MX2009000951A

MX2009000951A - Microparticulas de liberacion modificada en base a copolimero anfifilico y a principio(s) activo(s) y formulaciones farmaceuticas que las comprenden.

Info

Publication number: MX2009000951A
Application number: MX2009000951A
Authority: MX
Inventors: Alain Constancis; You-Ping Chan
Original assignee: Flamel Tech Sa
Priority date: 2006-07-28
Filing date: 2007-07-30
Publication date: 2009-02-04
Also published as: IL196426A; KR101407033B1; CA2661567A1; CN101568328A; CA2661567C; WO2008025425A1; AU2007291577A1; WO2008025425B1; FR2904219A1; WO2008025425A8; WO2008025425A9; ZA200900929B; EP2049085A1; CN101568328B; KR20090054976A; BRPI0714943A2; FR2904219B1; JP5302197B2; JP2009544759A; IL196426A0

Abstract

La presente invención se refiere a micropartículas novedosas, formadas de ácidos poliamino anfifílicos que transportan principio(s) activo(s), AP(s), en particular, principio(s) activo(s) de proteína y péptido, y a novedosas formulaciones farmacéuticas de liberación modificada que comprenden dichas micropartículas del AP. El propósito de la invención es desarrollar micropartículas novedosas, cargadas con el AP, obtenidas mediante adición de nanopartículas de ácidos poliamino anfifílicos y que tienen propiedades mejoradas, en particular en la forma sólida seca, con respecto a su capacidad de dispersarse y, con respecto a la suspensión reconstituida, su estabilidad y su capacidad para manejarse e inyectarse fácilmente. La invención se refiere, en primer lugar, a micropartículas de ácido poliamino anfifílico (PO) que comprenden al menos un AP (asociado de manera no covalente), que forman de manera espontánea una suspensión coloidal de nanopartículas en agua a pH 7.0, bajo condiciones isotónicas, cuyas micropartículas a. se obtienen por atomización de una solución o suspensión coloidal de PO que comprende al menos un AP, b. tienen un tamaño de entre 0.5 y 100 micras, c. y son dispersables en suspensión coloidal. La invención también se refiere al proceso para la preparación de estas micropartículas, a una formulación líquida que comprende una suspensión de estas micropartículas de PO/AP, a un proceso de reconstitución y equipo para esta formulación y a una forma seca de esta formulación.

Description

MICROPARTÍCULAS DE LIBERACIÓN MODIFICADA EN BASE A COPOLÍMERO ANFIFILICO Y A PRINCIPIO(S) ACTIVO(S) Y FORMULACIONES FARMACÉUTICAS QUE LAS COMPRENDEN Campo de la Invención La presente invención se refiere a transportadores novedosos de principio(s) activo(s) (APs), en particular, principio(s) activo(s) péptidos y de proteína, y a formulaciones farmacéuticas novedosas de liberación modificada, que comprenden dichos transportadores de AP. Existen muchas aplicaciones terapéuticas (humanas y veterinarias) de estas formulaciones. La referencia AP usada a través de todo el presente conteo se dirige por lo menos a un principio activo . El término "liberación modificada" denota una liberación prolongada y/o retrasada y/o pulsátil. Más específicamente, los transportadores de AP novedosos a los que se dirige la invención, son micropartículas formadas de polímeros anfifílicos, por ej emplo, ácidos poliamino modificados por grupos hidrofóbicos. Estas micropartículas comprenden al menos un AP asociado con el polímero y pueden proporcionarse en la forma de suspensiones coloidales o en la forma seca.

Contexto de la Invención En el campo de la liberación prolongada de APs , en particular de péptidos/proteínas terapéuticos, el propósito es con frecuencia reproducir tanto como sea posible en el paciente una concentración en plasma de péptido o proteína cercana al valor observado en el suj eto saludable. Este objetivo se dificulta por el bajo promedio de vida de las proteínas en el plasma, lo cual da como resultado que la proteína terapéutica se inyecte repetidamente. La concentración en plasma de la proteína terapéutica exhibe entonces un perfil de "dientes de sierra" caracterizado por picos de concentración elevada y mínimas de concentración muy baj a. Los picos de concentración, que son mucho mayores que la concentración basal en el suj eto saludable, tienen efectos dañinos muy marcados debido a la elevada toxicidad de las proteínas terapéuticas, tal como interleukin IL-2. Además, las mínimas de concentración se encuentran por debajo de la concentración necesaria para tener un efecto terapéutico, lo cual da como resultado una escasa cobertura terapéutica del paciente y serios efectos secundarios a largo plazo. En consecuencia, con obj eto de reproducir en el paciente una concentración en plasma de proteína terapéutica, cercana al valor ideal para el tratamiento del paciente, es importante que la formulación farmacéutica en consideración haga posible liberar la proteína terapéutica durante un periodo de tiempo prolongado, a fin de limitar las variaciones en concentración en plasma con el tiempo. Además, esta formulación activa debe satisfacer preferentemente las siguientes especificaciones, ya conocidas por una persona experta en la materia: 1 . liberación prolongada de una proteína terapéutica activa y no desnaturalizada, por ej emplo, una proteína humana o sintética, a fin de que la concentración en plasma se mantenga al nivel terapéutico; 2. viscosidad suficientemente baj a en la inyección para que sea fácilmente inyectable; 3. forma biocompatible y biodegradable; 4. forma que no exhiba toxicidad o inmunogenicidad; 5. forma que tenga excelente tolerancia local. Al intentar lograr estos obj etivos, uno de los mejores enfoques proporcionados en la técnica anterior, fue desarrollar formas de liberación prolongada de proteína(s) terapéutica(s) compuestas de suspensiones líquidas de baj a viscosidad de nanopartículas cargadas con proteínas terapéuticas. Estas suspensiones han hecho posible la fácil administración de proteínas terapéuticas sin tratar. Por lo tanto, la proteína terapéutica se ha asociado con nanopartículas de un ácido copoliamino que comprende grupos hidrofóbicos y grupos hidrofílicos. La Patente US-B-5 ,904,936 expone partículas de tamaño de sub-micra (NPV), con un tamaño promedio de entre 0.01 y 0.5 µp?, y partículas de tamaño en mieras (MPV), con un tamaño promedio de entre 0.5 y 20 µp?, de copolímero anfifílico de ácidos poliamino que comprenden al menos dos tipos de amino ácidos, siendo uno neutral e hidrofóbico y el otro ionizable. Las proteínas, tales como insulina, se adsorben espontáneamente en solución acuosa en estas partículas. El copolímero de ácido poliamino es, por ejemplo, un copolímero de bloque poli(L-leucina-b-(glutamato L de sodio)). Esta patente expone la adición de NPV para dar MPV por adición a una suspensión coloidal de poli-Leu/Glu de sales monocatiónicas (sulfato de amoniaco), sales policatiónicas (Fe2+, Fe3+, Zn2+, Ca2+, Al2+, Al3+ ó Cu2+), de ácido (HC1) o de polímeros catiónicos (polilisina). La Solicitud de Patente WO-A-03/ 104303 expone ácidos poliamino anfifílicos que comprenden residuos aspárticos y/o residuos glutámicos, conteniendo al menos una porción de estos residuos inj ertos que comprenden al menos una unidad de alfa-tocoferol, por ej emplo, (poliglutamato o poliaspartato inj ertado por alfa tocoferol de origen sintético o natural) . Estos ácidos homopoliamino "hidrofóbicamente modificados" forman espontáneamente, en agua, una suspensión coloidal de nanopartículas que son capaces de asociarse fácilmente en suspensión acuosa a pH. 7.4 con al menos una proteína activa (insulina). La duración de la liberación in vivo de la(s) proteína(s) activa(s) (por ejemplo, insulina) "vectorizada" por las suspensiones de acuerdo con la US-B-5,904,936 y WO-A-2003/ 104303 , podría hacerse al ser incrementada. El incremento en la duración de la liberación se obtuvo parcialmente por las formas farmacéuticas expuestas en la solicitud de PCT WO-A-05/05141 6. Esta solicitud expone una suspensión coloidal de nanopartículas (0.001 -0.5 µ??) de poli(glutamato-L de sodio) hidrofóbicamente modificado, que se inyecta a una concentración tal que, después de la inyección subcutánea, se forma un gel in situ en el paciente, al contacto con la albúmina endógena. La proteína se libera entonces lentamente durante un periodo típico de una semana. Sin embargo, cuando la concentración de la proteína terapéutica por administrarse es demasiado elevada, como es el caso, por ejemplo, para la hormona de crecimiento humana, la duración de la liberación se limita a solo unos cuantos días.

Obj etivos de la Invención Es posible mejorar esta técnica anterior al proporcionar una formulación farmacéutica para la liberación prolongada del AP: • lo cual hace posible, después de la inyección por la ruta parenteral (por ejemplo, de manera subcutánea), obtener una duración prolongada de liberación in vivo para APs (por ejemplo, proteínas terapéuticas, péptidos terapéuticos y moléculas pequeñas) que no se desnaturalizan y se encuentran altamente concentrados, por ejemplo, a varios mg/ml, • y que es estable en almacenamiento, tanto físico-química como biológicamente. Para hacer esto, es recomendable agregar en conjunto las nanopartículas de la formulación de acuerdo con la WO 05/051416 para dar las micropartículas, por medio de iones polivalentes de polaridad opuesta a la de los grupos ionizables (IG) del ácido poliamino anfifílico, presentándose dichos iones en proporciones bien definidas. Esto da como resultado una selección de una población específica de micro-partículas, que hace posible una extensión significativa en la duración de la liberación del AP (por ejemplo, proteína o péptido) con el cual se combinan. Algunos iones polivalentes, tales como Mg , Ca , Zn , Fe , Cu o sus mezclas y/o Al 3 + , Fe 3 ¦+¦ o sus mezclas, otorgan excelente tolerancia a tal formulación farmacéutica líquida durante la liberación prolongada del AP. La formulación puede comprender, por ejemplo, una suspensión coloidal acuosa de baja viscosidad en base a partículas de tamaño en mieras de poliglutamato injertado por alfa-tocoferol de origen sintético, con un tamaño de entre 0.5 y 100 mieras, que comprende iones polivalentes Mg2+, Ca , Zn , Fe , Cu , Al ó Fe , con un producto r que tiene la fórmula [Mi] r = n x — 4 [IG] en donde ¦ n es la valencia de dichos iones polivalentes, ¦ [MI] es la concentración molar de iones polivalentes, ¦ [IG] es la concentración molar de grupos ionizables IG, encontrándose r entre 0.3 y 10. Estas partículas seleccionadas de tamaño en mieras resultan de la adición de un gran número de nanopartículas de copolímero anfifílico. Una suspensión de micropartículas cargadas con AP (por ejemplo, hGH) puede elaborarse así mediante floculación con iones polivalentes Mg2+, Ca2+, Zn2+, Fe2+, Cu2+, Al3+ ó Fe3+, seguida esta floculación por maduración y enjuague. La suspensión puede liofilizarse posteriormente o atomizarse y después reconstituirse con agua para producir una formulación lista para inyección. Es claro que estas formas en polvo seco de micropartículas son una ventaja a priori con respecto al almacenamiento. Específicamente, deben hacer posible incrementar la estabilidad física de estas micropartículas y la estabilidad del AP. Sin embargo, en el contexto de uso de estos polvos en micropartículas para aplicaciones terapéuticas mediante la ruta parenteral, la dificultad consiste en ser capaz de dispersar fácilmente (o suspender) estos polvos al momento de usarse con objeto de obtener una forma de micropartícula líquida reconstituida, más específicamente una suspensión, que sea estable, por ej emplo, al menos durante unos cuantos minutos, incluso durante al menos unas cuantas decenas de minutos, a temperatura ambiente. Esta estabilidad se desea, en particular, con obj eto de hacer posible el fácil manej o de esta suspensión reconstituida. También es importante que esta suspensión reconstituida sea capaz de inyectarse fácilmente al pasar a través de una aguja hueca en combinación con una jeringa o con una pluma de inyección (tipo pluma de insulina). Finalmente, es recomendable tomar en cuenta el hecho de que las operaciones de dispersión, manejo e inyección de la suspensión reconstituida se intentan llevar a cabo por pacientes o personal médico. En este contexto, uno de los obj etivos esenciales de la invención sería proporcionar micropartículas novedosas, obtenidas por adición de nanopartículas de polímero anfifílico soluble en agua y biodegradable, por ej emplo, del tipo de aquellos de acuerdo con la formulación expuesta en WO-A-05/05 1416, cargándose estas micropartículas con el AP y siendo capaces de exhibir propiedades mejoradas, en particular, en la forma sólida seca, especialmente con respecto a su habilidad para dispersarse ("capacidad de dispersión") y, con respecto a la suspensión reconstituida, su estabilidad y su habilidad para manej arse e inyectarse fácilmente. Otro objeto de la invención es proporcionar micropartículas novedosas, obtenidas mediante adición de nanopartículas de polímero anfifílico soluble en agua y biodegradable, cargándose dichas micropartículas con el AP y teniendo buenas propiedades de dispersión, ya sea en la fase acuosa o en la fase orgánica y mientras se retenga la integridad de dichas micropartículas. Otro obj eto de la invención es proporcionar micropartículas novedosas, obtenidas mediante adición de nanopartículas de polímero anfifílico soluble en agua y biodegradable, cargándose dichas micropartículas con el AP y teniendo excelentes propiedades de estabilidad en la forma sólida y seca. Otro obj eto de la invención es proporcionar un proceso novedoso para la preparación de micropartículas en la forma sólida y seca, estas partículas además: ? obteniéndose mediante adición de nanopartículas de polímero anfifílico soluble en agua y biodegradable, por ejemplo, del tipo de aquellos de acuerdo con la formulación expuesta en WO-A-05/051416; ? cargándose con el AP; — ? y según se define en los obj etos anteriores. Otro objeto de la invención es proporcionar un proceso para la preparación de micropartículas en la forma sólida y seca del tipo de lo que se persigue en el obj eto anterior y que sea, además, simple, económico e industrial . Otro obj eto de la invención es proporcionar una formulación farmacéutica que comprenda micropartículas novedosas, obtenidas mediante adición de nanopartículas de polímero anfifílico soluble en agua y biodegradable, por ej emplo, del tipo de aquellos de acuerdo con la formulación expuesta en la WO-A-03/ 104303 , estas partículas además : ? cargándose con el AP ? y según se define en los obj etos anteriores. Otro obj eto de la invención es proporcionar una formulación farmacéutica para la liberación prolongada del AP, que supere las deficiencias de la técnica anterior y, en particular, que haga posible, después de inyección por la ruta parenteral (por ejemplo, de manera subcutánea), obtener una duración prolongada de liberación in vivo para APs no desnaturalizados (por ej emplo, proteínas, péptidos terapéuticos o moléculas pequeñas). Otro obj eto de la invención es proporcionar una formulación farmacéutica que haga posible, después de la inyección por la ruta parenteral (por ej emplo, de manera subcutánea), obtener una duración prolongada de liberación in vivo para proteínas o péptidos terapéuticos, altamente concentrados, por ejemplo, a varios mg/ml . Otro obj eto de la invención es proporcionar una formulación farmacéutica para liberación prolongada del AP in vivo, que sea estable en almacenamiento, tanto físico-química como biológicamente. Otro obj eto de la invención es proporcionar una formulación farmacéutica para liberación prolongada del AP in vivo, que exhiba al menos una de las siguientes propiedades : biocompatibilidad, capacidad de biodegradación, no toxicidad y buena tolerancia local. Otro obj eto de la invención es proporcionar una formulación farmacéutica para la lenta liberación prolongada de un AP in vivo, que comprende micropartículas de polímero anfifílico PO que se auto-asocian con al menos un AP (micropartículas PO/AP), siendo el PO de polímero un polímero biodegradable, soluble en agua, que contiene grupos hidrofóbicos (HG) y grupos hidrofílicos [preferentemente grupos ionizables (IG) al menos parcialmente ionizados] , que forman espontáneamente en agua una suspensión de nanopartículas coloidales, siendo este PO de polímero, por ej emplo, un ácido poliamino en el cual la cadena principal se forma por residuos aspárticos o residuos glutámicos, modificándose al menos una porción de estas unidades mediante inj erto de al menos un grupo hidrofóbico HG en la cadena y/o en el extremo de la cadena. Otro obj eto de la invención es proporcionar un equipo para reconstituir la formulación según se define en los obj etos arriba establecidos, siendo el equipo, por ejemplo, simple de usar a fin de que pueda emplearse fácilmente por el paciente o por el personal médico. Otro obj eto de la invención es proporcionar un proceso para reconstituir la formulación según se define en los objetos arriba establecidos, siendo este proceso, por ejemplo, simple de llevar a cabo, en particular para el paciente o el personal médico. Otro obj eto de la invención es proporcionar una formulación farmacéutica sólida para la liberación prolongada del AP, en particular, una forma de polvo seco para inhalación y administración pulmonar: • en base a micropartículas de PO asociadas con al menos un AP, según se define en los obj etos arriba establecidos; • u obtenerse a partir de la formulación según se define en los obj etos arriba establecidos.

Breve Descripción de la Invención Con obj eto de lograr estos objetos, entre otros, los inventores han tenido el crédito de descubrir, después de una larga y laboriosa investigación, que, en una manera completamente sorprendente e inesperada, la atomización de las formulaciones en base a PO anfifílico (por ej emplo, sobre ácidos copoliamino) y sobre resultados del AP en micropartículas secas de PO/AP que son muy estables, permite la reconstitución de suspensiones acuosas de micropartículas en un medio líquido y que tienen un tamaño entre 0.5 y 1 00 mieras. Además, los inventores han tenido el crédito de desarrollar medios para reconstituir una suspensión a partir de estas micropartículas, haciendo posible, dichos medios, optimizar su dispersión tanto en una fase líquida acuosa como en una fase líquida orgánica. Esto se debe a que una fácil dispersión estable de buena calidad es una pre-condición para el uso de estas suspensiones, reconstituidas a partir de micropartículas secas de PO/AP, como formulaciones inyectables. La atomización es una técnica industrial conocida por producir partículas secas a partir de solución o suspensión del material constituyente de dichas partículas. La atomización (o secado por aspersión) consiste en evaporar muy rápidamente, en una corriente de aire caliente o de gas inerte caliente, gotas nebulizadas de esta solución o suspensión. En este campo farmacéutico, la atomización puede ser problemática ya que impone una deformación térmica que puede probar ser absolutamente inaceptable para ciertos APs sensibles al calor, tal como los APs en base a proteínas u otros compuestos péptidos. El recurrir a la atomización para producir partículas secas en base a excipientes y al AP, por consiguiente, no es obvio, excepto al seleccionar excipientes capaces de prevenir, incluso de reducir, la desnaturalización de los APs péptidos. Por lo tanto, la solicitud US-A-2005/01 58392 expone la preparación mediante atomización de micropartículas lipofílicas sólidas, cargadas con AP péptido. Esta atomización consiste ya sea en atomizar un solución acuosa que comprende ácido hialurónico, AP y un agente activo en la superficie lipofílica (por ej emplo, lecitina), incluso otro surfactante del tipo Tween® 80 o, en una primer etapa, en atomizar una solución acuosa que comprende ácido hialurónico, AP y opcionalmente un surfactante del tipo Tween® 80, con obj eto de obtener partículas primarias y, en una segunda etapa, en atomizar una solución alcohólica de agente activo en la superficie lipofílica (por ej emplo, lecitina) en el cual se dispersan las partículas primarias. El acento en esta solicitud de EU se coloca en la combinación protectora de ácido hialurónico y agente activo en la superficie lipofílica (por ej emplo, lecitina), proponiéndose el último para formar una película de cubierta para las micropartículas en base a ácido hialurónico y al AP. Este documento no menciona ni hace referencia al uso de Pos anfifílicos e incluso menos de ácidos copoliamino anfifílicos como excipientes o transportadores de AP en conjunto que forman las micropartículas. Otro ej emplo de atomización es el descrito en el documento de Maa et al , J. Pharm. Sci., 87(2), 152- 159, 1988. De acuerdo con este documento, el AP (hormona de crecimiento humana) se acompleja por cinc en presencia de surfactantes biodegradables antes de atomizarse para dar micropartículas. Por lo tanto, es aparente que la atomización de proteínas es una operación difícil que requiere del uso de formulaciones complej as que comprenden numerosos excipientes presentes para proteger al AP durante el proceso y garantizar su estabilidad en almacenamiento, lo cual es particularmente crucial para ciertas moléculas sensibles, tal como hormona de crecimiento humana (hGH). Además, el crédito para los inventores es tan grande como lo muestra la técnica anterior nada con respecto al difícil problema de la dispersión y de la estabilización en un líquido de micropartículas secas (en particular con respecto a micropartículas de PO anfifílico) diseñadas para la liberación prolongada del AP . Como resultado de esto, la invención se refiere, en un primer aspecto, a micropartículas de polímero (PO) que comprenden al menos un principio activo (AP), el PO de polímero • siendo un (co)polímero anfifílico biodegradable, soluble en agua, que contiene grupos hidrofóbicos (HG) y grupos hidrofílicos, • que forma espontáneamente una suspensión coloidal de nanopartículas en agua, a pH 7.0, bajo condiciones isotónicas, • y asociándose de manera no covalente con el AP; cuyas micropartículas a. se obtienen mediante atomización de una solución o suspensión coloidal de PO que comprende al menos un AP, b. tienen un tamaño, medido en una prueba T, de entre 0.5 y 100 mieras, preferentemente entre 1 y 70 mieras, preferentemente entre 2 y 40 mieras, c. y son dispersables en suspensión coloidal en una prueba de "capacidad de dispersión" DP I . En un segundo aspecto, la invención se refiere a un proceso para la preparación de micropartículas de PO que se asocian con al menos un principio activo (AP), siendo estas micropartículas de PO/AP, en particular aquellas arriba definidas de acuerdo con el primer aspecto de la invención, i. el PO de polímero • que es un (co)polímero anfifílico biodegradable, soluble en agua, que contiene grupos hidrofóbicos (HG) y grupos hidrofílicos [preferentemente grupos ionizables (IG) al menos parcialmente ionizados] , • formar espontáneamente una suspensión coloidal de nanopartículas en agua, a pH 7.0, bajo condiciones isotónicas. • y asociándose de manera no covalente con el AP ; ii. teniendo dichas micropartículas un tamaño, medido en una prueba T, de entre 0.5 y 1 00 mieras, preferentemente entre 1 y 70 mieras, preferentemente entre 2 y 40 mieras, que comprende esencialmente atomizar una solución o una suspensión coloidal de PO que contiene AP . De acuerdo con una variante interesante, las micropartículas obtenidas por atomización se re-dispersan en un medio líquido esencialmente acuoso (que comprende preferentemente iones multivalentes como medios de dispersión), después se liofiliza la dispersión obtenida. En un tercer aspecto, la invención se refiere a una formulación farmacéutica líquida para la liberación prolongada del AP, el cual comprende una suspensión coloidal, de "baja" viscosidad, en base a micropartículas de PO que contienen al menos un AP, siendo estas micropartículas aquellas arriba definidas de acuerdo con el primer aspecto de la invención o aquellas obtenidas por el proceso arriba definido de acuerdo con el segundo aspecto de la invención. En un cuarto aspecto, la invención se refiere a un equipo de reconstitución, en particular para reconstituir la formulación según se define arriba de acuerdo con un tercer aspecto de la invención, que comprende: • micropartículas de PO que comprende al menos un AP, siendo estas micropartículas aquellas arriba definidas de acuerdo con el primer aspecto de la invención o aquellas obtenidas por el proceso arriba definido de acuerdo con el segundo aspecto de la invención; • y un líquido de reconstitución, seleccionado a partir del grupo que comprende: ? líquidos esencialmente acuosos; ? líquidos esencialmente orgánicos y miscibles en agua; ? y líquidos esencialmente orgánicos e inmiscibles en agua. En un quinto aspecto, la invención se refiere a un proceso de reconstitución, en particular para reconstituir la formulación según se define arriba de acuerdo con un tercer aspecto de la invención, que comprende esencialmente: • mezclar => micropartículas de PO que comprenden al menos un AP, siendo estas micropartículas aquellas arriba definidas de acuerdo con un primer aspecto de la invención o aquellas obtenidas por el proceso arriba definido de acuerdo con el segundo aspecto de la invención; => y un líquido de reconstitución seleccionado a partir del grupo que comprende: ? líquidos esencialmente acuosos; ? líquidos esencialmente orgánicos y miscibles en agua; ? y líquidos esencialmente orgánicos e inmiscibles en agua • y agitar esta mezcla. En un sexto aspecto, la invención se refiere a una formulación farmacéutica sólida para la liberación prolongada del AP, que comprende una forma de polvo en seco para inhalación y administración pulmonar: • en base a micropartículas de PO que comprenden al menos un AP, siendo estas micropartículas aquellas arriba definidas de acuerdo con el primer aspecto de la invención o aquellas obtenidas mediante el proceso arriba definido de acuerdo con el segundo aspecto de la invención; • u obtenerse de la formulación según se define arriba de acuerdo con un tercer aspecto de la invención. Ventajas Sin desear relacionarse con una teoría, puede creerse que los grupos hidrofóbicos de los polímeros PO, que pueden ensamblarse en conjunto para dar dominios hidrofóbicos, desempeñan un importante papel en el proceso de la liberación modificada del AP, tal como en la estabilización del último. Puede tenerse la hipótesis de que las interacciones físicas (no covalentes) ocurren entre los dominios hidrofóbicos del polímero anfifílico PO y el AP, en particular proteínico . Esta fuerte afinidad de la proteína hacia el polímero da como resultado en su prolongada liberación después de la administración subcutánea. Este mecanismo de liberación difiere en particular de, y puede combinarse opcionalmente con, lo observado para las micropartículas de ácido poliláctico, de ácido poliláctico-glicólico o también con aquellos de hialuronato de sodio en el cual la liberación del AP se relaciona esencialmente con la difusión del principio activo y la descomposición/erosión de la partícula. La afinidad de la proteína hacia el polímero PO hace posible limitar el fenómeno de adición de las proteínas y otros eventos de daño que pueden ocurrir durante el proceso de automatización, sin necesidad de hacer uso de otros agentes de estabilización (por ejemplo, azúcares, surfactantes y lo similar). Este efecto protector del PO también hace posible obtener fácilmente formulaciones líquidas que son estables en almacenamiento. Finalmente, cuando el PO tiene una naturaleza esencialmente amorfa (en particular, cuando el PO es un ácido poliamino), esto otorga excelentes propiedades de estabilidad física sobre las micropartículas cuando se almacenan en la forma seca. Por lo tanto, es aparente que la presencia de estos ácidos poliamino anfifílicos PO introduce medios adicionales para controlar la liberación modificada del AP y su estabilización con respecto a la adición o posibles descomposiciones químicas. Además, la naturaleza anfifílica del polímero PO hace posible, durante el proceso de atomización, ser capaz de usar ya sea una fase enteramente acuosa o una fase volátil enteramente orgánica o una mezcla volátil de fase acuosa y orgánica, que ofrece gran flexibilidad en la implementación del proceso . Además, debido a su naturaleza química, las micropartículas formadas a partir de PO del tipo de ácido (co)poliamino son biodegradables y biocompatibles y generalmente tienen buenas propiedades de tolerancia local. Con respecto al proceso para producir las micropartículas sólidas y líquidas de acuerdo con la invención, es decir la atomización, por naturaleza es fácilmente convertible a la escala industrial. Finalmente, las micropartículas de acuerdo con la invención y las formulaciones que las comprenden son no tóxicas y se toleran bien localmente.

Descripción Detallada de la Invención Definiciones : En toda la solicitud, la conjunción "ó" debe entenderse con el sentido inclusivo de "el uno o el otro o ambos". De este modo, por ejemplo, un alquilo lineal que podría contener al menos un hetero átomo (O, N o S) o al menos una insaturación puede tener dos hetero átomos; N y S ; y una insaturación. A través de todo el presente conteo, a diferencia de las micropartículas de acuerdo con la invención, el término "partículas a escala de sub-micra" o "nanopartículas", denota partículas de un tamaño (medido en una prueba T abajo descrita), por ej emplo, de más de o igual a 1 nm y de menos de 500 nm, preferentemente de entre 5 y 250 nm. Dentro del significado de la invención y a través de todo el presente conteo, el término "ácido poliamino" cubre tanto ácidos poliamino naturales como ácidos poliamino sintéticos, y también ácidos oligoamino que comprenden desde 2 hasta 20 residuos amino ácidos de la misma manera que los ácidos poliamino que comprenden más de 20 residuos amino ácidos. Los residuos amino ácidos preferidos de la principal cadena de ácido poliamino son aquellos que tienen la configuración en L, siendo el tipo de enlace preferido el tipo alfa, es decir, un enlace peptídico entre un grupo alfa-amino de un amino ácido y el grupo carboxílico, en la posición 1 , de otro alfa-aminoácido . Dentro del significado de la invención, el término "proteína" denota, por ej emplo, tanto una proteína como un péptido, ya sea un oligopéptido o un polipéptido. Esta proteína o este péptido pueden o no modificarse, por ej emplo, al insertar uno o más grupos polioxietileno. Dentro del significado de la invención y a través de todo el presente conteo, los términos "asociación" o "asociarse" empleados para describir las relaciones entre uno o más APs y los polímeros Pos, significan en particular que el principio activo o principios se unen al(a los) polímero(s) PO(s) por un enlace no covalente, por ej emplo, mediante interacción electroestática o hidrofóbica o enlace de hidrógeno o interferencia estérica. 1 er aspecto de la invención: las micropartículas Característica (a) : El hecho de asociar, antes de la atomización, al AP, por ej emplo, una proteína u otro compuesto péptido, con un polímero anfifílico PO, tal como un ácido (co)poliamino anfifílico, exhibe numerosas ventaj as, tanto con respecto al proceso en sí como a la propiedades de las micropartículas producidas por atomización. El tratamiento de atomización física otorga, a las micropartículas sólidas, secas, una estructura específica que es la fuente de un buen número de sus propiedades ventajosas. Esta estructura se caracteriza correctamente por este método de producción mediante atomización, así como también por las funciones anexas a estas propiedades ventaj osas.

Característica (b) : Esta característica se define de manera objetiva por la prueba T abajo descrita. Prueba T para medir el tamaño de las micropartículas por difracción láser: a - Prueba T0 en el caso donde las micropartículas se encuentran en la forma seca: 1 - Equipo y condiciones de operación 2 — Preparación de la muestra: Se prepara una solución al 0. 1 % de Span 80 en heptano (para hacerlo, se pesan 0.01 g de polvos de Span 80 en un matraz de 20 mi y después se agrega heptano mediante ponderación a fin de obtener un peso final de 10 g), se separan por peso aproximadamente 6 mg de polvo en un tubo de ensayo de 5 mi, se agregan 0.7 g de heptano que comprende 0. 1 % de Span 80 al tubo de ensayo, el tubo de ensayo se coloca durante 2 minutos en un baño ultrasónico con obj eto de dispersar concienzudamente el polvo . 3 - Análisis de la muestra El fluido en circulación almacenado en el sistema de dispersión de ruta líquida en reposo se vacía y se reemplaza por heptano. La agitación del rotor Hydro 2000SM se ajusta a 2400 rev/min. Se inicia la medición con las condiciones experimentales arriba mencionadas. Alineación del haz láser, Registro del ruido de fondo. Después de estas etapas, el operador introducirá la muestra por analizarse de la siguiente manera: la muestra diluida se agrega gota a gota (con una pipeta Pasteur) hasta que el oscurecimiento se encuentra entre 5 % y 20% y se inicia la adquisición. Se obtienen los datos con relación al D50, el cual es el diámetro por debajo del cual se encuentra el 50% de los obj etos analizados. Se produce el promedio de D50 de 3 mediciones llevadas a cabo en 3 diferentes preparaciones. b - Prueba T I en el caso donde las micropartículas se encuentran en la forma de una dispersión acuosa 1 - Equipo y condiciones de operación 2 - Preparación de la muestra La muestra por analizarse se introduce en la celda tal cual o puede re-diluirse opcionalmente con agua en el caso de muestras de alta dispersión. 3 - Análisis de la muestra El fluido en circulación almacenado en el sistema de dispersión de ruta líquida en reposo se vacía y reemplaza por agua desmineralizada fresca. La agitación del rotor Hydro2000SM se ajusta a 2400 rev/min. Se inicia la medición con las condiciones experimentales arriba mencionadas. Alineación del haz láser, Registro del ruido de fondo. Después de estas etapas, el operador introducirá la muestra por analizarse de la siguiente manera: la muestra diluida se agrega gota a gota (con una pipeta Pasteur) hasta que el oscurecimiento se encuentra entre 5 % y 20% y se inicia la adquisición. Se obtienen los datos con relación al D50, el cual es el diámetro por debajo del cual se encuentra el 50% de los obj etos analizados. Se produce el promedio de D50 de 3 mediciones llevadas a cabo en 3 diferentes preparaciones. c - Prueba T2 en el caso donde las micropartículas se encuentran en dispersión en un solvente orgánico Esta prueba es análoga a la prueba T I . No obstante, en este caso, es necesario reemplazar el agua por un solvente que sea completamente miscible con el líquido de dispersión y en el cual no se dilaten las partículas. En muchos casos, se utiliza heptano. 1 - Equipo y condiciones de operación 2 - Preparación de la muestra Con objeto de preparar la muestra por analizarse, 400 µ? de la muestra por analizarse tienen que diluirse en un tubo de ensayo de 5 mi con 600 µ? de heptano y después la preparación tiene que revolucionarse durante 10 segundos (10+5). 3 - Análisis de la muestra El fluido en circulación almacenado en el sistema de dispersión de ruta líquida en reposo se vacía y reemplaza por agua desmineralizada fresca. La agitación del rotor Hydro2000SM se ajusta a 2400 rev/min. Se inicia la medición con las condiciones experimentales arriba mencionadas. - Alineación del haz láser, Registro del ruido de fondo. Después de estas etapas, el operador introducirá la muestra por analizarse de la siguiente manera: la muestra diluida se agrega gota a gota (con una pipeta Pasteur) hasta que el oscurecimiento se encuentra entre 5% y 20% y se inicia la adquisición.

Se obtienen los datos con relación al D50, el cual es el diámetro por debaj o del cual se encuentra el 50% de los obj etos analizados. Se produce el promedio de D50 de 3 mediciones llevadas a cabo en 3 diferentes preparaciones. Característica (c) : Esta característica se define de manera obj etiva por la prueba DP I abajo descrita. "Capacidad de dispersión" Prueba DPI de los polvos: Se introducen aproximadamente 30 mg del polvo de partículas en un matraz de 3 mi equipado con un septo. Se determina entonces el peso exacto de las partículas (wj ). Se agrega 1 mi de solución de reconstitución al polvo a través del septo, usando una jeringa de 1 mi equipada con una aguja de 25G x 5/8 (0.5 x 16 mm) (de tipo BD Microlance 3 , por ej emplo) y el matraz se agita manualmente de manera intermitente durante un periodo de 1 5 minutos. El matraz se pesa a fin de determinar el peso exacto de la solución introducida (w2). Al final de este tiempo, la suspensión entera se succiona a través de una j eringa de 1 mi (de tipo Braun Injeckt-F Luer, red. 916601 7V) equipada con una aguj a 25G y se decanta en un matraz reciente, medido por adelantado, y se determina el peso w3 de la solución recuperada. El aspecto cualitativo de la dispersión (tendencia a dispersión, opacidad, homogeneidad visual de la solución), la posibilidad o no de inyectarla a través de una aguj a 25G y el porcentaje de la solución recuperada: % = w3 x 100 / (w,+w2) y el tamaño de las micropartículas se mide de acuerdo con una prueba T I o T2 (dependiendo de si el líquido de dispersión es una solución acuosa o un líquido orgánico). Se considera que el polvo tiene buenas propiedades de dispersión en el líquido si : ¦ la suspensión obtenida comprende micropartículas con un diámetro promedio de entre 2 y 40 µ??, ¦ la apariencia de la suspensión es homogénea, ¦ puede inyectarse a través de una aguj a 25G y si ¦ al menos 80% de la suspensión puede recuperarse así. Aparte de las características (a), (b) y (c), las micropartículas de acuerdo con la invención pueden definirse de manera objetiva por el hecho de que son estables en una prueba ST 1 y/o en una prueba ST2. Prueba ST1 de estabilidad física de las micropartículas secas : El tamaño de las micropartículas presentes en el polvo atomizado en seco se mide dentro de la semana posterior a la atomización del polvo en un dimensionador de partículas láser de acuerdo con la prueba T0. El polvo se coloca entonces en un horno a 30°C durante una semana. Una muestra de "control" se dej a a 5 °C . Se lleva a cabo nuevamente una medición de tamaño después de la dispersión bajo las mismas condiciones que en el momento tO. Se comparan las distribuciones de las partículas antes y después del endurecimiento. Prueba ST2 de estabilidad coloidal de las partículas en suspensión: El polvo de las micropartículas se dispersa en el líquido de dispersión con agitación magnética a la concentración a la cual se desea observar su estabilidad y se dej a agitando con agitación magnética moderada durante al menos 2 h (medida tO). El tamaño de las partículas se mide en un dimensionador de partículas láser, de acuerdo con la prueba T I o T2, de acuerdo con el medio de dispersión (acuoso u orgánico). La suspensión se dej a permanecer posteriormente durante 7 días a 5 °C. El gránulo de sedimentación se dispersa mediante agitación durante unos cuantos minutos (hasta que se obtiene una suspensión que es homogénea después de observación visual). Se lleva a cabo nuevamente una medición de tamaño después de la dispersión bajo las mismas condiciones que en el momento tO.

El polímero PO Los polímeros Pos de acuerdo con la invención son polímeros biodegradables, solubles en agua, que contienen grupos hidrofóbicos HG y grupos hidrofílicos [preferentemente grupos ionizables IGs que son al menos parcialmente ionizados] . Los grupos hidrofóbicos HG pueden ser pequeños en número con respecto al resto de la cadena y pueden situarse lateralmente a la cadena o insertarse en la cadena y pueden distribuirse de manera aleatoria (copolímero aleatorio) o distribuirse en la forma de secuencias o inj ertos (copolimeros de bloque o copolimeros secuenciales) . De acuerdo con una modalidad preferida de la invención, el •polímero PO es un ácido (co)poliamino anfifílico. Tal opción de PO proporciona excelente compatibilidad con los APs de tipo proteína/péptido . De este modo, es posible simplificar enormemente la composición de la solución o suspensión de inicio del AP de tipo proteína/péptido con el polímero PO. Esta solución o suspensión de inicio puede comprender únicamente el AP y el PO en una fase acuosa y/u orgánica. La ausencia de otros ingredientes hace posible que tal solución o suspensión de inicio sea capaz de filtrarse (a través de un filtro de 0.2 µp?) antes de la atomización, lo cual hace posible llevar a cabo lo último bajo condiciones asépticas. De acuerdo con una modalidad preferida de la invención, se elige PO a partir de ácidos (co)poliamino anfifílicos y sus mezclas. Preferentemente, los ácidos poliamino de acuerdo con la presente invención son oligómeros u homopolímeros que comprenden residuos de repetición de ácido glutámico o aspártico o copolímeros que comprenden una mezcla de estos dos tipos de residuos amino ácidos. Los residuos en consideración en estos polímeros son amino ácidos que tienen la configuración D o L o D/L y se unen a través de sus posiciones a ó ? para el glutamato o residuo glutámico y sus posiciones a ó ß para el residuo aspártico o aspartato. De acuerdo con una modalidad incluso más preferida de la invención, el polímero PO es un ácido poliamino formado por residuos aspárticos y/o residuos glutámicos, conteniendo al menos una porción de estos residuos inj ertos que tienen al menos un grupo hidrofóbico HG. Estos ácidos poliamino son, en particular, del tipo de aquellos expuestos en la solicitud de patente PCT WO-A-00/3061 8. De acuerdo con una primer posibilidad, los PO(s) se define(n) por la siguiente fórmula general (I) (el radical -COOR3 incluye formas en donde el enlace entre el carboxílico y R es un enlace iónico -COO R ) : (I) en la cual : ¦ R1 representa un H, un alquilo C2 a C 10 lineal o C3 a C 1 0 ramificado, un benzilo, y -R4 -[HG] , o ¦ NHR1 es un residuo amino ácido terminal; ¦ R2 representa un H, un acilo C2 a C i0 lineal o C3 a C ] 0 ramificado, un grupo piroglutamato terminal o -R4-[HG] o; ¦ R2 es un residuo piroglutamato terminal; ¦ R3 es un H; o ¦ +R3 se selecciona preferentemente a partir del grupo que comprende: cationes de metal ventajosamente seleccionados a partir del sub-grupo que comprende: sodio, potasio, calcio y magnesio, - cationes orgánicos ventajosamente seleccionados a partir del sub-grupo que comprende: • cationes en base a amino, • cationes en base a oligoamino, • cationes en base a poliamina (siendo la polietilenoimina particularmente preferida), • cationes en base a amino ácido(s) ventajosamente seleccionado(s) a partir de la clase que comprende cationes en base a lisina o una arginina, o ácidos poliamino catiónicos ventajosamente seleccionados a partir del sub-grupo que comprende polilisina u oligolisina; ¦ R4 representa un enlace directo o un "separador" en base a 1 a 4 residuos amino ácidos; ¦ A representa independientemente un radical -CH2-(residuo aspártico) o un radical -CH2-CH2- (residuo glutámico); ¦ n/(n+m) se define como la velocidad de injerto molar y su valor es suficientemente bajo para PO, disuelto en agua a pH = 7 y a 25°C, para formar una suspensión coloidal de partículas de tamaño de sub-micra de PO, preferentemente n(n+m) se encuentra entre 1 y 25% mol y aún mejor entre 1 y 15% mol. ¦ n+m se define como el grado de polimerización y varía desde 10 hasta 1000, preferentemente entre 50 y 300; ¦ HG representa un grupo hidrofóbico que comprende 6 a 30 átomos de carbono. En una modalidad preferida de la invención, el grupo hidrofóbico HG se selecciona a partir del grupo que comprende radicales alcoxi del tipo: -OCH2(CH2-CH2)3 -8-CH3, oleilo, tocoferilo o colesterilo, y R4 representa un solo enlace. De acuerdo con una segunda posibilidad, PO corresponde a una de las siguientes fórmulas generales (II), (III) y (IV) (el radical -COOR3 incluye formas en donde el enlace entre el carboxílico y R es un enlace iónico -COO (IV) en las cuales: ¦ HG representa un grupo hidrofóbico que comprende 6 a 30 átomos de carbono; ¦ R30 es una cadena de alquileno lineal bivalente C2 a C6; ¦ R3 es un H, o ¦ +R3 se selecciona preferentemente a partir del grupo que comprende: cationes de metal ventajosamente seleccionados a partir del subgrupo que comprende: sodio, potasio, calcio y magnesio, cationes orgánicos ventajosamente seleccionados a partir del sub-grupo que comprende: • cationes en base a amino, • cationes en base a oligoamino, · cationes en base a poliamina (siendo la polietilenoimina particularmente preferida), • cationes en base a amino ácido(s) ventajosamente seleccionado(s) a partir de la clase que comprende cationes en base a lisina 0 una arginina, - o ácidos poliamino catiónicos ventajosamente seleccionados a partir del sub-grupo que comprende polilisina u oligolisina; ¦ R50 es una cadena de alquileno lineal bivalente C i a C8 en donde una o dos unidades de metileno, preferentemente en cada extremo de R50, puede reemplazarse independientemente por -O o -NH; ¦ R4 representa un enlace directo o un separador en base a 1 a 4 residuos amino ácidos; ¦ A representa independientemente un radical -CH2-(residuo aspártico) o un radical -CH2-CH2- (residuo glutámico); ¦ n +m o n" se define como el grado de polimerización y varía de 10 a 1 000, preferentemente entre 50 y 300. De acuerdo con una formal alternativa ventajosa, el grupo R4 representa un solo enlace. De acuerdo con una tercer posibilidad, PO es una copolihidroxialquilglutamina esencialmente neutral (preferentemente alquilo es etilo) que comprende múltiples grupos hidrofóbicos pendientes (HGs) que son idénticos o diferentes entre sí. La copolihidroxialquilglutamina también contiene grupos hidroxialquilamina. Estos grupos hidroxialquilamina se enlazan preferentemente al copolímero a través de un enlace de amida. Los grupos hidroxialquilamina que pueden usarse para amidificar el carboxílico de los residuos de glutamato y para formar esta copolihidroxialquilglutamina son idénticos o diferentes entre sí y, por ej emplo, se seleccionan a partir de los siguientes grupos : 2-hidroxietil amina, 3 -hidroxipropilamina, 2,3 -dihidroxipropilamina, tris(hidroximetil)aminometano y 6-hidroxihexilamina. Ventajosamente, al menos uno de los grupos hidrofóbicos HGs se incluye en un inj erto hidrofóbico que comprende al menos una unión de separación (o unidad) (separador) que hace posible conectar el grupo hidrofóbico HG a una cadena de copoliglutamatos. Esta unión puede comprender, por ejemplo, al menos un enlace covalente directo o al menos un enlace amida o al menos un enlace éster. Por ej emplo, la unión puede ser del tipo de aquellas que pertenecen al grupo que comprende en particular residuos amino ácidos, derivados de aminoalcoholes, derivados de poliamina (por ej emplo, diaminas), derivados de polioles (por ejemplo, dioles) y derivados de ácidos hidroxi. El inj erto de los HGs a la cadena de copoliglutamato o polialquilglutamina, puede involucrar el uso de precursores de HG capaces de enlazarse a la cadena de copoliglutamato o copolihidroxialquilglutamina. Los precursores de los HGs se encuentran en práctica y sin ser esto limitante, se seleccionan a partir del grupo que comprende alcoholes y aminas, siendo posible para estos compuestos el habilitarse fácilmente por una persona experta en la materia. Para detalles adicionales con respecto a esta copolihidroxialquilglutamina (preferentemente alquilo es etilo), se hará referencia a la FR-A-2, 88 1 , 140. De acuerdo con una forma alternativa ventajosa, en particular, de acuerdo con al menos una de las tres posibilidades arriba señaladas, todo o parte de los radicales hidrofóbicos HGs de los Pos se seleccionan independientemente a partir del grupo de radicales que comprende: ¦ un alcoxi lineal o ramificado que comprende desde 6 hasta 30 átomos de carbono y que puede comprender al menos un heteroátomo (preferentemente O, N o S) y/o al menos una insaturación, ¦ un alcoxi que comprende 6 a 30 átomos de carbono y que tiene uno o más cicloalquilos templados y que opcionalmente comprende al menos una insaturación o al menos un heteroátomo (preferentemente O, N o S); ¦ un alcoxiarilo o un ariloxialquilo de 7 a 30 átomos de carbono y que puede comprende al menos una insaturación o al menos un heteroátomo (preferentemente O, N o S). De acuerdo con otra forma alternativa ventajosa, en particular, de acuerdo con al menos una de las tres posibilidades arriba señaladas, el grupo hidrofóbico HG se selecciona a partir del grupo que comprende radicales alcoxi del tipo : -OCH2(CH2-CH2)3 g-CH3, oleilo, tocoferilo o colesterilo, y R4 representa un solo enlace. De acuerdo con otra forma ventajosa alternativa, los grupos n HG del PO, en particular, de acuerdo con al menos una de las tres posibilidades arriba señaladas, cada uno representa, independientemente entre sí, un radical monovalente de la siguiente fórmula: (HG) en la cual: R5 representa un metilo (alanina), isopropilo (valina), isobutilo (leucina), sec-butilo (isoleucina) o benzilo (fenilalanina); R6 representa un radical hidrofóbico que comprende desde 6 hasta 30 átomos de carbono; I varía desde 0 hasta 6. De acuerdo con una característica notable de la invención, todos o parte de los grupos hidrofóbicos R6 de los POs se seleccionan independientemente a partir del grupo de radicales que comprende: ¦ un alcoxi lineal o ramificado que comprende desde 6 hasta 30 átomos de carbono y que pueden comprender al menos un heteroátomo (preferentemente O, N o S) o al menos una insaturación, ¦ un alcoxi que comprende 6 a 30 átomos de carbono y que tiene uno o más cicloalquilos templados y que opcionalmente comprende al menos una insaturación o al menos un heteroátomo (preferentemente O, N o S), ¦ un alcoxiarilo o un ariloxialquilo de 7 a 30 átomos de carbono, que pueden comprender al menos una insaturación o al menos un heteroátomo (preferentemente O, N o S). En la práctica, y sin limitarse a ésta, el radical hidrofóbico R6 del inj erto del PO se selecciona a partir del grupo que comprende radicales alcoxi del tipo : -OCH2(CH2-CH2)3 g-CH3, oleilo, tocoferilo o colesterilo, y R4 representa un solo enlace. Ventajosamente, la cadena principal del ácido poliamino es: ? un a-L-glutamato o a-L-homopolímero glutámico; ? un a-L-aspartato o a-L-homopolímero aspártico; ? o un a-L-aspartato/a-L-glutamato o copolímero a-L-aspártico/a-L-glutámico. En una manera notable, la distribución de los residuos aspárticos o glutámicos de la cadena principal de ácido poliamino del PO es tal que el polímero así formado es ya sea aleatorio o de tipo bloque o de tipo de múltiples bloques. De acuerdo con otro método de definición, PO tiene una masa molar que yace entre 2000 y 100 000 g/mol y preferentemente entre 5000 y 40 000 g/mol. De acuerdo con una forma alternativa, PO contiene al menos un injerto de tipo polialquileno glicol unido a un residuo de glutamato o aspartato. Ventajosamente, este inj erto de tipo polialquileno glicol es de la siguiente fórmula (V) : (V) en la cual : R 4 representa un enlace directo o un "separador" en base a 1 a 4 residuos amino ácidos; X es un heteroátomo seleccionado a partir del grupo que comprende oxígeno, nitrógeno y azufre; R7 y R8 representan independientemente un H o un alquilo lineal C i a C4; n' " varía desde 10 hasta 1 000, preferentemente desde 50 hasta 300. En la práctica, el polialquileno glicol es, por ej emplo, un polietileno glicol . Es deseable, de acuerdo con la invención, que el porcentaje molar de injerto respecto a polialquileno glicol varíe desde 1 hasta 30%. Además, los ácidos poliamino POs son extremadamente ventaj osos respecto al hecho de que, con un grado ajustable de inj erto, se dispersan en agua a pH = 7.4 (por ej emplo, con un regulador de fosfato) para dar suspensiones coloidales. Además, los principios activos APs, tales como proteínas, péptidos o moléculas pequeñas, pueden unirse en conjunto de manera espontánea con nanopartículas que comprenden estos ácidos poliamino POs. Debe entenderse que los POs comprenden grupos funcionales ionizables que, dependiendo del pH y la composición, son ya sea neutrales (por ejemplo, -COOH) o ionizados (por ej emplo, -COO"). Por esta razón, la solubilidad en una fase acuosa es directamente una función del nivel de grupos funcionales ionizados y por lo tanto del pH. En solución acuosa, en el caso de grupos funcionales carboxilo, el ión contrario puede ser un catión metálico, tal como sodio, calcio o magnesio, o un catión orgánico, tal como formas con protones de la trietanolamina, tris(hidroximetil)aminometano o una poliamina, tal como polietilenoimina. Los POs de tipo ácido poliamino se obtienen, por ej emplo, mediante métodos conocidos por una persona experta en la materia. Los ácidos poliamino aleatorios pueden obtenerse mediante inj erto del inj erto hidrofóbico, habilitarse por adelantado por el separador, directamente al polímero por una reacción de acoplamiento convencional. Los ácidos poliamino de bloque o de múltiples bloques POs pueden obtenerse mediante polimerización secuencia de los anhídridos correspondientes de ácido N-carboxiamino (NCA). Un ácido poliamino que es un homopoliglutamato, un homopoliaspartato o un bloque, multibloque o copolímero aleatorio de glutamato/aspartato, se prepara, por ejemplo, de acuerdo con métodos convencionales. La técnica más ampliamente utilizada para obtener ácido poliamino de tipo a se basa en la polimerización de anhídridos de ácido N-carboxiamino (NCA) descritos, por ej emplo, en el documento "Biopolímeros, 1976, 1 5, 1 869" y en el trabajo de H.R. Kricheldorf, "Anhídrido N-carboxi alfa-Amino ácido y Heterociclos relacionados" , Springer Verlag ( 1 987). Cuando la cadena lateral tiene una función de ácido carboxílico, los derivados de NCA son preferentemente derivados de NCA-O-Me, NCA-O-Et o NCA-O-Bz (Me = metilo, Et = etilo y Bz = benzilo) . Los polímeros se hidrolizan posteriormente bajo condiciones adecuada para obtener el polímero en su forma ácida. Estos métodos se inspiran por la descripción dada en la patente FR-A-2 801 226 del Solicitante. Un cierto número de polímeros que pueden usarse de acuerdo con la invención, por ejemplo, de tipo poli(a-L-aspártico), poli(a-L-glutámico), poli(a-D-glutámico) y poli(y-L-glutámico) con pesos variables, se encuentran comercialmente disponibles. El poliaspártico de tipo a,ß se obtiene mediante condensación de ácido aspártico (para obtener una polisuccinimida), seguido por hidrólisis básica (cf. Tomida et al. , Polímero 1997, 38, 4733-36). El acoplamiento del injerto con un grupo funcional ácido del polímero se lleva a cabo fácilmente por reacción del ácido poliamino en presencia de una carbodiimida como agente de acoplamiento y opcionalmente un catalizador, tal como 4-dimetilaminopiridina, y en un solvente adecuado, tal como dimetilformamida (DMF), N-metilpirrolidona (NMP) o sulfóxido de dimetilo (DMSO). La carbodiimida es, por ejemplo, diciclohexilcarbodiimida o diisopropilcarbodiimida. El grado de injerto se controla químicamente por la estequiometria de los constituyentes y reactivos o el tiempo de reacción. Los injertos hidrofóbicos habilitados por un "separador" se obtienen mediante acoplamiento péptido convencional o mediante condensación directa por catálisis ácida. Estas técnicas son muy conocidas por una persona experta en la materia. Los derivados de NCA sintetizados por adelantado con el injerto hidrofóbico, se utilizan para la síntesis de copolímero de bloque o de múltiple bloque. Por ejemplo, el derivado de NCA-hidrofobia se copolimeriza con el NCA-O-benzilo y después los grupos benzilo se retiran selectivamente mediante hidrólisis.

El(los) principio(s) activo(s) PA(s) Con respecto al AP, se elige preferentemente a partir del grupo que comprende: proteínas, glicoproteínas, proteínas enlazadas a una o más cadenas de polialquileno glicol [preferentemente polietileno glicol (PEG) : "proteínas PEGiladas"] , péptidos, polisacáridos, liposacáridos, oligonucleótidos, polinucleótidos y sus mezclas, y aún más preferentemente, a partir del sub-grupo de eritropoietina, oxitocina, vasopresina, hormona adrenocorticotrópica, factor de crecimiento epidérmico, factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGF), factores que estimulan la hematopoiesis y sus mezclas, factores VIII y IX, hemoglobina, citocromos, albúminas, prolactina, luliberina, hormona liberadora de hormona luteinizante (LHRH), antagonistas de LHRH, competidores de LHRH, hormonas de crecimiento humana, porcina o bovina (GHs), factor de liberación de hormona de crecimiento, insulina, somatostatina, glucagón, interleukinas o sus mezclas (IL-2, IL- 1 1 , IL- 12), interferones-a, -ß o -?, gastrina, tetragastrina, pentagastrina, urogastrona, seretina, calcitonina, encefalina, endomorfinas, angiotensinas, hormona liberadora de tirotropina (TRH), factor de necrosis de tumor (TNF), factor de crecimiento nervioso (NGF), factor estimulador de colonias de granulocitos (G-CSF), factor estimulador de colonias macrófagas de granulocitos (GM-CSF), factor estimulador de colonias macrófagas (m-CSF), heparinasa, proteína morfogenética ósea (BMP), hANP, péptido similar a glucagón (GLP- 1 ), VEG-F, antígeno de superficie de hepatitis B recombinante (rHBsAg), renina, citoquinas, bradiquinina, bacitracinas, polimixinas, colistinas, tirocidina, gramicidinas, cicloesporinas y análogos sintéticos, y modificaciones farmacéuticamente activas y fragmentos de enzimas, de citoquinas, de anticuerpos, de antígenos y de vacunas. De acuerdo con una forma alternativa, el principio activo es una molécula orgánica "pequeña", opcionalmente iónica, hidrofóbica o hidrofílica, del tipo de aquellas que pertenecen a la familia de las antraciclinas, taxoides o camptotecinas o del tipo de aquellas que pertenecen a la familia de los péptidos, tales como leuprolido o ciclosporina, y sus mezclas. De acuerdo con otra forma alternativa, el principio activo se selecciona ventajosamente a partir de al menos una de las siguientes familias de substancias activas : agentes para el tratamiento de abuso de alcohol, agentes para el tratamiento de enfermedad de Alzheimer, anestésicos, agentes para el tratamiento de acromegalia, analgésicos, antiasmáticos, agentes para el tratamiento de alergias, agentes anti-cáncer, anti-inflamatorios, anti-coagulantes y anti-trombóticos, anti-convulsivos, anti-epilépticos, anti-diabéticos, anti-eméticos, anti-glaucomas, anti-histamínicos, anti-infectivos, antibióticos, anti-fungales, antivirales, anti-parkinsonianos, anti-colinérgicos, anti-tosivos, inhibidores de anhidrasa carbónica, agentes cardiovasculares, hipolipidémicos, anti-arrítmicos, vasodilatadores, anti-anginales, anti-hipertensivos, vaso-protectores, inhibidores de colineserasa, agentes para el tratamiento de desórdenes del sistema nervioso central, estimulantes del sistema nervioso central, contraceptivos, promotores de fertilidad, inductores e inhibidores de labor uterina, agentes para el tratamiento de mucoviscidosis, agonistas receptores de dopamina, agentes para el tratamiento de endometriosis, agentes para el tratamiento de disfunciones eréctiles, agentes para el tratamiento de fertilidad, agentes para el tratamiento de desórdenes gastrointestinales, inmunomoduladores e inmunosupresores, agentes para el tratamiento de desórdenes de memoria, anti-migrañas, relaj antes musculares, análogos nucleósidos, agentes para el tratamiento de osteoporosis, parasimpatoimitadores, prostaglandinas, agentes psicoterapéuticos, sedantes, hipnóticos y tranquilizantes, neurolépticos, ansiolíticos, psicoestimulantes, antidepresivos, agentes para tratamientos dermatológicos, esteroides y hormonas, anfetaminas, anorécticos, eliminadores de dolor no analgésicos, barbituratos, benzodiacepinas, laxantes, psicotrópicos y cualquier combinación de estos productos. Cuantitativamente, es particularmente ventajoso para la fracción en peso del AP no asociarse con las partículas a escala de miera [AP no asociado] como % en peso de tal manera que: 0 [AP no asociado] < 1 ° preferentemente [AP no asociado] < 0.5 2do aspecto de la invención: el proceso para producir las micropartículas mediante atomización de una solución o suspensión coloidal de PO que comprende AP De acuerdo con una forma preferida del proceso de acuerdo con la invención, el PO presente en la solución o suspensión coloidal propuesta para atomizarse, se encuentra al menos parcialmente en la forma de nanopartículas de PO que tienen un tamaño, medido en la prueba T I , de menos de 500 nm, preferentemente de entre 10 y 300 nm y más preferentemente aún de entre 10 y 1 00 nm.

Ventajosamente, la concentración de PO en la solución o suspensión coloidal por atomizarse se encuentra, por ej emplo, entre 5 mg/ml y 1 00 mg/ml, preferentemente entre 1 0 mg/ml y 40 mg/ml. En el contexto de la invención, la asociación AP/PO se produce antes y/o durante la etapa de atomización. Para esta asociación, el PO y/o el AP pueden encontrarse en la forma sólida (preferentemente un polvo) en la forma de una suspensión líquida. Las técnicas para asociación de uno o más APs con PO antes de la etapa de atomización, se describen en particular en la solicitud de patente WO-A-00/3061 8. Consisten, por ej emplo, en mezclar una suspensión coloidal de PO con una solución o suspensión de AP. De acuerdo con una forma alternativa, el AP en la forma de polvo se mezcla con la suspensión de PO. De acuerdo con una variante interesante de este proceso de producción, las micropartículas del polímero PO asociado con al menos un principio activo (AP) se dispersan en un medio líquido esencialmente acuoso, conteniendo dicho medio preferentemente un medio de dispersión M i y la dispersión obtenida se liofiliza. El liofilizado así obtenido facilita la preparación de las formulaciones líquidas en base a micropartículas (3 er aspecto de la invención, posteriormente descrito), debido a que este liofilizado se dispersa rápidamente en el líquido reconstituyente usado para preparar dichas formulaciones líquidas. Ventajosamente, el medio de dispersión Mi se selecciona a partir del siguiente grupo: i. iones multivalentes cuya polaridad es opuesta a la polaridad de los grupos ionizables del polímero PO y que se contienen en la fase acuosa continua; ii. al menos un compuesto hidrofílico (preferentemente útil para una preparación inyectable) agregado en la suspensión/solución de PO por atomizar y contenido así en las micropartículas atomizadas de PO/AP; iii. al menos una cubierta de micropartículas con al menos una película de al menos un compuesto hidrofílico (preferentemente útil para una preparación inyectable); iv. el cambio de pH; v. y combinaciones de al menos dos de los medios (i) a (iv); prefiriéndose particularmente los medios (i). Para detalles adicionales acerca de las modalidades de los medios Mi (i) a (iv), se hará referencia a la siguiente descripción del medio de dispersión M2. De igual modo, con respecto al medio líquido de dispersión, puede contener los mismos aditivos que aquellos descritos para el líquido de reconstitución abajo definido. 3er aspecto de la invención: Formulaciones líquidas en base a las micropartículas obtenidas por atomización de una solución o suspensión coloidal de PO que comprenden AP La formulación de acuerdo con la invención puede ser un líquido farmacéutico para la liberación prolongada del AP, que comprende una suspensión coloidal, de baja viscosidad, en base a micropartículas de PO asociadas con al menos un AP, siendo estas micropartículas aquellas arriba definidas o aquellas obtenidas mediante el proceso en sí, también según se define arriba y en los ejemplos a continuación. Esta formulación tiene la ventaja de ser parenteralmente inyectable y de ser líquida bajo las condiciones de inyección. De acuerdo con la invención, los calificadores de "baja" o "muy baja" viscosidad, ventajosamente corresponden a una viscosidad dinámica a 20°C de menos de o igual a 1000 mPa.s. Preferentemente, la viscosidad dinámica de la formulación, medida a 20°C, para una gradiente de arrastre de 1000 s" 1 , es preferentemente menor de o igual a 500 mPa.s, preferentemente de entre 2 y 200 mPa.s, por ejemplo, de entre 1 .0 y 100 mPa.s, incluso entre 1 .0 y 50 mPa.s. Medición de la viscosidad dinámica La medición de referencia para la viscosidad dinámica puede llevarse a cabo, por ejemplo, a 20°C, usando un reómetro AR 1000 (Instrumentos TA) equipado con geometría de cono/placa (4 cm, 2). La viscosidad v se mide para una gradiente de arrastre de 10 s" 1. Esta baja viscosidad vuelve a las formulaciones de la invención fácilmente inyectables de manera parenteral, en particular por la ruta mucosal, subcutánea, intramuscular, intradérmica, intra-peritoneal o intra-cerebral o en un tumor. La formulación de acuerdo con la invención también puede administrarse a través de la ruta oral, nasal, pulmonar, vaginal u ocular, entre otras. La viscosidad de las formulaciones líquidas de la invención es baja, tanto a temperaturas de inyección correspondientes a temperaturas ambiente, por ej emplo, entre 4 y 30°C, como a la temperatura fisiológica. Las micropartículas secas, formadas por atomización de PO anfifílico (por ej emplo, ácido poliamino) pueden además re-dispersarse fácilmente para formar suspensiones de micropartículas o soluciones de baj a viscosidad. Medios de dispersión M? Con respecto específicamente a la dispersión o suspensión de las micropartículas atomizadas de PO/AP en un líquido reconstituyente con obj eto de preparar la formulación, se prevé de acuerdo con la invención que dicha formulación comprenda un medio M2 de dispersión de micropartículas de PO/AP. Este medio de dispersión M2 puede diferir de acuerdo con la naturaleza de la fase continua (es decir, del líquido reconstituyente) de la suspensión usada para formar la formulación. Por lo tanto, pueden preverse cuatro posibilidades, en particular, de acuerdo con la invención: 1 . La fase continua de la suspensión es esencialmente acuosa. 2. La fase continua de la suspensión es una fase miscible en agua, esencialmente orgánica. 3. La fase continua de la suspensión es una fase inmiscible en agua, esencialmente orgánica. 4. La fase continua de la suspensión es una fase miscible o no en agua, esencialmente orgánica. El término "fase continua esencialmente acuosa" se entiende que representa, por ej emplo, un líquido que comprende al menos 60% en masa de agua. El término "fase continua esencialmente orgánica" se entiende que representa, por ej emplo, un líquido que comprende al menos 60% en masa de fase orgánica. 1 . La fase continua de la suspensión es esencialmente acuosa Varios tipos de medios de dispersión M2, opcionalmente combinados entre sí, pueden preverse, es decir, que los medios de dispersión M2 se seleccionan, por ej emplo, en el siguiente grupo : i. iones multi-valentes cuya polaridad es opuesta a la polaridad de los grupos ionizables del polímero PO y que se contienen en la fase acuosa continua; ii. al menos un compuesto hidrofílico (preferentemente útil para una preparación inyectable) agregado en la suspensión/solución PO para atomizar y contenido así en las micropartículas atomizadas de PO/AP. iii. al menos una cubierta microparticulada con al menos una película de al menos un compuesto hidrofílico (preferentemente útil para una preparación inyectable); iv. el cambio de pH; v. y combinaciones de al menos dos de los medios (i) a (iv), prefiriéndose particularmente los medios (i). (i) Medios de dispersión en base a iones polivalentes En el caso donde PO exhibe grupos ionizables IGs, el medio de dispersión M2 puede comprender iones polivalentes, la polaridad de los cuales es lo opuesto a la polaridad de los grupos ionizables IGs (al menos parcialmente ionizados) del polímero PO, los cuales se introducen en la fase continua acuosa durante la reconstitución de la suspensión/solución que forma la suspensión. Dentro del significado de la invención, el término "iones polivalentes" denota, por ej emplo, iones divalentes, iones trivalentes, iones tetravalentes y mezclas de estos iones. En el caso donde PO exhibe grupos IG aniónicos, los iones polivalentes son cationes polivalentes, preferentemente cationes divalentes, más preferentemente aún se seleccionan a partir del grupo que consiste en: Mg2+, Ca2+, Zn2+, Fe2+, Cu2+ y sus mezclas, o cationes trivalentes, más preferentemente aún seleccionados a partir del grupo que comprende: Al3+, Fe3+ o sus mezclas. Es posible que la formulación de acuerdo con la invención, además de los iones polivalentes, comprenda iones monovalentes (por ej emplo, cationes), que pueden ser activos en la adición de las nanopartículas para dar micropartículas. Estos iones polivalentes se introducen en la formulación de la invención preferentemente en la forma de una solución de sal acuosa (orgánica o inorgánica), por ejemplo, una solución de sulfato, cloruro, acetato, gluconato o glutamato (u otro amino ácido aniónico) de cationes polivalentes. Este medio de dispersión M2 en base a iones polivalentes es más preferentemente adecuado en el caso don PO anfifílico (por ej emplo, un ácido (co)poliamino) es relativamente hidrofílico. (ii) y (iii) Medios de dispersión M2 en base a compuesto(s) hidrofílico(s) o que comprenden al menos una cubierta en base a compuesto (s) hidrofílico (s) El medio de dispersión M2 puede comprender esencialmente: al menos un compuesto hidrofílico (preferentemente que pueda usarse para una preparación inyectable) agregado a la suspensión/solución de PO por atomizarse y por lo tanto presente en las micropartículas atomizadas de PO/AP ; o al menos una cubierta de las micropartículas con al menos una película de al menos un compuesto hidrofílico (preferentemente que puede usarse para una preparación inyectable). Este medio de dispersión M2 puede incorporarse en · la formulación de acuerdo con varios métodos. De acuerdo con un primer método, al menos un compuesto hidrofílico seleccionado a partir de aquellos que pueden usarse en una preparación inyectable, se agrega a la suspensión/solución de PO por atomizarse, seleccionándose este compuesto hidrofílico a partir del grupo que comprende: ? amino ácidos (por ej emplo, lisina, arginina, glicina); ? polialquileno glicoles, preferentemente polietileno glicoles; ? copolialquileno glicoles, preferentemente copolímeros de etileno glicol/propileno glicol (de tipo Poloxamer o Pluronic o Lutrol); ? polímeros de celulosa y sus derivados, preferentemente carcoxialquilcelulosas (por ej emplo, carboximetilcelulosas) o alquilcelulosas (por ejemplo, metilcelulosas); ? sacáridos hidrogenados o no hidrogenados, tal como trehalosa, sorbitol, manitol o sucrosa; ? polioles, tales como propileno glicol o glicerol; ? gelatinas, preferentemente gelatinas hidrolizadas; ? (co)polímeros de nitrógeno, preferentemente aquellos presentes en el grupo que comprende poliacrilamidas, poli-N-vinilamidas, polivinilpirrolidonas (PVPs) y poli-N-vinillactamos; ? poli(vinilo alcohol)es (PVAs); ? poli(sodioglutamato); ? y sus mezclas; comprendiendo preferentemente dicho compuesta de cubierta hidrofílica al menos un polímero hidrofílico. De acuerdo con un segundo método, las micropartículas se cubren con al menos un estrato de al menos un compuesto hidrofílico, según se define arriba. En este segundo método, el compuesto hidrofílico preferentemente comprende al menos un polímero hidrofílico seleccionado a partir de los compuestos hidrofílicos según se definen arriba. El medio de dispersión M2 (ii) en base a por lo menos un compuesto hidrofílico, ha demostrado ser particularmente adecuado para POs anfifílicos que exhiben una hidrofobicidad lo suficientemente elevada, por ejemplo, a nivel de grupos HG de mayor o igual a 10% mol para un PO compuesto de al menos un ácido poliamino. La cubierta [medios M2 (iii)] de la micropartículas con tal estrato de compuesto hidrofílico y biocompatible, puede llevarse a cabo, por ej emplo, mediante dos atomizaciones sucesivas, el llevar a cabo la segunda atomización en una suspensión de partículas en un solvente inmiscible con dichas micropartículas puede contribuir a facilitar la dispersión de estas partículas. Tal medio de dispersión (iii), mediante cubierta hidrofílica de las micropartículas, permite que la suspensión de micropartículas permanezca confiable y estable al menos durante unos cuantos días, lo cual la hace fácil de manej ar. Ventajosamente, la combinación de un medio (ii) ó (iii) para dispersión de las micropartículas, en base a compuesto(s) hidrofílico(s), y de un medio (i) para dispersión en base a iones divalentes presentes en la fase acuosa durante la reconstitución de la formulación, hace posible la dispersión acelerada. De acuerdo con otra modalidad específica, la fase continua acuosa o la cubierta hidrofílica también pueden comprender al menos un surfactante inyectable, tal como Tween® 80, lecitina, fosfatidilcolina, fosfatidiletanolamina, fosfatidilserina o un copolímero de polioxipropileno/polioxietileno (nombre comercial: Poloxamer, Pluronic, Lutrol). (iv) Medios de dispersión M2 mediante cambio de pH Otro medio de dispersión que puede preverse de acuerdo con la invención consiste en un medio de dispersión por cambio de pH, preferentemente antes de la atomización. Este tipo de medio ha demostrado ser adecuado, en particular, en el caso donde el PO anfifílico (por ej emplo, ácido poliamino) es un compuesto que contiene grupos funcionales ionizables y que además es altamente hidrofílico, es decir, que comprende, por ej emplo, menos de 10% mol de grupos hidrofóbicos HGs. Por lo tanto, el uso de tal medio M2 (iv) hace posible incrementar la hidrofobicidad del PO anfifílico al llevar el pH hasta un valor tal que los grupos funcionales ionizables del PO (por ej emplo, el ácido poliamino) se vuelven no ionizados (por ejemplo, acidificación en el caso donde el PO es un ácido poliamino hidrofílico del tipo poliGlu o poliAsp). Preferentemente, este medio de dispersión M2 (iv) por cambio de pH antes de la atomización se aplica a la suspensión/solución de PO inmediatamente antes de la atomización. Este medio de dispersión M2 (iv) por cambio de pH antes de la atomización, puede o no combinarse. • con el medio de dispersión M2 (i) en base a los iones polivalentes empleados después de la atomización, en la etapa de reconstitución; o • con el medio de dispersión M2 (ii) ó (iii) en base a compuesto hidrofílico, preferentemente mediante cubierta de M2 (iii) de las micropartículas de al menos un polímero hidrofílico. 2. La fase continua de la suspensión es una fase miscible en agua, esencialmente orgánica El medio de dispersión consiste en esta fase orgánica, miscible en agua. Esta fase puede comprender, por lo tanto, por ej emplo, etanol, N-MetilPirrolidona (NMP), DiMetilo SulfÓxido (DMS O), isopropanol, glicerol o glicofurol (éter de polietileno glicol de alcohol de tetrahidro furfurilo) . 3 . La fase continua de la suspensión es una fase inmiscible en agua, esencialmente orgánica De acuerdo con una modalidad ventaj osa, el medio de dispersión comprende un líquido lipofílico, el punto de fusión del cual es preferentemente menor de o igual a 1 5 °C, presente en la fase continua orgánica, inmiscible en agua. Preferentemente, el líquido lipofílico comprende al menos una mezcla de triglicéridos de ácidos grasos saturados o al menos un aceite vegetal o al menos un lípido o al menos un derivado de lípido o al menos un ácido graso o al menos un derivado de ácido graso . Más preferentemente, el líquido lipofílico comprende: • una mezcla de triglicéridos de ácidos grasos saturados Cg-C t o, resultantes de aceite de coco, por ej emplo, el vendido baj o el nombre "Miglyol 8 1 2" por S asol ; • al menos un aceite vegetal, preferentemente aceite de soya, aceite de palma, aceite de linaza, aceite de algodón, aceite de aj onj olí, aceite de girasol o aceite de maní ; • al menos un lípido, preferentemente una lecitina líquida, vitamina E, sintética o natural ; • al menos un derivado de lípido, preferentemente araquidoilfosfatidilcolina y estearoilfosfatidilcolina, • al menos un ácido graso, preferentemente ácido oleico, ácido mirístico, ácido palmítico, ácido esteárico y sus sales; • al menos un derivado de ácido graso, preferentemente un derivado mono-, di- o triglicérido, oleato de etilo, lactato de laurilo, estearato de glicerilo, palmitato de sorbitan, estearato de sorbitan, monooleato de sorbitan o polisorbato; • y sus mezclas; con la condición de acuerdo a la cual, en el caso donde algunos de los productos arriba mencionados, tomados por separado, no sean líquidos a una temperatura de menos de o igual a, por ej emplo, 1 5°C, entonces estos productos se mezclas con otros a fin de que sean líquidos a una temperatura de menos de o igual a, por ej emplo, 1 5°C. Los derivados de triglicéridos de ácidos grasos se prefieren particularmente, en particular, una mezcla de triglicéridos de ácidos grasos saturados C8-C 10 resultantes de aceite de coco, por ej emplo, el vendido bajo el nombre "Miglyol 8 12" por Sasol. Otros triglicéridos que comprenden cadenas largas de ácidos grasos se presentan, en particular, en aceites vegetales, tales como aceite de soya, aceite de palma, aceite de linaza, aceite de algodón, aceite de ajonjolí, aceite de girasol o aceite de maní. Los polvos atomizados de PO/AP se dispersan fácilmente en esta fase inmiscible en agua, orgánica, para dar suspensiones estables de micropartículas que permanecen completas durante varios días y por lo tanto son nuevamente fáciles de manej ar. Esta dispersión es particularmente rápida sin ser necesario agregar otro u otros medios de dispersión, incluso si pudiera preverse esta posibilidad. 4. La fase continua de la suspensión es una fase miscible en agua, esencialmente orgánica, o fase inmiscible en agua De acuerdo con una ventajoso proceso alternativo, compatible con la 2a y 3er posibilidades con respecto a la naturaleza de la fase continua de la suspensión/solución que constituyen la formulación, el medio de dispersión comprende una cubierta de las micropartículas con al menos un compuesto de cubierta formador de película (preferentemente que pueda usarse para una preparación inyectable). Preferentemente, el compuesto de cubierta formador de película comprende al menos un polímero hidrofóbico, seleccionado a partir del grupo que comprende poliláctidos, poliglicólidos, poli(láctido-co-glicólido)s; poliortoésteres; polianhídridos; poli(ácido hidroxibutírico)s; policaprolactonas, poli(alquilo carbonato)s; polímeros PO insolubles en agua; sus derivados y sus mezclas. De acuerdo con una forma alternativa, el compuesto de cubierta formador de película es de naturaleza lípida y exhibe un punto de fusión preferentemente mayor de o igual a 15°C y comprende al menos un lípido o al menos un derivado de lípido, o al menos un aceite vegetal, o al menos un ácido graso o al menos un derivado de ácido graso o al menos una mezcla de triglicéridos de ácidos grasos saturados o una mezcla de estos productos. De acuerdo con otra modalidad ventajosa, la fase continua orgánica, por ej emplo, hidrofóbica o la cubierta hidrofóbica, también pueden comprender al menos un surfactante inyectable, tal como Tween® 80, lecitina, fosfatidiletanolamina, fosfatidilserina o un copolímero de polioxipropileno/polioxietileno (nombre comercial: Poloxamer, Pluronic, Lutrol).

Excipientes/estabilizadores También puede ser ventajoso, para facilitar las propiedades de dispersión en la fase acuosa y/o para mejorar aún más la estabilidad de las suspensiones acuosas, que la formulación inyectable comprenda otros aditivos, por un lado, aquellos anotados abajo por "excipientes/estabilizadores" y, por otro lado, excipientes convencionales. Los excipientes/estabilizadores pueden seleccionarse a partir del grupo que comprende: ? nanopartículas de al menos un polímero PO, siendo el PO un copolímero anfifílico, biodegradable, soluble en agua, que contiene grupos hidrofóbicos (HGs) y al menos grupos hidrofílicos ionizables, parcialmente ionizados (IGs) que forman espontáneamente una suspensión coloidal de nanopartículas en agua, a pH = 7.0, bajo condiciones isotónicas; ? amino ácidos; ? polialquileno glicoles, preferentemente polietileno glicoles; ? copolialquileno glicoles, preferentemente copolímeros de etileno glicol/propileno glicol (de tipo Poloxamer, Pluronic o Lutrol); ? polímeros de celulosa y sus derivados, preferentemente carboxialquilcelulosas (por ejemplo, carboximetilcelulosas) o alquilcelulosas (por ejemplo, metilcelulosas); ? ésteres de sorbitan y de ácido(s) graso(s), preferentemente ésteres de polioxialquileno (por ejemplo, etileno) glicol y de al menos un ácido (por ejemplo, ácido oleico), de tipo Tween (o polisorbato); ? surfactantes en base a fosfolípidos y a polialquileno glicoles, preferentemente en base a polietileno glicoles; ? sacáridos hidrogenados o no hidrogenados, tales como trehalosa, sorbitol, manitol o sucrosa; ? polioles, tales como propileno glicol o glicerol; ? gelatinas, preferentemente gelatinas hidrolizadas; ? (co)polímeros de nitrógeno, preferentemente a partir del grupo que comprende poliacrilamidas, poli-N-vinilamidas, polivinilpirrolidonas (PVPs) y poli-N-vinillactamos; ? poli(vinil alcohol)es (PVAs); ? y sus mezclas. Uno de los excipientes preferidos (estabilizadores) de acuerdo con la invención se forma por nanopartículas de al menos un polímero PO que es idéntico a o diferente de (preferentemente idéntico) aquel que constituye las micropartículas. La cantidad de excipiente/estabilizador empleado en la formulación se encuentra preferentemente entre 0.01 y 1 0% en peso y más preferentemente aún entre 0. 1 y 5% en peso. Con respecto a los estabilizadores que comprenden nanopartículas, se utilizan ventajosamente en la formulación en una proporción de 1 .5 a 3.5% en peso, por ej emplo, de 2.0 a 3.0 («2.5)% en peso. El líquido de reconstitución Además del medio de dispersión arriba descrito, el líquido de reconstitución empleado en la preparación de la formulación de acuerdo con la invención, puede comprender, por ej emplo : al menos un regulador o al menos una sal inyectable (regulador de fosfato, regulador de citrato, cloruro de sodio) a una concentración, por ej emplo, de entre O.OO I M y 0. 1 M, preferentemente entre 0.005M y 0.02M, haciendo posible este regulador o sal inyectable el ajustar el pH de la solución; al menos un surfactante inyectable, preferentemente de tipo polisorbato, tal como Tween® 20 y Tween® 80, o de tipo Poloxamer, tal como Lutrol® F38 , Lutrol® F68 o Lutrol® F 127, en concentraciones, por ej emplo, de entre 0.01 % y 2%, preferentemente entre 0.05 y 0.5 %. El líquido de reconstitución puede comprender adicionalmente agentes de densificación, tales como sacáridos, es decir, entre otros, sucrosa, D-mannitol o trehalosa, en concentraciones de entre 0. 1 % y 10%, preferentemente de entre 0.5 y 5%. La solución de reconstitución también puede comprender un polímero formador de viscosidad inyectable, seleccionado a partir del grupo que comprende polisacáridos, polímeros sintéticos (por ejemplo, carboximetilcelulosa de sodio), poli(alcohol vinilo), polivinilpirrolidona, polialquileno glicoles (por ejemplo, polietileno glicoles) y sus mezclas. El uso de micropartículas secas de PO anfifílico (por ej emplo, ácido poliamino) y el uso de un medio de reconstitución ad hoc hace así posible el cumplir con el doble obj etivo, el cual es ser capaz de obtener formulaciones farmacéuticas que sean tanto estables como fácilmente dispersables a fin de permitirles ser inyectadas parenteralmente. Además de los excipientes/estabilizadores arriba señalados para mejorar la dispersión y la estabilidad, los otros excipientes convencionales que pueden agregarse a la suspensión/solución por atomizarse o a la formulación de acuerdo con la invención son, por ejemplo, antimicrobianos, reguladores, anti-oxidantes o agentes que hacen posible ajustar la isotonicidad, los cuales se conocen por una persona experta en la materia. Puede hacerse referencia, por ej emplo, al trabaj o : Desarrollo de Fármacos Inyectables, P .K., Gupta et al. , Interpharm Press, Denver, Colorado, 1999. Esta adición de excipientes convencionales puede llevarse a cabo ya sea en la fase de dispersión acuosa o en la solución/suspensión antes de la atomización. Aplicación de la formulación líquida de acuerdo con la invención Aunque la formulación de acuerdo con la invención es preferentemente una formulación farmacéutica, sin embargo, ésta no excluye formulaciones cosméticas, de alimentos saludables o protección de plantas, que comprenden al menos un PO según se define arriba y al menos un AP . 4t0 aspecto de la invención: Equipo para reconstituir la formulación de acuerdo con la invención Las micropartículas de PO/AP y los líquidos de reconstitución esencialmente acuosos, los líquidos de reconstitución miscibles en agua, esencialmente orgánicos y los líquidos de reconstitución inmiscibles en agua, esencialmente orgánicos, se definen arriba. 5t0 aspecto de la invención: Proceso de reconstitución, en particular para reconstituir la formulación de acuerdo con la invención Las micropartículas de PO/AP y los líquidos de reconstitución esencialmente acuosos, los líquidos de reconstitución miscibles en agua, esencialmente orgánicos y los líquidos de reconstitución inmiscibles en agua, esencialmente orgánicos, se definen arriba. De acuerdo con la invención, es posible prever la proporción de filtración por esterilización, a través de filtros con una porosidad igual, por ej emplo, a 0.2 µp?, de la suspensión líquida de nanopartículas de las cuales resultan las partículas a escala de mieras de la formulación de la invención. La adición bajo condiciones estériles de acuerdo con el método de preparación arriba descrito, hace posible inyectar directamente la formulación en un paciente. 6t0 aspecto de la invención: Formulación farmacéutica sólida Esta formulación para la liberación prolongada de AP comprende una forma de polvo en seco para inhalación y administración pulmonar en base a micropartículas de PO/AP según se definen arriba. Otros aspectos de la invención La presente invención también se dirige a productos sólidos derivados de las micropartículas de PO de acuerdo con la invención. En la práctica, estos productos derivados pueden componerse, en particular, de polvos, geles, implantes o películas, entre otros. De este modo, la invención se dirige a productos derivados de la formulación de acuerdo con la invención, tomada como tal, cualquiera que sea su proceso de preparación. La invención también se refiere a un método de tratamiento terapéutico que consiste esencialmente en administrar la formulación según se describe en el presente conteo mediante la ruta parenteral, mucosal, subcutánea, intramuscular, intradérmica, intra-peritoneal o intra-cerebral, o en un tumor. La formulación de acuerdo con la invención también puede administrarse por la ruta oral, nasal, pulmonar, vaginal u ocular, entre otras. De acuerdo con una forma alternativa específica de la invención, este método de tratamiento terapéutico consiste en administrar la formulación, según se describe arriba, mediante inyección parenteral, subcutánea, intramuscular, intradérmica, intra-peritoneal o intra-cerebral o inyección en un tumor, preferentemente a fin de que forme un estrato depositado en el sitio de la inyección. La invención se entenderá mejor y sus ventaj as y modalidades alternativas surgirán claramente a partir de los ej emplos a continuación y que describen la síntesis de los POs formados por ácidos poliamino injertados por un grupo hidrofóbico, su conversión a un sistema para liberación prolongada del AP, es decir, a una formulación de acuerdo con la invención (polvo de micropartículas en seco) y las características de estabilidad y capacidad de re-dispersión de tales sistemas.

EJEMPLOS: EJEMPLO 1 : SÍNTESIS DE UN POLÍMERO ANFIFÍLICO PO-A Síntesis de un poliglutamato inj ertado por a-tocoferol de ori gen sintético 15 g de un poli(ácido a-L-glutámico) (con un peso equivalente a aproximadamente 16 900 Da con respecto a un polioxietileno estándar y obtenido por polimerización de NCAGluOMe, seguido por hidrólisis, como se describe en la solicitud de patente FR-A-2 801 226) se disuelven en 288 mi de dimetilformamida (DMF) al calentar a 80°C hasta que se disuelve el polímero. La solución se enfría a 1 5°C y 2.5 g de D,L-a-tocoferol (>98%, obtenido de Fluka®), disuelto antes en 8 mi de DMF, 280 mg de 4-dimetilaminopiridina, disuelta antes en 1 mi de DMF, y 1 .6 g de diisopropilcarbodiimida, disuelta antes en 6 mi de DMF, se agregan sucesivamente. Después de agitar por 3 horas, el medio de reacción se vierte en 1200 mi de agua comprendiendo 1 5% de clorhidrato de sodio y ácido hidroclórico (pH = 2). El polímero precipitado se recupera subsiguientemente mediante filtración y enjuaga con 0. 1 N ácido hidroclórico, con agua y con éter de diisopropilo . El polímero se seca subsiguientemente en un horno bajo vacío a 40°C. Un rendimiento del orden de 90% se obtiene. La masa molar, medida por cromatografía de exclusión estérica, es 1 5 500 con respecto a un polioxietileno estándar. El nivel de tocoferol inj ertado, estimado por espectroscopia NMR de protón, es 5. 1 mol%. Una suspensión de nanopartículas de polímero en agua se obtiene al disolverla en agua, el pH ajustándose (neutralización de los carboxilatos) a 7 +/- 1 .

EJEMPLO 2 : SÍNTESIS DE UN POLÍMERO ANFIFÍLICO PO-B El Ej emplo 2 se adapta del Ej emplo 1 , una velocidad de inj erto de 20% siendo el obj etivo.

EJEMPLO 3 : PREPARACIÓN DE PARTÍCULAS A ESCALA MICRÓN SECAS DE POLÍMERO PO-A CONTENIENDO IFN-a2b Preparación de una solución comprendiendo 20 mg/g de polímero y 0.25 mg/g de IFN 200 g de 30 mg/g solución de polímero PO-A se introducen en un matraz de 500 mi. 68 g de agua se introducen subsiguientemente en el matraz comprendiendo el polímero. Una solución congelada de IFN-a-2b concentrada a 2.8 mg/g se descongela a 25 °C por 1 h y 26.8 g de esta solución descongelada se introducen en el matraz comprendiendo la solución de polímero. La mezcla se dej a a temperatura ambiente por 14 h. La solución se filtra a través de un filtro de esterilización de 0.2 µ??. Atomización de la solución de polímero-IFN La solución se atomiza en un dispositivo atomizador de tipo Büchi B290. La solución líquida se aspira a una velocidad de 5 ml/min y nebuliza a través de una boquilla rociadora alimentada con nitrógeno (7 bar, 900 1/h). La velocidad de fluj o de succión (secar con aire) es 40 m3/h. La temperatura de entrada se mantiene a 90°C, lo que resulta, bajo estas condiciones, en una temperatura de salida de 45 °C. Caracterización de las micropartículas obtenidas : El tamaño de las partículas obtenidas (de acuerdo a la prueba T0) es D50 - 5 µ??. Después de dispersar el polvo en agua en la concentración de atomización, el ensayo IFN por HPLC es idéntico a aquel de la solución antes de la atomización y no se detecta la forma descompuesta.

EJEMPLO 4: PREPARACIÓN DE PARTÍCULAS A ESCALA MICRÓN SECAS DE POLÍMERO PO-A CONTENIENDO IFN-a2b Y POLISORBATO 80 La solución de polímero PO y de interferón se prepara en una manera idéntica al ej emplo 3. 0.9 g de polisorbato 80 se agregan a la solución antes de la atomización. Atomización de la solución de polímero-IFN en la presencia de polisorbato La solución se atomiza bajo condiciones idénticas a aquellas descritas en el ejemplo 3. Caracterización de las micropartículas obtenidas : El tamaño de las partículas obtenidas (de acuerdo a la prueba T0) es D50 = 5 µ??. Después de dispersar el polvo en agua en la concentración de atomización, el ensayo IFN por HPLC es idéntico a aquel de la solución antes de la atomización y no se detecta la forma descompuesta.

EJEMPLO 5 : PREPARACIÓN DE PARTÍCULAS A ESCALA MICRÓN SECAS ACIDIFICADAS DE POLÍMERO PO-A CONTENIENDO IFN-a2b La solución de polímero PO-A y de IFN se prepara en una manera idéntica al ejemplo 3. Se diluye subsiguientemente por adición de agua de manera que la concentración de polímero PO-A es 15 mg/g (la concentración IFN siendo entonces 0. 1 88 mg/g). Después de filtrar a través de un filtro de 0.2 µp?, la solución se acidifica por adición de 1N HC1 hasta que se obtiene un pH de 4. La solución obtenida de esta manera es opalescente. Atomización de la solución de polímero-IFN acidificada La solución se atomiza bajo condiciones idénticas a aquellas descritas en el ej emplo 3. Caracterización de las micropartículas obtenidas : El tamaño de las partículas obtenidas (de acuerdo a la prueba TO) es D50 = 5 µp?. Después de dispersar el polvo en agua en la concentración de atomización, el ensayo IFN por HPLC es idéntico a aquel de la solución antes de la atomización y no se detecta la forma descompuesta.

EJEMPLO 6: PREPARACIÓN DE PARTÍCULAS A ESCALA MICRÓN SECAS DE POLÍMERO PO-A QUE SE REVISTEN CON PVP Y QUE CONTIENEN IFN-a2b Un polvo formado de micropartículas secas de polímero PO-A y de IFN se obtiene de una mezcla PO-A/IFN de acuerdo al protocolo utilizado en el ejemplo 3. En conclusión de la etapa de atomización, 1 .5 g de este polvo se vuelven a suspender en una solución etanólica comprendiendo 7 g/1 de polivinilpirrolidona (PVP) de graado inyectable de PVP tipo K30. La suspensión etanólica se agita por 2 h y después se atomiza subsiguientemente una segunda vez en el dispositivo atomizador de tipo Büchi B290 equipado con una trampa de extracción para solvente orgánico (ciclo inerte a -20°C) y operando como un circuito cerrado bajo nitrógeno. La solución líquida se aspira a una velocidad de 5 ml/min y nebuliza a través de una boquilla rociadora alimentada con nitrógeno (7 bar - 670 1/h). La velocidad de fluj o de succión (secar con aire) es 40 m3/h. La temperatura de entrada se mantiene a 80°C, lo que resulta, baj o estas condiciones, en una temperatura de salida de 55 °C. Caracterización de las micropartículas obtenidas : El tamaño de las partículas obtenidas (de acuerdo a la prueba TO) es D50 = 6 µ??. Después de dispersar el polvo en agua en la concentración de atomización, el ensayo IFN por HPLC es idéntico a aquel de la solución antes de la atomización y no se detecta la forma descompuesta.

EJEMPLO 7 : PREPARACIÓN DE PARTÍCULAS A ESCALA MICRÓN SECAS DE POLÍMERO PO-B CONTENIENDO IFN-a2b El protocolo para preparar la solución de polímero-IFN y para atomizar es idéntico a aquel descrito en el ej emplo 3 , el polímero PO-A reemplazándose por el polímero PO-B . Caracterización de las micropartículas obtenidas : El tamaño de las partículas obtenidas (de acuerdo a la prueba TO) es D50 = 4 µp?. Después de dispersar el polvo en agua en la concentración de atomización, el ensayo IFN por HPLC es idéntico a aquel de la solución antes de la atomización y no se detecta la forma descompuesta.

EJEMPLO 8 : PREPARACIÓN DE PARTÍCULAS A ESCALA MICRÓN SECAS DE POLÍMERO PO-A CONTENIENDO hGH Preparación de la solución hGH concentrada: 60 g de una solución de hormona de crecimiento humana recombinante (concentración 3.9 mg/g) se descongelan a 25 °C por 1 h 30 y se concentran aproximadamente 6 veces por ultrafiltración frontal a través de una membrana de 1 0 kD hasta que se obtiene una concentración de 24 mg/g (monitoreándose por HPLC). Mezcla con la solución de polímero 52 g de una solución de polímero PO-A de 30 mg/g concentrada se diluyen en 1 9.5 mg/g por adición de 28 g de agua. 8 g de la solución hGH de 24 mg/g se vierten lentamente sobre la solución de polímero de esta manera diluida. La mezcla se dej a durante la noche a temperatura ambiente y después se filtra a través de un filtro de esterilización de 0.2 µ??. Atomización de la solución de polímero/hGH La solución se atomiza bajo condiciones idénticas a aquellas descritas en el ejemplo 3. Caracterización de las micropartículas obtenidas : El tamaño de las partículas obtenidas (de acuerdo a la prueba T0) es D50 = 5 µp?. Después de dispersar el polvo en agua en la concentración de atomización, el ensayo hGH por HPLC es idéntico a aquel de la solución antes de la atomización y no se detecta la forma descompuesta.

EJEMPLO 9 : PREPARACIÓN DE PARTÍCULAS A ESCALA MICRÓN SECAS DE POLÍMERO PO-A CONTENIENDO IL-2 Preparación de la solución IL-2 concentrada: 1 00 g de una solución congelada de IL-2 en la concentración de 2 g/1 estabilizada por SDS se descongelan a temperatura ambiente y entonces la solución se enfría a una temperatura de entre 0 y 2°C. 100 g de etanol absoluto se agregan lentamente a esta solución para precipitar la proteína. El precipitado se recupera mediante filtración a través de una membrana de 0.65/0.45 µp? en una célula de diafiltración frontal y enjuaga con 200 g de agua. El precipitado se seca por la aplicación de una corriente de nitrógeno. El precipitado se disuelve entonces en 1 0 g de 0.02N hidróxido de sodio preenfriado (<5 °C) para obtener una solución transparente de proteína a 20 mg/g y pH= 12 desprovisto de SDS . El ensayo exacto de la solución se determina por un método HPLC . Mezcla con la solución de polímero 96 g de una solución concentrada de polímero PO de ejemplo 1 (a 30 mg/g) se diluyen por adición de 39 g de agua. 9 g de la solución IL-2 concentrada precedente de 20 mg/g se vierten lentamente sobre la solución de polímero de esta manera diluida. La mezcla comprendiendo 20 mg/g de polímero PO y 1 .25 mg/g de IL-2 se dej a durante la noche a temperatura ambiente y después se filtra a través de un 0.2 µ?? filtro de esterilización. Atomización de la solución de polímero-IL-2 La solución se atomiza bajo condiciones idénticas a aquellas descritas en el ej emplo 3. Caracterización de las micropartículas obtenidas : El tamaño de las partículas obtenidas (de acuerdo a la prueba T0) es D50 = 5 µp?. Después de dispersar el polvo en agua en la concentración de atomización, el ensayo IL-2 por HPLC es idéntico a aquel de la solución antes de la atomización y no se detecta la forma descompuesta.

EJEMPLO 10 : PREPARACIÓN DE PARTÍCULAS A ESCALA MICRÓN SECAS DE POLÍMERO PO-A CONTENIENDO INSULINA Preparación de 40 g de una solución de insulina concentrada de 20.3 mg/g: 0.83 g de insulina humana recombinante (polvo) con una actividad de 28.7 Ul/g y con un contenido de agua de 2.5% se introduce en un matraz de vidrio. 23.62 g de agua se agregan y la insulina se dispersa con baj a agitación magnética. 6.22 g de 0.1 N HC1 se agregan hasta que se obtiene una solución de insulina ácida clara. 9.32 g de 1 N hidróxido de sodio se agregan entonces para obtener una solución final transparente teniendo un pH de entre 7 y 8. La solución de insulina se filtra a través de un filtro de esterilización de 0.2 µp?. Mezcla con la solución de polímero 37.66 g de la solución de insulina concentrada precedente se vierten lentamente (con agitación magnética) sobre 220 g de solución de polímero PO de 30 mg/g. 72.34 g de agua se agregan a la solución. La mezcla se dej a a temperatura ambiente por 4 horas y después se filtra a través de un filtro de 0.2 µp?. Atomización de la solución de polímero-insulina La solución se atomiza subsiguientemente en un dispositivo atomizador del tipo Büchi B290. La solución líquida se aspira a una velocidad de 5 ml/min y nebuliza a través de una boquilla rociadora alimentada con nitrógeno (7 bar - 900 1/h). La velocidad de flujo de succión (secar con aire) es 40 m /h. La temperatura de entrada se mantiene a 120°C, lo que resulta, baj o estas condiciones, en una temperatura de salida de 70°C . Atomización de la solución de polímero-insulina La solución se atomiza baj o condiciones idénticas a aquellas descritas en el ej emplo 3. Caracterización de las micropartículas obtenidas : El tamaño de las partículas obtenidas (de acuerdo a la prueba T0) es D50 = 5 µp?. Después de dispersar el polvo en agua en la concentración de atomización, el ensayo de insulina por HP LC es idéntico a aquel de la solución antes de la atomización y no se detecta la forma descompuesta.

EJEMP LO 1 1 : CARACTERÍSTICAS DE LAS MICROPARTÍCULAS OBTENIDAS DE ACUERDO A LA INVENC IÓN : TAMAÑO Y ESTAB ILIDAD El tamaño de las micropartículas se mide de acuerdo a la prueba T0 y la estabilidad de acuerdo a la prueba S I . La descomposición de la proteína se evalúa por HP LC al comparar un cromatograma de la formulación antes y después de la atomización. Ejemplos Tamaño D50 de Tamaño D50 después de Descomposición de la acuerdo a T0 (µp?) someter a estabilidad de proteína originada por acuerdo a ST1 (µp?) atomización* 3 5 5 ninguna 4 5 5 Ninguna 5 5 5 Ninguna 6 6 5 Ninguna 7 4 5 Ninguna 8 5 5 Ninguna 9 5 5 Ninguna 10 5 5 Ninguna * Ninguna significa que no se observa 1 Oima descompuesta.

Los resultados demuestran que la atomización de la proteínas en la presencia de un ácido poliamino anfifílico hace posible retener la estabilidad de la proteína. En la forma sólida, el polvo es estable de acuerdo al protocolo descrito. Es una condición forzada y se anticipa que la estabilidad de los polvos es de al menos dos años a 5 °C. La atomización es un método capaz de descomponer la proteína. El análisis por HPLC muestra que ninguna forma de descomposición se observa al comparar los cromatogramas antes y después de la atomización. La atomización de una proteína en la presencia de un ácido poliamino anfifílico resulta en micropartículas que son estables con el tiempo y no causan la descomposición de la proteína. Estos polvos pueden utilizarse en una forma sólida (inhalación, inyección sin aguj a por una pistola bajo presión, por ej emplo) o en la forma de una suspensión inyectable después de la reconstitución en un medio apropiado.

EJEMPLO 12 : RECONSTITUCIÓN DE SUSPENSIÓN INICIANDO DE LOS POLVOS DE EJEMPLOS 3 A 1 0. Los polvos se reconstituyen en tres medios diferentes de acuerdo al protocolo descrito para llevar a cabo la prueba DP I . A. Una solución salina reguladora de fosfato acuoso a pH 7.4 B . Una solución de cloruro de magnesio acuosa a 0. 1 M C . Una solución de triglicérido de ácido capricho (Miglyol® 812) Las muestras se evalúan subsiguientemente al llevar a cabo las siguientes etapas: dispersar en uno de los medios mencionados arriba transferir en una j eringa y después inyectar a través de una aguj a de 25 G Se considera que la suspensión tiene buenas propiedades si al menos 80% se recupera por succión/inyección a través de una aguj a de 25G. Resultados: También se ha medido que la proteína no se descompone después de la reconstitución en los medios A, B y C durante la prueba de estabilidad. Estos resultados muestran que solamente con la composición del Ej emplo 7 es posible obtener una suspensión estable e inyectable de las micropartículas en agua reguladas por PBS a pH = 7.4. Para la mayoría de los ej emplos (excepto 5), el medio de reconstitución comprendiendo una sal divalente hace posible mejorar estas propiedades. En medio Miglyol, todas las formulaciones son fácilmente dispersables, inyectables y estables.

La combinación de estas propiedades no se obtiene fácilmente de acuerdo al polímero utilizado . Es crédito de los inventores haber encontrado, después de numerosas pruebas, que ciertos excipientes y medios de reconstitución hacen posible obtenerlas.

EJEMPLO 1 3 : MEDICIÓN DE VISCOSIDAD DE LAS FORMULACIONES RECONSTITUIDAS Una dispersión de 30 mg/ml de los polvos en los medios B y C de los ej emplos precedentes (excepto 5 en el medio B) da suspensiones estables de baj a viscosidad; en el medio B, las viscosidades medidas son todas menores a 10 mPa. s y, en el medio C, las viscosidades son todas del orden de 30 a 40 mPa.s. A manera de comparación, una composición de los mismos polímeros en la forma de nanopartícula de acuerdo a la técnica anterior no puede obtenerse en esta concentración (30 mg/ml) con valores de viscosidad aceptables (< 100 mPa.s).

EJEMPLO 14: PREPARACIÓN DE PARTÍCULAS A ESCALA MICRÓN SECAS DE POLÍMERO PO-A CONTENIENDO IFN-a2b OBTENIDAS EN UNA FORMA EN POLVO LIOFILIZADA Las partículas se preparan primero como se describe en el ej emplo 3. La etapa de atomización se lleva a cabo baj o condiciones asépticos y las partículas se recuperan en un contenedor estéril . Partículas que se vuelven a dispersar en la presencia de iones Mg2+ Justo después de la fase de atomización, se recuperan partículas y se vuelven a dispersar bajo condiciones asépticas en una solución acuosa de 0. 1 M MgCl2. La cantidad de solución de MgCl2 agregada se ajusta de manera que la concentración de polímero PO-A en la suspensión es aproximadamente de 40 mg/ml. El pH se ajusta a 6.5 por adición de 1 N hidróxido de sodio. Liofilización La suspensión se divide en contenedores tipo Lyoguard® que permiten mantener estéril la suspensión durante la liofilización: los contenedores se liofilizan entonces en una manera estéril por un ciclo de 72h en un liofilizador de laboratorio (en una unidad de tabla lab Christ, Osterode, Alemania). El polvo se divide en una manera estéril en matraces antes del uso.

EJEMPLO 1 5 : COMPARACIÓN DE LA RECONSTITUCIÓN DE LOS POLVOS DE MICROPARTÍCULAS OBTENIDOS INICIANDO DEL EJEMPLO 3 Y LOS POLVOS DE MICROPARTÍCULAS DEL EJEMPLO 14. Para esta comparación, los volúmenes de las suspensiones reconstituidas son idénticos en ambos casos (aproximadamente 1 mi) y los matraces de reconstitución son idénticos (matraces de vidrio de 3 mi). Las cantidades de polvos se ajustan de manera que ambas suspensiones contienen al final 40 mg/ml de polímero y 0.5 mg/ml de IFN-a2b. El polvo del ej emplo 3 se reconstituye en una solución acuosa de 0. 1 M MgCl2 y el polvo del ej emplo 14 (que ya contiene iones Mg2+) se reconstituye en agua pura. En una primera vez, los matraces se agitan manualmente.

Cuando el polvo del ej emplo 3 requiere al menos 1 5 minutos para volverse a dispersar, la dispersión es más rápida con el polvo del ej emplo 14 y con menos de 5 minutos, se obtiene una suspensión homogénea. Una barra de agitación magnética se inserta entonces en matraces y ambos matraces se agitan en una manera idéntica por l h. Al final de esta agitación, las características de ambas suspensiones se comparan: el tamaño de partículas y la viscosidad de ambas suspensiones son similares.

EJEMPLO 1 6 : FARMACOCINÉTICAS DE IFN EN UN PERRO DESPUÉS DE UNA INYECCIÓN SUB-CUTÁNEA DE UNA FORMULACIÓN EN BASE A ÁCIDOS POLIAMINO ANFIFÍLICOS EN UNA FORMA MICROP ARTICULAR Ocho perros Beague (peso 9 ± 0.6 kg) se han tratado con las siguientes formulaciones: IFN IR (IR para liberación inmediata) corresponde a una solución de interferón humano recombinante (PCGen, grupo IB05.051 6) ajustada en concentración, pH y osmolaridad ([IFN] = 0.5 mg/ml, pH = 6.5 , y 354 mOsm). Las partículas de la formulación 1 se preparan de acuerdo al ej emplo 14 iniciando del mismo grupo PCGen de interferón: el polvo liofilizado se vuelve a suspender en agua en una manera estéril (bajo una capucha de flujo de aire laminar) de acuerdo a un proceso análogo al proceso descrito en el ej emplo 1 5. Los resultados de farmacocinéticas se indican en la siguiente tabla: en donde: Cmax es la concentración sérica IFN máxima; T > 50 pg/ml es el tiempo en donde la concentración sérica IFN es más alta que 50 pg/ml; AUC representa el área bajo la curva correspondiente a la concentración sérica IFN en función de tiempo; RBA representa la biodisponibilidad en relación a una formulación de Liberación Inmediata; - T50o/oauc representa el tiempo necesario para desalar el 50% de IFN desalado total. IFN IR representa un perfil de rápida liberación con una concentración sérica máxima de 25.2 ± 0.4 ng/ml, obtenida después de un tiempo promedio de 5h (rango: 3 -5h). IFN circulante no es más cuantificable después de 24h.

La formulación 1 ofrece una modificación principal del perfil farmacocinético IFN, con una liberación muy lenta, y una concentración sérica máxima de 0.5 ± 0.2 ng/ml (50 veces interior a la concentración sérica máxima de la forma IR) obtenida después de un tiempo promedio de 60 h (rango : 48 -96 h). El aspecto general de las farmacocinéticas es un perfil plano con pseudo placa. Los niveles de IFN circulante es una concentración no cuantificable entre 192 h y 240 h (8 y 10 días). Esta formulación tiene una AUC inferior a 66% de pérdida de la biodisponibilidad relativa (RBA = 34 %) T es aproximadamente 20 veces más alta que Tso%auc de IFN IR.

EJEMPLO 1 7 : FARMACODINÁMICAS DE INSULINA EN UN PERRO DESPUÉS DE UNA INYECCIÓN SUBCUTÁNEA DE UNA FORMULACIÓN EN BASE A POLIAMINOÁCIDOS ANFIFÍLICOS EN UNA FORMA MICROP ARTICULAR La referencia de este ej emplo, Lantus®, es un análogo de insulina modificado (insulina de glargina- Sanofi Aventis). La modificación de dos aminoácidos en la estructura primaria de la insulina humana da a Lantus® propiedades de liberación prolongada durante un periodo de 24 h a través de una precipitación in situ. Un grupo de 6 perros Beagle saludables (peso 1 1 .4 ± 1 kg) se ha tratado con la formulación Lantus® durante una prueba cruzada de dos periodos y un grupo de 8 perros Beagle saludables (peso 1 1 .8 ± 1 kg) se ha tratado con la formulación 2, dos y dos, durante una prueba cruzada de cuatro periodos. La tabla recaptiulativa del tratamiento se resume abajo : : Las partículas de la formulación 2 se preparan de acuerdo al ej emplo 10 al tener como objetivo una proporción de 30 mg de polímero PO par 3.5 mg ( 100 IU) de insulina. La formulación se prepara al dispersar el polvo atomizado en 0. 1 M MgCl2 y por agitación magnética de la suspensión por l h. El pH de la formulación es 6.2 y la osmolaridad es 348mOsm. El tamaño de partícula correspondiente, medido con una prueba T i , es: D50 = 12 µp? y la viscosidad de formulación es aproximadamente 5mPa. s a 20°C. La glicemia se dosifica por método enzimático (hexoquinasa) con una máquina de análisis bioquímico de sangre (Advia 1650, Bayer Diagnostics). El análisis de los resultados de farmacodinámicas se basa en el porcentaj e de la glicemia basal relativa al tiempo . Los datos de farmacodinámicas se indican en la siguiente tabla: Cmin es el porcentaj e mínimo observado de la glicemia base; APGC0-36h (Curva de Glicemia Por ciento de Area) representa la superficie entre la glicemia base ( 1 00%) y la curva que representa la evolución de glicemia (expresada en % de la glicemia base) durante el tiempo entre 0 y 36 h post-dosis; T5 representa el tiempo necesario para obtener 50 % de APGC0-36h. La administración de la referencia Lantus® conduce a una rápida disminución de la glicemia desde la primer hora. La acción hipoglicémica de insulina de glargina se mantiene entonces durante un periodo comprendido entre 1 8 y 36 h (la glicemia se regresa a su nivel base después de 30 h en el promedio). En comparación, la administración de la formulación 2 conduce también a una rápida disminución de glicemia desde la primer hora. El porcentaj e de la glicemia base se mantiene entonces al nivel hasta 36 h en el promedio. Cm¡n obtenida con la formulación 1 está en el promedio más alto que Cmi„ de la referencia Lantus®, esto podría permitir reducir de manera considerable varios fenómenos de hipoglicemia con pacientes diabéticos. La duración de acción de la formulación 2 es claramente más alta que la duración de acción de la acción larga de la referencia Lantus®. Esto se ilustra por el valor promedio de T50%APGC m s alto con la formulación 2. Una pérdida de APGCo-36h de solamente 24% se observa con la formulación 2 en relación a la referencia Lantus®.

Claims

REIVINDICACIONES

1 . Una micro-partícula de polímero (PO) que comprende al menos un principio activo (AP), el polímero PO: • siendo un (co)polímero anfifílico biodegradable, soluble en agua, que contiene grupos hidrofóbicos (HG) y grupos hidrofílicos, • que forma espontáneamente una suspensión coloidal de nanopartículas en agua, a pH 7.0, bajo condiciones isotónicas, • y asociándose de manera no covalente con el AP; cuyas micropartículas a. se obtienen mediante atomización de una solución o suspensión coloidal de PO que comprende al menos un AP, b. tienen un tamaño, medido en una prueba T, de entre 0.5 y 100 mieras, preferentemente entre 1 y 70 mieras, preferentemente entre 2 y 40 mieras, c. y son dispersables en suspensión coloidal en una prueba de "capacidad de dispersión" DP I .

2. La micropartícula según la reivindicación 1 , caracterizada porque es estable en una prueba ST l o en una prueba ST2.

3. La micropartícula según la reivindicación 1 ó 2, caracterizada porque PO es un copolímero de tipo bloque o aleatorio.

4. La micropartícula según cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizada porque los grupos hidrofílicos del PO son grupos ionizables (IG) que son al menos parcialmente ionizados.

5. La micropartícula según cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizada porque el PO es un ácido (co)poliamino anfifílico o una mezcla de ácidos (co)poliamino anfifílicos.

6. La micropartícula según cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizada porque el PO es un ácido poliamino que tiene una cadena principal formada por unidades aspárticas y/o unidades glutámicas, modificándose al menos una porción de estas unidades mediante inj erto de al menos un grupo hidrofóbico (HG) en la cadena o en el extremo de la cadena.

7. La micropartícula según cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizada porque el PO se define por la fórmula general (I) (el radical -COOR3 incluye formas en donde el enlace entre el carboxílico y R3 es un enlace iónico -COO"+R3) : (I) en la cual : ¦ R1 representa un H, un alquilo C2 a C 10 lineal o C3 a C i0 ramificado, un benzilo, o -R4 -[HG] , ¦ NHR1 es un residuo amino ácido terminal ; ¦ R2 representa un H, un acilo C2 a C 10 lineal o C3 a C 1 0 ramificado, o -R4-[HG] ; ¦ R2 es residuo piroglutamato terminal; ¦ R3 es un H; o ¦ +R3 se selecciona preferentemente a partir del grupo que comprende: cationes de metal ventajosamente seleccionados a partir del sub-grupo que comprende: sodio, potasio, calcio y magnesio, cationes orgánicos ventajosamente seleccionados a partir del sub-grupo que comprende: • cationes en base a amino, • cationes en base a oligoamino, · cationes en base a poliamina (siendo la polietilenoimina particularmente preferida), • cationes en base a amino ácido(s) ventajosamente seleccionado(s) a partir de la clase que comprende cationes en base a lisina 0 una arginina, - o ácidos poliamino catiónicos ventajosamente seleccionados a partir del sub-grupo que comprende polilisina u oligolisina; ¦ R4 representa un enlace directo o un separador en base a 1 a 4 residuos amino ácidos; ¦ A representa independientemente un radical -CH2-(unidad aspártica) o un radical -CH2-CH2- (unidad glutámica); ¦ n/(n+m) se define como la velocidad de injerto molar y su valor es suficientemente baj o para PO, disuelto en agua a pH = 7 y a 25 °C, para formar una suspensión coloidal de partículas de tamaño de sub-micra de PO, preferentemente n(n+m) se encuentra entre 1 y 25% mol y aún mejor entre 1 y 1 5% mol . ¦ n+m se define como el grado de polimerización y varía desde 10 hasta 1000, preferentemente entre 50 y 300; ¦ HG representa un grupo hidrofóbico que comprende 6 a 30 átomos de carbono.

8. La micropartícula según cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizada porque el PO o POs corresponden a una de las siguientes fórmulas generales (II), (III) y (IV) (el radical -COOR3 incluye formas en donde el enlace entre el carboxílico y R3 es un enlace iónico -COO+R3 ) : (III) (IV) en las cuales: ¦ HG representa un grupo hidrofóbico que comprende 6 a 30 átomos de carbono; ¦ R30 es una cadena de alquileno lineal bivalente C2 a C6; ¦ R3 es un H, o ¦ R se selecciona preferentemente a partir del grupo que comprende: cationes de metal ventajosamente seleccionados a partir del subgrupo que comprende: sodio, potasio, calcio y magnesio, cationes orgánicos ventajosamente seleccionados a partir del sub-grupo que comprende: • cationes en base a amino, • cationes en base a oligoamino, • cationes en base a poliamina (siendo la polietilenoimina particularmente preferida), • cationes en base a amino ácido(s) ventajosamente seleccionado(s) a partir de la clase que comprende cationes en base a lisina o una arginina, o ácidos poliamino catiónicos ventajosamente seleccionados a partir del sub-grupo que comprende polilisina u oligolisina; ¦ R50 es una cadena de alquileno lineal bivalente C ) a C8 en donde una o dos unidades de metileno, preferentemente en cada extremo de R50, puede reemplazarse independientemente por -O o -NH; ¦ R4 representa un enlace directo o un separador en base a 1 a 4 residuos amino ácidos; ¦ A representa independientemente un radical -CH2- (unidad aspártica) o un radical -CH2-CH2- (unidad glutámica); ¦ n +m o n" se define como el grado de polimerización y varía de 10 a 1000, preferentemente entre 50 y 300.

9. La micropartícula según la reivindicación 7 u 8 , caracterizada porque el grupo R4 representa un solo enlace.

10. La micropartícula según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, caracterizada porque el PO o POs comprenden al menos una copolihidroxialquilglutamina "esencialmente neutral" (preferentemente alquilo es etilo) que comprende una multiplicidad de grupos hidrofóbicos pendientes (HGs) que son idénticos o diferentes entre sí.

1 1 . La micropartícula según cualquiera de las reivindicaciones 6 a 1 0, caracterizada porque todos o parte de los radicales hidrofóbicos HGs de los POs se seleccionan independientemente a partir del grupo de radicales que comprende: ¦ un alcoxi lineal o ramificado que comprende desde 6 a 30 átomos de carbono y que puede comprender al menos un heteroátomo (preferentemente O o N o S) o al menos una insaturación, ¦ un alcoxi que comprende 6 a 30 átomos de carbono y que tiene uno o más carbociclos templados y que opcionalmente comprende al menos una insaturación o al menos un heteroátomo (preferentemente O o N o S); ¦ un alcoxiarilo o un ariloxialquilo de 7 a 30 átomos de carbono y que puede comprender al menos una insaturación o al menos un heteroátomo (preferentemente O o N o S).

12. La micropartícula según cualquiera de las reivindicaciones 6 a 1 0, caracterizada porque el grupo hidrofóbico HG se selecciona a partir del grupo que comprende radicales alcoxi del tipo : -OCH2(CH2-CH2)3 -8-CH3, oleilo, tocoferilo o colesterilo y R4 representa un solo enlace.

13. La micropartícula según cualquiera de las reivindicaciones 6 a 1 0, caracterizada porque los n grupos HG del PO representan cada uno, independientemente entre sí, un radical monovalente de la siguiente fórmula: (HG) en la cual : R5 representa un metilo, isopropilo, isobutilo, sec-butilo, benzilo; R6 representa un radical hidrofóbico que comprende desde 6 hasta 30 átomos de carbono; I varía desde 0 hasta 6.

14. La micropartícula según la reivindicación 13 , caracterizada porque todos o parte de los radicales R6 de los POs se seleccionan independientes a partir del grupo de radicales que comprende: ¦ un alcoxi lineal o ramificado que comprende desde 6 a 30 átomos de carbono y que puede comprender al menos un heteroátomo (preferentemente O o N o S) o al menos una insaturación, ¦ un alcoxi que comprende 6 a 30 átomos de carbono y que tiene uno o más carbociclos templados y que opcionalmente comprende al menos una insaturación o al menos un heteroátomo (preferentemente O o N o S); ¦ un alcoxiarilo o un ariloxialquilo de 7 a 30 átomos de carbono y que puede comprender al menos una insaturación o al menos un heteroátomo (preferentemente O o N o S).

1 5. La micropartícula según la reivindicación 1 3 ó 14, caracterizada porque el radical hidrofóbico R6 del injerto del PO se selecciona a partir del grupo que comprende radicales alcoxi del tipo : -OCH2(CH2-CH2)3 -8-CH3, oleilo, tocoferilo o colesterilo.

16. La micropartícula según cualquiera de las reivindicaciones 6 a 9 y 1 1 a 1 5, caracterizada porque la cadena principal del ácido poliamino es un a-L-glutamato u homopolímero a-L-glutámico.

1 7. La micropartícula según cualquiera de las reivindicaciones 6 a 9 y 1 1 a l 5 , caracterizada porque la cadena principal del ácido poliamino es un a-L-aspartato u homopolímero a-L-aspártico.

1 8. La micropartícula según cualquiera de las reivindicaciones 6 a 9 y 1 1 a l 5 , caracterizada porque la cadena principal del ácido poliamino es a-L-aspartato/a-L-glutamato o un copolímero a-L-aspártico/a-L-glutámico.

19. La micropartícula según cualquiera de las reivindicaciones 6 a 1 8 , caracterizada porque PO comprende HG, (n/n+m) en la fórmula (I), a un nivel de al menos 1 0% mol, preferentemente de al menos 1 5% mol.

20. La micropartícula según cualquiera de las reivindicaciones 6 a 19, caracterizada porque la masa molar de PO yace entre 2000 y 100 000 g/mol y preferentemente entre 5000 y 40 000 g/mol.

21 . Un proceso para la preparación de micropartículas de PO que comprenden al menos un principio activo (AP), siendo estas micropartículas en particular según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 20, i. el polímero PO: • siendo un (co)polímero anfifílico biodegradable, soluble en agua, que contiene grupos hidrofóbicos (HG) y grupos hidrofílicos [preferentemente grupos ionizables (IG) al menos parcialmente ionizados] , • que forma espontáneamente una suspensión coloidal de nanopartículas en agua, a pH 7.0, bajo condiciones isotónicas, • y asociándose de manera no covalente con el AP; ii. teniendo dichas micropartículas un tamaño, medido en una prueba T I , de entre 0.5 y 100 mieras, preferentemente entre 1 y 70 mieras, preferentemente entre 2 y 40 mieras, cuyo proceso comprende atomizar esencialmente una solución o suspensión coloidal de PO que comprende el AP .

22. El proceso según la reivindicación 21 , caracterizado porque el PO presente en la solución o suspensión coloidal se encuentra al menos parcialmente en la forma de nanopartículas de PO que tienen un tamaño, medido en la prueba T I , de menos de 500 nm, preferentemente de entre 10 y 300 nm y más preferentemente aún de entre 10 y 100 nm.

23. Un proceso según la reivindicación 21 ó 22, caracterizado porque las micropartículas de polímero PO asociadas con al menos un principio activo (AP) se dispersan en un medio líquido esencialmente acuoso, conteniendo dicho medio preferentemente un medio de dispersión M i y en donde la dispersión obtenida se liofiliza.

24. Un proceso según la reivindicación 23 , en donde el medio de dispersión M i se selecciona en el siguiente grupo : i. iones multivalentes cuya polaridad es opuesta a la polaridad de los grupos ionizables del polímero PO y que se contienen en la fase acuosa continua; ii. al menos un compuesto hidrofílico (preferentemente útil para una preparación inyectable) agregado en la suspensión/solución de PO por atomizar y contenido así en las micropartículas atomizadas de PO/AP; iii. al menos una cubierta de micropartículas con al menos una película de al menos un compuesto hidrofílico (preferentemente útil para una preparación inyectable); iv. el cambio de pH; v. y combinaciones de al menos dos de los medios (i) a (iv); prefiriéndose particularmente los medios (i).

25. Una formulación farmacéutica líquida para la liberación prolongada del AP, la cual comprende una suspensión coloidal, de baja viscosidad, en base a una micropartícula de PO que comprende al menos un AP, siendo estas micropartículas según se reivindica en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 20 o aquellas obtenidas mediante el proceso según la reivindicación 21 a 24.

26. La formulación según la reivindicación 25, caracterizada porque comprende un medio M2 para dispersar micropartículas de PO asociadas con al menos un AP .

27. La formulación según la reivindicación 25 ó 26, caracterizada porque la fase continua de la suspensión es esencialmente acuosa.

28. La formulación según la reivindicación 25 ó 26, caracterizada porque la fase continua de la suspensión es una fase miscible en agua, esencialmente orgánica.

29. La formulación según la reivindicación 25 ó 26, caracterizada porque la fase continua de la suspensión es una fase inmiscible en agua, esencialmente orgánica.

30. La formulación según la reivindicación 25 ó 26, eventualmente 27, caracterizada porque el medio de dispersión M2 se selecciona a partir del siguiente grupo : i. iones multivalentes cuya polaridad es opuesta a la polaridad de los grupos ionizables del polímero PO y que se contienen en la fase acuosa continua; ii. al menos un compuesto hidrofílico (preferentemente útil para una preparación inyectable) agregado en la suspensión/solución de PO por atomizar y contenido así en las micropartículas atomizadas de PO/AP ; iii. al menos una cubierta de micropartículas con al menos una película de al menos un compuesto hidrofílico (preferentemente útil para una preparación inyectable); iv. el cambio de pH; v. y combinaciones de al menos dos de los medios (i) a (iv); prefiriéndose particularmente los medios (i).

3 1 . La formulación según la reivindicación 30, caracterizada porque el compuesto de cubierta hidrofílica se selecciona a partir del grupo que comprende: ? amino ácidos; ? polialquileno glicoles, preferentemente polietileno glicoles; ? copolialquileno glicoles, preferentemente copolímeros de etileno glicol/propileno glicol (de tipo Poloxamer o Pluronic o Lutrol); ? polímeros de celulosa y sus derivados, preferentemente carcoxialquilcelulosas o alquilcelulosas; ? sacáridos hidrogenados o no hidrogenados, tal como trehalosa, sorbitol, manitol o sucrosa; ? polioles, tales como propileno glicol o glicerol; ? gelatinas, preferentemente gelatinas hidrolizadas; ? (co)polímeros de nitrógeno, preferentemente aquellos presentes en el grupo que comprende poliacrilamidas, poli-N-vinilamidas, polivinilpirrolidonas (PVPs) y poli-N-vinillactamos; ? poli(vinilo alcohol)es (PVAs); ? poli(sodioglutamato); ? y sus mezclas; comprendiendo preferentemente dicho compuesto de cubierta hidrofílica al menos un polímero hidrofílico.

32. La formulación según las reivindicaciones 25 y 27 ó 28 , caracterizada porque el medio de dispersión comprende un líquido )fílico, el punto de fusión del cual es preferentemente menor de o igual C, presente en la fase continua inmiscible en agua o miscible en agua.

33. La formulación según la reivindicación 32, caracterizada porque el líquido lipofílico comprende al menos una mezcla de triglicéridos de ácidos grasos saturados o al menos un aceite vegetal o al menos un lípido o al menos un derivado de lípido o al menos un ácido graso o al menos un derivado de ácido graso.

34. La formulación según la reivindicación 33 , caracterizada porque el líquido lipofílico comprende al menos una mezcla de triglicéridos de ácidos grasos saturados C8-C i0 que resultan de aceite de coco; • al menos un aceite vegetal, preferentemente aceite de soya, aceite de palma, aceite de linaza, aceite de algodón, aceite de ajonjolí, aceite de girasol o aceite de maní; • al menos un lípido, preferentemente una lecitina líquida, vitamina E, sintética o natural; • al menos un derivado de lípido, preferentemente araquidoilfosfatidilcolina y estearoilfosfatidilcolina, · al menos un ácido graso, preferentemente ácido oleico, ácido mirístico, ácido palmítico, ácido esteárico y sus sales; • al menos un derivado de ácido graso, preferentemente un derivado mono-, di- o triglicérido, oleato de etilo, lactato de laurilo, estearato de glicerilo, palmitato de sorbitan, estearato de sorbitan, monooleato de sorbitan o polisorbato; • y sus mezclas; con la condición de acuerdo a la cual, en el caso donde algunos de los productos arriba mencionados, tomados por separado, no sean líquidos a una temperatura de menos de o igual a, por ej emplo, 1 5°C, entonces estos productos se mezclan con otros a fin de que sean líquidos a una temperatura de menos de o igual a, por ej emplo, 1 5 °C .

35. La formulación según las reivindicaciones 25 y 27 ó 28 y opcionalmente 32, 33 ó 34, caracterizada porque el medio de dispersión comprende una cubierta de las micropartículas con al menos un compuesto de cubierta formador de películas (que preferentemente puede usarse para una preparación inyectable).

36. La formulación según la reivindicación 35, caracterizada porque el compuesto de cubierta formador de película comprende al menos un polímero hidrofóbico seleccionado a partir del grupo que comprende poliláctidos; poliglicólidos; poli(láctido-co-glicólido)s; poliortoésteres; polianhídridos; poli(ácido hidroxibutírico)s; policaprolactonas; poli(alquil carbonato)s, polímeros de PO solubles en agua; sus derivados y sus mezclas.

37. La formulación según la reivindicación 25 y 27 ó 29 y opcionalmente al menos una de las reivindicaciones 3 1 a 35 , caracterizada porque el compuesto de cubierta formadora de película es de naturaleza lípida y exhibe un punto de fusión preferentemente mayor de o igual a 1 5°C y comprende al menos una mezcla de triglicéridos de ácidos grasos saturados o al menos un aceite vegetal o al menos un lípido o al menos un derivado de lípido o al menos un ácido graso o al menos un derivado de ácido graso o una mezcla de estos productos.

38. Un equipo de reconstitución, en particular, para reconstituir la formulación según cualquiera de las reivindicaciones 24 a 37, caracterizado porque comprende: • micropartículas de PO que comprende al menos un AP, siendo estas micropartículas aquellas según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 20 o aquellas obtenidas por el proceso según la reivindicación 21 ó 22; • y un líquido de reconstitución, seleccionado a partir del grupo que comprende: ? líquidos esencialmente acuosos; ? líquidos esencialmente orgánicos, miscibles en agua; ? y líquidos esencialmente orgánicos, inmiscibles en agua.

39. Un proceso de reconstitución, en particular para reconstituir la formulación según cualquiera de las reivindicaciones 24 a 37, caracterizado porque comprende esencialmente: • mezclar => micropartículas de PO que comprenden al menos un AP, siendo estas micropartículas aquellas según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 20 o aquellas obtenidas por el proceso según la reivindicación 2 1 ó 22 ; => y un líquido de reconstitución seleccionado a partir del grupo que comprende: ? líquidos esencialmente acuosos; ? líquidos esencialmente orgánicos, miscibles en agua; ? y líquidos esencialmente orgánicos, inmiscibles en agua • y agitar esta mezcla.

40. Una formulación farmacéutica sólida para la liberación del AP, que comprende una forma en polvo seco : • en base a micropartículas de PO que comprenden al menos un AP, siendo estas micropartículas aquellas según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 20 o aquellas obtenidas por el proceso según la reivindicación 21 ó 22; • u obtenerse a partir de la formulación según cualquiera de las reivindicaciones 24 a 37.

41 . La formulación farmacéutica sólida según la reivindicación 40, para inhalación y administración pulmonar.