PT1147778E

PT1147778E - Formulações de gel estáveis para tratamentotópico de problemas de pele.

Info

Publication number: PT1147778E
Application number: PT01202699T
Authority: PT
Original assignee: Allergan Inc
Priority date: 1994-06-07
Filing date: 1995-06-07
Publication date: 2006-12-29
Also published as: IL122358A; AU693905B2; DE69526344D1; IL114049A; EP1147778A1; ATE215836T1; US6258830B1; WO1995033489A1; EP1147778B1; EP0764032B1; ATE336263T1; AU2821895A; CA2191773A1; ES2269296T3; IL122359A; DE69535184D1; CA2191773C; TW379143B; ZA954599B; US5914334A

Description

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DESCRIÇÃO "Formulações de gel estáveis para tratamento tópico de problemas de pele" 0 presente invento refere-se a uma formulação estável de gel para tratamento tópico de acne e de psoríase em humanos. A acne é uma doença inflamatória relativamente comum que atinge a pele. A gravidade da doença varia de uma perturbação mais ou menos superficial a problemas inflamatórios, nos quais ocorrem invasões bacterianas que causam o aparecimento de quistos inflamados e infectados. A maior actividade ocorre quando as glândulas sebáceas são as maiores, as mais numerosas e obviamente as mais activas. Sem tratamento, as lesões da acne podem tornar-se extensas e deixar cicatrizes desfigurantes permanentes. A causa de acne é a actividade acrescida das glândulas sebáceas e do tecido epitelial que reveste o infundíbulo. A actividade acrescida das glândulas sebáceas produz mais sebo, que consiste em ácidos gordos livres e esterifiçados, assim como componentes lipídicos, não saponifiçáveis, que resultam em maior oleosidade da pele.

Em acne inflamatório, a inflamação inicial das paredes do foliculo piloso resulta da presença de ácidos gordos livres que derivam do sebo. Na presença de enzimas lipolíticas bacterianas, os triglicéridos do sebo são fragmentados, libertando os ácidos gordos. A flora bacteriana normal no canal sebáceo produz as enzimas responsáveis pela fragmentação dos triglicéridos.

Os tratamentos correntes para a acne incluem comedolíticos, esfoliantes, bacteriostáticos orais e tópicos, assim como antibióticos sistémicos. Idealmente, as formulações tópicas para o tratamento de acne devem ser compostas com pouco ou nenhum óleo na formulação e não deve deixar qualquer filme de óleo sobre a pele para compor o problema. 2

ΕΡ 1 147 778 /PT A psoríase, por outro lado, é uma dermatose papulo--escamosa crónica, hereditária, recorrente, envolvendo tipicamente o couro cabeludo e as superfícies extensoras dos membros, em especial os cotovelos, joelhos e tornozelos. A lesão distinta de psoríase é uma mácula vermelho vivo, papulo ou placa, coberta quase até à sua periferia, por escamas laminadas prateadas. A psoríase é ainda caracterizada pela acelerada proliferação epidérmica, conduzindo a escamação excessiva da pele devido ao facto de a pele com psoríase perder água de oito a dez vezes mais rapidamente do que a pele normal. Por esta razão, o tratamento tópico, além disso, contém tipicamente óleos que se adequam melhor para a hidratação da pele.

Em WO 90/14833 apresentam-se veículos de libertação lenta para minimizar a irritação da pele de composições tópicas. Descrevem-se veículos de gel aquosos, estáveis, proporcionados para a aplicação tópica, na pele, de componentes activos irritantes tais como retinóis, com libertação lenta do componente activo e mínima irritação para a pele.

Em EP 0290130 descrevem-se acetilenos dissubstituídos com um grupo fenilo e um grupo heterobicíclico possuindo actividade do tipo dos retinóides. Apresenta-se uma formulação de solução que compreende polietilenoglicol e uma formulação de gel compreendendo hidroxipropilcelulose, pela qual os compostos que possuem actividade semelhante a retinóide podem ser administrados topicamente. O presente invento refere-se a uma formulação estável de gel que não contém qualquer óleo e, desse modo, satisfaz os requisitos de tratamento e também oferece um elevado factor de hidratação para tratamento de psoríase. A eficácia de um agente activo para o tratamento de acne e psoríase dependente, obviamente, da disponibilidade do agente para áreas afectadas quando aplicado numa maneira tópica. Isto é, a formulação não deve incorporar apenas agente activo suficiente para tratar correctamente o problema, mas também a libertação do agente activo da formulação é uma necessidade absoluta. 3

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Em conformidade com o presente invento, desenvolveu-se uma formulação de gel que se adequa ao tratamento de acne e de psoriase incorporando veículos para solubilizar o agente activo e para controlar a libertação do agente activo do gel para o problema da pele.

Resumo do invento

Em conformidade com o presente invento, proporciona-se uma formulação estável de gel para tratamento tópico de problemas de pele, nos humanos, compreendendo um agente activo que é um retinóide sintético, que possui actividade para o tratamento de acne e psoriase e é insolúvel em água. Em combinação com esse está uma multiplicidade de veículos não aquosos seleccionados de quaisquer dois ou mais de polisorbato 40 (um composto orgânico poli-hidroxi), poloxamero 407 e hexilenoglicol para solubilizar o agente activo e formar um gel com esses. Os veículos não aquosos permitem a aplicação tópica do gel a um problema de pele.

De preferência, os veículos encontram-se presentes em quantidades seleccionadas para produzir a libertação máxima do agente activo do gel para o problema de pele quando todos os veículos aí se encontram.

Outras combinações de veículos proporcionam meios para maximizar a solubilidade do agente activo no gel.

Mais particularmente, a formulação compreende três veículos. O retinóide sintético é, de preferência, etil-6-[2-(4,4-dimetiltiocroman-6-il]nicotinato ou qualquer dos outros retinóides sintéticos apresentados nas Patentes U.S. 4739098; 4923884; 4810804; 5013744; 4895868; 5006550; 4992468; 5149705; 5202471; 5130335; e 5134159.

Para fins de ilustração, uma formulação de gel estável possuindo uma quantidade eficaz de um composto pode possuir a fórmula: etil-6-[2-(4,4-dimetiltiocroman-6-il]nicotinato, (aqui seguidamente algumas vezes referido como AGN) para tratar acne num transportador farmacêutico compreendendo água, edetato dissódico, ácido ascórbico, Carbomer 934P, Poloxamero 407, polietilenoglicol, Polisorbato 40, 4

ΕΡ 1 147 778 /PT hexilenoglicol, hidroxitolueno butilado, hidroxianisolo butilado, álcool benzílico, e trometamina.

Para fins ilustrativos, um método para preparar uma formulação para o tratamento tópico de acne e psoríase inclui os passos de mistura de água purificada, edetato dissódico, ácido ascórbico e Carbómero 934P (um ácido poliacrilico) até o carbómero ficar disperso para formar uma parte I, mistura de água purificada, Poloxamero 407 para formar uma parte II e a adição da parte II à parte I, ao mesmo tempo que se efectua a homogeneização das mesmas. O método inclui, ainda, a mistura de polietilenoglicol, Polisorbato 40, hexilenoglicol, hidroxitolueno butilado e hidroxianisol butilado e aquecimento para os dissolver. Seguidamente, a mistura quente é arrefecida até à temperatura ambiente e são-lhe adicionados álcool benzílico e etil-6-[2-(4,4-dimetiltiocroman-6-il]nicotinato para formar uma parte III. A água purificada é misturada com a trometamina para formar a parte IV e a parte III, é adicionada às partes I e II, enquanto se agita, antes da parte IV com mistura até ficarem homogéneas.

Breve descrição dos desenhos

As vantagens e características do presente invento serão melhor entendidas através da descrição que se segue, quando consideradas em conjunto com os desenhos que as acompanham indicados da seguinte forma:

Figura 1: Representação de resíduos versus valores ajustados para os dados de solubilidade;

Figura 2: Representação normal de resíduos para os dados de solubilidade;

Figura 3: Efeito da transformação da resposta (dados de solubilidade);

Figura 4: Superfície de resposta que ajusta os dados de solubilidade (com hexilenoglicol); 5

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Figura 5: Efeito da droga libertada dos géis raiz quadrada 1 a 6; do tempo sobre a o o de Figura 6: Efeito da droga libertada dos géis raiz quadrada 7 a 10; do tempo sobre a o o de Figura 7: Efeito da droga libertada dos géis raiz quadrada 11 a 14; do tempo sobre a o o de Figura 8: Efeito da raiz quadrada do tempo sobre a o o de droga libertada dos géis 15 a 18;

Figura 9: Representação de resíduos versus valores ajustados para os dados de libertação;

Figura 10: Representação normal de resíduos para os dados de libertação;

Figura 11: Efeito da transformação da resposta (dados de libertação);

Figura 12: Superfície de resposta que ajusta os dados de libertação (com hexilenoglicol);

Figura 13: Correlação entre a taxa de libertação da droga a partir dos géis e a raiz quadrada da solubilidade da droga;

Figura 14: Perfis de libertação que comparam a libertação de droga a partir do gel protótipo (H) e a libertação de droga a partir de uma solução saturada; e

Figura 15: Perfis de libertação que mostram o efeito do aumento da concentração de droga no veículo do gel sobre a taxa de libertação, 0,025%, 0,05%, e 0,1%.

Descrição detalhada

Na formulação de uma preparação farmacêutica adequada para o tratamento de acne e psoríase, devem ser tomados em conta os seguintes factores:

Questões de formulação e concordância dos pacientes Não irrita e não mancha Sem cheiro Não oleoso e que não seque Lavável com água

Facilidade de aplicação e armazenagem Componentes rotulados

Questões de formulação

Desenvolvimento de apenas uma fórmula para acne e psoríase 6

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Entrega local da droga e pouco efeito sistémico Facilidade de aumentar proporcionalmente Estabilidade durante um mínimo de dois anos Utilização de excipientes seguros e compendiais Formulação isenta de parabeno Formulação isenta de propilenoglicol Droga possuindo mínima afinidade pela base.

Formulação isenta de álcool Formulação isenta de óleo

Formula apresentando efeito de placebo mínimo Alguma porção de droga em solução para libertação imediata Níveis de irritação comparáveis a outros retinóides comercializados.

Verificou-se que o composto etil-6-[2-(4,4-dimetiltio-croman-6-il]nicotinato é activo no tratamento de acne e psoríase. No entanto, a solubilidade do AGN 190168 em água é extremamente baixa. A solubilidade de etil-6-[2-(4,4-dimetil-tiocroman-6-il]nicotinato em várias soluções a 35±0,5°C é apresentada no Quadro I.

Quadro I

Solubilidade de AGN em Várias Soluções Aquosas a 35 ± 0,5°C Misturas aquosas (v/v) Solubilidade média (mg/ml) 100% de água Não Detectada 20% de Etanol/água Não Detectada 40% de Etanol/água 0,1472 ± 0,0209 60% de Etanol/água 2,2235 ± 0,000780 40% de Etanol/água 0,1472 ± 0,0209 80% de Etanol/água 8,2248 + 0,2206 20% de PEG-400/água Não Detectada 40% de PEG-400/água 0,0044 ± 0,0005 60% de PEG-400/água " 0,0896 ± 0,0011 80% de PEG-400/água 2,1628 ± 0,0899 1% de Oleth-20/água 0,0733 ± 0,0030 2% de Oleth-20/água 0,1492 ± 0,0006 4% de Oleth-20/água 0,3112 ± 0,007 96% de Oleth-20/água 0,4352 ± 0,0011 0,07% de Polisorbato 40 0,0037 ± 0,0006 0,15% de Polisorbato 40 0,0092 ± 0,0014 0,30% de Polisorbato 40 0,0183 ± 0,0018 0,50% de Polisorbato 40 0,0332 ± 0,0003 7

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Conforme se observou anteriormente, não é desejável uma forma de dosagem em solução contendo AGN em consideração do teor aquoso, da dificuldade em manusear a solução, e da aplicação na pele. Uma formulação em creme é exequível mas o óleo aí utilizado também não se adequa ao tratamento de acne como se verificou anteriormente. A formulação em conformidade com o presente invento inclui vários componentes conforme é apresentado no Quadro II.

Quadro II

Componentes Usados na Formulação de um Gel de AGN : COMPONENTE j FUNÇÃO | AGN S Droga ii Água Purificada ! Excipiente ji Edetato Dissódico S Estabilizante ii Acido Ascórbico S Estabilizante ii Carbómero 934P | Agente espessante | Poloxaraer 407 S Tensioactivo ii PEG—400 | Co-solvente ij Polisorbato 40 | Tensioactivo S Hexilenoglicol | Co-solvente S Hidroxitolueno butilado | Estabilizante S Hidroxianisol Butilado s Estabilizante S Álcool Benzílico s Conservante S Trietanolamina/ Trometamina ! Neutralizador Neutralizador S

Fundamentaçao lógica para a selecção de excipientes 0 raciocínio para a selecção dos excipientes utilizados no gel tópico de AGN é seguidamente delineado. PEG 400: O Polietilenoglicol 400 é utilizado na formulação em gel tópico de AGN como solvente para solubilizar a droga activa, AGN. A solubilidade do AGN em PEG 400 é 2,2 mg/ml. Nas condições ambientes o PEG 400 é um líquido que é completamente miscível com água, e as formulações tópicas podem ser facilmente compostas. O PEG 400 é quimicamente estável e não suporta crescimento microbiano. O PEG 400 é higroscópico e as formulações tópicas preparadas com PEG 400 não secam rapidamente sobre a pele após a aplicação. Os seguintes produtos de Rx comercializados nos E.U.A. contêm PEG 400 como excipiente: Retin A Liquid®, Lotrimin® solution®, Cleocin T® gel, Halotex® 1% Cream, Halog® 0,1% pomada, e solução 8

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Mycelex®. 0 PEG 400 é um componente de “pomada de Polietilenoglicol NF".

Carbómero 934P: é utilizado como construtor de viscosidade em formulações em gel tópico de AGN. O Carbómero 934P possui a capacidade de produzir viscosidades elevadas a concentração baixa, após a neutralização, com maior consistência de lote para lote do que as gomas naturais e não suporta crescimento microbiano. Os géis de Carbómero 934P mostram boas propriedades de fluxo plástico, tendo um valor de rendimento significativo (vulgarmente definido como a resistência inicial ao fluxo sob tensão aplicada) . O gel tópico de AGN, preparado com Carbómero 934P, apresenta espessura aceitável e espalha-se uniformemente sob aplicação na pele.

Edetato dissódico: é utilizado em géis tópicos de AGN como agente quelante para a estabilização de toda a formulação. Sabe-se que as quantidades vistigiais de ferro e de outros metais de transição degradam as resinas carbopol (usadas como espessante) e PEG 400 (usado como solvente) no gel de AGN. O edetato dissódico é utilizado para sequestrar vestígios de iões metálicos que catalizariam a oxidação do AGN e do ácido ascórbico usados na formulação. Sabe-se que as soluções aquosas de Polisorbato 40 sofrem também auto-oxidação.

Polisorbato 40: é utilizado como tensioactivo para solubilizar o AGN. O Polisorbato 40 é líquido nas condições ambientes e miscível com misturas de PEG 400 - água e não turva a solução. O Polisorbato 40 possui um valor de HBL de 15,6 e este tensioactivo de elevado valor de HLB é seleccionado para solubilizar AGN em PEG 400.

Poloxamero 407: é utilizado como tensioactivo na fase da água da formulação em gel de AGN. O Poloxamero 407 é solúvel em água e possui um valor de HLB de 20.

Hexilenoglicol: é miscível com misturas de água-PEG 400 e é utilizado como co-solvente para solubilizar o AGN junto com o PEG 400.

Trometamina: é utilizada para neutralizar o Carbómero 934P e como regulador de pH quando se fabrica o gel tópico de AGN. 9

ΕΡ 1 147 778 /PT Ácido ascórbico: é utilizado como anti-oxidante e é adicionado à fase da água durante o fabrico do gel tópico de AGN. A formulação laboratorial de AGN preparada sem ácido ascórbico apresenta fraca estabilidade. Álcool benzilico: é utilizado junto com PEG 400 e Polisorbato 40 para solubilizar o AGN activo. O álcool benzilico é também utilizado como conservante.

Hidroxitolueno butilado, hidroxianisol butilado: são utilizados na formulação de gel tópico de AGN como anti-oxidantes para proteger todo o produto de peróxidos residuais encontrados em excipientes. Esses anti-oxidantes não são solúveis em água e são adicionados à fase do PEG 400 durante o fabrico. As soluções alcoólicas contendo AGN são estabilizadas por BHT (relatório de pré-formulação). O azoto, como gás inerte, é utilizado durante o fabrico de gel tópico de AGN para reduzir qualquer potencial para auto-oxidação do componente activo e de outros excipientes. Água purificada: é utilizada como veículo na formulação em gel tópico de AGN.

As concentrações típicas de cada componente no gel encontram-se no Quadro III.

Quadro III

Tríetanolamína/Trometamina i Neutralizante/ Neutralizante 0, 8 10

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Os componentes sao combinados uns com os outros para produzir as seguintes quatro partes:

Parte I:

COMPONENTE

Agua purificada Edetato Dissódico Ácido Ascórbico

FUNÇÃO

Excipiente

Estabilizante

Carbómero 934P S Agente espessante Parte II: Água purificada S Excipiente Poloxamero 407 ij Tensioactivo Parte III: PEG-400 j Co-solvente Polisorbato 40 S Tensioactivo Hexilenoglicol j Co-solvente Hidroxitolueno Butilado S Estabilizante

Hidroxianisol Butilado Álcool Benzilico AGN

Estabilizante

Conservante

Droga

Parte IV:

Excipiente Neutralizante

Agua purificada Trometaraina

Procedimento para preparar o gel 0 procedimento para a preparação do gel é a seguinte: 1. Misturam-se os componentes na parte I com homogeneização a velocidade baixa até o carbomero dispersar. 2. Misturam-se os componentes na parte II. 3. Adiciona-se a parte II à parte I e homogeneíza-se a mistura. 4. Combinam-se os primeiros quatro componentes na parte III e aquecem-se até 65 graus centígrados até os compostos dissolverem todos. 5. Deixa-se arrefecer a mistura até à temperatura ambiente. A seguir, combinam-se lentamente o álcool benzilico e a droga (na sala amarela). 6. Adiciona-se a parte III à parte I/II enquanto se agita usando um homogeneizador de baixa velocidade. 7. Combinam-se os componentes na parte IV e adicionam-se 11

ΕΡ 1 147 778 /PT à mistura anterior e misturam-se até ficar homogéneo.

Verificou-se que três veículos influenciavam a solubilidade e libertação da droga; nomeadamente, o polisorbato 40, o poloxamero 407, e o hexilenoglicol. Usando uma concepção experimental, formularam-se variações do gel que continham polisorbato 40 e poloxamero 407, cada um em três níveis, e hexilenoglicol em dois níveis. Com base neste planeamento factorial 2x3 formularam-se dezoito variações de gel e avaliou-se o efeito da concentração de tensioactivo e de co-solvente na solubilidade e libertação in vitro da droga.

Materiais

Etil-6-[2-(4,4-dimetiltiocroman-6-il]nicotinato (disponível de SK&F, Cambridge), Ácido Ascórbico, USP (Hoffman-La Roche), Álcool Benzílico, NF (Akzo),

Hidroxianisol Butilado, NF (Penta), Hidroxitolueno Butilado, NF (Penta), Carbómero 934P, NF (Carbopol 974P, B.F. Goodrich), Edetato Dissódico, USP (Akzo), Álcool Etílico (Quantum Chemical Corp.), Hexilenoglicol, NF (Union

Carbide), Poloxamero 407, NF (BASF), Polietilenoglicol 400, NF (Union Carbide), Polisorbato 40, NF (ICI), Água

Purificada, USP, laminado de grau médico Silastic® (Dow Corning Wright), Trometamina, USP, (American Biorganic).

Equipamento

Misturador rotativo de contador Brookfield (Brookfield Engineering laboratories Inc.), Placa quente/agitador Nova II, (Baxter).

Montagem de difusão

Unidade accionadora de bombas Cassette® (Manostat), Aquecedor de células de difusão Posi Bloc™ (Crown glass company, Inc.), Colector de fracção Retriever IV (ISCO, Inc.), células de difusão "flow-thru" de Teflon® (Crown Glass Company, Inc.).

Instrumentação de Cromatografia 12

ΕΡ 1 147 778 /PT Módulo de solvente programável 116 (Beckman), Detector 166 (Beckman), coluna de HPLC, 4,6 mm x 7,0 cm, Beckman Ultrasphere XL (Beckman), Auto-injector WISP™ modelo 712 (Waters).

Software μΥΑΧ®

Sistema de recolha de dados Access Chrom® (Perkin-Elmer Nelson), RS/Discover® (BBN software). Métodos

Preparaçao de géis experimentais

Os componentes utilizados no gel protótipo (formula 8606X) são apresentados no Quadro III. Com base na concepção experimental, prepararam-se variações do gel protótipo que continha diferentes concentrações de três componentes presentes no gel; o polisorbato 40 (PS), o poloxamero 407 (PX) , e o hexilenoglicol (HG). O objectivo era estudar o efeito desses factores na taxa de libertação e na solubilidade de AGN no veiculo dos géis. O procedimento para a preparação dos géis está descrito no registo de formulação.

Concepção experimental

Utilizou-se a concepção experimental para determinar o número de formulações necessárias para proporcionar a informação desejada da maneira mais eficaz. As variáveis estudadas foram as concentrações de hexilenoglicol, de poloxamero 407, e de polisorbato 40. Estudou-se o hexilenoglicol a dois niveis e estudou-se cada um dos tensioactivos a 3 niveis. Deste modo, produziu-se um planeamento factorial de 2x32 que requereu a preparação de 18 formulações. O Quadro IV apresenta as verdadeiras concentrações utilizadas para cada um desses componentes. Para todos os componentes, a concentração de 0 indica que o componente não estava presente.

Quadro IV 13

ΕΡ 1 147 778 /PT Níveis de Poloxamero 407, Polisorbato 40, e Hexilenoglicol Usados na Preparação de Vários Géis Experimentais

COMPONENTE

Poloxamero 407 Polisorbato 40 Hexilenoglicol CONCENTRAÇÃO (% P/P) 0 í 0,2 0,4 :i 0 | 0,2 jj 0,4 0 | | 2 ij A concepção experimental encontra-se no Quadro V. Esta concepção exigiu a preparação de 18 géis contendo todas as combinações possíveis dos tensioactivos e co-solventes nos níveis desejados. Uma vez que o gel protótipo (Gel B) representava um dos géis, foi necessário formular outros 17 géis.

As formulações que compreendem menos de dois de polisorbato 40, poloxamero 407 e hexilenoglicol são incluídas apenas para fins comparativos • Quadro V Planeamento factorial de 2x32 usada para Preparar as Várias Formulações Experimentais do Gel Protótipo (Gel B) Gel Hexilenoglicol Polisorbato 40 | Poloxamero 407 5 10 0, 0 0, 0 0, 0 11 0, 0 0, 0 \ 0, 4 | 8 :i 0, 0 0, 0 ί 0,2 V.V.V.V.V.V.V. w^v.v.v.sw!,v.w.v.v. 12 ;i o, o 0,4 ! 0, 0 ί 18 :j 0, 0 0,4 í 0,4 15 ;i o, o 0,4 í 0, 2 § 9 :í 0, 0 0,2 í 0, 0 5 16 ;i o, o 0,2 5 0,4 5 7 ;i o, o 0,2 ; 0, 2 5 3 1 2,0 0, 0 ; 0, 0 í 5 ! 2, 0 0, 0 0,4 5 1 ij 2, 0 0, 0 0, 2 6 :Í 2, 0 0,4 ί 0, 0 | 17 j 2, 0 0,4 ί 0, 4 14 j 2,0 0,4 ί 0,2 ΐ 2 ! 2, 0 0,2 ί 0, 0 13 | 2, 0 0,2 ί 0,4 ' B 1 2, 0 0,2 0, 2 _1

Solubilidade de AGN nos géis 14

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Para determinar a solubilidade saturada da droga no veiculo de cada uma das 18 formulações de gel, prepararam-se sistemas de solventes contendo os mesmos componentes que os géis. Determinou-se a solubilidade saturada uma vez em soluções do veiculo sem carbómero e base, e uma outra vez substituindo o carbómero por ácido propiónico a fim de facilitar a filtração da solução enquanto se mantinha a força iónica da solução o mais próximo possível da do gel. Filtraram-se as soluções através de um filtro de 0,45 pm para remover quaisquer cristais que se possam ter formado. Diluíram-se então as soluções resultantes e testou-se o seu teor de droga usando Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (HPLC) conforme se descreve no Método HL036.

Libertação de AGN a partir dos géis

Estudou-se a libertação de AGN através de cada um dos géis a 0,1%, usando um método de libertação previamente desenvolvido. Testaram-se então as fracções recolhidas, directamente usando o Método HL036 de HPLC.

Declives dos perfis de libertação

Utilizaram-se os dados produzidos no teste das fracções recolhidas para cada gel para representar o perfil de libertação da droga na forma de % de droga libertada versus raiz quadrada do tempo. Para cada perfil de libertação, calculou-se o declive da região linear contendo, pelo menos, 6 pontos, usando regressão linear. Calculou-se também o desvio padrão e o coeficiente de correlação de cada declive.

Análise de dados de solubilidade e de libertação

Analisou-se estatisticamente os valores de solubilidade saturada, e declives da recta obtida da representação de % de droga libertada versus raiz quadrada do tempo para cada gel. Estudou-se a diferença entre os declives e as solubilidades de gel para gel usando um teste t bi-caudal para encontrar os géis que resultaram em valores significativamente diferentes. Utilizou-se o RS/Discover® para calcular as equações que se ajustavam aos dados e para 15

ΕΡ 1 147 778 /PT construir as superfícies de resposta.

Maximização da solubilidade e libertação

Analisou-se também o declive resultante e os dados de solubilidade usando o RS/Discover® a fim de maximizar essas respostas. Maximizou-se inicialmente o declive para encontrar o gel que exibia a solubilidade de droga mais elevada. Finalmente, maximizaram-se simultaneamente a solubilidade e o declive para encontrar o gel que proporcionava a solubilidade e a libertação de droga óptimas.

Efeito da solubilidade de partículas de droga na libertação de droga

Verifica-se, a partir dos dados de solubilidade, que aproximadamente 90% da droga se encontra no gel de base aquosa na forma de partículas sólidas. A fim de determinar se a velocidade de dissolução das partículas limita a taxa de libertação de droga, analisaram-se os dados obtidos no estudo de libertação in vitro.

Efeito da membrana na libertação de droga

Para investigar a possibilidade da membrana de silicone ser limitante da velocidade, comparou-se o declive do perfil de libertação para a difusão de droga através do gel com o declive do perfil de libertação obtido a partir de uma solução saturada da droga.

Efeito da concentração de droga na libertação de droga

Conduziu-se um estudo de libertação que mostrava o efeito da concentração de droga na libertação in vitro de AGN a partir de três formulações de gel. Os três géis foram as fórmulas 8606X (0,1%), 8607X (0,05%), e 8649X (0,025%), e compararam-se as representações de quantidade de droga libertada versus raiz quadrada do tempo.

Resultados e discussão 16

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Solubilidade de AGN nos géis

Determinou-se a solubilidade da droga no veiculo do gel protótipo (gel B), e em todos os outros géis formulados para investigar o efeito da adição de tensioactivos e de co-solventes na solubilização da droga no gel. Os valores de solubilidade obtidos usando os dois métodos (sem carbómero e base versus com ácido propiónico e base) não foram significativamente diferentes. Os valores de solubilidade da droga obtidos usando o ácido propiónico em vez de carbómero estão apresentados no Quadro VI.

As formulações que compreendem menos de dois de polisorbato 40, poloxamer 407 e hexilenoglicol estão incluídos apenas para fins comparativos.

Análise estatística dos dados de solubilidade

Interessava determinar se a quantidade de tensioactivo no gel de referência B (PS=0,2, PX=0,2, HG=2) resultava num aumento significativo na solubilidade da droga. Deste modo, realizou-se um teste t de Student para comparar a solubilidade da droga no gel B com a solubilidade nos dois géis sem tensioactivo. Esses dois géis foram o gel 3 (PS=0, PX=0, HG=2), e o gel 10 (PS=0, PX=0, HG=0). A única diferença entre os géis 3 e 10 foi a concentração de hexilenoglicol. O teste t (Quadro VII) indicou que a adição de tensioactivo resultava num aumento significativo na solubilidade da droga. Oito géis tinham valores de solubilidade que não eram significativamente diferentes do gel de referência. Esses géis foram os #5, 6, 11, 12, 13, 16, 17, e 18 que continham o nível mais elevado de tensioactivos (Quadro V).

Quadro VI 17

ΕΡ 1 147 778 /PT

Solubilidade de AGN no Veiculo dos Vários Géis Formulados (o Carbómero foi

Substituído por Ácido Propiónico) % Hexilenoglicol % Polisorbato 40 0, 0 0, 0 0, 0 0,2 0,2 0,2 0,4

"Ò",T 0,4 0, 0 0, 0 0, 0 0,2 0,2 0,2 0,4 0,4 0,4 % Poloxamero 407 0, 0 0,2 0, 4 0, 0 0,2 0, 4 0, 0 0,2 0, 4 0, 0 0,2 0, 4 0, 0 0,2 0,4 0, 0 0,2 0,4

Solubilidade (mg/ml) 0,0145±0,0003 0,0679±0,0044 0,0874±0,0066 0,0523±0,0027 0, 069 7±0, 0032 0,0800±0,0040 0,0893±0,0088 0,0775±0,0008 0, 086 7±0, 0060 0,0209±0,0017 0,0737±0,009 0,0863±0,0026 0,0759±0,0035 0,0938±0,0001 0,1020+0,0029 0,0980±0,0117 0,1300±0,0062 0,1180±0,0038

Quadro VII

Teste t de Student Comparando a Solubilidade da Droga no Veiculo dos Géis Preparados com a Solubilidade no Gel B : Géis |Solubilidade (mg/ml) ί Desvio S Padrão ; Valor de P (bicaudal) : Diferença ί 1 1 I 0,073700 \ 0,00086 \ 0,024822 § Significativa | I 2 | 0,075859 \ 0,00351 \ 0,040707 S Significativa s 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 | Gel B | 0,020875 0,086249 0,097950 0,069730 0,067890 0,052275 0,014465 0,087410 0,089315 0,102035 0, 129750 0,077475 0,080015 0,075105 0,086680 0,097621

Analisaram-se 0,00175 0,00257 0,01165 0,00321 0,00448 0,00268 0,00029 0,00660 0,00087 0,00292 0,00615 0,00088 0,00395 0,00381 \ 0,00597 jj 0, 00536também os 0,002689 | Significativa 0,113846 ! Não significativa 0,974439 S Não significativa 0,024199 S Significativa 0,026539 S Significativa 0,008625 | Significativa 0,002079 | Significativa 0,231684 j Não significativa 0,163089 | Não significativa 0,414257 I Não significativa 0,030781 | Significativa 0,034515 ! Significativa 0,064712 ! Não significativa 0,040134 ! Significativa 0,193570 S Não significativa dados de solubilidade com a 18

ΕΡ 1 147 778 /PT utilização do software RS/Discover® e a metodologia de superfície de resposta (RSM). 0 objectivo era encontrar a combinação de concentrações de polisorbato 40, de poloxamero 407, e de hexilenoglicol que conduziam à máxima solubilidade de droga (na gama de factores estudados) . Uma vez entrados os dados para os factores e respostas na folha de calculo, adaptou-se um modelo aos dados. O Quadro VIII mostra os coeficientes de mínimos quadrados. A partir do quadro é evidente que dois dos termos de interacção envolvendo o hexilenoglicol não são significativos. Deste modo, esses dois termos foram eliminados. Os coeficientes dos mínimos quadrados para o modelo refinado encontram-se no Quadro IX.

Quadro VIII

Quadro IX

Coeficientes de Minimos Quadrados para a Solubilidade (Modelo Refinado)

Termo i; 1 ϊ ps :i Coeficiente 76.911 17,140 Erro Padrão 1 2.135 j 2,615 ί Significância px | 13,896 j 2,615 HG :i 7, 438 | 2,135 | 0,0015 -20,475 | 3,203 I 0,0001 0 modelo tornou-se mais simples. A equação que se ajusta aos dados é:

Solubilidade = 76,91 + 17,14 PS + 13,90 PX + 7,44 HG - 20,48 PS PX

Os valores residuais são a diferença entre os valores observados e os valores ajustados da resposta associada ao modelo. O RS/Discover® submete automaticamente os resíduos ao Student para que tenham uma variância constante de um. 19

ΕΡ 1 147 778 /PT

Para verificar se existe qualquer relação entre a magnitude dos resíduos e os valores ajustados da resposta, construiu-se uma representação de valores absolutos dos resíduos submetidos a Student versus os valores ajustados (Figura 1) . Qualquer tipo de relação pode indicar a necessidade de transformar a resposta. A representação sugere que não existe nenhuma tendência clara nos resíduos e o modelo não necessita de ser refinado.

Uma representação de probabilidade normal dos resíduos, apresentada na Figura 2, indica que os pontos no gráfico caiem muito perto da recta indicando que os resíduos do modelo estão normalmente distribuídos.

Para determinar se o modelo pode ser melhorado por transformação da resposta, verifica-se o ajustamento do modelo. 0 RS/Discover® produz um gráfico que indica as transformações possíveis e os seus efeitos sobre o logaritmo da soma dos quadrados dos resíduos (Figura 3). A transformação que resulta nos valores mais pequenos para este número produz o melhor ajuste. As transformações abaixo da linha tracejada encontram-se no intervalo de confiança de 95% para a melhor transformação. Uma vez que a resposta não transformada se encontra abaixo da linha, a resposta não foi transformada.

Na Figura 4 apresenta-se uma superfície de resposta tridimensional. Para determinar os níveis dos factores que resultam em solubilidade da droga máxima, efectuou-se uma optimização. Conforme se vê no Quadro X, quando se prepara um gel que contém entre 0 e 0,4 de polisorbato 40, poloxamero 407, e hexilenoglicol, pode-se obter uma solubilidade máxima de 103,17 yg/ml com Polisorbato 40 no nível 0,4, Poloxamero 407 no nível 0,0, e hexilenoglicol no nível 2.

Quadro X

Optimização da Solubilidade da Droga Factor Intervalo Entradas Iniciais Polisorbato 40 0 a 0, 4 j 0,2 Poloxamer 407 0 a 0, 4 I 0,2 Hexilenoglicol Resposta 0 a 2 \ 2 Solubilidade Maximizar | 97,6 pg/ml

Valor Óptimo 0, 4 | o, o |

2 I 103,17 pg/ml

Libertação in vitro de géis 20

ΕΡ 1 147 778 /PT

Estudou-se a libertação de droga a partir de todos os dezassete géis formulados conforme foi anteriormente descrito. Os perfis de libertação para cada gel foram uma média de seis replicações, e foram representados como % de Droga libertada versus Raiz quadrada do tempo. Os perfis de libertação para esses géis são apresentados nas Figuras 5-8.

Estudos de libertação de géis preparados A partir das representações de % de droga libertada versus raiz quadrada do tempo, observa-se que a quantidade média de droga libertada de 200 mg de qualquer das formulações foi aproximadamente 70% durante um período de 44 horas. Observou-se a taxa de libertação mais elevada para o gel protótipo que continha 0,2% de polisorbato 40, 0,2% de

Poloxamero 407, e 2% de hexilenoglicol. A taxa de libertação mais baixa observou-se com o gel 3 (PS=0, PX=0, HG=2). A variabilidade média observada em cada replicação foi aproximadamente 5,56%.

Declives dos perfis de libertação

Para comparar as taxas de libertação de droga de cada formulação, computou-se o declive da porção linear da representação de % de droga libertada versus Raiz quadrada do tempo para cada um dos 18 géis. Os valores dos declives calculados encontram-se no Quadro XI. O declive para cada representação foi obtido na forma de uma média de seis replicações e com base num coeficiente de correlação (R2) >0, 94800 .

21 ΕΡ 1 147 778 /PT

Quadro XI a partir dos Perfis de Libertação dos Géis Formulados

Valores dos Declives Calculados

Gel # B 1 2 3 Concentraç (0,2; (0; (0,2 (0; ão (PS, PX, HG) 0,2; 2) | 0,2; 2) | ; 0; 2) ] Declive ± Desvio padrão 13,5871±0,9982 11,3446±0,2873 10,1447±0,7870 \ R2 | \ 0,9904 | \ 0,9483 | \ 0,9950 j 0; 2) | 7,4477±0,2806 1 0,9924 i 5 (0; 0, 4; ~2) Γ 9,9382±0,9804 \ 0,9958 | 6 (0,2 ; 0; 2) ! 12,0523+1,5882 \ 0,9833 \ 7 (0,2; 0,2 ; 0) j 11,9547±1,3305 ! 0,9517 | 8 (0; 0, 2; 0) | 10,1429±0,5636 1 0,9947 I 9 (0,2 ; 0; 0) ! 10,0411±0,0055 | 0,9841 i 10 (0; 0; 0) | 9,9340±0,3207 \ 0,9954 j 11 (0; 0,4; 0) 1 10,3253±0,1522 1 0,9809 | 12 (0,4 ; 0; ~Õ) f 10745±0,4200 \ 0,9922 j 13 (0,2; 0, 4 ; 2) | 9,6201+0,1916 \ 0,9869 l 14 (0, 4; 0,2 ; 2) | 11,4951±0,3704 | 0,9869 | 15 (0, 4; 0,2 ; 0) | 11,1432±0,2825 \ 0,9928 j 16 (0,2; 0,4 ; 0) ! 10,8250±1,1877 \ 0,9920 i 17 (0, 4; 0,4 ; 2) 1 11,8246±0,5878 | 0,9872 | 18 (0, 4; 0,4 ; 0) | 11,9089±0,6560 j 0,9798 j

Análise estatística dos dados de declive

Como aconteceu com a solubilidade da droga, interessava determinar se a quantidade de tensioactivo no gel de referência B (PS=0,2; PX=0,2; HG=2) resultava num aumento significativo na libertação de droga. Deste modo, efectuou-se um teste t de Student para comparar a taxa de libertação de droga no gel B com a taxa de libertação de droga a partir dos dois géis sem tensioactivo; o gel 3 (PS = 0, PX=0, HG=2), e o gel 10 (PS=0, PX=0, HG=0). O teste t (Quadro XII) indicou que a adição de tensioactivo resultou num aumento significativo na libertação de droga a partir do gel B. Em adição, o teste t revelou que a libertação de droga a partir do gel de referência foi significativamente superior à maioria dos géis, exceptuando o gel 6 (0,4; 0; 2), o gel 7 (0,2; 0,2; 0), e o gel 17 (0,4; 0,4; 2). 22

ΕΡ 1 147 778 /PT

Teste t de Student Comparando a Preparados com

GEIS

Declive

Desvio Padrão ^'|"|^'|'|1Ί"|^'|"|^'|"|^'|"|^'|"|^'|Ϊ>,ιΪΪ'ιΪΪ'ιΪΪ'ιΪΪ'ιΪΪ'ιΪΪ'ιΪΪ'ιΪΪ'ιΪΪ'ιΪΪ'ιΪ'(| 1 :| 11,3446 \ 0,28734 10,1447 7,4477 0,78707 0,28062

Quadro XII Libertação de Droga (Declives) a Libertação a partir do Gel B 9,9382 12,0523 11,9547 10,1429 0,98045 Ϊ,58828 1,33048 0,56364 0,94829 ”0798923 7798156 '0799042 7798332 7795172 7799466

Valor de P (bicaudal) 0,002510 Ò7 001860 6,000002 Ò,000440 0,138900 0,103840 Õ, 003750 partir dos Géis Diferença Significativa Significativa Significativa

Significativa Não significativa Não significativa Significativa 9 10 11 12 10,0411 '973390'' T'07'3'2'5'3 70Γ2745' 0,00545 0,32071 Ò', 15223 0,41097 0,98414 7799544 7798089 779922 5 13 14 1577'

9,6201 77749521777432” lo7Í25T 0,19163 0,37036 0,28253 1,18767 0,98692 7798685 7,79282 7779196 0,002780 0,002530 Õ, 004220 6,004210 Ò,001610 0,029800 0,015770 0,004400

Significativa Significativa Significativa Significativa

Significativa Significativa Significativa Significativa \ 17 :j 11,8246 -|lllllllllllllllllllllll-.Slllllllllllllllllllllllllllllll*lSll i 18 :j 11,4089

Gel B 13, 5871 0,58781 0,65602 0,99825 0,98720 0 Γ97 9 7 7 0799043 | 0,057890 illjlllllllllllllllllllllll \ 0, 028520 Não significativa Significativa A seguir, analisaram-se os dados de libertação obtidos a partir de todos os géis usando o software RS/Discover® e a metodologia de superfície de resposta (RSM). 0 objectivo era encontrar a combinação de concentrações de Polisorbato 40, de Poloxamero 407, e de hexilenoglicol que conduziam à máxima libertação de droga na gama de factores estudados.

Ajustou-se aos dados de libertação um modelo contendo os termos de interacção. A equação é apresentada a seguir. O Quadro XIII apresenta os coeficientes dos mínimos quadrados.

Declive = 10,94 + 0,88 PS + 0,38 PX + 0,30 HG - 0,42 PS.PX + 0,48 PS.HG + 0,04 PX*HG

Quadro XIII

Coeficientes de Mínimos Quadrados para a Taxa de Libertação .1111111111111111111111111' Significância 10,942 j 0,2174 0,884 | 0,2442 0,379 | 0,2648 0,304 | 0,2174 7, 424 1 0,3440 [ 0,2239 0,480 ! 0,2842 \ 0,0983 .llllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllis

Termo Coeficiente Erro Padrão 1

PS PX HG

PS*PX PS*HG | PX*HG 3 0,0438 j 0,2648 | 0,8695

«'llllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllll-illllllllllllllllllllllllllllllllllllllSlllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllllll-.lllllllllllllllllllllllllllS 23

ΕΡ 1 147 778 /PT A partir do Quadro, verifica-se que os coeficientes de interacção não são significativos. Deste modo, decidiu-se dividir os dados de libertação de droga em duas categorias com base na quantidade de hexilenoglicol existente nos géis (HG=0 versus HG=2). Analisou-se cada grupo separadamente.

Primeiro, analisaram-se os dados de libertação dos nove géis que não continham hexilenoglicol. Utilizou-se um modelo quadrático para ajustar os dados de libertação. 0 Quadro XIV apresenta os coeficientes dos mínimos quadrados. A equação é apresentada a seguir:

Declive = 11,29 + 0,40 PS + 0,34 PX + 0,19 PS*PX - 0,31 PS2 - 0,66 PX2

Quadro XIV

Coeficientes de Mínimos Quadrados para os Dados de Taxa de Libertação (Géis que não Continham Hexilenoglicol) j

Termo Coeficiente Erro Padrão Significância 1 I 11,286 0,4336 i PS j 0,404 0,2482 j PX j 0,338 0,2278 ; PS*PX j 0,185 0,3040 0,5511 j PS2 \ -0,309 0,3820 0,4297 j PX2 \ -0,659 0,4184 0,1348 j

Conforme se observa no quadro, os termos de interacção não são significantes. A eliminação desses termos conduz a um modelo linear que não ajusta bem os dados. Isto indica que não existem dados suficientes nas gamas estudadas para ajustar um modelo adequado. A equação que se ajusta aos dados é:

Desvio = 11,29 + 0,40 PS + 0,34 PX

Os dados de libertação obtidos a partir de géis que continham hexilenoglicol a 2% foram também ajustados usando um modelo quadrático. Os coeficientes dos mínimos quadrados encontram-se no Quadro XV.

Observa-se que todos os termos de interacção são significantes. A equação que se ajusta aos dados é:

Declive = 13,20 + 1,16 PS + 0,28 PX - 0,88 PS*PX - 1,02 PS2 24

ΕΡ 1 147 778 /PT

Quadro XV

Coeficientes de Mínimos Quadrados para os Dados de Taxa de Libertação (Géis que

Continham 2% de Hexilenoglicol)

Termo j Coeficiente Erro Padrão Significância 1 I 13, 196 0,3977 i ps | px s PS*PX j 1, 160 Õ, 282 -0,878 0,2874 0,2857 0,3453 0,0179 \ PS2 j 0, 025 0,3484 0,0314 \ PX2 \ -2,311 0,4365 0,0001 1 Para magnitude determinar se dos resíduos e existe alguma relação entre a os valores ajustados da resposta, construiu-se uma representação de valores absolutos dos valores submetidos a Student versus os valores ajustados (Figura 9). A representação sugere que não existe nenhuma tendência clara nos resíduos e o modelo não necessita de ser refinado.

Uma representação de probabilidade normal dos resíduos apresentada na Figura 10 indica que os pontos na representação caiem muito próximo da linha, indicando que os resíduos do modelo estão distribuídos normalmente.

Para determinar se o modelo pode ser melhorado através de transformação da resposta, verifica-se o ajuste do modelo. O gráfico que mostra as transformações possíveis e os seus efeitos no logaritmo da soma dos quadrados dos resíduos é apresentado na Figura 11. As transformações abaixo da linha tracejada encontram-se no intervalo de confiança de 95% para a melhor transformação. Uma vez que a resposta não transformada está abaixo da linha, não se transforma a resposta.

Na Figura 12 é apresentada uma representação tridimensional que mostra o efeito do polisorbato 40 e do Poloxamero 407 (quando HG=2) no declive.

Para determinar os níveis de tensioactivos que resultam em taxa de libertação de droga máxima, realiza-se uma optimização. Conforme se observa no Quadro XVI, quando se prepara um gel que contém entre 0 e 0,4% de polisorbato 40 e poloxamero 407, e de 0 a 2% de hexilenoglicol, pode-se obter 25

ΕΡ 1 147 778 /PT um declive de 13,53 com 0,32% de polisorbato 40, 0,18% de poloxamero 407, e 2% de hexilenoglicol.

Quadro XVI

Valor Óptimo

Factor

Optimização da Taxa de Libertação de Droga Intervalo Entrada Inicial

Polisorbato 40 Poloxamero 407 Resposta Declive 0 a 0, 4 0 a 0,4 Maximizar 0,20,2 13,59 0, 32 0, 18 13, 53

Correlação entre a solubilidade e a libertação

Para investigar uma possível correlação entre a solubilidade da droga e a taxa de libertação de droga, construiu-se uma representação do declive do perfil de libertação versus raiz quadrada da solubilidade da droga em gel. 0 coeficiente de correlação mais elevado obtido foi 0,5553 que foi para a solubilidade de droga em soluções sem carbómero, nem base (Figure 13). Deste modo, concluiu-se que na gama de tensioactivos e co-solventes estudados não se observou nenhuma correlação entre a libertação de droga e a solubilidade.

Maximização da solubilidade e da libertação A análise estatística final envolveu a optimização simultânea das duas respostas estudadas; a solubilidade da droga e a taxa de libertação. Realizou-se esta análise para identificar a concentração dos dois tensioactivos e co-solventes que podiam ser utilizados na produção de um gel com solubilidade e libertação máximas. 0 RS/Discover® não efectua optimizações simultâneas, contudo é possível optimizar uma das respostas enquanto se restringe a gama da outra resposta. Este é um processo iterativo.

Para este fim, maximizou-se o declive enquanto se restringiu a gama de solubilidades. Os resultados do processo são apresentados no Quadro XVII. Concluiu-se que pode ser obtido um declive máximo de 12,02 preparando um gel que contenha 0,4% de polisorbato 40, 0,0 % de poloxamero 407, e 2% de hexilenoglicol. Calcula-se que a gama de 26 ΕΡ 1 147 778 /PT solubilidade da droga neste gel seja entre 102 e 108 pg/ml.

Quadro XVII

Optimização Simultânea da Solubilidade da Droga e da Taxa de Libertação Factor Intervalo 1 Entrada Inicial Valor Óptimo

Polisorbato 40 0 a 0, 4 | 0,2 Poloxamer 407 0 a 0, 4 0,2 Hexilenoglicol 0 a 2 | 2 Resposta s Declive Maximizar l 13,59 Solubilidade 102 a 108 pg/ml \ 97,6 pg/ml 12, 02 107,99 pg/ml 0,4 0, 0 2

Efeito da solubilidade de partículas de droga na libertação de droga A partir dos dados de solubilidade indicados no Quadro VII, é evidente que aproximadamente 90% da droga se encontra no gel de base aquosa na forma de partículas sólidas. Para determinar se a velocidade de dissolução das partículas limita a taxa de libertação de droga, analisaram-se os dados obtidos no estudo de libertação in vitro (Quadro XVIII). A partir dos dados, observa-se que a taxa de libertação de droga permanece constante mesmo após três horas, para além do ponto em que é libertada 10% da droga (a quantidade total de droga que satura o gel aquoso) . Deste modo, conclui-se que a solubilidade das partículas de droga no gel não é limitante.

Quadro XVIII

Quantidade de Droga Libertada em Certos Intervalos de Tempo (Gel de 0,1% de AGN, formula 8606X, Lote # 10169)

Tempo (h) Quantidade libertada (mg) % de Droga Libertada

3,6259 7,0805 10,2129 13,3310 16,3225 0,00725±0,0005 0,00690±0,0005 0,00626±0,0004 0,00624±0,0004 0,00600±0,0003 6 7 8 9 12 15 18 0,00570±0,0002 0,00551±0,0003 0,00526+0,0003 0,00496±0,0004 0,02378±0,0024 0, 01727±0,0018 0,00901±0,0009 0,00582±0,0006 19,1727 21,9270 24,5573 27,0367 38,9273 47,5600 52,0643 54,9760 21 27

ΕΡ 1 147 778 /PT

Efeito da membrana na libertação de droga

Para investigar a possibilidade da membrana de silicone ser limitante da velocidade, comparou-se o declive do perfil de libertação para a difusão de droga através do gel com o declive do perfil de libertação obtido a partir de uma solução saturada da droga (Figura 14) . 0 declive da porção linear da curva para o gel foi 13,587±0, 973, e o declive obtido a partir da solução saturada foi 46,652±0,998 o que indica que a libertação de droga a partir da solução saturada é muito superior à libertação de droga através do gel. Deste modo, verificou-se que esta membrana servia como membrana de suporte adequada, não oferecendo nenhuma resistência à difusão da droga.

Efeito da concentração de droga na taxa de libertação

Os resultados do estudo de libertação de droga usando 0,1%, 0,05%, e 0,025% mostraram que a libertação de droga a partir do gel contendo 0,1% é aproximadamente 60% superior à libertação de droga a partir do gel a 0,05%, ao passo que a libertação de droga a partir do gel a 0,05% é também 60% superior à do gel a 0,025% (Figura 15). Deste modo, o método de libertação in vitro possui oportunidades distintas em libertação de droga devido a alterações na concentração de droga. Também, os resultados indicam que a libertação de droga a partir do gel é mais semelhante à libertação de droga a partir de solução, uma vez que se espera que a libertação de droga a partir de suspensões contendo o dobro da droga proporcione apenas 40% de aumento na taxa de libertação de droga (em conformidade com a teoria de

Higuchi).

Conclusão O efeito da variação das concentrações de polisorbato 40, poloxamero 407, e hexilenoglicol na libertação e solubilidade de AGN num gel indica que o gel exibia máxima solubilidade e libertação de droga, AGN. Este gel continha 0,2% de polisorbato 40, 0,2% de poloxamero 407, e 2% de hexilenoglicol. Em adição, identificou-se também um outro gel que exibia solubilidade de droga e libertação de droga 28

ΕΡ 1 147 778 /PT que não eram significativamente diferentes do gel protótipo. Este segundo gel (gel 6) continha 0,4% de polisorbato 40 e 2% de hexilenoglicol, mas não continha poloxamero. Todos os outros componentes foram disponibilizados à mesma concentração para os dois géis.

Lisboa,

Claims

ΕΡ 1 147 778 /PT 1/2 REIVINDICAÇÕES 1. Formulação de gel estável para o tratamento tópico de problemas de pele em humanos, compreendendo a referida formulação de gel estável: um retinóide sintético que possui actividade para o tratamento de acne e psoríase, sendo o referido agente activo insolúvel em água; uma multiplicidade de veículos não aquosos seleccionados de quaisquer dois ou mais de polisorbato 40, poloxamero 407 e hexilenoglicol, para solubilizar o referido agente activo e para formar um gel com eles, permitindo os referidos veículos não aquosos a aplicação tópica do gel a uma condição da pele.
2. Formulação de acordo com a reivindicação 1, onde a multiplicidade de veículos não aquosos é seleccionada de qualquer um de: % de Hexilenoglicol 1 % de Polisorbato 40 % de Poloxamero 407 0 | 0,2 0,2 0 I 0,2 0,4 I 0 | 0,4 0,2 ! 0 | 0,4 0,4 | 2 | 0,0 0,2 j 2 I 0,0 0,4 | 2 I 0,2 o,o | 2 2 | 0,2 | 0,2 0,2 I 0,4 i 2 I 0,4 ο,ο | 2 | 0,4 0,2 | 2 1 0,4 0,4 |
3. Formulação de acordo com a reivindicação 1 ou 2, onde os veículos se encontram presentes em quantidades seleccionadas para produzir libertação máxima do agente activo a partir do gel quando todos os veículos estão nele presentes. ΕΡ 1 147 778 /PT 2/2
4. Formulação de acordo com qualquer reivindicação anterior, onde a formulação compreende três veículos.
5. Formulação de acordo com a reivindicação 1, onde os veículos se encontram presentes em quantidades seleccionadas para produzir a máxima solubilidade do agente activo no gel.
6. Formulação de acordo com a reivindicação 1 ou com a reivindicação 5, onde a formulação compreende dois veículos.
7. Formulação de acordo com a reivindicação 1 ou com a reivindicação 5, onde os três veículos são utilizados para solubilizar o agente activo e formar um gel. Lisboa,