ME02786B - Glp-1 pegilovana jedinjenja - Google Patents

Glp-1 pegilovana jedinjenja

Info

Publication number
ME02786B
ME02786B MEP-2010-486A MEP48610A ME02786B ME 02786 B ME02786 B ME 02786B ME P48610 A MEP48610 A ME P48610A ME 02786 B ME02786 B ME 02786B
Authority
ME
Montenegro
Prior art keywords
glp
pegylated
pegylated glp
compound according
peg
Prior art date
Application number
MEP-2010-486A
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
Wolfgang Glaesner
John Philip Mayer
Rohn Lee Junior Millican
Andrew Mark Vick
Lianshan Zhang
Original Assignee
Lilly Co Eli
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Lilly Co Eli filed Critical Lilly Co Eli
Publication of ME02786B publication Critical patent/ME02786B/me

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/575—Hormones
    • C07K14/605—Glucagons
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
    • A61K47/60—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes the organic macromolecular compound being a polyoxyalkylene oligomer, polymer or dendrimer, e.g. PEG, PPG, PEO or polyglycerol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Child & Adolescent Psychology (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Polyethers (AREA)

Description

Opis
Oblast pronalaska
Predmetni pronalazak se odnosi na polietilen glikol (PEG) modifikovana jedinjenja glukagon-sličnog peptida -1 (GLP-1) i odnosi se na kompozicije koje su korisne za lečenje stanja ili poremećaja koji su poboljšani smanjenjem nivoa glikoze u krvi, smanjenjem unosa hrane, smanjenje gastričnog ili intestinalnog praženjenja, povećanjem broja beta (β) ćelija i/ili funkcijom i/ili inhibicijom apoptoze β ćelija, ili smanjenjem gastrične ili intestinalne pokretljivosti.
Stanje tehnike
GLP-1 prouzrokuje brojne biološke efekte kao što su stimulacija izlučivanja insulina, inhibicija glukagon sekrecije, inhibicija stomčnog pražnjenja, inhibicija stomačne pokretljivosti ili pokretljivosti creva, pospešivanje iskorišćenosti glukoze i podsticanje gubitka telesne mase. GLP-1 takođe može imati ulogu u prevenciji odumiranja p-ćelija pankreasa koje se javlja kao posledica napredovanja insulin nezavisnog dijabets mellitusa (NIDDM). Značajna karakteristika GLP-1 je njegova sposobnost da stimuliše sekreciju insulina bez propratnog rizika od hipoglikemije. GLP-1 izaziva sekreciju insulina samo kada je nivo šećera povišen, za razliku od ostalih terapijskih postupaka koji deluju povećanjem lučenja insulina bez obzira da li su nivoi šećera povišeni ili ne.
Svrsishodnost terpije kaja uključuje GLP-1 peptideje ograničena činjenicom daje GLP-l(l-37) slabo aktivan i dva prirodno dostupna skraćena peptida, GLP-l(7-37)OH i GLP-1 (7-36)NH2, se brzo u vivo pročiste i imaju ekstremno kratak u vivo polu-život. Poznato je da endogeno proizvedena dipeptidil-peptidaza IV (DPP-IV) zaustavlja cirkulaciju GLP-1 peptida uklanjanjem histidin i alanin ostataka na N-terminalu i glavni je uzrok kratkog u vivo polu-života.
Iako su razni pristupi rezultirali dobijanjem GLP-1 jedinjenja sa dužim vremenom polu-života ili većim potencijalomod biološke aktivnosti prirodnog GLP-1, dodatna jedinjenja su potrebna da bi se smanjio klirens i povećalo vreme polu-života i na taj način optimizovala sposobnost GLP-1 da bude delotvoran kao terapijsko sredstvo koje može biti administrovano minimalan broj puta u toku dužeg vremenskog perioda. Međunarodne patentne prijave br. PCT/US2004/006082 i br. PCT/CTS2000/11814 opisuju kovalentno vezivanje jednog ili više molekula PEG za razna GLP-1 i eksendin jedinjenja. Ova jedinjenja mogu imati vreme polu-života koje prelazi 24 sata omogućavajući manji broj administracija PEGilovanog GLP-1 jedinjenja uz istovremeno održavanje visokog nivoa jedinjenja u krvi u toku dužeg vremenskog perioda.
Dalja istraživanja su otkrila problem koji se sastoji u separaciji PEG od PEGilovanog GLP-1 ili eksendin jedinjenja koja se javlja u toku dužeg vremena čuvanja. Kao rezultat, slobodni GLP-1 ili eksendin peptid povećava početnu izloženost koncentracijama čiji maksimumi izlaze iz terapijskih okvira, do otvara mogućnost povećavanja neželjenih pratećih posledica kao su mučnina i povraćanje.
Predmetni pronalazak teži da prevaziđe probleme povezane sa produženim vremenom čuvanja i mogućnošću separacije PEG od PEGilovanog GLP-1 ili eksendin jedinjenja uvođenjem dva mesta PEGilacije u GLP-1 ili eksendin jedinjenja i potom simultanom PEGilacijom ta dva mesta PEGilacije. Ovakav pristup ima najmanje četiri prednosti. Prvo, PEGilacija jedinjenja će značajno produžiti u vivo vreme polu-života jedinjenja. Drugo, PEGilacija jedinjenja će usporiti apsorpciju jedinjenja i na taj način smanjiti početnu „eksploziju” Ieka, za koju se veruje daje odgovorna za izazivanje neželjenih pratećih posledica. Treće, linearni PEG može biti korišten direktno za PEGilaciju i na taj način uprostiti postupak sinteze. Četvrto, dvostruka PEGilacija će ublažiti probleme povezane sa produženim vremenom čuvanja i mogućnošću separacije PEG od PEGilovanog GLP-1 ili eksendin jedinjenja smanjenjem verovatnoće separacije oba PEG od istog GLP-1 ili eksendin peptid molekula.
Povrh toga, uvođenjem dva mesta PEGilacije u GLP-1 ili eksendin jedinjenje na C-terminalnom kraju jedinjenja i potom simultanom PEGilacijom ta dva mesta PEGilacije dobija se PEGilovano jedinjenje koje iskazuje veću aktivnost od onih PEGilovanih jedinjenja kod kojih najmanje jedno mesto PEGilacije nije na C-
terminalnom kraju peptida. Dalje, povezivanje linkera koji se sastoji od dva mesta PEGilacije na C-terminalnom kraju GLP-1 jedinjenja i potom simultanom PEGilacijom ta dva mesta PEGilacije dobija se PEGilovano GLP-1 jedinjenje koje iskazuje veću aktivnost od onih PEGilovanih jedinjenja kod kojih su mesta PEGilacije vezana za C-terminalni kraj GLP-1 jedinjenja bez linkera.
Takvo PEGilovano GLP-1 jedinjenje može se koristiti kao terapijsko sredstvo za lečenje pacijenata koji boluju od nekih od sledećih poremećaja: diajbetes, klinička gojaznost, poremćaja stomačne ili/i crevne pokretljivosti, nedeostatak beta (B) ćelija (na primer, insuficijencija ili nefunkcionalne β ćelija) i poremećaj stomačnog ili/i crevnog pražnjenja, sa posebnom prednošću da PEGilovano GLP-1 jedinjenje u skladu sa predmetnim pronalaskom zahteva manji broj administrovanja u toku perioda od 24 sata, istovremeno olakšavajući pacijentu unos potrebne doze uz ispunjavanje terapijskih potreba.
KRATAK OPIS PREDMETNOG PRONALASKA
Predmetni pronalazak, ovde opisan, omogućava dobijanje GLP-1 jedinjenja kovalentno vezano za dva molekula polietilen glikola (PEG). ili njegovih derivata u kojima je svaki PEG vezan za cistein ostatak, čime se dobija PEGilovana GLP-1 jedinjenja sa vremenom polu-života od najmanje jednog sata, ili najmanje 3, 5, 7, 10, 15, 20 sati ili najmanje 24 sata. PEGilovana GLP-1 jedinjenja u skladu sa predmetnim pronalaskom imaju vrednost klirensa od 200 ml/h/kg ili manje, ili 180,150, 120, 100, 80, 60 ml/h/kg ili manje, ili manje od 50, 40 ili 20 ml/h/kg.
PEGilovana GLP-1 jedinjenja u skladu sa predmetnim pronalaskom sadrže sekvencu amino kiseline sledeće formula:
His-Xaa8-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Xaa22-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Xaa33-Lys-Gly-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Cys45- Xaa46 Formula I (SEQ ID NO: 1) u kojoj je Xaa8 : D-Ala, Gly, Val, Leu, Ile, Ser, ili Thr;
Xaa22 je: Gly, Glu, Asp, ili Lys;
Xaa33 je: Val ili Ile
Xaa46 je: Cys ili Cys-NH2
i u kojoj je jedan PEG molekul kovalentno vezan zaCyS45 ijedan PEG molekul je kovalentno vezan za Cys46 ili Cys46-NH2.
Poželjno je da za PEGilovana GLP-1 jedinjenja Formule I: Xaag je Gly ili Val; Xaa22 je Gly ili Glu; Xaa33 je Val ili Ile; i Xaa46 je Cys ili Cys-NH2. Takođe, poželjna su i PEGilovana GLP-1 jedinjenja Formule I, u kojima: Xaa8 je Val; Xaa22 je Glu; Xaa33 je Val ili Ile; i Xaa46 je Cys ili Cys-NH2. Sledeća grupa poželjnih PEGilovanih GLP-1 jedinjenja Formule I, je ona u kojoj: Xaa8 je Val; Xaa22 je Glu; Xaa33 je Val; i Xaa46 je Cys. Sledeća grupa poželjnih PEGilovanih GLP-1 jedinjenja Formule I, je ona u kojoj: Xaa8 je Val; Xaa22 je Glu; Xaa33 je Val; i Xaa46 je Cys-NH2. Sledeća grupa poželjnih PEGilovanih GLP-1 jedinjenja Formule I, je ona u kojoj: Xaa8 je Val; Xaa22 je Glu; Xaa33 je Ile; i Xaa46 je Cys. Sledeća grupa poželjnih PEGilovanih GLP-1 jedinjenja Formule I, je ona u kojoj: Xaa8 je Val; Xaa22 je Glu; Xaa33 je Ile; i Xaa46 je Cys-NH2.
Polietilen glikol (“PEG”) polimeri korišteni u predmetnom pronalasku imaju molekulsku masu između 500 i 100,000 daltona, ili između 5,000 i 40,000 daltona, ili između 20,000 i 60,000 daltona, ili između 20,000 i 40,000 daltona i mogu biti linearni ili razgranati molekuli i mogu biti derivati polietilen glikola opisani u literaturi poznati prosečnom stručnjaku u tehnici. PEG molekul kovalentno vezan za OLP-1 jedinjenja u predmetnom pronalasku nije ograničen samo na određeni tip. Poželjno je da PEG bude linearni metoksi PEG maleimid molekulske mase 20 kilodalton. Još poželjnije je da PEG bude formule:
Predmetni pronalazak obuhvata jedinjenja za stimulaciju GLP-1 receptora kod pacijenata kod kojih je ta stimulacija potrebna. Jedinjenja administrirana pacijentu u delotvomoj dozi PEGilovanog GLP-1 jedinjenja ovde opisanog. Pacijenti kojima je potrebna stimalacija GLP-1 receptora uključuju one koji boluju od insulin-nezavisnog
dijabetesa, hiperglikemije izazvane stresom, kliničke gojaznosti, poremećaja stomačne ili/i crevne pokretljivosti ili poremećaja pražnjenja uključujući, na primer, sindrom nadraženih creva, nedostatka beta (B) ćelija, i funkcionalne dispezije.
DETALJAN OPIS PREDMETNOG PRONALASKA
[Glukagon-Like Peptid 1 (GLP-1) je peptid koji sadži 37 amino kiselina i luči ga L-ćelije tankog creva kao reakciju na unos hrane. Brojni GLP-1 analogi i njihovi derivati su opisani u stručnoj literaturi. Predmetni pronalazak opisuje modifikovanje GLP-1 jedinjenja koje kao rezltat daje produženo vreme polu-života i/ili umanjenje vrednosti klirensa. Inkorporiranje cistein ostataka određeno mesto u amino kiseline peptida obezbeđuje tiol grupu za koju (PEG) ili PEG derivati mogu biti kovalentno vezani dajući PEGilovano GLP-1 jedinjenje.
[0015] Izraz „GLP-1 jedinjenje” na način ovde korišten uključeje prirodne GLP-1, [GLP-l(7-37)OH ili GLP-1 (7-36)NH2], GLP-1 analoge, GLP-1 derivate, GLP-1 biološki aktivne fragmente, produženi GLP-1 ili analog ili fragment produženog GLP-1 peptida, eksendin-4 analozi i eksendin-4 derivati.Poželjno je da GLP-1 analog ima sekvencu amino kiseline GLP-1 (7-37)OH ili produženog GLP-1 peptida takvu da se 1, 2, 3, 4, 5 ili 6 amino kiseline razlikuju od amino keseline na odgovarajućoj poziciji GLP-1 (7-37)OH ili fragmenta GLP-1 (7-37)OH ili modifikovanu tako da se 0, 1, 2, 3, 4, 5 ili 6 amino kiseline razlikuju od amino kiselina na odgovarajućim pozicijama produženog GLP-1 peptida.
Izraz “PEGilovano” kada se odnosi na GLP-1 jedinjenje u skladu sa predmetnim pronalaskom označava takvo GLP-1 jedinjenje koje je hemijski modifikovano kovalentnim povezivanjem dva molekula polietilen glikola ili njegovog derivata. Dalje, izraz „PEG” se odnosi na polietilen glikol ili njegov derivat kao što je poznato u tehnici (pogledati, na primer, patentnu prijavu U.S. Patent Nos.: 5,445,090; 5,900,461;
5,932,462; 6,436,386; 6,448,369; 6,437,025; 6,448,369; 6,495,659; 6,515,100 i 6,514,491). Poželjno je da u PEGilovanom GLP-1 jedinjenju u skladu sa predmetnim pronalaskom, PEG (ili njegov derivat) bude kovalentno vezan za dva cistein ostatka uvedena u GLP-1 jedinjenje. Poželjno je da dva cistein ostatka uvedena u GLP-1 jedinjenje budu na na pozicijama 45 i 46.
Izraz „Insulinotropna aktivnost” se odnosi na sposobnost atimulacije lučenja insulina kao odgovora na povišene nivoe glukoze, time prouzrokujući ćelijsku apsorpciju glukoze i opadanje nivoa glukoze u plazmi. Insulinotropna aktivnost se može postići postupcima koji su poznati u tehnici, uključujući korišćenje u vivo eksperimenata i in vitro istraživanja koja mere aktivnost povezivanja GLP-1 receptora ili njihovu aktivaciju, na primer, istraživanja insulocit ćelija pankreasa ili insulinoma ćelija, kao stoje opisano u patentnoj prijavi br. EP 619,322 od strane Gelfand, et al., i U.S. Patent No. 5,120,712, redosledno. Insulinotropna aktivnost se kod ljudi rutinski određuje merenjem nivo insulina ili nivoa C-peptida. Za svrhu predmetnog pronalaska korišteno je in vitro ispitivanje signalizacije GLP-1 receptora da bi se utvrdilo da li će PEGilovano GLP-1 jedinjenje u skladu sa predmetnim pronalaskom iskazati insulinotropnu aktivnost u vivo. Insulinotropna aktivnost je ponašanje koje se može iskoristiti kao demonstracija daje PEGilovano GLP-1 jedinjenje biološki aktivno. Sva opisana PEGilovana GLP-1 jedinjenja u skladu sa predmetnim pronalaskom su insulinotropno aktivna (Pogledati Primer 6).
Izraz ,Jn vitro potencijal” na način upotrbljen ovde, je mera sposobnosti peptida da aktiviraju GLP-1 receptor u ispitivanjima ćelija, in vitro potencijal je izražen kao „EC50” koji predstavlja delotvomu koncentraciju jedinjenja koja se ogleda u 50% aktivnosti u ispitivanju reakcije na jednu dozu. Za svrhu predmetnog pronalaska, in vitro potencijal je određen fluoroscentnim ispitivanjem HEK-293 ćelija koje stabilno eksprimuje ljudski GLP-1 receptor. Ove HEK-293 ćelije imaju stabilno integrisan DNA vektor sa cAMP odzivnom elementom (CRE) koji upravlja eksprimovanjem gena luciferaze. Interakcija GLP-1 jedinjenja ili PEGilovanog GLP-1 jedinjenja sa receptorom inicira signal što rezultuje aktivacijom cAMP odzivnog elementa što kao posledicu ima eksprimovanje luciferaze. EC50 vrednosti za PEGilovana GLP-1 jedinjenja nabrojana u Primeru 3 su određene, prethodno opisanim, ispitivanjem luciferaze. Relativne vrednosti in vitro potencijala mogu se utvrditi upotrebom Val8-GLP-l(7-37)OH ili prirodni GLP-1 kao kontrolnog peptida kojem je dodeljena vrednost 100%.
Izraz „plazma polu-život” se odnosi na vreme u kome polovina referentnih molekula cirkuliše u plazmi pre nego što budu očišćeni. Alternativno korišten izraz je „polu-život eliminacije”. Izrazi „produženi” ili „duži” korišteni u kontekstu polu-života u plazmi ili polu-života eliminacije ukazuju na statistički značajano produženje vremena polu-života PEGilovanog GLP-1 jedinjenja u odnosu na referentni molekul (na primer, nePEGilovan oblik peptida ili prirodni peptid) kao stoje određeno u uporednim uslovima. Poželjno je da PEGilovano GLP-1 jedinjenje u skladu sa predmetnim pronalaskom ima vreme polu-života eliminacije od najmanje jednog sata, još poželjnije je da taj period bude najmanje 3, 5, 7, 10, 15, 20 sati i najpoželjnije je da bude najmanje 24 sata. Polu-životi dati kasnije u Primerima 4 i 5 su polu-životi eliminacije; su oni koji odgovaraju terminalnoj log-lineamoj brzini eliminacije. Prosečan stručnjak u tehnici zna daje polu-život podeljeni parametar koji se menja i u funkciji od klirensa kao i od zapremine dietribucije.
Klirens je mera sposobnosti organizma da eliminiše lek. Kad klirens opada zbog, na primer, modifikacije leka, za očekivati je da se poveća vreme polu-života. Međutim, ovaj recipročan odnos je tačan samo kad nema promene u zapremini distribucije. Upotrebljiv aproksimativni odnos između terminalnog log-lineamog polu-života (ti/2), klirensa (C), i zapremine distribucije (V) je dat jednačinom: t1/2 ≈ 0.693 (V/C). Klirens ne pokazuje količinu uklinjenog leka,već zapreminu biološkog fluida kao stoje krv ili plazma koja treba potpuno očistiti od leka da bi se računalo kao eliminacija. Klirens je izražen kao zapremina u jedinici vremena. PEGilovana GLP-1 jedinjenja u skladu sa predmetnim pronalaskom imaju vrednosti klirensa od 200 ml/h/kg ili manje, ili 180, 150, 120, 100, 80, 60 ml/h/kg ili manje, ili 50, 40 ili 20 ml/h/kg ili manje (pogledati Primere 4 i 5).
U predmetnom pronalasku, Cys amino kiselina je uvedena na pozicijama 45 i 46 GLP-1 jedinjenja. Dobijeni molekul je PEGilovan na Cys amino kiselinama dajući modifikovan molekul koji zadržava svu ili deo biološke aktivnosti imajući duže vreme polu-života u poređenju sa nemodifikovanim molekulom ili u poređenju sa prirodnim molekulom.
GLP-1 jedinjenja korištena u predmetnom pronalasku mogu biti dobijena upotrebom uobičajenih tehnika sinteze peptida u obliku rastvora ili u čvrstom stanju.
Kad je GLP-1 jedinjenje pripremljeno i prečišćeno, ono je PEGilovano kovalentnim vezivanjem dva PEG molekula za GLP-1 jedinjenje. Veliki broj postupka koji opisuju kovalentnu konjugaciju PEG za peptide je objavljen u stručnoj literaturi (za
pregled članaka pogledati, Roberts, M. et al. Advanced Drug Delivery Reviews, 54:459-476, 2002). PEGilacija peptida na karboksilnom terminalu može biti izvedena putem enzimskog kuplovanja upotrebom rekombinata GLP-1 peptida kao prekursora ili putem drugih opisanih postupaka poznatih prosečnom stručnjaku u tehnici. Pogledati na primer, patentnu prijavu U.S. Patent 4,343,898 ili International Journal of Peptide & Protein Research.43:127-38, 1994. Jedan način dobijanja PEGilovanog GLP-1 jedinjenja u skladu sa predmetnim pronalaskom se sastoji u upotrebi PEG-maleimida za direktno vezivanje PEG za tiol grupu peptida. Uvođenje tiol funkcionalne grupe može biti postignuto dodavanjem ili unošenjem Cys ostatka na ili u peptid na prethodno opisanoj poziciji. A thiol functionality can also be introduced onto the side-chain of the peptide (na primer acilacija lizin £-amino grupe kiseline koja sadrži tiol). Proces PEGilacije predmetnog pronalaska koristi Michael-ovu adiciju da bi se dobio stabilan tioetar linker. Reakcija je krajnje specifična i odvija se u blagim uslovima u prisustvu drugih funkcionalnih grupa. PEG maleimid je upotrebljen kao reaktivni polimer za dobijanje dobro definisanih, bioaktivnih konjugata PEG-proteina. Poželjno je da se u postupku koristi više molekula GLP-1 jedinjenja koja sadrže tiol u odnosu na PEG maleimid da bi se reakcija do kraja izvela. Poželjno je da se reakcije izvode na vrednostima između pH = 4.0 i pH = 9.0, na sobnoj temperaturi u trajanju od 1 do 40 sati. Višak nePEGilovanog peptida koji sadrži tiol je lako izdvojen od PEGilovanog proizvoda korišćenjem uobičajenih postupaka sparacije. Primeri uslova potrebnih za odvijanje PEGilacija GLP-1 jedinjenja su dati u Primerima 1 i 2. Cistein PEGilacija može biti izvedena upotrebom PEG maleimida ili razgranatog PEG maleimida. Poželjno je da PEG bude linearni metoksi PEG maleimid sa molekulskom masom 20 kilodaltona.
[0024] U svom tipičnom obliku, PEG je linearni polimer sa terminalnim hidroksil grupama i ima sledeću formulu HO-CH2CH2-(CH2CH2O)n-CH2CH2-OH, gde je n od oko 8 do oko 4000. Terminalni vodonik može biti supstituisana zaštitnom grupom kao što je alkil ili aril grupa. Poželjno je da PEG ima najmanje jednu hidroksilnu grupu, još poželjnije to bude terminaina hidroksilna grupa. Ta hidroksilna grupa, po mogućnosti pobuđena, reaguje sa peptidom. Postoje mnogi oblici PEG koji se mogu koristiti u patentnom pronalasku. Mnogobrojni PEG derivati koji su opisani u stručnoj literaturi su odgovarajući za upotrebu u predmetnom pronalasku. (Pogledati, na primer, patentnu
prijavu U.S. Patent Nos: 5,445,090; 5,900,461; 5,932,462; 6,436,386; 6,448,369; 6,437,025; 6,448,369; 6,495,659; 6,515,100 i 6,514,491 i Zalipsky, S. Bioconjugate Chem. 6:150 do 165, 1995). Nije namera da PEG molekul kovalentno vezan za GLP-1 jedinjenja u predmetnom pronalasku bude ograničen na određeni tip. Poželjno je da 5 molekulska masa PEG-a bude od 500 do 100,000 daltona, još poželjnije je da bude od 20,000 do 60,000 daltona i najpoželjnije je da bude od 20,000 do 40,000 daltona. PEG može biti linearan ili razgranat.
[PEGilovana GLP-1 jedinjenja u skladu sa predmetnim pronalaskom ima in vitro biološku aktivnost koja je najmanje 0.5%ođ biološke aktivnosti prirodnog GLP-1 ili of ) Val8-GLP-l(7-37)OH. PEGilovana GLP-1 jedinjenja u skladu sa predmetnim
pronalaskom imaju in vitro biološku aktivnost koja je najmanje l%od biološke aktivnosti prirodnog GLP-1 ili Valg-GLP-l(7-37)OH. Poželjno je da PEGilovana GLP-1 jedinjenja u skladu sa predmetnim pronalaskom imaju in vitro biološku aktivnost koja je najmanje 3%od biološke aktivnosti prirodnog GLP-1 ili of Valg-GLP-1(7-37)OH. Takva biološka ' aktivnost može biti utvrđena istrživanjem in vitro potencijala kao što je kasnije opisano (Primer 3) ili nekim drugim ispitivanjem GLP-1 pozanatim u tehnici. Iako neka PEGilovana GLP-1 jedinjenja u skladu sa predmetnim pronalaskom mogu imati biološku aktivnost nižu od biološke aktivnosti prirodnog GLP-1 ili Val8-GLP-l(7-37)OH kao što izmereno u konkretnom ispitivanju; ovaj pad je kompenzovan produženim vremenom polu-života i/ili smanjenom vrednošću klirensa.
Administracija PEGilovanog GLP-1 jedinjenja može se vršiti na bilo koji delotvoran način od strane prosečnog lekara. Periferna parenteralni način je jedan od od takvih načina. Parenteralna administracija se u medicinskoj literaturi uobičajeno opisuje kao injekcija jediničnog oblika administracije u telo upotrebom sterilnog šprica ili nekog drugog medicinskog uređaja kao što je infuziona pumpa. Periferni parenteralni načini administracije mogu uključiti: intravenozni, intramuskulami, supkutani, i intraperitonealni način administracije. PEGilovana GLP-1 jedinjenja u skladu sa predmetnim pronalaskom takođe mogu biti pogodna za administraciju oralnim, rektalnim, nazalnim načinom, ili u donje respiratorne puteve, koji nije parenteralni način. Od ne parenteralnih načina administracije poželjni su, u donje respiratorne puteve i oralni način.
PEGilovana GLP-1 jedinjenja u skladu sa predmetnim pronalaskom mogu se
koristiti u za lečenje velikog broja bolesti i stanja. PEGilovana GLP-1 jedinjenja u skladu sa predmetnim pronalaskom primamo iskazuju svoju biološku deletvomost ponašajući se kao receptor poznat kao „GLP-1 receptor”. Pacijenti sa bolestima i/ili stanjima na koje povoljno utiče stimulacija GLP-1 receptora ili administracija GLP-1 jedinjenja mogu zbog toga biti lečeni PEGilovanim GLP-1 jedinjenjima u skladu sa predmetnim pronalaskom. Za ove pacijente se kaže „potrebno im je lečenje GLP-1 jedinjenjima” ili „potrbna im je stimulacija GLP-1 receptora”. Uključeni su pacijenti koji boluju od insulin nezavisnog dijabetesa, insulin zavisnog dijabetesa, moždanog udara (pogledati patentnu prijavu WO 00/16797), infarkta miokarda (pogledati patentnu prijavu WO 98/08531), kliničke gojaznosti (pogledati patentnu prijavu WO 98/19698), katboličnih promena posle operacije (pogledati patentnu prijavu U.S. Patent No. 6,006,753), funkcionalne dispepzije i sindroma nadraženih creva (pogledati patentnu prijavu WO 99/64060). Takođe su uključeni pacijenti kojima je potreban preventivnim tretman GLP-1 jedinjenjem, na primer, pacijenti sa rizikom razvijanja insulin nezavisnog dijabetesa (pogledati patentnu prijavu WO 00/07617). Pacijenti sa poremećenom tolerancijom na glukozu ili smanjenom toleracijom na glukozu, pacijenti čija je telesna masa oko 25% iznad normalne telesne mase za pacijentovu visinu i telesnu građu, pacijenti sa delimičnom pankreatektomijom, pacijenti koji imaju jednog ili oba roditelja sa insulin nezavisnim dijabetesom, pacijenti koji su imali gestationalni dijabetes i pacijenti koji su imali akutni ili hronični pankreatitis su pacijenti sa rizikom od razvijanja insulin nezavisnog dijabetesa.
Delotvoma doza PEGilovanih GLP-1 jedinjenja, ovde opisanih, je količina koja administracijom, pacijentu kome je potrebna stimulacija GLP-1 receprora, daje željene terapijske i/ili profilatičke efekte bez izazivanja neprihvatljivih pratećih posledica. „Željeni terapijski efekat” uključije jedno ili više od nabrojanih: 1) poboljšanje simptoma povezanih sa bolešću ili stanjem; 2) odloženo vreme pojavljivanja simptoma povezanih sa bolešću ili stanjem; 3) produženje životnog veka u poređenju sa odsustvom lečenja; i 4) bolji kvalitet života u poređenju sa odsustvom lečenja. Na primer, „delotvoma doza” PEGilovanog GLP-1 jedinjenja za lečenje dijabetesa je količina koja će prouzrokovati bolju kontrolu koncentacije glukoz u krvi nego kad nema tretmana i time će odložiti pojavljivanje komplikacija povezanih sa dijabetesom kao što su retinopatija, neuropatija ili bolest bubrega. „Delotvoma doza” PEGilovanog GLP-1 jedinjenja za preventivu dijabetesa je ona količina koja će, u poređenju sa odsustvom tretmana, odložiti pojavljivanje povišenih nivoa glukoze u krvi koji zahtevaju lečenje anti-hiperglikemnim lekovima kao što su sulfonil uree, tiazolidindioni, metformini, insulin i/ili bisguanidini. Tipično, PEGilovana GLP-1 jedinjenja u skladu sa predmetnim pronalaskom biće administrirana u takvim dozama da se njihov nivo u plazmi kreće u rasponu od oko 5 pikomol/litar i oko 200 pikomol/litar. Optimalni plazma nivoi za Val8-GLP-l(7-37)OH su determinisani između 30 pikomol/litar i oko 200 pikomol/litar.
Delotvoma doza PEGilovanog GLP-1 jedinjenja koja normalizuje nivo glukoze kod pacijenta zavisiće od brojnih činilaca, od kojih su neki, bez ograničavanja, pol pacijenta, životno doba i težina, ozbiljnost nemogućnosti regulacije nivoa glukoze u krvi, način administracije i biodostupnosti, farmakološko kinetički profil PEGilovanog GLP-1 jedinjenja, potencijal, i formulacija. Tipičan raspon doziranja PEGilovanih GLP-1 jedinjenja u skladu sa predmetnim pronalaskom kretaće se od oko 0.01 mg na dan do oko 1000 mg na dan za odrasle. Poželjno je da se doziranje kreće od oko 0.1 mg na dan do oko 100 mg na dan Još poželjnije od oko 1.0 mg/dan do oko 10 mg/dan .
Poželjno je da PEGilovana GLP-1 jedinjenja u skladu sa predmetnim pronalaskom budu administrirana ili jedmom u dve nedelje ili jednom nedeljno. U zavisnosti od lečene bolesti može se javiti potreba za češćom administracijom PEGilovanog GLP-1 jedinjenja kao, na primer dva do tri puta nedeljno.
“Pacijent” je sisar, poželjno čovek, ali takođe može biti i životinja, na primer, kućni ljubimci (na primer, psi, mačke, i slično), domaće životinje (na primer, krave, ovce, svinje, konji, i slično) i laboratorijske životinje (na primer, pacovi, miševi, zamorčići, i slično).
Peptidi korišteni da bi se dobila PEGilovana GLP-1 jedinjenja u skladu sa predmetnim pronalaskom mogu biti dobijena standardnim tehnikama sinteze peptida u obliku rastora ili u čvrstom stanju.
Predmetni pronalazak je ilustrovan sledećim primerima.
PRIMERI:
Reakcije PEGilacije se izvode u uslovima koji dozvoljavaju formiranje tioetar veze. Specifično je da se pH rastvora kreće u rasponu od oko 4 do 9 i da se koncentracija peptida koji sadrže tiol kreće u rasponu od 1 do 10 koncentracije PEG2-MAL u molarom višku. Reakcije PEGilacije se normalno izvode na sobnoj temperaturi. PEGilovani GLP-1 peptid je potom izolovana upotrebom reversne faze HPLC hromatografije zamene jona, ili ekskluzionone hromatografije (SEC). PEGilovani GLP-1 analozi su okarakterisaniupotrebom analitičke RP-HPLC, HPLC-SEC, SDS-PAGE, i/ili MALDI Masene spektrometrije.
GLP-1 peptidi koji sadrže tiol su podvrgnuti reakciji sa polietilen glikol-maleimidom (PEG-maleimid) da bi se dobili derivati sa PEG kovalentno vezanim preko tioetar veze. Na primer, GLP-1 jedinjenje, 46aa dužine; 7.5 mg, 1.8 µmol je rastvoreno u 2 ml 200 mM fosfat pufera koji sadrži 20 mM EDTA, pH = 7.4. Rastvor je potom produvan argonom. U ovaj rastvor je dodato 40 mg metoksi-PEG-MAL, linearnog ili razgranatog PEG maleimida (Sheanvater Polimers, Ine., Huntsville, Alabama) (0.55:1 mol/mol odnos PEG u odnosu na peptid). Reakcija se odvijala u toku 2 sata. Potom je 25 mg PEGilovanog peptida prečišćeno upotrebom RP-HPLC, su okarakterisani ekskluzionom HPLC, i ispitano na in vitro aktivnost.
Primer 2 - Reakcija 2X20kDa-PEG-maleimida sa GLP analozima
GLP-1 analozi su selektivno PEGilovani na uvedene cistein ostatke upotrebom linearnog pobuđenog maleimida 20 kDa mPEG (NOF, Ine.). Za reakciju PEGilacije, peptid koji će biti PEGilovan je rastvoren u 100 mM NH4Ac puferu koji sadrži lOmM EDTA na pH = 6.8 i dodat je 1,25-puta u molamom višku 20 kDa-mPEG. Reakcijska smeša je mešana na sobnoj temperaturi u periodu od 1 do 4 sata i SP-Sepharose katjonska hromatografija je upotrebljena da bi se izdvojilo PEGilovano jedinjenje od slobodnog PEG i slobodnog peptida. Konjugat je oslobođen od soli pomoću RP-HPLC i je liofiliziran.
[HEK-293 ćelije, koje pouzdano predstavljaju ljudski GLP-1 receptor, korišćenjem sistema CRE-Luciferaze, su posejane u koncentraciji od 30,000 ćelija/ležište/80 pl u niskom serumskom DMEM F12 kao medijumu na ploče sa 96 ležišta. Dan posle sejanja, 20 p.1 aliquots ispitivanog proteina rastvorenog u 0.5% BSA je promešano i inkubirano sa ćelijama u toku 5 sati. Generalno 10 razblaženih rastvora koji sadrže od O.OOlnM do lOnM su pripremljeni za ispitivanje GLP-1 jedinjenja i 0.0003nM i 3nM su pripremljeni za Val8-GLP-l(7-37)OH standard pre dodavanja ćelijama da bi se dobila kriva osetljivosti na dozu od koje su određivane EC50 vrednosti. Posle inkubacije, 100 µl reagensa Luciferaze je direktno dodato na svaku ploču i blago mešano u toku 2 minuta. Ploče su stavljene u Tri-lux luminometar i izračunata je svetlosna emisija koja je posledica eksprimovanja luciferaze. Prosečna EC50 vrednost za PEGilovano GLP-1 jedinjenje prema Formuli I, u kojem: Xaas je Val; Xaa22 je Glu; Xaa33 je Ile; i Xaa46 je Cys; je 0.22±0.03 nM. Prosečna EC50 vrednost za PEGilovano GLP-1 jedinjenje prema Formuli I, u kojem: Xaa8 je Val; Xaa22 je Glu; Xaa33 je Ile; i Xaa46 je Cys-NH2 ; je 0.36±0.04 nM.
Primer 4 - Farmakokinetička ispitivanja derivatizovanog GLP-1 peptida
PEGilovanog GLP-1 jedinjenje odgovarajuće Formuli I, u kojem: Xaa8 je Val; Xaa22 je Glu; Xaa33 je Ile; i Xaa46 Cys-NH2 je administrirano, intravenoznim (IV) ili supkutanim (SK) načinom, u dozi od 0.1 mg/kg mužjaku SD pacova. Životinjama (3 pacova po grupi) je uzimana krv nekoliko puta u vremenskom intervalu od 0 i 192 sati posle administracije. Plazma je uzimana iz svakog uzorka i analizirana radio-imunoesejem specifičnim za N-kraj (N-terminalni specifični radioimunoesej). Farmakokinetički parametri (FK) su izračunati upotrebom noncompartmental methods (WinNonlin Pro). U slučaju intravenozne administracije, PEGilovani GLP-1 analog ima vreme polu-života eliminacije od približno 1,2 dana dok u slučaju supkutane administrcije PEGilovani GLP-1 analog ima vreme polu-života eliminacije od približno 1,1 dan. Nikakave nepoželjne kliničke opservacije nisu povezane sa IV ili SK administracijom doze od 0.1 mg/kg. Produženi polu-život eliminacije spor klirens i
supkutana biodostupnost (približno 30%) su osmotreni za jedinjenje. Podaci koji to pokazuju dati su u Tabeli 1
Tabela 1 - Srednje vrednosti (±SD) FK parametara za PEGilovano GLP-1 jedinjenje odgovarajuće Formuli I, u kojem: Xaa8 je Val; Xaa22 je Glu; Xaa33 je Ile; i Xaa46 je Cys-NH2 u slučaju intrvenozne ili supkutane administracije doze od 1 mg/kg mužjacima SD
.
Kad je Val8-GLP(7-37)OH na sličan način IV administriran Fischer 344 pacovim u dozi od 10 pg/kg, bitno različite vrednosti klirensa i polu-života eliminacije su zabeležene, kao što je dato u donjoj tabeli.
PEGilovano GLP-1 jedinjenje odgovarajuće Formuli I, u kojem: Xaas je Val; Xaa22 je Glu; Xaa33 je Ile; i Xaa46 je Cys-NH2 je admonistrirano, supkutanim putem (SK), u dozi od 0.01 mg/kg mužjacima cynomolgus majmuna. Životinjama je uzimana krv u različitim vremenskim periodima između 0 i 168 sati posle administracije. Serum je uziman od svakog uzorka i analiziran N-terminalnim specifičnim radioimunesejem.
Farmakokinetički parametri (FK) su izračunati upotrebom farmakokinetičkih metoda (WinNonlin Pro). Prikupljeni podaci su dati u donjoj u Tabeli 2.
Tabela 2 - Srednje vrednosti (±SD) FK parametara za PEGilovano GLP-1 jedinjenje odgovarajuće Formuli I, u kojem: Xaa8je Val; Xaa22 je Glu; Xaa33 je Ile; i Xaa46 je Cys-NH2 posle supkutane administracije doze od 0.01 mg/kg mužjacima cynomolgus
majmuna.
PEGilovano GLP-1 jedinjenje odgovarajuće Formuli I, u kojem: Xaag je Val;
Xaa22 je Glu; Xaa33 je Ile; i Xaa46 je Cys-NH2 je admonistrirano, supkutanim putem (SK), u dozi od 0.01 mg/kg mužjacima cynomolgus majmuna. Ravnomerna intravenozna infuzija glukoze je sprovedena odmah posle SK administracije nosača kao kontrole (fosfatni pufer) i 1, 5, i 7 dana posle SK administracije doze od 0.01 mg/kg PEGilovanog GLP-1 analoga. Stepenasta intravenozna infuzija glukoze je izvedena na omamljenim majmunima posle 16 sati posta. Uzorci krvi su uzeti 10 minuta pre početka infuzije i neposredno pred sam početak infuzije glukoze da bi se definisala osnovna linija. Stepenasta infuzija glukoze (20% dekstroza) je potom započeta tempom od 10 mg/kg/min u toku 20 minuta i nastavljena infuzijom 25 mg/kg/min u toku narednih 20 minuta.
Uzorci krvi su uzimani svakih deset minuta u toku trajanja infuzije. Nivoi insulina su određivani imunoesejem. Insulinotropna aktivnost se pokazivala u toku 7 dana (u odnosu naplacebo; p<0.0001) posle jedne SK injekcije doze od 0.01 mg/kg PEGilovanog GLP-1 analoga. Prikupljeni podatci su dati u donjoj Tabeli 3.
[0042] Srednje vrednosti (±SD) PD parametara za PEGilovano GLP-1 jedinjenje odgovarajuće Formuli I, u kojem: Xaa8 je Val; Xaa22 je Glu; Xaa33 je Ile; i Xaa46 je Cys-NH2 posle supkutane administracije doze od 0.01 mg/kg mužjacima cynomolgus majmuna.

Claims (13)

1.    di-PEGilovano GLP-1 jedinjenje koje sadrži sekvencu amino kiseline sledeće formule: His-Xaa8-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr*Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Xaa22-Gln- Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Xaa33u-Lys-Gly-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala- Pro-Pro-Pro-CyS45- Xaa46 Formula I (SEQ1D NO: 1) u kojem: Xaa8 je: D-Ala, Gly, Val, Leu, Ile, Ser, ili Thr; Xaa22 je: Gly, Glu, Asp, ili Lys; Xaa33 je: Val ili Ile; Xaa46 je: Cys ili Cys-NH2; i u kojem je jedan PEG molekul kovalantno vezan za Cys45 i jedan PEG molekul je kovalentno vezan za Cys46 ili Cys46-NH2.
2.    di-PEGilovano GLP-1 jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 1 u kojem: Xaa8 je Gly, ili Val, i Xaa22 je Gly ili Glu.
3.    di-PEGilovano GLP-1 jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 1 ili zahtevom 2 u kojem: Xaas je Val i Xaa22 je Glu.
4.    di-PEGilovano GLP-1 jedinjenje u skladu sa bilo kojim od patentnih zahteva od 1 do 3 u kojem: Xaa8 je Val, Xaa22 je Glu, Xaa33 je Ile, i Xaa46 je Cys-NH2.
5.    di-PEGilovano GLP-1 jedinjenje u skladu sa bilo kojim od patentnih zahteva od 1 do 4 u kojem: PEG molekuli imaju molekulsku masu između 5,000 i 40,000 daltona.
6.    di-PEGilovano GLP-1 jedinjenje u skladu sa bilo kojim od patentnih zahteva od 1 do 4 u kojem: PEG molekuli imaju molekulsku masu između 20,000 i 60,000 daltona.
7.    di-PEGilovano GLP-1 jedinjenje u skladu sa bilo kojim od patentnih zahteva od 1 do 4 u kojem: PEG molekuli imaju molekulsku masu između 20,000 i 40,000 daltona.
8.    di-PEGilovano GLP-1 jedinjenje u skladu sa bilo kojim od zahteva od 1 do 4 u kojem je svaki od PEG molekula korištenih u reakciji PEGilacije linearni metoksi PEG maleimid molekulske mase 20,000 daltona.
9.    di-PEGilovano GLP-1 jedinjenje u skladu sa bilo kojim od prethodnih patentnih zahteva u kojem su PEG molekuli simultano vezivani.
10.    di-PEGilovano GLP-1 jedinjenje u skladu sa bilo kojim od prethodnih zahteva u kojem je linker koji sadrži Cys45 i Cys46 ili Cys46-NH2 mesta PEGilacije vezan na C-terminal GLP-1 jedinjenja.
11.    di-PEGilovano GLP-1 jedinjenje, u skladu sa bilo kojim od zahteva od 1 do 10, za upotrebu kao lek.
12.    di-PEGilovano GLP-1 jedinjenje, u skladu sa bilo kojim od zahteva od 1 do 10, za korišćenje u lečenju insulin-nezavisnog dijabetesa ili kliničke gojaznosti.
13.    Upotreba di-PEGilovanog GLP-1 jedinjenja, u skladu sa bilo kojim od zahteva od 1 do 10, za proizvodnju lekova za lečenje insulin-nezavisnog dijabetesa ili kliničke gojaznosti.
MEP-2010-486A 2005-05-13 2006-05-11 Glp-1 pegilovana jedinjenja ME02786B (me)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US68068805P 2005-05-13 2005-05-13
PCT/US2006/018284 WO2006124529A1 (en) 2005-05-13 2006-05-11 Glp-1 pegylated compounds
EP06759598A EP1881850B1 (en) 2005-05-13 2006-05-11 Glp-1 pegylated compounds

Publications (1)

Publication Number Publication Date
ME02786B true ME02786B (me) 2011-10-31

Family

ID=36926842

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
MEP-2010-486A ME02786B (me) 2005-05-13 2006-05-11 Glp-1 pegilovana jedinjenja

Country Status (25)

Country Link
US (1) US8183340B2 (me)
EP (1) EP1881850B1 (me)
JP (2) JP5225074B2 (me)
KR (1) KR101011081B1 (me)
CN (1) CN101166545B (me)
AT (1) ATE482724T1 (me)
AU (1) AU2006247734B2 (me)
BR (1) BRPI0609676A2 (me)
CA (1) CA2608311C (me)
CY (1) CY1110853T1 (me)
DE (1) DE602006017202D1 (me)
DK (1) DK1881850T3 (me)
EA (1) EA012442B1 (me)
ES (1) ES2350852T3 (me)
HR (1) HRP20100543T1 (me)
IL (1) IL186772A0 (me)
ME (1) ME02786B (me)
MX (1) MX2007014052A (me)
NO (1) NO20076415L (me)
PL (1) PL1881850T3 (me)
PT (1) PT1881850E (me)
RS (1) RS51637B (me)
SI (1) SI1881850T1 (me)
UA (1) UA90896C2 (me)
WO (1) WO2006124529A1 (me)

Families Citing this family (78)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ES2586236T3 (es) 2005-11-04 2016-10-13 Glaxosmithkline Llc Procedimientos para administrar agentes hipoglucémicos
CN101534846B (zh) 2005-11-07 2014-11-05 印第安纳大学研究及科技有限公司 显示生理学溶解性和稳定性的胰高血糖素类似物
WO2007075534A2 (en) 2005-12-16 2007-07-05 Nektar Therapeutics Al, Corporation Polymer conjugates of glp-1
WO2008019147A2 (en) 2006-08-04 2008-02-14 Amylin Pharmaceuticals, Inc. Use of exendins, exendin agonists and glp-1 receptor agonists for altering the concentration of fibrinogen
AU2007283113A1 (en) 2006-08-08 2008-02-14 Sanofi-Aventis Arylaminoaryl-alkyl-substituted imidazolidine-2,4-diones, processes for preparing them, medicaments comprising these compounds, and their use
JP2008169195A (ja) 2007-01-05 2008-07-24 Hanmi Pharmaceutical Co Ltd キャリア物質を用いたインスリン分泌ペプチド薬物結合体
EP2124974B1 (en) 2007-01-05 2017-03-15 Indiana University Research and Technology Corporation Glucagon analogs exhibiting enhanced solubility in physiological ph buffers
BRPI0807728A2 (pt) 2007-02-15 2012-04-17 Univ Indiana Res & Tech Corp co-agonistas de receptor glucagon/glp-1
GB2448895A (en) * 2007-05-01 2008-11-05 Activotec Spp Ltd GLP-1 like compounds and uses thereof
US9353170B2 (en) 2007-06-08 2016-05-31 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Long-acting transient polymer conjugates of exendin
WO2009020802A2 (en) * 2007-08-03 2009-02-12 Eli Lilly And Company Treatment for obesity
EP2025674A1 (de) 2007-08-15 2009-02-18 sanofi-aventis Substituierte Tetrahydronaphthaline, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung als Arzneimittel
EP2217701B9 (en) 2007-10-30 2015-02-18 Indiana University Research and Technology Corporation Glucagon antagonists
ES2558155T3 (es) 2007-10-30 2016-02-02 Indiana University Research And Technology Corporation Compuestos que muestran actividad antagonista de glucacón y agonista de GLP-1
DE102007063671A1 (de) 2007-11-13 2009-06-25 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Neue kristalline Diphenylazetidinonhydrate, diese Verbindungen enthaltende Arzneimittel und deren Verwendung
WO2009075788A1 (en) * 2007-12-05 2009-06-18 Semprus Biociences Corporation Synthetic non-fouling amino acids
TWI451876B (zh) * 2008-06-13 2014-09-11 Lilly Co Eli 聚乙二醇化之離脯胰島素化合物
SG192405A1 (en) 2008-06-17 2013-08-30 Univ Indiana Res & Tech Corp Gip-based mixed agonists for treatment of metabolic disorders and obesity
KR20110039230A (ko) 2008-06-17 2011-04-15 인디애나 유니버시티 리서치 앤드 테크놀로지 코퍼레이션 생리학적 ｐＨ 완충액에서 강화된 용해도 및 안정성을 나타내는 글루카곤 유사체
CN102123723B (zh) 2008-06-17 2016-05-25 印第安纳大学研究及科技有限公司 胰高血糖素/glp-1受体共激动剂
UY31968A (es) 2008-07-09 2010-01-29 Sanofi Aventis Nuevos derivados heterocíclicos, sus procesos para su preparación, y sus usos terapéuticos
IT1392655B1 (it) * 2008-11-20 2012-03-16 Bio Ker S R L Site-specific monoconjugated insulinotropic glp-1 peptides.
WO2010068601A1 (en) 2008-12-08 2010-06-17 Sanofi-Aventis A crystalline heteroaromatic fluoroglycoside hydrate, processes for making, methods of use and pharmaceutical compositions thereof
EP2376097A4 (en) 2008-12-19 2012-10-03 Univ Indiana Res & Tech Corp PEPTIDE PRODRUGS OF AMIDE-BASED GLUCAGON SUPERFAMILY
RU2012101274A (ru) 2009-06-16 2013-07-27 Индиана Юниверсити Рисерч Энд Текнолоджи Корпорейшн Соединения глюкагона, активные в отношении рецептора gip
CN101993485B (zh) 2009-08-20 2013-04-17 重庆富进生物医药有限公司 促胰岛素分泌肽类似物同源二聚体及其用途
BR112012003973A2 (pt) 2009-08-26 2015-09-08 Sanofi Sa hidratos de fluoroglicosídeo heteroaromático cristalinos, produtos farmacêuticos compreendendo estes compostos e seu uso
WO2011080103A1 (en) 2009-12-16 2011-07-07 Novo Nordisk A/S Double-acylated glp-1 derivatives
WO2011075393A2 (en) 2009-12-18 2011-06-23 Indiana University Research And Technology Corporation Glucagon/glp-1 receptor co-agonists
AR079344A1 (es) 2009-12-22 2012-01-18 Lilly Co Eli Analogo peptidico de oxintomodulina, composicion farmaceutica que lo comprende y uso para preparar un medicamento util para tratar diabetes no insulinodependiente y/u obesidad
JO2976B1 (en) 2009-12-22 2016-03-15 ايلي ليلي اند كومباني Axentomodulin polypeptide
MX2012008603A (es) 2010-01-27 2013-01-25 Univ Indiana Res & Tech Corp Conjugados de antagonista de glucagon-agonista de gip y composiciones para el tratamiento de desordenes metabolicos y obesidad.
WO2011107494A1 (de) 2010-03-03 2011-09-09 Sanofi Neue aromatische glykosidderivate, diese verbindungen enthaltende arzneimittel und deren verwendung
DE102010015123A1 (de) 2010-04-16 2011-10-20 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Benzylamidische Diphenylazetidinone, diese Verbindungen enthaltende Arzneimittel und deren Verwendung
NZ602921A (en) 2010-05-05 2016-01-29 Boehringer Ingelheim Int Combination therapy comprising the administration of a glp-1 receptor agonist and a ddp-4 inhibitor
CA2797089A1 (en) 2010-05-13 2011-11-17 Indiana University Research And Technology Corporation Glucagon superfamily peptides exhibiting g protein-coupled receptor activity
WO2011143209A1 (en) 2010-05-13 2011-11-17 Indiana University Research And Technology Corporation Glucagon superfamily peptides exhibiting nuclear hormone receptor activity
US9487570B2 (en) * 2010-05-17 2016-11-08 Betta Pharmaceuticals Co., Ltd Glucagon like peptide analogs, composition, and method of use
US8933024B2 (en) 2010-06-18 2015-01-13 Sanofi Azolopyridin-3-one derivatives as inhibitors of lipases and phospholipases
US8530413B2 (en) 2010-06-21 2013-09-10 Sanofi Heterocyclically substituted methoxyphenyl derivatives with an oxo group, processes for preparation thereof and use thereof as medicaments
MX2012014576A (es) 2010-06-24 2013-02-21 Univ Indiana Res & Tech Corp Profarmacos de peptido de la superfamilia de glucagon basado en amida.
TW201221505A (en) 2010-07-05 2012-06-01 Sanofi Sa Aryloxyalkylene-substituted hydroxyphenylhexynoic acids, process for preparation thereof and use thereof as a medicament
TW201215387A (en) 2010-07-05 2012-04-16 Sanofi Aventis Spirocyclically substituted 1,3-propane dioxide derivatives, processes for preparation thereof and use thereof as a medicament
TW201215388A (en) 2010-07-05 2012-04-16 Sanofi Sa (2-aryloxyacetylamino)phenylpropionic acid derivatives, processes for preparation thereof and use thereof as medicaments
NZ612297A (en) 2010-12-22 2015-10-30 Univ Indiana Res & Tech Corp Glucagon analogs exhibiting gip receptor activity
US20130035281A1 (en) 2011-02-09 2013-02-07 Boehringer Ingelheim International Gmbh Pharmaceutical composition, methods for treating and uses thereof
US8710050B2 (en) 2011-03-08 2014-04-29 Sanofi Di and tri- substituted oxathiazine derivatives, method for the production, method for the production thereof, use thereof as medicine and drug containing said derivatives and use thereof
EP2683705B1 (de) 2011-03-08 2015-04-22 Sanofi Di- und trisubstituierte oxathiazinderivate, verfahren zu deren herstellung, ihre verwendung als medikament sowie sie enthaltendes arzneimittel und deren verwendung
WO2012120053A1 (de) 2011-03-08 2012-09-13 Sanofi Verzweigte oxathiazinderivate, verfahren zu deren herstellung, ihre verwendung als medikament sowie sie enthaltendes arzneimittel und deren verwendung
WO2012120052A1 (de) 2011-03-08 2012-09-13 Sanofi Mit carbozyklen oder heterozyklen substituierte oxathiazinderivate, verfahren zu deren herstellung, diese verbindungen enthaltende arzneimittel und deren verwendung
WO2012120056A1 (de) 2011-03-08 2012-09-13 Sanofi Tetrasubstituierte oxathiazinderivate, verfahren zu deren herstellung, ihre verwendung als medikament sowie sie enthaltendes arzneimittel und deren verwendung
CN102786590A (zh) * 2011-05-19 2012-11-21 江苏豪森药业股份有限公司 分枝型peg修饰的glp-1类似物及其可药用盐
BR112013032717A2 (pt) 2011-06-22 2017-01-24 Univ Indiana Res & Tech Corp coagonistas do receptor de glucagon/glp-1
US9156902B2 (en) 2011-06-22 2015-10-13 Indiana University Research And Technology Corporation Glucagon/GLP-1 receptor co-agonists
US20130035298A1 (en) 2011-07-08 2013-02-07 Boehringer Ingelheim International Gmbh Pharmaceutical composition, methods for treating and uses thereof
WO2013037390A1 (en) 2011-09-12 2013-03-21 Sanofi 6-(4-hydroxy-phenyl)-3-styryl-1h-pyrazolo[3,4-b]pyridine-4-carboxylic acid amide derivatives as kinase inhibitors
EP2567959B1 (en) 2011-09-12 2014-04-16 Sanofi 6-(4-hydroxy-phenyl)-3-styryl-1h-pyrazolo[3,4-b]pyridine-4-carboxylic acid amide derivatives as kinase inhibitors
WO2013045413A1 (en) 2011-09-27 2013-04-04 Sanofi 6-(4-hydroxy-phenyl)-3-alkyl-1h-pyrazolo[3,4-b]pyridine-4-carboxylic acid amide derivatives as kinase inhibitors
WO2013074910A1 (en) 2011-11-17 2013-05-23 Indiana University Research And Technology Corporation Glucagon superfamily peptides exhibiting glucocorticoid receptor activity
US20130303462A1 (en) 2012-05-14 2013-11-14 Boehringer Ingelheim International Gmbh Use of a dpp-4 inhibitor in podocytes related disorders and/or nephrotic syndrome
EP4151218A1 (en) 2012-05-14 2023-03-22 Boehringer Ingelheim International GmbH Linagliptin, a xanthine derivative as dpp-4 inhibitor, for use in the treatment of sirs and/or sepsis
WO2013174768A1 (en) 2012-05-24 2013-11-28 Boehringer Ingelheim International Gmbh A xanthine derivative as dpp -4 inhibitor for use in the treatment of autoimmune diabetes, particularly lada
CA2877358A1 (en) 2012-06-21 2013-12-27 Indiana University Research And Technology Corporation Glucagon analogs exhibiting gip receptor activity
CN102827270A (zh) * 2012-09-13 2012-12-19 无锡和邦生物科技有限公司 一种聚乙二醇化艾塞那肽衍生物及其用途
WO2014064215A1 (en) 2012-10-24 2014-05-01 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) TPL2 KINASE INHIBITORS FOR PREVENTING OR TREATING DIABETES AND FOR PROMOTING β-CELL SURVIVAL
MX2015016564A (es) 2013-06-20 2016-04-15 Novo Nordisk As Derivados de peptido similar al glucaton tipo 1 (glp-1) y uso de los mismos.
AU2014286234A1 (en) 2013-07-04 2015-12-17 Novo Nordisk A/S Derivatives of GLP-1 like peptides, and uses thereof
CN105934257B (zh) 2013-12-06 2020-10-09 韩捷 用于含氮和羟基的药物的生物可逆引入基团
CN106999602B (zh) 2014-11-27 2022-02-01 诺和诺德股份有限公司 Glp-1衍生物及其用途
US20160151511A1 (en) 2014-12-02 2016-06-02 Antriabio, Inc. Proteins and protein conjugates with increased hydrophobicity
WO2016097108A1 (en) 2014-12-17 2016-06-23 Novo Nordisk A/S Glp-1 derivatives and uses thereof
EP3273981B1 (en) 2015-03-24 2020-04-29 INSERM - Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Method and pharmaceutical composition for use in the treatment of diabetes
KR20180015131A (ko) 2015-06-04 2018-02-12 안트리아바이오 인크. 부위-특이적 단백질 콘쥬게이트의 제조를 위한 아민 페길화 방법
CN106699870A (zh) * 2016-12-14 2017-05-24 江苏师范大学 长效非洲爪蟾胰高血糖素样肽‑1（glp‑1）类似物及其应用
CN107056921B (zh) * 2017-03-23 2020-06-19 桂林八加一药业股份有限公司 一种选择性tnfr1拮抗肽sn10及其在炎症性肠病中的应用
US20210171598A1 (en) 2017-12-01 2021-06-10 University Of Copenhagen Peptide hormone with one or more o-glycans
CN110964116A (zh) * 2018-09-26 2020-04-07 北京辅仁瑞辉生物医药研究院有限公司 GLP1-Fc融合蛋白及其缀合物
CN114478744A (zh) * 2020-11-13 2022-05-13 成都奥达生物科技有限公司 一种长效glp-1拮抗剂

Family Cites Families (25)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4179337A (en) * 1973-07-20 1979-12-18 Davis Frank F Non-immunogenic polypeptides
IE50892B1 (en) 1980-02-11 1986-08-06 Novo Industri As Process for preparing insulin esters
US5120712A (en) 1986-05-05 1992-06-09 The General Hospital Corporation Insulinotropic hormone
US5445090A (en) 1991-07-25 1995-08-29 Mim Industries, Inc. Interchangeable clamp for use in a sewing machine
US5446090A (en) 1993-11-12 1995-08-29 Shearwater Polymers, Inc. Isolatable, water soluble, and hydrolytically stable active sulfones of poly(ethylene glycol) and related polymers for modification of surfaces and molecules
US5932462A (en) 1995-01-10 1999-08-03 Shearwater Polymers, Inc. Multiarmed, monofunctional, polymer for coupling to molecules and surfaces
US6006753A (en) 1996-08-30 1999-12-28 Eli Lilly And Company Use of GLP-1 or analogs to abolish catabolic changes after surgery
US6277819B1 (en) 1996-08-30 2001-08-21 Eli Lilly And Company Use of GLP-1 or analogs in treatment of myocardial infarction
US6214966B1 (en) 1996-09-26 2001-04-10 Shearwater Corporation Soluble, degradable poly(ethylene glycol) derivatives for controllable release of bound molecules into solution
UA65549C2 (uk) 1996-11-05 2004-04-15 Елі Ліллі Енд Компані Спосіб регулювання ожиріння шляхом периферійного введення аналогів та похідних glp-1 (варіанти) та фармацевтична композиція
US6448369B1 (en) 1997-11-06 2002-09-10 Shearwater Corporation Heterobifunctional poly(ethylene glycol) derivatives and methods for their preparation
CA2323048C (en) 1998-03-12 2006-10-10 Shearwater Polymers, Inc. Poly(ethylene glycol) derivatives with proximal reactive groups
SE9802080D0 (sv) 1998-06-11 1998-06-11 Hellstroem Pharmaceutical composition for the treatment of functional dyspepsia and/or irritable bowel syndrome and new use of substances therein
JP2002523333A (ja) 1998-07-31 2002-07-30 ノボ ノルディスク アクティーゼルスカブ Ｉｉ型糖尿病を予防するためのｇｌｐ−１及び類似体の利用
MY155270A (en) 1998-09-24 2015-09-30 Lilly Co Eli Use of glp-1 or analogs in treatment of stroke
KR100653153B1 (ko) 1999-12-22 2006-12-01 넥타르 테라퓨틱스 에이엘, 코포레이션 수용성 중합체의 입체장애 유도체
US6413507B1 (en) 1999-12-23 2002-07-02 Shearwater Corporation Hydrolytically degradable carbamate derivatives of poly (ethylene glycol)
PT1695983E (pt) * 2000-06-16 2009-05-05 Lilly Co Eli Análogos do peptídeo-1 do tipo glucagon
US6436386B1 (en) 2000-11-14 2002-08-20 Shearwater Corporation Hydroxyapatite-targeting poly (ethylene glycol) and related polymers
MXPA03005036A (es) * 2000-12-07 2003-09-05 Lilly Co Eli Proteinas de fusion glp-1.
EP1585959A4 (en) * 2002-01-08 2007-11-14 Lilly Co Eli PEPTIDE-1 ANALOGUES OF EXTENSION GLUCAGON TYPE
EA009366B1 (ru) * 2003-03-19 2007-12-28 Эли Лилли Энд Компани Связанные с полиэтиленгликолем соединения гпп-1
ATE525395T1 (de) * 2003-06-12 2011-10-15 Lilly Co Eli Fusions proteine von glp-1-analoga
DE602004011770T2 (de) * 2003-06-12 2009-02-05 Eli Lilly And Co., Indianapolis Fusionsproteine
CN1586625A (zh) * 2004-07-21 2005-03-02 上海第二医科大学附属瑞金医院 用于肿瘤显像和治疗的联合物及其制备方法

Also Published As

Publication number Publication date
HRP20100543T1 (hr) 2010-11-30
CN101166545A (zh) 2008-04-23
IL186772A0 (en) 2008-02-09
EP1881850A1 (en) 2008-01-30
MX2007014052A (es) 2008-02-05
CA2608311A1 (en) 2006-11-23
NO20076415L (no) 2007-12-12
PL1881850T3 (pl) 2011-03-31
DK1881850T3 (da) 2011-01-03
JP2008540565A (ja) 2008-11-20
CY1110853T1 (el) 2012-05-23
EA012442B1 (ru) 2009-10-30
BRPI0609676A2 (pt) 2011-10-18
KR20080025361A (ko) 2008-03-20
AU2006247734A1 (en) 2006-11-23
SI1881850T1 (sl) 2011-01-31
ES2350852T3 (es) 2011-01-27
KR101011081B1 (ko) 2011-01-25
CA2608311C (en) 2012-11-27
PT1881850E (pt) 2010-11-26
JP5225074B2 (ja) 2013-07-03
UA90896C2 (en) 2010-06-10
AU2006247734B2 (en) 2011-06-23
EA200702487A1 (ru) 2008-04-28
JP2013079256A (ja) 2013-05-02
ATE482724T1 (de) 2010-10-15
EP1881850B1 (en) 2010-09-29
WO2006124529A1 (en) 2006-11-23
RS51637B (sr) 2011-10-31
DE602006017202D1 (de) 2010-11-11
US8183340B2 (en) 2012-05-22
US20090215981A1 (en) 2009-08-27
CN101166545B (zh) 2011-06-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ME02786B (me) Glp-1 pegilovana jedinjenja
CN114901681B (zh) 胰岛素衍生物
RU2606840C2 (ru) Композиция для лечения диабета, содержащая конъюгат инсулина длительного действия и конъюгат инсулинотропного пептида длительного действия
US10159715B2 (en) Method for treating diabetes comprising long-acting insulin analogue conjugate and long-acting insulinotropic peptide conjugate
KR101238979B1 (ko) Ｐｅｇ화된 인슐린 리스프로 화합물
AU2004231461B2 (en) Polyethelene glycol linked GLP-1 compounds
JP2006520818A5 (me)
JP2015164916A (ja) 新規Ｅｘｅｎｄｉｎ変異体及びその複合物
JP2016505627A (ja) 治療剤、組成物、および血糖コントロールのための方法
JP6712230B2 (ja) リポジストロフィーおよびインスリン産生の欠損またはインスリンシグナル伝達の欠損と関連する代謝性障害を処置する方法
KR101417934B1 (ko) 비펩타이드성 중합체-인슐린 다량체 및 이의 제조방법
HK1117054A (en) Glp-1 pegylated compounds
NZ726959B2 (en) Composition for treating diabetes comprising long-acting insulin analogue conjugate and long-acting insulinotropic peptide conjugate
HK1230958A1 (en) Composition for treating diabetes, containing long-acting insulin analog conjugate and long-acting insulin secretion peptide conjugate
HK1230958B (en) Composition for treating diabetes, containing long-acting insulin analog conjugate and long-acting insulin secretion peptide conjugate