NO162770B

NO162770B - Fremgangsmaate for stabilisering av en fettsyreesterforbindelse.

Info

Publication number: NO162770B
Application number: NO842104A
Authority: NO
Inventors: Masaichiro Masui
Original assignee: Sekimoto Hiroshi; Nakanishi Michio; Akiyoshi Masataka
Priority date: 1983-05-28
Filing date: 1984-05-25
Publication date: 1989-11-06
Also published as: FR2547829B1; GB8413437D0; DE3419796A1; US4564475A; FR2547829A1; NO162770C; CA1218376A; NO842104L; GB2140806B; GB2140806A

Description

Foreliggende oppfinnelse vedrører en fremgangsmåte for stabilisering av en fettsyreesterforbindelse valgt fra gruppen bestående av en ester av fettsyre som har 20-22 karbonatomer og tre dobbeltbindinger eller flere (i det følgende betegnet fettsyreesterforbindelser A) eller en substans inneholdende fettsyreesterforbindelsen.

Forbindelsene som tilhører fettsyreesterforbindelser A, kan eksemplifiseres ved:

arakidonsyre (eikosatetraensyre, AA)

eikosapentaensyre (EPA)

dokosaheksaensyre (DHA)

Disse AA-, EPA- og DHA-forbindeIsene er viktige forbindelser

som virker som forløpere for en gruppe som henholdsvis betegnes prostaglandin (PG), tromboksan og leukotrien (disse stoffer er i besittelse av henholdsvis karakteristiske sterke fysio-logiske aktiviteter og f.eks PG, har en inhiberende virkning på blodplate-agglutinering og dilaterende virkning overfor arterieveggen, og hindrer dermed trombose og arteriosklerose samtidig som anti-kreftvirkning forventes), men disse stoffer kan ikke produseres i det menneskelige legeme og må derfor til-føres til legemet utenfra. Disse stoffene inneholdes stort sett i marine produkter, spesielt i sardiner eller makrell. Derfor blir nevnte umettede fettsyre ekstrahert fra disse fisker som sardinolje og makrellolje, og kan benyttes som den er eller i form av amid, ester slik som alkylester (f.eks etylester) tri-glyserid og lignende, som legemidler eller i helsekost.

I

På den annen side har disse fettsyreesterforbindelser A mange umettede bindinger ogjdårlig stabilitet, og blir dermed lett forringet i løpet av en relativt kort tidsperiode .

Man har i denne sammenheng foretatt et omfattende studium og funnet at en forbindelse som kan representeres ved den generelle formel:

12

hvor R og R henholdsvis betegner en acylgruppe avledet fra en fettsyreester, og R <3> b<:>etegner (H)^ eller (CH^)3 (i det følgende betegnet forbindelser I), har en stabiliserende virkning på fettsyreesterforbindelser A.

Formålet med foreliggende oppfinnelse er å tilveiebringe

en fremgangsmåte for stabilisering av fettsyreesterforbindel-i

ser A.

Ifølge foreliggende oppfinnelse er det således tilveiebragt en fremgangsmåte for stabilisering av en fettsyreesterforbindelse valgt fra gruppen bestående av en ester av fettsyre som har 20-22 karbonatomer og 3 dobbeltbindinger eller flere, eller en substans inneholdende fettsyreesterforbindelsen, og denne fremgangsmåten er kjennetegnet ved at det til fettsyreesterforbindelsen eller en substans inneholdende denne forbindelsen, tilsettes minst en forbindelse som et stabiliserinasmiddel for fettsyreesterforbindelsen, hvilket stabiliseringsmiddel er representert ved den ovenfor angitte formel (I) i en mengde på 0,5 vekt-% eller mer beregnet på vekten'av fettsyreesterforbindelsen,

og eventuelt tilsettes cyklodekstrin, i en mengde som er større enn vekten av fettsyreesterforbindelsen.

I foreliggende oppfinnelse betyr fettsyreesterforbindelser A som nevnt ester av umettet fettsyre med 20-22 karbonatomer og 3 dobbeltbindinger eller mer (vanligvis 3-6). Eksempler på slike estere er alkylester, triglycerid, osv. Som alkyl i ovennevnte alkylester kan eksemplifiseres C^_^ alkyl slik som metyl, etyl, n-propyl, iso-propyl, n-butyl, iso-butyl, t-butyl.

Fettsyreesterforbindelser A kan f.eks. være EPA-triglycerid, DHA-triglycerid, EPA-etylester.

De stoffer hvori forbindelse (I) kan inkorporeres, er de ovennevnte fettsyreesterforbindelsene A per se og stoffer inneholdende disse. Som stoffer inneholdende fettsyreester A kan nevnes sammensetninger inneholdende fettsyreesterforbindelser A sammen med en bærer som vanligvis benyttes for legemidler, helsekost, osv.

Fettsyreresten representert ved R 1 og R 2 i formel (I) er esterforbundet fettsyre (dvs. acylgruppe) som kan være rettkjedet eller forgrenet og mettet eller umettet, hvis 1 2 karbontall fortrinnsvis er i området 2-30. R og R kan være like eller forskjellige.

Eksempler på R 1 og R 2 er rester av fettsyrer slik som propionsyre, kaprinsyre, stearinsyre, palmitinsyre, olje-syre, linolsyre, osv.

Forbindelser (I) kan eksemplifiseres ved fosfatidylcholin, fosfatidyletanolamin, lysolfosfatidylcholin, inositol-fosfatid, osv. Forbindelser (I) kan inkorporeres i pre-parater ifølge oppfinnelsen også som en egnet blanding. Ved inkorporering som en blanding er det fortrinnsvis som lecitin. Lecitin, som er til stede i naturlig forekommende kilder, dvs. animalske og vegetabilske, kan anvendes som sådant etter raffinering, f.eks. eggeplommelecitin, soya-bønnelecitin, osv., kan nevnes som foretrukne.

Mengden av forbindelse (I) som skal inkorporeres, er som nevnt 0,5 vekt-% eller mer, spesielt foretrukket 1 vekt-% eller mer, og særlig 10% eller mer i forhold til fettsyreesterforbindelsene A.

Preparatet som oppnås ved foreliggende fremgangsmåte, er fortrinnsvis i- pulverform og cyklodekstrin tjener til i sterk grad å minimalisere ubehagelig lukt. og bitterhet som særpreger fettsyreforbindelser A, og tjener også til å gi preparatet en behagelig konsistens.

Det cyklodekstrinholdige, pulverformige preparat kan frem-stilles ved følgende1 metode: Først blir forbindelse (I), f.eks. lecitiner, oppløst i fettsyreesterforbindelser A under oppvarming. Oppvarmings-temperaturen er høy nok til åjoppløse fettsyreesterforbindelsene A og forbindelsé (I). Til det således oppnådde oljeaktige materiale tilsettes cyklodekstrin under oppvarming fulgt av avkjøling for oppnåelse av det ønskede pulverformige produkt.. Den mengde ciyklodekstrin som tilsettes,

er vanligvis større enn.den'for fettsyreesterforbindelsene A, fortrinnsvis mer enn 3 ganger så mye, beregnet etter vekt. Cyklodekstrinet som tilsettes, kan være a-, |3- eller Y-isomeren, eller en blanding derav, eller kan være en blanding med dekstrin.

Andre eventuelle tilsetninger er vitamin A, vitamin C eller vitamin E som stabiliseringsmidler.

Preparat som oppnås ved stabiliseringsprosessen, kan anvendes som sådant eller kan administreres i form av tabletter, kapsler, granulater, osv. ved<1>anvendelse av konvensjonelle bærere, eller lignende.

Foreliggende oppfinnelse skal!i det følgende beskrives under henvisning til nedenstående eksempler.

Eksempel 1

2 g hver av fettsyreesterforbindelsene A angitt i kolonnen under "Prøver" i tabell 1 ble anbragt i reagens-rør. Til hvert reagensrør ble tilsatt hvert av stabiliseringsmidlene angitt i kolonnen under "Stabiliseringsmidler" i tabell 1 i de respektive vekt-%-mengder som angitt i tabellen. De respektive blandinger ble godt blan-det. De således oppnådde sammensetninger i reagensrørene ble hensatt i ukorket tilstand i et termostatstyrt vannbad ved 70°C.

Under anvendelse av disse prøver ble gjenværende mengder av fettsyreesterforbindelser A inneholdt deri bestemt ved 24 timer, 48 timer og 6 dager etter tilsetning av stabiliseringsmidlene i forhold til mengden av fettsyre-esterf orbindelser A ved begynnelsen som 100%. Resultatene er vist i tabell 1.

Medtode for kvantitativ bestemmelse

Til 10 0 mg av hvert av prøvepreparatene ble det tilsatt metanoloppløsning inneholdende 1% kaustisk soda for oppnåelse av en oppløsning på 1 ml. De således fremstilte prøveoppløsningene ble rystet kraftig under oppvarming. Hver av de fullstendige oppløsningene ble underkastet gasskromatografi for kvantitativt å bestemme fettsyreesterforbindelse A som dens metylester.

Betingelser for kvantitativ bestemmelse

5% FFAP<*> på "Uniport B/2m"<Xx>.

Glasskolonne

Kolonne temperatur ... 205°C.

Preparatet til hvilket det ikke var tilsatt noe stabiliseringsmiddel, øket sin viskositet gradvis, og 6-7 dager senere ble det observert geldannelse på overflaten mens ingen endring ble observert på prøvepreparatet hvortil forbindelsen (I) var tilsatt.

=FFAP = fri fettsyrefase

=kolonnebærermateriale av diatoméjord av en lengde på

2 m.

Eksempel 2

Til 20 g EPA-olje (inneholdende 25% EPA-triglycerid og

13% DHA-triglycerid) ble det tilsatt 10 g soyabønnelecitin. Blandingen ble oppløst ved oppvarming ved 40°C. Til opp-løsningen ble tilsatt 70 g cyklodekstrin. Blandingen ble omrørt, fulgt av avkjøling for oppnåelse av et gult, tørt pulver av EPA-olje (A). Dette (A)-materiale og et EPA-oljepulver fremstilt uten tilsetning av soyabønnelecitin (B) ble hensatt i 30 timer i et termostatstyrt bad ved 37°C

ved anbringelse av hver av prøvene i en utildekket beholder. De respektive EPA-innhold ble bestemt,'og det ble funnet

at 80% EPA var tilbake i A-materialet mens 16% EPA var tilbake i B-materialet. A har en betydelig nedsatt ubehagelig lukt og bitterhet som er særpreget for EPA-olje.

I det nedenstående angis forsøksresultater hvor BHA (butylert hydroksyanisol) og vitamin E, som begge er kjent som sterke antioksydasjonsmidler, nesten ikke viser noen stabiliserende aktivitet overfor fettsyre-esterf orbindelse A. I motsetning til dette fremgår det fra nevnte forsøk at lecitin utviser en sterk stabiliserende aktivitet spesielt mot fettsyreesterforbindelse A. Når det gjelder stabiliserende effekter overfor etylester av linolsyre som er en forbindelse som ligner fettsyreesterforbindelsen A, så viser ikke desto mindre lecitin, BHA og vit. E ikke særlig forskjell.

Blant en rekke forskjellige naturlige oljer og stabiliseringsmidler har man funnet at den spesielle kombinasjon av fettsyreesterforbindelse A og lecitin forårsaker en uventet stabiliserende effekt.

Videre, stabiliseringen som oppnås i foreliggende oppfinnelse, skyldes ikke nødvendigvis den antioksyderende aktiviteten til lecitin, som vist i de vedlagte forsøk hvori andre sterke antioksydasjonsmidler, BHA og vit. E, mangler slik stabiliserende effekt som vises i foreliggende oppfinnelse.

Forsøk

I forsøkene ble det benyttet et preparat inneholdende lecitin, et preparat inneholdende BHA, et preparat inneholdende vit. E og et preparat uten noe tilsatt stabiliseringsmiddel.

Minskingsforholdet pr. dag av EPA og linolsyre inneholdt deri ble bestemt i forhold til mengden av triglycerid av EPA, EPA-etylester eller linolsyreetylester ved begynnelses-trinnet som 0%.

Resultatene er vist i nedenstående tabell.

Den kvantitative bestemmelse ble utført på en måte lik

den beskrevet i eksempel 1.

Dvs., til 100 mg hver av prøvepreparatene ble det tilsatt metanolopppløsning inneholdende 1% kaustisk soda til dannelse av en 1 ml oppløsning. De således fremstilte prøveoppløsningene ble kraftig rystet under oppvarming. Hver av de komplette oppløsningene ble underkastet gasskromatografi for kvantitativt å bestemme fettsyreesterforbindelsen A som dens metylester.

Betingelsene for kvantitativ bestemmelse:

5% FFAP på Uniport B/2m

Glasskolonne

Kolonnetemperatur ..... 20 5°C.

Fettsyreesterforbindelsen A er et ustabilt materiale og omdannes til et dekomponert produkt ved lagring i en lengre tidsperiode. Verdiene i nedenstående tabell under overskriften "Minskingsforhold" er den prosentvise verdi av mengden av fettsyreesterforbindelsen A som er dekomponert etter å ha blitt lagret i en viss tidsperiode, sammen-lignet med verdien (0%) ved begynnelsen av forsøket. De resulterende verdier i tabellen.viser at fettsyreforbindel-sen A kan stabiliseres ved tilsetning av et stabiliseringsmiddel, hvorved omfanget av dens dekomponerte del minsker. De lave verdiene for "minskingsforhold" i tabellen gir uttrykk for en utmerket stabiliserende effekt.

Claims

1. Fremgangsmåte for stabilisering av en fettsyreesterforbindelse valgt fra gruppen bestående av en ester av fettsyre som har 20-22 karbonatomer og 3 dobbeltbindinger eller flere, eller en substans inneholdende fettsyreesterforbindelsen, karakterisert ved at det til fettsyreesterforbindelsen eller en substans inneholdende denne forbindelsen, tilsettes minst en forbindelse som et stabiliseringsmiddel for fettsyreesterforbindelsen, hvilket stabiliseringsmiddel er representert ved den generelle formel: hvor R 1 og R <2>henholdsvis betegner en acylgruppe avledet fra en fettsyrerest, og R 3 betegner (H)^ eller (CH)^, i en mengde på 0,5 vekt-% eller mer beregnet på vekten av fettsyreesterforbindelsen, og eventuelt tilsettes cyklodekstrin, i en mengde som er større enn vekten av fettsyreesterforbindelsen.

2. Fremgangsmåte ifølge krav 1, karakterisert ved at det som forbindelse med formel (I) anvendes lecitin.

3. Fremgangsmåte ifølge krav 1, karakterisert ved at det anvendes en fettsyreesterforbindelse som er i form av en etylester.

4. Fremgangsmåte ifølge krav 1, karakterisert ved at det anvendes en fettsyreesterforbindelse som er i form av triglycerid.