NO169842B - Analogifremgangsmaate til fremstilling av terapeutisk aktive, kondenserte pyrimidiner - Google Patents

Analogifremgangsmaate til fremstilling av terapeutisk aktive, kondenserte pyrimidiner Download PDF

Info

Publication number
NO169842B
NO169842B NO891369A NO891369A NO169842B NO 169842 B NO169842 B NO 169842B NO 891369 A NO891369 A NO 891369A NO 891369 A NO891369 A NO 891369A NO 169842 B NO169842 B NO 169842B
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
compound
added
solution
tert
reference example
Prior art date
Application number
NO891369A
Other languages
English (en)
Other versions
NO891369D0 (no
NO891369L (no
NO169842C (no
Inventor
Hiroaki Nomura
Hiroshi Akimoto
Tetsuo Miwa
Original Assignee
Takeda Chemical Industries Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Takeda Chemical Industries Ltd filed Critical Takeda Chemical Industries Ltd
Publication of NO891369D0 publication Critical patent/NO891369D0/no
Publication of NO891369L publication Critical patent/NO891369L/no
Publication of NO169842B publication Critical patent/NO169842B/no
Publication of NO169842C publication Critical patent/NO169842C/no

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D239/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings
    • C07D239/70—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D239/72—Quinazolines; Hydrogenated quinazolines
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D239/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings
    • C07D239/70—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D239/72—Quinazolines; Hydrogenated quinazolines
    • C07D239/95—Quinazolines; Hydrogenated quinazolines with hetero atoms directly attached in positions 2 and 4

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)

Description

Foreliggende oppfinnelse vedrører fremstilling av nye kondenserte pyrimidinderivater som er nyttige som anti-tumormidler.
Folinsyre er en bærer av en Cl-enhet avledet fra maursyre eller formaldehyd, virkende som et koenzym i forskjellige enzymatiske reaksjoner såsom de som er innbefattet i biosyntese av nukleinsyrer, i metabolismen av aminosyrer og peptider, og ved fremstilling av metan. Spesielt i biosyntese av nukleinsyrer er folinsyre essensiell for formulering i de to reaksjonsveiene, dvs. purinsyntetisk reaksjonsvei og tymidinsyntetisk reaksjonsvei. Vanligvis er folinsyre nødvendig for å bli omdannet til dets aktiverte koenzymform ved reduksjon i to trinn før den blir biologisk aktiv. Ametopterin (metotreksat:MTX) og dets beslektede forbindelser er kjent for å hemme reduksjonen fra dihydrofolinsyre til tetrahydrofolinsyre ved sterk kobling av det dominante enzymet i det andre trinnet (dihydrofolinsyre reduktase). Disse medikamentene er blitt utviklet som anti-tumormedika-menter på grunn av at de kan forstyrre DNA-syntesen og dermed forårsake celledød, og er ansett å være klinisk viktig. Derimot er et nytt tetrahydroaminopterin anti-tumormiddel (5,10-dideaza-5,6,7,8-tetrahydroaminopterin: DDATEF) blitt rapportert som, ulikt medikamentene beskrevet ovenfor, ikke hemmer dihydrofolinsyre reduktase og hvori hovedmekanismen består av hemming av glycinamidribonukleotidtransformylase som er nødvendig i det begynnende trinnet av purinbiosyntesen [Journal of Medicinal Chemistry, 28, 914 (1985)].
Forskjellige studier er nå blitt utført på terapi for cancer, og man antar at utvikling av medikamenter som er mere effektive og som har toksisiteter som er veldig spesifikke på cancerceller basert på en ny mekanisme vil oppstå. Anti-tumormiddelet MTX, hvori den aktive mekanismen består av en antagonisme overfor folinsyre, blir klinisk anvendt, til tross for at dets terapeutiske effekt enda er utilfredsstil-lende på grunn av at det har en relativ sterk toksisitet med liten effekt på fast cancer. Det er også et hovedproblem at cancerceller erverver toleranse overfor middelet (MTX).
Vi har nå oppdaget at nye kondenserte pyrimidinderivater med en trimetylenkjede har toksisiteter som er veldig spesifikke overfor tumorceller og som har fremragende anti-tumoreffekter. Foreliggende oppfinnelse er basert på denne oppdagelsen.
Foreliggende oppfinnelse omhandler fremstilling av forbindelser med den generelle formel (I):
hvori ring A er en pyridinring som kan være hydrert eller en benzenring som kan være hydrert, X er NH2, R<*> og R^ er uavhengig hydrogen eller Ci~C4alkyl, og hver -COOR<5> og -COOR<6 >er uavhengig en karboksylgruppe som kan være forestret med Ci-C4alkyl eller et salt derav, kjennetegnet ved at man omsetter: hvori ring A, X, R<1> og R<2> er som definert ovenfor, eller et reaktivt derivat ved karboksylgruppen eller et salt derav, med en forbindelse med den generelle formel:
hvori -COOR<5> og -C00R<6>7 er som definert ovenfor, eller et salt derav.
Det kan være to eller flere asymetriske sentre i forbindelsene (I) fremstilt ifølge denne oppfinnelsen, og den absolutte konfigurasjonen ved alle asymmetriske karbonatomene kan være S, R eller en S-R blandet form, med unntagelse av den absolutte konfigurasjonen ved det asymmetriske karbonatomet i sidekjeden avledet fra glutaminsyre alltid er S(L). Derfor kan forbindelsene (I) ha to eller flere diastereomerer som, hvis nødvendig, lett kan separeres fra hverandre ved bruk av en rutinemessig fremgangsmåte for separasjon og rensing. Alle diastereomerene som kan bli separert ved bruk av en slik fremgangsmåte er innbefattet i denne oppfinnelsen.
Pyridinringen kan bli hydrert, blant annet representert ved ring (X) i formelen ovenfor kan enten være pyridin eller tetrahydropyridin. Videre kan benzenringen være hydrert, også representert ved ring (X) , være benzen, cykloheksen eller 1,3-cykloheksadien. Foretrukne eksempler av ring @ innbefatter en pyridinring som kan bli hydrert såsom pyridin eller tetrahydropyridin, og mere foretrukne eksempler innbefatter tetrahydropyridin.
Betegnelsen "lavere alkylgruppe" representert blant annet ved R<*> og R<2> i formelen ovenfor, innbefatter en alkylgruppe med 1 til 3 karbonatomer (f.eks. metyl, etyl, propyl eller isopropyl).
En forestret karboksylgruppe i en karboksylgruppe som kan være forestret, representert ved -COOR<5>, -COOR<6> og -COOR<7 >innbefatter en karboksylgruppe forestret ved (i) en lavere alkylgruppe med 1 til 5 karbonatomer, (li) en benzylgruppe som kan bli substituert, fortrinnsvis med en eller to av nitrogruppene eller en lavere alkoksygruppe med 1 til 3 karbonatomer (f.eks. metoksy, etoksy), eller (ili) en fenylgruppe som kan bli substituert, fortrinnsvis med en eller to nitrogrupper eller en lavere alkoksygruppe med 1 til 3 karbonatomer (f.eks. metoksy, etoksy eller propoksy).
Betegnelsen "lavere alkylgruppe" innbefatter metyl, etyl, propyl, isopropyl, n-butyl, iso-butyl, sec-butyl, tert-butyl, n-pentyl, iso-pentyl, sec-pentyl, neo-pentyl og tert-pentyl. Uttrykket "benzylgruppe som kan bli substituert" innbefatter benzyl, nitrobenzyl og metoksybenzyl. Uttrykket "fenylgruppe som kan bli substituert" innbefatter fenyl, nitrofenyl og metoksyfenyl.
Foretrukne eksempler på R<*> innbefatter hydrogen og en alkylgruppe med 1 til 3 karbonatomer, og fortrinnsvis de som innbefatter hydrogen.
Foretrukne eksempler på hver av R<2>, R<5> og R<6> innbefatter hydrogen.
I følgende partielle strukturelle formel av forbindelsene (I) og (II):
hvor ring A er en pyridinring som kan bli hydrert, er R<1 >fortrinnsvis ved 5-posisjonen derav og trimetylensidekjeden er fortrinnsvis festet til den kondenserte strukturen
ved 6-posisjonen derav, respektivt.
Forbindelsene (I) eller deres salter (som beskrevet nedenfor) kan bli tilveiebragt ved acylering av glutaminsyrederivatet (III) eller salter derav (som beskrevet for forbindelsen (I)) med karboksylsyrene (II) eller reaktive derivater eller salter (som beskrevet i de for forbindelse (I)) derav. Acyleringen kan for eksempel bli utført ved acylering av forbindelsen (III) eller et salt derav med forbindelsen (II) eller et salt derav i nærvær av et karbodiimid. Generelt blir omtrent 1 til 20 molekvivalenter, fortrinnsvis 1 til 5 molekvivalenter av forbindelse (III) eller dets salt relativt til forbindelse (II) eller dets salt anvendt. Generelt blir omtrent 1 til 25 molekvivalenter, fortrinnsvis omtrent 1 til 5 molekvivalenter av et karbodiimid relativt til forbindelse (II) eller dets salt anvendt.
Som karbodiimid, er dicykloheksyl-karbodiimid foretrukket av praktiske grunner, men andre karbodiimider såsom difenyl-karbodiimid, di-o-tolylkarbodiimid, di-p-tolylkarbodiimid, di-tert-butylkarbodiimid, l-cykloheksyl-3-(2-morfolinoetyl)-karbodiimid, l-cykloheksyl-3-)4-dietylaminocykloheksyl)karbodiimid, l-etyl-3-(2-dietylaminopropyl)karbodiimid og 1-etyl-3-(3-dietylaminopropyl)karbodiimid) kan alternativt bli anvendt.
Acyleringen blir fortrinnsvis utført i nærvær av et egnet oppløsningsmiddel, og slike oppløsningsmidler innbefatter estere (f.eks. etylacetat), etere (f.eks. dimetyleter, dietyleter, tetrahydrofuran, dioksan, monoglym, diglym), halogenerte hydrokarboner (f.eks. diklormetan, kloroform, karbontetraklorid ), nitriler (f.eks. acetonitril), aromatiske hydrokarboner (f.eks. benzen, toluen, xylen), nitrometan, pyridin, dimetylformamid, dimetylsulfoksid, heksametylfosfolamid og egnede blandinger av disse oppløsningsmidlene.
Reaksjonen forløper generelt ved en pH varierende fra 2 til 14, fortrinnsvis ved en pH varierende fra omtrent 6 til 9, ved en temperatur varierende fra omtrent -10°C til kokepunktet til oppløsningsmiddelet som blir anvendt (opp til omtrent 100°C), fortrinnsvis ved en temperatur varierende fra omtrent 0 til 50°C, i omtrent 1 til 100 timer.
Nedenfor er fremgangsmåtene for fremstilling av utgangsfor-bindelsene (II) og (III) eller salter derav forklart.
Forbindelse (II) hvori ring (X) er en pyridinring som kan bli hydrert, eller et salt derav kan bli fremstilt for eksempel ved følgende fremgangsmåter.
I reaksjonsf ormlene beskrevet ovenfor er X, R<1> og R<2> som beskrevet ovenfor; L er et halogenatom (f.eks. klor, brom eller jodatom), en ellminerbar gruppe som lett kan bli avledet fra en hydroksygruppe (f.eks. metansulfonyloksy-gruppe, benzensulfonyloksygruppe, p-toluensulfonyloksygruppe eller trifluormetan-sulfonylgruppe) eller en karboksylsyre-ester (f.eks. acetoksy eller benzoyloksy); Y er hydrogen eller et halogenatom (f.eks. fluor, klor, brom eller jod, osv.), Z er et oksygenatom eller et svovelatom; -COOR<7>' er en forestret karboksylgruppe; R<8> og R<10> er uavhengig en lavere alkylgruppe med 1 til 4 karbonatomer (f.eks. metyl, etyl, propyl, isopropyl, butyl, sec-butyl eller tert-butyl), benzyl eller en substituert benzylgruppe (p-nitrobenzyl eller p-metoksy-benzyl), eller fenyl eller en substituert fenylgruppe (f.eks. p-nitrofenyl) eller p-metoksyfenyl); R^ er en laverealkylgruppe med 1 til 4 karbonatomer, benzyl eller en substituert fenylgruppe som nevnt ovenfor. Den forestrede karboksylgruppen representert ved -COOR<7>, blir eksemplifisert ved en slik forestret karboksylgruppe som i "karboksylgruppen som kan bli forestret" representert ved —COOR<7>.
Forbindelse (XII) kan innbefatte et syreaddisjonssalt som nevnt nedenfor i relasjon til saltene av forbindelse (I).
I det følgende er reaksjonsfremgangsmåtene beskrevet ovenfor forklart i detalj.
Fremgangsmåte 1.
Forbindelse (V) og forbindelse (VI) blir utsatt for kondensasjon (aldolreaksjon, Wittig-reaksjon eller Reformatsky-reaksjon) og deretter for katalytisk reduksjon under hydrogenatmosfære for å tilveiebringe forbindelse (VII).
Ved kondensasjonen ved aldol-reaksjonen innbefatter anvendbare basiske katalysatorer metallhydroksyder såsom natriumhydroksyd, kaliumhydroksyd, litiumhydroksyd og bariumhydroksyd, metallalkoksyder såsom natriummetoksyd, natriumetoksyd, og kaliumtert-butoksyd, metallamider såsom natriumamid og litiumdiisopropylamid, metallhydrider såsom natriumhydrid og kaliumhydrid, organiske metallforbindelser såsom fenyllitium og butyllitium, og aminer såsom trietylamin, pyridin, a-, 3- eller -y-pikolin, 2,6-lutidin, 4-dimetylaminopyridin, 4-(1-pyrrolidinyl)-pyridin, dimetylanilin og dietylanilin; anvendbare sure katalysatorer innbefatter mineralsyrer såsom saltsyre, svovelsyre, salpetersyre, fosforsyre og borsyre, og organiske syrer såsom oksalsyre, tartarsyre, eddiksyre, trifluoreddiksyre, metansulfonsyre, benzensulfonsyre, p-toluensulfonsyre, og kamfersulfonsyre. Kondensasjonen kan bli utført ifølge en kjent fremgangsmåte [Ei-Ichi Negishi, Organometallics in Organic Synthesis, vol. 1, John Wiley & Sons, New York, Chichester, Brisbane, Toronto (1980)] som innbefatter omdanning av en ketonform til silylenoleterformen som deretter blir utsatt for kondensasjon med et aldehyd eller en ekvivalent i nærvær av en Lewissyre (f.eks. vannfri sinkklorid, vannfri aluminiumklorid (AICI3), vannfri jern-klorid, titantetraklorid (TiCl4), tinntetraklorid (SnCl4), antimonpentaklorid, koboltklorid, kupriklorid, bortrifluorid-etyleterkompleks, osv.), eller omdanning av en ketonform til enolatet ved behandling av ketonformen med et metalltriflat (f.eks. dialkylbortinn (II) triflat) i nærvær av et amin (f.eks. trietylamin, pyridin, a-, p- eller "y-pikolin, 2,6-lutidin, 4-dimetylaminopyridin, 4-(1-pyrrolidinyl)pyridin, dimetylanilin, dietylanilin) etterfulgt av utsetting av enolatet for kondensasjon med et aldehyd eller en ekvivalent. Kondensasjonen blir utført i et egnet oppløsningsmiddel ved en temperatur varierende fra omtrent —100"C til kokepunktet til oppløsningsmiddelet, fortrinnsvis varierende fra —78 til 100°C, i 1 minutt til 3 dager. Oppløsningsmidlene som kan anvendes for reaksjonen innbefatter vann, flytende ammoniakk, alkoholer (f.eks. metanol, etanol, propanol, isopropanol, butylalkohol, sec-butylalkohol, tert-butylalkohol, etylenglykol, metoksyetanol, etoksyetanol), etere (f.eks. dimetyleter, dietyleter, tetrahydrofuran, dioksan, monoglym, diglym), halogenerte hydrokarboner (f.eks. diklormetan, kloroform, karbontetraklorid), alifatiske hydrokarboner (f.eks. pentan, heksan, heptan), aromatiske hydrokarboner (f.eks. benzen, toluen, xylen), dimetylformamid, dimetylsulfoksid, heksametylfosfolamid, sulfolan og egnede blandigner derav. I kondensasjonen ved Wittig-reaksjon, innbefatter anvendbare reagenser metallhydroksyder såsom natriumhydroksyd, kaliumhydroksyd, 1 itiumhydroksyd og bariumhydroksyd, metallalkoksyder, såsom natriummetoksyd, natriumetoksyd og kaliumtert-butoksyd, metallamider såsom natriumamid og litiumdiisopropylamid, metallhydrider såsom natriumhydrid og kaliumhydrid, organiske metallforbindelser såsom fenyllitium og butyllitium, og aminer såsom fenyllitium og butyllitium, og aminer såsom trietylamin, pyridin, a-, p- eller -y-pikolin, 2,6-lutidin, 4-dimetylaminopyridin, 4-(l-pyrrolidlnyl)pyridin, dimetylanilin og dietylanilin. Reaksjonen blir utført i et egnet oppløsningsmiddel ved en temperatur varierende fra omtrent —20° C til kokepunktet til oppløsningsmiddelet som blir anvendt, fortrinnsvis varierende fra omtrent 0 til 150°C, i 1 minutt til 10 dager. Oppløsningsmidlene som kan anvendes for reaksjonen innbefatter flytende ammoniakk, alkoholer (f.eks. metanol, etanol, propanol, isopropanol, butylalkohol, sec-butylalkohol, tert-butyl.alkohol, etylenglykol, metoksyetanol, etoksyetanol), etere (f.eks. dimetyleter, dietyleter, tetrahydrofuran, dioksan, monoglym, diglym), alifatiske hydrokarboner (f.eks. pentan, heksan, heptan), aromatiske hydrokarboner (f.eks. benzen, toluen, xylen), dimetylformamid, dimetylsulfoksyd, heksametylfosfolamid, sulfolan og egnede blandinger derav.
Kondensasjonen kan bli utført ved anvendelse av en Refor-matsky-reaksjon. Reagenser som kan anvendes for Reformatsky-reaksjonen innbefatter sink, magnesium, aluminium, og tinn, og reaksjonen blir utført i et egnet oppløsningsmiddel ved en temperatur varierende fra omtrent —20"C til kokepunktet til oppløsningsmiddelet som blir anvendt, fortrinnsvis varierende fra omtrent 0 til 150°C i 30 minutter til 3 dager. Oppløs-ningsmidlene som kan anvendes for reaksjonen innbefatter etere, (f.eks. dimetyleter, dietyleter, tetrahydrofuran, dioksan, monoglym, diglym), alifatiske hydrokarboner (f.eks. pentan, heksan, heptan), aromatiske hydrokarboner (f.eks. benzen, toluen, xylen), og egnede blandinger derav.
Reaksjonsbetingelsene for den katalytiske reduksjonen utført kontinuerlig etter kondensasjonen er de samme som de for avestringen ved -COOR<5> og -COOR<6> av forbindelse (I) eller et salt derav (fremgangsmåte C).
Fremgangsmåte 2.
Dette er fremgangsmåten hvorved en gruppe ekvivalent med aldehydet som har en Cl-enhet blir introdusert i aktivt metylen (ot-posisjonen til karboksylsyreesteren) av forbindelse (VII). Gruppen som er ekvivalent med aldehydet er eksemplifisert ved -CH(0CH3)2, -CH(0CH2CH3)2, -<C>H(SCH3)2, -CH(0CH2C£,H5 )2, osv., og kan lett bli fremstilt fra korresponderende orto-maurester, orto-tiomaurester osv., ved anvendelse av kjente reagenser ifølge i seg selv kjent fremgangsmåte.
Fremgangsmåte 3.
Forbindelse (VIII) tilveiebragt i fremgangsmåte 2 ble utsatt for reduksjon av et hydrid (f.eks. litiumborhydrid, natrium-borhydrid, litiumcyanoborhydrid, litiumaluminiumhydrid, di-isobutylaluminiumhydrid) for å gi alkoholformen (IXiR<1> er hydrogenatom). I reduksjonen blir R<7>' og R<8> fortrinnsvis valgt slik at det oppstår forskjellig reaktivitet (eller selektivitet) overfor karbonylgruppen til hydridet mellom dem.
Reduksjonen blir utført i et egnet oppløsningsmiddel ved en temperatur varierende fra omtrent —40°C til kokepunktet til oppløsningsmiddelet som blir anvendt, fortrinnsvis varierende fra omtrent 0 til 50°C. Oppløsningsmiddelet som kan anvendes for reaksjonen innbefatter vann, alkoholer (f.eks. metanol, etanol, propanol, iso-propanol, butylalkohol, sec-butylalkohol, tert-butylalkohol, etylenglykol, metoksyetanol, etoksyetanol) eddiksyreestere (f.eks. metylacetat, etylacetat), etere (f.eks. dimetyleter, dietyleter, tetrahydrofuran, dioksan, monoglym, diglym), aromatiske hydrokarboner (f.eks. benzen, toluen, xylen), pyridin, dimetylformamid, og egnede blandinger derav. Mengden reduksjonsmiddel anvendt er omtrent 1 til 100 mol, fortrinnsvis omtrent 2 til 20 mol per redusert forbindelse. Omdanning av forbindelsen (IX:R<1> er hydrogenatom) til forbindelsen (IX^1 er en laverealkylgruppe som definert ovenfor) kan bli utført for eksempel ved følgende fremgangsmåte.
Dette er fremgangsmåten hvorved forbindelsen (IX:R<*> er hydrogenatom) blir oksydert for å tilveiebringe aldehydformen (XIII) og deretter blir den tilveiebragte formen (XIII) utsatt for en reaksjon ved øking av karbonatomet for å gi den korresponderende forbindelsen (IX:R<l> er en laverealkylgruppe). Oksydasjonsreaksjonen for å tilveiebringe en aldehydform kan bli utført ved anvendelse av kjente reagenser ifølge en i seg selv kjent fremgangsmåte. Reaksjonen for øking av karbonatomer kan fordelaktig bli utført ved anvendelse av organiske metallreagenser (f.eks. Grignard-reagens, alkyllitiumreagens, alkylsinkreagens, osv.), og kan også bli utført under betingelser ifølge en i seg selv kjent fremgangsmåte .
Fremgangsmåte 4.
Eydroksylgruppen til alkoholformen (IX) tilveiebragt i fremgangsmåte 3 kan lett bli omdannet til den ventede eliminerbare gruppen ved den i seg selv kjente fremgangsmåten som innbefatter halogeneringsreaksjon, acyleringsreaksjon eller sulfonyleringsreaksjon.
Fremgangsmåte 5.
Forbindelse (X) tilveiebragt i fremgangsmåte 4 er utsatt for kondensasjon med malonitril eller en cyanoeddiksyreester representert ved formelen NC-CH2COOR<10> hvori R<10> er den samme som beskrevet ovenfor, under basiske betingelser, for å gi forbindelse (XI). Anvendbare baser, oppløsningsmidler og reaksjonsbetingelser er ifølge kjente fremgangsmåter.
Fremgangsmåte 6.
Forbindelse (XI), når behandlet med guanidin, kan reagere ved cyanogruppen eller esterresidiet etterfulgt av ringslutning for å danne en pyrrolopyrimidinring. Ringslutning under basiske betingelser fører til at reaksjonen forløper fordelaktig. Anvendbare baser innbefatter metallalkoksyder, såsom natriummetoksyd, natriumetoksyd og kaliumtert-butoksyd. Anvendbare oppløsningsmidler for reaksjonen innbefatter metanol, etanol, propanol, tert-butylalkohol, tetrahydrofuran, dioksan, dimetylsulfoksyd og heksametylfosfolamid. Reaksjonstemperaturen varierer fra omtrent 0 til 150°C, fortrinnsvis fra omtrent 20 til 100°C. Reaksjonstiden varierer fra omtrent 1 til omtrent 24 timer.
Fremgangsmåte 7.
Når forbindelse (XII) tilveiebragt i fremgangsmåte 6 blir utsatt for avestring av esterresidiet ([-COOR<7>'] og deretter eliminering av en beskyttende gruppe [ZR<9>] i den beskyttende gruppen ekvivalent med aldehy [-CH(ZR<9>)2], vanligvis karboksylsyren (II-l) som automatisk blir oksydert, kan bli tilveiebragt. For avestringen er betingelsene anvendt for avestringen av esterresidiene [-COOR<5> og -COOR<6>] av forbindelse (I) (fremgangsmåtene A, B-l, B-2 og C) anvendbare. Eliminering av en beskyttende gruppe [ZRg] i gruppen ekvivalent til aldehydet kan bli utført ifølge en kjent fremgangsmåte. Forestringen og eliminering av beskyttende gruppe i gruppen ekvivalent med aldehydet kan bli utført i en hvilken som helst rekkefølge.
Fremgangsmåte 8.
Forbindelse (II-l) tilveiebragt i fremgangsmåte 7 kan bli utsatt for katalytisk reduksjon under hydrogenatmosfære for å tilveiebringe tetrahydroformen (II-2). Betingelsene for katalytisk reduksjon er de som fordelaktig blir anvendt ved avestring av -COOR<5> og -COOR<6> av forbindelsen (I) (fremgangsmåte C).
Til tross for at forbindelse (1-2) med en tetrahydropyridin-ring som ring (2) i formelen (I) ovenfor kan bli fremstilt ved utsetting av forbindelse (II-2) og forbindelse (III) for kondensasjon, er det bedre å fremstille den ved utsetting av forbindelse (I-l) med en pyridinring som ring A i formel (I) for katalytisk reduksjon under hydrogenatmosfære. Betingelsene for katalytisk reduksjon som er anvendbare er de som blir anvendt i avestring av -COOR<5> og -COOR<6> av forbindelse (I) eller et salt derav (fremgangsmåte C).
Forbindelse (II) hvori ring @ er en benzenring som kan bli hydrert, eller et salt derav, kan bli fremstilt for eksempel ved følgende fremgangsmåter. I reaksjonsformlene beskrevet ovenfor er R<1>, R<2>, og R<7> de samme som beskrevet før, og R<11> er en beskyttende gruppe for en hydroksylgruppe. Slike R<11> beskyttende grupper innbefatter for eksempel C^^, alkylgrupper (f. eks. metyl, etyl, n-propylisopropyl, n-butyl, sec-butyl, tert-butyl osv.), benzylgrupper som kan bli for eksempel bli substituert med en eller to grupper valgt fra nitro, C]_3 alkoksy såsom metoksy og etoksy, halogen, såsom klor og brom, cyano og fenyl (f.eks. benzyl, p-nitrobenzyl, p-metoksybenzyl, p-klorbenzyl, p-cyanobenzyl, difenylmetyl, trityl, osv.), silylgrupper som for eksempel er substituert med de samme eller forskjellige tre gruppene valgt fra C]_fc alkyl som nevnt ovenfor, fenyl, trifenylmetyl, benzyl og xylyl (f.eks. trimetylsilyl, trietylsilyl, iso-propyldimetylsilyl, tert-butyldimetylsilyl, trifenylmetyldimetylsilyl, tert-butyldifenylsilyl, metylldi-iso-propylsilyl, metyldi-tert-butylsilyl, tribenzylsilyl, trixylylsilyl, tri-iso-propylsilyl, trifenylsilyl, osv.), metoksymetylgruppe, isopropyloksymetylgruppe, tetrahydro-piranylgruppe og tetrahydrofuranylgruppe. Den forestrede karboksylgruppen representert ved -COOR<7>, er eksemplifisert ved en slik forestret karboksylgruppe som i "karboksylgruppen som kan bli forestret" representert ved —COOR<7>.
Forbindelsene (XX) kan innbefatte syreaddisjonssalter som nevnt nedenfor i salter av forbindelse (I).
I det følgende er reaksjonsfremgangsmåtene beskrevet ovenfor forklart i detalj.
Fremgangsmåte 9.
Forbindelse (XIV) fremstilt ved kjente fremgangsmåter og forbindelse (XV) fremstilt ved kjente fremgangsmåter blir utsatt for en en Wittig-reaksjon og kondensert for å tilveiebringe forbindelse (XVI). Reaksjonsbetingelsene som kan anvendes i denne Wittig-reaksjonen er de som blir anvendt i fremgangsmåte 1.
Fremgangsmåte 10.
Den beskyttende gruppen R<1*> for hydroksylgruppen i forbindelse (XVI) kan lett bli fjernet ved anvendelse av kjente reagenser ifølge en kjent fremgangsmåte, f.eks. som beskrevet i "Protective Groups in Organic Chemistry", Plenum Press, London og New York (1973).
Fremgangsmåte 11.
Forbindelse (XVII) tilveiebragt i fremgangsmåte 10 kan lett bli utsatt for reduksjon for å gi forbindelse (XVIII). Reduksjonen kan fordelaktig bli utført ved katalytisk reduksjon ved tilsetting av katalysator (f.eks. nikkel, palladium, platina, rhodium, osv.) under en hydrogenatmosfære. For reaksjonsbetingelser ved katalytisk reduksjon er de som blir anvendt ved avestring av —COOR<5> og —COOR<6> av forbindelse (I) (fremgangsmåte C) anvendbare. Fremgangsmåtene 10 og 11 kan bli utført i en hvilken som helst rekkefølge for å tilveiebringe hovedforbindelsen til hver fremgangsmåte og til slutt gi forbindelse (XVIII).
Fremgangsmåte 12.
Forbindelse (XVIII) tilveiebragt i fremgangsmåte 11 kan lett bli omdannet til ketonformen (XIX) ved anvendelse av kjente reagenser ifølge kjent fremgangsmåte.
Fremgangsmåte 13.
Forbindelse (XIX) kan bli omsatt med dicyanodiamid under oppvarming etterfulgt av ringslutning for dannelsen av en ny kondensert pyrimidinring for å tilveiebringe forbindelse (XX). Reaksjonstemperaturen i denne reaksjonen varierer fra 100 til 300'C, fortrinnsvis fra 150 til 250°C. Og reaksjons-tidene varierer fra 1 til 24 timer. Hvis nødvendig kan ring A bli omdannet til den korresponderende aromatiske ringen ved dehydrering med anvendelse av kjente reagenser ifølge kjent fremgangsmåte.
Fremgangsmåte 14.
Esterformen (XX) tilveiebragt i fremgangsmåte 13 kan bli utsatt for avestring for å tilveiebringe karboksylsyren (II-3). Avestringen kan bli utført ifølge fremgangsmåten anvendt i fremgangsmåte 7.
Fremgangsmåte 15.
Forbindelse (XIX) tilveiebragt i fremgangsmåte 12 kan bli aktivert i a-posisjonen av oksogruppen og deretter kan en etoksykarbonylgruppe bli introdusert dertil Ifølge konven-sjonell fremgangsmåte for å tilveiebringe forbindelse (XXI).
Reaksjonene, reagensene og reaksjonsbetingelsene anvendt i fremgangsmåtene 1 til 15, og til fremstilling av utgangsfor-bindelse (II) er kjente og forklart i detalj i følgende litteratur.
[J.F.W. Mcomine, Protective Groups in Organic Chemistry, Plenum Press, London og New York (1973)], [Pine, Eendrikson, Hammond, Organic Chemistry (4. utgave) [I]-[II] , Hirokawa Shoten (1982)], og [M. Fleser og L. Fleser, Reagents for Organic Synthesis vol. 1-10, Wiley-Interscience, New york, London, Sydney and Toronto (1969-1982)].
Forbindelsene fremstilt ifølge denne oppfinnelsen og mellomproduktene derav fremstilt ved bruk av disse fremgangsmåtene kan bli isolert fra reaksjonsblandingene ved bruk av konvensjonelle metoder for separering og rensing, såsom konsentrering, ekstrahering med oppløsningsmiddel, kromato-grafi, azeotrofi og omkrystallisering.
Forbindelsene (I), (II) og (III) kan danne salter. Slike salter blir fremstilt ved kjente fremgangsmåter, og eksemplifisert ved saltene av farmasøytisk akseptable baser eller syrer og kvaternære salter. Salter av baser innbefatter salter av alkalimetaller, alkaliske jordmetaller, ikke-toksiske metaller, ammonium og substituert ammonium, såsom natrium, kalium, litium, kalsium, magnesium, aluminium, sink, ammonium, trimetylammonlum, trletylammonium, trietanolammo-nium, pyridinium og substituert pyridinium. Salter av syrer innbefatter salter av mineralsyrer såsom saltsyre, svovelsyre, salpetersyre, fosforsyre og borsyre, og salter av organiske syrer såsom oksalsyre, tartarsyre, eddiksyre, trifluoreddiksyre, metansulfonsyre og kamfersulfonsyre. Kvaternære salter innbefatter salter av metylbromid, metyljodid, metylmetansulfonat, metylbenzensulfonat og metyl p-toluensulfonat.
Forbindelsene (I), (II) og (IV) kan også danne zwitterioner.
Forbindelsene (I) eller salter derav fremstilt ifølge denne oppfinnelsen utviser fremragende anti-tumoreffekter i musetumorcellestammer (P388, L1210, L5178Y, B16 melanoma, MethA, Lewis Lung Carcinoma, S180 sarcome, Ehrlich Carcinoma, Colon38) og humane tumorcellestammer (HL60, Lu65), reduserer tumorene i varmblodige dyr (f.eks. melanoma, sarkoma, mastocytoma, carcinoma, neoplasia, osv.), og forlenger livslengden til tumor-bærende varmeblodige dyr.
I det følgende blir resultatene som indikerer de farmasøy-tiske effektene av forbindelsene (I) eller saltene derav fremstilt ifølge denne oppfinnelsen beskrevet.
Cellevekstinhiberende effekt (IC50) av forbindelsene tilveiebragt i arbeidseksemplene 11 og 12 beskrevet nedenfor i HL-60 og HEL ble bestemt ved følgende fremgangsmåte.
(1) En suspensjon av humane leukemiceller (2 x IO<5> celler/ml) i GTT kulturmedium (Wako Pure Chemicals) innbefattende forbindelsen fremstilt ifølge denne oppfinnelsen ble inokkulert i hver brønn av 96-mikrobrønnplaten (0,2 ml i en brønn), og utsatt for henstand av kulturen ved 37°C under 5% C02 i 68 timer. Til denne kulturen ble 1>jC1-[<3>H] tymidin (5Ci/mmol) tilsatt og igjen utsatt for dyrking i 4 timer. For å måle tymidinopptaket i cellene, ble fraksjoner som ikke er
oppløselig i syre samlet og radioaktiviteten derav ble målt ved flytende scintillasjonstelling. ICsg-verdiene til en forbindelse ble bestemt som den konsentrasjonen av forbindelsen som er nødvendig for å redusere radioaktiviteten tatt opp i den ubehandlede kontrollgruppen med 50%. (2) En suspensjon av humane embryo lungefibroblast HEL (1 x IO<4> celler/ml) i MEM kulturmedium (Japan Flow Laboratories) ble inokkulert i hver brønn av 96-mikrobrønnplaten (0,1 ml i en brønn), og utsatt for henstand av kulturen ved 37°C under 5% C02 i 24 timer. Til denne ble MEM-kulturmedium innbefattende forbindelsen fremstilt ifølge denne oppfinnelsen tilsatt, og igjen utsatt for dyrking i 72 timer. Deretter ble kulturen erstattet med et kulturmedium innbefattende MTT (Dojindo Laboratories) I 1 pg, og til dette ble 10# SDS (Wako Pure Chemicals) tilsatt, etterfulgt av inkubasjon i en natt. Absorbansen ved 590 nm ble målt ved multiscan (Titertek) og IC5Q-verdien ble definert sammenlignet med den ubehandlede kontrollgruppen. Resultatene tilveiebragt er vist i tabell 1.
Som vist i ovenfornevnte resultater er forbindelsene (I) og saltene derav fremragende til inhibering av celleveksten av HL-60, men de utøver ikke toksisitet overfor HEL. Forbindelsene (I) fremstilt ifølge denne oppfinnelsen og saltene derav har lav toksisitet og fremragende antitumoreffekter. Derfor kan preparatene inneholdende forbindelse (I) eller saltet derav bli anvendt som anti-tumormidler for behandling av tumorer i varmblodige dyr, spesielt pattedyr (f.eks. menneske, mus, rotte, katt, hund, kanin osv.).
Forbindelsene (I) og saltene derav, når anvendt som anti-tumormidler, kan bli administrert oralt og parenteralt som de er og i form av pulvere, granuler, tabletter, kapsler, stikkpiller og injeksjoner, som blir preparert ifølge konvensjonelle fremgangsmåter ved anvendelse av farmasøytisk akseptable hjelpestoffer, bærere og fortynningsmidler. Dosen varierer ifølge dyrene, sykdommene, symptomene, forbindelsene og administrasjonsveiene; for eksempel er den daglig dosen omtrent 1,0 til 50 mg av forbindelsen ifølge denne oppfinnelsen pr. kg kroppsvekt av et varmblodig dyr beskrevet ovenfor for oral administrering, og omtrent 1,0 til 20 mg/kg for parenteral administrering. Injeksjonene kan bli administrert intramuskulært, intraperitonealt, subkutant eller intraven-øst .
Prepareringene blir fremstilt ved kjente fremgangsmåter. Ovenfor nevnte orale preparater, for eksempel tablettene, blir fremstilt ved egnet kombinasjon med et bindemiddel (f.eks. hydroksypropylcellulose, hydroksypropylmetylcellu-lose, makrogol, osv.), et oppløsningsmiddel (f.eks. stivelse, kalsiumkarboksylmetylcellulose osv.), eller et smøremiddel (f.eks.magnesiumstearat, talkum osv.).
For parenterale preparater blir for eksempel injeksjoner fremstilt ved egnet kombinasjon med et isotonicitetsdannende middel (f.eks. glukose, D-sorbitol, D-mannitol, natriumklorid osv.), et antiseptisk middel (f.eks. benzylalkohol, klorbutanol, metyl p-hydroksybenzoat, propyl p-hydroksybenzoat, osv.), eller en buffer (f.eks. fosfatbuffer, natrium-acetatbuffer osv.).
Et eksempel på en fremgangsmåte for fremstilling av tabletter innbefatter blanding av omtrent 1,0 til 50 mg av forbindelsen fremstilt ifølge oppfinnelsen, 100 til 500 g laktose, omtrent 50 til 100 mg maisstivelse og omtrent 5 til 20 mg hydroksypropylcellulose for preparering av en tablett ved konven-sjonell måte, granulering, blanding med maisstivelse og magnesiumstearat og tablettdanning, slik at tablettene hver veier omtrent 100 til 500 mg med diameter på omtrent 3 til 10 mm blir tilveiebragt. Tablettene kan bli belagt med en blanding aceton og etanol, hvori blandingen inneholder hydroksypropylmetylcelluloseftalat (omtrent 10 til 20 mg pr. tablett) og lakserolje (0,5 til 2 mg) i en konsentrasjon på omtrent 5 til 10$, for å gi belagte tabletter for innvortes bruk.
Et eksempel på en fremgangsmåte for fremstilling av en injeksjon innbefatter oppløsning av omtrent 5,0 til 50 mg av natriumsaltet til forbindelsen fremstilt ifølge denne oppfinnelsen i omtrent 2 ml fysiologisk saltvann for fremstilling av en ampulle, forsegling av den resulterende oppløsningen i en ampulle og sterilisering av ampullen ved 110° C i omtrent 30 minutter, eller oppløsning av omtrent 5,0 til 50 mg av natriumsaltet av forbindelsen fremstilt ifølge denne oppfinnelsen i omtrent 2 ml sterilt destillert vann hvori omtrent 10 til 40 mg mannitol eller sorbitol er løst opp i ampullen, frysetørring og forsegling av ampullen. For anvendelse av den frysetørrede forbindelsen for subkutan, intravenøs eller intramuskulær injeksjon blir ampullen åpnet og innholdet løst opp i, for eksempel, fysiologisk saltvann slik at konsentrasjonen av forbindelsen omtrent er 1,0 til 20 mg/ml.
Følgende referanseeksempler og arbeidseksempler vil forklare foreliggende oppfinnelse i mere detalj. I disse eksemplene betyr romtemperatur omtrent 20°C.
Referanseeksempel 1.
Fremstilling av metyl 5-[4-(tert-butoksykarbonyl)-fenyl]-pentanoat: Under argonatmosfære ble kalium (25 g) satt til tørket tert-butylalkohol (820 ml), som ble oppvarmet med tilbakeløp for en fullstendig oppløsning. Oppløsningen ble avkjølt til 20°C hvorpå eter (300 ml) ble tilsatt og deretter en oppløsnin bestående av metylkrotonat (63,93 g) og tert-butyl 4-formylbenzoat (71,0 g) i tert-butylalkohol-eter (2:1, 300 ml) ble sakt tilsatt mens den indre temperaturen ble holdt på 10°C. Etter omrøring ved samme temperatur i to timer ble 1 N kaliumhydrogensulfat i vann (75 ml) tilsatt med avkjøling slik at pHen kan bli justert til 4. Oppløsningen ble ekstrahert med eter, vasket med vann og deretter med mettet saltvann, og utsatt for fordamping av oppløsningsmiddelet under redusert trykk. Den resulterende resten ble løst opp i etylacetat (100 ml) hvorpå 5#Pd-C (15 g: Engelhard Co.) ble tilsatt og omfattende omrørt under hydrogentrykk på 4 kg/cm<2 >ved romtemperatur I 3 timer. Katalysatoren ble filtrert ut, oppløsningsmiddelet ble fordampet under redusert trykk, og resten ble tørket med etanol (200 ml), 4-(N,N-dimetylamino)-pyridin (30 mg) og diklormetan (250 ml) tilsatt, og deretter ble en oppløsning av 1,3-dicykloheksylkarbodiimid (132 g) i diklormetan (250 ml) sakte dråpevis tilsatt ved 0°C. Etter omrøring ved romtemperatur i 18 timer ble blandingen avkjølt til 0°C, og eddiksyre (30 ml) ble tilsatt og omrørt ved 0°C i 30 minutter og deretter ved romtemperatur i 30 minutter. Det resulterende presipitatet ble filtrert ut, filtratet ble konsentrert til tørrhet under redusert trykk, og etylacetat (100 ml) ble satt til resten og holdt ved 0°C i 2 timer, og det resulterende presipitatet ble igjen filtrert ut. Filtratet ble konsentrert under redusert trykk og resten ble renset ved kolonnekromatografi (bærer; silisiumoksydgel, 500 g, elueringsmiddel; eter:heksan = 1,15-»1:5), for å gi sluttforbindelsen (59,7 g).
Smeltepunkt (Smp) 145-155°C/0,2-0,3 mmHg
IR (Neat) : 2980, 2950, 1740, 1712, 1605 cm-<1>
■^•H-NMR (CDC13) S : 1,40-1,75 (4H,m), 1,55 (9H,s), 2,15-2,45 (2H, m), 2,50-2,75 (2H,m), 3,62 (3H,s), 7,16 (2H,d,j=8Hz), 7,85
(H,d,j=8Hz).
Referanseeksempel 2.
Fremstilling av metyl 5-[4-(tert-butoksykarbonyl)-fenyl]-2-(dimetoksymetyl)pentanoat: Under argonatmosfære ble en oppløsning av diisopropylamin (8,35 g) i tetrahydrofuran (150 ml) satt til en oppløsning av butyllitium (82,5 mmol) i heksan (51,6 ml) ved 0°C og omrørt i 10 minutter, hvorpå, etter avkjøling til —78"C, en oppløsning av forbindelsen (21,93 g) tilveiebragt i referanseeksempel i tetrahydrofuran (50 ml) ble dråpevis tilsatt i løpet av 30 minutter. Etter omrøring i 30 minutter ble kloro-trimetylsilan (15 ml) tilsatt i en porsjon. Temperaturen til blandingen ble bragt til romtemperatur i løpet av to timer, etterfulgt av avdamping av oppløsningsmiddelet og tilsetting av tørket toluen (30 ml x 2). Kloro-trimetylsilan ble fullstendig avdampet under redusert trykk. Til resten ble tørket toluen (30 ml) tilsatt. Etter at det uoppløselige stoffet ble fjernet ved filtrering, ble oppløsningsmiddelet avdampet under redusert trykk for å tilveiebringe ketensilylacetal av mellomproduktet. Under argonatmosfære ble tinn (I) klorid (2,84 g) og trifenylmetylklorid (4,18 g) suspendert i diklormetan (150 ml), og til dette ble en oppløsning av ketensillylacetal beskrevet ovenfor og metylortoformat (9,55 g) i diklormetan (50 ml) sakte tilsatt. Når den klare gule farven på reaksjonsblandingen ble borte, ble titantetraklorid (1,5 ml) satt til. Etter omrøring ved —78° C i 30 minutter ble reaksjonsblandingen satt til en oppløsning (150 ml) av 0,5 N natriumhydrogenkarbonat, etterfulgt av omrøring av romtemperatur i 30 minutter. Presipitatet ble fjernet ved filtrering og filtratet ble ekstrahert med diklormetan. Ekstraktet ble tørket over vannfri magnesiumsulfat og oppløsningsmiddelet ble fordampet under redusert trykk. Den tilveiebragte resten ble renset ved kolonnekromatografi (bærer; silisiumoksydgel, 200 g, elueringsmiddel; etylacetat:heksan = 1:12-»1:8) for å gi sluttforbindelsen (11,0 g).
IR (Neat) : 2940, 1740, 1715, 1608 cm-<1>
<1->H-NMR (CDC13) S : 1,40-1,85 (4H,m), 1,57 (9H,s), 2,45-2,90 (3H,m), 3,30 (3H,s), 3,33 (3H,s), 3,69 (3H,s), 4,48 (1E,d,j=8Hz ), 7,20
(2H,d,j=8Hz), 7,88 (2H,d,j=8Hz).
Referanseeksempel 3.
Fremstilling av t-butyl 4-[4-(dimetoksymetyl )-5-hydroksy-pentyl]benzoat: Under argonatmosfære ble til en oppløsning av forbindelsen (11,0 g) tilveiegbragt i referanseeksempel 2 i eter (50 ml) satt til litiumborhydrid (980 mg) ved 0°C, og temperaturen ble raskt bragt opp til romtemperatur, etterfulgt av omrøring over natt. Til reaksjonsblandingen ble metanol (70 ml) tilsatt ved 0°C, og etter omrøring i 30 minutter, ble pHen justert til 6 med isvann (10 ml) og vandig oppløsning av 1 N kaliumhydrogensulfat. Blandingen ble ekstrahert med eter, og ekstraktet ble vasket med vann, deretter med mettet natrium-kloridoppløsning og tørket over vannfri natriumsulfat. Oppløsningsmiddelet ble fordampet under redusert trykk og resten ble renset ved kolonnekromatografi (bærer; sillsiumoksydgel, 200 g, elueringsmiddel; etylacetat:heksan=l:3) for å gi sluttforbindelsen (7,98 g).
IR (Neat) : 3450, 2925, 1707, 1604 cm-<1>
<i>H-NMR (CDCI3) S : 1,20-1,95 (5H,m), 1,60 (9H,s), 2,33
(2H,t,J=8Hz), 2,40 (lH,brs), 3,35
(3H,s), 3,41 (3H,s), 3,50-3,73 (2H,m), 4,27 (lH,d,J=6Hz), 7,21 (2H,d,J=8Hz), 7,90 (2H,d,J=8Hz).
Referanseeksempel 4.
Fremstilling av t-butyl 4-[4-(dimetoksymetyl)-5-(metyl-sulfonyloksy)pentyl]benzoat:
Forbindelsen (7,98 g) tilveiebragt i referanseeksempel 3 ble løst opp i en blanding av pyridin og diklormetan (1:1, 40 ml) og til dette ble metansulfonylklorid (3,24 g) tilsatt ved -15°C. Temperaturen ble raskt bragt opp til 0°C etterfulgt av omrøring I 2 timer. Oppløsningsmiddelet ble avdampet under redusert trykk og eter (150 ml) og trietylamin (476 mg), ble tilsatt, etterfulgt av omrøring i 3 minutter. Eterlaget ble vasket med vann, en mettet vandig kobbersulfatoppløsning og en mettet natriumkloridoppløsning i denne rekkefølgen, og deretter tørket over vannfri natriumsulfat. Oppløsnings-middelet ble avdampet under redusert trykk for å tilveiebringe sluttforbindelsen (9,83 g).
IR (Neat): 2940, 1714, 1608, 1370, 1180 cm-<1>
<1>H-NMK (CDC13) S : 1,30-1,80 (5H,m), 1,63 (9H,s), 2,68
(2H,t,J=7Hz), 3,00 (3H,s), 3,43
(6H,s), 4,20-4,35 (3H,m), 7,26 (2H,d,J=8Hz), 7,93 (2H,d,J=8Hz).
Referanseeksempel 5.
Fremstilling av etyl 7-[4-(tert-butoksykarbonyl)fenyl]-2-cyano-4-(dimetoksymetyl)heptanoat: Under argonatmosfære ble en oppløsning av kaliumtert-butoksyd (10,60 g) og natriumjodid (3,54 g) i tetrahydrofuran (100 ml) dråpevis tilsatt til en oppløsning av etylcyanoacetat (10,68
g) I tetrahydrofuran (50 ml) og heksametylfosforamid (25 ml) ved 0°C. Etter omrøring ved romtemperatur i 5 minutter ble en
oppløsning av forbindelsen (9,83 g) tilveiebragt i referanseeksempel 4 i tetrahydrofuran (50 ml) tilsatt til denne blandingen. Etter oppvarming med tilbakeløp i 2,5 timer, ble temperaturen kjølt ned til romtemperatur. Reaksjonsblandingen ble helt på isvann og utsatt for pH 6 med en vandig oppløsnig av IN kaliumhydrogensulfat. Ekstraksjonen ble utført med eter, og ekstraktet ble vasket med vann og deretter med mettet natriumkloridoppløsning og tørket over vannfri natriumsulfat. Oppløsningsmiddelet ble fordampet under
redusert trykk og den resulterende resten ble renset ved kolonnekromatografi (bærer; sillsiumoksydgel, 250 g, elueringsmiddel; etylacetat:heksan-l:7) for å gl sluttforbindelsen (7,52 g).
IR (Neat) : 2980, 2940, 2245, 1748, 1713, 1697 cm-<1>
<i>H-NMR (CDC13) S : 1,20-2,20 (7H,m), 1,30 (3H,d,J=7Hz),
1,60 (9H,s), 2,66 (2H, t,J-7Hz), 3,30-3,40 (6H,m), 3,63-4,10 (lH,m), 4,15 (lH,d,J=3Hz), 4,23 (2H, t,J=7Hz), 7,23
(2H,d,J=8Hz), 7,93 (2H,d,J=8Hz).
Referanseeksempel 6.
Fremstilling av tert-butyl 4[5-(2,6-diamino-4-hydroksypyri-midin-5-yl)-4-(dimetoksymetyl)pentyl]benzoat: Til en oppløsning av kaliumtert-butoksyd (3,89 g) og guanidinhydroklorid (1,99 g) i tert-butylalkohol (30 ml) ble en oppløsning av forbindelsen (7,52 g) tilveiebragt i referanseeksempel 5 i tert-butylalkohol (30 ml) tilsatt under argonatmosfære, og oppvarmet med tilbakeløp i 3,5 timer. Til reaksjonsblandingen ble eddiksyre (834 mg) og vann (50 ml) tilsatt, etterfulgt av ekstraksjon med en kloroform-tetra-hydrofuranblanding (1:1). Oppløsningsmiddelet ble avdampet under redusert trykk og den resulterende resten ble renset ved kolonnekromatografi (bærer; sillsiumoksydgel, 240 g, elueringsmiddel; diklormetan:etanol=10:1) for å gi sluttforbindelsen (5,14 g).
IR (KBr): 3350, 2930, 1710, 1620, 1497, 1450 cm-<1>
1-H-NMR (CDCI3) S : 1,10-2,0 (5E,m), 1,56 (9H,s), 2,10-2,40 (2H,m), 2,58 (2H,brt,J=7Ez), 3,33
(3H,s), 3,38 (3H,s), 4,12 (lH,d,J=4Hz), 5,03 (2H,brs), 5,70
(2H,brs), 5,70 (2H,brs), 7,18 (2H,d,J=8Hz), 7,78 (2H,d,J=8Hz).
Referanseeksempel 7.
Fremstilling av tert-butyl 4-[6,6-dicyano-4-(dimetoksymetyl)-heksyl]benzoat: Under argonatmosfære ble det til en suspensjon av natriumhydrid (3,00 g) og natriumjodid (3,75 g) i dimetylsulfoksyd (15 ml) dråpevis tilsatt en oppløsning av malonitril (8,26 g) i dimetylsulfoksid (15 ml) under isavkjøling. Etter omrøring ved romtemperatur i 15 minutter ble en oppløsning av forbindelsen (10,41 g) tilveiebragt i referanseeksempel 4 i dimetylsulfoksid (15 ml) tilsatt, etterfulgt av oppvarming ved 60°C i 5 timer og deretter avkjøling til romtemperatur. Reaksjonsblandingen ble helt på isvann og justert til pH 6 med en vandig oppløsning av IN kaliumhydrogensulfat. Det organiske laget ekstrahert med eter ble vasket med vann og mettet natriumkloridoppløsning i denne rekkefølgen, og deretter tørket over vannfri natriumsulfat. Oppløsnings-middelet ble avdampet under redusert trykk og den resulterende resten ble renset ved kolonnekromatografi (bærer; sillsiumoksydgel, 300 g, elueringsmiddel; etylacetat: heksan=l:8) for å gi sluttforbindelsen (6,97 g).
IR (Neat): 2948, 2255, 1715, 1605 cm-<1>
<1->H-NMR (CDC13) S : 1,15-2,50 (7H,m), 1,60 (9H,s), 2,67
(2H,t,J=7Hz), 3,36 (3H,s), 3,40
(3H,s), 4,13 (lH,d,J=3Hz), 4,32
(lH,dd,J=10Hz,6Hz), 7,20 (2H,d,J=8Hz), 7,90 (2E,d,J=8Hz).
Referanseeksempel 8.
Fremstilling av tert-butyl 4-[5-(2,4,6-triaminopyridin-5-yl)-4-(dimetoksymetyl)pentyl]benzoat: Forbindelsen (663 mg) tilveiebragt i referanseeksempel 7 ble utsatt for samme reaksjon som den i refereanseeksempel 6, for å tilveiebringe forbindelsen (648 mg).
IR (KBR): 3480, 3390, 3200, 2940, 1710, 1604, 1570, 1430 cm<-*>.
<1->H-NMR (CDC13) S : 1,30-2,00 (5H,m), 1,60 (9H,s), 2,05-2,43 (2E,m), 2,43-2,77 (2H,m), 3,34 (3H,s), 3,39 (3H,s), 4,15 (lH,d,J=3Hz), 4,47 (2H,brs), 4,62
(4H,brs), 7,18 (2H,d,J=8Hz), 7,88
(2H,d,J=8Hz).
Referanseeksempel 9.
Fremstilling av tert-butyl 4-[4-(dimetoksymetyl)-5-okso-penty1]benzoat: Til en oppløsning av oksalylklorid (558 mg) i diklormetan (10 ml) ble en oppløsning av dimetylsulfoksid (668 mg) i diklormetan (2 ml) tilsatt ved -50'C, etterfulgt av omrøring i 2 minutter, og til den resulterende reaksjonsblandingen ble en oppløsning av forbindelsen (1,354 g) tilveiebragt i referanseeksempel 3 i diklormetan (5 ml) tilsatt og til dette ble trlmetylamin ((2,8 ml) dråpevis tilsatt etter omrøring i 15 minutter. Etter omrøring i 5 minutter ble temperaturen bragt opp til romtemperatur i løpet av 30 minutter. Til den resulterende blandingen ble vann (20 ml) tilsatt, etterfulgt av ekstraksjon med diklormetan. Ekstraktet ble tørket over vannfri natriumsulfat. Oppløsningsmiddelet ble fordampet under redusert trykk og den resulterende resten ble renset ved kolonnekromatografi (bærer; sillsiumoksydgel, 20 g, elueringsmiddel; etylacetat: heksan=l:5), for å gl sluttforbindelsen (1,27 g).
IR (KBr): 2975, 2940, 1727, 1708, 1604 cm-<1>
iB-NMR (CDCI3) S : 1,40-1,80 (4H,m), 1,55 (9H,s), 2,45-2,76 (3E,m), 3,30 (3H,s), 3,33 (3H,s), 4,45 (lH,d,J=6Hz), 7,15 (2H,d,J=8Hz ), 7,85 (2H,d,J=8Hz), 9,60 (1H,d,J=4Hz).
Referanseeksempel 10.
Fremstilling av tert-butyl 4-[4-(dimetoksymetyl)-5-hyd-roksyheksyl]benzoat: Til en oppløsning av forbindelsen (5,45 g) tilveiebragt i referanseeksempel 9 i tetrahydrofuran (15 ml) ble en oppløsning av metylmagnesiumbromid i tetrahydrofuran (12,3 ml, 24,1 mmol) dråpevis tilsatt ved —78'C under argonatmosfære. Etter omrøring ved -78°C i en time og deretter ved romtemperatur i 1 minutt, ble en mettet vandig ammonium-kloridoppløsning (80 ml) tilsatt, etterfulgt av ekstraksjon med eter. Det tilveiebragte organiske laget ble vasket med mettet natriumkloridoppløsning og tørket over vannfri natriumsulfat. Oppløsningsmiddelet ble avdampet under redusert trykk og den resulterende resten ble renset ved kolonnekromatografi (bærer; sillsiumoksydgel, 100 g, elueringsmiddel; etylacetat: heksan=l:3), for å gl sluttforbindelsen (4,46 g).
IR (Neat) : 3480, 2940, 1712, 1608 cm-<1>
%-NMR (CDC13) S : 1,07 (1,5H,d,J=7Hz), 1,12
(l,5H,d,J=7Ez), 1,25-1,90 (5H,m), 1,54
(9H,s), 2,50-2,75 (2H,m), 3,93 (lH,d,J=5Hz), 3,30 (l,5H,s), 3,32
(l,5H,s), 3,37 (3H,s), 3,70-4,20 (lH,m), 4,27 (0,5H,d,J=7Hz), 4,32
(0,5H,d,J=5Hz), 7,18 (2H,d,J=8Hz), 7,84 (2H,d,J=8Ez).
Referanseeksempel 11.
Fremstilling av tert-butyl 4-[4-(dlmetoksymetyl)-5-(metyl-sulfony1oksy)heksy1]benzoat: Forbindelsen (4,46 g) tilveiebragt i referanseeksempel 10 ble utsatt for den samme reaksjon som den i referanseeksempel 4, for å tilveiebringe sluttforbindelsen (5,45 g).
IR (Neat) : 2920, 1700, 1604, 1340, 1170 cm-<1>
<i>H-NMR (CDC13) S: 1,20-1,95 (5H,s), 1,33 (1,5H,d,J=6Hz),
1,40 (l,5H,d,J=5Hz), 1,59 (9H,s), 2,66
(2E,t,J=7Hz), 2,95 (3H,s), 3,35
(6H,s), 4,22 (lH,dd,J=8Hz, 6Hz), 4,83-5,13 (lH,m), 7,21 (2H,d,J=8Hz), 7,89
(2H,d,J=8Hz).
Referanseeksempel 12
Fremstilling av etyl 7-[4-(tert-butoksykarbonyl)-fenyl]-2-cyano-3-metyl-4-(dimetoksymetyl)]heptanoat: Forbindelsen (5,70 g) tilveiebragt i referanseeksempel 5, ble utsatt for samme reaksjon som den i referanseeksempel 5, for å tilveiebringe sluttforbindelsen (2,88 g).
IR (KBr): 2980, 2940, 2240, 1743, 1710, 1604 cm-<1>
1-H-NMR (CDCI3) S: 0,88-1,15 (3H,m), 1,20-1,80 (6H,m), 1,31 (3H,t,J=7Hz), 1,58 (9H,s), 2,65 (2H,t, J=7,5Hz), 3,35 (6H,s), 4,07-4,25 (2E,m), 4,23 (2H,q,J=7Ez), 7,20 (2H,d,J=8Hz), 7,89 (2H,d,J=8Hz).
Referanseeksempel 13.
Fremstilling av tert-butyl 4-[5-(2,6-diamlno-4-hydroksypyri-midin-5-yl )-4-(dimetoksymetyl)-5-metylpentyl]benzoat: Forbindelsen (569 mg) tilveiebragt i referanseeksempel 12 ble utsatt for samme reaksjon som den i referanseeksempel 6, for å tilveiebringe sluttforbindelsen (274 mg) som diastereomerer i proporsjon 1:3 (ifølge elueringen).
Hovedprodukt:
IR (KBr): 3350, 2978, 2940, 1710, 1650, 1640-1600 cm-<1>. 1-H-NMR (CDCI3 ) S: 1,25 83H,d, J=7Hz ), 1,30-1,95 (4H,m), 1,60
(9H,s), 2,03-2,33 (lH,m), 2,40-2,73 (3H,m), 3,26 (3H,s), 3,31 (3H,s), 4,05 (lH,d,J=3Hz), 4,83 (2H,brs), 5,38 (2H,brs), 7,21 (2E,d,J=8Hz), 7,89 (2H,d,J=8Hz).
Biprodukt:
IR (KBr): 3350, 2935, 1710, 1637, 1620, 1605 cm-<1>
1- H-NMR (CDC13) 5: 1,25-1,85 (4H,m), 1,31 (3H,d, J=7Ez), 1,60
(9H,s), 1,95-2,25 (lE,m), 2,55 (2E,t,J=7Ez), 2,60-2,90 (lH,m), 3,38
(6E,s), 4,27 (2H,d,J-5Hz), 4,93 (2E,brs), 5,25 (2H,brs), 7,17 (2E,d,J=8Ez), 7,83
(2E,d,J=8Hz).
Referanseeksempel 14.
Fremstilling av 5-[4-(tert-butoksykarbonyl)fenyl]-5-hydroksy-2- heksensyre: Til en suspensjon tilveiebragt ved tilsetting av en oppløs-ning av 4-acetylbenzosyre tert-butylester (7,82 g) i benzen-eter-tetrahydrofuran (3:3:2, 80 ml) til 4,64 g (71 mmol) sink, ble 4-bromkrotonsyremetylester (6,36 g) og jod (20 mg) gradvis tilsatt under oppvarming og omrøring. Etter varming med tilbakeløp i et oljebad ved 70°C i 1 time, ble metyl 4-bromkrotonat (2,13 g) og sink (1,55 g) tilsatt, etterfulgt av varming med tilbakeløp i 30 minutter. Temperaturen ble kjølt ned til romtemperatur, og reaksjonsblandingen ble helt inn i vann (300 ml) og justert til pH 5 med eddiksyre. Det organiske laget tilveiebragt ved ekstrahering med eter ble vasket med 556 vandig ammoniakk og deretter tørket over vannfritt magnesiumsulfat. Oppløsningsmiddelet ble avdampet under redusert trykk og den resulterende resten ble renset ved kolonnekromatografI (bærer; sillsiumoksydgel, 200 g, elueringsmiddel; etylacetat:heksan = 1:4), for å tilveiebringe sluttforbindelsen (9,2 g).
IR (Neat): 3480, 2975, 1720, 1700, 1650, 1605 cm-<1>
<1->H-NMR (CDCI3) S: 1,53 (12H,s), 2,64 (2H,d, J=7Ez), 2,67
(lH.brs), 3,63 (3H,s), 5,80 (1H ,d,J=15Ez), 6,80 (lH,dt,j=15Hz,7Hz), 7,45 (2H,d,j=8Ez ), 7,90 (2H,d,j=8Ez).
Referanseeksempel 15.
Fremstilling av metyl 5-[4-(tert-butoksykarbonyl)fenyl]heksa-noat: Til en oppløsning av forbindelsen (120 mg) tilveiebragt i referanseeksempel 14 i etanol (3 ml) ble 1056 Pd-C (60 mg) og eddiksyre (30 mg) tilsatt, etterfulgt av vigorøs omrøring i 10 timer under hydrogentrykk på 4 kg/cm<2>. Katalysatoren ble fjernet ved filtrering og oppløsningsmiddelet ble avdampet under redusert trykk. Den resulterende resten ble renset ved kolonnekromatografi (bærer; sillsiumoksydgel, 10 g, elueringsmiddel; etylacetatrheksan = 10:1), for å tilveiebringe sluttforbindelsen (107 mg) som en fargeløs olje.
IR (Neat): 2950, 2920, 1735, 1700, 1602 cm-<1>
%-NMR (CDC13) S: 1,20-1,75 (4H,m), 1,23 (3H,d,j=6,5Hz), 1,57
(9E,s), 2,24 (2E,brt,j=6,5Hz), 2,53-2,95 (lE,m), 3,62 (3E,s), 7,21 (2E,d,j=8Ez), 7,90 (2E,d,j=8Hz).
Referanseeksempel 16.
Fremstilling av 5-[4-(tert-butoksykarbonyl)fenyl]-2-(dimet-oksymetyl)heksansyre: Forbindelsen (5,62 g) tilveiebragt i referanseeksempel 15 ble utsatt for samme reaksjon som den i referanseeksempel 2, for å tilveiebringe sluttforbindelsen (4,86 g).
IR (Neat): 2959, 1732, 1703, 1600 cm-<1>
<1->H-NMR (CDCI3) 5: 1,22 (3E ,d , j =7Ez ), 1,25-1,70 (4E,m), 1,59
(9E,s), 2,50-2,90 (2E,m), 3,25 (3E,s), 3,31 (3H,s), 3,68 (3E,s), 4,43 (lH,dd,j=8Hz,3Hz), 7,20 (2E,d,j=8Hz), 7,93 (2H,d,j=8Ez).
Referanseeksempel 17.
Fremstilling av tert-butyl 4-[4-(dimetoksymetyl)-5-hydroksy-1-metylpentyl]benzoat: Forbindelsen (4,83 g) tilveiebragt i referanseeksempel 16 ble utsatt for samme reaksjon som den I referanseeksempel 3, for å tilveiebringe sluttforbindelsen (4,14 g).
IR (Neat): 3460, 2940, 1712, 1606, 1570 cm-<1>
1-H-NMR (CDC13) S: 1,10-2,20 (6H,m), 1,24 (3H,d, j=7Hz), 1,56
(9E,s), 2,72 (lH,tq,j=7Hz,7Ez), 3,28
(3H,s), 3,36 (3H,s), 3,45-3,68 (2H,m), 4,20 (lH,d,j=6Hz), 7,20 (2H,d,j-8Hz), 7,88
(2H,d,j=8Hz).
Referanseeksempel 18.
Fremstilling av tert-butyl 4-[4-(dimetoksymetyl)-l-metyl-5-(metylsulfonyloksy)pentyl]benzoat: Forbindelsen (4,13 g) tilveiebragt I referanseeksempel 17 ble utsatt for samme reaksjon som den i referanseeksempel 4, for å tilveiebringe sluttforbindelsen (5,03 g).
IR (Neat): 2970, 2945, 1713, 1608, 1360, 1175 cm-<1>
<i>H-NMR (CDCI3) S: 1,20-1,80 (4H,m), 1,25 (3H,d,j=7Hz ), 1,56
(9H,s), 2,72 (2H,tq,j=7Hz,7Hz), 2,91
(l,5H,s), 2,92 (l,5H,s), 3,30 (3H,s), 3,31 (l,5H,s), 3,32 (l,5H,s) 4,15-4,26 (3H,m), 7,21 (2H,d,j=8Hz), 7,90 (2H,d,j=8Hz ).
Ref eranseeksempel 19.
Fremstilling av etyl 7-[4-(tert-butoksykarbonyl)-fenyl]-2-cyano-4-(dimetoksymetyl)oktanoat: Forbindelsen (5,25 g) tilveiebragt i referanseeksempel 18 ble utsatt for samme reaksjon som den i referanseeksempel 5, for å tilveiebringe sluttforbindelsen (3,84 g).
IR (Neat): 2960, 2930, 2240, 1745, 1710, 1603 cm-<1>
<3->H-NMR (CDCI3) S: 1,10-2,20 (7H,m), 1,25 (3H, d , j=7Hz ), 1,31
(3H,t,j=7Ez), 1,58 (9H,s), 2,68
(lH,tq,j=7Hz), 3,20-3,40 (6H,m), 4,00-4,10
(2H,m), 4,21 (2H,q,j=7Hz), 7,20
(2H,d,j=8Hz), 7,91 (2H,d,j=8Hz).
Referanseeksempel 20.
Fremstilling av tert-butyl 4-[5-(2,6-diamino-4-hydroksypyri-din-5-yl )-4-(dimetoksymetyl)-1-metylpenyl]benzoat: Forbindelsen (3,84 g) tilveiebragt I referanseeksempel 19 ble utsatt for samme reaksjon som den i referanseeksempel 6, for å tilveiebringe sluttforbindelsen (3,64 g).
IR (KBr): 3355, 3220, 2965, 2940, 1713, 1620 cm-<1>
%-NMR (CDC13) S: 1,10-1,95 (5H,m), 1,19 (3H,d,j=7Hz), 1,58
(9H,s), 2,15-2,40 (2H,m), 2,50-2,83 (lH,m), 3,20-3,40 (6E,m), 4,10 (1H,d,j=4,5Hz), 5,00 (2E,brs), 5,62 (2H,brs), 7,20 (2E,d,j=8Hz), 7,90 (2H,d,j=8Hz).
Referanseeksempel 21.
Fremstilling av 4-[(tert-butyldimetylsilyl)-oksy]cykloheksa-nol: Til en oppløsning av 1,4-cykloheksandiol (cis: trans = ca. 1:1, 25,0 g) og t-butylklordimetylsilan (32,4 g) i dimetylformamid (150 ml) ble en oppløsning av trietylamin (21,8 g) og 4-(dimetylamino)pyridin (1,05 g) i dimetylformamid (50 ml) ved 0<*>C. Etter omrøring i en time ble vann og eter satt til reaksjonsblandingen. Eterlaget ble separert, vasket med vann og mettet vandig natriumklorid og tørket over vannfri magnesiumsulfat. Oppløsningsmiddelet ble fordampet under redusert trykk og den resulterende resten ble renset ved kolonnekromatografi (bærer; sillsiumoksydgel, 300 g, elueringsmiddel; etylacetat:heksan = 1:5) for å tilveiebringe sluttforbindelsen (17,8 g) som en blanding av cis og trans isomerer (ca. 1:1).
IR (Neat): 3350, 2955, 2940, 2895, 2865, 1375, 1255 cm-<1 >%-NMR (CDC13) S: -0,03 (6H,s), 0,90 (9H,s), 1,13-1,90
(8H,m), 1,30 (lH,s), 3,40-3,80 (2H,m) cm-<1>.
Referanseeksempel 22
Fremstilling av t-[(tert-butyldimetylsllyl)oksy]-cykloheksa-non: Til en oppløsning av oksalylklorid (10,73 g) i diklormetan (200 ml) ble en oppløsning av dimetylsulfoksid (14,40 g) i diklormetan (30 ml) tilsatt ved -60°C, etterfulgt av omrøring i 5 minutter. Til reaksjonsblandingen ble en oppløsning av forbindelsen (17,7 g) tilveiebragt i referanseeksempel 21 I diklormetan (75 ml) tilsatt, og etter omrøring i 15 minutter ble trietylamin (38,9 g) videre tilsatt. Etter omrøring i 5 minutter ble temperaturen bragt til romtemperatur i løpet av 30 minutter. Til blandingen ble vann (200 ml) tilsatt og ekstraksjonen ble utført med diklormetan. Ekstraktet ble tørket over vannfri natriumsulfat og oppløsningsmiddelet ble avdampet under redusert trykk. Den resulterende resten ble avdampet under redusert trykk for å tilveiebringe sluttforbindelsen (16,3 g).
Kokepunkt: 76°C/0,3 mmHg.
IR (KBr): 2955, 2928, 2860, 1720, 1250 cm-<1>.
1-H-NMR (CDCI3) S: -0,03 (6H,s), 0,80(9H,s), 1,13-1,95(8H,m),
l,30(lH,s), 3,40-3,80 (2H,m).
Referanseeksempel 23.
Fremstilling av metyl 3-[4-(tert-butoksykarbonyl)-fenyl]akry-lat: En oppløsning av tert-butyl 4-formylbenzoat (28,4 g) og metyl (trifenylfosforanyliden)acetat (46,0 g) i toluen (400 ml) ble omrørt under oppvarming i 1 time. Oppløsningsmiddelet ble avdampet under redusert trykk og den resulterende resten ble renset ved kolonnekromatografi (bærer; sillsiumoksydgel, 400 g, elueringsmiddel; etylacetat:heksan =» 1:30) for å tilveiebringe sluttforbindelsen (27,8 g).
IR (KBr): 2985, 1720, 1710, 1640, 853 cm-<1>. l-H-NMR (CDC13) S: 1,57 (9H,s), 3,79(3H,s), 6,48(1H,d,J=l5,5Hz), 7,55(2H,d,J=8Hz), 7,68(lH,d,J=15,5Hz), 7,97(2H,d,J=8Hz ).
Referanseeksempel 24.
Fremstilling av metyl 3-[4-(tert-butoksykarbonyl)-fenyl]pro-pionat: Forbindelsen (22,5 g) tilveiebragt i referanseeksempel 23 ble løst opp 1 en blanding av etylacetat og metanol (2:1, 300 ml), og til dette ble 10Sé Pd-C (4,0 g) tilsatt, etterfulgt av omrøring ved romtemperatur i 4 timer under hydrogenatmosfære. Pd-C ble fjernet ved filtrering med celit, og oppløsnings-middelet ble avdampet under redusert trykk for å tilveiebringe sluttforbindelsen (22,5 g).
IR (Neat): 2980, 1745, 1717, 1610, 850 cm-<1>.
<i>H-NMR (CDCI3) S: l,57(9H,s), 2,55 (1H,dd,J=6,5Hz,1,5Hz),
2,65(lH,d,J=6,5Ez), 2,94(H,d,J=6,5Hz ), 3,02 (lH,dd,J=6,5Ez, 1,5Ez), 3,64 (3H,s), 7,23(2H,d,J=8Hz), 7,90 (2H,d,J=8Ez).
Referanseeksempel 25.
Fremstilling av tert-butyl 4-(3-hydroksypropyl)benzoat:
Til en oppløsning av forbindelsen (22,8 g) tilveiebragt i referanseeksempel 24 i tørket eter (150 ml) ble litiumborhydrid (2,81 g) satt til ved 0°C. Temperaturen ble raskt bragt til romtemperatur, etterfulgt av omrøring i 15 timer. Til reaksjonsblandingen ble en vandig oppløsning av IN kaliumhydrogensulf at tilsatt ved 0°C (ca. 125 ml) slik at pHen derav ble justert til 6,5. Etter ekstraksjon med eter ble eterlaget vasket med mettet vandig natriumklorid og tørket over vannfri natriumsulfat. Oppløsningsmiddelet ble avdampet under redusert trykk for å tilveiebringe sluttforbindelsen (20,1 g).
IR (Neat): 3400, 2978, 2935, 1712, 1607, 848 cm-<1>.
<i>H-NMR (CDC13) S: l,48(lH,s), l,60(9H,s), 1,70-2,01(2H,m),
2,73 (2H,t,J=6,5Hz), 3,63(2H,t,J=6,5Hz), 7,22(2H,d,J=8Hz), 7,89(2H,d,J-8Hz).
Referanseeksempel 26.
Fremstilling av tert-butyl 4-(3-brompropyl)benzoat:
Til en oppløsning av N-bromsuccinimid (15,06 g) og trifenylfosfin (22,20 g) i dimetylformamid (100 ml) ble en oppløsning av forbindelsen (10,0 g) tilveiebragt i referanseeksempel 25 i dimetylformamid (50 ml) tilsatt ved romtemperatur, etterfulgt av omrøring i 30 minutter. Temperaturen ble bragt til 50°C og etter omrøring i 1 time ble reaksjonsblandingen helt på isvann og ekstrahert med eter. Eterlaget ble vasket med vann og deretter mettet vandig natriumklorid, og tørket over vannfri natriumsulfat. Oppløsningsmiddelet ble avdampet under redusert trykk og den resulterende resten ble renset ved kolonnekromatografi (bærer; sillsiumoksydgel, 100 g, elueringsmiddel; etylacetat:heksan = 1:15) for å tilveiebringe sluttforbindelsen (11,89 g).
IR (Neat): 2975, 2930, 1710, 1606, 846 cm-<1>.
<i>H-NMR (CDCI3) S: l,58(9H,s), 1,98-2,40(2H,m),
2,82(2H,t,J=7,5Hz), 3,35(2H,t,J=6Ez), 7,2 5(2H,d,J=8Hz), 7,9 0(2H,d,J=8Hz).
Referanseeksempel 27.
Fremstilling av 3-[4-(tert-butoksykarbonyl)fenyl]-propyl]tri-feny1fo s fon iumb rom i d: En oppløsning av forbindelsen (11,89 g) tilveiebragt i referanseeksempel 26 og trifenylfosfin (10,41 g) I xylen (50 ml) ble oppvarmet til 1550 C og omrørt i 48 timer. Etter avkjøling ble de utfelte hvite krystallene samlet ved filtrering og vasket med benzen for å tilveiebringe sluttforbindelsen (19,78 g).
IR (KBr): 2975, 2850, 2775, 1710, 1605, 1290, 1110, 856 cm-<1>. ^H-NMR (CDC13) S: l,55(9H,s), 1,80-2,13(2H,m),
3,12(2H,t,J=7,5Hz), 3,70-4,10(2H,m), 7,25(2H,d,J=8Hz), 7,50-7,95(15H,m), 7,83(2H,d,J=8Hz).
Referanseeksempel 28.
Fremstilling av tert-butyl 4-[3-[(tert-butyldimetylsilyl)-oksy]cykloheksyllden]propyl]benzoat: Til natriumhydrid (0,845 g) ble dimetylsulfoksid (20 ml) tilsatt, og etter omrøring ved 75°C i en time, under avkjøl-ing, ble en suspensjon av forbindelsen (19,8 g) tilveiebragt i referanseeksempel 27 i dimetylsulfoksid (60 ml) dråpevis tilsatt, etterfulgt av omrøring ved romtemperatur i 30 minutter. Til denne suspensjonen ble en oppløsning av forbindelsen (8,06 g) tilveiebragt i referanseeksempel 22 i dimetylsulfoksid (40 ml) tilsatt, og etter omrøring ved romtemperatur i en time og ved 60°C i en time, ble reaksjonsblandingen helt i isvann og ekstrahert med eter. Eterlaget ble vasket med vann og deretter mettet vandig natriumklorid, og tørket over vannfritt natriumsulfat. Oppløsningsmiddelet ble avdampet under redusert trykk og den resulterende resten ble renset ved kolonnekromatograf!, (bærer; sillsiumoksydgel, 200 g, elueringsmiddel; etylacetatrheksan = 1:20) for å tilveiebringe sluttforbindelsen (6,11 g).
IR (Neat): 2950, 2930, 2855, 1713, 1605, 1575, 860 cm-<1>. <i>H-NMR (CDCI3) S: 0,00(6H,s), 0,90(9H,s), 1,10-1,70(4H,m),
l,59(9H,s), 1,70-2,80 (8H,m), 3,65-3,9 0(1H,m), 5,10(1H,dt,J=7,5Ez,1Hz ), 7,20(2H,d,J=8Hz), 7,87(2H,d,J=8Hz).
Referanseeksempel 29
Fremstilling av tert-butyl 4-[3-(4-hydroksy-cyklohekyliden)-propyl]benzoat: Til en oppløsning av forbindelsen (6,11 g) tilveiebragt i referanseeksempel 28 i tetrahydrofuran (30 ml) ble en oppløsning av tetrabutylammoniumfluorid (28,4 mmol) I tetrahydrofuran (28,4 ml) tilsatt, og temperaturen ble bragt til romtemperatur. Etter omrøring i 16 timer, ble reaksjonsblandingen helt i isvann og ekstrahert med eter. Eterlaget ble vasket med vann og deretter mettet vandig natriumklorid, og tørket over vannfri natriumsulfat. Oppløsningsmiddelet ble avdampet under redusert trykk og den resulterende resten ble renset ved kolonnekromatografi (bærer; sillsiumoksydgel, 150 g, elueringsmiddel; etylacetatrheksan = 1:4) for å tilveiebringe sluttforbindelsen (3,93 g).
IR (Neat): 3390, 2955, 2930, 1710, 1605, 1570, 847 cm-<1>. l-H-NMR (CDC13) S: 1,10-1,70(4H,m), l,60(9H,s), 1,70- 2,80(8H,m), 3,60-3,90(1H,m), 5,13(1H,dt,J=7,5Hz,1Hz), 7,20(2H,d,J=8Hz), 7,90(2H,d,J=8Hz).
Referanseeksempel 30.
Fremstilling av tert-butyi 4-[3-(4-hydroksy-cykloheksyl)-propyl]benzoat: Til en oppløsning av forbindelsen (3,90 g) tilveiebragt i referanseeksempel 29 i etanol (30 ml) ble 10% Pd-C tilsatt, etterfulgt av omrøring ved romtemperatur i 18 timer under hydrogenatmosfære. Pd-C ble fjernet ved filtrering med celit og filtratet ble kondensert under redusert trykk for å tilveiebringe sluttforbindelsen (3,77 g).
IR (Neat): 3380, 2975, 2930, 2853, 1710, 1605, 846 cm-<1>. 1-H-NMR (CDCI3) S: 0 ,80-2 ,15 (14H ,m), l,57(9E,s),
2,63(2H,t,J=7,5Hz), 3,35-3,70(0,5H,m), 3,85-4,05(0,5H,m), 7,20(2H,d,J=8Hz), 7,90(2H,d,J=8Hz).
Referanseeksempel 31.
Fremstilling av tert-butyl 4-[3-(4-oksocykloheksyl )-propyl]-benzoat: Til en oppløsning av oksalylklorid (1,65 g) i diklormetan (30 ml) bl en oppløsning av dimetylsulfoksid (2,21 g) 1 diklormetan (5 ml) ved 60° C, og etterfulgt av omrøring i 5 minutter. Til reaksjonsblandingen ble en oppløsning av forbindelsen (3,77 g) tilveiebragt i referanseeksempel 30 i diklormetan (10 ml) tilsatt og etter omrøring i 15 minutter, ble det tilsatt ytterligere dråpevis trietylamin (5,97 g). Etter omrøring i 5 minutter ble temperaturen bragt til romtemperatur i løpet av 30 minutter, og 40 ml vann ble tilsatt og ekstraksjonen ble utført med diklormetan. Diklormetanlaget ble vasket med vann, vandig 0,5N kaliumhydrogensulfatoppløs-nlng og mettet vandig natriumklorid i denne rekkefølgen, og tørket over vannfritt natriumsulfat. Oppløsningsmiddelet ble avdampet under redusert trykk for å tilveiebringe sluttforbindelsen (3,60 g) som farveløse krystaller.
IR (KBr): 2950, 2940, 1720, 1700, 1608, 1290, 1110, 848 cm-<1>. <1->H-NMR (CDC13) S: 1,20-2 ,23( 9H ,m), l,57(9H,s), 2,23-2,46(4H,m), 2,66(2H,t,J=7Hz), 7,2 2(2H,d,J=8Hz), 7,9 0(2H,d,J=8Hz ).
Referanseeksempel 32.
Fremstilling av tert-butyl 4-[3-[3-(etoksykarbonyl)-4-oksocykloheksyl]propyl]benzoat: Under en argonatmosfære ble det til en oppløsning av litiumdiisopropylamid (1,74 mmol) i tetrahydrofuran (2 ml) tilsatt en oppløsning av forbindelsen (460 mg) tilveiebragt i referanseeksempel 31 i tetrahydrofuran (3 ml) ved —78°C, etterfulgt av omrøring i 30 minutter. Til den resulterende blandingen ble en oppløsning av 1,3-dimetyl-3,4,5,6-tetrahydro-2(lH)-pyrimidinon (186 mg) i tetrahydrofuran (1 ml) og en oppløsning av etylcyanoformat (172 mg) i tetrahydrofuran (1 ml) tilsatt, og etter omrøring i 10 minutter ble vann tilsatt for å stoppe reaksjonen. Ekstraksjonen ble utført med eter, og ekstraktet ble vasket med mettet vandig natriumklorid og tørket over vannfri magnesiumsulfat. Oppløsningsmiddelet ble avdampet under redusert trykk og den resulterende resten ble renset ved kolonnekromatografi (bærer; sillsiumoksydgel, 20 g, elueringsmiddel; etylacetat:heksan = 1:30) for å tilveiebringe sluttforbindelsen (308 mg).
IR (Neat): 2980, 2945, 2865, 1740, 1720, 1710, 1660, 1650, 1610 cm-<1>.
<1->H-NMR (CDC13) S: 1,15-1,90 (7H,m), 1,26 (3H, t, J=7Hz ), 1,57
(9H,s), 2,15-2,50 (3H,m), 2,63 (2H,t,j=7Hz), 4,20 (2H,q,J=7Hz), 7,20
(2H,d,J=8Ez), 7,85 (2H,d,j=8Hz).
Arbeldseksempel 1.
Fremstilling av dietyl N-[4-[3-(2,4-diaminopyrido[2,3-d]pyrimidin-6-yl)propyl]benzoyl]-L-glutatmat: Forbindelsen (300 mg) tilveiebragt i referanseeksempel 8 ble utsatt for samme reaksjon som den i arbeldseksempel 1, for å tilveiebringe sluttforbindelsen (185 mg).
IR (KBr): 3455, 3330, 3200, 2980, 2935, 1738, 1650, 1613, 1580, 1548 cm-<1>.
<i>H-NMR (CDCI3/CD3OD) S: 1,23 (3H,t,j=Hz), 1,31
(3H,t,j=7Ez), 1,70-2,82 (10H,m, 4,10 (2H,q,j=7Ez), 4,22
(2H,q,j=7Hz ), 4,70 (1H,dd,j=8Hz, 6Hz), 7,21 (2H,d,j=8Hz), 7,74
(H,d,j=8Hz), 8,80 (lH,d,j=2Hz), 8,52 (lH,d,J=2Hz).
Arbeldseksempel 2.
Fremstilling av dietyl N-[4-[3-(2,4-diamino-5,6,7,8-tetra-hydropyrido[2,3-d]pyrimidin-6-yl)propyl)benzoyl]-L-glutatmat: Forbindelsen (124 mg) tilveiebragt i arbeldseksempel 3 ble utsatt for samme reaksjon som den i arbeldseksempel 2, for å tilveiebringe sluttforbindelsen (112 mg).
IR (KBr): 3392, 3220, 2940, 1740, 1640, 1610, 1580, 1538, 1505, 1445 cm-<1>.
<1->H-NMR (CDC13) S: 1,20-3,15 (14H,m), 1,21 (3H,t,j«7Hz), 1,30
(3H,t,j=7Hz),3,30 (1H,brd,j-llEz), 4,10
(2H,q,j=7Hz), 4,23 (2H,q,j=7Hz), 4,45
(5B,brs), 4,65-4,90 (lH,m), 4,93 (lH,d,j=3Hz), 7,13 (lH,d,j=7Hz), 7,25
(2H,d,j=8Hz), 7,73 (2H,d,j=8Hz).
Arbeldseksempel 3.
Fremstilling av N-[4-[3-(2,4-diaminopyrido[2,3-d]pyrimidin-6-yl)propyl]benzoyl]-L-glutaminsyre: Forbindelsen (50 g) tilveiebragt i arbeldseksempel 3 ble utsatt for samme reaksjon som den i arbeidseksempel 9, for å tilveiebringe sluttforbindelsen (42 mg).
IR (KBr): 3350, 3200, 2945, 1640, 1597, 1540, 1505, 1400, 800 cm-*.
<1->H-NMR (DMS0-d6) S: 1,75-2,20 (4H,m), 2,20-2,43 (2H,m),
2,45-2,83 (6H,m), 4,25-4,54 (lH,m), 7,13 (2H,brs), 7,31 (2H,d,J=8Hz ), 7,83
(2H,d,J=8Hz), 7,88 (2H,brs), 8,31
(lH.brs), 8,41 (lH.brs), 8,55 (lH.brs).
Arbeidseksempel 4.
Fremstilling av N-[4-[3-(2,4-diamino-5,6,7,8-tetrahydro-pyrido[2,3-d]pyrimidin-6-yl)propyl]benzoyl]-L-glutaminsyre: Forbindelsen (100 mg) tilveiebragt i arbeidseksempel 4 ble utsatt for samme reaksjon som den i arbeidseksempel 9, for å tilveiebringe sluttforbindelsen (74 mg).
IR (KBr): 3350, 3240, 2940, 1650, 1565, 1503, 1400, 763 cm-<1>. <1->H-NMR (DMS0-d6) S: 1,10-1,48 (2H,m), 1,50-3,05 (12H,m),
3,23 (lH,brd,J=12Hz), 4,16-4,45
(lH,m), 6,66 (4H, brs), 7,21 (lH.brs), 7,27 (2H,d,J=8Hz), 7,80 (H,d,J=8Hz), 8,20 (lH,d,J=7Hz).
Arbeidseksempel 5.
A. Fremstilling av tert-butyl 4-[3-(2,4-diamino-5,6,7,8-tetrahydroquinazolin-6-yl)propyl]benzoat: En blanding av forbindelsen (316 mg) tilveiebragt i referanseeksempel 31 og dicyanodiamid (126 mg) ble varmet opp ved 180°C i 4 timer, og den resulterende svart-brune oljen ble renset ved (bærer; sillsiumoksydgel, 15 g, elueringsmiddel; diklormetan :metanol = 12:1 7:1) for å tilveiebringe sluttforbindelsen (78 mg).
IR (KBr): 3480, 3340, 3160, 2950, 1718, 1640, 1610, 1590, 1573, 1450, 1293, 1170, 1115, 1020, 850 cm-<1>.
1-H-NMR (CDC13) S: 1,20-2,50 (9H,m), 1,58 (9H,s), 2,50-2,80
(4H,m), 4,80 (4H,brs), 7,18 (2H,d,j=8Hz), 7,89 (2H,d,j=8Hz).
B. Fremstilling av dietyl N-[4-[3-(2,4-diamino-5,6,7,8-tetrahydroquinazolin-6-yl)propyl]benzoyl]-L-glutamat: Forbindelsen (70 mg) tilveiebragt i arbeidseksempel 17 ble trifluoreddlksyre (1 ml) tilsatt, etterfulgt av omrøring ved romtemperatur i 2 timer. Oppløsningsmiddelet ble fordampet under redusert trykk og resten ble tørket under vakuum ved 70°C for å tilveiebringe råkrystaller av 4-[3-(2,4-diamino-5,6,7,8-tetrahydroquinazolin-6-yl)propyl]-benzosyre. Til en oppløsning av disse krystallene ble dietyl L-glutamathydroklorid (132 mg) i dimetylformamid (0,5 ml) under argonatmosfære ved 0<*>0 en oppløsning av difenylfosforylazid (116 mg) i dimetylformamid (0,5 ml) tilsatt, etterfulgt av omrøring i 16 minutter og til dette ble det ved samme temperatur dråpevis tilsatt en oppløsning av trietylamin (93 mg) i dimetylformamid (0,5 ml). Etter omrøring ved 0°C i 30 minutter og deretter ved romtemperatur i 72 timer, ble oppløsningsmid-delet avdampet under redusert trykk og den resulterende resten ble renset ved kolonnekromatografi (bærer; sillsiumoksydgel, 10 g, elueringsmiddel; diklormetan separert fra kons. vandig ammoniak -♦ diklormetan separert fra kons. vandig ammoniakk:etanol = 20:1) for å tilveiebringe sluttforbindelsen (82 mg) som en hvit krystall.
IR (KBr): 3448, 3350, 3130, 2948, 1738, 1660, 1635, 1630, 1570, 1445, 1200, 1020 cm-<1>.
^H-NMR (CDC13) S: 1,23 (3H,t,j=7Hz ), 1,31 (3H,t,J=7Hz ), 1,33-1,50 (3H,m), 1,66-1,83 (3H,m), 1,83-2,01 (2E,m), 2,03-2,52 (5H,m), 3,60 (2E,ddJ=9Hz,4Hz), 3,70 (2H,t,j=7Hz ), 4,12 (2H,q,j=7Hz), 4,25 (2H,q,j=7Ez), 4,58
(2H,brs), 4,62 (2E,brs), 4,75-4,88 (lH,m), 7,03 (lH,d,j=8,5Hz), 7,26 (2H,d,j=8Hz), 7,76 (2H,d,j=8Hz).
Arbeldseksempel 6.
Fremstilling av N-[4-[3-(2,4-diamino-5,6,7,8-tetrahydro-quinazolin-6-yl)propyl]benzoyl]-L-glutaminsyre: Til en oppløsning av forbindelsen (77 mg) tilveiebragt i arbeidseksempel 17B i en blanding av tetrahydrofuran - vann (3:2, 2,5 ml) ble en vandig oppløsning av IN natriumhydroksyd (0,76 ml) tilsatt, og etter omrøring ved romtemperatur i 2 timer ble supernatanten fjernet ved filtrering med milipor-filter. Til filtratet ble eddiksyre (0,5 ml) tilsatt, og resten ble konsentrert opp til ca. 1 ml ved avdamping av oppløsningsmiddelet under redusert trykk, etterfulgt av tilsetting av vann (5 ml) med bestråling med supersoniske bølger for å gi en hvit krystall. Denne krystallen ble samlet ved filtrering, vasket tilstrekkelig med isvann og tørket ved 60°C under redusert trykk for å tilveiebringe sluttforbindelsen (64 mg).
IR (KBr): 3350, 3200, 2935, 1710, 1660, 1650, 1640, 1530, 1500, 1400 cm-<1>.
<i>H-NMR (Me2S0-d6) S: 1,10-1,45 (3H,m), 1,50-2,17 (8H,m),
2,20-2,50 (4E,m), 2,55-2,73 (2H,m), 3,00-5,10 (4H,m), 4,29 (lH.dd,j=7Hz,6,5Hz), 7,08 (lH.brs), 7,28 (2H,d,J«8Hz), 7,30 (lH,brs), 7,78 (2H,d,J=8Hz), 8,27 (1H,d,j=6,5Ez).
Arbeidseksempel 7.
A. Fremstilling av tert-butyl 4-[3-(2,4-diaminoquina-zolin-6-yl )propyl]benzoat: 200 mg av forbindelsen tilveiebragt i arbeidseksempel 17A ble oppløst i 1,4-dioksin (3 ml), og blandingen ble varmet med tilbakeløp i nærvær av 10% Pd-C (200 mg) i 7 dager. Etter fjerning av katalysatoren ved filtrering med celitt, ble filtratet konsentrert til tørrhet under redusert trykk. Resten ble renset ved kolonnekromatografi (bærer; sillsiumoksydgel, 20 g, elueringsmiddel; diklormetan:metanol =7:1) for å tilveiebringe sluttforbindelsen (79 mg).
IR (KBr): 3470, 3350, 2950, 1718, 1640, 1610, 1590, 848 cm-<1>. <1->H-NMR (CDC13) S: 1,59 (9H,s), 1,90-2,05 (2H,m), 2,60-2,80
(4H,m), 4,63 (2H,brs), 5,27 (2H,brs), 7,19 (2E,d,j=8Hz), 7,28-7,39 (lH.m), 7,53-7,63 (lH,m), 7,85-7,93 (lE,m).
B. Fremstilling av dietyl N-[4-[3-(2,4-diaminoquinazol-in-6-yl)propyl]benzoyl]-L-glutamat: På samme måte som i arbeidseksempel 17B ble sluttforbindelsen (79 mg) tilveiebragt fra forbindelsen (79 mg) tilveiebragt i arbeidseksempel 21.
IR (KBr): 3448, 3350, 2950, 1735, 1660, 1630, 1570 cm-<1>. %-NMR (CDC13) S: 1,23 (3H,t,j=7Hz), 1,31 (3H,t,j=7Hz), 1,93-2,19 (4H,m), 2,44 (2H,t,j=6Hz), 2,58-2,82 (4H,m), 4,12 (2H,q,j=7Hz), 4,25
(2H,q,J=7Hz), 4,62 (2H,brs), 4,75-4,88
(lH,m), 4,95 (2H,brs), 7,26 (2H,d,j=8Hz), 7,28 (7,45 (2H,m), 7,53-7,63 (lH.m), 7,76 (2H,d,j=8Hz), 7,85-7,93 (lH,m).
Arbeldseksempel 8.
Fremstilling av N-[4-[3-(2,4-diaminoqinazolin-6-yl)propyl]benzoyl]-L-glutaminsyre: På samme måte som i arbeidseksempel 18 ble sluttforbindelsen (63 g) tilveiebragt fra forbindelsen (79 mg) tilveiebragt i arbeidseksempel 21B.
IR (KBr): 3350, 3200, 2930, 1708, 1660, 1638, 1530 cm-<1>
<*>H-NMR (Me2S0-d6) S: 1,75-2,20 (4H,m), 2,40 (2H,t,j=7Hz), 2,60-2,80 (4H,m), 3,20-4,50 (4H,m), 4,39 (lE,dd,j=7Hz,6Hz), 7,30
(2H,d,j=8Hz), 7,30-7,40 (lH,m), 7,50-7,65 (lH,m), 7,82 (2H,d,j=8Hz), 7,85-7,93 (lH,m), 8,48 (1H,d,j=6Hz).
Fremstilling av forbindelse I og A,
(I) Fremstilling av N-(4-[3-(2,4-diamo-5,6,7,8-tetrahy-dropyrido[2,3-d]pyrimidin-6-yl)propyl]benzoyl]-L-glutaminsyre (forbindelse I): (1) Under en argonatmosfære ble kalium (25 g) tilsatt til tørket tert-butylalkohol (820 ml), som ble tilbakestrømmet ved oppvarming for å bli fullstendig oppløst. Oppløsningen ble avkjølt til 20°C og eter (300 ml) ble tilsatt og deretter en oppløsning av metylkrotonat (63,93 g) og tert-butyl 4-formylbenzoat (71,0 g) i tert-butyl-alkoholeter (2:1, 300 ml) ble sakte tilsatt mens den indre temperaturen ble holdt ved 10°C. Etter omrøring ved samme temperatur i 2 timer, ble 1 N kaliumhydrogensulfat i vann (750 ml) tilsatt med avkjøling, slik at pH ble Justert til 4. Oppløsningen ble ekstrahert med eter, vasket med vann og deretter med mettet saltvann og utsatt for avdampning av oppløsningsmidlet under redusert trykk. Den resulterende resten ble løst opp i etylacetat (100 ml) og 5% Pd-C (15 g: Engelhard Co.) ble tilsatt og omfattende omrørt under hydrogentrykk på 4 kg/cm<2> ved romtemperatur i 3 timer. Katalysatoren ble filtrert ut, oppløs-ningsmidlet avdampet under redusert trykk, og til resten ble tørket metanol (200 ml), 4-(N,N-dimetylamino)pyridin (30 mg) og diklormetan (250 ml) tilsatt, og deretter ble en oppløs-ning av 1,3-dicykloheksylkarbodiimid (132 g) i diklormetan (250 ml) sakte tilsatt ved 0°C. Etter omrøring ved romtemperatur i 18 timer ble blandingen avkjølt til 0°C og eddiksyre (30 ml) ble tilsatt og omrørt ved 0°C i 30 minutter og deretter ved romtemperatur i 30 minutter. Det resulterende presipitatet ble filtrert ut, filtratet konsentrert til tørrhet under redusert trykk, og til resten ble etylacetat (100 ml) tilsatt og holdt ved 0°C i 2 timer, og deretter ble det resulterende presipitatet filtrert ut. Filtratet ble konsentrert under redusert trykk, og resten ble renset ved kolonnekromatografi (bærer); silikagel, 500 g, utviklingsmiddel; eter:heksan = 1:15—1:5) for å tilveiebringe 5-[4-(tert-butoksykarbonyl)fenyl]pentanoat (59,7 g).
Smeltepunkt (sm.p.) 145-155°C/0,2-0,3 mmEg
IR (netto): 2980, 2950, 1740, 1712, 1605 cm-<1>
1-H-NMR (CDC13) S: 1,40-1,75 (4H,m), 1,55 (9H,s), 2,15-2,45 (2H,m), 2,50-2,75 (2H,m), 3,62 (3H,s), 7,16 (2B,d,J=8Hz), 7,85 (H,d,J=8Hz).
2) Under en argonatmosfære ble det til en oppløsning av diisopropylamin (8,35 g) i tetrahydrofuran (150 ml) tilsatt en oppløsning av butyllitium (82,5 mmol) i heksan (51,6 ml) ved 0°C og omrørt i 10 minutter, og etter avkjøling til -78°C, ble en oppløsning av forbindelsen (21,93 g) oppnådd i overnevnte (1) i tetrahydrofuran (50 ml) dråpevis tilsatt i løpet av 30 minutter. Etter omrøring i 30 minutter ble klortrimetylsillan (15 ml) tilsatt i en porsjon. Temperaturen i blandingen ble bragt opp til romtemperatur i løpet av 2 timer, etterfult av avdampning i oppløsningsmidlet og tilsetning a tørket toluen (30 ml x 2). Klortrimetylsilan ble fullstendig avdampet under redusert trykk. Til resten ble renset toluen (30 ml) tilsatt. Etter at det uoppløselige materialet ble fjernet ved filtrering, ble oppløsningsmidlet avdampet under redusert trykk for å oppnå ketensilylacetal fra mellomproduktet. Under argonatmosfære ble tinn (I) klorid (2,84 g) og trifenylmetylklorid (4,18 g) suspendert i diklormetan (150 ml) og til dette ble det sakte tilstt en oppløsning av ketensilylacetal beskrevet ovenfor og metylortoformat (9,55 g) i diklormetan (50 ml). Når denne klare gule farven til reaksjonsblandingen forsvant, ble titantetraklorid (1,5 ml) tilsatt. Etter omrøring ved -78°C i 30 minutter, ble reaksjonsblandingen tilsatt til en oppløsning av (150 ml) 0,5 N natriumhydrogenkarbonat, etterfulgt av omrøring i romtemperatur i 30 minutter. Presipitatet ble fjernet ved filtrering, og filtratet ble ekstrahert med diklormetan. Ekstraktet ble tørket over vannfri natriumsulfat og oppløs-ningsmidlet ble avdampet under redusert trykk. Den oppnådde resten ble renset ved kolonnekromatografi (bærer; sllikagel, 200 g, utviklingsmiddel; etylacetat:heksan = 1:12-»1:8) for å tilveiebringe metyl 5-[4-(tert-butoksykarbonyl)fenyl]-2-(dimetoksymetyl)pentanoat (11,0 g).
IR (netto): 2940, 1740, 1715, 1608 cm-<1>
<1->H-NMR (CDC13), S: 1,40-1,85 (4H,m), 1,57 (9H,s), 2,45-2,90 (3H,m), 3,30 (3H,s), 3,33 (3H,s), 3,69 (3H,s), 4,48 (lE,d,J=8Hz), 7,20 (2H,d,J=8Hz), 7,88 (2H,d,J=8Hz).
3) Under en argonatmosfære ble det til en oppløsning av forbindelsen (11,0 g) oppnådd i overnevnte (2) i eter (50 ml) tilsatt litiumborhydrid (980 mg) ved 0°C, og temperaturen ble hurtig bragt opp til romtemperatur, etterfulgt av omrøring overnatt. Til reaksjonsblandingen ble det tilsatt metanol (70 ml) ved 0°C, og etter omrøring i 30 minutter ble pH justert til 6 med isvann (10 ml) og en vandig oppløsning av IN kaliumhydrogensulfat. Blandingen ble ekstrahert med eter, og ekstraktet ble vasket med vann, deretter med mettet natrium-kloridoppløsning og tørket over natriumsulfat. Oppløsnings-midlet ble avdampet under redusert trykk, og resten ble renset ved kolonnekromatografi (bærer; slllkagel, 200 g, utviklingsmiddel; etylacetat; heksan=l:3), for å oppnå t-butyl 4-[4-(dlmetoksymetyl)-5-hydroksypentyl]benzoat (7,98
g)<.>
IR (netto): 3450, 2925, 1707, 1604 cm-<1>.
1-H-NMR (CDC13) 5: 1,20-1,95 (5H,m), 1,60 (9H,s), 2,33 (2H,t,J=8Hz), 2,40 (lH,brs), 3,35 (3H,s), 3,41 (3H,s), 3,50-3,73 (2H.m), 4,27 (lH,d,J=6Hxz), 7,21 (2H,d,J=8Hz), 7,90 (2H,d,J=8Hz). 4. Forbindelse (7,98 g) oppnådd i overnevnte (3) ble oppløst i en blanding av pyridin og diklormetan (1:1, 40 ml) og metansulfonylklorid (3,24 g) ble tilsatt ved -15"C. Temperaturen ble hurtig bragt opp til 0"C, etterfulgt av omrøring i 2 timer. Oppløsningsmidlet ble avdampet under redusert trykk og til resten ble det tilsatt eter (150 ml) og trietylamin (476 mg), etterfulgt av omrøring i 3 minutter. Eterlaget ble vasket med vann, mettet vandig kobbersulfat-oppløsning og en mettet natriumkloridoppløsing i denne rekkefølgen, og deretter tørket over vannfritt natriumsulfat. Oppløsningsmidlet ble avdampet under redusert trykk for å oppnå t-butyl 4-[4-(dimetoksymetyl)-5-(metylsulfonyloksy)-pentylbenzoat (9,83 g).
IR (netto): 2940, 1714, 1608, 1370, 1180 cm-<1>.
1-H-NMR (CDCI3) S: 1,30-1,80 (5E,m), 1,63 (9H,s), 2,68 (2H,t,J=7Hz), 3,00 (3E,s), 3,43 (6H,s), 4,20-4,35
(3H,m), 7,26 (2H,d,J=8Hz), 7,93 (2H,d,J=8Hz).
5) Under en argonatmosfære ble det til en suspensjon av natriumhydrid (3,00 g) og natriumiodid (3,75 g) i dimetylsulfoksid (15 ml) dråpevis tilsatt en oppløsning av malonitril (8,26 g) i dimetylsulfoksid (15 ml) under isavkjøling. Etter omrøring ved romtemperatur i 15 minutter, ble en oppløsning av forbindelsen (10,41 g) oppnådd ved gjentagelse av fremgangsmåten i overnevnte (4) i dimetylsulfoksid (15 ml) tilsatt, etterfulgt av opvarming ved 60'C i 5 timer, og deretter avkjøling i romtemperatur. Reaksjonsblandingen ble helt inn i isvann og justert til pH 6 med en vandig oppløs-ning av IN kaliumhydrogensulfat. Det organiske laget ble ekstrahert med eter, og vasket med vann og mettet natriumklorid-oppløsning i denne rekkefølgen, og deretter tørket over vannfri natriumsulfat. Oppløsningsmidlet ble avdampet under redusert trykk og den resulterende resten ble renset ved kolonnekromatografi (bærer; silikagel, 300 g, utviklingsmiddel; etylacetat: heksan=l:8) for å oppnå tert-butyl 4-[6 ,6-dicyano-4-(dimetoksymetyl)heksyl]benzoat (6,97 g).
IR (netto): 2948, 2255, 1715, 1605 cm-<1>.
<1->H-NMR (CDC13) S: 1,15-2,50 (7H,m), 1,60 (9H,s), 2,67 (2H,t,J=7Hz), 3,36 (3H,s), 3,40 (3H,s), 4,13 (lH,d,J=3Hz), 4,32 (1H,dd,J=10Hz,6Hz), 7,20 (2H,d,J=8Hz), 7,90 (2H,d,J=8Hz).
6) Til en oppløsning av kalium-tert-butoksid (400 mg) og guanidinhydroklorid (200 mg) tert-butylalkohol (3 ml), ble det tilsatt en oppløsning av forbindelsen (663 mg) oppnådd 1 overnevnte (5) i tert-butylalkohol (3 ml) under en argonatmosfære, og tilbakestrømmet ved oppvarming i 3,5 timer. Til reaksjonsblandingen ble det tilsatt eddiksyre (75 mg) og vann (5 ml) etterfulgt av ekstrahering med kloroform-tetrahyrofuranblanding (1:1). Oppløsningsmidlet ble avdampet under redusert trykk, og den resulterende resten ble renset ved kolonnekromatografi (bærer); silikagel, 240 g, utviklingsmiddel; diklormetan: etanol=10:l) for å oppnå tert-butyl 4-[5-(2,4,6-triaminpyridin-5-yl)-4-(dimetoksymetyl)-pentyl)benzoat (648 mg).
IR (KBr): 3480, 3390, 3200, 2940, 1710, 1604, 1570, 1430 cm-1.
1-H-NMR (CDC13) S: 1,30-2,00 (5H,m), 1,60 (9H,s), 2,05-2,43 (2H,m), 2,43-2,77 (2H,m), 3,34 (3H,s), 3,39 (3H,s), 4,15 (lH,d,J=3Hz), 4,47 (2H,brs), 4,62 (4H,brs), 7,18 (2H,d,J=8Hz), 7,88 (2H,d,J=8Hz). 7) Trifluoreddiksyre (3 ml) ble tilsatt til en oppløs-ning av forbindelsen (300 mg) oppnådd i overnevnte (6) i diklormetan (2,5 ml), etterfulgt av omrøring i romtemperatur i 18 timer. Til den resulterende reaksjonsblandingen ble det dråpevis tilsatt vann (1,0 ml), etterfulgt av omrøring i 1 time. Oppløsningsmidlet ble avdampet under redusert trykk, og til resten ble det tilsatt etanol og deretter benzen. Etter trifluoreddiksyre var fullstendig fjernet ved azeotrofi, ble resten tørket ved 60°C under redusert trykk for å oppnå rå krystaller av 4-(3-(2,4-dlaminopyrldo[2,3-d]pyrimldin-6-yl)propyl]benzosyre. Under en argonatmosfære ble det til en suspensjon av krystallene og dietylglutamat hydroklorid (500 mg) i dimetylformamid (1,0 ml), tilsatt en oppløsning av difenylfosforylazid (600 mg) i dimetylformamid (1,5 ml) og en oppløsning av trietylamin (400 mg) i dimetylformamid (1,5 ml) dråpevis ved 0°C. Den resulterende blandingen ble omrørt 1 1 time ved 0°C og deretter i 66 timer ved romtemperatur. Oppløsningsmidlet ble avdampet under redusert trykk, og resten ble separert og renset ved kolonnekromatografi (bærer:silikagel, 200 g; utviklingsmiddel:etyleddlksyre-etanol, 9:1 -* diklormetan - eddiksyre - etanol, 14:1:1 -♦ 9:1:1), for å oppnå dietyl N-[4-(3-(2,4-diaminopyrido[2,3-d[2,3-d]pyrlmidln-6-yl)propyl)benzoyl]-L-glutamat (185 mg).
IR (KBr): 3455, 3330, 3200, 2980, 2935, 1738, 1650, 1613, 1580, 1548 cm-<1>.
1-H-NMR (CDCI3/CD3OD) S: 1,23 (3H, t, J=7Hz ), 1,31 (3H,t,J=7Hz), 1,70-2,82 (lOH.m), 4,10 (2H,q,J=7Hz ), 4,22 (2H,q,J=7Hz) 4,70 (1H,dd,J=8Hz,6Hz), 7,21
(2H,d,J=8Hz ).
8) Til en oppløsning av produktet (124 mg) oppnådd i overnevnte (7) i trifluoreddiksyre (2 ml), ble 10% Pd-C (250 mg: Engelhard Co. Ltd.) tilsatt, etterfulgt av omfattende omrøring i 16 timer under hydrogentrykk på 4 kg/cm<2>. Katalysatoren ble fjernet ved filtrering, og filtratet ble avdampet under redusert trykk. Den resulterende resten ble renset ved kolonnekromatografi (bærer:silikagel, 8 g; utviklingsmiddel :etylacetat -» etylacetat - etanol, 10:1 -» diklorometan - etanol, 4:1), for å oppnå dietyl N-[4-[3-(2,4-diamino-5 ,6,7 ,8-tetrahydropyrido[2 ,3-d]pyrimidin-6-yl )propyl)benzoyl]-L-glutamat (112 mg).
IR (KBr): 3392, 3220, 2940, 1740, 1640, 1610, 1580, 1538, 1505, 1445 cm-<2>.
1-H-NMR (CDC13) S: 1,20-3,15 (14H,m), 1,21 (3H,t,J-tHz), 1,30 (3H,t,J=7Hz), 3,30
(lH,brd,J=HHz), 4,10 (2E,q, J=7Ez ), 4,23 (2H,q,J=7Hz), 4,45 (5H,brs), 4,65-4,90 (lH.m), 4,93 (lH,d,J=3Hz), 7,13 (lH,d,J=7Hz), 7,25 (2H,d,J=8Hz), 7,73 (2H,d,J=8Hz). 9) Dietyleter (100 mg) oppnådd i overnevnte (8) ble løst opp 1 hydrert tetrehydrofuran (1:1, 10 ml). Til den resulterende oppløsningen ble vandig oppløsning (1,9 ml) av IN natriumhydroksid tilsatt og hydrolysen ble utført ved romtemperatur 1 18 timer. Det uoppløselige materialet ble fjernet ved filtrering, og til filtratet ble det tilsatt eddiksyre (1,7 ml). Den resulterende blandingen ble konsentrert til 1 ml under redusert trykk, etterfult av tilsetning av vann (2 ml) for å tilveiebringe hvite krystaller. Krystallene ble samlet ved filtrering, vasket med isvann og tørket, for å oppnå hovedforbindelsen (74 mg).
IR (KBr: 3350, 3240, 2940, 1650, 1565, 1503, 1400, 762 cm-1.
<1->H-NMR (DMS0-d6) 5: 1,10-1,48 (2H,m), 1,50-3,05 (12H,m), 3,23 (1H,brd,J=12Hz), 4,16-4,45 (lH,m), 6,66
(4H,brs), 7,21 (lH.brs), 7,27 (2H,d,J=8Hz), 7,80 (2H,d,J=8Hz), 8,20 (lH,d,J=7Hz).
[II] Fremstilling av N-(4-[2-(2,4-diamino-5,6,7,8-tetrahydropyrido[2 ,3-d]pyrimidin-6-yl )etyl]benzoyl )-L-glutaminsyre (forbindelse A, produktet ifølge eksempel 20 i U.S.P. nr. 4.684.653):
(1) A. En blanding av 60,00 g (0,221 mol) 3-cyano-2-(4-nitrofenyltio)-5-metylpyridin, 39,37 g (0,221 mol) N-bromosuksinimid, 3,0 g benzoylperoksid og 60 ml benzen ble tilbakestrømmet i 16 timer mens den ble bestrålet med 275-W sollampe. Oppløsningsmidlet ble fjernet under redusert trykk og resten ble ristet med en blanding av 1 1 vann og 1 1 metylenklorid. Det organiske laget ble separert, vasket med 1 1 vann, tørket over vannfri magnesiumsulfat og filtrert. Fjerning av oppløsningsmidlet ved avdampning under redusert trykk ga 3-cyano-2-(4-nitrofenyltio)-5-bromometylpyridln som kan bli anvendt i følgende trinn uten ytterligere rensning.
B. Det faste stoffet oppnådd i del A, ble omrørt ved romtemperatur med en oppløsning av 58,01 g (0,221 mol) trifenylfosfln i 500 ml benzen. Filtrering av reaksjonsblandingen ga 77,63 g [3-cyano-2-(4-nitrofenyltio)-5-pyri-dinylmetyl)trifenylfosfoniumbromid.
Omrøring av morvæsken ved romtemperatur i 6 timer tilveiebragte ytterligere 5,67 g (totalt utbytte 83,30 g, b2% >). Omkrystallisasjon fra acetonitril tilveiebragte [3-cyano-2-( 4-nitrofenyltio )-5-pyridinylmetyl] trif enylf osf oniumbromid som lysegule krystaller, sm.p. 200°C, med ny stivning, sm.p. 253°C-256°C, med dek. 2) En blanding av 4,544 g (7,42 mmol) [3-cyano-2-( 4-nitrofenyltio)-5-pyridinyImetyl]trifenylfosfoniumbromid, 0,751 g (7,42 mmol) trietylamin og 50 ml kloroform ble omrørt i romtemperatur i 15 minutter, og 7,42 mmol 4-(tert-butoksy-karbonyl )benzaldehyd ble deretter tilsatt. Etter omrøring ved romtemperatur i 96 timer ble 100 ml vann tilsatt, og blandingen ble filtrert og det organiske laget ble separert og vasket to ganger med 100 ml porsjoner vann, tørket og filtrert. Avdampning av filtratet under redusert trykk, tilveiebragte en rest som ble kromatografert på silikagel. Ureagert aldehyd ble eluert med 2:1 petroleumeter:benzen, mens 3-cyano-2-(4-nitrofenyltio)-5-[2-(4-tert-butoksy-karbonylfenyl)etenyl]pyridin ble eluert med benzen. Avdampning av benzeneluatet tilveiebragte produktet i 8156 utbytte. Sm.p. ubegrenset (cis-transblanding);
NMR (CDC13) S 1,62 (s,9H), 6,43 (d,1H,J=13Hz ),
6,90 (d,lH,J=13Hz), 7,24 (d,2E,J=9Hz ), 7,69 (d,2B,J=8,lHz), 7,76 (d,1H,J=2,7Hz ), 7,92 (d,2H,J=8,lHz), 8,22 (d,2H,J=9Hz ), 8,34 (d,lH,J=2,7Hz): IR (KBr) 2220, 1707, 1600, 1577, 1518, 1341, 1290, 1163 cm-<1>.
Analyse: Beregnet for: C25H21<N>3O4S: C,65,35; H,4,61;
N,9,14; S,6,98. Funnet: C,65,28; H, 4,68; N,9,20;
S,6,93.
3) En suspensjon av 4,64 mmol 3-cyano-2-(4-nitrofenyl-tio)-5-[2-(4 -1er t-butoksykarbonylfenyl)-etenyl]pyridin, 1,553 g (6,95 mmol) kuprinbromid og 50 ml flytende ammoniakk ble omrørt i et trykkrør ved romtemperatur i 13 dager. Avdampning av ammoniakk tilveiebragte en mørk rest som ble kromatografert over magnesiumsilikat ved anvendelse av metylenklorid som elueringsmiddel. Eluatet ble fjernet ved avdamping under redusert trykk og resten ble kromatografert på silikagel. Det ureagerte utgangsmaterialet ble eluert med benzen, mens 2-amino-3-cyano-5-[2-4-tert-butoksykarbonyl-fenyl )etenyl]pyridin lysegule krystaller ble eluert med etylacetat og opnådd ved avdampning av etylacetatoppløsnings-midlet. Utbytte 1,14 g (84*). Sm.p. 190°C-195'C;
NMR (Me2SO-d6) S 1,57 (s,9H), 6,57-6,60 (m,2H),
7,00 (br,2H), 7,35 (d,2H,J=8,lHz), 7,65
(d,lH,J=2,7Hz), 7,84 (d,2H,J=8,lHz), 8,00 (d,lH,J«2,7Hz);
IR (KBr) 3460, 3360, 2215, 1707, 1623, 1480, 1300, 1287, 1158 cm-<1>.
Analyse: Beregnet for CigN302: C,71,00; H,5,96;
N,13,07. Funnet: C,70,83; H,6,03; N,12,83. 4) Til en oppløsning v 4,54 mmol guanidin som fri base (oppnådd fra 0,433 g (4,54 mmol) guanidin-hydroklorid og 0,114 g natrium i 25 ml tørr tert-butanol) ble 1,325 g (4,12 mmol) 2-amino-3-cyano-5-[2-(4-tert-butoksykarbonylfenyl)ete-nyl]pyridin oppnådd ved gjentagelse av fremgangsmåten 1 overnevnte (3) tilsatt. Den dyprøde suspensjonen ble oppvarmet ved tilbakeløp under tørr nitrogen i 8 timer. Reaksjonsblandingen ble avkjølt til romtemperatur og filtrert. Presipitatet ble suksesivt vasket med vann, aceton og eter, og ble deretter tørket under redusert trykk for å tilveiebringe 0,911 g (6156) 2,4-diamino-6-[2-4-tert-butoksy-karbonylfenyl)etenyl]pyrido[2,3-d]pyrimidin, som et lysegult fast stoff, sm.p. 350"C;
NMR (Me2S0-d6) 5 1,55 (s,9H), 6,42 (br.2H), 6,73 (m,2E), 7,30-8,00 (br.2H), 7,35 (d,2H,J=9Hz), 7,81 (d,2H,J=9Hz), 8,34 (m,2H);
IR (KBr) 3320-3300, 3200-3140, 2970, 1718, 1626, 1610-1600, 1550, 1450-1445, 1288, 1167, 812 cm-<1>, Anal. Beregnet for C20<H>21<N>502: C,66,10; H,5,82;
N,19,27. Funnet: C,65,88; H,5,86; N,18,98.
5) En oppløsning av 1,27 g 2,4-diamino-6-[2-(4-tert-butoksykarbonylfenyl)etenyl]pyrido[2,3-d]pyrimidin oppnådd ved å gjenta fremgangsmåten i overnevnte (4) og 10 ml 88* maursyre, ble omrørt ved romtemperatur. Et gult fast stoff begynte å bli dannet omtrent 12 timer, og etter 4 dager med omrøring, ble reaksjonsblandingen filtrert. Det samlede faste stoffet ble grundig vasket med vann, metanol og aceton og ble deretter tørket under redusert trykk for å tilveiebringe 0,85 g (79*) 2,4-diamino-6-[2-4-karboksyfenyl)etenyl]-pyri-do[2,3-d]pyrimidin; sm.p. 300°C. 6) Til en oppløsning av 1,0 g (0,0033 mol) 2,4-diamino-6-[2-[4-karboksyfenyl]etenyl]pyrido[2,3-d]pyrimidin oppnådd ved å gjenta fremgangsmåten i overnevnte (5) og 1 g N-metylmorfolin i 120 ml N-metylpyrrolidon avkjølt til 5°C, og på en dråpevis måte ble 1,4 g (0,0048 mol) difenylklorofos-fonat tilsatt. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 1 time, og ytterligere 0,5 ml N-metylmorfolin ble tilsatt, etterfulgt av 1,1 g (0,0048 mol) dietyl L-glutamathydroklorid. Reaksjonsblandingen ble omrørt overnatt ved romtemperatur, og oppløsningsmidlet ble deretter fjernet under redusert trykk. Det gjenværende faste stoffet ble vasket med 50 ml tørr eter, triturert med 100 ml IN vandig natriumhydroksid, og den resulterende suspensjonen ble sentrifugert. Det samlede faste stoffet ble løst opp i 200 ml 3:1 kloroform:metanol og filtrert gjennom Florisil. Filtratet ble avdampet til et lite volum; 10 g Florisil ble tilsatt, og den resulterende impregnerte Florisil ble tilsatt på toppen av en Florisil-kolonne som deretter ble eluert sekvensielt med etylacetat etterfulgt av etylacetat inneholdende økende mengder metanol (9:1, 3:1 og 1,1). Dietyl N-(4-[2-(2,4-diaminopyrido[2,3-d]pyrimidin-6-yl)etenyl]benzoyl)-L-glutamat ble samlet i 3:1 og 1:1 fraksjoner. Avdampning av de kombinerte eluatene tilveiebragte et glassaktig materiale som ble triturert med eter og deretter samlet ved filtrering; utbytte 0,41 g (26*), sm.p. 183°C-185°C;
NMR (Me2S0-d6/TFA) S 1,25-1,45 (overlapping t,6H,J=7Hz), 2,25-2,50 (m,2H), 2,5-2,8 (m,2H), 4,05-4,45 (overlapping q,4H,J=7Hz), 4,8-5,0 (m,lH), 6,8, 7,2 (ABq,2H,J=16Hz), 7,4, 7,85 [ABq,4H,J=9Hz), 8,6 (S,1H), 9,05 (s.lH);
IR (Nujol) 3500-3000, 130, 1635, 1605 cm-<1>.
MS: Beregnet for C25<H>28N6O5: 492. Funnet: m/e 492, 290, 94, 84. 7) En oppløsning av 0,9 g dietyl N-(4-[2-(2,4-diamino-pyrldo[2,3-d]pyrimidin-6-yl )etenyl]benzoyl )-L-glutamat oppnådd ved å gjenta fremgangsmåten i overnevnte (6) i 40 ml trifluoreddiksyre ble hydrert under 379,2 kPa hydrogen i 72 timer ved anvendelse av 2,5 g Pd/C som katalysator. Katalysatoren ble fjernet ved filtrering gjennom celitt og filtratet ble avdampet. Det gjenværende faste stoffet ble triturert med 30 ml 2N vandig natriumkarbonat, etterfulgt av en vasking med vann. Det resulterende faste stoffet ble renset ved kolonnekromatograf! på silikagel. Eluering med kloroform:metanol (95:5) tilveiebragte en liten mengde (0,2 g) av tetrahydro-derivatet med påfølgende eluering med kloroform:metanol (1:4) ga dietyl N-(4-[2-(2,4-diamino-5,6,7,8-tetrahydropyrido[2,3-d]pyrimidin-6-yl)benzoyl)-L-glutamat som et råprodukt som ble kromatografert på silikagel ved anvendelse av kloroform :-metanol (95:5) for å tilveiebringe 0,42 g (31*) av produktet som et farveløst mikrokrystallinsk fast stoff; sm.p. 250°C; NMR (Me2S0-d6) S 1,6, 1,8 (2t,6H,J=6Ez), 1,4-3,8 (m,13H), 4,1 (2q,4H,J=6Hz), 4,3-4,6 (m,lH), 6,8 (s,2H), 7,35, 7,85 (ABq,4H,J=9Ez), 8,7 (d,1H,J=9Hz);
IR (Nujol) 3350, 3150, 1730, 1630 cm-<1>.
MS: Beregnet for C25H34N6O5: 498. Funnet: m/e 498, 425, 178, 165 (base), 150.
8) En opløsning av 0,35 g dietyl N-(4-[2-(2,4-diamino-5,6,7 ,8-tetrahydropyrido[2,3-d]pyrimidin-6-yl)etyl]benzoyl)-L-glutamat i 50 ml metanol inneholdende 4,6 ml 0,5N vandig natriumhydroksid ble omrørt ved romtemperatur i 72 timer. Eddiksyre (5 ml) ble tilsatt, og det resulterende hvite presipitatet ble samlet ved filtrering. Fllterkaken ble grundig vasket med vann, metanol og eter, og ble tørket under redusert trykk for å tilveiebringe 0,13 g (42*) av tittelfor-bindelsen; sm.p. 250°C.
Forbindelene I og A oppnådd ovenfor, ble utsatt for følgende test: i ) Test på cellevekst- inhlberende virkning 1 KB- celler Humane nasofaryngeale cancer-KB-celler (1 x IO<4> celler/ml) ble inokulert i hver brønn av en 96-mikrobrønnplate (0,1 ml i en brønn) og utsatt for stående kultur ved 37<e>C under 5* COg i 24 timer. Til dette ble en oppløsning av en av forbindelsene oppnådd overfor i 10* MEM (Nissui Pharmaceutical Co. Ltd. i Japan) tilsatt, og påny utsatt for stående kultur ved 37°C under 5* COg i 72 timer. Kulturen ble deretter pipettert ut, og ytterligere 0,1 ml av MTT-oppløsningen (Dojindo Laboratories, Japan) i 10* MEM (1,0 mg/ml) ble tilstt og inkubert ved 37°C i 4 timer. Deretter ble 0,1 ml av 10* SDS oppløsningen (Wako Pure Chemicals, Japan) tilsatt og inkubert ved 37°C i ytterligere 24 timer. Absorbansen ved 590 nm ble målt, og IC5Q-verdien til testforbindelsen ble definert som konsentrasjonen av forbindelsen som er nødvendig for å øke antall celler i den ubehandlede kontrollgruppen med 50*. Resultatene som ble oppnådd, er vist i tabell 1.
i i ) Toksisitets- test.
1) CDF1 hunnmus (5 uker gamle, en gruppe bestående av fem mus) ble oralt gitt 0,2 ml av en vandig oppløsing av hver testforbindelse (natriumsalt) ved konsentrasjoner på 2,0, 4,0
og 8,0 mg/kg, én gang pr. dag i fem dager, og observert i seks dager. Antall overlevende etter administrasjonen er vist i tabell 2. 2) BALB/c hunnmus (9 uker gamle, en gruppe bestående av fem mus) ble intraperitonealt gitt 0,2 ml av hver testforbindelse (natriumsalt) løst opp i fysiologisk saltvann ved konsentrasjoner på 2,0, 4,0 og 8,0 mg/kg, en gang pr. dag 1 fem dager, og observert i seks dager. Antall overlevende etter administrasjonen er også vist i tabell 2.
Dette viser at forbindelse I har mindre enn 1/4 ganger lavere toksisitet enn forbindelse A, og cellevekstinhiberende aktiviteter til forbindelse I i KB-cellene er noe svakere enn forbindelse A, og forbindelse I har dermed bedre egenskaper som anti-tumormiddel enn forbindelse a.

Claims (1)

  1. Analogifremgangsmåte for fremstilling av terapeutisk aktive forbindelser med den generelle formel:
    hvori ring A er en pyridinring som kan være hydrert eller en benzenring som kan være hydrert, X er NHg, R<1> og R<2> er uavhengig hydrogen eller C1-C4alkyl, og hver -COOR<5> og -COOR6 er uavhengig en karboksylgruppe som kan være forestret med C^-C4alkyl eller et salt derav, karakterisert ved at man omsetter: hvori ring A, X, R<1> og R<2> er som definert ovenfor, eller et reaktivt derivat ved karboksylgruppen eller et salt derav, med en forbindelse med den generelle formel:
    hvori -COOR<5> og -C00R<6>7 er som definert ovenfor, eller et salt derav.
NO891369A 1988-04-01 1989-03-31 Analogifremgangsmaate til fremstilling av terapeutisk aktive, kondenserte pyrimidiner NO169842C (no)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP8204388 1988-04-01
JP1028120A JP2830008B2 (ja) 1988-04-01 1989-02-06 縮合ピリミジン誘導体

Publications (4)

Publication Number Publication Date
NO891369D0 NO891369D0 (no) 1989-03-31
NO891369L NO891369L (no) 1989-10-02
NO169842B true NO169842B (no) 1992-05-04
NO169842C NO169842C (no) 1992-08-12

Family

ID=26366158

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO891369A NO169842C (no) 1988-04-01 1989-03-31 Analogifremgangsmaate til fremstilling av terapeutisk aktive, kondenserte pyrimidiner

Country Status (9)

Country Link
US (1) US4946846A (no)
EP (1) EP0340905B1 (no)
JP (1) JP2830008B2 (no)
KR (1) KR890016020A (no)
CN (1) CN1024007C (no)
DE (1) DE68911197T2 (no)
DK (1) DK169703B1 (no)
HU (2) HU203102B (no)
NO (1) NO169842C (no)

Families Citing this family (22)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4895946A (en) * 1987-10-26 1990-01-23 The Trustees Of Princeton University Process for the preparation of fused pyridine compounds
JP2983254B2 (ja) * 1989-06-14 1999-11-29 武田薬品工業株式会社 ピロロ〔２，３―ｄ〕ピリミジン誘導体の製造法およびその中間体
JPH03173890A (ja) * 1989-09-21 1991-07-29 Takeda Chem Ind Ltd ピロロ［２，３―ｄ］ピリミジン誘導体，その製造法，用途及び中間体
US5243042A (en) * 1990-08-02 1993-09-07 Hoffmann-La Roche Inc. 1-thiaguanosine and process for preparing oxanosine and 1-thiaguanosine
US5217974A (en) * 1991-03-29 1993-06-08 Eli Lilly And Company Method for treating gar-transformylase tumors in mammals and reducing mammalian toxicity
ATE147386T1 (de) * 1991-08-12 1997-01-15 Takeda Chemical Industries Ltd Kondensierte pyrimidinderivate, ihre herstellung und ihre verwendung als antitumormittel
US5196424A (en) * 1992-03-24 1993-03-23 Eli Lilly And Company N-[2-amino-4-substituted[[(pyrrollo or pyrido)[2,3-d]pyrimidinyl]-alkyl]benzoyl]-L-glutamic acids
CZ66893A3 (en) * 1992-04-23 1993-12-15 Lilly Co Eli Application of gar - transformylase inhibitor
US5969136A (en) * 1992-10-15 1999-10-19 Eli Lilly And Company Cyclization for preparing antifolate compounds
PL320263A1 (en) * 1994-11-16 1997-09-15 Synaptic Pharma Corp Dihydropyrimidines and their application
US6268369B1 (en) 1994-11-16 2001-07-31 Synaptic Pharmaceutical Corporation 5-(heterocyclic alkyl)-6-aryl-dihydropyrimidines
US6228861B1 (en) 1995-11-16 2001-05-08 Synaptic Pharmaceutical Corporation Dihydropyrimidines and uses thereof
US6245773B1 (en) 1996-05-16 2001-06-12 Synaptic Pharmaceutical Corporation 5-(heterocyclic alkyl)-6-aryl-dihydropyrimidines
US6172066B1 (en) 1996-05-16 2001-01-09 Synaptic Pharmaceutical Corporation Dihydropyrimidines and uses thereof
US5912251A (en) * 1998-01-17 1999-06-15 Nair; Madhavan G. Metabolically inert anti-inflammatory and anti-tumor antifolates
US6680323B2 (en) * 1998-12-23 2004-01-20 Synaptic Pharmaceutical Corporation Dihydropyrimidines and uses thereof
US6274585B1 (en) 1998-12-23 2001-08-14 Synaptic Pharmaceutical Corporation Dihydropyrimidines and uses thereof
US6720324B2 (en) * 2000-07-05 2004-04-13 Synaptic Pharmaceutical Corporation Selective melanin concentrating hormone-1 (MCH1) receptor antagonists and uses thereof
WO2006029385A2 (en) 2004-09-08 2006-03-16 Chelsea Therapeutics, Inc. Quinazoline derivatives as metabolically inert antifolate compounds.
CN101652366A (zh) 2007-01-19 2010-02-17 切尔西治疗公司 新型抗叶酸剂
JP2013510163A (ja) 2009-11-06 2013-03-21 チェルシー・セラピューティクス，インコーポレイテッド 酵素阻害化合物
WO2012078708A1 (en) 2010-12-07 2012-06-14 Chelsea Therapeutics, Inc. Combination comprising methotrexate and an antifolate compound

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE3069468D1 (en) * 1979-12-19 1984-11-22 Nat Res Dev Quinazoline derivatives, processes for their preparation, compositions containing them and their use as anti-cancer agents
DE3276808D1 (de) * 1981-09-25 1987-08-27 Southern Res Inst Pyrido (2,3-d) pyrimidines
US4460591A (en) * 1982-08-26 1984-07-17 Sri International 8,10-Dideazaminopterins
US4684653A (en) * 1985-03-08 1987-08-04 The Trustees Of Princeton University Pyrido(2,3-d)pyrimidine derivatives
US4725687A (en) * 1986-04-28 1988-02-16 Southern Research Institute 5-methyl-5-deaza analogues of methotrexate and N10 -ethylaminopterin
NZ219971A (en) * 1986-06-06 1989-08-29 Univ Princeton Tetrahydropyrido (2,3-d pyrimidine derivatives and pharmaceutical compositions
IE60038B1 (en) * 1986-06-30 1994-05-18 Univ Princeton 4(3H)-oxo-5, 6, 7, 8-tetrahydropyrido-[2, 3-d]pyrimidine derivatives
US4895946A (en) * 1987-10-26 1990-01-23 The Trustees Of Princeton University Process for the preparation of fused pyridine compounds

Also Published As

Publication number Publication date
NO891369D0 (no) 1989-03-31
CN1036567A (zh) 1989-10-25
EP0340905B1 (en) 1993-12-08
KR890016020A (ko) 1989-11-28
NO891369L (no) 1989-10-02
HU908278D0 (en) 1991-06-28
US4946846A (en) 1990-08-07
CN1024007C (zh) 1994-03-16
EP0340905A1 (en) 1989-11-08
JPH0228162A (ja) 1990-01-30
DK169703B1 (da) 1995-01-16
HU203102B (en) 1991-05-28
DE68911197T2 (de) 1994-04-14
DK158589A (da) 1989-10-02
JP2830008B2 (ja) 1998-12-02
DK158589D0 (da) 1989-03-31
DE68911197D1 (de) 1994-01-20
HUT51620A (en) 1990-05-28
NO169842C (no) 1992-08-12

Similar Documents

Publication Publication Date Title
NO169842B (no) Analogifremgangsmaate til fremstilling av terapeutisk aktive, kondenserte pyrimidiner
DK173980B1 (da) Pyrimidinderivater, fremgangsmåde til fremstilling deraf og deres anvendelse som antitumormidler
EP0530537B1 (en) Condensed pyrimidine derivatives, their production and use as antitumor agents
US5496946A (en) Production of pyrrolopyrimidines and intermediates therefor
IE904445A1 (en) N-(pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-3-ylacyl)-glutamic acid¹derivatives
CA2034292A1 (en) Condensed heterocyclic compounds, their production and use
WO1986005181A1 (en) PYRIDO AD2,3-d BDPYRIMIDIN DERIVATIVES
EP0327190A1 (en) Pyrido(2,3-d)pyrimidine derivatives
US5496822A (en) Compounds and methods for treating tumors
EP0530579B1 (en) Condensed pyrimidine derivatives antitumor agents
JP3015957B2 (ja) ピロロ［２，３―ｄ］ピリミジン誘導体およびその製造法
Lee et al. Antitumor agents. 86. Synthesis and cytotoxicity of. alpha.-methylene-. gamma.-lactone-bearing purines
US5223620A (en) Pyrido[2,3-d]pyrimidine compounds useful as intermediates
JP3376479B2 (ja) 縮合ピリミジン誘導体、その製造法および用途
JPH04211063A (ja) 縮合三環性複素環化合物、その製造法、用途及び中間体
KR950011740B1 (ko) 축합된 피리미딘 유도체
JPH0578362A (ja) 縮合複素環化合物，その製造法，用途及び中間体
JP3425676B2 (ja) 縮合ピリミジン誘導体、その製造法および用途
JP3213426B2 (ja) ６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ〔ｄ〕ピリミジン誘導体
JPH04117381A (ja) 縮合複素環化合物，その製造法，用途及び中間体
JPH06239840A (ja) ピリミジン環縮合シクロペンチリデン誘導体
NO166185B (no) Analogifremgangsmaate for fremstilling av terapeutisk aktive 2-amino-7-(2-tientylmetyl)-4-pyrrolo(2,3-d)pyrimidon eller et farmasoeytisk akseptabelt base- eller syreaddisjonssalt derav.