PL157500B1 - Method of obtaining a preparation from derivatives of biophysically transformed materials of ascomycetes or schizomycetes cells - Google Patents

Method of obtaining a preparation from derivatives of biophysically transformed materials of ascomycetes or schizomycetes cells

Info

Publication number
PL157500B1
PL157500B1 PL1988271547A PL27154788A PL157500B1 PL 157500 B1 PL157500 B1 PL 157500B1 PL 1988271547 A PL1988271547 A PL 1988271547A PL 27154788 A PL27154788 A PL 27154788A PL 157500 B1 PL157500 B1 PL 157500B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
yeast
cells
preparation
treatment
suspension
Prior art date
Application number
PL1988271547A
Other languages
English (en)
Other versions
PL271547A1 (en
Inventor
Anna Wank
Original Assignee
Socop Nahrungsmittel
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Socop Nahrungsmittel filed Critical Socop Nahrungsmittel
Publication of PL271547A1 publication Critical patent/PL271547A1/xx
Publication of PL157500B1 publication Critical patent/PL157500B1/pl

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
    • C12N9/50—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25)
    • C12N9/58—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from fungi
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N63/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
    • A01N63/30—Microbial fungi; Substances produced thereby or obtained therefrom
    • A01N63/32—Yeast
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; PREPARATION THEREOF
    • A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
    • A23C9/12—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes
    • A23C9/127—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using microorganisms of the genus lactobacteriaceae and other microorganisms or enzymes, e.g. kefir, koumiss
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; PREPARATION THEREOF
    • A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
    • A23C9/12—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes
    • A23C9/13—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using additives
    • A23C9/1322—Inorganic compounds; Minerals, including organic salts thereof, oligo-elements; Amino-acids, peptides, protein-hydrolysates or derivatives; Nucleic acids or derivatives; Yeast extract or autolysate; Vitamins; Antibiotics; Bacteriocins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K10/00—Animal feeding-stuffs
    • A23K10/10—Animal feeding-stuffs obtained by microbiological or biochemical processes
    • A23K10/16—Addition of microorganisms or extracts thereof, e.g. single-cell proteins, to feeding-stuff compositions
    • A23K10/18—Addition of microorganisms or extracts thereof, e.g. single-cell proteins, to feeding-stuff compositions of live microorganisms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/06—Fungi, e.g. yeasts
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/06—Fungi, e.g. yeasts
    • A61K36/062—Ascomycota
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/48—Fabaceae or Leguminosae (Pea or Legume family); Caesalpiniaceae; Mimosaceae; Papilionaceae
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/97—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
    • A61K8/9728—Fungi, e.g. yeasts
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/99—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from microorganisms other than algae or fungi, e.g. protozoa or bacteria
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/74—Biological properties of particular ingredients
    • A61K2800/78—Enzyme modulators, e.g. Enzyme agonists
    • A61K2800/782—Enzyme inhibitors; Enzyme antagonists
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/80—Process related aspects concerning the preparation of the cosmetic composition or the storage or application thereof
    • A61K2800/85—Products or compounds obtained by fermentation, e.g. yoghurt, beer, wine

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Agronomy & Crop Science (AREA)
  • Dentistry (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Pest Control & Pesticides (AREA)
  • Physiology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)

Abstract

1. Sposób wytwarzania preparatu z pochodnych po biofizycznym przeksztalceniu materia- lów komórek Ascomycetes lub Schizomycetes o czynnosci wzmagajacej oddychanie, przezna- czonego do pasz, znamienny tym, ze komórki Ascomycetes lub Schizomycetes, ewentualnie wobec dodatku cieklego nosnika, poddaje sie tak dlugo obróbce na drodze oddzialywania promieniowania laserowego, liofilizacji, dzialania ultradzwiekami, krótkotrwalego doprowa- dzenia cisnienia i/lub osmolizy, az komórki te zostana przeksztalcone w mase latwo dajaca sie ponownie przeprowadzic w stan zawiesiny i zawiesine tych skurczonych komórek poddaje sie krótkotrwalej obróbce intensywnym wstrzasem cieplnym, az utworzone wskutek fermentacji gazy ulotnia sie. PL PL PL PL PL

Description

Przedmiotem wynalazku jeet sposób wytwarzania preparatu z pochodnych po biofizycznya przekształceniu natariałów koeórek Ascoayystes lub Schizomycetee, zwłaszcza komórek drożdżowych o czynności wzmagającej oddychanie, przeznaczonego do pasz·
Wiadomo, Ze organizmy roślinne i zwierzęce mogą wywierać wpływ i aktywność na przemianą maerii w komórce· Z tego powodu proponowano już liczne metody aktywowania przemiany matrliL.
Według opisu patentowego Republiki Federalnej Niemiec DE-PS nr 1 076 888 uzyskuje Się czynne substancje wzmaaajęye oddychanie z d^l^owanych komórek krwi i osoczy krwi. Maję one zwiększać pochłanianie tlenu przez homogenat wątrobowy szczura· Produkty wspierające wzrost otrzymuje się według opisu patentowego Stanów Zjedn. Ameryki nr 3 937 816 z czerwonej miazgi śledziony bydlęcej i w przypadku dożylnego wstrzyknięcia u myszy powoduje w dość krótkim czasie przybór masy śledziony. Danych o aktywności oddychania lub o wymiarach wpływu na fosforylację w łańcuchu oddechowym nie przedstawiono.
Wiadomo nadto, że w drożdżach można nagromadzać substancje terapeutycznie czynne /porównaj też opis RepubUki Federalnej Niemiec nr 3 341 840/.
Algi, grzyby 1 drożdże o tak zwiększonej aktywności meeabolicznej, że w przypadku wątrobowego homogenatu szczura wykazują one działanie wzmagające oddychanie, nia były dotychczas znane. Tradycyjne drożdże, takie jak drożdże piwne, Saccharomyces canaviβiaa 1 Saccharomyces carlsbergieneis, drożdże piekarnicze /saccharomyces/, Candida, Torula i inne zachowują się wobec takiego homogenatu obojętnie. Współczynnik zwiększenia oddychania przeważnie jest bliski wartości 1. Przeznaczony do pasz preparat z pochodnych po blofizycznm« przekształceniu majeΓigłów komórek Asylmycetae lub Schizomycetes, korzystnie komórek drożdżowych, wykazuje czynność wzraaaajęyą oddychanie, mierzalną w naczyniu Marburga na zzlΓaalClOwanya hlβolθnacie szczura i wyrażoną jako objętość tlenu dodatkowo w oddychaniu zużytego przez homogenat .
Sposób wytwarzania omówionego preparatu polega według wynalazku na tym, że komórki Ascomycetes lub Schizomycetee, korzystnie drożdże wyjściowe, ewentualnie wobec dodatku ciekłego nośnika, poddaje się tak długo obróbce na drodze oddziaływania promieniowania Laserowego, liofilizacji, działania ultradźwiękami, krótko trwałego doprowadzenia ciśnienia i/lub osmmlizy, aż te komórki, korzystnie komórki drożdżowe zostaną przekształcone w masę łatwo dającą się ponownie przeprowadzić w stan zawiesiny i zawiesinę tych skurczonych komórek, korzystnie komórek drożdżowych, poddaje się krótkotrwałej obróbce intensywnym wstrząsom cieplnym, aż utworzone wskutek fermennacji gazy ulotnią się.
Dzięki wynalazkowi po raz pierwszy sporządza się aktywny meeabolicznie preparat z mat^riaitiw komórek Ascomycetes lub Schizlóycetes, a zwłaszcza preparat z drożdży, wykazujący na zeormalllywanym hommoenacie wątrobowym szczura czynność wzmaga^cą oddychanie, jeśli merzy się to w próbie Marburga . Współczynnik zwiększenia oddychania wobec odpowwedniej próbki porównawczej jest na ogół co najmniej równy 2, a korzystnie ma wartość 2,0 - 10.
Określenie “Ascumycetes ma w opisie einiej&yym obejmować grzyby workowce z workowatymi strzępkami i tworzeniem askospor /zaiOdników workowych/, do których należą również drożdże /Sacchanmyces/ 1 grzyby dklżdżopldlbne) u których tworzenie sporów jest jeszcze nieznane, np. rodzaje Candida i Torulopsis. Schizomycetes są drozdżowatymi bakteriami. W opisie wykorzystuje się pojęcie grzyby jako skrótowiec dla oóówyonych rodzajów.
Preparat drozdżowy w opisie niniej3syó oznacza całe komórki drożdżowe, roztwór drożdży, zawiesiny drożdży, włącznie z wyciągiem z drożdży.
Wspprczynnlk zwiększenia oddychania dla metabolicznie aktywnych preparatów drożdżowych wytworzonych sposobem według wynalazku określa się za pomocą działania na wątrobowy hmosenat szczura według metodyki Warburga, a stanowi on stosunek dodatkowego zużytego tlenu /jego objętości/ w oddychaniu przez znormalizowany homogenat wątrobowy szczura, w odniesieniu do nie zawierającej preparatu próby sprawdzianowej o jednakowym pozostałym składzie.
Pomóak zwiększenia oddychania i współczynnika zwiększenia oddychania następuje w naczyniu Marburga o określonej objętości, które zgodnie z planem napełnienia wypełnia się buforem /korzystnie buforem Sδkeesen'a o wartości pH - 7,4/, określoną ilością koedycjonowaneel /lmól8natl wątrobowego szczura i substancją badaną lub roztworem badanym i w którym to naczy4
157 500 niu substancja badana przeważnie w ciągu 60 minut oddziaływuje w temperaturze 37°C na hornogenat. Drogę odczytów na manometrze określa się zużycie Og, po Ilościowym zaabsorbowaniu COg powstającego podczas oddychanna. Przeliczone na normalne warunki zużycie tlenu, podzielone przez zużycie tl^^nu w próbie sprawdzianowej bez substancj badanej jest bezpośrednią miarą współczynnika zwiększenia oddychania. To mierzalne zwiększenie oddychania w przypadku wytworzonych sposobem według wynalazku preparatów z komórek Ascimyyetes, Schizomycetes i z drożdży jest aadzwyccatne» co wynika z podanej niżej tabeli 1, omawi8Jęcej preparat drożdżowy z przykładu I.
Tabela 1
1 Nr Próba 1 Wsppóczynnik zwiększenia 1 i Procentowe , zwiększenie /%/
1 ..a». ( oddychania U - --T
1 Roztwór całkowity · 4,4 1 | 340
2 Supernatant 1 4.0 1 300
3 Pozostałość z odwirowania 2.8 1 1 180
4 Materiał wyjściowy · 1.0 1 -
β . - - J
Charakterystyczną dla nowych produktów z Aso^i^yccm^is, Schizomycetes i z drożdży Jest celowa zmiana ich biochemii, dzięki czemu silnie zwiększa się aktywność metoboiiczna. Kryterium dla oceny zwiększonej aktywności metaboiicżnθj, sę obok Już omówionego zwiększenie oddychania homogenatów narzędów, polepszone gojenie się ran, wywiθranin pozytywnego wpływu na układ makrofagów i działanie wspperajęce wzrost, które można stwierdzić w przypadku ryb, a także w przypadku stałocieplnych. Metaboilczain aktywne, nowe preparaty z komórek AscMycetes, Schiziiycetts i z drożdży wy^óe^i^i^^ję również pozytywny wpływ na wzrost zwykłych drożdży, na co wskazuję próby przedstawione w podanej niżej tabeli 2.
Tabela 2
Drożdże
Γ-----Τ--Wysiew . WSF ml
Kommrk i drożdży posiew komórki /10 ml/
WSR / % / /V
2% bulioa>maltizc a/ Sabouraud*a drożdże zwykłe drożdże zwykłe +2% nowego produktu drożdżowego
2.0 · 10
2,0 · 10
1.0 . 10
1,5 · 10' ,500
750
2% bulion<maltizc Sabouraud a b/ drożdże zwykłe drożdże zwykłe ♦2% nowego produktu drożdżowego
5,0 . 106
5,0 · 1QŁ
2,0 · 10
2,5 · 10
WSF Wapp^zynnik zwiększenia wzrostu
WSR ® Szybkość zwiększenia wzrostu
Drożdże zwykłe /a/ - Saccharoiycns cemvisiae Orożdże zwykłe /b/ Sa^haro^^es carlsbergiensis
Podobne w'yieraaie pozytywnego wpływu na wzrost stwierdzono też w przypadku bakterii, takich jak gatunki Lactobacillus i Sifidus.
157 500
Ze względu na zmienioną biochemię w pochodne przekształconych produktów wyjściowych z komórek Ascornycctas, Schizomycetes 1 drożdżowych interesującymi są otrzymane w zdefiniowanych warunkach doświadczalnych chromatogramy cienkowarstwowe lppidów, aminokwasów i składowych kwasów nukleinowych w porównaniu z komórkami wyjściowymi, przeznaczonymi do biofiyycznego przekształcenia w pochodne.
Otrzymane dwuwymiarowe chromatogramy cienkooarstwowe nadają się do charakteryzowania w pochodne przeksztacconych produktów i do ich odróżniania od inaczej wytworzonych produktów.
Figura 1 przedstawia iwuwtcBiarowy chromatogram ciθnkooaΓstwowy dla llpdóów i innych swoistych substancji w drożdżach biofizycznie przekształconych w pochodne. W tym calu 1 g tych w pochodne przeksztecconych drożdży ekstrahowano za pomocą 6 ml układu CHClg/CHgOH /2:J/. Ekstrakt ten chromatografowanot
1. faza ruchoma CHCC.3tCH.3OH t HgO /65 t 25 i 4/
2. faze ruchoma CgHg t C4H1{JO t CgHgO t CHgCOOH /&S i 40 ι 1 : 0,1/ benzent eter etylowy t etanol t kwas octowy.
W celu stwierdzenia obecności oddzielonych składników swoistych płytki ogląda się najpierw pod lampy nadfioletowy przy długości 366 nm 1 254 na i zaznacza się plamy. W celu wykrycia lipdóów płytki spryskuje się odczynni^em prymulli^wym i ocenia przy długości 366 nm pod αnβlicycznc lampy nadfioletową.
Nieoczekiwanie w przypadku większości nowych preparatów z komórek Asjomycctθ8, Schizomycetes 1 drożdżowych obok czynności wziiαgJęcθj oddychanie wykryto dodatkowo-czynnik hai^jący, który działa inhibituJęct na oksydazy. Oako oksydazy należałoby zwłaszcza wspomnieć oksydazy amintkwesowe / 1.4.3.2 lub 3 / i oksydazy i^noail.ntoe / 1.4.3.4 / oraz oksydazy iwuamintwt / 1.4.3.6 /.
Wytotaie tym efektem przypuszczalnie staje się zahamowane lub tpowotnltit utlenianie L-aminokwasów, które jako takie Jest katelltowant przez oksydazę L-araintkwatooę / 1.4.3.2 /. Oksydaza L-eminokwattoe jest zawarta w wielu układach wykorzystania substancci tizγιoczet, takich Jak flora bakteryjna jβlίtowa lub bakterie glebowe. Bezpośrednim skutkiem tego czynnika haiuJąjtgt jest irtjtntoot wyższe wykorzystanie L-eilntkoasJ w pożywieniu, które itprtoaiza się do takiego układu wykorzystania s^etancci odżywccze, z rezultaem takim, ze zwierzę lub roślina mogę rosnąć szybccee. To czy ten czynnik hemiJąjy może być bezpośrednio związany ze zwiększoną czynnością oddychania lub przynajmniej skorelowany, nie jest jeszcze pewne.
Abstrahując tu od wyraźnego ustalenia mechanizmu można byłoby działanie tego czynnika hemuJąjegt wyjaśnić następująco: oksydaza L-eiinokwestwa jako grupę protetyczną zawiera mocno związany FMN /ϋηοηυΗΜΐ^ jawiny/. W przypadku utleniania L-aminokwasów utlenia się ich grupę aminową według następującego schemitu:
1/ L-aminokwas : HgO ♦ Enzym - FMN -- oC - ketok^was + NHg ♦ Enzym - FMN · H2
2/ Enzym - FMN · H2 ♦ O2 -» Enzym - FhMI ♦ HgOg.
Zużycie tlenu można mierzyć Jwzelędπiając ilość utworzonego H2O2, gdyż H2O2 rozkłada się na wodę i 1/2 O2· W obecności katarzy rozkład ten Jest spontaniczny i ilościowy, toteż cała reakcja utlenianie L-aminokwasu tiptoiaie równaniu 3:
3/ R-CH/NH2/-COOH ♦ 1/2 02 -w R-CO-COOH + NH3·
Jeśli w układzie jest oksydaza L-aminokoestoe zahamowana, zablokowana lub w inny sposób unieruchomiona, to zuzywa się mniej tlenu niz bez tego czynnika hemiJęctgt, toteż wskutek tego pozos te je więcej eiiitkoetów i protein do dyspozy^j co może prowadzić do zwiększonego i intensywniejszego oykotzystaile substanc^i odżywccze.
W celu oznaczenia czynnika hemJąjtgt oksydazę L-aiiπokoetiwą /Hmf/ dla iowych preparatów z komórek Atctmycjtes, Sjhietiycattt i drożdżowych wprowadza się do naczynia Marburga według określonego planu napełniania roztwór oksydazy L-aminokwettoeJ / i mg/ml /, zawiesinę katalazy, bufor o wartości pH < 7,8 /50 ml 0,2 M NagPgO? ♦ 37,5 ml 0,2 M HCl/, roztwór L-fθiyloalaninc / 1 ra^mo/50 ml, bufor o pH » 7,8 / i roztwór badany /produkt z
157 500 odwirowania przy 105 g, lub zawiesina drożdży/ tak, żaby pomiary objęły zarówno reakcję oksydazy L-aiinokwasowej i L-fanyloalanina, Jak i reakcję tego enzymu z roztworem badanym /bez fenyloalaniny/ i tego enzymu z roztworem badanym i fenyloalaninę. Szarże w cylindrach zaopatruje się w pasma bibuły filtracyjnej, nasączonej 6N KOH. Roztwory te w temperaturze 37°C doprowadza się do równowatji, po czym roztwór enzymu dodaje się do ko«^ry głównej zawierającej roztwór badany lub ślepą próbę. Zużycie tlenu w μΐ można następnie rejestrować w zależności od czasu i Jest ono bezpośrednią miarą czynnika hamującego. Jeśli skoreluje się Je z zużyciem tlenu w ślepej próbie. Na ogół odczyt niezbędny dla oznaczenia Hmf następuje po upływie 60 minut.
W celu oceny tworzy się krzywą sumaryczną z krzywych pomiarowych oksydaza L-am.nokwasowa + fenyloalanina i oksydaza L-aminokwasowa + roztwór drożdży - zapotrzebowanie tlenu sprowadza się do samych aminokwasów zawartych w tych drożdżach i wówczas tę krzywą summryczną, które Jest miarą teoretycznie oczekiwanego wchłaniania tlenu, porównuje się z krzywą oksydaza L-aminokwasowa ♦ L-fenyloalanina * roztwór drożdży”. W przypadku nowych preparatów /biofizycznie przekształconych/ z komórek Ascornycctes, Schizomycetes i drożdżowych otrzymuje się w wyi^^ku zmniejszenia zużycia tlenu, które procentowo wyraża czynnik hamujący /np. 0.42 « 42% zahamowania lub i^najszego zużycia tlenu/. Porównując z każdym z wyjściowych materiałów komórkowych, które praktycznie odpowiadają teoretycznej krzywe,] sumarycznej, jest Hmf godny uwagi 1 osiąga wartości do 70% a nawet do 80%.
Dalszą nieoczekiwaną właściwością większości nowych preparatów z komórek Ascomycetes, Schizomycetes i drożdżowych jest czynność gojąca rany, którą można oszacować podczas leczenia ran ciętych na grzbiecie szczura. Napięcie w miejscu rany zwierząt leczonych było po upływie 6 dni wyraźnie większe niż w przypadku grupy sprawdzianowej Również podczas badania w dniu 21-szym przewaga zwierząt leczonych nad grupą sprawdzianową pod względem gojenia była jeszcze m.^rz^li3, W próbie tej męskie osobnńki szczura rasy W^tar o ciężarze 210-230 g każdy uśpiono i pod narkozą ostrzyżono włosy grzbietu. Następnie wzdłuż linii środkowej dokonano prost^^^wego nacięcia na długości około 4 cm i w odstępie każdorazowo 1 cm zszyto w miejscach. W 6-tym, 11-tym, 16-tym i 21-szym dniu od zabiegu otworzono ranę i pobrano 3 wąskie krążki skóry w prawym rogu względem linii rany, włączając 1 cm szerokości linii rany. Następnie zmierzono napięcie, które powstawało przy odrywaniu zranionej części skóry.
Dawkę 2,5 ml/kg supernatanta roztworu badanego z przykładu I aplikowano w dniu nacięcia rany i następnie codziennie. Grupa sprawdzianowa otrzymywała dawkę 2,5 ml/kg fizjologicznego roztworu soli kuchennej w Jednakowy sposób. W jednej grupie dla każdej próby każdorazowo przebadano 25 zwierząt. Można było zaobserwować, że napięcie zranionych części skóry w przypadku zwierząt leczonych roztworem badanym όϋΠϋΓη^ rosło. Podczas badania w każdym dniu zwierzęta leczone wykazywały większe napięcie tej części skóry niż grupa sprawdzianowa. W staduum początkowym w dniu 6-tym była różnica względem grupy sprawdzianowej większa niż 100%. Wynnki zestawiono w podanej niżej tabeli 3.
Tabela 3
Liczba dni 1 1 x/ Grupa testowa — r - 1 Grupa sprawdzianowa » - «1 1
• - 7 - » - - «4
6 l 215 ♦ 17 I 104 ♦ 33
“·
11 i I 493 + 24 « 390 ♦ 23
16 ł 840 + 48 « 730 ♦ 30
1
21 1 1659 + 52 1 1401 ♦ 60
- -----------------------«.-----------------J x/ Grupa testowa otrzymywała 2,5 ml roztworu badanego/kg wagi ciała.
Zauwaaalme polepszone gojenie się rany można objaśnić w ten sposób, że nowe preparaty z komórek Ascomycceas, Schizomycetes i drożdżowych sprzyjają oddychaniu tkankowemu 1 podwyższają funkcję metabbkiciię, toteż tkanka znacznie szybciej odradza się.
157 500
Nowy preparat, np. biofizycznie w pochodne przekształcone drożdże, ^^w^re^ą korzystny wpływ nie tylko na uszkodzoną skórę, lecz też na zdrową, nieuszkodzoną skórę.
Pod działaniem biofizycznie w pochodne przekształconego preparatu drożdżowego /przykład 1/ unorraotwjje 1 znacznie polepsza się zdolność utrzymywania wilgoci. Ola stwierdzenia tego działanie określono zawartość wody w skórze przed i po traktowaniu w ciągu wielu godzin. Koappzycję zawierającą preparat nanoszono na suchy skórę, a więc na skórę o złym wyglądzie wilgotnościowym. Na taky sapy skórę nakładano próbkę sprawdzianową bez preparatu, lecz o jednakowym pozostałym składzie. W rezultacie stosowania preparatu okazało się, że podwyższa się zawartość rody, a zdolność utrzymywania wilgoci w skórze praktycznie podwaja się.
W fig.2 przedstawionej na rysunku odtworzono na wykresie przebieg krzywych dla skóry pielęgnowanej i niepielęgnowanej. Ne osi X podano czas w godzinach od traktowania, a na osi Y podano w procentach wilgotność skóry. Oak już przy omawianiu gojenia się ran wyjaśniono, dzięki kompozycjom zawierającym nowy, biofizycznie w pochodne przekształcony preparat grzybowy lub drożdżowy, polepsza się elastyczność skóry lub napięcie skóry, co łatwo można śledzić drogę pomiarów częstotlwwości rezonansowej na ludzkiej skórze.
Dalszym kryterium zwiększonej aktywności mejaboiicznej nowych, biifizycyiie w pochod ne przekszta^cnych preparatów z komórek Ascom^y^eas, Schizomycetes i drożdżowych jest wywieranie pozytywnego wpływu na układ makrofagów /RES/. Z powodu ich działania za zahamowany przez błękit trypanowy funkcję układu mmkrofagów /RES/ szczura według metody z czerwienię Kongo można dla tych nowych preparatów stwierdzić działanie aktywujęce RES. W tym celu męskim osobnikom szczura rasy Wistar o ciężarze 210 - 230 g każdy wstrzyknięto dożylnie dawkę 1 mg/kg 1% roztworu czerwieni Kongo. Po upływie 4 minut i 60 minut pobrano krew. Współczynnik czerwieni Kongo wynikał ze stosunku wartości absorpeci przy 500 nm dla dziesięciokrotnie rozcieńczonej surowicy. W celu zahamowania funkcj układu-RES aplkloowano dawkę 10 mg/kg 1% roztworu błękitu t^pano^ego έρ^^ΓζβΝΠϋο. Przez pomiar wartości absorpcj przy 650 nm można było to zahamow^ie wyliczyć jako poprawioną wartość absorpcj przy 500 nm. Aplikowanie błękitu tΓypanoijgi następowało na 6,5 godziny przed badaniem układu-RES za pomoc? łzerίeni Kongo. W teście na 5 godzin przed tym badaniem aplioowano śródotyjiwnowi 0,5 ml roztworu bada nego /supernatanta według przykładu 1/. Grupa sprawdzianowa otrzymała adekwatną ilość fizjologicznego roztworu soli kuchenny . Jako jedną grupę każdorazowo przebadano 25 zwierząt doświadczalnych.
Ola grupy leczonej oznaczono średni współczynnik cyjrw.enί Kongo równy 9,4, a dla grupy sprawdzianowej oznaczono współczynnik czerwieni Kongo równy 15,1, co należy traktować jako bezpośredni dowód sprzyjającego oddziaływania nowych, biofizy^nie óryjksytałionych preparatów z komórek Asłommąłjes, Słhizipycetes i drożdżowych na funkcję układu-RES, gdyż hamujące działanie błękitu tapetowego zostaje zniesione,
Stwierdzone dla nowych preparatów z komórek Asłimpącjθs, Schizimycβtjs i drożdżowych, podwyższone aktywności ϋβόοΐ^ζϋ są o tyle zupełnie zaskakujące, że komórki Ascomycetes, Schizomycates i drożdżowe oraz ich preparaty komórkowe traktuje się tylko na drodze metod fizycznych. To traktowanie nazywa się tu ogólnie przekształceńeem w pochodne*.
Kommóki Asc^yy^es, Schizimycetjs i drożdżowe można przekształcać w pochodne drogą oziębiania, promieniowania laserowego, oddziaływania dźwiękami i innych metod biof z^cznych oraz dość krótkotrwałej intensywnej obróbki cieplnej. Dochodzi przy tym do wyraźnego zmit^jszenia komórek i komórek drożdzowych, korzystnie Sje-hannego lub rniejszegi, podczas gdy błony komórkowe stają się grubsze, tak więc stosunek przeciętnej średnicy kimmłki/grubiści błony komórkowej zmienia się o pewien wspóóczynnik, który korzystnie mieści się w zakresie około 5-20.
Preparat z rrteΓlałói komórek Ascimycθtjs i Schizipycetjs korzystnie zawiera dodath wo małe ilości ekstraktu rίtiłhiidrlłi, dzięki któiemmu aktywność preparatu wspierająca wzrost może jeszcze dodatkowo wzrosnąć.
Ten ekstrat mitochondriów najlepiej dodaje się już przed lub podczas obróbki biofizycznej. Mit^hondcia /zwane także chiidriosooarap/ sę yrlβnnoikztałtowymi, wykazującymi 0,1 - 1 jjm szerokości i 1 - 5 jum długości wtrąceniami w p^tople^ie komórek jednokomórkowców, roślin i zwierząt. Są one dostępne w handlu jako bezpi^ge^^^ proszki suche lub jako roztwory, takie jak produkt firmy Widmar AG, Szwwjjarla, o nazwie Mitochondyl-Pulyer,
157 500 wykazujący około 2% azotu 1 około 50% zawartości substancji suchej. Ten produkt handlowy stosuje się w podanych niżej przykładach. Na ogół ekstrakty oitochondriów wytwarza się drogę miażdżenia komórek, przeważnie komórek drożdżowych i kolejno nastąpujęcych zabiegów ponownego uwoonienia, przeprowadzenia w stan zawiesiny, przemywania i suszenia / patrz np.
P.M. Nossal, Auetral. □. exp. Biol. mad. Sci, 31, 583 /1965/; M.Merkanschlager, K. Schło mann, W. Kurz, Blochem. Z. 329, 332 /1957/ /· Mitochondyl stanowi produkt z raitochondriów ekstrahowanych komórek drożdżowych, zmieszany z substancjami buforowymi i dodaje się go bezpośrednio w postaci białego proszku lub drogę sporzędzenla odpowiednio zbuforowanego roztworu, który zawiera również substancje konserwujące. Korzystnie stosuje się ilość około 0,05 - 0,E0% wagowych ekstraktu oitochondrirw, wyrażonę jako substancja sucha i odniesionę do udziału stałej substancji suchej komórek przekształcanych w pochodne.
Rozmnnżanie komórek Asco^mccet^^, Schizomycetes i drożdżowych w podanych warunkach praktycznie nie zachodzi i Jest również iiepożędane. Stosowany korzystnie nośnik składa się z: a/ małej ilości /korzystnie 0,2 - 5^(% wagowych/ już bioflzycznie w pochodne przekształconych drożdży i/uub ekstraktu mitochondriów /korzystnie 0,01 - 0,1% wagowyoc/, uzyskanych z drożdży stosowanych jako maaeriał wyjściowy lub z innych drożdży; b/ glikoaanów celulozy, pirogenicznsgo kwasu krzemowego, tragakantu i/lub karagenów; c/ zdolnych do fermenna^i mono- i/uub dwusacharydów; d/ środków konserwu^cy^; e/ pierwiastków śladowych, takich jak Mn, Co, Zn, Mg, w postaci siarczanów lub glukoniaiów.
. Orożdże wyjściowe /a/ służę jako substancja uruchamiajęca w obróbcie, dodatek /b/ dba o lepsze rozproszenie tych drożdży. Węglowodany /c/ zabezpieczaję przed fermentację swoistych węglowodanów komórkowych. 3ako środki konserwuję^ /d/ służę korzystnie parabeny /estry alkilowe kwasu 4-hynroktybenzoetowegg/, sól kuchenna i chlorek wapniowy. Chronię one produkt końcowy od początku przed oddziaływaniem mikroorganizmów. Dodatek pierwiastków śladowych /e/ ummożiwia żędane przesunięcia stężenia w komórce drożdżowej lub w zawiesinie komórek drożdżowych.
Nowe preparaty z komórek Atclzzcθjθs, Schizlzycθtjs i drożdżowych wy*weraję również pozytywny wpływ na wzrost mikroorganizmów, takich jak B-fi^dus, Lactcbaadlus , zia^nkowce, bakterie glebowe i flora bakteryjna jelit.
Za pomocę nowych, biofizycznie w poc/odie przekształconych preparatów z komórek Atclmzcejes, Schizomycetjt i drożdżowych osięge się u wyższych roślin zauważalne wywweranie wpływu na wzrost roślin, kwiatostan i zawięzywanie owoców. Deżali do wody do podlewania doda 6ię co najwyżej 1% ciekłego preparatu z Ascomzcejθg, Schizlzycetjt i z drożdży według niżej podanych przykaadów I - VI, to rośliny ozdobna, takie jak aksamim^!, petunie, stniczki., chryzantemy i gożddiki, w ciągu testowego okresu 6-ciu tygodni w porównaniu z próbę porryiawczę /sprawdzianową/ rosnę szybccej, tworzęc obfitość liści i kwiatów. Podobnę poprawę obserwuje się też w przypadku roślin użytkowych, takich jak groch, słoneczniki 1 kukurydza, co dowodzi, znakomite przydatności nowych preparatów jako pobudzajęcego wzrost dodatku do roztworów do podlewania i iawarniania. Oziałanie to prawdopodobnie należy wyjaśnić wywyeraiiem korzystnego wpływu na mikroflorę glebową.
Podane niżej przykłady objaśniaję bliżej wynalazek.
Przykład I. 30 części wagowych /5% drożdży suszonych /sacchafozycet cer^is^e/ i 70 części wagowych wodnego roztworu lub zawiesiny nośnika, zawierającego /w % wagowych/ 0,5% d^^zycznie w plc/odij przekształconych drożdży, 0,0:% ekstraktu zitlc/lidniów, 0,6% glikoannów celulozy, 0,1% parabenów, 2% soli, łącznie 1% glukozy i tαc/arlzy oraz
0,00C0)l% pierw^ków śladowych, napromjnίoyuJj się w temperaturze 15 - 25°C tradycyjnym latejez gazowym - CO-. Moc tego lasera o rzędzie wielkości 0,3 W jest zupełnie wystarczajęca.
Jako zogniskowanie następuje na 0,05 - 5 kW/cm .
Dla poddania zawiesiny iaśwyetlriil lrtejzz-CC2 znajduje się zastosowanie urządzenia, skl^^ęce się z dwóch naczyń, które przy dolnych końcach sę ze sobę pouczone rurkę ze szkła podczerwonego. Rurka ta ma długość 20 - 50 cm i yewnitrzią średnicę 3-6 mm. 20 litrów tej zawiesiny wtłacza się za pomocę najczystszego azotu do przepłukanego azotem lewego naczynia tego urzędzenia. Nastawiwszy laser za pomocę endoskopu na wielkość punktową, odpowiadaj ęcę wewwntrznej średnicy rurki łęczęcee, tłoczy się tę zawiesinę za pomocą azotu z tego
157 500 naczynia do naczynia drugiego, przy czyn również to drugie naczynie pozostaje w atmosferze azotu. Przy pomocy 0,3 W i przy szybkości przepł^u zawieśiny 20 - 200 ml/minutę prowadzi się obróbkę aż do żądanego, mikroskopowo badanego zmniejszenia komórek. Następnie zawiesinę tę krótkotrwale /co najwyżej w ciągu 25 minut/ ogrzewa się do temperatury powyżej 50°C i mieszając utrzymuje w tej temperaturze Icońcowej. Ochłodzoną do temperatury 30°C zawiesi.^ następnie w celu zakonserwowania zadaje się za pomocą 0,1 - 0,ί% wagowych środka konserwującego, takiego jak kwas sorbowy i/lub parabeny.
□ako wynik morfologicznego badania tych komórek otrzymuje się zmniejszjnie przeciętnej średnicy komóóki do około 50% 1 wyraźne pogrubienie błon komórkowych. Zarówno produkt całkowity /zawiesina/ Jak i frakcje otrzymane z odwirowania / przy 10000 obrotów/minutę / tj. supernatant lub pozostałość z odwirowania, okazują się w próbie Warburga być aktywnymi meeabblicznie /w przeciwieństwie do drożdży wyjściowych/, jeżeli zostały zgodnie z tą opisaną próbą zbadane pod względem działania wzmaggaącego oddychania na wątrobowym homoganacle szczura. Współczynnik zwiększenia oddychania dla produktu całkowitego i dla jego superiatanta był większy od liczby 4 /porównaj tabelę 1/. Dalsze aktywności stwierdzono w opisanej próbie gojenia ran /tablica 3/ 1 w teścia zaktywuwania układu-RES.
Produkt całkowity w dawkowaniu 2% przetasowano w przypadku wstępnego tuczu ważącego po 10 - 35 kg prosiąt lub odstawionych /od ssania/ prosiąt /porównaj tabele 4 i 5/. Polepszenie dziennego przyswajanie paszy było o około 58% lub 42% wyraźnie wyższe niż w przypadku stosowania dostępnego w handlu dodatku paszowego, tak więc polepszenie wykorzystanie paszy odpowiadało 16,7% lub 19,5%. Szczegółowe wyniki zestawiono w niżej podanych tabelach 415.
Tabela 4
Wychów prosiąt /10 - 35 kg żywej wagi/
1 - -- -- -Sprawdzian Preparaty handlowe Preparat badany 1
i ' · · · i /bez/ A a /2°/oo/ ,
i Liczba zwierząt w grupie , doświadczalnej 1 i 24 24 24 24 ,
'Waga początkowa /kg/ J H.2 10,1 10,3 10,2 '
Czas próby /dni/ , 35 35 35 35 ,
,Wega w końcu próby /kg/ ' 25,4 26,7 30,2 34,2 ,
i Przyrost wagi /kg/ ' 15,2 16,6 19,9 24,0 '
'Przyrost dzienny /g/ ' 434 474 569 606 '
Różnica względna /%/ , 100 109 131 150 (
(Spożycie ’pesz.y/viti.iarzę/dz.ień/g/ i 900 971 1093 1194 ,
i Nakład kg paszy/kg przyrostu ' 2,09 2,05 1,92 1,74 i
'Różnica względna /%/ ' 100 1 90 92 03,3 1
'Polepszenie: Przyrost dzienny /%/ 1 1 9,21 30,9 57,9 '
(Wy^^ysianie paszy /%/ 1 - 2 0 16,7 ,
Preparatami handlowymi były A: CTC λ Θ: bayo-ηοχ /tak samo w tabeli 5/
157 600
Tabela 5
Próba z prosiętami odstawionymi /od ssania, wiek 21 dni., 5-12,5 kg wagi żywej/
1 ( Sprawdzian /bez/ Preparaty handlowe Preparat badany ^/oo/ a a a
A B
i Liczba zwierzęt w grupie ( dośwwadczalnej a 1 24 24 24 24 a t 1
i Waga poczęt:kowa /kg/ , 4,93 5,14 5,12 5,06 1
• Czas próby /dni/ i 20 20 20 20 1
Waga w końcu próby /kg/ • 10,2 11 11.9 12.9 1
, Całkowity przyrost wagi /kg/ * 5,23 5,84 6,78 7,45 a
• Przyrost dzienny /g/ , 262 292 339 373 a
* Różnica względna /%/ i 100 112 130 142 a
Spożycie paszy/zwwerzę/dzień/g/ • 429 465 480 492 1
, Nakład kg paszy/kg przyrostu ’ 1,64 1,59 1.42 1,32 a
Różnica względna z%/ , 100 97 86,3 80,5 1
i Polepszenie: 1 Przyrost dzienny /%^ a a 11.7 29.6 42,4 a a a
Wykorzystanie paszy z%z • - 3 13.7 19,5 a
..i___.... a
Przykład II. 100 litrów zawiesiny Torulopsis utilis i Saccharomyces cerevisiae /mieszanina 2:8/ o zawartości stałej substancji suchej łęcznie 20% zadaje się mieszaninę zawierajęcę: 1 kg produktu z przykładu I, 0,05 kg ekstraktu mitochondriów,
0,1 kg glikolanu celulozy, 0,1 kg gumy arabskiej, 0,1 kg glukozy i mannozy, 0,1 kg parabenów /4hhddrossbeenzoesanów alkilowych/, 1,5 kg mieszanki solnej z soli kuchennβj, MnS04 i MgSO^ oraz 0,000301% pierwiaskków śladowych.
Zawiesi.^ tę miesza się 1 w temperaturze 20°C traktuje ultradźwiękami, a podczas tej sonifi^cji najpierw ogrzewa się do temperatuds 45°C i nestępnie łt^^otrwal-e /2 minuty/ do temperatury 80°C. Ochło^o^ zawiesi.^ wraz z 200 g Itwasu ttrzemowe^ /o nazwie handl.owej Aerosil 300/ i dostateczny ilościę parabenów /śoodka konserwujęcego/ suszy się rozpyłowo w odpowiednim urzędzeniu /np. w aparaturze-Bucci/, P<zy czym otrzymuje się około 1,5 kg stałego produktu na 1 godzinę,
Wspó^zy™^ zwiększenia oddychania, badany na ciekyym produkcie /przed suszeniem rozpyłowym/, przy oznaczaniu czynności ^^i^ageei^ice.j oddycha nie na wątrobowym iomorenncie szczura był równy 5,1. W próbie gojenia się ran stwierdzono wyprzedzenie około 100% w stosunku do grupy sprawdzianowej Jeśli napięcie części skóry mierzono w wyżej opisany sposób. W przeciwieństwie do tego drożdże wyjściowe były nieaktywna.
Podwyższona aktywność metaboliczna tego nowego preparatu ujawniła się w próbach wzrostowych u ryb i kur. Duż bardzo małe ilości tego dodatku do paszy zwykłej /dodatki mnnejsze niż l%o/ powit^c^c^i^a^y zaskakujęco wysoki efekt wzrostowy, co wyrażało się znacznę oszczędnością paszy. W^ynlii zestawiono w niżej podanych tabelach 6 i 7.
Tabela 6
Próby wzrostowe u mieczników /ryb/
1 1 Sprawdzian ....a. ....... . r 1 1 Dodatek O,9%o . . T 1 <
1 J . Dodatek 0,8<%o
ł średnia waga narybku ł l 1 1 1 ł
( po 47 dniach , 1.9 a 3.7 t 4.1 a
u.... .......... . u __4
157 500
U
Podczas przeprowadzania próby 60 sztuk narybku w 15-tym dniu rozdzielono na trzy grupy i w ilości 5 litrów wody w przeciętneJ tempera turze zwornika 24,5°C skar«l.ano dwukrotnie w tygodniu. Dwie grupy rybek otrzymywały 0,£%o lub 0,95%o dodatku, stanowiącego preparat z przykładu II, podzielonego na 3 dawki w tygodniu.
Przyrost wagi Jest nadzwyczaj wysoki i potwierdza aktywność preparatu wspierającą wzrost.
Suszony rozpyłowo produkt z przykładu II testowano Jako dodatek do karmy dla kur rasy Harvard. Grupą doświadczalną, składającą sią z 3600 kur, skarmiano w ciągu 60 dni wzbogacając dodatkiem w ilości 0,1% wagowych. Grupa sprawdzianowa, składająca sią z 3600 kur, otrzymała karną bez dodatku. Określano wagą z co 20 kur i śmiertelność /tabela 1/ .
Tabela 7 Próby skarmiania kur
1 4 « 1 t I Ozieó: 1 f 1 10 20 30 40 50 60
Waga w grupie badanej /9/ 1 1 1 34 209 568 1110 1590 2001 2090
1 1 8 Waga w grupie sprawdzianowej /9/ 1 1 1 39 246 550 1100 1510 1890 1990
1 _1
Wynika z tego zuZycie karmy /kg/ na 1 kg wagi w grupie sprawdzianowej równe 2,27 i w grupie sprawdzianowej równe 2,65. śmiertelność w grupie badanej była równa 4,9%, w grupie sprawdzianowej zaś 7,7%. Polepszone wykorzystanie karmy odpowiada zaoszcządzeniu około 15% karmy.
Przykład III. 10 kg droZdZy prasowanych /Seccharornyces cerevisiae/ chłodzi sią w odpowiednim urządzeniu cUodniczym do temperatury poniżej -13°C i w ciągu okoto 4 godzin kondycjonuje w tej niskiej temperaturze. Nastąpnie do tego produktu dodaje sią 500 ml wodnej zawiesiny, zawierającej 15 g fruktozy i sacharozy, 40 g subtelnie rozdrobnionego kwasu krzemowego /SiO^, 50 g preparatu z przykładu II /podstawowy produkt stały/, 15 g parabe nów /4hhydrkSsybenzoesanói alkilowych/ i 160 g soli kuchennej mieszaniną tą najpierw starannie razem miesza si.ę i. do^owadza do temperatury ^kojowej /około 23°C/, przy czym tworzy sią ciekła mieszanina, w której cząstki drożdży łatwo przechodzą w stan zawiesiny. Mieszaniną tą następie ocjrzewa sią szybko w taki splsób, Zeby wzrost trm^βΓ^^uty odpowtodał oltoto 5°C/minutą. Mieszaniną tą stale mieszając o^zewa sią do trm^er^^ury 45 - 75°C. Tworzy si.ą rztoto zawiesina drożdży o cząstkach łatwo dających sią ponownie przeprowadzić w stan zawiesiny, która jako całkowity roztwór lub też jako produkt z odwirowania /supernatant lub pozostałość z ldwirowaaia/ współczynnik zwiąkszenia oddychania równy 4,8.
Przykład IV. 10 kg drożdży prasowanych /Saccharomyces cerevisiae/ doprowadza sią to temperatury ponitoj -15°C. Po upływie 24 godzin dodaje sią: 10 g earαbenri ^-hydoossybenzoesanów alkUowych/, 5 g kwasu sortowego, 170 g NaCl Jako środek konserwujący i 10 g sacharozy, 15 g SiO?, 10 g glikolanu celulozy i 0,8 mg pierwiastków śladowych /Mn, Co, Zn, Mg/. Mieszaniną tą po osiągniąciu temperatury pokojowej /25°C/, mieszając wprowadza sią do opisanej w przykładzie I aparatury laserowej i poddaje obróbce promieniowaniem laseliwym tak długo, aż cząstki drożdży skurczą sią do przynajmniej 5C% swej średnicy sprzed obróbki laserowej Nastąpnie nadal mieszając ogrzewa sią Jeszcze krótkotrwale /co najwyżej w ciągu 20 minut/ az do os^ągni.ącia trmρeraturs 40 - 80°c.
Produkt ten wykazywał współczynnik zwiększenia oddychania równy 5,1. Po konserwowaniu zawiesiny suszy sią Ją rozpylow! Produkt tan można stosować w przykładach I - III Jako b^^zycza^ w elc-lyną przekształcone drożdże wyjściowe. Otrzymany produkt służył w próbach skarmiania, przy czym jogo czynność zwiąkszająca przemianą maeri była porównywalna z takąż
157 500 czynnością z przykładu II, jeżeli dodatek paszowy testowano na kurach rasy Harvard. W praktyce czynność ta oznacza zauważalny oszczędność paszy 1 silnie skrócony czas skarmiania, co zwłaszcza liczy się w próbach na wielką skalę.
Również w przypadku skarmienia zwierząt futerkowych, takich Jak szynszyle, preparat ten okazał się nadzwyczaj pożyteczny. Po krótkim okresie stosowania tego preparatu owłosienie stało się bardziej gładkie i błyszczęca. Skórki, starszych zwierzęt hodowlanych sę jeszcze zdatne do stosowania, jeżeli zwierzęta te przez pewien czas otrzymywały ten preparat ^tworzony z drożdży.
Przykład V. 500 kg 20% drożdży /Saccharomyces/, tak zwanych 20-tych drożd^y, zadaje się w temperaturze 20°C za poaocę 0,2 kg ρarabenów, 0,03 kg kwasu sortawego, kg NaCl, 0,2 kg sacharozy, 0,5 kg S102> 0,3 kg glikolanu celulozy, 0,5 kg ekstraktu mto· chondriów i 10 ag pierwiastków śladowych i za poaocę urzędzenia o nazwie Ultraturax Jako mieszadła miesza się tak energicznie, żeby mieszanina ta szybko ogrzała się. W temperaturze 55 - 60°C miesza się nadal w cięgu około 10 minut, po czym chłodzi. W próbach skarmiania uzyskano wyniki testowe porównywalne z wynikami z przykładów I 1 II.
Przykład VI. 5° kg 2O-tych drożdży /Saccharoayces/ w temperaturze 2O°C zadaje się za pornocę 20 g glukozy i fruktozy /10:1/, 40 g alginianu, 30 g ekstraktu mitochondriów, 180 g NaCl, 10 g askorbinianu sodowego jako środka konserwujęcego 1 1,5 mg pierwiastków śladowych i miesza za pomocę aie/zedłe o nazwie Ultraturax w warunkach równoczesnej z^nnfikacji, przy czym mieszanina ta bez doprowadzania ciepła z zewnętrz ogrzewa się do temperatury 55°C 1 utrzymuje si.ę Ję krótkotrwalm, lecz nie dłużej niż w ciągu 20 minut, w tempera turze 52 - 60°C. Ochłodzonę mieszani^ stosowano w cel.u zwiększenla produkkji Jogurtu, przy czya do hodowli dodawano mnnej niż 0,1% wagowego, odniesionego do masy całego środowiska. Preparat ten był też przydatny dla innych produkcji w przemyśle mleczarskim, ponieważ przyspiesza on wzrost odpowiedniej mikroflory.
157 500
Wilgotność skóry (%)
- z przekształconymi w pochodne drożdżami (wynalazek)
...----bez przekształconych w pochodne drożdży
Fig. 2
157 500
Fig. 1
Zakład Wydawnictw UP RP. Nakład 90 egz.
Cena 5000 zł.

Claims (8)

  1. Zastrzeżenia patentowe
    1· Sposób wytwarzania preparatu z pochodnych pt bitfizycznym przekształceniu materiałów komórek Ascomycetes lub Schizomycetes o czynności wzmagającej oddychanie, przeznaczonego do pasz, znamienny tyra, że koaarki Ascomycetes lub Schizoaycetes, ewen^^lnie wobec dodatku ciekłego nośnika, poddaje się tak długo obróbce na drodze oddziaływania promieniowania laserowego, liofilizacji, działania ultaedżwiękowymi, krótkotrwałego doprowadzenia ciśnienia i/uub ost^izy, aż kommrki te zostanę przekształcone w masę łatwo dajęcę się ponownie przeprowadzić w stan zawiesiny i zawiesinę tych skurczonych komórek poddaje się krótkotrwałej obróbce intensywnym wstrząsem cieplnym, aż utworzone wskutek feraenZacyŁ gazy ulotnią się.
  2. 2. Sposób według zastrz.1, znamienny tym, że drożdże wyjściowe, twenzualnie wobec dodatku ciekłego nośnika, poddaje się tak długo obróbce na drodze oddziaływania promieniowania laserowego, liofilizacji, działania ultaadżwiękami, krótkotrwałego doprowadzenia ciśnienia i/lub osmmoizy, aż te komórki drożdżowe zostaną przekształcone w masę łatwo dającą się ponownie przeprowadzić w stan zawiesiny i zawiesinę tych skurczonych komórek drożdżowych poddaje się krótkotrwałej obróbce intnπzywπym wstrząsem cieplnym, aż utworzone wskutek fermennacci gazy ulotnią się.
  3. 3. Sposób według zastrz.l albo 2, znamienny tyra, że obróbkę cieplną komórek prowadzi się nie dłużej niż w ciętju 25 minut w tta^βr^^urct powyżej 40°C.
  4. 4. Sposób według zastrz.l albo 2 albo 3, znamienny tyra, że obróbkę cieplną przeprowadza się bezpośrednio gazem gorącym, prowadzonym w przeciwprądzie.
  5. 5. Sposób według zastrz.l albo 2 albo 3 albo 4, znamienny tym, że biofizyczne rozdrabnianie komórek prowadzi się równocześnie z krótkotnwgZaa intzszy#nya działaniem ciepła.
  6. 6. Sposób według zastrz.l albo 2 albo 3 albo 4 albo 5, znamienny tyra, że jako ciekły nośnik dodaje się wodny roztwór lub zawiesinę, które zawierają i/ 0,i - 05% biofizyc^ie w pochodne przekształconych drożdży, otrzymanych z drożdży, które służyły jako maTeriał wyjściowy, l/lub z innych drożdży i 0,02 - 0,4% ekstraktu yhozdzlosoarw, 2/ 0,3 - 5^ gl^ko^s^nu celulozy, wysokodyspersyjnego pirogenicznego kwasu krzemowego o zawartości więcej niż 99,8% i SiOg i o średnicy 7-25 nm, karagenu, tragakantu lub podobnych wypa^ia^y,
    3/ 0,0i - 0,% zdolnych do fermentacci mono- i/uub dwusacharydów, 4/ środki konserwujące, takie jak estry alkioowe kwasu 4—hydrokeybenzoesowego /parabeny/ i sole, takie jak sól kuchenna, w wystarczającym stężeniu, 5/ pierwiastki śladowe, takie jak Mn, Co, Zn, Mg, korzystnie w postaci siarczanów lub glukonianów.
  7. 7. Sposób według zastrz.l albo 2 albo 3 albo 4 albo 5 albo 6, znamienny t y m, ze jako wyjściowy MierlLał komórkowy stosuje się szczep z rodziny Sacyharomyzytaceae.
  8. 8. Sposób według zastrz.l albo 2 albo 3 albo 4 albo 5 albo 6 albo 7, znamienny tym, że drożdże suszone o zawartości 95 - 98% suchej substancci drożdżowej poddaje się obróbce razem z 2- do 4-krotną ilością ciekłego nośnika.
    157 500
PL1988271547A 1987-04-02 1988-03-31 Method of obtaining a preparation from derivatives of biophysically transformed materials of ascomycetes or schizomycetes cells PL157500B1 (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE19873711054 DE3711054A1 (de) 1987-04-02 1987-04-02 Biophysikalisch derivatisiertes hefepraeparat, verfahren zu dessen herstellung und dieses hefepraeparat enthaltende futtermittel und pflanzenwuchsstoffe

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL271547A1 PL271547A1 (en) 1990-01-22
PL157500B1 true PL157500B1 (en) 1992-06-30

Family

ID=6324678

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL1988271547A PL157500B1 (en) 1987-04-02 1988-03-31 Method of obtaining a preparation from derivatives of biophysically transformed materials of ascomycetes or schizomycetes cells

Country Status (11)

Country Link
EP (1) EP0286033A3 (pl)
JP (1) JPS63251079A (pl)
AU (1) AU1577188A (pl)
DD (1) DD282706C4 (pl)
DE (1) DE3711054A1 (pl)
DK (1) DK483789D0 (pl)
HU (1) HU208040B (pl)
PL (1) PL157500B1 (pl)
PT (1) PT87141B (pl)
WO (1) WO1988007580A2 (pl)
YU (1) YU65588A (pl)

Families Citing this family (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE59607409D1 (de) * 1995-05-10 2001-09-06 Thymopharma Ag Luzern Niedermolekularer wirkstoffextrakt aus hefen und verfahren zu seiner herstellung
DE19517020A1 (de) * 1995-05-10 1996-11-21 Thymopharma Ag Niedermolekularer Wirkstoffextrakt aus Hefen und Verfahren zu seiner Herstellung
US6013485A (en) * 1996-05-07 2000-01-11 Thymopharma, Ag Low-molecular weight active ingredient extract from yeasts and method for producing it
DE19624476C2 (de) * 1996-06-19 2001-01-04 Randolph Riemschneider Wasserlösliche Organextrakte mit verbessertem biochemischen Wirkungsgrad, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung
DE10105308A1 (de) * 2001-02-02 2002-08-14 Nutrinova Gmbh Sorbinsäure als wachstumsstabilisierender Zusatz zu Futtermitteln für die Nutztieraufzucht
DE10105305A1 (de) * 2001-02-02 2002-08-14 Nutrinova Gmbh Sorbinsäurepräparat als Futtermittelzusatz in der Nutztieraufzucht
DE10105347A1 (de) * 2001-02-05 2002-08-22 Nutrinova Gmbh Sorbinsäurepräparat enthaltend Probiotika als Futtermittelzusatz in der Nutztieraufzucht
EP1478242B1 (en) * 2002-02-21 2014-04-30 Societe Des Produits Nestle S.A. Pet food composition for skin photoprotection
FR2829025A1 (fr) * 2002-03-21 2003-03-07 Oreal Utilisation de microgels de polysaccharides, en tant qu'agents tenseurs de la peau, dans des compositions cosmetiques
DE102004023612A1 (de) * 2004-05-10 2005-12-01 Helmut Meusel Verwendung von microbiellen Mischbiozönosen zur Behandlung von Entzündungen der Haut
WO2017095946A1 (en) 2015-11-30 2017-06-08 Flagship Pioneering, Inc. Methods and compositions relating to chondrisomes
DE202016002366U1 (de) 2016-04-15 2016-05-13 Siegenia-Aubi Kg Beschlag zweier zumindest hebbarer und verschiebbarer Flügel von Fenstern oder Türen
CN110200899B (zh) * 2019-07-05 2022-03-25 欧诗漫生物股份有限公司 一种防腐剂及其制备方法和应用

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2636823A (en) * 1947-11-10 1953-04-28 Schenley Ind Inc Method of making biosynthesized product
US4284552A (en) * 1978-04-26 1981-08-18 Research Corporation Process for the preparation of CoA-SPC from Bakers' yeast
JPS5723520A (en) * 1980-07-14 1982-02-06 Tokyo Jido Kikai Seisakusho:Kk Conveyor
CH651063A5 (de) * 1981-05-14 1985-08-30 Elkawi Ag Verfahren zur gewinnung anaboler, atmungsfoerdernder, niedermolekularer wirkstoffe fuer prophylaktische, therapeutische, zell- und gewebekulturtechnische zwecke.
IT1155422B (it) * 1982-12-10 1987-01-28 Dox Al Italia Spa Procedimento per la preparazione di una coltura integrale di cellule di saccharomyces cerevisiae
CH654210A5 (it) * 1983-05-20 1986-02-14 Hasunor Ag Procedimento per ottenere preparati metabolicamente attivi ottenuti da lievito di qualsiasi tipo.
DE3341840C1 (de) * 1983-11-19 1985-05-30 Strath-Labor GmbH, 8405 Donaustauf Verfahren zur Anreicherung therapeutisch wirksamer Substanzen in Hefe
JPS61236727A (ja) * 1985-04-12 1986-10-22 Advance Res & Dev Co Ltd 抗う蝕乃至抗菌周症剤

Also Published As

Publication number Publication date
HU208040B (en) 1993-07-28
JPS63251079A (ja) 1988-10-18
PT87141B (pt) 1992-07-31
DD282706A5 (de) 1990-09-19
AU1577188A (en) 1988-11-02
DK483789A (da) 1989-10-02
DE3711054A1 (de) 1988-10-13
HUT57269A (en) 1991-11-28
DE3711054C2 (pl) 1990-06-13
WO1988007580A3 (en) 1988-11-17
EP0286033A3 (de) 1989-01-04
DK483789D0 (da) 1989-10-02
EP0286033A2 (de) 1988-10-12
PL271547A1 (en) 1990-01-22
PT87141A (pt) 1988-04-01
WO1988007580A2 (en) 1988-10-06
DD282706C4 (de) 1992-02-27
YU65588A (en) 1990-06-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
PL157500B1 (en) Method of obtaining a preparation from derivatives of biophysically transformed materials of ascomycetes or schizomycetes cells
US6858212B2 (en) Water-soluble yeast extract produced by adding peroxide to growing yeast cells
Niwa et al. The ratio of lipidperoxides to superoxide dismutase activity in the skin lesions of patients with severe skin diseases: an accurate prognostic indicator
KR101360760B1 (ko) 전복 발효추출물 및 이를 함유하는 피부화장료
JP3678449B2 (ja) 米からの水分保持能改善剤
JP3249844B2 (ja) 皮膚化粧料
Lampen et al. Effect of nystatin on the utilization of substrates by yeast and other fungi
EP0433304A1 (en) Means and method for increasing skin respiration
CN116509766B (zh) 一种具有抗氧化、控油和抗皱功效的绿茶共生发酵液及其制备方法与应用
DE2304073C3 (de) Verfahren zur Herstellung von schwarzem Tee
DK167225B1 (da) Fremgangsmaade til fremstilling af en hel saccharomyces cerevisiae cellekultur
KR20200054590A (ko) 미강 발효 고형분을 유효성분으로 함유한 피부 장벽 강화용 화장료 조성물
EP0065246B1 (de) Verfahren zur Gewinnung anaboler, atmungsfördernder, niedermolekularer Wirkstoffe für prophylaktische, therapeutische, zell- und gewebekulturtechnische Zwecke
KR101925635B1 (ko) 표고버섯 크리스타 자극을 통한 생장속도 향상을 위한 혼합조성물
Bergenholtz et al. The effect of diphenylhydantoin upon the biosynthesis and degradation of collagen in cat palatal mucosa in organ culture
KR20010087699A (ko) 감마-아미노낙산의 함량이 높은 동충하초의 재배방법
Majumdar et al. Effect of tannic acid on activities of certain digestive enzymes and alkaline phosphatase in intestine and glucose absorption in adult chickens
KR20220146917A (ko) 카렌듈라 꽃잎 연화물을 신규균주로 발효시킨 발효물을 유효성분으로 함유하는 항산화, 항염증 또는 피부 미백용 화장료 조성물
JPH1070960A (ja) セレン含有菌体の用途
EP0208805A1 (de) Verfahren zur Herstellung thallophytischer oder bryophytischer Zytorrhysate, danach hergestellte Chemizytorrhysate und deren Verwendung zur Nährstoffergänzung
RU2743370C1 (ru) Способ повышения биологической доступности силосованных кормов
KR0173106B1 (ko) 소맥 배아를 첨가한 키틴질의 숙성 토하젓 제조방법
KR20080078371A (ko) 뽕잎추출물을 이용한 누에 동충하초 균사체 배양액의 피부미백용 화장품 원료
KR20250126268A (ko) 항염증 활성이 향상된 꾸지뽕 열매 발효 추출물의 제조방법 및 이를 통해 제조된 항염증 활성이 향상된 꾸지뽕 열매 발효 추출물
RIMINGTON N-Acetylgiucosaminidase in Commercial Taka-diastase Preparations. By