KR20210132749A - 염증성 질환에서 il-18 결합 단백질(ｉｌ-18ｂｐ) - Google Patents

염증성 질환에서 il-18 결합 단백질(ｉｌ-18ｂｐ) Download PDF

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Abstract

본 발명은 인터류킨 18(IL-18)-관련 질환 및 장애를 치료하기 위한 수단 및 방법을 제공한다. 특히, 본 발명은 이러한 치료에서의 용도 및 징후의 진단을 위하여 유리 IL-18에 특이적인 항체 및 IL-18 결합 단백질(IL-18BP)을 개시한다.

Description

염증성 질환에서 IL-18 결합 단백질(ＩＬ-18ＢＰ){IL-18 BINDING PROTEIN (IL-18BP) IN INFLAMMATORY DISEASES}
본 발명은 인터류킨 18(IL-18)-관련 질환 및 장애의 치료를 위한 수단 및 방법을 제공한다. 특히, 본 발명은 이러한 치료에 사용하기 위한 및 징후의 진단을 위한 유리 IL-18에 대하여 특이적인 항체 및 IL-18 결합 단백질(IL-18BP)을 개시한다.
인터페론-감마 유도 인자로서도 공지된 인터류킨-18(IL-18)은 사이토카인이며, 이것은 활성화된 대식세포, 쿠퍼 세포 및 기타 세포에 의해 생성된다. IL-18은 IL-18 수용체에 결합하며 세포 매개된 면역을 유도한다. IL-18 사이토카인 수용체 또는 IL-18 사이토카인의 결함(예컨대 녹-아웃)은 손상된 자연 살생(NK) 세포 활성 및 TH1 반응을 초래한다. 그의 생리학적 역할 이외에도, IL-18은 또한 중증의 염증성 장애를 유발할 수 있다. 이러한 장애의 초기 진단의 목적을 위하여, 그러므로 이러한 장애를 가질 것으로 예상되는, 대상의 체액에서 유리 IL-18의 레벨을 정량화할 필요가 있다.
그러나, 현재, 체액 내의 IL-18 레벨의 정량화는 일반적으로 ELISA 분석법을 사용하여 수행되며, 이것은 유리 IL-18의 검출을 위한 비특이적인 항체를 포함한다. ELISA 분석법에 의해 달성된 결과는 타깃 항원을 결합하는 사용된 일차 항체의 특이성에 의해 제한된다. 지금까지 시판의 항체를 사용하여 총 IL-18 레벨을 검출하는 것이 단지 가능하지만, 유리 IL-18에 대한 항체는 지금까지 알려져있지 않다. 총 IL-18의 검출은 유리 IL-18 레벨의 평가를 위하여 불충분한데, 그 이유는, 복합체에서 결합된, 예컨대 그의 자연 길항제 IL-18 결합 단백질(IL-18BP)에 결합된 IL-18은 IL-18 수용체에 감소된 친화성을 갖기 때문이다. 또한, 종종 증가된 IL-18 레벨은 상승된 IL-18BP 레벨과 관련된다는 것이 공지되어 있다.
상기 기술된 이유로 인하여, 총 IL-18의 결정은 IL-18 관련 질환의 적절한 진단을 이루기 위하여는 불충분하다. 이것은, 대상의 체액 내에서 유리 IL-18의 레벨을 평가할 수 있도록 하기 위하며 및 IL-18 관련 질환의 적절한 진단을 할 수 있도록 하기 위하여, 검출 수단이 유리 IL-18에 특이적으로 결합하지만, 복합체에서 결합된 IL-18에는 결합하지 않을 필요가 있음을 의미한다. 따라서, 현재 IL-18 관련 질환 또는 장애를 위한 효과적인 치료는 존재하지 않는다.
본 발명은 현재 유리 IL-18에 특이적으로 결합하지만, 복합체에서 결합된 IL-18에는 결합하지 않는, IL-18 결합 분자, 특히 IL-18 결합 단백질(IL-18BP) 또는 항체 형태의 이러한 검출 수단을 제공한다. 그러므로, 본 발명은 유리 IL-18의 검출 및 체액에서 유리 IL-18와 관련된 질환 또는 장애의 진단을 위한 적절한 수단에 대한 필요성을 만족한다.
이것은 개인이 원하는 대로 할 수 있는 효율적인 의약 접근 방식을 가능하게 한다. 특히, 이것은 체 조직에서, 그러나 특히 체액에서 유리 IL-18 관련 질환 또는 장애를 앓는 환자의 집단을 파악하고 특이적으로 유리-IL18을 결합하는 결합 분자의 투여에 의해 상기 환자를 효과적으로 치료하는 것이 현재 처음으로 가능하다.
본 발명은 그러므로 체 조직, 그러나 특히 체액에서 유리 IL-18 관련 질환 또는 장애를 앓는 환자의 집단에서 IL-18 관련 질환 또는 장애의 치료 및 예방을 위한 효과적인 치료 수단을 더 제공한다. 본 발명은 또한 유리 IL-18에 대하여 특이적이지만 복합체에서 결합된 IL-18과 교차 반응하지 않는 IL-18 결합 분자, 특히 (1) IL-18BP, 및/또는 (2) 항체를 제공함에 의해, 체 조직, 특히 체액에서 유리 IL-18와 관련된 질환 또는 장애의 효과적인 치료를 위한 필요성을 만족한다.
본 발명에 따른 IL-18 결합 분자, 그러나 특히 IL-18BP 및 IL-18 특이적 항체는 유리 IL-18의 그의 수용체로의 결합을 감소 및/또는 폐지할 수 있으며 IL-18 관련 장애 또는 질환을 앓는 환자에게 치료 이점을 제공할 수 있다.
최근 비임상 및 임상 연구는 만성 폐쇄성 폐질환의 병인에서 전 염증성 사이토카인 인터류킨 18(IL-18)의 현저한 역할을 명확히 하였으며, IL-18은 파괴 및 리모델링 과정의 마스터 레귤레이터로서 작용하는 것을 암시하였다.
만성 폐쇄성 폐질환(chronic obstructive lung disease)(COLD), 만성 폐쇄성 기도 질환(COAD), 만성 기류 제한(CAL) 및 만성 폐쇄성 호흡기 질환(CORD)으로도 또한 알려진 만성 폐쇄성 폐질환(chronic obstructive pulmonary disease)(COPD)은 시간이 지남에 따라 기도가 좁아지는 일반적으로 공존하는 폐의 한 쌍의 질환인 만성 기관지염 또는 폐기종의 발생이다. 이것은 제한된 기류가 폐로 왕복하는 것을 초래하며, 이것은 완전하게 가역적이지 않은 것으로 간주 되지만, 시간이 지남에 따라 점진적으로 더 악화 된다. 흡연은 유럽 및 미국에서 90%의 COPD에 대한 책임이 있다. 모든 담배 흡연자가 COPD가 생기는 것은 아니지만, 그것은 20%일 것으로 추정된다. COPD가 있는 흡연자는 COPD가 있는 비흡연자보다 더 높은 사망률을 갖는다. 이들은 또한 비흡연자들 보다 더 빈번한 호흡기 증상(기침, 호흡 곤란, 등)을 가지며 폐 기능이 더 악화된다. 다른 위험 인자는, 예를 들어, 유전적 감수성(예컨대 α1-안티-트립신 결핍뿐만 아니라 HHIP 근처 및 FAM13A 내의 염색체 4 및 CHRNA 및 IREB2 내의 염색체 15 상의 영역), 이전 결핵, 공기 오염, 분진 및 연기(공중 입자)에 직업적 노출, 간접 흡연에 노출, 및 바이오매스 연기 흡입이다. COPD는 두 관련 질환을 일차적으로 포함한다: 만성 기관지염 및 폐기종. 만성 기관지염은 염증이며 기관지 내막에 궁극적으로 흉터를 형성한다. 기관지가 염증 및/또는 감염되었을 때, 더 적은 공기가 폐로 왕복할 수 있으며 심한 점액 또는 가래가 기침으로 배출된다. 폐기종은 유해 입자 또는 가스, 주로 담배 연기에 대한 폐의 비정상적인 염증 반응에 의해, 부분적으로 폐포(공기로부터의 산소를 혈액 중에 있는 이산화탄소와 교환하는 폐에 있는 공기 주머니)의 파괴로 시작한다. 공기 주머니의 벽은 얇고 취약하다. 공기 주머니의 손상은 비가역적이며 하폐엽(lower lungs)의 조직에서 영구적인 "호울"을 초래한다. 공기 주머니가 파괴됨에 따라, 폐는 점점 더 적은 산소를 혈류에 전송하여, 호흡 곤란을 야기한다. 폐는 또한 기류 개방을 유지하는 것이 중요한 탄성을 손실한다. 그 결과, 환자는 숨을 내쉴 때 매우 어려움을 경험한다. 만성 기관지염 및 폐기종 양자에서 폐색 및 조직 파괴는 일반적으로 영구적이며 진행적이다. COPD 환자는 종종 악화를 경험한다. 용어 "악화(exacerbation)"는 증상의 가중을 의미하거나 또는 질환의 중증도의 증가를 의미한다. 악화의 기간은 매우 크게- 수시간 내지 수일 동안 변할 수 있다. 악화는 증가하는 호흡 과정에 특이적인 증상을 야기할 수 있다. 환자는 증가된 호흡 곤란, 변형된 객담과 함께 젖은 기침, 및 발열을 경험할 수 있다. 객담은 증가될 수 있거나 또는 더 화농성이 되고 색이 변화될 수 있다. 환자는 또한 비특이적 증상 예컨대 권태감, 피로, 불면증, 졸음, 또는 우울증을 경험할 수 있다. COPD의 악화는 일반적으로 하 기도의 감염에 의해 야기된다. 감염의 가장 일반적인 원인은 하기이다: 호기성 그람 양성 및 그람 음성균, 비정형균, 호흡기 바이러스, 리노바이러스, 인플루엔자 바이러스, RSV, 또는 병원체의 조합. 바이러스성 악화는 더 중증으로, 더 오래 지속되며, 더 큰 레벨의 염증과 관련되고 다른 원인으로 인한 악화보다 폐기능을 더 손실한다(Wedzicha, 2004, PATS; Seemungel et al., 2001, AM. J. RCCM; Tan et al., 2003, Am. J. Med. Donaldson et al., 2000, Thorax). 각각의 COPD 환자는 1년에 1 내지 4 악화를 경험할 가능성이 있다. 많은 환자들이 이러한 악화를 경험하지만, 이들은 의사에게 모든 에피소드의 약 50%만을 보고하는 것으로 추정된다. 빈번한 악화는 높은 경제적 부담 및 낮은 삶의 질과 관련되어 왔다.
COPD 질환 모델의 연구는 IL-18 및 IL-18R을 통한 IL-18 신호 전달 경로가 동물 모델 및 인간 폐 염증에서 궐련 연기 노출 및 궐련 연기-유발된 폐기종에서 통기 간극 확대에 의해 유의하게 활성화됨을 실증하는, IL-18-유발된 폐 염증, 궐련 연기(CS)-유발된 및 간접 흡연-유발된 폐기종 및 염증 및 흡연자에서 COPD와의 관련성을 다루었다. 결과는 IL-18 방출의 주 세포 원으로서 폐포 대식세포의 중요한 역할을 확증하였다.
IL-18은 폐 특이적, 유발성 IL-18- 유전자 변형 마우스 뿐만 아니라 조직 염증, 폐기종, 점액 화생, 및 심장의 우심실 비대증에서 기도 및 맥관 리모델링을 유발하는 것으로 나타났다.
IL-18은 또한 IFNγ-의존성 메커니즘을 통한 폐기종 및 세포 독성 반응, IL-17A- 및 IL-13-의존 경로를 통한 섬유증 기도 리모델링, 점액 화생, 및 맥관 리모델링을 유발하는 것을 나타낸다. IL-17A- 의존 메커니즘을 통한 IL-18- 유도 IL-13이 있는 이들 경로 간에는 중요한 상호작용이 있으며 IFNγ 및 IL-17A/IL-13은 서로 반대 조절을 반응한다. 결과적으로, IL-18은 여러 염증 캐스케이드 모듈레이션의 핵심이다.
COPD가 있는 환자의 전신 IL-18 레벨은 COPD 중의 순환 IL-18의 원으로서 폐포 대식세포를 암시하며 IL-18은 순환 및 COPD 환자의 유발된 객담에서 상승됨을 나타내었다.
COPD의 동반 질환에서 상승된 혈청 IL-18 레벨은 전신 염증과 관련되는 것으로 암시된다.
또한, 강한 상관관계는 혈청 IL-18 레벨과 폐기능 간에 발견되었다.
대체로, 비임상 및 임상 결과는 잠재적인 상류 타깃으로서 IL-18을 억제/중화하는 것에 대하여 명백하게 지지하며, 이에 의해 전형적으로 COPD 질환 증상 및 진행을 초래하는 파괴적 및 리모델링 과정 양자를 예방 또한 제한한다.
COPD 환자의 순환 및 객담에서 IL-18 레벨에 대한 최근 임상 연구의 결과로부터, IL-18 폐 레벨은 질환 중증도와 관련하여 COPD 환자에서 유의하게 상승된다는 것을 결론지을 수 있다.
COPD가 있는 환자로부터의 객담에서 IL-18에 대한 데이터는 폐포 대식세포가 COPD에서 IL-18의 주된 원이며 IL-18은 대조에 비해 COPD 환자의 폐에서 유의하게 과발현됨을 암시한다.
카스파제-1 활성화 자극에 이은 전 염증성 사이토카인 IL-1b 및 IL-18의 성숙한 형태의 방출에서 NLRP3 인플라마솜의 역할에 대한 최근 연구는 기도 염증에서 흡연의 효과를 더 규명하는 것에 기여한다(Rastrick et al., 2013).
하루에 2회 궐련 연기에 노출된 마우스에서, 카스파제-1 활성화 및 IL-18 방출을 시험하였다(Eltom et al., 2011).
카스파제-1 활성화를 통한 IL-18의 연기 유발된 상향 조절은 담배 연기 및 일반 공기에 노출한 것의 효과를 비교하여 설명된다.
모두, IL-18은 COPD 폐에서 파괴 및 리모델링 과정으로 방해할 수 있는 미래의 COPD 치료제를 위한 인기있는 상류 타깃으로서 존재하며, 이에 의해 COPD에서 질환 개질 치료 방법을 위한 유망한 후보이다.
그러므로 WO2008/150431 A1은 IL-18 억제제, IL-18Rα 억제제, 및 IFN-γ 억제제, PKR 억제제, 및 그의 조합을 대상에게 투여함에 의한 COPD 및 관련 동반질환을 앓는 대상에서 IL-18, IFN-γ, 또는 PKR의 상승으로부터 초래하는 COPD 및 관련 동반질환을 치료하는 것에 관하여 제안하였다.
수용체 봉쇄에 의해 신호 전달하는 IL-18을 타깃으로 하는 예를 들어 단일 클론 항체에 의한 IL-18의 억제는 이들 제제의 연장된 반감기로 인하여 작용 지속 기간이 길며, 이에 의해 유해한 IL-18 활성에 대하여 작용할 뿐만 아니라 숙주 방어를 위한 유익한 효과도 함께 방해하여 IFN-감마 억제 및 림프구 T 헬퍼 타입 1에 의한 병원체(바이러스, 박테리아, 진균 및 기타 기생충)로 유도된 반응의 관점에서 바람직하지 않은 부작용을 초래한다.
이러한 바람직하지 않은 부작용은 대안적인 접근 방식을 취함으로서, 즉 인터류킨 18(IL-18)에 대한 높은 결합 친화성 및 예를 들어, 공지의 단일클론 항체와 비교시 IL-18을 타깃화 하는 근본적으로 상이한 모드의 작용을 갖는 자연적으로 발생하는 IL-18 결합 단백질(IL-18BP)의 투여에 의해 회피될 수 있음을 본 발명의 문맥 내에서 놀랍게도 알아내었다.
본 발명의 특정 실시양태에서, IL-18 결합 단백질(IL-18BP)은 실시예 4.4.2에서 나타낸 바와 같은 비아코어(BIAcore) 셋업에서 결정할 때, 20pM 내지 30pM의 결합 친화성을 갖는다.
본 발명은 그러므로 한 실시양태에서 건강한 대조군 대상의 체액 레벨과 비교하여, 체액 내의 유리 IL-18의 비정상적 레벨 및/또는 유리 IL-18/IL-18BP의 비정상적 비율을 갖는 것으로 진단된 대상에서 IL-18 관련 장애 또는 질환의 치료에 사용하기 위한 복합체에서 결합된 IL-18과 교차 반응함이 없이 유리 IL-18에 특이적으로 결합하는 IL-18 결합 분자("유리 IL-18 특이적 결합 분자"로서 하기에서 언급됨), 특히 유리 IL-18의 그의 수용체로의 결합을 감소 및/또는 폐지하는 IL-18 억제제인 유리 IL-18 특이적 결합 분자("IL-18 억제제"로서 하기에서 언급됨), 특히 IL-18BP에 관한 것이다.
특히, 체액 내에서 유리 IL-18의 상기 비정상적인 레벨은 5%, 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 100%, 또는 100% 초과만큼 건강한 대조군 대상의 체액에서의 레벨을 초과한다.
또 다른 실시양태에서 본 발명은 체 샘플, 특히 체액 내에서 상기 유리 IL-18의 비정상적 레벨이, 본 발명에 따라 및 본원의 특정 실시양태에서 개시된 바와 같이 유리 IL-18에 특이적으로 결합하지만, 복합체에서 결합된 IL-18에 결합하지 않는 IL-18 결합 분자, 특히 IL-18 결합 단백질(IL-18BP) 또는 항체의 사용에 의해 결정되는, 본 발명에 따라 및 본원에서 개시된 용도를 위한 유리 IL-18 특이적 결합 분자, 특히 IL-18 억제제, 특히 IL-18BP를 제공한다.
또한, 한 실시양태에서, 본 발명은 치료될 대상이 건강한 대상에서 취한 샘플 중의 레벨과 비교하여, 체 샘플, 특히 기관지 폐포 세척 유체(BALF) 순환 유체, 분비 유체, 생검 및 균질 조직, 특히 혈청, 소변, 눈물, 타액, 담즙, 땀, 날숨, 호기, 객담, 기관지 폐포 액, 피지, 세포, 선, 점막, 및 조직 분비로 이루어진 군으로부터 선택된 샘플 내에서 유리 IL-18의 상승된 레벨 및/또는 유리 IL-18/IL-18BP의 비정상적 비율을 갖도록 구하여진 대상의 군에 속하는, 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 용도를 위한 유리 IL-18 특이적 결합 분자, 특히 IL-18 억제제, 특히 IL-18BP를 제공하는 것이다.
병에 걸린 환자 또는 대상의 샘플 형태에서 유리 IL-18의 상기 상승된 레벨은 ≥5pg/mL 및 10000pg/mL 이하이다. 특히, 병에 걸린 환자 또는 대상의 샘플 형태에서 유리 IL-18의 상기 상승된 레벨은 ≥5pg/mL 내지 10000pg/mL의 범위, 특히 100pg/mL 내지 10000pg/mL의 범위, 특히 200pg/mL 내지 10000pg/mL의 범위, 특히 300pg/mL 내지 10000pg/mL의 범위, 특히 400pg/mL 내지 10000pg/mL의 범위, 특히 500pg/mL 내지 10000pg/mL의 범위, 특히 600pg/mL 내지 10000pg/mL의 범위, 특히 700pg/mL 내지 10000pg/mL의 범위, 특히 800pg/mL 내지 10000pg/mL의 범위, 특히 900pg/mL 내지 10000pg/mL의 범위, 특히 1000 내지 10000pg/mL의 범위, 특히 1500pg/mL 내지 10000pg/mL의 범위, 특히 2000pg/mL 내지 10000pg/mL의 범위, 특히 3000pg/mL 내지 10000pg/mL의 범위, 특히 4000pg/mL 내지 10000pg/mL의 범위, 특히 5000pg/mL 내지 10000pg/mL의 범위이다. 건강한 대상, 특히 건강한 인간의 혈청에서 유리 IL-18의 양은 ≤5pg/mL, 특히 ≤4pg/mL, 특히 ≤1pg/mL, 특히 ≤0.5 pg/m, 특히 검출 레벨 미만이다.
여전히 본 발명의 또 다른 목적은 IL-18 관련 장애 또는 질환이 성인 스틸 병, 소아 스틸 병, 만성 폐쇄성 폐질환(COPD), 수혈 관련 폐 손상, 기관지폐 이형성증(BPD), 성인 호흡 곤란 증후군(ARDS), 간질성 폐 질환(ILD), 특발성 폐 섬유증, 낭성 섬유증, 폐 동맥 고혈압, 천식, 기관지 확장증, 심장 마비, 근위축성 측삭 경화증(ALS), 안구 건조증(DED), 각막염, 각막 궤양 및 찰과상, 각막 신생 혈관, 병적인 안구내 혈관신생, 홍채염, 녹내장, 황반 변성, 쇼그렌 증후군, 자가 면역 포도막염, 베체트병, 결막염, 알레르기성 결막염, 눈꺼풀 피부염, 제2형 당뇨병, 비알코올성 지방 간 질환(NAFLD), 지방 간염, 고형 장기 및 혈액 이식, 허혈 재관류 손상, 가족성 지중해 열, 종양 괴사 인자 수용체 1-관련 주기적 증후군, 크리오피린 관련 주기적 발열 증후군, 하이퍼-IgD 증후군, 통풍, 슈니츨러 증후군, 다발성혈관염이 있는 육아종증(GPA)으로 불리우는 베게너 육아종증, 하시모토 갑상선염, 크론병, 궤양성 대장염, 면역글로불린-4(IgG4)-관련 질환 및 줄기세포 요법으로 이루어진 군으로부터 선택된 것인 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 용도를 위한 유리 IL-18 특이적 결합 분자, 특히 IL-18 억제제, 특히 IL-18BP를 제공하는 것이다.
특정 실시양태에서, 본 발명은 상기 IL-18 관련 장애 또는 질환이 흡연 또는 간접 흡연 노출, 특히 담배 연기 노출에 의해 유발된, 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 용도를 위한 유리 IL-18 특이적 결합 분자, 특히 IL-18 억제제, 특히 IL-18BP를 제공하는 것이다.
또 다른 특정 실시양태에서, 본 발명은 상기 IL-18 관련 장애 또는 질환이 바이러스 감염에 의해 유발된, 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 용도를 위한 유리 IL-18 특이적 결합 분자, 특히 IL-18 억제제, 특히 IL-18BP를 제공하는 것이다.
여전히 본 발명의 또 다른 목적은 상기 IL-18 관련 장애 또는 질환이 폐기종, 조직 염증, 조직 파괴, 폐 절제, 혈관의 소실, 내피 세포의 아포토시스, 점액 화성, 심장 비대, 폐 조직에서 VEGF의 감소, 폐 혈관 손실, 혈관 근육화, 맥관 리모델링, 콜라겐 침착, 폐에서의 이상 엘라스틴층, 섬유증 기도 리모델링, 통기간극 확대, 기도 및 폐혈관의 만성 리모델링 및 감소된 폐기능으로 이루어진 군으로부터 선택된 염증 및 관련 동반 질환의 IL-18 유발된 전신 증상인, 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 용도를 위한, 유리 IL-18 특이적 결합 분자, 특히 IL-18 억제제, 특히 IL-18BP를 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은, IL-18 수용체로의 유리 IL-18의 결합, 특히 IL-18Rα로의 유리 IL-18의 결합을 방지하는, 항체, 특히 유리 IL-18에 대하여 특이적인 항체, 특히 길항적 항체인, 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 용도를 위한 유리 IL-18 특이적 결합 분자, 특히 IL-18 억제제를 제공하는 것이다.
기능상 동등한 항체 또는 이의 일부를 포함하는 본 발명에 따른 IL-18 특이적 항체는 IL-18BP의 결합 부위 또는 IL-18BP의 결합 부위 부근에서 IL-18에 결합하거나 또는 IL-18 분자 상에 2 이상의 에피토프에 결합하는 형태 항체이며, 이것은 삼차원 형태로 함께 모인 불연속적인 아미노산을 포함하고, IL-18 분자 상의 IL-18BP의 결합 부위가 차단되도록 수용체의 파라토프와 상호 작용한다.
한 실시양태에서, 기능상 동등한 항체 또는 이의 일부를 포함하는 본 발명에 따른 및 다양한 실시양태에서 본원에서 개시된 바의 IL-18 특이적 항체는 IL-18/IL-18BP 복합체가 아닌 유리 IL-18 단백질을 결합한다.
특히, 기능상 동등한 항체 또는 이의 일부를 포함하는 본 발명에 따른 IL-18 특이적 항체는 경쟁적 ELISA에 의해 결정된 바로 ≤0.01% 내지 ≤0.05%, 특히 ≤0.1% 내지 ≤0.2%, 특히 ≤0.2% 내지 ≤0.5%, 특히 ≤0.5% 내지 ≤1%, 특히 ≤1% 내지 ≤2%의 IL-18/IL-18BP 복합체와의 교차 반응성을 나타낸다.
특정 실시양태에서, 기능상 동등한 항체 또는 이의 일부를 포함하는 본 발명에 따른 IL-18 특이적 항체는 경쟁적 ELISA에 의해 결정된 바로 ≤0.1%의 IL-18/IL-18BP 복합체와의 교차 반응성을 나타낸다.
한 실시양태에서, 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 기능상 동등한 항체 또는 이의 일부를 포함하는 IL-18 특이적 항체는 IL-18로의 IL-18BP의 결합을 입체적으로 방해한다.
여전히 또 다른 실시양태에서, 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 기능상 동등한 항체 또는 이의 일부를 포함하는 IL-18 특이적 항체는 각기 서열 번호:1, 서열 번호:2 및 서열 번호:3으로 나타낸 서열의 군으로부터 선택된 서열에 포함되는 단일 에피토프, 2개의 에피토프의 조합 또는 3개의 에피토프의 조합에 특이적으로 결합한다.
특정 실시양태에서, 본 발명의 항체는 서열 번호:1, 서열 번호:2 및 서열 번호:3으로 나타낸 서열의 군으로부터 선택된 서열에 포함되는 단일 에피토프에 특이적으로 결합한다.
또 다른 특정 실시양태에서, 본 발명의 항체는 각기 서열 번호:1, 서열 번호:2 및 서열 번호:3으로 나타낸 서열의 군으로부터 선택된 서열에 포함되는 2개의 에피토프에 특이적으로 결합한다.
특히, 항체는 (a) 각기 서열 번호:1 및 서열 번호:2, (b) 각기 서열 번호:1 및 서열 번호:3, (c) 각기 서열 번호:2 및 서열 번호:3의 서열에 포함되는 2개의 에피토프에 결합한다.
또 다른 특정 실시양태에서 3개의 에피토프에 특이적으로 결합하는 본 발명의 항체는 각기 서열 번호:1, 서열 번호:2 및 서열 번호:3에 포함된다.
한 실시양태에서, 본 발명은 서열 번호:4, 서열 번호: 5 및 서열 번호:6으로 이루어진 군으로부터 선택된 단일 에피토프, 2개의 에피토프의 조합 또는 3개의 에피토프의 조합에 항체 특이적으로 결합하는, 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 기능상 동등한 항체 또는 이의 일부를 포함하는 IL-18 특이적 항체를 제공한다.
특히, 본 발명은 또한 상기 에피토프가 서열 번호:4, 서열 번호:5 또는 서열 번호:6으로 나타낸 서열에 대하여 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100% 서열 동일성을 갖는 서열을 갖는 상기 기능상 동등한 항체 또는 이의 일부를 포함하는 IL-18 특이적 항체에 관한 것이다.
특정 실시양태에서, 단일 에피토프에 특이적으로 결합하는 본 발명의 항체는 서열 번호:4, 서열 번호: 5 및 서열 번호:6으로 나타낸 서열의 군으로부터 선택된 서열에 포함된다.
또 다른 특정 실시양태에서, 2개의 에피토프에 특이적으로 결합하는 본 발명의 항체는 서열 번호:4, 서열 번호: 5 및 서열 번호:6으로 나타낸 서열의 군으로부터 선택된 서열에 포함된다.
특히, 2개의 에피토프에 결합하는 항체는 (a) 각기 서열 번호:4 및 서열 번호: 5, (b) 각기 서열 번호:4 및 서열 번호:6, (c) 각기 서열 번호: 5 및 서열 번호:6의 서열에 포함된다.
또 다른 특정 실시양태에서 3개의 에피토프에 특이적으로 결합하는 본 발명의 항체는, 각기 서열 번호:4, 서열 번호: 5 및 서열 번호:6의 서열에 포함된다.
특정 실시양태에서, 기능상 동등한 항체 또는 이의 항원 결합 부분을 포함하는 다양한 실시양태에서 본원에 개시된 바의 본 발명에 따른 항체는 각기 서열 번호:10, 12, 14, 16, 17, 19, 22, 24 및 26으로 나타낸 바의 경쇄 가변 영역의 1 이상, 2 이상 또는 모두 3의 상보성 결정 영역(CDRs), 및/또는 각기 서열 번호: 9, 11, 13, 15, 18, 20, 21, 23, 및 25로 나타낸 바의 중쇄 가변 영역의 1 이상, 2 이상 또는 모두 3의 상보성 결정 영역(CDRs)을 포함하며, 여기에서 상기 항체, 동등한 항체 또는 이의 항원 결합 부분은 유리 IL-18 단백질, 특히 IL-18BP의 결합 부위 또는 IL-18BP의 결합 부위 부근에서 결합하지만, IL-18/IL-18BP 복합체를 결합하지는 않는다.
특히, 기능상 동등한 항체 또는 이의 항원 결합 부분을 포함하는 다양한 실시양태에서 본원에 개시된 바의 본 발명에 따른 항체는 각기 서열 번호:10, 12, 14, 16, 17, 19, 22, 24 및 26으로 나타낸 바의 경쇄 가변 영역의 상보성 결정 영역(CDRs) 및 각기 서열 번호: 9, 11, 13, 15, 18, 20, 21, 23, 및 25로 나타낸 바의 중쇄 가변 영역의 상보성 결정 영역(CDRs)을 포함하며, 여기에서 상기 항체, 동등한 항체 또는 이의 항원 결합 부분은 유리 IL-18 단백질, 특히 IL-18BP의 결합 부위 또는 IL-18BP의 결합 부위 부근에서 결합하지만, 유의한 정도로 IL-18/IL-18BP 복합체를 결합하지는 않는다.
특정 실시양태에서, 기능상 동등한 항체 또는 이의 항원 결합 부분을 포함하는 다양한 실시양태에서 본원에 개시된 바의 본 발명에 따른 항체는 도11에서 나타낸 바의 1 이상, 2 이상 또는 모두 3의 경쇄 가변 영역의 상보성 결정 영역(CDRs), 및/또는 도11에서 나타낸 바의 1 이상, 2 이상 또는 모두 3의 중쇄 가변 영역의 상보성 결정 영역(CDRs)을 포함하며, 여기에서 상기 항체, 동등한 항체 또는 이의 항원 결합 부분은 유리 IL-18 단백질, 특히 IL-18BP의 결합 부위 또는 IL-18BP의 결합 부위 부근에서 결합하지만, IL-18/IL-18BP 복합체를 결합하지는 않는다.
특히, 기능상 동등한 항체 또는 이의 항원 결합 부분을 포함하는 다양한 실시양태에서 본원에 개시된 바의 본 발명에 따른 항체는 도11에서 나타낸 바의 경쇄 가변 영역의 상보성 결정 영역(CDRs), 및 도11에서 나타낸 바의 중쇄 가변 영역의 상보성 결정 영역(CDRs)을 포함하며, 여기에서 상기 항체, 동등한 항체 또는 이의 항원 결합 부분은 유리 IL-18 단백질, 특히 IL-18BP의 결합 부위 또는 IL-18BP의 결합 부위 부근에서 결합하지만, 유의한 정도로 IL-18/IL-18BP 복합체를 결합하지는 않는다.
본 발명의 특정 실시양태에서, 상보성 결정 영역(CDRs)은 카바트(Kabat)에서와 같이 가변 도메인 잔기의 넘버링에 따라 결정된다.
본 발명의 또 다른 특정 실시양태에서, 상보성 결정 영역(CDRs)은 코티아(Chothia)에서와 같이 가변 도메인 잔기 넘버링에 따라 결정된다.
본 발명의 또 다른 특정 실시양태에서, 상보성 결정 영역(CDRs)은 IMGT 시스템에 의해 결정된다.
기능상 동등한 항체 또는 이의 항원 결합 부분을 포함하는 다양한 실시양태에서 본원에 개시된 바의 본 발명에 따른 항체는 하기와 같은 상보성 결정 영역(CDRs)을 포함한다:
a. 각기 서열 번호:27, 서열 번호:28, 및 서열 번호:29로 나타낸 바의 서열을 갖는 중쇄 가변 영역의 CDR1, CDR2, 및 CDR 3; 및 각기 서열 번호:30, 서열 번호:31, 및 서열 번호:32로 나타낸 바의 서열을 갖는 경쇄 가변 영역의 CDR1, CDR2, 및 CDR 3; 또는
b. 각기 서열 번호:33, 서열 번호:34, 및 서열 번호:35로 나타낸 바의 서열을 갖는 중쇄 가변 영역의 CDR1, CDR2, 및 CDR 3; 및 각기 서열 번호:36, 서열 번호:37, 및 서열 번호:38로 나타낸 바의 서열을 갖는 경쇄 가변 영역의 CDR1, CDR2, 및 CDR 3; 또는
c. 각기 서열 번호:39, 서열 번호:40, 및 서열 번호:41로 나타낸 바의 서열을 갖는 중쇄 가변 영역의 CDR1, CDR2, 및 CDR 3; 및 각기 서열 번호:42, 서열 번호:43, 및 서열 번호:44로 나타낸 바의 서열을 갖는 경쇄 가변 영역의 CDR1, CDR2, 및 CDR 3; 또는
d. 각기 서열 번호:45, 서열 번호:46, 및 서열 번호:47로 나타낸 바의 서열을 갖는 중쇄 가변 영역의 CDR1, CDR2, 및 CDR 3; 및 각기 서열 번호:48, 서열 번호:49, 및 서열 번호: 50으로 나타낸 바의 서열을 갖는 경쇄 가변 영역의 CDR1, CDR2, 및 CDR 3; 또는
e. 각기 서열 번호:45, 서열 번호:46, 및 서열 번호:47로 나타낸 바의 서열을 갖는 중쇄 가변 영역의 CDR1, CDR2, 및 CDR 3; 및 각기 서열 번호: 51, 서열 번호: 52, 및 서열 번호: 53으로 나타낸 바의 서열을 갖는 경쇄 가변 영역의 CDR1, CDR2, 및 CDR 3; 또는
f. 각기 서열 번호: 54, 서열 번호: 55, 및 서열 번호: 56으로 나타낸 바의 서열을 갖는 중쇄 가변 영역의 CDR1, CDR2, 및 CDR 3; 및 각기 서열 번호: 57, 서열 번호: 58, 및 서열 번호: 59로 나타낸 바의 서열을 갖는 경쇄 가변 영역의 CDR1, CDR2, 및 CDR 3; 또는
g. 각기 서열 번호:60, 서열 번호:61, 및 서열 번호:62로 나타낸 바의 서열을 갖는 중쇄 가변 영역의 CDR1, CDR2, 및 CDR 3; 및 각기 서열 번호:66, 서열 번호:67, 및 서열 번호:68로 나타낸 바의 서열을 갖는 경쇄 가변 영역의 CDR1, CDR2, 및 CDR 3; 또는
h. 각기 서열 번호:63, 서열 번호:64, 및 서열 번호:65로 나타낸 바의 서열을 갖는 중쇄 가변 영역의 CDR1, CDR2, 및 CDR 3; 및 각기 서열 번호:66, 서열 번호:67, 및 서열 번호:68로 나타낸 바의 서열을 갖는 경쇄 가변 영역의 CDR1, CDR2, 및 CDR 3; 또는
i. 각기 서열 번호:69, 서열 번호: 70, 및 서열 번호: 71로 나타낸 바의 서열을 갖는 중쇄 가변 영역의 CDR1, CDR2, 및 CDR 3; 및 각기 서열 번호: 72, 서열 번호: 73, 및 서열 번호: 74로 나타낸 바의 서열을 갖는 경쇄 가변 영역의 CDR1, CDR2, 및 CDR 3; 또는
j. 각기 서열 번호: 75, 서열 번호: 76, 및 서열 번호: 77로 나타낸 바의 서열을 갖는 중쇄 가변 영역의 CDR1, CDR2, 및 CDR 3; 및 각기 서열 번호: 78, 서열 번호: 79, 및 서열 번호: 80으로 나타낸 바의 서열을 갖는 경쇄 가변 영역의 CDR1, CDR2, 및 CDR 3.
k. 도11에서 나타낸 바의 서열을 갖는 중쇄 가변 영역의 CDR1, CDR2, 및 CDR 3; 및 도11에서 나타낸 바의 서열을 갖는 경쇄 가변 영역의 CDR1, CDR2, 및 CDR 3.
본 발명의 한 실시양태에서, 항체는 상기 변이체 CDRs를 합체하는 항체가 IL-18/IL-18BP 복합체를 결합함이 없이, 유리 IL-18 단백질, 특히 IL-18BP의 결합 부위 또는 IL-18BP의 결합 부위 부근에서의 결합을 포함하는, 본 발명에 따른 항체의 특이적 결합 활성을 여전히 갖는 정도로 하나 이상의 CDR 서열에서 변형을 나타낸다.
본 발명의 또 다른 특정 실시양태에서, 상기 항체는 인간 또는 인간화 항체, 특히, CDRs가 하나(또는 그 이상)의 인간 면역글로불린(들)로부터 유도된 인간 항체 "스카폴드"로 삽입되는, 인간 또는 인간화 항체이다.
여전히 또 다른 실시양태에서, 본 발명은 각기 서열 번호:10, 12, 14, 16, 17, 19, 22, 24, 26, 및 도 11에 나타낸 서열에 대하여 75%, 80%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 100% 서열 동일성을 갖는 하나 이상의 경쇄 가변 영역 및/또는 각기 서열 번호: 9, 11, 13, 15, 18, 20, 21, 23, 25 및 도 11에 나타낸 서열에 대하여 75%, 80%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 100% 서열 동일성을 갖는 하나 이상의 중쇄 가변 영역을 포함하는, 기능상 동등한 항체 또는 이의 항원 결합 부분을 포함하는 항체를 제공하며, 여기에서 상기 항체, 동등한 항체 또는 이의 항원 결합 부분은 유리 IL-18 단백질, 특히 IL-18BP의 결합 부위에 또는 IL-18BP의 결합 부위 부근에서 결합하지만, IL-18/IL-18BP 복합체를 결합하지는 않는다.
여전히 또 다른 특정 실시양태에서, 본 발명은 각기 서열 번호:10, 12, 14, 16, 17, 19, 22, 24, 26 및 도 11에 나타낸 서열에 대하여 75%, 80%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 100% 서열 동일성을 갖는 적어도 경쇄 가변 영역 및/또는 각기 서열 번호: 9, 11, 13, 15, 18, 20, 21, 23, 25 및 도 11에 나타낸 서열에 대하여 75%, 80%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 100% 서열 동일성을 갖는 하나 이상의 중쇄 가변 영역을 포함하는 기능상 동등한 항체 또는 이의 항원 결합 부분을 포함하는 항체를 제공하며, 단 경쇄 가변 영역 및/또는 중쇄 가변 영역의 CDR의 서열은 변하지 않고 남아있으며, 여기에서 상기 항체, 동등한 항체 또는 이의 항원 결합 부분은 유리 IL-18 단백질, 특히 IL-18BP의 결합 부위에 또는 IL-18BP의 결합 부위 부근에서 결합하지만, IL-18/IL-18BP 복합체를 결합하지는 않는다.
한 실시양태에서, 본 발명은 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 용도를 위해 기능상 동등한 항체 또는 이의 일부를 포함하는 IL-18 특이적 항체를 제공하며, 여기에서 상기 항체 또는 이의 일부는 단일클론 항체 또는 다중클론 항체이다.
특정 실시양태에서, 본 발명은 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 용도를 위해 기능상 동등한 항체 또는 이의 일부를 포함하는 IL-18 특이적 항체를 제공하며, 여기에서 상기 항체 또는 이의 일부는 키메라, 단일 사슬, 이중 특이성, 원숭이화, 인간 및 인간화 항체이다.
특히, 상기 항체는 인간화 항체, 특히 중쇄 및 경쇄 가변 영역 및/또는 중쇄 및 경쇄 불변 영역의 프레임워크 및 불변 도메인 내에서 특정 아미노산은 인간에서 면역 반응을 피하거나 또는 폐지하기 위하여 돌연변이되는 인간화 항체이다.
특히, 본 발명에 따른 기능상 동등한 항체 또는 이의 항원 결합 부분을 포함하는 IL-18 특이적 항체는 경쟁적 ELISA에 의해 결정된 바로 ≤0.01% 내지 ≤0.05%, 특히 ≤0.1% 내지 ≤0.2%, 특히 ≤0.2% 내지 ≤0.5%, 특히 ≤0.5% 내지 ≤1%, 특히 ≤1% 내지 ≤2%의 IL-18/IL-18BP 복합체와의 교차 반응성을 나타낸다.
특정 실시양태에서, 본 발명에 따른 기능상 동등한 항체 또는 이의 항원 결합 부분을 포함하는 IL-18 특이적 항체는 경쟁적 ELISA에 의해 결정된 바로 ≤0.1%의 IL-18/IL-18BP 복합체와의 교차 반응성을 나타낸다.
또 다른 특정 실시양태에서 본 발명은 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 기능상 동등한 항체 또는 이의 일부를 포함하는 IL-18 특이적 항체를 제공하는 것이며, 여기에서 상기 항체 또는 이의 일부는 인간 IL-18에 결합한다.
여전히 본 발명의 또 다른 목적은 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 기능상 동등한 항체 또는 이의 일부를 포함하는 IL-18 특이적 항체를 제공하는 것이며, 여기에서 IL-18의 IL-18 수용체 서브유닛 알파(IL-18Rα) 및 베타(IL-18Rβ)로의 결합, 특히 IL-18Rα로의 결합은 5% 이상, 특히 10% 이상, 특히 15% 이상, 특히 20% 이상, 특히 25% 이상, 특히 30% 이상, 특히 40% 이상, 특히 45% 이상, 특히 50% 이상, 특히 55% 이상, 특히 60% 이상, 특히 65% 이상, 특히 70% 이상, 특히 75% 이상, 특히 80% 이상, 특히 85% 이상, 특히 90% 이상, 특히 95% 이상, 특히 96%, 특히 97%, 특히 98%, 특히 99%, 특히 100%로 감소된다.
추가의 본 발명의 목적은 건강한 대조군 대상의 체액 레벨과 비교하여, 체 샘플, 특히 체액 내의 유리 IL-18의 비정상적 레벨 및/또는 유리 IL-18/IL-18BP의 비정상적 비율을 갖는 것으로 진단된 대상의 집단에서 IL-18 관련 장애 또는 질환의 치료에 사용하기 위한, 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 유리 IL-18 특이적 결합 분자, 특히 IL-18 억제제, 특히 IL-18BP, 특히 기능상 동등한 항체 또는 이의 일부를 포함하는 IL-18 특이적 항체를 제공하는 것이며, 여기에서 상기 유리 IL-18 특이적 결합 분자, 억제제, IL-18BP 또는 IL-18 특이적 항체 또는 이의 일부는 IL-18 수용체(IL-18R)로의 IL-18 결합, 특히 IL-18Rα로의 유리 IL-18 결합을 제한 또는 방지함에 의해 유리 IL-18의 효능을 중화한다.
한 실시양태에서, 본 발명은 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 기능상 동등한 항체 또는 이의 일부를 포함하는 IL-18 특이적 항체를 제공하는 것이며, 여기에서 상기 항체 또는 이의 일부는
a) 서열 번호:1, 서열 번호:2 및 서열 번호:3으로 나타낸 서열의 군으로부터 선택된 서열에 포함되는 단일 에피토프, 2개의 에피토프의 조합, 또는 3개의 에피토프의 조합에 특이적으로 결합; 및/또는
b) 서열 번호:4, 서열 번호:5 또는 서열 번호:6에 나타낸 서열에 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%의 서열 동일성을 갖는 에피토프에 특이적으로 결합; 및
c) IL-18BP의 결합 부위에 또는 IL-18BP의 결합 부위 부근에서 IL-18에 특이적으로 결합; 및
d) IL-18/IL-18BP 복합체가 아닌, 유리 IL-18 단백질에 특이적으로 결합; 및
e) IL-18BP의 IL-18로의 결합을 입체적으로 방해; 및
f) IL-18의 IL-18 수용체로의 결합, 특히 IL-18Rα로의 결합을 5% 이상, 특히 10% 이상, 특히 15% 이상, 특히 20% 이상, 특히 25% 이상, 특히 30% 이상, 특히 40% 이상, 특히 45% 이상, 특히 50% 이상, 특히 55% 이상, 특히 60% 이상, 특히 65% 이상, 특히 70% 이상, 특히 75% 이상, 특히 80% 이상, 특히 85% 이상, 특히 90% 이상, 특히 95% 이상, 특히 100% 감소시킨다.
특히, 상기 특이적으로 정의된 항체는 경쟁적 ELISA에 의해 결정된 바로 ≤0.01% 내지 ≤0.05%, 특히 ≤0.1% 내지 ≤0.2%, 특히 ≤0.2% 내지 ≤0.5%, 특히 ≤0.5% 내지 ≤1%, 특히 ≤1% 내지 ≤2%의 IL-18/IL-18BP와의 교차 반응성을 나타낸다.
본 발명의 특정 실시양태에서, 다양한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18BP 및/또는 유리 IL-18 특이적 항체는 IL-18 억제제로서 사용될 수 있다.
본 발명의 다른 특정 실시양태에서, 다양한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18BP 및/또는 유리 IL-18 특이적 항체는 체 샘플, 특히 기관지 폐포 세척 유체(BALF) 순환 유체, 분비 유체, 생검 및 균질 조직, 특히 혈청, 소변, 눈물, 타액, 담즙, 땀, 날숨, 호기, 객담, 기관지 폐포 액, 피지, 세포, 선, 점막, 및 조직 분비로 이루어진 군으로부터 선택된 샘플에서 유리 IL-18의 검출을 위한 분석에서, 포획 분자로서 사용될 수 있다.
한 실시양태에서, 본 발명은 다양한 실시양태에서 본원에서 개시된 바의 본 발명에 따른 항체를 코딩하는 폴리뉴클레오티드에 관한 것이다.
한 실시양태에서, 폴리뉴클레오티드는 서열 번호: 9, 11, 13, 15, 18, 20, 21, 23, 25 및 도 11에 나타낸 가변성 중쇄를 코딩한다.
한 실시양태에서, 폴리뉴클레오티드는 서열 번호: 10, 12, 14, 16, 17, 19, 22, 24, 26, 및 도 11에 나타낸 가변성 경쇄를 코딩한다.
한 실시양태에서, 폴리뉴클레오티드는 서열 번호: 27-80으로 나타낸 바의 CDR 영역을 코딩한다.
특히, 본 발명은 도 11에 나타낸 서열에 대하여 75%, 80%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 100% 서열 동일성을 갖는 서열을 갖는 본 발명에 따른 항체의 중쇄 및/또는 경쇄 가변 영역을 코딩하는 폴리뉴클레오티드에 관한 것이다.
더욱이, 본 발명은 억제제가 IL-18 결합 단백질(IL-18BP), 특히 인간 IL-18BP(hIL-18 BP), 특히 기능적으로 동등한 또는 이의 일부를 포함하는 IL-18BP, 특히 서열 번호: 7에서 나타낸 바의 IL-18BP인, 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 용도를 위한 본 발명에 따른 IL-18 억제제를 또한 제공한다.
또한 IL-18BP를 코딩하는 전사 변이체가 포함된다.
한 실시양태에서, 본 발명은 억제제가 서열 번호: 7로 나타낸 서열에 대하여 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%의 서열 동일성을 갖는 IL-18 결합 단백질(IL-18BP)인, 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제를 제공한다.
여전히 본 발명의 또 다른 목적은 치료가 상기 질환 또는 장애와 관련된 증상의 예방, 정지, 경감 또는 복귀를 포함하는, 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제를 제공한다.
추가의 실시양태에서, 본 발명은 IL-18 결합, 특히 IL-18R로의 유리 IL-18의 결합, 그러나 특히 IL-18Rα로의 유리 IL-18의 결합이 제한 또는 억제된 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제를 제공한다.
또 다른 실시양태에서, 본 발명은 IL-18-의존성 하류 신호 전달 경로가 개질, 특히 억제된, 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제를 제공한다.
여전히 또 다른 실시양태에서, 본 발명은 IFNγ, IL-13 또는 IL-17A의 증가된 발현이 상기 질환 또는 장애를 앓는 비치료된 대상과 비교하여 개질, 특히 억제된, 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제를 제공한다.
여전히 본 발명의 또 다른 목적은 IL-18 억제제가 조직 및 순환에서 과잉 유리 IL-18을 트래핑하여 IL-18/IL-18BP 불균형을 보상하는, 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제를 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은 IL-18 억제제가 호중구의 폐로의 침윤, 특히 폐의 기도 내에서 G-CSF 방출의 완화를 통해 억제하는 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제를 제공한다.
여전히 본 발명의 또 다른 실시양태는 전장 단백질 또는 뮤테인, 기능성 유도체, 기능성 단편, 생리 활성 펩티드, 분획, 순환 치환 유도체, 융합 단백질, 아이소형 또는 이의 염인 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제를 제공한다.
본 발명은 또한 만성 폐쇄성 폐질환(COPD), 심장 질환, 안구 건조증 및/또는 제II형 당뇨병의 치료에 사용하기 위한 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제, 특히 IL-18BP, 특히 길항적 항체를 제공한다.
본 발명은 또한 만성 폐쇄성 폐질환(COPD)의 치료에 사용하기 위한 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제, 특히 IL-18BP, 특히 길항적 항체를 제공한다.
본 발명은 또한 심장 질환의 치료에 사용하기 위한 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제, 특히 IL-18BP, 특히 길항적 항체를 제공한다.
본 발명은 또한 안구 건조증의 치료에 사용하기 위한 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제, 특히 IL-18BP, 특히 길항적 항체를 제공한다.
본 발명은 또한 근위축성 측삭 경화증(ALS)의 치료에 사용하기 위한 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제, 특히 IL-18BP, 특히 길항적 항체를 제공한다.
본 발명은 또한 제II형 당뇨병의 치료에 사용하기 위한 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제, 특히 길항적 항체,특히 IL-18BP 를 제공한다.
본 발명은 또한 성인 스틸 병의 치료에 사용하기 위한 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제, 특히 IL-18BP, 특히 길항적 항체를 제공한다.
본 발명은 또한 수혈 관련 폐 손상의 치료에 사용하기 위한 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제, 특히 IL-18BP, 특히 길항적 항체를 제공한다.
본 발명은 또한 소아 스틸 병의 치료에 사용하기 위한 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제, 특히 IL-18BP, 특히 길항적 항체를 제공한다.
본 발명은 또한 기관지폐 이형성증(BPD)의 치료에 사용하기 위한 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제, 특히 IL-18BP, 특히 길항적 항체를 제공한다.
본 발명은 또한 급성 호흡 곤란 증후군(ARDS)의 치료에 사용하기 위한 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제, 특히 IL-18BP, 특히 길항적 항체를 제공한다.
본 발명은 또한 간질성 폐 질환(ILD)의 치료에 사용하기 위한 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제, 특히 IL-18BP, 특히 길항적 항체를 제공한다.
본 발명은 또한 특발성 폐 섬유증의 치료에 사용하기 위한 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제, 특히 IL-18BP, 특히 길항적 항체를 제공한다.
본 발명은 또한 낭성 섬유증의 치료에 사용하기 위한 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제, 특히 IL-18BP, 특히 길항적 항체를 제공한다.
본 발명은 또한 폐 동맥 고혈압의 치료에 사용하기 위한 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제, 특히 길항적 항체, 특히 IL-18BP를 제공한다.
본 발명은 또한 천식의 치료에 사용하기 위한 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제, 특히 IL-18BP, 길항적 항체를 제공한다.
본 발명은 또한 기관지 확장증의 치료에 사용하기 위한 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제, 특히 IL-18BP, 특히 길항적 항체를 제공한다.
본 발명은 또한 심장 마비의 치료에 사용하기 위한 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제, 특히 IL-18BP, 특히 길항적 항체를 제공한다.
본 발명은 또한 각막염의 치료에 사용하기 위한 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제, 특히 IL-18BP, 특히 길항적 항체를 제공한다.
본 발명은 또한 각막 궤양의 치료에 사용하기 위한 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제, 특히 IL-18BP, 길항적 항체를 제공한다.
본 발명은 또한 각막 신생 혈관의 치료에 사용하기 위한 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제, 특히 IL-18BP, 특히 길항적 항체를 제공한다.
본 발명은 또한 병적인 안구내 혈관신생의 치료에 사용하기 위한 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제, 특히 IL-18BP, 특히 길항적 항체를 제공한다.
본 발명은 또한 홍채염의 치료에 사용하기 위한 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제, 특히 IL-18BP, 특히 길항적 항체를 제공한다.
본 발명은 또한 녹내장의 치료에 사용하기 위한 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제, 특히 길항적 항체, 특히 IL-18BP를 제공한다.
본 발명은 또한 황반 변성의 치료에 사용하기 위한 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제, 특히 IL-18BP, 특히 길항적 항체를 제공한다.
본 발명은 또한 쇼그렌 증후군의 치료에 사용하기 위한 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제, 특히 IL-18BP, 특히 길항적 항체를 제공한다.
본 발명은 또한 자가 면역 포도막염의 치료에 사용하기 위한 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제, 특히 길항적 항체, 특히 IL-18BP,를 제공한다.
본 발명은 또한 베체트병의 치료에 사용하기 위한 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제, 특히 IL-18BP, 특히 길항적 항체를 제공한다.
본 발명은 또한 결막염의 치료에 사용하기 위한 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제, 특히 IL-18BP, 특히 길항적 항체를 제공한다.
본 발명은 또한 눈꺼풀 피부염의 치료에 사용하기 위한 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제, 특히 IL-18BP, 특히 길항적 항체를 제공한다.
본 발명은 또한 비알코올성 지방 간 질환(NAFLD)의 치료에 사용하기 위한 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제, 특히 IL-18BP, 특히 길항적 항체를 제공한다.
본 발명은 또한 지방 간염의 치료에 사용하기 위한 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제, 특히 IL-18BP, 특히 길항적 항체를 제공한다.
본 발명은 또한 고형 장기 및 혈액 이식의 치료에 사용하기 위한 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제, 특히 IL-18BP, 특히 길항적 항체를 제공한다.
본 발명은 또한 허혈 재관류 손상의 치료에 사용하기 위한 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제, 특히 IL-18BP, 특히 길항적 항체를 제공한다.
본 발명은 또한 가족성 지중해 열의 치료에 사용하기 위한 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제, 특히 IL-18BP, 특히 길항적 항체를 제공한다.
본 발명은 또한 종양 괴사 인자 수용체 1-관련 주기적 증후군의 치료에 사용하기 위한 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제, 특히 IL-18BP, 특히 길항적 항체를 제공한다.
본 발명은 또한 크리오피린 관련 주기적 발열 증후군의 치료에 사용하기 위한 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제, 특히 IL-18BP, 특히 길항적 항체를 제공한다.
본 발명은 또한 하이퍼-IgD 증후군의 치료에 사용하기 위한 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제, 특히 IL-18BP, 특히 길항적 항체를 제공한다.
본 발명은 또한 통풍의 치료에 사용하기 위한 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제, 특히 IL-18BP, 특히 길항적 항체를 제공한다.
본 발명은 또한 슈니츨러 증후군의 치료에 사용하기 위한 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제, 특히 IL-18BP, 특히 길항적 항체를 제공한다.
본 발명은 또한 베게너 육아종증의 치료에 사용하기 위한 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제, 특히 IL-18BP, 특히 길항적 항체를 제공한다.
본 발명은 또한 하시모토 갑상선염의 치료에 사용하기 위한 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제, 특히 IL-18BP, 특히 길항적 항체를 제공한다.
본 발명은 또한 크론병의 치료에 사용하기 위한 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제, 특히 IL-18BP, 특히 길항적 항체를 제공한다.
본 발명은 또한 궤양성 대장염의 치료에 사용하기 위한 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제, 특히 IL-18BP, 특히 길항적 항체를 제공한다.
본 발명은 또한 면역글로불린-4(IgG4) 관련 질환의 치료에 사용하기 위한 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제, 특히 IL-18BP, 특히 길항적 항체를 제공한다.
본 발명은 또한 줄기세포 요법의 치료에 사용하기 위한 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제, 특히 IL-18BP, 특히 길항적 항체를 제공한다.
또 다른 실시양태에서, 본 발명은 상기 질환 또는 장애가 흡연 또는 간접 흡연 노출, 특히 담배 연기 노출에 의해 유발된, 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 용도를 위한 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제, 특히 IL-18BP, 특히 길항적 항체를 제공한다.
또 다른 실시양태에서, 본 발명은 상기 질환 또는 장애가 바이러스 감염에 의해 유발된, 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 용도를 위한 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제, 특히 IL-18BP, 특히 길항적 항체를 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 질환 또는 장애가 폐기종, 조직 염증, 조직 파괴, 폐 절제, 혈관의 소실, 점액 화성, 심장 비대, 폐 조직에서 VEGF의 감소, 폐 혈관 손실, 혈관 근육화, 콜라겐 침착, 폐에서의 이상 엘라스틴층, 섬유증 기도 리모델링, 통기간극 확대, 기도 및 폐혈관의 만성 리모델링 및 감소된 폐기능으로 이루어진 군으로부터 선택된 염증 및 관련 동반 질환의 IL-18 유도된 전신 증상인, 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 용도를 위한 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제, 특히 IL-18BP, 특히 길항적 항체를 제공한다.
여전히 본 발명의 또 다른 목적은 IL-18 결합, 특히 IL-18R로의 유리 IL-18의 결합, 그러나 특히 IL-18Rα로의 유리 IL-18 결합이 제한 또는 억제된, 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 용도를 위한, 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제, 특히 IL-18BP, 특히 길항적 항체를 제공하는 것이다.
여전히 본 발명의 또 다른 목적은 IL-18-의존성 하류 신호 전달 경로가 개질, 특히 억제된, 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 용도를 위한, 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제, 특히 IL-18BP, 특히 길항적 항체를 제공하는 것이다.
여전히 본 발명의 또 다른 목적은 IFNγ, IL-13 또는 IL-17A의 증가된 발현이 상기 질환 또는 장애를 앓는 비치료된 대상과 비교하여, 개질, 특히 억제된, 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 용도를 위한, 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제, 특히 IL-18BP, 특히 길항적 항체를 제공하는 것이다.
한 실시양태에서, 본 발명은 IL-18 억제제가 조직 및 순환에서 과잉 유리 IL-18을 트래핑하여 IL-18/IL-18BP 불균형을 보상하는 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 용도를 위한, 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제, 특히 IL-18BP, 특히 길항적 항체를 제공하는 것이다.
또 다른 실시양태에서, 본 발명은 치료가 상기 질환 또는 장애와 관련된 증상의 예방, 정지, 경감 또는 복귀를 포함하는, 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 용도를 위한, 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제, 특히 IL-18BP, 특히 길항적 항체를 제공하는 것이다.
더욱이, 본 발명은 또한 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 정의된 바의 이러한 질환 또는 장애를 앓거나 또는 이러한 질환 또는 장애가 전개되는 소인을 갖는 대상에서, 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 정의된 바의 질환 또는 장애의 치료에 사용하기 위한 약제학적 조성물을 제공하며, 여기에서 상기 조성물은 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제, 특히 IL-18BP, 특히 길항적 항체를, 특히 약제학적으로 허용 가능한 담체 및/또는 부형제와 함께, 특히 예방적 및/또는 치료적 유효량으로 포함한다.
특히, 본 발명은 상기 약제학적 조성물이 전 염증성 사이토카인 또는 이의 기능성 단편의 또 다른 억제제, 또는 상기 전 염증성 사이토카인 또는 이의 기능성 단편의 억제제의 원위치 발현을 유발하는 조절인자, 공동 치료제 예컨대 항염증제, 기관지확장제, 항히스타민제, 충혈완화제 또는 진해제 물질을 임의로 더 제공하는, 전술한 실시양태의 약제학적 조성물을 제공한다.
한 실시양태에서, 본 발명은 약제학적으로 허용 가능한 담체 및/또는 부형제를 포함하는 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 약제학적 조성물을 제공한다.
특정 실시양태에서, 본 발명은 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 정의된 바의 이러한 질환 또는 장애를 앓거나 또는 이러한 질환 또는 장애가 전개되는 소인을 갖는 대상에서 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 정의된 바의 질환 또는 장애의 치료에 사용하기 위한 약제학적 조성물을 제공하며, 여기에서 상기 조성물은 전술한 실시양태의 하나 이상에서 개시된 바의 인터류킨-18 결합 단백질(IL-18BP)을, 특히 약제학적으로 허용 가능한 담체 및/또는 부형제와 함께, 특히 예방적 및/또는 치료적 유효량 포함한다.
또 다른 특정 실시양태에서 본 발명은 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 정의된 바의 이러한 질환 또는 장애를 앓거나 또는 이러한 질환 또는 장애가 전개되는 소인을 갖는 대상에서 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 정의된 바의 질환 또는 장애의 치료에 사용하기 위한 약제학적 조성물을 제공하며, 여기에서 상기 조성물은 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 길항적 유리 IL-18 특이적 항체, 특히 경쟁적 ELISA에 의해 결정된 바로 ≤0.01% 내지 ≤0.05%, 특히 ≤0.1% 내지 ≤0.2%, 특히 ≤0.2% 내지 ≤0.5%, 특히 ≤0.5% 내지 ≤1%, 특히 ≤1% 내지 ≤2의 IL-18/IL-18BP 복합체와의 교차 반응성을 나타내는, 본 발명에 따른 기능상 동등한 항체 또는 이의 일부를 포함하는 길항적 유리 IL-18 특이적 항체를, 특히 약제학적으로 허용 가능한 담체 및/또는 부형제와 함께, 특히 예방적 및/또는 치료적 유효량 포함한다.
특정 실시양태에서, 본 발명은 상기 조성물이 전 염증성 사이토카인 또는 이의 기능성 단편의 또 다른 억제제, 또는 상기 전 염증성 사이토카인 또는 이의 기능성 단편의 억제제의 원위치 발현을 유발하는 조절인자, 공동 치료제 예컨대 항염증제, 기관지확장제, 항히스타민제, 충혈완화제 또는 진해제 물질을 임의로 더 제공하는, 전술한 실시양태의 약제학적 조성물을 제공한다.
여전히 본 발명의 또 다른 목적은 약제학적으로 허용 가능한 담체 및/또는 부형제를 포함하는 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 약제학적 조성물을 제공한다.
본 발명은 또한 전술한 실시양태에서 정의된 바의 질환 또는 장애를 앓거나 또는 이러한 질환 또는 장애가 전개되는 소인을 갖는 대상에게 투여시 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 질환 또는 장애의 치료에 사용하기 위한 IL-18 억제제의 원위치 발현을 초래하는, 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 안티센스 발현 벡터 또는 IL-18 억제제의 코딩 서열을 포함하는 발현 벡터 를 개시한다.
본 발명은 또한 본 발명의 실시양태에서 정의된 바의 질환 또는 장애를 앓거나 또는 이러한 질환 또는 장애가 전개되는 소인을 갖는 대상에게 투여시 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 정의된 바의 질환 또는 장애의 치료에 사용하기 위한 IL-18의 발현의 원위치 억제를 초래하는, IL-18 안티센스 발현 벡터를 포함하는 발현 벡터를 개시한다.
본 발명은 또한 전술한 실시양태 중의 어느 하나에서 개시된 바의 질환 또는 장애를 앓거나 또는 이러한 질환 또는 장애가 전개되는 소인을 갖는 대상에게 투여시, 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제의 발현을 제어하는 상류 신호 전달 경로를 모듈레이트하는 상기 조절 인자의 원위치 발현을 유발하며, 특히 상기 조절 인자는 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 질환 또는 장애의 치료에 사용하기 위한 IL-18 억제제의 세포 발현을 유발하는, 조절 인자의 코딩 서열을 포함하는 발현 벡터를 개시한다.
특히, 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 정의된 바의 질환 또는 장애의 치료에 사용하기 위한 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 상기 발현 벡터는 전술한 실시양태 중의 어느 하나에서 개시된 바와 같은 이러한 질환 또는 장애를 앓거나 또는 이러한 질환 또는 장애가 전개되는 소인을 갖는 대상에게, 단독으로 또는 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제, 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 인터류킨-18 결합 단백질(IL-18BP) 또는 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 약제학적 조성물과의 조합으로 투여된다.
본 발명은 또한 전술한 실시양태에서 정의된 바와 같은 질환 또는 장애를 앓거나 또는 이러한 질환 또는 장애가 전개되는 소인을 갖는 대상에게 투여시, 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 정의된 바의 질환 또는 장애의 치료에 사용하기 위한 IL-18BP의 원위치 발현을 초래하는, 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18BP의 코딩 서열을 포함하는 발현 벡터를 개시한다.
본 발명은 또한 전술한 실시양태 중의 어느 하나에서 정의된 바와 같은 질환 또는 장애를 앓거나 또는 이러한 질환 또는 장애가 전개되는 소인을 갖는 대상에게 투여 시, 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18BP의 발현을 제어하는 상류 신호 전달 경로를 모듈레이트하는 상기 조절 인자의 원위치 발현을 유발하며, 특히 상기 조절 인자는 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 정의된 바의 질환 또는 장애의 치료에 사용하기 위한 IL-18BP의 세포 발현을 유발하는, 조절 인자의 코딩서열을 포함하는 발현 벡터를 개시한다.
특히, 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 정의된 바의 질환 또는 장애의 치료에 사용하기 위한 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 상기 발현 벡터는 전술한 실시양태 중의 어느 하나에서 개시된 바와 같은 질환 또는 장애를 앓거나 또는 이러한 질환 또는 장애가 전개되는 소인을 갖는 대상에게, 단독으로 또는 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제, 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 인터류킨-18 결합 단백질(IL-18BP) 또는 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 약제학적 조성물과의 조합으로 투여된다.
여전히 본 발명의 또 다른 목적은 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제, 특히 IL-18BP, 특히 길항적 유리 IL-18 특이적 항체, 또는 IL-18 억제제, 특히 IL-18BP, 특히 길항적 유리 IL-18 특이적 항체, 또는 발현 벡터를 포함하는 약제학적 조성물을 제공하는 것이며, 여기에서 이들은 예방적 및/또는 치료적 유효량으로 전신, 비강 내, 안구 내, 유리체 내, 점안액, 구강, 경구, 점막경유, 기관 내, 정맥 내, 피하, 요로 내, 직장 내, 질 내, 설하, 기관지 내, 폐 내, 경피 또는 근육 내 투여, 특히 기관지-폐 투여에 의해 대상에게 투여된다. 특히, 상기 대상은 포유동물이며, 특히 상기 대상은 인간이다.
본 발명은 또한 치료적 또는 예방적 유효량의 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제, 특히 IL-18BP, 특히 길항적 유리 IL-18 특이적 항체, 또는 IL-18 억제제, 특히 IL-18BP, 특히 길항적 유리 IL-18 특이적 항체, 또는 발현 벡터를 포함하는 약제학적 조성물을 상기 대상에게 투여하는 것을 포함하는, 전술한 실시양태 중의 어느 하나에서 정의된 바와 같은 이러한 질환 또는 장애를 앓거나 또는 이러한 질환 또는 장애가 전개되는 소인을 갖는 대상에서 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 정의된 바의 질환 또는 장애를 치료하기 위한 방법에 관한 것이다.
본 발명은 또한 샘플 또는 원위치에서 유리 IL-18 단백질로의 전술한 실시 양태 중 어느 하나의 유리 IL-18 특이적 결합 분자의 특이적 결합을 검출하는 것을 포함하는 샘플 또는 원위치에서 유리 IL-18의 양을 검출하는 방법에 관한 것이며, 상기 방법은 하기 단계를 포함한다:
a) 유리 IL-18을 함유하는 것으로 의심되는 샘플 또는 특정 신체 일부 또는 신체 부위를 유리 IL-18에 특이적으로 결합하지만, 복합체에서 결합된 IL-18에 결합하지 않으며 유리 IL-18을 위한 포획 분자로서 기능하는 전술한 실시양태 중의 어느 하나의 유리 IL-18 특이적 결합 분자와 접촉시키는 단계;
b) 유리 IL-18 특이적 결합 분자를 유리 IL-18에 결합시키도록 하는 단계;
c) 유리 IL-18 특이적 결합 분자에 IL-18의 결합을 검출하고 샘플 내에서 유리 IL-18의 양을 구하는 단계.
또 다른 실시양태에서, 본 발명은 샘플 또는 원위치에서 유리 IL-18 단백질로의 전술한 실시양태 중 어느 하나의 유리 IL-18 특이적 결합 분자의 특이적 결합을 검출하는 것을 포함하는 환자에서 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 정의된 바의 질환 또는 장애의 진단 방법을 제공하는 것이며, 상기 방법은 하기 단계를 포함한다:
a) 유리 IL-18을 함유하는 것으로 의심되는 샘플 또는 특정 신체 일부 또는 신체 부위를 유리 IL-18에 특이적으로 결합하지만, 복합체에서 결합된 IL-18에 결합하지 않으며 유리 IL-18을 위한 포획 분자로서 기능하는 전술한 실시양태 중의 어느 하나의 유리 IL-18 특이적 결합 분자와 접촉시키는 단계;
b) 유리 IL-18 특이적 결합 분자를 유리 IL-18에 결합시키도록 하는 단계;
c) 유리 IL-18 특이적 결합 분자에 IL-18의 결합을 검출하고 샘플 내에서 유리 IL-18의 양을 구하는 단계;
d) 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 정의된 바의 질환 또는 장애를 앓는 대상의 샘플에서 유리 IL-18의 양과 건강한 대상의 샘플에서의 양을 비교하는 단계.
여전히 또 다른 실시양태에서, 본 발명은 샘플 또는 원위치에서 유리 IL-18 단백질로의 전술한 실시양태 중 어느 하나의 유리 IL-18 특이적 결합 분자의 특이적 결합을 검출하는 것을 포함하는 환자에서 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 정의된 바의 질환 또는 장애의 소인을 진단하기 위한 방법을 제공하는 것이며, 상기 방법은 하기 단계를 포함하고:
a) 유리 IL-18을 함유하는 것으로 의심되는 샘플 또는 특정 신체 일부 또는 신체 부위를 유리 IL-18에 특이적으로 결합하지만, 복합체에서 결합된 IL-18에 결합하지 않으며 유리 IL-18을 위한 포획 분자로서 기능하는 전술한 실시양태 중의 어느 하나의 유리 IL-18 특이적 결합 분자와 접촉시키는 단계;
b) 유리 IL-18 특이적 결합 분자를 유리 IL-18에 결합시키도록 하는 단계;
c) 유리 IL-18 특이적 결합 분자에 IL-18의 결합을 검출하고 샘플 내에서 유리 IL-18의 양을 구하는 단계;
d) 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 정의된 바의 질환 또는 장애를 앓는 환자의 샘플에서 유리 IL-18의 양과 건강한 환자의 샘플에서의 양을 비교하는 단계;
여기에서, 건강한 환자로부터 얻은 정상 대조군 값과 비교하여 샘플 내에서 상기 유리 IL-18의 양의 증가는 상기 환자가 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 정의된 바의 질환 또는 장애를 앓거나 또는 전개할 위험이 있음을 나타낸다.
또한 본원은 전술한 실시양태 중 어느 하나의 IL-18 억제제, 약제학적 조성물, 또는 발현 벡터의 치료를 따르는 환자에서 최소 잔류 질환을 모니터링하기 위한 방법을 포함하며, 상기 방법은 하기 단계를 포함하고:
a) 유리 IL-18을 함유하는 것으로 의심되는 샘플 또는 특정 신체 일부 또는 신체 부위를 유리 IL-18에 특이적으로 결합하지만, 복합체에서 결합된 IL-18에 결합하지 않으며 유리 IL-18을 위한 포획 분자로서 기능하는 전술한 실시양태 중의 어느 하나의 유리 IL-18 특이적 결합 분자와 접촉시키는 단계;
b) 유리 IL-18 특이적 결합 분자를 유리 IL-18에 결합시키도록 하는 단계;
c) 유리 IL-18 특이적 결합 분자에 IL-18의 결합을 검출하고 샘플 내에서 유리 IL-18의 양을 구하는 단계;
d) 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 정의된 바의 질환 또는 장애를 앓는 환자의 샘플에서 유리 IL-18의 양과 건강한 환자의 샘플에서의 양을 비교하는 단계;
여기에서, 건강한 환자로부터 얻은 정상 대조군 값과 비교하여 샘플 내에서 상기 유리 IL-18의 양의 증가는 상기 환자가 여전히 최소 잔류 질환을 앓고 있음을 나타낸다.
본 발명은 또한 전술한 실시양태 중 어느 하나의 IL-18 억제제, 약제학적 조성물, 또는 발현 벡터를 이용한 치료에 대한 환자의 반응성을 예측하는 방법에 관한 것이며, 상기 방법은 하기 단계를 포함하고:
a) 유리 IL-18을 함유하는 것으로 의심되는 샘플 또는 특정 신체 일부 또는 신체 부위를 유리 IL-18에 특이적으로 결합하지만, 복합체에서 결합된 IL-18에 결합하지 않으며 유리 IL-18을 위한 포획 분자로서 기능하는 전술한 실시양태 중의 어느 하나의 유리 IL-18 특이적 결합 분자와 접촉시키는 단계;
b) 유리 IL-18 특이적 결합 분자를 유리 IL-18에 결합시키도록 하는 단계;
c) 유리 IL-18 특이적 결합 분자에 IL-18의 결합을 검출하고 샘플 내에서 유리 IL-18의 양을 구하는 단계;
d) 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 정의된 바의 질환 또는 장애를 앓는 환자의 샘플에서 유리 IL-18의 양과 건강한 환자의 샘플에서의 양을 비교하는 단계;
여기에서, 샘플 내의 상기 유리 IL-18의 양의 감소는 상기 환자가 치료에 반응하는 높은 잠재력을 갖는 것임을 나타낸다.
방법은 특히 상기 분자 중의 하나가 IL-18BP의 IL-18 결합 부위에 결합하는, 포획 분자보다 IL-18BP의 상이한 부위에 결합하는, 단계 a)에서 IL-18BP 특이적 결합 분자를 사용하는 추가의 단계를 포함할 수 있다.
또한, 상기 방법은 IL-18BP 특이적 포획 분자 및 포획 분자보다 IL-18BP의 상이한 부위에 결합하는 IL-18BP 특이적 검출 분자를 단계 a)에서 사용함에 의해, 특히, 여기에서 상기 IL-18BP 특이적 분자 중의 하나는 IL-18BP의 IL-18 결합 부위에 결합하며, 샘플 내의 포획 분자에 결합하는 유리 및 총 IL-18과 유리 및 총 IL-18BP의 양을 단계 c)에서 구함에 의해; 및 전술한 실시양태 중의 어느 하나에서 정의된 바의 질환 또는 장애를 앓는 환자의 샘플에서 유리 및/또는 총 IL-18과 유리 및/또는 총 IL-18BP의 양을 건강한 환자의 샘플에서의 양과 단계 d)에서 비교함에 의해, 샘플에서 유리 IL-18BP의 존재를 구하는 추가 단계를 더 포함할 수 있다.
상기 방법에서 사용된 포획 분자는 전술한 실시양태 중 하나에 따른 유리 IL-18 특이적 결합 분자, 특히 본원에서 기술된 바의 IL-18 BP 또는 본원에서 기술되고 본 발명에 따른 유리 IL-결합 항체일 수 있다.
상기 방법에서 사용된 샘플은 기관지 폐포 세척 유체(BALF) 순환 유체, 분비 유체, 생검 및 균질 조직, 특히 혈청, 소변, 눈물, 타액, 담즙, 땀, 날숨, 호기, 객담, 기관지 폐포 액, 피지, 세포, 선, 점막 및 조직 분비 등으로 이루어진 군으로부터 선택된 샘플일 수 있다.
한 실시양태에서, 본원에서 개시된 질환을 앓는 대상, 특히 인간의 샘플에서 유리 IL-18의 양은 ≥5pg/mL 및 10000pg/mL 이하이다. 특히, 병에 걸린 환자 또는 대상이 형성하는 샘플에서 상기 유리 IL-18의 상승된 레벨은 ≥5pg/mL 내지 10000pg/mL의 범위, 특히 100pg/mL 내지 10000pg/mL의 범위, 특히 200pg/mL 내지 10000pg/mL의 범위, 특히 300pg/mL 내지 10000pg/mL의 범위, 특히 400pg/mL 내지 10000pg/mL의 범위, 특히 500pg/mL 내지 10000pg/mL의 범위, 특히 600pg/mL 내지 10000pg/mL의 범위, 특히 700pg/mL 내지 10000pg/mL의 범위, 특히 800pg/mL 내지 10000pg/mL의 범위, 특히 900pg/mL 내지 10000pg/mL의 범위, 특히 1000 내지 10000pg/mL의 범위, 특히 1500pg/mL 내지 10000pg/mL의 범위, 특히 2000pg/mL 내지 10000pg/mL의 범위, 특히 3000pg/mL 내지 10000pg/mL의 범위, 특히 4000pg/mL 내지 10000pg/mL의 범위, 특히 5000pg/mL 내지 10000pg/mL의 범위이다. 건강한 대상, 특히 건강한 인간의 혈청에서 유리 IL-18의 양은 ≤5pg/mL, 특히 ≤4pg/mL, 특히 ≤1pg/mL, 특히 ≤0.5 pg/m, 특히 검출 레벨 미만이다.
특히, 본원에서 개시된 질환을 앓는, 대상, 특히 인간의 단리된 샘플에서 유리 IL-18의 양은 ≥5pg/mL 및, 특히, 최대 10000pg/mL 이하이며, 한편 건강한 대상, 특히 건강한 인간의 샘플에서 유리 IL-18의 양은, ≤4pg/mL이다.
본 발명의 또 다른 실시양태에서, 바이오마커의 세트는 바이오마커 프로파일을 결정하고 특정 질환 또는 장애와 수득된 프로파일의 상관관계를 포함하는, 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 정의된 바의 질환 또는 장애를 더 구체화하기 위하여, 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 정의된 바의 질환 또는 장애의 소인을 진단하기 위하여, 대상에서의 최소 잔류 질환을 모니터링하기 위하여, 또는 전술한 실시양태 중 어느 하나의 IL-18 억제제, 약제학적 조성물, 또는 발현 벡터를 이용한 치료에 대한 환자의 반응성을 예측하기 위하여, 상기 검출 방법 중 어느 하나에서의 사용을 위해 제공된다.
특히, 바이오마커는 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 정의된 바의 질환 또는 장애의 진단을 위해, 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 정의된 바의 질환 또는 장애의 소인 진단 또는 대상에서 최소 잔류 질환의 모니터링을 위해, 또는 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제, 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18BP 또는 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제를 포함하는 약제학적 조성물로 치료할 대상의 반응성을 예측하기 위한 방법에 사용될 수 있으며, 하기 단계를 포함한다:
a) 상기 대상으로부터 체액의 샘플을 취하여 시험될 대상의 바이오마커 프로파일을 수득하는 단계;
b) 건강한 기준 집단의 바이오마커 프로파일을 수득하는 단계;
c) 상기 질환 또는 장애를 앓는 집단으로부터 바이오마커 프로파일을 수득하는 단계 및
d) 단계 a)에서 수득된 바이오마커 프로파일과 단계 b) 및 단계 c)에서 수득된 프로파일을 비교하는 단계.
여전히 본 발명의 또 다른 목적은, a) IL-18, IL-18BP, IL-13, IL-17A, IL-8, IL-1β, IL-2, IL-12, IL-4, IL-6, INF-γ, TNF-α, VEGF, EGF, HB-EGF, TGF-α, MMP-9, MMP-12, 미엘로퍼옥시다제, 면역분석법에 의해 측정된 칼프로텍틴, TGF-β, 메탈로프로테인아제의 조직 억제제(TIMP-1), 간세포 증식 인자(HGF), 저산소증 유발 인자 1 알파(HIF-1α), 폰 빌레브란트(von Willebrand) 인자(vWF), EN-RAGE, S-RAGE, 계면활성제 단백질 D, HsCRP, 피브리노겐, 내피 미세입자, 및 b) 호기(exhaled air) 조성에 의해 측정된 NO, CO, 알칸, 펜탄, 에탄을 포함하는 가스를 포함하는, 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 정의된 바의 질환 또는 장애의 진단에 사용, 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 정의된 바의 질환 또는 장애의 소인 진단에 사용 또는 대상에서 최소 잔류 질환의 모니터링에 사용, 또는 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제, 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18BP 또는 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제를 포함하는 약제학적 조성물로 치료할 대상의 반응성을 예측하기 위한 바이오마커의 세트를 제공하는 것이다,
여전히 본 발명의 또 다른 목적은 유효량으로 투여하기에 적당한 개별 단위 복용량 형태로, 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제, 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 인터류킨-18 결합 단백질(IL-18BP) 또는 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18 억제제 및 본 발명에 따른 약제학적으로 허용 가능한 담체 및/또는 부형제를 포함하는 약제학적 조성물을 포함하는 약제학적 키트를 제공하는 것이다.
한 실시양태에서, 본 발명은 검출 분자가 포획 분자보다 IL-18의 상이한 부위에 결합하는, 포획 분자로서 전술한 실시양태 중 어느 하나의 유리 IL-18 특이적 결합 분자, 및 검출 분자로서 제2 IL-18 특이적 결합 분자, 및 임의로, 제2 IL-18 특이적 포획 분자를 포함하는, 유리 IL-18의 검출을 위한 진단 키트를 제공한다.
또 다른 실시양태에서, 진단 키트는 IL-18BP의 IL-18 결합 부위에 결합하지 않는 제1 IL-18BP 특이적 결합 분자 및 IL-18의 IL-18BP 결합 부위에 결합하지 않는 제2 IL-18 특이적 결합 분자를 포함하는, 총 IL-18 또는 총 IL-18BP를 검출하기 위하여 제공된다.
또한 본원은 포획 분자로서 제1 IL-18BP 특이적 결합 분자 및 검출 분자로서 제2 IL-18 특이적 결합 분자를 포함하며 상기 검출 분자는 포획 분자 보다 IL-18BP의 상이한 부위에 결합하는, 유리 IL-18BP의 검출을 위한 진단 키트를 포함한다.
한 실시양태에서, 진단 키트는 상기 정의된 진단 키트에 함유된 일부 또는 전부의 결합 분자의 조합을 포함한다.
여전히 본 발명의 또 다른 목적은 검출 항체가 포획 분자보다 IL-18의 상이한 부위에 결합하는, 포획 항체로서 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18-특이적 항체 또는 대안적인 포획 분자로서 IL-18BP 및 제2 IL-18 특이적 검출 항체 또는 검출 항체로서 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 IL-18-특이적 항체 및 제2 IL-18 특이적 포획 항체를 포함하는 유리 IL-18의 검출을 위한 진단 키트를 제공한다.
여전히 본 발명의 또 다른 목적은 IL-18BP의 IL-18 결합 부위에 결합하지 않는 제1 단일클론 IL-18BP 특이적 항체 및 IL-18의 IL-18BP 결합 부위에 결합하지 않는 제2 IL-18 특이적 항체를 포함하는, 총 IL-18 또는 총 IL-18BP를 검출하기 위한 진단 키트를 제공하는 것이다.
여전히 본 발명의 또 다른 목적은 제1 단일클론 IL-18BP 특이적 포획 항체 및 포획 항체보다 IL-18BP의 상이한 부위에 결합하는 IL-18BP 특이적 검출 항체를 포함하는 유리 IL-18BP의 검출을 위한 진단 키트를 제공하는 것이다.
또 다른 실시양태에서, 본 발명은 전술한 실시양태 중 어느 하나에서 개시된 바의 모든 진단 키트를 포함하는, 진단 키트를 제공한다.
본 발명은 현재 IL-18 관련 장애 또는 질환의 치료에 사용하기 위하여, 이러한 질환 또는 장애를 앓거나 또는 이러한 질환 또는 장애가 전개되는 소인을 갖는 대상에게 치료적 유효량의 하나 이상의 IL-18BP를 투여하는 IL-18BP를 제공한다.
본 발명의 범위 내에 속하는 것으로 이해되는 IL-18BP는 또한 IL-18BP의 뮤테인, IL-18BP의 기능성 부분 또는 유도체, IL-18BP의 순환 치환 유도체, IL-18BP를 포함하는 융합 단백질, IL-18BP의 아이소형 또는 이의 염을 포함한다.
IL-18BP는 그 자체로서 또는 조성물, 특히 약제학적 조성물의 형태로 제공될 수 있다. 상기 조성물은 사용 및 적용 목적에 따라 추가의 의약 제제, 약제학적 제제, 담체, 완충제, 분산제, 희석제, 공동 치료제 예컨대 항염증제, 기관지확장제, 항히스타민제, 충혈완화제 또는 진해제 물질 등을 포함할 수 있다.
그러므로, 본 발명은 IL-18 관련 장애 또는 질환의 치료에서 이러한 질환 또는 장애를 앓거나 또는 이러한 질환 또는 장애가 전개되는 소인을 갖는 대상에게 IL-18BP 또는 IL-18BP 및 약제학적으로 허용 가능한 담체 및/또는 부형제를 포함하는 약제학적 조성물을 제공한다.
또한 IL-18 관련 장애 또는 질환의 치료를 위하여 이러한 치료가 필요한 대상에게 IL-18BP 또는 IL-18BP 및 본 발명에 따른 약제학적으로 허용 가능한 담체 및/또는 부형제를 포함하는 약제학적 조성물을 제공하는 것이며, 여기에서 IL-18 관련 장애 또는 질환은 특정 조직 및/또는 체 구분에서 IL-18의 과잉 발현에 의해 야기되며, 이것은 상기 조직 및/또는 구분에서 IL-18/IL-18BP 불균형을 초래한다. 예를 들어, 본원에서 기술된 바와 같은 IL-18의 강화된 발현은 상기 대상의 폐, 혈청, 객담, 기관지 폐포 세척 유체(BALF) 또는 순환에서 건강한 대조군 대상과 비교하여, IL-18의 상승된 레벨을 유도하며, 특히 객담 및/또는 혈청에서 IL-18의 레벨은 상승된다.
본 발명의 다양한 실시양태에서 본원에 기술된 바의 IL-18 관련 장애 또는 질환은 IL-18의 과잉 발현에 의해 야기된다. 따라서, 본원에서 기술된 바의 강화된 IL-18의 발현은 이러한 질환 또는 장애를 앓거나 또는 이러한 질환 또는 장애가 전개되는 소인을 갖는 대상의 폐, 혈청, 객담, 기관지 폐포 세척 유체(BALF) 및/또는 순환에서 건강한 대조군 대상과 비교하여 IL-18의 상승된 레벨을 초래하며, 특히 객담 및/또는 혈청에서 IL-18 레벨이 상승된다. 또한, IL-18의 상승된 레벨은 이러한 질환 또는 장애를 앓는 대상에서 IL-18/IL-18BP 불균형을 초래한다.
특정 실시양태에서, 본 발명은 과잉 IL-18을 트래핑함에 의해 본 발명의 다양한 실시양태에서 기술된 바의 IL-18 관련 장애 또는 질환을 앓거나 또는 이러한 질환 또는 장애에 대한 소인을 갖는 대상에서 IL-18/IL-18BP 불균형의 보상에 사용하기 위한 IL-18BP 또는 IL-18BP 및 약제학적으로 허용 가능한 담체 및/또는 부형제를 포함하는 약제학적 조성물을 제공한다. 특히 IL-18BP는 비치료된 대상과 비교하여 IL-18의 레벨을 감소시킨다.
추가의 실시양태에서, 본 발명은 IL-18BP가 IL-18의 발현의 억제를 초래하는, 본 발명에 따른 IL-18 관련 장애 또는 질환의 치료에 사용하기 위한 IL-18BP 또는 IL-18BP 및 약제학적으로 허용 가능한 담체 및/또는 부형제를 포함하는 약제학적 조성물을 제공한다. 특히 IL-18BP는 비치료된 대상과 비교하여 IL-18의 레벨을 감소시킨다.
본 발명은 IL-18 유발된 염증의 국부 및 전신 증상의 치료에 사용하기 위한 IL-18BP 또는 IL-18BP 및 약제학적으로 허용 가능한 담체 및/또는 부형제를 포함하는 약제학적 조성물을 더 제공한다.
본 발명은 IL-18 유발된 염증 및 관련 동반 질환 예컨대 폐기종, 조직 염증, 조직 파괴, 폐 절제, 혈관의 소실, 점액 화생, 심장 비대, 폐 조직에서 VEGF의 감소, 폐 혈관 손실, 혈관 근육화, 콜라겐 침착, 폐에서의 이상 엘라스틴층, 섬유증 기도 리모델링, 통기간극 확대, 기도 및 폐혈관의 만성 리모델링 및/또는 감소된 폐기능의 국부 및 전신 증상의 치료에 사용하기 위한 IL-18BP 또는 IL-18BP 및 약제학적으로 허용 가능한 담체 및/또는 부형제를 포함하는 약제학적 조성물을 더 제공한다.
본 발명의 또 다른 양상에서, 본 발명에 의해 개시된 바의 IL-18의 증가된 레벨은, 건강한 대조군 대상과 비교하여 상기 IL-18 관련 장애 또는 질환을 앓는 대상에서 IFNγ, IL-13 또는 IL-17A의 강화된 발현을 촉발한다. 본 발명은, 그러므로, 대상에서 IFNγ, IL-13 또는 IL-17A의 발현 및/또는 생성을 모듈레이션, 특히 감소시키기 위한 IL-18BP 또는 IL-18BP 및 약제학적으로 허용 가능한 담체 및/또는 부형제를 포함하는 약제학적 조성물을 제공한다.
본 발명의 특정 실시양태에서, IL-18BP 또는 IL-18BP 및 약제학적으로 허용 가능한 담체 및/또는 부형제를 포함하는 약제학적 조성물은 IL-18 수용체(IL-18R)로의 IL-18 결합, 특히 IL-18 수용체-α(IL-18Rα)로의 IL-18 결합의 억제를 초래한다.
IL-18 관련 장애 또는 질환의 증상은 Th1 사이토카인 반응 및/또는 Th2 사이토카인 반응에 의해 촉발된다. 본 발명의 IL-18BP 또는 IL-18BP 및 약제학적으로 허용 가능한 담체 및/또는 부형제를 포함하는 약제학적 조성물은 그러므로 Th1 사이토카인 반응 및/또는 Th2 사이토카인 반응의 억제를 초래한다.
본 발명의 특정 실시양태에서, IL-18BP 또는 IL-18BP 및 약제학적으로 허용 가능한 담체 및/또는 부형제를 포함하는 약제학적 조성물은 IL-18-의존성 하류 신호 전달 경로, 예컨대 TNF-알파, IL-1베타, IL-8, 대식세포 염증 단백질-알파(MIP-알파), IL-12, IL-15 및 일산화 질소 생성 및/또는 방출을 조절하는 유사 경로의 모듈레이션을 초래한다. 특히, 상기 신호 전달 경로는 억제된다.
본 발명의 한 실시양태에서, IL-18BP 또는 IL-18BP 및 약제학적으로 허용 가능한 담체 및/또는 부형제를 포함하는 약제학적 조성물은 카스파제 활성을 방지한다. 특히, 상기 카스파제는 카스파제-1이다.
한 실시양태에서 본 발명은 IL-18-관련 질환, 예컨대 만성 폐쇄성 폐질환(COPD), 심장 질환 및 제2형 당뇨병의 치료에 사용하기 위한 IL-18BP 또는 IL-18BP 및 약제학적으로 허용 가능한 담체 및/또는 부형제를 포함하는 약제학적 조성물을 제공한다.
한 실시양태에서 본 발명은 IL-18-관련 질환, 예컨대 만성 폐쇄성 폐질환(COPD), 수혈 관련 폐 손상, 기관지폐 이형성증(BPD), 급성 호흡 곤란 증후군(ARDS), 성인 스틸 병, 소아 스틸 병, 간질성 폐 질환(ILD), 특발성 폐 섬유증, 낭성 섬유증, 폐 동맥 고혈압, 천식, 기관지 확장증, 심장 마비, 근위축성 측삭 경화증(ALS), 안구 건조증(DED), 각막염, 각막 궤양 및 찰과상, 각막 신생 혈관, 병적인 안구내 혈관신생, 홍채염, 녹내장, 황반 변성, 쇼그렌 증후군, 자가 면역 포도막염, 베체트병, 결막염, 알레르기성 결막염, 눈꺼풀 피부염, 제2형 당뇨병, 비알코올성 지방 간 질환(NAFLD), 지방 간염, 고형 장기 및 혈액 이식, 허혈 재관류 손상, 가족성 지중해 열, 종양 괴사 인자 수용체 1-관련 주기적 증후군, 크리오피린 관련 주기적 발열 증후군, 하이퍼-IgD 증후군, 통풍, 슈니츨러 증후군, 다발성혈관염이 있는 육아종증(GPA)으로 불리 우는 베게너 육아종증, 하시모토 갑상선염, 크론병, 궤양성 대장염, 면역글로불린-4(IgG4) 관련 질환 및 줄기세포 요법의 치료에 사용하기 위한 IL-18BP 또는 IL-18BP 및 약제학적으로 허용 가능한 담체 및/또는 부형제를 포함하는 약제학적 조성물을 제공한다.
특정 실시양태에서, 본 발명은 본원에서 정의된 바의 IL-18-관련 폐 질환 또는 장애, 심장 질환 또는 장애 또는 제2형 당뇨병의 치료에 사용하기 위한 IL-18BP 또는 IL-18BP 및 약제학적으로 허용 가능한 담체 및/또는 부형제를 포함하는 약제학적 조성물을 제공한다.
더 특히, 치료될 상기 IL-18 관련 장애 또는 질환은 대상의 폐에 나타나며, 염증의 전신 증상과 관련된 만성 폐쇄성 폐질환(COPD) 및 관련 동반 질환 예컨대 폐기종, 조직 염증, 조직 파괴, 폐 절제, 혈관의 소실, 점액 화생, 심장 비대, 폐 조직에서 VEGF의 감소, 폐 혈관 손실, 폐 혈관 근육화, 폐에서의 콜라겐 침착, 폐에서의 이상 엘라스틴층, 섬유증 기도 리모델링, 통기간극 확대, 기도 및 폐혈관의 만성 리모델링 및/또는 감소된 폐기능의 전개를 초래할 수 있다. 특히, 상기 증상은 흡연 유발된 폐 염증이다. 특정 실시양태에서, 본 발명은 만성 폐쇄성 폐질환(COPD)의 치료에 사용하기 위한 본 발명에 따른 IL-18BP 또는 IL-18BP 및 약제학적으로 허용 가능한 담체 및/또는 부형제를 포함하는 약제학적 조성물을 제공한다.
대상에서 관측된 IL-18/IL-18BP 불균형 및 본원에서 기술된 바의 결과의 질환 또는 장애, 예컨대 COPD는 흡연 또는 간접 흡연 노출, 특히 담배 연기 노출 및/또는 바이러스 감염에 의해 초래될 수 있다. 특히, 궐련 연기 노출은 연기-유발된 폐기종 및/또는 염증의 전개를 초래할 수 있다.
본 발명의 또 다른 양상에서, 치료될 IL-18 관련 장애 또는 질환은 공기 오염에 장기간 노출에 의해 유발된다.
본 발명은, 그러므로, IL-18 유발된 기도 및 맥관 리모델링의 치료를 위해, 그러므로, COPD 질환 증상 및 진행을 예방하기 위한 IL-18BP 또는 IL-18BP 및 약제학적으로 허용 가능한 담체 및/또는 부형제를 포함하는 약제학적 조성물을 더 제공한다.
본 발명의 한 양상에서, 폐포 대식세포는 증가된 IL-18 레벨의 중요한 원이다. 그러므로, 본 발명에 의해 제공된 바의 IL-18BP 또는 IL-18BP 및 약제학적으로 허용 가능한 담체 및/또는 부형제를 포함하는 약제학적 조성물은 폐포 대식세포에 의한 IL-18의 발현 및/또는 생성을 감소시킨다.
본 발명은 본원에서 기술된 바의 IL-18 관련 장애 또는 질환에 의해 영향을 받은 폐 조직 세포 및/또는 상피 세포의 연기-유발된 세포 사멸의 형태를 방지 및/또는 억제하기 위한 IL-18BP 또는 IL-18BP 및 약제학적으로 허용 가능한 담체 및/또는 부형제를 포함하는 약제학적 조성물을 더 제공한다. 특히, 상기 연기-유발된 세포 사멸의 형태는 아포토시스이다.
본 발명의 한 실시양태에서, 다양한 실시양태에서 본원에 개시된 바의 본 발명의 약제학적 조성물은 예방적으로 투여된다.
본 발명의 또 다른 실시양태에서, 다양한 실시양태에서 본원에 개시된 바의 본 발명의 약제학적 조성물은 치료적으로 투여된다.
본 발명의 한 실시양태에서, 다양한 실시양태에서 본원에 개시된 바의 본 발명의 약제학적 조성물은 IL-18 관련 장애 또는 질환을 앓거나, 또는 이러한 질환 또는 장애가 전개되는 소인을 갖는 대상에게 전신, 비강 내, 안구 내, 유리체 내, 점안액, 구강, 경구, 점막경유, 기관 내, 정맥 내, 피하, 요로 내, 직장 내, 질 내, 설하, 기관지 내, 폐 내, 경피 또는 근육 내 투여에 의해 투여된다. 특히, 다양한 실시양태에서 본원에 개시된 바의 본 발명의 약제학적 조성물은 기관지-폐 투여에 의해 투여된다.
다양한 실시양태에서 본원에 개시된 바의 본 발명의 약제학적 조성물은 점막경유 투여를 위한 분말, 예컨대 비강 내, 구강, 경구 점막 경유, 기관 내, 요로 내, 질 내, 설하, 기관지 내, 폐 내 및/또는 경피 투여를 위한 액체, 액체 스프레이, 마이크로스피어, 반고체, 겔, 또는 분말로서 제공될 수 있다. 또한, 조성물은 구강, 경구 점막경유 및/또는 설하 투여를 위한 고체 복용 형태일 수 있다. 비강 내, 구강, 경구 기관 내, 요로 내, 질 내, 점막 경유 및 설하 투여는 체온의 구강 내에서 본원에서 기술된 바의 조성물의 붕해를 초래하며 임의로 구강의 체조직에 부착될 수 있다. 게다가, 본원에서 기술된 바의 조성물은 하나 이상의 부형제, 희석제, 결합제, 윤활제, 활택제, 붕해제, 탈감작제, 유화제, 점막 접착제, 가용화제, 현탁제, 점도 개질제, 이온 등장제, 완충제, 담체, 계면활성제, 향미제, 또는 이의 혼합물을 더 포함할 수 있다.
본 발명의 특정 양상에서, 조성물은 비경구, 정맥 내, 정제, 환제, 생체접착 패치, 드롭스, 스펀지, 필름, 로젠지, 하드 캔디, 웨이퍼, 구, 롤리팝, 디스크 형상 구조, 좌약 또는 스프레이로서 제형화된다.
점막경유 투여는 점막으로의 풍부한 맥관 공급 및 표피 내에서 각질층의 부족으로 인하여 일반적으로 신속하다. 이러한 약물 수송은 전형적으로 혈중 농도의 신속한 상승을 제공하며, 유사하게 소화관 벽 및 간 대사의 위산 또는 부분적인 첫 번째 통과 효과에 의해 장간 순환 및 즉각적인 파괴의 방지를 제공한다. 약물은 전형적으로 유의한 약물 흡수가 발생하도록 하기 위해 점막 표면에 장기간 노출이 필요하다.
점막경유 경로는 또한 이들 경로가 비교적 더 신속하게 흡수 및 치료 활동이 개시되도록 제공할 수 있다는 점에서 경구 경로보다 더 효과적일 수 있다. 또한, 점막경유 경로는 정제, 캡슐, 또는 기타 경구 고체를 삼키는 것이 어려운 환자, 또는 장내 흡수를 제대로 하지 못하는 질환을 갖는 환자의 치료에서 사용하기에 바람직할 수 있다. 따라서, IL-18BP 또는 IL-18BP 및 약제학적으로 허용 가능한 담체 및/또는 부형제를 포함하는 약제학적 조성물의 점막경유 투여는 많은 장점이 있다.
비강 내 또는 구강 경로 모두에서, 약물 흡수가 지연 또는 연장될 수 있거나, 흡수가 거의 정맥 내 볼루스가 투여된 것처럼 신속할 수 있다. 풍부한 혈액 공급의 높은 투과성으로 인하여, 설하 수단은 신속한 작용의 개시를 제공할 수 있다.
비강 내 조성물은 이들의 형태에 따라 적절한 방법에 의해 투여될 수 있다. 마이크로스피어 또는 분말을 포함하는 조성물은 비강 취입 디바이스를 사용하여 투여될 수 있다. 이들 디바이스의 예는 당업자에게 공지되어 있으며, 통상의 분말 시스템 예컨대 피선스 로무달 시스템(Fisons Lomudal System)을 포함한다. 취입은 건조 분말 또는 마이크로스피어의 미분된 클라우드를 생성한다. 취입은 바람직하게는 실질적으로 일정량의 조성물의 투여를 보장하는 메커니즘으로 제공된다. 분말 또는 마이크로스피어는 취입으로 직접적으로 사용될 수 있으며, 이것은 분말 또는 마이크로스피어를 위한 병 또는 용기와 함께 제공된다. 대안적으로, 분말 또는 마이크로스피어는 젤라틴 캡슐과 같은 캡슐, 또는 비강 투여에 적합한 기타 단일 용량 디바이스에 충전될 수 있다. 취입은 바람직하게는 캡슐 또는 기타 디바이스를 부수어 여는 메카니즘을 갖는다. 또한, 조성물은 예를 들어 하나 초과의 타입의 마이크로스피어 또는 분말을 제공함에 의해 활성 성분의 초기 신속 방출에 이어 활성 성분의 지속 방출을 제공할 수 있다. 또한, 구강에 조성물을 투여하기 위한 적당한 대안적인 방법은 당업자에의해 공지되어 있을 것이다. 임의의 적당한 방법이 사용될 수 있다. 적당한 방법의 더 상세한 설명에 대하여 EP2112923, EP1635783, EP1648406, EP2112923(그의 전체 내용이 참고로 본원에서 통합되었다)을 참고한다.
본 발명의 한 실시양태에서, 다양한 실시양태에서 본원에 개시된 바의 본 발명의 약제학적 조성물은 또한 비강 내 투여, 즉 흡입에 의해 투여될 수 있으며, 따라서 비강 내 투여에 적당한 형태, 즉 에어로졸, 건조 분말 제형 또는 액체 제제로 제형화될 수 있다.
적당한 약제학적 담체, 부형제 및/또는 희석제의 예는 당업계에 공지되어 있으며, 이것으로 제한되는 것은 아니지만, 검, 전분(예컨대 옥수수 전분, 전호화 전분), 당(예컨대, 락토오스, 만니톨, 수크로오스, 덱스트로스), 셀룰로오스 물질(예컨대 미세결정성 셀룰로오스), 아크릴레이트(예컨대 폴리메틸아크릴레이트), 탄산칼슘, 산화마그네슘, 탈크, 또는 이의 혼합물을 포함한다.
액체 제형을 위한 약제학적으로 허용 가능한 담체는 수용액 또는 비 수용액, 현탁액, 건조 분말 제형, 에멀션 또는 오일이다. 비 수성 용매의 예로는 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 및 에틸 올레이트와 같은 주사 가능한 유기 에스테르이다. 오일의 예로는, 동물, 채소, 또는 합성 기원의 것들 예를 들어, 땅콩유, 대두유, 올리브유, 해바라기유, 어간유, 다른 해양 오일, 또는 우유 또는 달걀로부터의 지질이다.
본 발명은 또한 다양한 실시양태에서 본원에 개시된 바의 본 발명의 약제학적 조성물의 흡입에 의한 경폐투여에 관한 것이며 이것은 기도를 통한 전신 순환으로 건조 분말, 기체 또는 휘발성 제형이다. 폐포 및 맥관 상피 막이 매우 투과성이 있으며, 혈류가 풍부하고 흡착을 위한 매우 큰 표면이 있으므로, 흡수는 제형이 폐의 폐포로 전달될 수 있는 것만큼 사실상 신속하다. 예를 들어, 에어로졸은 압축 포장된, 정량 흡입기(metered-dose inhalers)(MDIs)로부터 전달될 수 있다.
다양한 실시양태에서 본원에 개시된 바의 본 발명의 약제학적 조성물은 일반적으로 흡입 및 표준 약제학적 실행의 선정 수단으로 선택된 적당한 약제학적 부형제, 희석제 또는 담체와의 혼합물로 투여될 것이다.
본 발명의 또 다른 실시양태에서, IL-18BP 제형 또는 IL-18BP를 포함하는 약제학적 조성물의 제형은 바람직하게는 건조 분말 흡입 조성물 내의 담체로서 공지된 물질, 예를 들어 모노사카라이드, 디사카라이드, 폴리사카라이드를 포함하는 사카라이드 및 아라비노오스, 글루코오스, 푸룩토오스, 리보오스, 만노오스, 수크로오스, 트레할로오스, 락토오스, 말토오스, 전분, 덱스트란, 만니톨 또는 소르비톨과 같은 당 알코올로부터 선택된, 약제학적으로 허용 가능한 담체로서 공지된 하나이상의 물질일 수 있는, 하나 이상의 약제학적으로 허용 가능한 담체 미립자와 임의로 함께 있는 건조 분말이다. 특히 바람직한 담체는 락토오스, 예를 들어 락토오스 일수화물 또는 무수 락토오스이다. 건조 분말은 바람직하게는 5mg 내지 50mg의 캡슐 당 총 중량이 되도록 하는 양으로 담체와 함께 복용량 단위로, 단일 용량 또는 다중 용량 디바이스일 수 있는 건조 분말 흡입 디바이스에서의 사용을 위한, 예를 들어, 젤라틴 또는 플라스틱의 캡슐, 또는 블리스터(예컨대 알루미늄 또는 플라스틱)의 단위 용량으로 함유될 수 있다. 대안적으로, 건조 분말은 전달되도록 개조된 다중 용량 건조 분말 흡입(MDDPI) 디바이스 내의 저장용기에 함유될 수 있다.
치료적으로 효능이 있는 기타 모든 투여 경로가 사용될 수 있으며, 예를 들어 상피 또는 내피 조직을 통한 흡수 또는 활성제가 생체 내에서 발현 및 분비를 야기하도록, 활성제를 코딩하는 DNA 분자를 환자에게 투여하는(예컨대 발현 벡터를 통해) 유전자 요법이 있다.
체 내에서, IL-18BP의 발현은 상류 신호 전달 경로를 모듈레이트 함에 의해 유발될 수 있으며, 이것은 IL-18BP의 발현을 제어한다. 예를 들어, IL-18BP는 IL-18에 의한 IFN-감마의 유도를 조절하는 네거티브 피드백 루프의 일부로서 IFN-감마에 의해 특이적으로 유도된다. IL-18BP 발현을 조절하는 것으로 보고된 다른 공지 인자는 IL-18, IL-27, IFN-알파 및 STAT1이다.
그러므로, 본 발명의 한 실시양태에서, IL-18BP의 세포 발현은 IL-18BP의 발현을 제어하는 하나 이상의 상류 신호 전달 경로의 개질에 의해 간접적으로 유도된다. 특히, IL-18BP의 발현은 하나 이상의 상류 신호 전달 경로의 개질에 의해 간접적으로 유도된다.
본 발명은 또한 이러한 질환 또는 장애를 앓거나 또는 이러한 질환 또는 장애가 전개되는 소인을 갖는 대상에서 본원에서 기술된 바의 IL-18 관련 장애 또는 질환의 치료를 위한 의약의 제조에서 IL-18BP의 코딩 서열을 포함하는 발현 벡터에 관한 것이다.
특정 실시양태에서, 본 발명은 IL-18BP의 발현을 조절하는 상류 신호 전달 경로를 모듈레이트하는 조절 인자의 코딩 서열을 포함하는 발현 벡터에 관한 것이다. 그러므로, 상기 조절 인자는 하나 이상의 상류 신호 전달 경로를 모듈레이션함에 의해 IL-18BP의 발현을 유도한다.
본 발명은 또한 이러한 질환 또는 장애를 앓거나 또는 이러한 질환 또는 장애가 전개되는 소인을 갖는 대상에서 본원에서 기술된 바의 IL-18 관련 장애 또는 질환의 치료를 위한 의약의 제조에서 IL-18BP의 발현을 조절하는 상류 신호 전달 경로를 모듈레이트하는, 조절 인자의 코딩 서열을 포함하는 발현 벡터에 관한 것이다.
본 발명은 또한 이러한 질환 또는 장애를 앓거나 또는 이러한 질환 또는 장애가 전개되는 소인을 갖는 대상에서 본원에서 기술된 바의 IL-18 관련 질환 또는 장애의 치료를 위한 IL-18BP의 발현을 유도하는 조절 인자의 코딩 서열을 포함하는 발현 벡터에 관한 것이다. 특히 그것은 이러한 질환 또는 장애를 앓거나 또는 이러한 질환 또는 장애가 전개되는 소인을 갖는 대상에서 본원에서 기술된 바의 IL-18 관련 장애 또는 질환의 치료를 위해 폐에서 IL-18BP의 발현을 유도하는 조절 인자의 코딩 서열을 포함하는 발현 벡터에 관한 것이다.
임의로 본 발명은 두 번째 자연적으로 발생하는 전염증성 사이토카인 억제제 또는 상기 전염증성 사이토카인의 발현을 조절하는 하나 이상의 상류 신호 전달 경로를 모듈레이트하는 조절인자의 코딩 서열을 포함하는 제2 발현 벡터를 제공한다. 특히, 상기 조절 인자는 상기 사이토카인 억제제의 발현을 유도한다.
특히, IL-18의 발현은 RNA 간섭(RNAi) 또는 IL-18 안티센스 발현 벡터에 의해 모듈레이트된다. 더 특히, IL-18의 발현은 RNA 간섭(RNAi)에 의해 모듈레이트되며, 여기에서 IL-18의 발현은 전사 후 유전자 침묵(post transcriptional gene silencing)(PTGS)에 의해 하향 조절된다. 특히, IL-18의 발현은 본원에서 개시된 바와 같은 질환 또는 장애를 앓는 대상의 폐에서 하향 조절된다. RNA 간섭의 메커니즘은 전사 후 유전자 침묵 사건, 특히 microRNA(miRNA) 또는 짧은 간섭 RNA(siRNA)에의해 유도되는 전사 후 유전자 침묵 사건을 포함한다. microRNAs(miRNAs) 및 짧은 간섭 RNAs(siRNAs)는 본 발명에 따라 및 본원에서 기술된 바와 같이 발현 백터에 의해 발현될 수 있다.
유전자 치료 접근 방법은 그러므로 본원에서 기술되고 다양한 실시양태에서 개시된 바의 IL-18 관련 장애 또는 질환을 치료하기 위하여 사용될 수 있다. 따라서 IL-18BP의 발현은 원위치에서 발생하며, 그러므로, 상기 질환 또는 장애에 의해 영향을 받은 조직 또는 세포에서 IL-18을 직접적으로 중화한다. 특히, 본원에서 개시된 바의 IL-18BP의 발현은 폐에서 유도된다.
다양한 실시양태에서 본원에 개시된 바의 본 발명의 약제학적 조성물은 조류, 비 인간 영장류, 개, 고양이, 돼지, 염소, 양, 소, 말, 마우스, 쥐 및 토끼를 포함하는 인간 및 동물의 치료를 위한 인간 및 수의학에서 다양한 실시양태로 본원에서 기술된 바의 IL-18 관련 장애 또는 질환의 치료에 사용될 수 있다.
특정 실시양태에서, 본 발명은 다양한 실시양태로 본원에서 기술된 바의 IL-18 관련 장애 또는 질환의 치료에 사용하기 위한 다양한 실시양태로 본원에서 개시된 바의 본 발명의 약제학적 조성물을 제공하며, 여기에서 대상은 포유동물이고, 특히 대상은 인간이다.
또 다른 특정 실시양태에서, 다양한 실시양태로 본원에서 개시된 바의 본 발명의 약제학적 조성물은 적어도 두 번째 전염증성 사이토카인 억제제를 적당한 용량의 치료적 유효량으로 투여된다. 특히 상기 억제제는 IL-1, IL-6, IL-13, IL-17A, IFNγ 또는 TNFα에 특이적이다.
수성 담체는 염수 및 완충 매질 예컨대 인산염 완충 염수 용액, 물, 에멀션, 예컨대 오일/물 에멀션과 같은 에멀션, 다양한 타입의 습윤제, 살균 용액 등을 비롯한 물, 알코올 용액/수용액, 에멀션 또는 현탁액을 포함한다. 이러한 담체를 포함하는 조성물은 공지된 종래 방법으로 제형화될 수 있다. 적당한 담체는 본 발명의 생리 활성 화합물과 결합되었을 때, 생물학적 활성을 유지하는 물질을 포함할 수 있다.
특정 제제의 침투 허용, 전달되는 제제의 효능 강화, 전달 시간 강화, 전달된 복용량 감소, 다양한 전달 방법으로부터의 부작용 감소, 환자 반응 감소, 등을 위한 피부의 배리어 특성을 화학적으로 개질 하도록 하는 노력이 당업계에서 이루어졌다.
이와 관련하여, 침투 증진제는 약물의 피부 표면의 투과성을 증가시키기 위하여 사용되어 왔으며, 종종 프로톤 수용 용매 예컨대 디메틸 술폭시드(DMSO) 및 디메틸아세트아미드이다. 효과적인 것으로 연구 및 보고된 다른 침투 증진제는 2-피롤리딘, N,N-디에틸-m-톨루아미드(Deet), 1-도데칼-아자시클로헵탄-2-온, N,N-디메틸포름아미드, N-메틸-2-피롤리딘, 칼슘 티오글리콜레이트, 헥산올, 지방산 및 에스테르, 피롤리돈 유도체, 1,3-디옥산 및 1,3-디옥솔란의 유도체, 1-N-도데실-2-피롤리돈-5-카르복실산, 2-펜틸-2-옥소-피롤리딘아세트산, 2-도데실-2-옥소-1-피롤리딘아세트산, 1-아자시클로헵탄-2-온-2-도데실아세트산, 및 그 중에서도 1,3-디옥산의 유도체를 포함하는 아미노알코올 유도체를 포함한다.
점막경유 투여를 위한 제조는 살균 수용액 또는 비수용액, 현탁액, 건조 분말 제형 및 에멀션을 포함할 수 있다. 비수성 용매의 예는 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브유와 같은 식물유, 및 주사 가능한 에틸 올레이트와 같은 유기 에스테르이다. 수성 담체는 염수 및 완충 매질을 비롯한 물, 알코올 용액/수용액, 에멀션 또는 현탁액을 포함한다. 점막경유 비히클은 염화 나트륨 용액, 링거 덱스트로스, 덱스트로스 및 염화 나트륨, 락테이트 링거, 또는 불휘발성유(fixed oils)를 포함할 수 있다. 예를 들어, 항균제, 항산화제, 킬레이트화제, 및 불활성 가스 등을 포함하는 방부제 및 다른 첨가제도 또한 존재할 수 있다. 또한, 본 발명의 약제학적 조성물은 단백질성 담체류, 예컨대, 혈청 알부민 또는 면역글로불린, 바람직하게는 인간 기원의 것을 포함할 수 있다.
다양한 실시양태로 본원에서 개시된 바의 본 발명의 약제학적 조성물은 신체 표면에 국소적으로 투여될 수 있으며, 따라서, 적당한 국소 투여 형태로 제형화될 수 있다. 적당한 국소 제형은 겔, 연고, 크림, 로션, 드롭스 등을 포함한다. 국소 투여를 위하여, 다양한 실시양태로 본원에서 개시된 바의 본 발명의 약제학적 조성물이 제조되고 약제학적 담체와 함께 또는 없이 생리적으로 허용가능한 희석제 내에서 용액, 현탁액, 또는 에멀션으로서 적용된다.
다양한 실시양태에서 본원에 개시된 바의 본 발명의 약제학적 조성물은 또한 지효성(controlled-release) 조성물, 즉 활성 성분이 투여 후 일정 기간 동안 방출되는 조성물로서 투여될 수 있다. 지효성- 또는 서방성(sustained-release) 조성물은 친유성 저장소(예컨대 지방산, 왁스, 오일) 내의 제형을 포함한다. 또 다른 실시양태에서, 조성물은 속방성(immediate-release) 조성물, 즉, 모든 활성 성분이 투여 후 즉시 방출되는 조성물이다.
적당한 제형에 대한 추가의 예는 WO 2006/085983에서 제공되며, 이의 전체 내용은 본원에서 참고로 통합된다. 예를 들어, 다양한 실시양태에서 본원에 개시된 바의 본 발명의 약제학적 조성물은 리포솜 제형으로 제공될 수 있다. 리포솜 현탁액을 형성하기 위한 기술은 공지되어 있다. 사용된 지질층은 통상의 조성물일 수 있으며 콜레스테롤을 함유하거나 또는 콜레스테롤을 함유하지 않을 수 있다. 리포솜은 표준 초음파 및 균질화 기술의 사용을 통해 크기가 감소될 수 있다. 다양한 실시양태로 본원에서 개시된 바의 본 발명의 약제학적 조성물을 함유하는 리포솜 제형은 동결 건조되어 물과 같은 약제학적으로 허용 가능한 담체로 환원되어 리포솜 현탁액을 재생할 수 있는 동결건조물을 제조한다. 다양한 실시양태로 본원에서 개시된 바의 본 발명의 약제학적 조성물은 적당한 용량으로 대상에게 투여될 수 있다. 복용량 처방은 주치의 및 임상 인자에 의해 결정될 것이다. 의학 분야에서 공지된 바와 같이, 임의의 한 대상에 대한 복용량은 대상의 크기, 신체 표면적, 나이, 투여될 특정 화합물, 성별, 투여 시간 및 경로, 일반적인 건강, 및 동시에 투여되는 기타 약물을 포함하는 많은 인자에 의존한다.
또한, 본 발명의 약제학적 조성물은 약제학적 조성물의 사용 목적에 따라, 생리 활성제를 더 포함할 수 있다는 것을 구상할 수 있다. 이들 추가의 생리 활성제는 예컨대 항체, 항체 단편, 호르몬, 증식 인자, 효소, 결합 분자, 사이토카인, 케모카인, 핵산 분자 및 약물일 수 있다. 바람직한 실시양태에서, 본 발명의 약제학적 조성물은 지속형 베타-아드레날린수용체 작용제(LABA), 지속형 무스카린 길항제(LAMA), 스테로이드, 코르티코스테로이드, 글루코코르티코이드 및 글루코코르티코이드 작용제 포스포디에스테라제 억제제, 키나아제 억제제, 사이토카인 및 케모카인 억제제 또는 길항제 또는 프로테아제 억제제 또는 이들의 조합과 동시투여된다.
다양한 실시양태로 본원에서 개시된 바의 본 발명의 약제학적 조성물의 복용량은 치료되는 상태, 사용된 특정 조성물, 및 대상의 체중, 크기 및 상태와 같은 기타 임상 인자, 신체 표면적, 투여될 특정 화합물 또는 조성물, 동시에 투여되는 기타 약물 및 투여 경로에 의존할 것이다.
다양한 실시양태로 본원에서 개시된 바의 본 발명의 약제학적 조성물은 IL-18 관련 질환, 예컨대 만성 폐쇄성 폐질환(COPD), 수혈 관련 폐 손상, 기관지폐 이형성증(BPD), 급성 호흡 곤란 증후군(ARDS), 성인 스틸 병, 소아 스틸 병, 간질성 폐 질환(ILD), 특발성 폐 섬유증, 낭성 섬유증, 폐 동맥 고혈압, 천식, 기관지 확장증, 심장 마비, 근위축성 측삭 경화증(ALS), 안구 건조증(DED), 각막염, 각막 궤양 및 찰과상, 각막 신생 혈관, 병적인 안구내 혈관신생, 홍채염, 녹내장, 황반 변성, 쇼그렌 증후군, 자가 면역 포도막염, 베체트병, 결막염, 알레르기성 결막염, 눈꺼풀 피부염, 제2형 당뇨병, 비알코올성 지방 간 질환(NAFLD), 지방 간염, 고형 장기 및 혈액 이식, 허혈 재관류 손상, 가족성 지중해 열, 종양 괴사 인자 수용체 1-관련 주기적 증후군, 크리오피린 관련 주기적 발열 증후군, 하이퍼-IgD 증후군, 통풍, 슈니츨러 증후군, 다발성혈관염이 있는 육아종증(GPA)으로 또한 불리 우는 베게너 육아종증, 하시모토 갑상선염, 크론병, 궤양성 대장염, 면역글로불린-4(IgG4) 관련 질환 및 줄기세포 요법과 관련된 증상의 치료를 위한 기타 생리활성 물질 및 절차와 조합하여 투여될 수 있다. 기타 생리 활성 물질은 혼합물 형태의, 본 발명에 따른 조성물을 이미 포함하는 동일 조성물의 일부분일 수 있으며, 여기에서 본 발명의 조성물 및 기타 생리 활성 물질은 동일한 약제학적으로 허용 가능한 용매 및/또는 담체 내에서 또는 이와 함께 서로 혼합되거나 또는 키트의 부품의 형태로 개별적으로 또는 함께 제공될 수 있는, 별개의 조성물의 일부로서 개별적으로 제공될 수 있다.
다양한 실시양태로 본원에서 개시된 바의 본 발명의 약제학적 조성물은 기타 생리 활성 물질 또는 물질들과 병용으로, 간헐적으로 또는 연속적으로 투여될 수 있다. 예를 들어, 본 발명에 따른 조성물은 첫 번째 추가적인 생리 활성 물질과 동시에 또는 상기 조성물의 투여 전 또는 후에 연속적으로 투여될 수 있다. 하나 이상의 추가적인 생리 활성 물질이 투여되는 적용 방식이 선택되었다면, 본 발명에 따른 하나 이상의 조성물, 화합물 또는 물질은 다양한 조합으로 부분적으로 동시에, 부분적으로 연속적으로 투여될 수 있다.
그러므로 본 발명의 또 다른 목적은 치료적 또는 예방적 유효량으로 하나 이상의 추가의 생리 활성 물질을 임의로 포함하는 다양한 실시양태로 본원에서 개시된 바의 본 발명의 약제학적 조성물의 혼합물뿐만 아니라 만성 폐쇄성 폐질환(COPD), 심장 질환 및 제2형 당뇨병의 예방 및/또는 치료적 처치 및/또는 경감의 효과를 위한 본 발명에 따른 이러한 조성물 또는 이의 혼합물의 사용 방법을 제공하는 것이다.
그러므로 본 발명의 또 다른 목적은 치료적 또는 예방적 유효량으로 하나 이상의 추가의 생리 활성 물질을 임의로 포함하는 다양한 실시양태로 본원에서 개시된 바의 본 발명의 약제학적 조성물의 혼합물뿐만 아니라 만성 폐쇄성 폐질환(COPD), 수혈 관련 폐 손상, 기관지폐 이형성증(BPD), 급성 호흡 곤란 증후군(ARDS), 성인 스틸 병, 소아 스틸 병, 간질성 폐 질환(ILD), 특발성 폐 섬유증, 낭성 섬유증, 폐 동맥 고혈압, 천식, 기관지 확장증, 심장 마비, 근위축성 측삭 경화증(ALS), 안구 건조증(DED), 각막염, 각막 궤양 및 찰과상, 각막 신생 혈관, 병적인 안구내 혈관신생, 홍채염, 녹내장, 황반 변성, 쇼그렌 증후군, 자가 면역 포도막염, 베체트병, 결막염, 알레르기성 결막염, 눈꺼풀 피부염, 제2형 당뇨병, 비알코올성 지방 간 질환(NAFLD), 지방 간염, 고형 장기 및 혈액 이식, 허혈 재관류 손상, 가족성 지중해 열, 종양 괴사 인자 수용체 1-관련 주기적 증후군, 크리오피린 관련 주기적 발열 증후군, 하이퍼-IgD 증후군, 통풍, 슈니츨러 증후군, 다발성혈관염이 있는 육아종증(GPA)으로 불리 우는 베게너 육아종증, 하시모토 갑상선염, 크론병, 궤양성 대장염, 면역글로불린-4(IgG4) 관련 질환 및 줄기세포 요법의 예방 및/또는 치료적 처치 및/또는 경감의 효과를 위한 본 발명에 따른 이러한 조성물 또는 이의 혼합물의 사용 방법을 제공하는 것이다.
기타 생리 활성 물질 또는 화합물은 본 발명에 따른 조성물과 동일 또는 유사한 메커니즘에 의해, 또는 관련되지 않은 작용의 메커니즘에 의해, 또는 다수의 관련 및/또는 관련되지 않은 작용의 메커니즘에 의해 그의 생물학적 효과를 발휘할 수 있다.
일반적으로, 기타 생리 활성 화합물은 INF-감마, IL-17A, IL-13, IL-1베타, IL-6, IL-2, IL-4, IL-12, TNF-알파에 대하여 발생하고 이에 결합하는 항체를 포함한다. 특히, 본 발명에 따른 혼합물은 IL-18BP(IL-18BP) 또는 IL-18BP(IL-18BP) 및 본원에서 기술되고 본 발명에 따른 약제학적으로 허용 가능한 담체 및/또는 부형제를 포함하는 약제학적 조성물을 포함할 수 있다.
다양한 실시양태로 본원에서 개시된 바의 본 발명의 약제학적 조성물의 적당한 복용량은 상태, 나이 및 대상의 종에 따라 변할 것이며, 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다. 수의학 및 인간 의학 양자에서 사용된 총 일일 복용량은 0,01-2000mg/kg 체중, 바람직하게는 0,1-1000mg/kg 체중, 바람직하게는 1-100mg/kg 범위가 적당할 것이며 이들은 단일 또는 분할된 용량으로 투여될 수 있으며, 또한 지시가 있는 경우 상한은 또한 초과될 수 있다. 이러한 복용량은 투여될 특정 화합물(들), 투여의 수단, 치료되는 상태, 뿐만 아니라 치료되는 대상을 포함하는 각각의 특정 경우에 개별적인 요건에 맞게 조정될 것이다. 그러나, 화합물은 또한 주간, 매월 또는 심지어 더 긴 간격으로 저장소 제제(임플란트, 느린 방출 제제, 등)로서 투여될 수 있다. 이러한 경우에 복용량은 일일 복용량보다 훨씬 높을 것이며 체중 및 구체적인 징후에 맞게 조정되어야 한다. 적당한 복용량은 통상의 모델 시험, 바람직하게는 동물 모델에 의해 결정될 수 있다. 활성 성분(들)의 유효 용량은 적어도 치료되는 상태의 성질, 독성, 활성 화합물(들)이 활성 감염 또는 상태에 대하여 또는 예방적으로 사용되었는 지의 여부, 전달 방법, 및 약제학적 제형에 의존하며, 종래의 용량 에스컬레이션 연구를 사용하여 임상에 의에 의해 결정될 것이다. 그것은 하루에 약 0,01mg 내지 약 1g/kg 체중으로 예상될 수 있다. 예를 들어, 국소 전다렝 대하여 대략 70kg 체중의 성인에 대한 일일 후보 용량은 약 1mg 내지 약 500mg, 일반적으로 약 5mg 내지 약 40mg 범위일 것이며, 단일 또는 다중 용량의 형태로 또는 투여 영역에 취하여질 수 있다. 비강 내 전달을 위하여 후보 용량은 하루에 약 0.01mg 내지 약 1g/kg 체중으로 예상될 수 있다.
또한, IL-18BP의 기능성 유도체는 안정성, 반감기, 생체이용률, 인체에 의한 내성, 또는 면역원성과 같은 단백질의 성질을 개선하기 위해 중합체에 컨쥬게이트될 수 있다. 이러한 목표를 달성하기 위하여, IL18-BP는 예컨대 폴리에틸렌글리콜(PEG)에 연결될 수 있다. PEG화(PEGlation)는 예를 들어 WO 92/13095에 기술된 공지 방법에 의해 수행될 수 있다.
그러므로, 본 발명의 또 다른 실시양태에서, IL-18BP는 PEG화된다.
본 발명의 여전히 또 다른 실시양태에서, IL-18BP는 면역글로불린의 전부 또는 일부에 융합된 IL-18BP의 전부 또는 일부를 포함하는 융합 단백질이다.
본 발명의 추가의 실시양태에서, IL-18BP는 PEGy화, 면역글로불린의 전부 또는 일부에, 바람직하게는 면역글로불린의 불변 영역에 융합되고, 여기에서 융합 단백질은 여전히 IL-18에 결합할 수 있다. 더 구체적으로, 면역글로불린은 IgG1 또는 IgG2 동종형일 수 있다.
당업자는 결과의 융합 단백질은 IL-18BP의 생물학적 활성, 특히 IL-18로의 결합을 유지한다는 것을 이해할 것이다. 융합은 직접, 또는 1 내지 3 아미노산 잔기의 길이 많큼 짧거나 또는 더 긴, 예를 들어, 13 아미노산 잔기의 길이일 수 있는 짧은 링커 펩티드를 통하여 될 수 있다. 상기 링커는 IL-18BP 서열 및 면역글로불린 서열 사이에 도입되는 예를 들어, 서열 E-F-M(Glu-Phe-Met)(서열 번호: 9)의 트리펩티드, 또는 Glu-Phe-Gly-Ala-Gly-Leu-Val-Leu-Gly-Gly-Gln-Phe-Met(서열 번호: 8)을 포함하는 13-아미노산 링커 서열일 수 있다. 결과의 융합 단백질은 개선된 성질, 예컨대 체액 내에서 연장된 잔류 시간(반감기), 증가된 특이적 활성, 증가된 발현 레벨을 가지며, 또는 융합 단백질의 정제가 용이하게 된다.
바람직하게는, 그것은 예를 들어 인간 IgG1의 CH2 및 CH3 도메인과 같은, 중쇄 영역에 융합된다. IL-18BP 및 면역글로불린의 일부를 포함하는 특정 융합 단백질의 생성은 예를 들어 WP99/09063의 실시예 11에 기술되어 있다. 기타 Ig 분자의 아이소형도 또한 본 발명에 따른 융합 단백질, 예컨대 아이소형 IgG2 또는 IgG4, 또는 IgM 또는 IgA와 같은 기타 Ig 클래스의 생성을 위해 적당하다. 융합 단백질은 단량체 또는 다량체, 헤테로 또는 호모다량체일 수 있다.
추가의 특정 실시양태에서, 본 발명은 다양한 실시양태로 본원에서 개시된 바의 본 발명의 약제학적 조성물의 치료적 유효량을 상기 대상에게 투여하는 것을 포함하는 본 발명의 다양한 실시양태에서 본원에서 기술된 바의 IL-18의 과잉 발현과 관련된 질환 또는 장애를 앓거나 또는 전개되는 소인을 갖는 대상을 치료하기 위한 방법을 제공한다.
혈청학적 분석은 당업계에 공지되어 있으며 체액, 예컨대 혈청, 기관지 폐포 세척(BAL) 유체 및 객담에서 항원의 검출을 위한 유용한 도구가 되었다. 그러나, 현재까지 특이적 항체에 의한 IL-18의 검출을 위한 기능 진단 분석은 존재하지 않는다. 그러므로, 체액, 특히 혈청에서 IL-18의 검출을 위한 진단 방법을 위한 특별한 필요성이 있다.
그러므로 본 발명은 본원에서 기술된 바의 IL-18-관련 질환 또는 상태의 검출 및 진단을 위한, 본원에서 기술된 바의 IL18-관련 질환 또는 상태의 소인 진단을 위한 또는 대상에서 최소 잔류 질환을 모니터링 하기 위한 또는 다양한 실시양태로 본원에서 개시된 바의 본 발명의 약제학적 조성물로 치료할 대상의 반응성을 예측하기 위한 방법 및 키트를 개시한다. 이들 방법은 생물학적 샘플 또는 원위치 상태에서 물질을 검출 또는 정량화하기 위하여 통상적으로 사용되는 공지의 면역학적 방법을 포함한다.
한 실시양태에서 본 발명은 하기 단계를 포함하는, 본원에서 기술된 바의 IL-18-관련 질환의 진단을 위한, 또는 본원에서 기술된 바의 IL18-관련 질환의 소인 진단을 위한, 또는 대상에서 최소 잔류 질환을 모니터링하기 위한 또는 IL-18BP 또는 IL-18BP(IL-18BP) 및 전술한 실시양태 중 어느 하나에 따른 약제학적으로 허용 가능한 담체 및/또는 부형제를 포함하는 약제학적 조성물로 치료할 대상의 반응성을 예측하기 위한 방법을 더 개시한다:
a) 이러한 질환을 앓는 대상으로부터 체액의 샘플을 수득하는 단계;
b) 포획 분자로서 본원에서 기술된 바의 IL-18BP 또는 본 발명에 따른 IL-18-특이적 항체를 사용함에 의한 IL-18의 존재에 대하여 상기 샘플을 시험하는 단계;
c) 샘플에서 포획 분자에 결합한 IL-18의 양을 구하는 단계;
d) 이러한 질환을 앓는 대상의 샘플에서의 IL-18의 양과 건강한 대상의 샘플에서의 양을 비교하는 단계.
상기 질환을 앓는 대상, 특히 인간의 단리된 혈청에서 유리 IL-18의 양은 5 내지 10000pg/mL 범위, 특히 100 내지 10000pg/mL 범위, 특히 200 내지 10000pg/mL 범위, 특히 300 내지 10000pg/mL 범위, 특히 400 내지 10000pg/mL 범위, 특히 500 내지 10000pg/mL 범위, 특히 600 내지 10000pg/mL 범위, 특히 700 내지 10000pg/mL 범위, 특히 800 내지 10000pg/mL 범위, 특히 900 내지 10000pg/mL 범위, 특히 1000 내지 10000pg/mL 범위, 특히 1500 내지 10000pg/mL 범위, 특히 2000 내지 10000pg/mL 범위, 특히 3000 내지 10000pg/mL 범위, 특히 4000 내지 10000pg/mL 범위, 특히 5000 내지 10000pg/mL 범위이다. 건강한 대상, 특히 건강한 인간의 혈청에서 유리 IL-18의 양은 ≤40pg/mL, 특히 ≤30pg/mL, 특히 ≤25pg/mL, 특히 ≤20pg/mL, 특히 ≤10pg/mL, 특히 ≤5pg/mL, 특히 ≤1pg/mL, 특히 ≤0.5pg/mL 이다. 그러므로, 혈청 내에서 5 내지 10000pg/mL의 검출 가능한 IL-18 농도를 갖는 대상은 본원에서 개시된 바의 IL-18-관련 질환을 앓는 것이다. 혈청 및 기타 체액 내에서 IL-18의 양은 5 내지 200pg/mL 범위 내의 미리 정해진 IL-18 농도에 대하여 계산된 선형 표준 곡선을 사용함에 의해 본원에서 개시된 바의 진단 방법으로 구할 수 있다.
대상에서의 본원에서 기술된 바와 같은 IL-18-관련 질환 또는 상태의 진단 또는 IL-18-관련 질환 또는 상태의 소인의 진단은 샘플 또는 원위치에서 본원에서 개시된 바의 IL-18BP의 IL-18로의 결합 또는 본원에서 개시된 바의 단일클론 항체 또는 이의 활성 단편의 IL-18의 에피토프로의 면역 특이적 결합을 검출하여 달성될 수 있으며, 이것은 IL-18 항원을 함유하는 것으로 의심되는 샘플 또는 특정 신체 일부 또는 신체 부위를 IL-18 단백질 또는 이의 단편의 에피토프를 결합하는 IL-18BP 및/또는 항체와 접촉시키고, IL-18BP 또는 항체를 IL-18 항원에 결합하도록 하여 면역학적 복합체를 형성하며, 면역학적 복합체의 형성을 검출하고 임의로 정상 대조군 값과 상기 면역학적 복합체의 양을 비교하는, 샘플 또는 특정 신체 일부 또는 영역에서 IL-18 항원의 존재 또는 부재와 면역학적 복합체의 존재 또는 부재의 상관관계를 포함하며, 여기에서 정상 대조군 값과 비교된 상기 집합체의 양의 증가는 상기 대상이 IL-18-관련 질환 또는 상태를 앓거나 또는 전개의 위험이 있다는 것을 나타낸다.
IL-18BP 또는 IL-18BP 및 앞서 본원에서 기술되고 전술한 실시양태 중 어느 하나에 따른 약제학적으로 허용 가능한 담체 및/또는 부형제를 포함하는 약제학적 조성물로 치료 후 대상에서 최소 잔류 질환의 모니터링은 샘플 또는 원위치에서 본원에서 개시된 바의 IL-18BP의 IL-18로의 결합 또는 본원에서 개시된 바의 단일클론 항체 또는 이의 활성 단편의 IL-18 단백질 또는 이의 단편의 에피토프로의 면역 특이적 결합을 검출하여 달성될 수 있으며, 이것은 IL-18 항원을 함유하는 것으로 의심되는 샘플 또는 특정 신체 일부 또는 신체 부위를 IL-18 단백질 또는 이의 단편의 에피토프를 결합하는 본원에서 개시된 바의 IL-18BP 및/또는 항체와 접촉시키고, IL-18BP 및/또는 항체를 IL-18 항원에 결합하도록 하여 면역학적 복합체를 형성하며, 면역학적 복합체의 형성을 검출하고 임의로 정상 대조군 값과 상기 면역학적 복합체의 양을 비교하는, 샘플 또는 특정 신체 일부 또는 영역에서 IL-18 항원의 존재 또는 부재와 면역학적 복합체의 존재 또는 부재의 상관관계를 포함하며, 여기에서 정상 대조군 값과 비교된 상기 집합체의 양의 증가는 상기 대상이 여전히 최소 잔류 질환을 앓을 수 있음을 나타낸다.
다양한 실시양태로 본원에서 개시된 바의 본 발명의 약제학적 조성물로 치료할 대상의 반응성 예상은 샘플 또는 원위치에서 본원에서 개시된 바의 IL-18BP의 IL-18로의 결합 또는 본원에서 개시된 바의 단일클론 항체 또는 이의 활성 단편의 IL-18 단백질 또는 이의 단편의 에피토프로의 면역 특이적 결합을 검출하여 달성될 수 있으며, 이것은 IL-18 항원을 함유하는 것으로 의심되는 샘플 또는 특정 신체 일부 또는 신체 부위를 IL-18 단백질 또는 이의 단편의 에피토프를 결합하는 IL-18BP 및/또는 항체와 접촉시키고, IL-18BP 및/또는 항체를 IL-18 항원에 결합하도록 하여 면역학적 복합체를 형성하며, 면역학적 복합체의 형성을 검출하고 임의로 치료 시작 전 및 후에 상기 면역학적 복합체의 양을 비교하는, 샘플 또는 특정 신체 일부 또는 영역에서 IL-18 항원의 존재 또는 부재와 면역학적 복합체의 존재 또는 부재의 상관관계를 포함하며, 여기에서 상기 집합체의 양의 감소는 상기 대상이 치료에 반응하는 높은 잠재력을 갖는 것임을 나타낸다.
IL-18-관련 질환 또는 상태의 소인을 진단하기 위하여 또는 대상에서 본원에서 기술된 바의 최소 잔류 질환을 모니터링하기 위하여 또는 다양한 실시양태로 본원에서 개시된 바의 본 발명의 약제학적 조성물로 치료할 대상의 반응성을 예측하기 위하여 본원에서 기술된 바의 IL-18-관련 질환 또는 상태의 진단에 사용될 수 있는 생물학적 샘플은, 예를 들어, 유체 예컨대 혈청, 혈장, 타액, 위 분비물, 점액, 뇌척수액, 림프액, 등 또는 신경, 뇌, 폐, 심장 또는 맥관 조직과 같은 유기체로부터 수득된 조직 또는 세포 샘플이다. 샘플 내에서 IL-18 항원, 특히 유리 IL-18 항원의 존재 또는 부재를 결정하기 위하여, 당업계에서 공지된 면역분석법이 사용될 수 있다. (『Harlow and Lane, Antibodies: A Laboratory Manual(Cold Spring Harbor Laboratory, New York 1988 555-612』 참조)는 예를 들어, 검출을 위한 이차 시약을 사용한 간접 검출 방법을 이용한 분석, ELISA's 및 면역침전 및 응집 분석이 사용될 수 있다. 이들 분석법의 상세한 설명은, 예를 들어, WO96/13590 (Maertens and Stuyver, Zrein et al.(1998)) 및 WO96/29605에서 제공된다.
원위치 진단을 위해, 본원에서 개시된 바의 IL-18BP 및/또는 본원에서 개시된 바의 IL-18-특이적 항체 또는 이의 활성 및 기능성 부분이 IL-18 항원 상의 에피토프 영역과 IL-18BP 및/또는 특이적 항체간의 특이적 결합이 발생하도록 예를 들어, 정맥 내, 비강 내, 복강 내, 뇌 내, 동맥 내 주사와 같은 당업계에서 공지된 방법에 의해 진단된 유기체에 투여될 수 있다. IL18BP/항원 또는 항체/항원 복합체는 항체 또는 이의 기능성 단편에 부착된 표지를 통해 검출될 수 있다.
진단 적용 또는 본원에서 기술된 바의 IL-18-관련 질환 또는 상태의 소인을 진단하기 위한 또는 대상에서 최소 잔류 질환을 모니터링하기 위한 또는 다양한 실시양태로 본원에서 개시된 바의 본 발명의 약제학적 조성물로 치료할 대상의 반응성을 예측하기 위한 적용에 사용된 면역 분석법은 표지된 항원, 항체, 또는 검출을 위한 이차 시약에 전형적으로 의존한다. 이들 단백질 또는 시약은 효소, 방사성 동위원소, 및 콜로이드 금과 라텍스 비드와 같은 컬러 입자를 포함하는 형광, 발광 및 발색 물질을 포함하는 당업자에게 일반적으로 공지된 화합물로 표지될 수 있다. 이들 중, 방사성 표지는 대부분의 변형과 함께 거의 모든 타입의 분석을 위해 사용될 수 있다. 효소 컨쥬게이트된 표지는 방사능을 회피하여야 할 때 또는 신속한 결과가 필요할 때 특히 유용하다. 형광색소는, 그들의 사용을 위해 고가의 장비가 필요하지만 매우 민감한 검출 방법이다. 이들 분석법에 유용한 항체는 단일클론 항체, 다중클론 항체, 및 친화성 정제된 다중클론 항체를 포함한다.
대안적으로, 항체는 면역글로불린, 예컨대 단백질 A 또는 G 또는 이차 항체에 대한 친화성을 갖는 표지된 물질과의 반응에 의해 간접적으로 표지될 수 있다. 항체는 이차 물질과 컨쥬게이트되고 항체에 컨쥬게이트된 이차 물질에 대하여 친화성을 갖는 표지된 제3 물질로 검출될 수 있다. 예를 들어, 항체는 비오틴에 컨쥬게이트될 수 있으며 항체-비오틴 컨쥬게이트는 표지된 아비딘 또는 스트렙트아비딘을 사용하여 검출되었다. 유사하게, 항체는 합텐에 컨쥬게이트될 수 있으며 항체-합텐 컨쥬게이트는 표지된 안티-합텐 항체을 사용하여 검출된다.
당업자는 본 발명에 따라 사용될 수 있는 이들 및 기타 적당한 표지를 알 것이다. 항체 또는 이의 단편으로의 이들 표지의 결합은 당업자에게 일반적으로 공지된 표준 기술을 사용하여 달성될 수 있다. 전형적인 기술은 문헌『Kennedy, J. H., et al.,1976(Clin. Chim. Acta 70:1-31), 및 Schurs, A. H. W. M., et al. 1977(Clin. Chim Acta 81:1-40)』에 기술되어 있다. 후자에 언급된 커플링 기술은 글루타르알데히드 방법, 과요오드산 방법, 디말레이미드 방법, 등이 있으며, 이들 모두는 참고로 본원에서 통합된다.
현재 면역분석법은 분석물질의 존재를 검출하기 위한 이중 항체 방법을 이용하며, 여기에서 포획 항체는 검출 가능한 표지로 표지된 제2 항체와의 반응성에 의해 간접적으로 표지된다. 제2 항체는 바람직하게는 단일클론 항체가 유도되는 동물의 항체에 결합하는 것이다. 다시 말해서, 단일클론 항체가 마우스 항체라면, 표지된 제2 항체는 항-마우스 항체이다. 하기 기술된 분석에서 사용된 단일클론 항체에 대하여, 이 표지는 바람직하게는 항체-코팅된 비드, 특히 마그네틱 비드이다. 하기 기술된 면역분석법에 사용되는 다중클론 항체에 대하여, 표지는 바람직하게는 검출가능한 분자 예컨대 방사성, 형광 또는 전기화학발광 물질이다.
분석물질의 존재를 신속하게 결정하도록 적응되어 있기 때문에 고속 포맷 시스템으로서 종종 지칭되는, 대안적인 이중 항체 시스템은, 본 발명의 범위 내에서 또한 사용될 수 있다. 시스템은 항체와 분석물질 간에 높은 친화성이 필요하다. 본 발명의 실시양태에 따라, IL-18 항원의 존재는 항체, 각기 IL-18 항원에 대하여 특이적인 한 쌍의 항체를 사용하여 결정된다. 상기 항체의 쌍 중 하나는 본원에서 "검출 항체"로서 지칭되고 상기 항체의 쌍 중 다른 하나는 본원에서 "포획 항체"로서 지칭된다. 본 발명의 단일클론 항체는 포획 항체 또는 검출 항체로서 사용될 수 있다. 본 발명의 단일클론 항체는 또한 단일 분석법에서 함께 포획 및 검출 항체 양자로서도 또한 사용될 수 있다. 그러므로 본 발명의 한 실시양태는 생물학적 유체의 샘플 내에서 IL-18 항원을 검출하기 위한 이중 항체 샌드위치 방법을 사용한다. 이 방법에서, 분석물질(IL-18 항원)은 검출 항체 및 포획 항체 사이에서 샌드위치화되고, 포획 항체는 비가역적으로 고체 지지체 상에 고정되어 있다. 검출 항체는 항체-분석물질 샌드위치의 존재 및 따라서 분석물질의 존재를 식별하기 위하여 검출 가능한 표지를 함유한다.
대표적인 고체상 물질은, 이것으로 제한되는 것은 아니지만, 방사면역분석법 및 효소 면역분석법 분야에서 공지된 마이크로타이터 플레이트, 폴리스티렌 시험관, 마그네틱, 플라스틱 또는 유리 비드 및 슬라이드를 포함한다. 고체상에 항체를 커플링하기 위한 방법은 또한 당업자에게 공지되어 있다. 더 최근에, 다수의 다공성 물질 예컨대 나일론, 니트로셀룰로오스, 셀룰로오스 아세테이트, 유리 섬유 및 기타 다공성 중합체가 고체 지지체로서 사용되어 왔다.
본 발명은 또한 생물학적 샘플 내에서 IL-18 항원을 검출하기 위한 진단 키트에 관한 것이다. 더욱더, 본 발명은 상기 정의된 바의 조성물 이외에, 상기 정의된 바의 검출 시약도 또한 포함하는 후자의 진단 키트에 관한 것이다. 용어 "진단 키트"는 일반적으로 당업계에 공지된 진단 키트를 의미한다. 더 구체적으로, 후자의 용어는 『Zrein et al.(1998)』에서 기술된 바의 진단 키트를 의미한다.
본 발명의 여전히 또 다른 목적은 이전에 본원에서 개시된 바의 IL-18BP 또는 이전에 본원에서 개시된 바의 특이적 IL-18BP 항체를 포함하는 본원에서 기술된 바의 IL-18-관련 질환 및 상태의 검출 및 진단을 위한 새로운 면역프로브 및 시험 키트를 제공하는 것이다. 면역프로브를 위하여, IL-18BP 또는 항체는 적당한 리포터 분자, 예컨대, 효소 또는 방사성핵종에 직접적으로 또는 간접적으로 부착된다. 시험 키트는 IL-18BP 및/또는 하나 이상의 항체를 유지하기 위한 용기 및 면역학적 복합체를 형성하도록 IL-18 항원에 결합하는 목적을 위한 IL-18BP 및/또는 항체의 사용 및 IL-18 항원의 존재 또는 부재와 면역학적 복합체의 존재 또는 부재가 상관관계가 되도록 면역학적 복합체의 형성을 검출하는 것에 대한 지침서를 포함한다.
상기에 따라, 본 발명은 또한 유효량으로 투여하기에 적당한 개별 단위 복용량 형태로 다양한 실시양태에서 본원에서 개시된 바의 본 발명의 약제학적 조성물을 포함하는 약제학적 키트를 제공한다. 이러한 키트는 다양한 실시양태로 본원에서 개시된 바의 본 발명의 약제학적 조성물의 투여를 위한 하나 이상의 흡입 디바이스를 적당하게 더 포함한다. 예를 들어, 키트는 다양한 실시양태로 본원에서 개시된 바의 본 발명의 약제학적 조성물의 복용량 단위를 포함하는 건조 분말을 함유하는 캡슐과 함께, 캡슐로부터 건조 분말을 전달하도록 적용된 하나 이상의 건조 분말 흡입 디바이스를 포함할 수 있다. 또 다른 실시예에서, 키트는 다양한 실시양태로 본원에서 개시된 바의 본 발명의 약제학적 조성물을 포함하는 건조 분말을 그의 저장용기에 함유하는 다회 용량 건조 분말 흡입 디바이스를 포함하는 건조 분말을 그의 저장 용기에 함유하는 다회 용량 건조 분말 흡입 디바이스를 포함할 수 있다.
정의
본 출원의 범주 내에서 사용된 기술적인 용어 및 표현은 일반적으로 이하에서 달리 지시되지 않는 경우 해당 기술 분야에 적용되는 일반적인 의미를 부여한다.
본 명세서 및 첨부된 실시양태에서 사용된 단수 형태는 문맥이 명확하게 달리 지시하지 않는 한 복수의 지시대상을 포함한다. 그러므로, 예를 들어, 참고로 "화합물"은 하나 이상의 화합물들을 포함하는 것이다.
용어 "치료", "치료하는" 등은 일반적으로 본원에서 원하는 약리학적 및/또는 생리적 효과를 얻는 것을 의미하는 것으로 사용된다. 효과는 완전히 또는 부분적으로 그의 질환 또는 증상을 예방하는 관점에서 예방적 일 수 있으며 및/또는 질환 및/또는 질환으로 인한 역효과를 부분적으로 또는 완전히 치료하는 관점에서 치료적일 수 있다. 본원에서 사용된 바의 용어 "치료"는 대상의 질환을 치료하는 것을 커버하는 것으로 사용되며 하기를 포함한다: (a) 질환 예방, 즉 질환에 소인이될 수 있는 대상에서 발생하는 원하지 않는 면역 반응에 관련된 질환 예방; (b) 질환 억제, 즉 그의 전개를 정지시킴; 또는 (c) 질환 완화, 즉 질환의 퇴행을 야기함 (d) 질환 증상의 역전, 즉 손상된 조직의 복구를 유도함.
본원에서 사용된 바의 표현 "IL-18 결합 단백질(IL-18BP)"은 전장 단백질, 뮤테인, 단편, 펩티드, 기능성 유도체, 기능성 단편, 분획, 순환 치환 유도체, 융합 단백질, 아이소형 또는 이의 염을 포함한다.
본원에서 사용된 바의 용어 "유리 IL-18"은 단량체, 가용성 및 비-복합체화된 인터류킨-18 단백질을 의미한다.
"면역글로불린"은 4량체 분자이다. 자연적으로 발생하는 면역글로불린에서, 각각의 4량체는 각각의 쌍이 하나의 "경(light)"(약 25kDa) 및 하나의 "중(heavy)" 사슬(약 50-70kDa)을 갖는, 두 동일한 쌍의 폴리펩티드 사슬로 구성되어 있다. 각각의 사슬의 아미노 말단부는 항원 인식에 대하여 주로 담당하는 약 100 내지 110 이상의 아미노산의 가변 영역을 포함한다. 각 사슬의 카르복시 말단부는 이펙터 기능을 주로 담당하는 불변 영역을 규정한다. 인간 경쇄는 [카파] 및 [람다] 경쇄로서 분류된다. 중쇄는 [마이크로], [델타], [감마], [알파], 또는 [엡실론]으로서 분류되며, 각기 IgM, IgD, IgG, IgA, 및 IgE로서 항체의 동종형을 규정한다. 경쇄 및 중쇄 내에서, 가변 및 불변 영역은 약 10 초과의 아미노산의 "D" 영역을 또한 포함하는 중쇄와 약 12 2 이상의 아미노산의 "J" 영역에 의해 연결된다. 일반적으로, 문헌『Fundamental Immunology Ch. 7(Paul, W., ed., 2nd ed. Raven Press, N.Y.(1989 ))』(모든 목적을 위해 그의 전체는 참고로 통합되었다)을 참조한다. 각각의 경쇄/중쇄 쌍의 가변 영역은 온전한 면역글로불린이 두 결합 부위를 갖도록 항체 결합 부위를 형성한다.
면역글로불린 사슬은 상보성 결정 영역 또는 CDRs로도 또한 지칭되는 세 초가변 영역으로 연결된 비교적 보존된 프레임워크 영역(FR)의 동일한 일반 구조를 나타낸다. 각 쌍의 두 사슬로부터 CDRs는 특정 에피토프에 결합할 수 있는 프레임워크 영역에 의해 나란히 만들어진다. N-말단에서 C-말단까지, 경쇄 및 중쇄 양자는 도메인 FR1, CDR1, FR2, CDR.2, FR3, CDR3 및 FR4을 포함한다. 각 도메인으로 아미노산의 할당은 『Kabat Sequence of Proteins of Immunological Interest(National Institutes of Health, Bethesda, Md.(1987 및 1991 )), 또는 Chothia & Lesk J. Mol. Biol, 196:901-917(1987 ); Chothia et al. Nature 342:878-883(1989 )』의 정의에 따른다.
본원에서 사용된 바의 용어 "항체" 또는 "항체들"은 기술 분야에서 인식되는 용어이며 알려진 항원, 특히 면역글로불린 분자 및 면역학적으로 활성인 면역글로불린 분자의 부분에 결합하는 분자 또는 분자의 활성 단편, 즉 면역특이적으로 항원을 결합하는 결합 부위을 함유하는 분자를 의미하는 것으로 이해된다. 본 발명에따른 면역글로불린은 모든 타입(IgG, IgM, IgD, IgE, IgA 및 IgY) 또는 클래스(IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1 및 IgA2) 또는 면역글로불린 분자의 서브클래스일 수 있다.
용어 "항체"는 특이적 결합을 위해 온전한 항체와 경쟁하는 본 발명의 목적을 위한 온전한 면역글로불린 또는 이의 항원 결합 부분을 의미한다. 특히, "항체"는 단일클론, 다중클론, 키메라, 단일 사슬, 이중 특이성 또는 이중 효능, 원숭이화, 인간 및 인간화 항체를 포함하는 본 발명의 범주 내에 있는 것으로 의도된다.
항원 결합 부분의 예는 상술한 항체 및 단편의 Fab 면역글로불린 발현 라이브러리 및 에피토프-결합 단편의 생성물을 포함하는, 그 중에서도 특히 Fab, Fab', F(ab')2, scFv, dAb 및 Fv 단편을 포함한다. 또한 항원 결합 부분의 예는 폴리펩티드에 결합하는 특정 항원을 부여하기에 충분한 하나 이상의 면역글로불린의 부분을 함유하는 상보성 결정 영역(CDR) 단편, 이중체(diabodies) 및 폴리펩티드를 포함한다.
이러한 활성 단편은 공지된 다수의 기술에 의해 본 발명의 항체로부터 유도될 수 있다. 예를 들어, 정제된 단일클론 항체는 펩신과 같은 효소로 절단될 수 있으며, HPLC 겔 여과를 실행할 수 있다. Fab 단편을 함유하는 적당한 분획은 그 후 막 여과 등에 의해 수집 및 농축될 수 있다. 항체의 활성 단편의 단리를 위한 추가의 일반적인 기술에 관하여, 예를 들어, 문헌『Khaw, B. A. ct al. J. Nucl. Med. 23:1011-1019(1982); Rousseaux et al. Methods Enzymology, 121:663-69, Academic Press, 1986』을 참조한다.
"인간화 항체"는 비-인간 도너 면역글로불린으로부터 유도된 그의 CDRs를 갖는 조작 항체의 타입을 의미한다. 한 실시양태에서, 중쇄 및 경쇄의 프레임워크 및 불변 도메인 내의 특정 아미노산은 인간의 면역 반응을 피하거나 또는 폐지하기 위하여 돌연변이 된다. 대안적인 실시양태에서, 인간화 항체는 인간 항체로부터 비-인간 종의 가변 도메인에 불변 도메인을 융합함에 의해 생성될 수 있다. 인간화 항체를 만드는 방법에 대한 예는 미국 특허 제6,054,297호, 제5,886,152호 및 제5,877,293호에서 찾을 수 있다.
본 발명의 여전히 또 다른 실시양태에서, "인간화 항체"는 하나(또는 그 이상의) 인간 면역글로불린(들)로부터 유도되는 인간 항체 "스카폴드"에 삽입된 비-인간 도너 면역글로불린으로부터 유도된 그의 CDRs를 갖는 조작 항체의 타입을 의미한다. 또한, 프레임워크 지지 잔기는 결합 친화성을 유지하기 위해 변경될 수 있다. "인간화 항체"를 얻기 위한 방법은 당업자에게 공지되어 있다(예컨대, 문헌『 Queen et al., Proc. Natl Acad Sci USA, 86:10029-10032(1989), Hodgson et al., Bio/Technology, 9:421(1991)』 참조).
"인간화 항체"는 또한 예를 들어, 토끼와 같은 큰 동물에서, 친화성-숙성된 인간 유사 다중클론 항체를 생성할 수 있는 새로운 유전자 조작 접근법에 의해 수득될 수 있다.(예컨대, 미국 특허 제7,129,084호 참조).
용어 "단일클론 항체"는 또한 본 기술분야에서 잘 인식되고 있는 것이며 단일 클론으로부터 실험실에서 대량 생산되며 오로지 하나의 항원만을 인식하는 항체를 의미한다. 단일클론 항체는 일반적으로 단명, 항체-생성 B세포를 암 세포(때때로 "불멸" 세포로서 언급됨)와 같은 급속-증식 세포에 융합시켜 만들어지는 것이 전형적이다. 결과의 하이브리드 세포, 또는 하이브리도마는 빠르게 승산되어 다량의 항체를 생산하는 클론을 생성한다. 본 발명의 목적을 위하여, "단일클론 항체"는 또한 아직 완전한 단일클론성에 도달되지 않은 마더 클론(mother clone)에 의해 생산된 항체를 포함하는 것으로 이해된다.
용어 "CDRs"는 항체의 초가변 영역을 의미한다. 용어 "초가변 영역", "HVR", 또는 "HV"는 본원에서 사용될 때 서열 내에서 초가변성 이며 및/또는 구조적으로 한정된 루프를 형성하는 항체 가변 도메인의 영역을 의미한다. 일반적으로, 항체는 6개의 초가변 영역을 포함한다; VH 중 3개(H1, H2, H3), 및 VL 중 3개(L1, L2, L3). 다수의 초가변 영역 묘사가 사용되며 본원에서 포함된다. 카바트 상보성 결정 영역은 서열 가변성을 근거로 하며 가장 통상적으로 사용된다(Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD. (1991 )).
용어 "CDR" 이전의 문자 "HC" 및 "LC"는 각기 중쇄 및 경쇄의 CDR을 의미하며, 코티아는 구조 루프의 위치 대신에 지칭한다(Chothia and Lesk J. Mol. Biol.196:901-917(1987 )). AbM 초가변 영역은 카바트 CDRs 및 코티아 구조 루프 사이를 절충하는 것을 나타내며, Oxford Molecular's AbM 항체 모델링 소프트웨어에 의해 사용된다. "접촉" 초가변 영역은 입수할 수 있는 복합체 결정 구조의 분석을 근거로 한다.
용어 "카바트에서와 같은 가변 도메인 잔기 넘버링" 또는 "카바트에서와 같은 아미노산 위치 넘버링", 및 그의 변형은, 문헌『Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD (1991)』에서 항체의 컴파일의 중쇄 가변 도메인 또는 경쇄 가변 도메인을 위해 사용된 넘버링 시스템을 의미한다.
"기능상 동등한 항체"는 항체와 하나 이상의 주요 기능적 성질을 실질적으로 공유하는 본 발명의 범주 내의 항체로 이해되며, 예를 들어 본원에서 기술된 기능적 성질은, 이것으로 제한되는 것은 아니지만 하기를 포함한다: 유리 IL-18 단백질에 특이적으로 결합. 항체는 IgG, IgM, 또는 IgA, 등과 같은 클래스이거나 또는 IgG1, IgG2a, 등과 같은 서브클래스 및 본원에서 기술되고 당업계에 공지된 기타 서브클래스, 그러나 특히 IgG4 클래스일 수 있다. 또한, 항체는 파지 디스플레이와 같은 방법에 의해 제조될 수 있거나, 또는 박테리아, 곤충, 포유동물을 포함하는 유기체 또는 세포주 또는 인간화 항체와 같은 원하는 특징을 갖는 항체를 생산하는 기타 타입의 세포 또는 세포주에서 제조될 수 있다. 항체는 또한 상이한 종으로부터 Fab 부 및 Fc 영역을 조합하여 형성될 수 있다.
항체의 단편 또는 유사체는 본 명세서의 교시에 따라 당업자에 의해 용이하게 제조될 수 있다. 단편 또는 유사체의 바람직한 아미노- 및 카르복시- 말단은 기능성 도메인의 경계 근처에서 발생한다. 구조 및 기능성 도메인은 뉴클레오티드 및/또는 아미노산 서열 데이터와 공개 또는 독점적 서열 데이터베이스를 비교하여 식별될 수 있다. 바람직하게는, 컴퓨터화된 비교 방법은 공지 구조 및/또는 기능의 다른 단백질에서 발생하는 서열 모티프 또는 예측된 단백질 형태 도메인을 식별하기 위해 사용된다. 공지의 3차원 구조로 접힌 단백질 서열을 식별하는 방법은 공지되어 있다. Bowie et al. Science 253:164(1991 ).
용어 "인간 항체"는 인간 면역글로불린 서열로부터 유도된 하나 이상의 가변 및 불변 영역을 갖는 모든 항체를 포함한다. 바람직한 실시양태에서, 모든 가변 및 불변 도메인은 인간 면역글로불린 서열(완전 인간 항체)로부터 유도된다. 이들 항체는 원핵 세포, 예를 들어, E. coli와 같은 다양한 숙주 세포에서 제조될 수 있다. 또 다른 실시양태에서, 숙주 세포는 진핵 세포, 예를 들어, 원생생물 세포, 동물 세포, 식물 세포, 식물 또는 진균 세포이다. 실시양태에서, 숙주 세포는 이것으로 제한되는 것은 아니지만, CHO, COS, NS0, SP2, PER.C6, 또는 진균 세포, 예컨대 사카로마이세스 세레비지아에(Saccharomyces cerevisiae), 또는 곤충 세포, 예컨대 Sf9를 포함하는 포유동물 세포이다. 또 다른 실시양태에서, 인간 항체를 생산하는 세포는 바이오리액터에서 성장될 수 있거나 또는 식물에 대하여는 온실 및 필드에서 성장될 수 있다(예를 들어: Riechmann L, et al(1988). Nature 332(6162): 332-323; Queen C, et al.(Dec 1989). Proc Natl Acad Sci U S A. 86(24): 10029-33; Kashmiri SV, et al.(May 2005).. Methods 36(1): 25-34; Hou S, et al(July 2008).. J Biochem 144(1): 115-20 참조).
숙주에서.
본 발명의 목적을 위한 "환자" 또는 "대상"은 상호 교환적으로 사용되며 인간 및 기타 동물 양자, 특히 포유동물, 및 기타 유기체를 포함하는 의미이다. 그러므로, 방법은 인간 치료 및 수의학 적용 양자에 적용 가능하다. 바람직한 실시양태에서 환자 또는 대상은 포유동물이고, 가장 바람직한 실시양태에서 환자 또는 대상은 인간이다.
표현 "약제학적 조성물" 및 "치료적 조성물"은 가장 광범위한 의미로 상호 교환적으로 사용된다. 이들은 본 발명의 목적을 위하여 치료적으로 유효량의 활성 성분, 즉 IL-18BP 및, 임의로, 약제학적으로 허용 가능한 담체 또는 희석제를 지칭하는 것을 의미한다.
인간 또는 비인간 동물에서 의료적인 치료, 제어, 경감, 상태의 개선 또는 질환 또는 장애의 예방을 위한 적당한 조성물을 포함한다. 그러므로 인간 또는 수의학의 영역에서 사용하기 위한 약제학적 조성물을 포함한다. 이러한 "치료적 조성물"은 하나 이상의 IL-18BP 화합물 또는, 염 및 담체 및 부형제가 이와 함께 처리되는 타깃 유기체에 의해 허용되는, 생리적으로 허용 가능한 이의 염, 및 임의로 담체 또는 부형제를 포함하는 것을 특징으로 한다.
"치료적 유효량"은 주어진 조건 및 투여 요법에 대하여 치료 효과를 제공하는 양을 의미한다. 특히, "치료적 유효량"은 질환 증상의 효과적인 예방, 반전, 경감 또는 완화 또는 인간 또는 비인간 동물일 수 있는 치료될 대상의 생존의 연장에 효과적인 양을 의미한다. 치료적 유효량의 결정은 당업자의 기술 범위 내에 있다. 특히, 본 발명의 경우 "치료적 또는 예방적 유효량"은 단백질 또는 펩티드, 뮤테인, 기능성 유도체, 분획, 순환 치환 유도체, 융합 단백질, 아이소형 또는 이의 염, 및 인간 또는 동물에게 투여 되었을 때, 상기 인간 또는 동물에서 치료적 또는 예방적 효과를 유도하는 화합물 또는 약제학적 조성물의 양을 의미한다. 유효량은 루틴한 절차에 따라 당업자에 의해 용이하게 결정된다. 본 발명에 따른 화합물의 치료적 유효량 또는 복용량은 광범위한 제한 내에서 변할 수 있으며 관련 기술 분야에서 공지된 방식으로 결정될 수 있다. 복용량은 광범위한 제한 내에서 변할 수 있으며, 물론, 각각의 특정 경우에 개별적인 요건에 따라 조정되어야 한다.
용어 "점막경유" 투여는 화합물이 신체의 모든 부분의 점막에 의해 흡수되는 다양한 투여 경로를 의미한다. 점막경유 투여는 이것으로 제한되는 것은 아니지만, 즉 비강 내, 구강, 경구 점막경유, 기관 내, 요로 내, 직장 내, 질 내, 설하, 기관지 내, 폐 내 및 경피 투여를 포함한다.
정의 "약제학적으로 허용 가능한"은 활성 성분의 생물학적 활성의 효능을 간섭하지 않으며 투여되는 숙주에 독성이 없는 담체, 부형제, 희석제 또는 비히클을 포함하는 것을 의미한다.
용어 "융합 단백질"은 예컨대 체액 내에서 연장된 잔류 시간을 갖는 또 다른 단백질과 융합된 IL-18BP, 또는 바이러스성 IL-18BP, 또는 뮤테인 또는 이의 단편을 포함하는 폴리펩티드를 의미한다. IL-18BP 또는 바이러스성 IL-18BP는 그러므로 또 다른 단백질, 폴리펩티드 등, 예컨대, 면역글로불린 또는 이의 단편에 융합될 수 있다.
이들 아이소형, 뮤테인, 융합 단백질 또는 기능성 유도체는 특히 IL-18에 결합하는, IL-18BP의 생물학적 활성을 유지하며, 바람직하게는 필수적으로 IL-18BP와 유사한 하나 이상의 활성을 갖는다. 이상적으로, 이러한 단백질은 비개질된 IL-18BP와 비교하여 심지어 증가된 생물학적 활성을 갖는다. 바람직한 활성 분획은 IL-18BP의 활성보다 더 우수한 활성을 가지거나, 또는 더 우수한 안정성 또는 더 낮은 독성 또는 면역원성과 같은 추가의 장점을 갖거나, 또는 이들은 대량 생산이 더 용이하거나 또는 정제가 더 용이하다.
용어 "인터류킨-18 결합 단백질"은 또한 IL-18BP 뮤테인, 기능성 유도체, 분획, 생리 활성 펩티드, 순환 치환 유도체, 융합 단백질, 아이소형 및 이의 염을 포함한다.
본원에서 사용된 바의 용어 "뮤테인"은 와일드 타입 IL-18BP 또는 바이러스성 IL-18BP와 비교하여 결과의 생성물의 활성에 상당한 변화 없이 천연 IL-18BP 또는 바이러스성 IL-18BP의 아미노산 잔기의 하나 이상이 상이한 아미노산 잔기로 대체되거나, 또는 결실되며, 또는 하나 이상의 아미노산 잔기가 IL-18BP, 또는 바이러스성 IL-18BP의 자연 서열에 첨가된 IL-18BP의 유사체, 또는 바이러스성 IL-18BP의 유사체를 의미한다. 이들 뮤테인은 공지의 합성 및/또는 부위 지정 돌연변이 유발 기술, 높은 처리량 돌연변이 유발, DNA 셔플링, 단백질 진화 기술, 또는 기타 그에 대한 다른 공지 기술에 의해 제조된다.
이러한 뮤테인은 바람직하게는 IL-18BP와 실질적으로 유사한 활성을 갖도록 충분히 복제된 IL-18BP 또는 충분히 복제된 바이러스성 IL-18BP의 아미노산의 서열을 갖는다. IL-18BP의 한 활성은 IL-18을 결합하는 그의 능력이다. 뮤테인이 IL-18에 실질적인 결합 활성을 갖는 한, 그것은 친화 크로마토그래피의 수단과 같은 IL-18의 정제에 사용될 수 있으며, 따라서 IL-18BP와 실질적으로 유사한 활성을 갖는 것으로 고려될 수 있다. 그러므로, 그것은 예컨대 방사면역분석법 또는 ELISA 분석법과 같은 적절하게 표지된 IL-18에 결합하는 지의 여부를 결정하기 위한 간단한 샌드위치 경쟁 분석법으로 이러한 뮤테인을 실행하는 것을 포함하는 루틴한 실험 수단에 의해 주어진 뮤테인이 IL-18BP와 실질적으로 동일한 활성을 갖는지를 결정할 수 있다.
본 발명에 따라 사용될 수 있는 IL-18BP 폴리펩티드의 뮤테인 또는 바이러스성 IL-18BP의 뮤테인, 또는 핵산 코딩은 그러므로 본원에서 나타낸 교시 및 지침에 기초하여, 과도한 실험 없이 당업자에 의해 루틴하게 수득 될 수 있는 치환 펩티드 또는 폴리뉴클레오티드로서 실질적으로 상응하는 서열의 유한 집합을 포함한다.
본 발명에 따른 뮤테인에 대한 바람직한 변화는 "보전적" 치환으로서 공지되어 있는 것이다. IL-18BP 폴리펩티드 또는 단백질 또는 바이러스성 IL-18BP의 보전적 아미노산 치환은 기의 구성원 간의 치환이 분자의 생물학적 기능을 유지하는 충분히 유사한 물리화학적 성질을 갖는 기 내에서 동의 아미노산을 포함할 수 있다(Grantham, 1974). 특히 삽입 또는 결실이 오로지 수개의 아미노산, 즉, 30 이하, 및 바람직하게는 10 이하를 포함하며 기능성 형태에 중요한 아미노산, 즉 시스테인 잔기를 제거 또는 대체하지 않는다면 아미노산의 삽입 및 결실은 또한 그들의 기능을 변경함이 없이 상술한 서열로 또한 만들어질 수 있음은 명백하다. 단백질 및 뮤테인은 본 발명의 범위 내에 속하는 이러한 결실 및/또는 삽입에 의해 제조된다.
본원에서 사용된 바의 "기능성 유도체"는 당업계의 공지된 방법에 의해 잔기의 측쇄에서 발생하는 작용기 또는 N- 또는 C- 말단기로부터 제조될 수 있는 IL-18BP 또는 바이러스성 IL-18BP의 유도체, 및 그들의 뮤테인 및 융합 단백질을 커버하며, 이들이 약제학적으로 허용 가능하도록 유지되는 한, 즉 이들이 IL-18BP, 또는 바이러스성 IL-18BP의 활성과 실질적으로 유사한 단백질의 활성을 파괴하지 않고, 그것을 함유하는 조성물에 대하여 독성을 부여하지 않는다면, 본 발명에 포함된다.
이들 유도체는, 예를 들어, 폴리에틸렌 글리콜 측쇄를 포함하며, 이것은 항원 부위를 마스크할 수 있으며 체액에서 IL-18BP 또는 바이러스성 IL-18BP의 잔류를 연장한다. 기타 유도체는 카르복실기의 지방족 에스테르, 암모니아 또는 일차 또는 이차 아민과의 반응에 의한 카르복실기의 아미드, 아실 잔기(예컨대 알칸올 또는 카르비시클릭 아로일기)로 형성된 아미노산 잔기의 유리 아미노기의 N-아실 유도체 또는 아실 잔기와 형성된 유리 히드록실기의 O-아실 유도체(예를 들어 세릴 또는 트레오닐 잔기의 유도체)를 포함한다.
IL-18BP, 또는 바이러스성 IL-18BP, 뮤테인 및 융합 단백질의 "기능성 단편"으로서, 본 발명은 IL-18BP 단백질 분자 단독 또는 거기에 연결된 관련 분자 또는 잔기와 함께의 폴리펩티드 사슬의 단편 또는 전구체, 예컨대, 당 또는 포스페이트 잔기, 또는 그들 자신에 의한 단백질 분자 또는 당 잔기의 집합체를 커버하며, 단, 상기 분획은 실질적으로 IL-18BP와 유사한 활성을 갖는다.
본원에서 용어 "염"은 IL-18BP 분자 또는 이의 유사체의 카르복실기의 염 및 아미노기의 산부가염 양자를 의미한다. 카르복실기의 염은 당업계에 공지된 수단에 의해 형성될 수 있으며 무기염, 예를 들어, 나트륨, 칼슘, 암모늄, 제2철 또는 아연 염, 등, 및 형성된 것으로서 유기 염기와의 염, 예를 들어, 아민과의 염, 예컨대 트리에탄올아민, 아르기닌 또는 라이신, 피페리딘, 프로카인 등을 포함한다. 산부가염은 예를 들어, 염산 또는 황산과 같은 광산과의 염, 및 예를 들어, 아세트산 또는 옥살산과 같은 유기산과의 염을 포함한다. 물론, 이러한 염들은 IL-18BP의 생물학적 활성, 예컨대 IL-18에 결합하는 능력을 유지하여야 한다.
IL-18BP의 "아이소형"은 IL-18 또는 대안적인 스플라이싱에 의해 생성될 수 있는 이의 단편을 결합할 수 있는 단백질이다.
본원에서 사용된 바의 용어 "순환 치환 유도체(circularly permuted derivatives)"는 말단이 직접적으로 또는 링커를 통해 함께 연결되어 원형 분자를 생성하고, 그 후 원형 분자는 또 다른 위치에서 개방되어 원래 분자의 말단과는 상이한 말단을 갖는 새로운 선형 분자를 생성하는 선형분자를 의미한다. 순환 치환은 구조가 원형화한 후 개방되는 분자와 동등한 분자를 포함한다. 그러므로, 순환 치환 분자는 선형 분자로서 드 노보 합성될 수 있으며 원형화 및 개방 단계를 통해 진행되지 않는다. 순환 치환 유도체는 W095/27732에 기술되어 있다.
표현 "유리 IL-18의 비정상적 레벨"은 건강한 대조군 대상의 체액에서 검출되는 값과 비교하여 증가 또는 감소된 IL-18의 레벨을 의미한다. 특히, 이들 비정상적 레벨은 IL-18의 증가된 값을 의미한다. 특히, 상기 체액 내의 유리 IL-18의 비정상적 레벨은 5%, 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 100%, 또는 100% 초과만큼 건강한 대조군 대상의 체액 레벨을 초과한다. 본 발명의 특정 실시양태에서 기준 또는 대조군 값은 치료될 환자에게서 구한 유리 IL-18에 대한 정상적인 비 병리학적 기본 값이다.
표현 "유리 IL-18/IL-18BP의 비정상적 비율"은 건강한 대조군 대상의 체액에서 찾을 수 있는 값과 비교하여 IL-18BP에 대한 IL-18의 증가된 비율을 의미한다. 특히, 체액 내에서 IL-18BP에 대한 유리 IL-18의 상기 비정상적 비율은 1%, 2.5%, 5%, 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 100%, 또는 100% 초과만큼 건강한 대조군 대상의 체액에서의 비율을 초과한다. 본 발명의 특정 실시양태에서 기준 또는 대조군 값은 치료될 환자에게서 구한 유리 IL-18에 대한 정상적인 비 병리학적 기본 값이다.
표현 "유전자 침묵" 및 "전사 후 유전자 침묵"은 유전자 변형이 아닌 다른 메커니즘에 의한 유전자 발현의 억압적인 조절을 의미한다. 침묵은 전사 후 레벨에서 mRNA 중화에 의해 발생하며, 여기에서 mRNA 번역은 대부분의 경우 단백질인, 활성 유전자 생성물의 형성을 방지한다.
용어 "소인(predisposition)"은 특정 질환의 전개에 대하여 대상의 감수성이 증가하는 것을 의미한다. 본 발명의 경우 대상은 예를 들어 상승된 IL-18 레벨이 폐, 혈청, 객담, 기관지 폐포 세척 유체(BALF) 또는 순환에서 나타난다면 소인으로서 분류된다.
표현 "연기(smoke)", "연기 유도된(smoke-induced)", "궐련(cigarette) 연기" 또는 "궐련 연기 유도된"은 담배(tobacco) 연기를 의미한다.
"폐포 대식세포"는 폐의 폐포에서 발견되는 대식세포의 서브타입이다. 그들은 종종 호흡기 표면으로부터 포착한 외인성 물질의 과립을 함유한다. 이러한 흑색 과립은 장기간 미세 먼지에 노출, 미세 입자, 예컨대 흡연자 또는 장기간 도시 거주자인 사람들에게 특히 공통적으로 있다.
"Th2 사이토카인 반응"은 IL-4, IL-5, IL-6, IL-8, IL-10, IL-13, 및/또는 IL-17A, 특히 IL-4 및/또는 IL-8 및/또는 IL-17A에 의해 중재되며, 한편 "Th1 사이토카인 반응"은 인터페론-감마(IFN-γ), IL-2, 및 종양 괴사 인자-알파(TNF-α)에 의해 중재된다.
표현 "IL-18/IL-18BP 불균형"은 IL-18 및 IL-18BP의 상호 작용의 조절곤란을 의미하며, 이것은 최종적으로 상승된 레벨의 비결합된 IL-18을 초래한다.
"질환(disease)"은 동물이 항상성을 유지할 수 없으며, 질환이 완화되지 않는다면 동물의 건강이 계속 악화되는 동물의 건강상태이다. 반대로, 동물에서 "장애(disorder)"는 동물이 항상성을 유지할 수 있지만, 동물의 건강 상태는 장애가 존재하지 않은 것보다 덜 바람직한 건강 상태이다. 치료하지 않고 방치하면, 장애는 동물의 건강 상태의 추가적인 감소를 필수적으로 야기하지는 않는다.
질환 또는 장애 증상의 중증도, 대상에 의해 경험 되는 이러한 증상의 빈도, 또는 양자가 감소 된다면, 질환 또는 장애는 "경감"된다.
본원에서 사용된 바의 용어 "조절곤란된" 또는 "조절곤란(dysregulation)"은 결과적으로 유해한 생리적 후유증, 또는 유전자, 핵산, 단백질, 펩티드, 또는 기타 생물학적 분자의 비정상적인 발현을 초래할 수 있는 생물학적 과정에서의 손상을 의미한다. 유전자, 핵산, 단백질, 펩티드, 또는 기타 생물학적 분자의 발현이 조절곤란된 경우, 유전자, 핵산, 단백질, 펩티드, 또는 기타 생물학적 분자는 당업자에 의해 결정된 바의 유전자, 핵산, 단백질, 펩티드, 또는 기타 생물학적 분자에 대하여 고려되는 정상 범위 밖의 레벨로 발현, 진행, 또는 유지된다. 포유동물에서 유전자, 핵산, 단백질, 펩티드, 또는 기타 생물학적 분자의 조절곤란은 포유동물에서 유전자, 핵산, 단백질, 펩티드, 또는 기타 생물학적 분자의 레벨을 측정하고 이 포유동물에서 측정된 레벨과 유전자, 핵산, 단백질, 펩티드, 또는 기타 생물학적 분자의 조절곤란을 경험하지 않은 것으로 알려진 매칭 집단에서 측정된 레벨을 비교하여 결정될 수 있다. 대안적으로, 레벨은 상이한 시간에 동일한 개별 측정된 것과 비교될 수 있다.
본원에서 사용된 바의 용어 "심장 질환" 또는 "심혈관계 질환"은 심장 및 신체의 심근 또는 혈관에 영향을 주는 질환 및 장애를 포함한다. 심장 질환은 심부전으로 이어질 수 있으며 결국 산업 사회에서 사망의 가장 흔한 원인 중 하나가 되었다. IL-18/IL-18BP 불균형에 의해 유발된 심장 질환의 예는, 이것으로 제한되는 것은 아니지만 폐쇄성 심장 질환, 혈전 장애, 알코올성 심근증, 대동맥 판막 탈출증, 대동맥 판막 협착증, 부정맥, 심장성 쇼크, 선천성 심장 질환, 확장성 심근병증, 심장 마비, 심부전, 심장 종양, 심장 판막 폐동맥 협착증, 비후성 심근병증, 특발성 심근 병증, 허혈성 심장 질환, 허혈성 심근병증, 승모판막 폐쇄 부전증, 승모판막 탈출증, 출산기 심근병증, 안정형 협심증을 포함한다.
본원에서 사용된 바의 용어 "제2형 당뇨병"은 가장 일반적인 형태의 당뇨병이다. 이 질환 또는 장애는 신체가 효소 인슐린을 생성하지 않거나 또는 단지 불충분하게 생성하고, 또는 세포가 인슐린에 대한 그들의 반응에서 결함을 갖는 것을 특징으로 한다. 이러한 결함은 인슐린 수용체를 포함하는 것으로 생각된다.
본원에서 사용된 바의 "내인성"은 유기체, 세포, 조직 또는 시스템 내부에서 생성되거나 또는 이로부터의 물질을 의미한다. 용어 "외인성"은 유기체, 세포, 조직 또는 시스템의 밖에서 생성되거나 또는 이로부터 도입되는 물질을 의미한다.
본원에서 사용된 바의 용어 "발현"은 그의 프로모터로부터 유도된 특정 뉴클레오티드 서열의 전사 및/또는 번역으로서 정의된다. 본원에서 사용된 바의 용어 "발현 벡터"는 전사될 수 있는 적어도 일부의 유전자 생성물을 위한 핵산 서열 코딩을 함유하는 벡터를 의미한다. 일부 경우에, RNA 분자는 그 후 단백질, 폴리펩티드, 또는 펩티드로 번역된다. 다른 경우, 이들 서열은 예를 들어, 안티센스 분자, siRNA, 리보자임, 등의 생산에서 번역되지 않는다. 발현 벡터는 특정 숙주 유기체 내에서 작동가능 하게 연결된 코딩 서열의 전사 및 가능하게는 번역을 위해 필요한 핵산 서열을 의미하는 다양한 제어 서열을 함유할 수 있다. 전사 및 번역을 통제하는 제어 서열 이외에, 벡터 및 발현 벡터는 다른 기능을 또한 제공하는 핵산 서열을 함유할 수 있다. 본 발명에 따른 발현 벡터는 본원에서 개시된 바와 같은 질환 또는 장애의 치료를 위한 유전자 요법에 사용될 수 있다. 특히, 상기 발현 벡터는 바이러스성 벡터이다. 발현 벡터를 전달하는 비히클로서 사용될 수 있는 바이러스는 레트로바이러스, 아데노바이러스, 렌티바이러스, 단순 헤르페스 바이러스, 우두, 폭스 바이러스, 및 아데노 관련 바이러스의 군으로부터 선택된다.
본원에서 사용된 바의 용어 "억제(inhibit)", "중화(neutralize)" 또는 "차단(block)"은 측정 가능한 양으로 분자, 반응, 상호작용, 유전자 발현, mRNA, 및/또는 단백질의 발현, 안정성, 기능 또는 활성을 감소시키거나 또는 전체적으로 방지하는 것을 의미하는 동의어로 이해하여야 한다. 억제제, 예컨대, 길항제는 단백질, 유전자, 및 mRNA 안정성, 발현, 기능 및 활성을, 예컨대, 부분적으로 또는 전체적으로 차단 자극, 감소, 예방, 활성화 지연, 비활성화, 탈감작, 또는 조절 저하하도록 만드는 화합물이다.
용어 "안티센스 발현 벡터"는 메신저 RNA(mRNA) 가닥에 상보적이며 아미노산으로의 상기 mRNA의 번역을 억제하는 단일 가닥 또는 이중 가닥 RNA를 코딩하는 발현 벡터를 의미한다. 용어 안티센스 RNA는 asRNA, siRNA, shRNA, microRNA를 포함한다.
본원에서 사용된 바의 용어 "유전자 요법"은 본원에서 개시된 질환의 치료를 위한 약제학적 제제로서 DNA, 예컨대 발현 벡터의 사용을 의미한다.
도 1: 개별 패혈증 환자에서 총 및 유리 IL-18의 비교. Novick et al 2001에서 발췌. 승인 시 패혈증 환자의 혈청에서 유리 IL-18(폐쇄원)의 레벨은 IL-18 및 IL-18BPa의 1:1 복합체를 고려하여 총 IL-18(개방원) 및 IL-18BPa의 농도를 기준으로 계산되고 400pM의 KD로 계산되었다. 각각의 수직선은 개별 혈청 샘플 내에서 총 및 유리 IL-18을 링크한다. 상기 ELISA 분석법은『Taniguchi et al 1997 1』에 의해 개발된 항체의 쌍, 즉 일차로서 항체 125-2H/이차로서 포획 항체 및 159-12B/개발 항체로 수행된다.
도 2: 항체 125-2H 및 159-12B를 사용한 총 IL-18의 검출. 데이터는 두 항체가 총 IL-18을 정량화하는 것을 나타낸다.
도 3: IL-18BP 레벨의 함수로서 400pg/ml IL-18의 적정.
도 4: 1)공기 노출, 2) 담배 연기(TS), 3) p[I:C] 단독, 4) p[I:C] 4일에 담배 연기와 결합(악화 유발) 후 5일에 폐 기도 공간에서 마우스 IL-18 유도. 점선은 검출 하한치를 나타낸다. 통계 분석은 쌍을 이루지 않은 t-테스트를 사용하여 수행되었다.
도 5: 1) 공기 노출, 2) 담배 연기(TS), 3) p[I:C] 단독, 4) p[I:C] 4일에 담배 연기와 결합(악화 유발), 5-7) p[I:C] 1, 3 또는 10mg/kg으로 IL-18BP 치료 하에 4일에 담배 연기와 결합, 8) 10mg/kg으로 덱사메타손 치료 후 5일에 마우스 폐 기도 공간에서 총 세포 침윤의 억제. 통계 분석은 쌍을 이루지 않은 t-테스트를 사용하여 수행되었다.
도 6: 1) 공기 노출, 2) 담배 연기(TS), 3) p[I:C] 단독, 4) p[I:C] 4일에 담배 연기와 결합(악화 유발), 5) p[I:C] 10mg/kg으로 IL-18BP 치료 하에 4일에 담배 연기와 결합, 6) 10mg/kg으로 덱사메타손 치료 후 5일에 마우스 폐 기도 공간에서 총 세포 침윤의 억제. 통계 분석은 ANOVA 테스트(시닥의 사후 테스트(post-test Sidak's))를 사용하여 수행되었다.
도 7: IL-18BP에 의한 호중구 침윤의 억제. 1) 공기 노출, 2) 담배 연기(TS), 3) p[I:C] 단독, 4) p[I:C] 4일에 담배 연기와 결합(악화 유발), 5-7) p[I:C] 1, 3 또는 10mg/kg으로 IL-18BP 치료 하에 4일에 담배 연기와 결합, 8) 10mg/kg으로 덱사메타손 치료 후 5일에 마우스 폐 기도 공간에서 호중구 침윤을 모니터하였다. 통계 분석은 ANOVA 테스트(시닥의 사후 테스트)를 사용하여 수행되었다.
도 8: IL-18BP에 의한 호중구 침윤의 억제. 1) 공기 노출, 2) 담배 연기(TS), 3) p[I:C] 단독, 4) p[I:C] 4일에 담배 연기와 결합(악화 유발), 5) p[I:C] 10mg/kg으로 IL-18BP 치료 하에 4일에 담배 연기와 결합, 6) 10mg/kg으로 덱사메타손 치료 후 5일에 마우스 폐 기도 공간에서 호중구 침윤을 모니터하였다. 통계 분석은 ANOVA 테스트(시닥의 사후 테스트)를 사용하여 수행되었다.
도 9: IL-18BP에 의한 G-CSF 경로의 억제. 1) 공기 노출, 2) 담배 연기(TS), 3) p[I:C] 단독, 4) p[I:C] 4일에 담배 연기와 결합(악화 유발), 5-7) p[I:C] 1, 3 또는 10mg/kg으로 IL-18BP 치료 하에 4일에 담배 연기와 결합, 8) 10mg/kg으로 덱사메타손 치료 후 5일에 ELISA에 의한 마우스 폐 기도 공간에서 G-CSF(pg/ml)의 존재를 모니터하였다. 점선은 검출 하한치를 나타낸다. 통계 분석은 스튜던트 t-테스트를 사용하여 수행되었다.
도 10: IL-18BP에 의한 중량 손실의 완화. 1) 공기 노출, 2) 담배 연기(TS), 3) p[I:C] 단독, 4) p[I:C] 4일에 담배 연기와 결합(악화 유발), 5) p[I:C] 10mg/kg으로 IL-18BP 치료 하에 4일에 담배 연기와 결합, 7) 10mg/kg으로 덱사메타손 치료 후 5일에 마우스 중량 손실을 모니터하였다. 통계 분석은 ANOVA 테스트(시닥의 사후 테스트)를 사용하여 수행되었다.
도 11: 상이한 클론에 의해 제조된 항체의 가변 중쇄(VH) 및 가변 경쇄(VK)의 아미노산 서열을 나타낸다. 상보성 결정 영역 CDR 1, CDR 2 및 CDR 3은 IMGT 넘버링 시스템에 의해 결정된 바와 같이 각각의 서열을 밑줄에 의해 식별한다(Lefranc, M.-P. et al., Nucleic Acids Research, 27, 209-212(1999)). 왼쪽에서 오른쪽으로, 각각의 VH 및 VK 서열에서 첫 번째 밑줄 그은 서열은 CDR 1을 나타내고, 두 번째 밑줄 그은 서열은 CDR 2를 나타내며 세 번째 밑줄 그은 서열은 CDR 3를 나타낸다. 가변 도메인은 굵은 글씨로 강조된다.
서열
서열 번호 1: IL-18 에피토프 1: Tyr-Phe-Gly-Lys-Leu-Glu-Ser-Lys-Leu-Ser-Val-Ile-Arg-Asn
서열 번호 2: IL-18 에피토프 2: Phe-Ile-Ile-Ser-Met-Tyr-Lys-Asp-Ser-Gln-Pro-Arg-Gly-Met-Ala-Val-Thre-Ile-Ser-Val-Lys
서열 번호 3: IL-18 에피토프 3: Glu-Met-Asn-Pro-Pro-Asp-Asn-Ile-Lys-Asp-Thr-Lys-Ser-Asp-Ile-Ile-Phe
서열 번호 4: IL-18 에피토프 4: Tyr-Phe-Gly-Lys-Leu-Glu-Ser
서열 번호 5: IL-18 에피토프 5: Tyr-Lys-Asp-Ser-Gln-Pro-Arg-Gly-Met-Ala
서열 번호 6: IL-18 에피토프 6: Asp-Asn-Ile-Lys-Asp-Thr-Lys
서열 번호 7: IL-18 결합 단백질 (IL-18BP)
서열 번호 8: 13-아미노산 링커 서열: Glu-Phe-Gly-Ala-Gly-Leu-Val-Leu-Gly-Gly-Gln-Phe-Met
서열 번호: 9: 항체 107C6 VH 서열
서열 번호: 10: 항체 107C6 VK 서열
서열 번호: 11: 항체 108F8 VH 서열
서열 번호: 12: 항체 108F8 VK 서열
서열 번호: 13: 항체 109A6 VH 서열
서열 번호: 14: 항체 109A6 VK 서열
서열 번호: 15: 항체 111A6 VH 서열
서열 번호: 16: 항체 111A6 VK 서열 1
서열 번호: 17: 항체 111A6 VK 서열 2
서열 번호: 18: 항체 131B4 VH 서열
서열 번호: 19: 항체 131B4 VK 서열
서열 번호: 20: 항체 131E8 VH 서열 1
서열 번호: 21: 항체 131E8 VH 서열 2
서열 번호: 22: 항체 131E8 VK 서열
서열 번호: 23: 항체 132H4 VH 서열
서열 번호: 24: 항체 132H4 VK 서열
서열 번호: 25: 항체 133A6 VH 서열
서열 번호: 26: 항체 133A6 VK 서열
서열 번호: 27: 항체 107C6 VH 서열 CDR1: Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr Gly
서열 번호: 28: 항체 107C6 VH 서열 CDR2; Ile Asn Thr Tyr Ser Gly Val Pro
서열 번호: 29: 항체 107C6 VH 서열 CDR3: Ala Arg Glu Gly Tyr Ser Thr Thr Arg Ser Met Asp Tyr
서열 번호: 30: 항체 107C6 VK 서열 CDR1: Gln Ser Leu Leu Asp Ser Arg Thr Arg Lys Asn Tyr
서열 번호: 31: 항체 107C6 VK 서열 CDR2: Trp Ala Ser
서열 번호: 32: 항체 107C6 VK 서열 CDR3: Lys Gln Ser Tyr Asn Leu Arg Thr
서열 번호: 33: 항체 108F8 VH 서열 CDR1: Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr Gly
서열 번호: 34: 항체 108F8 VH 서열 CDR2: Ile Asn Thr Tyr Ser Gly Val Pro
서열 번호: 35: 항체 108F8 VH 서열 CDR3: Ala Arg Glu Gly Tyr Ser Thr Thr Arg Ser Met Asp Tyr
서열 번호: 36: 항체 108F8 VK 서열 CDR1: Gln Ser Leu Leu Asp Ser Arg Thr Arg Lys Asn Tyr
서열 번호: 37: 항체 108F8 VK 서열 CDR2: Trp Ala Ser
서열 번호: 38: 항체 108F8 VK 서열 CDR3: Lys Gln Ser Tyr Asn Leu Arg Thr
서열 번호: 39: 항체 109A6 VH 서열 CDR1: Gly Phe Lys Ile Lys Asp Thr Tyr
서열 번호: 40: 항체 109A6 VH 서열 CDR2: Ile Asp Pro Ala Asn Gly Asn Thr
서열 번호: 41: 항체 109A6 VH 서열 CDR3: Ala Gly Tyr Val Trp Phe Ala Tyr
서열 번호: 42: 항체 109A6 VK 서열 CDR1: Gln Arg Leu Val His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr
서열 번호: 43:: 항체 109A6 VK 서열 CDR2: Thr Val Ser
서열 번호: 44: 항체 109A6 VK 서열 CDR3: Ser Gln Ser Thr Leu Val Pro Trp Thr
서열 번호: 45: 항체 111A6 VH 서열 CDR1: Gly Phe Lys Ile Lys Asp Thr Tyr
서열 번호: 46 항체 111A6 VH 서열 CDR2: Ile Asp Pro Ala Asn Gly Asn Thr
서열 번호: 47: 항체 111A6 VH 서열 CDR3: Ala Gly Tyr Val Trp Phe Ala Tyr
서열 번호: 48: 항체 111A6 VK 서열 1 CDR1: Ser Ser Val Ser Ser Ser Tyr
서열 번호: 49: 항체 111A6 VK 서열 1 CDR2: Ser Thr Ser
서열 번호 50: 항체 111A6 VK 서열 1 CDR3: Gln Gln Tyr Ser Gly Tyr Pro Leu Thr
서열 번호: 51: 항체 111A6 VK 서열 2 CDR1: Gln Arg Leu Val His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr
서열 번호: 52: 항체 111A6 VK 서열 2 CDR2: Thr Val Ser
서열 번호: 53: 항체 111A6 VK 서열 2 CDR3: Ser Gln Ser Thr Leu Val Pro Trp Thr
서열 번호: 54: 항체 131B4 VH 서열 CDR1: Gly Phe Lys Ile Lys Asp Thr Tyr
서열 번호: 55: 항체 131B4 VH 서열 CDR2: Ile Asp Pro Ala Asn Gly Asn Thr
서열 번호: 56: 항체 131B4 VH 서열 CDR3: Ala Gly Tyr Val Trp Phe Ala Tyr
서열 번호: 57: 항체 131B4 VK 서열 CDR1: Gln Ser Leu Val His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr
서열 번호: 58: 항체 131B4 VK 서열 CDR2: Lys Val Ser
서열 번호: 59: 항체 131B4 VK 서열 CDR3: Ser Gln Ser Ser Leu Val Pro Trp Thr
서열 번호: 60: 항체 131E8 VH 서열 1 CDR1: Gly Phe Ser Leu Pro Asn Tyr Gly
서열 번호: 61: 항체 131E8 VH 서열 1 CDR2: Ile Trp Ser Gly Gly Ser Thr
서열 번호: 62: 항체 131E8 VH 서열 1 CDR3: Ala Arg Asn Phe Tyr Ser Lys Tyr Asp Tyr Ala Met Asp Tyr
서열 번호: 63: 항체 131E8 VH 서열 2 CDR1: Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr Trp
서열 번호: 64: 항체 131E8 VH 서열 2 CDR2: Ile Asn Pro Asn Ser Gly Ser Thr
서열 번호: 65: 항체 131E8 VH 서열 2 CDR3: Ala Arg Leu Gly Asp Tyr
서열 번호: 66: 항체 131E8 VK 서열 CDR1: Ser Ser Val Ser Tyr
서열 번호: 67: 항체 131E8 VK 서열 CDR2: Asp Thr Ser
서열 번호: 68: 항체 131E8 VK 서열 CDR3: Phe Gln Gly Ser Gly Tyr Pro Leu Thr
서열 번호: 69: 항체 132H4 VH 서열 CDR1: Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr Ala
서열 번호: 70: 항체 132H4 VH 서열 CDR2: Ile Ser Ser Gly Gly Ala Asn Ile
서열 번호: 71: 항체 132H4 VH 서열 CDR3: Ala Arg Gly Asp Tyr Phe Asn His Phe Trp Phe Ala Tyr
서열 번호: 72: 항체 132H4 VK 서열 CDR1: Gln Ser Ile Val His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr
서열 번호: 73: 항체 132H4 VK 서열 CDR2: Lys Val Ser
서열 번호: 74: 항체 132H4 VK 서열 CDR3: Phe Gln Gly Ser His Val Pro Trp Thr
서열 번호: 75: 항체 133A6 VH 서열 CDR1: Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr Ala
서열 번호: 76: 항체 133A6 VH 서열 CDR2: Ile Ser Ser Gly Gly Gly Asn Ile
서열 번호: 77: 항체 133A6 VH 서열 CDR3: Ala Arg Gly Asp Tyr Ser Asn Tyr Phe Trp Phe Ala Tyr
서열 번호: 78: 항체 133A6 VK 서열 CDR1: Gln Ser Ile Val His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr
서열 번호: 79: 항체 133A6 VK 서열 CDR2: Lys Val Ser
서열 번호: 80: 항체 133A6 VK 서열 CDR3: Phe Gln Gly Ser His Val Pro Trp Thr
서열 번호: 81: 항체 107C6 VH DNA 서열
서열 번호: 82: 항체 107C6 VH 서열
서열 번호: 83: 항체 107C6 VK DNA 서열
서열 번호: 84: 항체 107C6 VK 서열
서열 번호: 85: 항체 108F8 VH 서열
서열 번호: 86: 항체 108F8 VH 서열
서열 번호: 87: 항체 108F8 VK DNA 서열
서열 번호: 88: 항체 108F8 VK 서열
서열 번호: 89: 항체 109A6 VH DNA 서열
서열 번호: 90: 항체 109A6 VH 서열
서열 번호: 91: 항체 109A6 VK DNA 서열
서열 번호: 92: 항체 109A6 VK 서열
서열 번호: 93: 항체 111A6 VH DNA 서열
서열 번호: 94: 항체 111A6 VH 서열
서열 번호: 95: 항체 111A6 VK DNA 서열 1
서열 번호: 96: 항체 111A6 VK 서열 1
서열 번호: 97: 항체 111A6 VK DNA 서열 2
서열 번호: 98: 항체 111A6 VK 서열 2
서열 번호: 99: 항체 131B4 VH DNA 서열 1
서열 번호: 100: 항체 131B4 VH 서열 1
서열 번호: 101: 항체 131B4 VH DNA 서열 2
서열 번호: 102: 항체 131B4 VH 서열 2
서열 번호: 103: 항체 131B4 VH 가변 도메인 서열 2
서열 번호: 104: 항체 131B4 VH 서열 2 CDR1
서열 번호: 105: 항체 131B4 VH 서열 2 CDR2
서열 번호: 106: 항체 131B4 VH 서열 2 CDR3
서열 번호: 107: 항체 131B4 VH DNA 서열 3
서열 번호: 108: 항체 131B4 VH 서열 3
서열 번호: 109: 항체 131B4 VH 가변 도메인 서열 3
서열 번호: 110: 항체 131B4 VH 서열 3 CDR1
서열 번호: 111: 항체 131B4 VH 서열 3 CDR2
서열 번호: 112: 항체 131B4 VH 서열 3 CDR3
서열 번호: 113: 항체 131B4 VK DNA 서열
서열 번호: 114: 항체 131B4 VK 서열
서열 번호: 115: 항체 131E8 VH DNA 서열 1
서열 번호: 116: 항체 131E8 VH 서열 1
서열 번호: 117: 항체 131E8 VH DNA 서열 2
서열 번호: 118: 항체 131E8 VH 서열 2
서열 번호: 119: 항체 131E8 VH DNA 서열 3
서열 번호: 120: 항체 131E8 VH 서열 3
서열 번호: 121: 항체 131E8 VH 가변 도메인 서열 3
서열 번호: 122: 항체 131E8 VH 서열 3 CDR1
서열 번호: 123: 항체 131E8 VH 서열 3 CDR2
서열 번호: 124: 항체 131E8 VH 서열 3 CDR3
서열 번호: 125: 항체 131E8 VK DNA 서열
서열 번호: 126: 항체 131E8 VK 서열
서열 번호: 127: 항체 131H1 VH DNA 서열
서열 번호: 128: 항체 131H1 VH 서열
서열 번호: 129: 항체 131H1 VH 가변 도메인 서열
서열 번호: 130: 항체 131H1 VH 서열 CDR1
서열 번호: 131: 항체 131H1 VH 서열 CDR2
서열 번호: 132: 항체 131H1 VH 서열 CDR3
서열 번호: 133: 항체 131H1 VK DNA 서열 1
서열 번호: 134: 항체 131H1 VK 서열 1
서열 번호: 135: 항체 131H1 VK 가변 도메인 서열 1
서열 번호: 136: 항체 131H1 VK 서열 1 CDR1
서열 번호: 137: 항체 131H1 VK 서열 1 CDR2
서열 번호: 138: 항체 131H1 VK 서열 1 CDR3
서열 번호: 139: 항체 131H1 VK DNA 서열 2
서열 번호: 140: 항체 131H1 VK 서열 2
서열 번호: 141: 항체 131H1 VK 가변 도메인 서열 2
서열 번호: 142: 항체 131H1 VK 서열 2 CDR1
서열 번호: 143: 항체 131H1 VK 서열 2 CDR2
서열 번호: 144: 항체 131H1 VK 서열 2 CDR3
서열 번호: 145: 항체 132H4 VH DNA 서열
서열 번호: 146: 항체 132H4 VH 서열
서열 번호: 147: 항체 132H4 VK DNA 서열
서열 번호: 148: 항체 132H4 VK 서열
서열 번호: 149: 항체 133A6 VH DNA 서열
서열 번호: 150: 항체 133A6 VH 서열
서열 번호: 151: 항체 133A6 VK DNA 서열
서열 번호: 152: 항체 133A6 VK 서열
실시예
A. 복합체 IL-18/IL-18BP에 대한 유리 IL-18의 검출
1. 환자에게서 IL-18의 일반적인 검출
환자에게서 인간 IL-18 정량화는 총 IL-18(유리 형태 및 IL-18BP 복합체 양자)를 검출하는 ELISA 분석법으로 수행된다. ELISA는 시판의 항체를 포함한다(하기 표 8 참조). 대부분의 일반적인 ELISA 분석법은 『Taniguchi et al 1997』에 의해 개발되고 다른 공급 업체가 판매하는 안티-IL-18 항체의 쌍, 즉, 일차로서 단일클론 마우스 항체 125-2H/이차로서 포획 항체 및 단일클론 쥐 159-12B/개발 항체로 수행된다.
[표 8]
Figure pat00001
2. 유리 IL-18 레벨의 추정
지금까지, 유리 IL-18의 레벨을 측정하는 것을 보고한 것은 없다. 유리 IL-18의 추정은 Novick et al 2004(하기 참조)에 의해 기술된 계산을 사용한 외삽법에 의해 이루어진다. 데이터는 인간의 IL-18 및 IL-18BP의 레벨을 비교한다. 이들 연구에서, 연구진은 상업적 단일클론 안티-IL-18 항체 125-2H 및 159-12B의 쌍을 사용하였으며, 여기에서 항체 125-2H는 포획을 위해 사용되고 IL-18/IL-18BP 복합체에 결합하는 것으로 알려져 있다(Argiradi et al 2009). 환자 혈청에서 유리 IL-18을 계산하기 위하여, 이들은 IL-18 항체의 결합이 가역적임을 가정하는 질량 작용의 법칙을 적용하였다. 계산은 하기와 같다:
KD = 0.4nM =([IL-18] x [IL-18BP])/[IL-18-IL18BP]
또는 nM으로 [IL-18] =(0.4 x [IL-18-IL18BP])/[IL-18BP]
식 중:
IL-18-IL-18BP는 복합체이다
『Kim et al 2000』에 의해 계산된 해리 상수, KD=0.4nM
복합체 IL-18-IL-18BP에서 화학양론 1:1
IL-18의 농도는 전기 화학 발광에 의해 결정된다.
IL-18BP의 농도는 ELISA에 의해 결정된다.
저자가 IL-18BP에 대한 IL-18의 비율을 반영하지 않은 환자 간의 총 IL-18에 대한 유리 IL-18의 큰 변동을 알아내었다는 것을 유의하는 것이 중요하다. 흥미롭게도, 이 IL18/IL-18BP 비율은 인용된 간행물에 보고되어 있지 않다. 더욱이 안티-IL18 항체는 유리 IL-18과 복합체 형태 IL-18/IL-18BP 간에 구분할 수 없다. 마지막으로, 『Novick et al 2001』에 의해 기술된 바와 같이, 안티-IL-18BP 항체는 IL-18BP 유리 형태를 검출하지 않지만 총 IL-18BP는 검출하는데 그 이유는 이들이 IL-18BP 및 IL-18, 각기 단일클론 항체 582.10 및 657.27 간의 상호작용을 차단하는 것에 관하여 보고하지 않았기 때문이다. 결과적으로, IL-18BP의 농도를 사용한 유리 IL-18의 계산은 정확도가 부족하다. 심지어 권장하지만, 데이터 변동은 유리 IL-18 검출이 IL-18BP에 결합하는 IL-18의 영역을 특이적으로 타깃으로 하는 항체를 결합하는 더 적절한 분석법으로 개선될 수 있음을 나타낸다.
3. 일반적으로 사용된 상업적 항체가 유리 IL-18을 검출하지 않는다는 확인
11개의 시판 안티-IL-18 단일클론 항체는 IL-18BP와 IL-18의 상호작용을 방지하는 이들의 능력에 대하여 시험되었다. 하기 데이터는 이러한 경우가 아님을 나타내며 시험된 항체의 어느 것도 IL-18 및 IL-18BP의 상호작용의 부위에 결합하지 않음을 나타낸다. 따라서, 인간 샘플에서 유리 IL-18의 검출은 예를 들어 IL-18 결합 부위/IL-18BP에 대한 에피토프를 타깃으로 하는 특정 설계 및 접근이 필요하다.
일반적으로 사용된 125-2H 및 159-12B 항체는 포획 및 개발 항체 양자에 대하여 시험되었다(도 2 참조). 데이터는 양자의 항체가 IL-18BP에 대한 IL-18 에피토프를 인지하지 않으며 결과적으로 단지 총 IL-18(IL-18BP에 대한 유리 및 복합체 형태 양자)의 정량화만을 제공함을 나타낸다.
항체 125-2H 및 159-12G와 평행으로, 9개의 다른 상업적 단일클론 항체를 상기와 동일한 조건에서 유리 IL-18을 검출하는 이들의 잠재력에 대하여 시험하였다. 상술한 바와 같이, 이러한 항체는 생물학적 샘플 내에서 유리 IL-18을 검출하기 위해 도움이 될 것이다. 시험된 상업적 항체의 목록은 하기 표9에 제공된다.
[표 9]
Figure pat00002
수집된 데이터는 시판 항체 중 어느 것도 IL-18BP와의 그의 복합체로부터 유리 IL-18을 구분할 수 없음을 나타내었다.
4. 유리 IL-18을 검출하기 위한 ELISA 셋업
4.1. IL-18BP를 사용한 유리 IL-18의 포획
마이크로플레이트 웰은 적당한 부피의 재조합 인간 IL-18BP를 함유하는 인산염 완충염 용액으로 코팅하였다. 플레이트는 4℃에서 일정 기간 동안 배양하고 그 후 소 혈청 알부민 또는 기타 적당한 블록킹제를 함유하는 블록킹 완충제로 안정화 시켰다. 반응이 완료되면, 마이크로플레이트는 밀봉하고 유리 IL-18의 검출을 위해 사용될 때까지 4℃에 저장한다. 마이크로플레이트는 또한 실온으로 저장을 허용하는 안정화 용액에서 또한 건조할 수 있으며, 그 후 분석법을 위해 필요할 때 수화로 환원시킨다.
한 예로서, 100μl의 최종 반응 부피에 대하여, 첫 번째 80μl의 비오틴/항체 컨쥬게이트를 분배한다. 유리 IL-18을 함유하는 샘플 또는 생물학적 유체는 IL-18BP 코팅된 마이크로플레이트로 시험된다. 그 후, 생물학적 유체 또는 표준을 함유하는 20μl 샘플 부피는 각각의 마이크로플레이트 웰에 분배하였다. 비희석 또는 희석된 생물학적 유체는 이것으로 제한되는 것은 아니지만 혈청, 소변, 눈물, 타액, 담즙, 땀, 날숨 또는 호기, 객담, 기관지 폐포 액, 피지, 세포, 선, 점막 또는 조직 분비, 생검, 균질 조직일 수 있다. 유리 IL-18 표준 농도는 4.2pg/ml 내지 3000pg/ml 범위이다. 표준 및 농도는 시판 재조합 인간 IL-18로부터 제조되었다. 플레이트는 밀봉하고 그 후 유리 IL-18 포획을 위해 부드러운 진탕 하에 배양하였다. 적당한 기간이 샘플 및 시약의 안정성에 영향을 주지 않는 실온, 37℃ 또는 기타 온도에서 반응을 위해 수분 내지 수 시간 범위로 허용된다. 마이크로플레이트 웰은 적당한 완충제로 광범위하게 세척하고, 그 후 100μl 완충제 전개 혼합물은 각각의 웰에 첨가한다. 전개 혼합물은 퍼옥시다아제 또는 알칼리 포스파타아제와 같은 스트렙타비딘-컨쥬게이트된 효소를 함유한다. 마이크로플레이트 웰을 밀봉하고 반응은 샘플 및 시약의 안정성에 영향을 주지 않는 실온, 37℃ 또는 기타 온도에서 수분 내지 수 시간 범위의 적당한 기간의 시간 동안 허용된다. 결과의 반응물은 그 후 생성된 시약의 흡광도 또는 형광을 위한 적당한 나노미터 파장에서 마이크로플레이트 리더로 모니터된다.
4.2. 안티-IL-18 항체를 사용한 유리 IL-18의 포획
마이크로플레이트 웰은 적당한 부피의 항체 X를 함유하는 인산염 완충염 용액으로로 코팅하였다. 플레이트는 4℃에서 일정 기간 동안 배양하고 그 후 소 혈청 알부민 또는 기타 적당한 블록킹제를 함유하는 블록킹 완충제로 안정화시켰다. 반응이 완료되면, 마이크로플레이트는 밀봉하고 유리 IL-18의 검출을 위해 사용될 때까지 4℃에 저장한다. 마이크로플레이트는 또한 실온으로 저장을 허용하는 안정화 용액에서 또한 건조할 수 있으며, 그 후 분석법을 위해 필요할 때 수화로 환원시킨다.
한 예로서, 100μl의 최종 반응 부피에 대하여, 첫 번째 80μl의 비오틴/항체 컨쥬게이트를 분배한다. 유리 IL-18을 함유하는 샘플 또는 생물학적 유체는 IL-18BP 코팅된 마이크로플레이트로 시험된다. 그 후, 생물학적 유체 또는 표준을 함유하는 20μl 샘플 부피는 각각의 마이크로플레이트 웰에 분배하였다. 비희석 또는 희석된 생물학적 유체는 이것으로 제한되는 것은 아니지만 혈청, 소변, 눈물, 타액, 담즙, 땀, 날숨 또는 호기, 객담, 기관지 폐포 액, 피지, 세포, 선, 점막 또는 조직 분비, 생검, 균질 조직일 수 있다. 유리 IL-18 표준 농도는 4.2pg/ml 내지 3000pg/ml 범위이다. 표준 및 농도는 시판 재조합 인간 IL-18로부터 제조되었다. 플레이트는 밀봉하고 그 후 유리 IL-18 포획을 위해 부드러운 진탕 하에 배양하였다. 적당한 기간이 샘플 및 시약의 안정성에 영향을 주지 않는 실온, 37℃ 또는 기타 온도에서 반응을 위해 수분 내지 수 시간 범위로 허용된다. 마이크로플레이트 웰은 적당한 완충제로 광범위하게 세척하고, 그 후, 100μl 완충제 전개 혼합물은 각각의 웰에 첨가한다. 전개 혼합물은 퍼옥시다아제 또는 알칼리 포스파타아제와 같은 스트렙타비딘-컨쥬게이트된 효소를 함유한다. 마이크로플레이트 웰을 밀봉하고 반응은 샘플 및 시약의 안정성에 영향을 주지 않는 실온, 37℃ 또는 기타 온도에서 수분 내지 수 시간 범위의 적당한 기간의 시간 동안 허용된다. 결과의 반응물은 그 후 흡광도 또는 형광을 위한 적당한 나노미터 파장에서 마이크로플레이트 리더로 모니터된다.
4.3. IL-18BP 레벨의 함수로서 유리 IL-18의 적정
일정 양의 재조합 IL-18은 유리 IL-18이 더 이상 검출되지 않을 때 이해하기 위하여 상이하고 잘 정의된 양의 IL-18BP의 함수로서 적정하였다. 5% BSA가 보충된 400pg/mL IL-18의 PBS 용액은 0 내지 10'000pg/mL 범위의 IL-18BP의 정의된 양으로 스파이크시켰다. 몰비는 각각의 IL-18 및 IL-18BP의 분자량에 따라 계산하였다. 유리 IL-18 검출은 상술한 바와 같은 IL-18에 대한 IL-18BP를 사용하여 ELISA로 수행되었다. 도 1에 나타낸 수집된 데이터는 400pg/mL IL-18 검출이 IL-18BP 농도가 ~15배 더 높은 IL-18BP의 몰비 IL-18BP/IL-18을 나타내는 6000pg/mL 이상일 때 거의 백그라운드 검출 레벨임을 나타낸다. 반대로, 몰비가 15 미만일 때, 유리 IL-18은 용이하게 검출 가능하다.
4.4. 인간 IL-18 및 IL-18BP 간의 해리 상수(K D )의 개정된 계산
4.4.1 적정에 의한 K D 계산
400pM의 KD는 비아코어 측정을 근거로 문헌에서 보고되었다(Kim et al 2000 8). 그러나, 상기 결과로 인하여, KD는 상기 ELISA 셋업으로 재검토하였다. 10pM IL-18의 적정은 a) 내인성 IL-18BP에서 감손된 건강한 지원자 혈청 또는 b) 5% BSA가 보충된 PBS로 IL-18BP(60pM - 3nM)의 증가하는 농도로 수행되었다. 총 IL-18 및 총 IL-18BP에 대한 시판 분석법 이외에 유리 IL-18 ELISA는 고체상 비아코어 방법으로부터의 데이터보다 체액 내에서 그의 결합 단백질로의 IL-18의 친화성이 더 우수함을 더 잘 반영하는 용액 내에서의 KD의 결정을 허용한다. 결과의 예는 표 10에 나타낸다.
[표 10]
Figure pat00003
KD는 하기식을 기준으로 계산된다:
KD=[유리 IL-18]x[유리 IL-18BP]/[IL-18/IL-18BP 복합체]
[유리 IL-18BP]=[총 IL-18BP]-[유리 IL-18]
[IL-18/IL-18BP 복합체]=[총 IL-18]-[유리 IL-18]
결과: KD = 50pM(혈청 희석제) ; 35pM(5% BSA 희석제)
적정 결과는 각기 50pM의 혈청 희석제 및 35pM의 5% BSA가 보충된 PBS의 KD를 나타낸다. 인간 IL-18BP 및 IL-18 간의 KD의 이전의 추정과는 달리, 새롭게 계산된 KD는 『Kim et al 2000』에 의해 보고된 400pM의 KD를 근거로 유리 IL-18의 이전의 추정은 정확하지 않음을 나타낸다.
4.4.2 비아코어에 의한 K D 평가
적정에 의해 수득된 상기 KD 결과에 따라, 비아코어 칩으로의 IL-18BP의 결합 및 그 후 IL-18에 대한 그의 친화성을 시험하는 것으로 구성된 더 간단한 비아코어 셋업으로 IL-18로의 IL-18BP의 결합 친화성을 시험하였다. 방법 셋업은 단일클론 항체로 비아코어 칩에 IL-18을 결합시키고 그 후 IL-18BP에 대한 복합체 항체-IL-18의 친화성을 시험한 『Kim et al 2000 8』과는 반대이다. 중요한 것은, 새로운 비아코어 셋업은 상기 적정 결과에 완전히 일치되는 데이터, 즉 KD는 20 내지 30pM 범위의 KD가 수집된다. 데이터는 하기 표 11에 나타낸다.
[표 11]
Figure pat00004
4.5. 혈청 또는 IL-18BP를 함유하는 5% BSA 용액 내의 스파이크된 IL-18의 적정
인간 혈청은 각기 ng/mL 및 pg/ml 레벨로 IL-18BP에 대한 복합체화된 IL-18뿐만 아니라 내인성의 유의한 레벨을 함유한다. 양자는 시판 항체로 검출 가능하다. 그러나, 유리 IL-18을 검출하는 유용한 시판 분석법은 없다. 유리 IL-18의 검출을 위한 상기 ELISA 셋업을 검증하기 위하여, 인간 혈청에서 재조합 인간 IL-18을 스파이크 하여 검출 레벨을 찾았다. 이를 위해, IL-18의 나노그램은 내인성 35ng/mL IL-18BP 또는 5% BSA 및 35ng/mL IL-18BP가 공급된 PBS 용액을 함유하는 혈청에서 스파이크되었다. 결과의 유리 IL-18은 상기 기술된 ELISA 절차로 모니터하였다. 결과는 하기 표 12에 나타낸다.
[표 12]
Figure pat00005
5. 환자에서 유리 IL-18의 검출
5.1. 상이한 염증성 질환을 앓는 환자에서 혈청 및 활액 유체 내의 유리 IL-18의 검출
상이한 염증성 질환을 앓는 환자로부터 나온 샘플은 상기 기술된 ELISA로 시험하였다. 이를 위해, 류마티스 관절염, 건선, 전신 홍반성 루프스 및 집 중 치료부와 같은 더 높은 레벨의 IL-18을 갖는 것으로 보고된 상이한 질환 및 스트레스 상태를 선택하였다. 우리가 아는 바로는, 유리 IL-18은 이들 환자에서 식별될 수 없고, 단지 질량 작용의 법칙으로 계산되고 『Kim et al 2000』에 의해 보고된 400pM의 KD만으로 식별된다. 상기 데이터에 따라, 유리 IL-18의 가능한 레벨은 과학 간행물에 보고된 바와 같이 1000pg/mL 미만이거나 또는 근접한 혈청 내에서의 범위인 총 IL-18 레벨로 인하여 검출하는 것이 어려울 것으로 예상된다. 더욱이, 우리는 우리의 ELISA 셋업의 성능을 검증하기 위해 건강한 나이의 매칭되는 대조군으로부터의 샘플을 시험하였다. 기대되는 바와 같이 및 보고된 질량 작용의 법칙에서 추정되는 것과는 반대로, 유리 IL-18의 레벨은 혈청 및 활액 유체 내에서 검출할 수 없었지만 총 IL-18 및 IL-18BP는 검출되었다(표 13 참조).
[표 13]
Figure pat00006
- : 검출 가능하지 않은, 백그라운드 신호에 필적하는 레벨
**: 표준 곡선 내에 없는 높은 IL-18BP 레벨
5.2. 성인 발명 스틸 병을 앓는 환자로부터 혈청 내의 유리 IL-18의 검출
결과에 따라 및 합리적으로 낮은 레벨의 총 IL-18을 갖는 상기 징후와는 대조적으로, 우리는 혈청 내에서 총 IL-18의 상승된 레벨에 대하여 공지된(Kawashima et al 2001 및 Chen et al 2004) 성인 발병 스틸 병 환자 샘플을 시험하였다. 『Kawashima et al 2001』 및 다른 곳에서 기술된 바와 같이, 상승된 총 IL-18 혈청 레벨은 성인 발병 스틸 병 활성 예컨대 a) 발열, 관절통, 관절염, 연골 손상, b) 높은 레벨의 페리틴 및 c) 간 효소(LDH)와 상관관계가 있다. 상기 ELISA 셋업 덕분에, 우리는 성인 발병 스틸병 환자에서 유리 IL-18 레벨을 처음으로 보고한다(표 14 참조). 시험된 다른 징후에 대하여, 계산된 유리 IL-18 레벨은 검출된 유리 IL-18 레벨에 상응하지 않는다. 수집된 데이터는 70% 이상의 환자가 유리 IL-18에 양성 이었음을 나타낸다.
[표 14]
Figure pat00007
* : 백그라운드 신호에 필적하는 레벨
** : 검출 하한에 필적하는 레벨
- : 검출 가능하지 않은, 백그라운드 신호에 필적하는 레벨
6. 결론
두 간행물에서의 데이터 및 상기 실험 셋업은 상업용 단일클론 항체가 총 IL-18는 검출하지만 유리 IL-18은 검출하지 못함을 나타낸다. 또한, IL-18을 정량화하기 위하여 가장 일반적으로 사용되는 항체 즉 125-2H 및 159-12B는, 총 IL-18을 검출할 뿐만 아니라 확인한다.
질량 작용의 법칙을 사용한 유리 IL-18의 추정은 흥미로운 접근방식이다. 그럼에도 불구하고, 얻어진 큰 오차 막대는 임상 모니터링에서 그의 사용을 지원하지 않는다. 또한, 안티-IL-18BP 항체는 총 IL-18BP를 검출하지만 유리 형태는 검출하지 않는다. 결과적으로, IL-18BP의 농도를 사용한 유리 IL-18의 계산은 정확성이 부족하다.
IL-18BP로 IL-18 결합 부위를 타깃화 함에 의한 유리 IL-18 정량화에 대한 제안된 접근 방식은 더 적절한 것으로 보이며 질량 작용의 법칙을 사용한 외삽 정량화보다 더 정확함이 처음으로 입증되었다. 게다가, IL-18BP의 친화성은 혈청에서 50pM 근처 및 새로운 비아코어 셋업으로 20-30pM 범위의 KD를 갖는 『Kim et al 2000』에 의해 보고된 것보다 더 높다.
마지막으로, 성인 발병 스틸 병을 앓는 환자는 ELISA 접근을 사용하여 처음으로 IL-18에 양성으로 진단되었으며 셋 업은 본 발명에서 제시된다. 데이터는 총 IL-18의 높은 레벨을 보고하는 『Kawashima et al 2001 및 Chen et al 2004』에 의해 보고된 바와 같이 성인 발병 스틸 병에 대한 총 IL-18에 대한 이전의 연구결과를 지지한다. 처음으로, 본 출원에서 나타낸 새로운 ELISA 접근 방식은 성인 발병 스틸 병 환자에서 복합체화되지 않은 유리 및 생리 활성 전 염증성 IL-18의 존재를 입증하였다.
B. COPD 악화 마우스 모델에서 IL-18BP 효능
연구의 목적은 C57BL/6J 마우스에서 담배 연기 유발된 폐 염증의 폴리노시닉:폴리시티딜 산 유발된 악화에 대하여 피하 경로에 의해 3 용량 레벨로 투여된, IL-18BP의 효과를 결정하는 것이었다. 경구로 투약된 높은 레벨의 덱사메타손은 기준 제제로서 연구에 포함되었다.
1. 일반 방법론: 4일 악화/ 담배 연기 마우스 모델
마우스는 비히클(PBS) 또는 IL-18BP를 받았다. IL-18BP는 1일에서 4일까지 초기 담배 연기 노출 2시간 전에 각기 1, 3 또는 10mg/kg으로 3그룹의 동물에 피하로 제공하였다. 마우스는 각기 하루 2회 노출 1시간 전에 비히클 또는 덱사메타손(10mg/kg)을 경구로 받았다. 4일에 초기 공기 또는 담배 연기 노출 2시간 전 비히클 또는 폴리노시닉:폴리시티딜 산(2mg/kg)을 비강 내 투여로 받은 마우스는 폐의 염증 악화가 유발되었다. 담배 연기 노출은 하기와 같이 아침 및 오후 동안 수행되었다: 15분 동안 1일, 25분 동안 2일, 30분 동안 3일 및 30분 동안 4일.
동물 그룹 및 이들 각각의 치료 섭생은 표 1에 요약한다.
[표 15]
Figure pat00008
TS: 담배 연기;
Veh: 비히클;
Dex: 덱사메타손;
p[I:C]: 폴리노시닉:폴리시티딜 산
상기 치료에 따라, 동물은 5일에 마지막으로 마취하였다. 그 후, 혈액 샘플은 쇄골하 동맥(혈장)을 통해 취하고 동물은 추가의 세포 및 사이토카인/매개자 분석을 위해 3 X 0.4ml PBS로 기관지폐포 세척되었다. 기관지폐포 세척 상청액은 사이토카인/매개자 분석을 위해 -80℃에서 저장하였다. BALF로부터 회수된 세포는 시스멕스(Sysmex) 세포 카운터를 사용하여 계산하였다. 마지막으로, 수집된 데이터는 스튜던트 t-테스트 및 ANOVA(정규성 테스트를 통과한 데이터의 경우에 시닥의 테스트를 사용하였거나 또는 데이터가 정규성 테스트를 통과하지 않는다면 크러스칼 왈리스(Kruskal Wallis) 테스트를 사용하였다)에 의해 통계적으로 분석되었다.
2. 4일 악화/ 담배 연기 마우스 모델에서 IL-18 경로 활성화의 확인
마우스 IL-18은 IL-18 경로 활성화를 위한 마우스 모델을 확인하기 위하여 상업적 ELISA를 사용하여 BAL에서 시험하였다. 수집된 데이터는 폐 기도 공간에서 IL-18의 명확한 유발을 나타낸다(도 5 참조). IL-18은 대조(오로지 공기)에서 검출할 수 없다. 흥미롭게도, IL-18은 연기 노출하에서 발현되지만 폴리[I:C] 단독하에서 유의하게 유발되지 않는다(검출 하한 아래). 반면 예상대로, 연기 및 폴리[I:C]의 조합은 연기 또는 폴리[I:C] 단독보다 BAL에서 훨씬 더 높은 레벨로 IL-18이 상당히 상승하였다.
3. 악화/담배 연기 마우스 모델에서 IL-18BP에 의한 악화된 염증의 완화
3.1. IL-18BP에 의한 폐 기도 공간에서 총 세포 침윤 및 악화된 염증의 억제
IL-18BP로 치료된 마우스는 악화된 염증의 유발에 이서 폐에서 총 세포 침윤의 유의한 완화를 갖는다. 각기 3 및 10mg/kg의 용량은 양성 대조 덱사메타손과 비교하여 통계적으로 가치있는 효능을 나타내었다(도 5 참조). 덱사메타손은 마우스 모델에서 3mg/kg 용량에는 효능의 신호가 없었으며(데이터는 나타내지 않음), 10mg/kg의 고 용량 덱사메타손은 대식세포, 호산구 및 림프구와 같은 특정 세포 타입에서 잠재적으로 아포토시스를 유발함을 나타낸다는 것을(데이터는 나타내지 않음) 유의하는 것이 중요하다. 유사한 관측은 2.5mg/kg 용량으로 세포 침윤 억제의 힌트가 없는 것으로 관측된 마우스 모델에서 로플루미라스트 [3-(시클로프로필메톡시)-N-(3,5-디클로로피리딘-4-일)-4-(디플루오로메톡시)벤즈아미드]로 이루어졌다(데이터는 나타내지 않음). 도 6은 현재 마우스 모델에서 악화된 염증 억제에서 10mg/kg으로 IL-18BP의 명백하고 통계적으로 관련성이 있는 효능을 나타낸다.
3.2. IL-18BP에 의한 폐 기도 공간에서 호중구 침윤의 억제
호중구 침윤은 담배 연기-악화된 폐에서 IL-18BP에 의해 억제되었다. 각기 3 및 10mg/kg IL-18BP의 용량은 양성 대조 덱사메타손과 비교하여 통계적으로 가치있는 효능임을 나타내었다(도 7 참조). 현재 마우스 모델 조건에서, IL-18BP 10mg/kg 용량은 가장 우수한 통계적인 효능을 갖는 것으로 보여진다(도 8 참조).
3.3. IL-18BP에 의한 폐 기도 공간에서 과립구 집락-자극 인자(G-CSF) 경로의 억제
G-CSF는 호중구 전구체 및 성숙한 호중구의 생존, 증식, 분화, 및 기능을 자극하는 중요한 사이토카인으로서 잘 인정받고 있다. 따라서, 흡연-p[I:C]에 의해 유발된 G-CSF 경로의 완화는 마우스 폐 기도 공간에서 호중구 모집시 IL-18BP의 효과를 나타내는 중요한 인자이다. BALF에서 G-CSF의 존재는 시판 ELISA 키트를 사용하여 모니터하였다. 도 9는 IL-18BP의 투여가 폐의 기도에서 G-CSF 방출을 완화하며, 이에 의해 호중구 침윤의 억제를 확인함을 나타낸다. 세 가지 시험된 IL-18BP 용량은 통계적으로 마우스 모델에서 관련 효과를 갖는다.
3.4. IL-18BP 안전성: 악화/담배 연기 마우스 모델에서 중량 손실에 대한 효과
IL-18BP 투여는 악화/담배 연기 마우스 모델에서 잘 용납되는 것으로 나타났다. 예로서, 중량 손실은 스튜던트 t-테스트 및 ANOVA 통계 분석 양자가 유의하지는 않았지만 IL-18BP에 의해 완화되었다(도 10 참조). 3 및 10mg/kg IL-18BP를 받은 마우스의 대다수는 약 9%를 손실하는 담배 연기 및 p[I:C]에 노출된 대조군과는 대조적으로 각기 6-7% 중량을 손실하였다. 그러므로, 중량 손실 경감 데이터는 IL-18BP가 동물 모델에서 추가적인 스트레스를 제공하지 않음을 나타낸다. p[I:C] 만을 받은 마우스는 p[I:C] 및 담배 연기의 조합을 받은 마우스와 비교하여 중량 손실이 없다는 것을 유의하는 것은 흥미롭다 [도 8, 치료 3) 및 4) 참조].
C. 안티-IL-18 단일클론 항체의 생성
1. 마우스 면역화 및 단일클론 항체 스크리닝
마우스는 적절하게 폴드된 단백질로 면역화를 허용하는 기술을 사용하여 인간 인터류킨-18에 대하여 백신접종을 하였다. 면역화 전, 유전적으로 변형된 마우스는 IL-18BP를 결합하는 IL-18 표면 영역 에피토프에 추정상 민감한 주요 조직적합성 복합체를 위하여 선택되었다. 면역화에 이어, B 세포는 표준 하이브리도마 기술에 따라 비장에서 단리하고 하이브리드화하였다. 하이브리도마는 마이크로플레이트로 분류되고 그 후 IL-18BP 결합 부위에 포함된 단일클론 안티-IL-18 항체를 타깃으로 하는 IL-18 에피토프의 발현을 위해 시험 되었다. 스크리닝은 3연속 및 선택적 단계로 수행되었다 :
제1 단계. 양성 항체 스크리닝 시도는 단일클론 안티-IL-18 항체를 발현하는 루미넥스 비드 확인 세포에 부착된 IL-18로 수행되었다.
제2 단계. IL-18BP 결합 부위에서 IL-18을 타깃으로 하는 잠재적 항체는 IL-18BP와의 경쟁에서 재스크리닝되었다. 이를 위해, 단일클론 항체는 IL-18을 운반하는 루미넥스 비드에 결합되었다. 복합체는 그 후 미리 식별된 안티-IL-18 항체로의 간섭을 확인하기 위해 비오티닐화된 IL-18BP에 노출시켰다(표 1, 컬럼 #2 참조). 제2 스크리닝은 300 초과의 양성 항체 후보를 운반한다(표 1, 컬럼 #3 참조). 양성 후보의 수는 타깃화된 에피토프 영역에서 우수한 마우스 면역화를 놀랍게도 높이 암시하였다. 그러나, 억제는 감소로 인하여 충분하지 않았지만 여전히 형광 신호는 지속하였으며, 따라서 복합체화된 항체 IL-18로의 IL-18BP의 결합을 나타낸다. 그럼에도 불구하고 중요한 것은, 다른 곳에서 보고된 이러한 표준 스크리닝 방법은 매우 더 작은 IL-18BP(약 18kDa, 오로지 펩티드)에 대한 큰 항체 분자(약 160kDa)의 입체 장애를 고려하지 않았다.
제3 단계. 세번째 스크리닝 프로그램은 IL-18BP에 연결되고 그후 인터류킨-18로 복합체화된 루미넥스 비드로 수행되어, 양성 항체 후보로 적절하게 폴드된 재조합 IL-18의 존재를 확보한다. 결과의 스크리닝은 상기 항체의 대부분이 여전히 루미넥스-IL-18 비드를 결합하기 때문에 상당히 더 선택적이며 이에 의해 IL-18BP에 대한 이전의 억제 효과는 입체 장애로 인한 것임을 나타낸다. 최종적으로, 총 12 항체는 IL-18BP, 즉 클론 # 107C6, 108F8, 109A6, 111A6, 129C3, 131B4, 131E8, 131H1, 132C12, 132H4, 133A6 및 134B2의 존재하에 IL-18을 결합한 후 그들의 매우 낮은 형광 신호로 인하여 IL-18BP 단백질 상에서 IL-18을 타깃으로서 최종적으로 간주하였다(표 16 참조, 컬럼 #4, 컬럼 #2와 비교하여 500배 초과의 억제 수단을 나타내는 선택된 클론). 네거티브 세트에 대한 양성 항체는 하기 표 16에 나타낸다.
제3 스크리닝 단계로부터 수집된 데이터(표 16, 컬럼 #4)는 # 107C6, 108F8, 109A6, 111A6, 129C3, 131B4, 131E8, 131H1, 132C12, 132H4, 133A6 및 134B2의 양성 단일클론 세포를 풍부하게 하는 추가의 mRNA 염기서열결정 및 클론 희석을 촉진한다. 이들 단일클론 항체의 전부는 IL-18BP 결합 부위에서 IL-18에 결합하는 것으로 확인되었다.
[표 16]
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참고문헌
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본 발명의 추가의 실시양태
1. 건강한 대조군 대상의 체액 레벨과 비교하여, 체액 내의 유리 IL-18의 비정상적 레벨 및/또는 유리 IL-18/IL-18BP의 비정상적 비율을 갖는 것으로 진단된 대상에서 IL-18 관련 장애 또는 질환 치료용 IL-18 억제제.
2. 체액 내의 유리 IL-18의 상기 비정상적인 레벨이 5%, 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 100%, 또는 100% 초과만큼 건강한 대조군 대상의 체액에서의 레벨을 초과하는, 실시양태 1에 따른 IL-18 억제제.
3. 치료될 대상이 건강한 대상의 체액에서의 레벨과 비교하여 체액, 특히 혈청, 객담, 기관지 폐포 세척 유체(BALF), 활액 유체 및/또는 순환에서 유리 IL-18의 상승된 레벨 및/또는 유리 IL-18/IL-18BP(IL-18BP)의 비정상적 비율을 갖는 것으로 결정된 대상의 군에 속하는 전술한 실시 양태 중 어느 하나에서의 IL-18 억제제.
4. 혈청 내 유리 IL-18의 상기 상승된 레벨이 5 내지 10000pg/mL 범위이며, 한편 건강한 대상, 특히 건강한 인간의 혈청에서 유리 IL-18의 양이 ≤4pg/mL인, 실시양태 2 또는 실시양태 3의 IL-18 억제제.
5. 상기 IL-18 관련 장애 또는 질환이 만성 폐쇄성 폐질환(COPD), 수혈 관련 폐 손상, 기관지폐 이형성증(BPD), 급성 호흡 곤란 증후군(ARDS), 성인 스틸 병, 소아 스틸 병, 간질성 폐 질환(ILD), 특발성 폐 섬유증, 낭성 섬유증, 폐 동맥 고혈압, 천식, 기관지 확장증, 심장 마비, 근위축성 측삭 경화증(ALS), 안구 건조증(DED), 각막염, 각막 궤양 및 찰과상, 각막 신생 혈관, 병적인 안구내 혈관신생, 홍채염, 녹내장, 황반 변성, 쇼그렌 증후군, 자가 면역 포도막염, 베체트병, 결막염, 알레르기성 결막염, 눈꺼풀 피부염, 제2형 당뇨병, 비알코올성 지방 간 질환(NAFLD), 지방 간염, 고형 장기 및 혈액 이식, 허혈 재관류 손상, 가족성 지중해 열, 종양 괴사 인자 수용체 1-관련 주기적 증후군, 크리오피린 관련 주기적 발열 증후군, 하이퍼-IgD 증후군, 통풍, 슈니츨러 증후군, 다발성혈관염이 있는 육아종증(GPA)으로 불리우는 베게너 육아종증, 하시모토 갑상선염, 크론병, 궤양성 대장염, 면역글로불린-4(IgG4) 관련 질환 및 줄기세포 요법으로 이루어진 군으로부터 선택된, 전술한 실시 양태 중 어느 하나에 따른 IL-18 억제제.
6. 상기 IL-18 관련 장애 또는 질환이 흡연 또는 간접 흡연 노출, 특히 담배 연기 노출에 의해 유발된 전술한 실시 양태 중 어느 하나에 따른 IL-18 억제제.
7. 상기 IL-18 관련 장애 또는 질환이 바이러스 감염에 의해 유발된 전술한 실시 양태 중 어느 하나에 따른 IL-18 억제제.
8. 상기 IL-18 관련 장애 또는 질환이 폐기종, 조직 염증, 조직 파괴, 폐 절제, 혈관의 소실, 내피 세포의 아포토시스, 점액 화성, 심장 비대, 폐 조직에서 VEGF의 감소, 폐 혈관 손실, 혈관 근육화, 맥관 리모델링, 콜라겐 침착, 폐에서의 이상 엘라스틴층, 섬유증 기도 리모델링, 통기간극 확대, 기도 및 폐혈관의 만성 리모델링 및 감소된 폐기능으로 구성된 군으로부터 선택된 염증 및 관련 동반 질환의 IL-18 유발된 전신 증상인 전술한 실시 양태 중 어느 하나에 따른 IL-18 억제제.
9. 치료가 상기 질환 또는 장애와 관련된 예방, 정지, 경감 또는 복귀를 포함하는 전술한 실시 양태 중 어느 하나에서의 IL-18 억제제.
10. IL-18 결합, 특히 IL-18R로의 유리 IL-18의 결합, 그러나 특히 IL-18Rα로의 유리 IL-18의 결합이 제한 또는 억제된, 전술한 실시양태 중 어느 하나에 서의 IL-18 억제제.
11. IL-18 의존성 하류 신호 전달 경로가 개질, 특히 억제된 전술한 실시 양태 중 어느 하나에서의 IL-18 억제제.
12. IFNγ, IL-13 또는 IL-17A의 증가된 발현이 상기 질환 또는 장애를 앓고 있는 비치료된 환자와 비교하여 개질, 특히 억제되는 전술한 실시 양태 중 어느 하나에서의 IL-18 억제제.
13. L-18 억제제가 조직 및 순환에서 과잉 유리 IL-18을 트래핑 및 중화함에 의해 IL-18/IL-18BP 불균형을 보상하는 전술한 실시 양태 중 어느 하나에서의 IL-18 억제제.
14. 항체 또는 이의 일부가 IL-18BP의 결합 부위에 또는 IL-18BP의 결합 부위 부근에서 IL-18에 결합하는 기능상 동등한 항체 또는 이의 일부를 포함하는 IL-18 특이적 항체.
15. 항체 또는 이의 일부가 IL-18/IL-18BP 복합체가 아닌 유리 IL-18 단백질에 결합하는, 실시양태 14에 따른 기능상 동등한 항체 또는 이의 일부를 포함하는 IL-18 특이적 항체.
16. 상기 항체 또는 이의 일부가 IL-18로의 IL-18BP의 결합을 입체적으로 방해 또는 방지하는 실시양태 14 또는 실시양태 15에 따른 기능상 동등한 항체 또는 이의 일부를 포함하는 IL-18 특이적 항체.
17. 상기 항체 또는 이의 일부가 서열 번호:1, 서열 번호:2 및 서열 번호:3으로 나타낸 서열의 군으로부터 선택된 서열에 포함되는 단일 에피토프, 2개의 에피토프의 조합, 또는 3개의 에피토프의 조합에 특이적으로 결합하는, 실시양태 14 내지 실시양태 16에 따른 기능상 동등한 항체 또는 이의 일부를 포함하는 IL-18 특이적 항체.
18. 상기 에피토프가 서열 번호:4, 서열 번호: 5 및 서열 번호:6으로 나타낸 서열의 군으로부터 선택된 서열에 대하여 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 100%의 서열 동일성을 갖는 서열이 있는, 실시양태 17에 따른 기능상 동등한 항체 또는 이의 일부를 포함하는 IL-18 특이적 항체.
19. 상기 에피토프가 서열 번호:4, 서열 번호: 5 및 서열 번호:6으로 이루어진 군으로부터 선택된 실시양태 18에 따른 기능상 동등한 항체 또는 이의 일부를 포함하는 IL-18 특이적 항체.
20. 상기 항체 또는 이의 일부가 단일클론 항체 또는 다중클론 항체인 전술한 실시 양태 중 어느 하나에 따른 기능상 동등한 항체 또는 이의 일부를 포함하는 IL-18 특이적 항체.
21. 상기 항체 또는 이의 일부가 키메라, 단일 사슬, 이중 특이성, 원숭이화, 인간 및 인간화 항체인 전술한 실시 양태 중 어느 하나에 따른 기능상 동등한 항체 또는 이의 일부를 포함하는 IL-18 특이적 항체.
22. 상기 항체 또는 이의 일부가 인간 IL-18에 결합하는 전술한 실시 양태 중 어느 하나에 따른 기능상 동등한 항체 또는 이의 일부를 포함하는 IL-18 특이적 항체.
23. IL-18의 IL-18 수용체로의 결합, 특히 IL-18Rα로의 결합을 5% 이상, 특히 10% 이상, 특히 15% 이상, 특히 20% 이상, 특히 25% 이상, 특히 30% 이상, 특히 40% 이상, 특히 45% 이상, 특히 50% 이상, 특히 55% 이상, 특히 60% 이상, 특히 65% 이상, 특히 70% 이상, 특히 75% 이상, 특히 80% 이상, 특히 85% 이상, 특히 90% 이상, 특히 95% 이상, 특히 100% 감소시키는 전술한 실시 양태 중 어느 하나에 따른 기능상 동등한 항체 또는 이의 일부를 포함하는 IL-18 특이적 항체.
24. 상기 항체 또는 이의 일부가 IL-18 수용체(IL-18R)에 결합하는 IL-18, 특히 IL-18Rα에 결합하는 유리 IL-18을 제한 또는 방지함에 의해 유리 IL-18을 중화하는, 전술한 실시 양태 중 어느 하나에 따른 기능상 동등한 항체 또는 이의 일부를 포함하는 IL-18 특이적 항체.
25. 상기 항체 또는 이의 일부가
a) 서열 번호:1, 서열 번호:2 및 서열 번호:3으로 나타낸 서열의 군으로부터 선택된 서열에 포함되는 단일 에피토프, 2개의 에피토프의 조합, 또는 3개의 에피토프의 조합에 특이적으로 결합; 및/또는
b) 서열 번호:4, 서열 번호:5 또는 서열 번호:6으로 나타낸 서열에 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%의 서열 동일성을 갖는 에피토프에 특이적으로 결합; 및
c) IL-18BP의 결합 부위에 또는 IL-18BP의 결합 부위 부근에서 IL-18에 특이적으로 결합; 및
d) IL-18/IL-18BP 복합체가 아닌, 유리 IL-18 단백질에 특이적으로 결합; 및
e) IL-18BP의 IL-18로의 결합을 입체적으로 방해; 및
f) IL-18의 IL-18 수용체로의 결합, 특히 IL-18Rα로의 결합을 5% 이상, 특히 10% 이상, 특히 15% 이상, 특히 20% 이상, 특히 25% 이상, 특히 30% 이상, 특히 40% 이상, 특히 45% 이상, 특히 50% 이상, 특히 55% 이상, 특히 60% 이상, 특히 65% 이상, 특히 70% 이상, 특히 75% 이상, 특히 80% 이상, 특히 85% 이상, 특히 90% 이상, 특히 95% 이상, 특히 100% 감소시키는,
전술한 실시 양태 중 어느 하나에 따른 기능상 동등한 항체 또는 이의 일부를 포함하는 IL-18 특이적 항체.
26. 억제제가 항체, 특히 유리 IL-18에 대하여 특이적인 항체, 특히 IL-18 수용체로의 유리 IL-18의 결합, 특히 IL-18Rα로의 유리 IL-18 결합을 방지하는 길항적 항체인 실시양태 1 내지 13 중 어느 하나에 따른 IL-18 억제제.
27. 상기 항체가 실시양태 14-25 중 어느 하나의 항체인 실시양태 26에 따른 IL-18 억제제.
28. 상기 체액 내의 유리 IL-18의 비정상적 레벨이 실시양태 14-25 중 어느 하나에 따른 항체의 사용에 의해 결정되는 실시양태 1-13 중 어느 하나에 따른 IL-18 억제제.
29. 억제제가 IL-18BP, 특히 인간 IL-18BP(hIL-18BP), 특히 기능적 등가물 또는 이의 일부를 포함하는 IL-18BP, 특히 서열 번호: 7로 나타낸 바와 같은 IL-18BP인 실시양태 1-13 중 어느 하나에 따른 IL-18 억제제.
30. 전장 단백질 또는 뮤테인, 기능성 유도체, 기능성 단편, 생리 활성 펩티드, 분획, 순환 치환 유도체, 융합 단백질, 아이소형 또는 이의 염인 실시양태 26-29에 따른 IL-18 억제제.
31. 만성 폐쇄성 폐질환(COPD), 심장 질환, 안구 건조증 및/또는 제II형 당뇨병 치료용 IL-18BP.
32. 만성 폐쇄성 폐질환(COPD)의 치료를 위한 실시양태 31에 따른 용도를 위한 IL-18BP.
33. 심장 질환의 치료를 위한 실시양태 31에 따른 용도를 위한 IL-18BP.
34. 안구 건조증의 치료를 위한 실시양태 31에 따른 용도를 위한 IL-18BP.
35. 제II형 당뇨병의 치료를 위한 실시양태 31에 따른 용도를 위한 IL-18BP.
36. 상기 질환 또는 장애가 흡연 또는 간접 흡연 노출, 특히 담배 연기 노출에 의해 유발된 실시양태 31 내지 35에 따른 용도를 위한 IL-18BP.
37. 상기 질환 또는 장애가 바이러스 감염에 의해 유발된 전술한 실시양태 중 어느 하나에 따른 용도를 위한 IL-18BP.
38. 상기 질환 또는 장애가 폐기종, 조직 염증, 조직 파괴, 폐 절제, 혈관의 소실, 점액 화성, 심장 비대, 폐 조직에서 VEGF의 감소, 폐 혈관 손실, 혈관 근육화, 콜라겐 침착, 폐에서의 이상 엘라스틴층, 섬유증 기도 리모델링, 통기간극 확대, 기도 및 폐혈관의 만성 리모델링 및 감소된 폐기능으로 이루어진 군으로부터 선택된 염증 및 관련 동반 질환의 IL-18 유도된 전신 증상인 전술한 실시양태 중 어느 하나에 따른 용도를 위한 IL-18BP.
39. IL-18 결합, 특히 IL-18R로의 유리 IL-18의 결합, 그러나 특히 IL-18Rα로의 유리 IL-18 결합이 제한 또는 억제된 전술한 실시양태 중 어느 하나에 따른 용도를 위한 IL-18BP.
40. IL-18-의존성 하류 신호 전달 경로가 개질, 특히 억제되는 전술한 실시양태 중 어느 하나에 따른 용도를 위한 IL-18BP.
41. IFNγ, IL-13 또는 IL-17A의 증가된 발현이 상기 질환 또는 장애를 앓고 있는 비치료된 환자와 비교하여 개질, 특히 억제되는 전술한 실시양태 중 어느 하나에 따른 용도를 위한 IL-18BP.
42. IL-18 억제제가 조직 및 순환에서 과잉 유리 IL-18을 트래핑함에 의해 IL-18/IL-18BP 불균형을 보상하는 전술한 실시양태 중 어느 하나에 따른 용도를 위한 IL-18BP.
43. 치료가 상기 질환 또는 장애와 관련된 증상의 예방, 정지, 경감 또는 복귀를 포함하는 전술한 실시양태 중 어느 하나에 따른 용도를 위한 IL-18BP.
44. 상기 조성물이 실시양태 1-13 및 26-30 중 어느 하나에 따른 IL-18 억제제를, 특히 예방적 및/또는 치료적 유효량으로 포함하는, 실시양태 1-13 중 어느 하나에서 정의된 바와 같은 이러한 질환 또는 장애를 앓거나 또는 이러한 질환 또는 장애가 전개되는 소인을 갖는 대상에서 실시양태 1-13 중 어느 하나에서 정의된 바와 같은 질환 또는 장애의 치료용 약제학적 조성물.
45. 상기 조성물이 전 염증성 사이토카인 또는 이의 기능성 단편의 또 다른 억제제, 또는 전 염증성 사이토카인 또는 이의 기능성 단편의 상기 억제제의 원위치 발현을 유발하는 조절인자, 공동 치료제 예컨대 항염증제, 기관지확장제, 항히스타민제, 충혈완화제 또는 진해제 물질을 임의로 더 제공하는, 실시양태 44의 약제학적 조성물.
46. 약제학적으로 허용 가능한 담체 및/또는 부형제를 포함하는 실시양태 44 또는 45의 약제학적 조성물.
47. 상기 조성물이 실시양태 31 내지 43에 따른 IL-18BP를, 특히 예방적 및/또는 치료적 유효량으로 포함하는, 실시양태 31-43 중 어느 하나에서 정의된 바와 같은 이러한 질환 또는 장애를 앓거나 또는 이러한 질환 또는 장애가 전개되는 소인을 갖는 대상에서 실시양태 31-43 중 어느 하나에서 정의된 바와 같은 질환 또는 장애의 치료에 사용하기 위한 약제학적 조성물.
48. 상기 조성물이 전 염증성 사이토카인 또는 이의 기능성 단편의 또 다른 억제제, 또는 전 염증성 사이토카인 또는 이의 기능성 단편의 상기 억제제의 원위치 발현을 유발하는 조절인자, 공동 치료제 예컨대 항염증제, 기관지확장제, 항히스타민제, 충혈완화제 또는 진해제 물질을 임의로 더 제공하는, 실시양태 47의 약제학적 조성물.
49. 약제학적으로 허용 가능한 담체 및/또는 부형제를 포함하는 실시양태 47 또는 48의 약제학적 조성물.
50. 전술한 실시양태에서 정의된 바의 질환 또는 장애를 앓거나 또는 이러한 질환 또는 장애가 전개되는 소인을 갖는 대상에게 투여시 실시양태 1-13 중 어느 하나에서 정의된 바의 질환 또는 장애의 치료에 사용하기 위한 IL-18의 원위치 발현을 초래하는, 실시양태 1-13 및 26-30 중 어느 하나에 따른 IL-18 억제제의 코딩 서열을 포함하는 발현 벡터.
51. 실시양태 1-13에서 정의된 바의 질환 또는 장애를 앓거나 또는 이러한 질환 또는 장애가 전개되는 소인을 갖는 대상에게 투여시 실시양태 1-13 중 어느 하나에서 정의된 바의 질환 또는 장애의 치료에 사용하기 위한 IL-18의 발현의 원위치 억제를 초래하는, IL-18 안티센스 발현 벡터를 포함하는 발현 벡터.
52. 상기 발현 벡터가 이러한 질환 또는 장애를 앓거나, 또는 이러한 질환 또는 장애가 전개되는 소인을 갖는 대상에게, 단독으로 또는 실시양태 1-13 및 26-30 중 어느 하나에 따른 IL-18 억제제, 실시양태 31-43에 따른 IL-18BP 또는 실시양태 44-49 중 어느 하나에 따른 약제학적 조성물과의 조합으로 투여되는 실시양태 1-13 및 26-43 중 어느 하나에서 정의된 바의 질환 또는 장애의 치료에 사용하기 위한 실시양태 50 또는 51의 발현 벡터.
53. 전술한 실시양태에서 정의된 바의 질환 또는 장애를 앓거나 또는 이러한 질환 또는 장애가 전개되는 소인을 갖는 대상에게 투여시 실시양태 31-43 중 어느 하나에서 정의된 바의 질환 또는 장애의 치료에 사용하기 위한 IL-18BP의 원위치 발현을 초래하는, 실시양태 31-43에 따른 IL-18BP의 코딩 서열을 포함하는 발현 벡터.
54. 상기 발현 벡터가 이러한 질환 또는 장애를 앓거나, 또는 이러한 질환 또는 장애가 전개되는 소인을 갖는 대상에게, 단독으로 또는 실시양태 1-13 및 26-30 중 어느 하나에 따른 IL-18 억제제, 실시양태 31-43에 따른 IL-18BP 또는 실시양태 44-49 중 어느 하나에 따른 약제학적 조성물과의 조합으로 투여되는, 실시양태 1-13 및 26-43 중 어느 하나에서 정의된 바의 질환 또는 장애의 치료에 사용하기 위한 실시양태 53의 발현 벡터.
55. 예방적 및/또는 치료적 유효량의 상기 IL-18 억제제, IL-18BP, 약제학적 조성물, 또는 발현 벡터를, 특히 전신, 비강 내, 구강, 경구, 점막경유, 기관 내, 정맥 내, 피하, 요로 내, 질 내, 설하, 기관지 내, 폐 내, 경피 또는 근육 내 투여, 특히 기관지-폐 투여에 의해 이를 필요로 하는 대상에게 투여하는 것을 포함하는, 실시양태 1-13 및 26-30 중 어느 하나에 따른 IL-18 억제제, 실시양태 31-43 중 어느 하나에 따른 용도를 위한 IL-18BP, 실시양태 44-49 중 어느 하나에 따른 용도를 위한 약제학적 조성물 또는 실시양태 50-54 중 어느 하나에 따른 용도를 위한 발현 벡터.
56. 상기 대상이 포유동물, 특히 상기 대상이 인간인 실시양태 55에 따른 IL-18 억제제, IL-18BP, 약제학적 조성물 또는 발현 벡터.
57. 치료적 또는 예방적 유효량의 실시양태 1-13 및 26-30 중 어느 하나에 따른 IL-18 억제제, 실시양태 31-43에 따른 IL-18BP, 실시양태 44-49 중 어느 하나에 따른 약제학적 조성물, 및/또는 실시양태 50-54의 어느 하나에 따른 발현 벡터를, 특히 전신, 비강 내, 구강, 경구, 점막경유, 기관 내, 정맥 내, 피하, 요로 내, 질 내, 설하, 기관지 내, 폐 내, 경피 또는 근육 내 투여, 특히 기관지-폐 투여에 의해 상기 대상에게 투여하는 것을 포함하는 이러한 질환 또는 장애를 앓거나, 또는 이러한 질환 또는 장애가 전개되는 소인을 갖는 대상에서, 실시양태 1-13 및 26-43 중 어느 하나에서 정의된 바의 질환 또는 장애의 치료 방법.
58. 하기 단계를 포함하는, 실시양태 1-13 및 26-43 중 어느 하나에서 정의된 바의 질환 또는 장애의 진단을 위하여, 실시양태 1-13 및 26-43 중 어느 하나에서 정의된 바의 질환 또는 장애의 소인을 진단하기 위하여, 대상에서의 최소 잔류 질환을 모니터링하기 위하여, 또는 실시양태 1-13 및 26-30에 따른 IL-18 억제제, 실시양태 31-43에 따른 IL-18BP, 또는 실시양태 44-49에 따른 IL-18 억제제를 포함하는 약제학적 조성물로 치료할 대상의 반응성을 예측하기 위한 방법:
a) 대상으로부터 체액, 특히 혈청의 샘플을 수득하는 단계;
b) 포획 분자로서 실시양태 14-25 중 어느 하나의 IL-18 항체 또는 실시양태 중 어느 하나의 IL-18BP를 사용함에 의해 유리 IL-18의 존재에 대하여 상기 샘플을 시험하는 단계 및/또는 제1 단일클론 IL-18BP 특이적 포획 항체 및 포획 항체보다 IL-18BP의 상이한 부위에 결합하는 IL-18BP 특이적 검출 항체, 특히 상기 항체중 하나는 IL-18BP의 IL-18 결합 부위에 결합하는 항체를 사용함에 의해 유리 IL-18BP의 존재에 대하여 상기 샘플을 시험하는 단계;
c) 샘플 내의 포획 분자에 결합하는 유리 IL-18 및/또는 유리 IL-18BP의 양을 구하는 단계;
d) 이러한 질환을 앓는 대상의 샘플에서의 유리 IL-18 및/또는 유리 IL-18BP의 양과 건강한 대상의 샘플에서의 양을 비교하는 단계.
59. 하기 단계를 포함하는, 실시양태 1-13 및 26-43 중 어느 하나에서 정의된 바의 질환 또는 장애의 진단을 위하여, 실시양태 1-13 및 26-43 중 어느 하나에서 정의된 바의 질환 또는 장애의 소인을 진단하기 위하여, 대상에서의 최소 잔류 질환을 모니터링하기 위하여, 또는 실시양태 1-13 및 26-30에 따른 IL-18 억제제, 실시양태 31-43에 따른 IL-18BP, 또는 실시양태 44-49에 따른 IL-18 억제제 및 전술한 실시양태 중 어느 하나에 따른 약제학적으로 허용 가능한 담체 및/또는 부형제를 포함하는 약제학적 조성물로 치료할 대상의 반응성을 예측하기 위한 방법:
a) 대상으로부터 체액, 특히 객담 및 혈청의 샘플을 수득하는 단계;
b) 포획 분자로서 실시양태 14-25의 IL-18 항체 또는 IL-18BP를 사용함에 의한 유리 IL-18의 존재에 대하여 상기 샘플을 시험하는 단계 및/또는 제1 단일클론 IL-18BP 특이적 포획 항체 및 포획 항체보다 IL-18BP의 상이한 부위에 결합하는 IL-18BP 특이적 검출 항체, 특히 상기 IL-18BP 특이적 항체중 하나는 IL-18BP의 IL-18 결합 부위에 결합하는 항체를 사용함에 의한 유리 IL-18BP의 존재에 대하여 상기 샘플을 시험하는 단계;
c) IL-18BP의 IL-18 결합 부위에 결합하지 않는 제1 단일클론 IL-18BP 특이적 항체 및 IL-18의 IL-18BP 결합 부위에 결합하지 않는 제2 IL-18 특이적 항체를 사용함에 의한 총 IL-18 총 및/또는 총 IL-18BP의 존재에 대하여 상기 샘플을 시험하는 단계;
d) 샘플 내의 포획 분자에 결합하는 유리 및 총 IL-18 및/또는 유리 및 총 IL-18BP의 양을 구하는 단계;
e) 이러한 질환을 앓는 대상의 샘플에서의 유리 및/또는 총 IL-18 및/또는 유리 및/또는 총 IL-18BP의 양과 건강한 대상의 샘플에서의 양을 비교하는 단계.
60. 상기 질환을 앓는 대상, 특히 인간의 단리된 혈청에서 유리 IL-18의 양은, 5 내지 10000pg/mL 범위이며, 한편 건강한 대상, 특히 건강한 인간의 혈청에서 유리 IL-18의 양은 ≤4pg/mL인, 전술한 실시양태 중 어느 하나의 진단을 위한 방법.
61. 실시양태 1-13 및 26-43 중 어느 하나에서 정의된 바의 질환 또는 장애의 진단에 사용하기 위하여, 실시양태 1-13 및 26-43 중 어느 하나에서 정의된 바의 질환 또는 장애의 소인 진단에 사용하기 위하여, 또는 대상에서의 최소 잔류 질환의 모니터링에 사용하기 위하여, 또는 실시양태 1-13 및 26-30에 따른 IL-18 억제제, 실시양태 31-43에 따른 IL-18BP, 또는 실시양태 44-49에 따른 IL-18 억제제를 포함하는 약제학적 조성물로 치료할 대상의 반응성을 예측하기 위한 바이오마커의 세트.
62. 하기 단계를 포함하는, 실시양태 1-13 및 26-43 중 어느 하나에서 정의된 바의 질환 또는 장애의 진단을 위하여, 실시양태 1-13 및 26-43 중 어느 하나에서 정의된 바의 질환 또는 장애의 소인을 진단하기 위하여, 또는 대상에서의 최소 잔류 질환을 모니터링하기 위하여, 또는 실시양태 1-13 및 26-30에 따른 IL-18 억제제, 실시양태 31-43에 따른 IL-18BP, 또는 실시양태 44-49에 따른 IL-18 억제제를 포함하는 약제학적 조성물로 치료할 대상의 반응성을 예측하기 위한 방법:
e) 상기 대상으로부터 체액의 샘플을 취하여 시험될 대상의 바이오마커 프로파일을 수득하는 단계;
f) 건강한 기준 집단의 바이오마커 프로파일을 수득하는 단계;
g) 상기 질환 또는 장애를 앓는 집단으로부터 바이오마커 프로파일을 수득하는 단계 및
h) 단계 a)에서 수득된 바이오마커 프로파일과 단계 b) 및 단계 c)에서 수득된 프로파일을 비교하는 단계.
63. 실시양태 1-13 및 26-30 중 어느 하나의 IL-18 억제제, 실시양태 31-43에 따른 IL-18BP 또는 실시양태 44-49에 따른 IL-18 억제제를 포함하는 약제학적 조성물, 및 본 발명에 따른 약제학적으로 허용 가능한 담체 및/또는 부형제를, 유효량으로 투여하기에 적당한 개별 단위 복용량 형태로 포함하는 약제학적 키트.
64. 검출 항체가 포획 분자보다 IL-18의 상이한 부위에 결합하는, 포획 항체로서 실시양태 14-25 중 어느 하나에 따른 IL-18-특이적 항체 또는 대안적인 포획 분자로서 IL-18BP, 및 검출 항체로서 실시양태 14-25 중 어느 하나에 따른 제2 IL-18 특이적 검출 항체 또는 IL-18-특이적 항체 및 제2 IL-18 특이적 포획 항체를 포함하는, 유리 IL-18을 검출하기 위한 진단 키트.
65. IL-18BP의 IL-18 결합 부위에 결합하지 않는 제1 단일클론 IL-18BP 특이적 항체 및 IL-18의 IL-18BP 결합 부위에 결합하지 않는 제2 IL-18 특이적 항체를 포함하는 총 IL-18 또는 총 IL-18BP를 검출하기 위한 진단 키트.
66. 제1 단일클론 IL-18BP 특이적 포획 항체 및 포획 항체보다 IL-18BP의 상이한 부위에 결합하는 IL-18BP 특이적 검출 항체를 포함하는 유리 IL-18BP를 검출하기 위한 진단 키트.
67. 실시양태 64 내지 66의 모든 진단 키르를 포함하는 진단 키트.
<110> AB2 Bio SA <120> IL-18 Binding Protein (IL-18BP) In Inflammatory Diseases <130> W1568 PCT BS <150> EP13 18 3193.5 <151> 2013-09-05 <160> 152 <170> BiSSAP 1.3 <210> 1 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Epitope <400> 1 Tyr Phe Gly Lys Leu Glu Ser Lys Leu Ser Val Ile Arg Asn 1 5 10 <210> 2 <211> 22 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Epitope <400> 2 Phe Ile Ile Ser Met Tyr Lys Asp Ser Gln Pro Arg Gly Met Ala Val 1 5 10 15 Thr Thr Ile Ser Val Lys 20 <210> 3 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Epitope <400> 3 Glu Met Asn Pro Pro Asp Asn Ile Lys Asp Thr Lys Ser Asp Ile Ile 1 5 10 15 Phe <210> 4 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Epitope <400> 4 Tyr Phe Gly Lys Leu Glu Ser 1 5 <210> 5 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Epitope <400> 5 Tyr Lys Asp Ser Gln Pro Arg Gly Met Ala 1 5 10 <210> 6 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Epitope <400> 6 Asp Asn Ile Lys Asp Thr Lys 1 5 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atttatagca catccaactt ggcttctgga 240 gtccctactc gcttcagtgg cagtgggtct gggacctctt actctctcac aatcagcagt 300 gtggaggctg aagatgctgc cacttattac tgccagcagt acagtggtta cccactcacg 360 ttcggtgctg ggaccaagct ggagctgaaa cgggctgatg ctgcaccaac tgtatccatc 420 ttcccaccat ccagtgagca gttaacatct ggaggtgcct cagtcgtgtg cttcttgaac 480 aacttctacc ccaag 495 <210> 96 <211> 165 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 111A6 VK sequence 1 <400> 96 Met Asp Phe Gln Val Gln Ile Phe Ser Phe Leu Leu Ile Ser Ala Ser 1 5 10 15 Val Ala Met Ser Arg Gly Glu Asn Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ile 20 25 30 Met Ser Ala Ser Pro Gly Glu Lys Val Thr Met Thr Cys Arg Ala Arg 35 40 45 Ser Ser Val Ser Ser Ser Tyr Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Ser Gly 50 55 60 Ala Ser Pro Lys Leu Trp Ile Tyr Ser Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly 65 70 75 80 Val Pro Thr Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Ser Leu 85 90 95 Thr Ile Ser Ser Val Glu Ala Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln 100 105 110 Gln Tyr Ser Gly Tyr Pro Leu Thr Phe Gly 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agtaatatgg gctggtggaa gcacaaatta taattcggct 240 ctcatgtcca gactgagcat cagcaaagac aactccaaga gccaagtttt cttaaaaatg 300 aacagtctgc aaactgatga cacagccatg tactactgtg ccagagatag taactacttt 360 gactactggg gccaaggcac cactctcaca gtctcctcag agagtcagtc cttcccaaat 420 gtcttccccc tcgta 435 <210> 120 <211> 145 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 131E8 VH sequence 3 <400> 120 Ala Val Leu Gly Leu Leu Phe Cys Leu Val Ala Phe Pro Ser Cys Val 1 5 10 15 Leu Ser Gln Val Gln Leu Lys Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Ala Pro 20 25 30 Ser Gln Ser Leu Ser Ile Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr 35 40 45 Ser Tyr Gly Val His Trp Val Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu 50 55 60 Trp Leu Gly Val Ile Trp Ala Gly Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Ser Ala 65 70 75 80 Leu Met Ser Arg Leu Ser Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val 85 90 95 Phe Leu Lys Met Asn Ser Leu Gln Thr Asp Asp Thr Ala Met Tyr Tyr 100 105 110 Cys Ala Arg Asp Ser Asn Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr 115 120 125 Leu Thr Val Ser Ser 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Ala Ser 1 5 10 15 Val Ile Met Ser Arg Gly Glu Asn Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ile 20 25 30 Met Ser Ala Ser Pro Gly Glu Lys Val Thr Met Thr Cys Ser Ala Ser 35 40 45 Ser Ser Val Ser Tyr Met His Trp Tyr Gln Gln Lys Ser Ser Thr Ser 50 55 60 Pro Lys Leu Trp Ile Tyr Asp Thr Ser Lys Leu Ala Ser Gly Val Pro 65 70 75 80 Gly Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Asn Ser Tyr Ser Leu Thr Ile 85 90 95 Ser Ser Met Glu Ala Glu Asp Val Ala Thr Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly 100 105 110 Ser Gly Tyr Pro Leu Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 115 120 125 Arg Ala Asp Ala Ala Pro Thr Val Ser Ile Phe Pro Pro Ser Ser Glu 130 135 140 Gln Leu Thr Ser Gly Gly Ala Ser Val Val Cys Phe Leu Asn Asn Phe 145 150 155 160 Tyr Pro Lys <210> 127 <211> 453 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 131H1 VH DNA sequence <400> 127 atggctgtct tggggctgct cttctgcctg gtgacattcc caagctgtgt cctatcccag 60 gtgcagctga agcagtcagg acctggccta gtgcagccct cacagagcct gtccatcacc 120 tgcacagtct ctggtttctc attaactagc tatggtgtac actgggttcg ccagtctcca 180 ggaaagggtc tggagtggct gggagtgata tggagtggtg gaagcacaga ctataatgca 240 gctttcatat ccagactgag catcagcaag gacaattcca agagccaagt tttctttaaa 300 atgaacagtc tgcaagctga tgacacagcc atatattact gtgccagatc ttatgattac 360 gacgggaggg gttactttga ctactggggc caaggcacca ctctcacagt ctcctcagag 420 agtcagtcct tcccaaatgt cttccccctc gta 453 <210> 128 <211> 151 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 131H1 VH sequence <400> 128 Met Ala Val Leu Gly Leu Leu Phe Cys Leu Val Thr Phe Pro Ser Cys 1 5 10 15 Val Leu Ser Gln Val Gln Leu Lys Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val Gln 20 25 30 Pro Ser Gln Ser Leu Ser Ile Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu 35 40 45 Thr Ser Tyr Gly Val His Trp Val Arg Gln Ser Pro Gly Lys Gly Leu 50 55 60 Glu Trp Leu Gly Val Ile Trp Ser Gly Gly Ser Thr Asp Tyr Asn Ala 65 70 75 80 Ala Phe Ile Ser Arg Leu Ser Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln 85 90 95 Val Phe Phe Lys Met Asn Ser Leu Gln Ala Asp Asp Thr Ala Ile Tyr 100 105 110 Tyr Cys Ala Arg Ser Tyr Asp 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Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Glu Thr Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Glu Asn Val Tyr Arg Tyr 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Arg Gln Gly Lys Ser Pro Gln Leu Leu Val 35 40 45 Tyr Ser Ala Lys Thr Leu Ala Glu Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Gln Phe Ser Leu Lys Ile Asn Thr Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Gly Thr Tyr Tyr Cys Gln His His Tyr Asn Thr Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys 100 105 <210> 136 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 131H1 VK sequence 1 CDR1 <400> 136 Glu Asn Val Tyr Arg Tyr 1 5 <210> 137 <211> 3 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 131H1 VK sequence 1 CDR2 <400> 137 Ser Ala Lys 1 <210> 138 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 131H1 VK sequence 1 CDR3 <400> 138 Gln His His Tyr Asn Thr Pro Leu Thr 1 5 <210> 139 <211> 486 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 131H1 VK DNA sequence 2 <400> 139 atggttctta tatggctcct gctatgggta tctggtacct gtggggacat tgtgatgtca 60 cagtctccat cctccctggc tgtgtcagca ggagagaagg tcactatgag ctgcaaatcc 120 agtcagagtc tgttcaacag taaaacccga aagaactact tggcttggtt tcagcaaaaa 180 ccagggcagt ctcctgaact gctgatctac tgggcatcca ctaggaaatc tggggtccct 240 gatcgcttca caggcagtgg atctgggaca gatttcactc tcaccatcag cagtgtgcag 300 gctgaagacc tggcagttta ttactgcaag caatcttata atctgtggac gttcggcgga 360 ggcaccaagc tggaaatcaa acgggctgat gctgcaccaa ctgtatccat cttcccacca 420 tccagtgagc agttaacatc tggaggtgcc tcagtcgtgt gcttcttgaa caacttctac 480 cccaaa 486 <210> 140 <211> 162 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 131H1 VK sequence 2 <400> 140 Met Val Leu Ile Trp Leu Leu Leu Trp Val Ser Gly Thr Cys Gly Asp 1 5 10 15 Ile Val Met Ser Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ala Val Ser Ala Gly Glu 20 25 30 Lys Val Thr Met Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Phe Asn Ser Lys 35 40 45 Thr Arg Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser 50 55 60 Pro Glu Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Lys Ser Gly Val Pro 65 70 75 80 Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile 85 90 95 Ser Ser Val Gln Ala Glu Asp Leu Ala Val Tyr Tyr Cys Lys Gln Ser 100 105 110 Tyr Asn Leu Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg 115 120 125 Ala Asp Ala Ala Pro Thr Val Ser Ile Phe Pro Pro Ser Ser Glu Gln 130 135 140 Leu Thr Ser Gly Gly Ala Ser Val Val Cys Phe Leu Asn Asn Phe Tyr 145 150 155 160 Pro Lys <210> 141 <211> 112 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 131H1 VK variable domain sequence 2 <400> 141 Asp Ile Val Met Ser Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ala Val Ser Ala Gly 1 5 10 15 Glu Lys Val Thr Met Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Phe Asn Ser 20 25 30 Lys Thr Arg Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Gln 35 40 45 Ser Pro Glu Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Lys Ser Gly Val 50 55 60 Pro Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr 65 70 75 80 Ile Ser Ser Val Gln Ala Glu Asp Leu Ala Val Tyr Tyr Cys Lys Gln 85 90 95 Ser Tyr Asn Leu Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 142 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 131H1 VK sequence 2 CDR1 <400> 142 Gln Ser Leu Phe Asn Ser Lys Thr Arg Lys Asn Tyr 1 5 10 <210> 143 <211> 3 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 131H1 VK sequence 2 CDR2 <400> 143 Trp Ala Ser 1 <210> 144 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 131H1 VK sequence 2 CDR3 <400> 144 Lys Gln Ser Tyr Asn Leu Trp Thr 1 5 <210> 145 <211> 440 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 132H4 VH DNA sequence <400> 145 tgagctgggt tttccttgtc cttattttaa aaggtgtcca gtgtgaagtg aagctggtgg 60 agtctggggg aggcttagtg aagcctggag ggtccctgaa actctcctgt gcagcctctg 120 gattcacttt cagtaactat gccatgtctt gggttcgcca gaatccggcg aagaggctgg 180 agtgggtcgc aaccattagt agtggtggtg ctaatattta ctatccagac agtgtgaagg 240 gccgattcat catctccaga gacaatgcca ggaacaccct gtacctgcaa atgagcagtc 300 tgaggtctga ggacacggcc atgtattact gtgcaagagg cgactatttt aaccacttct 360 ggtttgctta ctggggccaa gggactcttg tcactgtctc tgcagccaaa acaacagccc 420 catcggtctt ccccctggca 440 <210> 146 <211> 146 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 132H4 VH sequence <400> 146 Ser Trp Val Phe Leu Val Leu Ile Leu Lys Gly Val Gln Cys Glu Val 1 5 10 15 Lys Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly Ser Leu 20 25 30 Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr Ala Met 35 40 45 Ser Trp Val Arg Gln Asn Pro Ala Lys Arg Leu Glu Trp Val Ala Thr 50 55 60 Ile Ser Ser Gly Gly Ala Asn Ile Tyr Tyr Pro Asp Ser Val Lys Gly 65 70 75 80 Arg Phe Ile Ile Ser Arg Asp Asn Ala Arg Asn Thr Leu Tyr Leu Gln 85 90 95 Met Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys Ala Arg 100 105 110 Gly Asp Tyr Phe Asn His Phe Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 115 120 125 Leu Val Thr Val Ser Ala Ala Lys Thr Thr Ala Pro Ser Val Phe Pro 130 135 140 Leu Ala 145 <210> 147 <211> 481 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 132H4 VK DNA sequence <400> 147 atgaagttgc ctgttaggct gttggtgctg atgttctgga ttcctgcttc cagcagtgat 60 gttttgatga cccaaactcc actctccctg cctgtcagtc ttggagatca agcctccatc 120 tcttgtagat cgagtcagag cattgtacat agtaatggaa acacctattt agaatggtac 180 ctgcagaaac caggccagtc tccaaagttc ctgatctaca aagtttccaa ccgattttca 240 ggggtcccag acaggttcag tggcagtgga tcagggacag atttcacact caagatcaac 300 agagtggagg ctgaggatct gggaatttat tactgctttc agggttcaca tgttccgtgg 360 acgttcggtg gaggcaccaa gctggaaatc aaacgggctg atgctgcacc aactgtatcc 420 atcttcccac catccagtga gcagttaaca tctggaggtg cctcagtcgt gtgcttcttg 480 a 481 <210> 148 <211> 160 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 132H4 VK sequence <400> 148 Met Lys Leu Pro Val Arg Leu Leu Val Leu Met Phe Trp Ile Pro Ala 1 5 10 15 Ser Ser Ser Asp Val Leu Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val 20 25 30 Ser Leu Gly Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile 35 40 45 Val His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro 50 55 60 Gly Gln Ser Pro Lys Phe Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser 65 70 75 80 Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr 85 90 95 Leu Lys Ile Asn Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Ile Tyr Tyr Cys 100 105 110 Phe Gln Gly Ser His Val Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu 115 120 125 Glu Ile Lys Arg Ala Asp Ala Ala Pro Thr Val Ser Ile Phe Pro Pro 130 135 140 Ser Ser Glu Gln Leu Thr Ser Gly Gly Ala Ser Val Val Cys Phe Leu 145 150 155 160 <210> 149 <211> 456 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 133A6 VH DNA sequence <400> 149 atgaactttg ggttgagatt ggttttcctt gtccttgttt taaaaggtgt ccagtgtgag 60 gtgaagctag tggagtctgg aggaggctta gtgaagcctg gagggtccct gaaactctcc 120 tgtgcagcct ctggattcac tttcagtaac tatgccatgt cttgggttcg ccagactccg 180 gcgaagaggc tggagtgggt cacaaccatt agtagtggtg gtggtaacat ctactataca 240 gacagtgtga agggccgatt caccgtctcc agagacaatg ccaggaacac cctgtacctg 300 caaatgagca gtctgaggtc tgaggacacg gccatgtatt actgtgcaag aggcgactat 360 agtaactact tctggtttgc ttactggggc caagggactc tggtctctgt ctctgaagcc 420 aaaacaacag ccccatcggt cttccccctg gcacct 456 <210> 150 <211> 152 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 133A6 VH sequence <400> 150 Met Asn Phe Gly Leu Arg Leu Val Phe Leu Val Leu Val Leu Lys Gly 1 5 10 15 Val Gln Cys Glu Val Lys Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys 20 25 30 Pro Gly Gly Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe 35 40 45 Ser Asn Tyr Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Thr Pro Ala Lys Arg Leu 50 55 60 Glu Trp Val Thr Thr Ile Ser Ser Gly Gly Gly Asn Ile Tyr Tyr Thr 65 70 75 80 Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Val Ser Arg Asp Asn Ala Arg Asn 85 90 95 Thr Leu Tyr Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Met 100 105 110 Tyr Tyr Cys Ala Arg Gly Asp Tyr Ser Asn Tyr Phe Trp Phe Ala Tyr 115 120 125 Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Ser Val Ser Glu Ala Lys Thr Thr Ala 130 135 140 Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro 145 150 <210> 151 <211> 498 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Antibody 133A6 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55 60 Gly Gln Ser Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser 65 70 75 80 Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr 85 90 95 Leu Lys Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys 100 105 110 Phe Gln Gly Ser His Val Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu 115 120 125 Glu Ile Lys Arg Ala Asp Ala Ala Pro Thr Val Ser Ile Phe Pro Pro 130 135 140 Ser Arg Glu Gln Leu Thr Ser Gly Gly Ala Ser Val Val Cys Phe Leu 145 150 155 160 Asn Asn Phe Tyr Pro Lys 165

Claims (87)

  1. 건강한 대조군 대상의 체액 레벨과 비교하여, 체 샘플, 특히 체액 내의 유리 IL-18의 비정상적 레벨 및/또는 유리 IL-18/IL-18BP의 비정상적 비율을 갖는 것으로 진단된 대상의 집단에서 IL-18 관련 장애 또는 질환 치료용 IL-18 억제제.
  2. 청구항 1에 있어서, 체액 내의 유리 IL-18의 상기 비정상적인 레벨이 5%, 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 100%, 또는 100% 초과만큼 건강한 대조군 대상의 체액에서의 레벨을 초과하는, IL-18 억제제.
  3. 청구항 1 또는 청구항 2에 있어서, 치료될 대상이 건강한 대상의 체액에서의 레벨과 비교하여 체 샘플, 특히 기관지 폐포 세척 유체(BALF) 순환 유체, 분비 유체, 생검 및 균질 조직, 특히 혈청, 소변, 눈물, 타액, 담즙, 땀, 날숨(exhalation), 호기(expiration), 객담, 기관지 폐포 유체, 피지, 세포, 선(gland), 점막, 및 조직 분비로 이루어진 군으로부터 선택된 샘플의 18BP에서 유리 IL-18의 상승된 레벨 및/또는 유리 IL-18/IL-18BP(IL-18BP)의 비정상적 비율을 갖는 것으로 결정된 대상의 군에 속하는, IL-18 억제제.
  4. 청구항 2 또는 청구항 3에 있어서, 혈청 내 유리 IL-18의 상기 상승된 레벨이 ≥5pg/mL 및, 특히, 10000pg/mL 이하이며, 한편 건강한 대상, 특히 건강한 인간의 혈청에서 유리 IL-18의 양이 ≤4pg/mL인, IL-18 억제제.
  5. 청구항 1 내지 청구항 4 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-18 관련 장애 또는 질환이 만성 폐쇄성 폐질환(COPD), 수혈 관련 폐 손상, 기관지폐 이형성증(BPD), 급성 호흡 곤란 증후군(ARDS), 성인 스틸 병, 소아 스틸 병, 간질성 폐 질환(ILD), 특발성 폐 섬유증, 낭성 섬유증, 폐 동맥 고혈압, 천식, 기관지 확장증, 심장 마비, 근위축성 측삭 경화증(ALS), 안구 건조증(DED), 각막염, 각막 궤양 및 찰과상, 각막 신생 혈관, 병적인 안구내 혈관신생, 홍채염, 녹내장, 황반 변성, 쇼그렌 증후군, 자가 면역 포도막염, 베체트병, 결막염, 알레르기성 결막염, 눈꺼풀 피부염, 제2형 당뇨병, 비알코올성 지방 간 질환(NAFLD), 지방 간염, 고형 장기 및 혈액 이식, 허혈 재관류 손상, 가족성 지중해 열, 종양 괴사 인자 수용체 1- 관련 주기적 증후군, 크리오피린 관련 주기적 발열 증후군, 하이퍼-IgD 증후군, 통풍, 슈니츨러(Schnitzler) 증후군, 다발성혈관염이 있는 육아종증(GPA)으로 불리우는 베게너 육아종증, 하시모토 갑상선염(Hashimoto's thyroiditis), 크론병, 궤양성 대장염, 면역글로불린-4(IgG4)-관련 질환 및 줄기세포 요법으로 이루어진 군으로부터 선택된 것인, IL-18 억제제.
  6. 청구항 1 내지 청구항 5 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-18 관련 장애 또는 질환이 흡연 또는 간접 흡연 노출, 특히 담배 연기 노출에 의해 유발되는, IL-18 억제제.
  7. 청구항 1 내지 청구항 6 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-18 관련 장애 또는 질환이 바이러스 감염에 의해 유발되는, IL-18 억제제.
  8. 청구항 1 내지 청구항 7 중 어느 한 항에 있어서, 상기 IL-18 관련 장애 또는 질환이 폐기종, 조직 염증, 조직 파괴, 폐 절제, 혈관의 소실, 내피 세포의 아포토시스, 점액 화성, 심장 비대, 폐 조직에서 VEGF의 감소, 폐 혈관 손실, 혈관 근육화(vessel muscularization), 맥관 리모델링, 콜라겐 침착, 폐에서의 이상 엘라스틴층, 섬유증 기도 리모델링, 통기간극 확대(airspace enlargement), 기도 및 폐혈관의 만성 리모델링 및 감소된 폐기능으로 구성된 군으로부터 선택된 염증 및 관련 동반 질환의 IL-18 유발된 전신 증상인, IL-18 억제제.
  9. 청구항 1 내지 청구항 8 중 어느 한 항에 있어서, 치료가 상기 질환 또는 장애와 관련된 증상의 예방, 정지, 경감 또는 복귀를 포함하는, IL-18 억제제.
  10. 청구항 1 내지 청구항 9 중 어느 한 항에 있어서, IL-18 결합, 특히 IL-18R로의 유리 IL-18의 결합이 제한 또는 억제되는, IL-18 억제제.
  11. 청구항 10에 있어서, IL-18Rα로의 유리 IL-18의 결합이 제한 또는 억제되는, IL-18 억제제.
  12. 청구항 1 내지 청구항 11 중 어느 한 항에 있어서, IL-18-의존성 하류 신호 전달 경로가 개질, 특히 억제되는, IL-18 억제제.
  13. 청구항 1 내지 청구항 12 중 어느 한 항에 있어서, IFNγ, IL-13 또는 IL-17A의 증가된 발현이 상기 질환 또는 장애를 앓고 있는 비치료된 대상과 비교하여 개질, 특히 억제되는, IL-18 억제제.
  14. 청구항 1 내지 청구항 13 중 어느 한 항에 있어서, IL-18 억제제가 조직 및 순환에서 과잉 유리 IL-18을 트래핑 및 중화함에 의해 IL-18/IL-18BP 불균형을 보상하는, IL-18 억제제.
  15. 청구항 1 내지 청구항 14 중 어느 한 항에 있어서, IL-18 억제제가 특히 폐 기도에서 G-CSF 방출의 완화를 통해, 폐로의 호중구의 침윤을 억제하는, IL-18 억제제.
  16. 청구항 1 내지 청구항 15 중 어느 한 항에 있어서, 만성 폐쇄성 폐질환(COPD), 심장 질환, 근위축성 측삭 경화증(ALS), 안구 건조증 및/또는 제II형 당뇨병 치료용 IL-18 억제제.
  17. 청구항 1 내지 청구항 16 중 어느 한 항에 있어서, 만성 폐쇄성 폐질환(COPD) 치료용 IL-18 억제제.
  18. 청구항 1 내지 청구항 17 중 어느 한 항에 있어서, 심장 질환 치료용 IL-18 억제제.
  19. 청구항 1 내지 청구항 18 중 어느 한 항에 있어서, 근위축성 측삭 경화증(ALS) 치료용 IL-18 억제제.
  20. 청구항 1 내지 청구항 19 중 어느 한 항에 있어서, 안구 건조증 치료용 IL-18 억제제.
  21. 청구항 1 내지 청구항 20 중 어느 한 항에 있어서, 제II형 당뇨병 치료용 IL-18 억제제.
  22. 청구항 1 내지 청구항 21 중 어느 한 항에 있어서, 상기 질환 또는 장애가 흡연 또는 간접 흡연 노출, 특히 담배 연기 노출에 의해 유발된, IL-18 억제제.
  23. 청구항 1 내지 청구항 22 중 어느 한 항에 있어서, 상기 질환 또는 장애가 바이러스 감염에 의해 유발된, IL-18 억제제.
  24. 청구항 1 내지 청구항 23 중 어느 한 항에 있어서, 상기 질환 또는 장애가 폐기종, 조직 염증, 조직 파괴, 폐 절제, 혈관의 소실, 점액 화성, 심장 비대, 폐 조직에서 VEGF의 감소, 폐 혈관 손실, 혈관 근육화, 콜라겐 침착, 폐에서의 이상 엘라스틴층, 섬유증 기도 리모델링, 통기간극 확대, 기도 및 폐혈관의 만성 리모델링 및 감소된 폐기능으로 구성된 군으로부터 선택된 염증 및 관련 동반 질환의 IL-18 유발된 전신 증상인, IL-18 억제제.
  25. 청구항 1 내지 청구항 24 중 어느 한 항에 있어서, IL-18 결합, 특히 IL-18R로의 유리 IL-18의 결합, 그러나 특히 IL-18Rα로의 유리 IL-18의 결합이 제한 또는 억제되는, IL-18 억제제.
  26. 청구항 1 내지 청구항 25 중 어느 한 항에 있어서, IL-18 억제제가 IL-18의 IL-18 수용체로의 결합, 특히 IL-18Rα로의 결합을 5% 이상, 특히 10% 이상, 특히 15% 이상, 특히 20% 이상, 특히 25% 이상, 특히 30% 이상, 특히 40% 이상, 특히 45% 이상, 특히 50% 이상, 특히 55% 이상, 특히 60% 이상, 특히 65% 이상, 특히 70% 이상, 특히 75% 이상, 특히 80% 이상, 특히 85% 이상, 특히 90% 이상, 특히 95% 이상, 특히 100% 감소시키는, IL-18 억제제.
  27. 청구항 1 내지 청구항 26 중 어느 한 항에 있어서, IL-18 억제제가 IL-18 수용체(IL-18R)로의 IL-18 결합, 특히 IL-18Rα로의 유리 IL-18 결합을 제한 또는 방지함에 의해 유리 IL-18을 중화하는, IL-18 억제제.
  28. 청구항 1 내지 청구항 27 중 어느 한 항에 있어서, 억제제가 IL-18 결합 분자, 특히 유리 IL-18을 특이적으로 결합하는 IL-18 결합 분자, 특히 IL-18 수용체로의 유리 IL-18의 결합, 특히 IL-18Rα로의 유리 IL-18의 결합을 방지하는 IL-18 결합 분자인, IL-18 억제제.
  29. 청구항 1 내지 청구항 28 중 어느 한 항에 있어서, IL-18 결합 분자가 IL-18BP, 특히 인간 IL-18BP(hIL-18BP), 특히 기능적 등가물 또는 이의 일부를 포함하는 IL-18BP, 특히 서열 번호: 7로 나타낸 바와 같은 IL-18BP인, IL-18 억제제.
  30. 청구항 28 또는 청구항 29에 있어서, 전장 단백질(full-length protein) 또는 뮤테인, 기능성 유도체, 기능성 단편, 생리 활성 펩티드, 분획, 순환 치환 유도체 (circularly permuted derivative), 융합 단백질, 아이소형 (isoform) 또는 이의 염인 청구항 1 내지 청구항 29 중 어느 한 항에 따른 IL-18 억제제.
  31. 청구항 1 내지 청구항 30 중 어느 한 항에 있어서, IL-18 결합 분자가 기능상 동등한 항체 또는 이의 일부를 포함하는 항체, 특히 유리 IL-18에 대하여 특이적인 항체, 특히 IL-18 수용체로의 유리 IL-18의 결합, 특히 IL-18Rα로의 유리 IL-18 결합을 방지하는 길항적 항체인, IL-18 억제제.
  32. 청구항 31 내지 청구항 32에 있어서, 기능상 동등한 항체 또는 이의 일부를 포함하는 IL-18 특이적 항체가 IL-18BP의 결합 부위에 또는 IL-18BP의 결합 부위 부근에서 IL-18에 결합하지만, IL-18/IL-18BP 복합체에는 결합하지 않는 청구항 1 내지 청구항 31 중 어느 한 항에 따른 IL-18 억제제.
  33. 청구항 31 내지 청구항 32에 있어서, 기능상 동등한 항체 또는 이의 일부를 포함하는 IL-18 특이적 항체가 단일클론 항체 또는 다중클론 항체인 청구항 1 내지 청구항 32 중 어느 한 항에 따른 IL-18 억제제.
  34. 청구항 31 또는 청구항 32에 있어서, 기능상 동등한 항체 또는 이의 일부를 포함하는 IL-18 특이적 항체가 키메라, 단일 사슬, 이중 특이성, 원숭이화, 인간 및 인간화 항체인 청구항 1 내지 청구항 33 중 어느 한 항에 따른 IL-18 억제제.
  35. 청구항 31 내지 청구항 34 중 어느 한 항에 있어서, 기능상 동등한 항체 또는 이의 일부를 포함하는 IL-18 특이적 항체가 인간 IL-18에 결합하는 청구항 1 내지 청구항 34 중 어느 한 항에 따른 IL-18 억제제.
  36. 청구항 1 내지 청구항 35 중 어느 한 항에 있어서, 상기 체 샘플, 특히 체액 내의 유리 IL-18의 상기 비정상적 레벨이 청구항 28 내지 청구항 35 중 어느 한 항에서 정의된 바의 IL-18 결합 분자를 사용하여 결정되는 (determined), IL-18 억제제.
  37. 건강한 대조군 대상의 체액 레벨과 비교하여, 체액 내의 유리 IL-18의 비정상적 레벨 및/또는 유리 IL-18/IL-18BP의 비정상적 비율을 갖는 또는 청구항 1 내지 청구항 27 중 어느 한 항에서 정의된 바의 질환 또는 장애가 전개되는 소인을 갖는 것으로 진단된 대상의 집단에서 IL-18 관련 장애 또는 질환의 치료에 사용하기 위한 약제학적 조성물에 있어서, 상기 조성물이 청구항 1 내지 청구항 36 중 어느 한 항에서 정의된 바의 IL-18 억제제, 특히 청구항 28 내지 청구항 35에서 정의된 바의 IL-18 억제제를, 특히 예방적 및/또는 치료적 유효량으로 포함하는 약제학적 조성물.
  38. 청구항 37에 있어서, 상기 조성물이 청구항 29 또는 청구항 30에서 정의된 바의 IL-18 억제제를, 특히 예방적 및/또는 치료적 유효량으로 포함하는 청구항 1 내지 청구항 27 중 어느 한 항에서 정의된 바의 질환 또는 장애의 치료에 사용하기 위한 약제학적 조성물.
  39. 청구항 36에 있어서, 상기 조성물이 청구항 31 내지 청구항 35 중 어느 한 항에서 정의된 바의 IL-18 억제제를, 특히 예방적 및/또는 치료적 유효량으로 포함하는 청구항 1 내지 청구항 27 중 어느 한 항에서 정의된 바의 질환 또는 장애의 치료에 사용하기 위한 약제학적 조성물.
  40. 청구항 37 내지 청구항 39 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물이 전 염증성 사이토카인 또는 이의 기능성 단편의 또 다른 억제제, 또는 전 염증성 사이토카인 또는 이의 기능성 단편의 상기 억제제의 원위치 발현을 유발하는 조절인자, 공동 치료제 예컨대 항염증제, 기관지확장제, 항히스타민제, 충혈완화제 또는 진해제 물질을 임의로 더 제공하는, 청구항 1 내지 청구항 27 중 어느 한 항에서 정의된 바의 질환 또는 장애의 치료에 사용하기 위한 약제학적 조성물.
  41. 청구항 37 내지 청구항 40 중 어느 한 항에 있어서, 약제학적으로 허용 가능한 담체 및/또는 부형제를 포함하는, 청구항 1 내지 청구항 27 중 어느 한 항에서 정의된 바의 질환 또는 장애의 치료에 사용하기 위한 약제학적 조성물.
  42. 청구항 1 내지 청구항 41 중 어느 한 항에서 정의된 바의 질환 또는 장애를 앓거나 또는 이러한 질환 또는 장애가 전개되는 소인을 갖는 대상에게 투여시 청구항 1 내지 청구항 27 중 어느 한 항에서 정의된 바의 질환 또는 장애의 치료에 사용하기 위한 IL-18 억제제의 원위치 발현을 초래하는, 청구항 28 내지 청구항 35 중 어느 한 항에 따른 IL-18 억제제의 코딩 서열을 포함하는 발현 벡터.
  43. 청구항 42에 있어서, 상기 발현 벡터가 이러한 질환 또는 장애를 앓거나 또는 이러한 질환 또는 장애가 전개되는 소인을 갖는 대상에게, 단독으로 또는 청구항 28 내지 청구항 35 중 어느 한 항에 따른 IL-18 억제제, 또는 청구항 37 내지 청구항 41 중 어느 한 항에 따른 약제학적 조성물과 조합하여 투여되는, 청구항 1 내지 청구항 27 중 어느 한 항에서 정의된 바의 질환 또는 장애의 치료에 사용하기 위한 발현 벡터.
  44. 청구항 42 또는 청구항 43에 있어서, 청구항 1 내지 청구항 43 중 어느 한 항에서 정의된 바의 질환 또는 장애를 앓거나 또는 이러한 질환 또는 장애가 전개되는 소인을 갖는 대상에게 투여시, 청구항 1 내지 청구항 27 중 어느 한 항에서 정의된 바의 질환 또는 장애의 치료에 사용하기 위한 IL-18BP의 원위치 발현을 초래하는, 청구항 29 또는 청구항 30에 따른 IL-18BP의 코딩 서열을 포함하는 발현 백터.
  45. 예방적 및/또는 치료적 유효량의 상기 IL-18 억제제, IL-18BP, 약제학적 조성물, 또는 발현 벡터를, 특히 전신, 비강 내, 구강, 경구, 점막경유, 기관 내, 정맥 내, 피하, 요로 내, 질 내, 설하, 기관지 내, 폐 내, 경피 또는 근육 내 투여, 특히 기관지-폐 투여에 의해 이를 필요로 하는 대상에게 투여하는 것을 포함하는, 청구항 1 내지 청구항 27 중 어느 한 항에 따른 용도를 위한 청구항 28 내지 청구항 35 중 어느 한 항의 IL-18 억제제, 청구항 37 내지 청구항 41 중 어느 한 항의 약제학적 조성물, 또는 청구항 42 내지 청구항 44 중 어느 한 항의 발현 벡터.
  46. 청구항 45에 있어서, 상기 대상이 포유동물, 특히 상기 대상이 인간인 IL-18 억제제, 약제학적 조성물 또는 발현 벡터.
  47. 치료적 또는 예방적 유효량의 청구항 28 내지 청구항 35 중 어느 한 항에서 정의된 바의 IL-18 억제제, 청구항 37 내지 청구항 41 중 어느 한 항의 약제학적 조성물, 또는 청구항 42 내지 청구항 44 중 어느 한 항의 발현 벡터를, 특히 전신, 비강 내, 구강, 경구, 점막경유, 기관 내, 정맥 내, 피하, 요로 내, 질 내, 설하, 기관지 내, 폐 내, 경피 또는 근육 내 투여, 특히 기관지-폐 투여에 의해 상기 대상에게 투여하는 것을 포함하는 건강한 대조군 대상의 체액 레벨과 비교하여, 체액 내의 유리 IL-18의 비정상적 레벨 및/또는 유리 IL-18/IL-18BP의 비정상적 비율을 갖거나 또는 이러한 질환 또는 장애가 전개되는 소인을 갖는 것으로 진단된 대상의 집단에서 IL-18 관련 장애 또는 질환의 치료를 위한 방법.
  48. 하기 단계를 포함하는, 샘플 또는 원위치 (in situ)에서 유리 IL-18 단백질로의 청구항 28에서 정의된 바의 IL-18 결합 분자, 특히 청구항 29 또는 청구항 30에서 정의된 바의 IL-18BP 또는 청구항 31 내지 청구항 35 중 어느 한 항에서 정의된 바의 항체의 특이적 결합을 검출하는 것을 포함하는 샘플 또는 원위치에서 유리 IL-18의 양을 구하는 방법:
    a) 유리 IL-18을 함유하는 것으로 의심되는 샘플 또는 특정 신체 일부 또는 신체 부위 (body area)를 유리 IL-18에 특이적으로 결합하지만, 복합체에서 결합된 IL-18에 결합하지 않으며 유리 IL-18을 위한 포획 분자로서 기능하는 청구항 28에서 정의된 바의 IL-18 결합 분자, 특히 청구항 29 또는 청구항 30에서 정의된 바의 IL-18BP 또는 청구항 31 내지 청구항 35 중 어느 한 항에서 정의된 바의 항체와 접촉시키는 단계;
    b) IL- IL-18 결합 분자, 18BP 또는 항체를 유리 IL-18에 결합시키도록 하는 단계;
    c) IL- IL-18 결합 분자, 18BP 또는 항체에 IL-18의 결합을 검출하고 샘플 내에서 유리 IL-18의 양을 구하는 단계.
  49. 하기 단계를 포함하는, 샘플 또는 원위치에서 유리 IL-18 단백질로의 청구항 28에서 정의된 바의 IL-18 결합 분자, 특히 청구항 29 또는 청구항 30에서 정의된 바의 IL-18BP 또는 청구항 31 내지 청구항 35 중 어느 한 항에서 정의된 바의 항체의 특이적 결합을 검출하는 것을 포함하는, 환자에서의 IL-18 관련 장애 또는 질환, 특히 청구항 1 내지 청구항 27 중 어느 한 항에서 정의된 바의 IL-18 관련 장애 또는 질환의 진단 방법:
    a) 유리 IL-18을 함유하는 것으로 의심되는 샘플 또는 특정 신체 일부 또는 신체 부위를 유리 IL-18에 특이적으로 결합하지만, 복합체에서 결합된 IL-18에 결합하지 않으며 유리 IL-18을 위한 포획 분자로서 기능하는 청구항 28에서 정의된 바의 IL-18 결합 분자, 특히 청구항 29 또는 청구항 30에서 정의된 바의 IL-18BP 또는 청구항 31 내지 청구항 35 중 어느 한 항에서 정의된 바의 항체와 접촉시키는 단계;
    b) IL-18 결합 분자, IL-18BP 또는 항체를 유리 IL-18에 결합시키도록 하는 단계;
    c) IL-18 결합 분자, IL-18BP 또는 항체에 IL-18의 결합을 검출하고 샘플 내에서 유리 IL-18의 양을 구하는 단계;
    d) 청구항 1 내지 청구항 27 중 어느 한 항에서 정의된 바의 질환 또는 장애를 앓는 대상의 샘플에서 유리 IL-18의 양과 건강한 대상의 샘플에서의 양을 비교하는 단계.
  50. 샘플 또는 원위치에서 유리 IL-18 단백질로의 청구항 28에서 정의된 바의 IL-18 결합 분자, 특히 청구항 29 또는 청구항 30에서 정의된 바의 IL-18BP 또는 청구항 31 내지 청구항 35 중 어느 한 항에서 정의된 바의 항체의 특이적 결합을 검출하는 것을 포함하는, 환자에서 IL-18 관련 질환 또는 장애, 특히 청구항 1 내지 청구항 27 중 어느 한 항에서 정의된 바의 IL-18 관련 질환 또는 장애의 소인을 진단하기 위한 방법에 있어서, 이 방법은 하기 단계를 포함하며,
    건강한 환자로부터 얻은 정상 대조군 값과 비교하여 샘플 내에서 상기 유리 IL-18의 양의 증가는 상기 환자가 청구항 1 내지 청구항 27 중 어느 한 항에서 정의된 바의 질환 또는 장애를 앓거나 또는 전개할 위험이 있음을 나타내는 방법:
    a) 유리 IL-18을 함유하는 것으로 의심되는 샘플 또는 특정 신체 일부 또는 신체 부위를 유리 IL-18에 특이적으로 결합하지만, 복합체에서 결합된 IL-18에 결합하지 않으며 유리 IL-18을 위한 포획 분자로서 기능하는 청구항 28에서 정의된 바의 IL-18 결합 분자, 특히 청구항 29 또는 청구항 30에서 정의된 바의 IL-18BP 또는 청구항 31 내지 청구항 35 중 어느 한 항에서 정의된 바의 항체와 접촉시키는 단계;
    b) IL-18 결합 분자, IL-18BP 또는 항체를 유리 IL-18에 결합시키도록 하는 단계;
    c) IL-18 결합 분자, IL-18BP 또는 항체에 IL-18의 결합을 검출하고 샘플 내에서 유리 IL-18의 양을 구하는 단계;
    d) 청구항 1 내지 청구항 27 중 어느 한 항에서 정의된 바의 질환 또는 장애를 앓는 환자의 샘플에서 유리 IL-18의 양과 건강한 환자의 샘플에서의 양을 비교하는 단계.
  51. 청구항 28 내지 청구항 35 중 어느 한 항에서 정의된 IL-18 억제제, 청구항 37 내지 청구항 41 중 어느 한 항의 약제학적 조성물, 또는 청구항 42 내지 청구항 44 중 어느 한 항의 발현 벡터의 치료를 따르는 환자에서 최소 잔류 질환을 모니터링하기 위한 방법에 있어서, 상기 방법은 하기 단계를 포함하며,
    건강한 환자로부터 얻은 정상 대조군 값과 비교하여 샘플 내에서 상기 유리 IL-18의 양의 증가는 상기 환자가 여전히 최소 잔류 질환을 앓고 있음을 나타내는 방법:
    a) 유리 IL-18을 함유하는 것으로 의심되는 샘플 또는 특정 신체 일부 또는 신체 부위를 유리 IL-18에 특이적으로 결합하지만, 복합체에서 결합된 IL-18에 결합하지 않으며 유리 IL-18을 위한 포획 분자로서 기능하는 청구항 28에서 정의된 바의 IL-18 결합 분자, 특히 청구항 29 또는 청구항 30에서 정의된 바의 IL-18BP 또는 청구항 31 내지 청구항 35 중 어느 한 항에서 정의된 바의 항체와 접촉시키는 단계;
    b) IL-18 결합 분자, IL-18BP 또는 항체를 유리 IL-18에 결합시키도록 하는 단계;
    c) IL-18 결합 분자, IL-18BP 또는 항체에 IL-18의 결합을 검출하고 샘플 내에서 유리 IL-18의 양을 구하는 단계;
    d) 청구항 1 내지 청구항 27 중 어느 한 항에서 정의된 바의 질환 또는 장애를 앓는 환자의 샘플에서 유리 IL-18의 양과 건강한 환자의 샘플에서의 양을 비교하는 단계.
  52. 청구항 28 내지 청구항 35 중 어느 한 항의 IL-18 억제제, 청구항 37 내지 청구항 41 중 어느 한 항의 약제학적 조성물, 또는 청구항 42 내지 청구항 44 중 어느 한 항의 발현 벡터의 치료에 대한 환자의 반응성을 예측하기 위한 방법에 있어서, 상기 방법은 하기 단계를 포함하며,
    샘플 내에서 상기 유리 IL-18의 양의 감소는 상기 환자가 치료에 반응하는 높은 잠재력을 갖는 것임을 나타내는 방법:
    a) 유리 IL-18을 함유하는 것으로 의심되는 샘플 또는 특정 신체 일부 또는 신체 부위를 유리 IL-18에 특이적으로 결합하지만, 복합체에서 결합된 IL-18에 결합하지 않으며 유리 IL-18을 위한 포획 분자로서 기능하는 청구항 28에서 정의된 바의 IL-18 결합 분자, 특히 청구항 29 또는 청구항 30에서 정의된 바의 IL-18BP 또는 청구항 31 내지 청구항 35 중 어느 한 항에서 정의된 바의 항체와 접촉시키는 단계;
    b) IL-18 결합 분자, IL-18BP 또는 항체를 유리 IL-18에 결합시키도록 하는 단계;
    c) IL-18 결합 분자, IL-18BP 또는 항체에 IL-18의 결합을 검출하고 샘플 내에서 유리 IL-18의 양을 구하는 단계;
    d) 청구항 1 내지 청구항 27 중 어느 한 항에서 정의된 바의 질환 또는 장애를 앓는 환자의 샘플에서 유리 IL-18의 양과 건강한 환자의 샘플에서의 양을 비교하는 단계.
  53. 청구항 48 내지 청구항 52 중 어느 한 항에 있어서, 포획 분자보다 IL-18BP의 상이한 부위에 결합하는, IL-18BP 특이적 결합 분자를 단계 a)에서 사용하는 추가의 단계를 포함하며, 특히 상기 분자 중의 하나가 IL-18BP의 IL-18 결합 부위에 결합하는 방법.
  54. 청구항 48 내지 청구항 53 중 어느 한 항에 있어서, IL-18BP 특이적 포획 분자 및 포획 분자보다 IL-18BP의 상이한 부위에 결합하는 IL-18BP 특이적 검출 분자를 단계 a)에서 사용함에 의해, 특히, 여기에서 상기 IL-18BP 특이적 분자 중의 하나는 IL-18BP의 IL-18 결합 부위에 결합하며, 샘플 내의 포획 분자에 결합된 유리 및 총 IL-18과 유리 및 총 IL-18BP의 양을 단계 c)에서 구함에 의해; 및 청구항 1 내지 청구항 27 중 어느 한 항에서 정의된 바의 질환 또는 장애를 앓는 환자의 샘플에서 유리 및/또는 총 IL-18과 유리 및/또는 총 IL-18BP의 양을 건강한 환자의 샘플에서의 양과 단계 d)에서 비교함에 의해, 샘플에서 유리 IL-18BP의 존재를 구하는 추가 단계를 포함하는 방법.
  55. 청구항 48 내지 청구항 54 중 어느 한 항에 있어서, 상기 포획 분자가 청구항 28에서 정의된 바의 IL-18 결합 분자인 방법.
  56. 청구항 48 내지 청구항 54 중 어느 한 항에 있어서, 상기 포획 분자가
    a. 청구항 29 또는 청구항 30에서 정의된 바의 IL-18BP.
    b. 청구항 31 내지 청구항 35 중 어느 한 항에서 정의된 바의 유리 IL-18 특이적 항체인 방법.
  57. 청구항 48 내지 청구항 56 중 어느 한 항에 있어서, 상기 샘플이 기관지 폐포 세척 유체(BALF) 순환 유체, 분비 유체, 생검, 및 균질 조직, 특히 혈청, 소변, 눈물, 타액, 담즙, 땀, 날숨 또는 호기, 객담, 기관지 폐포 액, 피지, 세포, 선, 점막 또는 조직 분비로 이루어진 군으로부터 선택된 방법.
  58. 청구항 48 내지 청구항 57 중 어느 한 항에 있어서, 상기 질환을 앓는 대상, 특히 인간의 단리된 혈청에서 유리 IL-18의 양이 ≥5pg/mL 및, 특히, 10000pg/mL 이하이며, 한편 건강한 대상, 특히 건강한 인간의 혈청에서 유리 IL-18의 양이 ≤4pg/mL인 방법.
  59. 청구항 1 내지 청구항 27 중 어느 한 항에서 정의된 바의 질환 또는 장애를 더 구체화하기 위하여,
    청구항 1 내지 청구항 27 중 어느 한 항에서 정의된 바의 질환 또는 장애의 소인을 진단하기 위하여,
    대상에서의 최소 잔류 질환을 모니터링하기 위하여,
    또는 청구항 28 내지 청구항 35 중 어느 한 항의 IL-18 억제제, 청구항 37 내지 청구항 41 중 어느 한 항의 약제학적 조성물, 또는 청구항 42 내지 청구항 44 중 어느 한 항의 발현 벡터를 이용한 치료에 대한 환자의 반응성을 예측하기 위하여,
    바이오마커 프로파일을 결정하고 특정 질환 또는 장애와 수득된 프로파일을 연관시키는 단계를 포함하는, 청구항 48 내지 청구항 58 중 어느 한 항에 따른 방법에서 사용하기 위한 바이오마커의 세트.
  60. 청구항 59에 있어서, 방법이 하기 단계를 포함하는, 바이오마커의 세트:
    i) 상기 대상으로부터 체액의 샘플을 취하여 시험될 대상의 바이오마커 프로파일을 수득하는 단계;
    j) 건강한 기준 집단의 바이오마커 프로파일을 수득하는 단계;
    k) 상기 질환 또는 장애를 앓는 집단으로부터 바이오마커 프로파일을 수득하는 단계 및
    l) 단계 a)에서 수득된 바이오마커 프로파일과 단계 b) 및 단계 c)에서 수득된 프로파일을 비교하는 단계.
  61. 유효량으로 투여하기에 적당한 개별 단위 복용량 형태로, 청구항 28 내지 청구항 35 중 어느 한 항의 IL-18 억제제, 청구항 37 내지 청구항 41 중 어느 한 항의 약제학적 조성물, 또는 청구항 42 내지 청구항 44 중 어느 한 항의 발현 벡터 및 본 발명에 따른 약제학적으로 허용 가능한 담체 및/또는 부형제를 포함하는 약제학적 키트.
  62. 검출 분자가 포획 분자보다 IL-18의 상이한 부위에 결합하는, 포획 분자로서 청구항 28에서 정의된 바의 IL-18 결합 분자, 청구항 29 또는 청구항 30에서 정의된 바의 IL-18BP 또는 청구항 31 내지 청구항 35 중 어느 한 항에서 정의된 바의 항체, 및 검출 분자로서 제2 IL-18 특이적 결합 분자 및, 임의로, 제2 IL-18 특이적 포획 분자를 포함하는, 유리 IL-18을 검출하기 위한 진단 키트.
  63. IL-18BP의 IL-18 결합 부위에 결합하지 않는 제1 IL-18BP 특이적 결합 분자 및 IL-18의 IL-18BP 결합 부위에 결합하지 않는 제2 IL-18 특이적 결합 분자를 포함하는, 총 IL-18 또는 총 IL-18BP를 검출하기 위한 진단 키트.
  64. 포획 분자로서 제1 IL-18BP 특이적 결합 분자 및 검출 분자로서 제2 IL-18 특이적 결합 분자를 포함하며, 상기 검출 분자는 포획 분자보다 IL-18BP의 상이한 부위에 결합하는, 유리 IL-18BP 검출을 위한 진단 키트.
  65. 청구항 62 내지 청구항 64 중 어느 한 항의 결합 분자를 포함하는 진단 키트.
  66. 청구항 61 내지 청구항 65 중 어느 한 항에 있어서, 청구항 46 내지 청구항 58 중 어느 한 항에 따른 방법에서 사용하기 위한 진단 키트.
  67. 항체 또는 이의 일부가 IL-18BP의 결합 부위에 또는 IL-18BP의 결합 부위 부근에서 IL-18에 결합하지만, IL-18/IL-18BP 복합체에 결합하지 않는, 기능상 동등한 항체 또는 이의 일부를 포함하는 IL-18 특이적 항체.
  68. 청구항 67에 있어서, 상기 항체 또는 이의 일부가 IL-18로의 IL-18BP의 결합을 입체적으로 방해 또는 방지하는, 기능상 동등한 항체 또는 이의 일부를 포함하는 IL-18 특이적 항체.
  69. 청구항 67 또는 청구항 68에 있어서, 상기 항체 또는 이의 일부가 서열 번호:1, 서열 번호:2 및 서열 번호:3으로 나타낸 서열의 군으로부터 선택된 서열에 포함되는 단일 에피토프, 2개의 에피토프의 조합, 또는 3개의 에피토프의 조합에 특이적으로 결합하는, 기능상 동등한 항체 또는 이의 일부를 포함하는 IL-18 특이적 항체.
  70. 청구항 69에 있어서, 상기 에피토프가 서열 번호:4, 서열 번호: 5 및 서열 번호:6으로 나타낸 서열의 군으로부터 선택된 서열에 대하여 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 100%의 서열 동일성을 갖는 서열을 가지는, 기능상 동등한 항체 또는 이의 일부를 포함하는 IL-18 특이적 항체.
  71. 청구항 70에 있어서, 상기 에피토프는 서열 번호:4, 서열 번호: 5 및 서열 번호:6으로 이루어진 군으로부터 선택된 기능상 동등한 항체 또는 이의 일부를 포함하는 IL-18 특이적 항체.
  72. 청구항 1 내지 청구항 71 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체 또는 이의 일부가 단일클론 항체 또는 다중클론 항체인 기능상 동등한 항체 또는 이의 일부를 포함하는 IL-18 특이적 항체.
  73. 청구항 1 내지 청구항 72 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체 또는 이의 일부가 키메라, 단일 사슬, 이중 특이성, 원숭이화, 인간 및 인간화 항체인, 기능상 동등한 항체 또는 이의 일부를 포함하는 IL-18 특이적 항체.
  74. 청구항 1 내지 청구항 73 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체 또는 이의 일부가 인간 IL-18에 결합하는 기능상 동등한 항체 또는 이의 일부를 포함하는 IL-18 특이적 항체.
  75. 청구항 1 내지 청구항 74 중 어느 한 항에 있어서, IL-18의 IL-18 수용체로의 결합, 특히 IL-18Rα로의 결합은 5% 이상, 특히 10% 이상, 특히 15% 이상, 특히 20% 이상, 특히 25% 이상, 특히 30% 이상, 특히 40% 이상, 특히 45% 이상, 특히 50% 이상, 특히 55% 이상, 특히 60% 이상, 특히 65% 이상, 특히 70% 이상, 특히 75% 이상, 특히 80% 이상, 특히 85% 이상, 특히 90% 이상, 특히 95% 이상, 특히 100%만큼 감소되는, 기능상 동등한 항체 또는 이의 일부를 포함하는 IL-18 특이적 항체.
  76. 청구항 1 내지 청구항 75 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체 또는 이의 일부가 IL-18 수용체(IL-18R)로의 IL-18 결합, 특히 IL-18Rα로의 유리 IL-18 결합을 제한 또는 방지함에 의해 유리 IL-18을 중화하는, 기능상 동등한 항체 또는 이의 일부를 포함하는 IL-18 특이적 항체.
  77. 청구항 1 내지 청구항 76 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체 또는 이의 일부가
    g) 서열 번호:1, 서열 번호:2 및 서열 번호:3으로 나타낸 서열의 군으로부터 선택된 서열에 포함되는 단일 에피토프, 2개의 에피토프의 조합, 또는 3개의 에피토프의 조합에 특이적으로 결합; 및/또는
    h) 서열 번호:4, 서열 번호:5 또는 서열 번호:6으로 나타낸 서열에 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%의 서열 동일성을 갖는 에피토프에 특이적으로 결합; 및
    i) IL-18BP의 결합 부위에 또는 IL-18BP의 결합 부위 부근에서 IL-18에 특이적으로 결합; 및
    j) IL-18/IL-18BP 복합체가 아닌, 유리 IL-18 단백질에 특이적으로 결합; 및
    k) IL-18BP의 IL-18로의 결합을 입체적으로 방해; 및
    l) IL-18의 IL-18 수용체로의 결합, 특히 IL-18Rα로의 결합을 5% 이상, 특히 10% 이상, 특히 15% 이상, 특히 20% 이상, 특히 25% 이상, 특히 30% 이상, 특히 40% 이상, 특히 45% 이상, 특히 50% 이상, 특히 55% 이상, 특히 60% 이상, 특히 65% 이상, 특히 70% 이상, 특히 75% 이상, 특히 80% 이상, 특히 85% 이상, 특히 90% 이상, 특히 95% 이상, 특히 100% 감소시키는
    기능상 동등한 항체 또는 이의 일부를 포함하는 IL-18 특이적 항체.
  78. 청구항 67 내지 청구항 77 중 어느 한 항에 있어서, 하기를 포함하는, 기능상 동등한 항체 또는 이의 일부 또는 이의 항원 결합 부분을 포함하며,
    상기 항체, 그의 동등한 항체 또는 항원 결합 부분은 유리 IL-18 단백질, 특히 IL-18BP의 결합 부위에 또는 IL-18BP의 결합 부위 부근에서 결합하지만, IL-18/IL-18BP 복합체에는 결합하지 않는 IL-18 특이적 항체:
    a. 그의 변이체를 포함하는, 각기 서열 번호: 9로 나타낸 바의 중쇄 가변 영역의 1 이상, 2 이상, 또는 모두 3의 상보성 결정 영역(CDRs) 및/또는 각기 서열 번호:10으로 나타낸 바의 경쇄 가변 영역의 1 이상, 2 이상, 또는 모두 3의 상보성 결정 영역(CDRs); 또는
    b. 그의 변이체를 포함하는, 각기 서열 번호:11로 나타낸 바의 중쇄 가변 영역의 1 이상, 2 이상, 또는 모두 3의 상보성 결정 영역(CDRs) 및/또는 각기 서열 번호:12로 나타낸 바의 경쇄 가변 영역의 1 이상, 2 이상, 또는 모두 3의 상보성 결정 영역(CDRs); 또는
    c. 그의 변이체를 포함하는, 각기 서열 번호:13으로 나타낸 바의 중쇄 가변 영역의 1 이상, 2 이상, 또는 모두 3의 상보성 결정 영역(CDRs) 및/또는 각기 서열 번호:14로 나타낸 바의 경쇄 가변 영역의 1 이상, 2 이상, 또는 모두 3의 상보성 결정 영역(CDRs); 또는
    d. 그의 변이체를 포함하는, 각기 서열 번호:15로 나타낸 바의 중쇄 가변 영역의 1 이상, 2 이상, 또는 모두 3의 상보성 결정 영역(CDRs) 및/또는 각기 서열 번호:16으로 나타낸 바의 경쇄 가변 영역의 1 이상, 2 이상, 또는 모두 3의 상보성 결정 영역(CDRs); 또는
    e. 그의 변이체를 포함하는, 각기 서열 번호:15로 나타낸 바의 중쇄 가변 영역의 1 이상, 2 이상, 또는 모두 3의 상보성 결정 영역(CDRs) 및/또는 각기 서열 번호:17로 나타낸 바의 경쇄 가변 영역의 1 이상, 2 이상, 또는 모두 3의 상보성 결정 영역(CDRs); 또는
    f. 그의 변이체를 포함하는, 각기 서열 번호:18로 나타낸 바의 중쇄 가변 영역의 1 이상, 2 이상, 또는 모두 3의 상보성 결정 영역(CDRs) 및/또는 각기 서열 번호:19로 나타낸 바의 경쇄 가변 영역의 1 이상, 2 이상, 또는 모두 3의 상보성 결정 영역(CDRs); 또는
    g. 그의 변이체를 포함하는, 각기 서열 번호:20으로 나타낸 바의 중쇄 가변 영역의 1 이상, 2 이상, 또는 모두 3의 상보성 결정 영역(CDRs) 및/또는 각기 서열 번호:22로 나타낸 바의 경쇄 가변 영역의 1 이상, 2 이상, 또는 모두 3의 상보성 결정 영역(CDRs); 또는
    h. 그의 변이체를 포함하는, 각기 서열 번호:21로 나타낸 바의 중쇄 가변 영역의 1 이상, 2 이상, 또는 모두 3의 상보성 결정 영역(CDRs) 및/또는 각기 서열 번호:22로 나타낸 바의 경쇄 가변 영역의 1 이상, 2 이상, 또는 모두 3의 상보성 결정 영역(CDRs); 또는
    i. 그의 변이체를 포함하는, 각기 서열 번호:23으로 나타낸 바의 중쇄 가변 영역의 1 이상, 2 이상, 또는 모두 3의 상보성 결정 영역(CDRs) 및/또는 각기 서열 번호:24로 나타낸 바의 경쇄 가변 영역의 1 이상, 2 이상, 또는 모두 3의 상보성 결정 영역(CDRs); 또는
    j. 그의 변이체를 포함하는, 각기 서열 번호:25로 나타낸 바의 중쇄 가변 영역의 1 이상, 2 이상, 또는 모두 3의 상보성 결정 영역(CDRs) 및/또는 각기 서열 번호:26으로 나타낸 바의 경쇄 가변 영역의 1 이상, 2 이상, 또는 모두 3의 상보성 결정 영역(CDRs).
  79. 청구항 78에 있어서, 경쇄 가변 영역 및 중쇄 가변 영역의 모든 6 CDRs (상보성 결정 영역)를 포함하는 IL-18 특이적 항체.
  80. 청구항 78 또는 청구항 79에 있어서, 상기 항체가 하기를 포함하는 IL-18 특이적 항체:
    a. 각기 서열 번호:27, 서열 번호:28, 및 서열 번호:29로 나타낸 바의 서열을 갖는 중쇄 가변 영역의 CDR1, CDR2, 및 CDR 3; 및 각기 서열 번호:30, 서열 번호:31, 및 서열 번호:32로 나타낸 바의 서열을 갖는 경쇄 가변 영역의 CDR1, CDR2, 및 CDR 3; 또는
    b. 각기 서열 번호:33, 서열 번호:34, 및 서열 번호:35로 나타낸 바의 서열을 갖는 중쇄 가변 영역의 CDR1, CDR2, 및 CDR 3; 및 각기 서열 번호:36, 서열 번호:37, 및 서열 번호:38로 나타낸 바의 서열을 갖는 경쇄 가변 영역의 CDR1, CDR2, 및 CDR 3; 또는
    c. 각기 서열 번호:39, 서열 번호:40, 및 서열 번호:41로 나타낸 바의 서열을 갖는 중쇄 가변 영역의 CDR1, CDR2, 및 CDR 3; 및 각기 서열 번호:42, 서열 번호:43, 및 서열 번호:44로 나타낸 바의 서열을 갖는 경쇄 가변 영역의 CDR1, CDR2, 및 CDR 3; 또는
    d. 각기 서열 번호:45, 서열 번호:46, 및 서열 번호:47로 나타낸 바의 서열을 갖는 중쇄 가변 영역의 CDR1, CDR2, 및 CDR 3; 및 각기 서열 번호:48, 서열 번호:49, 및 서열 번호: 50으로 나타낸 바의 서열을 갖는 경쇄 가변 영역의 CDR1, CDR2, 및 CDR 3; 또는
    e. 각기 서열 번호:45, 서열 번호:46, 및 서열 번호:47로 나타낸 바의 서열을 갖는 중쇄 가변 영역의 CDR1, CDR2, 및 CDR 3; 및 각기 서열 번호: 51, 서열 번호: 52, 및 서열 번호: 53으로 나타낸 바의 서열을 갖는 경쇄 가변 영역의 CDR1, CDR2, 및 CDR 3; 또는
    f. 각기 서열 번호: 54, 서열 번호: 55, 및 서열 번호: 56으로 나타낸 바의 서열을 갖는 중쇄 가변 영역의 CDR1, CDR2, 및 CDR 3; 및 각기 서열 번호: 57, 서열 번호: 58, 및 서열 번호: 59로 나타낸 바의 서열을 갖는 경쇄 가변 영역의 CDR1, CDR2, 및 CDR 3; 또는
    g. 각기 서열 번호:60, 서열 번호:61, 및 서열 번호:62로 나타낸 바의 서열을 갖는 중쇄 가변 영역의 CDR1, CDR2, 및 CDR 3; 및 각기 서열 번호:66, 서열 번호:67, 및 서열 번호:68로 나타낸 바의 서열을 갖는 경쇄 가변 영역의 CDR1, CDR2, 및 CDR 3; 또는
    h. 각기 서열 번호:63, 서열 번호:64, 및 서열 번호:65로 나타낸 바의 서열을 갖는 중쇄 가변 영역의 CDR1, CDR2, 및 CDR 3; 및 각기 서열 번호:66, 서열 번호:67, 및 서열 번호:68로 나타낸 바의 서열을 갖는 경쇄 가변 영역의 CDR1, CDR2, 및 CDR 3; 또는
    i. 각기 서열 번호:69, 서열 번호: 70, 및 서열 번호: 71로 나타낸 바의 서열을 갖는 중쇄 가변 영역의 CDR1, CDR2, 및 CDR 3; 및 각기 서열 번호: 72, 서열 번호: 73, 및 서열 번호: 74로 나타낸 바의 서열을 갖는 경쇄 가변 영역의 CDR1, CDR2, 및 CDR 3; 또는
    j. 각기 서열 번호: 75, 서열 번호: 78, 및 서열 번호: 77로 나타낸 바의 서열을 갖는 중쇄 가변 영역의 CDR1, CDR2, 및 CDR 3; 및 각기 서열 번호: 78, 서열 번호: 79, 및 서열 번호: 80으로 나타낸 바의 서열을 갖는 경쇄 가변 영역의 CDR1, CDR2, 및 CDR 3.
  81. 청구항 1 내지 청구항 80 중 어느 한 항에 있어서, 하기를 포함하는 기능상 동등한 항체 또는 이의 일부 또는 이의 항원 결합 부분을 포함하는 IL-18 특이적 항체:
    a. 각기 서열 번호:10, 12, 14, 16, 17, 19, 22, 24 및 26으로 나타낸 서열에 대하여 적어도 75%, 80%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 100% 서열 동일성을 갖는 경쇄 가변 영역, 및/또는
    각기 서열 번호: 9, 11, 13, 15, 18, 20, 21, 23, 및 25로 나타낸 서열에 대하여 적어도 75%, 80%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 100% 서열 동일성을 갖는 중쇄 가변 영역.
  82. 청구항 67 내지 청구항 81 중 어느 한 항에 있어서, 하기를 포함하는 기능상 동등한 항체 또는 이의 일부 또는 이의 항원 결합 부분을 포함하며,
    상기 항체, 동등한 항체 또는 이의 항원 결합 부분은 유리 IL-18 단백질을, 특히 IL-18BP의 결합 부위에 또는 IL-18BP의 결합 부위 부근에서 결합하지만, IL-18/IL-18BP 복합체는 결합하지 않는 IL-18 특이적 항체:
    a. 그의 변이체를 포함하는, 각기 서열 번호: 9로 나타낸 바의 중쇄 가변 영역, 및/또는 각기 서열 번호:10으로 나타낸 바의 경쇄 가변 영역; 또는
    b. 그의 변이체를 포함하는, 각기 서열 번호:11로 나타낸 바의 중쇄 가변 영역, 및/또는 각기 서열 번호:12로 나타낸 바의 경쇄 가변 영역; 또는
    c. 그의 변이체를 포함하는, 각기 서열 번호:13으로 나타낸 바의 중쇄 가변 영역, 및/또는 각기 서열 번호:14로 나타낸 바의 경쇄 가변 영역; 또는
    d. 그의 변이체를 포함하는, 각기 서열 번호:15로 나타낸 바의 중쇄 가변 영역, 및/또는 각기 서열 번호:16으로 나타낸 바의 경쇄 가변 영역; 또는
    e. 그의 변이체를 포함하는, 각기 서열 번호:15로 나타낸 바의 중쇄 가변 영역, 및/또는 각기 서열 번호:17로 나타낸 바의 경쇄 가변 영역; 또는
    f. 그의 변이체를 포함하는, 각기 서열 번호:18로 나타낸 바의 중쇄 가변 영역, 및/또는 각기 서열 번호:19로 나타낸 바의 경쇄 가변 영역; 또는
    g. 그의 변이체를 포함하는, 각기 서열 번호:20으로 나타낸 바의 중쇄 가변 영역, 및/또는 각기 서열 번호:22로 나타낸 바의 경쇄 가변 영역; 또는
    h. 그의 변이체를 포함하는, 각기 서열 번호:21로 나타낸 바의 중쇄 가변 영역, 및/또는 각기 서열 번호:22로 나타낸 바의 경쇄 가변 영역; 또는
    i. 그의 변이체를 포함하는, 각기 서열 번호:23으로 나타낸 바의 중쇄 가변 영역, 및/또는 각기 서열 번호:24로 나타낸 바의 경쇄 가변 영역; 또는
    j. 그의 변이체를 포함하는, 각기 서열 번호:25로 나타낸 바의 중쇄 가변 영역, 및/또는 각기 서열 번호:26으로 나타낸 바의 경쇄 가변 영역.
  83. 청구항 67 내지 청구항 82 중 어느 한 항에 있어서, 단일클론, 다중클론, 키메라, 단일 사슬, 이중 특이성 또는 이중 효능, 원숭이화, 인간 및 인간화 항체인 IL-18 특이적 항체.
  84. 청구항 67 내지 청구항 82 중 어느 한 항에 있어서, 인간 또는 인간화 항체인 IL-18 특이적 항체.
  85. 청구항 67 내지 청구항 84 중 어느 한 항에 있어서, 건강한 대조군 대상의 체액 레벨과 비교하여, 체액 내의 유리 IL-18의 비정상적 레벨 및/또는 유리 IL-18/IL-18BP의 비정상적 비율을 갖거나 또는 이러한 질환 또는 장애가 전개되는 소인을 갖는 것으로 진단된 대상의 집단에서, IL-18 관련 장애 또는 질환의 치료에 사용하기 위한 기능상 동등한 항체 또는 이의 일부를 포함하는 IL-18 특이적 항체.
  86. 청구항 85에 있어서, 청구항 2 내지 청구항 27 중 어느 한 항에 따른 IL-18 관련 장애 또는 질환의 치료에 사용하기 위한 IL-18 특이적 항체.
  87. 체 샘플, 특히 체액 내의 유리 IL-18의 비정상적 레벨이, 청구항 48 내지 청구항 58 중 어느 한 항에 따른 방법의 사용에 의해 구해지는, 청구항 1 내지 청구항 86 중 어느 한 항에 따른 IL-18 억제제.
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Families Citing this family (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2731713C2 (ru) 2013-09-05 2020-09-08 Аб2 Био Са Применение il-18-связывающего белка (il-18bp) при воспалительных заболеваниях
SG11201706879UA (en) * 2015-03-05 2017-09-28 Ab2 Bio Sa Il-18 binding protein (il-18bp) and antibodies in inflammatory diseases
US20180362660A1 (en) * 2016-05-09 2018-12-20 Schickwann Tsai Anti-penumbra monoclonal antibodies for detection and therapy of normal and abnormal B lymphocytes
GB201614455D0 (en) * 2016-08-24 2016-10-05 Univ Oxford Innovation Ltd Biomarkers
DE102016219607A1 (de) * 2016-10-10 2018-04-12 Siemens Healthcare Gmbh Erzeugung einer mit anatomischen Bilddaten korrelierten Ergebniskarte
US11629183B2 (en) 2017-12-29 2023-04-18 University Of Florida Research Foundation, Inc. Monoclonal antibodies targeting microtubule-binding domain of tau protein and methods of detecting tau protein in vivo
TWI679279B (zh) * 2018-05-09 2019-12-11 臺中榮民總醫院 檢測成人發作型史笛兒氏症之罹病風險及預後之方法
WO2019242655A1 (en) * 2018-06-19 2019-12-26 Shanghaitech University Human antibodies to human interleukin 18 receptor alpha and beta
JP6892180B2 (ja) * 2018-12-03 2021-06-23 株式会社ｍＡｂＰｒｏｔｅｉｎ 活性型インターロイキン−１８タンパク質のネオエピトープを認識する抗体、及びその応用
CN110433289A (zh) * 2019-09-10 2019-11-12 中山大学附属口腔医院 用于治疗牙周致病菌感染引起的牙周膜细胞功能紊乱与牙槽骨丧失的药物
EP4146174A1 (en) 2020-05-06 2023-03-15 AB2 Bio SA Il-18 binding protein (il-18bp) in respiratory diseases
GB202007404D0 (en) * 2020-05-19 2020-07-01 Nasser Syed Muhammad Tahir Treatment for viral respiratory infections
EP3943097A1 (en) 2020-07-24 2022-01-26 AB2 Bio SA Car-t cell therapy
KR20220044057A (ko) * 2020-09-29 2022-04-06 주식회사 에이프릴바이오 인터루킨-18 결합 단백질 및 혈청 알부민에 대한 항원 결합 단편을 포함하는 융합 단백질, 및 이의 용도
EP4371573A1 (en) 2021-07-13 2024-05-22 National University Corporation Tokai National Higher Education and Research System Medicinal composition for treating inflammatory bowel disease
WO2023067348A1 (en) * 2021-10-21 2023-04-27 Biosirius Ltd Treatment for virally-induced pneumonia
CN114236139A (zh) * 2021-12-30 2022-03-25 苏州和锐生物科技有限公司 一种TNF-α生物制剂的抗体检测试剂盒、制备方法
WO2023166206A1 (en) 2022-03-04 2023-09-07 Ab2 Bio Sa Il-18 binding protein (il-18bp) in the treatment of vexas

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20010022900A (ko) * 1997-08-14 2001-03-26 폴리나 벤-아미, 야코브 코헨 인터루킨-18 결합 단백질, 이들의 제조방법 및 용도
KR20020086540A (ko) * 2000-02-21 2002-11-18 어플라이드 리서치 시스템스 에이알에스 홀딩 엔.브이. Ｉｌ-18 저해물질의 용도

Family Cites Families (33)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB9014932D0 (en) 1990-07-05 1990-08-22 Celltech Ltd Recombinant dna product and method
RU2166955C2 (ru) 1991-01-18 2001-05-20 Эмген Инк. Способ лечения и профилактики заболеваний, обусловленных повышением уровня фактора, вызывающего некроз опухолевых клеток
WO1994004679A1 (en) 1991-06-14 1994-03-03 Genentech, Inc. Method for making humanized antibodies
JPH05244982A (ja) 1991-12-06 1993-09-24 Sumitomo Chem Co Ltd 擬人化ｂ−ｂ１０
US5635599A (en) 1994-04-08 1997-06-03 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Fusion proteins comprising circularly permuted ligands
DK0804584T3 (da) 1994-10-21 2002-09-23 Innogenetics Nv Sekvenser af hepatitis C virus genotype 7 og deres anvendelse som profylaktiske, terapeutiske og diagnostiske midler
US5756662A (en) 1995-03-14 1998-05-26 Corixa Corporation Compounds and methods for the detection of T. cruzi infection
US7220717B2 (en) 1997-08-14 2007-05-22 Yeda Research And Development Company Ltd. Interleukin-18 binding proteins, their preparation and use
US7767207B2 (en) 2000-02-10 2010-08-03 Abbott Laboratories Antibodies that bind IL-18 and methods of inhibiting IL-18 activity
CZ300792B6 (cs) 2000-05-05 2009-08-12 Applied Research Systems Ars Holding N. V. Farmaceutický prostredek
MXPA03001915A (es) 2000-08-03 2004-09-10 Therapeutic Human Polyclonals Produccion de anticuerpos humanizados en animales transgenicos.
US20040198706A1 (en) 2003-03-11 2004-10-07 Carrara Dario Norberto R. Methods and formulations for transdermal or transmucosal application of active agents
AU2002224417A1 (en) 2000-10-18 2002-04-29 Immunex Corporation Methods for treating il-18 mediated disorders
DE60224004T2 (de) 2001-01-29 2009-07-23 Laboratoires Serono S.A., Coinsins Verwendung von il-18 hemmern zur behandlung und/oder prävention von herzkrankheiten
SI1425028T1 (sl) * 2001-05-16 2010-02-26 Yeda Res & Dev Uporaba inhibitorjev za il-18 za zdravljenje ali prepreäśevanje sepse
HU230294B1 (hu) * 2001-05-25 2015-12-28 Ares Trading S.A. IL-18-inhibitorok alkalmazása központi idegrendszeri sérülések kezelésére vagy megelőzésére
GB0300531D0 (en) 2003-01-10 2003-02-12 West Pharm Serv Drug Res Ltd Pharmaceutical compositions
ATE549353T1 (de) 2003-05-13 2012-03-15 Merck Serono Sa Aktive varianten des il-18 bindenden proteins und dessen medizinische verwendungen
US20050100965A1 (en) 2003-11-12 2005-05-12 Tariq Ghayur IL-18 binding proteins
US7968684B2 (en) 2003-11-12 2011-06-28 Abbott Laboratories IL-18 binding proteins
AU2011224023C1 (en) 2003-11-12 2013-08-29 Abbvie Inc. IL-18 binding proteins
EP1736168A4 (en) 2004-03-11 2008-07-09 Redox Bioscience Inc INHIBITOR OF PROSTHESIS AND PREVENTIVES OR REMEDIES FOR DISEASES.
US7862829B2 (en) 2004-07-09 2011-01-04 University Of North Carolina At Chapel Hill Viral adjuvants
CA2577777A1 (en) 2004-08-20 2006-03-02 Smithkline Beecham Corporation Methods of healing wounds by administering human il-18
PL2267024T3 (pl) 2005-06-03 2012-10-31 Ares Trading Sa Wytwarzanie rekombinowanego białka wiążącego IL-18
US7612181B2 (en) 2005-08-19 2009-11-03 Abbott Laboratories Dual variable domain immunoglobulin and uses thereof
ES2363757T3 (es) 2005-09-15 2011-08-16 Val-Chum, S.E.C. Procedimientos de diagnóstico del cáncer de ovarios.
WO2008091588A1 (en) 2007-01-22 2008-07-31 Targacept, Inc. Intranasal, buccal, and sublingual administration of metanicotine analogs
AU2008260572A1 (en) 2007-05-29 2008-12-11 Yale University IL- 18 and protein kinase R inhibition for the treatment of COPD
JP2014508511A (ja) 2010-12-20 2014-04-10 メドイミューン・リミテッド 抗ｉｌ−１８抗体およびそれらの使用
JOP20200308A1 (ar) 2012-09-07 2017-06-16 Novartis Ag جزيئات إرتباط il-18
RU2731713C2 (ru) 2013-09-05 2020-09-08 Аб2 Био Са Применение il-18-связывающего белка (il-18bp) при воспалительных заболеваниях
SG11201706879UA (en) 2015-03-05 2017-09-28 Ab2 Bio Sa Il-18 binding protein (il-18bp) and antibodies in inflammatory diseases

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20010022900A (ko) * 1997-08-14 2001-03-26 폴리나 벤-아미, 야코브 코헨 인터루킨-18 결합 단백질, 이들의 제조방법 및 용도
KR20020086540A (ko) * 2000-02-21 2002-11-18 어플라이드 리서치 시스템스 에이알에스 홀딩 엔.브이. Ｉｌ-18 저해물질의 용도

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
J Autoimmun. 34(2):121-126(2010) *

Also Published As

Publication number Publication date
KR102321172B1 (ko) 2021-11-05
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RU2731713C2 (ru) 2020-09-08
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RU2016112596A3 (ko) 2018-07-18
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SG11201601717VA (en) 2016-04-28

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