NO301015B1 - Dekapeptid med antiovulatorisk aktivitet - Google Patents
Dekapeptid med antiovulatorisk aktivitet Download PDFInfo
- Publication number
- NO301015B1 NO301015B1 NO900888A NO900888A NO301015B1 NO 301015 B1 NO301015 B1 NO 301015B1 NO 900888 A NO900888 A NO 900888A NO 900888 A NO900888 A NO 900888A NO 301015 B1 NO301015 B1 NO 301015B1
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- piclys
- niclys
- ilys
- decapeptide
- decapeptide according
- Prior art date
Links
- 230000002513 anti-ovulatory effect Effects 0.000 title claims abstract description 42
- DFZVZEMNPGABKO-SSDOTTSWSA-N (2r)-2-amino-3-pyridin-3-ylpropanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CC1=CC=CN=C1 DFZVZEMNPGABKO-SSDOTTSWSA-N 0.000 claims abstract description 19
- QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N D-alanine Chemical compound C[C@@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N 0.000 claims abstract description 19
- SNDPXSYFESPGGJ-UHFFFAOYSA-N L-norVal-OH Natural products CCCC(N)C(O)=O SNDPXSYFESPGGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N Histamine Chemical compound NCCC1=CN=CN1 NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 96
- 229960001340 histamine Drugs 0.000 abstract description 48
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 abstract description 33
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 abstract description 26
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 abstract description 18
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 14
- 229910001868 water Inorganic materials 0.000 abstract description 13
- 239000000556 agonist Substances 0.000 abstract description 11
- 239000000203 mixture Substances 0.000 abstract description 7
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 abstract description 5
- 230000009471 action Effects 0.000 abstract description 4
- 239000002285 corn oil Substances 0.000 abstract description 2
- 235000005687 corn oil Nutrition 0.000 abstract description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 2
- QRYFGTULTGLGHU-NBERXCRTSA-N iturelix Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCNC(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@H](C)C(N)=O)NC(=O)[C@H](CCCCNC(=O)C=1C=NC=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](CC=1C=NC=CC=1)NC(=O)[C@@H](CC=1C=CC(Cl)=CC=1)NC(=O)[C@@H](CC=1C=C2C=CC=CC2=CC=1)NC(C)=O)CCCNC(=O)C1=CC=CN=C1 QRYFGTULTGLGHU-NBERXCRTSA-N 0.000 abstract 6
- 108010083551 iturelix Proteins 0.000 abstract 6
- 108700012941 GNRH1 Proteins 0.000 abstract 2
- 239000000579 Gonadotropin-Releasing Hormone Substances 0.000 abstract 2
- HQMLIDZJXVVKCW-UWTATZPHSA-N (2r)-2-aminopropanamide Chemical compound C[C@@H](N)C(N)=O HQMLIDZJXVVKCW-UWTATZPHSA-N 0.000 abstract 1
- 241000288906 Primates Species 0.000 abstract 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 abstract 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 abstract 1
- 238000009781 safety test method Methods 0.000 abstract 1
- 238000013341 scale-up Methods 0.000 abstract 1
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 42
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N acetic acid Substances CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 35
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 29
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 21
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 19
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 19
- 229910004373 HOAc Inorganic materials 0.000 description 18
- -1 [Ac-D-2-Nal<1> Chemical compound 0.000 description 18
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 18
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 102000009151 Luteinizing Hormone Human genes 0.000 description 15
- 108010073521 Luteinizing Hormone Proteins 0.000 description 15
- 229940040129 luteinizing hormone Drugs 0.000 description 15
- 238000000034 method Methods 0.000 description 15
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 15
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 15
- 239000000047 product Substances 0.000 description 14
- KYQCOXFCLRTKLS-UHFFFAOYSA-N Pyrazine Chemical compound C1=CN=CC=N1 KYQCOXFCLRTKLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 12
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 12
- 101000904173 Homo sapiens Progonadoliberin-1 Proteins 0.000 description 11
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 102100024028 Progonadoliberin-1 Human genes 0.000 description 11
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 11
- 101000996723 Sus scrofa Gonadotropin-releasing hormone receptor Proteins 0.000 description 11
- XLXSAKCOAKORKW-UHFFFAOYSA-N gonadorelin Chemical compound C1CCC(C(=O)NCC(N)=O)N1C(=O)C(CCCN=C(N)N)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)C(NC(=O)C(CO)NC(=O)C(CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)C(CC=1NC=NC=1)NC(=O)C1NC(=O)CC1)CC1=CC=C(O)C=C1 XLXSAKCOAKORKW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 10
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N L-arginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 9
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 9
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 8
- 235000019439 ethyl acetate Nutrition 0.000 description 8
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 8
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 8
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 8
- 239000003433 contraceptive agent Substances 0.000 description 7
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 7
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 7
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- PCNDJXKNXGMECE-UHFFFAOYSA-N Phenazine Natural products C1=CC=CC2=NC3=CC=CC=C3N=C21 PCNDJXKNXGMECE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 6
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 6
- 238000006722 reduction reaction Methods 0.000 description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 6
- BRFXCDOSNZVQAQ-UHFFFAOYSA-N (4-nitrophenyl) pyridine-3-carboxylate Chemical compound C1=CC([N+](=O)[O-])=CC=C1OC(=O)C1=CC=CN=C1 BRFXCDOSNZVQAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- QIVBCDIJIAJPQS-SECBINFHSA-N D-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-SECBINFHSA-N 0.000 description 5
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 5
- 229940124041 Luteinizing hormone releasing hormone (LHRH) antagonist Drugs 0.000 description 5
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 5
- QWCKQJZIFLGMSD-UHFFFAOYSA-N alpha-aminobutyric acid Chemical compound CCC(N)C(O)=O QWCKQJZIFLGMSD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 5
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 5
- 210000003630 histaminocyte Anatomy 0.000 description 5
- 230000016087 ovulation Effects 0.000 description 5
- 230000004044 response Effects 0.000 description 5
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 5
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 5
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- ODKSFYDXXFIFQN-SCSAIBSYSA-N D-arginine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-SCSAIBSYSA-N 0.000 description 4
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000012673 Follicle Stimulating Hormone Human genes 0.000 description 4
- 108010079345 Follicle Stimulating Hormone Proteins 0.000 description 4
- SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N Indole Chemical compound C1=CC=C2NC=CC2=C1 SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N Niacin Chemical compound OC(=O)C1=CC=CN=C1 PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 4
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 4
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 4
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 4
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 229940028334 follicle stimulating hormone Drugs 0.000 description 4
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 4
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 4
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 4
- OLMICDUONLWRJA-ZETCQYMHSA-N (2s)-2-[amino(cyclohexyl)amino]propanoic acid Chemical group OC(=O)[C@H](C)N(N)C1CCCCC1 OLMICDUONLWRJA-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 3
- BTJIUGUIPKRLHP-UHFFFAOYSA-N 4-nitrophenol Chemical compound OC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 BTJIUGUIPKRLHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 3
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 3
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N Palladium on carbon Substances [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000276498 Pollachius virens Species 0.000 description 3
- 230000021736 acetylation Effects 0.000 description 3
- 238000006640 acetylation reaction Methods 0.000 description 3
- 230000010933 acylation Effects 0.000 description 3
- 238000005917 acylation reaction Methods 0.000 description 3
- 210000003651 basophil Anatomy 0.000 description 3
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 3
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 3
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 3
- 238000005984 hydrogenation reaction Methods 0.000 description 3
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 3
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 3
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 3
- SIOXPEMLGUPBBT-UHFFFAOYSA-N picolinic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=N1 SIOXPEMLGUPBBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 3
- 230000003578 releasing effect Effects 0.000 description 3
- UQDJGEHQDNVPGU-UHFFFAOYSA-N serine phosphoethanolamine Chemical compound [NH3+]CCOP([O-])(=O)OCC([NH3+])C([O-])=O UQDJGEHQDNVPGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 3
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 3
- 230000002483 superagonistic effect Effects 0.000 description 3
- BCDUISSCCYHFOP-UHFFFAOYSA-N (4-nitrophenyl) pyrazine-2-carboxylate Chemical compound C1=CC([N+](=O)[O-])=CC=C1OC(=O)C1=CN=CC=N1 BCDUISSCCYHFOP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UFHVNJIPPMYVHJ-UHFFFAOYSA-N (4-nitrophenyl) pyridine-2-carboxylate Chemical compound C1=CC([N+](=O)[O-])=CC=C1OC(=O)C1=CC=CC=N1 UFHVNJIPPMYVHJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QIOIYVKXDHSHMD-UHFFFAOYSA-N 4-nitro-3-phenyl-3H-pyridine-4-carboxylic acid Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C2C=NC=CC2(C(=O)O)[N+](=O)[O-] QIOIYVKXDHSHMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HGTHJBMURXRBGV-UHFFFAOYSA-N 6-methyl-4-nitro-2-phenylpyridine-3-carboxylic acid Chemical compound CC1=CC(=C(C(=N1)C2=CC=CC=C2)C(=O)O)[N+](=O)[O-] HGTHJBMURXRBGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RZOKQIPOABEQAM-UHFFFAOYSA-N 6-methylpyridine-3-carboxylic acid Chemical compound CC1=CC=C(C(O)=O)C=N1 RZOKQIPOABEQAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KDXKERNSBIXSRK-RXMQYKEDSA-N D-lysine Chemical compound NCCCC[C@@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-RXMQYKEDSA-N 0.000 description 2
- ROSDSFDQCJNGOL-UHFFFAOYSA-N Dimethylamine Chemical compound CNC ROSDSFDQCJNGOL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N L-Ornithine Chemical compound NCCC[C@H](N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N Orn-delta-NH2 Natural products NCCCC(N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N Ornithine Natural products OC(=O)C(C)CCCN UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000003436 Schotten-Baumann reaction Methods 0.000 description 2
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 2
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 208000024780 Urticaria Diseases 0.000 description 2
- YRKCREAYFQTBPV-UHFFFAOYSA-N acetylacetone Chemical compound CC(=O)CC(C)=O YRKCREAYFQTBPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 description 2
- 125000003295 alanine group Chemical group N[C@@H](C)C(=O)* 0.000 description 2
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 2
- 230000002052 anaphylactic effect Effects 0.000 description 2
- RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N anisole Chemical compound COC1=CC=CC=C1 RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003042 antagnostic effect Effects 0.000 description 2
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CIHWJRSPVJBHGT-UHFFFAOYSA-N benzhydrylazanium;chloride Chemical compound Cl.C=1C=CC=CC=1C(N)C1=CC=CC=C1 CIHWJRSPVJBHGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HSDAJNMJOMSNEV-UHFFFAOYSA-N benzyl chloroformate Chemical compound ClC(=O)OCC1=CC=CC=C1 HSDAJNMJOMSNEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 230000002254 contraceptive effect Effects 0.000 description 2
- BGTOWKSIORTVQH-UHFFFAOYSA-N cyclopentanone Chemical compound O=C1CCCC1 BGTOWKSIORTVQH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 2
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 2
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 2
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 2
- ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N guanidine group Chemical group NC(=N)N ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000007327 hydrogenolysis reaction Methods 0.000 description 2
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 2
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 2
- PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N indole Natural products CC1=CC=CC2=C1C=CN2 PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N indolenine Natural products C1=CC=C2CC=NC2=C1 RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000691 measurement method Methods 0.000 description 2
- CQROVVJXIYLISJ-UHFFFAOYSA-N methyl n,n,n'-trimethylcarbamimidothioate Chemical compound CSC(=NC)N(C)C CQROVVJXIYLISJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 2
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 2
- 235000001968 nicotinic acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000011664 nicotinic acid Substances 0.000 description 2
- 229960003512 nicotinic acid Drugs 0.000 description 2
- 229960003104 ornithine Drugs 0.000 description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 2
- IWDCLRJOBJJRNH-UHFFFAOYSA-N p-cresol Chemical compound CC1=CC=C(O)C=C1 IWDCLRJOBJJRNH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N phenol group Chemical group C1(=CC=CC=C1)O ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 238000005932 reductive alkylation reaction Methods 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 2
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 238000012384 transportation and delivery Methods 0.000 description 2
- AJDUMMXHVCMISJ-CYBMUJFWSA-N (2r)-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]-5-oxo-5-phenylmethoxypentanoic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N[C@@H](C(O)=O)CCC(=O)OCC1=CC=CC=C1 AJDUMMXHVCMISJ-CYBMUJFWSA-N 0.000 description 1
- DFZVZEMNPGABKO-ZETCQYMHSA-N (2s)-2-amino-3-pyridin-3-ylpropanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CN=C1 DFZVZEMNPGABKO-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 1
- KWWSORXERGAEGJ-JTQLQIEISA-N (2s)-2-amino-3-quinolin-3-ylpropanoic acid Chemical compound C1=CC=CC2=CC(C[C@H](N)C(O)=O)=CN=C21 KWWSORXERGAEGJ-JTQLQIEISA-N 0.000 description 1
- BVYGCENHXMSEPS-VIFPVBQESA-N (2s)-6-(diaminomethylideneamino)-2-(diethylamino)hexanoic acid Chemical compound CCN(CC)[C@H](C(O)=O)CCCCNC(N)=N BVYGCENHXMSEPS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- ZODMYTRQCNEOFM-QMMMGPOBSA-N (2s)-6-amino-2-(propan-2-ylamino)hexanoic acid Chemical compound CC(C)N[C@H](C(O)=O)CCCCN ZODMYTRQCNEOFM-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- ADFXKUOMJKEIND-UHFFFAOYSA-N 1,3-dicyclohexylurea Chemical compound C1CCCCC1NC(=O)NC1CCCCC1 ADFXKUOMJKEIND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NUIURNJTPRWVAP-UHFFFAOYSA-N 3,3'-Dimethylbenzidine Chemical compound C1=C(N)C(C)=CC(C=2C=C(C)C(N)=CC=2)=C1 NUIURNJTPRWVAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NIGWMJHCCYYCSF-QMMMGPOBSA-N 4-chloro-L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(Cl)C=C1 NIGWMJHCCYYCSF-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 101150041968 CDC13 gene Proteins 0.000 description 1
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VGCXGMAHQTYDJK-UHFFFAOYSA-N Chloroacetyl chloride Chemical compound ClCC(Cl)=O VGCXGMAHQTYDJK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000030 D-alanine group Chemical group [H]N([H])[C@](C([H])([H])[H])(C(=O)[*])[H] 0.000 description 1
- 150000008574 D-amino acids Chemical group 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-MRVPVSSYSA-N D-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-MRVPVSSYSA-N 0.000 description 1
- XBPCUCUWBYBCDP-UHFFFAOYSA-N Dicyclohexylamine Chemical class C1CCCCC1NC1CCCCC1 XBPCUCUWBYBCDP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N Fluorane Chemical compound F KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102400000921 Gastrin Human genes 0.000 description 1
- 108010052343 Gastrins Proteins 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- SNDPXSYFESPGGJ-BYPYZUCNSA-N L-2-aminopentanoic acid Chemical compound CCC[C@H](N)C(O)=O SNDPXSYFESPGGJ-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-UHNVWZDZSA-N L-allo-Isoleucine Chemical compound CC[C@@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHNVWZDZSA-N 0.000 description 1
- LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N L-norleucine Chemical compound CCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- 244000137850 Marrubium vulgare Species 0.000 description 1
- VHWBWHBJEXGPNM-UHFFFAOYSA-N N(2)-(2,4-dichlorophenyl)-N-(7-{[(2,4-dichlorophenyl)amino]sulfonyl}-1-oxo-1,2-dihydronaphthalen-2-yl)glycinamide Chemical compound ClC1=CC(Cl)=CC=C1NCC(=O)NC1C(=O)C2=CC(S(=O)(=O)NC=3C(=CC(Cl)=CC=3)Cl)=CC=C2C=C1 VHWBWHBJEXGPNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000750002 Nestor Species 0.000 description 1
- 101100491597 Neurospora crassa (strain ATCC 24698 / 74-OR23-1A / CBS 708.71 / DSM 1257 / FGSC 987) arg-6 gene Proteins 0.000 description 1
- 108010056088 Somatostatin Proteins 0.000 description 1
- 102000005157 Somatostatin Human genes 0.000 description 1
- HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N Trichloro(2H)methane Chemical compound [2H]C(Cl)(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N 0.000 description 1
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000218 acetic acid group Chemical group C(C)(=O)* 0.000 description 1
- CSCPPACGZOOCGX-WFGJKAKNSA-N acetone d6 Chemical compound [2H]C([2H])([2H])C(=O)C([2H])([2H])[2H] CSCPPACGZOOCGX-WFGJKAKNSA-N 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000008485 antagonism Effects 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 229960003121 arginine Drugs 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003589 arginine hydrochloride Drugs 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- PASDCCFISLVPSO-UHFFFAOYSA-N benzoyl chloride Chemical compound ClC(=O)C1=CC=CC=C1 PASDCCFISLVPSO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 1
- DKPFZGUDAPQIHT-UHFFFAOYSA-N butyl acetate Chemical compound CCCCOC(C)=O DKPFZGUDAPQIHT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- AOXOCDRNSPFDPE-UKEONUMOSA-N chembl413654 Chemical compound C([C@H](C(=O)NCC(=O)N[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@H](CCSC)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](CC=1C=CC=CC=1)C(N)=O)NC(=O)[C@@H](C)NC(=O)[C@@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 AOXOCDRNSPFDPE-UKEONUMOSA-N 0.000 description 1
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 description 1
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 1
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- MHDVGSVTJDSBDK-UHFFFAOYSA-N dibenzyl ether Chemical compound C=1C=CC=CC=1COCC1=CC=CC=C1 MHDVGSVTJDSBDK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000010339 dilation Effects 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 230000035558 fertility Effects 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 239000010419 fine particle Substances 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 239000002474 gonadorelin antagonist Substances 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 1
- 229910000040 hydrogen fluoride Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000002883 imidazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 231100000546 inhibition of ovulation Toxicity 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 1
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- WSFSSNUMVMOOMR-NJFSPNSNSA-N methanone Chemical compound O=[14CH2] WSFSSNUMVMOOMR-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 1
- UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N methoxybenzene Substances CCCCOC=C UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CWWARWOPSKGELM-SARDKLJWSA-N methyl (2s)-2-[[(2s)-2-[[2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-5-amino-2-[[(2s)-5-amino-2-[[(2s)-1-[(2s)-6-amino-2-[[(2s)-1-[(2s)-2-amino-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]hexanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-5 Chemical compound C([C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)OC)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N)C1=CC=CC=C1 CWWARWOPSKGELM-SARDKLJWSA-N 0.000 description 1
- XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N methyl 1-acetylthieno[3,2-c]pyrazole-5-carboxylate Chemical compound CC(=O)N1N=CC2=C1C=C(C(=O)OC)S2 XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N ninhydrin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(O)(O)C(=O)C2=C1 FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000449 nitro group Chemical group [O-][N+](*)=O 0.000 description 1
- 230000000624 ovulatory effect Effects 0.000 description 1
- BHAAPTBBJKJZER-UHFFFAOYSA-N p-anisidine Chemical compound COC1=CC=C(N)C=C1 BHAAPTBBJKJZER-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940081066 picolinic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000001817 pituitary effect Effects 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000012913 prioritisation Methods 0.000 description 1
- NIPZZXUFJPQHNH-UHFFFAOYSA-N pyrazine-2-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)C1=CN=CC=N1 NIPZZXUFJPQHNH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 238000011894 semi-preparative HPLC Methods 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N somatostatin Chemical compound C([C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C3=CC=CC=C3NC=2)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(=O)N1)[C@@H](C)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)N)C(O)=O)=O)[C@H](O)C)C1=CC=CC=C1 NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N 0.000 description 1
- 229960000553 somatostatin Drugs 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- DYHSDKLCOJIUFX-UHFFFAOYSA-N tert-butoxycarbonyl anhydride Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)OC(=O)OC(C)(C)C DYHSDKLCOJIUFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 230000008728 vascular permeability Effects 0.000 description 1
- 230000002227 vasoactive effect Effects 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 1
- JPZXHKDZASGCLU-LBPRGKRZSA-N β-(2-naphthyl)-alanine Chemical compound C1=CC=CC2=CC(C[C@H](N)C(O)=O)=CC=C21 JPZXHKDZASGCLU-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- A61K38/08—Peptides having 5 to 11 amino acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/23—Luteinising hormone-releasing hormone [LHRH]; Related peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/06—Linear peptides containing only normal peptide links having 5 to 11 amino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S930/00—Peptide or protein sequence
- Y10S930/01—Peptide or protein sequence
- Y10S930/13—Luteinizing hormone-releasing hormone; related peptides
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Reproductive Health (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Macromonomer-Based Addition Polymer (AREA)
- Polyesters Or Polycarbonates (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
Description
Bakgrunn for oppfinnelsen
Foreliggende oppfinnelse beskriver dekapeptider med antiovulatorisk aktivitet, nærmere bestemt syntetiske analoger av hormonet som frigjør luteiniserende hormon (LHRH). Et viktig fremskritt var syntese av analoger som fungerte som antagonister til LHRH og var tilstrekkelig sterke til å hemme ovulasjon og tillate frigjøringen av bare små mengder histamin. Siden det ikke var noen pålitelig måte å forutsi strukturen til en antagonist på, som har en høy styrke og meget lav histaminfrigjøring, var det nødvendig å utforske forskjellige fremgangsmåter for å oppdage en kombinasjon av strukturelle egenskaper som ville gi en antagonist til LHRH som hadde høy styrke for ovulasjonshemming og meget lav aktivitet for histaminfrigj øring.
Forskjellige peptider slik som substans P, vaso-aktivt, intestinalt peptid, gastrin, somatostatin, så vel som andre, er kjent for å forårsake frigjøring av histamin fra mastceller. Disse cellene er i mange vev, slik som hud, lunge og tarmkrøs, tannkjøtt osv. De fleste celler har granuler som inneholder histamin og andre mediatorer av inflammasjon som kan bli frigjort av peptider og forårsake kapillær utvidelse og øket vaskulær permeabilitet. Da det ble observert at en antagonist til LHRH, f.eks. [Ac-D-2-Nal<1>, D-4-F-Phe<2>, D-Trp<3>, D-Arg<6>]-LHRH, forårsaket ødem i ansiktet og ekstremitetene da den ble gitt til rotter, virket det sannsynlig at slike antagonister, hvis tilført mennesker som et kontraseptisk middel, ville forårsake alvorlig ødem i ansiktet og andre steder i kroppen. Slike bivirkninger ville sannsynligvis forhindre til-førselen av slike antagonister til mennesker.
Den histamininneholdende leukocytt er en basofil som også kan frigjøre histamin når den blir stimulert med mange av de samme peptidene som er nevnt ovenfor. Basofiler skiller seg biokjemisk fra mastceller, og slike forskjeller kan forklare både forutsigbar og ikke forutsigbar histaminfrigjøring som svar på antagonister til LHRH. En antagonist til LHRH, som skal anvendes klinisk for å forhindre ovulasjon, skulle ikke frigjøre signifikante mengder av histamin fra verken mastceller eller basofiler.
Oppdagelsen av bivirkningene, slik som de ødem-dannende og anafylaktoide virkningene til LHRH-antagonister, gjorde det ønskelig med oppdagelse av nye LHRH-antagonister som forhindret ovulasjon, men som ikke frigjorde signifikant histamin. Disse uønskede bivirkninger har vært observert i rotter, og det er sannsynlig at the Food and Drug Adminis-tration ikke ville tillate testing av slike antagonister i mennesker.
Karten et al. (4) har gått igjennom tilgjengelig kunnskap vedrørende de strukturelle karakteristika for sterk histaminfrigjøring av antagonister til LHRH. Noen av de mest viktige funnene er som følger. Den mest sterke LHRH-antagonist i å utløse histaminfrigjøring in vltro, involverte en kombinasjon av sterke basiske D-aminosyresidekjeder (Arg eller Lys) i posisjon 6 og i nær tilknytning til Arg<8> og en samling av hydrofobe, aromatiske aminosyrer ved N-enden. Således er det ingen spesifikk aminosyre blant de ti aminosyrene som alene er ansvarlig for histaminfrigjøring. Tvert imot, strukturelle egenskaper som varierte fra N-enden (aminosyrene i de første få posisjoner, 1-4, etc.) og basiske aminosyrer mot C-enden (posisjoner 6 og 8) deltar på en eller annen måte i histaminfrigjøring. Endog D-Ala i posisjon 10 har en viss innflytelse på histaminfrigjøring, grunnen til dette er uklar. Ved seg selv er to basiske sidekjeder i stor nærhet, som i posisjoner 6 og 8, utilstrekkelig alene til å gi høy fri-gjøring av histamin. Samlingen av hydrofobe aminosyrer ved N-enden er utilstrekkelig alene for høy histaminfrigjøringsakti-vitet. Endog et heksapeptidfragment har vist moderat histaminfrigjørende styrke. Det synes ikke å være noen korrelasjon mellom antiovulatorisk styrke og histaminfrigjøring til disse antagonister in vitro.
I perspektiv kan mesteparten av hele kjeden av slike dekapeptidantagonister ha innflytelse på histaminfrigjøring. Det samme perspektivet synes å være riktig, men til forskjel-lig grad, når det gjelder høy antiovulatorisk aktivitet. Disse LHRH-antagonister er vanligvis dekapeptider som indikerer at det er ti variabler som må justeres for å oppnå en ønsket antiovulatorisk aktivitet og ti variabler å justere for å eli-minere histaminfrigjøringsaktivitet. Det er videre variasjoner for hver av disse tyve variabler, antallet av mulige peptider som skal designes, syntetiseres og måles blir ikke mulig å beregne. Antakelig kan noen av de ti variabler være fri for antiovulatorisk og histaminfrigjørende aktivitet, mens noen variabler kan overlappe med hensyn til disse to biologiske aktiviteter. Denne situasjon presenterer ekstraordinære vanskeligheter som må løses før en antagonist med høy styrke for antiovulasjon og meget lav styrke for histaminfrigjøring kan produseres.
Forskjellige strukturelle forandringer og kombina-sjoner av de ti aminosyrene, etterfulgt av målinger med hensyn til både antiovulasjon og histaminfrigjøringsaktiviteter, skulle bli utført i det håp at en sterk antagonist hovedsakelig fri for bivirkninger ville bli oppdaget. Syntesen av nye aminosyrer for å innsette i dekapeptidkjedene skulle også bli undersøkt, siden de vanlig tilgjengelige aminosyrer kanskje ikke kan være tilstrekkelig.
Oppsummering av oppfinnelsen
I antagonistene ifølge foreliggende oppfinnelse, ble arginin og dets derivat ikke benyttet. Lysin ble overført til derivater med acylgrupper eller med alkylgrupper på E-aminogruppen. Aminosyren ornitin ble acylert eller alkylert på d-aminogruppen. Både L- og D-formene til lysin og L-formen til ornitin ble benyttet for å syntetisere disse acyl- og alkyl-derivatene. Strukturelt beslektede mellomprodukter ble også syntetisert. Til sammen ble mange nye peptider syntetisert ved hjelp av det basale og minimale konsept på ti variabler for antiovulatorisk aktivitet og ti variabler for histaminfrigjøring, som kan være uavhengige eller delvis overlappende. På en slik basis kan antallet av slike peptider som kan bli designet bli overveldende, og enhver fornuftig prioritering må bli vurdert for å redusere antallet peptider som skal syntetiseres i det håp at en oppdagelse vil bli realisert.
Visse peptider ble syntetisert, testet og funnet å være fordelaktige peptider. Blant disse ønskelige peptidene var de følgende to.
[N-Ac-D-2-Nal<1>, D-pCIPhe<2>, D-3-Pal<3>, NicLys<5>, D-Nic-Lys<6>, ILys<8>, D-Ala<10>]-LHRH var effektiv når det gjaldt å for-
hindre ovulasjon og frigjorde bemerkelsesverdig lite histamin.
[N-Ac-D-2-Nal<1>, D-pCIPhe<2>, D-3-Pal<3>, PicLys<5>, D-PicLys<6>, ILys<8>, D-Ala<10>]-LHRH var to ganger så effektiv som peptidet ovenfor og frigjorde ikke mer histamin enn "superagonistene" til LHRH, som for tiden er markedsført av flere farmasøytiske selskaper.
Disse to nye peptidene, og også andre beslektede peptider beskrevet heri, gir en aksepterbar balanse mellom høy antiovulatorisk aktivitet og lav histaminfrigjøring.
Foreliggende oppfinnelse beskriver dekapeptider med antiovulatorisk aktivitet, kjennetegnet ved at de har den generelle formel
AA<1->D-pClPhe<2->D-3-Pal<3->Ser<4->AA<5>-AA<6>-Leu<7->AA8-Pro<9->D-Ala<10->NH2
hvor
AA<1> er N-Ac-D-2-Nal, N-Ac-D-pClPhe eller N-Ac-D-Cl2Phe, AA<5> er Tyr, NicLys, PicLys, MNicLys, MPicLys, INicLys,
DMGLys eller PzcLys, eller c-PzACAla,
AA<5> er D-NicLys, D-PicLys, D-MNicLys, D-MPicLys, D-INicLys, D-BzLys eller D-PzcLys, eller D-PzACAla, D-NACAla eller D-PACAla, og
AA<8> er ILys eller IOrn.
Foreliggende oppfinnelse beskriver også dekapeptider med antiovulatorisk aktivitet, kjennetegnet ved at de har formelen
AA<1->D-pClPhe<2->D-3-Pal<3->Ser<4->AA<5->AA<6->AA<7->AA8-Pro<9->D-Ala<10->NH2
hvor
AA<1> er N-Ac-D-2-Nal, N-Ac-D-pCIPhe eller N-Ac-D-Cl2Phe, AA<5> er Tyr, NicLys, PicLys, MNicLys, MPicLys, INicLys,
DMGLys eller PzcLys, eller c-PzACAla,
AA<6> er D-NicLys, D-PicLys, D-MNicLys, D-MPicLys, D-INicLys, D-BzLys eller D-PzcLys, eller D-PzACAla, D-NACAla eller D-PACAla,
AA<7> er Aile, Nie, Val, NVal, Abu eller Ala, og
AA<8> er ILys eller IOrn.
Disse dekapeptider inkluderer de som omfatter:
Ser<4>, PicLys<5> og D-PicLys<6>;
N-Ac-D-2-Nal1, D-pCIPhe<2>, Ser<4>, PicLys<5> og Pro9;
N-Ac-D-2-Nal<1>, D-pCIPhe<2>, D-3-Pal<3>, Ser<4>, D-PicL<ys6,> Pro9 og . D-Ala<10>;
N-Ac-D-2-Nal<1>, D-pCIPhe<2>, D-3-Pal , Ser , NicL<y>s , Pro og-; D-Ala<10>;
N-Ac-D-2-Nal<1>, D-pCIPhe<2>, D-3-Pal<3>, Ser4, Leu<7>, Pr<o9> og D-Ala<10>;
D-pCIPhe<2>, Pro<9> og D-Ala<10>;<:>
N-Ac-D-2-Nal<1>, D-pCIPhe2, D-3-Pal3, NicLys<5>, D-NicLys<6>,
8 10
ILys og D-Ala ;
N-Ac-D-2-Nal\ D-PClPhe<2>, D-3-Pal3, NicLys5, D-NicLys<6>,
ILys<8> og D-Ala<10>;
N-Ac-D-2-Nal\.D-pClPhe<2>, D-3-Pal<3>, PicLys<5>, D-PicLys<6>,
8 10
ILys og D-Ala ;
N-Ac-D-2-Nal1, D-pCIPhe<2>, D-3-Pal<3>, NicLys<5>, D-NicLys<6>,
IOrn<8> og D-Ala<10>;
N-Ac-D-2-Nal<1>, D-PClPhe<2>, D-3-Pal3, PicLys5, D-PicLys6,
IOrn og D-Ala ;
N-Ac-D-2-Nal<1>, D-pClPhe<2>, D-3-Pal3, MNicLys5, D-MNicLys<6>,
IOrn a og D-Ala io;
N-Ac-D-2-Nal<1>, D-PClPhe<2>, D-3-Pal<3>, PzcL<ys5,> D-<Pz>cLys<6>,
o 10
IOrn og D-Ala
N-Ac-D-pCIPhe<1>, D-3-Pal<3>, Tyr<5>, D-NicL<y>s<6> og <ILys8;>
N-Ac-D-Cl2Phe<1>, D-3-Pal<3>, Tyr5, D-NicLys6 og- ILys<8>;
NicLys<5>, D-NicLys<6> og ILys<8>;
PicLys<5>, D-PicLys<6> og ILys<8>;
NicLys<5>, D-NicLys<6> og IOrn<8>;
PicLys<5>, D-PicLys<6> og IOrn<8>;
MNicLys<5>, D-MNicLys<6> og IOrn<8>;
5 6 8
PzcLys , D-PzcLys 0g IOrn ;
Tyr , D-NicLys og . ILys 8;
5 6 8
Tyr , D-NicLys og IOrn ;
N-Ac-D-2-Nal<1>, D-pClPhe<2>, D-3-Pal<3>, Ser<4>, NicLys<5>, D-NicLys<6>, Leu7, ILys8, Pro<9> og D-Ala<10>NH2;
N-Ac-D-2-Nal<1>, D-pCIPhe<2>, D-3-Pal3, Ser4, PicLys<5>, cis D-PzACAla<6>, Leu<7>, ILys<8>, Pro9 og. D-Ala<10>NH2.
Anvendelse av de ovenfor nevnte dekapeptider skjer i en prosess for å hemme ovulasjon i et dyr. Denne prosess omfatter tilførsel til nevnte dyr et dekapeptid som fortrinnsvis har strukturen: N-Ac-D-2-Nal<1>, D-pCIPhe<2>, D-3-Pal<3>, Ser<4>, Nic-Lys<5>, D-Nic-Lys<6>, Leu7, ILys8, Pro<9> og D-Ala<10->N<H>2.
Beskrivelser av foretrukne utførelsesformer
Forkortelser og formler anvendt herved inkluderer de følgende:
De fleste naturlige aminosyrer erholdt fra Peninsula Laboratorier, San Carlos, CA. Hydroksylgruppen til Ser ble beskyttet som benzyleteren, fenolhydroksylgruppen på Tyr som Br-Z-derivatet og E-aminogruppen av Lys som Cl-Z-derivatet, guanidingruppen til Arg og imidazolgruppen til His som TOS-derivatene. a-aminofunksjonen ble beskyttet som BOC-derivatet. BOC-Orn(Z) ble erholdt fra Sigma Chemical Co., St. Louis, Mo. B0C-D-2-Nal, B0C-D-3-Pal, BOC-D-Cl2Phe, BOC-pCIPhe og BOC-ILys-(Z) dicykloheksylaminsalt ble kjøpt fra Southwest Foundation for Biomedical Research, San Antonio, TX. Benzhydrylamin-hydrokloridresin ble erholdt fra Beckman Bioproducts, Palo Alto, CA. Nitrogeninnholdet var omkring 0,65 mmol/g. CH2C12 ble destillert før bruk.
Foreliggende oppfinnelse involverer strukturen, syntesen og anvendelsen av LHRH-antagonister med høy antiovulatorisk styrke og nedsatt aktivitet til å frigjøre histamin (1). Disse nye antagonistiske karakteristika er f.eks. D-NE<->nikotinyllysin (D-NicLys) i posisjon 6 og NE<->isopropyllysin (ILys) i posisjon 8. Oppløsningen av D-Arg<6>, særlig i kombinasjon med Arg<8> og en samling av hydrofobe, aromatiske aminosyre-rester ved N-enden, har vært implisert i frigjøringen av histamin (2-4).
Andre reduksjoner i anafylaktoid aktivitet ble oppnådd ved å øke avstanden mellom de positive ladningene i posisjon 6 og 8 ved Arg<5> og ved å inkludere et nøytralt residuum i posisjon 6 som i [N-Ac-D-2-Nal<1>, D-pCIPhe<2>, D-3-Pal<3>, Arg<5>, D-4-(p-metoksybenzoyl)-2-aminosmørsyre6, D-Ala10]-LHRH [2-Nal representerer 3-(2-naftyl)alanin; pPCIPhe representerer 3-(4-klorfenyl)alanin; 3-Pal representerer 3-(3-pyridyl)alanin] av Rivier et al. (5) og [N-Ac-D-2-Nal<1>, D-aMepCIPhe<2>, D-Trp<3>, Arg<5>, D-Tyr<6>, D-Ala<10>]-LHRH [aMepCIPhe representerer 2-metyl-3-(4-klorfenyl)alanin] av Roeske et al. (6). Videre modifikasjoner i posisjon 6 er reduktiv alkylering av D-Lys<6> ved Hocart et al. (7), inkorporering av N,N-dietylhomoarginin av Nestor et al. (9). De cykliske analogene som nylig er syntetisert av Rivier et al., viste ingen reduksjon i histaminfrigjøring sammen-
lignet med de lineære motparter (10).
Av dekapeptidene ifølge foreliggende oppfinnelse ble to opprinnelig selektert som modeller for videre strukturer-ing. Peptidet [N-Ac-D-2-Nal<1>, D-pCIPhe<2>, D-3-Pal<3>, NicLys<5>, D-NicLys<6>, ILys<8>, D-Ala10]-LHRH (betegnet antid) hadde en impo-nerende styrkekombinasjon og lav histaminfrigjøring; antiovulatorisk aktivitet (AOA) var 100 % ved 1 jag og 36 % ved 0,5 ug; ED50 for histaminfrigjøring in vitro var bestandig over 300 ug/pl sammenlignet med omkring 0,17 for standardanalogen [N-Ac-D-2-Nal<1>, D-pFPhe<2>, D-Trp<3>, D-Arg6] - LHRH [pFPhe representerer 3-(4-fluorfenyl)alanin] (5). En annen analog var iden-tisk med antidet, bortsett fra PicLys<5> og D-PicLys<6> (PicLys representerer N-pikoloyllysin); 100 % AOA ved 0,5 ug og 40 % ved 0,25 pg; ED50, 93 + 11.
Inkludert heri er resultatet fra LHRH-analoger med acylerte aminocykloheksylalaninrester i posisjon 6, fra analoger i hvilke Leu<7> er blitt substituert med andre nøytrale residuer, fra en sammenligning av ILys<8> vs. IOrn<8>, og fra tester for oral aktivitet og varighet for antagonistisk aktivitet når gitt oralt eller parenteralt (s.k.)
Smeltepunktene er ikke rettet. NMR-data er rapportert som d-verdier nedfelt fra TMS.
Før acylering ble Z- og Cl-Z-gruppene til Lys og Orn spaltet ved hydrogenolyse i MeOH i nærvær av 10 % Pd/c.
BOC- D- BzLys ble syntetisert ved acylering av BOC-D-Lys med benzoylklorid, som beskrevet for L-isomeren av Bernardi et al. (17).
BOC- DMG- Lys ble fremstilt ved acylering av BOC-Lys med kloracetylklorid ved å anvende den samme metode og ved å reagere det urene produkt fra 10 mmol BOC-Lys i 10 pl THF med 10 pl 40 % vandig dimetylamin. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 15 minutter i isbad og så i 2,5 timer ved værelsestemperatur. Etter avdamping i vakuum ble det grove produkt løst opp i 10 pl H20 og applisert på Bio-Rad AGl-X8-kolonne, acetatform,
1 x 25 cm. Kolonnen ble først vasket med 200 pl vann, og så ble produktet eluert med 6 % HOAc og lyofilisert flere ganger for å fjerne HOAc. Utbytte 60-70 %. Amorf masse. Rf (n-BuOH:py:HOAc:H20 = 30:10:3:12) = 0,27. Renhet >95 %. NMR (CDC13): 1,45, s, 9 H, t-butoksygruppe; 1,85-1,48, m, 6 H, B, y, d, CH2-grupper; 2,6, s, 6 H, N(CH3)2; 3,25, m, 2 H, E-CH2; 3,37, s, 2 H, N-CH2-CO; 4,15, m, 1 H, a-CH.
De andre acylerte Lys-derivatene i tabellene ble fremstilt fra BOC-D eller L-Lys og den korresponderende p-nitro-fenylester.
p- nitrofenylnikotinat. Til 9,85 g (80 mmol) nikotinsyre og 13,35 g (96 mmol) p-nitrofenol i 250 pl DMF ble tilsatt 16,5 g (80 mmol) DCC med omrøring på isbad. Etter 1 time ved 0 °C og 3 timer ved værelsestemperatur ble urea filtrert fra, og produktet ble utfelt ved tilsetning av et likt volum vann. Filtrering, tørking i vakuum og rekrystallisering fra iPrOH gav 11,22 g, 57 %, hvite nåler, sm.p. 172,5-173 °C (24).
p- nitrofenylisonikotinat ble fremstilt på samme måte, 12 g, 61 %, sm.p. 139-141 °C, sm.p. 137-139 °C (18).
Også p-nitrofenyl-6-metylnikotinat ble fremstilt på samme måte. Utbytte fra 70 mmol 6-metylnikotinsyre: 6,0 g, 33 %, etter rekrystallisering fra MeOH, sm.p. 156-157 °C. Rf (2 % MeOH i CHC13) = 0,57 NMR (CDC13): 2,7, s, 3 H, CH3; 7,36, d, H, py H<5>; 7,45, m, 2 H, H ved siden av oksygen i fenylringen; 8,34, m, 3 H, H ved siden av N02-gruppen i fenylringen overlappende med py H4; 9,27, d, 1 H, py H<2>.
p- nitrofenylpikolinat. 4,92 g (40 mmol) pikolinsyre og 5,84 g (42 mmol) p-nitrofenol ble suspendert/oppløst i 200 pl CH2C12. Så ble 8,24 g (40 mmol) DCC tilsatt i 20 pl CH2-Cl2 med kraftig omrøring. Omrøring ble fortsatt ved værelsestemperatur i 17 timer. Så ble blandingen filtrert og filter-massen vasket med 30-40 pl CH2C12. Råproduktet ble først behandlet med 100 pl Et20 med omrøring i isbad og filtrert. Rekrystallisering fra 250 pl iPrOH gav 6,24 g, 63 %, produkt. Sm.p. 154-6 °C (dek.), sm.p. 145-7 °C (18).
Pyrazinkarboksylsyre- p- nitrofenylester. Denne forbindelse ble fremstilt ved å anvende den samme metode som den tidligere forbindelse. Fra 40 mmol pyrazinkarboksylsyre og 44 mmol p-nitrofenol ble det oppnådd 35,2 mmol, 88 %, ester. Sm.p. 180-182 °C (dek.). Rf (CHCl3:MeOH = 49:1) = 0,72. NMR (CDC13): 7,5, m og 8,37, m, 2 H hver, hydrogener ved siden av oksygenet og nitrogruppen i hhv. fenolringen; 8,84 m, 1 H, pyrazin H<5>; 8,9, d, 1 H, pyrazin H6; 9,48, d, 1 H, pyrazin H<3>.
BOC- NicLys. 2,5 g BOC-Lys (L eller D) ble suspendert i 200 pl DMF med omrøring. Så ble 1,1 ekvivalent p-nitrofenylnikotinat tilsatt og blandingen omrørt ved værelsestemperatur i 36 timer. Blandingen ble så filtrert og filtratet avdampet til tørrhet under redusert trykk for å gi en gul olje. Residuet ble så omrørt med 2 x 5 pl Et20 i isbad. Den første Et20-fasen ble dekantert, den annen filtrert av. Rekrystallisering fra EtOAc/heksan gav 2,05 g produkt, 58 % (L-form). Sm.p.
138 °C, lit. (17), 138-141 °C, L-form [a]20 = -2,91° (MeOH), D-form [a]<20> = 3,35° (MeOH).
D
L- og D- BOC- INicLys ble fremstilt på samme tid ved å acylere 10 mmol L- eller D-BOC-Lys med p-nitrofenylisonikotinat i 100 pl DMF, 40 timer, værelsestemperatur. Det urene produkt ble fordelt mellom 120 pl EtOAc og 50 pl H20. EtOAc-fasen ble ekstrahert med 2 x 50 pl H20 og 50 pl saltløsning. Den opprinnelige vannfasen ble tilbakeekstrahert med 30 pl EtOAc. De kombinerte EtOAc-fåsene ble så tørket (MgS04) og avdampet, og residuet ble behandlet med Et20 og rekrystallisert som ovenfor til å gi 1,07 g BOC-L-INicLys, 30,5 %. Utbyttet for D-forbindelsen var 1,26 g, 36 %. NMR (aceton d6): 1,4, s, 9 H, t-butoksygruppe; 1,8-1,48, m, 6 H, B, y, d, -CH2-; 3,44, t, 2 H, E-CH2; 4,13, m, 1 H, a-CH; 7,77, m, 2 H, py H<5> og H<3>; 8,70, m, 2 H, py H<2> og H<6>. L- og D- BOC- PicLys. 1,23 g (5 mmol) L- eller D-BOC-Lys ble omrørt med 1,34 g (5,5 mmol) p-nitrofenylpikolinat i 60 pl DMF i 16 timer. Etter filtrering og avdamping ble produktet renset ved kolonnekromatografi på silikagel på en 4,5 x 32 cm kolonne og løsningsmiddelsystemet var n-Bu-0H:py: H0Ac:H20 = 30:10:3:12. Produktet ble etter kromatografi løst opp i EtOAc og vasket med H20, saltløsning, tørket og avdampet i vakuum. Utbyttene ble vanligvis 60-70 %. NMR (CDC13): 1,43, s, 9 H, t-butoksygruppe; 1,73-1,45, m, 6 H, B, y, d-CH2-; 3,47, m, 2 H, E-CH2; 4,32, m, 1 H, a-CH; 7,43, m, 1 H, py H<5>, 7,85, m, 1 H, py H<4>; 8,2, m, 1 H, py H<3>; 8,55, m, 1 H, py H<5>. L- og D- BOC- MNicLvs. 10 mmol BOC-Lys og 10,5 mmol p-nitrofenyl-6-metylnikotinat ble tillatt å reagere i 150 pl DMF på den vanlige måten. Etter 27 timers filtrering og avdamping gav det en gul olje. Et20-behandling (2 x 50 pl) gav 3,3 g
produkt som ble rekrystallisert fra 50 ul 20 % MeOH i EtOAc/ heksan. Utbytte 2,87 g, 78,6 % (L-form). Rf (n-BuOH:py:HOAc:H20 = 32:10:3:12) = 0,61. NMR (CDC13): 1,46, s, 9 H, t-butoksygruppe; 1,9-1,5, m, 6 H, B, y, d-CH2; 2,57, s, 3 H, py CH3; 3,36, m, 2 H, E-CH2; 4,11, m, 1 H, a-CH; 7,22, d, 1 H, py H5; 8,08, m, 1 H, py H<4>; 8,95, bred s, 1 H, py H<2>. L- og D- BOC- PzcLys. Ved å anvende metoden ovenfor ble det oppnådd fra 7,7 mmol pyrazinkarboksylsyre-p-nitrofenylester g 7 mmol BOC-Lys, L eller D, i 100 ul DMF, omkring 6 mmol produkt etter rekrystallisering fra iPrOH. Rf (n-BuOH:
py:H0Ac:H20 = 30:10:3:12) = 0,47. NMR (CDC13): 1,45, s, 9 H, t-butoksygruppe; 1,9-1,48, m, 6 H, B, y, d-CH2-; 3,51, m, 2 H, E-CH2; 4,29, m, 1 H, a-CH; 8,52, q, 1 H, pyrazin H5; 8,77, d,
1 H, pyrazin H<6>; 9,41, d, 1 H, pyrazin H<3>.
BOC- L- NicOrn. Denne forbindelse ble fremstilt på vanlig måte ved å reagere 7 mmol p-nitrofenylnikotinat med 5 mmol BOC-Orn i 75 pl DMF i 36 timer. Avdamping og rekrystallisering fra EtOAc gav 3,5 mmol, 70 %, NicOrn. Sm.p. 143-
144 °C. Rf (n-BuOH:HOAc:H20 = 4:1:2) = 0,70. NMR (CDC13):
1,45, s, 9 H, t-butoksygruppe; 7,46, m, 1 H, py H<5>; 8,27, m,
1 H, py H4; 8,69, m, 1 H, py H<6>; 9,05, m, 1 H, py H<2>.
BOC- D- trans- NACAla. 1,43 g (5 mmol) BOC-D-trans-3-(4-aminocykloheksyl)alanin (oppnådd fra Southwest Foundation for Biomedical Research) ble omrørt med 1,35 g (5,5 mmol) p-nitrofenylnikotinat i 60 pl DMF i 120 timer i værelsestemperatur. Blandingen ble så filtrert, avdampet, behandlet med Et20 i isbad og filtrert igjen. Rekrystallisering ble uført ved å varme opp i 12 pl EtOH og tilsette 18 pl varmt H20. Dette gav en klar løsning fra hvilken krystaller separerte ved avkjøl-ing. Denne fremgangsmåten ble gjentatt to ganger. Utbytte: 0,98 g, 50 %. Renhet >95 %, sm.p. >220 °C. NMR (DMSO d6): 1,46, s, 9 H, t-butoksygruppe; 1,9-1,48, m, 11 H, ring CH2, ring CH i posisjon 1 og B-CH2; 3,72, m, 1 H, ring CH i posisjon 4; 3,95, m, 1 H, a-CH; 7,48, m, 1 H, py H5; 8,16, m, 1 H, py H<4>; 8,67, m, 1 H, py H<6>; 8,96, m, 1 H, py H<2>.
Boc- D- cis- NACAla. 5 mmol BOC-D-cis-3-(4-aminocyklo-heksyl)alanin (kilde som ovenfor) og 5,5 mmol p-nitrofenylnikotinat ble tillatt å reagere i DMF som ovenfor. Reaksjons-tid: 25 timer. Opprensing ble oppnådd ved Et20-behandling som ovenfor og silikagelkromatografi på en 4,5 x 32 cm kolonne ved bruk av løsningsmiddelsystemet CHC13:MeOH:py:HOAc = 75:10:10:5. Utbytte 1,3 g, 61 %, amorft pulver. R£ (kolonnesystem) = 0,58. NMR (CDC13): 1,44, s, 9 H, t-butoksygruppe; 1,95-1,45, m, 11 H, ring CH2, ring CH i posisjon 1 og B-CH2; 4,22, m, 1 H, a-CH; 4,35, m, 1 H, ring CH i posisjon 4; 7,35, 8,24, 8,63 og 8,98, 1 H hver, til- knytninger som for tidligere forbindelse. B0C- I0rn( Z). Denne forbindelse ble fremstilt fra BOC-Orn(Z) ved reduktiv alkylering med aceton og H2/Pd, som beskrevet av Prasad et al. (23), etterfulgt av omdannelse til Nd-Z-derivatet med benzylklorformiat i vandig alkali (Schotten-Baumann-betingelser). Opprensing ble oppnådd ved kromatografi på silikagel med CHCl3/MeOH 85:15. Rf (CHC13:MeOH: HOAc = 85:15:3) = 0,8. NMR (CHC13): 1,10, d, 6 H, isopropyl-CH3; 1,40, s, 9 H, t-butoksygruppe; 1,7-1,5, m, 4 H, B, y-CH2; 3,09, m, 2 H, d-CH2; 4,2, m, 1 H, a-CH; 5,10, s, 2 H, benzyl-CH2; 7,3, m, 5 H, aromatisk. B0C- CvpLys( Z). 2,04 g BOC-Lys(Z) ble oppløst i 8 ul cyklopentanon og 32 ul H20 som inneholdt 0,22 g NaOH. Hydro-genering ble utført i nærvær av 0,4 g 10 % Pd/C ved 50-60 psi i et Parr-apparat. Etter 4 timer ble hydrogeneringen avbrutt, og 2 ul 0,5 M NaOH og 10 ul MeOH ble tilsatt. Hydrogeneringen ble så fortsatt i 16 timer ved 50-60 psi, så filtrering og avdamping. Residuet ble oppløst i 75 pl H20 og vannfasen ekstrahert tre ganger med Et20 og én gang med heksan. pH ble så justert til 6-7 med HC1 og løsningen avdampet i en roterende fordamper, badtemperatur 40 °C. Det resulterende produkt ble så overført til Z-derivatet ved å anvende benzylklorformiat i vandig NaOH (Schotten-Baumann-betingelser). Utbytte: 1,3 g, 58 % totalt. Rf (n-Bu0H:py:H0Ac:H20 = 30:10:3:12) = 0,69. Renhet >95 %. NMR (CDC13): 1,45, s, 9 H, t-butoksygruppe; 1,95-1,35, m, 14 H, ring CH2 + B, y, d-CH2; 3,13, bred t, 2 H, E-CH2; 4,34-4,05, m, 2 H, a-CH + ring CH; 5,13, s, 2 H, benzyl-CH2; 7,35, m, 5 H, aromatiske protoner.
Boc- Me2 Lys, D- og L-. Disse forbindelsene ble fremstilt ved hydrogenolyse av de korresponderende Z- eller Cl-Z-derivater i nærvær av 37 % formaldehyd, hovedsakelig som beskrevet av L. Benoiton (22) for Na<->acetylanalogen. Opprensing ble oppnådd ved kromatografi på silikagel med løsningsmiddel-systemet n-BuOH:py:H20 = 2:2:1. Utbyttene er 40-65 % og produk-tene er amorfe. NMR (CDC13): 1,41, s, 9 H, t-butoksygruppe; 1,9-1,5, m, 6 H, B, y, d-CH2; 2,6, s, 6 H, N(CH3)2; 2,8, m,
2 H, E-CH2; 4,03, m, 1 H, a-CH.
BOC- D- AnGlu. 0,62 g (3 mmol) DCC ble tilsatt den is-avkjølte løsningen med 1,10 g (3 mmol) BOC-D-glutaminsyre-a-benzylester og 0,39 g (3 mmol) p-anisidin i 25 pl CH2C12. Reaksjonsblandingen ble omrørt og oppvarmet til værelsestemperatur og så omrørt i ytterligere 17 timer. Dicykloheksylurea ble så filtrert av og CHC13 tilsatt til et totalt volum på 125 pl. Denne løsningen ble ekstrahert med 2 x 1 N H2S04, H20, mettet NaHC03, 2 x H20 og tørket (MgS04). Avdamping og rekrystallisering fra EtOH gav 0,99 g, 74 %, produkt. Sm.p. 129,5-131 °C. Rf (4 % MeOH i CHC13) = 0,53. Dette produkt ble oppløst i 30 pl MeOH og 10 pl EtOH og hydrogenert i nærvær av 0,3 g Pd/C ved 50 psi i 2,5 timer. Filtrering og avdamping gav et kvantitativt utbytte av BOC-D-AnGlu. Ikke-krystallinsk, renhet >98 %. NMR (CDC13): 1,45, s, 9 H, t-butoksygruppe; 2,35-1,95, m, 2 H, B-CH2; 2,6-2,4, m, 2 H, y-CH2; 3,76, s, 3 H, 0CH3; 4,3, m, 1 H, a-CH; 6,82 og 7,42, bred d, 2 H hver, aromatiske protoner.
B0C- Me3Arq. Først ble N,N,N',S-tetrametylisotiourea fremstilt ved prosedyren til Lecher og Hardy (19). K.p.
(15 mm) = 74 °C, lit. (over) 68 °C ved 11 mm. 9 mmol BOC-Orn og 10 mmol tetrametylisotiourea ble oppløst i 15 pl DMF og 2 pl trietylamin og inkubert ved 100 °C i 2 timer og ved værelsestemperatur i 10 timer. Så ble reaksjonsblandingen avdampet til tørrhet og sendt gjennom en silikagelkolonne eluert med iPrOH:trietylamin:H20 = 42:6:13. Den hvite massen som ble oppnådd ble oppløst i H20, og løsningen ble surgjort med 6 N HC1 og lyofilisert til å gi 5,5 mmol produkt. Rf (kolonneeluer-ingsmiddel) = 0,50. NMR (D20): 1,42, s, 9 H, t-butoksygruppe; 2,80, m, 1 H, a-CH; 2,89, s, 3 H, CH3 på guanidingruppen; 2,96, s, 6 H, (CH3)2N; 3,25, t, 2 H, d-CH2; 1,50, m, 4 H, B, y-CH2.
BOC- Dpo. Av 10 mmol arginin-hydroklorid og 1,72 g natriumhydrogenkarbonat oppløst i 17 pl H20, 28,6 pl acetylace-ton og 28,6 pl EtOH ble det oppnådd 7,5 mmol Dpo ved å følge fremgangsmåten til F.-S. (20). Produktet ble så overført til det korresponderende BOC-derivat ved å anvende di-t-butyl-dikarbonat i 50 % vandig dioksan i nærvær av natriumhydroksid. Denne reaksjonen gir hovedsakelig et kvantitativt utbytte. Rf (n-BuOH:HOAc:H20 = 4:1:2) = 0,63. NMR (CDC13): 1,45, s, 9 H, t-butoksygruppe; 1,9-1,5, 4 H, B, y-CH2; 2,33, s, 6 H, CH3; 3,46, m, 2 H, d-CH2; 4,24, m, 1 H, a-CH; 6,35, s, 1 H, aromatisk H.
L- og D-former reagerer på samme måte.
BQC- D- Et3 hArq. Denne forbindelse ble fremstilt ved metoden til Nestor og Vickery, US patentskrift 4.530.920. Rf (n-BuOH:HOAc:H20 = 4:1:2) = 0,52.
Syntese av dekapeptidene
Dekapeptidene ifølge foreliggende oppfinnelse ble syntetisert ved fast-fase-metoden ved å anvende en Beckman, modell 990, Peptide Synthesizer (1, 11). Benzhydrylamin-hydrokloridresin (BHA-resin) ble benyttet som fast fase. Programmet til syntesemaskinen var oppdelt i underprogrammer.
1. Avbeskyttelse: 1) CH2C12 (2 x vask, 1 eller
2 minutter); 2) 50 % TFA i CH2C12 som inneholdt 0,1 % indol (1 x vask, 1 eller 2 minutter); 3) 50 % TFA i CH2C12 som inneholdt 0,1 % indol (avbeskyttelse, 20 minutter); 4) CH2C12 (2 x vask).
2. Nøytralisering: 1) CH2C12 (2 x vask, 1 eller
2 minutter); 2) DIEA (10 % i CH2C12) (2 x vask, 1 eller
2 minutter); 3) DIEA (10 % i CH2C12) (nøytralisering,
5 minutter): 4) CH2C12 (2 x vask, 1 eller 2 minutter).
3. DCC-kobling: 1) CH2C12 (2 x vask, 1 eller
2 minutter); 2) aminosyreløsning i CH2C12 (avlevering, over-føring, blanding, 5 minutter); 3) DCC (10 % i CH2C12, avlevering og blanding, 180 minutter); 4) CH2C12 (2 x vask, 1 eller 2 minutter).
4. Aktiv esterkobling: ikke benyttet.
5. Endelig vask: 1) CH2C12 (2 x vask, 1 eller
2 minutter); 2) i-PrOH (3 x vask, 1 eller 2 minutter); 3) DMF (3 x vask, 1 eller 2 minutter); 4) CH2C12 (3 x vask, 1 eller 2 minutter).
6. Vask etter TFA-behandling: 1) CH2C12 (2 x vask,
1 eller 2 minutter); 2) i-PrOH (2 x vask, 1 eller 2 minutter); 3) CH2C12 (3 x vask, 1 eller 2 minutter).
7. Acetylering: 1) CH2C12 (2 x vask, 1 eller
2 minutter); 2) 25 % Ac20 og Py i CH2C12 (1 x vask, 1 eller
2 minutter); 3) 25 % Ac20 og Py i CH2C12 (acetylering,
20 minutter); 4) CH2C12 (2 x vask, 1 eller 2 minutter).
Den første aminosyren ble bundet til resinet ved hjelp av programsekvens 2-3-5. Før resinet ble plassert i reaksjonsbeholderen, ble resinet vasket i en separat trakt med 25 ul CH2Cl2/g resin for å fjerne fine partikler. I alle koblingene ble vanligvis et 3-4 gangers overskudd av Boc-aminosyren over nitrogeninnholdet til resinet benyttet. Denne fremgangsmåten resulterte vanligvis i en komplett koblings-reaksjon. Hvis en positiv ninhydrin-fargereaksjon ble observert, ble en annen kobling utført (programsekvens 3-5). Så ble resinet acetylert (programsekvens 7-5).
Den neste aminosyren ble bundet ved hjelp av programsekvens 1-6-2-3-5. For DCC-kobling ble alle aminosyrene opp-løst i CH2C12. Acetylering av aminosyreresten i posisjon 1 ble utført ved å anvende programsekvens 1-6-2-7-5. Volumet av løsningsmidler og reagenser benyttet for vaskingen og ut-førelse av kjemiske reaksjoner, var omtrent 10 pl/g resin.
Spalting av peptidene fra resinet
Etter at alle aminosyrene var koblet, ble peptid-resinet tørket over natten i vakuum. Resinet ble så behandlet med dobbeltdestillert, flytende hydrogenfluorid (10 pl/g resin) som inneholdt 10-25 % destillert anisol eller p-kresol i 1 time ved 0 °C. Så ble HF avdampet under redusert trykk, og residuet ble tørket over natten i vakuum ved hjelp av en olje-pumpe. Blandingen ble så ekstrahert flere ganger med Et20
(25 pl/g resin), så med vann. HOAc, 30 %, 50 %, 10 % og én gang med 25 pl destillert, deionisert vann. Den kombinerte vandige løsning ble lyofilisert til å gi det urene peptid.
Rensing og karakterisering av peptidene
De fleste peptider ble renset ved silikagelkromatografi (1 x 60 cm kolonne) ved å anvende løsningsmiddel-systemene nBuOH:HOAc:H20 = 4:1:2 eller 4:1:5 øvre fase eller nBuOAc:nBuOH:HOAc:H20 = 2:8:2:3 etterfulgt av gelfiltrering på "Sephadex G-25" med 6 % HOAc som elueringsmiddel. I tilfellet med utilfredsstillende renhet etter denne prosedyre ble peptidene videre renset ved semipreparativ HPLC ved å anvende Waters væskekromatografi utstyrt med et 660 løsningsmiddel-programsystem. En 1,2 x 25 cm m-Bondapak C18-kolonne ble benyttet med løsningsmiddelsystem A = 0,1 M NH40Ac, pH 5,0, og B = 20 % A + 80 % CH3CN. Forskjellige gradienter med økende mengde av B i 15-25 minutter ble benyttet for å effektuere opprensing.
En alternativ opprensingsprosedyre har vært gelfiltrering på "Sephadex G-25" med 6 % HOAc, etterfulgt av kromatografi på "Sephadex LH 20" (2,5 x 100 cm) med løsningsmiddel-systemet H20:nBuOH:HOAc:MeOH = 90:10:10:8. Hvis nødvendig ble den sistnevnte prosedyre gjentatt 1-2 ganger.
Renheten til peptidene ble bedømt ved tynnsjikts-kromatografi på Merck silikagelplater ved å anvende minst fire forskjellige løsningsmiddelsystemer. Flekkene ble utviklet med klorin/o-tolidinreagenset. Det ble også benyttet analytisk HPLC. Utstyret var det ovenfor beskrevne, bortsett fra at en analytisk m-Bondapak C18-kolonne (3,9 mm x 30 cm) ble benyttet.
Aminosyreanalyse ble utført på en Beckman, modell 118 CL aminosyreanalysator. Prøver på omkring 0,5 ug ble hydrolysert i 6 N saltsyre i lukkede glassrør i 24 timer ved 110 °C. Restene ble så avdampet og oppløst i citratbuffer, pH 2,2, og applisert på analysatoren.
Bioassavs av peptidene og diskusjon av resultatene
Den antiovulatoriske aktivitet, AOA, hos rotter ble bestemt som beskrevet av Humphries et al. (12). Hevelses-(urticaria)-test ble utført ved å injisere inn i huden 10 ug av peptidet i 100 ul saltvann i bedøvde rotter og måle den ideelt sirkulære hevelsesrespons og beregne arealet. In vxtro-histaminfrigjøringstest ble utført som beskrevet av Karten et al. (4).
Resultatene fra disse bioassayene er presentert i tabell I og andre tabeller som hører til.
Av peptidene i tabell I hadde 12 en AOA på omkring 90 % eller mer i en dose på 1 ug i foreliggende assay. Av de peptidene i tabell I som ble testet for histaminfrigjøring i rottemastcellemetoden, hadde 5 ED50-verdier på 300 eller mer sammenlignet med 0,17 for standardforbindelsen [N-Ac-D-2-Nal<1>, D-4-F-Phe<2>, D-Trp<3>, D-Arg<6>]-LHRH. Fem tilleggsanaloger hadde ED50-verdier som varierte fra 93 til 288, dvs. de frigjorde ikke mer histamin enn klinisk brukte "superagonister".
Av de peptidene i tabell I som ble testet med rottemastcellemetoden, hadde 7 [nr. 4, 23, 24, 43 (antid), 44, 53, 55] både en AOA på omkring 90 % eller mer i 1 ug og en ED50-verdi på omkring > 93 ug/ml. Dette inkluderte den sterke analog, nr. 53, som hadde 100 % AOA ved 0,5 ug og 40 % AOA ved 0,25 ug. ED50-verdien for denne analogen var 93 ± 28. Det ble således demonstrert at høy AOA med lav histaminfrigjøring kunne bli funnet i analogene ifølge foreliggende oppfinnelse.
Strukturelle karakteristika felles for disse 7 peptidene er: 1) et D-Lys-residuum i posisjon 6 som var acylert av den svakt basiske nikotinsyre eller analoger som pikolin-og 6-metylnikotinsyre, 2) den korresponderende acylerte L-Lys-rest eller det naturlige Tyr i posisjon 5, 3) de alky-lerte derivatene ILys eller IOrn i posisjon 8, 4) Arg er fra-værende fra sekvensen.
Biologiske aktiviteter
For bestemmelsen av virkningens varighet ble antago-nisten gitt s.k. eller oralt til 25 dager gamle hunnrotter på en spesifikk tid før tilførsel av agonisten [D-Qal<6>]-LHRH. Serumnivåene til rotteluteiniserende hormon (LH) og rotte-follikkelstimulerende hormon (FSH) ble så målt 2 timer etter agonisttilførselen ved hjelp av RIA. Den orale tilførsel ble utført ved tvangsforing med foringsslanger.
AOA- og histaminfrigjøringsresultater
Tabell IV viser resultater fra AOA og histaminfrigjøring for analogene som inneholder acylerte aminocyklo-heksylalanihrester. For analogene med NicLys<5>, D-NACAla<6>, IV-1 og IV-2 [NACAla representerer 3-(4-nikotinylaminocykloheksyl)-alanin], analog 2 med cis-D-NACAla<6> er noe mer aktiv, 100 % vs. 70 % AOA ved 1 pg. Analogene IV-7 og IV-8 med NicLys<5>, D-PzACAla<6> [pzACAla representerer 3-(4-pyrazinylkarbonylamino-cykloheksyl)alanin] viser den motsatte rekkefølge med hensyn til aktivitet. Trans-residuet har høyere AOA, 88 % vs. 25 % ved 1 pg.
Analogene IV-3 og IV-4 med PicLys<5>, trans- og cis-PACAla<6> [PACAla representerer 3-(4-pikolinylaminocykloheksyl)-alanin] er ekvipotente, hhv. 50 og 54 % AOA ved 0,5 pg, mens i tilfellet med PicLys<5>, trans- og cis-PzACAla<6> er cis-forbindelsen mer enn to ganger så aktiv. Den første, analog IV-5, er omtrent så sterk som analogene IV-3 og IV-4 (44 % ved 0,5 pg) mens den sistnevnte, analog 6, har hhv. 100 %, 73 % og 29 % AOA ved 0,5, 0,25 og 0,125 pg. Høystyrkeanalogen IV-6 er unik i sammenligning med den lave aktivitet til den strukturelt like analog IV-8.
Analog IV-9 har cis-PzACAla<5>, D-PicLys<6> og, skjønt residuene 5 og 6 er reversert, beholdt den høye styrke til analog IV-6, hhv. 90 % og 67 % ved 0,5 og 0,25 pg.
Med hensyn til histaminfrigjøring har alle analoger som er testet in vitro lavere ED50-verdier enn utgangsforbin-delsene. ED50-verdiene varierer fra omtrent 30 til omtrent 60 sammenlignet med >300 og 93 ± 11 for antid og analog V-10. Testene for hevelses(urtica)-respons viser en variasjon fra 99,5 til 129,6, som er lik med antid (132,7) og analog V-10 (123,0). Mangel på korrelasjon mellom de to testene kan primært reflektere metodevariasjon.
Til oppsummering: for analogene med NicLys<5->inkorporering av aminocykloheksylalaninderivater i posisjon 6 resulterte det i vesentlig økning i in vitro-histaminfrigjøring og uforandret eller redusert AOA. For PicLys<5->analoger med de samme substitusjoner var det en reduksjon av AOA-styrke i alle tilfeller bortsett fra ett, hvor en betraktelig økning ble observert. Kombinasjonen av PicLys<5> og cis-D-PzACAla<6> besitter tydeligvis en viss gunstig struktur. Histaminfrigjøring for PicLys<5->analoger ble øket med 50-100 %.
I tabell V er resultatene fra substitusjoner i posisjon 7 til analog V-10. Denne posisjon tillater en viss struk-turell frihet, skjønt ingen av peptidene viser høyere AOA enn analog V-10. Analoger V-12, V-14 og V-16 som har Aile<7> (allo-isoleucin), Val<7> og Abu<7> (2-aminosmørsyre), er ekvipotente med analog V-10. Analog V-16 med den rette kjede Abu<7> er litt mer sterk enn analogene V-13 og V-15 med henholdsvis Nie<7> (nor-leucin) og NVal<7> (norvalin) som mer skulle ligne på naturlig
Leu<7>.
For forbindelse V-17 med den lille Ala<7> avtok AOA til 60 % ved 0,5 pg.
Den mest interessante egenskap ved tabell V er ln vitro-histaminfrigjøringsresultatene. De tre analoger med lignende AOA-styrke som analog V-10 viser markert nedsatt histaminfrigjøring. ED50-verdiene for analogene V-12, V-14 og V- 16 er hhv. >300, 213 ± 30 og 273 ± 27; det betyr en 2-3 gangers nedgang i histaminfrigjøring oppnådd ved små forandringer i sidekjedestrukturen. Også hevelsesresponsen er nedsatt for alle analoger sammenlignet med V-10.
Det var bemerket tidligere (1) at hvorvidt Hys eller IOrn er den beste substitusjon i posisjon 8, er sekvensavhen-gig. For videre å undersøke dette aspekt, ble IOrn<8->analoger korresponderende til noen av de beste peptidene syntetisert og testet. Resultatene i tabell VI indikerer at ILys<8> kan være bedre. For to av parene var analogene VI-10, VI-19 og VI-12, VI- 21, ILys<8> og IOrn<8> omtrent likeverdige. For de andre tre par var analogene med ILys<8> mer aktive, men forskjellene var ikke store. Den største forskjellen var for paret med Val<7>, hvor ILys<8->analogen VI-14 viste 90 % AOA ved 0,5 pg vs. 57 % for IOrn<8->analogen VI-20.
Analog VI-19 ble testet ln vitro for histaminfrigjør-ing. ED50-verdien er 42 ± 3,1; dvs. histaminfrigjøringen er to ganger den til analogen med én mer CH2-enhet. Hevelsesresponsen forandret seg ikke spesielt, bortsett fra Aile<7> og 10rn<8->analog 21 som hadde den lave verdi på 78,6 ± 4,5 sammenlignet med ILys-analogen 12, som hadde 97,9 ± 2,9.
Varighet av virkning
Tabell VII viser varigheten av virkningen til antid og to analoger. Da antid ble injisert 44 timer før 50 ng av [D-Qal<6>]-LHRH [Qal representerer 3-(3-kinolyl)alanin], en superagonist, i doser på 3, 10 og 30 pg, ble signifikante reduksjoner i serum-LH observert ved de to høyere doser. LH avtok fra 113 ± 11 til 46 ± 12 og 5 ± 0,7 ng/pl. Serum-FSH ble også nedsatt, mest signifikant fra omkring 300 til omkring 300 ng/pl ved 30 pg.
Analog VII-24 [Tyr<5>]-antid og analog IV-6 ble på lignende måte injisert 24 timer før agonisten. Analog VII-24 viste høy aktivitet og reduserte LH-nivået til 19 ± 4, 3 ± 0,4 og 0,3 ± 0,03 ng/pl i doser på hhv. 3, 10 og 30 pg. De korresponderende tall for analog IV-6 er 42 ± 7, 15 ± 3 og 3,4 ± 2 ng/pl. Dette er interessant siden analog IV-6 er betraktelig mer sterk i den antiovulatoriske målemetoden, 73 % ved 0,25 pg vs. 45 % ved 0,5 pg. Muligens blir analog IV-6 degradert enzymatisk raskere enn analog VII-24. Den lange varighet av virkning til disse analoger s.k. kan også skyldes "depot"-effekter på injeksjonsstedet.
Oral aktivitet
Tabell VIII viser varigheten av virkningen til antid etter oral administrasjon. Førtiåtte timer etter tilførsel av 100 eller 300 pg dosenivåer av antid var det signifikant reduserte nivåer av LH som var blitt frigjort ved 5 ng [D-Qal6] - LHRH s.k. Reduksjoner fra 21 ± 3 til 4 + 0,8 og 8 + 2 ng/pl ble hhv. observert. Resultatene er omkring de samme i 24-timers eksperimentet (9 + 2 og 6 + 0,3 ng/pl). Antid synes å besitte betraktelig motstand mot degraderende enzymer. Da antid ble gitt 2 timer før agonisten, ble en sterk nedgang i LH-nivåer observert. I en dose på 30 pg ble en signifikant reduksjon av LH-nivået til 6 ± 1 ng/pl observert. Ved 100 og 300 pg var nivåene 1 ± 0,3 og 0,4 ± 0,4 ng/pl, dvs. meget lave nivåer. Da 10 ng av agonisten ble benyttet, var resultatene kvalitativt meget like.
Til sammenligning er de tre siste opplysningene i tabell VIII fra eksperimenter med [N-Ac-D-pCIPhe<1-2>, D-Trp<3>, D-Arg<6>, D-Ala<10>]-LHRH, VIII-25, en analog som er blitt rapportert å ha oral aktivitet (16). Disse resultater viser at antid er mer aktivt enn VIII-25, siden en dose på 30 pg gitt 2 timer før agonisten reduserte LH-nivået fra 44 ± 4 til 22 ± 4 ng/pl (p<0,01). Verdien for analog VIII-25 er 39 ± 6 (NS). Ved 100 pg er de korresponderende tall 7 ± 3 (p<0,001) og 26 ± 7 (p<0,05). FSH-nivåene ble vanligvis senket da antid ble gitt ved *2 timer ved 100 eller 300 pg dosenivåer.
Resultatene i tabell IX viser at det er ingen signifikant forskjell mellom tilførsel av antid i vann eller i
maisolje.
Antid er også blitt testet oralt i den antiovulatoriske målemetode (tabell X). AOA-verdiene ved 300, 600 og 1200 pg dosenivåer er hhv. 18, 73 og 100 %. Uttrykt som ovulerte rotter/totalrotter er tallene 9/11, 3/11 og 0/11. For analog VIII-25 er tallene 9/11, 4/11 og 0/11 blitt rapportert i dosenivåer på hhv. 500, 1000 og 2000 pg (16). Antid var omkring to ganger så aktivt som analog VIII-25.
Tabell XI viser en sammenligning mellom de orale aktiviteter til antid og en analog. Analogen var betraktelig mindre aktiv.
Etter 15 ng s.k. dose av [D-Qal<6>]-LHRH steg LH-nivået til 91 + 4,6 ng/pl. Med orale dosenivåer på 30, 100 og 300 pg antid ble reduserte nivåer av LH på hhv. 75 ± 3, 20 ± 4 og 5 1 ng/pl observert. Analog 4 med PicLys<5> og D-PACAla<6> viste ingen signifikant reduksjon av LH ved 30 og 100 pg nivåer, men det var en reduksjon til 51 ± 6 ng/pl ved en 300 pg dose.
Tabellene XI og XII viser også resultater med antid, f.eks. når 50 ng av agonisten ble benyttet. Sammenligning mellom disse resultater og data fra eksperimentene som benyt-ter 15 ng agonist, viser en doseresponsrelasjon som er ventet ut fra kompetitiv antagonisme. Ved bruk av 15 ng av agonisten reduserte 100 og 300 pg antid LH-nivået fra hhv. 115 ± 15 ng/ pl til 20 ± 4 og 5 ± 1 ng/pl, mens i eksperimentene som benyttet 50 ng agonist, reduserte 300 og 900 pg antid LH til samme nivå (19 ± 3 og 5,3 ± 1,2 ng/pl).
Tabell XIII viser de biologiske effekter av antid i et dispergert hypofysecellekultursystem.
Strukturene og de biologiske aktiviteter til visse foretrukne LHRH-analoger som hemmer mer enn 50 % av den ovula-toriske aktivitet til en dose på 0,25 pg, er vist i tabell
XIV.
Fysiologiske bruksområder for antagonistene ifølge foreliggende oppfinnelse, slik som antid, ville være å hemme fertilitet hos både kvinner og menn.
Referansene i den følgende liste er det her henvist til ved hjelp av referansenummer.
Referanser
1. Ljungqvist, A., Feng, D.-M., Tang, P.-F.L., Kubota, M., Okamoto, T., Zhang, Y., Bowers, C.Y., Hook, W.A. & Folkers, K. (1987), Biochem. Biophys. Res. Commun.. 148 (2), 849-586. 2. Karten, M.D. & Rivier, J.E. (1986), Endocr. Rev., 7, 44-56. 3. Hook, W.A., Karten, M. & Siraganian, R.P. (1985), Fed. Proe. Fed. Am. Soc. Exptl. Biol.. 44, 1323. 4. Karten, M.D., Hook, W.A., Siraganian, R.P., Coy, D.H., Folkers, K., Rivier, J.E. & Roeske, R.W. (1987) i LHRH and its Analoqs; Contraceptive and Therapeutic Applications, Part 2, utg. Vickery, B.H. & Nestor, J.J. Jr. (MTP Press Ltd., Lancaster, England), s. 179-190. 5. Rivier, J.E., Porter, J., Rivier, C.L., Perrin, M., Corrigan, A., Hook, W.A., Siraganian, R.P. & Vale, W.W.
(1986), J. Med. Chem.. 29, 1846-1851. 6. Roeske, R.W., Chaturvedi, N.C., Hrinyo-Pavlina, T. & Kowalzzuk, M. (1987) i LHRH and its Analoqs; Contraceptive and Therapeutic Applications. Part 2. utg. Vickery, B.H. & Nestor, J.J. Jr. (MTP Press Ltd., Lancaster, England), s. 17-24. 7. Hocart, S.J., Nekola, M.W. & Coy, D.H. (1987), ±L_ Med. Chem.. 30. 739-743. 8. Nestor, J.J., Tahilramani, R., Ho, T.L., McRae, G.I. & Vickery, B.H. (1989), J. Med. Chem.. 31. 65-72. 9. Bajusz, S. Kovacs, M., Gazdag, M., Bokser, L., Karashima, T., Csernus, V.J., Janaky, T., Guoth, J. & Schally, A.V. (1988), Proe. Nati. Acad. Sei. USA. 85. 1637-1641. 10. Rivier, J., Kupryszewski, G., Varga, J., Porter, J., Rivier, C, Perrin, M. , Hagler, A., Struthers, S., Corrigan, A. & Vale, W. (1988), J. Med. Chem.. 31. 677-682. 11. Folkers, K., Bowers, C.Y., Shieh, H.-M., Liu, Y.-Z., Xiao, S.-B., Tang, P.-F.L. & Chu, J.-Y. (1984), Biochem . Biophys. Res. Commun.. 123 (3), 120-123. 12. Humphries, J. Wan, Y.-P., Folkers, K. S. Bowers, C.Y. (1978), J. Med. Chem.. 21 (1), 120-123. 13. Miyamoto, K., Hasegawa, Y., Nomura, M.,
Igarashi, M., Kanagawa, K. & Matsuo, H. (1984), Proe. Nati. Acad. Sei. USA. 81. 3874-3878. 14. Sherwood, N., Eiden, L., Brownstein, M., Spiess, J., Rivier, J. & Vale, W. (1983), Proe. Nati. Acad. Sei. USA, 80, 2794-2798. 15. Sherwood, N.M., Sower, S.A., Marshak, D.R., Fraser, B.A. & Brownstein, M.J. (1986), J. Biol. Chem., 261, 4812-4819. 16. Nekola, M.V., Horvath, A., Ge, L.-J., Coy, D.H.
& Schally, A.V. (1982), Science. 218. 160-161. 17. Bernardi et al., J. Pharm. Pharmacol.. 19, 95
(1967). 18. Fife, T.H. og Przystas, T.J., J. Am. Chem. Soc.. 107. 1041 (1985). 19. Lecher et al., US 2.872.484, 3. februar 1959, Chem. Abstr.. 53, 11238c. 20. Tjoeng et al., Chem. Ber.. 108. 862 (1975). 21. Humphries et al., J. Med. Chem.. 21 (1), 120
(1978). 22. Benoiton, L., Can. J. Chem., 42, 2043 (1969). 23. Prasad et al., J. Med. Chem.. 19. 492 (1976). 24. Zinner, H. og Fiedler, H., Arch. Pharm.. 291 (63), 330 (1958).
Claims (55)
1. Dekapeptid med antiovulatorisk aktivitet, karakterisert ved at det har den generelle formel
AA<1->D-pClPhe<2->D-3-Pal<3->Ser<4->AA<5->AA<6->Leu<7->AA<8->Pro<9->D-Ala<10->NH2 hvor
AA<1> er N-Ac-D-2-Nal, N-Ac-D-pCIPhe eller N-Ac-D-Cl2Phe, AA<5> er Tyr, NicLys, PicLys, MNicLys, MPicLys, INicLys,
DMGLys eller PzcLys, eller c-PzACAla,
AA<6> er D-NicLys, D-PicLys, D-MNicLys, D-MPicLys, D-
INicLys, D-BzLys eller D-PzcLys, eller D-PzACAla, D-NACAla eller D-PACAla, og
AA<8> er ILys eller IOrn.
2. Dekapeptid ifølge krav 1, karakterisert ved at AA<1> er N-Ac-D-2-Nal.
3. Dekapeptid ifølge krav 1 eller 2, karakterisert ved at AA<5> er Tyr.
4. Dekapeptid ifølge krav 3, karakterisert ved at AA6 er D-NicLys, D-PicLys, D-MNicLys, D-MPicLys, D-INicLys, D-BzLys eller D-PzcLys.
5. Dekapeptid ifølge krav 4, karakterisert ved at AA6 er D-NicLys.
6. Dekapeptid ifølge krav 1 eller 2, karakterisert ved at AA<5> er NicLys, PicLys, MNicLys, MPicLys, INicLys, DMGLys eller PzcLys, og AA6 er D-NicLys, D-PicLys, D-MNicLys, D-MPicLys, D-INicLys, D-BzLys eller D-PzcLys.
7. Dekapeptid ifølge krav 1 eller 2 karakterisert ved at AA<5> er NicLys, PicLys, MNicLys, MPicLys, INicLys, DMGLys eller PzcLys, og AA6 er D-
PzACAla, D-NACAla eller D-PACAla.
8. Dekapeptid ifølge krav 7, karakterisert ved at AA<5> er NicLys eller PicLys og AA<6> er D-PzACAla, D-NACAla eller D-PACAla.
9. Dekapeptid ifølge krav 2, karakterisert ved at AA<5> er DMGLys, AA6 er D-NicLys og AA<8> er ILys.
10. Dekapeptid ifølge krav 2, karakterisert ved at AA<5> er PicLys, AA6 er D-NicLys og AA<8> er ILys.
11. Dekapeptid ifølge krav 2, karakterisert ved at AA<5> er INicLys, AA6 er D-INicLys og AA<8> er ILys.
12. Dekapeptid ifølge krav 2, karakterisert ved at AA5 er NicLys, AA6 er D-BzLys og AA<8> er ILys.
13. Dekapeptid ifølge krav 2, karakterisert ved at AA<5> er NicLys, AA<6> er D-PicLys og AA<8> er ILys.
14. Dekapeptid ifølge krav 2, karakterisert ved at AA5 er NicLys, AA6 er D-PzcLys og AA<8> er ILys.
15. Dekapeptid ifølge krav 2, karakterisert ved at AA<5> er NicLys, AA6 er D-PzcLys og AA<8> er IOrn.
16. Dekapeptid ifølge krav 2, karakterisert ved at AA5 er NicLys, AA5 er D-PzACAla og AA<8> er ILys.
17. Dekapeptid ifølge krav 2, karakterisert ved at AA<5> er NicLys, AA6 er D-NACAla og AA<8> er ILys.
18. Dekapeptid ifølge krav 2, karakterisert ved at AA<5> er PicLys, AA6 er c-D-PzACAla og AA<8> er ILys.
19. Dekapeptid ifølge krav 2, karakterisert ved at AA5 er PicLys, AA6 er c-D-PzACAla og AA<8> er IOrn.
20. Dekapeptid ifølge krav 2, karakterisert ved at AA<5> er PicLys, AA6 er D-PACAla og AA<8> er ILys.
21. Dekapeptid ifølge krav 2, karakterisert ved at AA5 er PicLys, AA6 er t-D-PzACAla og AA<8> er ILys.
22. Dekapeptid ifølge krav 2, karakterisert ved at AA<5> er c-PzACAla, AA<6> er D-PicLys og AA<8> er ILys.
23. Dekapeptid ifølge krav 2, karakterisert ved at AA<5> er c-PzACAla, AA<6> er c-D-PzACAla og AA<8> er ILys.
24. Dekapeptid ifølge krav 2, karakterisert ved at AA5 er MPicLys, AA6 er D-MPicLys og AA<8> er ILys.
25. Dekapeptid ifølge krav 2, karakterisert ved at AA<5> er DMGLys, AA<6> er D-BzLys og AA<8> er ILys.
26. Dekapeptid ifølge krav 2, karakterisert ved at AA5 er Tyr, AA<6> er D-NicLys og AA<8> er ILys.
27. Dekapeptid ifølge krav 2, karakterisert ved at AA<5> er Tyr, AA<6> er D-NicLys og AA<8> er IOrn.
28. Dekapeptid ifølge krav 2, karakterisert ved at AA<5> er Tyr, AA<6> er c-D-PzACAla og AA<8> er ILys.
29. Dekapeptid ifølge krav 2, karakterisert ved at AA<5> er NicLys, AA6 er D-NicLys og AA<8> er ILys.
30. Dekapeptid ifølge krav 2, karakterisert ved at AA<5> er NicLys, AA6 er D-NicLys og AA<8> er IOrn.
31. Dekapeptid ifølge krav 2, karakterisert ved at AA<5> er PicLys, AA6 er D-PicLys og AA<8> er ILys.
32. Dekapeptid ifølge krav 2, karakterisert ved at AA<5> er PicLys, AA6 er D-PicLys og AA<8> er IOrn.
33. Dekapeptid ifølge krav 2, karakterisert ved at AA<5> er MNicLys, AA<6> er D-MNicLys og AA<8> er ILys.
34. Dekapeptid ifølge krav 2, karakterisert ved at AA<5> er PzcLys, AA6 er D-PzcLys og AA<8> er ILys.
35. Dekapeptid ifølge krav 1, karakterisert ved at AA<1> er N-Ac-D-pClPhe, AA<5> er Tyr, AA<6> er D-NicLys og AA<8> er ILys.
36. Dekapeptid ifølge krav 1, karakterisert ved at AA<1> er N-Ac-D-Cl2Phe, AA<5> er Tyr, AA<6> er D-NicLys og AA<8> er ILys.
37. Dekapeptid med antiovulatorisk aktivitet, karakterisert ved at det har formelen AA^D-pClPhe^D-S-Pal^Ser^AA^AA^AA^AA^Pro^D-Ala^-N^ hvor
AA<1> er N-Ac-D-2-Nal, N-Ac-D-pCIPhe eller N-Ac-D-Cl2Phe, AA<5> er Tyr, NicLys, PicLys, MNicLys, MPicLys, INicLys,
DMGLys eller PzcLys, eller c-PzACAla,
AA<6> er D-NicLys, D-PicLys, D-MNicLys, D-MPicLys, D-
INicLys, D-BzLys eller D-PzcLys, eller D-PzACAla, D-NACAla eller D-PACAla,
AA<7> er Aile, Nie, Val, NVal, Abu eller Ala, og AA<8> er ILys eller IOrn.
38. Dekapeptid ifølge krav 37, karakterisert ved at AA<1> er N-Ac-D-2-Nal.
39. Dekapeptid ifølge krav 37 eller 38, karakterisert ved at AA<5> er Tyr.
40. Dekapeptid ifølge krav 39, karakterisert ved at AA6 er D-NicLys, D-PicLys, D-MNicLys, D-MPicLys, D-INicLys, D-BzLys eller D-PzcLys.
41. Dekapeptid ifølge krav 40, karakterisert ved at AA6 er D-NicLys.
42. Dekapeptid ifølge krav 37 eller 38, karakterisert ved at AA<5> er NicLys, PicLys, MNicLys, MPicLys, INicLys, DMGLys eller PzcLys, og AA6 er D-NicLys, D-PicLys, D-MNicLys, D-MPicLys, D-INicLys, D-BzLys eller D-PzcLys.
43. Dekapeptid ifølge krav 37 eller 38, karakterisert ved at AA5 er NicLys, PicLys, MNicLys, MPicLys, INicLys, DMGLys eller PzcLys, og AA6 er D-PzACAla, D-NACAla eller D-PACAla.
44. Dekapeptid ifølge krav 43, karakterisert ved at AA<5> er NicLys eller PicLys og AA<6> er D-PzACAla, D-NACAla eller D-PACAla.
45. Dekapeptid ifølge krav 38, karakterisert ved at AA5 er PicLys, AA<6> er D-PicLys, AA<7> er Val og AA<8> er ILys.
46. Dekapeptid ifølge krav 38, karakterisert ved at AA<5> er PicLys, AA<6> er D-PicLys, AA<7> er Val og AA<8> er IOrn.
47. Dekapeptid ifølge krav 38, karakterisert ved at AA<5> er PicLys, AA<6> er D-PicLys, AA<7> er Aile og AA<8> er ILys.
48. Dekapeptid ifølge krav 38, karakterisert ved at AA5 er PicLys, AA<6> er D-PicLys, AA<7> er Aile og AA<8> er IOrn.
49. Dekapeptid ifølge krav 38, karakterisert ved at AA<5> er PicLys, AA<6> er D-PicLys, AA<7> er Abu og AA<8> er ILys.
50. Dekapeptid ifølge krav 38, karakterisert ved at AA<5> er PicLys, AA<6> er D-PicLys, AA<7> er Abu og AA<8> er IOrn.
51. Dekapeptid ifølge krav 38, karakterisert ved at AA<5> er PicLys, AA<6> er D-PicLys, AA<7> er Nie og AA<8> er ILys.
52. Dekapeptid ifølge krav 38, karakterisert ved at AA5 er PicLys, AA<6> er D-PicLys, AA<7> er NVal og AA<8> er ILys.
53. Dekapeptid ifølge krav 38, karakterisert ved at AA<5> er PicLys, AA<6> er D-PicLys, AA<7> er Ala og AA<8> er ILys.
54. Dekapeptid ifølge krav 38, karakterisert ved at AA<5> er PicLys, AA6 er c-D-PzACAla, AA<7> er Val og AA<8> er ILys.
55. Dekapeptid ifølge krav 38, karakterisert ved at AA5 er c-PzACAla, AA6 er D-PicLys, AA<7> er Val og AA<8> er ILys.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| NO942179A NO302577B1 (no) | 1987-08-24 | 1994-06-10 | Analogifremgangsmåte for fremstilling av terapeutisk aktive dekapeptider |
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US07/088,431 US4935491A (en) | 1987-08-24 | 1987-08-24 | Effective antagonists of the luteinizing hormone releasing hormone which release negligible histamine |
| PCT/US1988/002922 WO1989001944A1 (en) | 1987-08-24 | 1988-08-24 | Effective antagonists of the luteinizing hormone releasing hormone which release negligible histamine |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NO900888D0 NO900888D0 (no) | 1990-02-23 |
| NO900888L NO900888L (no) | 1990-04-23 |
| NO301015B1 true NO301015B1 (no) | 1997-09-01 |
Family
ID=22211329
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NO900888A NO301015B1 (no) | 1987-08-24 | 1990-02-23 | Dekapeptid med antiovulatorisk aktivitet |
Country Status (14)
| Country | Link |
|---|---|
| US (3) | US4935491A (no) |
| EP (1) | EP0377665B1 (no) |
| JP (1) | JP2621970B2 (no) |
| KR (1) | KR0135276B1 (no) |
| AT (1) | ATE124957T1 (no) |
| AU (1) | AU619221B2 (no) |
| DE (1) | DE3854159T2 (no) |
| DK (1) | DK173753B1 (no) |
| FI (1) | FI102074B1 (no) |
| HU (2) | HU213098B (no) |
| MX (1) | MX9203688A (no) |
| NO (1) | NO301015B1 (no) |
| OA (1) | OA09786A (no) |
| WO (1) | WO1989001944A1 (no) |
Families Citing this family (38)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5110904A (en) * | 1989-08-07 | 1992-05-05 | Abbott Laboratories | Lhrh analogs |
| IL87055A (en) * | 1988-07-08 | 1994-06-24 | Illana Gozes | Conjugates of vasoactive intestinal peptide (vip) and of fragments thereof and pharmaceutical compositions comprising them |
| US5171835A (en) * | 1988-10-21 | 1992-12-15 | The Administrators Of The Tulane Educational Fund | LHRH antagonists |
| US5447912A (en) * | 1989-09-18 | 1995-09-05 | Senetek, Plc | Erection-inducing methods and compositions |
| US5352796A (en) * | 1989-10-30 | 1994-10-04 | The Salk Institute For Biological Studies | Amino acids useful in making GnRH analogs |
| US5169932A (en) * | 1989-10-30 | 1992-12-08 | The Salk Institute For Biological Studies | Gnrh analogs |
| US5296468A (en) * | 1989-10-30 | 1994-03-22 | The Salk Institute For Biological Studies | GnRH analogs |
| US5212288A (en) * | 1990-02-20 | 1993-05-18 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Temporary minimal protection synthesis of serine-containing polypeptides |
| US5180711A (en) * | 1990-06-14 | 1993-01-19 | Applied Research Systems Ars Holding N.V. | Combined treatment with gnrh antagonist and gnrh to control gonadotropin levels in mammals |
| US5169935A (en) * | 1990-06-20 | 1992-12-08 | The Salk Institute For Biological Studies | Method of making peptides |
| US5744450A (en) * | 1991-03-14 | 1998-04-28 | The Salk Institute For Biological Studies | GnRH analogs |
| US5516887A (en) * | 1991-04-25 | 1996-05-14 | Romano Deghenghi | Luteinizing hormone releasing hormone antagonist peptides |
| DE4117507A1 (de) * | 1991-05-24 | 1992-11-26 | Schering Ag | Verfahren zur herstellung von n(pfeil hoch)6(pfeil hoch)-substituierten lysin-derivaten |
| US5480969A (en) * | 1992-09-15 | 1996-01-02 | The Administrators Of The Tulane Educational Fund | Antagonists of LHRH |
| US5656727A (en) * | 1992-09-15 | 1997-08-12 | The Administrators Of The Tulane Educational Fund | Antagonists of LHRH |
| CA2163225A1 (en) * | 1993-05-20 | 1994-12-08 | Gregory John Russell-Jones | Lhrh antagonists |
| US5843901A (en) | 1995-06-07 | 1998-12-01 | Advanced Research & Technology Institute | LHRH antagonist peptides |
| US6043218A (en) | 1996-10-22 | 2000-03-28 | Medical University Of South Carolina | Positively charged non-natural amino acids, methods of making thereof, and use thereof in peptides |
| US6566330B1 (en) | 1996-10-22 | 2003-05-20 | Medical University Of South Carolina Foundation Research Development | Positively charged non-natural amino acids, methods of making and using thereof in peptides |
| US5968895A (en) | 1996-12-11 | 1999-10-19 | Praecis Pharmaceuticals, Inc. | Pharmaceutical formulations for sustained drug delivery |
| US5821230A (en) * | 1997-04-11 | 1998-10-13 | Ferring Bv | GnRH antagonist decapeptides |
| US5925730A (en) | 1997-04-11 | 1999-07-20 | Ferring Bv | GnRH antagonists |
| EP0880969A1 (en) * | 1997-05-28 | 1998-12-02 | Applied Research Systems ARS Holdings N.V. | Pharmaceutical compositions of peptides having low solubility in physiological medium |
| EP0882736A1 (en) * | 1997-06-02 | 1998-12-09 | Laboratoire Theramex S.A. | LH-RH peptide analogues, their uses and pharmaceutical compositions containing them |
| US6217844B1 (en) | 1998-04-27 | 2001-04-17 | Praecis Pharmaceuticals, Inc. | Methods for detecting lesions in dense breast tissue using LHRH antagonists |
| ATE399567T1 (de) | 1998-04-28 | 2008-07-15 | Serono Lab | Peg konjugate von lhrh analogen |
| US7953788B2 (en) | 2001-09-29 | 2011-05-31 | Siebel Systems, Inc. | System and method for queuing data for an application server |
| US6455499B1 (en) | 1999-02-23 | 2002-09-24 | Indiana University Foundation | Methods for treating disorders associated with LHRH activity |
| US7109171B2 (en) * | 2000-02-28 | 2006-09-19 | Praecis Pharmaceuticals Inc. | Methods for treating FSH related conditions with GnRH antagonists |
| US6598784B2 (en) * | 2000-12-20 | 2003-07-29 | Meadwestvaco Packaging Syatens, Llc | Beverage carton with strap type carrying handle |
| ES2290095T3 (es) * | 2000-12-27 | 2008-02-16 | Ares Trading S.A. | Microparticulas lipidicas por micronizacion criogenica. |
| JP2002201168A (ja) * | 2000-12-28 | 2002-07-16 | Kaken Pharmaceut Co Ltd | シクロヘキサン誘導体 |
| WO2002056903A2 (en) * | 2001-01-17 | 2002-07-25 | Praecis Pharmaceuticals Inc. | Methods for treating hormone associated conditions using a combination of lhrh antagonists and specific estrogen receptor modulators |
| FR2840532B1 (fr) * | 2002-06-11 | 2005-05-06 | Ethypharm Sa | Nanocapsules lipidiques furtives, procede de preparation et utilisation comme vecteur de principes(s) actif(s) |
| GB0320806D0 (en) | 2003-09-05 | 2003-10-08 | Astrazeneca Ab | Therapeutic treatment |
| CA2552241C (en) | 2003-12-30 | 2013-10-01 | Durect Corporation | Co-polymeric devices for controlled release of active agents |
| US8329863B2 (en) * | 2004-07-16 | 2012-12-11 | Oakwood Laboratories, Llc | Gonadotropin releasing hormone antagonists |
| WO2006080256A1 (ja) * | 2005-01-26 | 2006-08-03 | Sumitomo Seika Chemicals Co., Ltd. | １－（６－メチルピリジン－３－イル）－２－［４－（メチルスルホニル）フェニル］エタノンの製造方法および製造中間体 |
Family Cites Families (22)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4431635A (en) * | 1979-06-13 | 1984-02-14 | Coy David Howard | LH-RH Antagonists |
| AU9102582A (en) * | 1981-12-10 | 1983-06-16 | David Howard Coy | Lh-rh antagonists |
| FI832053L (fi) * | 1982-06-10 | 1983-12-11 | Syntex Inc | Nonapeptid- och dekapeptidanaloger av lhrh anvaendbara som lhrh-antagonister samt deras framstaellningsfoerfarande |
| US4444759A (en) * | 1982-07-26 | 1984-04-24 | The Salk Institute For Biological Studies | GnRH Antagonists II |
| US4504414A (en) * | 1983-03-28 | 1985-03-12 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Synthetic pyridyl-alanyl decapeptides having antiovulatory activity |
| US4530920A (en) * | 1983-11-07 | 1985-07-23 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Nonapeptide and decapeptide analogs of LHRH, useful as LHRH agonist |
| US4547370A (en) * | 1983-11-29 | 1985-10-15 | The Salk Institute For Biological Studies | GnRH Antagonists |
| US4845077A (en) * | 1984-04-03 | 1989-07-04 | Serono Laboratories, Inc. | Method of inducing ovulation |
| IL74827A (en) * | 1984-05-21 | 1989-06-30 | Salk Inst For Biological Studi | Peptides active as gnrh antagonists and pharmaceutical compositions containing them |
| US4652550A (en) * | 1984-05-21 | 1987-03-24 | The Salk Institute For Biological Studies | GnRH antagonists VII |
| US4647653A (en) * | 1984-08-23 | 1987-03-03 | Tulane Educational Fund | Therapeutic peptides |
| US4565804A (en) * | 1984-09-07 | 1986-01-21 | The Salk Institute For Biological Studies | GnRH Antagonists VI |
| ZA862570B (en) * | 1985-04-09 | 1986-12-30 | Univ Tulane | Therapeutic decapeptides |
| EP0199302A2 (en) * | 1985-04-19 | 1986-10-29 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Contraception in dogs with luteinizing hormone releasing hormone antagonists |
| EP0225746A3 (en) * | 1985-11-14 | 1989-12-20 | The Administrators of The Tulane Educational Fund | Therapeutic decapeptides |
| US4801577A (en) * | 1987-02-05 | 1989-01-31 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Nonapeptide and decapeptide analogs of LHRH useful as LHRH antagonists |
| US4851385A (en) * | 1987-07-15 | 1989-07-25 | Indiana University Foundation | LHRH antagonist analogs having low histamine-release activity |
| US5140009A (en) * | 1988-02-10 | 1992-08-18 | Tap Pharmaceuticals, Inc. | Octapeptide LHRH antagonists |
| EP0328090A3 (en) * | 1988-02-10 | 1990-08-16 | Abbott Laboratories | Lhrh analogs |
| US5300492A (en) * | 1988-02-10 | 1994-04-05 | Tap Pharmaceuticals | LHRH analogs |
| US5180711A (en) * | 1990-06-14 | 1993-01-19 | Applied Research Systems Ars Holding N.V. | Combined treatment with gnrh antagonist and gnrh to control gonadotropin levels in mammals |
| US5413990A (en) * | 1993-08-06 | 1995-05-09 | Tap Pharmaceuticals Inc. | N-terminus modified analogs of LHRH |
-
1987
- 1987-08-24 US US07/088,431 patent/US4935491A/en not_active Expired - Lifetime
-
1988
- 1988-08-24 JP JP63507982A patent/JP2621970B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1988-08-24 HU HU885868A patent/HU213098B/hu unknown
- 1988-08-24 KR KR1019890700699A patent/KR0135276B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1988-08-24 AT AT88908786T patent/ATE124957T1/de not_active IP Right Cessation
- 1988-08-24 MX MX9203688A patent/MX9203688A/es unknown
- 1988-08-24 DE DE3854159T patent/DE3854159T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1988-08-24 WO PCT/US1988/002922 patent/WO1989001944A1/en active IP Right Grant
- 1988-08-24 AU AU25294/88A patent/AU619221B2/en not_active Expired
- 1988-08-24 EP EP88908786A patent/EP0377665B1/en not_active Expired - Lifetime
-
1989
- 1989-06-26 US US07/371,552 patent/US5470947A/en not_active Expired - Lifetime
-
1990
- 1990-02-23 DK DK199000486A patent/DK173753B1/da not_active IP Right Cessation
- 1990-02-23 FI FI900947A patent/FI102074B1/fi not_active IP Right Cessation
- 1990-02-23 NO NO900888A patent/NO301015B1/no not_active IP Right Cessation
- 1990-02-26 OA OA59743A patent/OA09786A/en unknown
-
1995
- 1995-06-06 US US08/466,333 patent/US5763404A/en not_active Expired - Lifetime
- 1995-06-29 HU HU95P/P00574P patent/HU211882A9/hu unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| HU213098B (en) | 1997-02-28 |
| JPH03501969A (ja) | 1991-05-09 |
| FI900947A0 (fi) | 1990-02-23 |
| HU211882A9 (en) | 1995-12-28 |
| WO1989001944A1 (en) | 1989-03-09 |
| US5763404A (en) | 1998-06-09 |
| HU885868D0 (en) | 1991-12-30 |
| MX9203688A (es) | 1992-09-01 |
| DE3854159T2 (de) | 1996-02-15 |
| NO900888L (no) | 1990-04-23 |
| JP2621970B2 (ja) | 1997-06-18 |
| KR890701117A (ko) | 1989-12-19 |
| DK48690A (da) | 1990-04-19 |
| ATE124957T1 (de) | 1995-07-15 |
| NO900888D0 (no) | 1990-02-23 |
| EP0377665B1 (en) | 1995-07-12 |
| DK173753B1 (da) | 2001-09-10 |
| DE3854159D1 (de) | 1995-08-17 |
| OA09786A (en) | 1994-04-15 |
| EP0377665A1 (en) | 1990-07-18 |
| DK48690D0 (da) | 1990-02-23 |
| AU2529488A (en) | 1989-03-31 |
| US5470947A (en) | 1995-11-28 |
| AU619221B2 (en) | 1992-01-23 |
| KR0135276B1 (ko) | 1998-04-23 |
| HUT59940A (en) | 1992-07-28 |
| US4935491A (en) | 1990-06-19 |
| FI102074B (fi) | 1998-10-15 |
| FI102074B1 (fi) | 1998-10-15 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| NO301015B1 (no) | Dekapeptid med antiovulatorisk aktivitet | |
| DK173375B1 (da) | LHRH-Antagonister, deres fremstilling og lægemidler der indeholder dem | |
| FI92326C (fi) | LHRH:n nonapeptidi- ja dekapeptidianalogeja, jotka ovat käyttökelpoisia LHRH:n antagonisteina | |
| JP4249806B2 (ja) | ５位および６位で修飾されているＧｎＲＨ拮抗物質 | |
| FI60553B (fi) | Foerfarande foer framstaellning av ovulationsframkallande nonapeptidamidderivat | |
| NO834404L (no) | Nonapeptid- og dekapeptid-analoger av lhrh med befruktningshindrende virkning | |
| NO178306B (no) | Analogifremgangsmåte ved fremstilling av bombesin-antagonistpeptid | |
| JPH05505630A (ja) | Ｌｈｒｈ拮抗薬 | |
| HU211603A9 (en) | Nonapeptide bombesin antagonists | |
| HU200785B (en) | Process for producing antagonist decapeptide derivatives of gonadotropin releasing hormone | |
| JP3801867B2 (ja) | 改善された溶解特性を有する新規のｌｈｒｈアンタゴニスト | |
| US4705778A (en) | Orally active LHRH analogs | |
| US4083967A (en) | Nona- and decapeptides | |
| FI79716B (fi) | Daeggdjur-pgrf. | |
| JPH02501224A (ja) | ブラジキニン アンタゴニスト ペプチド | |
| US6297354B1 (en) | Pentapeptide LHRH antagonists | |
| US5439884A (en) | Method of controlling fertilization using bombesin or its agonist | |
| CA1339659C (en) | Effective antagonists of the luteinizing hormone releasing hormone which release negligible histamine | |
| FI101884B (fi) | Luteinisoivaa hormonia vapauttavan hormonin (LHRH) antagonistipeptidej ä | |
| IE892496A1 (en) | Ghrh analogs |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MK1K | Patent expired |