MX2015001712A - Proceso para la preparacion de pemetrexed y sal de lisina del mismo. - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere a un proceso para la síntesis de pemetrexed y sales del mismo, en particular con una sal de lisina del mismo, con la sal como tal y con las composiciones farmacéuticas que comprenden la misma. Además, la presente descripción también se relaciona con una forma cristalina de la síntesis del dietiléter de pemetrexed intermediario y una forma cristalina de la sal de lisina de pemetrexed.

Description

PROCESO PARA LA PREPARACIÓN DE PEMETREXED Y SAL DE LISINA DEL MISMO CAMPO DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere a un proceso para la preparación de pemetrexed y sales del mismo, en particular una sal del U sina del mismo con la sal como tal y con las composiciones farmacéuticas que comprenden la misma.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Pemetrexed normalmente se utiliza en preparaciones farmacéuticas en la forma de sal disódica, específicamente la sal disódica heptahidratada es el producto comercializado por Eli Lilly and Compañy con el nombre comercial ALIMTA® y se describe en la EP1259513.

Pemetrexed se describió originalmente en la EP432677/US5344932. La síntesis mostrada en esta patente proporciona el 2-amino-7H-pirrol(2,3-d)pirimidin-4-ol como una materia prima, el grupo amino de este derivado está protegido con cloruro de pivaloilo y el producto obtenido se transforma en dos pasos en el derivado de 3-iodo correspondiente. La reacción de acoplamiento posterior con N- (4-etinilbenzoil)L-glutamato de dimetilo, proporciona un derivado biarilacetilénico que se convierte a pemetrexed mediante hidrogenación catalítica y saponificación posterior. Sin embargo, este procedimiento, no es adecuado para aplicación industrial.

El pemetrexed diácido también se puede obtener al seguir otros procedimientos sintéticos más recientes entre aquellos reportados en la patente de los Estados Unidos No. 5,416,211, en la EP 9916742 y en 905128/WO CJ Barnett et al., Org. Proc Res & Develop., 1999, 3, 184-188, utilizando síntesis industriales que requieren la preparación del dietiléster de pemetrexed intermediario 3 (Esquema I): .

. , ,. : : Esquema I En las referencias citadas, el dietiléster de pemetrexed 4 se prepara al hacer reaccionar el ácido 4—(2—(2— amino-4,7-dihidro-4-oxo-3H-pirrol(2,3-d)pirimidin-5- il)etil)benzoico (2) con el glutamato de L-dietil- clorhidratado en presencia de un agente condensante en N,N-dimetilformamida como solvente. Este procedimiento no proporciona el aislamiento del dietiléster de pemetrexed (3): después del trabajo extractivo con diclorometano, y el intercambio de solventes con etanol, el producto mencionado anteriormente se aísla y se purifica como una sal de ácido p-toluensulfónico (4) que posteriormente se convierte en pemetrexed (5) mediante hidrólisis básica y acidificación. El pemetrexed diácido (5) se convierte a la sal disódica correspondiente mediante el tratamiento con bicarbonato sódico acuoso.

Este proceso implica el uso de DMF (un solvente con alta toxicidad) como un solvente de la reacción de acoplamiento, y también, incluso si permite obtener el pemetrexed con alta pureza, consiste de una secuencia larga de operaciones para aislar y purificar la sal de diéster de pemetrexed (4) a saber, 3 trituraciones y una cristalización con filtraciones relativas, reduciendo por consiguiente la eficiencia del proceso.

Un aspecto negativo adicional del procedimiento de purificación del áster pemetrexed (3) a través de la formación de sal de ácido p-toluensulfónico se representa mediante la posible formación de ásteres mediante la reacción de ácido p-toluensulfónico con alcoholes. Estos productos de ésteres p-toluensulfónicos .se clasifican como agentes alquilantes genotóxicos y su contenido se debe reducir a valores muy bajos (Genotoxic and carcinogenic impurities in drug substances and Products: Recommended Approaches, FDA Guidance for Industry, 2008; Guideline on the Limits of genotoxic Impurities, EMEA/CHMP 2006).

El dietiléster de pemetrexed (3) sin embargo se describe en la bibliografía como un compuesto sólido: en CJ Barnett et al, Org. Proc Res & Develop., 1999, 3, 184-188, en la página 188 el compuesto 13 se muestra con una pf de 169- 171°C; en E.C. Taylor and B.Liu, J.Org. Chem., 2003, 68, 9938-9947, en la página 9945 el compuesto 25a se muestra con una pf 84-86°C; en T. Miwa et al, J.Org. Chem., 1993, 58, 1696-1701, en la página 1700, el compuesto 23a se muestra con una pf 131-133°C.

En la EP 2409978 se reivindica un proceso novedoso para preparar el diéster de pemetrexed (3) que permite eliminar el procedimiento de síntesis y purificación de (4). En particular, la reacción de acoplamiento entre el ácido (2) y el glutamato de dietilo se lleva a cabo en un solvente orgánico aprótico, en particular en una mezcla de DMF y diclorometano; al término de la reacción, la mezcla se lava con una solución acuosa básica, la solución se concentra, se agrega con un solvente orgánico polar, de preferencia etanol y el diéster de pemetrexed (3) se aísla mediante cristalización. Incluso en este proceso se emplean solventes con alta toxicidad (DMF y diclorometano), y también el trabajo de la mezcla de reacción del acoplamiento necesariamente implica un alto volumen de solventes y muchos lavados de la fase orgánica con soluciones acuosas para eliminar la DMF presente, limitando por consiguiente la eficiencia y productividad del proceso. La sal disódica de pemetrexed (6) luego se obtiene mediante la saponificación del éster (4).

La sal disódica de pemetrexed empleada en formulaciones farmacéuticas se caracterizada por una deficiente estabilidad y muestra la formación de impurezas de degradación, tanto en el estado sólido como en solución, en particular relacionadas con los efectos de tipo oxidativo que requiere condiciones adecuadas de manipulación y empaque en una atmósfera controlada e impide el uso de formulaciones líquidas listas para utilizarse. Recientemente, en la WO 2012/015810, se han reportador formulaciones acuosas de las sales de pemetrexed con antioxidante y agentes quelantes, que tienen una mayor estabilidad a largo plazo, aunque sin embargo muestran un aumento de los productos de degradación hasta valores del 1-5% que es una cantidad de impurezas no aceptable con base en los lineamientos ICH de los productos farmacéuticos si no se califican adecuadamente.

El alcance de la presente invención es superar los problemas presentes en el estado de la téenica y se refiere a la síntesis de pemetrexed y la inestabilidad de la sal disódica del mismo.

SUMARIO DE LA INVENCIÓN La presente invención se basa en el descubrimiento de que el uso de mezclas de agua-alcohol como un solvente en la reacción de acoplamiento (acoplamiento) de la síntesis de pemetrexed, permite la precipitación del dietiléster intermediario directamente en la mezcla de reacción, sin la necesidad de DMF. El dietiléster de pemetrexed de esta forma obtenido ya tiene una alta pureza que permite su uso directamente en pasos posteriores de la síntesis de pemetrexed sin la necesidad de realizar los pasos de salificación, purificación y/o lavado como se describe en el estado de la técnica de acuerdo con los métodos en los cuales se utiliza DMF.

Además, los inventores de la presente invención han observado que la sal de (bi)lisina de pemetrexed es sorprendente e inesperadamente más estable que la sal disódica ya conocida. Esta mayor estabilidad de la sal de bilisina implica una considerable ventaja técnica debido a que superan los problemas de inestabilidad del ingrediente activo pemetrexed en los pasos de manipulación y almacenamiento.

Para los fines de la presente invención, la sal de bilisina de pemetrexed se puede denominar genéricamente como sal de lisina asi como la sal disódica se puede denominar genéricamente como la sal sódica.

Por lo tanto, los objetivos de la solicitud son: un proceso para la preparación de una sal del pemetrexed de la fórmula general I: o cocrB+ (I) en la cual B+ es un catión adecuado, de preferencia Na+ o lisina protonada, que comprende los siguientes pasos: a) hacer reaccionar el ácido 4-(2-(2-amino-4,7-dihidro-4-oxo-3H-pirrol(2,3-d)pirimidin-5-il)etil)benzoico (2) con el L-dietil-glutamato clorhidratado en presencia de un reactivo de acoplamiento para obtener el dietiléster de pemetrexed (3). . b) hidrolizar el dietiléster de pemetrexed (3) a ácido de pemetrexed (5): c) salificar con una base seleccionada de NaOH o lisina para obtener la sal de pemetrexed correspondiente: caracterizado porque en el paso a): 1) el ácido (2) se convirtió in situ con anterioridad al carboxilato sódico correspondiente o carboxilato de morfolina que se pueden aislar o hacer reaccionar directamente; 2) el solvente de reacción utilizado consiste de una mezcla hidro-alcohólica de solventes en donde el alcohol se selecciona del grupo: metanol, etanol, isopropanol, n-propanol; 3) el dietiléster de pemetrexed intermediario (3) se precipita directamente de la mezcla de reacción con una pureza del >98%.

Un objetivo adicional de la presente invención es una sal de (bi)lisina del ácido N-[4-[2-(2-amino-4-oxo-4,7-dihidro-3H-pirrol[2,3—d]pirimidin-5-il)etil]benzoil]-L-glutámico (pemetrexed) de la fórmula (1) (1) en una forma anhidra o hidratada, de preferencia en su forma cristalina definida por el espectro de difracción de rayos X mostrado en la figura 7.

Los objetivos adicionales de la solicitud son el compuesto de acuerdo con la fórmula (1) anterior para utilizarse como un medicamento, de preferencia un agente anti-tumoral; un proceso para la sintesis del compuesto de la fórmula (1) que comprende un paso de salificación de pemetrexed biácido (5) con la base de U sina; una composición farmacéutica que comprende el compuesto de acuerdo con la fórmula (1) y/o una forma cristalina del mismo como se indicó anteriormente y al menos un excipiente farmacológicamente aceptable.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS La figura 1, muestra el espectro de difracción de rayos X de dietiléster de pemetrexed precipitado a partir de isopropanol/agua.

La figura 2, muestra el espectro de difracción de rayos X de dietiléster de pemetrexed precipitado a partir de etanol/agua/acetona.

La figura 3, muestra el perfil de DSC (calorimetría de exploración diferencial) de dietiléster de pemetrexed precipitado a partir de etanol/agua/acetona.

La figura 4, muestra el espectro de difracción de rayos X de dietiléster de pemetrexed cristalizado a partir de 2-metiltetrahidrofurano/etanol.

La figura 5, muestra el espectro de difracción de rayos X de dietiléster de pemetrexed cristalizó a partir de etanol/metiletilcetona.

La figura 6, muestra el perfil de DSC (calorimetría de exploración diferencial) de dietiléster de pemetrexed cristalizado a partir de etanol/metiletilcetona.

La figura 7, muestras el espectro de difracción de rayos X de la sal de U sina de pemetrexed.

La figura 8, muestra los datos de difracción de rayos X de la sal de U sina de pemetrexed.

La figura 9, muestras el perfil de DSC calorimetría de exploración diferencial) de la sal de U sina.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN La presente invención consiste de los siguientes aspectos que se describen en detalle más adelante.

Proceso de síntesis El objetivo del proceso de síntesis de la presente invención es un proceso para la preparación de una sal de pemetrexed, de la fórmula general I: (I) en la cual B+ es un catión adecuado, de preferencia seleccionado de Na+ o lisina protonada.

Esta sal se obtiene mediante un proceso de síntesis novedoso de aplicabilidad industrial (Esquema II) que permite obtener fácilmente el intermedio de la síntesis (3), el etildiéster de pemetrexed, en estado sólido evitando el uso de DMF.

. ¡ . : Esquema II En particular, el uso de mezclas hidro-alcohólicas (de preferencia isopropanol/agua) como el solvente de la reacción de acoplamiento (acoplamiento) da por resultado en la precipitación del intermedio (3) a partir de la mezcla de reacción. El diéster de pemetrexed (3) obtenido después de la filtración ya tiene alta pureza (> 98%) lo que permite el uso directo del mismo en pasos posteriores sin purificación adicional.

El diéster de pemetrexed (3) de esta forma preparado se puede convertir directamente en la sal de pemetrexed deseada, por ejemplo la sal disódica de lisina o, sin la necesidad de aislar el pemetrexed en forma de ácido libre que es esencial cuando se está preparando la sal de éster de pemetrexed con ácido de p-toluensulfónico, como se describe en el estado de la téenica. La formación directa de la sal de pemetrexed sin la necesidad de aislar el pemetrexed en forma ácida representa una ventaja adicional del objetivo del proceso de preparación de la presente invención.

Las sales de pemetrexed farmacéuticamente aceptables que se puedan obtener con el objetivo di proceso de la presente invención son, en particular, sin estar limitados a, la sal disódica y la sal de (bi)U sina.

Estas sales pueden estar ya sea en forma anhidra o en forma hidratada. De preferencia, la sal comprende un porcentaje de agua comprendido en la variación de 0-22% en peso. Se ha considerado por ejemplo que el compuesto en el mercado, Alimta®, corresponde al pemetrexed disódico heptahidratado y contiene un porcentaje de agua igual al 21% en peso, y otra sal de pemetrexed bien conocida en la bibliografía, el pemetrexed disódico hemipentahidratado en su lugar tiene porcentaje de agua igual al 8.7% en peso.

El proceso para la preparación de la sal de la fórmula 1, de acuerdo con la presente invención comprende, en particular, los siguientes pasos: a) hacer reaccionar el ácido 4-(2-(2-amino-4,7-dihidro-4-oxo-3H-pirrol(2,3-d)pirimidin-5-il)etil)benzoico (2) con el L-dietil-glutamato clorhidratado en presencia de un reactivo de acoplamiento para obtener el dietiléster de pemetrexed (3); b) hidrolizar el dietiléster de pemetrexed (3) a ácido de pemetrexed (5) c) salificar con una base seleccionada de NaOH o U sina para obtener la sal de pemetrexed correspondiente.

Para la síntesis del ácido 4- (2-(2-amino-4,7-dihidro-4-oxo-3H-pirrol(2,3-d)pirimidin-5-il)etil)benzoico, (2) se reportan muchos procedimientos sintéticos en la bibliografía entre las cuales se citan la EP432677, EP 905 128, U.S.5,416,211, EP 2301909, CJ Barnett et al., Org. Proc Res & Dev., 1999, 3, 184-188. En general el ácido 2 se puede preparar convenientemente al seguir el procedimiento sintético general descrito en el siguiente Esquema III: 9 2 Esquema III En la EP 905 128 (Ejemplo 1, p 10) el aldehido crudo 7 (rendimiento del 87%) no se aísla ni se purifica, aunque la solución orgánica que contiene el aldehido 7 obtenido se filtra sobre una resina para eliminar el Pd elemental todavía presente, y el solvente orgánico mediante evaporación en seco. El aldehido crudo 7 asi obtenido, luego se purifica mediante tratamiento con bisulfuro de sodio y la formación de la sal sódica del ácido sulfónico derivado correspondiente (el derivado también conocido como "compuesto de Bertagnini") en la forma de un sólido cristalino (EP905128, Ejemplo 2, página 11).

En la EP 2301909 se reporta en su lugar que no es necesario purificar el aldehido crudo 7 por medio de la sal sódica de ácido sulfónico derivado, aunque podría ser suficiente una extracción con un solvente orgánico (de preferencia una mezcla de solventes) de la mezcla de reacción, una decoloración sobre gel de sílice y la posterior evaporación en seco del solvente orgánico para obtener un aldehido (7) ya con una pureza del 96% adecuada para los pasos sintéticos posteriores.

Se ha encontrado que en lugar de que sea suficiente operar como se describen en la EP905128, Ejemplo 1, para obtener una solución en acetato de etilo del aldehido crudo 7, que se puede utilizar directamente en el paso posterior de brominación sin ninguna necesidad de purificación por el derivado sulfónico de la sal sódica, como se espera a partir de la EP905128, o la extracción, aislamiento y decoloración, como se espera a partir de la EP2301909.

El aldehido crudo (7) se transforma en el aldehido del bromo correspondiente que a su vez se hace reaccionar directamente con 2,4-diamino-6-hidroxipirimidina, obteniendo asi el 4-(2-(2-amino-4,7-dihidro-4-oxo-1H-pirrol(2,3-d)pirimidin-5-il)etil)benzoato de metilo (9) (EP905128, Ejemplo 4, página 11).

La saponificación del éster (9) y la acidificación posterior de la mezcla de reacción conduce al ácido carboxilico (2) (EP905128, Ejemplo 5, página 11) que tiene la pureza adecuada para la preparación del pemetrexed disódico para usos farmacéuticos.

El proceso del objetivo de la síntesis de pemetrexed de la presente solicitud se caracteriza principalmente por el hecho de que el solvente de reacción utilizado en el paso sintético a) del Esquema I está constituido por una mezcla de agua y solventes de etanol en los cuales el alcohol se selecciona del grupo metanol, etanol, isopropanol, n-propanol. De preferencia, la mezcla de solventes está representada por isopropanol/agua o agua/etanol. En particular, el agua y el alcohol isopropílico o alcohol etílico están en una proporción v/v comprendida entre 3/1 y 1/3, de preferencia entre 6/4 y 4/6. La cantidad de la mezcla solventes utilizada está entre 5 y 25 volúmenes con respecto al precursor ácido (2) y de preferencia entre 10 y 20 volúmenes, entendido por el término "volumen", la proporción de solvente/soluto expresada en mi de solvente/g del precursor.

Bajo las condiciones de reacción en el paso sintético a), el dietiléster de pemetrexed intermediario (3) se precipita directamente de la mezcla de reacción con una pureza del >98% y posiblemente se puede utilizar directamente en el siguiente paso sin purificación adicional.

Además, en el paso sintético a), el ácido (2) se convierte in situ con anterioridad en el carboxilato sódico correspondiente que se puede aislar (US2008/0146799, Ejemplo 5, p 13) o hacer reaccionar directamente. Alternativamente, siempre en el paso sintético a), el ácido 2 se puede convertir in situ en el carboxilato de morfolinio correspondiente que luego se hace reaccionar directamente. La salificiación in situ se puede realizar de acuerdo con los métodos usuales que se conocen por el experto.

El reactivo de acoplamiento se selecciona de CDMT (2-cloro-4,6-dimetoxi-l,3,5-triazina), EDC (l-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida, DMTMM cloruro de (4-(4,6- dimetoxi-1,3,5-triazin-2-il)-4-metilmorfolina) y de mayor preferencia CDMT (2-cloro-4,6-dimetoxi-l,3,5-triazina).

La reacción se lleva a cabo a temperatura entre 0°C y 60°C, de preferencia entre 15 y 50°C.

La precipitación completa del dietiléster de pemetrexed (3) se obtiene mediante la adición adicional de la mezcla de reacción, de 5-35 volúmenes, de preferencia 10-25 volúmenes de agua o una mezcla de agua/acetona en una proporción comprendida de 2/1 hasta 1/1.

La suspensión obtenida se puede mantener bajo agitación a temperaturas entre 0 y 5°C, de preferencia 5 y 30°C, durante un tiempo entre 1 y 24 horas, de preferencia entre 5 y 12 horas.

El diéster de pemetrexed (3) asi obtenido, después de la filtración y lavado con una mezcla de solventes hidro-alcohólicos, posteriormente se puede deshidratar bajo vacio a aproximadamente 50°C a un peso constante. Este producto crudo exhibe alta pureza mediante HPLC >98% y, para los fines de la presente invención, se puede utilizar directamente sin purificaciones adicionales en la reacción de hidrólisis posterior del ácido libre.

Luego, la conversión de diéster de pemetrexed (3) a ácido (5) se puede llevar a cabo de acuerdo con el proceso ya descrito en la US 5,416,211 o la EP 905128 mediante hidrólisis en solución acuosa en presencia de una base. Pemetrexed luego se aisla después de la acidificación, mediante precipitación a partir de las mezclas de .agua-alcohol.

La temperatura de reacción está entre 0 y 40°C, dé preferencia entre 10 y 30°C.

En la formación de la sal de pemetrexed, el ácido (5) se salifica con una base adecuada, de preferencia seleccionada de NaOH o lisina para obtener la sal de pemetrexed correspondiente.

El proceso descrito aqui también se puede utilizar para preparar la sal disódica de pemetrexed que se puede obtener a partir del precursor biácido (5), por ejemplo, mediante tratamiento con hidróxido de sodio en solución acuosa hasta pH 8 y precipitación con un solvente miscible en agua en analogía con el que se reporta en la EP 905128.

Alternativamente, la alta pureza del diéster de pemetrexed (3) permite obtener la sal disódica en un solo paso directamente mediante hidrólisis básica en una solución hidroalcohólica de (3) y la precipitación de la sal disódica mediante la adición de un solvente miscible en agua.

Diéster de pemetrexed de la fórmula 3: obtenido de acuerdo con el proceso descrito anterior tiene una forma predominantemente amorfa cuyo grado de cristalinidad puede variar dependiendo de los lotes de reacción (figura 1).

El diéster de pemetrexed crudo se puede utilizar sin purificación adicional en reacciones posteriores o se puede purificar adicionalmente, por ejemplo, para una mejor caracterización, mediante cristalización utilizando una serie de solventes seleccionados de acetonitrilo, acetato de etilo/etanol, 2-metiltetrahidrofurano/etanol, metiletilcetona/etanol, isopropanol/agua, proporcionando un dietiléster de pemetrexed (3) con una pureza del >99.5%, como se muestra mediante HPLC.

En particular, los autores de la presente invención han observado que: utilizando como la mezcla de cristalización 2-metiltetrahidrofurano/etanol un sólido cristalino de diéster de pemetrexed (3) se exhibe un espectro de difracción de rayos X mostrado en la figura 4, se obtiene mientras se utiliza como la mezcla de cristalización de etanol/metiletilcetona, se obtiene un sólido cristalino de diéster de pemetrexed (3) exhibiendo un espectro de difracción de la rayos X mostrado en la figura 5.

Sal de lisina de pemetrexed El objetivo de la presente invención también es el compuesto ácido de la sal de lisina del ácido N-[4-[2-(2-amino-4-oxo-4,7-dihidro-3H-pirrol[2,3-d]pirimidin-5-il)etil]benzoil]-L-glutá ico (pemetrexed) de la fórmula (1): (1) en forma anhidra o hidratada.

De preferencia, esta sal tiene que un porcentaje de agua comprendido en la variación de 0-22% en peso.

Además, la sal de lisina se puede obtener como un sólido cristalino y se caracterizar mediante un espectro de difracción de rayos X mostrado en la figura 7, y se resume en la figura 8.

La sal de lisina también está caracterizada por un perfil de DSC (calorimetría de exploración diferencial) mostrado en la figura 9, en donde tiene un punto de fusión a 230°C seguido por descomposición. El análisis termogravimétrico (TGA) muestra una pérdida de peso del 3.8%.

La sal de U sina de pemetrexed objetivo de la presente solicitud se caracteriza mediante una estabilidad significativamente superior en comparación con la sal disódica como se muestra en las siguientes tablas.

Tabla 1: Resultados de la pureza mediante HPLC (área %) para la sal disódica de pemetrexed hemipentahidratado almacenada a 25°C ± 5°C y 40°C ± 5°C (humedad no controlada) Tabla 2: Resultados de la pureza mediante HPLC (área %) de la sal de lisina de pemetrexed almacenada a 25°C ± 5°C y 40°C ± 5°C (humedad no controlada) Tabla 3: Resultados de la pureza mediante HPLC (área %) para la sal disódica de pemetrexed hemipentahidratado, sal heptahidratada y de lisina almacenada a 100°C durante 6 dias (humedad no controlada) La sal disódica de pemetrexed muestra una degradación significativa en condiciones aceleradas a 40°C, y la formación de 3 impurezas principales con relación a los tiempos de retención de 0:19, 0:26 y 1:15 ya observados después de 3 meses. En las mismas condiciones, la sal de U sina queda prácticamente sin alterar.

Un estudio en las condiciones de estrés de 100°C durante 6 dias muestra un aumento remarcable de impurezas en los tiempos de retención de 0:19, 0:26 y 1:15 y tanto en el caso de la sal disódica hemipentahidratada (0.4%-2%) y la sal disódica heptahidratada comercial (0.4-1%).

Los principales productos de degradación se identificaron mediante HPLC/MS y estas estructuras parecen que se pueden atribuir a la oxidación del producto. Se obtiene un patrón similar de impurezas mediante el tratamiento de la sal disódica de pemetrexed en solución acuosa en presencia de agentes oxidantes tales como peróxido de hidrógeno al 10%.

Para una confirmación adicional de la degradación de tipo oxidativo, una muestra de sal disódica empacada en una atmósfera controlada bajo nitrógeno, bajo condiciones de estrés de 100°C durante 6 dias muestra una reducción remarcable en el contenido de impurezas.

La sal de lisina también es mucho más estable bajo condiciones de estrés de 100°C durante 6 dias y l^s mismas impurezas no exceden el valor de 0.2%.

Por lo tanto, estos datos demuestran la forma en que la sal de U sina de pametrexed es significativamente más estable que la sal disódica correspondientes y por lo tanto se puede utilizar ventajosamente como una sal del ingrediente activo pemetrexed debido a que es menos propenso a la degradación/descomposición provocadas por estrés oxidativo.

La sal de U sina de pemetrexed, como también su forma cristalina definida mediante el espectro de difracción de rayos X mostrado de la figura 7, se puede utilizar ventajosamente como un medicamento y de preferencia, similarmente con la sal disódica de pemetrexed, como un fármaco anti-tumoral.

La sal de lisina de pemetrexed se puede obtener en general a través de un paso de salificación del biácido de pemetrexed (5) con la lisina base. En particular, en una modalidad del método, la sal de la fórmula I se puede obtener al agregar a una solución acuosa de ácido del pemetrexed (5) de 2 a 4 equivalentes de lisina hidratada, de preferencia 3 equivalentes. Posteriormente, la sal de lisina formada se precipita a partir de la mezcla de reacción mediante la adición de un solvente miscible en agua tal como acetona, etanol, metanol o isopropanol, de preferencia etanol.

Los volúmenes de agua están entre 3 y 8 con respecto al precursor ácido y de preferencia 5 volúmenes, los volúmenes del solvente orgánico están entre 18 y 48 volúmenes en comparación con el precursor ácido, de preferencia 30 volúmenes dado a entender con el término "volumen" la proporción de solvente/soluto en mi de solvente/g del precursor.

Composiciones farmacéuticas Las composiciones f rmacéuticas de la presente invención son composiciones/formulaciones que comprenden la sal de lisina de pemetrexed de la fórmula 1 o su forma cristalina definida por el espectro de la figura 3 y uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables. Las composiciones están destinadas principalmente para utilizarse como anti-tumorales.

Las composiciones descritas en la presente de preferencia se administran mediante una ruta oral, parenteral o intravenosa, en cualquier caso, de acuerdo con todas las rutas de administración conocidas por aquellos expertos en la téenica y adecuadas para alcanzar el sitio blanco de interés farmacológico.

Las composiciones para administración oral pueden tomar la forma de soluciones o suspensiones liquidas o polvos. Las composiciones se pueden presentar en forma de dosificación unitaria para facilitar la administración.

Cada dosis unitaria contiene una cantidad predeterminada del ingrediente activo calculado para producir el efecto terapéutico deseado, en asociación con un excipiente farmacéutico adecuado. Las formas de dosificación unitarias típicas incluyen, píldoras, tabletas, cápsulas o lo semejante en el caso de las composiciones sólidas y viales o jeringas en el caso de las composiciones líquidas.

En estas formas sólidas, los ingredientes activos se mezclan con al menos un excipiente o portador farmacéuticamente aceptable y los aditivos usuales.

Las composiciones para uso parenteral por ejemplo, pueden ser, soluciones, suspensiones o emulsiones acuosas u oleosas y se pueden formular de acuerdo con la téenica conocida utilizando agentes de dispersión adecuados, agentes humectantes y agentes de suspensión.

Las mismas también pueden presentar conservadores y otros aditivos tales anti-microbianos, anti-oxidantes, agentes quelantes y gases inertes (Mack (1982) Remington's Pharmaceutical Sciences, 16ava Edición).

Los componentes comprendidos en las composiciones farmacéuticas de la presente invención también pueden estar liofilizados para almacenamiento y se pueden reconstituir en un portador adecuado antes de utilizarse.

Un ejemplo típico de una composición farmacéutica de acuerdo con una la presente invención también puede estar representado de esta manera: Sal disódica o de lisina de pemetrexed: 25 mg/ l (como ácido de pemetrexed) Manitol: 25 mg/ml HCl hasta pH = 7.0-7.4 NaOH hasta pH = 7.0-7.4 Agua c.b.p.

Una cantidad de la solución que contrarresta la cantidad deseada del medicamento se distribuye en viales y se liofiliza.

EJEMPLOS Las siguientes modalidades no son limitantes de la presente invención.

EJEMPLO 1 Preparación de 4-(4-oxobutil)benzoato de metilo, (4-(4- carbometoxifenil)butanal), compuesto (7) del Esquema III 13.0 g de acetato de litio deshidratado, 14.7 g de cloruro de litio y 17.1 g de cloruro de tetrabutilamonio se agregaron a una solución de 25.0 g de p-bromo benzoato de metilo en 285 mi de DMF. Se hizo burbujear nitrógeno en la mezcla y luego se agregaron 12 mi de 3-buten-1-ol y 0.52 g de acetato de paladio. La mezcla, se calentó a 75°C, se dejó reaccionar hasta la conversión completa del p-bromo benzoato de metilo (control mediante HPLC).

Después de enfriar a temperatura ambiente, a la mezcla de reacción se agregaron 285 mi de agua y 285 mi de acetato del etilo. Después de la separación de las fases, la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 x 143 mi), las fases orgánicas combinadas se lavaron con NaCl al 3% (3 x 285 mi) y con agua (2 x 285 i). El producto (7) se obtuvo en solución de acetato de etilo con un rendimiento igual a aproximadamente 85% y se utilizó como tal, sin aislamiento o purificación adicional, en la siguiente reacción.

EJEMPLO 2 Preparación de (RS)-4-(3-brom-4-oxo-butilo)benzoato de metilo, compuesto (8) del Esquema III 125 mi de la solución en acetato de etilo a partir del Ejemplo 1, que contuvo 3 g de (7), se concentraron bajo vacio hasta aproximadamente 22 mi. La solución resultante se enfrió hasta 0°C y agregó con 0.126 mi de HBr al 33% en AcOH y 0.97 mi de bromo. Después de 1 hora de agitación a 0°C, a la mezcla de reacción se agregó metabisulfito de sodio al 2% (21 mi), la fase orgánica separada se lavó con bicarbonato de sodio saturado (21 mi) y con NaCl al 3% (21 mi). La solución se evaporó en seco a presión reducida, el residuo se solubilizó en 46 mi de acetonitrilo y la solución resultante se utilizó directamente en el siguiente paso.

EJEMPLO 3 Preparación_ de_ 4- (2-(2-amino-4,7-dihidro-4-oxo-3H- pirrol(2,3-d)pirimidin-5-il)etilo)benzoato de metilo, compuesto (9) de Esquema III 46 mi de agua, 6.2 g de 2,4-diamin-6-hidroxipirimidina y 2.72 g de acetato de sodio se agregaron a la solución del derivado de bromo (8) en el acetonitrilo del Ejemplo 2. La mezcla se agitó a 40°C durante aproximadamente 3.5 horas, se enfrió a temperatura ambiente y se filtró. El sólido se lavó con 35 mi de acetonitrilo/agua 1/1 y se secó bajo vacío a 50°C. Se obtuvieron 3.4 g de (9) en la forma de un sólido rosa pálido (rendimiento combinado con respecto a (7) igual al 69%).

EJEMPLO 4 Preparación del ácido 4-(2-(2-amino-4,7-dihidro-4-oxo-3H- pirrol(2,3-d)pirimidin-5-il)etilo)benzoico, compuesto (2) de Esquema Una suspensión de 14.0 g de (9) del Ejemplo 3 en 162 mi de NaOH 2 M se calentó a 40°C durante 1 hora. Después de enfriar a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se diluyó con 170 mi de acetona y el pH se ajustó a aproximadamente 4.4 con HCl 6N. La suspensión obtenida se filtró y lavó sobre el filtro con 60 mi de acetona/agua 1/1 y con 60 mi de acetona. El sólido se secó bajo vacio a 50°C hasta obtener 13:58 g del producto (2) como un sólido blanquecino (rendimiento cuantitativo).

EJEMPLO 5 Preparación la sal sódica del ácido 4-(2-(2-amino-4,7- dihidro-4-oxo-3H-pirrol(2,3-d)pirimidin-5- il)etil)benzoico), sal sódica del compuesto (2) Esquema Se agregaron NaOH 2 M (pH aproximadamente 13) hasta la disolución completa a una suspensión de 10.0 g del compuesto (2) a partir del Ejemplo 4 en 60 mi de agua. El pH luego se ajustó a 9 con HC1 1 M obteniendo asi una precipitación abundante del producto. Después de 1 hora de agitación a temperatura ambiente, filtración y secado bajo vacío a 50°C se obtuvo la sal sódica de (2) como un sólido blanco se obtuvo.

EJEMPLO 6 Preparación de N- (4-(2-(2-amino-4,7-dihidro-4-oxo-3H- pirrol(2,3-d)pirimidin-5-il)etil)benzoil-L-glutamato de dietilo, compuesto (3) del Esquema 36 mi de NaOH 1 M, 60 mi de agua y 64 mi de isopropanol se agregaron a 10.72 g del ácido (2) del Ejemplo 4 a temperatura ambiente. Después de 60 minutos de agitación a temperatura ambiente se agregaron a la mezcla 5.93 mi de N-metilmorfolina (NMM), 64 mi de isopropanol y 9:47 g de 2-cloro-4,6-dimetoxi-l,3,5-triazina (CDMT). La mezcla se mantuvo bajo agitación a temperatura ambiente durante 20 minutos y luego se agregó con 2.18 mi de NMM y 4.74 g de dietil-L-glutamato clorhidratado. Después de 40 minutos, se realizó una adición adicional de 2.18 mi de NMM y 4.74 g de dietil-L-glutamato clorhidratado. Después de 6 horas de reacción, se agregaron a la mezcla 192 mi de agua, la suspensión así obtenida se mantuvo bajo agitación durante la noche, se filtró y el sólido lavó con agua (3 x 30 mi) y secó bajo vacío a 50°C, se obtuvieron 15.76 g de dietiléster de pemetrexed (3) como un sólido de color crema (rendimiento del 90.7%) .

Datos analíticos: pureza mediante HPLC del 98.9%.

El producto tiene el espectro de difracción de rayos X mostrado en la figura 1, y corresponde a un producto parcialmente amorfo.

Dependiendo de los diferentes lotes de los compuestos de reacción se pueden obtener compuestos en menor grado de cristalinidad.

EJEMPLO 7 Preparación de N- (4-(2-(2-amino-4,7-dihidro-4-oxo-3H- pirrol(2,3-d)pirimidin-5-il)etil)benzoil-L-glutamato de dietilo, compuesto (3) del Esquema 10.00 g del ácido (2) del Ejemplo 4 se agregaron a temperatura ambiente a 90 mi de etanol, 40 mi de agua y 8.83 g de 2-cloro-4,6-dimetoxi-l,3,5-triazina (CDMT).

Una mezcla que consistió de 21.1 g de NaOH, 20 i de agua y 10.3 mi de N-metilmorfolina se agregó primero a la suspensión obtenida y luego 10.45 g de dietil-L-glutamato clorhidratado.

La mezcla de reacción se mantuvo bajo agitación a 40°C durante 3 horas y se filtró sobre un lecho que consistió de 0.48 g de carbón activado y 0:48 g de Celite. Después de lavar el filtro con 20 mi de una mezcla de etanol/agua 3/2, el filtrado se calentó a 40°C y se agregó a 49 mi de agua y 55 mi de acetona.

La mezcla luego se enfrío a temperatura ambiente y después de enfriar a 0°C durante 1 hora, la suspensión obtenida se filtró, el sólido se lavó con 80 mi de una mezcla de agua/acetona 3/1 y con 80 mi de acetona. El sólido luego se secó bajo vacío a 50°C. Se obtuvieron 14:25 g de dietiléster de pemetrexed (3) como un sólido color crema (rendimiento del 93.5%). pf (placa de calor): 171°C (se obtuvo con un lote diferente a p.f. de 138°C).

Espectro de difracción de rayos X: mostrado en la figura 2.

DSC mostrada en la figura 3.

EJEMPLO 8 Preparación de N- (4-(2-(2-amino-4,7-dihidro-4-oxo-3H- pirrol(2,3-d)pirimidin-5-il)etilo)benzoil-L-qlutamato de dietilo, compuesto (3) del Esquema 10.0 g del ácido (2) del Ejemplo 4 se agregaron a temperatura ambiente a 40 mi de isopropanol y 60 mi de NaOH 0:50 . Después de 10 minutos de agitación a temperatura ambiente, se agregaron a la mezcla 25 mi de isopropanol, 5.15 mi de N-metilmorfolina (NMM), 8.83 g de CDMT y nuevamente 25 mi de isopropanol a la mezcla. Después de 5 minutos, se agregaron 4.80 mi de N-Metilmorfolina mediante 10.45 g de H-Glu (OEt)2*HCl.

La mezcla de reacción luego se calentó a 40°C durante 1 hora, luego se agregaron 30 mi de agua. La solución se enfrió a temperatura ambiente y luego se agregó con 180 mi de agua y se mantuvo bajo agitación a temperatura ambiente durante 1 hora. La suspensión se filtró, se lavó con agua/iPrOH = 3/1 (3 x 30 mi), agua (3 x 40 mi) y el sólido secó bajo vacio a 50°C. Se obtuvieron 14:52 g de dietiléster de pemetrexed (3) como un sólido color crema (rendimiento del 89.1%).

Datos analíticos: pureza mediante HPLC del 98.4%.

EJEMPLO 9 Preparación de N- (4-(2-(2-amino-4,7-dihidro-4-oxo-3H- pirrol(2,3-d)pirimidin-5-il)etil)benzoil-L-glutamato de dietilo, compuesto (3) del Esquema 10.0 g del ácido (2) del Ejemplo 4 se agregaron a temperatura ambiente a 40 i de isopropanol y 60 mi de NaOH 0.50 M. Después de 10 minutos de agitación a temperatura ambiente, se agregaron a la mezcla 25 mi de isopropanol, 5.15 mi de N-metilmorfolina (NMM), 8.83 g de CDMT y nuevamente 25 i de isopropanol. Después de 5 minutos, se agregaron 4.80 mi de N-metilmorfolina seguidos por 10:45 g de H-Glu (OEt)2*HCl.

La mezcla de reacción luego se calentó a 40°C durante 1 hora, luego se agregaron 80 mi de agua y 80 mi de acetona. La solución se enfrió a temperatura ambiente y luego se mantuvo a 0°C durante 2 horas. La suspensión se filtró, se lavó con agua/acetona = 3/1 (40 mi), agua (3 x 40 mi) y acetona (2 x 20 mi) y el sólido secó bajo vacio a 50°C. Se obtuvieron 13.90 g de dietiléster de pemetrexed (3) como un sólido color crema (rendimiento del 85.7%).

Datos analíticos: Purezas mediante HPLC del 98.5%.

EJEMPLO 10 Preparación de N- (4-(2-(2-amino-4,7-dihidro-4-oxo-3H- pirrol(2,3-d)pirimidin-5-il)etil)benzoil-L-glutamato de dietilo, compuesto (3) del Esquema 10.0 g del ácido (2) del Ejemplo 4 se agregaron a temperatura ambiente a 60 mi de isopropanol, 60 mi de agua y 13.65 mi de NMM. La mezcla se calentó a 40°C y después de 40 minutos, se agregaron 8.83 g de CDMT, 30 mi de isopropanol, 10:45 g de H-Glu (OEt)2*HCl. La mezcla de reacción se calentó a 40°C durante 2 horas, luego se agregaron 80 mi de agua y 50 mi de acetona. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y luego se mantuvo durante 2 horas a 0°C. La suspensión se filtró, se lavó con agua/acetona = 3/1 (40 mi), agua (3 x 40 mi) y acetona (2 x 20 mi) y el sólido se secó bajo vacío a 50°C. Se obtuvieron 13.58 g de dietiléster de pemetrexed (3) como un sólido color crema (rendimiento 83.8%).

Datos analíticos: pureza mediante HPLC del 98.7%.

EJEMPLO 11 Trituración/cristalización con 2- metiltetrahidrofurano/etanol absoluto 10/1 de N-(4-(2-(2- amino-4,7-dihidro-4-oxo-3H-pirrol(2,3-d)pirimidin-5- il)etil)benzoil-L-glutamato de dietilo, compuesto (3) Esquema 10.36 g de dietiléster de pemetrexed crudo (3) se trituraron/cristalizaron a un reflujo débil en 62 i de una mezcla de THF 2-ml/etanol absoluto 10/1. La solución se enfrió lentamente a temperatura ambiente y se mantuvo a 0°C durante 5 horas. La suspensión luego se filtró y el sólido se lavó con 10 mi de THF 2-ml se enfrió a 0°C. Después del secado bajo vacio a 40°C, se obtuvieron 11.8 g del producto 3 como un sólido crema (rendimiento del 78.3%).

Datos analíticos: pureza mediante HPLC del 99.9%.

Espectro de difracción de rayos X: mostrado en la figura 4.

EJEMPLO 12 Cristalización con metiletilcetona/etanol al 96% 9/2 de N-(4-(2-(2-amino-4,7-dihidro-4-oxo-3H-pirrol(2,3- d)pirimidin-5-il)etil)benzoil-^L-glutamato de dietilo, compuesto (3) del Esquema 14.00 g del dietiléster de pemetrexed crudo (3) se disolvieron con agitación a reflujo débil con 182 mi de la mezcla de metiltilcetona/EtOH al 96% 9/2. La solución obtenida se dejó enfriar a temperatura ambiente, la suspensión se enfrió a 0°C durante 2 horas, se filtró y el sólido se lavó con 84 mi de metiletilcetona. Después del secado bajo vacio a 50°C, se obtuvieron 13.24 g del producto 3 como un sólido crema (rendimiento del 94.5%).

Análisis: pureza mediante HPLC del 99.83%. p.f. (placa de calor): 175°C (la pf varia ligeramente dependiendo del lote).

Espectro de difracción de rayos X: mostrado en la figura 5.

SDC se muestra en la figura 6.

Un compuesto análogo se puede obtener mediante cristalización a partir de los siguientes solventes: etanol, etilacetato/etanol, acetonitrilo.

EJEMPLO 13 (ejemplo de referencia) Preparación de p-toluensulfonato de N-(4-(2-(2-amino-4,7- dihidro-4-oxo-3H-pirrol(2,3-d)irimidin-5- il)etil)benzoil-L-glutamato de dietilo, compuesto (4) del Esquema 11.4 g del producto (3) del Ejemplo 5 se suspendieron en 142 mi de etanol absoluto. La mezcla se calentó a 50°C y la solución asi obtenida se agregó a una solución de 11.2 g de ácido p-toluensulfónico monohidratado (pTs0H.H20) en 142 mi de etanol absoluto. La suspensión obtenida se calentó a 80°C durante 2 horas, luego se enfrió a temperatura ambiente y se filtró. El sólido húmedo se trituró a reflujo durante 1 hora con 242 mi de etanol absoluto.

La suspensión se filtró y el sólido se secó bajo vacio a 50°C. El producto rosa claro se calentó a reflujo en 65 mi de D SO y 260 mi de etanol absoluto durante 1.5 horas. Después de enfriar a 10°C, la suspensión se filtró y el sólido húmedo se trituró a 5°C con 250 mi de etanol absoluto durante 30 minutos. El sólido se seco bajo vacio a 50°C para proporcionar 12.2 g de un sólido rosa claro (rendimiento del 79%).

Datos analíticos: purezas mediante HPLC del 99.2%.

EJEMPLO 14 Preparación de pemetrexed, compuesto (5) Una suspensión de 9.60 g del producto (3) obtenido en el Ejemplo 6 (o alternativamente una de los Ejemplos 7-12) en 62 mi de NaOH 1 M se mantuvo bajo agitación a temperatura ambiente durante aproximadamente 1 hora. Después de la adición de 75 mi de etanol, la solución se acidificó a pH 3 con HCl 4 M y la mezcla se calentó a 70-75°C durante aproximadamente 20 minutos. La suspensión obtenida se enfrió a temperatura ambiente y se filtró. El sólido húmedo se trituró con 93 mi de etanol/agua 1/1 a temperatura ambiente durante 2 horas. Después de la filtración, el sólido se seco bajo vacio a 50°C para proporcionar 6.15 g de un sólido blanquecino, (98% de rendimiento).

Datos analíticos: purezas mediante HPLC del 99.8%.

EJEMPLO 15 Preparación_ de_ sal_ disódica_ de_ pemetrexed hemipentahidratado, compuesto (6) A una suspensión de 7.0 g de Pemetrexed 5 en 38 mi de agua, se agregó NaOH 1 M hasta un pH de aproximadamente 8 (variación de pH de 7.5 hasta 8.5). La solución se calentó a 70°C y agregó a 398 mi de etanol. La suspensión se dejó enfriar a temperatura ambiente, se filtró y el sólido se seco a 50°C.

Se obtuvieron 7.4 g de disodio hemipentahidratado de pemetrexed como un sólido blanco (rendimiento del 88%).

Datos analíticos: purezas mediante HPLC del 99.8%.

EJEMPLO 16 Preparación_ de sal disódica de_ pemetrexed hemipentahidratado, compuesto (6) A una suspensión de 10.0 g de éster de pemetrexed (3) como se obtuvo en el Ejemplo 6 (o alternativamente uno de los Ejemplos 7-12), se agregaron 100 mi de NaOH 1M y la mezcla se agitó a temperatura ambiente hasta la dilución completa del sólido. Después de la adición de 60 mi del etanol, se agregó lentamente una solución de HCl 1 M hasta un pH de aproximadamente 8 (variación del pH de 7.5 hasta 8.5). La mezcla se calentó a 55°C y agregó a 160 mi de etanol. La suspensión se dejó enfriar a temperatura ambiente, se filtró y el sólido se secó a 50°C.

Se obtuvieron 9.6 g del disodio hemipentahidratado de Pemetrexed como un sólido blanco (rendimiento del 90%). Datos analíticos: purezas mediante HPLC del 99.8%.

EJEMPLO 17 Preparación de sal de lisina de pemetrexed, compuesto (1) 8.8 g de Pemetrexed (5) se agregaron a una solución de 9 g de lisina hidratada en 41 i de agua. La solución se calentó a 70°C y se agregó a 249 mi de etanol. La suspensión se dejó enfriar a temperatura ambiente, se filtró y el sólido se secó a 50°C.

Se obtuvieron 13.8 g de sal de lisina de pemetrexed como un sólido blanco. (Rendimiento del 93%).

Datos analíticos: purezas mediante HPLC del 99.93%, contenido de lisina (HPLC): 39.5%.

Pérdida de peso (TGA): 3.8%.

Espectro de difracción de rayos X: mostrado en las figuras 7 y 8.

DSC, mostrado en la figura 9: p.f.230°C (dec). 1H-NMR (D20): d 1.46 (m, 2H), 1.52 (m, 2H), 1.73 (m, 4H), 1.92 (m, 4H), 2.9 (m, 1H), 2.22 (m, 1H), 2.37 (m, 2H), 2.81 (s, 4H), 3.03 (t, 4H), 3.78 (t, 2H), 4:37 (dd, 1H), 6.34 (s, 1H), 7.19 (d, 2H), 7.68 (d, 2H). 13C_NMR (D20): d 24.2, 29.2, 29.6, 31.2, 32.7, 37.1, 38.2, 41.8, 57.3, 58.8, 101.5, 118.3, 120.9, 129.8, 131.3, 133.4, 149.5, 153.5, 154.8, 163.9, 172.8, 177.4, 181.8, 185.0.

EJEMPLO 18 Estudios de estabilidad de la sal de (bi) y sal disódica de U sina de pemetrexed Los estudios de estabilidad a 25°C ± 5°C, 45°C ± 5°C y 100°C se llevaron a cabo en las sales del mismo obtenidas de acuerdo con el procedimiento reportado en los Ejemplos 9, 11 y, para comparación sobre la sal disódica heptahidratada preparada de acuerdo con el procedimiento de la EP 1259513.

Las muestras se empacaron en recipientes de vidrio en aire o alternativamente en una atmósfera controlada.

La pureza de las muestras se determinó a intervalos variables de tiempo (1, 3, 6 meses para las muestras almacenadas a 25°C + 5°C y 45°C ± 5°C, 6 dias para las muestras almacenadas a 100°C) mediante análisis HPLC utilizando el siguiente procedimiento: Aparato de cromatografía líquida de alta presión con un detector de UV con longitud de onda variable Agilent 1100 o equivalente: Columna: Sunfire C18, 3.5 mm, 100 x 4.6 mm.

Condiciones de operación: Fase móvil A: 0.1% H3PO4 Fase móvil B = CH3CN Elución de gradiente; t = 0, A/B 88/12, t = 10 min, A/B 88/12, t = 30 min, A/B 30/7, Magnitud de flujo: 1.5 ml/min; Detector l = 230 nm; volumen de inyección: 201, T: 35°C; Blanco: Agua.

EJEMPLO 19 Preparación de una composición farmacéutica con la sal sódica de pemetrexed En un reactor adecuado en una atmósfera inerte, se cargaron disodio de pemetrexed (6), manitol y agua (agua para inyección-WFI) para tener una solución que consistió de 25 g/ml de ácido de pemetrexed, 25 mg/ml de manitol. El pH de la soludión obtenida se ajustó a 7.2 ± 0.6 con NaOH 0.1 N o HCl 0.1 N. La solución luego se filtró dos veces en 0.22 mm, se agregó a viales, en la cantidad requerida y se liofilizó.

EJEMPLO 20 Preparación de una composición farmacéutica con una sal sódica de pemetrexed En un reactor adecuado en una atmósfera inerte, se cargaron sal de U sina de pemetrexed (1), manitol y agua (agua para inyección-WFI) para tener una solución que consistió de 25 mg/ml de ácido de pemetrexed, 25 mg/ml de manitol. El pH de la solución obtenida se ajusta a 7.2 ± 0.6 con NaOH 0.1 N o HCl 0.1 N. La solución luego se filtró dos veces en 0.22 mm, se agregó en viales, en la cantidad requerida y se liofilizó.

Claims (17)

NOVEDAD DE LA INVENCIÓN Habiendo descrito el presente invento, se considera como una novedad y, por lo tanto, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes REIVINDICACIONES:

1. Un proceso para la preparación de una sal del pemetrexed que tiene la fórmula general I: ; (I) en donde B+ representa Na+ o lisina protonada, que comprende los siguientes pasos: a) hacer reaccionar ácido 4-(2-(2-amino-4,7-dihidro-4-oxo-3H-pirrol(2,3-d)pirimidin-5-il)etil)benzoico (2) con el L-dietil-glutamato clorhidratado en presencia de un reactivo de acoplamiento para obtener el dietiléster de pemetrexed (3). b) hidrolizar el dietiléster de pemetrexed (3) a ácido de pemetrexed (5): c) salificar con una base seleccionada de NaOH o lisina para obtener la sal de pemetrexed correspondiente: caracterizado porque en el paso a): i) el ácido (2) se convirtió in situ con anterioridad al carboxilato sódico o el carboxilato de morfolina correspondiente que se pueden aislar o hacer reaccionar directamente; ii) el solvente de reacción utilizado consiste de una mezcla hidro-alcohólica de solventes en donde el alcohol se selecciona del grupo: metanol, etanol, isopropanol, n-propanol; iii) el dietiléster de pemetrexed intermediario (3) se precipita directamente de la mezcla de reacción con una pureza del >98%.

2. El proceso de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la mezcla hidro-alcohólica de los solventes se representa por agua mezclada con alcohol isopropílico o alcohol etílico.

3. El proceso de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque los componentes de la mezcla de agua/alcohol isopropílico o alcohol etílico en el paso a) están en una proporción de 3/1 hasta 1/3 entre sí.

4. El proceso de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, caracterizado porque el reactivo de acoplamiento en el paso a) se selecciona del grupo: CDMT (2-cloro-4,6-dimetoxi-l,3,5-triazina), EDC (l-etil-3(3-dimetilaminopropil)carbodiimida y DMTMM (cloruro de 4-(4,6-dimetoxi-1,3,5-triazin-2-il)-4-metilmorfolina) de preferencia CDMT.

5. El proceso de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, caracterizado porque la reacción en el paso a) se lleva a cabo a una temperatura entre aproximadamente 0°C y 50°C o entre aproximadamente 15°C y 50°C.

6. El proceso de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, caracterizado porque la sal de U sina se obtiene mediante la adición al ácido de pemetrexed (5) de una solución acuosa que contiene de 2 hasta 4 equivalente de lisina hidratada, de preferencia 3 equivalente.

7. El proceso de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, caracterizado porque en el paso c) la sal de lisina formada en solución se precipita mediante la adición de un solvente orgánico miscible con agua seleccionado del grupo: acetona, etanol, metanol o isopropanol, de preferencia etanol.

8. El proceso de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-7 caracterizado porque, como alternativa a los pasos sintéticos b) y c) es posible obtener la sal disódica de pemetrexed mediante hidrólisis directa del diéster (3) sin aislamiento del ácido de pemetrexed intermediario (5).

9. El proceso de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, caracterizado porque el dietiléster de pemetrexed (3) se utiliza directamente en el siguiente paso sin ninguna purificación adicional.

10. Un compuesto de la fórmula (1), sal de (bi)lisina del ácido N-[4-[2-(2-amino-4-oxo-4,7-dihidro-3H-pirrol[2,3-d]pirimidin-5-il)etil]benzoil]-L-glutamico (pemetrexed): en una forma anhidra o una forma anhidratada.

11. El compuesto de conformidad con la reivindicación 10, caracterizado porque tiene un porcentaje de agua comprendido en la variación de aproximadamente 0-22% en peso.

12. El compuesto de conformidad con la reivindicación 10, en forma cristalina como se define por el espectro de difracción de rayos X de la figura 3.

13. Un proceso para la síntesis del compuesto de conformidad con la reivindicación 10, caracterizado porque comprende un paso de salificación del pe etrexed (5) mediante lisina protonada.

14. El compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 10-12, para utilizarse como un medicamento.

15. El compuesto de conformidad con la reivindicación 15, para utilizarse como un medicamento anti cáncer.

16. Una composición farmacéutica caracterizada porque comprende el compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 10 a 12 y al menos un excipiente farmacológicamente aceptable.

17. Una composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 16 para utilizarse como una composición anti-cáncer.