MXPA05002519A

MXPA05002519A - Reparacion de dano mutagenico al dna.

Info

Publication number: MXPA05002519A
Application number: MXPA05002519A
Authority: MX
Inventors: Cath Walker
Original assignee: Novogen Res Pty Ltd
Priority date: 2002-09-06
Filing date: 2003-09-05
Publication date: 2005-06-17
Also published as: NO20051605L; TR200500749T2; AU2002951271A0; CZ2005136A3; US20060153781A1; EP1534232A4; JP2006501252A; EP1534232A1; CA2497823A1; CN1688285A; WO2004022023A1; NO20051605D0

Abstract

Se describen metodos para proteger la piel de dano mutagenico al DNA inducido por yayos UV, que comprende la administracion de uno o mas compuestos de equol, deshidroequol, isoflav-3-eno e isoflavano en mezcla con un portador aceptable dermicamente. Taimen se describen metodos para prevenir la informacion de cancer de la piel.

Description

REPARACION DE DAÑO MUTAGENICO AL DNA CAMPO DE LA INVENCION La presente invención concierne al uso de equol, deshidroequiol e iso-flav-3-eno y compuestos de isoflavano al promover la reparación del daño mutagénico al DNA.

ANTECEDENTES DE LA INVENCION Las metalotioneinas (MT) , son proteínas sintetizadas o sobre expresadas en respuesta a agentes que dañan el DNA por ejemplo Rayos UV (Hansen y colaboradores 1997) . En la mayoría de los estudios en cultivos de tejidos y animales, se usaron altas dosis de radiación para inducir las MT, y por consiguiente, es difícil extrapolar estos resultados a nivel bajo o exposiciones repetidas a Rayos UV en humanos (Cai y colaboradores, 1999) . La síntesis inducida de MT se consideró como uno de los mecanismos involucrados en la respuesta adaptable a la exposición a bajas dosis de Rayos ÜV, y niveles crecientes de MT parece estar asociada con la protección de los Rayos UV, posiblemente mediada a través de la eliminación de ROS en la piel (Hanada, y colaboradores 1992) . También, MT está implicada en la protección contra los efectos inmunosupresores de los Rayos UV sobre respuestas mediadas por células como se demostró en ratones ahotados con MT = I y II (Reeve, y colaboradores 2000) . Los Rayos UV induce MT detectable inmunohistoquimicamente en queratinocitos y fibroblastos concurrentemente con la fotoconducción de p53, lo cual sugiere que los sistemas de estas proteínas son de función protectoras y complementarias. MT es detectable en fibroblastos dérmicos desde 2 horas post-UV (Anstey, y colaboradores 1996) . Se describen el equol, deshidroequol , isoflav-3-eno y compuestos de isoflavano y métodos para producir los mismos en la Solicitud de Patente Internacional PCT/AU 03/00427 y WO 98/08503 provisional, que se incorpora a la presente como referencia. La piel expuesta a rayos UV causa daño en el DNA que puede dar origen a carciogénesis . La mayoría de los tumores comunes en humanos es el carcinoma celular basal (BCC) seguida por el carcinoma de células escamosas (SCC) , y más raramente melanoma maligno. Los solicitantes encontraron que compuestos de la presente invención, cuando se aplican a la piel dan como resultado la elevación de la producción de metalotioneinas en la piel, particularmente la capa basal de la piel irradiada . Como se mencionó anteriormente, las metalotioneinas afectan y promueven la reparación de daño mutagénico al DNA de la piel sometida a exposición a rayos UV.

SUMARIO DE LA INVENCIÓN De conformidad con la presente invención se proporciona el uso de equol, deshidroequol, isoflav-3-eno o compuestos de isoflavano para proteger la piel de daño mutagénico al DNA asociado con la exposición a los rayos UV. En otro aspecto se proporciona el uso de equol, deshidroequol, isoflav-3-eno o estructuras de isoflavano para la sobre-expresión de metalotioneinas en la piel, particularmente en la capa basal de la piel. De conformidad con otro aspecto de esta invención se proporciona un método para proteger la piel del daño mutagénico al DNA inducido por los rayos ÜV, que comprende aplicar a la piel una composición que contiene uno o más de equol, deshidroequol, isoflav-3-eno, o compuestos de isoflavano en mezclas con un portador aceptable dérmicamente. El isoflav-3-eno y los compuestos de isoflavano pueden representarse por la Fórmula General (ID en donde ¾/ RZÍ R3 y 4/ son independientemente hidrógeno, hidroxi, 0R9, OC(O)R10, OS (0) Rio, CHO, C(O)R10, COOH, CO2Ri0, C0 RnRi2, alquilo, haloalquilo, arilalquilo, alquenilo, alquinilo, arilor heteroarilo, alquilarilo, alcoxiarilo, tio, alquiltio, amino, alquilamino, dialquilamino, nitro o halo, o R3 y R son como se definieron previamente, y ¾ y R2 tomados juntos con los átomos de carbono al cual están fijados forman un anillo de cinco elementos seleccionado de Ri y R son como se definieron previamente, y R2 y R3 tomados juntos con los átomos de carbono al cual están fijados forman un anillo de cinco elementos seleccionados de Ri 2 son como se definieron previamente, y R3 y ¾ tomados juntos con los átomos de carbono a los cuales están fijados forman un anillo de cinco elementos seleccionado de Rs, Re y 7 son independientemente hidrógeno, hidroxi, 0R9, OC(O)Ri0, OS (0) Rio, CHO, C(O)Ri0, COOH, C02Rio, CONRnRi2, alquilo, haloalquilo, arilaquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, heteroarilo, tio, alquiltio, amino, alquilamino, dialquilamino, nitro o halo, R8 es hidrógeno, hidroxi, alquilo, arilo, amino, tio, NR11R12 , CONR11R12, C(0)R13 donde R13 es hidrógeno, alquilo, arilo, arilalquilo, o un aminoácido, o CO2R14 , donde R14 es hidrógeno, alquilo, haloalquilo, arilo o arilalquilo, R9, es alquilo, haloalquilo, arilo, arilalquilo, C(0) i3 donde R13 es como se definió previamente, o Si(Ri5)3 donde Ri5 es independientemente hidrógeno, alquilo o arilo, Rio, es hidrógeno, alquilo, haloalquilo, amino, arilo, arilalquilo, un aminoácido, alquilamino o dialquilamino, R11 es hidrógeno, alquilo, arilaquilo, alquenilo, arilo, un aminoácido, C(0)Ri3 donde R13 es como se definió previamente, o C02Ri4, donde R14 es como se definió previamente , R12 es hidrógeno, alquilo o arilo, o Rii y R12 tomados juntos con nitrógeno al cual están fijados comprende pirrolidinilo o piperidinilo, la expresión " " representa ya sea un enlace simple o un doble enlace, preferiblemente un doble enlace, T, es independientemente hidrógeno, alquilo o arilo, y X es O, NR12 o S, preferiblemente 0, Incluyendo sales y derivados de los mismos aceptables farmacéuticamente . El equol corresponde a la Fórmula (II) cuando Rlr R2, R3, R4, 6, R7 y Re son hidrógeno, R5 es hidroxi, X es 0, y " " es un enlace simple. El deshidroequol corresponde a la Fórmula (II) cuando Ri, R2, R3, R4, R6, R7 y Rs son hidrógeno, R5 es hidroxi, X es 0 y " " es un doble enlace. Los portadores y lociones aceptables dérmicamente son bien conocidos en el arte, y se describen por ejemplo en Remington' s Pharmaceutical Sciences, Gennaro A. 18ava Ed., Mack APublishing Co., Easton, PA, 1990, pag. 1492-1517. Cualquier portador aceptable dermatológicamente puede ser usado en las composiciones de la invención. Como se usa en la presente, "portador aceptable dermatológicamente", se refiere a vehículos, diluyentes, portadores, los cuales pueden incluir adyuvantes, aditivos, o excipientes conocidos apara uso en composiciones dermatológicas. Las composiciones de la invención incluyen, pero no se limitan a, cremas, ungüentos, soluciones, barras, frotadores, limpiadores, y/o geles. Los compuestos de la presente invención pueden ser simplemente mezclados, añadidos al mezclar o combinados con portadores adecuados para dar composiciones adecuadas para aplicación a la piel. Los portadores aceptables dermatológicamente pueden incluir uno o más agentes bloqueadores solares. Los bloqueadores solares incluyen los materiales usados comúnmente para bloquear los rayos ultravioleta. Los compuestos ilustrativos incluyen los derivados de cinamato, PABA, y salicilato. Por ejemplo, pueden usarse metoxicinamato de octilo y 2- hidroxi- 4- metoxi benzofenona (también conocida como oxibenzona) . El metoxicinamato de octilo y la 2- hidroxi- 4- metoxi benzofenona están disponibles comercialmente bajo las marcas comerciales, Parsol MCX y Benzofenona-3, respectivamente. La cantidad exacta de bloqueador solar empleada puede variar dependiendo del grado de protección deseada de la irradiación de rayos UV del sol. En una modalidad preferida uno o más compuestos de la Fórmula (II) se formularon en preparaciones cosméticas. Los ejemplos de formulaciones cosméticas incluyen cremas, geles, polvos, pastas, tortas y los similares. Típicamente dichos cosméticos pueden ser mencionados como , "maquilla e", y/o base (típicamente usado para proporcionar una apariencia uniforme, lisa a la piel y como una base para cosméticos coloreados) . Los compuestos de Fórmula (II) pueden ser usados en las composiciones en una cantidad desde 0.001 % a 100 %, preferiblemente desde 0.1 % a 20 %, mayormente se prefiere desde 0.1 % a 10 % en peso. Por ejemplo, las composiciones pueden comprender 1 µp? a 500 inmoles de equol o de otros compuestos de la Fórmula (II) , tal como 20 um a 400 um. El remanente de la composición comprenderá uno o más portadores y excipientes aceptables dermatológicamente que son bien conocidos en el arte. Pueden utilizarse uno o más compuestos en las composiciones, con equol y deshidroequol, que se prefiere particularmente. Las composiciones pueden ser administradas tópicamente a la piel antes de, durante y/o después de exposición al sol. Típicamente, las dosis de entre aproximadamente 1 a 500 mg por día, prefiriéndose las dosis de entre 2 a 100 mg por día . De conformidad con otros aspectos de esta invención se proporciona un método para el tratamiento, o mejoramiento o prevención de la formación de cáncer en la piel, tal como carcinoma de células básales (BCC) , carcinoma de células escamosas (SCC) y melanoma maligno, el cual comprende aplicar a la piel de un sujeto una composición que contenga uno o más de equol, deshidroequol, o un compuesto de isoflav-3-eno o isoflavano de la Fórmula General (II) . En otro aspecto de la invención se proporciona un método para incrementar la producción de metalotioneina en la piel, tal como la capa basal de la piel, la cual comprende aplicar a la piel uno o más de equol, deshidroequol, isoflav-3-eno o compuestos de isoflavano en asociación con un portador aceptable dermatológicamente. Adicionalmente el solicitante encontró que los compuestos de conformidad con esta invención promueven la reparación del DNA. La promoción de la reparación del DNA puede ser por uno o mas de, incrementar la velocidad de reparación de dimeros de ciclobutan pirimidina (CPDs) , promover la reparación del DNA por disminución de la expresión de p53, y/o por promoción de la formación de metalotioneina (MT) . La formación de CPD se considera que es una consecuencia mutagénica y letal importante de la exposición a los rayos UV (Mitchell y colaboradores, 1989; Liardet y colaboradores, 2000) . Modelos animales han demostrado una relación inversa entre la reparación de de los CPD epidérmicos y la carcinogénesis de la piel (Young y colaboradores, 1996) . La proteina de P53 (TP53) es expresada después del daño al DNA por medio de irradiación ultravioleta. P53 es un factor de transcripción que bloquea el progreso celular desde la fase Gl a la S, previniendo asi la replicacion del DNA dañado (Campbell y colaboradores, 1993) . La proteina de P53 puede actuar como un agente promotor de tumores (Murphey y colaboradores, 2001) . DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN Esta invención puede ser descrita con referencia a los siguientes ejemplos no limitantes. Ejemplo 1 Se examinó el efecto del equol sobre la inducción de CPD en la piel de ratones lampiños (un modelo estándar para investigaciones dermatológicas humanas) expuestos a radiación ultravioleta estimulada por el sol (SSUV) . A varios tiempos puntuales después de SSUV, se extirparon las pieles dorsales, se fijaron por 6 horas en un medio fijador estándar (IlistoChoice™, Amersco Inc. Solón, Ohio, USA) , se procesaron y se implantaron en parafina. Se detectaron inmunohistoquimicamente dimeros de pirimidina usando la recuperación de antigenos de ácido cítrico y el anticuerpo dimérico anti-pirimidina H3. Se contó manualmente el número de células positivas al dimero en 30 campos por ratón, a amplificación de 40x. Cuando la loción de equol (que contenía 20 µ? de equol) se aplicó diariamente por 7 días antes de y después de irradiación con 1 x 3 ED de SSUV, el efecto del equol fue reducir la inducción inicial de dineros, y mejorar la velocidad de su reparación, como se pone en evidencia por un número reducido de dimeros a 24 horas (Tabla 1) . Tabla 1 : Inducción de células positivas al CPD epidérmico después de la irradiación UV.

La aplicación de equol inmediatamente después de la exposición SSUV (y continúa por 5 días) dio como resultado dimeros significativamente reducidos a 1 día postirradiación (una reducción significativa del 23 %) , a dos días (una reducción significativa de 42 % - no se muestran los datos) . Cuando se aplicó la loción de equol (20 µ?) tanto por 7 días antes como 5 días después de la exposición SSUV, la reducción en los números de CPD fue evidente inmediatamente y a l, 24 y 48 horas después (p < 0.05; 54 %, 50 % y 26 % de reducción en el número de CPD respectivamente) en comparación con el grupo control (vehículo solo) . Ejemplo 2 Se aplicó equol a la piel de cinco voluntarios humanos inmediatamente después, y a 4 horas y 6 horas post- irradiación UV. Se usó también una loción control que no contenía equol. Veinticuatro horas después de irradiación UV, se tomaron biopsias de piel y se midió la producción de MT usando inmunohistoquimica. La Tabla 2 muestra lo conteos de células en la epidermis basal y en la dermis superficial que demostraron tinción positiva para MT. Aproximadamente la mitad de las células en la epidermis basal expresaron constitutivamente MT en la línea base, mientras que casi ninguna de las células en las capas más superficiales de la epidermis expresaron MT. A 24 horas después de exposición a 2.5 MED SSÜV, ahí fueron obvias las diferencias en la expresión de MT en las capas básales de la epidermis entre las secciones tratadas con equol y las tratadas con DMSO en la loción base (vehículo) . En los 5 participantes, la expresión de MT fue superior en la piel tratada con equol, con la magnitud de la diferencia que varió desde + 4 % a + 21 %.

Tabla 2 : Proporción. de células que se tiñeron positivamente para MT en la epidermis de cinco humanos voluntarios, por grupo de tratamiento.

Epidermis Total Suj eto tratamiento negativo positivo *S N01DWH Linea base 303 201 40 10 minutos 255 179 41 DMSO 282 185 40 equol 303 382 56 N03PPA Linea base 227 109 32 10 minutos 231 237 51 DMSO 317 236 43 equol 270 271 50 N06MED Linea base 420 413 50 10 minutos 437 565 56 DMSO 440 442 50 equol 315 539 63 N13PDO Linea base 267 217 45 10 minutos 468 703 60 DMSO 465 405 47 equol 323 527 62 N14GB0 Linea base 270 127 32 10 minutos 381 242 39 DMSO 276 217 44 equol 225 234 51 Tabla 2 (Continuación) Epidermis Superior Su eto tratamiento negativo positivo N01DWH Linea base 99 0 0 10 minutos 72 0 0 DMSO 70 0 0 equol 185 2 1 N03PPA Linea base 97 0 0 10 minutos 77 4 5 DMSO 96 4 4 equol 82 0 0 N06MED Linea base 169 0 0 10 minutos 168 1 1 DMSO 130 6 4 equol 76 8 10 N13PDO Linea base 112 0 0 10 minutos 270 10 4 DMSO 144 0 0 equol 169 5 3 N14GBO Linea base 113 0 0 10 minutos 247 0 0 DMSO 111 4 3 equol 68 1 1 Tabla 2 (Continuación) Epidermis Basal Suj eto tratamiento negativo positivo N01DWH Línea base 204 201 50 10 minutos 183 179 49 DMSO 212 185 47 equol 118 380 76 N03PPA Linea base 130 109 46 10 minutos 154 233 60 DMSO 221 232 51 equol 188 271 59 N06MED Línea base 251 413 62 10 minutos 269 564 68 DMSO 310 436 58 equol 239 531 69 N13PDO Línea base 155 217 58 10 minutos 198 693 78 DMSO 321 405 56 equol 154 522 77 N14GBO Línea base 157 127 45 10 minutos 134 242 64 DMSO 165 213 56 equol 157 233 60 Nota : "línea base", se refiere a las secciones de la piel de la biopsia por punción tomadas antes de exposición a 2.5 MED de SSUV. "10 minutos", se refiere a las secciones de la piel de la biopsia por punción tomada 10 minutos después de exposición a 2.5 MED de SSÜV. La piel no fue tratada ni con DMSO en la loción base (vehículo) ni con equol a 200 µ?. "DMSO", se refiere a las secciones de la piel de la biopsia por punción tomada 24 horas después de exposición a 2.5 MED de SSUV. La piel fue de la rejilla tratada con DMSO en la loción base (vehículo) . "Equol", se refiere a las secciones de la piel de la biopsia por punción tomadas 24 horas después de exposición a 2.5 MED de SSÜV. · La piel fue de la rejilla tratada con equol a 200 µ?. El incremento de la inmunoreactividad de MT en queratinocitos básales y suprabasales de individuos expuestos a rayos UV recientemente fue superior en la piel que había sido tratada con equol. Ejemplo 3 Las biopsias de piel de los cinco humanos voluntarios del Ejemplo 2 fueron probadas para formación de dimeros de ciclobutan pirimidina usando inmunohistoquímica. La Tabla 3, presenta los conteos y porcentajes de células que se tiñeron positivamente con un anticuerpo dirigido contra CPD. Estos datos demuestran que, como se esperó, esencialmente no hubo células positivas a CPD en la epidermis antes de irradiación con 2.5 MED. No obstante, las secciones de piel tomadas de todos los participantes 10 minutos después de exposición a los rayos ÜV mostraron altos niveles de daño al DNA, con la proporción de células que se tiñeron positivamente que varió desde 36 % (participantes N01DWH y ?03???) a 87 % (participante N14GBO) . Las secciones de piel tomadas 24 horas después de exposición a los rayos UV mostraron niveles substancialmente más bajos de daño a CPD en todos los sujetos. Para 4 de los 5 participantes, la secciones de piel tratadas con loción de equol tuvieron proporcionalmente menos células positivas a CPD que las secciones de piel tratadas con DMSO en la loción base (vehículo) .

Tabla 3 : Proporción de células que se tiñeron positivamente para CPDs en la epidermis de cinco humanos voluntarios, por grupo de tratamiento.

Epidermis Total Suj eto tratamiento negativo positivo N01DWH Línea base 345 0 0 10 minutos 162 107 40 DMSO 231 105 31 equol 164 39 19 ?03??? Línea base 309 0 0 10 minutos 204 ¦ 191 48 DMSO 179 25 12 equol 349 18 5 N06MED Línea base 309 0 0 10 minutos 136 364 73 DMSO 339 65 16 equol 279 92 25 N13PD0 Línea base 205 0 0 10 minutos 69 195 74 DMSO 105 68 39 equol 213 94 31 N14GB0 Línea base 255 0 0 10 minutos 34 389 92 DMSO 240 131 35 equol 188 85 31 Tabla 3 (Continuación) Epidermis Superior Sujeto tratamiento negativo positivo o ? N01DWH Linea base 134 0 0 10 minutos 64 51 44 DMSO 81 47 37 equol 70 23 25 N03PPA Linea base 104 0 0 10 minutos 56 106 65 DMSO . 55 20 27 equol 70 17 20 N06MED Linea base 90 0 0 10 minutos 19 198 91 DMSO 112 59 35 equol 98 71 42 N13PDO Linea base 60 0 0 10 minutos 20 94 82 DMSO 78 51 40 equol 79 50 39 N14GB0 Linea base 98 0 0 10 minutos 0 157 100 DMSO 93 69 43 equol 63 44 41 Tabla 3 (Continuación) Epidermis Basal Sujeto tratamiento negativo positivo o. o N01D H Linea base 211 0 0 10 minutos 98 56 36 DMSO 150 58 28 equol 94 16 15 N03PPA Linea base 205 0 0 10 minutos 148 85 36 DMSO 124 5 4 equol 279 1 0 N06MED Linea base 219 0 0 10 minutos 177 166 59 DMSO 227 6 3 equol 181 21 10 N13PDO Linea base 145 0 0 10 minutos 49 101 67 DMSO 27 11 39 equol 134 44 25 N14GBO Linea base 157 0 0 10 minutos 34 232 87 DMSO 147 62 30 equol 125 41 25 Nota : "línea base", se refiere a las secciones de la piel de la biopsia por punción tomadas antes de exposición a 2.5 MED de SSUV. "10 minutos", se refiere a las secciones de la piel de la biopsia por punción tomada 10 minutos después de exposición a 2.5 MED de SSUV. La piel no fue tratada ni con DMSO en la loción base ("vehículo) ni con equol a 200 µ?. "DMSO", se refiere a las secciones de la piel de la biopsia por punción tomadas 24 horas después de exposición a 2.5 MED de SSUV. La piel fue de la rejilla tratada con DMSO en la loción base (vehículo) . "Equol", se refiere a las secciones de la piel de la biopsia por punción tomadas 24 horas después de exposición a 2.5 MED de SSUV. La piel fue de la rejilla tratada con loción que contenía equol a 200 µ?. Cuando se conjuntaron los datos de todos los participantes, se pudo ver que las secciones de la piel tratadas con equol tuvieron niveles moderadamente más bajos de CPD dañado a 24 horas. Ejemplo 4 Las biopsias de piel de los cinco humanos voluntarios del Ejemplo 2 fueron probadas por tinción para P53 después de irradiación por rayos UV. En la Tabla 4 se muestran los resultados .

Tabla 4 : Proporción de células que se tiñeron positivamente para P53 en la epidermis de cinco humanos voluntarios, por grupo de tratamiento.

Epidermis Total Su eto tratamiento negativo positivo o o N01DWH Linea base 261 0 0 10 minutos 343 1 0 DMSO 187 12 6 equol 270 94 26 N03PPA Linea base 274 2 1 10 minutos 316 2 1 DMSO 223 55 20 equol 337 87 21 N06MED Linea base 412 1 0 10 minutos 402 3 1 DMSO 462 133 22 equol 500 50 9 N13PDO Linea base 325 0 0 10 minutos 304 0 0 DMSO 222 45 17 equol 287 13 4 N14GB0 Linea base 321 0 0 10 minutos 292 4 1 DMSO 217 190 47 equol 227 76 25 Tabla 4 (Continuación) Epidermis Superior Suj eto tratamiento negativo positivo o o N01DWH Línea base 115 0 0 10 minutos 154 1 1 DMSO 79 4 5 equol 109 48 31 N03PPA Línea base 112 1 1 10 minutos 114 2 2 DMSO 81 31 28 equol 165 72 30 N06MED Línea base 134 0 0 10 minutos 153 1 1 DMSO 165 77 32 equol 250 19 7 N13PD0 Línea base 141 0 0 10 minutos 140 0 0 DMSO 109 8 7 equol 147 4 3 N14GB0 Línea base 149 0 0 10 minutos 185 2 1 DMSO 106 106 50 equol 109 35 24 Tabla 4 (Continuación) Epidermis Basal Sujeto tratamiento negativo positivo o, N01D H Linea base 146 0 0 10 minutos 189 0 0 DMSO 108 8 7 equol 161 46 22 N03PPA Linea base 162 1 1 10 minutos 202 0 0 DMSO 142 24 14 equol 172 15 8 N06MED Linea base 278 1 0 10 minutos 249 2 1 DMSO 297 56 16 equol 250 31 11 N13PDO Linea base 184 0 0 10 minutos 164 0 0 DMSO 113 37 25 equol 140 9 6 N14GBO Linea base 172 0 0 10 minutos 107 2 2 DMSO 111 84 43 equol 118 41 26 Nota: "linea base", se refiere a las secciones de la piel de la biopsia por punción tomadas antes de exposición a 2.5 MED de SSUV. 10 minutos", se refiere a las secciones de la piel de la biopsia por punción tomada 10 minutos después de exposición a 2.5 MED de SSUV. La piel no fue tratada ni con DMSO en la loción base (vehículo) ni con equol a 200 µ?. "DMSO", se refiere a las secciones de la piel de la biopsia por punción tomadas 24 horas después de exposición a 2.5 MED de SSUV. La piel fue de la rejilla tratada con DMSO en la loción base (vehículo) . "Equol", se refiere a las secciones de la piel de la biopsia por punción tomadas 24 horas después de exposición a 2.5 MED de SSUV. La piel fue de la rejilla tratada con equol a 200 µ?. Como se esperó, esencialmente, no hubo células en la epidermis que expresan a p53 antes de las irradiaciones con 2.5 MED para cualquiera de los participantes. De manera similar secciones de piel tomadas de los participantes a 10 minutos después de exposición a rayos UV mostraron niveles despreciables de expresión de p53, de conformidad con la literatura. Las secciones de piel tomadas a 24 horas después de exposición a los rayos UV mostraron niveles substancialmente más altos de expresión de p53, en todos los sujetos. El porcentaje de expresión de p53 en la epidermis superior y/o basal se redujo en cuatro de los cinco sujetos tratados con equol. Por ejemplo, en los sujetos N13PD0 y N14GB0, el porcentaje de p53 que se tiñeron se redujo significativamente (de manera general más de 50 %) en comparación con vehículos control. Conclusiones Los biomarcadores evaluados en estos experimentos fueron seleccionados con base en sus asociaciones biológicas con cáncer de la piel (el cual está asociado con daño mutagenico al DNA inducido por Rayos UV) . El daño mutagénico oxidante inducido por los Rayos UV no está reconocido como un factor causal potencialmente importante en cáncer de la piel. Las MTs son moléculas con propiedades anti-oxidantes que son inducidas específicamente en respuesta a la exposición a los Rayos UV. Este estudio encontró evidencia consistente de que piel humana tratada con equol, y se cree que otros compuestos de la Fórmula (I), inducen más MT que la piel tratada con loción base. Las CPDs son los indicadores más antiguos de daño molecular después de exposición a Radiación UV, y si no se repara, conduce a mutaciones fijas en el DNA de células de la piel. Por consiguiente, un mecanismo de acción de un tratamiento post-exposición incrementarla la velocidad de reparación de estas lesiones. Los experimentos que se condujeron en la presente sugieren que la reparación por CPD puede ser mejorada por medio de composiciones de equuol tópicas, y otras composiciones que contienen uno o más compuestos de la Fórmula (I) . P53 es claramente es un gen regulador importante que comúnmente es mutado en cánceres de la piel epidérmica. Además, en células de piel normales, p53 es sobre-regulada después de exposición a Rayos UV para prevenir la mitosis hasta que el DNA dañado es reparado. Equol moduló la expresión de p53 en este estudio lo que causó una reducción en el número de células que expresaron p53 en la epidermis basal y superior para cuatro de cinco sujetos. En el transcurso de esta especificación y las reivindicaciones que siguen, a menos que el contexto lo requiera de otra manera, la palabra "comprender", o variaciones tales como "comprende" o "que comprende" se comprenderá que implica la inclusión de un entero establecido o etapa o grupo de enteros o etapas pero no la exclusión de cualquier otros grupo de entero o etapa o grupo de enteros o etapas . La referencia a cualquier arte previo en esta especificación, no es, y no deberá tomarse como un conocimiento o cualquier forma de sugestión de que el arte previo forma parte del conocimiento general común en Australia.

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Claims

NOVEDAD DE LA INVENCION Habiendo descrito la presente invención, se considera como novedad, y por lo tanto se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes: REIVINDICACIONES

l.ün método para proteger la piel del daño mutagénico al DNA inducido por los rayos UV, caracterizado porque comprende aplicar tópicamente a la piel una composición que contiene uno o más compuestos de la Fórmula General (II) en donde Ri, R2, ' R3 y R4, son independientemente hidrógeno, hidroxi, OR9, OC(O)Ri0, OS(O)Ri0, CHO, C(O)Ri0, COOH, C02Rio, CONR11R12, alquilo, haloalquilo, arilalquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, heteroarilo, alquilarilo, alcoxiarilo, tio, alquiltio, amino, alquilamino, dialquilamino, nitro o halo, o í¾3 y FU son como se definieron previamente, y ¾ y R2 tomados juntos con los átomos de carbono al cual están fijados forman un anillo de cinco elementos seleccionado de
Ra y son como se definieron previamente, y í y R3 tomados juntos con los átomos de carbono al cual están fijados forman un anillo de cinco elementos seleccionados de y R2 son como se definieron previamente, y R3 y ¾ tomados juntos con los átomos de carbono a los cuales están fijados forman un anillo de cinco elementos seleccionado de y en donde R5/- R-6 y R7 son independientemente hidrógeno, hidroxi, OR9/ OC (O) R10, OS (O) Ri0, CHO, C (O) R10, COOH, CO2R10, CONR1LRi2, alquilo, haloalquilo, arilaquilo, alquenllo, alquinilo, arilo, heteroarilo, tio, alquiltio, amino, alquilamino, dialquilamino, nitro o halo, Rg es hidrógeno, hidroxi, alquilo, arilo, amino, tio, NRnR12, COHRuR12r C(0)R13 donde R13 es hidrógeno, alquilo, arilo, arilalquilo, o un aminoácido, o C02 i , donde R14 es hidrógeno, alquilo, haloalquilo, arilo o arilalquilo, Rg, es alquilo, haloalquilo, arilo, arilalquilo, C(0)R13 donde R13 es como se definió previamente, o S (Ri5)3 donde R15 es independientemente hidrógeno, alquilo o arilo, R10, es hidrógeno, alquilo, haloalquilo, amino, arilo, arilalquilo, un aminoácido, alquilamino o dialquilamino, R11 es hidrógeno, alquilo, arilaquilo, alquenilo, arilo, un aminoácido, C(0)Ri3 donde R13 es como se definió previamente, o C02Ri , donde R14 es como se definió previamente, R12 es hidrógeno, alquilo o arilo, o R11 y R12 tomados juntos con nitrógeno al cual están fijados comprende pirrolidinilo o piperidinilo, la expresión " " representa ya sea un enlace simple o un doble enlace, preferiblemente un doble enlace, T, es independientemente hidrógeno, alquilo o arilo, y X es O, NR12 o S preferiblemente O, incluyendo sales y derivados de los mismos aceptables farmacéuticamente en mezclas por adición con un portador aceptables dermatológicamente. 2. ün método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el uno o más compuestos de la Fórmula (II) comprenden equol y deshidroequol .
3. Un método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque es un método para prevenir la formación de cáncer en la piel.
4. Un método de conformidad con la reivindicación 3, caracterizado porque el cáncer en la piel es seleccionado de carcinoma celular basal, carcinoma celular escamoso y melanoma maligno.
5. Un método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la piel está protegida de daño mutagénico inducido por Rayos UV por medio de uno o más de incrementar la velocidad de reparación de dimeros de ciclobutan pirimidina, promover la formación de metalotioneinas , y disminuir la expresión de p53.
6. Un método de conformidad con las reivindicaciones 1 a 5, caracterizado porque la composición es administrada antes de, durante y/o después de exposición a los Rayos UV.
7. Un método de conformidad con la reivindicación 6, caracterizado porque la composición es administrada antes de exposición a los Rayos UV.
8. Un método de conformidad con la reivindicación 6, caracterizado porque la composición es administrada antes y después de exposición a Rayos UV.
9. Un método de conformidad con las reivindicaciones 1 a 8, caracterizado porque la composición comprende 20 µp? a 500 mmoles de compuestos de la Fórmula (II) .
10. Uso de uno o más compuestos de la Fórmula (II) en donde Rlf R2, R3 y R , son independientemente hidrógeno, hidroxi, 0R9, OC(0)R10, OS (0) Rio, CHO, C(O)Ri0, COOH, C02Rio, CO 11R12, alquilo, haloalqüilo, arilalquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, heteroarilo, alquilarilo, alcoxiarilo, tio, alquiltio, amíno, alquilamino, dialquilamino, nitro o halo, o R.3 y R son como se definieron previamente, y ¾ y R2 tomados juntos con los átomos de carbono al cual están fijados forman un anillo de cinco elementos seleccionado de Ri y R4 son como se definieron previamente, y R2 y R3 tomados juntos con los átomos de carbono al cual están fijados forman un anillo de cinco elementos seleccionados de Ra y R2 son como se definieron previamente, y R3 y R4 tomados juntos con los átomos de carbono a los cuales están fijados forman un anillo de cinco elementos seleccionado de y en donde R5, R.6 y R7 son independientemente hidrógeno, hidroxi, 0R9, OC(O)R10, OS (0) Rio, CHO, C(O)R10, COOH, CO2R10, CONRaiRi2, alquilo, haloalquilo, arilaquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, heteroarilo, tío, alquiltio, amino, alquilamino, dialquilamino, nitro o halo, RQ es hidrógeno, hidroxi, alquilo, arilo, amino, tio, NR11R12, CONR11R12, C(0)Ri3 donde R13 es hidrógeno, alquilo, arilo, arilalquilo, o un aminoácido, o CO2R1 , donde R14 es hidrógeno, alquilo, haloalquilo, arilo o arilalquilo, Rg, es alquilo, haloalquilo, arilo, arilalquilo, C(0)Ri3 donde R13 es como se definió previamente, o S (Ris)3 donde R15 es independientemente hidrógeno, alquilo o arilo, Rio, es hidrógeno, alquilo, haloalquilo, amino, arilo, arilalquilo, un aminoácido, alquilamino o dialquilamino, R11 es hidrógeno, alquilo, arilaquilo, alquenilo, arilo, un aminoácido, C(0)Ri3 donde Ri3 es como se definió previamente, o CO2R14, donde R14 es como se definió previamente, R12 es hidrógeno, alquilo o arilo, o R11 Y R12 tomados juntos con nitrógeno al cual están fijados comprende pirrolidinilo o piperidinilo, la expresión " " representa ya sea un enlace simple o un doble enlace, preferiblemente un doble enlace, V 39 * r , es independientemente hidrógeno, alquilo o arilo, y X es 0, R12 o S, preferiblemente 0, incluyendo sales y derivados de los mismos aceptables 5 farmacéuticamente en mezclas por adición con un portador aceptables dermatológicamente, para la fabricación de una composición tópica para proteger la piel de daño mutagénico al DNA asociado con la exposición a los Rayos UV. 10
11. Uso de conformidad con la reivindicación 10 caracterizado porque el uno o más compuestos de la Fórmula (II) comprenden equol y deshidroequol .
12. Uso de conformidad con la reivindicación 10, caracterizado porque es un método para prevenir la 15 formación de cáncer en la piel.
13. Uso de conformidad con la reivindicación 12, caracterizado porque el cáncer en la piel es seleccionado de carcinoma de células básales, carcinoma de células escamosas y melanoma maligno. 20
14. Uso de conformidad con la reivindicación 10, caracterizado porque la piel está protegida de daño mutagénico al DNA inducido por Rayos UV por medio de uno o más de incrementar la velocidad de reparación de dimeros de ciclobutan pirimidina, promover la formación de 25 metalotioneinas, y disminuir la expresión de p53.
15. Uso de conformidad con las reivindicaciones 10 a 14, caracterizado porque la composición es administrada antes de, durante y/o después de la exposición a los Rayos UV.
16. Uso de conformidad con la reivindicación 15, caracterizado porque la composición es administrada antes de exposición a los Rayos UV.
17. Uso de conformidad con la reivindicación 15, caracterizado porque la composición es administrada antes y después de exposición a Rayos UV.
18. Uso de conformidad con las reivindicaciones 10 a 17, caracterizado porque la composición comprende 20 µ?? a 500 mmoles de compuestos de la Fórmula (II) .
19. Uso de compuestos de la Fórmula (II) para proteger la piel de daño mutagénico al DNA asociado con la exposición a los Rayos UV.
20. Un método de conformidad con las reivindicaciones 1 a 9, caracterizado porque la composición comprende una composición cosmética o bloqueadora solar.
21. Uso de conformidad con las reivindicaciones 10 a 19, caracterizado porque la composición comprende una composición cosmética o bloqueadora solar.
22. Una composición cosmética o bloqueadora solar, caracterizada porque comprende uno o más compuestos de conformidad con la Fórmula (II) como se definió anteriormente en asociación con uno o más excipientes o portadores aceptables dermatológicamente.
23. Una composición cosmética de conformidad con la reivindicación 22, caracterizada porque comprende un maquillaje o composición base.