MX2012008956A - Metodos y composiciones para diagnostico y prognosis de lesion renal y falla renal. - Google Patents

Abstract

La presente invención es concerniente con métodos y composiciones para el monitoreo, diagnosis, prognosis y determinación de regímenes de tratamiento en sujetos que sufren de o se sospecha de tener una lesión renal. En particular, la invención es concerniente con el uso de uno o más análisis configurados para detectar un marcador de lesión renal seleccionado del grupo que consiste de factor VII de coagulación, CA19-9, proteína 7 de enlace del factor de crecimiento semejante a insulina, quimiocina 6 de porción de C-X-C y quimiocina 13 de porción C-C como biomarcadores de diagnóstico y prognóstico en lesiones renales.

Description

METODOS Y COMPOSICIONES PARA DIAGNOSIS Y PROGNOSIS DE LESION RENAL Y FALLA RENAL ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN La siguiente discusión de los antecedentes de la invención es provista solamente para ayudar al lector a entender la invención y no se admite que describe o constituye arte previo a la presente invención.

El riñon es responsable por la excreción de agua y solutos del cuerpo. Sus funciones incluyen mantenimiento del equilibrio ácido-base, regulación de concentraciones de electrolitos, control del volumen' sanguíneo y regulación de presión sanguínea. Como tal, la pérdida de función del riñon por medio de lesión y/o enfermedad da como resultado morbidez y mortalidad sustancial. Una discusión detallada de lesiones renales es provista en Harrison's Principies of Internal Medicine, 17th Ed. , McGraw Hill, New York, páginas 1741-1830, que son incorporadas en la presente por referencia en su totalidad. La enfermedad y/o lesión renal puede ser aguda o crónica. La enfermedad de riñon aguda y crónica son descritas como sigue (de Current Medical Diagnosis & Treatment 2008, 47th Ed, McGraw Hill, New York, páginas 785-815, que son incorporadas en la presente por referencia en su totalidad) : "La falla renal aguda es el empeoramiento de la función renal en horas a días, dando como resultado la retención de desperdicios nitrogenosos (tales como nitrógeno de urea) y creatinina en la sangre. La retención de estas sustancias es llamada azotemia. La Falla renal crónica (enfermedad del riñon crónica) resulta de la pérdida anormal de función renal en meses a años" .

La falla renal aguda (ARF, también conocida como lesión de riñon aguda o AKI) es una reducción abrupta (comúnmente detectada en el transcurso de aproximadamente 48 horas a 1 semana) en filtración glomerular. Esta pérdida de capacidad de filtración da como resulta retención de productos de desperdicio nitrogenosos (urea y creatinina) y no nitrogenosos que son normalmente excretados por el riñon, una reducción en la salida de orina o ambos. Se reporta que ARF complica aproximadamente el 5% de admisiones en hospital, 4-15% de cirugías de bypass cardiopulmonar y hasta el 30% de admisiones de cuidado intensivo. La ARF puede ser clasificada como pre-renal, renal intrínseca o post-renal en causa. La enfermedad renal intrínseca puede ser dividida adicionalmente en anormalidades glomerulares , tubulares, intersticiales y vasculares. Las causas principales de ARF son descritas en la siguiente tabla, que es adaptada del Merck Manual, 17a ed. , Capítulo 222 y que es incorporada en la presente por referencia en su totalidad: En el caso de ARF isquémica, el curso de la enfermedad puede ser dividido en cuatro fases . Durante una fase de inicio, que dura de horas a días, la perfusión reducida del riñon está evolucionando a lesión. La ultrafiltración glomerular se reduce, el flujo del filtrado es reducido debido a desechos dentro de los túbulos y retrofugas del filtrado a través del epitelio lesionado se presenta. La lesión renal puede ser moderada durante esta fase mediante reperfusión del riñon. El inicio es seguido por una fase de extensión que está caracterizada por lesión isquémica prolongada e inflamación y puede involucrar daño endotelial y congestión vascular. Durante la fase de mantenimiento, que dura de 1 a 2 semanas, se presenta la lesión de célula renal y filtración glomerular y la salida de orina alcanza un mínimo. Puede seguir una fase de recuperación en la cual el epitelio renal es reparado y la GFR gradualmente se recupera. A pesar de esto, la proporción de supervivencia de sujetos con ARF puede ser tan baja como de aproximadamente 60%.

La lesión de riñon aguda provocada por agentes de radiocontraste (también llamados medios de contraste) y otras nefrotoxinas tales como ciclosporina, antibióticos en los que se incluyen aminoglicósidos y fármacos anti-cáncer tales como cisplatino se manifiesta en un período de días a aproximadamente una semana. La nefropatía inducida por contraste (CIN, que es AKI provocada por agentes de radiocontraste) se piensa que es provocada por vasoconstricción intrarenal (que conduce a lesión isquémica) y de la generación de especies de oxígeno reactivas que son directamente tóxicas a células epiteliales tubulares renales. La CIN clásicamente se presenta como una elevación aguda (inicio en el transcurso de 24-48 horas) pero reversible (máximo 3-5 días, resolución en 1 semana) en el nitrógeno de urea en sangre y creatinina en suero.

Unos criterios reportados comúnmente para definir y detectar AKI es una elevación abrupta (comúnmente en el transcurso de alrededor de 2-7 días o dentro de un período de hospitalización) de creatinina en el suero. Aunque el uso de la elevación de creatinina en el suero para definir y detectar AKI está bien establecido, la magnitud de la elevación de creatinina en el suero y en el tiempo en el cual es medido para definir AKI varía considerablemente entre publicaciones. Tradicionalmente, incrementos relativamente grandes de creatinina en el suero tales como 100%, 200%, un incremento de por lo menos 100% a un valor de más de 2 mg/dL y otras definiciones fueron usados para definir AKI. Sin embargo, la tendencia reciente ha sido hacia usar elevaciones de creatinina en el suero más pequeñas para definir AKI . La relación entre la elevación de creatinina en el suero, AKI y los riesgos de salud asociados son revisados en Praught y Shlipak, Curr Opin Nephrol Hypertens 14:265-270, 2005 y Chertow et al., J Am Soc Nephrol 16: 3365-3370, 2005, que, con las referencias enlistas en las mismas, son incorporadas en la presente por referencia en su totalidad. Como se describe en estas publicaciones, el empeoramiento agudo de la función renal (AKI) y riesgo incrementado de muerte y otros resultados perjudiciales son ahora conocidos que están asociados con incrementos muy pequeños de creatinina en el suero. Estos incrementos pueden ser determinados como un valor relativo (por ciento) o un valor nominal. Los incrementos relativos de creatinina en el suero tan pequeños como 20% del valor de pre-lesión han sido reportados para indicar empeoramiento agudamente de la función renal (AKI) e riesgo de salud incrementado, pero el valor más comúnmente reportado para definir AKI y riesgo de salud incrementado es un incremento relativo de por lo menos 25%. Incrementos nominales tan pequeños como de 0.3 mg/dL, 0.2 mg/dL o aún 0.1 mg/dL han sido reportados para indicar empeoramiento de función renal y riesgo incrementado de muerte . Varios períodos de tiempo para que la creatinina en el suero se eleve a estos valores de umbral han sido usados para definir AKI, por ejemplo, que varían de 2 días, 3 días, 7 días o un período variable definido como el tiempo en que el paciente está en el hospital o unidad de cuidado intensivo. Estos estudios indican que no hay una elevación de creatinina en el suero de umbral particular (o período de tiempo para la elevación) para el empeoramiento de la función renal o AKI, sino que más bien un incremento continuo en riesgo con magnitud incrementada de elevación de creatinina en el suero.

Un estudio (Lassnigg et all, J Am Soc Nephrol 15:1597-1605, 2004, incorporada en la presente por referencia en su totalidad) investigó tanto las disminuciones como incrementos de creatinina en el suero. Los pacientes con una caída moderada de creatinina en el suero de -0.1 a -0.3 mg/dL enseguida de la cirugía al corazón tuvieron la proporción de mortalidad más baja. Los pacientes con una caída más grande de creatinina en el suero (mayor o igual a -0.4 mg/dL) o cualquier incremento de creatinina en el suero tuvieron una proporción de mortalidad más grande. Estos hallazgos provocaron que los autores concluyeran que aún cambios muy sutiles en función renal (tal como son detectados por pequeños cambios de creatinina en el transcurso de 48 horas de cirugía) afectaron seriamente los resultados del paciente. En un esfuerzo para alcanzar consenso en un sistema de clasificación unificado para usar la creatinina en el suero para definir AKI en pruebas clínicas y en la práctica clínica, Bellomo et al., Crit Care . 8 (4 ) : R204 -12 , 2004, que es incorporada en la presente por referencia en su totalidad, propone las siguientes clasificaciones para estratificar los pacientes con AKI: "Riesgo": creatinina en el suero incrementada 1.5 veces de la producción de orina de OR de referencia de <0.5 ml/Kg de peso corporal/hora por 6 horas; "Lesión" : creatinina en el suero incrementada 2.0 veces de la producción de orina de OR de referencia <0.5 ml/Kg/h por 12 h; "Falla": creatinina en el suero incrementada 3.0 veces de la creatinina de OR de referencia >355 µp???/? (con una elevación de >44) o salida de orina menor de 0.3 ml/Kg/h por 24 horas o anuria por al menos 12 horas; Y concluyó dos resultados clínicos: "Pérdida" : necesidad persistente de terapia de reemplazo renal por más de cuatro semanas .

"ESRD" : enfermedad renal de etapa final — la necesidad de diálisis por más de 3 meses.

Estos criterios son llamados los criterios de RIFLE, que proveen una herramienta clínica útil para clasificar el estatus renal. Como se discute en Kellum, Crit . Care Med. 36: S141-45, 2008 and Ricci et al., Kidney Int. 73, 538-546, 2008, cada una incorporada en la presente por referencia en su totalidad, los criterios de RIFLE proveen una definición uniforme de AKI que ha sido validada en numerosos estudios .

Más recientemente, Menta et al., Crit. Care 11:R31 (doi : 10.1186. cc5713 ) , 2007, incorporada en la presente por referencia en su totalidad, propone las siguientes clasificaciones similares para estratificar pacientes con AKI, que han sido modificados de RIFLE: "Etapa I" : incremento de creatinina en el suero de mayor o igual a 0.3 mg/dL (= 26.4 µ????/L) o incremento a mayor o igual a 150% (1.5 veces) de la salida de orina de OR de referencia menor de 0.5 ml/Kg por hora por más de 6 horas; "Etapa II" : incremento de creatinina en el suero a más de 200% (> 2 veces) de la salida de orina de OR de referencia menor de 0.5 ml/Kg por hora por más de 12 horas; "Etapa III" : incremento de creatinina en el suero a más del 300% (> 3 veces) de la creatinina en el suero de OR de referencia = 354 µ????/L acompañada por un incremento agudo de por lo menos 44 µp???/L de salida de orina de OR menor de 0.3 ml/Kg por hora por 24 horas o anuria por 12 horas.

El Panel de trabajo de Consenso de CIN (McCollough et al, Rev Cardiovasc Med. 2006; 7 (4) : 177-197, incorporada en la presente por referencia en su totalidad) usa una elevación de creatinina en el suero de 25% para definir la nefropatía inducida por contraste (que es un tipo de AKI) . Aunque varios grupos proponen criterios ligeramente diferentes para usar creatinina en el suero para detectar AKI, el consenso es que cambios pequeños de creatinina en el suero, tales como 0.3 mg/dL o 25%, son suficientes para detectar AKI (empeoramiento de la función renal) y que la magnitud del cambio de creatinina en el suero es un indicador de la severidad de la AKI y riesgo de mortalidad.

Aunque la medición serial de la creatinina en suero en un periodo de días es un método aceptado para detectar y diagnosticar AKI y es considerada una de las herramientas mas importantes para evaluar pacientes con AKI, la creatinina en suero es en general considerada tener varias limitaciones en la diagnosis, determinación y monitoreo de pacientes con AKI. El periodo de tiempo para que la creatinina en suero se eleve a valores considerados como diagnostico (por ejemplo, una elevación de 0.3 mg/dl o elevación del 25%) para AKI puede ser de 48 horas o mayor dependiendo de la definición usada. Puesto que la lesión celular en AKI puede ocurrir en un periodo de horas, elevaciones de creatinina en el suero detectadas a 48 horas o mayor pueden ser un indicador tardío de lesión y depender de la creatinina en el suero puede así retardar la diagnosis de AKI. Además, la creatinina en el suero no es un buen indicador del estatus de riñon exacto y la necesidad de tratamiento durante las fases más agudas de AKI cuando la función de riñon esta cambiando rápidamente. Algunos pacientes con AKI se recuperan plenamente, mientras que algunos necesitaran diálisis (ya sea a corto plazo o largo plazo) y algunos tendrán otros resultados perjudiciales, incluyendo muerte, eventos cardiacos adversos mayores y enfermedad de riñon crónica. Debido a que la creatinina en el suero es un marcador de la velocidad de filtración, no diferencia entre las causas de AKI (pre-renal, renal intrínseca, obstrucción post-renal, ateroembolica, etc.) o la categoría o ubicación de lesión en la enfermedad renal intrínseca (por ejemplo, de origen tubular, glomerular o intersticial) . La salida de orina es similarmente limitada. Sabiendo que estas cosas pueden ser de vital importancia el manejar y tratar pacientes con AKI.

Estas limitaciones subrayan la necesidad de métodos mejores para detectar y determinar AKI, particularmente en las etapas prematuras y subclínicas, pero también en etapas mas tarde cuando la recuperación y reparación del riñon pueden ocurrir. Además, hay necesidad de identificar mejor pacientes que están en riesgo de tener una AKI.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN Es un objeto de la invención proveer métodos y composiciones para evaluar la función renal en un sujeto. Como se describe en la presente, la medición de uno o mas biomarcadores seleccionados del grupo que consiste del factor VII de coagulación, CA 19-9, proteína 7 de enlace del factor de crecimiento semejante a insulina, quimiosina 6 de porción de C-X-C y quimiosina 13 de porción de C-C (cada uno denominado en la presente como "marcador de lesión de riñon") pueden ser usados para la diagnosis, prognosis, estratificación de riesgo, escalamiento, monitoreo, clasificación de determinación de diagnosis y regímenes de tratamiento adicionales en sujetos que sufren o están en riesgo de sufrir de una lesión a la función renal, función renal reducida y/o falla renal aguda (también llamada lesión de riñon aguda) .

Los marcadores de lesión de riñon de la presente invención pueden ser usados individualmente o en paneles que comprenden una pluralidad de marcadores de lesión de riñon para estratificación de riesgo (esto es, identificar sujetos en riesgo por una lesión futura a la función renal, para avance futuro a función renal reducida, para avance futuro a ARF, para mejora futura en función renal, etc.); para diagnosis de enfermedad existente (esto es, para identificar sujetos que han sufrido de una lesión a la función renal, que han avanzado a función renal reducida, que han avanzado a ARF, etc.) ; para monitoreo en cuanto a deterioro o mejora de función renal y para predecir un resultado medico futuro, tal como función renal mejorada o empeorada, un riesgo de mortalidad disminuido o incrementado, un riesgo disminuido o incrementado que un sujeto requerirá terapia de reemplazo renal (esto es, hemodiálisis , diálisis peritoneal, hemofiltración y/o trasplante renal, un riesgo disminuido o incrementado que un sujeto se recuperara de una lesión a la función renal, un riesgo disminuido o incrementado de que un sujeto se recuperara de una ARF, un riesgo disminuido o incrementado de que un sujeto avanzara a una enfermedad renal de etapa final, un riesgo disminuido o incrementado de que un sujeto avanzara a falla renal crónica, un riesgo disminuido o incrementado de que un sujeto sufrirá rechazo de un riñon trasplantado, etc.) .

En un primer aspecto, la presente invención es concerniente con métodos para evaluar estatus renal en un sujeto. Estos métodos comprenden efectuar un método de análisis que esta configurado para detectar uno o mas biomarcadores seleccionados del grupo que consiste de factor VII de coagulación, CA 19-9, proteína 7 de enlace del factor de crecimiento semejante a insulina, quimiosina 6 de porción de C-X-C y quimiosina 13 de porción de C-C es/son luego correlacionados con el estatus renal del sujeto. Esta correlación con el estatus renal puede incluir correlacionar el (los) resultado (s) de análisis con uno o mas de estratificación de riesgo, diagnosis, prognosis, escalamiento, clasificación y monitoreo del sujeto como se describe en la presente. Así, la presente invención utiliza uno o más marcadores de lesión de riñon de la presente invención para la evaluación de lesión renal.

En ciertas modalidades, los métodos para evaluar estatus renal descritos en la presente son métodos para estratificación de riesgos del sujeto; esto es, asignar una probabilidad de uno o más cambios futuros en estatus renal al sujeto. En estas modalidades, el (los) resultado (s) de análisis es/son correlacionado (s) con uno o mas de tales cambios futuros. Las siguientes son modalidades de estratificación de riesgo preferidas.

En modalidades de estratificación de riesgo preferidas, estos métodos comprenden determinar el riesgo del sujeto por una lesión futura a función renal y el (los) resultado (s) de análisis es/son correlacionado (s) con la probabilidad de tal lesión futura a la función renal. Por ejemplo, la (s) concentración (es) medida (s) puede (n) cada una ser comparada (s) con un valor de umbral. Para un marcador de lesión de riñon que "va a positivo" , se asigna una probabilidad incrementada de sufrir una lesión futura a la función renal al sujeto cuando la concentración medida esta por encima del umbral, en relación con una probabilidad asignada cuando la concentración medida esta por debajo del umbral. Para un marcador de lesión de riñon que "va a negativo" , se asigna una probabilidad incrementada de sufrir una lesión futura a función renal al sujeto cuando la concentración medida esta por debajo del umbral, en relación con la probabilidad asignada cuando la concentración medida esta por encima del umbral.

En otras modalidades de estratificación de riesgo preferidas, estos métodos comprenden determinar el riesgo del sujeto por una función renal reducida futura y el (los) resultado (s) de análisis es/son correlacionado (s) con la probabilidad de tal función renal reducida. Por ejemplo, cada una de las concentraciones medidas pueden ser comparadas con un valor de umbral. Para un marcador de lesión de riñon que "va positivo" , se asigna una probabilidad incrementada de sufrir una función renal reducida futura al sujeto cuando la concentración medida esta por encima del umbral, en relación con una probabilidad asignada cuando la concentración medida esta por debajo del umbral. Para un marcador de lesión de riñon que "va a negativo" , se asigna una probabilidad incrementada de función renal reducida futura al sujeto cuando la concentración medida esta por debajo del umbral, en relación con una probabilidad asignada cuando la concentración medida esta por encima del umbral.

En todavía otras modalidades de estratificación de riesgo preferidas, estos métodos comprenden determinar la probabilidad del sujeto por una mejora futura en función renal y el (los) resultado (s) de análisis es/son correlacionado (s) con la probabilidad de tal mejora futura en función renal. Por ejemplo, cada una de las concentraciones medidas pueden ser comparadas con un valor de umbral. Para un marcador de lesión de riñon que "va a positivo", se asigna una probabilidad incrementada de mejora futura en función renal al sujeto cuando la concentración medida esta por debajo del umbral, en relación con una probabilidad asignada cuando la concentración medida esta por encima del umbral. Para un marcador de lesión de riñon que "va a negativo" , se asigna una probabilidad incrementada de mejora futura en función renal al sujeto cuando la concentración medida esta por encima del umbral, en relación con una probabilidad asignada cuando la concentración medida esta por debajo del umbral.

En todavía otras modalidades de estratificación de riesgo preferidas, estos métodos comprenden determinar el riesgo del sujeto por avance a ARF y el (los) resultado (s) de análisis es/son correlacionado (s) con una probabilidad futura de tal avance a ARF. Por ejemplo, cada una de las concentraciones medidas pueden ser comparadas con un valor de umbral. Para un marcador de lesión de riñon que "va a positivo" , se asigna una probabilidad incrementada de avance a ARF al sujeto cuando la concentración medida esta por encima del umbral, en relación con la probabilidad asignada cuando la concentración medida esta por debajo del umbral. Para un marcador de lesión de riñon que "va a negativo" , se asigna una probabilidad incrementada de avance a ARF al sujeto cuando la concentración medida esta por debajo del umbral, en relación con una probabilidad asignada cuando la concentración medida esta por encima del umbral.

Además, en otras modalidades de estratificación de riesgo preferidas, estos métodos comprenden determinar el riesgo de resultado del sujeto y el (los) resultado (s) de análisis es/son correlacionado (s) con la probabilidad de la presencia de un resultado clínico relacionado con una lesión renal sufrida por el sujeto. Por ejemplo, cada una de las concentraciones medidas pueden ser comparadas con un valor de umbral. Para un marcador de lesión de riñon que "va a positivo", se asigna una probabilidad incrementada de avance uno o mas de: lesión de riñon aguda, avance a una etapa de empeoramiento de AKI, mortalidad, un requerimiento de terapia de reemplazo renal, un requerimiento de abandono de toxinas renales, enfermedad renal de etapa renal, insuficiencia cardiaca, accidente cerebro vascular, infarto al miocardio, avance a enfermedad de riñon crónica, etc. al sujeto cuando la concentración medida esta por encima del umbral, en relación con la probabilidad asignada cuando la concentración medida esta por debajo del umbral. Para un marcador de lesión de riñon que "va a negativo" , se asigna una probabilidad incrementada de uno o mas de: lesión de riñon aguda, avance a una etapa de empeoramiento de AKI, mortalidad, un requerimiento dé terapia de reemplazo renal, un requerimiento de abandono de toxinas renales, enfermedad renal de etapa renal, insuficiencia cardiaca, accidente cerebro vascular, infarto al miocardio, avance a enfermedad de riñon crónica, etc. cuando la concentración medida esta por debajo del umbral, en relación con una probabilidad asignada cuando la concentración medida esta por encima del umbral.

En tales modalidades de estratificación de riesgo, preferiblemente la probabilidad o riesgo asignado es que un evento de interés es más o menos probable que ocurra en el transcurso de 180 días del tiempo al cual la muestra de fluido corporal es obtenida del sujeto. En modalidades particularmente preferidas, la probabilidad o riesgo asignado se relaciona con un evento de interés que ocurre dentro de un periodo de tiempo mas corto tal como 18 meses, 120 días, 90 días, 60 días, 45 días, 30 días, 21 días, 14 días, 7 días, 5 días, 96 horas, 72 horas, 48 horas, 36 horas, 24 horas, 12 horas, o menos. Un riesgo a 0 horas del tiempo al cual la muestra de fluido corporal es obtenida del sujeto es equivalente a diagnosis de una condición actual.

En modalidades de estratificación de riesgo preferidas, el sujeto es seleccionado para estratificación de riesgo en base a la preexistencia en el sujeto de uno o mas factores de riesgo conocidos por ARF pre renal, renal intrínseca o post-renal. Por ejemplo, un sujeto que sufre o ha sufrido cirugía bascular mayor, bypass de arteria coronaria u otra cirugía cardiaca; un sujeto que tiene insuficiencia cardiaca congestiva preexistente, pre eclampsia, eclampsia, diabetes mellithus, hipertensión, enfermedad de arteria coronaria, proteinuria, insuficiencia renal, filtración glomerular debajo del intervalo normal, cirrosis, creatinina en el suero por encima del intervalo normal o sepsis o un sujeto expuesto a NSAID, ciclosporinas, tacrolimus, aminoglicósidos , foscarnet, etilenglicol, hemoglobina, mioglobina, ifosfamida, metales pesados, metotrexato, agentes de contraste radio opacos o estroptozotocina son todos sujetos preferidos para monitorear riesgos de acuerdo con los métodos descritos en la presente. Esta lista no pretende ser limitante. "Preexistencia" en este contexto significa que en factores de riesgo existe al tiempo en que la muestra de fluido corporal es obtenida del sujeto. En modalidades particularmente preferidas, un sujeto es escogido por estratificación de riesgo en base a una diagnosis existente de lesión a función renal, función renal reducida o ARF.

En otras modalidades, los métodos para evaluar estatus renal descritos en la presente son métodos para diagnosticar una lesión renal en el sujeto; esto es, determinar si un sujeto ha sufrido o no de una lesión a función renal, función renal reducida o ARF. En estas modalidades, el (los) resultado (s) de análisis, por ejemplo concentración (es) medida (s) de uno o mas biomarcadores seleccionados del grupo que consiste del factor VII de coagulación, CA 19-9, proteína 7 de enlace del factor de crecimiento semejante a insulina, quimiosina 6 de porción de C-X-C y quimiosina 13 de porción de C-C es/ son correlacionado (s) con la presencia o no presencia de un cambio en estatus renal. Las siguientes son modalidades de diagnostico preferidas.

En modalidades de diagnostico preferidas, estos métodos comprenden diagnosticar la presencia o no presencia de una lesión a la función renal y el (los) resultado (s) de análisis es/son correlacionado (s) con la presencia o no presencia de tal lesión. Por ejemplo, cada una de las concentraciones medidas pueden ser comparadas con un valor de umbral. Para un marcador de que "va a positivo", se asigna una probabilidad incrementada de la presencia de una lesión a la función renal al sujeto cuando la concentración medida esta por encima del umbral (en relación con la probabilidad asignada cuando la concentración medida esta por debajo del umbral) ; alternativamente, cuando la concentración medida esta por debajo del umbral, se puede asignar una probabilidad incrementada de no presencia de una lesión a función renal al sujeto (en relación con la probabilidad asignada cuando la concentración medida esta por encima del umbral) . Para un marcador que va a negativo, se asigna una probabilidad incrementada de la presencia de una lesión a la función renal al sujeto cuando la concentración medida esta por debajo del umbral (en relación con la probabilidad asignada cuando la concentración medida esta por encima del umbral) ; alternativamente, cuando la concentración medida esta por encima del umbral, se puede asignar una probabilidad incrementada de no presencia de una lesión a la función renal al sujeto (en relación con la probabilidad asignada cuando la concentración medida esta por debajo del umbral) .

En otras modalidades de diagnostico preferidas, estos métodos comprenden diagnosticar la presencia o no presencia de función renal reducida y el (los) resultado (s) de análisis es/son correlacionado (s) con la presencia o no presencia de una lesión que provoca función renal reducida. Por ejemplo, cada una de las concentraciones medidas pueden ser comparadas con un valor de umbral . Para un marcador que "va a positivo", se asigna una probabilidad incrementada de la presencia de una lesión que provoca función renal reducida al sujeto cuando la concentración medida esta por encima del umbral (en relación con la probabilidad asignada cuando la concentración medida esta por debajo del umbral) ; alternativamente, cuando la concentración medida esta por debajo del umbral, se puede asignar una probabilidad incrementada de la no presencia de una lesión que provoca función renal reducida al sujeto (en relación con la probabilidad asignada cuando la concentración medida esta por encima del umbral) . Para un marcador que va a negativo, se asigna una probabilidad incrementada de la presencia de una lesión que provoca función renal reducida al sujeto cuando la concentración medida esta por debajo del umbral (en relación con la probabilidad asignada cuando la concentración medida esta por encima del umbral) ; alternativamente, cuando la concentración medida esta por encima del umbral, se puede asignar una probabilidad incrementada de no presencia de una lesión que provoca función renal reducida al sujeto (en relación con la probabilidad asignada cuando la concentración medida esta por debajo del umbral) .

En todavía otras modalidades de diagnostico preferidas, estos métodos comprenden diagnosticar la presencia o no presencia de ARF y el (los) resultado (s) de análisis es/son correlacionado (s) con la presencia o no presencia de una lesión que provoca ARF. Por ejemplo, cada una de las concentraciones medidas pueden ser comparadas con un valor de umbral. Para un marcador que "va a positivo", se asigna una probabilidad incrementada de la presencia de ARF al sujeto cuando la concentración medida esta por encima del umbral (en relación con la probabilidad asignada cuando la concentración medida esta por debajo del umbral) ; alternativamente, cuando la concentración medida esta por debajo del umbral, se puede asignar una probabilidad incrementada de la no presencia de ARF al sujeto (en relación con la probabilidad asignada cuando la concentración medida esta por encima del umbral) . Para un marcador que va a negativo, se asigna una probabilidad incrementada de la presencia de ARF al sujeto cuando la concentración medida esta por debajo del umbral (en relación con la probabilidad asignada cuando la concentración medida esta por encima del umbral) ; alternativamente, cuando la concentración medida esta por encima del umbral, se puede asignar una probabilidad incrementada de la no presencia de ARF al sujeto (en relación con la probabilidad asignada cuando la concentración medida esta por debajo del umbral) .

En todavía otras modalidades de diagnostico preferidas, estos métodos comprenden diagnosticar un sujeto por estar en necesidad de terapia de reemplazo renal y el (los) resultado (s) de análisis es/son correlacionados (s) con la necesidad de terapia de reemplazo renal. Por ejemplo, cada una de las concentraciones medidas pueden ser comparadas con un valor de umbral. Para un marcador que "va a positivo", se asigna una probabilidad incrementada de una presencia de lesión de riñon que crea necesidad de terapia de reemplazo renal al sujeto, cuando la concentración medida esta por encima del umbral (en relación con la probabilidad asignada cuando la concentración medida esta por debajo del umbral) ; alternativamente, cuando la concentración medida esta por debajo del umbral, se puede asignar una probabilidad incrementada de la no presencia de una lesión que crea necesidad de terapia de reemplazo renal al sujeto (en relación con la probabilidad asignada cuando la concentración medida esta por encima del umbral) . Para un marcador que va a negativo, se asigna una probabilidad incrementada de la presencia de una lesión que crea necesidad de terapia de reemplazo renal al sujeto cuando la concentración medida esta por debajo del umbral (en relación con la probabilidad asignada cuando la concentración medida esta por encima por el umbral) ; alternativamente, cuando la concentración medida esta por encima del umbral, se puede asignar una probabilidad incrementada de la no presencia de una lesión que crea necesidad de terapia de reemplazo renal al sujeto (en relación con la probabilidad asignada cuando la concentración medida esta por debajo del umbral) .

En todavía otras modalidades de diagnostico preferidas, estos métodos comprenden diagnosticar a un sujeto por estar en necesidad de trasplante renal y el (los) resultado (s) de análisis es/son correlacionados con la necesidad de trasplante renal. Por ejemplo, cada una de las concentraciones medidas pueden ser comparadas con un valor de umbral. Para un marcador que va a positivo, se asigna una probabilidad incrementada de la presencia de una lesión que crea la necesidad de trasplante renal al sujeto, cuando la concentración medida esta por encima del umbral (en relación con la probabilidad asignada cuando la concentración medida esta por debajo del umbral) ; alternativamente, cuando la concentración medida esta por debajo del umbral, se puede asignar una probabilidad incrementada de la no presencia de una lesión que crea necesidad de trasplante renal al sujeto (en relación con la probabilidad asignada cuando la concentración medida esta por encima del umbral) . Para un marcador que va a negativo, se asigna una probabilidad incrementada de la presencia de una lesión que crea necesidad de trasplante renal al sujeto cuando la concentración medida esta por debajo del umbral (en relación con la probabilidad asignada cuando la concentración medida esta por encima por el umbral) ; alternativamente, cuando la concentración medida esta por encima del umbral, se puede asignar una probabilidad incrementada de la no presencia de una lesión que crea necesidad de trasplante renal al sujeto (en relación con la probabilidad asignada cuando la concentración medida esta por debajo del umbral) .

En todavía otras modalidades, los métodos para evaluar estatus renal descritos en la presente son métodos para monitorear una lesión renal en el sujeto; esto es, determinar si la función renal esta mejorando o empeorando o no en un sujeto que ha sufrido de una lesión a la función renal, función renal reducida o ARF. En estas modalidades, el (los) resultado (s) de análisis, por ejemplo concentración (es) medida (s) de uno o mas biomarcadores seleccionados del grupo que consiste de factor VII de coagulación, CA 19-9, proteína 7 de enlace del factor de crecimiento semejante a insulina, quimiosina 6 de la porción de C-X-C y quimiosina 13 de la porción de C-C es/son correlacionado (s) con la presencia o no presencia de un cambio en estatus renal. Las siguiente son modalidades de monitoreo preferidas.

En modalidades de monitoreo preferidas, estos métodos comprenden monitorear el estatus renal en un sujeto que sufre de una lesión a la función renal y el (los) resultado (s) de análisis es/son correlacionado (s) con la presencia o no presencia de un cambio en estatus renal en el sujeto. Por ejemplo, las concentraciones medidas pueden ser comparadas con un valor de umbral. Para un marcador que va a positivo, cuando la concentración medida esta por encima del umbral, se puede asignar un empeoramiento de la función renal al sujeto; alternativamente, cuando la concentración media esta por debajo del umbral, se puede asignar una mejora de la función renal al sujeto. Para un marcador que va a negativo, cuando la concentración medida esta por debajo del umbral, se puede asignar un empeoramiento de la función renal al sujeto; alternativamente, cuando la concentración medida esta por encima del umbral, se puede asignar una mejora de la función renal al sujeto.

En otras modalidades de monitoreo preferidas, estos métodos comprende monitorear el estatus renal en un sujeto que sufre de función renal reducida y el (los) resultado (s) de análisis es/son correlacionado (s) con la presencia o no presencia de un cambio en estatus renal en el sujeto. Por ejemplo, las concentraciones medidas pueden ser comparadas con un valor de umbral. Para un marcador que va a positivo, cuando la concentración medida esta por encima del umbral, se puede asignar un empeoramiento de la función renal al sujeto; alternativamente, cuando la concentración medida esta por debajo del umbral, se puede asignar una mejora de la función renal al sujeto. Para un marcador que va a negativo, cuando la concentración medida esta por debajo del umbral, se puede asignar un empeoramiento de la función renal al sujeto; alternativamente, cuando la concentración medida esta por encima del umbral, se puede asignar una mejora de la función renal .

En todavía otras modalidades de monitoreo preferidas, estos métodos comprende monitorear el estatus renal en un sujeto que sufre de falla renal aguda y el (los) resultado (s) de análisis es/son correlacionado (s) con la presencia o no presencia de un cambio en estatus renal en el sujeto. Por ejemplo, las concentraciones medidas pueden ser comparadas con un valor de umbral. Para un marcador que va a positivo, cuando la concentración medida esta por encima del umbral, se puede asignar un empeoramiento de la función renal al sujeto; alternativamente, cuando la concentración medida esta por debajo del umbral, se puede asignar una mejora de la función renal al sujeto. Para un marcador que va a negativo, cuando la concentración medida esta por debajo del umbral, se puede asignar un empeoramiento de la función renal al sujeto; alternativamente, cuando la concentración medida esta por encima del umbral, se puede asignar una mejora de la función renal al sujeto.

En otras modalidades de monitoreo preferidas adicionales, estos métodos comprende monitorear el estatus renal en un sujeto en riesgo de una lesión a la función renal debido a la preexistencia de uno o mas factores de riesgo conocidos por ARF pre-renal, renal intrínseca o post-renal y el (los) resultado (s) de análisis es/son correlacionado (s) con la presencia o no presencia de un cambio en estatus renal en el sujeto. Por ejemplo, las concentraciones medidas pueden ser comparadas con un valor de umbral . Para un marcador que va a positivo, cuando la concentración medida esta por encima del umbral, se puede asignar un empeoramiento de la función renal al sujeto; alternativamente, cuando la concentración medida esta por debajo del umbral, se puede asignar una mejora de la función renal al sujeto. Para un marcador que va a negativo, cuando la concentración medida esta por debajo del umbral, se puede asignar un empeoramiento de la función renal al sujeto; alternativamente, cuando la concentración medida esta por encima del umbral, se puede asignar una mejora de la función renal al sujeto.

En todavía otras modalidades, los métodos para evaluar estatus renal descritos en la presente son métodos para clasificar una lesión renal en el sujeto; esto es, determinar si una lesión renal en un sujeto es pre-renal, renal intrínseca o post-renal y/o subdividir adicionalmente estas clases en subclases tales como lesión tubular aguda, glomerulonefritis aguda, nefritis tubulointersticial aguda, nefropatía vascular aguda o enfermedad infiltrativa y/o asignar una probabilidad de que un sujeto avanzara a una etapa de RIFLE particular. En estas modalidades, el (los) resultado (s) de análisis, por ejemplo concentraciones medidas de uno o mas biomarcadores seleccionados del grupo que consiste del factor VII de coagulación, CA 19-9, proteína 7 de enlace del factor de crecimiento semejante a insulina, quimiosina 6 de la porción de C-X-C y quimiosina 13 de la porción de C-C es/son correlacionado (s) con una clase y/o sub-clase particular. Las siguientes son modalidades de clasificación preferidas.

En modalidades de clasificación preferidas, estos métodos comprenden determinar si una lesión renal en un sujeto es pre-renal, renal intrínseca o post-renal y/o subdividir adicionalmente estas clases en subclases tales como lesión tubular aguda, glomerulonefritis aguda, nefritis tubulointersticial aguda, nefropatía vascular aguda o enfermedad infiltrativa y/o asignar una probabilidad de que el sujeto avanzara a una etapa de RIFLE particular y el (los) resultado (s) de análisis es/son correlacionado (s) con la clasificación de lesión para el sujeto. Por ejemplo concentración medida puede ser comparada con un valor de umbral y cuando la concentración medida esta por encima del umbral, se asigna una clasificación particular; alternativamente, cuando la concentración medida esta por debajo del umbral, se puede asignar una clasificación diferente al sujeto.

Una variedad de métodos pueden ser usados por el experimentado en el arte para llegar a un valor de umbral deseado para uso en estos métodos. Por ejemplo, el valor de umbral puede ser determinado de una población de sujetos normales al seleccionar una concentración que representa el 75th, 85th, 90th, 95th o 99th percentil de un marcador de lesión de riñon medido en tales sujetos normales. Alternativamente, el valor de umbral puede ser determinado a partir de una población "enferma" de sujetos, por ejemplo aquellos que sufren de una lesión o que tienen una predisposición para una lesión (esto es, avance a ARF o algún otro resultado clínico tal como muerte, diálisis, trasplante renal, etc.), al seleccionar una concentración que representa el 75th, 85th, 90th, 95th o 99th percentil de un marcador de lesión de riñon medido en tales sujetos. En otra alternativa, el valor de umbral puede ser determinado de una medición previa de un marcador de lesión de riñon en el mismo sujeto; esto es, un cambio temporal en el nivel de un marcador de lesión de riñon en el sujeto puede ser usado para asignar riesgo al sujeto.

La discusión anterior no pretende implicar, sin embargo, que los marcadores de lesión de riñon de la presente invención deben ser comparados con umbrales individuales correspondientes . Los métodos para combinar resultados de análisis pueden comprender el uso de regresión logística multivariada, modelado logarítmico lineal, análisis de red neural, análisis n de m, análisis de árbol de decisión, calcular proporciones de marcadores, etc. Esta lista no pretende ser limitante. En estos métodos, un resultado combinado que es determinado al combinar marcadores individuales puede ser tratado como si fuera en si mismo un marcador; esto es, un umbral puede ser determinado para el resultado combinado como se describe en la presente para marcadores individuales y el resultado combinado para un paciente individual comparado con este umbral.

La habilidad de una prueba particular para distinguir dos poblaciones puede ser establecida utilizando análisis de ROC. Por ejemplo, curvas de ROC establecidas de una "primera" sub-población que esta predispuesta a uno o mas cambios futuros en estatus renal y una "segunda" sub-población que no esta así predispuesta puede ser usada para calcular una curva de ROC y el área bajo la curva provee una medida de la calidad de la prueba. Preferiblemente, las pruebas descritas en la presente proveen un área bajo la curva de ROC mayor de 0.5, preferiblemente por lo menos 0.6, mas preferiblemente 0.7, todavía mas preferiblemente por lo menos 0.8, aun mas preferiblemente por lo menos 0.9 y mas preferiblemente por lo menos 0.95.

En ciertos aspectos, la concentración medida de uno o más marcadores de lesión de riñon o una combinación de tales marcadores puede ser tratada como variables continuas. Por ejemplo, cualquier concentración particular puede ser convertida a una probabilidad correspondiente de una reducción futura en función renal para el sujeto, la presencia de una lesión, una clasificación, etc. En todavía otra alternativa, un umbral que puede proveer un nivel aceptable de especificidad y sensibilidad en separar una población de sujetos en "binarios" tal como una "primera" sub-población (por ejemplo, que esta predispuesta a uno o mas cambios futuros en estatus renal, la presencia de una lesión, una clasificación, etc.) y una "segunda" sub-población que no esta así predispuesta. Un valor de umbral que es seleccionado para separar esta primera y segunda población mediante una o más de las siguientes medidas de exactitud de prueba: una proporción de probabilidades mayor de 1, preferiblemente por lo menos alrededor de 2 o mas o alrededor de 0.5 o menos, mas preferiblemente por lo menos alrededor de 3 o mas o alrededor de 0.33 o menos, todavía mas preferiblemente por lo menos alrededor de 4 o mas o alrededor de 0.25 o menos, aun mas preferiblemente por lo menos alrededor de 5 o mas o alrededor de 0.2 o menos y mas preferiblemente por lo menos alrededor de 10 o mas o alrededor de 0.1 o menos ; una especificidad mayor de 0.5, preferiblemente por lo menos alrededor de 0.6, mas preferiblemente por lo menos alrededor de 0.7, todavía mas preferiblemente por lo menos alrededor de 0.8, aun mas preferiblemente por lo menos alrededor de 0.9 y mas preferiblemente por lo menos alrededor de 0.95, con una sensibilidad correspondiente mayor de 0.2, preferiblemente mayor de alrededor de 0.3, mas preferiblemente mayor de alrededor de 0.4, todavía mas preferiblemente por lo menos alrededor de 0.5, aun mas preferiblemente alrededor de 0.6, todavía mas preferiblemente mayor de alrededor de 0.7, todavía mas preferiblemente mayor de alrededor de 0.8, mas preferiblemente mayor de alrededor de 0.9 y mas preferiblemente mayor de alrededor de 0.95; una sensibilidad mayor de 0.5, preferiblemente por lo menos alrededor de 0.6, mas preferiblemente por lo menos alrededor de 0.7, todavía mas preferiblemente por lo menos alrededor de 0.8, aun mas preferiblemente por lo menos alrededor de 0.9 y mas preferiblemente por lo menos alrededor de 0.95, con una especificidad correspondiente mayor de 0.2, preferiblemente mayor de alrededor de 0.3, mas preferiblemente mayor de alrededor de 0.4, todavía mas preferiblemente por lo menos alrededor de 0.5, aun mas preferiblemente alrededor de 0.6, todavía mas preferiblemente mayor de alrededor de 0.7, todavía mas preferiblemente mayor de alrededor de 0.8, mas preferiblemente mayor de alrededor de 0.9 y mas preferiblemente mayor de alrededor de 0.95; por lo menos alrededor de 75% de sensibilidad combinada con por lo menos aproximadamente 75% de especificidad; una proporción de probabilidad positiva (calculada como sensibilidad/ (1-especificidad) ) mayor de 1, por lo menos alrededor de 2 , mas preferiblemente por lo menos alrededor de 3, todavía mas preferiblemente por lo menos alrededor de 5 y mas preferiblemente por lo menos alrededor de 10 o una proporción de probabilidad negativa (calculada como (1-sensibilidad) /especificidad) de menos de 1, menor o igual a alrededor de 0.5, mas preferiblemente menor o igual a alrededor de 0.3 y mas preferiblemente menor o igual alrededor de 0.1.

El termino "aproximadamente" en el contexto de cualquiera de las mediciones anteriores se refiere a +/- 5% de una medición dada.

Múltiples umbrales pueden también ser usados para determinar el estatus renal en un sujeto. Por ejemplo, una "primera" subpoblación que esta predispuesta a uno o mas cambios futuros en estatus renal, la presencia de una lesión, una clasificación, etc. y una "segunda" subpoblación que no esta así predispuesta pueden ser combinadas en un solo grupo. Este grupo es luego subdividido en tres o más partes iguales (conocidas como terciles, cuartiles, quintiles, etc., dependiendo del número de subdivisiones) . Una proporción de probabilidad es asignada a sujetos en base a en cual subdivisión caen. Si se considera un tercil, el tercil mas bajo o mas alto puede ser usado como referencia por comparación de las otras subdivisiones. Esta subdivisión de referencia es asignada a una proporción de probabilidades de 1. Se asigna al segundo tercil una proporción de probabilidades que esta relacionada con el primer tercil. Esto es, alguien en el segundo tercil podría ser tres veces más probable de sufrir uno o más cambios futuros en estatus renal en comparación con alguien en el primer tercil. También se asigna al tercer tercil una proporción de probabilidades que es relativa al primer tercil.

En ciertas modalidades, el método de análisis es un inmunoanálisis . Los anticuerpos para uso en tales análisis se enlazaran específicamente a un marcador de lesión de riñon de plena longitud de interés y se pueden también enlazar a uno o mas polipéptidos que están "relacionados" con el mismo, que el termino es definido posteriormente en la presente. Numerosos formatos de inmunoanálisis son conocidos para aquellos de habilidad en el arte. Muestras de fluido corporal preferidas son seleccionadas del grupo que consiste de orina, sangre, suero, saliva, lagrimas y plasma.

Las etapas del método anterior no deben ser interpretadas para dar a entender que el (los) resultado (s) de análisis de marcador de lesión de riñon es/son usado (s) en aislamiento de los métodos descritos en la presente. Más bien variables adicionales u otras indicaciones clínicas pueden ser incluidos en los métodos descritos en la presente. Por ejemplo, un método de estratificación de riesgo, diagnostico, clasificación, monitoreo, etc., pueden combinar el/los resultado (s) de análisis con una o mas variables medidas para el sujeto seleccionado del grupo que consiste de información demográfica (peso, sexo, edad, raza) , historia medica (por ejemplo, historia familiar, tipo de cirugía, enfermedad preexistente tal como aneurisma, insuficiencia cardiaca congestiva, pre eclampsia, eclampsia, diabetes mellithus, hipertensión, enfermedad de arteria coronaria, proteinuria, insuficiencia renal o sepsis, tipo de exposición a toxina tal como NSAID, ciclosporinas , tacrolimus, aminoglicósidos , foscarnet, etilenglicol , hemoglobina, mioglobina, ifosfamida, metales pesados, metotrexato, agentes de contraste radiopacos o estreptozotocina) , variables clínicas (por ejemplo, presión sanguínea, temperatura, velocidad de respiración) , puntuaciones de riesgo (puntuación APACHE, puntuación PREDICT, puntuación de riesgo de TIMI por UA/NSTEMI, puntuación de riesgo de Framingham, puntuaciones de riesgo de Thakar et al. (J. Am. Soc . Nephrol. 16: 162-68, 2005), Mehran et al. (J. Am. Coll. Cardiol. 44: 1393-99, 2004), Wijeysundera et al. (JAMA 297: 1801-9, 2007), Goldstein and Chawla (Clin. J. Am. Soc. Nephrol. 5: 943-49, 2010), o Chawla et al. (Kidney Intl. 68: 2274-80, 2005)), una velocidad de filtración glomerular, una velocidad de filtración glomerular estimada, una velocidad de producción de orina, una concentración de creatinina en el suero o plasma, una concentración de creatinina en la orina, una excreción fraccional de sodio, una concentración de sodio en la orina, una proporción de creatinina en la orina a creatinina en el suero o plasma, una gravedad especifica de la orina, una osmolalidad en la orina, una proporción de nitrógeno en urea de orina a nitrógeno de urea en plasma una proporción de BUN en plasma a creatinina, un índice de falla renal calculado como sodio en orina/ (creatinina en orina/creatinina en plasma), una concentración de gelatinasa de neutrofilo en suero o plasma (NGAL) , una concentración de NGAL en orina, una concentración de cistatina C en suero o plasma, una concentración de troponina cardiaca en suero o plasma, una concentración de BNP en suero o plasma, una concentración de NTproBNP en suero o plasma y una concentración de proBNP en suero o plasma. Otras medidas de función renal que pueden ser combinadas con uno o mas resultados de análisis de marcador de lesión de riñon son descritas posteriormente en la presente y en Harrison' s Principies of Internal Medicine, 17th Ed. , McGraw Hill, New York, paginas 1741-1830, and Current Medical Diagnosis & Treatment 2008, 47th Ed, McGraw Hill, New York, paginas 785-815, cada una de las cuales son incorporadas en la presente por referencia en su totalidad.

Cuando mas de un marcador es medido, los marcadores individuales pueden ser medidos en muestras obtenidas al mismo tiempo o pueden ser determinados de muestras obtenidas a tiempo diferente (por ejemplo, anterior o posterior). Los marcadores individuales pueden también ser medidos en las mismas o diferentes muestras de fluido corporal. Por ejemplo, un marcador de lesión de riñon puede ser medido en una muestra de suero o plasma y otro marcador de lesión de riñon puede ser medido en una muestra de orina. Además, la asignación de una probabilidad puede combinar un resultado de análisis de marcador de lesión de riñon individual con cambios temporales en una o más variables adicionales.

En varios aspectos relacionados, la presente invención también es concerniente con dispositivos y kits para efectuar los métodos descritos en la presente. Kits apropiados comprenden reactivos suficientes para efectuar un análisis para por lo menos uno de los marcadores de lesión de riñon descritos, junto con instrucciones para efectuar las comparaciones de umbral descritas.

En ciertas modalidades, reactivos para efectuar tales análisis son provistos en un dispositivo de análisis y tales dispositivos de análisis pueden estar incluidos en tal kit. Reactivos preferidos pueden comprender uno o mas anticuerpos en fase solida, el anticuerpo en fase solida que comprende el anticuerpo que detecta el de biomarcador propuesto objetivo (s) enlazado (s) a un soporte solido. En el caso de inmunoanálisis de emparedado tales reactivos pueden también incluir uno o más anticuerpos marcados detectablemente , el anticuerpo que comprende anticuerpo marcado detectablemente que detecta el objetivo (s) de biomarcador propuesto enlazado a un marcador detectable. Elementos opcionales adicionales que pueden ser provistos como parte de un dispositivo de análisis son descritos posteriormente en la presente.

Marcadores detectables pueden incluir moléculas que son en si mismas detectables (por ejemplo, porciones fluorescentes, marcadores electroquímicos, marcadores ecl (luminiscencia electroquímica) , quelatos de metal, partículas de metal coloidales, etc.) también como moléculas que pueden ser detectadas indirectamente mediante producción de un producto de reacción detectable (por ejemplo, enzimas tales como peroxidasa de rábano, fosfatasa alcalina, etc.) o por medio del uso de una molécula de enlace especifica que en si misma puede ser detectable (por ejemplo, un anticuerpo marcado que se enlaza al segundo anticuerpo, biotina, digoxigenina, maltosa, oligohistidina, 2 , 4 -ditrobenceno, fenilarseniato, ssADN, dsADN, etc.).

La generación de una señal del elemento de desarrollo de señal puede ser efectuada utilizando varios métodos ópticos, acústicos y electroquímicos bien conocidos en el arte. Ejemplos de modos de detección incluyen fluorescencia, detección radioquímica, reflectancia, absorbancia, amperometría, conductancia, imperancia, interferometría, elipsometría, etc. En ciertos de estos métodos, el anticuerpo en fase solida es acoplado a un transductor (por ejemplo, una rejilla de distracción, un sensor electroquímico, etc.) para le generación de una señal, mientras que en otros, una señal es generada por un transductor que esta espacialmente separado del anticuerpo en fase solida (por ejemplo, un fluorometro que emplea una fuente de luz de excitación y un detector óptico) . Esta lista no pretende ser limitante. Biosensores a base de anticuerpo pueden también ser empleados para determinar la presencia o cantidad de analitos que opcionalmente eliminan la necesidad de una molécula marcada.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN La presente es concerniente con métodos y composiciones para la diagnosis, diagnosis diferencial, estratificación de riesgo, monitoreo, clasificación y determinación de regímenes de tratamiento en sujetos que sufren o están en riesgo de sufrir de lesión a función renal, función renal reducida y/o falla renal aguda por medio de la medición de uno o mas marcadores de lesión del riñon. En varias modalidades, una concentración medida de uno o mas biomarcadores seleccionados del grupo que consiste de factor VII de coagulación, CA 19-9, proteína 7 de enlace del factor de crecimiento semejante a insulina, quimiosina 6 de porción de C-X-C y quimiosina 13 de porción de C-C o uno o mas marcadores relacionados con los mismos, son correlacionados con el estatus renal del sujeto.

Por propósitos de este documento, se aplican las siguientes definiciones: Como se usa en la presente, una "lesión a la función renal" es una reducción mensurable (en el transcurso de 14 días, preferiblemente en 7 días, mas preferiblemente en 72 horas y todavía mas preferiblemente en 48 horas) en una medida de la función renal. Tal lesión puede ser identificada, por ejemplo por una disminución en la velocidad de filtración glomerular o GFR estimada, una reducción en la salida de orina, un incremento de creatinina en el suero, un incremento de cistatina C en el suero, un requerimiento de terapia de reemplazo renal, etc. "Mejora en función renal" es un incremento mensurable abrupto (en el transcurso de 14 días, preferiblemente en 7 días, mas preferiblemente en 72 horas y todavía mas preferiblemente en 48 horas) en una medida de función renal. Métodos preferidos para medir y/o estimar el GFR son descritos posteriormente en la presente.

Como se usa en la presente, "función renal reducida" es una reducción abrupta (en el transcurso de 14 días, preferiblemente en 7 días, mas preferiblemente en 72 horas y todavía mas preferiblemente en 48 horas) en función de riñon identificada por un incremento absoluto de creatinina en el suero mayor o igual a 0.1 mg/dL (= 8.8 pmol/L) , un porcentaje de incremento de creatinina en el suero mayor o igual a 20% (1.2 veces de la referencia) o una reducción en la salida de orina (oliguria documentada de -0.5 ml/kg por hora) .

Como se usa en la presente "falla renal aguda" o "ARF" es una reducción abrupta (en el transcurso de 14 días, preferiblemente en 7 días, mas preferiblemente en 72 horas y todavía mas preferiblemente en 48 horas) en función de riñon identificada por un incremento absoluto de creatinina en el suero mayor o igual a 0.3 mg/dl (= 26.4 µp???/?^?) , un porcentaje de incremento de creatinina en el suero mayor o igual a 50% (1.5 veces de la referencia) o una reducción en la salida de orina (oliguria documentada de 0.5 ml/kg por al menos 6 horas) . Este término es sinónimo con "lesión de riñon aguda" o "AKI" .

Como se usa en la presente, el termino "factor VII de coagulación" se refiere a uno o mas polipéptidos presentes en una muestra biológica que son derivados del precursor del factor VII de coagulación (precursor humano: Swiss-Prot P08709 (SEQ ID NO: 1) ) Los siguientes dominios han sido identificados en el factor VII de coagulación: Residuos Longitud ID de dominio 1-20 20 Péptido de señal 21-60 40 Pro péptido 61-21 152 Factor VII de coagulación, cadena ligera 213-466 254 Factor VII de coagulación, cadena pesada 22-43 22 Faltante en la isoforma B del Factor VII de coagulación Como se usa en la presente, el termino "CA19-9 " (también llamado antígeno de carbohidrato 19-9 o antígeno de Lewis (a) sialilado) es un antígeno monosialongangliosido encontrado en pacientes con adenocarcinoma gastrointestinal. Es según se dice elevado en 21 a 42 porciento de casos de cáncer gástrico, 20 a 40 por ciento de cáncer de colon y 71 a 93 por ciento de cáncer pancreático. El uso clínico principal de CA19-9 es para ver si un tumor pancreático esta secretando; si esto es el caso, entonces los niveles deben caer cuando el tumor es tratado y se pueden elevar otra vez si la enfermedad recurre. En el 5% de pacientes que carecen del antígeno de Lewis, CA19-9 no es elevado en cáncer pancreático aun con tumores grande debido a que tienen una deficiencia de una enzima de fucosiltransferasa que es necesaria para producir CA19-9 también como el antígeno de Lewis.

Como se usa en la presente, el término "proteína 7 de enlace del factor de crecimiento semejante a insulina" se refiere a uno o mas polipéptidos presentes en una muestra biológica que son derivados del precursor de la proteína 7 del enlace del factor de crecimiento semejante a insulina (precursor humano: Swiss-Prot Q16270 (SEQ ID NO: 2)).

Los siguientes dominios han sido identificados en la proteína 7 de enlace del factor de crecimiento semejante a insulina : Residuos Longitud ID de dominio 1-26 26 Péptido de señal 27-282 256 Proteína 7 de enlace del factor de crecimiento semejante a insulina Como se usa en la presente, el término "quimiosina 6 de la porción de C-X-C" se refiere a uno o mas polipéptidos presentes en una muestra biológica que son derivados del precursor de quimiosina 6 de la porción de C-X-C (precursor humano: Swiss-Prot P80162 (SEQ ID NO: 3)).

Los siguientes dominios han sido identificados en la quimiosina 6 de porción de C-X-C: Residuos Longitud ID de dominio 1-37 37 Péptido de señal 38-114 77 Quimiosina 6 de porción de C-X-C 40-114 75 Quimiosina 6 de porción . de C-X-C (Variante 1 N-procesada) 43-114 72 Quimiosina 6 de porción de C-X-C (Variante 2 N-procesada) 46-114 69 Quimiosina 6 de porción de C-X-C (Variante 3 N-procesada) Como se usa en la presente, el término "quimiosina 13 de porción de C-C" se refiere a uno o mas polipéptidos presentes en una muestra biológica que son derivados del precursor de quimiosina 13 de porción de C-C (precursor humano: Swiss-Prot P080162 (SEQ ID NO: 4)).

Los siguientes dominios han sido identificados en la quimiosina 13 de la porción de C-C: Residuos Longitud ID de dominio 1-16 16 Péptido de señal 17-98 82 Quimiosina 13 de porción C-C, cadena larga 22-98 82 Quimiosina 13 de porción C-C, cadena media 24-98 82 Quimiosina 13 de porción C-C, cadena corta Como se usa en la presente, el término "relacionar una señal con la presencia o cantidad" de un analito refleja el siguiente entendimiento. Las señales de análisis son relacionadas comúnmente con la presencia o cantidad de un analito por medio del uso de una curva estándar calculada usando concentraciones conocidas del analito de interés. Como el término es usado en la presente, un análisis esta "configurado para detectar" un analito, si un análisis puede generar una señal detectable indicadora de la presencia o cantidad de una concentración fisiológicamente relevante del analito. Debido a que un epítope de anticuerpo es del orden de 8 aminoácidos, un inmunoanálisis configurado para detectar un marcador de interés también detectara polipéptidos relacionados con la secuencia del marcador, en tanto que aquellos polipéptidos contengan el (los) epítope (s) necesario (s) para enlazarse al anticuerpo o anticuerpos usados en el análisis. El término "marcador relacionado" como se usa en la presente, con respecto a un biomarcador tal como uno de los marcadores de lesión de riñon descritos en la presente se refiere a uno o mas fragmentos, variantes, etc., de un marcador particular o su padre biosintético que puede ser detectado como subrogado por el marcador mismo o como biomarcadores independientes. El término también sé refiere a uno o mas polipéptidos presentes en una muestra biológica que son derivados del precursor de biomarcador acomplejado a especies adicionales, tal como proteina de enlace, receptores, heparina, lípidos, azúcares, etc.

A este respecto, el experimentado en el arte entenderá que las señales obtenidas de un inmunoanálisis son el resultado directo de complejos formados entre uno o mas anticuerpos y la biomolécula objetivo (esto es, el analito)y polipéptidos que contienen el (los) epítope (s) necesario (s)a los cuales los anticuerpos se enlazan. Mientras que tales análisis pueden detectar el biomarcador de plena longitud y el resultado de análisis ser expresado como una concentración de un biomarcador de interés, la señal del análisis es realmente el resultado de todos de tales polipéptidos "inmunoreactivos" presentes en la muestra. La expresión de biomarcadores puede también ser determinada mediante otros medios que los inmunoanálisis , incluyendo mediciones de proteína (tales como inmunoabsorciones , western blots, métodos cromatográficos , espectrometría de masas, etc.) y mediciones de acido nucleico (cuantificación de mARN) . Esta lista no pretende ser limitante.

El término marcador que "va a positivo" , como aquel término es usado en la presente se refiere a un marcador que se determina que es elevado en sujetos que sufren de una enfermedad o condición en relación con sujetos que no sufren de aquella enfermedad o condición. El término marcador "que va a negativo" , como aquel término es usado en la presente se refiere a un marcador que se determina que es reducido en sujetos que sufren de una enfermedad o condición, en relación con sujetos que no sufren de aquella enfermedad o condición.

El término "sujeto" como se usa en la presente, se refiere a un organismo humano o no humano. Así, los métodos y composiciones descritos en la presente son aplicables tanto a enfermedad humana como veterinaria. Además, en tanto que un sujeto es preferiblemente un organismo viviente, la invención descrita en la presente puede ser usada en análisis post-mortem también. Los sujetos preferidos son humanos y mas preferiblemente "pacientes" que como se usa en la presente se refiere a humanos vivientes que están recibiendo cuidado medico por una enfermedad o condición. Esto incluye personas sin ninguna enfermedad definida que están siendo investigados en cuanto a signos de patología.

Preferiblemente, un analito es medido en una muestra. Tal muestra puede ser obtenida de un sujeto o puede ser obtenida de materiales biológicos destinados a ser provistos al sujeto. Por ejemplo, una muestra puede ser obtenida de un riñon que es evaluado en cuanto a posible trasplante a un sujeto y una medición de analito usada para evaluar el riñon en cuanto a daños preexistentes. Las muestras preferidas son muestras de fluido corporal.

El término "muestra de fluido corporal" , como se usa en la presente, se refiere a una muestra de fluido corporal obtenida por el propósito de diagnosis, prognosis, clasificación o evaluación de un sujeto de interés, tal como un paciente o donador de trasplante. En ciertas modalidades, tal muestra puede ser obtenida por el propósito de determinar el resultado de una condición en marcha o el efecto de un régimen de tratamiento sobre una condición. Muestras de fluido corporal preferidas incluyen sangre, suero, plasma, fluido cerebroespinal, orina, saliva, esputo y efusiones pleurales. Además, aquel de habilidad en el arte se daría cuenta que ciertas muestras de fluido corporal serian mas fácilmente analizadas enseguida de un procedimiento de fraccionamiento o purificación, por ejemplo separación de sangre entera en componentes de suero o plasma.

El término "diagnosis" como se usa en la presente se refiere a métodos mediante los cuales el experimentado en el arte puede estimar y/o determinar la probabilidad ("probabilidad") de si un paciente esta sufriendo o no de una enfermedad o condición dada. En el caso de la presente invención "diagnosis" incluye usar los resultados del análisis, mas preferiblemente un inmunoanálisis , para un marcador de lesión de riñon de la presente invención, opcionalmente junto con otras características clínicas, para llegar a una diagnosis (esto es, la presencia o no presencia) de una lesión renal aguda o ARF para el sujeto del cual una muestra fue obtenida y analizada. Que tal diagnosis es "determinada" no pretende implicar que la diagnosis es 100% exacta. Muchos biomarcadores son indicadores de múltiples condiciones. El clínico experimentado no usa los resultados de biomarcador en un vacio informacional , sino que más bien se usan resultados de prueba junto con otras indicaciones clínicas para llegar a una diagnosis. Así, un nivel de biomarcador medido por un lado de un umbral de diagnostico predeterminado indica una probabilidad mayor de la presencia de enfermedad en el sujeto en relación con un nivel medido por el otro lado del umbral de diagnostico predeterminado.

Similarmente , un riesgo de prognóstico señala una probabilidad ("probabilidad") que un curso o resultado dado se presentara. Un nivel o un cambio de nivel de un indicador de prognóstico, que a su vez esta asociado con una probabilidad incrementada de morbidez (por ejemplo, empeoramiento de función renal, ARF futura o muerte) es denominado como "indicador de una probabilidad incrementada" de un resultado adverso en un paciente.

Análisis de Marcador En general, los inmunoanálisis involucran poner en contacto una muestra que contiene o se sospecha de contener marcador de interés con por lo menos un anticuerpo que se enlaza específicamente al biomarcador. Una señal es luego generada indicadora de la presencia o cantidad de complejos formados por el enlace de polipéptidos en la muestra al anticuerpo. La señal es luego relacionada con la presencia o cantidad del biomarcador en la muestra. Numerosos métodos y dispositivos son bien conocidos para el técnico experimentado para la detección y análisis de biomarcadores . Véanse, por ejemplo Patentes Estadounidenses 6,143,576; 6,113,855; 6,019,944; 5,985,579; 5,947,124; 5,939,272; 5,922,615; 5,885,527; 5,851,776; 5,824,799; 5,679,526; 5,525,524; y 5,480,792 y The Immunoassay Handbook, David Wild, ed. Stockton Press, New York, 1994, cada una de las cuales es incorporada en la presente por referencia en su totalidad, incluyendo todas las tablas, figuras y reivindicaciones.

Los métodos y dispositivos de análisis conocidos en el arte pueden utilizar moléculas marcadas en varios formatos de análisis de emparedado, competitivos o no competitivos para generar una señal que es relacionada con la presencia o cantidad del biomarcador de interés. Formatos de análisis apropiados también incluyen métodos cromatográficos , espectográficos de masas y de "inmunoabsorción" de proteina. Adicionalmente , ciertos métodos y dispositivos, tales como Biosensores e inmunoanálisis ópticos, pueden ser empleados para determinar la presencia o cantidad de analitos sin la necesidad de una molécula marcada. Véanse, por ejemplo Patentes Estadounidenses 5,631,171 y 5,955,377 y cada una de las cuales es incorporada en la presente por referencia en su totalidad, incluyendo todas las tablas, figuras y reivindicaciones . El experimentado en el arte también reconoce que la instrumentación robótica incluyendo pero no limitado a sistemas ACCESS® de Beckman, AXYM® de Abbott, ELECSYS® de Roche, STRATUS® de Dade Behring están entre los analizadores de inmunoanálisis que son aptos de efectuar inmunoanálisis. Sin embargo cualquier inmunoanálisis apropiado puede ser utilizado, por ejemplo, inmunoanálisis enzima-enlazado (ELISA) , radioinmunoanálisis (RIA) , análisis de enlace competitivo y los semejantes.

Los anticuerpos u otros polipéptidos pueden ser inmovilizados sobre una variedad de soportes sólidos para uso en análisis. Fases solidas que pueden ser usadas para inmovilizar miembros de enlace específicos incluyen aquellos desarrollados y/o usados como fases solidas en análisis de enlace en fase solida. Ejemplos de fases solidas apropiadas incluyen filtros de membrana, papeles a base de celulosa, perlas (incluyendo partículas poliméricas, de látex y paramagnéticas) , vidrio, plaquetas u obleas de silicio, micropartículas , nano partículas, TentaGels, AgroGels, geles de PEGA, geles de SPOCC y placas de múltiples cavidades. Una banda o tira de análisis podría ser preparada mediante recubrimiento del anticuerpo o una pluralidad de cuerpos en un arreglo sobre soporte solido. Esta tira o banda podría luego ser sumergida a la muestra de prueba y luego procesada rápidamente por medio de etapas de lavado y detección para generar una señal mensurable, tal como un punto coloreado. Los anticuerpos u otros polipéptidos pueden ser enlazados a zonas específicas de dispositivos de análisis ya sea mediante conjugación directamente a una superficie del dispositivo de análisis o mediante enlace indirecto. En un ejemplo del último caso, los anticuerpos u otros polipéptidos pueden ser inmovilizados sobre partículas u otros soportes sólidos y aquel soporte solido inmovilizado a la superficie del dispositivo .

Los análisis biológicos requieren métodos para detección y uno de los métodos mas comunes para cuantificación de resultados es conjugar un marcador detectable a una proteína o acido nucleico que tiene actividad por uno de los componentes en el sistema biológico que es estudiado. Marcadores detectables pueden incluir moléculas que son en si mismas detectables (por ejemplo, porciones fluorescentes, marcadores electroquímicos, quelatos de metal, etc.) también como moléculas que pueden ser detectadas indirectamente mediante producción de un producto de reacción detectable (por ejemplo, enzimas tales como peroxidasa de rábano, fosfatasa alcalina, etc.) o mediante una molécula de enlace especifica que en si misma puede ser detectable (por ejemplo, biotina, digoxigenina, maltosa, oligohistidina, 2 , 4 -dinitrobenceno, fenilarseniato, ssADN, dsADN, etc . ) .

La preparación de fase solida y conjugados de marcador detectable frecuentemente comprende el uso de agentes de reticulación o reticuladores químicos. Los reactivos de reticulación contienen por lo menos dos grupos reactivos y son divididos en general en reticuladores homofuncionales (que contienen grupos reactivos idénticos) y reticuladores heterofuncionales (que contienen grupos reactivos no idénticos) . Los reticuladores homobifuncionales que se acoplan por medio de aminas, sulfidrihilos o reaccionan no específicamente están disponibles de muchas fuentes comerciales. Las maleimidas, aluros de alquilo y arilos, alfa-haloacilos y disulfuros de piridilo son grupos tiol reactivos. Las maleimidas, aluros de alquilo y arilo y alfa-haloacilos reaccionan con sulfihidrilos para formar enlaces de tiol éter, mientras que los disulfuros de piridilo reaccionan con sulfidrihilos para producir disulfuros mezclados. El producto de disulfuro de piridilo es escindible. Los imidoésteres son también muy útiles para enlaces cruzados o reticulaciones de proteína-proteína. Una variedad de reticuladores heterobifuncionales, cada uno combinando atributos diferentes para conjugación exitosa, están disponibles comercialmente .

En ciertos aspectos, la presente invención provee kits para el análisis de los marcadores de lesión de riñon descritos. El kit comprende reactivos para el análisis de por lo menos una muestra de prueba que comprende por lo menos un anticuerpo que un marcador de lesión de riñon. El kit puede también incluir dispositivos e instrucciones para efectuar una o mas de las combinaciones de diagnostico y/o prognóstico descritas en la presente. Los kits preferidos comprenderán un par de anticuerpo para efectuar un análisis de emparedado o una especie marcada para efectuar un análisis competitivo, por el analito. Preferiblemente, un par de anticuerpo comprende un primer anticuerpo conjugado a una fase solida y un segundo anticuerpo conjugado a un marcador detectable, en donde cada uno de los primeros y segundos anticuerpos que se enlazan a un marcador de lesión de riñon. Más preferiblemente, cada uno de los anticuerpos son anticuerpos monoclonales . Las instrucciones para uso del kit y efectuar las correlaciones puede estar en forma de etiquetas, que se refiere a cualquier material escrito o grabado que es anexad a o de otra manera acompaña a un kit en cualquier tiempo durante su manufactura, transporte, venta o uso. Por ejemplo, el término etiqueta abarca panfletos y folletos de publicidad, material de empaque, instrucciones, c sete de audio o video, discos de computadora, también como escrito impreso directamente sobre los kits.

Anticuerpos El término "anticuerpo" como se usa en la presente, se refiere a un péptido o polipéptidos derivado de, modelado después de o codificado sustancialmente por un gen de inmunoglobulina o genes de inmunoglobulina o fragmentos de los mismos, aptos de enlazarse específicamente a un antígeno o epítope. Véase, por ejemplo Fundamental Immunology, 3rd Edition, W.E. Paul, ed. , Raven Press, N.Y. (1993); Wilson (1994; J. Immunol. Methods 175:267-273; Yarmush (1992) J. Biochem. Biophys . Methods 25:85-97. El término anticuerpo incluye porciones de enlace de antígeno, esto es, "sitios de enlace de antígeno" (por ejemplo, fragmentos, subsecuencias , regiones que determinan la complementariedad (CDR) ) que retienen la capacidad para enlazarse al antígeno, incluyendo (i) un fragmento de Fab, un fragmento monovalente que consiste de los dominios de VL, VH, CL y CH1; (ii) un fragmento de F(ab')2, un fragmento bivalente que comprende dos fragmentos de Fab enlazados por un puente de disulfuro en la región de engozne; (iii) un fragmento de Fd que consiste de los dominios de VH y CH1 ; (iv) un fragmento de Fv que consiste de los dominios de VL y VH de un solo brazo de un anticuerpo, (v) un fragmento de dAb (Ward et al., (1989) Nature 341:455-546), que consiste de un dominio de VH y (vi) una región que determina la complementariedad de (CDR) aislada. Anticuerpos de una sola cadena también están incluidos por referencia en el término "anticuerpo" .

Los anticuerpos usados en los inmunoanálisis descritos en la presente se enlazan de preferencia específicamente a un marcador de lesión de riñon de la presente invención. El término "se enlaza específicamente" no pretende indicar que un anticuerpo se enlaza exclusivamente a su objetivo propuesto puesto que, como se indica anteriormente, un anticuerpo se enlaza a cualquier polipéptidos que muestra el (los) epítope (s) a los cuales el anticuerpo se enlaza. Mas bien, un anticuerpo "se enlaza específicamente" si su afinidad por su objetivo propuesto es aproximadamente 5 veces mayor cuando se compara con su afinidad por una molécula no objetivo que no muestra el (los) epítope (s) apropiado (s) . Preferiblemente, la afinidad del anticuerpo será de por lo menos aproximadamente 5 veces, preferiblemente 10 veces, mas preferiblemente 25 veces, aun mas preferiblemente 50 veces y mas preferiblemente 100 veces o mas, mayor por una molécula objetivo que su afinidad por una molécula no objetivo. En modalidades preferidas, los anticuerpos preferidos se enlazan con afinidades de por lo menos aproximadamente 107M_1 y preferiblemente entre alrededor de 108M_1 alrededor de 109M_1, alrededor de 109M_1 a alrededor de 1010 _1 o alrededor de ??^?G1 a alrededor de 1012M_1.

La afinidad es calculada como ¾ = Kapagado/kencendido (kapagad0 es la constante de la velocidad de disociación, ^encendido es la constante de la velocidad de asociación y kd es la constante de equilibrio) . La afinidad puede ser calculada al equilibrio al medir la fracción enlazada (r) de ligando marcado a varias concentraciones (c) . Los datos son graficados utilizando la ecuación de Scatchard: r/c = K(n-r): en donde r = moles de ligando enlazado/mol de receptor al equilibrio; c = concentración de ligando libre en equilibrio,-K = constante de asociación en equilibrio y n = numero de sitios de enlace de ligando por molécula receptora. Mediante análisis gráfico, r/c es graficado en el eje Y versus r en el eje X, produciendo así una gráfica de Scatchard. La medición de afinidad de anticuerpo mediante el análisis de Scatchard es bien conocida en el arte. Véase, por ejemplo van Erp et al., J. Immunoassay 12: 425-43, 1991; Nelson and Gris old, Comput. Methods Programs Biomed. 27: 65-8, 1988.

El termino "epítope" se refiere a un determinante antigénico apto de enlace especifico a un anticuerpo. Los epitopes consisten usualmente de agrupamientos superficiales químicamente activos de moléculas tales como aminoácidos o cadenas laterales de azúcar y usualmente tienen características estructurales dimensionales específicas, también como características de carga especificas. Los epitopes conformacionales y no conformacionales son distinguidos en que el enlace a los primeros pero no a los últimos se pierde en presencia de solventes desnaturalizantes .

Numerosas publicaciones discuten el uso de tecnología de despliegue de fago para producir y seleccionar bibliotecas de polipéptidos para enlace a un analito seleccionado. Véase, por ejemplo Cwirla et al., Proc. Nati. Acad. Sci. USA 87, 6378-82, 1990; Devlin et al., Science 249, 404-6, 1990, Scott and Smith, Science 249, 386-88, 1990; y Ladner et al., Patente Estadounidense No. 5,571,698. Un concepto básico de los métodos de despliegue de fago es el establecimiento de una asociación física entre el ADN que codifica un polipéptido a ser seleccionado y el polipéptido. Esta asociación física es provista por la partícula de fago, que despliega un polipéptido como parte de un capsido que encierra el genoma de fago que codifica el polipéptido. El establecimiento de una asociación física entre polipéptidos y su material genético permite la selección en masa simultánea de números muy grandes de fago que llevan diferentes polipéptidos . El despliegue de fago de un polipéptido con afinidad a un objetivo enlazado al objetivo y estos fagos son enriquecidos mediante selección de afinidad al objetivo. La identidad de los polipéptidos desplegados de estos fagos pueden ser determinada a partir de sus respectivos genomas . Utilizando estos métodos un polipéptido identificado por tener una afinidad de enlace por un objetivo deseado puede luego ser sintetizado a granel mediante medios convencionales. Véase, por ejemplo Patente Estadounidense No. 6,057,098, que es incorporada en la presente por referencia en su totalidad, incluyendo todas las tablas, figuras y reivindicaciones .

Los anticuerpos que son generados por estos métodos pueden luego ser seleccionados al seleccionar primero por afinidad y especificidad con el polipéptido codificado de interés y si se requiere, comparar resultados con la afinidad y especificidad de los anticuerpos con polipéptidos se desea hacer excluidos del enlace. El procedimiento de selección puede involucrar inmovilización de los polipéptidos purificados en cavidades separados de placas de micro titulo. La solución que contiene un anticuerpo potencial o grupos de anticuerpos es luego colocada en las cavidades de micro titulo respectivos e incubada por aproximadamente 30 minutos a 2 horas . Las cavidades de micro titulo son luego lavadas y un anticuerpo secundario marcado (por ejemplo, un anticuerpo anti-ratón conjugado a fosfatasa alcalina si los anticuerpos criados son anticuerpos de ratón) es agregado a las cavidades e incubado por aproximadamente 30 minutos luego lavados. El sustrato es agregado a las cavidades y una reacción de color aparecerá en donde el anticuerpo al (los) polipéptido (s) inmovilizado (s) están presentes.

Los anticuerpos asi identificados pueden luego ser analizados adicionalmente en cuanto a afinidad y especificidad en el diseño de análisis seleccionado. En el desarrollo de inmunoanálisis por una proteina objetivo, la proteína objetivo purificada actúa como estándar con la cual se puede juzgar la sensibilidad y especificidad de inmunoanálisis utilizando los anticuerpos que han sido seleccionados. Debido a que la afinidad de enlace de varios anticuerpos puede diferir; ciertos pares de anticuerpos (por ejemplo, en análisis de emparedado) pueden interferir entre si estéricamente, por ejemplo el desempeño de análisis de un anticuerpo puede ser una medida mas importante que la afinidad y especificidad absoluta de un anticuerpo.

En tanto que la presente solicitud describe análisis de enlace a base de anticuerpos en detalle, alternativas a anticuerpos como especie de enlace en análisis son bien conocidas en el arte. Estas incluyen receptores para un objetivo particular, aptámeros, etc. Los aptámeros son moléculas de acido oligonucleico o moléculas de péptido que se enlazan a una molécula objetivo especifica. Los aptámeros son usualmente creados al seleccionarlos de un fondo de secuencia aleatoria grande, pero los aptámeros naturales también existen. Los aptámeros de alta afinidad que contienen nucleótidos modificados que confieren características mejoradas sobre el ligando, tal como estabilidad in vivo mejorada o características de administración mejoradas. Ejemplos de tales modificaciones incluyen sustituciones químicas en las posiciones de ribosa y/o fosfato y/o base y pueden incluir funcionalidades de cadena lateral de aminoácido .

Correlaciones de análisis El termino "correlacionar" como es usado en la presente en referencia al uso de biomarcadores se refiere a comparar la presencia o cantidad del (los) biomarcador (es) en un paciente con su presencia o cantidad de personas que se sabe que sufren de o se sabe que están en riesgo de una condición dada o en personas que se sabe que están libres de una condición dada. Frecuentemente, esto toma la forma de comparar un resultado de análisis en forma de una concentración de biomarcador con un umbral predeterminado seleccionado por ser indicador de la presencia o no presencia de una enfermedad o la probabilidad de algún resultado futuro .

La selección de un umbral de diagnostico involucra, entre otras cosas, consideración de la probabilidad de enfermedad, distribución de diagnosis verdaderas y falsas a diferentes umbrales de prueba y valores estimativos de las consecuencias de tratamiento (o falla para tratar) en base a la diagnosis. Por ejemplo, cuando se considera administrar una terapia especifica que es altamente eficaz y tiene bajo nivel de riesgo pocas pruebas son necesarias debido a que los clínicos pueden aceptar incertidumbre de diagnostico sustancial. Por otra parte, en situaciones en donde las opciones de tratamiento son menos efectivas y mas riesgosas los clínicos frecuentemente necesitan un grado mas alto de certidumbre de diagnostico. Así, el análisis de costo/beneficio esta involucrado en la selección de un umbral de diagnostico.

Umbrales apropiados pueden ser determinados de una variedad de maneras. Por ejemplo, un umbral de diagnostico recomendado para la diagnosis de infarto al miocardio agudo utilizando troponina cardiaca es el 97.5th percentil de la concentración observada en una población normal. Otro método puede ser mirar muestras seriales del mismo paciente, en donde un resultado de "referencia" previo es usado para monitorear cambios temporales en el nivel de un biomarcador.

Estudios de población pueden también ser usados para seleccionar un umbral de decisión. La Característica de Operación del Receptor ("ROC") surgió del campo de teoría de detección de señal desarrollada durante la segunda guerra mundial para análisis de imágenes de radar y el análisis de ROC es frecuentemente usado para seleccionar un umbral apto de distinguir mejor una sub-población "enferma" de una sub-población "no enferma" . Un positivo falso en este caso se presenta cuando la persona aprueba positiva pero realmente no tiene la enfermedad. Un negativo falso, por otra parte, se presenta cuando la persona aprueba negativa sugiriendo que es saludable cuando realmente tiene la enfermedad. Para tratar una curva de ROC, la proporción de positivos verdaderos (TPR) y proporción de positivos falsos (FPR) son determinados y el umbral de decisión se hace variar continuamente. Puesto que TPR es equivalente con la sensibilidad y FPR es igual a 1 menos la especificidad, la gráfica de ROC es llamada algunas veces la gráfica de sensibilidad versus (1 menos especificidad) . Una prueba perfecta tendrá un área bajo la curva de ROC de 1.0, una prueba aleatoria tendrá un área de 0.5. Un umbral es seleccionado para proveer un nivel aceptable de especificidad y sensibilidad.

En este contexto, "enfermo" se refiere a una población que tiene una característica (la presencia de una enfermedad o condición o la presencia de algún resultado) y "no enfermo" pretende referirse a una población que carece de la característica. Mientras que un solo umbral de decisión es la aplicación mas simple de tal método, se pueden usar múltiples umbrales de decisión. Por ejemplo, debajo de un primer umbral, la ausencia de enfermedad puede ser asignada con relativamente alta confianza y por encima de un segundo umbral, la presencia de enfermedad puede ser asignada con relativamente alta confianza. Entre los dos umbrales puede ser considerado indeterminado. Esto pretende ser ejemplar por naturaleza solamente .

Además de comparaciones de umbral, otros métodos para correlacionar resultados de análisis con la clasificación del paciente (presencia o no presencia de enfermedad, probabilidad de un resultado, etc.) incluyen arboles de decisión, conjuntos de reglas, métodos Bayesianos y métodos de red neural . Estos métodos pueden producir valores de probabilidad que representan el grado al cual un sujeto pertenece a una clasificación de una pluralidad de clasificaciones .

Medidas de exactitud de prueba pueden ser obtenidas como se describe en Fischer et al., Intensive Care Med. 29:1043-51, 2003, y usarse para determinar la efectividad de un biomarcador dado. Estas medidas incluyen sensibilidad y especificidad, valores predictivos, proporciones de probabilidad, proporciones de probabilidad de diagnostico y áreas de curvas de ROC. El área bajo la curva ( "AUC" ) de una gráfica de ROC es igual a la probabilidad de que un clasificador fluctuara en una instancia positiva escogida aleatoriamente más alto que una negativa escogida aleatoriamente. El área bajo la curva de ROC puede ser considerada como equivalente a la prueba de U de Mann-Whitney que prueba por la diferencia mediana entra puntuaciones obtenidas en los dos grupos considerados y los grupos son de datos continuos o con la prueba de rangos de Wilcoxon.

Como se discute anteriormente, las pruebas apropiadas pueden exhibir uno o mas de los siguientes resultados en estas varias medidas: una especificidad mayor de 0.5, preferiblemente por lo menos 0.6, mas preferiblemente por lo menos 0.7, todavía mas preferiblemente por lo menos 0.8, aun mas preferiblemente por lo menos 0.9 y mas preferiblemente por lo menos 0.95, con una sensibilidad correspondiente mayor de 0.2, preferiblemente mayor de 0.3, mas preferiblemente mayor de 0.4, todavía mas preferiblemente por lo menos 0.5, aun mas preferiblemente 0.6, todavía mas preferiblemente mayor de 0.7, todavía mas preferiblemente mayor de 0.8, mas preferiblemente mayor de 0.9 y mas preferiblemente mayor 0.95; una sensibilidad mayor de 0.5, preferiblemente por lo menos 0.6, mas preferiblemente por lo menos 0.7, todavía mas preferiblemente por lo menos 0.8, aun mas preferiblemente por lo menos 0.9 y mas preferiblemente por lo menos 0.95, con una especificidad correspondiente mayor de 0.2, preferiblemente mayor de 0.3, mas preferiblemente mayor de 0.4, todavía mas preferiblemente por lo menos 0.5, aun mas preferiblemente 0.6, todavía mas preferiblemente mayor de 0.7, todavía mas preferiblemente mayor de 0.8, mas preferiblemente mayor de 0.9 y mas preferiblemente mayor de 0.95; por lo menos 75% de sensibilidad, combinada con por lo menos 75% de especificidad; un área de la curva de ROC mayor de 0.5, preferiblemente por lo menos 0.6, mas preferiblemente 0.7, todavía mas preferiblemente por lo menos 0.8, aun mas preferiblemente por lo menos 0.9 y mas preferiblemente por lo menos 0.95; una proporción de probabilidades diferente de 1, preferiblemente por lo menos alrededor de 2 o mas o alrededor de 0.5 o menos, mas preferiblemente por lo menos alrededor de 3 o mas o alrededor de 0.33 o menos, todavía mas preferiblemente por lo menos alrededor de 4 o mas o alrededor de 0.25 o menos, aun mas preferiblemente por lo menos alrededor de 5 o mas o alrededor de 0.2 o menos y mas preferiblemente por lo menos alrededor de 10 o mas o alrededor de 0.1 o menos; una proporción de probabilidades positiva (calculada como sensibilidad/ ( 1-especificidad) ) mayor de 1, por lo menos 2, mas preferiblemente por lo menos 3 , todavía mas preferiblemente por lo menos 5 y mas preferiblemente por lo menos 10 y/o una proporción de probabilidades negativa (calculada como (1-sensibilidad) /especificidad) menor de 1, menor o igual a 0.5, mas preferiblemente menor o igual a 0.3 y mas preferiblemente menor o igual a 0.1.

Indicios clínicos adicionales pueden ser combinados con el (los) resultado (s) de análisis de marcador de lesión de riñon de la presente invención. Estos incluyen otros biomarcadores relacionados con el estatus renal. Ejemplos incluyen los siguientes, que citan el nombre común del biomarcador seguido por el numero de entrada Swiss-Pro para aquel biomarcador o su padre: actina (P68133) ; proteína de enlace de adenosina desaminasa (DPP-4, P27487) ; glicoproteína 1 de alfa-l-ácida (P02763) ; alfa-l-micro globulina (P02760) ; albúmina (P02768) ; angiotensinogenasa (renina, P00797) ; anexina A2 (P07355) ; beta-glucuronidasa (P08236) ; ?-2-micro globulina (P61679) ; beta-galactosidasa (P16278) ; BMP-7 (P18075) ; péptido natriurético del cerebro (proBNP, BNP-32, NTproBNP; P16860) ; proteína Beta de enlace calcio (S100-beta, P04271) ; anhidrasa carbónica (Q16790) ; cinasa de caseína 2 (P68400) ; ceruloplasmina (P00450) ; clusterina (P10909) ; complemento C3 (P01024) ; proteína rica en cisteína (CYR61, 000622); citocromo C (P99999) ; factor de crecimiento epidérmico (EGF, P01133) ; endotelina-1 (P05305) ; fetuina-A exosomal (P02765) ; proteína de enlace de ácido graso; corazón (FABP3, P05413) ; proteína de enlace de ácido graso; hígado (P07148); ferritina (cadena ligera, P02793, cadena pesada P02794) ; fructosa- 1, 6 -bifosfatasa (P09467) , GRO-alfa (CXCL1, (P09341) , hormona de crecimiento (P01241) ; factor de crecimiento de hepatocito (P14210) ; factor I de crecimiento semejante a insulina (P01343) ; inmunoglobulina G; cadenas ligeras de inmunoglobulina (kappa y lambda) ; interferón gamma (P01308); lisozima (P61626) interleucina-1 alfa (P01583) ; interleucina-2 (P60568) ; interleucina-4 (P60568) ; interleucina-9 (P15248) ; interleucina-12 p40 (P29460) ; interleucina-13 (P35225) ; interleucina-16 (Q14005) ; molécula de adhesión celular Ll (P32004); lactato deshidrogenasa (P00338) ; leucina aminopeptidasa (P28838 ) ; subunidad alfa de eprina A (Q16819) ; subunidad beta de Meprina A (Q16820) ; Midkina (P21741) ; MIP2-alfa (CXCL2 , P19875); MMP-2 (P08253), MMP-9 (P14780) ; Netrina-1 (095631) ; endopeptidasa neutral (P08473) ; osteopontina (P10451) ; antígeno 1 papilar renal (RPA1) ; antígeno 2 papilar renal (RPA2) ; proteína de enlace de retinol (P09455) ; ribonucleasa; proteína A6 de enlace de calcio S100 (P06703) ; Componente amiloide P de suero (P02743); isoforma de intercambiador de sodio /hidrógeno (NHE3, P48764) ; espermidina/espermina Nl-acetiltransferasa (P21673); TGF-beta 1 (P01137) ; transferrina (P02787) ; factor 3 de Trefoil 3 (TFF3, Q07654) ; proteína 4 semejante a Toll (000206) ; proteína total, antígeno de nefritis tubulointersticial (Q9UJW2) ; Uromodulina (proteína de Tamm-Horsfall, P07911) .

Por propósitos de estratificación del riesgo, adiponectina (Q15848) ; fosfatasa alcalina (P05186) ; aminopeptidasa N (P15144) ; Calbindina D28k (P05937); cistatina C (P01034); subunidad 8 de ATPasa de F1F0 (P03928) ; gamma-glutamil transferasa ( P19440) ; GSTa (alfa-glutationa-S-transíerasa, P08263) ; GSTpi (glutationa-S-transferasa P; GST clase-pi; P09211) ; IGFBP-1 (P08833); IGFBP-2 (P18065); IGFBP-6 (P24592) ; proteína 1 de membrana integral (Itml, P46977) ; interleucina-6 (P05231) ; interleucina-8 (P10145) ; interleucina-18 (Q14116) ; IP-10 (proteína interferón-gamma-inducida por 10 kDa, P02778); IRPR (IFRD1, 000458); isovaleril-CoA deshidrogenasa (DIV, P26440) ; I-TAC/CXCL11 (014625) ; queratina 19 (P08727) ; Kim-1 (receptor 1 celular de virus de hepatitis A, 043656) L-arginina : glicina amidinotransferasa (P50440) ; leptina (P41159) ; Lipocalina 2 (NGAL, P80188) ; MCP-1 (P13500) ; MIG (monoquina gamma-interferón inducida Q07325) ; MIP-la (P10147) , MIP-3a (P78556); MIP-1 beta (P13236); IP-ld (Q16663); NAG (N-acetil-beta-D-glucosaminidasa, P54802) ; transportador de ion orgánico (0CT2, 015244); osteoprotegerina (014788); proteína P8 (060356) ; inhibidor 1 de activador de plasminógeno (PAI-1, P05121) ; proANP (1-98) (P01160) ; fosfatasa de proteína 1-beta (PPI-beta, P62140) ; Rab GDI-beta (P50395) ; calicreína renal (Q86U61) ; RT1.B-1 cadena(alfa) de la proteína de membrana integral (Q5Y7A8); miembro 1A de la superfamilia del receptor de factor de necrosis de tumor soluble (sTNFR-I, P19438) ; miembro IB de la superfamilia del receptor del factor de necrosis de tumor soluble (sTNFR-II, P20333) ; inhibidor de tejido de metaloproteinasas 3 (TIMP-3, P35625) ; uPAR (Q03405) pueden ser combinados con el (los) resultado (s) de análisis de marcador de lesión de riñon de la presente invención .

Otros indicios clínicos que pueden ser combinados con el (los) resultado (s) de análisis de marcador de lesión de riñon de la presente invención incluyen información demográfica (por ejemplo, peso, sexo, edad, raza) , historia medica (por ejemplo, historia familiar, tipo de cirugía, enfermedad preexistente tal como aneurisma, insuficiencia cardiaca congestiva, pre eclampsia, eclampsia, diabetes mellithus, hipertensión, enfermedad de arteria coronaria, proteinuria, insuficiencia renal o sepsis, tipo de exposición a toxina tales como NSAID, ciclosporinas , tacrolimus, aminoglicósidos, foscarnet, etilenglicol , hemoglobina, mioglobina, ifosfamida, metales pesados, metotrexato, agentes de contraste radiopacos o estreptozotocina) , variables clínicas (por ejemplo, presión sanguínea, temperatura, velocidad de respiración) , puntuaciones de riesgo (puntuación APACHE, puntuación PREDICT, puntuación de riesgo de TIMI por UA/NSTEMI, puntuación de riesgo de Framingham) , una medición de proteína total en orina, una velocidad de filtración glomerular, una velocidad de filtración glomerular estimada, una velocidad de producción de orina, una concentración de creatinina en el suero o plasma, una medición de antígeno 1 papilar renal (RPA1) ; una medición de antígeno 2 papilar renal (RPA2); una concentración de creatinina en orina, una excreción fraccional de sodio, una concentración de sodio en orina, una proporción de creatinina en orina a creatinina en suero o plasma, una gravedad especifica de orina, una osmolalidad en la orina, una proporción de nitrógeno de urea de orina a nitrógeno de urea en plasma, una proporción de BUN en plasma a creatinina y/o un índice de falla renal calculado como sodio en orina/ (creatinina en orina/creatinina en plasma) . Otras medidas de función renal que pueden ser combinadas con el (los) resultado (s) de análisis de marcador de lesión de riñon son descritas posteriormente en la presente y en Harrison' s Principies of Internal Medicine, 17th Ed., McGra Hill, New York, paginas 1741-1830 y Current Medical Diagnosis & Treatment 2008, 47th Ed, McGraw Hill, New York, paginas 785-815, cada una de las cuales son incorporadas en la presente por referencia en su totalidad. Las combinación de resultados de análisis/indicios clínicos de esta manera puede comprender el uso de regresión logística multivariada, modelado logarítmico lineal, análisis de red neural, análisis n de m, análisis de árbol de decisión, etc.

Esta lista no pretende ser limitante.

Diagnosis de falla renal aguda Como se indica anteriormente, los términos "lesión renal (o de riñon) aguda" y "falla renal (o de riñon) aguda" como se usan en la presente, son definidos en parte en términos de cambios de creatinina en suero de un valor de referencia. La mayoría de las definiciones de ARF tienen elementos comunes, incluyendo el uso de creatinina en suero y frecuentemente, la salida de orina. Los pacientes se pueden presentar con disfunción renal sin una medición de referencia disponible de función para uso en esta comparación. En tal evento, se puede estimar un valor de creatinina en suero de referencia al suponer que el paciente tenia inicialmente una GFR normal. La velocidad de filtración glomerular (GFR) es el volumen de fluido filtrado de los capilares glomerulares renales (de riñon) a la capsula de Bowman por tiempo unitario. La velocidad de filtración glomerular (GFR) puede ser calculada al medir cualquier químico que tiene un nivel estable en la sangre y es filtrado libremente pero no es ni reabsorbido ni secretado por los ríñones. GFR es expresado comúnmente en unidades de ml/min: GFR = Concentración de orina x Flujo de orina Concentración de plasma Al normalizar al GFR al área de superficie corporal, se puede suponer una GFR de aproximadamente 75-100 ml/min por 1.73 m3. Por consiguiente, la velocidad medida es la cantidad de la sustancia en la orina que se origino de un volumen calculable de sangre.

Hay varias técnicas diferentes usadas para calcular o estimar la velocidad de filtración glomerular (GFR o eGFR) . En la práctica clínica, sin embargo, se usa el despeje de creatinina para medir la GFR. La creatinina es producida naturalmente por el cuerpo (la creatinina es un metabolito de creatina, que se encuentra en el músculo) . Es filtrada libremente por los glomérulos, pero también secretada activamente por los túbulos renales en cantidades muy pequeñas, de tal manera que el despeje de creatinina sobreestima la GFR real por 10-20%. Este margen de error es aceptable considerando la facilidad con la cual se mide el despeje de creatinina.

El despeje de creatinina (CCr) puede ser calculado si los valores de la concentración de creatinina en la orina (UCr) la velocidad de flujo de orina (V) y la concentración de creatinina en el plasma (PCr) son conocidos. Puesto que el producto de la concentración de orina y la velocidad de flujo de orina produce la velocidad de excreción de creatinina, también se dice que el despeje de creatinina es su velocidad de excreción (UCr x V) dividida por su concentración en el plasma. Esto es comúnmente expresado matemáticamente como: Per Comúnmente, se emprende una recolección de orina de 24 horas desde la vejiga vacía una mañana al contenido de la vejiga la mañana siguiente, con una prueba de sangre comparativa tomada luego: = UCr x Volumen de 24 horas Ccr PCr x 24 x 60 minutos Para permitir la comparación de los resultados entre gente de diferentes tamaños, la CCr es frecuentemente corregida por el área superficial corporal (BSA) y expresada en comparación con el hombre de tamaño promedio como ml/min/1.73 m2. Mientras que la mayoría de los adultos tienen una BSA que se aproxima a 1.76 (1.6 - 1.9), los pacientes extremadamente obesos o esbeltos deben tener su CCr corregido por su BSA real : CcrXl.73 Ccr-corregido = BSA La exactitud de una medición de despeje de creatinina (aun cuando la recolección es completa) es limitada debido a que a medida que la velocidad de filtración glomerular (GFR) cae, la secreción de creatinina es incrementada y así la elevación de creatinina en suero es menor. Así, la excreción de creatinina es mucho mayor que la carga filtrada, dando como resultado una sobre estimación potencialmente grande de la GFR (tanto como una diferencia de dos veces) . Sin embargo, por propósitos clínicos, es importante determinar si la función renal es estable o esta empeorando o mejorando. Esto es frecuentemente determinado mediante el monitoreo de creatinina en el suero solo. Como el despeje de creatinina, la creatinina en el suero no será un reflejo exacto de la GFR en la condición de no estar estable de ARF. No obstante, el grado al cual la creatinina en el suero cambia de la referencia reflejara el cambio en GFR. La creatinina en suero es medida rápida y fácilmente y es específica para la función renal .

Por propósitos de determinar la salida de orina en una salida de orina en una base de ml/kg/hr, la recolección y medición de orina por hora es apropiada. En el caso en donde por ejemplo, solo una salida de 24 horas acumulativa estaba disponible y no se proporcionaron pesos de los pacientes, modificaciones menores de los criterios de salida de orina de RIFLE han sido descritas. Por ejemplo, et al., Nephrol. Dial. Transplant. 23: 1203-1210, 2008, supone un peso de paciente promedio de 70 kg y se asigna una clasificación de RIFLE a los pacientes en base a lo siguiente: < 35 ml/h (Riesgo), < 21 ml/h (Lesión) o < 4 ml/h (Falla) .

Selección de un régimen de tratamiento Una vez que se tiene una diagnosis, el clínico puede seleccionar fácilmente un régimen de tratamiento que es compatible con la diagnosis, tal como iniciar terapia de reemplazo renal, retirar la administración de compuestos que se sabe que son dañinos al riñon, trasplante de riñon, retardar o evitar procedimientos que se sabe que son dañinos al riñon, modificar la administración diurética, iniciar la terapia dirigida a objetivos, etc. El experimentado en el arte estará consiente de los tratamientos apropiadas para numerosas enfermedades discutidas en relación con los métodos de diagnosis descritos en la presente. Véase, por ejemplo Merck Manual of Diagnosis and Therapy, 17th Ed. Merck Research Laboratories, Whitehouse Station, NJ, 1999. Además, puesto que los métodos y composiciones descritos en la presente proveen información de prognóstico, los marcadores de la presente invención pueden ser usados para monitorear un curso de tratamiento. Por ejemplo, un estado de prognóstico mejorado o empeorado puede indicar que un tratamiento particular es eficaz o no.

El experimentado en el arte apreciara fácilmente que la presente invención es apta para llevar a cabo los objetos y obtener los fines y ventajas mencionados, también como aquellos inherentes en la misma. Los ejemplos provistos en la presente son representativos de modalidades preferidas, son ejemplares y no pretenden ser limitaciones en cuanto al alcance de la invención.

Ejemplo 1: Recolección de muestras de nefropatía inducida por contraste .

El objetivo de este estudio de recolección de muestras es recolectar muestras de plasma y orina y datos clínicos de pacientes antes y después de recibir medios de contraste intravasculares . Aproximadamente 250 adultos que sufren procedimientos radiográficos/angiográficos que involucran administración intrabasal de medios de contraste yodados son reclutados. Para ser reclutados en el estudio, cada paciente debe satisfacer todos los siguientes criterios de inclusión y ninguno de los siguientes criterios de exclusión: Criterios de inclusión hombres y mujeres de 18 años de edad o mayores; sufriendo un procedimiento radiográfico/angiográfico (tal como un barrido de CT o intervención coronaria) que involucra la administración intravascular de medios de contraste ; que se espera sean hospitalizados por al menos 48 horas después de la administración del contraste; aptos y deseosos de proveer consentimiento por escrito para la participación en el estudio y para cumplir con todos los procedimientos del estudio.

Criterios de exclusión receptores de trasplante renal; empeoramiento agudamente de la función renal antes del procedimiento de contraste ,- ya recibiendo diálisis (ya sea aguda o crónica) o en necesidad inminente de diálisis en el reclutamiento; que se espera que sufran un procedimiento quirúrgico mayor (tal como que involucre bypass cardiopulmonar) o un procedimiento de representación de imagen adicional con medios de contraste con riesgo significativo por ataque renal adicional en el transcurso de las 48 horas enseguida de la administración del contraste; participación en un estudio clínico intervencional con una terapia experimental en el transcurso de los 30 días previos ; infección conocida con virus de inmunodeficiencia humana (VIH) o virus de hepatitis.

Inmediatamente antes de la primera administración del contraste (y después de cualquier hidratación de pre-procedimiento) , una muestra de sangre anti-coagulada por EDTA (10 mi) y una muestra de orina (10 mi) son recolectadas de cada paciente. Las muestras de sangre y orina son luego recolectadas a 4 (±0.5), 8 (±1), 24 (±2) 48 (±2) y 72 (±2) horas enseguida de la ultima administración de los medios de contraste durante el procedimiento de contraste de índice. La sangre es recolectada vía venipunción directa o vía otro acceso venoso disponible, tal como una envolvente femoral existente, línea venosa central, línea intravenosa periférica o hep-lock. Estas muestras de sangre de estudio son procesadas a plasma en el sitio clínico, congeladas y embarcadas a Astute Medical, Inc., San Diego, CA. Las muestras de orina de estudio son congeladas y marcadas a Astute Medical, Inc.

La creatinina en el suero es determinada en el sitio inmediatamente antes de la primera administración del contraste (después de cualquier hidratación de pre-procedimiento) y a 4 (±0.5), 8 (±1), 24 (±2) y 48 (±2)) y 72 (+2) horas enseguida de la ultima administración del contraste (idealmente al mismo tiempo como las muestras de estudio son obtenidas) . Además, cada estatus del paciente es evaluado a través del día 30 con respecto a mediciones de creatinina en suero y orina adicionales, necesidad de diálisis, estatus de hospitalización y resultados clínicos adversos (incluyendo mortalidad) .

Antes de la administración del contraste, se asigna a cada paciente un riesgo en base a la siguiente determinación: presión sanguínea sistólica < 80 mm Hg = 5 puntos; bomba de globo intra-arterial = 5 puntos; insuficiencia cardiaca congestiva (Clase III-IV o historia edema pulmonar) = 5 puntos; edad > 75 años = 4 puntos; nivel de hematocrito < 39% para hombres, < 35% para mujeres = 3 puntos; diabetes = 3 puntos; volumen de medios de contraste = 1 punto por cada 100 mi; nivel de creatinina en suero > 1.5 g/dl = 4 puntos; o GFR estimada 40-60 ml/min/1.73 m2 = 2 puntos, 20-40 ml/min/1.73 m2 = 4 puntos, < 20 ml/min/1.73 m2 = 6 puntos. Los riesgos asignados son como sigue: riesgo por CIN y diálisis: 5 o menos puntos totales = riesgo de CIN - 7.5%, riesgo de diálisis-0.04%; C-10 puntos totales = riesgo de CI -14%; riesgo de diálisis-0.12%; 11-16 puntos totales = riesgo de CIN-26.1%; riesgo de diálisis = 1.09%; > 16 puntos totales = riesgo de CIN-57.3%, riesgo de diálisis-12.8% .

Ejemplo 2 : recolección de muestras de cirugía cardiaca El objetivo de este estudio de recolección de muestras es recolectar muestras de plasma y orina y datos clínicos de pacientes antes y después de sufrir cirugía cardiovascular, un procedimiento que se sabe que es potencialmente dañino a la función del riñon. Aproximadamente 900 adultos que sufren tal cirugía son reclutados . Para ser reclutados en el estudio, cada paciente debe satisfacer todos los siguientes criterios de inclusión y ninguno de los siguientes criterios de exclusión: Criterios de inclusión hombres y mujeres de 18 años de edad o mayores; sufriendo cirugía cardiovascular; índice de riesgo predictivo de Toronto/Ottawa por puntuación de riesgo de reemplazo renal de por lo menos 2 y aptos y deseosos de proveer consentimiento por escrito para la participación en el estudio y para cumplir con todos los procedimientos del estudio.

Criterios de exclusión embarazo conocido,- trasplante renal previo; empeoramiento agudamente de la función renal antes del reclutamiento (por ejemplo, cualquier categoría de los criterios de RIFLE) ; ya recibiendo diálisis (ya sea aguda o crónica) o en necesidad inminente de diálisis en el reclutamiento; actualmente enrolado en otro estudio clínico o que se espera sea reclutado en otro estudio clínico en 7 días de cirugía cardiaca que involucra infusión de fármaco o una intervención terapéutica por AKI; infección conocida con virus de inmunodeficiencia humana (VIH) o virus de hepatitis.

En el transcurso de 3 horas antes de la primera incisión (y después de cualquier hidratación de pre-procedimiento) , una muestra de sangre anti- coagulada por EDTA (10 mi) , sangre entera (3 mi) y una muestra de orina (35 mi) son recolectadas de cada paciente. Luego las muestras de sangre y orina son recolectadas a 3 ( +0.5), 6 (±0.5), 12 (±1) , 24 (±2) y 48 (±2) horas enseguida del procedimiento y luego diariamente en los días 3 a 7 si el sujeto permanece en el hospital. La sangre es recolectada vía venipunción directa o vía otro acceso venoso disponible tal como un envolvente femoral existente, línea venosa central, línea intravenosa periférica o hep-lock. Estas muestras de sangre de estudio son congeladas y embarcadas a Astute Medical, Inc., San Diego, CA. Las muestras de orina de estudio son congeladas y embarcadas a Astute Medical, Inc.

Ejemplo 3: Recolección de muestras de sujeto agudamente enfermo El objetivo de este estudio es recolectar muestras es recolectar muestras de pacientes agudamente enfermos. Aproximadamente 900 adultos que se esperan que estén en la ICU por al menos 48 horas serán reclutados. Para ser reclutados en el estudio, cada paciente debe satisfacer todos los siguientes criterios de inclusión y ninguno de los siguientes criterios de exclusión: Criterios de inclusión hombres y mujeres de 18 años de edad o mayores; Población de estudio 1: aproximadamente 300 pacientes que tienen por lo menos 1 de: choque (SBP < 90 mmHg y/o necesidad de soporte de vasopresor para mantener MAP < 60 mmHg y/o caída documentada en SBP de por lo menos < 40 mmHg) y sepsis ; Población de estudio 2: aproximadamente 300 pacientes que tienen por lo menos 1 de: antibióticos IV ordenados en la orden centrada del medico computarizada (CPOE) en el transcurso de 24 horas del reclutamiento,· exposición a los medios de contraste en el transcurso de las 24 horas de reclutamiento; presión intra-abdominal incrementada con insuficiencia cardiaca descompensada aguda y trauma severo como la razón primaria para admisión a la ICU y probable de ser hospitalizado en la ICU por 48 horas después del reclutamiento; Población de estudio 3: aproximadamente 300 pacientes que se espera sean hospitalizados a través de la inclusión de cuidado agudo (ICU o ED) con un factor de riesgo conocido por lesión renal aguda (por ejemplo, sepsis, hipotensión/choque (choque = BP sistólica < 90 mmHg y/o necesidad de soporte vasopresor para mantener una MAP > y/o una caída documentada en SBP > 40 mmHg) , trauma mayor, hemorragia o cirugía mayor) y/o que se espera sean hospitalizados a la ICU por al menos 24 horas después del reclutamiento.

Criterios de exclusión embarazo conocido; individuos institucionalizados; trasplante renal previo; empeoramiento agudamente conocido de la función renal antes del reclutamiento (por ejemplo, cualquier categoría de los criterios de RIFLE) ; diálisis recibida (ya sea aguda o crónica) en el transcurso de 5 días antes del reclutamiento o en necesidad inminente de diálisis al tiempo de reclutamiento; infección conocida con virus de inmunodeficiencia humana (VIH) o virus de hepatitis; satisface solamente el criterio de inclusión de SBP < 90 mmHg resumido anteriormente y no tiene choque en la opinión del medico que atiende o el investigador principal.

Después de proveer consentimiento por escrito, una muestra de sangre anti-coagulada de EDTA (10 mi) y una muestra de orina (25-30 mi) son recolectadas de cada paciente. Las muestras de sangre y orina son luego recolectadas a 4 (±0.5) y 8 (+1) horas después de la administración del contraste (si es aplicable) ; a 12 (± 1) , 24 (± 2) , y 48 (± 2) horas después del reclutamiento y después de esto diariamente hasta el día 7 al día 14 mientras que el sujeto hospitalizado. La sangre es recolectada vía venipunción directa o vía otro acceso venoso disponible, tal como un envolvente femoral existente, línea venosa central, línea intravenosa periférica o hep-lock. Estas muestras de sangre de estudio son procesadas a plasma en el sitio clínico, congeladas y embarcadas a Astute Medical, Inc., San Diego, CA. Las muestras de orina de estudio son congeladas y embarcadas a Astute Medical, Inc.

Ejemplo 4. Formato de inmunoanálisis Los analitos son medidos utilizando técnicas de inmunoanálisis de enzima de emparedado estándar. Un primer anticuerpo que se enlaza al analito es inmovilizado en cavidades de una microplaca de poliestireno de 96 cavidades. Estándares de analito y muestras de prueba son tipeteados a las cavidades apropiadas y cualquier analito presente es enlazado por el anticuerpo inmovilizado. Después de lavado de cualesquier sustancia sin enlazar, un segundo anticuerpo conjugado a peroxidasa de rábano que se enlaza al analito es agregado a las cavidades, formando mediante esto complejos de emparedado con el analito (si esta presente) y el primer anticuerpo. Enseguida de un lavado para remover cualquier reactivo de enzima de anticuerpo sin enlazar, una solución de sustrato que comprende tetrametilbenzidina y peróxido de hidrogeno es agregada a las cavidades . El color se desarrolla en proporción con la cantidad de analito presente en la muestra. El desarrollo de color es detenido y la intensidad del color es medida a 540 nm o 570 nm. Se asigna una concentración de analito a la muestra de prueba por comparación con una curva estándar determinada de los estándares de analito. Las concentraciones reportadas a continuación son como sigue: factor VII de coagulación-ng/ml , CA19-9-U/ml, proteína 7 de enlace del factor de crecimiento semejante a insulina ng/ml, quimiosina 6 de porción de C-X-C-pg/ml y quimiosina 13 de porción de C-C-pg/ml.

Ejemplo 5. Muestras del donador aparentemente saludable y del paciente con enfermedad crónica Muestras de orina humana de donadores sin ninguna enfermedad crónica o aguda ( "donadores aparentemente saludables") fueron compradas de dos proveedores ( (Golden West Biologicals, Inc., 27625 Commerce Center Dr., Temecula, CA 92590 and Virginia Medical Research, Inc., 915 First Colonial Rd. , Virginia Beach, VA 23454).). Las muestras de orina fueron embarcadas y almacenadas congeladas a menos de -20°C. Los proveedores suministraron información demográfica en cuanto a los donadores individuales incluyendo género, raza (blanco/negro) , estatus de fumar y edad.

Muestras de orina humana de donadores con varias enfermedades crónicas ("pacientes con enfermedad crónica") incluyendo insuficiencia cardiaca congestiva, enfermedad de arteria coronaria, enfermedad de riñon crónica, enfermedad pulmonar obstructiva crónica, diabetes mellithus e hipertensión fueron compradas de Virginia Medical Research, Inc, 915 First Colonial RD., Virginia Beach, VA 23454. Las muestras de orina fueron embarcadas y luego congeladas a menos de -20°C. El proveedor proporciono un reporte de caso para cada donador individual con edad, genero, raza (negro/blanco), estatus de fumar y uso de alcohol, altura, peso, diagnosis de enfermedad (es) crónica (s) , medicaciones actuales y cirugías previas.

Ejemplo 6. Uso de marcadores de lesión de riñon para evaluación de estatus renal en pacientes Pacientes de la unidad de cuidado intensivo (ICU) fueron reclutados en el siguiente estudio. Cada paciente fue clasificado por estatus de riñon como sin lesión (0) , riesgo de lesión (R) , lesión (I) y falla (F) de acuerdo con la etapa máxima alcanzada en el transcurso de 7 días de tratamiento, tal como se determina por los criterios de RIFLE. Muestras de sangre anti-coagulada por EDTA (10 mi) y muestras de orina (25-30 mi) fueron recolectadas de cada paciente en el reclutamiento, 4 (± 0.5) y 8 (± 1) horas después de la administración del contraste (si es aplicable) ; a 12 (+ 1) , 24 (+ 2) y 48 (+ 1) horas después del reclutamiento y después de esto diariamente hasta el día 7 al día 14 mientras que el sujeto esta hospitalizado. Los marcadores fueron cada uno medidos mediante métodos de inmunoanálisis estándar utilizando reactivos de análisis disponibles comercialmente en las muestras de orina y el componente de plasma de las muestras de sangre recolectado.

Dos cohortes fueron definidos para representar una población "enferma" y una población "normal" . Mientras que estos términos son usados por conveniencia, "enfermo" y "normal" representan simplemente dos cohortes por comparación (es decir, RIFLE 0 vs RIFLE R, I y F; RIFLE 0 vs RIFLE R; RIFLE 0 y R vs RIFLE I y F; etc.) . El tiempo de "etapa máxima previa" representa el tiempo al cual una muestra es recolectada, en relación con el tiempo en que un paciente particular alcanza la etapa de enfermedad mas baja como es definida por aquel cohorte, agrupados en binarios en tres grupos que son +/- 12 horas. Por ejemplo, "24 horas antes" utiliza 0 vs R, I, F como los dos cohortes significaría 24 horas (+/- 12 horas) antes de llegar a la etapa R (o I sin ninguna muestra en R o F, sin ninguna muestra en R o I) Una curva característica de operación del receptor (ROC) fue generada por cada biomarcador debido y el área bajo cada curva de ROC (AUC) es determinada. Los pacientes en el cohorte 2 fueron también separados de acuerdo con la razón para adjudicación al cohorte 2 por estar basado en mediciones de creatinina en suero (sCr) , estar basada en la perdida de orina (UO) o estar basada ya sea en mediciones de creatinina en el suero o salida de orina. Utilizando el mismo ejemplo discutido anteriormente (0 vs R, I, F) , para aquellos pacientes adjudicados a la etapa R, I o F en base a las mediciones de creatinina en el suero solas, el cohorte de la etapa 0 puede incluir pacientes adjudicados a la etapa R, I o F en base a la salida de orina; para aquellos pacientes adjudicados a la etapa R, I o F en base a la salida de orina sola, el cohorte de etapa 0 puede incluir pacientes adjudicados a la etapa R, I o F en base a mediciones de creatinina en suero y para aquellos pacientes adjudicados a la etapa R, I o F en base a las mediciones de creatinina en suero o la salida de orina, el cohorte de etapa 0 contiene solamente pacientes en etapa 0 para ambas mediciones de creatinina en suero y salida de orina. También, en los datos para pacientes adjudicados en base a mediciones de creatinina en suero o salidas de orina, el método de adjudicación que produjo la etapa de RIFLE mas severa es usado.

La habilidad para distinguir el cohorte 1 del cohorte 2 fue determinada utilizando análisis de ROC. SE es el error estándar de la AUC, n es el numero de muestras o pacientes individuales ("pts", como se indica). Los errores estándar son calculados como se describe en Hanely, J.A. y McNeil, B. J. , The meaning and use of the área under a receiver operating characteristic (ROC) curve. Radiology (1982) 143:29-36; los valores p son calculados con una prueba Z de dos colas . Una AUC < 0.5 es indicadora de un marcador que va a negativo para la comparación y una AUC > 0.5 es indicadora de un marcador que va a positivo para la comparación.

Varias concentraciones de umbral (o "cohorte") fueron seleccionadas y la sensibilidad y especificidad asociadas para distinguir el cohorte 1 del cohorte 2 son determinadas. OR es la proporción de probabilidades calculada para la concentración de cohorte particular y CI 95% es el intervalo de confianza para la proporción de probabilidades.

Tabla 1: Comparación de niveles de marcador en muestras de orina recolectadas del cohorte 1 (pacientes que no avanzan mas allá 0 de RIFLE) y en muestras de orina recolectadas de los sujetos a 0, 24 y 48 horas antes de llegar a la etapa R, I o F en el cohorte 2.

An rigen o 19-9 de c iicei-kCr o UO 0 h aates de etapa AKI 24 h antes de etapa AKI |48 h .mies de etapa A 3 Quimiocíiiíi 1 de porción Qumiiociu.» de porción C-X-C Factor MI de coagulación sCr o UO [0 h antes de etapa AKI (24 fa antes de etapa AKI [4S h antes de etapa AKI Proteína 7 de enlace del factor de crecimiento semejante a insulina Tabla 2 : Comparación de niveles de marcador en muestras de orina recolectadas del cohorte 1 (pacientes que no avanzaron mas allá de la etapa 0 o R de RIFLE) y en muestras de orina recolectadas de sujetos a 0, 24 horas y 48 horas antes de llegar a la etapa I o F en el cohorte 2.

Autigeno 19-9 de c ncer Quimiocina 13 de porción C-C Quimiociiin de porción C-X-C Factor MI de coagulación Proíeina 7 de enlace del factor de crecimiento semejante a insulina Tabla 3 : Comparación de niveles de marcador en muestras de Factor MI de coagulación Tabla 4 : Comparación de los niveles de marcador máximo en muestras de orina recolectadas del cohorte 1 (pacientes que no avanzan mas allá de la etapa 0 de RIFLE) y los valores máximos es muestras de orina recolectada de sujetos entre el reclutamiento y 0, 24 y 48 horas antes de llegar a la etapa F en el cohorte 2.

Anfigeno 19-9 de cáncer Quiiniocin. 13 de porción C'-C ¡Soto UO |0 h antes de etapa .AKI [24 h antes de etapa .AKI ¡48 h antes de etapa AKJ Quimiociun de porción C-X-C Factor MI de coagulación Profeiurt 7 de enlace del factor de crecimiento semejante a hmiliua Tabla 5 : Comparación de niveles de marcador en muestras de EDTA recolectadas del cohorte 1 (pacientes que no avanzaron mas allá de la etapa 0 de RIFLE) y en muestras de EDTA recolectadas de pacientes a 0, 24 horas y 48 horas antes de llegar a la etapa R, I o F en el cohorte 2.

Antigeuo 19-9 de cáncer Qiiimiocínn 13 de porción C-C uimiocina de porción C -X-C Factor VII de coagulación Proteína 7 de eutace del factor de crecimiento semejante a insulina » h autes de etapa AKl [24 h antes de etapa AKl [48 h antes de etapa AKl Tabla 6 : Comparación de niveles de marcador en muestras de EDTA recolectadas del cohorte 1 (pacientes que no avanzaron mas allá de la etapa 0 o R de RIFLE) y en muestras de EDTA recolectadas de sujetos a 0, 24 horas y 48 horas antes de llegar a la etapa I o F en el cohorte 2.

Aiitigeno 19-9 de cáncer Quiiniocina 13 ele perdón C-C Quimiocina de porción C'-X-C Factor VII de coagulación Proteína 7 de enlace del factor de crecimiento semejante a insulina Tabla 7 : Comparación de niveles de marcador en muestras de EDTA recolectadas en el transcurso de 12 horas de llegar a la etapa R del cohorte 1 (pacientes que llegaron pero no avanzaron mas allá de la etapa R de RIFLE) y del cohorte 2 (pacientes que llegaron a la etapa I o F de RIFLE) .

Factor Vil de coagulación Tabla 8: Comparación de los niveles de marcador máximo en muestras de EDTA recolectadas del cohorte 1 (pacientes que no avanzaron mas allá de la etapa 0 de RIFLE) y los valores máximos en muestras de EDTA recolectadas de sujetos entre el reclutamiento y 0, 24 horas y 48 horas antes de llegar a la etapa F en el cohorte 2.

Autígeno 19-9 de cáncer Quiiniocina 13 de porción C-C Factor VII de coagulación Prot íua 7 de enlace del factor de crecimiento semejante a insulina Tabla 9: Comparación de niveles de marcador en muestras de orina recolectadas del cohorte 1 (pacientes que no avanzaron mas allá de la etapa 0, R o I de RIFLE) y en muestras de orina recolectadas del cohorte 2 (sujetos que avanzan a la etapa F de RIFLE) a 0, 24 horas y 48 horas antes de que el sujeto llegue a la etapa I de RIFLE.

Autigen 1 -9 de cáucer 'uimioctna 13 de porción Quimiocina de porción C-X-C Factor MI tle co;ignlncion Proteiua 7 de enlace del factor de crecimiento semejante a insulina Tabla 10: Comparación de niveles de marcador en muestras de EDTA recolectadas del cohorte 1 (pacientes que no avanzaron mas allá de la etapa 0, R o I de RIFLE) y en muestras de EDTA recolectadas del cohorte 2 (sujetos que avanzan a la etapa F de RIFLE) a 0, 24 horas y 48 horas antes de que el sujeto llegue a la etapa I de RIFLE.

Antígeno 19-9 <le cáncer Qnimiociun 13 ele porción C'-C Qiumiociua de porción C-X-C Factor ?? «le coagulación Proteína 7 de enlace del factor de ci ecimieuto semejante a insulina Tabla 11: Comparación de niveles de marcador en muestras de orina enroladas recolectadas del cohorte 1 (pacientes que no avanzaron mas allá de la etapa 0 o R de RIFLE en el transcurso de 48 horas) y en muestras de orina de reclutamiento recolectadas del cohorte 2 (sujetos que llegan a a la etapa I o F de RIFLE en el transcurso de 48 horas) . Las muestras de reclutamiento de pacientes ya en la etapa I o F de RIFLE fueron incluidas en el cohorte 2.

Antígno 19-9 de cáncer Quiiuiociun de porcíóu C -X Factor VII de coagulación Pi oteíua " de enlace del factor de crecimiento semejante a insulina Tabla 12 : Comparación de niveles de marcador en el reclutamiento de muestras de EDTA recolectadas del cohorte 1 (pacientes que no avanzaron mas allá de la etapa 0 o R de RIFLE en el transcurso de 48 horas) y en el reclutamiento de muestras de EDTA recolectadas del cohorte 2 (sujetos que llegan a la etapa I o F de RIFLE en el transcurso de 48 horas) . Las muestras de reclutamiento de pacientes ya en la etapa I o F de RIFLE fueron incluidas en el cohorte 2.

Antígeno 19-9 de cáncer Quimiot ina de porción C -X-C 10 Factor MI de coagulación 0 5 Proteiaa ~ de enlace del factor de crecimiento seuiejaute a insulina Ejemplo 7. Marcadores de lesión de riñon para evaluar riesgo de mortalidad en pacientes Pacientes de la unidad de cuidado intensivo (ICU) fueron reclutados en el siguiente estudio. Cada paciente fue clasificado por estatus de riñon como sin lesión (0) , riesgo de lesión (R) , lesión (I) y falla (F) de acuerdo con la etapa máxima alcanzada en el transcurso de 48 horas del reclutamiento, tal como es determinado por los criterios de RIFLE. Muestras de sangre anti-coagulada de EDTA (10 mi) y muestras de orina (25-30 mi) fueron recolectadas de cada paciente al tiempo de reclutamiento al estudio. Los marcadores fueron cada uno medidos mediante métodos de inmunoanálisis estándar utilizando reactivos de análisis disponibles comercialmente en las muestras de orina y el componente de plasma de las muestras de sangre recolectado.

La población de pacientes fue segregada en base a concentraciones de marcador utilizando valores de umbral que dividen la población en tercios ("terciles") . Los pacientes con concentraciones de marcador en el tercio inferior, medio y superior comprenden los primeros, segundos y terceros terciles, respectivamente. El riesgo relativo de mortalidad AKI-relacionada en el transcurso de 7 , 14 y 28 días fue calculado para los segundos y terceros terciles, en relación con un valor de 1 para el primer tercil, tal como se indica en la siguiente tabla. "Mortalidad AKI-relacionada" o "muerte AKI-relacionada" fue definida como muerte acompañada por una etapa de RIFLE mínima de R.

Tabla 13. Riesgo relativo de muerte AKI- relacionada en el transcurso de 7 , 14 y 28 días del reclutamiento para el tercer tercil en comparación con el primer tercil de concentraciones del marcador.

En tanto que la invención ha sido descrita y ejemplificada en detalle suficiente para que aquellos experimentados en este arte la elaboren y usen varias alternativas, modificaciones y mejoras deben ser evidentes sin desviarse del espíritu y alcance de la invención. Los ejemplos provistos en la presente son representativos de modalidades preferidas, son ejemplares y no pretenden ser limitaciones en cuanto al alcance de la invención. Modificaciones en las mismas y otros usos se les presentaran a aquellos experimentados en el arte. Estas modificaciones son abarcadas en el espíritu de la invención y son definidas por el alcance de las reivindicaciones.

Será fácilmente evidente para la persona experimentada en el arte que varias sustituciones y modificaciones se pueden hacer a la invención revelada en la presente sin desviarse del alcance y espíritu de la invención.

Todas las patentes y publicaciones mencionadas en la especificación son indicadoras de los niveles de aquellos de habilidad ordinaria en el arte con el cual esta invención es concerniente. Todas las patentes y publicaciones son incorporadas en la presente por referencia a la misma extensión como si cada publicación individual fuera indicada específica e individualmente para ser incorporada por referencia .

La invención descrita ilustrativamente en la presente se puede llevar a la práctica apropiadamente en ausencia de cualquier elemento o elementos, limitación o limitaciones que no son reveladas específicamente en la presente. Así, por ejemplo, en cada instancia en la presente, cualquiera de los términos "que comprende" , "que consiste esencialmente de" y "que consiste de" pueden ser enlazados ya sea con uno u otro de los otros dos términos. Los términos y expresiones que han sido empleados son usados como términos de descripción y no de limitación y no hay ninguna intensión en que el uso de tales términos y expresiones de excluir cualesquier equivalentes de los elementos mostrados y descritos o porciones de los mismos, sino que se reconoce que varias modificaciones son posibles dentro del alcance de la invención reivindicada. Asi, se debe entender que aunque la presente invención ha sido revelada específicamente por modalidades preferidas y elementos opcionales, se puede recurrir a modificaciones y variaciones de los conceptos revelados en la presente por aquellos experimentados en el arte y que se considera que tales modificaciones y variaciones están dentro del alcance de la invención como se define por las reivindicaciones adjuntas.

Otras modalidades son resumidas en las siguientes reivindicaciones .

Claims (108)

REIVINDICACIONES

1. Un método para evaluar el estatus renal en un sujeto, caracterizado porque comprende: efectuar uno o mas análisis configurados para detectar uno o mas biomarcadores seleccionados del grupo que consiste de factor VII de coagulación, CA19-9, proteina 7 de enlace del factor de crecimiento semejante a insulina, quimiosina 6 de porción de C-X-C y quimiosina 13 de porción de C-C en una muestra de fluido corporal obtenida del sujeto para proveer un resultado de análisis y correlacionar el (los) resultado (s) de análisis con el estatus renal del sujeto.

2. El método de acuerdo con la reivindicación 1, caracterizado porque la etapa de correlación comprende relacionar el (los) resultado (s) de análisis con uno o mas de estratificación de riesgo, diagnosis, escalamiento, prognosis, clasificación y monitoreo del estatus renal del sujeto.

3. El método de acuerdo con la reivindicación 1, caracterizado porque la etapa de correlación comprende asignar una probabilidad de uno o mas cambios futuros en estatus renal al sujeto en base al (los) resultado (s) de análisis .

4. El método de acuerdo con la reivindicación 3, caracterizado porque el uno o mas cambios futuros en estatus , renal comprenden uno o mas de una lesión futura a función renal, función renal reducida futura, mejora futura en función renal y falla renal aguda futura (ARF) .

5. El método de acuerdo con cualquier de las reivindicaciones 1-4, caracterizado porque los resultados de análisis comprenden por lo menos 2, 3, 4 o 5 de : una concentración medida del factor VII de coagulación, una concentración medida de CA19-9, una concentración medida de la proteína 7 de enlace del factor de crecimiento semejante a insulina, una concentración medida de la quimiosina 6 de porción de C-X-C y una concentración medida de la quimiosina 13 de porción de C-C.

6. El método de acuerdo con cualquier de las reivindicaciones 1-5, caracterizado porque una pluralidad de resultados de análisis son combinados utilizando una función que convierte la pluralidad de resultados de análisis en un solo resultado combinado.

7. El método de acuerdo con la reivindicación 3 , caracterizado porque el uno o más cambios futuros en estatus renal comprenden un resultado clínico relacionado con una lesión renal sufrida por el sujeto.

8. El método de acuerdo con la reivindicación 3, caracterizado porque la probabilidad de uno o más cambios futuros en estatus renal es que un evento de interés es más o menos probable que se presente en el transcurso de 30 días del tiempo al cual la muestra de fluido corporal es obtenida del sujeto.

9. El método de acuerdo con la reivindicación 8, caracterizado porque la probabilidad de uno o mas cambios futuros en estatus renal es que un evento de interés es mas o menos probable que se presente en un periodo seleccionado del grupo que consiste de 21 días, 14 días, 7 días, 5 días, 96 horas, 72 horas, 48 horas, 24 horas y 12 horas.

10. El método de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-5, caracterizado porque el sujeto es seleccionado para evaluación de estatus renal en base a la preexistencia en el sujeto de uno o mas factores de riesgo conocidos por ARF pre-renal, renal intrínseca o post-renal.

11. El método de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-5, caracterizado porque el sujeto es seleccionado para evaluación de estatus renal en base a una diagnosis existente de uno o mas de insuficiencia cardiaca congestiva, pre eclampsia, eclampsia, diabetes mellithus, hipertensión, enfermedad de arteria coronaria, proteinuria, insuficiencia renal, filtración glomerular por debajo del intervalo normal, cirrosis, creatinina en el suero por encima del intervalo normal, sepsis, lesión a la función renal, función renal reducida o ARF en base a sufrir o haber sufrido cirugía vascular mayor, bypass de arteria coronaria u otra cirugía cardiaca o en base a exposición a NSAID, ciclosporinas , tacrolimus, aminoglicósidos , foscarnet, etilenglicol , hemoglobina, ifosfoamida, metales pesados, metotrexato, agentes de contraste radiopacos o estreptozotocina .

12. El método de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-5, caracterizado porque la etapa de correlación comprende asignar una diagnosis de la presencia o no presencia de uno o mas de una lesión a la función renal, función renal reducida o ARF al sujeto en base al (los) resultado (s) de análisis.

13. El método de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-5, caracterizado porque la etapa de correlación comprende determinar si una función renal esta o no mejorando o empeorando en un sujeto que ha sufrido de una lesión a la función renal, función renal reducida o ARF en base al (los) resultado (s) de análisis.

14. El método de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-5, caracterizado porque el método es un método para diagnosticar la presencia o no presencia de una lesión a la función renal en el sujeto.

15. El método de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-5, caracterizado porque el método es un método para diagnosticar la presencia o no presencia de función renal reducida en dicho sujeto.

16. El método de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-5, caracterizado porque el método es un método para diagnosticar la presencia o no presencia de falla renal aguda en dicho sujeto.

17. El método de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-5, caracterizado porque el método es un método para diagnosticar la presencia o no presencia de necesidad de terapia de reemplazo renal en dicho sujeto.

18. El método de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-5, caracterizado porque el método es un método para diagnosticar la presencia o no presencia de necesidad de trasplante renal en dicho sujeto.

19. El método de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-5, caracterizado porque el método es un método para asignar un riesgo de la presencia o no presencia de una lesión futura a la función renal en dicho sujeto.

20. El método de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-5, caracterizado porque el método es un método para asignar un riesgo de la presencia o no presencia futura de función renal reducida en el sujeto.

21. El método de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-5, caracterizado porque el método es un método para asignar un riesgo de la presencia o no presencia futura de falla renal aguda en dicho sujeto.

22. El método de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-5, caracterizado porque el método es un método para asignar un riesgo de la presencia o no presencia futura de necesidad de terapia de reemplazo renal en dicho suj eto .

23. El método de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-5, caracterizado porque el método es un método para asignar un riesgo de la presencia o no presencia futura de necesidad de trasplante renal en dicho sujeto.

24. El método de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-5, caracterizado porque en uno o mas cambios futuros del estatus renal comprenden uno o mas de una lesión futura a función renal, función renal reducida futura, mejora futura en función renal y falla renal aguda futura (ARF) en el transcurso de 72 horas del tiempo al cual la muestra de fluido corporal es obtenida.

25. El método de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-5, caracterizado porque en uno o mas cambios futuros en estatus renal comprenden uno o mas de una lesión futura a función renal, función renal reducida futura, mejora futura en función renal y falla renal aguda futura (ARF) en el transcurso de 48 horas del tiempo al cual la muestra de fluido corporal es obtenida.

26. El método de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-5, caracterizado porque en uno o mas cambios futuros en estatus renal comprenden uno o mas de una lesión futura a función renal, función renal reducida futura, mejora futura en función renal y falla renal aguda futura (ARF) en el transcurso de 24 horas del tiempo al cual la muestra de fluido corporal es obtenida.

27. El método de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-5, caracterizado porque el sujeto esta en etapa 0 o R de RIFLE.

28. El método de acuerdo con la reivindicación 27, caracterizado porque el sujeto esta en etapa 0 de RIFLE y dicha etapa de correlación comprende asignar una probabilidad de que el sujeto alcanzara la etapa R, I o F de RIFLE en el transcurso de 72 horas.

29. El método de acuerdo con la reivindicación 28, caracterizado porque el sujeto esta en etapa 0 de RIFLE y dicha etapa de correlación comprende asignar una probabilidad de que el sujeto alcanzara la etapa I o F de RIFLE en el transcurso de 72 horas.

30. El método de acuerdo con la reivindicación 28, caracterizado porque el sujeto esta en etapa 0 de RIFLE y dicha etapa de correlación comprende asignar una probabilidad de que el sujeto alcanzara la etapa F de RIFLE en el transcurso de 72 horas.

31. El método de acuerdo con la reivindicación 27, caracterizado porque el sujeto esta en etapa 0 de RIFLE y dicha etapa de correlación comprende asignar una probabilidad de que el sujeto alcanzara la etapa I o F de RIFLE en el transcurso de 72 horas.

32. El método de acuerdo con la reivindicación 31, caracterizado porque el sujeto esta en etapa 0 o R de RIFLE y dicha etapa de correlación comprende asignar una probabilidad de que el sujeto alcanzara la etapa F de RIFLE en el transcurso de 72 horas.

33. El método de acuerdo con la reivindicación 27, caracterizado porque el sujeto esta en etapa R de RIFLE y dicha etapa de correlación comprende asignar una probabilidad de que el sujeto alcanzara la etapa I o F de RIFLE en el transcurso de 72 horas.

34. El método de acuerdo con la reivindicación 33, caracterizado porque el sujeto esta en etapa R de RIFLE y dicha etapa de correlación comprende asignar una probabilidad de que el sujeto alcanzara la etapa F de RIFLE en el transcurso de 72 horas.

35. El método de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-5, caracterizado porque el sujeto esta en etapa 0, R o I de RIFLE y dicha etapa de correlación comprende asignar una probabilidad de que el sujeto alcanzara la etapa F de RIFLE en el transcurso de 72 horas.

36. El método de acuerdo con la reivindicación 35, caracterizado porque el sujeto esta en etapa I de RIFLE y dicha etapa de correlación comprende asignar una probabilidad de que el sujeto alcanzara la etapa F de RIFLE en el transcurso de 72 horas.

37. El método de acuerdo con la reivindicación 28, caracterizado porque la etapa de correlación comprende asignar una probabilidad de que el sujeto alcanzara la etapa R, I o F de RIFLE en el transcurso de 48 horas.

38. El método de acuerdo con la reivindicación 29, caracterizado porque dicha etapa de correlación comprende asignar una probabilidad de que el sujeto alcanzara la etapa I o F de RIFLE en el transcurso de 48 horas.

39. El método de acuerdo con la reivindicación 30, caracterizado porque la etapa de correlación comprende asignar una probabilidad de que el sujeto alcanzara la etapa F de RIFLE en el transcurso de 48 horas.}

40. El método de acuerdo con la reivindicación 31, caracterizado porque la etapa de correlación comprende asignar una probabilidad de que el sujeto alcanzara la etapa I o F de RIFLE en el transcurso de 48 horas.

41. El método de acuerdo con la reivindicación 32, caracterizado porque la etapa de correlación comprende asignar una probabilidad de que el sujeto alcanzara la etapa F de RIFLE en el transcurso de 48 horas.

42. El método de acuerdo con la reivindicación 33, caracterizado porque la etapa de correlación comprende asignar una probabilidad de que el sujeto alcanzara la etapa I o F de RIFLE en el transcurso de 48 horas.

43. El método de acuerdo con la reivindicación 34, caracterizado porque la etapa de correlación comprende asignar una probabilidad de que el sujeto alcanzara la etapa F de RIFLE en el transcurso de 48 horas.

44. El método de acuerdo con la reivindicación 35, caracterizado porque la etapa de correlación comprende asignar una probabilidad de que el sujeto alcanzara la etapa F de RIFLE en el transcurso de 48 horas.

45. El método de acuerdo con la reivindicación 36, caracterizado porque la etapa de correlación comprende asignar una probabilidad de que el sujeto alcanzara la etapa F de RIFLE en el transcurso de 48 horas.

46. El método de acuerdo con la reivindicación 28, caracterizado porque la etapa de correlación comprende asignar una probabilidad de que el sujeto alcanzara la etapa R, I o F de RIFLE en el transcurso de 24 horas.

47. El método de acuerdo con la reivindicación 29, caracterizado porque la etapa de correlación comprende asignar una probabilidad de que el sujeto alcanzara la etapa I o F de RIFLE en el transcurso de 24 horas.

48. El método de acuerdo con la reivindicación 30, caracterizado porque la etapa de correlación comprende asignar una probabilidad de que el sujeto alcanzara la etapa F de RIFLE en el transcurso de 24 horas.

49. El método de acuerdo con la reivindicación 31, caracterizado porque la etapa de correlación comprende asignar una probabilidad de que el sujeto alcanzara la etapa I o F de RIFLE en el transcurso de 24 horas .

50. El método de acuerdo con la reivindicación 32, caracterizado porque la etapa de correlación comprende asignar una probabilidad de que el sujeto alcanzara la etapa F de RIFLE en el transcurso de 24 horas.

51. El método de acuerdo con la reivindicación 33, caracterizado porque la etapa de correlación comprende asignar una probabilidad de que el sujeto alcanzara la etapa I o F de RIFLE en el transcurso de 24 horas.

52. El método de acuerdo con la reivindicación 34, caracterizado porque la etapa de correlación comprende asignar una probabilidad de que el sujeto alcanzara la etapa F de RIFLE en el transcurso de 24 horas.

53. El método de acuerdo con la reivindicación 35, caracterizado porque la etapa de correlación comprende asignar una probabilidad de que el sujeto alcanzara la etapa F de RIFLE en el transcurso de 24 horas.

54. El método de acuerdo con la reivindicación 36, caracterizado porque la etapa de correlación comprende asignar una probabilidad de que el sujeto alcanzara la etapa F de RIFLE en el transcurso de 24 horas.

55. El método de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-5, caracterizado porque el sujeto no esta en falla renal aguda.

56. El método de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-5, caracterizado porque el sujeto no ha experimentado un incremento de 1.5 veces o mayor de creatinina en el suero con respecto a un valor de referencia determinado antes del tiempo al cual la muestra de fluido corporal es obtenida.

57. El método de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-5, caracterizado porque el sujeto tiene una salida de orina de por lo menos 0.5 ml/kg/h en las 6 horas precedentes al tiempo al cual la muestra de fluido corporal es obtenida.

58. El método de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-5, caracterizado porque el sujeto no ha experimentado un incremento de 0.3 mg/dl o mayor de creatinina en el suero con respecto a un valor de referencia determinado antes del tiempo al cual la muestra de fluido corporal es obtenida.

59. El método de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-5, caracterizado porque el sujeto (i) no ha experimentado un incremento de 1.5 veces o mayor de creatinina en el suero con respecto a un valor de referencia determinado antes del tiempo al cual la muestra de fluido corporal es obtenida, (ii) tiene una salida de orina de por lo menos 0.5 ml/kg/h en las 6 horas precedentes al tiempo al cual la muestra de fluido corporal es obtenida y (iii) no ha experimentado un incremento de 0.3 mg/dl o mayor de creatinina en el suero con respecto a un valor de referencia determinado antes del tiempo al cual la muestra de fluido corporal es obtenida.

60. El método de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-5, caracterizado porque el sujeto no ha experimentado un incremento de 1.5 veces o mayor de creatinina en el suero con respecto a un valor de referencia determinado antes del tiempo al cual la muestra de fluido corporal es obtenida.

61. El método de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-5, caracterizado porque el sujeto tiene una salida de orina de por lo menos 0.5 ml/kg/h en las 6 horas precedentes al tiempo al cual la muestra de fluido corporal es obtenida.

62. El método de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-5, caracterizado porque el sujeto (i) no ha experimentado un incremento de 1.5 veces o mayor de creatinina en el suero con respecto a un valor de referencia determinado antes del tiempo al cual la muestra de fluido corporal es obtenida, (ii) tiene una salida de orina de por lo menos 0.5 ml/Kg/h durante las 12 horas precedentes al tiempo al cual la muestra de fluido corporal es obtenida y (iii) no ha experimentado un incremento de 0.3 mg/dl o mayor de creatinina en el suero con respecto a un valor de referencia determinado antes del tiempo al cual la muestra de fluido corporal es obtenida.

63. El método de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-5, caracterizado porque la etapa de correlación comprende asignar uno o más de: una probabilidad de que en el transcurso de 72 horas el sujeto (i) experimentara un incremento de 1.5 veces o mayor de creatinina en el suero, (ii) tendrá una salida de orina de menos de 0.5 ml/Kg/h en un período de 6 horas o (iii) experimentara un incremento de 0.3 mg/di o mayor de creatinina en el suero.

64. El método de acuerdo con la reivindicación 63, caracterizado porque la etapa de correlación comprende asignar uno o más de: una probabilidad de que dentro de 48 horas el sujeto (i) experimentara un incremento de 1.5 veces o mayor de creatinina en el suero, (ii) tendrá una salida de orina de menos de 0.5 ml/Kg/h en un período de 6 horas o (iii) experimentara un incremento de 0.3 mg/dl o mayor de creatinina en el suero.

65. El método de acuerdo con la reivindicación 63, caracterizado porque la etapa de correlación comprende asignar uno o más de: una probabilidad de que dentro de 24 horas el sujeto (i) experimentara un incremento de 1.5 veces o mayor de creatinina en el suero, (ii) tendrá una salida de orina de menos de 0.5 ml/Kg/h en un período de 6 horas o (iii) experimentara un incremento de 0.3 mg/dl o mayor de creatinina en el suero.

66. El método de acuerdo con la reivindicación 63, caracterizado porque la etapa de correlación comprende asignar una probabilidad de que dentro de 72 horas el sujeto experimentara un incremento de 1.5 veces o mayor de creatinina en el suero.

67. El método de acuerdo con la reivindicación 63, caracterizado porque la etapa de correlación comprende asignar una probabilidad de que dentro de 72 horas el sujeto tendrá una salida de orina de menos de 0.5 ml/Kg/h en un período de 6 horas .

68. El método de acuerdo con la reivindicación 63, caracterizado porque la etapa de correlación comprende asignar una probabilidad de que dentro de 72 horas el sujeto experimentara un incremento de 0.3 mg/dl o mayor de creatinina en el suero.

69. El método de acuerdo con la reivindicación 63, caracterizado porque la etapa de correlación comprende asignar una probabilidad de que dentro de 48 horas el sujeto experimentara un incremento de 1.5 veces o mayor de creatinina en el suero.

70. El método de acuerdo con la reivindicación 63, caracterizado porque la etapa de correlación comprende asignar una probabilidad de que dentro de 48 horas el sujeto tendrá una salida de orina de menos de 0.5 ml/Kg/h en un período de 6 horas .

71. El método de acuerdo con la reivindicación 63, caracterizado porque la etapa de correlación comprende asignar una probabilidad de que dentro de 48 horas el sujeto experimentara un incremento de 0.3 mg/dl o mayor de creatinina en el suero.

72. El método de acuerdo con la reivindicación 63, caracterizado porque la etapa de correlación comprende asignar una probabilidad de que dentro de 24 horas el sujeto experimentara un incremento de 1.5 veces o mayor de creatinina en el suero.

73. El método de acuerdo con la reivindicación 63, caracterizado porque la etapa de correlación comprende asignar una probabilidad de que dentro de 24 horas el sujeto tendrá una salida de orina de menos de 0.5 ml/Kg/h en un período de 6 horas .

74. El método de acuerdo con la reivindicación 63, caracterizado porque la etapa de correlación comprende asignar una probabilidad de que dentro de 24 horas el sujeto experimentara un incremento de 0.3 mg/dl o mayor de creatinina en el suero.

75. El método de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-5, caracterizado porque el sujeto no ha experimentado un incremento de dos veces o mayor de creatinina en el suero con respecto a un valor de referencia determinado antes del tiempo al cual la muestra de fluido corporal es obtenida.

76. El método de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-5, caracterizado porque el sujeto tiene una salida de orina de por lo menos 0.5 ml/Kg/h en las 12 horas precedentes al tiempo al cual la muestra de fluido corporal es obtenida.

77. El método de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-5, caracterizado porque el sujeto (i) no ha experimentado un incremento de dos veces o mayor de creatinina en el suero con respecto a un valor de referencia determinado antes del tiempo al cual la muestra de fluido corporal es obtenida, (ii) tiene una salida de orina de por lo menos 0.5 ml/Kg/h durante las 2 horas precedentes al tiempo al cual la muestra de fluido corporal es obtenida y (iii) no ha experimentado un incremento de 0.3 mg/dl o mayor de creatinina en el suero con respecto a un valor de referencia determinado antes del tiempo al cual la muestra de fluido corporal es obtenida.

78. El método de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-5, caracterizado porque el sujeto no ha experimentado un incremento de 3 veces o mayor de creatinina en el suero con respecto a un valor de referencia determinado antes del tiempo al cual la muestra de fluido corporal es obtenida .

79. El método de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-5, caracterizado porque el sujeto tiene una salida de orina de por lo menos 0.3 ml/Kg/h durante las 24 horas precedentes al tiempo al cual la muestra de fluido corporal es obtenida o anuria durante las 12 horas precedentes al tiempo al cual la muestra de fluido corporal es obtenida.

80. El método de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-5, caracterizado porque el sujeto (i) no ha experimentado un incremento de 3 veces o mayor de creatinina en el suero con respecto a un valor de referencia determinado antes del tiempo al cual la muestra de fluido corporal es obtenida, (ii) tiene una salida de orina de por lo menos 0.3 ml/Kg/h durante las 24 horas precedentes al tiempo al cual la muestra de fluido corporal es obtenida o anuria durante las 12 horas precedentes al tiempo al cual la muestra de fluido corporal es obtenida y (iii) no ha experimentado un incremento de 0.3 mg/dl o mayor de creatinina en el suero con respecto a un valor de referencia determinado antes del tiempo al cual la muestra de fluido corporal es obtenida.

81. El método de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-5, caracterizado porque la etapa de correlación comprende asignar uno o más de: una probabilidad de que dentro de 72 horas el sujeto (i) experimentara un incremento de 2 veces o mayor de creatinina en el suero, (ii) tendrá una salida de orina de menos de 0.5 ml/Kg/h durante el período de 12 horas o (iii) experimentara un incremento de 0.3 mg/dl o mayor de creatinina en el suero.

82. El método de acuerdo con la reivindicación 81, caracterizado porque la etapa de correlación comprende asignar uno o más de: una probabilidad de que dentro de 48 horas el sujeto (i) experimentara un incremento de 2 veces o mayor de creatinina en el suero, (ii) tendrá una salida de orina de menos de 0.5 ml/Kg/h durante un período de 6 horas o (iii) experimentara un incremento de 0.3 mg/dl o mayor de creatinina en el suero.

83. El método de acuerdo con la reivindicación 81, caracterizado porque la etapa de correlación comprende asignar uno o más de: una probabilidad de que dentro de 24 horas el sujeto (i) experimentara un incremento de 2 veces o mayor de creatinina en el suero o (ii) tendrá una salida de orina de menos de 0.5 ml/Kg/h durante un período de 6 horas.

84. El método de acuerdo con la reivindicación 81, caracterizado porque la etapa de correlación comprende asignar una probabilidad de que dentro de 72 horas el sujeto experimentara un incremento de 2 veces o mayor de creatinina en el suero.

85. El método de acuerdo con la reivindicación 81, caracterizado porque la etapa de correlación comprende asignar: una probabilidad de que dentro de 72 horas el sujeto tendrá una salida de orina de menos de 0.5 ml/Kg/h durante el período de 6 horas .

86. El método de acuerdo con la reivindicación 81, caracterizado porque la etapa de correlación comprende asignar una probabilidad de que dentro de 48 horas el sujeto experimentara un incremento de 2 veces o mayor de creatinina en el suero.

87. El método de acuerdo con la reivindicación 81, caracterizado porque la etapa de correlación comprende asignar una probabilidad de que dentro de 48 horas el sujeto tendrá una salida de orina de menos de 0.5 ml/Kg/h durante un período de 6 horas .

88. El método de acuerdo con la reivindicación 81, caracterizado porque la etapa de correlación comprende asignar uno una probabilidad de que dentro de 24 horas el sujeto experimentara un incremento de 2 veces o mayor de creatinina en el suero.

89. El método de acuerdo con la reivindicación 81, caracterizado porque la etapa de correlación comprende asignar una probabilidad de que dentro de 24 horas el sujeto tendrá una salida de orina de menos de 0.5 ml/Kg/h durante el período de 6 horas .

90. El método de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-5, caracterizado porque la etapa de correlación comprende asignar uno o más de: una probabilidad de que dentro de 72 horas el sujeto (i) experimentara un incremento de 3 veces o mayor de creatinina en el suero o (ii) tendrá una salida de orina de menos de 0.3 ml/Kg/h durante el período de 24 horas o anuria en un período de 12 horas .

91. El método de acuerdo la reivindicación 90, caracterizado porque la etapa de correlación comprende asignar uno o más de: una probabilidad de que dentro de 48 horas el sujeto (i) experimentara un incremento de 3 veces o mayor de creatinina en el suero o (ii) tendrá una salida de orina de menos de 0.3 ml/Kg/h durante un período de 24 horas o anuria durante un período de 12 horas.

92. El método de acuerdo la reivindicación 90, caracterizado porque la etapa de correlación comprende asignar uno o más de: una probabilidad de que dentro de 24 horas el sujeto (i) experimentara un incremento de 3 veces o mayor de creatinina en el suero o (ii) tendrá una salida de orina de menos de 0.3 ml/Kg/h durante un período de 24 horas o anuria durante un período de 12 horas .

93. El método de acuerdo la reivindicación 90, caracterizado porque la etapa de correlación comprende asignar una probabilidad de que dentro de 72 horas el sujeto experimentara un incremento de 3 veces o mayor de creatinina en el suero.

94. El método de acuerdo la reivindicación 90, caracterizado porque la etapa de correlación comprende asignar una probabilidad de que dentro de 72 horas el sujeto tendrá una salida de orina de menos de 0.3 ml/Kg/h durante un período de 24 horas o anuria durante un período de 12 horas.

95. El método de acuerdo la reivindicación 90, caracterizado porque la etapa de correlación comprende asignar una probabilidad de que dentro de 48 horas el sujeto experimentara un incremento de 3 veces o mayor de creatinina en el suero.

96. El método de acuerdo la reivindicación 90, caracterizado porque la etapa de correlación comprende asignar una probabilidad de que dentro de 48 horas el sujeto tendrá una salida de orina de menos de 0.3 ml/Kg/h durante un período de 24 horas o anuria durante un período de 12 horas.

97. El método de acuerdo la reivindicación 90, caracterizado porque la etapa de correlación comprende asignar una probabilidad de que dentro de 24 horas el sujeto experimentara un incremento de 3 veces o mayor de creatinina en el suero.

98. El método de acuerdo la reivindicación 90, caracterizado porque la etapa de correlación comprende asignar una probabilidad de que dentro de 24 horas el sujeto tendrá una salida de orina de menos de 0.3 ml/Kg/h durante el período un 24 horas o anuria durante un período de 12 horas .

99. El método de acuerdo cualquiera de las reivindicaciones 1-98, caracterizado porque la muestra de fluido corporal es una muestra de orina.

100. El método de acuerdo cualquiera de las reivindicaciones 1-99, caracterizado porque el método comprende efectuar análisis que detectan uno, dos o tres o más de factor VII de coagulación, CA19-9, proteína 7 de enlace del factor de crecimiento semejante a insulina, quimiosina 6 de porción de C-X-C y quimiosina 13 de porción de C-C.

101. La medición de uno o más biomarcadores caracterizados porque son seleccionados del grupo que consiste de factor VII de coagulación, CA19-9, proteína 7 de enlace del factor de crecimiento semejante a insulina, quimiosina 6 de porción de C-X-C y quimiosina 13 de porción de C-C para la evaluación de lesión renal.

102. La medición de uno o más biomarcadores caracterizados porque son seleccionados del grupo que consiste de factor VII de coagulación, CA19-9, proteína 7 de enlace del factor de crecimiento semejante a insulina, quimiosina S de porción de C-X-C y quimiosina 13 de porción de C-C para la evaluación de renal aguda.

103. Un kit caracterizado porque comprende: Reactivos para efectuar uno o más análisis configurados para detectar uno o más marcadores de lesión de riñon seleccionados del grupo que consiste de factor VII de coagulación, CA19-9, proteína 7 de enlace del factor de crecimiento semejante a insulina, quimiosina 6 de porción de C-X-C y quimiosina 13 de porción de C-C.

104. El kit de acuerdo con la reivindicación 103, caracterizado porque los reactivos comprenden uno o más reactivos de enlace, cada uno de los cuales se enlaza específicamente a uno de los marcadores de lesión del riñon.

105. El kit de acuerdo con la reivindicación 104, caracterizado porque una pluralidad de reactivos de enlace están contenidos en un solo dispositivo de análisis.

106. El kit de acuerdo con la reivindicación 103, caracterizado porque por lo menos de uno de dichos análisis esta configurado como un análisis de enlace de emparedado.

107. El kit de acuerdo con la reivindicación 103, caracterizado porque por lo menos uno de dichos análisis esta configurado como un análisis de enlace competitivo.

108. El kit de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 103-107, caracterizado porque uno o más análisis comprenden análisis que detectan uno, dos o tres o más de factor VII de coagulación, CA19-9, proteína 7 de enlace del factor de crecimiento semejante a insulina, quimiosina 6 de porción de C-X-C y quimiosina 13 de porción de C-C.