KR850004272A - 토끼암괴사인자를 코우드하는 dna 및 토기암괴사인자 폴리펩티드의 제조방법 - Google Patents

토끼암괴사인자를 코우드하는 dna 및 토기암괴사인자 폴리펩티드의 제조방법 Download PDF

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Abstract

내용 없음

Description

토끼암괴사인자를 코우드하는 DNA 및 토끼암괴사인자 폴리펩티드의 제조방법
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음

Claims (22)

  1. 토끼 마크로파지를 유도체와 함께 배양하고, 그의 마크로파지로부터 토끼암괴사인자 mRNA를 함유하는 분획을 분리하고, 이것을 함께하여 cDNA 라이브 러리를 작성하고, 이로써 하이브리다이제이션베에의하여 토끼 암괴사인자 cDNA를 클론화한 것을 특징으로 하는 토끼암괴사인자 또는 그의 주요부를 코우드하는 DNA의 제조방법.
  2. 토끼 마크로파지를 유도제와 함께 배양하고, 그의 마크로파지로부터 토끼암괴사인자 mRNA를 함유하는 분획을 분리하고, 이것을 함께 하여 cDNA라이브러리를 작성하고, 하이브리다이제이션법에 의하여 토끼 암괴사인자 cDNA를 클로하고, 다음에 이의 클론화한 DNA 또는 그의 수식체를 형질발현 벡타에 삽입하고, 이에 의하여 형질전환시킨 숙주를 배양하고, 생산된 토끼암괴사인자 또는 그의 주요부를 갖거나 또는 함유하는 폴리펩티드를 채취하는 것을 특징으로 하는 폴리펩티드의 제조방법.
  3. 토끼암괴사인자의 아미노산배열 또는 그의 주요부를 코우드하는 염기배열 또는 그의 수식된 염기배열을 갖거나 또는 함유하는 DNA를 형질발현 벡타에 삽입하고, 그의 벡타를 이용하여 호스트를 형질전환 시키고, 이 호스트를 배양하고, 이 호스트로부터 생산되는 토끼암괴사인자 또는 그의 주요부를 갖거나 또는 함유한ㄴ 폴리팹티드를 채취하는 것을 특징으로하는 폴리팹티드의 제조방법.
  4. 토끼암괴사인자 폴리펩티드 또는 그의 주요부를 코우드하는 염기배열 또는 그의 수식체를 갖는 DNA를 제조할때 다음과 같은 (1)내지(7)의 공정을 행하는 것을 특징으로 하는 DNA의 제조방법. (1)토끼마크로파지를 유도제와 함께 배양한다. (2) 이 마크로파지로부터 토끼암괴사인자 mRA를 포함하는 분획을 분리한다. (3)상기 mRNA로부터 역전사효소를 사용하여 단쇄 cDNA를 합성하고, 다음에 2중쇄 cDNA로 변환한다. (4)상기 DNA를 플라스미드에 삽입한다. (5) 상기 변환 플라스미드를 숙주에 도입하여 형질전환시켜서 cDNA 라이브러리를 작성한다. (6) 상기 라이브러리로부터 하이브리다이제이션법에 의하여 토끼암괴사인자를 코우드하는 cDNA를 클로닝한다. (7) 다음에 소망에 따라 상기 cDNA를 부분적으로 수식한다.
  5. 제1 똔ㄴ 4항에 있어서, 다음식[A]의 아미노산 배열에 대응하는 염기배열 또는 그의 수식체를 갖거나 또는 함유하는 DNA, 또는 그의 대립 유전자 변이체를 제조하는 것을 특징으로하는, 토끼암괴사인자 폴리펩티드 또는 그의 주요부를 토우드하는 DNA의 제조방법.
  6. 제1 또는 4항에 있어서, 상기식[A]로 표시되는 아미노산 배열에 있어서, 제7번째의 Ser이 Gly로 변환된 아미노산 배열에 대응하는 염기배열을 갖거나 또는 함유하는 DNA를 제조하는 것을 특징으로하는 DNA의 제조방법.
  7. 제1 또는 4항에 있어서, 다음식[I]의 염기배열 또는 그의 수식체를 갖거나 또는 함유하는 DNA, 또는 그의 대립 유전자변이체를 제조하는 것을 특징으로 하는 ENA의 제조방법.
    (5')-TCA GCT TCT CGC GCC CTG AGT GAC AAG CCT CTA GCC CAC GTA GTA GCA AAC CCG CCA GTG GAG GGG CAG CTC CAG TGG CTG AGC CAG CGT GCG AAC GCC CTG CTG GCC AAC GGC ATG AAG CTC ACG GAC AA CCAG CTG GTC GTG CCG GCC GAC GGG CTG TAC CTC ATC TAC TCC CAG GTT CTC TTC TGC GGT CAA GGC TGC CGC TCC TAC GTG CTC CTC ACT CAC ACT GTC AGC CGC TTC GCC GTC TCC TAC CCG AAC AAG GTC AAC CTC CTC TCT GCC ATC AAG AGC CCC TGC CAC CGG GAG ACC CCC GAG GAG GCT GAG CCC ATC GCC TGG TAC GAG CCC ATC TAC CTG GGC GGC GTC TTC CAG TTG GAG AAG GGT GAC CGG CTC AGC ACC GAG GTC AAC CAG CCT GAG TAC CTG GAC CTT GCC GAG TCC GGG CAG GTC TAC TTT GGG ATC ATT GCC CTG (3')[I]
  8. 제1 또는 4항에 있어서, 상기 식[I]로 표시되는 제조방법에 있어서, 제7번째의 코돈인 AGT가 GGT또는 그의 축중코돈으로 변환된 염기배열을 갖거나 또는 함유하느 DNA를 제조하는 것을 특징으로 하는 DNA의 제조방법.
  9. 제1 또는 제4항에 있어서, 다음식[B]로 표시되는 아미노산 배열에 대응하는 염기배열 또는 그의 수식체를 갖거나 또는 함유하는 DNA를 제조하는 것을 특징으로하는, 토끼암괴사인자폴리펩티드 또는 그의 주요부를 코우드화는 DNA의 제조방법.
  10. 제1 또는 제4항에 있어서, 상기식 [B]로 표시된 아미노산 배열에 있어서, 제87번의 Ser번의 Gly로 변환된 아미노산 배열에 대응하는 염기배열 또는 그의 수식체를 갖거나 또는 함유하는 DNA를 제조하는 것을 특징으로 하는 DNA의 제조방법.
  11. 제1 또는 제4항에 있어서, 다음식 Ⅱ로 표시되는 염기배열 또는 그의 수식체를 갖거나 또는 함유하는 DNA를 제조하는 것을 특징으로하는 DNA의 제조방법.
  12. 제1 또는 제4항에 있어서, 상기식[Ⅱ]로 표시되는 염기배열에서 제87버의 코돈인 AGT가 GGT 또는 그의 축중코돈으로 변환된 염기배열을 갖는 DNA를 제조하는 것을 특징으로 하는 DNA의 제조방법.
  13. 제5항 내지 제12항중 어느 하나에 있어서, 상기 DNA의 5'말단에 개시코돈 ATG를 갖는 염기배열을 갖거나 또는 함유하는 DNA를 제조한는 것을 특징으로 하는 DNA제조방법.
  14. 제2 또는 3항에 있어서, 대장균중에서 증식하여 얻은 플라스미드를 벡타로서 사용하는 것을 특징으로한ㄴ 토끼암괴 사인자 또는 그의 주요부를 갖거난 또는 함유하는 폴리펩티드의 제조방법.
  15. 제2 또는 3항에 있어서, 대장균을 숙주로 사용하는 것을 특징으로 하는 토끼암괴사인자 또는 그의 주요부를 갖거나 또는 함유하는 폴리펩티드의 제조방법.
  16. 제2 또는 제3항에 있어서, 토끼암괴사인자의 아미노산 배열 또는 그의 주요부를 갖거나 또는 함유하는 폴리펩티드에서 그 자체 또는 그의 분해물이 토끼암괴사인자폴리펩티드와 실질적으로 동등한 생물환성을 갖고, 또한 면역학적으로 교차하는 폴리펩티드를 제조하느 것을 특징으로 하는 폴리펩티드의 제조방법.
  17. 제2 또는 제3항에 있어서, 다음 식[A]로 표시되는 아미노산 배열 또는 그의 일부가 수식된 아미노산 배열을 갖거나 또는 함유하는 폴리팹티드를 제조하는 것을 특징으로 하는 폴리펩티드의 제조방법.
  18. 제2또는 제3항에 있어서, 상기식[A]로 표시되는 아미노산 배열에서 제7번의 Ser가 Gly로 변환된 아미노산 배열을 갖거나 또는 함유하는 폴리펩티드를 제조하는 것을 특징으로하는 폴리펩티드의 제조방법.
  19. 제2 또는 제3항에 있어서, 다음식[B]로 표시되는 아미노산 배열 또는 그의 일부가 수식된 아미노 배열을 갖거나 또는 함유하는 폴리펩티드를 제조하는 것을 특징으로하는 폴리펩티드의 제조방법.
  20. 제2 또는 제3항에 있어서, 상기식[B]로 표시되는 아미노산 배열에서 제8 번의 Ser이 Gly로 변환된아미노산 배열을 갖거나 또는 함유하는 폴리펩티드를 제조하는 것을 특징으로 하는 폴리펩티드의 제조방법.
  21. 제2 또는 제3항에 있어서, 상기식[A] 혹은 [B] 또는 식[A]의 제7번 혹은 식 [B]의 제87번의 Ser가 Gly로 변환된 폴리펩티드의 N 말단 그리고/또는 C말단에 다른 아미노산 또는 펩티드가 결합되어 있는 폴리펩티드렐 제조하는 것을 특징으로 하는 폴리펩티드의 제조방법.
  22. 제21항에 있어서, 상기의 다른 아미노산이 Met인 폴리펩티드를 제조하는 것을 특징으로 하는 폴리펩티드의 제조방법.
    ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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