NO323354B1 - Nye spiroheterocykliske forbindelser nyttige som inhibitorer av cystein proteaser samt anvendelse og fremstilling derav og farmasoytisk preparat. - Google Patents

Nye spiroheterocykliske forbindelser nyttige som inhibitorer av cystein proteaser samt anvendelse og fremstilling derav og farmasoytisk preparat. Download PDF

Info

Publication number
NO323354B1
NO323354B1 NO20021207A NO20021207A NO323354B1 NO 323354 B1 NO323354 B1 NO 323354B1 NO 20021207 A NO20021207 A NO 20021207A NO 20021207 A NO20021207 A NO 20021207A NO 323354 B1 NO323354 B1 NO 323354B1
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
cyano
ylcarbamoyl
carboxylic acid
amide
ethyl
Prior art date
Application number
NO20021207A
Other languages
English (en)
Other versions
NO20021207L (no
NO20021207D0 (no
Inventor
Eugene Richard Hickey
Sanxing Sun
Michel Jose Emmanuel
Leah Lynn Frye
Weimin Liu
Tina Marie Morwick
Denice Mary Spero
David S Thomson
Yancey David Ward
Erick Richard Roush Young
Original Assignee
Boehringer Ingelheim Pharma
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Boehringer Ingelheim Pharma filed Critical Boehringer Ingelheim Pharma
Publication of NO20021207L publication Critical patent/NO20021207L/no
Publication of NO20021207D0 publication Critical patent/NO20021207D0/no
Publication of NO323354B1 publication Critical patent/NO323354B1/no

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A61P19/10—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A61P21/04—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system for myasthenia gravis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/02—Drugs for disorders of the nervous system for peripheral neuropathies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/14—Drugs for disorders of the endocrine system of the thyroid hormones, e.g. T3, T4
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D205/00—Heterocyclic compounds containing four-membered rings with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D205/02—Heterocyclic compounds containing four-membered rings with one nitrogen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D205/04—Heterocyclic compounds containing four-membered rings with one nitrogen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D207/10—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D207/14—Nitrogen atoms not forming part of a nitro radical
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D207/10—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D207/16—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
    • C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D211/06—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D211/36—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D211/56—Nitrogen atoms
    • C07D211/58—Nitrogen atoms attached in position 4
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
    • C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D211/06—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D211/36—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D211/60—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D211/62—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals attached in position 4
    • C07D211/66—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals attached in position 4 having a hetero atom as the second substituent in position 4
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D309/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom, not condensed with other rings
    • C07D309/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom, not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D309/08—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom, not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D309/14—Nitrogen atoms not forming part of a nitro radical
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D335/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom
    • C07D335/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)

Description

TEKNISK OPPFINNELSESOMRÅDE
Foreliggende oppfinnelse vedrører nye spiroheterocykliske forbindelser nyttige som inhibitorer av cystein proteraser samt anvendelse og fremstilling derav og farmasøytisk preparat.
Foreliggende oppfinnelse angår følgelig peptidyl spiroheterocykliske, amidino og guanidino forbindelser. Forbindelsene er reversible inhibitorer av cysteinprotease cathepsin S, K, F, L og B og er derfor anvendelige ved behandling av autoimmune og andre beslektede sykdommer. Oppfinnelsen angår følgelig også prosesser for fremstilling av slike forbindelser og farmasøytiske preparater omfattende dem.
BAKGRUNN FOR OPPFINNELSEN
Cathepsin S og cathepsin K er medlemmer av papainfamilien, innen papain-superfamilien av cysteinproteaser. Papainfamilien er den største gruppen av cystein-proteaser og omfatter proteaser så som cathepsiner B, H, K, L, O og S. (AJ. Barrett et al., 1996, Perspectives in Drug Discovery and Design, 6,1). Cysteinproteasene har viktige roller i human biologi og sykdommer omfattende aterosklerose, emfysem, osteoporose, kronisk inflammasjon og immune lidelser (H.A. Chapman et al., 1997, Ann. Rev. Physiol., 59,63). Cathepsin S spiller en nøkkelrolle i regulering av antigen presentasjon og immunitet (H.A. Chapman,. 1998, Current Opinion in Immunology, 10,93; R. J. Riese et al., 1998, J. Clin. Invest., 101,2351; R.J. Riese et al., 1996, Immunity, 4,357). Cathepsin S manglende mus har svekket invariant kjedenedbrytning hvilket resulterer i redusert antigen presentasjon og germinal center dannelse og redusert mottagelighét av kollagen-fremkalt artritt som indikerer det terapeutiske potensiale for en cathepsin S inhibitor (G. Shi et al., 1999, Immunity, 10,197; T.Y. Nakagawa et al, 1999, Immunity, 10,207)
Spesifisiteten av immunresponsen er basert på prosessering av fremmed protein og presentasjon av antigent peptid på celleoverflaten. Antigent peptid er presentert bundet til MHC Klasse II, et heterodimerisk glykoprotein uttrykt i visse antigen-presenterende celler av hematopoetisk linje, så som B-celler, makrofager og dendrittiske celler. Presentasjon av antigen til effektorceller, så som T-celler, er et fundamental trinn i gjenkjennelse av ikke-selv og således initiering av immun-responsen.
Nylig ble det vist at MHC Klasse II heterodimerer er assosiert intracellulært med et tredje molekyl betegnet invariant kjede. Invariant kjede letter Klasse II transport til det endosomale kammer og stabiliserer klasse II protein før belastning med antigen. Invariant kjede reagerer direkte med Klasse II dimerer i antigen-bindende kløft og må derfor bli proteolysert og fjernet eller så kan antigenet ikke bli belasted eller presentert. Aktuell forskning indikerer at invariant kjede blir selektivt proteolysert av cathepsin S, som blir plassert med MHC Klasse II komplekser innen cellen. Cathepsin S nedbryter invariant kjede til et lite peptid, betegnet CLIP, som okkuperer antigen -bindende kløft. CLEP blir frigjort fra MHC Klasse II ved interaksjonen av MHC Klasse II med HLA-DM, et MHC-lignende molekyl som således befrir MHC Klasse II for å assosiere med antigene peptider. MHC Klasse H-antigen komplekser blir deretter transportert til celleoverflaten for presentasjon til T-celler og initiering av immunresponsen.
Cathepsin S tilveiebringer gjennom proteolytisk nedbrytning av invariant kjede til CLIP et fundamental trinn i dannelse av en immunrespons. Følgelig kan hemning av antigen presentasjon via forebygging av invariant kjede nedbrytning til cathepsin S gi en mekanisme for immuno-regulering. Kontroll av antigen-spesifikke immunresponser har lenge vært ønskelig som en anvendelig og sikker terapi for autoimmune syk-dommer. Slike sykdommer omfatter Crohn's sykdom og artritt, så vel som andre T-celle-medierte immunresponser (C. Janeway og P. Travers, 1996, Immunobiology, The Immune System in Health and Disease, Chapter 12). Videre, er cathepsin S, som har bred pH spesifisitet, implisert i en rekke andre sykdommer som involverer ekstra-cellulær proteolyse, så som Alzheimer's sykdom (U. Muller-Ladner et al., 1996, Perspectives in Drug Discovery and Design, 6, 87) og aterosklerose (G.K. Sukhova et al., 1998, J. Clin. Invest., 102,576).
En cathepsin S inhibitor er funnet å blokkere stigningen i IgE titere og eosinofil infiltrering i lungen i en musemodell av pulmonal hypersensitivitet, hvilket indikerer at cathepsin S kan medvirke i astma (R.J. Riese et al., J. Clin. Investigation.1998,101,2351).
En annen cysteinprotease, cathepsin F er funnet i makrofager og er også involvert i antigen procesering. Det har vært postulert at cathepsin F i stimulerte lunge makro-fager og muligens. andre antigenpresenterende celler kan spille en rolte i luftveis- inflammasjon (G.-P. Shi et al., J. Exp. Med., 2000,191,1177).
Cathepsin K, en annen cysteinprotease er funnet å bli meget uttrykt i osteoklaster og å
nedbryte benkollagen og andre ben matriks proteiner. Inhibitorer av cathepsin K er vist å hemme benresorpsjon hos mus. Derfor, kan cathepsin K spille en rolle i osteoklastisk benresorpsjon og cathepsin K inhibitorer kan være anvendelige ved behandling av sykdommer som involverer benresorpsjon så som osteoporose (F. Lazner et al., Human Molekylær Genetics, 1999,8,1839).
Cysteinproteaser er karakterisert ved å ha en cysteinrest ved det aktive sete som virker som en nukleofil. Det aktive sete inneholder også en histidinrest. Imidazolringen på histidin virker som en base for å danne et tiolatanion på det aktive sete cystein, for derved å øke dens nukleofilitet. Når et substrat blir gjenkjent av proteasen, er amid-bindingen som skal bli spaltet rettet mot det aktive sete, hvor tiolatet angriper karbonylkarbonet som danner et acyl-enzym mellomprodukt og spalter amidbindingen, og frigjør et amin. Deretter spalter vannet acyl-enzym arter som regenererer enzymet og frigjør det andre spaltningsprodukt av substratet, en karboksylsyre.
Inhibitorer av cysteinproteaser inneholder en funksjonalitet som kan reagere reversibelt eller irreversibelt med aktivt sete cystein. Eksempler på reaktive funksjonaliteter som er beskrevet (D. Rasnick, 1996, Perspectives in Drug Discovery and Design, 6,47) på cysteinproteaseinhibitorer omfatter peptidyldiazometaner, epoksyder, monofluor-alkaner og acyloksymetaner, som irreversibelt alkylerer cysteintiol. Andre irreversible inhibitorer omfatter Michael akseptorer så som peptidylvinylestere og andre karboksyl-syrederivater (S. Liu et al., J. Med Chem., 1992,35,1067) og vinylsulfoner (J.T. Palmer et al., 1995, J. Med Chem.,38,3193).
Reaktive funksjonaliteter som danner reversible komplekser med det aktive sete cystein omfatter peptidyl aldehyder (R.P. Hanzlik et al., 1991, Biochim. Biophys. Acta., 1073,33), som er ikke-selektive, som hemmer både cystein og serinproteaser så vel som andre nukleofiler. Peptidylnitriler (R.P. Hanzlik et al., 1990, Biochim. Biophys. Acta., 1035,62) er mindre reaktive enn aldehyder og er derfor mer selektiv for de mer nukleofile cysteinproteaser. Forskjellige reaktiv ketoner har også vært angitt å være reversible inhibitorer av cysteinproteaser (D. Rasnick, 1996, ibid). 1 tillegg til reaksjon med nukleofilt cystein til det aktive sete, kan reaktive ketoner reagere med vann, som danner en hemiketal som kan virke som en overgangs tilstand inhibitor.
Eksempler på cathepsin S inhibitorer er rapportert. J.L. Klaus et al. (WO 9640737) har beskrevet reversible inhibitorer av cysteinproteaser omfattende cathepsin S, inne-holdende et etylendiamin. I US-patent nr. 5,776,718 til Palmer et al. er det beskrevet i dets bredeste generiske aspekt en proteaseinhibitor omfattende en målrettende gruppe bundet gjennom en to karbonatomkjede til en elektrontiltrekkende gruppe (EWG). Forbindelsene i foreliggende søknad er strukturelt forskjellige og er således utelukket fra 5,776,718 patent med spesiell utførelsesformer som har uventet større aktivitet enn de nærmeste forbindelser ifølge tidligere teknikk. Andre eksempler på cathepsin S inhibitorer er rapportert av E.T. Altmann et al, (WO 9924460,1999) som beskriver dipeptid nitriler påstått å ha aktivitet som inhibitorer av Cathepsinér B, K, L og S. WO-publikasjonen beskriver ikke noen forbindelser som har en imino eller guanidino gruppe og gir ingen beskrivelse, metoder eller eksempler på spesielle spirohetero-cyliske grupper i P2 stilling.
Ytterligere peptidylnitriler er rapportert som proteaseinhibitorer. For eksempel begge nitriler og ketoheterocykliske grupper er beskrevet av B.En. Rowe et al. (US 5.714.471) som proteaseinhibitorer anvendelige ved behandling av neurodegenerative sykdommer. Peptidyl nitriler er angitt av B. Malcolm et al. (WO 9222570) som inhibitorer av pikornavirus protease. B.J. Gour-Salin (Kan. J. Chem., 1991,69,1288) og T.C. Liang (Arch. Biochim. Biophys., 1987,252,626) har beskrevet peptidylnitriler som inhibitorer av papain.
En reversibel inhibitor presenterer en mer attraktiv terapi enn irreversible inhibitorer. Selv forbindelser med høy spesifisitet for en spesiell protease kan binde ikke-mål enzymer. En irreversible forbindelse kunne derfor permanent inaktivere et ikke-mål enzym, og øke sannsynlighet for toksisitet. Videre, hvilke som helst toksisk effekter som er et resultat av inaktivering av målenzymet ville bli mildnet av reversible inhibitorer og kan bli lett utbedret ved modifisering eller lavere dosering. Til slutt, kan ko<y>alent modifikasjon av et enzym til en irreversible inhibitor potensielt generere en antistoffrespons ved å virke som et hapten.
I lys av det ovenfor, er det et klart behov for forbindelser som reversibelt og selektivt hemmer cysteinproteaser så som cathepsin S og cathepsin K for indikasjoner hvor disse proteaser forverrer sykdom.
KORT BESKRIVELSE AV FORELIGGENDE OPPFINNELSE
Det er derfor et formål med foreliggende oppfinnelse å gi nye forbindelser som beskrevet her som reversibelt hemmer cysteinproteasene cathepsin S, K, F, L og B.
DETALJERT BESKRIVELSE AV OPPFINNELSEN
En foreslått virkningsmekanisme til cysteinproteaseinhibitorer ifølge foreliggende oppfinnelse er at inhibitorene inneholder en funksjonalitet som kan reagere (reversibelt eller irreversibelt) med det aktive sete til cystein. Den reaktive funksjonaliteten er bundet til et peptid eller peptid etterligning som kan bli gjenkjent og akkomodert av regionen av proteasen som omgir det aktive sete. Typen av både den reaktive funksjonaliteten og den gjenværende porsjon av inhibitoren bestemmer graden av selektivitet og potensen mot en spesiell protease.
Gitt likheten til de aktive seter i cysteinproteaser, kan det antas at en gitt klasse av inhibitorer kan ha aktivitet mot mer enn én cysteinprotease. Det kan også forventes at på grunn av strukturelle forskjeller mellom individuelle cysteinproteaser, kan forskjellige forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse ha forskjellig hemmende potens mot forskjellige cysteinproteaser. Således kan noen av forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse også forventes å være mest effektive ved behandling av sykdommer mediert av cysteinproteaser som de hemmer sterkest. Aktiviteten til spesielle forbindelser beskrevet her mot cysteinproteasene cathepsin S, K, F, L og B kan bestemmes ved screeninger beskrevet i delen med tittelen "Vurdereing av Biologiske Egenskaper."
I ét bredt generisk aspekt tilveiebringer oppfinnelsen nye forbindelser med formel (I):
hvor:
Het er piperidinyl, pyrrolidinyl, azetidinyl, tetrahydropyranyl, tetrahydrotiopyranyl, azabicyklooktyl, piperazinyl, som hver er eventuelt substituert med én eller flere R5;
YerO;
Ri er fenyl, pyrrolidinyl, piperidinyl, morfolinyl, azepanyl, piperazinyl, imidazolyl, pyrimidinyl eller pyrazinyl hvor Ri eventuelt er substituert med én eller flere Ra;
Ra er fenyl, piperidinyl, C1 -5 alkoksy
eller Ra er Cl-5-alkanoylamino, Cl-5 alkylsulfonylamino, Cl-5 alkylsulfonylamino-Cl-5-alkyl, cyano eller CF3;
R2 er hydrogen eller Cl-3 alkyl;
R3 er hydrogen eller Cl-5 alkyl hvor R3 eventuelt er substituert med én eller flere Rc;
Rc er Cl-5 alkyl eller C3-7 cykloalkyl og kan videre være substituert med en eller flere Rdl
Rd er en eller flere grupper valgt fra C1 -5 alkyl og C3-6 cykloalkyl;
R4 er hydrogen;
Rs er en eller flere grupper valgt blant hydrogen, Cl-5 alkylkjede, fenyl, naftyl, fenyl Cl-3 alkyl, indanyl, C3-7 cykloalkyl, C3-7 cykloalkenyl, pyrimidinyl, Cl-5 alkanoyl, benzo yl, Cl-5 alkoksykarbonyl, fenoksykarbonyl, benzyloksykarbonyl, karbamoyl hvor nitrogenatomet kan være uavhengig mono eller disubstituert med Cl-5 alkyl, piperidinyl eller Rs er Cl-S alkyltio hvor svovelatomet kan oksyderes til et sulfoksyd eller sulfon, piperidinylkarbonyl, pyridinylkarbonyl eller indolyl eller Rs er amidino eller guanidino, R5 kan videre være eventuelt substituert med én eller flere Re;
Re er C1 -5 alkyl, C3-6 cykloalkyl, fenylsulfonyl, indolyl, Cl -5 alkoksy, fenoksy, pyridinyl, halogen, hydroksy, okso, karboksy, cyano, nitro, benzyloksy, amidino eller guanidino;
X er O og
farmasøytisk akseptable derivater derav.
Ved en annen utførelsesform av oppfinnelsen, tilveiebringes nye forbindelser med formel (I) som beskrevet umiddelbart ovenfor og hvor: Het er piperidinyl, pyrrolidinyl, tetrahydropyranyl eller tetrahydrotiopyranyl hver ring som er substituert med én eller flere Rs;
YerO;
Ri er fenyl, piperidinyl, morfolinyt, piperazinyl, pyrazinyl eller benzoisoksazolyl hvor Ri eventuelt er substituert med én eller flere R»;
R« er fenyl, piperidinyl, C1 -3 alkoksy eller R, er C1 -5 alkanoylamino, C1 -5 alkylsulfonylamino, amino, cyano eller CF3;
R2 er hydrogen;
R3 er C1-5 alkyl hvor R3 eventuelt er substituert med én eller flere Rc;
Rc er Cl -4 alkyl eller C5-6 cykloalkyl, Rc kan videre være eventuelt substituert med én eller flere R<t;
Rd er metyl;
R4 er hydrogen;
Rs er en eller flere grupper valgt blant Cl-4alkylkjede, fenyl, fenylCl-2alkyl, pyrimidinyl, Cl-3 alkanoyl, benzoyl, Cl-4 alkoksykarbonyl, karbamoyl hvor nitrogenatomet kan være uavhengig mono eller disubstituert med Cl-S alkyl, piperidinyl, Cl-3 alkyltio eller pyridinylkarbonyl, Rs kan videre være eventuelt substituert med én eller flere R*;
Re er Cl-3 alkyl, C5-6 cykloalkyl, Cl-4 alkoksy, pyridinyl, halogen, hydroksy, okso eller cyano; og
XerO.
I enda en annen utførelsesform av oppfinnelsen, tilveiebringes nye forbindelser med formel (I) som beskrevet ovenfor og hvor: Ri er fenyl, piperidinyl, morfolinyl, piperazinyl eller pyrazinyl hvor Ri eventuelt er substituert med én eller flere Ra;
R, er fenyl, pipeirdinyl, Cl-3 alkoksy, fenoksy, Cl-3 alkanoylamino, klor eller CRF3;
R3 er metyl, etyl, n-propyl, n-butyl, isobutyl eller propenyl hvor R3 eventuelt er substituert med én eller flere R«;
Rc er metyl, etyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, isobutyl eller tert-butyl, Rc kan videre være eventuelt substituert med én eller flere Rj;
Rd er metyl, metoksy, etoksy, klor, fluor, nitro eller hydroksy;
Rs er metyl, etyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, isobutyl, tert-butyl, fenyl, metoksy-karbonyl, etoksykarbonyl, n-propoksykarbonyl, isopropoksykarbonyl, n-butoksy-karbonyl, isobutyloksykarbonyl, tert-butoksykarbonyl og pyrimidinyl, Rs kan videre være eventuelt substituert med én eller flere R«;
Re er metyl, etyl, n-propyl, isopropyl, metoksy, etoksy, n-propoksy, isopropoksy, n-butoksy, isobutoksy, tert-butoksykarbonyl, brom, klor, fluor, jod, nydroksy, okso eller cyano.
I enda fortsatt en annen utførelsesform av oppfinnelsen, tilveiebringes nye forbindelser med formel (I) som beskrevet ovenfor og hvor: Het er piperidinyl eller pyrrolidinyl;
Ri er N-acetylaminofenyl, klorfenyl, metoksyfenyl, morfolinyl eller pyrazinyl;
R3 er n-butyl, isobutyl, 2,2-dimetylpropyl eller cykloheksylmetyl; og
hvor konfigurasjonen ved stereosenteret definert av R2 og R3 når de er forskjellig og karbonet de er bundet til er definert som L; og
Rs er metyl, propyl, isopropyl, etoksykarbonyl, fenetyl, N,N-dimetylaminoacetyl eller pyrimidinyl.
I enda en ytterligere utførelsesform av oppfinnelsen, tilveiebringes nye forbindelser med formel (I) som beskrevet umiddelbart ovenfor og hvor: Het er piperidin-4-yl eller pyrrolidinyl;
Ri er morfolinyl eller N-acetylaminofenyl;
R3 er 2,2-dimetylpropyl eller cykloheksylmetyl; og
Rs er metyl, propyl, isopropyl, etoksykarbonyl, fenetyl, N,N-dimetylaminoacetyl eller pyrimidinyl.
I et andre bredt generisk aspekt ved foreliggende oppfinnelse, tilveiebringes nye forbindelser valgt fra gruppen bestående av: Morfolin-4-karboksylsyre [l-(4-cyano-l-metyl-piperidin-4-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-amid;
4-acetylamino-A^-[l-(4-cyano-l-metyl-pipeirdin-4-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-benzamid;
4-acetylamino-Af- [ 1 -(4-cyano-1 -metyl-piperidin-4-ylkarbamoyl)-3,3-dimetyl-butyl]-benzamid;
Morfolin-4-karboksylsyre [l-(4-cyano-l-metyl-piperidin-4-ylkarbamoyl)-3,3-dimetyl-butyl]-amid;
Morfolin-4-karboksylsyre [ 1 -(1 -benzyl-4-cyano-piperidin-4-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-amid;
Morfolin-4-karboksylsyre [ 1 -(4-cyano-piperidirt-4-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-amidhydroklorid;
Morfolin-4-karboksylsyre {1 -[4-cyano-1 -(1 -metyl-etyl)-piperidin-4-ylkarbamoyl]-2-cykloheksyl-etyl}-amid;
Morfolin-4-karboksylsyre [ 1 -(4-cyano-1 -fenetyl-piperidin-4-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-amid;
Morfolin-4-karboksylsyre {l-[3-cyano-l-benzyl-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl]-2-cykloheksyl-etyl}-amid;
Morfolin-4-karboksylsyre [1 -(4-cyano-1 -propyI-piperidin-4-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-amid;
Morfolin-4-karboksylsyre [1 -(4-cyano-1 -isopropyl-piperidin-4-ylkarbamoyl)-3,3-dimetyl-butyl]-amid;
Morfolin-4-karboksylsyre [1 -(1 -fenetyl-4-cyano-piperidin-4-ylkarbamoyl)-3,3-dimetyl-butyl]-amid;
Morfolin-4-karboksylsyre [l-(l-n-propyI-4-cyano-pipeirdin-4-ylkarbamoyl)-3,3-dimetyl-butyl]-amid;
Morfolin-4-karboksylsyre [ 1 -(1 -benzyl-4-cyano-piperidin-4-ylkarbamoyl)-3,3-dimetyl-butyl]-amid;
4-acetylamino-^-[l-(l-benzyl-4-cyano-pipeirdin-4-y]karbamoy])-2-cykloheksyl-etyl]-benzamid;
4-acetylamino-Af-[l -(4-cyano-1 -isopropy1-piperidin-4-y!karbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-benzamid;
Morfolin-4-karboksylsyre [1 -(1 -benzyl-3-cyano-piperidin-3-ylkarbamoyl)-2-cykloheksy]-ety]]-amid;
N-[ 1 -(4-cyano-1 -metyl-piperidin-4-ylkarbamoy])-2-cykloheksyl-etyl ]-benzamid;
4-(Acetylamino-metyl)-M[l-(4-cyano-l-metyl-piperidin-4-ylkarbamoyI)-2-cykloheksyl-etyl]-benzamid;
N-[ 1 -(4-cyano-1 -metyl-piperidin-4-ylkaitamoyl>2-cyldoheksyl-etyl]-isonikotinanu'
Pyrazin-2-karboksylsyre [1 -(4-cyano- l-metyl-pirjeridin-4-ylkarbarnoyl)-2-cykloheksyl-€ty1]-amid;
5-klor-tiofen-2-karboksylsyrc [ 1 -(4-cyano-1 -mctyl-piperidin-4-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-ety!]-amid;
4-klor-W-[ 1 -(4-cyano-1 -rnetyl-piperidin-4-ylkart>amoyl)-2-cyklohcksyl-ctyl]-b€nzamid;
N-[ 1 -(4-c<y>ano-1 -met<y>l-<p>i<p>eridin-4-<y>lkarbamo<y>l)-2-c<y>kloheks<y>l-et<y>l]-3-fcnoksy-bcn2amid;
N-[ 1 -(1 -benzyl-3-cyano-pyrorlidin-3-ylkaitamoyl>2<y
Pyra2in-2-karboksylsyrc [ 1 -(1 -bcn2yl-3-cyano-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl)-2-cyklohcksyl-ctylj-amid;
Morfo)in-4-karboksylsyrc {l-[3-cyano-l -(cyk1oheksyl-metyl)-pyrroHdin-3-ylkarbarnoyl]-2-cykloheksyl-ctyl }-amid;
Morfolin-4-karboksy1syrc UK3^yano-l-bcnzyl-pyrrolidin-3-ylkarbanK>yl)-3,3-dirnetyl-butyl]-amid;
N-[ 1 -(1 -benzyl-3-cyanc-pvrrolidin-3-ylkarbar^
Pyrazin-2-karboksylsyre [l-(l-b«nzyl-3-cyanc^pyrroIidin-3-ylkaitamoyl)-3,3-dinietyl-butyl]-amid;
Morfolin-4-karboksylsyre {l-[3-cyarK>1-(l-metyl-«ryl)-pyiTolidin-3-ylkarbamoyl]-2-cykloheksyl-etyl} -amid; -benzyl-3-cyano-pyrrolifl^ benzamid;
^-tl-(l-benzyl-3-cyano-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl)-2-cyk]oheksyl-ety]]-4-metansulfonylamino-benzamid;
JV- [ 1 -(4-cyano-1 -metyl-pipeirdin-4-y]karbamoyl)-3,3-dimetyl-buty 1 ]-benzamid;
A^[l-(4-cyano-l-metyl-piperidin-4-ylkarbamoyl)-2-cykloheksy]-etyl]-4-fluor-benzarnid;
N-[ 1 -(4-cyano-1 -mety 1-piperidi n-4-yl karbamoyl)-3,3-dimetyl-butyl]-4-metansulfonylamino-benzamid;
Morfolin-4-karboksylsyre [ 1 -(3-cyano-l -cykloheksy1-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl)-2-cykloheksy1-etyl]-amid;
Morfolin-4-karboksylsyre [l-(3-cyano-l-etyl-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-amid;
Morfolin-4-karboksylsyre [l-(3-cyano-l-metyl-pyrrolidin-3-y]karbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-amid;
Morfolin-4-karboksylsyre {1-[3-cyano-l -(3-metyl-benzyl)-pyrrolidin-3-ylkarbamoy1]-2-cykloheksyl-etyl} -amid;
Morfolin-4-karboksylsyre {l-[3-cyano-l-(2-metyl-pent-2-enyl)-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl]-2-cykloheksyl-etyl }-amid;
Morfolin-4-karboksylsyre {1 -[3-cyano-l -(lH-indol-3-ylmetyl)-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl]-2-cykloheksyl-etyl }-amid;
Pyrrolidin-1 -karboksylsyre [1 -(1 -benzyl-3-cyano-pyrro]idin-3-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyI-etyl]-amid;
Morfolin-4-karboksylsyre [ 1 -(3-cyano-1 -cykloheksylmetyl-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl)-3,3-dimetyl-butyl]-amid;
Morfolin-4-karboksylsyre [1 -(3-cyano-l -isobutyl-pyrrolidin-3-ylkarbamoy l)-2-cykloheksy 1-etyl]-amid;
Morfolin-4-karboksylsyre [1-(3-cyano-1-isopropy l-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl)-3,3-dimetyl-butyl]-amid;
Morfolin-4-karboksylsyre [ 1 -(3-cyano-1 -isobutyl-pyrrolidin-3-ylkarbamoyI)-3,3-dimetyl-butyl]-amid;
MorfoHn-4-karboksylsyre {1 -[3-cyano-l -(1 -etyl-propyl)-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl]-2-cykloheksyl-etyl }-amid;
Morfolin-4-karboksylsyre {1 -[3-cyano-1 -(1 -etyl-propyl)-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl]-3,3-di metyl-butyl} -amid;
Morfolin-4-karboksylsyre [1 -(3-cyano-l -fenetyl-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-amid;
Morfolin-4-karboksylsyre [l-(3-cyano-l-cyklopropylmetyl-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-amid;
Morfolin-4-karboksylsyre [1 -(3-cyano-l -metyl-piperidin-3-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-amid;
Morfolin-4-karboksylsyre [l-(l-benzy]-3-cyano-azetidiri-3-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-amid;
Morfolin-4-karboksylsyre [1 -(3-cyano-l -propyl-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl)-3,3-dimetyl-butyl]-amtd;
Morfolin-4-karboksylsyre [1 -(3-cyano-1 -propyl-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-amid;
Morfolin-4-karboksylsyre {1 -[3-cyano-1 -(Jrans-4-metyl-cykloheksyl)-pyrrolidin-3-yl karbamoyl]-2-cykloheksyl-etyl} -amid;
Morfolin-4-karboksylsyre [1 -(3-cyano-l -cyklopentyl-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl)-3,3-dimetyI-butyl]-amid;
Morfolin-4-karboksylsyre [ 1 -(3-cyano- l-isobutyI-piperidin-3-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-amid;
Morfolin-4-karboksylsyre [1 -(3-cyano-1 -cyklopentyl-pyrro1idin-3-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-amid;
Morfolin-4-karboksylsyre [1 -(3-cyano-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-amid;
Moifolin-4-karboksylsyre {l-[3-cyano-l-(frarts-4-metyl-cykloheksyl)-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl3-3,3-dimetyl-butyl }-amid;
Morfolin-4-karboksylsyre [1 -(1 -benzyl-3-cyano-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl)-2-naftalen-2-yl-etyl]-amid;
Morfolin-4-karboksylsyre [1 -(1 -benzyl-3-cyano-pyrrolidin-3-y1karbamoyl)-2-(4-klor-fenyl)-etyl]-amid;
Morfolin-4-karboksylsyre {1 -[3-cyano-l-(5-metyl-tiofen-2-ylmetyI)-pyiToli di n-3-ylkarbamoyl]-2-cykloheksyl-etyl} -amid;
Morfolin-4-karboksylsyre [ 1 -(1 -ben2yl-3-cyano-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl)-3-metyl-but-3-enyl]-amid;
Morfolin-4-karboksylsyre [1 -(3-cyano-1 -cyklopentylmetyl-pyrrolidin-3-y lkarbamoyl)-2-cykloheksyl-ety I]-amid;
MorfoHn-4-karboksylsyre [1-(3-cyano-l-cykloheksylmetyl-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl)-3-metyl-butyl]-amid;
4- k\ or- N-[ 1 -(4-cyano- l-propyl-piperidin-4-ylkarbamoyl)-3,3-dimety]-butyI]-benzamid;
Pyrazin-2-karboksylsyrc [l-(4-cyano-l-propyl-piperidin-4-ylkarbamoyl)-3,3-dimetyl-butyl]-amid;
4,4-dimetyl-2-(2-tiofen-2-yl-acetylamino)-pentansyre(4-cyano-l-propyl-piperidin-4-yl)-amid;
Morfolin-4-karboksylsyre [1 -(1 -benzyl-3-cyano-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl)-3-metyl-butyl]-amid;
Morfolin-4-karboksy Isyre [ 1 -(4-cyano-1 -cykloheksyl -piperidi n-4-ylkarbamoyl)-3,3-di metyl-butyl]-amid;
Morfolin-4-karboksylsyre [2-(4-klor-fenyl)-l -(4-cyano-1 -propyl-piperidin-4-ylkarbamoyl)-etyl]-amid;
Morfolin-4-karboksylsyre [l-(4-cyano-l-propyl-piperidin-4-ylkarbamoyl)-2-(3,4-diklor-fenyl)-etyl]-amid;
Morfolin-4-karboksylsyre [ 1 -(4-cyano-1 -propyl-piperidin-4-yIkarbamoyl)-2-naftalen-2-yl-etyl]-amid;
Morfoli n-4-karboksylsyre [ 1 -(4-cyano-1 -propyl -piperidin-4-ylkarbamoyl)-3-metyl-butyl] - amid;
Morfolin-4-karboksylsyre [1 -(4-cyano-1,2-dimetyl-piperidin-4-ylkarbamoyl)-3,3-dimetyl-butyl]-amid
og de farmasøytisk akseptable derivater derav.
Ved en annen utførelsesform av oppfinnelsen, tilveiebringes farmasøytisk preparat, kjennetegnet ved at det omfatter en farmasøytisk effektiv mengde av forbindelse ifølge kravene 1 eller 6..
I enda en annen utførelsesform av oppfinnelsen, tilveiebringes anvendelse ifølge krav 8, idet den autoimmune sykdom er revmatoid artritt, systemisk lupus erythematosus, Crohn's sykdom, ulcerativ kolitt, multippel sklerose, Guiilain-Barre syndrom, psoriasis, Grave's sykdom, myasthenia gravis, sklerodermi, glomerulonefritt, atopisk dermatitt eller insulin-avhengig diabetes melhtus.
I enda fortsatt en annen utførelsesform av oppfinnelsen, tilveiebringes anvendelse av en forbindelse ifølge krav 1 eller 6, for fremstilling av et farmasøytisk preparat for behandling av Alzheimer's sykdom.
I enda fortsatt en annen utførelsesform av oppfinnelsen, tilveiebringes anvendelse av en forbindelse ifølge krav 1 eller 6, for fremstilling av et farmasøytisk preparat for behandling av aterosklerose eller osteoporose.
I enda en ytterligere utførelsesform av oppfinnelsen, tilveiebringes anvendelse av en forbindelse ifølge krav 1 eller 6, for fremstilling av et farmasøytisk preparat for behandling av astma.
I enda fortsatt en ytterligere utførelsesform av oppfinnelsen, tilveiebringes fremgangsmåte for fremstilling av en forbindelse med formel (I)
hvor Ri, R2, R3, R4, Het og R5 er som definert i krav 1 og Y og X er begge O, kjennetegnet ved at den omfatter: a) omsetning av en aminosyreester (IV), hvor R' er en beskyttelsesgruppe, under egnete reaksjonsbetingelser med en RiC(0)L hvor L er en utgående gruppe: b) fjerning av beskyttelsesgruppen R' fra forbindelsen produsert i trinn a) for å produsere den tilsvarende karboksylsyre; c) omsetning av produktet av trinn b) under koblings-betingelser med et aminonitril som bærer "Het-Rs" vist nedenfor for å produsere forbindelsen med formel (I): I enda en annen utførelsesform av oppfinnelsen, tilveiebringes fremgangsmåte for fremstilling av en forbindelse med formel (I)
hvor R], R2, R3, R4, Het og R5 er som definert i krav 1 og Y og X er begge O,
kjennetegnet ved at den omfatter:
a) omsetning av under koblings-betingelser en beskyttet aminosyre med en beskyttelsesgruppe R' med en nitrilforbindelse som har "Het-Rs": b) fjerning av beskyttelsesgruppen R<*> fra forbindelsen produsert i trinn a); c) omsetning av forbindelsen produsert fra trinn b) med en aktivert syre RjC(Y)L hvor L er en utgående gruppe, for å produsere en nitril med formel (I); En annen utførelsesform av oppfinnelsen tilveiebringer fremgangsmåte for fremstilling av en forbindelse med formel (I) hvor Ri, R2, R3, R+, Het og Rj er som definert i krav 1 og Y og X er begge O, kjennetegnet ved at den omfatter: a) omsetning av ammoniakk med en beskyttet aminosyre som bærer "Het-R5" hvor R" er en beskyttelses gruppe, under egnete koblings-betingelser: b) fjerning av beskyttelsesgruppen R" fra produktet av trinn a) for å produsere forbindelse III c) omsetning av en aminoester med formel (IV) rried RjC(0)L hvor L er en utgående gruppe, i nærvær av en egnet base, for å produsere forbindelse (V); d) hydrolyse av produktet av trinn c) for å produsere karboksylsyre (VI); e) omsetning av under egnet koblings-betingelser, produktet (III) fra trinn b) med produktet (VI) fra trinn d), fulgt av dehydratisering for å produsere nitrilforbindelsen med formel (I). Foreliggende oppfinnelse vedrører videre fremgangsmåte for fremstilling av en forbindelse med formel (I) hvor Ri, R2, R3, R4, Het og R5 er som definert i krav 1 og Y og X er begge O, kjennetegnet ved at den omfatter: a) omsetning av under koblings-betingelser, en aminosyre amidforbindelse som bærer "Het-R5" med en beskyttet aminosyre som bærer grupper R2,R3: b) fjerning av beskyttelsesgruppen R<*> fra forbindelsen produsert i trinn a); c) omsetning av under egnede betingelser produktet av trinn b) med en R]C(0)L forbindelse
hvor L er en utgående gruppe, fulgt av dehydratisering for å produsere en nitrilforbindelse
med formeten(I).
Aktiviteten til spesielle forbindelser beskrevet her mot cathepsin K kan bestemmes uten unødvendig eksperimentering av en fagmann på området i betraktning av fagområdet, rettledning gitt i hele denne beskrivelsen og av screeningene beskrevet i delen med tittel "Vurdering av Biologiske Egenskaper."
Hvilken som helst av forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse som inneholder én eller flere asymmetrisk karbonatomer kan forekomme som racemater og racemiske blandinger, enkel enantiomerer, diastereomer blandinger og individuell diastereomerer. Alle slik isomere former av disse forbindelser er uttrykkelig omfattet av foreliggende oppfinnelse. Hvert stereogent karbonatom kan være i R eller S konfigurasjon hvis ikke på annen måte spesifisert eller en kombinasjon av konfigurasjoner.
Noen av forbindelsene med formel (I) kan eksistere i mer enn én tautomer form. Oppfinnelsen omfatter alle slik tautomerer.
Det skal forstås av en fagmann på området at alle forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse er de som er kjemisk stabile.
Oppfinnelsen omfatter farmasøytisk akseptable derivater av forbindelsene med formel (I). Et "farmasøytisk akseptabelt derivat" angir hvilken som helst farmasøytisk akseptable syre, salt eller ester av en forbindelse ifølge foreliggende oppfinnelse eller hvilken som helst andre forbindelse som, ved administrering til en pasient, kan gi (direkte eller indirekte) en forbindelse ifølge foreliggende oppfinnelse, en farmakologisk aktiv metabolitt eller farmakologisk aktiv residue derav.
For at oppfinnelsen her beskrevet skal bli mer fullstendig forstått, er den følgende detaljerte beskrivelse angitt. Som anvendt her, blir de følgende forkortelser anvendt: BOC eller t-BOC er.tertiær-butoksykarbonyl;
t-Bu er tertiær-butyl;
DMF er di metylformamid;
EtOAc er etylacetat;
THF er tetrahydrofuran;
Ar er argon;
EDC er l-(3-dimetyIaminopropyl)-3-etylkarbodimid-hydroklorid og HOBTer l-hydroksybenzotriazol.
Også, som anvendt her, er hver av de følgende betegnelser, anvendt alene eller sammen med andre betegnelser, definert som følger (bortsett fra hvor det motsatte er angitt): Betegnelsen "alkyl" angir en mettet alifatisk rest inneholdende fra én til ti karbon-atomer eller en mono- eller flemmettede alifatisk hydrokarbonrest inneholdende fra to til tolv karbonatomer. Mono- eller flerumettede alifatisk hydrokarbonrest inneholdende minst én dobbel eller trippelbinding, henholdsvis. "Alkyl" angir både forgrenete og uforgrenede alkylgrupper. Eksempler på "alkyl" omfatter alkylgrupper som er lineære alkylgrupper inneholdende fra éh til åtte karbonatomer og forgrenede alkylgrupper inneholdende fra tre til åtte karbonatomer. Andre eksempler omfatter lavere alkyl-grupper som er lineære alkylgrupper inneholdende fra ett til seks karbonatomer og forgrenede alkylgrupper inneholdende fra tre til seks karbonatomer. Det skal forstås at hvilken som helst kombinasjons angivelse ved anvendelse av et "alk" eller "alkyl" prefix angir analoger i henhold til definisjonen ovenfor av "alkyl". For eksempel angir betegnelser så som "alkoksy", "alkytio" alkylgrupper bundet til en andre gruppe via et oksygen eller svovelatom. "Alkanoyl" angir en alkylgruppe bundet til en karbonyl-gruppe (C=0). Hver alkyl- eller alkylanalog beskrevet her skal forstås å være eventuelt delvis eller fullstendig halogenert.
Betegnelsen "cykloalkyl" angir cyklisk analog av en alkylgruppe, som definert oven-for. Eksempler på cykloalkyl grupper er mettete eller umettete ikke-aromatiske cyklo-alkylgrupper inneholdende fra tre til åtte karbonatomer og andre eksempler omfatter cykloalkylgrupper som har tre til seks karbonatomer. Hver cykloalkyl beskrevet her skal forstås å være eventuelt delvis eller fullstendig halogenen.
Betegnelsen "aryl" angir fenyl og naftyl.
Betegnelsen "halogen" angir en halogenrest valgt fra fluor, klor, brom eller jod. Representative halogengrupper ifølge foreliggende oppfinnelse er fluor, klor og brom.
Betegnelsen "heteroaryl" angir en stabil 5-8 leddet (men fortrinnsvis, 5- eller 6-leddet) monocyklisk eller 7-12 leddet polycyklisk, fortrinnsvis bicyklisk aromatisk hetero-cyklisk gruppe rest. Hver heterocyklisk gruppe består av karbonatomer og fra 1 til 4 heteroatomer valgt fra nitrogen, oksygen og svovel. Den heterocykltske gruppen kan være tilknyttet hvilket som helst atom av cyklusen, som resulterer i dannelsen av en stabil struktur. Eksempler på "heteroaryl" omfatter rester så som furanyl, tienyl, pyrrolyl, oksazolyl, tiazolyl, imidazolyl, pyrazolyl, isoksazolyt, isotiazolyl, oksadiazolyl, triazolyl, tetrazolyl, tiadiazolyl, pyridinyl, pyridazinyl, pyrimidinyl, pyrazinyl, indolizinyl, indolyl, isoindolyl, benzofuranyl, benzotienyl, indazolyl, benzimidazolyl, benztiazolyl, benzoksazolyl, purinyl, kinolizinyl, kinolinyl, isokinolinyl, cinnolinyl, ftalazinyl, kinazolinyl, kinoksalinyl, naftyridinyl, pteridinyl, karbazolyl, acridinyl, fenazinyl, fenotiazinyl og fenoksazinyl,
Betegnelsen "heterocyklisk gruppe" angir en stabil 4-8 leddet (men fortrinnsvis, 5- eller 6-leddet) monocyklisk eller 7-12 leddet polycyklisk, fortrinnsvis bicyklisk heterocyklisk gruppe rest som kan være mettet eller umettet og er ikke-aromatisk. Hver heterocyklisk gruppe består av karbonatomer og fra 1 til 4 heteroatomer valgt fra nitrogen, oksygen og svovel. Den heterocykliske gruppen kan være tilknyttet et hvilket som helst atom av cyklusen, som resulterer i dannelsen av en stabil struktur.
Eksempler på "heterocyklisk gruppe" omfatter rester så som pyrrolinyl, pyrrolidinyl, pyrazolinyl, pyrazolidinyl, piperidinyl, morfolinyl, tiomorfolinyl, pyranyl, tiopyranyl, piperazinyl, indolinyl, azetidinyl, tetrahydropyranyl, tetrahydrotiopyranyl, tetrahydrofuranyl, heksahydropyrimidinyl, heksahydropyridazinyl, l,4,5,6-tetrahydropyrimidiri-2-ylamin, dihydro-oksazolyl, 1,2-tiazinanyl-l,1-dioksyd, l,2,6-tiadiazinanyl-l,l-dioksyd, isotiazolidinyl-l,l-dioksyd og imidazolidinyl-2,4-dion.
Betegnelsene "heterocyklisk gruppe", "heteroaryl" eller "aryl", når forbundet med en annen gruppe, hvis ikke på annen måte spesifisert skal ha samme betydning som gitt ovenfor. For eksempel angir "aroyl" fenyl eller naftyl bundet til en karbonylgruppe (C=0).
Hver aryl eller heteroaryl hvis ikke på annen måte spesifisert omfatter dens delvis eller fullstendig hydrogenene derivat. For eksempel kan kinolinyl omfatte decahydro-kinolinyl og tetrahydrokinolinyl, naftyl kan omfatte dens hydrogenene derivater så som tetrahydranaftyl. Andre delvis eller fullstendig hydrogenen derivater av aryl og hetero-arylforbindelser beskrevet her vil være innlysende for en fagmann på området.
Betegnelsen heterocyklisk gruppe som vedrører "Het" skal forståes å bety en stabil ikke-aromatisk spiroheterocycle, 4-8 leddet (men fortrinnsvis, 5- eller 6-leddet) monocyklisk, 7-12 leddet polycyklisk, fortrinnsvis bicyklisk heterocyklisk gruppe rest som kan være mettet eller umettet eller en C6-C10 brodannet bicyklo hvor ett eller flere karbonatomer eventuelt blir erstattet av et heteroatom. Hver heterocyklisk gruppe består av karbonatomer og fra 1 til 4 heteroatomer valgt fra nitrogen, oksygen og svovel. Den heterocykliske gruppen kan være tilknyttet et hvilket som helst atom av cyklusen, som resulterer i dannelsen av en stabil struktur. Eksempler på "Het" omfatter de følgende heterocykliske grupper: azepanyi, piperidinyl, pyrrolidinyl, azeddinyl, oxepanyl, tetrahydropyranyl, tetrahydrotiopyranyl, tetrahydrofuranyl, oxetanyl, azocanyl, oksocanyl, 1,3-diazocanyl, 1,4-diazocanyl, 1,5-diazocanyl, 1,3-dioksocanyl, 1,4-di oksocanyl, 1,5-dioksocanyl, 1,3-oksazocanyl, 1,4-oksazocanyl, 1,5-oksazocanyl, 1,3-di azepanyi, 1,4-diazepanyl, 1,3-dioxepanyl, 1,4-dioxepanyl, 1,3-oksazepanyl, 1,4-oksazepanyl, l,2-tiazocanyl-l,l-dioksyd, 1,2,8-tiadiazocanyl-1,1 -dioksyd, 1,2-tiaze-panyl-l, 1-dioksyd, 1,2,7-tiadi azepanyi-1,1-dioksyd, tetrahydrotiofenyl, heksahydro-pyrimidinyl, heksahydropyridazinyl, piperazinyl, 1,4,5,6-tetrahydropyrimidinyl, pyrazolidinyl, dihydro-oksazolyl, dihydrotiazolyl, dihydroimidazolyl, isoksazolinyl, oksazolidinyl, 1,2-tiazinanyl-l,1-dioksyd, l,2,6-tiadiazinanyl-l,l-dioksyd, isotiazo-lidinyl-1,1 -dioksyd, imidazolidinyl-2,4-dion, imidazoHdinyl, morfolinyl, dioksanyl, tetrahydropyridinyl, tiomorfolmyl, tiazolidinyl, dihydropyranyl, ditianyl, decahydro-kinolinyl, decahydro-isokinolinyl, 1,2,3,4-tetrahydro-kinolinyl, indolinyl, oktahydro-kinolizinyl, dihydro-indolizinyl, oktahydro-indolizinyl, oktanydro-indolyl, decahydro-kinazolinyl, decahydrokinoksalinyl, 1,2,3,4-tetrahydrokinazolinyl eller 1,2,3,4-tetra-hydrokinoksalinyl, aza-bicyklo[3,2,l]oktan, aza-bicyklo[2,2,l]heptan, aza-bicyklo-[2,2,2]oktan, aza-bicyklo[3,2,2]nonan, aza-bicyklo[2,l,l]heksan, aza-bicyklo[3,l,l]-heptan, aza-bicyklo[3,3,2]decan og 2-oksa eller 2-tia-5-aza-bicyklo[2,2,I]heptan idet den heterocykliske ring er substituert med én eller flere R$. Substituenten Rs er definert ovenfor.
Som anvendt her ovenfor og gjennom hele denne søknaden, angir "nitrogen" og "svovel" hvilken som helst oksydert form av nitrogen og svovel og kvatemisert form av hvilket som helst basisk nitrogen.
For at foreliggende oppfinnelse skal bli mer fullstendig forstått, er de følgende eksempler angitt. Disse eksempler skal illustrere foretrukne utførelsesformer av foreliggende oppfinnelse.
Eksemplene som følger er illustrerende og, som kjent av fagfolk på området, vil spesielle reagenser eller tilstander kunne bli modifisert etter behov for individuelle forbindelser. Utgangsmaterialer anvendt i skjemaet nedenfor er enten kommersielt tilgjengelig eller kan lett fremstilles fra kommersielt tilgjengelige materialer av fagfolk på området.
GENERELLE SYNTESE- METODER
Oppfinnelsen tilveiebringer også fremgangsmåter for fremstilling av foreliggende nye forbindelser. Forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse kan fremstilles ved metoder beskrevet nedenfor. Standard peptidkobling, beskyttelse og avbeskyttelsesreaksjoner (se for eksempel M. Bodanszky, 1984, Practice of Peptide Synthesis, Springer-Verlag) blir anvendt i disse synteser og er inntatt her ved referanse i deres helhet.
FORBINDELSER MED FORMEL (I)
Forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse med formel (I) kan fremstilles ved Metode A som illustrert i Skjema I.
I henhold til Metode A blir en hensiktsmessig beskyttet aminosyre som bærer "Het" latt reagere med ammoniakk under standard koblings-betingelser. Et eksempel på en egnet beskyttelsesgruppe er en f-butoksykarbonyl (BOC) gruppe. Et eksempel på standard koblings-. betingelser ville være kombinereing av utgangsmaterialene i nærvær av et koblingsreagens så som l-(3-dimetylaminopropyl)-3-etylkarbodiimid (EDC)med 1-hydroksybenzotriazol
(HOBT), i et egnet løsningsmiddel så som DMF eller metylenklorid. En base så som N-metylmorfolin kan tilsettes. Dette blir fulgt av avbeskyttelse, hvilket gir aminosyreamid III.
En aminosyreester (IV) som bærer R2, R3 og eventuelt R4 forskjellig fra H blir deretter omsatt med en aktivert syre [RiC(0)L] så som syreklorid (L = Cl) i nærvær av en egnet base så som N,N-diisopropyletylamin for å gi V. Alternativt, kan man anvende karboksylsyren [RiC(0)L,
L = OH] og aktivere ved anvendelse av standard peptid koblings-betingelser, så som EDC og HOBT som beskrevet ovenfor. Hvis R4 er H i V, kan man eventuelt reagerer V med et alkylhalogenid i nærvær av en egnet base så som natriumhydrid, i et egnet løsnings-middel så som DMF eller THF for å gi V hvor R4 er alkyl. Omdannelse til karboksyl-syren tilveiebringer VI. Standard peptid kobling av III og VI, fulgt av dehydratisering av amidet tilveiebringer det ønskede nitril I eller II. Et eksempel på egnete dehydrati-seringsbetingelser er cyanurinklorid i
DMF.
I en variasjon (Metode B) illustrert i Skjema II, blir et aminosyreamid som bærer "Het" koblet med en amin-beskyttende aminosyre som bærer R2 og R3. En egnet beskyttelses-gruppe og koblings-betingelser ville være som beskrevet ovenfor. Avbeskyttelse blir deretter fulgt av omsetning med RiC(0)L (som beskrevet i Metode A). Omdannelse av amidet til nitrilet som ovenfor tilveiebringer I eller II.
Forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse som har formel (1) kan også fremstilles ved Metode C som illustrert i Skjema III.
I denne variasjonen (Metode C) blir et aminonitril som bærer "Het" koblet med en amin beskytten aminosyre som bærer R2 og R3. En egnet beskyttelsesgruppe og koblings-betingelser er beskrevet ovenfor. Avbeskyttelse blir deretter fulgt av omsetning med RtC(0)L som beskrevet ovenfor hvilket gir nitrilet (I/n).
Forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse kan også fremstilles som beskrevet nedenfor i Skjema IV (Metode D).
I en ytterligere variasjon (Metode D) illustrert i Skjema IV, blir en aminosyreester (IV) som bærer R2, R3 og eventuelt R4 forskjellig fra H omsatt med RiC(0)L som beskrevet i Metode A. Omdannelse ril karboksylsyren tilveiebringer VI. Standard pepridkobling av et aminonitril som bærer "Het" med VI tilveiebringer de ønskede nitril (I/II).
Mellomproduktet aminonitril anvendt i Metoder C og D ovenfor kan fremstilles som beskrevet i Skjema V
I denne metoden, blir et keton som bærer "Het" omsatt med et primært amin eller et ammonium-salt, så som ammoniumklorid og et cyanidsalt, så som kaliumcyanid eller natriumcyanid, i et egnet løsningsmiddel, så som vann eller en løsning av ammoniakk i metanol, ved omtrent romtemperatur til tilbakeløpstemperatur.
I hver av metodene beskrevet ovenfor, er nødvendige utgangsmaterialer enten kommersielt tilgjengelig eller kan lett fremstilles av fagfolk på området, for eksempel se: Leung, M.-k.; Lai, J.-L.; Lau, K.-H.-; Yu, H.-h.; Hsiao, J.-J. J. Org. Chem. 1996, 61,4175-4179.
Mee, J. D. J. Org. Chem. 1975, 40, 2135-2136.
Micovic, I. V.; Roglic, G. M.; Ivanovic, M. D.; Dosen-Micovic, L.; Kiricojevic, V. D.; Popovic, J. B. J. Chem. Soc, Perkin Trans. 1,1996, 2041-2050.
Tornus, I.; Schaumann, E. Tetrahedron 1996, 52 , 725-732.
Jadhav, P. K.; Woerner, F. J. Tetrahedron Letters 1995, 36,6383-6386.
Kochhar, K. S.; et al. Tetrahedron Letters 1984, 25,1871-1874.
Fordon, K. J.; Cran, C. G.; Burrows, C. J. Tetrahedron
Letters 1994, 35, 6215-6216.
For at foreliggende oppfinnelse skal bli mer fullstendig forstått, er de følgende eksempler angitt. Disse eksempler skal illustrere utførelsesformer av foreliggende oppfinnelse.
Eksemplene som følger er illustrerende og, som kjent av fagfolk på området, kan spesielle reagenser eller betingelser bli modifisert etter behov for individuell forbindelser. Utgangsmaterialer anvendt i skjemaet nedenfor er enten kommersielt tilgjengelig eller kan lett bli fremstilt fra kommersielt tilgjengelig materialer av fagfolk på området.
SYNTESEEKSEMPLER
EKSEMPEL 1
Morfolin-4-karboksylsyre [l-(4-cyano-l-metyl-piperidiri-4-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-amid
(a) 4-amino-4-cyano-l-metylpiperidin.
En løsning av ammoniumklorid (1,89 g, 35,37 mmol) og kaliumcyanid (2,30 g, 35,37 mmol) ble fremstilt i 50 ml vann. 1-metyl-4-piperidon (1,0 g, 8,84 mmol) ble satt til løsningen og omrørt i 2 dager. Løsningen ble bragt til pH 11 med fast natriumkarbonat og reaksjonsløsningen ble ekstrahert 3 x 100 ml EtOAc. Det organiske laget ble tørket over vannfri Na2SC>4, dekantert og konsentrert til en oransje olje (857 mg). 'H NMR viste at oljen var en 2:1:1 blanding av det ønskede aminonitril, cyanohydrin og utgangs- keton. Den urensede blandingen ble anvendt i neste trinn uten ytterligere rensning.
(b) N-(4-morfolinekarbonyl)-L-cykloheksyl alanin metylester.
Metyl L-p-cykloheksylalanin hydroklorid (1,45 g, 6,54 mmol) ble oppløst i 20 ml DMF og 10 ml Hunig's base ble tilsatt, hvilket ga en klar fargeløs løsning. 4-morfolin-karbonylklorid (1,17 g, 7,85 mmol) ble tilsatt og den resulterende reaksjon ble omrørt ved omgivelsestemperatur i 6 timer. Reaksjonsblandingen ble konsentrert i vakuum og residuet ble tatt opp i 200 ml CH2CJ2 og vasket med 1x100 ml EtOAc og 2x 100 ml saltvann. Det organiske laget ble tørket over Na2S04, dekantert og konsentrert til et halvfast stoff (1,86 g) som ble anvendt i neste trinn uten ytterligere rensning.
(c) N-(4-morfolinekarbonyl)-L-cykloheksylalanin
N-(4-Morfolinekarbonyl)-L-cykloheksylalaninmetylester (1,86 g, 6,23 mmol) ble oppløst i 50 ml MeOH til hvilken ble tilsatt 50 ml THF og 50 ml vann. LiOH monohydrat (2,61 g, 62,3 mmol) ble tilsatt til reaksjonsløsningen og reaksjonen ble overvåket i 5 min og hver 20 min deretter ved anvendelse av 5% MeOH i CH2CI2. Utgangsmaterialet ble oppbrukt etter 2 timer og reaksjonsblandingen ble vasket med 150 ml dietyleter idet det organiske laget ble kastet. Det vandige laget ble bragt til pH 1 méd konsentrert HC1 og produktet ble ekstrahert med 2x100 ml EtOAc. De samlede organiske lag ble tørket over Na2S04, dekantert og konsentrert til hvitt fast stoff skum (1,63 g): 'H NMR (CDC13) 6 8,90-7,90 (br, 1H), 5,05-4,99 (m, 1H), 4,55-4,39 (m, 1H), 3,71-3,62 (m, 4H), 3,50-3,36 (m, 4H), 1,90-0,83 (m, 13H).
(d) Morfolin-4-karboksylsyre[l-(4-cyano-l-metyl-piperidin-4-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-amid
N-(4-Morfolinekarbonyl)-L-cykloheksylalanin (350 mg, 1,23 mmol) ble oppløst i 15 ml DMF. EDC (235 mg, 1,23 mmol) og HOBT (166 mg, 1,23 mmol) ble tilsatt og den resulterende blanding ble omrørt ved omgivelsestemperatur i 20 min i løpet av hvilken tid de faste stoffene ble oppløste. 4-amino-4-cyano-l-metylpiperidin (310 mg 2:1:1 blanding av aminonitril:cyanohydrin:keton, = 1,1 mmol aminonitril) ble oppløst i 5 ml DMF, N-metylmorfolin ble tilsatt til denne løsningen (497 mgs, 4,92 mmol) og den resulterende løsning satt til løsningen av den aktiverte ester. Den resulterende blanding ble omrørt ved omgivelsestemperatur i 16 timer. De flyktige stoffene ble fjernet 1 vakuum og det resulterende residuet ble oppløst i 200 ml EtOAc og vasket sekvensielt med 2x200 ml mettet natriumbi karbonat og 1 x 100 ml saltvann. Det organiske laget ble tørket over vannfri Na2S04, dekantert og konsentrert ti) en tykk olje. Oljen ble renset ved kolonne kromatagrafi på Si02 ved anvendelse av som elueringsmiddel 100% CHjCh til 12% MeOH i CH2C12> hvilket gå det ønskede produkt som et hvitt pulver (225 mg): <!>H NMR (CDCI3) 87,55 (s, 1H), 5,13-5,08 (m, 1H), 4,40-4,20 (m, 1H), 3,77-3,62 (m, 4H), 3,51-3,33 (m, 4H), 2,88-2,55 (m, 2H), 2,53-2,39 (m, 2H), 2,30 (s, 3H), 2,10-0,83 (m, 17H).
EKSEMPEL 2
Morfolin-4-karboksylsyre[l-(4-cyano-tetrahydro-pyran-4-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-amid.
(a) 4-amino-4-cyano-tetrahydropyran.
En løsning av ammoniumklorid (2,12 g, 39,57 mmol) og kaliumcyanid (2,58 g, 39,57 mmol) ble fremstilt i 50 ml vann. Tetrahydropyran-4-on (1,0 g, 9,89 mmol) ble tilsatt til løsningen og omrøring ble fortsatt i 2 dager. Løsningen ble bragt til pH 11 med fast natriumkarbonat og reaksjonsløsningen ble ekstrahert 3 x 100 ml EtOAc. Det organiske laget ble tørket over vannfri Na2S04, dekantert og konsentrert til en klar olje (1,02 g). <l>H NMR viste at oljen var en 7 til 1 blanding av de ønskede aminonitril og cyanohydrin. Den urensede blandingen ble anvendt i neste trinn uten ytterligere rensning. (b) Morfolin-4-karboksylsyre [l-(4-cyano-tetrahydro-pyran-4-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-amid.
N-(4-morfolinekarbonyl)-L-cykloheksyl alanin (350 mg, 1,23 mmol) ble oppløst i 15 ml
DMF. EDC (235 mg, 1,23 mmol) og HOBT (166 mg, 1,23 mmol) ble tilsatt og den resulterende blanding ble omrørt ved omgivelsestemperatur i 20 min i løpet av hvilken tid de faste stoffene ble oppløste. 4-amino-4-cyano-tetrahydropyran (161 mg 7:1 blanding av aminonitril, =1,1 mmol aminonitril) ble oppløst i 5 ml DMF, N-metyl-morfolin ble tilsatt til denne løsningen (497 mgs, 4,92 mmol) og resulterende løsning satt til løsningen av det aktive ester. Den resulterende blanding ble omrørt ved omgivelsestemperatur i 16 timer. De flyktige stoffene ble fjernet i vakuum og det resulterende residuet ble kraftig omrørt i 30 min med 100 ml av en 1 til 1 blanding av vann og mettet natriumbikarbonat, hvilket ga et dunaktig hvitt fast stoff som ble oppsamlet ved filtrering. Det faste stoffet ble vasket med 3x50 ml vann og tørket, hvilket ga det ønskede produkt (210 mg): <*>H NMR (CDC13) 8 7,80 (s, 1H), 5,25-5,15 (m, 1H), 4,41-20 (m, 1H), 3,97-3,62 (m, 8H), 3,50-3,41 (m, 4H), 2,50-2,37 (m 1H), 2,35-2,20 (m, 1H), 2,05-1,88 (m,2H), 1,79-0,75 (m, 13H).
EKSEMPEL 3
4-cyano-4-{3-cyldoheksyl-2-[(mofrolin-4-karbonyl)-arnino]-propionylamino}-piperidin-1-karboksylsyre etylester
(a) 4-amino-4-cyano-piperidin-l -karboksylsyreetylester.
En løsning av ammoniumklorid (31 g, 584 mmol) og kaliumcyanid (7,61 g, 116,8 mmol) ble fremstilt i 250 ml vann. l-(Etoksykarbonyl)-4-piperidon (10 g, 58,4 mmol) ble tilsatt til løsningen fulgt av 50 ml MeOH og omrøring ble fortsatt i 3 dager. Løsningen ble bragt til pH 11 med fast natriumkarbonat (20 g) og reaksjonsløsningen ble ekstrahert med 3 x 250 ml EtOAc. De organiske lag ble samlet, tørket over Na2S04, dekantert og konsentrert til en tykk olje. Oljen ble utgnidd med 500 ml heksan og det resulterende faste stoffet ble oppsamlet ved filtrering (8,3 g). 'H NMR viste at produktet var mer enn 95% rent.
(b) 4-cyano-4-{3-cykIoheksyl-2-[(moifolin-4-karbonyl)-amino]-propionyl-amino}-piperidin-l-karboksylsyreetylester
N-(4-morfolinekarbonyl)-L-cykloheksylalanin (555 mg, 1,95 mmol) ble oppløst i 15 ml DMF. EDC (373 mg, 1,95 mmol) og HOBt (264 mg, 1,95 mmol) ble tilsatt og den resulterende blanding ble omrørt ved omgivelsestemperatur i 20 min i løpet av hvilken tid de faste stoffene ble oppløste. 4-amino-4-cyano-piperidin-l-karboksylsyreetylester (350 mg, 1,77 mmol) ble oppløst i 5 ml DMF og satt til løsningen av den aktive ester fulgt av tilsetning av 2 ml N-metylmorfolin. Den resulterende blanding ble omrørt ved omgivelsestemperatur i 16 timer. De flyktige stoffene ble fjernet i vakuum og det resulterende residuet ble oppløst i 200 ml EtOAc og vasket sekvensielt med 2x200 ml mettet natriumbikarbonat, 1 xl00 ml saltvann. Det organiske laget ble tørket over NazSO*, dekantert og konsentrert til et hvitt, fast stoff. Det faste stoffet ble renset ved kolonnekromatagrafi på Si02 ved anvendelse av som elueringsmiddel 100% CH2CI2 til 5% MeOH i CH2CI2, hvilket ga ti «el forbinde! sen som et hvitt pulver (511 mg): sm.p. 140-143 °C.
EKSEMPEL 4
Morfolin-4-karboksylsyre[l-(4-cyano-l-fenetyl-piperidin-4-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-amid (a) 4-amino-4-cyano-l-fenetylpiperidin ble fremstilt i henhold til metoden fra Eksempel 1, trinn a, ved å starte med l-fenyletyl-4-piperidon. (b) Tittelforbindelsen ble fremstilt ved å starte fra N-(4-Morfolinekarbonyl)-L-cykloheksyl alanin og 4-amino-4-cyano-l-fenetyIpiperidin i henhold til metoden fra Eksempel 2, trinn b, bortsett fra at forbindelsen ble renset ved HPLC ved anvendelse av en 20 x 250 mm C|g revers fase kolonne med metoden 30% acetonitril i vann til 100% acetonitril. MS, m/z 496 = M+l.
EKSEMPEL 5
Morfolin-4-karboksylsyre[l-(l-benzyl-4-cyano-piperidin-4-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-amid
(a) 4-amino-4-cyano-1 -benzylpiperidin ble fremstilt i henhold til metoden fra Eksempel 1, trinn a» ved å starte med l-benzyl-4-piperidon (b) Tittelforbindelsen ble fremstilt ved å starte fira N-(4-Morfolinekarbonyl)-L-cykloheksyl alanin og 4-amino-4-cyano-l -benzylpiperidin i henhold til metoden fra Eksempel 2, trinn b, bortsett fra at forbindelsen ble renset ved HPLC ved anvendelse av en 20 x 250 mm Ctg revers fase kolonne med metoden 30% acetonitril i vann til 100% acetonitril. MS, m/z 482 = M+l. EKSEMPEL 6 Morfolin-4-karboksylsyre [1 -(4-cyano-1 -propyl-piperidin-4-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-amid (a) 4-amino-4-cyano-l -propylpiperidin ble fremstilt i henhold ril metoden fra Eksempel 1, trinn a, ved å starte med l-propyl-4-piperidon. (b) Tittelforbindelsen ble fremstilt ved å starte fra N-(4-Morfolinekarbonyl)-L-cykloheksyl alanin og 4-amino-4-cyano-l-propylpiperidin i henhold til metoden fra Eksempel 2, trinn b, bortsett fra at forbindelsen ble renset ved HPLC ved anvendelse av en 20 x 250 mm Cig revers fase kolonne med metoden 30% acetonitril i vann til 100% acetonitril. MS, m/z 434 M+l. EKSEMPEL 7 4-cyano-4-{3-cykloheksyl-2-[(mofrolin-4-karbonyl)-anu^o]-propionylarnino}-piperidin-1-karboksylsyrebenzylester (a) En løsning av natriumcyanid (1052 mg, 21,5 mmol), ammoniumklorid (1265 mg, 23,65 mmol) og benzyl 4-okso-l-piperidin-karboksylat (5,0 gm, 21,5 mmol), ble fremstilt i 5 M ammoniakk i metanol (8,6 ml, 43 mmol). Løsningen ble bragt til tilbakeløp i 4 timer og deretter fikk avkjøles til romtemperatur. Løsningen ble deretter filtrert og vasket med metanol (100 ml) og filtratet ble konsentrert i vakuum. Den resulterende olje ble tatt opp i MTBE (250 ml) og filtrert igjen. Filterkaken ble vasket med MTBE (100 ml) og filtratet ble konsentrert i vakuum, hvilket ga4-amino-4-cyano-piperidin-l-karboksylsyre benzylester som en klar olje (3,5 g) som ble anvendt uten ytterligere rensning. (b) Tittelforbindelsen ble fremstilt ved å starte fra N-(4-Morfolinekarbonyl)-L-cykIoheksyl alanin og 4-amino-4-cyano-pipeirdin-1-karboksyl syre benzylester i henhold til metoden fra Eksempel 2, trinn b, bortsett fra at forbindelsen ble renset ved HPLC ved anvendelse av en 20 x 250 mm C|g revers fase kolonne med metoden 30% acetonitril i vann til 100% acetonitril. MS,m/z526 = M+l. EKSEMPEL 8 Morfolin-4-karboksylsyre[l-(4-cyano-tetrahydro-tiopyran-4-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyll-amid (a) 4-amino-tetrahydro-tiopyran-4-karbonitril ble fremstilt i henhold til metoden fra Eksempel 7, trinn a, ved å starte fra tetrahydrotiopyran-4-on. (b) Tittelforbindelsen ble fremstilt ved å starte fra N-(4-Morfolinekarbonyl)-L-cykloheksylalanin og 4-amino-4-cyano-tetrahydrotiopyran i henhold til metoden fra Eksempel 2, trinn b, bortsett fra at forbindelsen ble renset ved revers fase HPLC ved anvendelse av en 20 x 250 mm Cig revers fase kolonne med metoden 30% acetonitril i vann til 100% acetonitril. MS, m/z 409 = M+1. EKSEMPEL 9 Morfolin-4-karboksylsyre[l-(4-cyano-l-pyirmidln-2-yl-piperidin-4-yl-karbamoyl)-2-cykloheksyI-etyl]-amid (a) 4-amino-4-cyano-l -pyirmidin-2-yl-piperidin ble fremstilt i henhold til metoden fra Eksempel 7, trinn a, ved å starte med l-(pyrimidin-2-yl)-4-piperidon med unntak av at en 2 M ammoniakk i metanolløsning erstattet 5 M ammoniakk i metanolløsning. (b) Tittelforbindelsen ble fremstilt ved å starte fra N-(4-Morfolinekarbonyl)-L-cykloheksylalanin og 4-amino-4-cyano-l-pyirmidin-2-yl-piperidin i henhold til metoden fra Eksempel 2, trinn b, bortsett fra at forbindelsen ble renset ved HPLC ved anvendelse av en 20 x 250 mm Cig revers fase kolonne med metoden 30% acetonitril i vann til 100% acetonitril. MS,m/z469 = M+l.
EKSEMPEL 10
Morfolin-4-karboksylsyre [l-(4-cyano-2,6-difenyl-piperidin-4-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyI]-amid (a) 4-amino-4-cyano-2,6-difenyl-piperidin ble fremstilt i henhold til metoden fra Eksempel 9, trinn a, ved å starte fra 2,6-difenyl-4-piperidon. (b) Tittelforbindelsen ble fremstilt ved å starte fra N-(4-Morfolinekarbonyl)-L-cykloheksyl alanin og 4-amino-4-cyano-2,6-difenyl-piperidin i henhold til metoden fra Eksempel 2, trinn b, bortsett fra at forbindelsen ble renset ved HPLC ved anvendelse av en 20 x 250 mm Ci8 revers fase kolonne med metoden 30% acetonitril i vann til 100% acetonitril; MS, m/z 544 = M+l.
EKSEMPEL 11
Morfolin-4-karboksylsyre [l-(4-cyano-2,6-difenyI-piperidin-4-ylkarbamoyl)-3,3-dinietyl-butyl]-amid
(a) 2-amino-4,4-dimetyl-pentansyre-metylester
2-amino-4,4-dimetyl-pentansyre (1,00 g, 6,84 mmol) ble suspendert i 50 ml metanol og avkjølt i et isbad. Tionylklorid (1,82 g, 15,0 mmol) ble tilsatt dråpevis, etter noe tid ble alle syren oppløst. Reaksjonen ble deretter fjernet fra isbadet og oppvarmet til tilbake-løp i 3,5 timer. Reaksjonsblandingen ble konsentrert i vakuum og det resulterende faste stoffet (1,10 g) ble anvendt i neste trinn uten ytterligere rensning. MS, m/z 159,9=M+1 (b) 4,4-dimetyl-2-[(morfolin-4-karbonyl)-amino]-pentansyre-metylester 2-amino-4,4-dimetyl-pentansyre-metylester (5,35 g, 27,4 mmol) ble oppløst i 100 ml diklormetan. Hunig's base (7,07 g, 54,7 mmol) og 4-morfolinekarbonylklorid (4,08 g, 27,4 mmol) ble tilsatt og reaksjonsblandingen ble omrørt ved omgivelsestemperatur i 16 timer. Reaksjonsblandingen ble konsentrert i vakuum og tatt opp i 150 ml EtOAc. Et hvitt presipitat ble dannet og ble filtrert og vasket med EtOAc. EtOAc løsninger ble samlet og vasket med 3 x 50 ml 1 N HC1 (vandig), 3 x 50 ml mettet NaHC03 (vandig) og 1 x 50 ml saltvann. Det
organiske laget ble tørket over Na2S04, dekantert og konsentrert til et hvitt, fast stoff (6,33 g). MS, m/z 273 = M+l
(c) N-(4-morfolinekarbonyl)-L-neopentylglycin
4,4-dimetyl-2-[(morfolin-4-karbonyl)-amino]-pentansyre-metylester (6,33 g, 23,2 mmol) ble oppløst i 100 ml THF og 50 ml metanol. Løsningen ble avkjølt på et isbad og litiumhydroksydmonohydrat (5,80 g, 116 mmol) ble tilsatt som en suspensjon i 50 ml vann. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved omgivelsestemperatur i 1 time. Ytterligere vann ble tilsatt til reaksjonen (25 ml) og blandingen ble ekstrahert med dietyleter 2 x 75 ml. Det organiske laget ble kastet. Det vandige laget ble surgjort til pH 2 med 20% HC1 (vandig) og produktet ble ekstrahert med 3 x 75 ml EtOAc. EtOAc-laget ble vasket med 1 x 50 ml saltvann og tørket over Na2S04, dekantert og konsentrert i vakuum til et hvitt, fast stoff (5,85
g). MS, m/z 259 = M+l (d) Morfolin-4-karboksylsyre [l-(4-cyano-2,6-difenyl-piperidin-4-ylkarbamoyl)-3r3- dimetyl-buty)]-amid N-(4-morfolinekarbonyl)-L-neopentylglycin (214 mg, 0,83 mmol) ble oppløst i 25 ml diklormetan. EDC (175 mg, 0,91 mmol), HOBT (123 mg, 0,91 mmol), 4-amino-4-cyano-2,6-difenylpiperidin (Eksempel 10) (278 mg, 0,91 mmol) og N-metylmorfolin (420 mg, 4,2 mmol) ble tilsatt til løsningen. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved omgivelsestemperatur i 16 timer. Reaksjonen ble konsentrert i vakuum og det resulterende residuet ble oppløst i 150 ml EtOAc. EtOAc-laget ble vasket med 2 x 50 ml mettet NaHC03,1 x 50 ml saltvann, deretter tørket over Na2S04, dekantert og konsentrert til en olje. Produkt ble omkrystallisert fra EtOAc/ heksaner, hvilket ga et hvitt, fast stoff (42 mg). MS, m/z 518 = M+l EKSEMPEL 12 Morfolin-4-karboksylsyre [l-(l-acetyI-4-cyano-piperidin-4-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-amid (a) 4-amino-4-cyano-1 -acetylpiperidin ble fremstilt i henhold til metoden fra Eksempel 9, trinn a, ved å starte med l-acetyl-4-piperidon. (b) Tittelforbindelsen ble fremstilt ved å starte fra N-(4-morfolinekarbonyl)-L-cykloheksylalanin og 4-amino-4-cyano-l-acetylpiperidin i henhold til metoden fra Eksempel 2, trinn b, bortsett fra at forbindelsen ble renset ved HPLC ved anvendelse av en 20 x 250 mm. Cig revers fase kolonne med metoden 30% acetonitril i vann til 100% acetonitril. MS, m/z 433 = M+1. EKSEMPEL! 3 Morfolin-4-karboksylsyre[l-(4-cyano-tetrahydro-pyran-4-ylkarbamoyl)-3,3-dimetyl-butyl]-amid (a) 4-amino-4-cyano-tetrahydropyran ble fremstilt i henhold til metoden fra Eksempel 1, trinn a, ved å starte fra tetrahydropyran-4-on. (b) Tittelforbindelsen ble fremstilt ved å starte fra N-(4-morfolinekarbonyl)-L-neopentylglycin (Eksempel 11, trinn c) og 4-amino-4-cyano-tetrahydropyran i henhold til metoden fra Eksempel 2, trinn b, bortsett fra at forbindelsen ble renset ved HPLC ved anvendelse av en 20 x 250 mm Cig revers fase kolonne med metoden 30% acetonitril i vann til 100% acetonitril. MS, m/z 367 = M+l.
EKSEMPEL 14
Morfolin-4-karboksylsyre[l-(4-cyano-tetrahydro-tiopyran-4-ylkarbamoyl)'33-dimetyl-butylj-amid
Tittelforbindelsen ble fremstilt ved å starte fra N-(4-Morfolinekarbonyl)-L-neopentyl glycin (Eksempel 11, trinn c) og 4-amino-4-cyano-tetrahydrotiopyran (Eksempel 8) i henhold til metoden fra Eksempel 1, trinn d, bortsett fra at forbindelsen ble renset ved HPLC ved anvendelse av en 20 x 250 mm dg revers fase kolonne med metoden 30% acetonitril i vann til 100% acetonitril. MS, m/z 383 = M+l.
EKSEMPEL 15
Morfolin-4-karboksylsyre [l-(l-benzyl-4-cyano-piperidin-4-ylkarbamoyl)-3,3-dinietyl-butylj-amid
Tittelforbindelsen ble fremstilt ved å starte fra N-(4-Morfolinekarbonyl)-L-neopentyl glycin (Eksempel 11, trinn c) og 4-amino-4-cyano-l-benzylpiperidin (Eksempel 5, trinn a) i henhold til metoden fra Eksempel 1, trinn d, bortsett fra at forbindelsen ble renset ved HPLC ved anvendelse av en 20 x 250 mm Cig revers fase kolonne med metoden 30% acetonitril i vann til 100% acetonitril. MS, m/z 456 = M+l.
EKSEMPEL 16
Morfolin-4-karboksylsyre [l-(l-isopropyl-4-cyano-pipeirdin-4-ylkarbamoyl)-3^-dimetyl-butylj-amid (a) 4-amino-4-cyano-l -isopropylpiperidin ble fremstilt i henhold til metoden fra Eksempel 1, trinn a, ved å starte fra l-i-propyl-4-piperidon. (b) Tittelforbindelsen ble fremstilt ved å starte fra N-(4-morfolinekarbonyl)-L-neopentylglycin (Eksempel 11, trinn c) og 4-amino-4-cyano-l-isopropylpiperidin i henhold til metoden fra Eksempel 1, trinn d, bortsett fra at forbindelsen ble renset ved HPLC ved anvendelse av en 20 x 250 mm Cig revers fase kolonne med metoden 30% acetonitril i vann til 100% acetonitril. MS, m/z 456 = M+l.
EKSEMPEL 17
Morfolin-4-karboksylsyre [l-(l-fenetyl-4-cyano-pipeirdin-4-ylkarbamoyl)-33-dimetyl-butyl]-amid
Tittelforbindelsen ble fremstilt ved å starte fra N-(4-morfolinekarbonyl)-L-neopentyl glycin (Eksempel 11, trinn c) og 4-amino-4-cyano-l-fenetyIpipéridin (Eksempel 4) i henhold til metoden fra Eksempel 1, trinn d, bortsett fra at forbindelsen ble renset ved HPLC ved anvendelse av en 20 x 250 mm Cjg revers fase kolonne med metoden 30% acetonitril i vann til 100% acetonitril. MS, m/z470 = M+l.
EKSEMPEL 18
Morfolin-4-karboksylsyre [1 butyl]-amid
Tittelforbindelsen ble fremstilt ved å starte fra N-(4-morfolinekarbonyl)-L-neopentyl glycin (Eksempel 11, trinn c) og 4-anruno-4-cyano-l-n-propylpiperidin (Eksempel 6) i henhold til metoden fra Eksempel 1, trinn d, bortsett fra at forbindelsen ble renset ved HPLC ved anvendelse av en 20 x 250 mm Clg revers fase kolonne med metoden 30% acetonitril i vann til 100% acetonitril. MS, m/z 408 = M+l.
EKSEMPEL 19
4-cyano^-{3^-dimetyl-2-[(moifolin-4-karbonyl)-amino]-pentanoylaniino}-piperidin-l-karboksylsyrebenzylester
Tittelforbindelsen ble fremstilt ved å starte fra N-(4-morfoIinekarbonyl)-L-neopentyl glycin (Eksempel 11, trinn c) og 4-amino-4-cyano-piperidih-l-karboksylsyrebenzyl-ester (Eksempel 7, trinn a) i henhold til metoden fra Eksempel 1, trinn d, bortsett fra at forbindelsen ble renset ved HPLC ved anvendelse av en 20 x 250 mm Cjg revers fase kolonne med metoden 30% acetonitril i vann til 100% acetonitril. MS, m/z 500 = M+l.
EKSEMPEL 20
Morfolin-4-karboksylsyre[l-(l-acetyl-4-cyano-piperidin-4-ylkarbamoyl)-3^-dimetyl-butyl]-amid
(a) l-acetyl-4-amino-piperidin-4-karbonitril
l-acetyl-4-amino-piperidin-4-karbonitril bie fremstilt fra N-acetyl-4-piperidon i henhold til metoden fra Eksempel 9, trinn a. (b) Tittelforbindelsen ble fremstilt ved å starte fra 1-acetyl-4-amino-piperidin-4-karbonitril og N-(4-morfolinekarbonyl)-L-neopentylglycin (Eksempel 11, trinn c) i henhold til metoden fra Eksempel 11, trinn d og renset ved revers fase HPLC (43 mg). MS, m/z 408 = M+l. EKSEMPEL 21 Morfølin-4-karboksyIsyre [l-(l-benzoyl-4-cyano-piperidin-4-ylkarbamoyl)-3,3-dinietyl-butylj-amid (a) 4-ami no-1 -benzoyl -piperidin-4-karbonitril ble fremstilt fra N-benzoyl-4-piperidon i henhold til metoden fra Eksempel 9, trinn a. MS, m/ z 168 = M+1
(b) Tittelforbindelsen ble fremstilt ved å starte fra 4-amino-1 -benzoyl-piperidin-4-
karbonitril og N-(4-morfolinekarbonyl)-L-neopentylglycin (Eksempel 11, trinn c)
i henhold til metoden fra Eksempel 11, trinn d og renset ved revers fase HPLC (66 mg). MS, m/z 470 = M+l
EKSEMPEL 22
4-cyano-4-{4,4-dimetyl-2-[(morfoIin-4-karbony])-amino]-pentanoylaniino}-piperidin-l-karboksylsyreetylester (a) 4-amino-4-cyano-piperidin-1 -karboksylsyreetylester ble fremstilt i henhold til metoden fra Eksempel 1, trinn a, fra 4-oksopipeirdin-l-karboksylsyreetylester. (b) Tittelforbindelsen ble fremstilt ved å starte fra 4-amino-4-cyano-piperidin-l - karboksylsyreetylester og N-(4-morfolinekarbonyl)-L-neopentylglycin (Eksempel 11, trinn c)
i henhold til metoden fra Eksempel 11, trinn d og renset ved revers fase HPLC (67 mg). MS, m/z 438 = M+l
EKSEMPEL 23
Morfolin-4-karboksy)sy re (1- [4-cyano-l-(2-dimetylamino-acetyl)-pipeirdin-4-yl-karbamoyl]-2-cykloheksyl-etyl}-amid
Tittelforbindelsen ble fremstilt fra N.N-dimetylaminoglycin og morf oli n-4-karboksylsyre [l-(4-cyano-piperidin-4-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-amidhydroklorid ved anvendelse av koblingsmetode beskrevet i Eksempel 1-del (d). Produktet ble renset ved revers fase preparative HPLC, hvilket ga tittelforbindelsen som et gråhvitt, fast stoff; MS, m/z 477 - M+l.
EKSEMPEL 24
4-acetylamino-iV-[l-(4-cyano-tetrahydro-pyran-4-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyI-etyl]-benzaniid
(a) t-butoksykarboksylsyre [l-(4-cyano-tetrahydro-pyran-4-ylkarbamoyl)-2-cyk]oheksyI- etyl]-amid. /-butoksykarboksylsyre [ 1 -(4-cyano-tetrahydro-pyran-4-y1karbamoy l)-2-cykloheksy l-etyl]-amid ble fremstilt fra N-Boc-L-cykloheksylalanin og 4-amino-4-cyano-tetrahydropyran ved metoden ifølge Eksempel 2-del (b). Produktet ble anvendt i neste trinn uten ytterligere rensning. (b) [l-(4-cyano-tetrahydro-pyran-4-ylkarbamoyl)-2s;ykloheksyl-etyl]-amin-hydroklorid. r-butoksykarboksylsyre [ I -(4-cyano-tetrahydro-pyran-4-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-amid (1000 mg, 2,62 mmol) ble oppløst i 15 ml 4 M HC1 i dioksan. Løsningen ble omrørt ved omgivelsestemperatur i 1 time. De flyktige stoffene ble fjernet i vakuum og den resulterende massen ble utgnidd med 25 ml dietyleter, hvilket ga et fint hvitt fast stoff som ble oppsamlet ved filtrering og tørket i vakuum. Produktet ble anvendt uten ytterligere rensning. (c) 4-acetylamino-A^-[l-(4-cyano-tetrahydro-pyran-4-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]- benzamid. 4-acetamidobenzosyre (353 mg, 1,98 mmol), EDC (378 mg, 1,98 mmol) og HOBT (268 mg, 1,98 mmol) ble samlet i 15 ml DMF og omrørt i 20 min. Fast stoff [l-(4-cyano-tetrahydro-pyran-4-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-amin-hydroklorid (625 mg, 1,98 mmol) ble tilsatt. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 16 timer. De flyktige stoffene ble fjernet med en pumpe og det resulterende residuet ble utgnidd, med rask omrøring, med 250 ml mettet vandig natrium-bikarbonat. Det resulterende faste stoffet ble oppsamlet ved filtrering og vasket med 250 ml vann. Det faste stoffet ble tørket i vakuum, hvilket ga tittelforbindelsen (250 mg); MS, m/z 441 = M+1. EKSEMPEL 25 Morfo)in-4-karboksyIsyre [l-(4-cyano-l-metyl-piperidin-4-y)karbamoyl)-33-dimetyl-butyl]-amid (a) /-butoksykarboksylsyre [l-(4-cyano-l-meryI-piperidin-4-ylkarbamoyl)-3,3-dimetyl- butyl]-amid. r-butoksykarboksylsyre [1 -(4-c<y>ano-l-met<y>l-<p>i<p>eirdin-4-<y>lkarbamo<y>l)-33-dimetyl-butyl]-amid ble fremstilt fra N-Boc-L-neopentylglycin og 4-amino-4-cyano-l-metyl-piperidin ved en metode analogt med den i Eksempel 2-del (b). Produktet ble anvendt uten ytterligere rensning. (b) [l-(4-cyano-l-metyl-piperidin-4-ylltarbamoyI)-3^-dimetyl-butyl]-amindihydroklorid. [1-(4-cyano-l-metyl-piperidin-4-ylkarbamoyl)-3,3-dimetyl-butyl]-amindihydroklorid ble fremstilt ved en metode analog med den i Eksempel 24-del (b). Produktet ble anvendt uten ytterligere rensning. (c) Morfolin-4-karboksylsyre [l-(4-cyano-l-metyl-piperidin-4-ylkarbamoyl)-3,3-dimetyl-butyl]-amid. [ 1-(4-cyano-l-metyl-piperidin-4-ylkarbamoyl)-3,3-di metyl-butyl]-amindihydroklorid (350 mg, 1,03 mmol) ble blandet i 10 ml DMF til hvilken det ble tilsatt 1 ml N-metylmorfolin fulgt av tilsetning av 4-morfolinkarbonylklorid (180 mg, 1,20 mmol) som en løsning i 5 ml DMF. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 16 timer hvor på de flyktige stoffene ble fjernet i vakuum. Residuet ble gjenoppløst i 150 ml EtOAc og vasket sekvensielt med 50 ml mettet vandig bikarbonat og 50 ml saltvann. Det organiske laget ble tørket over natriumsulfat, dekantert og konsentrert. Produktet ble renset ved flash kromatografi på silikagel ved anvendelse av 100% metylenklorid til 12 % metanol i metylenklorid som elueringsmiddel, hvilket ga tittel-forbindelsen som en tykk olje (85 mg); MS, m/z 380 = M+l. EKSEMPEL 26 4-acerylaim'no-^-l-(4-cyano-l-metyl-piperidin-4-ylkarbamoyl)-2-cyIdohelffiyl-etyl]-benzaniid Tittelforbindelsen ble fremstilt ved en metode analog med den i Eksempel 24; MS, m/z 454 = M+l. EKSEMPEL 27 4-acerylanTino-jV*[l-(4-cyano-l-metyl-piperidin-4-ylkarbamoyl)-3^3-dimetyl-butyl]-benzamid Tittelforbindelsen ble fremstilt ved en metode analog med den i Eksempel 24; MS, m/z 428 = M+l. EKSEMPEL 28 4-cyano-4-{3^:ykloheksyl-2-[(mofrolin-4-karbonyl)-aniino]-propionyIaniino}-piperidin-l-karboksylsyre f-butylester (a) 4-amino-4-cyano-pipeirdin-l-karboksylsyre t-butylester. 4-amino-4-cyano-piperidin-l-karboksylsyre t-butylester ble fremstilt ved en metode analog med den i Eksempel 3-del (a). Produktet ble anvendt uten ytterligere rensning. (b) 4-cyano-4-{3-cykloheksyl-2-[(morfolin-4-karbonyl)-aimno]-propionylaniino}-piperidin-1-karboksylsyre f-butylester.
4-cyano-4- {3-cykloheksyl-2-[(morfolin-4-karbonyl)-amino]-propionylamino }-piperidiri-l-karboksylsyre r-butylester ble fremstilt ved en metode analog med den i Eksempel 3-del (b); MS, m/z 391, M- f-butoksykarbonyl).
EKSEMPEL 29
Morfolin-4-karboksylsyre [l-(4-cyano-piperidin-4-yIkarbamoy])-2-cykloheksyl-etyl]-amidhydroklorid
4-cyano-4-{ 3-cykloheksyl -2-[(morfolin-4-karbonyl)-amino]-propionylamino} -piperidin-1 - karboksylsyre r-butylester (1000 mg, 2,03 mmol) ble oppløst i 20 ml 4 M HC1 i dioksan og omrørt i 1 time hvor på de flyktige stoffene ble fjerne i vakuum. Det resulterende residuet ble utgnidd med 100 ml dietyleter og det resulterende faste stoffet ble oppsamlet ved filtrering under inert atmosfære (det faste stoffet er meget hygroskopisk) og vasket 2x50 ml dietyleter og tørket i vakuum, hvilket ga tittelforbindelsen som et klart hvitt pulver (802 mg); MS, m/z 392, M-35).
EKSEMPEL 30
Morfo)in-4-karboksylsyre {l-[4-cyano-l-(l-metyl-etyI)-piperidin-4-ylkarbamoyl]-2-cykloheksyl-etyl}-amid
(a) 4-amino-4-cyano-l-(l-metyl-etyl)-piperidin.
4-amino-4-cyano-l-(l-metyl-etyl)-piperidin ble fremstilt ved en metode analog med den i Eksempel 1-del (a). Produktet ble anvendt uten ytterligere rensning.
(b) Morfolin-4-karboksylsyre{l-[4-cyano-l-(l-metyl-etyl)-piperidin-4-yIkarbamoyl]-2-cykJoheksyl-etyl}-ami<L
Morfolin-4-karboksylsyre {1 -[4-cyano-l -(1 -metyl-etyl)-pipeirdin-4-ylkarbamoyl]-2-cykloheksyl-etyl }-amid ble fremstilt ved en metode analog med den i Eksempel 1-del (d); MS, m/z 434 = M+l.
EKSEMPEL 31
Morfolin-4-karboksylsyre {l-[3-cyano-l-benzyl-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl]-2-cyk]oheksyl-etyl}-amid
(a) 3-amino-3-cyano-l-benzylpyrrolidIn. 3-amino-3-cyano-l-benzylpyrrolidin ble fremstilt ved en metode analog med den i Eksempel 1-del (a) med unntak av at natriumkarbonat ikke ble tilsatt til reaksjonsblandingen. Produktet ble ekstrahert fra rå omsetning med 3x100 ml EtOAc og ble anvendt uten rensning. (b) Morfolin-4-karboksylsyre {l-[3-cyano-l-benzyl-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl]-2-cykloheksyl-etyl}-amid. Separerte diastereomerer.
Diastereomer morfolin-4-karboksylsyre {1 -[3-cyano-1 -benzyl-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl]-2-cykloheksyl-etyl}-amid ble fremstilt ved en metode analog med den i Eksempel 1-del (d). Rensingen ble utført ved revers fase preparative HPLC (Hypersil HyPURITYTM,C18 kolonne, 250 x 21,2 5Qfor å separere de to diastereomerene; MS, m/z 468 = M+1.
EKSEMPEL 32
Morfolin-4-karboksylsyre [l-(4-cyano-2,6-dimetyl-piperidin-4-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyI-etyl]-amid
(a) Cis-2,6-dimetyM-piperidon.
Inn i en blanding av dimetylacetonedikarboksylat (10 g, 57,4 mmol) og acetaldehyd (4,4 g, 100 mmol) holdt ved -25 °C ble det boblet ammoniakk inntil løsningen ble mettet (forsiktig bobling nødvendig på grunn av eksoterm oppløsning av NH3). Den resulterende løsning ble lagret ved 0 °C i 20 timer, hvor på den ble til en hvit masse. Til dette ble det tilsatt 25 ml 3 N saltsyre og løsningen ble oppvarmet på et damp-bad. Karbondioksyd begynte raskt å utvikles, men etter 24 timer var den fortsatt i meget sakte utvikling. Løsningen ble inndampet nesten dl tørrhet. Til det gyldenbrune tunge presipitat ble det tilsatt 25 ml vann og løsningen ble igjen inndampet. Til residuet ble det tilsatt en løsning av 10 g natriumkarbonat i 45 ml vann og 20 ml kloroform. Laget ble ristet og separert. Vannlaget ble ekstrahert seks ganger med 20 ml porsjoner av metylenklorid. De organiske lag ble tørket over magnesiumsulfat og konsentrert, hvilket ga det ønskede råprodukt som ble anvendt uten ytterligere rensning.
(b) 4-amino-4-cyano-2,6-dimetyl-piperidin.
Til en blanding av ammoniumklorid (0,58 g, 9,98 mmol), natriumcyanid (0,50 g, 11,0 nimol), ammoniumhydroksyd (2 ml) ble det tilsatt en løsning av cis-2,6-dimetylpiperidon (1,27 g, 9,98 mmol) i 5 ml metanol. Den resulterende blanding ble tilbakeløpskokt i 4 timer. Reaksjonsblandingen ble inndampet til tørrhet og residuet ble tatt opp i 50 mLEtOAc, vasket med mettet natriumbikarbonat 3 x 50 ml. Det organiske laget ble inndampet til tørrhet og renset ved flash kromatografi på silikagel ved anvendelse av 90 til 9 metylenklorid og metanol, hvilket ga det ønskede produkt. (c) Morfolin-4-kårboksylsyre [l-(4-cyano-2,6-dimetyl-piperidin-4-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-amid.
Tittelforbindelsen ble fremstilt ved standard metode i Eksempel 1-del (d); MS, m/z 420 = M+l.
EKSEMPEL 33
Morfolin-4-karboksyIsyre [l-(4-cyano-lt3-dimetyl-piperidin-4-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-amid
(a) 1,3-dimetyM-piperidonhydroklorid.
Til en løsning av metylamin (100 ml 2,0 M løsning i metanol) ble det tilsatt, i løpet av 1 time ved 0
°C, en løsning av metylmetakrylat (30,2 g, 300 mmol) i 20 ml metanol. Den resulte-rende løsning fikk stå i tre dager, hvor på de flyktige stoffene ble fjernet på en rotovap og residuet ble vakuum destillert, hvilket ga det ønskede produkt som en klar olje, k.p. 48-49 C ved 8,5 mm. Oljen ble oppløst i 100 ml metanol og metylakrylat (14,8 g, 200 mmol) ble tilsatt og reaksjonen fikk stå i 3 dager. De flyktige stoffene ble fjernet.
30 ml Xylen ble fremstilt over natrium (2,42 g) og tilbakeløpskokt i 2 timer og avkjølt til 60 °C. Til denne blandingen ble det tilsatt diesteren og reaksjonen ble tilbakeløpskokt inntil natrium partikler hadde forsvunnet. Den resulterende mørke røde væske ble avkjølt og hellet i 150 ml isvann. Fasene ble separert og xylen ekstrahert med 50 ml konsentrert saltsyre og, etter vasking med 50 ml isopropyleter, ble det vandige laget avkjølt, gjort basisk med kaliumkarbonat og ekstrahert åtte ganger med 75 ml porsjoner av etyleter. De samlede eteriske ekstrakter ble tørket over kaliumkarbonat og behandlet med overskudd av tørr eterisk hydrogenklorid; det resulterende salt ble filtrert og tørket.
Saltet ble tatt opp i 60 ml 6 N saltsyre og oppvarmet på et vannbad i tre timer, ved slutten av denne tiden var den innledende kraftige karbondioksyd utviklingen nesten borte. Den resulterende løsning ble inndampet til tørrhet og tørket i vakuum, hvilket ga l,3-dimetyl-4-piperidon hydroklorid (5 g) som ble anvendt i neste trinn uten ytterligere rensning.
(b) 4-amino-4-cyano-lr3-dimetylpiperidin>
Tittelforbindelsen ble fremstilt som beskrevet i tidligere eksempel i 4-amino-4-cyano-2,6-dimetylpiperidin. Råproduktet ble anvendt i neste trinn uten ytterligere rensning. (c) Morfolin-4-karboksylsy re [l-(4-cyano-l ,3-dimetyl-piperidin-4-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-amid.
Tittelforbindelsen ble fremstilt som i Eksempel 1-del (d); MS, m/z 420 = M+l.
EKSEMPEL 34
4-cyano-4-{3-cykloheksyl-2-[({4-acetylamino}-fenyl-l-karbonyl)-aim<*>no]-propionyl-amlno}-piperidin-1-karboksylsyreetylester
Tittelforbindelsen ble fremstilt ved en metode analog med den i Eksempel 24; MS, m/z 512 = M+l.
EKSEMPEL 35
4-acerylamino-A^-[l-(4-cyano4-benzyl-piperidln-4-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-beiuamid Tittelforbindelsen ble fremstilt ved en metode analog med den i Eksempel 24; MS, m/z 530 = M+l.
EKSEMPEL 36
4-acetylamino-A^-{l-[4-cyano-l-(l-metyI-eryl)-piperidin-4-ylkarbamoyl]-2-cykloheksyl-etyl}-benzamid
Tittelforbindelsen ble fremstilt ved metoden ifølge Eksempel 24; MS, m/z 482 = M+l.
EKSEMPEL 37
Morfolin-4-karboksylsyre {l-[3-cyano-l-benzyl-piperidin-3-ylkarbamoyl]-2-cykloheksyl-etyl}-amid
Tittelforbindelsen, separert inn i to diastereomerer, ble fremstilt ved en metode analog med den i Eksempel 31; MS, m/z 482 = M+1.
EKSEMPEL 38
4-cyano-4-{3-cyUoheksyl-2-[({4-acetylamino}-fenyl-l-karbonyl)-aim^o]-propionylarnino}-piperidin-l-karboksylsyrebenzylester
Tittelforbindelsen ble fremstilt ved en metode analog med den i Eksempel 24; MS, m/z 574 = M+l.
EKSEMPEL 39
Ar<->[l-(4-cyano-l-metyl-piperidin-4-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-benzarnid Tittelforbindelsen ble fremstilt ved en metode analog med den i Eksempel 24; MS, m/z 397 = M+l.
EKSEMPEL 40
4-acerylaimno-iV-{l-[4-cyano-l-(2-fenyI-eryl)-p^ benzamid
Tittelforbindelsen ble fremstilt ved en metode analog med den i Eksempel 24; MS, m/z 544 = M+l.
EKSEMPEL 41
4-(Acetylamino-metyl)-iV-[l-(4-cyano-l-metyl-piperidin-4-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-eryl]-benzamid
(a) 4-(Acetylamino-metyl)-benzosyre.
Metyl-4-(acetylamino-metyl)-benzoat ble fremstilt fra eddiksyre og metyl 4-(aminometyl)-benzoat ved anvendelse av en metode analog med den i Eksempel 1-del (d). Rå N-acylester ble forsåpet ved anvendelse av en metode analog med den i Eksempel 1-del (c). Råproduktet ble anvendt uten ytterligere rensning.
(b) 4-(AcetyIamino-meytl)-iV4M4<yano-l-m
etyl]-benzamid.
Tittelforbindelsen ble fremstilt ved en metode analog med den i Eksempel 24-del (c); MS, m/z 468 = M+l.
EKSEMPEL 42
Morfolin-4-karboksylsyre [l-(3-cyano-8-metyl-8-aza-bicyklo[3>2,l]okt-3-ylkarbamoyl)-2-cykIoheksyl-etyl]-amid
(a) 3-amino-3-cyano-8-metyI-8-aza-bicyklo[3^,l]oktart.
Aminonitril ble fremstilt fra tropinon ved anvendelse av en metode analog med den i Eksempel 1-del (a) . (b) Morfolin-4-karboksylsyre [l-(3-c<y>ano-8-met<y>l-8-aza-bic<y>klo[3^,l]okt-3-ylkarbamoyl)-2-cykloheksy]-etyl]-amid.
Tittelforbindelsen ble fremstilt ved anvendelse av en metode analog med den i Eksempel 1-del (d); MS, m/z 432 = M+l.
EKSEMPEL 43
Morfolin-4-karboksylsyre [l-(l-karbamiinidoyl-4-cyano-piperidin-4-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etylj-amidp-toluensulfonat
(a) l-karbamimidoyl-l,2,3-benztriazolp-toluensulfonat
En blanding av benztriazol (11,9 g, 100 mmol), cyanamid (4,2 g, 100 mmol) og p-toraen sulfonsyrehydrat (19,2 g, 100 mmol) i dioksan ble tilbakeløpskokt i 24 timer. Reaksjons-blandingen fikk avkjøles til romtemperatur og ble fortynnet med eter, og omrørt kraftig, deretter filtrert. Filterkaken ble vasket med eter og omkrystallisert fra etanol, hvilket ga det ønskede produkt som et hvitt, fast stoff.
(b) Morfolin-4-karboksylsyre [l-(l-karbamimidoyl-4-cyano-piperidin-4-ylkarbamoyI)-2-cykloheksyl-etyl]-amid p-toluensulfonat
Morfolin-4-karboksylsyre [ 1 -(4-cyano-piperidin-4-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-amidhydroklorid (0,2 g, 0,47 mmol) ble oppløst i 3 ml DMF og 2 ekv av Hunig's base ble tilsatt fulgt av l-karbairumidoyl-l,2,3-benztriazolp-toluensulfonat (0,16 g,0,47 mmol). Reaksjonsblandingen blé omrørt 24 timer hvor på løsningsmidlet ble fjernet i vakuum. Den resulterende masse ble renset ved preparative HPLC, hvilket ga tittelforbindelsen; MS, m/z 434, M+l- p-toluen sulfonat).
EKSEMPEL 44
4-acetylamino-Ar-[l-(4-cyano-tetrahydro-pyran-4-ylkarbamoyl)-3^-dimetyl-butyl]-
benzamid
4-amino-4-cyano-tetrahydropyran fremstilt i henhold til metoden fra Eksempel 1, trinn a, ved å starte fra tetrahydropyran-4-on.
Tittelforbindelsen ble fremstilt fra 4-amino-4-cyano-tetrahydropyran, L-neopenyyl glycin og 4-acetylaminobenzosyre analogt med metoden beskrevet i Eksempel 24.
EKSEMPEL 45
MorfoHn-4-karboksylsyre[l-(4-cyano-l-metansulfonyl-piperidin-4-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-amid.
Tittelforbindelsen blir fremstilt ved behandling av morfolin-4-karboksylsyre [l-(4-cyano-piperidin-4-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-ety]]-amidhydroklorid med metansulfonylklorid og en tertiær aminbase så som W-metylmorfolin i et løsningsmiddel så som metylenklorid.
EKSEMPEL 46
4-acetylamino-piperidin-l-karboksylsyre [l*(4*cyano-l-metyl-piperidin-4-ylkarbamoyi)-2-cykloheksyl-etyl]-amid.
Tittelforbindelsen blir fremstilt ved en metode analog med den i Eksempel 24.
EKSEMPEL 47
Morfolin-4-karboksylsyre{l-[l-(2-klor-benzyl)-3-cyano-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl]-2-cykloheksyI-etyl}-amid,
Tittelforbindelsen blir fremstilt ved en metode analog med den i Eksempel 31..
EKSEMPEL 48
Morfolin-4-karboksylsyre [l-(l-benzylkarbamoyl-4-cyano-piperidin-4-ylliarbainoyl)-3,3-dimetyl-butyl]-amid.
Tittelforbindelsen blir fremstilt fra morfolin-4-karboksylsyre [l-(4-cyano-piperidin-4-ylkarbamoyl> 3,3-di metyl-bu ty I]-amidhydro klorid og benzylisocyanat i nærvær av en tertiær aminbase så som N-metylmorfolin i et løsningsmiddel så som metylenklorid.
EKSEMPEL 49
Morfolin-4-karboksylsyre [l-(l-fenylkarbamoyl-4-cyano-pipeirdin-4-ylkarbamoyI)-3»3-dimeryl-butyl]-amid.
Tittelforbindelsen blir fremstilt fra morfolin-4-karboksylsyre [1 -(4-cyano-piperidin-4-ylkarbamoyl)-3,3-dimetyl-butyl]-amidhydroklorid og fenyl-isocyanat i nærvær av en tertiær aminbase så som N-metylmorfolin i et løsningsmiddel så som metylenklorid.
EKSEMPEL 50
Morfolin-4-karboksylsyre {l-[4-cyano-l-(morfoHn-4-karbonyl)-piperidin-4-yl-karbamoyl)-3^3-dimetyl-buty]]-amid.
Tittelforbindelsen blir fremstilt fra morfolin-4-karboksylsyre [l-(4-cyano-piperidin-4-yl-karbamoyl)-3,3-dimetyl-butyl]-amidhydroklorid og 4-morfolin karbonylklorid i nærvær av en tertiær aminbase så som Af-metylmorfolin i et løsningsmiddel så som metylenklorid.
EKSEMPEL 51
Morfolin-4-karboksylsyre (l-{4-cyano-l-[(pyridin-3-ylmetyl)-karbamoyl]-piperidin-4-ylkarbamoyl}-3^-dimetyl-butyl)-amid.
Tittelforbindelsen blir fremstilt fra morfolin-4-karboksylsyre [l-(4-cyano-piperidin-4-yl-karbamoyl)-3,3-dimetyl-butyl]-amidhydroklorid og 3-pyridyl-metyl isocyanat i nærvær av en tertiær aminbase så som AT-metylmorfolin i et løsningsmiddel så som metylenklorid.
EKSEMPEL 52
MorfoIin-4-karboksy)syre {l-[4-cyano-l-(4-metyl-piperazin-l-karbonyl)-plperidin-4-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-amid.
Tittelforbindelsen blir fremstilt fra morfolin-4-karboksyIsyre [l-(4-cyano-piperidin-4-yl-karbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-amidhydroklorid og 4-metyl-piperzin karbonylklorid i nærvær av en tertiær aminbase så som iV-metylmorfolin i et løsningsmiddel så som metylenklorid.
EKSEMPEL 53
4-(4-cyano-4-{3-cykJoheksyl-2-[(morfolin-4-karbonyl)-armno]-propionylarnino}-piperidin-l-yl)-smørsyre.
Tittelforbindelsen blir fremstilt fra moifolin-4-karboksylsyre [l-(4-cyano-piperidin-4-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etylj-amidhydroklorid og 4-brom-smørsyre i nærvær av en hindret tertiær aminbase så som Hunig's base i et løsningsmiddel så som metylenklorid.
EKSEMPEL 54
Morfolin-4-karboksylsyre [l-(4-cyano-l-cyklopropyl-piperidin-4-ylkarbambyl)-2-cykloheksyl-etylj-amid..
Tittelforbindelsen kan fremstilles fra morfolin-4-karboksylsyre [l-(4-cyano-piperidin-4-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-amidhydroklorid og 1-etoksy-l-trimetylsilyloksy-cyklopropan ved anvendelse av et reduksjonsmiddel slik som natriumcyanoborhydrid i et løsningsmiddelsystem så som eddiksyre i metanol.
EKSEMPEL 55
Morfolin-4-karboksylsyre{l-[4-cyano-l-(2-dimetyIamino-etyl)-piperidin-4-yl-karbamoyI]-2-cykloheksyl-etyl}-amid.
Tittelforbindelsen blir fremstilt ved metoden ifølge Eksempel 33.
EKSEMPEL 56
Morfblin-4-karboksylsyre [l-(4-cyano-l-fenyl-piperidin-4-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyI-etyl]-amid.
Tittelforbindelsen blir fremstilt ved eh metode analog med den i Eksempel 58.
EKSEMPEL 57
Morfolin-4-karboksylsyre {l-[4-cyano-l-(M-dimeryl-etyl)-piperidin-4-ylkarbanioyl]-2-cykloheksyl-etyl}-amid.
Tittelforbindelsen kan fremstilles ved en metode analog med den i metoden ifølge Eksempel 59.
EKSEMPEL 58
Morfolin-4-karboksylsyre [l-(4-cyano-l-fenyl-piperidin-4-ylkarbamoyl)-3^-dimetyl-butyl]-amid.
(a) Af-fenyl-4-piperidon.
l,4-dioksa-8-azaspiro[4,5]-decan (2,0 g, 14,0 mmol, 1,0 ekiv), Pd2(DBA)3 (0,31 g, 0,34 mmol, 0,024 ekiv), BINAP (0,64 g, 1,0 mmol, 0,073 ekiv), NaO-r-Bu (3,9 g, 41 mmol, 3,0 ekiv) og brombenzen (2,6 g, 17,7 mmol, 1,3 ekiv) ble samlet under Ar i 50 ml tørr toluen. Den resulterende blanding ble tilbakeløpskokt under Ar i 4 timer. Reaksjons-blandingen ble avkjølt og hellet i 250 ml mettet natriumbikarbonat-løsning. Produktet ble ekstrahert med 3 x 100 ml CH2CI2. De organiske ekstrakter ble samlet og konsentrert. Produktet ble renset ved flash kromatografi on Si02 ved anvendelse av 50% heksaner i CH2CI2 til ren CH2C12, hvilket ga -fenyl ketal (2,9 g). Renset ketal ble oppløst i blanding av 50 ml 1,4-dioksan, 50 ml vann og 20 ml konsentrert HC1. Blandingen ble tilbakeløpskokt i 3 timer hvor på massespektrometri viste forsvinning av utgangs- ketal. Den avkjølte blandingen ble forsiktig hellet i 600 ml mettet natrium-bikarbonat-løsmng og produktet ekstrahert med 3 x 200 ml EtOAc. De samlede organiske ekstrakter ble samlet og tørket over Na2S04, dekantert og konsentrert til en rød olje (2,3 g) som ble anvendt uten ytterligere rensning; MS, m/z 176=M+1.
(b) 4-amino-4-cyano-l -fenyl-piperidin.
iV-fenyl-4-piperidon (2,3 g, 13 mmol, 1,0 ekiv) ble oppløst i 26 ml 2 M NH3 i MeOH og NaCN (0,76 g, 15 mmol, 1,2 ekiv) og NH4CI (0,80 g, 15 mmol, 1,2 ekiv) ble tilsatt og blandingen ble tilbakeløpskokt i 2 timer hvor på en ytterligere 26 ml 2 M NHs/MeOH ble tilsatt fulgt av ytterligere 2 timer tilbakeløp. Reaksjonsblandingen ble avkjølt og filtrert. Filtratet ble konsentrert. Råproduktet ble renset ved flash kromatografi på Si02 under eluering med 100% CH2C12 og 2% MeOH i CH2C12, hvilket ga det rene produkt (1,92 g) som en tykk gul olje som stivnet ved henstand; MS, m/z 202=M+1. (c) Morfolin-4-karboksylsyre [1 -(4-cyano-1 -fenyl-piperidin-4-ylkarbamoyl)-3,3-dimetyl-butyl]-amid.
AT-(4-morfolinekarbonyl)-L-neopenylglycin (0,2 g, 0,97 mmol, 1,0 ekiv) og EDC (0,19 g, 0,97 mmol, 1,0 ekiv) ble samlet i 10 ml CH2C12 og omrørt i 15 min ved rom-temperatur. en løsning av 4-amino-4-cyano-l-fenyl-piperidin (0,20 g, 0,97 mmol, 1,0 ekiv) i 5 ml CH2CI2 og N-metyl-morfolin (0,31 g, 3,1 mmol, 4,0 ekiv) ble tilsatt og omrøring ble fortsatt i 16 timer. Reaksjonen ble konsentrert 1 vakuum og residuet ble utgnidd med 100 ml mettet natriumbikarbonat-løsning med rask omrøring i 2 timer. Det resulterende faste stoffet ble oppsamlet ved filtrering og omkrystallisert fra CH3CN og vann (2 til 1), hvilket ga tittelforbindelsen som et gråhvitt, fast stoff (165 mg, 39%); MS, m/z 443=M+1.
EKSEMPEL 59
Morfolin-4-karboksylsyre [l-(l-<£rt-but<y>l-4-c<y>ano-<p>i<p>eridin-4-<y>lkarbamoyl)-3^-dimetyl-butyl]-ami<L
(a) N-metoksy-jV-metyl-akrylamid.
Acrolylklorid (20 g, 221 mmol, 1,0 ekiv) ble oppløst i 500 ml CH2C12 og avkjølt til 0 °C. Fast stoff W.Ø-dimetyl-hydroksylamin-hydroklorid (21,5 g, 221 mmol, 1,0 ekv) ble tilsatt alt på én gang. Ét3N ble tilsatt dråpevis over en 2 timer period, hvilket ga en tykk gul blanding. Reaksjonsblandingen bie omrørt i en ytterligere time i løpet av hvilken tid den fikk oppvarmes til romtemperatur. Blandingen ble hellet i 1 L av vann. Laget ble separert og det organiske laget ble vasket med 1 x 500 ml vann, 1 x 500 ml saltvann og tørket over Na2S04. Løsningen ble dekantert og konsentrert i vakuum, hvilket gå det ønskede produkt som en gul olje (23 g, 90%) som ble anvendt uten ytterligere rensning.
(b) 3-^butyl-amino)-W-metoksy-N-metyl-propanairiid.
N-metoksy-W-metyl-akrylamid (5 g, 43,4 mmol, 1,0 ekv) ble oppløst i f-outylamin (3,36 g, 46 mmol, 1,06 ekv). Den resulterende løsning ble omrørt ved romtemperatur i 48 timer. Overskudd av primær amin ble fjernet i vakuum og råproduktet ble renset ved flash kromatografi på silika ved anvendelse av 100% CH2C12 til 2% MeOH i CH2C12, hvilket ga det ønskede produkt som en lysegul olje (5,7 g, 70%); MS, m/z 189=M+1.
(c) l-f-butyl-4-piperidon.
3-(?-butyl-amino)-A^-metoksy-Ar-metyl-propanamid (5 g, 26,6 mmol, 1,0 ekv) ble oppløst i tørr THF (50 ml) under Ar. Løsningen ble avkjølt til -78 °C og en 1 M løsning av vinylmagnesiumbromid (66,5 ml, 66,5 mmol, 2,5 ekv) ble tilsatt dråpevis over en 20 min periode. Reaksjonen ble deretter omrørt ved -78 °C i 30 min og ved 0 °C i 30 min hvor på reaksjonsløsningen ble overført via en dobbel-endet kanyle inn i is-kald mettet natriumbikarbonat-løsning under Ar. Blandingen ble omrørt i 10 min og råproduktet ble ekstrahert 2 x 150 ml EtOAc. De organiske ekstrakter ble samlet og konsentrert i vakuum til en rød olje. Rensning ble utført ved flash kromatografi på silika ved anvendelse av 100% CH2C12 gjennom 4, 8 og 16% MeOH i CH2C12. Produktet ble isolert som en oransje olje (1,3 g, 32%); MS, m/z 156=M+1.
(d) 4-amino-l-f-butyl-4-cyano-piperidin.
l-r-butyl-4-piperidon (1,3 g, 8,4 mmol, 1,0 ekv), NaCN (0,61 g, 12,6 mmol, 1,5 ekv) og NH4CI (0,67 g, 12,6 mmol, 1,5 ekv) ble samlet i 34 ml 2 M NH3 i MeOH. Blandingen ble tilbakeløpskokt i 2 timer hvor på en ytterligere 34 ml 2 M NH3 i MeOH ble tilsatt fulgt av ytterligere 2 timer ved tilbakeløp. Blandingen ble avkjølt og filtrert. Filtratet ble konsentrert / vakuum og residuet ble utgnidd med CH2CI2 og filtrert igjen. Løsningen ble konsentrert til en tykk rød olje som ble anvendt uten ytterligere rensning; MS, m/z 182=M+1. (e) Morfolin-4-karboksylsyre [l-(l-<er/-butyl-4-cyano-piperidin-4-ylkarbamoyl)- 33* dimetyl-butyl]-amid.
^-(4-morfolinekarbonyl)-L-neopenylglycin (0,070 g, 0,27 mmol, 1,0 ekv) og EDC (0,057 g, 0,30 mmol, 1,1 ekv) ble samlet i 10 ml DMF og omrørt i 15 min ved romtemperatur. En løsning av 4-amino-l-r-butyl-4-cyano-piperidin (0,054 g, 0,30 mmol, 1,1 ekv) i 5 ml DMF og JV-metyl-morfolin (0,11 g, 1,1 mmol, 4,0 ekv) ble tilsatt og omrøringen ble fortsatt i 16 timer. Reaksjonen ble fortynnet med 50 ml mettet natriumbikarbonat-løsning og produktet ble ekstrahert med 3 x 50 ml EtOAc. De organiske ekstrakter ble samlet og konsentrert i vakuum. Produktet ble renset ved semi-prep revers-fase HPLC ved anvendelse av 20 til 60% CH3CN i vann over en 25 min gradient, hvilket ga tittelforbindelsen som et hvitt, fast stoff etter konsentrasjon (25 mg, 22%); MS, m/z 422=M+1.
EKSEMPEL 60
Morfolin-4-karboksylsyre[l-(4-cyano-l,2-dimetyl-piperidin-4-ylkarbamoyl)-3^3-dimetyl-butyl]-amid.
(a) 3-(Benzyl-metyl-anuno)-srnørsyre-metylester.
Benzyl-metyl-amin (20 g, 165 mmol, 1,0 ekv) ble tilsatt alene til metylkrotonat (19,8 g, 198 mmol, 1,2 ekv). Den resulterende løsning ble omrørt ved romtemperatur i 72 timer. Overskudd av krotonester ble fjernet i vakuum, hvilket ga det ønskede produkt (40,3 g,
-100%) som ble anvendt uten ytterligere rensning; MS, m/z 222=M+1.
(b) 3-metylamino-smørsyre-rnetylester.
3-(Benzyl-metyl-amino)-smørsyre-metylester (15 g, 67,8 mmol, 1,0 ekv) ble plassert i en Parr hydrogenersflaske og oppløst i 50 ml MeOH. 20% Palladiumhydroksyd på karbon (0,5 g, 0,94 mmol, 0,014 ekv) ble tilsatt og blandingen ble ristet ved 50 psi H2 i 16 timer. Reaksjonen ble bedømt som fullstendig når opptak av H2 hadde stanset Flasken ble åpnet og 10 g diatoméjord i 100 ml MeOH ble tilsatt. Blandingen ble filtrert på en pute av diatoméjord som ble deretter vasket med 2 x 100 ml MeOH. Filtratene ble samlet og konsentrert / vakuum, hvilket ga det ønskede produkt som en olje som er noe flyktig (7,6 g, 85%). Råproduktet ble anvendt uten ytterligere rensning; MS, m/z 132=M+1. (c) 3-[(2-metoksykarbonyl-etyl)-metyl-amino]-smørsyre-metylester.
3-metylamino-smørsyre-metylester (7,6 g, 58 mmol, 1,0 ekv) ble tilsatt alene til metylakrylat (7,5 g, 87 mmol, 1,5 ekv). Den resulterende løsning ble tilbakeløpskokt i 16 timer.
Reaksjonsblandingen ble avkjølt og fortynnet med heksaner (200 ml) og en uoppløselig polymer ble separert ut. Heksanløsningen ble dekantert og polymeren vasket 2 x 100 ml heksaner med kraftig omrøring. De samlede heksanløsninger ble deretter konsentrert i vakuum. Råproduktet ble renset ved flash kromatografi på SiC<2 ved anvendelse av ren CH2CI2 som et elueringsmiddel. Det rene produkt ble isolert som en klar fargeløs olje (7,3 g, 58%); MS,m/z218=M+l.
(d) l^-dimetyl-4-piperidon.
En 1 M løsning av TiCU i CH2C12 (23 ml, 23 mmol, 1,0 ekv) ble tilsatt til en kolbe under Ar og avkjølt til -15 °C med et MeOH/isvannbad. 3-[(2-metoksykarbonyl-etyl)-metyl-amino]-smørsyre-metylester (5 g, 23 mmol, 1,0 ekv) ble tilsatt dråpevis over en 25 min period som en løsning i 75 ml tørr CH2CI2,hvilket ga en mørke rød blanding som ble vanskelig å omrøre med en magnetisk rørestav. Omrøringen ble fortsatt i ytterligere 1 time og deretter ble Et3N (5,1 g, 50,6 mmol, 2,2 ekv) tilsatt dråpevis over en 30 min periode og deretter ble reaksjonsblandingen omrørt i ytterligere 1,5 timer ved -15 °C. Reaksjonsblandingen ble hellet i 150 ml saltvann og 150 ml CH2CI2 ble tilsatt. Etter grundig blanding, ble pH t vannet bragt til 8-9 med Et3N. Blandingen ble filtrert og det gel-lignende faste stoff ble vaskét 3 x 100 ml CH2CI2. Filtratlagene ble separert og det vandige laget ble vasket 3 x 50 ml CH2C12. Alle de organiske lag ble samlet og konsentrert til en tykk rød olje. Residuet ble tatt opp i 150 ml konsentrert HC1 og løsningen ble tilbakeløpskokt i 4 timer. Den avkjølte reaksjonsløsning ble inndampet til tørrhet og residuet ble oppløst i 200 ml mettet natriumbikarbonat-løsning. Produktet keton ble ekstrahert med 2 x 100 ml EtOAc. De organiske lag ble samlet og tørket over Na2S04. Produktet ble renset ved flash kromatografi on Si02 ved anvendelse av ren CH2CI2 til 4% MeOH i CH2C12 som elueringsmiddel. Produktet ble isolert som en oransje olje (1,23 g, 42%); MS, m/z 128=M+1.
(e) 4-amino-4-cyano-l,2-dimetyl-piperidin.
l,2-dimetyl-4-piperidon (1,23 g, 9,67 mmol, 1,0 ekv) ble oppløst i 39 ml 2 M NH3 i MeOH (8 ekv NH3). Til denne løsningen ble det tilsatt NaCN (0,52 g, 10,6 mmol, 1,1 ekv) og NH4CI (0,57 g, 10,6 mmol, 1,1 ekv). Den resulterende blanding ble tilbake-løpskokt i 2 timer hvorpå ytterligere 39 ml 2 M NH3 i MeOH ble tilsatt fulgt av ytterligere 2 timer av tilbakeløp. Reaksjonsblandingen ble avkjølt og filtrert. Filtratet ble konsentrert og tatt opp i 100 ml CH2CI2 hvilket ga mer saltpresipitat som ble fjernet ved en andre filtrering. Filtratet ble deretter konsentrert til en tykk oransje olje (1,32 g, 89%). <*>H NMR viste en 3 til 1 blanding av diastereomerene av ukjent konfigurasjon. Råproduktet ble anvendt uten ytterligere rensning; MS,m/zl54=M+l.
(f) Morfolin-4-karboksylsyre [l-(4-cyano-l^-dimeryl-pipeirdin-4-yl-
karbamoyl)-3^3-dimetyl-butyl]-amid.
iv<*->(4-morfolinekarbonyl)-L-neopenylglycin (0,20 g, 0,77 mmol, 1,0 ekv) og EDC (0,15 g, 0,77 mmol, 1,0 ekv) ble samlet i 10 ml DMF og omrørt i 15 min ved romtemperatur, en løsning av 4-amino-4-cyano-l,2-dimetyl-piperidin (0,11 g, 0,74 mmol, 0,95 ekv) i 5 ml DMF og N~ metyl-morfolin (0,31 g, 3,1 mmol, 4,0 ekv) ble tilsatt og omrøringen ble fortsatt i 16 timer. Reaksjonen ble fortynnet med 50 ml mettet natriumbikarbonat-løsning og produktet ble ekstrahert med 3 x 50 ml EtOAc. De organiske lag ble samlet og konsentrert. Råproduktet ble renset ved semi-prep revers-fase HPLC ved anvendelse av 20% CH3CN i vann til 60% CH3CN i vann over en gradient av 16 min, hvilket ga to topper (diastereomerene) under
eluering ved 13,1 og 14,0 min (49 mg og 20 mg henholdsvis); MS, m/z 394=M+1 for hver topp.
EKSEMPEL 61
Morfolin-4-karboksylsyre [l-(4-cyano-l-cyUoheksyl-piperidin-4-ylkarbamøyl)-3,3-dimetyl-butyll-amid. (a) 4-anu'no-4-cyano-piperidin-l-karboksylsye rr-butylester. r-butyl 4-okso-l-piperidin-karboksylat (10 g, 50 mmol, 1,0 ekv) ble oppløst 100 ml 2 M NH3 i MeOH. NaCN (2,7 g, 55 mmol, 1,1 ekv) og NH4CI (3 g, 55 mmol, 1,1 ekv) ble tilsatt og den resulterende blanding ble tilbakeløpskokt i 2 timer hvor på ytterligere 100 ml 2 M NH3 i MeOH ble tilsatt fulgt av ytterligere 2 timer av tilbakeløp. Reaksjonsblandingen ble avkjølt og filtrert. MeOH ble fjernet i vakuum og residuet utgnidd med 100 ml CH2CI2 og filtrert igjen. Filtratet ble konsentrert av ca. 75% og 200 ml heksaner ble tilsatt, hvilket ga et gyldenbrunt presipitat som ble oppsamlet ved filtrering hvilket gir, etter tørking under vakuum, det ønskede produkt som krem-farget fast stoff (10,1 g) som ble anvendt uten ytterligere rensning. (b) 4-cyano-4-{3^-dimetyl-2-[(morfoIin-4-karbonyl)-amino]-pentanoylamino}-piperidin-l-karboksylsyre r-butylester.
AK4-morfolinekarbonyl)-L-neopenylglycin (1,00 g, 3,87 mmol, 1,00 ekv) og EDC (0,739 g, 3,87 mmol, 1,00 ekv) ble blandet i 20 ml CH2CI2 og omrørt i 15 min. En løsning av 4-amino-4-cyano-piperidin-l-karboksylsyre r-butylester (0,872 g, 3,87 mmol, 1,00 ekv) i 10 ml CH2CI2 og JV-metyl-morfolin (1,56 g, 15,5 mmol, 4,0 ekv) ble tilsatt og den resulterende løsning ble omrørt ved romtemperatur i 16 timer. Reaksjonen ble fortynnet med 100 ml CH2C12 og 100 ml mettet natriumbikarbonat-løsning. Lagene ble separert og vandig ble vasket 2 x 50 ml CH2Cl2. De organiske ekstrakter ble samlet og tørket over Na2SC«4. Løsningen ble dekantert og konsentrert til et hvitt, fast stoff. Det faste stoffet ble oppløst i 20 ml CH3CN og vann (100 ml) ble tilsatt for å presipitere produktet. Det dunaktige hvite faste stoff ble oppsamlet ved filtrering og tørket under høyvakuum, hvilket ga den ønskede forbindelse som et hvitt pulver (1,51 g). (c) MorfoIin-4-karboksylsyre [l-(4-cyano-piperidin-4-ylkarbainoyl)-3,3-diirietyl- butylj-amidhydroklorid. 4-cyano-4- {3,3-dimetyl-2-[(morfolin-4-karbonyl)-amino]-pentanoylamino }-piperidin-l-karboksylsyre f-butylester (1,51 g, 3,24 mmol, 1,0 ekv) ble oppløst i 50 ml tørr Et20 under Ar. 4 M HC1 i 1,4-dioksan (16 ml, 20 ekv) ble tilsatt og blandingen ble omrørt i 20 min. Et hvitt, fast stoff ble nesten umiddelbart utfelt ved tilsetning av syren. Blandingen ble filtrert under Ar og det faste stoffet ble vasket 2 x 25 ml tørr Et20. Det faste stoffet ble tørket under høyvakuum til et klart hvitt pulver (1,25 g, 96%) som ble anvendt uten ytterligere rensning. (d) Morfolin-4-karboksylsyre[l-(4-cyano-l-cykloheksyl-piperidin-4-ylkarbamoyl)-3r3-dimetyl-butyl]-amid.
Morfolin-4-karboksylsyre [l-(4-cyano-pir«irdin-4-ylkarbamoyI)-33-dinietyl-buty]]-amidhydroklorid (0,050 g, 0,12 mmol, 1,0 ekv), cykloheksanon (0,015 g, 0,15 mmol, 1,2 ekv) og Na(OAc)3BH (0,046 g, 0,22 mmol, 1,75 ekv) ble blandet i 15 ml 1 % AcOH i THF. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i 16 timer. Reaksjonen ble fortynnet med 25 ml mettet natriumbikarbonat-løsning og produktet ble ekstrahert 4 x 25 ml EtOAc. De organiske ekstrakter ble samlet og konsentrert. Råproduktet ble renset ved semi-prep revers-fase HPLC ved anvendelse av 20 til 80% CH3CN i vann over en gradient av 25 min, hvilket ga det ønskede produkt, rent, som et hvitt, fast stoff (0,012 g, 21%); MS, m/z 448=M+1.
Ifølge prosedyrene ovenfor ble den følgende forbindelse syntetisert: Morfolin-4-karboksylsyre {l-[4-cyano-l -(tetrahydro-pyran-4-yl)-piperidin-4-ylkarbamoyl]-3,3-dimetyl-butyl}-amid; MS, m/z450=M+l
EKSEMPEL 62
Morfolin-4-karboksylsyre [l-(3-cyano-l-cyklopropylmetyl-pyrrolidin-3-yl-karbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-amid.
(a) l-cyklopropylmetyl-3-hydroksy-pyrrolidin.
3-nydroksy-pyrrolidin (5,65 g, 65 mmol, 1,0 ekv) ble oppløst i 100 ml 1 % AcOH i THF og avkjølt til 0 °C. Na(OAc)3BH (24 g, 114 mmol, 1,75 ekv) og cyklopropyl-karboksaldehyd (5,0 g, 71 mmol, 1,1 ekv) ble tilsatt og den resulterende blanding ble omrørt ved 0 °C i 1 time og romtemperatur natten over (161). Reaksjonen ble fortynnet med 200 ml 2 N NaOH og produktet ble ekstrahert 3x200 ml CH2C12. De organiske ekstrakter ble samlet, tørket over Na2S04, dekantert og konsentrert, hvilket ga det ønskede produkt som en fri-strømmende olje (7,26 g, 79%) som ble anvendt uten ytterligere rensning; MS, m/z 142=M+1.
(b) l-cyklopropylmetyl-pyrrolidin-3-on.
En løsning av oksalylklorid (13,1 g, 103 mmol, 2,0 ekv) ble fremstilt i 200 ml tørr CH2CI2 og avkjølt under Ar til -78 °C. DMSO (16,1 g, 206 mmol, 4,0 ekv) ble tilsatt som en løsning i 20 ml CH2C12 dråpevis over en 30 min periode hvilket ga kraftig gass dannelse. Etter tilsetning, ble blandingen omrørt i ytterligere 15 min og deretter ble en løsning av l-cyklopropylmetyl-3-hydroksy-pyrrolidin (7,26 g, 52 mmol, 1,0 ekv) i 50 ml CH2C12 tilsatt dråpevis over en 30 min periode. Etter fullstendig tilsetning ble reaksjonsblandingen omrørt i ytterligere en time ved - 78 °C. Et3N (31 g, 309 mmol, 6,0 ekv) ble tilsatt over en periode på 10 min. Kald-badet ble fjernet og blandingen ble omrørt mens den ble oppvarmet i 1 time. Blandingen ble fortynnet med 500 ml vann og 100 ml CH2C12. Etter grundig blanding, ble lagene separert og det organiske laget ble vasket med 200 ml vann, tørket over Na2S04, dekantert og konsentrert til én gul olje (6,1 g, 85%) som ble anvendt uten ytterligere rensning.
(c) 3-amino-3-cyano-l-cyklopropyl-pyrrolidin-
1 -cyklopropylmetyl-pyrrolidin-3-on (6,1. g, 44 mmol, 1,0 ekv), NaCN (2,4 g, 48 mmol, 1,1 ekv) og NH4C1 (2,6 g, 48 mmol, 1,1 ekv) ble blandet i 88 ml 2 M NH3 i MeOH og den resulterende blanding ble tilbakeløpskokt i 2 timer hvor på ytterligere 88 ml 2 M NH3 i MeOH ble tilsatt fulgt av ytterligere 2 timer ved tilbakeløp. Reaksjons-blåndingen ble avkjølt, filtrert, konsentrert og tatt opp i 100 ml CH2CI2. Blandingen ble filtrert en andre gang og konsentrert til en rød olje (5,9 g) som ble anvendt uten ytterligere rensning. (d) Morfolin-4-karboksylsyre [l-(3-cyano-l-cyklopropylmetyl-pyrrolidin-3-y]karbamoyl>2-cykloheksyl-etyl]-arnid.
AH4-morfolinekarbonyl)-L-cykloheksy1 alanin (1,00 g, 3,52 mmol, 1,00 ekv) og EDC (1,01 g, 4,58 mmol, 1,30 ekv) og HoBt (0,72 g, 4,58 mmol, 1,30 ekv) ble blandet i 20 ml DMF i 15 min fulgt av tilsetning av 3-amino-3-cyano-l -cyklopropyl-pyrrolidin (0,86 g, 5,28 mmol, 1,5 ekv) og N-metyl-morfolin (1,42 g, 14,1 mmol, 4,0 ekv). Den resulterende løsning ble omrørt ved romtemperatur i 16 timer. Reaksjonsløsningen ble fortynnet med 100 ml mettet natriumbikarbonat-løsning og produktet ble ekstrahert med 2x100 ml EtOAc. De organiske ekstrakter ble samlet og konsentrert. Råproduktet ble renset ved semi-prep revers-fase HPLC ved anvendelse av 40 til 90% CH3CN i vann over en gradient tid på 30 min, hvilket ga det ønskede produkt i to topper (diastereomerene) under eluering ved 9,5 min og 10,3 min henholdsvis (128 mg og 98 mg, 15% totalt renset utbytte); MS, m/z 432=M+1 for begge topper.
Ifølge prosedyrene ovenfor ble de følgende forbindelser også fremstilt: Morfolin-4-karboksylsyre {1-[3-cyano-l-(2-klor-benzyl)-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl]-2-cykloheksyl-etyl}-amid; MS, m/z 502=M+1
Morfolin-4-karboksylsyre {1 -[3-cyano-1 -(cykloheksyl-metyl)-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl]-2-cykloheksyl-etyl}-amid; MS, m/z474=M+l
Morfolin-4-karboksylsyre {1 - [3-cyano-1 -(1-metyl-etyl)-pyrrolidin-3-yl karbamoyl]-2-cykloheksyl-etylj-amid MS, m/z420=M+l
MorfoIin-4-karboksylsyre (1-[3-cyano-l-(3-benzyloksy-benzyl)-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl]-2-cykloheksyl-etyl }-amid; MS, m/z 574=M+1
Morfolin-4-karboksylsyre {1 -[3-cyano-1 -(2-benzyloksy-benzyl)-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl]-2-cykloheksyl-etyl} -amid; MS, m/z 574=M+1
Morfolin-4-karboksylsyre {1-[3-cyano-l-(3,5-difluor-benzyl)-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl]-2-cykloheksyl-etylj-amid; MS, m/z 504=M+1
Morfolin-4-karboksylsyre {1-[3-cyano-l -(2,6-difluor-benzyl)-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl]-2-cykloheksyl-etyl}-amid; MS, m/z 504=M+1
Morfolin-4-karboksylsyre {1-[3-cyano-1 -(3-trifluormetyl-benzyl)-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl]-2-cykloheksyl-etyl}-amid; MS, m/z 536=M+1
Morfolin-4-karboksylsyre {1 -[3-cyano-l -(3-fenoksy-benzyl)-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl]-2-cykloheksyl-etylj-amid; MS, m/z 560=M+1
Morfolin-4-karboksylsyre [1 -(3-cyano-l -cykloheksyl-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyI]-amid; MS, m/z 460=M+1
Morfolin-4-karboksylsyre {l-[3-cyano-l-(l-metyl-piperidin-4-yl)-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl]-2-cykloheksyl-etyl}-amid; MS, m/z 475=M+1
Morfolin-4-karboksylsyre {1-[3-cyano-l-(3-metyl-benzyl)-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl]-2-cykloheksyl-etyl} -amid; MS, m/z 482=M+1
Morfolin-4-karboksylsyre {1 - [3-cyano-1 -(2-fenoksy-benzyl)-pyrrolidi n-3-ylkarbamoyl]-2-cykloheksyl-etyl}-amid; MS, m/z 560=M+1
Morfolin-4-karboksylsyre {l-[3-cyano-l-(4-fluor-benzyl)-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl]-2-cykloheksyl-etyl}-amid; MS, m/z 486=M+1
Morfolin-4-karboksylsyre {l-[3-cyano-1 -(2,4,6-trimetyl-benzyl)-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl]-2-cykloheksyl-etyl }-amid; MS, m/z 510=M+1
MorfoHn-4-karboksylsyre {I -[3-cyano-1 -(lff-indol-3-ylmetyl)-pyrroIidin-3-yIkarbamoyl]-2-cykloheksyl-etylj-amid; MS, m/z 507=M+1
Morfolin-4-karboksylsyre [l-(3-cyano-l-cyklopropyl-pyrrolidin-3-ylkarbamoyI)-2-cykloheksyl-etylj-amid; MS, m/z 418=M+1
MorfoHn-4-karboksylsyre {l-[3-cyano-l-(l-pyridin-3-ylmetyl)-pyrrolidin-3-ylkarbamoyi]-2-cykloheksyl-etyl} -amid; MS, m/z 469=M+1
Morfolin-4-karboksylsyre [1 -(3-cyano-1 -cykloheksylmetyl-pyrrolidin-3-ylkarbåmoyl)-3,3-dimetyl-butyl]-amid; MS, m/z 448=M+1
Morfolin-4-karboksylsyre [1 -(1 -benzyl-3-cyano-2-hydroksymetyl-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl>-3,3-dimetyl-butyl]-amid; MS, m/z 472=M+1
Morfo)in-4-karboksylsyre [ 1 -(3-cyano-1 -isobutyl-pyrrol idin-3-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-amid; MS, m/z434=M+l
Morfolin-4-karboksylsyre [ 1-(3-cyano-l-isopropyl-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl)-3,3-dimetyl-butyl]-amid; MS, m/z 394=M+1
Morfolin-4-karboksylsyre [ 1 -(3-cyåno-1 -isobutyl -pyrroHdin-3-ylkarbamoyl)-3,3-dimetyl-butyl]-amid; MS, m/z 408=M+1
Morfolin-4-karboksylsyre {1 -[3-cyano-1 -(1 -etyl-propyl)-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl]-2-cykloheksyl-etylj-amid; MS, m/z 448=M+1
Morfolin-4-karboksylsyre {1-[3-cyano-1 -{l-etyl-propyl)-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl]-3,3-dimetyl-butyl}-amid; MS, m/z 422=M+1
MorfoIin-4-karboksylsyre[l-(3-cyano-l-fenetyl-pyiTolidin-3-ylkarbamoyl)-2-cy etyl]-amid; MS, m/z 482=M+1
Morfolin-4-karboksylsyre [ 1 -(3-cyano-1 -metyl-piperidin-3-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-amid; MS, m/z 406=M+1
Morfolin-4-karboksyIsyre [l-(3-cyano-l-propyl-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl)-3,3-dimetyl-butyl]-amid; MS, m/z 394=M+1
Moifolin-4-karboksylsyre[l-(3-cyano-l-propyl-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-amid; MS, m/z 420=M+1
Morfolin-4-karboksylsyre {l-[3-cyano-l-(fronj-4-metyl-cykloheksyl)-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl]-2-cykloheksyl-etyl} -amid; MS, m/z 474=M+1
Morfolin-4-karboksylsyre {1 -[3-cyano-l-(cw-4-metyl-cyk]oheksy1)-pyrroIidin-3-ylkarbamoyl]-2-cykloheksy1-etyl}-amid; MS, m/z 474=M+1
Morfolin-4-karboksylsyre [l-(3-cyano-l-cyk]opentyl-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl)-3,3-dimetyl-butyl]-amid; MS, m/z 420=M+1
Morfolin-4-karboksylsyre [1 -(3-cyano-1 -isobuty]-piperidin-3-y]karbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-amid; MS, m/z448=M+l
Morfolin-4-karboksylsyre [l-(3-cyano-l-cyklopentyl-pyrrolidin-3-y1karbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-amid; MS, m/z 446=M+1
1 -benzyI-3-cyano-3-{ 3-cykloheksyl-2-[(mofrolin-4-karbonyl)-amino]-propionylamino}-pyrrolidin-2-karboksylsyre-metylester; MS, m/z 526=M+1
Morfolin-4-karboksylsyre {1 -[3-cyano-l-(cw-4-metyl-cykloheksyl)-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl]-3,3-dimetyl-butyl}-amjd; MS, m/z448=M+l
Morfolin-4-karboksylsyre {1 -[3-cyano-1 -(rra/is-4-metyl-cykloheksyl)-pyrro!idin-3-ylkarbamoyl]-3,3-dimetyl-butyl}-amid; MS, m/z 448=M+1
Morfolin-4-karboksylsyre [ 1 -(3 -cyano-1 -cykloheksyl -pyrroIidin-3-ylkarbamoyl)-2-(4-jod-fenyl)-ety]]-amid; MS, m/z 580=M+1
Morfolin-4-karboksylsyre {1 -[3-cyano-l-(3-metoksy-benzyl)-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl]-2-cykloheksyl-etyl }-amid; MS, m/z 498=M+1
Morfolin-4-karboksy1syre {1-[3-cyano-l -(naftalen-2-ylmetyl)-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl]-2-cykloheksyl-etylj-amid; MS, m/z 518=M+1
Morfolin-4-karboksylsyre [ 1 -(3 -cyano-1 -cyklopentylmetyl-pyrrolidi n-3-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-amid; MS, m/z 460=M+1
Morfolin-4-karboksylsyre [1 -(3-cyano-l -cykloheksylmetyl-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl)-3-metyl-butyl]-amid; MS, m/z 434=M+1
[ l-(3-cyano-1 -cykloheksylmetyl-pyirolidin-3-ylkarbamoyl)-3-metyl-butyl]-karbaminsyre benzylester; MS, m/z 455=M+1
EKSEMPEL 63
Morfolin-4-karboksylsyre (l-{3-cyano-l-[l-(toluen-4-sulfonyl)-lff-indol-3-yI-metyl]-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl}-2-cykloheksyl-etyl)-amid.
(a) l-[l-(Toluen-4-sulfonyl)-l//-indol-3-ylmetyl]-3-hydroksy-pyiTolidin, l-(Toluen-4-sulfonyl)-lH-indol-3-karboksaldehyd (fremstilt som beskrevet i Cnatterjee, R. K.; Indian J. Chem Sect. B 1994,33( 1), 32-37) ble omsatt med 3-hydroksypyrrolidin som beskrevet for cykloprppylkarboksaldehyd i Eksempel 60 del (a) for å gi det ønskede produkt. (b) Morfolin-4-karboksylsyre (l-{3-cyano-l-[l-(toluen-4- suIfonyl)-lff-indol-3- ylmetyl]-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl}-2-cykloheksyl-etyl)-amid
Tittelforbindelsen ble fremstilt fra produktet av del (a) og N-(4-morfolinekarbonyl)-L-cykloheksylalanin ved metoden beskrevet i Eksempel 60; MS, m/z 661=M+1.
EKSEMPEL 64
Morfolin-4-karboksy tsy re {1 - [4-cyano-l-(l-mety]-piperidin-4-karbonyl)-piperidin-4-ylkarbamoyl]-2-cykloheksyl-etyl}-amid.
En løsning av 1 -metyl-piperidin-4-yl karboksylsyre (0,050 g, 0,30 mmol, 1,0 ekv) og EDC (0,057 g, 0,30 mmol, 1,0 ekv) ble fremstilt i 15 ml DMF. Etter 15 min ble morfolin-4-karboksylsyre [l-(4<yano-piperidin-4-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-amidhydroklorid (0,128 g, 0,30 mmol, 1,0 ekv) tilsatt fulgt av N-metyl-morfolin (0,12 g, 1,2 mmol, 4,0 ekv) fulgt av omrøring natten over (161). Reaksjonsblandingen ble fortynnet med 100 ml mettet natriumbikarbonat-løsning og produktet ble ekstrahert med 2x50 ml EtOAc. De samlede organiske ekstrakter ble konsentrert. Råproduktet ble renset ved semi-prep revers-fase HPLC ved anvendelse av 20 til 80% CH3CN i vann over en gradient av 25 min, hvilket ga det ønskede produkt som et hvitt, fast stoff (39 mg); MS, m/z 517=M+1.
Ifølge ovenfor prosedyre ble den følgende forbindelse også syntetisert;
Morfolin-4-karboksylsyre {1-[4-cyano-1 -(pyridin-4-karbonyl)-piperidin-4-ylkarbamoyl]-2-cykloheksyl-etyl }-amid; MS, m/z 4?7=M+1
EKSEMPEL 65
/V-[l-(4-cyano-l-metyl-pir«ridin-4-yIkarbamoyl)-2-cykloheksyl-eryl]-4-metansiilfonylamino-benzamid.
(a) 4-metansulfonylamino-benzosyre.
Etyl 4-amino-benzoat (5 g, 30 mmol, 1,0 ekv) ble blandet i 50 ml CH2C12 med Et3N (6,1 g, 60 mmol, 2,0 ekv). Løsningen ble avkjølt til 0 °C og metansulfonylklorid (3,8 g, 33 mmol. 1,1 ekv) ble tilsatt som en løsning i 15 ml CH2C12 dråpevis over en 15 min period. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 4 timer hvor på den ble fortynnet med 50 ml vann. Lag ble separert og det organiske laget ble vasket med 50 ml mettet natrium-bikarbonat-løsning og konsentrert. Den resulterende ester ble oppløst i 50 ml MeOH og behandlet med 50 ml 5 N NaOH i 4 timer. Reaksjonsløsningen ble ekstrahert med Et20 og det vandige laget ble surgjort, hvilket ga et hvitt presipitat som ble oppsamlet ved filtrering. Det faste stoffet ble tørket og anvendt uten ytterligere rensning.
(b) A^-[l-(4-cyano-l-metyl-piperidin-4-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyIl-4-metansulfonylamino-benzamid.
Denne forbindelsen ble fremstilt fra produktet i del (a) ved anvendelse av metoden beskrevet i Eksempel 24, hvilket ga det ønskede produkt som et hvitt, fast stoff; MS, m/z 490=M+1. Ifølge prosedyrene ovenfor ble de følgende forbindelser også fremstilt: A/^[l<l-benzyl-3-cyano-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl)-3,3-dimetyl-butyI]-4-metansulfonylamino-benzamid; MS, m/z 526=M+1
/v*-[l-(l-benzyl-3-cyano-pyrrolidin-3-ylkarbamoyI)-2-cykloheksyl-etyl]-4-metansulfonylamino-benzamid; MS, m/z 552=M+l
W-tl-C^cyano-l-metyl-piperidin-^ylkarbamoyO-S.S-dimetyl-butylj^-metansulfonylamino-benzamid; MS, m/z464=M+l
EKSEMPEL 66
Morfolin-4-karboksylsyre [l-(l-benzyI-3-cyano-l-oksy-pyrrolidin-3-yl-karbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-amid.
(a) Morfolin-4-karboksylsyre [l-(l-benz<y>l-3-c<y>ano-l-oksy-p<y>iToHdin-3-ylkarbamoyl)-2-cykIoheksyl-etyl]-amid.
Morfolin-4-karboksylsyre [ 1 -(1 -benzyl-3-cyano-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-amid (0,50 g, 1,1 mmol, 1,0 ekv) ble oppløst i CH2C12 (25 ml) og avkjølt til -78 °C under Ar. Fast stoff K2CO3 (0,22 g, 1,7 mmol, 1,5 ekv) ble tilsatt fulgt av tilsetning av fast stoff m-CPBA (0,24 g, 1,1 mmol, 1,0 ekv). Den resulterende blanding ble omrørt ved -78 °C i 2 timer og, deretter, fikk oppvarmes til romtemperatur. Reaksjonsblandingen ble filtrert og løsningsmidlet fjernet i vakuum. Residuet ble renset ved flash kromatografi på silikagel ved anvendelse av 10-75% MeOH-etOAc som et gradient elueringsmiddel, hvilket ga det ønskede produkt (0,32 g, 62%) som et hvitt, fåst stoff; MS, m/z 484=M+1.
EKSEMPEL 66
3-cyano-3-{3-cyldoheksyl-2-[(morfo)in-4-karbonyl)-anu'no]-prop 1-karboksylsyrebenzylester.
(a) 3-hydroksy-pyrrolidin-l-karboksylsyrebenzylester.
3-hydroksy-pyrrolidiii (10 g, 115 mmol, 1,0 ekv) ble oppløst i 2 N NaOH (100 ml) og blandingen ble avkjølt til 0 °C. Benzylklorformiat (21 g, 126 mmol, 1,1 ekv) ble tilsatt dråpevis over en 45 min period. Etter tilsetning, ble reaksjonsblandingen omrørt ved romtemperatur i 4 timer hvor på pH ble regulert til 7-8 ved anvendelse av konsentrert HC1. Produktet ble ekstrahert med 3x 100 ml CH2CI2. De organiske ekstrakter ble samlet og tørket over Na2S04, dekantert og konsentrert i vakuum, hvilket ga det ønskede produkt som en lysegul olje (24,1 g, 95%) som ble anvendt uten ytterligere rensning.
(b) 3-Okso-pyrrolidin-l-karboksyIsyrebenzylester.
En løsning av oksalylklorid (12,6 g, 99 mmol, 2,0 ekv) ble fremstilt i 250 ml tørr CH2C12 og avkjølt under Ar til -78 °C. DMSO (15,5 g, 199 mmol, 4,0 ekv) ble tilsatt dråpevis over en 15 min period hvilket ga kraftig gass dannelse. Etter tilsetning, ble blandingen omrørt i ytterligere 25 min og deretter ble en løsning av 3-hydroksy-pyrrolidin-l-karboksylsyrebenzylester (11 g, 50 mmol, 1,0 ekv) i 20 ml CH2CI2 tilsatt dråpevis over en 10 min period. Etter fullstendig tilsetning ble reaksjonsblandingen omrørt i ytterligere en time ved -78 °C. Et3N (55 ml, 398 mmol, 8,0 ekv) ble tilsatt over en periode på 10 min. Kald-badet ble fjernet og blandingen ble omrørt med oppvarming i 2 timer. Blandingen ble fortynnet med 500 ml vann. Etter grundig blanding, ble lagene separert og det vandige laget ble ekstrahert 2x 150 ml CH2CI2. De samlede organiske lag ble vasket med 200 ml natriumbikarbonat-løsning og 200 ml saltvann, tørket over Na2S04, dekantert og konsentrert til en gul olje. Produktet ble renset ved flash kromatografi på silikagel ved anvendelse av CH2C12 som elueringsmiddel, hvilket ga det ønskede produkt som en fargeløs olje (8,5 g). (c) 3-amino-3-cyano-pyrrolidin-l-karboksylsyrebenzylester. 3-amino-3-cyano-pyrrolidin-l-karboksylsyrebenzylester ble fremstilt fra ketonet fra del (b) ved anvendelse av metoden beskrevet i Eksempel 1 del (a), hvilket ga det ønskede produkt som en 2 til 1 til 1 blanding av amino-nitril, cyanohydrin og utgangs- keton som ble anvendt uten ytterligere rensning. (d) 3-cyano-3-{3-cykloheltsyl-2-[(morfolin-4-karbonyl)-aimno]-propionylaniino}-pyrrolidin-l-karboksylsyrebenzylester.
3-cyano-3- {3-cykloheksyl-2-[(morfoli n-4-karbonyI)-amino]-propionylaniino} -pyrrolidin-1 - karboksylsyrebenzylester ble fremstilt fra aminet fra del (c) ved anvendelse av metoden beskrevet i Eksempel 1 del (a), hvilket ga etter rensning på silika, det ønskede produkt som et off-hvitt hardt skum; MS, m/z 512=M+1.
Ifølge prosedyrene. ovenfor ble den føl gende forbindelse også syntetisert;
3-cyano-3-{ 3-cykloheksyl-2-[(morfolin-4-karbonyl)-amino]-propionylamino} -pyrrolidin-1-karboksylsyre (2-propen-l-yl) ester; MS, m/z 462=M+1.
EKSEMPEL 68
Morfolin-4-karboksylsyre{l-[3-cyano-l-(53-dimetyl-3-okso-cykloheks-l-enyl)-pyrrolidin-3-yIkarbamoyl]-2-cykIoheksyl-etyl}-amid..
3- cyano-3-{ 3-cykloheksyl-2-[(morfolin-4-karbonyl)-amino]-propionylamino} -pyrrolidin-1 - karboksylsyre (2-propen-l-yl) ester (1,35 g, 2,93 mmol, 1,00 ekv) ble oppløst i 35 ml CH2C12 sammen med dimedon (3,30 g, 23,5 mmol, 8,03 ekv). Pd(PPh3)4 (0,25 g, 0,22 mmol, 0,07 ekv) ble tilsatt og suspensjonen ble omrørt ved romtemperatur i 3,5 timer. Reaksjonsblandingen ble konsentrert og tatt opp i EtOAc (100 ml) og ekstrahert med 1 N HC1 (2x50 ml). Konsentrasjon av den organiske fasen og rensning av den urensede blandingen ved revers-fase HPLC gir produktet som to separate diastereomerer; MS, m/z 500=M+1. EKSEMPEL 69 4- cyano-4-{3-cyklohel(syl-2-[(piperidin-4-karbonyl)-ariuno]-propionylarfuno}-piperidin-l-karboksylsyreetylester. (a) 4-cyano-4-{3-cykloheksyl-2-[(l-/-butoksykarbonyl-piperidin-4-karbonyl)-amino]-propionyIamino}-piperidin-l-karboksylsyreetylester..
Dette mellomproduktet ble fremstilt fra 1-t-butoksykarbonyl-piperidinkarboksylsyre og 4-cyano-4-{[3-cykloheksyl-2-amino]-propionylamino}-piperidinkarboksylsyreetylester-hydroklorid ved anvendelse av metoden beskrevet i Eksempel 24.
(b) 4-cyano-4-{3-cykloheksyl-2-[(piperidin-4-karbonyl)-amino]-propionylarnino}-piperidin-l-karboksylsyreetylester.
Esteren fra (a) ble oppløst i 10 ml 4 N HC1 i 1,4-dioksan ved 0 °C i 1 time. Løsningen ble konsentrert i vakuum og saltet nøytralisert av natriumbikarbonat-løsningen og produktet ekstrahert med CH2CI2. Etter konsentrasjon av den organiske ekstrakten, ble råproduktet renset ved revers-fase HPLC, hvilket ga det ønskede produkt; MS, m/z 462=M+1.
Ifølge prosedyrene ovenfor ble de følgende forbindelser også syntetisert: 4-cyano-4- {3<ykloheksyl-2-t(4-metyl-piperazin-l-karbonyl)-amino]-propionylamino }-piperidin-1 -karboksylsyre etylester; MS, m/z 477=M+1
4-mety 1-piperazin-1 -karboksylsyre [ 1 -(4-cy ano-tetrahydro-pyran-4-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyljamid; MS, m/z 406=M+1.
EKSEMPEL 70
Morfolin-4-karboksylsyre [1-(1 -benzyI-3-cyano-azetidin-3-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-amid.
(a) 3-amino-l-benzyI-3-cyano-azetidiii.
l-benzyl-3-okso-azetidin (1,6 g, 10 mmol, 1,0 ekv), fremstilt som beskrevet i litteraturen (Katritzky, En. R.; Cundy, D. J.; J. Heterocyklisk Chem. 1994,31 271-275), ble oppløst i tørr
MeOH og løsningen ble avkjølt til -78 °C. Gassformig ammoniakk ble boblet gjennom løsningen i 30 minutter hvor på 3 angstrom molekylsikter ble tilsatt og blandingen overført til et trykkrør. Løsningen ble oppvarmet i 30 min ved 60 °C. Blandingen ble avkjølt til -78 °C, røret ble åpnet og KCN (0,65 g, 10 mmol, 1,0 ekv) og NH4CI (0,27 g, 5 mmol, 0,5 ekv) ble tilsatt og røret ble på ny forseglet og oppvarmet ved 60 °C i 4 timer. Reaksjonsblandingen ble filtrert og filtratet ble inndampet. Den rå resten ble renset ved flash kromatografi ved anvendelse av 2% MeOH i CH2CI2, hvilket ga det ønskede produkt (0,11 g, 6%) som en brun olje;MS,m/zl88=M+l.
(b) Morfolin-4-karboksylsyre[l-(l-benzyl-3-cyano-azetidin-3-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-amid.
Tittelforbindelsen ble fremstilt fra 3-amino-l-benzyl-3-cyano-azetidin og N-(4-morfolinekarbonyl)-L-cykloheksylalanin ved anvendelse av metoden beskrevet i Eksempel 1 trinn (d), hvilket ga det ønskede produkt som et hvitt, fast stoff; MS, ni/z 454=M+1.
EKSEMPEL 71
MorfoIin-4-karboksylsyre [l-(3-cyano-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl)-2-cykIoheksyl-etyl]-amid.
3-cyano-3-{3-cykloheksyl-2-[(morf karboksylsyrebenzylester (0,1 g, 0,20 mmol, 1,0 ekv) ble oppløst i 15 ml absolutt EtOH. 10% Pd på karbon (20 mg) ble tilsatt og blandingen ble omrørt under 1 atm av H2 inntil utgangsmaterialet forsvant ved TLC (5% MeOH i CH2CI2. Den urensede blandingen ble filtrert på diatoméjord og filtratet ble konsentrert. Rå materialet ble renset ved revers-fase HPLC, hvilket ga to diastereomerer; MS, m/z 378=M+1.
EKSEMPEL 72
Morfolin-4-karboksylsyre {l-[3-cyano-l-(2-metyl-2-fenyl-propyl)-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl]-2-cykloheksyl-etyl}-amid.
Reduktiv aminering av morfolin-4-karboksylsyre [l-(3-cyano-pyrrolidin-3-ylkar<p>amoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-amid med 2,2-dimetyl-2-fenyl-acetaldehyd og Na(OAc)3BH i 1% AcOH i THF ga det ønskede produkt; MS, 510=M+1.
Ifølge ovenfor prosedyre ble de følgende forbindelser også syntetisert;
Morfolin-4-karboksylsyre {1-[3-cyano-l-(indan-2-ylmetyl)-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl]-2-cykloheksy]-etyl}-amid; MS, m/z 508=M+1
Morfolin-4-karboksylsyre {l-[3-cyano-l-(5-metyl-tiofen-2-ylmetyl)-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl]-2-cykloheksyl-etyl) -amid; MS, m/z 488=M+1.
EKSEMPEL 72
2-{ [Acetylimino-(4-metoksy-fenyl)-metyI]- amino }-N-(4-cyano-l-metyl-piperidin-4-yl)-3-cykloheksyl-propionamid (Metode E).
(a) N-(4-metoksy-tiobenzoyl)acetamid.
En løsning av acetylklorid (4,69 g, 59,8 mmol) i aceton (20 ml) ble tilsatt dråpevis til en løsning av 4-metoksytiobenzamid (5,00 g, 29,9 mmol) og pyridin (4,76 g, 60,1 mmol) i aceton (30 ml). Reaksjonsblandingen ble oppvarmet til tilbakeløp i 30 min og deretter hellet i isvann. Det resulterende utfelte stoff ble isolert via filtrering og tørket under vakuum natten over for å gi en lysegul/oransje farget fast stoff (4,52 g, 72%). 'H NMR (400 MHz, CDC13) □ 2,56 (s, 3H), 3,87 (s, 3H), 6,89 (dd, /= 6,9,2,0 Hz, 2H), 7,77 (dd, J = 6,9,2,0 Hz, 2H). (b) 2-{[Acetyliinino<4-metolisy-fenyl)-meryl]-aniino}-N-(4-cyano-l-metyl-piperidin- 4-yl)-3-cykloheksyl-propionamid. 2-klor-N-metylpyridiniumjodid (660 mg, 2,58 mmol), ble tilsatt til en løsning av N-(4-metoksy-tiobenzoyl)acetamid (420 mg, 2,01 mmol), 2-amino-N-(4-cyano-l-metyl-piperidin-4-yl)-3-cykloheksyl-propionamid bis hydrokloridsalt (730 mg, 2,00 mmol) og N.N-diisopropyletylamin (1,05 ml, 6,02 mmol) i diklormetan (8,0 ml). Reaksjons-blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 2 timer, deretter fortynnet med diklormetan (100 ml)og vasket med 2x 150 ml mettet natriumbikarbonat. Den organiske fasen ble tørket (MgS04) og konsentrert. Det resulterende residuet ble kromatografert over 100 g flash silika først ved anvendelse av EtOAc, deretter diklormetan/metanol 9:1 som elueringsmidlet for å gi det ønskede produkt som et gråhvitt, fast stoff (377 mg, 40%). 'H NMR (400 MHz, DMSO-d6) S 0,70-0,90 (m, 2H), 1,00-1,30 (m, 4H), 1,35-1,65 (m, 8H), 1,72 (s, 3H), 1,85-2,20 (m, 6H), 2,48-2,60 (m, 1H), 3,78 (s, 3H), 4,20-4,35 (m, 1H), 6,95-6,99 (m, 2 T), 7,33 (d, J = 8,4 Hz, !H), 7,72 (d, J = 8,4 Hz, 1H). MS, m/z 468 = M+l. EKSEMPEL 73 2-[(Acetylimino-fenyl-metyI)-^^ propionamid. (a) Tiobenzoyl åcetamid ble fremstilt i henhold til metoden fra Eksempel 1, trinn a, ved å starte med tiobenzamid. (b) Tittelforbindelsen ble fremstilt ved å starte fra tiobenzoylacetamid og 2-amino-N-(4-cyano-l-metyl-piperidin-4-yl)-3-cykloheksyI-propionamid bis hydrokloridsalt i henhold til metoden fra Eksempel 72, trinn b. MS, m/z 438 = M+l.
EKSEMPEL 74
2-{ [Acet<y>limino-(4-fluor-fen<y>l)-met<y>l]-amino} -N-(4-c<y>ano-l-metyl-piperidin-4-yl)-3-cykloheksyl-propionamid. (a) N-(4-fluor-tiobenzoyl )acetamid ble fremstilt i henhold til metoden fra Eksempel 72, trinn a, ved å starte med 4-fluortiobenzamid. (b) Tittelforbindelsen ble fremstilt ved å starte fra N-(4-fluor-tiobenzoyl) acetamid og 2-amino-N-(4-cyano-l-metyl-piperidin-4-yl)-3-cykloheksyl-propionamid bis hydrokloridsalt i henhold til metoden fra Eksempel 72, trinn b. MS, m/z 456 = M+l.
EKSEMPEL 75
2-[(Acetylimino-fenyl-metyl)]-amino]-N-[3-cyano-l-(l-etyl-propyl)-pyrrolidin-3-yl]-3-cykloheksyl-propionamid. (a) Tittelforbindelsen ble fremstilt ved å starte fra tiobenzoylacetamid og 2-amino-N-[3-cyano-l-(l-etyl-propyl)-pyrrolidin-3-yl]-3-cykloheksyl-propionamid bis hydrokloridsalt i henhold til metoden fra Eksempel 72, trinn b, bortsett fra at forbindelsen ble renset ved HPLC ved anvendelse av en 20 x 250 mm C18 revers fase kolonne med metoden 20% acetonitril i vann til 90% acetonitril i vann. MS, m/z 480 = M+l. EKSEMPEL 76
{[l-(4-cyano-1 -metyl-piperidin-4-ylkarbamoyl)^ metylen }-karbaminsyreetylester (Metode E).
(a) (Morfolin-4-karbotioyl)-karbaminsyreetylester.
Morfolin (7,5 ml, 86,0 mmol) ble tilsatt dråpevis til en løsning av etylisotiocyanato formiat (10,0 ml, 84,8 mmol) i tetrahydrofuran (200 ml). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i 2,5 timer, deretter konsentrert og tørket under vakuum for å gi det ønskede produkt som et hvitt, fast stoff (16,5 g, 89%). Dette materialet ble anvendt uten ytterligere rensning. 'H NMR (400 MHz, CDC13) 81,28 (t, J = 7,1 Hz, 3H), 3,61-3,97 (m, 8H), 4,16 (q, 7,1 Hz, 2H), 7,44 (br s, 1H). (b) {[1 -(4-cyano-1 -metyl-piperidin-4-ylkarbamoyI)-2-cykloheksyl-etylamino]-morfolin-4- yl-metylen} -karbaminsyreetylester. 2-klor-N-metylpyridiniumjodid (680 mg, 2,66 mmol), ble tilsatt til en løsning av (Morfolin-4-karbotioyl)-karbaminsyreetylester (450 mg, 2,06 mmol), 2-amino-N-(4-cyano-l-metyl-piperidin-4-yl)-3-cykloheksyl-propionamid bis hydrokloridsalt (745 mg, 2,04 mmol) og N,N-diisopropyletylamin (1,10 ml, 6,3 mmol) i diklormetan (8,0 ml). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i 2,5 timer og deretter tatt opp i 10% sitronsyreløsning og vasket med EtOAc. Den vandige fasen ble deretter gjort basisk med mettet natriumkarbonat og ekstrahert med EtOAc. Den organiske ekstrakten ble tørket (MgS04) og konsentrert for å gi det ønskede produkt som et hvitt, fast stoff (250 mg, 26%). Dette materialet ble ytterligere renset ved HPLC ved anvendelse av en 20 x 250 mm Cig revers fase kolonne med metoden 20% acetonitril i vann til 90% acetonitril i vann. MS, m/z 477 M+l. EKSEMPEL 77
{[l-(4-cyano-1 -propyl-piperidin-4-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etylimino]-morfolin metyl} -karbami nsyreetylester.
Tittelforbindelsen ble fremstilt ved å starte fra (Mprfolin-4-karbotioyl)-karbaminsyre etylester og 2-amino -N-(-4-cyano-l -propyl-piperidin-4-yl)-3:cykloheksylpropionamid bis hydrokloridsalt i henhold til metoden fra Eksempel 76, trinn b, bortsett fra at forbindelsen ble først renset ved kromatografi over silikagel ved anvendelse av 9:1 metylenklorid : metanol som elueringsmidlet før revers fase HPLC rensning. MS, m/z 505 = M+1.
EKSEMPEL 78
{[1 -(4-cyano-l -propyl-piperidin-4-ylkarbamoyl)-3,3-dimetyl-butyIimino]-morfolin-4-yl-metyl }-karbaminsyreetylester.
Tittelforbindelsen ble fremstilt ved å starte fra (Morfolin-4-karbotioyl)-karbaminsyre etylester og 2-amino -4,4-dimetyl-pentansyre (4-cyano-1-propyl-pipéridin-4-yl)amid bis hydrokloridsalt i henhold til metoden fra Eksempel 76. MS, m/z 460 = M+l.
EKSEMPEL 79
({l-[3-cyano-l-(l-etyl-propyl)-pyirolidin-3-ylkarbamoy morfolin-4-yl -metylen )-karbaminsyreetylester.
Tittelforbindelsen ble fremstilt ved å starte fra (Morfolin-4-karbotioyI)-karbaminsyre etylester og 2-amino-N-[3-cyano-1 -(1 -ety 1-propyl )-pyrrolidin-3-yl 1-3-cykloheksyl -propionamid bis hydrokloridsalt i henhold til metoden fra Eksempel 76, trinn b,. MS, m/z 519 = M+l.
EKSEMPEL 80
N-(4-cyano-l-metyl-piperidin-4-yl)-3-cykloheksyl-2-[(etylkarbamoylimino-fenyl-metyl)-amino]-propionamid (Metode F),
(a) Benzimidsyre-metylester.
Benzimidsyre-metylester-hydroklorid (5 g, 29,1 mmol) ble fordelt mellom mettet natriumkarbonat-løsning (200 ml) og dietyleter (100 ml). Det organiske laget ble tørket (MgS04) og konsentrert for å gi det ønskede produkt som en fargeløs væske (3,20 g, 81%). Dette materialet ble anvendt uten ytterligere rensning. <*>H NMR (400 MHz, CDC13) 5 3,93 (s, 3H), 7,39-7,46 (m, 3H), 7,75 (d, J = 1,1 Hz, 2H).
(b) 1 -etyl-3-(metoksy-fen yl-metylen)-urinstoff.
En alene blanding av benzimidsyre-metylester (750 mg, 5,56 mmol) og etyl isocyanat (808 mg, 11,3 mmol) ble omrørt ved 50 °C i 24 timer. Overskudd av isocyanat ble fjernet under vakuum for å gi det ønskede produkt som en fargeløs viskøs olje (1,09 g, 95%). Dette materialet ble anvendt uten ytterligere rensning. <*>H NMR (400 MHz, CDC13) 81,07 (t, J 7,3 Hz, 3 T), 3,25 (q, J = 7,3 Hz, 2 T), 3,87 (s, 3H), 4,97 (br s, 1H), 7,26-7,40 (m, 2H), 7,45 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 7,69-7,71 (m, 2H). MS, m/z 207 = M+l. (c) N-(4-cyano-1 -metyl-piperidin-4-yl)-3-cykloheksyl-2-[(etylkarbamoylimino-fenyl-metyl)-amino]-propionamid.
En løsning av l-etyl-3-(metoksy-fenyl-metylen)-urinstoff (350 mg, 1,70 mmol), 2-amino-N-(4-cyano-l-metyl-pipéridin-4-y])-3-cykloheksyl-propionamid bis hydro-kloridsalt (512 mg, 1,40 mmol) og N,N-diisopropyletylamin (352 mg, 2,73 mmol) i tørr metanol (5,0 ml) ble omrørt ved romtemperatur i 60 timer. Reaksjonsblandingen ble konsentrert og den resulterende resten ble kromatografert over 50 g flash silikagel ved anvendelse av diklormetan til 5% metanol i diklormetan som elueringsmidlet. Dette ga det ønskede produkt som et lysegult, fast stoff (280 mg, 43%) som ble ytterligere renset ved HPLC ved anvendelse av en 20 x 250 mm C]8 revers fase kolonne med metoden 20% acetonitril i vann til 90% acetonitril i vann. MS, m/z 467 = M+l.
EKSEMPEL 81
N-( 4- cyano- l- metvl- piperidin- 4- vlV3- cvkloheksvl- 2-( l. l- diokso- ljrY- lD6- benzordl- isotiazol-3- vlaminoVpropionamid ( Metode G).
(a) En suspensjon av 3-klor-benzo[d]isotiazol 1,1 -dioksyd (300 mg, 1,49 mmol) og 2-amino -N-(-4-cyano-l-metyl-piperidin-4-yl)-3-cykloheksylpropionamid bis hydrokloridsalt (500 mg, 1,37 mmol) ble fremstilt i 5,5 ml acetonitril. Trietylamin (575 DL, 4,10 mmol) ble
tilsatt og reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i 1 dag. Suspensjonen ble filtrert for å fjerne trietylamin-hydroklorid og filtratet ble konsentrert. Det resulterende residuet ble kromatografert over 50 g flash silika ved anvendelse av diklormetan/ metanol 9:1 som elueringsmidlet for å gi det ønskede produkt som et lysegult, fast stoff (310 mg, 49%). 'H NMR (400 MHz, CDC13) 8 0,25-0,45 (m, 1H), 0,65-0,85 (m, 2H), 0,95-1,10 (m, 2H), 1,30-1,60 (m, 7H), 1,75-1,85 (m, 2H), 1,85-2,2 (m, 2H), 2,31 (s, 3H), 2,35-2,50 (m, 3H), 2,65-2,80
(m, 2H), 4,60-4,70 (m, 1H), 7,35-7,50 (m, 2H), 7,58 (t, J = 7,3,1H), 7,78 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 7,81 (br s, 1H), 8,91 (br s, 1H). MS, m/z458 = M+l.
EKSEMPEL 82
N-( 4- cvano- l- propvl- piperidin- 4- vn- 3- cykloheksvl- 2-( l. l- diokso- lg- lD6- benzordlisotiazol-3- ylamino)- propionamid.
Tittelforbindelsen ble fremstilt ved å starte fra 3-klor-benzo[d]isotiazol 1,1-dioksyd og 2-amino -N-(-4-cyano-l-propy]-piperidin-4-yl)-3-cykloheksylpropionamid bis hydrokloridsalt i henhold til metoden fra Eksempel 81, bortsett fra at forbindelsen ble ytterligere renset ved HPLC ved anvendelse av en 20 x 250 mm Cig revers fase kolonne med metoden 20% acetonitril i vann til acetonitril. MS, m/z 486 = M+l.
EKSEMPEL 83
2- f 1. 1 - diokso- 1 H -\ □ 6- benzofd1isotiazol- 3- vlamino' l- 4. 4- clirnetvl- peiitansvref4- cvano-1 - propvlpiperidin- 4- vl Vamid.
Tittelforbindelsen ble fremstilt ved å starte fra 3-klor-benzo[d]isotiazol 1,1-dioksyd og 2-amino -4,4-dimetyl-pentansyre (4-cyano-1 -propyl-piperidin-4-yl)amid bis hydrokloridsalt i henhold til metoden fra Eksempel 81, bortsett fra at forbindelsen ble ytterligere renset ved HPLC ved anvendelse av en 20 x 250 mm Cig revers fase kolonne med metoden 20% acetonitril i vann til acetonitril. MS, m/z 460 = M+l.
EKSEMPEL 84
N- r3- cvano- l - fl - etvl- propvlVpvrrolidin- 3- vl1- 3- cvkloheksvl- 2-( l . 1- diokso- ltf- l D<6->benzordlisotiazol- 3- vlaminol- propionamid.
Tittelforbindelsen ble fremstilt ved å starte fra 3-klor benzo[d]isotiazol 1,1-dioksyd og 2-ami no-N- [3-cyano-1 -(1 -etyl-propyl)-pyrrolidi n-3-yl]-3-cykloheksyl-propionamid bis hydrokloridsalt i henhold til metoden fra Eksempel 81, bortsett fra at forbindelsen ble ytterligere renset ved HPLC ved anvendelse av en 20 x 250 mm Cig revers fase kolonne med metoden 40% acetonitril i vann til acetonitril. MS, m/z 500 = M+l.
EKSEMPEL 85
N-( 3- cvano- 1 - cvkloheksvl- pvrrolidin- 3- vn- 3- cvkloheksvl- 2- f Ll- diokso- ltf- 1 benzofdlisotiazol- 3- vlaminoVpropionamid.
Tittelforbindelsen ble fremstilt ved å starte fra 3-klor benzo[d]isotiazol 1,1-dioksyd og 2-amino-N-(3-cyano-1 -cykloheksyl-pyrrolidin-3-yl)-3-cykloheksyl-propionamid bis hydrokloridsalt i henhold til metoden fra Eksempel 81, bortsett fra at forbindelsen ble ytterligere renset ved HPLC ved anvendelse av en 20 x 250 mm Cig revers fase kolonne med metoden 40% acetonitril i vann til acetonitril. MS, m/z 512 = M+l.
EKSEMPEL 86
N- f4- cvano- metvl- piperidin- 4- vlV3- cvkloheksvl- 2- f3- okso- 3H- isoindol- l- vlaminoV propionamid.
Tittelforbindelsen ble fremstilt ved å starte fra 3-imino-2,3-dihydro-isoindol-l-oneand 2-amino-N-(4-cyano-l-metyl-piperidin-4-yl)-3-cykIoheksyl-propionamid bis hydrokloridsalt i henhold til metoden fra Eksempel 81, bortsett fra at tilbakeløpende THF ble anvendt som løsningsmidlet. Forbindelsen ble ytterligere renset ved HPLC ved anvendelse av en 20 x 250 mm C|g revers fase kolonne med metoden 20% acetonitril i vann til acetonitril. MS, m/z 422,5 = M+l.
EKSEMPEL 87
4. 4- dimetyl- 2-( 3- okso- 3H- isoindol- 1 - vlamino)- pentanoicacid-( 4- cvano- 1 - propyl- piperidin- 4-vO- amid.
Tittelforbindelsen ble fremstilt fra 3-imino-2,3-dihydro-isoindol-l-oneand 2-amino -4,4-dimetyl-pentansyre (4-cyano- 1-propyl-pipeirdin-4-yl)amid bis hydrokloridsalt i henhold til metoden fra Eksempel 86. MS, m/z 424,5 = M+l.
EKSEMPEL 88
N-( 4- cvano- l- metyl- piperidin- 4- vlV3- cvkloheksvl- 2-( 5. 6- difluor- 3- okso- 3H- isoindol- l-vlamino) propionamid.
(a) 2-klor-4,5-difluorbenzosyre-metylester.
2-klor-4,5-difluorbenzosyre (1,93 g, 10 mmol) ble oppløst i 20 ml aceton. Cesiumkarbonat (5,29 g, 15 mmol) ble tilsatt fulgt av jodmetan (1,0 ml, 15 mmol). Denne reaksjonsblandingen ble oppvarmet under tilbakeløp i 1 time og deretter avkjølt til romtemperatur. Denne
suspensjonen ble deretter fortynnet med 40 ml etyleter. Det faste stoffet ble fjernet ved filtrering og vasket med etyleter. Filtratet ble inndampet i vakuum, hvilket ga tittelforbindelsen i kvantitativt utbytte som en klar olje.
(b) 2-cyano-4,5-difluorbenzosyre-metylester.
Oljen ovenfor (2,06 g, 10 mmol) ble oppløst i 10 ml iV-metylpyrrolidinon. Kobber (I) cyanid (1,79 g, 20 mmol) ble tilsatt. Denne blandingen ble oppvarmet ved 19S °C under nitrogen i 1 time. Etter avkjøling til romtemperatur, ble denne løsningen fortynnet med 100 ml vann. Det resulterende faste stoffet ble oppsamlet ved filtrering. Dette faste stoffet ble deretter suspendert i en raskt omrørt løsning av kaliumcyanid (0,5 g) i 30 ml vann i 1 time. EtOAc (30 ml) ble tilsatt. Blandingen ble filtrert gjennom diatoméjord. Den organiske fasen ble separert og den vandige fasen ble ekstrahert med EtOAc (20 ml x 2). Den samlede organiske fase ble vasket med saltvann og tørket over magnesiumsulfat. Løsningsmidlet ble fjernet i vakuum. Residuet ble krystallisert fra etyleter og petroleter, hvilket ga tittelforbindelsen som et gult, faststoff (1,26 g, 64%).
(c) 5,6-difluor-2,3-dihydro-3-imino-l//-isoindol-l-on.
Fast stoffet ovenfor (0,493 g, 2,5 mmol) ble oppløst i 20 ml MeOH. Denne løsningen ble mettet med ammoniakk ved 0 °C og deretter omrørt i et trykkrør ved rom-temperatur i 3 dager. Det faste stoffet ble oppsamlet ved filtrering og vasket med etyleter, hvilket ga tittelforbindelsen som et gult, fast stoff (0,363 g, 80 %).
Tittelforbindelsen ble fremstilt fra 5,6-difluor-2,3-dihydro-3-imino-l/f-isoindol-l-on og 2-amino-N-(4-cyano-l-metyl-piperidin-4-yl)-3-cykloheksyl-propionamid bis hydrokloridsalt i henhold til metoden fra Eksempel 86. MS, m/z 458,3 = M+l.
EKSEMPEL 89
N-( 4- cyano- 1 - metvl- piperidin- 4- yl)- 3- cvkloheksvl- 2-( 2- okso- 2H- benzoreiri . 31 oksazin- 4-vlamino)- propionamid.
Tittelforbindelsen ble fremstilt ved å starte fra 4-klor-benzo[e][l,3] oksazin-2-on (fremstilt fra benzo [e][l,3] oksazin-2,4-dion og PCI5 i tilbakeløpende toluen) og 2-amino-N-(4-cyano-l-metyl-piperidin-4-yl)-3-cykloheksyl-propionamid bis hydrokloridsalt i henhold til metoden fra Eksempel 81. MS, m/z 438 = M+1.
EKSEMPEL 90
N-( 4- cvano- l- metvl- piperidin- 4- vlV2-( 4- cvano- pvrimidin- 2- vlamino')- 3- cvkloheksvl-propionamid ( Metode G).
2-klor-4-pyrimidinekarbonitril (0,3 mmol, Daves, G. D. Jr., 0'Brien, D. E., Cheng, C. C. J. Het. Chem, 1964, 1,130) og 2-amino-/V-(4-cyano-l-metyl-piperidin-4-yl)-3-cykloheksyl-propionamid (0,7 mmol) ble oppløst i acetonitril (10 ml) inneholdende N, N-diisopropyletylamin (0,6 mmol). Løsningen ble oppvarmet til et forsiktig tilbakeløp i 17 timer. De flyktige stoffene ble inndampet og residuet ble underkastet kromatografi (silikagel, elueringsmiddel = EtOAc deretter MeOH). Metanolholdig fraksjon ble konsentrert til et fargeløst, fast stoff som ble rekromatografert (10% MeOH/EtOAc), hvilket ga
tittelforbindelsen som et fargeløst, fast stoff (52%). Materialet ble omkrystallisert fra diklormetan/petroleter.
EKSEMPEL 91
N-( 4- cvano- l- metyl- piperidin- 4- yl)- 2-( 4- trifluormetyl- pvrimidin- 2- ylaminoV3- cvkloheksvl-propionamid.
Tittelforbindelsen ble fremstilt fra 2-klor-4-trifluormetyl pyrimidin og 2-amino-Af-(4-cyano-l-metyl-pipeirdin-4-yl)-3-cykloheksyl-propionamid i henhold til metoden fra Eksempel 90. MS, m/z 439,5 = M+l.
EKSEMPEL 92
N-(4-cyano-1 -mety l-piperidin-4-yl )-3-cykloheksyl-2[N-cyano-morfolin-4-karboksimidoyl)-aminoj-propionamid (Metode T). (a) 2-(N-cyano-iminometylen-amino)-N-(4-cyano-l-metyl-piperidin-4-yl)-3-cykloheksyl-propionamid.
En løsning av difenylcyanokarbonimidat (455 mg, 1,91 mmol), 2-amino-N-(4-cyano-l-metyl-piperidin-4-yl)-3-cykloheksyl-propionamid bis hydrokloridsalt (680 mg, 1,86 mmol) og N,N-diisopropyletylamin (482 mg, 3,73 mmol) i isopropanol (5,0 ml) ble omrørt natten over ved romtemperatur. Reaksjonsblandingen ble deretter filtrert for å gi det ønskede karbodiimid som et hvitt pulver (140 mg, 22%). Dette materialet ble anvendt uten ytterligere rensning. 'H NMR (400 MHz, CDC13) 80,80-1,00 (m, 2H), 1,05-1,20 (m, 1H), 1,20-1,40 (2H), 1,50-1,85 (m, 8H), 2,32 (s, 3H), 2,40-2,50 (m, 2H), 2,55-2,70 (m, 4H), 2,85-2,95 (m, 2H), 4,10-4,20 (m, 1H), 8,77 (br s, 1H). MS, m/z 343 = M+l. (b) 2-(N-cy ano-benzimidoyl-amino)-N-(4-cyano-1 -metyl-piperidin-4-yl)-3 -cykloheksyl-propionamid.
En suspensjon av 2-(N-cyano-iminometylen-amino)-N-(4-cyano-l-metyl-piperidin-4-yl)-3-cykloheksyl-propionamid (120 mg, 0,35 mmol) i tetrahydrofuran (1 ml) ble behandlet med morfolin (4 ml, 45,9 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i 3 dager og deretter konsentrert til tørrhet. Residuet ble renset ved HPLC ved anvendelse av en 20 x 250 mm ds revers fase kolonne med metoden 20% acetonitril i vann til 90% acetonitril i vann. MS,m/z430 = M+l.
EKSEMPEL 93
N-(4-cyano-l-metyl-piperidin-4-yl)-3-cykloheksyl-2-{t(dietyl-karbamoylimino)-morfolin-4-yl-metyl]-amino }-propionamid (Metode T).
(a) N,N-dietyl karbamoyltiocyanat.
En suspensjon av natriumtiocyanat (3,30 g, 40,7 mmol) i tørr acetonitril (25 ml) ved 80°C ble behandlet dråpevis med en løsning av N,N-dietylkarbamoylklorid (5,0 g, 36,9 mmol) i tørr acetonitril (15 ml). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved 80°C i 50 min, avkjølt til romtemperatur, deretter filtrert gjennom en fin glassfritte. Det resulterende filtrat ble anvendt som en 0,9 M løsning av N,N-dietyl karbamoyltiocyanat i acetonitril.
(b) N-(4-cyano-1 -metyl-piperidi n-4-yl)-3-cykloheksyl-2-(3-dietylamino-karbonyl-tioureido)-propionamid
En løsning av 2-amino -N-(-4-cyano-l-propyl-piperidin-4-yl)-3-cykloheksylpropion-amid bis hydrokloridsalt (560 mg, 1,53 mmol) og trietylamin (500 uL, 3,59 mmol) i acetonitril (4 ml) ble behandlet med en løsning av N,N-dietyl karbamoyltiocyanat i acetonitril (3,0 ml, 2,7 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt natten over ved romtemperatur og konsentrert på en rotasjonsinndamper. Det resulterende residuet ble kromatografert (etylacetat: heksaner 1:1 deretter etylacetat og til slutt metanol: metylenklorid 1:9 som elueringsmidlet) for å gi det ønskede produkt som et lysegult, fast stoff (340 mg, 49%). MS, m/z 451,3 = M+l.
Tittelforbindelsen ble fremstilt ved behandling av en løsning av det resulterende tiourinstoff (340 mg, 0,75 mmol) og trietylamin (230 jiL, 1,65 mmol) i tørr acetonitril (4 ml) med kvikksølv (II) klorid (225 mg, 0,83 mmol) og morfolin (200 u,L, 2,23 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i 4 timer deretter filtrert gjennom en 0,45 □m filter skive. Det resulterende filtrat ble filtrert gjennom en kolonne av silika (5% metanol/metylenklorid som elueringsmidlet) og det resulterende råprodukt ble ytterligere renset av HPLC ved anvendelse av en 20 x 250 mm Cig revers fase kolonne med metoden 20% acetonitril i vann til acetonitril. MS, m/z 504,6 = M+l.
De følgende eksempler ble fremstilt ved Metode T på en tilsvarende måte:
EKSEMPEL 94
{[1 -(4-cyano-1 metyl-piperidin-4-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etylamino]-pyrrolidin-l -yl-metylj-karbaminsyreetylester. MS, m/z 461 = M+l.
EKSEMPEL 95
{[ 1 -{4-cyano-1 -metyl-piperidin-4-y lkarbamoyI)-2-cykloheksyl-etylamino]-pipeirdin-1 -yl-metyl} -karbaminsyreetylester. MS, m/z 477 = M+l.
EKSEMPEL 96
{Azepan-1 -yl-[l -(4-cyano-1 metyl-piperidin-4-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl-amino]-metylenj-karbaminsyreetylester. MS, m/z 490 = M+1.
EKSEMPEL 97
{Azocan-1 -yl-[ 1 -(4-cyano-l metyI-piperidin-4-ylkarbamoyl)-2-cykIoheksyl-etylamino]-metylenj-karbaminsyreetylester. MS, m/z 504 =M+1.
EKSEMPEL 98
1 - {[ 1 -(4-cyano-1 -metyl-pipeirdin-4-yl karbamoyl)-2-cykloheksyl-etylamj no]-etoksykarbonylimino-metyl}-pipeirdin-4-karboksylsyreetylester. MS, m/z 548 = M+l. EKSEMPEL 99 l-{[l-(4-cyano-l-metyl-pipeirdin-4-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etylamino]-etoksykarbonylimi no-metyl}-pipen di n-3-karboksylsyreety lester. MS, m/z 548 = M+l.
EKSEMPEL 100
[[l-(4-cyano-l-metyl-piperidin-4-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etylainino]-(4-pyrrolidin-l-yl-piperidin-l-yl)-metylen]-karbaminsyreetylester. MS, m/z 545 =M+1.
EKSEMPEL 101
{[1,4']Bipiperidinyl-1 '-yl-[l -(4-cyano-1 -metyl-piperidin-4-ylkarbamoyl)-2-cykloheksy1-etylamino]-metylen}-karbaminsyreetylester. MS, m/z 559 =M+1.
EKSEMPEL 102
[[l-(4-cyano-l-metyl-piperidin-4-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etylamino]-(4-fenyl-pipe^ l-yl)-metylen]-karbaminsyreetylcster. MS, m/z 553 =M+1.
EKSEMPEL 103
[[1 -(4-cyano-1 -mety]-piperidin-4-ylkarbamoyI)-2-cykloheksyl-etylamino] -(4-etyl-piperazin-1 - yl)-metylen]-karbaminsyreetylester. MS, m/z 505 = M+l.
EKSEMPEL 104
{(4-acetyl-piperazin-1 -yl)-[l -(4-cyano-l -mety1-piperidin-4-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etylamino]-metylen}-karbaminsyreetylester. MS, m/z519 = M+l.
EKSEMPEL 105
4-{ [1 -(4-cyano-1 -mety1-piperidin-4-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etylarnino]-etoksykarbonyIimino-metyl}-piperazin-l-karboksylsyreetylester. MS, m/z549 = M+l.
EKSEMPEL 106
[[ 1 -(4-cyano-1 -metyl-piperi din-4-ylkarbamoyl )-2-cykloheksyl-ety 1 amino]-(3,3,5-trimetyl-6-aza-bicyklo[3,2,l]okt-6-yl)-metylen]-karbaminsyreetylester. MS, m/z 544 =M+1.
METODER FOR TERAPEUTISK ANVENDELSE
Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse er anvendelige for å hemme aktiviteten til cathepsin S, K, F, L og B. Ved dette er disse forbindelser anvendelige for blokke-ring av sykdomsprosesser mediert av disse cysteinproteaser.
Forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse blokkerer effektivt nedbrytning av invariant kjeden til CLIP av cathepsin S og hemmer således antigen presentasjonen og antigen-spesifikke immunresponser. Kontroll av antigen spesifikke immunresponser er en attraktiv metoder for behandling av autoimmune sykdommer og andre uønskede T-celle medierte immunresponser. Således, tilveiebringes metoder for behandling ved anvendelse av forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse for slike tilstander. Disse omfatter autoimmune sykdommer og andre sykdommer som involverer upassende antigen spesifikke immunresponser omfattende, men ikke begrenset til, revmatoid artritt, systemisk lupus erythematosus, Crohn's sykdom, ulcerativ kolitt, multippel sklerose, Guillain-Barre syndrom, psoriasis, Grave's sykdom, myasthenia gravis, sklerodermi, glomerulonefritt, atopisk dermatitt, insulin-avhengig diabetes mellitus og astma. Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse kan også anvendes for å behandle andre lidelser forbundet med ekstracellulær proteolyse så som Alzheimers sykdom og aterosklerose. Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse kan også anvendes for å behandle andre lidelser forbundet med upassende autoimmunresponser, T-celle medierte immunresponser eller ekstracellulær proteolyse mediert av cathepsin S, ikke beslektet med de oppført ovenfor eller beskrevet i Bakgrunn for oppfinnelsen. Derfor tilveiebringer oppfinnelsen også metoder for modulering av en autoimmun sykdom omfattende administrering til en pasient med behov for slik behandling en farmasøytisk effekt mengde av en forbindelse ifølge oppfinnelsen.
Forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse hemmer også cathepsin K. Ved dette kan de blokkere upassende nedbrytning av ben kollagen og andre ben matriks proteaser. Således, tilveiebringes en metode for behandling av sykdommer hvor disse fremgangs-måter spiller en rolle så som osteoporose. Hemning av cathepsiner F, L og B hører også innenfor omfanget av foreliggende oppfinnelse grunnet likheter i de aktive siter i cysteinproteaser som beskrevet ovenfor.
For terapeutisk anvendelse kan forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse admini-streres i hvilken som helst konvensjonell doseform på hvilken som helst konvensjonell måte. Administreringsmetoder omfatter, men er ikke begrenset til, intravenøst, intra-muskulært, subkutant, intrasynovialt, ved infusjon, sublingvalt, transdermalt, oralt, topisk eller ved inhalering. De foretrukne administreirngsmetoder er oral og intravenøs.
Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse kan administreres alene eller i kombinasjon med tilsetningsmidler som forbedrer stabiliteten til inhibitorene, letter administrering av farmasøytiske preparater inneholdende dem i visse utførelsesformer, gir øket oppløsning eller dispersjon, øker den hemmende aktivitet, gir samterapi og lignende, omfattende andre aktive bestanddeler. Fordelaktig kan slike kombinasjons-terapier anvende lavere doser av konvensjonelle terapeutiske midler, for således å unngå mulig toksisitet og ugunstige bivirkninger når midlene blir anvendt som monoterapier. Forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse kan fysisk kombineres med konvensjonelle terapeutiske midler eller andre tilsetningsmidler inn i et enkelt farmasøytiske preparat. Fordelaktig kan forbindelsene deretter administreres sammen i en enkel doseform. I noen utførelsesformer, inneholder de farmasøytiske preparater omfattende slik kombinasjoner av forbindelser minst ca. 15%, men mer foretrukne minst ca. 20%, av en forbindelse av oppfinnelsen (vekt/vekt) eller en kombinasjon derav. Alternativt, kan forbindelsene administreres separat (enten i serie eller parallelt). Separat dosering tillater større fleksibilitet i doseringsregimet.
Som nevnt ovenfor, omfatter doseformer av forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse farmasøytisk akseptable bærere og tilsetningsmidler kjent for fagfolk på området. Disse bærere og tilsetningsmidler omfatter, for eksempel ionebyttere, aluminia, aluminiumstearat, lecitin, serum proteiner, buffer substanser, vann, salter eller elektrolytter og cellulose-baserte substanser. Foretrukne doseformer omfatter, tablett, kapsel, caplet, væske, løsning, suspensjon, emulsjon, pastiller, sirup, rekonstituerbare pulver, granule, suppositorium og transdermalt plaster. Metoder for fremstilling av slike doseformer er kjent (se for eksempel T.C. Ansel og N.G. Popovisn, Pharmaceutical Dosage and Drug Delivery Systems, Sth ed., Lea og Febiger (1990)). Dosenivåer og krav er velkjente på området og kan velges av fagfolk på området fra tilgjengelig metoder og teknikker egnet for en spesielt pasient. I noen utførelsesformer, er dosenivåer i området fra ca. 10-1000 mg/dose for en 70 kg pasient. Selv om én dose pr. dag kan være tilstrekkelig, kan opptil 5 doser pr. dag bli gitt. For orale doser, opptil 2000 mg/dag kan være nødvendig. Som fagfolk vil forstå, kan lavere eller høyere doser være nødvendig avhengig av spesielle faktorer. For eksempel, vil spesifikke dose og behandlingsregimer avhenge av faktorer så som pasienten's generelle helse profil, alvorlighetsgraden og grad av pasienten's lidelse eller disposisjon dertil og bedømmelsen av behandling av lege.
VURDERING AV BIOLOGISKE EGENSKAPER
Ekspresjon og Rensning av rekombinant human Cathepsin S
Kloning av human cathepsin S:
U937 RNA ble underkastet revers transkriptase / polymerasekjedereaksjon med primer A (5'cacaatgaaacggctggtttg 3') og primer B (5'ctagatttctgggtaagaggg 3') utformet for spesifikt å amplifisere cathepsin S cDNA. Det resulterende 900 bp DNA-fragment ble subklonet inn i pGEM-T (Promega) og sekvensert for å bekrefte dens identitet. Denne konstruksjonen ble anvendt i alle påfølgende manipulasjoner. Denne prosedyren er typisk for kloning av kjente gener og er etablert i fagområdet.
Human Pre-Pro-Cat S ble fjernet fra pGem-T vektoren (Promega, 2800 Woods Hollow Rd, Madison, WI 53711) ved fordøyelse med restriksjonsenzymet SacII, fulgt av behandling med T4 DNA polymerase for å danne en butt ende og et andre restriksjons-enzym spaltet med Sali. Den ble subklonet inn i pFastBacl donor plasmid GibcoBRL, 8717 Grovemont Cr., Gaithersburg, MD 20884) som hadde vært kuttet med restrik-sjonsenzym BamHl og gjort budt-endet og deretter kuttet med restriksjonsenzym Sali. Ligeringsblandingen ble anvendt for å transformere DH5a kompetente celler (GibcoBRL) og platet ut på LB plater inneholdende 100ug/ml ampicillin. Kolonier ble dyrket i natten over kulturer av LB medium inneholdende 50ug/ml Ampicillin, plasmid DNA ble isolert og korrekt innskudd bekreftet ved restriksjonsenzym fordøyelse. Rekombinant pFastBac donor plasmid ble transformert inn i DHlOBac kompetente celler (GibcoBRL). Store hvite kolonier ble plukket fra LB plater inneholdende 50ug/ml kanamycin, 7ug/ml gentamicin, 10ug/ml tetracyklin, 100ug/ml Bluo-gal og 40ug/ml IPTG. DNA ble isolert og anvendt for å transfektere Sf9 insektceller ved anvendelse av CellFECTIN reagens (GibcoBRL). Celler og supernatant ble høstet etter 72 timer. Viral supernatant ble ført to ganger og tilstedeværelse av Cat S bekreftet ved PCR av supernatanten.
SF9 celler ble infisert med rekombinant baculovirus ved en MOI på 5 i 48-72 timer. Celle pellet ble lysert og inkubert i buffer ved pH 4,5 ved 37 i 2 timer for å aktivere Cat S fra pro-formen til aktiv moden form (Bromme, D & McGrath, M., Protein Science. 1996.5:789-791.) Tilstedeværelse av Cat S ble bekreftet ved SDS-PAGE og Western blot ved anvendelse av kanin anti-human proCat S.
Hemning av Cathepsin S
Human rekombinant cathepsin S uttrykt i Baculovirus blir anvendt i en endelig konsentrasjon på 10nM i buffer. Buffer er 50mM Na Acetat, pH 6,5, 2,5mMEDTA, 2,5mMTCEP. Enzym blir inkubert med hver forbindelse eller DMSO i 10 min ved 37C. Substratet 7-amino-4-metylkumarin, CBZ-L-valyl-L-valyl-L-arginineamid (vanlig syntetisert av Molekylar Probes) blir fortynnet til 20uM i vann (endelig konsentrasjon på 5uM), satt til forsøket og inkubert i ytterligere 10 minutter ved 37 C. Aktiviteten til forbindelsen blir målt ved redusert fluorescens sammenlignet med DMSO kontroll når avlest ved 360nm eksitasjon og460nm emisjon.
Eksemplene oppført ovenfor ble evaluert for hemning av cathepsin S i forsøket ovenfor. Alle hadde IC50 verdier på 100 mikromolar eller under.
Hemning av Cathepsin K. F. L og B:
Hemning av disse enzymer av spesielle forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse kan bestemmes uten unødvendig eksperimentering ved anvendelse av metoder kjente på området som gitt nedenfor og hver er inntatt her ved referanse:
Cathepsin B og L forsøk skal finnes i de følgende referanser:
1. Methods in Enzymology, Vol,244, Proteolytic Enzymes: Serin and Cysteine Peptidases, Alan J. Barrett, ed..
Cathepsin K forsøk skal finnes i de følgende referanser:
2. Bromme, D., Okamoto, K., Wang, B. B. og Biroc, S. (1996) /. Biol. Chem. 271,2126-2132.
Cathepsin F forsøk skal finnes i de følgende referanser:
3. Wang, B., Shi, G.P., Yao, P.M., Li, Z., Chapman, T.En. og Bromme, D. (1998) J. Biol. Chem. 273,32000-32008. 4. Santamaria, I., Velasco, G., Pendas, En.M, Paz, En. og Lopez-Otin, C (1999) J. Biol Chem. 274,13800-13809.
Foretrukne forbindelser som skal evalueres for hemning av Cathepsin K, F, L og B i forsøket ovenfor har fortrinnsvis IC50 verdier på 100 mikromolar eller nedenfor.

Claims (16)

1. Forbindelse, karakterisert ved at den har formel (I): hvor: Het er piperidinyl, pyrrolidinyl, azetidinyl, tetrahydropyranyl, tetrahydrotiopyranyl, azabicyklooktyl, piperazinyl, som hver er eventuelt substituert med én eller flere Rs; YerO; Ri er fenyl, pyrrolidinyl, piperidinyl, morfolinyl, azepanyi, piperazinyl, imidazolyl, pyrimidinyl eller pyrazinyl hvor Ri eventuelt er substituert med én eller flere R»; R» er fenyl, piperidinyl, Cl-5 alkoksy eller R„ er Cl-5-aIkanoylamino, Cl-5 alkylsulfonylamino, Cl-5 alkylsulfonylaniino-Cl-5-alkyl, cyano eller CF3; R2 er hydrogen eller Cl-3 alkyl; R3 er hydrogen eller C1 -5 alkyl hvor R3 eventuelt er substituert med én eller flere R^; Rc er Cl-5 alkyl eller C3-7 cykloalkyl og kan videre være substituert med en eller flere Rd; Rd er en eller flere grupper valgt fra Cl-5 alkyl og C3-6 cykloalkyl; Rt er hydrogen; Rs er en eller flere grupper valgt blant hydrogen, Cl-5 alkylkjede, fenyl, naftyl, fenyl Cl-3 alkyl, indanyl, C3-7 cykloalkyl, C3-7 cykloalkenyl, pyrimidinyl, Cl-5 alkanoyl, benzoyl, Cl-5 alkoksykarbonyl, fenoksykarbonyl, benzyloksykarbonyl, karbamoyl hvor nitrogenatomet kan være uavhengig mono eller disubstituert med Cl-5 alkyl, piperidinyl eller R5 er Cl-5 alkyltio hvor svovelatomet kan oksyderes til et sulfoksyd eller sulfon, piperidinylkarbonyl, pyridinylkarbonyl eller indolyl eller Rs er amidino eller guanidino, Rs kan videre være eventuelt substituert med én eller flere R*; R« er Cl-5 alkyl, C3-6 cykloalkyl, fenylsulfonyl, indolyl, Cl-5 alkoksy, fenoksy, pyridinyl, halogen, hydroksy, okso, karboksy, cyano, nitro, benzyloksy, amidino elter guanidino; X er O og farmasøytisk akseptable derivater derav.
2. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at Het er piperidinyl, pyrrolidinyl, tetrahydropyranyl eller tetrahydrotiopyranyl hver ring er substituert med én eller flere R5; Y er O; Ri er fenyl, piperidinyl, morfolinyl, piperazinyl, pyrazinyl eller benzoisoksazolyl hvor Rt eventuelt er substituert med én eller flere Ra; Ra er fenyl, piperidinyl, C1:3 alkoksy eller Ra er C1 -5 alkanoylamino, Cl-5 alkylsulfonylamino, amino, cyano eller CF3; R2 er hydrogen; R3 er Cl-5 alkyl hvor R3 eventuelt er substituert med én eller flere Rc; Rc er C1 -4 alkyl eller C5-6 cykloalkyl, Rt kan videre være eventuelt substituert med én eller flere Rj; Rd er metyl; R4 er hydrogen; R5 er en eller flere grupper valgt blant Cl-4alkylkjede, fenyl, fenylCl-2alkyl, pyrimidinyl, Cl-3 alkanoyl, benzoyl, Cl-4 alkoksykarbonyl, karbamoyl hvor nitrogenatomet kan være uavhengig mono eller disubstituert med Cl-5 alkyl, piperidinyl, Cl-3 alkyltio eller pyridinylkarbonyl, R5 kan videre være eventuelt substituert med én eller flere Re; Re er Cl-3 alkyl, C5-6 cykloalkyl, Cl-4 alkoksy, pyridinyl, halogen, hydroksy, okso eller cyano; og XerO.
3. Forbindelse ifølge krav 2, karakterisert ved at Ri er fenyl, piperidinyl, morfolinyl, piperazinyl eller pyrazinyl hvor Ri eventuelt er substituert med én ellér flere Ra; Ra er fenyl, piperidinyl, Cl-3 alkoksy, fenoksy, Cl-3 alkanoylamino, klor eller CRF3; R3 er metyl, etyl, n-propyl, n-butyl, isobutyl eller propenyl hvor R3 eventuelt er substituert med én eller flere Rc; Rc er metyl, etyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, isobutyl eller tert-butyl, Rc kan videre være eventuelt substituert med én eller flere Rj; Rd er metyl, metoksy, etoksy, klor, fluor, nitro eller hydroksy; R5 er metyl, etyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, isobutyl, tert-butyl, fenyl, metoksy-karbonyl, etoksykarbonyl, n-propoksykarbonyl, isopropoksykarbonyl, n-butoksy-karbonyl, isobutyloksykarbonyl, tert-butoksykarbonyl og pyrimidinyl, R5 kan videre være eventuelt substituert med én eller flere Re; Re er metyl, etyl, n-propyl, isopropyl, metoksy, etoksy, n-propoksy, isopropoksy, n-butoksy, isobutoksy, tert-butoksykarbonyl, brom, klor, fluor, jod, hydroksy, okso eller cyano.
4. Forbindelse ifølge krav 3, karakterisert ved at Het er piperidinyl eller pyrrolidinyl; Ri er N-acetylaminofenyl, klorfenyl, metoksyfenyl, morfolinyl eller pyrazinyl; R3 er n-butyl, isobutyl, 2,2-dimetylpropyl eller cykloheksylmetyl; og hvor konfigurasjonen ved stereosenteret definert av R2 og R3 når de er forskjellig og karbonet de er bundet til er definert som L; og R5 er metyl, propyl, isopropyl, etoksykarbonyl, fenetyl, N,N-dimetylaminoacetyl eller pyrimidinyl.
5. Forbindelse ifølge krav 4, karakterisert ved at Het er piperidin-4-yl eller pyrrolidinyl; Ri er morfolinyl eller N-acetylaminofenyl; R3 er 2,2-dimetylpropyl eller cykloheksylmetyl; og R5 er metyl, propyl, isopropyl, etoksykarbonyl, fenetyl, N,N-dimetylaminoacetyl eller pyrimidinyl.
6. Forbindelse, karakterisert ved at den er valgt fra gruppen bestående av: Morfolin-4-karboksylsyre[l-(4-cyano-l-metyl-piperidin-4-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-amid; 4-acetylarmno-AT-[l-{4-cya^ benzamid; 4-åcetylanMno-A^tl-(4-cyano-l-metyl-piperidin-4-ylkarbamoyl)- Morfolin-4-karboksylsyre [1 -(4-c<y>ano- 1-met<y>l-<p>i<p>eridin-4-<y>lkarbamoyl)-3,3-dimetyl-butyl]-amid; Morfolin-4-karboksylsyre [ 1 -(1 -benzyl-4-cyano-piperidin-4-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-amid; Morfolin-4-karboksylsyre [ 1 -(4-cyano-piperidin-4-y Ikarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl J-amidhydroklorid; Morfoli n-4-karboksylsyre {1 - [4-cyano-1 -(1 -metyl-ety l)-piperidin-4-ylkarbamoyl] -2-cykloheksyl-etyl}-amid; Moifolin-4-karboksylsyre [1-(4-cyano-1-fenety1-piperidin-4-y]karbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-amid; Morfolin-4-karboksylsyre {1 -[3-cyano-1 -benzy 1-pyrroli di n-3-ylkarbamoyl]-2-cykloneksyI-etylj-amid; Morfolin-4-karboksylsyre [l-(4-cyano-1 -propyl-piperidin-4-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etylj-amid; Morfolin-4-karboksylsyre [ 1 -(4-cyano-1 -isopropyl-pipeirdin-4-y lkarbamoyl)-3,3-dimetyl-butyl]-amid; Morfolin-4-karboksylsyre [l-(i-fenetyl-4-cyano-piperidin-4-ylkarbamoy1)-3,3-dimetyl-butyl]-amid; Morfolin-4-karboksylsyre [ 1 -(1 -n-propyl-4-cyano-piperidin-4-ylkarbamoyl)-3,3-dimetyl-butyl]-amid; Morfolin-4-karboksylsyre [l-(l-benzyl-4-cyano-piperidin-4-ylkarbamoyl)-3,3-dimetyl-butyl]-amid; 4-acetylamino-A4Kl-benzyl-4-cyano-pipeirdin-4-ylka^ benzamid; 4-acetylamino-#-[l-(4-cyano-l-tsopropyl-piperi^^ benzamid; Moifolin-4-karboksylsyre [ 1 -(1 -benzyl-3-cyano-piperidin-3-y1karbamoy])-2-cykloheksyl-etyl]-amid; N-[ 1 -(4-cyano-1 -metyl-piperidin-4-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-benzamid;
4- (Acetylamino-metyl)-A(r-[l-(4-cyano-l -metyl-piperidin-4-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-benzamid; W-[l-(4-cyano-l-metyl-piperidin-4-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-isonikotinamid; Pyrazin-2-karboksylsyre [1 -(4-cyano-1 -metyl-piperidin-4-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-amid;
5- klor-tiofen-2-karboksy1syre [ 1 -(4-cyano-1 -metyl-piperidin-4-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-amid; 4-klorrN-[l-(4-cyano-1-metyl-piperidin-4-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-benzamid; JV-[ 1 -(4-cyano-1 -metyl-piperidin-4-ylkarbamoyI)-2-cykIoheksyl-etyl]-3-fenoksy-benzamid; A^[l-(l-benzyl-3-cyano-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl-etyl]-isonikotinamid; Pyrazin-2-karboksylsyre [ 1 -(1 -benzyl-3-cyano-pyrrolidi n-3-y lkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-amid; Morfolin-4-karboksylsyre {1 -[3-cyano-l-(cykloheksyl-metyl)-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl]-2-cykloheksyl-etyl }-amid; Morfolin-4-karboksylsyre[l-(3-cyano-l-benzyl-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl)-3,3-dimetyl-butyl]-amid; N-tl-tl-benzyl-S-cyano-pyirolidin-S-ylkarbamoylJ-S^-dimetyl-butyll-benzaniid; Pyrazin-2-karboksylsyre [l-(l-benzyl-3-cyano-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl)-3,3-dimetyl-butyl]-amid; MorfoIin-4-karboksylsyre {1 -[3-cyano-1 -(1 -metyl-etyl)-pyrrolidin-3-y 1 karbamoyl]-2-cykloheksyl-etyl}-amid; N- [ 1 -(1 -benzyl-3-cyano-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl)-3,3 -dimetyl-butyl ]-4-metansulfonylamino-benzamid; A^[l-(l-benzyl-3-cyano-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-4-metansulfonylamino-benzamid; -(4-cyano-1 -metyl-piperidin-4-ylkarbamoyl)-3,3-dimetyl-butyl]-benzamid; N-[ 1 -(4-cyano-l -metyl-piperidin-4-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-4-fluor-benzamid; N-[ 1 -(4-cyano-1 -metyl-piperidin-4-ylkarbamoy^ benzamid; Morfolin-4-karboksylsyre [1 -(3-cyano-1 -cykloheksyl-pyrrolidin-3-ylkarbamioyl)-2-cykloheksyl-etyl]-amid; Morfolin-<4>-karboksylsyre [l-(3-cyano-l-etyl-pynrolidin-3-y]karbamoy])-2-cykloheksy]-etyl]-amid; Morfolin-4-karboksylsyre [ 1 -(3-cyano-l-metyl-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-amid; Morfolin-4-karboksylsyre {1 - [3-cyano-l -(3-metyl-benzyI)-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl]-2-cykloheksyl-etyl }-amid; Morfolin-4-karboksylsyre {1 - [3-cyano-l-(2-metyl-pent-2-enyl)-pyrrolidin-3-ylkarbamoyI]-2-cykloheksyl-etyl}-amid; Morfblin-4-karboksylsyre {1 - [3-cyano-1 -(1 /f-indol-3-ylmetyl)-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl]-2-cy kloheksyl-etyl}-amid; Pyrrolidin-1-karboksylsyre [l-(l-benzyl-3-cyano-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-amid; Morfolin-4-karboksylsyre [1 -(3-cyano- l-cykloheksylmetyl-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl)-3,3-dimetyl-butyl]-amid; Morfolin-4-karboksylsyre [1 -(3-cyano-1 -isobutyl-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-amid; Morfblin-4-karboksylsyre [ 1 -(3-cyano-1 -i sopropyl-pyirolidin-3-ylkarbamoyl)-33-dimetyl-butyl]-amid; Mbrfolin-4-karboksylsyre [1 -(3-cyano- I-isobutyl-pyrro]idin-3-ylkarbamoyl)-3,3-dimetyl-butyl]-amid; Morfolin-4-karboksylsyre {1-[3-cyano-1-(1-etyl-propyl)-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl]-2-cykloheksyl-etyl }-amid; Morfolin-4-karboksylsyre {1-[3-cyano-l -(l-etyl-propyl)-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl]-3,3-dimetyl-butyl}-amid; Morfo1in-4-karboksy1syre [1 -(3-cyano-l -fenetyl-pyrrolidin-3-ylkarbamoy])-2-cyk]oheksyl-etyl]-amid; Morfolin-4-karboksylsyre [l-(3-cyano-l-cyklopropylmetyl-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl)-2-cykloheksy]-etyl]-amid; Morfolin-4-karboksylsyre [l-(3-cyano-l-metyl-piperidin-3-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-amid; Morfolin-4-karboksylsyre [1-(1-benzyl-3-cyano-azetidin-3-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-amid; Morfolin-4-karboksylsyre [1 -(3-cyano-1 -propyl-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl)-3,3-dimetyl-butyl]-amid; Morfolirt-4-karboksylsyre [ 1 -(3-cyano-1 -propyl-pyrrolidin-3-yl karbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-amid; Morfolin-4-karboksylsyre {1 -[3-cyano-1 -(rran5-4-metyl-cykloheksyl)-pyrro]idin-3-ylkarbamoyl]-2-cykloheksyl-€tyl}-amid; Morfolin-4-karboksylsyre [ 1 -(3-cyano- l-cyklopentyl-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl)-3,3-dimetyl-butyl]-amid; Morfolin-4-karboksylsyre [1-(3-cyano-i-isobutyl-piperidin-3-ylkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-amid; Morfolin-4-karboksylsyre [ 1-(3-cyano-l-cyk1opentyl-pyrrolidin-3rylkarbarnoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-amid; Morfolin-4-karboksylsyre [1 -(3-cyano-pyrro1idin-3-ylkarbamoy])-2-cykloheksyl-etyl]-amid; Morfolin-4-karboksylsyre {1-[3-cyano-l-(rra«s-4-metyl-cykloheksy])-pyrro]idin-3-ylkarbamoyl]-3,3-dimetyl-butyl}-amid; Morfolin-4-karboksylsyre [l-(l-benzyl-3-cyano-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl)-2-naftalen-2-yl-etyl]-amid; Morfolin-4-karboksylsyre [1 -(I -benzyl-3-cyano-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl)-2-(4-klor-fenyl)-etyl]-amid; Morfolin-4-karboksyisyre {1 -[3-cyano-1 -(5-metyl-tiofen-2-ylmetyl)-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl]-2-cykloheksyl-etyl}-amid; Morfolin-4-karboksylsyre [l-(l-benzyl-3-cyano-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl)-3-metyl-but-3-enyl]-amid; MorfoHn-4-karboksylsyre [ 1 -(3-cyano-1 -cyklopentylmetyl-pyrrolidin-3-yIkarbamoyl)-2-cykloheksyl-etyl]-amid; Morfolin-4-karboksylsyre [ 1 -(3 -cyano-1 -cykIoheksylmetyl-pyrrolidin-3-ylkarbamoyI)-3-metyl-butyl]-amid; 4-klor-W- [1 -(4-cyano-1 -propyl-piperidin-4-ylkarbamoyl)-3,3-dimetyl-buty l]-benzamid; Pyrazin-2-karboksylsyre [1 -(4-cyano-1 -porpyI-piperidin-4-ylkarbamoyl)-3,3-dimetyl-butyl3-amid; 4,4-dimetyl-2-(2-tiofen-2-yl-acetyIamino)-pentansyre (4-cyano-l-propyl-piperidin-4-yl)-amid; MorfoHn-4-karbpksylsyre [1 -(1 -benzyl-3-cyano-pyrrolidin-3-ylkarbamoyl)-3-metyl-butyl]-amid; Morfolin-4-karboksylsyre [ 1 -(4-cyano-1 -cyk1oheksyl-pipeirdin-4-y]karbamoyl)-3,3-dimetyl-butyl]-amid; Morfolin-4-karboksylsyre [2-(4-klor-fenyl)-1 -(4-cyano-1 -propyl-piperidin-4-ylkarbamoyl)-etyl]-amid; Morfolin-4-karboksylsyre [1 -(4-cyano-l-propyl-piperidin-4-ylkarbamoyl)-2-(3,4-diklor-fenyl)-etyl]-amid; Morfolin-4-karboksylsyre [1-(4-cyano-l-propyl-piperidin-4-ylkarbamoyl)-2-naftalen-2-yl-etyl]-amid; Morfolin-4-karboksylsyre [1 -(4-cyano- 1-propy l-piperidin-4-ylkarbamoyl)-3-metyl-butyl]-amid; Morfolin-4-karboksylsyre [1 -(4-cyano- 1,2-di metyl-piperidin-4-ylkarbamoyl)-3,3-dimety1-butyl]-amid og de farmasøytisk akseptable derivater derav.
7. Farmasøytisk preparat, karakterisert ved at det omfatter en farmasøytisk effektiv mengde av forbindelse ifølge kravene 1 eller 6.
8. Anvendelse av en forbindelse ifølge krav 1 eller 6, for fremstilling av et farmasøytisk preparat for modulering av en autoimmun sykdom.
9. Anvendelse ifølge krav 8, idet den autoimmune sykdom er revmatoid artritt, systemisk lupus erythematosus, CromVs sykdom, ulcerativ kolitt, multippel sklerose, Guillain-Barre syndrom, psoriasis, Grave's sykdom, myasthenia gravis, sklerodermi, glomerulonefritt, atopisk dermatitt eller insulin-avnengig diabetes mellitus.
10. Anvendelse av en forbindelse ifølge krav 1 eller 6, for fremstilling av et farmasøytisk preparat for behandling av Alzheimers sykdom.
11. Anvendelse av en forbindelse ifølge krav 1 eller 6, for fremstilling av et farmasøytisk preparat for behandling av aterosklerose eller osteoporose.
12. Anvendelse av en forbindelse ifølge krav 1 eller 6, for fremstilling av et farmasøytisk preparat for behandling av astma.
13. Fremgangsmåte for fremstilling av en forbindelse med formel (I) hvor Ri, R2, R3, R4, Het og R5 er som definert i krav 1 og Y og X er begge O, karakterisert ved at den omfatter: a) omsetning av en aminosyreester (IV), hvor R<*> er en beskyttelsesgruppe, under egnete reaksjonsbetingelser med en R|C(0)L hvor L er en utgående gruppe: b) fjerning av beskyttelsesgruppen R' fra forbindelsen produsert i trinn a) for å produsere den tilsvarende karboksylsyre; c) omsetning av produktet av trinn b) under koblings-betingelser med et aminonitril som bærer "Het-Rs" vist nedenfor for å produsere forbindelsen med formel (I):
14. Fremgangsmåte for fremstilling av en forbindelse med formel (I) hvor Ri, R2, R3, R+, Het og R5 er som definert i krav 1 og Y og X er begge O, karakterisert ved at den omfatter: a) omsetning av under koblings-betingelser en beskyttet aminosyre med en beskyttelsesgruppe R<*> med en nitrilforbindelse som har "Het-Rs": b) fjerning av beskyttelsesgruppen R<*> fra forbindelsen produsert i trinn a); c) omsetning av forbindelsen produsert fra trinn b) med en aktivert syre R]C(Y)L hvor L er en utgående gruppe, for å produsere en nitril med formel (I);
15. Fremgangsmåte for fremstilling av en forbindelse med formel (I) hvor Ri, R2, R3, R4, Het og Rs er som definert i krav 1 og Y og X er begge O, karakterisert ved at den omfatter: a) omsetning av ammoniakk med en beskyttet aminosyre som bærer "Het-Rs" hvor R" er en beskyttelsesgruppe, under egnete koblings-betingelser: b) fjerning av beskyttelsesgruppen R" fra produktet av trinn a) for å produsere forbindelse III c) omsetning av en aminoester med formel (IV) med R]C(0)L hvor L er en utgående gruppe, i nærvær av en egnet base, for å produsere forbindelse (V); d) hydrolyse av produktet av trinn c) for å produsere karboksylsyre (VI); e) omsetning av under egnet koblings-betingelser, produktet (III) fra trinn b) med produktet (VI) fra trinn d), fulgt av dehydratisering for å produsere nitrilforbindelsen med formel (I).
16. Fremgangsmåte for fremstilling av en forbindelse med formel (I) hvor Ri, R2, R3, R4. Het og R5 er som definert i krav 1 og Y og X er begge O, karakterisert ved at den omfatter: a) omsetning av under koblings-betingelser, en aminosyre amidforbindelse som bærer "Het-Rs" med en beskyttet aminosyre som bærer grupper R2,R3: b) fjerning av beskyttelsesgruppen R' fra forbindelsen produsert i trinn a); c) omsetning av under egnede betingelser produktet av trinn b) méd en R|C(0)L forbindelse hvor L er en utgående gruppe, fulgt av dehydratisering for å produsere en nitrilforbindelse med formelen(I).
NO20021207A 1999-09-13 2002-03-12 Nye spiroheterocykliske forbindelser nyttige som inhibitorer av cystein proteaser samt anvendelse og fremstilling derav og farmasoytisk preparat. NO323354B1 (no)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US15373899P 1999-09-13 1999-09-13
US22290000P 2000-08-03 2000-08-03
PCT/US2000/023584 WO2001019816A1 (en) 1999-09-13 2000-08-28 Novel spiroheterocyclic compounds useful as reversible inhibitors of cysteine proteases

Publications (3)

Publication Number Publication Date
NO20021207L NO20021207L (no) 2002-03-12
NO20021207D0 NO20021207D0 (no) 2002-03-12
NO323354B1 true NO323354B1 (no) 2007-04-10

Family

ID=26850810

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO20021207A NO323354B1 (no) 1999-09-13 2002-03-12 Nye spiroheterocykliske forbindelser nyttige som inhibitorer av cystein proteaser samt anvendelse og fremstilling derav og farmasoytisk preparat.

Country Status (30)

Country Link
EP (1) EP1218372B1 (no)
JP (1) JP2003529546A (no)
KR (1) KR20030024651A (no)
CN (1) CN100410250C (no)
AR (1) AR032136A1 (no)
AT (1) ATE244235T1 (no)
AU (1) AU782246B2 (no)
BG (1) BG106483A (no)
BR (1) BR0013966A (no)
CA (1) CA2385130C (no)
CZ (1) CZ2002844A3 (no)
DE (1) DE60003702T2 (no)
DK (1) DK1218372T3 (no)
EE (1) EE200200132A (no)
ES (1) ES2199856T3 (no)
HK (1) HK1048807A1 (no)
HR (1) HRP20020221A2 (no)
HU (1) HUP0302380A2 (no)
IL (2) IL148184A0 (no)
MY (1) MY122696A (no)
NO (1) NO323354B1 (no)
NZ (1) NZ518255A (no)
PL (1) PL364045A1 (no)
PT (1) PT1218372E (no)
RU (1) RU2255937C2 (no)
SA (1) SA00210456B1 (no)
SK (1) SK286463B6 (no)
TW (1) TWI230159B (no)
WO (1) WO2001019816A1 (no)
YU (1) YU17402A (no)

Families Citing this family (46)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TR200103337T2 (tr) 1999-03-15 2002-03-21 Axys Pharmaceuticals, Inc. Protez inhibit”rleri olarak yeni bileçikler ve bileçimler
US6420364B1 (en) * 1999-09-13 2002-07-16 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Compound useful as reversible inhibitors of cysteine proteases
US7030116B2 (en) 2000-12-22 2006-04-18 Aventis Pharmaceuticals Inc. Compounds and compositions as cathepsin inhibitors
AR036375A1 (es) 2001-08-30 2004-09-01 Novartis Ag Compuestos pirrolo [2,3-d] pirimidina -2- carbonitrilo, un proceso para su preparacion, una composicion farmaceutica y el uso de dichos compuestos para la preparacion de medicamentos
RU2316546C2 (ru) 2001-09-14 2008-02-10 Авентис Фармасьютикалз Инк. Новые соединения в качестве ингибиторов катепсина, фармацевтическая композиция на их основе, их применение и способ их получения
CA2459825A1 (en) 2001-10-02 2003-04-10 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Compounds useful as reversible inhibitors of cysteine proteases
US6841571B2 (en) 2001-10-29 2005-01-11 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Compounds useful as reversible inhibitors of cysteine proteases
CA2467391A1 (en) 2001-11-14 2003-05-22 Aventis Pharmaceuticals Inc. Oligopeptides and compositions containing them as cathepsin s inhibitors
AU2003218028A1 (en) 2002-03-08 2003-09-22 Bristol-Myers Squibb Company Cyclic derivatives as modulators of chemokine receptor activity
US7101880B2 (en) 2002-06-24 2006-09-05 Schering Aktiengesellschaft Peptidic compounds as cysteine protease inhibitors
ATE555087T1 (de) 2002-11-27 2012-05-15 Incyte Corp 3-aminopyrrolidinderivate als modulatoren von chemokinrezeptoren
AU2003298740A1 (en) * 2002-12-05 2004-06-30 Axys Pharmaceuticals, Inc. Cyanomethyl derivatives as cysteine protease inhibitors
US7109243B2 (en) 2003-03-24 2006-09-19 Irm Llc Inhibitors of cathepsin S
US7384970B2 (en) 2003-03-24 2008-06-10 Irm Llc Inhibitors of cathepsin S
EP1761485A1 (en) * 2003-06-04 2007-03-14 Schering AG Amidino compounds as cysteine protease inhibitors
US7173051B2 (en) 2003-06-13 2007-02-06 Irm, Llc Inhibitors of cathepsin S
US7256207B2 (en) 2003-08-20 2007-08-14 Irm Llc Inhibitors of cathepsin S
NZ542865A (en) * 2003-09-18 2009-04-30 Virobay Inc Haloalkyl containing compounds as cysteine protease inhibitors
US7297714B2 (en) * 2003-10-21 2007-11-20 Irm Llc Inhibitors of cathepsin S
WO2006060810A1 (en) 2004-12-02 2006-06-08 Schering Aktiengesellschaft Sulfonamide compounds as cysteine protease inhibitors
KR101447897B1 (ko) 2005-03-21 2014-10-07 비로베이, 인코포레이티드 시스테인 단백질분해효소 억제제로서의 알파 케토아미드화합물
MX2007011739A (es) 2005-03-22 2008-03-14 Celera Genomics Compuestos que contienen sulfonilo como inhibidores de cisteina proteasa.
KR20080028881A (ko) * 2005-06-14 2008-04-02 쉐링 코포레이션 헤테로사이클릭 아스파르틸 프로테아제 억제제, 이의제조방법 및 용도
US8067415B2 (en) 2005-11-01 2011-11-29 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Compounds useful as antagonists of CCR2
US8067457B2 (en) 2005-11-01 2011-11-29 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Compounds useful as antagonists of CCR2
AR059035A1 (es) * 2006-01-16 2008-03-12 Syngenta Participations Ag Insecticidas derivados de antranilamida
DK2032535T3 (da) 2006-06-01 2012-11-05 Sanofi Sa Spiro-cycliske nitriler som protease-inhibitorer
US7893112B2 (en) 2006-10-04 2011-02-22 Virobay, Inc. Di-fluoro containing compounds as cysteine protease inhibitors
ES2535603T3 (es) 2006-10-04 2015-05-13 Virobay, Inc. Compuestos que contienen di-fluoro como inhibidores de la cisteína proteasa
DE102006057036A1 (de) 2006-12-04 2008-06-05 Bayer Cropscience Ag Biphenylsubstituierte spirocyclische Ketoenole
WO2009087379A2 (en) 2008-01-09 2009-07-16 Amura Therapeutics Limited Tetrahydrofuro (3, 2 -b) pyrrol- 3 -one derivatives as inhibitors of cysteine proteinases
EP2198879A1 (en) 2008-12-11 2010-06-23 Institut Curie CD74 modulator agent for regulating dendritic cell migration and device for studying the motility capacity of a cell
US8324417B2 (en) 2009-08-19 2012-12-04 Virobay, Inc. Process for the preparation of (S)-2-amino-5-cyclopropyl-4,4-difluoropentanoic acid and alkyl esters and acid salts thereof
US8680152B2 (en) 2011-05-02 2014-03-25 Virobay, Inc. Cathepsin inhibitors for the treatment of bone cancer and bone cancer pain
JP5859000B2 (ja) * 2011-06-07 2016-02-10 株式会社クレハ オキセタン化合物の製造方法、アゾリルメチルシクロペンタノール化合物の製造方法、および中間体化合物
EP2537532A1 (en) 2011-06-22 2012-12-26 J. Stefan Institute Cathepsin-binding compounds bound to a nanodevice and their diagnostic and therapeutic use
DK2780015T3 (en) 2011-11-18 2017-03-27 Heptares Therapeutics Ltd M1 MUSCARINRECEPTORAGONISTER
GB201617454D0 (en) * 2016-10-14 2016-11-30 Heptares Therapeutics Limited Pharmaceutical compounds
GB201810239D0 (en) 2018-06-22 2018-08-08 Heptares Therapeutics Ltd Pharmaceutical compounds
GB201819960D0 (en) 2018-12-07 2019-01-23 Heptares Therapeutics Ltd Pharmaceutical compounds
GB202020191D0 (en) 2020-12-18 2021-02-03 Heptares Therapeutics Ltd Pharmaceutical compounds
US11124497B1 (en) 2020-04-17 2021-09-21 Pardes Biosciences, Inc. Inhibitors of cysteine proteases and methods of use thereof
IL298529A (en) * 2020-06-09 2023-01-01 Pardes Biosciences Inc Cysteine protease inhibitors and methods of using them
US11174231B1 (en) 2020-06-09 2021-11-16 Pardes Biosciences, Inc. Inhibitors of cysteine proteases and methods of use thereof
CN117836270A (zh) * 2021-03-10 2024-04-05 文森雷生物科学股份有限公司 Usp30抑制剂及其用途
WO2023044171A1 (en) * 2021-09-20 2023-03-23 Pardes Biosciences, Inc. Inhibitors of cysteine proteases and methods of use thereof

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU713492B2 (en) * 1995-03-24 1999-12-02 Axys Pharmaceuticals, Inc. Reversible protease inhibitors
US5776718A (en) * 1995-03-24 1998-07-07 Arris Pharmaceutical Corporation Reversible protease inhibitors
TW438591B (en) * 1995-06-07 2001-06-07 Arris Pharm Corp Reversible cysteine protease inhibitors
TR200103337T2 (tr) * 1999-03-15 2002-03-21 Axys Pharmaceuticals, Inc. Protez inhibit”rleri olarak yeni bileçikler ve bileçimler

Also Published As

Publication number Publication date
IL148184A0 (en) 2002-09-12
JP2003529546A (ja) 2003-10-07
BR0013966A (pt) 2004-06-15
HRP20020221A2 (en) 2005-10-31
SK286463B6 (sk) 2008-10-07
HK1048807A1 (zh) 2003-04-17
PT1218372E (pt) 2003-11-28
SA00210456B1 (ar) 2006-10-03
CN100410250C (zh) 2008-08-13
DE60003702D1 (de) 2003-08-07
HUP0302380A2 (hu) 2004-03-01
CZ2002844A3 (cs) 2002-06-12
RU2255937C2 (ru) 2005-07-10
YU17402A (sh) 2004-11-25
EE200200132A (et) 2003-12-15
NZ518255A (en) 2004-11-26
KR20030024651A (ko) 2003-03-26
CN1384830A (zh) 2002-12-11
AR032136A1 (es) 2003-10-29
ES2199856T3 (es) 2004-03-01
IL148184A (en) 2007-03-08
AU7081800A (en) 2001-04-17
NO20021207L (no) 2002-03-12
NO20021207D0 (no) 2002-03-12
PL364045A1 (en) 2004-12-13
WO2001019816A1 (en) 2001-03-22
EP1218372B1 (en) 2003-07-02
HRP20020221B1 (no) 2007-01-31
EP1218372A1 (en) 2002-07-03
AU782246B2 (en) 2005-07-14
ATE244235T1 (de) 2003-07-15
DE60003702T2 (de) 2004-04-22
CA2385130A1 (en) 2001-03-22
MY122696A (en) 2006-04-29
DK1218372T3 (da) 2003-10-20
BG106483A (bg) 2002-10-31
CA2385130C (en) 2009-10-20
TWI230159B (en) 2005-04-01
SK4902002A3 (en) 2002-09-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
NO323354B1 (no) Nye spiroheterocykliske forbindelser nyttige som inhibitorer av cystein proteaser samt anvendelse og fremstilling derav og farmasoytisk preparat.
US6420364B1 (en) Compound useful as reversible inhibitors of cysteine proteases
UA73320C2 (en) Spiroheterocyclic compounds (variants), a pharmaceutical composition containing them, a method for preparing them (variants), a method for treatment (variants) and a method for modulation of autoimmune disease