HU211882A9 - Effective antagonists of the luteinizing hormone releasing hormone which release negligible histamine - Google Patents
Effective antagonists of the luteinizing hormone releasing hormone which release negligible histamine Download PDFInfo
- Publication number
- HU211882A9 HU211882A9 HU95P/P00574P HU9500574P HU211882A9 HU 211882 A9 HU211882 A9 HU 211882A9 HU 9500574 P HU9500574 P HU 9500574P HU 211882 A9 HU211882 A9 HU 211882A9
- Authority
- HU
- Hungary
- Prior art keywords
- nal
- ilys
- pal
- piclys
- pro
- Prior art date
Links
- NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N Histamine Chemical compound NCCC1=CN=CN1 NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 112
- 229960001340 histamine Drugs 0.000 title claims abstract description 57
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 title abstract description 23
- 108700012941 GNRH1 Proteins 0.000 title abstract 3
- 239000000579 Gonadotropin-Releasing Hormone Substances 0.000 title abstract 3
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims abstract description 35
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims abstract description 27
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 13
- 230000002513 anti-ovulatory effect Effects 0.000 claims abstract description 11
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 52
- 229940124041 Luteinizing hormone releasing hormone (LHRH) antagonist Drugs 0.000 claims description 23
- 230000003578 releasing effect Effects 0.000 claims description 17
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 14
- 239000002474 gonadorelin antagonist Substances 0.000 claims description 14
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- 230000016087 ovulation Effects 0.000 claims description 11
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 claims description 9
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims description 9
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims description 9
- 230000002710 gonadal effect Effects 0.000 claims description 7
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 claims description 6
- 239000005556 hormone Substances 0.000 claims description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 5
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 claims description 4
- 239000003433 contraceptive agent Substances 0.000 claims description 4
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 claims description 4
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 3
- 230000002254 contraceptive effect Effects 0.000 claims description 3
- 230000001568 sexual effect Effects 0.000 claims description 3
- 230000009467 reduction Effects 0.000 claims description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims description 2
- 101000904173 Homo sapiens Progonadoliberin-1 Proteins 0.000 claims 1
- AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N L-Ornithine Chemical compound NCCC[C@H](N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims 1
- AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N Orn-delta-NH2 Natural products NCCCC(N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N Ornithine Natural products OC(=O)C(C)CCCN UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 102100024028 Progonadoliberin-1 Human genes 0.000 claims 1
- 101000996723 Sus scrofa Gonadotropin-releasing hormone receptor Proteins 0.000 claims 1
- XLXSAKCOAKORKW-UHFFFAOYSA-N gonadorelin Chemical compound C1CCC(C(=O)NCC(N)=O)N1C(=O)C(CCCN=C(N)N)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)C(NC(=O)C(CO)NC(=O)C(CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)C(CC=1NC=NC=1)NC(=O)C1NC(=O)CC1)CC1=CC=C(O)C=C1 XLXSAKCOAKORKW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 claims 1
- 229960003104 ornithine Drugs 0.000 claims 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 claims 1
- DFZVZEMNPGABKO-SSDOTTSWSA-N (2r)-2-amino-3-pyridin-3-ylpropanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CC1=CC=CN=C1 DFZVZEMNPGABKO-SSDOTTSWSA-N 0.000 abstract description 117
- QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N D-alanine Chemical compound C[C@@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N 0.000 abstract description 25
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 20
- 239000000556 agonist Substances 0.000 abstract description 16
- 229910001868 water Inorganic materials 0.000 abstract description 14
- QRYFGTULTGLGHU-NBERXCRTSA-N iturelix Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCNC(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@H](C)C(N)=O)NC(=O)[C@H](CCCCNC(=O)C=1C=NC=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](CC=1C=NC=CC=1)NC(=O)[C@@H](CC=1C=CC(Cl)=CC=1)NC(=O)[C@@H](CC=1C=C2C=CC=CC2=CC=1)NC(C)=O)CCCNC(=O)C1=CC=CN=C1 QRYFGTULTGLGHU-NBERXCRTSA-N 0.000 abstract description 12
- 108010083551 iturelix Proteins 0.000 abstract description 12
- 239000000203 mixture Substances 0.000 abstract description 10
- 230000009471 action Effects 0.000 abstract description 7
- 239000002285 corn oil Substances 0.000 abstract description 6
- 235000005687 corn oil Nutrition 0.000 abstract description 6
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 abstract description 6
- HQMLIDZJXVVKCW-UWTATZPHSA-N (2r)-2-aminopropanamide Chemical compound C[C@@H](N)C(N)=O HQMLIDZJXVVKCW-UWTATZPHSA-N 0.000 abstract 1
- 241000288906 Primates Species 0.000 abstract 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 abstract 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 abstract 1
- 238000009781 safety test method Methods 0.000 abstract 1
- 238000013341 scale-up Methods 0.000 abstract 1
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 48
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 36
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 28
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- -1 aromatic amino acids Chemical group 0.000 description 27
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N L-arginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 24
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- 229910004373 HOAc Inorganic materials 0.000 description 21
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 18
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 17
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 17
- 239000000047 product Substances 0.000 description 17
- 238000000034 method Methods 0.000 description 15
- 102000012673 Follicle Stimulating Hormone Human genes 0.000 description 14
- 108010079345 Follicle Stimulating Hormone Proteins 0.000 description 14
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 14
- 229940028334 follicle stimulating hormone Drugs 0.000 description 14
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 13
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 13
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 13
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 13
- KYQCOXFCLRTKLS-UHFFFAOYSA-N Pyrazine Chemical compound C1=CN=CC=N1 KYQCOXFCLRTKLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 12
- QWCKQJZIFLGMSD-UHFFFAOYSA-N alpha-aminobutyric acid Chemical compound CCC(N)C(O)=O QWCKQJZIFLGMSD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 11
- 239000000729 antidote Substances 0.000 description 10
- 235000019439 ethyl acetate Nutrition 0.000 description 10
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 9
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 9
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- QIVBCDIJIAJPQS-SECBINFHSA-N D-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-SECBINFHSA-N 0.000 description 8
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 8
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical class CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 8
- 241000219422 Urtica Species 0.000 description 7
- 210000003630 histaminocyte Anatomy 0.000 description 7
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 7
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 7
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 7
- PCNDJXKNXGMECE-UHFFFAOYSA-N Phenazine Natural products C1=CC=CC2=NC3=CC=CC=C3N=C21 PCNDJXKNXGMECE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 6
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 6
- 238000013461 design Methods 0.000 description 6
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 6
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 6
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 6
- 230000002483 superagonistic effect Effects 0.000 description 6
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N trifluoroacetic acid Substances OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- ODKSFYDXXFIFQN-SCSAIBSYSA-N D-arginine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-SCSAIBSYSA-N 0.000 description 5
- SNDPXSYFESPGGJ-UHFFFAOYSA-N L-norVal-OH Natural products CCCC(N)C(O)=O SNDPXSYFESPGGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N Niacin Chemical compound OC(=O)C1=CC=CN=C1 PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N Palladium Chemical compound [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 5
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 5
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 5
- BRFXCDOSNZVQAQ-UHFFFAOYSA-N (4-nitrophenyl) pyridine-3-carboxylate Chemical compound C1=CC([N+](=O)[O-])=CC=C1OC(=O)C1=CC=CN=C1 BRFXCDOSNZVQAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N Indole Chemical compound C1=CC=C2NC=CC2=C1 SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- IBMVEYRWAWIOTN-UHFFFAOYSA-N L-Leucyl-L-Arginyl-L-Proline Natural products CC(C)CC(N)C(=O)NC(CCCN=C(N)N)C(=O)N1CCCC1C(O)=O IBMVEYRWAWIOTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- IBMVEYRWAWIOTN-RWMBFGLXSA-N Leu-Arg-Pro Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(O)=O IBMVEYRWAWIOTN-RWMBFGLXSA-N 0.000 description 4
- 235000009108 Urtica dioica Nutrition 0.000 description 4
- 230000010933 acylation Effects 0.000 description 4
- 238000005917 acylation reaction Methods 0.000 description 4
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 4
- 239000000935 antidepressant agent Substances 0.000 description 4
- 229940005513 antidepressants Drugs 0.000 description 4
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 4
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 4
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 4
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 4
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 4
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 4
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 4
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 4
- SIOXPEMLGUPBBT-UHFFFAOYSA-N picolinic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=N1 SIOXPEMLGUPBBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 4
- OLMICDUONLWRJA-ZETCQYMHSA-N (2s)-2-[amino(cyclohexyl)amino]propanoic acid Chemical group OC(=O)[C@H](C)N(N)C1CCCCC1 OLMICDUONLWRJA-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 3
- BTJIUGUIPKRLHP-UHFFFAOYSA-N 4-nitrophenol Chemical compound OC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 BTJIUGUIPKRLHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- RZOKQIPOABEQAM-UHFFFAOYSA-N 6-methylpyridine-3-carboxylic acid Chemical compound CC1=CC=C(C(O)=O)C=N1 RZOKQIPOABEQAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 3
- LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N L-norleucine Chemical compound CCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 3
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 3
- NHUHCSRWZMLRLA-UHFFFAOYSA-N Sulfisoxazole Chemical compound CC1=NOC(NS(=O)(=O)C=2C=CC(N)=CC=2)=C1C NHUHCSRWZMLRLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000024780 Urticaria Diseases 0.000 description 3
- 125000003295 alanine group Chemical group N[C@@H](C)C(=O)* 0.000 description 3
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 3
- DKPFZGUDAPQIHT-UHFFFAOYSA-N butyl acetate Chemical compound CCCCOC(C)=O DKPFZGUDAPQIHT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 3
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000005984 hydrogenation reaction Methods 0.000 description 3
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 3
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 3
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 3
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 3
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 3
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 3
- 235000001968 nicotinic acid Nutrition 0.000 description 3
- 239000011664 nicotinic acid Substances 0.000 description 3
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 3
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 3
- DFZVZEMNPGABKO-ZETCQYMHSA-N (2s)-2-amino-3-pyridin-3-ylpropanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CN=C1 DFZVZEMNPGABKO-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 2
- UFHVNJIPPMYVHJ-UHFFFAOYSA-N (4-nitrophenyl) pyridine-2-carboxylate Chemical compound C1=CC([N+](=O)[O-])=CC=C1OC(=O)C1=CC=CC=N1 UFHVNJIPPMYVHJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BGAJNPLDJJBRHK-UHFFFAOYSA-N 3-[2-[5-(3-chloro-4-propan-2-yloxyphenyl)-1,3,4-thiadiazol-2-yl]-3-methyl-6,7-dihydro-4h-pyrazolo[4,3-c]pyridin-5-yl]propanoic acid Chemical compound C1=C(Cl)C(OC(C)C)=CC=C1C1=NN=C(N2C(=C3CN(CCC(O)=O)CCC3=N2)C)S1 BGAJNPLDJJBRHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NIGWMJHCCYYCSF-QMMMGPOBSA-N 4-chloro-L-phenylalanine Chemical group OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(Cl)C=C1 NIGWMJHCCYYCSF-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- HGTHJBMURXRBGV-UHFFFAOYSA-N 6-methyl-4-nitro-2-phenylpyridine-3-carboxylic acid Chemical compound CC1=CC(=C(C(=N1)C2=CC=CC=C2)C(=O)O)[N+](=O)[O-] HGTHJBMURXRBGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 2
- KDXKERNSBIXSRK-RXMQYKEDSA-N D-lysine Chemical compound NCCCC[C@@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-RXMQYKEDSA-N 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-MRVPVSSYSA-N D-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-MRVPVSSYSA-N 0.000 description 2
- IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N Dimethyl sulfoxide Chemical compound [2H]C([2H])([2H])S(=O)C([2H])([2H])[2H] IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N 0.000 description 2
- ROSDSFDQCJNGOL-UHFFFAOYSA-N Dimethylamine Chemical compound CNC ROSDSFDQCJNGOL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N Fluorane Chemical compound F KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 2
- 101500023492 Lithobates catesbeianus Growth hormone-releasing peptide Proteins 0.000 description 2
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 241000750002 Nestor Species 0.000 description 2
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical group C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000003436 Schotten-Baumann reaction Methods 0.000 description 2
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 2
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010046798 Uterine leiomyoma Diseases 0.000 description 2
- YRKCREAYFQTBPV-UHFFFAOYSA-N acetylacetone Chemical compound CC(=O)CC(C)=O YRKCREAYFQTBPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000021736 acetylation Effects 0.000 description 2
- 238000006640 acetylation reaction Methods 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 2
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 2
- RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N anisole Chemical compound COC1=CC=CC=C1 RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001430 anti-depressive effect Effects 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 229960003121 arginine Drugs 0.000 description 2
- 210000003651 basophil Anatomy 0.000 description 2
- CIHWJRSPVJBHGT-UHFFFAOYSA-N benzhydrylazanium;chloride Chemical compound Cl.C=1C=CC=CC=1C(N)C1=CC=CC=C1 CIHWJRSPVJBHGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HSDAJNMJOMSNEV-UHFFFAOYSA-N benzyl chloroformate Chemical compound ClC(=O)OCC1=CC=CC=C1 HSDAJNMJOMSNEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 2
- RHGKLRLOHDJJDR-UHFFFAOYSA-N citrulline Chemical group OC(=O)C(N)CCCNC(N)=O RHGKLRLOHDJJDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BGTOWKSIORTVQH-UHFFFAOYSA-N cyclopentanone Chemical compound O=C1CCCC1 BGTOWKSIORTVQH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 2
- 230000002357 endometrial effect Effects 0.000 description 2
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 2
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 2
- 210000002149 gonad Anatomy 0.000 description 2
- 125000002795 guanidino group Chemical group C(N)(=N)N* 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 229910000040 hydrogen fluoride Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000007327 hydrogenolysis reaction Methods 0.000 description 2
- PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N indole Natural products CC1=CC=CC2=C1C=CN2 PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N indolenine Natural products C1=CC=C2CC=NC2=C1 RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 2
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 2
- 201000010260 leiomyoma Diseases 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 230000001592 luteinising effect Effects 0.000 description 2
- CQROVVJXIYLISJ-UHFFFAOYSA-N methyl n,n,n'-trimethylcarbamimidothioate Chemical compound CSC(=NC)N(C)C CQROVVJXIYLISJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 2
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 2
- 229960003512 nicotinic acid Drugs 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- IWDCLRJOBJJRNH-UHFFFAOYSA-N p-cresol Chemical compound CC1=CC=C(O)C=C1 IWDCLRJOBJJRNH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 2
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 2
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N phenol group Chemical group C1(=CC=CC=C1)O ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 2
- 229940081066 picolinic acid Drugs 0.000 description 2
- NIPZZXUFJPQHNH-UHFFFAOYSA-N pyrazine-2-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)C1=CN=CC=N1 NIPZZXUFJPQHNH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000005932 reductive alkylation reaction Methods 0.000 description 2
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 2
- FSYKKLYZXJSNPZ-UHFFFAOYSA-N sarcosine Chemical compound C[NH2+]CC([O-])=O FSYKKLYZXJSNPZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 2
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- DYHSDKLCOJIUFX-UHFFFAOYSA-N tert-butoxycarbonyl anhydride Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)OC(=O)OC(C)(C)C DYHSDKLCOJIUFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000001685 thyroid gland Anatomy 0.000 description 2
- AJDUMMXHVCMISJ-CYBMUJFWSA-N (2r)-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]-5-oxo-5-phenylmethoxypentanoic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N[C@@H](C(O)=O)CCC(=O)OCC1=CC=CC=C1 AJDUMMXHVCMISJ-CYBMUJFWSA-N 0.000 description 1
- WYWLYZBQCIXWEU-VIFPVBQESA-N (2r)-2-amino-2-fluoro-3-phenylpropanoic acid Chemical group OC(=O)[C@@](F)(N)CC1=CC=CC=C1 WYWLYZBQCIXWEU-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- WLYWPPYENNVPCZ-GDKBPFBDSA-N (2s)-2-amino-3-[4-(pyridine-3-carbonylamino)cyclohexyl]propanoic acid Chemical compound C1CC(C[C@H](N)C(O)=O)CCC1NC(=O)C1=CC=CN=C1 WLYWPPYENNVPCZ-GDKBPFBDSA-N 0.000 description 1
- JNNCNURVELPUNP-LURJTMIESA-N (2s)-2-amino-3-pyrazin-2-ylpropanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CC=N1 JNNCNURVELPUNP-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- KWWSORXERGAEGJ-JTQLQIEISA-N (2s)-2-amino-3-quinolin-3-ylpropanoic acid Chemical compound C1=CC=CC2=CC(C[C@H](N)C(O)=O)=CN=C21 KWWSORXERGAEGJ-JTQLQIEISA-N 0.000 description 1
- GZYCYMQMZRWRJQ-JTQLQIEISA-N (2s)-6-amino-2-(pyridine-2-carbonylamino)hexanoic acid Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)C1=CC=CC=N1 GZYCYMQMZRWRJQ-JTQLQIEISA-N 0.000 description 1
- IYHOIXNPULYXFO-NSHDSACASA-N (2s)-6-azaniumyl-2-benzamidohexanoate Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)C1=CC=CC=C1 IYHOIXNPULYXFO-NSHDSACASA-N 0.000 description 1
- BCDUISSCCYHFOP-UHFFFAOYSA-N (4-nitrophenyl) pyrazine-2-carboxylate Chemical compound C1=CC([N+](=O)[O-])=CC=C1OC(=O)C1=CN=CC=N1 BCDUISSCCYHFOP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NRHBVYZNPLTUTD-UHFFFAOYSA-N (4-nitrophenyl) pyridine-4-carboxylate Chemical compound C1=CC([N+](=O)[O-])=CC=C1OC(=O)C1=CC=NC=C1 NRHBVYZNPLTUTD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CSCPPACGZOOCGX-BMQYTIHCSA-N 1,1,1,3-tetradeuteriopropan-2-one Chemical compound [2H]CC(=O)C([2H])([2H])[2H] CSCPPACGZOOCGX-BMQYTIHCSA-N 0.000 description 1
- ADFXKUOMJKEIND-UHFFFAOYSA-N 1,3-dicyclohexylurea Chemical compound C1CCCCC1NC(=O)NC1CCCCC1 ADFXKUOMJKEIND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OOYAHIROFIQHBM-UHFFFAOYSA-N 2-amino-5-(4-methoxyanilino)-5-oxopentanoic acid Chemical group COC1=CC=C(NC(=O)CCC(N)C(O)=O)C=C1 OOYAHIROFIQHBM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LRQKBLKVPFOOQJ-UHFFFAOYSA-N 2-aminohexanoic acid Chemical compound CCCCC(N)C(O)=O LRQKBLKVPFOOQJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JPZXHKDZASGCLU-GFCCVEGCSA-N 3-(2-Naphthyl)-D-Alanine Chemical compound C1=CC=CC2=CC(C[C@@H](N)C(O)=O)=CC=C21 JPZXHKDZASGCLU-GFCCVEGCSA-N 0.000 description 1
- 125000001255 4-fluorophenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(*)=C([H])C([H])=C1F 0.000 description 1
- HCCNBKFJYUWLEX-UHFFFAOYSA-N 7-(6-methoxypyridin-3-yl)-1-(2-propoxyethyl)-3-(pyrazin-2-ylmethylamino)pyrido[3,4-b]pyrazin-2-one Chemical group O=C1N(CCOCCC)C2=CC(C=3C=NC(OC)=CC=3)=NC=C2N=C1NCC1=CN=CC=N1 HCCNBKFJYUWLEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 description 1
- 206010001488 Aggression Diseases 0.000 description 1
- USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N Ammonium acetate Chemical compound N.CC(O)=O USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005695 Ammonium acetate Substances 0.000 description 1
- 206010002198 Anaphylactic reaction Diseases 0.000 description 1
- LQJAALCCPOTJGB-YUMQZZPRSA-N Arg-Pro Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O LQJAALCCPOTJGB-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- 241000972773 Aulopiformes Species 0.000 description 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 1
- CSPDIGZSHAVUCZ-AVERBVTBSA-N C1CCC(C(C1)C(=O)C2=CC=NC=C2)(C[C@@H](C(=O)O)N)N Chemical compound C1CCC(C(C1)C(=O)C2=CC=NC=C2)(C[C@@H](C(=O)O)N)N CSPDIGZSHAVUCZ-AVERBVTBSA-N 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VGCXGMAHQTYDJK-UHFFFAOYSA-N Chloroacetyl chloride Chemical compound ClCC(Cl)=O VGCXGMAHQTYDJK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010011684 Cutaneous tuberculosis Diseases 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UWTATZPHSA-N D-Serine Chemical compound OC[C@@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UWTATZPHSA-N 0.000 description 1
- 125000000030 D-alanine group Chemical group [H]N([H])[C@](C([H])([H])[H])(C(=O)[*])[H] 0.000 description 1
- 150000008574 D-amino acids Chemical group 0.000 description 1
- 125000002038 D-arginyl group Chemical group N[C@@H](C(=O)*)CCCNC(=N)N 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-RXMQYKEDSA-N D-histidine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-RXMQYKEDSA-N 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-MRVPVSSYSA-N D-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-MRVPVSSYSA-N 0.000 description 1
- XBPCUCUWBYBCDP-UHFFFAOYSA-N Dicyclohexylamine Chemical class C1CCCCC1NC1CCCCC1 XBPCUCUWBYBCDP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 1
- 102400000921 Gastrin Human genes 0.000 description 1
- 108010052343 Gastrins Proteins 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 206010020880 Hypertrophy Diseases 0.000 description 1
- SNDPXSYFESPGGJ-BYPYZUCNSA-N L-2-aminopentanoic acid Chemical compound CCC[C@H](N)C(O)=O SNDPXSYFESPGGJ-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-UHNVWZDZSA-N L-allo-Isoleucine Chemical compound CC[C@@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHNVWZDZSA-N 0.000 description 1
- 244000137850 Marrubium vulgare Species 0.000 description 1
- 101100025911 Mus musculus Ncoa3 gene Proteins 0.000 description 1
- 208000001132 Osteoporosis Diseases 0.000 description 1
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 108010077895 Sarcosine Proteins 0.000 description 1
- RZEQTVHJZCIUBT-WDSKDSINSA-N Ser-Arg Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCNC(N)=N RZEQTVHJZCIUBT-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102000005157 Somatostatin Human genes 0.000 description 1
- 108010056088 Somatostatin Proteins 0.000 description 1
- 244000300264 Spinacia oleracea Species 0.000 description 1
- 235000009337 Spinacia oleracea Nutrition 0.000 description 1
- 208000033781 Thyroid carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 208000024770 Thyroid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N Trichloro(2H)methane Chemical compound [2H]C(Cl)(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N 0.000 description 1
- 108010003205 Vasoactive Intestinal Peptide Proteins 0.000 description 1
- 102400000015 Vasoactive intestinal peptide Human genes 0.000 description 1
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- 210000001789 adipocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000003470 adrenal cortex hormone Substances 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 230000016571 aggressive behavior Effects 0.000 description 1
- 208000012761 aggressive behavior Diseases 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 1
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 229940043376 ammonium acetate Drugs 0.000 description 1
- 235000019257 ammonium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000002052 anaphylactic effect Effects 0.000 description 1
- 230000036783 anaphylactic response Effects 0.000 description 1
- 208000003455 anaphylaxis Diseases 0.000 description 1
- 230000008485 antagonism Effects 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- 229960003589 arginine hydrochloride Drugs 0.000 description 1
- 108010060035 arginylproline Proteins 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000013405 beer Nutrition 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- PASDCCFISLVPSO-UHFFFAOYSA-N benzoyl chloride Chemical compound ClC(=O)C1=CC=CC=C1 PASDCCFISLVPSO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001584 benzyloxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)* 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 210000002449 bone cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000010322 bone marrow transplantation Methods 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 208000019065 cervical carcinoma Diseases 0.000 description 1
- AOXOCDRNSPFDPE-UKEONUMOSA-N chembl413654 Chemical compound C([C@H](C(=O)NCC(=O)N[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@H](CCSC)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](CC=1C=CC=CC=1)C(N)=O)NC(=O)[C@@H](C)NC(=O)[C@@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 AOXOCDRNSPFDPE-UKEONUMOSA-N 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 1
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 1
- 229940125904 compound 1 Drugs 0.000 description 1
- 229940125773 compound 10 Drugs 0.000 description 1
- 229940126545 compound 53 Drugs 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 1
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000010339 dilation Effects 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 210000002745 epiphysis Anatomy 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 239000010419 fine particle Substances 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 239000000745 gonadal hormone Substances 0.000 description 1
- 239000003163 gonadal steroid hormone Substances 0.000 description 1
- 230000001456 gonadotroph Effects 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 125000002883 imidazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 231100000546 inhibition of ovulation Toxicity 0.000 description 1
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 1
- VBUWHHLIZKOSMS-RIWXPGAOSA-N invicorp Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC=1NC=NC=1)C(C)C)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C(C)C)C1=CC=C(O)C=C1 VBUWHHLIZKOSMS-RIWXPGAOSA-N 0.000 description 1
- TWBYWOBDOCUKOW-UHFFFAOYSA-M isonicotinate Chemical compound [O-]C(=O)C1=CC=NC=C1 TWBYWOBDOCUKOW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- ZLVXBBHTMQJRSX-VMGNSXQWSA-N jdtic Chemical compound C1([C@]2(C)CCN(C[C@@H]2C)C[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H]2NCC3=CC(O)=CC=C3C2)=CC=CC(O)=C1 ZLVXBBHTMQJRSX-VMGNSXQWSA-N 0.000 description 1
- HXEACLLIILLPRG-RXMQYKEDSA-N l-pipecolic acid Natural products OC(=O)[C@H]1CCCCN1 HXEACLLIILLPRG-RXMQYKEDSA-N 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000001394 metastastic effect Effects 0.000 description 1
- 206010061289 metastatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N methoxybenzene Substances CCCCOC=C UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CWWARWOPSKGELM-SARDKLJWSA-N methyl (2s)-2-[[(2s)-2-[[2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-5-amino-2-[[(2s)-5-amino-2-[[(2s)-1-[(2s)-6-amino-2-[[(2s)-1-[(2s)-2-amino-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]hexanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-5 Chemical compound C([C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)OC)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N)C1=CC=CC=C1 CWWARWOPSKGELM-SARDKLJWSA-N 0.000 description 1
- XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N methyl 1-acetylthieno[3,2-c]pyrazole-5-carboxylate Chemical compound CC(=O)N1N=CC2=C1C=C(C(=O)OC)S2 XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- XJODGRWDFZVTKW-ZCFIWIBFSA-N n-methylleucine Chemical group CN[C@@H](C(O)=O)CC(C)C XJODGRWDFZVTKW-ZCFIWIBFSA-N 0.000 description 1
- FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N ninhydrin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(O)(O)C(=O)C2=C1 FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000449 nitro group Chemical group [O-][N+](*)=O 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 230000002611 ovarian Effects 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 125000004430 oxygen atom Chemical group O* 0.000 description 1
- BHAAPTBBJKJZER-UHFFFAOYSA-N p-anisidine Chemical compound COC1=CC=C(N)C=C1 BHAAPTBBJKJZER-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052763 palladium Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N phenylmethyl ester of formic acid Natural products O=COCC1=CC=CC=C1 UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;potassium Chemical compound [K].OP(O)(O)=O PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HXEACLLIILLPRG-UHFFFAOYSA-N pipecolic acid Chemical compound OC(=O)C1CCCCN1 HXEACLLIILLPRG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001817 pituitary effect Effects 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 1
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 238000006722 reduction reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003488 releasing hormone Substances 0.000 description 1
- 238000002390 rotary evaporation Methods 0.000 description 1
- 235000019515 salmon Nutrition 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 238000011894 semi-preparative HPLC Methods 0.000 description 1
- 230000009329 sexual behaviour Effects 0.000 description 1
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910000679 solder Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N somatostatin Chemical compound C([C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C3=CC=CC=C3NC=2)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(=O)N1)[C@@H](C)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)N)C(O)=O)=O)[C@H](O)C)C1=CC=CC=C1 NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N 0.000 description 1
- 229960000553 somatostatin Drugs 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 210000002435 tendon Anatomy 0.000 description 1
- 125000005931 tert-butyloxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(OC(*)=O)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 1
- 201000002510 thyroid cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000013077 thyroid gland carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 1
- 206010046766 uterine cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000012991 uterine carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000008728 vascular permeability Effects 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 1
- 230000004584 weight gain Effects 0.000 description 1
- 235000019786 weight gain Nutrition 0.000 description 1
- 230000029663 wound healing Effects 0.000 description 1
- JPZXHKDZASGCLU-LBPRGKRZSA-N β-(2-naphthyl)-alanine Chemical compound C1=CC=CC2=CC(C[C@H](N)C(O)=O)=CC=C21 JPZXHKDZASGCLU-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- A61K38/08—Peptides having 5 to 11 amino acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/23—Luteinising hormone-releasing hormone [LHRH]; Related peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/06—Linear peptides containing only normal peptide links having 5 to 11 amino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S930/00—Peptide or protein sequence
- Y10S930/01—Peptide or protein sequence
- Y10S930/13—Luteinizing hormone-releasing hormone; related peptides
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Reproductive Health (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Macromonomer-Based Addition Polymer (AREA)
- Polyesters Or Polycarbonates (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
Description
Ez a US 088 431 számon 1987. 08. 24-én benyújtóit szabadalmi leírás részleges folytatása.
A találmány megalkotásával kapcsolatos kutatást részben a Contraceptive Branch of the National Institutes of Child Health and Humán Development (szerződés száma NŐI HD-6-2938) és a Róbert A. Welch Foundation támogatta.
A találmány a luteinizáló hormont felszabadító hormon (LHRH) szintetikus analógjainak tervezésére, szintézisére és biológiai vizsgálatára vonatkozik. Jelentős eredmény volt olyan analógok előállítása, amelyek LHRH-antagonistaként működnek és megfelelően erős ovulációgátló hatással rendelkeznek, de csak elhanyagolható mennyiségű hisztamin felszabadulását teszik lehetővé. Mivel a nagy hatású és alacsony hisztamin felszabadítású antagonisták előre megjósolható szerkezete nem ismert, különféle megközelítéseket kellett alkalmazni annak érdekében, hogy a szerkezeti jellemzők olyan kombinációját felderítsük, amelynek eredményeként olyan LHRH antagonistát kapunk, amely az ovulációt erőteljesen gátolja, de hisztamin felszabadító aktivitása igen alacsony.
Jól ismert, hogy különféle peptidek - például a P-anyag, a vazoaktív intesztinális peptid, a gasztrin, a szomatosztatin és mások - hízósejtekből hisztamint szabadítanak fel. Ilyen sejtek számos szövetben - például bőr-, tüdő-, bélfodor- és ínszövetben - előfordulnak. Ezekben a sejtekben granulák vannak, amelyek hisztamint és más gyulladás-mediátorokat tartalmaznak. amelyek peptidek hatására felszabadulnak és kapilláris tágulást, valamint fokozott ér-permeabilitást okoznak. Amikor megfigyelték, hogy egy ismert LHRH-antagonista vegyület. például az [Ac-D-2Nal1.D-4-F-Phe2,D-Trp\D-Arg6]-LHRH patkányok pofáján és végtagjain ödémát okoz, valószínűnek tűnt. hogy az ilyen antagonisták fogamzásgátlóként embernek adagolva súlyos ödémát okozhatnak a kezelt személy arcán, vagy testének egyéb részein. Az ilyen mellékhatások valószínűleg megakadályoznák az ilyen antagonisták humán gyógyászati alkalmazását.
A hisztamint tartalmazó leukocita olyan bazofil sejt. amelyből a fent említett peptidek többségének hatására hisztamin válhat szabaddá. A bazofilek biokémiailag különböznek a hízósejtektől, és ezen különbségek miatt mind előrelátható, mind előre nem várt hisztamin-felszabadulás következhet be LHRH-antagonista vegyületek hatására. Az ovuláció gátlására klinikailag alkalmazandó LHRH-antagonistáknak nem szabad számottevő mennyiségű hisztamint felszabadítaniuk sem hízósejtekből, sem bazofilekből.
Az LHRH-antagonista vegyületek mellékhatásainak, úgymint ödémát és anaphylaxiát kiváltó hatásainak felderítése szükségessé tette olyan új LHRH-antagonista vegyületek felfedezését, amelyek gátolják az ovulációt, de nem szabadítanak fel jelentős mennyiségű hisztamint. Ezeket a nemkívánatos mellékhatásokat patkányokban mutatták ki. és valószínű, hogy az egészségügyi hatóságok nem engedélyeznék ilyen antagonista vegyületek klinikai vizsgálatát embereken.
Az LHRH-antagonisták erős hisztamin-felszabadító hatásához szükséges szerkezeti jellemzőkről rendelkezésre álló ismereteket Karten és munkatársai (4) tekintették át. A legfontosabb ismereteket az alábbiakban foglaljuk össze. A leghatásosabb LHRH-antagonista, amely hisztamin felszabadítást vált ki in vitro, 6-os helyzetben, közel az Args-hoz bázikus D-aminosav oldalláncok (Arg vagy Lys) és az N-terminálison hidrofób aromás aminosavakból álló rész kombinációját tartalmazza. Tehát nincs olyan specifikus aminosav az első 10 aminosav között, amely egyedül lenne felelős a hisztamin felszabadulásért. Ezzel szemben az N-terminálistól (az első néhány, l-estől a 4-es helyzetű aminosavaktól) a C-terminális felé eső (6-os és 8-as helyzetű) bázikus aminosavakig tartó szakasz szerkezeti tulajdonságai valamiképpen közrejátszanak a hisztamin felszabadulásában. Még a 10-es helyzetben lévő D-Ala is befolyásolja némiképp a hisztamin felszabadulását, amelynek oka még ismeretlen. Önmagában két bázikus oldallánc egymáshoz oly közel, mint 6-os és 8-as helyzetben, nem elég a hisztamin nagymértékű felszabadulásának kiváltásához. Az N-terminálison lévő hidrofób aminosavakból álló szekvencia önmagában nem elegendő az erős hisztamin felszabadító aktivitáshoz. Még egy hexapeptid fragmentum is enyhe hisztamin felszabadító aktivitást mutat.
Nem látható összefüggés a fenti antagonisták ovulációgátló és hisztamint felszabadító aktivitása között in vitro.
Várhatólag az ilyen dekapeptidek teljes láncának nagy része befolyásolhatja a hisztamin felszabadulást. Ugyanez érvényes lehet - de különböző mértékben az erős ovulációgátló aktivitásra is. Ezen LHRH-antagonista vegyületek rendszerint dekapeptidek, ami azt jelenti, hogy tíz változó áll rendelkezésre az antiovulációs aktivitás szabályozására, és tíz változó áll rendelkezésre a kívánt ovulációgátló hatás beállítására, és tíz változó van a hisztamin felszabadító aktivitás eliminálásának beállítására. Ezenkívül e húsz változó mindegyike változtatható, és a megtervezendő, szintetizálandó és vizsgálandó peptidek lehetséges száma szinte meghatározhatatlan. Feltehetőleg a tíz változó közül némelyek függetlenek az ovulációgátló aktivitástól és hisztamint felszabadító aktivitástól, míg bizonyos változók a két biológiai aktivitás szempontjából átfedhetik egymást. Ez a helyzet rendkívüli nehézségeket állít az olyan antagonista előállítása elé, amely erős antiovulációs aktivitással, és rendkívül alacsony hisztamint felszabadító aktivitással rendelkezik.
Annak reményében, hogy sikerül olyan hatásos antagonistát találni, amely a mellékhatásoktól mentes, a tíz aminosavon széleskörű szerkezeti változtatásokat és kombinációkat hajtottunk végre, majd mind antiovulációs. mind hisztamint felszabadító aktivitás szempontjából elvégeztük a vizsgálatokat. Új aminosavakat is szintetizáltunk, hogy azokat a peptidláncba beépítsük, mivel lehet, hogy a szokásosan rendelkezésre álló aminosavak nem megfelelőek.
A találmány szerint előállított antagonistákban nem alkalmaztunk arginint és annak származékait. A lizint E-amino-csoportján acilcsoportokat és alkilcsoportokat
HU 211 882 A9 tartalmazó származékokká alakítottuk. Az omitin aminosavat d-amino-csoportján acileztük vagy alkileztük. A fenti acil- és alkil-származékok előállítására a lizinnek mind az L-, mind D-izomerjét, és az omitin L-izomerjét alkalmaztuk. Szerkezetileg rokon köztitermékeket is szintetizáltunk. Összesen sok új peptidet szintetizáltunk, az antiovulációs aktivitás tíz változójának és a hisztamint felszabadító aktivitás tíz változójának alapvető és minimális variálásával, amely aktivitások egymástól függetlenek, vagy részben átfedésben vannak. Ilyen alapon a megtervezhető és szintetizálható peptidek száma óriási, és a találmány megalkotásához minden ésszerű irodalmi előzményt figyelembe kellett venni ahhoz, hogy az előállítandó peptidek számát csökkentsük.
Előállítottunk bizonyos peptideket, megvizsgáltuk ezeket, és azt találtuk, hogy előnyös tulajdonságokat mutatnak. Ezen kívánt peptidek közé tartozik az alábbi kettő. [N-Ac-D-2-Nal1 ,D-pClPhe2,D-3-Pal3,NicLys5,DNicLys6,IlysB,D-Alal0]-LHRH, amely hatásosan gátolja az ovulációt és figyelemremélóan kis mennyiségű hisztamint szabadít fel. [N-Ac-D-2-Nal',D-pClPhe2,D-3Pa!-’.PicLys5.D-PicLys6,ILys8,D-Alal0]-LHRH, amely kétszer olyan hatásos, mint az előbbi peptid, és nem szabadít fel több hisztamint, mint az LHRH „szuper agonistái”, amelyeket jelenleg több gyógyszergyártó cég forgalomba hoz.
A fenti két új peptid és a leírásban ismertetett többi hasonló szerkezetű peptid olyan vegyületeket képviselnek, amelyekben a nagy ovulációgátló aktivitás és az alacsony hisztamint felszabadító aktivitás aránya elfogadható a teljeskörű, potenciális klinikai alkalmazás szempontjából.
A találmány antiovulációs aktivitással és minimális hisztamin felszabadító hatással rendelkező dekapeptidek előállítására és alkalmazására vonatkozik. Ezen dekapeptidek közé tartoznak azok, amelyek az alábbi változtatásokat tartalmazzák:
Ser4. PicLys5 és D-PicLys6;
N-Ac-D-2-Nal1. D-pCIPhe2, Ser4, D-PicLys5 és Pro9; N-Ac-D-2-Nal1. D-pCIPhe2, D-3-Pal3, Ser4 DPicLys6, Pro9 és D-Ala10;
N-Ac-D-2-Nal1, D-pCIPhe2, D-3-Pal3, Ser4, NicLys5, Pro9 és D-Ala10;
N-Ac-D-2-Nal1, D-pCIPhe2, D-3-Pal3, Ser4, Leu7,
Pro9 és D-Ala10;
N-Ac-D-2-Nal1, D-pCIPhe2, D-3-Pal3, Ser4, Leu7,
Pro9 és D-Ser'°;
D-pCIPhe2, Pro9 és D-Ala10;
D-pCIPhe2, Pro9 és Ser10;
N-Ac-D-2-Nal1, D-pCIPhe2, D-3-Pal3, NicLys5, DNicLys6, ILys8 és D-Ala10;
N-Ac-D-2-Nal1. D-pCIPhe2, D-3-Pal3, NicLys5, DNicLys6. ILys8 és D-Ala10;
N-Ac-D-2-Nal1, D-pCIPhe2, D-3-Pal3, PicLys5, DPicLys6, ILys8 és D-Ala10;
N-Ac-D-2-Nal1. D-pCIPhe2, D-3-Pal3, NicLys5, DNicLys6,10m8 és D-Ala10;
N-Ac-D-2-Nal1. D-pCIPhe2, D-3-Pal3, PicLys5, DPicLys6, lOrn® és D-Ala10;
N-Ac-D-2-Nal1, D-pCIPhe2, D-3-Pal3, MNicLys5, DMNicLys6, IOm8 és D-Ala10;
N-Ac-D-2-Nal1, D-pCIPhe2, D-3-Pal3, PzcLys5, DPzcLys6, löm8 és D-Ala10;
N-Ac-D-pCIPhe1, D-3-Pal3, Tyr5, D-NicLys6 és ILys8; N-Ac-D-CljPhe1, D-3-Pal3, Tyr5, D-NicLys6 és ILys8; acilezett Lys5, D-acilezett Lys6 és N-alkilezett diaminosav8;
NicLys5, D-NicLys6 és ILys8;
PicLys5, D-PicLys6 és ILys8;
NicLys5, D-NicLys6 és IOm8;
PicLys5, D-PicLys6 és IOm8;
MNicLys5, D-MNicLys6 és IOm8;
PzcLys5, D-PzcLys6 és IOm8;
Tyr5, D-NicLys6 és ILys8;
Tyr5, D-NicLys6 és IOm8;
N-Ac-D-2-Nal1, D-pCIPhe2, D-3-Pal3, Ser4, NicLys5, D-NicLys6, Leu7, ILys8, Pro9 és D-Ala*°NH2; és N-Ac-D-2-Nal1, D-pCIPhe2, D-3-Pal3, Ser4, PicLys5, cisz-D-PzACAla6, Leu7, ILys8, Pro9 és D-Alal0NH2.
A találmány tárgyát képezi továbbá a fenti dekapeptidek alkalmazása egy eljárásban az ovuláció gátlására állatokban. Ez az eljárás abból áll, hogy az állatnak egy dekapeptidet adagolunk, amelynek szerkezete előnyösen: N-Ac-D-2-Nal1-D-pClPhe2-D-3-Pal3-Ser4NicLys5-D-NicLys6-Leu7-ILys8-Pro9-D-Alal0-NH2. Hasonlóképpen a találmány szerinti eljárás alkalmazható ovuláció gátlására állatban, a pubertás fellépésének gátlására állatban, a szexuális ösztön gátlására egy állatban; a gonád-funkció megváltoztatására egy állatban, a hormon-dependens tumorok növekedésének gátlására egy állatban; és a klimaxon túljutott nők szérumában az LH és FSH szint csökkentésére is alkalmazhatók. A fenti és a hasonló alkalmazások szakember számáráé leírásból világosan kitűnnek.
A leírásban alkalmazott rövidítések és képletek az alábbiak:
a = alfa
BOC = terc-butoxi-karbonil
Br-Z = o-bróm-benzil-oxi-karbonil nBuOAc = n-butil-acetát n-BuOH = n-butanol c = cisz
CDCl, = deutero-kloroform
CHClj = kloroform
CH2CI2 = diklór-metán
CH3CN = acetonitril
Cl-Z = o-klór-benzil-oxi-karbonil d = delta
DCC = diciklohexil-karbodiimid
DIEA = diizopropil-etil-amin
DMF = dimetil-formamid
E = epszilon
Et = etil
EtOAc = etil-acetát
EtOH = etanol
Et2O = dietil-éter
HF = hidrogén-fluorid
HOAc = ecetsav
KH2PO4 = kálium-dihidrogén-foszfát
HU 211 882 A9
MeOH = metanol
MgSO4 = magnézium-szulfát
NH4OAc = ammónium-acetát iPrOH = 2-propanol py = piridin t = transz
TFA = trifluor-ecetsav
THF = tetrahidrofurán
TOS = p-toluolszulfonil m = mikro
Z = benzil-oxi-karbonil
Abu = 2-amino- vajsav
Aile = alloizoleucin
AnGlu = 4-(4-metoxi-fenil-karbamoil)-2-aminovajsav
BzLys = NE-benzoil-lizin
Cit = citrullin
CLPhe = 3,4-diklőr-femlalanin
CypLys = NE-ciklopentil-lizin
DMGLys = NE-(N.N-dimetil-glicil)-lizin
Dpo = Nd-(4,6-dimetil-2-pirimidil)-ornitin
Et2hArg = NG,NG-dietil-homoarginin
FPhe = a-fluor-fenilalanin
HOBLys = NE-(4-hidroxi-benzoil)-lizin
ILys = NE-izopropil-lizin
INicLys = NE-izonikotinoil-lizin lOm = Nd-izopropil-orinitin
Me?Arg = NG,NG.NGI-trimetil-arginin
Me2Lys = NE,NE-dimetil-lizin
MNicLys = NE-(6-metil-nikotinoil)-lizin
MPicLys = NE-(6-metil-pikolinoil)-lizin
NACAla = 3-(4-nikotinoil-amino-ciklohexil)-alanin
2- Nal = 3-(2-naftil)-alanin
NicLys = NE-nikotinoil-lizin
NicOrn = Nd-nikotinoil-omitin
Nle = noleucin. 2-amino-hexánsav
PACAla = 3-(4-pikolinoil-amino-ciklohexil)-alanin
NMeLeu = N-metil-ieucin
Nval = norvalin, 2-amino-pentánsav
3- Pal = 3-(3-piridil)-alanin pCIPhe = 3-(4-klór-fenil)-alanin PicLys = NE-pikolinoil-lizin Pip = piperidin-2-karbonsav
PmcLys = NE-(4-pirimidinil-karbonil)-lizin
PmACAla = 3-[4-(4-pirimidinil-karbonil)-aminociklohexil]-alanin
PzACAla = 3-(4-pirazinil-karbonil-amino-ciklohexib-alanin
3-PzAla = 3-pirazinil-alanin
PzcLys = NE-(pirazinil-karbonil)-lizin
Sár = N-metil-glicin
TinGly = 3-tieni l-glicin.
A természetes aminosavak többségét a Peninsula Laboratories-tól (San Carlos, CA) szereztük be. A Ser hidroxilcsoportját benzil-cter, a Tyr fenolos hidroxilcsoportját Br-Z-származék és a Lys E-amino-csoportjál Cl-Z-származék, az Arg guanidinocsoportját és a His imidazolcsoportját TOS-származék formájában védtük. Az a-amino-funkciót BOC-származékként védtük. A
BOC-Om(Z)-t a Sigma Chemical Co.-tól (St. Louis, Mo) szereztük be. A B0C-D-2-Nal, B0C-D-3-Pal, BOC-D-Cl2Phe, BOC-pCIPhe és BOC-ILys(Z) diciklohexil-amin-só a Southwest Foundation fór Biomedical Research (San Antonio, TX) terméke. A benzhidrilamin-hidroklorid gyantát a Beckman Bioproducts (Palo Alto, CA) állította elő. A nitrogéntartalom mintegy 0,65 mmoL/g. A CH2Cl2-t felhasználás előtt desztilláltuk.
A találmány LHRH-antagonisták tervezésére, szintézisére és alkalmazására vonatkozik, amelyek nagy antiovulációs aktivitással és csökkent hisztamint felszabadító aktivitással rendelkeznek (1). Ezen új antagonistákra jellemző például 6-os helyzetben a D-NE-nikotinoil-lizin (D-NicLys) és 8-as helyzetben az NE-izopropil-lizin (ILys). A D-Arg6, különösen Arg8-cal és az N-terminálison hidrofób aromás aminosav-maradékokkal kombinálva a hisztamin felszabadulásában játszik szerepet (2—4).
Az anaphylaxiás aktivitás további csökkenése érhető el a 6-os és 8-as helyzetű pozitív töltések közötti távolság növelésével Arg5 által, és egy semleges maradék beillesztésével 6-os helyzetbe, mint például az [N-Ac-D-2-Nal'.D-pClPhe2,D-3-Pal3,Arg5,D-4-(p-metoxi-benzoil)-2-amino-vajsav6,D-Alal0]-LHRH-ban [2Nal jelentése 3-(2-naftil)-alanin; pCIPhe jelentése 3-(4klór-fenil)-alanin; 3-Pal jelentése 3-(3-piridil)-alanin] Rtvier és munkatársai által (5) és az [N-Ac-D-2Nal',D-aMepClPhe2,D-Trp3,Arg5,D-Tyr6,D-Ala10]LHRH esetén [aMepCIPhe jelentése 2-metil-3-(4-klórfenib-alanin] Roeske és munkatársai (6) által. 6-os helyzetben végrehajtott változtatás még a D-Lys6 reduktív alkilezése Hocart és munkatársai által (7), és az Ν,Ν-dietil-homoarginin beépítése Nestor és munkatársai által (9). Az újabban Rivier és munkatársai által szintetizált gyűrűs analógok nem mutattak csökkenést a hisztamin-felszabadító aktivitásban, a megfelelő lineáris vegyületekkel összehasonlítva (10).
A találmány szerinti peptidek közül első lépésben kettőt választottunk ki a további tervezéshez. Az [NAc-D-2-Nal',D-pClPhe2,D-3-Pal3,NicLys5,D-NicLys6, ILys8,D-Ala'°]-LHRH peptid (amelyet Antidnak neveztünk) igen alacsony hisztamin-felszabadulással párosult, jelentős aktivitást mutatott; ovulációgátló akvititása (AOA) 100% volt 1 pg-ban, és 36% 0,5 pg-ban; EDjq értéke hisztamin-felszabadításra in vitro következetesen 300 pg/pl feletti volt, összehasonlítva a standard analóg |N-Ac-D-2-Nal’,D-pFPhe2,D-Trp3,DArg6]-LHRH [pFPhe jelentése 3-(4-fluor-fenil)-alanin] (5) 0,17 körüli értékével. Egy másik analóg, amely az Antiddal azonos, kivéve az 5-ös és 6-os helyzetet, ahol ebben PicLys5. illetve D-PicLys6 van (PicLys jelentése N-pikolinoil-lizin) AOA értéke 100% 0,5 pg-ban és 40% 0,25 pg-ban; ED50 értéke 93+11.
A leírásban ismertetjük a 6-os helyzetben acilezett amino-ciklohexil-alanin-maradékot tartalmazó LHRH analógokkal kapott eredményeket, az olyan analógokkal kapott eredményeket, amelyekben a Leu7 más, semleges maradékokkal van szubsztituálva, az ILys8 IOrn8-cal történő összehasonlításából kapott eredmé4
HU 211 882 A9 nyékét, és az orális aktivitás és az antagonisták orális vagy parenterális (s.c.) adagolása esetén a hatás időtartamának vizsgálatából származó eredményeket.
Az olvadáspontokat nem korrigáltuk. Az NMRadatokat d-értékként adjuk meg TMS-hez viszonyítva.
Acilezés előtt a Lys és Om Z és Cl-Z csoportjait metanolban hidrogenolízissel hasítottuk, 10% fémet tartalmazó szénhordozós palládiumkatalizátor jelenlétében.
A BOC-D-BzLys-t BOC-D-Lys-ből állítottuk elő benzoil-kloriddal végzett acilezéssel, a Bemardi és munkatársai által az L-izomene ismertetett eljárással (17).
A BOC-DMG-Lys-t BOC-Lys-ből állítottuk elő klór-acetil-kloriddal végzett acilezéssel a fenti eljárás szerint, és a 10 mmol BOC-Lys-ből kapott nyersterméket 10 μΐ tetrahidrofuránban 10 μΙ 40%-os vizes dimetil-aminnal reagáltattuk. A reakcióelegyet 15 percen keresztül jégfürdőn, majd 2,5 órán keresztül szobahőmérsékleten kevertük. A reakcióelegyet vákuumban bepároltuk, majd a nyersterméket 10 μΐ vízben oldottuk. és Bio-Rad AG1-X8 oszlopra (acetát forma, 1x25 cm) vittük. Az oszlopot először 200 μΐ vízzel mostuk, majd a terméket 6%-os HOAc-val eluáltuk, és a HOAc-at többszöri liofílizálással eltávolítottuk. A terméket amorf anyag formájában kaptuk. Hozam: 6070%. Rf (n-BuOH:py:HOAc:H2O = 3ö:10:3:12) = 0,27. Tisztaság >95%. NMR (CDClj): 1,45 s, 9H, t-butoxi-csoport; 1,85-1,48, m, 6H, B, y, d-CH2-csoportok; 2.6. s, 6H. N(CH,)2; 3,25, m, 2H, E-CH2; 3,37, s, 2H, N-CH2-CO; 4,15, m, IH, a-CH.
A táblázatokban ismertetett egyéb acilezetl Lysszármazékokat BOC-D- vagy -L-Lys-ből és a megfelelő p-nitro-fenil-észterből állítottuk elő.
p-Nitro-fenil-nikotinát. 9,85 g (80 mmol) nikotinsav és 13,35 g (96 mmol) p-nitro-fenol elegyéhez 250 μΐ DMF-ban 16,5 g (80 mmol) DCC-t adtunk jeges fürdőn való keverés közben. A reakcióelegyet 0 ’Con 1 órán keresztül, majd szobahőmérsékleten 3 órán keresztül kevertük, a karbamidot leszűrtük és a terméket azonos térfogatú víz hozzáadásával kicsaptuk. Szűrés. vákuumban való szárítás és iPrOH-ból végzett átkristályosítás után 1,22 g (57%) terméket kaptunk fehér, tűs kristályok formájában, olvadáspont: 172,5— 173 ’C (24).
A fentiekben ismertetett módon állítottuk elő a pnitro-fenil-izonikotinátol is, 12 g terméket kaptunk, hozam: 61%, olvadáspont: 139-141 ’C; 137-139 ’C (18).
Szintén azonos módon eljárva állítottuk elő a p-nitro-fenil-6-metii-nikotinátol. A hozam 70 mmol 6-metilnikotinsavból kiindulva: 6,0 g, MeOH-ból végzett átkristályosítás után 33%. Olvadáspont: 156-157 ’C. Rf (2% MeOH CHCl,-bán) = 0,57. NMR (CDCI,): 2,7, s, 3H, CH,; 7,36, d, IH, py H5; 7,45, m, 2H, afenilgyűrűben lévő oxigénnel szomszédos H; 8,34, m, 3H, a fenilgyűrűben lévő NO2-csoporttal szomszédos H, a py H4-nel átfedésben; 9,27, d. IH, py H2.
p-Nitro-fenil-pikolinát. 4,92 g (40 mmol) pikolinsavat és 5.84 g (42 mmol) p-nitro-fenolt 200 μΐ CH2C12ban szuszpendáltunk/oldottunk. Ezután 8,24 g (40 mmol) DCC-t adtunk hozzá 20 μΐ CH2Cl2-ban erőteljes keverés közben. A keverést szobahőmérsékleten 17 órán keresztül folytattuk. Az elegyet ezután szűrtük, és a szűrőn maradt csapadékot 30-40 μΐ CH2Cl2-nal mostuk. A nyersterméket először 100 μΙ Et2O-rel kezeltük jeges fürdőn való keverés közben, és szűrtük. 250 μΐ iPrOH-ból végzett átkristályosítással 6,24 g (63%) terméket kaptunk. Olvadáspont: 154-6 ’C (bomlás közben). Olvadáspont: 145—7 ’C (18).
Pirazinkarbonsav-p-nittO-fenil-észter. Ezt a vegyületet az előző vegyület előállítására ismertetett eljárással azonos módon állítottuk elő. 40 mmol pirazinkarbonsavból és 44 mmol p-nitro-fenolból 35,2 mmol (88%) észtert kaptunk. Olvadáspontja 180-182 ’C (bomlás közben). Rf (CHCl3:MeOH = 49:1) = 0,72. NMR (CDC13): 7,5, m és 8,37 m, mindkettő 2H, a fenolgyűrűben lévő oxigénatommal, illetve nitrocsoporttal szomszédos hidrogének; 8,84, m, IH, pirazin H5; 8,9, d, IH, pirazin H6; 9,48, d, IH, pirazin H3.
BOC-NicLys. 2,5 g (L- vagy D-izomer) BOC-Lys-t 200 μΐ DMF-ben szuszpendáltunk keverés közben. Ezután hozzáadtunk 1,1 ekvivalens p-nitro-fenil-nikotinátot, és az elegyet szobahőmérsékleten 36 órán keresztül kevertük. Az elegyet ezután szűrtük, és a szűrletet vákuumban szárazra pároltuk. A kapott sárga olajat kétszer 50 μΐ Et2O-rel kevertük jeges fürdőn. Az első Et2O-es fázist dekantáltuk, a másodikat leszűrtük. EtOAc/hexánok elegyből végzett átkristályosítással 2,05 g terméket kaptunk, a hozam 58% (L-izomer). Olvadáspont: 138 ’C, irodalmi érték (17) 138-141 ’C. L-izomer [aló =-2,91’ (MeOH), D-izomer [a]§ = 3,35’ (MeOH).
Az L- és D-BOC-INicLys-t hasonló módon állítottuk elő 10 mmol L- vagy D-BOC-Lys p-nitro-fenil-izonikotináttal végzett acilezésével 100 μΐ DMF-ban, 40 órán keresztül, szobahőmérsékleten. A nyersterméket 120 μΐ EtOAc és 50 μΐ H2O között megosztottuk. Az EtOAc-os fázist kétszer 50 ml H2O-zel és 50 μΐ sóoldattal extraháltuk. Az eredeti vizes fázist 30 μΐ EtOActal visszaextraháltuk. Az egyesített EtOAc-os fázisokat ezután szárítottuk (MgSO4) és bepároltuk, és a maradékot Et2O-rel kezeltük, és a fent ismertetett módon átkristályosítottuk. 1,07 g BOC-L-INicLys-t kaptunk, a hozam 30,5%. A D-izomer vegyületre a hozam 1,26 g, 36%. NMR (aceton-d4): 1,4, s, 9H, t-butoxi-csoport;
l, 8-1,48, m, 6H, B, y, d-CH2; 3,44, t, 2H, E-CH2; 4,13, m, IH, a-CH; 7,77, m, 2H, py H5 és H3; 8,70, m, 2H, py H2 és H6.
L- és D-BOC-PicLys. 1,23 g (5 mmol) L- vagy DBOC-Lys-t 1,34 g (5,5 mmol) p-nitro-fenil-pikolináttal 60 μΐ DMF-ban 16 órán keresztül kevertünk. Szűrés és bepárlás után a terméket szilikagélen, 4,5x32 cm-es oszlopon kromatográfiás eljárással tisztítottuk, oldószer-rendszerként n-BuOH:py:HOAc:H2O =
30:10:3:12 elegyet alkalmazva. A kromatográfiás tisztítással kapott terméket EtOAc-ban oldottuk, és H2Ozel, sóoldattal mostuk, szárítottuk és vákuumban bepároltuk. A hozam rendszerint 60-70% volt. NMR (CDCI,): 1,43, s, 9H, t-butoxi-csoport; 1,73-1,45, m, 6H, B, y, d-CH2; 3,47, m, 2H, E-CH2; 4,32, tn, IH,
HU 211 882 A9 a-CH; 7,43, m, IH, py H5; 7,85. m, IH, py H4; 8,2, m, IH, py H3; 8,55, m, lH.pyH6.
L- és D-BOC-MNicLys. 10 mmol BOC-Lys-t és
10.5 mmol p-nitro-fenil-6-metil-nikotinátot 150 μΐ DMF-ban a szokásos módon reagáltattunk. 27 óra elteltével a reakcióelegyet szűrtük, és bepároltuk. A kapott sárga olajat kétszer 50 μΙ Et2O-rel kezeltük. 3,3 g terméket kaptunk, amelyet 50 μΐ 20% MeOH-t tartalmazó EtOAc/hexán elegyből átkristályosítottunk. 2,87 g (78,6%) terméket kaptunk (L-izomer). Rf (nB uOH :py :HOAc :H2O = 32:10:3:12) = 0,61. NMR (CDC13): 1.46, s, 9H, t-butoxi-csoport; 1,9-1,5, m, 6H, B, y, d-CH2; 2,57. s, 3H, py CH3; 3,36, m, 2H, E-CH2; 4,11, m, IH, a-CH; 7,22, d, IH, py H5; 8,08, m, lH,py H4; 8,95, széles s, IH, py H2.
L- és D-BOC-PzcLys. A fent ismertetett eljárással 7,7 mmol pirazinkarbonsav-p-nitro-fenil-észterből és 7 mmol L- vagy D-izomer BOC-Lys-ből 100 μΐ DMFban mintegy 6 mmol terméket kaptunk iPrOH-ból végzett átkristályosítás után. Rf (n-BuOH:py:HOAc:H,O = 30:10:3:12) = 0,47; NMR (CDCl,); 1,45, s, 9H. t-butoxi-csoport; 1,9-1,48, m, 6H, B, y, d-CH,; 3,51, m, 2H, E-CH,; 4,29, m. IH. a-CH; 8,52. q, IH, pirazin H3; 8.77. d. IH, pirazin H6; 9,41, d, IH, pirazin H’.
BOC-L-NicOm. Ezt a vegyületet szokásos módon állítottuk elő, 7 mmol p-nitro-fenil-nikotinátot 5 mmol BOC-Orn-nel reagáltatva 75 μΐ DMF-ban 36 órán keresztül. Bepárlás és EtOAc-ból végzett átkristályosítás után 3,5 mmol (70%) NicOrn-t kaptunk, olvadáspontja 143-144 “C. R, (n-BuOH:HOAc:H,0 = 4:1:2) = 0,70. NMR (CDCl,): 1,45, s, 9H, t-butoxi-csoport; 7,46. m, IH. py H3; 8.27. m, IH. py H4; 8,69. m, IH. py H6; 9,05. m. IH. py H2.
BOC-D-transz-NACAla, 1,43 g (5 mmol) BOC-Dtransz-3-(4-amino-ciklohexil)-alanint (gyártó a Southwest Foundation fór Biochemical Research) 1,35 g (5,5 mmol) p-mtro-fenil-nikotináttal 60 μΐ DMF-ban, szobahőmérsékleten, 120 órán keresztül kevertünk. Az elegyet ezután szűrtük, bepároltuk, jeges fürdőn Et2Orel kezeltük és újra szűrtük. Átkristályosítás céljából 12 μΐ EtOH-ban melegítettük, és 18 μΙ forró H2O-et adtunk hozzá. Ily módon tiszta oldatot kaptunk, amelyből hűtés közben kristályok váltak ki. A fenti eljárást kétszer megismételtük. Hozam: 0,98 g (50%), tisztaság >95%. olvadáspont: >220 °C. NMR (DMSO-d6): 1.46, s. 9H, t-butoxi-csoport; 1,9-1,48, m, 11H, gyűrű CH2, gyűrű CH 1-es helyzetben és B-CH2; 3,72, m, IH, gyűrű CH 4-es helyzetben; 3,95, m, IH, a-CH; 7.48, m. IH. py H5: 8.16, m. IH, py H4; 8,67, m, IH. py H6; 8,96, m. IH. py H2.
BOC-D-cisz-NACAla. 5 mmol BOC-D-cisz-3-(4amino-ciklohexil)-alanint (beszerzés a fenti cégtől) és
5.5 mmol p-nitro-fenil-nikotinátot DMF-ben reagáltattunk a fentiek szerint. A reakcióidő 25 óra volt. A tisztítást Et2O-rel a fentiek szerint végzett kezeléssel, majd 4,5x32 cm-es oszlopon, szilikagélen kromatografálva, CHCIj:MeOH:py;HOAc = 75:10:10:5 oldószerrendszer alkalmazásával végeztük. A hozam: 1,3 g, 61%, amorf por. Rf (oszlop rendszer) = 0,58. NMR (CDClj): 1,44, s. 9H, t-butoxi-csoport; 1,95-1,45, m.
11H, gyűrű CH2, gyűrű CH 1-es helyzetben és B-CH2; 4,22, m, IH, a-CH; 4,35, m, IH, gyűrű CH 4-es helyzetben; 7,35, 8,24, 8,63 és 8,98, mindegyik IH, értelmezések mint az előző vegyületnél.
BOC-IOm(Z). Ezt a vegyületet BOC-Om(Z)-ből állítottuk elő acetonnal és H2/Pd-mal végzett reduktív alkilezéssel Prasad és munkatársai módszere szerint (23), majd benzil-klór-formiáttal vizes lúgban (Schotten-Baumann körülmények között) Nd-Z-származékká alakítással. A tisztítást szilikagélen kromatográfiás eljárással végeztük CHClj/MeOH = 85:15 eleggyel. Rf (CHCl,:MeOH:HOAc = 85:15:3) = 0,8. NMR (CHCl,): 1,10. d, 6H. izopropil CH3; 1,40, s, 9H, t-butoxi-csoport; 1,7-1,5, m, 4H, B, y-CH2; 3,09, m, 2H, d-CH2; 4,2, m, IH, a-CH; 5,10, s, 2H, benzil CH2; 7,3, m, 5H, aromások.
BOC-CypLys(Z). 2,04 g BOC-Lys(Z)-t 8 μΐ ciklopentanonban és 32 μΐ 0,22 g NaOH-ot tartalmazó H2Oben oldottunk. A hidrogénezést 0,4 g 10%-os Pd/C jelenlétében, 50-60 psi nyomáson Parr-készülékben végeztük. 4 óra elteltével a hidrogénezést megszüntettük, és 2 μΙ 0,5 mól/1 koncentrációjú NaOH-oldatot és 10 μΙ MeOH-t adtunk hozzá. A hidrogénezést ezután 16 órán keresztül 50-60 psi nyomáson folytattuk. Az elegyet szűrtük, és bepároltuk. A maradékot 75 μΐ H2O-ben oldottuk, és a vizes fázist háromszor extraháltuk Et2O-rel és egyszer hexánnal. A pH-t ezután HC1val 6-7-re állítottuk, és az oldatot rotációs bepárlóval, 40 ‘C-os fürdőhőmérsékleten bepároltuk. A kapott terméket ezután benzil-klór-formiáttal, vizes NaOH-ban (Schotten-Baumann körülmények között) alakítottuk Z-származékká. Hozam: 1,3 g, 58% összhozam. Rf (nBuOH:py:HOAc:H,O = 30:10:3:12) = 0,69. Tisztaság >95%. NMR (CDClj): 1,45, s, 9H, t-butoxi-csoport; 1,95-1,35, m, 14H, gyűrű CH2+B, y, d-CH2; 3,13, széles t, 2H. E-CH,; 4,34,-4,05. m, 2H, a-CH+gyűrű CH; 5,13, s, 2H. benzil CH2; 7,35. m, 5H, aromás protonok.
BOC-Me:L\s. D- és L-izomer. Ezeket a vegyületeket a megfelelő Z- vagy Cl-Z-származékok hidrogenolízisével állítottuk elő 37%-os formaldehid jelenlétében. lényegében L. Benoiton (22) az Na-acetilanalóg előállítására ismertetett eljárása szerint. A tisztítást szilikagélen, kromatografálással végeztük, n-BuOH:py:H2O = 2:2:1 oldószer-rendszert használva. A cím szerinti termékeket amorf formában kaptuk, a hozamok: 40-65%. NMR (CDClj): 1,41, s, 9H, t-butoxi-csoport; 1,9-1.5. m, 6H. B, y, d-CH2; 2,6. s, 6H, N(CHj)2; 2.8, m, 2H. E-CH2; 4,03, m, IH, a-CH.
BOC-D-AnGItt. 0,62 g (3 mmol) DCC-t adtunk 1,10 g (3 mmol) BOC-D-glutaminsav-a-benzil-észter és 0,39 g (3 mmol) p-anisidin 25 μΐ CH2Cl2-nal készült, jéghideg oldatához. A reakcióelegyet keverés közben szobahőmérsékletre hagytuk melegedni, és ezután további 17 órán keresztül kevertük. A diciklohexil-karbamidot ezután leszűrtük, és az oldat térfogatát kloroformmal 125 μΙ-re kiegészítettük. A kapott oldatot kétszer 1 n H2SO4-val, H2O-zel, telített NaHCO3-tal és kétszer Η,Ο-zel extraháltuk, és szárítottuk (MgSO4). Bepárlás és EtOH-ból végzett átkristályosítás után
HU 211 882 A9
0,99 g (74%). terméket kaptunk, olvadáspontja 129,5131 ’C. Rf (4% MeOH CHCl3-ban) = O,53. Ezt a terméket 30 μΐ MeOH és 10 μΐ EtOH elegyében oldottuk, és 0,3 g Pd/C jelenlétében 50 psi nyomáson 2,5 órán keresztül hidrogéneztük. Szűrés és bepárlás után kvantitatív hozammal BOC-D-AnGlu-t kaptunk. A termék nem kristályos. Tisztasága >98%. NMR (CDClj): 1,45, s, 9H, t-butoxi-csoport; 2,35-1,95, m, 2H, B-CH2, 2,62,4, m, 2H, y-CH2, 3,76, s, 3H, OCH,; 4,3, m, IH, a-CH; 6,82 és 7,42, széles d, mindegyik 2H, aromás protonok.
BOC-Mefirg. Első lépésben N,N,N',S-tetrametilizotiokarbamidot állítottunk elő Lecher és Hardy módszere szerint (19). Forráspontja (15 mm) = 74 ’C (a fenti irodalom szerint 11 mm-en 68 ’C). 9 mmol BOCOrn-t és 10 mmol tetrametil-izotiokarbamidot 15 μΐ DMF-ban és 2 μΐ trietil-aminban oldottunk, és az oldatot 100 ’C-on 2 órán keresztül és szobahőmérsékleten 10 órán keresztül inkubáltuk. A reakcióelegyet szárazra pároltuk, és szilikagél oszlopon vezettük át, iPrOH:trietil-amin:H2O = 42:6:13 eleggyel eluáltuk. A kapott fehér. szilárd anyagot H2O-ben oldottuk, és az oldatot 6 n HCl-val megsavanyítottuk, és liofilizáltuk. 5,5 mmol terméket kaptunk. Rf (oszlop eluenssel) =0,50. NMR (D2O): 1.42, s, 9H, t-butoxi-csoport; 2,80, m, IH, aCH; 2,89. s. 3H, CH3 a guanidinocsoporton; 2,96, s, 6H. (CH,)2N; 3,25, t. 2H, d-CH3: 1,50, m, 4H, B, y-CH,.
BOC-Dpo. 10 mmol arginin-hidrokloridból és 1.72 g nátrium-hidrogén-karbonát 17 μΐ H2O-zel készült oldatából, 28,6 μΐ acetil-acetonból és 28,6 μΐ EtOH-ból 7,5 mmol Dpo-t kaptunk F.-S. eljárása szerint (20). A terméket ezután 50%-os vizes dioxánban nátrium-hidroxid jelenlétében di(terc-butil)-dikarbonátot alkalmazva a megfelelő BOC-származékká alakítottuk. A reakció lényegében kvantitatív hozammal ment végbe. R, (n-BuOH:HOAc:H2O = 4:1:2) = 0,63. NMR (CDClj): 1.45, s, 9H, t-butoxi-csoport, 1,9-1,5, 4H. B. y-CH2; 2,33, s, 6H, CH3; 3,46, m, 2H, d-CH2; 4,24, m. IH, a-CH: 6,35. s. IH, aromás H. Az L- és D-izomerek hasonlóképpen reagáltak.
BOC-D-Et2hArg. Ezt a vegyületet Nestor és Vickery eljárása szerint állítottuk elő [US 4 530 920 lajstromszámú szabadalmi leírás (1985. július 23.)]. Rf (nBuOH:HOAc:H20 = 4:1:2) = 0,52.
A találmány szerinti peptideket szilárd fázisú eljárással állítottuk elő Beckmann Model 990 peptid szintetizátort alkalmazva (1, 11). Benzhidril-amin-hidroklorid gyantát (BHA-gyanta) használtunk szilárd hordozóként. A szintetizátor programját alprogramokra osztottuk.
1. Védőcsoport eltávolítás: 1. CH2C12 (mosás kétszer, 1 vagy 2 perc); 2. 50% TFA 0,1% indolt tartalmazó CH2Cl2-ban (mosás egyszer, 1 vagy 2 perc); 3. 50% TFA 0,1% indolt tartalmazó CH2Cl2-ban (védőcsoport eltávolítás. 20 perc); 4. CH2C12 (mosás kétszer).
2. Semlegesítés: 1. CH2C12 (mosás kétszer, 1 vagy 2 perc); 2. DIEA (10% CH2CI2-ban) (mosás kétszer. 1 vagy 2 perc); 3. DIEA (10% CH2Cl2-ban) (semlegesítés, 5 perc); 4. CH2C12 (mosás kétszer, 1 vagy 2 perc).
3. Kapcsolás DCC-del: 1. CH2C12 (mosás kétszer, 1 vagy 2 perc); 2. aminosav CH2Cl2-ban oldva (hozzáadás, szállítás és keverés, 5 perc); 3. DCC (10% CH2Cl2-ban) (hozzáadás és keverés, 180 perc); 4. CH2C12 (mosás kétszer. 1 vagy 2 perc).
4. Kapcsolás aktív észterrel: nem alkalmaztuk.
5. Befejező mosás: 1. CH2C12 (mosás kétszer, 1 vagy 2 perc); 2. i-PrOH (mosás háromszor, 1 vagy 2 perc); 3. DMF (mosás háromszor, 1 vagy 2 perc); 4. CH2C12 (mosás háromszor, 1 vagy 2 perc).
6. Mosás a TFA-as kezelés után: 1. CH2C12 (mosás kétszer, 1 vagy 2 perc); 2. i-PrOH (mosás kétszer, 1 vagy 2 perc); 3. CH2C12 (mosás háromszor, 1 vagy 2 perc).
7. Acetilezés: 1. CH2C12 (mosás kétszer, 1 vagy 2 perc); 2. 25% Ac2O és Py CH2Cl2-ben (mosás egyszer, 1 vagy 2 perc); 3. 25% Ac2O és Py CH2Cl2-ban (acetilezés, 20 perc); 4. CH2C12 (mosás kétszer, 1 vagy 2 perc).
Az első aminosavat a 2-3-5 program-szekvenciával kapcsoltuk a gyantához. A gyantát a reakcióedénybe való bevitel előtt választótölcsérben 1 g gyantára számítva 25 μΙ CH2Cl2-nal mostuk, a finom részecskék eltávolítása céljából. Az összes kapcsolásban a Bocaminosavat a gyanta nitrogéntartalmára számítva rendszerint 3-4-szeres feleslegben használtuk. A fenti eljárással a kapcsolási reakció általában teljesen végbement. Ha pozitív ninhidrin-színreakciót észleltünk, egy második kapcsolást is végrehajtottunk (3-5 programszekvencia). Ezután a gyantát acetileztük (7-5 program-szekvencia).
A következő aminosavat az 1-6-2-3-5 programszekvenciával kapcsoltuk. A DDC-del végzett kapcsoláshoz mindegyik aminosavat CH2CI2-ban oldottuk. Az aminosav-maradék 1-es helyzetben való acetilezésére az 1-6-2-7-5 program-szekvenciát használtuk. A mosásra használt oldószerek és a kémiai reakciókban használt reaktánsok térfogata mintegy 10 μΙ/g gyanta volt.
Az összes aminosav kapcsolása után a peptid-gyantát vákuumban egy éjszakán keresztül szárítottuk. A gyantát ezután 10-25% desztillált anizolt vagy p-krezolt tartalmazó, kétszer desztillált cseppfolyós hidrogén-fluoriddal kezeltük 0 ’C-on 1 órán keresztül. ΙΟμΙ/g gyanta mennyiségben. Ezután a HF-ot vákuumban elpárologtattuk, és a maradékot olajszivattyúval létesített vákuumban egy éjszakán keresztül szárítottuk. Az elegyet ezután néhányszor Et2O-rel (25 μΙ/g gyanta), majd 30%-os, 50%-os, 10%-os vizes HOAcval, és desztillált, ionmentes vízzel egyszer extraháltuk. Az egyesített vizes oldatokat liofilizálva kaptuk a nyers peptidet.
A peptidek többségét szilikagélen, kromatográfiás eljárással tisztítottuk (1x60 cm-es oszlopon), oldószerrendszerként nBuOH:HOAc:H2O = 4:1:2 vagy 4:1:5 elegy felső fázisát, vagy nBuOAc:nBuOH:HOAc:H20 = 2:8:2:3 elegyet alkalmazva, majd Sephadex G-25-ön gélszűrést végeztünk, eluensként 6%-os HOAc-at használva. Ha a peptidek tisztítása a fenti műveletek elvégzése után nem volt kielégítő, a további tisztítást
HU 211 882 A9 félpreparatív HPLC eljárással végeztük, 660 oldószerprogramozóval ellátott Waters folyadékkromatográfot alkalmazva. 1,2x35 cm-es m-Bondapak C]g oszlopot használtunk, A oldószer-rendszerként 0,1 mol/1 NH4OAc-ot (pH 5,0), B oldószer-rendszerként 20% A+80% CHjCN-t alkalmazva. A tisztítást 15-25 perc alatt a B mennyiségének növelésével kialakított különböző grádiensekkel értük el.
Egy alternatív tisztítási eljárásként a Sephadex G25-ön gélszűrést végeztünk, 6%-os HOAc-val, majd Sephadex LH-20-οη (2,5x100 cm) H2O:nBu0H: HOAc:MeOH = 90:10:10:8 oldószer-rendszerrel kromatografáltunk. Szükség esetén az utóbbi műveletet 1-2-szer megismételtük.
A peptidek tisztaságát szilikagél-lemezen (Merck) vékonyréteg-kromatográfiás eljárással határoztuk meg, legalább négy különböző oldószer-rendszert alkalmazva. amelyeket a II. táblázatban ismertetünk. A foltokat klór/o-tolidin reagenssel hívtuk elő. A II. táblázatban az analitikai HPLC körülményeit és eredményeit is ismertetjük. A berendezés a fent ismertetett volt, azzal az eltéréssel, hogy analitikai m-Bondapak C18 oszlopot (3,9 mmx30 cm) használtunk.
Az aminosav-analízist Beckman model 118 CL aminosav analizátorral végeztük. A mintegy 0,5 pg tömegű mintákat 6 n HCl-val leforrasztott üvegcsőben hidrolizáltűk 110 °C-on 24 órán keresztül. A maradékot ezután bepároltuk, és cilrát pufferben (pH 2,2) oldottuk, és így vittük az analizátorba. Az eredményeket a III. táblázat tartalmazza.
Az ovulációgátló aktivitást (AOA) patkányban határoztuk meg Humphries és munkatársai módszere szerint (12). A csalánhólyag vizsgálatot altatott patkányokon végeztük, amelyeknek intradermálisan 10 pg peptidet injektáltunk 100 pl sóoldatban, mértük az ideálisan kapott keringési csalán reakciót és kiszámítottuk a területet. Az in vitro hisztamin felszabadulási vizsgálatot Karten és munkatársai leírása szerint (4) hajtottuk végre.
A biológiai vizsgálatok eredményeit az 1. táblázatban, valamint a kapcsolódó többi táblázatban ismertetjük.
Az I táblázatban ismertetett 57 peptid közül 21 peptid rendelkezik mintegy 90%. vagy annál nagyobb AOA aktivitással 1 pg dózisban ebben a vizsgálatban. A hisztamin felszabadító hatás szempontjából patkány hízósejt-vizsgálatnak alávetetett 37 peptid közül 10 peptid ED50 értéke 300 vagy annál nagyobb, szemben a standard vegyületként használt [N-Ac-D-2-NalbD-4F-PheJ.D-Trp\D-Arg6]-LHRH-val kapott 0,17 értékkel. 9 további analóg ED50 értéke 86 és 288 közötti, ami azt jelenti, hogy nem szabadítanak fel több hisztamint, mint a klinikai gyakorlatban használt „szuperagonisták”
A patkány hízósejt-vizsgálattal tesztelt I. táblázatbeli 37 peptid közül 7 [szám szerint a 4., 23., 24., 43. (antid), 44., 53. és 55. vegyület] 1 pg dózisban 90% vagy annál nagyobb AOA aktivitást mutatott, és ED50 értéke J86 pg/p] volt. Ezen vegyületek között van a leghatásosabb analóg, az 53. vegyület, amelynek AOA értéke 100% 0.5 pg dózisban, és 40% 0,25 pg dózisban. Ezen analóg EDjq értéke 93±28. Kimutattuk tehát, hogy a nagy AOA aktivitás mellett az alacsony hisztamin felszabadítás megtalálható a találmány szerinti analógokban.
A fenti hét peptid közös szerkezeti jellemzői az alábbiak: (1) 6-os helyzetben D-Lys-maradékot tartalmaznak, amely enyhén bázikus nikotinsavval vagy annak analógjaival, például pikolinsavval vagy 6-metilnikotinsavval van acilezve. (2) 5-ös helyzetben megfelelő acilezett L-Lys-maradékol vagy természetes Tyr-t tartalmaznak. (3) 8-as helyzetben alkilezett ILys-t vagy IOrn-t tartalmaznak. (4) Szekvenciájukból hiányzik az Arg.
Az Arg-nek a hisztamin felszabadulásra kifejtett hatására két vegyületpárt, a 43. és 10. vegyületet, illetve a 4. és 1. vegyületet említjük példaként. A 43. vegyület (antid) szekvenciája N-Ac-D-2-Nal’.DpClPhe,D-3-Pal3,Ser4,NicLys5,D-NicLys6,Leu7,ILys8, Pro9,D-Ala'°-NH2. ED50 értéke >300. A 10. vegyület szekvenciája azonos, azzal az eltéréssel, hogy NicLys5 helyett Arg5-öt tartalmaz. Ennek következtében ED50 értéke 4,3+0,52-re csökkent. A 4. vegyület szekvenciája azonos a 43. vegyületével, azzal az eltéréssel, hogy 5-ös helyzetben Tyr-t tartalmaz. ED50 értéke 133±22. Az 1. vegyületben ILys8 helyett Arg8 van e szekvenciában, amelynek következtében az EDS0 érték 39,2±7-re csökkent. Úgy tűnik, hogy az 5-ös helyzet az Arg szubsztitúció szempontjából érzékenyebb, mint a 8-as helyzet.
8-as helyzetben az alkilezett ILys- és IOm-maradékok előnyösebbek, mint a megfelelő Lys- és Orn-maradékok mind az AOA, mind a hisztamin felszabadító aktivitás szempontjából (3. és 4., illetve 6. és 7. vegyületpárok). Az, hogy az ILys8 vagy az IOrn8 előnyösebbe, úgy tűnik, hogy a szekvenciától függ.
A hatás időtartamának meghatározására a vizsgálandó antagonista vegyületet s.c. vagy orálisan adagoltuk 26 napos nőstény patkányoknak a (D-Qal6)-LHRH agonista vegyület beadása előtt meghatározott idővel. Ezután az agonista beadása után 2 órával, RIA módszerrel meghatároztuk a patkányok szérumában a luteinizáló hormon (LH) és a follikulsz-stimuláló hormon (FSH) koncentrációját. Az orális adagolási gyomorszonda segítségével végeztük.
AIV. táblázatban ismertetjük az acilezett amino-ciklohexil-alanin-maradékot tartalmazó analógok AOA és hisztamin-felszabadító hatását. A IV-1 és IV-2 NicLys5,D-NACAla6-analógok esetén [NACAla jelentése 3-(4-nikotinoil-amino-ciklohexil)-alanin] a cisz-DNACAla6-ot tartalmazó 2. analóg valamivel aktívabb, 1 pg-ban 100% az AOA, 70% AOA-val szemben. AIV7 és IV-8 NicLys5,D-PzACAla6-analógok [PzACAla jelentése 3-(4-pirazinil-karbonil-amino-ciklohexil)-alanin] esetén fordított az aktivitás erősségének sorrendje. A transz-maradékot tartalmazó analóg AOA értéke a magasabb, 88%, a 25%-kal szemben, 1 pg-ban.
A IV-3 és IV-4 PicLys5, transz- és cisz-PACAla6analógok [PACAla jelentése 3-(4-pikolinoil-aminociklohexil)-alanin] azonos hatásúak. 0,5 pg-ban az AOA 50%, illetve 54%, míg a PicLys5, transz- és
HU 211 882 A9 cisz-PzACAla6-analógok esetén a cisz-vegyület több, mint kétszer aktívabb. Az előbbi, a IV-5 analóg aktivitása körülbelül azonos a IV-3 és IV-4 analógok aktivitásával (44% 0,5 gg-ban), míg az utóbbi IV-6 analóg aktivitása 0,5 gg-ban 100%, 0,25 gg-ban 73% és 0,125 gg-ban 29%. A nagy aktivitású IV-6 analóg egyedülálló, ha a szerkezetileg hasonló, kis aktivitású
IV- 8 analóggal hasonlítjuk össze.
AIV-9 analóg cisz-PzACAIa5, D-PicLys6-ot tartalmaz, és annak ellenére, hogy az 5. és 6. maradékok fel vannak cserélve, megtartja a IV-6 analóg nagy aktivitását, 0,5 gg-ban 90%, 0,25 gg-ban 67%.
A hisztamin-felszabadító aktivitást tekintve, az összes vizsgált analóg in vitro kisebb ED50 értékkel rendelkezik, mint az alap-vegyületek. Az ED50 értékek körülbelül 30 és 60 között változnak, szemben az antid >300. és az V-10 analóg 93±11 értékével. A csalánhólyag-reakció vizsgálatban 99,5 és 129,6 közötti értékeket kapunk, amelyek hasonlóak az antid (132,7) és az
V- 10 analóg (123,0) értékéhez. Az összefüggés hiánya a két vizsgálat eredményei között a vizsgálatok különbözőségét tükrözi elsősorban.
Összefoglalóan megállapíthatjuk, hogy a NicLys5analógok 6-os helyzetébe amino-ciklohexil-alanin-maradékok beépítése alapvető növekedést okoz az in vitro hisztamin-felszabadításban, és az AOA-t változatlanul hagyja, vagy csökkenti. Az azonos módon szubsztituált PicLys'-analógok esetében minden egyes esetben csökken az AOA. kivéve egy vegyületet. ahol jelentős növekedést észleltünk. A PicLys5 és cisz-D-PzACAla6 kombinációja nyilvánvalóan előnyös szerkezetet jelent. A PicLys’-analógok hisztamin-felszabadítása mintegy 50-100%-kai emelkedett.
Az V. táblázatban ismertetjük az V-10 analóg 7-es helyzetű szubsztitúciójának eredményeit. Ez a helyzet bizonyos szerkezeti szabadságot megenged, de a peptidek egyike sem rendelkezik nagyobb AOA értékkel, mint az V-10 analóg. Az Aile’-t (alloizoleucint), Val7-t és Abu7-et (2-amino-vajsavat) tartalmazó V-12, V-14 és V-l6 analógok hatása azonos az V-10 analógéval. Az egyenes szénláncú Abu7-et tartalmazó V-16 analóg hatása valamivel nagyobb, mint az Nle7-et (norleucint), illetve Nval7-et (norvolint) tartalmazó V-13, illetve V-l5 analógoké, amelyek szerkezete közelebb van a természetes Leu7-analóghoz.
A 7-es helyzetben kisméretű alanint tartalmazó V17 analóg AOA értéke 0,5 gg-ban 60%-ra csökken. A 7-es helyzetbe Trp beépítése - amely a csirke II-, lazacés orsóhal-LHRH-ban természetesen előforduló maradék (13-15) - olyan V-l 8 analógot eredményez, amelynek AOA értéke 0,5 gg-ban csak 10%. A Trp7 valószínűleg túl nagy a szomszédos D-PicLys6 és ILys8 méretét figyelembevéve.
Az V. táblázat legérdekesebb vonását az in vitro hisztamin-felszabadítás adatai jelentik. Az V-10 analóg AOA értékéhez hasonló értéket mutató három analóg jelentősen kisebb hisztamin-felszabadító aktivitást mutat. Az V-12, V-14 és V-16 analógok EDjq értéke >300,213±30, illetve 273±27, azaz 2-3-szoros csökkenés érhető el a hisztamin-felszabadításban az oldallánc szerkezeiének kismértékű megváltoztatásával. Ezenkívül, a csalánhólyag-reakció is csökken minden analóg esetén az V-10 analóghoz viszonyítva.
Már korábban is megállapították (1), hogy a szekvenciától függ, vajon az ILys vagy az IOm a jobb szubsztituens a 8-as helyzetben. A fenti megállapítás további vizsgálatára előállítottuk a legelőnyösebb peptideknek megfelelő IOm8-analógokat, és megvizsgáltuk ezeket. A VI. táblázat eredményei alapján az ILys8-analógok jobbnak tűnnek. Két vegyületpár, a VI-10 és VI-19, illetve a VI12 és Vl-21 analógok esetén az ILys8 és IOm8 közelítőleg egyenértékű. A másik három vegyületpár esetén az ILys8-analógok hatásosabbak, de a különbség nem nagy. A legnagyobb különbséget a Val7-vegyületpár mutatja, ahol a VI-14 ILys8-analóg 0,5 gg-ban 90% AOA-t, míg a
VI-20 IOm8-analóg 57% AOA-t mutat.
A VI-19 analógot in vitro vizsgáltuk hisztamin-felszabadító hatás szempontjából. ED50 értéke 42±3,1, azaz a hisztamin-felszabadítás az egy CH2 egységgel hosszabb maradékot tartalmazó analógénak kétszerese. A csalánhólyag-reakció nem változik jelentősen, kivéve a Vl-21 Aile7 és IOrn8 analógot, amelynek értéke csak 78,6±4,5, a VI-12 ILys analóg 97,9+2,9 értékével szemben.
A VII. táblázat tartalmazza az antid és két másik analóg hatásának időtartamát. Ha az antidot 50 ng [DQal6]-LHRH [Qal jelentése 3-(3-kinolil)-alanin], mint „szuperagonista” beadása előtt 44 órával injektáljuk 3. 10, illetve 30 gg dózisban, a két magasabb dózis esetén jelentős mértékben csökken a szérum LH-koncentrációja. Az LH 113+11 ng/gl-ről 46±12, illetve 5±O,7 ng/gl-re csökken. A szérum FSH koncentrációja is csökken, legjelentősebben mintegy 300-ról mintegy 300 ng/gl-re 30 gg dózisban.
A VII-24 analógot, a (Tyr5)-antidot és a IV-6 analógot egyaránt 24 órával az agonista beadása előtt injektáljuk. A VII-24 analóg nagy aktivitást mutat, az LH-szintet 3 gg dózisban 19±4 ng/gl-re, 10 gg dózisban 3±0,4 ng/gl-re és 30 gg dózisban O,3±O,O3 ng/gl-re csökkenti. A IV-6 analóg megfelelő értékei 42±7, 15±3 és 3,4±2 ng/gl. Ez igen érdekes eredmény, mivel a IV-6 vegyület ovulációgátló aktivitása lényegesen nagyobb, 0.25 gg-ban 73%, szemben a 0,5 gg-ban 43% értékkel. Lehetséges, hogy a IV-6 analóg enzimatikusan gyorsabban lebomlik, mint a VII-24 analóg. A fenti analógok hosszú hatásideje s.c. adagolás esetén az injekció helyén kialakuló ún. „depó” hatások eredménye is lehet.
A VIII. táblázatban ismertetjük az antid hatásának időtartamát, orális adagolás esetén. 100 gg, illetve 300 gg antid beadagolása után 48 órával az 5 ng [DQal6]-LHRH s.c. adagolására felszabaduló LH-koncentráció a szérumban jelentősen csökken. Az LH-koncentráció 21+3 ng/gl-ról 4±0,8 ng/gl-re, illetve 8±2 ng/gl-re csökken. Szinte azonos eredményeket kapunk a -24 órás kísérletben is (9±2 ng/gl és 6±0,3 ng/gl). Az antid láthatólag igen ellenálló a lebontó enzimekkel szemben. Ha az antidot 2 órával adjuk az agonista beadagolása előtt, az LH-szint igen jelentős csökkenését észleljük. 30 gg dózisban az LH-szint jelentősen, 6±1 ng/gl-re csökken. 100 és 300 gg dózis esetén az LH-szint l±0,3 ng/gl, illetve
HU 211 882 A9
0,4+0,4 ng/μΙ, vagyis igen alacsony. Ha 10 ng agonistái használunk, minőségileg nagyon hasonló eredményeket kapunk.
A Vili. táblázat utolsó 3 sorában összehasonlításként közöljük az [N-Ac-D-pClPhel'2,D-Trp3,DArg5,D-Ala'°]-LHRH analóggal (VIII-25) kapott eredményeket is, amely analóg ismerten orális aktivitással rendelkezik (16). Az eredmények szerint az antid sokkal aktívabb, mint a VIII-25 vegyület, mivel 30 pg dózisban adva az agonista beadása előtt 2 órával, az LH-koncentráció 44+4 ng/pl-ről 22+4 ng/pl-re csökken (p<0,01). A VIII-25 vegyület esetén ez az érték 39+6 (nem szignifikáns). 100 pg dózisban a megfelelő adatok 7+3 (p<0,001), illetve 26+7 (p<0,05). Az FSHszint általában alacsonyabb, ha az antidot adagoljuk 2 órával korábban, 100 vagy 300 pg dózisban.
AIX. táblázat adatai szerint nincs jelentős különbség akkor, ha az antidot vízben vagy kukoricaolajban adagoljuk.
Az antid ovulációgátló hatását orális adagolás esetén is megvizsgáltuk (X. táblázat). Az AOA értékek 300,600 és 1200 pg dózisban 18, 73. illetve 100%. A peteérésen átesett patkány/összes patkány arányban kifejezve, a számok: 9/11, 3/11. illetve 0/11. A VI11-25 analóg esetén a fenti számok: 9/11, 4/11, illetve 0/11, 500, 1000, illetve 2000 pg dózisban (16). Eszerint az antid aktivitása a Vili—25 analógénak mintegy kétszerese.
A Xl. táblázatban hasonlítjuk össze az antid és négy másik analóg orális aktivitását. Az egyik analóg aktivitása az antidéval azonos, egy analóg aktivitása lényegesen kisebb, és két másik aktivitása kisebb alacsony dózisokban (30 és 100 pg), és kb. azonos aktivitású 300 pg dózisban.
ng [D-Qal6]-LHRH s.c. beadagolása után az LH-szint 91+4,6 ng/pl-re emelkedik. Az antid 30. 100 és 300 pg orális dózisban az LH-szintet 75+3, 20+4, illetve 5+1 ng/pl-re csökkenti. A 4. analóg - amely PicLys5-öt és D-PACAla6-ot tartalmaz - 30 és 100 pg dózisban nem csökkenti jelentősen ay LH-szintet, viszont 100 pg dózisban 51+6 ng/pl-re csökkenti.
APicLys5.D-PicLys6,Aile7 tartalmú V-l2 analóg és a PicLys5, cisz-D-PzACAla6 tartalmú IV-6 analóg 30 és 100 pg dózisban kisebb aktivitású, mint az antid. de 300 pg dózisban azonos aktivitású. Mind a két fenti peptid lényegesen aktívabb, mini az antid, s.c. adagolás esetén végzett ovulációgátlási vizsgálatban.
A 26. analóg aktivitása azonos az antidéval. Ez nem meglepő, mivel a két analóg között az egyetlen szerkezeti különbség az, hogy pirazin-maradék van piridi n-maradék helyett a D-Lys6 maradék NE-acil-csoportjában.
A XI. és XII. táblázatban láthatók olyan eredmények is az anlidra vonatkozóan, amikor 50 ng agonistát adagolunk. Az így kapott eredményeket a 15 ng agonista adagolásakor kapott eredményekkel összehasonlítva a kompetitív antagonizmusra jellemző dózis-hatás összefüggést kapunk. 15 ng agonista alkalmazása esetén 100 és 300 pg antid 115+15 ng/pl-ről 20+4, illetve 5+1 ng/pl-re csökkenti az LH-szintet. míg 50 ng agonista adagolása esetén 300 és 900 pg antid csökkenti az LH-t azonos szintre (19+3, illetve 5.3+1.2 ng/pl-re).
A XIII. táblázatban közöljük az antid biológiai hatását diszpergált hipofízis-sejttenyészet rendszerben.
A XIV. táblázatban ismertetjük néhány előnyös LHRH-analóg szerkezetét és biológiai aktivitását, amelyek az ovulációs aktivitást 0,25 pg dózisban 50%-nál nagyobb mértékben csökkentik.
Véleményünk szerint az antid és más, találmány szerinti eljárással előállított LHRH-antagonisták reverzibilis gyógyszeres kasztráció előidézésére használhatók, amely például különféle betegségek - így méhnyálkahártyagyulladás, méh-ftbromák és hormon-dependens daganatok (prosztata-, mellrák) - kezelésében lehet hasznos. Bizonyos betegek esetén a gonádok funkciójának átmeneti gátlása antiddal - miközben a beteg kemoterápiás vagy besugárzásos kezelést kap - kivédheti, vagy csökkentheti ezen szereknek gonádokra kifejtett káros hatását, így segít a későbbi fogamzást képesség megőrzésében. Gyógyászati példaként említhetjük a csontvelő-transzplantálás, méhnyak-karcinoma, metasztázisos pajzsmirigy- és méh-karcinoma, esetleges kóros pajzsmirigytúltengés során, a szétszórt erythemás bőrtuberkulózis kemoterápiás kezelése alatti, és szerv-átültetések bizonyos szakaszaiban folytatott besugárzást. A találmány szerinti antagonisták, például antid további gyógyászati alkalmazási lehetőségéi jelenti a fogamzásgátlás, mind hím-, mind nőnemű egyedekben.
Az antid és a találmány szerinti dekapeptidek még különlegesebb lehetséges felhasználása lehet bizonyos kóros állapotok esetén a szexuális viselkedés módosítása. Ilyen kóros állapot alatt értünk pl. egy AIDS-es beteget, vagy a börtönökben a szexuális támadók agresszív viselkedését, vagy a javítóintézetre ítélt agresszív kiskorúakat. Az is lehetséges, hogy a gonadotrop-hormonok magas szérum-koncentrációja a zsírsejtek működésében zavart okoz, és így hízást eredményez, vagy a csontsejtekben szerepet játszik a csontritkulás felgyorsulásában klimaxon túljutott nőkben. Ezek a működési rendellenességek antid alkalmazásával valószínűleg csökkenthetők, mivel ezzel csökkenthető a magas LH- és/vagy FSH-szint a klimax utáni szakaszban lévő nők szérumában.
A 6-os és/vagy 8-as helyzetben töltéssel rendelkező aminosav-helyettesítéseket tartalmazó szelektív LHRH-antagonisták valószínűleg a hízósejtekre kifejtett közvetlen hatással serkentik a hisztamin-felszabadulást, míg más LHRH-antagonisták - az antidhoz hasonlóan - nem. Ezért feltételezhető, hogy a bőrön lévő sebekre helyileg alkalmazott hízósejt-stimuláló antagonisták felgyorsítják a sebgyógyulást, míg a hisztamint nem stimuláló antagonisták gátolhatják az emberben előforduló allergiás reakciók némelyikét.
Kisnövésű gyermekek pubertásának késleltetése antid adagolásával, GH vagy GH-felszabadító peptidek egyidejű adagolásával vagy anélkül, a testmagasság növelésének különleges módszere lehet. Az ivarmirigy-hormonok jelenléte összeforrasztja a hosszú csontok epifízisét és megakadályozza további növekedésüket. Ez a lehetőség tovább bővíti a GH és GH-felszabadító peptidek alkalmazását.
A találmány szerinti LHRH-antagonista vegyületek
HU 211 882 A9 adagolása a gonádok működését gyorsan, 24 órán belül gátolja. LHRH-szuperagonisták folyamatos adagolásával a gonádok működése szintén gátolható, de ez csak akkor következik be, ha a gonádokat néhány napon keresztül túlműködésre serkentettük. Az ilyen szuperagonista vegyületek adagolása számos nemkívánatos klinikai problémát okozhat, prosztata-rákban, méhnyálkahártya-gyulladásban, méh-fibromában szenvedő betegek, valamint a szexuális támadók, és olyan betegek esetén, akiket átmenetileg gyógyszeresen kasztráltak. Ezért feltételezzük, hogy az LHRH-antagonisták jobban megfelelnek a reverzibilis gyógyszeres kasztrálás céljára, mint az LHRHagonisták. Diagnosztikai szinten, például az adrenális eredetű szteroid-szekréció megkülönböztetésére az ovárium-eredetűtől, vagy a kalcium-ürítés gonádos szteroidhormonoktól való függése mértékének meghatározására, az LHRH-antagonisták hatására gyorsan fellépő gonádfunkció gátlás miatt ezek a vegyületek egyérteműen sokkal előnyösebbek, mint az LHRH-agonisták. Véleményünk szerint minden olyan helyzetben, amikor LHRHszuperagonistát használnak a gonád-funkció gátlására, előnyösebb egy találmány szerinti LHRH-antagonistát használni.
Irodalomjegyzék
1. Ljugqvist A., Feng D.-M., Tang P.-F. L„ Kubota M.. Okamoto T., Zhang Y., Bowers C. Y., Hook W. A. és Folkers K.. Biochem. Biophys. Rés. Commun. 148(2). 849-586(1987).
2. Karten M. D. és Rivier J. E., Endocr. Rév. 7, 44-56(1986).
3. Hook W. A., Karten M. és Siraganian R. P., Fed. Proc. Fed. Am. Soc. Exptl. Bioi. 44, 1323 (1985).
4. Karten M. D., Hook W. A., Siraganian R. P., Coy D. H. Folkers K., Rivier J. E. és Roeske, R. W., LHRH and its Analogs; Contraceptive and Therapeutic Applications Part 2, kiadók Vickery Β H. és Nestor J. J., Jr. (MTP Press Ltd.. Lancaster, England) 179-190. oldal (1987).
5. Rivier J. E., Porter J., Rivier C. L., Perrin M., Corrigan A.. Hook W. A., Siraganian R. P. és Vale W. W„ J. Med. Chem. 29, 1846-1851 (1986).
6. Roeske R. W.. Chaturvedi N. C., Hrinyo-Pavlina T. és Kowalczuk M., LHRH and its Analogs: Contraceptive and Therapeutic Applications Part 2, kiadók Vickery Β. H. és Nestor J. J., Jr. (MTP Press Ltd., Lancaster, England), 17-24. oldal (1987).
7. Hocart. S. J.. Nekola Μ. V. és Coy D. H., J. Med. Chem. 30. 739-743 (1987).
8. Nestor J. J., Tahilramani R., Ho T. L„ McRae G. 1. és Vickery Β. H., J. Med. Cem. 31, 65—72 (1988).
9. Bajusz S„ Kovács M„ Gazdag M., Bokser L„ Karashima T„ Csemus V. J., Janaky T., Guoth J. és Schally A. V., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85. 16371641 (1988).
10. Rivier J., Kupryszewski G., Varga J., Porter J., Rivier C., Perrin M., Hagler A., Struthers S., Corrigan A. és Vale W„ J. Med. Chem. 31, 677-682 (1988).
11. Folkers K., Bowers C. Y., Shieh H.-M., Liu Y.-Z., Xiao S.-B., Tang P.-F. L. és Chu J. Y., Biochem. Biphys. Rés. Commun. 123(3) 1221-1226 (1984).
12. Humphries J., Wan Y.-P., Folkers K. és Bowers C. Y., J. Med. Chem. 2/(1), 120-123 (1978).
13. Miyamoto K., Hasegawa Y., Nomura M„ Igarashi M., Kanagawa K. és Matsuo H., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 81, 3874-3878 (1984).
14. Sherwood N„ Eiden L., Brownstein M., Spiess J., Rivier J. és Vale W., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 80, 2794-2798 (1983).
15. Sherwood, N. M., Sower S. A., Marshak D. R., Fraser B. A. és Brownstein M. J., J. Bioi. Chem. 261, 4812-4819 (1986).
16. Nekola Μ. V. Horváth A„ Ge L.-J., Coy D. H. és Schally A. V, Science 218, 160-161 (1982).
17. Bemardi és munkatársai, J. Pharm. Pharmacol. 19, 95(1967).
18. Fife T. H. és Przystas T. J., J. Am. Chem. Soc. 107, 1041 (1985).
19. Lecher és munkatársai, US 2 872 484 (1959. február 3.), Chem. Abstr. 53, 11238c.
20. Tjoeng és munkatársai, Chem. Bér., 108, 862 (1975).
21. Humphries és munkatársai, J. Med. Chem.. 2/(1). 120(1978).
22. Benoiton L., Can. J., Chem. 42, 2043 (1969).
23. Prasad és munkatársai, J. Med. Chem. 19, 492 (1976).
24. Zinner H. és Fiedler H., Arch. Pharm., 29/(63), 330(1958).
A találmány tárgykörébe tartoznak a leírásban ismertetett egyes aminosavakban vagy származékokban vagy azok összekapcsolásában, vagy az ismertetett eljárás egyes lépéseiben vagy a lépések sorrendjében végrehajtott változtatások is, az alábbi igénypontoknak megfelelően.
I. táblázat l()1 -D-pClPhe2-():' -()-Pro9-D-Alal0]-NH2képletű LHRH-antagonisták
| Sorszám | IBR szám | Vegyület | AOA %/qg | Csalánhólyag területe mm2/10 qg | ED5o Mg/ml | ||||||
| 0' | ()·’ | O5 | o6 | 08 | 0,5 | 1.0 | 2,0 | ||||
| 6-os helyzetben DNicLys-t tartalmazó analógok | |||||||||||
| 1. | 22396 | N-Ac-D- 2-Nal | D-3-Pal | Tyr | D- NicLys | Arg | 60 | 100 | - | 85 | 39,2+7 |
| 2. | 24753 | N-Ac-D- 2-NaI | D-3-Pal | Tyr | D- NicLys | Me3Arg | - | - | - | 39,9+7 |
HU 211 882 A9
| Sorszám | IBR szám | Vegyület | AOA %/pg | Csalánhólyag területe mm2/10pg | ed50 pg/ml | ||||||
| o' | 03 | O5 | ()6 | o8 | 0,5 | 1,0 | 2.0 | ||||
| 6-os helyzetben DNicLys-I tartalmazó analógok | |||||||||||
| 3. | 24825 | N-Ac-D- 2-Nal | D-3-Pal | Tyr | D- NicLys | Lys | - | 27 | - | 119,5+3,2 | |
| 4. | 24315 | N-Ac-D- 2-Nal | D-3-Pal | Tyr | D- NicLys | ILys | 45 | 89 | 100 | 79,0±9,2 | 133+22 |
| 5. | 24443 | N-Ac-D- 2-Nal | D-3-Pal | Tyr | D- NicLys | Me2Lys | - | 90 | 100 | 122,7 | 18,4 |
| 6. | 24748 | N-Ac-D- 2-Nal | D-3-Pal | Tyr | D- NicLys | Om | - | - | 67 | 129,4±3,3 | 19,3 |
| 7. | 24756 | N-Ac-D- 2-Nal | D-3-Pal | Tyr | D- NicLys | IOm | 22 | 71 | - | 92,2±2.9 | >300 |
| 8. | 24199 | N-Ac-D- 2-Nal | D-3-Pal | Arg | D- NicLys | Arg | 0 | 42 | - | 146,8 | |
| 9 | 24446 | N-Ac-D- 2-Nal | D-Tyr | Arg | D- NicLys | Arg | 33 | - | - | 113,2±5,6 | 1,73 |
| 10 | 25335 | N-Ac-D- 2-Nal | D-3-Pal | Arg | D- NicLys | ILys | 43 | 17 | - | 196.9±4,2 | 4,3±0,52 |
| 11. | 24931 | N-Ac-D- 2-Nal | D-3-Pal | Me?Arg | D- NicLys | ILys | - | - | 44 | 140+7,0 | |
| 12. | 25506 | N-Ac-D- 2-Nal | D-3-Pal | Dpo | D- NicLys | ILys | 56 | __ | - | 110+3 | |
| 13. | 24543 | N-Ac-D- 2-Nal | D-3-Pal | ILys | D- NicLys | ILys | - | 89 | - | 132.7+0 | 20,3 |
| 14. | 24545 | N-Ac-D- 2-Nal | D-3-Pal | His | D- NicLys | Arg | - | 89 | - | 139.7+0 | |
| 15. | 24593 | N-Ac-D- 2-Nal | D-3-PaI | 3-Pal | D- NicLys | Arg | - | 100 | - | 146.4±3,6 | |
| 16. | 25383 | N-Ac-D- 2-Nal | D-3-Pal | 3-Pal | D- NicLys | ILys | - | 75 | - | 132.8+6,0 | 86+28* |
| 17. | 25384 | N-Ac-D- 2-Nal | D-3-Pal | 3-Pal | D- NicLys | IOm | - | 100 | - | 139,9+7,2 | 55±13* |
| 18. | 25144 | N-Ac-D- 2-Nal | D-3-Pal | Ile | D- NicLys | ILys | - | 82 | - | 147.7+7,1 | 324+20 |
| 19. | 25145 | N'-Ac-D- 2-Nal | D-3-Pal | Ile | D- NicLys | IOm | 55 | - | 116.5+8.7 | 151±75 | |
| 20. | 25333 | N-Ac-D- 2-Nal | D-3-Pal | NieOrn | D- NicLys | IOm | - | 73 | - | 113,6±1O,9 | 57±13 |
| 21. í 25509 | N-Ac-D- 2-Nal | D-3-Pal | DMGLys | D- NicLys | ILys | 20 | - | - | 110+3 | 34±1,1 | |
| 22. | 25510 | N-Ac-D- 2-Nal | D-3-Pal | PicLys | D- NicLys | ILys | 64 | 100 | - | U6±3.3 | 39±1.0 |
| 23. | 25337 | N-Ac-D- pClPhe | D-3-Pal | Tyr | D- NicLys | ILys | - | 100 | - | 139,9+7,2 | 198±33* |
| 24. | 25338 | N-Ac-D- CljPhe | D-3-Pal | Tyr | D- NicLys | ILys | 0 | 89 | - | 103,9±5,3 | 311±65* |
| 5-ös helyzetben NicLys-t tartalmazó analógok | |||||||||||
| 25. | 22495 | N-Ac-D- 2-Nal | D-3-Pal | NicLys | D-3-Pal | Arg | 0 | - | 112 | ||
| 26. | 24544 | N-Ac-D- 2-NaI | D-3-Pal | NicLys | D-His | Arg | - | 100 | - | 146.7±3,6 | |
| 27. | 24754 | N-Ac-D- 2-Nal | D-3-Pal | NicLys | D-ILys | Arg | - | 56 | 73 | 196,9+4.1 | |
| 28. | 25334 | N-Ac-D- 2-Nal | D-3-Pal | NicLys | D-Dpo | ILys | 40 | 100 | - | 165,2±6,7 | 6.7±2,2 |
HU 211 882 A9
| Vegyület | AOA %/pg | Csalánhó- | ed50 Ug/ml | ||||||||
| Sorszám j1BR szám | 0' | ()3 | O5 | O6 | o8 | 0,5 | 1,0 | 2,0 | lyag területe mm2/10pg | ||
| 5-ös helyzetben NicLys-t tartalmazó analógok | |||||||||||
| 29. | 25332 | N-Ac-D- 2-Nal | D-3-Pal | NicLys | D-BzLys | ILys | - | 50 | - | 119,616,7 | >300 |
| 30. | 25507 | N-Ac-D- 2-Nal | D-3-Pal | NicLys | D- EljhArg | ILys | - | 67 | - | 123+5.8 | |
| 31. | 25589 | N-Ac-D- 2-Nal | D-3-Pal | NicLys | D-PicLys | ILys | 36 | - | - | 12017 | 6011,4 |
| 32. | 25588 | N-Ac-D- 2-Nal | D-3-Pal | NicLys | D-AnGlu | ILys | - | 67 | - | 11317 | >300 |
| 33. | 25647 | N-Ac-D- 2-Nal | D-3-Pal | NicLys | t-D- NACAla | ILys | - | 70 | - | 119,513,2 | |
| 34. | 25648 | N-Ac-D- 2-Nal | D-3-Pal | NicLys | c-D- NACAla | ILys | - | 100 | - | 113,6110,9 | 3711,1 |
| 35. | 25591 | N-Ac-D- 2-Nal | D-3-Pal | NicLys | D- MejLys | ILys | - | 82 | - | 11112 | 262123 |
| 36. | 25649 | N-Ac-D- 2-Nal | D-3-Pal | NicLys | D- PzcLys | ILys | 78 | 92 | - | 122,215,1 |
8-as helyzetben NicLys-t tartalmazó analógok
| 37. | 24749 | N-Ac-D- 2-Nal | D-3-Pal | Tyr | D-Arg | NicLys | - | - | 88 | 136,6+6,8 | 14,2 |
| 38. | 24771 | N-Ac-D- 2-Nal | D-3-Pal | Arg | D-3-Pal | NicLys | 0 | - | - | 99,0110,3 | |
| 39. | 24824 | N-Ac-D- 2-Nal | D-3-Pal | Tyr | D-ILys | ...... .......... NicLys | - | - | 100 | 122,8+5,8 | |
| 5-ös. 6-os vagy 8-as, 6-os vagy 3-as, 6-os helyzetben NicLys-Ι és D-NicLys-t tartalmazó analógok | |||||||||||
| 40. | 24594 | N-Ac-D- 2-Nal | D-3-Pal | NicLys | D- NicLys | Arg | 22 | 100 | - | 126,218,8 | |
| 41. | 24987 | N-Ac-D- 2-Nal | D-3-Pal | NicLys | D- NicLys | MejArg | - | - | 100 | 150.9114,0 | |
| 42. | 25143 | N-Ac-D- 2-Nal | D-3-Pal | NicLys | D- NicLys | Dpo | - | 18 | - | 113,6111,1 | <300 |
| 43. | 24542 | N-Ac-D- 2-Nal | D-3-Pal | NicLys | D- NicLys | ILys | 36 | 100 | 100 | 132.710 | 300 |
| 44. | 24933 | N-Ac-D- 2-Nal | D-3-Pal | NicLys | D- NicLys | lOm | 88 | 100 | - | 136.0+3,4 | 206+64 |
| 45. | 25078 | N-Ac-D- 2-Nal | D-3-Pal | NicLys | D- NicLys | CypLys | - | 64 | - | 147,017,1 | 171+49 |
| 46. | 24540 | N-Ac-D- 2-Nal | D-3-Pal | 1>r | D- NicLys | NicLys | - | 0 | - | 82,612,8 | 300 |
| 47. | 24745 | N-Ac-D- 2-Nal | D-3-Pal | His | D- NicLys | NicLys | - | - | 18 | 136,316,8 | |
| 48. | 24746 | N-Ac-D- 2-Nal | D-3-Pal | ILys | D- NicLys | NicLys | - | 30 | - | 132,815,9 | |
| 49. | 24597 | N-Ac-D- 2-Nal | D- NicLys | Tyr | D- NicLys | Arg | - | 89 | - | 101,0+6,0 |
az I. táblázat folytatása
Vegyes analógok
| Sor- szám | 1BR szám | Vegyület | AOA %/pg | Csalánhólyag területe mm2/10pg | ed50 gg/ml | ||||||||
| ()’ | ()3 | O5 | o6 | O8 | 0,25 | 0,5 | 1,0 | 2,0 | 10,0 | ||||
| 50. | 24596 | N-Ac- D-2-Nal | D-3- Pal | NicLys | D-NicLys | NicLys | - | - | 0 | - | - | 122,8+5,7 | |
| 51. | 24934 | N-Ac- D-2-Nal | D-3- Pal | NicLys | NicLys | ILys | - | - | - | - | 8 | 123+5,9 | >300 |
HU 211 882 A9
| Sor- szám | IBR szám | Vegyület | AOA %/gg | Csalánhólyag területe mm2/10 gg | ed50 gg/ml | ||||||||
| 0' | 0’ | ()5 | 06 | ()8 | 0,25 | 0,5 | í.o | 2,0 | 10,0 | ||||
| 52. | 25146 | N-Ac- D-2-Nal | D-3- Pal | INicLys | D-INicLys | ILys | - | 63 | 91 | - | - | 140,3+13,9 | 15±8,2 |
| 53. | 25147 | N-Ac- D-2-Nal | D-3- Pal | PicLys | D-PicLys | ILys | 40 | 100 | 90 | - | - | 123,0±0 | 93±28 |
| 54. | 25385 | N-Ac- D-2-Nal | D-3- Pal | Arg | D-BzLys | ILys | - | - | 63 | - | - | 169,0±7,7 | 8,7±3* |
| 55. | 25386 | N-Ac- D-2-Nal | D-3- Pal | MNicLys | D- MNicLys | llys- | - | 56 | 100 | - | - | 126,1+6,7 | >300* |
| 56. | 25508 | N-Ac- D-2-Nal | D-3- Pal | DMGLys | D-BzLys | ILys | - | - | 100 | - | - | 136,6±6,7 | 24+0,3 |
| 57. | 25650 | N-Ac- D-2-NaI | D-3- Pa! | PzcLys | D-PzcLys | ILys | - | 17 | - | - | - | 110,2±8,l | 288±30 |
* ebben a tesztsorozatban a standard vegyület ED^, értéke 0,46, a szokásos 0.1-0,2 helyett ll. táblázat
PicLys5-, D-PicLys6-aiutlógok
| Sorszám | IBR szám | ------, Szekvencia | |||||||||
| 58. | 26100 | N-Ac-D- CljPhe | D- pCIPhe | D-3-Pal | Ser | PicLys | D-PicLys | Leu | ILys | Pro | D-Ala- nh2 |
| 59. _ | 25807 | N-Ac-D- 2-Nal | D-ChPhe | D-3-Pal | Ser | PicLys | D-PicLys | Leu | ILys | Pro | D-Ala- nh2 |
| 60. | 26364 | N-Ac-D- 2-Nal | D-3-Pal | D- pClPhe | Ser | PicLys | D-PicLys | Leu | IOm | Pro | D-Ala- nh2 |
| 61. | 26119 | N-Ac-D- 2-Nal | D- pCIPhe | D-3- PzAla | Ser | PicLys | D-PicLys | Leu | löm | Pro | D-Ala- nh2 |
| 62 | 26177 | N-Ac-D- 2-Nal | D- pCIPhe | D-Trp | Ser | PicLys | D-PicLys | Leu | llys | Pro | D-Ala- nh2 |
| 63. | 25934 | N-Ac-D- 2-Nal | D- pClPhe | D-3-Pal | Ser | — PicLys | — D-PicLys | Val | -1 llys | Pro | D-Ala- nh2 |
| 64. | 26118 | N-Ac-D- 2-Nal | D- pClPhe | D-3-Pal | Ser | PicLys | D-PicLys | Val | IOm | Pro | D-Ala- nh2 |
| 65 | 25936 | N-Ac-D- 2-Nal | D- pClPhe | D-3-Pal | Ser | PicLys | D-PicLys | Aile | ILys | Pro | D-Ala- nh2 |
| 66. | 26178 | N-Ac-D- 2-Nal | D- pClPhe | D-3-Pal | Ser | PicLys | D-PicLys | Ailc | IOm | Pro | D-Ala- nh2 |
| 67. _ | 25990 | N-Ac-D- 2-Nal | D- pClPhc | D-3-Pal | Ser | PicLys | D-PicLys | Abu | ILys | Pro | D-Ala- nh2 |
| 68. | 26179 | N-Ac-D- 2-Nal | D- pClPhe | D-3-Pal | Ser | PicLys | D-PicLys | Abu | IOm | Pro | D-Ala- nh2 |
| 69. | 25935 | N-Ac-D- 2-Nal | D- pClPhe | D-3-Pal | Ser | PicLys | D-PicLys | Trp | ILys | Pro | D-Ala- nh2 |
| 70. | 25988 | N-Ac-D- 2-Nal | D- pClPhe | D-3-Pal | Ser | PicLys | D-PicLys | Nle | ILys | Pro | D-Ala- nh2 |
| 71. | 25989 | N-Ac-D- 2-Nal | D- pClPhe | D-3-Pal | Ser | PicLys | D-PicLys | N val | ILys | Pro | D-Ala- nh2 |
| 72. | 26020 | N-Ac-D- Cl2Phe | D- pClPhe | D-3-Pal | Ser | PicLys | D-PicLys | Ile | ILys | Pro | D-Ala- nh2 |
| 73. | 26099 | N-Ac-D- 2-Nal | D pCIPhe | D-3-Pal | Ser | PicLys | D-PicLys | Alá | ILys | Pro | D-Aia- nh2 |
| 74. | 26346 | N-Ac-D- Cl2Phe | D- pCIPhe | D-3-Pal | Ser | PicLys | D-PicLys | Abu | Arg | Pro | D-Ala- nh2 |
| 75. | 25937 | N-Ac-D- Cl2Phe | D- pClPhe | D-3-Pal | Ser | PicLys | D-PicLys | Leu | ILys | Pip | D-Ala- nh2 |
HU 211 882 A9
| Sorszám | IBR szám | Szekvencia | |||||||||
| 76. | 26019 | N-Ac-D- Cl2Phe | D- pClPhe | D-3-Pal | Ser | PicLys | D-PicLys | Leu | ILys | Pro | D-Abu- nh2 |
| 77. | 25933 | N-Ac-D- Cl2Phe | D- pClPhe | D-3-Pal | Ser | PicLys | D-PicLys | Leu | IOm | Pro | D-Ala- nh2 |
| PicLys5-an alógok | |||||||||||
| 78. | 26349 | N-Ac-D- 2-Nal | D- pClPhe | D- TinGly | Ser | PicLys | c-D- PzACAla | Leu | ILys | Pro | D-Ala- nh2 |
| 79. | 26324 | N-Ac-D- 2-Nal | D- pClPhe | D-3- PxAla | Ser | PicLys | c-D- PzACAla | Leu | ILys | Pro | D-Ala- nh2 |
| 80. | 26897 | N-Ac-D- 2-Nal | D- pClPhe | D-3-Pal | Ser | PicLys | c-D- PzACAla | Leu | ILys | Pro | D-Ala- nh2 |
| 81. | 26181 | N-Ac-D- 2-Nal | D- pClPhe | D-3-Pal | Ser | PicLys | c-D- PzACAla | Leu | IOm | Pro | D-Ala- nh2 |
| 82. | 26325 | N-Ac-D- 2-Nal | D- pClPhe | D-3-Pal | Ser | PicLys | c-D- PzACAla | Val | ILys | Pro | D-Ala- nh2 |
| 83. | 26366 | N-Ac-D- 2-Nal | D- pClPhe | D-3-Pal | Ser | PicLys | c-D- PzACAla | Phe | ILys | Pro | D-Ala- nh2 |
| 84. | 26347 | N-Ac-D- 2-Nal | D- pClPhe | D-3-Pal | Ser | PicLys | c-D- PzACAla | Leu | Arg | Pro | D-Ala- NH, |
| 85. | 26348 | N-Ac-D- 2-Nal | D- pClPhe | D-3-Pal | Ser | PicLys | c-D- PzACAla | Leu | ILys | Pro | D-Ser- nh2 |
| 86. | 26383 | N-Ac-D- 2-Nal | D- pClPhe | D-3-Pal | Ser | PicLys | c-D- PzACAla | Leu | ILys | Pro | NHEt |
| 87. | 26323 | N-Ac-D- 2-Nal | D- pClPhe | D-3-Pal | Ser | PicLys | c-D- PmACA- la | Leu | ILys | Pro | D-Ala- nh2 |
(D-PicLys6-analógok)
| 88. | 26180 | N-Ac-D- 2-Nal | D- pCIPhe | D-3-Pal | Ser | c- PzACAla | D-PicLys | Leu | ILys | Pro | D-Ala- NH2 |
| 89. | 26381 | N-Ac-D- 2-Nal | D- pCIPhe | D-3-Pal | Ser | HOBLys | D-PicLys | Abu | ILys | Pro | D-Ala- NH2 |
| 90. | 26382 | N-Ac-D- 2-Nal | D pCIPhe | D-3-Pal | Ser | Cit | D-PicLys | Abu | ILys | Pro | D-Ala- nh2 |
| 91. | 26363 | N-Ac-D- 2-Nal | D- pClPhe | D-3-Pal | Ser | Tyr | D-PicLys | Leu | IOm | Pro | D-Ala- nh2 |
| NicLys5- | analógok | ||||||||||
| 92. | 25805 | N-Ac-D- 2-Nal | D pCIPhe | D-3-Pal | Ser | NicLys | r-D- PzACAla | Leu | ILys | Pro | D-Ala- nh2 |
| 93. | 25806 | N-Ac-D- 2-Nal | D- pClPhe | D-3-Pal | Ser | NicLys | c-D- PzACAla | Leu | ILys | Pro | D-Ala- nh2 |
| 94. | 26345 | N-Ac-D- 2-Nal | D- pClPhe | D-3-Pal | Ser | NicLys | D- NicLys | NMe | Leu | ILys | Pro |
| 95. | 25991 | N-Ac-D- 2-Nal | D- pClPhe | D-3-Pal | Ser | NicLys | D- PzcLys | Leu | IOm | Pro | D-Ala- nh2 |
| 5-ös és 6-os helyzetben különféleképpen helyettesített analógok | |||||||||||
| 96. | 25808 | N-Ac-D- 2-Nal | D- pClPhe | D-3-Pal | Ser | MPicLys | D-M- PicLys | Leu | ILys | Pro | D-Ala- nh2 |
| 97. | 26322 | N-Ac-D- 2-Nal | D- pClPhe | D-3-Pal | Ser | PmcLys | D- PmcLys | Leu | ILys | Pro | D-Ala- nh2 |
| 98. | 26326 | N-Ac-D- 2-Nal | D- pOPhe | D-3-Pal | Ser | o PzACAla | c-D- PzACAla | Leu | ILys | Pro | D-Ala- nh2 |
| 99. | 26417 | N-Ac-D- 2-Nal | D- pClPhe | D-3-Pal | Ser | c- PzACAla | D-3- PzAla | Leu | Arg | Pro | D-Ala- nh2 |
HU 211 882 A9
| Sorszám | IBR szám | Szekvencia | |||||||||
| 100. | 26418 | N-Ac-D- 2-Nal | D- pClPhe | D-3-Pal | Ser | Tyr | c-D-PzA- CAla | Leu | ILys | Pro | D-Ala- nh2 |
| 101. | 26365 | N-Ac-D- 2-Nal | D- pClPhe | D-3-Pal | Ser | Tyr | c-D-PzA- CAla | Leu | ILys | Pro | D- SerNH2 |
| 102. | N-Ac-D- 2-Nal | D- pClPhe | D-3-Pal | Ser | Arg | D-3-Pal | Leu | Arg | Pro | Sar-NH2 | |
| 103. | N-Ac-D- 2-Nal | D- pClPhe | D-3-Pal | Ser | PicLys | c-D-PzA- CAla | Leu | ILys | Pro | Sar-NH2 | |
| 104. | D-pGlu | D- pClPhe | D-Phe | Ser | Arg | D-3-Pal | Leu | Arg | Pro | D-Ala- nh2 | |
| 105. | N-Ac-D- 2-Nal | D- pClPhe | D-3-Pal | Ser | o PzACAla | D-PicLys | Val | ILys | Pro |
III. táblázat Biológiai adatok
| Sorszám | IBR szám | AOA/pg | Hólyagteriilet mm2/10 pg | In vitro hisztamin felszabadítás ED5o pg/ml ± SEM | ||
| 0,25 | 0.5 | 1.0 | ||||
| PicLy | s5-, D-PicLys6-analógok | |||||
| 58. | 26100 | - | 38 | - | 116,2±3,7 | |
| 59. | 25807 | - | 64 | 90 | 139,8+7.1 | |
| 60. | 26364 | 12 | - | - | 116,2+5.5 | |
| 61 | 26119 | - | 75 | - | 103,9+3.4 | |
| 62. | 26177 | 20 | - | 71,0±4.3 | ||
| 63. | 25934 | 43 | 90 | 100 | 97,9+2,9 | 213±30 |
| 64. | 26118 | - | 57 | - | 119,6±6,6 | |
| 65. | 25936 | 43 | 89 | - | 97,9±2,9 | >300 |
| 66. | 26178 | - | 82 | - | 78,6±4,5 | |
| 67. | 25990 | 36 | 100 | - | 91,0±5,4 | 273+27 |
| 68. | 26179 | - | 80 | - | 101,5±9,3 | |
| 69 | 25935 | - | 10 | - | 78.5+0 | |
| 70. | 25988 | 20 | 77 | - | 107.0±6.0 | |
| 71 | 25989 | 10 | 100 | - | 95.3±6.0 | |
| 72. | 26020 | 0 | - | - | 110,7±2,3 | |
| 73. | 26099 | - | 60 | - | 103,9±3,7 | |
| 74. | 26346 | 50 | 88 | - | 113,2±5,4 | |
| 75. | 25937 | - | 0 | 100 | 95,0±0 | |
| 76. | 26019 | - | 78 | - | 1O9,9±3,O | |
| 77. | 25933 | 50 | 90 | 100 | 113,0+0 | |
| PicLys5- analógok | ||||||
| 78. | 26349 | 0 | - | - | 84,6±3,9 | |
| 79. | 26324 | 22 | 100 | - | 127,8±4,9 | |
| 80. | 25897 | 73 | 100 | - | 122,8±5,7 | 28±7,5 |
| 81. | 26181 | 50 | 100 | - | 101,6+2,2 | |
| 82. | 26325 | 73 | 100 | - | 127,8±4,9 | |
| 83. | 26366 | . 0 | - | - | 116,2±3,2 | |
| 84. | 26347 | 14 | - | - | 119,6±6,6 |
HU 211 882 A9
| AOA/pg | Hölyagteriilet mm2/10 pg | In vitro hiszta- | ||||
| Sorszám | IBR szám | 0.25 | 0,5 | 1.0 | min felszabadítás ED50 pg/ml 1SEM | |
| PicLys5-analógok | ||||||
| 85. | 26348 | 22 | - | - | 122,815,7 | |
| 86. | 26383 | 25 | - | - | 119,616,6 | |
| 87. | 26323 | - | 9 | - | 120,414,7 | |
| D-PicLys6-analógok | ||||||
| 88. | 26180 | 67 | 90 | - | 99,5+4,5 | |
| 89. | 26381 | 11 | - | - | 95,115,0 | |
| 90 | 26382 | 11 | - | - | 89,5+5,5 | |
| 91. | 26383 | 0 | - | - | 113,2+5,5 | |
| NicLys5- analógok | ||||||
| 92. | 25805 | - | 67 | 88 | 129,6+8,8 | |
| 93. | 25806 | - | - | 25 | 101,7+5,0 | |
| 94. | 26345 | 10 | - | - | 110,5111,4 | |
| 95 | 25991 | 44 | - | 104.3+10.5 |
5-ös és 6-os helyzetben különféleképpen helyettesített analógok
| 96. | 25808 | - | 67 | 91 | 106,2+4,3 | |
| 97 | 26322 | 0 | - | - | 130,2+2,5 | |
| 98. | 26326 | 57 | 100 | - | 115,512,4 | |
| 99. | 26417 | 22 | - | - | 133,2+11 ,8 | |
| 100. | 26418 | 22 | - | - | 95,0+0 | |
| 101. | 26365 | 0 _ | Σ | - | 129.413.3 |
ÍV. táblázat jN-Ac-D-2-Nal}. D-pCiP)>e-.D-3-PaPX; Y^ILytffD-Ala'f-LHRH-analógok biológiai adatat
| Szám l·--- | Y | AOA %/pg | In vitro hiszatim felszabadítás EDj0 pg/ml±SEM | Csalánhólyag területe mm2/10pg | ||||
| 0,125 | 0.25 | 0.5 | 1.0 | |||||
| IV-1. | NicLys | transz-D- NACAla | - | - | - | 70 | 119,5+3,2 | |
| IV-2. | NicLys | cisz-D- NACAla | - | - | 50 | 100 | 37+1,1 | 101,814,3 |
| 1V-3. | PicLys | transz-D- PACAla | - | - | 50 | - | 64+5.4 | 101,0+3.0 |
| IV-4. | PicLys | cisz-D- PACAla | - | - | 54 | - | 41 ±5,4 | 123.015,0 |
| IV-5. | PicLys | transz-D- PzACAla | - | - | 44 | - | 39+4,4 | 106,314,3 |
| IV-6. | PicLys | cisz-D- PzACAla | 29 | 73 | 100 | - | 2817,5 | 122,815,7 |
| IV-7. | NicLys | transz-D- PzACAla | - | - | 67 | 88 | 129,6+8,8 | |
| IV-8. | NicLys | cisz-D- PzACAla | - | - | - | 25 | 101,7+5,0 | |
| IV-9. | cisz- PzACAla | D-PicLys | - | 67 | 90 | - | 99,5+4.5 |
HU 211 882 A9
V táblázat (N-Ac-D-2-Nal'.D-pClPhe^D-í-PaP.PicLys-.D-PicLyfi.X'1,ILyÁ,D-AlawJ-LHRH-analógok biológiai adatai
| Szám | X | AOA %/pg | In vitro hiszatim felszabadítás FD50 pg/ml+SEM | Csalánhólyag területe = mm2/10pg | ||
| 0,25 | 0,5 | 1.0 | ||||
| V-10,* | Leu | 40 | 100 | 90 | 93111 | 12310 |
| V-l 1 | Ile | 0 | - | - | 110,7+2,3 | |
| V-12. | Aile | 43 | 89 | - | >300 | 97,912,9 |
| V-l 3. | Nle | 20 | 77 | - | 107,016,0 | |
| V-14. | Val | 43 | 90 | 100 | 213130 | 97,912,9 |
| V-l 5. | NVal | 10 | 100 | - | 95,316,0 | |
| V-l 6. | Abu | 36 | 100 | - | 273+27 | 91,0+5,4 |
| V-l 7. | Ala | - | 60 | - | 103,9+3,7 | |
| V-18. | Trp | - | 10 | - | 78,5+0 |
* Az (1) irodalmi hivatkozásból
VI. táblázat
IN-Ac-O-2-Nal',D-pClPhe2,D-3-Pal-,PicLys\XfY\ZfD-Ala'°]-LHRH-analógok biológiai adatai
| Szám | X | Y | Z | AOA %/pg | In vitro hiszatim felszabadítás ED5o pg/mlíSEM | Csalánhólyag területe mm2/10 pg | ||
| 0.25 | 0.5 | 1,0 | ||||||
| VI-10 - | D-PicLys | Leu | ILys | 40 | 100 | 90 | 93+11 | 12310 |
| VI-19. | D-PicLys | Leu | IOm | 50 | 90 | 100 | 42+3.1 | 113.0+0 |
| VI-14. | D-PicLys | Val | ILys | 43 | 90 | 100 | 213130 | 97,9+2.9 |
| VI-20. | D-PicLys | Val | IOm | - | 57 | r - | 119,6+6,6 | |
| VI-12 | D-PicLys | Aile | ILys | 43 | 89 | >300 | 97,912,9 | |
| VI-21 | D-PicLys | Aile | IOm | - | 82 | 78,614,5 | ||
| VI-16. _ | D-PicLys | Abu | ILys | 36 | 100 | - | 273127 | 91,015,4 |
| VI-22. | D-PicLys | Abu | IOm | - | 80 | 101,5+9,3 | ||
| VI-6. | cisz-D- PzACAla | Leu | ILys | 73 | 100 | 2817,5 | 122,815,7 | |
| Vl-23. | cisz-D- PzACAla | Leu | IOm | 50 | 100 | - | 101,612,2 |
* az (I) irodalmi hivatkozásból
VII. táblázat
Antid és két analóg hatásának időtartama, szubkután* adagolás esetén
| Analóg | Injektálás időpontja | Dózis pg | 0. óra ng s.c. |D-3-Qal6]LHRH | +2 óra | |||
| LH ng/ml +SEM | p érték | FSH ng/ml +SEM | p érték | ||||
| - | - | - | - | 0,410,03 | <0.001 | 143110 | <0,001 |
| - | - | - | 50 | 113111 | - | 28991387 | - |
| Antid | —44 óra | 3 | 50 | 90+5 | NS | 2497+155 | NS |
| Antid | -44 óra | 10 | 50 | 46112 | <0,001 | 14131230 | <0,01 |
| Antid | -44 óra | 30 | 50 | 5+0,7 | <0.001 | 311+34 | <0,001 |
| VI1-24+ | -24 óra | 3 | 50 | 1914 | <0,001 | 719+123 | <0.001 |
HU 211 882 A9
| Analóg | Injektálás időpontja | Dózis gg | 0. óra ng s.c. [D-3-Qal6]LHRH | +2 óra | |||
| LH ng/ml +SEM | p érték | FSH ng/ml +SEM | p érték | ||||
| VI1-24* | -24 óra | 10 | 50 | 3+0,4 | <0,001 | 289+30 | <0,001 |
| VI1-24* | -24 óra | 30 | 50 | 0,3+0,03 | <0,001 | 147+10 | <0,001 |
| IV-6 (25897) | -24 óra | 1 | 50 | 91+19 | NS | 2020+295 | NS |
| IV—6 (25897) | -24 óra | 3 | 50 | 42+7 | <0,001 | 1298+275 | <0,01 |
| IV-6 (25897) | -24 óra | 10 | 50 | 15+3 | <0,001 | 624+84 | <0,001 |
| IV-6 (25897) | -24 óra | 30 | 50 | 3,4+2 | <0,001 | 273+89 | <0,001 |
* 6 mérés állaga ±SEM * [Tyr^-antid
VM. táblázat
Antid hatásának időtartama orális adagolás esetén és összehasonlítása az [N-Ac-D-pCIPhe'·2,D-Trp3,D-Arg6,D-Ala'°l-LHRH (25)* vegyülettel
| — | Beadagolás** időpontja óra | 0. óra | +2 óra | ||||
| Antagonista | Dózis gg | Agonista* Dózis (s.c.) ng | szérum LH ng/ml ±SEM | p érték | FSH ng/ml +SEM | p érték | |
| - | - | - | 3+1 | <0,001 | 298+20 | <0,001 | |
| - | - | 5 | 21+3 | - | 796+102 | - | |
| Antid | 38 | 100 | 5 | 4+0,8 | <0,001 | 481+27 | <0,02 |
| Antid | -48 | 300 | 5 | 8+2 | <0,01 | 600+72 | NS |
| Antid | -24 | 100 | 5 | 9±2 | <0,01 | 596+50 | NS |
| Antid | -24 | 300 | 5 | 6+0.3 | <0,001 | 462+54 | <0,02 |
| Antid | -2 | 10 | S | 19+4 | NS | 588+70 | NS |
| Antid | _2 | 30 | 5 | 6+1 | <0.001 | 573+67 | NS |
| Antid | _2 | 100 | 5 | 1+0.3 | <0.001 | 320+48 | <0,01 |
| Antid | _2 | 300 | 5 | 0.4+0,4 | <0,001 | 327+63 | <0,01 |
| - | - | - | - | 3+1 | <0,001 | 298+20 | <0,001 |
| - | - | - | 10 | 44=4 | - | 1488+168 | - |
| Antid | -48 | 100 | 10 | 18+2 | <0,001 | 792+110 | <0,01 |
| Antid | 38 | 300 | 10 | 25+3 | <0,01 | 1021+202 | NS |
| Antid | -24 | 100 | 10 | 24+6 | <0,02 | 1008+285 | NS |
| Antid | -24 | 100 | 10 | 25+3 | <0,01 | 1119+71 | NS |
| Amid | -2 | 10 | 10 | 51+8 | NS | 1729+243 | NS |
| Antid | -2 | 30 | 10 | 22+4 | <0,01 | 1051+141 | NS |
| Antid | -2 | 100 | 10 | 7+3 | <0,001 | 548+83 | <0,001 |
| Antid | -2 | 300 | 10 | 0,5+0,06 | <0,001 | 251+24 | <0,001 |
| VI11-25 | -2 | 10 | 10 | 59+11 | NS | 1794+329 | NS |
| VIII-25 | -2 | 30 | 10 | 39+6 | NS | 1470+190 | NS |
| VIII-25 | -2 | 100 | 10 | 26+7 | <0,05 | 1161+277 | NS |
* dr Dávid Coy bocsátotta rendelkezésre + [D-Qal6]-LHRH ++ vízben adagolva
HU 211 882 A9
IX. táblázat
Antid orális aktivitása különböző hordozóanyagokban
| Hordozóanyag | -2 óra Antagonista Dózis Mg (p.o.) | 0. óra Agonista Dózis ng (s.c.) | +2 óra | |||
| LH ng/nl ±SEM | p érték | FSH ng/ml ±SEM | p érték | |||
| víz | - | - | Ι,Ι+Ο,Ι | <0,001 | 243±35 | <0,001 |
| víz | - | 50 | 148±9 | - | 3041±238 | - |
| víz | 100 | 50 | 44±5 | <0,001 | 1372±84 | <0,001 |
| víz | 300 | 50 | 20+4 | <0,001 | 936±I5O | <0,001 |
| víz | 900* | 50 | 6,3±3 | <0,001 | 374±80 | <0,001 |
| kukoricaolaj | - | - | 0,8+0,6 | <0,001 | 138±6 | <0,001 |
| kukoricaolaj | - | 50 | 115±8 | - | 2935+133 | - |
| kukoricaolaj | 100 | 50 | 72+12 | <0,01 | 2148±234 | <0,02 |
| kukoricaolaj | 300 | 50 | 20±4 | <0,001 | 792±I37 | <0,001 |
| kukoncaolaj | 900 | 50 | 7±2 | <0,001 | 599±59 | <0,001 |
Kísérlet tervezése: -2 óra antagonista
Ü óra: [D-3-Qal6]-LHRH +2 óra: állatok (26 napos nőstény patkány) elpusztítása (6 mérés átlaga +SEM) •1:1 arányú hígítás 10 mmol/l HOAc/HvO eleggyel (enyhén opálos), 0.1 ml orálisan, további koncenlrációk vízzel hígítva
X. táblázat
Antid orális aktivitása ovulációgátlás-vizsgálatban*
| Dózis (p.o.) pg | AOA %-os gátlás (ovulált patkányok száma/összes vizsgált patkány száma) |
| - | 0 (6/6) |
| 300 | 18(9/11) |
| 600 | 73 (3/11) |
| 1200 | 100(0/11) |
* 10 mmol/l ecelsav/vfz =1:1 elegyben
XI. táblázat
Anttg és más analógok orális aktivitása
| Antagonista | -2 óra Dózis Mg <p o.) | 0. óra Agonista ng (s.c.) | +2 óra | |||
| LH ng/ml ±SEM | p érték | FSH ng/ml ±SEM | p érték | |||
| - | - | 3.4±2,2 | <0,001 | 271±56 | <0.001 | |
| - | 15 | 91 ±4,6 | - | 2491±146 | - | |
| Antid | 30 | 15 | 75±3 | <0.02 | 1718±223 | <0,02 |
| Antid | 100 | 15 | 20±4 | <0,001 | 738±89 | <0,001 |
| Antid | 300 | 15 | 5+1 | <0,001 | 472±26 | <0,001 |
| 4 | 30 | 15 | 79±9 | NS | 1831+249 | <0,05 |
| 4 | 100 | 15 | 76±6 | NS | 2175±211 | NS |
| 4 | 300 | 15 | 51±6 | <0,001 | 1404±117 | <0,001 |
| 12 | 30 | 15 | 71+9 | NS | 1965±256 | NS |
| 12 | 100 | 15 | 54±l0 | <0.01 | 1031±195 | <0,001 |
| 12 | 300 | 15 | 6+1.1 | <0,001 | 514±54 | <0,001 |
| 26* | 30 | 15 | 75±9 | NS | 2438±207 | NS |
| 26* | 100 | 15 | 19+3 | <0,001 | 845±149 | <0,001 |
HU 211 882 A9
| Antagonista | -2 óra Dózis Pg (po.) | 0. óra Agonista ng (s.c.) | +2 óra | |||
| LH ng/ml ±SEM | p érték | FSH ng/ml ±SEM | p érték | |||
| 26* | 300 | 15 | 6±1,4 | <0,001 | 431±22 | <0,001 |
| 6 | 30 | 15 | 77±12 | NS | 176I±191 | <0.01 |
| 6 | 100 | 15 | 59±12 | <0,05 | 1782±388 | NS |
| 6 | 300 | 15 | 6,3±1,4 | <0,001 | 467±43 | <0,001 |
| - | 50 | 115±15 | - | 2372±126 | - | |
| Antid | 30 | 50 | 93±75 | NS | 2262+55 | NS |
| Antid | 100 | 50 | 49±7 | <0,001 | 1345±199 | <0,001 |
| Antid | 300 | 50 | 19±3 | <0,001 | 630±40 | <0,001 |
| Antid | 900 | 50 | 5,3±1,2 | <0,001 | 450±48 | <0,001 |
Kísérlet tervezése: -2 óra: antagonista óra: [D-J-Qal6]-LHRH +2 óra: állatok (26 napos nőstény patkány) elpusztítása (6 mérés átlaga ±SEM) Hordozóanyag: 0.1 ml 10 mmol/1 HOAc/H2O=l:l •: [D-Ne-(pirazini l-karbonil )-li zil6] -amid
Xll. táblázat
Antid orális aktivitása az [N-Ac-D-2-Nal1 ,D-pClPhe2,D-3-Pal3,NicLys!,D-NicLyff,lLyss.D-Ata]0J-LHRH szupe ragonistával együtt vizsgálva különböző adagolási tervek és dózisok esetén
| Antagonista | Agonista* dózis (s. c.) 0 óra | LH ng/ml + SEM | p érték | FSH ng/ml ± SEM | p érték | |
| adagolás ideje óra | dózis (p.o.) | |||||
| - | - | - | 3±1 | <0,001 | 298±20 | <0,001 |
| - | - | 5 ng | 21±3 | - | 796±120 | - |
| -48 | 100 | 5 ng | 4±0,8 | <0,001 | 481±27 | <0,02 |
| —48 | 300 | 5 ng | 8+2 | <0,01 | 60O±72 | NS |
| -24 | 100 | 5 ng | 9±2 | <0,01 | 596±50 | NS |
| -24 | 300 | 5 ng | 6+0,3 | <0,001 | 462±54 | <0,02 |
| -2 | 10 | 5 ng | 19±4 | NS | 588±70 | NS |
| 2 | 30 | 5 ng | 6+1 | <0.001 | 573±67 | NS |
| -2 | 100 | 5 ng | 1+0,3 | <0,001 | 320±48 | <0,01 |
| - | 300 | 5 ng | 0,4±0,4 | <0,001 | 327±63 | <0,01 |
| - | - | 3±1 | <0,001 | 298±20 | <0,001 | |
| - | - | 10 ng | 44±4 | - | 1488+168 | - |
| ^48 | 100 | 10 ng | I8±2 | <0,001 | 792±110 | <0,01 |
| -48 | 300 | 10ng | 25±3 | <0,01 | 1021±202 | NS |
| -24 | 100 | 10 ng | 24±6 | <0,02 | 1008±285 | NS |
| -24 | 300 | 10 ng | 25±3 | <0,01 | 1119±71 | NS |
| -2 | 10 | 10 ng | 51+8 | NS | 1729±243 | NS |
| -2 | 30 | 10 ng | 22+4 | <0,01 | 105l±141 | NS |
| -2 | 100 | lOng | 7+3 | <0,001 | 548±83 | <0,001 |
| -2 | 300 | 10 ng | 0,5+0,06 | <0,001 | 25l±24 | <0,001 |
| -2 | 10** | 10ng | 59±11 | NS | 1794±329 | NS |
| -2 | 30 | 10 ng | 39+6 | NS | 1470±190 | NS |
| -2 | 100 | lOng | 26±7 | <0,05 | 1161±277 | NS |
* 24270 [D-3-Qal6]-LHRH ·· AHI95-3 [N-Ac-D-pClPheL2,D-Trp’,D-AlaIO]-LHRH (Dr. Dávid Coy) eredmények: 6 mérés átlaga ±SEM
HU 211 882 A9
Xlll. táblázat
Antid hatása diszpergált hipofízis-sejttenyészet vizsgálatban
| Peptid | Dózis nM | LHRH nM | RLH ng/ml 1SEM | p érték | IDR5o | FSH ng/ml +SEM | p érték | IDR50 |
| kontroll | - | - | 1010,4 | - | 196+23 | - | ||
| LHRH | - | 0,1 | 40+7 | <0,05 | 221118 | NS | ||
| - | 0,3 | 80+1 | <0,001 | 562+48 | -0,02 | |||
| - | 1,0 | 118+ | NA | 8021 | NA | |||
| - | 3,0 | 150+1 | <0,001 | - | 6461123 | NS | - | |
| - | 10,0 | 14114 | <0,001 | 602126 | <0,01 | |||
| - | 30,0 | 152+7 | <0,01 | 557115 | <0,01 | |||
| 139-95-20 | 0,01 | 3,0 | 118111 | NS* | 0,26:1 | 546193 | NS* | 0,52:1 |
| 0.03 | 3,0 | 117±10 | NS | 499+26 | NS | |||
| 0,1 | 3,0 | 11617 | <0,05 | 472159 | NS | |||
| 0,3 | 3,0 | I07+11 | NS | 617173 | NS | |||
| 1.0 | 3,0 | 8012 | <0,001 | 481+17 | NS | |||
| 3,0 | 3,0 | 3412 | <0,001 | 233+38 | NS | |||
| 10.0 | 3,0 | 11+1 | <0,001 | 165+21 | NS |
• p értékek 3 nM LHRH-val szemben; 139-95-20: [N-Ac-D-2-Nal'.D-pCIPhe2 D-3-Pal3.NicLys5,D-NicLys6.ILys8.D-Alal0]-LHRH
XIV. táblázat
LHRH-analógok, amelyek AOA értéke 0,25 pg-ban legalább 50%
| IBR szám | Szekvencia | AOA % 0.25 pg | Hólyagterület | ed50 |
| 25897 | N-Ac-D-2-Nal-DpClPhe-D-3-Pal-Ser-PicLys-c-D- PzACAIa-Leu-lLys-Pro-D-Ala-NHi | 73 | 122,8+5,7 | 28+7 |
| 26325 | N-Ac-D-2-Nal-DpClPhe-D-3-Pal-Ser-PicLys-c-D- PzACAla-Val-lLys-Pro-D-Ala-NH2 | 73 | 127.8+4,9 | |
| 26180 | N-Ac-D-2-Nal-DpCIPhe-D-3-Pal-Ser-c-D-PzACAla- D-PicLys-Leu-ILys-Pro-D-Ala-NHi | 67 | 99.514,5 | |
| 26326 | N-Ac-D-2-Nal-DpCIPhe-D-3-Pal-Ser-c-D-PzACAIa- c-D-PzACAla-Leu-lLys-Pro-D-Ala-NH2 | 57 | 115,5+2,4 | |
| 26381 | N-Ac-D-2-Nal-DpClPhe-D-3-Pal-Ser-PicLys-c-D- PzACAIa-Leu-10m-Pro-D-Ala-NH2 | 50 | 101,612,2 | |
| *25933 | N-Ac-D-2-Nal-DpClPhe-D-3-Pal-Ser-PicLys-D- PicLys-Leu-IOrn-Pro-D-Ala-NH2 | 50 | 113.010 | |
| 26346 | N-Ac-D-2-Nal-DpCIPhe-D-3-Pal-Ser-PicLys-D- Pidys-Abu-Arg-Pro-D-Ala-NH2 | 50 | 113,2+5,4 |
* eredetileg igényelve
Claims (14)
- SZABADALMI IGÉNYPONTOK1. Jelentős ovulációgátló aktivitással és elhanyagolható hisztamin-felszabadító aktivitással rendelkező LHRH-antagonista dekapeptidek, amelyek jellemzője, hogy (a) arinin és annak származékai nincsenek felhasználva. (bl az 5-ös és/vagy 6-os helyzetben lévő lizin ε-amino-csoportján acilcsoportot tartalmazó származékká van alakítva és (c) 8-as helyzetben alkilezett lizint vagy ornitint tartalmaznak.
- 2. Az 1. igénypont szerinti LHRH-antagonista, amelyben a dekapcptid a [O'-D-pClPhe^D-S-Pal360Ser4-()5-()6-Leu7-()8-Pro9-D-Alal0]-NH2 szekvencián alapul.
- 3. A 2. igénypont szerinti LHRH-antagonista, amely az [N-Ac-D-2-Nall,NicLys5,D-NicLys6,ILys8]NH2 vagy az [N-Ac-D-2-Nal’,PicLys5,DPicLys6,lLys8]-NHj.
- 4. A 2. igénypont szerinti LHRH-antagonista, amelynek további jellemzője, hogy az alábbi csoportból választjuk:[N-Ac-D-2-Nall,Tyr5,D-NicLys6,ILys8]-NH2; [N-Ac-D-2-Nal'.Tyr5,D-NicLys6,Me2Lys8]-NH2; [N-Ac-D-2-Nal1 .Tyr5,D-NicLys6,IOm8]-NH2;HU 211 882 A9 [N-Ac-D-2-Nal1 ,Dpo5,D-NicLys6,ILys8]-NH2; [N-Ac-D-2-Nal1 ,ILy s’,D-NicLys6,ILys8]-NH2; [N-Ac-D-2-Nall,3-Pal5,D-NicLys6,ILys8]-NH2; [N-Ac-D-2-Nal1,3-Pal5,D-NicLys6,IOrn8]-NH2; [N-Ac-D-2-Nall,Ile5,D-NicLys6,ILys8]-NH2; [N-Ac-D-2-Nal1 ,ne5,D-NicLys6,IOrn8]-NH2; [N-Ac-D-2-Nall,NicOm5,D-NicLys6,IOrn8]-NH2; [N-Ac-D-2-Nal',DMGlys5,D-NicLys6,ILys8]-NH2; [N-Ac-D-2-Nal1 ,PicLys5,D-NicLys6,ILys8]-NH2; [N-Ac-D-2-pClPhl,Tyr\D-NicLys6,ILys8]-NH2; [N-Ac-D-Cl2Phe',Tyr5,D-NicLys6,ILys8]-NH2; [N-Ac-D-2-Nal1 ,NicLys5,D-Dpo6,ILys8]-NH2; [N-Ac-D-2-Nal’,NicLys5,D-BzLys6,ILys8]-NH2; [N-Ac-D-2-Nal1,NicLys5,D-PicLys6,ILys8]-NH2; [N-Ac-D-2-Nal1 ,NicLyss,D-AnGlu6,ILy s8]-NH2; [N-Ac-D-2-Nal1 ,NicLys5,transz-D-NAC Ala6,ILy s8]-NH2; [N-Ac-D-2-Naí1 ,NicLys5,cisz-D-NACAla6,ILy s8]NH2, [N-Ac-D-2-Nal1,NicLys5,D-Me2Lys6,ILys8]-NH2;[N-Ac-D-2-Nal',NicLys5,D-PzcLys6,ILys8]-NH2;[N-Ac-D-2-Nal1,NicLys5,D-NicLys6.Dpo8]-NH2;[N-Ac-D-2-Nall,NicLys5,D-NicLys6,CypLys8]-NH2;[N-Ac-D-2-Nall,NicLys5,NicLys6,ILys8]-NH2;[N-Ac-D-2-Nal',INicLys5,D-INicLys6,ILys8]-NH2;[N-Ac-D-2-Nall,INicLys5,D-INicLys6,ILys8]-NH2;[N-Ac-D-2-Nal1,MNicLys5,D-MNicLys6,ILys8]-NH2;[N-Ac-D-2-Nall,DMGLys5,D-BzLys6,ILys8]-NH2; és [N-Ac-D-2-Nall,PzcLys5,D-PzcLys6,ILys8]-NH2.
- 5. Jelentős antiovulációs aktivitással és elhanyagolható hisztamin-felszabadító aktivitással rendelkező LHRH-antagonista dekapeptid, amelyet az alábbi csoportból választunk:[N-Ac-D-CUPhe1-D-pClPhe2-D-3-Pal3-Ser4-PicLys5D-PicLys6-Leu'-ILys8-Pro9-D-Ala'°]-NH2;[N-Ac-D-2-Nal1-D-Cl2Phe2-D-3-Pal3-Ser4-PicLys5-DPicLys6-Leu7-ILys8-Pro9-D-Ala,0]-NH2;[N-Ac-D-2-Nal,-D-3-Pal2-D-pClPhe’-Ser4-PicLys5-DPicLys6-Leu7-IOrn8-Pro9-D-Alal0]-NH2;[N-Ac-D-2-Nall-D-pClPhe2-D-3-PzAla3-Ser4-PicLys5D-PicLys6-Leu7-lOrn8-Pro9-D-Alal0]-NH2;[N-Ac-D-2-Nall-D-pClPhe2-D-Trp3-Ser4-PicLys5-DPicLys6-Leu7-ILys8-Pro9-D-Ala10]-NH2;[N-Ac-D-2-Nal1 -D-pClPhe2-D-3-Pal1-Ser4-PicLys5-DPicLys6-Val7-ILys8-Pro9-D-Alal0]-NH2;[N-Ac-D-2-Nal'-D-pCIPhe2-D-3-Pal’-Ser4-PicLys5-DPicLys6-Val7-IOrn8-Pro9-D-Alal0]-NH2;[N-Ac-D-2-Nall-D-pCIPhe2-D-3-Pal3-Ser4-PicLys5-DPicLys6-Aile7-ILys8-Pro9-D-A1a,<)]-NH2;[N-Ac-D-2-Nal'-D-pClPhe2-D-3-Pal3-Ser4-PicLys5-DPicLys6-Aile7-IOrn8-Pro9-D-Alal0]-NH2;[N-Ac-D-2-Nall-D-pCIPhe2-D-3-PaF-Ser4-PicLys5-DPicLys6-Abu7-ILys8-Pro9-D-Alal0]-NH2;[N-Ac-D-2-Nal'-D-pCIPhe2-D-3-Pal3-Ser4-PicLys5-DPicLys6-Abu7-IOrn8-Pro9-D-Ala10]-NH2;[N-Ac-D-2-Nal'-D-pClPhe2-D-3-Pal3-Ser4-PicLys5-DPicLys6-Trp7-ILys8-Pro9-D-Ala10]-NH2;[NAc-D-2Nal1-D-pClPhe2-D-3-Pal,-Ser4-PicLys5-DPicLys6-Nle7-ILys8-Pro9-D-Ala10J-NH2;[N-Ac-D-2-Nal1 -D-pCI Phe2-D- 3-Pal3-Ser4-PicLyss-DPicLys6-Nval7-ILys8-Pro9-D-Alal0]-NH2;[N-Ac-D-2-Nal'-D-pClPhe2-D-3-Pal3-Ser4-PicLys5-DPicLys6-Ile7-ILys8-Pro9-D-Alal0]-NH2;[N-Ac-D^-Nal'-D-pClPhe^D-S-PaU-Seri-PicLys^DPicLys6-Ala7-ILys8-Pro9-D-Alal0]-NH2;[N-Ac-D-2-Nall-D-pClPhe2-D-3-Pal3-Sei4-PicLys5-DPicLys6-Leu7-ILys8-Pip9-D-Alal0]-NH2;[N-Ac-D-2-Nal1 -D-pClPhe2-D-3-Pal ’-Seri-PicLy s5-DPicLys6-Leu7-ILys8-Pro9-D-Abu,0]-NH2;[N-Ac-D-2-Nal'-D-pClPhe2-D-3-Pal3-Ser4-PicLys5-DPicLys6-Leu7-IOm8-Pro9-D-Alal0]-NH2;[N-Ac-D-2-Nal'-D-pClPhe2-D-TinGly3-Ser4-PicLys5c-D-PzACAla6-Leu7-ILys8-Pro9-D-Alal0]-NH2;[N-Ac-D-2-Nal1 -D-pClPhe2-D-3-PzAla3-Ser4-PicLy s5 c-D-PzACAla6-Leu7-ILys8-Pro9-D-Alal0]-NH2;[N-Ac-D-2-Nal'-D-pClPhe2-D-3-Pal3-SeiA-PicLys5-cD-PzACAla6-Leu7-ILys8-Pro9-D-Alal0]-NH2;[N-Ac-D-2-Nall-D-pClPhe2-D-3-Pal3-Ser4-PicLys5-cD-PzACAla6-Leu7-IOm8-Pro9-D-Ala’°]-NH2;[N-Ac-D-2-Nal1-D-pClPhe2-D-3-Pal3-Ser4-PicLys5-cD-PzACAla6-Val7-ILys8-Pro9-D-AIa10]-NH2;[N-Ac-D-2-Nal‘-D-pClPhe2-D-3-Pal3-Ser4-PicLys5-cD-PzACAla6-Phe7-ILys8-Pro9-D-AIa,0]-NH2;[N-Ac-D-2-Nal'-D-pClPhe2-D-3-Pal3-Ser4-PicLys5-cD-PzACAla6-Leu7-ILys8-Pro9-D-Serl0]-NH2;[N-Ac-D-2-Nal‘-D-pClPhe2-D-3-Pal3-Ser4-PicLys’-cD-PzACAIa6-Leu7-ILys8-Pro9-NHet10];[N-Ac-D-2-Nall-D-pClPhe2-D-3-Pal3-Ser4-PicLys5-cD-PmACAla6-Leu7-ILys8-Pro9-D-Ala'°]-NH2;[N-Ac-D-2-Nal'-D-pClPhe2-D-3-Pal3-Ser4-c-PzACAla5-D-PicLys6-Leu7-ILys8-Pro9-D-Ala,0]-NH2;[N-Ac-D-2-Nal1-D-pClPhe2-D-3-Pal3-Ser4-HOBLys5D-PicLys6-Abu7-ILys8-Pro9-D-Alal0]-NH2;[N-Ac-D-2-Nal'-D-pClPhe2-D-3-Pal3-Ser4-Cit5-DPicLys6-Abu7-lLys8-Pro9-D-Alal0]-NH2;[N-Ac-D-2-Nal'-D-pClPhe2-D-3-Pal3-Ser4-Tyr,-DPicLys6-Leu7-lOm8-Pro9-D-Ala,0]-NH2;[N-Ac-D-2-Nal'-D-pClPhe2-D-3-Pal3-Ser4-NicLys5-íD-PzACAla6-Leu7-ILys8-Pro9-D-Alal0]-NH2;[N-Ac-D-2-Nall-D-pCIPhe2-D-3-Pal3-Ser4-NicLys5-cD-PzACAla6-Leu7-ILys8-Pro9-D-Ala,0]-NH2;[N-Ac-D-2-Nall-D-pClPhe2-D-3-Pal3-Ser4-NicLys5D-NicLys6-NMeLeu7-ILys8-Pro9-D-Ala10]-NH2;[N-Ac-D-2-Nal1 -D-pClPhe^D-S-PaP-Seri-NicLys5D-PzcLys6-Leu7-IOrn8-Pro9-D-Alal0]-NH2;[N-Ac-D-2-Nall-D-pClPhe2-D-3-Pal3-Ser4-MPicLys50-ΜΡίοΕν56-υ6υ7-^58-ΡΓθ9-Ρ-Αΐ3ιθ]-ΝΗ2;[N-Ac-D-2-Nall-D-pClPhe2-D-3-Pal3-Sei4-PmcLys5D-PmcLys6-Leu7-ILys8-Pro9-D-Ala10]-NH2;[N-Ac-D-2-Nal'-D-pClPhe2-D-3-Pal3-Ser4-c-PzACAla5-c-D-PzACAIa6-Leu7-ILys8-Pro9-D-Alal()]-NH2;[N-Ac-D-2-Nal'-D-pClPhe2-D-3-Pal3-Ser4-Tyr5-c-DPzACAla6-Leu7-ILys8-Pro9-D-Ala'°]-NH2;[N-Ac-D-2-Nal1 -D-pClPhe’-D-S-Pal’-Seri-Tyr’-cPzACAla6-Leu7-ILys8-Pro9-D-Ser,0]-NH2;[N-Ac-D-2-Nall-D-pClPhe2-D-3-Pal3-Ser4-PicLys5-cD-PzACAla6-Leu7-ILys8-Pro9-Sarl0]-NH2;[N-Ac-D-2-Nal'-D-pClPhe2-D-3-Pal3-Ser4-c-PzACAla5-D-PicLys6-Val7-ILys8-Pro9-D-Alal0]-NH2;[N-Ac-D-2-Nal‘-D-pClPhe2-D-3-Pal3-Ser4-PicLys5-tD-PACAIa6-Leu7-ILys8-Pro9-D-Ala10]-NH2;HU 211 882 A9 [N-Ac-D-2-Nall-D-pClPhe2-D-3-Pal1-Ser4-PicLys5-cD-PACAla6-Leu7-ILys8-Pro9-D-Alal0]-NH2; és [N-Ac-D-2-Nal‘-D-pClPhe2-D-3-PaP-Ser4-PicLys5-rD-PzACAIa6-Leu7-ILys8-Pro9-D-Alal0]-NH2.
- 6. Az előző igénypontok bármelyike szerinti deka- 5 peptidek, amelyek ovulációgátlő aktivitása közelítőleg legalább 90% 1 gg dózisban Humphries és munkatársai [J. Med. Chem. 21, 210-123 (1978)] módszere szerint meghatározva.
- 7. Az előző igénypontok bármelyike szerinti dekapeptidek, amelyek közelítőleg legalább 86 gg/ml ED50 értéknek megfelelő hisztamin-felszabadítással rendelkeznek. Karten és munkatársai [LHRH and its Analogs: Contraceptive and Therapeutic Applications Part 2, 179-190 (1987)] módszere szerint meghatározva.
- 8. Az 1-5. igénypontok bármelyike szerinti dekapeptidek, gyógyászati és/vagy állatgyógyászati alkalmazásra.
- 9 Az 1-5. igénypontok bármelyike szerinti deka10 peptidek alkalmazása gyógyszerek előállítására, ovuláció gátlására állatokban.
- 10. Az 1-5. igénypontok bármelyike szerinti dekapeptidek alkalmazása gyógyszerek előállítására, a pubertás fellépésének gátlására állatokban.
- 11. Az 1-5. igénypontok bármelyike szerinti dekapeptidek alkalmazása gyógyszerek előállítására, a szexuális ösztön gátlására állatokban.
- 12. Az 1-5. igénypontok bármelyike szerinti dekapeptidek alkalmazása gyógyszerek előállítására, a gonád funkció megváltoztatására állatokban.
- 13. Az 1-5. igénypontok bármelyike szerinti dekapeptidek alkalmazása gyógyszerek előállítására, hormon dependens tumorok növekedésének gátlására állatokban.
- 14. Az 1-5. igénypontok bármelyike szerinti dekapeptidek alkalmazása gyógyszerek előállítására, az LH és FSH szintek csökkentésére a klimaxon túljutott nők szérumában.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US07/088,431 US4935491A (en) | 1987-08-24 | 1987-08-24 | Effective antagonists of the luteinizing hormone releasing hormone which release negligible histamine |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| HU211882A9 true HU211882A9 (en) | 1995-12-28 |
Family
ID=22211329
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| HU885868A HU213098B (en) | 1987-08-24 | 1988-08-24 | Process for producing decapeptides antagonistic to hormone for releazing lutheinizing-hormone and pharmaceutical compositions containing them as active components |
| HU95P/P00574P HU211882A9 (en) | 1987-08-24 | 1995-06-29 | Effective antagonists of the luteinizing hormone releasing hormone which release negligible histamine |
Family Applications Before (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| HU885868A HU213098B (en) | 1987-08-24 | 1988-08-24 | Process for producing decapeptides antagonistic to hormone for releazing lutheinizing-hormone and pharmaceutical compositions containing them as active components |
Country Status (14)
| Country | Link |
|---|---|
| US (3) | US4935491A (hu) |
| EP (1) | EP0377665B1 (hu) |
| JP (1) | JP2621970B2 (hu) |
| KR (1) | KR0135276B1 (hu) |
| AT (1) | ATE124957T1 (hu) |
| AU (1) | AU619221B2 (hu) |
| DE (1) | DE3854159T2 (hu) |
| DK (1) | DK173753B1 (hu) |
| FI (1) | FI102074B1 (hu) |
| HU (2) | HU213098B (hu) |
| MX (1) | MX9203688A (hu) |
| NO (1) | NO301015B1 (hu) |
| OA (1) | OA09786A (hu) |
| WO (1) | WO1989001944A1 (hu) |
Families Citing this family (38)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5110904A (en) * | 1989-08-07 | 1992-05-05 | Abbott Laboratories | Lhrh analogs |
| IL87055A (en) * | 1988-07-08 | 1994-06-24 | Illana Gozes | Conjugates of vasoactive intestinal peptide (vip) and of fragments thereof and pharmaceutical compositions comprising them |
| US5171835A (en) * | 1988-10-21 | 1992-12-15 | The Administrators Of The Tulane Educational Fund | LHRH antagonists |
| US5447912A (en) * | 1989-09-18 | 1995-09-05 | Senetek, Plc | Erection-inducing methods and compositions |
| US5352796A (en) * | 1989-10-30 | 1994-10-04 | The Salk Institute For Biological Studies | Amino acids useful in making GnRH analogs |
| US5169932A (en) * | 1989-10-30 | 1992-12-08 | The Salk Institute For Biological Studies | Gnrh analogs |
| US5296468A (en) * | 1989-10-30 | 1994-03-22 | The Salk Institute For Biological Studies | GnRH analogs |
| US5212288A (en) * | 1990-02-20 | 1993-05-18 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Temporary minimal protection synthesis of serine-containing polypeptides |
| US5180711A (en) * | 1990-06-14 | 1993-01-19 | Applied Research Systems Ars Holding N.V. | Combined treatment with gnrh antagonist and gnrh to control gonadotropin levels in mammals |
| US5169935A (en) * | 1990-06-20 | 1992-12-08 | The Salk Institute For Biological Studies | Method of making peptides |
| US5744450A (en) * | 1991-03-14 | 1998-04-28 | The Salk Institute For Biological Studies | GnRH analogs |
| US5516887A (en) * | 1991-04-25 | 1996-05-14 | Romano Deghenghi | Luteinizing hormone releasing hormone antagonist peptides |
| DE4117507A1 (de) * | 1991-05-24 | 1992-11-26 | Schering Ag | Verfahren zur herstellung von n(pfeil hoch)6(pfeil hoch)-substituierten lysin-derivaten |
| US5480969A (en) * | 1992-09-15 | 1996-01-02 | The Administrators Of The Tulane Educational Fund | Antagonists of LHRH |
| US5656727A (en) * | 1992-09-15 | 1997-08-12 | The Administrators Of The Tulane Educational Fund | Antagonists of LHRH |
| CA2163225A1 (en) * | 1993-05-20 | 1994-12-08 | Gregory John Russell-Jones | Lhrh antagonists |
| US5843901A (en) | 1995-06-07 | 1998-12-01 | Advanced Research & Technology Institute | LHRH antagonist peptides |
| US6043218A (en) | 1996-10-22 | 2000-03-28 | Medical University Of South Carolina | Positively charged non-natural amino acids, methods of making thereof, and use thereof in peptides |
| US6566330B1 (en) | 1996-10-22 | 2003-05-20 | Medical University Of South Carolina Foundation Research Development | Positively charged non-natural amino acids, methods of making and using thereof in peptides |
| US5968895A (en) | 1996-12-11 | 1999-10-19 | Praecis Pharmaceuticals, Inc. | Pharmaceutical formulations for sustained drug delivery |
| US5821230A (en) * | 1997-04-11 | 1998-10-13 | Ferring Bv | GnRH antagonist decapeptides |
| US5925730A (en) | 1997-04-11 | 1999-07-20 | Ferring Bv | GnRH antagonists |
| EP0880969A1 (en) * | 1997-05-28 | 1998-12-02 | Applied Research Systems ARS Holdings N.V. | Pharmaceutical compositions of peptides having low solubility in physiological medium |
| EP0882736A1 (en) * | 1997-06-02 | 1998-12-09 | Laboratoire Theramex S.A. | LH-RH peptide analogues, their uses and pharmaceutical compositions containing them |
| US6217844B1 (en) | 1998-04-27 | 2001-04-17 | Praecis Pharmaceuticals, Inc. | Methods for detecting lesions in dense breast tissue using LHRH antagonists |
| ATE399567T1 (de) | 1998-04-28 | 2008-07-15 | Serono Lab | Peg konjugate von lhrh analogen |
| US7953788B2 (en) | 2001-09-29 | 2011-05-31 | Siebel Systems, Inc. | System and method for queuing data for an application server |
| US6455499B1 (en) | 1999-02-23 | 2002-09-24 | Indiana University Foundation | Methods for treating disorders associated with LHRH activity |
| US7109171B2 (en) * | 2000-02-28 | 2006-09-19 | Praecis Pharmaceuticals Inc. | Methods for treating FSH related conditions with GnRH antagonists |
| US6598784B2 (en) * | 2000-12-20 | 2003-07-29 | Meadwestvaco Packaging Syatens, Llc | Beverage carton with strap type carrying handle |
| ES2290095T3 (es) * | 2000-12-27 | 2008-02-16 | Ares Trading S.A. | Microparticulas lipidicas por micronizacion criogenica. |
| JP2002201168A (ja) * | 2000-12-28 | 2002-07-16 | Kaken Pharmaceut Co Ltd | シクロヘキサン誘導体 |
| WO2002056903A2 (en) * | 2001-01-17 | 2002-07-25 | Praecis Pharmaceuticals Inc. | Methods for treating hormone associated conditions using a combination of lhrh antagonists and specific estrogen receptor modulators |
| FR2840532B1 (fr) * | 2002-06-11 | 2005-05-06 | Ethypharm Sa | Nanocapsules lipidiques furtives, procede de preparation et utilisation comme vecteur de principes(s) actif(s) |
| GB0320806D0 (en) | 2003-09-05 | 2003-10-08 | Astrazeneca Ab | Therapeutic treatment |
| CA2552241C (en) | 2003-12-30 | 2013-10-01 | Durect Corporation | Co-polymeric devices for controlled release of active agents |
| US8329863B2 (en) * | 2004-07-16 | 2012-12-11 | Oakwood Laboratories, Llc | Gonadotropin releasing hormone antagonists |
| WO2006080256A1 (ja) * | 2005-01-26 | 2006-08-03 | Sumitomo Seika Chemicals Co., Ltd. | １－（６－メチルピリジン－３－イル）－２－［４－（メチルスルホニル）フェニル］エタノンの製造方法および製造中間体 |
Family Cites Families (22)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4431635A (en) * | 1979-06-13 | 1984-02-14 | Coy David Howard | LH-RH Antagonists |
| AU9102582A (en) * | 1981-12-10 | 1983-06-16 | David Howard Coy | Lh-rh antagonists |
| FI832053L (fi) * | 1982-06-10 | 1983-12-11 | Syntex Inc | Nonapeptid- och dekapeptidanaloger av lhrh anvaendbara som lhrh-antagonister samt deras framstaellningsfoerfarande |
| US4444759A (en) * | 1982-07-26 | 1984-04-24 | The Salk Institute For Biological Studies | GnRH Antagonists II |
| US4504414A (en) * | 1983-03-28 | 1985-03-12 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Synthetic pyridyl-alanyl decapeptides having antiovulatory activity |
| US4530920A (en) * | 1983-11-07 | 1985-07-23 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Nonapeptide and decapeptide analogs of LHRH, useful as LHRH agonist |
| US4547370A (en) * | 1983-11-29 | 1985-10-15 | The Salk Institute For Biological Studies | GnRH Antagonists |
| US4845077A (en) * | 1984-04-03 | 1989-07-04 | Serono Laboratories, Inc. | Method of inducing ovulation |
| IL74827A (en) * | 1984-05-21 | 1989-06-30 | Salk Inst For Biological Studi | Peptides active as gnrh antagonists and pharmaceutical compositions containing them |
| US4652550A (en) * | 1984-05-21 | 1987-03-24 | The Salk Institute For Biological Studies | GnRH antagonists VII |
| US4647653A (en) * | 1984-08-23 | 1987-03-03 | Tulane Educational Fund | Therapeutic peptides |
| US4565804A (en) * | 1984-09-07 | 1986-01-21 | The Salk Institute For Biological Studies | GnRH Antagonists VI |
| ZA862570B (en) * | 1985-04-09 | 1986-12-30 | Univ Tulane | Therapeutic decapeptides |
| EP0199302A2 (en) * | 1985-04-19 | 1986-10-29 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Contraception in dogs with luteinizing hormone releasing hormone antagonists |
| EP0225746A3 (en) * | 1985-11-14 | 1989-12-20 | The Administrators of The Tulane Educational Fund | Therapeutic decapeptides |
| US4801577A (en) * | 1987-02-05 | 1989-01-31 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Nonapeptide and decapeptide analogs of LHRH useful as LHRH antagonists |
| US4851385A (en) * | 1987-07-15 | 1989-07-25 | Indiana University Foundation | LHRH antagonist analogs having low histamine-release activity |
| US5140009A (en) * | 1988-02-10 | 1992-08-18 | Tap Pharmaceuticals, Inc. | Octapeptide LHRH antagonists |
| EP0328090A3 (en) * | 1988-02-10 | 1990-08-16 | Abbott Laboratories | Lhrh analogs |
| US5300492A (en) * | 1988-02-10 | 1994-04-05 | Tap Pharmaceuticals | LHRH analogs |
| US5180711A (en) * | 1990-06-14 | 1993-01-19 | Applied Research Systems Ars Holding N.V. | Combined treatment with gnrh antagonist and gnrh to control gonadotropin levels in mammals |
| US5413990A (en) * | 1993-08-06 | 1995-05-09 | Tap Pharmaceuticals Inc. | N-terminus modified analogs of LHRH |
-
1987
- 1987-08-24 US US07/088,431 patent/US4935491A/en not_active Expired - Lifetime
-
1988
- 1988-08-24 JP JP63507982A patent/JP2621970B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1988-08-24 HU HU885868A patent/HU213098B/hu unknown
- 1988-08-24 KR KR1019890700699A patent/KR0135276B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1988-08-24 AT AT88908786T patent/ATE124957T1/de not_active IP Right Cessation
- 1988-08-24 MX MX9203688A patent/MX9203688A/es unknown
- 1988-08-24 DE DE3854159T patent/DE3854159T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1988-08-24 WO PCT/US1988/002922 patent/WO1989001944A1/en active IP Right Grant
- 1988-08-24 AU AU25294/88A patent/AU619221B2/en not_active Expired
- 1988-08-24 EP EP88908786A patent/EP0377665B1/en not_active Expired - Lifetime
-
1989
- 1989-06-26 US US07/371,552 patent/US5470947A/en not_active Expired - Lifetime
-
1990
- 1990-02-23 DK DK199000486A patent/DK173753B1/da not_active IP Right Cessation
- 1990-02-23 FI FI900947A patent/FI102074B1/fi not_active IP Right Cessation
- 1990-02-23 NO NO900888A patent/NO301015B1/no not_active IP Right Cessation
- 1990-02-26 OA OA59743A patent/OA09786A/en unknown
-
1995
- 1995-06-06 US US08/466,333 patent/US5763404A/en not_active Expired - Lifetime
- 1995-06-29 HU HU95P/P00574P patent/HU211882A9/hu unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| HU213098B (en) | 1997-02-28 |
| JPH03501969A (ja) | 1991-05-09 |
| FI900947A0 (fi) | 1990-02-23 |
| WO1989001944A1 (en) | 1989-03-09 |
| US5763404A (en) | 1998-06-09 |
| HU885868D0 (en) | 1991-12-30 |
| MX9203688A (es) | 1992-09-01 |
| DE3854159T2 (de) | 1996-02-15 |
| NO900888L (no) | 1990-04-23 |
| JP2621970B2 (ja) | 1997-06-18 |
| KR890701117A (ko) | 1989-12-19 |
| DK48690A (da) | 1990-04-19 |
| ATE124957T1 (de) | 1995-07-15 |
| NO900888D0 (no) | 1990-02-23 |
| EP0377665B1 (en) | 1995-07-12 |
| DK173753B1 (da) | 2001-09-10 |
| DE3854159D1 (de) | 1995-08-17 |
| OA09786A (en) | 1994-04-15 |
| EP0377665A1 (en) | 1990-07-18 |
| DK48690D0 (da) | 1990-02-23 |
| AU2529488A (en) | 1989-03-31 |
| NO301015B1 (no) | 1997-09-01 |
| US5470947A (en) | 1995-11-28 |
| AU619221B2 (en) | 1992-01-23 |
| KR0135276B1 (ko) | 1998-04-23 |
| HUT59940A (en) | 1992-07-28 |
| US4935491A (en) | 1990-06-19 |
| FI102074B (fi) | 1998-10-15 |
| FI102074B1 (fi) | 1998-10-15 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US5470947A (en) | CHRH antagonists with low histamine release | |
| JP3645255B1 (ja) | ５位および６位で修飾されているＧｎＲＨ拮抗物質 | |
| US4801577A (en) | Nonapeptide and decapeptide analogs of LHRH useful as LHRH antagonists | |
| US4667014A (en) | Nonapeptide and decapeptide analogs of LHRH, useful as LHRH antagonists | |
| JP2944669B2 (ja) | ペプチド、その製造法、該ペプチドを含有する、ｌｈｒｈ拮抗剤 | |
| US4481190A (en) | Nonapeptide and decapeptide analogs of LHRH useful as LHRH antagonists | |
| EP0097031B1 (en) | Nonapeptide and decapeptide analogs of lhrh useful as lhrh antagonists, their preparation and compositions containing them | |
| US3992365A (en) | Agonist analogues of luteinizing hormone releasing hormone | |
| JP4191259B2 (ja) | ＧｎＲＨ拮抗物質 | |
| US4690916A (en) | Nona and decapeptide analogs of LHRH useful as LHRH antagonists | |
| HU217552B (hu) | GnRH-antagonista peptidek | |
| US4075191A (en) | Biologically active amides | |
| US4581169A (en) | Nona-peptide and deca-peptide analogs of LHRH, useful as LHRH antagonists | |
| US4083967A (en) | Nona- and decapeptides | |
| CA1339659C (en) | Effective antagonists of the luteinizing hormone releasing hormone which release negligible histamine | |
| HU210066A9 (hu) | ) Elhanyagolható hisztamin-felszabadulást kiváltó, luteinizáló hormont felszabadító hormon antagonisták Az átmeneti oltalom az 1-6. igénypontra vonatkozik. |