NL8702295A - Cefalosporineantibiotica en preparaten die deze antibiotica bevatten. - Google Patents

Description

- Cefalosporineantibiotica en preparaten die deze antibiotica bevatten -

De uitvinding heeft betrekking op cefalosporinen en verbeteringen ervan, in het bijzonder op nieuwe cefalosporineverbindingen en derivaten daarvan met waardevolle antibiotische eigenschappen.

5 De cefalosporineverbindingen volgens de uitvinding worden aangeduid onder verwijzing naar 'cefam’ volgens J. Amer. Chem. Soc., 1962, 84 , 3400, waarbij de uitdrukking 'cefemT duidt op de cefambasistructuur met een dubbele binding.

Cefalosporineantibiotica worden op grote 10 schaal toegepast bij de behandeling van ziekten of aandoeningen veroorzaakt door pathogene bacteriën bij mensen en dieren , en zijn in het bijzonder bruikbaar bij de behandeling van ziekten veroorzaakt door bacteriën die resistent zijn ten opzichte van andere antibiotica zoals penicillineverbindingen, en bij de behandeling 15 van voor penicilline gevoelige patiënten. Het is vaak wenselijk een cefalosporineantibioticum te gebruiken dat zowel een werking tegen Gram-positieve als Gram-negatieve microorganismen uitoefent, en er is aanzienlijk veel research verricht op de ontwikkeling van verschillende typen cefalosporineantibiotica met een breed 20 spectrum .

Zo is bijvoorbeeld in het Britse octrooi-schrift 1.399.086 van aanvraagster een nieuwe klasse cefalosporineantibiotica beschreven die een 7 ft -(¾-veretherde oxyimino)acyl-amido zijketen bevatten, welke oxyiminogroep de syn-eonfiguratie 25 heeft. Deze klasse antibiotische verbindingen is gekaimarkt door een krachtige antibacteriele werking tegen een reeks Gram-positieve en Gram-negatieve organismen, gekoppeld met een bijzonder hoge stabiliteit tegen $-lactamasen, die door verschillende Gram-negatieve organismen worden geproduceerd.

30 De ontdekking van deze klasse verbindingen heeft verdere research in hetzelfde gebied gestimuleerd, waarbij verbindingen gezocht worden die verbeterde eigenschappen hebben, bijvoorbeeld tegen bepaalde klassen organismen, met name Gram-negatieve organismen. Deze belangstelling blijkt uit het zeer grote ^70 2 25? * Λ - 2 - aantal octrooiaanvragen met betrekking tot cefalosporineanti-biotica met bepaalde substituenten zowel op de 7 β-acylamidozijketen als op de 3-plaats van de cefalosporinekern.

Het Britse octrooischrift 1.567.625 5 bevat bijvoorbeeld een algemene beschrijving van cefalosporine- antibiotica met een 7 β-( öl-veretherde oxyimino)aceetamido zijketen waarbij de veretherende groep een alifatische koolwaterstofgroep is welke eventueel geschikte substituenten kan hebben (naast een groot aantal mogelijkheden, bijvoorbeeld een carboxygroep of 10 een beschermde carboxygroep en een fenylgroep gesubstitueerd door ten hoogste drie hydroxygroepen), welke zijketen voorts o£,“ gesubstitueerd is door een groep welke onder andere een aminothia-zolylgroep kan zijn. Geen van de met name genoemde voorbeelden bevat echter een carboxyfenylalkylveretherende groep. De groep 15 op de 3-plaats kan eveneens uit een groot aantal alternatieven gekozen worden, maar een waterstofatoom valt daar niet onder.

In het Britse octrooischrift 1.604.971 zijn een groot aantal cefalosporineantibiotica algemeen beschreven, waarbij de zijketen op de 7 -plaats gekozen kan worden uit 20 onder andere een 2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(veretherde oxyimino)-aceetamidogroep, waarbij de veretherende groep ,naast zeer veel andere betekenissen, een alkylgroep (bijvoorbeeld methyl) gesubstitueerd door zowel fenyl als carboxy kan zijn, hoewel er geen specifiek voorbeeld van verbindingen met een carboxyfenylalkylgroep 25 is en de veretherende groep bij voorkeur een niet-gesubstitueerde methylgroep is. De groep op de 3-plaats kan ook uit een groot aantal alternatieven gekozen worden en tot de mogelijke 3-substi-tuenten behoort ook een waterstofatoom.

In het Britse octrooischrift 2.017.702 30 kan de oxyiminoveretherende groep, volgens de algemene definitie, onder andere een Krcarboxyfenylmethylgroep zijn. In de met name genoemde verbindingen is de carboxyfenylmethylgroep altijd met een acetoxymethylgroep op de 3-plaats gecombineerd.

Het Britse octrooischrift 2.104.888 beschrijft 35 in het algemeen cefalosporineantibiotica waarbij de zijketen op de if^-plaats een 2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(veretherde oxyimino)-aceetamidogroep is. De oxyiminoveretherende groep kan onder andere 870220ύ ï

V

- 3 - een carboxyfenylmethylgroep zijn waarbij de fenylgroep door een hydroxygroep gesubstitueerd kan zijn. De groep op de 3-plaats is een isothiazolylthiomethyl- of iminoalkylideendithiethaangroep.

Het Europese octrooischrift 197.409 5 beschrijft in het algemeen cefalosporineantibiotica waarbij de zijketen op de 7-plaats een 2-(2-aminothiazol-r4-y 1)-2-(ver-etherde oxyimino)aceetamidogroep is,De oxyiminoveretherende groep kan onder andere een catecholcarboxymethyloxyiminogroep zijn.

De substituent op de 3-plaats kan gekozen worden uit een aantal 10 alternatieven, maar hiertoe behoort niet een waterstofatoom.

Gevonden is nu, dat door de keuze van een (Z)-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2—(veretherde oxyimino)aceetamidogroep op de 7^-plaats in combinatie met een waterstofatoom op de 3-plaats, en door de keuze van een ty.-carboxy gesubstitueerde 15 fenylmethoxyiminogroep als de veretherde oxyiminogroep , cefalospori-neverbindingen kunnen worden verkregen,die een bijzonder gunstig werkingsprofiel (hierna uitvoeriger beschreven) tegen een groot aantal verschillende algemeen voorkomende pathogene organismen hebben en/of als tussenprodukten bij de bereiding van andere 20 werkzame verbindingen gebruikt kunnen worden.

Dienovereenkomstig worden cefalosporine-verbindingen met de algemene formule 1 verschaft , waarin en R2 , die gelijk of verschillend kunnen zijn, elk een waterstofatoom of een carboxylgroep blokkerende 25 groep voorstellen,

Rg een waterstofatoom of een aminobescher- mende groep voorstelt, R^ en R^ elk een hydroxy- of gesubstitueerde hydroxygroep voorstellen of R^ en tezamen een cyclische 30 beschermde diolgroep voorstellen, Z S of S-H) (0C- of $-) voorstelt,en / / · de stippellijn die de 2-, 3- en 4-plaatsen overbrugt , aangeeft dat de verbinding een cef-2-em- of cef-3-em-verbinding is, en niet-toxische zouten en solvaten (in het bijzonder hydraten) 35 daarvan .

Wanneer en/of R2 carboxylgroep blokkerende groepen voorstellen, kan de blokkerende groep bijvoorbeeld de rest van een estervormende alifatische of aralifatische alkohol «70?·: ♦ - 4 - of van een estervormend fenol , silanol of stannanol zijn (waarbij de alkohol, fenol , silanol of stannanol bij voorkeur 1 tot 20 koolstofatomen bevat ) of een symmetrisch of gemengd anhydride blokkerende groep afkomstig van een geschikt .zuur.

* Voorkeursvoorbeelden van of zijn t-butyl , difenylmethyl en p-nitrobenzyl.

Wanneer R^ een aminobeschermende groep is, kan de beschermende groep bijvoorbeeld een aralkylgroep met 7-20 koolstofatomen ( bijvoorbeeld een trifenylmethyl- of 4- 1Ω methoxybenzylgroep) , een acylgroep, zoals een eventueel gesubstitueerde alkanoylgroep met 1-6 koolstofatomen ( bijvoorbeeld een formyl- of chlooracetylgroep) of een eventueel gesubstitueerde alkoxycarbonylgroep (bijvoorbeeld een t-butoxycarbonyl- of 2,2,2-trichloorethoxycarbonylgroep ), of een aralkyloxy- carbonylgroep ( bijvoorbeeld een benzyloxycarbonylgroep) of een silylgroep ( bijvoorbeeld een trimethylsilylgroep) zijn.

In het algemeen hebben verbindingen met formule 1 waarin R^ een waterstofatoom is de voorkeur.

2Q Wanneer R^ of R^ een gesubstitueerde hydroxygroep voorstelt , kan deze bijvoorbeeld een acyloxygroep /bijvoorbeeld een formyloxygroep of een groep met formule -OCORg (waarin Rg een alkylgroep met 1-8 koolstofatomen is , bijvoorbeeld een methylgroep)7, een carbonaatgroep -OCC^Rg (waarin R& de hierboven gedefinieerde betekenis heeft) een silyloxygroep /bijvoorbeeld een (C^-alkyl)silyloxygroep zoals een trimethyl-silyloxygroep of een t-butyldimethylsilyloxygroep7, of een boraat /-0B(0R7)of fosfaat [-0Έ(0) (OR^)groep ( waarin R^ een alkylgroep met 1-4 koolstofatomen voorstelt) zijn.

2q Wanneer R^ en R,. tezamen een cyclische beschermde diolgroep vormen, kan deze een alkylideendioxygroep, bij voorkeur met 1-20 koolstofatomen, bijvoorbeeld een methyleen-dioxy-,ethyleendioxy~,of isopropylideendioxygroep met eventueel één of meer substituenten, zoals fenyl- , C^_^-alkoxy- of oxo-^ substituenten, bijvoorbeeld methoxymethyleendioxy-, difenyl- methyleendioxy- of carbonyldioxygroepen; een cyclische boraat-groep , bijvoorbeeld -0B(0H)0-; een cyclische fosfaatgroep, bijvoorbeeld -0P(0)(0H)0- of -0P(0)(0R7)0- (waarin de hierboven ¢702295 * - 5 - s>- gedefinieerde betekenis heeft) of een cyclische silylethergroep, bijvoorbeeld eendi(C^_^ alkyl)silyldioxygroep , zoals een dimethylsilyldioxygroep, zijn.

In het algemeen stellen dergelijke silyl-5 oxy-, boraat- of fosfaatgroepen beschermde hydroxygroepen voor die gesplitst kunnen worden ter verkrijging van een verbinding met formule 1 met vrije hydroxygroepen.

In het algemeen zijn R^ en R,. elk bij voorkeur een acetoxygroep of in het bijzonder een hydroxygroep.

^ In de verbindingen met formule 1 is Z bij voorkeur S.

Cef-3-emverbindingen volgens de uitvinding hebben in het bijzonder de voorkeur.

Wanneer de verbinding in de geneeskunde ^5 gebruikt moet worden, moet elke eventuele ester van de carboxyl-groepen in het molecuul een niet-toxische, metabolisch labiele esterfunktie zijn. Voorbeelden van niet-toxische metabolisch labiele esterderivaten zijn acyloxyalkylesters, bijvoorbeeld lage alkanoyl-oxy-methyl- of -ethylesters zoals acetoxy-methyl- of -ethyl-20 of pivaloyloxymethylesters , en alkoxyearbonyloxyethylesters , bijvoorbeeld lage alkoxyearbonyloxyethylesters zoals de ethoxy-carbonyloxyethylester.

Het zal duidelijk zijn, dat , behalve de hiervoor genoemde esterderivaten, binnen het kader van de uitvin-25 ding eveneens vallen de werkzame verbindingen met formule 1 in de vorm van andere , fysiologisch aanvaardbare equivalenten, d.w.z. fysiologisch aanvaardbare verbindingen die , evenals de metabolisch labiele esters , in vivo in de antibiotische ouderver-bindingen volgens de uitvinding worden omgezet.

30 De niet-toxische zoutderivaten die door reaktie van de carboxylgroep die in de verbindingen met formule 1 aanwezig is, kunnen worden gevormd , omvatten anorganische basezouten, zoals alkalimetaalzouten ( bijv. natrium- en kaliumzouten) en aardalkalimetaalzouten ( bijv. calciumzouten), aminozuurzouten 35 ( bijv. lysine- en argininezouten) , zouten van organische basen (bijv. procaine, fenylethylbenzylamine,dibenzylethyleendiamine , ethanolamine, diethanolamine en N-methylglucosaminezouten) .

6 70 2 29 - 6 -

Onder andere niet-toxische zoutderivaten vallen zuuradditiezouten, bijv. gevormd met zoutzuur, broomwaterstofzuur, zwavelzuur, salpeterzuur, fosforzuur, mierezuur en trifluorazijnzuur. De zouten kunnen eveneens in de vorm van harsprodukten aanwezig zijn, bijvoorbeeld gevormd met een polystyreenhars of een verknoopte polystyreen-divinylbenzeencopolymeerhars die amino- of kwaternaire aminogroepen of sulfonzuurgroepen bevat, of met een hars die carboxylgroepen bevat, bijvoorbeeld een polyacrylzuurhars.

Oplosbare basezouten ( bijv. alkalimetaalzouten zoals het natrium- 1 o zout) van de verbindingen met formule 1 kunnen, wegens de snelle verdeling van dergelijke zouten in het lichaam na de toediening , gemakkelijk voor therapeutische toepassingen worden gebruikt. Zijn bij een bepaalde toepassing, bijvoorbeeld voor gebruik in depotpreparaten, onoplosbare zouten van verbindingen met 15 formule 1 gewenst, dan kunnen dergelijke zouten op een gebruikelijke wijze, bijvoorbeeld met geschikte organische aminen, worden bereid.

De verbindingen volgens de uitvinding zijn syn-isomeren . De syn-isomere vorm wordt gedefinieerd door de 20 configuratie van de groep met formule 10 ten opzichte van de carboxamidogroep. In deze beschrijving wordt de syn-configuratie voorgesteld als in formule 1. Het zal duidelijk zijn, dat , aangezien de verbindingen volgens de uitvinding geometrische isomerai zijn, er enige menging met het overeenkomstige anti-isomeer kan optreden.

25 ......

Voorts zal het duidelijk zijn,dat m de oxim veretherende groep het koolstofatoom naast de oxygroep chiraal is en derhalve in de R- of S- configuratie kan voorkomen .

Binnen het kader van de uitvinding vallen dan ook de afzonderlijke R- en S-vormen aan dit ehirale koolstofatoom alsmede mengsels 30 (met inbegrip van diastereomere mengsels) daarvan. In het algemeen hebben verbindingen met formule 1 waarin dit ehirale koolstofatoom de S-configuratie heeft en R/S-mengsels waarin het S-isomeer overheerst , de voorkeur.

De verbindingen volgens de uitvinding kunnen oc J m tautomere vormen voorkomen ( bijvoorbeeld ten aanzien van de 2- aminothiazolylgroep), en het zal duidelijk zijn, dat dergelijke »702295 « * - 7 - tautomere vormen, bijvoorbeeld de 2-iminothiazolinylvorm , binnen het kader van de uitvinding vallen.

Zoals eerder aangegsven, zijn de verbindingen volgens de uitvinding werkzaam tegen een grote verscheiden-5 heid aan algemeen voorkomende pathogene organismen en/of kunnen zij gebruikt worden als tussenprodukten voor de bereiding van andere werkzame verbindingen. Wanneer de verbindingen volgens de uitvinding als tussenprodukt gebruikt worden, zijn de groepen en R2 vaak carboxylgroep blokkerende groepen; de groep R, is dan vaak 10 * een ammogroep beschermende groep en de groepen en R^ zijn dan vaak beschermde hydroxygroepen zoals silyloxy-, boraat- of fosfaat- groepen , of vormen tezamen een cyclische beschermde diolgroep.

Niet-toxische derivaten waarin en/of R^ acyloxygroepen zoals acetoxygroepen voorstellen kunnen zowel als tussenprodukt als ook ^ als werkzame verbindingen fungeren.

In het algemeen zijn werkzame verbindingen volgens de uitvinding cef-3-em verbindingen met formule 1 waarin

V

E|, R 2 en Rj waterstofatomen voorstellen , Z S voorstelt en R, en Re die gelijk of verschillend kunnen zijn , hydroxy- of 20 ^ y C.| -C^-acyloxygroepen zoals acetoxygroepen voorstellen.

Belangrijke werkzame verbindingen volgens de uitvinding hebben de formule 1a, waarin R^a een hydroxy- of acetoxygroep is,

Re een hydroxy- of acetoxygroep is , 25 . , 2 en de niet-toxische zouten , solvaten, hydraten en metabolisch labiele esters daarvan.

Een bijzondere voorkeursverbinding volgens de uitvinding is: (6R, 7R,2'Z,S)-7-/2-(2-aminothiazol-4-yl)-2- /"(carboxy) (3,4-dihydroxyfenyl)methoxyimino_/aceetamidq7cef-3-em- 30 · 4-carbonzuur, en de niet-toxische zouten, solvaten, hydraten en metabolisch labiele esters daarvan.

Gevonden is , dat (6R,7R,2’Z,S)-7-£2-(2- aminothiazol-4-yl)-2-£tcarboxy)(3,4-dihydroxyfenyl)methoxyiminq7- aceetamido_/cef-3-em-4-carbonzuur op voordelige en reproduceerbare wijze met een hoge zuiverheidsgraad in kristallijne vorm kan worden bereid en gewonnen, en dit vormt een verder aspekt van de uitvinding. In het bijzonder is kristallijn gehydrateerd (óR^R^1- Z,S)-7-^2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-/f(carboxy) (3,4-dihydroxyfenyl)- 870 2:,;· - 8 - methoxyiminoj/-aceetamidoJcef-3-em-4-carbonzuur bereid en gewonnen. Deze nieuwe stof is niet alleen uitstekend wat kristalliniteit en grote zuiverheid betreft , maar wordt ook in grote opbrengst verkregen en heeft een grote stabiliteit bij opslag zelfs bij 5 een hoge temperatuur gedurende lange perioden. Wegens deze eigenschappen is de kristallijne stof bijzonder waardevol voor farmaceutisch gebruik.

Het bovengenoemde gehydrateerde kristallijne materiaal kan gekarakteriseerd worden door het infrarood-10 spectrum en/of door het röntgendiffractiepatroon van het poeder. IR-spectrum (Nujol) V 3700-2100 (breeds 1760, 1720, 1660, 1555, 1520, 1350, 1300 max 1290, 1240, 1215, 1170, 1155, 1120, 1030, 1000, 920, 860, en 755 cm“1.

15 Röntgendiffractiepatroon (gegeven als d-afstanden in AngstrÖm- eenheden en procentuele intensiteiten I).

12,5 (21); 9,97 (37); 9,51 (22); 6,79(13); 6,33 (35); 5,29 (10); 4,76 (30); 4,63 (100); 4,39 (54); 4,32 (5); 4,18 (15); 4,09 (31);3,91 (24); 3,78 (69); 3,69 (17); 3,61 (9); 3,52 (12); 3,48 (21); 3,42 (6); 20 3,33 (37); 3,15 (36); 3,07 (22); 3,02 (4); 2,96 (36); 2,85 (9); 2,78 (3); 2,75 (3); 2,65 (11); 2,59 (49); 2,50 (6); 2,44 (9); 2,38 (6); 2,31 (3); 2,27 (4); 2,20 (5); 2,16 (9); 2,10 (10); 2,05 (4);2,01 (9).

Verbindingen volgens de uitvinding oefenen 25 een breedspectrum antibiotische werking uit tegen zowel Gram- positieve als Gram-negatieve organismen, met inbegrip van vele f1-lactamase producerende stammen. De verbindingen hebben tevens een grote stabiliteit t.o.v. |>-lactamases die door een verscheidenheid aan Gram-negatieve en Gram-positieve organismen geproduceerd worden.

30 Gebleken is dat verbindingen volgens de uitvinding een krachtige werking uitoefenen tegen stammen (met inbegrip van penicillinase vormende stammen) van Gram-positieve bacteriën zoals Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis en Streptococcus-soorten.Dit is gekoppeld aan een uitstekende 35 werking tegen Pseudomonas-soorten.en ook aan een sterke werking tegen verschillende leden van de Enterobacteriaceae (bijv. stammen van Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Enterobacter cloacae, 8702295 « - 9 -

Serratia mareescens, Proteus mirabilis en indool-positieve Proteus-organismen zoals Proteus vulgaris, Proteus morganii en Providence-soorten), en stammen van Haemophilus influenzae en Acinetobacter calcoaceticus. Deze combinatie van een sterke werking tegen 5 Gram-positieve organismen met een sterke werking tegen Gram-negatieve organismen, in het bijzonder tegen Pseudomonas, van de verbindingen volgens de uitvinding is ongebruikelijk en bijzonder voordelig.

Gebleken is dat de hierin beschreven IQ cefalosporinederivaten in vivo een wenselijke lange serumeliminatie halveringstijd hebben.

Verbindingen volgens de uitvinding kunnen toegepast worden voor het behandelen van een verscheidenheid aan ziekten of aandoeningen veroorzaakt door pathogene bacteriën 15 bij mensen en dieren, zoals infecties van de ademhalingswegen en infecties van de urinewegen.

De antibiotisch werkzame verbindingen volgens de uitvinding kunnen op elke geschikte wijze voor toedie-ningsdoeleinden worden verwerkt, in analogie met andere anti-2q biotica, en de uitvinding omvat daardoor eveneens farmaceutische preparaten die één of een aantal antibiotisch werkzame verbindingen volgens de uitvinding, geschikt voor toepassing bij de humane of veterinaire geneeskunde, bevatten. Dergelijke preparaten kunnen worden aangeboden voor een gebruikelijke toepassing , 25 met behulp van eventueel nodige farmaceutische dragers of excipienten.

De antibiotisch werkzame verbindingen volgens de uitvinding kunnen worden verwerkt voor injektiedoelein-den,en in een eenheidsdoseringsvorm, in ampullen of in houders met een veelvoudige dosis, indien nodig met een toegevoegd ver-30 duurzamingsmiddel, worden aangeboden. De preparaten kunnen eveneens suspensies, oplossingen of emulsies in olieachtige of waterige dragers zijn , en kunnen verwerkingsmiddelen zoals suspendeer-middelen, stabilisatiemiddelen en/of dispergeermiddelen, bevatten.

Het is ook mogelijk dat het aktieve bestanddeel zich in een 35 poedervorm voor verwerking met een geschikte drager , bijvoorbeeld steriel, pyrogeen-vrij water, voor de toepassing, bevindt.

Desgewenst kunnen dergelijke poederachtige preparaten een geschikte, niet-toxische base bevatten, teneinde de 870229a - 10 - oplosbaarheid in water van het aktieve bestanddeel te verbeteren en/of te verzekeren dat indien het poeder met water wordt verwerkt, de pH van het verkregen, waterige preparaat fysiologisch aanvaardbaar is . Het is ook mogelijk dat de base in het water 5 aanwezig is waarmee het poeder wordt verwerkt. De base kan bij voorbeeld een anorganische base zoals natriumcarbonaat, natriumbicarbonaat of natriumacetaat, of een organische base, zoals lysine of lysineacetaat, zijn.

Het preparaat kan ook worden aangeboden 10 in een vorm die geschikt is voor absorptie door het maag-darm- stelsel, bijvoorbeeld tabletten, capsules, siropen of suspensies voor orale toediening en zetpillen.

Preparaten voor veterinair gebruik kunnen bijvoorbeeld worden verwerkt tot preparaten bestemd voor de 15 borst, in langwerkende of snel afgevende bases.

De preparaten kunnen van 0,1 % af, bijvoorbeeld 0,1-99% , aktief materiaal bevatten, afhankelijk van de wijze van toediening. Wanneer de preparaten uit eenheids-doseringen bestaan , zal elke eenheid bij voorkeur 100-3000 mg 20 van het aktieve bestanddeel bevatten, bijvoorbeeld 200-2000 mg.

De dagelijkse dosering voor het behandelen van volwassen mensen zal bij voorkeur variëren van 200-12000 mg , bijvoorbeeld 1000-9000 mg, per dag,afhankelijk onder andere van de aard van de infectie en de wijze en de frequentie van het toedienen. In het algemeen zal 25 intraveneuze of intramusculaire toediening toegepast worden, bij voorbeeld met 400 tot 4000 mg per dag van het aktieve bestanddeel bij de behandeling van volwassen mensen. Het zal duidelijk zijn, dat onder sommige omstandigheden, bijvoorbeeld bij de behandeling van pasgeborenen, kleinere eenheidsdoseringen en dagelijkse 30 doses gewenst kunnen zijn.

De antibiotisch werkzame verbindingen volgens de uitvinding kunnen gecombineerd met andere therapeutische middelen, zoals antibiotica, bijvoorbeeld penicillinen, cefalosporinen of andere (Vlactamverbindingen , worden toegediend.

35 De verbindingen volgens de uitvinding kunnen volgens een aantal hieronder besproken werkwijzen bereid 1702295 - 11 - worden.

Zo verschaft de uitvinding een werkwijze voor de bereiding van een antibiotisch werkzame verbinding met de algemene formule T zoals hierboven gedefinieerd of een niet-5 toxisch zout, solvaat of hydraat daarvan, door acylering van een verbinding met de formule 2, waarin , Z en de stippellijn de voor de formule 1 gedefinieerde betekenis hebben, of een zout, bijvoorbeeld een zuuradditiezout , gevormd met bijvoorbeeld een anorganisch zuur zoals zoutzuur, broomwaterstofzuur, 10 zwavelzuur, salpeterzuur of fosforzuur of een organisch zuur zoals methaansulfonzuur of tolueen-p-sulfonzuur, of een 7-N-silyl-derivaat daarvan, met een zuur met formule 3 , waarin R2 , R^, R^ en de hierboven gedefinieerde betekenis hebben, of een zout daarvan, of met een acyleringsmiddel dat daarmee overeenkomt , 15 waarna, telkens indien het nodig en/of wenselijk is , elk van de volgende reakties , in elke geschikte volgorde, worden uitgevoerd: 2 i) omzetting van een Δ -isomeer in .3 .

een gewenst Δ -isomeer,

ii) reductie van een verbinding waarin Z

20 S-*0 is tot een verbinding waarin Z S is, iii) omzetting van een carboxylgroep in een niet-toxische metabolisch labiele esterfunctie, iv) vorming van een niet-toxisch zout of solvaat, 25 v) verwijdering van eventueel aanwezige carboxylgroep blokkerende en/of N-beschermende groepen, en vi) verwijdering van eventueel aanwezige hydroxygroep blokkerende groepen.

De bovenstaande reakties i) tot vi) kun-50 nen op gebruikelijke wijze uitgevoerd worden.

Bij de acylering is de uitgangsstof met formule 2 bij voorkeur een verbinding waarin Z S is en de stippellijn een cef-3-em-verbinding voorstelt.

Onder acyleringsmiddelen die bij de 35 bereiding van verbindingen met formule 1 kunnen worden toegepast, vallen zuurhalogeniden, in het bijzonder zuurchloriden of -bromiden. Dergelijke acyleringsmiddelen kunnen worden bereid door reaktie 8702295 - 12 - van een zuur met formule 3 of een zout daarvan, met een halogenerings-middel, bijvoorbeeld fosforoxychloride, thionylchloride of oxalyl-chloride.

Acyleringen onder toepassing van zuurhaloge-5 niden kunnen worden uitgevoerd in waterige en niet-waterige reaktie-media, geschikt bij temperaturen van -50 tot +50°C , bij voorkeur bij een temperatuur tussen -40 en +30°C , desgewenst in aanwezigheid van een zuurbindend middel. Ondergeschikte reaktiemedia vallen waterige ketonen, zoals waterig aceton , waterige alkoholen, zoals 10 waterige ethanol, esters zoals ethylacetaat, halogeenkoolwaterstoffen zoals methyleenchloride , amiden zoals dimethylaceetamide, nitrillen zoals acetonitril , of mengsels van twee of meer van dergelijke oplosmiddelen. Geschikte zuurbindende middelen zijn bijvoorbeeld tertiaire aminen (bijvoorbeeld triethylamine of dimethyl-15 aniline), anorganische basen( bijvoorbeeld calciumcarbonaat of natriumbicarbonaat) en oxiranen, zoals lage 1,2-alkyleenoxyden (bijv. ethyleenoxyde of propyleenoxyde) die het bij de acylerings-reaktie vrijgekomen waterstofhalogenide binden.

Zuren met formule 3 kunnen zelf als acy-20 leringsmiddelen bij de bereiding van verbindingen met formule 1 worden toegepast. Het is wenselijk acyleringen onder toepassing van zuren met formule 3 uit te voeren in aanwezigheid van een condensatiemiddel, bijvoorbeeld een carbodiimide zoals N,N'-dicyclohexylcarbodiimide of N-ethyl-N'-Y-dimethylaminopropyl-25 carbodiimide, een carbonylverbinding zoals carbonyldiimidazool, of een isoxazoliumzout zoals N-ethyl-5-fenylisoxazoliumperchloraat, of N-ethoxycarbony1-2-ethoxy-1,2-dihydrochinoline.

De acylering kan eveneens geschieden met andere amidevormende derivaten van zuren met formule 3 , zoals 30 bijvoorbeeld een geaktiveerde ester, een symmetrisch anhydride of een gemengd anhydride, bijvoorbeeld gevormd met pivalinezuur of met een halogeenformiaat, zoals een laag alkylhalogeenformiaat.

Eveneens kunnen gemengde anhydriden met fosforzuren, bijvoorbeeld fosforzuur of fosforig^zuur, zwavelzuur of alifatische of aromatische 35 sulfonzuren, bijvoorbeeld tolueen-p-sulfonzuur, worden gevormd.

Een geaktiveerde ester kan geschikt in situ worden gevormd onder 8702295 - 13 - toepassing van bijvoorbeeld 1-hydroxybenzotriazool in aanwezigheid van een condensatiemiddel , zoals hiervoor aangegeven. Ook kan de geaktiveerde ester van tevoren worden gevormd.

Het is wenselijk acyleringsreakties onder toepassing van de vrije zuren of hun hiervoor genoemde amidevormende derivaten in een watervrij reaktiemilieu uit te voeren, zoals methyleenchloride, tetrahydrofuran, dimethylformamide, acetonitril , dimethylaceetamide of dimethylsulfoxyde.

Een andere aktiveringsmethode is bijvoor- 10 beeld de reaktie van een zuur met formule 3 met een oplossing of suspensie die van tevoren gevormd is door een carbonylhaloge-nide , in het bijzonder oxalylchloride of fosgeen , of een fosforylhalogenide, zoals fosforoxychloride , toe te voegen aan een oplosmiddel zoals een halogeenkoolwaterstof, bijvoorbeeld methyleenchloride, dat een (laag acyl)tert.amide zoals N,N-dimethylformamide bevat . Men kan de geaktiveerde vorm van het zuur met formule 3 daarna laten reageren met een 7-aminoverbinding met formule 2 in een geschikt oplosmiddel of mengsel van oplosmiddelen, bijvoorbeeld halogeenkoolwaterstoffen zoals dichloor- 20 methaan, alkoholen zoals een alkanol , bijvoorbeeld ethanol of technische gedenatureerde alkohol, esters zoals ethylacetaat, ethers zoals tetrahydrofuran of dioxan , ketonen zoals aceton, amiden zoals dimethylaceetamide, acetonitril, water en mengsels daarvan.

De acyleringsreaktie kan geschikt worden 25 uitgevoerd bij een temperatuur tussen -50 tot +50°C , bij voorkeur tussen -40 en +30°C, desgewenst in aanwezigheid van een zuur-bindend middel, bijvoorbeeld zoals hiervoor vermeld, bijvoorbeeld dimethylaniline, triethylamine of natriumbicarbonaat.

Desgewenst kunnen de hiervoor beschreven 30 . . .

acyleringsreakties worden üitgevoerd m aanwezigheid van een katalysator zoals 4-dimethylaminopyridine.

De zuren met formule 3 en acylerings- middelen die daarmee overeenkomen kunnen, indien het wenselijk en geschikt is, in de vorm van hun zuuradditiezouten worden 35 bereid en toegepast. Zo kunnen bijvoorbeeld zuurchloriden geschikt als hun hydrochloridezouten en zuurbromiden als hun hydrobromide-zouten worden toegepast.

Voor toepassing als uitgangsstoffen voor 8702295 - 14 - de bereiding van verbindingen met de algemene formule 1 volgens de uitvinding worden verbindingen met de algemene formule 3 en de amidévormende derivaten daarvan,zoals daarmee overeenkomende zuurhalogeniden en -anhydriden , bij voorkeur gebruikt in hun -* syn-isomere vorm of in de vorm van mengsels van de syn-isomeren en de overeenkomstige anti-isomeren die tenminste 90% van het syn-isomeer bevatten.

Zuren met formule 3 en hun derivaten kunnen bereid worden door verethering van een verbinding met formule 4, waarin Rg de hierboven gedefinieerde betekenis heeft,en Rg een waterstofatoom of een carboxylgroep blokkerende groep voorstelt, of een zout daarvan, door selectieve reaktie met een verbinding met de algemene formule 5, waarin T een chloor-, broom- of joodatoom, een sulfaatgroep,of een sulfonaatgroep zoals de tosylaatgroep is, gevolgd door verwijdering van een eventueel aanwezige carboxylgroep blokkerende groep Rg.

De veretheringsreaktie wordt doelmatig uitgevoerd in aanwezigheid van een base , bijvoorbeeld kaliumcarbonaat of natriumhydride,en bij voorkeur in een organisch oplosmiddel, 20 bijvoorbeeld dimethylsulfoxyde, een cyclische ether zoals tetra-hydrofuran of dioxan of een Ν,Ν-digesubstitueerd amide zoals di-methylformamide.

De isomeren kunnen vóór of na een dergelijke verethering gescheiden worden. Onder de boven beschreven 25 omstandigheden wordt de configuratie van de oxyiminogroep nagenoeg niet door de veretheringsreaktie gewijzigd.

Wanneer de verbinding met formule 4 in de vorm van een vrij zuur of een zout met een base toegepast wordt, wordt de verethering in het algemeen uitgevoerd in aanwezig-30 heid van een sterke base, bijvoorbeeld kalium-t-butanolaat, waarbij voldoende base wordt toegevoegd voor het vormen van een dianion. Bovendien moet de reaktie worden uitgevoerd in aanwezigheid van een base,als een zuuradditiezout van een verbinding met formule 4 wordt gebruikt, waarbij de hoeveelheid base voldoen-33 de is om het betreffende zuur snel te neutraliseren.

Zuren met formule 3 kunnen ook worden bereid door reaktie van een verbinding met formule 6, waarin Rg en Rg de hierboven gedefinieerde betekenis hebben, met een verbinding 8702295 ? - 15 - met formule 7, waarin , R^ en de hierboven gedefinieerde betekenis hebben, gevolgd door verwijdering van een eventueel aanwezige carboxylgroep blokkerende groep Rg, en indien nodig scheiding van syn- en anti-isomeren.

5 De reaktie wordt doelmatig uitgevoerd in een oplosmiddel zoals dimethylformamide, dimethylaceetamide, dimethylsulfoxyde, tetrahydrofuran of methanol, alle eventueel in aanwezigheid van water, bij een temperatuur van -20 tot +50°C, bij voorkeur 0 tot 30°C.

10 De zuren met formule 3 kunnen volgens gebruikelijke methoden, bijvoorbeeld zoals hierboven beschreven, worden omgezet in de overeenkomstige zuurhalogeniden en -anhydriden en zuuradditiezouten.

De tussenprodukten met formule 7 kunnen 15 worden bereid door behandeling van verbindingen met formule 8, waarin Y een imidogroep, bijvoorbeeld een ftaalimido-, suecin-imido- of maleimidogroep is , met een hydrazinereagens zoals hydrazinehydraat of een alkylhydrazine zoals methylhydrazine. De reaktie wordt in het algemeen uitgevoerd in een inert oplosmiddel, 20 bijvoorbeeld een halogeenkoolwaterstof zoals methyleenchloride bij een lage temperatuur, bijvoorbeeld -70 tot +30°C.

De tussenprodukten met formule 8 kunnen worden bereid door alkylering met verbindingen met formule 9, waarin Hal een halogeenatoom zoals een chloor- of broomatoom 25 is, van een geschikt N-hydroxyimide, bijvoorbeeld N-hydroxyftaal- imide, N-hydroxysuccinimide of N-hydroxymaleimide, in aanwezigheid van een base zoals triethylamine in een oplosmiddel zoals acetonitril bij bijvoorbeeld -10 tot +30°C.

De tussenprodukten met formule 9 zijn 30 ofwel bekende verbindingen of kunnen worden bereid onder toepassing van methoden die analoog zijn aan die welke voor de bereiding van de bekende verbindingen gebruikt worden.

De verbindingen met formule 2 die als uitgangsstoffen bij de acylering gebruikt worden, zijn bekend 35 uit de literatuur, bijvoorbeeld uit de Britse octrooiaanvrage 2.159.817, of kunnen volgens informatie uit de literatuur worden bereid.

2 .

Een Δ -cefalospormeesterderivaat verkregen volgens de werkwijze van de uitvinding kan worden omgezet in e 7 0 2 2 0 o ft 3 - 16 - het overeenkomstige, gewenste Δ -derivaat door bijvoorbeeld be-2 bandeling van de A -ester met een base, zoals pyridine of triethyl-amine.

Een cef-2-em reaktieprodukt kan eveneens 5 worden geoxydeerd tot het overeenkomstige cef-3-em-1-oxyde, bijvoorbeeld door reaktie met een perzuur, bijvoorbeeld perazijn-zuur of m-chloorperbenzoezuur, en bet verkregen sulfoxyde kan vervolgens , zoals hierna zal worden beschreven, worden gereduceerd tot het overeenkomstige gewenste cef-3-em-sulfide.

Indien een verbinding wordt verkregen •s waarin Z S -►O is , dan kan deze worden omgezet in het overeenkomstige sulfide door bijvoorbeeld reductie van het overeenkomstige acyloxysulfonium- of alkoxysulfoniumzout, in situ bereid door reaktie met bijvoorbeeld acetylchloride in het geval van een acetoxysulfonium-1-* zout, waarbij de reductie bijvoorbeeld wordt uitgevoerd met natriumdithioniet of jodideionen , zoals in een oplossing van kaliumjodide in een oplosmiddel zoals azijnzuur, aceton, tetra-hydrofuran, dioxan, dimethylformamide of dimethylaceetamide. De reaktie kan worden uitgevoerd bij een temperatuur van -20 tot +50°C.

90 · ·

Bij de boven beschreven oxydaties en reducties zijn de groepen R^ en in de uitgangsstoffen bij voorkeur geen hydroxygroepen.

Metabolisch labiele esterderivaten van de carboxylgroepen in de verbindingen met formule 1 kunnen worden 25 verkregen door reaktie van een verbinding met formule 1 of een zout of beschermd derivaat daarvan met het geschikte veresterende middel, zoals een acyloxyalkylhalogenide of alkoxycarbonyloxyalkyl-halogenide (bijvoorbeeld jodide) geschikt in een inert organisch oplosmiddel, zoals dimethylformamide of aceton, desgewenst 30 gevolgd door verwijdering van eventuele beschermende groepen.

Basezouten van de verbindingen met formule 1 kunnen worden verkregen door reaktie van een zuur met formule 1 met een geschikte base. Zo kunnen bijvoorbeeld de natrium- of kaliumzouten worden verkregen onder toepassing van het respectie-35 velijke acetaat-, 2-ethylhexanoaat- of waterstofcarbonaatzout.

Zuuradditiezouten kunnen worden bereid door reaktie van een verbinding met formule 1 of een metabolisch labiel esterderivaat daarvan met het geschikte zuur.

8702295 - 17 -

A

Indien een verbinding met formule 1 wordt verkregen als een mengsel van isomeren, kan het syn-isomeer bijvoorbeeld worden verkregen door gebruikelijke methoden zoals kristallisatie of chromatografie.

5 Het zal duidelijk zijn dat in enkele van de hiervoor beschreven omzettingen het noodzakelijk kan zijn eventuele gevoelige groepen in het molecuul van de betreffende verbinding te beschermen, teneinde ongewenste nevenreakties te vermijden. Voorbeelden van geschikte beschermende groepen worden 10 gegeven in "Protective Groups in Organic Synthesis" door Theodora W.Greene (John Wiley and Sons, 1981).

Het kan bijvoorbeeld tijdens elk van de hiervoor vermelde reakties nodig zijn de M^-groep van de amino-thiazolylrest te beschermen , bijvoorbeeld door trityleren , 15 acyleren (bijv. chlooracetyleren of formyleren), protoneren of volgens een andere gebruikelijke methode. De beschermende groep kan daarna op elke geschikte wijze die geen afbraak van de gewenste verbinding teweeg brengt , worden verwijderd, bijvoorbeeld in het geval van een tritylgroep door toepassing van een eventueel 20 gehalogeneerd carbonzuur, bijvoorbeeld azijnzuur , mierezuur, chloorazijnzuur of trifluorazijnzuur of onder gebruikmaking van een anorganisch zuur, bijvoorbeeld zoutzuur of mengsels van dergelijke zuren, bij voorkeur in aanwezigheid van een protisch oplosmiddel zoals water, of in het geval van een chlooracetylgroepj 25 door behandeling met thioureum.

Evenzo kan het nodig zijn de hydroxy-groepen van de catecholrest tijdens ééivan de bovengenoemde reakties te beschermen .Hydroxygroep beschermende groepen die onder milde omstandigheden verwijderd kunnen worden, zullen in het algemeen 30 geschikt zijn, bijvoorbeeld acetyl- of silylgroepen. Dergelijke groepen kunnen op gebruikelijke wijze ingevoerd worden, en desgewenst zodanig verwijderd worden dat het produkt niet afgebroken wordt. Zo kan in het geval van een acetylgroep de groep verwijderd worden door solvolyse met een waterig oplosmiddel zoals waterige 35 methanol of waterige ethanol in aanwezigheid van een base zoals natriumbicarbonaat , ammoniumhydroxyde, ammoniumcarbonaat of ammonxumcarbamaat. Een trimethylsilylgroep kan bijvoorbeeld afgesplitst 8702295 s - 18 - worden door behandeling met een verdund waterig zuur.

Het is wenselijk dat groepen die carboxyl-groepen blokkeren en die toegepast worden bij de bereiding van verbindingen met formule 1 of bij de bereiding van noodzakelijke 5 uitgangsstoffen , groepen zijn die gemakkelijk bij een geschikte stap van de reaktievolgorde kunnen worden afgesplitst , geschikt in de laatste stap. Het kan soms echter geschikt zijn niet-toxische , metabolisch labiele , carboxylgroep blokkerende groepen toe te passen, zoals acyloxymethyl- of -ethylgroepen (bijvoorbeeld 10 acetoxymethyl of -ethyl of pivaloyloxymethyl) en deze in het eindprodukt te behouden teneinde een geschikt esterderivaat van een verbinding met formule 1 te geven.

Geschikte groepen die de carboxylgroep blokkeren zijn bekend uit de stand der techniek; een lijst van 15 representatieve geblokkeerde carboxylgroepen is opgenomen in hét Britse octrooischrift 1 399 086. Onder aanbevolen geblokkeerde carboxylgroepen vallen aryl (lage alkoxy)carbonylgroepen zoals p-methoxybenzyloxycarbonyl, p-nitrobenzyloxycarbonyl en difenyl-methoxycarbonyl ;lage alkoxycarbonylgroepen zoals t-butoxycarbonylf 20 en lage halogeenalkoxycarbonylgroepen zoals 2,2,2-trichloorethoxy-carbonyl. De carboxylgroep blokkerende groep kan daarna volgens elk van de in de literatuur beschreven geschikte methoden worden verwijderd; zo kan bijvoorbeeld een door zuur gekatalyseerde hydrolyse cf reductie vaakwarcfentoegspast^venals een door enzymen gekatalyseerde 25 hydrolyse.

Indien een bepaald enantiomeer van een verbinding met formule 1 vereist wordt, moeten uitgangsstoffen met de gewenste stereochemische configuratie bij de bovengenoemde werkwijzen worden gebruikt. Dergelijke tussenprodukten kunnen 30 worden verkregen met gebruikelijke scheidingsmethoden. Zo kunnen bijvoorbeeld enantiomere tussenprodukten met formule 8, waarin R.2 een waterstofatoom is, en waarin het chirale koolstof atoom de (R)- of (S)-configuratie heeft, verkregen worden door reaktie van een mengsel van enantiomeren met een scheidingsmiddel zoals 35 een chirale organische base C-bijvoorbeeld R-(+)-^ -methyl- benzylamine/ in een oplosmiddel zoals aceton of acetonitril onder 87 0 2 ?9 5 0 - 19 - vorming van de overeenkomstige diastereomere zouten. De zouten kunnen daarna met bekende methoden worden gescheiden, en het gewenste chirale tussenprodukt met formule 8 kan daarna worden verkregen door behandeling met een waterig zuur zoals zoutzuur bij 5 bijvoorbeeld kamertemperatuur.

Het kristallijne (6R,7R,2'Z,S)-7-/£-(2-aminothiazol-4-y1)-2- /(carboxy)(3,4-dihydroxyfeny1)met hoxy imino/-aceetamido7cef-3-em-4-carbonzuur als het hydraat kan geschikt worden bereid uit een waterige oplossing van een zout van het 10 bovengenoemde cefalosporine of een solvaat daarvan.

De uitvinding verschaft derhalve voorts een werkwijze voor het bereiden van kristallijn gehydrateerd (6R, 7R,2 'Z, S)-7-/2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-/T(carboxy) (3} 4-dihydroxy-fenyl)methoxyimino7aceetamido/cef-3-em-4-carbonzuur door 15 kristallisatie van het zuur uit een waterige oplossing, bij voorkeur een waterige oplossing van een zuuradditiezout of basezout daarvan of een solvaat van die zouten, onder vorming van het kristallijne gehydrateerde produkt, De kristallisatie wordt normaliter gevolgd door winning en drogen van het produkt.

20 Geschikte basezouten zijn bijvoorbeeld anorganische basezouten zoals alkalimetaalzouten en aardalkalimetaal-zouten en organische basezouten zoals boven beschreven. Een bijzonder geschikt basezout is het natriumzout.

De als uitgangsstof gebruikte zuuradditie-25 zouten kunnen worden gevormd met een organisch of anorganisch zuur. Organische zuren die toegepast kunnen worden,zijn bijvoorbeeld carbonzuren en sulfonzuren, bijvoorbeeld mierezuur, tri-fluorazijnzuur en methaansulfonzuur. Anorganische zuren die toegepast kunnen worden,zijn bijvoorbeeld zoutzuur, broomwaterstof-30 zuur of zwavelzuur.

Volgens nog een aspekt van de uitvinding kan het gewenste materiaal worden gekristalliseerd uit een oplossing van een zuur- of basezout van (6R,7R,2'Z,S)-7-/2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-/(carboxy)(3,4-dihydroxyfenyl)methoxyiminq7-35 aceetamido7cef-3-em-4-carbonzuur of een solvaat daarvan , in een waterig medium door de pH in te stellen op 1,0 tot 4,0.

87 0 2 ?.S;j i - 20 -

Een hydraat kan bijvoorbeeld uit een waterige oplossing van een basezout worden gekristalliseerd door toevoeging van een organisch of anorganisch zuur tot een pH in het bovengenoemde trajekt. Geschikte zuren die toegepast kun-5 nen worden bij de kristallisatie zijn bijvoorbeeld zoutzuur en zwavelzuur. Ook kan het gewenste hydraat worden gekristalliseerd uit een waterige oplossing van een zuuradditiezout door toevoeging van een organischs of anorganische base tcteen geschikte pH in het bovengenoemde trajekt. Basen die toegepast kunnen worden,zijn ^ bijvoorbeeld alkalimetaal- of aardalkalimetaalhydroxyden, -carbonaten, -bicarbonaten of -acetaat, bijvoorbeeld natriumhydroxyde, natrium-carbonaat, natriumbicarbonaat of natriumacetaat.

Het waterige medium kan een met water mengbaar organisch oplosmiddel bevatten zoals een alkohol , bijvoor-^ beeld ethanol of isopropanol,een ether, bijvoorbeeld tetrahydro-furan of dioxan, een amide, bijvoorbeeld Ν,Ν-dimethylformamide of Ν,Ν-dimethylaceetamide, een keton, bijvoorbeeld aceton, of een nitril , bijvoorbeeld acetonitril.

Het is gewenst de kristallisatie bij omgevingstemperatuur, bijvoorbeeld van 0 tot 30°C, bij voorkeur van 15 tot 25°C uit te voeren. Het kristallijne produkt kan op gebruikelijke wijze door filtratie worden verkregen en gewassen en gedroogd , bijvoorbeeld door drogen aan de lucht of door zorgvuldig drogen onder verlaagde druk.

25 In de volgende voorbeelden zijn Nujol en

Sorbsil handelsmerken. Sorbsil U30 is silicagel , vervaardigd door Joseph Crosfield and Son uit Warrington, Cheshire, Engeland. Tenzij anders vermeld wordt, werden de NMR-spectra in DMSO-dg opgenomen. De röntgendiffractiemetingen werden gedaan op een 50 Siemens D-500 diffractometer onder toepassing van CuK^-straling.

De intensiteit van de röntgenstraling werd gemeten in stapjes van 0,02° van 2Θ gedurende 5 sec. , met een scintillatieteller, tussen waarden van 2 en 90°. De resultaten werden door een computer verwerkt.

35 6702295 % - 21 -

Tussenprodukt 1 2-(3,4-Dioxycarbonylfeny1)-2-(ftalimidooxy)- azijnzuur

Een oplossing van N-hydroxyftalimide ^ (14,6 g) en triethylamine ( 25 ml) in acetonitril ( 50 ml) werd onder roeren bij -2°C in de loop van 20 min toegevoegd aan een suspensie van 2-(3,4-dioxycarbonylfenyl)-2-chloorazijnzuur ( 20,5 g) in acetonitril .Na nog een uur bij ongeveer 0°C werd een oplossing van geconcentreerd zoutzuur (7,5 ml) in water (100 ml) snel ^ toegevoegd. Water ( 100 ml) werd langzaam toegevoegd en de aanvankelijk gevormde olie kristalliseerde, geholpen door enting.

Het mengsel werd gefiltreerd en de filterkoek werd uitgewassen met water en ethylacetaat:petroleumether (kpt. 40-60°C) (1:2) en gedroogd onder verkrijging van de titelverbinding ( 30 g) , smpt.

15 183 tot 185°C; £ 5,84 (s, OCH), 7,53 (s, catechol 5-H en 6-H), 7,69 (s, catechol 2-H), en 7,85 (s-ftalimido-protonen).

Tussenprodukt 2 20 (a) (R)-(+)-&-Methylbenzylaminezout van (S)—2—(3,4-dioxycarbonylfenyl)-2-(ftalimidooxy)azijnzuur

Een oplossing van R-(+)-0(-methylbenzyl- amine ( 16,3 ml) in aceton ( 100 ml) werd bij 21°C onder stikstof snel toegevoegd aan een magnetisch geroerde oplossing van Tussen-25 produkt 1 ( 45 g) in aceton ( 1,25 1). Na 30 min werd het mengsel gefiltreerd, waarna het neerslag grondig werd uitgewassen met aceton onder verkrijging van de titelverbinding (16,57 g) ; + 242° (c 1,07, EtOH); 6 1,46 (d, J 7Hz, CH,CH), 5,48 (s,0CH), 7,3 tot 7,6 (m, aromatische

30 J

protonen) en 7,80 (s, ftalimidoprotonen) (b) Difenylmethyl-(S)-2-(3,4-dioxycarbonyl- fenyl)-2-(ftalimidooxy)acetaat 2M Zoutzuur ( 10 ml) werd onder stikstof 35 bij 21°C en onder roeren toegevoegd aan een suspensie van Tussenprodukt 2 (a) ( 5,0 g) in water ( 30 ml) . Na 2 min werd een oplossing van difenyldiazomethaan met één equivalent in methyleen- 870 2 295 - 22 - chloride ( 11 ml) toegevoegd. Na krachtig roeren gedurende 35 min werd de organische : laag afgescheiden en onder roeren toegedruppeld aan ethanol (150 ml). Het mengsel werd 10 min bij 21°C geroerd en vervolgens 1 uur bij 4°C bewaard. De kristallen werden door 5 filtratie verzameld, met ethanol uitgewassen en gedroogd onder verkrijging van de titelverbinding ( 3,59 g),smpt. 135-135,5°C; + 112,6° (c, 1,18, ethylacetaat).

Tussenprodukt 3 10 (S)-(3,4-Dihydroxyfeny1) (difenylmethoxy- carbony1)methoxyamine

Tussenprodukt 2(b) (5,71 g ) werd bij ongeveer 40°C 4,5 uur geroerd in methanol ( 390 ml) met M zoutzuur (5,5 ml) . De oplossing werd geconcentreerd en met methyleenchloride 15 gemengd. Na 2 maal wassen met water werd de oplossing over magnesiumsulfaat gedroogd en tot een schuim ingedampt. Een oplossing van dit schuim in methyleenchloride (176 ml) werd onder roeren en onder stikstof tot -50°C afgekoeld , waarna hydrazine-hydraat ( 1,5 ml) toegevoegd werd. Men liet het mengsel onder 20 roeren langzaam tot 21°C opwarmen . Na 5,75 uur werd het mengsel gefiltreerd, waarna de filterkoek met methyleenchloride uitgeloogd werd. De gecombineerde filtraten werden met ethylacetaat verdund en met citroenzuuroplossing en zoutoplossing uitgewassen. Na drogen over magnesiumsulfaat en indampen werd de titelverbinding 25 (4,35 g ) als een schuim verkregen; Γ%Ί^λ + 17,8° (c, 1,03, methanol); 6 5,02 (s, OCHCO), 6,68 en 6,81 (m, thiazool H, OCH en catechol protonen ) 7,1 tot 7,4 (m, aromatische protonen) 9,04 (s,0H).

30 Tussenprodukt 4 (Z ,S)-2-(2-Aminothiazol-4~yl)-2-£(3,4-dihydroxyfenyl) (difenylmethoxycarbonyl)methoxyimino7azijnzuur 2-(2-Aminothiazol-4-yl)glyoxylzuur (1,91 g) werd bij 3°C onder roeren in de loop van 3 min toegevoegd aan 35 een oplossing van Tussenprodukt 3 (4,20 g) in N,N-dimethylformamide (22 ml) . Na nog eens 30 min met koeling door ijswater liet men 8702295 i - 23 - de oplossing in de loop van 1,5 uur opwarmen tot 21°C, waarna men deze in 20 min onder roeren toedruppelde aan een ijs-watermengsel (110 g). Het neerslag werd door filtratie verzameld, met water uitgewassen en gedroogd. Het neerslag werd opnieuw gesuspendeerd 5 in methyleenchloride ( 45 ml) , 15 min geroerd en gefiltreerd.

De filterkoek werd met methyleenchloride uitgewassen en gedroogd onder verkrijging van de titelverbinding ( 3,76 g); /oi7D21 +25,4° (c, 1,02 , methanol); b 5,59 (s, OCHCO), 6,6 tot 6,9 (m, thiazool H, OCH en catechol 10 protonen), 7,0 tot 7,5 (m , N^ en fenyl protonen) en 9,06 en 9,13 (2s,0H).

Tussenprodukt 5 (Z,S)-2-(2-Formamidothiazol-4-yl)“2-/(3, 15 4-dihydroxyfenyl)(difenylmethoxycarbonyl)methoxyimino7azijnzuur 2-(2-Formamidothiazol-4-yl)glyoxylzuur (6,96 g) werd bij omgevingstemperatuur onder roeren toegevoegd aan een oplossing van /¾, 4-dihydroxyf enyl) (difenylmethoxycarbonyl)^/-methoxyamine (12,73 g ) in Ν,Ν-dimethylformamide ( 100 ml) . Na 20 1,5 uur werd meer Ν,Ν-dimethylformamide (40 ml) toegevoegd, en na 2,5 uur werd de verkregen oplossing in water ( 700 ml ) uitgegoten. De produkten werden geextraheerd met ethylacetaat ( 3 x 250 ml) . De gecombineerde extracten werden met water ( 2 x250 ml) uitgewassen, over magnesiumsulfaat gedroogd en tot een 25 vaste stof ingedampt. Deze vaste stof werd met ethylacetaat (20 ml) en vervolgens met dichloormethaan (200 ml) behandeld , waarbij een suspensie verkregen werd. Na afkoelen werd de vaste stof door filtratie verzameld, met dichloormethaan uitgewassen en gedroogd onder verkrijging van de titelverbinding ( 11,38 g) , 30 smpt. 125-127°C; CKJjj + 22,2° ( c, 0,99 , methanol).

Voorbeeld I

Difenylmethyl-(6R?7R,2 TZ,S)-7-/2-(2- 35 aminothiazol-4-yl)-2-j£(3,4-dihydroxyfenyl)(difenylmethoxycarbonyl)- methoxyiminqZaceetamidoy cef-3-em-4-carboxylaat.

Het tosylaatzout van difenylmethyl-(6R,7R)- 7-aminocef-3-em-4-carboxylaat ( 1,24 g ) werd omgezet in het vrije 8702295 - 24 - amine door verdeling tussen methyleenchloride en waterige natrium-bicarbonaatoplossing. De organische laag werd met water uitgewassen en over magnesiumsulfaat gedroogd. Door indampen werd een schuim verkregen dat onder roeren werd gemengd met Tussenprodukt 4 (1,0 g) 5 in THF (25 ml) , waarna Ν,Ν'-dicyclohexylcarbodiimide (830 mg) en hydroxybenzotriazool-hydraat (290 mg) werden toegevoegd. Na 16 uur roeren bij 21°C werd het mengsel gefiltreerd, waarna de filterkoek met ethylacetaat uitgeloogd werd . De gecombineerde organische oplossingen werden ingedampt tot een schuim, dat opnieuw 10 werd opgelost in ethylacetaat en gefiltreerd door een kolom Sorbsil U30 (100 g) in ethylacetaat. Door indampen van het geschikte eluaat werd het ruwe produkt verkregen dat opnieuw werd opgelost in chloroform en opgebracht op een kolom Sorbsil U30 (100 g) , gestort met chloroform. De kolom werd met chloroform en daarna met ^ 1% , 2% en 2% methanol in chloroform geelueerd. Door indampen van het geschikte eluaat werd de titelverbinding ( 800 mg) als een schuim verkregen;

Zoc7d2 1 + 36,25° (c, 1,17, DMSO); λ inf1 (EtOH) 230,8 (e]% 303), 290 (e]% 117) en 300,4 nm (e]% 84).

1 cm 1 cm 1cm 20

Voorbeeld II

Trifluorazijnzure zout van (6R,7R,2'Z,S)- 7-/2-(2-Aminothiazol-4-yl)-2-/(carboxy)(3,4-dihydroxyfenyl)methoxy- imino7aceetamido/cef-3-em-4-carbonzuur 25

De verbinding van voorbeeld I (740 mg) werd met anisool ( 1,5 ml) geroerd , waarna trifluorazijnzuur ( 7,5 ml) toegevoegd werd. Na 1 min werd diisopropylether ( 50 ml) toegevoegd.

Het neerslag werd door filtratie verzameld, met diisopropylether uitgewassen en onder vacuum gedroogd onder verkrijging van de ^ titelverbinding ( 450 mg) ; /DC?/1 + 102,8° (c 0,88, DMSO); ^max (pH6 buffer ) 236,8 nm (e!^ 335),^infl 250,0 (e|^ 257),277,4

Am 17 cm 1 cm (E /o 173 ) en 296,0 nm (E A 139).

1 cm 1 cm

Voorbeeld III

Difenylmethyl-(6R,7R,2*Z,S)-7~Z2-(2-formamido-thiazol-4-yl)-2-/!(3,4-dihydroxyfenyl)(difenylmethoxycarbonyl)methoxy-iminoJaceetamido2cef-3-em-4-carboxylaat 8702295 - 25 - i

Tussenprodukt 5 (1,2 g) werd onder roeren en onder stikstof gesuspendeerd in methyleenchloride (20 ml), en Ν,Ν-dimethylaceetamide ( 4 ml) werd toegevoegd. De oplossing werd tot -25°C gekoeld en fosforoxychloride (0,28 ml) werd toege- 5 voegd. Na 1 uur roeren bij -25 tot -20°C werd een oplossing van difenylmethyl-(6R,7R)-7-aminocef-3-em-4-carboxylaat (bereid uit het tosylaatzout ( 1,35 g) door reaktie met natriumbicarbonaat- oplossing ) in methylchloride ( 20 ml ) met N,N-dimethylaniline

(2 ml) toegevoegd. De oplossing had nu een temperatuur van -10°C

10 en werd vervolgens omgeven door ijswater en zo 1,75 uur geroerd.

Het reaktiemengsel werd daarna achtereenvolgens met natriumbicarbo- naatoplossing, verdund zoutzuur en drie maal met water uitgewassen, waarbij de waterlagen telkens met methyleenchloride teruggeextra- heerd werden. De gecombineerde organische lagen werden over 15 magnesiumsulfaat gedroogd en geconcentreerd. Het ruwe produkt in methyleenchloride werd opgebracht op een kolom Sorbsil U30 (50 g) gestort in 40 % ethylacetaat in petroleumether ( kpt. 40-60°c) met 2% azijnzuur . Door indampen van het geschikte eluaat werd de titelverbinding (1,56 g) verkregen; 20 WD21 + 36,2° <c> 1>05 > DMSO); Λ max (EtOH) 269,2 nm (e]% 184) λinf1 232,0 (e!% 285)260,4

Icm 1cm ' (e; 179) en 266,8 nm (El% 183).

Icm Icm

Voorbeeld IV

25 - r

Difenylmethyl-(6R,7R,2,Z,S)-7-/2-(2-amino- thiazol-4-y1)-2-^( 3,4-dihydroxyfenyl)(difenylmethoxycarbonyl)- methoxyimino7aceetamido7cef-3-em-4-carboxylaat

De verbinding van voorbeeld III (1,5 g) werd bij 21°C met methanol ( 15 ml) geroerd, en 60% perchloorzuur 30 ( 1 ml) werd toegevoegd. Na 2,5 uur werd de oplossing verdeeld tussen water en ethylacetaat, waarna natriumbicarbonaatoplossing in overmaat voorzichtig werd toegevoegd. De waterlaag werd met meer ethylacetaat geextraheerd en de gecombineerde organische lagen werden twee maal met zoutoplossing uitgewassen, over magnesiumsulfaat gedroogd en ingedampt onder verkrijging van de titelverbinding (1,34 g) ; Z^2d21 + 36,5° (c 0,96, DMSO); β 7 0 Z i C : - 26 - O (Nujol) 3600 tot 3100 (breed) , 1785, 1730 en 1680 cm-^ .

Ill 3.X

Voorbeeld V

Natriumzout van (6R,7R,2'Z,S)-7-ji-(2- 5 aminothiaz o1-4-y1)-2- /Xcarboxy)(3,4-dihydroxyfeny1)methoxyimino/- aceetamidoj cef-3-em-4-carbonzuur

De verbinding van voorbeeld II (11 g) werd onder roeren bij 21°C opgelost in ethanol (110 ml) en verzadigde natriumacetaatoplossing ( 4,8 ml) werd toegevoegd. Na 10 min werd het mengsel gefiltreerd. De filterkoek werd goed uitgewassen, 4 maal met ethanol en 4 maal met ether, en onder vacuum gedroogd onder verkrijging van de titelverbinding ( 5,45 g).

Nog een opbrengst (2,73 g) werd verkregen door toevoegen van meer verzadigde natriumacetaatoplossing ( 2 ml) aan de moederlogen; 15 WD21 + 185,0° (c 0,78, DMS0); Λ max (pH6 buffer) 234,4 (e]^ 386); "λίηίΐ 250,4 (E276),276,8 a 07 17 cm Ί cm (E 184) en 294,4 nm (E /o 148).

1cm ’ 1 cm

Voorbeeld VI

20 (6R,7R,2lZ,S)-7-Z2-(2-Aminothiazol-4-yl)- 2-/f(carboxy)(3,4-dihydroxyfenyl)methoxyiminq7 aceetamido7cef-3-em- 4-carbonzuur

De verbinding van voorbeeld V (1,0 g) werd met water ( 4 ml) gemengd, en toen een oplossing gevormd was 25 werd natriumacetaat ( 41 mg) toegevoegd. De oplossing werd gefiltreerd en door krassen werd kristallisatie gestart. Het mengsel werd 14,5 uur bij 21°C bewaard, waarna de kristallen door filtratie verzameld werden . Deze kristallen werden met water uitgewassen en onder vacuum bij 21°C gedroogd onder verkrijging van de titelver-30 binding ( 250 mg) .Door toevoegen van 2n zoutzuur ( 0,9 ml)werd verder kristallijn produkt (360 mg) verkregen; A;d21 + 136,27° (c 0,54, DMSO); Λ max 234,4 nm (e!% 408),ληί1 249,6 (e]% 295),277,8 (e]% 192) én .« 1 cm 1 cm 1 cm 295,0 nm (E 156).

Icm 35

Voorbeeld VII

(6R,7R,2'Z,S)-7-/2-(2-Aminothiazol-4-yl)-2- &ï u i29 5 - 27 - /“(carboxy) (3, 4~dihydroxyfenyl)methoxyimino7 aceetamido7cef-3-em-4-carbonzuur, hydrochloride

De verbinding van voorbeeld IV ( 27,4 g) 5 werd onder roeren bij 20°C opgelost in mierezuur ( 110 ml) , waarna 3 equivalenten geconcentreerd zoutzuur ( 8,2 ml) toegevoegd werden. Het mengsel werd nog eens 15 min geroerd , en vervolgens onder roeren bij 20°C in de loop van 6 min toegedruppeld aan diisopropylether (1,1 1), Het neerslag werd door filtratie ver-10 zameld, met diisopropylether ( 500 ml) uitgewassen en onder vacuum gedroogd onder verkrijging van de titelverbinding ( 18,02 g); ^ max (Nujol) 3600-2800 (breed) en en 1780 cm ^; S 3,3-3,7 (m, H-2), 5,05(d, H-6), 5,4(s,CHON),5,8(m,H-7), 6,46(m, H-3) en 9,6 (d,NHC0).

15

Voorbeeld VIII

(6R, 7R, 2’Z,S)-7-^2-(2-Aminothiazol-4-yl)-2-/f(carboxy)(3,4-dihydroxyfeny1)methoxyiminq7aceetamido7 cef-3-em-4-carbonzuur 20 De verbinding van voorbeeld VII (2,65 g) werd bij 20 °C onder roeren toegevoegd aan gedestilleerd water (10,6 ml) , en het mengsel werd 30 min geroerd, gedurende welke tijd kristallisatie plaats had. De geroerde suspensie werd 15 min in ijs/water gekoeld, waarna de kristallen door filtratie verzameld, 25 met ijskoud gedestilleerd water ( 10 ml) uitgewassen en in een oven bij 30°C gedroogd werden onder verkrijging van de titelverbin-ding ( 2,09 g); watergehalte 12% (Karl Fischer); IR-spectrum (Nujol) 30 ^ max 3700“2100 (breed), 1760,1720, 1660, 1555, 1520, 1350, 1300, 1290, 1240 , 1215, 1170, 1155, 1120, 1030, 1000, 920, 860 en 755 cnf1; Röntgendiffractiepatroon (gegeven als d-afstanden in Angström-eenheden en procentuele intensiteiten I).

12,5 (21); 9,97 (37); 9,51 (22); 6,79(11); 6,33 (35); 5,29 (10); 4,76 35 (30); 4,63 (1-0); 4,39 (54); 4,32 (5); 4,18 (15); 4,09 (31); 3,91 (24); 3,78 (69); 3,69 (17); 3,61 (9); 3,52(12); 3,48 (21); 3,42 (6); 3,33 (37); 3,15 (36); 3,07 (22); 3,02 (4); 2,96 (36); 2,85(9); 2,78 (3); 2,75 (3); 2,65 (11); 2,59 (49); 2,50(6); 2,44 (9); 2,38(6); 87 0 2 2 9 5 Μ - 28 - 2,31 (3); 2,27 (4); 2,20 (5); 2,16 (9); 2,10 (10); 2,05 (4); 2,01 (9).

Voorbeeld IX

tert-Butyl-(6R,7R,21Z,S)-7-/2-(2-formamido-thiazol-4-yl)-2-/j(3,4-dihydroxyfenyl)(difenylmethoxycarbonyl)methoxy-iminq/ aceetamido/cef-3-em-4-carboxylaat

Tussenprodukt 5 ( 1,53 g) werd onder roeren opgelost in methyleenchloride ( 15 ml) en N,N-dimethylaceet-amide ( 2,9 ml), de oplossing werd tot -35°C afgekoeld, en fosfor- 10 oxychloride ( 0,41 ml) werd toegevoegd. Het mengsel werd 1 uur bij -25 tot -20°C geroerd, waarna een oplossing van tert-butyl- (6R,7R)-7-aminocef-3-em-4-carboxylaat (bereid uit het tosylaatzout (1,0 g) door reaktie met waterige natriumbicarbonaatoplossing zoals beschreven in voorbeeld I voor de difenylmethylester ) in 15 methyleenchloride ( 15 ml) met Ν,Ν-dimethylaniline ( 2,9 ml) werd toegevoegd . Het reaktiemengsel werd 16 uur op ongeveer 0°C gehouden en daarna achtereenvolgens met water, verdund zoutzuur (2 maal) en water uitgewassen; telkens werd de waterlaag terug-geextraheerd met methyleenchloride. De gecombineerde organische 20 lagen werden geconcentreerd tot een schuim, dat opnieuw werd opgelost in methyleenchloride ( 15 ml) en door een kolom Sorbsil U30 silica ( 5 g) werd gevoerd met methyleenchloride ( 30 ml)als elutiemiddel. Het eluaat werd tot een klein volume geconcentreerd en met diisopropylether ( 15 ml) behandeld teneinde de titel-25 verbinding als een witte vaste stof ( 1,2 g) te doen neerslaan; 6 (CDC13) 1,57 (s,(CH3)3), 5,74 (s.OCHCO), 6,15 (m ,H-7), 6,49 (d, H-3), 8,4-8,7 (m, NHCO en -OH).

Voorbeeld X

30 1 tert-Butyl- (6R, 7R, 21Z, S) -7-/2- (2-amino- thiazol-4-yl)-2-£(3,4-dihydroxyfenyl)(difenylmethoxycarbonyl)- methoxyimino/aceetamido/cef-3-em-4-carboxylaat

De verbinding van voorbeeld IX ( 6,29 g) werd bij 20°C geroerd in methanol ( 64 ml) en 1,4-dioxan (16 ml), 35 en 60% perchloorzuur ( 5,63 ml) werd toegevoegd. Na 3,5 uur werd de oplossing onder krachtig roeren toegevoegd aan een natriumbicarbonaatoplossing ( 240 ml). Het mengsel werd nog eens een uur 8 7 0 2 : 5 - 29 - geroerd en daarna afgekoeld. Het produkt werd door filtratie verzameld, met water uitgewassen en gedroogd. Het produkt werd vervolgens inasn mengselvan ethylacetaat en methyleenchloride (1:1) opgelost, en deze oplossing werd opgebracht op een kolom "Sorbsil" U3Q silica 5 (65 g) , welke kolom met meer oplosmiddel werd geelueerd. Door indampen van de geschikte eluaatfractie werd de titelverbinding (4,0 g) verkregen; 1,5 (s, (CH3)3), 5,06 (d,H-6), 5,61 (s, CHON), 5,8 (m, H-7), 6,41 (m, H-3), 9,0 (breed, -OH), 9,5 (d, NHCO).

10 ~

Voorbeeld XI

(6R,7R,2%S)-7-Z2-(2-Aminothiazol-4-yl)- 2-/T(carboxy ) (3,4-dihydroxyfenyl)methoxyimino7 aceet amido.7 cef-3-em- 4-carbonzuur, hydrochloride 15 . .

De verbxndmg van voorbeeld X (1,5 g) werd onder roeren bij 20°C opgelost in mierezuur ( 6 ml) , en geconcentreerd zoutzuur ( 0,35 ml ,2,1 equivalenten ) werd toegevoegd. Het mengsel werd 2 uur geroerd , gefiltreerd en vervolgens onder verminderde druk ingedampt. Ethylacetaat (6 ml) werd aan het 20 residu toegevoegd en het mengsel werd opnieuw ingedampt tot een schuim, dat met ethylacetaat ( 6 ml) werd aangewreven. De verkregen suspensie werd 30 min bij omgevingstemperatuur geroerd. De vaste stof werd door filtratie verkregen, 2 maal met ethylacetaat uitgewassen en onder vacuum gedroogd onder verkrijging van de titelver-binding ( 1,33 g) welke identiek was met het produkt van voorbeeld VII.

Droog poeder voor inektiedoeleinden (6R,7R,21Z,S)-7- i2-/2-Aminothiazol-30 4~yl/-2-/"(carboxy) (3,4-dihydroxy- fenyl)methoxyiminq/aceetamido]· cef- 500 mg 3-em-4-carbonzuur

Natriumcarbonaat (watervrij) 99 mg

De twee steriele componenten werden aseptisch gemengd en in steriele fiolen afgevuld. De bovenruimten van de fiolen 8 7 0 2 2 P 5 * - 30 - werden met steriele stikstof gespoeld en de fiolen werden met rubber stoppen en een metalen bekleding (aangebracht door krimpen) afgesloten. Het produkt kan worden verwerkt door het korte tijd voor de toediening op te lossen in water voor injektie-5 doeleinden of in een andere geschikte, steriele drager.

8?01 29 5

Claims (9)

1. Verbinding met de algemene formule I, waarin Rj en R2 , die gelijk of verschillend kunnen zijn, elk een waterstofatoom of een carboxylgroep .blokkerende 5 groep voorstellen, Rg een waterstofatoom of een aminobescher- mende groep voorstelt, R^ en R^ elk een hydroxy- of gesubstitueerde hydroxygroep voorstellen of R^ en R^ tezamen een cyclische 10 beschermde diolgroep voorstellen, Z -S- of -SO- (IX- of β-) voorstelt, en de stippellijn die de 2-, 3- en 4-plaatsen overbrugt , aangeeft dat de verbinding een cef-2-em- of cef-3-emverbinding is, en zouten en solvaten (met inbegrip van hydraten) daarvan.

2. Verbinding volgens conclusie 1 met formule 1a, waarin R, een hydroxy- of acetoxygroep is , » 3. R^a een hydroxy- of acetoxygroep is, en de niet-toxische zouten, solvaten ( met inbegrip van hydraten) 20 en metabolisch labiele esters daarvan.

3. Verbinding volgens conclusie 2, waarin de oximveretherende groep de S-configuratie heeft.

4. (6R, 7R,21Z,S)-7-/2-(2-Aminothiazol-4-y1)-2-/tcarboxy)(3,4-dihydroxyfenyl)methoxyimino_/aceetamido7cef- 25 3-em-4-carbonzuur en de niet-toxische zouten , solvaten (met inbegrip van hydraten) en metabolisch labiele esters daarvan.

5. Verbinding volgens conclusie 4 in kristallijne gehydrateerde vorm.

6. Kristallijne gehydrateerde verbinding 30 volgens conclusie 5, gekenmerkt door een infrarood-spectrum met absorptiebanden bij 3700-2100 (breed), 1760, 1720, 1660, 1555, 1520, 1350, 1300, 1290, 1240, 1215, 1170, 1155, 1120, 1030, 1000, 920, 860 en 755 cm"1.

7. Kristallijne gehydrateerde verbinding 35 volgens conclusie 5, gekenmerkt door het volgende röntgendiffractie- 8702205 i - 32 - * patroon (gegeven als d-afstanden in Angström-eenheden en procentuele intensiteiten): 12.5 (21); 9,97 (37); 9,51 (22); 6,79 (11); 6,33 (35); 5,29 (10); 4,76 (30); 4,63 (100); 4,39 (54); 5 4,32 (5); 4,18 (15); 4,09 (31); 3,91 (24); 3,78 (69); 3,69 (17); 3,61 (9); 3,52 (12); 3,48 (21); 3,42 (6); 3,33 (37); 3,15 (36); 3,07 (22); 3,02 (4); 2,96 (36); 2,85 (9); 2,78 (3); 2,75 (3); 2,65 (11); 2,59 (49); 2,50 (6); 2,44 (9); 2,38 (6); 10 2,31 (3); 2,27 (4); 2,20 (5); 2,16 (9); 2,10 (10), 2.05 (4); 2,01 (9).

8. Werkwijze voor het bereiden van cefalosporinederivaten, met het kenmerk, dat men verbindingen volgens conclusie 1 bereidt door acylering van een verbinding met 15 formule 2, waarin , Z en de stippellijn de in conclusie 1 gedefinieerde betekenis hebben, of een zout of een 7-N-silylderi-vaat daarvan, met een verbinding met formule 3, waarin R2, R^> R^ en R,. de in conclusie 1 gedefinieerde betekenis hebben, of een zout daarvan, of met een acyleringsmiddel dat daarmee overeenkomt, 20 ... waarna, telkens mdien het nodig en/of wenselijk is , elk van de volgende reakties, in elke geschikte volgorde, worden uitgevoerd: 2 i) omzetting van een Δ -isomeer in een gewenst Δ^-is omeer, ii) reductie van een verbinding waarin 25 . .... Z -SO- is tot een verbinding waarin Z -S- is, iii) omzetting van een carboxylgroep in een niet-toxische, metabolisch labiele esterfunctie, iv) vorming van een niet-toxisch zout of solvaat, 30 . v) verwijdering van eventueel aanwezige carboxylgroep blokkerende en/of N-beschermende groepen, en vi) verwijdering van eventueel aanwezige hydroxygroep blokkerende groepen. 35

9. Werkwijze voor het bereiden van het kristallijne hydraat volgens conclusie 5, waarbij men een waterige oplossing vormt van (6R,7R,2'Z,S)-7-Z2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-//carboxy)(3,4-dihydroxyfenyl)methoxyimino/-aceetamidq7-cef-3-em- 4-carbonzuur of een zuuradditiezout of basezout daarvan of een 5702295 τ - 33 - solvaat van het zout, en het hydraat daaruit kristalliseert.

10. Werkwijze voor het bereiden van het kristallijne hydraat volgens conclusie 5, waarbij men een waterige oplossing vormt van een zuuradditiezout of basezout van 5 (6R, 7R, 2 *Z,S)-7-/£-(2-aminothiazol-4-y1)carboxy)-(3,4- dihydroxyfenyl)methoxyimino/-aceetamido/-cef-3-em-4-carbonzuur of een solvaat daarvan?en de pH van de oplossing instelt tussen 1,0 en 4,0 .

11. Farmaceutisch preparaat dat als 10 werkzaam bestanddeel tenminste een verbinding met formule 1a volgens conclusie 2 omvat.

12. Farmaceutisch preparaat volgens conclusie 11, waarbij het werkzame bestanddeel een verbinding volgens conclusie 4 is.

13. Farmaceutisch preparaat volgens con clusie 12, waarbij het werkzame bestanddeel de kristallijne ge-hydrateerde verbinding volgens conclusie 5 is. -o-o-o-o- 870. m P NHRi Η H As Η H HiN —f-V^Sl SN Ξ ί J, ) I I IJZ. J>-KA I--1—C — CONH-f f > 0 γ H

11. J \ rT T^H C00Rl 2 OCHCOORj COOR, j 3 ifS kAn 1 L=J—C-COORs ] R^i II d NHt N. Rf I ^OH / NHR, * S ^N Η H S 1-1—c— CONH-^-I''5'', -=-C-COOH N. J-NV#\h II \ O ] H N OCHCOOH COOH üCHCOORi 3 ijl 1° •LA I T XR|, Rra Rf T-CHCOORj NHR HiN-O-CHCOORi Φ. rV & I, ς -.LcO-COORg RJ, 5 ^ 6^7 y-o-ch-coor2 I Hal —CH COORi — O CH COOR* Φ* & fr Rf T I Xr4

8 Rr

9 Rf 10 870 2 29 5 y .. GLAXO GROUP LIMITED, Londen, Groot Brittannie