PL147734B1 - Method of obtaining new active polysaccharides capable of lowering trigliceride level - Google Patents

Description

twórczych drobnoustrojów myszom /w wieku 18 tygodni, samce, srednia waga 30 g, 10 myszy w grupie/. Szczury i myszy hoduje sie w ciegu 8-12 tygodni. Nastepnie z tetnicy brzusznej tych zwierzet pobiera sie próbki tetniczej krwi, z których za pomoce wirowania oddziela sie surowice. Poziom trigli- cerydu okresla sie przy uzyciu aparatu Triglyceride TG WAKO A^ako Dunyake Co.,Ltd., metode acetyloacetonowe/.Otrzymane wyniki zestawia sie w tablicy 4. Wartosci zamieszczone w tej tablicy oznaczaje wielkosci obnizenia /%/ poziomu triglicerydu, od wartosci w grupie kontrolnej.6 147 734 w której nie podaje sie próbki badanej substancji. W tablicy 5 przedstawia sie sklad paszy /% wagowe/, które bez ograniczen podaje sie badanym zwierzetom.Tablica 4 1 Zwierzeta , 1 Znormalizowane szczury /12 tygodni/ 1 Znormalizowane myszy /8 tygodni/ l 1 Myszy wolne od chorobotwórczych 1 drobnoustrojów /8 tygodni/ Wielkosc obnizenia 1 / % / 1 40,5 1 45,1 39,5 1 Tablica 5 Skladnik 1 Kazeina 1 Olej sojowy I Skrobia pszeniczna 1 Skladniki mineralne 1 Mieszanina witamin 1 Sproszkowana bibula filtracyjna % wagowy 20 10 51 4 2 3 2. Zdolnosc obnizania poziomu triglicerydów /2/.Wymienione powyzej próbki preparatów podaje sie per os w dziennej dawce 1 cmw znormalizowanym szczurom /w wieku 18 tygodni, samcom, sredni ciezar ciala 238 g, 15 szczurów w kazdej grupie/ i znormalizowanym i wolnym od chorobotwórczych drobnoustrojów myszom /w wieku 18 tygodni, samcom, sredni ciezar ciala 31 g, 10 myszy w kazdej grupie/ w ciegu 4 tygodni. Poziom triglicerydów we krwi okresla sie sposobem opisanym powyzej.Otrzymane wyniki zestawia sie w tablicy 6.Okreslenia - obciezony cholesterolem i obciazony fruktoze stosowane w tablicy, oznacza dodanie do wymienionej powyzej paszy odpowiednio 1& cholesterolu i zastepienie calej ilosci skrobi pszenicznej fruktoze. W tablicy 6 przedstawia sie wartosci stopnia redukcji /%/ w odniesieniu do wartosci wystepujecych w grupie zwierzet kontrolnych, których nie poddawano dzialaniu preparatów.Tablica 6 1 1 Zwierzeta 1 Myszy wolne od chorobotwórczych drobnoustrojów x 1/ 1 Znormalizowane myszy x 1/ 1 Znormalizowane szczury x 1/ 1 Znormalizowane szczury x 2/ Stopien redukcji 1 / % / 45,4 41,6 43,2 i 42,0 1 x 1/ - pasza obciezona cholesterolem x 2/ - pasza obciezona fruktoze.147 734 9 3* Zdolnosc obnizania poziomu triglicerydów /3/* 3 Próbki fizjologicznych roztworów soli zawierajece 4 mg/cm polisacharydu 3 TRS podaje sie per os w dziennych dawkacn 1 cm dla Jednego szczura w ciegu 2 tygodni, szczurom o podwyzszonym poziomie tluszczy we krwi /zwierzeta 18 tygodniowe, samce, sredni ciezar ciale 250 g, po 5 szczurów w grupie/, którym podaje sie pasze obciezone choleste¬ rolem* Poziom trlglicerydu we krwi oznacza sie sposobem opisanym powyzej* Otrzymane wyniki przedstawia sie w tablicy 7* W tablicy tej zestawia sie wartosci stopnia redukcji poziomu triglicerydów / % / w odniesieniu do wyników uzyskanych w kontrolnej grupie zwierzet* Tablica7 I I | I Zwierzeta i Stopien redukcji I L j ./_*_/ J I Poddane dzialaniu 45,0 I I i I I z grupy kontrolnej , 0 I 4* Wplyw wielkosci dawki* 3 Próbki fizjologicznego roztworu soli, zawierajecego 0,1 ng - 20 mg/cm 3 polisacharydu TRS podaje sie per os w dziennych dawkach 1 cm dla Jednego znormalizowanego szczura /w wieku 6 tygodni, samca, o srednim ciezarze ciala 216 g, po 5 szczurów w kazdej grupie/ w ciegu 4 tygodni* Poziom triglicerydów we krwi oznacza sie sposobem podanym powy¬ zej/ zwierzetom z grupy kontrolnej nie podawano leku* Wyniki zamieszcza sie w tablicy 8* Tablica 8 1 Dawkowanie 1 / mg/szczura/ 1 Grupa kontrolna 1 0,1 1 1 1 10 1 20 1 Stopien redukcji 1 , / srednio w % / 0 1 <10,0 1 17.4 1 43,0 1 48,2 1 5* Toksycznosc ostra* 3 Próbki fizjologicznego roztworu soli /O,5 cm /mysz/ zawierajece 1, 10 i 100 mg polisacharydu TRS podaje sie dootrzewnowe) myszom ICR /w wieku 6 tygodni, samcom, 0 srednim ciezarze ciala 31,6 +, 0,5 g, 10 myszy w grupie/* Obserwacje smiertelnosci myszy przeprowadza sie w ciegu 14 dni* Zwierzetom grupy kontrolnej podaje sie fizjologiczny roztwór soli* Wartosci LD Q oblicza sie zgodnie z metode Behrensa-Karbera i wynosze one powyzej 1 200 mg/kg wagi ciala* Preparat uznaje sie za zasadniczo nietoksyczny po podaniu per os* Polisacharydy wytwarzane sposobem wedlug wynalazku podawane se w formie tabletek lub syropów sporzadzonych w sposób nastepujacy: - 25 mg oczyszczonego polisacharydu TRS jednorodnie miesza sie z 275 mg oczyszczonej sproszkowanej skrobi i z otrzymanej mieszaniny formuje sie tabletki do poda¬ wanie per os* Kazda z tabletek odpowiada dawce 10 komórek poddanych dzialaniu ciepla na 1 kilogram wagi ciala i przeznaczona jest dla doroslych o ciezarze ciala powyzej 50 kg.- Mozna tez polisacharyd TRS jednorodnie mieszac z rozcienczalnikiem takim jak: weglan wapniowy, laktoza i tym podobne, srodkami poslizgowymi takimi jak kwas stearynowy, talk i tym podobne oraz z innymi dodatkami, po czym formowac tabletki do poda¬ wania per os* Zwykle dzienne dawkowanie utrzymuje sie w granicach 0,1 mg - 100 mg polisa¬ charydu TRS na 1 kilogram wagi ciala*10 147 734 - W postaci syropu polisacharyd TRS / 900 mg/ zawiesza sie i rozpuszcza w 3 destylowanej wodzie /30 cm / i slodzi syropem. PL PL PL PL

Claims (2)

1. Zastrzezenia patentowe 1* Sposób wytwarzania nowego, aktywnego polisacharydu, zdolnego do obnizania poziomu triglicerydów o skrecalnosci wlasciwej - /a£/D * + 190,1/ roztwór 1,8% wagowo- objetosciowych/, ciezarze czasteczkowym, oznaczonym metode seczenia przez warstwe zelu 14 000 +_ 3 000, skladzie cukrów, oznaczonym metode chromatografii gazowej /w procentach wagowych/ - glukoza 70,3, ramnoza 13,7, kwas uronowy 16,0, analizie elementarnej C 37,2%, H 6,4?3 i 0 56,4% oraz charakterystyce kwasowo-zasadowej jako polisacharyd obojetny, znamienny tym, ze drobnoustrój nalezecy do rodzaju Streptococcus poddaje sie hodowli w odpowiedniej pozywce hodowlanej, a nastepnie oddziela sie aktywny polisacharyd od wyhodowanych komórek drobnoustroju i/lub z cieczy sklarowanej znad brzeczki hodowlanej. 2. Sposób wedlug zastrz. 1, z n a m i e n n y t y m, ze jako drobnoustrój stosuje sie co najmniej jeden drobnoustrój z grupy obejmujecej Streptococcus faecium, Streptococcus faecalis, Streptococcus avium, Streptococcus bovis, Streptococcus salivarius, Streptococcus durans, Streptococcus mitis i Streptococcus equinus. 3. Sposób wedlug zastrz.1, znamienny tym, ze jako drobnoustrój stosuje sie co najmniej jeden z drobnoustrojów z grupy obejmujacej Streptococcus faecium FERM BP-296, Streptococcus faecalis FERM BP-297, Streptococcus avium FERM 3P-298, Strepto¬ coccus salivarius FERM BP-299, Streptococcus durans FERM BP-300, Streptococcus mitis FERM BP-301, Streptococcus equinus FERM 3P-302. 4. Sposób wedlug zastrz.l, znamienny tym, ze aktywne polisacharydy oddziela sie za pomoce rozrywania komórek drobnoustroju zebranego z brzeczki hodowlanej i nastepnie izolowania z nich frakcji polisacharydowej• 5. Sposób wedlug zastrz.1, znamienny tym, ze aktywne polisacharydy oddziela sie z cieczy sklarowanej z brzeczki hodowlanej. Fig. I 100 F 2.5 5.0 4000 2000 10.0 150 25.0 1000 (cm-1) 400147 734 Fig.

2. E \ a. 200 50 100 (124) 150 (mi) 200 Fig. 3 200 r C7 100 100 150 (ml)147 734 ~ 200r E \ Fig. 4 10CM- 0 50 100 150 (mi) Pracownia Poligraficzna UP PRL. Naklad 100 cgz. Cena 400 zl PL PL PL PL