KR940003938B1 - 펩타이드 제제의 제조방법 - Google Patents

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Abstract

내용 없음.

Description

펩타이드 제제의 제조방법
본 발명은 유장(whey)의 가수분해로부터 나온 펩타이드 제제, 우유 혹은 우유단백질의 대용물로서의 펩타이드 제제의 용도와, 유장의 한외여과 및 가수분해에 의해서 펩타이드 제제를 제조하는 방법에 관한 것이다.
락토오스를 흡수하지 못하는 사람이 있는 것처럼, 우유알레르기와 같은 알레르기와 관련된 문제를 가지고 있는 사람들이 증가하고 있다. 그런한 문제들은 우유와 우유생성물이 유아들의 영양에 있어서 커다란 비중을 차지하기 때문에 그들이 몇가지 이유에 의해서 모유로 양육되지 못한 경우에 특히 중요하다.
효소적 가수분해, 열처리와 안외여과의 배합으로, 예를들면, 유장으로부터 모유의 대용물을 제조하려고 하는 시도가 있어왔다(참고, 미국특허공보 제4,293,571호). 이렇게해서 얻어진 것은 1,000-10,000달톤의 크기인데, 5,000-10,000달톤의 펩타이드는 종종 알레르기를 일으킨다는 것은 잘 알려진 사실이다(예를들면, Immunochemistry, Pergamon Press, 1967. 4, p. 1-10 참조).
언급한 미국특허 공보에 기술된 과정은, 예를들면 100-140℃에서 10초-4분간, 혹은 73-100℃에서 2-60분간의 열처리에 의해서 이루어지는 단백질의 변성을 포함한다. 그러한 강력한 변성은 황을 함유하는 아미노산을 파괴하여 알레르기를 잘 일으키는 메일라이드 반응 생성물을 형성해서(불완전 항원효과) 생성물의 맛을 해친다든가 하는 등의 중대한 위험을 함유하고 있다(예를들면 Otani, H와 Tokita, F. Jap. J. Zootechn. Sci., 1982, 53, p. 344, Otani 등, Jap. J. Zootechn. Sci., 1985, 56, p. 987 그리고 Matsuda, T. 등, J Food Sci., 1985, 50, p. 618. 참조).
분자량이 6,000달톤까지되는 팹타이드를 포함하는 유장-기본 펩타이드 제제가 있다면, 이것은 식품생성물과 알레르기에 대한 자극제의 성분으로 혼입될 수 있다는 것이 알려졌다. 이 제제는 알레르기를 일으키기쉬운 사람이나 락토오스를 흡수하지 못하는 사람의 식품 생성물과 자극제로서 뿐만 아니라, 유아들의 모유 대용물로서 유용하여, 운동선수들, 특히 역기를 들어오리는 사람들, 던지는 사람들과 육체미선수들 뿐만 아니라 위나 장수술을 받은적이 있는 환자들의 액체 다이어트로서 유용하다. 이것은 얼음 및 단백질 음료와 같은 기호식품으로 유용하다.
따라서, 이 발명의 제제는 분자량이 6,000달톤까지 되는 펩타이드를 포함하면서, 메일라아드 반응 생성물과 락토오스와 같은 알레르기를 일으키기 쉬운 물질이 없다는 것이 특징이다.
특히 요망되는 펩타이드 제제는, 유리 아미노산과 염들은 삼투성 효과가 있으므로 바람직하지 못한 설사를 일으키는 경향이 있기 때문에 분자량이 2,000-6,000달톤, 특히 2,000-2,500달톤이 되는 펩타이드들로주로 이루어지는 특징을 가진다.
본 발명은 또한 위와 같은 펩타이드를 제조하는 과정에 관한 것으로서 다음과 같은 단계로 구성된다.
a) 원한다면 유장을 먼저 농축시킨 후 약 20,000달톤 막상에서 물을 이용하여 본질적으로 카제인을 함유하지 않는 유장을 여과하는 단계와 b) 하나 혹은 그 이상의 단계들에서 나오는 유장단백질 잔류물을 효소적으로 가수분해시킨 후 약 6,000달톤 막을 통과시켜 그 결과의 투과물중의 펩타이드를 수득하기 위하여 한외여과하는 단계.
출발물질로서 사용되는 유장이 근본적으로 카제인을 함유하고 있다면, 본 발명의 과정을 수행하기에 앞서, 적당한 여과, 원심분리 또는 기타 다른 처리를 하여 복합물로서 존재할지도 모를 카제인 잔류물을 제거하여야 한다. 유장은 편의상 대략 200,000달톤의 컷-오프 값을 갖는 200,000달톤 막에서, 또는 pH를 약4.6으로 조정하고, 침전제를 첨가함으로써 정제된다. 이때 침전제로는 염화 칼슘을 많이 쓴다. 원하는 컷-오프 값을 갖는 어떤막도 본원에서 사용할 수 있다. 통상, 상업적으로 유용한 막을 사용하는데, 이것은 강한 저항성의 합성 폴리머들로부터 제조되며, 이 폴리머들은 또한 예를들면 산과 가성 알칼리 용액을 이용하여 적소 세정(clean-in place), 즉, 부위에 대한 세정인 CIP 세정에 유용하다. 그러한 막들은 예를들면 DDS(De Danske Sukkerfabriker, Rhone-Poulenc and Romicon)로부터 구할 수 있다. 실시예에서 사용되는 막들은 DDS에서 구입한 것이다.
유럽 특허출원번호 65663에 장의 다이어트중에 있는 환자를 위한 식품으로서 유용한 단백질 가수분해물을 제조하는 과정이 나타나있다. 이 과정은 중량으로 1.0% 미만이되는 락토오스와 아스페르길루스 니이거에서 나오는 프로테아제를 가지고 있는 유장단백질 현탁액의 가수분해를 포함한다. 이때 기본적인 사전 가수분해를 90-95℃에서 실시하면 더욱좋다. 원한다면 바실러스 리케니포르미스에서 나오는 세균 프로테아제를 쓸수도 있다. 이 가수분해후에 그 효소나 효소들을 불활성화 시키기 위해서 이 현탁액을 통상적으로 90℃까지 열처리한다.
이러한 생성물은 분자량이 2,000 미만되는 물질들을 상당량 가질 것이며, 그러므로 설사를 일으키기 쉬운 경향이 있다. 게다가, 분자량이 6,000 이상이 되며 알레르기를 일으키기 쉬운 단백질이 수시하지 못할 만큼 존재할 것이다.
특별히, 효소들을 불활성화시키기 위한 열처리는 불완전 항원효과를 갖는 메일라아드 반응생성물을 만들것이다.
결론적으로, 위에 기술한 가수분해물은 그러므로 락토오스를 감당하지 못하는 사람들에게 유용치 못한 것처럼, 우유알레르기 체질과 유아들에게 밀크 대용물로서 적절치 못한다.
게다가, 유럽 특허공보번호 제33694호에는 동물성 단백질의 안정된 가수분해물을 제조하는 과정이 나타나있는데, 이 단백질 가수분해물은 액체우유 생성물(예를들면, 안정된 단백질 가수분해물을 토대로 최소한 50%의 양의 우유의 한외여과의 잔류물)과 혼합되었다.
안정화된 가수분해물들은 환자와 영양부족 및 영양실조의 사람들에게 식이요법 영양원으로 의도되었으나, 우유알레르기를 가진 사람들과 락토오스를 흡수하지 못하는사람들에는 쉽게 받아들여질수 없다.
미국특허 공보번호 제4,293,571호와 유럽특허 출원 65663, 그리고 본 발명의 과정에 따른 다른 절차에서처럼 변성열처리를 생략함으로써, 저 알레르기 유발원과 락토오스가 없는 생성물을 얻을 수 있다.
유럽 특허출원번호 22019에는 12%의 3염소-아세트산으로 침전시킬 수 있는 부분이 없는 것으로 규정되는, 본질적으로 잔류 단백질들이 없는 종합적효소 유장 단백질 가수분해물이 기재되어 있다. 유리아미노산의 함유량이 15%보다 이하인 반면, 펩타이드의 최소 50%는 2-5아미노산들을 함유하고 있다. 펩타이드의 70-90%가 10 이하의 사슬길이를 가지고 있으면 더욱 좋다.
이 생성물들은 장벽을 통해서 직접적으로 흡수될 수 있고 효소생성을 자극시킬 수 있으므로 대사를 재확립시킬 수 있다는 관점에서 식품생성물로, 특히 수술후에 유용하다는 보고가 있다. 알레르기 문제들과 락토오스의 흡수불능, 유아의 영양에 대해서는 언급이 없는데, 그것은 즉, 본 발명의 펩타이드 제제의 용도가 근거하고 있는 현상과, 서술된 제한기준이 알레르기를 덜 일으킨다는 사실과 락토오스를 함유하지 않는 생성물을 보장하기에는 불충분하다는 것이다.
가수분해물은 본 발명의 과정과 유사한 일정한 요건을 가진 방법에 의해 회수될 수 있는데, 이것은 한외여과나 투과된 유장단백질을 원하는 작은 분자크기까지 효소적으로 가수분해시키고, 중간의 효소불활성업이 한외여과에 의해 원하는 가수분해물을 수집하는 것을 포함하고 있기 때문이다. 하지만 사용되는 효소는 필히 인간의 단백질 대사를 재확립할 수 있는 것이어야 하는데, 특히 트립신과 키모트립신의 혼합체인 판크레아틴이면 더욱 좋다.
그러나, 언급한대로, 상기 특허출원은 본 발명의 제제 사용에 결정적인 분자 크기의 사용에 대한 규정이 없는데, 가수분해에 의한 몇몇 효소들의 조합에 대해서도 서술하고 있지않다.
본 발명의 과정을 실시하는 바람직한 방법에 의하면, 사용되는 출발물질은 산-침전된 카제인에서 얻는다. 이것은 예를들면 치즈생성물로부터 얻어진 유장을 가지고 시작하는 것보다 더 맛이 좋은 결과를 얻는데, 치즈생성물의 유장에는 제거하기 어렵고 때로는 불가능한 쓴맛을 내는 경향이 있는, 카파 카제인을 표함하여 일정한 양의 카제인이 있기 때문이다.
가수분해는 여러가지 프로테아제에 의해서 실시할 수 있는데, 이 모든것들은-출발 물질들의 질과 생성조건에 따라서-만족할만한 펩타이드 제제를 줄 수가 있다. 가수분해는 pH-고정 방법에 의해서 연속적으로 실시할 수 있으며, 가수분해의 정도는 보통의 방법에 있어서 소비되는 NaOH에 근거해서 계산되어질 수 있다. 가수분해의 정도는 총 팹타이드 결합의 수와 관련하여 절단될 펩타이드의 퍼센트 비율로 나타낼 수 있다(J. Adler-Nisson: J. Chem. Technol. Biotechn. 32. 138, 1982. 참조). 프로테아제들은 한외여과 이전에 불활성화되면 안된다. 실질적으로 식품산업에서 쓰여지는 모든 프로테아재들을 쓸 수 있다. 특히 유용한 효소들을 보면, 아스페르길루스 오리재로부터 나온"Rhozyme 41 PC"와 같은 효소들, 바실럿스리케니포르미스로부터 나온 "AlcalaseR0.6L"과 "Corolase PP"(판크레아스 추출물)등이 있다. "Rhozyme 41 PC"는 류신 아미노팹티다아제들을 함유하는데 이것들은 쓴 펩타이드들을 가수분해하므로 적은 량의 쓴물질을 함유하는 유장을 처리하는데 유용하다. 가수분해는 중간의 한외여과를 포함하는 하나 혹은 그 이상의 단계로 수행하는 것이 바람직하다. 이렇게 하면 더나은 수율과 더나은 분자량 분포를 결과할 수 있다.
Ⅰ. 유장단백질의 처리
언급한대로, 가장좋은 출발물질은 산 침전된 카제인에서 얻은 유장이다. 치즈생성물로부터 얻어진 유장을 사용하는 것도 가능하다. 후자의 유장은 변화하는 양의 카제인을 함유한다. 적은 양의 카제인을 함유하고 있는 유장만이 사용될 수 있는데, 왜냐하면 카제인을 가수분해하면 재거하기에 어렵고 또한 불가능하기까지한 쓴맛의 물질이 생성되기 때문이다. 언급한 바와 같이 유장은, 거친(coarse) 여과(200,000달톤)에 의해, 및/또는 pH를 약 4.6으로 하는 산첨가, CaCl₂와 같은 침전제를 특히 유장 100ℓ당 5 내지 40g의 양으로 첨가함에 의해서 그리고 계속해서 예컨대 경사분리에 의해 카제인을 제거함으로써 CaCl₂카제인 잔류물이 없게 된다. 그리고나서, 유장단백질을 함유하는 투과물은 취급할 액량을 줄이기 위해서 농축(20,000달톤)될 수 있다. pH2.0-2.5에서 높은 흐름율을 얻을 수 있다. 농축물은 락토오스를 제거하고, pH 를 높이고 단백질양을 0.5%-20%까지로 농축시키기 위하여 물로 여과할 수 있다. 락토오스를 함유하지 않은 유장단백질 농축물, WPC의 제조는 연속적으로 실시할 수 있다. 제조는 대부분 미생물의 생육을 억제하기 위하여 약 5℃까지로 차게하거나 약 50℃까지로 가열하여 진행시킨다.
산 침전된 카제인 혹은 산과 CaCl2로 처리된 유장만이 무시할 수 있을 정도의 양의 카제인을 함유할때는 출발물질의 대략적인 투과는 필요하지 않다.
Ⅱ. 가수분해물의 제조
유장단백질 농축물은 여러가지 프로테아제들로 가수분해될 수 있으며 언급한 바와 같이 출발물질의 질과 생성상태에 따라서, 모두 만족한 펩타이드 제제를 제공할수 있다. 가수분해는 연속적으로 실시할 수 있으며 가수분해의 정도는 NaOH의 소비에 근거해서 계산할 수 있다. 얻어진 가수분해의 최저 정도는 아래에 기술되어 있다. 프로테아제들은 한외여과에 앞서 불활성화되면 안된다.
Ⅱa. 두가지 효소를 이용한 가수분해
먼저, 5% 유장단백질 농축물은 기질 리터당 1.0g의 "Rhozyme 41 PC"(아스페르길루스 오리재-Genencore)로 50℃와 pH 7.5에서 9%가수분해된다. 6,000달톤 막에서 한외여과를 실시한다.
한외여과물에서의 펩타이드 수율은 초기 단백질량의 30-40%를 구성한다.
그리고나서 "Rhozyme" 가수분해물의 한외여과에서 생긴 잔류물은 50℃,pH 7.5에서 기질의 리터당(처음 가수분해를 할때의 출발부피) 0.5ml의 "AlcalaseR0.6L"로 더 가수분해시킨다. 12%가 될때까지 가수분해를 계속한다. 한외여과투과물에 있어서의 펩타이드 수율은 초기 단백질 함량의 40-45%가 된다. 전체수율은 70-80%이다.
연속적인 가수분해는 전체적인 수율을 증가시킨다. 처음 가수분해에서 형성된 펩타이드를 얻기 위하여 중간 한외여과를 사용하는데, 그렇지 않으면 이것은 더 가수분해되어 생성물의 보다높은 삼투물 농도를 나타내는 유리아미노산이 된다.
Ⅱb. 두 효소를 결합한 가수분해
한 단계에서 두 효소를 사용하면 수율을 향상시키고, 중간의 수확을 하지않아도 되기 때문에 유리하게 사용되고 있다.
Ⅱc. "Corolase PP"를 이용한 가수분해
유장단백질 농축물은 50℃, pH 8.0에서 "Corolase PP"(판크레아스추출물-Rohm)로 가수분해하여(유장단백질 농축물 kg당 5.0g) 10% 가수분해된다. 하지만 이것은 쓴 펩타이드의 형성을 회피하기 위하여 카제인 없는 유장단백질 농축물을 필요로 한다. 한 여과물중 50~60% 펩타이드 수율을 얻을 수 있다.
Ⅱd. "Alcalase 0.6L"을 이용한 가수분해
5%의 유장단백질 농축물은 50℃, pH 7.5에서 "AlcalaseR0.6L"(기질 리터당 1.0ml)로서 18%까지 가수분해된다. 한외여과물에 있어서의 펩타이드수율은 약 80%이다. 하지만, 카제인이 쓴 펩타이드를 형성하기 때문에 기본적으로 카제인 없는 유장단백질을 사용할때만 이 방법을 사용할 수 있다.
Ⅲ. 펩타이드의 수확
알레르기를 적게 일으키는 펩타이드는 한외여과나 완전여과에서 생성된 가수분해물로부터 얻어지는데, 여과중에 여과지를 더럽히면 투과성을 떨어뜨리기 때문에 이것들을 조합하여 사용하는 경우가 더많다.
이 발명의 일련의 과정에 의해서 제조된 펩타이드들은 언급한 바와 같이 여러가지 식품 생성물과 자극제 중에 이용될 수 있다. 그러므로 수확된 하외여과물중의 단백질 함량을 3%로 조정하고, 염, 비타민, 사카로오스, 전분과 지방을 첨가하여 완제품을 사용할때 희석될 완제품을 제공하기 위하여,이 혼합물을 유화시키고, 농축, 살균, 분무화 건조시켜서 모유 대용물을 제조할 수 있다. 또한 사용하기 쉬운 액체농축물 혹은 생성품을 알려진 방법 그 자체로 제조하는 것도 가능하다.
다음과 같은 예시 방법에 의해서 이 발명이 보다 완전히 설명될 수 있을 것이다.
산-침전된 카제인에서 얻어진 유장을 기초로 한 모유 대용물의 제조
단백질 함량이 0.5%인 산-침전된 카제인에서 얻어진 카제인 없는 50.000리터의 유장을 "GR 30 PP"막(200,000달톤)에서 대략 여과하여 사전 처리한다. 그런 다음 유장단백질을 농축시켜 "GR 61 PP" 막(20,000달톤)에서 완전 여과시킨다. 여기서 나온 잔류물은 락토오스가 없다. 이것을 온도를 50℃로 항상 일정하게 하기 위한 열 자켓을 갖춘 탱크에 공급한다. 가수분해에서 pH를 약 8.0으로 일정하게 유지하기 위하여 사용되는 pH기/적정기 장치로 유장단백질 농축물의 pH를 8.0으로 조정한다. NaOH의 소비량으로 가수분해의 정도를 측정할 수 있다. 또한 탱크에 효율적인 교반기를 설치한다. 유장단백질 농축물이 50℃, pH 8.0에서 평형이되면 1.23kg의 "Corolase PP"를 첨가하고, 4.0N의 NaOH 약 40리터가 소비될때까지(10% 가수분해) 가수분해를 진행시킨다. 이렇게 되는데 약 4시간이 소비된다. 그리고 나서 가수분해물을 "GR 81 PP"막(6,000달톤)에서 한외여과/완전여과시켜 저 알레르기성 투과물을 제공한다. 투과물에 있어서의 단백질 함량을 280nm에서 연속적으로 측정한다. 투과물에 있어서, 단백질함량은 2.5에서 3.0%이다. 1,000kg의 완전한 모유 대용물에 상당하는 125kg의 저 알레르기성 펩타이드를 얻는다.
[실시예2]
치즈 제조과정에서 얻은 유장을 기초로 한 저 알레르기 유발 펩타이드의 제조
단백질함량이 약 0.65%되는 치즈 제조과정에서 얻은 19,200리터의 유장을 실시예 1에서와 같이 대략 여과하거나, 또는 앞서 언급했듯이 산과 CaCl₂로써 처리한다. 미립 카제인은 없지만 카파 카제인을 함유하고 있는 유장을 구성하는 투과물을 다른 탱크에 공급시키고, 실시예 1에서와 같이 농축/완전여과 시킨다. 그러면 잔류물은 락토오스 없는 유장단백질 농축물을 구성한다. 유장단백질 농축물을 pH7.5, 50℃로 조정하고 2.5kg의 "Rhozyme 41 PC"를 첨가한다. 4.0N의 NaOH가 약 18리터 소비될때까지 (약 2시간 소모됨) 가수분해를 진행시킨다(9% 가수분해). 가수분해물을 실시예 1에서와 같이 한외여과/완전여과 시킨다. 여과물에서 펩타이드의 수율은 약 35%가 된다. 잔류물을 pH7.5, 50℃로 조정하고, 1.25리터의 "AlcalaseR0.6L"을 첨가한다. 가수분해는 4.0N 의 NaOH가 약 15리터 소비될때까지(잔류물의 12% 가수분해) 계속시키는데, 이때 2시간 소요된다. "AlcalaseR0.6L" 가수분해물을 실시예 1과 같이 여과/완전여과 시킨다. 한외여과 물에 있어서 펩타이드의 수율은 유장단백질 농축물량의 약 35%이다. 두 효소를 이용하는 가수분해를 실시한 후의 전체 한외여과물의 단백질 함량은 1.0% 이하가 될 것이며, 그러므로 한외여과물은 모유 대용물의 제조에 사용하기 이전에 4-5번 농축시켜야 한다. 760kg의 완전 모유 대용물에 상당하는 90kg의 저 알레르기 유발성 펩타이드를 얻을 수 있다.
[실시예3]
단백질 함량이 0.85%가 되는 치즈 제조에서 얻은 60,000리터의 유장을, pH를 4.6으로 떨어뜨리고 CaCl₂로 침전시킴으로써 사전처리한다. 침전된 카제인을 경사분리로 제거시키고 단백질 함량이 0.70%인 액체를 완전 여과시켜서 락토오스 함량을 최대 0.1%까지로 감소시킨다. 그런다음 단백질 함량을 5%로 조정한다. 이 잔류물을 웅유효소를 불활성시키기 위하여 70℃에서 10분간 열처리하고 "Rhozyme"와 "AlcalaseR2.4L"을 E/S 2와 1.36%에 각각 해당하는 양을 동시에 첨가시킨다. 가수분해를 pH 7.6 및 55℃에서 수행하고 가수분해하는 동안에 pH-고정기로 7.5에서 유지시킨다.
약 4시간 후에는 약 17%의 가수분해 정도를 얻을 수 있으며, 그리고나서 혼합물을 대략 6,000의 컷-오프 값을 막상에서 한외여과시킨다.
단백질 함량이 약 3.5%되는 투과물을 약 4.500리터 얻을 수 있다. 이것을 저 알레르기 유발성 락토오스를 함유하지 않는 제제를 제공하도록 해당 분야의 규정에 따라 탄수화물, 비타민, 지방가 미네랄을 첨가한다. 계속해서 제제를 살균 및/또는 분무건조에 의해 더 처리한다.
두 탱크를 사용할때에는, 하나의 탱크에서는 유장단백질을 한외여과/완전여과를 하도록 하고, 다른 탱크에서는 가수분해를 하게 해서 연속적으로 이 과정이 수행되도록 할 수 있다. 실시예 1에서 서술된 과정은 실시예 2에서 서술된 과정보다 효소의 소비와 장치의 필요성이라는 측면에서 볼때 훨씬 더 비싸다. 다른 한편 출발물질로 사용된 선택적으로 농축된 유장의 질(및 가격)을 포함하는 필요조건들은 실시예 2에서 보다 낮은데 이것은 실시예 2에서의 수율이 실시예 1에서보다 높은 것과 같다. "Alcalase 0.6L"로 보다 철저한 가수분해를 진행시킴으로써 실시예 1에 상당하는 과정에 의하여 보다 높은 수율을 얻을 수 있다. 하지만 이 과정은 앞서 말한바와 같이 유장이 카제인을 갖지 않아야 하는 것과 같이 상당히 엄밀해야 한다. 현재로서는 실시예 3에 해당하는 과정이 선호되는데 이는 저 알레르기 유발성 락토오스 비함유 및 매혹적인 맛을 갖는 외에 편리하고 생성물의 질이 뛰어나기 때문이다.
본 발명의 방법에 의해서 제조되는 생성물은 다음과 같은 항체들을 사용함으로써 ELISA에서 관측되는 항체결합을 보이지 않으며, 측정에 대응하는 알레르기 유발성을 보이지 않는다.
Ⅰ.카제인 혹은 유장단백질에 대해서 출원인에 의해 생산되는 상업적 토끼항체.
Ⅱ.우유단백질에 대한 인간의 항체를 함유하며, 소의 우유에 대해 알레르기성을 갖는 환자에게서 얻어진 혈청.
더욱이, 이것들은 우유단백질에 대해서 토끼나 혹은 쥐의 항체로 처리되면 쥐의 실험에서 PLA반응을 일으키지 않으며, 전술한 바대로 환자의 혈청을 사용한 히스타민-방출시험을 실험실내에서 실시했을때 양성반응을 일으키지 않는다. 또한 임상적으로 우유알레르기를 가진 것으로 증명된 유아들의 자극시험에서 알레르기를 일으키지 않는다. 펩타이드는 적정량의 필수아미노산을 가지며 따라서 고영양가를 갖는데, 이는 그 생산물이 락토오스를 함유치 않는 것과 같다. 1.5%의 펩타이드 수용액은 맛과 향기가 없다. 10%까지의 수용액에 있어서의 펩타이드는 pH4.5에서 녹는다. 이 pH에서 펩타이드는 10분동안 끓을 수 있다. 언급한 바와 같이, 펩타이드는 6,000보다 적은 크기를 가지며, 그 대부분은 분자량 2,000-2,500달톤을 갖는다. 그것들은, 빈약한 거품안정성을 가진 적은 거품성을 가진 것처럼, 유화능력이 매우 적거나 전혀없다. 따라서 이것은 앞서 언급한 바와 같이 우유 대용물로서 유용하다.

Claims (6)

  1. a) 카제인이 없는 유장을, 분자량 컷-오프가 20,000달톤인 막상에서 물을 이용하여 여과함으로써 락토오스가 없는 유장농축물을 얻는 단계; b) 상기 a)에서 얻어지는 유장단백질 잔류물을 효소적으로 가수분해시키는 단계; 그리고 c) 분자량 컷-오프가 6,000달톤인 막을 이용하여 상기 가수분해물을 한외여과함으로써 상기 가수분해 반응을 종결시키고, 6,000달톤 이하의 펩타이드를 수득하는 단계로 이루어지며, 유장의 한외여과 및 가수분해에 의한, 2,000 내지 6,000달톤의 분자량을 가지는 펩타이드아 수개의 아미노산을 함유하는 한편, 알레르기 유발성 물질과 락토오스를 함유하지 않는 것을 특징으로 하는 펩타이드 제제의 제조방법.
  2. 제1항에 있어서, 산-침전된 카제인으로부터 얻은 유장을 사용하는 것을 특징으로 하는 방법.
  3. 제1항 또는 2항에 있어서, 200,000달톤막을 통한 대략적인 여과 및 염화칼슘으로의 침전에 의해 얻어지는 카제인을 함유하지 않는 유장을 사용하는 것을 특징으로 하는 방법.
  4. 제1항에 있어서, 2개의 상이한 효소를 사용하여 2단계로 가수분해를 수행하는 것을 특징으로 하는 방법.
  5. 제1항에 있어서, 2개의 프로테아제를 사용하는 것을 특징으로 하는 방법.
  6. 제1항에 있어서, 아스페르길루스 오리재로부터의 로이신 아미노펩티다아제와 바실루스 리케니포르미스로부터의 프로테아제를 사용하여 가수분해를 수행하는 것을 특징으로 하는 방법.
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