15 g). 118 RMN de XH (400 MHz, MeOD) δ ppm 7,21 - 7,30 (m, 10H) 3,79 (d, J=13,l Hz, 2H) 3,73 (d, J=13,1 Hz, 2H) 2,85 (d, J=12,6 Hz, 2H) 2,80 (d, J=12,6 Hz, 2H) . LC-MS Tempo de retenção 2,36 min, MH+ 339.

Intermediário 14: 3-Amino-2-(aminometil)-1,1,1-trifluoro-2-propanol

F

F

OH

Uma solução de 1,1,1-trifluoro-3-[(fenilmetil)amino]-2- {[(fenilmetil)amino]metil}-2-propanol (8,15 g, 24,1 mmol) em etanol (200 mL) foi agitada numa atmosfera de hidrogénio sobre catalisador de Pearlman (500 mg) durante 24 horas. O catalisador foi filtrado e o filtrado concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi redissolvido em metanol e concentrado sob pressão reduzida para dar um óleo (4,825 g) . Este óleo foi redissolvido em etanol (200 mL) e agitada numa atmosfera de hidrogénio sobre catalisador de Pearlman (500 mg) durante 24 horas. O catalisador foi filtrado e o filtrado concentrado sob pressão reduzida para dar o composto em epígrafe (3,07 g) como um óleo. RMN de ΧΗ (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 2,68 - 2,79 (m, 4H) . 119

Intermediário 15: õ-Amino-N- [2-(aminometil)-3,3,3- trifluoro-2-hidroxipropil]-1-(4-fluorofenil)-lfl-pirazole-4-carboxamida

Intermediário 15: õ-Amino-N- [2-(aminometil)-3,3,3- F

A uma solução de ácido 5-amino-l-(4-fluorofenil)-1H-pirazole-4-carboxílico (1,8 g, 8 mmol) em dimetilformamida anidra (30 mL) e diisopropiletilamina (7 mL, 40 mmol) foi adicionado hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotriazol-l-il)-N,N,N',N'-tetrametilurónio (HATU) (3,34 g, 8,8 mmol). Após 20 minutos, foi adicionada uma solução de 3-amino-2-(aminometil)-1,1,1-trifluoro-2-propanol (1,79 g, 11,3 mmol) em dimetilformamida (5 mL) . A mistura foi agitada a 21 °C durante 15 horas, antes do solvente ter sido evaporado sob pressão reduzida e a goma resultante foi partilhada entre acetato de etilo (150 mL) e água (100 mL) . A fase orgânica separada foi lavada com água (100 mL), cloreto de litio aquoso (50 mL) e solução aquosa saturada de cloreto de sódio (100 mL) . Foi então seca sobre sulfato de sódio e evaporada sob pressão reduzida para dar um vidro (5,2 g) . Este foi triturado com diclorometano (ca. 25 mL) e o sólido (2,41 g) foi filtrado. Este sólido foi partilhado entre acetato de etilo (50 mL) e ácido clorídrico 2 M (40 mL) e a fase orgânica separada lavada com água (20 mL) . As fases aquosas combinadas foram tornadas alcalinas através da adição de hidrogenocarbonato de sódio sólido e em seguida foram extraídas com acetato de etilo (50 mL). As fases orgânicas combinadas foram lavadas com água (25 mL), solução aquosa saturada de cloreto de sódio (25 mL), secas sobre sulfato de 120 sódio e concentradas sob pressão reduzida para dar o composto em epígrafe (936 mg) como uma espuma branca. RMN de (400 MHz, DMSO-d6) d ppm 8,15 (t, J= 6 Hz, 1H) , 7,98 (s. 1H) 7,57 (dd, J= 9, 5 Hz, 2H) 7,37 (t, J= 9 Hz, 2H) 6,39 (S, 2H) 3,61-3,49 (m, 2H) 3,34 (s. 1., 2H) 2,83 (d, J=3 Hz, 2H). LC-MS Tempo de retenção 2,00 min, MH+ 362.

Preparação Alternativa A do Intermediário 15 Ácido 5-amino-l-(4—fluorofenil)-lH-pirazole-4-carboxílico (0,67 g) foi seco por co-evaporação de THF/tolueno (1:1) seguido de alto vácuo durante 18 horas, 0,67 g transformaram-se em 0,47 g após secagem. Foi adicionado cloreto de tionilo (6 mL) ao ácido (0,634 g, 2,9 mmol) e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas. A mistura foi evaporada até à secura em seguida co-evaporada com diclorometano seguido de tolueno. 2-(Aminometil)-3,3,3-trifluoro-1,2-propanodiol (0,47 g) foi dissolvido em THF (5 mL) e arrefecido até <5 °C num banho de gelo sob uma atmosfera de azoto. Foi adicionada piridina (0,47 mL, 0,459 g, 5,8 mmol) seguida de uma solução do cloreto ácido em THF (5 mL) . A reacção foi deixada aquecer lentamente até à temperatura ambiente, em seguida agitada de um dia para o outro - tempo total 20 horas. A mistura reaccional foi partilhada entre acetato de etilo (25 mL) e hidrogenocarbonato de sódio aquoso saturado (25 mL). A fase orgânica foi lavada com ácido clorídrico aquoso (25 mL) seguido de solução aquosa saturada de cloreto de sódio. A fase orgânica foi seca (MgS04), filtrada e evaporada. O produto foi obtido como uma espuma laranja pálida (0,86 g). 121

Preparação Alternativa B do Intermediário 15 5-Amino-l-(4-fluorofenil)-N-(3,3,3-trifluoro-2-hidroxi-2-{[(fenilmetil)amino]metil}propil)-lH-pirazole-4-carboxamida (20,47 g) foi dissolvida em etanol (100 mL) e hidrogenada sobre paládio a 10% sobre carvão (2 g). Uma pequena porção foi filtrada utilizando celite para dar uma solução amarela-laranja e a análise por LC/MS indicou que a reacção estava concluída. Por isso, o remanescente da suspensão foi então filtrado e a solução amarela-laranja concentrada in vacuo para dar um sólido amarelo pálido. Este foi seco na linha de vácuo de um dia para o outro para dar o composto em epígrafe (14,64 g) como um sólido branco. RMN de XH (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) d ppm 7,62 (s, 1H), 7,51 (m, 2H), 7,21 (m, 2H), 6,1 (t. 1., 1H), 5,46 (s. 1., 2H), 3,85 (dd, 1H), 3,54 (dd, 1H), 3,1 (d, 1H) , 2,78 (d, 1H) . LC-MS Tempo de retenção 2,10 min, MH+ 362.

Intermediário_16j_5-Amino-l- (4-fluorofenil) -N-{ 3,3,3- trifluoro-2-hidroxi-2-[(metilamino)metil]propil}-li7-pirazole-4-carboxamida

A uma solução de 5-amino-l-(4-fluorofenil)-N-{ [2-(trifluorometil)-2-oxiranil]metil}-lií-pirazole-4-carboxamida (750 mg, 2,18 mmol) em tetra-hidrofurano anidro (10 mL) foi 122 adicionada metilamina (2 M em tetra-hidrofurano, 4 mL, 8 mmol) e agitada a 21 °C durante 15 horas. Foi evaporada para dar uma espuma que foi triturada com éter dietilico (ca. 5 mL). 0 sólido resultante foi filtrado e lavado com um pouco de éter dietilico e em seguida éter de petróleo (40-60°) para dar o composto em epígrafe (465 mg). RMN de XH (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 7,62 (s, -1H) 7,50 - 7,57 (m, 2H) 7,19 - 7,25 (m, 2H) 6,11 - 6,21 (m, 1H) 5,46 (s, 2H) 3,85 (dd, J=14,4, 7,7 Hz, 1H) 3,56 (dd, J=14,3, 5,0 Hz, 1H) 3,03 (d, J=13,3 Hz, 1H) 2,62 (d, J=13,l Hz, 1H) 2,45 - 2,51 (m, 3H). LC-MS Tempo de retenção 1,79 min, MH+ 376.

Intermediário 17: 5-Amino-N-{2-[(etilamino)metil]-3,3, 3- trifluoro-2-hidroxipropil}-1-(4-fluorofenil)-lff-pirazole-4- carboxamida

A uma solução de 5-amino-l-(4-fluorofenil)-N-{ [2-(tif luorometil) -2-oxiranil] metil} -l.fí-pirazole-4-carboxamida (2 g, 5,8 mmol) em acetonitrilo (25 mL) foi adicionada etilamina (5 mL, 23 mmol). A solução foi agitada à temperatura ambiente durante 24 horas sob azoto, antes de ter sido adicionada mais 123 etilamina (2 mL). A solução foi concentrada sob pressão reduzida para dar o composto em epígrafe (2,290 g). RMN de XH (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 7,64 (s, 1H) 7,50 -7,56 (m, 2H) 7,19 - 7,25 (m, 2H) 6,29 (s. 1., 1H) 5,46 (s, 2H) 3,83 (dd, J=14,4, 7,6 Hz, 1H) 3,60 (dd, J=14,3, 4,7 Hz, 1H) 3,08 (d, J=13,4 Hz, 1H) 2,63 - 2,84 (m, 3H) 1,13 (t, 3H). LC-MS Tempo de retenção 2,06 min, MH+ 390.

Preparação Alternativa A do Intermediário 17

Uma solução de 5-amino-N-(2-{[etil(fenilmetil)amino]metil}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4-fluorofenil)-lH-pirazole-4-carboxamida (0,39 g, 0,813 mmol) em etanol (35 mL) foi agitada sob uma atmosfera de hidrogénio sobre catalisador de Pearlman (45 mg) durante 7 horas (captados 32 mL de hidrogénio). O catalisador foi filtrado e o filtrado foi evaporado para dar o composto em epígrafe (0,313 g) como um sólido branco. RMN de XH ( 400 MHz, DMSO-CÍ6) δ ppm 8,10 (t, 1H) 7,94 (s, 1H) 7,54 - 7,61 (m, 2H) 7,33 - 7,40 (m, 2H) 6,37 (s. 1., 2H) 3, 65 (dd, J=6,3 Hz, 1H) 3,46 (dd, J=14,0, 5,7 Hz , 1H) 2,72 (dd, J=5,6 Hz, 2H) 2, 52 - 2,62 (m, 2H) 1,01 (t, J=7,l Hz, 3H). LC-MS Tempo de retenção 2,00 min, MH+ 390. 124

Intermediário 18: 3-Amino-2-{[etil(fenilmetil)amino]metil} 1,1,1-trifluoro-2-propanol

A uma solução de 4-metilbenzenossulfonato de [2-(trifluorometil)-2-oxiranil]metilo (4,15 g, 14 mmol) em dioxano anidro (35 mL) foi adicionada N-etilbenzilamina (2,4 mL, 16,1 mmol) . A mistura foi agitada sob azoto a 21 °C durante 24 horas. Foi adicionada amónia 0,5 M em dioxano (200 mL, 100 mmol), agitado durante 30 minutos e em seguida aquecido a 100 °C durante 24 horas. Foi deixado arrefecer, o sólido filtrado e o filtrado evaporado sob pressão reduzida para dar um resíduo (4,7 g). Este foi purificado sobre Flashmaster (cartuchos de sílica 3 x 100 g) utilizando um gradiente de 0-25% metanol em diclorometano ao longo de 60 minutos para dar o composto em epígrafe (2,64 g) como um óleo. RMN de XH (400 MHz, DMSO-c/6) δ ppm 7,17 - 7,38 (m, 5H) 3,84 (d, J=13,8 Hz, 1H) 3,56 (d, J=13, 8 Hz, 1H) 2,79 (s, 2H) 2,62 -2,76 (m, 2H) 2,53 - 2,61 (m, 1H) 2, 38 - 2, 48 (m, J=13,4, 6,9, 6,8 Hz, 1H) 0,94 (t, J=7,0 Hz, 3H) . LC-MS Tempo de retenção 2,18 min, MH+ 277. 125

Intermediário 19: õ-Anu-no-N- (2-{ [etil (f enilmetil) amino] me til}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4-fluorofenil)-1H-pirazole-4-carboxamida

Foi adicionada diisopropiletilamina (0,175 mL, 1 mmol) a uma mistura de ácido 5-amino-l-(4-fluorofenil)-líí-pirazole-4-carboxílico (0,119 g, 0,54 mmol) e hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotriazol-l-il)-N, N, N', N '-tetrametilurónio (HATU) (0,205 g, 0,54 mmol) em dimetilformamida (1 mL). A mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 20 minutos, em seguida foi adicionada uma solução de 3-amino-2-{[etil(fenilmetil)amino]metil}-l,1,1-trifluoro-2-propanol (0, 296 g, 1,07 mmol) em dimetilformamida (1 mL) . A mistura reaccional foi agitada à temperatura ambiente durante 4 horas. A mistura reaccional foi partilhada entre acetato de etilo (30 mL) e água (30 mL) e a fase orgânica separada lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio, filtrada e evaporada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia sobre sílica (10 g) utilizando um gradiente de 0-100% de acetato de etilo em ciclo-hexano ao longo de 15 minutos para dar o composto em epígrafe (0,39 g) . RMN de XH (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 7,50 - 7,55 (m, 2H) 7,49 (s, 1H) 7, 25 - 7, 36 (m, 5H) 7,19 - 7,24 (m, 2H) 5,83 - 5,89 (m, 1H) 5,71 (s. 1., 1H) 5,46 (s. 1., 2H) 3, 78 - 3, 87 (m, 2H) 3,63 (d, J=13,4 Hz, 1H) 3,48 (dd, J=14,l, 4,5 Hz, 1H) 2,98 (d, 126 J= 14,9 Hz, 1H) 2,77 (d, J=15,2 Hz, 1H) 2,56 - 2,72 (m, 2H) 1,06 (t, J=7,1 Hz, 3H) . LC-MS Tempo de retenção 2,58 min, MH+ 480.

Intermediário 20: Butanoato de (S)-3,3,3-trifluoro-2- hidroxi-2-(hidroximetil)propilo

OH

O

Preparação de Precipitado de Lipase Amano PS

Amano PS (disponível de Amano Enzymes) (10 g) foi suspensa em água (30 mL) e filtrada através de um tubo de filtração Bond elute da Varian, lavando com água (20 mL). Após precipitação com propan-2-ol (200 mL), a suspensão foi deixada depositar e o sobrenadante decantado para deixar um volume de 50 mL de suspensão que foi centrifugada a 4000 rpm durante 5 minutos e o sobrenadante decantado para deixar o composto em epígrafe.

Dessimetrização Catalisada por Lipase utilizando Precipitado de Amano PS

Foi adicionado butirato de vinilo (1 mL) a uma mistura, mantida sob agitação, de peneiros moleculares de 4 A (2 g), precipitado de lipase de Amano PS (100 mg) e 2-(trifluorometil)- 127 1,2,3-propanotriol (1 g) suspensos em éter 1,1-dimetiletílico metílico (10 mL) e a mistura agitada à temperatura ambiente. A mistura foi filtrada através de celite após 21,5 horas, lavando com diclorometano, concentrada, diluída com tolueno (20 mL) e lavada com cloreto de sódio aquoso saturado (2 x 20 mL), seca (Na2S04) e evaporada para dar um óleo amarelo claro. A espectroscopia de RMN de 19F apresentou uma mistura a 20:1 de monoéster/diéster sem triol de partida. O óleo amarelo foi purificado por cromatografia sobre sílica utilizando uma mistura 1:1 de diclorometano/ciclo-hexano como eluente para remover os produtos secundários, seguida de eluição com diclorometano/acetato de etilo para proporcionar o composto em epígrafe como um óleo amarelo pálido (0,64 g). RMN de XH (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 4,45 (d, 1H) 4,35 (d, 1H) 3,85 (dd, 1H) 3,73 (dd, 1H) 2,37 (t, 2H) 1,64 - 1,74 (m, 2H) 0,98 (t, 3H).

Determinação do excesso enantiomérico

Cloreto de (R)-(-)-α-metoxi-a-trifluorometilfenilacetilo (45 pL) e cloreto de (S)-(+)-a-metoxi-a- trifluorometilfenilacetilo (45 pL) foram adicionados a duas reacções paralelas contendo misturas do composto em epígrafe (20 mg) em piridina (22 pL) e diclorometano (1 mL) e as misturas resultantes agitadas à temperatura ambiente. Após 1 hora, as misturas foram lavadas com uma solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (1 mL) em seguida uma solução aquosa 2 M de HC1 (1 mL) e finalmente água (1 mL) e as porções orgânicas concentradas e as misturas em bruto analisadas por RMN de 19F a 128 partir da qual foi determinado que o composto em epígrafe tinha um excesso enantiomérico de 88% e 86% respectivamente.

Preparação Alternativa A do Intermediário 20

Preparação de Solução de Amano PS

Amano lipase PS (100 g) foi suspensa em solução de fosfato de potássio 1 M, pH 7 (400 mL) e filtrada, lavando o bolo com mais solução tampão (100 mL) para dar uma solução amarela/castanha como o filtrado.

Imobilização de Amano PS em Sepabeads

Foi adicionada solução de Amano PS (100 mL) a sepabeads EC-EP (disponível de Mitzubishi-Resindion) (40 g) e a mistura agitada à temperatura ambiente. Após 23 horas foi removido tanto líquido quanto possível com uma pipeta e o líquido substituído por um volume igual de uma solução de fosfato de potássio 1 M, pHlO e a agitação continuou. Após 92 horas, a mistura foi filtrada e o resíduo lavado com água (3 X 50 mL), suspenso numa solução saturada de octadecilamina em tolueno (50 mL) e agitada à temperatura ambiente durante mais 25 horas. A mistura foi filtrada, lavada com tolueno (2 X 100 mL) e acetona (25 mL) e deixada sob sucção para proporcionar um pó fluido. A enzima imobilizada foi obtida como esferas castanhas pálidas (17,29 g) . 129

Dessimetrização Catalisada por Lipase utilizando Amano PS em Sepabeads

Em reacções paralelas, uma mistura de 2-(trifluorometil)-1,2,3-propanotriol (100 mg), Amano PS em Sepabeads (100 mg), butirato de vinilo (0,3 mL) e solvente (como se mostra no quadro 1 abaixo) (1 mL) foi agitada à temperatura ambiente. As reacções foram analisadas por RMN de 19F após 42 horas para dar as proporções dos picos de 2-(trifluorometil)-1,2,3-propanotriol (triol) / composto em epígrafe /butanoato de 2-[(butanoiloxi)metil]-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropilo (diéster) mostradas no quadro 1 abaixo.

Quadro 1

Entra da Triol/mg Catalisador/mg Butirato de vinilo/mL Solvente /1 mL Composição após 42 horas (RMN de 19F -% área pico) Diéster Composto em epígrafe Triol material de partida 1 100 100 0,3 TBME 3 47 39 2 100 100 0,3 TBME 4 80 16 3 100 100 ro o THF Não reagiu 47 53 4 100 100 ro o Tolueno 16 4 78 5 100 100 co o tBuOH 1 47 53 6 100 100 0,3 MeCN 3 28 69 * Também foram adicionadas 10 esferas de peneiros moleculares de 4 Ã no inicio da reacção. 130

Determinação do Excesso Enantiomérico A reacções em paralelo, foi adicionado cloreto de (R)-(-)-α-metoxi-a-trifluorometilfenilacetilo (45 pL) a misturas do composto em epígrafe em bruto (20 mg) em piridina (22 pL) e diclorometano (1 mL) e as misturas resultantes foram agitadas à temperatura ambiente. Após 1 hora, as misturas foram lavadas com HC1 2 Μ (1 mL), separadas e as porções orgânicas lavadas com uma solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (1 mL), as porções orgânicas foram então concentradas sob uma corrente de azoto e analisadas por RMN de 19F a partir da qual foram obtidos os excessos enantioméricos do composto em epígrafe.

Quadro 2

Reacção % ee (RMN de 19f) 1 61 2 74 3 55 4 Não testada 5 52 6 32

Preparação Alternativa B do Intermediário 20

Foi preparada uma solução a 10 g/L de 2-(trifluorometil)-1,2,3-propanotriol em butirato de vinilo/TBME (1: 9) e feita passar através de uma coluna Omnifit (10 cm x 0,6 cm) para as Entradas 1 - 3 e 2 colunas Omnifit (10 cm x 1,2 cm) em paralelo para as Entradas 4 e 5, todas empacotadas à capacidade máxima 131 com lipase Amano PS ou sepabeads à temperatura ambiente utilizando uma bomba de HPLC e um amortecedor de impulsos adaptado depois da coluna. A coluna foi deixada equilibrar durante 1 hora ao alterar as condições para cada Entrada antes da amostragem (retiradas amostras de cerca de 5 mL) da saída da coluna. Cada amostra colhida foi evaporada e analisada por RMN de 19F.

Quadro 3

Entrada [Triol] g/dnf3 Coluna tamanho/cm N° de colunas em paralelo Caudal / cm3min_1 Aspecto TLC Composição (RMN de 19F -% área do Pico) Diéster Monoéster (composto em epígrafe) Triol 1 10 10 x 0,6 1 0, 5 < 50% monoéster 2 32 42 2 10 10x0,6 1 0, 2 >50% monoéster 4 69 28 3 1 10 x 0,6 1 0, 5 -50% monoéster 4 46 50 4 10 10 x 1,2 2 0,5 Apenas monoéster 2 89 7 5 10 10 x 1,2 2 1 Monoéster + vestígios de diéster 2 63 35

Determinação do Excesso Enantiomérico

Foi adicionado cloreto de (R)-(-)-a-metoxi-a-trifluorometilfenilacetilo (40 pL) ou cloreto de (S)-(+)-α-metoxi-a-trifluorometilfenilacetilo a reacções em paralelo contendo as misturas de monoésteres (20 mg) mostradas 132 no Quadro 4 abaixo em piridina (20 pL) e diclorometano (1 mL) e as misturas resultantes agitadas à temperatura ambiente. Após 1 hora, as misturas foram lavadas com uma solução aquosa 2 M de HC1 (1 mL), em seguida uma solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (1 mL), as porções orgânicas foram concentradas e as misturas em bruto foram analisadas por RMN de 19 F a partir da qual foram obtidos os excessos enantiomericos do composto em epígrafe.

Quadro 4

Entrada % ee (RMN de 19F) 1 74 2 70 3 Não testada 4 78 5 67 IA 72 5A 66 *As amostras IA, 5 e 5A foram feitas reagir com cloreto de (S)-(+)-α-metoxi-a-trifluorometilfenilacetilo. 133

Intermediário 21: Butanoato de (R)-3,3,3-trifluoro-2- hidroxi-2-({[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}metil)propilo

Butanoato de (S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroxi-2- (hidroximetil)propilo (372 mg) foi dissolvido em diclorometano seco (4 mL) e piridina seca (3 mL) e arrefecido num banho de gelo sob azoto. Foi adicionado cloreto de p-toluenossulfonilo (0,4 g) e a reacção foi agitada à temperatura de um banho de gelo durante 1 hora e em seguida à temperatura ambiente de um dia para o outro. A reacção foi deixada agitar à temperatura ambiente sob azoto durante mais 2 dias. O solvente foi evaporado e o resíduo foi partilhado entre acetato de etilo e água. A camada orgânica foi lavada com ácido clorídrico 1 M, água, bicarbonato de sódio, solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca utilizando um vidro poroso hidrófobo e evaporado para dar um óleo laranja (0,68 g). Este foi dissolvido em diclorometano e aplicado a um cartucho de SPE de 50 g e eluído com diclorometano seguido de 10% de metanol em diclorometano. As fracções relevantes foram combinadas e evaporadas para dar o composto em epígrafe como um óleo amarelo pálido (0,36 g). RMN de (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) d ppm 7,82 (d, 2H) 7,39 (d, 2H) 4,32 - 4,41 (m, 2H) 4,16 - 4,22 (m, 2H) 3,68 - 3,69 (m, 1H) 2,48 (s, 3H) 2,34 (t, 2H) 1,60 - 1,69 (m, 2H) 0,95 (t, 3H). LC-MS Tempo de retenção 3,33 min, MNH4+ 402. 134

Foram combinadas quatro fracções adicionais que continham produto por TLC (eluido com 10% MeOH/DCM) e evaporadas para dar um óleo laranja (0,39 g) que foi dissolvido em DCM e aplicado a uma coluna de SPE de 20 g e purificado sobre Flashmaster eluindo com um gradiente de 0-50% de acetato de etilo/ciclo-hexano ao longo de 20 minutos. As fracções contendo o produto foram evaporadas para dar um óleo incolor (0,3 g) . Rendimento total (0,66 g). LC-MS Tempo de retenção 3,48 min, MNH4+ 402.

Intermediário 22: Butanoato de (5)-3,3, 3-trifluoro-2- hidroxi-2-{[(fenilmetil)amino]metil}propilo

Resina de carbonato suportada em polímero (ex Fluka, 3,5 mmol/g, 0,96 g) foi lavada exaustivamente com tetra-hidrofurano seco (5 vezes). Butanoato de (R)-3,3,3-trifluoro-2-hidroxi-2-({[ (4- metilfenil)sulfonil]oxi}metil)propilo (0,43 g) foi dissolvido em tetra-hidrofurano seco (5 mL) e agitado com o carbonato suportado em polímero de um dia para o outro. A resina foi filtrada e a solução reaccional foi tratada com benzilamina (122 pL). A reacção foi agitada à temperatura ambiente sob azoto, de um dia para o outro. Foi adicionada uma porção adicional de benzilamina (24 pL) e a reacção foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas. O solvente foi evaporado 135 para dar o composto em epígrafe como um líquido incolor (0,38 g). RMN de XH (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) d ppm 7,27 - 7,38 (m, 5H) 4,28 - 4,32 (m, 1H) 4,16 - 4,20 (m, 1H) 3, 82 - 3,92 (m, 4H) 3,01 - 3,06 (m, 1H) 2, 71 - 2,77 (m, 1H) 2,28 - 2,32 (m, 2H) 1,60 - 1,69 (m, 2H) 0,91 - 0,99 (m, 3H) • LC-MS Tempo de retenção 2,72 min, MH+ 320.

Intermediário 23: (S)-3,3,3-Trifluoro-2-{[(fenilmetil)amino]metil}-l,2-propanodiol

Butanoato de (S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroxi-2- {[(fenilmetil)amino]metil}propilo (0,32 g) foi dissolvido em ácido clorídrico 5 M (5 mL) e etanol (5 mL) e aquecido a 100 °C durante 3 horas. Depois de arrefecer, o etanol foi evaporado e o aquoso remanescente foi basificado com hidróxido de sódio 2 M e extraído com acetato de etilo (2 vezes). Os orgânicos combinados foram secos utilizando um vidro poroso hidrófobo e evaporados para dar o composto em epígrafe como um óleo amarelo pálido (0,26 g). RMN de (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) 3 ppm 7,28 - 7,40 (m, 5H) 3,82 - 3,91 (m, 3H) 3,61 (d, 1H) 3,52 (s, 1H) 3,12 (d, 1H) 2,91 (d, 1H) . 136 LC-MS Tempo de retenção 1,65 min, MH+ 250.

Intermediário 24: (5)-2-(Aminometil)-3,3,3-trifluoro-1,2- propanodiol

(S)-3,3,3-Triluoro-2-{[(fenilmetil)amino]metil}-l,2-propanodiol (160 mg) foi dissolvido em metanol (1,5 mL) e hidrogenado utilizando paládio a 10% sobre carvão como o catalisador e o H-cube (Thales) como a fonte de hidrogénio. O solvente foi cuidadosamente evaporado para dar um óleo volátil rosado (112 mg) que por RMN de ΧΗ continua a conter 13% de material de partida. Por isso, este foi re-dissolvido em metanol (2 mL) e novamente hidrogenado utilizando o H-cube. O solvente foi evaporado para dar o composto em epigrafe como um óleo rosa/castanho (93 mg). RMN de 1H (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) d ppm 3,85 (d, 1H) 3,57 (d, 1H) 3,50 (s, 4H) 3,15 (s, 1H) 2,98 (d, 1H). LC-MS Tempo de retenção 0,41 min, MH+ 160. 137

Intermediário 25: (S)-5-Amino-l-(4-fluorofenil)-N-[3, 3,3- trif luoro-2-hidroxi-2- (hidroximetil) propil] -lff-pirazole-4-carboxamida

Ácido 5-amino-l- (4-f luorofenil) -líí-pirazole-4-carboxílico (104 mg) foi dissolvido em dimetilformamida seca (3 mL) e foi adicionada diisopropiletilamina (0,33 mL) seguida da adição de hexafluorofosfato de O-(7-Azabenzotriazol-l-il)-N,N,N',N'-tetrametilurónio (196 mg). A reacção foi agitada à temperatura ambiente, sob azoto, durante 20 minutos. Foi adicionada (S)-2-(aminometil)-3,3,3-trifluoro-1,2-propanodiol (90 mg) em dimetilf ormamida seca (2 mL) e a reacção foi agitada à temperatura ambiente durante 3 horas. A reacção foi partilhada entre acetato de etilo (50 mL) e água (50 mL) e a fase aquosa separada foi re-extraida com acetato de etilo (50 mL). Os orgânicos combinados foram lavados com água, ácido clorídrico 1 M, solução de cloreto de lítio a 10% (2 vezes), bicarbonato e solução aquosa saturada de cloreto de sódio. Os orgânicos foram secos utilizando um vidro poroso hidrófobo e evaporados para dar um óleo amarelo pálido (200 mg). Este foi dissolvido em diclorometano (ca. 5 mL) e deixado em repouso à temperatura ambiente durante 4 horas em que se formou um precipitado. O precipitado foi filtrado e lavado com uma pequena quantidade de diclorometano para dar o composto em epígrafe como um sólido branco (93 mg). 138 RMN de ΧΗ (400 MHz, DMSO-cfe) δ ppm 8,15 - 8,22 (m, 1H) 8,01 (s, 1H) 7, 55 - 7,60 (m, 2H) 7, 34 - 7, 40 (m, 2H) 5,76 (s, 2H) 5,17 - 5,21 (m, 1H) 3,40 - 3,68 (m, 4H). LC-MS Tempo de retenção 2,47 min, MH+ 363. O filtrado anterior foi evaporado e o residuo foi dissolvido em DMSO/MeOH (1 mL 1:1) e purificado sobre MDAP. As fracções contendo produto foram combinadas e evaporadas para dar o composto em epigrafe como um óleo incolor (28 mg) (rendimento total 121 mg) RMN de 1H mostrou um produto puro. LC/MS Tempo de retenção 2,51 min, MH+ 363.

Intermediário 26: 4-Metilbenzenossulfonato de (5)-2-[({[5-amino-1-(4—fluorofenil)-lH-pirazol-4-il]carbonil}amino)metil]-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipronilo

O NH. '2 (S)-5-Amino-l-(4-fluorofenil)-N- [3,3,3-trifluoro-2-hidroxi-2-(hidroximetil)propil]-lH-pirazole-4-carboxamida (90 mg) foi dissolvida em diclorometano seco (3 mL) e piridina seca (3 mL) e arrefecida num banho de gelo sob azoto. Foi adicionado cloreto de p-toluenossulfonilo (62 mg) e a reacção foi agitada à temperatura de um banho de gelo durante 1 hora e em seguida à 139 temperatura ambiente durante 24 horas. Foi adicionado cloreto de p-toluenossulfonilo (25 mg) e a reacção foi agitada à temperatura ambiente, sob azoto durante um fim-de-semana. Foi adicionado cloreto de p-toluenossulfonilo (25 mg) e a reacção foi agitada à temperatura ambiente sob azoto durante 2 horas e aquecida a 50 °C durante 2 horas e deixada agitar à temperatura ambiente de um dia para o outro. O solvente foi evaporado e o resíduo foi partilhado entre diclorometano e água. A camada orgânica foi lavada com ácido clorídrico 1 M, água, bicarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca utilizando um vidro poroso hidrófobo e evaporada para dar uma espuma bege (94 mg). Esta foi dissolvida em diclorometano e aplicada num cartucho de SPE de 10 g e purificada sobre Flashmaster eluindo com um gradiente de 0-50% de acetato de etilo em ciclo-hexano ao longo de 20 minutos. A fracção apropriada foi evaporada para dar o composto em epigrafe como um óleo incolor (83 mg). RMN de XH (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) 3 ppm 7, 79 - 7,83 (m, 2H) 7, 71 (S, 1H) 7, 50 - 7, 55 (m, 2H) 7,37 - 7,41 (m, 2H) 7,20 - 7,26 (m 2H) 6, 60 - 6, 68 (m, 1H) 6,56 (s, 1H) 5,46 (s, 2H) 4, 17 - 4, . 24 (m , 1H) 3, 98 - 4,07 (m, 1H) 3 ,60 - - 3,70 (m, 1H) 3, 45 - 3, . 55 (m, 1H) 2, 47 (s, 3H) . LC-MS Tempo de retenção 3,33 min, MH+ 517. 140

Intermediário 27: (S)-5-Amino-l-(4-fluorofenil) -N-{ [2 (trifluorometil)-2-oxiranil]metil}-lff-pirazole-4-carboxamida.

Resina de carbonato suportada em polímero (3,5 mmol/g, 137 mg) foi lavada exaustivamente com tetra-hidrofurano seco (5 vezes). 4-Metilbenzenossulfonato de (S)-2-[({[5-amino-l-(4-fluorofenil) -liJ-pirazol-4-il] carbonil}amino)metil] -3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropilo (83 mg) foi dissolvido em tetra-hidrofurano seco (5 mL) e agitado com a resina suportada em polímero de um dia para o outro. A resina foi filtrada e a solução foi evaporada para dar o composto em epígrafe como um sólido bege (60 mg). RMN de XH (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) d ppm 7, 60 (s, 1H) 7,50 - 7,55 (m, 2H) 7 ,19 - 7,25 (m, 2H) 5, r 73 (s. 1., 1H) 5,47 (s. 1., 2H) 4,21 - 4,31 (m, 1H) 3,73 - 3,78 (m, 1H) 3,13 (d, 1H) 2, 95 - 2,98 (m, 1H). LC-MS Tempo de retenção 2,84 min, MH+ 345. 141

Intermediário 28: l-Cloro-3-[(difluorometil)oxi]-2 metilbenzeno

Foi borbulhado difluoroclorometano numa mistura, mantida sob agitação, de 3-cloro-2-metilfenol (5 g), hidróxido de sódio (4,8 g) e brometo de tetraetilamónio (0,92 g) em dioxanorágua (100 mL:10 mL) aquecida a 75-80 °C. Foi observada uma exotérmica inicial que cessou após ca. 10 minutos, também foi observado um precipitado branco. Após ca. 15 minutos, foi parada a adição de difluoroclorometano e a mistura reaccional deixada arrefecer até à temperatura ambiente. A mistura reaccional foi partilhada entre éter (200 mL) e água (200 mL) . A fase orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca (MgSCg), filtrada e evaporada. O resíduo foi purificado por cromatografia sobre sílica (cartucho de 100 g) eluindo com 0-50% de acetato de etilo em ciclo-hexano ao longo de 40 minutos. As fracções apropriadas foram combinadas e evaporadas para dar o composto em epígrafe como um óleo incolor. RMN de (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) 5 ppm 7,28 (d, 1H), 7,16 (t, 1H), 7,05 (d, -1H), 6,53 (t, 1H, J = 75Hz), 2,38 (s, 3H) . LC-MS Tempo de retenção 3,59 min. 142

Intermediário 29: Ácido 2-cloro-6 [(difluorometil)oxi]benzóico

Foi adicionado permanganato de potássio (1,64 g) em porções ao longo de um período de 4 horas a uma mistura, mantida sob agitação, de l-cloro-3-[(difluorometil)oxi]-2-metilbenzeno (0, 999 g) em t-butanol/água (20 mL, 1:1) aquecida a 100 °C. A mistura reaccional foi aquecida durante mais 4 horas - tempo de aquecimento total foi 8 horas. A mistura reaccional foi deixada arrefecer até à temperatura ambiente e em seguida deixada em repouso de um dia para o outro. Foi adicionada gota a gota uma solução aquosa de metabissulfito de sódio (5%) até a cor púrpura desaparecer e a mistura resultante foi filtrada. O filtrado foi ajustado a pH 10 utilizando solução aquosa de carbonato de sódio e extraído com éter (100 mL) . A porção aquosa foi acidificada utilizando ácido clorídrico aquoso (2 M) até pH 1 e em seguida extraída com éter (100 mL) . A camada de éter foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca (MgS04), filtrada e evaporada. Foi obtido o composto em epígrafe como um óleo incolor (0,538 g). RMN de 1H (400 MHz, CLOROFÓRMIO-tí) 3 ppm 7,42 (t, lH), 7,34 (dd, 1H), 7,20 (dd, 1H), 6,55 (t, 1H, J=75Hz), 5,9 (s. 1., 1H) . LC-MS Tempo de retenção 1,90 min, MNH4+ 240, ES~ 221. 143

Intermediário 30: 2-[(Difluorometil)oxi]-6-fluorobenzoato de metilo

A uma solução de 6-fluorossalicilato de metilo (1,07 g) em DMF anidra (25 mL) agitada a 21 °C foi adicionado carbonato de potássio (4,15 g) e carbonato de césio (3,26 g) . A mistura reaccional foi agitada durante 30 minutos e em seguida arrefecida em gelo durante 20 minutos. Foi adicionado iododifluorometano (5 g), o banho de gelo foi removido e a agitação continuou durante 18 horas. A mistura reaccional foi partilhada entre éter (250 mL) e água (250 mL) . A fase orgânica foi lavada com água (100 mL), ácido clorídrico 2 M (100 mL), cloreto de lítio (100 mL), água (100 mL) e solução aquosa saturada de cloreto de sódio (100 mL), seca sobre sulfato de magnésio e evaporada para dar um óleo (1,68 g) . O produto em bruto foi purificado sobre 2 colunas Flash de sílica pré-empacotadas (100 g) eluindo com 0-50% de acetato de etilo e ciclo-hexano durante 60 minutos. As fracções apropriadas foram combinadas e evaporadas para dar o composto em epígrafe como um óleo (800 mg). RMN de XH (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) d ppm 7,43 (m, lH), 7,04 (m, 2H), 6,54 (t, 1H, J=72Hz), 3,96 (s, 3H). LC-MS Tempo de retenção 1,18 min. 144

Intermediário 31: Ácido 2-[(difluorometil)oxi] -6 fluorobenzóico

A uma solução de 2-[(difluorometil)oxi]-6-fluorobenzoato de metilo (800 mg) em dioxano anidro (20 mL) foi adicionada uma solução de hidróxido de litio (260 mg) em água (10 mL) . Foi agitada durante 15 horas, evaporada, dissolvida em água (25 mL) e extraída com acetato de etilo (25 mL) e éter (25 mL) . A fase aquosa foi acidificada com ácido clorídrico 5 M e extraida com acetato de etilo (2 x 25 mL) . As fases orgânicas combinadas foram lavadas com água (10 mL) e solução aquosa saturada de cloreto de sódio (10 mL), secas sobre Na2S04 e evaporadas para dar um óleo que cristalizou (616,3 mg). Foi triturado com heptano (ca. 10 mL) e filtrado para dar o composto em epigrafe (456 mg). RMN de XH (400 MHz, DMSO-d6) 3 ppm 7,57 (m, 1H) , 7,28 (t, 1H, J=72Hz), 7,23 (t, 1H), 7,16 (d, 1H). LC-MS Tempo de retenção 1,41 min, ES~ 205. 145

Intermediário 32: [(2,6-Diclorofenil)carbonil]carbamato de 1,1-dimetiletilo

Uma suspensão, mantida sob agitação, de 2,6-diclorobenzamida (4,7 g) em diclorometano (80 mL) foi tratada com dicarbonato de di-t-butilo (10,1 g) seguido de 4-dimetilaminopiridina (350 mg) . A solução, que se formou após 15 minutos e após libertação visível de azoto, foi agitada durante 20 horas antes de ser diluída com diclorometano (150 mL) e lavada com ácido clorídrico 1 Μ (1 x 100 mL), água (1 x 80 mL) e em seguida passada através de um vidro poroso hidrófobo. A fase orgânica foi concentrada in vacuo para dar um óleo incolor (8,5 g) . Este óleo foi dissolvido em etanol (80 mL) antes de ser tratado com hidróxido de sódio 2 M (12,5 mL) . A mistura foi agitada durante 90 horas, antes de ter sido adicionado mais hidróxido de sódio 2 M (10 mL) e a agitação continuou durante mais 22 horas. O solvente foi concentrado in vacuo e o resíduo foi partilhado entre acetato de etilo (200 mL) e água (150 mL) . A fase orgânica separada foi ainda lavada com água (2 x 50 mL), feita passar através de um vidro poroso hidrófobo e concentrada in vacuo para dar o composto em epígrafe (6,25 g) como um sólido branco. RMN de XH (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 7,62 (s. 1., 1H) 7,25 - 7,37 (m, 3H) 1,37 (s, 9H) 146 LC-MS Tempo de retenção 3,25 min, MNH4+ 307.

Intermediário 33: [(2,6-Diclorofenil)carbonil]{ [2-(trifluorometil)-2-oxiranil]metil}carbamato de 1,1-dimetiletilo

Uma solução, mantida sob agitação, de [(2,6-diclorofenil)carbonil]carbamato de 1,1-dimetiletilo (6,25 g) em 1,2-dimetoxietano (100 mL) foi tratada com hidreto de sódio (dispersão a 60%, 880 mg) em porções ao longo de 15 minutos. Depois de agitar durante 45 minutos, a solução turva foi transferida para um funil de carga de 100 mL e adicionada gota a gota a uma solução, mantida sob agitação, de 4-metilbenzenossulfonato de [2-(trifluorometil)-2-oxiranil]metilo (6,6 g) em 1,2-dimetoxietano (100 mL) . A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 19 horas. Foi adicionado propan-2-ol (1,5 mL) e após 15 minutos a mistura completa foi partilhada entre acetato de etilo (300 mL), água (100 mL) e solução aquosa saturada de cloreto de sódio (50 mL) . A fase orgânica separada foi então lavada com água (2 X 50 mL), solução aquosa saturada de cloreto de sódio (1 x 50 mL), feita passar através de um vidro poroso hidrófobo, concentrada in vacuo e re-evaporada in vacuo com etanol (2 x 50 mL) para dar um 147 óleo amarelo (11,1 g). Este foi dissolvido em diclorometano (10 mL) e aplicado num cartucho de SPE de 70 g. A eluição com acetato de etilo: éter de petróleo (1: 9) em seguida (1:6) deu dois óleos incolores (6:8 g) e (1,9 g) . A repurificação num cartucho de SPE de 70 g com acetato de etilo:éter de petróleo (1: 19) em seguida (1:9) como eluente deu o composto em epígrafe (5,4 g) . RMN de ΧΗ (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 7,28 -7,26 (m, 3H) 4,76 (d, J=4,5 Hz, 1H) 4,39 (d, J=4,5 Hz 1H), 3,09 -3, 04 (m, 2H), 1,56 (s, 1H) 1,27 (s, 9H) . LC-MS Tempo de retenção 3,78 min, MNH4+ 431.

Intermediário 34: N-[2-(Azidometil)-3, 3,3-trifluoro-2- hidroxipropil]-2,6-diclorobenzamida

Uma solução, mantida sob agitação, de [(2,6-diclorofenil)carbonil]{[2-(trifluorometil)-2-oxiranil]metil}carbamato de 1,1-dimetiletilo (0,66 g) em dimetilformamida (12 mL) e água (0,2 mL) foi tratada com azida de sódio (0,305 g). A mistura foi agitada à temperatura ambiente 148 de um dia para o outro antes de ser partilhada entre acetato de etilo (50 mL) e água (40 mL) . A fase aquosa separada foi ainda extraída com acetato de etilo (2 x 30 mL) e os extractos orgânicos combinados foram lavados com água (3 x 25 mL), solução aquosa saturada de cloreto de sódio (1 x 20 mL), feitos passar através de um vidro poroso hidrófobo e concentrados in vacuo para dar uma goma incolor (0,71 g) .

Esta goma foi dissolvida em diclorometano (2 mL) e aplicada num cartucho de SPE de 50 g. A purificação via o sistema

Flashmaster 2 utilizando um gradiente de 0-25% de acetato de etilo em diclorometano ao longo de 60 minutos deu, após combinação e concentração in vacuo das fracções relevantes, o composto em epígrafe (235 mg) como uma goma incolor. RMN de 1H (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 7, 30 - 7, 44 (m, 3H) 6,21 (s. 1., 1H), 4,64 (s, 1H) 3, 95 -3, 82 (m, 2H) , 3,69 (ABq, J=12,0 Hz, 2H). LC-MS Tempo de retenção 3,03 min, MNH4+ 374. 149

Intermediário 35: N-[2-(Aminometil)-3,3,3-trifluoro-2- hidroxipropil]-2, 6-diclorobenzamida

Uma solução, mantida sob agitação, de N-[2-(azidometil)-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil]-2,6-diclorobenzamida (0,06 g) em tetra-hidrofurano seco (30 mL) foi tratada com trifenilfosfina ligada a polímero (3 mmol/g, 2,01 g) . A mistura foi vigorosamente agitada à temperatura ambiente durante 19 horas, antes de ter sido adicionada água (3 mL) . A agitação continuou à temperatura ambiente durante mais 24 horas. A suspensão foi então diluída com tetra-hidrofurano (50 mL) e em seguida filtrada através de uma almofada de hyflo. A almofada foi lavada com mais tetra-hidrofurano (2 x 30 mL) . O filtrado e as lavagens combinados foram partilhados entre acetato de etilo (100 mL) e água (50 mL) . A fase orgânica separada foi ainda lavada com água (2 x 50 mL), feita passar através de um vidro poroso hidrófobo e concentrada in vacuo e em seguida re-evaporada in vacuo com etanol (1 x 20 mL) para dar o composto em epígrafe (0,84 g) como uma goma quase incolor. RMN de XH (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 7,24 - 7,40 (m, 3H) 6,15 (s. 1., 1H) 3,95 (dd, J=15, 8 Hz, 1H) 3,58 (dd, J=15,4 Hz, 1H) 3,19 (d, J=14 Hz, 1H) 2,99 (d, J=14 Hz, 1H) 1,5 (1. 2H). LC-MS Tempo de retenção 1,75 min, MH+ 331, 333. 150

Intermediário 36: 2-Bromo-l,3-bis(dibromometil)benzeno

Br

Br Br Br

Br A uma suspensão de N-bromossuccinimida (28,5 g) em tetracloreto de carbono (250 mL) foram adicionados 2-bromo-l,3-dimetilbenzeno (2,66 mL) e AIBN (20 mg). A mistura foi agitada e aquecida a refluxo sob azoto durante 16 horas. Foram adicionados mais N-bromossuccinimida (5,6 g) e AIBN (20 mg) e o aquecimento a refluxo continuou durante 3 horas. Foi deixada arrefecer e o sólido foi filtrado e lavado com tetracloreto de carbono (2 x 100 mL). O filtrado foi evaporado para dar um sólido branco (9,8 g), o qual foi triturado com heptano (150 mL) e filtrado para dar o composto em epígrafe (8,3 g). RMN de XH (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) d ppm 8,05 (d, 2H) 7,53 (t, 1H) 7,15 (s, 2H). LC-MS Tempo de retenção 3,96 min. 151

Intermediário 37 - 2-Bromo-l,3-benzenodicarbaldeído

O Br O

Uma mistura de 2-Bromo-l,3-bis(dibromometil)benzeno (8,5 g) em ácido fórmico (130 mL) e água (15 mL) foi agitada e aquecida a refluxo sob azoto durante 20 horas, no decurso das quais o sólido dissolveu-se. Foi concentrada in vacuo para dar uma suspensão que foi partilhada entre água (150 mL) e diclorometano (2 X 200 mL) . As camadas orgânicas reunidas foram lavadas com solução aquosa saturada de cloreto de sódio (100 mL), secas sobre sulfato de magnésio e evaporadas para dar um sólido (4,25 g). A tentativa de cristalização de etanol (ca. 70 mL) falhou e, por isso, foi adicionado ácido clorídrico 2 M (25 mL) e aquecido a refluxo durante 1,5 horas. A mistura foi deixada arrefecer de um dia para o outro e evaporada até um volume pequeno com algum sólido. Este foi então partilhado entre acetato de etilo (150 mL) e água (50 mL) e a fase orgânica foi lavada com água (50 mL), bicarbonato de sódio saturado (30 mL), água (30 mL) e solução aquosa saturada de cloreto de sódio (30 mL) . Foi então seca sobre sulfato de magnésio e evaporada para dar um sólido (3,8 g) . Este foi purificado sobre Flashmaster utilizando cartuchos 2 x 100 g com um gradiente de 0-50% de acetato de etilo em ciclo-hexano ao longo de 1 hora. As fracções puras foram combinadas e evaporadas para dar o composto em epígrafe (2,38 g). RMN de (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) d ppm 10,52 (s, 2H) 8,16 (d, 2H) 7,59 (t, 1H) 152 LC-MS Tempo de retenção 2,40 & 2,64 min.

Intermediário 38: 2-Bromo-l, 3-bis(difluorometil)benzeno

H A uma solução de 2-bromo-l,3-benzenodicarbaldeído (1,4 g) em diclorometano anidro (10 mL) foi adicionada trifluoreto de bis(2-metoxietil)amino-enxofre (solução a 50% em tetra-hidrofurano, 16 mL) ao longo de 10 minutos sob azoto. Foi então adicionado etanol (70 pL), foi observada uma exotérmica e a solução foi agitada a 21 °C durante 3 dias. A solução foi então aquecida a refluxo a 75 °C durante 20 horas. A solução foi vertida para gelo e partilhada entre bicarbonato de sódio saturado (50 mL) e acetato de etilo (100 mL) . A camada aquosa foi retro-extraida com acetato de etilo (50 mL) . As camadas orgânicas foram combinadas, lavadas com água (50 mL) e solução aquosa saturada de cloreto de sódio (50 mL). Foi então seca sobre sulfato de magnésio, filtrada e concentrada para dar um residuo (2,97 g) . Este foi purificado sobre a coluna Flashmaster 2 (100 g) eluindo com um gradiente de 0-100% de diclorometano em ciclo-hexano ao longo de 60 minutos. Este deu um sólido branco (0,38 g) . A uma solução deste sólido branco (285 mg) em tolueno anidro (3 mL) foi adicionado etanol (20 pL) seguido de trifluoreto bis(2-metoxietil)amino-enxofre (solução a 50%, 3 mL) . A solução foi agitada a 100 °C sob azoto durante três dias. Foi deixada arrefecer e vertida para gelo e bicarbonato de sódio saturado (50 mL) . Foi extraida com éter (50 mL), lavada 153 com cloreto de sódio, ácido clorídrico 2 M, água e solução aquosa saturada de cloreto de sódio. Foi então seca sobre sulfato de magnésio e evaporada para dar um óleo escuro e algum sólido (335 mg) . Este foi tratado com heptano (3 mL) e algum material insolúvel foi rejeitado para dar, após evaporação, um óleo e sólido (280 mg).

Destilação de Kugelrohr (3 Torr a ca. 125 °C) deu o composto em epígrafe (124 mg). RMN de XH (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) d ppm 7,80 (d, 2H) 7,57 (t, 1H) 7,00 (t, 2H) . LC-MS Tempo de retenção 1,21 min, MH+ 290.

Intermediário 39: Ácido 2, 6-bis(difluorometil)benzóico

Cloreto de lítio (33 mg) (seco in vacuo a 80 °C) foi suspenso em tetra-hidrofurano anidro (0,4 mL) sob azoto seguido de cloreto de isopropil-magnésio (2 M em tetra-hidrofurano, 0,4 mL) . Esta foi agitada durante 1 hora e em seguida foi adicionada uma solução de 2-bromo-l,3-bis(difluorometil)benzeno (124 mg) em tetra-hidrofurano anidro (0,4 mL) . Esta foi agitada sob azoto a 21 °C durante 3 horas e em seguida foi adicionado C02 sólido (1 pequeno grão) originando borbulhamento vigoroso. Foi 154 então deixada em repouso de um dia para o outro, em seguida diluída com acetato de etilo (10 mL) e depois lavada com ácido clorídrico 2 M (5 mL), água (5 mL) e solução aquosa saturada de cloreto de sódio (10 mL). Foi então seca sobre sulfato de magnésio e evaporada para dar um vidro amarelo (86,6 mg). Este foi purificado por mdap para dar um resíduo que foi dissolvido em diclorometano, seco sobre sulfato de sódio e evaporado para dar o composto em epígrafe (22,3 mg). RMN de (400 MHz, DMSO-d6) d ppm 13,95 (s. 1., 1H) 7,60 (d, 2H) 7,51 (t, 1H) 7,01 (t, 2H). LC-MS Tempo de retenção 0,71 min, MH” 121,0.

Preparação Alternativa do Intermediário 39 A uma solução de 2,6-bis(difluorometil)benzoato de metilo (205 mg) em metanol (3 mL) foi adicionada uma solução de hidróxido de lítio (48 mg) em metanol (3 mL) . Foi agitada a 21 °C e a suspensão oleosa inicial clareou lentamente ao longo de ca. 2 horas, mas permaneceu material insolúvel. Foi agitada durante um total de 20 horas e em seguida evaporada até à secura. Foi partilhada entre acetato de etilo (10 mL) e água (10 mL), lavada com éter (10 mL), acidificada com ácido clorídrico 2 M e extraída com acetato de etilo (2 x 10 mL). Este foi lavado com água (10 mL) e solução aquosa saturada de cloreto de sódio (10 mL), seco sobre sulfato de sódio e evaporado para dar o composto em epígrafe (146 mg). RMN de XH (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 14,21 (s. 1., 1H) 7,87 (d, 2H) 7,80 (t, 1H) 7,18 (t, 2H) . 155

Intermediário 40: Ácido 2, 6-bis(dibromometil)benzóico

Uma solução de ácido 2,6-dimetilbenzóico (5 g) em tetracloreto de carbono (250 mL) foi aquecida a refluxo suave e em seguida foi retirada a fonte de aquecimento. Sob um projector potente, foi adicionada uma solução de bromo (7,2 mL, 22,5 g) em tetracloreto de carbono (100 mL) ao longo de 45 minutos. Ocorreu libertação vigorosa de brometo de hidrogénio com refluxo suave. A agitação sob a luz continuou durante mais 30 minutos, no decurso dos quais precipitou um sólido branco. A mistura foi deixada arrefecer de um dia para o outro, o sólido foi filtrado, lavado com tetracloreto de carbono e em seguida heptano e depois seco in vacuo para dar o composto em epígrafe (4,38 g). RMN de (400 MHz, DMSO-d6) d ppm 8,03 (d, 2H) 7,77 (t, 1H) 7,16 (s, 2H) . LC-MS Tempo de retenção 1,00 min, MH” 463. 156

Intermediário 41: l-Hidroxi-3-oxo-l,3-di-hidro-2-benzofuran-4-carbaldeído

Carbonato de sódio aquoso (5%, 70 mL) foi posto a refluxo e foi adicionado ácido 2, 6-bis(dibromometil)benzóico (4,38 g) em porções. Foi agitado e aquecido durante 1,5 horas, a maioria do sólido dissolveu. A solução foi decantada de um sólido castanho-amarelado insolúvel, deixado arrefecer e acidificado com ácido clorídrico concentrado. Não precipitou nenhum sólido e foi assim arrefecido em gelo e friccionado para dar o composto em epígrafe (724 mg). RMN de XH (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 10,87 (s, 1H) 8,39 (s, 1H) 7,98 (m, 3H), 6,8 (s. 1., 1H). LC/MS Tempo de retenção 0,60 min, MH+ 179. 157

Intermediário 42: 2, 6-Diformilbenzoato de metilo

A uma solução de l-hidroxi-3-oxo-l,3-di-hidro-2-benzofuran-4-carbaldeido (720 mg) em dimetilformamida anidra (4 mL) foi adicionado carbonato de potássio (613 mg). Foi agitada durante 30 minutos para dar uma suspensão branca espessa. Foi adicionado iodometano (0,4 mL) e agitado durante 3 dias. Foi adicionado mais iodeto de metilo (0,4 mL) e a agitação continuou durante 24 horas. A maior parte da dimetilformamida foi evaporada in vacuo. O residuo amarelo pálido foi partilhado entre acetato de etilo (25 mL) e água (25 mL) e a fase orgânica foi lavada com cloreto de litio aquoso (50 mL) e solução aquosa saturada de cloreto de sódio (25 mL), seco sobre sulfato de sódio e evaporado para dar um sólido amarelo pálido (645 mg). Este foi purificado sobre Flashmaster 2 utilizando um gradiente de 0-100% de acetato de etilo em ciclo-hexano ao longo de 60 minutos para dar o composto em epígrafe (532 mg) com 85% de pureza. RMN de XH (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) 5 ppm 10,10 (s, 2H) 8,16 (d, 2H) 7, 76 - 7, 86 (m, 1H) 4,07 (s, 3H) . LC-MS Tempo de retenção 2,20 min, MH+ 193. 158

Intermediário 43: 2,6-Bis(difluorometil)benzoato de metilo

A uma solução de 2,6-diformilbenzoato de metilo (192 mg) em tolueno anidro (3 mL) foi adicionado etanol (10 pL) seguido de trifluoreto de bis(2-metoxietil)amino-enxofre (solução a 50% em tolueno, 2 mL) . A solução foi agitada sob azoto a 100 °C. Após ca. 1 hora separou-se um óleo castanho e este aumentou com o tempo. O aguecimento continuou durante 19 horas. Foi deixado arrefecer e partilhado entre acetato de etilo (25 mL) e bicarbonato de sódio saturado (10 mL). A fase orgânica foi lavada com água (20 mL), solução aquosa saturada de cloreto de sódio (10 mL), ácido clorídrico 2 M (20 mL), água (20 mL) e solução aquosa saturada de cloreto de sódio (20 mL) . Foi seca sobre sulfato de sódio e evaporada para dar o composto em epígrafe (207 mg). RMN de XH (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) d ppm 7,84 (d, 2H) 7,70 (t, 1H) 7,08 (t, 2H) 3,99 (s, 3H). LC-MS Tempo de retenção 0,96 e 0,98 min. 159

Intermediário 44: 5-Amino-l-(4-fluorofenil)-N-(3,3,3 trifluoro-2-{[(2-fluoroetil)amino]metil}-2-hidroxipropil)-lfl-pirazole-4-carboxamida

A uma solução de 5-amino-l-(4-fluorofenil)-N-{[2-(trifluorometil)-2-oxiranil]metil}-lH-pirazole-4-carboxamida (1,03 g, 3 mmol) em acetonitrilo anidro (10 mL) foi adicionado cloridrato de 2-fluoroetilamina (650 mg, 6 mmol, ca. 90% de pureza) e trietilamina (0,98 mL, 7 mmol) e a suspensão resultante foi agitada durante 4 dias. Foi partilhada entre acetato de etilo (70 mL) e água (20 mL), lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio (20 mL), seca sobre sulfato de sódio e evaporada para dar uma goma (1,57 g). Esta foi purificada sobre 100 g de Si02 utilizando Flashmaster 2 com um gradiente de 0-100% de acetato de etilo em ciclo-hexano durante 60 minutos como eluente. Isto deu o composto em epígrafe (924 mg). RMN de (400 MHz, DMSO-d6) a ppm 7, 98 - 8, 08 (m, 1H) 7,94 (s, 1H) 7,53 - 7,61 (m, 2H) 7, 32 - 7, 40 (m, 2H) 6,37 (s, 2H) 4,53 (t, 1H) 4,41 (t, 1H) 3,61 - 3,72 (m, 1H) 3,43 - 3,53 (m, 1H) 2,74 - 2,92 (m, 4H). LC-MS Tempo de retenção 2,12 min, MH+ 408. 160

Intermediário 45: [(2-Cloro-6- fluorofenil)carbonil]carbamato de 1,1-dimetiletilo

Uma solução de bis(trimetilsilil)amida de litio em tetra-hidrofurano (20 mL, 1 M solução) foi adicionada gota a gota a uma solução, mantida sob agitação, de carbamato de t-butilo (1,17 g) em tetra-hidrofurano (20 mL) arrefecida até < -70 °C sob uma atmosfera de azoto. Foi adicionada, gota a gota, uma solução de cloreto de 2-cloro-6-fluorobenzoilo (1,93 g) em tetra-hidrofurano (5 mL). Após a adição, foi retirada uma amostra através de uma seringa, uma porção foi desactivada e a remanescente deixada aquecer até à temperatura ambiente. Ambas as amostras foram analisadas por LC-MS. A mistura reaccional foi deixada agitar e aquecida suavemente durante 2 horas, a temperatura do banho atingiu -40 °C. A mistura reaccional foi partilhada entre acetato de etilo (200 mL) e água (200 mL) . A fase aquosa foi extraída com acetato de etilo (200 mL) e as fases orgânicas combinadas lavadas com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secas (MgS04), filtradas e evaporadas. Foi obtido o composto em epigrafe como um sólido branco (2,65 g) . RMN de 1n (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) d ppm 7,65 (s. 1., 1H) , 7,35 (m, 1H), 7,23 (d, 1H), 7,16 (t, 1H) , 1,4 (s, 9H) . LC-MS Tempo de retenção 3,08 min, MNH4+ 291. 161

Intermediário 5-Amino-l-(4-fluorofenil)-N-(3,3,3 4 6 : trifluoro-2-hidroxi-2-{[(fenilmetil)amino]metil}propil)-lff-pirazole-4-carboxamida

A 5-amino-l-(4-fluorofenil)-N-{[2-(trifluorometil)-2-oxiranil]metil}-lfí-pirazole-4-carboxamida (15,3 g) em dioxano (250 mL) foi adicionada benzilamina (5,76 mL) . A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 16 horas e em seguida durante mais 4 horas para garantir que a reacção estava concluída. A solução laranja foi concentrada in vacuo para dar um óleo laranja (que continha ainda algum solvente) . O óleo foi seco na linha de vácuo para dar o composto em epígrafe (20,50 g) como um sólido laranja. RMN de ΧΗ (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) d ppm 7,52 (m, 2H), 7,47 (S, 1H), 7,26 (m, 8H), 6,24 (t, -1H), 5,47 (s. 1., 2H) , 3,81 (m, 3H), 3,55 (dd, 1H), 3,02 (d, 1H), 2,71 (d, 1H) . LC-MS Tempo de retenção 2,70 min, MH+ 452. 162

Exemplo 1: 5-Amlno-N- (2-{[[(2,6-diclorofenil)carbonil] (me til)amino]metil}-3,3,3-trlfluoro-2-hldroxipropll)-1-(4-fluorofenil) -lff-pirazole-4-carboxamida

A uma solução de 5-amino-l-(4-fluorofenil)-I7-{3,3,3-trifluoro-2-hidroxi-2- [ (metilamino) metil] propil} -lfí-pirazole-4-carboxamida (56 mg, 0,15 mmol) em tetra-hidrofurano anidro (2 mL) arrefecida em gelo foi adicionada diisopropiletilamina (0,052 mL, 0,3 mmol) seguida de cloreto de 2,6-diclorobenzoilo (0,023 mL, 0,164 mmol). Após 20 minutos, a mistura foi removida do gelo e deixada a 21 °C durante 19 horas. A mistura foi evaporada, o resíduo foi dissolvido em diclorometano (3 mL) e lavado com ácido clorídrico 2 Μ (1 mL) e água (1 mL) . Foi novamente evaporado e purificado sobre um cartucho de SPE de 5 g, eluindo com diclorometano e em seguida com misturas de ciclo-hexano/acetato de etilo (10:1), (5:1), (3:1) e finalmente (2:1) para dar o composto em epígrafe (55,6 mg). RMN de ΧΗ (400 MHz, DMSO- de) δ ppm co o (t, J=6,1 Hz, 1H) 7, 85 (s, 1H) 7, 51 - - 7,62 (m, 5H) 7, 33 - - 7,40 (m, 2H) 6 ,37 (s, 2H) 4, 21 (d, , 7=14 ,3 Hz, 1H) ' 3, . 95 - 4 :, 05 (m, 1H) 3, 56 (d, J=14, , 3 Hz , 1H) 3 ,47 (dd, J=14,6 , 5, 3 Hz, 1H) 2, 98 ( s, 3H). LC-MS Tempo de retenção 3, 41 min , MH + 548. 163 0 Exemplo 1 foi ainda preparativamente separado nos seus enantiómeros (Isómeros A e B) utilizando uma coluna Chiralpak AD 2 x 25 cm eluindo com 30% de etanol em heptano a um caudal de 1 mL/min.

Enantiómero 1 (Isómero A) HPLC Quiral Analítica (coluna Chiralpak AD 25 x 0,46 cm, 30% etanol em heptano eluindo a 1 mL/min) - Tempo de retenção 10,7 min.

Dicroísmo circular (MeCN, RT, 0,000144 M, v = 350-200 nm, comprimento da célula = 0,2 cm) 204,6 nm (de = -8,03). 218,4 nm (de = 1,69). 232.0 nm (de = -2,53). 262.0 nm (de = -3,18).

Enantiómero 2 (Isómero B) HPLC Quiral Analítica (coluna Chiralpak AD 25 x 0,46 cm, 30% etanol em heptano eluindo a 1 mL/min) - Tempo de retenção 14.6 min.

Dicroísmo circular (MeCN, RT, 0,000136 M, v = 350-200 nm, comprimento da célula = 0,2 cm) 204,6 nm (de = 7,88). 218,8 nm (de = -2,07). 231,4 nm (de = 2,12). 262.6 nm (de = 2,96). 164

Exemplo 2: 5-Amino-N-(2—{[[(2,6-diclorofenil)carbonil](e- tll)amino]metil}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4-fluorofenil)-lff-pirazole-4-carboxamida

A uma solução de 5-amino-.N-{2-[ (etilamino)metil]-3,3, 3-trifluoro-2-hidroxipropil}-1-(4-fluorofenil)-lH-pirazole-4-carboxamida (56 mg, 0,15 mmol) em tetra-hidrofurano anidro (2 mL) arrefecida em gelo foi adicionada diisopropiletilamina (0, 052 mL, 0,3 mmol) seguida de cloreto de 2,6-diclorobenzoilo (0,023 mL, 0,164 mmol). Após 20 minutos, a mistura foi retirada do gelo e deixada a 21 °C durante 19 horas. A mistura foi evaporada, o resíduo foi dissolvido em diclorometano (3 mL) e lavado com ácido cloridrico 2 Μ (1 mL) e água (1 mL) . Foi novamente evaporado e purificado sobre um cartucho de SPE de 5 g, eluindo com diclorometano e em seguida com misturas de ciclo-hexano/acetato de etilo (10:1). (5:1). (3:1) e finalmente (2:1) para dar o composto em epígrafe (73,5 mg). RMN de ΧΗ (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8,07 (t, J= 5,9 Hz, 1H) 7,85 (s, 1H) 7,52 - 7, 63 (m, 5H) 7,33 - 7, 44 (m, 2H) 6,37 (s, 2H) 4,22 (d, J=14,1 Hz, 1H) 3,96 - 4,05 (m, 1H) 3,46 - 3,57 (m, 3H) 3,21 - 3,32 (m, 1H) 1,08 (t, J=7,2 Hz, 3H). LC-MS Tempo de retenção 2,97 min, MH+ 562. 165 0 Exemplo 2 foi ainda preparativamente separado nos seus enantiómeros (Isómeros A e B) utilizando uma coluna Chiralpak AD 2 x 25 cm eluindo com 40% etanol em heptano a um caudal de 1 mL/min.

Enantiómero 1 (Isómero A) HPLC Quiral Analítica (coluna Chiralcel OD 25 x 0,46 cm, 40% etanol em heptano eluindo a 1 mL/min) - Tempo de retenção 4,60 min.

Dicroismo circular (MeCN, RT, 0,000116 M, v = 350-200 nm, comprimento da célula = 0,2 cm) 206,4 nm (de = 13,58). 231,0 nm (de = 5,52). 262,2 nm (de = 3,33).

Enantiómero 2 (Isómero B) HPLC Quiral Analítica (coluna Chiralcel OD 25 x 0,46 cm, 40% etanol em heptano eluindo a 1 mL/min)- Tempo de retenção 6,50 min.

Dicroismo circular (MeCN, RT, 0,000131 M, v = 350-200 nm, comprimento da célula = 0,2 cm) 207,0 nm (de = -13,04). 229,0 nm (de = -5,64). 260,8 nm (de = -3,39). 166

Exemplo 3: 5-Amino-N-[2-({[(2,6-diclorofenil)carbonil]a mino}metil)-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil]-1-(4-fluorofenil)-lff-pirazole-4-carboxamida

A uma solução de 5-amino-N-[2-(aminometil)-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil]-1-(4-fluorofenil)-lH-pirazole-4-carboxamida (0,93 g, 2,57 mmol) em tetra-hidrofurano anidro (12 mL) foi adicionada diisopropiletilamina (0,91 mL, 5,2 mmol) seguida de cloreto de 2,6-diclorobenzoilo (0,38 mL, 1,05 equiv). Houve uma exotérmica imediata e, portanto, a mistura foi colocada num banho de gelo/dióxido de carbono sólido durante 20 minutos e em seguida agitada a 21 °C durante 17 horas. Foi então partilhada entre acetato de etilo (100 mL) e ácido clorídrico 2 M (20 mL) e a fase orgânica foi lavada com água (20 mL), solução aquosa saturada de cloreto de sódio (20 mL), bicarbonato de sódio saturado (20 mL), água (20 mL) e solução aquosa saturada de cloreto de sódio (20 mL) antes de ser seca sobre sulfato de magnésio e evaporada sob pressão reduzida para dar uma espuma. Esta foi purificada sobre uma coluna Flashmaster de sílica (100 g) com um gradiente de 0-100% acetato de etilo em ciclo-hexano ao longo de 60 minutos para dar o composto em epígrafe (1,07 g) . 167 RMN de XH (400 MHz, DMSO-cfc) δ ppm 9,07 (t, J=6,4 Hz, 1H) 8,04 (t, J=6,1 Hz, 1H) 7,91 (s, 1H) 7,51 - 7,59 (m, 4H) 7,44 - 7,48 (m, 1H) 7,34 - 7,40 (m, 2H) 6,37 (s, 2H) 3,69 - 3,84 (m, 2H) 3,47 - 3,58 (m, 2H). LC-MS Tempo de retenção 3,26 min, MH+ 534. O Exemplo 3 foi ainda preparativamente separado nos seus enantiómeros (Isómeros A e B) utilizando uma coluna Chiralpak AD 2 x 20 cm eluindo com 20% propan-2-ol em heptano a um caudal de 75 mL/min.

Enantiómero 1 (Isómero A) HPLC Quiral Analítica (coluna Chiralpak AD 25 X 0,46 cm, 30% etanol em heptano eluindo a 1 mL/min) - Tempo de retenção 6,34 min.

Dicroísmo circular (MeCN, RT, 0,000106 M, v = 350-200 nm, comprimento da célula =0,2 cm) 205.8 nm (de = -3,39) . 240.8 nm (de = -2,59) . 259,6 nm (de = -2,80).

Enantiómero 2 (Isómero B) HPLC Quiral Analítica (coluna Chiralpak AD 25 x 0,46 cm, 30% etanol em heptano eluindo a 1 mL/min) - Tempo de retenção 12,53 min. 168

Dicroísmo circular (MeCN, RT, 0,000133 M, v = 350-200 nm, comprimento da célula = 0,2 cm) 205.4 nm (de = 4,66). 240.4 nm (de = 3,12). 259,6 nm (de = 3,05).

Exemplo 4: 5-Amino-i7-(2-{ [ [ (2-cloro-6-fluorofenil)carbonil] (etil)amino]metil}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4-fluorofenil)-lfl-pirazole-4-carboxamida

A uma solução de 5-amino-.W-{2-[ (etilamino)metil]-3,3, 3-trif luoro-2-hidroxipropil} -1- (4-f luorof enil) -lff-pirazole-4-carboxamida (0,1885 g, 0,484 mmol) em diclorometano (2 mL) foi adicionada diisopropiletilamina (0,253 mL, 1,45 mmol). Após 5 minutos de agitação, foi adicionado cloreto de 2-cloro-6-fluorobenzoílo (0,103 g, 0,533 mmol). Depois de agitar durante 40 horas, a mistura reaccional foi concentrada para dar um residuo (0,371 g) . a purificação numa coluna de sílica (20 g) deu o composto em epígrafe (0,152 g) como um sólido amarelo. RMN de ΧΗ (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 7,75 (s, 1H) 7,49 - 7,56 (m, 2H) 7,41 (tt, J=8,5, 6,5 Hz, 1H) 7,18 - 7,25 (m, 2H) 6,97 - 7,04 (m, 2H) 5,47 (s. 1., 1H) 4,00 - 4,18 (m, 2H) 3,67 (d, J=14,6 Hz, 1H) 3,54 (dd, J=14,8, 5,8 Hz, 1H) 169 3,41 - 3,49 (m, 1H) 3,23 - 3,34 (m, J=14,7, 7,3, 7,2, 7,0 Hz, 1H) 1,10 (t, J=7,2 Hz, 3H) . LC-MS Tempo de retenção 3,33 min, MH+ 546. O Exemplo 4 foi ainda preparativamente separado nos seus enantiómeros (Isómeros A (mistura de rotâmeros 1 e 2 e atropisómeros 1 e 2) e B (mistura de rotâmeros 3 e 4 e atropisómeros 3 e 4)) utilizando uma coluna Chiralpak AD 2" x 23 cm eluindo com 20% propan-2-ol em heptano a um caudal de 15 mL/min.

Enantiómero 1 (mistura de rotâmeros 1 e 2 e atropisómeros 1 e 2) HPLC Quiral Analítica (coluna Chiralpak AD 25 x 0,46 cm, 20% propan-2-ol em heptano eluindo a 1 mL/min) - Tempo de retenção 22,47 min e 24,75 min.

Enantiómero 2 (mistura de rotâmeros 3 e 4 e atropisómeros 3 e 4) HPLC Quiral Analítica (coluna Chiralpak AD 25 x 0,46 cm, 20% propan-2-ol em heptano eluindo a 1 mL/min) - Tempo de retenção 30,23 min e 34,68 min. 170

Exemplo 5: 5-Amino-N-(2-{[[(2, 6 dlfluorofenil)carbonil] (et11)amino]metil}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil- (4-fluorofenil) -lff-pirazole-4-carboxamida

A uma solução de 5-amino-N-{2-[(etilamino)metil]-3,3, 3-trif luoro-2-hidroxipropil} -1- (4-fluorofenil) -lfí-pirazole-4-carboxamida (0,277 g, 0,712 mmol) em diclorometano seco (ca. 11 mL), foi adicionada diisopropiletilamina (0,245 mL, 1,42 mmol) e em seguida arrefecida num congelador a -10 até -15 °C, antes de ter sido adicionada, sob agitação, uma solução analogamente arrefecida de cloreto de 2,6-difluorobenzoílo (0,123 g, 0,712 mmol) em diclorometano (2 mL) . A mistura foi agitada durante 1 minuto e em seguida deixada em repouso no frigorifico durante aprox. 2 horas e em seguida deixada aquecer até à temperatura ambiente. No dia seguinte, a mistura foi evaporada sob pressão reduzida e purificada sobre a coluna de sílica. A eluição com 2% de etanol em clorofórmio deu, após evaporação sob pressão reduzida, um vidro transparente (0,421 g) que, após fricção, deu o composto em epígrafe (0,356 g) como um sólido branco. RMN de XH (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 7,50 - 7,58 (m, 2H) 7,37 - 7,46 (m, 1H) 7,18 - 7,25 (m, 2H) 6,98 - 7,05 (m, 2H) 5,47 (s. 1., 1H) 4,04 - 4,15 (m, 2H) 3,65 (d, J=14,8 Hz, 1H) 3,49 - 3,58 (m, 1H) 3,40 - 3,49 (m, 1H) 3,24 - 3,34 (m, 1H) 1,12 (t, J= 7,2 Hz, 3H) . 171 LC-MS Tempo de retenção 3,07 min, MH+ 530. O Exemplo 5 foi ainda preparativamente separado nos seus enantiómeros (Isómeros A e B) utilizando uma coluna Chiralcel OD 4,6 mmid x 25 cm eluindo com 20% etanol em heptano a um caudal de 1 mL/min.

Enantiómero 1 (Isómero A) HPLC Quiral Analítica (coluna Chiralpak AD 25 x 4,6 cm, 20% etanol em heptano eluindo a 1 mL/min) - Tempo de retenção 10.0 min.

Dicroísmo circular (MeCN, RT, 0,000138 M, v = 350-200 nm, comprimento da célula =0,2 cm) 204.0 nm (de = 7,59). 229.0 nm (de = 3,09). 263,2 nm (de = 3,71) .

Enantiómero 2 (Isómero B) HPLC Quiral Analítica (coluna Chiralpak AD 25 x 0,46 cm, 20% etanol em heptano eluindo a 1 mL/min) - Tempo de retenção 12,01 min.

Dicroísmo circular (MeCN, RT, 0,000143 M, v = 350-200 nm, comprimento da célula = 0,2 cm) 203,2 nm (de = -6,51). 229,8 nm (de = -2,53). 262,6 nm (de = -3,49). 172

Exemplo 6: 5-Amino-A?- [2-({ [ (2, 6-dif luorofenil) carbonil] ami-no}metil)-3,3,3-trifluoro-2-hldroxipropil]-1-(4—fluorofenil)-1H-pirazole-4-carboxamida

Ácido 2,6-difluorobenzóico (0,069 mmol) foi pesado para um tubo micrónico. A este foi adicionado hexafluorofosfato de (HATU) O-(7-azabenzotriazol-l-il)-Ν,Ν,Ν',N'-tetrametilurónio (0, 069 mmol, 26 mg) como uma solução em DMF (200 pL) . Foi então adicionada diisopropiletilamina (0,20 mmol, 36 pL) e a solução agitada durante 5 minutos. Foi então adicionada 5-amino-W-[2-(aminometil)-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil]-1-(4-fluorofenil)-lfí-pirazole-4-carboxamida (0, 069 mmol, 25 mg) como uma solução em DMF (200 pL). A solução foi então agitada durante mais 10 minutos e deixada em repouso de um dia para o outro à temperatura ambiente. Foi realizada LC-MS após este período, a amostra (20 pL) foi diluída em acetonitrilo (100 pL) . A LC-MS mostrou produto presente. A mistura em bruto foi filtrada e purificada por HPLC dirigida por massa. Os produtos pareciam depositar-se quando introduzidos em 90% de H20 (0,1% de TFA)/10% MeCN (0,1% de TFA) (do método da norma CAT) resultando numa contrapressão elevada. No seu lugar foi utilizado o método Cat-GR já que 70% H20 (0,1% de TFA)/30% de MeCN (0,1% de TFA) assegurou que não havia deposição do sólido ao introduzir na coluna. A solução recolhida da purificação foi transferida para um frasco de cintilação onde o MeCN/H20/TFA foi removido em Genevac. O composto seco foi então transferido para frasquinhos 173 previamente tarados. Peso obtido para o produto desejado 22,7 mg. RMN de XH (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8,98 (t, J=6,4 Hz, 1H) 8,11 (t, J=6,1 Hz, 1H) 7,95 (s, 1H) 7,60 - 7,51 (m, 3H) 7,39 - 7,35 (t, 2H) 7,22 - 7,16 (t, 2H) 6,85 (s, 1H) 6,40 - 6,30 (s. 1., 2H) 3,79 - 3,71 (m, 2H) 3,58 - 3,47 (m, 2H). LC-MS Tempo de retenção 2,9 min, MH+ 502.

Exemplo 7: 5-Amino-N-[2-({[(2-cloro-6-fluorofenil)carbonil]amino}metil)-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil]-1-(4-fluorofenil)-lfl-pirazole-4-carboxamida

Uma solução de cloreto de 2-cloro-6-fluorobenzoílo (0,169 g) em tetra-hidrofurano seco (1 mL) foi adicionada a uma mistura, mantida sob agitação, de 5-amino-W-[2-(aminometil)-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil]-1-(4-fluorofenil)-lií-pirazole-4-carboxamida (0,289 g) e diisopropiletilamina (0,21 mL) numa mistura de diclorometano (4 mL) e tetra-hidrofurano (3 mL) arrefecida até <5 °C. Após a adição, o banho de arrefecimento foi retirado e a mistura reaccional agitada à temperatura ambiente durante 20 minutos. Foram adicionados água (10 mL) e diclorometano (10 mL) à mistura reaccional e a mistura resultante agitada vigorosamente. As fases foram separadas utilizando um vidro poroso hidrófobo e a fase aquosa lavada com 174 mais diclorometano (10 mL) . A fase orgânica foi evaporada e o residuo purificado por cromatografia sobre sílica (cartucho de 20 g) eluindo com 0-100% de acetato de etilo em ciclo-hexano. As fracções apropriadas foram combinadas e evaporadas para dar o composto em epígrafe (0, 409 g) . RMN de XH (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9,05 (s. 1., 1H) 8,11 (s. 1., 1H) 7,85 (s, 1H) 7, 68 - 7, 60 (m, 2H) 7, 55 - 7, 43 (m, 1H) 7,41 - 7,28 (m, 4H) 6,68 (s. 1., 1H) 6, 46 - 6,30 (s. 1., 2H) 3, 79 - 3,72 (m, 2H) 3, 58 - 3, 47 (m, 2H) . LC-MS Tempo de retenção 3,08 min, MH+ 518, 520. O Exemplo 7 foi ainda preparativamente separado nos seus enantiómeros (Isómeros A e B) utilizando uma coluna Chiralpak AD 2" X 20 cm eluindo com 20% etanol em heptano a um caudal de 75 mL/min.

Enantiómero 1 (Isómero A) HPLC Quiral Analítica (coluna Chiralpak AD 25 x 0,46 cm, 40% etanol em heptano eluindo a 1 mL/min) - Tempo de retenção 6,34 min.

Dicroísmo circular (MeCN, RT, 0,000135 M, v = 350-200 nm, comprimento da célula =0,2 cm) 203,2 nm (de = -3,92). 237,4 nm (de = -3,16). 260,0 nm (de = -2,99) . 175

Enantiómero 2 (Isómero B) HPLC Quiral Analítica (coluna Chiralpak AD 25 x 0,46 cm, 40% etanol em heptano eluindo a 1 mL/min) - Tempo de retenção 8,95 min.

Dicroísmo circular (MeCN, RT, 0,000148 M, v = 350-200 nm, comprimento da célula =0,2 cm) 203,4 nm (de = 4,32). 239.0 nm (de = 3,32). 260.0 nm (de = 3,07).

Exemplo 8: 5-Amino-J7- (2 — { [ [ (2, 6-dif luorofenil) carbonil] (me-til)amino]metil}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4-f luorof enil) -lfí-pirazole-4-carboxamida

Preparada de modo análogo ao Exemplo 6 de 5-amino-l-(4-fluorofenil)-N-{3,3,3-trifluoro-2-hidroxi-2- [ (metilamino)metil]propil}-li7-pirazole-4-carboxamida e ácido 2,6-difluorobenzóico. RMN de ΧΗ (400 MHz, DMSO- ~d6) δ ppm 8,05 (t, 1H) 7,88 (s, 1H) 7,55 - 7, .61 (m, 2H) 7,37 (t, 2H) 7,25 (t, 2H) 6,95 (s. 1., 1H) 6,29 - 6, .43 (s. 1., 2H) 4,10 (d, 1H) 3,81 (dd, 1H) 3,72 (d, 1H) 3,46 (dd, 1H) 3,04 (s, 3H). LC-MS Tempo de retenção 3,11 min, MH+ 516. 176

Exemplo 9: 5-Amino-N-(2-{[[(2-cloro-6- fluorofenil)carbonil] (metil)amino]metil}-3,3, 3-trifluoro-2-hidroxipropil) -1- (4-f luorofenil) -lfif-pirazole-4-carboxamida

Preparada de modo análogo ao Exemplo 6 de 5-amino-l-(4-fluorofenil)-N-{3,3,3-trifluoro-2-hidroxi-2- [(metilamino)metil]propil}-l#-pirazole-4-carboxamida e ácido 2-cloro-6-fluorobenzóico. RMN de (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8,05 (t, J=6,l Hz, 1H) 7,85 (s, 1H) 7, 55 - 7, 62 (m, 2H) 7,46 (d, 1H) 7,34 - 7,41 (m, 3H) 7,00 (s, 0,5H) 6,94 (s, 0,5H) 6,32 - 6,40 (m. 1., 2H) 4,20 (d, 0,5H) 4,10 (d, 0,5H) 3,94 (dd, 0,5H) 3,84 (dd, 0,5H) 3,69 (d, 0,5H) 3,60 (d, 0,5H) 3,01 (d, 3H). LC-MS Tempo de retenção 3,17 min, MH+ 532, 534. 177

Exemplo 10: 5-Amino-N-{2-[(etil{[2-(metilsulfonil)fenll]carbonil}amino)metil]-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil}-1-4-fluorofenil)-lH-pirazole-4-carboxamida

Ácido 2-(metilsulfonil)benzóico (0,204 g, 1,017 mmol) foi dissolvido em dimetilformamida seca, antes de ter sido adicionada diisopropiletilamina (0,531 mL, 3,05 mmol). Foi adicionado hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotriazol-l-il)- N,N,N',N'-tetrametilurónio (HATU) (0,464 g, 1,22 mmol) e a reacção agitada durante 10 minutos. A mistura reaccional foi arrefecida em gelo e em seguida foi adicionada 5-amino-N-{2-[(etilamino)metil]-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil}-l-(4-f luorof enil) -lfí-pirazole-4-carboxamida (0,46 g, 1,118 mmol, 1,1 equiv) (lavada com dimetilformamida) (volume total de dimetilformamida utilizada: 2,5 mL). A reacção foi então agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro. A mistura reaccional foi então concentrada sob pressão reduzida e o resíduo foi partilhado entre diclorometano e água. O produto foi extraído para diclorometano e concentrado sob pressão reduzida. O produto em bruto foi purificado sobre sílica (50 g) com um gradiente de 0-100% de acetato de etilo:diclorometano ao longo de 40 minutos para dar o composto em epígrafe (0,53 g). 178 RMN de XH (250 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8,03 (d, 1H) 7,85 (s, 1H) 7,67 - 7,83 (m, 3H) 7,50 - 7,64 (m, 3H) 7,26 - 7,36 (m, 2H) 6,52 (s. 1., 1H) 6,09 (s. 1., 2H) 3,26 - 4,25 (m, 6H) 3,23 (s, 3H) 1, 08 (t, 3H) . LC-MS Tempo de retenção 3,01 min, MH+ 572. O Exemplo 10 foi ainda preparativamente separado nos seus enantiómeros (Isómeros A e B) utilizando uma coluna Chiralpak AD 2 x 25 cm eluindo com 80% etanol em heptano a um caudal de 1 mL/min.

Enantiómero 1 (Isómero A) HPLC Quiral Analítica (coluna Chiralpak AD 25 X 0,46 cm, 80% etanol em heptano eluindo a 1 mL/min) - Tempo de retenção 5,86 min.

Dicroísmo circular (MeCN, RT, 0,000127 M, v = 350-200 nm, comprimento da célula =0,2 cm) 210,2 nm (de = 2,45). 226,6 nm (de = -3,43). 271,0 nm (de = -3,34) .

Enantiómero 2 (Isómero B) HPLC Quiral Analítica (coluna Chiralpak AD 25 X 0,46 cm, 80% etanol em heptano eluindo a 1 mL/min) - Tempo de retenção 12,01 min. 179

Dicroísmo circular (MeCN, RT, 0,000125 M, v = 350-200 nm, comprimento da célula = 0,2 cm) 209,8 nm (de = -2,04). 227,2 nm (de = 3,57). 270,4 nm (de = 3,20).

Exemplo 11:_5-Amino-N-[2-({[(2,6-dibromofenil)carbonil]a- mino}metil)-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil]-1-(4-fluorofenil)-lff-pirazole-4-carboxamida

Br A uma solução de ácido 2,6-dibromobenzóico (28 mg, 0,1 mmol) em tetra-hidrofurano anidro (1 mL) foi adicionada dimetilformamida anidra (4 pL) seguida de cloreto de oxalilo (100 pL de uma solução de 1 mL de 87 pL de cloreto de oxalilo em THF; 0,1 mmol). A mistura efervesceu e foi agitada sob azoto durante 45 minutos. Foi adicionada uma solução de 5-amino-N-[2-(aminometil)-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil]-1-(4-fluorofenil)-lH-pirazole-4-carboxamida (25,3 mg, 0,07 mmole) em tetra-hidrofurano anidro (0,5 mL) e diisopropiletilamina (52 pL, 0,3 mmol). Foi então agitada sob azoto a 21 °C durante 3 dias. Foi evaporada, partilhada entre diclorometano (5 mL) e ácido clorídrico 2 M (2 mL) . A camada orgânica foi evaporada e o resíduo purificado sobre um cartucho de SPE de 5 g de sílica. A eluição com diclorometano, depois com ciclo-hexano:acetato de etilo (10:1), (5:1), (3:1), (2:1) (3 vezes) e finalmente (1:1) (3 vezes). O produto em epígrafe foi eluído na terceira (2:1) 180 fracção e na primeira (1:1) fracção. Estas fracções foram combinadas e evaporadas para dar o produto em epígrafe (39,6 mg). RMN de XH (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9,06 (t, 1H) 8,03 (s, 1H) 7,91 (t, 1H) 7,71 (d, 2H) 7,54 - 7,61 (m, 2H) 7, 34 - 7, 40 (m, 2H) 7,30 (t, 1H) 6,68 (s, 1H) 6,37 (s, 2H) 3, 79 - 3, 89 (m, 1H) 3,66 - 3,76 (m, 1H) 3,55 - 3,65 (m, 1H) 3,43 - 3,52 (m, 1H). LC-MS Tempo de retenção 3,29 min, MH+ 622, 624, 626. 0 Exemplo 11 foi ainda preparativamente separado nos seus enantiómeros (Isómeros A e B) utilizando uma coluna Chiralpak AD de 5 cm x 20 cm eluindo com 25% etanol em heptano a um caudal de 75 mL/min.

Enantiómero 1 (isómero A) HPLC Quiral Analítica (coluna Chiralpak AD de 25 cm, 30% etanol em heptano eluindo a 1 mL/min) - Tempo de retenção 8,5 min.

Dicroísmo circular (MeCN, RT, 0,000159 M, v = 350-200 nm, comprimento da célula = 0,2 cm) 207,2 nm (de = 3,65). 258,8 nm (de = 2,85). 181

Enantiómero 2 (Isómero B) HPLC Quiral Analítica (coluna Chiralpak AD de 25 cm, 30% etanol em heptano eluindo a 1 mL/min)- Tempo de retenção 12,1 min.

Dicroísmo circular (MeCN, RT, 0,0000947 M, v = 350-200 nm, comprimento da célula =0,2 cm) 208,2 nm (de = -3,51). 260,8 nm (de = -2,67).

Exemplo 12: 5-Amino-N- [2-({[(2-bromo-6-clorofenil) carbonil]aminojmetil)-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil]-1-(4-f luorof enil) -lff-pirazole-4-carboxamida

A uma solução de 5-amino-N-[2-(aminometil)-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil]-1-(4-fluorofenil)-lH-pirazole-4-carboxamida (250 mg, 0,69 mmol) em tetra-hidrofurano (2 mL) foi adicionado cloreto de 2-bromo-6-clorobenzoílo (192,7 mg, 0,76 mmol) seguido de diisopropiletilamina (178 mg, 1,38 mmol). A reacção foi deixada agitar sob azoto de um dia para o outro. A análise por LC-MS mostrou que a reacção estava concluída. A mistura reaccional foi concentrada in vacuo. O resíduo foi redissolvido em diclorometano e lavado com ácido clorídrico 2 M seguido de água. A camada orgânica foi concentrada in vacuo para dar o composto em epígrafe (280 mg). 182 RMN de XH (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 7, 77 (s, 1H) 7,40 - 7, .49 (m, 3H) 7,28 - 7,38 (m, 1H) 7, 12 - 7, 23 (m, 3H) 6,43 - 6, 53 (m, 1H) 4,02 - 4,14 (m, 2H) 3, 48 - 3, 60 (m, 1H) 3, 36 - 3,46 (m, 1H) . LC-MS Tempo de retenção 3,19 min. MH+ 580. O Exemplo 12 foi ainda preparativamente separado nos seus enantiómeros (Isómeros A e B) utilizando uma coluna Chiralpak AD 5 cm x 20 cm eluindo com 25% etanol em heptano a um caudal de 75 mL/min.

Enantiómero 1 (Isómero A) HPLC Quiral Analítica (coluna Chiralpak AD de 25 cm, 30% etanol em heptano eluindo a 1 mL/min) - Tempo de retenção 8,4 min.

Dicroismo circular (MeCN, RT, 0,000130 M, v = 350-200 nm, comprimento da célula =0,2 cm) 206,6 nm (de = 4,44). 239,8 nm (de = 2,74). 260,2 nm (de = 3,08).

Enantiómero 2 (Isómero B) HPLC Quiral Analítica (coluna Chiralpak AD de 25 cm, 30% etanol em heptano eluindo a 1 mL/min) - Tempo de retenção 12,0 min.

Dicroismo circular (MeCN, RT, 0,000155 M, v = 350-200 nm, comprimento da célula = 0,2 cm) 183 206.4 nm (de = -3,85). 241,0 nm (de = -2,71). 260.4 nm (de = -2,92).

Exemplo 13: 5-Amlno-N-[2-({[(2-bromo-6-fluorofenil)carbonil]aminojmetil)-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil]-1-(4-fluorofenil)-lfi-pirazole-4-carboxamida

A uma solução de ácido 2-bromo-6-fluorobenzóico (22 mg, 0,1 mmol) em tetra-hidrofurano anidro (1 mL) foi adicionada dimetilformamida anidra (4 pL) e em seguida uma alíquota de 100 pL (0,1 mmol) de uma solução de cloreto de oxalilo (87 pL, 1 mmol) em tetra-hidrofurano anidro (0,9 mL) . Foi agitada durante 30 minutos e em seguida foi adicionada uma solução de 5-amino-l7-[2-(aminometil)-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil]-1-(4-f luorof enil) -líí-pirazole-4-carboxamida (29 mg, 0,08 mmol) em tetra-hidrofurano anidro (0,5 mL) e diisopropiletilamina (54 pL) e lavada com tetra-hidrofurano (100 pL). Foi então agitada a 21 °C durante 4 horas, no decurso das quais se formou um sólido. Foi evaporada, dissolvida em diclorometano (5 mL) e lavada sucessivamente com ca. 5 mL de água, ácido clorídrico 2 M, água, bicarbonato de sódio saturado, água e solução aquosa saturada de cloreto de sódio. Foi evaporada para dar um sólido branco (41 mg). Foi adicionado diclorometano (ca. 2 mL) e deu o composto em epígrafe como um sólido branco insolúvel (20 mg) que foi filtrado e lavado com éter (1 mL) . O filtrado foi carregado 184 numa coluna de SPE de 5 g de Si02. A eluição com diclorometano, éter, ciclo-hexano:acetato de etilo (2:1) e (1:1) (3 vezes) deu, após combinação e evaporação das fracções relevantes, mais composto em epígrafe (18,6 mg). RMN de XH (400 MHz, DMSO-cfe) δ ppm 9,02 (t, 1H) 8,04 (t, 1H) 7,91 (s, 1H) 7,51 - 7,60 (m, 3H) 7,33 - 7, 44 (m, 4H) 6,65 (s, 1H) 6,36 (s, 2H) 3,71 - 3,82 (m, 2H) 3,45 - 3,57 (m, 2H). LC-MS Tempo de retenção 3,15 min, MH+ 564, 563. O Exemplo 13 foi ainda preparativamente separado nos seus enantiómeros (Isómeros A e B) utilizando uma coluna Chiralpak AD 2" x 23 cm eluindo com 50% acetonitrilo em água a um caudal de 70 mL/min.

Enantiómero 1 (Isómero A) HPLC Quiral Analítica (coluna Chiralpak AD 25 x 0,46 cm, 30% etanol em heptano eluindo a 1 mL/min) - Tempo de retenção 10,20 min.

Dicroísmo circular (MeCN, RT, 0,00014 M, v = 350-200 nm, comprimento da célula =0,2 cm) 204,6 nm (de = -3,23) . 218 nm (de = 0,25). 244 nm (de = -2,72). 244 nm (de = -2,77). 185

Enantiómero 2 (Isómero B) HPLC Quiral Analítica (coluna Chiralpak AD 25 x 0,46 cm, 30% etanol em heptano eluindo a 1 mL/min) - Tempo de retenção 13,98 min.

Dicroísmo circular (MeCN, RT, 0,000131 M, v = 350-200 nm, comprimento da célula =0,2 cm) 204 nm (de = 3,66). 218 nm (de = 0,00). 240 nm (de = 2,58) 260 nm (de = 2,53)

Exemplo 14: 5-Amino-N-(2 —{[({2-cloro-6-[(difluorornetil)oxi]fenil}carbonil)amino]metil}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4-fluorofenil)-lfl-pirazole-4-carboxamida

A uma solução de ácido 2-cloro-6-[(difluorometil)oxi]benzóico (220 mg) em tetra-hidrofurano anidro (5 mL) foi adicionada dimetilformamida anidra (10 pL) seguida de cloreto de oxalilo (87 pL) . Foi agitada sob azoto à temperatura ambiente durante 30 minutos. Foi adicionada uma solução de 5-amino-N-[2-(aminometil)-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil]-1-(4-fluorofenil)-lH-pirazole-4-carboxamida 186 (325 mg) em tetra-hidrofurano anidro (3 mL) e diisopropiletilamina (0,52 mL) lavada com mais tetra-hidrofurano (1 mL) . A mistura foi agitada sob azoto durante 22 horas. Foi adicionada a acetato de etilo (50 mL) e lavada sequencialmente com água (50 mL), ácido clorídrico 2 M (25 mL), água (25 mL), bicarbonato de sódio saturado (25 mL), água (25 mL) e solução aquosa saturada de cloreto de sódio (25 mL) . Foi então seca sobre MgSCg e evaporada. O resíduo foi purificado sobre um cartucho de SPE de 10 g de sílica eluindo com diclorometano e depois ciclo-hexano:acetato de etilo (4:1), (3:1) e finalmente (2:1) (8 vezes). As fracções apropriadas foram combinadas e evaporadas e dissolvidas em metanol e evaporadas para dar o composto em epígrafe (369 mg) como um vidro. RMN de XH (400 MHz, DMSO) d ppm 8,97 (t, 1H), 8,00 (t, 1H), 7,90 (s, 1H), 7,58 (m, 2H), 7,51 (m, 1H), 7,38 (m, 3H), 7,36 (t, 1H, J = 60Hz), 7,26 (d, 1H) , 6,63 (s, 1H) , 6,35 (s. 1., 2H), 3,78 (m, 2H), 3,48 (m, 2H). LC/MS Tempo de retenção 1,08 min, MH+ 566. O Exemplo 14 foi ainda preparativamente separado nos seus enantiómeros (Isómeros A e B) utilizando uma coluna Chiralpak AD 5 cm x 20 cm eluindo com 30% propan-2-ol em heptano a um caudal de 75 mL/min. 187

Enantiómero 1 (Isómero A) HPLC Quiral Analítica (coluna Chiralpak AD 25 x 0,46 cm, 40% propan-2-ol em heptano eluindo a 1 mL/min) - Tempo de retenção 5,55 min.

Dicroísmo circular (MeCN, RT, 0,000136 M, v = 350-200 nm, comprimento da célula =0,2 cm) 204,6 nm (de = -4,49). 217,8 nm (de = 0,63). 240 nm (de = -3,28). 262 nm (de = -3,20).

Enantiómero 2 (Isómero B) HPLC Quiral Analítica (coluna Chiralpak AD 25 X 0,46 cm, 40% propan-2-ol em heptano eluindo a 1 mL/min) - Tempo de retenção 7,63 min.

Dicroísmo circular (MeCN, RT, 0,000134 M, v = 350-200 nm, comprimento da célula =0,2 cm) 203,8 nm (de = 4,55). 218,6 nm (de = -0,23). 240 nm (de = 2,94). 260 nm (de = 2,84).

Os Exemplos seguintes foram preparados de modo análogo ao Exemplo 14: 188 F.

Numero do Exemplo R1 R2 R3 Nome do Composto 15 H cf3 cf3 5-amino-N-{2-[({[2,6- bis(trifluorometil)fenil]carbonil}amino) metil]-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil}-1-(4-fluorofenil)-lfí-pirazole-4-carboxamida 15 Enantiómero 1 H cf3 cf3 5-amino-W-{2-[({[2,6- bis(trifluorometil)fenil]carbonil}amino) metil]-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil} -1-(4-fluorofenil)-lfí-pirazole-4-carboxamida 15 Enantiómero 2 H cf3 cf3 5-amino-AT- { 2 - [ ( { [2,6- bis(trifluorometil)fenil]carbonil}amino) metil]-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil}-1-(4-f luorof enil) -líí-pirazole-4-carboxamida 16 ch3 Cl Br 5-amino-N-(2 — { [[(2-bromo-6-clorofenil)carbonil](metil)amino]metil}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4-f luorof enil) -lfí-pirazole-4-carboxamida 17 ch2ch2f F F 5-amino-AJ- (2 — { [ [ (2,6 — difluorofenil)carbonil] (2- fluoroetil)amino]metil}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxilo propil)-1-(4-fluorofenil)-1H-pirazole-4-carboxamida 18 ch2ch2f F cf3 5-amino-l-(4-fluorofenil)-N-{3, 3, 3-trifluoro-2-[( (2-fluoroetil) { [2-fluoro-6-(trifluorometil)fenil]carbonil}amino)metil]-2-hidroxipropil} -lií-pirazole4-carboxamida 19 H cf3 F 5-amino-l-(4-fluorofenil)-N-{3, 3, 3-trifluoro-2-[({[2-fluoro-6-(trifluorometil)fenil]carbonil}amino) metil]-2-hidroxipropil}-lH-pirazole-4-carboxamida 19 Enantiómero 1 H cf3 F 5-amino-l-(4-fluorofenil)-N-{3, 3, 3-trifluoro-2-[({[2-fluoro-6- (trifluorometil)fenil]carbonil}amino)metil]-2-hidroxipropil} -lfí-pirazole-4-carboxamida 189 (continuação) Número do Exemplo R1 R2 R3 Nome do Composto 19 Enantiómero 2 H cf3 F 5-amino-l-(4-fluorofenil)-N-{3, 3, 3-trifluoro-2-[({[2-fluoro-6- (trifluorometil)fenil]carbonil}amino)metil]-2-hidroxipropil}-lH-pirazole-4-carboxamida 20 H ochf2 ochf2 5-amino-N-(2-{ [ ({2,6- bis[(difluorometil)oxi]fenil}carbonil) amino]metil}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4-fluorofenil)-1H-pirazole-4-carboxamida 21 ch3 cf3 F 5-amino-l-(4-fluorofenil)-N-(3, 3, 3-trifluoro-2-{[{[2-fluoro-6-(trifluorometil)fenil]carbonil}(metil) amino]metil]-2 -hidroxipropil)-lH-pirazole-4-carboxamida 22 ch3 cf3 cf3 5-amino-N-(2 — { [{[2,6- bis(trifluorometil)fenil]carbonil}(metil) amino]metil}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4-fluorofenil)-1H-pirazole-4-carboxamida 23 ch2ch3 cf3 F 5-amino-N-{2-[(etil{[2-fluoro-6-(trifluorometil)fenil]carbonil}amino)metil]-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil}-1-(4-f luorof enil) -lfí-pirazole-4-carboxamida 24 ch2ch3 Br Cl 5-amino-W-(2 — { [[(2-bromo-6-clorofenil)carbonil](etil)amino]metil}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil)-l-(4-f luorof enil) -lfí-pirazole-4-carboxamida 25 ch2ch3 ochf2 Cl 5-amino-17-(2-{ [ ({2-cloro-6-[(difluorometil)oxi]fenil}carbonil)(etil) amino]metil}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4-fluorofenil)-1H-pirazole-4-carboxamida 26 ch2ch3 ochf2 ochf2 5-amino-W-(2-{ [ ({2,6- bis[(difluorometil)oxi]fenil}carbonil)(etil) amino] metil}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4-fluorofenil)-1H-pirazole-4-carboxamida 27 ch2ch3 cf3 cf3 5-amino-W-(2 — { [{[2,6- bis(trifluorometil)fenil]carbonil}(etil) amino]metil}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil)-l-(4-fluorofenil)-lH-pirazole-4-carboxamida 28 ch2ch2f Cl Cl 5-amino-W-(2 — { [[(2,6-diclorofenil)carbonil](2- fluoroetil)amino]metil}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4-fluorofenil)-1H-pirazole-4-carboxamida 190 (continuação) Número do Exemplo R1 R2 R3 Nome do Composto 29 ch2ch2f Cl F 5-amino-W-(2 — { [ [ (2-cloro-6-fluorofenil)carbonil](2- fluoroetil)amino]metil}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4 —fluorofenil)-1H-pirazole-4-carboxamida 30 ch2ch2f Br Cl 5-amino-N-(2 — { [[(2-bromo-6-clorofenil)carbonil](2- fluoroetil)amino]metil}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4-fluorofenil)-1H-pirazole-4-carboxamida 31 ch2ch2f ochf2 Cl 5-amino-N-(2 —{ [ ({2-cloro-6-[ (difluorometil)oxi]fenil}carbonil) (2-fluoroetil)amino]metil}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4 —fluorofenil)-1H-pirazole-4-carboxamida 32 ch2ch2f ochf2 ochf2 5-amino-W-(2-{ [ ({2,6- bis[(difluorometil)oxi]fenil}carbonil)(2-fluoroetil)amino]metil}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4 —fluorofenil)-1H-pirazole-4-carboxamida

OS

Exemplos seguintes foram preparados de modo análogo ao

Exemplo 6:

Número do Exemplo (X)n Nome do Composto 33 3- F, 4- F 5-amino-l-(3,4-difluorofenil)-N-(2 —{[[(2,6-diftuorofenil)carbonil](etil)amino]metil}—3,3,3— trifluoro-2-hidroxipropil)-lH-pirazole-4-carboxamida 191 (continuação) Número do Exemplo (X)n Nome do Composto 34 2-F, 4-F 5-amino-l-(2,4-difluorofenil)-N-(2 — {[[(2,6 — difluorofenil)carbonil](etil)amino]metil}-3,3,3-trif luoro-2-hidroxipropil) -lfí-pirazole-4-carboxamida 35 3-F, 5-F 5-amino-l- (3,5-dif luorof enil) -17- (2 — { [[(2,6 — difluorofenil)carbonil](etil)amino]metil}-3,3,3-trif luoro-2-hidroxipropil) - lií-pirazole-4-carboxamida 36 2-F, 5-F 5-amino-l-(2,5-difluorofenil)-N-(2-{[[(2,6— difluorofenil)carbonil](etil)amino]metil}-3,3,3-trif luoro-2-hidroxipropil) - lfí-pirazole-4-carboxamida 37 2-F, 6-F 5-amino-l- (2, 6-dif luorof enil) -17- (2 — { [[(2,6 — difluorofenil)carbonil](etil)amino]metil}-3,3,3-trif luoro-2-hidroxipropil) - lfí-pirazole-4-carboxamida 38 3-F 5-amino-N-(2—{[[(2,6— difluorofenil)carbonil](etil)amino]metil}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(3-fluorofenil)-1H-pirazole-4-carboxamida 39 4-C1 5-amino-l- (4-clorofenil) -17- (2—{ [ [ (2,6 — difluorofenil)carbonil](etil)amino]metil}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil)-lú-pirazole-4-carboxamida 40 2-C1 5-amino-l-(2-clorofenil)-N-(2—{[[(2,6— difluorofenil)carbonil](etil)amino]metil}-3,3,3-trif luoro-2-hidroxipropil) - lfí-pirazole-4-carboxamida 41 3-C1 5-amino-l- (3-clorofenil) -17- (2 — { [ [ (2,6 — difluorofenil)carbonil](etil)amino]metil}-3,3,3-trif luoro-2-hidroxipropil) -lfí-pirazole-4-carboxamida 42 2-F 5-amino-I7- (2— { [ [ (2,6 — difluorofenil)carbonil](etil)amino]metil}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(2-fluorofenil)-1H-pirazole-4-carboxamida 192

Exemplo 43: 5-Amino-N-{2-[({[2,6-bis(dlfluorometil)fe nil]carbonil}amino)metil]-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil}-l-(4-fluorofenil)-lfl-pirazole-4-carboxamida

A uma solução de ácido 2,6-bis(difluorometil)benzóico (20 mg) em tetra-hidrofurano anidro (0,8 mL) foi adicionada dimetilformamida anidra (5 pL) seguida de cloreto de oxalilo (90 pL de uma solução de cloreto de oxalilo (87 pL) em tetra-hidrofurano (0,9 mL). Foi deixada durante 30 minutos e em seguida foram adicionadas 5-amino-lV-[2-(aminometil)-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil]-1-(4-fluorofenil)-lfí-pirazole-4-carboxamida (36 mg) e diisopropiletilamina (52 pL) . Foi deixada a 21 °C durante 17 horas, evaporada, partilhada entre diclorometano (3 mL) e ácido clorídrico 2 M (2 mL), lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio (2 mL) e evaporada para dar (41,7 mg). Este foi purificado sobre um cartucho de SPE (Si02, 2 g) eluindo com diclorometano e em seguida com ciclo-hexano:acetato de etilo (4:1), (3:1), (2:1)(2x), (3:2)(3x) e finalmente (1:1)(2x). As fracções apropriadas foram combinadas e evaporadas para dar o composto em epígrafe (26,5 mg). RMN de (400 MHz, MeOD) õppm 7,81 - 7,89 (m, 3H) 7,68 - 7,76 (m, 1H) 7,48 - 7,58 (m, 2H) 7,21 - 7,32 (m, 2H) 6,95 (t, 2H) 3, 41 - 3, 82 (m, 4H) . 193 LC-MS Tempo de retenção 1,08 min, MH+ 566. 0 Exemplo 43 foi ainda preparativamente separado nos seus enantiómeros (Isómeros A e B) utilizando uma coluna Chiralcel OD eluindo com 20% etanol em heptano a um caudal de 15 mL/min.

Enantiómero 1 (Isómero A) HPLC Quiral Analítica (coluna Chiralcel OD 25 x 0,46 cm, 25% etanol em heptano eluindo a 1 mL/min) - Tempo de retenção 5,26 min.

Dicroísmo circular (MeCN, RT, 0,000168 M, v = 350-200 nm, comprimento da célula = 0,2 cm) 203 nm (de = 3,10). 218 nm (de = -1,47). 262 nm (de = 2,09) .

Enantiómero 2 (Isómero B) HPLC Quiral Analítica (coluna Chiralcel OD 25 x 0,46 cm, 25% etanol em heptano eluindo a 1 mL/min) - Tempo de retenção 7,47 min.

Dicroísmo circular (MeCN, RT, 0,000166 M, v = 350-200 nm, comprimento da célula =0,2 cm) 202,4 nm (de = -2,20) . 217 nm (de = 1,68). 263 nm (de = -1,85) . 194

Exemplo 44: 5-Amino-N-{2-[({[2-cloro-6-(trlfluorometil)fenll]carbonil}amlno)metil]-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil}-1-(4-fluorofenil)-lH-pirazole-4-carboxamida

A uma solução de ácido 2-cloro-6-(trifluorometil)benzóico (27 mg) em tetra-hidrofurano anidro (1 mL) foi adicionada dimetilformamida anidra (5 pL) seguida de uma solução de cloreto de oxalilo em tetra-hidrofurano anidro (1 M, 0,13 mL) . A solução efervesceu e foi agitada sob azoto durante 30 minutos. Foi adicionada uma solução de 5-amino-W-[2-(aminometil)-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil]-1-(4-fluorofenil)-lií-pirazole-4-carboxamida (36 mg) em tetra-hidrofurano anidro (1 mL) e diisopropiletilamina (65 pL) lavada com mais tetra-hidrofurano (0,5 mL) . Foi agitada sob azoto durante 16 horas, evaporada, dissolvida em diclorometano (5 mL), lavada com ácido clorídrico 2 M (2 mL), evaporada e purificada sobre um cartucho de SPE de sílica (5 g) . Eluição com diclorometano seguida de acetato de etilo:ciclo-hexano (1:5), (1:3), (1:2), (1:1) (4 vezes). A combinação das fracções apropriadas e evaporação deu o composto em epígrafe (50 mg). RMN de (400 MHz, DMSO) 5 ppm 9,02 (t, 1H), 8,03 (t, 1H), 7,91 (s, 1H), 7,87 (d, 1H), 7,79 (d, 1H), 7,67 (t, 1H), 7,57 (m, 2H), 7,36 (m, 2H), 6,65 (s, 1H), 6,35 (s. 1., 2H), 3,75 (m, 2H), 3,52 (m, 2H). 195 LC/MS Tempo de retenção 3,22 min, MH+ 568. 0 Exemplo 44 foi ainda preparativamente separado nos seus enantiómeros (Isómeros A e B) utilizando uma coluna Chiralpak AD eluindo com 40% propan-2-ol em heptano a um caudal de 15 mL/min.

Enantiómero 1 (Isómero A) HPLC Quiral Analítica (coluna Chiralpak AD 25 x 0,46 cm, 40% propan-2-ol em heptano eluindo a 1 mL/min) - Tempo de retenção 4,62 min.

Enantiómero 2 (Isómero B) HPLC Quiral Analítica (coluna Chiralpak AD 25 x 0,46 cm, 40% propan-2-ol em heptano eluindo a 1 mL/min) - Tempo de retenção 6,47 min. 196

Exemplo 45: 5-Amino-i\7-{2-[({[2-bromo-6-(trifluorometil)fenil]carbonil}amino)metil]-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil}-1-(4-fluorofenil)-lfl-pirazole-4-carboxamida

Ácido 2-bromo-6-(trifluorometil)benzóico (70% puro, 60 mg) foi dissolvido em tetra-hidrofurano anidro (2 mL) . A este foi adicionada dimetilformamida anidra (5 pL) e 0,25 mL de uma solução de cloreto de oxalilo (87 pL) em tetra-hidrofurano anidro (0,9 mL) . Foi então agitada sob azoto a 21 °C durante 30 minutos e em seguida foi adicionada uma solução de 5-amino-N-[2-(aminometil)-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil]-1-(4-fluorofenil)-lH-pirazole-4-carboxamida (72 mg) em tetra-hidrofurano anidro (2 mL) e diisopropiletilamina (130 pL) . Foi agitada sob azoto durante 2 horas para dar uma suspensão antes de ser partilhada entre acetato de etilo (20 mL) e ácido clorídrico 2 M (10 mL), lavada com água (10 mL) e solução aquosa saturada de cloreto de sódio (10 mL), seca sobre MgS04 e evaporada para dar uma goma (128 mg) . A purificação desta goma via Flashmaster 2 sobre Si02 (20 g) utilizando 0-100% de acetato de etilo em ciclo-hexano durante 30 minutos deu o composto em epígrafe (39,5 mg). RMN de :Η (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) d ppm 9,0 (t, 1H), 8,03 (m, 2H), 7,91 (s, 1H), 7,83 (d, 1H), 7,58 (m, 3H), 7,36 (m, 2H), 6,65 (s, 1H), 6,35 (s. 1., 2H), 3,75 (m, 2H), 3,52 (m, 2H). 197 LC-MS Tempo de retenção 3,32 min, MH+ 612, 614. 0 Exemplo 45 foi ainda preparativamente separado nos seus enantiómeros (Isómeros A e B) utilizando uma coluna Chiralpak AD eluindo com 40% de propan-2-ol em heptano a um caudal de 15 mL/min.

Enantiómero 1 (Isómero A) HPLC Quiral Analítica (coluna Chiralpak AD 25 x 0,46 cm, 40% propan-2-ol em heptano eluindo a 1 mL/min) - Tempo de retenção 4,80 min.

Enantiómero 2 (Isómero B) HPLC Quiral Analítica (coluna Chiralpak AD 25 x 0,46 cm, 40% propan-2-ol em heptano eluindo a 1 mL/min) - Tempo de retenção 7,49 min. 198

Exemplo 48: 5-Amino-i7-{ [ ({ 2-[ (dif luorometil) oxi]-6-fluorofenil}carbonil)amino]metil}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4-fluorofenil)-lff-pirazole-4-carboxamida

F A uma solução de ácido 2-[(difluorometil)oxi]-6-fluorobenzóico (53,5 mg) em tetra-hidrofurano anidro (2 mL) foi adicionada dimetilformamida anidra (5 pL) seguida de cloreto de oxalilo (23 pL) . Foi agitada sob azoto durante 30 minutos e em seguida foram adicionadas 5-amino-N-[2-(aminometil)-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil]-1-(4-fluorofenil)-líí-pirazole-4-carboxamida (72 mg) e diisopropiletilamina (130 pL) . Foi agitada durante 23 horas e em seguida partilhada entre acetato de etilo (25 mL) e água (20 mL) . Foi lavada com ácido clorídrico 2 M (10 mL), água (10 mL), bicarbonato de sódio saturado (10 mL), água (10 mL) e solução aquosa saturada de cloreto de sódio (10 mL), seca sobre MgS04 e evaporado para dar uma goma (114 mg).

Esta foi purificada sobre um cartucho de Si02 (20 g) eluindo com 0-100% acetato de etilo em diclorometano ao longo de 20 minutos. O isolamento da fracção apropriada deu o composto em epígrafe (65,3 mg). RMN de XH (400 MHz, DMSO) d ppm 8,92 (t, 1H), 8,02 (t, 1H), 7,91 (s, 1H), 7,56 (m, 3H), 7,36 (t, 2H), 7,24 (t, 1H, J=75 Hz),

199 LC-MS Tempo de retenção 3,13 min, MH+ 550. O Exemplo 48 foi ainda preparativamente separado nos seus enantiómeros (Isómeros A e B) utilizando uma coluna Chiralcel OD eluindo com 20% etanol em heptano a um caudal de 15 mL/min.

Enantiómero 1 (Isómero A) HPLC Quiral Analítica (coluna Chiralcel OD 25 x 0,46 cm, 20% etanol em heptano eluindo a 1 mL/min) - Tempo de retenção 9,55 min.

Enantiómero 2 (Isómero B) HPLC Quiral Analítica (coluna Chiralcel OD 25 x 0,46 cm, 20% etanol em heptano eluindo a 1 mL/min) - Tempo de retenção 12,81 min. 200

Outros compostos que também podem ser preparados incluem:

Número do Exemplo R1 R2 R3 46 H chf2 cf3 47 H Br ochf2

EXEMPLOS BIOLÓGICOS

Ensaio de ligação ao receptor de glucocorticóides A capacidade dos compostos para se ligar ao receptor de glucocorticóides foi determinada avaliando a sua capacidade para competir com um derivado de dexametasona marcado fluorescentemente com Alexa 555. Os compostos foram solvatados e diluidos em DMSO, e transferidos directamente para as placas de ensaio. Foram adicionados dexametasona fluorescente e um receptor de glucocorticóides de comprimento total parcialmente purificado às placas, em conjunto com componentes de tampão para estabilizar a proteina GR e incubados à temperatura ambiente durante 2 h no escuro. A ligação de cada composto foi avaliada analisando o deslocamento do ligando fluorescente medindo a diminuição do sinal de polarização de fluorescência da mistura. 201

Foram construídas curvas dose-resposta a partir das quais foram estimados os valores de plC50.

Exemplo 1 (racémico), , Exemplo 1 Enantiómero 1, , Exemplo 1 Enantiómero 2, Exemplo 2 (racémico), Exemplo 2 Enantiómero 1, Exemplo 2 Enantiómero 2 , Exemplo 3 (racémico), Exemplo 3 Enantiómero 1, Exemplo 3 Enantiómero 2, Exemplo 4 (racémico), Exemplo 4 Enantiómero 1, Exemplo 4 Enantiómero 2, Exemplo 5 (racémico), Exemplo 5 Enantiómero 1, Exemplo 5 Enantiómero 2, Exemplo 7 (racémico), Exemplo 8 (racémico), Exemplo 9 (racémico), Exemplo 10 ( racémico), Exemplo 10 Enantiómero 1, Exemplo 11 (racémico), Exemplo 11 Enantiómero 1, Exemplo 11 Enantiómero 2, Exemplo 12 (racémico), Exemplo 12 Enantiómero 1, Exemplo 12 Enantiómero 2 , Exemplo 13 (racémico), Exemplo 13 Enantiómero 1, Exemplo 13 Enantiómero 2, Exemplo 14 (racémico), Exemplo 14 Enantiómero 1, Exemplo 14 Enantiómero 2, Exemplo 15 (racémico), Exemplo 15 Enantiómero 1, Exemplo 15 Enantiómero 2, Exemplo 16 (racémico), Exemplo 17 (racémico), Exemplo 18 (racémico), Exemplo 19 (racémico), Exemplo 19 Enantiómero 1, Exemplo 19 Enantiómero 2 , Exemplo 20 (racémico), Exemplo 21 (racémico), Exemplo 22 (racémico), Exemplo 23 (racémico), Exemplo 24 (racémico), Exemplo 25 (racémico), Exemplo 26 (racémico), Exemplo 27 (racémico), Exemplo 28 (racémico), Exemplo 29 (racémico), Exemplo 30 (racémico), Exemplo 31 (racémico), Exemplo 32 (racémico), Exemplo 33 (racémico), Exemplo 34 (racémico), Exemplo 35 (racémico), Exemplo 36 (racémico), Exemplo 37 (racémico), Exemplo 38 (racémico), Exemplo 39 (racémico), Exemplo 40 (racémico), Exemplo 41 (racémico), Exemplo 42 (racémico), Exemplo 43 (racémico), Exemplo 43 Enantiómero 1 , Exemplo 44 (racémico), Exemplo 44 Enantiómero 1, Exemplo 44 Enantiómero 2, Exemplo 45 (racémico), Exemplo 45 Enantiómero 1, Exemplo 45 Enantiómero 2, Exemplo 48, 202

Exemplo 48 Enantiómero 1 e Exemplo 48 Enantiómero 2 exibiram ligação glucocorticóide com uma pICso ú 6,5 neste ensaio.

Julga-se que os compostos que possuem agonismo no ensaio NFkB, que possuem eficácia reduzida no ensaio agonista de MMTV e actividade reduzida no receptor de progesterona tenham o perfil desejado para proporcionar actividade anti-inflamatória com possibilidades reduzidas de efeitos secundários.

Ensaio NFkB

Células A549 SPAP

Linhas de células A549 de carcinoma pulmonar de caucasiano humano (ECACC No. 86012804) foram transfectadas de modo estável no laboratório com um plasmideo contendo uma sequência promotora de ELAM que tem um elemento de resposta NFkB. a estimulação da linha de células com TNFa resulta na transdução do sinal intracelular e, em última análise, na translocação de NFkB para o núcleo. Isto activa a sequência de ADN inserida, resultando na transcrição do gene SPAP integrado, o que é quantificado utilizando um ensaio colorimétrico. Neste ensaio, os compostos agonistas de GR inibem a transcrição orientada por NFkB resultando numa diminuição do sinal. A linha de células transfectada de modo estável foi cultivada como uma monocamada em DMEM suplementado com FCS-HI (10%), aminoácidos não essenciais (1%), L-Glutamina (2 mM), Pen/Estrep (1%) e Geneticina (50 mg/ mL). 203

Ensaio agonista de NFkB

Um balão T225 de células A549 SPAP 70% confluentes foi colhido por centrifugação durante 5 min a 200 g, ressuspenso em tampão de ensaio (DMEM suplementado com 10% de FCS 2xHI, L-Glutamina 2 mM, 1% de Pen/Estrep e aminoácidos não essenciais) e diluido a 0,16 x 106/mL. 60 pL da solução de células foram transferidos para cada poço de placas de 384 poços Nunc transparentes, contendo o composto à concentração necessária. As placas foram incubadas durante 1 h a 37 °C, com 95% de humidade, 5% de C02 antes de ter sido adicionados 10 pL de TNFa à concentração final de 3,2 ng/mL e, em seguida, retornadas à incubadora de células durante 15 h. As placas foram equilibradas até à temperatura ambiente durante 1 h antes da adição de 25 pL de tampão pNPP (Dietanolamina 1 M, pH 9,8, MgCl2 0,5 mM, NaCl 0,28 M, 2 mg/mL de pNPP) a cada poço das placas de ensaio. As placas foram tapadas para proteger os reagentes da luz, e em seguida incubadas à temperatura ambiente durante aproximadamente 1 hora, antes de as ler num Ascent utilizando um único filtro a 405 nm. Foram construídas curvas dose-resposta a partir das quais foram estimados os valores de piCso.

Os valores de ρΙΟ50 para Exemplo 1 (racémico), Exemplo 1 Enantiómero 1, Exemplo 1 Enantiómero 2, Exemplo 2 (racémico),

Exemplo 2 Enantiómero 1, Exemplo 2 Enantiómero 2, Exemplo 3 (racémico), Exemplo 3 Enantiómero 1, Exemplo 3 Enantiómero 2, Exemplo 4 (racémico), Exemplo 4 Enantiómero 1, Exemplo 4

Enantiómero 2, Exemplo 5 (racémico), Exemplo 5 Enantiómero 1, Exemplo 5 Enantiómero 2, Exemplo 7 (racémico), Exemplo 7

Enantiómero 1, Exemplo 7 Enantiómero 2, Exemplo 8 (racémico),

Exemplo 9 (racémico), Exemplo 10 (racémico), Exemplo 10 204

Enantiómero 1, Exemplo 11 (racémico), Exemplo 11 Enantiómero 1, Exemplo 11 Enantiómero 2, Exemplo 12 (racémico), Exemplo 12 Enantiómero 1, Exemplo 12 Enantiómero 2, Exemplo 13 (racémico),

Exemplo 13 Enantiómero 1 , Exemplo 13 Enantiómero 2, Exemplo 14 (racémico), Exemplo 14 Enantiómero 1, Exemplo 14 Enantiómero 2, Exemplo 15 (racémico), Exemplo 15 Enantiómero 2, Exemplo 16 (racémico), Exemplo 17 (racémico), Exemplo 18 (racémico), Exemplo 19 (racémico), Exemplo 19 Enantiómero 1, Exemplo 19 Enantiómero 2, Exemplo 21 (racémico) , Exemplo 22 (racémico), Exemplo 23 (racémico), Exemplo 24 (racémico ), Exemplo 25 (racémico), Exemplo 26 (racémico), Exemplo 27 (racémico), Exemplo 28 (racémico), Exemplo 29 (racémico )/ Exemplo 30 (racémico), Exemplo 31 (racémico), Exemplo 32 (racémico), Exemplo 33 (racémico), Exemplo 34 (racémico ), Exemplo 35 (racémico), Exemplo 36 (racémico), Exemplo 37 (racémico), Exemplo 38 (racémico), Exemplo 39 (racémico), Exemplo 40 (racémico), Exemplo 41 (racémico), Exemplo 42 (racémico), Exemplo 43 (racémico), Exemplo 43 Enantiómero 1, Exemplo 43 Enantiómero 2, Exemplo 44 (racémico), Exemplo 44 Enantiómero 1, Exemplo 44 Enantiómero 2, Exemplo 45 (racémico), Exemplo 45 Enantiómero 1, Exemplo 45 Enantiómero 2, Exemplo 48 (racémico), Exemplo 48 Enantiómero 1 e Exemplo 48 Enantiómero 2 são > 6 no ensaio de NFkB.

Ensaio de MMTV

Células A549 MMTV

Linha de células A549 de carcinoma pulmonar de caucasiano humano (ECACC N° 86012804) foram transfectadas de modo estável no laboratório com um plasmideo contendo um repórter de renila 205 luciferase com um promotor de MMTV. A estimulação da linha de células com agonistas de GR resulta na transdução de sinal intracelular e, em última análise, na translocação de GR para o núcleo. Isto activa a sequência de ADN inserida resultando na transcrição do gene de luciferase integrado, que é quantificado utilizando uma emissão de luz. A linha de células transfectada de modo estável foi cultivada como uma monocamada em DMEM suplementado com FCS-HI (10%), Aminoácidos não essenciais (1%), L-Glutamina (2 mM), Pen/Estrep (1%) e Geneticina (50 mg/ mL).

Ensaios agonista de MMTV

Um balão T175 com células A549 MMTV 90% confluentes foi colhido por centrifugação durante 5 min a 200 g, ressuspenso em tampão de ensaio (DMEM suplementado com 10% de FCS 2XHI, Glutamax 2 mM, Aminoácidos não essenciais e HEPES 25mM) e diluído a 0,1 x 106/mL. 70 pL da solução de células foram distribuídos para cada poço de uma placa de 384 poços Nunc branca, contendo composto à concentração necessária. As placas foram incubadas durante 6 h a 37 °C, com 95% de humidade, 5% de CO2. As placas foram equilibradas até à temperatura ambiente durante 1 h antes da adição de 10 pL de substrato de Renila a cada poço das placas de ensaio. As placas foram tapadas para proteger os reagentes da luz, e em seguida incubadas à temperatura ambiente durante aproximadamente 15 min antes de serem lidas num Viewlux. Foram construídas curvas dose-resposta a partir das quais foram estimados os valores de pEC50 e da assimptota máxima. 206

Ensaio Antagonista de MMTV

Um balão T175 com células A549 MMTV 90% confluentes foi colhido por centrifugação durante 5 min a 200 g, ressuspenso em tampão de ensaio (DMEM suplementado com 10% de FCS 2XHI, Glutamax 2 mM, Aminoácidos não essenciais e HEPES 25 mM) e diluido a 0,1 x 106/mL. Foi adicionada dexametasona à solução de células até uma concentração de 15 nM. A partir de uma solução-mãe de dexametasona 75 uM (solvente de DMSO), foram adicionados 20 uL por 100 mL de meio de ensaio e células. Foram distribuídos 70 pL da solução de células para cada poço das placas de 384 poços Nunc branca, contendo composto à concentração necessária. As placas foram incubadas durante 24 h a 37 °C, com 95% de humidade, 5% de CO2. As placas foram equilibradas até à temperatura ambiente durante 1 h antes da adição de 10 pL de substrato de Renila a cada poço das placas de ensaio. As placas foram tapadas para proteger os reagentes da luz, e em seguida incubadas à temperatura ambiente durante aproximadamente 15 min antes de serem lidas num Viewlux. Foram construídas curvas dose-resposta a partir das quais foram estimados os valores de pICso-

Os seguintes exemplos são agonistas totais (i. e. têm uma assimptota máxima média > 85%) nos ensaios agonistas de NFkB e MMTV:

Exemplo 1 (racémico), Exemplo 1 Enantiómero 1, Exemplo 2 (racémico), Exemplo 2 Enantiómero 2, Exemplo 4 (racémico), Exemplo 4 Enantiómero 1, Exemplo 5 (racémico), Exemplo 5 Enantiómero 2, Exemplo 8 (racémico), Exemplo 9 (racémico), Exemplo 10 (racémico), Exemplo 10 Enantiómero 1, Exemplo 16 207 (racémico), Exemplo 17 (racémico), Exemplo 18 (racémico), Exemplo 21 (racémico), Exemplo 22 (racémico), Exemplo 23 (racémico), Exemplo 24 (racémico), Exemplo 25 (racémico), Exemplo 26 (racémico), Exemplo 27 (racémico), Exemplo 28 (racémico), Exemplo 29 (racémico), Exemplo 30 (racémico), Exemplo 31 (racémico), Exemplo 33 (racémico), Exemplo 34 (racémico), Exemplo 35 (racémico), Exemplo 36 (racémico), Exemplo 37 (racémico), Exemplo 38 (racémico), Exemplo 39 (racémico), Exemplo 40 (racémico), Exemplo 41 (racémico) e Exemplo 42 (racémico). Os seguintes exemplos são agonistas parciais : ou totais (i. e. têm uma assimptota máxima média > 20%) no ensaio de NFkB e são agonistas parciais ou selectivos de eficácia (i.e. têm uma assimptota máxima média >20% e < 85%) no ensaio agonista de MMTV: Exemplo 1 Enantiómero 2, Exemplo 2 Enantiómero 1, Exemplo 3 (racémico), Exemplo 3 Enantiómero 1, Exemplo 3 Enantiómero 2, Exemplo 4 Enantiómero 2, Exemplo 5 Enantiómero 1, Exemplo 7 (racémico), Exemplo 7 Enantiómero 1, Exemplo 7 Enantiómero 2, Exemplo 11 (racémico), Exemplo 11 Enantiómero 1, Exemplo 11 Enantiómero 2, Exemplo 12 (racémico), Exemplo 12 Enantiómero 1, Exemplo 12 Enantiómero 2, Exemplo 13 (racémico), Exemplo 13 Enantiómero 1, Exemplo 13 Enantiómero 2, Exemplo 14 (racémico), Exemplo 14 Enantiómero 1, Exemplo 14 Enantiómero 2, Exemplo 15 (racémico), Exemplo 15 Enantiómero 1, Exemplo 15 Enantiómero 2, Exemplo 19 (racémico), Exemplo 19 Enantiómero 1, Exemplo 19 Enantiómero 2, Exemplo 43 (racémico), Exemplo 43 Enantiómero 1, Exemplo 44 (racémico), Exemplo 44 Enantiómero 1, Exemplo 44 Enantiómero 2, Exemplo 45 (racémico), Exemplo 45 Enantiómero 1, Exemplo 45 Enantiómero 2, Exemplo 48 Enantiómero 1 e Exemplo 48 Enantiómero 2. 208

Ensaio em relação à Actividade no Receptor de Progesterona

Um balão T225 de células CV-1 com uma densidade de 80% da confluência foi lavado com PBS, as células foram desprendidas do balão utilizando tripsina a 0,25% e contadas utilizando um Sysmex KX-21N. As células foram diluidas em DMEM contendo 10% de Hyclone, L-Glutamato 2 mM e 1% de Pen/Estrep a 140 células/ pL e transduzidas com 10% de PRb-BacMam e 10% de MMTV-BacMam. Foram distribuídos 70 mL da suspensão de células para cada poço de placas de 384 poços Nunc brancas, contendo compostos à concentração necessária. Após 24 h, foram adicionados 10 pL de Esteadilite a cada poço das placas. As placas foram incubadas no escuro durante 10 min antes de serem lidas num leitor Viewlux. Foram construídas curvas dose-resposta a partir das quais foram estimados os valores de pEC5o·

Exemplo 1 (racémico), Exemplo 1 Enantiómero 1, Exemplo 1

Enantiómero 2, Exemplo 2 (racémico), Exemplo 2 Enantiómero 1,

Exemplo 2 Enantiómero 2, Exemplo 3 (racémico), Exemplo 3

Enantiómero 1, Exemplo 3 Enantiómero 2, Exemplo 4 (racémico),

Exemplo 4 Enantiómero 1, Exemplo 4 Enantiómero 2, Exemplo 5 (racémico), Exemplo 5 Enantiómero 1, Exemplo 5 Enantiómero 2,

Exemplo 6 (racémico), Exemplo 7 (racémico), Exemplo 7

Enantiómero 1, Exemplo 7 Enantiómero 2, Exemplo 8 (racémico),

Exemplo 9 (racémico), Exemplo 10 (racémico), Exemplo 10

Enantiómero 1, Exemplo 10 Enantiómero 2, Exemplo 11 (racémico), Exemplo 11 Enantiómero 1, Exemplo 11 Enantiómero 2, Exemplo 12 (racémico), Exemplo 12 Enantiómero 1, Exemplo 12 Enantiómero 2,

Exemplo 13 (racémico), Exemplo 13 Enantiómero 1, Exemplo 13

Enantiómero 2, Exemplo 14 (racémico), Exemplo 14 Enantiómero 1, Exemplo 14 Enantiómero 2, Exemplo 15 (racémico), Exemplo 15

Enantiómero 1, Exemplo 15 Enantiómero 2, Exemplo 16 (racémico), 209

Exemplo 17 (racémico), Exemplo 18 (racémico), Exemplo 19 (racémico), Exemplo 20 (racémico), Exemplo 21 (racémico), Exemplo 22 (racémico), Exemplo 23 (racémico), Exemplo 24 (racémico), Exemplo 25 (racémico), Exemplo 26 (racémico), Exemplo 27 (racémico), Exemplo 28 (racémico), Exemplo 30 (racémico), Exemplo 31 (racémico), Exemplo 32 (racémico), Exemplo 33 (racémico), Exemplo 34 (racémico), Exemplo 35 (racémico), Exemplo 36 (racémico), Exemplo 37 (racémico), Exemplo 38 (racémico), Exemplo 39 (racémico), Exemplo 41 (racémico), Exemplo 42 (racémico), Exemplo 43 (racémico), Exemplo 43 Enantiómero 1, Exemplo 43 Enantiómero 2, Exemplo 44 Enantiómero 1, Exemplo 44 Enantiómero 2, Exemplo 45 (racémico), Exemplo 45 Enantiómero 1, Exemplo 45 Enantiómero 2, Exemplo 48 (racémico), Exemplo 48 Enantiómero 1 < e Exemplo 48 Enantiómero 2 exibem pECso < 6 neste ensaio.

Ensaio em relação à Penetração no Cérebro

Cada ratinho recebeu uma única dose intravenosa a um nível de 1 mg/kg. A dose foi formulada em 10% de DMSO/50% de PEG200/40% de água estéril. Foram colhidas amostras de sangue terminal aos 5 ou 15 minutos após administração, por punção cardíaca após anestesia com isofluorano. Os cérebros foram retirados ao mesmo tempo.

Os compostos foram extraídos de 20 pL de plasma por precipitação da proteína utilizando 120 pL de acetonitrilo contendo um composto análogo como um padrão interno. Os extractos filtrados foram recolhidos numa placa de 96 poços e foram diluídos com um volume igual de acetonitrilo a 10% contendo 0,1% de ácido fórmico em água (v/v) . A placa foi então 210 misturada num agitador de placas durante pelo menos 5 minutos, antes da análise por LC-MS/MS contra uma curva de calibração preparada em plasma de controlo.

Cada cérebro foi pesado, em seguida homogeneizado em 3 mL de acetonitrilo:água (10:90 v/v). Os compostos foram extraídos de 200 pL do homogenato resultante por precipitação da proteina utilizando 600 pL de acetonitrilo contendo um composto análogo como um padrão interno. Os extractos foram centrifugados e foram filtrados 150 pL de cada e transferidos para uma placa de 96 poços. A aliquota foi diluida com acetonitrilo a 10% contendo 0,1% de ácido fórmico em água (v/v) . A placa foi misturada num agitador de placas durante pelo menos 5 minutos antes da análise por LC-MS/MS contra uma curva de calibração preparada em homogenato cerebral de controlo.

Neste ensaio, os Exemplo 1 (Enantiómero 1), Exemplo 5 (Enantiómero 1) e Exemplo 5 (Enantiómero 2) têm uma proporção cérebro/plasma igual ou superior a 0,1 aos 5 minutos.

Ao descrever os exemplos de acordo com a sua actividade nos ensaios acima, entender-se-á que pelo menos um isómero, por exemplo, um enantiómero numa mistura de isómeros (tal como um racemato) tem a actividade descrita. O outro enantiómero pode ter actividade semelhante, menos actividade, não ter actividade ou pode ter alguma actividade antagonista no caso de um ensaio funcional.

Ao longo da descrição e das reivindicações que se seguem, a menos que o contexto exija o contrário, a palavra 'compreendem', e variantes tais como 'compreende' e 'compreendendo', serão entendidas como implicando a inclusão de um número inteiro ou 211 sequência ou grupo de número inteiros especificado, mas não a exclusão de qualquer outro número inteiro ou sequências ou grupo de número inteiros ou sequências. 0 pedido do qual esta descrição e reivindicações fazem parte pode ser utilizado como base para prioridade em relação a qualquer pedido seguinte. As reivindicações de tais pedidos seguintes podem ser dirigidas a qualquer caracteristica ou combinação de caracteristicas aqui descritas. Elas podem tomar a forma de reivindicações de produto, composição, processo ou utilização e podem incluir, a titulo de exemplo e sem limitação, as reivindicações que se seguem.

As patentes, pedidos de patente e outras referências descritas neste pedido são aqui incorporadas por referência.

Lisboa, 26 de Janeiro de 2011 212

Claims (39)

1. REIVINDICAÇÕES 1. Composto de fórmula (I):

   * = centro quiral em que R1 é seleccionado de hidrogénio, metilo, etilo e 2-fluoroetilo; R1 e R2 são, cada, independentemente seleccionados de bromo, cloro, flúor, -CHF2, - CF3 e -OCHF2, ou R1 é -S02CH3 e R2 é hidrogénio; n é um número inteiro seleccionado de 0, 1 e 2, quando n é 1, X é seleccionado de cloro e flúor, e quando n é 2, cada X é flúor; ou um seu sal ou solvato. 1 1 Composto ou um seu sal ou solvato de acordo com a 2 reivindicação 1 em que R1 é seleccionado de hidrogénio e etilo.
2. 3. Composto ou um seu sal ou solvato de acordo com a reivindicação 1 em que R1 é hidrogénio.
3. 4. Composto ou um seu sal ou solvato de acordo com qualquer uma das reivindicações precedentes em que R2 e R3 são, cada, independentemente seleccionados de flúor, cloro, bromo, -OCHF2 e -CHF2.
4. 5. Composto ou um seu sal ou solvato de acordo com a reivindicação 4 em que R2 e R3 são, cada, cloro.
5. 6. Composto ou um seu sal ou solvato de acordo com a reivindicação 4 em que R2 e R3 são, cada, flúor.
6. 7. Composto ou um seu sal ou solvato de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores em que n é 1.
7. 8. Composto ou um seu sal ou solvato de acordo com a reivindicação 7 em que X é flúor.
8. 9. Composto de fórmula (IA): 2

   * = centra quiral em que R1 é seleccionado de hidrogénio, metilo e etilo; e quando R1 é hidrogénio ou metilo, R2 e R3 são, cada, independentemente seleccionados de cloro e flúor, ou quando R1 é etilo, R2 e R3 são, cada, independentemente seleccionados de cloro e flúor, ou R2 é -S02CH3 e R3 é hidrogénio; ou um seu sal ou solvato.
9. 10. Composto ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores.
10. 11. Composto que é: 5-amino-N- [2-({[(2,6-diclorofenil)carbonil]aminojmetil)-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil]-1-(4—fluorofenil) -1H-pirazole-4-carboxamida; 3 5-amino-N- [2-({[(2,6-diclorofenil)carbonil]amino}metil) 3, 3,3-trif luoro-2-hidroxipropil] -1- (4-f luorofenil) — 1 ff— pirazole-4-carboxamida (Enantiómero 1); 5-amino-N- [2-({[(2,6-diclorofenil)carbonil]amino}metil) 3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil]-1-(4-fluorofenil)-1H-pirazole-4-carboxamida (Enantiómero 2); 5-amino-N- (2 —{[[(2,6-difluorofenil)carbonil] (e- til)amino]metil}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4- f luorof enil) -líí-pirazole-4-carboxamida; 5-amino-N- (2—{[[(2,β-difluorofenil)carbonil] (e- til)amino]metil}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4- f luorof enil)-lfí-pirazole-4-carboxamida (Enantiómero 1); 5-amino-N- (2-{[[(2,6-difluorofenil)carbonil] (e- til)amino]metil}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4- fluorofenil)-lH-pirazole-4-carboxamida (Enantiómero 2); 5-amino-W- [2-({[(2-cloro-6-fluorofenil)carbonil]ami- nojmetil)-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil]-1-(4- f luorof enil) -lfí-pirazole-4-carboxamida; 5-amino-N- [2-({[(2-cloro-6-fluorofenil)carbonil]ami-nojmetil)-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil]-1-(4-f luorof enil)-lií-pirazole-4-carboxamida (Enantiómero 1); 5-amino-N- [2-({[(2-cloro-6-fluorofenil)carbonil]ami-nojmetil)-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil]-1-(4-f luorof enil) -líf-pirazole-4-carboxamida (Enantiómero 2); 5-amino-N- [2-({[(2-bromo-6-fluorofenil)carbonil]ami-nojmetil)-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil]-1-(4-f luorof enil) -lff-pirazole-4-carboxamida; 5-amino-N- [2-({[(2-bromo-6-fluorofenil)carbonil]ami-nojmetil)-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil]-1-(4-fluorofenil)-ltf-pirazole-4-carboxamida (Enantiómero 1); 4 5-amino-N- [2-({[(2-bromo-6-fluorofenil)carbonil]ami-no}metil)-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil]-1-(4-f luorof enil)-lf?-pirazole-4-carboxamida (Enantiómero 2); 5-amino-N- (2—{[({2-cloro-6-[(difluorometil)oxi]fe-nil}carbonil)amino]metil}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil) -1- (4—f luorofenil) -lfí-pirazole-4-carboxamida; 5-amino-N- (2-{[({2-cloro-6-[(difluorometil)oxi]fe-nil}carbonil)amino]metil}-3,3, 3-trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4—fluorofenil)-lH-pirazole-4-carboxamida (Enantiómero 1); 5-amino-N- (2-{[({2-cloro-6-[(difluorometil)oxi]fe-nil]carbonil)amino]metil]-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4-fluorofenil)-lH-pirazole-4-carboxamida (Enantiómero 2); 5-amino-W-{2-[({[2,β-bis(difluorometil)fenil]car-bonil}amino)metil]-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil}-l-(4-f luorof enil) -lfí-pirazole-4-carboxamida; 5-amino-N-{2-[({[2,6-bis(difluorometil)fenil]car-bonil}amino)metil]-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil}-l-(4-f luorof enil) -lfí-pirazole-4-carboxamida (Enantiómero 1); 5-amino-N-{2-[({[2,6-bis(difluorometil)fenil]car-bonil}amino)metil]-3, 3,3-trifluoro-2-hidroxipropil}-l-(4-fluorofenil)-lH-pirazole-4-carboxamida (Enantiómero 2); 5-amino-N- (2—{[({2-[(difluorometil)oxi]-6-fluorofenil}carbonil)amino]metil}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil) -1- (4-f luorof enil) - lfí-pirazole-4-carboxamida; 5-amino-W- (2 —{[({2-[(difluorometil)oxi]-6-fluorofenil}carbonil)amino]metil}-3,3,3-trifluoro-2- 5 hidroxipropil)-1-(4-fluorofenil)-lH-pirazole-4-carboxamida (Enantiómero 1); 5-amino-W- (2-{[({2-[(difluorometil)oxi] -6-fluorofeniljcarbonil)amino]metil}-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil)-1-(4-fluorofenil)-lH-pirazole-4-carboxamida (Enantiómero 2); ou um seu sal ou solvato.
11. 12. Composto de acordo com a reivindicação 11, ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável.
12. 13. Composto que é: 5-amino-N- [2-({[(2,6-diclorofenil)carbonil]amino}metil)- 3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil]-1-(4-fluorofenil)-1H-pirazole-4-carboxamida (Enantiómero 2); ou um seu sal ou solvato.
13. 14. Composto que é: 5-amino-W-[2-({[(2,6-diclorofenil)carbonil]amino}metil)- 3.3.3- trifluoro-2-hidroxipropil]-1-(4-fluorofenil)-1H-pirazole-4-carboxamida (Enantiómero 2); ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável.
14. 15. Composto que é: 5-amino-N-[2-({[(2,6-diclorofenil)carbonil]amino}metil)- 3.3.3- trifluoro-2-hidroxipropil]-1-(4-fluorofenil)-1H-pirazole-4-carboxamida (Enantiómero 2); ou um sal farmaceuticamente aceitável. 6 16. Composto que é: 5-amino-N- [2-({[(2,6-diclorofenil)carbonil]aminojmetil)-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropil]-1-(4-fluorofenil) -1H-pirazole-4-carboxamida (Enantiómero 2) como a base livre.
15. 17. Composto que é: 5-amino-N-(2—{[[(2,6- difluorofenil)carbonil] (etil)amino]metil}-3, 3,3-trif luoro-2-hidroxipropil) -1- (4-f luorof enil) — li?— pirazole-4-carboxamida (Enantiómero 2); ou um seu sal ou solvato.
16. 18. Composto como reivindicado em qualquer uma das reivindicações 1 a 17, ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável, para utilização em terapia.
17. 19. Composto como reivindicado em qualquer uma das reivindicações 1 a 17, ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável, para utilização no tratamento de doentes com um estado inflamatório e/ou alérgico.
18. 20. Composto como reivindicado em qualquer uma das reivindicações 1 a 17 ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável para utilização no tratamento de doentes com um estado inflamatório e/ou auto-imune. 7
19. 21. Composto como reivindicado em qualquer uma das reivindicações 1 a 17 ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável para utilização no tratamento de doentes com artrite reumatóide, asma, COPD, alerqia e/ou rinite.
20. 22. Composto como reivindicado em qualquer uma das reivindicações 1 a 17 ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável para utilização no tratamento de doentes com eczema, psoríase, dermatite alérgica, neurodermite, prurido e/ou reacções de hipersensibilidade.
21. 23. Composto como reivindicado em qualquer uma das reivindicações 1 a 17 ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável para utilização no tratamento de doentes com inflamação no sistema nervoso central.
22. 24. Composto como reivindicado em qualquer uma das reivindicações 1 a 17 ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável para utilização no tratamento de doentes com esclerose múltipla, vasculite cerebral, neurossarcoidose, sindrome de Sjogren, lúpus eritematoso sistémico, polirradiculopatia inflamatória aguda ou crónica, doença de Alzheimer, doenças neoplásicas do sistema nervoso incluindo meningioma, linfoma e meningite maligna, traumatismo ou doenças infecciosas do sistema nervoso, tais como tuberculose, lesão da medula espinal ou lesão cerebral tal como após enfarte (acidente vascular cerebral). 8
23. 25. Composto como reivindicado em qualquer uma das reivindicações 1 a 17 ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável para utilização no tratamento de doentes com neurossarcoidose.
24. 26. Composto como reivindicado em qualquer uma das reivindicações 1 a 17 ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável para utilização no tratamento de doentes com inflamação oftálmica.
25. 27. Composto como reivindicado em qualquer uma das reivindicações 1 a 17 ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável para utilização no tratamento de doentes com conjuntivite alérgica.
26. 28. Utilização de um composto como reivindicado em qualquer uma das reivindicações 1 a 17 ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável para o fabrico de um medicamento para o tratamento de doentes com um estado inflamatório e/ou alérgico.
27. 29. Utilização de um composto como reivindicado em qualquer uma das reivindicações 1 a 17 ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável para o fabrico de um medicamento para o tratamento de doentes com artrite reumatóide, asma, COPD, alergia e/ou rinite.
28. 30. Utilização de um composto como reivindicado em qualquer uma das reivindicações 1 a 17 ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável para o fabrico de um medicamento para o tratamento de doentes com eczema, 9 psoriase, dermatite alérgica, neurodermite, prurido e/ou reacções de hipersensibilidade.
29. 31. Utilização de um composto como reivindicado em qualquer uma das reivindicações 1 a 17 ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável para o fabrico de um medicamento para o tratamento de doentes com um estado inflamatório e/ou auto-imune.
30. 32. Utilização de um composto como reivindicado em qualquer uma das reivindicações 1 a 17 ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável para o fabrico de um medicamento para o tratamento de doentes com inflamação no sistema nervoso central.
31. 33. Utilização de um composto como reivindicado em qualquer uma das reivindicações 1 a 17 ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável para o fabrico de um medicamento para o tratamento de doentes com esclerose múltipla, vasculite cerebral, neurossarcoidose, sindrome de Sjogren, lúpus eritematoso sistémico, polirradiculopatia inflamatória aguda ou crónica, doença de Alzheimer, doenças neoplásicas do sistema nervoso incluindo meningioma, linfoma e meningite maligna, traumatismo ou doenças infecciosas do sistema nervoso, tais como tuberculose, lesão da medula espinal ou lesão cerebral tal como após enfarte (acidente vascular cerebral). 10
32. 34. Utilização de um composto como reivindicado em qualquer uma das reivindicações 1 a 17 ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável para o fabrico de um medicamento para o tratamento de doentes com neurossarcoidose.
33. 35. Utilização de um composto como reivindicado em qualquer uma das reivindicações 1 a 17 ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável para o fabrico de um medicamento para o tratamento de doentes com inflamação oftálmica.
34. 36. Utilização de um composto como reivindicado em qualquer uma das reivindicações 1 a 17 ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável para o fabrico de um medicamento para o tratamento de doentes com conjuntivite alérgica.
35. 37. Composição farmacêutica compreendendo um composto de fórmula (I) como reivindicado em qualquer uma das reivindicações 1 a 17, ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável, misturado com um ou mais diluentes ou veiculos farmaceuticamente aceitáveis.
36. 38. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 37 na forma de colírio para administração tópica.
37. 39. Composto de fórmula (II) 11

    em que R1, X e n são como definidos na reivindicação 1 40. Composto de fórmula (IV)

    (IV) em que X e n são como definidos na reivindicação 1. 41. Composto de fórmula (VII)

    em que R1, X e n são como definidos na reivindicação 1 12
38. 42. Composto de fórmula (X)

    em que X e n são como definidos na reivindicação 1
39. 43. Composto de fórmula (XI)

    em que X e n são como definidos na reivindicação 1 Lisboa, 26 de Janeiro de 2011 13