LU85711A1

LU85711A1 - Acylaminomitosanes

Info

Publication number: LU85711A1
Application number: LU85711A
Authority: LU
Original assignee: Bristol Myers Co
Priority date: 1983-12-23
Filing date: 1984-12-21
Publication date: 1985-09-12
Also published as: ES8603485A1; DK169477B1; ES538804A0; FI845037L; NO163570C; PT79741A; IL73876A0; ATA407484A; MY100976A; JPH0471076B2; FR2557112B1; IE57835B1; IT1178792B; US4642352A; DD228259A5; IE843318L; KR850004762A; FR2557112A1; DK621484A; FI81099C

Description

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Acylaminomitosanes. 1 CD.MdC.3F - 1 - SY-1749

Domaine de 11 invention

La présente invention concerne des analogues de la mitomycine contenant un ou plusieurs radicaux acylamino (classe 260 sous-classe 326.24). Ces composés sont des dérivés de la mitomycine C dans lesquels le radical 7-amino et/ou l'atome d'azote Nia sont incor- t.

t h i , pores à un substituant acylamino. Ces composés sont des 1 substances antitumorales actives qui manifestent in vivo une activité inhibitrice contre les tumeurs expérimentales chez les animaux.

Nomenclature

La dénomination systématique suivant Chemical Abstracts pour la mitomycine C est : [ laR-(la<* ,8fî> ,8a<* , 8b oc ) _7-6-amino-8-/” ((aminocarbo-nyl)oxy)méthyl_7-l, la, 2,8,8a,8b-hexahydro-8a-mêthoxy-5-méthyl-azirino-/" 2 ', 3 ', 3,4_7-pyrrolo-/' 1,2-a _7-indole- 4,7-dione, le système cyclique de 11azirinopyrrolo-indole étant dès lors numéroté de la façon suivante : 2 la 1

Chemical Abstracts Formule I

Suivant un système trivial de nomenclature fréquent dans le domaine de la mitomycine, le terme mitosane désigne le système cyclique ci-dessus portant divers des substituants caractéristiques des mitomy-* eines.

T

CD. MdC. 3F - 2 - SY-1749

A

* J? 10 ? ®3 fi 41 ^[Vb 3 2

Mitosane Formule II

Ce système est commode et convient pour de nombreux dérivés simples tels que ceux portant des substituants sur l'atome d'azote du cycle azirino ou sur les positions 7 ou 9a, mais il laisse subsister certaines ambiguïtés et insuffisances pour l'usage général. Pour ' les composés de la présente invention, qui sont des dérivés de la mitomycine C portant des substituants sur l'atome d'azote du cycle azirino et sur l'atome d'azote du radical amino du cycle aromatique, la Demanderesse a choisi de nommer N^-a l'atome d'azote du radical azirino et N7 l'atome d'azote du radical amino du cycle aromatique dans la nomenclature des mitosanes. Lorsque les composés de l'invention sont identifiés par le terme "mitosane" ou par la formule de structure, il convient , d'entendre que leur configuration stéréochimique est la même que celle de la mitomycine C.

1 Arrière-plan de technologique w La mitomycine C est un antibiotique produit par fermentation et actuellement commercialisé, notamment avec l'approbation de la Food and Drug Administration aux Etats-Unis d'Amérique, pour le traitement de l'adénocarcinome disséminé de l'estomac ou du pancréas dans des combinaisons reconnues avec d'autres CD.MdC.3F - 3 - SY-1749 \ » y m agents chimiothêrapeutiques approuvés# de meme que pour le traitement palliatif après l'échec de certaines autres thérapeutiques (Mutamycin (ß) Bristol Laboratories, Syracuse, New York 13201, Physicians' Desk Reference 35th Edition, 1981, pages 717 et 718). La ‘ mitomycine C et sa production par fermentation font ~ l'objet du brevet EUA 3.660.578 (2 mai 1972 revendi quant des priorités plus anciennes, notamment du 6 avril 1957 au Japon).

Les structures des mitomycines A, B et C et de la porfiromycine ont été publiées initialement par J.S. Webb et al. de Lederle Laboratories Division American Cyanamid Company, J. Amer. Chem. Soc. 84, 3185-3187 (1962). L’une des transformations chimiques appliquées pour cette étude de structure visant à établir la relation entre la mitomycine A et la mitomy-~ eine C est la conversion du premier composé ou 7,9o^- diméthoxymitosane par réaction avec l'ammoniac en le second ou 7-amino-9 o<-méthoxymitosane. La suppression du radical 7-méthoxy de la mitomycine A s'est révélé être une réaction d'un intérêt considérable pour la préparation des dérivés antitumoraux de la mitomycine C. Les articles et brevets repris ci-après sont relatifs à la conversion de la mitomycine A en une 7-(amino substitué)-mitomycine C antitumorale. Aucune 7-acylaminomitomycine C semblable à celles faisant l'objet de l'invention n'est toutefois mentionnée dans 1'état connu de la technique.

Matsui et al. "The Journal of Antibiotics", XXI, 189-

A

^ 198 (1968).

Kinoshita et al. "J. Med. Chem." 14, 103-109 (1971). Iyengar et al. "J. Med. Chem." 24, 975-981 (1981). Iyengar, Sami, Remers et Bradner, Abstracts of Papers Annual Meeting of the American Chemical Society,

Las Vegas, Nevada, Mars 1982, Abstract ne MEDI 72.

CD.MdC.3F - 4 - SY-1749 * 9 t

Sasaki, et al. Internation. J. Pharm. 1983, lj>, 49.

Les brevets ci-après concernent la préparation de 7-(amino substitué)-mitosanes par réaction de la mitomycine A, de la mitomycine B ou d'un dérivé Nla-substitué de celles-ci avec une amine primaire ou secondaire.

Cosulich et al. brevet EUA 3.332.944 25 juillet 1967

Matsui et al. brevet EUA 3.420.846 7 janvier 1969

Matsui et al. brevet EUA 3.450.705 17 juin 1969

Matsui et al. brevet EUA 3.514.452 26 mai 1970

Nakano et al brevet EUA 4.231.936 4 novembre 1980

Remers brevet EUA 4.268.676 19 mai 1981.

Les dérivés de la mitomycine C portant un radical amino substitué en la position 7 ont été préparés aussi par biosynthèse directe, en l'occurrence par mélange de différentes amines primaires à des bouillons de fermentation et par conduite de la façon habituelle de la fermentation produisant la mitomycine. (C.A. Claridge et al. Abst. of the Annual Meeting of Amer. Soc. for Microbiology 1982. AbS. 028).

Aperçu de l'invention

La présente invention concerne une autre classe de mitomycines C N^-substituées dont le radical amino en la position 7 est substitué par un radical acyle organique. Des exemples sont donnés de carboxa-mides, de thiocarboxamides, d'urées, de thiourées, d'uréthanes, de thiophosphoramides, de phosphoramides ♦ et de sulfonamides. Ces composés répondent à la formule î suivante ; CD.MdC.3F - 5 - SY-1749 i * * R7NE II .CS.O&H,

Vjrt».

ch/IU>1

Formule III

où R1 est choisi entre H, alcoyle en Ci-ß, et ,

OS 0 S

_ // // // // R 7 est choisi entre Rac-, R^C-, RaNHC-, RaNHC-, 0 S 0 O 0 .// . // . // // //

RbOC-, (Rbo)2P-, (Rb0)2P-/ RaS-, RaS-, RaS-,

O S

‘ // // (Ra)2P~ et (Ra)2P-» où Ra est choisi entre H, alcoyle en Ci-g, alcoyle en Ci-6 A-substitué, aryle en Cg-iO/ aryle en Cg-io A-substitué, aralcoyle en 07-17, aralcoyle en 07-17 A-substitué, alcényle en C2-6, alcényle en C2-6 A-substitué, alcynyle en 02_6, alcynyle en C2-6 A-substitué, cyclo-alcoyle en C3-8 et cycloalcoylalcoyle en 04-10/

Rb est choisi entre alcoyle en Ci_g, alcoyle en Ci_g A-substitué, aryle en Cß-iO/ aryle en Cg-iQ A-substi-tue, aralcoyle en 07..17 et aralcoyle en C7-17 A-substitué, * dont le substituant A est choisi entre chloro, bromo, s fluoro, iodo, amino, amino protégé, alcoxy en Ci-ß/ ï alcoylamino en Ci_g, di(alcoyl en Ci-6)amino, cycloal- coylamino en 03-8/ cycloalcoylamino en 04-14/ thiol, ^ alcoylthio en Ci_g, alcoyldithio en Ci-6, arylthio en 06-10 et aralcoylthio en C7-17·

Ces composés sont des inhibiteurs des tumeurs expérimentales chez les animaux. Ils sont comparables à CD.MdC.3F - 6 - SY-1749 * .. la mytomicine C par la nature des tumeurs qu’ils inhibent, mais manifestent souvent une activité plus élevée, c'est-à-dire exercent une inhibition plus intense que celle due â la mitomycine C. Leur toxicité est généralement inférieure à celle de la mitomycine C et se traduit, en particulier, par un effet myélosup- 9 presseur plus faible. A des fins antitumorales, ils sont administrés à un mammifère porteur d'une tumeur en une dose antitumorale efficace sensiblement non toxique.

Ces composés sont administrés principalement par injection, sensiblement comme la mitomycine C. En général, ils peuvent être administrés en doses plus élevées que la mitomycine C parce qu'ils sont moins toxiques et ont un effet antitumoral accru aux doses supérieures. Ils sont aisément présentés sous forme de compositions pharmaceutiques sèches contenant des diluants, des tampons, des stabilisants, des solubilisants et des constituants améliorant la présentation pharmaceutique. Ces compositions peuvent être mélangées extemporanément avec un liquide injectable. Des liquides injectables appropriés sont notamment l'eau, la solution physiologique salée isotonique, etc. Description détaillée de l'invention

Les composés de formule III sont préparés à partir de la mitomycine C par déprotonation donnant la forme anionique de la mitomycine C, puis par réaction de 1 ' anion avec un isocyanate ou isothiocyanate orga-î nique donnant un mitosane portant un radical uréido ou 5 thiouréido substitué en la position 7, ou bien par réaction de la forme anionique de la mitomycine C avec une forme acylante d'un acide organique, comme un halogénure d'acyle, un ester réactif d'un acide carbo-xylique ou thiocarboxylique tel qu'un ester phénylique, p-nitrophénylique, p-nitrobenzylique, etc. un ester CD.MdC.3F - 7 - SY-1749 « « * d'un acide carboxylique avec une N-hydroxyamine telle que le N-hydroxysuccinimide, le N-hydroxybenzotriazole, le N-hydroxyphtalimide, la N-hydroxypipéridine, etc., un carbonate organique ou un halogénoformiate organique conduisant à un mitosane portant un radical amino ou un radical carbamoyle en la position 7. Les anhydrides d'acyles conviennent aussi comme agents d'acylation.

Les agents d’acylation pour la réaction avec j la mitomycine C anionique répondent aux formules suivantes :

OS OS

// // // /✓

Rac-X, Rac-X, RaNCO, R^NCS, Rb0C-X, (Rbo)2p“X'

0 0 0 0 S

. fi // // // » (RO0)2P-X, RaS-X, RaS-X, Ras-X, (Ra)2P-X ou (Ra)2p“x \\ 0

Dans ces formules, X représente un radical qu'il est convenu d'appeler radical qui s'élimine. De très nombreux radicaux de ce genre sont connus en synthèse organique qui sont notamment les radicaux halogénure et différents autres radicaux ester réactifs déjà indiqués de même que d'autres radicaux acyle, auquel cas l'agent d'acylation résultant est un anhydride. Les anhydrides mixtes dont une partie du radical anhydride exerce la fonction acylante et dont l'autre est le radical qui s'élimine peuvent être utilisés.

La déprotonation de la mitomycine C donnant sa forme anionique ayant des propriétés nucléophiles a été décrite dans la demande de brevet EUA 492.903 du s 9 mai 1983. Sous cette forme, la mitomycine C réagit aisément avec des agents électrophiles, en l'occurrence des agents d'acylation.

Pour la déprotonation de la mitomycine C, celle-ci est mise à réagir en solution dans le dimé-thylformamide avec environ 1,5 proportion molaire d'hydrure de sodium à la température ambiante ou à une CD.MdC.3F - 8 - SY-1749 température plus basse. La réaction de l'anion avec un agent d'acylation pris en quantité d'au moins 1 équivalent chimique est de préférence de 1,5 à 2 équivalents chimiques, par rapport à la forme anionique de mitomycine C, est exécutée dans des conditions anhydres à une température s'échelonnant à peu près de la » température ambiante à -60°C. Les températures de -20 à -30°C sont aisément entretenues au laboratoire et dans les conditions de fabrication et donnent satisfaction pour la conduite du procédé de 1'invention.

Des solvants organiques aprotiques polaires comme la pyridine, le diméthylformamide, 1'hexaméthyl-phosphoramide et le diméthylsulfoxyde sont utilisés. Le procédé n'est toutefois pas limité à la formation de la mytomicine anionique de la façon décrite ci-dessus, du fait que ses variantes sont connues du spécialiste.

Les composés préférés faisant l'objet de l'invention, parce qu'ils ont une haute activité antitumorale et sont relativement moins toxiques que la mitomycine C, sont le 7-(formyl)-amino-9a-méthoxymito-sane (exemple 1), le 7-(acétyl)-amino-9a-méthoxymito-sane (exemple 3) et le 7-(cyclopropanecarbonyl)-amino-9a-méthoxymitosane (exemple 13). Ces composés sont représentatifs de la sous-classe de composés de formule III où R? représente un radical alcanoyle de 1 à 7 atomes de carbone ou cycloalcoylcarbonyle de 4 à , 9 atomes de carbone, qui comprend les substances préférées conformes à l'invention.

' Activité contre la leucémie P-388 de la souris £ Le tableau I comprend les résultats d'expé riences de laboratoire sur des femelles de souris CDF^ ayant reçu en implantation intrapéritonéale un inoculum de tumeur de 106 cellules d'ascite de la leucémie P-388 de la souris et ayant subi un traitement au moyen de différentes doses d'un composé de l'invention ou de CD.MdC.3F - 9 - SY-1749 » f i mitomycine C. Les composés sont administrés par injec tion intrapéritonéale. Les souris sont groupées par six pour chaque dose et reçoivent une dose unique du composé au jour de l'inoculation. Le groupe de contrôle pour chaque série d'expériences comprend dix souris recevant de la solution physiologique salée. Les groupes recevant la mitomycine C constituent le contrôle positif. L'expérience est poursuivie pendant 30 jours et le temps de survie moyen, en jours, est déterminé pour chaque groupe de souris avec notation du nombre de survivants au terme de la durée de 30 jours. Les souris sont pesées avant le traitement, de même qu'au sixième jour. Le changement de poids est retenu comme mesure de la toxicité du médicament. Les souris utilisées ont un poids de 20 g, et une perte de poids . d'à peu près 2 g n'est pas considérée comme excessive.

Les résultats sont exprimés par le rapport T/C %, qui est le produit de 100 par le rapport du temps de survie moyen dans le groupe traité au temps de survie moyen dans le groupe de contrôle recevant la solution physiologique salée. Les animaux recevant la solution physiologique salée meurent d'habitude dans les neuf jours. "L'effet maximum" au tableau ci-après est exprimé par T/C % avec indication de la dose exerçant cet effet. Les valeurs entre parenthèses sont celles obtenues avec la mitomycine C comme contrôle positif lors de la même expérience. Il est ainsi possible d'estimer l'activité des substances de l’invention en comparaison de celle de la mitomycine C. On considère que 125, exprimé par 5 T/C %, est un effet minimum. La dose efficace minimale mentionnée au tableau ci-après est celle donnant un T/C % d'à peu près 125. Les deux valeurs indiquées dans chaque cas dans la colonne intitulée "changement moyen de poids" sont, respectivement, le changement moyen de poids par souris à la dose efficace maximale et à la CD.MdC.3F - 10 - SY-1749 î dose efficace minimale.

TABLEAU I

Inhibition de la leucémie P-388 de la souris

Composé Effet maximal Dose Changement de T/C % Dosel efficace moyen 1'exem- minimale^ de poids^ pie n° 1 183(144) 3,2(3,2) 1,6 -2,1, -1,3 244(228) 6,4(4,8) <0,4 -2,2, +0,3 2 183(228) 6,4(4,8) 0,8 -1,0, +0,5 6 183(228) 12,8(4,8) 0,8 -0,8, +0,4 5 219(263) 25,6(4,8) 0,8 -2,8, -1,3 3 233(228) 6,4(3,2) 0,2 -1,4, +0,3 13 250(228) 12,8(3,2) 0,2 -1,8, +0,4 14 163(363) 3,2(4,8) <0,2 -0,6, +0,6 (BL-6938) 11 200(244) 6,4(4,8) <0,2 -2,2, -1,4 » 10 189(356) 6,4(4,9) <0,2 -1,2, -0,3 7 213(313) 3,2(3,2) <0,1 -0,3, +0,6 9 206(313) 3,2(3,2) <0,025 -1,8, +2,3 15 inactif 8 229(241) 3,2(4,8) <0,2 -1,6, -0,9 1 2 3 CD.MdC.3F - 11 - SY-1749 en mg par kg de poids du corps 2 en g par souris, aux doses efficaces maximale et minimale 3

les valeurs entre parenthèses sont relatives à la mitomycine C

Le tableau II comprend les résultats d'expé- i· f j riences antitumorales contre le melanome B16 chez la souris. A cet effet, des souris BDF^ reçoivent un ” implant de la tumeur par inoculation sous-cutanée.

L'expérience est conduite pendant 60 jours. On constitue des groupes de 10 souris pour chaque dose et on t 5 calcule le temps de survie moyen pour chaque groupe.

Les animaux de contrôle qui sont inoculés de la même façon que les animaux d ' épreuve et reçoivent le véhicule d’injection sans médicament manifestent un temps de survie moyen de 24,5 jours. Le temps de survie moyen par rapport aux animaux de contrôle (T/C %) permet de mesurer l'efficacité et de déterminer la dose efficace maximale et la dose efficace minimale pour chaque composé. La dose efficace minimale est définie comme étant celle donnant une valeur de 125 à T/C %. Pour chaque dose, les animaux d'épreuve reçoivent le composé expérimental aux jours 1, 5 et 9 par voie intra veineuse.

TABLEAU II Mélanome B16

Composé Effet maximal Dose Changement de T/C % Dose* efficace moyen 11exem- minimale1 de poids^ pie n° 1 228(195)3 2(4)3 < 1 -0,6, +0,2 220(220) 2(4) < 0,5 -2,8, -1,1 3 186(195) 1(4) < 1 +0,6, +0,6 2 3 4 CD.MdC.3F - 12 - SY-1749 2 en mg par kg de poids du corps 3 en g par souris 4

les valeurs entre parenthèses sont relatives à la mitomycine C

La tableau III comprend d'autres résultats λ. d'expériences antitumorales sur le mélanome B16 entre tenu chez des souris BDF^, qui ont reçu la tumeur en inoculation intrapéritonéale (0,5 ml, 10% de Brei). L'expérience est conduite pendant 60 jours. On utilise des groupes de 10 souris pour chaque dose essayée et on détermine le temps de survie moyen dans chaque groupe.

; Les animaux de contrôle inoculés de la même façon que les animaux d'épreuve et recevant le véhicule d'injection sans médicament manifestent un temps de survie moyen de 20,5 jours. Le temps de survie relatif par rapport aux animaux de contrôle (Τ/c %) permet de mesurer l'efficacité et de déterminer la dose efficace maximale et la dose efficace minimale pour chaque composé expérimental. La dose efficace minimale est définie comme étant celle donnant une valeur de 125 à T/c %. Pour chaque dose, les animaux d'épreuve reçoivent le composé expérimental aux jours 1, 5 et 9 par voie intrapéritonéale.

TABLEAU III Mélanome B16 , Composé Effet maximal Dose Changement de T/C % Dosel efficace moyen 1'exem- minimale^ de poids^ pie n° 3 >249(173)3 4(2) < 0,5 -0,4, néant 13 173(173) 1,5(2) < 1,5 néant, néant 16 >270(202) 7,0(3) < 7,0 +1,2, +1,2 1 en mg par kg de poids du corps 2 en g par souris

3 les valeurs entre parenthèses sont relatives à la mitomycine C

Le tableau IV concerne la mesure de l'effet myélosuppresseur des composés des exemples 1, 3 et 13 - administrés par voie intraveineuse à des souris, par comparaison avec la mitomycine C. Les souris reçoivent ^ une dose unique du composé expérimental au jour 0, et on détermine le nombre total de globules blancs (GB) aux jours 0, 4 et 7. Les valeurs relatives aux jours 4 et 7 sont reportées au tableau sous le titre change- CD.MdC. 3F - 13 - SY-1749 ♦ t Ÿ ment % {Δ%). Des comptages différentiels sont réalisés aux jours 0 et 4 et repris sous le titre changement % (A%) au jour 4. Les composés expérimentaux sont administrés en différentes doses indiquées au tableau à des groupes de 10 animaux. Les valeurs de A % entre parenthèses sont des valeurs de comparaison relatives à la mitomycine C, dans les mêmes conditions. La conclusion est que les composés des exemples 1, 3 et 13 sont moins myélosuppresseurs que la mitomycine C. Aux doses d'une létalité équivalente, les composés de l'invention ont sensiblement moins d'effet que la mitomycine C sur le nombre des neutrophiles.

TABLEAU IV

Effet myélosuppresseur et toxicité létale

Composé Dose GB Neutro- Lyrrpho- GB Morts de mg/kg jour 4 philes cytes jour 7 au 1'exem- i.v. jour 4 jour 4 jour 14 pie n° Δ % Δ% Δ % Δ % 3 12,8 -69 mort 5/5 5/5 6.4 -57(-82)1 -5(-96)1 -65(-80)1 -15(-58)1 1/10 3.2 -26(-54) +11(-62) -30(-53) -18(-16) 0/10 1 12,8 -83 mort 5/5 5/5 6.4 -77(-71) mort 10/10 10/10 3.2 -62(-43) -25(-77) -69(-35) -22(-8) 6/10 13 12,8 -64 46 -78 -14 10/10 6.4 -26(-78) -2(-96) -31(-75) +18(-57) 0/10 1 les valeurs entre parenthèses sont relatives à la mytomicine C, dans des conditions comparables.

Formes de réalisation spécifiques 1 Les exemples ci-après décrivent en détail la préparation de divers composés spécifiques faisant l'objet de l'invention. Les composés sont en général CD.MdC.3F - 14 - SY-1749 * «. caractérisés par le spectre de résonance magnétique nucléaire, le spectre d'absorption infrarouge et le spectre d'absorption ultraviolet. Les spectres sont décrits dans les exemples dans les termes habituels à cet effet. Le plus souvent, les analyses élémentaires en conformité avec les formules de structure confirment davantage l'identité des substances.

Abréviations BOC - t-butoxycarbonyle DMF - diméthylformamide

EtOAc - acétate d'éthyle IR - spectre d'absorption infrarouge

MeOH - méthanol RMN - spectre de résonance magnétique

nucléaire de H

TA - température ambiante, 20-25°C

UV - spectre d'absorption ultraviolet EXEMPLE 1,- 7-(Formyl)-amino-9a-méthoxymitosane (BL-6859) 0

A (J

B HyL_t^0NH= IM"3

CH, U \—OïH

3 o

On ajoute du diméthylformamide (6 ml) à un v mélange de mitomycine C (549 mg, 1,78 millimole) et de 214 mg d'une dispersion huileuse à 50% de NaH (4,45 millimoles) maintenue sous atmosphère d'argon. Après 10 minutes d'agitation à la température ambiante, on refroidit le mélange à -20°c et on y ajoute du formiate de phényle (0,60 ml du composé d'un titre de CD.MdC.3F - 15 - SY-1749

V

, 65%, 3,50 millimoles, H.L. Yale, J. Org. Chem. 36, 3234 (1971). On agite le mélange de réaction à -20°C pendant 30 minutes, puis on le réchauffe jusqu'à la température ambiante en 1 heure. Après arrêt de la réaction par addition de dioxyde de carbone solide, on dilue le mélange de réaction avec du EtOAc. On recueille par filtration le précipité résultant et on en chasse le solvant sous pression réduite. On chromatographie le résidu sur du gel de silice (5% MeOH-CH2ci2) pour obtenir le composé annoncé au titre (306 mg, 47%). On cristallise une fraction du produit dans l'acétone et l'éther : P.F.> 280eC? RMN (pyridine-d5, 6 ) 2,02 (s, 3H), 2,72 (m, 1H), 3,06 (m, 1H), 3,24 (s, 3H), 3,50 (dd, 1H, J=12, 1 Hz), 3,93 (dd, 1H, J=10, 4 Hz), 4,16 (d, 1H, J=12 Hz), 4,92 (t, 1H, J=10 Hz), 5,24 (dd, 1H, J=10, 4 Hz), 8,76 (s, 1H); IR(KBr) 3450, 3300, 1705, 1660, 1580, 1336, 1220, 1063 cm"·*·? UV (MeOH, λ max) 223, 330, 520 nm.

Analyse pour

Calculé : C, 53,04? H, 5,01? N, 15,46%

Trouvé : C, 52,75? H, 5,09? N, 15,96%

En remplaçant le formiate de phényle dans le présent exemple par le thioacétate de phényle ou le thioformiate d'éthyle, on peut obtenir le 7-(thioacétyl ou thioformyl)-amino-9a-méthoxymitosane.

'S« £*} CD.MdC.3F - 16 - SY-1749

II

« EXEMPLE 2,- 7-(Trifluoroacétyl)-amino-9a-méthoxymitosane (BL-6878) 0

Λ Q

CF^ N Jl -OCONH2

CH, " ^—--NS

3 0

Au départ de 300 mg (0,899 millimole) de mitomycine C et de 2,25 millimoles de NaH, on exécute la réaction comme décrit dans l'exemple 1. On utilise du trifluoroacétate de p-nitrophényle (432 mg, W- 1,80 millimole) comme agent d'acylation. Par chromatographie en couche mince sur du gel de silice (10% MeOH-CH2CI2), on obtient le composé annoncé au titre sous la forme d'un solide amorphe pourpre rougeâtre (91 mg, 24%) ; P.F. 93-95°C; RMN (pyridine-d5, 6 ) 2,02 (s, 3H), 2,74 (m, 1H), 3,11 (d, 1H, J=4 Hz), 3,20 (s, 3H), 3,52 (dd, 1H, J=12, 1 Hz), 4,00 (dd, 1H, J=ll, 5 Hz), 5,00 (t, 1H, J=10 Hz), 5,35 (dd, 1H, J=10, 5 Hz); IR(KBr) 3460, 3300, 1720, 1665, 1580, 1335, 1220, 1150, 1065 cm“l; UV (MeOH, λ max) 216, 355, 510 nm.

On récupère aussi une quantité sensible (120 mg) du composé de départ.

t Analyse pour C17H17F3N4O6 r Calculé : C, 47,45; H, 3,98; N, 13,01% „ Trouvé : C, 48,10; H, 4,43; N, 12,91% CD.MdC.3F - 17 - SY-1749 k . EXEMPLE 3.- 7-(Acétyl)-amino-9a-méthoxymitosane (BL-6905) 0 CH^^N fî ,-OCONH^

CH if \-£*NB

3 o

Au départ de 668 mg (2 millimoles) de mitomycine C et de 4 millimoles de NaH, on exécute la réaction comme dans l'exemple 1. On utilise l'ester N-hydroxysuccinimidique de l'acide acétique (314 mg, 2 millimoles) comme agent d'acylation. Par chromato graphie rapide sur du gel de silice (3% MeOH-CH2Cl2 ), • on obtient 200 mg (27%) du composé annoncé au titre ; P.F. 110-112 °C; RMN (pyridine-d5, ό ) 2,06 (s, 3H), 2,39 (s, 3H), 2,75 (m, 1H), 3,12 (d, 1H, J=4 Hz), 3,24 (s, 3H), 3,52 (dd, 1H, J=13, 1 Hz), 3,95 (dd, 1H, J=10, 4 Hz), 4,19 (d, 1H, J=13 Hz); 5,03 (t, 1H, J=10 Hz), 5,34 (dd, 1H, J=10, 4 Hz), 10,16 (si, 1H); IR(KBr) 3420, 3320, 1700, 1650, 1610, 1575, 1330, 1245, 1055 cm“1; UV (CH2OH, λ max) 220, 330, 510 nm.

Analyse pour Ci7H20^4^6·Η2θ ^ Calculé : C, 51,77; H, 5,62; N, 14,21% % Trouvé s C, 51,58; H, 5,25; N, 14,10% CD.MdC.3F - 18 - SY-1749 w EXEMPLE 4.-♦ .............

7-(Chloroacétyl)-amino-9a-méthoxymitosane (BL-6904) 9 A ,·—0C0nb2

Fi I ir^î CHni v>·

Il N—ί,.ΝΒ 0

Au départ de 668 mg (2 millimoles) de mitomycine C et de 4 millimoles de NaH, on exécute la réaction comme dans l'exemple 1. On utilise du chloro- acétate de phényle (520 mg, 3 millimoles) comme agent “ d'acylation. Par chromatographie sur gel de silice (5%

MeOH-CH2Cl2), on obtient 60 mg (7,3%) du composé annoncé au titre î P.F. 118-120°C? RMN (pyridine-d5, 6 ) 2,04 (s, 3H), 2,77 (m, 1H), 3,15 (d, 1H, J=4 Hz), 3,53 (dd, 1H, J=12, 1 Hz), 4,04 (dd, 1H, J-ll, 4 Hz), 4,64 (s, 2H), 5,01 (t, 1H, J=10 Hz), 5,31 (dd, 1H, J=10, 4 Hz); IR(KBr) 3420, 3330, 1760, 1647, 1588, 1480, 1330, 1060 cm-l; UV (MeOH, λ max) 218, 235 (ép.), 298 (ép.), 342 480 nm.

On récupère aussi environ 100 mg du composé de départ.

Analyse pour C17H19CIN4O6

Calculé : C, 49,70; H, 4,66; N, 13,64% ^ Trouvé î C, 51,31; H, 5,05; N, 11,75% CD.MdC.3F - 19 - SY-1749 fc * EXEMPLE 5,- 7-(Méthanesulfonyl)-amino-9a-méthoxymitosane (BL-6905) S J1 -OCONB, CH3?Nfll-Γ

H I

CHnr'>0·

Il λ—Ore o

On ajoute du diméthylformamide (6 ml) à un mélange de mitomycine C (668 mg, 2 millimoles) et de 4 millimoles de NaH sous atmosphère d’argon. Après 20 minutes d’agitation à la température ambiante, on refroidit le mélange de réaction à -25°C et on y ajoute du méthanesulfonate de p-nitrophényle (454 mg, 2 millimoles, Kametani et al. Yakugaku Zasshi, 84, 237 (1963)). On maintient le mélange de réaction à -25°C pendant 4 heures. Après arrêt de la réaction au moyen de dioxyde de carbone solide, on dilue le mélange de réaction avec du EtOAc et on le lave à la saumure. Par séchage sur Na2S04 et élimination du solvant, on obtient un résidu pourpre rougeâtre. On chromatographie celui-ci sur de l’alumine neutre (3% MeOH-CH2Cl2) pour obtenir 100 mg (12%) du composé annoncé au titre : P.F. 126-128eCy RMN (pyridine-d5, Ô ) 2,28 (s, 3H), 2,74 (m, 1H), 3,15 (d, 1H, J=4 Hz), 3,24 (s, 3H), 3,31 (s, 3H), 3,55 (dd, * 1H, J-13, 1 Hz), 4,04 (dd, 1H, J=ll, 4 Hz), 4,19 (d, 1H, J-13 Hz), 5,06 (t, 1H, J-ll Hz), 5,48 (dd, 1H, J=ll, 4 Hz)r IR(KBr) 3450, 1710, 1650, 1600, 1445, 1335, 1155, 1060 cm“l; UV (MeOH, λ max) 218, 340, 360, 490 nm.

CD.MdC.3F - 20 - SY-1749 b

Analyse pour C16Hi9N408S.H20

Calculé : C, 43,14? H, 4,75? N, 12,58%

Trouvé : C, 42,99? H, 4,67? N, 12,60% EXEMPLE 6,- 1-Ç 3-(t-Butoxycarbonylamino)-propionyl_7-amino-9a-méthoxymitosane (BL-6879) 0 0

R

;-0C0NH2 " ' x%··

CH, H N—c..NH

3 0

Au départ de 350 mg (1,05 millimole) de mitomycine C et de 2,62 millimoles de NaH, on exécute la réaction comme dans l'exemple 1. On utilise l'ester N-hydroxysuccinimimique de la N-BOC-yî-alanine comme agent d'acylation. Par chromatographie en couche mince sur gel de silice (10% MeOH-CH2Cl2)» on obtient 181 mg (34%) du composé annoncé au titre î P.P. 121-125°C? RMN (pyridine-d5, <5 ) 1,53 (s, 9H), 2,03 (s, 3H), 2,75 (m, 1H), 3,06 (t, 2H, J=6 Hz), 3,11 (m, 1H), 3,52 (d, 1H, J=12 Hz), 3,81 (q, 1H, J=6 Hz), 3,97 (dd, 1H, J=10, 4 Hz), 4,16 (d, 1H, J=12 Hz), 5,00 (t, 1H, J=10 Hz), 5,30 (dd, 1H, J=10, 4 Hz), 10,32 (si, 1H)? IR(KBr) 3360, 3310, 1705, 1660, 1625, 1585, 1500, 1168, * 1068 cm“l? , UV (MeOH, λ max) 221, 237, 327, 515 nm.

_ Analyse pour C23H31N5O8.H2O

Calculé : C, 52,76? H, 6,35? N, 13,38% υ

Trouvé : C, 52,85? H, 6,22? N, 12,83% CD.MdC.3F - 21 - SY-1749 EXEMPLE 7.- * 7-(Méthoxycarbonyl)-amino-9a--méthoxymitosane (BL-25069) A δ · *-OCONB9 3ντ?ι—r 2 * H il 11 Lock, 'N 3 3 B 1 U™

On ajoute 5 ml de IMF sec, sous atmosphère d'azote, â un mélange de mitomycine C (334 mg, 1 millimole) et de NaH en dispersion à 50% dans l'huile (96 mg, 2 millimoles). On agite le mélange à TA pendant » 10 minutes, puis on le refroidit à -30°C. On y ajoute r du carbonate de méthyle et de p-nitrobenzyle (482 mg, 2,3 millimoles) sous forme de solide et on poursuit l'agitation pendant 1 heure à -30°C. On arrête la réaction par addition d'une petite quantité de dioxyde de carbone solide, puis on soumet le mélange de réaction au partage entre EtOAc et H20. On lave la couche organique à la saumure et on la sèche sur Na2S04. On soumet le résidu obtenu après évaporation du solvant à la chromatographie sur silice (2% CH3OH-CH2CI2) pour recueillir 150 mg (38%) du composé annoncé au titre : P.F. 106-107°C; RMN (pyridine-d5, 6 ) 2,05 (s, 3H), 2,76 (m, 1H), 3,15 (m, 1H), 3,54 (d, 1H, J=12 Hz), 3,74 (s, 3H), 4,04 (dd, 1H, J=12, 5 Hz), 4,19 (d, 1H, J=12 Hz), 5,12 (t, 1H, * J=12 Hz), 5,36 (dd, 1H, J=10, 5 Hz), 10,20 (si, 1H); IR(KBr) 3450, 3300, 1725, 1652, 1615, 1580, 1495, 1445, l' 1335, 1220, 1010 cm-1; UV (CH3OH, λ max) 218, 329, 514 nm.

CD.MdC.3F - 22 - SY-1749 w

Analyse pour C17H20N4O7

Calculé : C, 52,04; H, 5,14; N, 14,28%

Trouvé s C, 52,03; H, 5,15; N, 14,20% EXEMPLE 8,- 7-(Ethoxycarbonyl)-amino-9a-méthoxymitosane (BMY-25082) 0 8 ,^-ocokh^ 2 b »Tl H-T 2 JJ II Loch,

chVîS

Au départ de 334 mg (1 millimole) de mitomy-** _ eine C, de 96 mg de NaH en dispersion à 50% dans l'huile (2 millimoles) et de 450 mg de carbonate d'éthyle et de p-nitrobenzyle, on prépare comme dans l'exemple 7, 150 mg (37%) du composé annoncé au titre : P.P. 100-102eC; RMN (pyridine-d5/ 6 ) 1,16 (t, 3H, J=7 Hz), 2,09 (s, 3H), 2,77 (m, 1H), 3,14 (d, 1H, J=4 Hz), 3,26 (s, 3H), 3,54 (dd, 1H, J=13, 2 Hz), 4,02 (dd, 1H, J=12, 5 Hz), 4,10 (d, 1H, J=13 Hz), 4,12 (q, 2H, J=7 Hz), 5,10 (t, 1H, J=12 Hz), 5,40 (dd, 1H, J=10, 5 Hz); IR(KBr) 3460, 3300, 1740, 1655, 1620, 1580, 1495, 1335, 1220, 1060 cm-1; UV (CH3OH, λ max) 218, 330, 515 nm.

Analyse pour C18H22N4O7 0,75 H2O

Calculé : C, 51,55; H, 5,64; N, 13,34%

Trouvé : C, 51,52; H, 5,64; N, 13,47% CD.MdC.3F - 23 - SY-1749 * « L· EXEMPLE 9,- 7-/~(2-Méthoxyéthoxy)-carbonyl_7-amino-9a-méthoxymi-tosane (BMY-25071) CB3°-^(An —cx:oKii2 Β"ΐΓ jT XoCB, αήΠΑ]>

Au départ de 688 mg (2 millimoles) de mitomycine C, de 192 mg de NaH en dispersion à 50% dans l'huile (4 millimoles) et de 960 mg (4 millimoles) de carbonate de 2-méthoxyéthyle et de p-nitrobenzyle, on prépare comme dans l'exemple 7, 300 mg (35%) du composé annoncé au titre : P.F. 82-84°C; RMN (CDC13, b ) 1,92 (s, 3H), 2,90 (m, 2H), 3,24 (s, 3H), 3,45 (s, 3H), 3,52-3,80 (m, 4H), 4,11 (d, 1H, J=12 Hz), 4,24-4,38 (m, 2H), 4,44-4,84 (m, 4H), 7,47 (s, 1H); IR(KBr) 3450, 1715, 1655, 1585, 1505, 1450, 1340, 1225, 1065 cm“1;

Analyse pour ^9^4^03 0,25 H2O

Calculé : C, 51,76; H, 5,60; N, 12,71%

Trouvé ; C, 52,09; H, 5,50; N, 12,72%

V

CD.MdC.3F - 24 - SY-1749 » b EXEMPLE 10.- 7- ( Isopropylaminocarbonyl ) -amino-9a-méthoxymitosane (BMY-25003) ν,Α 0C0KS2 B εΊ| jT J0CB3 3 B I_J>

On ajoute 8 ml de DMF sec, sous atmosphère d'azote, à un mélange de mitomycine C (668 mg, 2 millimoles) et de NaH en dispersion à 50% dans l'huile (192 mg, 4 millimoles). On agite la solution résultante à la température ambiante pendant 20 minutes, puis on la refroidit à -25°C. On ajoute de l'isocyanate d'iso-propyle (340 mg, 4 millimoles) et on poursuit l'agitation pendant 1 heure à -25°C. On arrête la réaction par addition d'une petite quantité de dioxyde de carbone solide et on soumet le mélange de réaction au partage entre EtOAc et H2O. On lave la couche organique à la saumure et on la sèche sur Na2S04- On soumet le résidu obtenu après évaporation du solvant à la chromatographie sur silice (3% CH3OH-CH2CI2) pour recueillir * 140 mg (17%) du composé annoncé au titre ï P.F. 163-165°C; * RMN (pyridine-d5, Ô ) 1,19 (d, 6H, J=6 Hz), 2,22 (s, ^ 3H), 2,75 (m, 1H), 3,12 (d, 1H, J=4 Hz), 3,22 (s, 3H), r 3,53 (dd, 1H, J=12, 2 Hz), 3,94 (dd, 1H, J=10, 5 Hz ), L 4,12 (sept., 1H, J=6 Hz), 4,24 (d, 1H, J=12 Hz), 4,75 (t, 1H, J=10 Hz), 5,26 (dd, 1H, J=10, 5 Hz ), 7,80 (d, 1H, J=7 Hz), 8,46 (s, 1H); IR(KBr) 3340, 3300, 1700, 1630, 1455, 1320, 1215, CD.MdC.3F - 25 - SY-1749 * k « k 1050 cm”l; UV (CH3OH, λ max) 219, 238 (ép.), 348, 520 nm.

Analyse pour C19H25N5O6 0,75 H2O

Calculé : C, 52,71; H, 5,99; N, 16,17%

Trouvé î C, 53,01; H, 6,03; N, 15,86%

Une fraction plus rapide donne le la-(isopro-pylaminocarbonyl )-7-( isopropylaminocarbonyl ) -amino-9a-méthoxymitosane : 120 mg (24%); RMN (pyridine-ds» (5 ) 1»20 (m, 12H), 2,22 (s, 3H), 3,17 (s, 3H), 3,40 (m, 1H), 3,53 (dd, 1H, J=12, 2 Hz), 3,78- 4,30 (m, 3H), 3,87 (d, 1H, J=4 Hz), 4,16 (d, 1H, J=12 Hz), 4,78 (t, 1H, J=10 Hz), 5,30 (dd, 1H, J=10, 4 Hz), 7,86 (d, 1H, J=7 Hz), 8,40 (s, 1H), 8,53 (d, 1H, J=7 Hz).

EXEMPLE 11,- ‘ . 7-(Cyclohexylaminocarbonyl)-amino-9a-méthoxymitosane (BMY-6936)

0 Q

Α.Λ.Λ ^cq«h2 '—' H ^Loch3 L)18

Au départ de 334 mg (1 millimole) de mitomycine C, de 96 mg de NaH en dispersion à 50% dans l'huile (2 millimoles) et de 250 mg (2 millimoles) . d'isocyanate de cyclohexyle, on prépare comme dans l'exemple 10, 100 mg (22%) du composé annoncé au 4 titre ; P.F. 138-140°C; RMN (pyridine-d5, δ ) 1,06-1,72 (m, 10H), 1,96-2,15 (m, 1H), 2,26 (s, 3H), 2,75 (dl, 1H, J=4 Hz), 3,12 (d, 1H, J=4 Hz), 3,22 (s, 3H), 3,56 (d, 1H, J=13 Hz), 3,95 (dd, 1H, J=12, 5 Hz), 4,27 (d, 1H, J=13 Hz), 5,00 (t, 1H, CD.MdC.3F - 26 - SY-1749 *· J=13 Hz), 5,28 (dd, 1H, J=12, 5 Hz), 7,88 (d, 1H, J=8 Hz), 8,52 (s, 1H); IR(KBr) 3380, 1710, 1695, 1675, 1585, 1535, 1340, 1220, 1080 cm“l; UV (CH3OH, λ max) 218, 236 (ép.)/ 348, 520 nm.

Analyse pour C22H29N5O6 0,75 H2O

Calculé : C, 55,86; H, 6,50; N, 14,81%

Trouvé î C, 55,83; H, 6,22; N, 14,44%

Une fraction plus rapide donne 70 mg (14%) de la-(cyclohexylaminocarbonyl)-7-(cyclohexylaminocarbo-nyl)-amino-9a-méthoxymitosane; RMN (pyridine-d5, 6 ) 1,1-1,7 (m, 20H), 1,9-2,2 (m, 2H), 2,28 (s, 3H ), 3,19 (s, 3H), 3,42 (m, 1H), 3,54 (dd, 1H, J=13, 2 Hz), 3,86 (d, 1H, J=5 Hz), 3,94 (dd, 1H, J=ll, 5 Hz), 4,14 (d, 1H, J=13 Hz), 4,78 (t, 1H, " . J=ll Hz), 5,33 (dd, 1H, J-ll, 5 Hz), 7,94 (d, 1H, J=7 Hz), 8,50 (s, 1H), 8,64 (d, 1H, J=7 Hz).

EXEMPLE 12,- 7-(Benzylaminocarbonyl)-amino-9a-méthoxymitosane (BL-6955) B ill^oc h 3 Cî^o|l>

Au départ de 668 mg (2 millimoles) de mitomycine C, de 192 mg de NaH en dispersion à 50% dans l'huile (4 millimoles) et de 536 mg (4 millimoles) d'isocyanate de benzyle, on prépare comme dans l'exem-

C

pie 10, 110 mg (12%) du composé annoncé au titre : P.P. 145-147°C; RMN (pyridine-d5f 6 ) 2,24 (s, 3H), 2,74 (m, 1H), 3,12 CD.MdC.3F - 27 - SY-1749 (d, 1H, J=5 Hz), 3,23 (s, 3H), 3,55 (dd, 1H, J=13, 2 Hz), 3,96 (dd, 1H, J=10, 5 Hz), 4,24 (d, 1H, J=13 Hz), 4,68 (d, 2H, J=6 Hz), 5,05 (t, 1H, J=10 Hz), 5,27 (dd, 1H, J=10, 5 Hz), 7,2-7,7 (m, 5H), 8,5-8,7 (m, 2H); IR(KBr) 3310, 1700, 1650, 1620, 1565, 1475, 1340, 1212, 1067 cm“!? UV (CH3OH, λ max) 217, 240 (ép.), 346, 515 nm.

Analyse pour C23H25N5O6

Calculé : C, 58,53; H, 5,45; N, 14,84%

Trouvé : C, 58,93; H, 5,45; N, 14,12% EXEMPLE 13.- 7-(Cyclopropanecarbonyl)-amino-9a-méthoxymitosane (BL-6906) v

Jt ^ocowh2 V hT jT "LoCH, ch^V^lj)îh

Au départ de 668 mg (2 millimoles) de mitomycine C, de 4 millimoles de NaH et de 370 mg (2 millimoles) d'ester N-hydroxysuccinimidique d'acide cyclo-propanecarboxylique, on exécute la réaction comme dans l'exemple 1. Une chromatographie sur gel de silice (2% CH3OH-CH2CI2) donne 65 mg (8%) du composé annoncé au titre : P.F. 102-104°C; RMN (pyridine-ds, Ô ) 0,70-0,84 (m, 2H), 1,00-1,25 (m, * 2H), 2,04 (s, 3H), 2,10 (m, 1H), 2,85 (m, 1H), 3,12 (m, Ί 1H), 3,23 (s, 3H), 3,51 (dl, 1H, J=ll Hz), 3,99 (dd, 1H, J=10, 4 Hz), 4,19 (d, 1H, J=ll Hz), 5,03 (t, 1H, J=10 Hz), 5,31 (dd, 1H, J-10, 4 Hz), 10,17 (si, 1H); IR(KBr) 3420, 3320, 1700, 1580, 1430, 1330, 1210, CD.MdC.3F - 28 - SY-1749 v

Y

À 1056 cm“l·

L

ÜV (CH3OH, λ max) 220, 330, 510 nm.

Analyse pour Ci9H22N4^6 3/4 H2O

Calculé : C, 55,00; H, 5,59; N, 13,50%

Trouvé : C, 55,16; H, 5,88; N, 12,86% EXEMPLE 14.- 7-(Diéthylthiophosphoryl)-aminô-9â-méthoxymitosane (BL-6938) (C H 0) ,1 NNrA>__f''-0C0NH2 βΙΠ«η3

3 T I

Au départ de 450 mg (1,35 millimole) de mitomycine C, de 2,7 millimoles de NaH et de 280 mg (1,49 millimole) de chlorure de diéthylthiophosphoryle, on exécute la réaction comme dans l'exemple 1. Une chromatographie sur colonne de gel de silice (2% CH2OH-CH2CI2) suivie d'une chromatographie en couche mince sur gel de silice (3% CH3OH-CH2CI2) donne 39 mg (8%) de la-diéthylthiophosphoryl-7-(diéthylthiophospho-ryl)-amino-9a-méthoxymitosane (BL-6934) : P.F. 47-49eC; RMN (pyridine-ds, 6 ) 1,24 (t, 6H, J=7 Hz), 2,31 (d, 3H, J=1 Hz), 2,76 (m, 1H), 3,14 (m, 1H), 3,22 (s, 3H), 3,55 (dl, 1H, J=10 Hz), 4,02 (dd, 1H, J=ll, 4 Hz), 4,15-4,42 (m, 5H), 5,04 (t, 1H, J-ll Hz), 5,40 (dd, 1H, J=ll, 4 Hz); IR(KBr) 3450, 3350, 3210, 1720, 1640, 1625, 1580, 1425, 1320, 1015, 960, 810, 785 cm-1; UV (CH3OH, λ max) 212, 345, 515 nm.

Analyse pour C23H36N4O9P2S2

Calculé : C, 43,26; H, 5,68; N, 8,77% CD.MdC.3F - 29 - SY-1749

Y

» «r ^ Trouvé : C, 43,29; H, 5,41; N, 8,83%

Une bande plus polaire donne 91 mg (14%) du composé annoncé au titre s P.F, 76-79°C; RMN (pyridine-d5, S ) 1,06-1,32 (m, 12H), 2,28 (d, 3H, J=1 Hz), 3,28 (s, 3H), 3,30-3,76 (m, 3H), 4,00-4,40 (m, 10H), 4,72 (t, 1H, J=ll Hz), 5,74 (dd, 1H, J=ll, 5 Hz); IR(KBr) 3450, 3280, 3210, 1715, 1620, 1575, 1425, 1325, 1015, 960, 780 cm"1; UV (CH3OH, λ max) 216, 348, 526 nm.

Analyse pour C19H27N4O7PS

Calculé : C, 46,91; H, 5,60; N, 11,52%

Trouvé î C, 47,02; H, 5,53; N, 11,88% EXEMPLE 15.- n!&-(Benzyloxycarbonyl)-7-benzyloxycarbonylamino-9a-méthoxymitosane (BMY-25072)

X X OCONH

nJ c ΕΙ^ΥΊ γΛ 0 J_OCH2C6H5

Au départ de 668 mg (2 millimoles) de mitomycine C, de 4 millimoles de NaH et de 997 mg (4 millimoles) de carbonate de benzyle et de N-hydroxysuccini-mide, on exécute la réaction comme dans l'exemple 7. Une chromatographie sur gel de silice (2% CH3OH-CH2CI2) donne 490 mg (41%) du composé annoncé au titre : P.F. 68-70eC; RMN (pyridine-d5, δ ) 2,09 (s, 2H), 3,20 (s, 3H), 3,42-? 3,60 (m, 2H), 3,84 (d, 1H, J=4 Hz), 4,08 (dd, 1H, J=ll, f ^ 5 Hz), 4,32 (d, 1H, J=13 Hz), 4,86 (t, 1H, J=ll Hz), 5,27 (s, 2H), 5,36 (s, 2H), 5,61 (dd, 1H, J=ll, 5 Hz), 7,24-7, 55 (m, 10H), 10,50 (si, 1H); CD.MdC.3F - 30 - SY-1749 * TR(KBr) 3460, 3360, 1725, 1652, 1585, 1495, 1260, 1212, 1177, 1015 cm-1;

Analyse pour C3^3(^409

Calculé : C, 61,79; H, 5,24; N, 9,63%

Trouvé î C, 61,68; H, 5,02; N, 9,30%

En remplaçant la mitomycine C comme composé de départ dans l'un quelconque des exemples 1 à 15 par un analogue N*a-substitué de la mitomycine C, on obtient des produits analogues à ceux des exemples et correspondant à ceux de formule I où Ri représente un radical alcoyle inférieur. Les mitomycines C Nla-substituées de départ peuvent être obtenues comme décrit par Matsui et al., J. Antibiotics, 21_, ri° 3, 189-198 (1968). Les composés de formule I ou Ri représente un radical tel que défini à propos de r7 sont des produits de réaction 1 bis-substitués isolés comme décrit des exemples ci- dessus. Dans des conditions de réaction judicieusement choisies, il est possible d’augmenter la proportion du produit bis-substitué. Les mitomycines C de départ dont le substituant en Nla est un radical acyle peuvent s'obtenir comme décrit par Matsui et al. dans le brevet EUA 3.450.705 (17 juin 1969).

EXEMPLE 16.- 7-Acétylamino-9a-méthoxy-la-méthylmitosane (BL-6916) cAn.A_^°nh2 iVÂs

Au départ de 348 mg (1 millimole) de porfiro-mycine, de 2 millimoles de NaH et de 314 mg (2 milli- CD.MdC.3F - 31 - SY-1749

V

-C

, moles) d'ester N-hydroxysuccinimidique d'acide acéti- λ que, on exécute la réaction comme dans l'exemple 1. Une chromatographie en couche mince préparative sur gel de silice (10% CH3OH-CH2CI2) donne 40 mg (10%) du composé annoncé au titre : P.P. 101-103°C; RMN (pyridine-d5, ô ) 2,05 (s, 3H), 2,14 (dd, 1H, J=4, 2 Hz), 2,23 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 2,52 (d, 1H, J=4 Hz), 3,16 (s, 3H), 3,42 (dd, 1H, J=13, 2 Hz), 3,93 (dd, 1H, J=12, 4 Hz), 4,08 (d, 1H, J-13 Hz), 4,74 (t, 2H, J=10 Hz), 5,24 (dd, 1H, J=10, 4 Hz), 10,04 (si, 1H); IR(KBr) 3430, 3320, 1700, 1650, 1615, 1575, 1435, 1320, 1245, 1060 cm“1? UV (CH3OH, λπβχ) 221, 245 (ép.), 329, 515 nm

Sh

Analyse pour CX8H22N4O6 0,5 H2O

Calculé s C, 54,13? H, 5,80? N, 13,72%

Trouvé : C, 54, 37; H, 5,71? N, 13,88% EXEMPLE 17.- 7-jf 3- (Ethoxycarbonyl ) -propionyl J- amino-9a-méthoxy-mitosane (BL-6920) C2H5°V~^ vJk_^^0C0HH2

Au départ de 334 mg (1 millimole) de mitomycine C, de 2 millimoles de NaH et de 486 mg (2 milli-* moles) d'ester N-hydroxysuccinimidique de succinate de monoéthyle, on exécute la réaction comme dans l'exemple 1. Une chromatographie sur alumine (2% CH3OH-CH2CI2) donne 130 mg (30%) du composé annoncé au CD.MdC.3F - 32 - SY-1749 * * £ *· 1 titre : P.P. 52-55°C; RMN (pyridine-d5, <5 ) 1,12 (t, 3H), 2,08 (s, 3H), 2,68- 3,16 (m, 6H), 3,22 (s, 3H), 3,52 (dl, 1H, J=13 Hz), 4,00 (dd, 1H, J=10, 4 Hz), 4,12 (q, 2H, J=7 Hz), 4,16 (d, 1H, J=13 Hz), 5,06 (t, 1H, J*=10 Hz), 5,35 (dd, 1H, J=10, 4 Hz); IR(KBr) 3455, 3310, 1720, 1660, 1625, 1580, 1450, 1340, 1300, 1220, 1070 cm"!; UV (CH30H, “Xnax) 220, 240 (ép. ), 334, 515 nra;

Analyse pour C20H26N4O7 0,75 H2O

Calculé : C, 52,61; H, 6,19; N, 12,51%

Trouvé : C, 53,99; H, 5,69; N, 12,12% EXEMPLE 18.- 7-Benzoylamino-9ai-méthoxymitosane (BL-6930 ) 4 "«Vn;

Au départ de 668 mg (2 millimoles) de mitomycine C, de 4 millimoles de NaH et de 730 mg (3 millimoles) de benzoate de p-nitrobenzyle, on exécute la . réaction comme dans l'exemple 1. Une chromatographie sur alumine (2% CH3OH-CH2CI2) donne 150 mg (17%) du composé annoncé au titre : P.F. 129-130°C; ; RMN (pyridine-d5, S ) 2,12 (s, 3H), 2,80 (m, 1H), 3,18 (m, 1H), 3,25 (s, 3H), 3,54 (dl, 1H, J=13 Hz), 4,01 * (dd, 1H, J=10, 4 Hz), 4,23 (d, 1H, J=13 Hz), 5,04 (t, 1H, J=10 Hz), 5,33 (dd, 1H, J=10, 4 Hz), 10,00 (dl, 1H); IR(KBr) 3460, 3360, 3210, 1715, 1660, 1640, 1585, 1480, CD.MdC.3F - 33 - SY-1749 * r : 1260, 1070 cm-1;

V

UV (CH3OH, λ max) 215, 236 (ép.), 337, 515 nm

Analyse pour C22H22N4°6· H2®

Calculé : C, 57, 89; H, 5,29; N, 12,27%

Trouvé s C, 57,71; H, 5,29; N, 12,27% EXEMPLE 19.- 1~Ç ((2-(Chloroéthyl)-amino)-carbonylJ7~ amino-9a-mé- thoxymitosane (BL-6931)

Pi 0 C1N^NCCONH,

Au départ de 334 mg (1 millimole) de mitomycine C, de 2 millimoles de NaH et de 211 mg (2 millimoles) d'isocyanate de 2-chloroéthyle, on exécute la réaction comme dans l'exemple 10. Une chromatographie sur colonne d'alumine (3% CH3OH-CH2CI2) donne 50 mg (11%) du composé annoncé au titre : P.P. 118-120eC; RMN (pyridine-d5, 6 ) 2,30 (s, 3H), 2,73 (m, 1H), 3,13 (m, 1H), 3,20 (s, 3H), 3,64 (dl, 1H, J=13 Hz), 3,80 (m, 4H), 3,96 (dd, 1H, J=10, 4 Hz), 4,23 (d, 1H, J=13 Hz), 5,02 (t, 1H, J=10 Hz), 5,28 (dd, 1H, J=10, 4 Hz), 7,80 -si, 1H), 8,46 (tl, 1H); IR(KBr) 3410, 3300, 1720, 1620, 1560, 1440, 1330, 1220, 1055 cm“1? UV (CH3OH, X max) 218, 238 (ép.), 296, 520 nm;

^ Analyse pour C18H22CIN5O6 0,5 H2O

Calculé î C, 48,16; H, 5,16; N, 15,60%

Trouvé î C, 48,21; H, 5,16; N, 15,27%

De meme, l'isocyanate d'isopropyle peut être CD.MdC.3F - 34 - SY-1749 ¥ i

V

T

remplacé dans l'exemple 10 par 11isothiocyanate d'iso-w propyle pour donner le 7-(isopropylaminothiocarbonyl)-amino-9a-méthoxymitosane sensiblement comme décrite.

e

V

i fr

L

CD.MdC.3F - 35 - SY-1749

Claims

1.- Composé de formule : 0 0 ,CHjOCNH2 IIT>h3 CBH Hy ou Rl est choisi entre H, alcoyle en Ci-6» et R^/ OS 0 S ·? , ft /f // // Rf est choisi entre RaC-, RaC-, RaNHC-, RaNHC-, r 0 S 0 O O V y. ^ v // ^ RbOC-, (RbO)2P-, (RbO)2P-f Ras-, RaS—, Ras-, 0 s // '/ (Ra)2P- et (Ra)2P-/ où Ra est choisi entre H, alcoyle en Ci-g, alcoyle en Cl-6 A-substitué, aryle en Cg-io, aryle en Cß-lO A-sub-stitué, aralcoyle en C7-17, aralcoyle en 07-17 A-substitué, alcényle en C2-6/ alcényle en C2-6 A-substitué, alcynyle en C2_g, alcynyle en C2-6 A-substitué, cyclo-alcoyle en C3_s et cycloalcoylalcoyle en 04-10» * Rb est choisi entre alcoyle en Ci_g, alcoyle en Ci_g A-substitué, aryle en Cß-iQ, aryle en Cg-iQ A-substitué, aralcoyle en 07-17 et aralcoyle en 07-17 A-sub-stitué, V. dont le substituant A est choisi entre chloro, bromo, [ fluoro, iodo, amino, amino protégé, alcoxy en Ci-6* alcoylamino en Ci_g, di(alcoyl en Ci-6)amino, cycloal-coylamino en 03-8, cycloalcoylamino en C4-14/ thiol, alcoylthio en Ci_g, alcoyldithio en C1-6, arylthio en CD.MdC.3F - 36 - SY-1749 V ' ► jÎ 4s V c6-10 et aralcoylthio en C7-17.

2. Composé suivant la revendication 1, dans lequel Ri représente H.

3. Composé suivant la revendication 1, dans lequel R1 représente H et R7 représente un radical alcanoyle de 1 à 7 atomes de carbone.

4 Ra et Rb ont les mêmes significations que dans la ~ revendication 1, dans un solvant organique aprotique polaire â une température de -60 à +25°C.

4. Composé suivant la revendication 1, qui est le 7-(formyl)-amino-9a-méthoxymitosane.

5. Composé suivant la revendication 1, qui est le 7-(trifluoroacétyl )-amind-9a-méthoxymitosane.

6. Composé suivant la revendication 1, qui est le 7-acétamido-9a-méthoxymitosane.

7. Composé suivant la revendication 1, qui est le 7-(2-chloroacétyl )-amino-9a-méthoxymitosane.

8. Composé suivant la revendication 1, qui ^ „ est le 7-(méthanesulfonyl )-aminçi-9a-méthoxymitosane.

9. Composé suivant la revendication 1, qui ' est le 7-/“ S-it-butoxycarbonylaminoJ-propionylJ/^raïno- 9a-méthoxymitosane.

10. Composé suivant la revendication 1# qui est le 7-(méthoxycarbonyl)-amino-9a-méthoxymitosane.

11. Composé suivant la revendication 1, qui est le 7-(éthoxycarbonyl)-amino-9a-méthoxymitosane.

12. Composé suivant la revendication 1, qui est le 7-ΖΓ(2-méthoxyéthoxy)-carbonyl_7-amino-9a-métho-xymitosane.

13. Composé suivant la revendication 1, qui est le 7-(isopropylaminocarbonyl)-amino-9a-méthoxymito-sane.

14. Composé suivant la revendication 1, qui est le 7-(cyclohexylaminocarbonyl)-amino-9a-méthoxymi-tosane.

15. Composé suivant la revendication 1/ qui est le 7-(benzylaminocarbonyl)-amino-9a-méthoxymito-sane. CD.MdC.3F - 37 - SY-1749 •1 i λ V *

16. Composé suivant la revendication 1, qui est le 7-(diéthylthiophosphoryl )-amino-9at-méthoxymito-sane.

17. Composé suivant la revendication 1, qui est le Nla-(benzyloxycarbonyl )-7-benzyloxycarbonylami-nd-9a-méthoxymitosane.

18. Composé suivant la revendication 1, dans lequel représente H et représente un radical cycloalcoylcarbonyle de 4 à 9 atomes de carbone.

19. Composé suivant la revendication 1, qui est le 7-(cyclopropanecarbonyl )-amino-9a-méthoxymito-sane.

20. Composé suivant la revendication 1, qui est le 7-acétyl-amino-9a-méthoxy-laÊ-méthylmitosane.

21. Composé suivant la revendication 1, qui ? est le T~C 3- ( éthoxycarbonyl ) -propionyl J7 -amino-9a-mi - tosane.

22. Composé suivant la revendication 1/ qui est le 7-benzoylamino-9a-méthoxymitosane.

23. Composé suivant la revendication 1, qui est le 7-£" (2-chloroéthyl)-aminocarbonyl_7-amino-9a-mé-thoxymitosane.

24. Procédé de préparation d'un composé suivant la revendication lf caractérisé en ce qu'on fait réagir la mitomycine C anionique avec 1 à 2 proportions moléculaires d'un agent d'acylation de formule : OS OS // // , // , // RaC-X, RaC-X, RaNC0, RaNCS, Rb0C-X, (ΐΦθ)2Ρ-Χ £ 0 0 0 O S ^ . // // // // // (Rb0)2P-X, Ra-S-X, RaS-X, RaS-X, (Ra)2P-X ou (Ra)2P-X * % l —r où X représente un radical classique qui s'élimine et Ra et Rb ont les mêmes significations que dans la revendication 1, dans un solvant organique aprotique CD.MdC. 3F - 38 - SY-1749 4 •*1 V* a £ polaire à une température de -60 à +25°C.

25. Procédé de préparation d'un composé suivant la revendication 1, caractérisé en ce qu'on fait réagir la mitomycine C en solution dans le diméthylformamide (ou un autre solvant compatible) avec 1,0 â 1,5 proportion moléculaire d'hydrure de sodium pour former la mitomycine C anionique et on fait réagir ensuite la mitomycine C anionique avec 1 à 2 proportions moléculaires d'un agent d'acylation de formule : OS OS „ tt tt // // RaC-X, RaC-X, RaNCO, RaNCS, Rb0C-X, (RbO)2P-X) 0 0 0 0 S ... ff ff il II f! (Rb0)2P-X, Ra-S-X, RaS-X, RaS-X, (Ra)2P-X ou (Ra)2P-X *0 où X représente un radical classique qui s'élimine et M

26.- Procédé suivant la revendication 24 ou 25, caractérisé en ce que le solvant organique polaire aprotique est le diméthylformamide ou la pyridine. C* V. CD.MdC.3F - 39 - SY-1749