MXPA04011681A - Esteres en la posicion 20 de camptotecinas. - Google Patents

Abstract

Se describen los compuestos de la formula (I): (I) donde los grupos son definidos en la descripcion de este texto, las mezclas racemicas, sus enantiomeros individuales, sus diastereoisomeros individuales, sus mezclas y sus sales farmaceuticamente aceptables. Los compuestos son inhibidores de topoisomerasa I.

Description

ESTERES EN LA POSICION 20 DE CAMPTOTECINAS Campo de la Invención La invención descrita en este texto se refiere a compuestos útiles como medicamentos y, particularmente, a derivados de esteres de camptotecina en la posición 20, a procedimientos para su preparación, a su uso como ingredientes activos con actividad inhibitoria de topoisomerasa 1 y a composiciones farmacéuticas que contienen los mismos como ingredientes activos.

Antecedentes de la Invención La camptotecina es un alcaloide aislado por Wall y colaboradores (J. Am. Chem. Soc. , 88, 3888-3890 (1966)) por primera vez del árbol Caznptokheca acuminata, una planta nativa de China que pertenece a la familia Nyssaceae. La molécula consiste de una estructura pentacíclica con una lactona en el anillo E, que es esencial para la citotoxicidad . Para una revisión de las camptotecinas y los problemas relacionados con su uso como medicamentos, asi como también la resolución de una variedad de estos problemas, véase la patente europea EP 1044977, presentada a nombre de los solicitantes. Entre los compuestos preferidos de esta última patente se debe mencionar la 7-terc-butoxiiminometil- REF : 159421 camptotecina, la cual es oralmente activa. El compuesto, dotado con actividad sustancial, no puede ser formulado en composiciones liquidas, acuosas, particularmente aquellas adecuadas para la ruta de administración inyectable. El problema de solubilidad de las camptotecinas es bien conocido para los expertos en el campo. Los profármacos de camptotecina solubles se describen en la solicitud de patente norteamericana No. 4,943,579, publicada el 24 de julio de 1990, la cual proporciona ásteres en la posición 20 de camptotecinas con aminoácidos unidos directamente al grupo hidroxilo del anillo de lactona. Como se describe en esta referencia, el problema de la preparación de camptotecina y sus derivados hidrosolubles se vuelve más difícil por el hecho que no es posible alterar el anillo de lactona sin una pérdida de la actividad terapéutica. Al mismo tiempo, en cualquier caso, existe el problema de reducir la toxicidad típica de las camptotecinas, particularmente a nivel intestinal. La patente WO 97/21865, The Stehlin Foundation, publicada el 7 de agosto de 1997, proporciona profármacos de camptotecina con el propósito de prolongar la estabilidad del anillo de lactona, el cual es hidrolizado in vivo, dando origen a un metabolito tóxico, inactivo. Para este fin, el grupo hidroxi del anillo de lactona es esterificado con ácidos carboxílicos de longitud variante, que llevan opcionalmente un grupo epóxido en la cadena. Los compuestos descritos en esta referencia son más liposolubles y, por lo tanto, van en una dirección diferente en comparación con la presente invención. Conover C. D. y colaboradores, Anti-Cancer Drug Design (1999) , 14, 499-506 describen un sistema de transporte macromolecular, hidrosoluble de camptotecina-polietilenglicól, en el cual varios separadores de naturaleza de aminoácido afectan sus características de actividad farmacocinética y anticancerígena. La patente WO 00/08033, The University of Kansas, publicada el 17 de febrero de 2000, describe profármacos hidrosolubles con un grupo hidroxi estéricamente obstaculizado, el cual es esterificado con un grupo fosfono-oximetilo. Singer J. W. y colaboradores, Journal of Controlled Reléase, 74 (2001), 243-247, describen conjugados hidrosolubles de camptotecina con ácido poliglutámico-glicina. Matsumoto H. y colaboradores, Bioorgamic & Medicinal Chemistry Letters 11 (2001) , 605-609 describen profármacos hidrosolubles de un inhibidor de proteasa del virus VIH (molécula de naturaleza dipeptídica, que difiere enormemente de la estructura molecular de camptotecina) y para ese fin funcionalizan un grupo hidroxilo con una porción formada por una parte separadora y una parte solubilizante . La parte separadora es provista por un ácido bicarboxílico, mientras que la parte solubilizadora es provista por una diamina. La patente WO 01/09139, The Stehlin Foundation, publicada el 8 de febrero de 2001, describe esteres arilicos de camptotecina en la posición 20, pero no soluciona el problema de hidrosolubilidad, sino preferiblemente aquel de la toxicidad y estabilidad prologada del anillo de lactona. Sin embargo, en gran manera, en el diseño de nuevos fármacos se encuentran varios problemas de naturaleza fisicoquímica, tal como la estabilidad de la molécula en el plasma o su hidrosolubilidad para propósitos de formulación, existe una búsqueda constante por un mejor índice terapéutico.

Breve Descripción de la Invención Ahora se ha descubierto sorprendentemente que los ésteres en la posición 20 de camptotecinas, particularmente las camptotecinas que llevan un grupo oxima en la posición 7, como se describe en la patente europea mencionada anteriormente EP 1044977, están dotados con actividad anticancerigena sustancial. Estos compuestos tienen un mejor índice terapéutico. Por lo tanto, el objetivo de la presente invención comprende los compuestos de la fórmula general (I) donde : A es alquilo de 1 a 8 átomos de carbono de cadena recta o ramificada, saturado o insaturado, cicloalquilo de 3 a 10 átomos de carbono, cicloalquil- (C3-C10) -alquilo de 1 a 8 átomos de carbono de cadena recta o ramificada; cuando n y m son iguales a 1, entonces Y es alquilo de 1 a 8 átomos de carbono de cadena recta o ramificada, saturado o insaturado, que es sustituido por R12R13 o +Ri2Ri3¾4, donde R12, R13 y R , los cuales pueden ser los mismos o diferentes, son hidrógeno o alquilo de 1 a 4 átomos de carbono de cadena recta o ramificada o Y es BCOOX, donde B es un residuo de un aminoácido, X es H, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono de cadena recta o ramificada, bencilo o fenilo, sustituido en las posiciones disponibles por al menos un grupo seleccionado de alcoxi de 1 a 4 átomos de carbono, halógeno, nitro, amino, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono o, si n y m son ambos 0; Y es 4-trimetilamonio-3-hidroxibutanoilo, tanto en la forma de zwitterion como en la forma de una sal con un anión de un ácido farmacéuticamente aceptable o Y es +R12Ri3Ri4, como se definiera anteriormente; Ri es hidrógeno o un grupo -C (R5) =N-0-R4, en el cual R4 es hidrógeno o un grupo alquilo de 1 a 5 átomos de carbono de cadena recta o ramificada o alquenilo de 1 a 5 átomos de carbono o un grupo cicloalquilo de 3 a 10 átomos de carbono o un grupo cicloalquil- (C3-C10) -alquilo de 1 a 5 átomos de carbono de cadena recta o ramificada o un grupo arilo de 6 a 14 átomos de carbono o un grupo aril- {C6-Ci4) -alquilo de 1 a 5 átomos de carbono de cadena recta o ramificada o un grupo heterocíclico o un grupo heterociclo-alquilo de 1 a 5 átomos de carbono de cadena recta o ramificada, el grupo heterocíclico que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de un átomo de nitrógeno, sustituido opcionalmente por un grupo alquilo de 1 a 5 átomos de carbono y/o un átomo de oxígeno y/o de azufre; los grupos alquilo, alquenilo, cicloalquilo, ciclo alquilalquilo, arilo, arilalquilo, alquilo heterocíclico o heterociclo-alquilo pueden ser sustituidos opcionalmente por uno o más grupos seleccionados de: halógeno, hidroxi, alquilo de 1 a 5 átomos de carbono, alcoxi de 1 a 5 átomos de carbono, fenilo, ciano, nitro, -NR6R7, donde R6 y 7, los cuales pueden ser los mismos o diferentes, son hidrógeno, alquilo de 1 a 5 átomos de carbono de cadena recta o ramificada, el grupo -C00H o uno de sus ásteres farmacéuticamente aceptables; o el grupo CONReRg, donde Rs y Rg, los cuales pueden ser los mismos o diferentes, son hidrógeno, alquilo de 1 a 5 átomos de carbono de cadena recta o ramificada; o R es un residuo de aroilo de 6 a 10 átomos de carbono o arilsulfonilo de 6 a 10 átomos de carbono, sustituido opcionalmente por uno o más grupos seleccionados de: halógeno, hidroxi, alquilo de 1 a 5 átomos de carbono de cadena recta o ramificada, alcoxi de 1 a 5 átomos de carbono de cadena recta o ramificada, fenilo, ciano, nitro, -NR10R11, donde R10 y Rn, los cuales pueden ser los mismos o diferentes, son hidrógeno, alquilo de 1 a 5 átomos de carbono de cadena recta o ramificada; o R4 es un residuo de poliaminoalquilo; o R4 es un residuo de glicosilo; R5 es hidrógeno, alquilo de 1 a 5 átomos de carbono de cadena recta o ramificada, alquenilo de 1 a 5 átomos de carbono de cadena recta o ramificada, cicloalquilo de 3 a 10 átomos de carbono, cicloalquil- (C3-C10) -alquilo de 1 a 5 átomos de carbono de cadena recta o ramificada, arilo de 6 a 14 átomos de carbono, aril- (C6-C1 ) -alquilo de 1 a 5 átomos de carbono de cadena recta o ramificada; R2 y R3, los cuales pueden ser los mismos o diferentes, son hidrógeno, hidroxi, alcoxi de 1 a 5 átomos de carbono de cadena recta o ramificada; los Nl-óxidos, las mezclas racémicas, sus enantiómeros individuales, sus diastereoisómeros individuales, sus mezclas y sus sales farmacéuticamente aceptables. La presente invención comprende el uso de los compuestos de la fórmula (I) mencionados anteriormente como ingredientes activos para medicamentos y, particularmente, para medicamentos que son útiles como inhibidores de topoisomerasa I. Entre las aplicaciones terapéuticas que se derivan de la actividad inhibitoria de topoisomerasa I, se deben mencionar los tumores e infecciones parasíticas o virales.

La presente invención comprende composiciones farmacéuticas que contienen los compuestos de la fórmula (I) como ingredientes activos, en una mezcla con vehículos y excipientes farmacéuticamente aceptables. La presente invención también incluye los procedimientos para la preparación de los compuesto de la fórmula ( I ) .

Descripción Detallada de la Invención Dentro de la estructura de la presente invención, se entiende que los ejemplos del grupo alquilo de 1 a 8 átomos de carbono de cadena recta o ramificada incluyen metilo, etilo, propilo, butilo, pentilo, hexilo, heptilo y octilo y sus posibles isómeros, tales como, por ejemplo, isopropilo, isobutilo y tere-butilo. Los ejemplos del grupo alquenilo de 1 a 5 átomos de carbono de cadena recta o ramificada son metilideno, etilideno, vinilo, alilo, propargilo, butileno y pentileno, donde el enlace doble de carbono-carbono puede ser adecuado en diversas posiciones posibles de la cadena de alquileno, la cual también puede ser ramificada en el contexto de su isomerismo permitido. Los ejemplos del grupo cicloalquilo de 3 a 10 átomos de carbono son ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, ciclooctilo y grupos policíclicos, tales como, por ejemplo, adamantilo. Los ejemplos del grupo cicloalquil- (C3-C10) -alquilo de 1 a 5 átomos de carbono de cadena recta o ramificada son ciclopropilmetilo, 2-ciclopropiletilo, 1-ciclopropiletilo, 3-ciclopropilpropilo, 2-ciclopropilpropilo, 1-ciclopropilpropilo, ciclobutilmetilo, 2-ciclobutiletilo, 1-ciclobutiletilo, 3-ciclobutilpropilo, 2-ciclobutilpropilo, 1-ciclobutilpropilo, ciclohexilmetilo, 2-ciclohexiletilo, 1-ciclohexiletilo, 3-ciclohexilpropilo, 2-ciclohexilpropilo, 1-ciclohexilpropilo, 5-ciclohexilpentilo, 3-ciclohexilpentilo, 3-metil-2-ciclohexilbutilo, 1-adamantiletilo, 2-adamantiletilo y adamantilmetil . Los ejemplos de arilo de 6 a 14 átomos de carbono de cadena recta o ramificada o aril- (C6-C14) -alquilo de 1 a 5 átomos de carbono son fenilo, 1- o 2-naftilo, antracenilo, bencilo, 2-feniletilo, 1-feniletilo, 3-fenilpropilo, 2-antracenilpropilo, 1-antracenilpropilo, naftilmetilo, 2-naftiletilo, 1-naftiletilo, 3-naftilpropilo, 2-naftilpropilo, 1-naftilpropilo, ciclohexilmetilo, 5-fenilpentilo, 3-fenilpentilo, 3-metil-2-fenilbutilo. Los ejemplos del grupo alquilo heterociclico o heterociclo-alquilo de 1 a 5 átomos de carbono de cadena recta o ramificada son tienilo, quinolilo, piridilo, N-metilpiperidinilo, 5-tetrazolilo, 2- (4, 5-dihidroxazolilo) , 1 , 2 , 4-oxadiazolidin-3-il-5-ona, bases de purina y pirimidina, por ejemplo uracilo, sustituidos opcionalmente como se indica en las definiciones generales anteriores. Los ejemplos de los grupos aroilo de 6 a 10 átomos de carbono son benzoilo y naftoilo. Los ejemplos de los grupos ar lsulfonilo de 6 a 10 átomos de carbono son tosilo y benzoil-sulfonilo . Lo que se propone por halógeno es flúor, cloro, bromo y yodo. Los ejemplos de grupos sustituidos son pentafluorofenilo, 4-fenilbencilo, 2 , 4-difluorobencilo, 4-aminobutilo, 4-hidroxibutilo, dimetilaminoetllo, p-nitrobenzoilo y p-cianobenzoilo . Un ejemplo del residuo de poliaminoalquilo es -(CH2) m- Ri5- (CH2) p- Ri6- (CH2) q-N¾, donde m, p y q son números enteros de 2 a 6 inclusive y R15 y Ri6 son un grupo alquilo de 1 a 5 átomos de carbono de cadena recta o ramificada, por ejemplo 4-amAnobutil-2-aminoetilo, 3-aminopropil-4-aminobutilo o 3-aminopropil-4-aminobutil-3-aminopropilo. Los ejemplos del residuo de glicosilo son 6-D-galactosilo y 6-D-glucosilo . Lo que se propone por aminoácido es la definición genérica de un compuesto orgánico que lleva al menos un residuo de carboxilo y al menos un residuo de amina. Los ejemplos de residuos de aminoácidos son los aminoácidos naturales, en las formas enantioméricas posibles; entre estos, los aminoácidos preferidos son glicina, alanina, fenilalanina, valina, leucina, isoleucirja, ácido aspártico, ácido glutámico, lisina, arginina, tirosina y ácido ?-aminobutirico; todos los aminoácidos pueden ser salificados, si es necesario, en el grupo carboxilo libre y/o el grupo básico libre con bases o ácidos farmacéuticamente aceptables.

Los ejemplos de sales farmacéuticamente aceptables son, en el caso de átomos de nitrógeno de naturaleza básica, sales con ácidos farmacéuticamente aceptables, tanto inorgánicos como orgánicos, tales como, por ejemplo, ácido clorhídrico, ácido sulfúrico, ácido acético o en el caso de un grupo ácido, tal como carboxilo, sales con bases farmacéuticamente aceptables, tanto orgánicas como inorgánicas, tales como, por ejemplo, hidróxidos alcalinos y alcalinotérreos, hidróxido de amonio y aminas, que incluyen aminas heterociclicas . En el caso de Y igual a 4-trimetil-amonio-3-hidroxi-butanoilo, las sales farmacéuticamente aceptables son conocidas y descritas ampliamente, por ejemplo, en la patente O 00/06134. Un primer grupo de compuestos preferidos comprende los compuestos de la fórmula (I), en los cuales n y m son iguales a 1. Un segundo grupo de compuestos preferidos comprende los compuestos de la fórmula (I) , en los cuales n y m son ambos 0.

En el contexto de los dos grupos preferidos mencionados anteriormente, aquellos preferidos son los compuestos de la fórmula (I), en los cuales R es diferente de hidrógeno y, particularmente un grupo alquilo de 1 a 5 átomos de carbono de cadena recta o ramificada o alquenilo de 1 a 5 átomos de carbono o un grupo cicloalquilo 3 a 10 átomos de carbono o un grupo cicloalquil- (C3-C10) -alquilo de 1 a 5 átomos de carbono de cadena recta o ramificada o un grupo arilo de 6 a 14 átomos de carbono o un grupo aril- { e- u) -alquilo de 1 a 5 átomos de carbono de cadena recta o ramificada o un grupo alquilo heterociclico o heterociclo-alquilo de 1 a 5 átomos de carbono de cadena recta o ramificada, el grupo heterociclico contiene al menos un heteroátomo seleccionado de un átomo de nitrógeno, sustituido opcionalmente por un grupo alquilo de 1 a 5 átomos de carbono y/o un átomo de oxigeno y/o azufre; los grupos alquilo, alquenilo, cicloalquilo, arilo, aril-alquilo, alquilo heterociclico o heterociclo-alquilo, los cuales pueden ser sustituidos por uno o más grupos seleccionados de: halógeno, hidroxi, alquilo de 1 a 5 átomos de carbono, alcoxi de 1 a 5 átomos de carbono, fenilo, ciano, nitro, -NR6R7, donde R6 y R7, los cuales pueden ser los mismos o diferentes, son alquilo de 1 a 5 átomos de carbono de cadena recta o ramificada; el grupo -COOH o uno de sus ésteres farmacéuticamente aceptables; o el grupo -CONR8R9, donde Rs y R9, los cuales pueden ser los mismos o diferentes, son hidrógeno, alquilo de 1 a 5 átomos de carbono de cadena recta o ramificada de acuerdo con las definiciones resumidas anteriormente como ejemplos. Un grupo de compuestos particularmente preferidos incluye : bromuro de (E) -7-terc-butoxiiminometil-20-O- ( 4-trimetil-amonio-3-hidroxi) butanoil-camptotecina (ST2204) ; bromuro de (E) -7-terc-butoxiiminometil-20-0- (4-trimetil-amonio) butanoil-camptotecina (ST2200); (E) -7-terc-butoxiiminometil-20-O-hemisuccinil-camptotecina; clorhidrato de (E) -7-terc-butoxiiminometil-20-O- [2- (dimetilamino) etilamino] succinil-camptotecina (ST1657) ; 20-O- (bencilglicil) succinil-camptotecina (ST1451) ; bromuro de 20-O- (terc-butilglicil) succinil-camptotecina (ST1453) ; 7-terc-butoxiiminometil-20-0- (terc-butilglicil) succinil-camptotecina (ST1616) ; 20-O- (glicil) succinil-camptotecina (ST1452) ; 20-O- (2-metoxifenilglicil) succinil-camptotecina (ST1454); 7-terc-butoxiiminometil-20-O- (2-metoxifenilglicil) succinil-camptotecina (ST1617) . Los compuestos de la fórmula (I) pueden prepararse con el procedimiento descrito posteriormente en este texto y ejemplificado por los compuestos preferidos de la invención.

Es muy obvio para la persona que tiene experiencia ordinaria en el campo que el esquema de reacción aplica a todos los compuestos cubiertos por la fórmula (I), puesto que el método para obtener los compuestos de inicio se describe completamente en la patente mencionada anteriormente EP 1044997. En términos generales, los compuestos de la fórmula (I), donde n y m son 0, se obtienen por medio de un procedimiento que comprende los pasos que consisten en: a) la reacción de la camptotecina, sustituida opcionalmente por los grupos R2 y R3 definidos anteriormente, con un ácido carboxílico que lleva un grupo saliente en o, para obtener el éster respectivo en la posición 20; b) la sustitución del grupo saliente con el grupo Y. En términos generales, los compuestos de la fórmula (I), donde n y m son 1, se obtienen por medio de un procedimiento que consiste en: a) la reacción de la camptotecina, sustituida opcionalmente por los grupos Ri, R2 y R3 definidos anteriormente, con un ácido bicarboxilico con 3 a 11 átomos de carbono, para obtener el hemiéster respectivo en la posición 20; b) la transformación del grupo carboxilo libre del hemiéster a la amida respectiva -NH-Y.

Procedimiento general Preparación del producto intermedio 2a,b Los productos descritos en el esquema de reacción se obtienen por medio de la reacción de la camptotecina la,b disuelta en una mezcla de un solvente aprótico, tal como, por ejemplo, DMF o solventes halogenados o etéreos, y en presencia de bases orgánicas o inorgánicas no acuosas, tales como aminas terciarias o K2C03 o en presencia de solo la base en aquellos casos en los cuales la última es liquida a la temperatura de reacción, a una temperatura entre -10 y +80 °C, se adicionan de 2 a 30 equivalentes de ácidos carboxílicos diversamente activados, todos llevan un grupo saliente tal como OTs, Cl, Br o I en ?.

Preparación del producto intermedio 3a,b A una mezcla de camptotecina la,b disuelta en una mezcla de un solvente aprótico, tal como, por ejemplo, DMF o solventes halogenados o etéreos, y en presencia de bases orgánicas o inorgánicas no acuosas, tales como aminas terciarias o K2C03 o en presencia de la base sola en aquellos casos en los cuales la última es liquida a la temperatura de reacción, a una temperatura entre -10 y +80 °C, se adicionan de 2 a 30 equivalentes de ácido carboxilico activado como halogenuro de acilo o como anhídrido o imidazolida o anhídrido mezclado. El solvente es removido in vacuo y el producto es purificado por medio de la cromatografía.

Preparación de los productos intermedios 4a,b y 5a,b Al producto intermedio 2a, b disuelto en una mezcla de un solvente aprótico, tal como, por ejemplo, DMF o THF o solventes halogenados o etéreos, y en presencia de bases orgánicas o inorgánicas no acuosas, tales como aminas terciarias o 2C03 o en presencia de la base sola en aquellos casos en los cuales la última es liquida a la temperatura de reacción, a una temperatura entre +20 y +80°C, se adicionan de 2 a 30 equivalentes de alquil-carboxilatos sustituidos de manera adecuada o aminas NR12R13R14 sustituidas de manera adecuada y la reacción continúa durante periodos de tiempo que varían de 15 a 36 horas. El solvente es removido in vacuo y el producto es purificado por medio de la cromatografía o por medio de la cristalización.

Preparación del producto intermedio 6a,b Al producto intermedio 3a, b, activado como halogenuro de acilo o como anhídrido o imidazolida o anhídrido mezclado, disueltos en una mezcla de un solvente aprótico, tal como, por ejemplo, DMF o THF o solventes halogenados o etéreos, y en presencia de bases orgánicas o inorgánicas no acuosas, tales como aminas terciarias o K2C03 o en presencia de la base sola en aquellos casos en los cuales la última es líquida a la temperatura de reacción, a una temperatura entre +20 y +80°C, se adicionan de 2 a 30 equivalentes de alquil-aminas sustituidas de manera adecuada y la reacción continúa durante periodos de tiempo que varían de 15 a 36 horas. El solvente es removido in vacuo y el producto es purificado por medio de la cromatografía o por medio de la cristalización.

Preparación del producto intermedio 7a,b Al producto intermedio 3a, b activado como halogenuro de acilo o como anhídrido o como imidazolida o anhídrido mezclado, disuelto en una mezcla de un solvente aprótico, tal como, por ejemplo, DMF o THF o solventes halogenados o etéreos, y en presencia de bases orgánicas o inorgánicas no acuosas, tales como aminas terciarias o K2CO3 o en presencia de la base sola en aquellos casos en los cuales la última es líquida a la temperatura de reacción, a una temperatura entre +20 y +80°C, se adicionan de 2 a 30 equivalentes de aminoácidos y la reacción continúa durante periodos de tiempo que varían de 15 a 36 horas. El solvente se remueve ín vacuo y el producto es purificado por medio de la cromatografía o por medio de la cristalización.

Preparación del producto intermediario 8a,b El producto intermediario 7a, b es disuelto en un solvente aprótico, tal como, por ejemplo, DMF, solventes halogenados o solventes etéreos. A la solución obtenida de esta manera se adicionan de 2 a 20 equivalentes de un alcohol alifático o aromático de 2 a 10 equivalentes de una base y un exceso de 2 a 10 equivalentes de agente de condensación, tal como, por ejemplo, DCC o EDC. La reacción se mantiene a una temperatura que varia de 25 a 50 °C durante un periodo de tiempo que varia de 4 a 24 horas. El producto es purificado por medio de la cromatografía. El producto 8a, b también se obtiene directamente del producto 3a, b utilizando un aminoácido esterificado . Las sales farmacéuticamente aceptables se obtienen con métodos convencionales reportados en la bibliografía y no requieren ninguna descripción adicional. Los compuestos descritos en la presente invención son inhibidores de topoisomerasa I y, por lo tanto, son útiles como medicamentos, particularmente para el tratamiento de enfermedades que se benefician de la inhibición de la topoisomerasa. En particular, los compuestos de acuerdo con la presente invención exhiben actividad antiproliferativa y, por lo tanto, se utilizan tomando en cuenta su actividad terapéutica y poseen propiedades fisicoquímicas que los hacen adecuados para la formulación en composiciones farmacéuticas.

Las composiciones farmacéuticas contienen al menos un compuesto de la fórmula (I) como un ingrediente activo, en tal cantidad para producir un efecto terapéutico significante. Las composiciones cubiertas por la presente invención son completamente convencionales y se obtienen con métodos, los cuales son una práctica común en la industria farmacéutica. De acuerdo con la ruta de administración optada, las formulaciones estarán en forma sólida o liquida, que es adecuada para la administración oral, parenteral o intravenosa. Las composiciones de acuerdo con la presente invención contienen, junto con el ingrediente activo, al menos un vehículo o excipiente farmacéuticamente aceptable. Los coadyuvantes de formulación pueden ser particularmente útiles, tales como, por ejemplo, solubilizadores, agentes de dispersión, agentes de suspensión y emulsionantes. Las composiciones acuosas son indicadas. Los compuestos de la fórmula (I) también se pueden utilizar en combinación con otros ingredientes activos, tales como, por ejemplo, otros fármacos anticancerígenos u otros fármacos con actividad antiparasítica o antiviral, tanto en formas separadas como en formas de dosificación individuales.

Los compuestos de acuerdo con la presente invención son útiles como medicamentos con actividad anticancerígena, por ejemplo, en cánceres pulmonares, tal como cáncer pulmonar diferente de microcitoma o en tumores colorrectales o prostéticos o gliomas. La actividad citotóxica de los compuestos de acuerdo con la presente invención ha sido sometida a ensayo en sistemas celulares de células tumorales de humano, utilizando la prueba de actividad antiproliferativa como el método para evaluar el potencial citotóxico. La línea de células utilizada es un adenocarcinoma pulmonar diferente de microcitoma llamada NCI H460, pertenece a la clase NSCLC (cáncer pulmonar diferente de células pequeñas) .

Actividad anticancerígena Para evaluar el efecto de los compuestos de acuerdo con la presente invención, se evaluó su citotoxicidad contra la línea de células de cáncer pulmonar diferente de microcitoma (NCI-H460) . Las células de The American Type Culture Collection (ATCC) se mantuvieron en cultivo en RPMI 1640 (GIBCO) que contenía suero bovino fetal al 10% y sulfato de gentamicina a una concentración de 50 µg/ml. Las células se sembraron en un volumen de 250 µ? en placas de 96 pocilios y se incubaron durante 24 horas a 37 °C. Al siguiente día, los compuestos del estudio se adicionaron en concentraciones escalares de 1 µ? a 0.004 µ? y las células se incubaron durante otras 2 horas a 37 °C en una atmósfera humidificada que contenía CO2 al 5%. Las células se lavaron 3 veces, invirtiendo las placas cada vez y adicionando PBS. Se adicionaron 200 µ?/pocillo del medio RPMI 1640 que contenía FCS al 10% y las placas se incubaron a 37°C durante 72 horas adicionales. En el día 5, el medio de crecimiento se removió al invertir las placas y se adicionaron 200 µ?/pocillo de PBS y 50 µ? de TCA frío al 80%. Las placas luego se incubaron en hielo durante al menos 1 hora. El TCA se removió al invertir las placas; las placas se lavaron 3 veces por la inmersión en agua destilada y se secaron primero en papel de inmunotransferencia y luego bajo un chorro de aire caliente. Se adicionaron 200 µ? de sulforodamina B al 0.4% en ácido acético al 1% a todos los pocilios. Las placas se incubaron a temperatura ambiente durante 30 minutos adicionales. La sulforodamina B se removió al invertir las placas; las placas se lavaron por medio de la inmersión 3 veces en ácido acético al 1% y luego se secaron primero en papel de inmunotransferencia y luego con un chorro de aire caliente. Se adicionaron 200 µ? de base Tris 10 mM a todos los pocilios y las placas se sujetaron a la agitación durante al menos 20 minutos. La densidad óptica se medió utilizando un espectrofotómetro Multiskan a 540 nm. La tabla 1 presenta los valores IC50, es decir la concentración capaz de inhibir 50% de la supervivencia celular, para cada compuesto examinado, procesados utilizando el programa ALLFIT.

Tabla 1 Producto NCI-•H460 IC50 (µ?) ST1451 0 .15 ST1452 1 .6 ST1453 0 .26 ST1454 0 .16 ST1616 0 .004 ST1617 0 .029 ST1657 0, .012 ST2200 0. .017 ST2204 0. .041 Los siguientes ejemplos ilustran adicionalmente la invención, con referencia al esquema de reacción resumido anteriormente .

Ejemplo 1 (E) -7-terc-Butoxiiminometil-20-O- (4-bromo) -butiril-camptotecina (2a) (ST2599) En un matraz, que se mantuvo protegido de la luz, se cargaron 2 g (4.5 mmol) de 7-terc-butoxiiminometil-camptotecina (la) y 25 mL de piridina; la mezcla se enfrió en un baño de hielo y se adicionaron gota a gota 4.5 mL (38.9 mmol, 8.6 eq. ) de cloruro de 4-bromobutirilo . Después de 3 horas, la mezcla de reacción se llevó a sequedad y luego se purificó por medio de la cromatografía con evaporación instantánea en una columna (CH2Cl2/acetona 98:2) para obtener 1.26 g (2.1 mmol, 46.7%) del producto {Tdeso. = 212°C) . Rf= 0.61 (CH2Cl2/dioxano 95:5). E (IS): [MH]+ = 596.2, 598.2; [M+Na]+ = 618.2, 620.2; [M-l]~ = 594.0, 596.0 Análisis elemental: calculado: C 58.29, H 5.19, N 7.04; encontrado: C 58.25, H 5.18, N 7.03. RMN XH (300 MHz, DMSO, d) : 0.95-1.00 (t, 3H, CH3) , 1.50 (s, 9H, t-Bu) , 1.95-2.20 (m, 4H, 2xCH2) , 2.65-2.75 (t, 2H, CH2) , 3.50-3.60 (t, 2H, CH2) , 5.30 (s, 2H, CH2) , 5.50 (s, 2H, CH2) , 7.10 (s, 1H, CH), 7.65-7.75 (t, 1H, CH) , 7.85-7.95 (t, 1H, CH), 8.10-8.20 (d, 1H, CH) , 8.50-8.60 (d, 1H, CH) , 9.20 (s, 1H, CH) . RMN 13C (75.4 MHz, DMSO, d) : 8.1; 28.4; 28.2; 28.1; 31.0; 31.5; 33.8; 34.2; 45.9; 53.6; 65.4; 77.8; 82.1; 96.4; 120.4; 125.8, 126.5; 129.8; 130.4; 131.2; 133.0; 144.5; 146.3; 147.7; 149.4; 153.8; 157.0; 168.0; 172.5. Prueba de Citotoxicidad en células H460: IC50 = 42 nM ± 6 Ejemplo 2 Bromuro de (E) -7-terc-butoxiiminometil-20-O- (4-trimetil-amonio-3-hidroxi) butanoil-camptotecina (4a) (ST2204) A una solución de 510 mg (0.86 mmol) de (E)-7-terc- butoxiiminometil-20-?- (4-bromo) -butiril-camptotecina (2a) en 10 mL de DMF anhidro se adicionaron 906 mg (5.6 mmol , 6.5 eq.) de sal inerte de L-carnitina. La mezcla obtenida de esta manera se agitó a temperatura ambiente y protegió de la luz. Después de 16 horas, la reacción mostró una conversión del 40% y luego se adicionaron 600 mg (3.7 mmol, 4.3 eq.) de zwitterion de L-carnitina. Después de otras 20 horas, el exceso de carnitina se eliminó después de la dilución de la mezcla con 15 mL de CH2C12, con un lavado acuoso (4 mL) . La fase orgánica resultante se agitó con 10 mL de H20 para extraer el producto y eliminar las impurezas lipofílicas en CH2C12. Se obtuvieron 161 mg (0.21 mmol, 24%) de un sólido de color amarillo (Tdesc. = 189°C) . Rf = 0.38 (CH2C12/CH30H 7:3). E (IS) : M+ = 677.4 Análisis elemental: calculado: C 57.02, H 5.93, N 7.39; encontrado: C 56.98, H 5.92, N 7.38. (2% de ¾0) . RMN 1H (300 Hz, DMSO, d) : 0.90-1.00 (t, 3H, CH3) , 1.50 (s, 9H, t-Bu) , 1.80-1.95 (quinteto, 2H, CH2) , 2.10-2.20 (q, 2H, CH2) , 2.60-2.70 (t, 2H, CH2) , 3.10 (s, 9H, Me3) , 3.20-3.40 (t, 4H, 2x GH2) , 4.05-4.15 (t, 2H, CH2) , 4.35-4.45 (m, 1H, CH) , 5.30 (s, 2H, CH2) , 5.50 (s, 2H, CH2) , 7.10 (s, 1H, CH) , 7.70-7.80 (t, 1H, CH) , 7.85-7.95 (t, 1H, CH) , 8.15-8.20 (d, 1H, CH) , 8.55-8.65 (d, 1H, CH) , 9.30 (s, 1H, CH) . RMN 13C (75.4 MHz, DMSO, d) : 8.2; 24.4; 28.0; 28.2; 30.5; 31.0; 53.3; 54.1; 62.9; 63.7; 67.0; 69.9; 76.6; 81.3; 95.3; 119.7, 125.0; 125.8; 127.3; 129.0; 130.4; 131.2; 132.6; 144.3; 146.0; 146.0; 149.4; 153.0; 157.1; 168.0; 170.7; 172.3.

Ejemplo 3 Bromuro de (E) -7-terc-butoxiiminometil-20-O- (4-trimetilamonio) -butanoil-camptotecina (5a) (ST2200) En una solución de 500 mg (0.84 mmol) de la (E)-7-terc-butoxiiminometil-20-?- (4-bromo) -butiril-camptotecina (2a) en 10 mL de THF, se burbujeó trimetilamina gaseosa durante 15 horas a temperatura ambiente y se protegió de la luz. El THF luego se removió por medio de la evaporación y el producto se purificó por medio de la re-precipitación con éter etílico desde una solución de metanol. Se obtuvieron 300 mg (0.46 mmol, 54.7%) del producto como un sólido de color amarillo (Tdesc. = 212°C) . R£= 0.38 (CH2C12/CH30H 7:3). EM (IS) : M+ = 575.4. Análisis elemental: calculado: C 58.57, H 5.95, N 8.54; encontrado: C 58.53, H 5.94, N 8.53. (1% de ¾0) . RMN ¾ (300 MHz, DMSO, d) : 0.95-1.00 (t, 3H, CH3) , 1.50 (s, 9H, t-Bu) , 1.90-2.00 (m, 2H, CH2) , 2.15-2.25 (q, 2H, C¾) , 2.60-2.80 (m, 2H, CH2) , 3.00 (s, 9H, NMe3) , 3.25 (m, 2H, CH2) , 5.40 (s, 2H, CH2), 5.50-6.00 (d, 2H, CH2) , 7.10 (s, 1H, CH) , 7.70-7.80 (t, 1H, CH) , 7.85-7.95 (t, 1H, CH) , 8.10-8.20 (d, 1H, CH), 8.55-8.65 (d, 1H, CH) , 9.30 (s, 1H, CH) . RMN 13C (75.4 MHz, DMSO, d) : 8.1; 18.4; 28.6; 20.2; 21.3; 53.6; 54.8; 65.4; 67.2; 77.3; 79.0; 82.1; 96.5; 120.2, 125.8; 126.0; 128.0; 129.5; 130.1; 133.2; 144.2; 146.1; 147.0; 149.5; 153.0; 157.9; 168.0; 172.9.

Ejemplo 4 (E) -7-terc-Butoxllminometil-20-O-hemisuccinll-camptotecina (3a) En un matraz que se mantuvo protegido de la luz se disolvieron 6 g (13.4 mmol) de 7-terc-butoxiiminometil-camptotecina (la), 26.82 g (268 mmol) de anhídrido succínico y 600 mg (4.9 mol) de 4-dimetilaminopiridina en 60 mL de piridina anhidra; la mezcla obtenida de esta manera se agitó a T = 60°C. Después de 22 horas, el solvente se removió por medio de la evaporación y el residuo se extrajo con CH2CI2. La fase orgánica se agitó con HCl 0.5% (2x20 mL) y se secó en Na2S04 anhidro. El producto de reacción crudo se purificó por medio de la cromatografía en gel de sílice con CH2C12/CH30H 95:5 ? 9:1 para obtener 5.3 g (9.7 mmol, 72.4%) del producto. EM (IS) : [M+H]+ = 548.3. Análisis elemental: calculado: C 63.62, H 5.30, N 7.68; encontrado: C 63.59, H 5.29, N 7.67.

RMN XH (300 MHz, CDC13, d) : 0.95-1.05 (t, 3Hr CH3) , 1.50 (s, 9H, t-Bu), 2.10-2.30 (m, 4H, 2x CH2), 2.90-3.10 (m, 2H, CH2) , 5.35-5.45 (d, 2H, CH2) , 5.70-5.80 (d, 2H, CH2) , 7.40 (s, 1H, CH) , 7.65-7.75 (d, 2H, 2xCH) , 8.10-8.20 (d, 2H, 2xCH) , 8.90 5 (s, 1H, CH) . R N 13C (75.4 MHz , D SO, d) : 8.1; 28.0; 30.2; 32.0; 52.1; 67.0; 82.4; 120.6, 122.1; 124.7; 125.5; 128.2; 129.1; 142.7; 144.0; 146.4; 147.3; 151.5; 156.8; 172.9; 174.4. RMN 13C (75.4 MHz, CDCI3, d) : 8.1; 28.0; 30.2; 32.0; 52.1; 10 67.0; 82.4; 120.6; 122.1; 124.7; 125.5; 128.2; 129.1; 142.7; 144.0; 146.4; 147.3; 151.5; 156.8; 167.2; 172.9; 174.4.

Ejemplo 5 Clorhidrato de (E) -7-terc-butoxiiminometil-20-O- [2- 15 (dimetilamino) etilamino] succinil-camptotecina (6a) (ST1657) El producto intermedio 3a (3 g, 5.48 rttmol) se disolvió en 60 mi de CH2CI2 anhidro (60 mi). A la solución, enfriada en un baño de hielo, se adicionaron 22 mi de cloruro de oxalilo. Al completar la adición, el baño de enfriamiento 0 se removió y la reacción se dejó a temperatura ambiente durante 8 horas. Después de esto, la reacción se procesó al remover el solvente y el exceso de cloruro de oxalilo y luego mediante el lavado, la adición repetidamente y la evaporación de CH2CI2 anhidro. (Cualquier ácido oxálico restante se 5 descompuso) .

El producto de reacción crudo (un sólido de color rojo) (3.1 g) se utilizó como estaba en la siguiente reacción sin ninguna purificación adicional. En un matraz equipado con un embudo de goteo se disolvieron 3.4 g (6 mmol) del cloruro ácido, crudo descrito previamente en 80 mi de CH2CI2 anhidro. A la solución resultante, mantenida a 0°C, se adicionó gota a gota una solución de 1 mi de N, N-dimetil-etilendiamina y 1.25 mi de TEA en 10 mi de CH2CI2. Dos horas después de la adición, la reacción se verificó. La reacción se procesó al adicionar una alícuota adicional de CH2CI2 y luego agitarla con varias porciones de agua. La fase orgánica, resultante se secó sobre Na2SC anhidro y se concentró, para obtener 4.6 g de un sólido de color rojo, el cual luego se purificó. Al sólido re-disuelto en CH2CI2 se adicionó HC1 gaseoso disuelto en THF. Después de una agitación de 10 minutos, la concentración se concentró en el dispositivo Rotavapor hasta que todo el solvente y el exceso de ácido clorhídrico se removieron. El producto de reacción crudo se disolvió en una cantidad mínima de CH2C12 y se filtró para remover cualquier sólido dispersado . El ST1657 se precipitó de la solución mediante la adición de acetona (1.5 g del producto crudo produjo 1 g del sólido precipitado) . El rendimiento total de ST1657 a partir de 3a fue del 25%.

Rf = 0.2 (CH2C12/CH30H 8:2). Tdesc. = 230 C EM (IS) : [M ion]+ = 618. Análisis elemental: calculado: C 60.60, H 6.12, N 10.71; encontrado: C 60.56, H 6.11, N 10.70. (2% de H20) . RMN XH (300 Hz, DMSO, d) : 0.90-1.00 (t, 3H, CH3) , 1.50 (s, 9H, tBu), 2.05-2.20 (q, 2H, CH2), 2.40-2.50 (q, 2H, CH2), 2.60-2.70 (s, 6H, 2xCH3) , 2.70-2.90 (m, 4H, 2xCH2) , 3.00-3.10 (q, 2H, CH2), 5.30 (s, 2H, CH2), 5.50 (s, 2H, CH2), 7.10 (s, 1H, CH) , 7.70-7.80 (t, 1H, CH) , 7.85-7.95 (t, 1H, CH) , 8.15-8.20 (d, 1H, CH) , 8.20-8.30 (t, 1H, NH) , 8.55-8.60 (d, 1H, CH) , 9.30 (s, 1H, CH) . R N 13C (75.4 MHz, DMSO, d) : 8.3; 27.9; 29.4; 30.4; 31.0; 34.6; 42.9; 53.2; 56.6; 66.9; 71.0; 76.6; 81.3; 95; 7; 119.6; 124.9; 125.7; 127.7; 128.9; 130.4; 131.2; 132.5; 144.3; 146.4; 149.4; 153.1; 157.0; 168.0; 171.8; 172.2.

Ejemplo 6 20-O- (Bencilglicil) succinil-camptotecina (7b) (ST1451) 500 mg (1.44 mmol) de camptotecina (lb) , 4 g (40 mmol; 28 eq. ) de anhídrido succínico y dimetilaminopiridina en una cantidad catalítica se suspendieron en 5 mi de piridina; la mezcla se agitó a 50 °C durante 48 horas. Al completar la reacción, se adicionaron 50 mL de HC1 6 N y el sólido obtenido de esta manera se recristalizó por medio MeOH para producir 452 mg (1 mmol; 70%) de un producto con Rf = 0.2 en CH2Cl2/MeOH 95:5. A una suspensión de 1 mmol del ácido obtenido de esta manera en 10 mL de CH2C12 anhidro, enfriado a T = 0°C, se adicionaron 1.27 g (10 mmol; 10 eq.) de cloruro de oxalilo. La mezcla se dejó agitar durante 3 horas hasta que se logró la formación completa del cloruro ácido; después de llevar el producto de reacción a sequedad, la extracción se hizo con 10 mL de CH2C12 anhidro y 1.65 g (10 mmol; 10 eq.) de glicina-bencilo-éster; y se adicionaron 1.5 mi (15 mmol; 15 eq.) de trietilamina . Después de 3 horas, la mezcla se llevó a sequedad, el residuo se extrajo con CH2CI2 y la fase orgánica obtenida de esta manera se lavó con HC1 1N y luego con H2O. El producto crudo obtenido de esta manera se purificó por medio de la cromatografía en una columna de Si02 con CH2Cl2/MeOH 95:5 para obtener 400 mg (0.67 mmol; 67%) del producto deseado. Rf = 0.38 en CH2C12 92:8. P.F. = 189°C. CtD = -5.2° (c = 0.44 en CHCl3/MeOH 8:2). EM (IS) : [M+l]+ = 597. Análisis elemental: calculado: C 66.55, H 4.87, N 7.06; encontrado: C 66.52, H 4.86, N 7.05. RMN ¾ (300 MHz, DMSO, d):0.95-1.00 (t, 3H, CH3) , 2.10-2.20 (q, 2H, CH2), 2.40-2.60 (m, 2H, CH2) , 2.65-2.85 (m, 2H, CH2) , 3.90-4.10 (m, 2H, CH2) , 5.00 (s, 2H, CH2) , 5.30 (s, 2H, CH2) , 5.50 (s, 2H, CH2), 7.10 (s, 1H, CH) , 7.25-7.35 (m, 5H, Ph) , 7.65-7.80 (m, 2H, 2CH) , 8.10-8.20 (q, 2H, 2CH) , 8.40-8.50 (t, 1H, NH) , 8.70 (s, 1H, CH) . RMN 13C (75.4 MHz, DMSO, d) : 7.5; 28.8; 29.4; 30.2; 40.6; 40.7; 50.0; 65.7; 66.1; 75.8; 95; 3; 118.6; 127.5; 127.7; 127.8; 127.9; 128.2; 128.4; 128.9; 129.6; 130.2; 131.4; 135.7; 145.4; 145.7; 147.8; 152.3; 156.4; 167.1; 169.7; 170.9; 171.1.

Ejemplo 7 Bromuro de 20-0- (terbutilqlicll ) succinil-camptotecina (8b) (ST1453) 500 mg (1.44 mmol) de camptotecina (Ib), 4 g (40 mmol; 28 eq. ) de anhídrido succínico y dimetilaminopiridina en una cantidad catalítica se suspendieron en 5 mi de piridina; la mezcla se agitó 50°C durante 48 horas. Al completar la reacción, se adicionaron 50 mL de HC1 6 N y el sólido obtenido de esta manera se recristalizó por medio de MeOH para producir 452 mg (1 mmol; 70%) de un producto con Rf = 0.2 en CH2Cl2/MeOH 95:5. A una suspensión de 1 mmol del ácido obtenido de esta manera en 10 mL de CH2CI2 anhidro, enfriado a T = 0°C, se adicionaron 1.27 g (10 mmol; 10 eq. ) de cloruro de oxalilo. La mezcla se dejó agitar durante 3 horas hasta que se logró la formación completa del cloruro ácido; después de llevar el producto de reacción a sequedad, la extracción se hizo con 10 mL de CH2CI2 anhidro y 1.31 g (10 mmol; 10 eq.) de glicina-terc-butil-éter y se adicionaron 1.5 mi (15 mmol; 15 eq.) de trietilamina . Después de 3 horas, la mezcla se llevó a sequedad, el residuo se extrajo CH2CI2 y la fase orgánica obtenida de esta manera se lavó con HCl 1 N y luego con H2O. El producto crudo obtenido de esta manera se purificó por medio de la cromatografía en una columna de Si02 con CH2Cl2/MeOH 95:5 para producir 390 mg (0.7 mmol; 70%) del producto deseado. Rf = 0.4 en CH2C12 92:8. -^desc. 213 C . aD = -52.1° (c = 0.41 en CHCl3/MeOH 8:2). EM (IS) : [M+l]+ = 562; M + Na+ = 584; [M-l]"= 560. Análisis elemental: calculado: C 64.17, H 5.53, N 7.49; encontrado: C 64.12, H 5.51, N 7.46. RMN ?? (300 MHz, DMSO, d) : 0.90-1.00 (t, 3H, CH3) , 1.40 (s, 9H, tBu), 2.10-2.20 (q, 2H, C¾) , 2.35-2.55 (m, 2H, CH2) , 2.60-2.85 (m, 2H, CH2) , 3.75-4.00 (m, 2H, CH2) , 5.30 (s, 2H, CH2), 5.50 (s, 2H, C¾), 7.20 (s, 1H, CH) , 7.70-7.80 (t, 1H, CH) , 7.85-7.95 (t, 1H, CH) , 8.10-8.15 (d, 1H, CH) , 8.20-8.25 (d, 1H, CH) , 8.30-8.35 (t, 1H, H) , 8.70 (s, 1H, CH) . RMN 13C (75.4 MHz, DMSO, d) : 7.5; 27.5; 28.9; 29.4; 30.2; 40.3; 41.2; 50.0; 66.1; 75.8; 80.4; 95; 4; 118.6; 127.6; 127.9; 128.4; 128.9; 129.7; 130.2; 131.4; 145.4; 145.7; 147.8; 152.3; 156.5; 167.1; 169.0; 170.7; 171.2.

Ejemplo 8 7-terc-Butoxiiminometil-20-O- (terbutilglicil) -succinil- camptotecina (8a) (ST1616) 387 mg (0.71 mmol) del producto intermedio 3a se disolvieron en 100 mL de CH2C12 anhidro. La solución se enfrió en un baño de hielo y luego se adicionaron 3 mL de cloruro de oxalilo. Al completar la adición, el baño de hielo se removió y la reacción se dejó a temperatura ambiente durante 6 horas. Al completar la reacción, la mezcla se llevó a sequedad y se lavó varias veces con CH2CI2. Al cloruro ácido obtenido de esta manera se adicionó una solución de éster terc-butílico de glicina en CH2CI2, obtenido por medio de la liberación con NaOH 2 N 1.6 g (9.6 mmol; 13 eq. en comparación con el producto intermedio 3a de inicio) del clorhidrato correspondiente y 1.6 mL de trietilamina . Después de 3 horas, la mezcla de reacción se diluyó con CH2C12 y se lavó con HC1 1 N, NaOH 2 N y con NaClsat. La fase orgánica luego se secó en sulfato de sodio anhidro y se purificó en una columna preparativa (CH2Cl2/MeOH 9:1) para producir 360 mg (0.54 mmol; 76%) del producto final. Rf = 0.47 en CH2Cl2/MeOH 95:5. P.F. = 190°C. [M-l]" = 659. Análisis elemental: calculado: C 63.64, H 6.06, N 8.48; encontrado: C 63.67, H 6.09, N 8.51.

RMN ¾ {300 MHz, DMSO, d) : 0.95-1.00 (t, 3H, CH3) , 1.40 (s, 9H, tBu) , 1.50 (s, 9H, tBu) , 2.10-2.30 (q, 2H, CH2) , 2.40- 2.60 (m, 2H, CH2) , 2.70-2.90 (m, 2H, CH2) , 3.70-4.00 (m, 2H, CH2), 5.40 (s, 2H, C¾), 5.50 (s, 2H, CH2) , 7.20 (s, 1H, CH) , 5 7.70-7.80 (t, 1H, CH) , 7.90-8.00 (t, 1H, CH) , 8.20-8.25 (d, 1H, CH) , 8.30-8.40 (t, 1H, H) , 8.60-8.65 (d, 1H, CH) , 9.30 (s, 1H, CH) . RMN 13C (75.4 MHz, D SO, d) : 8.3; 28.0; 28.3; 29.6; 30.1; 31.0; 42.0; 53.1; 66.9; 76.6; 81.2; 81; 3; 96.0; 119.5; 10 124.9; 125.7; 127.2; 128.9; 130.5; 131.0; 132.4; 144.3; 146.1; 146.2; 149.4; 153.1; 157.0; 167.9; 171.5; 171.2.

Ejemplo 9 20-O- (Glicil) succinil-camptotecina (7b) (ST1452) 15 200 mg (0.34 mmol) de ST1451 se disolvieron en 3 mL de una mezcla de DMF/EtOH 1:1; la solución se adicionó con Pd-BaS04 cat . y se sujetó a la hidrogenación a 4.213 kg/cm2 (60 psi) . Después de 1 hora, la reacción se completó, con la formación de un producto con Rf = 0.2 en ??2012/?ß?? 8:2. El 0 producto se purificó en una columna de Si02 con CH2Cl2/MeOH 7:3 para producir 157 mg (0.31 mmol; 90%) del producto esperado. Tdesc. 255 C. aD = -62° (c = 0.4 en CHCl3/ eOH 8:2) 5 EM (IS) : [M-l] " = 504.

Análisis elemental: calculado: C 61.78, H 4.87, N 7.06; encontrado: C 61.74, H 4.82, N 7.10. RMN XH (300 MHz, DMSO, d) : 0.90-1.00 (t, 3H, CH3) , 2.10-2.20 (q, 2H, CH2), 2.35-2.55 (m, 2H, CH2) , 2.65-2.85 (m, 2H, CH2) , 5 3.75-3.90 (m, 2H, CH2), 5.30 (s, 2H, CH2) , 5.50 (s, 2H, CH2) , 7.20 (s, 1H, CH) , 7.70-7.80 (t, 1H, CH) , 7.85-7.95 (t, 1H, CH), 8.10-8.15 (d, 1H, CH) , 8.20-8.25 (d, 1H, CH) , 8.25-8.30 (t, 1H, NH) , 8.70 (s, 1H, CH) . RMN 13C (75.4 MHz, DMSO, d) : 8.5; 29.9; 30.4; 31.3; 51.1; 10 67.2; 76.8; 96.3; 119.7; 128.6; 128.9; 129.4; 130.0; 130.7; 131.2; 132.4; 146.8; 149.9; 153.3; 157.7; 168.1; 171.6; 172.2.

Ejemplo 10 15 20-0- (2-Metoxifenilglicil) succinil-camptotecina (8b) (ST1454) A 55 mg de (7B) ST1452 disuelto en 3 mL de CH2C12, se adicionaron 27 mg (0.22 mmol; 1.8 eq.) de dimetilaminopiridina, 150 mg (1.2 mmol; 10 eq.) de guayacol y 150 mg (0.73 mmol; 7 eq.) de DCC. La mezcla se agitó a 0 temperatura ambiente durante toda la noche. La reacción se diluyó con 10 mi de CH2C12, se lavó con HC1 1N y se secó en Na2S04. El producto crudo se purificó en una columna preparativa con CH2Cl2/MeOH 98/2. se obtuvieron 49 mg del producto (0.08 mmol; 67%). 5 Tf=180°C. oeD = -41.1° (c = 0.41 en CHCl3/ eOH 8:2). EM (IS): [M+l]+ = 612; M + Na+ = 634; M + K+ = 650. Análisis elemental: calculado: C 64.81, H 4.75, N 6.87; encontrado: C 64.87, H 4.79, N 6.83. RMN XH (300 MHz, DMSO, d) : 0.90-1.00 (t, 3H, CH3) , 2.10-2.20 (q, 2H, CH2) , 2.40-2.60 (m, 2H, CH2) , 2.65-2.85 (m, 2H, CH2) , 3.70 (s, 3H, CH3), 4.10-4.30 (m, 2H, CH2) , 5.30 (s, 2H, CH2) , 5.50 (s, 2H, CH2), 6.85-7.00 (ra, 2H, 2xCHar) , 7.05-7.25 (m, 3H, 2xCHar + CH0ie£) 7.60-7.70 (t, 1H, CH) , 7.75-7.85 (t, 1H, CH) , 8.05-8.10 (d, 1H, CH) , 8.20-8.25 (d, 1H, CH) , 8.45-8.55 (t, 1H, NH), 8.70 (s, 1H, CH) . RMN 13C (75.4 MHz, DMSO, d) : 8.5; 25.4; 26.3; 29.8; 30.4; 31.2; 34.3; 48.4; 51.1; 52.7; 67.2; 76.8; 96.3; 113.9; 119.7; 121.5; 123.5; 127.9; 128.6; 128.9; 129.4; 130.0; 130.7; 131.2; 132.4; 146.4; 146.8; 148.9; 151.7; 153.4; 157.5; 169.3; 171.9; 172.2.

Ejemplo 11 7-terc-Butoxiiminometil-20-O- (2-metoxi-fenil-glicil) succinil-camptotecina (8a) (ST1617) 180 mg (0.27 mmol) de ST1616 se disolvieron en 3 mL de CH2C12 anhidro y 1.5 mL de ácido trifluoroacético se adicionaron a la solución. Después de 3 horas a temperatura ambiente, la reacción se completó y la mezcla se llevó a sequedad y el residuo obtenido de esta manera se lavó varias veces para eliminar el exceso de ácido trifluoroacético. El producto luego se disolvió en 6 rtiL de CH2CI2 anhidro y 0.82 ml (7.5 mmol; 28 eq. ) de guayacol, se adicionaron a la solución 80 mg (0.65 mmol; 2.4 eq.) de dimetilaminopiridina y 410 mg (2 mmol; 7.4 eq.) de DCC. Después de 24 horas, la mezcla de reacción se filtró a través de celite y el producto crudo se purificó por medio de la cromatografía en una columna de Si02 con CH2Cl2/MeOH 92:8 para producir 85 mg (0.12 mmol; 44%) de un sólido de color amarillo. Rf = 0.24 en C¾Cl2/MeOH 95:5. Tdesc. = 170 °C. [M+l]+ = 711; M + Na+ = 733; Análisis elemental: calculado: C 64.23, H 5.35, N 7.89; encontrado: C 64.29, H 5.39, 7.84. RMN XH (300 MHz, DMSO, d) : 0.95-1.00 (t, 3H, CH3) , 1.50 (s, 9H, tBu) , 2.10-2.30 (q, 2H, CH2) , 2.40-2.65 (m, 2H, CH2) , 2.70-2.95 (m, 2H, CH2) , 3.80 (s, 3H, CH3) , 4.15-4.35 (m, 2H, CH2), 5.40 (s, 2H, CH2), 5.60 (s, 2H, CH2) , 6.90-7.05 (m, 2H, 2xCH) , 7.10-7.30 (m, 3H, 2xCHar + CH0ief) , 7.75-7.80 (t, 1H, CH), 7.85-7.90 (t, 1H, CH) , 8.30-8.35 (d, 1H, CH) , 8.55-8.70 (m, 2H, CH + NH) , 9.30 (s, 1H, CH) . RMN 13C (75.4 MHz, DMSO, d) : 8.3; 25.1; 26.0; 27.0; 28.7; 29.6; 30.1; 31.0; 34.0; 48.2; 56.4; 76.6; 81.3; 96.0; 113.6; 119.5; 121.2; 123.3; 124.9; 125.7; 127.2; 127.7; 128.9; 130.5; 131.0; 132.4; 144.3; 146.2; 149.4; 151.4; 157.0; 157.3; 167.9; 169.0; 171.7; 172.0.

Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención.

Claims (1)

1. REIVINDICACIONES Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones : 1. Los compuestos de la fórmula (I) caracterizados porque: A es alquilo de 1 a 8 átomos de carbono de cadena recta o ramificada, saturado o insaturado, cicloalquilo de 3 a 10 átomos de carbono, cicloalquil- (C3-C10) -alquilo de 1 a 8 átomos de carbono de cadena recta o ramificada; cuando n y m son iguales a 1, entonces Y es alquilo de 1 a 8 átomos de carbono de cadena recta o ramificada, saturado o insaturado, que es sustituido por NR12R13 o +Ri2Ri3Ri , donde R12 , R13 y R14, los cuales pueden ser los mismos o diferentes, son hidrógeno o alquilo de 1 a 4 átomos de carbono de cadena recta o ramificada o Y es BCOOX, donde B es un residuo de un aminoácido, X es H, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono de cadena recta o ramificada, bencilo o fenilo, sustituido en las posiciones disponibles por al menos un grupo seleccionado de alcoxi de 1 a 4 átomos de carbono, halógeno, nitro, amino, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, o si n y m son ambos 0; Y es 4 -trimetilamonio-3 -hidroxibutanoilo, tanto en la forma de sal inerte como en la forma de una sal con un anión de un ácido farmacéuticamente aceptable o Y es ?¾?2¾3¾4, como se definiera anteriormente; Ri es hidrógeno o un grupo -C (R5) =N-0~R4, en el cual R4 es hidrógeno o un grupo alquilo de 1 a 5 átomos de carbono de cadena recta o ramificada o alquenilo de 1 a 5 átomos de carbono o un grupo cicloalquilo de 3 a 10 átomos de carbono o un grupo cicloalquil- (C3-Ci0) -alquilo de 1 a 5 átomos de carbono de cadena recta o ramificada o un grupo arilo de 6 a 14 átomos de carbono o un grupo aril- (C6-Ci ) -alquilo de 1 a 5 átomos de carbono de cadena recta o ramificada o un grupo heterocíclico o un grupo heterociclo-alquilo de 1 a 5 átomos de carbono de cadena recta o ramificada, el grupo heterocíclico que contiene al menos un heteroátomo seleccionado de un átomo de nitrógeno, sustituido opcionalmente por un grupo alquilo de 1 a 5 átomos de carbono y/o un átomo de oxígeno y/o de azufre; los grupos alquilo, alquenilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, arilo, arilalquilo, alquilo heterocíclico o heterociclo-alquilo pueden ser sustituidos opcionalmente por uno o más grupos seleccionados de: halógeno, hidroxi, alquilo de 1 a 5 átomos de carbono, alcoxi de 1 a 5 átomos de carbono, fenilo, ciano, nitro, -NR6R7, donde R6 y R7, los cuales pueden ser los mismos o diferentes, son hidrógeno-, alquilo de 1 a 5 átomos de carbono de cadena recta o ramificada, el grupo -COOH o uno de sus ésteres farmacéuticamente aceptables; o el grupo -CONR8R9, donde R8 y Rg, los cuales pueden ser los mismos o diferentes, son hidrógeno, alquilo de 1 a 5 átomos de carbono de cadena recta o ramificada; o R es un residuo de aroilo de 6 a 10 átomos de carbono o arilsulfonilo de 6 a 10 átomos de carbono, sustituido opcionalmente por uno o más grupos seleccionados de: halógeno, hidroxi, alquilo de 1 a 5 átomos de carbono de cadena recta o ramificada, alcoxi de 1 a 5 átomos de carbono de cadena recta o ramificada, fenilo, ciano, nitro, -NRi0Rn, donde Rio y Rn, los cuales pueden ser los mismos o diferentes, son hidrógeno, alquilo de 1 a 5 átomos de carbono de cadena recta o ramificada; o R4 es un residuo de poliaminoalquilo; o R4 es un residuo de glicosilo; R5 es hidrógeno, alquilo de 1 a 5 átomos de carbono de cadena recta o ramificada, alquenilo de 1 a 5 átomos de carbono de cadena recta o ramificada, cicloalquilo de 3 a 10 átomos de carbono, cicloalquil- (C3-C10) -alquilo de 1 a 5 átomos de carbono de cadena recta o ramificada, arilo de 6 a 14 átomos de carbono, aril- (C5-Ci ) -alquilo de 1 a 5 átomos de carbono de cadena recta o ramificada; R2 y R3, los cuales pueden ser los mismos o diferentes, son hidrógeno, hidroxilo, alcoxi de 1 a 5 átomos de carbono de cadena recta o ramificada; los NI- óxidos, las mezclas racémicas, sus enantiómeros individuales, sus diastereoisómeros individuales, sus mezclas y sus sales farmacéuticamente aceptables. 2. Los compuestos de conformidad con la reivindicación 1, caracterizados porque, en la fórmula (I), n y m son 1. 3. Los compuestos de conformidad con la reivindicación 1, caracterizados porque, en la fórmula (I), n y m son 0. 4. Los compuestos de conformidad con la reivindicación 1, caracterizados porque se seleccionan del grupo que consiste de: bromuro de (E) -7-terc-butoxiiminometil-20-O- (4-trimetil-amonio-3-hidroxi ) butanoil-camptotecina; bromuro de (E) -7-terc-butoxiiminometil-20-O- (4-trimetil-amonio) butanoil-camptotecina; (E) -7-terc-butoxiiminometil-20-O-hemisuccinil-camptotecina; clorhidrato de (E) -7-terc-butoxiiminometil-20-O- [2- (dimetilamino) etilamino] succinil-camptotecina; 20-O- (bencilglicil) succinil-camptotecina; bromuro de 20-O- (terc-butilglicil ) succinil-camptotecina; 7-terc-butoxiiminometil-20-O- (terc-butilglicil) succinil-camptotecina; 20-O- (glicil) succinil-camptotecina; 20-0- (2-metoxifenilglicil) succinil-camptotecina; 7-terc-butoxiiminonietil-20-O- (2-metoxifenilglicil) succinil-camptotecina . 5. Un procedimiento para la preparación de los compuestos de conformidad con la reivindicación 1, donde n y m son 0, caracterizado porque comprende: a) la reacción de la camptotecina, sustituida opcionalmente por los grupos Ri, I¾ y R3 definidos anteriormente, con un ácido carboxílico que lleva un grupo saliente en o¡>, para obtener el éster respectivo en la posición 20; b) la sustitución del grupo saliente con el grupo Y. 6. Un procedimiento para la preparación de los compuestos de conformidad con la reivindicación 1, donde n y m son 1, caracterizado porque comprende: a) la reacción de la camptotecina, sustituida opcionalmente por los grupos Ri, R¿ y R3 definidos anteriormente, con un ácido carboxílico con 3 a 11 átomos de carbono, para obtener el hemiéster respectivo en la posición 20; b) la transformación del grupo carboxilo libre del hemiéster a la amida respectiva -NH-Y. 7. Los compuestos de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-4, caracterizados porque se formulan como medicamentos. 8. Una composición farmacéutica, caracterizada porque contiene una cantidad terapéuticamente efectiva de al menos un compuesto de conformidad con las reivindicaciones 1-4, en una mezcla con vehículos y excipientes farmacéuticamente aceptables. 9. Una composición farmacéutica, caracterizada porque contiene una cantidad terapéuticamente efectiva de al menos un compuesto de conformidad con las reivindicaciones 1-4, en una mezcla con vehículos y excipientes farmacéuticamente aceptables y opcionalmente en combinación con otro ingrediente activo. 10. Una composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 9, caracterizada porque el otro ingrediente activo es un agente anticancerígeno. 11. El uso de un compuesto de conformidad con las reivindicaciones 1-4, para la preparación de un medicamento dotado con actividad inhibitoria de topoisomerasa I. 12. El uso de conformidad con la reivindicación 11, para la preparación de un medicamento que sea útil para el tratamiento de tumores. 13. El uso de conformidad con la reivindicación 11, para la preparación de un medicamento que sea útil para el tratamiento de infecciones parasíticas o virales.