KR20200112898A

KR20200112898A - 캐리마이신 또는 이의 활성 성분의 용도

Info

Publication number: KR20200112898A
Application number: KR1020207023822A
Authority: KR
Inventors: 밍위 시아; 시아오펑 자오; 쉰레이 지앙; 쉰동 지앙
Original assignee: 쉔양 푸양 파마슈티컬 테크놀로지 컴퍼니 리미티드
Priority date: 2018-01-19
Filing date: 2019-01-18
Publication date: 2020-10-05
Also published as: RU2020126396A3; MX2020007627A; US11413302B2; JP7152052B2; RU2771046C2; US20200338107A1; WO2019141256A1; EP3741373A1; EP3741373B1; CA3088823A1; EP3741373A4; RU2020126396A; JP2021517887A; AU2019209740A1

Abstract

질병을 예방 및/또는 치료하는 약물에 있어서, 상기 질병은 알츠하이머병, 당뇨병 또는 노화이며; 상기 약물에는 제1 활성 성분이 포함되며, 상기 제1 활성 성분에는 캐리마이신, 이소발레릴 스피라마이신I, 이소발레릴 스피라마이신II 및 이소발레릴 스피라마이신III 중의 1종; 또는 이소발레릴 스피라마이신I, 이소발레릴 스피라마이신II, 이소발레릴 스피라마이신III 중의 2종 또는 3종의 조성이 포함된다.

Description

캐리마이신 또는 이의 활성 성분의 용도

본 발명은 약물 분야에 관한 것으로, 구체적으로, 캐리마이신 또는 이의 활성 성분의 용도에 관한 것이다.

캐리마이신(Carrimycin)은 유전자변형 기술에 의해 카보마이신 생성균의 4" 이소발레릴 전이효소 유전자(4"-o-acyl-transferase)를 스피라마이신 생성균에 클론 발현하고, 스피라마이신 4"-OH를 정향 아실화하고, 4"-에 이소발레릴 측쇄를 첨가하여 형성한 4"-이소발레릴 스피라마이신을 주요 조성 성분으로 하는 신형 항생제이다.

캐리마이신은 다양한 스피라마이신 파생물로 조성되며, 주요 활성 성분인 이소발레릴 스피라마이신(I+II+III)의 총함량은 60% 이상이며, 약학적으로 허용 가능한 약학 조성물이다. 중심 구조는 16 원자 락톤 고리이며, 1개의 포로사민(Forosamine) 분자, 1개의 미카미노즈(mycaminose) 분자 및 1개의 미카로즈(Mycarose) 분자와 연결되며, 주요 성분인 이소발레릴 스피라마이신I, II, III의 구조와 스피라마이신 구조의 차이점은 미카로즈 4"-에 연결된 라디칼은 하이드록실이 아닌 이소발레릴인 것에 있다. 상기 약물은 쉔양 통리엔 등이 공동으로 1.1류 신약으로 등록하였다.

캐리마이신의 주성분 화학 구조는 식(I)과 같다:

식(I)

여기서, R=H, R'=COCH₂CH(CH₃)₂일 경우, 이소발레릴 스피라마이신I;이고,

R=COCH₃, R'=COCH₂CH(CH₃)₂일 경우, 이소발레릴 스피라마이신II;이며,

R=COCH₂CH₃, R'=COCH₂CH(CH₃)₂일 경우, 이소발레릴 스피라마이신III;이며,

캐리마이신은 16 원자 마크로라이드계 항생제이며, 자유라디칼인 카르복실기, 알콕시기, 에폭시기, 케톤기, 알데하이드기 및 한쌍의 공액 C=C를 가지며, 분자량은 약 884~982이다. 유사한 화학 구조로 인해, 캐리마이신은 마크로라이드계 항생제와 많은 공통점을 가지며, 에스테르, 아세톤, 클로로포름, 알코올 등과 같은 다수의 유기 용제에 쉽게 용해되고, 석유 에테르에 약간 용해되며, 물에 용해되기 어렵고; 분자 구조는 2개의 디메틸아민기를 함유하고 있어 약 알칼리성이며, 산성 수용액에 잘 용해되며; 온도가 상승함에 따라 용해도는 감소하는 "음의 용해도" 특성을 가진다. 캐리마이신의 주성분인 이소발레릴 스피라마이신 4"- 탄소 사슬은 비교적 길기 때문에, 친수성이 떨어지고, 이의 수중 용해도는 스피라마이신 및 4"- 아세틸 스피라마이신보다 낮다.

캐리마이신은 백색의 비결정 분말이며, 약간의 흡습성을 지니며, 비선광도는 약 -80.8°이고, 자외선의 최대 흡수 파장은 231~232nm이며, 자체적으로 약간의 형광 발색 라디칼을 가지고 있기 때문에, 진한 황산 또는 염산과 만나면 자색을 보이는 반응이 일어나고, 강한 자색 형광이 나타나며, 231~232nm 지점에서 최대 흡광도를 가진다.

이 약물은 친지성이 좋고, 조직 삼투력이 강하며, 내복 흡수력이 빠르고, 체내에서 유지되는 시간이 길며, 지속적인 항생제 지발효과가 있다. 약효와 화학 배위의 관계에 따르면, 마크로라이드계 항생제 4"-가 아실화된 후, 이의 친지성 및 체내 활성은 향상되고, 체내 항균 활성과 임상 치료 효과 모두 현저하게 향상되며, 체내에서 항생제의 안정성이 4" 하이드록시 에스테르의 탄소 사슬 증가에 따라 강화되며, 즉 이소발레릴 스피라마이신 ＞ 부티릴 스피라마이신 ＞ 프로피오닐 스피라마이신 ＞ 아세틸 스피라마이신이다.

초보적인 체내 체외 테스트 결과에 따르면, 이 약물은 다수의 G⁺균에 대해 비교적 좋은 항균 활성을 보일 뿐만 아니라, 일부 G^-균에도 일정한 작용을 하며, 각 항 기술적 스펙이 아지트로마이신, 에리트로마이신, 아세틸 스피라마이신 및 메디마이신보다 현저하게 우수하며, 특히 폐렴 마이코프라즈마에 대한 항균 활성이 제일 강하며, 에리트로마이신 약제에 내성이 있는 균, 네이세리아 고노로이애, 폐렴구균, 황색포토상구균, 녹농균, 인플루엔자 바실러스, 헤모필루스 인플루엔자, 박테로이데스 프라길리스, 레지오넬라, 박테로이데스 테타이오타오미크론 및 클로스트리디움 퍼프린젠스에 대해서도 일정한 항균 활성을 가지며, 임상적으로 에리트로마이신에 내성을 가지는 황색포도상구균에 대해서 극히 적은 교차 내성만 가진다. 캐리마이신은 주로 그람양성균의 감염성 질병 치료에 사용되며, 특히 기관지 감염 치료에 적용되며, 비뇨기 계통의 감염 등에 사용될 수도 있다.

본 출원인은 최근의 한 연구를 통해, 캐리마이신 또는 이의 활성 성분인 이소발레릴 스피라마이신I, 이소발레릴 스피라마이신II, 이소발레릴 스피라마이신III 중의 1종, 또는 이들의 조성에는 비교적 우수한 항노화, 항당뇨병 또는 항알츠하이머병 효과가 있는 것을 발견하였으며, 약물 캐리마이신 또는 이의 약물 활성 성분의 해당 분야에서의 임상시험 및 보급에 이론적 근거를 제공하였으며, 중요한 경제 및 사회적 효과를 가진다.

이를 고려하여, 본 발명이 제안된다.

본 발명은 질병을 예방 및/또는 치료하는 약물을 제공하는 것을 목적으로 한다.

상술한 목적을 구현하기 위해, 본 발명은 다음과 같은 기술 방안을 채용한다:

질병을 예방 및/또는 치료하는 약물에 있어서, 상기 질병은 알츠하이머병, 당뇨병 또는 노화;이며, 상기 약물에는 제1 활성 성분이 포함되며, 상기 제1 활성 성분에는 캐리마이신, 이소발레릴 스피라마이신I, 이소발레릴 스피라마이신II 및 이소발레릴 스피라마이신III 중의 1종;

또는 이소발레릴 스피라마이신I, 이소발레릴 스피라마이신II, 이소발레릴 스피라마이신III 중의 2종 또는 3종의 조성이 포함된다.

나아가, 상기 약물에는 제2 활성 성분이 더 포함되며;

바람직하게는, 상기 질병이 알츠하이머병일 경우, 상기 제2 활성 성분은 항알츠하이머병 약물 중의 1종 이상;이며,

상기 질병이 당뇨병일 경우, 상기 제2 활성 성분은 항당뇨병 약물 중의 1종 이상;이며,

상기 질병이 노화일 경우, 상기 제2 활성 성분은 노화 완화 또는 수명 연장 약물 중의 1종 이상이다.

나아가, 상기 약물과 약학적으로 허용 가능한 담체는 임상적으로 허용 가능한 제제로 제조되며, 바람직하게는 정제, 캡슐, 환제, 주사제, 방출조절제 및 각종 미립자 약물 투여 시스템이다.

나아가, 상기 약물의 용량은 10~1500mg/kg, 바람직하게는 50~1000mg/kg, 더 바람직하게는 100~500mg/kg이다.

본 발명에는 질병을 예방 및/또는 치료하는 조합 제품이 더 제공되며, 상기 질병은 알츠하이머병, 당뇨병 또는 노화;이며, 상기 조합 제품에는 제1 약제가 포함되며, 상기 제1 약제의 활성 성분에는 캐리마이신, 이소발레릴 스피라마이신I, 이소발레릴 스피라마이신II 및 이소발레릴 스피라마이신III 중의 1종;

나아가, 상기 조합 제품에는 제2 약제가 더 포함되며;

바람직하게는, 상기 질병이 알츠하이머병일 경우, 상기 제2 약제는 알츠하이머병 예방 및/또는 치료 관련 약물 중의 1종 이상;이며,

상기 질병이 당뇨병일 경우, 상기 제2 약제는 당뇨병 예방 및/또는 치료 관련 약물 중의 1종 이상;이며,

상기 질병이 노화일 경우, 상기 제2 약제는 노화 완화 또는 수명 연장 관련 약물 중의 1종 이상이다.

나아가, 상기 제1 약제 및 제2 약제의 용량 비율은 1~99: 99~1이며, 바람직하게는 5~95: 95~5, 더 바람직하게는 10~90: 90~10, 보다 더 바람직하게는 20~80: 80~20이다.

나아가, 상기 알츠하이머병 예방 및/또는 치료 관련 약물에는 콜린성 시스템에 작용하는 약물, N-메틸-D-아스파르테이트 수용체에 작용하는 약물, 항산화 약물, 항염증 약물, Aβ 단백질 형성을 억제하는 약물, 에스트로겐, 신경 성장 인자, 니모 디핀, 세포 사멸 억제제;가 포함되며,

상기 당뇨병 예방 및/또는 치료 관련 약물에는 비구아니드계 혈당강하제, 설포닐우레아계 혈당강하제, α-글루코시다아제 억제제, 인슐린 증감제, 비설포닐우레아계 인슐린 분비 촉진제 또는 인슐린 중의 1종 이상이 포함된다.

본 발명에는 알츠하이머병, 누트로픽, 당뇨병, 노화 완화 또는 수명 연장 방면의 예방 및/또는 치료 약물 제조에서의 상기 약물 또는 상기 조합 제품의 응용이 더 제공된다.

구체적으로, 상기 알츠하이머병, 누트로픽 방면의 예방 및/또는 치료 약물 제조에서의 응용은 아세틸콜린 가수분해를 감소시키는 약물 제조에서의 응용, 인지장애 및 운동장애 개선을 위한 약물 제조에서의 응용, 뇌의 신경 세포를 보호하는 약물 제조에서의 응용, 체중을 감소시키지 않고, 면역력을 향상시키거나, 백혈구를 증가시키는 약물 제조에서의 응용;이며,

상기 당뇨병 예방 및/또는 치료 약물 제조에서의 응용은 I형 당뇨병, II형 당뇨병 또는 특이 형태 당뇨병의 예방 및/또는 치료 약물 제조서의 응용이며, 바람직하게는 인슐린 분비 촉진, 혈당 강하 또는 인슐린 분비 β세포 보호 약물 제조에서의 응용, 또는 당뇨병을 예방 및/또는 치료하고 체중을 유지하는 약물 제조에서의 응용;이며,

상기 노화 완화 또는 수명 연장 방면의 약물 제조에서의 응용은 전사 인자 DAF-16의 활성을 변화시킴으로써 노화 완화 및/또는 수명 연장을 하는 약물 제조에서의 응용; SIR2 상동단백질 SIR2.1의 발현 수준을 증가시키고, SIR2.1이 다시 DAF-16의 활성에 영향을 주어, 노화 완화 및/또는 수명 연장을 하는 약물 제조에서의 응용; 또는 AMPK를 활성화하여, FOXO/DAF-16의 활성을 직접 향상시키는, 노화 완화 및/또는 수명 연장을 하는 약물 제조에서의 응용이다.

이하에서 본 발명을 자세하게 설명한다.

본 발명은 알츠하이머병을 예방 및/또는 치료하는 약물을 제공하는 것을 첫 번째 목적으로 한다.

상술한 발명을 구현하기 위해, 본 발명은 다음과 같은 기술 방안을 채용한다:

본 발명은 알츠하이머병을 예방 및/또는 치료하는 약물을 제공하며, 상기 약물의 유효 성분에는 캐리마이신, 이소발레릴 스피라마이신III, 이소발레릴 스피라마이신II, 이소발레릴 스피라마이신I 중의 1종; 또는 이소발레릴 스피라마이신I, 이소발레릴 스피라마이신II, 이소발레릴 스피라마이신III 중의 2종 또는 3종의 조성이 포함된다.

캐리마이신은 복수의 활성 성분의 혼합물이며, 이소발레릴 스피라마이신I, 이소발레릴 스피라마이신II, 이소발레릴 스피라마이신III 이 3가지 활성 성분 이외에도, 기타 불순물을 더 포함한다.

나아가, 상기 약물에는 약학적으로 허용 가능한 담체가 포함된다.

나아가, 상기 약물은 임상적으로 허용 가능한 정제, 캡슐, 환제, 주사제, 방출조절제 및 각종 미립자 약물 투여 시스템으로 제조된다.

나아가, 상기 약물의 용량은 10~1500mg/kg이다.

나아가, 상기 약물의 용량은 50~1000mg/kg이다.

나아가, 상기 약물의 용량은 100~500mg/kg이다.

본 발명에는 알츠하이머병을 예방 및/또는 치료하는 조합 제품이 더 제공되며, 상기 조합 제품에는 제1 약제가 포함되며, 상기 제1 약제의 활성 성분에는 캐리마이신, 이소발레릴 스피라마이신III, 이소발레릴 스피라마이신II, 이소발레릴 스피라마이신I 중의 1종; 또는 이소발레릴 스피라마이신I, 이소발레릴 스피라마이신II, 이소발레릴 스피라마이신III 중의 2종 또는 3종의 조성이 포함된다.

나아가, 상기 조합 제품에는 제2 약제가 더 포함된다.

나아가, 상기 제2 약제에는 알츠하이머병 예방 및/또는 치료 관련 약물 중의 1종 이상이 포함된다.

나아가, 상기 알츠하이머병 예방 및/또는 치료 관련 약물에는 콜린성 시스템에 작용하는 약물, N-메틸-D-아스파르테이트 수용체에 작용하는 약물, 항산화 약물, 항염증 약물, Aβ 단백질 형성을 억제하는 약물, 에스트로겐, 신경 성장 인자, 니모 디핀, 세포 사멸 억제제가 포함된다.

본 발명에는 임의의 상기 약물 또는 임의의 상기 조합 제품의 알츠하이머병, 누트로픽 예방 및/또는 치료에서의 응용이 더 제공된다.

알츠하이머병(AD)은 진행성 치매를 주요 임상적 증상으로 하는 신경 퇴행성 질환이며, 콜린성 손상 가설은 비교적 일찍 공인된 알츠하이머병 (AD) 학설로, 콜린성 손상은 AD의 중요한 원인으로 여겨지고 있으며, 콜린성 시스템은 AD 약물의 중요한 표적으로 간주되며, 실험에 따르면, 본 발명의 약물은 아세틸 콜린의 가수분해를 감소시킴으로써 뇌의 해마 및 피질에서 아세틸 콜린의 함량을 증가시켜, 인지 기능을 향상 시킴으로써, 알츠하이머병의 예방 및/또는 치료를 구현한다.

본 발명에는 임의의 상기 약물 또는 임의의 상기 조합 제품의 아세틸 콜린의 가수분해 감소에서의 응용이 더 제공된다.

본 발명에는 임의의 상기 약물 또는 임의의 상기 조합 제품의 인지장애 및 운동장애 개선에서의 응용이 더 제공된다.

본 발명에는 임의의 상기 약물 또는 임의의 상기 조합 제품의 뇌 내 신경세포 보호에서의 응용이 더 제공된다.

본 발명에는 임의의 상기 약물 또는 임의의 상기 조합 제품의 체중 유지, 면역력 향상, 백혈구 증가에서의 응용이 더 제공된다.

본 발명은 당뇨병 예방 및/또는 치료 약물을 제공하는 것을 두 번째 목적으로 한다.

본 발명의 두 번째 목적을 구현하기 위해, 본 발명은 다음과 같은 기술 방안을 채용한다:

당뇨병 예방 및/또는 치료 약물에 있어서, 상기 약물의 유효 성분에는 캐리마이신, 이소발레릴 스피라마이신I, 이소발레릴 스피라마이신II, 이소발레릴 스피라마이신III 중의 1종, 또는 이소발레릴 스피라마이신I, 이소발레릴 스피라마이신II, 이소발레릴 스피라마이신III 중의 2종 또는 3종의 조성이 포함된다.

본 발명의 상기 약물에는 약학적으로 허용 가능한 담체가 포함된다.

본 발명의 상기 약물은 약학적으로 허용 가능한 담체와 함께 정제, 캡슐, 환제, 주사제, 방출조절제 및 각종 미립자 약물 투여 시스템으로 제조될 수 있다.

본 발명의 상기 약물 중의 유효 성분의 용량은 100~1500mg/, 바람직하게는 50~1000mg/kg, 더 바람직하게는 100~500mg/kg이다.

상기 당뇨병은 I형 당뇨병, II형 당뇨병 또는 특이 형태 당뇨병이다.

당뇨병의 발병 요인은 매우 다양하며, 본 발명의 당뇨병 예방 및/또는 치료 약물은 주로: Th1 및 Th2 세포 및 이들의 발현 인자가 균형을 잃어, 바이러스가 신체에 침입하여 β 세포를 잃거나, UCP2 유전자가 과발현되거나 상염색체 변이의 요인으로 인한 당뇨병을 치료한다.

본 발명에는 당뇨병을 예방 및/또는 치료하는 조합 제품이 더 제공되며, 상기 조합 제품에는 제1 약제가 포함되며, 상기 제1 약제의 유효 성분에는 캐리마이신, 이소발레릴 스피라마이신I, 이소발레릴 스피라마이신II, 이소발레릴 스피라마이신III 중의 1종, 또는 이소발레릴 스피라마이신I, 이소발레릴 스피라마이신II, 이소발레릴 스피라마이신III 중의 2종 또는 3종의 조성이 포함된다.

본 발명의 상기 조합 제품에는 제2 약제가 더 포함되며, 상기 제2 약제에는 당뇨병을 치료하는 약물 중의 1종 이상이 포함된다.

바람직하게는, 상기 제2 약제에는 비구아니드계 혈당강하제, 설포닐우레아계 혈당강하제, α-글루코시다아제 억제제, 인슐린 증감제, 비설포닐우레아계 인슐린 분비 촉진제 또는 인슐린 중의 1종 이상이 포함된다.

바람직하게는, 제1 약제 및 제2 약제의 용량 비율은 1~99: 99~1이며, 바람직하게는 5~95: 95~5, 더 바람직하게는 10~90: 90~10, 보다 더 바람직하게는 20~80: 80~20이다.

본 발명에는 캐리마이신, 이소발레릴 스피라마이신I, 이소발레릴 스피라마이신II, 이소발레릴 스피라마이신III 중의 1종 이상을 당뇨병 예방 및/또는 치료 약물의 제조에 사용하는 용도가 더 제공되며;

본 발명에는 캐리마이신, 이소발레릴 스피라마이신I, 이소발레릴 스피라마이신II, 이소발레릴 스피라마이신III 중의 1종 이상을 인슐린 분비 촉진, 혈당 강하 또는 인슐린 분비 β세포 보호 약물 제조에 사용하는 용도가 더 제공된다.

본 발명에는 캐리마이신, 이소발레릴 스피라마이신I, 이소발레릴 스피라마이신II, 이소발레릴 스피라마이신III 중의 1종 이상을 당뇨병을 예방 및/또는 치료하고 체중을 유지하는 약물 제조에 사용하는 용도가 더 제공된다.

본 발명은 노화 완화 및/또는 수명 연장을 하는 약물을 제공하는 것을 세 번째 목적으로 한다.

본 발명의 세 번째 목적을 구현하기 위해, 본 발명은 다음과 같은 기술 방안을 채용한다:

노화 완화 및/또는 수명 연장을 하는 조성물에 있어서, 상기 조성물에는 제1 활성 성분이 포함되며, 상기 제1 활성 성분은 캐리마이신, 이소발레릴 스피라마이신I, 이소발레릴 스피라마이신II, 이소발레릴 스피라마이신III 중의 1종, 또는 이소발레릴 스피라마이신I, 이소발레릴 스피라마이신II, 이소발레릴 스피라마이신III 중의 2종 또는 3종의 조성이다.

나아가, 상기 조성물에는 제2 활성 성분이 더 포함된다.

나아가, 상기 제2 활성 성분에는 노화 완화 또는 수명 연장 약물 중의 1종 이상이 포함된다.

본 발명에서, 제1 활성 성분 중의 1종 이상과 제2 활성 성분 중의 1종 이상으로 복합제제를 제조할 수 있다.

나아가, 복합제제를 제조할 경우, 제1 활성 성분과 제2 활성 성분의 용량 비율은 1~99: 99~1이며, 바람직하게는 5~95: 95~5, 더 바람직하게는 10~90: 90~10, 보다 더 바람직하게는 20~80: 80~20이다.

나아가, 상기 조성물과 허용 가능한 보조제는 약물, 건강 기능 식품 또는 식품 첨가제로 제조된다.

나아가, 상기 약물은 약학적으로 허용 가능한 제형이다.

나아가, 상기 약학적으로 허용 가능한 제형은 정제, 캡슐, 환제, 주사제, 방출조절제 및 각종 미립자 약물 투여 제제이다.

본 발명에는 노화 완화 및/또는 수명 연장을 하는 조합 제품을 더 제공하며, 상기 조합 제품에는 제1 약제가 포함되며, 상기 제1 약제의 활성 성분에는 캐리마이신, 이소발레릴 스피라마이신I, 이소발레릴 스피라마이신II, 이소발레릴 스피라마이신III 중의 1종, 또는 이소발레릴 스피라마이신I, 이소발레릴 스피라마이신II, 이소발레릴 스피라마이신III 중의 2종 또는 3종의 조성이 포함된다.

본 발명에서, 캐리마이신은 복수의 활성 성분의 혼합물이며, 이소발레릴 스피라마이신I, 이소발레릴 스피라마이신II, 이소발레릴 스피라마이신III 이 3가지 활성 성분 이외에도, 기타 불순물을 더 포함한다.

나아가, 상기 조합 제품에는 제2 약제가 더 포함된다.

나아가, 상기 제2 약제에는 노화 완화 또는 수명 연장 약물 중의 1종 이상이 포함된다.

본 발명에서, 제1 약제와 제2 약제를 조합하여 약물을 투여할 수 있으며, 결합하여 약물을 투여할 경우, 제1 약제와 제2 약제의 투여 순서에는 제한이 없으며, 제1 약제를 먼저 투여하거나, 제2 약제를 먼저 투여할 수 있으며, 두 가지 약제를 동시에 투여할 수도 있다.

조합하여 약물을 투여할 경우, 제1 약제와 제2 약제의 용량 비율은 1~99: 99~1이며, 바람직하게는 5~95: 95~5, 더 바람직하게는 10~90: 90~10, 보다 더 바람직하게는 20~80: 80~20이다.

나아가, 상기 제1 약제는 약학적으로 허용 가능한 제형이다.

나아가, 상기 약학적으로 허용 가능한 제형은 정제, 캡슐, 환제, 주사제, 방출조절제 및 미립자 약물 투여제이다.

본 발명에는 노화 완화 및/또는 수명 연장 제품의 제조에서의 상기 조성물 또는 조합 제품의 응용이 더 제공된다.

구체적으로, 전사 인자 DAF-16의 활성을 변화시킴으로써 노화 완화 및/또는 수명 연장을 하는 약물 제조에서의 상기 조합 제품의 응용; SIR2 상동단백질 SIR2.1의 발현 수준을 증가시키고, SIR2.1이 다시 DAF-16의 활성에 영향을 주어 노화 완화 및/또는 수명 연장을 하는 약물 제조에서의 응용; 또는 AMPK를 활성화하여, FOXO/DAF-16의 활성을 직접 향상시키는, 노화 완화 및/또는 수명 연장을 하는 약물 제조에서의 응용에 관한 것이다.

나아가, 상기 제품은 약물, 건강 기능 식품 또는 식품 첨가제이다.

연구에서 야생형 예쁜꼬마선충을 투여군과 블랭크 대조군으로 나누고, 우선 선충의 성장 곡선을 결정하기 위해 상이한 농도를 부여하였으며; 선충의 산란량 및 행동 능력과 같이 수명과 관련되는 생리학적 지표에 대한 캐리마이신의 영향을 관찰한다. 또한 캐리마이신을 투여한 후 37℃ 고온 스트레스, 자외선 조사 자극 이후의 선충 생존율을 측정한다.

선충을 항노화 모델에 적용하는 장점은 다음과 같다:

선충 유전자의 60~80%가 인간 관련 유전자와 고도로 유사하며, 지금까지 발견된 신호 전달 경로에서, 선충은 이들 중 12개를 가지므로, 본 발명은 야생형 예쁜꼬마선충을 항노화 약물 스크리닝을 위한 모델 유기체로 사용한다. 선충의 풍부한 유전자 자원을 이용하여, 연구 목적에 따라 적절한 돌연변이체를 선택하고, 노화와 항노화의 메커니즘을 연구할 수 있으며, 실제로 노화 메커니즘의 몇몇 주요 이론은 선충에서 입증되었다. 따라서, 선충에 항노화 효과가 있는 약물은 일반적으로 인간에게도 동일한 효능을 가지는 것으로 간주된다.

예쁜꼬마선충은 30년 동안 수명 분석에 사용되고 있다. 이의 독특한 장점으로 인해, 노화 연구에서 가장 선호하는 모델로 사용되고 있다. 선충의 세대주기는 3일 정도로 빠르며, 수명은 3주 정도로 짧다. 이는 실험의 반복 안정성이 가능하도록 한다. 실험 방법의 신뢰성 및 실험 결과의 정확성을 보장하고, 약물 스크리닝에서 보다 정확하고 신뢰할 수 있는 정보를 확보하기 위해, 반복 실험이 필요하다. 예쁜꼬마선충은 이와 같은 독특한 장점으로 인해, 노화 연구에서 가장 선호하는 모델로 사용되고 있다. 따라서 선충은 조성물의 항노화 작용 평가에 사용될 수 있으며, 나아가 항노화 약물 제조에 사용되는 조성물을 판단할 수 있다.

연구 결과에 따르면, 캐리마이신은 예쁜꼬마선충에 대한 항노화 작용이 있다.

본 발명에서, 상기 약물은 본 분야의 통상적인 방법에 의해 약학적으로 허용 가능한 정제, 캡슐 등 각종 제형으로 제조될 수 있다.

본 발명에서, 상기 약물의 용량은 10~1500mg/kg; 바람직하게는 50~1000mg/kg; 더 바람직하게는 100~500mg/kg이다.

본 출원인은 시험을 통해, 캐리마이신 또는 이의 약물 활성 성분인 이소발레릴 스피라마이신I, 이소발레릴 스피라마이신II, 이소발레릴 스피라마이신III 또는 이들의 조성에 비교적 우수한 항알츠하이머병, 항당뇨병 또는 항노화 효과가 있는 것을 발견하였으며, 약물 캐리마이신 또는 이의 약물 활성 성분의 해당 분야에서의 임상시험 및 보급에 이론적 근거를 제공하였으며, 이는 중요한 경제 및 사회적 효과를 가진다.

도 1은 본 발명의 Y형 미로 실험에서의 각 그룹 래트의 자발적 교체 반응 비율을 나타내며;
도 2는 본 발명의 Y형 미로 실험에서의 각 그룹 래트의 암 진입 총횟수를 나타내며;
도 3은 본 발명의 새로운 물체에 대한 인식 실험에서의 각 그룹 래트의 1시간 이후의 새로운 물체에 대한 선호도 지수를 나타내며;
도 4는 본 발명의 새로운 물체에 대한 인식 실험에서의 각 그룹 래트의 24시간 이후의 새로운 물체에 대한 선호도 지수를 나타내며;
도 5는 본 발명의 새로운 물체에 대한 인식 실험에서의 각 그룹 래트의 1시간 이후의 새로운 물체에 대한 변별도 지수를 나타내며;
도 6은 본 발명의 새로운 물체에 대한 인식 실험에서의 각 그룹 래트의 24시간 이후의 새로운 물체에 대한 변별도 지수를 나타내며;
도 7은 본 발명의 수중 미로 실험에서의 각 그룹 래트의 탈출 잠복기를 나타내며;
도 8은 본 발명의 수중 미로 실험에서 각 그룹 래트가 플랫폼을 가로지르는 횟수를 나타내며;
도 9는 본 발명의 수중 미로 실험에서의 각 그룹 래트의 수영 속도를 나타내며;
도 10은 캐리마이신 투여가 수명 주기에 주는 영향을 나타내며;
도 11-a는 캐리마이신 5μg/ml 투여 이후에 측정한 운동지표이며;
도 11-b는 캐리마이신 10μg/ml 투여 이후에 측정한 운동지표이며;
도 12는 캐리마이신 투여 이후 열 스트레스 반응에서 측정한 생존율이며;
도 13은 캐리마이신 투여 이후에 UV 조사 환경에서 측정한 생존율이며;
도 14-a는 캐리마이신을 10일 동안 투여한 후에 측정한 형광강도이며;
도 14-b는 캐리마이신을 15일 동안 투여한 후에 측정한 형광강도이며;
도 15는 캐리마이신 투여 이후에 측정한 형광강도이며;
도 16-a는 캐리마이신을 6일 동안 투여한 후 측정한 TJ356 선충의 DAF-16 핵이동 상황이며;
도 16-b는 캐리마이신을 6일 동안 투여한 후에 측정한 TJ356 선충의 형광강도이며;
도면에서 KL은 캐리마이신을 나타내고, RES는 레스베라트롤을 나타낸다.

본 발명 실시예의 목적, 기술방안 및 장점을 더 명확하게 설명하기 위해, 이하에서 본 발명의 실시예와 결합하여, 실시예의 기술방안을 명확하고 완정하게 설명하며, 이하 실시예는 본 발명을 설명할 뿐, 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.

설명해야할 것은, 이하 실시예에서의 약물 캐리마이신은 이소발레릴 스피라마이신I, 이소발레릴 스피라마이신II, 이소발레릴 스피라마이신III 중의 1종 또는 여러 종의 조성물일 수 있다.

실시예 1. 캐리마이신 정제

규격: 200mg/350mg

정제 핵의 처방:

캐리마이신 200g

아비셀 110g

카르복시메틸스타치나트륨 22g

포비돈 K₃₀(5%) 15g

스테아린산마그네슘 3g

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1,000알 제조

코팅액 처방:

오파드라이II 21g

증류수 적당량

------------------------------------

105ml 제조

제조공정:

정제 핵의 제조: 주약과 보조제를 각각 100 메쉬 체로 치고, 처방량의 캐리마이신, 아비셀과 1/2 처방량의 카르복시메틸스타치나트륨을 골고루 섞은 후, 5% 포비돈 K₃₀수용액을 첨가하여 연제를 만들고, 18 메쉬 체로 과립을 제조하고, 젖은 과립을 60℃ 통풍 조건 하에서 2시간 건조하며; 건조 후 18 메쉬 체로 과립을 체질하고, 1/2 처방량의 카르복시메틸스타치나트륨과 스테아린산마그네슘을 골고루 섞어 넣고, 직경 11mm의 얕은 오목형 다이로 정제함으로써, 정제 중량 350mg, 경도 6.5kg의 정제 코어를 얻는다.

코팅액의 제조: 필요한 오파드라이II(백색)의 무게를 달고, 필요한 양의 물을 여러 차례에 나누어 배액 용기에 부으며, 전부 부은 다음, 교반 속도를 늦추어, 소용돌이가 사라지도록, 계속하여 30분 동안 교반하여 얻는다.

필름 코팅의 제조: 정제 코어를 코팅 솥에 넣고, 코팅 조건을 확인하며, 메인 설비 속도 20r/min, 입풍 온도 40℃, 송풍 온도 30℃, 분사 압력 0.02Mpa, 분사 유량 1ml/min으로 코팅하며, 안정된 다음 지속적으로 1.5시간 동안 분사 코팅하여, 정제 표면이 매끄럽고, 색갈이 균일하며, 필름 코팅 검수 기준에 부합되도록 하면 합격이다. 코팅 후 무게는 5% 정도 증가한다.

실시예 2. 캐리마이신 정제(10,000알로 계산함）

처방:

캐리마이신 원분 1,000g

저치환도 하이드록시프로필셀룰로오스(5%) 92.5g

카르복시메틸스타치나트륨(3%) 55.5g

스테아린산마그네슘(1%) 18.5g

전분 총 중량 - 기타 원료와 보조재의 중량

총 중량 1,850g

제조공정: 적당한 량의 전분을 취하여, 농도가 15%가 되도록 희석한 후, 크림처럼 될 때까지 가열하여, 접착제를 만들고; 주재료 캐리마이신, 보조재 전분, 저치환도 하이드록시프로필셀룰로오스, 카르복시메틸스타치나트륨, 스테아린산 마그네슘을 각각 100 메쉬 체로 치고, 처방량에 따라, 필요한 만큼 주재료와 보조재를 취하고; 약물 A, 전분, 저치환도 하이드록시프로필셀룰로오스를 균일하게 충분히 혼합한 후, 전분 농도가 15%인 전분을 이용하여 연제를 만들며, 14 메쉬 체로 과립을 제조하고, 50~60℃ 온도에서 건조하며, 수분은 3~5%로 제한하고, 14 메쉬 체로 체질하며, 카르복시메틸스타치나트륨과 스테아린산 마그네슘을 넣어 과립의 함량을 측정하며; 과립 함량에 기초하여, 정제의 무게를 측정하고, 정제를 프레스하여(Φ9mm 얕은 오목형 펀치), 정제 중량 편차를 검사하고; 검사에 합격한 후 포장한다.

실시예 3. 캐리마이신 캡슐(10,000알로 계산함)

처방:

캐리마이신 1,000g

전분 1,080 - 약물 A 원분 중량

약용 3호 캡슐 1,000알

액체 파라핀 50ml

제조공정: 공정 처방에 따라 주재료 캐리마이신과 보조재인 약용 전분의 무게를 각각 달고, 혼합기에 넣어 1.5~2시간을 충분히 혼합하며; 표본을 추출하여 측정한 함량의 수치는 이론수치와 기본적으로 일치해야 하며(캡슐 하나의 내용량은 약 0.105g), 자동 캡슐기기 작동 요구에 따라 검증에 합격한 약용 3호 캡슐 및 혼합된 포장 예정인 원료를 각각 포장용 기계에 넣어 충전하며, 충전된 캡슐에 대해 편차를 검증하며(±10%이내，＜0.3g), 용해율은 요구에 부합해야 하며, 검증 후 요구에 부합하는 캡슐을 폴리싱 머신에 넣고 액체 파라핀을 첨가하여 15~20분간 폴리싱한 후, 꺼내어 완성품 포장 용기 점검을 진행한다.

실시예 4. 캐리마이신 드라이 시럽(10,000팩으로 계산함）

처방:

캐리마이신 원분 1,250g

구연산(0.5%) 15g

사카로즈 총 중량 - 기타 원료와 보조재

총 중량 5,000g

색소(쿠르쿠민) 약 1g

제조공정: 고속 제트 분쇄기로 캐리마이신 원분, 구연산, 사카로즈를 각각 분쇄하여 과립으로 만들고, 그 중에 85%는 300 메쉬 체로 치고, 나머지 15%는 180 메쉬 체로 치며, 분쇄된 가루를 처방에 따라 무게를 단 후 1~1.5시간 동안 충분히 혼합하여, 그 함량을 측정하고, 팩당 함량을 계산하며(이론적인 팩당 함량은 500mg임), 이어서 혼합물을 비닐 포장용 기계에 넣고, 알루미늄 박지를 넣은 후, 분리기 제어 요구에 따라 나누어 담되, 팩당 함량 편차는 ±÷5% 이내로 제한하고, 패킹하고 테스트에 합격하면 겉포장을 한다.

실시예 5. 캐리마이신 과립제(10,000팩으로 계산함）

처방:

캐리마이신 원분 1,250g

슈가파우더 20,000g

덱스트린 9,000g

5%PVP-K₃₀ 적당량

제조공정: 캐리마이신, 슈가파우더와 덱스트린을 120 메쉬 체로 치고, 처방량에 따라 캐리마이신, 슈가파우더와 덱스트린 무게를 단 다음 균일하게 혼합하며, 균일하게 혼합한 상기 재료를 5%PVP-K₃₀의 점액을 이용하여 연제를 만들고, 진동 과립기로 과립을 만들고, 70℃의 온도에서 건조하고, 체로 친 다음, 테스트에 합격하면 분리하여 포장한다.

실시예 6. 동결건조 주사용 분말

캐리마이신 500mg을 무게를 달아 몰 량이 동일한 아디프산과 균일하게 혼합하여 5ml의 정제수에 용해하여, 담황색 투명액체를 얻되, pH는 4.6~5.6 이어야 한다. 이어서 동결건조 프롭프엔트로 40mg의 마니톨을 넣고, 저온에서 쾌속으로 9h 냉동 후, 동결건조하여, 담황색의 푸석한 덩어리를 얻으며, 사용 전에 10ml의 무균수를 사용하여 용해한다.

시험예 1. 세포 실험을 이용하여 캐리마이신의 섬세포 보호 작용 구비 여부 확인

측정의 목적은 테스트 샘플인 캐리마이신의 체외에서의 췌장 β 세포 보호 작용을 평가하는 것이다.

세포주:

래트 췌장 종양 세포인 INS 세포는 중국의학과학원 기초연구소 세포자원센터에서 구매하였다.

시약제:

RPMI 1640 배양액 및 송아지 태아 혈청은 미국 Gibco사에서 구매하였고, 트립신, 글루타민, 페니실린, 스트렙토 마이신, 디메틸 술폭시드(DMSO), 메틸 티아졸 테트라졸리움(MTT), 알록산 모노하이드레이트(Alloxan monohydrate, 순도≥◎98.0%)는 미국 Sigma사에서 구매하였다.

측정 기구:

이산화탄소 인큐베이터(Sanyo, Japan), 효소 결합 면역 측정기(Tecan, Austria), 96웰 배양 플레이트(Corning, USA), 도립 현미경 (Motic, China).

동작 단계는 다음과 같다:

부착세포:

INS-1 세포는 부착세포이며, 로그 생장기의 INS-1 세포를 채용하며, 트립신을 사용하여 소화시키고, 완전 배지를 사용하여 취타하여, 단일 세포 현탁액을 제조하고, 세포 농도를 1*10⁵개/ml로 조절하여, 96웰 배양 플레이트에 접종하며, 웰당 100μL씩, 5%CO₂, 37℃ 환경에서 24시간 배양한다. 실험 요구에 따라 그룹을 나누고, 24mmol/L의 알록산으로 약물군 세포를 손상시키며, 동시에 시험 약물인 캐리마이신을 상이한 농도로(0.2mM, 0.4mM, 0.8mM) 투여하며, 각 농도에 대해 4개의 복제 웰을 설치하며, 37℃ 환경에서 계속하여 24시간 배양한다. 이외에 정상대조군(약물 처리를 전혀 하지 않음), 모델군(알록산에 의한 세포 손상만 진행), 양성대조군(알록산 처리에 기초하여 메트포르민 0.5mmol/L첨가)을 설정하고, 상청액을 버리며, PBS로 조심스럽게 3회 세척하며, 0.5 mg/ml의 MTT를 함유하는 새로 제조된 배지 100μL를 각 웰에 첨가하고, 37℃에서 4시간 동안 계속하여 배양한다. 상청액을 조심스럽게 버리고, DMSO를 150mL 첨가하며, 마이크로 쉐이커로 10분 동안 균일하게 혼합한 후, 효소 면역 측정기를 사용하여 492nm에서 광학밀도를 측정한다.

결과 평가:

하기 식에 따라 약물에 의한 INS-1 세포의 생존율을 계산한다:

INS-1 세포 생존율(%) = A₄₉₂(투여군)/A₄₉₂(정상대조군)×100％

결과: 테스트 대상 약물의 섬세포 보호 작용 평가 결과는 표 1과 같다:

[표 1] INS-1에 대한 캐리마이신의 보호 작용

* p<0.05 정상대조군 대비, ^## p<0.01 모델대조군 대비, ^### p<0.001 모델대조군 대비, 샘플은 INS-1 세포에 대해 양호한 보호 작용을 나타낸다.

시험예 2

측정의 목적은 테스트 대상 샘플인 캐리마이신의 당뇨병 마우스의 혈당에 대한 작용을 평가하는 것이다.

시약제:

알록산 모노하이드레이트(Alloxan monohydrate, 순도≥98.0%) 및 메트포르민(Metformin, 순도 97%)은 모두 Sigma-Aldrich 사에서 제공한 것이다.

인슐린 측정 키트는 Shanghai Rongsheng Biotech사에서 구매하였다(로트 번호: E02I0006).

측정 기구:

원터치 혈당 측정기 및 혈당 시험지(존슨앤존슨), 분석용 전자저울.

동물:

SPF급 쿤밍 마우스, 무게: 18~20g.

방법:

캐리마이신의 혈당 강하 작용에 대한 연구에서 쿤밍 마우스를 사용하며, 알록산 모노하이드레이트 160mg/kg을 복강에 한 번에 주사하여 모델을 구축한 후, 혈당 값이 모델 형성 기준(10~25mmol/L)에서 안정적인 마우스를 선택하여 모델대조군, 양성대조군(메트포르민 200mg/kg), 투여군(약물은 캐리마이신이며, 25, 50, 100mg/kg)으로 무작위로 분류하며, 별도로 정상대조군을 구축하여, 생리 식염수를 위내투여 한다.

모델 구축 및 위내투여 30일 후 및 45일 후, 16시간 금식하며, 마우스의 무게를 측정한다. 무게 측정 후, 꼬리 채혈하며, 혈당 측정기로 공복 혈당 값을 측정한다. 공복 혈당 값을 측정한 후, 약물을 한 차례 더 위내투여하고, 2h 후, 각 그룹 마우스에 2g/kg씩 포도당 용액을 위내투여하며, 꼬리 채혈하고, 포도당 투여 후 0, 0.5, 2시간 이후의 혈당 값(Bg0, Bg0.5, Bg2)을 측정하며, 아래 식에 의해 혈당 반응곡선 아래의 면적(AUC)(당내성)을 계산한다:

AUC=0.25*(Bg0+4*Bg0.5+3*Bg2).

모델 구축 및 위내투여 45일 이후, 16시간 금식하며, 안와정맥채혈을 진행한다. 채혈 전, 헤파린으로 모세혈관을 윤활시키고, 0.5ml의 양을 안와정맥채혈하며, 3500r/min으로, 10분 동안 원심 분리하고, 혈장을 분리하고 측정 대기한다. 상청액을 제거하고, ELISA 방법에 의해 인슐린을 측정한다. 구체적인 방법은 진단키트 설명서를 따른다.

인슐린저항성(Insulin Resistance) 측정: 공복 혈당 및 인슐린의 농도를 측정한 후, 식에 따라 인슐린저항성 지수를 계산한다.

인슐린저항성 지수 = 공복혈당 * 공복 인슐린 / 22.5(최근 데이터 > 2.6일 경우, 인슐린저항성을 갖는 것으로 판단)

모든 데이터는 SPSS16.0 소프트웨어를 사용하여 통계적으로 분석하였며, 실험 데이터는 평균 +/- 표준 편차(x±s)로 표시되며, 그룹 평균 간의 차이는 일원분산분석(one-way ANOVA)으로 테스트하여 분석되며, P<0.05는 그 차이가 유의하다는 것을 나타낸다. 결과는 표 2 내지 표 6과 같이, 모델 구축 및 위내투여 30일 및 45일 후, 정상대조군에 비해, 모델군 동물의 중량이 현저히 감소하고, 공복 혈당이 유의하게 증가하며, 당내성이 저하되며, 공복 시 혈청 인슐린에 대한 영향은 뚜렷하지 않지만, 인슐린저항 지수가 크게 향상된다.

캐리마이신은 당뇨병 마우스의 체중 저하 증상을 개선하고, 마우스의 공복 혈당을 저하시키며, 당내성을 향상시키며, 공복 혈청 인슐린에 대한 영향이 뚜렸하지 않지만, 인슐린저항 지수를 크게 저하시킬 수 있으며, 이는 캐리마이신에 뛰어난 혈당 강하 효과가 있음을 의미한다.

[표 2] 각 동물 실험군의 체중 변화(g)

[표 3] 각 동물 실험군의 혈당 변화(mmol/L)

[표 4] 당뇨병 마우스의 당내성에 대한 캐리마이신의 영향

(30day)

[표 5] 당뇨병 마우스의 당내성에 대한 캐리마이신의 영향

(45day)

[표 6] 각 동물 실험군의 공복 인슐린(mmol/L) 및 인슐린저항성(IR)

시험예 3: SD 래트의 양측 해마 CA1 영역에 Aβ _1-42 를 주사하여 구축한 AD 모델에 대한 캐리마이신의 영향

시험동물:

Sprague Dawley 사의 건강한 수컷 래트(SPF 등급), 무게 220-260g, 랴오닝 Changsheng Biotechnology Co., Ltd.에서 구입, 허가번호: SCXK(료)2015-0001.

실험 약물 및 시약제:

캐리마이신

Aβ_1-42: Sigma，USA에서 구입;

레스베라트롤(Resveratrol): 알라딘 사(Lot#K1414052)(L.A., CA, USA);

실험 기구:

입체정위기구: 미국 Stoelting, 모델명: 51600(Kiel, WI, USA);

모리스 수중 미로 및 자동 수집 분석 장비: Beijing Shuolinyuan Technology Co., Ltd. (중국 베이징);

Y형 미로 및 자동 수집 분석 장비: Beijing Shuolinyuan Technology Co., Ltd. (중국 베이징);

동작 단계:

그룹 분류: 수컷 SD 래트, 무게 220-260g, 3일 동안 적응 급식, 자유롭게 식수 및 식사, 12시간 주기 주야간 반복. 6개 그룹으로 무작위로 분류, 즉 모의 수술 대조군, 모델군, 캐리마이신 25mg/kg, 50mg/kg, 100mg/kg, 양성 약물 레스베라트롤 30mg/kg으로 나눈다.

실험 과정: 헥사 플루오로 이소프로판올 / 멸균 생리 식염수 용액을 이용하여 Aβ_1-42를 2μg/μL의 농도로 용해시키고, 4℃에서 24시간 동안 배양하여 Aβ 올리고머를 형성하여, 준비해둔다. 수술 시, 래트의 복강에 3.5% 염소 수화물(350mg/kg)을 주사하여 마취시킨 후, 입체정위기구에 고정시킨다. 브레그마를 원점으로 하여, 뒤로 3.6mm, 좌우 ±2.5mm 지점에, 바늘 깊이 3.1mm로, 마이크로 인젝터를 사용하여 양측 해마의 CA1 영역에 한 번에 주입하고, 5분 이내에 각 측 해마에 2.5μL (0.5μL/min)을 주사하며, 바늘을 5분동안 방치하며, 치매 래트 모델을 구축하며; 모의 수술 대조군 래트는 동일한 동작 방법으로 양측 해마의 CA1 영역에 동일 면적으로 생리식염수를 주사하며, 즉 동물 모델을 Aβ_1-42 측뇌실 주사 방법으로 구축하며; 모의 수술 대조군 래트에 동일한 동작 방법으로 양측 해마의 CA1 영역에 동일 면적으로 생리식염수를 주사하며, 여기서, β- 아밀로이드 단백질(Aβ)의 아밀로이드반은 현재 AD의 공인된 병리학적 표지이며, 상술한 동물 모델을 이용하여 중추신경계 질환인 알츠하이머에 대한 캐리마이신의 작용을 고찰하는 것은 충분한 이론적 근거가 될 수 있다.

모델 구축 후 이튿날, 모의 수술 대조군 및 모델군에 해당 시약을 위내투여하고, 기타 실험군에는 각각 캐리마이신 25mg/kg, 50mg/kg, 100mg/kg 및 양성 약물 레스베라트롤 30mg/kg을 투여한다. 해마 내에 Aβ_1-42를 주사한 후 12일째 되는 날부터 Y형 미로, 새로운 물체에 대한 인식 실험 및 수중 미로 실험을 진행한다. 행동학 실험 동안 계속하여 약물을 투여하며, 행동학 실험이 끝날 때까지 하루에 한 번씩 투여한다.

래트 Y형 미로 실험: 약물 투여 12일차, 각 그룹 래트를 대상으로 Y형 미로 실험 진행. 래트 Y형 미로 실험의 목적은 래트의 자발적 교체 활동 및 작업 기억에 대한 캐리마이신의 영향을 고찰하기 위한 것이다. 장치는 협각이 120도인 나무 브라켓 암 3개로 구성되며, 각각 암 A, B, C이다. 실험 시 래트를 암 A의 끝단에 놓고, 래트가 3개의 암을 자유롭게 출입하도록 하며, 8분 동안에 각 래트가 3개의 암에 출입한 총 횟수, 암에 진입한 횟수 및 암에 진입한 순서를 기록하며, 연속하여 3 개의 서로 다른 암에 진입한 것을 정확한 교체 활동 1회로 하며, 정확한 교체 반응 횟수를 기록한다. 자발적 교체 반응률로 작업 기억 능력을 반영한다.

래트의새로운 물체에 대한 인식 실험: 약물 투여 14-15일차, 각 그룹 래트를 대상으로 새로운 물체에 대한 인식 실험 진행. 래트의 새로운 물체에 대한 인식 실험의 목적은 래트의 이미지 인식 기억력에 대한 캐리마이신의 영향을 고찰하기 위한 것이다. 실험장치는 직경이 약 60cm, 높이 20cm인 검은 색 플라스틱 원형 개방 필드이다. 본 실험은 적응 단계 및 테스트 단계로 나뉜다. 적응 단계에서 매번 래트 2~3마리를 개방 필드에 넣고, 이들이 3분 동안 자유롭게 탐색하도록 하며, 하루에 2번씩, 2일 동안 진행한다. 셋째 날 테스트를 진행하며, 한 번에 래트 한마리를 개방 필드에 넣어 3분 동안 자유롭게 탐색하도록 한 후, 래트를 꺼내고, 2개의 동일한 물체(A1, A2)를 개방 필드의 중앙에 넣은 후, 래트를 넣고, 5분 이내에 2개의 물체를 탐색하는 시간(tA1, tA2)을 기록한다. 1시간 후, A2 물체를 새로운 물체 B로 교체하고, 래트를 다시 넣고, 2개의 물체를 탐색하는 시간(tA1, tB)을 기록한다. 24시간후, 물체 B를 물체 C로 교체하고, 래트를 다시 넣고, 2개의 물체를 탐색하는 시간(tA1, tC)을 기록한다. 탐색의 판단 기준은 래트가 코로 물체를 가리키고 물체의 1cm 이내에 있거나, 코에 닿거나, 물체를 핥거나, 앞발로 물체를 터치하는 것이다. 새로운 물체에 대한 선호도 지수(Preferential index) 및 변별도 지수(Discrimination index)를 계산한다.

선호도 지수의 계산 공식은 다음과 같다:

선호도 지수(1h)= tB /(tA1+tB)

선호도 지수(24h)= tC /(tA1+tC)

변별도 지수의 계산 공식은 다음과 같다:

변별도 지수(1h)= (tB-tA1)/(tA1+tB)

변별도 지수(24h)= (tC-tA1)/(tA1+tC)

래트 수중 미로 실험: 약물 투여 16-20일차, 각 그룹 래트를 대상으로 모리스 수중 미로 실험 진행. 모리스 수중 미로 실험의 목적은 공간 학습 기억 장애에 대한 캐리마이신의 영향을 고찰하는 것이다. 수중 미로 장치는 직경 1.5m, 높이 50cm의 검은색 스테인리스강 원형 수조 및 직경이 10cm인 원형 금속 플랫폼 하나로 구성되며, 플랫폼의 위치는 자유롭게 이동할 수 있다. 실험 전에 수조에 물(수온 24÷1→)을 주입하되, 수면이 플랫폼보다 1cm 높게 올라오도록 주입한다. 훈련 단계, 매일 오전 오후 각 1회씩 훈련하며, 6일 동안 훈련한다. 플랫폼을 제4 사분면에 놓고, 수조 벽을 향해 래트를 넣고, 90초 동안 기록하며, 래트가 90초 이내에 플랫폼을 찾으면 플랫폼에서 10초 동안 휴식하도록 한다. 90초 이내에 플랫폼을 찾지 못하면, 래트를 플랫폼으로 유도하여 10초 동안 휴식하도록 한다. 훈련 완료 후 테스트를 진행하며, 플랫폼을 제거하고, 래트가 90초 동안 자유롭게 수영하도록 한다. 미로 시스템은 래트가 기존 플랫폼의 사분면(목표 사분면)에 머무르는 시간을 자동으로 기록한다.

결과:

Y형 미로에 의한 래트 작업 기억력 테스트: 실험 결과, 모의 수술 대조군에 비해, 모델군 래트의 Y형 미로 자발 교체 반응률은 현저히 떨어지며; 모델군에 비해, 캐리마이신(25, 50, 100mg/kg)그룹 및 레스베라트롤(30mg/kg) 대조군 래트의 Y형 미로 자발 교체 반응률은 현저히 증가한다(도 1 참조). 각 그룹 래트의 암 진입 총 횟수에는 현저한 차이가 나타나지 않았다(도 2 참조). 따라서, 캐리마이신이 Aβ_1-42로 인한 래트의 작업 기억 손상을 개선한다는 결론을 얻을 수 있다.

새로운 물체에 대한 인식 실험에 의한 래트 이미지 기억 능력 테스트: 실험 결과, 각 그룹 래트의 A1 및 A2 2개의 동일한 물체에 대한 변별도 지수에는 큰 차이가 없었다(도 7 참조). 새로운 물체에 대한 인식 실험에서, 모의 수술 대조군에 비해, 모델군 래트는 1시간 및 24시간 이후에, 새로운 물체에 대한 선호도 지수 및 변별도 지수가 현저하게 하락하였으며; 모델군에 비해, 캐리마이신 및 레스베라트롤 그룹 래트는 1시간 및 24시간 이후에, 새로운 물체에 대한 선호도 지수(도 3, 도 4 참조) 및 변별도 지수(도 5, 도 6 참조) 모두 현저하게 향상되었다. 따라서, 캐리마이신은 Aβ_1-42로 인한 래트의 이미지 기억 손상을 개선하는 기능을 구비한다.

[표 7] Aβ_1-42로 인한 래트의 새로운 물체에 대한 인식 실험에서,

A1 및 A2와 관련된 변별도 지수 테스트 결과(N=4-5, 평균 값÷표준 편차)

모리스 수중 테스트에 의한 래트 학습 기억 능력 테스트: 실험 결과, 위치 내비게이션 실험에서, 훈련 회차가 증가함에 따라, 각 실험군 래트의 도피 잠복 기간은 모두 짧아졌으며, 래트의 공간 탐구 학습 능력이 모두 향상하였다. 실험 2일차, 모의 수술 대조군에 비해, 모델군 래트의 도피 잠복 기간은 현저하게 길어졌으며; 모델군에 비해, 캐리마이신 및 레스베라트롤 그룹의 도피 잠복기는 현저하게 줄어 들어, 3일차 및 4일차에는, 이러한 추세가 유지되었다(도 7 참조).

공간 탐색 실험 결과, 모의 수술 대조군에 비해, 모델군 래트의 플랫폼을 가로 지르는 횟수는 현저하게 줄어들며; 모델군에 비해, 캐리마이신 및 레스베라트롤 그룹이 플랫폼을 가로 지르는 횟수는 현저하게 향상되었다(도 8 참조); 각 그룹 래트의 수영 속도에는 현저한 차이가 없으며(도 9 참조), 이는 캐리마이신 및 레스베라트롤이 래트가 플랫폼을 가로 지르는 횟수를 향상시킬 수 있음을 나타낸다. 실험 결과, 캐리마이신은 Aβ_1-42로 인한 래트의 학습 기억 및 공간 탐색 능력 손상을 개선할 수 있다.

상기 시험은 본 발명의 약물이 중추신경계 질병인 알츠하이머를 치료함에 있어서 비교적 우수한 효과를 가지는 것을 입증하였으며, 이는 본 발명의 약물을 중추신경계 질병 치료에 응용하고 임상 적용을 확대함에 있어서 이론적 근거를 제공하였으며, 중요한 경제 및 사회적 효과를 가진다.

시험예 4: 수명 실험을 이용하여 캐리마이신에 예쁜꼬마선충의 수명 연장 효과가 있는지 여부를 확인

실험 재로, 시약제 및 측정 기구

1.1 균주, 선충

E.coli OP50 선양 약학대학 실험실 보존

C.elegans N2 선양 약학대학 실험실 보존

1.2 주요 시약제

무수 알코올(분석용 시약) 베이징화학공장

수산화나트륨 (분석용 시약) 베이징화학공장

트립톤 OXOID

한천가루 DINGGUO BIOLOGY

효모 분말 OXOID

염화나트륨(분석용 시약) 베이징화학공장

염화칼륨(분석용 시약) 베이징화학공장

콜레스테롤(분석용 시약) 상하이화학시약회사

황산마그네슘(분석용 시약) 베이징화학공장

황산칼륨(분석용 시약) 베이징화학공장

인산이수소칼륨(분석용 시약) 상하이시약2공장

인산수소이나트륨(분석용 시약) 베이징화학공장

디메틸술폭시드

1.3 주요 측증 기구

겔 이미지 장치 ImageMaster Pharmacia

클린벤치 쑤저우정화장비유한회사

생화학 인큐베이터 하얼빈둥리엔전자기술

752 분광 광도계 상하이정밀과학기기

광학현미경 OLYMPUS

항온 공기욕 오실레이터 하얼빈둥리엔전자기술

저온 원심분리기 Hettich zentrifug

전기 항온 수욕 허베이황화항공우주기기

고압멸균기 일본산요

열풍건조기 난징실험기기공장

분석용전자저울 SHIMADZU

동작 단계는 다음과 같다:

1.1 선충 배양

자웅동체 선충을 대장균 OP50(E.coli OP50)으로 코팅된 선충 성장 배지(Nematode growth medium，NGM)에서 20→의 온도로 배양하고, 선충의 성장 상태를 관찰하며, E.coli OP50으로 코팅된 새 NGM 배지에 정기적으로 선충을 옮겨준다.

1.2 선충 동기화

우선, 산란기 선충 여러 마리를 선택하여 하나의 평판에 놓는다(구체적인 수량은 필요한 선충의 양에 따라 결정하며, 일반적으로 산란기 선충 한 마리는 1시간 당 8개 정도의 알을 낳는다). 30분 후, 플레이트의 선충을 골라 내며, 플레이트의 알은 부화 후 동일 발달 단계에 있다.

1.3 수명 주기 실험

선충의 수명을 체계적이고 정확하게 확정하기 위해, 액체 배양 방법을 사용하여 투여군 및 블랭크군을 설정하며, 투여군 약물 농도를 선택하고, 생리식염수를 이용하여 필요한 농도로 약물을 희석하며, 24웰 플레이트를 사용하며, 420마이크로 리터의 배양액을 각 웰에 첨가한 후, 30마이크로 리터의 균액, 50마이크로 리터의 캐리마이신 약물(블랭크군은 S-medium 배양액을 사용)을 첨가하여 각 웰의 액체 총 부피가 500마이크로 리터가 되도록 하며, 각 웰에 동기화 선충 25마리를 넣고, 24시간 후 생존한 선충을 동일 조건의 새로운 배양액 웰로 옮기며, 선충이 죽을 때까지 반복한다. 기계적 자극에 반응하지 않고 삼키거나 배설하지 않는 선충은 죽은 것으로 판단하며, 24 시간마다 옮긴 후 각 그룹의 생존 수량, 각 그룹의 선충 최장 생존일 및 평균 생존일을 기록한다.

실험 결과는 표 8 및 도 10에 도시되며, 이는 캐리마이신이 예쁜꼬마선충의 수명을 연장할 수 있고, 농도가 5┢g/ml일 경우 뚜렷한 효과가 있음을 나타낸다.

[표 8]

시험예 5: 운동 능력 지표를 측정하여 캐리마이신에 예쁜꼬마선충의 수명 연장 효과가 있는지 여부를 확인시약제: 시험예 4와 동일

측정 기구: 시험예 4와 동일

실험 대상: 예쁜꼬마선충

방법: 투여군 선충 및 대조군 선충을 각각 동기화 처리하여, 그룹 별로 일정 수량의 동기화 선충을 배양한다. 성충 후기에 들어선 후(일반적으로 3일차), 캐리마이신을 투여한 48시간 이후에 이의 운동 속도를 측정한다. 24시간마다 그룹 당 무작위로 선충 10마리를 골라 일정 시간 이내의 운동 거리를 측정하고, 선충이 20s 이내에 경과한 봉우리 개수를 기록한다.

실험 결과, 캐리마이신을 각각 5μg/ml 및 10μg/ml 투여한 후, 선충의 운동 능력을 현저하게 개선할 수 있으며, 이는 도 11-a 및 도 11-b에 도시된 바와 같다.

시험예 6

열충격 조건에서 예쁜꼬마선충의 생존율을 측정하여 캐리마이신에 예쁜꼬마선충에 대한 수명 연장 효과가 있는지 여부를 확인.

시약제: 시험예 4와 동일

측정 기구: 시험예 4와 동일

실험 대상: 예쁜꼬마선충

방법: 정상 배양 조건으로 동일 시기에 선충을 L4기까지 배양하고, 일정 수량의 자웅동체 선충을 골라 2ml S-medium을 첨가한 30mm 일회용 페트리 디쉬에 넣고, 20℃에서 계속하여 배양한다. 배양액에는 캐리마이신, E.coli OP50 균체(OD600=0.2-0.3), 50μM FUdR(잡종 선충의 성장 방지)이 포함되며, 대조군은 캐리마이신을 포함하지 않는 S-medium 배양액으로 배양한다. 주의해야 할 것은, 매일 새로운 배양액이 담긴 페트리 디쉬로 옮겨 담아 배양액을 교환해야 한다. 48시간 후, 선충을 37℃ 환경으로 옮겨 계속하여 10시간 배양하며, 배양이 완료된 후 생존한 선충의 수량을 기록하여 해당 실험의 생존율로 하며, 실험을 동일한 조건으로 2-3회 진행하여, 평균 값을 최종 생존율 결과로 한다.

실험 결과, 도면으로부터 대조군에 비해, 캐리마이신이 선충의 내열성을 현저하게 향상시키고, 37℃에서의 선충 평균 생존 시간을 연장함을 알 수 있으며, 이는 도 12에 도시된 바와 같다.

시험예 7:

자외선 조사 실험에서 예쁜꼬마선충의 생존율을 측정하여 캐리마이신에 예쁜꼬마선충에 대한 수명 연장 효과가 있는지 여부를 확인.

시약제: 시험예 4와 동일

측정 기구: 시험예 4와 동일

실험 대상: 예쁜꼬마선충

방법: I4기까지 동기화된 선충의 실험 배양 플레이트를 자외선 램프 아래에 고정하여 각각 240s동안 사전 실험조사하며, 선충의 사망, 생존 수량을 기록한다. 선충의 사망 기준은 수명실험과 동일하다. 자외선 파장은 254nm이며, 자외선 램프는 배양 플레이트에서 15cm 떨어진 높이에서 조사하며, 출력은 1×10^-3W/cm³이다. 실험 그룹은 블랭크군 및 투여군으로 나뉜다.

실험 결과, 도면으로부터 캐리마이신이 자외선 조사로 인한 산화 손상에 일정한 보호 작용이 있음을 확인할 수 있으며, 이는 도 13에 도시된 바와 같다.

결과

실험은 최소 3회 반복한다. 결과는 평균 값 및 표준편차의 형식으로 제공한다. 유의도 검정은 t검정을 위주로 한다. 모든 데이터 통계 분석 및 도면 제작에 Excel 및 SPSS16.0 프로그램을 사용한다.

시험예 8

캐리마이신이 야생형 예쁜꼬마선충의 리포푸신 체내 축적을 감소시키는지 여부를 측정.

방법: 수명 실험에서의 배양 방법에 따라 10d, 15d, 20d를 배양한다. NaN3로 마취한 후, 형광 현미경에 도치하며, 여기광 340-380nm, 방출광 430nm으로 선충 체내의 리포푸신 수준을 관찰하며, 형광 이미지를 촬영하고, Image J 프로그램을 이용하여 선충 체내의 리포푸신 형광 수준을 분석한다.

교차 연결 단백 등의 축적 및 응집으로 인해, 리포푸신은 인체의 각 기관 세포에 축적되어, 세포대사가 느려지고, 활성이 떨어지며, 따라서 인체 기관 기능이 감퇴하고 노화가 발생하게 된다. 따라서, 리포푸신은 노화의 상징이라고 할 수 있다. 리포푸신에는 자발적 형광의 특징이 있으며, 형광 현미경에서 선충을 관찰하면, 형광 강도에 의해 이의 노화 정도를 판단할 수 있다. 결과는 도 14-a 및 도 14-b 참조. 실험 결과, 투여군의 리포푸신 축적량은 대조군에 비해 현저하게 감소하였다.

시험예 9

선충 수명에 대한 캐리마이신의 영향 매커니즘을 연구.

Sod-3 함량 측정 결과, 투여 후 투여군 선충 내의 sod-3 발현이 감소하였으며, 리포푸신 형광 함량은 투여 후 투여군의 리포푸신 함량이 감소하였음을 나타낸다. 본 발명은 캐리마이신에 sod-3 업 스트림 유전자 daf-16 및 daf-15에 대한 영향이 있는지 여부를 고찰한다.

1. 캐리마이신은 선충 체내의 항노화 유전자 sod-3의 발현을 증가시킨다.

방법: 본 실험은 gfp 태그를 갖는 선충 균주 CF1553을 사용하여 sod-3의 발현을 관찰한다. 캐리마이신으로 6일 동안 지속적으로 성숙기에 들어선 선충을 처리하고, 각각 10mM의 아지드화 나트륨을 사용하여 두 그룹의 선충을 마취시키며, 5% 한천겔에 고정시킨 후, 488nm의 여기광 파장, 500nm-530nm의 방출광으로 형광 현미경에서 선충 형광 강도를 관찰하며, 촬영한다. ImageJ 프로그램을 이용하여 정량적인 형광강도를 분석하며, 그룹 당 선충 샘플의 수량은 15마리이며, 실험은 2번 반복한다.

유리기와 노화 이론에 따르면, ROS는 유기체의 노화 및 질병을 일으키는 주요원인이다. 노화의 과정에 따라 선충 체내의 유리기는 점차 증가하며, 본 발명은 캐리마이신을 관찰함으로써 야생형 선충의 내열성능을 향상시키고, 선충의 세포 내 스트레스 저항력을 향상시킨다. 따라서 본 발명인은 Kl이 항산화 유전자인 sod-3에 영향을 줌으로써 항노화 작용을 한다는 추측을 하게 되었으며, 캐리마이신으로 연속 6일 동안 Cf1553(sod-3::GFP)형 선충을 처리한 후, 형광현미경으로 관찰하여 약물투여군 선충의 녹색 형광 단백질 발현량이 대조군 선충에 비해 유의하게 향상된 것을 발견하였다. 결과는 도 15 참조. 이는 캐리마이신이 항산화 유전자인 sod-3을 향상시켜 선충 체내의 ROS 수준을 감소시킴으로써 수명을 연장함을 나타낸다.

2. 캐리마이신은 세포 내에서의 DAF-16의 분포에 영향을 줄 수 있다.

방법: L4기의 TJ356(DAF-16::GFP)선충을 그룹 당 30마리씩 OP50 성장세가 양호한 NGM 플레이트에 선택하여 넣고, 3-4시간 산란하여, 선충의 동기화를 완료한다. 알이 성충으로 성장한 후, 그룹 당 30마리씩 약물 투여군에 배분한다. 6일 동안 약물을 투여한 TJ356 선충의 DAF-16의 핵 안으로의 이동 상황을 측정하고, 도립 형광현미경을 사용하여 DAF-16의 핵 안으로의 이동 상황을 관찰한다.

DAF-16이 세포핵에 축적되는지 또는 세포질에 확산되는지는 이의 활성과 직접적인 관련이 있다. 정상적인 환경에서 DAF-16은 체내의 세포질에 위치하며, 외부 스트레스를 받으면, 다른 단백질이 활성화되며, 나아가 세포핵 안으로 이동하여 전사 기능을 함으로써 다운 스트림 유전자 발현을 촉진하여 선충의 수명을 연장시킨다. 연구에 따르면, 인슐린 부족 또는 산화 스트레스는 DAF-16이 세포핵에 축적되어, 선충이 산화 스트레스에 저항하는 능력을 향상시켜, 선충의 수명을 연장시킨다.

캐리마이신에 의한 선충의 수명 연장은 DAF-16과 관련이 있기 때문에, 본 발명인은 캐리마이신이 세포에서 DAF-16의 분포에 영향을 미칠 수 있다고 추측한다. 본 발명은 DAF-16::GFP 트랜스제닉 선충 TJ356을 이용하여 세포에서 DAF-16의 분포를 연구한다. 캐리마이신을 이용하여 막 성충기에 진입한 선충을 처리하고, 6일 동안 약물을 투여한 후, 도립 형광현미경을 이용하여 관찰한다.

시험 결과, 캐리마이신으로 처리된 TJ356 선충의 녹색 형광은 세포핵에서 응집 상태인 반면, 캐리마이신으로 처리되지 않은 TJ356 선충의 녹색 형광은 세포 전체에 확산 적으로 분포되어 있음을 보여준다. 캐리마이신 5, 10μg/ml로 6일 동안 처리할 경우, 처리되지 않은 선충에 비해 세포에서 DAF-16의 응집은 유의하게 증가한다. 이는 캐리마이신이 새포핵으로의 DAF-16 진입을 촉진할 수 있음을 나타내며, 이는 도 16-a 및 도 16-b를 참조하기 바란다.

Claims

질병을 예방 및/또는 치료하는 약물에 있어서,
상기 질병은 알츠하이머병, 당뇨병 또는 노화;이며, 상기 약물에는 제1 활성 성분이 포함되며, 상기 제1 활성 성분에는 캐리마이신, 이소발레릴 스피라마이신I, 이소발레릴 스피라마이신II 및 이소발레릴 스피라마이신III 중의 1종;
또는 이소발레릴 스피라마이신I, 이소발레릴 스피라마이신II, 이소발레릴 스피라마이신III 중의 2종 또는 3종의 조성이 포함되는 것을 특징으로 하는 질병을 예방 및/또는 치료하는 약물.
제1항에 있어서,
상기 약물에는 제2 활성 성분이 더 포함되며;
바람직하게는 상기 질병이 알츠하이머병일 경우, 상기 제2 활성 성분은 항알츠하이머병 약물 중의 1종 이상;이며,
상기 질병이 당뇨병일 경우, 상기 제2 활성 성분은 항당뇨병 약물 중의 1종 이상;이며,
상기 질병이 노화일 경우, 상기 제2 활성 성분은 노화 완화 또는 수명 연장 약물 중의 1종 이상인 것을 특징으로 하는 약물.
제1항 또는 제2항에 있어서,
상기 약물과 약학적으로 허용 가능한 담체는 임상적으로 허용 가능한 제제로 제조되며, 바람직하게는 정제, 캡슐, 환제, 주사제, 방출조절제 및 각종 미립자 약물 투여 시스템인 것을 특징으로 하는 질병을 예방 및/또는 치료하는 약물.
제3항에 있어서,
상기 약물의 용량은 10~1500mg/kg, 바람직하게는 50~1000mg/kg, 더 바람직하게는 100~500mg/kg인 것을 특징으로 하는 질병을 예방 및/또는 치료하는 약물.
질병을 예방 및/또는 치료하는 조합 제품에 있어서,
상기 질병은 알츠하이머병, 당뇨병 또는 노화;이며, 상기 조합 제품에는 제1 약제가 포함되며, 상기 제1 약제의 활성 성분에는 캐리마이신, 이소발레릴 스피라마이신I, 이소발레릴 스피라마이신II, 이소발레릴 스피라마이신III 중의 1종;
또는 이소발레릴 스피라마이신I, 이소발레릴 스피라마이신II, 이소발레릴 스피라마이신III 중의 2종 또는 3종의 조성이 포함되는 것을 특징으로 하는 질병을 예방 및/또는 치료하는 조합 제품.
제5항에 있어서,
상기 조합 제품에는 제2 약제가 더 포함되며;
바람직하게는, 상기 질병이 알츠하이머병일 경우, 상기 제2 약제는 알츠하이머병 예방 및/또는 치료 관련 약물 중의 1종 이상;이며,
상기 질병이 당뇨병일 경우, 상기 제2 약제는 당뇨병 예방 및/또는 치료 관련 약물 중의 1종 이상;이며,
상기 질병이 노화일 경우, 상기 제2 약제는 노화 완화 또는 수명 연장 관련 약물 중의 1종 이상인 것을 특징으로 하는 조합 제품.
제6항에 있어서,
상기 제1 약제 및 제2 약제의 용량 비율은 1~99: 99~1이며, 바람직하게는 5~95: 95~5, 더 바람직하게는 10~90: 90~10, 보다 더 바람직하게는 20~80: 80~20인 것을 특징으로 하는 조합 제품.
제6항에 있어서,
상기 알츠하이머병 예방 및/또는 치료 관련 약물에는 콜린성 시스템에 작용하는 약물, N-메틸-D-아스파르테이트 수용체에 작용하는 약물, 항산화 약물, 항염증 약물, Aβ 단백질 형성을 억제하는 약물, 에스트로겐, 신경 성장 인자, 니모 디핀, 세포 사멸 억제제;가 포함되며,
상기 당뇨병 예방 및/또는 치료 관련 약물에는 비구아니드계 혈당강하제, 설포닐우레아계 혈당강하제, α-글루코시다아제 억제제, 인슐린 증감제, 비설포닐우레아계 인슐린 분비 촉진제 또는 인슐린 중의 1종 이상이 포함되는 것을 특징으로 하는 조합 제품.
알츠하이머병, 누트로픽, 당뇨병, 노화 완화 또는 수명 연장 방면의 예방 및/또는 치료 약물 제조에서 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 따르는 약물 또는 제5항 내지 제8항 중 어느 한 항에 따르는 조합 제품의 응용.
제9항에 있어서,
상기 알츠하이머병, 누트로픽 방면의 예방 및/또는 치료 약물의 제조에서의 응용은 아세틸콜린 가수분해를 감소시키는 약물 제조에서의 응용, 인지장애 및 운동장애의 개선을 위한 약물 제조에서의 응용, 뇌의 신경 세포를 보호하는 약물 제조에서의 응용, 체중을 감소시키지 않고 면역력을 향상시키거나 백혈구를 증가시키는 약물 제조에서의 응용;이며,
상기 당뇨병 예방 및/또는 치료 약물 제조에서의 응용은 I형 당뇨병, II형 당뇨병 또는 특이 형태 당뇨병 예방 및/또는 치료 약물 제조에서의 응용이며, 바람직하게는 인슐린 분비 촉진, 혈당 강하 또는 인슐린 분비 β┑세포 보호 약물 제조에서의 응용, 또는 당뇨병을 예방 및/또는 치료하고 체중을 유지하는 약물 제조에서의 응용;이며,
상기 노화 완화 또는 수명 연장 방면에서의 응용은 전사 인자 DAF-16의 활성을 변화시킴으로써 노화 완화 및/또는 수명 연장을 하는 약물 제조에서의 응용; SIR2 상동단백질 SIR2.1의 발현 수준을 증가시키고, SIR2.1이 다시 DAF-16의 활성에 영향을 주어, 노화 완화 및/또는 수명 연장을 하는 약물 제조에서의 응용; 또는 AMPK를 활성화하여, FOXO/DAF-16의 활성을 직접 향상시키는, 노화 완화 및/또는 수명 연장을 하는 약물 제조에서의 응용인 것을 특징으로 하는 응용.