NO863382L

NO863382L - Fremgangsmaate ved fremstilling av middel med antiphlogistisk, immun-stimulerende og farmasoeytisk virkning.

Info

Publication number: NO863382L
Application number: NO863382A
Authority: NO
Inventors: Leif Wickman; Gabriel Emoedi
Original assignee: Cederroth Nordic Ab; Intex Pharmazeutische Produkte
Priority date: 1985-08-23
Filing date: 1986-08-22
Publication date: 1987-02-24
Also published as: EP0213099A3; ATE79035T1; JPS63222118A; NO863382D0; EP0213099A2; JPS6289626A; EP0212595A3; EP0212595A2; JPH0784388B2; DK400886D0; FI863369A0; FI863369A; US4855284A; EP0212595B1; IS3133A7; DE3686300D1; DK400886A

Description

Foreliggende beskrivelse omhandler fremgangsmåte ved fremstilling av middel med antiflogistisk, immunstimulerende og cytoprotektiv virkning.

Lektiner av planteopprinnelse har allerede vært kjent i 100 år. Ifølge definisjonen er dette proteiner som binder kull-hydrater kraftig, men som ikke har enzymatisk aktivitet. Betegnelsen fytohemagglutinin henviser på at de fleste lektiner oppviser erytrocytisk agglutinerende karakter. Deres cellevekst og celledelende stimulerende virkning er bemerkelsesverdi. Som polyklonale stimulatorer øker lymfosyttisk mitose hos mennesker og dyr, hovedsaklig ved stimulering av T-celler. In vitro kan økningen av inter feronprodukter på-vises hos menneskelige leukocytter.

Den blastogene aktivitet av lymfosyttisk mot fytohemagglutinin blir anvendt ved undersøkelse av immunkompetanse så som f.eks. ved diagnose av maline tumorer (Bioscience, 1984, Vol, 24, nr. 2, s. 95-98), (Lancet, 1978 2. s. 1275).

For biologisk aktivitet av lektiner er toverdige ioner, spesielt Ca<2+>nødvendig. (J. Mol. Biol. 32 453 (1968)).

Bemerkelsesverdi er også den antiflogistisk virkning av lektiner (Japan J. Pharmacol.' 32 139-142 ( 1982)).

Ved siden av proteinen er kullhydratene hvor oligo og poly-saccarider er hyppig forkommende den andre store type mak-romolekyldannende materialgruppe. Fra litteraturen er den antiflogistiske virkning av Arabino-fuco-glukanpolymere kjent. (Chem. Pharm. Bull. 32, 4, 1385-1391 (1984)).

De nevnte forbindelser har imidlertid ved siden av deres fordelaktige biologiske egenskaper også visse uheldige virkninger f.eks under naturlige fremstilte stoffer befinner det seg lektiner som er meget toksiske som f.eks. Ricin/Ricinus communis Lectin, hvis LD^q verdi er i området ca. 1 um/kg hos pattedyr.

Den forbrennings hemmende virkning av slitstoff med poly-glukan innhold og av planteopprinnelse var allerede kjent, imidlertid er det ikke kjent noe legemiddel under disse stoffer. Den forbrenningshemmende virkning til kalsiumioner og andre flerverdige metallioner er også kjent, men her kan det imidlertid oppstå penetreringsproblemer ved biologiske barrierer.

Overraskende ble det funnet at ved fremstilling av fytohemagglutinin konsentrat av spesielle drogeplante kompleks-er blir det erholdt isolering av lektin, polyheteroglykan og kalsium eller magnesium.

Det er videre kjent - A.J.E: Robert og medarbeidere (am. J. Physiol. 245) (Gastrointest. Liver Physiol.) 8 (1983) 6113-6121) at den cytoproteksjonistiske effekt går tilbake på den saltsyre nøytraliserende effekt av en buffer. Det blir beskrevet saltsyre og etanol induserte mavesår og deres hemming ved to tidligere kjente substanser, nemlig cimeti-din og ranitidin.

Disse hydrogen reseptor blokkerende stoffer oppviser imidlertid flere uønskede bieffekter (Adverse Drug React. Bull 1980, Aug. 300) .

Det er også kjent nøytraliserende buffere, f.eks i hovedsak syrenøytraliserende natron.

Det er også kjent såkalt natron med eksempelvis følgende sammensetning:

De syrenøytraliserende produkter har den fordel at de oppviser en umiddelbar eller i det minste en meget raskt virkning. De er meget virksomme ved mageskader forårsaket av for meget syre, f.eks. reflux betinget Oesofagitt. De gir imidlertid som ulempe en pH-forhøyning av magesyren og kan ifølge nedsatt alkaliereserve føre til alkalose.

Den nøytraliserende reaksjon forårsaker i mange tilfeller blandt annet en hyperosmotisk irritasjon og kan videre ved store mengder antacidterapi virke hemmende på absorpsjonen av antibiotika. D.W. Piper, I Kang Drugs 1979, 17, 124; M.P. Dutro og A.B. Amerson Br. Med. J. 1981, 305.

En del av ikke-stereoid inneholdene antiflogistiske substanser innvirker på prostaglandinsyntesen. Man har funnet at denne hemming av prostaglandinsyntesen har en cytoproteksjon. En slik effekt blir også funnet ved slike substanser som oppviser antiulkusvirkning som ikke er virksom over prostaglandinmekanismen som sucralfat.

(Sucralfat I.N. Marks, Drugs 1980, 20, 283).

Den terapeutiske effekt av sucalfat lar seg påvise ved sin bivirkning. Dannelsen av proteinkomplekser hemmer ^-re-sorpsjonen .

(R. Nagashima, T. Hirano, Arzneimittel Forsch. 1980, 30, 80) .

Lektinene har viktige cytoproteksjonistiske og forbrennings hemmende, terapeutiske egenskaper.

Ifølge foreliggende oppfinnelse er det nå fremskaffet en virkestoffkombinasjon som hemmer ødeleggelsen av mageslim-hinnen ved overdreven magesyreproduksjon, dvs. ifølge oppfinnelsen følger en cytoproteksjon hvorved komponentene fremstilt ved kombinasjonen ifølge oppfinnelsen virker på synergistisk måte. Videre viser det seg at middelet fremstilt ifølge oppfinnlsen sammenlignet med tilsvarende kjente substanser har meget lav toksisitet.

Ifølge oppfinnelsen oppnås dette ifølge oppfinnelsen med fremstilling av et middel med følgende sammensetning.

a) Kalsium- og/eller magnesiumkomplekser av fytohemagglu-tininpolyheteroglykaner av plantemessig opprinnelse

inneholdene

- ca. 3 til 25% fytohemagglutinin

- inntil ca. 60% polyheteroglykan og

- kalsium, eventuelt magnesium med et innhold fra 2,0 til 10,0%, og b) et syrenøytraliserende middel med syrenøytraliserende egenskap på ca. 3 M-mol til ca. 30 M-mol.

Den fremstilte kombinasjon ifølge oppfinnelsen med komponenter a) og b) erkarakterisert veden fordelaktig virksom og dessuten syrenøytraliserende virkning. Samtidig blir det med dette middel oppnådd en cytoproteksjonistisk virkning, dvs. at en slik kombinasjon virker til å fremskaffe en umiddelbar og langvarig terapeutisk effekt.

Sammenfattende kan det således bli fastslått at lektinene av plantemessig opprinnelse utøver langvarende terapeutisk virknin , men i alminnelighet viser de ingen direkte virk-ningseffekt og dette spesielt ved refluxoesofagitt.

Den cytoprotektive virkning ved Robert-testen, ved hvilken det ble tilsatt saltsyre-etanol som irriterende middel, viser entydig at syrenøytraliseringseffekten bringer en direkte lindring for pasientene.

Ifølge oppfinnelsen blir således et syrenøytraliserende middel med bufferegenskaper kombinert med en andre kompo nent hvis cytoprotektive virkning kommer i tillegg, dvs. den fordelaktige virkning blir fremskaffet av begge komponentene. Den således oppnådde umiddelbare virkning via buf-fereffekten og den cytoprotektive egenskap gir middelet fremstilt ifølge oppfinnelsen også en 1angtidsvirkende be-skytt el ses effekt.

Ifølge en hensiktsmessig utførelsesform av oppfinnelsen er delen av komponenten a) i blandingen minst 0,1 vekt-%. Den andel kan ved visse anvendelser eksempelvis ligge opptil 35 vekt-% og ligger fortrinnsvis mellom 2-20 vekt-%.

Hensiktsmessig kan fytohemagglutinin-polyheteroglykan-delen til komponenten a) ifølge oppfinnelsen omfatte en eller fler planter av følgende familier: Compositae, Malvaceae, Cucurbitaceae og Gramineae, eksempelvis Tussilago farfara, Althea officinalis Cucurbita pepo convar. Styriaca og Triticum vulgare.

Ifølge en foretrukket utførelsesform av oppfinnelsen er komponentene a) av kombinasjonen særpreget ved det følgende - en molekylvekt av fytohemagglytinin mellom 10.000 og 75.000 Dalton (bestemt ved gelelektroforese), - et infrarødt spektrum ifølge fig. 2 med brede bånd med 3400 og 1750 cm-"'" og et smalt bånd ved 1600 cm"''",

- et ikke-karakteristisk ultrafiolett spektrum,

- et innhold av kalsium eller magnesium på 2,0 til 10,0 %,

- en fos forinnhold på 0,2 til 2 %,

- et innhold av glykaner opptil ca. 60%, derunder Monosac-carider hvilke minst består av 50% galaktose og 10% uronsyrer, - en elementæranalyse med 35 til 45% karbon og 4 til 7% hydrogen, - aske etter forbrenning med følgende sammensetning: 15 til 25% kalium, 0,1 til 2% natrium, 20 til 45% kalsium, eventuelt 5 til 15% magnesium og 3 til 6% fosfor,

- en gløderesistanse på minst 15% (600°C, 2 timer),

- et peptidinnhold på 3 til 25% (bestemt ved aminosyreana-

lyse),

- et peptidinnhold fra 6 til 30% (bestemt ved biuret-reak-s jonen) , - et peptidinnhold som minst består av følgende aminosyrer: asparaginsyre eller asparagin, glutaminsyre eller glutamin, alanin, glycin, lysin, serin, valin og leucin, - et forhold mellom sure og basiske aminosyrer på minst 3:1, - et forhold mellom peptid- og glykaninnholdet på ca. 1:10, og - en cytoprotekiv virkning ved en dose på 400 mg/kg per os hos rotte på minst 40% (bestemt ved alkohol-magesårfor-søket ifølge Robert).

Ifølge oppfinnelsen omfatter den syrenøytraliserende komponent b) kombinasjonen av et fruktsalt som f.eks. vinsyre, sitronsyre, eplesyre eller fumarsyre, en blanding herav og bikarbonater så som natrium- eller kaliumbikarbonat eller en blanding av disse.

Som syrenøytraliserende komponent b) kan imidlertid også magnesiumsalter som magnesiumoksyd, magnesiumhydroksyd og/ eller magnesiumkarbonat anvendes hvorved disse blandinger i tillegg også kan inneholde kalsiumkarbonat.

Videre kan den syrenøytraliserende komponent b) ifølge oppfinnelsen omfatte aluminiumforbindelser så som aluminiumhydroksydgel, aluminiumfosfatgel eller av kombinasjoner med disse geler og magnesiumsalter.

Videre trekk ved foreliggende oppfinnelse fremgår fra de forskjellige særtrekk ifølge etterfølgende krav.

Foreliggende oppfinnelse vil nedenfor ytterligere beskrives ved eksempler og utførelsesformer.

Komponent a) :

Som utgangsmateriale for fremstilling av denne komponent egner spesielt planter fra familiene Compositae, Malvaceae, eksempelvis Tussilago farfara, Althea officinalis seg. De krevede plantedeler blir brukt ved at de blir finkuttet, moset eller malt til en grøt.

I tilfellet ved anvendelse av ferske drogeplanter blir plantene etter maling med vann hvis mengde er 0,8 - 1,0 ganger vekten til drogeplantene fordelaktig behandlet med en bufferløsning med en pH-verdi mellom 8,0 - 9,0 f.eks. fosfat buffer en eller flere ganger ved knaing. Ifølge en annen fremgangsmåte kan det i dette trinn bli anvendt en NaCl med en konsentrasjon på 0,1 - 0,2 mol/liter. I det tilfellet det anvendes tørkede drogeplanter blir plantene ekstrahert med 10 - 20% metanolholdig vann hvis mengde er 30 - 40 ganger i forhold til vekten av drogeplantene og den fremgangsmåte kan eventuelt gjentas flere ganger.

Ekstraksjonen eventuelt behandlingen med bufferløsning blir utført ved romtemperatur men oppvarming kan i enkelte tilfeller være fordelaktig eksempelvis til ca. 40 - 60°C. I løpet av ekstraksjonen kan knaing og langsom omrøring bli foretatt kontinuerlig eller diskontinuerlig variert med oppklaring.

For å erholde et bedre utbytte kan ekstraksjonen gjentas med de gjenværende plantemateriale på samme måte som tidligere angitt. I dette tilfellet blir de enkelte ekstrakter slått sammen for videre opparbeidelse.

Etter avslutning av ekstraksjonen blir de vandige eller vandig alkoholiske ekstrakter av gjenværende fast plantemateriale trukket ut ved filtrering eller sentrifugering.

Kalsium eller magnesiumkompleks av fytohemagglutinin-polyheteroglykan blir deretter felt ut av ekstraksjonsløsningen ved omrøring med vannblandbar alkohol fortrinnsvis med metanol eller etanol av en slik mengde at alkoholinnholdet til løsningen når 75 - 95%. Denne fellingsreaksjon blir gjen-nomført ved 20 - 50°C og eventuelt gjentatt slik at rent produkt kan isoleres. Etter tilsetningen av alkohol blir omrøringen stoppet etter 1-24 timer. Sedimentasjon av presipitatet kan bli isolert ved filtrering eller ved sentrifugering. Eventuelt kan presipitatet vaskes flere ganger med alkohol og derpå tørkes i luft eller i våkum ved 60

°C. Således oppstår et råpreparat hvilket nedenfor også blir betegnet som cutiflog.

I mange tilfeller er det hensiktsmessig å rense det rå cutiflog ved oppløsning i en bufferløsning, fordelaktig i en fosfat-bufferløsning hvis pH ligger i området 8,0 - 9,0 og hvis mengde er 5 - 20 ganger i forhold til vekten av preparatet. Etter avslutning av løsningstrinnet under om-røring ved tilsetning av fast NH^2S04^ s^-^ mengde at konsentrasjonen til løsningen når 20 - 40% med hensyn til NH^2S04eller det lekitinrike preparat cutiflog utav løsningen og kan isolert etter 1-24 timer sedimentasjon via filtrering eller sen tri fugering. Fremgangsmåten kan også bli gjennomført slik at etter oppløsning i alkal-isk buffer blir pH-verdien til løsningen ved tilsetning av en egnet syre innstilt under 7,0 hensiktsmessig mellom 3,0

- 7,0 og deretter kan felling bli utført med NH^2S04*

Fellingen kan bli utført trinnvis og således oppstår cutiflog preparater med forskjellig lekitin-polyglykanforhold. Ønskelig kan presipiteringen bli gjennomført under lett oppvarming f.eks. til 20 - 50°C og på denne måten oppstår et produkt som er enda rikere i fytohemagglytinin.

Også det rå cutiflog preparat innholder kalsium og magnesi-umioner men mengden av ioner varierer avhengig av kvalitet-en til utgangsmaterialene.

Ifølge oppfinnelsen blir jordalkali metallinnholdet til cutiflogpreparåtene innstilt i et separat trinn. Dersom det anvendes rått eller opprenset cutiflogpreparat som et utgangsmateriale blir det først dialysert i en standard Kalle Dialyse Slange (forhandler: Kalle AB, BRD-6200, Wiesbaden-Biebrich) mot ionefritt vann til dets saltinnhold (dvs. dets glødemotstand) faller under 5%. Dialysen foregår ved romtemperatur i strømmende vann, eksempelvis i løpet av 10 til 48 timer. Derpå blir den ytre løsning byttet ut med en 2 - 10% CaCl2, eventuelt en MgCl,, oppløsning og dialys-

en fortsatt til preparatet i slangen oppviser en Ca^<+>eller Mg<2+>konsentrasjonen på 2 - 10%. Til slutt blir en liten del av preparatedelen kontrollert ved analyse. Denne andre dialyse foretas også ved romtemperatur og den ytre løsning strømmer i dette tilfellet også fordelaktig i et tidsrom på 12 - 72 timer.

Eventuelt kan det imidlertid istedet for den andre dialyse blir anvendt en direkte reaksjon med Ca, eventuelt Mg-salt-er. Kompleksdannelsen blir nå utført med løsningen selv eller den av et lite volum egnet løsning eller med det tør-kede via alkoholutfelling eller frysetørkede erholdte produkt. Dersom det blir erholdt et fast produkt blir dette først oppløst i mineralholdig vann noe som blir lettet ved hjelp av omrøring og lett oppvarming. Den vandige løsning blir så behandlet med en vandig, f.eks. 10%-ig kalsium eller magnesiumsalt oppløsning, og til dette egner det seg spesielt kalsiumklorid eller magnesiumklorid oppløsning. For dannelse av kompleksene blir det fortrinnsvis omrørt i en time.

Det dannede kompleks blir isolert ved inndamping av løs-ningen til et lite volum og utfelling ved en ved vannbland alkohol, eksempelvis metanol eller etanol som faststoff og for bedre dannelse av nedfellingen kan blandingen bli oppbevart i en eller 2 timer. Deretter blir utfellingen filtrert av og vasket med samme eller lignende alkohol og tør-ket ved lett forhøyet temperatur og under normalt trykk.

Det blir her henvist igjen til følgende videre fremstil-lingseksempler for komponent a):

EKSEMPEL 1

1,0 kg hvetekli inneholdene hovedsaklig Perikarp, Spermo-derm og Perisperm av Triticum Vulgare eller i Sativum med en maksimal partikkelstørrelse på 2 mm blir blandet med 2,4 liter vann ved 20°C i hvilket tidligere 48 g koksalt (NaCl) har blitt oppløst.

Den dannede masse blir langsomt omrørt i 10 timer og derpå presset ut med en hydraulisk presse.

Pressvæsken har et volum på 2150 ml. Dette blir sentrifugert ved 4000 rpm iløpet av 30 minutter og så dekantert.

Det erholdes 150 g sediment og 2000 ml væske. For adskil-lelse blir det dekantert og det overstående filtrert ved hjelp av et Seitz K5-Filter.

Filtratet blir inndampet ved 45°C og i våkum på 90 Torr til et volum på 300 ml. Til dette konsentrat blir det tilsatt under meget god omrøring 900 ml 96 % etanol. Det oppstår en utfelling som blir oppbevart i 24 timer ved 20°C.

Utfellingen blir avfiltrert og suspendert i 2 x 50 ml 96% etanol, suget av og igjen vasket med 50 ml 96% etanol. Til slutt blir det tørket ved 45°C og normaltrykk.

EKSEMPEL 2

Ifølge eksempel 1 fremstilt 55 g rå cutiflog blir fremstil-let som en masse med 500 ml vann i 3timers blanding i turn-miks ved 20°C og sentrifugert uten opphold.

Ved overstående bestående av 450 ml blir ristet med 450 ml n-butanol og oppbevart.

Butanolfasen viser en brungul farging. Cutifloget befinner seg under den flytende fase.

Igjen blir det sentrifugert hvorved alt butanolet fjernes.

For utfelling blir det tilført 750 ml etanol og alt blir oppbevart 24 timer ved romtemperatur.

Derpå blir det filtrert og utfellingen blir suspendert 3 ganger av 40 ml 96% etanol, vasket og tørket.

EKSEMPEL 3

Utgangsmaterialet består av 300 ml konsentrat fremstilt ifølge eksempel 1.

Det overforstående blir finfordelt og løst opp i en vandig løsning inneholdene 150 g urea og 15 g finpulverisert kalsiumklorid (CaC^).

Den således fremstilte løsning blir under kraftig omrøring tilsatt langsatt langsomt 800 ml 96% etanol og blandingen blir oppbevarti 24 timer. Derpå blir det sintrert og vasket 3 ganger av 30 ml 96% etanol. Etter avsuging blir material-et tørket ved høyst 45°C.

EKSEMPEL 4

Til 1,0 kg ferskt oppsamlet Tussilago farfara (blanding)

(tørrsubstans 20%) blir det tilsatt 560 ml KH2PC>4 buf-ferløsning med pH-verdi 8,5 og malt til en masse i en kna-maskin iløpet av 3 timer ved 40°C og deretter sentrifu-

gert. Pelletten blir suspendert i en 300 ml bufferløsning med en pH-verdi på 8,5 og sentrifugert etter en halv-times omrøring. Pelletten blir omhyggelig vasket. Sitratene blir slått sammen og blandingen blir oppbevart for avleiring av utfellingene iløpet av ca. 4 timer og filtrert over et Seitz K5 Filter. Således oppnår man 1450 ml klart filtrat. Filtratet blir tilført 4350 ml etanol under kraftig omrør-ing og sedimentert iløpet av 8 timer ved romtemperatur. Den vandige moderlut blir dekantert fra presipitatet og resten blir tatt opp i 100 ml vann og frysetørket. Utbyttet er 20,0 g rå cutiflog.

De erholdte 20,0 g rå cutiflog blir løst i 400 ml vann og løsningen blir tilsatt konsentrert NH^OH til dens pH-verdi når 9,0. Blandingen blir omrørt iløpet av 3 timer ved 40°C og den ikkeløslige rest blir separert ved sentrifugering. Til den klare løsning blir det under omrøring tilsatt 160 g (NH^^SO^ og blandingen blir oppbevart for nedfelling iløpet av 12 timer ved 25°C. Den oppbevarte nedfelling blir adskilt ved sentrifugering og vasket med 100 ml aceton under oppdeling. Vekten av den aceton-fuktige lektin-fraksjon er 3,0 g. Produktet blir oppløst i 10 ml 8% vandig NH^OH løsning, og løsningen blir dialysert i en Standard Kalle Dialyseslange iløpet av 12 timer mot strøm-mende ionefritt vann.

Under dialysen synker det uorganiske saltinnhold av preparatet til 3% hvilket kan kontrolleres ved en kvantitativ askeanalyse av en liten aliquott del. Etter å ha oppnådd denønskede uorganiske saltkonsentrasjon blir dialyseopp-løsningen byttet ut med 10% CaCl2og dialysen blir fort satt iløpet av 12 timer. Sluttproduktet blir til slutt isolert som frysetørket. Utbyttet er 0,50 g rent cutiflog.

Komponent b) :

Den syrenøytraliserende komponent b) kan fortrinnsvis bestå av et fruktsalt.

En passende syrenøytraliserende buffer-løsning nedenfor også omtalt som Samarin kan fremstilles som følger:

hvorved den vandige løsning av de ovenforstående komponenter har en pH-verdi på ca. 5,0.

En ytterligere passende sammensetning II av komponentene b) er som følger:

Komponentene b) kan dessuten også bestå av andre kjente syrenøytraliserende blandinger og for dette blir det henvist til de medfølgende krav hvor angitte sammensetninger.

Kombinasjon ifølge oppfinnelsen

0,2 vekt-% av den ifølge eksempel 1 fremstilte komponent a) ble blandet med 4,0 g av den under II ovenfor angitte komponent b) og en vandig løsning av den således erholdte pul-verblanding blir gitt i en daglig dose på 0,5 g pr. dag.

Herved kunne det fastslås at også en lengre tilføring av

denne dose førte ikke til noen toksiske bivirkninger.

Et preparat ifølge oppfinnelsen av ovenfor angitte sammensetning ble også anvendt ved de nedenforstående forsøk.

Herved ble vanlige Wistar-rotter 200-250 g/p rotter i grup-per på hver 10 dyr fastet iløpet av en dag og så behandlet via en magesonde engang med 1 til 2 ml vannfri etanol hvilket inneholdt 0,5% HC1. En time tidligere ble produktet til undersøkelse tilført med hjelp av en magesonde per os.

Etter oppdeling av dyrene ble for utvikling av magelidelser og nølende av de oppståtte slimhud utdemmer målt og sammenlignet med hver av de med produkter ikke-behandlede kon-trolldyr.

Fastslått hemming i %

Det er bemerkelsesverdi at det ved en dosering av kombinasjonen fremstilt ifølge oppfinnelsen på 400 mg/kg per os erholdes en hemming på 66% istedet for den ventede på kun 46,5%.

Det kjente middel Sucralfat ble anvendt i en lignende test som ovenfor som referansesubstans.

Ved en tilsvarende dosering på 400 mg/kg per os blir det kun erholdt en 50% hemming, dvs. med kombinasjonen Samarin/

Sucralfat eller Cutiflog/Sucralfat kunne ingen synergistisk effekt bli funnet.

Ifølge oppfinnelsen fremstilte kombinasjonspreparater ut-merker seg ved en meget liten toksisitet som ved en terapeutisk anvendelse ligger under 1 pr. 100.

Ifølge oppfinnelsen kan det foreliggende kombinasjonspre-parat fremstilles som en blanding av granulater av komponent a) og b) hvorved granulatet som bør pakkes oksydasjons sikkert.

Det foreslåtte preparat ifølge oppfinnelsen kan fordelaktig innføres profylaktisk og også til behandling av gastrointe-stinale lidelser som eksempelvis Gastritis, Ulcus Ventricu-li .

Claims

1. Middel med antiflogistisk, immunstimulerende og cytoprotektiv virkning, karakterisert ved en kombinasjon av a) Kalsium- og/eller magnesiumkomplekser av fytohemaggluti-ninpolyheteroglykaner av plantemessig opprinnelse omfat-tende - ca. 3 til 25% fytohemagglytinin - opptil ca. 60% polyheteroglykan og - kalsium, eventuelt magnesium i et innhold på 2,0 til 10,0%, og b) et syrenøytraliserende middel med en syrenøytraliserende effekt på ca. 3 M-mol til 30 M-mol.

2. Middel ifølge krav 1, karakterisert ved at delen av komponent a) i blandingen minst utgjør 0,1 vekt-%.

3. Middel ifølge krav 2, karakterisert ved at delen av komponent a) utgjør 0,1 - 35 vekt-%, fortrinnsvis 2-30 vekt-%.

4. Middel ifølge krav 1, karakterisert ved at fytohemagglutininpolyheteroglykan-delen til komponent a) omfatter en eller fler planter av følgende familier: Compositae, Malvaceae, Cucurbitaceae og Grmainae, eksempelvis Tussilago farfara, Al thea officinalis, Cucurbita pepo convar. Styriaca og Triticum vulgare.

5. Middel ifølge krav 1, karakterisert ved at molekylvekten til fytohemagglutininet av komponent a) ligger mellom 10.000 og 75.000 Dal ton bestemt ved gelelektroforese.

6. Middel ifølge krav 1, karakterisert ved at glykandelen av komponent a) innholder monosaccharid hvilke minst består av 50% galaktose og 10% uronsyrer.

7. Middel ifølge krav 1, karakterisert ved et peptidinnhold av komponent a) på 3 til 25% bestemt ved aminosyreanalyse.

8. Middel ifølge krav 1, karakterisert ved et peptidinnhold av komponent a) på 6 til 30% bestemt ved biuret-reaksjon.

9. Middel ifølge krav 1, karakterisert ved et peptidinnhold av komponent a) hvilket minst omfatter 75% av følgende aminosyrer: asparaginsyre eller asparagin, glutaminsyre eller glutamin, alanin, glycin, lysin, serin, valin og leucin hvorved forholdet til de sure og basiske aminsyrer utgjør minst 3:1.

10. Middel ifølge krav 1, karakterisert ved at komponent a) har - en molekylvekt av fytohemaglutininet mellom 10.000 og 75.000 Dalton (bestemt ved gelelektroforese), - et infrarødtspektrum ifølge fig. 2 med brede bånd ved 3.400 og 1. 750 cm-"'" og et smalt bånd ved 1.600 cm-"'", - et ikke-karakteristisk ultrafiolett spektrum, - et kalsium, eventuelt magnesiuminnhold på 2,0 til 10,0%, - et forsforinnhold på 0,2 til 2%, - et glykaninnhold på opptil ca. 60%, herunder monosaccarid hvilke minst omfatter 50% galaktose og 10% uronsyre, - en elementæranalyse med 35 til 45% karbon og 4 til 7% hydrogen, - etter forbrenning aske med følgende sammensetning: 15 til 25% kalium, 0,1 til 2% natrium, 20 til 45% kalsium, eventuelt 5 til 15% magnesium, og 3 til 6% fosfor, - en glødemotstand på minst 15% (600°C, 2 timer), - et peptidinnhold på 3 til 25% (bestemt ved aminosyreanalyse), - et peptidinnhold på 6 til 30% (bestemt ved biuret-reak-sjonen), - et peptidinnhold hvilket minst består av 75% av følgende aminosyrer: asparaginsyre eller asparagin, glutaminsyre eller glutamin, alanin, glycin, lysin, serin, valin og leucin, - et forhold mellom det syre og basiske aminosyrer på minst 3:1, - et forhold mellom peptid og glykaninnholdet på ca. 1:10, og - en cytoprotektiv virkning ved en dose på 400 mg/kg per os hos rotte på minst 40% (bestemt ved alkohol-Ulcustesten ifølge Robert).

11. Middel ifølge krav 1, karakterisert ved at den syrenø ytraliserende komponent b) omfatter et frukt-i salt som eksempelvis en blanding av vinsyre, sitronsyre, eplesyre eller fumarsyre og av bikarbonater så som natrium eller kaliumbikarbonat eller en blanding derav.

12. Middel ifølge krav 1, karakterisert ved at den syrenø ytraliserende komponent b) omfatter en kombi nasjon av magnesiumsalter, så som magnesiumoksyd, magnesium hydroksyd og/eller magnesiumkarbonat.

13. Middel ifølge krav 12, karakterisert ved at den syrenøytraliserende komponent b) av blandingen inneholder ytterligere kalsiumkarbonat.

14. Middel ifølge krav 1, karakterisert ved at den syrenøytraliserende komponent b) av blandingen omfatter aluminiumsforbindelser så som aluminiumhydroksydgel, aluminiumfosfatgel eller av kombinasjoner av disse geler med magnesiumsalter.

15. Middel ifølge krav 1, karakterisert ved at den syrenøytraliserende komponent b) omfatter 438 - 622 mg Na 6 - 2 25 mg K 136 - 200 mg HC03 og 1756 - 1886 mg vinsyre blandet med 200 - 400 mg av komponent a).

16. Middel ifølge krav 1, karakterisert ved at den har følgende sammensetning

hvor det etter oppløsning av disse som tørrpreparat av foreliggende blanding i vandig løsning gis i en dose på 1 til 3 ganger pr. dag.