NO300848B1

NO300848B1 - Nye 2-substituerte indan-2-mercaptoacetylamidderivater som er anvendbare som inhibitorer av enkefalinase og ACE

Info

Publication number: NO300848B1
Application number: NO923744A
Authority: NO
Inventors: Alan M Warshawsky; Gary Alan Flynn
Original assignee: Merrell Dow Pharma
Priority date: 1991-09-27
Filing date: 1992-09-25
Publication date: 1997-08-04
Also published as: GR3024850T3; ATE155143T1; AU2524592A; HU214820B; JPH05294963A; ES2106112T3; CA2078758C; NZ244461A; HU9203074D0; IL103263A0; FI924311A; US5486513A; US5529996A; CA2078758A1; KR100271239B1; DE69220744T2; NO923744L; DK0534363T3; JP3173675B2; EP0534363A2

Description

Enkefalinase eller nærmere bestemt endopeptidase-

24,11, er et pattedyr-ectoenzym som er involvert i den metabolske nedbrytning av visse sirkulerende regulerende peptider.

+2

Dette enzym, som er en Zn -metallopeptidase, utøver sm :.ef fekt ved spaltning av de ekstracellulære peptider ved aminogruppen av hydrofobe rester, og inaktiverer således peptidene som regulerende budbringere.

Enkefalinase er involvert i den metabolske nedbrytning av et utall av sirkulerende regulerende peptider innbefattende endorfiner, slik som 3-endorfin, og enkefalinene, atrialt natriuretisk peptid (ANP) og andre sirkulerende regulerende peptider.

Endorfiner er naturlig forekommende polypeptider som binder tcfLl opiate reseptorer i forskjellige områder av hjernen,

og tilveiebringer derved en analgesisk effekt ved å heve smerte-terskelen. Endorfiner forekommer i forskjellige former innbefattende a-endorfin, 8-endorfin, y-endorfin så vel som enkefalinene. Enkefalinene, dvs. Met-enkefalin og Leu-enkefalin,

er pentapeptider som forekommmer i nerveender av hjernevev, ryggmarg og den gastrointestinale traktus. Som andre endor-

finer tilveiebringer enkefalinene en analgesisk effekt ved binding til de opiate reseptorer i hjernen. Ved inhibering av enkefalinase inhiberes den metabolske nedbrytning av de naturlig forekommende endorfiner og enkefaliner, og tilveiebringer derved en kraftig endorfin- eller enkefalin-formidlet analgesisk effekt. Inhibering av enkefalinase vil derfor være anvendbar på en pasient som lider av akutt eller kronisk smerte. Inhibering av enkefalinase vil også være anvendbar hva gjelder å tilveiebringe en antidepressiv effekt og tilveiebringe en reduksjon i strengheten av avvenningssymptomer assosiert med avslutning av opiat- eller morfinadministrering.

ANP viser til en familie av naturlig forekommende peptider som er involvert i den homeostatiske regulering av blodtrykk, så vel som natrium-og vann-nivåer. ANP er blitt funnet å variere i lengde fra ca. 21 til ca. 126 aminosyrer,

hvor et felles strukturelt trekk er én eller flere disulfid-slyngede sekvenser på 17 aminosyrer med forskjellige amino- og carboxy-terminale sekvenser bundet til cystingruppen. ANP er

blitt funnet å.bindes til spesikke bindingsseter i forskjellige vev innbefattende nyre, binyre, aorta og vaskulære glattmuskler med affiniteter varierende fra ca. 50 pico-molar (pM) til ca. 500 nanomolar (nM) I^Needleman, Hypertension 7, 469 (1985) 3 .

I tillegg er det antatt at ANP binder til spesifikke reseptorer i hjernen og muligens tjener som en neuromodulator så vel som konvensjonelle perifere hormoner.

De biologiske egenskaper av ANP innbefatter kraftige diuretiske/natriuretiske og vasodilaterende/hypotensive effekter, så vel som en inhiberende effekt på renin- og aldosteronsekresjon [deBold, Science 230, 767 (1985)3. Ved inhibering av enkefalinase inhiberes den metabolske nedbrytning av de naturlig forekommende ANP . og tilveiebringer derved en kraftig ANP-formidlet diuretisk, natriuretisk, hypotensiv, og hypoaldosteronemisk effekt. Inhibering av enkefalinase vil derfor, være anvendbar i en pasient som lider av sykdomstilstander karakterisert ved unormaliteter i væske, elektrolytt, blodtrykk, intraokulart trykk, renin eller aldosteron-

homeostase, slik som hypertensjon, nyresykdommer, hyperaldosteronemia, hjertehypertrofi, glaucom og kongestiv hjertesvikt.

I tillegg er forbindelsene ifølge oppfinnelsen inhibitorer av angiotensin-omdannende enzym (ACE). ACE er en peptidyl-dipeptidase som katalyserer omdannelsen av angiotensin I til angiotensin II. Angiotensin II er en vasokonstriktor som også stimulerer aldosteronsekresjon av binyre-cortex. Inhibering av ACE vil derfor være anvendbar i en pasient som lider av sykdomstilstander slik som hypertensjon og kongestiv hjertesvikt [se William W. Douglas, "Polypeptides - Angiotensin, Plasma Kinins, and Others", kapittel 27, i GOODMAN AND

GILLMANS<1>S THE PHARMACOLOGICAL BASIS OF THERAPEUTICS, 7. utg.

1985, s. 652-653, MacMillan Publishing C., New York, New York]. I tillegg er det blitt funnet at ACE-inhibitorer er anvendbare ved:.behandling av erkjennelsessykdommer (tysk patentsøknad nr. 3901-291-A, publisert 3. august 1989).

i

Foreliggende oppfinnelse angår nye forbindelser, hvilke forbindelser er kjennetegnet ved at de har formelen

hvori

A er en binding, methylen, oxygen, svovel, NR4 eller NCOR5

hvori R4 er hydrogen og R5 er -CF3;

R± er hydrogen, acetyl, -CH2OC(0)C(CH3)3 eller benzoyl;

R3 er hydrogen eller -CH2OC(0)C(CH3)3;

n er et helt tall fra 0 til 3; og

Q er en gruppe av formelen

hvori Z er 0, NH eller S; og m er et helt tall fra 1 til 5.

Foreliggende oppfinnelse angår også et farmasøytisk preparat omfattende en effektiv inhiberende mengde av en forbindelse av formel (I) i blanding eller på annen måte i assosiasjon med én eller flere farmasøytisk akseptable bærere eller eksipienser.

Forbindelsene av formel I hvori A er en binding, methylen, oxygen, svovel eller NH, kan fremstilles ved anvendelse av prosedyrer og teknikker vel kjent innen faget. Et generelt synteseskjema for fremstilling av disse forbindelser er angitt i Reaksjonsskjema A, hvori alle substituenter med mindre annet er angitt, er som tidligere definert.

A' = en binding, -CH2-, 0, S eller NH.

Forbindelsene av formel I hvori A er en binding, methylen, oxygen, svovel eller NH, kan fremstilles ved omsetning av den egnede beskyttede.thiol/carboxylsyreforbindelse av struktur 2 med den egnede aminoforbindelse av struktur 1. Eksempelvis kan den egnede aminoforbindelse av struktur 1 omsettes med den egnede beskyttede thiol/carboxylsyre-forbindelse av struktur 2 i nærvær av et koblingsreagens slik som EDC (l-ethoxycarbonyl-2-ethoxy-l,2-dihydrokinolin), DCC (1,3-dicyklohexylcarbodiimid),celler diethylcyanofosfonat

i et egnet aprotisk løsningsmiddel slik som methylenklorid, under dannelse av den egnede tricykliske forbindelse av struktur 3.

Alternativt kan den beskyttede thiol/carboxylsyre-forbindelse av struktur 2 omdannes til det tilsvarende syreklorid, etterfulgt av omsetning med den egnede aminoforbindelse av struktur 1, under dannelse av den egnede forbindelse av formel I.

Valget og anvendelsen av egnede thiol-beskyttende;. grupper, slik som t-butyl og 4-methoxybenzyl, er vel kjent for fagmannen, som er beskrevet i "Protective Groups in Organic Syntheses", Theodora W. Greene, Wiley (1981).

Som angitt i tabell 1, kan R^- og R-^-gruppene på forbindelsene av formel I manipuleres under anvendelse av teknikkérirog prosedyrer vel kjent innen faget, under dannelse av de tilsvarende forbindelser av struktur 4-8.

Eksempelvis kan både difenylmethylesterfunksjonali-teten og den thiol-beskyttende gruppe av den egnede forbindelse av struktur 3 fjernes under dannelse av den egnede carboxylsyre/thiolforbindelse av struktur 4.

Eksempelvis bringes den egnede tricykliske forbindelse av struktur 3 i kontakt med -en molarekvivalent kvikk-sølvacetat. Reaktantene bringes typisk i kontakt i et egnet surt løsningsmiddel slik som trifluoreddiksyre. Reaktantene omrøres typisk sammen ved romtemperatur i et tidsrom varierende fra 1-24 timer. Kvikksølv gjenvinnes fra reaksjonsblandingen ved tilsetning av overskudd av hydrogensulfid. Carboxylsyre/ thiolforbindelsen av struktur 4 gjenvinnes fra reaksjonssonen ved ekstraktive metoder vel kjent innen faget. Den kan renses ved silicagelkromatografi.

Thiolfunksjonaliteten av den egnede ..carboxylsyre/ thiolforbindelse av struktur 4 kan alkyleres under dannelse av carboxylsyre/pivaloyloxymethylthioacetalforbindelsen av struktur 5.

Eksempelvis kan en carboxylsyre/pivaloyloxymethylthioacetalforbindelse av struktur 5 fremstilles ved behandling av den egnede carboxylsyre/thiolforbindelse av struktur 4 med klormethylpivalat i et egnet aprotisk løsningsmiddel slik som dimethylformamid, sammen med en ikke-nueleofil base slik som cesiumcarbonat.

Thiolfunksjonaliteten av den egnede carboxylsyre/ thiolforbindelse av struktur 4 kan acylerés under dannelse av carboxylsyre/thioacetat eller thiobenzoatforbindelsen av struktur 6.

Eksempelvis kan den egnede carboxylsyre/thiolforbindelse av struktur 4 bringes i kontakt med en molarekvivalent-av et egnet acyleringsmiddel slik som eddiksyreanhydrid og en katalytisk mengde av en syre slik som svovelsyre. Reaktantene omrøres typisk sammen i et tidsrom varierende fra 10 minutter til 10 timer. Carboxylsyre/thioacetatforbindelsen av struktur 6 kan gjenvinnes fra reaksjonssonen ved fordampning av løs-ningsmidlet. Den kan renses ved silicagelkromatografi.

Alternativt kan den egnede carboxylsyre/thiolforbindelse av struktur 4 bringes i kontakt med en molarekvivalent'<1 >av et egnet acylerende middel slik som benzoylklorid og en molarekvivalent av en base slik som pyridin. Reaktantene omrøres typisk sammen i et tidsrom varierende fra 10 minutter til 10 timer. Carboxylsyre/thiobenzoatforbindelsen av struktur 6 kan gjenvinnes-fra reaksjonssonen ved fordampning av løs-ningsmidlet. Den kan renses ved silicagelkromatografi.

Carboxylsyrefunksjonaliteten av den egnede carboxylsyre/thioacetat- :eller thiobenzoatforbindelse av struktur 6 kan omdannes til det tilsvarende pivaloyloxymethylester/ thioacetat eller benzoat av struktur 7 under anvendelse av teknikker og prosedyrer vel kjent innen faget..

Eksempelvis kan en pivaloyloxymethylester/thioacetat-eller benzoatforbindelse av struktur 7 fremstilles ved behandling av carboxylsyre/thioacetat- eller thiobenzoatforbindelsen av struktur 6 med en molarekvivalent klormethylpivalat i et egnet aprotisk løsningsmiddel slik som dimethylformamid, sammen med en ikke-nucleofil base slik som cesiumcarbonat.

Thioacetat- eller thiobenzoatfunksjonaliteten av den egnede pivaloyloxymethylester/thioacetat- eller benzoatforbindelse av struktur 7 kan hydrolyseres til de tilsvarende pivaloyloxymethylester/thiolforbindelser av struktur 8 med ammoniakk i et egnet protisk løsningsmiddel slik som methanol.

Den egnede carboxylsyre/thiolforbindelse av struktur 4 kan omdannes til den tilsvarende pivaloyloxymethylester/ pivaloyloxymethylthioacetalforbindelse av struktur 9.

Eksempelvis kan en pivaloyloxymethylester/pivaloyloxymethylthioacetalforbindelse av struktur 9 fremstilles ved behandling av carboxylsyre/thiolforbindelsen av struktur 4 med 2 molar ekvivalenter av klormethylpivalat i et egnet aprotisk løsningsmiddel slik som dimethylformamid, sammen med en ikke-nucleof il base slik som cesiumcarbonat.

Forbindelsene av formel I hvori A er -NR^, kan fremstilles ved teknikker og prosedyrer vel kjent innen faget. En generell synteseprosedyre for fremstilling av disse forbindelser er angitt i Reaksjonsskjema B. I Reaksjonsskjema B er alle substituenter, med mindre annet er angitt, som tidligere definert.

Reaksjonsskjema B tilveiebringer en generell synteseprosedyre for fremstilling av forbindelsene av formel I hvori A er -NR4« Aminofunksjonaliteten av den egnede aminoforbindelse av struktur 10 underkastes reduktiv alkylering med det egnede aldehyd av struktur 11 under anvendelse av natrium-cyanoborhydrid, som er vel kjent innen faget, under dannelse av den tilsvarende N-alkylaminoforbindelse av struktur 12.

ogl R3-gruppene på forbindelsene av formel I hvori A er -NR^, kan manipuleres som beskrevet tidligere i Reaksjonsskjema A og Tabell 1.

Forbindelsene av formel I hvori A er -NCORj-, kan fremstilles ved teknikker og prosedyrer vel kjent innen faget. En generell synteseprosedyre for fremstilling av disse forbindelser er angitt i Reaksjonsskjema C. I Reaksjonsskjema C i alle substituenter med mindre annet er angitt, som tidligere definert.

Reaksjonsskjema C tilveiebringer en generell

synteseprosedyre for fremstilling av forbindelsene av formel I hvori A er -NCOR^. Den egnede aminoforbindelse av struktur 10 acyleres under anvendelse av det egnede acylklorid av struktur 13 eller det egnede anhydrid av struktur 14, som vel kjent

innen faget, under dannelse av den tilsvarende N-acylamino-forbindelse av struktur 15.

Gruppene R1 og R 3 kan manipuleres ved teknikker og prosedyrer vel kjent innen faget, og som beskrevet tidligere i Reaksjonsskjema A og vist i Tabell 1.

Utgangsmaterialer for anvendelse i Reaksjonsskjema A - C er lett tilgjengelige for fagmannen. Eksempelvis er visse tricykliske aminoforbindelser av struktur 1 hvori X er S, beskrevet i Europa-patent 0 249 223 (16. desember 1987) og visse andre tricykliske aminoforbindelser av struktur 1 hvori A er methylen, kan fremstilles som beskrevet i Europa-patentsøknad til Flynn og Beight, søknadsnummer 34533AEP

(11. juni 1987) .

Tricykliske aminoforbindelser av struktur 1 hvori A er 0, kan fremstilles som beskrevet i Reaksjonsskjema D. I Reaksjonsskjema D er alle substituenter med mindre annet er angitt, som tidligere definert.

Reaksjonsskjema D tilveiebringer en generell synteseprosedyre for fremstilling av aminoforbindelser av struktur 1 hvori A er 0.

I trinn a omdannes det egnede;fthalimid-blokkerte (S)-fenylalaninderivat av struktur 16 til det tilsvarende syreklorid, omsettes deretter med den egnede L-serinmethylester av struktur 17 under dannelse av den tilsvarende l-oxo-3-fenyl-propyl-L-serinmethylester av struktur 18.

Eksempelvis kan det egnede fthalimid-blokkerte (S)-fenylalaninderivat av struktur 16 omsettes med oxalylklorid i et egnet aprotisk løsningsmiddel slik som methylenklorid.

Det resulterende syreklorid kan deretter kobles med den egnede L-serinmethylester av struktur 17 under anvendelse av N-methylmorfolin i et egnet aprotisk løsningsmiddel slik som dimethylformamid, under dannelse av den egnede l-oxo-3-fenylpropyl-L-serinmethylester av struktur 18.

I trinn b allyleres hydroxyfunksjonaliteten av den egnede l-oxo-3-fenylpropyl-L-serinmethylester av struktur 18 med allylimidatet av struktur 19 under dannelse av den tilsvarende l-oxo-3-fenylpropyl-L-serin-O-allylmethylester av struktur 20.

Eksempelvis bringes den egnede l-oxo-3-fenylpropyl-1-serinmethylester av struktur 18 i kontakt med 2 molar-ekvivalenter av allylimidatet av struktur 19, og en molarekvivalent av en egnet syre slik som trifluormethansulfonsyre. Reaktantene bringes typisk i kontakt i en egnet organisk løs-ningsmiddelblanding slik som methylenklorid/cyklohexan. Reaktantene omrøres typisk sammen ved romtemperatur under en inert atmosfære i et tidsrom varierende fra 2-24 timer. l-oxo-3-fenylpropyl-L-serin-O-allylmethylesteren av struktur 20 gjenvinnes fra reaksjonssonen ved ekstraktive metoder vel kjent innen faget. Den kan renses ved silicagelkromatografi eller krystallisering.

I trinn c cykliseres den egnede l-oxo-3-fenylpropyl-L-serin-O-allylmethylester av struktur 20 under dannelse av det tilsvarende (4S)-enamin av struktur 21.

Eksempelvis bringes den egnede l-oxo-3-fenylpropyl-L-serin-O-allylmethylester av struktur 2 0 først i kontakt med et molart overskudd av en blanding av ozon/oxygen. Reaktantene bringes typisk i kontakt i en egnet organisk løsningsmiddel-blanding slik som methylenklorid/methanol. Reaktantene omrøres typisk sammen i et tidsrom varierende .fra 5 minutter til 30 minutter eller inntil en blå farge vedvarer, og ved et tempera-turområde fra -78° C til -40° C. Reaksjonen stanses med et overskudd av methylsulfid, og aldehyd-mellomproduktforbindelsen gjenvinnes fra reaksjonssonen ved ekstraktive metoder som er kjent innen faget.

Aldehyd-mellomproduktforbindelsen bringes deretter i kontakt med trifluoreddiksyre i et egnet aprotisk lsøningsmid-del,slik som methylenklorid, under dannelse av det tilsvarende (4S)-enamin av struktur 21.

I trinn d cykliseres det egnede (4S)-enamin av struktur 21 under dannelse av den tilsvarende (4S)-tricykliske forbindelse av struktur 22 ved en syrekatalysert Friedel-Crafts-reaksjon. Eksempelvis kan det egnede (4S)-enamin av struktur 21 omdannes til den tilsvarende (4S)-tricykliske forbindelse av struktur 22 ved behandling med en blanding av trifluormethansulfonsyre og trifluoreddiksyreanhydrid i et egnet aprotisk løsningsmiddel slik som..methylenklorid.

I trinn d kan det være nødvendig å re-forestre carboxyfunksjonaliteten på grunn av betingelsene for opp-arbeidelsen. Eksempelvis kan behandling av det urene produkt med bromdifenylmethan i et egnet aprotisk løsningsmiddel slik som dimethylformamid, sammen med en ikke-n&cleofil base slik som cesiumcarbonat anvendes for å gi den tilsvarende (S)-difenylmethylester.

I trinn e fjernes den fthalimid-beskyttende gruppe

av den egnede (4S)-tricykliske forbindelse av struktur 22

under dannelse av den tilsvarende aminoforbindelse av struktur 23 hvori X er 0. Eksempelvis kan den f.thalimid-beskyttende gruppe av den egnede (4S)-tricykliske forbindelse av struktur 22 fjernes under anvendelse av hydrazinmonohydrat i et egnet protisk løsningsmiddel slik som methanol, under dannelse av den tilsvarende (4S)-tricykliske aminoforbindelse av struktur 23.

Tricykliske aminoforbindelser av struktur 1 hvori A

er NH, kan fremstilles som beskrevet i Reaksjonsskjema E. I Reaksjonsskjema E er alle substituenter med mindre annet er angitt, som tidligere definert.

Reaksjonsskjema E tilveiebringer en alternativ generell synteseprosedyre for fremstilling av aminoforbindelser av struktur 1 hvori A er NH.

I trinn a omdannes det egnede fthalimid-blokkerte (S)-fenylalaninderivat av struktur 16 til det tilsvarende syreklorid, omsettes deretter med den egnede 3-trifluoracetyl-åmino-3-allyl-L-2-aminopropionsyre-methylester av struktur 24, under dannelse av den tilsvarende l-oxo-3-fenylpropyl-N-trifluoracetyl-N-allyl-L-aminosyre-methylester av struktur 25 som beskrevet tidligere i Reaksjonsskjema D, trinn a.

I trinn b cykliseres den egnede l-oxo-3-fenylpropyl-N-trifluoracetyl-N-allyl-L-aminosyremethylester av struktur 25 under dannelse av det tilsvarende enamin av struktur 26 som beskrevet i Reaksjonsskjema D, trinn c.

I trinn c cykliseres det egnedé (4S)-enamin av struktur 26 under dannelse av den tilsvarende (4S)-tricykliske forbindelse av struktur 2 7 som beskrevet tidligere i Réåksjonsskje-ma D, trinn d.

I trinn d fjernes den fthalimid-beskyttende gruppe av den egnede (4S)-tricykliske forbindelse av struktur 27 under dannelse av den tilsvarende (4S)-aminoforbindélse av struktur 28 hvori X er NH som beskrevet i Reaksjonsskjema D, trinn e.

Tricykliske aminoforbindelser av struktur 1 hvori A er methylen, kan fremstilles som beskrevet i Reaksjonsskjema F. I Reaksjonsskjema F er alle substituenter med mindre annet er angitt, som tidligere definert.

Reaksjonsskjema F tilveiebringer en generell synteseprosedyre for fremstilling av de tricykliske aminoforbindelser av struktur 1 hvori A er methylen.

I trinn a kan det egnede fthalimid-blokkerte (S)-fenylalaninderivat av struktur 16 omdannes til det tilsvarende syreklorid, omsettes deretter med den egnede aminosyremethylester av struktur 29 i en koblingsreaksjon. Eksempelvis kan det ;egnede fthalimid-blokkerte (S)-fenylalaninderivat av struktur 16 omsettes med oxalylklorid i et egnet aprotisk løsnings-middel slik som methylenklorid. Det resulterende syreklorid kan deretter kobles med den egnede aminosyremethylester av struktur 29 under anvendelse av N-methylmorfolin i et egnet aprotisk løsningsmiddel slik som dimethylformamid, under dannelse av det egnede l-oxo-3-fenylpropyl-aminosyremethylester-derivat av struktur 30.

I trinn b kan hydroxymethylen-funksjonaliteten av det egnede l-oxo-3-fenylpropyl-aminosyremethylesterderivat av struktur 30 oxyderes til det egnede aldehyd av struktur 31 ved oxy-dasjonteknikker vel kjent innen faget. Eksempelvis kan hydroxy-methylenfunksjonaliteten av det egnede l-oxo-3-fenylpropyl-amino-syremethylesterderivat av struktur 30 oxyderes til det egnede aldehyd av struktur 31 ved hjelp av en Swern-oxydasjon under anvendelse av oxalylklorid og dimethylsulfoxyd i et egnet aprotisk løsningsmiddel slik som methylenklorid.

I trinn c kan det egnede aldehyd av struktur 31 cykliseres til det egnede enamin av struktur 32 ved syre-katalyse. Eksempelvis kan det egnede aldehyd av struktur 31 cykliseres til det egnede enamin av struktur 32 ved behandling med trifluoreddiksyre i et egnet aprotisk løsningsmiddel slik som methylenklorid.

I trinn d kan det egnede enamin av struktur 32 omdannes til den tilsvarende tricykliske forbindelse av struktur 33 ved en syrekatalysert Friedel-Crafts-reaksjon. Eksempelvis kan det egnede enamin av struktur 32 omdannes til den tilsvarende tricykliske forbindelse av struktur 33 ved behandling med en blanding av trifluormethansulfonsyre og trifluoreddiksyreanhydrid i et egnet aprotisk løsningsmiddel slik som methylenklorid.

I trinn d kan det være nødvendig å re-forestre carboxyfunksjonaliteten på grunn av betingelsene ved oppar-beidelsen. Eksempelvis kan behandling av det urene produkt med bromdifenylmethan i et egnet aprotisk løsningsmiddel slik som dimethylformamid, sammen med en ikke-nucleofil base, slik som cesiumcarbonat, anvendes for å gi den tilsvarende difenylmethylester.

I trinn e kan den fthalimid-beskyttende gruppe av

den egnede tricykliske forbindelse av struktur 33 fjernes under.anvendelse av teknikker og prosedyrer vel kjent innen faget. Eksempelvis kan den fthalimid-beskyttende gruppe av den egnede tricykliske forbindelse av struktur 33 fjernes under anvendelse av hydrazinmonohydrat i et egnet protisk løsningsmiddel slik som methanol, under dannelse av den tilsvarende aminoforbindelse av struktur 34.

Forbindelsene av formel I hvori A er en binding, kan fremstilles ved anvendelse av prosedyrer og teknikker vel kjent innen faget. Et generelt synteseskjema for fremstilling av disse forbindelser er angitt i Reaksjonsskjema G, hvori alle substituenter med mindre annet er angitt, er som tidligere

35 definert.

Reaksjonsskjema G tilveiebringer en generell synteseprosedyre for fremstilling av forbindelser av formel I hvori A er en binding.

I trinn a kan N-(fenylmethylen)glycinmethylesteren av struktur 35 behandles med én ekvivalent av en ikke-nucleofil base slik som lithiumdiisopropylamid, i et egnet aprotisk løsningsmiddel slik som tetrahydrofuran, etterfulgt av tilsetning av et 4-halobuten av struktur 36, under dannelse av 2-(3-butenyl)-N-(fenylmethylen)glycinmethylester av struktur 37.

I trinn b kan N-(fenylmethylen)-funksjonaliteten av 2-(3-butenyl)-N-(fenylmethylen)glycinmethylester av struktur 37 hydrolyseres under sure betingelser, slik som med saltsyre i et egnet aprotisk løsningsmiddel slik som ethylether, under dannelse av 2-(3-butenyl)-glycinmethylester av struktur 38.

I trinn c kan den egnede amidforbindelse av struktur 38 fremstilles ved omsetning av den egnede fthalimid-beskyttede (S)-fenylalaninforbindelse av struktur 16 med 2-(3-butenyl)-glycinmethylester av struktur 39 under koblingsreaksjons-betingelser, slik som med EEDQ, i et egnet aprotisk løsningsmiddel slik som methylenklorid.

I trinn d kan olefinfunksjonaliteten av den egnede amidforbindelse av struktur 39 omdannes til den egnede aldehydforbindelse av struktur 40 under betingelser for oxydativ spaltning, slik som behandling med ozon i en egnet løsningsmiddelblanding slik som methylenklorid og methanol.

Forbindelsene av formel I hvori A er en binding,

kan fremstilles fra et egnet aldehyd av struktur 40 i en fremgangsmåte som angitt tidligere i Reaksjonsskjema F, trinn c-e og Reaksjonsskjema A.

De individuelle 3(S)- og 3(R)-estere av forbindelsene av formel I hvori A er en binding, R^ er t-butyl og R^

er methyl, kan fremstilles fra et egnet aldehyd av struktur 40 i en fremgangsmåte som vist tidligere i Reaksjonsskjema F, trinn c, separering av 3(S)- og 3(R)-esterne av enaminfor-bindelsene dannet fra cykliseringsreaksjonen beskrevet i Reaksjonsskjema F, trinn c, og fullførelse av fremgangsmåten som vist i Reaksjonsskjema F, trinn d-e og Reaksjonsskjema A.

Gruppene R^ og R^ kan manipuleres ved teknikker og prosedyrer vel kjent innen faget, og som beskrevet tidligere

i Reaksjonsskjema A og Tabell 1.

Utgangsmaterialer for anvendelse i de generelle synteseprosedyrer vist i-Reaks jonsskjemaer D og G er lett tilgjengelige for fagmannen. Eksempelvis er N et-(benzyloxycarbonyl)-B-(amino)-L-alanin beskrevet i J. Am.Chem. Soc, 107 (24) . 7105

(1985), t-butylklormethylsulfid er beskrevet i J.Am, Chem.-Soc. 77. 572 (1955), . og..allyltrikloracetimidat er beskrevet i J.Chem.Soc. Perkin Trans. 1.(11), 2247 (1985). 3 ,4-(dicarboethoxy) thiofen er beskrevet i Bull. Chem. Soc. Jpn., 41, 2532 (1968), N- (fenylmethylen)— glycinmethylester er beskrevet % J.Org.Chem. 4_1, 3491 (1976), og 3v4-(dicarboethoxy)pyrrol er beskrevet i Tetrahedron Lett. 3165 0.97]).

De etterfølgende eksempler viser typiske synteser som beskrevet i Reaksjonsskjema A-G. Som anvendt her, har følgende uttrykk de angitte betydninger: "g" angir gram; "mmol" angir millimol; "ml" angir milliliter; "kp" angir kokepunkt; "°C" angir grader Celsius; "mmHg" angir millimeter kvikksølv; "yl" angir mikroliter; "ug" angir mikrogram; og "um" angir mikromolar.

Eksempel 1

f4S- f4a, 7a( R*) r 12bBl 1- 7- T ( 2- t:hio- 2- oxoindan) methvlamino1-1, 2, 3, 4, 6, 7, 8, 12b- octahvdro- 6- oxopyrido f 2, 1-a 1 [ 21 benzazepin'.- 4— carboxyIsyre;

Reaksjonsskjema F, trinn a; ( S)- N-[ 2-( l, 3- dihydro- l, 3- dioxo-2H- isoindol- 2- yl)- l- oxo- 3- fenylpropyl]- 6- hydroxy-( S)- norleucin-methylester

Bland 1,82 kg (12,3 mol) fthalsyreanhydrid, 1,84 kg (11,1 mol) (S)-fenylalanin og 2,26 liter vannfritt dimethylformamid. Omrør ved 115 - 12 0° C i 2 timer under en nitrogenatmosfære. Hell over i 32,6 liter hurtig omrørt vann og avkjøl over natten til 0° C. Filtrer, vask med 2x2 liter kaldt

vann og lufttørk. Oppløs i en blanding av 8,05 liter 9A ethanol og 8,05 liter vann og oppvarm til tilbakeløpstemperaturen. Fallfiltrer, avkjøl til omgivende temperatur og avkjøl over

natten til ca. 0° C. Filtrer det krystalliserte produkt,

vask med 2x2 liter kald 50:50 9A ethanol/vann og lufttørk under dannelse av 2,96 kg (90,3 %) N-fthaloyl-(S)-fenylalanin; sm.p.: 177 - 179° C.

Bland 50,2 g (0,17 mol) N-fthaloyl-(S)-fenylalanin, 660 ml methylenklorid og 0,5 ml dimethylformamid under en nitrogenatmosfære. Tilsett 17,7 ml (0,2 mol) oxalylklorid i løpet av ca. 5 minutter under omrøring. Omrør ved omgivende temperatur i 3 timer og fordamp løsningsmidlet i vakuum under dannelse av N-fthaloyl-(S)-fenylalanin-syreklorid som et fast materiale (54,3 g, 101,9 %).

Bland 33,5 g (0,1 mol) 6-hydroxy-(S)-norleucin-methylester-hydrokloridsalt og 201 ml dimethylformamid, avkjøl til ca. 0° C og anbring under nitrogenatmosfære. Tilsett dråpevis:51 ml (0,46 mol) N-methylmorfolin under avkjøling slik at kartemperaturen forblir ved 0 - 5° C. Omrør ved 0 - 5° C i ytterligere 10 minutter, tilsett deretter en løsning av 53,5 g XQ,17 mol) N-fthaloyl-(S)-fenylalaninTsyreklorid i 270 ml methylenklorid i løpet av 30 minutter under avkjøling slik at temperaturen forblir ved 0 - 5°.C. Fjern kjølebadet og omrør ved romtemperatur i 18 timer.

Fordamp methylenkloridet i vakuum og fortynn det gjenværende residuum med 800 ml ethylacetat. Ekstraher den resulterende blanding med 800 ml vann, separer det organiske lag og ekstraher med 270 ml IN saltsyre, etterfulgt av 3 x 500 ml vann. Tørk det organiske lag (MgSO^), filtrer og fordamp i vakuum under dannelse av urent produkt (76 g, 98 %). Oppløs det urene produkt i 223,5 ml varm toluen, avkjøl til romtemperatur, avkjøl deretter over natten ved ca. 0° C. Filtrer det krystalliserte produkt, vask med kald toluen og lufttørk under dannelse av 56,6 g (76 %) av tittelforbindelsen; sm.p. 128 - 130° C.

Reaksjonsskjema F, trinn b: 2-( 1, 3- dihydro- l, 3- dioxo- 2H-isoindol- 2- yl)- l- oxo- 3- fenylpropyl- 6- oxo-( S)- norleucin- methylester

Bland 80 ml (0,92 mol) oxalylklorid og 2 liter methylklorid og anbring under nitrogenatmosfære. Avkjøl til under -50° C og tilsett en løsning av 65,4 ml (0,92 mol) dimethylsulfoxyd i 425 ml methylenklorid. Omrør i 15 minutter og tilsett en løsning av 200 g (0,465 mol) (S)-N-[2-(1,3-dihydro-1,3-dioxo-2H-isoindol-2-yl)-l-oxo-3-fenylpropyl]-6-hydroxy-(S)-norleucin-methylester i 80.0. ml methylenklorid i løpet av 45 minutter og hold kartemperaturen under -50° C i 30 minutter. Tilsett 420 ml (3,01 mol) triethylamin i løpet av 30 minutter. Omrør mens det oppvarmes til 0° C i løpet av 1,25 timer. Overfør reaksjonsblandingen til en 12 liters kolbe. Omrør og avkjøl mens det tilsettes en løsning av 566 g oxon (kaliumperoxymonosulfat) i 6,74 liter vann med en slik hastighet av kartemperaturen forblir under 15° C. Omrør i 5 minutter, separer det organiske lag og ekstraher det vandige lag med 1 liter methylenklorid. Kombiner de organiske faser, tørk (MgS04) og filtrer under dannelse av tittelforbindelsen som en løsning.

Reaksjonsskjema F, trinn c: [ S~( R*, R*)]- N-[ 2-( 1, 3- dihydro- l, 3-dioxo- 2H- isoindol- 2- yl)- l- oxo- 3- fenylpropyl]-!, 2, 3, 4- tetra-hydro- 2- pyridincarboxylsyre- methylester

Overfør løsningen av 2-(1,3-dihydro-l,3-dioxo-2H-isoindol-2-yl)-l-oxo-3-fenylpropyl]-6-oxo-(S)-norleucin-methylester i methylenklorid (volum ca. 4,5 liter) til en 12-liters kolbe og anbring under nitrogenatmosfære. Omrør og tilsett 440 ml (5,71 mol) trifluoreddiksyre i én porsjon. Omrør den resulterende blanding ved romtemperatur i 1 time, avkjøl deretter hurtig til ca. 0° C. Tilsett en løsning av 240 g (6,0 mol) natriumhydroxyd i 3,4 liter vann i en langsom strøm til den kraftig omrørte blanding med en slik hastighet at kartemperaturen forblir ved ca. 0° C. Separer den organiske fase og ekstraher den vandige fase med 1 liter methylenklorid. Kombiner de organiske faser og tørk (MgS04). Filtrer og fjern løsningsmidlet i vakuum under dannelse av et et residuum (262 g, 137 %).

Oppløs det ovenfor angitte residuum i 1 liter diethylether og vask med 5 x 500 ml vann. Fordamp den organiske fase i vakuum under dannelse av et residuum på 229 g. Fortynn residuet med 200 ml methylenklorid og rens ved silicagelkromatografi (methylenklorid) under dannelse av et viskøst residuum på 225 g.

Fortynn det ovenfor angitte residuum med 250 ml diethylether og la blandingen stå ved romtemperatur i 24 timer. Filtrer det faste materiale, vask med diethylether og lufttørk under dannelse av 123,2 g; sm.p. 140 - 142,5° C. Omkrystalliser (125 ml methylenklorid/615 ml isopropanol) ved avkokning av løsningsmidlet inntil kartemperaturen når 75° C, og la den resulterende prøve stå ved romtemperatur i 24 timer. Filtrer, vask med kald isopropanol og lufttørk under dannelse av 101,5 g av tittelforbindelsen; sm.p. 144 - 146° C.

Fordamp filtratet fra de ipi,5 g i vakuum under dannelse av 24 g. Omkrystalliser (isopropanol) under dannelse av ytterligere 3,5 g av tittelforbindelsen.

Fordamp filtratet fra de 123,2 g i vakuum under dannelse av 62 g olje. Rens ved silicagelkromatografi (25 % ethylacetat/75 % hexan) og oppsaml 21 - 500 ml fraksjoner. Kombiner fraksjonene 9 - 20 og fordamp i vakuum under dannelse av 35 g av en viskøs olje. Omkrystalliser tre ganger (isopropanol/ 5ml/g) under dannelse av ytterligere 11,9 g av tittelforbindelsen; sm.p. 142,5 - 144,5° C. Totalt utbytte av anvendbart materiale: 1,16,9 g (61,3 %) .

Reaksjonsskjema F, trinn d: [ 4S-[ 4a, 7a( R*), 12bg]]- 7-[( l, 3- dihydro- l, 3- dioxo- 2H- isoindol- 2- yl)]- l, 2, 3, 4, 6, 7, 8, 12b-octahydro- 6— roxopyrido[ 2, l- a][ 2] benzazepin- 4- carboxylsyre-difenylmethylester

Bland 500 g (3,33 mol) trifluormethansulfonsyre og 74,8 ml (0,53 mol) trifluoreddiksyreanhydrid :.og anbring under nitrogenatmosfære. Omrør og tilsett en løsning av 200 g

(0,48 mol) [S-(R<*>,R<*>)]-N-[2-(1,3-dihydro-l,3-dioxo-2H-isoindol-2-yl)-l-oxo-3-fenylpropyl]-l,2,3,4-tetrahydro-2-pyridincarboxyl-syremethylester i 1 liter methylenklorid under avkjøling og med en slik hastighet at kartemperaturen holdes under 35° C.

Omrør ved omgivende temperatur i 2 dager. Hell over i 5 liter kraftig omrørt isvann og omrør i 30 minutter. Ekstraher med 3x1 liter ethylacetat, kombiner de organiske faser og vask med 3 x 500 ml vann. Fordamp i vakuum til et residuum. Opp-løs residuet i 4 liter ethylacetat og ékstraher med 1 liter 1/4 mettet kaliumhydrogencarbonat og deretter 7x1 liter 1/3 mettet kaliumhydrogencarbonat. Kombiner de vandige ekstrakter og fortynn med 2 liter ethylacetat. Omrør den resulterende blanding og avkjøl til 5 - 10° C. Juster pH til 2 under anvendelse av ca. 750 ml konsentrert saltsyre.

Separer den organiske fase og ekstraher den vandige

fase med 3x1 liter ethylacetat. Kombiner ethylacetatekstrak-tene, vask med 3x1 liter vann, deretter med 0,8 liter mettet natriumklorid og tørk (MgS04). Filtrer og vask med 3 x 200 ml ethylacetat. Fordamp i vakuum under dannelse av 188,3 g (101,5 %) [4S-[4a, 7a (R*), 12bB ] ]-7-[ (1,3-dihydro-l*:3-dioxo-2H-isoindol-2-yl)]-l,2,3,4,6,7,8,12b-octahydro-6-oxopyrido-[2,l-a][2]benzazepin-4-carboxylsyre som et farveløst skum.

Oppløs 113,9 g (0,28 mol) [4S-[4a, 7a(R<*>), 12bB]]-7-[(1,3-dihydro-l,3-dioxo-2H-isoindol-2-yl)]-1,2,3,4,7,8,12b-octahydro— 6-oxopyrido[2,l-a][2]benzazepin-4-carboxylsyre i 1,2 liter methylenklorid og tørk over 6 0 g vannfritt MgSO^. Filtrer og vask med 3 x 200 ml methylenklorid. Fordamp i vakuum til et residuum. Oppløs residuet i 860 ml vannfritt dimethylformamid og anbring under nitrogenatmosfære. Tilsett 98,9 g (0,3 mol) cesiumcarbonat i én porsjon. Omrør i 45 minutter ved omgivende temperatur. Tilsett 164,8 g (0,67 mol) bromdifenylmethan. Omrør den resulterende blanding ved romtemperatur i 18 timer. Stans reaksjonen med 2,464 liter ethylacetat og 630 ml vann. Separer den organiske fase og vask med 7 x 625 ml vann, 625 ml 1/4 mettet kaliumhydrogencarbonat, 625 ml vann og 625 ml mettet natriumklorid. Tørk (MgS04), filtrer og fordamp i vakuum under dannelse av 214,4 g av en olje. Ekstraher de kombinerte vandige vaskéløsninger med 3 x 500 ml ethylacetat, vask med 4 x 300 ml vann og tørk (MgS04). Filtrer og fordamp i vakuum under dannelse av ytterligere 20,2 g av en olje.

Oppløs det urene produkt (234,6 g) i 200 ml methylenklorid og pluggfiltrer gjennom 213 g silicagel og eluer med 2 liter methylenklorid. Kok av løsningsmidlet og erstatt med

3 liter hexan, idet kartemperaturen når et maksimum på 6 5° C. Avkjøl til omgivende temperatur, dekanter fra den utfelte olje

og krystalliser (9A ethanol) under dannelse av 96,6 g (60 %)

av tittelforbindelsen; sm.p. 153 - 155° C.

Reaksjonsskjema F, trinn e: [ 4S-[ 4a, 7a( R*), 12bg]]- 7-( amino)-1, 2, 3, 4, 6, 7, 8, 12b- octahydro- 6- oxopyrido[ 2, l- a][ 2] benzazapin- 4-carboxy1syre- difenylmethylester

Bland 170,9 g (0,3 mol) [4S-[4a, 7a(R<*>), 12bB]]-7-[(1,3-dihydro-l,3-dioxo-2H-isoindol-2-yl)]-1,2,3,4,6,7,8,12b-octahydro-6-oxopyrido[2,1-a][2]benzazepin-4-carboxylsyre-difenylmethylester, 34,4 g (0,68 mol) hydrazinmonohydrat og 3,4 liter methanol under nitrogenatmosfære. Oppvarm til til-bakeløpskoknxng-i..5 timer. Avkjøl til omgivende temperatur og filtrer for å fjerne fthaloylhydrazid. Fordamp filtratet i vakuum til et residuum og omslem i 600 ml kloroform. Fjern uløselig fthaloylhydrazid ved filtrering og vask med 4 x 210 ml kloroform. Vask filtratet med 4 x 429 ml vann, tørk (MgS04) og filtrer. Fordamp filtratet til et fast residuum av tittelforbindelsen som veier 142 g (107,7 %).

Reaksjonsskjema A. [ 4S-[ 4a, 7a( R*), 12bB]]- 7-[( 2- thio- 2-oxoindan) methylamino1- 1, 2, 3, 4, 6, 7, 8, 12b- octahydro- 6- oxopyrido-[ 2, l- a][ 2] benzazepin- 4- carboxylsyre

Oppløs 15,2 ml (0.,100 mol) diethylmalonat i 800 ml tetrahydrofuran. Avkjøl på et isbad og behandl med 3,0 g (0,10 mol) natriumhydrid (80 % i mineralolje). Omrør inntil en oppløsning oppnås og tilsett 26,4 g (0,100 mol) a,a'-dibrom-o-xylen. Omrør i 30 minutter og tilsett deretter ytterligere 3,0 g (0,10 mol) natriumhydrid. Omrør ved romtemperatur i 2 0 timer, filtrer gjennom et filterhjelpestoff og fordamp løsningsmidlet i vakuum. Rens ved silicagelkromatografi under dannelse av 2,2-(dicarboethoxy)ihdån som en blek gul olje (16,0 g, 61,5 %).

Oppløs 15,9 g (60,6 mmol) 2,2-(dicarboethoxy)indan i 140 ml dimethylsulfoxyd. Tilsett 14 ml vann og 7,0 g (0,16 mol) lithiumklorid. Oppvarm til tilbakeløpskokning i 4 timer, av-kjøl og fordel mellom 150 ml vann og 2 x 150 ml methylenklorid. Vask den organiske fase med 150 ml vann, tørk (MgSO^) og før gjennom en silicagelplugg under dannelse av 2-(carboethoxy)indan som en ravfarget olje (6,49 g, 56 %) .

Oppløs 6,49 g (34,1 mmol) 2-(carboethoxy)indan i

150 ml 95 % ethanol og 75 ml vann. Tilsett 9,5 g (0,17 mol) kaliumhydroxyd og omrør ved romtemperatur i 1 time. Fordel mellom 150 ml vann og 2 x 150 ml ethylether. Surgjør den vandige fase med saltsyre til pH 1. Ekstraher med 2 x 150 ml methylenklorid, tørk (Na2S04) og fordamp løsningsmidlet i" vakuum under dannelse av 2-indancarboxylsyre som et brunt fast materiale (3,82 g, 69 %).

Oppløs 3,82 g (23,5 mmol) 2-indancarboxylsyre i 60 ml methanol og behandl med 5,8 ml (47 mmol) dimethoxypropan og 0,8 ml svovelsyre. Omrør ved romtemperatur i 6 dager. Fordamp løsningsmidlet i vakuum,fortynn med 75 ml methylenklorid og vask med 35 ml mettet natriumhydrogencarbonat. Ekstraher den vandige fase med 30 ml methylenklorid, vask de kombinerte organiske bestanddeler med 30 ml saltvann og tørk (Na2S04). Fordamp løsningsmidlet i vakuum og før gjennom en plugg av silicagel under dannelse av 2-(carbomethoxy)indan som en gul olje (3,98 g).

Bland 3,0 g (19 mmol) 4-methoxybenzylthiol i natriumhydroxyd (20 ml av en 2,5N vandig løsning) og 10 ml methanol. Tilsett 1,5 ml mettet vandig kobbersulfatløsning og omrør ved romtemperatur i 2 timer og blås luft over toppen av blandingen. Filtrer det faste materiale, vask med vann og tørk under dannelse av 4-methoxybenzyldisulfid som et blekt gult pulver (2,71 g, 91 %).

Avkjøl 4,2 ml (4,2 mol) lithiumhexamethyldisilazan (1,0M i tetrahydrofuran) til -7 8° C og behandl med en løsning av 625 mg (3,55 mmol) 2-(carbomethoxy)indan i 5 ml tetrahydrofuran. Omrør i 1 time og tilsett 0,93 ml (5,3 mmol) hexamethylfosforamid og omrør i 5 minutter. Tilsett 1,6 g (5,2 mmol) 4-methoxybenzyldisulfid i 10 ml tetrahydrofuran. Omrør i 5 timer ved -78° C og stans reaksjonen med en løsning -av ammoniumklorid. Fordel mellom 75 ml ethylacetat og 30 ml saltvann. Tørk (Na2S04), fordel løsningsmidlet i vakuum og rens ved silica-gelkromatograf i (4:1 hexan/ethylacetat) under dannelse av 2-(carbomethoxy)-2-(4-methoxybenzylthio)indan (2,20 g).

Oppløs 2,20 g (3,55 mmol) 2-(carbomethoxy)-2-(4-methoxybenzylthio)indan i 25 ml 95 % ethanol og 12 ml vann og 15 ml tetrahydrofuran. Behandl med 1,3 g (23 mmol) kaliumhydroxyd og omrør ved romtemperatur i 1 time. Filtrer og fordamp løsningsmidlet i vakuum. Fordel mellom 125 ml vann og 75 ml ether. Separer den vandige fase og surgjør med kald konsentrert saltsyre. Ekstraher med 75 ml methylenklorid,

tørk (Na2S04) og fordamp løsningsmidlet i vakuum. Rens ved silicagelkromatografi (2:1 hexan/ethylacetat) under dannelse av 2-carboxy-2-(4-methoxybenzylthio)indan som et gult fast materiale (0,48 g).

Oppløs 200 mg (0,454 mmol) [4S-[4a, 7a (R*) , [ 12b8 ] ] - 7-(amino)-1,2,3,4,6,7, 8 ,12b-octahydro-6-oxopyrido[2,l-a][2]-benzazepin-4-carboxylsyre-difenylmethylester og 130 mg (0,68 mmol) EDC i 5 ml tetrahydrofuran. Behandl med 143 mg (0,454 mmol) 2-carboxy-2-(4-methoxybenzylthio)indan. Omrør ved romtemperatur i 20 timer og fordamp løsningsmidlet i vakuum. Oppløs residuet i 50 ml ethylacetat og vask med 15 ml;:5 % svovelsyre og deretter med 15 ml mettet natriumhydrogencarbonat.

Tørk (Na2S04) og fordamp løsningsmidlet i vakuum. Rens ved silicagelkromatografi (2,5:1 hexan/ethylacetat til 3:2 hexan/ ethylacetat) under dannelse av [4S-[4a, 7a(R<*>), 12bB]]-7-[(2-(4-methoxybenzylthio)-2-oxoindan)methylamino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-octahydro-6-oxopyrido[2,l-a][2]benzazepin-4-carboxylsyre-difenylester som en blek gul olje (245 mg, 73,1 %).

Oppløs 120 mg (0,163 mmol) [4S-[4q, 7a(R<*>), 12b&]]-7-[(2-(4-methoxybenzylthio)-2-oxoindan)methylamino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-octahydro-6-oxopyrido[2,l-a][2]benzazepin-4-carboxylsyre-difenylmethylester i 3 ml methylenklorid og avkjøl til 0° C. Behandl med 1,5 ml trifluoreddiksyre, 0,19 ml

(1,7 mmol) anisol og 65 mg (0,2 mmol) kvikksølvacetat. Omrør ved 0° C i 3 timer og bobl deretter hydrogensulfidgass gjennom oppløsningen i 10 minutter. Filtrer og vask med methylenklorid. Vask den organiske fase med 2 0 ml vann, tørk (Na2S04) og fordamp løsningsmidlet i vakuum. Rens ved silicagelkromatografi (2,5:1 hexan/ethylacetat til 1:1 hexan/ethylacetat med 1 % eddiksyre) under dannelse av tittelforbindelsen

(65 mg, 89 %).

Eksempel . 2

[ 4S-[ 4a, 72( R*), 12b8]]- 7-[( 2- pivaloyloxymethylthio- 2- oxoindan)-methylamino]- 1, 2, 3, 4, 6, 7, 8, 12b- octahydro- 6- oxopyrido[ 2, l- a][ 2]-benzazepin- 4- carboxylsyre

Oppløs 126 mg (0,28 mmol) [4S-[4a, 7a(R<*>), 12bB]]-7-[(2-thiol-2-oxoindan)methylamino]-l,2,3,4,6,7,8,12b-octahydro-6-oxopyrido[2,l-a][2]benzazepin-4-carboxylsyre i 1 ml methylenklorid og tørk over 60 g vannfritt MgSO^. Filtrer og vask med 3 x 20 ml methylenklorid. Fordamp i vakuuum til et residuum. Oppløs residuet i 10 ml vannfritt dimethylformamid og anbring under nitrogenatmosfære. Tilsett 100 mg (0,3 mmol) cesiumcarbonat i én porsjon. Omrør i 45 minutter ved omgivende temperatur. Tilsett 42 g (0,28 mmol) klormethylpivalat.

Omrør den resulterende blanding ved omgivende temperatur i 18 timer. Stans reaksjonen med 3 ml ethylacetat og 10 ml vann. Separer den organiske fase og vask med 7 x 10 ml vann, 10 ml 1/4 mettet kaliumhydrogencarbonat, 10 ml vann og 10 ml mettet natriumklodrid. Tørk (MgS04), filtrer og fordamp i vakuum under dannelse av tittelforbindelsen.

Eksempel 3

[ 4S-[ 4a, 7a( R*)- 12bB]]- 7-[( 2- thioacetat- 2- oxoindan) methylamino]-1, 2, 3, 4, 6, 7, 8, 12b- octahydro- 6- oxopyrido[ 2, l- a][ 2] benzazepin- 4-carboxylsyre

Bland 2,73 g (6,07 mmol) [4S-[4a, 7a(R<*>), 12bB]]-7-

[(2-thiol-2-oxoindan)methylamino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-octahydro-6-oxopyrido[2,l-a][2]benzazepin-4-carboxylsyre og svovelsyre (0,1 ml av en 10 % løsning i eddiksyre). Tilsett 0,572 ml

(6,07 mmol) eddiksyreanhydrid og omrør i 2 timer. Fortynn med 30 ethylether, vask med vann og deretter med natriumhydrogencarbonat og saltvann. Tørk (MgSO^), fordamp løsningsmidlet i vakuum og rens ved silicagelkromatografi under dannelse av tittelforbindelsen.

Eksempel 4

[ 4S-[ 4a, 7a( R*), 12bB]]- 7-[( 2- thioacetat- 2- oxoindan) methylamino ]- l, 2 , 3/ 4, 6, 7, 8, 12b- octahydro- 6- oxopyrido[ 2, l- a][ 2 ]-benza2epin- 4- carboxylsyre- pivaloyloxymethylester

Oppløs 138 g (0,28 mmol) [4S-[4a, 7a(R<*>), 12bB]]-7-[(2-thioacetat-2-oxoindan)methylamino]-l,2,3,4,6,7,8,12b-octa- . hydro-6-oxopyrido[2,l-a][2]benzazepin-4-carboxylsyre i 1 ml methylenklorid og tørk over 6 0 mg vannfritt MgSO^. Filtrer og vask med 3 x 20 ml methylenklorid. Fordamp i vakuum til et residuum. Oppløs residuet i 10 ml vannfritt dimethylformamid og anbring under nitrogenatmosfære. Tilsett 100 mg (0,3 mmol) cesiumcarbonat i én porsjon. Omrør i 45 minutter ved omgivende temperatur. Tilsett 42 g (0,28 mmol) klormethylpivalat. Omrør den resulterende blanding ved omgivende temperatur i 18 timer. Stans reaksjonen med 3 ml ethylacetat og 10 ml vann. Separer den organiske fase og vask med 7 x 10 ml vann, 10 ml 1/4 mettet kaliumhydrogencarbonat, 10 ml vann og 10 ml mettet natriumklorid. Tørk (MgSO^), filtrer og fordamp i vakuum under dannelse av tittelforbindelsen.

Eksempel 5

[ 4S-[ 4a, 7a( R*), 12bB]]- 7-[( 2- thio- 2- oxoindan) methylamino]-1, 2, 3, 4, 6, 7, 8, 12b- octahydro- 6- oxopyrido[ 2, l- a][ 2] benzazepin-4- carboxylsyre- pivaloyloxymethylester

Omrør 2,42 g (4 mmol) [4S-[4a, 7a(R<*>), 12bB]]-7-[ (2-thioacetat-2-oxoindan)methylamino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-octahydro-6-roxopyrido{2, l-a] [ 2 ]benzazepin-4-carboxylsyre-pivaloyloxy-methyléster og mettet methanolisk ammoniakk ved omgivende temperatur inntil hydrolysen er fullført. Fordamp løsnings-midlet i vakuum og rens ved silicagelkromatografi under dannelse av tittelforbindelsen.

Eksempel 6

[ 4S~[ 4a, 7a( R*), 12b8]]- 7-[( 2- pivaloyloxymethylthio- 2- oxoindan)-methylamino]- 1, 2, 3, 4, 6, 7, 8, 12b- octahydro- 6- oxopyrido[ 2, l- a][ 2]-benzazepin- 4- carboxylsyre- pivaloyloxymethylester

Oppløs 63 mg (0,14 mol) [4S-[4a, 7a(R<*>), 12bB]]-7-[(2-thiol-2-oxoindan)methylamino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-octahydro-6-oxopyrido[2,l-a][2]benzazepin-4-carboxylsyre i 1 ml methylenklorid og tørk over 60 mg vannfritt MgS04. Filtrer og vask med 3 x 20 ml methylenklorid. Fordamp i vakuum til et residuum. Oppløs residuet i 10 ml vannfritt dimethylformamid og anbring under nitrogenatmosfære. Tilsett 100 mg (0,3 mmol) cesiumcarbonat i én porsjon. Omrør i 45 minutter ved omgivende temperatur. Tilsett 42 g (0,3 mmol) klormethylpivalat. Omrør den resulterende blanding ved omgivende temperatur i 18 timer. Stans reaksjonen med 3 ml ethylacetat og 10 ml vann. Separer den organiske fase og vask med 7 x 10 ml vann, 10 ml 1/4 mettet kaliumhydrogencarbonat, 10 ml vann og 10 ml mettet natriumklorid. Tørk (MgS04), filtrer og fordamp i vakuum under dannelse av tittelforbindelsen.

Eksempel 7

[ 4S-[ 4ct, 7a ( R*), 12bB] ]- 7-[ ( 2-( 2- mercaptoethyl) - 2- oxoindan) - methylamino]- 1, 2, 3, 4, 6, 7, 8, 12b- octahydro- 6- oxopyrido[ 2, l- a][ 2]-benzazepin- 4- carboxylsyre

Avkjøl 4,2 ml (4,2 mmol) lithiumhexamethyldisilazan

i et tørris/acetonbad og tilsett dråpevis en løsning av 625 mg (3,55 mmol) 2-(carbomethoxy)indan i 6 ml tetrahydrofuran. Omrør i 30 minutter og tilsett deretter 1,0 ml (5,7 mmol) hexamethylfosforamid. Omrør i 45 minutter og tilsett deretter 0,37 ml (4,44 mmol) l-brom-2-klorethan. Omrør i 3 timer, fjern isbadet og tillat blandingen å oppvarmes til romtemperatur. Stans reaksjonen med 30 ml vandig ammoniumklorid og ekstraher med 75 ml ethylacetat. Tørk (Na2S04) og fordamp løsningsmidlet i vakuum.. Før gjennom en plugg av silicagel (6:1 hexan/ethylacetat) under dannelse av 2-(carbomethoxy)-2-(2-klorethan)indan (0,62 g).

Oppløs 0,7 ml (5 mmol) 4-methoxybenzylthiol i 10 ml tetrahydrofuran og anbring under en argonatmosfære. Behandl med natriumhydrid (144 mg av en 80 % dispersjon i mineralolje, 4,8 mmol). Omrør suspensjonem.i 10 minutter og tilsett 40 mg (0,11 mmol) tetrabutylammoniumjodid. Omrør i 10 minutter og tilsett deretter en løsning av 0,6 g (3,55 mmol) 2-(carbomethoxy) -2- (2-klorethan) indan i 5 ml tetrahydrofuran. Omrør i 18 timer og fordel mellom 15 ml vandig ammoniumklorid og 50 ml ethylacetat. Tørk (Na2S04) og fordamp løsningsmidlet i vakuum. Rens ved silicagelkromatografi (6:1 hexan/ethylacetat) under dannelse av 2-(carbomethoxy)-2-[2-(4-methoxybenzylthio)-ethan]indan (0,75 g).

Oppløs 0,75 g (3,55 mmol) 2-(carbomethoxy)-2-[2-(4-methoxybenzylthio)ethan]indan i 16 ml 95 % ethanol, 8 ml vann og 10 ml tetrahydrofuran. Behandl med 1,3 g (23 mmol) kaliumhydroxyd. Omrør i 1 time og fordamp løsningsmidlet i vakuum.-Fordel mellom 50 ml vann og 2 x 35 ml ethylether. Avkjøl den vandige fase på et isbad og surgjør med konsentrert saltsyre til pH 1. Ekstraher med 75 ml methylenklorid, tørk (Na2S04)

og fordamp løsningsmidlet i vakuum under dannelse av 2-carboxy-2-^2-(4-methoxybenzylthio) ethan] indan som et hvitt fast materiale (147 mg).

Oppløs 180 mg (0,409 mmol) [4S-[4a, 7ot (R*)., 12bB]]-7-(amino)-1,2,3,4,6,7,8,12b-octahydro-6-oxopyrido[2,l-a][2]-benzazepin-4-carboxylsyre-difenylmethylester og 118 mg (0,613 mmol). EDC i 5 ml tetrahydrofuran. Behandl med en løsning av 140 mg (0,409 mmol) 2-carboxy-2-[2-(4-methoxybenzylthio)ethan]-indan i 3 ml tetrahydrofuran. Omrør ved romtemperatur i 20 timer og fordamp løsningsmidlet i vakuum. Oppløs residuet i 40 ml ethylacetat og vask med 15 ml 5 % svovelsyre og deretter med 15 ml mettet natriumhydrogencarbonat. Tørk (Na2S04) og fordamp løsningsmidlet i vakuum. Rens ved silicagelkromatografi (2:1 hexan/ethylacetat til 3:2 hexan/ethylacetat) under dannelse av Us-£4cx# 7ot (R*) , 12b6 l.J-7-C (2-[2-(4-methoxybenzylthio) - ethan-2-oxoindan)methylamino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-octahydro-6-oxopyrido[2,l-a][2]benzazepin-4-carboxylsyre-difenylmethylester som et hvitt fast materiale (166 mg, 53,2 %).

Oppløs 166 mg (0,217 mmol) [4S-[4a, 7a(R<*>), 12bB]]-7-[(2-[2-(4-methoxy-benzylthio)ethan-2-oxoindan)methylamino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-octahydro-6-ox<q>pyrido[2,l-a]C2]benzazepin-4-carboxylsyre-difenylmethylester i 4 ml methylenklorid og avkjøl til 0° C. Behandl med 2 ml trifluoreddiksyre, 0,24 ml (2,2 mmol) anisol og 86 mg (0,27 mmol) kvikksølvacetat. Omrør ved 0° C i

3 timer og bobl deretter hydrogensulfidgass gjennom løsningen i 10 minutter. Filtrer og fortynn med methylenklorid. Vask den organiske fase med 2 0 ml vann., tørk (Na2S04) og fordamp løsningsmidlet i vakuum. Rens ved silicagelkromatografi (2:1 hexan/ethylacetat til 1:1 hexan/ethylacetat med 1 % eddiksyre) under dannelse av tittelforbindelsen (78 mg, 75 %).

Eksempel 8

f. 4S-[ 4a, 7ot( R*), 12bBll- 7-[ ( 2- mercaptomethyl- 2- oxoindan) - methylamino]- 1, 2, 3, 4, 6, 7, 8, 12b- octahydro- 6- oxopyrido[ 2, l- a][ 2]-benzazepin- 4- carboxylsyre

Oppløs 7,6 ml (50 mmol) diethylmalonat i 500 ml vannfritt tetrahydrofuran og anbring under en argonatmosfære. Avkjøl til 5° C, tilsett 1,2 g (50 mmol) natriumhydrid og om-rør kort inntil blandingen blir homogen. Tilsett 13,2 g (50 mmol) ot ,ot1 -dibrom-o-xylen og omrør i ytterligere 15 minutter. Tilsett ytterligere 1,2 g (50 mmol) natriumhydrid og omrør i 16 timer mens blandingen oppvarmes til romtemperatur. Filtrer, fordamp løsningsmidlet i vakuum og rens ved silicagelkromatografi (1:1 methylenklorid/hexan) under dannelse av 2 ,2-dicarboethoxyr-indan (9,64 g, 74 %).

Oppløs 5,67 g (21,7 mmol) 2,2-dicarboethoxy-indan i 150 ml ethanol. Tilsett 50 ml IN lithiumhydroxyd og omrør over natten ved romtemperatur. Kok under tilbakeløpskjøling 1 1 time og konsentrer løsningen i vakuum. Fordel mellom ethylacetat og 6N saltsyre. Separer den organiske fase og vask med saltvann. Tørk (MgS04) og fordamp løsningsmidlet i vakuum under dannelse av et off-hvitt fast materiale. Destil-ler (120 - 160° C @ 0,2 - 0,5 mmHg) under dannelse av 2-carboxy-indan (2,5 g, 71 %).

Oppløs 2,5 g (15,4 mmol) 2-carboxy-indan i methanol

og avkjøl til 0° C. Mett med saltsyregass og tilsett deretter 2 - 3 ml 2,2-dimethoxypropan. Omrør over natten og fordamp deretter løsningsmidlet i vakuum. Rens ved silicagelkromatografi (2:1 methylenklorid/hexan) under dannelse av 2-carbomethoxy-indan som en vann-hvit olje (2,04 g, 75 %).

Oppløs 1,90 ml (7,8 mmol) diisopropylamin i 8 ml vannfritt tetrahydrofuran, avkjøl til -20° C og anbring under en argonatmosfære. Tilsett dråpevis n-butyllithium (3,12 ml av en 2,5N løsning i hexan, 7,8 mmol) og omrør i 20 minutter mens blandingen avkjøles til -70° C. Tilsett dråpevis en løsning av 1,34 g (7,8 mmol) 2-carbomethoxy-indan i 8 ml vannfritt tetrahydrofuran. Omrør ved -70° C i ytterligere 30 minutter og tilsett deretter trimethylsilylklorid (friskt destillert fra bariumoxyd, 1,0 ml, 7,8 mmol). Tillatt blandingen å oppvarmes til 10° C, fordamp løsningsmidlet i vakuum og tørk residuet under vakuum i 30 minutter. Suspender residuet i 30 ml methylenklorid, tilsett 300 ml (1,3 mmol) sinkbromid etterfulgt av 1,08 g (7,8 mmol) t-butylklormethylsulfid. Omrør i 15 minutter ved romtemperatur og tilsett ytterligere 500 ml (2,2 mmol) sinkbromid. Hell over i overskudd av mettet natriumhydrogencarbonat og rist kraftig. Separer den organiske fase og ekstraher den vandige fase med 30 ml methylenklorid. Kombiner de organiske faser, tørk (MgSO^) og fordamp løsningsmidlet i vakuum under dannelse av urent produkt som en brun olje (2,12 g, 98 %). Rens ved silicagelkromatografi (30 - 70° C methylenklorid/hexan) og omkrystalliser (methanol) under dannelse av 2-carbomethoxy-2-(t-butyl)thiomethyl-indan som et krystallinsk fast materiale (1,3 g, 61 %). Oppløs 557 mg (2,0 mmol) 2-carbomethoxy-2-(t-butyl)-thiomethyl-indan i 15 ml methanol og tilsett 3,5 ml IN lithiumhydroxyd. Oppvarm kort for å bevirke oppløsning og omrør deretter ved romtemperatur under en argonatmosfære i 1 time. Kok under tilbakeløpskjøling i 6 timer, konsentrer i vakuum til et volum på 3 ml og fortynn til et volum på 15 ml med vann. Vask med methylenklorid og surgjør den vandige fase med overskudd av 2N saltsyre. Oppsaml etter 5 minutter det resulterende, hvite bunnfall ved filtrering og tørk under dannelse av 2-carboxy-2-(t-butyl)thiomethyl-indan (506 mg, 96 %); sm.p. 158 - 163° C.

Oppløs 150 mg (0,340 mmol) [4S-[4a, 7a(R<*>), 12bB]]-7-(amino)-1,2,3,4,6,7,8,12b-octahydro-6-oxopyrido[2,l-a][2]-benzazepin-4-carboxylsyre-difenylmethylester og 98 mg (0,51 mmol) EDC i 5 ml tetrahydrofuran. Behandl med en løsning av 113 mg (0,426 mmol) 2-carboxy-2-(t-butyl)thiomethyl-indan. Omrør ved romtemperatur i 15 timer og fordamp løsningsmidlet

i vakuum. Oppløs residuet i 40 ml ethylacetat og vask med 15 ml IN saltsyre og deretter med 15 ml mettet natriumhydrogencarbonat. Tørk (Na2S04) og fordamp løsningsmidlet i vakuum.

Rens ved silicagelkromatografi (2:1 hexan/ethylacetat) under dannelse av [4S-[4a, 7a(R<*>), 12b8]]-7-[(2-(t-butylthio)methan-2-oxoindan)methylamino]-l,2,3,4,6,7,8,12b-octahydro-6-oxopyrido-[2,l-a][2]benzazepin-4-carboxylsyre-difenylmethylester som et hvitt fast materiale (213 mg, 91 %).

Oppløs 210 mg (0,306 mmol) [4S-[4a, 7a(R<*>), 12b8]]-7r.

[(2-(t-butylthio)methan-2-oxoindan)methylamino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-octahydro-6-oxopyrido[2,l-a][2]benzazepin-4-carboxylsyre-difenylmethylester i 4 ml methylenklorid og avkjøl til 0° C. Behandl med 2 ml trifluoreddiksyre, 0,3 ml (2,7 mmol) anisol og 122 mg (0,38 mmol) kvikksølvacetat. Omrør ved romtemperatur over natten og bobl deretter hydrogensulfidgass gjennom løsningen i 10 minutter. Filtrer og fortynn med methylenklorid. Vask den organiske fase med 20 ml vann, tørk (Na2S04) og fordamp løsningsmidlet i vakuum. Rens ved silica-gelkromatograf i (2,5:1 hexan/ethylacetat til 1:1 hexan/ethylacetat med 1 % eddiksyre) under dannelse av tittelforbindelsen.

(144 mg).

Eksempel 9

[ 4S-[ 4a, 7a( R*), 12bB]]- 7-[( 1- thio- l- oxocyklopentan) methylamino ]- 1, 2, 3, 4, 6, 7, 8, 12b- octahydro- 6- oxopyrido[ 2, l- a][ 2]-benzazepin- 4- carboxylsyre

Oppløs 0,46 ml (3,3 mmol) diisopropylamin i 10 ml tetrahydrofuran og avkjøl på et isbad. Tilsett dråpevis n-butyllithium (1,8 ml av en 1,6M løsning i hexaner, 2,9 mmol). Omrør i 15 minutter, avkjøl til -78° C og tilsett en løsning

av 322 mg (2,51 mmol) methyl-cyklopentancarboxylat i 5 ml tetrahydrofuran. Omrør i 1 time og behandl med 0,66 ml (3,8 mmol) hexamethylfosforamid. Omrør i 15 minutter og tilsett deretter 1,0 g (3,3 mmol) 4-methoxybenzyldisulfid i 13 ml tetrahydrofuran. Omrør i 3 timer ved -78° C, tilsett 5 ml mettet vandig ammoniumklorid. Fordel mellom 2 x 50 ml vann og 100 ml ethylacetat. Tørk (Na2S04) og før gjennom en plugg,

av silicagel (methylenklorid) under dannelse av 1-(carbomethoxy)-1-(4-methoxybenzylthib)cyklopentan som en blek gul olje.

Oppløs 3,3 mmol 1-(carbomethoxy)-1-(4-methoxybenzylthio) cyklopentan i 18 ml 95 % ethanol, 9 ml vann og 10 ml tetrahydrofuran. Behandl med 0,91 g (16 mmol) kaliumhydroxyd. Omrør ved romtemperatur i 2 timer og fordamp løsningsmidlet i vakuum...

Fordel mellom 50 ml vann og 30 ml ethylether.

Surgjør den vandige fase med kald konsentrert saltsyre og ekstraher med 50 ml methylenklorid. Tørk (MgSO^) og fordamp løsningsmidlet i vakuum under dannelse av 1-(carboxy)-1-(4-methoxybenzylthio)cyklopentan som en blek gul olje (483 mg, 72 %) .

Oppløs 200 mg (0,454 mmol) [4S-[4ot, 7ct(R*), 12b8]]-7-(amino)-1,2,3,4,6,7,8,12b-octahydro-6-oxopyrido[2,l-a][2]-benzazepin-4-carboxylsyre-difenylmethylester, 130 mg (0,68 mmol) EDC og 128 mg (0,480 mmol) 1-(carboxy)-1-(4-methoxybenzylthio)-cyklopentan i 5 ml tetrahydrofuran. Omrør ved romtemperatur i 16 timer og fordamp løsningsmidlet i vakuum. Oppløs residuet i 30 ml ethylacetat og vask med 15 ml 5 % svovelsyre og deretter med 15 ml mettet natriumhydrogencarbonat. Tørk (Na2S04) og fordamp løsningsmidlet i vakuum. Rens ved silicagelkromato-: grafi (2:1 hexan/ethylacetat til 3:2 hexan/ethylacetat) under dannelse av [4S-[4a, 7a(R<*>), 12bB]]-7-[(1-(4-methoxybenzylthio)-1-oxo-cyklopentan)methylamino1-1,2,3,4,6,7,8,12b-qctahydro-6-oxopyrido{-2 , l-a] [2 ]benzazepin-4-carboxylsyre-difenylmethylester som et hvitt fast materiale (195 mg, 62,3 %).

Oppløs 195 mg (0,283 mmol) [4S-[4a, 7a (R*), 12bB]]-7-[(1-(4-methoxybenzylthio)-1-oxo-cyklopentan)methylamino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-octahydro-6-oxopyrido[2,l-a][2]benzazepin-4-carboxylsyre-difenylmethylester i 4 ml methylenklorid og avkjøl til 0° C. Behandl med 2 ml trifluoreddiksyre, 0,3 ml (2,7 mmol) anisol og 113 mg (0,354 mmol) kvikksølvacetat.

Omrør i 3 timer og bobl deretter hydrogensulfidgass gjennom løsningen i 15 minutter. Filtrer og:.fortynn med methylenklorid. Vask den organiske fase med 20 ml vann, tørk (Na2S04) og fordamp løsningsmidlet i vakuum. Rens ved silicagelkromatografi (2:1 hexan/ethylacetat til 1:1 hexan/ethylacetat med 1 % eddiksyre) under dannelse av tittelforbindelsen

(110 mg, 96,5 %) .

Eksempel 10

[ 4S-[ 4a, 7a( R*), 12bB] 3- 7-[( 2- thio- l- oxo- 2- methyl)- 2- propyl-amino 3- 1, 2, 3, 4, 6, 7, 8, 12b- octahydro- 6- oxopyrido[ 2, l- a][ 2]-benzazepin- 4- earboxylsyre

Oppløs 14 ml (0,10 mmol) 4-methoxybenzylthiol i 150

ml vannfritt dimethylformamid, avgass og spyl med nitrogen. Tilsett 2 0 ml (0,115 mol), diisopropylethylamin og behandl deretter med 11,1 ml (0/10 mol) ethylbromacetat. Anbring reak-sjonskolben i et kjølebad inneholdende kaldt vann og omrør til romtemperatur i 64 timer. Fordel mellom 300 ml vann og 250 ml ether. Separer den vandige fase og ekstraher med 250 ml ether. Kombiner de organiske faser, vask med 2 x 150 ml vann og ekstraher de kombinerte vandige faser med 125 ml ether. Tørk (Na2SO^) og fordamp løsningsmidlet i vakuum. Rens ved kroma--tografi (6:1 hexan/ethylacetat) . under dannelse av l-(carbo-ethoxy)-1-(4-methoxybenzylthio)methan som en gul olje (22 g, 92 %) .

Oppløs lithiumhexamethyldisilazan (4,2 ml av en 1,0M løsning i tetrahydrofuran, 4,2 mmol) i 9 ml tetrahydrofuran og avkjøl til -78° C. Behandl med en løsning av 1,0 g (4,2 mmol) 1-(carboethoxy)-1-(4-methoxybenzylthio)methan i 4 ml tetrahydrofuran. Omrør i 45 minutter, tilsett 0,26 ml (4,2 mmol) methyljodid og omrør i 3 timer. Tilsett ytterligere lithiumhexamethyldisilazan (4,2 ml av en 1,0M løsning i tetrahydrofuran, 4,2 mmol), omrør i 30 minutter og tilsett 0,3 ml (4,8 mmol) methyljodid. Omrør ved romtemperatur over natten. Fordel mellom 30 ml mettet ammoniumklorid og 50 ml ethylacetat.

Separer den organiske fase, tørk (Na2S04) og fordamp løsnings-midlet i vakuum. Rens ved kromatografi (5:1 hexan/ethylacetat) under dannelse av 2-(carboethoxy)-2-(4-methoxybenzylthio)propan som en blek gul olje (1,05 g, 93,8 %) .

Oppløs 1,05 g (3,91 mmol) 2-(carboethoxy)-2-(4-methoxybenzylthio)propan i en blanding av 18 ml 95 % ethanol,

9 ml vann og 10 ml tetrahydrofuran. Tilsett 1,4 g (25 mmol) kaliumhydroxyd og omrør ved romtemperatur i 2 timer og deretter ved 55° C i 1 time. Fordamp løsningsmidlet i vakuum og fordel mellom 50 ml vann og 50 ml ether. Surgjør til pH 1 med konsentrert saltsyre og ekstraher i 50 ml methylenklorid. Tørk (Na2S04) og fordamp løsningsmidlet i vakuum under dannelse av 2-(carboxy)-2-(4-methoxybenzylthio)propan som et brunt fast materiale (763 mg).

Oppløs 175 mg (0,40 mmol) [4S-[4ct, 7a (R*), 12bB]]-7-(amino)-1,2,3,4,6,7,8,12b-octahydro-6-oxopyrido[2,l-a][2]-benzazepin-4-carboxylsyre-difenylmethylester, 101 mg (0,41 mmol) EEDQ og 96 mg (0,40 mmol) 2-(carboxy)-2-(4-methoxybenzylthio)-propan i 5 ml methylenklorid. Omrør ved romtemperatur i 18 timer og fordamp løsningsmidlet i vakuum. Oppløs residuet i 30 ml ethylacetat og vask med 15 ml 5 % svovelsyre og deretter med 15 ml mettet natriumhydrogencarbonat. Tørk (Na2S04) og fordamp løsningsmidlet i vakuum. Rens ved silicagelkromatografi (3:2 hexan/ethylacetat til 1:1 hexan/ethylacetat) under dannelse av [4S-[4a, 7a(R<*>), 12bB]]-7-[(2-(4-methoxybenzylthio)-1-oxo-2-methyl)-2-propylamino]-l,2,3,4,6,7,8,12b-octahydro-6-oxo-pyridot 2,l-a][2]benzazepin-4-carboxylsyre-difenylmethylester som et hvitt skum (260 mg).

Oppløs 260 mg (0,40 mmol) [4S-[4a, 7a(R<*>), 12bBl]-7-[(2-(4-methoxybenzylthio)-l-oxo-2-methyl)-2-propylamino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-octahydro-6-oxopyrido[2,l-a][2]benzazepin-4-carboxylsyre-difenylmethylester i 5 ml methylenklorid og avkjøl til 0° C. Behandl med 0,43 ml (4,0 mmol) anisol og 159 mg (0,50 mmol) kvikksølvacetat og deretter med 2,5 ml trifluoreddiksyre. Omrør i 3 timer og bobl deretter hydrogensulfidgass gjennom løsningen i 10 minutter. Filtrer og fortynn med methylenklorid. Vask den organiske fase med 20 ml vann, tørk (Na2S04) og fordamp løsningsmidlet i vakuum. Rens ved silicagelkromatografi (1:1 hexan/ethylacetat med 1 % eddiksyre) under dannelse av tittelforbindelsen som et hvitt fast materiale (114 mg).

Eksempel 11

[ 4S-[ 4a, 7a( R*), 12bB]]- 7-[( 1- thio- l- oxocyklopropan) methylamino]-1, 2, 3, 4, 6, 7, 8, 12b- octahydro- 6- oxopyrido[ 2, l- a][ 2] benzazepin- 4-carboxylsyre

Avkjøl lithiumhexamethyldisilazan (6 ml av enl,0M løsning i tetrahydrofuran, 6,0 mmo]) til -78° C. Tilsett ved kanyleoverføring en løsning av 1,36 g (5,66 mmol) l-(carbo-ethoxy)-1-(4-methoxybenzylthio)methan i 10 ml tetrahydrofuran. Omrør i 45 minutter, tilsett 0,73 ml (6,0 mmol) 1,3-dimethyl-3,4,5,6-tetrahydro-2(1H)-pyrimidinon (DMPU) etterfulgt av 0,50 ml (6,0 mmol) l-brom-2-klorethan og omrør ved romtemperatur over natten. Avkjøl til -78° C, tilsett 6,0 ml (6,0 mmol) lithiumhexamethyldisilazan og omrør ved romtemperatur i 24 timer. Tilsett 5 ml ammoniumklorid og fordel mellom 30 ml ethylacetat og 30 ml vann. Separer den organiske fase, tørk (Na2S04) og fordamp løsningsmidlet i vakuum. Rens ved kromatografi (5:1 hexan/ethylacetat til 2,5:1 hexan/ethylacetat) under dannelse av 1-(carboethoxy)-1-(4-methoxybenzylthio)cyklo-propan (317 mg, 21 %).

Oppløs 0,310;.g (1,16 mmol) 1-(carboethoxy)-1-(4-methoxybenzylthio)cyklopropan i 6 ml 95 % ethanol, 3 ml vann og 6 ml tetrahydrofuran. Behandl med 420 mg (10 mmol) lithiumhydroxydmonohydrat. Omrør under forsiktig tilbakeløpskokning i 6 timer og fordamp løsningsmidlet i vakuum. Tilsett 50 ml vann og vask med 50 ml ether. Surgjør den vandige fase og ekstraher i 50 ml methylenklorid. Tørk (Na2SO^) og fordamp løsningsmidlet i vakuum under dannelse av 1-(carboxy)-1-(4-methoxybenzylthio)cyklopropan som et blekt gult fast materiale (266 mg).

Oppløs 220 mg (0,50 mmol) [4S-[4a, 7a(R<*>), 12bB]]-7-(amino)-1,2,3,4,6,7,8,12b-octahydro-6-oxopyrido[2,l-a][2]-benzazepin-4-carboxylsyre-difenylmethylester, .144 mg (0,75 mmol) EDC og 120 mg (0,50 mmol) 1-(carboxy)-1-(4-methoxybenzylthio) cyklopropan i 5 ml tetrahydrofuran. Omrør ved romtemperatur i 24 timer og fordamp løsningsmidlet i vakuum. Oppløs residuet i 30 ml ethylacetat og vask med 20 ml 5 % svovelsyre, 15 ml mettet natriumhydrogencarbonat og 15 ml saltvann. Tørk (Na2S04) og fordamp løsningsmidlet i vakuum. Rens ved silicagelkromatografi (3:2 hexan/ethylacetat til 2:3 hexan/ethylacetat) under dannelse av [4S-[4a, 7a(R<*>), 12bB]]-7-[(1-(4-methoxybenzylthio)-1-oxocyklopropan)methylamino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-octahydro-6-oxopyrido[2,l-a][2]benzazepin-4-carboxylsyre-difenylmethylester (128 mg, 39 %).

Oppløs 128 mg (0,193 mmol) ['4S-[4a, 7a (R*) , 12bB]]-7-[(1-(4-methoxybenzylthio)-1-oxo-cyklopropan)methylamino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-octahydro-6-oxopyrido[2,l-a][2]benzazepin-4-carboxylsyre-difenylmethylester i 3 ml methylenklorid og tilsett 0,21 ml (1,94 mmol) anisol og 78 mg (0,245 mmol) kvikk-sølvacetat. Avkjøl til 0° C og behandl med 1,5 ml trifluoreddiksyre. Omrør i 3,5 timer og bobl deretter hydrogensulfidgass gjennom løsningen i 15 minutter. Filtrer, fordamp løsningsmidlet i vakuum og fortynn med methylenklorid og carbontetraklorid. Fordamp løsningsmidlet i vakuum og rens ved silicagelkromatografi (1:1 hexan/ethylacetat med 1 % eddiksyre) under dannelse av tittelforbindelsen som et hvitt fast materiale (70 mg).

Eksempel 12

[ 4S-[ 4a, 7a( R*), 12bB]]- 7-[( 1- thio- l- oxocyklohexan) methylamino]-1, 2, 3, 4, 6, 7, 8, 12b- octahydro- 6- oxopyrido 0 2, l- a][ 2] benzazepin- 4-carboxylsyre

Avkjøl lithiumhexamethyldisilazan (8,4 ml av en

1,0M løsning i tetrahydrofuran, 8,4 mol) til -78° C. Tilsett ved kanyleoverføring en løsning av 2,0 g (8,3 mmol) 1-(carbo-ethoxy) -1- (4-methoxybenzylthio) methan i 8 ml tetrahydrofuran. Omrør i 45 minutter og tilsett deretter en løsning av 1,94 g (8,32 mmol) l-jod-5-klorpentan i 8 ml tetrahydrofuran. Omrør

i 1 time og tilsett 1,21 ml (10., 0 mmol) 1,3-dimethyl-3,4,5,6-tetrahydro-2(1H)-pyrimidinon (DMPU). Omrør ved 0° C i 4 timer og ved romtemperatur i 6 timer. Avkjøl til -78° C, tilsett 8,4 ml (8,4 mmol) lithiumhexamethyldisilazan og omrør ved romtemperatur over natten. Tilsett 5 ml mettet ammoniumklorid og fordel mellom 50 ml ethylacetat og 50 ml vann. Separer den organiske fase, tørk (Na2S04) og fordamp løsningsmidlet i vakuum. Rens ved kromatografi (6:1 hexan/ethylacetat) under dannelse av 1-(carboethoxy)-1-(4-methoxybenzylthio)cyklohexan som en farveløs olje (1,45 g, 56 %).

Oppløs 1,45 g (4,7 mmol) 1-(carboethoxy)-1-(4-methoxybenzylthio)cyklohexan i 2,5 ml vann og 10 ml tetrahydrofuran. Behandl med 4 ml (10 mmol) 2,5N natriumhydroxyd. Oppvarm til 60° C i 2 timer, tilsett 10 ml 95 % ethanol og 0,42 g (10 mmol) lithiumhydroxydmonohydrat. Oppvarm til forsiktig tilbakeløpskokning i 2 0 timer, avkjøl og fordamp løsningsmidlet i vakuum. Fordel mellom 50 ml vann og 50 ml ether. Separer den vandige fase og surgjør til pH 1. Ekstraher med 50 ml methylklorid, tørk (Na2S04) og fordamp løsnings-midlet i vakuum under dannelse av 1-(carboxy)-1-(4-methoxybenzylthio) cyklohexan som et hvitt fast materiale (1,21 g, 92%).

Oppløs 220 mg (0,50 mmol) [4S-[4a, 7ot (R*) , 12b8]]-7-(amino)-1,2,3,4,6,7,8,12b-octahydro-6-oxopyrido[2,l-a][2]-benzazepin-4-carboxylsyre-difenylmethylester, 144 mg (0,75 mmol) EDC og 140 mg (0,50 mmol) 1-(carboxy)-1-(4-methoxybenzylthio)--cyklohexan i 6 ml tetrahydrofuran. Omrør ved romtemperatur i 24 timer, tilsett ytterligere 95 mg (0,5 mmol) EDC og 70 mg (0,25 mmol) 1-(carboxy)-1-(4-methoxybenzylthio)cyklohexan. Omrør ved romtemperatur over natten og fordamp løsningsmidlet

i vakuum. Oppløs residuet i 30 ml ethylacetat og vask med 15 ml 5 % svovelsyre, 15 ml mettet natriumhydrogencarbonat og 15 ml saltvann. Tørk (Na2S04) og fordamp løsningsmidlet i vakuum. Rens ved silicagelkromatografi (2:1 hexan/ethylacetat) under dannelse av [4S-[4ct, 7a (R*), 12b6 ]]-7-[ (1- (4-methoxybenzylthio) - 1-oxo-cyklohexan)methylamino]-l,2,3,4,6,7,8,12b-octahydro-6-oxopyrido[2,l-a][2]benzazepin-4-carboxylsyre-difenylmethylester (220 mg, 6 3 %).

Oppløs 220 mg (0,313 mmol) [4S-[4a, 7a(R<*>), 12bg]]-7-[(1-(4-methoxybenzylthio)-1-oxo-cyklohexan)methylamino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-octahydro-6.-oxopyrido [ 2, l-a ] [ 2 ]benzazepin-4-carboxylsyre-difenylmethylester i 5 ml methylenklorid og tilsett 0,34 ml (3,13 mmol) anisol og 125 mg (0,39 mmol) kvikksølv-acetat. Avkjøl til 0° C og behandl med 2,5 ml trifluoreddiksyre. Omrør i 3 timer og bobl deretter hydrogensulfidgass gjennom løsningen i 10 minutter. Filtrer og fordamp løsningsmidlet i vakuum. Fortynn med methylenklorid og carbontetraklorid og fordamp løsningsmidlet igj^ehui: vakuum. Rens ved silicagelkromatografi (1:1 hexan/ethylacetat med 1 eddiksyre) under dannelse av tittelforbindelsen som et hvitt fast materiale (100 mg, 77 %).

Eksempel 13

[ 4S-[ 4a, 7a ( R*), 12bg] ]- 7-[ ( 5- thio- 5- oxo- 4, 5- dihydro- cyklo-pentimidazol) metylamino]- 3, 4, 6, 7, 8, 12b- hexahydro- 6- oxo-( 1H-[ 1, 4]- oxazino[ 3, 4- a][ 2] benzazepin- 4- carboxylsyre

Reaksjonsskjema D, trinn a; N-[ 2-( 1, 3- dihydro- 1, 3- dioxo- 2H-isoindol- 2- yl)- l- oxo- 3- fenylpropyl]- L- serin- methylester

Oppslem 90 g (0,3 mol) N-fthaloyl-(S)-fenylalanin i

450 ml methylenklorid og tilsett dråpevis 54 ml (0,62 mol) oxalylklorid. Anbring under en tørr atmosfære (CaS04~rør) og behandl med 10 yl dimethylformamid. Omrør i 5 timer, filtrer og konsentrer i vakuum under dannelse av N-fthaloyl-(S)-fenyl-alanin-syreklorid, et off-hvitt amorft fast materiale.

Oppløs 56 g (0,36 mol) serinmethylesterhydroklorid i

300 ml tetrahydrofuran, avkjøl deretter til 0° C og tilsett 88 ml (0,8 mol) 4-methylmorfolin. Tilsett dråpevis en løsning av N-fthaloyl-(S)-fenylalanin-syreklorid i 200 ml tetrahydrofuran.-Tillat blandingen å oppvarmes til romtemperatur og omrør i 3 timer. Filtrer og konsentrer filtratet i vakuum. Oppløs residuet i ethylacetat og separer den organiske fase. Vask med vann og deretter med mettet natriumklorid og tørk (MgS04). Fordamp løsningsmidlet i vakuum under dannelse av en olje.

Rens ved silicagelkromatografi (gradient 50 % ethylacetat/

hexan til ethylacetat) under dannelse av tittelforbindelsen

(80,8 g, 67 %) med sm.p. 129 - 132° C.

Reaksjonsskjema D, trinn b: N-[ 2-( l, 3- dihydro- l, 3- dioxo- 2H-isoindol- 2- yl)- l- oxo- 3- fenylpropyl]- O- 2- propenyl- L- serinmethylester

Oppløs 25 g (63 mmol) N-[2-(1,3-dihydro-l,3-dioxo-2H-isoindol-2-yl)-l-oxo-3-fenylpropyl]-L-serin-methylester i 600 ml 1:1 methylenklorid/cyklohexan. Tilsett 26 g (128 mmol) allyl-trikloracetimidat ,og 5 ml (56,6 mmol) trifluormethansulfonsyre. Omrør ved romtemperatur under en nitrogenatmosfære i 5 timer

og fortynn med methylenklorid. Vask med mettet vandig natriumhydrogencarbonat, vann, tørk (MgS04) og fordamp løsningsmidlet i vakuum. Rens ved silicagelkromatografi (gradient 20 % ethylacetat/hexan til 35 % ethylacetat/hexan) under dannelse av tittelforbindelsen; sm.p. 95 - 97° C.

Reaksjonsskjema D, trinn c; £S-( R*, R<*>)] N- [ 2-( 1, 3- dihydro- l, 3-dioxo- 2H- isoindol- 2- yl)- I^ ox, p- 3-* f enylpropyl ]- 3 , 4- dihydro- 2H- l, 4-oxazin- 3- carboxylsyre- methylester

Oppløs 13 g (29,8 mmol) N-[2-(1,3-dihydro-l,3-dioxo-2H-isoindolrr2rryl) -l-oxo-3-fenylpropyl]-0-2-propenyl-L-serinmethylester i 220 ml 10:1 methylenklorid/methanol. Avkjøl til -78° C og spyl med en blanding av ozon/oxygen i ca. 10 minutter inntil en blå farge vedvarer. Spyl med nitrogen i 10 minutter ved -78° C for å fjerne overskudd av ozon. Behandl med 60 ml (0,82 mol) methylsulfid og tillat blandingen å oppvarmes til romtemperatur. Omrør ved romtemperatur i 2,5 timer, fordamp løsningsmidlet i vakuum og oppløs residuet i 200 ml ethylacetat. Vask med vann, mettet natriumklorid, tørk (MgSO^) og fordamp løsningsmidlet i vakuum under dannelse av mellomproduktet N-[2-(1,3-dihydro-l,3-dioxo-2H-isoindol-2-yl)-l-oxo-3-fenylpropyl]-0-2-oxoethyl-L-serin-methylester som et skum (13,6 g).

Oppløs 13,6 g N-[2-(l,3-dihydro-l,3-dioxo-2H-isoindol-2-yl)-l-oxo-3-fenylpropyl]-0-2-oxoethyl-L-serin-methylester i 330 ml 10:1 methylenklorid/trifluoreddiksyre. Omrør ved romtemperatur i 2,5 timer og fordamp løsningsmidlet i vakuum. Rens ved silicagelkromatografi (35 % ethylacetat/hexan) og omkrystalliser (ethylacetat/hexan) under dannelse av tittelforbindelsen (8,52 g, 68 %); sm.p. 70 - 72° C.

Reaksjonsskjema D, trinn d: [ 4S-[ 4a, 7a( R*), 12bg]]- 7-[( 1, 3-dihydro- 1, 3- dioxo- 2H- isoindol- 2- yl)]- 3, 4, 6, 7, 8, 12b- hexahydro-6- oxo- lH-[ 1, 4]- oxazino[ 3, 4- a][ 2] benzazepin- 4- carboxylsyre-difenylmethylester

Oppløs 2,5 g (5,9 mmol) [s-(R<*>, R<*>)]-N-£2-(1,3-dihydro-1,3-dioxo-2H-isoindol-2-yl)-l-oxo-3-fenylpropyl]-3,4-dihydr.6-2H-l, 4-oxazin-3-carboxylsyre-methylester i 5 ml methylenklorid og tilsett dråpevis til en på forhånd fremstilt løsning av 4,0 ml (45 mmol) trifluormethansulfonsyre og 1,0 ml (7,1 mmol) trifluoreddiksyreanhydrid. Anbring under en nitrogenatmosfære og omrør ved romtemperatur i 123 timer.

Hell over i en skilletrakt inneholdende 200 g is og 200 ml ethylacetat. Separer den organiske fase, vask med 3 x 200 ml vann og 100 ml mettet vandig natriumklorid. Ekstraher den organiske fase med 4 x 40 ml 10 vekt% kaliumhydrogencarbonat og 40 ml vann. Anbring 100 ml ethylacetat over de kombinerte basiske vandige faser og avkjøl på et isbad. Tilsett dråpevis 6N saltsyre for å justere pH til 1 mens temperaturen opprettholdes ved 5 - 10° C. Separer den organiske fase og ekstraher den vandige fase med 3 x 200 ml ethylacetat, vask med mettet natriumklorid og tørk (MgS04). Fordamp løsningsmidlet i vakuum og tørk residuet ved høyvakuum ved 56 C i 24 timer under dannelse av mellomproduktet [4S-[4a, 7a(R<*>), 12bB]]-7-[(1,3-dihydro-1,3-dioxo-2H-isoindol-2-yl)]-3,4,6,7,8,12b-hexahydro-6-oxo-lH-[1,4]-oxazino[3,4-a][2]benzazepin-4-carboxylsyre (1,75 g, 73 %).

Oppløs 500 mg (1,23 mmol) [4S-[4a, 7a(R<*>), 12bB]]-7-[(1,3-dihydro-l,3-dioxo-2H-isoindol-2-yl)3-3,4,6,7,8,12b-hexahydro-6-oxo-lH-[l,4]-oxazino[3,4-a][2]benzazepin-4-carboxylsyre i 12 ml methylenklorid og behandl med 360 mg

(1,86 mmol) difenyldiazomethan. Omrør i 5,5 timer og fordamp løsningsmidlet i vakuum. Rens ved silicagelkromatografi

(gradient 20 % ethylacetat/hexan til 35 % ethylacetat/hexan)

under dannelse av tittelforbindelsen (563 mg, 80 %); sm.p.

178 - 181° C (isopropanol).

Reaksjonsskjema D, trinn e: .[ 4S-[ 4a, 7a( R*), 12bB]]- 7-( amino)-3, 4, 6, 7, 8, 12b- hexahydro- 6- oxo- lH- 01, 4]- oxazino[ 3, 4- a ][ 2 ] - benzazepin- 4- carboxylsyre- difenylmethylester

Oppløs 296 g (0,517 mmol) [4S-[4a, 7a(R<*>), 12bB]]-7-[(1,3-dihydro-l,3-dioxo-2H-isoindol-2-yl)]-3,4,6,7,8,12b-hexahydro-6-oxo-lH-[1,4]-oxazino[3,4-a][2]benzazepin-4-carboxylsyre-difenylmethylester i 5 ml methanol og behandl med hydrazinmonohydrat (1,1 ml av en IM løsning i methanol, 1,1 mmol). Omrør ved romtemperatur i 44 timer, fordamp løsningsmidlet i vakuum og oppslem residuet i 19 ml methylenklorid.

Filtrer og fordamp løsningsmidlet i vakuum under dannelse av tittelforbindelsen (218 mg, 95 %).

Reaksjonsskjema A: [ 4S-[ 4a, 7a( R*), 12bB]]- 7-[( 5- thio- 5- oxo-4, 5- dihydro- cyklopentimidazol) methylamino]- 3, 4, 6, 7, 8, 12b-hexahydro- 6- oxo- lH-[ 1, 4]- oxazino[ 3, 4- a][ 2] benzazepin- 4-carboxylsyre

Oppløs 31,2 g (0,2 mol) 4,5-imidazoldicarboxylsyre i 500 ml ethanol og behandl med 0,5 ml konsentrert svovelsyre. Oppvarm til 60° C i 16 timer, avkjøl og reduser løsningsmidlet med 50 % i vakuum. Fortynn med 500 ml ethylether, vask med mettet natriumhydrogencarbonat og deretter med saltvann. Tørk (MgSO^) og fordamp løsningsmidlet i vakuum under dannelse av 4,5-(dicarboethoxy)imidazol.

Oppløs 1,06 g (5 mmol) 4,5-(dicarboethoxy)imidazol og 1,5 ml (7,5 mmol) triethylamin i 25 ml 50/50 dioxan/vann. Tilsett 1,36 g (5,5 mmol) [2-(tert-butyloxycarbonyloxyimino)-2-fenylacetonitril] og omrør ved romtemperatur i 2 timer. Tilsett 7,5 ml vann og 10 ml ethylacetat, separer den vandige fase og vask med 10 ml ethylacetat. Kombiner de organiske faser, tørk (MgS04) og fordamp løsningsmidlet i vakuum. Rens residuet ved silicagelkromatografi under dannelse av N-(carbo-t-butyloxy)-4,5-(dicarboethoxy)imidazol.

Oppløs 3,12 g (10 mmol) N-(carbo-t-butyloxy)-4,5-(dicarboethoxy)imidazol i 30 ml vannfritt tetrahydrofuran og avkjøl til -20° C. Behandl med lithiumborhydrid (7 ml av en 2N løsning) og omrør. under en nitrogenatmosfære i flere dager. Tilsett forsiktig vann og fordel mellom ethylacetat og 5 % saltsyre. Separer den organiske fase, vask med saltvann og tørk (MgSO^). Fordamp løsningsmidlet i vakuum og rens ved silicagelkromatografi under dannelse av N-(carbo-t-butyloxy)-4,5-(dihydroxymethy1)imidazol.

Oppløs 1,78 g (0,01 mol) N-bromsuccinimid i 60 ml tetrahydrofuran og tilsett en løsning av 2,62 g (0,01 mol trifenylfosfin i tetrahydrofuran. Tilsett en løsning av 1,14 g (5 mmol) N-(carbo-t-butyloxy)-4,5-(dihydroxymethyl)imidazol i 25 ml tetrahydrofuran og omrør inntil mesteparten av det faste materiale går i oppløsning. Fordamp løsningsmidlet i vakuum og fordel residuet mellom vann og ethylether. Separer den organiske fase og vask med vann. Tørk (Na2S04) og fordamp løsningsmidlet i vakuum. Rens ved silicagelkromatografi under dannelse av N-(carbo-t-butyloxy)-4 ,5-(dibrommethyl)-imidazol.

Oppløs 15,2 ml (0,100 mol) diethylmalonat i 800 ml tetrahydrofuran. Avkjøl på et isbad og behandl med 3,0 g (0,10 mol, 80 % i mineralolje) natriumhydrid. Omrør inntil en oppløsning oppnås og tilsett 35,4 g (0,100 mol) N-(carbo-t-butyloxy) -4 , 5- (dibrommethyl) imidazol . Omrør i 30 minuttter og tilsett deretter ytterligere 3,0 g (0,10 mol) natriumhydrid. Omrør ved..romtemperatur i 20 timer, filtrer gjennom et filterhjelpestoff og fordamp løsningsmidlet i vakuum.

Rens ved silicagelkromatografi under dannelse av 5,5-(dicarboethoxy) -1-(carbo-t-butyloxy)-4,5-dihydro-cyklopentimidazol.

Oppløs 21,3 g (60,6 mmol) 5,5-(dicarboethoxy)-1-(carbo-t-butyloxy)-4,5-dihydro-cyklopentimidazol i 140 ml dimethylsulfoxyd. Tilsett 14 ml vann og 7,0 g (0,16 mol) lithiumklorid. Oppvarm til tilbakeløpskokning i 4 timer, avkjøl og fordel mellom 150 ml vann og 2 x 150 ml methylenklorid. Vask den organiske fase med 150 ml vann, tørk (MgS04) og før gjennom en silicagelplugg under dannelse av 5-(carbo-ethoxy) -1-(carbo-t-butyloxy)-4,5-dihydro-cyklopentimidazol.

Oppløs 9,5 g (34,1 mmol) 5-(carboethoxy)-1-(carbo-t-butyloxy) -4 , 5-dihydro-cyklopentimidazol i 150 ml 95 % ethanol og 75 ml vann. Tilsett 9,5 g (0,17 mol) kaliumhydroxyd og omrør ved romtemperatur i 1 time. Fordel mellom 150 ml vann og 2 x 150 ml ethylether. Surgjør den vandige fase med saltsyre til pH 1. Ekstraher med 2 x 150 ml methylenklorid, tørk (Na2S04) og fordamp løsningsmidlet i vakuum under dannelse av 5-(carboxy)-1-(carbo-t-butyloxy)-4,5-dihydro-cyklopentimi-dazol.

Oppløs 5,9 g (23,5 mmol) 5-(carboxy)-1-(carbo-t-butyloxy) -4,5-dihydro-cyklopentimidazol i 60 ml methanol og behandl med 5,8 ml (47 mmol) dimethoxypropan og 0,8 ml svovelsyre. Omrør ved romtemperatur i 1 dag. Fordamp løsningsmidlet i vakuum, fortynn med 75 ml methylenklorid og vask med 35 ml mettet natriumhydrogencarbonat. Ekstraher den vandige fase med 3 0 ml methylenklorid, vask de kombinerte organiske bestanddeler med 30 ml saltvann og tørk - (Na2S04). Fordamp løsnings-midlet i vakuum og før gjennom en plugg av silicagel under under dannelse av 5-(carbomethoxy)-1-(carbo-t-butyloxy)-4,5-dihydro-cyklopentimidazol.

Bland 3,0 g (19 mmol) 4-methoxybenzylthiol i natriumhydroxyd (20 ml av en 2,5N vandig løsning) og 10 ml methanol. Tilsett 1,5 ml mettet vandig kobbersulfatløsning og omrør ved romtemperatur i 2 timer, og blås luft over toppen av blandingen. Filtrer, vask det faste materiale med vann og tørk under dannelse av 4-methoxybenzyldisulfid somlet blék-gult pulver (2,71 g, 91 %).

Avkjøl 4,2 ml (4,2 mol) lithiumhexamethyldisilazan (1,0M i tetrahydrofuran) til -78° C, og behandl med en løsning av 944 mg (3,55 mmol) 5-(carbomethoxy)-1-(carbo-t-butyloxy)-4,5-dihydro-cyklopentimidazol i 5 ml tetrahydrofuran. Omrør i 1 time og tilsett deretter 0,93 ml (5,3 mmol) hexamethylfosforamid og omrør i 5 minutter. Tilsett 1,6 g (5,2 mmol) 4-methoxybenzyldisulfid i 10 ml tetrahydrofuran. Omrør i 5

timer ved -78° C og tilsett en løsning av ammoniumklorid. Fordel mellom 75 ml ethylacetat og 30 ml saltvann. Tørk (Na2S04), fordamp løsningsmidlet i vakuum og rens ved silicagelkromatografi under dannelse av 5-(carbomethoxy)-1-(carbo-t-butyloxy)-5-(4-methoxybenzylthio)-4,5-dihydro-cyklo-pentimidazol.

Oppløs 1,43 g (3,55 mmol) 5-(carbomethoxy)-1-(carbo-t-butyloxy) -5-(4-methoxybenzylthio)-4,5-dihydro-cyklopentimida-zol i 25 ml 95 % ethanol, 12 ml vann og 15 ml tetrahydrofuran. Behandl med 1,3 g (23 mmol) kaliumhydroxyd og omrør ved romtemperatur i 1 time. Filtrer og fordamp løsningsmidlet i vakuum. Fordel mellom 125 ml vann og 75 ml ether. Separer den vandige fase og surgjør med kald konsentrert saltsyre. Ekstraher med 75 ml methylenklorid, tørk (Na2S04) og fordamp løsningsmidlet i vakuum. Rens ved silicagelkromatografi under dannelse av 5-(carboxy)-1-(carbo-t-butyloxy)-5-(4-methoxybenzylthio) -4,5-dihydro-cyklopentimidazol.

Oppløs 201 mg (0,454 mmol) [4S-[4a, 7a(R<*>), 12b8]J-7-(amino) -3,4,6,7,8,12b-hexahydro-6-oxo^lH-[ 1, 4 ].-oxazinoC 3,4-a]-[2]benzazepin-4-carboxylsyre-difenylmethylester og 130 mg (0,68 mmol) EDC i 5 ml tetrahydrofuran.- Behandl med 177 mg (0,454 mmol) 5-(carboxy)-1-(carbo-t-butyloxy)-5-(4-methoxybenzylthio)-4,5-dihydro-cyklopentimidazol. Omrør ved romtemperatur i 20 timer og fordamp løsningsmidlet i vakuum. Oppløs residuet i 50 ml ethylacetat og vask med 15 ml 5 % svovelsyre og deretter med 15 ml mettet natriumhydrogencarbonat. Tørk (Na2S04) og fordamp løsningsmidlet i vakuum. Rens ved silicagelkromatografi under dannelse av [4S-[4ct, 7a (R*), 12bB] ]-7-[ (5-(4-methoxybenzylthio) -5-oxo-l-(carbo-t-butyloxy)-4,5-dihydro-cyklo-pentimidazol )methylamino1-3,4,6,7,8,12b-hexahydro-6-oxo-lH-[1,4]-oxazino[3,4-a][2]benzazepin-4-carboxylsyre-difenylmethylester .

Oppløs 133 mg (0,163 mmol) [4S-[4a, 7a(R<*>), 12b3]]-7-[(5-(4-methoxybenzylthio)-5-oxo-l-(carbo-t-butyloxy)-4,5-dihydro. cyklopentimidazol)methylamino]-3,4,6,7,8,12b-hexahydro-6-oxo-lH-[1,4]-oxazino[3,4-a][2]benzazepin-4-carboxylsyre-difenylmethylester i 3 ml methylenklorid og avkjøl til 0° C. Behandl med 1,5 ml trifluoreddiksyre, 0,19 ml

(1,7 mmol) anisol og 65 mg (0,2 mmol) kvikksølvacetat. Omrør ved 0° C i 3 timer og bobl deretter hydrogensulfidgass gjennom løsningen, i 10 minutter. Filtrer og vask med methylenklorid. Vask den organiske fase med 20 ml vann, tørk (Na2S04) og fordamp løsningsmidlet i vakuum. Rens ved silicagelkromatografi under dannelse av tittelforbindelsen.

Eksempel 14

Fremstilling av [ 4S-[ 4a, 7a( R*), 12bB]]- 7-[( 5- thio- 5- oxo-4, 5, 6- trihydro- cyklopenta( c] furan) methylamino]- 3, 4, 6, 7, 8, 12b-hexahydro- 6- oxo- lH-[ 1, 4]- thiazino[ 3, 4- a][ 2] benzazepin- 4-carboxylsyre

Oppløs 21,2 g (10 mmol) 3,4-.(dicarboethoxy)furan i

30 ml vannfritt tetrahydrofuran og avkjøl til -20° C. Behandl med lithiumborhydrid (7 ml av en 2N løsning), og omrør under en nitrogenatmosfære i flere dager. Tilsett forsiktig vann og fordel mellom ethylacetat og 5 % saltsyre. Separer den organiske fase, vask med saltvann og tørk (MgS04). Fordamp løsningsmidlet i vakuum og rens ved silicagelkromatografi under dannelse av 3,4-(dihydroxymethyl)furan.

Oppløs 11,9 g (0,093 mol) 3,4-(dihydroxymethyl)furan

i 12,4 g 2,4,6-collidin og tilsett en løsning av 7,9 g (91 mmol)

lithiumbromid i 80 ml dimethylformamid. Avkjøl til -50° C og anbring under en nitrogenatmosfære. Tilsett 11,8 g methan-sulfonylklorid med en hastighet som holder temperaturen under 0° C. Omrør ved 0° C i 2 timer og hell over i isvann. Ekstraher med ethylether, tørk (MgS04), fordamp løsningsmidlet

i vakuum og rens ved silicagelkromatografi under dannelse av 3,4-(dibrommethyl)furan.

Oppløs 15,2 ml (0,100 mol) diethylmalonat i 800 ml tetrahydrofuran. Avkjøl på et isbad og behandl med 3,0 g

(0,10 mol) natriumhydrid (80% i mineralolje). Omrør inntil

en oppløsning oppnås og tilsett 23,8 g (0,100 mol) 3,4-(dibrom-methyl) f uran . Omrør i 30 minutter og tilsett deretter ytterligere 3,0 g (0,10 mol) natriumhydrid. Omrør ved romtemperatur i 20 timer, filtrer gjennom et filterhjelpestoff og fordamp løsningsmidlet i vakuum. Rens ved silicagelkromatografi under dannelse av 5,5-(dicarboethoxy)-2,4,5,6-tetrahydro-cyklopenta-[c]furan.

Oppløs 15,3 g (60,6 mmol) 5,5-(dicarboethoxy)-2,4,5,6-tetrahydro-cykopenta[c]furan i 140 ml dimethylsulfoxyd. Tilsett 14 ml vann og 7,0 g (0,16 mol) lithiumklorid. Oppvarm til tilbakeløpskokning i 4 timer, avkjøl og fordel mellom 150 ml vann og 2 x 150 ml methylenklorid. Vask den organiske fase med 150 ml vann, tørk (MgS04) og før gjennom en silicagelplugg under dannelse av 5-<carboethoxy) -2 ,4 ,5 ,.6-tetrahydro-cyklopenta-Cc]furan.

Oppløs 6,2 g (34,1 mmol) 5-(carboethoxy)-2,4,5,6-tetrahydro-cyklopehtatc]furan i 150 ml 95 % ethanol og 75 ml vann. Tilsett 9,5 g (0,17 mol) kaliumhydroxyd og omrør ved romtemperatur i 1 time. Fordel mellom 150 ml vann og 2 x 150 ml ethylether. Surgjør den vandige fase med saltsyre til pH 1. Ekstraher med 2 x 150 ml methylenklorid, tørk (Na2S04) og fordamp løsningsmidlet i vakuum under dannelse av 5-(carboxy)-2,4,5,6-tetrahydro-cyklopenta[c]furan.

Oppløs 3,6 g (23,5 mmol) 5-(carboxy)-2,4,5,6-tetra-hydro-cyklopentatc]furan i 60 ml methanol og behandl med 5>8 ml (47 mmol) dimethoxypropan og 0,8 ml svovelsyre. Omrør ved romtemperatur i 1 dag. Fordamp løsningsmidlet i vakuum, fortynn med 75 ml methylenklorid og vask med 3 5 ml mettet natriumhydrogencarbonat. Ekstraher den vandige fase med 30 ml methylenklorid, vask de kombinerte organiske bestanddeler med 30 ml saltvann og tørk (Na,,S04). Fordamp løsningsmidlet i vakuum og før gjennom en plugg av silicagel under dannelse av 5-(carbomethoxy)-2,4,5,6-tetrahydro-cyklopenta[c]furan.

Bland 3,0 g (19 mmol) 4-methoxybenzylthiol i natriumhydroxyd (20 ml av en 2, 5N vandig løsning}- ogllO ml methanol. Tilsett 1,5 ml mettet vandig kobbersulfatløsning og omrør ved romtemperatur i 2 timer, og blås luft over toppen av blandingen. Filtrer, vask det faste materiale med vann og tørk under dannelse av 4-methoxybenzyldisulfid som et blekt gult pulver

(2,71 g, 91 %).

Avkjøl lithiumhexamethyldisilazan (4,2 ml, 4,2 mmol, 1,0M i tetrahydrofuran) til -78° C og behandl med en løsning av 589 mg (3,55 mmol) 5-(carbomethoxy)-2,4,5,6-tetrahydro-cyklopenta[c]furan i 5 ml tetrahydrofuran. Omrør ved 1 time og tilsett deretter 0,93 ml (5,3 mmol) hexamethylfosforamid og omrør i 5 minutter. Tilsett 1,6 g (5,2 mmol) 4-methoxybenzyl-disulf id i 10 ml tetrahydrofuran. Omrør i 5 timer ved -7 8°..C og tilsett en løsning av ammoniumklorid. Fordel mellom 75 ml ethylacetat og 30 ml saltvann. Tørk (Na2S04), fordamp løsningsmidlet i vakuum og rens ved silicagelkromatografi under dannelse av 5-(carbomethoxy)-5-(4-methoxybenzylthio)-2,4,5,6-tetrahydro-cyklopenta[c]furan.

Oppløs 1,08 g (3,55 mmol) 5-(carbomethoxy)-5-(4-methoxybenzylthio)-2,4,5,6-tetrahydro-cyklopenta[c]furan i 25 ml 95 % ethanol og 12 ml vann og 15 ml tetrahydrofuran. Behandl med 1,3 g (23 mmol) kaliumhydroxyd og omrør ved romtemperatur i 1 time. Filtrer og fordamp løsningsmidlet i vakuum. Fordel mellom 125 ml vann og 75 ml ether. Separer den vandige fase og surgjør med kald konsentrert saltsyre. Ekstraher med 75 ml methylenklorid, tørk (Na2S04) og fordamp løsningsmidlet i vakuum. Rens ved silicagelkromatografi under dannelse av 5-(carboxy)-5-(4-methoxybenzylthio)-2,4,5,6-tetra-hydro-cyklopenta [ c ] f uran .

Oppløs 208 mg (0,454 mmol) [4S-[4a, 7a(R<*>), 12bB]]-7-(amino)-3,4,6,7,8,12b-hexahydro-6~oxo-lH-[1,4]-thiazino-[3,4-a][2]benzazepin-4-carboxylsyre-difenylmethylester og 130 mg (0,68 mmol) EDC i 5 ml tetrahydrofuran. Behandl med 132 mg (0,454 mmol) 5-(carboxy)-5-(4-methoxybenzylthio)-2,4,5,6-tetrahydro-cyklopentatc]furan. Omrør ved romtemperatur i 2 0 timer og fordamp løsningsmidlet i vakuum. Oppløs residuet i 50 ml ethylacetat og vask med 15 ml 5 % svovelsyre og deretter med 15 ml mettet natriumhydrogencarbonat. Tørk (Na2S04) og fordamp løsningsmidlet i vakuum. Rens ved silicagelkromatografi under dannelse av [4S-[4ct, 7ct(R*), 12bB]]-7-[(5- (4-methoxybenzylthio) -5-OXO-2,4,5,6-tetrahydro-cyklopenta[c]furan) - methylamino]-3,4,6,7,8,12b-hexahydro-6-oxo-lH-[1,4]-thiaz ino-[3,4-a][2]benzazepin-4-carboxylsyre-difenylmethylester.

Oppløs 119 mg (0,163 mmol) [4S-[4a, 7a(R<*>), 12bB]]-7-[ (5-(4-methoxybenzylthio)-5-oxo-2,4,5,6-tetrahydro-cyklopenta-[c]furan)methylamino]-3,4,6,7,8,12b-hexahydro-6-oxo-lH- [1,4]-, thiazino[3,4-a][2]benzazepin-4-carboxylsyre-difenylmethylester

i 3 ml methylenklorid og avkjøl til 0° C. Behandl med 1,5 ml trifluoreddiksyre, 0,19 ml (1,7 mmol) anisol og 65 mg (0,2 mmol) kvikksølvacetat. Omrør ved 0° C i 3 timer og bobl deretter hydrogensulfidgass gjennom løsningen i 10 minutter. Filtrer i og vask med methylenklorid. Vask den organiske fase med 2 0 ml vann, tørk (Na2S04) og fordamp løsningsmidlet i vakuum. Rens ved silicagelkromatografi under dannelse av tittelforbindelsen.

Eksempel 15

i Fremstilling av [ 4S-[ 4a, 7a( R*), 12bB]]- 7-[( 5- thio- 5- oxo- 4, 5, 6-trihydro- cyklopenta[ c] thiofen) methylamino]- 3, 4, 6, 7, 8, 12b-hexahydro- 6- oxo- lH-[ 1, 4]- thiazino[ 3, 4— a] [ 2] benzazepin- 4- carboxylsyre

Oppløs 2,28 g (10 mmol) 3,4-(dicarboethoxy)thiofen i 3 30 ml vannfritt tetrahydrofuran og avkjøl til -20° C. Behandl med lithiumborhydrid (7 ml av en 2N løsning) og omrør under en nitrogenatmosfære i flere dager. Tilsett forsiktig vann og fordel mellom ethylacetat og 5 % saltsyre. Separer den organiske fase, vask med saltvann og tørk (MgS04). Fordamp j løsningsmidlet i vakuum og rens ved silicagelkromatografi under.dannelse av 3,4-(dihydroxymethyl)thiofen.

Oppløs 13,4 g (0,093 mal) 3,4-(dihydroxymethyl)-thiofen i 12,4 g 2,4,6-collidin og tilsett en løsning av 7,9 g (91 mmol) lithiumbromid i 80 ml dimethylformamid. Avkjøl til -50° C og anbring under en nitrogenatmosfære. Tilsett 11,8 g trifluormethansulfonylklorid med en hastighet som holder temperaturen under 0° C. Omrør ved 0° C i 2 timer og hell over i isvann. Ekstraher med ethylether, tørk (MgSO^), fordamp løsningsmidlet i vakuum og rens ved silicagelkromatogra-.l fi under dannelse av 3,4-(dibrommethyl)thiofen.

Oppløs 15,2 ml (0,100 mol) diethylmalonat i 800 ml tetrahydrofuran. Avkjøl i et isbad og behandl med 3,0 g (0,10 mol) natriumhydrid (80 % i mineralolje). Omrør inntil en oppløsning oppnås og tilsett 25,4 g (0,100 mol) 3,4-(dibrom-methyl) thiofen. Omrør i 30 minutter og tilsett deretter ytterligere 3,0 g (0,10 mol) natriumhydrid. Omrør ved romtemperatur i 20 timer, filtrer gjennom ét filterhjelpestoff og fordamp løsningsmidlet i vakuum. Rens ved silicagelkromatografi under dannelse av 5,5-(dicarboethoxy)-2,4,5,6-tetrahydro-cyklopenta-[c]thiofen.

Oppløs 16,2 g (60,6 mmol) 5,5-(dicarboethoxy)-2,4,5,6-tetrahydro-cyklopenta[c]thiofen i 140 ml dimethylsulfoxyd. Tilsett 14 ml vann og 7,0 g (0,16 mol) lithiumklorid. Oppvarm til tilbakeløpskokning i 4 timer, avkjøl og fordel mellom 150 ml vann og 2 x 150 ml methylenklorid. Vask den organiske fase med 150 ml vann, tørk (MgSO^) og før gjennom en silicagelplugg under dannelse av 5-(carboethoxy)-2,4,5,6-tetrahydro-cyklopenta [c]thiofen.

Oppløs 6,68 g (34,1 mmol) 5-(carboethoxy)-2,4,5,6-tetrahydro-cyklopenta[c]thiofen i 150 ml 95 % ethanol og 75 ml vann. Tilsett 9,5 g (0,17 mol) kaliumhydroxyd og omrør ved romtemperatur i 1 time. Fordel mellom 150 ml vann og 2 x 150

ml ethylether. Surgjør den vandige fase med saltsyre til pH 1. Ekstraher med 2 x 150 ml methylenklorid, tørk (Na2S04) og fordamp løsningsmidlet i vakuum under dannelse av 5-(carboxy)-2,4,5,6-tetrahydro-cyklopenta[c]thiofen.

Oppløs 3,95 g (23,5 mmol) 5-(carboxy)-2,4,5,6-tetrahydro-cyklopenta[c]thiofen i 60 ml methanol og behandl med 5,8 ml (47 mmol) dimethoxypropan og 0,8 ml svovelsyre.

Omrør ved romtemperatur i 1 dag. - Fordamp løsningsmidlet i vakuum, fortynn med 75 ml methylenklorid og vask med 35 ml mettet natriumhydrogencarbonat. Ekstraher den vandige fase med 30 ml methylenklorid, vask de kombinerte organiske bestanddeler med 30 ml saltvann og tørk (Na2S04). Fordamp løsningsmidlet i vakuum og før gjennom en plugg av silicagel under dannelse av 5-(carbomethoxy)-2,4,5,6-tetrahydro-cyklopenta[c]thiofen.

Bland 3,0 g (19 mmol) 4-methoxybenzylthio i natriumhydroxyd (20 ml av en 2,5N vandig løsning) og 10 ml methanol. Tilsett 1,5 ml mettet vandig kobbersulfatløsning og omrør ved romtemperatur i 2 timer og blås luft over toppen av blandingen. Filtrer, vask det faste materiale med vann og tørk under dannelse av 4-methoxybenzyldisulfid som et blekt gult pulver (2,71 g, 91 %) .

Avkjøl 4,2 ml (4,2 mol) lithiumhexamethyldisilazan (1,0M i tetrahydrofuran) til -78° C, og .behandl med en løsning av 646 mg (3,55 mmol) 5-(carbomethoxy)-2,4,5,6-tetrahydro-cyklopenta[c]thiofen i 5 ml tetrahydrofuran. Omrør i 1 time og tilsett deretter 0,93 ml (5,3 mmol) hexamethylfosforamid og omrør i 5 minutter. Tilsett 1,6 g (5,2 mmol) 4-methoxybenzyl-disulf id i 10 ml tetrahydrofuran. Omrør i 5 timer ved -78° C og tilsett en løsning av ammoniumklorid. Fordel-.mellom 75 ml ethylacetat og 30 ml saltvann. Tørk (Na2S04), fordamp løsningsmidlet i vakuum og rens ved silicagelkromatografi under dannelse av 5-(carbomethoxy)-5-(4-methoxybenzylthio)-2,4,5,6-tetrahydro-cyklopenta[c]thiofen.

Oppløs 1,14 g (3,55 mmol) 5-(carbomethoxy)-5-(4-methoxybenzylthio)-2,4,5,6-tetrahydro-cyklopenta[c]thiofen i 25 ml 95 % ethanol, 12 ml vann og 15 ml tetrahydrofuran. Behandl med 1,3 g (23 mmol) kaliumhydroxyd og omrør ved romtemperatur i 1 time. Filtrer og fordamp løsningsmidlet i vakuum. Fordel mellom 125 ml vann og 75 ml ether. Separer den vandige fase og surgjør med kald konsentrert saltsyre. Ekstraher med 75 ml methylenklorid, tørk (Na2S04) og fordamp løsningsmidlet i vakuum. Rens ved silicagelkromatografi under dannelse av 5-(carboxy)-5-(4-methoxy enzylthiof-2,4,5,6-tetrahydro-cyklopenta[c]thiofen.

Oppløs 208 mg (0,454 mmol) [4S-[4a, 7a(R<*>), 12bB]]-7-(amino)-3,4,6,7,8,12b-hexahydro-6-oxo-lH-[l,4]-thiazino-[3,4-a][2]benzazepin-4-carboxylsyre-difenylmethylester og 130 mg (0,68 mmol) EDC i 5 ml tetrahydrofuran. Behandl med 139 mg (0,454 mmol) 5-(carboxy)-5-(4-methoxybenzylthio)-2,4,5,6-tetarhydro-cyklopenta[c]thiofen. Omrør ved romtemperatur i 2 0 timer og fordamp løsningsmidlet i vakuum. Oppløs residuet i 50 ml ethylacetat og vask med 15 ml 5 % svovelsyre og deretter med 15 ml mettet natriumhydrogencarbonat. Tørk (Na2S04) og fordamp løsningsmidlet i vakuum. Rens ved silicagelkromatografi under dannelse av [4S-[4a, 7a(R<*>), 12b£]]-7-[(5-(4-methoxybenzylthio) -5-OXO-2,4,5, 6-tetrahydro-cyklopenta [c ] thiof en)'-methylamino]-3,4,6,7,8,12b-hexahydro-6-oxo-lH-[l,4]-thiazino-[3,4-a][2]benzazepin-4-carboxylsyre-difenylmethylester.

Oppløs 122 mg (0,163 mmol) [4S-[4a, 7a(R<*>), 12b3]]-7-[(5-(4-methoxybenzylthio)-5-oxo-2,4,5,6-tetrahydro-cyklopenta-[c]thiofen)methylamino]-3,4,6,7,8,12b-hexahydro-6-oxo-lH-[1,4]-thiazino[3,4-a][2]benzazepin-4-carboxylsyre-difenylmethylester i 3 ml methylenklorid og avkjøl til 0° C. Behandl med 1,5 ml trifluoreddiksyre, 0,19 ml il, 7 mmol) anisol og 65 mg (0,2 mmol) kvikksølvacetat. Omrør ved 0° C i 3 timer og bobl deretter hydrogensulfidgass gjennom løsningen i 10 minutter. Filtrer og vask med methylenklorid. Vask den organiske fase med 20 ml vann, tørk (Na2S04) og fordamp løsningsmidlet i vakuum. Rens ved silicagelkromatografi under dannelse av tittelforbindelsen.

Eksempel 16

Fremstilling av [ 4S-[ 4a, 7a( R*), 12bB]]- 7-[( 5- thio- 5- oxo-2, 4, 5, 6- tetrahydro- cyklopenta[ c] pyrrol) methylamino]-3, 4, 6, 7, 8, 12b- hexahydro- 6- oxo- lH-[ 1, 4]- azino[ 3, 4- 2][ 2]-benzazepin- 4- carboxylsyre

Reaksjonsskjema E, trinn a: N-[ 2-( 1, 3- dihydro- l, 3- dioxo- 2H-isoindol- 2- yl)- l- oxo- 3- fenylpropyl]-( S)- 3-[( trifluoracetyl- 2-propenyl) amino]- 2- amino- propionsyre- methylester

Oppløs 47,6 g (0,2 mol) N a-(carbobenzyloxy)-8-(amino)-L-alanin i 500 ml methanol og behandl med 0,5 ml konsentrert saltsyre. Oppvarm til 60° C i 16 timer, avkjøl og reduser løsningsmidlet med 50 % i vakuum. Fortynn med 500 ml ethylether, vask med mettet natriumhydrogencarbonat og deretterrmed saltvann. Tørk (MgS04) og fordamp løsningsmidlet i vakuum under dannelse av N ct- (carbobenzyloxy,)-8-(ammo) —L-alanin-methylester.

Oppløs 15,9 g (63 mmol) N ct-(carbobenzyloxy)-8-(amino).-L-ralahin-methylester : i :.600 .. ml 1:1 methylenklorid/ cyklohexan. Tilsett 26 g (128 mmol) trikloracetimidat og 5 ml (56,6 mmol) trifluormethansulfonsyre. Omrør ved romtemperatur under en nitrogenatmosfære i 5 timer og fortynn med methylenklorid. Vask med mettet vandig natriumhydrogencarbonat, vann, tørk (MgSO.) og fordamp løsningsmidlet i vakuum. Rens ved silicagelkromatografi under dannelse av N ot-(carbobenzyloxy)

(allylamino)-L-alanin-methylester.

Oppløs 663 mg (2,27 mmol) N ot-(carbobenzyloxy)-8-(allylamino)-L-alanin-methylester i 15 ml vannfritt tetrahydrofuran. Béhandl..med 183 ul (2,27 mmol) trifluoreddiksyreanhydrid og omrør ved romtemperatur over natten. Fordel mellom ethylether og vann. Separer den organiske fase, tørk (MgS04)

og fordamp løsningsmidlet i vakuum. Rens ved silicagelkromato-r; grafi under dannelse av N -(carbobenzyloxy)-8-(trifluoracetyl-allylamino)-L-alanin-methylester.

Anbring 215 mg (0,86 mmol) bortribromid i en kolbe

og avkjøl til 0° C. Tilsett forsiktig 5 ml trifluoreddiksyre under omrøring. Fordamp løsningsmidlet under dannelse av bor-tris(trifluoracetat).

Oppløs 0,3 g (0,86 mmol) bortris(trifluoracetat) i

10 ml trif luoreddiksyre og tilsett 105 mg (0,27 mmol) N<01->

(carbobenzyloxy)-8-(trifluoracetyl-allylamino)-L-alanin-methylester. Omrør under en argonatmosfære i 1 time og fordamp deretter løsningsmidlet i vakuum ved romtemperatur. Tilsett methanol og fordamp gjentatte ganger. Rens ved silicagelkromatografi under dannelse av 8-(trifluoracetyl-allylamino) -L-alanin-methylester-hydroklorid.

Oppløs 104,8 g (0,36 mol) 8~(trifluoracetyl-allyl-amino) -L-alanin-methylester-hydroklorid i 300 ml tetrahydrofuran, avkjøl deretter til 0° C og tilsett 88 ml (0,8 mol) 4-methylmorfolin. Tilsett dråpevis en løsning av 108,7 g (0,36 mol) N-fthaloyl-(S)-fenylalanin-syreklorid i 200 ml tetrahydrofuran. Tillat blandingen å opparbeides til romtemperatur om omrør i

3 timer. Filtrer og konsentrer filtratet i vakuum. Oppløs residuet i ethylacetat og separer den organiske fase. Vask med vann og deretter med mettet natriumklorid og tørk (MgS04). Fordamp løsningsmidlet i vakuum under dannelse av en olje.

Rens ved silicagelkromatografi under dannelse av tittelforbindelsen.

Reaksjonsskjema E, trinn b: [ S-( R*, R*)]- N-[ 2-( 1, 3- dihydro- l, 3-dioxo- 2H- risoindol- 2- yl) - l- oxo- 3- fenylpropyl]- 3, 4- dihydro- 2H- 4-trifluoracetyl- 1, 4- azazin- 3- carboxylsyre- methylester

Oppløs 15,8 g (29,8 mmol) N-[2-(1,3-dihydro-l,3-dioxo-2H-isoindol-2-yl)-l-oxo-3-fenylpropyl]-(S)-[(trifluoracetyl-2-propenyl)amino]-2-amino-propionsyre-methylester i 220 ml 10:1 methylenklorid/methanol. Avkjøl til -78°-C og spyl med en blanding av ozon/oxygen i ca. 10 minutter inntil en blå farge vedvarer. Spyl med nitrogen i 10 minutter ved

-7 8° C for å fjerne overskudd av ozon. Behandl med 60 ml

(0,82 mol) methylsulfid og tillat blandingen å oppvarmes til romtemperatur. Omrør ved romtemperatur i 2,5 timer, fordamp løsningsmidlet i vakuum og oppløs residuet i 200 ml ethylacetat. Vask med vann, mettet natriumklorid, tørk (MgSO^) og fordamp løsningsmidlet i vakuum under dannelse av mellomproduktet N-[2-(1,3-dihydro-l,3-dioxo-2H-isoindol-2-yl)-l-oxo-3-fenylpropyl]-N-2-oxoethyl-methylester.

Oppløs 15,9 g (29,8 mmol) N-[2-(1,3-dihydro-l,3-dioxo-2H-isoindol-2-yl)-l-oxo-3-fenylpropyl]-(S)-3-[(trifluoracetyl-2-oxoethyl)amino]-2-amino-propionsyre-methylester i 330 ml 10:1 methylenklorid/trifluoreddiksyre. Omrør ved romtemperatur i 2,5 timer og fordamp løsningsmidlet i vakuum. Rens ved silicagelkromatografi under dannelse av tittelforbindelsen.

Reaksjonsskjema E, trinn c: [ 4S-[ 4a, 7a( R*), 12bB]]- 7-[( 1, 3-dihydro- 1, 3- dioxo- 2H- isoindol- 2- yl)]- 3, 4, 6, 7, 8, 12b- hexahydro-6- oxo- lH- 4- trifluoracetyl-[ 1, 4]- azazino[ 3, 4- a][ 2] benzazepin-4- carboxylsyre- difenylmethylester

Oppløs 3,04 g (5,9 mmol) CS-(R<*>, R<*>)]-N-[2-(1,3-dihydro-1,3-dioxo-2H-isoindol-2-yl)-l-oxo-3-fenylpropyl]-3,4-dihydro-2H-4-trifluoracetyl-1,4-azazin-3-carboxylsyre-methylester i 5 ml methylenklorid og tilsett dråpevis til en på forhånd fremstilt løsning av 4,0 ml (45 mmol) trifluormethansulfonsyre og 1,0 ml (7,1 mmol) trifluoreddiksyreanhydrid. Anbring under en nitrogenatmosfære og omrør vedl romtemperatur

i 123 timer. Hell over i en skilletrakt inneholdende 200 g is og 200 ml ethylacetat. Separer den organiske fase, vask med 3 x 200 ml vann og 100 ml mettet vandig natriumklorid. Ekstraher den organiske fase med 4 x 40 ml 10 vekt% kaliumhydrogencarbonat og 4 0 ml vann. Legg 100 ml ethylacetat over de kombinerte basiske vandige faser og avkjøl på et isbad. Tilsett dråpevis 6N saltsyre for å justere pH til 1 mens temperaturen opprettholdes ved 5 - 10° C. Separer den organiske fase og ekstraher den vandige fase med 3 x 200 ml ethylacetat, vask med mettet natriumklorid og tørk (MgS04). Fordamp løsningsmidlet i vakuum og tørk residuet under høyvakuum ved 56° C i 24 timer under dannelse av mellomproduktet [4S-[4ct, 7a(R<*>), 12bg]]-7-[(1,3-dihydro-l,3-dioxo-2H-isoindol-2-yl)]-3,4,6,7,8,12b-hexahydro-6-oxo-lH-4-trifluoracetyl-[1,4]-oxazinot 3,4-a][2]benzazepin-4-carboxylsyre.

Oppløs 616 mg XI,23 mmol) [4S-[4a, 7a(R<*>), 12bB]]-7-[(1,3-dihydro-l,3-dioxo-2H-isoindol-2-yl)]-3,4,6,7,8,12b-hexahydro-6-oxo-lH-4-trifluoracetyl-[1,4]-azazino[3,4-a][2]benzazepin-4-carboxylsyre i 12 ml methylenklorid og behandl med 360 mg (1,86 mmol) difenyldiazomethan. Omrør i 5,5 timer og fordamp løsningsmidlet i vakuum. Rens ved silicagelkromatografi under dannelse av tittelforbindelsen.

Reaksjonsskjema E, trinn e; [ 4S-[ 4a, 7a( R*), 12bg]]- 7-( amino)-3, 4, 6, 7, 8, 12b- hexahydro- 6- oxo- lH-[ 1, 4]- azazino[ 3, 4- a][ 2]-benzazepin- 4- carboxylsyre- difenylmethylester

Oppløs 345 mg (0,517 mmol) [4S-[4a, 7a(R<*>), 12bg]]-7-[ (1, 3-dihydro-l, 3-dioxo-2H-isoiindbl-2-yl) ]-3 , 4 , 6 , 7 , 8 ,12b-hexahydro-6-oxo-lH-4-trifluoracetyl-[i,4]-azazino[3,4-a][2]benzazepin-4-carboxylsyre-difenylmethylester i 5 ml methanol og behandl med hydrazinmonohydrat (1,1 ml av en IM løsning i methanol, 1,1 mmol). Omrør ved romtemperatur i 44 timer, fordamp løsningsmidlet i vakuum og oppslem residuet i 10 ml methylenklorid. Filtrer og fordamp løsningsmidlet i vakuum under dannelse av tittelforbindelsen.

Reaksjonsskjema A; [ 4S-[ 4ot, 7a( R*), 12bg ] ]- 7-[ ( 5r- thio- 5- oxo-2, 4, 5, 6- tetrahydro- cyklopenta[ c] pyrrol) methylamino]-3, 4, 6, 7, 8, 12b- hexahydro- 6- oxo- lH-[ 1, 4]- azazino[ 3, 4- a] [ 2 ] - benzazepin- 4- carboxylsyre

Oppløs 1,06 g (5 mmol) 3,4-(dicarboethoxy)pyrrol i

25 ml 50/50 dioxan/vann og bufre. til pH 10 med IN natriumhydroxyd. Tilsett dråpevis en etherløsning av 1,2 g (5,5 mmol) di-t-butyl-dicarbonat ved 10° C. Tillat reaksjonsblandingen å oppvarmes til romtemperatur og bufre leilighetsvis for å bibeholde pH 10. Surgjør med en natriumcitrat/sitronsyre-buffer til pH 5, ekstraher 3 ganger med ethylether, tørk (MgS04) og fordamp løsningsmidlet i vakuum. Rens residuet ved silicagelkromatografi under dannelse av N-(carbo-t-butyloxy)-3,4-(dicarboethoxy)pyrrol.

Oppløs 3,11 g (10 mmol) N-(carbo-t-butyloxy)-3,4-(dicarboethoxy)pyrrol i 30 ml vannfritt tetrahydrofuran og avkjøl til -20° C. Behandl med lithiumborhydrid (7 ml av en 2N løsning) og omrør under en nitrogenatmosfære i flere dager. Tilsett forsiktig vann og fordel mellom ethylacetat og 5 % saltsyre. Separer den organiske fase, vask med saltvann og tørk (MgSO^). Fordamp løsningsmidlet i vakuum og rens ved silicagelkromatografi under dannelse av N-(carbo-t-butyloxy)-3,4-(dihydroxymethyl)pyrrol.

Oppløs 1,78 g (0,01 mol) N-bromsuccinimid i 60 ml tetrahydrofuran og tilsett en løsning av 2,62 g (0,01 mol) trifenylfosfin i tetrahydrofuran. Tilsett en løsning av 1,14 g (5 mmol) N- (carbo-t-butyloxy)-3 , 4-(dihydroxymethyl).pyrrol i 25 ml tetrahydrofuran, og omrør. inntil mesteparten av det fsste materiale oppløses. Fordamp løsningsmidlet i vakuum og fordel residuet mellom vann og ethylether.. Separer den organiske fase og vask med vann. Tørk (Na2S04) og fordamp, løsningsmidlet i vakuum. Rens ved silicagelkromatografi under dannelse av N-(carbo-t-butyloxy)-3,4-(dibrommethyl)pyrrol.

(0,10 mol) natriumhydrid (80 % i mineralolje). Omrør inntil

en oppløsning oppnås og tilsett 35,3 g (0,100 mol) N-(carbo-t-butyloxy ) -3 , 4- (dibrommethyl) pyrrol . Omrør i 30 minutter

og tilsett ytterligere 3,0 g (0,10 mol) natriumhydrid.

Omrør ved romtemperatur i 20 timer, filtrer gjennom et filterhjelpestoff og fordamp løsningsmidlet i vakuum. Rens ved silicagelkromatografi under dannelse av 5,5-(dicarboethoxy)-2-(carbo-t-butyloxy)-2,4,5,6-tetrahydro-cyklopenta[c 3pyrrol.

Oppløs 21,3 g (60,6 mmol) 5,5-(dicarboethoxy)-2-(carbo-t-butyloxy)-2,4,5,6-tetrahydro-cyklopenta[c]pyrrol i 140 ml dimethylsulfoxyd. Tilsett 14 ml vann og 7,0 g (0,16

mol) lithiumklorid. Oppvarm til tilbakeløpskokning i 4 timer, avkjøl og fordel mellom 150 ml vann og 2 x 150 ml methylenklorid. Vask den organiske fase med 150 ml vann, tørk (MgSO^) og før gjennom en silicagelplugg under dannelse av 5-(carbo-ethoxy ) -2-(carbo-t-butyloxy)-2,4,5,6-tetrahydro-cyklopenta-[c]pyrrol.

Oppløs 9,5 g (34,1 mmol) 5-(carboethoxy)-2-(carbo-t-butyloxy ) -2 , 4 , 5 , 6-tetrahydro-cyklopenta Lclpyrrol i 150 ml 95 % ethanol og 75 ml vann. Tilsett 9,5 g (0,17 mol) kaliumhydroxyd og omrør ved romtemperatur i 1 time. Fordel mellom 150 ml vann og 2 x 150 ml ethylether. Surgjør den vandige fase med saltsyre til pH 1. Ekstraher med 2 x 150 ml methylenklorid, tørk (Na2S04) og fordamp løsningsmidlet i vakuum under dannelse av 5-(carboxy)-2-(carbo-t-butyloxy)-2,4,5,6-tetrahydro-cyklopenta [c3 pyrrol.

Oppløs 5,9 g (23,5 mmol) 5-(carboxy)-2-(carbo-t-butyloxy) -2,4,5,6-tetrahydro-cyklopenta[c3pyrrol i 60 ml methanol og behandl med 5,8 ml (47 mmol) dimethoxypropan og 0,8 ml svovelsyre. Omrør ved romtemperatur i 1 dag. Fordamp løsningsmidlet i vakuum, fortynn med 75 ml methylenklorid og vask med 35 ml mettet natriumhydrogencarbonat. Ekstraher den vandige fase med 30 ml methylenklorid, vask de kombinerte organiske bestanddeler med 30 ml saltvann og tørk (Na2S04). Fordamp løsningsmidlet i vakuum og før gjennom en plugg av silicagel under dannelse av 5-(carbomethoxy)-2-(carbo-t-butyloxy )-2,4,5,6-tetrahydro-cyklopenta[c 3pyrrol.

Bland 3,0 g (19 mmol) 4-methoxybenzylthiol i natriumhydroxyd (20 ml av en 2,5N vandig løsning) og 10 ml methanol. Tilsett 1,5 ml mettet vandig kobbersulfatløsning og omrør ved romtemperatur i 2 timer og blås luft over toppen av blandingen. Filtrer, vask det faste materiale med vann og tørk under dannelse av 4-methoxybenzyldisulfid som et blekt gult pulver (2,71 g, 91 %).

Avkjøl 4,2 ml (4,2 molj lithiumhexamethyldisilazan (1,0M i tetrahydrofuran) til -78° C og behandl med en løsning av 941 mg (3,55 mmol) 5-(carbomethoxy)-2-(carbo-t-butyloxy)-2,4,5,6-tetrahydro-cyklopentatclpyrrol i 5 ml tetrahydrofuran. Omrør i 1 time og tilsett deretter 0,93 ml (5,3 mmol) hexamethylfosforamid og omrør i 5 minutter. Tilsett 1,6 g (5,2 mmol) 4-methoxybenzyl-disulfid i 10 ml tetrahydrofuran. Omrør i 5 timer ved -7 8° C og tilsett en løsning av ammoniumklorid. Fordel mellom 75 ml ethylacetat og 30 ml saltvann. Tørk (Na2S0^), fordamp løsningsmidlet i vakuum og rens ved silicagelkromatografi under dannelse av 5-(carbomethoxy)-2-(carbo-t-butyloxy) -5- (4-methoxybenzylthio) -2,4,5, 6-rtetrahydro-cyklopenta[c]pyrrol.

Oppløs 1,43 g (3,55 mmol) 5-(carbomethoxy)-2-(carbo-t-butyloxy ) -5-(4-methoxybenzylthio)-2,4,5,6-tetrahydro-cyklo-penta [c]pyrrol i 25 ml 95 % ethanol, 12 ml vann og 15 ml tetrahydrofuran. Behandl med 1,3 g (23 mmol) kaliumhydroxyd og omrør ved romtemperatur i 1 time. Filtrer og fordamp løsningsmidlet i vakuum. Fordel mellom 125 ml vann og 75. ml ether. Separer den vandige fase og surgjør med kald konsentrert saltsyre. Ekstraher med 75 .ml methylenklorid, tørk (Na2SO^) og fordamp løsningsmidlet i vakuum. Rens ved silicagelkromatografi under-dannelse av 5-(carboxy)-2-(carbo-t-butyloxy) -5-(4-methoxybenzylthio)-2,4,5,6-tetrahydro-cyklo-penta [ c J py rro 1.

Oppløs 200 mg (0,454 mmol) [4S-[4a, 7a(R<*>), 12b8]]-7-(amino)-3,4,6,7,8,12b-hexahydro-6-oxo-lH-[1,4]-azazino[3,4 -a]-[2]benzazepin-4-carboxylsyre-difenylmethylester og 130 mg

(0,68 mmol) EDC i 5 ml tetrahydrofuran. Behandl med 177 mg (0,454 mmol) 5-(carboxy)-2-(carbo-t-butyloxy)-5-(4-methoxybenzylthio) -2,4,5,6-tetrahydro-cyklopenta[c]pyrrol. Omrør ved romtemperatur i 20 timer og fordamp løsningsmidlet i vakuum. Oppløs residuet i 50 ml ethylacetat og vask med 15 ml 5 % svovelsyre, og deretter med 15 ml mettet natriumhydrogencarbonat. Tørk (Na2S04) og fordamp løsningsmidlet i vakuum. Rens ved silicagelkromatografi under dannelse av

[4S-[4a, 7a(R<*>), 12b8]]-7-[(5-(4-methoxybenzylthio)-5-oxo-2-(carbo-t-butyloxy)-2,4,5,6-tetrahydro-cyklopenta[c]pyrrol)-methylamino]-3,4,6,7,8,12b-hexahydro-6-oxo-lH-01,4]-azazino-[3,4-a][2]benzazepin-4-carboxylsyre-difenylmethylester.

Oppløs 132 mg (0,163 mmol) [4S-[4a, 7a(R<*>), 12b6]]-7-[ (5- (4-methoxy-.benzylthio) -5-oxo-2- (carbo-t-butyloxy) -2,4,5,6-tetrahydro-cyklopenta[c]pyrrol)methylamino3-3,4,6,7,8,12b-hexahydro-6-oxo-lH- [l, 4 ]-azazino[ 3,4-a)[ 2 ]benzazepin-4-carboxylsyre-difenylmethylester i 3 ml methylenklorid og avkjøl til 0° C. Behandl med 1,5 ml trifluoreddiksyre,

0,19 ml (1,7 mmol) anisol og 65 mg (0,2 mmol) kvikksølvacetat. Omrør ved 0° C i 3 timer og bobl deretter hydrogensulfidgass-gjennom løsningen i 10 minutter. Filtrer og vask med methylenklorid. Vask den organiske fase med 20 ml vann, tørk (Na2S04)

og fordamp løsningsmidlet i vakuum. Rens ved silicagelkromato^ grafi under dannelse av tittelforbindelsen.

Eksempel 17

Fremstilling av [ 4S-[ 4a, 7a( R*), 12bg]]- 7-[( 5- thio- 5- oxo-2, 4, 5, 6- tetrahydro- cyklopenta[ c] pyrrol) methylamino]-3, 4, 6, 7, 8, 12b- hexahydro- 6- oxo- lH-[ 1, 4] N4^ trifluoracétvl-azazinoE 3, 4- a][ 2] benzazepin- 4- carboxylsyre

Oppløs 1,84 g (2,27 mmol) [4S-[4a, 7a(R<*>), 12bg]]-7-[(5-(4-methoxybenzylthio)-5-oxo-2-(carbo-t-butyloxy)-2,4,5,6-tetrahydro-cyklopenta[c]pyrrol)methylamino 3-3,4,6,7,8,12b-hexahydro-6-oxo-lH-[1,4 3-azazino[3,4-a][2]benzazépin-4-carboxylsyre-difenylmethylester i 15 ml vannfritt tetrahydrofuran. Behandl med 183 ul (2,27 mmol). pyridin, etterfulgt av 321 yl (2,27 mmol) trifluoreddiksyreanhydrid og omrør ved romtemperatur over natten. Fordel mellom ethylether og vann. Separer den organiske fase, tørk (MgS04) og fordamp løsningsmidlet i vakuum. Rens ved silicagelkromatografi under dannelse av

[4S-[4a, 7a(R<*>), 12bB]]-7-C(5-(4-methoxybenzylthio)-5-oxo-2-(carbo-t-butyloxy)-2,4,5,6-tetrahydro-cyklopenta[c]pyrrol)-methylamino 3-3,4,6,7,8,12b-hexahydro-6-oxo-lH-[1,43-N4-trifluoracetyl-azazinot 3,4-a3[2 3benzazepin-4-carboxylsyre-difenylmethylester.

Oppløs 148 mg (0,163 mmol) [4S-[4a, 7a(R<*>), 12bB]]-7-[(5-(4-methoxybenzylthio)-5-oxo-2-(carbo-t-butyloxy)-2,4,5,6-tetrahydro-cyklopenta[c]pyrrol)methylamino1-3,4,6,7,8,12b-hexahydro-6-oxo-lH- [1,4] -N4-trifluoracetyl-azazino [ 3,4-aJ[ 2 ] - benzazepin-4-carboxylsyre-difenylmethylester i 3 ml methylenklorid og avkjøl til 0° C. Behandl med 1,5 ml trifluoreddiksyre, 0,19 ml (1,7 mmol) anisol og 65 mg (0,2 mmol) kvikksølvacetat. Omrør ved 0° C i 3 timer og bobl deretter hydrogensulfidgass gjennom løsningen i 10 minutter. Filtrer og vask med methylenklorid. Vask den organiske fase med 20 ml vann, tørk (Na2S04)

og fordamp løsningsmidlet i vakuum. Rens ved silicagelkromato-graf i under dannelse av tittelforbindelsen.

Eksempel 18

[ 6a ( R*) , llbBl- 6-[ ( S)-( 5- thio- 5- oxo- 2, 4, 5, 6- tetr. ahydro-cyklopenta[ c] pyrrol) methylamino]- l, 2, 3, 5, 6, 7, llb- heptahydro-5- oxo- pyrro] g[ 2, l- a] [ 2 ] benzazepin- 3-( S) - carboxylsyre- methylester

Reaksjonsskjema G, trinn a; N-( fenylmethylen)- 2-( 3- butenyl)-glycin- methylester

Oppløs 15,4 ml (110 mmol) diisopropylamin i 250 ml tetrahydrofuran, anbring under en nitrogenatmosfære og avkjøl til -78° C. Tilsett n-butyllithium (39 ml av en 2,7M løsning i hexan, 105 mmol). Omrør i 30 minutter og tilsett deretter dråpevis en løsning av 17,7 g (100 mmol) N-(fenylmethylen)-glycin-methylester i 25 ml tetrahydrofuran. Omrør i 15 minutter og tilsettl3,5 g (100 mmol) 4-brombuten og la blandingen langsomt oppvarme til romtemperatur. Tilsett 20 ml (100 mmol) hexamethylfosforamid og omrør under en nitrogenatmosfære i 3 timer. Hell over i vann, ekstraher i ethylether og vask flére ganger._med:_saltvann. Tørk (MgS04) og fordamp løsningsmidlet i vakuum under dannelse av tittelforbindelsen som en ravfarget olje (25 g).

Reaksjonsskjema G, trinn b; 2-( 3- butenyl) glycin- methylester

Oppløs 25 g N-(fenylmethylen)-2-(3-butenyl)glycinmethylester i 400 ml ethylether og omrør ved 150 ml IN saltsyre og 150 ml vann. Anbring under en argonatmosfære og omrør i 2 timer. Separer den vandige fase og juster til pH 9, ekstraher i kloroform, tørk og fordamp løsningsmidlet i vakuum under dannelse av tittelforbindelsen som en lys olje (4,5 g).

Reaksjonsskjema G, trinn c: ( S)- N-[ 2-( 1, 3- dihydro- l, 3- dioxo-2H- isoindol- 2- yl)- l- oxo- 3- fenylpropyl]- 2-( 3- butenyl)- glycinmethylester

Oppløs 6,0 g (20 mmol) N-fthaloyl-(S)-fenylalanin (2) og 6,0 g (24 mmol) EEDQ i 30 ml methylenklorid. Tilsett 3,0 g (21 mmol) 2-(3-butenyl)glycinmethylester og omrør i 18 timer. Hell over i methylenklorid, vask med 2 x 100 ml 10 % saltsyre og deretter med mettet natriumhydrogencarbonat. Tørk og fordamp løsningsmidlet i vakuum under dannelse av 8,3 g gul olje. Rens ved silicagelkromatografi (25 % ethylacetat/hexan) under dannelse av en diastereomer blanding av tittelforbindelsen som skum (5,2 g).

Reaksjonsskjema G, trinn d; ( S)- N-[ 2-( 1, 3- dihydro- l, 3- dioxo-2H- isoindol- 2- yl) 3- fénylalanyl]- 2- ( 3- oxopropyl) glycin- methylester

Oppløs 4,2 g (10 mmol) av den diastereomere blanding av (S)-N-[2-(1,3-dihydro-l,3-dioxo-2H-isoindol-2-yl)-1-oxo-3-fenylpropyl]-2-(3-butenyl)-glycin-methylestere i 100 ml methylenklorid og 10 ml absolutt methanol. Avkjøl til -78° C og behandl med ozon inntil en blåfarge vedvarer. Avgass med oxygen og tilsett 10 ml methylsulfid og 0,5 ml pyridin.

Tillat blandingen langsomt å oppvarmes til romtemperatur og omrør i 18 timer. Vask med 10 % saltsyre og deretter med saltvann. Tørk og fordamp løsningsmidlet i vakuum under dannelse av en diastereomer blanding av tittelforbindelsen som en olje (4,5 g).

Reaksjonsskjema F, trinn c: ( S)- N-[ 2-( 1, 3- dihydro- l, 3- dioxo-2H- isoindol- 2- yl)]- l- oxo- 3- fenylpropyl- l, 2, 3- trihydro- 2( S)-pyrrolcarboxylsyre- methylester og ( S)- N-[ 2-( 1, 3- dihydro- l, 3-dioxo- 2H- isoindol- 2- yl)]- oxo- 3- fenylpropyl- 1, 2, 3- trihydro-2( R)- pyrrolcarboxylsyre- methylester

Oppløs 4,5 g av den diasteromere blanding av (S)-N-[2-(1,3-dihydro-l,3-dioxo-2H-isoindol-2-yl)]-(S)-fenylalanyl]-2-(3-oxopropyl)glycin-methylestere i 150 ml 1,1,1-triklorethan og behandl med 0,5 ml trifluoreddiksyre. Oppvarm til tilbake-løpskokning i 18 timer, fordamp løsningsmidlet og rens ved silicagelkromatografi (80 % ethylacetat/hexan) under dannelse av 2 (S)-tittelforbindelsen (7-00 mg) og 2 (R)-tittelforbindelsen (600:.mg) .

Reaksjonsskjema F, trinn d: [ 6a( R*), llb$]- 6-[( S)-( lf3-dihydro- 1, 3- dioxo- 2H- isoindol- 2- yl) 1- 1, 2, 3, 5, 6, 7, llb- heptahydro- 5- oxo- pyrrolo[ 2, 1- al[ 2lbenzazepin- 3( S)- carboxylsyre-methylester

Oppløs 338 mg (0,836 mmol) (S)-N-[2-(1,3-dihydro-1,3-dioxo-2H-isoindol-2-yl)1-l-oxo-3-fenylpropyl-1,2,3-trihydro-2(S)-pyrrolcarboxylsyre-methylester i 10 ml vannfritt methylenklorid og tilsett 5 ml' trif luormethansulfonsyre;.

Omrør i 3,5 timer, avkjøl på et isbad og tilsett forsiktig

25 ml vann. Ekstraher med 75 ml ethylacetat og vask med

25 ml mettet natriumhydrogencarbonat. Tørk (Na2S04) og fordamp løsningsmidlet i vakuum. Rens ved silicagelkromatografi (1:1 ethylacetat/hexan til 2:1 ethylacetat/hexan) under dannelse av tittelforbindelsen som et hvitt skum (314 mg, 93 %).

Reaksjonsskjema F, trinn e: [ 6a( R*), llbgl- 6-[( S)- aminol-1, 2, 3, 5, 6, 7, llb- heptahydro- 5- oxo- pyrrolo[ 2, l- a1[ 2Ibenzazepin-3 ( S)- carboxylsyre- methylester

Oppløs 244 mg (0,603 mmol) [6a(R<*>)f llbgl-6-[(S)-(1,3-dihydro-l,3-dioxo-2H-isoindol-2-yl)]-1,2,3,5,6,7,llb-heptahydro-5-oxo-pyrrolo[2,l-a1[2]benzazepin-3(S)-carboxylsyre-methylester i 3 ml methanol og behandl med hydrazinmonohydrat (0,70 ml av en IM løsning i methanol) og omrør ved romtemperatur i 24 timer. Tilsett ytterligere hydrazinmonohydrat (0,3 ml av en IM løsning i methanol) og omrør i 48 timer. Filtrer gjennom et filterhjelpestoff, fordamp løsningsmidlet i vakuum og tilsett methylenklorid. Filtrer langsomt gjennom ét filterhjelpestoff <p>g fordamp løsningsmidlet i vakuum under dannelse av tittelforbindelsen som en gul olje (181 mg).

Reaksjonsskjema A: [ 6d( R*), llbB]- 6-[ ( S) - ( 5- thio- 5- oxo-2, 4, 5/ 6- tetrahydro- cyklopenta( c] pyrrol) methylamino]-1, 2, 3, 5, 6, 7, llb- heptahydro- 5- oxo- pyrrolo[ 2, l- a][ 2]-benzazepin- 3( S)- carboxylsyre- methylester

Oppløs 329 mg (0,845 mmol) 5-(carboxy)-2-(carbo-t-butyloxy) -5-(4-methoxybenzylthio)-2,4,5,6-tetrahydro-cyklo-penta [cjpyrrol i 6 ml methylenklorid, avkjøl i et is-methanol-bad og behandl med 0,94 ml (11 mmol) oxalylklorid. Omrør i 1,5 time, fordamp løsningsmidlet i vakuum ved 0 - 5° C. Fortynn residuet med 3 ml methylenklorid og tilsett en løsning av 155 mg (0,565 mmol) [6a(R<*>), llbB1-6-[(S)-amino]-1,2,3,5,6,7,llb-heptahydro-5-oxo-pyrrolo[2,l-a][2]benzepin 3(S)-carboxylsyre-methylester i 6 ml methylenklorid. Tilsett 68 yl (0,85 mmol) pyridin og omrør i 2 timer. Fortynn med 60 ml ethylacetat og vask med 30 ml IN saltsyre og 2 x 30 ml mettet natriumhydrogencarbonat. Tørk (MgSO^), fordamp løsnings-midlet i vakuum og rens ved silicagelkromatografi under dannelse avl[6a(R<*>), llbB]-6-[(S)-(5-(4-methoxybenzylthio)-5-oxo-2-(carbo-t-butyloxy)-2,4,5,6-tetrahydro-cyklopenta[cIpyrrol)-methylamino ]-1,2,3,5,6,7, llb-heptahydro-5-oxo-pyrrolo [ 2 , l-a ] t-[2]benzazepin-3(S)-carboxylsyre-methylester.

Oppløs 105 mg (0,163 mmol) [6a(R<*>), llbB]-b[(S)-(5-(4-methoxybenzylthio)-5-oxo-2-(carbo-t-butyloxy)-2,4,5,6-tetrahydro-cyklopenta[c]pyrrol)methylamino]-l,2,3,5,6,7,11b-heptahydro-5-oxo-pyrrolo[2,l-a][2]benzazepin-3(S)-carboxylsyre-methylester i 3 ml methylenklorid og avkjøl til 0° C. Behandl med 1,5 ml trifluoreddiksyre, 0,19 ml (1,7 mmol) anisol og 65 mg (0,2 mmol) kvikksølvacetat. Omrør ved 0° C i 3 timer og bobl deretter hydrogensulfidgass gjennom løsningen i 10 minutter. Filtrer og vask med methylenklorid. Vask den organiske fase med 20 ml vann, tørk (Na2S0'4 og fordamp løsningsmidlet i vakuum. Rens ved silicagelkromatografi under dannelse av tittelforbindelsen.

Eksempel 19

Fremstilling av [ 6ct( R*), llbB3- 6- L( S)-( 5- thio- 5- oxo- 2, 4, 5, 6-tetrahydro- cyklopenta[ c] pyrrol) methylamino]— 1, 2, 3, 5, 6, 7, 11b-heptahydro- 5- oxo- pyrrolo[ 2, l- a] l2] benzazepin- 3( S)- carboxylsyre

Oppløs 42 mg (0,098 mmol) [6a(R<*>), llbB]-6-[(S)-(5-thio-5-oxo-2,4,5,6-tetrahydro-cyklopenta[c]pyrrol)methylamino 3-1,2,3,5,6,7, llb-heptahydro-5-oxo-pyrrolo [ 2 , l-a ] £ 2-}-benzazepin-3(S)-carboxylsyre-methylester i 1,5 ml methanol og avgass ved 0° C. Tilsett vandig lithiumhydroxyd (0,6 ml av eitr 1N avgasset løsning, 0,6 mmol) ved 0°-C^ Tilsett tetrahydrofuran for å oppnå en løsning (4 ml) og omrør i 17;timer ved romtemperatur, avkjøl i et isbad og tilsett 1 ml IN saltsyre. Fordel mellom 30 ml methylenklorid og 15 ml vann og separer

den organiske fase. Tørk (Na2S04), fordamp løsningsmidlet i vakuum og rens ved silicagelkromatografi under dannelse av tittelforbindelsen.

Som anvendt her angir uttrykket "pasient" varmblodige dyr eller pattedyr, innbefattende mus>- rotter og mennesker.

En pasient har behov for behandling for å inhibere enkefalinase når pasienten lider av akutt eller kronisk smerte og har behov for en endorfin- eller enkefalin-formidlet analgesisk effekt.

I tillegg har en pasient behov for behandling for å inhibere enkefalinase når pasienten lider av en sykdomstilstand karakterisert ved unormaliteter i væske, elektrolytt, blodtrykk, intraokulart trykk, renin eller aldosteron-homeostase, slik som hypertensjon, nyresykdommer, hyperaldosteronemia, hjertehypertrofi, glaucom og congestiv hjertesvikt. I

disse tilfeller har pasienten behov for en ANP-formidlet diuretisk, natriuretisk, hypotensiv, hypoaldosteronemisk effekt. Inhibering av enkefalinase vil tilveiebringeren endorfin- eller enkefalin-formidlet analgesisk effekt ved inhibering av den metabolske nedbrytning av endorfiner og enkefaliner. Inhibering av enkefalinase vil tilveiebringe

en ANP-formidlet diruretisk, natriuretisk, hypotensiv, hypo-aldostereonemisk effekt ved inhibering av den metabolske nedbrytning av ANP.

I tillegg har en pasient behov for behandling for å inhibere enkefalinase når pasienten har behov for en antidepressiv effekt eller en reduksjon i strengheten av avven-ningssymtomer assosiert med avslutning av opiat-eller morfinadministrering.

Identifiseringen av de pasienter som har behov for behandling for å inhibere enkefalinase hører til fagmannens kunnskap. En lege kan lett identifisere, ved anvendelse av kliniske tester, fysikalsk eksaminasjon og medisinsk/familie-historie, de pasienter som har behov for en endorfin- eller enkefalin-formidlet analgesisk effekt, eller hvem som har behov for en ANP-formidlet diuretisk, natriuretisk, hypotensiv eller hypoaldosteronemisk effekt.

En effektiv enkefalinase-inhiberende mengde av en forbindelse av av formel (I) er en mengde som er effektiv til å inhibere enkefalinase og således å inhibere den metabolske nedbrytning av de naturlig forekommende sirkulerende regulerende peptider slik som endorfinene, innbefattende enkefaliner, og ANP. Vellykket behandling skal også forstås å innbefatte profylakse ved behandling av en pasient i slike tilfeller som for eksempel i en pre-operativ prosedyre hvor en pasient vil lide av akutt eller kronisk smerte i den nærmeste fremtid.

En effektiv enkefalinase-inhiberende mengde av en forbindelse av formel (I) er en mengde som er effektiv til å inhibere enkefalinase i en pasient med behov for dette, som resulterer i for eksempel endorfin- eller enkefalin-formidlede analgesiske effekter, eller i ANP-formidlet diuretisk, natriuretisk, hypotensiv, hypoaldosteronemisk effekt.

En effektiv enkefalinase-inhiberende dose kan lett bestemmes ved anvendelse av konvensjonelle teknikker og ved observering av resultater erholdt under analoge omstendigheter. Ved bestemmelse av den effektive dose tas et utall av faktorer

i betraktning, innbefattende: arten av pasient, dens størrelse, alder og generelle helse? den spesifikke sykdom som er involvert; graden eller innbefattelsen eller strengheten av sykdommen;

responsen av den individuelle pasient; den bestemte forbindelse som administreres; administreringsmåte; biotilgjengelighets-karakteristika for det administrerte preparat; det valgte dose-regime og anvendelse av ledsagende medikamentering.

En effektiv enkefalinase-inhiberende mengde av en forbindelse av formel (I) vil generelt variere fra ca. 0,01 milligram pr. kilo kroppsvekt pr. dag (mg/kg/dag) til ca. 20 mg/kg/dag. En daglig dose på fra 0,1 mg/kg til ca. 10 mg/kg er foretrukket.

En pasient har behov for behandling for å inhibere ACE når pasienten lider av hypertensjon, kronisk congestiv hjertesvikt, hyperaldosteronemia eller erkjennelsessykdommer. Inhibering av ACE reduserer nivåer av angiotensin II,:,og inhiberer således vasopressoren, hypertensive og hyper-aldosteronemiske effekter forårsaket derav. En effektiv ACE-inhiberende mengde av en forbindelse av formel (I) er den mengde som er effektiv til å inhibere ACE i en pasient med behov for dette, som resulterer eksempelvis i en hypotensiv effekt. En effektiv ACE-inhiberende mengde og en effektiv ACE-inhiberende dose er det samme som er beskrevet ovenfor

for en effektiv enkefalinase-inhiberende mengde og dose.

Ved utførelse av behandling av en pasient kan forbindelsene av formel (I) administreres i en hvilken som helst form eller måte som gjør forbindelsen biotilgjengelig i effektive mengder, innbefattende orale og parenterale ruter. Eksempelvis kan forbindelsen administreres oralt, subkutant, intramuskulært, intravenøst, transdermalt, intranasalt, rektalt og lignende. Oral administrering foretrekkes generelt. Fagmannen vedrørende fremstilling av formuleringer kan lett velge den riktige form og administreringsmåte avhengig av den sykdomstilstand som skal behandles, graden av sykdommen og andre relevante omstendigheter.

Forbindelsene av formel (I) kan administreres i

form av farmasøytiske preparater eller medikamenter som frem-

stilles ved kombinasjon av forbindelsene av formel (I) med farmasøytisk akseptable bærere eller eksipienser, hvis art og mengde bestemmes av den valgte administreringsrute og standard farmasøytisk praksis.

I særdeleshet tilveiebringer den foreliggende oppfin-r neise farmasøytiske preparater omfattende en effektiv mengde av en forbindelse av formel (I) i blanding eller på annen måte i assosiasjon med én eller flere farmasøytisk akseptable bærere eller eksipienser.

De farmasøytiske preparater eller medikamenter fremstilles på kjent måte innen det farmasøytiske fag. Bæreren eller eksipiensen kan være et fast, halvfast eller væskeformig materiale som kan tjene som en bærer eller et medium for den aktive bestanddel. Egnede bærere eller eksipienser er vel kjent innen faget. Det farmasøytiske preparat kan være tilpasset for oral eller parenteral bruk, og kan administreres til pasienten i form av tabletter, kapsler, stikkpiller, løsninger, suspensjoner eller lignende.

De farmasøytiske preparater kan administreres oralt, for eksempel med et inert fortynningsmiddel eller med en spiselig bærer. De kan være innelukket i gelatinkapsler eller sammenpresset til tabletter. For oral terapeutisk administrering kan forbindelsene av formel (I) inkorporeres med eksipienser og anvendes i form av tabletter, pastiller, kapsler, eliksirer, suspensjoner, siruper, kjeks, tyggegummi og lignende. Disse preparater skal inneholde minst 4 % av forbindelsene av formel (I), den aktive bestanddel, men kan varieres avhengig av den bestemte form, og kan hensiktsmessig være mellom 4 % til ca. 70 % av vekten av enheten. Mengden av den;.aktive bestanddel tilstedeværende i preparater er slik at en enhetsdoseringsform egnet for administrering vil bli erholdt.

Tablettene, pillene, kapslene, pastillene og lignende kan også inneholde én eller flere av de'.følgende adjuvanser: bindemidler slik som mikrokrystallinsk cellulose, gummitragant eller gelatin; eksipienser slik som stivelse eller lactose, oppbrytendé midler slik som alginsyre, "Primogél", maisstivelse og lignende; smøremidler slik som magnesiumstearat eller "Sterotex"; glidemidler slik som kolloidalt siliciumdioxyd;

og søtningsmidler slik som sukrose eller sakkarin kan tilsettes, eller smaksgivende midler slik som peppermynte, methylsalicylat eller appelsinsmak. Når doseringsenhetsformen er en kapsel, kan den i tillegg til materialer av den ovenfor angitte type, inneholde en væskeforraig bærerrslik som polyethylenglykol eller en fettolje. Andre doseringsenhetsformer kan inneholde andre forskjellige materialer som modifiserer den fysikalske formen av doseringsenheten, for eksempel som belegg.. Således kan tabletter eller piller belegges med sukker, skjellakk eller andre enteriske belegningsmidler. En sirup kan i .tillegg til den aktive bestanddel inneholde sucrose som et søtningsmiddel og visse konserveringsmidler, farvestoffer og smaksgivende midler. Materialer anvendt ved fremstilling av disse forskjellige preparater skal være farmasøytisk rene og ikke-toksiske i de anvendte mengder.

For parenteral administrering kan forbindelsene av formel (I) inkorporeres i en løsning eller suspensjon. Disse preparater skal inneholde minst 0,1 % av forbindelsen ifølge oppfinnelsen, men kan varieres til å være mellom 0,1 og 50 %

av vekten derav. Mengden av den aktive bestanddel tilstedeværende i slike preparater er slik at den egnede dose vil bli erholdt.

Løsningene eller suspensjonene kan også inneholde én eller flere av de følgende adjuvanser: sterile fortynnings-midler slik som vann for injeksjon, saltvannsløsning, blåste oljer, polyethylenglykoler, glycerol, propylenglykol eller andre syntetiske løsningsmidler; antibakterielle midler slik som benzylalkohol eller methylparaben; antioxydanter slik som ascorbinsyre eller natriumbisulfitt; chelaterende'-midler slik. som ethylendiamintetraeddiksyre; buffere slik som acetater, citrater eller fosfater, og midler for justering av tonisiteten slik som natriumklorid eller dextrose. Det parenterale preparat kan være innelukket-i ampuller, éngangssprøyter eller multiple doseampuller fremstilt av glass eller plast.

Som med enhver gruppe av strukturelt beslektede forbindelser som utviser en bestemt generisk anvendelighet er visse grupper og konfigurasjoner foretrukne for forbindelsene av formel (I) i deres sluttelige anvendelse.

Forbindelsene av formel (I) hvori B, er hydrogen eller alkoxy er foretrukne. Forbindelser av formel (I) hvori og R^ er hydrogen og n er 0 er foretrukne.

Det skal selvsagt forstås at forbindelsene av formel (I) kan eksistere i et utall av isomeriske konfigurasjoner, innbefattende strukturelle så vel som stereoisomerer. Det skal ennvidere forstås at den foreliggende oppfinnelse omfatter disse forbindelser av formel (I) i hver av deres forskjellige strukturelle og stereoisomeriske konfigurasjoner, som individuelle isomerer og som blandinger av isomerer.

De etterfølgende spesifikke forbindelser av formel (I) er særlig foretrukne ved deres sluttelige anvendelse når det gjelder forbindelsene ifølge oppfinnelsen: [4S-[4a, 7a (R*), 12bB ]]-7-[ (2-thibrr2-oxoindan) methylamino ] - 1,2,3,4,6,7,8,12b-octahydro-6-oxopyrido[2,l-a][2]benzazepin-4-carboxylsyre;

[4S-[4a, 7a(R<*>), 12bB]]-7-[(2-mercaptomethyl-2-oxoindan)-methylamino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-octahydro-6-oxopyrido[2,l-a] [ 2 ] - benzazepin-4-carboxylsyre;

[4S-[4a, 7a(R<*>), 12bB]]-7-[(2-(2-mercaptoethyl)-2-oxoindan)-methylamino ]-1,2,3,4,6,7,8,12b-octahydro-6-oxopyrido [2^1-a ] [ 2 ] - benzazepin-4-carboxylsyre;

[4S-[4a, 7a(R<*>), 12bB]]-7-[(1-thio-l-oxocyklopentan)methylamino]-!, 2,3,4,6,7,8,12b-octahydro-6-oxopyrido[2,l-a][2]benzazepin-4-carboxylsyre.

Følgende studier illustrer anvendeligheten av forbindelsene ifølge oppfinnelsen som enkefalinaseinhibitorer og som ACE-inhibitorer.

Enkefalinase renses delvis fra rottenyre. Enzymet ekstraheres fra mikrpvilli-fraksjonen> ved anvendelse av "Triton X-100" i henhold til metoden ifølge Malfroy og Schwartz (J.Biol.Chem. 259, 14365-14370 (1984)) eller ved anvendelse av en proteolytisk behandling i henhold til metoden ifølge Almenoff og Orlowski (Biochem. 22, 590-599 (1983)). Enzymet renses ytterligere ved anionbyttekromatografi (kono Q1' — kolonne, Pharmacia) ved anvendelse av et Pharmacia FPLC-system. Enzymaktiviteten kan måles ved de fluorometriske metoder ifølge Florentin et al. (Anal.Biochem. 141, 62-69

(1984)) eller ifølge Almenoff og Orlowski (J.Neurochemistry 42, 151-157 (1984)). Enzymet bestemmes i 50 mm HEPES-buffer

(pH 7,4) i et 3,0 ml reaksjonsvolum inneholdende 12 ym av substratet dansyl-D-AlaGly(p-nitro)PheGly (Km=40 ym) ved 25°C. Substratet (og inhibitoren) tilsettes fra en konsentrert lagerløsning i DMSO (opp til 0,1 ml DMSO sluttvolum). Enzymet i et lite volum (ca. 0,1 yg FPLC-renset protein) tilsettes for å starte reaksjonen, og graden av fluorescensøkning nedtegnes kontinuerlig under anvendelse av et fluorometer (eksitering ved 339 nm, emisjon ved 562 nm).

Den enzymatiske aktivitet av ACE overvåkes under anvendelse av det spektrofotometriske substrat beskrevet av Holmquist et al. (Anal.Biochem. 95, 540-548 (1979)) og buffer-systernet beskrevet av Ryan (Methods of Enzymatic Analysis, 3dje utgave, H.U. Bergmeyer, red.; . vol^ V, Verlag Chemie, Weinheim, 1983, s. 20 - 34);

Resultatene av analysene av enzymatisk aktivitet som beskrevet i tabell 1 indikerer at forbindelsene ifølge oppfinnelsen er inhibitorer av enkefalinase så vel som inhibitorer av ACE.

102.708=[4S-[4a, 7ct(R*), 12b6 ] ]-7-[ (2-thio-2-oxoindan)methylamino1-1,2,3,4,6,7,8,12b-octahydro-6-oxopyridL 2,l-a][2lbehzazepin-4-carboxylsyre

l00-.-346=[4S-[4a, 7a(RlJ, 12bBl 1-7-[ (2-mercaptomethyl-. 2-oxoindan) methylamino 1-1,2,3,4,6,7,8 ,12b-roctahydro-6-oxopyrido[2,l-a][2]benzazepin-4-carboxylsyre

100,273=[4S-[4a, 7a(R<*>), I2b6]]-7-[(2-(2-mercaptoethyl)-2-oxoindan)methylamino]-l,2,3,4,6,7,8,12b-octahydro-6-oxopyrido[2,l-a][2lbenzazepin-4-carboxylsyre

l02.769=[4S-[4a, 7a(R<*>), I2b6]]-7-[(1-thio-l-oxocyklopentan)methylamino]-l,2,3,4,6,7,8,12b-octahydro-6-oxopyrido[2,3^a] [2 ]benzazepin-4-carboxylsyre 101.069=[4S-[4a, 7a(R<*>), 12b6]]-7-[(2-thio-l-oxo-2-methy1)-2-propylamino1-1,2,3,4,6,7,8,12b-octahydro-6-oxopyrido[2,1-al[2lbenzazepin-4-carboxylsyre

Claims

1. Forbindelser, karakterisert ved at de har formelen hvori A er en binding, methylen, oxygen, svovel, NR4 eller NCOR5 hvori R4 er hydrogen og R5 er -CF3; R^j^ er hydrogen, acetyl, -CH2OC (0) C (CH3) 3 eller benzoyl; R3 er hydrogen eller -CH20C(0)C(CH3)3; n er et helt tall fra 0 til 3; og Q er en gruppe av formelen hvori Z er 0, NH eller S; og m er et helt tall fra 1 til 5.

2. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at den er [4S-[4a, 7a(R<*>), 12b6]]-7-[(2 - thio-2-oxoindan)methylamino]-1,2,3,4,6,7,8,12b-octahydro-6-oxopyrido[2,l-a][2]benzazepin-4-carboxylsyre.

3. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at den er [4S-[4ct, 7a (R*), 12bB] ]-7-[ (2-mercaptomethyl-2-oxoindan)-methylamino]-l,2,3,4,6,7,8,12b-octahydro-6-oxopyrido[2,l-a][2]-benzazepin-4-carboxylsyre.

4. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at den er [4S-[4a, 7a(R<*>), 12bB]]-7-[(2-(2-mercaptoethyl)-2-oxoindan)-methylamino 1-1,2,3,4,6,7,8,12b-octahydro-6-oxopyr ido [ 2 , l-a ] [ 2 ] benzazepin-4-carboxylsyre.

5. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at den er [4S-[4a, 7a(R<*>), 12bB]]-7-[(1-thio-l-oxocyklopentan)-methylamino)-l,2,3,4,6,7,8,12b-octahydro-6-oxopyrido[2,l-a][2]-benzazepin-4-carboxylsyre.

6. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at den er [4S-[4a, 7a(R<*>), 12bB]]-7-[(1-thio-l-oxocyklohexari)-methylamino)-1,2,3,4,6,7,8,12b-octahydro-6-oxopyrido[2,l-a][2]-benzazepin-4-carboxylsyre.

7. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at den er [4S-[4a, 7a(R<*>), 12bB]]-7-[(1-thio-l-oxocyklopropan)-methylamino]-l,2,3,4,6,7,8,12b-octahydro-6-oxopyrido[2,l-a][2]-benzazepin-4-carboxylsyre.

8. Forbindelse, ifølge krav 1, karakterisert ved at den er [4S-[4a, 7a(R<*>), 12bB]]-7-[(2-thio-l-oxo-2-methyl)-2-propyl-amino]-l,2,3,4,6,7,8,12b-octahydro-6-oxopyrido[2,l-a][2]benzazepin-4-carboxylsyre.

9. Farmasøytisk preparat, karakterisert ved at det omfatter en effektiv mengde av en forbindelse ifølge krav 1 i blanding eller på annen måte i assosiasjon med én eller flere farmasøytisk akseptable bærere eller eksipienser.