SU1429031A1 - Способ дифференциальной диагностики гломерулонефрита и пиелонефрита - Google Patents

Abstract

Изобретение относитс  к медицине ,, касаетс  лабораторной диагностики болезней почек. Цель изобретени  - роввппение точности способа.-Дл  этого порцию ацетонового порошка тест-м1к- роба растирают в ступке с водой, к суспензии добавл ют 1 т реактива рд  приготовлени  полиакриламидноЬо гел  (ПАТ), рН 4,3 (раствор гидроокиси кали  1 н. 48 мл, уксусна  кислота ле- д на  17,2 мл, N,N,N ,N- -TeTpaMeTRn- зтилэтилендиамин 4 мл, вода до 100 мл), 1,5 мл реактива, содержащего акриламид 60 г, N,N -мeтилe Iбиc- акриламид 0,4 г, вода до 100 мл, и добавл ют 4 мл реактива, содержащего персульфат аммони  0,28 г, вода до 100 МП. СГмесь перемешивают и заливают в трубки аппарата дл  электрофореза в ПАГ. После полимеризации на поверхность гелей наслаивают О,15 мл свежевз той отцентрифугированной Мочи, на нее наслаивают злектродньй буфер (рН 4,0, глицин 28,1 г, уксусна  кислота лед на  3,06 мл, вода), верхним электродом служит анод (+), а нижним - g катод (-). Разделение провод т 2,5 ч в холодильнике при силе тока 2 мА на ГЛ трубку. Затем провод т инкубацию в термостате 1 ч при З7 с. Результат оценивают по расположению зоны лизиса тест-микробов, соответствующей положе- нию лизоцима в геле. При расположении полосы лизоцима в области катода диагностируют гломерулонефрит,. а при расположении полосы лизоцима в области анода - пиелонефрит, 2 ил.

Description

Изобретение относитс  к медицине, в частности, к лабораторной диагностике , и может быть использовано дл  диагностики болезней почек. с Целью изобретени   вл етс  повьппе- ние точности способа.

На фиг. 1 и 2 схематически показано расположение мочи больных соответственно гломерулонефритом и пиелонефри-Ю- том после электрофореза в,полиаксил- амидном геле.

Способ осуществл ют следующим образом .

10 мг ацетонового порошка тест-мик15 роба растирают в ступке с 1 мл воды, к суспензии добавл ют 1 мл реактива , 1,5 мл реактива и 4 мл реактива Ь, Смесь перемешивают и заливают в трубки аппарата дл  электрофореза в 20 полиакриламидном геле (ПАГ). После полимеризации на поверхность гелей наслаивают 0,15 мл свежевыпущенной отцен- трифугированной моче, на нее до кра  трубок наслаивают электродный буфер и25 трубки помещают в аппарат. В сосуды аппарата заливают электродный буфер, верхним электродом служит анод (Ч-), а Н1СКНИМ катод (). Разделение провод т в течение 2,5 ч в холодильнике при JQ силе тока 2 мА на трубку. После окончани  электрофореза гели, не вынима  из трубок, помещают в сухие пробирки и-инкубируют в термостате 1 ч при , после чего оценивают результат по расположению зоны лизиса тест-микробов , соответствующей положению лизо- хщма в геле. При расположении полосы лизоцима в области катода диагностируют гломерулонефрит, а при располо- . жении полосы лизоидима в области анода - пиелонефрит.

Используют следунлцие реактивы.

1. Реактивы дл  приготовлени  ПАГ, рН 4,3: .45

а. Раствор 1 н. гидроксида кали  48 мл; уксусна  кислота лед на  17,2 МЛ} N,N,N ,N -тетраметилэтилен- диамин 4 МП} вода до 100 мл.

35

-

5 0 5 Q .

5

5

5. Акриламил 60 г; N,N -метилен- бисакриламид 0,4 г; вода до 100 ют.

6г Персульфат аммони  0,28 г; вода до 100 мл.

2.Электродньй буфер, рН 4,0: глицин 28,1 г, уксусна  кислота лед на  3,06 мл; вода до 1000 мл.

3.Ацетоновый порошок тест-микроба. Перед использованием все реактивы

развод т в 10 раз.

Пример 1. Расположение лизоцима мочи больных гломерулонефритом после 2,5 ч электрофорез в 12%-ном полиакриламидном геле при рН гел  4,3 и рН электродного буфера 4,0. Зона лизиса тест-микробов, соответствующа  положению лизоцима в геле, указана стрелкой (фиг. 1).

Пример 2. Расположение лизоцима мочи больных пиелонефритом после 2,5 ч электрофореза в 12%-ном полиакриламидном геле при рН гел  4,3 и рН электродного буфера 4,0. Зона лизиса тест-микробов, соответствующа  положению лизоцима в геле, указана стрелкой (фиг. 2).

Использование предлагаемого способа позвол ет повысить точность диагностики с 60-70 (известньй способ) до 97%.,

Claims (1)

1. Формула изобретени 

   Способ дифференциальной диагностики гломерулонефрита и пиелонефрита путем электрофоретического исследовани  , лизоцима мочи, отличающий- с   тем, что, с целью повышени  точности способа, электрофорез провод т в полиакриламидном геле при значени х рН гел  и электродного буфера менее 7,0 и при расположении полрсы лизоцима в области катода диагностируют гломерулонефрит, а при расположении полосы лизоцима в области анода - пиелонефрит.

   7lt«.f

   Pwt.2