NL8304024A - Cefalosporineantibiotica en werkwijzen voor het bereiden en toepassen van deze antibiotica. - Google Patents

Description

- i - i .............. -£ •m.

Gefalosporineantibiotica en werkwijzen voor het bereiden en toepassen van deze antibiotica.

De uitvinding heeft betrekking op verbeteringen 5 van of verband houdende met cefalosporinen, in het bijzonder op nieuwe cefalosporineverbindingen en derivaten daarvan met waardevolle antibiotische eigenschappen. De uitvinding heeft eveneens betrekking op werkwijzen voor het bereiden en toepassen van deze nieuwe cefalosporineverbindingen en deriva-10 ten daarvan.

De cefalosporineverbindingen in deze beschrijving zijn vermeld onder aanduiding van "cefam " volgens J. Amer. Chem. Soc., 1962, 84, 3400, waarbij de uitdrukking πeefam,, betrekking heeft op de basis cefamstructuur met 15 een dubbele binding.

Cefalosporineantiobiotica worden op grote schaal toegepast bij het behandelen van ziekten die door pathogene bacteriën bij mensen en dieren worden veroorzaakt en zijn in het bijzonder bruikbaar bij het behandelen van 20 aandoeningen veroorzaakt door bacteriën die resistent zijn ten opzichte van andere antibiotica, zoals penicilline-verbindingen en voor het behandelen van voor penicilline gevoelige patiënten. In vele gevallen is het wenselijk een cefalosporineantibioticum te gebruiken dat zowel een 25 werking tegen Gram-positieve als Gram-negatieve micro- organismen vertoont en zeer veel onderzoek is gericht op de ontwikkeling van verschillende typen cefalosporineantiobiotica met een breed spektrum.

Zo is bijvoorbeeld in het Britse octrooi-30 schrift 1.399.086 van aanvraagster een nieuwe klasse cefa- losporineantibiotica beschreven die een 7 β -( -veretherde oximino)-aeylamidogroep bevatten, waarvan de oximinogroep de syn-configuratie bezit. Deze klasse van antibiotische verbindingen wordt gekenmerkt door een krachtige anti-35 ... -2 u u c b i \ - 2 - bacteriele werking tegen een reeks Gram-positieve en Gram-negatieve organismen, gepaard gaande met een bijzonder grote stabiliteit ten opzichte van -lactamasen die door verschillende Gram-negatieve organismen worden geproduceerd.

5 De vondst van deze klasse verbindingen heeft het verdere onderzoek op hetzelfde gebied gestimuleerd teneinde verbindingen met betere eigenschappen te vinden, bijvoorbeeld tegen bijzondere klassen organismen, in het bijzonder Gram-negatieve organismen.

10 In het Britse octrooischrift 1.604.971 is een grote verscheidenheid aan cefalosporineantibiotica beschreven waarin de zijketen op de ΐβ -plaats onder andere gekozen kan worden uit een 2-(2-aminothiazool-4-yl)-2-(ver-etherde oximino)aceetamidogroep, waarin de veretherende groep, 15 onder zeer veel mogelijk betekenissen, een door een cyclo- alkylgroep gesubstitueerde alkylgroep kan zijn, ofschoon er geen specifieke voorbeelden van verbindingen met een dergelijke groep zijn gegeven. De groep op de 3-plaats kan eveneens uit een groot aantal alternatieven worden gekozen 20 en een mogelijke substituent is een thiomethylgroep die door een desgewenst gesubstitueerde heterocyclische 5- of 6-groep, die een of een aantal stikstof? zuurstof-of zwavelatomen bevat, is gesubstitueerd.

In de Britse octrooiaanvrage 202769IA van 25 aanvraagster zijn cefalosporineantibiotica beschreven waarin de zijketen op de Ίβ> -plaats een 2-(2-aminothiazool- 4- yl)-2-(veretherde oximino)aceetamidogroep is, waarin de veretherende groep een carboxyalkyl- of carboxycycloalkyl-groep is. De 3-substituent is een groep met formule 30 -CH^SY, waarin Y een met koolstof verbonden heterocyclische 5- of 6-ring is die tenminste een stikstofatoom bevat en door een alkylgroep met 1-4 koolstofatomen kan zijn gesubstitueerd.

Hen heeft nu gevonden dat door keuze van een 35 syn-2-(2-aminothiazool-4-yl)-2-cyclopropylmethoxyimino- Q v ί- t * .......' i - 3 - aceetamidogroep op de 7β -plaats gecombineerd met bepaalde groepen op de 3-plaats^cefalosporineverbindingen met een bijzonder gunstige werking (hierna uitvoeriger beschreven) tegen een grote verscheidenheid aan gewoonlijk voorkomende 5 pathogene organismen kan worden verkregen.

Volgens de uitvinding worden derhalve cefalo-sporineantibiotica met de algemene formule I verschaft, waarin Y een via koolstof verbonden onverzadigde heterocyclische 5- of 6-ring voorstelt, die tenminste een stikstof-10 atoom bevat, welke ring eveneens een of een aantal zwavel- atomen kan bevatten en/of door een of een aantal alkyl-groepen met 1-4 koolstofatomen, oxo-, hydroxyl- en/of carbamoylmethylgroepen kan zijn gesubstitueerd, en de niet-toxische zouten en niet-toxische metabolisch labiele esters 15 daarvan.

De verbindingen volgens de uitvinding zijn syn-isomeren. De syn-isomere vorm wordt gedefinieerd door de configuratie van de -O.CR,-^ 20 groep met betrekking tot de carboxamidogroep.

In deze beschrijving wordt de syn-configuratie struktureel aangegeven met formule lb.

Het zal duidelijk zijn dat aangezien de ver-25 bindingen volgens de uitvinding geometrische isomeren zijn, enige menging met het overeenkomstige anti-isomeer kan plaatshebben.

Binnen het kader van de uitvinding vallen eveneens de solvaten (in het bijzonder de hydraten) van 30 de verbindingen met formule 1. Eveneens binnen dit kader vallen de solvaten van niet-toxische zouten met formule 1 en de niet-toxische zouten en solcaten van niet-toxische, metabolisch labiele esters van de verbindingen met formule 1. Het zal duidelijk zijn dat de solvaten farmacologisch 35 aanvaardbaar moeten zijn.

S3 040 24 . _______ __ é

« V

- 4 -

In de hiervoor vermelde formule kan de door Y weergegeven heterocyclische ring bijvoorbeeld 1-4 stikstofatomen en desgewenst een zwavelatoom bevatten; speciale voorbeelden van deze heterocyclische groepen zijn de imida-5 zolyl-, pyrazolyl-, pyridyl-, pyrimidyl-., pyrazinyl-, pyri- dazinyl-, triazolyl-, tetrazolyl-, thiazolyl-, thiadiazolyl-, triazinyl- en triazolidinylgroep. Desgewenst kan de hetero-cycische ring door een of een aantal (bijvoorbeeld 1-3) alkylgroepen met 1-4 koolstofatomen (bijvoorbeeld methyl), 10 oxo-, hydroxyl- en/of carbamoylmethylgroepen zijn gesubsti tueerd. De alkyl- en carbamoylmethyl-substituenten kunnen bijvoorbeeld aan het stikstofheteroatoom of de stikstof-heteroatomen zijn gehecht.

De verbindingen volgens de uitvinding vertonen 15 zowel in vitro als in vivo een antibiotische werking met een breed spektrum. Ze bezitten een goede werking zowel tegen Gram-positieve als Gram-negatieve organismen, waaronder vele ,-lactamaseproducerende stammen. De verbindingen bezitten eveneens een grote stabiliteit tegen β -lactamasen 20 die door een reeks Gram-negatieve en Gram-positieve organis men worden gevormd.

De verbindingen volgens de uitvinding bleken een goede werking tegen stammen van Staphylococcus aureus en Staphylococcus epidermidis species, waaronder penicillase-25 producerende stammen van deze Gram-positieve bacteriën, uit te oefenen. Dit is gekoppeld met een goede werking tegen verschillende leden van de Enterobacteriaceae (bijvoorbeeld stammen van Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Entero-bacter cloacae, Serratja marcescens, Proteus mirabilis en 30 indool-positieve Proteus organismen, zoals Proteus vulgaris,

Proteus morganii en Providence species), en stammen van Haemophilus influenzae en Acinetobacter calcoaceticus, evenals een werking tegen sommige stammen van Pseudomonas species. Deze combinatie van krachtige werking tegen Gram-35 positieve organismen met een krachtige werking tegen Gram- 8304024 ί · - 5 - negatieve organismen die de verbindingen volgens de uitvinding bezitten is bijzonder zeldzaam .

Onder de niet-toxische zoutderivaten, die door reaktie van de in de verbindingen met formule 1 aan-5 wezige carboxylgroep of door reaktie van een eventueel aanwezige zure hydroxylgroep, die aan de heterocyclische groep Y aanwezig kan zijn, kunnen worden gevormd, vallen zouten met anorganische basen, zoals de alkalimetaalzouten (bijvoorbeeld natrium- en kaliumzouten) en aardalkalimetaal-10 zouten (bijvoorbeeld calciumzouten), zouten van aminozuren (bijvoorbeeld lysine- en argininezouten) en zouten van andere organische basen (bijvoorbeeld zouten van procaine, fenyl-ethylbenzylamine, dibenzylethyleendiamine, ethanolamine, diethanolamine en N-methylglucosamine). Onder andere 15 niet-toxische zoutderivaten vallen zuuradditiezouten, bijvoorbeeld gevormd met waterstofchloride, waterstofbromide, zwavelzuur, salpeterzuur, fosforzuur, mierezuur en trifluor-azijnzuur. Geschikt kunnen de verbindingen eveneens in een Zwitter-ionogene of inwendige zoutvorm voorkomen. De zouten 20 kunnen eveneens in de vorm van een harsprodukt, bijvoorbeeld gevormd met een polystyreenhars of een verknoopte polystyreen-divinylbenzeencopolymeerhars, die amino·of kwatemaire aminogroepen of sulfonzuurgroepen bevat, of met een carboxylgroe-pen bevattende hars, bijvoorbeeld een polyacrylzuurhars, 25 zijn. Oplosbare basische zouten (bijvoorbeeld alkalimetaal zouten, zoals het natriumzout) van de verbindingen met formule 1 kunnen wegens de snelle verdeling van dergelijke zouten in het lichaam na toediening eveneens in therapeutische toepassingsvormen worden toegepast. Indien echter 30 onoplosbare zouten van verbindingen met formule 1 voor een speciale toepassing zijn gewenst, bijvoorbeeld voor gebruik in depotpreparaten, kunnen dergelijke zouten op een gebruikelijke wijze worden bereid, bijvoorbeeld met geschikte organische aminen.

35 Het zal duidelijk zijn dat de Y-groep een 8304024

t V

- 6 - positieve lading kan dragen, bijvoorbeeld indien Y een 1-rnethyl-pyridinium-2-ylgroep is en indien dat het geval is moet de positieve lading in evenwicht zijn meteen negatieve lading. De verbindingen kunnen dus betainen zijn, zodat de Θ negatieve lading door een -C00 groep op de 4-plaats wordt verschaft. De negatieve lading kan eveneens worden verschaft 0 door een A anion; een dergelijk anion zal niet-toxisch zijn en kan zijn afgeleid van elk van de hiervoor beschreven zuren die de niet-toxische zoutderivaten zullen vormen.

De niet-toxische, metabolisch labiele ester-derivaten die door verestering van de carboxylgroep in de moederverbinding met formule 1 kunnen zijn gevormd, zijn bijvoorbeeld acyloxyalkylesters, bijvoorbeeld lage alkanoyl-oxy-methyl-of -ethylesters, zoals acetoxymethyl- of -ethyΙοί pivaloyloxymethylesters en alkoxycarbonyloxyalkylesters, bijvoorbeeld lage alkoxycarbonyloxyethylesters, zoals de ethoxycarbonyloxyethylester. Behalve de hiervoor genoemde esterderivaten vallen onder de uitvinding eveneens de verbindingen met formule 1 in de vorm van andere fysiologisch aanvaardbare equivalenten, dat wil zeggen fysiologisch aanvaardbare verbindingen die, evenals de metabolisch labiele esters, in vivo,in de moederverbinding met antibiotische werking met formule 1 worden omgezet.

Deze en andere zout- en esterderivaten, zoals de zouten met tolueen-p-sulfonzuur en methaansulfonzuren, of de esters met t-butyl- of difenylmethyl-veresterende groepen, kunnen als tussen-produkten bij het bereiden en/of zuiveren van de onderhavige verbindingen met formule 1 worden toegepast, bijvoorbeeld in de hierna beschreven werkwijzen.

Onder de aanbevolen verbindingen volgens de uitvinding vallen die, waarin Y een l-methylpyridinium-2-yl-, 1-methylpyridinium-4-yl-, 1-methyltetrazöol-5-y1-, l-methylpyridinium-3-yl-, 1,2-dimethylpyrazolium-3-yl-, 1,3-dimethylimidazolium-3-yl-, 1-methylpyrimidinium-2-yl-, 8304024 2 « .............Ί«ϊ' -τι -carbamoylmethylpyridinium-4-yl-, 2,5-dihydro-6-hydroxy-2-methyl-5-oxo-l,2,4-triazine-3-y1- of 4,5-dihydro-6-hydroxy- 4-methyl-5-oxo-l,2,4,-triazine-3-yl-groep voorstelt. Een bijzonder aanbevolen verbinding volgens de uitvinding is 5 (6R, 7R)-7-£XZ)-2-(2-aminothiazool-4-yl)-2-cyclopropylmethoxy- iminoaceetamidq7“3-/T( 1 -methyl pyridinium-4-y 1) thiomethy lj-cef-3-em-4-carboxylaat en de niet-toxische zouten daarvan.

De verbindingen volgens de onderhavige uitvinding kunnen in tautomere vormen voorkomen (bijvoorbeeld 10 met betrekking tot de 2-aminothiazolylgroep of wat betreft een 3-substituent, zoals een 2,5-dihydro-6-hydroxy-2-methyl-5-oxo-l,2,4-triazine-3-yl-groep) en het zal duidelijk zijn dat dergelijke tautomere vormen eveneens binnen het kader van de uitvinding vallen.

15 De verbindingen volgens de uitvinding kunnen voor het behandelen van een verscheidenheid aan ziekten veroorzaakt door pathogene bacteriën bij mensen en dieren, zoals infekties van het ademhalingsstelsel en van de urinewegen, worden toegepast.

20 Een ander aspekt van de uitvinding heeft

betrekking op een werkwijze voor het bereiden van cefalosporineverbindingen met de algemene formule Ia, waarin Y een hiervoor gedefinieerde betekenis heeft, B

25 “^0 (tl ~ ofβ -) voorstelt, de stippellijn die de 2-, 3- en 4-plaatsen verbindt aangeeft dat de verbinding een cef-2-em- of cef-3-em-verbinding is,

Rj een waterstofatoom of een carboxylgroepblokkerende groep 30 voorstelt, bijvoorbeeld de rest van een estervormende alifatische of aralifatische alkohol of een estervormend fenol, dilanol of stannanol (waarbij de genoemde alkohol, fenol, dilanol of stannanol bij voorkeur 1-20 koolstof-atomen bevat) of een symmetrisch of gemengd anhydride-35 blokkerende groep afgeleid van een geschikt zuur en R^ een 8304024 - 8 - aminogroep of een beschermde· aminogroep weergeeft, of de zouten daarvan, welke omvat (A) het acyleren van een verbinding met formule 2, waarin Y, B, de stippellijn en Rj de hiervoor 5 gedefinieerde betekenissen hebben, of een zout daarvan, bijvoorbeeld een zuuradditiezout, bijvoorbeeld gevormd met een mineraal zuur, zoals waterstofchloride, waterstofbromide, zwavelzuur, salpeterzuur of fosforzuur, of een organisch zuur, zoals methaansulfonzuur of tolueen-4-sulfonzuur, of

10 een 7-N-silylderivaat daarvan, of alternatief, indien Y

een kwaternair stikstofatoom bevat, een overeenkomstige Θ verbinding met een -C00 groep op de 4-plaats, met een zuur met formule 3, waarin R£ een hiervoor gedefinieerde betekenis heeft, of een zout daarvan, of met een acyleringsmiddel dat 15 daarmede overeenkomt, (B) reaktie van een verbinding met formule 4, waarin R^, R^, B en de stippellijn de hiervoor gedefinieerde betekenissen hebben en X een vervangbare rest van een nucleo-fiele groep, bijvoorbeeld een acetoxy- of dichlooracetoxy- 20 groep of een halogeenatoom, zoals chloor, broom of jodium, is, of een zout daarvan, met een zwavelnucleofiel die dient voor de vorming van de -CH^SY-groep, waarin Y een hiervoor gedefinieerde betekenis heeft, op de 3-plaats, of (C) indien Y in de verbinding volgens de 25 uitvinding een door alkyl met 1-4 koolstofatomen gesubsti tueerd of door carbamoylmethyl gesubstitueerd kwaternair stikstofatoom in de heterocyclische ring bevat, reaktie van een verbinding met formule 5, waarin R^, B en de stippellijn de hiervoor gedefinieerde betekenissen hebben en Rj 30 in dit geval een carboxylblokkerende groep is en Y’ een met koolstof verbonden heterocyclische 5- of 6-ring die een tertiair stikstofatoom bevat voorstelt, met een alky-leringsmiddel met 1-4 koolstofatomen of een carbamoyl-methyleringsmiddel dat dient voor het invoeren van een 35 alkylgroep met 1-4 koolstofatomen of een carhamoylmethylgroep

83 04 0 2 A

> « - 9 - als substituent van het tertiaire stikstofatoom in de heterocyclische ring van Y’, waarna, indien nodig en/of gewenst in elk geval, elk van de volgende reakties, in elke geschikte volgorde, wordt uitgevoerd: 5 i) omzetting van een Δ -isomeer in het ge wenste Λ. ^-isomeer, ii) reduktie van een verhinding waarin B = > 0, onder vorming van ee n verbinding waarin 10 B= ^S, iii) omzetting van een carboxylgroep in een niet-toxische, metabolisch labiele, esterfunktie, iv) vorming van een niet-toxisch zout en 15 v) verwijdering van eventueel aanwezige carboxylgroepblokkerende en/of N-beschermende groepen.

Bij de hiervoor beschreven werkwijze (A) is het uitgangsmateriaal met formule 2 bij voorkeur een verbinding waarin B = \s en de stippellijn een cef-3-em-20 verbinding voorstelt.

Indien de Y-groep in formule 2 geladen is, bijvoorbeeld zoals in een N-alkylpyridiniumgroep, en de verbinding een groep met formule -COORj (waarin Rj een hiervoor gedefinieerde betekenis heeft) op de 4-plaats 0 25 bevat, zal de verbinding een geassocieerd anion E , zoals een halogenide, bijvoorbeeld chloride of bromide, of een trifluoracetaatanion, bevatten.

Onder de acyleringsmiddelen die bij het bereiden van de verbindingen met formule 1 kunnen worden 30 toegepast vallen zuurhalogeniden, in het bijzonder zuur- chloriden en -bromiden. Dergelijke acyleringsmiddelen kunnen worden bereid door reaktie van een zuur met formule 3 of een zout daarvan met een halogenerings- middel, bijvoorbeeld fosforpentachloride, thionylchloride 35 of oxalylchloride.

_:_M

8304024 -10-

Acyleringen onder toepassing van zuurhalogeniden kunnen in waterige en niet-waterige reaktiemedia worden uitgevoerd, geschikt bij temperaturen tussen -50 en +50° C, hij voorkeur tussen -40 en +30° C, desgewenst in aanwezig-5 heid van een zuurhindend middel. Onder geschikte reaktie media vallen waterige ketonen, zoals waterige aceton, waterige alkoholen, zoals waterige ethanol, esters, zoals ethylacetaat, gehalogeneerde koolwaterstoffen, zoals methy-leenchloride, amiden, zoals dimethylaceetamide, nitrilen, 10 zoals acetonitril, of mengsels van twee of meer van derge lijke oplosmiddelen. Voorbeelden van geschikte zuurbindende middelen zijn tertiaire aminen, bijvoorbeeld triethylamine of dimethylaniline, anorganische basen, bijvoorbeeld calcium-carbonaat of natriumbicarbonaat en oxiranen, zoals lage 15 1,2-alkyleenoxyden, bijvoorbeeld ethyleenoxyde of propyleen- oxyde, die het bij de acyleringsreaktie vrijgekomen waterstof-halogenide binden.

Zuren met formule 3 kunnen zelf als acylerings-middel bij de bereiding van’ verbindingen met formule 1 worden 20 gebruikt. Het is wenselijk dat acyleringen waarbij gebruik gemaakt wordt van zuren met formule 3 in aanwezigheid van een condensatiemiddel, bijvoorbeeld een cartodiimide, zoals Ν,Ν'-dicyclohexylcarbodiimide of N-ethyl-Nf- ^-dimethyl-aminopropylcarbodiimide, een aarbonylverbinding, zoals 25 carbonyldiimidazool of een isoxazoliumzout, zoals N-ethyl- 5-fenylisoxazoliumperchloraat, worden uitgevoerd.

De acylering kan eveneens met andere amide-vormende derivaten van zuren met formule 3 geschieden, zoals bijvoorbeeld een geaktiveerde ester, een symmetrisch 30 anhydride of een gemengd anhydride, bijvoorbeeld gevormd met pivalinezuur of met een halogeenformiaat, zoals een laag alkylhalogeenformiaat. Gemengde anhydriden kunnen eveneens met fosforzuren worden gevormd, bijvoorbeeld fosfor-zuur of fosforigzuur, zwavelzuur of alifatische of aroma-35 tische sulfonzuren, bijvoorbeeld tolueen-4-sulfonzuur. Een 8304024 * » -11- geaktiveerde ester kan geschikt in situ worden gevormd onder toepassing van bijvoorbeeld 1-hydroxybenzotriazool in aanwezigheid van een condensatiemiddel, zoals hiervoor vermeld.

Ook kan de geaktiveerde ester van tevoren worden gevormd.

5 Het is wenselijk de acyleringsreakties waar bij de vrije zuren of hun hiervoor genoemde amide-vormende derivaten een rol spelen, in een watervrij reaktiemilieu, bijvoorbeeld methyleenchloride, tetrahydrofuran, dimethyl-formamide of acetonitril, uit te voeren.

10 Een alternatieve aktiveringsmethode berust bijvoorbeeld op de reaktie van een zuur met formule 3 met een oplossing of suspensie die van tevoren is gevormd door toevoeging van een carbonylhalogenide, in het bijzonder oxalylchloride of fosgeen, of een fosforylhalogenide, 15 zoals fosforoxychloride, aan een oplosmiddel , zoals een gehalogeneerde koolwaterstof, bijvoorbeeld methyleenchloride, dat een laag acyl tertiair amide, zoals N,N-dimethylformamide, bevat. De geaktiveerde vorm van het zuur met formule 3 kan daarna reageren met een 7-amino-20 verbinding met formule 2 in een geschikt oplosmiddel of mengsel van oplosmiddelen, bijvoorbeeld een gehalogeneerde koolwaterstof, bijvoorbeeld dichloormethaan. De acylerings-reaktie kan geschikt bij een temperatuur tussen -50 en +50° C, bij voorkeur -40 tot +30° C, desgewenst in aanwezigheid 25 van een zuurbindend middel, bijvoorbeeld zoals hiervoor beschreven, zoals dimethylaniline, worden uitgevoerd.

Desgewenst kunnen de hiervoor vermelde acyleringsreakties in aanwezigheid van een katalysator, zoals 4-dimethylaminopyridine, worden uitgevoerd.

30 De zuren met formule 3 en acyleringsmiddelen die daarmede corresponderen kunnen desgewenst in de vorm van hun zuuradditiezouten worden bereid en toegepast. Zo kunnen bijvoorbeeld zuurchloriden geschikt in de vorm van hun waterstofchloridezouten en zuurbromiden als hun water-35 stofbromidezouten, worden toegepast.

_ _ Λ 8304024 * > -12-

Bij de hiervoor beschreven werkwijze (B) kan het zwavelnucleofiel worden toegepast ter vervanging van een grote verscheidenheid van suhstituenten X in het cefalo-sporine met formule 4. Tot op zekere hoogte houdt het gemak 5 van de vervangingsreaktie verband met de pKa van het zuur HX waarvan de substituent is afgeleid. Zo hebben atomen of groepen X afgeleid van sterke zuren in het algemeen de neiging gemakkelijker te worden vervangen dan atomen of groepen afgeleid van zwakkere zuren. Het gemak van de ver-10 vangingsreaktie houdt eveneens tot op zekere hoogte verband met het nauwkeurige karakter van het zwavelnucleofiel. Het laatste nucleofiel kan bijvoorbeeld in de vorm van een geschikt thiol of thion worden toegepast.

De vervanging van X door het zwavelnucleofiel 15 kan geschikt worden uitgevoerd door de reaktiebestanddelen in oplossing of suspensie te houden. De reaktie wordt geschikt uitgevoerd onder toepassing van 1-10 mol equivalenten nucleofiel.

Nucleofiele vervangingsreakties kunnen geschikt 20 worden uitgevoerd op die verbindingen met formule 4 waarin de substituent X een halogeenatoom of een acyloxygroep is, zoals bijvoorbeeld hierna wordt besproken.

Acyloxygroepen.

25

Verbindingen met formule 4, waarin X een acetoxygroep voorstelt, zijn geschikte uitgangsmaterialen _ om bij de nucleofiele vervangingsreaktie met het zwavelnucleofiel te worden toegepast. Onder andere uitgangsmateri-30 alen uit deze klasse vallen verbindingen met formule 4, waarin X de rest van een gesubstitueerd azijnzuur, bijvoorbeeld chloorazijnzuur, dichloorazijnzuur en trichloor-azijnzuur, voorstelt,

Vervangingsreakties van verbindingen met 35 formule 4 die X-substituenten uit deze klasse bevatten, in 8304024 * · · -13- het bijzonder in het geval dat X een acetoxygroep is, kunnen door de aanwezigheid van jodide- of thiocyanaat-ionen in het reaktiemilieu worden vergemakkelijkt.

Substituent X kan eveneens van mierezuur, 5 een halogeenmierezuur, zoals chloormierezuur, of een carbaminezuur zijn afgeleid.

Bij gebruik van een verbinding met formule 4, waarin X een acetoxygroep of een gesubstitueerde acetoxygroep voorstelt , is het in het algemeen wenselijk dat de 10 Rj-groep in formule 4 een waterstofatoom zal zijn en dat B. ^ S voorstelt. In dat geval verloopt de reaktie geschikt in een waterig milieu.

Onder waterige omstandigheden kan de pH van de reaktieoplossing geschikt tussen 6 en 8 worden gehouden, 15 indien nodig onder toevoeging van een base. De base is geschikt een alkalimetaal- of aardalkalimetaalhydroxyde of -bicarbonaat, zoals natriumhydroxyde of natriumbicarbonaat.

Bij gebruik van verbindingen met formule 4 20 waarin X een acetoxygroep is, wordt de reaktie geschikt bij een temperatuur tussen 10 en 110° C, bij voorkeur tussen 20 en 80° C, uitgevoerd.

Halogenen.

25

Verbindingen met formule 4 waarin X een chloor-, broom- of jodiumatoom voorstelt, kunnen eveneens geschikt als uitgangsmaterialen bij de nucleofiele vervang-ingsreaktie met het zwavelnucleofiel wqrden toegepast. Bij 30 gebruik van verbindingen met formule 4 uit deze klasse, kan B geschikt \s zijn en Rj een blokkerende groep voor de carhoxylgroep voorstellen. De reaktie kan geschikt in een niet-waterig milieu worden uitgevoerd, dat bij voorkeur een of een aantal organische oplosmiddelen, geschikt van 35 polaire aard, zoals ethers , bijvoorbeeld dioxan of tetra- ---- 8304024

• V

-14- hydrofuran, esters, bijvoorbeeld etbylacetaat, amiden, bijvoorbeeld formamide en Ν,Ν-dimethylformamide, en ketonen, bijvoorbeeld aceton, bevat. Andere geschikte organische oplosmiddelen zijn uitvoeriger in het Britse 5 octrooischrift 1.326.531 beschreven. Het reaktiemilieu zal noch extreem zuur, noch extreem basisch zijn.

In het geval van reakties die op verbindingen met formule 4,. waarin Rj een blokkerende groep voor de carboxylgroep voorstelt en de verkregen Y-groep een kwater-10 nair stikstofatoom bevat,, wordt uitgevoerd, zal het produkt als het overeenkomstige halogenidezout worden gevormd, dat, desgewenst, aan een of een aantal ionenuitwisselende reakties wordt onderworpen teneinde een zout met het gewenste anion te verkrijgen.

15 Bij gebruik van verbindingen met formule 4, waarin X een halogeenatoom, zoals hiervoor beschreven, voorstelt, wordt de reaktie geschikt bij een temperatuur tussen -20 en +60° C, bij voorkeur tussen 0 en +30° C, uitgevoerd.

20 Indien het op te nemen nucleofiel geen verbinding geeft die een gekwateriseerd stikstofatoom bevat, wordt de reaktie in het algemeen in aanwezigheid van een zuurbindend middel, bijvoorbeeld een base, zoals triethylamine of calciumcarbonaat, uitgevoerd..

25 Bij de 'hiervoor beschreven werkwijze (C) laat men de verbinding met formule 5 geschikt reageren met een verbinding met formule R^Z, waarin R^ een alkyl-groep met 1-4 koolstofatomen of een groep met formule ^NCOQl^- en Z een af splitsbare groep, zoals een halogeen-30 atoom (bijvoorbeeld jodium, chloor of broom), of een koolwaterstofsulfonaat (bijvoorbeeld mesylaat of tosylaat) groep voorstellen. Het is ook mogelijk.een di-Cj_^-alkyl-sulfaat, bijvoorbeeld dimethylsulfaat, als alkylerings-middel te gebruiken. Joodmethaan verdient als alkylerings-35 middel aanbeveling, terwijl joodaceetamide als het carba- 8304024 -15- moylmethyleringsmiddel de voorkeur heeft. De reaktie wordt hij voorkeur hij een temperatuur tussen 0 en 60° C, geschikt tussen 20 en 30° C, uitgevoerd. Indien het alkyleringsmiddel onder de reaktieomstandigheden vloeibaar is, zoals in het 5 geval van joodmethaan, kan dit middel zelf als oplosmiddel fungeren. Het is ook mogelijk de reaktie geschikt uit te voeren in een inert oplosmiddel, zoals een ether, bijvoorbeeld tetrahydrofuran, een amide, bijvoorbeeld dimethyl-formamide, een laag alkanol, bijvoorbeeld ethanol, een 10 laag dialkylketon, bijvoorbeeld aceton, een gehalogeneerde koolwaterstof, bijvoorbeeld dichloormethaan, of een ester, bijvoorbeeld ethylacetaat.

De als uitgangsmateriaal bij werkwijze (C) toe te passen verbinding met formule 5 kan bijvoorbeeld 15 worden verkregen door reaktie van een verbinding met formule 4, zoals hiervoor gedefinieerd, met een geschikt zwavelnucleo-fiel, op een wijze analoog aan de nucleofiele vervangings-reaktie beschreven met betrekking tot werkwijze (B). Desgewenst kan het hiervoor genoemde nucleofiel in de vorm 20 van een metaalthiolaatzout worden gebruikt.

Is X in formule 4 een halogeenatoom, dan wordt de reaktie bij voorkeur in aanwezigheid van een zuur-bindend middel, bijvoorbeeld een base, zoals triethylamine of calciumcarbonaat, uitgevoerd.

25 Het reaktieprodukt kan van het reaktiemengsel, dat bijvoorbeeld onveranderd cefalosporineuitgangsmateriaal en andere materialen bevat, volgens een grote verscheidenheid van werkwijzen, waaronder herkristallisatie, ionoforese, kolomchromatografie en het gebruik van ionenuitwisselaars, 30 bijvoorbeeld door chromatograferen over ionenuitwisselende harsen, of macroverknoopte harsen, worden afgescheiden.

2

Een^ -cefalosporineesterderivaat verkregen volgens de uitvinding kan in het overeenkomstige, gewenste Δ^-derivaat worden omgezet door bijvoorbeeld behandeling 35 van de ^ ^-ester met een base, zoals pyridine of triethyl- -----^ 8304024 -16- amine.

Wordt een verbinding verkregen waarin B

'^S -^ 0 voorstelt, dan kan deze bijvoorbeeld door 5 / reduktie van het overeenkomstige acyloxysulfonium- of alkoxjrsulfoniumzout, dat in situ is bereid door reaktie met bijvoorbeeld acetylcbloride in het geval van een acetoxysulfoniumzout, in het overeenkomstige sulfide worden 10 omgezet, welke reduktie bijvoorbeeld wordt uitgevoerd met natriumdithioniet of jodideionen zoals aanwezig in een oplossing van kaliumjodide in een met water mengbaar oplosmiddel, bijvoorbeeld azijnzuur, aceton, tetrahydrofuran, dioxan, dimethylformamide of dimethylaceetamide. De reaktie 15 kan bij een temperatuur tussen -20 en +50° C worden uitge voerd .

Metabolisch labiele esterderivaten van de verbindingen met formule 1 kunnen worden bereid door reaktie van een verbinding met formule 1 of een zout of 20 beschermd derivaat daarvan met het geschikte veresterings- middel, zoals een acyloxyalkylhalogenide of alkoxycarbonyl-oxyalkylhalogenide (bijvoorbeeld jodideji geschikt in een inert, organisch oplosmiddel, zoals dimethylformamide of aceton, indien nodig gevolgd door verwijdering van eventueel 25 aanwezige beschermende groepen.

Basezouten van de verbindingen met formule 1 kunnen worden gevormd door reaktie van een zuur met formule 1 met een geschikte base. Zo kunnen bijvoorbeeld natrium-en kaliumzouten worden verkregen onder toepassing van het 30 respektieyelijke 2-ethylhexanoaat- of waterstofcarbonaat- zout. Zuuradditiezouten kunnen worden bereid door reaktie van een verbinding met formule 1 of een metabolisch labiel esterderivaat daarvan met het geschikte zuur.

Wordt een verbinding met formule 1 verkregen 35 als een mengsel van isomeren, dan kan het syn-isomeer bij- 8304024 -17- voorbeeld volgens gebruikelijke methoden, zoals kristallisatie of chromatografie, worden verkregen.

Voor toepassing als uitgangsmateriaal voor het bereiden van verbindingen met de algemene formule 1 5 volgens de uitvinding, worden bij voorkeur verbindingen met de algemene formule 3 en de amidevormende derivaten daarvan, zoals zuurhalogeniden en -anhydriden die daarmee overeenkomen^in hun syn-isomere vorm of in de vorm van mengsels van de syn-isomeren en de overeenkomstige anti-10 isomeren die tenminste 90 % van het syn-isomeer bevatten gebruikt.

Zuren met formule 3 en hun derivaten kunnen worden verkregen door verethering van een verbinding met formule 7, waarin een hiervoor gedefinieerde betekenis 15 heeft en R^ een waterstofatoom of een carboxylgroepblokkeren- de groep voorstelt, of een zout daarvan, door selektieve reaktie met een verbinding met de algemene formule 8, waarin T een halogeenatoom, zoals een chloor-, broom- of jood-atoom, een sulfaatgroep of een sulfonaatgroep, zoals p-20 tolueensulfonaat, voorstelt, gevolgd door verwijdering van een eventueel aanwezige carboxylgroepblokkerende groep R^.

Het scheiden van de isomeren kan zowel voor als na een dergelijke verethering geschieden. De veretheringsreaktie wordt geschikt uitgevoerd in aanwezigheid van een base, 25 bijvoorbeeld kaliumcarbonaat of natriumhydride en verloopt bij voorkeur in een organisch oplosmiddel, bijvoorbeeld dimethylsulfoxyde, een cyclische ether, zoals tetrahydro-furan of dioxan, of een Ν,Ν-digesubstitueerd amide, zoals dimethylformamide. Onder deze omstandigheden verandert de 30 configuratie van de oximinogroep door de veretherings reaktie vrijwel niet. De reaktie zal in aanwezigheid van een base worden uitgevoerd indien een zuuradditiezout van een verbinding met formule 7 wordt toegepast. De base zal in een voldoende hoeveelheid worden gebruikt om het be-35 treffende zuur snel te neutraliseren.

-;_a 8304024 -18-

Zuren met formule 3 kunnen eveneens worden verkregen door reaktie van een verbinding met formule 9, waarin en R^ de hiervoor gedefinieerde betekenissen hebben, met een verbinding met formule IQ, gevolgd door verwijdering 5 van een eventueel aanwezige carboxylgroepblekkerende groep R^ en indien nodig scheiding van de syn- en anti-isomeren.

De zuren met formule 3 kunnen volgens ge-bruikelijke methoden in de overeenkomstige zuurhalogeniden en -anhydriden en zuuradditiezouten worden omgezet, zoals 10 bijvoorbeeld op de hiervoor beschreven wijze.

Stelt X een halogeenatoom, dat wil zeggen een chloor-, broom- of jodiumatoom, in formule 4 voor, dan kunnen de cef-3-em-uitgangsmaterialen op een gebruikelijke wijze worden bereid, bijvoorbeeld door de halogenering 15 van een IjS -beschermd amino-3-methyl-cef-3-em-4-carbonzuur- ester . \ ƒ§ -oxyde, verwijdering van de Ίβ -beschermende groep, acylering van de verkregen 7-aminoverbinding onder vorming van de gewenste Ί^ -acylamidogroep, bijvoorbeeld op een wijze analoog aan de hiervoor beschreven werkwijze 20 (A), gevolgd door reduktie van de 1 -oxydegroep later.

Dit is beschreven in het Britse octrooischrift 1.326.531.

De overeenkomstige cef-2-em-verbindingen kunnen volgens de methode van de ter inzage gelegde Nederlandse octrooiaanvrage 6.902.013 worden verkregen door reaktie van een 25 3-methyl-cef-2-em verbinding met N-broomsuccinimide tot de overeenkomstige 3-broommethylcef-2-em verbinding.

Stelt X in een verbinding met formule 4 een acetoxygroep voor, dan kunnen dergelijke uitgangsmaterialen bijvoorbeeld worden verkregen door acylering van 7-amino-30 cefalosporaanzuur, bijvoorbeeld op een wijze analoog aan de hiervoor beschreven werkwijze (A)· Verbindingen met formule 4 waarin X een andere acyloxygroep voorstelt, kunnen worden verkregen door acylering van.de overeenkomstige 3-hydroxymethylverbindingen, die bijvoorbeeld kunnen worden 35 bereid door hydrolyse van de geschikte 3-acetoxymethyl- 8304024 * 9 -19- verbindingen, bijvoorbeeld op de wijze als bijvoorbeeld beschreven in de Britse octrooischriften 1.474.519 en 1.531.212.

Verbindingen met formule 2 kunnen eveneens 5 op een gebruikelijke wijze worden bereid, bijvoorbeeld door nucleofiele vervanging van een overeenkomstige 3-acyloxymethyl- of 3-halogeenmethylverbinding met het geschikte nucleofiel, zoals bijvoorbeeld beschreven in de Britse octrooischriften 1.012.943, 1.241.657, 2.027.691A 10 en 2.046.26IA.

Een andere methode voor het bereiden van de uitgangsmaterialen met formule 2 omvat het verwijderen van de beschermende groep van een overeenkomstig beschermde 7β -aminoverbinding, bijvoorbeeld op een gebruikelijke 15 wijze, zoals bijvoorbeeld onder gebruik van fosforpenta- chloride.

Het zal duidelijk zijn dat bij enkele van de hiervoor beschreven omzettingen het nodig kan zijn eventueel aanwezige gevoelige groepen in het molekuul van 20 de betreffende verbinding te beschermen, teneinde ongewenste nevenreakties te vermijden. Het kan bijvoorbeeld tijdens elk van de hiervoor aangeduide reaktieschema's nodig zijn de tffi^-groep van het aminothiazolylgedeelte te beschermen, bijvoorbeeld door tritylering, acylering, bijvoorbeeld 25 chlooracetylering of formylering, protonering, of volgens een andere gebruikelijke methode, zodat de beschermde groep bestand is tegen de reaktieomstandigheden die bij een of een aantal synthetische trappen optreden. De beschermende groep kan daarna volgens elke geschikte 30 methode die geen afbraak van de gewenste verbinding veroor zaakt worden verwijderd, bijvoorbeeld in het geval van een tritylgroep door gebruikmaking van een geschikt gehalo-geneerd carbonzuur, bijvoorbeeld azijnzuur, mierezuur, chloorazijnzuur of trifluorazijnzuur, of door toepassing 35 van een mineraal zuur, bijvoorbeeld waterstofchloride of 3 0 “ ’ Ί :i 4 -20- mengsels van dergelijke zuren, bij voorkeur in aanwezigheid van een protisch oplosmiddel, zoals water, of in het geval van een chlooracetylgroep, door behandeling met thioureum.

Het is wenselijk dat de carhoxylgroepblokke-5 rende groepen die bij het bereiden van verbindingen met formule 1 of van de benodigde uitgangsmaterialen worden toegepast groepen zijn die gemakkelijk in een geschikt stadium van de reaktievolgorde kunnen worden afgesplitst, geschikt in de laatste stap. Het kan echter, in enkele 10 gevallen gunstig zijn niet-toxische., metabolisch labiele, carboxylgroepblokkerende groepen, zoals acyloxy-methyΙοί -ethylgroepen, bijvoorbeeld acetoxy-methyl of -ethyl of pivaloyloxymethyl, of alkoxycarbonyloxyalkylgroepen, bijvoorbeeld ethoxycarbonyloxyethyl, te gebruiken en deze 15 in het eindprodukt te behouden, waardoor een geschikt ester- derivaat van een verbinding met formule 1 wordt verkregen.

Geschikte groepen die de carboxylgroep blokkeren zijn eveneens bekend in de stand der techniek; een lijst van representatieve, geblokkeerde carboxylgroepen 20 is opgenomen in het Britse octrooischrift 1.399.086. Onder aanbevolen geblokkeerde carboxylgroepen vallen aryl lage alkoxycarbonylgroepen, zoals p-methoxybenzyloxycarbonyl, p-nitrobenzyloxycarbonyl en difenylmethoxycarbonyl; lage alkoxycarbonylgroepen, zoals t-butoxycarbonyl; en lage 25 halogeenalkoxycarbonylgroepen, zoals 2,2,2-trichloorethoxy- carbonyl. De carboxylgroepblokkerende groep kan vervolgens volgens elk van de geschikte, in de stand der techniek beschreven, methoden worden verwijderd, zo is bijvoorbeeld door een zuur of base gekatalyseerde hydrolyse in vele 3Q gevallen toepasbaar, evenals door enzymen gekatalyseerde hydrolyse.

Het zal duidelijk zijn dat het gebruik van aminogroep- en carboxylgroepbeschermende groepen bekend is in de stand der techniek en relevante voorbeelden 35 van een dergelijke toepassing zijn bijvoorbeeld vermeld in: 0 "Z i\ A o 9 λ -21-

Theodora W. Greene, "Protective Groups in Organic Synthesis" (Wiley-Interscience, New York, 1981) en J.F.W. McOmie, "Protective Groups in Organic Chemistry" (Plenum Press,

London, 1973).

5 De antibiotisch werkzame verhindingen volgens de uitvinding kunnen volgens elke geschikte methode worden verwerkt voor toedieningsdoeleinden, in analogie met andere antibiotica, en de uitvinding omvat derhalve eveneens farmaceutische preparaten die een of een aantal antibiotisch 10 werkzame verbindingen volgens de uitvinding, geschikt voor toepassing in de humane of veterinaire geneeskunde, bevat.

Dergelijke preparaten kunnen desgewenst voor toepassing op een gebruikelijke wijze met behulp van eventueel noodzakelijke farmaceutische dragers en/of excipienten worden 15 aangeboden.

De antibiotisch werkzame verbindingen volgens de uitvinding kunnen worden verwerkt voor injektiedoeleinden en kunnen in een eenheidsdoseringsvorm, in ampullen of in houders met een veelvoudige doses, desgewenst met een toe-20 gevoegd verduurzamingsmiddel, worden aangeboden. De prepa raten kunnen eveneens de vorm van suspensies, oplossingen of emulsies in olieachtige of waterige dragers, hebben en kunnen verwerkingsmiddelen, zoals suspendeermiddelen, stabiliseermiddelen en/of dispergeermiddelen bevatten. Het 25 aktieve bestanddeel kan ook een poedervorm hebben en voor het gebruik met een geschikte drager, bijvoorbeeld steriel, pyrogeenvrij water, worden verwerkt.

Desgewenst kunnen dergelijke poedervormige preparaten een geschikte niet-toxische base bevatten, 30 teneinde de oplosbaarheid in water van het aktieve bestand deel te verbeteren en/of te verzekeren dat indien het poeder weer met water voor het gebruik geschikt gemaakt wordt, de pH van het verkregen, waterige preparaat fysiologisch aanvaardbaar is. Het is ook mogelijk dat de base 35 in het water waarmee het poeder weer voor het gebruik ge- - jk S3 040 24 -22- schikt gemaakt wordt aanwezig is. De base kan bijvoorbeeld een anorganische base, zoals natriumcarbonaat, natriumbicarbonaat of natriumacetaat, of een organische base, zoals lysine of lysineacetaat, zijn.

5 De verbindingen met antibiotische werking kunnen bijvoorbeeld worden aangeboden in een vorm die geschikt is voor absorptie door het maag-darmstelsel, bijvoorbeeld als tabletten of capsules.

De verbindingen met antibiotische werking 10 kunnen eveneens bijvoorbeeld tot zetpillen worden verwerkt, die bijvoorbeeld een gebruikelijke zetpilbasis, zoals cacaoboter of andere glyceriden, bevatten.

Preparaten voor veterinair gebruik kunnen bijvoorbeeld tot preparaten voor toepassing in de borst, 15 met hetzij een langdurige werking, hetzij een werking waarbij het aktieve bestanddeel snel wordt vrijgemaakt, worden verwerkt.

De preparaten kunnen vanaf 0,1 %, bijvoorbeeld 0,1-99 %, aktief materiaal, afhankelijk van de wijze van 20 toedienen, bevatten. Bestaan' de preparaten uit doserings- eenheden, dan zal elke doseringseenheid bij voorkeur 100— 3000 mg, bijvoorbeeld 200-2000 mg, aktief bestanddeel bevatten. De voor de behandeling van volwassen mensen toegepaste dosis zal bij voorkeur variëren van 200-12000 mg, 25 bijvoorbeeld 1000-9000 mg, per dag, afhankelijk van de wijze van toedienen en de frequentie van het toedienen.

Zo is bijvoorbeeld voor het behandelen van volwassen mensen een dosis tussen 400 en 6000 mg per dag, intraveneus of intramusculair toegediend, voldoende. Voor het behandelen 30 van Pseudomonas infekties kunnen hogere dagelijkse doses nodig zijn. Het zal duidelijk zijn dat in enkele gevallen, bijvoorbeeld bij het behandelen van neonaten, kleinere doseringseenheden en dagelijkse doses wenselijk kunnen zijn.

35 De antibiotisch werkende verbindingen volgens a’s fi i A n f o υ :j l ^ -23- de uitvinding kunnen desgewenst tezamen met andere therapeutische middelen, zoals antibiotica, bijvoorbeeld penicil-linen of andere cefalosporinen, worden toegediend.

In de volgende voorbeelden is Sorbsil U30 5 een siliciumdioxydegel van de firma Joseph Crosfield and

Son of Warrington, Lancashire, Engeland. Verder is THF tetrahydrofuran, DME Ν,Ν-dimethylformamide en DMSO dimethyl-sulfoxyde.

10

Bereiding 1:

Ethyl (Z)-2-cyclopropylmethoxyimi-.no-2-(2-tritylamino-thiazool-4-yl)acetaat 15

Men roerde 30 g ethyl (Z)-2-hydroxyimino-2- (2-tritylaminothiazool-4-yl)acetaat,hydrochloride in een stikstofatmosfeer en bij 21° C gedurende 7 uren met 13,5 g cyclopropylmethylbromide in 150 ml DMSO dat 30 g kalium- 20 carbonaat bevatte. Daarna verdeelde men het mengsel tussen methyleenchloride en water. De waterlaag werd geextraheerd met meer methyleenchloride en de samengevoegde organische oplossingen werden gewassen met water. Na drogen boven magnesiumsulfaat werd de oplossing geconcentreerd en op 25 200 g van een Sorbsil U30 kolom gebracht. De kolom werd geelueerd met ethylacetaat (10-30 %) in petroleumether (kookpunt: 40-60° C). Door indampen van de geschikte frak- ties werd de in de titel genoemde verbinding verkregen, (20,9 g); i (ethanol) 234,5 nm (E?^ 403); )s .

7 ° ’ A. max . 1 cm ' xnf 30 17 17 1 «7 254.5 nm (E, 302), 259,5 nm (E, 267), 265 nm (E, 229), 1 cm 1 cm 7 1 cm 271.5 nm (e!% 190) en 294 nm (El.% 111); V (CHBr_) 7 Icm lcm 7 max 3 35 3398 (Niï), 1730 (ester) en 1593 en 1491 cm ^ (aromatische 3304024 -24- dubbele binding).

Bereiding 2: 5 (Z)-2-Cyclopropylmethoxyimino-2-(2-tritylaminothiazool-4-yl)azijnzuur.

Men loste 20 g van bet produkt van bereiding 10 1 op in 200 ml ethanol en voegde 3,12 g natriumhydroxyde

in 40 ml water toe. Daarna verhitte men het mengsel 45 minuten onder terugvloeiing, waarbij zich neerslag vormde. Een gedeelte van de ethanol (ongeveer 150 ml) werd afgedestilleerd en het residu werd afgekoeld. Het mengsel 15 werd verdeeld tussen methyleenchloride en water dat 2 N

zoutzuur bevatte (70 ml). De organische fase werd gewassen met water en elke waterlaag werd weer teruggeextraheerd met meer methyleenchloride. De samengevoegde organische lagen werden gedroogd boven magnesiumsulfaat en ingedampt, 20 waardoor de in de titel genoemde verbinding werd verkregen (20 g); . j. (ethanol) 234,5 nm (e!^ 383) 259,5 nm ö ' xnf. ’ Icm ’ (e!% 242), 266,5 nm (E,1% 226) en 272,5 nm (e!% 217); 1 cm 1 cm 1 cm 25 Sf max (Nujol) 3260 (NH) en 1685 cm 1 (zuur).

Bereiding 3 30 Difenylmethyl (óR^lO-S-broommethyl^-^^^-cyelopropyl- methoxyimino-2-(2-tritylaminothiazool-4-yl)-aceetamido7~ cef-3-em-4-carboxylaat.

Men voegde onder roeren, in een stikstof-35 atmosfeer en bij -20° C 0,37 ml oxalylchloride toe aan een 8304024 -25- oplossing van 0,38 ml DMF in 10 ml methyleenchloride. Het mengsel werd eerst 10 minuten onder koelen met ijswater geroerd en vervolgens verder afgekoeld tot -20° C. Men voegde 1,94 g (Z)-2-cyclopropylmethoxyimino-2-(2-trityl-5 aminothiazool-4-yl)azijnzuur toe en roerde de oplossing onder koelen met ijswater gedurende 10 minuten voordat men verder weer afkoelde tot -20° C. Daarna voegde men een suspensie van 1,98 g difenylmethyl (6R,7R)-7-amino-3-broom-methyl-cef-3-em-4-carboxylaat.hydrochloride in 10 ml 10 methyleenchloride die 1,76 ml Ν,Ν-dimethylaniline bevatte toe. Er vormde zich een heldere oplossing indien men het mengsel gedurende een uur liet opwarmen tot 21° C. De oplossing werd gewassen met verdund zoutzuur en water , waarbij elke wassing werd teruggeextraheerd met meer methy-15 leenchloride en de samengevoegde extrakten boven magnesiumr sulfaat werden gedroogd en tot een klein volume werden ingedampt. Deze oplossing werd gefiltreerd door Sorbsil U30 (50 g) in ethylacetaat en het eluaat werd ingedampt. Het residu (3,54 g) werd gekristalliseerd uit een mengsel van 20 diethylether en petroleumether (kookpunt: 40-60° C), waar door men de in de titel genoemde verbinding verkreeg (2,43 g), smeltpunt 135 tot 147°, £’J. -11,9° (c 0,6, chci3).

25

Bereiding 4

Difenylmethyl (1S,6R, 7R)-3-broommethy1-7-jf(Z)-2-cyclopropy1-methoxyimino-2-(2-tritylaminothiazool-4-yl)aceetamidoj cef-30 3-em-4-carboxylaat, 1-oxyde.

Men loste 1,2 g difenylmethyl (6R,7R)-3-broommethy l-7-^"(Z) -2-cyclopropy lmethoxyimino-2-(2-tritylaminothia-zool-4-yl)aceetamidq7cef-3-em-4-carboxylaat op in 10 ml 35 methyleenchloride en voegde onder roeren en koelen met ijs- ------Λ 8304C24 -26- water hieraan 292 mg 3-chloorperbenzoezuur toe. Na 30 minuten waste men de oplossing met een waterige natrium-bicarbonaatoplossing en water (twee malen). Na drogen boven magnesiumsulfaat concentreerde men de oplossing en 5 zuiverde haar op een kolom van Sorbsil U30 (50 g), die met ethylacetaat (50-80 %) in petroleumether (kookpunt 40-60° C) werd geelueerd, waardoor 1,1 g van de in de titel genoemde verbinding werd verkregen.

io ^Jll +I4»2° <c ï»23’ racy5 infl. 244>5 ™ (e!% 260), 258,5 nm (E,1% 232), 266 nm (E,1% 225), en 1 cm 1 cm 1 cm 272 nm (E?% 214).

lcm 15

Voorbeeld I: (a) Difenylmethyl (6R,7R)-7-/~(Z)-2-cyclopropylmethoxyimino-20 2-(2-tritylaminotriazool-4-yl)aceetamido7-3-/~(l-methyl- pyridinium-4-y1)thiomethy17 cef-3-em-4-carboxylaat,bromide.

Onder roeren en bij 21° C loste men 1,2 g difenylmethyl (6R,7R)-3-broommethyl-7-ZXZ)-2-cyclopropyl-25 methoxyimino-2-(2-tritylaminothiazool-4-yl)aceetamido7-cef- 3-em-4-carboxylaat op in 20 ml THF en voegde 162 mg 1-methylpyrid-4-thion toe. Na 2 uren en 15 minuten en 3 uren en 45 minuten voegde men nog 2 porties, elk van 50 mg, l-methylpyrid-4-thion toe. Na 6 uren verdunde men de op-30 lossing met 80 ml dimethylether en roerde het mengsel enkele minuten bij de temperatuur van een ijsbad. Het neerslag werd afgefiltreerd, gewassen met diethylether en gedroogd, waardoor men 1,27 g van de in de titel genoemde verbinding verkreeg, /"p( -29,7° (c 0,71, DMSO), 35 ^max 1784 (^“lactam), 1720 (ester) en 1675 en 8304024 -27- 1520 cm ^ (amide).

(b) (6R,7R)-7-Z(Z)-2-(2-aminothiazool-4-yl)-2-cyclopropyl-methoxyiminoaceetamid^-3-iC( 1 -methylpyridinium-4-yl) thio-5 methylj cef-3-em-4-carboxylaat,dihydrochloride.

Men loste 1,1 g van de hiervoor genoemde ester op in 4 ml mierezuur en voegde 0,29 ml geconcentreerd zoutzuur toe. Na 1,5 uren roeren bij 21° C filtreerde men 10 het mengsel en loogde de filterkoek uit met mierezuur.

De samengevoegde filtraten werden ingedampt tot een gom, die met aceton werd behandeld en werd gedroogd, waardoor men 560 mg van de in de titel genoemde verbinding verkreeg, ZToiJp1 -39,7° (c 1,03, DMSO), Y (Nujol) 3680 - 2200 15 (OH, NHen NH^ ®), 1780 {jï -lactam), 1710 (COOH) en 1675 en 1550 cm * (amide).

Voorbeeld II

20 (a) Difenylmethyl (6R, 7R) -7-/*(Z) -2-cyclcopropylmethoxyimino-2- (2-tritylafflinothiazool-4-yl)aeeetamidq73-Z~( 1 -methyl-pyridinium-2-y1)thiomethyl7cef-3-em-4-carboxylaat.

25 Men roerde difenylmethyl (6R,7R)-3-broom- methyl-7“2"(Z)-2-cyclopropylmethoxyimino-2-(2-tritylamino-thiazool-4-yl)aceetamidoJcef-3-em-4-carboxylaat met 162 mg l-methylpyrid-2-thion in 20 ml THF 2 uren bij 21° C. Daarna voegde men nog 160 mg 1-methylpyrid-2-thion toe. Na 30 4 dagen bij 21° C kookte men de oplossing 3 uren onder terugvloeiing. Daarna voegde men fijn verdeelde calcium-carbonaat (overmaat) toe en roerde het mengsel weer 2 dagen bij 21° C. Het mengsel werd gefiltreerd en het filtraat werd met 80 ml diethylether verdund. Het neerslag werd af-35 gefiltreerd, gewassen met ether en gedroogd, waardoor men 8304024 -28- 540 mg van de in de titel genoemde verbinding verkreeg, ^ (ethanol) 240,5 nm (E^m 245), 265nm (ε|^208), 272nm

17 17 9lD

(E, 198), 308nm (E (\f> (Nujol) 3700-2500 (NH), 1790 v lcm Icm I V max J , 5 (y^-lactam), 1725 (ester), 1680 en 1520 cm (amide).

(b) (6R,7R)-7-J£TZ)-2-(2-Aminothiazool-4-yl)-2-cyclopropyl-methoxyiminoaceetamidQ7-3-/'( 1 -methylpyridinium-2-yl) thio-methyl7 cef-3-em-4-carboxylaat.dihydrochloride.

10

Men loste 480 mg van de hiervoor genoemde ester op in 2 ml mierezuur en voegde 0,13 ml geconcentreerd zoutzuur toe. Na 1 uur roeren bij 21° C werd het mengsel gefiltreerd en de filterkoek uitgeloogd met mierezuur. De 15 samengevoegde filtraten werden ingedampt en het residu werd behandeld met aceton, waardoor men 300 mg van de in de titel genoemde verbinding verkreeg, ν' (Nujol), a max 3700-2300 (NH3 , NH en OH), 1780 ( yg -lactam), 1710 (zuur), en 1680 cm * (amide).

20 T (d^-DMSO) omvat 0,90 (d, J6 Hz), 1,58 (t, J 6 Hz), o 1,88 (d, J 6Hz) en 2,12 (t, J 6Hz) pyridylprotonen; 3,09 (thiazoolproton) en 8,88, 9,30-9,80, multiplets, cyclopropylprotonen.

25

Voorbeeld III

(a) Difenylmethyl (6R,7R)-7-/T(Z)-2-cyclopropylmethoxy-imino-2-(2-tritylaminothiazool-4-yl)aceetamidoJ-S-ZX1-methy1-30 l-H-tetrazool-5-yl)thiomethyl7cef-3-em-4-carboxylaat.

Men voegde onder roeren en bij -20° C 0,37 ml oxalylchloride toe aan een oplossing van 0,38 ml DMF in 10 ml methyleenchloride. Men liet het mengsel gedurende 5 35 minuten opwarmen tot 0° C, waarna men het weer afkoelde tot 8304024 ». Λ» -29- -20° C. Vervolgens voegde men 1,94 g (Z)-2-cyclopropyl-methoxyimino-2-(2-tritylaminotriazool-4-yl)azijnzuur toe en roerde de oplossing 5 minuten bij 0° C. Na weer afkoelen tot -20° C voegde men een suspensie van 1,98 g difenyl-5 methyl (6R, 7R)-7-amino-3-/~( I-methyl-1 -H-t et razool-5-yl)- thiomethylJ-cef-3-em-4-Garboxylaat in 10 ml methyleen-chloride die 1,26 ml dimethylaniline bevatte toe. Men liet de temperatuur van de oplossing gedurende een uur oplopen tot 21° C. Daarna verdunde men de oplossing met meer methy-10 leenchloride en waste met verdund zoutzuur. De waterlaag werd met meer methyleenchloride geextraheerd en de samengevoegde organische lagen werden gewassen met water, gedroogd boven magnesiumsulfaat en tot een klein volume ingedampt.

De oplossing werd gechromatografeerd over Sorbsil U30 (70 g) 15 in een gradient van ethylacetaat (10-50 %) in petroleum- ether (kookpunt: 40-60° C), waardoor 3,28 g van de in de titel genoemde verbinding in de vorm van een schuim werden verkregen, Γoei?1 .-83^° (c0,91, CHClJ, / u j max (CHBr^) 3400 (NH), 1780 (β -lactam), 1725 (ester) en 20 1685 en 1515 cm * (amide).

(b) (6R,7R)-7-£~(Z)-2-(2-Aminothiazool-4-yl)-2-cyclopropyl-methoxyiminoaceetamidoJ-3-/t1-methyl-1-H-tetrazool-5-y1)-thiomethy 17 cef-3-em-4-carbonzuur. trif luoiftcetaat 25

Men loste 3,14 g van de hiervoor genoemde ester onder roeren en bij 21° C op in 6,5 ml anisool en voegde 25 ml trifluorazijnzuur toe. Na 1 uur voegde men 1,5 ml water toe. Na nog 5 minuten dampte mende oplossing 30 in tot de helft van het volume en voegde ongeveer 100 ml diisopropylether toe. Het neerslag werd afgefiltreerd, gewassen met diisopropylether en gedroogd, waardoor men 2,02 g van de in de titel genoemde verbinding verkreeg, Γ0(if1 -40,7° (c 0,44, DMS0), V* (Nujol) 3700 -D Π2&Χ ^ 2200 (NH^, OH, NH), 1770 ( /Q -lactam), 1725 (zuur) en 8304024 ' ---é m * -30- en 1690 cm ^ (amide).

Voorbeeld IV

5 (a) Difenylmethyl (IS, 6R, 7R)-7-/~(Z)-2-cyclopropylmethoxy-imino-2-(2-tritylaminothiazool-4-yl)aceetamido7-3-/~( 1-methy 1-pyridinium-4-yl)thiomethyl7cef-3-em-4-carboxylaat.1-oxyde. bromide.

10

Men roerde 700 mg difenylmethyl (lS,6R,7R)-3-broommethyl-7-Z’(Z)-2-cyclopropylmethoxyimino-2-(2-trityl-aminothiazool-4-yl)aceetamido7cef-3-em-4-carboxylaat.1-oxyde 3,5 uur bij 21° C met 125 mg N-methylpyrid-4-thion in 15 ml 15 THF. Daarna voegde men diethylether toe en filtreerde het neerslag af, waste het met ether en droogde het, waardoor men 700 mg van de in de titel genoemde verbinding verkreeg, -31,8° (c 0,75, CHC1J, Ϋ (Nujol) 1795 (^-lactam), 1722 (ester) en 1675 en 1512 cm (amide).

20 (b) Difenylmethyl (6R, 7R) -7-/~(Z) -2-cyclopropylmethoxyimino- 2- (2-tritylaminothiazool-4-y1)aceetamido7-3-ir( 1-methyl-pyridinium-4-y1)thiomethyXJcef-3-em-4-carboxylaat, gemengd halogenide.

25

Men roerde 0,30 g difenylmethyl (lS,6R,7R)-7-(T(Z)-2-cyclopropylmethoxyimino-2-(2-tritylaminothiazool-4-yl) aceetamida7“3-£( 1 -methylpyridinium-4-yl) thiomethylj-cef- 3- em-4-carboxylaat.1-oxyde.bromide onder koelen met ijs- 30 water met 0,24 g kaliumjodide in 2 ml aceton en 2 ml DMF.

Daarna voegde men 0,1 ml acetylchloride toe en roerde en koelde nog gedurende 3 uren. Vervolgens goot men de oplossing in een waterige natriummet-abisulfietoplossing en filtreerde het neerslag af. De vaste stof werd gewassen met 35 water en diethylether werd gedroogd, waardoor men 230 mg a 3 0 4 0 2 4

Mb*.'. ___ -31- van de in de titel genoemde verbinding met N.M.R.- en I.R.-spektra en onder hoge druk uitgevoerde vloeistof-chromatografie in overeens temming met het produkt van voorbeeld 1(a) verkreeg.

5 Dit produkt kan op de wijze als beschreven in voorbeeld 1(b) van de beschermende groepen worden ontdaan, waardoor het (6R,7R)-7-/‘(Z)-2-(2-aminothiazool-4-yl)-2-cyclopropylmethoxyiminoaceetamido7-3-Z(l-methyl-pyridinium-4-yl)thiomethy17 cef-3-em-4-carboxylaat.dihydro-10 chloride werd verkregen.

Voorbeeld V

15 (a) Difenylmethyl (IS,6R,7R)-7-/TZ)-2-cyclopropyImethoxy- imino-2-(2-tritylaminothiazool-4-yl)aceetamidoj-3-(pyrid- 4-ylthiomethyl)cef-3-em-4-carboxylaat.1-oxyde.

Men roerde 700 mg difenylmethyl (1S,6R,7R)-20 3-broommethyl-7-£’(Z)-2-cyclopropylmethoxyimino-2-(2-trityl- aminothiazool-4-yl)aceetamido7 cef-3-em-4-carboxylaat.1-oxyde met 115 mg 4-mercaptopyridine en 700 mg fijnverdeelde calciumcarbonaat 2 uren en 10 minuten in 20 ml aceton onder terugvloeiing. Daarna koelde men het mengsel af en filtreerde 25 het. Het filtraat werd geconcentreerd en over 50 g silica- gel gechromatografeerd. De kolom was vervaardigd in methy-leenchloride en er werd achtereenvolgens geelueerd met methyleenchloride, ethylacetaat en 10 % ethanol in ethyl-acetaat. Door verdampen van de geschikte frakties verkreeg 30 men 260 mg van de in de titel genoemde verbinding als een

O Y

schuim, U 7; -14,9° (¢0,81, CHC1_) Y (CHBrJ

D * 3 max 3 3485 (NH), 1808 ( β -lactam), 1778 (ester) en 1681 en 1512 cm * (amide).^ 35 n 8304024 -32- (b) Difsnylmethyl (lS,6R,7R)-7-/'(Z)-2-cyclopropylmethoxy-imino-2- (2-trity laminothiazool-4-yl) -aceetamido7-3-ZI( 1 -methylpyridinium-4-yl)thiomethyl7 cef-3~em-4-carboxylaat. 1-oxyde.jodide.

5

Men loste 100 mg difenylmethyl (lS,6R,7R)-7-ZXZ)-2-cyclopropylmethoxyimino-2-(2-tritylaminothiazoo1-4-y1)aceetamido7 3-(pyrid-4-ylthiomethyl)cef-3-em-4-carboxylaat. 1-oxyde op in 0,5 ml methyljodide. Nadat men het reaktie-10 mengsel 2 uren op 21° C had gehouden verdunde men de op lossing met diethylether en filtreerde het neerslag af.

Dit werd gewassen met ether en gedroogd, waardoor men 70 mg van het in de titel genoemde jodide verkreeg, dat volgens N.M.R.- en I.R.-spektra en onder hoge druk uitgevoerda 15 vloeistofchromatografie geleek op het hiervoor genoemde bromidezout.

Het produkt kan op de wijze als beschreven in voorbeeld IV(b) worden gereduceerd en volgens voorbeeld 1(b) van de beschermende groepen worden ontdaan, waardoor 20 men het (6R,7R)-7-/f(Z)-2-(2-aminothiazool-4-yl)-2-cyclo- propy lmethoxyiminoaceetamido7-3-/T( 1 -methyl-pyridinium-4-yl)-thiomethyl7cef-3-em-4-carboxylaat.dihydrochloride verkreeg.

25

Voorbeeld VI

(a) (6R, 7R)-7-/‘(Z)-2-cyclopropylmethoxyimino-2-(2-trity 1-aminotriazool-4-yl)aceetamidq7-3-/*( 1,2,5,6-tetrahydro-2-30 methyl-5,6-dioxo-l,2,4-triazine-3-yl)thiomethyl7cef-3-em-4- carbonzuur.

Een oplossing van 0,4 ml DMF in 0,5 ml di-chloormethaan werd bij -10° C behandeld met 0,15 ml oxalyl-35 chloride en dit mengsel werd 15 minuten geroerd bij -10° C.

8304024

.....J

-33-

Daarna voegde men 721 mg (Z)-2-cyclopropylmethoxyimino-2- (2-tritylaminotriazool-4-yl)azijnzuur toe. Deze oplossing werd 15 minuten in een ijsbad geroerd. Vervolgens voegde men deze oplossing toe aan een oplossing van 500 mg (6R,7R)-7- amino-3-jT(l,2,5,6-tetrahydro-2~methyl-5,6-dioxo-l,2,4-tria- zine-3-yl)thiomethyl7cef-3-em-4-carbonzuur (dat op de wijze als beschreven in de Europese octrooiaanvrage 0065748 kan worden bereid) in 6 ml industriële gedenatureerde alko- hol, 0,65 ml water en 1,9 ml triethylamine. Daarna roerde men de verkregen oplossing 1 uur bij 0° C. Na nog 10 minuten roeren bij 21° C verdeelde men het reaktiemengsel tussen dichloormethaan en 2 N zoutzuur. Vervolgens scheidde men de organische laag af, waste deze met water, droogde en dampte in, waardoor men het in de titel genoemde zuur als een schuim (1,12 g) verkreeg, £JiJD -37,91° (c 0,91; DMSO), ^ (CHBr.) 3700-2700 (OH), 3395 (NH), 1789 max j ( Δ -lactam), 1738 (ester + andere carbonylgroepen), 1669 -1 en 1523 cm (amide).

(b) (6R,7R)-7-£(Z)-2-(2-aminothiazoo 1-4-y 1)-2-cyclopropy 1-methoxyiminoaceetamidoJ-3-Z~( 1,2,5,6-tetrahydro-2-methy 1- 5,6-dioxo-1,2,4-triazine-3-yl)thiomethylj cef-3-em-4-carbon-zuur.formiaat.

Men loste 1,169 g van de ester van stap (a) op in 9,3 ml mierezuur. Men roerde de oplossing en voegde 3,2 ml water toe. Vervolgens roerde men het mengsel 1,5 uur bij 21° C. Daarna werd de vaste stof afgefiltreerd.

Het filtraat werd tot een klein volume geconcentreerd en diisopropylether werd toegevoegd. De verkregen vaste stof werd afgefiltreerd, gewassen met diisopropylether en gedroogd, waardoor men 654 mg van de in de titel genoemde verbinding als vaste stof verkreeg, -51,35° (c 0,74; DMSO), p (Nujol) 3650-2700 (OH+NH), 1779 (/^-lactam), 1738 (ester + dioxo) 1675 + 1530 (amide) en 1625 cm (car- 8 3 0 4 0 2 4 •v r -34- boxylaat).

Voorbeeld A 5

Droog poeder voor injektiedoeleinden.

Men vulde glazen flesjes aseptiscb met steriel (6R,7R)-7-£’(Z)-2-(2-aminothiazool-4-yl)-2-cyclopropylmethoxy-10 iminoaceetamidoJ-3-ZX 1 -methylpyridinium-4-yl) thiomethyl/- cef-3-em-4-carboxylaat, zodanig, dat elk flesje 1 g watervrij, zuiver materiaal bevatte. Men spoelde de bovenstaande volumes van het flesje met steriele stikstof, sloot ze met rubber schijfjes of stoppen en dichtte ze met metaal af (toegepast 15 onder krimpen). Het produkt kan voor gebruik gereedgemaakt worden door het in water voor injektiedoeleinden of andere geschikte, steriele dragers, kort voor de toediening, op te lossen.

20 83 0 4 0 2 4

Claims (6)

1, Cefalosporineantibiotica met de algemene formule 1, waarin Y een via koolstof verbonden onverzadigde heterocyclische 5- of 6-ring voorstelt die tenminste een stikstofatoom bevat en eveneens nog een of een aantal 5 zwavelatomen kan bevatten en/of door een of een aantal alkylgroepen met 1-4 koolstofatomen, oxo-, hydroxyl- en/of carbamoylmethylgroepen kan zijn gesubstitueerd, alsmede de niet-toxische zouten en de niet-toxische, metabolisch labiele, esters daarvan.

2. Verbindingen volgens conclusie 1, waarin Y een l-methylpyridinium-2-yl-, l-methylpyridinium-4-yl-, l-methyltetrazool-5-yl-, l-methylpyridinium-3-yl-, 1,2-di-methylpyrazolium-3-yl-, 1,3-dimethylimidazolium-3-yl-, 1- methylpyridinium-2-yl-, l-carbamoylmethylpyridinium-4-yl-, 15 2,5-dihydro-6-hydroxy-2-methyl-5-oxo-l,2,4-triazine-3-yl- of 4,5-dihydro-6-hydroxy-4-methyl-5-oxo-l,2,4-triazine-3-yl-groep voorstelt.

3. (6R,7R)-7-/'(Z)-2-(2-Aminothiazool-4-yl)- 2- cyclopropy lmethoxyiminoaceetamido7”3-ZX 1 -methy lpyridinium- 20 4-yl)thiomethyl7cef“3-em-4-carboxylaat en de niet toxische zouten daarvan volgens conclusie 1.

4. Werkwijze voor het bereiden van een heterocyclische verbinding, met het kenmerk, dat men een heterocyclische verbinding volgens conclusie I, of een 25 niet-toxisch zout of niet-toxisch, metabolisch labiele ester daarvan, bereidt door (A) een verbinding met formule 2, waarin Y een in conclusie 1 gedefinieerde betekenis heeft, B N S of ^ S —0 ( ïL. - of -) weergeeft; R^ een waterstof- 30 atoom of een groep die de carboxylgroep blokkeert voorstelt en de stippellijn die de 2-, 3- en 4-plaats verbindt aangeeft 8304024 - -36- * c dat de verbinding een cef-2-em- of cef-3-em verbinding is f of een zout of 7 N-s.ylylderivaat daarvan, of een overeen- Θ komstige verbinding met een -COO groep op de 4-plaats, te acyleren met een zuur met formule 3, waarin een 5 aminogroep of een beschermde·, aminogroep voorstelt, of een zout daarvan, of met een acyleringsmiddel dat daarmee overeenkomt, (B) een verbinding met formule 4, waarin Rj, R^, B en de stippellijn de hiervoor aangegeven betekenissen 10 hebben en X een residu van ' een nucleofiel is dat kan worden vervangen, of een zout daarvan, te laten reageren met een zwavelnucleofiel die dient voor het vormen van de -CI^SY-groep, waarin Y een in conclusie 1 gedefinieerde betekenis heeft, op de 3-plaats, of 15 (C) indien Y in de gewenste verbinding volgens conclusie 1 een door alkyl met 1-4 koolstofatomen of door een carbamoylmethylgroep gesubstitueerd kwatemair stikstofatoom in de heterocyclische ring is, een verbinding met formule 5, waarin R^, B en de stippellijn de hiervoor ge-20 definieerde betekenissen hebben, Rj in dit geval een carboxyl- groepblokkerende groep is en Y’ een via koolstof verbonden heterocyclische 5- of 6-ring die een tertiair stikstofatoom bevat voorstelt, te laten reageren met een Cj_^ alkylerings-middel of een carbamoylmethyleringsmiddel dat dient voor 25 het invoeren van een alkylgroep met 1-4 koolstofatomen of een carbamoylmethylgroep als substituent aan het tertiaire stikstofatoom in de heterocyclische ring van Y’, en daarna, desgewenst, en/of gewenst, telkens elk van de volgende reakties, in elke geschikte volgorde, uit te voeren: 30 i) omzetting van een Δ -isomeer in het gewenste Δ ^-isomeer, ii) reduktie van een verbinding waarin B = ^ S —* 0 in een verbinding waarin B = ^ S, iii) omzetting van een carboxylgroep in een 35 niet-toxische, metabolisch labiele, esterfunktie, 83 0 4 9 2':· -37- iv) vorming van een niet-toxisch zout en v) verwijdering van eventuele carboxylgroep-blokkerende groepen en/of N- besehermencfegroepen.

5. Farmaceutiscne preparaten die als aktief 5 bestanddeel een of een aantal verbindingen volgens conclusie 1, desgewenst tezamen met een farmaceutische drager en/of excipient bevatten.

6. Werkwijzen als beschreven in de beschrijving en/of voorbeelden. 10 U S304??.A