NL8701994A

NL8701994A - Toepassing van n-(2-hydroxyethyl)nicotinamidenitraat of een farmaceutisch acceptabel zout hiervan ter bereiding van een geneesmiddel.

Info

Publication number: NL8701994A
Application number: NL8701994A
Authority: NL
Original assignee: Chugai Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 1986-08-27
Filing date: 1987-08-26
Publication date: 1988-03-16
Also published as: BE1003959A5; KR950002151B1; GB8720219D0; IE872218L; DE3728499A1; FI873727A; SE8703308D0; CA1302888C; IT1211477B; NO873571D0; AU603375B2; SE8703308L; DK441987D0; IT8767725A0; LU86973A1; IE60601B1; GB2195532B; KR880002525A; SG52393G; FR2605222A1

Description

* -1- 26702/Vk/mvl

Korte aanduiding: Toepassing van N-(2-hydroxyethyl>nicotinamidenitraat of een farmaceutisch acceptabel zout hiervan ter bereiding van een geneesmiddel.

5

De uitvinding heeft betrekking op de toepassing van N-(2-hydroxy-ethyUnicotinamidenitraat of een farmaceutisch acceptabel zout hiervan als actieve stof in een hoeveelheid effektief om cerebrale bloedvaten te verwijden, samen met een farmaceutisch acceptabele drager ter bereiding 10 van geneesmiddelen. Volgens de uitvinding wordt het geneesmiddel gebruikt tegen ziekten samenhangende met cerebrale ischaemie. Verder heeft de uitvinding betrekking op een therapeutisch middel voor het behandelen van ziekten samenhangende met cerebrale ischaemie, welk middel hierdoor wordt gekenmerkt, dat het N-(2-hydroxyethyl)nicotinamidenitraat of een zout 15 hiervan bevat als actief middel. Meer in het bijzonder heeft de uitvinding betrekking op een zeer effektief middel voor het behandelen van ziekten samenhangende met cerebrale ischaemie zoals cerebrale arteriosclerosis, de nasleep van cerebraal infarct, de nasleep van een cerebrale aandoening die een bloeding veroorzaakt, de nasleep van cerebrale apoplexy, de na-20 sleep van trauma in het hoofd en dergelijke en symptomen samenhangende met deze ziekten zoals hypoxia, anoxia en dergelijke evenals de neurologische symptomen zoals duizeligheid, spraakstoornis, motorische en sensoire afwijkingen, paropsis en dergelijke.

N-(2-hydroxyethyl)nicotinamidenitraat is toegepast om patiënten 25 te behandelen die Lijden aan angina pectoris. Deze verbinding is echter niet toegepast om cerebrale ischaemie of daarmee samenhangende ziekten te genezen.

Anderzijds zijn verschillende therapeutische middelen toegepast voor de behandeling van ziekten samenhangende met cerebrale ischaemie, 30 zowel in de acute als de chronische fasen. Deze middelen worden in het algemeen in de twee volgende groepen verdeeld: middelen voor het verbeteren van de cerebrale circulatie en activeringsmiddelen van het cerebrale metabolisme. Hoewel therapeutische middelen die worden geklassificeerd als middelen ter verbetering van de cerebrale circulatie 35 in het algemeen vasoditaterende werkingen hebben op cerebrale btoedvaten, hebben ze ook dezelfde invloed op de andere periferale bloedvaten, hetgeen leidt tot ongewenste resultaten zoals systemische hypotensie. Daarom 8 7 0 1 9 s 4 * -2- 26702/Vk/mvl is gezocht naar middelen die selectief werken op cerebrale bloedvaten. Anderzijds worden activeringsmiddelen voor het cerebrale metabolisme beschouwd als middelen die de cerebrale ischaemie verbeteren door het vergroten van het cerebrale zuurstofgebruik en de opname van glucose in 5 de hersenen en ook door beschermende werkingen uit te oefenen op het energie-producerende systeem zoals is weergegeven in de ischaemische experimenten, hoewel het mechanisme van de werking hiervan nog niet duidelijk is gemaakt.

Slechts enkele bekende middelen voor de behandeling van storingen 10 in de cerebrale circulatie hebben selectieve werkingen ten aanzien van de cerebrale bloedvaten en enkele hiervan veroorzaken systemische hypo-tensie. Verder is het mechanisme van de werking van de meeste hiervan niet bekend.

In het kader van het onderhavige onderzoek is gebleken dat de 15 verbindingen volgens de onderhavige uitvinding, te weten N-(2-hydroxy-ethyUnicotinamidenitraat en zouten hiervan, de cerebrale bloedvaten verwijden zonder dat een aanzienlijke daling wordt veroorzaakt in de systemische bloeddruk [Kekkan (Blood Vessel) 6, 3 (1983), Japanese Heart Journal (Jap. Heart J.) 19, 112 (1977) en Chiryou (Treatment) 60, 1 20 (1978)]. Verder is gebleken dat deze verbindingen het cerebrale metabo lisme verbeteren door het vergroten van de glucose-opname door de hersenen en dat deze verbindingen werkzaam zijn bij het behandelen van verschillende hypoxia-modellen en zodoende is men tot de onderhavige uitvinding gekomen.

25 Verbindingen volgens de onderhavige uitvinding, te weten N-(2-hydroxyethyl)nicotinamidenitraat en zouten hiervan kunnen bijvoorbeeld als volgt worden bereid.

Aan een nitraatester van 2-aminoethanol wordt een katalysator toegevoegd zoals natriumwaterstofcarbonaat, pyrimidine of een basische kata-30 lysator zoals kaliumcarbonaat, triëthylamine en dergelijke. Het gebruik van een katalysator verdient de voorkeur, hoewel de reactie ook plaatsheeft zonder katalysator. Water of een organisch oplosmiddel zoals chloroform, pyridine, tetrachloorkoolstof, benzeen, dichloormethaan, tolueen, triëthylamine en dergelijke wordt toegevoegd aan het reactie-35 mengsel dat daarna wordt gekoeld. Onder roeren wordt een gelijke of overmatige molaire hoeveelheid nicotinezuurchloride of het zoutzure zout hiervan of een ander funktioneel derivaat van nicotinezuur, in ge- 87 0 1 99 4 ► *

-3- 26702/Vk/mvL

deelten toegevoerd onder verwarmen of bij kamertemperatuur, bij voorkeur tussen 0 en 5 °C gedurende 5-90 minuten, meer in het bijzonder gedurende 10-30 minuten. Na verder roeren en afscheiden van de oplosmiddellaag uit het verkregen produkt wordt de waterlaag opnieuw geëxtraheerd met het 5 oplosmiddel. De gecombineerde oplosmiddellaag wordt gewassen en gedroogd, gevolgd door indampen onder verlaagde druk. Het verkregen residu wordt herkristatliseerd uit een organisch oplosmiddel ter verkrijging van de beoogde verbinding in de vorm van kleurloze, naaldachtige kristallen.

Deze verbinding kan eventueel worden omgezet tot anorganische of 10 organische zouten zoals het hydrochloride, oxalaat, p-tolueensulfonaat, maleaat of een dergelijk zout volgens een algemeen bekende methode.

Dit therapeutisch middel voor het behandelen van cerebrale circu-latiestoornissen kan aan de mens worden toegediend volgens hiertoe geschikte methoden, zoals een orale of parenterale (intramusculaire, 15 subcutane, intraveneuze toediening en via een zetpil). De verbinding volgens de onderhavige uitvinding kan worden samengesteld tot doserings-vormen zoals een tablet, granule, poeder, capsule, suspensie, injectie, zetpil en dergelijke volgens een op zich bekende werkwijze op het gebied van de formuleringstechnologie. De actieve stof kan bijvoorbeeld worden 20 geformuleerd tot een tablet, granule of poeder door het te mengen met een hulpstof, een bindmiddel, een oplosmiddel en dergelijke, zoals met farmaceutische hulpstoffen zoals lactose, zetmeel, mannitol, kaoline, kristal-lijne cellulose, talk, calciumcarbonaat, magnesiumstearaat en dergelijke.

De verbinding kan ook in een capsule worden gebracht door het vullen van 25 een harde capsule met de verbinding in de vorm van een granule of poeder of door het vullen van een zachte capsule met de in olie opgeloste vorm van de verbinding. Bij het bereiden van een suspensie kan de verbinding worden gesuspendeerd in een waterige oplossing, samen met poedervormige Arabische gom of witte suiker, gevolgd door het regelen van de pH-waarde 30 hiervan. Bij een formulering voor een injectie kan de verbinding worden gemengd met mannitol.

Het gehalte van de onderhavige verbinding in verschillende doseringsvormen zoals tabletten, capsules en dergelijke, moet een geschikte hoeveelheid zijn zodat de therapeutische en profylactische werking 35 van de verbinding voor cerebrale circulatiestoornissen effektief zal zijn zonder dat nadelige werkingen worden verkregen. In het algemeen verdient het de voorkeur wanneer elk tablet of capsule 1-20 mg van dit middel bevat 8701994 if -4- 26702/Vk/mvl voor het behandelen van circulatiestoornissen als doseringseenheid voor orale toediening en elk flesje bevat ongeveer 0,1-12 mg van de actieve stof als doseringseenheid voor parenterale toediening.

De feitelijke dosering kan bij een patiënt worden toegediend 5 onder toepassing van de bovenvermelde doseringseenheid van het preparaat, afhankelijk van de individuele omstandigheden van de patiënt. Het zal duidelijk zijn dat het noodzakelijk is de feitelijke dosering te veranderen, afhankelijk van de behoefte van een individuele patiënt. De geschikte dagelijkse dosering voor een volwassen patiënt is ongeveer 10 1-100 mg voor orale toediening en ongeveer 0,1-150 mg bij intraveneuze injectie.

De uitvinding wordt nader toegelicht aan de hand van de volgende voorbeelden.

Voorbeeld I (Preparaat).

15 (a) Sublinguaal tablet.

Verbinding volgens de onderhavige uitvinding _ (vrije vorm) m9 lactose 19,7 mg mannitol 25 mg 2Q magnesiumstearaat 0,3 mg_ 50 mg/tablet

De bovenvermelde verbindingen werden goed gemengd en direkt tot tabletten geperst van 50 mg en met een diameter van 5 mm in een tablet-teermachine.

25 (b) Tablet (voor orale toediening).

Verbinding volgens de onderhavige uitvinding 1fJ (hydrochloridezout) m9 lactose 44,5 mg maïszetmeel 20 mg 2q kristallijne cellulose 25 mg magnesiumstearaat 0,5 mg_ 100 mg/tablet

De bovenvermelde verbindingen werden goed gemengd en direkt tot tabletten geperst met een gewicht van 100 mg en een diameter van 7 mm 35 met behulp van een tabletteermachine.

8/01994 % -5- 26702/Vk/mvl (c) Harde capsule.

Verbinding volgens de onderhavige uitvinding ?n (vrije vorm) m9 lactose 176 mg g magnesiumstearaat 4 mg_ 200 mg/capsule

De bovenvermelde verbindingen werden goed gemengd en toegevoerd aan een machine voor het vullen van capsules, toegevoerd aan capsules nr. 3 zodat elke capsule 200 mg zou bevatten van het mengsel en 250 mg 10 in zijn totaliteit zou wegen.

(d) Granule (harde capsule).

Verbinding volgens de onderhavige uitvinding 1fï (vrije vorm) m9 lactose 710 mg g maïszetmeellijm 280 mg_ 1000 mg/eenheids-vorm

De bovenvermelde verbindingen werden gemengd en goed gekneed. Het mengsel werd tot granules gevormd met een diameter van 1 mm onder toepas-20 sing van een granulator. Ze werden toegevoerd aan capsule nr. 3, zodat elke capsule 200 mg zou bevatten van de granules en in zijn totaliteit 250 mg zou wegen.

(e) Injectie.

Verbinding volgens de onderhavige uitvinding (vrije vorm) m9 mannitol 50 mg_ 55 mg/flesje

De verbindingen zoals bovenvermeld, werden goed gemengd en toe* gevoerd aan een hiertoe geschikt flesje, gevolgd door lyofilisatie vol-30 gens een algemeen bekende methode. Het flesje werd daarna afgesloten om de injectie te bereiden. Het produkt werd zodanig samengesteld, dat dit kon oplossen in 1 ml gedestilleerd water bij de tijdsduur voor de injectie.

Voorbeeld II (Acute toxiciteit) 35 De orale en intraveneuze acute toxiciteit van de verbinding vol gens de onderhavige uitvinding werden bestudeerd bij mannelijke en vrouwelijke SD-ratten die 4 weken oud waren. De resultaten toonden aan dat de 8701994

-6- 26702/Vk/mvL

orale LD^-waarde is gelegen tussen 1200 mg/kg en 1300 mg/kg bij zowel mannelijke als vrouwelijke ratten en dat de intraveneuze LD^g-waarde is gelegen tussen 800 mg/kg en 1000 mg/kg bij zowel mannelijke als vrouwelijke ratten.

5 Voorbeeld III

Invloed op hypoxia of KCN-geïnduceerde dood.

C1) Dieren en toegepaste geneesmiddelen.

Mannelijke F344/NS1c (Fischer) ratten met een gewicht van 78-210 g (9 weken oud) werden voor dit onderzoek gebruikt.

10 Het onderzochte geneesmiddel werd gesuspendeerd in 2% oplossing van Arabische gom en oraal bij de dieren gedurende 30 minuten toegediend voordat gas werd toegevoerd of een intraveneuze KCN-injectie. Een ter vergelijking dienende groep ontving eveneens 2,0 mg/kg 2% Arabische gom-oplossing via orale weg.

15 (2) Invloed op normobarische hypoxia.

Ratten werden in een kooi geplaatst onder normale atmosferische druk en een gasmengsel bestaande uit 97% Ng en 3% werd toegevoerd in een hoeveelheid van 2 l/minuut. De periode vanaf het begin van de gastoevoer tot beëindigen van de ademhaling werd geregistreerd als 20 overlevingstijd (sec). Tabel A geeft de resultaten weer.

TABEL A

, u. ... , dosering (mg/kg) overlevingstijd (sec) onderzocht geneesmiddel . . , Z , - - * oraal toegediend (gemiddelde +_ S.E.) 25 ter vergelijking — 311,8 _+ 10,3 3 357,4 +_ 19,4 verbinding volgens de ^ 5+3^ 2*3) onderhavige uitvinding ' — ' 30 411,8 + 28,6 30 1 318,3 + 9,6 nicardipine 3 293,7 +_ 15,3 10 283,8 + 14,4 10 348,3 + 18,1 vinpocetine 30 367,8 +_ 18,6 ^ 35 100 371,4 + 23,8*1)

Opmerkingen: *1) P<0,05; *2) P<0,01; *3) P<0,001 (Student t~test) 8/01994 5 -7- 26702/Vk/mvl (3) Invloed op de door KCN-geinduceerde dood.

Een groep van 10 mannelijke ratten (testgroep voor het geneesmiddel) en een groep van 20 mannelijke ratten (ter vergelijking dienende groep) werd toegepast. Dertig minuten na toediening van het 5 geneesmiddel werd 3 mg/kg KCN toegediend in de ader van de staart en de overLevingsverhouding werd geregistreerd. Het significant zijn van de gegevens met betrekking tot de overLevingsverhouding werd getest volgens de x2-methode. Tabel B geeft de resultaten weer.

TABEL B

10 --------- onderzocht geneesmiddel dosering ^3? overLevingsverhouding (%) oraal toegediend ter vergelijking — 3/20 (15,0) 3 2/10 (20,0) verbinding volgens de onderhavige uitvinding ' 30 8/10 (80,0) 1 0/10 (0,0) nicardipine 3 0/10 (0,0) 20 10 3/10 (30,0) 10 3/10 (30,0) vinpocetine 30 5/10 (50,0) 100 7/10*2) (70,0)

Opmerking: *2) P<0,01 Voorbeeld IV

Invloed op de opname van glucose in de hersenen.

(1) Toegepaste dieren en geneesmiddelen.

Mannelijke F344/NSlc (Fischer) ratten die 9-11 weken oud 30 waren, werden toegepast. Ze werden aan het onderzoek onderworpen nadat ze gedurende ongeveer 18 uren geen voeding hadden gekregen.

Het te onderzoeken geneesmiddel werd gesuspendeerd in een oplossing van 2% Arabische gom en 2 ml/kg hiervan werd oraal aan elke groep toegediend. De ter vergelijking dienende groep ontving op verge-35 lijkbare wijze oraal een oplossing van 2% Arabische gom.

(2) Toeneming van de glucose-opname in de hersenen bij normale ratten.

De dieren werden in vier groepen verdeeld, vijf per groep. De 8701994

-8- 26702/Vk/mvL

» verbinding volgens de onderhavige uitvinding werd oraal aan de groep toe-gediend bij 3 doseringsniveaus, te weten 3, 10 en 30 mg/kg. Een ter vergelijking dienende groep kreeg 2% oplossing van Arabische gom toegediend.

Dertig minuten na de toediening werden de ratten gedood door be-5 straling met microgolven (Toshiba-microgolftoestel TMW-6402, 5 kW, 1,4 sec.), welke bestraling gericht was op de kop. De schedel werd direkt geopend om de hersenen te verwijderen en de cerebrale cortex werd zorgvuldig uitgesneden. Een kwantitatieve bepaling van de monsters werd uitgevoerd in overeenstemming met de methode volgens Forbergrova et al 10 [J. Neurochem., vol. 19 (1972)]. Hierbij werd aan een ingewogen hoeveel heid hersenmonster een met ijs gekoelde 0,3 N HCI0^/1 mM EDTA-oplossing toegevoegd (2 ml/200 mg nat weefselgewicht). Het mengsel werd gehomogeniseerd en gecentrifugeerd (26.000 x g, 10 minuten bij 4 °C) om de bovenstaande vloeistof af te scheiden die werd bewaard. Het verkregen neer-15 slag werd gehomogeniseerd en opnieuw gecentrifugeerd onder dezelfde omstandigheden en de bovenstaande vloeistof werd gecombineerd met de vloeistof verkregen uit de eerste centrifugeerbewerking. De gecombineerde bovenstaande vloeistof werd geneutraliseerd met een met ijs gekoeld mengsel van 1,5 N Κ0Η - 0,4 M imidazoL - 0,3 N KOI en na centrifugeren 20 werd de verkregen bovenstaande vloeistof gebruikt als monsters voor de kwantitatieve bepaling van glucose. De monsters werden bepaald met behulp van een fluorofotometer (bestralende golflengte: 340 nm, fluorescerende golflengte 455 nm, Aminco Spectrofotofluorometer, vervaardigd door American Institute Company), waarbij de vorming en ontleding werd ge-25 registreerd van NADH of NADPH. Tabel C geeft de verkregen resultaten weer.

TABEL C

gehalte aan glucose in toegevoegd dosering N de hersenen (μ mol/g 2q geneesmiddel (mg/kg P.0.) hersenen) ____(gemiddelde j S.E.) ter vergelijking — 5 0,93 _+ 0,06 , . . 3 5 1,45 + 0,07*3) verbinding volgens ' — ' de onderhavige 10 5 1,53 +_ 0,10 35 uitvinding 3Q 5 1/80 ^ 0,08*3)

Opmerking: *3) P< 0,001 (Student t-test) 8701994 * ί -9- 26702/Vk/mvl (3) Verhoging van de opname van glucose in de hersenen bij ratten onder hypoxische omstandigheden.

De dieren kregen 30 mg/kg van de verbinding volgens de uitvinding of 2% oplossing van Arabische gom (ter vergelijking) oraal toe-5 gediend. Dertig minuten na de toediening van het të testen geneesmiddel werden de ratten in een kooi geplaatst en een gasmengsel bestaande uit 97% Ng en 3% werd toegevoerd in een hoeveelheid van 2 l/minuut gedurende 5 minuten, waardoor ze onder hypoxische omstandigheden werden gebracht. Direkt na de hypoxische periode werden de ratten gedood door 10 bestraling met microgolven. De normale ratten van de ter vergelijking dienende groep werden gedood volgens een vergelijkbare methode op een tijdstip 30 minuten na de toediening van de ter vergelijking dienende oplossing. De cerebrale cortex werd uitgesneden en de monsters werden voor de analyse geprepareerd zoals beschreven onder C1) en het gehalte 15 aan glucose werd bepaald. In tabel D zijn de verkregen resultaten samengevat .

TABEL D

gehalte aan glucose toegevoegd geneesmiddel , N in de hersenen 20 Cmg/kg P.0.) (y mol/g hersenen) (gemiddelde +_ S.E.) ter vergelijking — 8 0,92 _+ 0,05 hypoxische _______________________________________________________________ hPdïn™**9 verbinding vol- n gens de uitvin- 30 8 1,12 + 0,04" 25 ding normaal ter vergelijking — 8 1,30 +_ 0,03*^

Opmerkingen: *2) P<0,01; *3) P<0,001 (Student t-test)

Voorbeeld V

30 (Clinisch onderzoek).

Tabletten met de verbinding volgens de uitvinding werden oraal toegediend bij een dagelijkse dosering van 15-30 mg gedurende 8 weken aan patiënten met een leeftijd van 40 tot 80 jaar die aan een cerebraal infarct leden (thrombose of embolisme) en cerebrale arteriosclerosis.

35 De verlichting van subjectieve en mentale symptomen werd bepaald (licht hersteL-ópmerkelijk herstel) en de resultaten zijn weergegeven in tabel E.

8/0199 4 -10- 26702/Vk/mvl Λ TABEL Ε aantal onderzochte aantal gevallen waarbij de behandeling gevallen effektief was (effektieve verhouding) 5 49 33 (67/3%)

Als enkele nadelige reactie werd bij twee gevallen een lichte hoofdpijn waargenomen.

De bovenvermelde resultaten geven aan dat de verbinding volgens 10 de onderhavige uitvinding de overlevingstijd verlengt en de opname van glucose in de hersenen bij ratten doet toenemen onder hypoxische omstandigheden. Zodoende is aangetoond dat het middel geschikt is als therapeutisch middel voor de behandeling van ziekten samenhangende met cerebrale ischaemia.

8701994

Claims

1. Toepassing van N-(2-hydroxyethyl)nicotinamidenitraat of een farmaceutisch acceptabel zout hiervan als actieve stof in een hoeveel- 5 heid effektief om cerebrale bloedvaten te verwijden, samen met een farmaceutisch acceptabele drager ter bereiding van geneesmiddelen werkzaam tegen ziekten samenhangende met cerebrale ischaemie.

2. Toepassing volgens conclusie 1, met het kenmerk, dat het geneesmiddel de vorm heeft van een tablet dat 0,1-20 mg actieve stof 10 bevat.

3. Toepassing van het geneesmiddel in de vorm van een capsule, met het kenmerk, dat hij 0,1-20 mg actieve stof bevat.

4. Toepassing van het geneesmiddel volgens conclusie 1, met het kenmerk, dat dit de vorm heeft van een injectie die 1-12 mg actieve 15 stof bevat.

5. Geneesmiddel ter behandeling van cerebrale ischaemie, bestaande uit een actieve stof en gebruikelijke hulpstoffen, met het kenmerk, dat als actieve stof N-C2-hydroxyethyl)nicotinamidenitraat is toegepast, 8701994