PT1194559E

PT1194559E - Grupos de borrelia burgdorferi e borrelia afzelii que causam a doença de lyme em seres humanos

Info

Publication number: PT1194559E
Application number: PT00942966T
Authority: PT
Inventors: Raymond J Dattwyler; Gerald Seinost; Daniel Dykhuizen; Benjamin J Luft; Maria Gomes-Solecki
Original assignee: Brook Biotechnologies Inc; Res Foundation Of State Univ O
Priority date: 1999-06-18
Filing date: 2000-06-19
Publication date: 2007-01-31
Also published as: DE60030859D1; US7582304B2; US7060281B1; EP1683867A1; WO2000078966A1; EP1194559A1; US20090060932A2; EP1683867B1; ES2272296T3; EP1194559B1; DK1194559T3; DE60030859T2; AU5751000A; US20060182756A1; ATE340262T1

Description

1 DESCRIÇÃO "GRUPOS DE BQRRELIA BURGDORFERI E BORRELIA AFZELII QUE CAUSAM A DOENÇA DE LYME EM SERES HUMANOS"

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO

A doença de Lyme tem início no local onde se dá uma mordedura de carraça, produzindo uma infecção primária com propagação do organismo para locais secundários, o que ocorre precocemente no curso da infecção. A doença de Lyme é uma patologia multissistémica progressiva e constitui a doença transmitida por vector mais comum quer na América do Norte quer na Europa. Esta doença foi inicialmente descrita como um foco de doentes com artrite pediátrica em Old Lyme, CT [Steere, A. C. et al,, Arth, Rheum20: 17 (1977)]. A associação deste síndroma com a mordedura da carraça do veado, Ixodes scapularis, levou à identificação da espiroqueta Borrelia burgdorferi como o agente causador [Burgdorfer, W. et al., Science, 216:1317-1319 (1982)]. À medida que o isolamento da bactéria em cultura, a partir de amostras do terreno e de amostras clinicas, se tornou mais eficiente, Baranton e os seus colaboradores descreveram três genoespécies patogénicas, B. burgdorferi sensu stricto (B. burgdorferi ou B.b.s.s.), B. afzelii e B. garinii [Baranton, G. et al., Int. J. Syst. Bacteriol., 42:378-383 (1992)]. Estes são membros de um complexo de espécies, B, burgdorferi sensu lato, que consiste em pelo menos dez genoespécies diferentes [Píken, R. N. et al., J. Invsst, Dermatol., 110:211-214 (1998); Postic D. et al,, Int. J.

Sy-st, Bacteriol., 44:743-752 (1994); Valsangiacomo, C. T. st al., Int, J. Syst, Bacteriol,, 47:1-10 (1997)]. Pensa-se que B, burgdorferi, B, afzelii e B. garinii são patogénicas e podem ser todas encontradas na Europa, mas, na América do Norte, a B. burgdorferi é a única genoespécie patogénica que se pode encontrar. Cada genoespécie destas três está associada a manifestações clínicas distintas [Van Dam, A. P» et al., Clin. Infect. Dis., 17:708-717 (1993)]. Isto implica que as diferenças nas genoespécies possam desempenhar um papel importante na grande variedade de manifestações clínicas observadas na doença de Lyme.

Quando a carraça infectada começa a alimentar-se de um mamífero, é induzida a síntese da proteína C de superfície externa (outer surface protein C - OspC) [Schwan, T. G. et al., Proc. Natl. Acad. Sei., 2:2909-2913 (1995)]. Assim, na infecção inicial, a OspC é a principal proteína da membrana externa expressa pela espiroqueta [Fung, B. P. et al., Infect. Immun., 62:3213-3221) (1994); Padula, S. J. et al., J. Clin, Microbiol., 32:1733-1738 (1994)]. Mesmo tendo sido completamente demonstrado que a OspC tem uma exposição à superfície limitada [Cox, D. L. et al., Proc. Natl. Acad. Sei., 93:7973-7978 (1996); Mathiesen, Μ. M. et al., Infect. Immun., 66:4073-4079 (1998)], a OpsC é um imunogénio potente» A imunização com a OspC protege contra a infecção com Borrelia transmitida pela carraça [Gilmore Jr., R. D., Infect. Immun., 64:2234-2239 (1999)]. Contudo, pelo facto de a OspC ser muito variável na sua sequência, a protecção é limitada à estirpe de Borrelia burgdorferi que expressa a mesma OspC imunizante codificada por um alelo específico. O desafio com isolados heterólogos, expressando outros alelos

OspC, resulta em infecção [Probert, W. S. et al . , J, Infect, D„, 1 75:400-405 (1997)]. A OspC é muito variada [Jauris-Heipke, S. et al., Med. Microbiol. Immunol., 182:37-50 (1993)]. Lívey et al. detectaram trinta e quatro alelos em setenta e seis isolados de B. burgdorferi sensu lato [Livey I. et al., Mol. Microbiol., 18:257-269 (1995)].

Actualmente, a doença de Lyme é tratada com antibióticos. Contudo, tal tratamento nem sempre é bem sucedido na eliminação da infecção. O tratamento é frequentemente protelado devido a um diagnóstico incorrecto, com o efeito deletério da progressão da infecção para uma situação crónica, em que o tratamento com antibióticos é frequentemente ineficaz. Um dos factores que contribuem para o atraso no tratamento é a falta de meios de diagnóstico eficazes.

Para além disso, apesar de os antigénios como a OspC serem conhecidos como protectores, em alguns casos, a existência de múltiplos alelos desses antigénios impede em grande medida o desenvolvimento de vacinas com base nesses antigénios que protegeriam contra mais do que uma estirpe de Borrelia. Dois ensaios independentes de vacinas de primeira geração para a prevenção da doença de Lyme investigaram recentemente a eficácia e a segurança de uma vacina que é baseada na proteína A de superfície externa recombinante (outer surface protein A - OspA) [Sigal, L. H. et al., N. Engl. J. Med. , 339:216-222, 1998; Steere, A. C. et al., N. Erigi. J. Med., 339:209-215 (1998}] . Contudo, uma vacina que consiste de OspA recombinante pode requerer imunizações de reforço frequentes. A infecção natural com B, hurgdorferí não desencadeia uma resposta com anticorpos para a OspA, como faz contra a OspC. 0 que é necessário é uma selecção de antigénios de Borrelia que possam ser utilizados quer para diagnosticar quer para vacinar contra todas ou a maior parte das formas de Borrelia que causam a doença sistémica.

As diferenças na frequência de B. hurgdorferí, B. garinii e B, afzelii na infecção de carraças e de seres humanos conduziu à hipótese de que diferentes genoespécies têm patogenicidades diferentes. (Picken, R. N. et al., J-Invest, Darmatol., 110:211-214, 1998; Van Dam, A. P. et al,, Clin. Infect. Dis,, 17:708-717, 1993). Contudo, o número de estirpes diferentes de uma dada genoespécie e as diferenças entre as estirpes de uma dada genoespécie, bem como entre as genoespécies, impõem obstáculos no desenvolvimento de compostos proteicos imunogénicos para serem utilizados como agentes diagnósticos e como vacinas para a detecção, a prevenção e o tratamento da doença de Lyme. Alguns investigadores utilizaram a OspC como um antigénio de serodiagnóstico na fase inicial da doença de Lyme [Fung, B. P. et al,, Infect, Immun,, 62:3213-3221, (1994) ; Gerber, Μ. A. et al,, J, Infect, Dis„, 171:724-727, (1995) ; Padula, S. J. et al,, J. Clin, Microbiol., 32:1733-1738 (1994)]. Nestes testes, a utilização da OspC como um antigénio de diagnóstico originou .resultados com especificidade elevada, mas não sensíveis. Contudo, estes estudos incluíram apenas uma estirpe de B. hurgdorferí e, desse modo, apenas um tipo de OspC. Os testes de rotina para o diagnóstico da doença de Lyme também utilizaram um protocolo com uma estirpe única e, desse modo, um único 5 alelo OspC para a detecção de anticorpos contra a espiroqueta. Não é clara que mistura de proteínas OspC que deve ser utilizada de modo a criar meios de diagnóstico e de vacinação úteis, eficazes contra mais do que uma estirpe da Borrelia que provoca doença de Lyme, se não contra a maior parte ou contra todas as estirpes invasivas dentro de uma genoespécie. Idealmente, tal mistura deveria ser eficaz contra todas as estirpes invasivas da Borrelia que causa a doença de Lyme. A patente WO 94/25595 descreve uma abordagem de uma formulação de uma vacina para a Borrelia que leva em conta a informação serológica, genotípica e epidemiológica através da qual as proteínas OspC de diferentes estirpes de B. burgdorferi estão agrupadas. Os antigénios OspC são escolhidos de modo a constituir uma amostra representativa dos grupos, de modo a que a vacina resultante confira a maior protecção cruzada com o menor número de antigénios.

RESUMO DA INVENÇÃO A presente invenção dirige-se à composição de uma vacina que compreende polipéptidos OspC da Borrelia que causa a doença de Lyme, como reivindicado na reivindicação 1 e nas reivindicações 5 a 6. Além disso, a invenção diz respeito a um método de detecção, numa amostra do hospedeiro, de uma resposta imunitária à Borrelia associada à doença de Lyme como referido na reivindicação 7. As características preferidas do método estão definidas nas reivindicações 6 a 9. Para além disso, a invenção diz respeito a uma proteína quimérica como referido na reivindicação 10. As 6 características preferenciais da proteína estão definidas nas reivindicações 11 a 13. A invenção diz ainda respeito a um ácido nucleico isolado, como reivindicado na reivindicação 14. As características preferenciais do ácido nucleico estão definidas nas reivindicações 15 a 16, Além disso, a invenção diz respeito à composição referida na reivindicação 17. A composição aqui descrita compreende um polipéptido OspC ou um fragmento deste, de pelo menos duas famílias OspC da Borrelia burgdorferi seleccionadas a partir do grupo que consiste nas famílias A, B, I e K, que são características preferenciais da vacina, como está definido nas reivindicações 2 a 3. Noutro âmbito, a invenção diz respeito à utilização da composição na produção de um medicamento para a imunização de um animal contra a doença de Lyme disseminada. As características preferenciais da utilização estão definidas. A composição aqui descrita compreende pelo menos um polipéptido OspC ou um fragmento deste de cada uma das famílias OspC A e B da Borrelia afzelii.

Também é descrito um método de imunização de um animal contra a doença de Lyme que compreende a administração de uma composição constituída por polipéptidos OspC da Borrelia que causa a doença de Lyme. Também se descreve uma composição que compreende um polipéptido OspC ou um fragmento deste a partir de pelo menos duas famílias OspC da Borrelia burgdorferi seleccionadas a partir do grupo constituído por A, B, I e K, com excepção para a combinação que consiste em duas proteínas OspC, em que uma proteína OspC provém da família OspC Δ e a segunda proteína OspC provém da família OspC I. É igualmente descrita uma 7 composição que compreende pelo menos um polipéptido OspC ou um fragmento deste de cada uma das famílias OspC A e B da Borrelia afzelii. As composições aqui descritas conjuntamente com excipientes adequados e/ou adjuvantes são administradas a um animal de modo a que o animal desenvolva uma resposta imunitária a pelo menos um polipéptido OspC da composição. Ê descrito de igual modo um método de detecçâo, numa amostra do hospedeiro, da resposta imunitária à Borrelia que causa a doença de Lyme. 0 método compreende o contacto da amostra do hospedeiro com uma composição que compreenda polipéptidos OspC das estirpes da Borrelia que causa a doença de Lyme de modo a que os anticorpos anti-OspC, se presentes, se liguem na dita amostra aos ditos polipéptidos OspC. A composição compreende pelo menos um polipéptido OspC ou um fragmento deste de cada uma das famílias OspC A, B, I e K da Borrelia burgdorferi. É determinada a quantidade de anticorpos que se ligam aos referidos polipéptidos OspC ou a fragmentos destes, levando, por conseguinte, à detecçâo de uma resposta imunitária à Borrelia que causa a doença de Lyme. É igualmente descrito um conjunto de diagnóstico que compreende os polipéptidos OspC provenientes da Borrelia que causa a doença de Lyme. 0 conjunto de diagnóstico compreende, pelo menos, um polipéptido OspC ou um fragmento diagnóstico deste de cada uma das famílias OspC A, B, I e K da Borrelia burgdorferi. Em alternativa, a composição de diagnóstico compreende pelo menos um polipéptido OspC ou um 8 fragmento diagnóstico deste de cada uma das famílias OspC A e B da Borrelia afzelii. É igualmente descrita uma composição que compreende pelo menos um polipéptido OspC ou um fragmento deste de cada uma das famílias OspC A e B da Borrelia afzelii. Também são descritas as composições que compreendem polipéptidos OspC ou fragmentos destes da Borrelia burgdorferi, Borrelia afzelii, Borrelia garínii e suas combinações.

Também são reveladas as proteínas quiméricas para a utilização nos métodos aqui descritos. É revelada a proteína quimérica que compreende polipéptidos OspC de duas ou mais famílias OspC da Borrelia que causa a doença de Lyme. As famílias podem compreender as famílias OspC A, B, I e K da Borrelia burgdorferi. Em alternativa, as famílias compreendem as famílias OspC A e B da Borrelia afzelii, Em alternativa, a composição compreende polipéptidos quiméricos OspC ou seus fragmentos da Borrelia burgdorferi, Borrelia afzelii, Borrelia garinii e suas combinações.

As proteínas quiméricas aqui descritas compreendem, pelo menos, um primeiro e um segundo polipéptido OspC, de modo a que o primeiro polipéptido compreenda a OspC aproximadamente desde a base 26 até aproximadamente à base 630 de um primeiro gene de OspC e de modo a que o segundo polipéptido compreenda aproximadamente desde a base 28 até aproximadamente à base 570 de um segundo gene de OspC.. As proteínas quiméricas aqui descritas podem ser utilizadas nos métodos de imunização e detecção aqui descritos. 9

Divulga-se o número mínimo de famílias de Borrelia burgdorferi e de Borralia afzalii que são responsáveis pela doença sistémica em humanos e a sua utilidade em vacinas e em conjuntos de diagnóstico. Descreve-se uma combinação de proteínas que, quando utilizada como vacina, pode prevenir que a doença de Lyme se venha a tornar sistémica. As proteínas e as proteínas quiméricas aqui descritas podem ser eficazes na prevenção da doença de Lyme, bem como ter um efeito terapêutico na infecção estabelecida, por exemplo, depois de uma mordedura de carraça ter sido detectada pelo doente. Prevê-se que as proteínas e as proteínas quiméricas aqui descritas actuem ao nível da carraça, bem como ao nível do hospedeiro, na prevenção quer da infecção quer da doença devida à Borrelia burgdorferi, Borrelia afzelii e/ou Borrelia garinii. A descrição aqui presente permite o desenvolvimento de uma vacina mundial que compreende apenas seis proteínas necessárias para gerar uma resposta imunitária protectora contra todas as estirpes.

Também são descritos meios de diagnóstico melhorados. Actualmente, é possível preparar meios de diagnóstico que compreendam antigénios OspC que representem as quatro famílias patogénicas da Borrelia burgdorferi e/ou as duas famílias patogénicas da Borrelia afzelii, detectando deste modo a exposição clínica importante à bactéria patogénica, ignorando as restantes famílias que não causam doença patogénica.

Como se demonstra, uma proporção significativa, senão a totalidade, de infecções sistémicas por B. burgdorferi 10 sensu stricto em seres humanos está associada a quatro grupos de OspC e uma parte significativa, senão a totalidade, das infecções regulares por B, afzelií em seres humanos está associada a dois grupos de OspC. Sabe-se que as vacinas contra a OspC são protectoras, mas têm sido limitadas pela diversidade de OspC [Probert, W. S. et al., J. Infect. D., 175:400-405, (1997)]. Os polipéptidos aqui descritos fornecem proteínas imunogénicas, fragmentos e proteínas quiméricas destas, para vacinas com elevado grau de protecção e meios de diagnóstico. Descreve-se uma vacina que inclua uma ou mais destas quatro formas de OspC. As vacinas devem constituir um segundo nível importante de protecção contra a infecção disseminada pela espiroqueta B. burgdorferi. Para além disso, a análise do polimorfismo de conformação de cadeia simples (single-stranded conformational polymorphism - SSCP) aqui descrita pode conferir um meio rápido e eficaz para monitorizar a eficácia da vacina na detecção de grupos de OspC invasivos raros ou novos.

Os novos ensaios de diagnóstico da presente invenção, baseados nos principais grupos de OspC A, B, I e K são úteis na identificação dos sujeitos que estão em risco de doença progressiva. Dado que as proteínas OspC são antigenicamente variáveis, os indivíduos infectados com uma estirpe podem produzir uma resposta com anticorpos que não são reactivos para uma proteína OspC de um grupo principal diferente. A detecção de anticorpos utilizando preparados de antigénios que incorporem uma mistura adequada de clones invasivos de B. burgdorferi será muito mais sensível do que os actuais protocolos de estirpe única. As composições aqui 11 descritas não só desencadeiam uma resposta imunitária humoral e uma mediada por células, mas também são capazes de detectar quer a resposta imunitária humoral quer a mediada por células, quando utilizadas para testar uma amostra do hospedeiro. São descritos os polipéptidos OspC lipidados, os fragmentos destes e as proteínas quiméricas que compreendem dois ou mais polipéptidos OspC, em que a proteína quimérica tem um sinal de lipidação, como o sinal de lipidação a partir da proteína de superfície externa B na extremidade 5' do gene que codifica a quimera. Para além disso, são descritos os polipéptidos OspC não lipidados, os fragmentos destes e as proteínas quiméricas que compreendem dois ou mais polipéptidos OspC, em que o gene que codifica a proteína quimérica não compreende um sinal de lipidação e a proteína quimérica não sofre lipidação. Os polipéptidos OspC não lipidados, os fragmentos destes e as proteínas quiméricas destes são vantajosos, devido a métodos de produção mais simples, rendimentos proteicos melhorados e purificação mais simples. As proteínas quiméricas não lipidadas aqui descritas desencadeiam inesperadamente uma resposta imunitária contra as estirpes da Borrelia que causam a doença de Lyme, pelo menos tão amplamente reactivas como as proteínas lipidadas que são utilizadas como controlo positivo. Para além disso, as proteínas quiméricas OspC não lipidadas desencadeiam uma resposta imunitária para mais do que uma genoespécie de Borrelia que causa a doença de Lyme, incluindo para as genoespécies e para as estirpes que não são utilizadas para gerar o imunogénio OspC quimérico. 12

BREVE DESCRIÇÃO DAS FIGURAS A Figura 1 é um diagrama esquemático da distribuição da frequência dos principais grupos OspC entre isolados da B. burgdorferi das carraças Ixodes scapularis do Este de Long Island. A Figura 2 é um gráfico de barras que mostra a reactividade do soro de ratos imunizados com a proteína de Borrelia indicada ou a proteína quimérica recombinante de Borrelia (eixo X) contra os antígénios OspC indicados (legenda) em que o soro é da primeira colheita da sangue. A Figura 3 é um gráfico de barras que mostra a reactividade do soro de ratos imunizados com a proteína de Borrelia indicada ou a proteína quimérica recombinante de Borrelia (eixo X) contra os antígénios OspC indicados (legenda) em que o soro é da primeira colheita da sangue. A Figura 4 é um gráfico de barras que mostra a reactividade do soro de ratos imunizados com a proteína de Borrelia indicada ou a proteína quimérica recombinante de Borrelia (eixo X) contra as estirpes indicadas de Borrelia burgdorferi sensu stricto (legenda). A Figura 5 é um gráfico de barras que mostra a reactividade do soro de ratos imunizados com a proteína de Borrelia indicada ou a proteína quimérica recombinante de Borrelia (eixo X) contra as estirpes indicadas de Borrelia burgdorferi sensu lato (legenda). A Figura 6 é um gráfico de barras que mostra a reactividade do soro de ratos imunizados com a proteína de Borrelia indicada ou a proteína quimérica recombinante de Borrelia (eixo X) contra as estirpes indicadas de Borrelia afzelii (legenda). 13 A Figura 7 é um gráfico de barras que mostra a reactividade do soro de ratos imunizados com a proteína de Borrelia indicada ou a proteína quimérica recombinante de Borrelia (eixo X) contra as estirpes indicadas de Borrelia burgdorfari sen.su garinii (legenda). A Figura 8 é uma tabela de comparação da reactividade das proteínas OspC lipidadas Cl e C2 contra os soros de doentes com o estado de doença indicado com a reactividade das proteínas quiméricas não lipidadas da presente invenção, em que o número entre parênteses é o número total de soros testados nessa categoria.

DESCRIÇÃO PORMENORIZADA DA INVENÇÃO

Tal como se descreve, foram inicialmente detectados dezanove grupos de OspC da B. burgdorferi sensu strícto numa pequena população de carraças [Wang, I-N. et al., Genetics, 151:15-30 (1999)]. Os principais grupos de OspC foram definidos fazendo uso da observação de que os alelos OspC são muito semelhantes, com menos de 2% de divergência na sequência, ou muito diferentes, com mais de 8% de divergência na sequência, com a maior parte a ter mais de 14% de divergência na sequência.

Com base nas divergências das sequências, os alelos OspC podem ser agrupados em vinte e um grupos principais (Tabela II). De modo a determinar se as diferenças entre as estirpes, como definidas por um dado grupo de OspC, estariam ligadas à capacidade de invasão e à patogenicidade, foram comparadas as frequências de distribuição dos principais grupos de OspC a partir das 14 carraças, provenientes da lesão cutânea primária do eritema migrans (EM), e a partir de localizações secundárias, principalmente pela corrente sanguínea e pelo líquido cefalorraquidiano. Tal como se descreve, a distribuição de frequências dos grupos de OspC a partir das carraças é significativamente diferente da da localização primária de infecção, que por sua vez é significativamente diferente das localizações secundárias. Os principais grupos de OspC A, B, I e K aumentavam em frequência nas carraças da localização primária e foram os únicos grupos detectados nas localizações secundárias da infecção. Assim, sâo definidas aqui três categorias de grupos principais de OspC. Há uma categoria comum nas carraças que muito raramente, se é que alguma vez, causa doença nos seres humanos, uma segunda categoria que apenas causa infecção local e no local da mordedura da carraça e uma terceira categoria que causa doença sistémica ou disseminada. Apesar de muitos grupos de OspC encontrados nas carraças também terem sido encontrados nas lesões cutâneas primárias, as frequências de distribuição são significativamente diferentes entre as carraças e as lesões cutâneas primárias (Tabela III). Todos os grupos de OspC foram encontrados de forma mais ou menos comum nas carraças. Contudo, apenas quatro grupos foram frequentemente encontrados nas lesões cutâneas ou nas infecções secundárias (Tabelas III e IV) . Tal como se descreve, as lesões cutâneas primárias infectadas com Borrelía contendo outros grupos de OspC que não os A, B, I e K são raras ou inexistentes. De modo mais importante, apenas estes quatro grupos de OspC foram encontrados em localizações secundárias. Os resultados que revelam que todas as infecções por B. burgdorferi sensu 1 5 stricto estão associadas a quatro grupos de GspC têm importância no diagnóstico, tratamento e prevenção da doença de Lyme.

Constatou-se que a OspC tem sido trocada entre estirpes e até mesmo entre genoespécies [Wang, I~N. et al., Genetics, 151:15-30 (1999)]. Este aspecto não é verdadeiro para os genes cromossómicos da Borrelia [Dykhuizen, D. E. et al., Proc„ Natl. Acad. Sei., 30:10163-10167 (1999); Maynard Smith, J. e Smith, N, H., Mol. Biol. Evol., 15:590-599 (1998)]. Contudo, os alelos OspA e OspC na B. burgdorferi sensu stricto estão quase totalmente ligados [Wang, I-N., et al., Genetics, 151:15-30 (1999)]. Isto sugere que, uma vez que um alelo OspC tenha sido transferido para um segundo plano particular, existe pouca ou nenhuma selecção para outro evento de recombinação semelhante. Assim, cada grupo de OspC principal representa uma população clonal descendente de uma recombinação única.

Vinte por cento de eritema migrans não tratados resolvem espontaneamente sem causar nenhuma complicação sistémica [Steere, A. C. et al., Arth. Rheum. 20: 7-17 (1977)]. Como demonstrado aqui, isto não é significativamente diferente (p = 0,25 para um teste de contingência 2 por 2 com dicotomia dupla) da percentagem de estirpes não invasivas encontradas na pele, sugerindo que o eritema migrans que resolve espontaneamente seja causado por clones não invasivos.

Existe uma extensa diversidade genética e antigénica da OspC em todas as três genoespécies patogénicas da B. 16 burgdorferi sensu lato [Livey, I, et al., Mol„ Mícrobiol,, 18:257-269, 1995; Masuzawa, T. et al., Clin. Diagn. Lab, Im/nunol-, 4:60-63, 199 7; Picken, R. N„ et al., J, Invest. Dermatol., 110:211-214, 1998; Thiesen, M, et al,, J. Clin. Mícrobiol,, 31:2570-2576, 1993; Wang, I-N. et al., Genetics 151:15-30 (1999)]. Tal como se demonstra, apenas quatro grupos de alelos OspC estão ligados que à infecciosidade quer à invasibilidade, e em que a invasibilidade está confinada a um pequeno número de clones de OspC. É certo que os alelos OspA e OspC estão estritamente ligados, mesmo apesar de estarem em plasmídeos diferentes [Wang, I-N. et al., Genetics, 151:15-30 (1999)]. Se a invasibilidade for causada pela variação alélica em outro locus, esta variação estará, com probabilidade, estreitamente relacionada com a variação OspC. Por conseguinte, o OspC é um bom marcador para a patogenicidade humana e, talvez, o seu determinante. Estes resultados têm implicações importantes, não só para compreensão da patogenicidade desta doença, mas para o seu diagnóstico e prevenção. A espiroquetémia é um fenómeno transitório, mas presumivelmente constitui a chave da disseminação para localizações secundárias, para o coração, para as articulações e para o sistema nervoso, onde a Borrelia causa as manifestações clinicas secundárias e terciárias da doença de Lyme. Os quatro grupos invasivos de Borrelia burgdorferi foram todos encontrados em isolados no sangue e no LCR. O grupo isolado a nível articular pertenceu ao grupo A. Contudo, pode-se inferir que os grupos não detectados no sangue não se encontram a nível articular, uma vez que a maior parte da disseminação da Borrelia para 17 localizações secundárias, senão toda, ocorre por via sanguínea„

Normalmente, são utilizados organismos-modelo como substitutos para experiências em seres humanos. Não obstante, esta substituição funciona apenas enquanto as propriedades do organismo-modelo e dos seres humanos sejam as mesmas para o fenómeno em estudo. O sistema imunitário humano desempenha um papel critico, que se espera ser diferente da resposta imunitária no organismo-modelo, particularmente no rato. Os seres humanos são hospedeiros acidentais e frequentemente terminais, enquanto o rato é um hospedeiro reservatório fundamental. O campo da genética populacional desenvolveu procedimentos profundos para obter conclusões a partir dos dados pesquisados.

Os polipéptidos quiméricos aqui descritos desencadeiam respostas imunitárias específicas para a OspC. Os polipéptidos quiméricos também desencadeiam uma resposta imunitária contra estirpes da Borrelia que causam doença de Lyme das mesmas genoespécies que as representadas pela OspC quimérica, bem como contra a Borrelia que causa doença de Lyme de genoespécies diferentes do que as que são representadas pela OspC quimérica. A resposta imunitária inclui respostas humorais, respostas secretoras, respostas mediadas por células e combinações destas num animal tratado com as composições aqui descritas. As composições podem incluir componentes adicionais adequados para utilização in vitro e in vivo„ Estes componentes adicionais incluem tampões, proteínas de transporte, adjuvantes, conservantes e combinações destes. 18

As composições imunogénicas aqui descritas podem ser utilizadas para imunizar animais, incluindo seres humanos. Pensa-se que a imunização desencadeia respostas imunogénicas especificas, como descrito anteriormente. Tal como se descreve, uma resposta imunogénica inclui respostas que originam pelo menos algum grau de imunidade no animal tratado, em que o animal foi tratado com uma composição que contém pelo menos uma proteína ou uma proteína quimérica. 0 animal tratado desenvolve imunidade contra a infecçâo por Borrelia que causa doença de Lyme, em que as proteínas quiméricas aqui descritas desencadeiam respostas contra a Borrelia burgdorferir a Borrelia afzelii e a Borrelia garinii» A imunidade, tal como se descreve, é explicada como a representação da capacidade do animal tratado em resistir à infecçâo, resistir à infecçâo sistémica, vencer uma infecçâo como a infecçâo sistémica ou vencer uma infecçâo como a infecçâo sistémica mais fácil ou mais rapidamente quando comparada com indivíduos não imunizados ou não tratados. A imunidade também pode incluir uma capacidade melhorada do indivíduo tratado em suster uma infecçâo com poucos ou nenhuns sintomas de infecçâo sistémica. 0 indivíduo pode ser tratado com as proteínas quiméricas aqui descritas ou de forma proactiva, por exemplo, uma vez por ano, ou ser tratado depois de ter sofrido uma mordedura de carraça.

Para uma utilização como vacina, a composição aqui descrita pode incluir adjuvantes adequados, bem conhecidos nesta 19

arte, de modo a aumentar a imunogenicidade, a eficácia ou a semivida das proteínas quiméricas no animal tratado.. Os adjuvantes e a sua utilização na arte são por demais conhecidos (ver, por exemplo, a publicação PCT WO 96/40290). A composição pode ser preparada por métodos conhecidos de preparação de vacinas. As proteínas OspC ou as proteínas quiméricas a ser utilizadas nas composições podem, por exemplo, ser isoladas e/ou purificadas por técnicas conhecidas, como a cromatografia de exclusão de tamanho, a cromatografia de afinidade, a electroforese preparativa, a precipitação selectiva ou combinações destas. As preparações de proteínas ou de proteínas quiméricas podem ser misturadas com outros reagentes adequados como acima descrito, em que a proteína quimérica se encontra numa concentração adequada. A dose de proteína ou de proteína quimérica varia de 1 pg até 500 pg e depende da idade, do peso e/ou da condição física do animal a ser tratado. A dose ideal pode ser determinada por técnicas de optimização de rotina, utilizando modelos animais adequados„ A composição a ser utilizada como vacina pode ser administrada por qualquer técnica adequada. A administração é feita por injecção, por exemplo, subcutânea, intramuscular, endovenosa ou intraperitoneal. Em alternativa, a composição pode ser administrada pela mucosa, por exemplo pela exposição da mucosa nasal a gotas nasais que contenham as proteínas das proteínas quiméricas da presente invenção. Num modo de realização alternativo, a composição imunogénica pode ser administrada por 20 administração oral. Em alternativa, as proteínas quiméricas podem ser administradas por imunização do ADN.

Tal como muitas proteínas de superfície externa da Borrei ia, a OspC é produzida na espiroqueta Borrei ia com lípídação 5' . Os polipéptidos quiméricos aqui descritos podem ser produzidos quer na forma lipidida quer na forma não lipidada. O sinal de lipidaçâo codificado pelo tipo selvagem do OspC é removido da sequência de codificação, de tal modo que o gene ou o gene quimérico codifique uma OspC não lipidada ou um polipéptido OspC quimérico. Em alternativa, o sinal de lipidaçâo do gene de OspC do tipo selvagem é substituído pelo sinal de lipidaçâo do gene de OspB. Assim, produz-se uma proteína quimérica OspC ou OspC lipidada.

Os polipéptidos aqui descritos podem ser expressos de modo recombinante em hospedeiros microbianos adequados, em que os referidos hospedeiros estão incluídos, mas não estão limitados a, hospedeiros bacterianos, como a E. coli, hospedeiros fúngicos S. cerevisiae ou hospedeiros de culturas celulares, como uma cultura de células de mamífero ou uma cultura de células de insecto.

Apesar de a falta de sinal de lipidaçâo permitir a produção de grandes quantidades de proteínas OspC e proteínas quiméricas OspC, pensa-se que a falta de sinal de lipidaçâo pode originar proteínas de superfície externa da Borrelia menos imunogénicas ou não imunogénicas. Contudo, tal como se descreve, os polipéptidos quiméricos não lipidados desencadeiam inesperadamente uma iirmnogenicidade tão 21 extensa como a da proteína OspC lipidada (Figuras 2 e 3) e uma maior imunogenícidade contra estirpes de outras genoespécies (Figura 5 a 7) comparativamente com os controlos positivos, que eram OspC lípidadas da B31 e OspC lipidadas da C12.

As proteínas e as proteínas quiméricas aqui descritas também são antigénicas e, portanto, úteis na detecção ou no diagnóstico da presença da Borrelia que causa a doença de Lyme, particularmente a Borrelia de grupos capazes de causar sintomas disseminados da doença de Lyme. Tal como se descreve, os sintomas disseminados dizem respeito à infecção para além da lesão cutânea do eritema migrans, por exemplo, à infecção no sangue, no SNC ou na sinovial. Tal como se descreve, o termo antigénico designa a capacidade de um composto se poder ligar a produtos de uma resposta imunitária, como anticorpos, receptores das células T ou ambos. Essas respostas podem ser determinadas utilizando ensaios-padrão de detecção de anticorpos, como o ELISA ou ensaios-padrão de activação de células T.

As composições que compreendem polipéptidos OspC da Borrelia que causa a doença de Lyme e polipéptidos quiméricos OspC também são descritos. As composições podem incluir um ou mais polipéptidos OspC ou fragmentos destes, de pelo menos dois grupos OspC da Borrelia burgdorferí, também designados como famílias, seleccionados do grupo que consiste nas famílias A, B, I e K, com excepção da combinação que consiste em dois polipéptidos OspC das famílias A e I. Em alternativa, as composições podem incluir peio menos um polipêptido OspC ou um fragmento deste de cada uma das famílias OspC A, B, I e K da Borrelia burgdorfari. De modo alternativo, a composição pode incluir pelo menos um polipéptido OspC ou um fragmento deste, de cada uma das famílias OspC A e B da Borrelia afzelii. Em alternativa, a composição pode incluir polipéptidos OspC de pelo menos um grupo ou um membro da família das OspC da Borrelia burgdorferi seleccionado a partir do grupo que consiste nas famílias A, B, I e K e pelo menos um membro da família das OspC da Borrelia afzelii seleccionado a partir do grupo que consiste nas famílias A e B.

Tal como está descrito, as famílias OspC partilham cerca de 98% de homologia ao nível do ácido nucleico entre estirpes da mesma família e partilham não mais do que 92% da homologia ao nível do ácido nucleico entre estirpes de famílias diferentes. A determinação da homologia exclui todas as sequências não OspC. Os membros da mesma família OspC têm perfis antigénicos semelhantes, por exemplo, desencadeiam uma resposta imunitária contra estirpes semelhantes da Borrelia que causam a doença de Lyme. As proteínas quiméricas aqui descritas desencadeiam inesperadamente uma resposta imunitária contra genoespécies diferentes da Borrelia que causa a doença de Lyme do que contra as genoespécies a partir das quais derivam os componentes polipeptídicos. A família OspC A da Borrelia burgdorferi pode compreender as estirpes 831, CA4, HII, IPI, IP2, IP3, L5, PIF, PKA, TXGW e as estirpes de Borrelia que contêm o alelo OspC 0C1. A família OspC B da Borrelia burgdorferi pode compreender as estirpes 35B808, 61BV3, BUR, DK7, PB3, ZS7 e as estirpes que contêm os alelos OspC 0C2 e OC3. Ά família OspC I da Borrelia burgdorferi pode compreender as estirpes 297, HB 19 e as estirpes que contêm o alelo OspC OCIO, em que a estirpe 297 é caracteri zada pela OspC com o número de acesso do GenBank 42893, A família OspC K da Borralia burgdorferi pode compreender as estirpes 272, 297, 2 83 54, KIPP, MUL e as estirpes que contêm os alelos OspC 0C12 e OC13, em que a estirpe 297 é caracterizada pela OspC com o número de acesso do GenBank U08284.

As composições referidas podem compreender um polipéptido OspC ou um fragmento deste de cada uma das famílias OspC A e B da Borrelia afzelii. A família OspC A da Borrelia afzelii pode compreender as estirpes Pbo, Pwud, Pko, Pgau, DK2, DK3, DK21, DK8, Bfox e JSB. A família OspC B da Borrelia afzelii pode compreender as estirpes DK5, ACAl, DK9, X.B18h, Pie e 14 3M. Como descrito acima para a Borrelia burgdorferi, as composições também incluem os polipéptidos quiméricos OspC das famílias A e B da Borrelia afzelii. 0 polipéptido OspC pode ser uma OspC quimérica que compreende pelo menos uma região variável da proteína OspC ou uma parte desta a partir de pelo menos um gene OspC, Em alternativa, a região variável do polipéptido OspC pode ser codificada por um ácido nucleico que compreenda os dois terços 3' do gene OspC, aproximadamente do nucleótido 150 até aproximadamente ao nucleótido 519 de um gene OspC (ou aproximadamente do códão 50 até aproximadamente ao códão 173). Em alternativa, a referida região variável do polipéptido OspC é codificada por um ácido nucleico em que o ácido nucleico compreenda, por exemplo, do nucleótido 244 até aproximadamente ao nucleótido 519 (ou aproximadamente 24 do códão 81 até aproximadamente ao códão 173), ácido nucleico aproximadamente do nucleótido 337 até aproximadamente ao nucleótido 519 (ou aproximadamente do códão 112 até aproximadamente ao códão 173), ácido nucleico aproximadamente do nucleótido 418 até aproximadamente ao nucleótido 519 (ou aproximadamente do códão 139 até aproximadamente ao códão 173), ácido nucleico aproximadamente do nucleótido 244 até aproximadamente ao nucleótido 418 (ou aproximadamente do códão 81 até aproximadamente ao códão 139), ácido nucleico aproximadamente do nucleótido 337 até aproximadamente ao nucleótido 418 (ou aproximadamente do códão 112 até aproximadamente ao códão 139), ácido nucleico aproximadamente do nucleótido 150 até aproximadamente ao nucleótido 243 (ou aproximadamente do códão 50 até aproximadamente ao códão 81) de um gene OspC.

Os polipéptidos quiméricos OspC descritos aqui compreendem dois ou mais polipéptidos em que um primeiro polipéptido provém de um primeiro gene OspC aproximadamente do nucleótido 26 (ou aproximadamente do códão 8) até aproximadamente ao nucleótido 630 (ou aproximadamente do códão 210) . Em alternativa, o primeiro polipéptido provém aproximadamente do nucleótido 28. Em alternativa, o primeiro polipéptido provêm aproximadamente do nucleótido 53. Em alternativa, o primeiro polipéptido provém aproximadamente do nucleótido 55. Em alternativa, o primeiro polipéptido vai aproximadamente até ao nucleótido 621 do primeiro gene OspC. Em alternativa, o primeiro polipéptido vai até aproximadamente ao nucleótido 582 do primeiro gene OspC. Em alternativa, o primeiro polipéptido 25 vai até aproximadamente ao nucleótido 576 do primeiro gene OspC. Ά OspC quimérica aqui descrita compreende ainda um segundo polipéptido, em que o segundo polipéptido deriva de um segundo gene OspC desde aproximadamente o nucleótido 28 (ou aproximadamente do códão 9) até aproximadamente ao nucleótido 571 (ou aproximadamente ao códão 190).

Sabe-se que os polipéptidos que compreendem o polipéptido quimérico podem incluir nucleótidos extra ou menos nucleótidos do dado gene OspC, a partir do qual deriva o polipéptido de modo a simplificar a construção do gene que codifica o polipéptido quimérico, por exemplo, de modo a permitir a utilização dos locais de restrição da endonuclease convenientes ou a permitir a ligação dos fragmentos de genes de modo a que seja criada uma região de codificação contígua.. Com base nas orientações aqui descritas, uma das competências comuns na arte será a capacidade de adicionar ou remover nucleótidos a partir da extremidade dos fragmentos do gene que codifica os polipéptidos da proteína quimérica OspC de modo a criar proteínas quiméricas sem um processo experimental ou com um que seja apenas de rotina. Para além disso, pode existir um extra de cerca de 1 até cerca de 10 aminoácidos na extremidade N- e/ou C- dos polipéptidos e das proteínas quiméricas descritas e ainda reter as propriedades descritas.

Também se descrevem as variantes ou as versões alteradas dos polipéptidos OspC e ácidos nucleicos que codificam os 26 referidos polipéptidos. Tal como se utiliza aqui, uma variante de um polinucleótido ou de um polipéptido diz respeito a uma molécula que é substancialmente semelhante quer a uma molécula inteira quer a um fragmento desta. Por exemplo, quando a molécula é um polipéptido, a variante designa uma sequência de aminoácidos que é alterada por um ou mais aminoácidos, em que a função biológica, a estrutura ou a antigenicidade da referida sequência ou a combinação destas se mantém na variante. A variante pode ter alterações «conservadoras», em que um aminoácido substituído tem propriedades estruturais ou químicas semelhantes, por exemplo, a substituição da leucina pela isoleucina. Ou uma variante pode ter alterações «não conservadoras», por exemplo, a substituição da glicína pelo triptofano. As variações menores semelhantes também podem incluir deleções ou inserções de aminoácidos, ou ambas as coisas. Do mesmo modo, quando a molécula é um polinucleótido, a variante diz respeito a uma sequência que é alterada por um ou mais nucleótidos. A variante pode ter alterações silenciosas, em que a alteração não modifica o aminoácido codificado pelo tripleto compreendido na referida variante ou a variante é não silenciosa, ou seja, em que são geradas alterações nos aminoácidos codificados.

Tal como se utiliza aqui, a expressão «versão alterada» diz respeito a uma sequência de polinucleótidos ou a uma sequência de polipéptidos, em que a dita sequência tem uma ou mais diferenças em relação à versão nativa ou selvagem da dita sequência. 27

Também se descrevem moléculas de ácidos nucleicos isolados que compreendem uma sequência de nucleótidos que é homóloga a uma ou mais das sequências quiméricas descritas, ou seus complementos. Essa sequência de nucleótidos exibe cerca de, pelo menos, 80% de homologia ou igualdade em relação à sequência, com uma das sequências quiméricas OspC, de modo a que a proteína codificada retenha a antigenicidade e a imunogenicidade da proteína quimérica inalterada. De preferência, as sequências homólogas partilham, pelo menos, 90% de homologia ou igualdade em relação à sequência com a OspC quimérica inalterada correspondente. As sequências particularmente preferidas têm, pelo menos, 95% de homologia ou têm essencialmente a mesma sequência.

Os ácidos nucleicos alterados e os ácidos nucleicos homólogos hibridam com a OspC quimérica correspondente sob condições de estringência elevada. Uma descrição geral da estringência para as condições de hibrídação é conferida por Ausubel, F. M. et al,t Current Protocols in Molecular Biology, Greene Publishing Assoe. e Wíley-Interscience 1987, e supl. 49, 2000, Factores como o tamanho da sonda, a composição das bases, a percentagem de incompatibilidade entre as sequências a hibridar, a temperatura e a força iónica influenciam a estabilidade dos híbridos de ácidos nucleicos. Assim, as condições de estringência, suficientes para permitir a hibridação de oligonucleótidos no modelo, podem ser alteradas pela optimização da rotina de modo a gerar condições de estringência elevada.

Em alternativa, as condições para atingir a estringência constam na patente WO 98/40404. Há exemplos de condições de 28 estringência elevada, estringência, estringência reduzida e de menos estringência descritos, em particular, na patente WO 98/40404 na tabela da página 36. Há exemplos de condições para atingir a estringência patentes na Tabela I abaixo, cuja fonte é a patente WO 98/40404 de Jacobs et al, : as condições de estringência elevada são as que têm, por exemplo, pelo menos a estringência das condições A a F; as condições de estringência são as que têm, por exemplo, pelo menos a estringência das condições G a L; e as condições de estringência reduzida têm, por exemplo, pelo menos a estringência das condições M a R.

TABELA I

Condição de estringência Polinucleótido híbrido Comprimento do híbrido (bp)! Temperatura e tampão de hidridização’ Temperatura e tampão de lavagem’ A AON : ADN >50 65°C; 1 x SSC -ou- 4 2 ° C; 1 x SSC, 50¾ de formamida 65 °C; 0,3 x SSC B ADN : ADN <50 T3*; 1 x SSC T3*; 1 x SSC C ADN : ARN à5G 67°C; 1 x SSC -ou- 4 50 C; 1 x SSC, 50% de formamida 67°C; 0,3 x SSC D ADN : ARN <50 TD*; 1 x SSC Tu*; 1 x SSC E ARN : ARN >50 7 0 ° C; 1 x SSC -ou- 50 ° C; 1 x SSC, 50% de formamida 70°C; 0,3 x SSC F ARN : ARN <50 Tf*; 1 x SSC TF*; 1 x SSC G ADN : ADN >50 65°C; 4 x SSC -ou- 4 2 ° C; 65°C; 1 x SSC 29

Condição de estringência Polinucleótido hibrido Comprimento do híbrido (bp)! Temperatura e tampão de hidridização1 Temperatura e tampão de lavagem1 4 x SSC, 50% de formamida H ADN : ADN <50 Tu*; 4 :·: SSC lj,*; 4 x SSC I ADN : ARN Ϊ50 67°C; 4 x SSC -ou- 4 5 0C; 4 x SSC, 50% de formamida 67°C; 1 x SSC J ADN : ARN <50 T,*; 4 x SSC T,*; 4 x SSC K ARN : ARN ãSO 70 ° C; 4 x SSC -ou- 50°C; 4 x SSC, 50% de formamida 6 7 0 C; 1 x SSC L ARN : ARN <50 T,.*; 2 x SSC T;*; 2 x SSC M ADN : ADN >50 50°C; 4 x SSC -ou- 400C; 6 x SSC, 50% de formamida 5 0 ° C; 2 x SSC N ADN : ADN <50 Tu*; 6 x SSC TH*; 6 x SSC 0 ADN : ARN >50 5 5 ° C; 4 x SSC -ou- 4 2 °C; 6 x SSC, 50% de formamida 55°C; 2 x SSC P ADN : ARN <50 TP*; 6 x SSC TP*; 6 x SSC Q ARN : ARN >50 60°C; 4 x SSC -ou- 45°C; 6 x SSC, 501 de formamida 60°C; 2 x SSC R ARN : ARN <50 TR*; 4 x SSC TR*; 4 x SSC í 0 tamanho do híbrido é o antecipado para a(s) região(ões) hibridizada(s) dos polinucleótidos hibridizantes. Quando se hibridiza um polinucleótido num polinucleótido-alvo de sequência desconhecida, assume~se que o tamanho do híbrido seja o do polinucleótido hibridizante- Quando se hibridizam polinucleótidos de sequência conhecida, o tamanho do híbrido pode ser determinado através do 30 30 Comprimento Temperatura e Temperatura e Condição de Polinucleótido do híbrido tampão de iismpao de estringência híbrido (bp) ‘ hidridização’ lavagem1 alinhamento das sequências dos polinucleótidos e da identificação da região ou regiões com complementaridade de sequência óptima. t SSPE (1 :>; SSPE é 0,15 M de NaCl, 10 mM de NaH:.P04, e 1,25 mM de EDTA, pH 7,4) pode ser substituído por SSC (1 x SSC é 0,15M de NaCl e 15 mM de citrato de sódio) nos tampões de hibridização e de lavagem; as lavagens são realizadas durante 15 minutos depois de a hibridização estar completa. + TB - TR: A temperatura de hibridização para híbridos que se prevê terem um tamanho inferior a 50 pares de bases deve ser 5 a 10 °C abaixo da temperatura de fusão (Tm) do híbrido, em que a Tm é determinada de acordo com as seguintes equações. Pax_a híbridos com um tamanho inferior a 18 pares de bases, a Tm(*C) = 2 ({f de bases A + T) + 4 (ΐί de bases G + C) .. Para híbridos com um tamanho entre 18 a 4 9 pares de bases, a Tmí°C) = 81,5 + 16,6 (log,0 ENa+] ) +0,41 {% G + C) - (600 / N), em que N é o número de bases do híbrido e [Na+] é a concentração de iões de sódio no tampão de hibridização {[Na·1] para 1 x SSC = 0,165 M) .

Tal como se utiliza aqui, «isolado» designa o ácido nucleico ou o polipéptido que foi removido do seu ambiente original (por exemplo, o ambiente natural se estiver a ocorrer naturalmente) . Por exemplo, o polinucleótido ou o ADN ou o polipéptido, que é separado de alguns ou da totalidade dos materiais coexistentes no sistema natural. Um polinucleótido isolado pode ser parte de um vector e/ou de uma composição, e ainda assim ser isolado, na medida em que o vector ou a composição não fazem parte do seu ambiente natural. Do mesmo modo, os polipéptidos podem fazer parte de uma composição e ainda assim serem isolados, na medida em que a composição não faz parte do seu ambiente natural, 31

As proteínas quiméricas aqui descritas compreendem proteínas ou polipétidos OspC como acima descrito, provenientes de duas ou mais famílias OspC da Borrelia que causa a doença de Lyme, como descrito na Tabela II, As ditas famílias podem compreender as famílias OspC A, B, I e K da Borrelia burgdorferi e as famílias OspC A e B da Borrelia afzelií. As proteínas quiméricas aqui descritas compreendem, por exemplo, um primeiro polipéptido OspC codificado por um ácido nucleico que compreende uma sequência aproximadamente do códâo 18 até aproximadamente ao códão 210 de um primeiro gene OspC, Em alternativa, a sequência inicia-se aproximadamente no códão 8. Em alternativa, a sequência termina aproximadamente no códão 207. Em alternativa, a sequência termina aproximadamente no códão 194. Em alternativa, a sequência termina aproximadamente no códão 192. As proteínas quiméricas aqui descritas ainda compreendem, por exemplo, um segundo polipéptido OspC que compreende um polipéptido variável OspC codificado por fragmentos de ácidos nucleicos, como acima descrito. Em alternativa, a proteína quimérica compreende dois ou mais polipéptidos variáveis OspC, como acima descrito.

As proteínas quiméricas aqui descritas compreendem ainda, por exemplo, um segundo polipéptido OspC codificado por um ácido nucleico constituído por uma sequência aproximadamente do códão 9 até aproximadamente ao códão 190 de um segundo gene OspC.

Para as proteínas quiméricas aqui descritas, pelo menos dois dos referidos polipéptidos OspC ou seus fragmentos 32 imunogénicos sâo fundidos conjuntamente numa proteína única, uma proteína quimérica, codificada por um ácido nucleico único, em que não se encontram dois polipéptídos adjacentes na dita fusão na mesma configuração numa proteína OspC que ocorra naturalmente.

Em alternativa, as proteínas ou as proteínas quiméricas OspC descritas, a partir da Borre lia burgdorferi e da Borrelia afzelíi, são associadas numa composição.

Também se descreve um método para a detecçào da resposta imunitária à Borrelia que causa a doença de Lyme numa amostra do hospedeiro. 0 método compreende o contacto da amostra do hospedeiro com uma composição que compreende polipéptídos OspC das estirpes de Borrelia que causam a doença de Lyme, de tal modo que os anticorpos anti-OspC, se presentes na referida amostra, se liguem aos referidos polipéptídos OspC. A composição pode compreender um ou mais polipéptídos OspC ou seus fragmentos de diagnóstico, a partir de duas famílias OspC da Borrelia burgdorferi seleccionadas de entre o grupo constituído pelas famílias A, B, I e K, excluindo a composição constituída por duas proteínas OspC em que uma proteína OspC é da família OspC A e a segunda proteína OspC é da família OspC I. Os anticorpos que se ligam aos polipéptídos OspC da composição, são detectados ou medidos, detectando assim uma resposta imunitária à Borrelia que causa a doença de Lyme. Em alternativa, a composição pode compreender pelo menos dois polipéptídos OspC da Borrelia ou seus fragmentos de duas famílias OspC da Borrelia afzelii seleccionadas de entre o grupo constituído pelas famílias A e B. Em -»

D J alternativa, a composição pode compreender polipéptidos da OspC da Borxelia burgdorferi e da Borrelia afzelii. Em alternativa, a composição pode compreender um ou mais polipéptidos de cada uma das famílias A, B, I e K da Borrelia burgdorferi e das famílias A e B da Borrelia afzelii. A composição também pode compreender um ou mais dos polipéptidos quiméricos descritos..

Também se descrevem os conjuntos que contêm um ou mais polipéptidos OspC ou polipéptidos quiméricos OspC ou suas combinações conjuntamente com tampões adequados e reagentes de detecção de antigénios para a detecção ou o diagnóstico da estirpe de Borrelia que causa a doença de Lyme. Os conjuntos podem conter ácidos nucleicos suficientemente homólogos aos polipéptidos OspC ou aos polipéptidos quiméricos OspC para detectar os ácidos nucleicos que codificam os genes OspC das estirpes de Borrelia que causam a doença de Lyme, conjuntamente com reagentes que detectam uma hibridação positiva para o ADN alvo ou, por exemplo, reagentes para o ADN específico..

Com o objectivo de um conjunto de detecção, o termo «homólogo» designa duas ou mais sequências que partilham semelhanças substanciais mas que não são idênticas. Duas sequências de ADN são «substancialmente semelhantes» quando pelo menos 95% (de preferência pelo menos 98%) dos nucleótidos coincidem ao longo de um comprimento definido de sequências de ADN. As sequências que são substancialmente homólogas podem ser identificadas pela comparação das sequências utilizando um programa padrão disponível em bancos de dados de sequências ou numa experiência de hibridação de Southern sob, por exemplo, condições de estringência como as definidas para esse sistema particular. A definição de condições de hibridação adequadas está dentro das competências da arte. Ver, por exemplo, Ausubel et al., Current Protocol-s in Molecular Biology, John Wiley & Sons, Inc., Nova Iorque; Sambrook et al.f Molecular Cloníng: Ά Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press. Para os objectivos desta divulgação, as sequências de aminoácidos que tinham, por exemplo, mais do que 90% de semelhança, foram consideradas homólogas.

As composições das vacinas aqui descritas desencadeiam uma resposta imunitária humoral e uma resposta imunitária mediada por células num hospedeiro. Para além disso, as composições de diagnóstico descritas são capazes de detectar quer a resposta imunitária humoral quer a mediada por células a partir de uma amostra de um hospedeiro utilizando as técnicas habituais de imunodiagnóstico.

EXEMPLIFICAÇÃO EXEMPLO 1: TÉCNICAS

Estixpes da Borrelia

Isolaram-se cento e quarenta estirpes de B. burgdorferi a partir de lesões primárias de eritema migrans (EM), sangue e liquido cefalorraquidiano (LCR) de doentes observados no Lyme Disease Center em Stony Brook, Nova Iorque, Lyme

Disease Diagnostic Center na New York Medicai College, Valhalla, Nova Iorque ou da actividade privada de dois médicos colaboradores na parte oriental de Long Island ou obtidas dos Centros de Controlo da Doença (CDC - Centers for Disease Control). Todos os doentes cumpriram as definições de vigilância dos Centros de Controlo da Doença para a doença de Lyme [CDC, Morb. Mortal. Wkly, Rep,, 46:20-21 (1997)]. As amostras isoladas da pele, do sangue e do LCR foram obtidas utilizando técnicas-padrão [Barbour, A.G., Yale J. Biol. Med., 57:521-525 (1984); Berger, B. W. et al, , J. Clin, Microbiol. 30:359-361 (1992); Wormser, G. P. et al., J. Clin. Microbiol36:296-298 (1998)]. Foram obtidas biópsias punch com colheita de um fragmento cilíndrico do bordo mais avançado da lesão de eritema migrans e incubadas num meio BSK-H (Sigma, St. Louis, MO) a 34°C de modo a criar uma cultura. Existiu um pequeno viés na cultura, como determinado pela análise directa do tecido da biópsia comparativamente às amostras isoladas a partir da cultura [Seinost, G. et al., Arch. Derm., 135:1329-1333, (1999)3, ao contrário do isolado da B. burgdorferi a partir de carraças não alimentadas [Norris, D. E. et al., J. Clin. Microbiol., 35:2359-2364, (1997)]. Para além disso, vinte e duas sequências OspC da B. burgdorferi sensu stricto foram recuperadas a partir do GenBank. Os dados das carraças utilizados foram quer do GenBank quer do estudo de Wang et al. [Wang, I-N. et al., Genetics 151:15-30 (1999)].

Isolamento do ADN

Para o isolamento do ADN genómico da Borrelia, as células em fase log foram obtidas por centrifugação a 10 000 rpm 36 durante 30 minutos a 4°C. O sedimento bacteriano foi ressuspenso num tampão de Tris/soro fisiológico [10 mM de Tris (pH 7,5), 150 mM de NaClj. As bactérias foram depois sedimentadas e ressuspensas em TNE [10 mM de Tris (pH 7,5), 150 mM de NaCl e 1 mM de EDTA] , Adicionaram-se lisozima acabada de preparar (20 mg/mL em TNE), sulfato dodecilo de sódio (10%) e proteinase K (20 mg/mL) e a mistura foi incubada a 50°C durante uma hora, seguida por um tratamento com RNAse. O ADN foi extraído com fenol/clorofórmio, precipitado em etanol e ressuspenso num tampão TE.

Reacção em cadeia da polimerase 0 gene OspC foi amplificado por intermédio da PCR, como previamente descrito [Wang, I~N„ et al., Genetics, 151:15-30 (1999)]. O gene OspC foi amplificado utilizando dois primers externos: 5'-AAA GAA TAC ATT AAG TGC GAT ATT-3' ( + ) , SEQ ID NO: 1, com início na base 6; e 5'-GGG CTT GTA AGC TCT TTA ACT G-3' (-), SEQ ID NO: 4, terminando na base 602. A metade 5' do gene OspC foi amplificada utilizando o SEQ ID NO: 1 e o pzimer inverso, 5'-CAA TCC ACT TAA TTT TTG TGT TAT TAG-3' (-) SEQ ID NO: 2, terminando na base 345. A metade 3' do gene OspC foi amplificada utilizando o primer, 5'-TTG TTA GCA GGA GCT TAT GCA ATA TC-3' (+), SEQ ID NO: 3, com início na base 289 e SEQ ID NO: 4 como o primer inverso. Os primers externos amplificam um fragmento de 597 pb. A amplificação da metade 5' originou um fragmento de 340 pb, enquanto a amplificação da metade 3' originou um fragmento de 314 pb. Todos os números das bases e os tamanhos dos fragmentos amplificados são baseados na 37 sequência OspC da estirpe B31 (número de acesso do GenBank U01894), tendo como códão de inicio a base 1. A amplificação foi conduzida em 50 pL de uma solução que contém um tampão Perkin-Elmer Cetus lOx PCR [100 mM de Tris-HCl (pH 8,3), 500 mM de KC1], 2,5 mM de MgCl2, desoxinucleosideo trifosfato a 0,2 mM por nucleótido, 2,5 U de Taq polimerase (Perkin-Elmer/Cetus) e 0,5 μΜ de cada prímer, A reacção de amplificação foi levada a cabo em quarenta ciclos num «ciclador» térmico de ADN (PTC-100; MJ Research, Inc., Watertown, MA) com um perfil de amplificação de: desnaturação a 95°C durante 40 segundos, emparelhamento a 54°C durante 35 segundos e extensão a 72°C durante 1 minuto, após um passo inicial de desnaturação a 96°C durante 2 minutos. Foram incluídos controlos negativos em cada experiência, de modo a controlar a contaminação.

Análise SSCP a frio A análise SSCP foi escolhida de modo a caracterizar a variação genética dos fragmentos isolados do gene OspC com base na sua taxa de detecção de polimorfismos de ADN e mutações pontuais extremamente elevada numa variedade de posições em fragmentos de ADN [Orita, M. et al,, Proc. Natl. Acad, Sei,, 86:2766-2770 (1989)]. Foram detectadas mutações pontuais isoladas em fragmentos com dimensões até 800 pb [Michaud, J. et al., Genomics, 13:389-394, (1992)].

Contudo, existem provas de que a capacidade da análise SSCP em detectar mutações começa a diminuir significativamente à medida que os fragmentos PCR atingem 400 pb de tamanho [Hayashi, K., PCR Methods & Applications, 1:34-38 (1991)].

Por esse motivo, de modo a obter uma eficácia elevada na detecção de polimorfismos de nucleótidos, o tamanho dos produtos PCR aqui utilizados foi de 340 pb na metade 5' e 314 pb na metade 3' do gene OspC.

Analisaram-se os fragmentos do gene OspC amplificados de todas as cento e quarenta estirpes para variações genéticas pelo protocolo SSCP a frio descrito por Hongyo et al. [Hongo, T. et al,, Nucleic. Acicls Res., 21:3637-3642 (1993)]. Resumidamente, adicionaram-se 5 a 15 pL do produto PCR a uma mistura com 4 pL de uma amostra de tampão 5x TBE Ficoll (NOVEX, San Diego, CA) e 0,4 pL de 1 pM de hidróxido de metilmercúrio (Alfa Aesaer, Ward Hill, MA). A quantidade do produto PCR utilizado para a análise SSCP foi estimada após a visualização do produto PCR em gel de agarose com brometo de etídio. A mistura de amostra foi aquecida a 95°C durante 4 minutos, e depois arrefecida em gelo antes de se colocar a totalidade dos 20 pL no poço da amostra de gel. As bandas mais finas foram observadas quando a amostra foi aplicada a um gel pré-moldado TBE 20% (NOVEX) num sistema de electroforese (ThermoFlow ETC Unit, NOVEX) com tampão de funcionamento l,25x TBE. A electroforese dos produtos SSCP foi conduzida a uma temperatura constante de 8°C durante 17 horas a 240 volts de modo a revelar as variações de mobilidades passíveis de ser discerníveis, Os géis foram corados com 0,5 pL/mL de brometo de etídio num tampão lx TBE durante 25 minutos e descorados em água destilada durante 30 minutos. As bandas coradas foram visualizadas numa câmara de luz UV a 340 nm. As amostras que revelaram mais do que duas bandas SSCP foram reamplifiçadas de modo a determinar se as bandas detectadas correspondiam a alelos 39 reais ou ao produto de artefactos da PCR. A análise SSCP lado a lado foi realizada de modo a detectar até mesmo ligeiras variações na mobilidade electroforética,

Sequenciação do ADN

Reamplif icou-se o gene OspC ou os representantes de cada classe de mobilidade. Os fragmentos da PCR de cadeia dupla foram purificados em electroforese de gel de agarose e submetidos a sequenciação de ADN automática utilizando química de finalização didesóxi fluorescente e os prdmers directos e inversos originariamente utilizados para a amplificação por PCR.

Análise estatística

Foi realizada a análise Qui-Quadrado das tabelas de contingência. Esta análise testa diferenças significativas nas frequências de distribuição. As tabelas eram 2xN em que N é o número dos principais grupos OspC distinguidos. 0 número médio previsto em cada elemento da tabela necessita de ser cerca de 6 ou maior para um teste sem vieses [Zar, J. H., Biostatistical Analysis, 3.a ed., p. 206 (1996)]. Isto significa que o número de observações deve ser pelo menos 6 vezes maior do que 2N. Quando o número médio previsto foi menor do que 6, os grupos OspC principais com o menor número na amostra foram combinados até que o número de observações fosse aproximadamente igual ou superior a 12N .

RESULTADOS 40

Classes de mobilidade OspC em isolados de B. burgdorfeiri em seres humanos

Cento e trinta e dois isolados de B, burgdorferi sensu stricto foram propagados in vitro e utilizados como uma fonte de AND para análise a partir de amostras de pele, de sangue e de LCR de doentes (Tabela II), O genótipo OspC de cada estirpe foi determinado por análise SSCP a frio da extremidade 5' (34 0 pb) do gene e foi confirmado por análise SSCP da extremidade 3' (314 pb) do OspC, Em todos os isolados de B. burgdorferi, a variação genética da extremidade 5' do gene correspondeu à variação na extremidade 3' , Pelo menos dois representantes de cada classe de mobilidade SSCP foram subsequentemente sequenciados. As sequências das mesmas classes de mobilidade foram idênticas em todas as amostras e cada classe de mobilidade tinha uma sequência única. Assim, a sensibilidade e a especificidade da análise SSCP foi de 100%. Cada classe de mobilidade SSCP foi designada como um alelo. Wang et al. descreveram recentemente 13 alelos OspC (Wang, I-N. et al., Genetics, 151:15-30). Descrevem-se cinco classes de mobilidade OspC (OC) adicionais, OC14-18. A OC14 tem a mesma sequência OspC que o OspC da estirpe 2591.

TABELA II. Alinhamento dos principais grupos OspC com alelos OspC identificados por análise SSCP 41

Principal grupo OspC Alelo OspC (SSCP) Número GenBank1 Carraças Pele- Disseminada-' A 1 A.F02 98 60 17 23 21 B 2 AF029861 17 19 4 C 3 AF029862 11 3 Q D 4 AF029863 10 1 Q E 5, 7 AF029864 6 1 0 F 6 AF029865 9 0 0 G 8 AF029867 5 7 0 H 9 AF029868 7 6 0 I 10 AF029869 1 9 3 J 11, 18 AF029870 3 7 0 K 12, 13 AF029871 6 32 16 L L42899 2 0 0 M 14 UQ1892 1 3 0 N 15 L42899 1 3 0 0 - X84778 0 1 0 P U91796 1 0 0 Q - U91790 1 0 õ R 091791 1 2 0 0 S - U91793 1 0 0 T 16 AF065Í43 0 1 0 u 17 AF065144 0 2 0 1 Dá-se como exemplo uma única sequência GenBank de cada tipo. 2 0 número de cada grupo OspC principal observado no sangue, líquido sinovial ou líquido cefalorraquidiano. Estão incluídos quer os dados de SSCP quer os dados da literatura, incluindo os do GenBank. * Os grupos P a S de B. burgdorferi sensu stricto só se encontram na Europa. Os grupos R e S são excluídos da análise dado que se encontram quase alelos OspC idênticos na B, afselii e na B. garinií, demonstrando que estes grupos foram recentemente criados por transferência interespécie.

Infecções múltiplas

Dos cento e trinta e dois isolados primários a partir de doentes com doença de Lyme neste estudo a maior parte continha uma única estirpe. Sete isolados da pele e um isolado do LCR continham duas estirpes diferentes como determinado por análise SSCP, originando assim um total de cento e quarenta estirpes diferentes. Os pares do alelo OspC detectados em amostras de biópsia de eritema migrans com infecção múltipla foram (0C1, 0C12), (0C1, 0C14), 2x(0C2, 0C3}, 2x(OC2, OC12) e {0C8, 0C18). 0 isolado de LCR NY940657 continha alelos OspC OC1 e OC12. Para o isolado de LCR 297, que foi isolado no Connecticut, existiam duas sequências OspC publicadas no GenBank: L42893, que é análogo ao OCIO e ao U08284, que é análogo ao 0C12. A diferença entre os pares das sequências OspC de ambas as estirpes é de 16,4%, sugerindo infecção do SNC com duas estirpes diferentes neste isolado. No global, 5,5% de todos os isolados aqui descritos continham duas estirpes. Uma vez que 50% dos isolados em carraças na natureza apresentam infecção com múltiplas estirpes, é comum a exposição a múltiplas estirpes numa única mordedura de carraça, levantando a possibilidade de estirpes diferentes serem patogenicamente diferentes. Às cento e quarenta estirpes em que o alelo OspC foi determinado adicionaram-se vinte e duas estirpes de sequência OspC conhecida do GenBank de modo a perfazer um total de cento e sessenta e duas. Cinquenta e uma destas estirpes foram obtidas na parte oriental de Long Island; setenta e sete foram obtidas em Westchester County, Nova Iorque e as restantes noutras áreas endémicas nos Estados Unidos da América (vinte e duas estirpes) e na Europa (doze 43 estirpes) . Os isolados foram divididos em isolados provenientes do local de infecção primária, isolados provenientes da lesão cutânea com eritema migrans (cento e dezoito isolados) e isolados provenientes das localizações secundárias, em que a infecção se tinha disseminado (quarenta e quatro isolados), Este último grupo incluía, por exemplo, vinte provenientes do líquido cefalorraquidiano (LCR) , vinte e três do sangue e um do liquido sinovial.

Principais grupos OspC nos isolados de B, burgdorferi em seres humanos

Tal como se descreve, as diferenças entre as sequências OspC entre as famílias de B. burgdorferi sensu stricto dividiram-se, de forma surpreendente, em dois grupos. Pares de genes OspC na mesma família diferiram na sequência de ácidos nucleicos em menos de dois por cento enquanto os pares de genes OspC de famílias separadas diferiram em mais de oito por cento na sequência de ácidos nucleicos. Wang et al. definiram dezanove grupos OspC principais, designados de A a S (Wang, I-N. et al., Genetics, 151:15-30). Tal como se descreve, são estabelecidos dois grupos OspC adicionais, designados T e U. OC16 representa o grupo principal T e OC17 representa o grupo principal U (Tabela X). As menores diferenças entre pares do grupo T e do grupo U para qualquer outro grupo OspC principal são de 16,1% e 20,5%, respectivamente.

Os clones da B. burgdorferi são patogenicamente diferentes 44

Tal como se descreve, os clones que representam grupos OspC diferentes da Borrelia hurgdorferi são patogenicamente diferentes. Isto é demonstrado pelas frequências diferentes dos vários grupos OspC principais nas carraças, na infecção inicial a nível cutâneo e nas ínfecções disseminadas.

As estirpes no GenBank e a literatura em que as sequências OspC foram determinadas tiveram uma vasta amostragem a partir de toda a área geográfica das espécies e foram escolhidas independentemente de ser de carraças ou de seres humanos. Estas estirpes originaram uma amostra pequena mas aleatória da frequência dos grupos OspC principais nas carraças e em seres humanos. Tal como se descreve, a frequência dos grupos OspC principais a partir de isolados de seres humanos foi significativamente diferente da frequência detectada em carraças em Long Island. Ά Tabela III revela que a distribuição de frequências das estirpes da pele na parte oriental de Long Island difere significativamente das estirpes de carraças obtidas na mesma área. 111

Principais grupos OspC Isolados de lesões de erítema migrans (N = 46) carraças Ixodes scapulazis {W = 74) A B C D F G H I K Comb 13 6 2 0 0 1 0 4 16 4 12 12 11 9 6 5 7 1 5 6 XJ = 36,3 com 9 graus de liberdade p<0,001 " Os principais grupos combinados são definidos por frequências individuais de 0,025 ou menos e incluem os grupos E, J, N e O. A análise aqui apresentada de todos os grupos OspC presentes neste estudo revelaram que a maior parte dos grupos se encontra nas carraças e nos seres humanos (Tabela II). Contudo, os grupos principais A, B, I e K predominam nos seres humanos, com os grupos A e K a serem detectados mais frequentemente (Figura 1). 0 padrão de patogenícídade dos vários clones, como demonstrado pela frequência no local primário de infecção, na pele, quando comparado com a frequência em localizações secundárias revelou que apenas quatro grupos principais (A, B, I e K) foram detectados na pele e em localizações secundárias (comparar Tabelas III e IV) . Todos os outros grupos principais só foram detectados na pele. Quando todos os grupos com três ou menos isolados são combinados de modo a originar o grupo combinado da Tabela IV, um teste de contingência 2 por 8 que compara a distribuição de frequências na pele versus em localizações secundárias é significativo com um p<0,005. Quando não são combinados nenhuns grupos, um teste de contingência 2 por 15 ainda é significativo (χ2 = 24,07 com 14 graus de liberdade, p<0,05). A distribuição de estirpes de localizações primárias e secundárias indica que só alguns dos grupos principais, A, B, I e K causam doença disseminada. Tal como se descreve, estes são designados clones invasivos, enquanto outros clones são designados clones não invasivos.

TABELA IV 46

Principais grupos OspC A B G Η I J K Comb, ‘ Isolados de lesões de eritema 23 19 7 6 9 7 32 16 migrans (N = 118)

Infecções disseminadas 21 4 0 0 3 0 16 0 (N = 44) χ3 = 23,6 com 7 graus de liberdade p<0,005 a Os principais grupos combinados são definidos por frequências individuais de 0,025 ou menos e incluem os grupos C, D, E, Μ, N, O, T e U,

Tal como se descreve, os clones diferentes de B. burgdorferí sensu stricto, como definido pelos grupos OspC, são patogenicamente diferentes. Alguns grupos só muito raramente, se é que alguma vez, causam doença humana, por exemplo, os grupos OspC D, E, F e L. Alguns grupos causam infecção local ao nível da mordedura da carraça, mas não causam doença sistémica, como por exemplo os grupos OspC G, H, J e T. Finalmente, existem alguns grupos que são responsáveis pela doença sistémica, os grupos OspC A, B, I e K. Os nossos resultados indicam que todas as infecções B. burgdorferí sensu stricto em seres humanos são causadas por estirpes destes quatro grupos OspC. A Figura 1 apresenta a distribuição de frequências dos grupos OspC principais entre isolados da B, burgdorferí a partir de carraças Ixodes scapularis do Este de Long Island, n=72, (A}; lesões de eritema migrans, n=118, {B) ; e

localizações secundárias da infecção, n-44 (C) . A percentagem dos grupos A mais K aumentou de 23% nos isolados em carraças para 47% nos isolados na pele e para 84% nas localizações secundárias. 0 comprimento das barras na Figura 1 reflecte este aumento, pela manutenção 47 constante do comprimento dos grupos A e K combinados. Na pele, os grupos C, D, E, Μ, N, 0, T e U foram combinados dado que as suas frequências individuais eram de 0,025 ou menos. Esta combinação dos grupos quando associados constitui 12,71 do número total de estirpes.

Foi conduzida uma análise semelhante para a Borrelia afzelii. A análise incluiu alelos OspC de 21 estirpes do GenBank e 12 estirpes sequenciadas para este estudo. Estas sequências enquadraram-se entre os 20 grupos principais em que a definição de um grupo tem menos de 1% de diversidade de sequência dentro de um grupo e em que existe pelo menos uma diferença de sequência de 7,7% entre grupos» Existiram duas excepções a esta regra, que foram causadas pela deleção de um gene OspC e por uma transferência inter-espécie de uma pequena secção de ADN noutro gene OspC. Quando estas secções anómalas foram removidas, todos os alelos OspC se enquadraram em 20 grupos. Só dois grupos continham estirpes de infecções crónicas - os grupos A e B. Por analogia e pelo estudo da B. burgdorferi, parece que só dois grupos são patogénicos na B. afzelii. EXEMPLO 2: Expressão de proteínas e Immunoblot

Expressão de proteínas A Escherichía coli [estirpe BL21 (pLysS) ou a estirpe B834 (DE3)] foi transformada com o plasmídeo que contém as proteínas quiméricas recombinantes da Borrelia (RCBP) e cultivada em 10 mL de meio LB (5 g/L de NaCl, 10 g/L de triptona, 5 g/L de extracto de levedura, 25 mg/L de 48 cloranfenicol e 50 mg de ampicilina) a 37°C, com agitação. Quando a densidade óptica a 600 λ alcançou 0,3 a 0,4 unidades, foi induzida a expressão de proteína recombinante pela adição de IPTG (B-D-tiogalactopiranosido de isopropilo) para uma concentração final de 0,5 mM e as células foram cultivadas por um período adicional de três horas. As culturas foram obtidas por centrifugação a 3800xg durante cinco minutos. As células foram ressuspensas em 20 mM de NaPCh a pH 7,7 e armazenadas de um dia para o outro a -20°C. Uma vez descongelados, os extractos em bruto foram incubados com DNAse (2 pg/mL) na presença de 2,5 mM de MgCls à temperatura ambiente durante trinta minutos, centrifugados a 14 000 rpm (Eppendorf 5417C) durante cinco minutos e foram colocados 5 pL da amostra de proteínas num SDS-PAGE que foi quer corado com Commassie Blue quer utilizado para Immunoblot. As amostras de proteínas foram solubilizadas, normalmente com um tampão que continha sulfato dodecilo de sódio (SDS) e, em casos seleccionados, com agentes redutores como o ditiotreitol (DTT) ou o 2-mercaptoetanol (2-ME). Após a solubilização, o material foi separado por SDS-PAGE. As proteínas foram depois transferidas por electroforese para uma membrana de difluoreto de polivinilideno (PVDF, Immobilon-P®, Millipore). A transferência das proteínas foi monitorizada por um procedimento de coloração reversível, Ponceau S. Foi efectuada a coloração da membrana, que foi descolorada por imersão em água durante 10 minutos. Todos os locais de ligação não específicos nas proteínas e na membrana foram bloqueados pela imersão da membrana numa solução que continha uma proteína ou um detergente agente bloqueador [5% de leite em solução salina tris-tamponada (TBS) Tween- 49 20® a 0,1%]. As membranas foram depois incubadas com o anticorpo primário (quer um anticorpo monoclonal quer soro humano de eritema migrans de doença de Lyme). A membrana foi lavada e os complexos anticorpo-antigénio identificados utilizando enzimas de fosfatase alcalina (AP) acopladas ao anticorpo secundário, quer a anti-imunoglobulina G (IgG anti-rato) de modo a detectar o anticorpo monoclonal quer a IgA+IgG+IgM anti-humana de modo a detectar anticorpos séricos. Foi depois utilizado um substrato cromogénico para a fosfatase alcalina de modo a visualizar a actividade. EXEMPLO 3: CARACTERIZAÇÃO SEROLÓGICA - ELISA (Ensaio Imunoenzimático)

Imobilização das RCBP em Placas ELISA, Determinação da lEiicjaçao RCBP Ideal

Utilizou-se uma solução de RCBP purificadas num tampão de fosfato de sódio, a pH 9,0, para revestir placas de micropoços comerciais (MaxiSorp®, Nunc). As proteínas recombinantes OspC da Borrelia estão descritas na Tabela V. O procedimento de revestimento foi realizado como se descreve em seguida: adicionaram-se 100 μ! de uma solução que continha a concentração adequada de cada RCBP a cada poço e a placa de micropoços foi incubada quer durante uma hora à temperatura ambiente quer a 4°C de um dia para outro. A solução de antigénio foi removida dos poços, a placa foi lavada três vezes com soro fisiológico tamponado com fosfato (PBS) a pH 9,0 e foram adicionados 200 pL de solução bloqueadora [2% BSA fracção V (Sigma) em PBS]. Após 50 um período de trinta minutos de incubação a 37°C, as placas foram lavadas três vezes com PBS, envolvidas em plástico e armazenadas a 4°C até utilização. A ligação das RCBP individuais foi medida utilizando anticorpos monoclonais específicos quer para a OspA quer para a OspC seguida (após lavagem) por anticorpo secundário cabra anti-rato conjugado com fosfatase alcalina. Descobriu-se que o limite superior da ligação de proteínas estava acima do limiar de acção do anticorpo monoclonal utilizado na sua medição e foi detectado que o protocolo-padrão de bloqueio saturava com sucesso esta elevada capacidade de ligação de proteínas, deixando leituras de fundo inferiores nos poços de controlo. Os resultados destas experiências indicam que uma concentração de proteínas de 0,5 pg/mL no tampão de revestimento era ideal para cada uma das RCBP testadas. Não foi dado como necessário que as proteínas quiméricas fossem imobilizadas numa razão molar especifica; apenas que o suficiente de cada proteína fosse ligado de modo a que os epítopos nessa proteína quimérica não se tornassem limitantes nos ensaios ELISA subsequentes que utilizam soro de doentes. Para efeitos práticos, foi detectado que estas condições eram satisfeitas quando o ensaio de captura monoclonal alcançava uma absorvência de cerca de 1,5 unidades ou superior para cada anticorpo monoclonal de rato, com um epítopo específico representado numa das proteínas quiméricas da superfície do poço. Se necessário, contudo, as concentrações de proteínas individuais na mistura podem ser ajustadas de modo a obter os níveis desejados de proteína imobilizada utilizando uma optimização de rotina. Apesar de a quantidade de cada RCBP ligada à superfície do poço e de a quantidade de qualquer 51 um dos epítopos expostos à solução variarem um pouco de proteína para proteína, a quantidade de epítopo ligado não foi considerada limitante dentro do intervalo útil do ELISA.

Ensaios ELISA 0 procedimento-padrão para os ensaios ELISA foi o seguinte: as amostras de soro humano foram diluídas em 1:100 na amostra díluente (10% de soro bovino fetal em PBS a pH 9,0) e 100 pL de cada amostra foram adicionados às placas de micropoços ELISA que foram revestidas com antigénio, como descrito anteriormente. Depois da incubação durante um período de 1 hora a 37°C, as amostras foram removidas e as placas lavadas três vezes em TBS-Tween™ (0,5 M de Tris a pH 7,2; 1,5 M de NaCl; 0,5% de Tween™) . O anti-soro anti-humano de cabra conjugado com a fosfatase alcalina específica quer para a IgM (Fc) quer para a IgG (Fab), (Jackson Immuno Research Laboratories) foi diluído em 1:1000 em PBS, a pH 7,4 e adicionaram-se 100 pL da solução a cada poço. Após a incubação durante trinta minutos a 37°C, as placas foram lavadas três vezes com TBS-Tween™ e foram adicionados 100 pL da solução de substrato a cada poço (5 mg de comprimidos de p-nitrofenilfosfato dissolvidos num tampão substrato de IX dietanolamina de modo a produzir uma solução 2 mg/mL - Kirkegaard Perry Laboratory). As placas foram incubadas durante trinta minutos a 37°C e adicionaram-se 100 pL de solução de paragem (5% de EDTA) a cada poço. A absorvência a 410 nm foi lida num leitor de microplacas (Dynatech). A amostra foi considerada positiva se produzisse uma absorvência média superior à média dos controlos negativos mais três desvios-padrão. A reactividade cruzada foi medida contra o soro de doentes com sifilis, lúpus eritematoso sistémico, artrite reumatóide, bem como trabalhadores rurais endémicos e trabalhadores rurais não endémicos.

Utilizando o ensaio ELISA acima descrito, testou-se o soro de vários doentes. Os doentes com eritema migrans agudo (EMA) tinham infecções localizadas precoces tipificadas pela presença de eritema migrans (EM) bem definido em doentes da área endémica. Os doentes com disseminação em fase inicial (early disseminated - EA) ou infecções agudas disseminadas (acute disseminated - AcD) foram tipificados por EM e um dos seguintes: lesões EM adicionais, bloqueio AV, alterações neurológicas (por exemplo, paralisia do sétimo par craniano) ou meningite.. Os doentes em convalescença aguda (acute convalescent - AcC) foram obtidos a partir dos mesmos doentes que os EA e os AcD, 2 a 4 semanas depois. 0 soro também foi testado pelo CDC a partir dos doentes com sifilis (Ξ) bem documentada, o soro também foi obtido a partir da SUNY na Stony Brook, Divissâo de Reumatologia a partir de doentes com lúpus eritematoso sistémico (systemic lupus erythematosus - SEL) bem documentado ou de doentes com artrite reumatóide (rheumatoid arthritís - RA) bem documentada. Os soros de trabalhadores rurais endémicos (End) foram obtidos a partir de pessoas que trabalham ao ar livre de Long Island, região que é endémica para a doença de Lyme. Os soros não endémicos (NEnd) foram obtidos a partir de pessoas que trabalham ao ar livre do Arizona, região que não é endémica para a doença de Lyme. Para além disso, o soro foi testado a partir de trabalhadores rurais endémicos (End) e de trabalhadores rurais não endémicos (NEnd). Os polipéptidos da presente invenção foram utilizados para testar estes soros, como se resume na Figura 8.

TABELA V

Polipéptido SEQ ID NO.. :* (ADN) SEQ ID NO.: (Polipétido) Cl não lipidado 5 6 C2 não lipidado 7 8 !C1 9 10 C2 11 12 C5 13 14 C7 15 15 CIO 17 18 Cll 19 20 02 21 22 CICIO2 23 24 C1C12 25 26 B31C1O3 27 28 B31C12 29 30 C2C7 31 32 C2C19 33 34 C2C12 35 36 C5C7 37 38 C5C10 39 40 C5C12 41 42 1 C1-C12 são genes/proteinas OspC com sinal de lipidação. 2 C2C10 e outros compostos de nome C referem-se a proteínas OspC quiméricas em que a porção N-terminal da quimera é derivada de um primeiro alelo OspC e a porção C-terminal da molécula quimérica é derivada de um segundo alelo OspC, tal como se descreve. Os polipéptidos não foram lipidados. 54

EXEMPLO 4: IMUNIZAÇÃO DE RATOS COM PROTEÍNAS QUIMÉRICAS OSPC COMO IMUNOGÉNIOS

Imunizaram-se ratos fêmea BALB/c com quatro a cinco semanas de idade com 5 pg de proteínas quiméricas OspC em 100 pL de hidróxido de alumínio adjuvante por injecção SC (subcutânea). Utilizaram-se cinco ratos para cada grupo. Para controlo negativo, imunizaram-se cinco ratos fêmea BALB/c apenas com 100 pL de hidróxido de alumínio adjuvante. Duas semanas depois da imunização, os ratos receberam um reforço com o mesmo antigénio e duas semanas mais tarde foi administrado um reforço igual. Uma semana depois de cada reforço, colheu-se sangue de cada rato (incluindo dos controlos negativos) e o soro foi testado, utilizando o método de ELISA acima descrito, para a presença dos respectivos anticorpos anti-proteínas quiméricas OspC.

Os ratos foram imunizados com proteínas quiméricas, como consta na Tabela VI.

TABELA VI

Imunogénio SEQ ID NO.:(polipéptido) Família OspC LÍPCB311 4 4 (ADN 43) A LipC12" 22 (ADN 21) K UnlipC2J 8 B UnlipC2C7·’ 32 B/E UnlipC2C10 34 B/I UnlipC2C12 36 B/K UnlipC5C10 40 E/I UnlipC5C12 42 E/K 55 1 «Lip» significa extremidade N-terminal lipidada. Lip CB31 é a proteína OspC da estirpe burgdorferi.. 331 da - 0 número imediatamente a seguir ao «C» diz resp eito ao alelo particular OspC aqui descrito.. 3 «Unlip» significa a forma não lipidada da extremidade N-terminal.

Utilizaram-se vários tipos de OspC únicas da B. burgdorferi senso stricto, 0spCB31, 0spC2, 0spC5, 0spC7, OspCIO, OspC12 e uma OspC única da B. afzelii, Ctro, como antigénio num ELISA para testar o soro colhido dos ratos imunizados. Como está patente nas Figuras 2 e 3, a unlipC2C10 e a unlipC2C12 desencadearam uma resposta imunitária sob a forma de anticorpos (uma resposta humoral) contra uma vasta gama de familias OspC, após a primeira e a segunda colheitas de sangue, respectivamente. 0 soro dos ratos imunizados unlipC2C10, unlipC2C12, LipCB31 e LipC12 foi depois utilizado para testar polipéptidos OspC únicos de várias estirpes das três espécies genéticas principais de Borrelía, Borrelia burgdorferi, Borrelia afzelii e Borrelia garíníí,

Como está patente na Figura 4, testaram-se 13 estirpes diferentes de B. burgdorferi sensu stricto (B.b.s.s, ) para reactividade com os soros acima descritos. Os soros de ratos imunizados quer com a LipCB31 quer com a LipC12, que eram o gold Standard desta experiência, detectaram 12/13 das estirpes B.b.s.s. testadas. Os soros de ratos imunizados com C2C12 não lipidada detectaram 8/13 das estirpes testadas. É desejável a utilização de formas não lipidadas destas proteínas como imunogénios para vacinas ou 56 como antigénios de diagnóstico, porque o rendimento produzido pelo vector expressado é muito superior e as proteínas são muito mais fáceis de purificar. Estas duas razões isoladas tornam a produção destas proteínas menos dispendiosa.

Como se ilustra na Figura 5, as proteínas quiméricas unlipC2C10 e unlipC2C12 da presente invenção desencadearam uma resposta imunitária que detectou 5/6 e 6/6 das estirpes testadas, quando comparadas com as proteínas lipidadas LipCl2 e LipCB31 gold Standard que detectaram 5/6 e 3/6 das estirpes, respectivamente. Quando comparadas com a OspC2 não lipídada parental (r0spC2), as proteínas quiméricas unlipC2C10 e unlipC2C12 desencadearam uma resposta imunitária e detectaram mais estirpes do que o gold Standard [(0/6) versus (5/6} e (6/6), respectivamente]. Este resultado foi imprevisto e inesperado.

Noutra experiência, como ilustrado pelas Figuras 6 e 7, as proteínas quiméricas da presente invenção desencadearam uma resposta imunitária significativa nas 18 estirpes diferentes de B. afzelii (Figura 6) e em todas as diferentes 21 estirpes de B. garinii (Figura 7). Por exemplo, as quimeras unlipC2C10 e unlipC2C12 detectaram 12 e 18 das 18 estirpes de B. afzelii, respectivamente, quando comparadas com 0/18 detectadas pela C2 não lipidada parental. As mesmas quimeras detectaram 14 e 20 das 21 estirpes de B. garinii, respectivamente, quando comparadas com 0/21 detectadas pela C2 não lipidada parental. Para além disso, os gold standards que correspondem à LipCB31 e LipC12 detectaram 2 e 17 das 18 estirpes de B. afzelii, 57 respectivamente, e 2 e 15 das 21 estirpes de B. garinii. Estes resultados indicam que, ao contrário da LipOspCBSl, da LipOspC12 e da unlipOspC2, a C2C10 não lipidada e a C2C12 não lipidada, utilizadas como imunogénios, desencadearam uma resposta imunitária significativa ao nas diferentes estirpes de B. burgdorferi, B. afzelii e B. garinii testadas,

Contruíram-se quimeras adicionais, que se encontram registadas na Tabela VII.

TABELA VII

PolipéptidLos OspC e Polipéptidos Quiméricos da Presente

Invenção

Polipéptido SEQ ID NO.:(ADN) (Polipéptidos) ^nlip OspC kkp(55-621*) 45 4 6 unlip OspC PKO 47 48 unlip OspC TRO 49 50 Junlip OspC-55B31/58PKO/56TRO 51 52 unlip OspCl-TRO 53 54 unlip OspC-TRO 55 56 JBlip OspCIClO 57 58 Blip 0spC12 59 60 Blip OspCl-TRO 75 76 Blip OspC2C7 65 66 Blip OspC2C10 61 62 Blip OspC2C12 63 64 Blip 0spC2~TR0 67 68 Blip OspC5C7 73 74 Blip OspCSClO 69 70 Blip OspCSCl2 71 72 58 SEQ ID NO.:(ADN) (Polipéptidos)

Polípéptido

Blip OspCB31C10 77 78 Blip OspCB31C12 79 80 Blip OspCPkoTro 81 82 Blip OspC-55B31/58Pko/56Tro 83 84 1 «Unlip» significa que o polípéptido não está lipídado. J Uma quimera OspC compreendida por 3 polipéptidos OspC. ' «Blip» significa que o polípéptido está lipídado devido ao gene que tem o sinal de lipídação OspB na extremidade 5'- terminal.

LISTA DE SEQUÊNCIAS <110> Research Foundation da State University of New York Brook Bíotechnologies, Inc. <110> Dattwyler, Raymond J.

Seinost, Gerald Dykhuizen, Danial Luft, Benjamin J.

Maria J.C. Gomes-Solecki <120> Grupos de Borrelia burgdorferi e Borrelia afzelii que

Causam a Doença de Lyme em Humanos <130> 2631.1002-003 <150> US 60/140,042 <151> 1999-06-18 <160> 84 59 <170> FastSEQ para Windows versão 4.0 <210> 1 <211> 24

<212> ADN <213> Sequência Artificial <220> <2 23> Primer <4 00> 1 aaagaataca ttaagtgcga tatt 24 <210> 2 <211> 27 <212> ADN < 213 > Sequência Artificial <220> <223> Primer <4 00> 2 caatccactt aatttttgtg ttattag 27

<210> 3 <211> 26 <212> ADN <213> Sequência Artificial <2 20> 60 <223> Primei" <4 00> 3 ttgttagcag gagcttatgc aatatc 26

<210> 4 <211> 22 <212> ADN <213> Sequência Artificial <220> <223> Primer < 4 0 0 > 4 gggcttgtaa gctctttaac tg 22 <210> 5 <211> 573 <212> ADN <213> borrelia burgdorferi <220> < 2 21 > CDS <2 2 2> (1).-.(573) <400> 5 61 atg gct tgt aat aat tca ggg aaa gat ggg aat aca tct gca aat tct 48 Met 1 Ala Cys Asn Asn 5 Ser Gly Lys Asp Gly 10 Asn Thr Ser Ala Asn 15 Ser gct gat gag tct gtt aaa ggg cct aat çtt aca gaa ata agt âclcl aaa 96 Ala Asp Glu Ser 20 Vai Lys Gly Pro 1 Asn 25 Leu Thr Glu Ile Ser 30 Lys Lys att acg gat tct aat gcg gtt tta ctt gct gtg aaa gag gtt gaa gcg 144 Ile Thr Asp 35 Ser Asn Ala Vai ( Leu 40 Leu Ala Vai Lys Glu 45 Val Glu Ala ttg ctg tca tct ata gat gag ctt gct aaa gct att ggt aaa aaa ata 192 Leu Leu 50 Ser Ser Ile Asp Glu 55 Leu Ala Lys Ala Ile 60 Gly Lys Lys Ile aaa aac gat ggt agt tta gat aat gaa gca aat ege aac gag tca ttg 240 Lys 65 Asn Asp Gly Ser Leu 70 Asp Asn Glu Ala Asn 75 Arg Asn Glu Ser Leu 80 tta gca gga gct tat aca ata tca acc tta ata aca caa aaa tta agt 288 Leu Ala Gly Ala Tyr 85 Thr Ile Ser Thr Leu 90 Ile Thr Gin Lys Leu 95 Ser aaa tta aac gga tca gaa ggt tta aag gaa aag att gee gca gct aag 336 Lys Leu Asn Gly 100 Ser Glu Gly Leu Lys 105 Glu Lys Ile Ala Ala 110 Ala Lys tgc tct gaa gag ttt agt act aaa cta aaa gat aat cat gca cag 384 Lys Cys Ser 115 Glu Glu Phe Ser Thr 120 Lys Leu Lys Asp Asn 125 His Ala Gin ctt ggt ata cag ggc gtt act gat gaa aat gca aaa aaa gct att tta 432 y λ** í-l .» Ilc m Cl ir Vai Thr J-Lsp Glu Asn Ala L,rs T,vs Ala 11 ç Ι.0Π Jf 130 ---.1 135 140 gca aat gca gcg ggt aaa gat aag ggc gtt gaa gaa ctt gaa aag 480 Lys 145 Ala Asn Ala Ala Gly 150 Lys Asp Lys Gly vai 155 Glu Glu Leu Glu Lys 160 ttg tcc gga tca tta gaa age tta tca aaa gca gct aaa gag atg ctt 528 Leu Ser Gly Ser Leu 165 Glu Ser Leu Ser Lys 170 Ala Ala Lys Glu Met 175 Leu gct Ala aat Asn tca Ser gtt Vai 180 aaa Lys gag Glu Ctt Leu aca Thr age Ser 185 cct Pro gtt Vai gtc val cat His gga Gly 190 tcc Ser 573

<210> 6 <211> 190 <212> PRT <213> borrelia burgdorferi < 4 0 0 > 6 62 A.la Cys Asn Asn Ser Gly Lys Asp Gly Asn Thr Ser Ala Asn Ser Ma 1 Asp Glu Ser Vai 5 Lys Gly Pro Asn 10 Leu Thr Glu Ile Ser Lys 15 Lys Ile Thr Asp Ser 20 Asn Ala Vai Leu Leu 25 Ma Vai Lys Glu Vai 30 Glu Ala Leu Leu Ser 35 Ser Ile Asp Glu Leu 40 Ala Lys Ma Ile Gly 45 Lys Ile Lys Asn 50 Asp Gly Ser Leu Asp 55 Asn Glu Ala Asn Arg 60 Asn Glu Ser Leu Leu 65 Ala Gly Ala Tyr Thr 70 Ile Ser Thr Leu Ile 75 Thr Gin Lys Leu Ser 80 Lys Leu Asn Gly Ser 85 Glu Gly Leu Lys 90 Glu Lys Ile Ma Ala Ala 95 Lys Lys Cys Ser Glu 100 Glu Phe Ser Thr Lys 105 Leu Lys Asp Asn His 110 Ala Gin Leu Gly Ile 115 Gin Gly Vai Thr Asp 120 Glu Asn Ma Lys Lys 125 Ala Ile Leu Lys Ala 130 Asn Ala Ala Gly Lys 135 Asp Lys Gly Vai Glu 140 Glu Leu Glu Lys Leu Í45 Ser Gly Ser Leu Glu 150 Ser Leu Ser Lys Ma 155 Ala Lys Glu Met Leu 160 Ma Asn Ser Vai Lys 180 165 Glu Leu Thr Ser 170 Pro Vai 185 Vai His Gly Ser 190 175

<21G> 7 <211> 557 <212> ADN <213> Borrelia burgdorferi <2 20>

<221> CDS <222> (1) . . . (557) <400> 7 63 atg gct tgt aat aat tca gga aaa gat ggg aat gca tct gca aat tct 4Θ Met Ala Cys Asn Asn Ser Gly Lys Asp Gly Asn Ala Ser Ala Asn Ser 1 5 10 15 gct gat gag tct gtt aaa ggg cct aat ctt aca gaa ata agt aaa aaa 96 T> 7 — Ti ri C ~ — T ***« m ir T ou *rv.*· Tio Cor- T.ifc T.wo 20 25 30 311 aca gaa tct aac gca gtt gtt ctg gcc gtg aaa gaa gtt gag acc 144 Ile Thr Glu Ser Asn Ala Val Val Leu Ala Val Lys Glu Val Glu Thr 35 40 45 tta ctt gca tct ata gat gaa ctt gct acc 3l 31 gct att ggt aaa 192 Leu Leu Ala Ser Ile Asp Glu Leu Ala Thr Lys AXâ Ile Gly Lvs Lys 50 55 60 ata ggc aat aat ggt tta gag gcc aat cag agt aaa aac aca tca ttg 240 Ile Gly Asn Asn Gly Leu Glu Ala Asn Gin Ser Lys Asn Thr Ser Leu 65 70 75 80 tta tca gga gct tat gca ata tct gac cta ata gca gaa aaa tta aat 288 Leu Ser Gly Ala Tyr Ala Ile Ser Asp Leu Ile Ala Glu Lys Leu Asn 85 t 90 95 gta ttg aaa aat gaa gaa tta aag gaa aag att gat aca gct aag caa 336 Vai Leu Lys Asn Glu Glu Leu Lys Glu Lys Ile Asp Thr Ala Lys Gin 100 105 1.10 tgt tct aca gaa ttt act aat aaa cta aaa agt gaa cat gca gtg Ctt 384 Cys Ser Thr Glu Phe Thr Asn Lys Leu Lys Ser Glu His Ala Val Leu 115 120 125 ggt ctg gac aat ctt act gat gat aat gca caa aga gct att tta aaa 432 Gly Leu Asp Asn Leu Thr Asp Asp Asn AXâ Gin Arg Ala Ile Leu Lys 130 r 135 1 140 aaa Câfc gca aat aaa gat aag ggt gct gca gaa ctt gaa aag tta ttt 480 Lys His Ala Asn Lys Asp Lys Gly Ala Ala Glu Leu Glu Lys Leu Phe 145 150 155 160 aaa gcg gta gaa aac tta tca aaa gca gct caa gac aca tta aaa aat 528 Lys Ala Vai Glu Asn Leu Seri Lys Ala Ala Gin Asp Thr Leu Lys Asn 165 170 175 gct gtt aaa gag ctt aca agt cct att gt 557 Ala Vai Lys Glu Leu Thr Ser Pro Ile 180 185

<210> 8 <211> 18-3 <212> PRT <213> Borrelia burgdorferi < 4 0 0 > 64 Ala Cys Asn Asn Ser Gly Lys Asp Gly Asn Ala Ser Ala Asn Ser 3 1 5 10 15 Asp Glu Ser Vai Lys Gly Pro Asn Leu Thr Glu Ile Ser Lys Lys Ile 20 25 30 Thr Glu Ser Asn Ala Val Val Leu Ala Val Lys Glu Val Glu Thr Leu t 35 40 45 Leu Ala Ser Ile Asp Glu Leu Ala Thr Lys Ala Ile Gly Lys Lys Ile 50 55 60 Gly Asn Asn* Gly Leu Glu Ala Asn Gin Ser Lys Asn Thr Ser Leu Leu 65 70 75 80 Ser Gly Ala Tyr Ala Ile Ser Asp Leu Ile Ala Glu Lys Leu Asn Val 85 90 95 Leu Lys Asn Glu Glu Leu Lys Glu Lys Ile Asp Thr Ala Lys Gin Cys 100 105 110 Ser Thr Glu Phe Thr Asn Lys Leu Lys Ser Glu His Ala Val Leu Gly 115 120 125 Leu Asp Asn Leu Thr &SP Asp Asn Ala Gin Arg Ala Ile Leu Lys Lys 130 135 140 His Ala Asn Lys Asp Lys Gly Ala Ala Glu Leu Glu Lys Leu Phe Lys 145 150 155 160 Ala Vai Glu Asn Leu Ser Lys Ala Ala Gin Asp Thr Leu Lys Asn Ala 165 170 175 Vai Lys Glu Leu Thr Ser Pro Ile 180 <210> 9 < 211 > 579 < 212 > ADN <213> Borrelia burgdorferi <220> < 2 21> CDS <222> {!)... (579) <4OCO 9 65 atg act tta ttt tta ttt ata tct tgt aat aat tca ggg aaa gat ggg 48 Met 1 Thr Leu Phe Leu 5 Phe Ile Ser Cys Asn 10 Asn Ser Gly Lys Asp 15 Gly aat aca tct gca aat tct gct gat gag tct gtt aaa ggg cct aat ctt 96 Asn Thr Ser Ala 20 Asn Ser Ala Asp Glu 25 Ser Vai Lys Gly Pro 30 Asn Leu a ca gaa ata agt aaa aaa att a cg gat tct aat gcg gtt tta ctt gct 144 Thr Glu Ile 35 Ser Lys Lys Ile Thr 40 Asp Ser Asn Ala Vai 45 Leu Leu Ala gtg aaa gag gtt gaa gcg ttg ctg tca tct ata gat gaa att gct gct 192 Vai Lys 50 Glu Vai Glu Ala Leu 55 Leu Ser Ser Ile Asp 60 Glu Ile Ala Ala Βάά gct att ggt aaa aaa ata esc caa aat aat ggt ttg gat acc gaa 240 Lys 65 Ala Ile Gly Lys Lys 70 Ile HiS Gin Asn Asn 75 Gly Leu Asp Thr Glu 80 aat aat cac aat gga tca ttg tta gcg gga gct tat gca ata tca acc 288 Asn Asn His Asn Gly 85 Ser Leu Leu Ala Gly 90 Ala Tyr Ala Ile Ser 95 Thr cta ata caa aaa tta gat gga ttg aaa aat gaa gga tta aag gaa 336 Leu Ile Lys Gin 100 Lys Leu Asp Gly Leu 105 Lys Asn Glu Gly Leu 110 Lys Glu aaa att gat gcg gct aag aaa tgt tct gaa aca ttt act aat aaa tta 384 Lys Ile Asp 115 Ala Ala Lys Lys Cys 120 Ser Glu Thr Phe Thr 125 Asn Lys Leu aaa gaa aaa cac aca gat ctt ggt aaa gaa ggt gtt act gat gct gat 432 Lys Glu 130 Lys His Thr Asp Leu 135 Gly Lys Glu Gly Vai 140 Thr Asp Ala Asp gca aaa gaa gcc att tta aaa aca aat ggt act aaa act aaa ggt gct 480 Ala 145 Lys Glu Ala Ile Leu 150 Lys Thr Asn Gly Thr 155 Lys Thr Lys Gly Ala 160 aaa ctt aaa aaa tta ttt gaa tca ata aaa ate ttg tca aaa gca 528 Glu Glu Leu GÍy Lys 165 Leu Phe Glu Ser Vai 170 Glu Vai Leu Ser Lys 175 Ala gCt aaa gag atg ctt gct aat tca gtt aaa gag ctt aca age cct gtt 576 Ala Lys Glu Met 180 Leu Ala Asn Ser Vai 185 Lys Glu Leu Thr Ser 190 Pro Vai gtg 579

Vai

< 210 > 10 <211> 192 <212> PRT <213> Borrelia burgdorferi 66 <4 00> 10

Thr 1 Leu Phe Leu Phe 5 Ile Ser Cys Asn Asn 10 Ser Gly Lys Asp Gly 15 Asn Thr Ser Ala Asn 20 Ser Ala Asp Glu Ser 25 Vai Lys Gly Pro Asn 30 Leu Thr Glu Ile Ser 35 Lys Lys Ile Thr Asp 40 Ser Asn Ala Vai Leu 45 Leu Ala Vai Lys Glu 50 Va.l Glu Ala Leu Leu 55 Ser Ser Ile Asp Glu 60 Ile Ala Ala Lys Ala 65 Ile Gly Lys Lys Ile 70 His Gin Asn Asn Gly 75 Leu Asp Thr Glu Asn 80 Asa ΐ 11Ξ Asn Gly Ser 85 Leu Leu Ala’ Gly Ala 90 Tyr Ala Ile Ser Thr 95 Leu Ile Lys Gin Lys 100 Leu Asp Gly Leu Lys 105 Asn Glu Gly Leu Lys 110 Glu Lys Ile Asp Ala 115 Ala Lys Lys Cys Ser 120 Glu Thr Phe Thr Asn 125 Lys Leu Lys Glu Lys 130 HiS Thr Asp Leu Gly 135i Lys Glu Gly Vai Thr 140 Asp Ala Asp Ala Lys Glu 145 Ala Ile Leu Lys 150 Thr Asn Gly Thr Lys 155 Thr Lys Gly Ala Glu 160 Glu Leu Gly Lys Leu 165 Phe Glu f Ser Vai Glu 170 Vai Leu Ser Lys Ala 175 Ala Lys C3 JL InL Met Leu 180 Ala Asn Ser Vai Lys 185 Glu Leu Thr Ser Pro 190 Vai Vai

<210> 11 <211> 582 <212> ADN <213> Borrelia burgdorferi <22 0> <221> CD3 < 2 2 2 > (1) ... (582) <400> 11 67 atg act tta ttt tta ttt ata tct tgt aat aat tca ggg aaa gat ggg 48 Met 1 Thr Leu Phe Leu 5 Phe Ile Ser Cys Asn 10 Asn Ser Gly Lys Asp Gly 15 aat aca tct gca aat tct gct gat gag tct gtt aaa ggg cct aat ctt 96 Asn Thr Ser Ala 20 Asn Ser Ala Asp Glu 25 Ser Val Lys Gly Pro 30 Asn Leu u uu gca Sftf - 333. ac*n --- ·» nat· - tct HBt nnrt ? ' P ctt v - - tfa ctt gct 144 Thr Glu Ile 35 Ser Lys Lys Ile Thr 40 Asp Ser Asn Ala Val 45 Leu Leu Ala gtg aaa gag gtt gaa gcg ttg ctg tca tct ata gat gag ctt gct aaa 192 Vai Lys 50 Glu Val Glu Ala Leu 55 Leu Ser Ser Ile Asp Glu 60 Leu Ala Lys gct att ggt aaa aaa ata aaa aac gat ggt agt tta gat aat gaa gca 240 Ala 65 Ile Gly Lys Lys Ile 70 Lys Asn Asp Gly Ser 75 Leu Asp Asn Glu Ala 80 aat cac aac gaa tca ttg tta gca gga gct tat aca ata tca acc tta 2Θ8 Asn Arg Asn Glu Ser 85 Leu Leu Ala Gly Ala Tyr 90 Thr Ile Ser Thr 95 Leu ata aca caa 333 tta agt aaa tta aac gga tca gaa ggt tta aag gaa 336 Xle Thr Gin Lys 100 Leu Ser Lys Leu Asn 105 Gly Ser Glu Gly Leu 110 Lys Glu aag att gcc gca gct aag aaa tgc tct gaa gag ttt agt act aaa cta 384 Lys Ile Ala 115 Ala Ala Lys Lys Cys 120 Ser Glu Glu Phe Ser 125 Thr Lys Leu aaa gat aat cat gca cag ctt ggt ata cag ggc gtt act gat gaa aat 432 Lys Asp 130 Asn His Ala Gin Leu Gly 135 Ile Gin Gly Val 140 Thr Asp Glu Asn gca aaa 333 gct att tta aaa gca aat gca gcg ggt aaa gat aag ggc 480 Ala 145 Lys Lys Ala Ile Leu 150 Lys Ala Asn Ala Ala 155 Gly Lys Asp Lys Gly 160 gtt gaa gaa ctt gaa aag ttg tcc gga tca tta gaa age tta tca aaa 528 Val Glu Glu Leu Glu 165 Lys Leu Ser Gly Ser 170 Leu Glu Ser Leu Ser 175 Lys gca gct aaa gag atg ctt gct aat tca gtt aaa gag ctt aca age cct 576 Ala gtt Val Ala gtg Val Lys Glu 180 Met Leu Ala Asn Ser 185 Val Lys Glu Leu Thr 190 Ser Pro 582

<210> 12 <211> 193 <212> PRT <213> Borrelia burgdorferi 68 <4 00> 12

Thr 1 Leu Phe Leu Phe 5 Ile Ser Cys Asn Asn 10 Ser Gly Lys Asp Gly Asn 15 Thr Ser Ala Asn 20 Ser Ala Asp Glu Ser 25 Val Lys Gly Pro Asn 30 Leu Thr Glu Ile Ser 35 Lys Lys Ile Thr Asp 40 Ser Asn Ala Val Leu 45 Leu Ala Val Lys Glu 50 Vai Glu Ala Leu Leu 55 Ser Ser Ile Asp Glu 60 Leu Ala Lys Ala Ile 65 Gly Lys Lys Ile Lys 70 Asn Asp Gly Ser Leu 75 Asp Asn Glu Ala Asn Θ0 Arg Asn Glu Ser Leu 85 Leu Ala Gly Ala Tyr 90 Thr Ile Ser Thr Leu Ile 95 Thr Gin Lys Leu 100 Ser Leu Asn Glv 105 Ser Glu Gly Leu Lvs 110 Glu Lys Ile AI a Ala 115 Ala Lys Lys Cys Ser 120 Glu Glu Phe Ser Thr 125 Lys Leu Lys Asp Asn 130 Hls Ala Gin Leu Gly 135 Ile Gin Gly Val Thr 140 Asp Glu Asn Ala Lys 145 Lys Ala Ile Leu Lys 150 Ala Asn Ala Ala Gly 155 Lys Asp Lys Gly Val 160 Glu Glu Leu Glu Lys 165 Leu Ser Gly Ser Leu 170 Glu Ser Leu Ser Lys Ala 175 Ala Vai. Lys Glu Met 180 Leu Ala Asn Ser Val. 185 Lys Glu Leu Thr Ser 190 Pro Val

<210> 13 <211> 576 < 212 > ADN <213> Borrelia burgdorferi <220> <221> CDS <222> {!),,,(576) <4 00> 13 69 atg act tta ttt tta ttt ata tct tgt aat aat tca gga aaa gat ggg 4 Θ Met 1 Thr Leu Phe Leu 5 Phe Ile Ser Cys Asn 10 Asn Ser Gly Lys Asp 15 Gly aat gca tct gca aat tct gct gat' gag tct gtt aaa ggg cct aat ctt 96 Asn Ala Ser Ala 20 Asn Ser Ala Asp Glu 25 Ser Vai Lys Gly Pro 30 Asn Leu aca gaa ata agt aaa aaa att aca gaa tct aac gca gtt gtt ctg gcc 144 Thr Glu Ile 35 Ser Lys Lys Ile ! Thr 40 Glu Ser Asn Ala Vai 45 Val Leu Ala gtg aaa gaa gtt gag acc tta ctt gca tct ata gat gaa ctt gct acc 192 Vai Lys 50 Glu Vai. Glu Thr Leu 55 Leu Ala Ser Ile Asp 60 Glu Leu Ala Thr aaa gct att ggt aaa aaa I ata ggc aat aat ggt tta gag gcc aat cag 240 Lys 65 Ala Ile Gly Lys Lys 70 Ile Gly Asn Asn Gly 75 Leu Glu Ala Asn Gin 80 agt aãa aac aca tca ttg tta tca gga gct tat gca ata tct gac cta 288 Ser Lys Asn Thr Ser 85 Leu Leu Ser Gly Ala 90 Tyr Ala Ile Ser Asp 95 Leu ata gca gaa aaa tta aat gta ttg aaa aat gaa gaa tta aag gaa aag 336 Ile Ala Glu Lys 100 Leu Asn Vai Leu Lys 105 Asn Glu Glu Leu Lys 110 Glu Lys att gat aca gct aag caa tgt tct aca gaa ttt act aat aaa cta aaa 384 Ile Asp Thr 115 Ala Lys Gin Cys Ser 120 Thr Glu Phe Thr Asn 125 Lys Leu Lys agt gaa cat gca gtg ctt ggt ctg gac aat ctt act gat gat aat gca 432 Ser Glu 130 His Ala Vai Leu Gly 135 Leu Asp Asn Leu Thr 140 Asp Asp Asn Ala caa aga gct att tta aaa aaa cat gca aat aaa gat aag ggt gct gca 480 Gin 14S Arg Ala Ile Leu Lys 150 Lys His Ala Asn Lys 155 Asp Lys Gly Ala Ala 160 gaa ctt gaa aag tta ttt aaa gcg gta gaa aac tta tca aaa gca gct 528 Glu Leu Glu Lys Leu 165 Phe Lys Ala Vai Glu 170 Asn Leu Ser Lys Ala 175 Ala caa gac aca tta aaa aat gct gtt aaa gag ctt aca agt cct att gtg 576 Gin Asp Thr Leu 180 Lys Asn Ala Vai Lys 185 Glu Leu Thr Ser Pro 190 Ile Val

<210> 14 <211> 191 <212> PRT <213> Borrelia burgdorferí 70 <4 00> 14

Thr 1 Leu Phe Leu Phe 5 Ile Ser Cys Asn Asn 10 Ser Gly Lys Asp Gly 15 Asn Ala Ser Ala Asn 20 Ser Ala Asp Glu Ser 25 Vai Lys Gly Pro Asn 30 Leu Thr Glu 1.1 e Ser 35 Lys Lys Ile Thr Glu 40 Ser Asn Ala Vai Val 45 Leu Ala Val Lys Glu 50 Vai Glu Thr Leu Leu 55 Ala Ser Ile Asp Glu 60 Leu Ala Thr Lys Ala 65 Ile Gly Lys Lys Ile 70 Gly Asn Asn Gly Leu 75 Glu Ala Asn Gin Ser 80 lys Asn Thr ser Leu Θ5 Leu Ser Gly Ala .J.yr 90 Ala Ile Ser Asp Leu 95 Ile Ala Glu Lys Leu 100 Asn Vai Leu Lys Asn 105 Glu Glu Leu Lys Glu 110 Lys Ile Asp Thr Ala 115 Lys Gin Cys Ser Thr 120 Glu Phe Thr Asn Lys 125 Leu Lys Ser GlU His 130 Ala Vai Leu Gly Leu 135 Asp Asn Leu Thr Asp 140 Asp Asn Ala Gin Arg 145 Ala Ile Leu Lys Lys 150 His Ala Asn Lys Asp 155 Lys Gly Ala Ala Glu 160 Leu Glu Lys Leu Phe 165 Lys Ala Vai Glu Asn 170 Leu Ser Lys Ala Ala 175 Gin Asp Thr Leu Lys ISO Asn Ala Vai Lys Glu 185 Leu Thr Ser Pro Ile 190 Val

<210> 15 <211> 576 <212> ADN <213> Borrelia burgdorferi <220> <22l> C.DS <222> {!)...(576) <4 00> 15 71 71 atg act tta ttt tta ttt ata tct tgt aat aat tca aga aaa gat ggg 48 Met 1 Thr Leu Phe Leu 5 Phe Ile Ser Cys Asn 10 Asn Ser Arg Lys Asp 15 Gly aat gca tct aca aat tct gcc gat gag tct gtt aaa ggg cct aat ctt 96 Asn Ala Ser Thr 20 Asn Ser Ala Asp Glu 25 Ser Val Lys ciy Pro 30 Asn Leu aca gaa ata agt aaa aaa att aca gaa tct aac gca gtt gtt ctg gcc 144 Thr Glu Ile 35 Ser T.vç T.W.<5 ” + — Ile Thr 40 Glu Ser Asn ala v?l 45 Val T.ftu Ala gtg aaa gaa gtt gag acc tta ctt gca tct ata gat gaa ctt gct acc 192 Val Lys 50 Glu Val Glu Thr Leu 55 Leu Ala Ser Ile Asp Glu 60 Leu Ala Thr aaa gct att ggt aag aaa ata ggc aat aat ggt tta gag gcc aat cag 240 hys 65 Ala lie Gly Lys Lys 70 lie Gly Asn Asn Gly 75 Leu Glu Ala Asn Gin 80 agt aaa aac aca tca ttg tta tca gga gct tat gca ata tct gac cta 288 Ser Lys Asn Thr Ser 85 Leu Leu Ser Gly Ala 90 Tyr Ala Ile Ser Asp 95 Leu ata gca gaa aaa tta aat gta ttg aaa aat gaa gaa tta aag gaa aag 336 Ile Ala Glu Lys 100 Leu Asn Val Leu Lys 105 Asn Glu Glu Leu Lys 110 Glu Lys att gat aca gct aag caa tgt tct áca gaa ttt act aat aaa cta aaa 384 Ile Asp Thr 115 Ala Lys Gin Cys Ser 120 Thr Glu Phe Thr Asn 125 Lys Leu Lys agt gaa cat gca gtg ctt ggt ctg gac aat ctt act gat gat aat gca 432 Ser Glu 130 His Ala Val Leu Gly 135 Leu Asp Asn Leu Thr 140 Asp Asp Asn Ala caa aga gct att tta aaa aaa cat gca aat aaa gat aag ggt gct gca 480 Gin Arg 145 Ala 1 Ile Leu Lys 150 Lys His 1 Ala Asn Lys 155 Asp Lys Gly Ala Ala 160 gaa ctt gaa aag tta ttt âSS gcg gta gaa aac tta tca a&B gca gct 528 Glu Leu Glu Lys Leu 165 Phe Lys Ala Val Glu 170 Asn Leu Ser Lys Ala 175 Ala caa gac aca tta aaa aat gct gtt aaa gag ctt aca agt cct att gtg 576 Gin Asp Thr Leu 180 Lys Asn Alai vai Lys 1.85 Glu Leu Thr Ser Pro 190 Ile Val

<210> 16 < 211> 191 <212> PRT <213> Borrelia burgdorferi <400 > 16

Thr 1 Leu Phe Leu Phe 5 Ile Ser Cys Asn Asn 10 Ser Arg Lys Asp Gly 15 Asn Ala Ser Thr Asn 20 Ser Ala Asp Glu Ser 25 Val. Lys Gly Pro Asn 30 Leu Thr Glu Ile Ser 35 Lys Lys Ile Thr Glu 40 Ser Asn Ala Val Val 45 Leu Ala Val Lys Glu 50 Vai Glu Thr Leu Leu 55 Ala Ser Ile Asp Glu 60 Leu Ala Thr Lys Ala 65 He Gly Lys Lys Ile 70 Gly Asn Asn Gly Leu 75 Glu Ala Asn Gin Ser 80 Lys Asn Thr Ser Leu 85 Leu Ser Gly Ala Tyr 90 Ala Ile Ser Asp Leu 95 Ile Ala Glu Lys Leu 100 Asn Vai Leu Lys Asn 105 Glu Glu Leu i*ys Glu 110 Lys Ile Asp Thr Ala 115 Lys Gin Cys Ser Thr 120 Glu Phe Thr Asn Lys 125 Leu Lys Ser Glu hiS 130 m α tl. Λ voa. V iImJO Wi f*l .. v*^jr T U 135 & e?ri Thr Ben 140 len "~~·ιτ Asn A Xa Gin Arg 145 AI a Il,e Leu Lys Lys 150 HiS Ala Asn Lys Asp 155 Lys Gly Ala Ala Glu 160 Leu Glu Lys Leu Phe 165 Lys Ala val Glu Asn 170 Leu Ser Lys Ala Ala 175 Gin Asp Thr Leu Lys 180 Asn Ala Vai Lys Glu 185 Leu Thr Ser Pro Ile 190 Val < 210 > 17 <211> 573

<212> ADN <213> Borrelia burgdorferi <220> <221> CDS <222> (1)...(573) 400> 17 73 atg act tta ttt tta ttt ata tct tgt aat aat tca ggg aaa gat ggg 48 Met 1 Thr Leu Phe Leu 5 Phe Ile Ser Cys Asn 10 Asn Ser Gly Lys Asp 15 Gly aat aca tct gca aat tct gct gat gag tct gtt aaa ggg cct aat ctt 96 Asn Thr Ser Ala 20 Asn Ser Ala Asp Glu 25 Ser Vai Lys Gly Pro 30 Asn Leu aca gaa ata agt aaa aaa att aca gaa tct aac gca gtt gtt etc gcc 144 Thr Glu Ile 35 Ser Lys Lys Ile Thr 40 Glu Ser Asn Ala Val 45 Val Leu Ala gtg aaa gaa gtt gaa act ttg ctt aca tct ata gat gag ctt gct aaa 192 Vai Lys 50 G.lu Vai Glu Thr Leu 55 Leu Thr Ser Ile Asp 60 Glu Leu Ala Lys gct att ggt aaa aaa ata aaa aac gat gtt agt tta gat aat gag gca 240 Ala 65 Ile Gly Lys Lys Ue 70 Lys Asn Asp Vai Ser 75 Leu Asp Asn Glu Ala 80 gat cac aac gga tca tta ata tca gga gca tat tta att tca aac tta 288 Asp His Asn Gly Ser 85 Leu Ile Ser Gly Ala 90 Tyr Leu Ile Ser Asn 95 Leu ata aca aaa <3,<3â ata agt gca ata aaa gat tca gga gaa ttg aag gca 336 Ile Thr Lys Lys 100 Ile Ser Ala Ile Lys 105 Asp Ser Gly Glu Leu 110 Lys Ala gaa att gaa aag gct aag aaa tgt tct gaa gaa ttt act gct aaa tta 384 Glu Ile Glu 115 Lys Ai a Lys Lys Cys 120 Ser Glu Glu Phe Thr 125 Ala Lys Leu aaa ggt gaa cac aca gat ctt ggt aaa gaa ggc gtt act gat gat aat 432 Lys Gly 130 Glu His Thr Asp Leu 135 Gly Lys Glu Gly Vai 140 Thr Asp Asp Asn gca aaa aa a gcc att tta aaa aca aat aat gat aaa act aag ggc gct 480 Ala 145 Lys Lys Ala Ile Leu 150 Lys Thr Asn Asn Asp 155 Lys Thr Lys Gly Ala 160 gat gaa ctt gaa aag tta ttt Ç[S3 tca gta aaa aac ttg tca 33SI gca 528 Asp Glu Leu Glu Lys 165 Leu Phe Glu Ser Vai 170 Lys Asn Leu Ser Lys 175 Ala gct Ala aaa Lys gag Glu atg Met 1Θ0 ctt Leu act Thr aat Asn tca Ser gtt Vai 185 aaa Lys gag Glu ctt Leu aca Thr age Ser 190 cct Pro 573

< 210 > 18 < 211> 190 <212> PRT <213> Borrelia burgdorferi < 4 0 0 > 18 74

Thr 1 Leu Phe Leu Phe 5 Ile Ser Cys Asn Asn 10 Ser Gly Lys Asp Gly Asn 15 Thr Ser Alei Asn 20 Ser Ala Asp Glu Ser 25 Vai Lys Gly Pro Asn 30 Leu Thr Glu Ile Ser 35 Lys Lys Ile Thr Glu 40 Ser i Asn Ala Vai Vai 45 Leu Ala Vai Lys Glu 50 Vai Glu Thr Leu Leu Thr 55 Ser 1 Ile Asp Glu 60 Leu Ala Lys Ala Ile 65 Gly Lys Lys Ile Lys 70 Asn Asp Vai Ser Leu 75 Asp Asn Glu Ala Asp 80 His Asn Gly Ser Leu 85 Ile Ser Gly Al.a Tyr 90 Leu Ile Ser Asn Leu Ile 95 Thr Lys Lys Ile 100 Ser Ala Ile Lys Asp 105 Ser Gly Glu Leu Lys 110 Ala Glu Ile Glu Lys 115 Ala Lys Lys Cys Ser 120 Glu Glu Phe Thr Ala 125 Lys Leu Lys Gly Glu .130 His Thr Asp Leu Gly Lys1 135 Glu Gly Vai. Thr 140 Asp Asp Asn Ala Lys 145 Lys Ala Ile Leu Lys 150 Thr Asn Asn Asp Lys 155 Thr Lys Gly Ala Asp 160 Glu Leu Glu Lys Leu 165 Phe Glu Ser Vai Lys 170 Asn Leu Ser Lys Ala Ala 175 Lys Glu Met Leu 180 Thr Asn Ser Vai·· 1 Lys 185 Glu Leu Thr Ser Pro 190 <210> 19 <211> 553 <212> ADN <213> Borrelia burgdorferi <220> <221> CDS <222> (1).- - (553) <400> 19 75 atg act tta ttt tta ttt ata tct tgt aat aat tea gga aaa gat ggg 48 Met Thr Leu Phe Leu Phe Ile Ser Cys Asn Asn Ser Gly Lys Asp Gly 1 5 10 15 aat aca tct gca aat tct gct gat gag tct gtt aaa ggg cct aat ctt 96 Asn Thr Ser Ala Asn Ser Ala Asp Glu Ser Vai Lys Gly Pro Asn Leu 20 25 30 a ca gaa ata agt aaa aaa att aca gaa tct aac gca gtt gtt ctg gct 144 Thr Glu Ile Ser Lys Lys I.le Thr Glu Ser Asn Ala Vai Val Leu Ala 35 40 45 gtg aaa gaa att gaa act ttg ctt gca tct ata gat gaa ctt gct act 192 Vai Lys Glu Ile Glu Thr Leu Leu Ala Ser Ile Asp Glu Leu Ala Thr 50 55 60 aaa gct att ggt aaa aaa ata gat aac aat gct ggt ttg ggt gct gaa 240 Lys Ala Ile Gly Lys Lys Ile Asp Asn Asn Ala Gly Leu Gly Ala Glu 65 70 75 80 gtg ggt caa aac gga tea ttg cta gca gga gct tat gca ate tea act 288 Vai Gly Gin Asn Gly Ser Leu Leu Ala Gly Ala Tyr Ala Ile Ser Thr 85 90 95 gta ata ata gaa aaa ttg age aca tta aaa aat gta gaa gaa tta aaa 336 Vai Ile Ile Glu Lys Leu Ser Thr Leu Lys Asn Vai Glu Glu Leu Lys 100 105 1.10 gaa att aca aag gct aag gat tgt tct gaa aaa ttc act aaa aaa 384 Glu Lys Ile Thr Lys Ala Lys ASp Cys Ser Glu Lys Phe Thr Lys Lys 115 120 125 tta 33.3 gat age ege gca gag ctt ggt aaa aaa gat gee agt < gat gat 432 Leu Lys Asp Ser Arg Ala Glu Leu Gly Lys Lys Asp Ala ; Ser Asp Asp 130 1.35 140 gat gca aaa aaa gct att tta 333 aca aat caa gct aac gat i aag ggt 480 Asp Ala Lys Lys Ala Ile Leu Lys Thr Asn Gin Ala Asn Asp : Lys Gly 145 150 .155 160 gct aaa gaa ctt aaa gag tta ttt gaa gca gta gaa age ttg 1 tea aaa 528 Ala Lys Glu Leu Lys Glu Leu Phe Glu Ala Vai Glu Ser : Leu : Ser Lys 165 170 175 gcg gct aaa gag atg cta aac aag t 553 Ala Ala Lys Glu Met Leu Asn Lys 180

<210> 20 <211> 183 <212> PRT <213> Borrelia burgdorferi 76 <400> 20

Thr Leu Phe Leu Phe Ile Ser Cys Asn Asn Ser Gly Lys Asp Gly Asn 1 5 10 15 Thr Ser Ala Asn Ser Ala Asp Glu Ser Vai Lys Gly Pro Asn Leu Thr 20 25 30 Glu lie Ser Lys Lys Ile Thr Glu Ser Asn Ala Vai Vai Leu Ala Vai 35 40 45 Lys Glu Ile Glu Thr Leu Leu Ala Ser Ile Asp Glu Leu Ala Thr Lys 50 55 60 Ala Xle Gly Lys Lys Ile Asp Asn Asn Ala Gly Leu Gly Ala Glu Val 65 70 75 80 Gly Gin Asn Gly Ser Leu Leu Alâ G.ly Ala Tyr Ala Ile Ser Thr Val 85 90 95 Xle Ile Glu Lys Leu Ser Thr Leu Lys Asn Vai Glu Glu Leu Lys Glu 100 105 110 Lys Ile Thr Lys Ala Lys Asp Cys Ser Glu Lys Phe Thr Lys Lys Leu 115 120 125 Lys Asp Ser Arg Ala Glu Leu Gly Lys Lys Asp Ala Ser Asp Asp Asp 130 135 140 Ala Lys Lys Ala Ile Leu Lys Thr Asn Gin Ala Asn Asp Lys Gly Ala 145 150 155 160 Lys Glu Leu Lys Glu Leu Phe Glu Ala Vai Glu Ser Leu Ser Lys Ala 165 170 175 Ala Lys Glu Met Leu Asn Lys 180

< 210 > 21 <211> 582 <212> ADN <213> Borrelia burgdorferi <220> <221> CDS < 2 2 2 > (1) ... (582) <400> 21 77 atg act tta ttt tta ttt ata tct tgt aat aat tca gga aaa gat ggg 48 Met 1 Thr Leu Phe Leu 5 Phe Ile Ser Cys Asn 10 Asn Ser Gly Lys Asp 15 Gly aat aca tct gca aat tct gct gat gag tct gtt 33B ggg cct aat ctt 96 Asn Thr Ser Ala 20 Asn Ser Ala Asp Glu 25 Ser Vai Lys Gly Pro 30 Asn Leu aca gaa ata agt aaa aaa att aca gaa tct aac ÇJGti gtt gtt ctg gct 144 Thr Glu Ile 35 Ser Lys Lys Ile Thr 40 Glu Ser Asn Ala Val 45 Val Leu Ala gtg aaa gaa att gaa act ttg ctt gca tct ata gat gaa ctt gct act 192 Vai Lys 50 Glu Ile Glu Thr Leu 55 Leu 1 Ala Ser Ile Asp 60 Glu Leu Ala Thr aaa gct 1 att ggt aaa aaa ata caa caa aat ggt ggt tta gct gtc gaa 240 Lys 65 Ala Ile Gly Lys Lys 70 Ile Gin Gin Asn Gly 75 Gly Leu Ala Val Glu 80 gcg ggg cat aat gga aca ttg tta gca ggt gct tat aca ata tca 933 288 Ala Gly His Asn Gly 85 Thr Leu 1 Leu Ala Gly 90 Ala Tyr Thr Ile Ser 95 Lys cta ata aca caa aaa tta gat gga ttg aaa aat tca gaa aaa tta aag 336 Leu Ile Thr Gin 100 Lys Leu Asp Gly 1 Leu 105 Lys Asn Ser Glu Lys 110 Leu Lys gaa aaa att gaa aat gct aag aaa tgt tct gaa gat ttt act aaa aaa 384 Glu Lys Ile 115 Glu Asn Ala Lys Lys 120 Cys Ser Glu Asp Phe 125 Thr Lys Lys cta Ç33 gga gaa cat caa ctt gga att gaa aat gtt act gat gag 432 Leu Glu 130 Gly Glu Hís Ala Gin 135 Leu Gly Ile Glu Asn 140 Val Thr Asp Glu aat gca aaa aaa gct att tta ata aca gat gca gct aaa gat aag ggc 480 Asn 145 Ala Lys Lys Ala Ile 150 Leu Ile Thr Asp Ala 155 Ala Lys Asp Lys Gly 160 gct ÇCct gag ctt gaa aag cta ttt aaa gca gta gaa aac ttg gca aaa 528 Ala Ala Glu Leu Glu 165 Lys Leu Phe Lys Ala 170 Vai Glu Asn Leu Ala 175 Lys gca gct aaa gag atg ctt gct aat tca gtt aaa gag ctt aca agt cct 576 Ala Ala Lys Glu 180 Met Leu Ala Asn Ser 185 Vai Lys Glu Leu Thr 190 Ser Pro att gtg 582 T Λ _ tf- 1

<210> 22 <211> 193 <212> PRT <213> Borrelia burgdorferi 78 < 4 Ο Ο > 22

Thr .1 Leu Phe Leu Phe 5 Ile Ser Cys Asn Asn 10 Ser Gly Lys Asp Gly Asn 15 Thr Ser Ala Asn 20 Ser Ala Asp Glu Ser 25 Vai Lys Gly Pro , Asn : 30 Leu Thr Glu Ile Ser 35 Lys Lys Ile Thr Glu Ser 40 Asn Ala Vai Val 45 Leu Ala Val Lys Glu 50 Ile Glu Thr Leu Leu 55 Ala Ser Ile Asp Glu 60 Leu Ala Thr Lys Ala 65 Ile Gly Lys Lys Ile 70 Gin Gin Asn Gly Gly Leu 75 Ala Val Glu Ala 80 Gly His Asn Gly Thr 85 Leu Leu Ala Gly Ala 90 Tyr Thr Ile Ser Lys 95 Leu Ile Thr Gin Lys 100 Leu Asp Gly Leu Lys 105 Asn Ser Glu Lys Leu 110 Lys Glu Lys Ile Glu 115 Asn Ala Lys Lys Cys Ser 120 Glu Asp Phe Thr 125 Lys Lys Leu Glu Gly 130 Glu His Ala Gin Leu 135 Gly Ile Glu Asn Val 140 Thr Asp G.1.U Asn Ala 145 tys Lys Ala Ile Leu 150 Ile Thr Asp Ala Ala Lys 155 Asp Lys Gly Ala 160 Ala Glu Leu Glu Lys 165 Leu Phe Lys Ala Vai 170 Glu Asn Leu Ala Lys 175 Ala Ala Lys Glu Met 180 Leu Ala Asn Ser Val 185 Lys Glu Leu Thr ser 190 Pro Ile <210> 23 <211> 1128

< 212 > ADN <213> Sequência Artificial < 2 2 Ο >

<223> Quimera OspC

<221> CDS <2 2 2> (1) . . . (1128) <400> 23 79 atg gct tgt aat aat tca ggg Θ3 3 gat ggg 33t 3C 3 tct gca aat tct 48 Met 1 Ala Cys Asn Asn 5 Ser Gly Lys Asp Gly 10 Asn Thr Ser Ala Asn 15 Ser gct gat gag tct gtt aaa ggg cct aat ctt ãC9 Ç3â ata agt aaa aaa 96 Ala Asp Glu Ser 20 Val Lys Gly Pr o Asn 25 Leu Thr Glu Ile Ser 30 Lys Lys att acg gat tct aat gcg gtt tta ctt gct gtg 333 gag gtt gaa gcg 144 Ile Thr Asp 35 Ser Asn Ala Val Leu 40 Leu Ala Val Lys Glu 45 Val Glu Ala ttg ctg tca tct ata gat gaa att gct gct aaa gct att ggt aaa aaa 192 Leu Leu 50 Ser Ser Ile Asp Glu 55 Ile Ala Ala Lys Ala 60 Ile Gly Lys Lys ata cac caa aat aat ggt ttg gat acc gaa tat aat cac aat gga tca 240 Ile 65 His Gin Asn Asn Gly 70 Leu Asp Thr Glu Tyr 75 Asn His Asn Gly Ser 80 ttg tta gcg gga gct tat gca ata tca acc cta ata 333 caa aaa tta 288 Leu Leu Ala Gly Ala 85 Tyr Ala Ile Ser Thr 90 Leu Ile Lys Gin Lys 95 Leu 80 gat gga ttg aaa aat gaa gga tta aag gaa aaa att gat gcg gct aag 336 Asp Gly Leu Lys 100 Asn Glu Gly Leu Lys 105 Glu Lys Ile Asp Ala 110 Ala Lys aaa tgt tct gaa aca ttt act aat aaa tta aaa gaa aaa cac aca gat 384 Lys Cys Ser 115 Glu Thr Phe Thr Asn 120 Lys Leu Lys Glu Lys 125 His Thr Asp ctt ggt aaa gaa ggt gtt act gat gct gat gca aaa gaa gee att tta 432 Leu Gly 130 Lys Glu Gly Val Thr 135 Asp Ala Asp Ala Lys 140 Glu Ala Ile Leu aaa aca aat ggt act aaa act aaa ggt gct gaa gaa ctt gga tta 480 Lys 145 Thr Asn ! Gly Thr Lys 150 Thr Lys Gly 1 Ala Glu 155 Glu Leu Gly Lys Leu 160 ttt gaa tca gta gag gtc ttg tca aaa gca gct aaa gag atg ctt gct 528 Phe Glu Ser Vai Glu 165 Val Leu Ser Lys Ala 170 Ala Lys Glu Met Leu 175 Ala aat tca gtt aaa gag ctt aca age cct gtt gtg gca gaa agt cca gee 576 Asn Ser Vai Lys 180 Glu Leu Thr ! Ser Pro 185 Val Val Ala Glu Ser 190 Pro Ala atg gta aat aat tca ggg ctâct gat ggg aat 3G3 tct gca aat tct gct 624 Met Vai Asn 195 Asn Ser Gly Lys, Asp 200 Gly Asn Thr Ser Ala 205 Asn Ser Ala gat gag tct gtt aaa ggg cct aat ctt aca gaa ata agt aaa aaa att 672 Asp Glu 210 Ser Vai Lys Gly Pro 215 Asn Leu Thr Glu Ile 220 Ser Lys Lys Ile aca gaa tct aac gca gtt gtt etc gee gtg aaa gaa gtt gaa act ttg 720 Thr 225 Glu Ser Asn Ala Val 230 Val Leu Ala Val Lys 235 Glu Val Glu Thr Leu 240 ctt aca tct ata gat gag ctt gct aaa gct att ggt aaa aaa ata aaa 768 Leu Thr Ser Ile Asp 245 Glu Leu Ala Lys Ala 250 Ile Gly Lys Lys Ile 255 Lys aac gat gtt agt tta gat aat gag gca gat cac aac gga tca tta ata 816 Asn Asp Vai Ser 260 Leu ASp Asn Glu Ala 265 Asp His Asn Gly Ser 270 Leu Ile tca gga gca tat tta att tca clclC tta ata aca aaa aaa ata agt gca 864 Ser Gly Ala 275 Tyr Leu Ile Ser Asn 280 Leu Ile Thr Lys Lys 2B5 Ile Ser Ala ata aaa gat tca gga gaa ttg aag gca gaa att gaa aag gct aag aaa 912 Ile Lys 290 Asp Ser Gly Glu Leu Lys 295 Ala Glu Ile Glu 300 Lys Ala Lys Lys tgt tct gaa gaa ttt act gct aaa tta aaa ggt gaa cac aca gat ctt 960 Cys 305 Ser Glu Glu Phe Thr 310 Ala Lys Leu Lys Gly 31.5 Glu His Thr Asp Leu 320 ggt aaa gaa ggc gtt act gat gat aat gca aaa aaa gee att tta aaa 1008 Gly Lys Glu Gly Val 325 Thr Asp Asp Asn Ala 330 Lys Lys Ala Ile Leu 335 Lys aca aat aat gat aaa act aag ggc gct gat gaa ctt gaa aag tta ttt 1056 Thr Asn Asn Asp 340 Lys Thr Lys Gly Ala 345 Asp Glu Leu Glu Lys 350 Leu- Phe 81 gaa Glu tca Ser gta Vai 355 aaa Lys aac Asn ttg Leu tca Ser aaa Lys 360 gea Ala gct aaa Lys gag Glu atg Met 365 ctt Leu act Thr aat Asn 1104 tca Ser gtt vai 370 aaa Lys gag Glu ctt Leu aca Thr age Ser 375 taa tr 1128

<210> 24 <211> 374 <212 > PRT <213> Sequência Artificial < 2 2 0 > <223> Quimera OspC < 4 0 0 > 2 4 82

Ala 1 Cys Asn Asn Ser 5 Gly Lys Asp Gly Asn 10 Thr Ser Ala Asn Ser 15 Ala Asp Glu Ser Vai 20 Lys Gly Pro Asn Leu 25 Thr Glu Ile Ser Lys 30 Lys Ile Thr Asp Ser Asn 35 Ala Val Leu Leu 40 Ala Val kys Glu Val 45 Glu Ala Leu Leu Ser 50 Ser Ile Asp Glu Ile 55 Ala Ala Lys Ala Ile 60 Gly Lys Lys Ile His 65 Gin Asn Asn Gly Leu 70 Asp Thr Glu Tyr Asn 75 His Asn Gly Ser Leu 80 Leu Ala Gly Ala Tyr 85 Ala Ue Ser Thr Leu 90 Ile Lys Gin kys Leu Asp 95 Gly Leu Lys Asn 100 Glu Gly Leu Lys Glu 105 Lys Ile Asp Ala Ala 110 Lys Lys Cys Ser Glu Thr 115 Phe Thr Asn Lys 120 Leu Lys Glu Lys His 125 Thr Asp Leu Gly Lys 130 Glu Gly Vai Thr Asp 135 Ala Asp Ala Lys Glu 140 Ala Ile Leu Lys Thr 145 Asn Gly Thr Lys Thr 150 Lys Gly Ala Glu Glu 155 Leu Gly Lys Leu Phe 160 Glu Ser Vai Glu Val 165 Leu Ser Lys Ala Ala 170 Lys Glu Met Leu Ala 175 Asn Ser Vai Lys Glu 180 Leu Thr Ser Pro Val 185 Val Ala Glu Ser Pro 190 Ala Met Vai Asn Asn Ser 195 Gly Lys Asp Gly 200 Asn Thr Ser Ala Asn 205 Ser Ala Asp Glu Ser 210 Vai Lys Gly Pro Asn 215 Leu Thr Glu Ile Ser 220 Lys Lys Ile Thr Glu 225 Ser Asn Ala Val Val 230 Leu Ala Val Lys Glu 235 Val Glu Thr Leu Leu 240 Thr Ser Ile Asp Glu 245 Leu Ala Lys Ala Ile 250 Gly Lys Lys Ile Lys 255 Asn Asp Vai Ser Leu 260 Asp Asn Glu Ala Asp 265 His Asn Gly Ser Leu 270 Ile Ser Gly Ala Tyr Leu 275 Ile Ser Asn Leu 280 Ile Thr Lys Lys Ile 285 Ser Ala Ile Lys Asp 290 Ser Gly Glu Leu Lys 295 Ala Glu Ile Glu Lys 300 Ala Lys Lys Cys Ser 305 Glu Glu Phe Thr Ala 310 Lys Leu Lys Gly Glu 315 His Thr Asp Leu Gly 320 Lys Glu Gly Vai Thr 325 Asp Asp Asn Ala Lys 330 Lys Ala Ile Leu Lys 335 Thr Asn Asn Asp Lys 340 Thr Lys Gly Ala Asp 345 Glu Leu Glu Lys Leu 350 Phe Glu Ser Vai Vai Lys 370 Lys Asn 355 Glu Leu Leu Thr Ser Ser Lys Ala 360 Ala Lys Glu Met Leu 365 Thr Asn Ser <210> 25 < 211> 1124

< 212 > ADN <213> Sequência Artificial <220> <223> Quimera OspC <2 21> CDS <222> (1) . ., . (1124 ) < 4 0 0 > 25 84 atg gct tgt aat aat tca ggg elâcl Çf St ggg aat aca tct gca aat tct 48 Met 1 Ala Cys Asn Asn 5 Ser Gly 1 Lys Asp Gly 10 Asn Thr Ser Ala Asn 15 Ser gct gat gag tct gtt clôcl ggg cct aat ctt aca gaa ata agt aaa aaa 96 Ala Asp Glu Ser 20 Vai Lys Gly 1 Pro Asn 25 Leu Thr Glu Ile Ser 30 Lys Lys att acg gat tct aat gcg gtt tta ctt gct gtg aaa gag gtt gaa gcg 144 Ile Thr Asp 35 Ser Asn Ala Val Leu 40 Leu Ala Val Lys Glu 45 Val Glu Ala ttg ctg tca tct ata gat gaa att gct gct aaa gct att ggt aaa aaa 192 Leu Leu 50 Ser Ser Ile Asp Glu 55 Ile Ala Ala Lys Ala 60 Ile Gly Lys Lys ata cac caa aat aat ggfc ttg gat acc gaa tat aat cac aat gga tca 240 Ile 65 His Glu Asn Asn Gly 70 Leu Asp Thr Glu Tyr 75 Asn His Asn Gly Ser 80 ttg tta gcg gga gct tat gca ata tca acc cta ata aaa caa aaa tta 288 Leu L'eu Ala Gly Ala 85 Tyr Ala Ile Ser Thr 90 Leu Ile Lys Gin Lys 95 Leu gat gga ttg aaa aat gaa gga tta aag gaa aaa att gat g«=g gct aag 336 Asp Gly Leu Lys 100 Asn Glu Gly Leu Lys 105 Glu Lys Ile Asp Ala 110 Ala Lys aaa tgt tct gaa aca ttt act aat aaa tta aaa gaa aaa cac aca gat 384 T » „ _ r* - — ri pV»A & e*v» T «re T Glu 7,1*0 His Thr Asp 4¾ s—i y ca 11.5 120 •—.r — “J — -*jr - 125 ctt ggt dei cl gaa ggt gtt act gat gct gat gca aaa gaa gcc att tta 432 Leu Gly 130 Lys Glu Gly Vai Thr Asp 135 Ala Asp Ala Lys 140 Glu Ala Ile Leu aaa aca aat ggt act aaa act aaa ggt gct gaa gaa ctt gga aaa tta 480 Lys 145 Thr Asn Gly Thr Lys 150 Thr Lys Gly Ala Glu 155 Glu Leu Gly Lys Leu 160 ttt gaa tca gta gag gtc ttg tca aaa gca gct aaa gag atg ctt gct 528 Phe Glu Ser Vai Glu 165 Val Leu Ser Lys Ala 170 Ala Lys Glu Met Leu 175 Ala 85 aat tca gtt aaa gag ctt aca age cct gtt gtg gca gaa agt cca gee 576 Asn Ser Val Lys 180 Glu Leu Thr Ser Pro 185 Val Val Ala Glu Ser 190 Pro Ala atg gta aat aat tca gga aaa gat ggg aat aca tct gca aat tct gct 624 Met Vai Asn 195 Asn Ser Gly Lys Asp 200 Gly Asn Thr Ser Ala 205 Asn Ser Ala gat gag tct gtt aaa ggg cct aat ctt aca gaa ata agt aaa aaa att 672 Asp Glu 210 Ser val Lys Gly Pro 215 Asn Leu Thr Glu Ile 220 Ser Lys Lys Ile aca gaa tct cikâG gca gtt gtt ctg gct gtg aaa gaa att gaa act ttg 720 Thr 225 Glu Ser Asn Ala Val 230 Val Leu Ala Val Lys 235 Glu Ile Glu 1 Thr Leu 240 ctt gca tct ata gat gaa ctt gct act aaa gct att ggt aaa aaa ata 768 Leu Ala Ser Ile Asp 245 Glu Leu Ala Thr Lys 250 Ala Ile Gly Lys Lys 255 Ile ca a caa aat ggt ggt tta gct gtc gaa gcg ggg cat aat gga aca ttg 816 Gin Gin Asn Gly 260 Gly Leu Ala Val Glu 2 65 Ala Gly His Asn Gly 270 Thr Leu tta gca ggt gct tat aca ata tca •aaa Ca cl Cl cta ata aca caa aaa tta gat 864 Leu Ala Gly 275 Ala Tyr Thr Ile Ser 280 Lys Leu Ile Thr Gin 285 Lys Leu Asp gga ttg aaa aat tca gaa aaa tta aag gaa aaa att gaa aat gct aag 912 Gly Leu 290 Lys Asn Ser Glu Lys 295 Leu Lys Glu Lys Ile 300 Glu Asn Ala Lys aaa tgt tct gaa gat ttt act aaa aaa cta gaa gga gaa cat gcg caa 960 Lys 305 Cys Ser Glu Asp Phe 310 Thr Lys Lys Leu Glu 315 Gly Glu His Ala Gin 320 ctt gga att gaa aat gtt act gat gag aat gca aaa aaa gct att tta 1008 Leu Gly Ile Glu Asn 325 Val Thr Asp Glu Asn 330 Ala Lys Lys Ala Ile 335 Leu ata aca gat gca gct aaa gat aag ggc gct gca gag ctt gaa aag cta 1056 Ile Thr Asp Ala 340 Ala Lys Asp Lys Gly 345 Ala Ala Glu Leu Glu 350 Lys Leu ttt aaa gca gta gaa aac ttg gca aaa gca gct aaa gag atg ctt gct 1104 Phe Lys Ala 355 Val Glu Asn Leu Ala 360 Lys Ala Ala Lys Glu 365 Met Leu Ala ããt tG« gtt 555 gUg CtC 50

Asn Ser Vai Lys Glu Leu 370

<210> 26 <211> 373 <212> PRT <213> Sequência Artificial 86 <220> <223> Quimera OspC <400> 26 87

Ala Cys 1 Asn Asn Ser 5 Gly Lys Asp Gly Asn 10 Thr Ser Ala Asn Ser 15 Ala Asp Glu Ser Va.1 20 Lys Gly Pro Asn Leu 25 Thr Glu Ile Ser Lys 30 Lys Ile Thr Asp Ser 35 Asn Ala Vai Leu Leu Ala 4 0’ Vai Lys Glu Vai 45 Glu Ala Leu Leu Ser 50 Ser Ile Asp Glu Ile 55 Ala Ala Lys Ala Ile 60 Gly Lys Lys Ile His Gin 65 Asn Asn Gly Leu 70 Asp Thr Glu Tyr Asn 75 His Asn Gly Ser Leu 80 Leu Ala Gly Ala Tyr 85 Ala Ile Ser Thr Leu 90 Ile Lys Gin Lys Leu 95 Asp Gly Leu Lys Asn 100 Glu Gly Leu Lys Glu 105 Lys Ile Asp Ala Ala 110 Lys Lys Cys Ser Glu 115 Thr Phe Thr Asn Lys Leu 120 Lys Glu Lys His 125 Thr Asp Leu Gly Lys 130 Glu Gly Va.l Thr Asp 135 Ala Asp Ala Lys Glu 140 Ala Ile Leu Lys Thr Asn 145 Gly Thr Lys Thr 150 Lys Gly Ala Glu | Glu 155 Leu Gly Lys Leu Phe 160 Glu Ser Vai Glu Vai 165 Leu Ser 1 Lys Ala Ala 170 Lys Glu Met Leu Ala 175 Asn Ser Vai Lys Glu 180 Leu Thr Ser Pro Vai 185 Vai Ala Glu Ser Pro 190 Ala Met Vai Asn Asn 195 Ser Gly Lys Asp Gly Asn . 200 Thr Ser Ala Asn 205 Ser Ala Asp Glu Ser 210 Vai Lys Gly Pro Asn 215 Leu Thr Glu Ile Ser 220 Lys Lys Ile Thr Glu Ser 225 Asn Ala Vai Vai 230 Leu Ala Vai Lys Glu 235 Ile Glu Thr Leu Leu 240 Ala Ser Ile Asp Glu 245 Leii Ala Thr Lys Ala 250 Ile Gly Lys Lys Ile 255 Gin Gin Asn Gly Gly 260 Leu Ala Vai Glu Ala 265 Gly His Asn Gly Thr 270 Leu Leu Ala Gly Ala 275 Tyr Thr Ile Ser Lys Leu 280 Ile Thr Gin Lys 285 Leu Asp Gly Leu Lys 290 Asn Ser G1 ΰ Lys Leu 295 Lys Glu Lys Ile Glu 300 Asn Ala Lys Lys Cys Ser 305 Glu Asp Phe Thr 310 Lys Lys Leu Glu Gly 315 Glu His Ala Gin Leu 320 Gly rie G.lu Asn Vai 325 Thr Asp Glu Asn Ala 330 Lys Lys Ala Ilê Leu 335 Ile Thr Asp Ala AX a 340 Lys Asp Lys Gly Ala 345 Ala Glu Leu Glu Lys 350 Leu Phe Lys Ala Ser Vai 370 Vai 355 Lys Glu Glu Asn Leu Leu Ala Lys Ala 360 Ala Lys Glu Met 365 Leu Ala Asn <210> 27 < 211> 1137

< 212 > ADN <213> Sequência Artificial <22 0>

<223> Quimera QspC <221> CDS <222> (1) . . . (1137) <400> 27 89 89 atg gct tgt aat aat tca ggg aaa gat ggg aat aca tct gca aat tct Met 1 Ala Cys Asn Asn 5 Ser Gly Lys Asp Gly 10 Asn Thr Ser Ala Asn 15 Ser gct gat gag tct gtt âcãct ggg cct aat ctt aca gaa ata aat aaa âââ Ala Asp Glu Ser 20 Val Lys Gly Pro Asn 25 Leu Thr Glu Ile Asn 30 Lys Lys att acg gat tct aat gcg gtt t t Ui ctt gct gtg aaa gag gtt gaa gcg Ile Thr Asp 35 Ser Asn Ala Val Leu 40 Leu Ala Val Lys Glu 45 Val Glu Ala ttg ctg tca tct ata gat gaa att gct gct aaa gct att ggt aaa aaa Leu Leu 50 Ser Ser lie Asp Glu 55 lie Ala Ala Lys Ala 60 Ile Gly Lys Lys ata cac caa aat aat ggt ttg gat acc gaa aat aat cac aat gga tca Ile 65 His Gin Asn Asn Gly 70 Leu Asp Thr Glu Asn 75 Asn Hls Asn Gly Ser 80 ttg tta gcg gga gct tat gca ata tca acc cta ata Sâã caa aaa tta Leu Leu Ala Gly Ala 85 Tyr Ala Ile Ser Thr 90 Leu Ile Lys GXn Lys 95 Leu gat gga ttg aaa aat gaa gga tta aag gaa aaa att gat gcg gct aag Asp Gly Leu Lys 100 Asn Glu Gly Leu Lys 105 Glu Lys Ile Asp Ala 110 Ala Lys aaa tgt tct gaa aca ttt act aat aaa tta aaa gaa aaa cac aca gat Lys Cys Ser 115 Glu Thr Phe Thr Asn 120 Lys Leu Lys Glu Lys 125 His Thr Asp ctt ggt aaa gaa ggt gtt act gat gct gat gca aaa gaa gee att tta Leu Gly 130 Lys Glu Gly Val Thr 135 Asp Ala Asp Ala Lys 140 Glu Ala Ile Leu aaa gca aat ggt act aaa act aaa ggt gct gaa gaa ctt gga tta Lvs 145 Ala Asn Gly Thr Lys ISO Thr Lys Gly Ala Glu 155 Glu Leu Gly Lys Leu 160 ttt gaa tca gta gag gtc ttg tca aaa gca gct aaa gag atg ctt gct Phe Glu Ser Vai Glu 165 Val Leu Ser Lys Ala 170 Ala Lys Glu Met Leu 175 Ala aat tca gtt aaa gag ctt aca age cct gtt gtg gca gaa agt cca aaa Asn Ser Vai Lys 180 Glu Leu Thr Ser Pro 185 Val Val Ala Glu Ser 190 Pro Lys aaa tcc =» "— nf-a 57 aat aah tca ggg aaa rrat· *“ — rtrtrt tt 5» ^ aat aca tct gca Lys Pro Ser 195 Met Val Asn Asn Ser 200 Gly Lys Asp Gly Asn 205 Thr Ser Ãla aat tct gct gat gag tct gtt aaa ggg cct aat ctt aca gaa ata agt Asn Ser 210 Ala Asp Glu Ser Val 215 Lys Gly Pro Asn Leu 220 Thr Glu Ile Ser aaa att aca gaa tct aac gca gtt gtt ctc gee gtg aaa gaa gtt Lys 225 Lys Ile Thr Glu Ser 230 Asn Ala Val Val Leu 235 Ala Val Lys Glu Val 240 gaa act ttg ctt aca tct ata gat gag ctt gct aaa gct att ggt aaa Glu Thr Leu Leu Thr 245 Ser Ile Asp Glu Leu 250 Ala Lys Ala Ile Gly Lys 255 48 96 144 192 240 288 336 384 4 32 480 528 576 624 672 720 768 90 aaa ata aaa aac gat gtt agt tta gat aat gag gca gat cac aac gga 816 Lys Ile Lys Asn Asp Vai Ser Leu Asp Asn Glu Ala Asp His Asn Gly 260 265 270 tca tta ata tca gga gca tat tta \ att tca aac tta ata aca aaa aaa 864 Ser Leu Ile Ser Gly Ala Tyr Leu Ile Ser Asn Leu Ile Thr Lys Lys 275 280 2Θ5 ata agt gca ata aaa gat tca gga gaa ttg aag gca gaa att gaa aag 912 Xle Ser Ala Ile Lys Asp Ser Gly Glu Leu Lys Ala Glu Ile Glu Lys 290 295 300 gct aag aaa tgt tct gaa gaa ttt act gct aaa tta aaa ggt cac 960 Ala Lys Lys Cys Ser Glu Glu Phe' Thr Ala Lys Leu Lys Gly Glu His 305 310 315 320 aca gat ctt ggt aaa gaa ggc gtt act gat gat aat gca aaa aaa gee 1008 Thr Asp Leu Gly Lys Glu Gly Vai Thr Asp Asp Asn Ala Lys Lys Ala 325 330 r 335 att tta aaa aca aat aat gati aaa act aag ggc gct gat gaa ctt gaa 1056 Ile Leu Lys Thr Asn Asn Asp Lys Thr Lys Gly Ala Asp Glu Leu Glu 340 345 350 aag tta ttt gaa tca gta aaa aac ttg tca aaa gca gct aaa gag atg 1104 Lys Leu Phe Glu Ser Vai. Lys Asn Leu Ser Lys Ala Ala Lys Glu Met 355 360 365 ctt act aat tca gtt aaa gag ctt aca age taa 1137 Leu Thr Asn Ser Vai Lys Glu Leu Thr Ser * 370 375

<210> 28 <211> 378 <212> PRT <213> Sequência Artificial <2 20>

<223> Quimera OspC <400> 28 91

Met Ala Cys Asn Asn Ser Gly Lys Asp Gly Asn Thr Ser Ala Asn Ser 1 5 10 15 Ala Asp Glu Ser Vai Lys Gly Pro Asn Leu Thr Glu Ile Asn Lys Lys 20 25 30 Ile Thr Asp Ser Asn Ala Vai Leu Leu Ala Val Lys Glu Val Glu Ala 35 40 45 Leu Leu Ser Ser Ile Asp Glu rie Ala Ala Lys Ala Ile Gly Lys Lys 50 55 60 Ile His Gin Asn Asn Gly Leu Asp Thr Glu Asn Asn His Asn Gly Ser 65 70 75 80 Leu Leu Ala Gly Ala Tyr Ala Ile Ser Thr Leu Ile Lys Gin Lys Leu 85 90 95 Asp Gly Leu Lys Asn Glu Gly Leu Lys Glu Lys Ile Asp Ala ^\lâ Lys 100 105 110 Lys Cys Ser Glu Thr Phe Thr Asn Lys Leu Lys Glu Lys His Thr Asp 115 120 125 Leu Gly Lys Glu Gly Vai Thr Asp Ala Asp Ala Lys Glu Ala Ile Leu 130 135 140 Lys Ala Asn Gly Thr Lys Thr Lys Gly Ala Glu Glu Leu Gly Lys Leu 145 150 155 160 Phe Glu Ser Vai Glu Vai Leu Ser Lys Ala Ala Lys Glu Met Leu Ala 165 170 175 Asn Ser Vai Lys Glu Leu Thr Ser Pro Val Val Ala Glu Ser Pro Lys 180 185 190 Lys Pro Ser Met Vai Asn Asn Ser Gly Lys Asp Gly Asn Thr Ser Ala 195 200 205 Asn Ser Ala Asp Glu Ser val Lys Gly Pro Asn Leu Thr Glu Ile Ser 210 215 220 Lys Lys Ile Thr Glu Ser Asn Ala Val Val Leu Ala Val Lys Glu Val 225 230 235 240 Glu Thr Leu Leu Thr Ser Ile Asp Glu Leu Ala Lys Ala Ile Gly Lys 245 250 255 Lys Ile Lys Asn Asp Vai Ser Leu Asp Asn Glu Ala Asp His Asn Gly 260 265 270 Ser Leu Ile Ser Gly Ala Tyr Leu Ile Ser Asn Leu Ile Thr Lys Lys 275 200 2Θ5 Ile Ser Ala Ile Lys Asp Ser Gly Glu Leu Lys Ala Glu Ile Glu Lys 290 295 300 Ala Lys Lys Cys Ser Glu Glu Phe Thr Ala Lys Leu Lys Gly Glu H«l s 305 310 315 320 Thr Asp Leu Gly Lys GlU Gly Val Thr Asp Asp Asn Ala Lys Lys Ala 325 330 335 Ile Leu Lys Thr Asn Asn Asp Lys Thr Lys Gly Ala Asp Glu Leu Glu 340 345 350 Lys Leu Phe Glu Ser Vai Lys Asn Leu Ser Lys Ala Ala Lys Glu Met 355 360 365 Leu Thr Asn Ser Vai Lys Glu Leu Thr Ser 370 375

<210> 29 <211> 1133 <212> ADN <213> Sequência Artificial 92 <220>

<223> Quimera OspC

<221> CDS <222> {1).-.(1133) <400> 29 93 atg gct tgt aat aat tca 999 aaa gat ggg aat aca tct gca aat tct 48 Met 1 Ala Cys Asn Asn 5 Ser Gly Lys Asp Gly 10 Asn Thr Ser Ala Asn 15 Ser gct gat gag tct gtt aaa ggg cct aat ctt aca gaa ata aat aaa aaa 96 AI 9. Rsp Glu Ser 20 Vai Lvs Gly Pro Asn 25 Leu Thr Glu Ile Asn 30 Lys Lys att acg gat tct aat gcg gtt tta c 11 gct gtg aaa gag gtt gaa gcg 144 11ε Thr Asp 35 Ser Asn Ala Vai Leu 40 Leu Ala Vai Lys Glu 45 Vai Glu Ala ttg ctg tca tct ata gat gaa att gct gct aaa gct att ggt aaa aaa 192 Leu leu 50 Ser Ser 31e Asp Gl u 55 Ile Ala Ala Lys Ala 60 Ile Gly Lys Lys ata cac caa aat aat ggt ttg gat acc gaa aat aat cac aat gga tca 240 Ile 65 His Gin Asn Asn Gly 70 Leu Asp Thr Glu Asn 75 Asn His Asn Gly Ser 80 94 ttg tta gcg gga gct tat gca ata tca acc cta ata aaa caa aaa tta 288 Leu Leu Ala Gly Ala 85 Tyr Ala Ile Ser 1 Thr 90 Leu Ile Lys Gin Lys 95 Leu gat gga ttg aaa aat gaa gga tta aag gaa aaa att gat gcg gct aag 336 Asp Gly Leu Lys 100 Asn Glu Gly Leu Lys 105 Glu Lys Ile Asp Ala 110 Ala Lys aaa tgt tct gaa aca ttt act aat aaa tta aaa gaa aaa cac aca gat 384 Lys Cys Ser 115 Glu Thr Phe Thr Asn 120 Lys Leu Lys Glu Lys 125 His Thr Asp ctt ggt aaa gaa ggt gtt act gat gct gat gca aaa gaa gee att tta 432 Leu Gly 130 Lys 1 Glu Gly Val Thr Asp 135 Ala Asp Ala Lys 140 Glu Ala Ile Leu 3â-c3 gca aat ggt act aaa act aaa ggt gct gaa gaa ctt gga aaa tta 480 Lys Ala 145 Asn Gly Thr Lys 150 Thr Lys Gly Ala Glu 155 Glu Leu Giy Lys Leu 160 ttt gaa tca gta gag gtc ttg tca aaa gca gct aaa gag atg ct t gct 528 Phe Glu Ser Val Glu 165 Val Leu, Ser Lys Ala 170 Ala Lys Glu Met Leu 175 Ala aat tca gtt aaa gag ctt aca age cct gtt gtg gca gaa agt cca aaa 576 Asn Ser Vai Lys 180 Glu Leu Thr 1 Ser Pro 105 Val Val Ala Glu Ser 190 Pro Lys aaa cct tcc atg gta aat aat tca gga aaa gat ggg aat aca tct gca 624 Lys Pro Ser 195 Met Val Asn Asn Ser 200 Gly Lys Asp Gly Asn 205 Thr Ser Ala aat tct gct gat gag tct gtt aaa ggg cct aat ctt aca gaa ata agt 672 Asn Ser 210 Ala Asp Glu Ser Val 215 Lys Gly Pro Asn Leu 220 Thr Glu Ile Ser aaa aaa att aca gaa tct aac gca gtt gtt ctg gct gtg aaa gaa att 720 Lys Lys 225 Ile Thr Glu Ser 230 Asn Ala Val Val Leu 235 Ala Val Lys Glu Ile 240 gaa act ttg ctt gca tct ata gat gaa ctt gct act aaa gct att ggt 76S Glu Thr Leu Leu Ala 245 Ser Ile Asp Glu Leu 250 Ala Thr Lys Ala Ile 255 Gly aaa aaa ata caa caa aat ggt ggt tta gct gtc gaa gcg ggg cat aat B16 Lys Lys Ile Gin 260 Gin Asn Gly Gly Leu 265 Ala Val Glu Ala Gly 270 His Asn aaa aca ttg tta qca ggt gct tat aca ata tca aaa cta ata aca caa 864 Gly Thr Leu 275 Leu Ala Gly Ala Tyr 280 Thr Ile Ser Lys Leu 285 Ile Thr Gin aaa tta gat gga ttg aaa aat tca gaa aaa tta aag gaa aaa att gaa 912 Lys Leu 290 Asp Gly Leu Lys Asn 295 Ser Glu Lys Leu Lys 300 Glu Lys Ile Glu aat gct aag aaa tgt tct gaa gat ttt act aaa cta gaa gga gaa 960 Asn 305 Ala Lys Lys Cys Ser 310 Glu Asp Phe Thr Lys 315 Lys Leu Glu Gly Glu 320 cat gcg caa ctt çjcjb att gaa aat gtt act gat gag aat gca aaa 33. cl 1008 His Ala Gin Leu Gly 325 Ile Glu Asn Val Thr 330 Asp Glu Asn Ala Lys 335 Lys 95 gct att tta ata a ca gat gca gct aaa Ala Ile Leu Ile 34 0 Thr Asp Ala Ala Lys 345 gaa aag cta ttt aaa gca gta gaa aac Glu Lys Leu 355 Phe Lys Ala Vai Glu 360 Asn atg ctt gct aat tca gtt aaa gag ctt Met Leu 370 Ala Asn Ser Vai Lys 375 Glu Leu gat Asp aag Lys ggc Gly gct Ala gca Ala 350 gag Glu ctt Leu 1056 ttg Leu gca Ala aaa Lys gca Ala 365 gct Ala aaa Lys gag Glu 1104 1133

<210> 30 <211> 377 <212> PRT <213> Sequência Artificial <220> <2 2 3> Quimera OspC <400> 30 96

Met 1 Ala Cys Asn Asn 5 Ser Gly Lys Ala Asp Glu Ser 20 Vai Lys Gly Pro Ile Thr Asp 35 Ser Asn Ala Vai Leu 40 Leu Leu 50 Ser Ser Ile Asp Glu 55 Ile Ile 65 His Gin Asn Asn Gly 70 Leu Asp Leu Leu Ala Gly AI a 85 Tyr Ala Ile Asp Gly Leu Lys 100 Asn Glu Gly Leu Lys Cys Ser 115 Glu Thr Phe Thr Asn 120 Leu Gly 130 Lys Glu Gly Vai Thr 135 Asp Lys 145 Ala Asn Gly Thr Lys 150 Thr Lys Phe Glu Ser Vai Glu 165 Va.1 Leu Ser Asn Ser Vai Lys 180 Glu Leu Thr Ser Lys Pro Ser 195 Met Vai Asn Asn Ser 200 Asn Ser 210 Ala Asp Glu Ser Vai 215 Lys Lys 225 Lys Ile Thr Glu Ser 230 Asn Ala Glu Thr Leu Leu Ala 245 Ser Ile Asp Lys Lys Ile Gin 260 Gin Asn Gly Gly Gly Thr Leu 275 Leu Ala Gly Ala Tyr 280 Lys Leu 290 Asp Gly Leu Lys Asn 295 Ser Asn 305 Ala Lys Lys Cys Ser 310 Glu Asp His Ala Gin Leu Gly 325 Ile Glu Asn Ala X le Leu Ile 340 Thr Asp Ala Ala Glu Lys Leu 355 Phe Lys Ala Vai Glu 360 Met Leu 370 Ala Asn Ser Vai Lys 375 Glu

Asp Gly 10 Asn Thr Ser Ala Asn 15 Ser Asn 25 Leu Thr Glu Ile Asn 30 Lys Lys Leu Ala Vai Lys Glu 45 Vai Glu Ala Ala Lys Ala 60 Ile Gly Lys Lys Thr Glu Asn 75 Asn His Asn Gly Ser 80 Ser Thr 90 Leu Ile Lys Gin Lys 95 Leu Lys 105 Glu Lys Ile Asp Ala 110 Ala Lys Lys Leu Lys Glu Lys 125 His Thr Asp Ala Asp Ala Lys 140 Glu Ala rie Leu Gly Ala Glu 155 Glu Leu Gly Lys Leu 160 Lys Ala 170 Ala Lys Glu Met Leu 175 Ala Pro 185 Vai Vai Ala Glu Ser 190 Pro Lys Gly Lys Asp Gly Asn 205 Thr Ser Ala Gly Pro Asn Leu 220 Thr Glu Ile Ser Vai Vai Leu 235 si Va.1 Lys Glu Ile 240 Glu Leu 250 Ala Thr Lys Ala Ile Gly 255 Leu 265 Ala Vai Glu Ala Gly 270 His Asn Thr Ile Ser Lys Leu 285 Ile Thr Gin Glu Lys Leu Lys 300 Glu Ly3 Ile Glu Phe Thr Lys 315 Lys Leu Glu Gly Glu 320 Vai Thr 330 Asp Glu Asn Ala Lys 335 Lys Lys 345 Asp Lys Gly AI a Ala 350 Glu Leu Asn F Leu Leu Ala Lys Ala 365 Ala Lys Glu

< 210 > 31 <212> ADN

<213> Sequência Artificial <220 > <223> Quimera OspC <221 > CDS <222> (1) ... (1112) <400> 31 98 atg gct tgt aat aat tca ggg aaa gat ggg aat aca tct gca aat tct 48 Met 1 Ala Cys Asn Asn 5 Ser Gly 1 Lys Asp Gly 10 Asn Thr Ser Ala Asn 15 Ser gct gat gag tct gtt aaa ggg cct aat ctt aca gaa ata agt aaa aaa 96 Ala Asp Glu Ser 20 Vai Lys Gly Pro Asn 25 Leu Thr Glu Ile Ser 30 Lys Lys att acg gat tct aat gcg gtt tta ctt gct gtg aaa gag gtt gaa gcg 144 Ile Thr Asp 35 Ser Asn Ala Vai Leu 40 Leu Ala Val Lys Glu 45 Val Glu Ala ttg ctg tca tct ata gat gag ctt gct aaa gct att ggt aaa aaa ata 192 Leu Leu 50 Ser Ser Ile Asp Glu 55 Leu Ala Lys Ala Ile 60 Gly Lys Lys Ile aaa aac gat ggt agt tta gat aat gaa gca aat cgc aac gag tca ttg 240 Lys 65 Asn Asp Gly Ser Leu 70 Asp Asn Glu Ala Asn 75 Arg Asn Glu Ser Leu BO tta gca gga gct tat a ca ata tca acc tta ata aca caa aaa tta agt 288 Leu Ala Gly Ala Tyr 85 Thr I Xe Ser Thr Leu 90 Ile Thr Gin Lys Leu 95 Ser aaa tta aac gga tca gaa ggt tta aag gaa aag att gcc gca gct aag 336 T.tfe -4 - ΤΛη Asn çiv IÕÔ Ser Glu Gly Leu Lvs 1Õ5 Glu Lys Ile Ala Ala 110 Ala Lys aaa tgc tct gaa gag ttt agt act aaa cta aaa gat aat cat gca cag 384 Lys Cys Ser 115 Glu Glu Phe Ser Thr 120 Lys Leu Lys Asp Asn 125 His Ala Gin ctt ggt ata cag ggc gtt act gat gaa aat gca aaa 333 gc t att tta 432 Leu Gly 130 Ile Gin Gly Vai Thr 135 Asp Glu Asn Ala Lys 140 Lys Ala Ile Leu aaa gca aat gca gcg ggt aaa gat aag ggc gtt gaa gaa ctt gaa 339 480 Lys 145 Ala Asn Ala Ala Gly 150 Lys Asp Lys Gly Val 155 Glu Glu Leu Glu Lys 160 99 ttg tcc gga tca tta gaa age tta tca aaa gca gct aaa gag atg ctt 528 Leu Ser ciy Ser Leu 165 Glu Ser Leu Ser Lys .170 Ala Ala Lys Glu Met 175 Leu gct aat tca gtt aaa gag ctt aca age cct gtt gtc cat ggt aat aat 576 Ala Asn Ser Vai 180 Lys Glu Leu Thr Ser 185 Pro Val Val His Gly 190 Asn Asn tca aga 333 gat ggg aat gca tct aca aat tct gcc gat gag tct gtt 624 Ser Arg Lys 1.95 Asp Gly Asn Ala Ser 200 Thr Asn Ser Ala Asp 205 Glu Ser Val aaa ggg cct aat ctt aca gaa ata agt aaa aaa att aca gaa tct aac 672 Lys Gly 210 Pro Asn Leu Thr Glu 215 Ile Ser Lys Lys Ile 220 Thr Glu Ser Asn gca gtt gtt ctg 'gcc gtg aaa gaa gtt gag acc tta ctt gca tct ata 720 Ala 225 Vai Vai Leu Ala Vai 230 Lys Glu Val Glu Thr 235 Leu Leu Ala Ser Ile 240 gat gaa ctt gct acc aaa gct att ggt aag aaa ata ggc aat aat ggt 768 Asp Glu Leu Ala Thr 245 Lys Ala Ile Gly Lys 250 Lys Ile Gly Asn Asn 255 Gly tta gag gcc aat cag agt aaa aac aca tca ttg tta tca gga gct tat 816 Leu Glu Ala Asn 260 Gin Ser Lys Asn Thr 265 Ser Leu Leu Ser Gly 270 Ala Tyr gca ata tct gac cta ata gca gaa aaa tta aat gta ttg aaa aat gaa 664 Ala Ile Ser 275 Asp Leu Ile Ala Glu 280 Lys Leu Asn Val Leu 285 Lys Asn Glu gaa tta aag gaa aag att gat aca gct aag caa tgt tct aca gaa ttt 912 Glu Leu 290 Lys Glu Lys Ile Asp 295 Thr Ala Lys Gin Cys 300 Ser Thr Glu Phe act aat aaa cta aaa agt gaa cat gca gtg ctt ggt ctg gac aat ctt 960 Thr 305 Asn Lys Leu Lys Ser 310 Glu His Ala Val Leu 315 Gly Leu Asp Asn Leu 320 act gat gat aat gca caa aga gct att tta aaa aaa cat gca aat aaa 1008 Thr Asp Asp Asn Ala 325 Gin Arg Ala Ile Leu 330 Lys Lys His Ala Asn 335 Lys gat aag ggt gct gca gaa ctt gaa aag tta ttt aaa gcg gta gaa aac 1056 Asp Lys Gly Ala 340 Ala Glu Leu Glu Lys 345 Leu Phe Lys Ala Val 350 Glu Asn tce aaa gca gct caa gac aca tta a as aat gct gtt âãã gag ctt 1104 Leu aca Ser clCJt Lys 355 cc Ãla Ãla Gin Asp Thr 360 Leu Lys Asn Ala Val 365 Lys Glu Leu 1112

Thr Ser 370 <210> 32 <211> 369 100

<212> PRT <213> Sequência Artificial <22 0> <223> Quimera OspC <400> 32 101

Ala 1 Cys Asn Asn Ser 5 Gly Lys Asp Gly 1 Asn 10 Thr Ser Ala Asn Ser 15 Ala Asp Glu Ser Vai 20 Lys Gly Pro Asn Leu 25 Thr Glu Ile Ser Lys 30 Lys Ile Thr Asp Ser 35 Asn Ala Vai Leu Leu 40 Ala Vai Lys Glu Vai 45 Glu Ala Leu Leu Ser 50 Ser Ile Asp Glu Leu 55 Ala Lys Ala Ile Gly 60 Lys Lys Ile Lys Asn 65 Asp Gly Ser Leu Asp 70 Asn Glu Ala Asn Arg 75 Asn Glu Ser Leu Leu 80 Ala Gly Ala Tyr Thr 85 Ile Ser Thr 1 Leu Ile 90 Thr Gin Lys Leu Ser 95 Lys Leu Asn Gly Ser 100 Glu Gly Leu Lys Glu 105 Lys I I* Ala Ala Ala 110 Lys Lys Cys Ser Glu 115 Glu Phe Ser Thr Lys 120 Leu Lys Asp Asn His 125 Ala Gin Leu Gly Ile 130 Gin Gly Vai Thr Asp 135 Glu Asn Ala 1 Lys Lys 140 Ala Ile Leu Lys Ala 145 Asn Ala Ala Gly Lys 150 Asp Lys Gly Vai Glu 155 Glu Leu Glu Lys Leu 160 Ser Gly Ser Leu Glu 165 Ser Leu Ser Iiys Ala 170 Ala Lys Glu Met Leu 175 Ala Asn Ser Vai Lys 180 Glu Leu Thr Ser Pro 185 Vai Vai His Gly Asn 190 Asn Ser Arg Lys Asp 195 Gly Asn Ala Ser Thr 200 Asn Ser Ala Asp Glu 205 Ser Vai Lys Gly Pr o 210 Asn Leu Thr Glu Ile 215 Ser Lys Lys Ile Thr 220 Glu Ser Asn Ala Vai 225 Vai Leu Ala Vai Lys 230 Glu Vai Glu Thr Leu 235 Leu Ala Ser Ile Asp 240 Giu Leu Al a Thr Lys 245 Ala Ile Gly Lys Lys 250 lie Gly Asn Asn Gly Leu 255 Glu Ala Asn Gin 260 Ser Lys Asn Thr Ser 265 Leu Leu Ser Gly Ala 270 Tyr Ala Ile Ser Asp 275 Leu Ile Ala Glu Lys 2B0 Leu Asn Vai Leu Lys 285 Asn Glu Glu Leu Lys 290 Glu Lys Ile Asp Thr 295 Ala Lys Gin Cys Ser 300 Thr Glu Phe Thr Asn 305 Lys Leu Lys Ser Glu 310 His Ala Vai Leu Gly 315 Leu Asp Asn Leu Thr 320 Asp Asp Asn Ala Gin 325 Arg Ala Ile Leu Lys 330 Lys His Ala Asn Lys Asp 335 Lys Gly Ala Ala 340 Glu Leu Glu Lys Leu 345 Phe Lys Ala Vai Glu 350 Asn Leu Ser Ser Lys Ala 355 Ala Gin Asp Thr Leu 360 Lys Asn Ala Vai Lys 365 Glu Leu Thr

<210> 33 <211> 1113 <212> ADN <213> Sequência Artificial <220> <223> Quimera OspC <221> CDS < 2 2 2 > (1),.. (1113) <400> 33 48 103 48 103 atg gct tgt aat aat tca ggg aaa gat ggg aat aca tct gca aat tct Met Ala 1 Cys Asn Asn 5 Ser Gly Lys Asp Gly 1.0 Asn Thr Ser Ala Asn 15 Ser gct gat gag tct gtt aaa ggg cct aat ctt aca gaa ata agt aaa aaa Ala Asp Glu Ser 20 Vai Lys Gly Pro Asn 25 Leu Thr Glu Ile Ser 30 Lys Lys att acg gat tct aat gcg gtt tta ctt gct gtg aaa gag gtt gaa gcg lie Thr Asp 35 Ser Asn Ala Val. Leu 40 Leu Ala Val Lys Glu 45 Val f Glu Ala ttg ctg tca tct ata gat gag ctt gct aaa gct att ggt aaa aaa ata Leu Leu 50 Ser Ser Ile Asp Glu 55 Leu Ala Lys Ala Ile 60 Gly Lys Lys Ile aaa aac gat ggt agt tta gat aat gaa gca aat ege aac gag tca ttg Lvs Asn 65 Asp Gly Ser Leu 70 Asp Asn Glu Ala Asn 75 Axg Asn Glu Ser Leu 80 tta gca gga gct tat aca ata tca acc tta ata caa aaa tta agt Leu Ala Gly Ala Tyr 85 Thr Ile Ser Thr Leu 90 Ile Thr Gin Lys IiO u 95 Ser aaa tta aac gga L o gaa ggt tta aag gaa aag att gcc gca gct aag Lys Leu Asn Gly 100 Ser Glu G.ly Leu Lys 105 Glu Lys Ile Ala Ala 110 Ala Lys aaa tgc tct gaa gag ttt agt act aaa cta aaa gat aat cat gca cag Lys Cys Ser 115 Glu Glu Phe Ser Thr 120 Lys Leu Lys Asp Asn 125 His Ala Gin ctt ggt ata cag ggc gtt act gat gaa aat gca aaa aaa gct att tta Leu Gly 130 lie Gin Gly Val Thr 135 Asp Glu Asn Ala Lys 140 Lys Ala Ile Leu aaa gca aat gca gcg ggt aaa gat aag ggc gtt gaa gaa ctt gaa aag Lys Ala 145 Asn Ala Ala Gly 150 Lys Asp Lys Gly Val 155 Glu Glu Leu Glu Lys 160 ttg tcc gga tca tta gaa age tta tca aaa gca gct 333 gag atg ctt Leu Ser Gly Ser Leu 165 Glu Ser Leu Ser Lys 170 Ala Ala Lys Glu Met 175 Leu gct aat tca gtt aaa gag ctt aca age cct gtt gtc cat ggt aat aat AJ, 3. As n Ser Yal 1B0 *** J — Glu Leu Thr Ser 185 Pm Val Val HÍ.5 Glv 19Õ Asn Asn tca ggg a&H gat ggg aat aca tct gca aat tct gct gat gag tct gtt Ser Gly Lys 195 Asp Gly Asn Thr Ser 200 Ala Asn Ser Ala Asp 205 Glu Ser Val aaa ggg cct aat ctt aca gaa ata agt aaa aaa att aca gaa tct aac Lys Gly 210 Pro Asn Leu Thr Glu 215 Ile Ser Lys Lys Ile 220 Thr Glu Ser Asn gca gtt gtt ctc gcc gtg aaa gaa gtt gaa act ttg Ctt aca tct ata Ala Vai 225 Vai Leu Ala Val 230 Lys Glu Val Glu Thr 235 Leu Leu Thr Ser Ile 240 96 144 192 24 0 288 336 384 432 480 528 576 624 672 720 104 gat gag ctt gct aaa gct att ggt aaa aaa ata aaa aac gat gtt agt 7 68 Asp Glu Leu Ala Lys 245 Ala Ile Gly Lys ( Lys 250 Ile Lys Asn Asp Val 255 Ser tta gat aat gag gea gat cac aac gga tca tta ata tca gga gea tat 816 Leu Asp Asn Glu 260 Ala Asp His Asn Gly 265 Ser Leu Ile Ser Gly 270 Ala Tyr tta att tca aac tta ata aca a 3 3 333 ata agt gea ata aaa gat tca 864 Leu I le Ser 275 Asn Leu Ile Thr Lys 280 Lys Ile Ser Ala Ile 285 Lys Asp Ser gga gaa ttg aag gea gaa att gaa aag gct aag aaa tgt tet gaa gaa 912 Gly Glu 290 Leu 1 Lys Ala Glu ile 295 Glu 1 Lys Ala Lys Lys 300 cys Ser Glu Glu ttt act gct aaa tta aaa ggt gaa cac aca gat ctt ggt aaa gaa ggc 960 Phe 305 Thr Ala Lys Leu Lys 310 Gly Glu His Thr Asp 315 Leu Gly Lys Glu Gly 320 gtt act gat gat aat gea aaa aaa gee !att tta aaa aca aat aat gat 1008 Vai Thr Asp Asp Asn 325 Ala Lys, Lys Ala Ile 330 Leu Lys Thr Asn Asn 335 Asp aaa act aag ggc gct gat gaa ctt gaa aag tta ttt gaa tca gta aaa 1056 Lys Thr Lys Gly 340 Ala Asp Glu Leu Glu Lys 345 Leu Phe Glu Ser 350 Val Lys aac ttg tca aaa gea gct aaa gag atg ctt act aat tca gtt aaa gag 1104 Asn ctt Leu Leu aca Thr 370 Ser 355 age Ser Lys Ala Ala Lys Glu 360 Met Leu Thr Asn Ser 365 Val Lys Glu 1113

<210> 34 <211> 370 <212> PRT <213> Sequência Artificial < 2 2 0 > <223> Quimera OspC <4 00> 34 105

Ala Cys Asn Asn Ser Gly Lys Asp Gly Asn Thr Ser Ala Asn Ser Ala 1 5 10 15 Asp Glu Ser Vai Lys Gly Pro Asn Leu Thr Glu Ile Ser Lys Lys Ile 20 25 30 Thr Asp Ser Asn Ala vai Leu Leu Ala Val Lys Glu Val Glu Ala Leu 35 40 45 Leu Ser Ser Ile Asp Glu Leu Ala Lys Ala Ile Gly Lys Lys Ile Lys 50 55 60 Asn Asp Gly Ser Leu Asp Asn Glu Ala Asn Arg Asn Glu Ser Leu Leu 65 70 75 80 Ala Gly Ala Tyr Thr Ile Ser Thr Leu Ile Thr Gin Lys Leu Ser Lys 85 90 95 Leu Asn Gly Ser Glu Gly Leu Lys Glu Lys Ile Ala Ala Ala Lys Lys 100 105 110 Cys Ser Glu Glu Phe Ser Thr Lys Leu Lys Asp Asn His Ala Gin Leu 115 120 125 Gly Ile Gin Gly Vai Thr Asp Glu Asn Ala Lys Lys Ala Ile Leu Lys 130 135 140 Ala Asn Ala Ala Gly Lys Asp Lys Gly Val Glu Glu Leu Glu Lys Leu 145 150 155 160 Ser Gly Ser Leu Glu Ser Leu Ser Lys Ala Ala Lys Glu Met Leu Ala 165 170 175 Asn Ser Vai Lys Glu Leu Thr Ser Pro Val Val His Gly Asn Asn Ser 180 185 190 Gly Lys Asp Gly Asn Thr Ser Ala Asn Ser Ala Asp Glu Ser Val Lys 195 200 205 Gly Pro Asn Leu Thr Glu Ile Ser Lys Lys Ile Thr Glu Ser Asn Ala 210 2X5 220 Vai Vai Leu Ala Vai Lys Glu Vai Glu Thr Leu Leu Thr Ser Ile Asp 225 230 235 240 Glu Leu Ala Lys Ala Ile Gly Lys Lys Ile Lys Asn Asp Val Ser Leu 245 250 255 Asp Asn Glu Ala Asp His Asn Gly Ser Leu Ile Ser Gly Ala Tyr Leu 260 265 270 Ile Ser Asn Leu Ile Thr Lys Lys Ile Ser Ala Ile Lys Asp Ser Gly 275 280 285 Glu Leu Lys Ai ia Glu Ile Glu Lys Ala Lys Lys Cys Ser Glu Glu Phe 290 295 300 Thr Ala Lys Leu Lys Gly Glu His Thr Asp Leu Gly Lys Glu Gly Val 305 310 315 320 Thr Asp Asp Asn Ala Lys Lys Ala I le Leu Lys Thr Asn Asn Asp Lys 325 330 335 Thr Lys Gly Ala Asp Glu Leu Glu Lys Leu Phe GlU Ser Val Lys Asn 340 345 350 Leu Ser Lys Ala Ala Lys Glu Met Leu Thr Asn Ser Val Lys Glu Leu 355 360 365 Thr Ser 370 <210> 35 < 211> 1112 106

<212> ADN <213> Sequência Artificial < 2 2 0 >

<223> Quimera QspC

<221> CDS <222> (1) . . . (1112) <400> 35 107 atg gct tgt aat aat tca 999 aaa gat 999 aat aca tct gca aat tct 46 Me*- 1 Ais Hys Asn Asn 5 Ser Glv Lvs Asp Gly 10 Asn Thr Ser Ala Asn 15 Ser gct gat gag tct gtt aaa 999 cct aat ctt a ca gaa ata agt aaa aaa 96 Ma Asp Glu Ser 20 Vai Lys Gly Pro Asn 25 Leu Thr Glu Ile Ser 30 Lys Lys att a cg gat tct aat gcg gtt tta ctt gct gtg aaa gag gtt gaa gcg 144 lie Thr Asp 35 Ser Asn Ala Va.l Leu 40 Leu Ala Vai Lys Glu 45 Vai Glu Ala ttg ctg tca tct ata gat gag ctt gct aaa gct att ggt aaa aaa ata 192 Leu Leu 50 Ser Ser Ile Asp Glu 55 Leu Ala Lys Ala Ile 60 Gly Lys Lys Ile 108 aaa aac gat ggt agt tta gat aat gaa gca aat ege aac gag tca ttg 240 Lys 65 Asn Asp Gly Ser Leu 70 Asp Asn Glu Ala Asn 75 Arg Asn Glu Ser Leu 80 tta gca gga gct t.at aca ata tca a'cc tta ata aca caa aaa tta agt 288 Leu Ala Gly Ala Tyr 85 Thr Ile Ser Thr Leu 90 Ile Thr Gin Lys Leu 95 Ser aaa tta aac gga tca gaa ggt tta B BÇ Çf3B aag att gee gca gct aag 336 Lys Leu Asn Gly 100 Ser Glu Gly Leu Lys 105 Glu Lys Ile Ala Ala 110 Ala Lys aaa tgc tct gaa gag ttt agt act aaa cta aaa gat aat cat gca cag 384 Lys Cys Ser 115 Glu Glu Phe Ser Thr 120 Lys Leu Lys Asp Asn 125 His Ala Gin ctt ggt ata cag ggc gtt act gat gaa aat gca aaa aaa gct att tta 432 Leu siy 130 Ile Gin Gly Vai Thr Asp 135 Glu Asn Ala Lys 140 LYS Ala Ile Leu aaa gca aat gca gcg ggt asa gat aag 1 ggc gtt gaa Cf&cl Ctt gaa aag 480 Lys 145 Ala Asn Ala Ala Gly 150 Lys'Asp Lys Gly Vai Glu Glu Leu Glu Lys 160 ttg tcc gga tca tta gaa age tta tca aaa gca gct aaa gag atg ctt 528 Leu Ser Gly Ser Leu 165 Glu Ser, Leu Ser Lys 170 Ala Ala Lys Glu Met 175 Leu gct aat tca gtt aaa gag ctt aca age cct gtt gtc cat ggt aat aat 576 Ala Asn Ser Vai 1Θ0 Lys Glu Leu Thr Ser 185 Pro Vai Vai His Gly Asn 190 Asn tca gga aaa gat ggg aat aca tct gca aat tct gct gat gag tct gtt 624 Ser Gly Lys 195 Asp Gly Asn Thr Ser 200 Ala Asn Ser Ala Asp 205 Glu Ser Vai aaa ggg cct aat ctt aca ^33 ata agt 333 333 att aca gaa tct aac 672 Lys Gly 210 Pro Asn Leu Thr Glu 215 Ile Ser Lys Lys lie 220 Thr Glu Ser Asn gca gtt gtt ctg gct gtg aaa gaa att gaa act ttg ctt gca tct ata 720 Ala 225 Vai Vai Leu Ala Vai 230 Lys Glu Ile Glu Thr 235 Leu Leu Ala Ser Ile 240 gat gaa ctt gct act aaa gct att ggt aaa aaa ata caa caa aat ggt 768 Asp Glu Leu Ala Thr 245 Lys Ala Ile Gly Lys 250 Lys Ile Gin Gin Asn Gly 255 nnt tta aat gtc aaa g cg aaa cat aat aaa aca ttg tta aca ggt gct 816 Gly Leu Ála Vai 260 Glu Ala Gly His Asn 265 Gly Thr Leu Leu Ãla 270 Gly Ala t a t a ca ata tca aaa cta ata aca caa aaa tta gat gga ttg aaa aat 864 Tyr Thr Ile 275 Ser Lys Leu Ile Thr 280 Gin Lys Leu Asp Gly Leu 285 Lys Asn tca gaa aaa tta aag gaa aaa att gaa aat gct aag aaa tgt tct gaa 912 Ser Glu 290 Lys Leu Lys Glu Lys 295 Ile Glu Asn Ala Lys 300 Lys Cys Ser Glu gat ttt act aaa aaa cta gaa gaa gaa cat gcg caa ctt gga att gaa 960 Asp 305 Phe Thr Lys Lys Leu 310 Glu Gly Glu His Ala 315 Gin Leu Gly Ile Glu 320 109 aat gtt act gat gag aat gca aaa aaa gct att tta ata aca gat gca 1008 Asn Vai Thr Asp Glu 325 Asn Ala Lys Lys Ala 330 Ile Leu Ile Thr Asp 335 Ala gct aaa gat aag ggc gct gca gag ctt gaa aag cta ttt aaa gca gta 1056 Ala Lys Asp Lys 34 0 Gly Ala Ala Glu Leu 345 Glu Lys Leu Phe Lys Ala 350 Vai gaa aac ttg gca aaa gca gct aaa gag atg ctt gct aat tca gtt aaa 1104 Glu Asn Leu 355 Ala Lys Ala Ala Lys 360 Glu Met Leu Ala Asn 365 Ser Vai Lys gag ctt ac 1112

Glu Leu 370

<210> 36 <211> 369 <212> PRT <213> Sequência Artificial < 2 2 0 >

<223> Quimera OspC <4QQ> 36 110

Ala Cys Asn Asn Ser Gly Lys Asp Gly Asn Thr Ser Ala Asn Ser Ala 1 5 10 15 Asp Glu Ser Vai Lys Gly Pro Asn Leu Thr Glu Ile Ser Lys Lys Ile 20 25 30 Thr Asp Ser Asn Ala Val Leu Leu Ala Val Lys Glu Val Glu Ala Leu 35 40 45 Leu Ser Ser Ile Asp Glu Leu Ala Lys Ala He Gly Lys Lys Xle Lys 50 55 60 Asn Asp Gly Ser Leu Asp Asn Glu Ala Asn Arg Asn Glu Ser Leu Leu 65 70 75 80 Ala Gly Ala Tyr Thr Ile S O" Jw Thr Leu Ile Thr Gin Lys Leu Ser Lys 85 90 95 Leu Asn Gly Ser Glu Gly Leu Lys Glu Lys Ile Ala Ala Ala Lys Lys 100 105 110 Cys Ser Glu Glu Phe Ser Thr Lys Leu Lys Asp Asn His Ala Gin Leu 115 120 125 Gly Xle Gin Gly Vai Thr Asp Gl.u Asn Ala Lys Lys Ala Xle Leu Lys 130 135 140 Ala Asn Ala Ala Gly Lys Asp Lys Gly Val Glu Glu Leu Glu Lys Leu 145 150 155 160 Ser Gly Ser Leu Glu Ser Leu Ser Lys Ala Ala Lys Glu Met Leu Ala 165 170 1 75 Asn Ser Vai Lys Glu Leu Thr Ser Pro Val Val His Gly Asn Asn Ser 180 185 190 Gly Lys Asp Gly Asn Thr Ser Ala Asn Ser Ala Asp Glu Ser Val Lys 195 200 205 Gly Pro Asn Leu Thr Glu Ile Ser Lys Lys Ile Thr Glu Ser Asn Ala 210 215 220 Vai Vai Leu Ala Vai Lys Glu Ile Glu Thr Leu Leu Ala Ser Ile Asp 225 230 235 240 Glu Leu Ala Thr Lys Ala Ile Gly Lys Lys Ile Gin Gin Asn Gly Gly 245 250 255 Leu Al.a Vai Glu Ala Gly His Asn Gly Thr Leu Leu Ala Gly Ala Tyr 260 265 270 Thr Ile Ser Lys Leu Ile Thr Gin Lys Leu Asp Gly Leu Lys Asn Ser 275 280 285 Glu Lys Leu Lys Glu Lys Ile Glu Asn Ala Lys Lys Cys Ser Glu Asp 290 295 300 Phe - Thr Lys Lys Leu Glu Gly Glu Ala Gin Leu Gly Ile Glu Asn 305 310 315 320 Vai Thr Asp Glu Asn Ala Lys Lys Ala Ile Leu Ile Thr Asp Ala Ala 325 1 330 335 Lys Asp Lys Gly Ala Ala Glu Leu Glu Lys Leu Phe Lys Ala Val Glu 340 345 350 Asn Leu Ala Lys Ala Ala Lys Glu Met Leu Ala Asn Ser Val Lys Glu 355 360 365

Leu

<210> 37 <2ll> 1106 <212> ADN 111 <213> Sequência Artificial <2 2 0>

<223> Quimera OspC <221> CDS <222> (1) . .. {1106) <400> 37 112 atg gct tgt aat aat tca Met 1 AI a Cys Asn Asn 5 Ser gct gat gag tct gtt aaa Ala Asp Glu Ser 20 Va.l Lys att aca gaa tct aac gca Ile Thr Glu 35 Ser Asn Ala tta ctt gca tct ata gat Leu Leu 50 Ala Ser Ile Asp ata ggc aat aat ggt tta Ile Gly 65 Asn Asn Gly Leu 70 tta tca gga gct tat gca r .... /·* t ·. Ala 85 gta ttg aaa aat gaa gaa Vai Leu Lys Asn 100 Glu Glu tgt tct aca gaa ttt act Cys Ser Thr 1.15 Glu Phe Thr ggt ct g gac aat ctt act Gly Leu 130 Asp Asn Leu Thr gga aaa gat ggg aat gca Gly Lys Asp Gly 10 Asn Ala ggg cct aat ctt aca gaa Gly Pro Asn 25 Leu Thr Glu gtt gtt ctg gcc gtg aaa Vai Vai 40 Leu Ala Val Lys gaa ctt gct acc aaa gct Glu 55 Leu Ala Thr Lys Ala 60 gag gcc aat cag agt âclcl Glu Ala Asn Gin Ser 75 Lys ata tct gac cta ata gca Ile Car & T.âit lie Ai* * -«-er 90 tta aag gaa aag att gat Leu Lys Glu 105 Lys Ile Asp aat aaa cta aaa agt gaa Asn Lys 120 Leu Lys Ser Glu gat gat aat gca ca a aga Asp 135 Asp Asn Ala Gin Arg 140 tct Ser gca A.la aat Asn 15 tct Ser 48 ata Ile agt Ser 30 aaa Lys aaa Lys 96 gaa Glu 45 gtt Val gag Glu acc Thr 144 att Ile ggt aaa Gly Lys aaa Lys 192 aac Asn aca Thr tca Ser ttg Leu 80 240 gaa G1'J aaa r.ita ~ J — tta TjOt» 95 aat Aen 288 aca Thr gct Ala 110 aag Lys caa Gin 336 cat His 125 gca Ala gtg val ctt Leu 384 gct Ala att Ile tta Leu aaa Lys 432 113 aaa cat gca aat aaa gat aag ggt gct gca gaa ctt gaa aag tta ttt 480 Lys 145 His Ala Asn Lys Asp 150 Lys Gly Ala Ala Glu 155 Leu Glu Lys Leu Phe 160 aaa çcç gta gaa aac tta tca aaa gca gct caa gac aca tta aaa aat 528 Lys Ala Vai Glu Asn 165 Leu Ser Lys Ala Ala 170 Gin Asp Thr Leu Lys 175 Asn gct gtt aaa gag ctt aca agt cct att gtc cat ggt aat aat tca aga 576 Ala Vai Lys Glu 180 Leu Thr Ser Pro Ile 185 Vai His Gly Asn Asn 190 Ser Arg 3 cl 9 gat ggg aat gca tct 3G3 aat tct gcc gat gag tct gtt 333 ggg 624 Lys Asp Gly 195 Asn Ala Ser Thr Asn 200 Ser Ala Asp Glu Ser 205 Va.l Lys Gly cct aat ctt a ca gaa ata agt aaa aaa att aca gaa tct aac gca gtt 672 Pro Asn 21.0 Leu Thr Glu Ile Ser 215 Lys Lys Ile Thr Glu 220 Ser Asn Ala Val gtt ctg gcc gtg aaa gaa gtt gag acc tta ctt gca tct ata gat gaa 720 Vai 225 Leu Al a Vai Lys Glu 230 Vai. Glu Thr Leu Leu 235 Ala Ser Ile Asp Glu 240 ctt gct acc aaa gct att ggt aag aaa ata ggc aat aat ggt tta gag 768 Leu Ala Thr Lys Ala 245 Ile Gly Lys Lys Ile 250 Gly Asn Asn Gly Leu 255 Glu gcc aat cag agt aaa aac aca tca ttg tta tca gga gct tat gca ata 816 Ala Asn Gin Ser 260 Lys Asn Thr Ser Leu 265 Leu Ser Gly Ala Tyr 270 Ala Ile tct gac cta ata gca gaa 399 tta aat gta ttg aaa aat gaa gaa tta 864 Ser Asp Leu 275 Ile Ala Glu Lys Leu 280 Asn Vai Leu Lys Asn 2Θ5 Glu Glu Leu aag gaa aag att gat aca gct aag caa tgt tct aca gaa ttt act aat 912 Lys Glu 290 Lys Ile Asp Thr Ala 295 Lys Gin Cys Ser Thr 300 G.lu Phe Thr Asn aaa cta aaa agt gaa cat gca gtg ctt ggt ctg gac aat ctt act gat 960 Lys 305 Leu Lys Ser Glu His 310 Ala Vai Leu Gly Leu 315 Asp Asn Leu Thr Asp 320 gat aat gca caa aga gct att tta aaa aaa cat gca aat aaa gat aag 1008 Asp Asn Ala Gin Arg 325 Ala Ile Leu Lys Lys 330 His Ala Asn Lys Asp 335 Lys ggt gCt gca yaa ctt eã^ a* L LO Am Am Am l_ l_ Iw. õõcà gcg gca -7» —► <* tlC3 1056 Gly Ala Ala Glu 340 Leu Glu Lys Leu Phe 345 Lys Ala Val Glu Asn 350 Leu Ser aaa gca gct caa gac aca tta aaa aat gct gtt aaa gag ctt aca agt 1104 Lys Ala Ala 355 Gin Asp Thr Leu Lys 360 Asn Ala Val Lys Glu 365 Leu Thr Ser cc 1,106

<210> 38 <211> 368 <212> PRT <213> Sequência Artificial <220> <223> Quimera OspC <40Q> 38 115

Met Ala 1 Cys Asn Asn 5 Ser Gly Lys Ásp Gly 10 Asn Ala Ser Ala Asn 15 Ser Ala Asp Glu Ser 20 Vai Lys Gly Pro Asn 25 Leu Thr Glu Ile Ser 30 Lys Lys Ile Thr Glu 35 Ser Asn Ala Val Val Leu 40 Ala Val Lys Glu 45 Val Glu Thr Leu Leu 50 Ala Ser Ile Asp Glu 55 Leu Ala Thr Lys Ala 60 Ile Gly Lys Lys Ile Gly 65 Asn Asn Gly Leu 70 Glu Ala Asn Gin Ser 75 Lys Asn Thr Ser Leu 80 Leu Ser Gly Ala Tyr 85 Ala Ile Ser' Asp Leu 90 Ile Ala Glu Lys Leu 95 Asn Vai Leu Lys Asn 100 Glu Glu Leu Lys Glu 105 Lys Ile Asp Thr Ala 110 Lys Gin Cys Ser Thr 115 Glu Phe Thr Asn Lys Leu 120 Lys i Ser Glu His 125 Ala Val Leu Gly Leu 130 Asp Asn Leu Thr Asp 135* Asp Asn Ala Gin Arg 140 Ala Ile Leu Lys Lys His 145 Ala Asn Lys Asp 150 Lys Gly Ala Ala Glu 155 Leu Glu Lys Leu Phe 160 Lys Ala Vai Glu Asn 165 Leu Ser 1 Lys Ala Ala 170 Gin Asp Thr Leu Lys 175 Asn Ala Vai Lys Glu ISO Leu Thr Ser Pro Ile 185 Val His Gly Asn Asn 190 Ser Arg Lys Asp Gly 195 Asn Ala Ser Thr Asn Ser 200 Ala Asp Glu Ser 205 Val Lys Gly Pro Asn 210 Leu Thr Glu Ile Ser 215 Lys Lys Ile Thr Glu 220 Ser Asn Ala Val Vai Leu 225 Ala Vai Lys Glu 230 Val Glu Thr Leu Leu 235 Ala Ser Ile Asp Glu 240 Leu Ala Thr Lys Ala 245 Ile Gly Lys Lys Ile 250 Gly Asn Asn Gly Leu 255 Glu Ala Asn Gin Ser 260 Lys Asn Thr Ser Leu 265 Leu Ser Gly Ala Tyr 270 Ala Ile Ser Asp Leu 275 Ile Ala Glu Lys Leu Asn 280 Val Leu Lys Asn 285 Glu Glu Leu Lys Glu 290 Lys Ile Asp Thr Ala 295 Lys Gin Cys Ser Thr 300 Glu Phe Thr Asn Lys Leu 305 Lys Ser Glu His 310 Ala Val Leu Gly Leu 315 Asp Asn Leu Thr Asp 320 Asp Asn Ala Gin Arg 325 Ala Ile Leu Lys Lys 330 His Ala Asn Lys Asp Lys 335 Gly Ala Ala Glu 34 0 Leu Glu Lys Leu Phe 345 Lys Ala Val Glu Asn 350 Leu Ser Lys Ala nxa 355 V3Í.1Í mu _ •l 1 i T « . - ΛΧ* IA T · «·» 1\ ΛβΛ T U <Γ**<>Λ* 360 Tl 1 H. «*3k^- Ui Ua 1 W U.-A. T Cl >· 365 L»ôv* Thr Ser

<210> 39 <211> 1107 <212> ADN <213> Sequência Artificial 116 <220>

<223> Quimera OspC

<2 21> CDS <222> (1) ... (1107} <400> 39 117 atg gct tgt aat aat tca gga aaa gat ggg aat gea tct gea aat tct 48 Met 1 Ala Cys Asn Asn 5 Ser Gly Lys Asp Gly 10 Asn Ala Ser Ala Asn 15 Ser gct gat gag tct gtt aaa ggg cct aat ctt aca gaa ata agt aaa aaa 96 Ala Asp Glu Ser 20 Val Lys Gly Pro Asn 25 Leu Thr Glu Ile Ser 30 Lys Lys att aca gaa tct aac gea gtt gtt ctg gee gtg aaa gaa gtt gag acc 144 lie Thr Glu 35 Ser Asn Ala Val Val 40 Leu Ala Val Lys Glu 45 Val Glu Thr tta ctt gea tct ata gat gaa ctt gct acc aaa gct att ggt aaa aaa 192 Leu Leu 50 Ala Ser Ile Asp Glu 55 Leu Ala Thr Lys Ala 60 Ile Gly Lys Lys ata ggc aat aat ggt tta gag gee aat cag agt aaa aac aca tca ttg 240 Ile Gly 65 Asn Asn Gly Leu 70 Glu Ala Asn Gin Ser 75 Lys Asn Thr Ser Leu 80 tta tca gga gct tat gea ata tct gac cta ata gea gaa aaa tta aat 2 88 Leu Ser Gly Ala Tyr 85 Ala Ile Ser Asp Leu 90 Ile Ala Glu Lys Leu 95 Asn gta ttg aaa aat gaa tta aag gaa aag att gat aca gct aag caa 336 Vai Leu Lys Asn 100 Glu Glu Leu Lys Glu 105 Lys Ile Asp Thr Ala 110 Lys Gin tgt tct aca gaa ttt act aat aaa cta aaa agt gaa cat gea gtg ctt 384 Cys Ser Thr 115 Glu Phe Thr Asn Lys 120 Leu Lys Ser Glu His 125 Ala Val Leu ggt ctg gac aat ctt act gat gat aat gea caa aga gct att tta aaa 432 Gly Leu 130 Asp Asn Leu Thr Asp 135 Asp Asn Ala Gin Arg 140 Ala Ile Leu Lys aaa cat gea aat aaa gat aag ggt gct gea gaa ctt gaa aag tta ttt 480 Lys 145 His Ala Asn Lys Asp 150 Lys Gly Ala Ala Glu 155 Leu Glu Lys Leu Phe 160 aaa gcg gta gaa aac tta tca aaa gea gct caa gac aca tta aaa aat 528 Lys Ala Val Glu Asn 165 Leu Ser Lys Ala Ala 170 Gin Asp Thr Leu Lys Asn 175 gct gtt aaa gag ctt aca agt cct att gtc cat ggt aat aat tca ggg 576 Ala Vai Lys Glu 180 Leu Thr Ser Pro Ile 185 Val His Gly Asn Asn 190 Ser Gly aaa gat ggg aat aca tct gea aat tct gct gat gag tct gtt aaa ggg 624 Lys Asp Gly 195 Asn Thr Ser Ala Asn 200 Ser Ala Asp Glu Ser 205 Val Lys Gly cct a a t ctt aca ata agt aaa aaa att aca gaa tct aac gea gtt 672 Pro Asn 210 Leu Thr Glu Ile Sex 215 Lys Lys Ile Thr Glu 220 Ser Asn Ala Val gtt etc gee gtg aaa gaa gtt gaa act ttg ctt aca tct ata gat gag 720 Vai 225 Leu Ala Val Lys Glu 230 Val Glu Thr Leu Leu 235 Thr Ser Ile Asp Glu 240 118 ctt gct aaa gct att ggt aaa aaa ata aaa aac gat gtt agt tta gat 768 Leu Ala Lys Ala Ile 245 Gly Lys Lys Ile Lys Asn Asp 250 Va.1 Ser Leu 255 Asp aat gag gca gat cac aac gga tca tta ata tca gga gca tat tta att 816 Asn Glu Ala Asp 260 His Asn Gly Ser Leu 265 Ile Ser Gly Ala Tyr 270 Leu Ile tca aac tta ata aca aaa aaa ata agt gca ata aaa gat tca gga gaa 864 Ser Asn Leu 275 11,e Thr Lys Lys Ile 280 Ser Ala Ile Lys Asp Ser 285 Gly Glu ttg aag gca gaa att gaa aag gct aag aaa tgt tct gaa gaa ttt act 912 Leu Lys 290 Ala 1 Glu Ile Glu Lys 295 Ala Lys Lys Cys Ser 300 Glu Glu Phe Thr gct aaa tta aaa ggt gaa cac aca gat ctt ggt aaa gaa ggc gtt act 960 Al a 305 Lys Leu Lys Gly Glu 310 His Thr Asp Leu Gly Lys 315 Glu Gly Vai Thr 320 gat gat aat gca aaa aaa gcc att tta 1 aaa aca aat aat gat act 1008 Asp Asp Asn Ala Lys 325 Lys Alá Ile Leu Lys 330 Thr Asn Asn Asp Lys 335 Thr aag QGC gct gat gaa ctt gaa aag tta ttt gaa tca gta aaa aac ttg 1056 Lys Gly Ala Asp 340 Glu Leu Glu Lys Leu 345 £>he Glu Ser Vai Lys 350 Asn Leu tca aaa gca gct aaa gag atg ctt act aat tca gtt aaa gag ctt aca 1104 Ser Lys Ala 355 Al a Lys Glu Met Leu 360 Thr Asn Ser Vai Lys 365 Glu Leu Thr

Ser

<210> 40 <211> 368 <212> PRT <213> Sequência Artificial <220> <223> Quimera OspC <4Q0> 40 119

Ala 1 Cys Asn Asn Ser 5 Gly Lys Asp Gly Asn 10 Ala Ser Ala Asn Ser 15 Ala Asp Glu Ser V ai 20 Lys Gly *-»__ C1V n mr _ nou ψ «... XiCU 25 mW _ í HL vau ▼ 1 * xxe r . »<«» Jf o 30 7 ~jr ** lio Thr Glu Ser 35 Asn Ala Val Val Leu 40 Ala Val Lys Glu Val 45 Glu Thr Leu Leu Ala 50 Ser Xle Asp Glu Leu 55 Ala Thr Lys Ala Ile 60 Gly Lys Lys Ile Gly 65 Asn Asn Gly Leu Glu 70 Ala Asn Gin Ser Lys 75 Asn Thr Ser Leu Leu 80 Ser Gly Ala Tyr Ala 85 Ile Ser Asp Leu Ile 90 Ala Glu Lys Leu Asn 95 Val Leu Lys Asn Glu 100 Glu Leu Lys Glu Lys 105 Ile Asp Thr Ala Lys 110 Gin Cys Ser Thr Glu 115 Phe Thr Asn Lys Leu 120 Lys Ser Glu His Ala 125 Val Leu Gly Leu Asp 130 Asn Leu Thr Asp Asp 135 Asn Ala Gin Arg Ala 140 Ile Leu Lys Lys His 145 Ala Asn Lys Asp Lys 150 Gly Ala Ala Glu Leu 155 Glu Lys Leu Phe Lys 160 Ala Vai Glu Asn Leu 165 Ser Lys Ala Ala Gin 170 Asp Thr Leu Lys Asn 175 Ala Vai Lys Glu Leu 180 Thr Ser Pro Ile Val 185 His Gly Asn Asn Ser 190 Gly Lys Asp Gly Asn 195 Thr Ser Ala Asn Ser 200 Ala Asp Glu Ser Val 205 Lys Gly Pro Asn Leu 210 Thr Glu Ile Ser Lys 215 Lys Ile Thr Glu Ser 220 Asn Ala Val Val Leu 225 Ala Vai Lys Glu Val 230 Glu Thr Leu Leu Thr 235 Ser Ile Asp Glu Leu 240 Ala Lys Ala I le Gly 245 Lys Lys Ile Lys Asn 250 Asp Val Ser Leu Asp 255 Asn Glu Ala Asp His 260 Asn Gly Ser Leu Ile 265 Ser Gly Ala Tyr Leu 270 Ile Sêr Asn Leu Ile 275 Thr Lys Lys Ile Ser 2B0 Ala Ile Lys Asp Ser 285 Gly Glu Leu Lys Ala 290 Glu Ile Glu Lys Ala 295 Lys Lys Cys Ser Glu 300 Glu Phe Thr AI a I.ys 305 Leu Lys Gly Glu His 310 Thr Asp IiPii Gly Lys 315 Glu Gly Val Thr Asp 320 Asp Asn Ala Lys Lys 325 Ala Ile Leu Lys Thr 330 Asn Asn Asp Lys Thr 335 Lys Gly Ala Asp Glu 340 Leu Glu Lys Leu Phe 345 Glu Ser Val Lys Asn 350 Leu Ser Lys Ala Ala 355 Lys Glu Met Leu Thr 360 Asn Ser Val Lys Glu 365 Leu Thr Ser

<210> 41 <211> 1106 <212> ADN <213> Sequência Artificial <2 2 0> <223> Quimera OspC <221> CDS <2 2 2> (1) .. . (1106) <400> 41 121 atg gct tgt aat aat tca gga aaa gat ggg aat gca tct gca aat tct 48 Met 1 Ala Cys Asn Asn 5 Ser Gly Lys Asp Gly 10 Asn Ala Ser Ala Asn 15 Ser gct gat gag tct gtt aaa ggg cct aat ctt aca gaa ata agt aaa aaa 96 Ala Asp Glu Ser 20 Val Lys Gly Pro Asn 25 Leu Thr Glu Ile Ser 30 Lys Lys att aca gaa tct aac gca gtt gtt ctg gcc gtg aaa gaa gtt gag acc 144 Ile Thr Glu 35 Ser Asn Ala Val Val 40 Leu Ala Val Lys Glu 45 Val Glu Thr tta ctt gca tct ata gat gaa ctt gct acc aaa gct att ggt aaa aaa 192 Leu Leu 50 Ala Ser Ile Asp Glu 55 Leu Ala Thr Lys Ala 60 Ile Gly Lys Lys 122 ata ggc aat aat ggt tta gag gee aat cag agt aaa aac aca tca ttg 240 Ile Gly 65 Asn Asn Gly Leu 70 Glu Ala Asn Gin Ser 75 Lys Asn Thr Ser Leu 80 tta tca gga gct tat gea ata tct gac cta ata gea gaa aaa tta aat 288 Leu Ser Gly Ala Tyr B5 Ala Ile Ser Asp Leu . 90 Ile Ala Glu Lys Leu 95 Asn gta ttg aaa aat gaa gaa tta aag gaa aag att gat aca gct aag caa 336 Vai Leu Lys Asn 100 Glu Glu Leu Lys Glu 105 Lys He Asp Thr Ala 110 Lys Gin tgt tct aca gaa ttt act aat aaa cta aaa agt gaa cat gea gtg ctt 384 Cys Ser Thr 115 l Glu Phe Thr Asn Lys 120· Leu Lys Ser Glu His 125 Ala Val Leu ggt ctg gac aat ctt act gat gat aat gea caa aga gct att tta aaa 432 Gly Leu 130 Asp Asn Leu Thr Asp 135 Asp Asn Ala Gin Arg 140 Ala He Leu Lys aaa cat gea aat aaa gat aag ggt gct gea gaa Ctt gaa aag tta ttt 480 Lys His 145 Ala Asn Lys Asp 150 Lys, Gly Ala Ala Glu 155 Leu Glu Lys Leu Phe 160 aaa gcg gta gaa aac tta tca aaa gea gct caa gac aca tta aaa aat 528 Lys Ala Vai Glu Asn 165 Leu Ser 1 Lys Ala Ala 170 Gin Asp Thr Leu Lys 175 Asn gct gtt aaa gag Ctt aca agt cct att gtc cat ggt aat aat tca gga 576 Ala Vai Lys Glu 180 Leu Thr Ser Pro He 185 Val His Gly Asn Asn 190 Ser Gly aaa gat ggg aat aca tct gea aat tct gct gat gag tct gtt aaa ggg 624 Lys Asp Gly 195 Asn Thr Ser Ala Asn 200 Ser Ala Asp Glu Ser 205 Val Lys Gly cct aat ctt aca gaa ata agt aaa aaa att aca gaa tct aac gea gtt 672 Pro Asn 210 Leu Thr Glu Ile Ser 215 Lys Lys Ile Thr Glu 220 Ser Asn Ala Val gtt ctg gct gtg aaa gaa att gaa act ttg ctt gea tct ata gat gaa 720 Vai Leu 225 Ala Vai Lys Glu 230 He Glu Thr Leu Leu 235 Ala Ser Ile Asp Glu 240 ctt gct act aaa gct att ggt aaa aaa ata caa caa aat ggt ggt tta 768 Leu Ala Thr Lys Ala 245 Ile Gly Lys Lys Ile 250 Gin Gin Asn Gly Gly 255 Leu gct ate gãa gcg σαα cat aat gga aca ttq tta gea ggt gct tat aca 816 Ála Vai Glu Ãlã 260 Gly His Asn Gly Thr 265 Leu Leu Ala Gly Ala 270 Tyr Thr ata tca aaa cta ata aca caa aaa tta gat gga ttg aaa aat tca gaa 864 Ile Ser Lys 275 Leu I le Thr Gin Lys 280 Leu Asp Gly Leu Lys 285 Asn Ser Glu aaa tta aag gaa aaa att gaa aat gct aag aaa tgt tct gaa gat ttt 912 Lys Leu 290 Lys Glu Lys Ile Glu 295 Asn Ala Lys Lys Cys 300 Ser Glu Asp Phe act aaa aaa cta gaa gga gaa cat gcg caa ctt gga att gaa aat gtt 960 Thr Lys 305 Lys Leu Glu Gly 310 Glu His Ala Gin Leu 315 Gly Ile Glu Asn Val 320 ] 23 act Thr gat Asp gag Glu aat Asn gca Ala 325 aaa Lys 333 Lys gct Ala att Ile tta Leu 330 ata Ile a ca Thr gat Asp ÇC3 Ala gct Ala 335 aaa Lys 1008 gat Asp aag Lys ggc Gly gct Ala 340 gca Ala Q 51 Çf Glu ctt Leu gaa Glu aag Lys 345 cta Leu ttt Phe Lys gca Ala gta Vai 350 gaa Glu aae Asn 1056 ttg Leu gca Ala 3Sâ Lys 355 gca Ala gct Ala aaa Lys gag Glu atg Met 360 ctt Leu gct Ala aat Asn tca Ser gtt Vai 365 aaa Lys gag Glu ctt Leu 1104 ac 1106

<210> 42 <211> 367 <212> PRT <213> Sequência Artificial <2 2 0> <223> Quimera OspC <400> 42 124

Ala 1 Cys Asn Asn Ser 5 Gly Lys Asp Gly Asn 10 Ala Ser Ala Asn Ser 15 Ala Asp Glu Ser Vai 20 Lys Gly Pro Asn Leu 25 Thr Glu Ile Ser Lys 30 Lys Ile Thr Glu Ser 35 Asn Ala Vai Vai Leu 40 Ala Vai Lys Glu val 45 Glu Thr Leu Leu Ala 50 Ser Ile Asp Glu Leu 55 Ala Thr Lys Ala Ile 60 Gly Lys Lys Ile Gly Asm 65 Asn Gly Leu Glu 70 Ala Asn Gin Ser Lys 75 Asn Thr Ser Leu Leu 80 Ser Gly Ala Tyr Ala 85 Ile Ser Asp Leu Ile 90 Ala Glu Lys Leu Asn 95 Val Leu Lys Asn Glu 100 Glu Leu Lys Glu Lys 105 Ile Asp Thr Ala Lys 110 Gin Cys Ser Thr Glu 115 Phe Thr Asn Lys Leu 120 Lys Ser Glu His Ala 125 Val Leu Gly Leu Asp 130 Asn Leu Thr Asp Asp 135 Asn Ala Gin Arg Ala 140 Ile Leu Lys Lys His 145 Ala Asn Lys Asp Lys 150 Gly Ala Ala Glu Leu 155 Glu Lys Leu Phe Lys 160 Ala Vai Glu Asn Leu 165 Ser Lys Ala Ala Gin 170 Asp Thr Leu Lys Asn 175 Ala Vai Lys Glu Leu 180 Thr Ser Pro Ile Vai 185 His Gly Asn Asn Ser 190 Gly Lys Asp Gly Asn 195 Thr Ser Ala Asn Ser 200 Ala Asp Glu Ser Val 205 Lys Gly Pro Asn Leu 210 Thr Glu Ile Ser Lys 215 Lys Ile Thr Glu Ser 220 Asn Ala Val Val Leu 225 Ala Vai Lys Glu Ile 230 Glu Thr Leu Leu Ala 235 Ser Ile Asp Glu Leu 240 Ala Thr Lys Ala Ile 245 Gly Lys Lys Ile Gin 250 Gin Asn Gly Gly Leu 255 Ala Vai Glu Ala Gly 260 His Asn Gly Thr Leu 265 Leu Ala Gly Ala Tyr 270 Thr Ile Ser Lys Leu 275 Ile Thr Gin Lys Leu 280 Asp Gly Leu Lys Asn 285 Ser Glu Lys Leu Lys 290 Glu Lys Ile Glu Asn 295 Ala Lys Lys Cys Ser 300 Glu Asp Phe Thr Lys 305 Lys Leu Glu Gly Glu 310 His Ala Gin Leu Gly 315 Ile Glu Asn Val Thr 320 Asp Glu Asn A.l.a Lys 325 Lys Ala Ile Leu 1 Ile 330 Thr Asp Ala Ala Lys 335 Asp Lys Gly Ala Ala 340 Glu Leu Glu Lys Leu 345. Phe Lys Ala Val Glu 350 Asn Leu Ala Lys Ala 355 Ala Lys Glu Met Leu 360 Ala Asn Ser Vai Lys 365 Glu Leu

<210> 43 <211> 633 <212> ADN <213> Borrelia burgdorferi 125 < 2 2 Ο >

<221> CDS <2 2 2> (1} ..... (633) <400> 43 126 atg aaa aag aat aca tta agt gcg ata tta atg act tta ttt tta ttt 48 Met 1 Lys Lys Asn Thr 5 Leu Ser Ma Ile Leu 10 Met Thr Leu Phe Leu 1.5 Phe ata tct tgt aat aat tca ggg aaa gat ggg aat aca tct gca aat tct 96 Ile Ser Cys Asn 20 Asn Ser Gly , Lys Asp Gly 25 Asn Thr Ser Ala 30 Asn Ser gct gat gag tct gtt aaa ggg cct aat ctt aca gaa ata aat aaa aaa 144 Ala Asp Glu 35 Ser Val Lys Gly Pro 40 Asn Leu Thr Glu Ile 45 Asn Lys Lys att acg gat tct aat gcg gtt tta ctt gct gtg aaa gag gtt gaa gcg 192 Ile Thr 50 Asp Ser Asn Ala Val 55 Leu Leu Ala Val Lys 60 Glu Val Glu Ala ttg ctg tca tct ata gat gaa att gct gct aaa gct att ggt aaa aaa 240 Leu 65 Leu Ser Ser Ile Asp 70 Glu Ile Ala Ala Lys 75 Ala Ile Gly Lys Lys 80 ata cac caa aat aat ggt ttg gat acc gaa aat aat cac aat gga tca 288 Ile His Gin Asn Asn 85 Gly Leu Asp Thr Glu 90 Asn Asn His Asn Gly Ser 95 ttg tta gcg gga gct tat gca ata tca acc cta ata aaa caa aaa tta 336 Leu Leu Ala Gly 100 Ala Tyr Ala Ile Ser 105 Thr Leu Ile Lys Gin 110 Lys Leu 3— — 3 3- Htt - — SI aaa aat aaa tta aag aaa aaa att gat aca gct aag 384 Asp Gly Leu 115 Lys Asn Glu GÍy Leu 120 Lys Glu Lys Ile Ãsp 125 Ãlã Ala Lys aaa tgt tct gaa aca ttt act aat aaa tta aaa gaa fit aa cac aca gat 432 Lys Cys 130 Ser Glu Thr Phe Thr 135 Asn Lys Leu Lys Glu 140 Lys His Thr Asp ctt ggt aaa gaa ggt gtt act gat gct gat gca aaa gaa gee att tta 480 Leu 145 Gly Lys Glu Gly Val 150 Thr Asp Ala Asp Ala 155 Lys Glu Ala Ile Leu 160 gca aat ggt act aaa act aaa ggt gct gaa gaa ctt gga ctcil 3. tta 528 Lys Ala Asn Gly Thr 165 Lys Thr Lys Gly Ala 170 Glu Glu Leu Gly Lys 175 Leu ttt gaa tca gta gag gtc ttg tca aaa gca gct aaa gag atg ctt gct 576 Phe Glu Ser Vai 180 Glu Val Leu Ser Lys 185 Ala Ala Lys Glu Met 190 Leu Ala aat tca gtt aaa gag ctt aca age cct gtt gtg gca gaa agt 1 cca aaa 624 Asn aaa Ser cct Vai 195 taa Lys Glu Leu Thr Ser 200 Pro Val Val Ala Glu 205 Ser Pro Lys 633

Lys Pro * 210 <210> 44 <211> 209 127

<212> PRT <213> Borrelia burgdorferi <400> 44

Lys 1 Lys Asn Thr Leu 5 Ser Ala Ile Leu Met 10 Thr Leu Phe Leu Phe 15 Ile Ser cys Asn Asn 20 Ser Gly Lys Asp Gly 25 Asn Thr Ser Ala Asn 30 Ser Ala Asp Glu Ser 35 Vai Lys Gly Pro Asn 40 Leu Thr Glu Ile Asn 45 Lys Lys Ile Thr Asp 50 Ser Asn Ala Vai Leu 55 Leu Ala Val Lys Glu 60 Val Glu Ala Leu Leu 65 Ser Ser Ile Asp Glu 70 Ile Ala Ala Lys Ala 75 Ile Gly Lys Lys Ile 80 His Gin Asn Asn Gly 85 Leu Asp Thr Glu Asn 90 Asn His Asn Gly Ser 95 Leu Leu Ala Gly Ala 100 Tyr Ala Ile Ser Thr 105 Leu Ile Lys Gin Lys 110 Leu Asp Gly Leu Lys 1.15 Asn Glu Gly Leu Lys 120 Glu Lys Ile Asp Ala 125 Ala Lys Lys Cys Ser 130 Glu Thr Phe Thr Asn 135 Lys Leu Lys Glu Lys 140 His Thr Asp Leu Gly 145 Lys Glu Gly Vai Thr 150 Asp Ala Asp Ala Lys 155 Glu Ala Ile Leu Lys 160 Ala Asn Gly Thr Lys 165 Thr Lys Gly Ala Glu 170 Glu Leu Gly Lys Leu 175 Phe Glu Ser Vai Glu 1Θ0 Vai Leu Ser Lys Ala 185 Ala Lys Glu Met Leu 190 Ala Asn Ser Pro Vai Lys 195 Glu Leu Thr Ser Pro 200 Vai Val Ala Glu Ser 205 Pro Lys Lys

<210> 45 <211> 580 <212> ADN <213> Borrelia burgdorferi <220> <221> CDS <222> ¢1)...(580) <40Q> 45 128 atg gct tgt aat aat tca ggg 1 aaa t gat ggg aat aca tct gca aat tct 48 Met 1 Ala Cys Asn Asn 5 Ser Gly Lys : Asp Gly Asn Thr Ser Ala Asn Ser 10 15 gct gat gag tct gtt aaa ggg cct aat ctt aca gaa ata aat aaa aaa 96 Ala Asp Glu Ser 20 Vai Lys Gly Pro Asn 25 1 Leu Thr Glu Ile Asn 30 Lys Lys att acg gat tct aat gcg gtt ttá ctt gct gtg aaa gag gtt gaa gcg 144 Ile Thr Asp 35 Ser Asn Ala Val Leu 40 Leu Ala Val Lys Glu 45 Val Glu Ala ttg c*t g tca tct ai tr 3 gat gaa att gct gct aaa gct att ggt aaa aaa 192 Leu Leu 50 Ser Ser Ile Asp Glu 55 Ile Ala Ala Lys Ala 60 Ile Gly Lys Lys ata cac caa aat aat ggt ttg gat Asp' acc gaa aat aat cac aat gga tca 240 Ile 65 His Gin Asn Asn Gly 70 Leu Thr Glu Asn 75 Asn His Asn Gly Ser 80 ttg tta gcg gga gct tat gca ata tca acc cta ata aaa caa aaa tta 288 Leu Leu Ala Gly Ala 85 Tyr Ala Ile Ser Thr ,90 Leu Ile Lys Gin Lys 95 Leu gat gga ttg aaa aat gaa ggaitta aag gaa aaa att gat gcg gct aag 336 Asp Gly Leu Lys 100 Asn Glu Gly Leu Lys 105 Glu Lys Ile Asp Ala 110 JTii 13 Lys aaa tgt tct gaa aca ttt act, aat aaa tta aaa gaa aaa cac aca gat 384 Lys Cys Ser 115 Glu Thr Phe Thr Asn 120 Lys Leu Lys Glu Lys 125 His Thr Asp ctt ggt aaa gaa ggt gtt act gat gct gat gca aaa gaa gee att tta 4 32 Leu Gly Lys 130 Glu Gly Vai Thr 135 Asp Ala Asp Ala Lys 140 Glu Ala Ile Leu aaa gca aat ggt act 333 act aaa ggt gct gaa gaa ctt gga aaa tta 480 Lys 145 Ala Asn Gly Thr Lys 150 Thr Lys Gly Ala Glu 155 Glu Leu Gly Lys Leu 160 ttt gaa tca gta gag gtc ttg tca aaa gca gct aaa gag atg ctt gct 528 Phe Glu Ser vai Glu 165 Vai Leu Ser Lys Ala 170 Ala Lys Glu Met Leu 175 Ala aat tca gtt aaa gag ctt aca age cct gtt gtg gca gaa agt cca tcc 576 Asn atg Met Ser g Vai Lys 1Θ0 Glu Leu Thr Ser Pro 185 Val Val Ala Glu Ser 190 Pro Ser 580

<210> 46 <211> 192 < 212 > PRT 129 <213> Borrelia burgdorferi <400> 46

Ala l Cys Asn Asn Ser 5 Gly Lys Asp Gly Asn 10 Thr Ser Ala Asn Ser 15 Ala Asp Glu Ser Val 20 Lys Gly Pro Asn Leu 25 Thr Glu Ile Asn Lys 30 Lys Ile Thr Asp Ser Asn 35 Ala val Leu Leu 40 Ala Val Lys Glu Val 45 Glu Ala Leu Leu Ser 50 Ser 11e Asp Glu Ile 55 Ala Ala Lys Ala Ile Gly 60 Lys Lys Ile His 65 Gin Asn Asn Gly Leu 70 Asp Thr Glu Asn Asn 75 His Asn Gly Ser Leu 80 Leu Ala Gly Ala Tyr 85 Ala Ile Ser Thr Leu 90 Ile Lys Gin Lys Leu 95 Asp Gly Leu Lys Asn 100 Glu Gly Leu Lys Glu 105 Lys Ile Asp Ala Ala 110 Lys Lys Cys Ser Glu Thr 115 Phe Thr Asn Lys 120 Leu Lys Glu Lys His 125 Thr Asp Leu GLy Lys 130 Glu Gly Val Thr Asp Ala 135 Asp Ala Lys Glu 140 Ala Ile Leu Lys Ala 145 Asn Gly Thr Lys Thr 150 Lys Gly Ala Glu Glu 155 Leu Gly Lys Leu Phe 160 Glu Ser Val Glu Val 165 Leu Ser Lys Ala Ala 170 Lys Glu Met Leu Ala 175 Asn Ser Val Lys Glu 1Θ0 Leu Thr Ser Pro Val 185 Val Ala Glu Ser Pro 190 Ser Met <210> 47 < 211 > 639 < 212 > ADN <213> Borrelia ga <220> <221> CDS <222> (D · . . (639) <400> 47 130 atg HctB aag aat aca tta agt gcg ata Met Lys Lys Asn Thr Leu Ser Ala Ile 1 5 ata tct tgt agt aat tca ggg aaa ggt XI e Ser Cys Ser Asn Ser Gly Lys Gly 20 25 cct gct gac gag tct gcg aaa ggg cct Pro Ala Asp Glu Ser Ala Lys Gly Pro 35 40 aaa att aca gat tct aat gca ttt gta Lys Ile Thr Asp Ser Asn Ala Phe Val 50 55 act ttg gtit tta tct ata gat gaa ctt Thr Leu Vai Leu Ser Ile Asp Glu Leu 65 70 aaa ata gac aat aat aat ggt tta gct Lys Ile Asp Asn Asn Asn dy Leu Ala 85 tcg ttg tta gca gga gcc tat gca ata Ser Leu Leu Ala Gly Ala Tyr Ala Ile 100 105 ttg agt aaa ttg aaa aat tta gaa gaa Leu Ser Lys Leu Lys Asn Leu Glu Glu 115 120 gct aag aaa tgt tcc gaa gaa ttt act Ala Lys Lys Cys Ser Glu Glu Phe Thr 130 135 gca gat ctt ggc aaa cag gat gct 1 acc Ala Asp Leu Gly Lys Gin Asp Ala Thr 145 150 1 att tta aaa aca cat gca act acc gat Ile Leu Lys Thr His Ala Thr Thr Asp 165 gat tta ttt gaa tca gta gaa ggt ttg Asp Leu Phe Glu Ser Val Glu Gly Leu 1B0 185 i cta act 1 aat tca gtt aaa gaa ctt aca Leu Thr Asn Ser Val Lys Glu Leu Thr 195 200 cca aaa aaa cct taa Pro Lys Lys Pro * 210 tta Leu 10 atg Met act Thr tta Leu ttt Phe tta Leu 15 ttt Phe 48 ggg Gly gat Asp tct Ser gca Ala tct Ser 30 act Thr aat Asn 96 aat Asn ctt Leu aca Thr gaa Glu 45 ata Ile age Ser aaa Lys 144 ctt Leu gct Ala gtt Val 60 aaa Lys gaa Glu gtt Val gag Glu 192 gct Ala aag Lys 75 aaa Lys gct Ala att ggt Ile Gly caa Gin 00 240 gct Ala 90 tta Leu aat Asn aat Asn cag Gin aat Asn 95 gga Gly 288 tca Ser acc Thr cta Leu ata Ile aca Thr 110 gaa Glu aaa Lys 336 tta Leu aag Lys aca Thr gaa Glu 125 att Ile gca Ala aag Lys 384 aat aaa cta agt ggt cat 432 Asn Lys Leu Lys 140 Ser Gly His gat gat Asp Asp 155 cat His gca Ala aaa Lys gca Ala gct AJLa 160 480 aaa Lys 170 ggt gct Gly Ala aaa Lys gaa Glu ttt Phe 175 aaa Lys 528 tta Leu aaa gca gct Lys Ala Ala caa Gin 190 gta Va.l gca Ala 576 agt Ser cct Pro gtt Val gta Val gca Ala gaa Glu agt Ser 624 <210> 48 205 131

<211> 211 <212> PRT <213> Borrelía garinii <400> 48

Lys 1 Lys Asn Thr Leu :5 Ser Ala Ile Leu Met 10 Thr Leu Phe Leu Phe 15 Ile Ser Cys Ser Asn 20 Ser Gly Lys Gly Gly 25 Asp Ser Ala Ser Thr 30 Asn Pro Ala Asp Glu 35 Ser Ala Lys Gly Pro 40 Asn Leu Thr Glu Ile 45 Ser Lys Lys Ile Thr 50 Asp Ser Asn Ala Phe 55 Vai Leu Ala Val Lys 60 Glu Val Glu Thr Leu 65 Vai Leu Ser Ile Asp Glu 70 Leu Ala Lys Lys 75 Ala Ile Gly Gin Lys 80 Ile Asp Asn Asn Asn 85 Gly Leu Ala Ala Leu 90 Asn Asn Gin Asn Gly 95 Ser Leu Leu Ala Gly 100 A.1 (3^ Tyr AI a Ile Ser 105 Thr Leu Ile Thr Glu 110 kys Leu Ser Lys Leu 115 Lys Asn Leu Glu Glu 120 Leu Lys Thr Glu Ile 125 Ala Lys Ala Lys Lys 130 Cys Ser Glu Glu Phe 135 Thr Asn Lys Leu Lys 140 Ser Gly His Ala ϋςη ' —íT 145 T_.nn fZl \r **"“"»* T.V,=! ' ‘ At filn Aso 150 Ala Thr Asp Asri His 155 AJla I.us Ala Ala Ile 160 Leu Lys Thr His Ala 165 Thr Thr Asp Lys Gly 170 Ala Lys Glu Phe Lys 175 Asp Leu Phe Glu Ser 180 Vai Glu Gly Leu Leu 185 Lys Ala Ala Gin Val 190 Ala Leu Thr Asn Ser 195 Vai Lys Glu Leu Thr 200 Ser Pro Val Val Ala 205 Glu Ser Pro

Lys Lys Pro 210

<210> 49 <211> 624 <212> ADN <213> Borrelía afzelii <220>

<221> CDS <222> {!)... (624) 132 <400> 49 atg aaa aag aat aca tta agt gcg ata tta atg act tta ttt tta ttt 48 mt 1 Lys Lys Asn Thr 5 Leu Ser Ala Ile Leu 10 Met Thr Leu Phe Leu 15 Phe ata tct tgt aat aat tca ggt ggg gat tct gea tct act aat cct gat 96 Xle Ser Cys Asn 20 Asn Ser Gly dy Asp 25 Ser Ala Ser Thr Asn 30 í Pro Asp gag tct gea aas gga cct aat ctt acc gta ata age aaa aaa att aca 144 Glu Ser Ala 35 Lys Gly Pro Asn Leu 40 Thr Vai Ile Ser Lys 45 Lys Ile Thr gat tct aat gea ttt tta ctg gct gtg aaa gaa gtt gag gct ttg ctt 192 Asp Ser 50 Asn Ala Phe Leu Leu 55 Ala Vai Lys Glu Val 60 Glu Ala Leu Leu tca tct ata gat gaa ctt tct aaa gct att ggt aaa aaa ata aaa aat 240 Ser 65 Ser Ile Asp Glu Leu 70 Ser Lys Ala Ile Gly 75 Lys Lys Ile Lys Asn 80 gat ggt act tta gat aac gaa gea aat cga aac gaa tca ttg ata gea 288 Asp Gly Thr Leu Asp 85 Asn Glu Ala Asn Arg 90 Asn Glu Ser Leu Ile 95 Ala gga gct tat gaa ata tca aaa cta â t â aca caa aaa tta agt gta ttg 336 Gly Ala Tyr Glu 100 Ile Ser Lys Leu Ile 105 Thr Gin Lys Leu Ser 110 Val Leu aat tca gaa gaa tta aag aaa aaa att aaa gag gct aag gat tgt tcc 384 Asn Ser Glu 115 Glu Leu Lys Lys Lys 120 Ile Lys Glu Ala Lys 125 Asp Cys Ser caa aaa ttt act act aag cta aaa gat agt cat gea gag ctt ggt ata 432 Gin Lys 130 Phe Thr Thr Lys Leu 135 Lys Asp Ser His Ala 140 Glu Leu Gly Ile caa age gtt cag gat gat aat gea aaa aaa gct att tta âaa aca cat 480 Gin 145 Ser Vai Gin Asp Asp 150 Asn Ala Lys Lys Ala 155 Ile Leu Lys Thr His 160 gga act aaa gac aag ggt gct aaa gaa Ctt gaa gag tta ttt aaa tca 528 Gly Thr Lvs Asp Lvs 165 Gly Ala Lys Glu Leu 170 Glu Glu Leu Phe Lys 175 Ser cta gaa age ttg tca aaa gea gcg caa gea gea tta act aat tca gtt 576 Leu Glu Ser Leu 1Θ0 Ser Lys Ala Ala Gin 185 Ala Ala Leu Thr Asn 190 Ser Val aaa gag ctt aca aat cct gtt gtg gea gaa agt cca aaa aaa cct taa 624 Lys Glu Leu 195 Thr Asn Pro Vai Vai 200 Ala Glu Ser Pro 205 Lys Pro 4

<210> 50 <211> 206 <212> PRT <213> Borrelia afzelii <400> 50

Lys 1 Lys Asn Thr Leu 5 Ser Ala Ile Ser Cys Asn Asn 20 Ser Gly Gly Asp Ser Ala Lys 35 Gly Pro Asn Leu Thr 40 Ser Asn 50 Ala Phe Leu Leu Ala 55 Vai Ser 65 Ile Asp Glu Leu Ser 70 Lys Ala j Gly Thr Leu Asp Asn 85 Glu Ala Asn Ala Jyj. Glu Ile 100 Ser Lys Leu Ile Ser Glu Glu 115 Leu Lys Lys Lys Ile 120 Lys Phe 130 Thr Thr Lys Leu Lys 13 5' Asp Ser 145 Vai Gin Asp Asp Asn 150 Ala Lys Thr Lys Asp Lys Gly 165 Ala Lys t Glu Gl,u Ser Leu Ser 180 Lys Ala Gin Glu Leu Thr 195 Asn Pro Vai Vai Ala 200

Leu Met Thr Leu Phe Leu Phe Ile 10 15 Ser Ala Ser Thr Asn Pro Asp Glu 25 30 Vai Ile Ser Lys Lys Ile Thr Asp 45 Lys Glu Vai Glu Ala Leu Leu Ser 60 Ile Gly Lys Lys Ile Lys Asn Asp 75 80 Arg Asn Glu Ser Leu Ile Ala Gly 90 95 Thr Gin Lys Leu Ser Vai Leu Asn 1.05 110 Lys Glu Ala Lys Asp Cys Ser Gin 1 125 Ser His Ala Glu Leu Gly Ile Gin 140 Lys Ala Ile Leu Lys Thr His Gly 155 160 Leu Glu Glu Leu Phe Lys Ser Leu 170 175 Ala Ala Leu Thr Asn Ser Vai Lys 1B5 190 Glu Ser Pro Lys Lys Pro 205

<210> 51 <211> 1680 <212> ADN

<213> Quimera OspC <220> <221> CDS <2 2 2> (1) . ., (1680) <400> 51 134 atg gct tgt aat aat tca ggg aaa gat ggg aat aca tct gca aat tct 48 Met 1 Ala Cys Asn Asn 5 Ser Gly Lys Asp Gly 10 Asn Thr Ser Ala Asn 15 Ser gct gat gag tct gtt aaa ggg cct aat ctt aca gaa ata agt aaa aaa 96 Ala Asp Glu Ser r» AU Vai Lys Gly Pro Asn r»c Leu Thr Glu Ile Ser 30 Lys Lys att acg gat tct aat gcg gtt tta Ctt gct gtg aaa gag gtt gaa gcg 144 Ile Thr Asp 35 Ser Asn Ala Vai Leu 40 Leu Ala Vai Lys Glu 45 Vai Glu Ala ttg ctg tca tct ata gat gaa att gct gct aaa gct att ggt aaa aaa 192 Leu Leu 50 Ser Ser Ile Asp Glu 55 Ile Ala Ala Lys Ala 60 Ile Gly Lys Lys ata cac caa aat aat ggt ttg gat acc gaa tat aat cac aat gga tca 240 Ile 65 His Gin Asn Asn Gly 70 Leu Asp Thr Glu Tyr 75 Asn His Asn Gly Ser 80 ttg tta gcg gga gct tat gca ata tca acc cta ata aaa caa aaa tta 28Θ 336 135 336 135 Leu Leu Ala Gly Ala 85 Tyr Ala Ile Ser Thr 90 Leu Tle Lys Gin Lys 95 Leu gat gga ttg 333 aat gaa gga tta aag gaa aaa att gat gcg gct aag Asp Gly Leu Lys 100 Asn Glu Gly Leu Lys 105 Glu Lys Ile Asp Ala Ala 110 i>ys aaa tgt tct gaa aca ttt act aat aaa tta aaa gaa aaa cac aca gat Lys Cys Ser 115 Glu Thr Phe Thr Asn 120 Lys Leu Lys Glu Lys 125 His Thr ASp ctt ggt aaa gaa ggt gtt act gat gct gat gca aaa gaa gcc att tta Leu Gly 130 Lys Glu Gly Val Thr 135 Asp Ala Asp Ala Lys 140 Glu Ala Ile í Leu aaa a ca aat ggt act aaa act aaa ggt gct gaa gaa ctt gga aaa tta Lys 145 Thr Asn Gly Thr Lys 150 Thr Lys Gly Ala Glu 155 Glu Leu Gly Lys Leu 160 ttt gaa tca gta gag gtc ttg tca aaa gca gct aaa gag atg ctt gct Phe Glu Ser Val Glu 165 Val Leu Ser Lys Ala 170 Ala Lys Glu Met Leu 175 Ala aat tca gtt aaa gag ctt aca age cct gtt gtg gca gaa agt cca gcc Asn Ser Val Lys 180 Glu Leu Thr Ser Pro 185 Val Val Ala Glu Ser Pro 190 Ala atg ggt agt aat tca ggg aaa ggt ggg gat tct gca tct act aat cct Met Gly Ser 19S Asn Ser Gly Lys Gly 200 Gly Asp Ser Ala Ser 205 Thr Asn Pro gct g&c gag tct gcg aaa ggg cct aat ctt aca gaa ata age aaa aaa Ala Asp 210 Glu Ser Ala Lys Gly 215 Pro Asn Leu Thr Glu 220 Ile Ser Lys Lys att aca gat tct aat gca ttt gta ctt gct gtt 333 gaa gtt gag act Ile 225 Thr Asp Ser Asn Ala 230 Phe Val Leu Ala Val 235 Lys Glu Val Glu Thr 240 ttg gtt tta tct ata gat gaa ctt gct aag aaa gct att ggt caa aaa Leu Val Leu Ser Ile 245 Asp Glu Leu Ala Lys 250 Lys Ala Ile Gly Gin 255 Lys ata gac aat aat aat ggt tta gct gct tta aat aat €3ÇJ aat gga teg Ile Asp Asn Asn 260 Asn dy Leu Ala Ala 265 Leu Asn Asn Gin Asn Gly 270 Ser ttg tta gca gga gcc tat gca ata tca acc cta ata aca gaa aaa ttg Leu Ala 275 Gly -Ala Tyr Ala Tle 280 Ser Thr Leu Ile Thr 285 Glu Lys Leu agt aaa ttg aaa aat tta gaa gaa tta aag aca gaa att gca aag gct Ser Lys 290 Leu Lys Asn Leu Glu 295 Glu Leu Lys Thr Glu 300 Ile Ala Lys Ala aag aaa tgt tcc gaa gaa ttt act aat aaa cta aaa agt ggt cat gca Lys 305 Lys Cys Ser Glu Glu 310 Phe Thr Asn Lys Leu 315 Lys Ser Gly His Ala 320 gat ctt ggc aaa cag gat gct acc gat gat cat gca aaa gca gct att Asp Leu Gly Lys Gin 325 Asp Ala Thr Asp Asp 330 His Ala Lys Ala Ala 335 Ile 384 432 48 Ο 528 576 624 672 720 768 Β16 Β64 912 960 1008 136 tta aaa aca cat gca act acc gat aaa ggt gct aaa gaa ttt aaa gat 1056 Leu Lys Thr His 340 Ala Thr Thr Asp Lys 345 Gly Ala Lys Glu Phe 350 Lys Asp tta ttt gaa tca gta gaa ggt ttg tta aaa gca gct caa gta gca cta 1104 Leu Phe Glu 355 Ser Vai Glu Gly Leu 360 Leu Lys Ala Ala Gin 365 val Ala Leu açt aat tca gtt aaa gaa ctt ggt ca c cgt aat aat tca ggt ggg gat 1152 Thr Asn 370 Ser Vai Lys Glu Leu Gly 375 His Axg Asn Asn 380 Ser Gly Gly Asp tct gca tct act aat cct gat gag tct gca aaa gga cct aat ctt acc 1200 Ser 385 Ala Ser P Thr Asn Pro 390 Asp Glu] Ser Ala Lys 395 Gly Pro Asn Leu Thr 400 gta ata age aaa £ii Gk 51 att aca gat tct aat gca ttt tta ctg gct gtg 124 S Vai Ile Ser Lys Lys 405 Ile Thr Asp Ser Asn 410 Ala Phe Leu Leu Ala 415 Val aaa gaa gtt gag gct ttg ctt tca tct ata gat gaa ctt tct aaa gct 1296 Lys Glu Vai Glu 420 Ala Leu Leu1 Ser Ser 425 Ile Asp Glu Leu Ser 430 Lys Ala att ggt aaa aaa ata aaa aat gat ggt act tta gat aac gaa gca aat 1344 lie Gly Lys 4 35 Lys Ile Lys Asn Asp 440 Gly Thr Leu Asp Asn 445 Glu Ala Asn cga aac gaa tca ttg ata gca gga gct tat gaa ata tca aaa cta ata 1392 Arg Asn 450 Glu Ser Leu Ile Ala 455 Gly Ala Tyr Glu Ile 460 Ser Lys Leu Ile aca caa aaa tta agt gta ttg aat tca gaa gaa tta aag aaa aaa att 1440 Thr 465 Gin Lys Leu Ser Vai 470 Leu Asn Ser Glu Glu 475 Leu Lys Lys Lys Ile 480 aaa gag gct aag gat tgt tcc caa aaa ttt act act aag cta aaa gat 1488 Lys Glu Ala Lys Asp 485 Cys Ser G1 ιϊ Lys Phe 490 Thr Thr Lys Leu Lys 495 Asp agt cat gca gag ctt ggt ata caa age gtt cag gat gat aat gca ciili íU ϋ 1536 Ser His Ala Glu 500 Leu Gly Ile Gin Ser 505 Val Gin Asp Asp Asn 510 Ala Lys aaa gct att tta aaa aca cat gga act aaa gac aag ggt gct aaa gaa 1584 Lys Ala Ile 515 Leu Lys Thr His Gly 520 Thr Lys Asp Lys Gly 525 Ala Lys Glu uLL yàõ. gag tta *«* LLL âõã tCu n i« m gca 4· *·»#* raa 1632 Leu Glu 530 Glu Leu Phe Lys Ser 535 Leu Glu Ser Leu 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<212> PRT <213> Quimera OspC <400> 52 138

Met 1 Ala Cys Asn Asn 5 Ser Gly Lys Asp Gly 10 Asn Thr Ser Ala Asn Ser 15 Ala Asp Glu Ser 20 Vai Lys Gly Pro Asn 25 Leu Thr Glu Ile Ser 30 Lys Lys Xle Thr Asp 35 Ser Asn Ala Vai Leu 40 Leu Ala Vai Lys Glu 45 Vai Glu Ala Leu Leu 50 Ser Ser Ile Asp Glu 55 Ile Ala Ma Lys Ala 60 Ile Gly Lys Lys Ile 65 His Gin Asn Asn Gly 70 Leu Asp Thr Glu Tyr 75 Asn His Asn Gly Ser 80 Leu Leu Ala Gly Ala 85 Tyr Ala Ile Ser Thr 90 Leu Ile Lys Gin Lys Leu 95 Asp Gly Leu Lys 100 Asn Glu Gly Leu Lys 105 Glu Lys Ile Asp Ala 110 Ala Lys Lys Cys Ser 115 Glu Thr Phe Thr Asn 120 Lys Leu Lys Glu Lys 125 His Thr Asp Leu Gly 130 Lys Glu Gly Vai Thr 135 Asp Ala Asp Ala Lys 140 Glu Ma Ile Leu Lys 145 Thr Asn Gly Thr Lys 150 Thr Lys Gly Ala Glu 155 Glu Leu Gly Lys Leu 160 Phe Glu Ser Vai Glu 165 Vai Leu Ser Lys Ala 170 Ala Lys Glu Met Leu Ma 175 Asn Ser Vai Lys 180 Glu Leu Thr Ser Pro 185 Vai Vai Ma Glu Ser 190 Pro Ala Met Gly Ser 195 Asn Ser Gly Lys Gly 200 Gly Asp Ser Ala Ser 205 Thr Asn Pro Ala Asp 210 Glu Ser Ala Lys Gly 215 Pro Asn Leu Thr Glu 220 Ile Ser Lys Lys Ile 225 Thr Asp Ser Asn Ala 230 Phe Vai Leu Ala Va.1 235 Lys Glu Vai Glu Thr 240 Leu Vai Leu Ser Ile 245 Asp Glu Leu Ala Lys 250 Lys â Ile Gly Gin Lys 255 Ile Asp Asn Asn 260 Asn Gly Leu Ala Ala 265 Leu Asn Asn Gin Asn 270 Gly Ser Leu Leu Ala 275 Gly Ala Tyr Ala Ile 280 Ser Thr Leu Ile Thr 285 Glu Lys Leu Ser Lys 290 Leu Lys Asn Leu Glu 295 Glu Leu Lys Ihr Glu 300 Ile Ala Lys Ala Lys 305 Lys Cys Ser Glu Glu 310 Phe Thr Asn Lys Leu 315 Lys Ser Gly His Ma 320 Asp Leu Gly Lys Gin 325 Asp Ala Thr Asp Asp 330 His Ma Lys Ala Ala ile 335 Leu Lys Thr His 340 Ala Thr Thr Asp Lys 345 Gly Ma Lys Glu Phe 350 Lys Asp Leu Phe Glu 355 Ser Va.1. Glu Gly Leu 360 Leu Lys Ma Ala Gin 365 Vai Ma Leu Thr Asn 370 Ser Vai Lys Glu Leu C W r W Gly His Arg Asn Asn oon w w w Ser Gly Gly Asp Ser 385 Ala Ser Thr Asn Pro 390 Asp Glu Ser Ala Lys 395 Gly Pro Asn Leu Thr 400 Vai Ile Ser Lys Lys 405 Ile Thr Asp Ser Asn 410 Ma Phe Leu Leu Ala Vai 415 Lys Glu Vai Glu 420 Ala Leu Leu Ser Ser 425 Ile Asp Glu Leu Ser 430 Lys Ala Ile Gly Lys 435 Lys Ile Lys Asn Asp 440 Gly Thr Leu Asp Asn 445 Glu Ma Asn Arg Asn 450 Glu Ser Leu Ile Ala 455 Gly Ala Tyr Glu Ile 4 60 Ser Lys Leu Ile Thr 4 65 Gin Lys Leu Ser Vai 470 Leu Asn Ser Glu Glu 475 Leu Lys Lys Lys Ile 480 Lys Glu Ala Lys Asp 485 Cys Ser Gin Lys Phe 490 Thr Thr Lys Leu Lys Asp 495 139

Ser His Ala Glu 500 Leu Gly Ile Gin Ser 505 Val Gin Asp Asp Asn 510 Ala Lys Lys Ala Ile 515 Leu Lys Thr His Gly 520 Thr Lys Asp Lys Gly Ala 525 Lys Glu Leu Glu 530 Glu Leu Phe Lys Ser 535 Leu Glu 1 Ser Leu Ser 540 Lys Ala Ala Gin Ala 545 Ala Leu Thr Asn Ser 550 Val Lys Glu ,Leu Thr 555 Asn Pro Val Val Ala 560 <210> 53 <211> 1137 <212> ADN <213> Quimera OspC < 2 2 0 > <221> CDS <222> (1) ... (1137) < 4 0 0 > 53 140 atg gct tgt aat aat tca ggg aaa gat ggg aat aca tct gca aat tct 48 Met 1 Ala Cys Asn Asn 5 Ser Glyi Lys Asp Gly 10 Asn Thr Ser Ala Asn 15 Ser gct gat gag tct gtt aaa ggg cct aat ctt aca gaa ata agt aaa aaa 96 Ala Asp Glu Ser 20 Vai Lys Gly Pro Asn 25 Leu Thr Glu Ile Ser 30 Lys Lys att a cg gat tct a a t gcg gtt tta Ctt gct gtg aaa gag gtt gaa g«=g 144 Ile Thr Asp 35 Ser Asn Ala Vai Leu 40 Leu AI -a Vai Lys Glu 45 Vai Glu Ala ttg ctg tca tct ata gat gag ctt gct 333 gct att ggt 333 333 ata .192 Leu Leu 50 Ser Ser x 1, xx Asp Glu 55 Leu Ala Lys Ala Ile 60 Gly Lys Lys Ile aaa aac gat ggt agt tta gat aat gaa gca aat ege aac gag tca ttg 240 Lys 65 Asn Asp Gly Ser Leu 70 Asp Asn Glu Ala Asn 75 Arg Asn Glu Ser Leu 80 tta gca gga gct tat aca ata tca acc tta ata aca caa aaa tta agt 288 Leu Ala Gly Ala Tyr 85 Thr Ile Ser Thr Leu 90 Ile Thr Gin Lys Leu 95 Ser aaa tta aac gga tca Qââ ggt tta cLcIÇT gaa aag att gee gca gct aag 336 Lys Leu -Asn Gly 100 Ser Glu Gly Leu Lys 105 Glu Lys Ile Ala Al a 110 Ala Lys aaa tac tct gaa gaa ttt aqt act aaa cta aaa qat aat cat gca cag 384 Lys Cys Ser 1,15 Glu Glu Phe Ser Thr 120 Lys Leu Lys Asp Asn 125 His Ala Gin ctt ggt ata cag gg<= gtt act gat gaa aat gca aaa aaa gct att tta 432 Leu Gly 130 Ile Gin Gly Vai Thr Asp 135 Glu Asn Ala Lys 140 Lys Ala Ile Leu aaa gca aat gca gcg ggt aaa gat aag ggc gtt gaa gaa ctt gaa aag 480 Lys 145 Ala Asn Ala Ala Gly 150 Lys Asp Lys Gly Vai 155 Glu Glu Leu Glu Lys 160 ttg tcc gga tca tta gaa age tta tca 333 gca gct aaa gag atg ctt 528 Leu Ser Gly Ser Leu 165 Glu Ser Leu Ser Lys 170 Ala Ala Lys Glu Met 175 Leu 141 gct ΑΧ 3 aat Asn tca Ser gtt Vai 1.80 aaa Lys ÇãÇ Glu tca ggt Ser Gly ggg Gly 195 gat Asp tct Ser gca Ala cct Pro aat Asn 210 ctt Leu acc Thr gta Vai ata Ile tta Leu 225 ctg Leu gct Ala gtg Vai 3clS Lys gaa Glu 230 ctt Leu tct Ser aaa Lys gct Ala att Ile 245 ggt Gly aac Asn gaa Glu gca Ala aat Asn 260 cga Arg aac Asn tca Ser aaa Lys cta Leu 275 ata lie aca Thr caa Gin aag Lys aaa Lys 290 aaa Lys att Ile aaa i-ys gag Glu aag Lys 305 cta Leu aaa Lys gat Asp agt Ser cat His 310 gat aat Asp Asn gca JV1 a aaa Lys aaa Lys 325 gct Ala ggt gct Gly Ala aaa Lys gaa Glu 340 ctt Leu gaa Glu aaa gca Lys Ala gcg Ala 355 caa Gin gca Ala gca Ala cct Pro gtt Vai 370 gtg Vai gca Ala gaa Glu agt Ser ctt aca age cct gtt gtc Leu Thr Ser 185 Pro Vai Vai tct act aat cct gat gag Ser Thr 200 Asn Pro Asp Glu age aaa aaa att aca gat Ser 215 Lys Lys Ile Thr Asp 220 gtt gag gct ttg ctt tca Vai Glu Ala Leu Leu 235 Ser aaa aaa ata aaa aat gat Lys Lys Ile Lys 250 Asn Asp gaa tca ttg ata gca gga Glu Ser Leu 265 Ile Ala Gly aaa tta agt gta ttg aat Lys Leu 280 Ser Vai Leu Asn gct aag gat tgt tcc caa Ala 295 Lys Asp Cys Ser Gin 300 gca gag ctt ggt ata caa Ala Glu Leu Gly Ile 315 Gin att tta aaa aca cat gga Ile Leu Lys Thr 330 His Gly gag tta ttt aaa tca cta Glu Leu Phe 345 Lys Ser Leu tta act aat tca gtt aaa Leu Thr 360 Asn Ser Vai Lys cea aaa aaa cct taa Pro 375 Lys Lys Pro * cat ggt aat aat 576 His Gly 190 Asn Asn tct gca aaa gga 624 Ser 205 Ala Lys Gly tct aat gca ttt 672 Ser Asn Ala Phe tct ata gat gaa 720 Ser Ile Asp Glu 240 ggt act tta gat 76B Gly Thr Leu Asp 255 gct tat gaa ata 816 Ala Tyr 270 Glu Ile tca gaa gaa tta 864 Ser 285 Glu Glu Leu aaa ttt act act 912 Lys Phe Thr Thr age gtt cag gat 960 Ser Vai Gin Asp 320 act aaa gac aag 1008 Thr Lys Asp Lys 335 gaa age ttg tca 1056 Glu Ser 350 Leu Ser gag ctt aca aat 1104 Glu 365 Leu Thr Asn

<210> 54 <211> 378 <212> PRT

<213> Quimera OspC 1137 142 <400> 54

Mefc Ala Cys Asn Asn Ser Gly Lys Asp Gly Asn Thr Ser • Ala ; Asn Ser 1 5 10 15 Ala Asp Glu Ser Vai Lys Gly Pro Asn Leu Thr Glu Ile Ser Lys Lys 20 25 30 11ε Thr Asp Ser Asn Ala Vai Leu Leu Ala Vai Lys Glu Vai Glu Ala 35 40 45 Leu Leu Ser Ser Ile Asp Glu Leu Ala Lys Ala Ile Gly Lys Lys Ile 50 55 í 60 Lys Asn Asp Gly Ser Leu Asp Asn Glu. Ala Asn Arg Asn Glu Ser Leu 65 70 75 80 Leu Ala Gly Ala Tyr Thr Ile Ser Thr Leu Ile Thr Gin Lys Leu Ser 85 90 95 Lys Leu Asn Gly Ser Glu Gly Leu Lys Glu Lys Ile Ala Ala Ala Lys 100 105 110 Lys Cys Ser Glu Glu Phe Ser Thr Lys Leu Lys Asp Asn His Ala Gin 1.15 120 125 Leu Gly Ile Gin Gly Vai Thr Asp Glu Asn Ala Lys Lys Ala Ile Leu 130 ( 135 140 Lys Ala Asn Ala Ala Gly Lys Asp Lys Gly Vai Glu Glu Leu Glu Lys 145 .150 155 160 Leu Ser Gly Ser Leu Glu Ser Leu Ser Lys Ala Ala Lys Glu Met Leu 165 170 175 Ala Asn Ser Vai Lys Glu Leu Thr Ser 'pro Vai Vai His Gly Asn Asn 180 1 185 190 Ser Gly Gly Asp Ser Ser Thr Asn Pro Asp Glu Ser Ala Lys Gly 195 200 205 Pro Asn Leu Thr Vai Ile Ser Lys Lys Ile Thr Asp Ser Asn Ala Phe 210 215 220 Leu Leu Ala Vai Lys Glu Vaí Glu Ala Leu Leu Ser Ser Ile Asp Glu 225 230 235 240 Leu Ser Lys Ala Ile Gly Lys Lys Ile Lys Asn Asp Gly Thr Leu Asp 245 250 255 Asn Glu Ala Asn Axg Asn Glu Ser Leu Ile Ala Gly Ala Tyr Glu Ile 260 265 270 Ser Lys Leu Ile Thr Gin Lys Leu Ser Vai Leu Asn Ser Glu Glu Leu 275 280 285 Lys Lys Lys Ile Lys Glu Ala Lys Asp Cys Ser Gin Lys Phe Thr Thr 290 295 300 Lys Leu Lys Asp Ser His Ala Glu Leu Gly Ile Gin Ser Vai Gin Asp 30 5 310 315 320 Asp Asn Ala Lys Lys Ala Ile Leu Lys Thr His Gly Thr Lys Asp Lys 325 330 335 Gly Ala Lys Glu Leu Glu Glu Leu Phe Lys Ser Leu Glu Ser Leu Ser 340 345 350 Lys Ala Ala Gin Ala Ala Leu Thr Asn Ser Vai Lys Glu Leu Thr Asn 355 360 365 Pro Vai Vai Ala Glu Ser Pro Lys Lys Pro 370 375

<210> 55 <211> 1158 <212> ADN

<213> Quimera OspC <2 20>

<221> CDS <222> (1) .- - (1158) <400> 55 144 atg gct tgt aat aat tca ggg aaa gat ggg aat aea tct gca aat tct 48

Met Ala Cys Asn Asn Ser Gly Lys Asp Gly Asn Thr Ser Ala Asn Ser 15 10 15 gct gat gag tct gtt aaa ggg cct aat ctt aca gaa ata agt aaa aaa 96 145

Ala Asp Glu Ser 20 Vai Lys Gly Pro Asn 25 Leu Thr Glu Ile Ser 30 Lys Lys att acg gat tct aat gcg gtt tta ctt gct gtg aaa gag gtt gaa gcg 144 Ile Thr Asp 35 Ser Asn Ala Vai Leu 40 Leu Ala Val Lys Glu 45 Val Glu Ala ttg ctg tca tct ata gat gaa att gct gct aaa gct att ggt aaa aaa 192 Leu Leu 50 Ser Ser Ile Asp Glu 55 Ile Ala Ala Lys Ala 60 Ile Gly Lys Lys ata cac caa aat aat ggt ttg gat acc gaa tat aat cac aat gga tca 240 Ile 65 His Gin Asn Asn Gly 70 Leu Asp Thr Glu Tyr 75 Asn His Asn Gly Ser 80 ttg tta gcg gga gct tat gca ata tca acc cta ata aaa caa Sââ tta 288 Leu Leu Ala Gly Ala 85 Tyr Ala Ile Ser Thr 90 Leu Ile Lys Gin Lys 95 Leu gat gga ttg aaa aat gaa gga tta aag gaa aaa att gat gcg gct aag 336 Asp Gly Leu Lys 100 Asn Glu Gly Leu Lys 105 Glu Lys Ile Asp Ala 110 Ala Lys aaa tgt tct gaa aca ttt act aat aaa tta aaa clll cl aaa cac aca gat 384 Lys Cys Ser 115 Glu Thr Phe Thr Asn 120 Lys Leu Lys Glu Lys 125 His Thr Asp ctt ggt aaa gaa ggt gtt act gat gct gat gca aaa gaa gee att tta 432 Leu Gly 130 Lys Glu Gly Vai Thr 135 Asp Ala Asp Ala Lys 140 Glu Ala Ile Leu aaa aca aat ggt act aaa act ci cl cl ggt gct gaa gaa ctt gga aaa tta 480 Lys 145 Thr Asn Gly Thr Lys 150 Thr Lys Gly Ala Glu 155 Glu Leu Gly Lys Leu 160 ttt gaa tca gta gag gtc ttg tca aaa gca gct aaa gag atg ctt gct 528 Phe Glu Ser Vai Glu 165 Vai Leu Ser Lys Ala 170 Ala Lys Glu Met Leu 175 Ala aat tca gtt aaa gag ctt aca age cct gtt gtg gca gaa agt cca aaa 576 Asn Ser Vai Lys 180 Glu Leu Thr Ser Pro 185 Val Val 13 Glu Ser 190 Pro Lys aaa cct ttc cat ggt aat aat tca ggt ggg gat tct gca tct act aat 624 Lys Pro Phe 195 His Gly Asn Asn Ser 200 Gly Gly Asp Ser Ala 205 Ser Thr Asn cct gat gag tct gca gga cct aat ctt acc gta ata age aaa aaa 672 Pro Aso 210 Glu Ser Ala Lys Gly 215 Pro Asn Leu Thr Val 220 Ile Ser Lys Lys att aca gat tct aat gca ttt tta ctg gct gtg aaa gaa gtt gag gct 720 Ile 225 Thr Asp Ser Asn Ala 230 Phe Leu Leu Ala Val 235 Lys Glu Val Glu Ala 24 0 ttg ctt tca tct ata gat gaa ctt tct aaa gct att ggt aaa aaa ata 768 Leu Leu Ser Ser Ile 245 Asp Glu Leu Ser Lys 250 Ala Ile Gly Lys Lys 255 Ile aaa aat gat ggt act tta gat aac gaa gca aat cga aac gaa tca ttg 816 Lys Asn Asp Gly 260 Thr Leu Asp Asn Glu 265 Ala Asn Arg Asn Glu 270 Ser Leu 864 146 864 146 ata gca gga gct tat gaa ata tca aaa cta ata aca caa aaa tta agt Ile Ala Gly 275 Ala Tyr Glu Ile Ser 280 Lys Leu Ile Thr Gin 285 Lys Leu Ser gta ttg aat tca gaa gaa tta aag aaa aaa att aaa gag gct aag gat Vai Leu 290 Asn Ser Glu Glu Leu 295 Lys Lys Lys Ile Lys 300 Glu Ala Lys Asp tgt tcc caa aaa ttt act act aag cta aaa gat agt cat gca gag ctt Cys 305 Ser Gin Lys Phe Thr 310 Thr Lys Leu Lys Asp 315 Ser His Ala Glu Leu 320 ggt ata caa age gtt cag gat gat aat gca aaa aaa gct att tta aaa Gly Ile Gin 1 Ser Vai 325 Gin Asp Asp 1 Asn Ala 330 Lys Lys Ala Ile Leu 335 Lys aca cat gga act aaa gac aag ggt gct aaa gaa ctt gaa gag tta ttt Thr His Gly Thr 340 Lys Asp Lys Gly Ala 34 5 Lys Glu Leu Glu Glu 350 Leu Phe aaa tca cta gaa age ttg tca aaa gca 'gcg caa gca gca tta act aat Lys Ser Leu 355 Glu Ser Leu Ser. Lys 360 Ala Ala Gin Ala Ala 365 Leu Thr Asn tca gtt aaa gag ctt aca aat cct gtt gtg gca gaa agt cca aaa aaa Ser Vai 370 Lys Glu Leu Thr Asn 375 Pro Vai Vai Ala Glu 380 Ser Pro Lys Lys cct taa Pro * 385 912 960 1008 1056 1.104 1152 1158

<210> 56 <211> 384 <212> PRT <213> Quimera OspC <400> 56 147

Ala Cys Asn Asn Ser Gly Lys Asp Gly Asn Thr Ser Ala Asn Ser Ala 1 5 10 15 Asp Glu Ser Val Lys Gly Pro Asn Leu Thr Glu Ile Ser Lys Lys Ile 20 25 30 Thr Asp Ser Asn Ala Val Leu Leu Ala Val Lys Glu val Glu Ala Leu 35 40 45 Leu Ser Ser ile Asp Glu Ile Ala Ala Lys Ala Ile Gly Lys Lys Ile 50 55 60 His Gin Asn Asn Gly Leu Asp Thr Glu Tyr Asn His Asn Gly Ser Leu 65 70 75 80 Leu Ala Gly Ala Tyr Ala Ile Ser Thr Leu Ile Lys Gin Lys Leu Asp 85 90 95 Gly Leu Lys Asn Glu Gly Leu Lys Glu Lys Ile Asp Ala Ala Lys Lys 100 105 110 Cys Ser Glu Thr Phe Thr Asn Lys Leu Lys Glu Lys His Thr Asp Leu 115 120 125 Gly Lys Glu Gly Val Thr Asp Ala Asp Ala Lys Glu Ala Ile Leu Lys 130 135 140 Thr Asn Gly Thr Lys Thr Lys Gly Ala Glu Glu Leu Gly Lys Le u Phe 145 150 155 160 Glu Ser Val Glu Val Leu Ser Lys Ala Ala Lys Glu Met Leu Ala Asn 165 170 175 Ser Val Lys Glu Leu Thr Ser Pro Val Val Ala Glu Ser Pro Lys Lys 180 185 190 Pro Phe His Gly Asn Asn Ser Gly Gly Asp Ser Ala Ser Thr Asn Pro 195 200 205 Asp Glu Ser Ala Lys Gly Pro Asn Leu Thr Val Ile Ser Lys Lys Ile 210 215 220 Thr Asp Ser Asn Ala Phe Leu Leu Ala Val Lys Glu Val Glu Ala Leu 225 230 235 240 Leu Ser Ser Ile Asp Glu Leu Ser Lys Ala Ile Gly Lys Lys Ile Lys 245 250 255 Asn Asp Gly Thr Leu Asp Asn Glu Ala Asn Arg Asn Glu Ser Leu Ile 260 265 270 Ala Gly Ala Tyr Glu Ile Ser Lys Leu Ile Thr Gin Lys Leu Ser Val 275 280 285 Leu Asn Ser Glu Glu Leu Lys Lys Lys Ile Lys Glu Ala Lys Asp Cys 290 295 300 Ser Gin Lys Phe Thr Thr Lys Leu Lys Asp Ser His Ala Glu Leu Gly 305 310 315 320 Ile Gin Ser Val Gin Asp Asp Asn Ala Lys Lys Ala Ile Leu Lys Thr 325 330 335 His Gly Thr Lys Asp Lys Gly Ala Lys Glu Leu Glu Glu Leu Phe Lys 340 345 350 Ser Leu Glu Ser Leu Ser Lys Ala Ala Gin Ala Ala Leu Thr Asn Ser 355 360 365 Vai Lys Glu Leu Thr Asn Pro Val Val Ala Glu Ser Pro Lys Lys Pro 370 375 380 <210> 57 < 211> 1161 < 212> ADIS!

<213> Quimera OspC <220> <221> CDS <222> U) · . (1161) <400> 57 149 atg tgt agt aat tca ggg aaa ggt ggg gat tct gca tct act aat cct 4Θ Met 1 Cys Ser Asn Ser 5 G.ly Lys Gly Gl.y Asp 10 Ser Ala Ser Thr Asn 15 Pro gct gac gag tct gcg aaa ggg cct aat ctt aca gaa ata age aaa aaa 96 Ala Asp Glu Ser 20 Ala Lys Gly Pro Asn 25 Leu Thr Glu Ile Ser 30 Lys Lys att aca gat t ct aat gca ttt gta ctt gct gtt aaa gaa gtt gag act 144 Ile Thr Asp 35 Ser Asn Ala Phe Val -30 Leu Ala Val Lys Glu 45 Val Glu Thr t rg η·£ΐ 1rf a 1" nt. ata gat aaa ctt gct aag aaa gct att aat caa aaa 192 Leu Val 50 Leu Ser ile Ãsp Glu 55 Leu Ala Lys Lys Ãla 60 Ile Gly Gin lys alia gac aat aat aat ggt tta gct gct tta aat aat cag aat gga teg 240 Ile 65 Asp Asn Asn Asn ciy 70 Leu Ala Ala Leu Asn 75 Asn Gin Asn Gly Ser 80 ttg tta gca gga gcc tat gca ata tca acc cta ata aca gaa aaa ttg 288 Leu Leu Ala Giy Ala 85 Tyr Ala Ile Ser Thr 90 Leu Ile Thr Glu Lys 95 Leu agt aaa ttg aaa aat tta gaa gaa tta aag aca gaa att gca aag gct 336 Ser Lys Leu Lys 100 Asn Leu Glu Glu Leu 105 Lys Thr Glu Ile Ala 110 Lys Ala 150 aag aaa tgt tcc gaa gaa ttt act aat aaa cta aaa agt ggt cat gca 384 Lys Lys Cys 115 Ser Glu Glu Phe Thr 120 Asn 1 Lys Leu Lys Ser 125 Gly His Ala gat ctt ggc aaa cag gat gct 1 acc gat gat cat gca aaa gca gct att 432 Asp Leu 130 Gly Lys Gin Asp Ala 135 Thr Asp Asp His Ala 140 Lys Ala Ala Ile tta 3Θ,Η aca cat gca act acc gat cl ggt gct aaa ttt aaa gat 480 Leu 145 Lys Thr His Ala Thr 150 Thr Asp Lys Gly Ala 155 Lys Glu Phe Lys Asp 160 tta ttt gaa tca gta gaa ggt ttg, tta aaa gca gct caa gta gca cta 52B Leu Phe Glu Ser Vai 165 Glu Gly Leu' Leu Lys 170 Ala Ala Gin Val Ala 175 Leu act aat tca gtt aaa gaa ctt aca agt cct gt t gta gca gaa agt cca 576 Thr Asn Ser Vai 180 Lys Glu Leu Thr Ser 185 Pro 1 Vai Vai Ala Glu 190 Ser Pro aaa aaa cct cat atg gct aat1 aat tca ggt ggg gat tct gca tct act 624 Lys Lys Pro 195 His Met Ala Asn Asn 200 Ser Gly Gly Asp Ser 205 Ala Ser Thr aat cct gat gag tct gca aaa gga cct aat ctt acc gta ata age aaa 672 Asn Fro 210 Asp Glu Ser Ala Lys 215 Gly Pro Àsn Leu Thr 220 Val Ile Ser Lys aaa att aca gat tct aat gca ttt tta ctg gct gtg aaa gaa gtt gag 720 Lys 225 Ile Thr Asp Ser Asn 230 Ala Phe Leu Leu Ala 235 Val Lys Glu Val Glu 240 gct ttg ctt tca tct ata gat gaa ctt tct aaa gct att ggt aaa aaa 768 Ala Leu Leu Ser Ser 245 Ile Asp Glu Leu Ser 250 Lys Ala Ile Gly Lys 255 Lys ata 5151 cl aat gat ggt act tta gat aac Çâcl gca aat cga aac gaa tca 816 Ile Lys Asn Asp 260 Gly Thr Leu Asp Asn 265 Glu Ala Asn Arg Asn 270 Glu Ser ttg ata gca gga gct tat gaa ata tca aaa cta ata aca caa aaa tta 864 Leu Ile Ala 275 Gly Ala Tyr Glu Ile 280 Ser Lys Leu Ile Thr 205 Gin Lys Leu agt gta ttg aat tca gaa gaa tta BcICJ aaa aaa att aaa gag gct aag 912 Ser Vai 290 Leu Asn Ser Glu Glu 295 Leu Lys Lys Lys Ile 300 Lys Glu Ala Lys gat tgt tcc caa aaa ttt act act aag cta aaa gat agt cat gca gag 960 Asp Cys 305 Ser Gin Lys Phe 310 Thr Thr Lys Leu Lys 315 Asp Ser His Ala Glu 320 ctt ggt ata caa age gtt cag gat gat aat gca aaa aaa gct att tta 1008 Leu Gly Ile Gin Ser 325 Vai Gin Asp Asp Asn 330 Ala Lys Lys Al.a Ile 335 Leu aaa aca cat gga act aaa gac aag ggt gct aaa gaa ctt gaa gag tta 1056 Lys Thr His Gly 340 Thr Lys Asp Lys Gly 345 Ala Lys Glu Leu Glu 350 Glu Leu 151 ttt phe aaa Lys tca Ser 355 cta Leu gaa Glu age Ser ttg Leu tca Ser 360 aaa Lys gea Ala gcg Ala caa Gin gea Ala 365 gea Ala tta Leu act Thr 1104 aat Asn tca Ser 370 gtt Vai aaa Lys gag Glu ctt Leu aca Thr 375 aat Asn cct Pro gtt Vai gtg Val gea Ala 380 gaa Glu agt Ser cca Pro ãclô Lys 1152 a £13, Lys 3Θ5 cct Pro t aa * 1161 <210> 58 < 211> 386 < 212 > PRT <213> Quimera <4 G0> 58 152

Met 1 Cys Ser Asn Ser 5 Gly Lys eiy Gly Asp 10 Ser Al.a Ser Thr Asn 15 Pro Ala Asp Glu Ser 20 Ala Lys Gly Pro Asn Leu 25 Thr Glu Ile Ser 30 Lys Lys Ile Thr Asp 35 Ser Asn Ala Phe Val 40 Leu Ala Val Lys Glu 45 Val Glu Thr Leu Val 50 Leu Ser Ile Asp Glu 55 Leu Ala Lys Lys Ala 60 Ile Gly Gin Lys Ile 65 Asp Asn Asn Asn Gly 70 Leu Ala Ala Leu Asn 75 Asn Gin Asn Gly Ser 80 Leu Leu Ala Gly Ala 85 Tyr Ala Ile Ser Thr 90 Leu Ile Thr Glu Lys 95 Leu Ser kys Leu Lys 100 Asn Leu Glu Glu Leu Lys 105 Thr Glu Ile Ala 110 Lys Ala Lys Lys Cys 115 Ser Glu Glu Phe Thr 120 Asn Lys Leu Lys Ser 1.25 Gly His Ala Asp Leu 130 Gly Lys Gin Asp Ala 135 Thr Asp Asp His Ala 140 Lys Ala Ala 116 Leu 145 Lys Thr His Ala Thr 150 Thr Asp Lys Gly Ala 155 Lys Glu Phe Lys Asp 160 Leu Phe Glu Ser Val 165 Glu Gly Leu Leu Lys 170 Ala Ala Gin Val Ala 175 Leu Thr Asn Ser Val 180 Lys Glu Leu Thr Ser Pro 185 Val Val Ala Glu 190 Ser Pro Lys Lys Pro 195 His Met Ala Asn Asn 200 Ser Gly Gly Asp Ser 205 Ala Ser Thr Asn Pro 210 Asp Glu Ser Ala Lys 215 Gly Pro Asn Leu Thr 220 Val Ile Ser Lys T.vs 225 Ile Thr Asp Ser Asn 230 Ai a Phe Leu Leu Ala 235 Val Lys Glu Val Glu 240 Ala Leu Leu Ser Ser 245 Ile Asp Glu Leu Ser 250 Lys Ala Ile Gly Lys 255 Lys Ile Lys Asn Asp 260 Gly Thr Leu Asp Asn Glu 265 Ala Asn Arg Asn 270 Glu Ser Leu I il s Ala 275 Gly Ala Tyr Glu Ile 280 Ser Lys Leu Ile Thr 285 Gin i*ys Leu Ser Val 290 Leu Asn Ser Glu Glu 295 Leu Lys Lys Lys Ile 300 Lys Glu Ala Lys Asp Cys 305 Ser Gin Lys Phe 310 Thr Thr Lys Leu Lys 315 Asp Ser His Ala Glu 320 Leu Gly Ile Gin Ser 325 Val Gin Asp Asp Asn 330 Ala Lys Lys Ala Ile 335 Leu Lys Thr His Gly 340 Thr Lys Asp Lys Gly Ala 345 Lys Glu Leu Glu 350 Glu Leu Phe Lys Ser 355 Leu Glu Ser Leu Ser 360 Lys Ala Ala Gin Ala 365 Ala Leu Thr Asn Ser 370 Val Lys Glu Leu Thr 375 Asn Pro Val 1 Val Ala 380 Glu Ser Pro Lys

Lys Pro 385 <210> 59 153

<211> 1197 <212> ADN

<213> Quimera OspC <220>

<221> CDS <222> (1)...(1197) <4 00> 59 154 atg aga tta tta ata gga ttt gct tta gcg tta gct tta ata tgt 48 Met Arg Leu Leu Ile Gly Phe1 Ala Leu Ala Leu Ala Leu Ile Gly Cys 1 5 10 15 gca caa aaa ggt gct gag tca att gga tcc tgt aat aat tca ggg âââ 96 Ma Gin Lys Gly Ala Glu Ser Ile Gly Ser Cys Asn Asn Ser Gly Lys 20 25 30 gat ggg aat aca tct gca aat tct gct gat gag tct gtt aaa ggg cct 144 Asp Gly Asn Thr Ser a Asn Ser Ala Asp Glu Ser Vai Lys Gly Pro 35 40 45 aat ctt aca gaa ata agt aaa aaa att a cg gat tct aat gcg gtt tta 192 Asn Leu Thr Glu Ile Ser Lys Lys Ile Thr Asp Ser Asn Ala Vai Leu 50 55 60 ctt gct gtg aaa gag gtt gaa gcg ttg ctg tca tct ata gat gaa att 240 Leu Ala Vai Lys Glu Vai Glu Ala Leu Leu Ser Ser Ile Asp Glu Ile 65 70 75 80 gct gct aaa gct att ggt aaa aaa ata cac caa aat aat ggt ttg gat 288 Ma Ala Lys Ala Ile Gly Lys Lys Ile His Gin Asn Asn Gly Leu Asp 85 90 95 acc gaa tat aat cac aat gga tca ttg tta gcg gga gct tat gca ata 336 Thr Glu Tyr Asn His Asn Gly Ser Leu Leu Ma Gly Ala Tyr Ala Ile 100 105 110 ct C ctc cts 999 λλ λ tta gat nrrra 39" fir» ** *- ^ aat; t-ta 384 Ser Thr Leu Ile Lys Gin Lys Leu Asp Gly Leu Lys Asn Glu Gly Leu 115 120 125 aag gaa aaa att gat gcg gct aag aaa tgt tct Cf 3.3 aca ttt act aat 432 Lys Glu Lys Ile Asp Ala Ala Lys Lys Cys Ser GlU Thr Phe Thr Asn 130 135 140 aaa tta Ά&& gaa aaa cac aca gat ctt ggt aaa gaa ggt gtt act gat 480 Lys Leu Lys Glu Lys His Thr Asp Leu Gly Lys Glu Gly Va.l Thr Asp 145 150 155 160 gct gat gca aaa gaa acc att tta aaa aca aat ggt act aaa act aaa 528 Ma Asp Ala Lys Glu Ala Ile Leu Lys Thr Asn Gly Thr Lys Thr Lys 165 170 175 155 ggt gct gaa gaa ctt gga aaa tta ttt gaa tca gta gag gtc ttg tca 576 Gly Ala Glu Glu Leu Gly Lys Leu Phe Glu Ser Val Glu Val Leu Ser 180 185 190 aaa gca gct aaa gag atg ctt gct aat tca gtt aaa gag ctt aca age 624 Lys Ala Ala Lys Glu Met Leu Ala Asn Ser Val Lys Glu Leu Thr Ser 195 200 205 cct gtt gtg gca gaa agt cca gcc atg gta aat aat tca ggg aaa gat 672 Pro Val Val Ala Glu Ser Pro Ala Met Val Asn Asn Ser Gly Lys Asp 210 215 220 ggg aat aca tct gca aat tct gct gat gag tct gtt aaa ggg cct aat 720 Gly Asn Thr Ser Ala Asn Ser Ala Asp Glu Ser Val Lys Gly Pro Asn 225 230 235 240 ctt aca gaa ata agt aaa aaa att aca gaa tct aac gca gtt gtt ctc 768 Leu Thr Glu Ile Ser Lys Lys Ile Thr Glu Ser Asn Ala Val Val Leu 245 250 255 gcc gtg aaa gaa gtt gaa act ttg ctt aca tct ata gat gag ctt gct 816 Ala Val Lys Glu Val Glu Thr Leu Leu Thr Ser Ile Asp Glu Leu Ala 260 265 270 aaa gct att ggt 333 aaa ata aaa aac gat gtt agt tta gat aat gag 864 Lys Ala Ile Gly Lys Lys Ile Lys Asn Asp Val Ser Leu Asp Asn Glu 275 280 285 gca gat cac aac gga tca tta ata tca gga ÇC3 tat tta att tca aac 912 Ala Asp His Asn Gly Ser Leu Ile Ser Gly Ala Tyr Leu Ile Ser Asn 290 295 300 tta ata aca aaa aaa ata agt gca ata aaa gat tca gga gaa ttg aag 960 Leu Ile Thr Lys Lys Ile Ser Ala Ile Lys Asp Ser Gly Glu Leu Lys 305 310 315 320 gca gaa att gaa aag gct aag aaa tgt tct gaa gaa ttt act gct aaa 1008 Ala Glu Ile Glu Lys Ala Lys Lys Cys Ser Glu Glu Phe Thr Ma Lys 325 330 335 tta aaa ggt gaa cac aca gat ctt ggt aaa gaa ggc gtt act gat gat 1056 Leu Lys Gly Glu His Thr Asp Leu Gly Lys Glu Gly Val Thr Asp Asp 340 345 350 aat gca aaa aaa gcc att tta aaa aca aat aat gat aaa act aag ggc 1104 Asn Ma Lys Lys Ala Ile Leu Lys Thr Asn Asn Asp Lys Thr Lys Gly 355 360 365 gct gat gaa ctt gaa aag tta ttt gaa tca gta aac ttg tca aaa 1152 Ma Asp Glu Leu Glu Lys Leu Phe Glu Ser Val Lys Asn Leu Ser Lys 370 375 380 gca gct aaa gag atg ctt act aat tca gtt aaa gag ctt aca age 1197 Ala Al.a Lys Glu Met Leu Thr Asn Ser Val Lys Glu Leu Thr Ser 385 390 395 <210> 60 <211> 398 156

<212> PRT <2Ί3> Quimera OspC <4 0 0> 60 157

Arg Leu Leu Ile Gly Phe Ala Leu ^^kl· a Leu Ala Leu Ile Gly Cys ^11 ã 1 5 10 15 Gin Lys Gly Ala Glu Ser Ile Gly Ser Cys Asn Asn Ser Gly Lys Asp 20 25 30 Gly Asn Thr Ser Ala Asn Ser Ma Asp Glu Ser Val Lys Gly Pro Asn 35 40 45 Leu Thr Glu Ile Ser Lys Lys Ile Thr Asp Ser Asn Ala Val Leu Leu 50 55 60 Ala Vai Lys Glu Va.l Glu Ma Leu Leu Ser Ser Ile Asp Glu Ile Ma 65 70 75 80 A.la Lys Ma Ile Gly Lys Lys I.le His Gin Asn Asn Gly Leu Asp Thr 85 90 95 Glu Tyr Asn His Asn Gly Ser Leu Leu Ala Gly Ma Tyr Ma Ile Ser 100 t 105 110 Thr Leu I le Lys Gin Lys Leu Asp Gly Leu Lys Asn Glu Gly Leu Lys 115 120 125 Glu Lys Ile Asp Ma Ma Lys Lys Cys Ser Glu Thr Phe Thr Asn Lys 130 135 140 Leu Lys Glu Lys His Thr Asp Leu Gly Lys Glu Gly Val Thr Asp Ala 145 150 1 155 160 Asp Ala Lys Glu Ala Ile Leut Lys Thr Asn Gly Thr Lys Thr Lys Gly 165 170 175 Ala Glu Glu Leu Gly Lys Leu Phe Glu Ser Vai Glu Val Leu Ser Lys 1Θ0 185 190 Ala Ala Lys Glu Met Leu Ma Asn Ser Vai Lys Glu Leu Thr Ser Pro 195 i 200 205 Vai Vai Ma Glu Ser Pro Ma Met Vai Asn Asn Ser Gly Lys Asp Gly 210 215 220 Asn Thr Ser Ala Asn Ser Ma Asp Glu Ser Vai Lys Gly Pro Asn Leu 225 230 2 240 Thr Glu Ile Ser Lys Lys Ile Thr Glu Ser Asn AI a Val. Val Leu Ma 245 250 255 Vai Lys Glu Vai Glu Thr Leu Leu Thr Ser Ile Asp Glu Leu Ala Lys 260 265 270 Ala Ile Gly Lys Lys Ile Lys Asn Asp Vai Ser Leu Asp Asn Glu Ala 275 280 285 Asp His Asn Gly Ser Leu Ile Ser Gly Ala Tyr Leu Ile Ser Asn Leu 290 295 300 11 e Thr Lys Lys Ile Ser Ala Ile Lys Asp Ser Gly Glu Leu Lys Ala 305 , 310 315 320 Glu Ile Glu Lys M,a Lys Lys Cys Ser Glu Glu Phe Thr Ala Lys Leu 325 330 335 Lys Gly Glu His Thr Asp Leu Gly Lys Glu Gly Val Thr Asp Asp Asn 340 345 350 Ala Lys Lys Ala Ile Leu Lys Thr Asn Asn Asp Lys Thr Lys Gly Ma 355 360 365 Asp Glu Leu Glu Lys Leu Phe Glu Ser Vai Lys Asn Leu Ser Lys Ala 370 375 380 Ala Lys Glu Met Leu Thr Asn Ser Vai Lys Glu Leu Thr Ser 3B5 390 395 < 210 > 61 < 211> 1196 <212> ADN <213> Quimera OspC <220>

<221> CDS <222> (1) ... (1196) < 4 0 0 > 61 48 159 48 159 atg aga tta tta ata gga ttt gct tta gcg tta gct tta ata gga tgt Met Arq Leu Leu Ile Gly Phe Ala Leu Ala Leu 711 3 Leu Ile Gly Cys 1 5 10 15 gca caa aaa ggt gct gag tca att gga tcc tgt aat aat tca ggg aaa Ala Gin Lys Gly Ala Glu Ser Ile Gly Ser Cys Asn Asn Ser dy Lys 20 25 30 gat ggg aat aca tct gca aat tct gct gat gag tct gtt aaa ggg cct Asp Gly Asn Thr Ser Ala Asn Ser Ala Asp Glu Ser Val Lys Gly Pro 35 40 45 aat ctt aca gaa ata agt aaa aaa att a cg gat tct aat gcg gtt tta Asn Leu Thr Glu Ile Ser Lys lys Ile Thr Asp Ser Asn Ala Val Leu 50 55 60 1 ctt gct gtg aaa gag gtt gaa gçg ttg ctg tca tct ata gat gaa att Leu Ala Val Lys Glu Va.l. Glu Ala Leu Leu Ser Ser Ile Asp Glu Ile 65 70 75 80 gct gct gct att ggt aaa aaa ata cac caa aat aat ggt ttg gat Ala Ala Lys Ala Ile Gly Lys Lys Ile His Gin Asn Asn Gly Leu Asp 85 90 95 acc gaa tat aat cac aat gga tca ttg tta gcg gga gct tat gca ata Thr Glu Tyr Asn His Asn Gly Ser Leu Leu Ala Gly Ala Tyr Ala Ile 100 105 110 tca acc cta ata aaa caa aaa tta gat gga ttg aaa aat gaa gga tta Ser Thr Leu Xle Lys Gin lys Leu Asp Gly Leu Lys Asn Glu Gly Leu 115 120 125 aag gaa aaa att gat gcg gct a ct άί=13. tgt tct gaa aca ttt act aat Lys Glu Lys Xle Asp Ala Ala Lys Lys cys Ser Glu Thr Phe Thr Asn 130 135 1.4 0 aaa tta aaa gaa aaa G&G aca gat ctt ggt aaa gaa ggt gtt act gat Lys Leu Lys Glu Lys His Thr Asp Leu Gly Lys Glu Gly Val Thr Asp 145 150 155 160 gct gat gca aaa gaa gcc att tta aaa aca aat ggt act aaa act aaa Ala Asp Ala Lys Glu Ala Ile Leu Lys Thr Asn Gly Thr Lys Thr Lys 165 170 175 ggt gct gaa gaa ctt gga aaa tta ttt gaa tca gta gag gtc ttg tca Gly Ala Glu Glu Leu Gly Lys Leu Phe Glu Ser Val Glu Val Leu Ser 180 185 190 aaa gca gct aaa gag atg ctt gct aat tca gtt aaa gag ctt aca age Lys Ãla Ãla Lys Glu Met Leu Ala Asn Ser Val Lys Glu Leu Thr Ser 195 200 205 cct gtt gtg gca gaa agt cca gcc atg gta aat aat tca gga aaa gat Pro Vai Val Ala Glu Ser Pro Ala Met Val Asn Asn Ser Gly Lys Asp 210 215 220 ggg aat aca tct gca aat tct gct gat gag tct gtt aaa ggg cct aat Gly Asn Thr Ser Ala Asn Ser Ala Asp Glu Ser Val Lys Gly Pro Asn 225 230 235 240 ctt aca gaa ata agt aaa aaa att aca gaa tct aac gca gtt gtt ctg Leu Thr Glu Ile Ser Lys Lys Ile Thr Glu Ser Asn Ala Val Val Leu 245 250 255 96 144 192 240 288 336 384 432 480 528 576 624 672 720 768 160 gct gcg aaa gaa att gaa act ttg ctt gca tct ata gat gaa ctt gct 816 Ala Val Lys Glu 260 Ile Glu Thr Leu Leu 265 Ala Ser Ile Asp Glu 270 Leu Ala act aaa gct att ggt aaa aaa atà caa caa aat ggt ggt tta gct gtc 864 Thr Lys Ala 275 Ile Gly Lys Lys Ile 280 Gin Gin Asn Gly Gly 285 Leu Ala Val gaa gcg ggg cat aat gga aca ttg tta gca ggt gct tat aca ata tca 912 Glu Al.a 290 Gly His Asn Gly Thr 295 Leu Leu Ala Gly Ala 300 Tyr Thr Ile Ser aaa cta ata aca ca a cl 3 cL tta gat gga ttg aaa aat tca gaa aaa tta 960 Lys 305 Leu Ile < Thr Gin Lys 310 Leu Asp -Gly Leu Lys 315 Asn Ser Glu Lys Leu 320 aag aaa att Q33 aat gct aag aaa tgt tct gaa cjeti ttt act aaa 1008 Lys Glu Lys Ile Glu 325 Asn Ala Lys Lys Cys 330 1 Ser Glu Asp Phe Thr 335 Lys aaa cta gga naa y ca d cat gcg ,caa ctt gga att gaa Hcit gtt act gat 1056 Lys Leu GlU G.ly 340 Glu His Ala Gin Leu 345 Gly ile Glu Asn Val 350 Thr Asp gag aat ÇGcil aaa aaa gct att tta ata aca gat gca gct aaa gat aag 1104 Glu Asn Ala 355 Lys Lys Ala Ile' Leu 360 Ile Thr Asp Ala Ala 365 Lys Asp Lys ggc gct gca gag ctt gaa aag cta ttt 3 3 3 gca gta gaa aac ttg gca 1152 Gly Ala 370 Ala Glu Leu Glu Lys 375 Leu Phe Lys Ala Val 380 Glu Asn Leu Ala aaa Lys 3Θ5 gca Ala gct Ala aaa Lys gag Glu atg Met 390 ctt Leu gct Ala aat Asn tca Ser gtt Val 395 aaa Lys gag Glu ctt Leu ac 1196

<210> 62 <211> 397 <212> PRT <213> Quimera OspC <400> 62 161

Arg Leu Leu Ile Gly Phe Ala Leu Ala Leu l Ala i Leu Ile Gly Cys Ala 1 5 10 15 Gin Lys Gly Ala Glu Ser Ile Gly Ser Cys : Asn Asn i Ser Gly Lys Asp 20 25 30 Gly Asn Thr Ser Ala Asn Ser Ala Λ3Ρ Glu Ser Vai . Lys Gly Pro Asn 35 40 45 Leu Thr Glu Ile Ser Lys Lys Ile Thr Asp Ser Asn i Ala Val Leu Leu 50 55 60 Ala Vai Lys Glu Vai Glu Ala Leu Leu Ser Sei : Ile : Asp Glu Ile Ala 65 70 75 80 Ala Lys Ala Ile Gly Lys Lys Ile His Gin Asn Asn ; Gly Leu Asp Thr 85 90 95 Glu Tyr Asn His Asn Gly Ser Leu Leu Ala i Gly Ala Tyr Ala Ile Ser 100 105 110 Thr Leu Ile Lys Gin Lys Leu Asp Gly Leu Lys ; Asn 1 Glu Gly Leu Lys 115 120 125 Glu Lys Ile Asp Ala Ala Lys Lys Cys Ser Glu i Thr Phe Thr Asn Lys 130 135 140 Leu Lys Glu Lys His Thr Asp Leu Gly Lys Glu Gly Vai Thr Asp Ala 145 150 155 160 Asp Ala Lys Glu Ala Ile Leu Lys Thr Asn Gly Thr Lys Thr Lys Gly 165 170 175 Ala Glu Glu Leu Gly Lys Leu Phe Glu Ser Vai Glu Vai Leu Ser Lys 180 185 190 ALa Ala Lys Glu Met Leu Ala Asn Ser Vai Lys Glu Leu Thr Ser Pro 195 200 205 Vai Vai Ala Glu Ser Pro Ala Met Vai Asn Asn Ser Gly Lys Asp Gly 210 215 220 Asn Thr Ser Ala Asn Ser Ala Asp Glu Ser Vai Lys Gly Pro Asn Leu 225 230 235 240 Thr Glu Ile Ser Lys Lys Ile Thr Glu Ser Asn Ala Val Val Leu Ala 245 250 255 Val Lys Glu lie Glu Thr Leu Leu liRklh 2 Ser Ile Asp Glu Leu Ala Thr 260 265 270 Lys Ala Ile Gly Lys Lys Ile Gin Gin Asn Gly Gly Leu Ala Val Glu 275 280 2B5 Ala Gly His Asn Gly Thr Leu Leu Ala Gly Ala Tyr Thr Ile Ser Lys 290 295 300 Leu Ile Thr Gin Lys Leu Asp Gly Leu Lys Asn Ser Glu Lys Leu Lys 305 310 315 320 Glu Lys Ile Glu Asn Ala Lys Lys Cys Ser Glu Asp Phe Thr Lys Lys 325 330 335 Leu Glu Gly Glu His Ala Gin Leu Gly Ile Glu Asn Val Thr Asp Glu 340 345 350 Asn Ala Lys Lys Ala Ile Leu Ile Thr Asp Ala Ala Lys Asp Lys Gly 355 360 365 Ala Ala Glu Leu Glu Lys Leu Phe Lys Ala Vai Glu Asn Leu Ala Lys 370 375 380 Ala Ala Lys Glu Met Leu Ala Asn Ser Vai Lys Glu Leu 3Θ5 390 395 <210> 63 <211> 1185 162

< 212 > ADN

<213> Quimera OspC <220>

<221> CDS <2 22> (1) ... (1185) <4 00> 63 163 atg aga tta tta ata gga ttt gct tta gcg tta gct tta ata gga tgt 48 Met Arg 1 Leu Leu Ile 5 Gly Phe Ala Leu Ala 10 Leu Ala Leu Ile Gly 15 Cys qr.a Γ33 333 aat act aaa tca att aaa tcc tgt aat aat tca ggg aaa 96 Ãla Gin Lys Gly 20 Ãla Glu Ser Ile Gly 25 Ser Cys Asn Asn Ser 30 Gly Lys gat ggg aat aca tct gca aat tct gct gat gag tct gtt aaa ggg cct 144 Asp Gly Asn 35 Thr Ser Ala Asn Ser 40 Ala Asp Glu Ser Vai 45 Lys Gly Pro aat ctt aca gaa ata agt aaa aaa att acg gat tct aat gcg gtt tta 192 Asn Leu 50 Thr Glu Ile Ser Lys 55 Lys Ile Thr Asp Ser 60 Asn Ala Vai Leu ctt gct gtg aaa gag gtt gaa gcg ttg ctg tca tct ata gat gag ctt 240 Leu 65 Ala Vai Lys Glu Vai 70 Glu Ala Leu Leu Ser 75 Ser Ile Asp Glu Leu 80 298 ! 64 298 ! 64 gct âââ gct att ggt aaa aaa ata 333 aac gat ggt agt tta gat aat Ala Lys Ala Ile Gly 85 Lys Lys Ile Lys 1 Asn 90 Asp Gly Ser Leu Asp 95 Asn gaa gea aat ege aac gag tca ttg tta gea gga gct tat aca ata tca Glu Ala Asn Arg 100 Asn Glu Ser Leu Leu 105 .Ala Gly Ala Tyr Thr 110 Ile Ser acc tta ata aca ca a aaa tta agt aaa tta aac gga tca gaa ggt tta Thr Leu Ile 115 Thr Gin Lys Leu Ser 120 Lys Leu Asn Gly Ser 125 Glu Gly Leu aag gaa aag att gee gea gct aag aaa tgc tet gaa gag ttt agt act Lys Glu 130 Lys Ile Ala Ala Ala 135 Lys' Lys Cys Ser Glu 140 Glu Phe Ser Thr 333 et a aaa gat aat cat gea cag Ctt ggt ata cag ggc gtt act gat Lys 145 Leu Lys Asp Asn His 150 Ala Gin Leu Gly 1 Ile 155 Gin Gly Val Thr Asp 160 gaa aat gea aaa aaa gct attt tta aaa gea aat gea gcg ggt aaa gat Glu Asn Ala Lys Lys 165 Ala Ile Leu Lys Ala 170 Asn Ala Ala Gly Lys 175 Asp aag ggc gtt gaa gaa ctt gaa aag ttg tcc gga tca tta gaa age tta Lys Gly Vai Glu 180 Glu Leu Glu Lys Leu 185 Ser Gly Ser Leu Glu 190 Ser Leu tca 333 gea gct aaa gag atg ctt gct aat tca gtt aaa gag ctt aca Ser Lys Ala 195 Ala Lys Glu Met Leu 200 Ala Asn Ser Val Lys 205 GlU Leu Thr age cct gtt gtc cat ggt aat aat tca ggg aaa gat ggg aat aca tet Ser Pro 210 Vai Vai His Gly Asn 215 Asn Ser Gly Lys Asp 220 Gly Asn Thr Ser gea aat tet gct gat gag tet gtt aaa ggg cct aat ctt aca gaa ata Ala 225 Asn Ser Ala Asp Glu 230 Ser Val Lys Gly Pro 235 Asn Leu Thr Glu Ile 240 agt aaa 333. att aca gaa tet aac gea gtt gtt ctc gee gtg aaa gaa Ser Lys Lys Ile Thr 245 Glu Ser Asn Ala Val 250 Val Leu Ala Val Lys 255 Glu gtt ÇJ33 act ttg ctt aca tet ata gat gag ctt gct 333 gct att ggt Vai Glu Thr Leu 260 Leu Thr Ser Ile Asp 265 Glu Leu Ala Lys Ala 270 Ile Gly aaa Ξι 3.3 ata aaa aac gat gtt agt tta gat aat gag CJC3 gat cac aac Lys Lys Ile 275 Lys Asn Asp Vai Ser 280 Leu Asp Asn Glu Ala 285 Asp His Asn gga tca tta ata tca gga gea tat tta att tca aac tta ata aca aaa Gly Ser 290 Leu Ile Ser Gly Ala 295 Tyr Leu Ile Ser Asn 300 Leu Ile Thr Lys aaa ata agt gea ata aaa gat tca gga gaa ttg aag gea gaa att gaa Lys 305 Ile Ser Ala Ile Lys 310 Asp Ser Gly Glu Leu 315 Lys Ala Glu Ile Glu 320 336 384 432 4Θ0 528 576 624 672 720 768 816 864 912 960 165 aag g«=t aag aaa tgt tct Lys Ala Lys Lys Cys 325 S Θ17 cac aca gat ctt ggt His Thr Asp Leu 340 Gly Lys gcc att tta aaa aca aat Ala Ile Leu 355 Lys Thr Asn gaa aag tta ttt gaa tca Glu Lys 370 Leu Phe Glu Ser atg ctt act aat tca gtt Met 385 Leu Thr Asn Ser Vai 390 gaa gaa ttt act gct aaa Glu Glu Phe Thr 330 Ala Lys gaa ggc gtt act gat gat Glu Gly Vai 345 Thr Asp Asp aat gat d&cl. act aag ggc Asn Asp 360 Lys Thr Lys Gly gta aac ttg tca aaa Vai 375 Lys Asn Leu Ser Lys 380 aaa gag ctt aca age Lys Glu Leu Thr Ser 395 tta aaa ggt gaa 1UUO Leu Lys Gly 335 Glu aat gea aaa aaa 1056 Asn Ala 350 Lys Lys gct gat gaa ctt 1104 Ala 365 Asp Glu Leu gea gct aaa gag 1152 Ala Ala Lys Glu 1185

<210> 64 <211> 394 <212> PRT <213> Quimera OspC < 4 0 0 > 64 166

Arg Leu Leu ile Gly Phe Ala Leu Ala Leu Ala Leu Ile Gly Cys Ala 1 5 10 15 Gin Lys Gly Ala Glu Ser Ile Gly Ser Cys Asn Asn Ser Gly Lys Asp 20 25 30 Glv Asn Thr Ser Ala Asn Ser Ala Asp Glu Ser Vai Lys Gly Pro Asn 35 40 45 leu Thr Glu Ile Ser Lys Lys Ile Thr Asp Ser Asn Ala Vai Leu Leu 50 55 60 Ala Vai Lys Glu Vai Glu Ala Leu Leu Ser Ser Ile Asp Glu Leu Ala 65 70 75 80 Lys Ala Ile Gly Lys Lys Ile Lys Asn Asp Gly Ser Leu Asp Asn Glu 85 90 95 Ala Asn Arg Asn Glu Ser Leu Leu Ala Gly Ala Tyr Thr Ile Ser Thr 100 105 110 Leu Ile Thr Gin Lys Leu Ser Lys Leu Asn Gly Ser Glu Gly Leu Lys , 115 120 125 Glu Lys Ile Ala Ala Ala Lys Lys Cys Ser Glu Glu Phe Ser Thr Lys 130 135 140 Leu Lys Asp Asn His Ala Gin Leu Gly Ile Gin Gly Vai Thr Asp Glu 145 150 155 160 Asn Ala Lys Lys Ala Ile Leu Lys Ala Asn Ala Ala Gly Lys Asp Lys 165 170 175 Gly vai Glu GlU Leu Glu Lys Leu Ser Gly Ser Leu Glu Ser Leu Ser 180 185 190 Lys Ala Ala Lys Glu Met Leu Ala Asn Ser Vai Lys Glu Leu Thr Ser 195 200 205 Pro Vai Vai His Gly Asn Asn Ser Gly Lys Asp Gly Asn Thr Ser Ala 210 215 220 Asn Ser Ala Asp Glu Ser Vai Lys Gly Pro Asn Leu Thr Glu Ile Ser 225 230 235 240 Lys Lys lie Thr Glu Ser Asn Ala Vai Vai Leu Ala Vai Lys Glu Vai 245 250 255 Glu Thr Leu Leu Thr Ser Ile Asp Glu Leu Ala Lys Ala Ile Gly Lys 260 265 270 Lys Ile Lys Asn Asp Vai Ser Leu Asp Asn Glu Ala Asp Hi.s Asn Gly 275 280 285 Ser Leu Ile Ser Gly Ala Tyr Leu Ile Ser Asn Leu Ile Thr Lys Lys 290 295 300 Ile Ser Ala Ile Lys Asp Ser Gly Glu Leu Lys Ala Glu Ile Glu Lys 305 310 í 315 320 Ala Lys Lys Cys Ser Glu Glu Phe Thr Ala Lys Leu Lys Gly Glu His 325 1 I 330 335 Thr Asp Leu Gly Lys Glu Gly Vai Thr Asp Asp Asn Ala Lys Lys Ala 340 345 350 Ile Leu Lys Thr Asn Asn Asp Lys Thr Lys Gly Ala Asp Glu Leu Glu 355 360 365 Lys Leu Phe Glu Ser Vai Lys Asn Leu Ser Lys Ala Ala Lys Glu Met 370 375 380 Leu Thr Asn Ser Vai Lys Glu Leu Thr Ser 385 390 <210> 65

<211> 1184 <212> ADN

<213> Quimera OspC <220>

<221> CDS <222> (1) .,. (1184) <400> 65 168 168 atg aga tta tta ata gga ttt; gct tta gcg tta gct tta ata gga tgt Met 1 Arg Leu Leu Ile 5 Gly Phe Ala Leu Ala 10 Leu Ala Leu Ile Gly 15 Cys gca ca a aaa ggt gct gag tca att gga tcc tgt aat aat tca ggg aaa Ala Gin Lys Gly 20 Ala Glu Ser Ile Gly 25 Ser Cys Asn Asn Ser 30 Gly Lys gat ggg aat aca tct gca aat tct gct gat gag tct gtt aaa ggg cct Asp Gly Asn 35 Thr Ser Ala Asn Ser 40 Ala Asp Glu Ser Val 45 Lys Giy Pro aat ctt a ca gaa ata agt aaa aaa att acg cy 1 tct aat gcg gtt tta Asn Leu ,50 Thr Glu Ile Ser Lys 55 Lys Ile Thr Asp Ser 60 Asn Ala Val Leu ctt gct gtg aaa gag gtt gaa gcg ttg ctg tca tct ata gat gag ctt Leu 65 Ala Val Lys Glu Val 70 Glu Ala Leu Leu Ser 75 Ser Ile Asp Glu Leu 80 gct aaa gct att ggt aaa aaa ata aaa aac gat ggt agt tta gat aat Ala Lys Ala Ile Gly 85 Lys Lys Ile Lys Asn 90 Asp Gly Ser Leu Asp 95 Asn gaa gca aat cgc aac gag tca ttg tta gca gga gct tat aca ata tca Glu Ala Asn Arg 100 Asn Glu Ser Leu Leu 105 Ala Gly Ala Tyr Thr 110 Ile Ser acc tta ata aca ca a aaa tta agt aaa tta aac gga tca gaa ggt tta Thr Leu Ile 1,15 Thr Gin Lys Leu Ser 120 Lys Leu Asn Gly Ser 125 Glu Gly Leu aag gaa aag att gcc gca gct aag aaa tgc tct gaa gag ttt agt act Lys Glu 130 Lys Ile Ala Ala Al a 135 Lys Lys Cys Ser Glu 140 Glu Phe Ser Thr aaa cta aaa gat aat cat gca cag Ctt ggt ata cag ggc gtt act gat 4Β 96 144 192 240 288 336 384 432 480 169

Lys 145 Leu Lys Asp Asn His 150 gaa aat gea aaa aaa gct Glu Asn Ala Lys Lys 165 Ala aag gtt gaa gaa ctt Lys Gly Val Glu 180 Glu Leu tca Β.ΆΒ gea gct saa gag Ser Lys Ala 195 Ala Lys Glu age cct gtt gtc cat ggt Ser Pro 210 Val Val. His Gly gea aat tet gct gat gag Ala 225 Asn Ser Ala Asp Glu 230 agt aaa aaa att aca gaa Ser Lys Lys Ile Thr 245 Glu att gaa a et ttg ctt gea Ile Glu Thr Leu 260 Leu Ala ggt aaa aaa ata caa caa Gly Lys Lys 275 Ile Gin Gin aat gga aca ttg tta gea Asn Gly 290 Thr Leu Leu Ala caa aaa tta gat gga ttg Gin 305 Lys Leu Asp Gly Leu 310 gaa aat gct aag aaa tgt Glu Asn Ala Lys Lys 325 Cys gaa Cãt gcg caa ctt gga Glu His Ala Gin 340 Leu Gly aaa gct att tta ata aca Lys Ala Ile 355 Leu Ile Thr ctt gaa aag cta ttt aaa Leu Glu 370 Lys Leu Phe Lys gag atg ctt gct aat tca Glu 3B5 Met Leu Ala Asn Ser 390

Ala Gin Leu Gly ile 155 Gin att tta aaa gea aat gea Ile Leu Lys Ala Ϊ70 Asn Ala gaa aag ttg tcc gga tca Glu Lys Leu 185 Ser Gly Ser atg ctt gct aat tca gtt Met Leu 200 Ala Asn Ser val aat aat tca gga aaa gat Asn 215 Asn Ser Gly Lys Asp 220 tet gtt aaa ggg cct aat Ser Val Lys Gly Pro 235 Asn tet aac gea gtt gtt ctg Ser Asn Ala Val 250 Val Leu tet ata gat gaa ctt gct Ser Ile Asp 265 Glu Leu Ala aat ggt ggt tta gct gtc Asn Gly 280 Gly Leu Ala Val ggt gct tat aca ata tca Gly 295 Ala Tyr Thr Ile Ser 300 aaa aat tca gaa aaa tta Lys Asn Ser Glu Lys 315 Leu tet gaa gat ttt act aaa Ser Glu Asp Phe 330 Thr Lys att gaa aat gtt act gat Ile Glu Asn 345 Val Thr Asp gat gea gct aaa gat aag Asp Ala 360 Ala Lys Asp Lys gea gta gaa aac ttg gea Ala 375 Val Glu Asn Leu Ala 380 gtt Val aaa Lys gag Glu ctt Leu ac

Gly Val Thr Asp 160 gcg ggt aaa gat 528 Ala Gly Lys 175 Asp tta gaa age tta 57 6 Leu Glu 190 Ser Leu aaa gag ctt aca 624 Lys 205 Glu Leu Thr ggg aat aca tet 67 2 Gly Asn Thr Ser ctt aca gaa ata 720 Leu Thr Glu Ile 240 gct gtg aaa gaa 768 Ala Val Lys 255 GLu act aaa gct att 816 Thr Lys 270 Ala Ile gaa gcg ggg cat 864 Glu 285 Ala Gly His aaa cta ata aca 912 Lys Leu Ile Thr aag gaa aaa att 960 Lys Glu Lys Ile 320 aaa cta gaa gga 1008 Lys Leu Glu 335 Gly gag aat gea aaa 1056 Glu Asn 350 Ala Lys ggc gct gea gag 1104 Gly 365 Ala Ala Glu aaa gea gct aaa 1152 Lys Ala Ala Lys 1184

<210> 66 <211> 393 <212> PRT <213> Quimera OspC <Λ 00> 66 171

Arg Leu Leu Ile Gly Phe Ala Leu Ala Leu Ala Leu Ile Gly Cys Ala 1 5 10 15 Gin Lys Gly Ala Glu Ser Ile Gly Ser Cys Asn Asn Ser Gly Lys Asp 20 25 30 Gly Asn Thr Ser Ala Asn Ser Ala Asp Glu Ser Vai Lys Gly Pro Asn 35 40 45 Leu Thr Glu Ile Ser Lys Lys Ile Thr Asp Ser Asn Ala Vai Leu Leu 50 55 60 Ala Vai Lys Glu Vai Glu Ala Leu' Leu Ser Ser Ile Asp Glu Leu Ala 65 70 75 80 Lys Ala Ile Gly Lys Lys Ile Lys Asn Asp Gly Ser Leu -Asp Asn Glu 85 90 95 Ala Asn Arg Asn Glu Ser Leu Leu Ala Gly Ala Tyr Thr Ile Ser Thr 100 105 110 Leu Ile Thr Gin Lys Leu Ser Lys Leu Asn Gly Ser Glu Gly Leu Lys 115 1 120 125 Glu Lys Ile Ala Ala Ala Lys Lys Cys Ser Glu Glu Phe Ser Thr Lys 130 135 140 Leu Lys Asp Asn His Ala Gin Leu Gly Ile Gin Gly Vai Thr Asp Glu .145 150 1 155 160 Asn Ala Lys Lys Ala Ile Leu Lys Ala Asn Ala Ala Gly Lys Asp Lys 165 170 175 Gly Vai Glu Glu Leu Glu Lys Leu Ser Gly Ser Leu Glu Ser Leu Ser 180 185 190 Lys Ala Ala Lys Glu Met Leu Ala Asn Ser Vai Lys Glu Leu Thr Ser 195 200 205 Pro Vai Vai His Gly Asn Asn Ser Gly Lys Asp Gly Asn Thr Ser Ala 210 215 220 Asn Ser Ala Asp Glu Ser Vai Lys Gly Pro Asn Leu Thr Glu Ile Ser 225 230 235 240 Lys Lys Ile Thr Glu Ser Asn Ala Vai Vai Leu Ala Vai Lys Glu Ile 245 250 255 Glu Thr Leu Leu Ala Ser Ile Asp Glu Leu Ala Thr Lys Ala Ile Gly 260 265 270 Lys Lys Ile Gin Gin Asn Gly Gly Leu Ala Vai Glu Ala Gly His Asn 275 280 285 Gly Thr Leu Leu Ala Gly Ala Tyr Thr Ile Ser Lys Leu Ile Thr Gin 290 295 300 Lys Leu Asp Gly Leu Lys Asn Ser Glu Lys Leu Lys Glu Lys Ile Glu 305 310 315 320 Asn Ala Lys Lys Cys Ser Glu Asp Phe Thr Lys Lys Leu Glu Gly Glu 325 330 335 His Ala Gin Τ,βΜ Gly Ile Glu Asn Vai Thr Ά cn Glu Asn Ais Lys Lys 340 345 *350 Ala Ile Leu Ile Thr Asp Ala Ala Lys Asp Lys Gly Ala Ala Glu Leu 355 360 365 Glu Lys Leu Phe Lys Ala Vai Glu Asn Leu Ala Lys Ala Ala Lys Glu 370 375 380 Met Leu Ala Asn Ser Vai Lys Glu Leu 385 390 <210> 67 <211> 1184

<212> ADN <213> Quimera OspC <220>

<221> CDS <222> (1) . „. (1184} <400> 67 173 atg aga tta tta ata gga ttt gct tta gcg tta gct tta ata gga tgt 48 Met 1 Arg Leu Leu Ile 5 Gly Phe Ala Leu Ala 10 Leu Ala Leu Ile Gly 15 Cys gca caa aaa ggt gct gag tca att gga tcc tgt aat aat tca ggg aaa 96 Ma Gin Lys Gly 20 Ala Glu Ser Ile Gly 25 Ser Cys Asn Asn Ser 30 Gly Lys gat ggg aat aca tet gca aat tet gct gat gag tet gtt aaa ggg cct 144 Asp Gly Asn 35 Thr Ser Al a Asn Ser 40 Ala Asp Glu Ser Val 45 Lys Gly Pro aat ctt aca gaa ata agt aaa att acg gat tet aat gcg gtt tta 192 Asn Leu 50 Thr Glu Ile Ser Lys 55 Lys Ile Thr Asp Ser 60 Asn Ala Val Leu ctt gct gtg aaa gag gtt gaa gcg ttg ctg tca tet ata gat gag ctt 240 Leu 65 Ala Vai Lys Glu Vai 70 Glu Ala Leu Leu Ser 75 Ser Ile Asp Glu Leu 80 gct aaa gct att ggt aaa aaa ata aaa aac gat ggt agt tta gat aat 288 Ala Lys Ala Ile Gly 85 Lys Lys Ile Lys Asn 90 Asp Gly Ser Leu Asp 95 Asn gaa ÇTC3 aat ege aac gag tca ttg tta gca gga gct tat aca ata tca 336 Glu Ma Asn Arg 100 Asn Glu Ser Leu Leu 105 Ma Gly Ala Tyr Thr 110 Ile Ser acc tta ata aca caa aaa tta agt aaa tta aac gga tca gaa ggt tta 384 Thr Leu Ile 115 Thr Gin Lys Leu Ser 120 Lys Leu Asn Gly Ser 125 Glu Gly Leu aag gaa aag att gee gca gct aag aaa tgc tet gaa gag ttt agt act 432 Lys Glu 130 Lys Ile Ala Ala Ma 135 Lys Lys Cys Ser Glu 140 Glu Phe Ser Thr aaa cta aaa gat aat cat gca cag ctt ggt ata cag ggc gtt act gat 480 Lys 145 Leu Lys Asp Asn His 150 Ma Gin Leu Gly Ile 155 Gin Gly Val Thr Asp 160 gaa aat gca aaa aaa gct att tta aaa gca aat gca gcg ggt aaa gat 528 Glu Asn Ala Lys Lys 165 Ma Ile Leu Lys Ma 170 Asn Ala Ma Gly Lys 175 Asp aag ggc gtt gaa gaa ctt gaa aag ttg tcc gga tca tta gaa age tta 57 b Lys Gly Vai Glu 180 Glu Leu Glu Lys Leu 185 Ser Gly Ser Leu Glu 190 Ser Leu tca aaa gca gct aaa gag atg ctt gct aat tca gtt aaa gag ctt aca 624 Ser Lys Ala 195 Ala Lys Glu Met Leu 200 Ma Asn Ser Val Lys 205 Glu Leu Thr age cct gtt gtc cat ggt aat aat tca aga aaa gat ggg aat gca tet 672 Ser Pro 210 Vai Vai His Gly Asn 215 Asn Ser Arg Lys Asp 220 Gly Asn Ala Ser 174 aca Thr 225 aat Asn tct Ser gcc Ala gat Asp gag Glu 230 tct Ser gtt Val 3cL& Lys ggg Gly cct Pro 235 aat Asn ctt Leu aca Thr gaa Glu ata Ile 240 720 agt Ser aaa Lys aaa Lys att Ile aca Thr 245 gaa Glu tct Ser aac Asn ÇfCB Alá gtt Val 250 gtt Val ctg Leu gcc Ala gtg Val aaa Lys 255 gaa Glu 768 gtt Vai gag Glu acc Thr tta Leu 260 ctt Leu gca Ala tct Ser ata Ile gat Asp 265 gaa Glu ctt Leu gct Ala acc Thr aaa Lys 270 gct att Ile 816 ggt Gly aag Lys aaa Lys 27,5 ata Ile ggc Gly aat Asn aat Asn ggt Gly 280' tta Leu gag Glu gcc Ala aat Asn cag Gin 285 agt Ser aaa Lys aac Asn 864 aca Thr tca Ser 290 ttg Leu tta Leu tca Ser gga Gly gct Ala 295 tat Tyr gca Ala ata lie tct Ser gac Asp 300 cta Leu ata Ile gca Ala gaa Glu 912 aaa Lys 305 tta Leu aat Asn gta Val ttg Leu aaa Lys 310 aat Asn1 gaa Glu gaa Glu 1 tta Leu aag Lys 315 gaa Glu aag Lys att Ile gat Asp aca Thr 320 960 gct Ala aag Lys caa Gin tgt Cys tct Ser 325 aca Thr gaa Glu ttt Phe act Thr aat Asn 330 aaa Lys cta Leu aaa Lys agt Ser gaa Glu 335 cat His 1008 gca Ala gtg Val ctt Leu ggt Gly 340 ctg Leu gac Asp aat Asn ctt Leu act Thr 345 gat Asp gat Asp aat Asn gca Ala GâiSt Gin 350 aga Arg gct Ala 1056 att Ile tta Leu aaa Lys 355 aaa Lys cat His gca Ala aat Asn aaa Lys 360 gat Asp aag Lys ggt Gly gct Ala gca Ala 365 gaa Glu ctt Leu gaa Glu 1104 aag Lys tta Leu 370 ttt Phe aaa Lys gcg Ala gta Val gaa Glu 375 aac Asn tta Leu tca Ser aaa Lys gca Ala 380 gct Ala caa Gin gac Asp aca Thr 1152 tta Leu 385 aaa Lys aat Asn gct Ala gtt Val aaa Lys 390 gag Glu ctt Leu aca Thr agt Ser cc 1184

<210> 68 <211> 393 <212> PRT

<213> Quimera OspC <400> 68 175

Arg 1 Leu Leu Ile Gly 5 Phe Ala Leu Gin Lys Gly Ala 20 Glu Ser Ile Gly Gly Asn Thr 35 Ser Ala Asn Ser Ala 40 Leu Thr 50 Glu Ile Ser Lys Lys 55 Ile Ala 65 Vai Lys Glu Vai Glu 70 Ala Leu Lys Ala Ile Gly Lys 85 Lys Ile Lys Ala Asn Arg Asn 100 Glu Ser Leu Leu Leu Ile Thr 115 Gin Lys Leu Ser Lys 120 Glu Lys 130 lie Ala Ala Ala Lys 135 Lys Leu 145 Lys Asp Asn His Ala 150 Gin Leu Asn Ala Lys Lys Ala 165 Ile Leu Lys Gly Vai Glu Glu 180 Leu Glu Lys Leu Lys Ala Ala 195 Lys Glu Met Leu Ala 200 Pro Vai 210 Vai His Gly Asn Asn 215 Ser Asn 225 Ser Ala Asp Glu Ser 230 Vai Lys Lys Lys Ile Thr Glu 245 Ser Asn Ala Glu Thr Leu Leu 260 Ala Ser Ile Asp Lys Lys Ile 275 Gly Asn Asn Gly Leu 280 Ser Leu 290 Leu Ser Gly Ala Tyr 295 Ala Leu 305 Asn Vai Leu Lys Asn 310 Glu Glu Lys Gin Cys Ser Thr 325 Glu Phe Thr Vai Leu Gly Leu 340 Asp Asn Leu Thr Leu Lys Lys 355 His Ala Asn Lys Asp 360 Leu Phe 370 Lys Ala Vai Glu Asn 375 Leu Lys 385 Asn Ala Vai Lys Glu 390 Leu Thr

Ala Leu 10 Ala Leu Ile Gly Cys 15 Ala Ser 25 Cys Asn Asn Ser Gly 30 Lys Asp Asp Glu Ser Vai Lys 45 Gly Pro Asn Thr Asp Ser Asn 60 Ala Vai Leu Leu Leu Ser Ser 75 Ile Asp Glu Leu Ala B0 Asn Asp Gly 90 Ser Leu Asp Asn 95 Glu Alã 105 Gly Ala Tyr Thr Ile 110 Ser Thr Leu Asn Gly Ser Glu 125 Gly Leu Lys Cys Ser Glu Glu 140 Phe Ser Thr Lys Gly Ile Gin 155 Gly Vai Thr Asp Glu 160 Ala Asn 170 Ala Ala Gly Lys Asp 175 Lys Ser IBS Gly Ser Leu Glu Ser 190 Leu Ser Asn Ser Vai Lys Glu 205 Leu Thr Ser Arg Lys Asp Gly Asn 220 Ala Ser Thr Gly Pro Asn 235 Leu Thr Glu Ile Ser 240 Vai Vai 250 Leu Ala Vai Lys Glu 255 Vai Glu 265 Leu Ala Thr Lys Ala 270 Ile Gly Glu Ala Asn Gin Ser 285 Lys Asn Thr Ile Ser Asp Leu 300 Ile Ala Glu Lys Leu Lys Glu 315 Lys Ile Asp Thr Ala 320 Asn Lys 330 Leu Lys Ser Glu His 335 Ala Asp 345 Asp Asn Ala Gin Arg 350 Ala Ile Lys Gly Ala Ala Glu 365 Leu Glu Lys Ser Ser Lys Ala Ala 380 Gin Asp Thr Leu <r 210 69 176 <211 > 1209 <212> ADN <213> Quimera OspC <2 20> <221> CDS <222> (1)--.( 1209) <4 00> 69 177 atg aga tta tta ata gga ttt gct tta Met 1 Arg Leu Leu Ile 5 Gly Phe Ala Leu gca caa aaa ggt gct gag tca att gga Ala Gin Lys Gly 20 AI a Glu Ser Ile Gly 25 gat ggg aat aca tct gca aat tct gct Asp Gly Asn 35 Thr Ser Ala Asn Ser 40 Ala aat ctt aca gaa ata agt aaa aaa att gcg Ala 10 tta Leu gct Ala tta Leu ata tle gga Gly 15 tgt Cys 48 tcc Ser tgt Cys aat Asn aat Asn tca Ser 30 ggg Gly aaa Lys 96 gat Asp CJclCJ Glu tct Ser gtt Vai 45 aaa Lys ggg Gly cct Pro 144 acg gat tct aat gcg gtt tta 192 178

As η Leu Thr Glu Ile Ser Lys Lys Ile Thr Asp Ser Asn Ala Val Leu 50 55 60 ctt gct gtg aaa gag gtt gaa gcg ttg ctg tca tet ata gat gag ctt 240 Leu Ala Vai Lys Glu Val Glu Ala Leu Leu Ser Ser Ile Asp Glu Leu 65 70 1 75 80 gct aaa gct att ggt aaa aaa ata aaa aac gat ggt agt tta gat aat 288 Ala Lys Ala Ile Gly Lys Lys Ile Lys Asn Asp Gly Ser Leu Asp Asn Θ5 90 95 gaa gea aat ege aac gag tca ttg tta gea gga gct tat aca ata tca 336 Glu Ala Asn Arg Asn Glu Ser Leu Leu Ala Gly Ala Tyr Thr Ile Ser 100 t 105 110 acc tta ) ata aca caa aaa tta agt aaa tta aac gga tca gaa ggt tta 384 Thr Leu Ile Thr Gin Leu Ser Lys Leu Asn Gly Ser Glu Gly Leu 115 120 125 aag gaa aag att gee gea gct aag aaa (tgc tet gaa gag ttt agt act 432 Lys Glu Lys Ile Ala Ala Ala Lys Lys Cys Ser Glu Glu Phe Ser Thr 130 135' 140 aaa cta aaa gat aat cat gea cag ctt ggt ata cag ggc gtt act gat 480 Lys Leu Lys Asp Asn His Ala Gin Leu Gly Ile Gin Gly Val Thr Asp 145 150 I 155 160 gaa aat gea aaa aaa gct att tta aaa gea aat gea gcg ggt aaa gat 528 Glu Asn Ala Lys Lys Ala Ile Leu Lys Ala Asn Ala Ala Gly Lys Asp 165 170 175 aag ggC gtt gaa gaa ctt gaa aag ttg tcc gga tca tta ÇJâcl age tta 576 Lys Gly Vai Glu Glu Leu Glu Lys Leu Ser Gly Ser Leu Glu Ser Leu 180 185 190 tca aaa gea gct aaa gag atg ctt gct aat tca gtt aaa gag ctt aca 624 Ser Lys Ala Ala Lys Glu Met Leu Ala Asn Ser Val Lys Glu Leu Thr 195 200 205 age cct gtt gtc cat ggt aat aat tca ggt ggg gat tet gea tet act 672 Ser Pro Val Val His Gly Asn Asn Ser Gly Gly Asp Ser Ala Ser Thr 210 215 220 aat cct gat gag tet gea aaa gga cct aat ctt acc gta ata age aaa 720 Asn Pro Asp Glu Ser Ala Lys Gly Pro Asn Leu Thr Val Ile Ser Lys 225 230 235 240 aaa att aca gat tet aat gea ttt tta ctg gct gtg aaa gaa gtt gag 768 T.y er Ile Thr & cri ” """ Γ Ser Asn Ala Phe Leu Leu Ala Val Lys Glu Val Glu 245 250 255 gct ttg ctt tca tet ata gat gaa ctt tet aaa gct att ggt aaa aaa 816 Ala Leu Leu Ser Ser Ile Asp Glu Leu Ser Lys Ala Ile Gly Lys Lys 260 265 270 ata aaa aat gat ggt act tta gat aac gaa gea aat cga aac gaa tca 864 Ile Lys Asn Asp Gly Thr Leu Asp Asn Glu Ala Asn Arg Asn Glu Ser 275 2B0 285 ttg ata gea gga gct tat gaa ata tca aaa cta ata aca caa aaa tta 912 Leu Ile Ala Gly Ala Tyr Glu Ile Ser Lys Leu Ile Thr Gin Lys Leu 290 295 300 179 agt gta ttg aat tca gaa gaa tta aag aaa aaa att aaa gag gct aag 960 Ser 305 Vai Leu Asn Ser Glu 310 Glu Leu Lys Lys Lys 315 Ile Lys Glu Ala Lys 320 gat tgt tcc caa aaa ttt act act aag cta aaa gat agt cat gea gag 1008 Asp Cys Ser Gin Lys 325 Phe Thr Thr Lys Leu 330 Lys Asp Ser His Ala 335 Glu ctt ggt ata caa age gtt cag gat gat aat gea aaa aaa gct att tta 1056 Leu Gly Ile Gin 340 Ser Vai Gin Asp Asp Asn 345 Ala Lys Lys Ala 350 Ile Leu aaa aca cat gga act aaa gac aag ggt gct aaa gaa ctt gaa gag tta 1104 Lys Thr Ris 355 Gly Thr Lys Asp Lys 360 Gly Ala Lys Glu Leu 365 Glu Glu Leu ttt aaa tca cta gaa age ttg tca aaa gea gcg caa gea gea tta act 1152 Phe Lys 370 Ser Leu Glu Ser Leu 375 Ser Lys Ala Ala Gin 380 Ala Ala Leu Thr aat tca gtt aaa gag ctt aca aat cct gtt gtg gea gaa agt cca aaa 1200 Asn 385 aaa Lys Ser cct Pro Vai taa ir Lys Glu Leu 390 Thr Asn Pro Vai Val 395 Ala Glu Ser Pro Lys 400 1209 < 210 > 70 <211> 401 <212> PRT <213> Quimera

OspC <400> 70 180

Arg Leu Leu Ile Gly Phe Ala Leu Ala Leu Ala Leu Ile Gly Cys Ala 1 5 10 15 Gin Lys Gly Ala Glu Ser Ile Gly Ser Cys Asn Asn Ser Gly Lys Asp 20 25 30 Gly Asn Thr Ser Ala Asn Ser Ala Asp Glu Ser Val Lys Gly Pro Asn 35 40 45 Leu Thr Glu Ile Ser Lys Lys Ile Thr Asp Ser Asn Ala Val Leu Leu 50 55 60 Ala Val Lys Glu Val Glu Ala Leu Leu Ser Ser Ile Asp Glu Leu Ala 65 70 75 80 Lys Ala Ile Gly Lys Lys Ile Lys Asn Asp Gly Ser Leu Asp Asn Glu B5 90 95 Ala Asn Arg Asn Glu Ser Leu Leu Ala Gly Ala Tyr Thr Ile Ser Thr 100 105 110 Leu Ile Thr Gin Lys Leu Ser Lys Leu Asn Gly Ser Glu Gly Leu Lys 115 120 125 Glu Lys Ile Ala Ala Ala Lys Lys Cys Ser Glu Glu Phe Ser Thr Lys 130 1.35 140 Leu Lys Asp Asn His Ala Gin Leu G.ly Ile Gin Gly Val Thr Asp Glu 145 150 155 160 Asn Ala Lys Lys Ala Ile Leu Lys Ala Asn Ala Ala Gly Lys Asp Lys 165 170 175 Gly Vai Glu Glu Leu Glu Lys Leu Ser Gly Ser Leu Glu Ser Leu Ser 180 185 190 Lys Ala Ala Lys Glu Met Leu Ala Asn Ser Val Lys Glu Leu Thr Ser 195 200 205 Pro Val Val His Gly Asn Asn Ser Gly Gly Asp Ser Ala Ser Thr Asn 210 215 220 Pro Asp Glu Ser Ala Lys Gly Pro Asn Leu Thr Val Ile Ser Lys Lys 225 230 235 240 Ile Thr Asp Ser Asn Ala Phe Leu Leu Ala Val Lys Glu Val Glu Ala 245 250 255 Leu Leu Ser Ser Ile Asp Glu Leu S'er Lys Ala Ile Gly Lys Lys Ile 260 265' 270 Lys Asn Asp Gly Thr Leu ASp Asn Glu Ala Asn Arg Asn Glu Ser Leu 275 280 285 Ile Ala Gly Ala Tyr Glu Ile Ser Lys Leu Ile Thr Gin Lys Leu Ser 290 295 300 Val Leu Asn Ser Glu Glu Leu Lys Lys Lys Ile Lys Glu Ala Lys Asp 305 310 315 320 Cys Ser Gin Lys Phe Thr Thr Lys Leu Lys Asp Ser His Ala Glu Leu 325 330 335 Gly Ile Gin Ser Val Gin Asp Asp Asn Ala Lys Lys Ala Ile Leu Lys 340 345 350 Thr His Gly Thr Lys Asp Lys Gly Ala Lys Glu Leu Glu Glu Leu Phe 355 360 365 Lys Ser Leu Glu Ser Leu Ser Lys Ala Ala Gin Ala Ala Leu Thr Asn 370 375 | 380 Ser Val Lys Glu Leu Thr Asn Pro Val Val Ala Glu Ser Pro Lys Lys 385 390 1 395 4 00

Pro < 210 > 71

<211> 1179 <212> ADN

<213> Quimera OspC <220>

<221> CDS <222> (1)...(1179) <400> 71 182 atg aga tta tta ata 99a ttt gct tta gcg tta gct tta ata gga tgt 48 Met 1 Axg Leu Leu Ile 5 Gly Phe Ala Leu Ala 10 Leu Ala Xj0U Ile Gly 15 Cys gca caa aaa ggt gct gag tca att gga tcc tgt aat aat tca gga aaa 96 Ala Gin Lys Gly 20 Ala Glu Ser lie Gly 25 Ser Cys Asn Asn Ser 30 Gly Lys gat ggg aat gca tct gca aat tct gct gat gag tct gtt aaa ggg cct 144 Asp Gly Asn 35 Ala Ser Ala Asn Ser 40 Ala Asp Glu Ser Val 45 Lys Gly Pro ããt DM 4· W. V C3k %i» CÂ *A WU >>*+* - *s a a aaa Bttl 3Γ3 naa 4" aac rira 5 — — gtt rrt t 192 Asn Leu 50 Thr Glu Ile Ser Lys 55 Lys X X © Thr Glu Ser 60 Asn Ala val Val ctg gcc gtg aaa gaa gtt gag acc tta ctt gca tct ata gat gaa ctt 240 Leu 65 Ala Val Lys Glu Val 70 Glu Thr Leu Leu Ala 75 Ser Ile Asp Glu Leu 80 gct acc aaa gct att ggt aaa aaa ata ggc aat aat ggt tta gag gcc 288 Ala Thr Lys Ala Ile 85 Gly Lys Lys Ile Gly 90 Asn Asn Gly Leu Glu 95 Ala aat CEÇ agt âBõ aac aca tca ttg tta tca gga gct tat gca ata tct 336 Asn G.ln Ser Lys 100 Asn Thr Ser Leu Leu 105 Ser Gly Ala Tyr Ala 110 Ile Ser 183 gac cta ata gca gaa aaa tta aat gta ttg aaa aat gaa gaa tta aag 384 Asp Leu I le 115 Ala Glu Lys Leu Asn 120 Vai Leu Lys Asn Glu 125 Glu Leu Lys gaa aag att gat aca gct aag caa tgt tct aca gaa ttt act aat aaa 432 Glu Lys 130 Ile Asp Thr Ala Lys 135 Gin Cys Ser Thr Glu 140 Phe Thr Asn Lys cta aaa agt gaa cat gca gtg ctt ggt ctg gac aat ctt act gat gat 480 Leu 145 Lys Ser Glu His Ala 150 Vai Leu Gly Leu Asp 155 Asn Leu Thr Asp Asp 160 aat gca caa aga gct att tta aaa aaa cat gca aat aaa gat aag ggt 528 Asn Ala Gin Arg Ala 165 Ile Leu Lys Lys His 170 Ala Asn Lys Asp Lys 175 Gly gct gca gaa ctt gaa aag tta ttt aaa gcg gta gaa aac tta tca aaa 576 Ala Ala Glu Leu 180 Glu Lys Leu Phe Lys 185 Ala Val Glu Asn Leu 190 Ser Lys gca gct caa gac aca tta aaa aat gct gtt aaa gag ctt aca agt cct 624 Ala Ala Gin 195 Asp Thr Leu Lys Asn 200 Ala Val Lys Glu Leu 205 Thr Ser Pro att gtc cat ggt aat aat tca ggg aaa gat ggg aat aca tct gca aat 672 Ue Vai 210 His Gly Asn Asn Ser 215 Gly Lys Asp Gly Asn 220 Thr Ser Ala Asn tct gct gat gag tct gtt aaa ggg cct aat ctt aca gaa ata agt aaa 720 Ser 225 Ala Asp Glu Ser Vai 230 Lys Gly Pro Asn Leu 235 Thr Glu Ile Ser Lys 240 333 att aca gaa tct aac QC3 gtt gtt ctc gcc gtg aaa gaa gtt gaa 768 Lys Ile Thr Glu Ser 245 Asn Ala Vai Vai Leu 250 Ala Val Lys Glu Val 255 Glu act ttg ctt aca tct ata gat gag ctt gct aaa gct att ggt aaa aaa 816 Thr Leu Leu Thr 260 Ser Ile Asp Glu Leu 265 Ala Lys Ala Ile Gly Lys 270 Lys ata aaa aac gat gtt agt tta gat aat gag gca gat cac aac gga tca B64 Ile Lys Asn 275 Asp Vai Ser Leu Asp 280 Asn Glu Ala Asp His 285 Asn Gly Ser tta ata tca gga gca tat tta att tca aac t ta ata aca aaa aaa ata 912 Leu 11* c# 290 Ser Giy Ala Tyr Leu 295 Ile Ser Asn Leu Ile 300 Thr Lys Lys Ile agt gca ata aaa gat tca gga gaa ttg aag gca gaa att Çf33 aag gct 960 Ser 305 Ala lie Lys Asp Ser 310 Gly Glu Leu Lys Ala 315 Glu Ile Glu Lys Ala 320 aag aaa tgt tct gaa gaa ttt act gct aaa tta 333 ggt gaa cac aca 1008 Lys Lys Cys Ser Glu 325 Glu Phe Thr Ala Lys 330 Leu Lys Gly Glu His 335 Thr gat ctt ggt aaa gaa ggc gtt act gat gat aat gca aaa 333 gcc att 1056 Asp Leu Gly Lys 340 Glu Gly Vai Thr Asp 345 Asp Asn Ala Lys Lys 350 Ala Ile 1104 184 tta aaa a ca aat aat gat aaa act Leu Lys Thr 355 Asn Asn Asp Lys Thr 360 tta ttt gaa tca gta aaa aac ttg Leu Leu Phe 370 Glu Ser Vai Lys Asn 375 act aat tca gtt aaa gag ctt aca Thr 385 Asn Ser Vai Lys Glu 390 Leu Thr aag ggc gct gat gaa ctt gaa aag

Lys Gly Ala Asp Glu Leu Glu Lys 365 tca aaa gca gct aaa gag atg ctt

Ser Lys Ala Ala Lys Glu Met Leu 380 age

Ser 1152 1179

<210> 72 <211> 392 <212> PRT <213> Quimera OspC <400> 72 185

Arg Leu Leu Ile Gly Phe Ala Leu Ala Leu Ala Leu Ile Gly Cys Ala 1 5 io 15 Gin Lys Gly Ala Glu Ser liei Gly Ser Cys Asn Asn Ser Gly Lys Asp 20 25 30 Glv Asn Ala Ser Ala Asn Ser Ala Asp Glu Ser Val Lys Gly Pro Asn 35 40 45 Leu Thr Glu Ile Ser Lys Lys Ile Thr Glu Ser Asn Ala Val Val Leu 50 55 60 Ala Vai Lys Glu Val Glu Thr Leu Leu Ala Ser Ile Asp Glu Leu JV.1 St 65 70 75 80 Thr Lys Ala Ile Gly Lys Lys Ile Gly Asn Asn Gly Leu Glu Ala Asn 85 90 95 Gin Ser Lys Asn Thr Ser Leu Leu Ser Gly Ala Tyr Ala Ile Ser Asp 100 105 110 Leu Ile Ala Glu Lys Leu Asn Val Leu Lys Asn Glu Glu Leu Lys Glu 115 120 125 Lys Ile Asp Thr Ala Lys Gin Cys Ser Thr Glu Phe Thr Asn Lys Leu 130 135 140 Lys Ser Glu His Ala Val Leu Gly Leu Asp Asn Leu Thr Asp Asp Asn 145 150 155 160 Ala Gin Arg Ala Ile Leu Lys Lys His Ala Asn Lys Asp Lys Gly Ala . 165 170 175 Ala Glu Leu Glu Lys Leu Phe Lys Ala Val Glu Asn Leu Ser Lys Ala 1B0 185 190 Ala Gin Asp Thr Leu Lys Asn Ala Val Lys Glu Leu Thr Ser Pro Ile 195 200 205 Vai His Gly Asn Asn Ser Gly Lys Asp Gly Asn Thr Ser Ala Asn Ser 210 215 220 Ala Asp Glu Ser Val Lys Gly Pro Asn Leu Thr Glu Ile Ser Lys Lys 225 230 235 240 lie Thr Glu Ser Asn Ala Val Val Leu Ala Val Lys Glu Val Glu Thr 245 250 255 Leu Leu Thr Ser Ile Asp Glu Leu Ala Lys Ala Ile Gly Lys Lys Ile 260 265 270 Lys Asn Asp Vai Ser Leu Asp Asn Glu Ala Asp His Asn Gly Ser Leu 275 280 285 lie Ser Gly Ala Tyr Leu Ile Ser Asn Leu Ile Thr Lys Lys Ile Ser 290 295 300 Ala Ile Lys Asp Ser Gly Glu Leu Lys Ala Glu Ile Glu Lys Ala Lys 305 310 315 320 Lys Cys Ser Glu Glu Phe Thr Ala Lys Leu Lys Gly Glu His Thr Asp 325 330 335 Leu Gly Lys Glu Gly Val Thr Asp Asp Asn Ala Lys Lys Ala Ile Leu 340 345 350 Lys Thr Asn Asn Asp Lys Thr Lys Gly Ala Asp Glu Leu Glu Lys Leu 355 360 365 Phe Glu Ser Val Lys Asn Leu Ser Lys Ala Ala Lys Glu Met Leu Thr 370 375 380 Asn Ser Vai Lys Glu Leu Thr Ser \ 385 390 <210> 73

<211> 1178 <212> ADN

<213> Quimera OspC <220> <221> CDS <222> (!)„.„ (1178) <400> 73 48 187 48 187 atg aga tta tta ata gga ttt gct tta gcg tta gct tta ata gga tgt Met Arg 1 Leu Leu Ile 5 Gly Phe Ala Leu Ala ' 10 Leu Ala Leu Ile Gly 15 Cys gca caa aaa ggt gct gag tca att gga tcc tgt aat aat tca gga aaa Ala G.ln Lys Gly 20 Ala Glu Ser Ile Gly 25 Ser Cys Asn Asn Ser 30 Gly Lys gat ggg aat gca tct gca 1 aat tlG& gct gat gag tct gtt aaa ggg cct Asp Gly Asn 35 Ala Ser Ala Asn Ser 40 Ala Asp Glu Ser Vai 45 Lys Gly Pro aat ctt aca gaa ata agt aaa aaa att aca gaa tct aac gca gtt gtt Asn Leu 50 Thr Glu Ile Ser Lys 55 Lys I Xe Thr Glu Ser 60 Asn Ala Vai Vai ctg gcc gtg aaa gaa gtt gag acc tta ctt gca tct ata gat gaa ctt Leu 65 Ala Vai Lys Glu Vai 70 Glu Thr Leu Leu Ala 75 Ser Ile Asp Glu Leu 80 gct acc aaa gct att ggt aaa aaa ata ggc aat aat ggt tta gag gcc Ala Thr Lys Ala Ile 85 Gly Lys Lys Ile Gly 90 Asn Asn Gly Leu Glu 95 Ala aat cag agt aaa aac aca tca ttg tta tca gga gct tat gca ata tct Asn Gin Ser Lys 100 Asn Thr Ser Leu Leu 105 Ser Gly Ala Tyr Ala 110 Ile Ser gac cta ata gca gaa aaa tta aat gta ttg aaa aat gaa gaa tta aag Asp Leu Ile 11 5 Ala Glu Lys Leu Asn 120 Vai Leu Lys Asn Glu 125 Glu Leu Lys gaa ââÇj att gat aca gct aag caa tgt tct aca gaa ttt act aat aaa Glu Lys 130 Ile Asp Thr Ala Lys 135 Gin Cys Ser Thr Glu 140 Phe Thr Asn Lys cta aaa agt gaa cat gca gtg ctt ggt ctg gac aat ctt act gat gat Leu 145 Lys Ser Glu His Ala 150 Vai Leu Gly Leu Asp 155 Asn Leu Thr Asp Asp 160 aat gca caa aga gct att tta aaa aaa cat gca aat aaa gat aag ggt Asn Ala Gin Arg Ala 165 Ile Leu Lys Lys His 170 Ala Asn Lys Asp Lys 175 Gly gct gca gaa ctt gaa aag tta ttt aaa gcg gta gaa aac tta tca aaa 96 144 192 240 288 336 384 432 480 528 576 188

Ala Ala Glu Leu Glu Lys Leu Phe Lys Ala Val Glu Asn Leu Ser Lys 180 185 190 gca gct caa gac aca tta 833 3 31 gct gtt aaa gag ctt aca agt cct 624 Ala Ala Gin Asp Thr Leu Lys Asn Ala Val ^ys Glu Leu Thr Ser Pro 195 200 205 att gtc cat ggt aat aat tca gga aaa gat ggg aat aca tct gca aat 672 Ile Vai His Gly Asn Asn Ser Gly Lys Asp Gly Asn Thr Ser Ala Asn 21.0 215 220 tct gct gat gag tct gtt aaa ggg cct aat ctt aca gaa ata agt aaa 720 Ser Ala Asp Glu Ser Vai Lys Gly Pro Asn Leu Thr Glu Ile Ser Lys 225 230 235 240 aaa att aca gaa tct aac gca gtt gtt ctg gct aaa gaa att gaa 768 Lys Ile Thr Glu Ser Asn Ala Vai Vai Leu Ala Val Lys Glu Ile Glu 245 250 255 act ttg ctt gca tct ata gat gaa ctt gct act aaa gct att ggt aaa 816 Thr Leu Leu Ala Ser Ile Asp Glu Leu Ala Thr Lys Ala Ile Gly Lys 260 265 270 aaa ata caa caa aat ggt ggt tta gct gtc gaa gcg ggg cat aat gga 864 Lys Ile Gin Gin Asn Gly Gly Leu Ala Val Glu Ala Gly His Asn Gly 275 280 285 a ca ttg tta gca ggt gct tat aca ata tca aaa cta ata aca caa aaa 912 Thr Leu Leu Ala Gly Ala Tyr Thr Ile Ser Lys Leu Ile Thr Gin Lys 290 295 300 tta gat gga ttg aaa aat tca gaa aaa tta aag gaa aaa att gaa aat 960 Leu Asp Gly Leu Lys Asn Ser Glu Lys Leu Lys Glu Lys Ile Glu Asn 305 310 315 320 gct aag aaa tgt tct gaa gat ttt act aaa aaa cta gaa gga gaa cat 1008 Ala Lys Lys Cys Ser Glu Asp Phe Thr Lys Lys Leu Glu Gly Glu His 325 330 335 gcg caa ctt gga att gaa aat gtt act gat gag aat gca ôl33 aaa gct 1056 Ala Gin Leu Gly Ile Glu Asn Vai Thr Asp Glu Asn Ala Lys Lys Ala 340 345 350 att tta ata aca gat gca gct aaa gat aag ggc gct gca gag ctt gaa 1104 Ile Leu Ile Thr Asp Ala Ala Lys Asp Lys Gly Ala Ala Glu Leu Glu 355 360 365 aag cta ttt aaa gca gta gaa aac ttg gca 838 gca gct aaa gag atg 1152 Lys LèU **» V rn CUCS Lys ai· CI.Í.O 1 U 1 VOU» ^*1 ·« VJXU Λ MM lUII ws. u Λ 1 · j>a-q Lys Ala A 1 x nxu T iip Q1 vi Uaf 370 375 380 Ctt gct aat tca gtt aaa gag ctt ac 1178 Leu Ala Asn Ser Vai Lys Glu Leu 3B5 390 <210> 74 <211> 391

<212> PRT <213> Quimera OspC <400> 74 190

Arg Leu Leu Ile Gly Phe Ala Leu Ala Leu Ala Leu Ile Gly cys A.la 1 5 10 15 Gin Lys Gly Ala Glu Ser Ile Gly Ser Cys Asn Asn Ser Gly Lys Asp 20 25 30 Gly Asn Ala Ser AI a Asn Ser Ala ASp Glu Ser Vai Lys Gly Pro Asn 35 40 1 45 Leu Thr Glu Ile Ser Lys Lys Ile Thr Glu Ser Asn Ala Vai Vai Leu 50 55 60 Ala Vai Lys Glu Vai Glu Thr Leu Leu Ala Ser Ile Asp Glu Leu Ala 65 70 75 80 Thr Lys Ala Ile Gly Lys Lys Ile Gly Asn Asn Gly Leu Glu Ala Asn 85 90 95 Gin Ser Lys Asn Thr Ser Leu Leu Ser Gly Ala Tyr Ala ile Ser Asp 100 105 110 Leu Ile Ala Glu Lys Leu Asn Vai 'Leu Lys Asn Glu Glu Leu Lys Glu 115 120 125 Lys Ile Asp Thr Ala Lys Gin Cys Ser Thr Glu Phe Thr Asn Lys Leu 130 135 140 Lys Ser Glu His Ala Vai Leu Gly Leu Asp Asn Leu Thr Asp Asp Asn 145 150 I 155 160 Ala Gin Arg Ala Ile Leu Lys Lys His Ala Asn Lys Asp Lys Gly Ala 165 1 170 175 Ala Glu Leu Glu Lys Leu Phe Lys Ala Vai Glu Asn Leu Ser Lys Ala 180 185 190 Ala Gin Asp Thr Leu Lys Asn Ala Vai Lys Glu Leu Thr Ser Pro Ile 195 1 200 205 Vai His Gly Asn Asn Ser Gly Lys Asp Gly Asn Thr Ser Ala Asn Ser 210 215 220 Ala Asp Glu Ser Vai Lys Gly Pro Asn Leu Thr Glu Ile Ser Lys Lys 225 230 235 240 Ile Thr Glu Ser Asn Ala Vai Vai Leu Ala Vai Lys Glu Ile Glu Thr 245 250 255 Leu Leu Ala Ser Ile Asp Glu Leu Ala Thr Lys Ala Ile Gly Lys Lys 260 265 270 Ile Gin Gin Asn Gly Gly Leu Ala Vai Glu Ala Gly His Asn Gly Thr 275 280 285 Leu Leu Ala Gly Ala Tyr Thr Ile Ser Lys Leu Ile Thr Gin Lys Leu 290 295 300 Asp Gly Leu Lys Asn Ser Glu Lys Leu Lys Glu Lys Ile Glu Asn Ala 305 310 315 320 Lys Lys Cys Ser Glu Asp Phe Thr Lys Lys Leu Glu Gly Glu His Ala 325 330 335 Gin Leu Gly Ile Glu Asn Vai Thr Asp Glu Asn Ala Lys Lys Ala Ile 340 345 350 Leu Ile Thr Asp Ala Ala Lys Asp Lys Gly Ala Ala Glu Leu Glu Lys 355 360 365 Leu Phe Lys Ala Vai Glu Asn Leu Ala Lys Ala Ala Lys Glu Met Leu 370 375 380 Μ ^ rubu /Vcn Co*"· Vsl Lys Glu Leu 385 390 <210> 75 <22 2> 1178

<212> ADN <213> Quimera OspC <220>

< 2 21 > CDS <222> (1)...(1178) <4 00> 75 192 atg aga tta tta ata gga ttt gct tta gcg tta gct tta ata gga tgt 48 193

Met 1 Arg Leu Leu ile 5 Gly Phe Ala Leu Ala 10 Leu Ala Leu Ile Gly 15 Cys gca ca a aaa ggt gct gag tca att gga tcc tgt aat aat tca gga aaa 96 Ala Gin Lys Gly 20 Ala Glu Ser Ile Gly 25 Ser Cys Asn Asn Ser 30 Gly Lys gat ggg aat gca tct gca aat tct gct gat gag tct gtt aaa ggg cct 144 Asp Gly Asn 35 Ala Ser Ala Asn Ser 40 Ala Asp Glu Ser Val 45 Lys Gly Pro aat ctt aca gaa ata agt ciêtcl aaa att aca gaa tct aac gca gtt gtt 192 Asn Leu 50 Thr Glu lie Ser Lys 55 Lys Ile Thr Glu Ser 60 Asn Ala ϊ Val val ctg gcc gtg aaa gaa gtt gag acc tta ctt gca tct ata gat gaa ctt 240 Leu 65 Ala Vai Lys Glu Vai 70 Glu Thr Leu Leu Ala 75 Ser Ile Asp Glu Leu 80 gct acc aaa gct att ggt aaa aaa ata ggc aat aat ggt tta gag gcc 288 Ala Thr Lys Ala Ile 85 Gly Lys i*ys Ile Gly 90 Asn Asn Gly Leu Glu 95 Ala aat cag agt aaa aac aca tca ttg tta tca gga gct tat gca ata tct 336 Asn Gin Ser Lys .100 Asn Thr Ser Leu Leu 105 Ser Gly Ala Tyr Ala 110 Ile Ser gac cta ata gca gaa aaa tta aat gta ttg aaa aat gaa gaa tta aag 384 Asp Leu Ile 115 Ala Glu Lys Leu Asn 120 Vai Leu Lys Asn Glu 125 Glu Leu Lys gaa aag att gat aca gct aag caa tgt tct aca gaa ttt act aat aaa 432 Glu Lys 130 Ile Asp Thr Ala Lys 135 Gin Cys Ser Thr Glu 140 Phe Thr Asn Lys cta aaa agt gaa cat gca gtg ctt ggt ctg gac aat ctt act gat gat 480 Leu Lys 145 Ser Glu His Ala 150 vai Leu Gly Leu Asp 155 Asn Leu Thr Asp Asp 160 aat gca caa aga gct att tta aaa aaa cat gca aat aaa gat aag ggt 528 Asn Ala Gin Arg Ala 165 Ile Leu Lys Lys His 170 Ala Asn Lys Asp Lys 175 Gly gct gca gaa ctt gaa aag tta ttt aaa gcg gta gaa aac tta tca aaa 576 Ala Ala Glu Leu 180 Glu Lys Leu Phe Lys 185 Ala Val Glu Asn Leu 190 Ser Lys gca gct caa gac aca tta aaa aat gct gtt 333 gag ctt aca agt cct 624 Ala ftla Gin 195 Asp Thr Leu Lys Asn 200 Ala Vai Lys Glu Leu 205 Thr Ser Pro att gtc cat ggt aat aat tca 3Çf3 aaa gat ggg aat gca tct aca aat 672 lie Vai 210 His Gly Asn Asn Ser 215 Arg Lys Asp Gly Asn 220 Ala Ser Thr Asn tct gcc gat gag tct gtt aaa ggg cct aat ctt aca gaa ata agt aaa 720 Ser 225 Ala Asp Glu Ser Vai 230 Lys Gly Pr o Asn Leu 235 Thr Glu Ile Ser Lys 240 aaa att aca gaa tct aac gca gtt gtt ctg gcc gtg aaa gaa gtt gag 768 Lys lie Thr Glu Ser 245 Asn Ala Vai Vai Leu 250 Ala Val Lys Glu Val 255 Glu 194 acc tta ctt gca tct ata gat gaa ctt gct acc aaa gct att ggt aag 816 Thr Leu Leu Ala Ser Ile Asp Glu Leu Ala Thr Lys Ala Ile Gly Lys 260 265 270 aaa ata ggc aat aat ggt tta gag g'cc aat cag agt aaa aac aca tca 864 Lys Ile Gly Asn Asn Gly Leu Glu Ala' Asn Gin Ser Lys Asn Thr Ser 275 280 285 ttg tta tca gga gct tat gca ata tct gac cta ata gca gaa aaa tta 912 Leu Leu Ser Gly Ala Tyr Ala Ile Ser Asp Leu Ile Ala Glu Lys Leu 290 295 300 aat gta ttg aaa aat gaa gaa tta aag gaa aag att gat aca gct aag 960 Asn Vai Leu Lys Asn Glu Glu Leu rLys Glu Lys Ile Asp Thr Ala Lys 305 1 310 315 320 caa tgt tct aca gaa ttt act aat aaa cta aaa agt gaa cat gca gtg 1008 Gin Cys Ser Thr Glu Phe Thr Asn Lys Leu Lys Ser Glu His Ala Vai 325 330 335 ctt ggt ctg gac aat ctt act gat gat 1 aat gca caa aga gct att tta 1056 Leu Gly Leu Asp Asn Leu Thr 'Asp Asp Asn Ala Gin Arg Ala Ile Leu 34 0 345 350 aaa aaa cat gca aat aaa gat aag ggt gct gca gaa ctt gaa aag tta 1104 Lys Lys His Ala Asn Lys Aspi Lys Gly Ala Ala Glu Leu Glu Lys Leu 355 360 365 ttt âââ g<=g gta gaa aac tta tca aaa gca gct caa gac aca tta aaa 1152 Phe Lys Ala Vai Glu Asn Leu Ser Lys Ala Ala Gin Asp Thr Leu Lys 370 375 380 aat gct gtt aaa gag ctt aca agt cc 1178 Asn Ala Vai Lys Glu Leu Thr Ser 385 390 < 210 > 7 6 <211> 391 < 212 > PRT <213> Quimera <400> 76 195

Arg Ιιί ^- Τιιϊ Leu Ile Gly Phe Ala Leu Ala Leu Ala Leu Ile Gly Cys Ala 1 5 10 15 Gin Lys Gly Ala Glu Ser Ile Gly Ser Cys Asn Asn Ser Gly Lys Asp 20 25 30 eiy Asn Ala Ser Ala Asn Ser Ala Asp Glu Ser Vai Lys Gly Pro Asn n c .J-J λ n 4 5 Leu Thr Glu Ile Ser Lys Lys 1.1 e Thr Glu Ser Asn Ala Vai Vai Leu 50 55 60 Ala Vai Lys Glu Vai Glu Thr Leu Leu Ala Ser Ile Asp Glu Leu Ala 65 70 75 80 Thr Lys Ala Ile Gly Lys Lys Ile Gly Asn Asn Gly Leu Glu Ala Asn 85 90 95 Gin Ser Lys Asn Thr Ser Leu Leu Ser Gly Ala Tyr 1 â Ile Ser Asp 100 105 110 Leu Ile Ala Glu Lys Leu ASn Vai Leu Lys Asn Glu Glu Leu Lys Glu 115 120 125 Lys Ile Asp Thr Ala Lys Gin cys Ser Thr Glu Phe Thr Asn Lys Leu 130 135 140 Lys Ser Glu His Ala Vai Leu Gly Leu Asp Asn Leu Thr Asp Asp Asn 145 150 155 160 Al a Gin Arg Ala Ile Leu Lys Lys His Ala Asn Lys Asp Lys Gly Alâ 165 170 175 Ala Glu Leu Glu Lys Leu Phe Lys Ala Vai Glu Asn Leu Ser Lys Ala 180 185 190 Ala Gin Asp Thr Leu Lys Asn Ala Vai Lys Glu Leu Thr Ser Pro Ile 195 200 205 Vai His Gly Asn Asn Ser Arg Lys Asp Gly Asn Ala Ser Thr Asn Ser 210 215 220 Ala Asp Glu Ser Vai Lys Gly Pro Asn Leu Thr Glu Ile Ser Lys Lys 225 230 235 240 Ile Thr Glu Ser Asn Ala Vai Vai Leu Ala Vai Lys Glu Vai Glu Thr 245 250 255 Leu Leu Ala Ser Ile Asp Glu Leu Ala Thr Lys Ala Ile Gly Lys Lys 260 265 270 Ile Gly Asn Asn Gly Leu Glu Ala Asn Gin Ser Lys Asn Thr Ser Leu 275 280 285 Leu Ser Gly Ala Tyr Ala Ile Ser Asp Leu Ile Ala Glu Lys Leu Asn 290 295 300 Vai Leu Lys Asn Glu Glu Leu Lys Glu ^ys Ile Asp Thr Ala Lys Gin 305 310 315 320 Cys Ser Thr Glu Phe Thr Asn Lys Leu Lys Ser Glu His Ala Vai Leu 325 330 335 Gly Leu Asp Asn Leu Thr Asp Asp Asn Ala Gin Arg Ala Ile Leu Lys 340 345 350 Lys His Ala Asn Lys Asp Lys Gly Ala Ala Glu Leu Glu Lys Leu Phe 355 360 365 Lys Ala Vai Glu Asn Leu Ser Lys Ala Ala Gin Asp Thr Leu Lys Asn 370 375 380 Ala Vai Lys Glu Leu Thr Ser 385 390 <210> 77

<211> 1230 <212> ADN

<213> Quimera OspC < 220>

< 2 21> CDS <2 2 2> {!)... {1230) <400> 77 197 atg aga tta tta ata gga ttt gct tta gcg tta gct tta ata gga tgt 48 Met Arg Leu Leu Ile Gly Phe A.la Leu Ala Leu Ala Leu lie Gly Cys 1 5 10 15 gca caa aaa ggt gct gag tca att gga tcc tgt aat aat tca ggg aaa 96 Ala Gin Lys Gly Ala Glu Ser Ile Gly Ser Cys Asn Asn Ser Gly Lys 'tn *Λ W 25 30 gat ggg aat aca tct gca aat tct gct gat gag tct gtt aaa ggg cct 144 Asp Gly Asn Thr Ser Ala Asn Ser Ala Asp Glu Ser Vai Lys Gly Pro 35 40 45 aat ctt aca gaa ata agt aaa aaa att a cg gat tct aat gcg gtt tta 192 Asn Leu Thr Glu Ile Ser Lys Lys Ile Thr Asp Ser Asn Ala Vai Leu 50 55 60 ctt gct gtg aaa gag gtt gaa gcg ttg ctg tca tct ata gat gaa att 240 Leu Ala Vai Lys Glu Vai Glu Ai a Leu Leu Ser Ser Ile Asp Glu Ile 65 70 75 eo 288 198 288 198 gct gct aaa gct att ggt aaa aaa ata cac caa aat aat ggt ttg gat Ala Ala Lys Ala Ile Gly Lys Lys Ile His Gin Asn Asn Gly Leu Asp 85 , 90 95 acc gaa tat aat cac aat gga tca ttg tta gcg gga gct tat gca ata Thr Glu Tyr Asn His Asn Gly Ser Leu Leu Ala Gly Ala Tyr Ala Ile 100 105 110 tca acc cta ata aaa caa aaa tta gat gga ttg aaa aat gaa gga tta Ser Thr Leu Ile Lys Gin Lys Leu Asp Gly Leu Lys Asn Glu Gly Leu 115 120 125 aag gaa aaa att gat gcg gct aag aaa tgt tct gaa aca ttt act aat Lys Glu Lys Ile Asp Ala Ala Lys Lys Cys Ser Glu Thr Phe Thr Asn 130 1 135 1 140 aaa tta aaa gaa aaa cac aca gat ctt ggt aaa gaa ggt gtt act gat Lys Leu Lys Glu Lys His Thr Asp Leu Gly Lys Glu Gly Vai Thr Asp 145 150 155 160 gct gat gca aaa gaa gcc att tta aaa áca aat ggt act aaa act aaa Ala Asp Ala Lys Glu Ala lie jLeu Lys Thr Asn Gly Thr Lys Thr Lys 165 , 170 175 ggt gct gaa gaa ctt gga aaa tta ttt gaa tca gta gag gtc ttg tca Glv Ala Glu Glu Leu Gly Lys, Leu Phe Glu Ser Vai Glu Vai Leu Ser 180 185 190 aaa gca gct aaa gag atg ctt gct aat tca gtt 333 gag ctt aca age Lys Ala Ala Lys Glu Met Leu Ala Asn Ser Vai Lys Glu Leu Thr Ser 195 200 205 cct gtt gtg gca gaa agt cca aaa aaa cct ttc cat ggt aat aat tca Pro Vai Va.l. Ala Glu Ser Pro Lys Lys Pro Phe His Gly Asn Asn Ser 210 215 220 ggt ggg gat tct gca tct act aat cct gat gag tct gca aaa gga cct Gly Gly Asp Ser Ala Ser Thr Asn Pro Asp Glu Ser Ala Lys Gly Pro 225 230 235 240 aat Ctt acc gta ata age aaa aaâ att aca gat tct aat gca ttt tta Asn Leu Thr Vai Ile Ser Lys Lys lie Thr Asp Ser Asn Ala Phe Leu 245 250 255 ctg gct gtg aaa gaa gtt gag gct ttg ctt tca tct ata gat gaa ctt Leu Ale Vai Lys Glu vai Glu Ala Leu Leu Ser Ser lie Asp Glu Leu 260 265 270 tct eee gct att aat aaa aaa ata aaa aat gat aat act tta gat aac Ser Lys Ala Ile GÍy Lys Lys Ile Lys Asn Ãsp GÍy Thr Leu Asp Asn 275 280 285 gaa gca aat cga aac gaa tca ttg ata gca gga gct tat gaa ata tca Glu Ala Asn Arg Asn Glu Ser Leu Ile Ala Gly Ala Tyr Glu Ile Ser 290 295 300 aaa cta ata aca caa aaa tta agt gta ttg aat tca gaa gaa tta aag Lys Leu Ile Thr Gin Lys Leu Ser Vai Leu Asn Ser Glu Glu Leu Lys 305 310 315 320 aaa aaa att aaa gag gct aag gat tgt tcc caa aaa ttt acc act aag Lys Lys Ile Lys Glu Ala Lys Asp Cys Ser Gin Lys Phe Thr Thr Lys 325 330 335 336 384 432 480 528 576 624 672 720 768 816 864 912 960 1008 199 cta Leu a 3 ci Lys gat Asp agt Ser 340 cat His gca Ala gag Glu ctt Leu ggt Gly 345 ata Ile caa Gin age gtt Ser Val cag Gin 350 gat Asp gat Asp 1056 aat Asn gca Ala aaa Lys 355 aaa Lys gct Ala att Ile tta Leu aaa Lys 360 aca Thr cat His gga Gly act Thr aaa Lys 365 gac Asp aag Lys ggt Gly 1104 gct Ala aaa Lys 370 gaa Glu ctt Leu gaa Glu gag Glu tta Leu 375 ttt Phe aaa Lys tca Ser cta Leu gaa Glu 380 age Ser ttg Leu tca Ser aaa Lys 1152 gca Ala 385 gcg Ala caa Gin gca Ala gca Ala tta Leu 390 act Thr aat Asn tca Ser gtt Val aaa Lys 395 gag Glu ctt Leu aca Thr aat Asn cct Pro 400 1200 gtt Vai gtg Vai gca Ala gaa Glu agt Ser 405 cca Pro aaa Lys aaa Lys cct Pro taa * 1230 <210> 78 < 211 > 408 <212> PRT <213> Quimera <4 00> 78 200

Arg Leu Leu Ile Gly Phe Ala Leu Ala Leu Ala Leu Ile Gly Cys Ala 1 5 10 15 Gin Lys Gly Ala Glu Ser Ile Gly Ser Cys Asn Asn Ser Gly Lys Asp 20 25 30 Gly Asn Thr Ser Ala Asn Ser Ala Asp Glu Ser Val Lys Gly Pro Asn 35 40 45 Leu Thr Glu Ile Ser Lys Lys Ile Thr Asp Ser Asn Ala Val Leu Leu 50 55 60 Ala Vai Lys Glu Val Glu Ala Leu Leu Ser Ser Ile Asp Glu Ile Ala 65 70 75 80 Ala Lys Ala Ile Gly Lys Lys Ile His Gin Asn Asn Gly Leu Asp Thr 85 90 95 Glu Tyr Asn His Asn Gly Ser Leu Leu Ala Gly Ala Tyr Ala Ile Ser 100 105 110 Thr Leu Ile Lys Gin Lys Leu Asp Gly Leu Lys Asn Glu Gly Leu Lys 115 120 125 Glu Lys Ile Asp Ala Ala Lys Lys Cys Ser Glu Thr Phe Thr Asn Lys 130 135 140 Leu Lys Glu Lys His Thr Asp Leu Gly Lys Glu Gly Val Thr Asp Ala 145 150 155 160 n$p n 1 « rvj. g. T υγ o Λ1 .. Tl 1 — AAU Ile Leu T . .o ",I“ Thr A Cl .r V v· T yO Thr T.trc Gly 165 170 Λ 175 Ala Glu Glu Leu Gly Lys Leu Phe Glu Ser Val Glu Val Leu Ser Lys 180 185 190 Ala Ala Lys Glu Met Leu Ala Asn Ser Val Lys Glu Leu Thr Ser Pro 195 200 205 Vai Vai Ala Glu Ser Pro Lys Lys Pro Phe His Gly Asn Asn Ser Gly 210 215 220 Gly Asp Ser Ala Ser Thr Asn Pro Asp Glu Ser Ala Lys Gly Pro Asn 225 230 235 240 Leu Thr Val Ile Ser Lys Lys Ile Thr Asp Ser Asn Ala Phe Leu Leu 245 250 255 Ala Vai Lys Glu Val Glu Ala Leu Leu Ser Ser Ile Asp Glu Leu Ser 260 265 270 Lys Ala Ile Gly Lys Lys Ile Lys Asn Asp G.ly Thr Leu Asp Asn Glu 275 280 285 Ala Asn Arg Asn Glu Ser Leu Ile Ala Gly Ala Tyr Glu Ile Ser Lys 290 295 300 Leu Ile Thr Gin Lys Leu Ser Val Leu Asn Ser Glu Glu Leu Lys Lys 305 310 - 315 320 Lys Ile Lys Glu Ala Lys Asp Cys Ser Gin Lys Phe Thr Thr Lys Leu 325 330 335 Lys Asp Ser His Ala Glu Leu Gly Ile Gin Ser Val Gin Asp Asp Asn 340 345 350 Ala Lys Lys Ala Ile Leu Lys Thr His Gly Thr Lys Asp Lys Gly Ala 355 360 365 Lys Glu Leu Glu Glu Leu Phe Lys Ser Leu Glu Ser Leu Ser Lys A..1 ^ j 370 375 380 Ala Gin Ala, Ala Leu Thr Asn Ser Val Lys Glu Leu Thr Asn Pro Val 385 390 395 400 Vai Ala Glu Ser Pro Lys Lys Pro 405

<210> 79 <211> 1209 <212> ADN <213> Quimera OspC <22 0>

<221> CDS <222> {!)... (1209) <400> 79 202 atg aga tta tta ata gga ttt gct tta gcg tta gct tta ata gga tgt 48 Met 1 Arg Leu Leu Ile 5 Gly Phe Ala Leu Ala 10 Leu Ala Leu Ile Gly 15 Cys gca caa aaa ggt gct gag tca att gga t cc tgt aat aat tca ggg 333 96 Ala Gin Lys Gly 20 Ala Glu Ser Ile Gly 25 Ser Cys Asn Asn Ser 30 Gly Lys gat ggg aat aca tct gca aat tct gct gat gag tct gtt aaa ggg cct 144 Asp Gly Asn 35 Thr Ser Ala Asn Ser 40 Ala Asp Glu Ser Val 45 Lys Gly Pro aat ctt a ca gaa ata agt aaa aaa att acg gat tct aat gcg gtt tta 192 Asn Leu 50 Thr Glu Ile Ser Lys 55 Lys Ile Thr Asp Ser 60 Asn Ala Val Leu ctt gct gtg aaa gag gtt gaa gcg ttg ctg tca tct ata gat gaa att 240 Leu cc. w Ala Vai Lys Glu Vai 70 Glu Ala Leu Leu Ser 75 Ser Ile Asp Glu He 80 gct gct aaa gct att ggt aaa aaa ata cac caa aat aat ggt ttg gat 288 Ala Ala Lys Ala Ile 85 Gly Lys Lys Ile His 90 Gin Asn Asn Gly Leu 95 Asp acc gaa tat aat cac aat gga tca ttg tta gcg ÇfGfâ gct tat gca ata 336 Thr Glu Tyr Asn 100 Bis Asn Gly Ser Leu 105 Leu Ala Gly Ala Tyr 110 Ala Ile tca acc cta ata aaa caa aaa tta gat gga ttg aaa aat gaa gga tta 384 Ser Thr Leu 115 Ile Lys Gin Lys Leu 120 Asp Gly Leu Lys Asn 125 Glu Gly Leu aag gaa aaa att gat gcg gct aag aaa tgt tct gaa aca ttt act aat 432 203

Lys Glu 130 Lys Ile Asp Ala Ala 135 Lys Lys Cys Ser Glu 140 Thr Phe Thr Asn aaa tta aaa gaa aaa cac aca gat ctt ggt aaa gaa ggt gtt act gat 480 Lys 145 Leu Lys Glu Lys His 150 Thr Asp Leu Gly Lys 155 Glu Gly Val Thr Asp 160 gct gat gca aaa gaa gcc att tta aaa aca aat ggt act aaa act aaa 528 Ala Asp Ala Lys Glu 165 Ala Ile Leu Lys Thr 170 Asn Gly Thr Lys Thr 175 Lys ggt gct gaa gaa ctt gga aaa tta ttt gaa tca gta gag gtc ttg tca 576 Gl.y Ala Glu Glu ISO Leu Gly Lys Leu Phe 185 Glu Ser Val Glu Val 190 Leu Ser aaa gca gct aaa gag atg ctt gct aat tca gtt βάά gag ctt aca age 624 Lys Ala Ala 195 Lys Glu Met Leu Ala 200 Asn Ser Val Lys Glu 205 Leu Thr Ser cct gtt gtg gca gaa agt cca aaa aaa cct tcc atg gta aat aat tca 672 Pro Val 210 Val Ala Glu Ser Pro 215 Lys Lys Pro Ser Met 220 Val Asn Asn Ser ggg aaa gat ggg aat aca tct gca aat tct gct gat gag tct gtt aaa 720 Gly 225 Lys Asp Gly Asn Thr 230 Ser Ala Asn Ser Ala 235 Asp Glu Ser Val Lys 240 ggg cct aat ctt aca gaa ata agt aaa aaa att aca gaa tct aac gca 768 Gly Pro Asn Leu Thr 245 Glu Ile Ser Lys Lys 250 Ile Thr Glu Ser Asn 255 Ala gtt gtt ctc gcc gtg aaa Cf 3 cl gtt gaa act ttg ctt aca tct ata gat 816 Vai Val Leu Ala 260 Val Lys Glu Val Glu 265 Thr Leu Leu Thr Ser 270 Ile Asp gag ctt gct aaa gct att ggt aaa &â3 ata aaa aac gat gtt agt tta 864 Glu Leu Ala 275 Lys Ala Ile Gly Lys 260 Lys Ile Lys Asn Asp 285 Val Ser Leu gat aat gag gca gat cac aac gga tca tta ata tca gga gca tat tta 912 Asp Asn 290 Glu Ala Asp His Asn 295 Gly Ser Leu Ile Ser 300 Gly Ala Tyr Leu att tca aac tta ata aca aaa aaa ata agt gca ata aaa gat tca gga 960 Ile 305 Ser Asn Leu Ile Thr 310 Lys Lys Ile Ser Ala 315 Ile Lys Asp Ser Gly 320 gaa ttg aag gca gaa att gaa aag gct aag aaa tgt tct gaa gaa ttt 1008 Glu Leu T trc -j — Aia Glu 325 Ile çlu lys Ala Lvs 330 Lys Cys Ser Glu Glu 335 Phe act gct aaa tta aaa ggt gaa cac aca gat ctt ggt aaa gaa ggc gtt 1056 Thr Ala Lys Leu 340 Lys Gly Glu His Thr 345 Asp Leu Gly Lys Glu 350 Gly Val act gat gat aat gca aaa aaa gcc att tta aaa aca aat aat gat aaa 1104 Thr Asp Asp 355 Asn Ala Lys Lys Ala 360 Ile Leu Lys Thr Asn 365 Asn Asp Lys act aag ggc gct gat gaa ctt gaa aag tta ttt gaa tca gta aaa aac 1152 Thr Lys 370 Gly Ala Asp Glu 375 Glu Lys Leu Phe Glu 380 Ser Val Lys Asn 1200 204 ttg tca aaa gca gct aaa gag atg ctt act aat tca gtt aaa gag ctt

Leu Ser Lys Ala Ala Lys Glu Met Leu Thr Asn Ser Vai Lys Glu Leu 3B5 390 395 400 1209 aca age taa , 1

Thr Ser * < 210 > 80 < 211 > 401 < 212 > PRT <213> Quimera OspC <400> 80 205

Arg 1 Leu Leu Ile Gly 5 Phe Ala Leu Ala Leu 10 Ala Leu Ile G.l,y Cys 15 Ala Gin Lys Gly Ala 20 Glu Ser Ile Gly Ser 25 Cys Asn Asn Ser Gly 30 Lys Asp Gly Asn Thr 35 Ser Ala Asn Ser Ala 40 Asp Glu Ser Vai Lys 45 Gly Pro Asn Leu Thr 50 Glu Ile Ser Lys Lys1Ile 55 Thr Asp Ser Asn 60 Ala Vai Leu Leu Ala 65 Vai Lys Glu Vai Glu 70 Ala Leu Leu Ser Ser 75 Ile Asp Glu Ile Ala 80 Ala Lys Ala Ile Gly 85 Lys Lys, Ile His Gin 90 Asn Asn Gly Leu Asp 95 Thr Glu Tyr Asn His 100 Asn Gly Ser Leu Leu 105 Ala Gly Ala Tyr* Ala 110 rie Ser Thr Leu lie 115 Lys Gin Lys Leu Asp 120 Gly Leu Lys Asn Glu 125 Gly Leu Lys Glu Lys 130 Ile Asp Ala Ala Lys Lys 135 Cys Ser Glu Thr 140 Phe Thr Asn Lys Leu 145 Lys Glu Lys His Thr 150 Asp Leu Gly Lys Glu 155 Gly Vai Thr Asp Ala 160 Asp Ala Lys Glu Ala 165 Ile Leu Lys Thr Asn 170 Gly Thr Lys Thr Lys 175 Gly Ala Glu Glu Leu 180 Gly Lys Leu Phe Glu 185 Ser Vai Glu Vai Leu 190 Ser Lys Ala Ala Lys 195 Glu Met Leu Ala Asn 200 Ser Vai Lys Glu Leu 205 Thr Ser Pro Vai Vai 210 Ala Glu Ser Pro Lys Lys 215 Pro Ser Met Vai 220 Asn Asn Ser Gly Lys 225 Asp Gly Asn Thr Ser 230 Ala Asn Ser Ala Asp 235 Glu Ser Vai Lys Gly 240 Pro Asn Leu Thr Glu 245 Ile Ser Lys Lys Ile 250 Thr Glu Ser Asn Ala 255 Vai Vai Leu Ala vai Λ ΛΛ £ W Lys Glu Vai Glu Thr <>CE 4~ VM- Leu Leu Thr Ser Ile no Asp Glu Leu Ala Lys 27 5 Ala Ile Gly Lys Lys 280 Ile Lys Asn Asp Vai 285 Ser Leu Asp Asn Glu 290 Ala Asp His Asn Gly Ser 295 Leu Ile Ser Gly 300 Ala Tyr Leu Ile Ser 305 Asn Leu Ile Thr Lys 310 Lys Ile Ser Ala Ile 315 Lys Asp Ser Gly Glu 320 Leu Lys Ala Glu Ile 325 Glu Lys Ala Lys Lys 330 Cys Ser Glu Glu Phe 335 Thr Ala Lys Leu Lys 340 Gly Glu His Thr Asp 345 Leu Gly Lys Glu Gly 350 Vai Thr Asp Asp Asn 355 Ala Lys Lys Ala Ile 360 Leu Lys Thr Asn Asn 365 Asp Lys Thr Lys Gly Ala 370 Asp Glu Leu Glu Lys 375 Leu Phe Glu Ser 380 Vai Lys Asn Leu Ser 385 Ser Lys Ala Ala Lys GlU 390 Met Leu Thr Asn Ser 395 Vai Lys Glu Leu Thr 400 <210> 81 206

<211> 1205 <212> ADN

<213> Quimera OspC <220>

<221> CDS <222> (1) ... (1205) <4 00> 81 207 atg aga tta tta ata gga ttt gct tta gcg tta gct tta ata gga tgt 48 Met Arg Leu Leu Ile Gly Phe Ala Leu ALa Leu Ala Leu Ile Gly Cys 1 5 10 15 gca caa aaa ggt gct gag tca att gga tcc tgt aat aat tca ggg aaa 96 Ala Gin Lys Gly Ala Glu Ser Ile Gly Ser Cys Asn Asn Ser Gly Lys 20 25 30 gat ggg aat aca tct gca aat tct gct gat gag tct gtt aaa ggg cct 144 Asp Gly Asn Thr Ser Ala Asn Ser Ala Asp Glu Ser Val Lys Gly Pro 35 40 45 aat ctt aca gaa ata agt aaa â&Gl att acg gat tct aat gcg gtt tta 192 Asn Leu Thr Glu Ile Ser Lys Lys Ile Thr Asp Ser Asn Ala Val Leu 50 55 60 ctt gct gtg aaa gag gtt gaa gcg ttg ctg tca tct ata gat gaa att 240 Leu Ala Vai Lys Glu Vai Glu Ala Leu Leu Ser Ser Ile Asp Glu Ile 65 70 75 80 gct gct aaa gct att ggt aaa aaa ata cac caa aat aat ggt ttg gat 288 Ala Ala Lys Ala Ile Gly Lys Lys Ile His Gin Asn Asn Gly Leu Asp 85 90 95 acc gaa tat aat cac aat gga tca ttg tta gcg gga gct tat gca ata 336 Thr Glu Tyr Asn His Asn Gly Ser Leu Leu Ala Gly Ala Tyr Ala Ile 100 105 110 tca acc cta ata aaa caa aaa tta gat gga ttg aaa aat gaa gga tta 384 Ser Thr Leu Ile Lys Gin Lys Leu Asp Gly Leu Lys Asn Glu Gly Leu 115 120 125 aay gaa dââ αΐΐίϋ gcg — - aag ΞΗϋ - Ϊ7 " tct γτλ a 90^ ttt c3 Ct aat 432 Lys Glu Lys Ile Asp Ala Ala Lys Lys Cys Ser Glu Thr Phe Thr Asn 130 135 140 aaa tta aaa gaa cac aca gat ctt ggt 333 gaa ggt gtt act gat 4B0 Lys Leu Lys Glu Lys His Thr Asp Leu Gly Lys Glu Gly Val Thr Asp 145 150 155 160 gct gat gca aaa gaa gcc att tta aaa aca aat ggt act aaa act aaa 528 Ala Asp Ala Lys Glu Ala Ile Leu Lys Thr Asn Gly Thr Lys Thr Lys 165 170 175 ggt gct gaa gaa ctt aga aaa tta ttt gaa tca gta gag gtc ttg tca 576 Gly Ala Glu Glu Leu Gly Lys Leu Phe Glu Ser Vai Glu Val Leu Ser 1BO IBS 190 208 aaa gca gct aaa gag atg ctt gct aat tca gtt aaa gag ctt aca age 624 Lys Ala Ala Lys Glu Met Leu Ala Asn Ser Val Lys Glu Leu Thr Ser 195 200 ( 205 cct gtt gtg gca gaa agt cca 1 aaa aaa cct tcc atg gta aat aat tca 672 Pro Val val Ala Glu Ser Pro Lys Lys 'Pro Ser Met Val Asn Asn Ser 210 215 220 gga aaa gat ggg aat aca tct gca aat tct gct gat gag tct gtt aaa 720 Gly Lys Asp Gly Asn Thr Ser Ala Asn Ser Ala Asp Glu Ser Val Lys 225 230 235 240 ggg cct aat ctt aca gaa ata agt, aaa aaa att aca gaa tct aac gca 768 Gly Pro Asn Leu Thr Glu Ile Ser Lys Lys Ile Thr Glu Ser Asn Ala 245 250 255 gtt gtt ctg gct gtg aaa gaa att gaa act ttg ctt gca tct ata gat 816 Val Val Leu Ala Val Lys Glu Ile Glu Thr Leu Leu Ala Ser Ile Asp 260 265 1 270 gaa ctt gct act aaa gct att1 ggt aaa aaa ata caa caa aat ggt ggt 864 Glu Leu Ala Thr Lys X le Gly Lys Lys Ile Gin Gin Asn Gly Gly 275 280 285 tta gct gtc gaa gcg ggg cat aat gga aca ttg tta gca ggt gct tat 912 Leu Ala Val Glu Ala Gly His Asn Gly Thr Leu Leu Ala Gly Ala Tyr 290 295 300 aca ata tca aaa cta ata aca OaS aaa tta gat gga ttg aaa aat tca 960 Thr Ile Ser Lys Leu Ile Thr Gin Lys Leu Asp Gly Leu Lys Asn Ser 305 310 315 320 Ç3cl aaa tta aag gaa aaa att gaa aat gct aag aaa tgt tct gaa gat 1008 Glu Lys Leu Lys Glu Lys Ile Glu Asn Ala Lys Lys Cys Ser Glu Asp 325 330 335 ttt act aaa aaa cta gga gaa cat gcg ca a ctt gga att ÇJclal aat 1056 Phe Thr Lys Lys Leu Glu Gly Glu His Ala Gin Leu G.ly Ile Glu Asn , 340 345 350 gtt act gat gag aat gca aaa aaa gct att tta ata aca gat gca gct 1104 Val Thr Asp Glu Asn Ala Lys Lys Ala Ile Leu Ile Thr Asp Ala Ala 355 360 365 aaa gat aag ggc gct gca gag ctt gaa aag cta ttt aaa gca gta gaa 1152 Lys Asp Lys Gly Ala Ala Glu Leu Glu Lys Leu Phe Lys Ala Val Glu 370 375 380 aac ttg gca aaa gca gct aaa gag atg ctt gct aat tca gtt aaa gag 1200 Asn Leu Ala Lys Ala Ala Lys Glu Met Leu Ala Asn Ser Val Lys Glu 3B5 390 395 400 ctt ac 1205

Leu <210> 82 <211> 400 209

<212> PRT <213> Quimera OspC <400> 82 210

Arg 1 Leu Leu Ile G.ly 5 Phe Ala Leu Ala Leu 10 Ala Leu Ile Giy cys 15 Ala Gl.n Lys Gly Ala 20 Glu Ser Ile Gly Ser 25 Cys Asn Asn Ser Gly 30 Lys Asp Gly Asn Thr 35 Ser Ala Asn Ser Ala 40 Asp Glu Ser Vai Lys 45 Gly Pro Asn Leu Thr 50 Glu Ile Ser Lys Lys 55 Ile Thr Asp Ser Asn 60 Ala Vai Leu Leu Ala 65 Vai Lys Glu Vai Glu 70 Ala Leu Leu Ser Ser 75 Ile Asp Glu Ile Ala 80 Ala Lys Ala Ile Gly 85 Lys Lys Ile His Gin 90 Asn Asn Gly Leu Asp 95 Thr Glu Tyr Asn His 100 Asn Gly Ser Leu Leu 105 Ala Gly Ala Tyr Ala 110 Ile Ser Thr Leu Ile 115 Lys Gin Lys Leu Asp 120 Gly Leu Lys Asn Glu 125 Gly Leu Lys Glu Lys 130 Ile Asp Ala Ala Lys 135 Lys Cys Ser Glu Thr 140 Phe Thr Asn Lys Leu 145 Lys Glu Lys His Thr 150 Asp Leu Gly Lys Glu 155 Gly Vai Thr Asp Ala 160 Asp Ala Lys Glu Ala 165 Ile Leu Lys Thr Asn 170 Gly Thr Lys Thr Lys 175 Gly Ala Glu Glu Leu 180 Gly Lys Leu Phe Glu 185 Ser Vai Glu Vai Leu 190 Ser Lys Ala Ala Lys 195 Glu Mefc Leu Ala Asn 200 Ser Vai Lys Glu Leu 205 Thr Ser Pro Vai Vai 210 A1 ã Glu Ser Pro Lys 215 Lys Pro Ser Met Vai 220 Asn Asn Ser Gly Lys 225 Asp Gly Asn Thr Ser 230 Ala Asn Ser AI ci Asp 235 Glu Ser Vai Lys Gly 240 Pro Asn Leu Thr Glu 245 Ile Ser Lys Lys Ile 250 Thr Glu Ser Asn Ala 255 Vai. Vai Leu Ala Vai 260 Lys Glu Ile Glu Thr 265 Leu Leu Ala Ser Ile 270 Asp Glu Leu Ala Thr 275 Lys Ala Ile Gly Lys 280 Lys Ile Gin Gin Asn 285 Gly Gly Leu Ala Vai 290 Glu Ala Gly His Asn 295 Gly Thr Leu Leu Ala 300 Gly Ala Tyr Thr Ile 305 Ser Lys Leu Ile Thr 310 Gin Lys Leu Asp Gly 315 Leu Lys Asn Ser Glu 320 Lys Leu Lys Glu Lys 325 Ile Glu Asn Ala Lys 330 Lys Cys Ser Glu Asp 335 Phe Thr Lys Lys Leu 340 Glu Gly Glu His Ala 345 Gin Leu Gly Ile Glu 350 Asn Vai Thr Asp Glu 355 Asn Ala Lys Lys Ala 360 Ile Leu Ile Thr Asp 365 Ala Ala Lys Asp Lys 370 Gly Ala Ala Glu Leu 375 Glu Lys Leu Phe Lys 380 Ala Vai Glu Asn Leu 385 Ãla Lys Ala Ala Lys 390 Glu Met Leu Ala Asn 395 Ser Vai Lys Glu Leu 400 <210> 83 <211> 1236

<212> ADN <213> Quimera QspC < 2 2 Ο >

<221> CDS <222> (1) ... (1236) <400> 83 212 atg aga tta tta ata gga ttt gct tta gcg tta gct ata gga tgt 48 Met 1 Arg Leu Leu 21e 5 Gly Phe Ala Leu Ala 10 Leu Ala Leu Ile Gly 15 Cys gca ca a aaa ggt gct gag tca att gga tcc tgt agt aat tca ggg aaa 96 Ala Gin Lys Gly 20 Ala Glu Ser Ile Gly 25 Ser Cys Ser Asn Ser 30 Gly Lys ggt ggg gat tct gca tct act aat cct gct gac gag tct gcg 3 3 ggg 144 Gly Gly Asp 35 Ser Ala Ser Thr Asn 40 Pro Ala Asp Glu Ser 45 Ala Lys Gly cct aat ctt aca gaa ata age aaa aaa att aca gat tct aat gca ttt 192 Pro Asn 50 Leu í Thr Glu Ile Ser 55 i-ys, Lys Ile Thr Asp 60 Ser Asn Ala Phe gta ctt gct gtt aaa gaa gtt gag act ttg gtt tta tct ata gat gaa 240 Vai €5 L3U Ala Val Lys Glu 70 Val Glu Thr Leu Val 75 Leu Ser Ile Asp Glu 80 ctt gct aag aaa gct att ggt caa aaa 1 ata gac aat aat aat ggt tta 288 Leu Ala Lys Lys Ala 85 I le Gly' Gin Lys Ile 90 Asp Asn Asn Asn Gly 95 Leu gct gct tta 33 t aat cag aat gga teg ttg tta gca gga gee tat gca 336 Ala Ala Leu Asn 100 Asn Gin Asn Gly Ser 105 Leu Leu Ala Gly Ala 110 Tyr Ala ata tca acc cta ata aca gaa aaa ttg agt aaa ttg aaa aat tta gaa 384 Ile Ser Thr 115 Leu Tle Thr Glu Lys 120 Leu Ser Lys Leu Lys 125 Asn Leu Glu 93.01 tta aag aca gaa att gca 339 gct aag aaa tgt tcc gaa gaa ttt 432 Glu Leu 130 Lys Thr Glu Ile Ale 135 Lys Ala Lys Lys Cys 140 Ser Glu Glu Phe act aat aaa cta aaa agt ggt cat gca gat ctt ggc 333 cag gat gct 480 Thr 145 Asn Lys Leu Lys Ser 150 Gly His Ala Asp Leu 155 Gly Lys Gin Asp Ala 160 acc gat gat cat gca aaa gca gct att tta aaa aca cat gca act acc 528 Thr Asp Asp His Ala 165 Lys Ala Ala Ile Leu 170 Lys Thr His Ala Thr 175 Thr gat €133. ggt gct aaa gaa ttt 333 gat tta ttt gaa tca gta gaa ggt 576 Asp Lys Gly Ala ISO Lys Glu Phe Lys Asp 185 Leu Phe Glu Ser Val 190 Glu Gly LLy ^ 1. V·· GM3. €f Ctl «« A* QVvU A iá PUV *·» .u, a. d Cd gaa c£t C? Λ Leu Leu Lys 195 Ala Ala Gin Val Ala 200 Leu Thr Asn Ser Val 205 Lys Glu Leu a ca agt cct gtt gta gca gaa agt cca aaa aaa cct cat atg gct aat 672 Thr Ser 210 Pro Val Val Ala Glu 215 Ser Pro Lys Lys Pro 220 His Met Ala Asn aat tca ggt ggg gat tct gca tct act aat cct gat gag tct gca aaa 720 Asn 225 Ser Gly Gly Asp Ser 230 Ala Ser Thr Asn Pro 235 Asp Glu Ser Ala Lys 240 gga cct aat ctt acc gta ata age aaa aaa att aca gat tct aat gca 768 Gly Pro Asn Leu Thr 245 Val Ile Ser Lys Lys 250 Ile Thr Asp Ser Asn 255 Ala 213 ttt tta ctg gct gtg aaa gaa gtt gag gct ttg ctt tca tct ata gat 816 Phe Leu Leu Ala Val Lys Glu Val Glu Ala Leu Leu Ser Ser 11 c Asp 260 265 270 gaa ctt tct aaa gct att ggt 333 aaa ata aaa aat gat ggt act tta 864 Glu Leu Ser Lys Ala Ile Gly Lys Lys Ile Lys Asn Asp Gly Thr Leu 275 280 285 gat aac gaa gca aat cga aac gaa tca ttg ata gca gga gct tat gaa 912 Asp Asn Glu Ala Asn Arg Asn Glu Ser Leu I.le Ala Gly Ala Tyr Glu 290 295 300 ata tca aaa cta ata aca caa aaa tta agt gta ttg aat tca gaa gaa 960 Ile Ser Lys Leu Ile Thr Gin Lys Leu Ser Val Leu Asn Ser Glu Glu 305 310 315 320 tta aag âdB aaa att aaa gag gct aag gat tgt tcc caa aaa ttt act 1008 Leu Lys Lys Lys Ile Lys Glu Ala Lys Asp Cys Ser Gin Lys Phe Thr 325 330 335 act aag cta aaa gat agt cat gca gag ctt ggt ata caa age gtt cag 1056 Thr Lys Leu Lys Asp Ser His Ala Glu Leu Gly Ile Gin Ser Val Gin 340 345 350 gat gat aat gca 333 aaa gct att tta aaa aca cat gga act aaa gac 1104 Asp Asp Asn Ala Lys Lys Ala I >L fi Leu Lys Thr His Gly Thr Lys Asp 355 360 365 aag ggt gct aaa gaa ctt gaa gag tta ttt aaa tca cta gaa age ttg 1152 Lys Gly Ala Lys Glu Leu Glu Glu Leu Phe Lys Ser Leu Glu Ser Leu 370 375 380 tca aaa gca gcg caa gca gca tta act aat tca gtt aaa gag ctt aca 1200 Ser Lys Ala Ala Gin Ala Ala Leu Thr Asn Ser Val Lys Glu Leu Thr 385 390 395 400 aat cct gtt gtg gca gaa agt cca aaa aaa cct taa 1236 Asn Pro Vai vai Ala Glu Ser Pro Lys Lys Pro * 405 410 <210> 84 <211> 410 <212> PRT <213> Quimera <4 00> 84 214

Arg T . Jjc:u Jjèu. T 1 ^ ^1 " OJ- J c, nu - L r> 1 ΓΊ--+Ό r Χ*Ό· χλ Xl Gin Lys Gly Ala 20 Glu Ser Ile Gly Gly Asp Ser 35 Ala Ser Thr Asn Pro 40 Asn Leu 50 Thr Glu Ile Ser Lys 55 Lys Leu 65 Ale Vai Lys G1 u Vai 70 Glu Thr Ala Lys Lys Ala Ile 85 Gly Gin Lys Ala Leu Asn Asn 100 Gin Asn Gly Ser Ser Thr Leu 115 Ile Thr Glu Lys Leu 120 Leu Lys 130 Thr Glu Ile Ala Lys 135 Ala Asn 145 Lys Leu Lys Ser Gly 150 His Ala Asp Asp His Ala Lys 165 Ala Ala Ile Lys Gly Ala Lys 180 Glu Phe Lys Asp Leu Lys Ala 195 Ala Gin Vai Ala Leu 200 Ser Pro 210 Vai Vai Ala G1 u Ser 215 Pro r Ser 225 Gly Gly Asp Ser Ala 230 Ser Thr Pro Asn Leu Thr Vai 245 Ile Ser Lys Leu Leu Ala Vai 260 Lys Glu Vai Glu Leu Ser Lys 275 Ala Ile Gly Lys 1 Lys 280 Asn Glu 290 Ala Asn Arg Asn Glu 295 Ser Ser 305 Lys Leu Ile Thr Gin 310 Lys 1 Leu Lys Lys Lys Ile Lys 325 Glu Ala Lys Lys Leu Lys Asp 340 Ser His Ala Glu Asp Asn 1. íi 355 Lys Lys Al.a Ile Leu 360 Gly Ala 370 Lys Glu Leu Glu Glu 375 Leu Lys 385 Ala Ala Gin Ala Ala 390 Leu Thr Pro Vai Vai Ala Glu 405 Ser Pro Lys

Lisboa, 19/12/2006 Λ 1 -» T «. ·. η-Λ α jjc w* 10 ui . J"u. o Leu ria «Á* hÂ> w~ I Γι íe* w 2 “ 15 Ala Ser Cys 25 Ser Asn Ser Gly 30 Lys Gly Ala Asp Glu Ser Ala 45 Lys Gly Pro Ile Thr Asp Ser 60 Asn Ala Phe Val Leu Val Leu 75 Ser Ile Asp Glu Leu 80 Ile Asp 90 Asn Asn Asn Gly Leu 95 Ala Leu Leu 105 Ala Gly Ala Tyr 110 Ala Ile Ser Lys Leu Lys Asn 125 Leu Glu Glu Lys Lys Cys Ser 140 Glu Glu Phe Thr Àsp Leu Gly 155 Lys Gin Asp Ala Thr 160 Leu-Lys 170 Thr His Ala Thr Thr 175 Asp Leu Phe 185 Glu Ser Val Glu 190 Gly Leu Thr Asn Ser Val Lys 205 Glu Leu Thr Lys Lys Pro His 220 Met Ala Asn Asn Asn Pro Asp 235 Glu Ser Ala Lys Gly 240 Lys Ile 250 Thr Asp Ser Asn Ala 255 Phe Ala Leu 265 , Leu Ser Ser Ile 270 Asp Glu Ile Lys Asn Asp Gly 285 Thr Leu Asp Leu Ile Ala Gly 300 Ala Tyr Glu Ile Ser Val Leu 315 Asn Ser Glu Glu Leu 320 Asp Cys 330 Ser Gin Lys Phe Thr 335 Thr Leu Gly 345 Ile Gin Ser Val 350 Gin Asp Lys Thr His Gly Thr 365 Lys Asp Lys Phe Lys Ser Leu 380 Glu Ser Leu Ser Asn Ser Val 395 Lys Glu Leu Thr Asn 400

Lys Pro 4.10

Claims

REIVINDICAÇÕES 1. Uma composição de uma vacina que compreende um ou mais excipientes, adjuvantes, tampões, proteínas transportadoras, ou conservantes ou uma combinação destes e um agente imunogénico, que consiste em um ou mais polipéptidos OspC de cada uma das famílias OspC da Borrelia burgdorferi seleccionadas a partir dos grupos que consistem nas famílias A, B, I e K, em que a família OspC A da Borrelia burgdorferi é caracterizada pelo número de acesso GenBank AF029860 e em que os genes OspC têm pelo menos 98% de identidade com o número de acesso GenBank AF029860, em que a família OspC B da Borrelia burgdorferi é caracterizada pelo número de acesso GenBank AF029861 e em que os genes OspC têm pelo menos 98% de identidade com o número de acesso GenBank AF029861, em que a família OspC I da Borrelia burgdorferi é caracterizada pelo número de acesso GenBank AF029869 e em que os genes OspC têm pelo menos 98% de identidade com o número de acesso GenBank AF029869, e em que a família OspC K da Borrelia burgdorferi ê caracterizada pelo número de acesso GenBank U08284 e em que os genes OspC têm pelo menos 98% de identidade com o número de acesso GenBank U08284.
2. A composição da Reivindicação 1: (a) em que o dito polipéptido OspC compreende a região variável da proteína OspC codificada pelos nucleótidos 150 a 519 de um gene OspC; ou 2 (b) em que o dito polipéptido OspC é codificado por um ácido nucleico compreendendo desde o nucleótido 26 até aproximadamente ao nucleótido 621 de um gene OspC; ou (c) em que o dito polipéptido OspC é codificado por um ácido nucleico compreendendo desde o nucleótido 53 até aproximadamente ao nucleótido 570 de um gene OspC; ou (d} em que pelo menos dois dos ditos polipéptidos OspC se fundem numa única proteína, codificada por um único ácido nucleico, em que os polipéptidos na dita proteína de fusão não se encontram na mesma configuração numa proteína OspC que ocorra naturalmente.
3. A composição da Reivindicação 2, em que: (a) a família OspC A da Borrelia burgdorferi compreende as estirpes B31, CA4, HÍI, IPI, IP2, IP3, L5, PIF, PKa, Txgw e as estirpes que contêm o alelo OspC 0C1; ou (b) a família OspC B da Borrelia burgdorferi compreende as estirpes 35B808, 61BV3, BUR, DK7, PB3, ZS 7 e as estirpes que contêm os alelos OspC 0C2 e OC3; ou (c) a família OspC I da Borrelia burgdorferi compreende a estirpe HB19, as estirpes que contêm o alelo OspC OCIO e o número de acesso do GenBank L42893; ou (d) a família OspC K da Borrelia burgdorferi compreende as estirpes 272, 28354, KIPP, MUL, as estirpes que contêm os alelos OspC 0C12 e OC13, e o número de acesso do GenBank U08284.
4. A utilização de uma composição na produção de um medicamento para a imunização de um animal contra a doença de Lyme disseminada, em que a dita composição compreende um mais ou mais excipientes, adjuvantes, tampões, proteínas transportadoras ou conservantes, ou uma combinação destes e um agente imunológico em que o agente imunológico consiste em ou mais polipéptidos OspC de cada uma das famílias da Borrei ia burgdorferi OspC seleccionadas de entre o grupo constituído pelas famílias A, B, I e K, em que a família OspC A da Borrei ia burgdorferi é caracterizada pelo número de acesso do GenBank AF029860 e genes OspC com pelo menos 98% de identidade com o número de acesso do GenBank AF029860, a família OspC B da Borrelia burgdorferi é caracterizada pelo número de acesso do GenBank AF029861 e genes OspC com pelo menos 98% de identidade com o número de acesso do GenBank AF029861, a família OspC I da Borrelia burgdorferi é caracterizada pelo número de acesso do GenBank AF029869 e genes OspC com pelo menos 98% de identidade com o número de acesso do GenBank AF029869, e a família OspC K da Borrelia burgdorferi é caracterizada pelo número de acesso do GenBank U08284 e genes OspC com pelo menos 98% de identidade com o número de acesso do GenBank U08284, de modo a que o animal gere uma resposta imunitária ao polipéptidos OspC.
5. A utilização da Reivindicação 4, em que (a) um ou mais dos ditos polipéptidos OspC compreendem a região variável da proteína OspC codificada pelos nucleótidos 150 a 519 de um gene OspC; ou (b) um ou mais dos ditos polipéptidos OspC é codificado por um ácido nucleico compreendendo desde o nucleótido 26 ao nucleótido 621 de um gene OspC; ou 4 {c} um ou mais dos ditos polipéptidos ou um fragmento do mesmo é codificado por um ácido nucleico compreendendo desde o nucleótido 53 ao nucleótido 570 de um gene OspC; ou (d) pelo menos dois dos ditos polipéptidos OspC fundem-se numa única proteína, codificada por um único ácido nucleico, em que os polipéptidos na dita proteína de fusão não se encontram na mesma configuração de numa proteína OspC que ocorra naturalmente.
6. A utilização de uma das Reivindicações 4 a 5, em que: (a) a família OspC A da Borrelia burgdorferi compreende as estirpes B31, CA4, HII, IPI, IP2, IP3, L5, PIF, PKa, Txgw e as estirpes que contêm o alelo OspC OC1; ou (b) a família OspC B da Borrelia burgdorferi compreende as estirpes 35B808, 61BV3, BUR, DK7, PB3, ZS7 e as estirpes que contêm os alelos OspC 0C2 e 0C3; ou (c) a família OspC I da Borrelia burgdorferi compreende a estirpe HB19, as estirpes que contêm o alelo OspC OCIO e o número de acesso do GenBank L42893; ou (d) a família OspC K da Borrelia burgdorferi compreende as estirpes 272, 28354, KIPP, MUL, as estirpes que contêm os alelos OspC 0C12 e OC13, e o número de acesso do GenBank U08284.
7. Um método de detecção, numa amostra de hospedeiro, de uma resposta imunitária à Borrelia associada à doença de Lyme disseminada, compreendendo: a) pôr em contacto a amostra do hospedeiro com uma 5 composição que compreenda polipéptidos OspC das estirpes da Borrelia associadas à doença de Lyme disseminada, de modo a que os anticorpos anti-OspC, se presentes, se liguem na dita amostra aos ditos polipéptidos OspC, em que a dita composição consiste de um ou mais polipéptidos OspC de cada uma das famílias OspC da Borrelia burgdorferi seleccionadas de entre o grupo que consiste das famílias A, B, I e K, em que a família OspC A da Borrelia burgdorferi é caracterizada pelo número de acesso GenBank AF029860 e em que os genes OspC têm pelo menos 981 de identidade com o número de acesso GenBank AF029860, em que a família OspC B da Borrelia burgdorferi é caracterizada pelo número de acesso GenBank AF029861 e em que os genes OspC têm pelo menos 98% de identidade com o número de acesso GenBank AF029861, em que a família OspC I da Borrelia burgdorferi é caracterizada pelo número de acesso GenBank AF029869 e em que os genes OspC têm pelo menos 98% de identidade com o número de acesso GenBank AF029869, e em que a família OspC K da Borrelia burgdorferi é caracterizada pelo número de acesso GenBank 008284 e em que os genes OspC têm pelo menos 98% de identidade com o número de acesso GenBank U08284; e b) a detecção de anticorpos que se tenham ligado aos ditos péptidos OspC, detectando assim uma resposta imunitária à Borrelia associada à doença de Lyme disseminada,
8. O método de Reivindicação 7, em que: 6 (a) um ou mais dos ditos polipéptidos OspC compreendem a região variável da proteína OspC codificada pelos nucleótídos 150 a 519 de um gene OspC; ou (b) um ou mais dos ditos polipéptidos OspC é codificado por um ácido nucleico compreendendo desde o nucleótido 26 ao nucleótido 621 de um gene OspC; ou (c) um ou mais dos ditos polipéptidos é codificado por um ácido nucleico compreendendo desde o nucleótido 53 ao nucleótido 570 de um gene OspC; ou (d) pelo menos dois dos ditos polipéptidos OspC se fundem numa única proteína, codificada por um único ácido nucleico, em que os polipéptidos na dita proteína de fusão não se encontram na mesma configuração de numa proteína OspC que ocorra naturalmente.
9. 0 método da Reivindicação, em que (a) a família OspC A da Borrelia burgdorferi compreende as estirpes B31, CA4, HII, IPI, IP2, IP3, L5, PIF, PKa, Txgw e as estirpes que contêm o alelo OspC OCl; ou (b) a família OspC B da Borrelia burgdorferi compreende as estirpes 35B808, 61BV3, BUR, DK7, PB3, ZS7 e as estirpes que contêm os alelos OspC OC2 e 0C3; ou (c) a família OspC I da Borrelia burgdorferi compreende a estirpe HB19, as estirpes que contêm o alelo OspC OCIO e o número de acesso do GenBank L42893; ou (d) a família OspC K da Borrelia burgdorferi compreende as estirpes 272, 28354, KIPP, MUL, as estirpes que contêm os alelos OspC 0C12 e 0C13, e o número de acesso do GenBank U08284. 7
10. Uma proteína quimérica que consiste de polipéptidos OspC de cada uma das famílias OspC seleccionadas a partir do grupo que consiste nas famílias OspC A, B, I e K da Borrelia burgdorferi em que a família OspC A da Borrelia burgdorferi é caracterizada pelo número de acesso GenBank AF029860 e em que os genes OspC têm pelo menos 98% de identidade com o número de acesso GenBank AF029860, em que a família OspC B da Borrelia burgdorferi é caracterizada pelo número de acesso GenBank AF029861 e em que os genes OspC têm pelo menos 98% de identidade com o número de acesso GenBank AF029861, em que a família OspC I da Borrelia burgdorferi é caracterizada pelo número de acesso GenBank AF029869 e em que os genes OspC têm pelo menos 98% de identidade com o número de acesso GenBank AF029869, e em que a família OspC K da Borrelia burgdorferi é caracterizada pelo número de acesso GenBank U08284 e em que os genes OspC têm pelo menos 98% de identidade com o número de acesso GenBank U08284.
11. A proteína quimérica da Reivindicação 10, compreendendo: a) um primeiro polipéptido OspC codificado por um ácido nucleico que compreende uma sequência desde o nucleótido 26 ao nucleótido 621 de um gene OspC de uma primeira família OspC e um segundo polipéptido OspC codificado por um ácido nucleico que compreende uma sequência desde o nucleótido 28 ao nucleótido 5 70 de um gene OspC de uma segunda família OspC; ou b) um primeiro polipéptido OspC codificado por um 8 ácido nucleico que compreende uma sequência desde o nucleótido 53 ao nucleótido 570 de um gene OspC de uma primeira família OspC e um segundo polipéptido OspC codificado por um ácido nucleico que compreende uma sequência desde o nucleótido 28 ao nucleótido 570 de um gene OspC de uma segunda família OspC.
12. A proteína quimérica da Reivindicação 10 e 11, em que a dita proteína é não lipidada.
13. Uma proteína quimérica OspC seleccionada de entre o grupo que consiste de: números SEQ ID: 24, 26, 28, 30, 34, 36, 42, 52, 54, 58, 60, 64, 66, 70, 72, 78, 80, 82, 84 e 86.
14. Um ácido nucleico isolado que codifica uma proteína quimérica em que a dita proteína consiste de polipéptidos OspC de cada uma das famílias OspC seleccionadas de entre o grupo que consiste nas famílias OspC A, B, I e K da Borrelia burgdorferi em que a família OspC A da Borrelia burgdozfezi é caracterizada pelo número de acesso GenBank AF029860 e em que os genes OspC têm pelo menos 98% de identidade com o número de acesso GenBank AF029860, em que a família OspC B da Borrelia burgdorferi é caracterizada pelo número de acesso GenBank AF029861 e em que os genes OspC têm pelo menos 98% de identidade com o número de acesso GenBank AF029861, em que a família OspC I da Borrelia burgdorferi é caracterizada pelo número de acesso GenBank AF029869 e em que os genes OspC têm pelo menos 98% de identidade com o número de acesso GenBank AF029869, e em 9 que a família OspC K da Borrei ia burgdorferí é caracterizada pelo número de acesso GenBank U08284 e em que os genes OspC têm pelo menos 98% de identidade com o número de acesso GenBank U08284.
15. 0 ácido nucleico isolado da Reivindicação 14, em que: a) o dito ácido nucleico compreende uma sequência desde o nucleótido 26 ao nucleótido 621 de um gene OspC de uma primeira família OspC e uma sequência desde o nucleótido 28 ao nucleótido 570 de um gene OspC de uma segunda família OspC; ou b} o dito ácido nucleico compreende uma sequência desde o nucleótido 53 ao nucleótido 570 de um gene OspC de uma primeira família OspC e um ácido nucleico que compreende uma sequência desde o nucleótido 28 ao nucleótido 570 de um gene OspC de uma segunda família OspC,
16. Um ácido nucleico isolado seleccionado de entre o grupo que consiste de: números SEQ ID: 23, 25, 27, 29, 33, 35, 51, 53, 59, 63, 65, 69, 77, 79, 81, 83 e 85.
17. Uma composição de acordo com qualquer uma das Reivindicações 1, 2 e 3 para utilização em tratamentos, por exemplo, no tratamento da doença de Lyme disseminada. Lisboa, 19/12/2006