KR20210005270A

KR20210005270A - 트리에틸렌테트라민 테트라클로라이드의 결정형 및 이의 약제학적 용도

Info

Publication number: KR20210005270A
Application number: KR1020207035089A
Authority: KR
Inventors: 티모시 제임스 몰리; 로니 맥스웰 로렌스; 나심 아민
Original assignee: 오르파란
Priority date: 2018-05-04
Filing date: 2019-05-03
Publication date: 2021-01-13
Also published as: US20210163398A1; JP2021531322A; SG11202010785UA; TW202002956A; EP3652145A1; US20200392068A1; MA58726A1; SA520420467B1; MA51919A1; BR112020018451A2; DE19724752T1; US11072577B2; WO2019211464A1; ES2769049T1; AU2019263969B2; US20220169594A1; CO2020013806A2; US10988436B2; AU2019263969A1; EA202092241A1

Abstract

본 발명은 다이클로라이드 염 대비 및 공지된 형태 대비 개선된 실온 안정성을 갖는 트리에틸렌테트라민 테트라클로라이드(triethylenetetramine tetrachloride)의 신규한 결정형(crystalline form)에 관한 것이다. 상기 신규한 결정형은 943, 1173, 1527 및 1612 ± 5 cm^-1의 라만 시프트(Raman shift)와 22.9, 25.4, 25.8, 26.6, 34.6 및 35.3 ± 0.1°2θ의 XRPD 스펙트럼(spectrum)에서 피크를 갖는 것을 특징으로 한다. 상기 트리에틸렌테트라민 테트라클로라이드의 결정형은 윌슨병(Wilson's disease)의 치료에 유용하다.

Description

트리에틸렌테트라민 테트라클로라이드의 결정형 및 이의 약제학적 용도

본 발명은 트리에틸렌테트라민 테트라클로라이드(triethylenetetramine tetrachloride, TETA.4HCl)의 결정형 및 상기 결정형의 제조 방법에 관한 것이다. 본 발명은 또한 트리에틸렌테트라민 테트라클로라이드 결정을 사용하는 윌슨 병의 치료에 관한 것이다.

트리에틸렌테트라민(Triethylenetetramine), 또는 1,2-에탄디아민, N, N′-비스(2-아미노에틸)(TETA)은 다음의 구조를 가진다:

다이클로라이드 염(dichloride salt, TETA.2HCl)은 구리(II)의 폴리아민 킬레이트제이다. 이의 구리 킬레이트 특성으로 인해 다양한 질환(condition), 특히 윌슨병(Wilson's disease) 치료에 유용하다. 윌슨병(Wilson's disease)은 윌슨병 단백질(Wilson disease protein)(ATP7B 유전자)의 돌연변이에 의해 유발되는 유전 질환이다. 이 질환(condition)으로 인해 신체에 구리가 축적된다. TETA.2HCl의 구리 킬레이트 능력은 또한 당뇨병 환자(diabetes patient), 알츠하이머병(Alzheimer's disease) 및 암(cancer)에서 내부 장기 손상과 같은 수많은 질환(condition)의 치료에 대한 고려로 이어졌다(Henriet et al, International Journal of Pharmaceutics 511 (2016) 312-321).

그러나, TETA.2HCl이 윌슨병의 치료에 유용한 것으로 공지된 지 여러 해가 지났음에도 불구하고, 이는 성공적인 치료법이 아니다. 이는, 적어도 부분적으로는, 실온에서 충분한 안정성을 갖는 TETA.2HCl의 적절한 형태를 제공하는 것이 어렵다는 것이 입증되었기 때문이다. 따라서 환자는 감소된 온도 조건에서 정제(tablet)를 보관해야 하며, 이는 평생 동안 매 식사와 함께 복용해야하는 치료에 대한 부담스러운 요구 사항이다.

연구에 따르면 또한 습도의 변화가 염(salt)의 안정성에 영향을 미칠 수 있다. 염(salt)은 물에 매우 민감하며 습도 수준에 따라 상이한 다형체(polymorphic form)로 존재한다. 습도가 높으면 화합물이 불안정해진다. 이러한 안정성 효과는 환자의 치료에 적합한 약물의 제형화와 감소된 온도와 같은 특수한 조건에서 재료를 보관해야할 필요성에 대한 과제를 야기한다. 따라서 경구로 전달될 수 있고 장기간에 걸쳐 주변(ambient) 조건 하에서 안정한 윌슨병에 대한 개선된 치료가 필요하다.

EP 1778618은 TETA와 .2HCl 염 및 .4HCl 염을 포함하는 이의 염을 생산하기 위한 합성 기술을 설명한다. 2HCl 염만이 윌슨병(Wilson's disease)의 치료에 유용하다고 한다.

WO 2006/027705는 I형 및 II형 트리에틸렌테트라민 다이하이드로클로라이드를 포함하는 트리에틸렌테트라민의 합성을 설명한다. 이 문서는 트리에틸렌테트라민 테트라하이드로클로라이드의 결정형을 언급하지 않는다.

발명의 요약

본 발명자들은 놀랍게도 TETA.4HCl의 신규한 결정형이 개선된 취급 특성(handling properties) 및 실온 안정성(room temperature stability)을 갖는다는 것을 발견하였다. 따라서, 이는 다이클로라이드 또는 테트라클로라이드 염의 공지된 형태보다 약물로의 제형화에 더 유용하다. TETA.4HCl를 생산하기 위한 이전에 공지된 기술(예컨대, 실온에서 수행되는 반-용매(anti-solvent) 결정화 공정, 및 고온 건조 단계를 포함하는 공정)은 본 명세서에 A형으로 기재된 결정형으로 이어진다. 그러나, 본 발명자들은 제조 조건, 특히 온도 및 결정화 속도를 주의 깊게 제어함으로써, 본 명세서에서 B형으로 알려진, 신규한 결정형이 생성될 수 있음을 발견하였다. 이 신규한 형태는 우수한 취급 특성 및 또한 우수한 저장 안정성 및 저장 수명 특성을 가지고 있으므로 윌슨병을 치료하기 위한 신규한 제형, 예를 들어 정제의 생산에 유용하다.

따라서 본 발명은 다음의 특성 중 적어도 하나를 가지는 트리에틸렌테트라민 테트라클로라이드(triethylenetetramine tetrachloride)의 결정형(cyrstalline form)을 제공한다:

(i) 22.9, 25.4, 25.8, 26.6, 34.6 및 35.3 ± 0.1°2θ의 피크(peak)로부터 선택되는 적어도 두 개의 피크를 갖는 XRPD 패턴(pattern); 및/또는

(ii) 943, 1173, 1527 및 1612 ± 5 cm^-1의 라만 시프트(Raman shift)의 피크로부터 선택되는 적어도 두 개의 피크를 갖는 라만 스펙트럼(Raman spectrum).

또한 하나 이상의 약제학적으로 허용 가능한 담체 또는 희석제와 함께 본 명세서에 기재된 결정형을 포함하는 약제학적 조성물이 제공된다.

또한 반-용매(anti-solvent)를 트리에틸렌테트라민 테트라클로라이드의 수성 용액에 첨가하는 단계 및 수득된 결정을 수집하는 단계를 포함하는 트리에틸렌테트라민 테트라클로라이드의 결정형을 생산하는 방법이 제공되며, 상기 반-용매 첨가는 약 20℃ 이하의 온도에서 수행된다.

또한 본 명세서에 기재된 방법에 의해 획득된 또는 획득 가능한 트리에틸렌테트라민 테트라클로라이드의 결정형 또는 트리에틸렌테트라민 테트라클로라이드를 포함하는 약제학적 조성물이 제공된다.

또한 요법에 의해 인간 또는 동물 신체의 치료에 사용하기 위한, 바람직하게는 윌슨병의 예방 또는 치료에 사용하기 위한, 본 명세서에 기재된 결정형 또는 약제학적 조성물이 제공된다.

또한 이를 필요로 하는 대상(subject)에서 윌슨병의 예방 또는 치료를 위한 방법이 제공되며, 상기 방법은 본 명세서에 기재된 결정형 또는 약제학적 조성물의 유효량의 대상(subject)으로의 투여를 포함한다.

또한 윌슨병의 예방 또는 치료를 위한 약제의 제조에 있어서 본 명세서에 기재된 결정형 또는 약제학적 조성물의 용도(use)가 제공된다.

본 발명의 특정한 양태는 아래와 같다:

1. 다음 특징 중 적어도 하나를 갖는 트리에틸렌테트라민 테트라클로라이드 (triethylenetetramine tetrachloride)의 결정형(crystalline form):

(i) 22.9, 25.4, 25.8, 26.6, 34.6 및 35.3 ± 0.1°2θ의 피크로부터 선택되는 적어도 두 개의 피크를 갖는 XRPD 패턴; 및/또는

2. 제 1 양태에 있어서, 22.9, 25.4, 25.8, 26.6, 34.6 및 35.3 ± 0.1°2θ의 피크로부터 선택되는 적어도 두 개의 피크를 갖는 XRPD 패턴을 갖는 것인, 결정형.

3. 제 1 양태 또는 제 2 양태에 있어서, 22.9, 25.4, 25.8, 26.6, 34.6 및 35.3 ± 0.1°2θ의 피크로부터 선택되는 적어도 세 개의 피크를 갖는 XRPD 패턴을 갖는 것인, 결정형.

4. 제 1 양태 내지 제 3 양태 중 어느 한 양태에 있어서, 25.4, 34.6 및 35.3 ± 0.1°2θ의 피크를 갖는 XRPD 패턴을 갖는 것인, 결정형.

5. 제 1 양태 내지 제 4 양태 중 어느 한 양태에 있어서, 25.2 및 35.7 ± 0.1° 2θ의 피크를 갖는 XRPD 패턴을 갖는 트리에틸렌테트라민 테트라클로라이드 A형을 10 중량% 이하로 포함하는 것인, 결정형.

6. 제 5 양태에 있어서, 25.2 및 35.7 ± 0.1° 2θ의 피크를 갖는 XRPD 패턴을 갖는 트리에틸렌테트라민 테트라클로라이드 A형을 5 중량% 이하로 포함하는 것인, 결정형.

7. 다음을 갖는 트리에틸렌테트라민 테트라클로라이드 B형을 필수적으로 포함하는 선행 양태 중 어느 한 양태에 따른 결정형:

(i) 제 1 항 내지 제 4 항 중 어느 한 항에서 정의된 XRPD 패턴; 및/또는

(ii) 943, 1173, 1527 및 1612 ± 5 cm^-1의 라만 시프트의 피크로부터 선택되는 적어도 두 개의 피크를 갖는 라만 스펙트럼.

8. 제 1 양태 내지 제 7 양태 중 어느 한 양태에 따른 결정형 및 약제학적으로 허용 가능한 담체 또는 희석제를 포함하는 약제학적 조성물.

9. 제 8 양태에 있어서, 상기 약제학적 조성물은 제 1 항 내지 제 7 항 중 어느 한 항에 따른 결정형 및 약제학적으로 허용 가능한 담체를 포함하는 고체 경구 제형(oral dosage)인 것인, 약제학적 조성물.

10. 제 8 양태 또는 제 9 양태에 있어서, 25.2 및 35.7 ± 0.1° 2θ의 피크를 갖는 XRPD 패턴을 갖는 트리에틸렌테트라민 테트라클로라이드 A형을 10 중량% 이하, 바람직하게 5 중량% 이하, 보다 바람직하게 2 중량% 이하로 포함하는 것인, 약제학적 조성물.

11. 제 10 양태에 있어서, 25.2 및 35.7 ± 0.1° 2θ의 피크를 갖는 XRPD 패턴을 갖는 트리에틸렌테트라민 테트라클로라이드 A형이 실질적으로 없는 약제학적 조성물.

12. 트리에틸렌테트라민 테트라클로라이드의 결정형을 생산하는 방법으로서, 상기 방법은 반-용매(anti-solvent)를 트리에틸렌테트라민 테트라클로라이드의 수성 용액에 첨가하는 단계 및 수득된 결정을 수집하는 단계를 포함하고, 상기 반-용매 첨가는 약 20℃ 이하의 온도에서 수행되는 것인, 방법.

13. 제 12 양태에 있어서, 상기 반-용매의 용액으로의 첨가 속도는 수성 용액에 용해된 TETA.4HCl의 그램(gram) 당 0.5 ml/분 이하인 것인, 방법.

14. 제 12 양태 또는 제 13 양태에 있어서, 상기 방법은 다음 단계를 포함하는, 방법:

(i) 시간 t1 기간 동안 온도 T1에서 및/또는 첨가 R1의 속도에서 반-용매를 TETA.4HCl의 수성 용액에 첨가하는 단계;

(ii) 선택적으로 TETA.4HCl 시드 결정(seed crystal)을 첨가하는 단계;

(iii) 선택적으로 추가 기간 t1a 동안 T1에서 결과 혼합물을 교반하는 단계;

(iv) 선택적으로 상기 온도를 온도 T2로 감소시키는 단계 및 추가 기간 t2 동안 상기 혼합물을 교반하는 단계; 및

(v) 결과 결정을 수집하는 단계;

상기 T1은 약 20℃ 이하고; 상기 T2는 T1 보다 적어도 5℃ 낮으며; 상기 t1은 적어도 1시간이고, 상기 R1은 0.5 ml/분/g 이하이며, 상기 t1a는 적어도 2시간이고 및 상기 t2는 적어도 30분이다.

15. 제 14 양태에 있어서, 상기 방법은 다음을 포함하는, 방법:

(i) 시간 t1 기간 동안 T1 온도에서 및 또는 속도 R1에서 반-용매를 TETA.4HCl의 수성 용액에 첨가하는 단계;

(ii) 선택적으로 TETA.4HCl 시드 결정을 첨가하는 단계;

(iv) 상기 온도를 온도 T2로 감소시키는 단계 및 추가 기간 t2 동안 상기 혼합물을 교반하는 단계; 및

(v) 결과 결정을 수집하는 단계;

상기 T1은 약 20℃ 이하고; 상기 T2는 약 10℃ 이하며; 상기 t1은 적어도 1시간이고, 상기 R1은 0.5 ml/분/g 이하이며, 상기 t1a는 적어도 3시간이고 및 상기 t2는 적어도 30분이다.

16. 제 15 양태에 있어서, 상기 방법은 다음을 포함하는, 방법:

(i) 시간 t1 기간 동안 T1 온도에서 및/또는 속도 R1에서 반-용매를 TETA.4HCl의 수성 용액에 첨가하는 단계;

(ii) TETA.4HCl 시드 결정을 첨가하는 단계;

(iii) 추가 기간 t1a 동안 T1에서 결과 혼합물을 교반하는 단계;

(v) 결과 결정을 수집하는 단계;

상기 T1은 약 15℃ 이하고; 상기 T2는 약 5℃ 이하며; 상기 t1은 적어도 1시간이고, 상기 R1은 0.2 ml/분/g 이하이며, 상기 t1a는 적어도 4시간이고 및 상기 t2는 적어도 30분이다.

17. 제 12 양태 내지 제 16 양태 중 어느 한 양태에 있어서, 상기 방법은 약 40℃ 아래의, 바람직하게 약 30℃ 아래의 온도에서 수집된 결정을 건조하는 단계를 추가로 포함하는 것인, 방법.

18. 제 12 양태 내지 제 17 양태 중 어느 한 양태에 있어서, 상기 수집된 결정은 약제학적으로 허용 가능한 담체와 조합되어 약제학적 조성물을 생산하는 것인, 방법.

19. 제 18 양태에 있어서, 상기 방법은 약제학적으로 허용 가능한 담체 및 결정의 혼합물을 압축하여 정제를 형성하는 단계 및 선택적으로 상기 정제를 당-코팅(sugar-coating) 또는 필름-코팅(film-coating)하는 단계를 추가로 포함하는 것인, 방법.

20. 제 12 양태 내지 제 19 양태 중 어느 한 양태에 따른 방법에 의해 수득 가능한 약제학적 조성물 또는 결정형.

21. 요법에 의해 인간 또는 동물 신체를 치료하는 데 사용하기 위한, 선행 양태 중 어느 한 양태에 따른 약제학적 조성물 또는 결정형.

22. 윌슨병(Wilson’s disease)을 예방하거나 또는 치료하는 데 사용하기 위한, 제 21 양태에 따른 약제학적 조성물 또는 결정형.

도 1a 및 1b는 크루드 형(crude form)의 TETA.4HCl를 생산하는 방법을 나타내는 순서도(flow chart)이다.
도 2는 실질적으로 순수한 형태(pure form)의 TETA.4HCl B형을 생산하는 방법을 나타내는 순서도이다.
도 3은 TETA.4HCl A형("프로파일 1")과 TETA.4HCl A 및 B형의 혼합물("프로파일 1+2")의 X-선 분말 회절(X-ray powder diffraction) 패턴을 나타낸다. 화살표는 TETA.4HCl B형의 특징적인 피크를 강조한다.
도 4는 TETA.4HCl B형의 X-선 회절 패턴을 나타낸다.
도 5a는 TETA.4HCl A형(아래) 및 B형(위)의 라만 스펙트럼을 나타낸다. 도 5b는 상단 라인에 A형과 하단 라인에 B형이 오버레이 된 스펙트럼을 나타낸다. B형 피크가 강조되어 있다.
도 6은 TETA.4HCl A형 및 TETA.4HCl B형의 Heckel 도표를 나타낸다.
도 7a는 TETA.4HCl A형으로부터 형성된 TETA.4HCl의 정제(tablet)를 나타낸다. 도 7b는 에이징(aging) 후 동일한 정제의 사진을 나타낸다. 도 7c는 정제에서 TETA.4HCl A형의 위치에 해당하는 어두워진 영역이 있는, 에이징 된 정제의 라만 분석을 나타낸다.
도 8a 및 8b는 TETA.4HCl B형의 FTIR-ATR 스펙트럼을 나타낸다. 도 8a는 전체 스펙트럼 4000 - 525 cm^-1를 나타낸다. 도 8b는 지문 영역(fingerprint region) 1800 - 525 cm^-1를 나타낸다.
도 9a는 상이한 속도로 에탄올의 수동 첨가 후 실시예 7의 샘플에 대한 X-선 분말 회절 분석, 및 A형 및 B형의 참조 패턴과의 비교를 나타낸다. 도 9b는 2θ = 20 - 29 °에서 도 9a의 확대를 나타낸다. 도 9c는 2θ = 34-37 °에서 도 9a의 확대를 나타낸다.
도 10a는 에탄올의 프로그래밍 된 첨가 후 실시예 7의 샘플에 대한 X-선 분말 회절 분석, 및 A형 및 B형의 참조 패턴과의 비교를 나타낸다. 도 10b는 2θ = 20 - 29 °에서 도 10a의 확대를 나타낸다. 도 10c는 2θ = 34-37 °에서 도 10a의 확대를 나타낸다.
도 11a 및 11b는 각각 실시예 2 및 참조 실시예 3의 DVS 분석에서 상대적 습도에 대한 질량 변화를 나타낸다.
도 12a 내지 12c는 종래의 기술 공정에 따라 생성된 생성물의 XRPD 스펙트럼 분석을 나타낸다.

TETA.4HCl 결정(Crystalline TETA.4HCl)

본 명세서에 기재된 트리에틸렌테트라민 테트라클로라이드(TETA.4HCl)의 결정형은 B형으로 알려져 있다. 이 결정형은 이의 XRPD 스펙트럼, 이의 로만 스펙트럼, 이의 녹는점, 이의 FTIR 스펙트럼 및 이의 DVS 작용(behaviour) 중 하나 이상을 특징으로 할 수 있다. 결정형의 이러한 특징의 각각의 세부 사항은 하기에 기재되어 있다. 일반적으로, 본 발명의 결정형은 이의 XRPD 스펙트럼 및/또는 이의 로만 스펙트럼, 가장 바람직하게 이의 XRPD 스펙트럼을 특징으로 한다. 그러므로, 본 발명의 결정형은 일반적으로 다음의 특징 중 적어도 하나를 가진다:

(i) 22.9, 25.4, 25.8, 26.6, 34.6 및 35.3 ± 0.1°2θ의　피크로부터 선택되는 적어도 두 개의 피크를 갖는 X-선 분말 회절(X-ray powder diffraction, XRPD) 패턴; 및/또는

일반적으로, 본 발명의 TETA.4HCl의 결정형은 22.9, 25.4, 25.8, 26.6, 34.6 및 35.3 ± 0.1°2θ의 피크로부터 선택되는 적어도 두 개의 피크를 갖는 XRPD 패턴을 갖는다. 바람직하게, 상기 XRPD 패턴은 22.9, 25.4, 25.8, 26.6, 34.6 및 35.3 ± 0.1°2θ의 피크로부터 선택되는 적어도 세 개의 피크, 보다 바람직하게는 적어도 네 개의 피크를 갖는다. 보다 바람직하게, 이러한 피크의 적어도 5개 또는 전부는 상기 XRPD 패턴에서 관찰된다. 보다 바람직하게, 본 발명의 TETA.4HCl의 결정형은 22.9, 25.4, 25.8, 26.6, 34.6 및 35.3 ± 0.05°2θ의 피크로부터 선택되는, 적어도 두 개의 피크, 바람직하게 적어도 세 개, 네 개, 다섯 개 또는 전부를 갖는 XRPD 패턴을 가진다. TETA.4HCl의 결정형이 25.4, 34.6 및 35.3 ± 0.1°2θ의, 보다 바람직하게는 25.4, 34.6 및 35.3 ± 0.05°2θ의 피크를 갖는 XRPD 패턴을 갖는 것이 특히 바람직하다.

일반적으로, 25.4 및 35.3 ± 0.1°2θ의 피크, 특히 25.4 ± 0.1°2θ의 피크는 가장 강하다. 바람직하게, 25.4 ± 0.1°2θ의 피크는 다음으로 가장 강한 피크보다 적어도 두 배 더 강하고, 보다 바람직하게는 적어도 세 배 더 강하다. 일반적으로, 35.3 ± 0.1°2θ의 피크는 다음으로 가장 강한 피크보다 적어도 두 배 강하다.

일반적으로, TETA.4HCl B형의 XRPD 패턴은 도 4에 나타낸 것과 실질적으로 유사하다.

XRPD 데이터는 PANALYTICAL X'PERT PRO MPD 회절계(diffractometer)를 이용하여 얻을 수 있다. 회절 데이터는 일반적으로 1.5418 Å의 특징적인 파장(l)을 갖는, Cu-K_α X-선 방사선을 분말 샘플에 노출시켜 획득한다. X-선은 40 kV와 40 mA의 전류가 공급된 Cu 양극으로부터 생성되었다. XRPD 데이터를 얻기 위한 작동 조건에 대한 추가 세부 사항은 본 명세서의 실시예 부분에 제시되어 있다.

일반적으로, 본 발명의 TETA.4HCl의 결정형은 943, 1173, 1527 및 1612 ± 5 cm^-1 중 두 개 이상에서 시프트(shift)를 갖는 라만 스펙트럼을 가진다. 바람직하게, 라만 스펙트럼은 943, 1173, 1527 및 1612 ± 5 cm^-1의 피크 중 적어도 두 개, 바람직하게 세 개, 보다 바람직하게 네 개 모두를 나타낸다. TETA.4HCl의 결정형이 943, 1173, 1527 및 1612 ± 2 cm-¹ 중 두 개 이상, 바람직하게 세 개, 보다 바람직하게 네 개 모두에서 시프트를 갖는 라만 스펙트럼을 갖는 것이 특히 바람직하다. TETA.4HCI의 결정형이 943 및 1173 ±5 cm^-1에서, 가장 바람직하게 943 및 1173 ± 2 cm^-1에서 시프트를 갖는 라만 스펙트럼을 갖는 것이 특히 바람직하다. 일반적으로, 라만 스펙트럼은 도 5a(상단의 스펙트럼)에 나타낸 것과 유사하다.

라만 스펙트럼은, 예를 들어, Renishaw RA802 Pharmaceutical Analyser를 사용하여 얻을 수 있다. 이는 785nm의 레이저 파장에서 작동될 수 있다. 추가 작동 조건은 본 명세서의 실시예 부분에 제시되어 있다.

TETA.4HCl B형 결정형은 저장 안정성이 있다. 따라서, 일반적으로, 20℃에서 6개월, 바람직하게는 10개월, 보다 바람직하게는 12개월 동안 보관된 본 발명의 결정형의 샘플의 라만 스펙트럼 및/또는 XRPD 패턴은 상술한 본 발명의 결정형의 것과 동일하거나, 또는 실질적으로 동일하다. 바람직하게, 20℃에서 6개월, 바람직하게는 10개월, 보다 바람직하게는 12개월 동안 보관된 본 발명의 결정형의 샘플의 적어도 90 중량%, 보다 바람직하게 적어도 95 중량%, 보다 바람직하게 적어도 98 중량%는 본 명세서에 기재된 결정형, B형을 유지한다.

TETA.4HCl B형 결정형은 습한 환경에서 안정적이다. 따라서, 일반적으로, 40℃ 및 75% 습도에서 1개월, 바람직하게는 4개월, 보다 바람직하게는 6개월 동안 보관된 본 발명의 결정형의 샘플의 라만 스펙트럼 및/또는 XRPD 패턴은, 상술한 본 발명의 결정형의 것과 동일하거나, 또는 실질적으로 동일하다. 바람직하게, 40℃ 및 75% 습도에서 1개월 동안 보관된 본 발명의 결정형의 샘플의 적어도 90 중량%, 보다 바람직하게는 적어도 95 중량%, 보다 바람직하게는 적어도 98 중량%는 본 명세서에 기재된 결정형, B형을 유지한다. 바람직하게, 40℃ 및 75% 습도에서 4개월, 바람직하게는 6개월 동안 보관된 본 발명의 결정형의 샘플의 적어도 90 중량%, 보다 바람직하게 적어도 95 중량%, 보다 바람직하게 적어도 98 중량%는 본 명세서에 기재된 결정형, B형을 유지한다.

바람직하게, 본 발명의 결정형의 저장 안정성은 XRPD 패턴에 의해 결정된다. 따라서, 바람직하게 20℃에서 6개월, 바람직하게 10개월, 보다 바람직하게 12개월 동안 보관된 본 발명의 결정형의 샘플의 XRPD 패턴은 본 명세서에 기재된 발명의 결정형의 것과 동일하거나, 또는 실질적으로 동일하다. 바람직하게, 20℃에서 6개월, 바람직하게 10개월, 보다 바람직하게 12개월 동안 보관된 본 발명의 결정형의 샘플의 적어도 90 중량%, 보다 바람직하게 적어도 95 중량%, 보다 바람직하게 적어도 98 중량%는 본 명세서에 기재된 결정형, B형의 것과 동일하거나 또는 실질적으로 동일한 XRPD 패턴을 유지한다. 또한, 바람직하게 40℃ 및 75% 습도에서 1개월, 바람직하게는 4개월, 보다 바람직하게는 6개월 동안 보관된 본 발명의 결정형의 샘플의 XRPD 패턴은 본 명세서에 기재된 발명의 결정형의 것과 동일하거나, 또는 실질적으로 동일하다. 바람직하게, 40℃ 및 75% 습도에서 1개월, 바람직하게는 4개월, 보다 바람직하게는 6개월 동안 보관된 본 발명의 결정형의 샘플의 적어도 90 중량%, 보다 바람직하게는 적어도 95 중량%, 보다 바람직하게는 적어도 98 중량%는, 본 명세서에 기재된 결정형, B형의 것과 동일하거나 또는 실질적으로 동일한 XRPD 패턴을 유지한다.

대안으로, 본 발명의 결정형의 저장 안정성은 라만 스펙트럼에 의해 결정된다. 따라서, 바람직하게 20℃에서 6개월, 바람직하게 10개월, 보다 바람직하게 12개월 동안 보관된 본 발명의 결정형의 샘플의 라만 스펙트럼은 상술한 본 발명의 결정형의 것과 동일하거나, 또는 실질적으로 동일하다. 바람직하게, 20℃에서 6개월, 바람직하게 10개월, 보다 바람직하게 12개월 동안 보관된 본 발명의 결정형의 샘플의 적어도 90 중량%, 보다 바람직하게 적어도 95 중량%, 보다 바람직하게 적어도 98 중량%는 본 명세서에 기재된 결정형, B형의 것과 동일하거나 또는 실질적으로 동일한 XRPD 패턴을 유지한다. 또한, 바람직하게 40℃ 및 75% 습도에서 1개월, 바람직하게는 4개월, 보다 바람직하게는 6개월 동안 보관된 본 발명의 결정형의 샘플의 라만 스펙트럼은, 상술한 본 발명의 결정형의 것과 동일하거나, 또는 실질적으로 동일하다. 바람직하게, 40℃ 및 75% 습도에서 1개월, 바람직하게는 4개월, 보다 바람직하게는 6개월 동안 보관된 본 발명의 결정형의 샘플의 적어도 90 중량%, 보다 바람직하게 적어도 95 중량%, 보다 바람직하게 적어도 98 중량%는, 본 명세서에 기재된 결정형, B형의 것과 동일하거나 또는 실질적으로 동일한 라만 스펙트럼을 유지한다.

본 발명의 결정형의 특별한 이점은 이의 저장 안정성에 관한 것이다. A형 TETA.4HCl로부터 얻은 정제의 보관은 40℃ 및 75% 습도에서 6개월 동안 보관 후 변색된 부분이 있는 것을 관찰되었다. 에이징 된, TETA.4HCl A형으로부터 얻은 정제는 도 7b에 나타나 있다. 이는 시간 흐름에 따른 정제의 변색을 나타낸다. 본 발명 및 TETA.4HCl B형, 특히 실질적으로 순수한 TETA.4HCl B형의 제공은 이 문제를 해결하기 위한 것이다. TETA.4HCl B형으로부터 얻은 정제는 시간이 지남에 따라 변색되는 경향이 감소된 것으로 여겨진다.

본 발명의 결정형은 일반적으로 1475, 1525, 16010, 2380, 2435, 2580, 2830 및 2880 ±5 cm^-1 중 두 개 이상, 바람직하게는 네 개 이상, 보다 바람직하게는 다섯 개 또는 여섯 개 이상, 가장 바람직하게는 모두에서의 피크를 갖는 FTIR 스펙트럼을 갖는다. 바람직하게는, 본 발명의 결정형은 1525, 2435 및 2675 ±5 cm^-1의, 가장 바람직하게는 1526, 2436 및 2674 ±2 cm^-1의 피크를 갖는 FTIR 스펙트럼을 갖는다. 바람직하게는, 본 발명의 결정형은 FTIR 스펙트럼에서 943 ±2 cm^-1의 피크를 갖는 결정형의 50 중량% 이하, 예를 들어, 40 중량% 이하, 바람직하게는 20 중량% 이하, 보다 바람직하게는 10 중량% 이하를 포함한다. 가장 바람직하게는, 결정형은 943 ±2 cm^-1의 피크를 갖는 결정형이 실질적으로 없다.

FTIR 스펙트럼은 일반적으로 FTIR-ATR 스펙트럼이며 ATR 다이아몬드 모드(diamond mode)에서 Nicolet iS5 FT-IR 분광기를 사용하여 얻어질 수 있다. FTIR 스펙트럼을 얻기에 적합한 특정 조건은 실시예 4에 더 자세히 제시되어 있다.

본 발명의 결정형은 일반적으로 DSC로 측정했을 때 약 260℃, 일반적으로 약 259℃의 녹는점을 가진다. DSC 분석은 실시예 4에 제시되어 있는 대로 수행될 수 있다. 예를 들어, 분석은 Toledo DSC3+ 장치를 사용하고 질소 플러시(nitrogen flush), 50 mL/분 아래에서, 분석 전에 뚜껑을 뚫은 40μL 밀봉된 알루미늄 팬(pan)에 샘플을 제공하여 수행될 수 있다.

DVS에 의한 본 발명의 결정형의 분석은 또한 본 결정형 B형을 A형과 구별하는 데 사용될 수 있다. 본 발명의 결정형은 일반적으로 54-57%으로부터, 50-59%으로부터 이상에서와 90%RH에서 중량 증가를 나타낸다. 일반적으로, 흡착(sorption) 및 탈착(desorprtion) 사이클(0% 내지 95% RH) 완료 후, 샘플의 중량 증가는 10% 이하, 바람직하게는 5% 이하이다. 이는 14-15%의 흡착/탈착(0-95%RH) 후 중량 증가를 나타내는 TETA.4HCl A형과 대조된다.

일반적으로, 본 발명에 따른 TETA.4HCl의 결정형은 TETA.4HCl A형을 50 중량% 이하, 예를 들어 40 중량% 이하, 바람직하게 20 중량% 이하, 보다 바람직하게 10 중량% 이하로 포함한다. 본 발명에 따른 TETA.4HCl의 바람직한 결정형은 TETA.4HCl A형이 실질적으로 없다. 본 명세서에 사용된 A형이 실질적으로 없다는 것은 결정형이 5 중량% 이하의 A형, 바람직하게 2 중량% 이하, 보다 바람직하게 1 중량% 이하 및 가장 바람직하게 0.5 중량% 이하 또는 0.1 중량% 이하의 A형을 포함한다는 것을 의미한다.

TETA.4HCl A형은 본 명세서의 참조 실시예 3에 기재된 것과 같은 표준 결정화(crystallisation) 조건 하에서 얻은 결정형이다. A형은 25.2 및 35.7 ± 0.1° 2θ의, 일반적으로 25.2 및 35.7 ± 0.05° 2θ의 피크를 갖는 XRPD 패턴을 특징으로 한다. 바람직하게 A형의 XRPD 스펙트럼은 또한 21.8, 26.9 및 28.2 ± 0.1° 2θ의, 일반적으로 21.8, 26.9 및 28.2 ± 0.05° 2θ의 피크를 가진다. 특히 A형은 도 3("프로파일 1")에 제시되어 있는 XRPD 패턴을 특징으로 한다. A형은 또한 933 및/또는 1513 ± 5 cm^-1의, 일반적으로 933 및/또는 1513 ± 2 cm^-1의 피크를 갖는 라만 스펙트럼을 특징으로 할 수 있다. 특히, A형은 933, 1167, 1513 및 1604 ± 5 cm^-1의, 일반적으로 933, 1167, 1513 및 1604 ± 2 cm^-1의 피크를 갖는 라만 스펙트럼을 특징으로 한다. 일반적으로, A형은 본 명세서의 도 5a(하단 스펙트럼)에 제시되어 있는 라만 스펙트럼을 특징으로 한다.

바람직하게는, 본 발명에 따른 결정형은 25.2 및 35.7 ± 0.1° 2θ의 피크를 갖거나, 또는 21.8, 25.2, 26.9, 28.2 및 35.7 ± 0.1° 2θ의 피크를 갖는 XRPD 패턴을 갖는 TETA.4HCl의 결정형을 50 중량% 이하, 예를 들어 40 중량% 이하, 바람직하게 20 중량% 이하, 보다 바람직하게 10 중량% 이하, 보다 바람직하게 5 중량% 이하, 2 중량% 이하, 1 중량% 이하 및 가장 바람직하게는 0.5 중량% 이하 또는 0.1 중량% 이하로 포함한다.

바람직하게는, 본 발명에 따른 결정형은 933 및/또는 1513 ± 5 cm^-1의, 일반적으로 933 및/또는 1513 ± 2 cm^-1의 피크를 갖거나, 또는 933, 1167, 1513 및 1604 cm^-1 ± 5 cm^-1의, 일반적으로 933, 1167, 1513 및 1604 ± 2 cm^-1의 피크를 갖는 라만 스펙트럼을 갖는 TETA.4HCl의 결정형을 50 중량% 이하, 예를 들어 40 중량% 이하, 바람직하게 20 중량% 이하, 보다 바람직하게 10 중량% 이하, 보다 바람직하게 5 중량% 이하, 2 중량% 이하, 1 중량% 이하 및 가장 바람직하게 0.5 중량% 이하 또는 0.1 중량% 이하로 포함한다.

바람직하게, TETA.4HCl의 결정형은 적어도 90 중량%의 B형을 포함한다. 보다 바람직하게, 결정형은 B형을 필수적으로 포함하는데, 즉 이는 실질적으로 순수한 TETA.4HCl B형이다. 결정형이 필수적으로 B형을 포함하는 경우, 이는 일반적으로 적어도 95 중량%의 TETA.4HCl B형을, 보다 바람직하게 적어도 98 중량%, 보다 바람직하게 적어도 99 중량%, 및 가장 바람직하게 적어도 99.5 중량% 또는 99.9 중량%의 TETA.4HCl B형을 포함하며, 상기 TETA.3HCl B형은 본 명세서에 제시되어 있는 XRPD 스펙트럼 및/또는 라만 스펙트럼을 특징으로 하고, 바람직하게 TETA.4HCl B형은 본 명세서에 제시되어 있는 XRPD 스펙트럼을 특징으로 한다.

본 명세서에 기재된 TETA.4HCl 결정은 일반적으로 건조된 형태로 제공된다. 따라서, 이들은 일반적으로 1 중량% 미만의 물, 바람직하게 0.5 중량% 미만의 물, 보다 바람직하게 0.1 중량% 또는 0.05 중량% 미만의 물을 포함한다. 총 잔류 용매는 바람직하게 0.1 중량% 미만, 보다 바람직하게 0.5 중량% 미만이다.

결정형 TETA.4HCl의 제조 방법

TETA.4HCl는 당 업계에서 공지된 기술에 의해 생산될 수 있다. 예를 들어, TETA 유리 염기(free base)는 구입가능하고, TETA 유리 염기는 결정 TETA 수화물로 전환되어 공지된 방법으로 분리될 수 있다. TETA 수화물은 TETA.4HCl 염을 제조하기 위해 HCl 수성 용액으로 처리될 수 있다. 일반적으로, TETA.4HCl 염은 B형 다형체 형태(polymorphic form)로 재결정되기 전에 크루드 형으로 분리된다.

결정형의 TETA.4HCl는 반-용매 결정화 공정에 의해 수득될 수 있으며, 일반적으로는 수성 용액으로부터 수득될 수 있다. 이러한 공정은 TETA.4HCl 수성 용액에 반-용매를 첨가하고, 결과 결정을 수집하는 것을 포함한다. 표준 결정화 조건하에서, 예를 들어 실온 또는 그 이상에서 결정화 및/또는 고온에서 건조하는 것을 포함하는 방법에 의해 수행될 때, 이러한 방법은 본원에서 A형으로 기재되는 TETA.4HCl의 단결정 형태(single crystalline form)를 유도하는 것으로 나타났다. A형 결정은 용매 시스템의 변화에 의해서도 수득되었다.

예를 들어, 본 발명자는 WO 2006/027705에 기술된 방법을 사용하여 TETA.4HCl을 생산했으며, 이러한 방법이 A형 결정의 생산으로 이어진다는 것을 확인하였다. 본 발명자는 트리에틸렌테트라민의 이성질체 혼합물로부터 시작되고 WO 2006/027705의 실시예 17에 기재된 결정화 조건을 사용하여 WO 2006/027705의 실시예 17을 재현하였다. 생성물은 XRPD로 분석되었으며, 결과는 도 12a 내지 12c에 나타내었다. 수득된 생성물은 TETA.4HCl A형의 피크 특징을 포함하였다. 그러나, TETA.4HCl B형의 피크 특징으로 알려진 특정 피크, 특히 약 35° 2θ 및 25.4° 2θ의 피크는 나타나지 않았으며, 이는 생산된 생성물이 TETA.4HCl A형이며, 이는 표준 실온 결정화에 의해 생성되는 것으로 알려져 있다.

본 발명자는 동일한 용매 시스템을 사용하지만 결정화 조건, 특히 공정 시간 및 온도를 조절하여 B형 결정을 수득할 수 있음을 확인하였다.

약 20℃이하, 특히 약 15℃ 이하에서 TETA.4HCl은 B형으로 생산될 수 있다. 약 20℃ 내지 30℃에서는 생성된 결정형이 단순히 결정화 온도 이외의 조건에 따라 달라질 수 있다. 따라서, 약 20℃ 초과 조건에서는 B형을 생산하기 위해 일반적으로 추가 조건을 제어할 필요가 있다. 특히, 생산되는 결정형은 결정화 속도에 따라 달라질 수 있다. 따라서, 느린 결정화는 B형 형성에 호의적이며, 빠른 결정화는 A형 형성에 호의적이다. 15-20℃의 온도에서도 결정화를 느린 속도로 수행하지 않으면 일부 A형 결정이 생성될 수 있다. 예를 들어 결정 생성을 위해 반-용매를 첨가하는 경우에는, 반-용매는 천천히 첨가되어 A형이 아닌 B형이 생성되도록 하는 것이 바람직하다.

일반적으로, 본 발명의 결정형은 약 20℃ 이하, 바람직하게는 약 15℃ 이하, 보다 바람직하게 약 10℃ 이하에서의 결정화를 통해 생성된다. 일 구현예에서, 결정화를 위한 바람직한 온도는 13℃ 이하이고, 보다 바람직하게는 7℃ 내지 13℃이다. 약 15℃ 이하, 특히 13℃ 이하의 온도에서 B형은 열역학적으로 선호되는 형태이며 결정화는 실질적으로 순수한 B형을 일반적으로 생성한다.

바람직하게, 결정화 공정의 모든 단계는 30℃ 이하에서 수행되며, 바람직하게는 약 20℃ 이하, 바람직하게는 15℃ 이하, 보다 바람직하게는 약 10℃ 이하에서 수행된다. 온도가 약 15℃ 이상인 경우에는 A형 및 B형의 혼합물이 생성될 수 있다. 온도가 약 30℃ 이상인 경우에는 오직 A형만 생성될 것이다. 온도는 결정화 동안 15℃ 이하로 유지하여 생성된 생성물이 실질적으로 순수한 B형임을 보장하는 것이 바람직하다. 약 15℃에서 20℃ 사이의 온도에서, B형 결정은 느린 속도로 반-용매를 첨가하는 결정화를 수행하여 생성될 수 있다. 특히, B형 시드 결정의 첨가와 함께 느린 용매 첨가를 수행하면, 실질적으로 순수한 B형 형성이 촉진된다. 통제된 조건에서의 느린 속도의 반-용매 첨가는 시드 결정으로부터 결정화 발생을 유도하고, A형의 분리된 결정핵 생성은 발생하지 않는다.

일반적으로, 결정화는 수성 용액에 용해된 TETA.4HCl 그램 당 TETA.4HCl 수성 용액에 0.5ml/분 이하의 반-용매 첨가 속도로 반-용매를 첨가하여 수행된다. 따라서, 바람직한 첨가 속도는 TETA.4HCl의 그램 당, 분 당 0.5 ml 반-용매 즉, 0.5 ml/분/g 이하이다. 바람직한 반-용매 첨가 속도는 0.2 ml/분/g 이하, 보다 바람직하게 약 0.1 ml/분/g 이하이다. 바람직한 첨가 속도는 0.01 내지 0.2 ml/분/g이며, 가장 바람직하게는 0.01 내지 0.1 ml/분/g이다.

따라서, 결정화는 바람직하게 약 15℃ 이하에서 바람직하게 5 ml/분/g 이하의 첨가 속도로 수행되어야 하며, 보다 바람직하게 0.2 ml/분/g 이하, 예를 들어 약 0.1 ml/분/g에서 수행되어야 하고, 가장 바람직하게 결정화는 13℃ 이하, 예를 들어 7℃ 내지 13℃에서 수행되어야 하며, 바람직하게는 0.2 ml/분/g 이하, 예를 들어 0.1 ml/분/g 이하에서 수행되어 실질적으로 순수한 B형 결정을 제공한다.

TETA.4HCl B형의 시드 결정은 바람직하게 첨가된다. 시드 결정은 반-용매 첨가 전, 첨가 중, 또는 첨가 후에 첨가될 수 있으며, 일반적으로 반-용매 첨가 전 또는 첨가 중에, 가장 바람직하게는 반-용매 첨가 전에 첨가될 수 있다. 시드 결정이 반-용매 첨가 중 또는 첨가 후에 첨가되는 경우, 결정 형성이 관찰되기 전에 첨가하는 것이 바람직하다.

결정화의 바람직한 방법은 출발 물질로 TETA.4HCl을 사용하는 것이고, 바람직하게는 정제된 TETA.4HCl을 사용하는 것이다. 출발 물질에 불순물이 있으면 원하는 다형체(polymorph)를 결정화하는 것에 영향을 미칠 수 있다. 따라서, TETA.4HCl은 바람직하게는 분리된 형태로, 즉 B형을 생산하기 위한 결정화가 시작되기 전에 생산된(그리고 일반적으로 정제된) 반응 혼합물로부터 분리된 형태이다. 또한, 크루드 TETA.4HCl은 바람직하게는 B형 생산 공정이 시작되기 전에 재결정화된다. 또한, 이것은 더 높은 순도의 출발 물질을 제공하고 본원에 기재된 방법에 따라 B형 결정이 안정적으로 생성될 수 있도록 한다.

TETA.4HCl은 일반적으로 결정화 전에 수성 용액에 용해된다. 일반적으로, 용액은 물 ml 당 0.01g 내지 10g TETA.4HCl을 포함한다. 바람직하게, 용액은 물 ml 당 0.1 g 내지 5g TETA.4HCl을 포함하며, 가장 바람직하게 용액은 물 ml 당 0.6g 내지 1.2g TETA.4HCl을 포함한다. 재결정화에 사용되는 반-용매의 부피는 일반적으로 수성 용액에 용해된 TETA.4HCl 그램 당 0.5 ml 이하이다. 반-용매의 바람직한 양은 0.2 ml/g TETA.4HCl 이하, 보다 바람직하게 약 0.1 ml/g TETA.4HCl 이하이다. 반-용매의 바람직한 양은 0.01 내지 0.2 ml/g TETA.4HCl이며, 가장 바람직하게는 0.01 내지 0.1 ml/g TETA.4HCl이다.

바람직한 B형 결정화 방법은 다음의 단계를 포함한다:

(i) 시간 t1 기간 동안 T1 온도에서 및/또는 첨가 속도 R1에서 반-용매를 TETA.4HCl의 수성 용액(바람직하게는 교반된 수성 용액)에 첨가하는 단계;

(iv) 선택적으로 상기 온도를 온도 T2로 감소시키고, 및 추가 기간 t2 동안 상기 혼합물을 교반하는 단계; 및

(v) 결과 결정을 수집하는 단계.

T1은 약 20℃ 이하, 바람직하게는 약 15℃ 이하, 보다 바람직하게 약 10℃ 이하이다. T1은 바람직하게 약 15℃ 이하, 보다 바람직하게 약 10℃ 이하가 되어 실질적으로 순수한 B형을 생성한다.

반-용매는 TETA.4HCl이 실질적으로 불용성인 임의의 용매일 수 있다. 적합한 반-용매는 에탄올(ethanol), 메탄올(methanol), 아세토니트릴(acetonitrile), 프로판-2-올(propan-2-ol), 아세톤(acetone) 및 1,4-디옥산(1,4-dioxane) 및 이들의 혼합물을 포함한다. 메탄올 및 에탄올 및 이들의 혼합물이 바람직하며, 특히 에탄올이 바람직하다.

용액은 일반적으로 첨가 단계에서 스터링(stirring)으로 교반되거나 혼합된다. 또한, 혼합물의 교반(예를 들어, 스터링)은 (iii) 및 (iv) 단계에서 적용될 수 있다.

결정화 과정은 일반적으로 장기간으로 수행된다. 따라서 t1은 일반적으로 적어도 1시간, 바람직하게는 적어도 1.5 시간이다. 반-용매의 첨가 속도 R1은 일반적으로 0.5 ml/분/g 이하이다. 바람직한 속도 R1은 0.2 ml/분/g 이하, 보다 바람직하게 약 0.1 ml/분/g 이하, 예를 들어 0.01 내지 0.2 ml/분/g이며, 가장 바람직하게는 0.01 내지 0.1 ml/분/g이다.

시드 결정이 첨가되는 경우에는, 시드 결정은 일반적으로 단계 (i) 수행 전, 수행 중, 또는 수행 후에 첨가된다. 바람직하게는, 시드 결정은 단계 (i) 수행 전 또는 단계 (i)의 반-용매 첨가 중에 첨가된다. 시드 결정이 반-용매의 첨가 중 또는 첨가 후에 첨가되는 경우에는 혼합물은 일반적으로 추가로 연장된 기간인 t1a 동안 스터링되며, 이는 바람직하게는 적어도 2 시간, 예를 들어 적어도 3시간 또는 4시간, 예를 들어 약 5 시간이다. 바람직하게는, 낮은 온도에서의 추가 스터링 단계의 기간은 또한 결정을 수집하기 전에 포함된다. 이 추가 스터링 단계는 바람직하게는 적어도 30분인 기간 t2 기간 동안 수행된다. 추가 스터링 단계는 감소된 온도 T2에서 수행된다. T2는 일반적으로 T1 보다 낮으며, 바람직하게는 T2는 T1보다 적어도 5℃ 낮으며, 보다 바람직하게 T2는 T1보다 적어도 10℃ 낮다. T2는 일반적으로 약 10℃ 이하이며, 바람직하게는 약 5℃ 이하이며, 보다 바람직하게는 약 0℃이다. 결정화의 시간 또는 속도를 늘리고 결정화의 온도를 낮추는 것이 B형의 순도를 높이는 것으로 확인되었다. 시드 결정을 도입하면 B형 결정형의 순도를 높이는 것에 도움이 된다.

상기 방법에서, 일반적으로, 상기 T1은 약 20℃ 이하이고; 상기 T2는 T1 보다 적어도 5℃ 낮으며; 상기 t1은 적어도 1시간이고, 상기 R1은 0.5 ml/분/g 이하이며, 상기 t1a는 적어도 2시간이고 및 상기 t2는 적어도 30분이다. 바람직하게, T1은 약 20℃ 이하이고; T2는 약 10℃ 이하이고; t1은 적어도 1시간이고, R1은 0.5 ml/분/g 이하이고, t1a는 적어도 3시간이고 및 t2는 적어도 30분이다. 보다 바람직하게 상기 T1은 약 15℃ 이하이고; 상기 T2는 약 5℃이하이며; 상기 t1은 적어도 1시간이고, 상기 R1은 0.2 ml/분/g 이하이며, 상기 t1a는 적어도 4시간이고 및 상기 t2는 적어도 30분이다.

결정화는 바람직하게는 불활성 환경(inert atmosphere), 예를 들면, 결정화는 질소 하에서 수행된다.

바람직한 결정화 방법은 적어도 상기 단계 (i), (iv) 및 (v)를 포함한다. 보다 바람직한 방법은 단계 (i), (iii), (iv) 및 (v)를 포함한다. 가장 바람직한 방법은 모든 단계 (i) 내지 (v)를 포함한다. 따라서, TETA.4HCl을 제조하는 바람직한 방법은 다음을 포함한다:

(i) 시간 t1 기간 동안 T1 온도에서 및/또는 속도 R1에서 반-용매를 TETA.4HCl의 수성 용액(일반적으로는 교반된 수성 용액)에 첨가하는 단계;

(ii) 선택적으로 TETA.4HCl 시드 결정을 첨가하는 단계;

(iv) 상기 온도를 온도 T2로 감소시키고, 및 추가 기간 t2 동안 상기 혼합물을 교반하는 단계; 및

(v) 결과 결정을 수집하는 단계;

상기 T1은 약 20℃ 이하이며; 상기 T2는 약 10℃ 이하이고; 상기 t1은 적어도 1시간이고, 상기 R1은 0.5 ml/분/g 이하이며, 상기 t1a는 적어도 3시간이고 및 상기 t2는 적어도 30분이다.

실질적으로 순수한 TETA.4HCl B형을 생산하는 데 적합한 추가적인 바람직한 방법은 다음을 포함한다:

(ii) TETA.4HCl 시드 결정을 첨가하는 단계;

(v) 결과 결정을 수집하는 단계;

상기 T1은 약 15℃ 이하이고; 상기 T2는 약 5℃ 이하며; 상기 t1은 적어도 1시간이고, 상기 R1은 0.2 ml/분/g 이하이며, 상기 t1a는 적어도 4시간이고 및 상기 t2는 적어도 30분이다.

결정은 수집 단계의 온도가 약 40℃ 미만, 바람직하게는 약 30℃ 미만으로 유지되는 한 임의의 적절한 수단에 의해 수집될 수 있다. 결정이 완전히 건조되기 전에 수행된 더 높은 온도 단계는 A형 결정만을 생산하는 것을 확인하였다. 가장 바람직하게, 결정을 수집하는 단계는 약 25℃ 미만에서 수행되며, 예를 들어 약 20℃ 이하에서 수행된다.

결정을 수집하기 위한 적합한 방법은 여과 및 원심분리를 포함한다. 일반적으로, 결과 결정은 건조되며, 일반적으로 약 40℃ 미만, 바람직하게는 약 30℃ 미만의 온도에서 건조된다. 결정은 건조되기 전에 세척될 수 있으며, 예를 들어 반-용매로 세척될 수 있다. 세척에 적합한 반-용매는 상술한 용매로, 특히 메탄올 또는 에탄올이며, 가장 바람직하게는 에탄올이다. 가열하면 A형 결정이 생성되기 때문에, 건조는 일반적으로 진공 건조이다. 진공 건조는 약 40℃ 미만에서 수행되는 것이 바람직하다.

건조된 생성물은 필요에 따라 예를 들어 밀링단계(milling) 또는 과립화단계(granulation)에 의해 추가로 가공될 수 있다. B형 결정은 밀링단계에서 실질적으로 안정적이다.

관련이있는 경우, 수집단계 및 세척, 건조, 및 밀링단계와 같은 추가 처리 단계는 일반적으로 질소 하와 같은 불활성 환경에서 수행된다.

약제학적 조성물 및 제형

본 발명의 약제학적 조성물은 하나 이상의 약제학적으로 허용 가능한 담체 또는 희석제와 함께 본원에 기재된 결정 TETA.4HCl B형을 포함한다. 약제학적 조성물은 임의의 적합한 제형을 취할 수 있으며, 바람직하게는 경구 투여 형태이다. 예를 들어, 상기 조성물은 정제, 캡슐제, 분말, 반고체, 서방형제, 액제, 현탁제, 또는 기타 적절한 형태를 취할 수 있다. 정제, 캡슐제, 분말, 특히 정제가 바람직하다.

대안적인 구현예에서, 상기 조성물은 비경구로 투여되며, 예를 들어 피하 또는 정맥내로 투여된다.

약제학적 제형은 본원에 기재된 방식으로 생성된 결정에 대해 추가 처리 단계를 수행함으로써 생성될 수 있다. 따라서, 일반적으로 경구 투여 형태인 조성물은 다음의 방식으로 생성될 수 있다: (a) TETA.4HCl B형을 수득하는 단계, 예를 들어 상술한 방법을 사용하여 TETA.4HCl B형을 수득하는 단계, (b) 선택적으로 수득된 결정을 밀링하는 단계 및/또는 과립화하는 단계, (c) 약제학적으로 허용 가능한 담체를 TETA.4HCl B형과 조합하는 단계, 및 (d) 선택적으로 TETA.4HCl B형과 담체를 혼합하는 단계. 적합한 담체는 이하에서 추가로 설명된다. 경구 투여 제형이 정제인 경우, 공정은 다음 단계를 추가로 포함할 수 있다: (e) 혼합물을 압축하여 정제를 형성하는 단계 및 선택적으로 정제를 당 또는 필름으로 코팅하는 단계. 대안적으로 고체 경구 투여 제형은 캡슐제 또는 분말일 수 있다. 이 경우, 본 발명의 방법은 다음 단계를 추가로 포함할 수 있다: (e) 결과 혼합물을 포장하는 단계, 예를 들어 결과 혼합물을 캡슐에 포장하는 단계. 추가 표준 단계가 공정에 포함될 수 있다, 예를 들어 밀링 단계, 과립화 단계, 당-코팅 단계, 또는 필름 코팅 단계는 공정에 포함될 수 있다.

약제학적 조성물은 일반적으로 최대 85 중량%의 TETA.4HCl을 포함한다, 예를 들어 약제학적 조성물은 최대 50 중량%의 TETA.4HCl을 포함한다. 바람직한 조성물은 무균 및 발연인자(pyrogen)가 없는 상태이다.

경구 투여 제형의 제조에 적합한 약제학적으로 허용 가능한 담체는 다음을 포함한다, 예를 들어, 가용화제(solubilising agents), 예를 들어, 사이클로덱스트린(cyclodextrins) 또는 개질된 사이클로덱스트린(modified cyclodextrins); 희석제, 예를 들어, 락토즈(lactose), 덱스트로오스(dextrose), 사카로오스(saccharose), 셀룰로오스(cellulose), 옥수수 전분(corn starch) 또는 감자 전분(potato starch); 윤활제(lubricants), 예를 들어, 실리카(silica), 탈크(talc), 스테아르산(stearic acid), 마그네슘 또는 칼슘 스테아레이트(magnesium or calcium stearate), 및/또는 폴리에틸렌 글리콜(polyethylene glycols); 결합제(binding agents); 예를 들어, 전분(starches), 트라가칸스 검(tragacanth gums), 젤라틴(gelatin), 시럽(syrup), 아카시아(acacia), 소르비톨(sorbitol), 메틸셀룰로오스(methylcellulose), 카복시메틸셀룰로오스(carboxymethylcellulose) 또는 폴리비닐 피롤리돈(polyvinyl pyrrolidone); 탈응집제(disaggregating agents), 예를 들어, 전분(starch), 알긴산(alginic acid), 알긴산염(alginates) 또는 전분 글리콜산 나트륨(sodium starch glycolate); 포화제(effervescing mixtures); 착색제(dyestuffs); 감미제(sweeteners); 레시틴(lecithin), 폴리소르베이트(polysorbates), 라우릴설페이트(laurylsulphates)와 같은 습윤제(wetting agents); 및, 일반적으로 약제학적 제형(pharmaceutical formulation)에 사용되는 무독성 및 약리학적 비활성 물질. 이러한 약제학적 제제는 예를 들어 공지된 방식으로 혼합하여 제조할 수 있다,

본 발명의 조성물은 일반적으로 높은 비율의 TETA.4HCl B형 및 적은 양의 A형을 포함한다. 바람직하게는, 본 발명의 약제학적 조성물은 TETA.4HCl A형을 10 중량% 이하로 포함한다. 바람직하게는, 본 발명의 조성물은 트리에틸렌테트라민 테트라클로라이드 A형이 실질적으로 존재하지 않는다. 본원에서 사용하는 A형이 실질적으로 존재하지 않는 것은 조성물이 TETA.4HCl A형을 5 중량% 이하로 포함하는 것을 의미하며, 바람직하게는 2 중량% 이하로 포함하는 것을 의미하며, 보다 바람직하게는 1 중량% 또는 0.5 중량% 이하로 포함하는 것을 의미하며, 가장 바람직하게는 0.1 중량% 이하로 포함하는 것을 의미한다.

의약용도

본 발명 화합물의 치료적 유효량이 대상체에 투여된다. 임의의 특정 대상체에 대한 특정 용량 수준은 사용된 특정 화합물의 활성, 연령, 체중, 일반적인 건강, 성별, 식이요법, 투여 시간, 투여 경로, 배설 속도, 약물 조합 및 치료 중인 특정 질병의 중중도를 포함하는 다양한 요인에 의해 결정된다. 최적의 용량 수준과 투여 빈도는 보통 임상 시험에 의해 결정된다.

일반적인 일일 복용량은 치료할 대상의 연령과 체중과 상태, 질병의 유형과 중증도, 및 투여의 빈도와 경로에 따라 체중 kg 당 최대 50 mg, 예를 들어 체중 kg 당 0.001 mg 내지 50 mg이다. 바람직하게는, 1일 투여량 수준은 0.05 mg 내지 2 g, 바람직하게는 0.1 mg 내지 10 mg이다. 본 발명의 화합물은 전형적으로 독성을 나타내지 않는 양으로 환자에게 투여된다.

본 발명은 또한 요법(therapy)에 의한 인간 또는 동물의 치료방법에 사용되는 본원에서 정의한 결정형 또는 본원에서 정의한 조성물을 제공한다. 특히, 본 발명의 결정형 및 조성물은 대상체의 구리 수준을 감소시키거나 및/또는 대상체에 잔존한 구리의 독성을 감소시키는 데 유용하다. 따라서, 본 발명의 결정형 및 조성물은 증가된 구리 수준과 연관된 장애 및 질병 치료에 유용하다. 특히, 본 발명의 결정형 및 조성물은 윌슨병의 예방 또는 치료에 유용하다.

TETA 자체는 윌슨병 및 구리 수준 상승과 관련된 장애 및 질병에 대해 알려진 치료법이다. 본 발명의 결정형 투여 후, 상기 화합물은 생체 내 시스템에 용해되며 결정형의 치료효과는 공지된 형태의 TETA와 동일할 것으로 기대할 수 있다.

본 발명에 따라 치료된 대상체는 인간 또는 동물 대상체일 수 있으며, 특히 인간 또는 포유동물일 수 있으며, 일반적으로는 인간일 수 있다.

실시예

참조 실시예 1: TETA.4HCl 크루드 형(crude form)의 합성

크루드 형인 TETA.4HCl은 도 1a 및 1b에 제시된 것과 같이 생성되었다.

실시예 2: TETA.4HCl B형의 합성

실질적으로 순수한 형태의 TETA.4HCl B형은 도2에 제시된 단계에 따라 생성되었다.

참조 실시예 3: TETA.4HCl A형의 합성

크루드 TETA 4HCl이 질소 조건에서 2 부피의 정제수에 용해된 다음, 수득된 용액은 여과에 의해 정화되었다. 반응기가 70℃(재킷(jacket) 반응기 온도)로 가열되고 반응 혼합물의 온도가 55 내지 60℃ 사이일 때, 55 내지 65℃ 사이에서 유지되는 매스의 온도와 같은 속도로 7 부피의 메탄올이 첨가되어 생성물이 재결정화되었다.

65℃(재킷 반응기 온도)에서 적어도 30분 이상 교반 후, 반응 혼합물은 30분 당 약 5℃의 냉각 속도를 유지하면서, 적어도 2시간 30분에 걸쳐 천천히 냉각되어 매스에서 30℃ 내지 35℃ 사이의 온도를 얻었다. 현탁액은 이어서 30℃ 내지 35℃ 사이로 유지되는 매스의 온도에서 적어도 1시간 이상 동안 교반되었다.

생성물은 10 μm 막 다공성을 가진 에나멜이 입혀진 Nutsch 필터에서 여과되었고 1.5 부피의 메탄올로 2 회 세척되었다. 강제 여과는 마지막 세척 후에 실행되어 생성물이 건조되었다. 생성물은 60℃의 진공 오븐에서 적어도 14시간 동안 건조되었다.

실시예 4: TETA.4HCl 결정 형 분석

X-선 분말 회절

상기 실시예 2 및 참조 실시예 3에서 얻어진 샘플의 수 밀리그램은 3개의 폴리머 포일(Kapton® 및 폴리프로필렌) 사이에 배치되었다. Kapton®은 약 2세타(2θ) = 5.5 °의 약한 강도와 함께 회절도(diffractogram)에서 광범위한 피크를 나타내었다.

샘플은 투과 모드로 구성되어 진 PANALYTICAL X’PERT PRO MPD 회절계에 두어 졌고, 하기 표 1에 표시된 조건을 사용하여 분석되었다. 회절 데이터는 분말 샘플을 1.5418 Å의 특징적인 파장(λ)을 갖는 Cu-K_α X-선 방사선에 노출시킴으로써 획득되었다. X-선은 40 kV 및 40 mA의 전류가 공급되는 Cu 양극으로부터 생성되었다. 분석은 (달리 명시되지 않는 한) 2 ° 내지 50 ° 사이에서 수행되었다. 회절계의 보정은 각각의 분석 전에 검증되었다.

도 3은 A형과 B형의 혼합물(“프로파일 1 + 2”)에 대한 XRPD 패턴뿐만 아니라 참조 실시예 3에 따라 생성된 결정(실질적으로 순수한 A형: “프로파일 1”)에 대한 XRPD 패턴을 보여준다. 화살표는 B형에 대한 고유한 피크를 표시한다. 도 4는 실시예 2에 따라 생성된 결정에 대한 XRPD 패턴을 나타낸다.

라만 분광법

실시예 2 및 참조 실시예3의 샘플은 라만 분광법(Raman spectroscopy)에 의해 분석되었다. Renishaw RA802 Pharmaceutical Analyser는 아래의 조건하에서 사용되었다:

스펙트럼은 도 5a 및 도 5b에 제시된다. 도 5b에서, 아래쪽 줄은 실시예 2(B형)를 나타내고 위쪽 줄은 참조 실시예 3(A형)을 나타낸다. 화살표는 B형의 고유한 이동(shift)을 나타낸다. 실시예 2에 대한 라만 스펙트럼은 943, 1173, 1527 및 1612 cm^-1에서 밴드를 나타낸다. 참조 실시예 3(A형)에 대한 라만 스펙트럼은 933, 1167, 1513 및 1604 cm^-1에서 피크를 나타낸다.

FTIR-ATR 분석

적외선 스펙트럼은 하기에 제시된 매개변수와 함께 iS7 ATR 모듈이 장착된 Nicolet iS5 FT-IR 분광기에서 측정되었다:

적외선 스펙트럼은 실시예 2(B형)에 대하여 얻어졌다. 스펙트럼은 도 8a 및 b에 제시된다.

DSC 분석

DSC 분석은 50 mL/분의 질소 플러시 조건 하에서, Mettler Toledo DSC3+(일련 번호 B531255222)를 사용하여 분석 전에 뚜껑이 뚫린 40 μl 밀봉 알루미늄 팬에서 수행되었다.

샘플의 용융에 해당하는 흡열성 이벤트가 관찰되었다. 개시온도 및 피크 온도는 아래의 표에 제시된다.

개시온도, 피크 온도 및 엔탈피

열 중량 분석(TGA)

열 중량 분석은 20 mL/분의 질소 플러시 조건 하에서, Pyris 1 TGA 분석기(일련 번호 537N7052501)를 사용하여 분석 전에 뚫린 밀봉된 알루미늄 팬에서 수행되었다.

열 중량 분석은 225℃에서 시작하여 이후에 289.5℃로 증가하는 온도에서 무게 손실을 보여준다. 이것은 분해 때문일 수 있다. 무게 손실은 10.24%이다: 225.0 내지 289.5℃ 사이에서 2.64% 및 289.5 내지 299.0℃ 사이에서 7.60%.

동적 수분 흡착 (DVS) 분석

DVS 분석은 100 ml/분의 질소 퍼지(purge) 가스가 있는 SMS DVS 고유 분석기(일련 번호 PF 140088)를 사용하여 25℃의 열린 알루미늄 팬에서 수행된다. 안정성 기준은 5분 시간 프레임(최소 10분 및 최대 100분)에서 0.002% 미만의 중량 변화였다.

DVS 등온 플롯은 도 11a(실시예 2) 및 11b(참조 실시예 3)에 제공되어 있다. DVS 분석은 높은 상대 습도 값(90%RH 이상)에서 상당한 무게 증가를 보여주는 이 두 샘플에서 수행되었다:

- 실시예 2에 대하여 적어도 +55.8%

- 참조 실시예 3에 대하여 적어도 +60.8%

탈착(desorption) 단계는 두 고체에 대한 다른 작용을 나타낸다. 실시예 2는 두 번째 탈착 단계에서 그것의 참조 중량에 거의 도달한다. 참조 실시예 3의 경우에 무게는 두 번째 탈착 단계가 끝날 때의 기준 무게보다 여전히 +14.4% 더 높다(도달된 최소값에 대해 여전히 +7.9% 더 높음). 후자의 경우 이러한 단계에서 시간 제한 기준에 도달했음을 주목할 가치가 있다(따라서 샘플의 무게는 안정화되지 않았다).

실시예 5: Heckel 테스트

Heckel 테스트의 목적은 제어된 조건 하에서 테스트 물질을 압축하여 벌크 재료의 항복 압력(yield pressure)을 유도하는 것이다. 알려진 무게의 재료는 설정된 속도로 움직이는 평평한 면의 펀치로 직경 10 mm의 다이(die) 내에서 압축된다. 펀치에 가해지는 힘은 펀치의 변위가 분말의 부피를 계산하는 데 사용되는 동안 빈번한 간격으로 정확하게 측정된다. 항복 압력은 느리고 빠른 펀치 속도에서 계산되어 재료의 변형에 대한 시간 종속적인 구성 요소가 평가된다. 실시예 2 및 참조 실시예 3에 따라 생성된 샘플은 Heckel 테스트를 받았다.

방법론

헬륨 비중측정법(pychnometry)에 의한 실제 밀도 결정

사용된 장비: Micromeritics AccuPyc II 1340

테스트 매개변수:

컵 사이즈 3.5 cm³

퍼지 수 5

퍼지 압력 19.5 psig

실행 수 10

실행 주입 압력 19.5 psig

평형 비율 0.02 psig

정밀 실행 예

풀 스케일 백분율 0.05%

테스트는 두 번 수행되었다. (목표물은 2 % 이내의 변동성을 가진다고 가정함).

압축

알려진 무게의 순수한 약물은 10 mm 직경의 평평한 면을 가진 펀치를 사용하여 이론적으로 다공성이 0이 되도록 압축된다. Compaction Simulator는 아래의 조건 하에서 사용된다:

툴링(Tooling): 10 mm 원형의 평평한 면

프로파일: V 모양의 프로파일

펀치 속도 - 느리게 0.1 mm/s

펀치 속도 - 빠르게 300 mm/s

다이 윤활: 예, 마그네슘 스테아레트(Mg stearate)가 포함된 아세톤

반복 수: 3

탄력성 보정: 예

압축하는 동안 펀치 팁의 위치가 정확하게 결정되고 로드 셀(load cell)에 의해 측정된 힘이 1 차 압축 매개변수의 기록을 생성한다. 온도와 습도는 테스트 동안 간격을 두고 모니터링 되었다.

데이터는 Heckel 방정식을 사용하고 Compaction Analysis 소프트웨어 프로그램에 의해 분석되어 항복 압력(Py)에 대한 값이 생성되었다:

여기서 D = 콤팩트의 상대 밀도

P = 적용되는 압력

K = 선형 영역에서의 선의 기울기

[참조 문헌: R.W. Heckel. Trans. Metall. Soc. AIME 221 (1961)1001-1008]

변형률 속도 민감도(Strain Rate Sensitivity, SRS)

일부 재료의 경우, 변형 특성은 적용되는 힘의 비율에 따라 변경된다. 이것은 변형률 속도 민감도를 계산하여 추정될 수 있다. 고속 압축 시의 항복 압력은 다음의 방정식을 사용하여 저속 시의 압력과 비교된다:

[참조 문헌: R.J. Roberts and R.C. Roe, Chem. Eng. Sci. 42(1987) p903].

결과

실제 밀도

*실행 1과 2 사이의 변동이 2%를 초과하였다. 3번째 실행이 수행되었다. 실행 2로부터 나온 데이터는 이상치(outlier)로 가정하고 평균 계산에 사용되지 않았다.

실험실 상태: 21.3℃/52.1% RH

실험실 상태: 21.6°C/50.0% RH

실험실 상태: 21.7℃/51.1% RH

실험실 상태: 21.7℃/51.2% RH

Heckel 테스트는 형성된 정제의 변형의 측정법이다. 압축력은 체류 시간이 압축물의 결합에 어떻게 영향을 미치는지에 대한 지표이다. 느린 속도로 생산된 참조 실시예 2의 압축물은 적당한 인장 강도(6 내지 11 kiloponds)를 갖는 것으로 밝혀졌다. 빠른 속도에서는, 강도가 약 4 내지 6 kiloponds로 감소하였다. 반면 실시예 3은 느린 속도에서 7 내지 12 kiloponds의 강도를 보여주었지만, 빠른 속도에서 9 내지 11 kiloponds의 강도를 나타내어, 실시예 3이 빠른 압축 운명(compaction fates)에서 압축된 생성물이 더 큰 인장 강도를 가진다는 것을 보여주었다. 도 6은 다른 생산 속도에서 실시예 2 및 참조 실시예 3의 변형률 속도 민감도 나타낸다.

실시예 6: 정제의 에이징(aging)

참조 실시예 3에 따라 얻은 TETA.4HCl은 압축되어 정제가 형성되었다. 정제의 이미지는 도 7a에 제공된다. 정제는 40℃ 및 75% 습도에서 6 개월 동안 에이징 되었다. 에이징 후에, 정제는 수많은 변색된 부분들을 가지고 있음이 관찰되었다. 에이징 된 정제는 이미지는 도 7b에 제공된다.

정제는 위의 실시예 4 및 TETA.4HCl의 A형과 B형에 대한 라만 스펙트럼과 비교한 결과에 제시된 것과 같은 조건 하에서 라만 분광법에 의해 분석되었다. 도 7c는 TETA.4HCl A형의 존재를 보여주는 정제의 영역을 어두운 영역으로 나타낸다. 도 7b 및 c의 비교로부터 명백한 바와 같이, TETA.4HCl A형의 영역은 정제 표면의 변색된 영역의 위치와 관련이 있다.

TETA.4HCl B형의 극미량이 정제를 형성하기 위한 TETA.4HCl의 압축 하에서 형성되었을지도 모르는 정제에서 검출되었다. TETA.4HCl B형의 영역은 에이징 된 정제에서 관찰되는 변색된 영역과 관련이 없다.

실시예 7: 결정화 과정

B형의 준비를 위한 결정화 테스트는 20℃에서 수행된다. 스타팅 용액은 에탄올/물의 혼합물(25:75)에서 준비되었고 에탄올의 첨가는 (75:25)의 비율에 도달할 때까지 수행되었다. 첫 번째 테스트는 수동으로 에탄올을 첨가하여 수행되었다. 그런 다음 추가적인 테스트는 주사기 펌프를 사용하여 수행되어 천천히 제어되는 속도로 첨가되었다.

수동 첨가(드롭 방식)

이러한 테스트에서, 첨가는 마이크로파이펫을 이용하여 수동으로 수행되었다. (25:75) 에탄올/물 혼합물의 TETA.4HCl 용액은 20℃ 항온 상태에서 교반하는 조건하에 두었다. TETA.4HCl 스타팅 용액의 양은 표 15에 제시되어 있다.

반-용매(에탄올)은 일정한 간격으로 드롭 방식을 통해 첨가되었다. 첨가의 두 가지 "속도"가 테스트되었다. 반-용매의 첨가 후에, 고체 상(solid phase)은 샘플링 되었고 X-선 회절로 분석되어 고체 상의 특성이 결정되었다. X-선 회절의 조건은 실시예 4에 제시된 것과 같다. 마지막 시험은 첨가 초기에 존재하는 B형의 시드와 함께 더 느린 첨가 속도로 수행되었다(PE1716E007-L-5). 이 시험은 회절도 상에서 관찰되는 A형의 신호가 관찰되지 않는 고체 상으로 이어진다.

결과는 표 15에 제시되어 있으며 에탄올 첨가 종료 시에 현탁액의 고체 상 분석 후 얻어지는 회절도는 도 9a, b 및 c에 제시되어 있다. 도 9a 내지 c는 가장 낮은 라인에서 시작하는 XRPD 회절도를 보여준다:

A형의 참조(도 9a 내지 c 에서의 바텀 라인)

B형의 참조

PE1716E007-L-5

PE1716E007-L-4

PE1716E007-L-3

PE1716E007-L-2

PE1716E007-L-1

PE1716E007-R-1(도 9a 내지 c 에서의 탑 라인)

프로그래밍 된 첨가 (연속적인 방식)

이 일련의 테스트에서, 반용매의 첨가는 주사기 펌프에 의해 구동되었다. 이것은 매우 낮은 속도로 연속적인 첨가를 가능하게 하였다. 위와 같이 동일한 프로토콜이 사용되었다: 표 16에 제시된 바와 같이 25:75 에탄올/물 혼합물에서, 포화에 가까운, 스타팅 물질의 용액이 준비되었다. 그런 다음 용액은 현탁액에 고체 상이 남아있을 때까지 B형으로 포화되었다: 이것은 반-용매 첨가 시작 시 B형인 시드의 존재를 보장한다.

두 가지 첨가 속도가 테스트되었다: 0.05 mL/분 및 0.1 mL/분(용액 내 750 mg 스타팅 물질에 대한). 에탄올은 75:25 에탄올/물 비율이 얻어질 때까지 이러한 선택된 속도로 첨가되었다. 약 12.5%의 농도에 해당하는 82:18까지, 그리고 약 9%의 농도에 해당하는 87.5/12.5 비율까지(스타팅 물질/총 무게) 첨가하는 두 가지 추가적인 테스트가 수행되었다.

X-선 회절 분석은 실시예 4에 제시된 조건을 사용하여 수행되었다. 결과는 아래의 표 16에 제시되어 있고 에탄올 첨가 종료 시점의 현탁액 상의 고체 상의 분석 후에 얻어진 회절도는 도 10a 내지 10c에 제시되어 있다. 이러한 것들은 75:25의 최종 에탄올/물 비율 및 87.5:12.5로 진행한 두 가지 테스트에 대해 관찰되는 A형의 신호가 없는 회절 프로파일을 보여준다. 82:18에서의 테스트에 대한 2세타(2θ) = 25.4°(A형에 해당)에서의 피크의 왼쪽에 있는 작은 숄더(shoulder).

도 10a 내지 c는 가장 낮은 라인에서 시작하는 XRPD 회절도를 보여준다:

A형의 참조(도 10a 내지 c 에서의 바텀 라인))

B형의 참조

PE1716E007-L-6

PE1716E007-L-7

PE1716E007-L-8

PE1716E007-L-9(도 10a 내지 c 에서의 탑 라인)

실시예 8: 결정화 과정

트리에틸렌테트라민(트리엔틴) 테트라하이드로클로라이드(TETA 4HCl)의 합성의 개요는 아래의 도식에 나타나 있다.

I 단계에서. 트리에틸렌테트라민(TETA)는 물과 TBME가 존재하는 상태에서 교반함으로써 트리에틸렌테트라민 수화물(TETA hydrate)에 해당하는 것으로 변환된다. 아이소프로판올(Isopropanol)은 반-용매로 첨가되고 필요한 경우에는, TETA 수화물로 시딩 된다(seeded). TEATA 수화물은 결정화되고, 여과되고 분리된다. 크루드 트리에틸렌테트라민 테트라하이드로클로라이드(Crude TETA 4HCl)는 에탄올에서 트리에틸렌테트라민 수화물(TEATA hydrate)과 수용성 염산의 반응에 의해 얻어진다(II 단계). 크루드 트리에틸렌테트라민 테트라하이드로클로라이드(Crude TETA 4HCl)는 정제된 물과 에탄올의 혼합물로부터 재결정화 된다. 크루드 트리에틸렌테트라민 테트라하이드로클로라이드(Crude TETA 4HCl)는 B형 시드의 존재 하에 정제된 물과 에탄올의 혼합물로부터 재결정화에 의해 추가로 정제되어(III 단계) 트리에틸렌테트라민 테트라하이드로클로라이드(TEAT 4HCl)를 제공한다.

상기 방법은 125 kg의 TETA로부터, 110 내지 130 kg의 배치 사이즈를 생산한다. 합성에 대한 전체 수율은 크루드 TETA 4HCl의 두 번의 재결정화를 포함하여 약 50%이다.

B형 결정을 생산하기 위한 재결정화는 도 1a, 1b 및 2의 흐름도에 요약된 대로 수행되었으나, II단계(도 1b)의 끝과 III단계(도 2) 이전에 크루드 TETA.4HCl의 추가적인 재결정화가 첨가되었다. 상기 과정은 아래와 같이 기술될 수 있다:

설비의 비활성화가 수행될 때, 모든 조작은 질소 흐름 하에서 수행된다.

I 단계: 트리에틸렌테트라민 수화물(TETA hydrate)의 제조

^● 트리에틸렌테트라민(표시량 125 kg)을 반응기에 넣은 다음 TBME(185 ± 5 kg)를 채운다. 물(약 28 kg)은 온도가 30℃ 이하로 유지되는 동안 15분 이상 교반하며 첨가된다.

^●용액은, 필요한 경우, 25 내지 35℃에서 교반하면서 트리에틸렌테트라민 수화물(약 0.1 kg)로 시딩 되어 결정화를 촉진한다.

^● 아이소프로판올(64 ± 1 kg)은 25 내지 35℃에서 첨가된다.

^●현탁액은 30 내지 40℃에서 15분 이상 가열되고, 이어서 15 내지 25℃로 90분 이상 천천히 냉각된다.

^●현탁액은 -5에서 5℃로 냉각되고 30분 이상 교반된다.

^●생성물은 여과되고 원심분리된다. 그런 다음, 샘플은 채취되어 분석(GC 어세이) 및 불순물 측정이 진행된다.

^●샘플이 충분히 순수하다면, 습식 TETA 수화물은 건조기에 채워지고 다음 단계에서 제시하는 요구 사항들을 충족할 때까지 25℃ 이하에서 건조된다.

^●건조된 생성물은 GC에 의해 순도, 외관, KF에 의해 잔류 수분, FTIR에 의해 동일성, GC에 의해 황화 회분 및 잔류 용매가 분석된다.

II 단계: 크루드 트리에틸렌테트라민 테트라하이드로클로라이드(crude TETA.4HCl)의 제조

^●트리에틸렌테트라민 수화물(TETA hydrate)은 물(85 ± 1 kg)에 용해되고 40℃ 이하에서 1시간 이상 충전되는 농축된 수용성 염산(200 ± 5 kg)으로 산성화된다. pH 값이 체크되고(목표 pH = 1.0) pH가 1.0 이하로 충족될 때까지 농축된 수용성 염산이 첨가된다.

^●반응 혼합물은 15 내지 25℃로 냉각되고 10분 이상 교반된다.

^●용액은 온도가 30℃ 이하로 유지되면서 1.5시간 이상 충전되는 에탄올 (672 ± 5 kg)로 처리된다.

^●현탁액은 -5에서 5℃로 냉각되고 30분 이상 교반된다.

^●생성물은 여과되고 고체는 에탄올(1 x 20 kg, 그 다음 3 x 25 kg)에 의해 연속적으로 세척된다.

^●크루드 트리에틸렌테트라민 테트라하이드로클로라이드(Crude TETA 4HCl)는 물(340 ± 10 kg)에 용해된다.

^●용액은 온도가 30℃ 이하로 유지되면서 1.5시간 이상 충전되는 에탄올 (909 ± 10 kg)로 처리된다.

^●현탁액은 -5에서 5℃로 냉각되고 30분 이상 교반된다.

^●생성물은 여과되고 고체는 에탄올(1 x 14 kg, 그 다음 3 x 15 kg)에 의해 연속적으로 세척된다.

III 단계: 트리에틸렌테트라민 테트라하이드로클로라이드(TETA.4HCl)의 제조

^●크루드 트리에틸렌테트라민 테트라하이드로클로라이드(crude TETA.4HCl)는 물(340 ± 10 kg)에 용해된다.

^●용액은 온도가 7 내지 13℃ 이하로 유지되면서 1.5시간 이상 충전되는 에탄올(909 ± 15 kg)로 처리된다.

^●용액은 에탄올 첨가 동안 TETA.4HCl(2 중량%)로 시딩된다.

^●현탁액은 5시간 이상 교반되고, 그 다음 -5℃로 냉각되고 30분 이상 교반된다.

^● 생성물은 여과되고 고체는 에탄올(1 x 14 kg, 그 다음 3 x 15 kg)에 의해 연속적으로 세척된다.

^●생성물 샘플은 GC에 의해 순도가 분석된다.

^●생성물은 40℃ 이하에서 건조되며 건조 감량 시험법(loss-on-drying)에 대한 관리 매개변수가 충족되면 생성물은 분쇄된다.

^●분쇄된 원료 의약품은 이중 식품 품질 폴리에틸렌 백에 질소하에 옮겨지며 그 다음 알루미늄 백에 넣어 밀봉된다. 알루미늄 백은 HDPE 드럼으로 삽입된다.

재가공

재결정화 후에 얻어지는 TETA 4HCl는 GC에 의해 불순물이 테스트된다. 만약 불순물의 레벨이 너무 높으면, III 단계가 반복될 수 있다.

Claims

다음 특징 중 적어도 하나를 갖는 트리에틸렌테트라민 테트라클로라이드(triethylenetetramine tetrachloride)의 결정형(cyrstalline form):
(i) 22.9, 25.4, 25.8, 26.6, 34.6 및 35.3 ± 0.1°2θ의 피크(peak)로부터 선택되는 적어도 두 개의 피크를 갖는 XRPD 패턴; 및/또는
(ii) 943, 1173, 1527 및 1612 ± 5 cm^-1의 라만 시프트(Raman shift)의 피크로부터 선택되는 적어도 두 개의 피크를 갖는 라만 스펙트럼(Raman spectrum).
제 1 항에 있어서, 25.4, 34.6 및 35.3 ± 0.1°2θ의 피크를 갖는 XRPD 패턴을 갖는 것인, 결정형.
제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 25.2 및 35.7 ± 0.1° 2θ의 피크를 갖는 XRPD 패턴을 갖는 트리에틸렌테트라민 테트라클로라이드 A형을 10 중량% 이하로 포함하는 것인, 결정형.
다음을 갖는 트리에틸렌테트라민 테트라클로라이드 B형을 필수적으로 포함하는 선행 청구항 중 어느 한 항에 따른 결정형:
(i) 제 1 항 또는 제 2 항에서 정의된 XRPD 패턴; 및/또는
(ii) 943, 1173, 1527 및 1612 ± 5 cm^-1의 라만 시프트의 피크로부터 선택되는 적어도 두 개의 피크를 갖는 라만 스펙트럼.
제 1 항 내지 제 4 항 중 어느 한 항에 따른 결정형 및 약제학적으로 허용 가능한 담체 또는 희석제를 포함하는 약제학적 조성물.
제 5 항에 있어서, 상기 약제학적 조성물은 제 1 항 내지 제 4 항 중 어느 한 항에 따른 결정형 및 약제학적으로 허용 가능한 담체를 포함하는 고체 경구 제형(oral dosage form)인 것인, 약제학적 조성물.
제 5 항 또는 제 6 항에 있어서, 25.2 및 35.7 ± 0.1° 2θ의 피크를 갖는 XRPD 패턴을 갖는 트리에틸렌테트라민 테트라클로라이드 A형을 10 중량% 이하, 바람직하게 5 중량% 이하, 보다 바람직하게 2 중량% 이하로 포함하는 것인, 약제학적 조성물.
제 7 항에 있어서, 25.2 및 35.7 ± 0.1° 2θ의 피크를 갖는 XRPD 패턴을 갖는 트리에틸렌테트라민 테트라클로라이드 A형이 실질적으로 없는 것인, 약제학적 조성물.
트리에틸렌테트라민 테트라클로라이드의 결정형을 생산하는 방법으로서, 상기 방법은 반-용매(anti-solvent)를 트리에틸렌테트라민 테트라클로라이드의 수성 용액에 첨가하는 단계 및 수득된 결정을 수집하는 단계를 포함하고, 상기 반-용매 첨가는 약 20℃ 이하의 온도에서 수행되는 것인, 방법.
제 9 항에 있어서, 상기 반-용매의 상기 용액으로의 첨가 속도는 수성 용액에 용해된 TETA.4HCl의 그램(gram) 당 0.5 ml/분 이하인 것인, 방법.
제 9 항 또는 제 10 항에 있어서, 상기 방법은 다음 단계를 포함하는, 방법:
(i) 시간 t1 기간 동안 온도 T1에서 및/또는 첨가 R1의 속도에서 반-용매를 TETA.4HCl의 수성 용액에 첨가하는 단계;
(ii) 선택적으로 TETA.4HCl 시드 결정(seed crystal)을 첨가하는 단계;
(iii) 선택적으로 추가 기간 t1a 동안 T1에서 결과 혼합물을 교반하는 단계;
(iv) 선택적으로 상기 온도를 온도 T2로 감소시키고, 및 추가 기간 t2 동안 상기 혼합물을 교반하는 단계; 및
(v) 결과 결정을 수집하는 단계;
상기 T1은 약 20℃ 이하고; 상기 T2는 T1 보다 적어도 5℃ 낮으며; 상기 t1은 적어도 1시간이고, 상기 R1은 0.5 ml/분/g 이하이며, 상기 t1a는 적어도 2시간이고 및 상기 t2는 적어도 30분이다.
제 11 항에 있어서, 상기 방법은 다음을 포함하는, 방법:
(i) 시간 t1 기간 동안 T1 온도에서 및/또는 속도 R1에서 반-용매를 TETA.4HCl의 수성 용액에 첨가하는 단계;
(ii) TETA.4HCl 시드 결정을 첨가하는 단계;
(iii) 추가 기간 t1a 동안 T1에서 결과 혼합물을 교반하는 단계;
(iv) 상기 온도를 온도 T2로 감소시키고, 및 추가 기간 t2 동안 상기 혼합물을 교반하는 단계; 및
(v) 결과 결정을 수집하는 단계;
상기 T1은 약 15℃ 이하고; 상기 T2는 약 5℃ 이하며; 상기 t1은 적어도 1시간이고, 상기 R1은 0.2 ml/분/g 이하이며, 상기 t1a는 적어도 4시간이고 및 상기 t2는 적어도 30분이다.
제 9 항 내지 제 12 항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 방법은 약 40℃ 미만의, 바람직하게 약 30℃ 미만의 온도에서 수집된 결정을 건조하는 단계를 추가로 포함하는 것인, 방법.
제 9 항 내지 제 13 항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 수집된 결정은 약제학적으로 허용 가능한 담체와 조합되어 약제학적 조성물을 생산하는 것인, 방법.
제 14 항에 있어서, 상기 방법은 약제학적으로 허용 가능한 담체 및 결정의 혼합물을 압축하여 정제를 형성하고 선택적으로 상기 정제를 당-코팅(sugar-coating) 또는 필름-코팅(film-coating)하는 단계를 추가로 포함하는 것인, 방법.
제 9 항 내지 제 15 항 중 어느 한 항에 따른 방법에 의해 수득 가능한 약제학적 조성물 또는 결정형.
윌슨병(Wilson's disease)의 예방 또는 치료용, 선행 청구항 중 어느 한 항에 따른 약제학적 조성물 또는 결정형.