KR20230012445A - 유산균 발효를 이용한 뽕잎 추출물의 제조방법 및 이로부터 제조된 뽕잎 추출물 - Google Patents

유산균 발효를 이용한 뽕잎 추출물의 제조방법 및 이로부터 제조된 뽕잎 추출물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 건조된 뽕잎을 용매에 혼합하고 추출하는 단계, 상기 혼합물을 여과하는 단계, 상기 여과물을 분리하여 여과액을 제조하는 단계, 상기 여과액을 농축하는 단계 및 상기 농축된 여과액에 락토바실러스속(Lactobacillus spp.) 유산균을 접종하여 발효하는 단계를 포함하는 뽕잎 추출물의 제조방법 및 이로부터 제조된 뽕잎 추출물을 제공한다.

Description

유산균 발효를 이용한 뽕잎 추출물의 제조방법 및 이로부터 제조된 뽕잎 추출물 {Method of manufacturing mulberry leaf extract using lactic acid bacteria fermentation, and mulberry leaf extract manufactured by the method}
본 발명은 유산균 발효를 이용한 뽕잎 추출물의 제조방법 및 이로부터 제조된 뽕잎 추출물에 관한 것이다.
본 특허출원은 중소벤처기업부에서 지원하는 2018년도 산학연 협력 기술개발사업 (No. S2602630)의 연구 수행으로 인한 결과물임을 밝힌다.
뽕나무(Morus alba L.)는 누에고치 생산에 필요한 식물일 뿐만 아니라 전통적으로 약제로써 널리 사용되었으며, 뽕나무의 잎 뿐만 아니라 뿌리, 어린 가지, 잎의 흰 액즙 및 열매와 같은 부산물도 다양한 분야에서 사용되고 있으며, 뽕잎, 상백피, 오디의 생리 활성에 대한 연구가 꾸준히 진행되고 있다.
뽕잎은 오래전부터 당뇨병 환자의 치료제로 사용되어 왔으며 조선시대 허준이 집필한 동의보감(東醫寶鑑)에도 소갈(消渴)환자와 뇌졸증 환자 등의 치료에 사용되었다고 기술된다.
뽕잎의 기능성 성분으로는 뇌 모세혈관의 발달과 당 대사의 활성화 및 혈압 감소 등에 효과가 크다고 알려진 rutin, quercetin, isoquercetin과 같은 플라보노이드가 함유되어 있으며, 혈당을 낮추고 혈중 콜레스테롤을 조절하며 당대사에 도움을 준다고 알려진 GABA(γ-aminobutyric acid)는 녹차 잎에 비하여 약 10배 이상 함유되어 있는 것으로 밝혀진다.
또한, 탁월한 혈당 강하성분으로 알려진 1-deoxynojirimycin(DNJ)은 α-glucosidase 저해제로서 뽕잎의 대표적인 항당뇨 지표물질로 평가되고 있다.
인체 소장의 brush-border membrane에 존재하는 소화효소인 α-glucosidase는 이당류나 다당류 형태의 탄수화물을 단당류로 가수분해하여 소화 흡수될 수 있도록 작용하는 효소로서 α-glucosidase의 저해제는 탄수화물 식이 후 혈당상승을 억제할 수 있다.
지금까지 뽕잎의 생리활성에 대한 연구 중 α-glucosidase 활성 억제에 의한 혈당 강하효과, 혈청 중 중성지방과 콜레스테롤 저하작용, 동맥경화증 및 고지혈증 효과 등이 연구되어져 왔으며 생체 내 혈당 강하 및 생리적 기능에 대한 연구가 이루어져 왔다.
당뇨병은 우리나라의 5대 사망원인 중 하나로 비만과 운동부족의 증가로 인해 전 세계적으로 유병률이 증가하고 있다. 우리나라에서도 2003년 전 인구의 5.9%에 불과했던 당뇨병 유병률이 2030년 10.85%로 급격히 증가할 것으로 예상된다(Park et al. 2013).
당뇨병은 췌장 베타세포의 인슐린 분비량이 부족하거나 결핍되어 발생하는 대사성 질환으로 열량원의 대사를 변형시키며, 이러한 대사이상은 고혈압, 고지혈증, 비만 및 동맥 경화성 혈관 장애를 일으킨다(Lee et al. 2014). 이러한 증상 외에도 망막증, 신증, 신경장애, 감염증 등이 당뇨 합병증으로 나타날 수 있다. 면역체계에도 영향을 주게 되어 세포매개성 면역에 더 큰 영향을 미치는 것으로 알려져 있다(Rim. 2012). 당뇨병을 근원적으로 치료할 수 있는 치료법은 아직 개발되어 있지 않는 실정이며, 혈당이 정상적인 수준으로 유지되도록 하는 것이 최선의 치료법으로 알려져 있다.
현재까지 유산균을 이용한 발효를 통해 뽕잎의 항당뇨 활성 증가에 관한 연구는 미비한 상태이다. 뽕잎 또는 뽕잎 발효물의 항당뇨 용도와 관련하여 대한민국 등록특허공보 제10-1274664호에는 뽕잎 발효물을 포함하는 음료 조성물로서, 조성물 총 중량에 대하여 뽕잎 발효물 20~30중량%, 결정과당 0.1~0.5중량% 및 사과 농축액 0.05~0.5중량%를 함유하고, 상기 뽕잎 발효물은 뽕잎, 현미 추출물 및 정제염을 혼합한 혼합물을 호기성 유산균 바실러스 코아귤란스(Bacillus coagulance)로 발효시켜 제조한 것이며, 당뇨, 비만 또는 과혈당증을 예방하기 위한 것임을 특징으로 음료 조성물이 개시되어 있다.
한국 등록특허공보 제10-1274664호
본 발명이 해결하고자 하는 과제는 유산균을 이용하고, 별도의 인공 화학물질을 이용하지 않아 친환경적이고 인체에 유해하지 않으면서도, 탁월한 혈당 강하성분으로 알려진 1-deoxynojirimycin(DNJ)의 함량이 향상된 뽕잎 추출물을 제공하는 것이다.
상기 과제를 해결하기 위하여 본 발명은 건조된 뽕잎을 용매에 혼합하고 추출하는 단계, 상기 혼합물을 여과하는 단계, 상기 여과물을 분리하여 여과액을 제조하는 단계, 상기 여과액을 농축하는 단계 및 상기 농축된 여과액에 락토바실러스속(Lactobacillus spp.) 유산균을 접종하여 발효하는 단계를 포함하는 뽕잎 추출물의 제조방법을 제공한다.
나아가, 본 발명은 상기의 제조방법으로부터 제조된 뽕잎 추출물을 제공한다.
본 발명에 따른 뽕잎 추출물의 제조방법은 유산균을 이용하고, 별도의 인공 화학물질을 이용하지 않아 친환경적이고 인체에 유해하지 않으면서도, 1-deoxynojirimycin(DNJ)의 함량이 향상된 뽕잎 추출물을 제공할 수 있다.
도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 뽕잎 추출물의 제조방법에 대한 절차도(Procedure drawing)이다.
이하, 본 발명의 다양한 실시예를 기재한다. 본 발명은 특정 실시예에 대해 한정되지 아니며, 본 발명의 실시예들의 다양한 변경(Modification), 균등물(Equivalent) 및/또는 대체물(Alternative)을 포함하는 것으로 이해되어야 한다. 도면의 설명과 관련하여, 유사한 구성요소에 대해서는 유사한 참조 부호가 사용될 수 있다.
본 문서에서, "가진다", "가질 수 있다", "포함한다", 또는 "포함할 수 있다" 등의 표현은 해당 특징(예: 수치, 기능, 동작, 또는 부품 등의 구성요소)의 존재를 가리키며, 추가적인 특징의 존재를 배제하지 않는다.
본 문서에서, "A 또는 B", "A 또는/및 B 중 적어도 하나", 또는 "A 또는/및 B 중 하나 또는 그 이상" 등의 표현은 함께 나열된 항목들의 모든 가능한 조합을 포함할 수 있다. 예를 들면, "A 또는 B", "A 및 B 중 적어도 하나", 또는 "A 또는 B 중 적어도 하나"는, (1) 적어도 하나의 A를 포함, (2) 적어도 하나의 B를 포함, 또는 (3) 적어도 하나의 A 및 적어도 하나의 B 모두를 포함하는 경우를 모두 지칭할 수 있다.
본 문서에서 사용된 표현 "~하도록 구성된(또는 설정된)(Configured to)"은 상황에 따라, 예를 들면, "~에 적합한(Suitable for)", "~하는 능력을 가지는(Having the capacity to)", "~하도록 설계된(Designed to)", "~하도록 변경된(Adapted to)", "~하도록 만들어진(Made to)", 또는 "~를 할 수 있는(Capable of)"과 바꾸어 사용될 수 있다. 용어 "~하도록 구성(또는 설정)된"은 "특별히 설계된(Specifically designed to)"것 만을 반드시 의미하지는 않는다.
본 문서에서 사용된 용어들은 단지 특정한 실시예를 설명하기 위해 사용된 것으로, 다른 실시예의 범위를 한정하려는 의도가 아닐 수 있다. 단수의 표현은 문맥상 명백하게 다르게 뜻하지 않는 한, 복수의 표현을 포함할 수 있다. 기술적이거나 과학적인 용어를 포함해서 여기서 사용되는 용어들은 본 문서에 기재된 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에 의해 일반적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 가질 수 있다. 본 문서에 사용된 용어들 중 일반적인 사전에 정의된 용어들은 관련 기술의 문맥 상 가지는 의미와 동일 또는 유사한 의미로 해석될 수 있으며, 본 문서에서 명백하게 정의되지 않는 한, 이상적이거나 과도하게 형식적인 의미로 해석되지 않는다. 경우에 따라서, 본 문서에서 정의된 용어일지라도 본 문서의 실시예들을 배제하도록 해석될 수 없다.
또한, 본 발명에 따른 공정의 각 단계는 완전 시계열적 순서에 의한 것이라고 한정하는 것은 아니고, 일반적인 조성물의 제조 공정에 적용하는 순서에 따라 발명을 이해하기 쉽게 기재한 것으로, 발명의 공정 순서는 필요에 따라 변경 또는 수정 가능함은 물론이며, 후술하는 조성물들의 제조는 개별적인 공정으로 별도로 진행될 수도 있다
본 문서에 개시된 실시예는 개시된, 기술 내용의 설명 및 이해를 위해 제시된 것이며, 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다. 따라서, 본 문서의 범위는, 본 발명의 기술적 사상에 근거한 모든 변경 또는 다양한 다른 실시예를 포함하는 것으로 해석되어야 한다.
이하, 본 발명의 바람직한 실시예를 상세히 설명하기로 한다. 이에 앞서, 본 명세서 및 청구범위에 사용된 용어나 단어는 통상적이거나 사전적인 의미로 한정해서 해석되어서는 아니 되며, 발명자는 그 자신의 발명을 가장 최선의 방법으로 설명하기 위해 용어의 개념을 적절하게 정의할 수 있다는 원칙에 입각하여 본 발명의 기술적 사상에 부합하는 의미와 개념으로 해석되어야만 한다.
따라서, 본 명세서에 기재된 실시예의 구성은 본 발명의 가장 바람직한 일부 실시예에 불과할 뿐이고 본 발명의 기술적 사상을 모두 대변하는 것은 아니므로, 본 출원시점에 있어서 이들을 대체할 수 있는 다양한 균등물과 변형예들이 있을 수 있음을 이해하여야 한다.
명세서 전체에서, 어떤 부분이 어떤 구성요소를 “포함”한다고 할 때, 이는 특별히 반대되는 기재가 없는 한 다른 구성요소를 제외하는 것이 아니라 다른 구성요소를 더 포함할 수 있는 것을 의미한다.
국내외의 뽕잎의 가공 현황을 살펴보면, 열탕추출, 증자, 가열건조와 풍미개선을 위한 고온에서의 볶음(Roasting) 등의 공정을 이용하여 뽕잎차와 뽕잎 음료를 생산한다. 그렇지만, 신선한 과일이나 야채를 과도하게 열처리하면 과일이나 야채의 유용 성분이 상당량 파괴된다. 연구보고서에 의하면 뽕잎을 찌거나 삶으면 유용성분의 손실이 크다.
또한, 청취(풋내라고도 함)를 없애고 구수한 맛을 내기 위하여 높은 온도에서 볶을 경우에도 유용성분의 파괴가 심하다. 이에, 유용성분의 파괴를 방지하고자 녹즙과 같이 뽕잎을 녹즙화 하여 상태로 공급될 경우, 풋내가 강하고, 대장균과 같은 장내 세균 등의 오염으로 인하여 위생상의 문제가 있고, 체질에 따라서 소화기관의 과민성(설사 등)을 일으키며, 저장성이 떨어져서 유통상의 문제점이 많다.
뽕잎 추출물의 제조방법
본 발명의 일 실시예에 따른 뽕잎 추출물의 제조방법은 도 1을 참조하여 설명하면, 건조된 뽕잎을 용매에 혼합하고 추출하는 단계(S10), 상기 혼합물을 여과하는 단계(S20), 상기 여과물을 분리하여 여과액을 제조하는 단계(S30), 상기 여과액을 농축하는 단계(S40) 및 상기 농축된 여과액에 락토바실러스속(Lactobacillus spp.) 유산균을 접종하여 발효하는 단계(S50)를 포함하는 것이다.
이하에서는 이러한 뽕잎 추출물의 제조방법에 대하여 각 단계별로 상세히 설명한다.
건조된 뽕잎을 용매에 혼합하고 추출하는 단계(S10)는 건조된 뽕잎을 고온의 용매에 함침함으로써, 뽕잎에 존재하는 유효 성분을 추출하는 단계이다.
상기 추출 단계는 용매로서 물을 포함하고, 60 내지 100℃의 온도 조건에서 추출하는 것일 수 있고, 보다 구체적으로는 90 내지 100℃, 바람직하게는 95 내지 98℃의 온도 조건에서 추출 단계를 수행하는 것일 수 있다.
상기 물은 시판되는 음용수를 이용할 수 있으며, 정제수, 초순수 정제수를 이용할 수도 있다. 일반 정제수는 음료, 제약, 화장품 등에 일반적으로 사용되는 물로서, 순도를 나타내는 용존 고형분이 1.0 내지 0.5ppm이고, 정제수 제조 시 미립자 및 미생물의 제거를 위해 사용하는 필터의 사이즈가 0.2 내지 0.45㎛이며, pH는 약산으로부터 약알칼리까지 다양하다. 상기 초순수 정제수는 용존 고형분이 0.03ppm으로 순도가 매우 높고, 초순수 정제수 제조 시 사용되는 필터의 사이즈는 0.001㎛로서 이를 이용하여 미생물이 99.99% 제거된 것이며, pH는 중성이므로 추출물의 용매로서 바람직하다. 상기 추출 단계에서, 상기 건조된 뽕잎과 상기 온도 조건을 갖춘 물의 중량비는 1: 3 내지 25, 바람직하게는 1: 5 내지 20일 수 있다.
건조된 뽕잎을 용매에 혼합하고 추출하는 단계(S10)에서는 혼합물을 수득하고, 상기 혼합물을 여과하는 단계(S20)는 유효성분을 포함하는 액상 이외에 불순물을 걸러내는 단계이다. 여과 단계는 1회만 진행할 수 있고, 작업의 여건에 따라서는 2회 이상을 수행할 수도 있다.
상기 여과는 30 내지 60 mesh, 바람직하게는 40 mesh의 체 또는 면포로 여과함이 바람직하다.
상기 여과물을 분리하여 여과액을 제조하는 단계(S30)는 여과물에 혼재된 핵심 성분들을 효과적으로 분리하기 위한 것으로서, 상기 여과물의 분리는 5000 내지 10000rpm으로 5 내지 15분 원심분리를 수행하는 것이 바람직하다.
상기 여과액을 농축하는 단계(S40)는 이후 공정인 발효에 적용시키기 위한 고형분을 제조하기 위한 것으로서, 상기 농축된 여과액은 전체 성분 중 고형분이 2 내지 5 중량%일 수 있다.
상기 농축된 여과액에 락토바실러스속(Lactobacillus spp.) 유산균을 접종하여 발효하는 단계(S50)는 뽕잎에 포함된 유효 성분인 1-deoxynojirimycin(DNJ)의 추출 함량을 효과적으로 높이기 위하여 본 발명자들이 안출하여 선택한 것으로서, 발효 단계 이후에 최종적으로 얻어지는 뽕잎 추출물에는 상술한 1-deoxynojirimycin(DNJ)의 함량이 효과적으로 상승할 뿐만 아니라, 뽕잎 추출물에 공존하는 락토바실러스속(Lactobacillus spp.) 유산균은 혈중 포도당의 세포 내 흡수를 통해 혈당 강하를 효과적으로 확보할 수 있으며, 혈당상승 억제 작용과 소장에서의 α-glucosidase 저해 활성을 우수하게 확보할 수 있다.
또한, 상기 락토바실러스속(Lactobacillus spp.) 유산균 발효에 의해 뽕잎 추출물에는 휘발성 향기 성분인 hexanal, (E)-hexenal, phenylethyl alcohol, benzaldehyde의 함량이 증가하여, 최종 추출물의 향미가 개선될 수 있다.
상기 락토바실러스속(Lactobacillus spp.) 유산균은 락토바실러스 플란타럼(Lactobacillus plantarum), 락토바실러스 카세이 (Lactobacillus casei), 락토바실러스 헬베티쿠스(Lactobacillus helveticus) 및 락토바실러스 루테리 (Lactobacillus reuteri)로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상을 포함하는 것일 수 있고, 바람직하게는 상기 락토바실러스속(Lactobacillus spp.) 유산균은 락토바실러스 플란타럼(Lactobacillus plantarum)일 수 있다.
상기 농축된 여과액에 락토바실러스속(Lactobacillus spp.) 유산균을 접종하여 발효하는 단계(S50)는 엄격한 조건 하에서 발효가 되어야 만이 본 발명 고유의 효과를 얻을 수 있으므로, 바람직하게는 하기 조건으로 발효 단계를 수행하는 것일 수 있다.
(1) 발효전 초기 액의 pH 4 내지 6
(2) 발효 온도 25 내지 35℃
(3) 발효 시간 20 내지 40시간
(4) 접종량 0.5 내지 3%[(유산균 vol / 여과액 vol) * 100(%)]
상술한 엄격한 조건 하에서, 1-deoxynojirimycin(DNJ)의 추출물의 함량을 높이기 위해서는 각 단계별로, 더욱 바람직한 조건으로 발효 단계가 수행될 수 있다.
구체적으로 (1) 발효전 초기 액의 pH 4 내지 6는 바람직하게는 pH 4.5 내지 6, 더욱 바람직하게는 pH 5 내지 6의 조건으로 수행될 수 있으며, (2) 발효 온도의 경우 25 내지 35℃, 바람직하게는 25 내지 30℃의 조건으로 수행될 수 있으며, (3) 발효 시간 20 내지 40시간, 바람직하게는 20 내지 30시간, (4) 접종량의 경우 0.5 내지 3%, 바람직하게는 2 내지 3%일 수 있다.
상기와 같은 공정을 수행하여 제조된 뽕잎 추출물은 하기와 같은 음용수나 치료제로서 이용될 수 있다. 구체적인 조성 및 조건은 하기와 같다.
유산균 Lactobacillus plantarum SG-053로 발효한 고형분 1.5∼3%의 뽕잎 추출액 1∼2 중량%에 정제수, 비타민C, 탄산수소나트륨, 가향제 등을 첨가한 후 살균, 충전, 냉각, 포장하여 뽕잎 발효차를 제조할 수 있다.
유산균 Lactobacillus plantarum SG-053로 발효한 고형분 1.5∼3%의 뽕잎 추출액 2∼3 중량%에 일정량의 작두콩추출액 또는 차류추출액을 첨가하여 관능을 조정하고, 정제수, 비타민C, 탄산수소나트륨, 가향제 등을 첨가한후 살균(130±5℃ 또는 ASEPTIC 살균), 충전, 냉각, 포장하여 뽕잎 발효차를 제조할 수 있다.
유산균 Lactobacillus plantarum SG-053로 발효한 고형분 1.5∼3 중량%의 뽕잎 추출액 2±0.5%에 정제수, 에리스리톨, 효소처리스테비아, 수크랄로스, 비타민C, 사과산, 구연산, 가향제 등을 첨가한 후 살균, 충전(98±2℃ 또는 ASEPTIC 살균), 냉각, 포장하여 뽕잎 발효차를 제조할 수 있다.
유산균 Lactobacillus plantarum SG-053로 발효한 고형분 3∼10 중량%의 뽕잎 추출액 5∼10 중량%에 정제수, 액상과당, 칡농축액, 헛개농축액, 타우린, 구연산, 비타민C, 말토덱스트린, 가향제 등을 첨가한 후 살균, 충전(98±2℃/30초), 냉각, 포장하는 뽕잎 발효 음료를 제조할 수 있다.
실험예
뽕잎 추출물을 수득하기 위하여, 유산균을 이용한 발효 단계시의 락토바실러스속(Lactobacillus spp.) 유산균 중 락토바실러스 플란타럼(Lactobacillus plantarum)을 이용한 발효 조건을 분석하기 위하여 하기와 같은 실험을 진행하였다.
변수 값 뽕잎 추출물 중의
DNJ 함량 (μg/mL)
Initial pH Temperature (℃) Time (h) Inoculum concentration (%) Sugar content (°Brix) Agitation speed (rpm)
1 5.5 (-1) 40 (+1) 12 (-1) 0.5 (-1) 0.5 (-1) 200 (+1) 23.65±0.90***
2 5.5 (-1) 28 (-1) 12 (-1) 0.5 (-1) 0.5 (-1) 0(-1) 19.11±2.15**
3 5.5 (-1) 28 (-1) 12 (-1) 2.5 (+1) 2.5 (+1) 200 (+1) 20.48±1.62**
4 7.5 (+1) 28 (-1) 12 (-1) 0.5 (-1) 2.5 (+1) 200 (+1) 12.96±0.26***
5 7.5 (+1) 40 (+1) 12 (-1) 2.5 (+1) 2.5 (+1) 0(-1) 11.80±0.99**
6 7.5 (+1) 40 (+1) 12 (-1) 2.5 (+1) 0.5 (-1) 0(-1) 21.71±2.07**
7 5.5 (-1) 40 (+1) 24 (+1) 2.5 (+1) 0.5 (-1) 200 (+1) 15.75±3.44*
8 5.5 (-1) 40 (+1) 24 (+1) 0.5 (-1) 2.5 (+1) 0(-1) 29.27±1.61**
9 5.5 (-1) 28 (-1) 24 (+1) 2.5 (+1) 2.5 (+1) 0(-1) 36.63±1.65**
10 7.5 (+1) 28 (-1) 24 (+1) 0.5 (-1) 0.5 (-1) 0(-1) 24.24±1.61**
11 7.5 (+1) 28 (-1) 24 (+1) 2.5 (+1) 0.5 (-1) 200 (+1) 24.11±0.60***
12 7.5 (+1) 40 (+1) 24 (+1) 0.5 (-1) 2.5 (+1) 200 (+1) 15.71±0.35***
실험예 9에서 나타나듯이 뽕잎 추출물 내의 DNJ 함량은 pH 5.5, 온도 28℃, 시간 24시간, 접종량 2.5%, 당도 2.5°Brix, 교반속도 0 rpm 일 때가, 36.63 μg/mL로 가장 높게 나타났다.
실시예
이하에서는, 본 발명의 실시 형태에 관한 첨가제 조성물의 실시예를 기재하여 본 발명에 대하여 구체적으로 설명하지만, 본 발명은 이들 실시예로 한정되는 것은 아니다.
실시예 1
95℃∼100℃의 물 10kg에 건조 뽕잎 500g을 넣고, 2시간 동안 추출한 후 40mesh로 여과한 후, 8000rpm에서 10분 원심분리한 후 농축한 뽕잎추출액에 유산균 Lactobacillus plantarum SG-053을 접종하여 뽕잎 발효 추출물을 얻는다.
실시예 2
95℃∼100℃의 물 10kg에 건조 뽕잎 500g을 넣고, 2시간 동안 추출한 후 40mesh로 여과한 후, 1㎛로 여과한 액을 농축한 뽕잎추출액에 유산균 Lactobacillus plantarum SG-053을 접종하여 뽕잎 발효 추출물을 얻는다.
실시예 3
95℃∼100℃의 물 2.5kg에 건조 뽕잎 500g을 넣고, 2시간 동안 추출한 후 1차 40mesh로 여과한 후, 2차 8,000rpm에서 10분동안 원심 분리하여 얻은 액을 유산균 Lactobacillus plantarum SG-053을 접종하여 뽕잎 발효 추출물을 얻는다.
실시예 4
95℃∼100℃의 물 2.5kg에 건조 뽕잎 500g을 넣고, 2시간 동안 추출한 후 1차 40mesh로 여과, 2차 1㎛로 여과한 액을 유산균인 Lactobacillus plantarum SG-053을 접종하여 뽕잎 발효 추출물을 얻는다.
실시예 6
배합탱크에 유산균 Lactobacillus plantarum SG-053로 발효한 뽕잎추출물(고형분 3 중량%) 1 중량%에 뽕잎차향 0.1 중량 %와 정제수 99.8 중량%를 혼합한 후 130±5℃에서 30초 살균 후 PET, 기타 용기에 90±2℃로 충전, 캡살균, 냉각하여 칼로리가 0인 발효 뽕잎 차를 제조한다.
실시예 7
배합탱크에 유산균 Lactobacillus plantarum SG-053로 발효한 뽕잎 추출물(고형분 3 중량%) 1 중량%에 탄산수소나트륨 0.05 중량%, 비타민C 0.01 중량%, 뽕잎차향 0.1 중량%와 정제수 99.84 중량%를 혼합한 후 130±5℃에서 30초간 살균 후 PET, 기타 용기에 90±2℃로 충전, 캡살균, 냉각하여 칼로리 0인 발효 뽕잎 차를 제조한다.
실시예 8
배합탱크에 유산균 Lactobacillus plantarum SG-053로 발효한 뽕잎추출물(고형분 3 중량%) 1 중량%에 작두콩추출액(고형분 0.1 중량%) 48.822 중량%, 탄산수소나트륨 0.03 중량%, 비타민C 0.01 중량%, 뽕잎차향 0.1 중량%, 천연차향 0.03 중량%, 감귤류추출물 0.008 중량%와 정제수 99.84 중량%를 혼합한 후 130±5℃에서 30초간 살균 후 PET, 기타 용기에 90±2℃로 충전, 캡살균, 냉각하여 칼로리 0인 발효 뽕잎 차를 제조한다.
실시예 9
배합탱크에 유산균 Lactobacillus plantarum SG-053로 발효한 뽕잎 추출물(고형분 3 중량%) 2 중량%에 에리스리톨 5 중량%, 효소처리스테비아 0.17 중량%, 사과산 0.08%, 비타민C 0.01 중량%, 뽕잎차향 0.1 중량%, 정제수 92.64 중량%를 혼합한 후 130±5℃에서 30초간 살균 후 PET, 기타 용기에 90±2℃로 충전, 캡살균, 냉각하여 칼로리 0인 발효 뽕잎 차를 제조한다.
실험예
차의 관능 검사는 (사)우리차문화연합회 회원 30명으로 구성된 관능 요원을 대상으로 실시하였다. 단맛, 신맛, 떫은맛, 구수한 맛은 강도로 아주 낮다(1점), 낮다(2점), 보통이다(3점), 강하다(4점), 아주 강하다(5점)로 나타내었다. 향미 기호도, 색상 기호도 및 종합 기호도는 아주 싫다(1점), 싫다(2점), 보통이다(3점), 좋다(4점), 아주 좋다(5점)로 평가하였다. 30명 값의 평균치를 계산하였으며, 그 결과는 표 2에 나타내었다.
관능검사항목 실시예 6 실시예 7 실시예 8 실시예 9 시판
비발효 뽕잎차
단맛 1.85 2.30 2.01 1.90 2.31
신맛 1.32 1.42 1.38 1.39 1.30
떫은맛 1.56 1.84 1.43 1.65 2.12
구수한 맛 3.21 3.85 3.42 3.34 3.35
향미 기호도 3.62 3.42 3.81 3.42 2.96
색상 기호도 3.78 3.65 3.89 3.23 3.01
종합 기호도 3.65 3.73 3.54 3.75 2.83

Claims (2)

  1. 건조된 뽕잎을 뽕잎과 용매의 중량비가 1: 5 내지 20이 되도록 용매에 혼합하되 풋내를 줄이고 세균 오염을 방지하면서 유용성분 파괴를 막기 위하여 용매로서 초순수 정제수를 이용하여 95 내지 98℃의 온도 조건에서 추출하는 단계;
    상기 혼합물을 30 내지 60 mesh를 통해 여과하는 단계;
    상기 여과물을 5000 내지 10000rpm으로 5 내지 15분 원심분리하여 여과액을 제조하는 단계;
    상기 여과액을 전채 성분 중 고형분이 2 내지 5 중량%가 되도록 농축하는 단계; 및
    뽕잎에 포함된 유효 성분인 1-deoxynojirimycin(DNJ)의 추출 함량과 휘발성 향기 성분인 hexanal, (E)-hexenal, phenylethyl alcohol, benzaldehyde의 함량을 높여 추출물의 향미를 높이기 위해 상기 농축된 여과액에 락토바실러스속(Lactobacillus spp.) 유산균 중 락토바실러스 플란타럼(Lactobacillus plantarum) SG-053을 접종하여 발효하는 단계를 포함하되,
    상기 농축된 여과액은 전체 성분 중 고형분이 2 내지 5 중량%이며,
    하기 조건의 발효 단계를 수행하는 것인 뽕잎 추출물의 제조방법.
    (1) 발효전 초기 액의 pH 5 내지 6
    (2) 발효 온도 25 내지 30℃
    (3) 발효 시간 20 내지 30시간
    (4) 접종량 2 내지 3%[(유산균 vol / 여과액 vol) * 100(%)]
  2. 청구항 1항에 따라 제조된 뽕잎 추출물.
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