KR20190129896A - Tgf-β-수용체 엑토도메인 융합 분자 및 그의 용도 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 일반적으로 형질전환 성장 인자 베타 (TGF-β) 리간드에 결합하여 그를 중화할 수 있는 폴리펩티드, 및 TGF-베타 발현 또는 활성화와 관련된 장애 (예컨대 암 및 섬유성 질환)를 치료하기 위한 이러한 폴리펩티드의 용도, 및 그와 같은 분자의 제조 방법에 관한 것이다.
Description
본 발명은 TGF-β 수용체 엑토도메인 융합 분자 및 그의 용도에 관한 것이다. 보다 구체적으로, 본 발명은 TGF-β 슈퍼패밀리 수용체 엑토도메인 융합 분자 및 TGF-β 리간드 중화에서의 그의 용도에 관한 것이다.
TGF-β는 세포 증식, 이동 및 분화를 포함한 여러 생리학적 과정을 조절하는 30종 초과의 리간드의 슈퍼패밀리 중 일부이다. 그의 농도 및/또는 신호전달의 교란은 유의한 병리학적 효과를 야기한다. 예를 들어, TGF-β 및 액티빈 리간드는 암을 포함한 많은 질환에서 중요한 병원성 역할을 한다 (Hawinkels & Ten Dijke, 2011; Massague et al., 2000; Rodgarkia-Dara et al., 2006). 특히, TGF-β는 종양 진행의 중요한 조절인자로 간주되며, 대부분의 종양 유형에서 과다발현된다. 그것은 부분적으로 침습성 전이로 이어지는 상피 종양 세포에서의 상피-중간엽 전이 (EMT)를 유도하는 것에 의해 종양발생에 관여한다 (Thiery et al., 2009). TGF-β는 또한 종양 미세환경에서 면역 반응의 강력한 억제인자로 작용하는 것에 의해 종양발생을 촉진한다 (Li et al., 2006). 사실상, TGF-β는 종양 미세환경에 존재하는 가장 강력한 면역억제 인자 중 하나로 인식되고 있다. TGF-β는 수지상 세포, 대식세포, NK 세포, 호중구, B-세포 및 T-세포를 포함한 많은 면역 세포 유형의 분화, 증식 및 생존을 방해하며; 그에 따라 그것은 선천 및 적응 면역 둘 다를 조절한다 (Santarpia et al., 2015; Yang et al., 2010). 종양 미세환경에서의 TGF-β의 중요성은 여러 종양 유형 (흑색종, 폐, 췌장, 결장직장, 간 및 유방 포함)에서 상승된 TGF-β 리간드 농도가 질환 진행 및 재발, 전이, 및 사망률과 상관된다는 것을 제시하는 증거에 의해 두드러진다. 이에 따라, TGF-β 억제를 포함하는 항-종양 치료 접근법을 고안하는데 상당한 노력이 투입되어 왔다 (Arteaga, 2006; Mourskaia et al., 2007; Wojtowicz-Praga, 2003). 이러한 접근법에는 TGF-β 리간드에 결합하거나 그를 "포획"하는 TGF-β 수용체 엑토도메인을 기반으로 하는 폴리펩티드 융합체의 사용이 포함된다 (WO01/83525; WO2005/028517; WO2008/113185; WO2008/157367; WO2010/003118; WO2010/099219; WO2012/071649; WO2012/142515; WO2013/000234; US5693607; US2005/0203022; US2007/0244042; US8318135; US8658135; US8815247; US2015/0225483; 및 US2015/0056199 참조).
TGF-β 기능을 억제하는 치료제를 개발하는 것에 있어서의 한 가지 접근법은 리간드에 결합하여 그를 봉쇄하는 항체 또는 가용성 디코이 수용체 (수용체 엑토도메인 (ECD)-기반 리간드 트랩으로도 지칭됨)를 사용함으로써 해당 세포 표면 수용체로의 리간드의 접근을 차단하는 것이었다 (Zwaagstra et al., 2012). 일반적으로, 수용체 ECD-기반 트랩은 광범위한 리간드를 봉쇄할 수 있으며 단백질-조작 접근법을 사용하여 최적화될 수 있는 종류의 치료제이다 (Economides et al., 2003; Holash et al., 2002; Jin et al., 2009).
이전에, 결합력 효과로 인하여 TGF-β 슈퍼패밀리 리간드의 구성원을 강력하게 중화할 수 있는 단일-쇄의 2가 TGF-β 유형 II 수용체 엑토도메인 (TβRII-ECD) 트랩을 생성시키는데 신규 단백질 조작 설계 전략이 사용된 바 있다 (Zwaagstra et al., 2012) [WO 2008/113185; WO 2010/031168). 이와 같은 경우에서, 2가성은 TβRII-ECD의 구조화된 리간드-결합 도메인에 플랭킹하는 고유 불규칙 영역 (IDR)의 영역을 사용한 2개 TβRII 엑토도메인의 공유 연결을 통하여 달성되었다. 이러한 단일-쇄 2가 트랩의 예인 T22d35가 1가의 비-조작 TβRII 엑토도메인에 비해 ~100-배 더 높은 TGF-β 중화 효력을 나타내기는 하였지만, 상기 2가 트랩은 TGF-β2 이소타입은 중화하지 못하였으며, 상대적으로 짧은 순환 반감기를 가졌다.
증진된 효력과 같은 개선된 특성을 갖는 TβRII-ECD-기반 트랩을 제공한다면 유용할 것이다.
본 발명은 TGFβ를 억제하는데 있어서 증진된 효력을 갖는 폴리펩티드 구축물을 제공한다.
본 발명의 폴리펩티드 구축물은 제1 영역 및 제2 영역을 포함하며, 여기서 제1 영역은 제1 및/또는 제2 TGFβ 수용체 엑토도메인 (ECD)을 포함하고; 여기서 제2 영역은 항체 중쇄의 제2 불변 도메인 (CH2) 및/또는 제3 불변 도메인 (CH3)을 포함한다. 바람직한 비제한적 실시양태에서, 제1 영역의 C-말단은 제2 영역의 N-말단에 연결된다. 바람직한 비제한적 실시양태에서, 폴리펩티드 구축물의 제1 영역은 제1 TβRII-ECD (ECD1) 및/또는 제2 TβRII-ECD (ECD2)를 포함하며, 여기서 ECD1 및 ECD2는 탠덤 방식으로 연결된다.
제1 영역이 그의 C-말단에서 항체 불변 도메인과 연결되는 (TβRII-ECD)-(TβRII-ECD) 이중체를 포함하는 제공되는 폴리펩티드 구축물은 그의 C-말단에서 항체 불변 도메인과 연결되는 단일 TβRII-ECD (즉 제2 ECD가 부재하는 경우, 본원에서는 단일체로도 지칭됨)를 갖는 대응부 구축물에 비해 적어도 600-배 더 큰 효력으로 TGFβ 활성을 억제한다.
제공되는 폴리펩티드 구축물은 제1 ECD에 탠덤 방식으로 연결되는 제2의 TGFβ 수용체 엑토도메인 ECD를 포함하며, 여기서 항체 불변 도메인에 연결된 폴리펩티드 구축물 (즉 ECD 이중체 구축물)은 항체 불변 도메인이 부재하는 대응부 구축물 (즉 본원에서 비-Fc 융합된 이중체로도 지칭되는 ECD 이중체 구축물)에 비해 적어도 100, 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800 또는 900-배 더 큰 TGFβ 중화 (억제)를 나타낸다.
TβRII-ECD 및 그것이 TGF-β 활성을 억제하는 효력과 관련하여, 놀랍게도, 그의 구성요소의 신중한 선택으로부터 증진된 효력이 기인할 수 있다는 것이 발견되었다. 이는 특정 TβRII-ECD가 탠덤 방식으로 연결되고 그의 C-말단이 항체 불변 도메인 (Fc)의 N-말단에 연결되는 경우에 이루어진다. 해당하는 융합된 이량체성 형태에서 각 폴리펩티드의 불변 도메인/들 사이의 시스테인 가교화를 통하여 가교-결합된 2개의 그와 같은 폴리펩티드를 포함하는 경우, 2개의 "아암" 각각 상에 2개의 TβRII-ECD (ECD 이중체)를 갖는 결과적인 소위 "Fc 융합체"는 특히 인간 비소세포 폐암 (NSCLC) A549 세포에 의한 TGF-β1 및 -β3-유도 IL-11 분비의 억제에 의해 입증되는 바와 같이, 2개의 "아암" 각각 상에 1개의 엑토도메인을 갖는 "Fc 융합체"와 비교 시, TGF-β1에 대하여 600-배를 초과하여 더 크며 TGF-β3에 대하여 20-배를 초과하여 더 큰 억제 활성을 나타낼 수 있다. Fc 영역이 결핍되어 있거나 제2 ECD가 결핍되어 있는 (즉 ECD "단일체"인) 대응부에 대비하여, 효력 증진은 분명하다. 효력 증진은 Fc-융합된 단일체에 비해 Fc-융합된 이중체에서 적어도 100, 200, 300, 400, 500 또는 600-배 더 크다. 효력 증진은 비-Fc 이중체에 비해 Fc-융합된 이중체에서 적어도 100, 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900-배 및 대략 1000-배 더 크다. Fc 영역이 결핍되어 있거나 (Fc-융합된 이중체 T22d35-Fc는 TGF-β1 및 TGF-β3에 대하여 각각 비-Fc 이중체에 비해 972- 및 243-배 더 큼) 제2 ECD가 결핍되어 있는 (ECD "단일체"; Fc-융합된 이중체 T22d35-Fc는 TGF-β1 및 TGF-β3에 대하여 각각 비-Fc 이중체에 비해 615- 및 24-배 더 큼) 대응부에 대비하였을 때, 효력 증진은 분명하다. 보다 구체적으로, Fc-이중체 (T22d35-Fc)는 비-Fc 융합된 ECD 이중체와 비교 시 TGF-β1에 대하여 적어도 970-배 더 크며 TGF-β3에 대하여 적어도 240-배 더 큰 효력 증진을 나타낸다. 또한, Fc-이중체 (T22d35-Fc)는 Fc-단일체 (T2m-Fc)와 비교 시 TGF-β1에 대하여 적어도 600-배 더 크며 TGF-β3에 대하여 20-배가 넘게 더 큰 효력 증진을 나타낸다.
일반적인 측면에서, 탠덤 방식으로 연결된 적어도 2개의 TβRII-ECD (즉 ECD 이중체), 및 적어도 항체 중쇄의 제2 불변 도메인 (CH2) 및/또는 제3 불변 도메인 (CH3)을 포함하는 항체 불변 도메인을 포함하며, 여기서 엑토도메인의 C-말단은 항체 불변 도메인의 N-말단에 연결되는, 폴리펩티드 구축물이 제공된다. 이와 같은 형태에서, 구축물은 단일 쇄 폴리펩티드이다. 예컨대, 상기 항체 불변 도메인은 CH2 도메인만을 포함할 수 있거나, 또는 그것은 CH2 도메인 및 CH3 도메인을 포함할 수 있다.
실시양태에서는, 2개의 단일 쇄 폴리펩티드 및 쇄들을 공유로 커플링하는 가교-결합 수단을 포함하는 이량체성 융합 폴리펩티드로서 폴리펩티드가 제공된다.
다른 실시양태에서, 2개의 엑토도메인은 일반적으로 그의 결합 표적 및/또는 그의 표적 종 면에서 동일하다.
바람직한 실시양태에서, 제1 영역은 2개의 TGF-β 수용체 엑토도메인 (TGFβR-ECD 또는 'TβR-ECD')을 포함한다. 바람직한 실시양태에서, TβR-ECD는 TGF-β 수용체 유형 II 엑토도메인 (TβRII-ECD)이다. 바람직한 실시양태에서, TβR-ECD는 서열식별번호(SEQ ID NO): 1 및 그와 실질적으로 동일한 서열을 포함한다.
제2 영역은 서열식별번호: 12, 서열식별번호: 15, 서열식별번호: 18, 서열식별번호: 24 및 그와 실질적으로 동일한 서열로 이루어진 군으로부터 선택되는 서열을 포함할 수 있다.
바람직한 실시양태에서, 본 발명의 폴리펩티드 구축물의 제2 영역은 추가적으로 CH1을 포함할 수 있다. 실시양태에서, 구축물은 단일기능적이다.
본 발명의 폴리펩티드 구축물은 인간 기원의 항체 중쇄를 활용한다. 바람직한 실시양태에서, 항체 중쇄는 인간 IgG1 (서열식별번호: 15) 및 IgG2 (서열식별번호: 24)로 이루어진 군으로부터 선택된다.
이에 따라, 또 다른 측면에서, 본 발명에 따른 폴리펩티드 구축물로서, 여기서 구축물은 이량체성 폴리펩티드이며; 여기서 이량체성 폴리펩티드는 하기를 포함하는 것인 폴리펩티드 구축물이 제공된다:
(i) 항체 중쇄의 제2 불변 도메인 (CH2) 및 제3 불변 도메인 (CH3)을 포함하는 제2 영역, 및 2개의 TGF-β 수용체 엑토도메인 (TβRII-ECD)을 포함하는 제1 영역을 포함하며, 여기서 제1 영역의 C-말단은 제2 영역의 N-말단에 연결되는 것인, 제1 단일 쇄 폴리펩티드, 및
(ii) 항체 중쇄의 제2 불변 도메인 (CH2) 및 제3 불변 도메인 (CH3)을 포함하는 제2 영역, 및 탠덤 방식으로 연결된 2개의 TGF-β 수용체 엑토도메인 (TβRII-ECD)을 포함하는 제1 영역을 포함하며, 여기서 제1 영역의 C-말단은 제2 영역의 N-말단에 연결되고, 제1 단일 쇄 폴리펩티드는 제2 단일 쇄 폴리펩티드와 가교-결합되는 것인, 제2 단일 쇄 폴리펩티드.
본 발명의 임의의 폴리펩티드 구축물을 코딩하는 핵산 분자가 또한 제공된다. 본 발명의 핵산 분자를 포함하는 벡터가 또한 제공된다.
1종 또는 1종 초과의 독립적으로 선택되는 본 발명의 폴리펩티드 구축물, 및 제약상 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제를 포함하는 조성물이 또한 제공된다.
본 발명의 핵산 분자 또는 벡터를 포함하는 트랜스제닉 세포 숙주가 또한 제공된다. 해당 제2 폴리펩티드 구축물이 제1 폴리펩티드 구축물과 동일하거나 상이한 경우에서, 상기 트랜스제닉 세포 숙주는 추가적으로 제2 폴리펩티드 구축물을 코딩하는 제2 핵산 분자 또는 제2 벡터를 포함할 수 있다. 제2 핵산 분자 또는 제2 벡터는 2종의 폴리펩티드 구축물이 상이한 경우에는 (이종이량체성) 반드시 존재하나, 구축물들이 동일한 경우에는 (동종이량체성) 필요하지 않다.
의학적 병태, 질환 또는 장애의 치료를 위한 본 발명에 따른 폴리펩티드 구축물의 용도가 또한 제공되며; 여기서 상기 의학적 병태, 질환 또는 장애는 암, 안구 질환, 섬유성 질환, 또는 결합 조직의 유전적 장애 및 면역 장애를 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
본 발명의 폴리펩티드 구축물은 인간 기원의 것인 항체 중쇄로부터의 CH2 및 CH3, 또는 단지 CH2만을 포함할 수 있다. 제한하고자 하는 것은 아니나 예를 들면, 상기 항체 중쇄는 인간 IgG1 및 IgG2로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다. 실시양태에서, 구축물 중 불변 도메인은 CH2 자체, 또는 CH3 자체 또는 CH2-CH3이다. 적합하게는, 항체 중쇄 구성요소는 동일하거나 상이한 단일 쇄 폴리펩티드 구축물들 사이에 디술피드 가교결합을 제공한다. 또한 적합하게는, 항체 중쇄는 숙주 세포에 의해 생산되는 이량체성 폴리펩티드의 단백질 A-기반 단리를 제공한다.
실시양태에서, 수용체 엑토도메인 영역은 탠덤 방식으로, 즉 선형 방식으로 연결되는 2개의 독립적으로 선택되는 엑토도메인을 포함한다. 일부 실시양태에서, 상기 엑토도메인들은 서열상 동일하거나, 또는 적어도 그의 표적 리간드와 관련하여 동일하다.
본 발명은 또한 본원에 기재된 바와 같은 폴리펩티드 구축물을 코딩하는 핵산 분자를 제공한다. 상기 기재된 핵산 분자를 포함하는 벡터가 또한 본 발명에 의해 포괄된다. 본 발명은 또한 본원에 기재된 바와 같은 핵산 분자 또는 벡터를 포함하는 트랜스제닉 세포 숙주를 포함하며; 상기 세포 숙주는 추가적으로 제1 폴리펩티드 구축물과 상이한 제2 폴리펩티드 구축물을 코딩하는 제2 핵산 분자 또는 제2 벡터를 포함할 수 있다. 특히 디술피드 가교를 통한 이량체화가 요구되는 경우, 본 발명의 폴리펩티드를 생산하는데 사용되는 시스템은 분비 시스템일 수 있으며, 그에 따라 발현 폴리뉴클레오티드는 배양 배지로의 분비 시 숙주에 의해 절단되는 분비 신호를 코딩할 수 있다.
본원에 기재된 1종 또는 1종 초과의 독립적으로 선택되는 폴리펩티드 구축물, 및 제약상 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제를 포함하는 조성물이 또한 본 발명에 의해 포괄된다.
지금부터, 첨부된 도면을 참조하여 예로서 본 발명의 이들 및 다른 특색이 기재될 것이며, 하기와 같다.
도 1 A/B는 TGF-β 유형 II 수용체 엑토도메인 (TβRII-ECD; T2m으로도 약기) 및 2개 T2m 도메인의 단일 쇄 융합체 (T22d35로도 약기)의 개략도이며 (도 1A); 도 1B는 해당 아미노산 서열을 제공하며, 여기서 천연 링커 서열 (서열식별번호: 6, 서열식별번호: 7, 서열식별번호: 8)은 밑줄표시되어 있고, TβRII 구조화된 도메인의 서열 (서열식별번호: 4)은 볼드체로 제시되어 있다.
도 2 A-G 중 도 2A/B/C는 융합체 단백질인 T2m-Fc (2B) 및 T22d35-Fc (2C)을 생성시키기 위한 IgG2 Fc 영역 (2A) 중쇄 N-말단에의 T2m 및 T22d35 모듈 융합의 개략적인 표현이며; 도 2D는 T2m-Fc 및 T22d35-Fc 융합 단백질의 아미노산 서열 (서열식별번호: 9, 서열식별번호: 10)을 제공한다. 도 2E는 T22d35-Fc 융합체에서의 Fc와 ECD 영역 사이 링커 영역의 추가적인 변이체의 정렬된 서열을 제공한다. 도 2F 및 2G는 인간 IgG1 Fc (도 2F; 서열식별번호: 14, 서열식별번호: 17, 서열식별번호: 20) 및 인간 IgG2 Fc 영역 (도 2G; 서열식별번호: 23)을 사용하는 T22d35-Fc 링커 변이체의 아미노산 서열을 제공한다. 천연 링커 서열 (서열식별번호: 6, 서열식별번호: 7, 서열식별번호: 8)은 밑줄표시되어 있고, TβRII 구조화된 도메인의 서열 (서열식별번호: 4)은 볼드체로 제시되어 있고, 인간 IgG Fc 서열 변이체 (서열식별번호: 12, 서열식별번호: 15, 서열식별번호: 18, 서열식별번호: 24)은 볼드체-이탤릭체로 제시되어 있다.
도 3 A/B/C는 T2m-Fc 융합 단백질에 대한 정제용 SEC 용리 프로파일을 제시하며 (3A); 분획 (Fr.) 6-11을 풀링하여 농축시켰다. 다음에는, UPLC-SEC 프로파일 (3B) 및 비-환원성 (NR) 및 환원성 (R) 조건 하에서의 SDS-PAGE 평가 (3C)에 의해 SEC 정제된 물질의 단백질 완전성을 평가하였다.
도 4 A/B/C는 T22d35-Fc 융합 단백질에 대한 정제용 SEC 용리 프로파일을 제시하며 (4A); Fr. 7-10을 풀링하여 농축시켰다. 다음에는, UPLC-SEC 프로파일 (4B) 및 비-환원성 (NR) 및 환원성 (R) 조건 하에서의 SDS-PAGE 평가 (4C)에 의해 SEC 정제된 물질의 단백질 완전성을 평가하였다.
도 5 A/B는 비-환원성 (A) 및 환원성 (B) 조건 하에서의 단백질 A 정제된 T22d35-Fc, T22d35-Fc-IgG2-v2(CC), T22d35-Fc-IgG1-v1(CC), T22d35-Fc-IgG1-v2(SCC), T22d35-Fc-IgG1-v3(GSL-CC), hIgG1FcΔK(C)-T22d35, hIgG1FcΔK(CC)-T22d35 및 hIgG2FcΔK(CC)-T22d35 변이체의 SDS-PAGE 분석을 제공한다.
도 6 A/B/C는 다양한 융합 단백질의 무손상 단량체 (A), 응집물 (B) 및 단편 (C) 백분율을 제공하며, 이는 IgG Fc 부분의 N-말단에서 T22d35 이중체를 발현하는 것에 이점이 존재한다는 것을 나타낸다. 표에는 분석된 파라미터에 있어서의 숫자상 차이를 열거하였다.
도 7A/B/C는 A549 IL-11 방출 검정에서의 비-Fc-융합된 단일 쇄 T22d35 트랩과 비교한 T2m-Fc 및 T22d35-Fc 융합 단백질의 기능적 평가를 제공한다. TGF-β1 (5A), -β2 (5B), -β3 (5C)의 중화를 평가하고, TGF-β 대조군 중 %로서 계산하였다 (삼중 실험의 평균 +/- SD). 표에는 그래프패드 프리즘(Graphpad Prism) (4-PL 알고리즘 ((log (억제제) vs. 반응 - 변수 기울기 (4 파라미터))에서 계산된 IC50 계산값을 열거하였다.
도 8은 A549 IL-11 방출 검정에서의 C-말단 Fc-융합된 T22d35 트랩 변이체와 비교한 T22d35-Fc, T22d35-Fc-IgG2-v2(CC), T22d35-Fc-IgG1-v1(CC), T22d35-Fc-IgG1-v2(SCC), 및 T22d35-Fc-IgG1-v3(GSL-CC)의 기능적 평가를 제공한다. TGF-β1의 중화를 평가하고, TGF-β1 대조군 중 %로서 계산하였다 (삼중 실험의 평균 +/- SD). 표에는 그래프패드 프리즘 (4-PL 알고리즘 ((log (억제제) vs. 반응 - 변수 기울기 (4 파라미터))에서 계산된 IC50 계산값을 열거하였다.
도 9는 A549 IL-11 방출 검정에서의 T22d35-Fc-IgG1-v1 (CC) 변이체에 의한 TGF-β1, -β2 및 -β3 중화의 기능적 평가를 제공한다. TGF-β 중화를 평가하고, TGF-β 대조군 중 %로서 계산하였다 (삼중 실험의 평균 +/- SD). 표에는 그래프패드 프리즘 (4-PL 알고리즘 ((log (억제제) vs. 반응 - 변수 기울기 (4 파라미터))에서 계산된 IC50 계산값을 열거하였다.
도 10은 동계 MC-38 마우스 결장 암종 모델에서의 T22d35-Fc 융합 단백질의 기능적 생체내 평가이다. (A) 기재된 바와 같이 종양 부피를 계산하고, 코호트당 평균 종양 값 +/- SD로 플로팅하였다. 이원 ANOVA를 사용하여, 시간 경과에 따른 T22d35-Fc 및 CTL IgG 치료 코호트에서의 계산된 평균 종양 부피 사이에 통계적으로 유의한 차이가 있는지를 분석하였다. 또한, CTL IgG (B) 및 T22d35-Fc 치료된 코호트 (C)에 대하여 개별 마우스별로 MC-38 종양 성장 (계산된 부피)을 플로팅하였다.
본 발명의 추가적인 측면 및 이점은 하기 설명에 비추어 명백할 것이다. 본 발명의 바람직한 실시양태를 나타내고 있기는 하지만, 상세한 설명 및 실시예는 오로지 예시로서 제공되며, 이는 본 발명의 범주에 속하는 다양한 변화 및 변형이 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 명백해질 것이기 때문이다.
도 2 A-G 중 도 2A/B/C는 융합체 단백질인 T2m-Fc (2B) 및 T22d35-Fc (2C)을 생성시키기 위한 IgG2 Fc 영역 (2A) 중쇄 N-말단에의 T2m 및 T22d35 모듈 융합의 개략적인 표현이며; 도 2D는 T2m-Fc 및 T22d35-Fc 융합 단백질의 아미노산 서열 (서열식별번호: 9, 서열식별번호: 10)을 제공한다. 도 2E는 T22d35-Fc 융합체에서의 Fc와 ECD 영역 사이 링커 영역의 추가적인 변이체의 정렬된 서열을 제공한다. 도 2F 및 2G는 인간 IgG1 Fc (도 2F; 서열식별번호: 14, 서열식별번호: 17, 서열식별번호: 20) 및 인간 IgG2 Fc 영역 (도 2G; 서열식별번호: 23)을 사용하는 T22d35-Fc 링커 변이체의 아미노산 서열을 제공한다. 천연 링커 서열 (서열식별번호: 6, 서열식별번호: 7, 서열식별번호: 8)은 밑줄표시되어 있고, TβRII 구조화된 도메인의 서열 (서열식별번호: 4)은 볼드체로 제시되어 있고, 인간 IgG Fc 서열 변이체 (서열식별번호: 12, 서열식별번호: 15, 서열식별번호: 18, 서열식별번호: 24)은 볼드체-이탤릭체로 제시되어 있다.
도 3 A/B/C는 T2m-Fc 융합 단백질에 대한 정제용 SEC 용리 프로파일을 제시하며 (3A); 분획 (Fr.) 6-11을 풀링하여 농축시켰다. 다음에는, UPLC-SEC 프로파일 (3B) 및 비-환원성 (NR) 및 환원성 (R) 조건 하에서의 SDS-PAGE 평가 (3C)에 의해 SEC 정제된 물질의 단백질 완전성을 평가하였다.
도 4 A/B/C는 T22d35-Fc 융합 단백질에 대한 정제용 SEC 용리 프로파일을 제시하며 (4A); Fr. 7-10을 풀링하여 농축시켰다. 다음에는, UPLC-SEC 프로파일 (4B) 및 비-환원성 (NR) 및 환원성 (R) 조건 하에서의 SDS-PAGE 평가 (4C)에 의해 SEC 정제된 물질의 단백질 완전성을 평가하였다.
도 5 A/B는 비-환원성 (A) 및 환원성 (B) 조건 하에서의 단백질 A 정제된 T22d35-Fc, T22d35-Fc-IgG2-v2(CC), T22d35-Fc-IgG1-v1(CC), T22d35-Fc-IgG1-v2(SCC), T22d35-Fc-IgG1-v3(GSL-CC), hIgG1FcΔK(C)-T22d35, hIgG1FcΔK(CC)-T22d35 및 hIgG2FcΔK(CC)-T22d35 변이체의 SDS-PAGE 분석을 제공한다.
도 6 A/B/C는 다양한 융합 단백질의 무손상 단량체 (A), 응집물 (B) 및 단편 (C) 백분율을 제공하며, 이는 IgG Fc 부분의 N-말단에서 T22d35 이중체를 발현하는 것에 이점이 존재한다는 것을 나타낸다. 표에는 분석된 파라미터에 있어서의 숫자상 차이를 열거하였다.
도 7A/B/C는 A549 IL-11 방출 검정에서의 비-Fc-융합된 단일 쇄 T22d35 트랩과 비교한 T2m-Fc 및 T22d35-Fc 융합 단백질의 기능적 평가를 제공한다. TGF-β1 (5A), -β2 (5B), -β3 (5C)의 중화를 평가하고, TGF-β 대조군 중 %로서 계산하였다 (삼중 실험의 평균 +/- SD). 표에는 그래프패드 프리즘(Graphpad Prism) (4-PL 알고리즘 ((log (억제제) vs. 반응 - 변수 기울기 (4 파라미터))에서 계산된 IC50 계산값을 열거하였다.
도 8은 A549 IL-11 방출 검정에서의 C-말단 Fc-융합된 T22d35 트랩 변이체와 비교한 T22d35-Fc, T22d35-Fc-IgG2-v2(CC), T22d35-Fc-IgG1-v1(CC), T22d35-Fc-IgG1-v2(SCC), 및 T22d35-Fc-IgG1-v3(GSL-CC)의 기능적 평가를 제공한다. TGF-β1의 중화를 평가하고, TGF-β1 대조군 중 %로서 계산하였다 (삼중 실험의 평균 +/- SD). 표에는 그래프패드 프리즘 (4-PL 알고리즘 ((log (억제제) vs. 반응 - 변수 기울기 (4 파라미터))에서 계산된 IC50 계산값을 열거하였다.
도 9는 A549 IL-11 방출 검정에서의 T22d35-Fc-IgG1-v1 (CC) 변이체에 의한 TGF-β1, -β2 및 -β3 중화의 기능적 평가를 제공한다. TGF-β 중화를 평가하고, TGF-β 대조군 중 %로서 계산하였다 (삼중 실험의 평균 +/- SD). 표에는 그래프패드 프리즘 (4-PL 알고리즘 ((log (억제제) vs. 반응 - 변수 기울기 (4 파라미터))에서 계산된 IC50 계산값을 열거하였다.
도 10은 동계 MC-38 마우스 결장 암종 모델에서의 T22d35-Fc 융합 단백질의 기능적 생체내 평가이다. (A) 기재된 바와 같이 종양 부피를 계산하고, 코호트당 평균 종양 값 +/- SD로 플로팅하였다. 이원 ANOVA를 사용하여, 시간 경과에 따른 T22d35-Fc 및 CTL IgG 치료 코호트에서의 계산된 평균 종양 부피 사이에 통계적으로 유의한 차이가 있는지를 분석하였다. 또한, CTL IgG (B) 및 T22d35-Fc 치료된 코호트 (C)에 대하여 개별 마우스별로 MC-38 종양 성장 (계산된 부피)을 플로팅하였다.
본 발명의 추가적인 측면 및 이점은 하기 설명에 비추어 명백할 것이다. 본 발명의 바람직한 실시양태를 나타내고 있기는 하지만, 상세한 설명 및 실시예는 오로지 예시로서 제공되며, 이는 본 발명의 범주에 속하는 다양한 변화 및 변형이 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 명백해질 것이기 때문이다.
이제, 모든 형질전환 성장 인자 베타 (TGF-β1, β2 및 β3) 이소형에 결합하여 그를 중화하는 폴리펩티드 구축물이 제공된다. 이러한 폴리펩티드는 TGF-β 수용체 엑토도메인을 활용하여 TGF-β1 및 TGF-β3, 그리고 어느 정도까지의 TGF-β2를 포함한 다양한 TGFβ 종을 포획하거나 봉쇄한다. 본원에 입증된 바와 같이, 본 발명의 폴리펩티드 구축물이 TGF-β1 및 -β3를 중화하는 효력은 놀랍게도 관련 구축물에 비해 훨씬 더 크다. 이와 같은 이유로, 본 발명의 구축물은 암, 섬유성 질환 및 특정 면역 장애와 같은 의학적 적응증의 치료를 위한 약제로서 특히 유용할 것으로 예상된다.
본 발명의 폴리펩티드 구축물은 (C-말단에서 N-말단으로) 탠덤 방식으로 연결되는 2개의 TβR-ECD, 예컨대 TβRII-ECD를 포함하며, 또한 적어도 항체 중쇄의 제2 불변 도메인 (CH2) 및/또는 제3 불변 도메인 (CH3)을 포함하는 항체 불변 도메인을 포함한다. 항체 불변 도메인 (Fc)은 그의 N-말단에서 엑토도메인의 C-말단에 커플링된다. 이중체로서 엑토도메인을 갖고 항체 불변 도메인의 N-말단에 커플링된 채로 그 이중체를 갖는 것은 항체 불변 도메인의 N-말단에 커플링된 단일 ECD를 갖는 구축물에 비해 TGFβ1에 대하여 615배까지, 그리고 TGFβ3에 대하여 24배까지 증진된 중화 효력을 갖는 "트랩"을 제공한다.
본원에 사용될 때, TβRII-ECD라는 용어는 TGF-β 리간드에 결합하는 TGF-β 유형 II 수용체의 세포외 영역을 지칭한다. 본 발명의 구축물의 바람직한 실시양태에서, TGFβRII 엑토도메인은 하기의 안정한 3-차원 폴딩 구조를 형성하는 서열을 포함하는 TGFβR 종의 엑토도메인 (즉 TβRII-ECD)이다:
가요성 천연 플랭킹 서열을 포함하는 관련 형태에서, ECD는 하기에 제시된 바와 같은 밑줄표시된 구조를 포함할 수 있다:
이와 같은 서열은 TGF-β1 및 TGF-β3로 지칭되는 TGF-β 리간드 이소타입에 결합한다. TGF-β2에 대한 결합 친화성은 덜하다.
본 발명의 폴리펩티드 구축물에서, 2개의 TβRII-ECD는 동일한 서열을 포함할 수 있다. 2개의 엑토도메인은 탠덤 방식으로 연결되는데, 그 결과는 하나의 엑토도메인의 C-말단이 또 다른 엑토도메인의 N-말단에 연결되는 선형 폴리펩티드이다.
2개의 엑토도메인은 추가적인 아미노산 잔기가 도입되지 않도록 하는 직접 융합에 의해 연결될 수 있다. 대안적으로는, 추가적인 아미노산 잔기가 2개의 수용체 엑토도메인을 탠덤 방식으로 커플링하는 링커를 형성할 수 있다. 본 발명의 단백질 구축물에서는, 본 발명의 폴리펩티드 구축물의 제1 및 제2 영역이 또한 연결된다. "연결되는"이라는 용어는 2개의 영역이 공유 결합된다는 것을 의미한다. 화학 결합은 화학 반응에 의해 달성될 수 있거나, 또는 단일 폴리펩티드 쇄에서의 2개 영역의 재조합 발현의 산물일 수 있다. 구체적인 비제한적 예에서, 제1 영역의 C-말단은 제2 영역의 N-말단에 직접적으로 연결되는데, 다시 말하자면 2개 영역 사이에 추가적인 "링커" 아미노산이 존재하지 않는다. 링커가 존재하지 않는 경우, 다시 말하자면 2개 영역의 직접 융합의 경우에는, 전체 엑토도메인의 C-말단과 항체 불변 영역 CH2-CH3의 N-말단 사이에 직접 연결이 존재하게 된다. 예를 들어, 서열식별번호: 1을 갖는 TβRII-ECD의 일부인 서열식별번호: 8을 갖는 고유 불규칙 링커를 통하여 (즉 추가적인 "링커" 아미노산은 첨가되지 않음) 서열식별번호: 1에 Fc 변이체 (서열식별번호: 12, 서열식별번호: 15, 서열식별번호: 18, 서열식별번호: 24)을 융합시키는데 있어서는, 서열식별번호: 1 마지막 위치의 아스파르트산을 각각 서열식별번호: 12, 서열식별번호: 15, 서열식별번호: 18 또는 서열식별번호: 24의 첫 번째 위치에서 발견되는 글루탐산, 트레오닌, 발린 또는 발린에 연결한다.
융합 구축물을 생산할 때의 일반적인 관행은 융합된 구성요소들 사이에 GGGGS 또는 [G4S]n (여기서 n은 1, 2, 3, 4 또는 5 또는 그 초과, 예컨대 10, 25 또는 50)과 같은 글리신 또는 글리신-세린 링커 (GSL)를 도입하는 것이다. 상기 단락에서 교시된 바와 같이, 본 발명의 폴리펩티드 융합체는 Fc 영역 및 수용체 엑토도메인 영역에 존재하는 것들을 제외한 어떠한 추가적인 아미노산 서열의 사용도 없이 직접 연결에 의해 생산될 수 있다. 이에 따라, 외래 서열을 링커로 이용하는 것을 생략함으로써, 그의 원치 않는 면역원성의 가능성 및 그의 추가되는 분자량과 관련한 이점을 제공할 수 있다. 고도로 가요성이며 표적 결합 시 부분적으로 제한될 수 있어서 결합 친화성에 바람직하지 않은 엔트로피 손실을 야기하는 글리신 및 글리신-세린 링커의 엔트로피 요소가 또한 잠재적인 결점이 된다. 이에 따라, 본 발명의 실시양태에서는, TGFβRII-ECD의 가요성, 고유 불규칙 N-말단 영역만을 천연 링커로서 사용하였다. 그러나, 이러한 고유 불규칙 링커 (예컨대 서열식별번호: 6, 서열식별번호: 7, 서열식별번호: 8)의 구체적인 아미노산 조성 및 길이는 생성되는 직접-융합 구축물이 그의 원하는 이량체성 리간드에의 올바른 결합을 위한 요구되는 기하구조 및 바람직한 분자 상호작용을 갖게 되는지에 대한 정밀한 예측을 방해한다. 서열식별번호: 1을 갖는 TβRII-ECD 마지막 위치의 아스파르트산 (D)과 서열식별번호: 15를 갖는 Fc 영역 변이체 첫 번째 위치의 트레오닌 (T) 사이에 서열식별번호: 21을 갖는 GS 링커가 도입되는 서열식별번호: 20의 구축물에 예시되어 있는 바와 같이, 다른 실시양태에서, 융합 폴리펩티드는 가요성 인공 GSL을 포함할 수도 있다.
실시양태에서, 폴리펩티드 구축물의 제1 및 제2 영역은 서열식별번호: 8, 13, 16, 19, 25 및 그와 실질적으로 동일한 서열로 이루어진 군으로부터 선택되는 천연 고유 불규칙 폴리펩티드 링커에 의해 연결된다. 다른 실시양태에서, 폴리펩티드 구축물의 영역은 서열식별번호: 21 및 서열식별번호: 22, 및 그와 실질적으로 동일한 서열로 이루어진 군으로부터 선택되는 가요성 링커에 의해 연결된다.
이와 같은 실시양태에서, 본 발명의 폴리펩티드 구축물의 하나의 영역은 서열식별번호: 6을 갖는 천연 고유 불규칙 폴리펩티드 링커에 의해 탠덤 방식으로 연결되는 제1 및 제2 수용체 엑토도메인을 포함하며 하기를 포함하는 아미노산 서열을 갖는 TβRII-ECD 이중체를 포함한다:
본 발명의 구축물은 적어도 항체 중쇄의 제2 불변 도메인 (CH2) 및/또는 제3 불변 도메인 (CH3)을 포함하는 항체 불변 도메인을 포함하는 영역을 또한 포함한다. 상기 항체 불변 도메인은 그의 N-말단에서 엑토도메인 이중체의 C-말단에 커플링되며, 그에 따라 구축물의 배향은 TβRII-ECD(연결)TβRII-ECD(연결)CH2-CH3의 단일 쇄이다.
항체 불변 도메인은 2개의 본 발명의 폴리펩티드 구축물 사이에 가교-결합을 제공한다. 이는 발현되는 폴리펩티드 구축물이 그의 발현 숙주로부터 분비될 때 달성된다. 이에 따라, 단일 쇄 폴리펩티드의 생산은 각 구축물에 존재하는 각 항체 불변 도메인 내의 하나 이상의 시스테인 잔기를 포함하는 디술피드 가교를 통하여 2개의 구축물이 가교-결합되어 있는 이량체성 형태로 구축물을 제공한다.
구축물에 존재하는 항체 불변 도메인은 바람직하게는 IgG 불변 영역, 특히 IgG1 또는 IgG2 중 어느 하나의 불변 도메인으로부터 유래한다.
제공되는 구축물은 불변 영역 자체가 폴리펩티드 구축물의 이량체가 형성될 수 있는 구조로서 작용한다는 것이 아닌 다른 특정 활성은 갖지 않을 수 있다는 의미에서 단일기능적이다. 이러한 최소한의 불변 영역은 상응하는 힌지 영역을 혼입하는 것 및 임의적으로 시스테인 잔기 조성을 변화시키는 것에 의해 소정의 이점을 제공하도록 변경될 수도 있다. 예컨대, 2개의 Fc 단편을 가교시키는데 연관되어 있거나 전체-길이 항체의 중쇄와 경쇄 사이를 가교시키는데 천연에서 사용되는 시스테인 잔기들 일부 또는 전부가 대체되거나 결실될 수 있다. 시스테인 잔기의 수를 최소화하는 것의 한 가지 이점은 응집을 촉진할 수 있는 디술피드 결합 스크램블링의 경향을 감소시키는 것이다. 예를 들면, 폴리펩티드 구축물 제1 및 제2 영역의 연결부 부근에 위치하는 천연 또는 비-천연 링커 서열에서 이러한 시스테인 잔기 및 그의 변경이 나타나며, 하기에 열거한다:
인간 IgG1 힌지 서열의 SEEYNTSNPDTHTCPPCPAPE (서열식별번호: 16), SEEYNTSNPDVEPKSSDKTHTCPPCPAPE (서열식별번호: 19), SEEYNTSNPDGGGSGGGSGGGTHTCPPCPAPE (서열식별번호: 22) 혼입 변이체; 및 인간 IgG2 힌지 서열의 SEEYNTSNPDERKCCVECPPCPAPP (서열식별번호: 13) 및 SEEYNTSNPDVECPPCPAPP (서열식별번호: 25) 혼입 변이체; 및 그와 실질적으로 동일한 서열.
Fc 동종이량체의 안정성이 분자간 디술피드 가교의 수에 따라 달라질 수 있는 것으로 알려져 있기는 하지만, Fc 동종이량체화가 이루어지기 위해서 모든 천연-발생 힌지간 디술피드 결합이 형성될 필요가 있는 것은 아니다.
본 개시내용에서, "이뮤노글로불린" (Ig)으로도 관련 기술분야에서 지칭되는 "항체"는 쌍형성된 폴리펩티드 중쇄 및 경쇄로 구성되는 단백질을 지칭한다. 항체 및 각 도메인의 구조가 잘 알려져 있어서 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 친숙하기는 하지만, 여기에서 요약하기로 한다. 항체가 올바르게 폴딩되는 경우, 각 쇄는 더 선형인 폴리펩티드 서열에 의해 연결되는 수많은 고유한 구형 도메인으로 폴딩되며; 이뮤노글로불린 경쇄는 하나의 가변 (VL) 및 하나의 불변 (CL) 도메인으로 폴딩되는 반면, 중쇄는 하나의 가변 (VH) 및 3개의 불변 (CH1, CH2, CH3) 도메인으로 접힌다. 일단 쌍형성되면, 중쇄 및 경쇄 가변 도메인 (VH 및 VL) 및 제1 불변 도메인 (CL 및 CH1)의 상호작용은 결합 영역 (Fv)을 함유하는 Fab (항원-결합 단편)의 형성을 초래하며; 2개 중쇄 쇄의 상호작용은 Fc (결정화가능 단편)의 형성으로 이어지는 CH2 및 CH3 도메인의 쌍형성을 초래한다. CH2 및 CH3 도메인에 대하여 본원에 기재된 특징은 Fc에도 적용된다.
본 발명 및 그의 구체적인 실시양태에서, 유의하게 증진된 효력을 나타내는 폴리펩티드 구축물은 하기를 포함한다:
구체적인 실시양태에서, 폴리펩티드 구축물은 유의하게 증진된 효력을 나타내는 본 발명의 폴리펩티드를 포함하며, 예를 들면 유의하게 증진된 효력을 나타내는 폴리펩티드는 서열식별번호: 10, 서열식별번호: 14, 서열식별번호: 17, 서열식별번호: 20 또는 서열식별번호: 23을 포함할 수 있다. 또 다른 구체적인 실시양태에서, 폴리펩티드 구축물은 유의하게 증진된 효력을 나타내는 2개의 폴리펩티드를 포함하는 동종이량체일 수 있으며; 예를 들어 유의하게 증진된 효력을 나타내는 폴리펩티드 구축물이 서열식별번호: 14인 경우, 폴리펩티드 구축물은 각 폴리펩티드 구축물이 서열식별번호: 14를 포함하는 2개의 폴리펩티드 구축물을 포함하는 동종이량체이다. 마찬가지로, 증진된 효력을 나타내는 폴리펩티드가 서열식별번호: 10, 14, 17, 20 또는 23인 경우, 본 발명의 동종이량체는 마찬가지로 동종이량체의 각 폴리펩티드가 각각 서열식별번호: 10, 14, 17, 20 또는 23인 2개의 폴리펩티드 구축물을 포함한다.
주지된 바와 같이, 이러한 단일 쇄 폴리펩티드 구축물은 생산 숙주로부터 분비될 때 이량체화됨으로써, 2개 단일 쇄 폴리펩티드의 불변 도메인들 사이에 형성되는 디술피드 가교에 의해 연결된 2개의 단일 쇄 폴리펩티드를 포함하는 이량체성 폴리펩티드 구축물을 산출하게 된다.
"유의하게 증진된 효력"은 이와 같은 이량체성 형태에서의 본 발명의 폴리펩티드 구축물의 효과 또는 활성이 TGF-β의 생물학적 활성을 평가하기 위한 관련 검정에서 측정하였을 때 대응부 구축물에 비해 더 크다는 것을 의미한다. 이와 같은 측정을 수행하기 위한 적절한 수단은 본원에 예시된다. 예를 들면, A549 세포에 의한 TGF-β-유도 IL-11 방출 (도 7)에 의해 예시되는 바와 같이, N-말단 Fc-융합된 T22d35 이중체는 N-말단으로 Fc-융합된 T2m 단일체에 비해 훨씬 더 큰 정도까지 TGF-β를 중화한다.
본 발명의 유형의 융합 구축물은 비-Fc 융합된 2가 TGF-β 수용체 엑토도메인 구축물 (예컨대 T22d35 이중체) 및 단일 수용체 엑토도메인이 Fc 영역의 N-말단에 융합되어 있는 구축물을 포함한 여러 다른 버전의 TβRII 수용체-엑토도메인 기반 분자에 대비하여 이점을 갖는 것으로 관찰된다. 특히, 본원에 제공되는 Fc 융합 구축물은 Fc 영역의 존재로 인하여 개선된 제조성을 갖는다 (예를 들면, 단백질 A 크로마토그래피를 사용하여 정제가 수행될 수 있음). Fc 영역은 또한 개선된 순환 반감기를 가능하게 한다. 중요하게는, 본 발명의 구축물은 단일체 융합체 (T2m-Fc) 및 비-Fc-융합된 이중체 엑토도메인 (T22d35)에 비해 실질적으로 더 높은 TGF-β 중화 효력을 갖는다. 제공되는 N-말단 융합된 TGF-β ECD 이중체 Fc 구축물 (T22d35-Fc)은 TGF-β 리간드 중화 효력의 유의한 개선과 관련하여 이점을 나타낸다 (예를 들면, 도 7에 제시된 바와 같은 비-Fc 융합된 이중체에 대비한 TGF-β1 중화에 있어서의 970-배가 넘는 개선에서 제시된 바와 같음). 또한, 그것은 > 99%의 단량체 함량을 제시하는 (즉, 응집물의 최소한의 존재, 및 정제된 N-말단 융합된 T22d35-Fc 구축물의 단편의 부재) (도 6에 예시되어 있는 바와 같음) 생물물리학 분석에 의해 입증되는 바와 같이, 개선된 제조성을 나타낸다. 이에 따라, 본 발명의 이점은 T2m-Fc (Fc-단일체) 또는 T22d35 (비 Fc-융합된) 구축물을 사용하여서는 관찰되지 않는 어느 정도의 TGF-β2 중화를 포함한 TGF-β 리간드 중화의 예상치 못한 높은 효력이다.
구체적인 실시양태에서, 본 발명의 폴리펩티드 구축물의 제2 영역은 서열식별번호: 12, 15, 18, 24로 예시되는 바와 같은 N-말단 서열의 변이를 나타내는 서열의 군으로부터 선택된다. 이들은 Fc-영역 이량체화의 정도를 조절하고 그에 따라 효능 및 제조성 둘 다에 영향을 주기 위한 수단으로서 보유되는 시스테인 잔기의 길이 및 수가 힌지 영역과 다를 수 있다. 예컨대, 실시양태에서, 폴리펩티드 구축물은 가교-결합에 연관되어 있는 적어도 하나의 시스테인 잔기가 결실되거나 치환되어 있는 불변 도메인의 변이를 포함한다. 적합한 치환체에는 세린 또는 알라닌이 포함되며, 바람직하게는 세린에 의한다.
실질적으로 동일한 서열은 배양 배지로의 분비 시 여전히 적정한 폴딩을 제공하는 하나 이상의 보존성 아미노산 돌연변이를 포함할 수 있다. 관련 기술분야에서는, 참조 서열에 대한 하나 이상의 보존성 아미노산 돌연변이가 참조 서열과 비교 시 생리학적, 화학적, 물리화학적 또는 기능적 특성에 있어서의 실질적인 변화가 없는 돌연변이 펩티드를 산출할 수 있으며; 이와 같은 경우, 참조 서열과 돌연변이 서열은 "실질적으로 동일한" 폴리펩티드로 간주되게 된다고 알려져 있다. 본원에서 보존성 아미노산 치환은 유사한 화학적 특성 (예컨대 크기, 전하 또는 극성)을 갖는 또 다른 아미노산 잔기를 대신한 아미노산 잔기 치환으로 정의된다. 이러한 보존성 아미노산 돌연변이는 불변 도메인의 전체적인 구조를 유지하면서 프레임워크 영역에 대하여 이루어질 수 있어서; Fc의 기능이 유지된다.
구체적인 비제한적 예에서, 본 발명의 폴리펩티드 구축물의 제1 영역은 하기와 같은 TGF-β 수용체 유형 II를 포함할 수 있다:
바람직한 실시양태에서, 폴리펩티드 구축물은 TβRII-ECD가 또 다른 TβRII-ECD와 탠덤 방식으로 연결되는 TβRII-ECD "이중체"를 포함하며, 엑토도메인들은 동일하거나 상이한 TGF-β 슈퍼패밀리 수용체 엑토도메인일 수 있는데, 예컨대 하기이다:
그와 실질적으로 동일한 서열. "실질적으로 동일한"은 상기에서 정의된 바와 같다.
엑토도메인 이중체는 둘 다 TGFβ 슈퍼패밀리의 수용체 과에 속하는 동일하거나 상이한 엑토도메인들을 혼입할 수 있다. 실시양태에서, 상기 엑토도메인들은 동일한 표적에 결합한다. 다른 실시양태에서, 엑토도메인들은 동일한 수용체 종의 것이다. 다른 실시양태에서는, 엑토도메인들이 동일하며, 그에 따라 동종체성이다.
예를 들면, 본 발명의 폴리펩티드 구축물은 각각 TGF-β1 및 TGF-β3에 대하여 T22d35 이중체 단독에 비해 적어도 900-배 및 200-배 더 강력한 것으로 이루어진 군으로부터 선택되는 TGF-β 중화 효력을 가질 수 있다. 예를 들어, IL-11 방출 검정에서, T22d35-Fc 이중체 구축물은 비-Fc-융합된 T22d35 이중체 단독과 비교 시 TGF-β1을 중화하는데 있어서는 대략 972-배 더 강력하며, TGF-β3를 중화하는데 있어서는 대략 243-배 더 강력하다.
또 다른 예에서, 구축물의 효력은 항체 불변 도메인이 이중체가 아닌 단일 엑토도메인에 커플링되는 구축물에 비해 각각 TGF-β1 및 TGF-β3를 중화하는데 있어서 적어도 600-배 및 적어도 20-배 더 크다. 본 발명의 폴리펩티드 구축물은 항체 불변 도메인이 이중체가 아닌 단일 엑토도메인에 커플링되는 구축물의 효력과 비교 시, 각각 TGF-β1 및 TGF-β3에 대하여 적어도 615-배 및 24-배 더 우수한 중화 효력을 가질 수 있다.
중화 효력은 하기와 같이 요약될 수 있다: Fc-융합된 이중체 (ECD-ECD-Fc)의 중화 효력은 Fc-융합된 ECD 단량체 (ECD-Fc)에 비해 더 크며; 다시 말하자면 ECD-ECD-Fc > ECD-Fc인 반면, ECD-Fc는 비-Fc-융합된 이중체 (ECD-ECD)에 비해 더 강력하며, 비-Fc 융합된 이중체 ECD는 비-Fc-융합된 단일체 ECD에 비해 더 강력하며; 다시 말하자면 ECD-ECD-Fc >> ECD-Fc > ECD-ECD >> ECD이다. 제조성 면에서, Fc 단백질의 존재는 단백질 A 정제를 가능하게 하며, 절단가능 태그를 사용할 필요성을 방지한다. 또한, 단일체 또는 이중체 ECD를 Fc 부분의 N-말단에 위치시키는 것은 Fc 부분 힌지 영역 시스테인 잔기들의 부적절한 쌍형성으로 인한 응집 문제를 방지한다. 이에 따라, Fc 부분의 N-말단에 대한 ECD 단일체 또는 이중체의 융합은 C-말단 융합에 비해 개선된 제조성을 제공한다 (N-말단 융합은 더 높은 단량체성 종 백분율, 더 적은 응집, 더 적은 단편을 가짐). 또한, N-말단 Fc 융합된 T2m 단일체 ECD에 비해 N-말단 Fc 융합된 이중체 ECD에서 모든 TGF-β 이소타입에 대하여 TGF-β 중화 효력의 예상치 못한 유의한 증가가 관찰된다.
또한, 본 발명의 폴리펩티드 구축물이 TGF-β에 결합하는 TβRII-ECD를 포함하는 경우, 폴리펩티드 구축물은 가변적인 정도로 3종 TGF-β 이소타입 (즉 TGF-β1, TGF-β2 및 TGF-β3) 전체를 중화할 수 있다.
본 발명의 폴리펩티드 구축물은 세포-기반 검정으로 평가하였을 때 2가의 비교용 폴리펩티드, 즉 비-Fc-융합된 T22d35 (이중체 단독) 및 T2m-Fc (Fc 융합된 단일체)의 것에 비해 유의하게 더 높은 (20-배 이상) TGF-β 중화 효력을 갖는다. 일련의 본 발명의 폴리펩티드 구축물 중 Fc 불변 영역의 N-말단에 융합된 2개 이상의 TβRII-ECD 카피를 함유하는 것들은 세포 기반 검정에서 평가하였을 때 하나의 카피만을 함유하는 구축물에 비해 더 높은 효력을 갖는다.
본 발명의 폴리펩티드 구축물은 단일 폴리펩티드 쇄로서 발현된다. 일단 발현되면, 본 발명의 폴리펩티드 구축물은 발현된 산물이 배양 배지로 분비될 때 이루어지는 바와 같이 각 폴리펩티드 구축물의 CH2 및 CH3 도메인이 상호작용하여 적정하게 조립된 Fc 영역을 형성하는 이량체를 형성한다.
본 발명의 폴리펩티드 구축물은 재조합 항체 또는 그의 단편의 발현, 검출 또는 정제를 돕는 추가적인 서열을 포함할 수도 있다. 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 알려져 있는 어떠한 그와 같은 서열 또는 태그도 사용될 수 있다. 제한하고자 하는 것은 아니나 예를 들면, 항체 또는 그의 단편은 표적화 또는 신호 서열 (예를 들면 비제한적으로 ompA), 검출/정제 태그 (예를 들면 비제한적으로 c-Myc, His5, His6 또는 His8G), 또는 이들의 조합을 포함할 수 있다. 또 다른 예에서, 상기 신호 펩티드는 MDWTWRILFLVAAATGTHA (서열식별번호: 11)일 수 있다. 다른 예에서, 추가적인 서열은 [WO/1995/04069호] 또는 [WO/2004/076670호]에 기재된 것과 같은 비오틴 인식 부위일 수 있다. 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 또한 알려져 있는 바와 같이, 링커 서열이 추가적인 서열 또는 태그와 함께 사용될 수 있거나, 또는 검출/정제 태그로 작용할 수 있다. 적합하게는, 불변 영역은 단일 쇄 폴리펩티드가 단백질 A 친화성 접근법을 사용하여 추출/단리되는 것을 가능하게 하는 단백질 A 결합 부위 (통상적으로 대략 CH2와 CH3 사이에 존재함)를 포함한다.
본 발명은 상기 기재된 바와 같은 분자를 코딩하는 핵산 서열을 또한 포괄한다. 통상의 기술자라면 잘 알고 있을 바와 같이, 유전자 코드의 축중성을 감안하면, 수많은 뉴클레오티드 서열이 원하는 폴리펩티드를 코딩하는 효과를 가지게 된다. 핵산 서열은 다양한 미생물에서의 발현용으로 코돈-최적화될 수 있다. 본 발명은 상기 기재된 바와 같은 핵산을 포함하는 벡터를 또한 포괄하며, 상기 벡터는 통상적으로 선택된 세포성 생산 숙주에서의 그의 발현을 추진하기 위하여 구축물-코딩 폴리뉴클레오티드에 작용가능하게 연결되는 프로모터 및 신호 서열을 포함한다. 상기 벡터는 둘 다 이량체성 폴리펩티드 구축물의 분비를 초래한다는 전제 하에, 동일하거나 상이할 수 있다.
또한, 본 발명은 제1 폴리펩티드 구축물을 코딩하는 기재된 바와 같은 핵산 및/또는 벡터를 포함하는, 본원에서 트랜스제닉 세포 숙주로도 지칭되는 세포를 포괄한다. 상기 숙주 세포는 제1 폴리펩티드 구축물과 상이한 제2 폴리펩티드 구축물을 코딩하는 제2 핵산 및/또는 벡터를 포함할 수 있다. 상기 제1 및 제2 폴리펩티드 구축물의 공동-발현은 이종이량체의 형성으로 이어질 수 있다.
본 발명은 또한 1종 또는 1종 초과의 본원에 기재된 바와 같은 폴리펩티드 구축물을 포함하는 조성물을 포괄한다. 상기 조성물은 상기 기재된 바와 같은 단일 폴리펩티드 구축물을 포함할 수 있거나, 또는 폴리펩티드 구축물들의 혼합물일 수 있다. 조성물은 또한 1종 또는 1종 초과의 적재물 분자에 연결된 1종 또는 1종 초과의 본 발명의 폴리펩티드 구축물을 포함할 수 있다. 어떠한 방식으로도 제한하고자 하는 것은 아니나 예를 들면, 조성물은 본 발명에 따른 항체-약물 접합체 (ADC)를 생성시키기 위하여 세포독성 약물에 연결된 1종 또는 1종 초과의 본 발명의 폴리펩티드 구축물을 포함할 수 있다.
조성물은 또한 제약상 허용되는 희석제, 부형제 또는 담체를 포함할 수 있다. 상기 희석제, 부형제 또는 담체는 관련 기술분야에 알려져 있는 임의의 적합한 희석제, 부형제 또는 담체일 수 있는데, 다른 조성물 중 성분, 조성물의 전달 방법과 상용성이어야 하며, 조성물의 수용자에게 유해하지 않아야 한다. 조성물은 임의의 적합한 형태일 수 있으며; 예를 들면 조성물은 현탁액 형태, 분말 형태 (예를 들면 비제한적으로 동결건조되거나 캡슐화됨), 캡슐 또는 정제 형태로 제공될 수 있다. 제한하고자 하는 것은 아니나 예를 들면, 조성물이 현탁액 형태로 제공되는 경우, 담체는 가용성 및/또는 안정성을 개선시키기 위한 물, 식염수, 적합한 완충제 또는 첨가제를 포함할 수 있으며; 현탁액을 생성하기 위한 재구성은 항체 또는 그의 단편의 생존율을 보장하는 적합한 pH로 완충제 중에서 수행된다. 건조 분말은 안정성을 개선시키기 위한 첨가제 및/또는 양/부피를 증가시키기 위한 담체를 포함할 수도 있는데; 제한하고자 하는 것은 아니나 예를 들면, 건조 분말 조성물은 수크로스 또는 트레할로스를 포함할 수 있다. 구체적인 비제한적 예에서, 조성물은 대상체의 위장관로로 항체 또는 그의 단편을 전달하도록 제제화될 수 있다. 이에 따라, 조성물은 항체 또는 그의 단편의 전달을 위한 캡슐화, 시한-방출 또는 다른 적합한 기술을 포함할 수 있다. 본 발명의 화합물을 포함하는 적합한 조성물을 제조하는 것은 관련 기술분야의 통상의 기술자의 능력에 속하게 된다.
본 발명의 구축물은 TGF-β 슈퍼패밀리 리간드의 과다-발현 또는 과다-활성화와 연관되어 있는 질환 또는 장애를 치료하는데 사용될 수 있다. 상기 질환 또는 장애는 암, 안구 질환, 섬유성 질환 또는 결합 조직의 유전적 장애에서 선택될 수 있으나 이에 제한되지는 않는다.
암 치료법 분야에서 최근 TGF-β가 면역 체크포인트 억제제 (ICI) (Hahn & Akporiaye, 2006)와 같은 면역치료법에 의해 도출되는 항종양 반응을 억제하는 핵심 인자라는 것이 입증되었다. 구체적으로, ICI 항체에 대한 치료 반응은 주로 종양-국소화 T-세포의 재-활성화에 기인한다. ICI 항체에 대한 내성은 종양 미세환경에서의 T-세포의 사멸을 초래하는 면역억제 기작의 존재에 기인한다. 예컨대, 현재 내성 환자에서 반응을 도출하기 위해서는 ICI 항체가 T-세포를 활성화시키고 종양으로의 그의 동원을 유도할 수 있는, 즉 "비-T-세포-염증발생" 종양 표현형을 반전시킬 수 있는 작용제와 조합될 필요가 있는 것으로 알려져 있다. 어떤 문헌은 비-T-세포-염증발생 종양 미세환경을 극복하는 것이 면역-종양학에 있어서의 가장 유의한 다음 장애물이라고 주지하고 있다 (Gajewski, 2015).
본 발명자들은 개념-증명 TGF-β 트랩인 T22d35를 사용하여 TGF-β의 차단이 "비-T 세포 염증발생" 종양 표현형을 효과적으로 반전시킨다는 것을 제시한 바 있다 (Zwaagstra et al., 2012). 이는 항-TGF-β 분자를 ICI 및 다른 면역치료제와의 잠재적인 상승작용성 조합으로 자리매김한다. 이를 지지하여, 2014 연구 (Holtzhausen et al., ASCO poster presentation)는 생리학적으로-관련된 트랜스제닉 흑색종 모델에서의 항-CTLA-4 항체를 조합하였을 때의 TGF-β 차단제의 효과를 조사하였다. 상기 연구는 항-CTLA-4 항체 단독요법은 흑색종 진행을 억제하는데 실패하지만 TGF-β 길항제와 항-CTLA-4 항체의 조합은 원발성 흑색종 종양 성장 뿐만 아니라 흑색종 전이 둘 다를 유의하게 그리고 상승작용성으로 억제한다는 것을 입증하였다. 이러한 관찰은 흑색종 조직에서의 이펙터 T-세포의 유의한 증가와 상관되었다.
본원에서 본 발명자들은 T22d35-Fc인 기본 구조를 갖는 본 발명의 폴리펩티드가 동계 마우스 MC-38 결장암 모델에서 종양 성장을 유의하게 감소시킨다는 것을 제시한다. 따라서, 이는 항-TGF-β 분자를 다른 면역치료제와의 잠재적인 상승작용성 조합에서 사용되도록 자리매김한다.
본 발명의 구축물은 비제한적으로 신장, 폐, 간, 심장, 피부 및 눈을 포함한 임의의 신체 기관에 영향을 주는 것들을 포함한 섬유성 질환을 치료하는데 유용할 수 있다. 이러한 질환에는 만성 폐쇄성 폐 질환 (COPD), 사구체신염, 간 섬유증, 경색후 심장 섬유증, 재협착, 전신성 경화증, 안구 수술-유도 섬유증 및 흉터형성이 포함되나 이에 제한되지는 않는다.
결합 조직의 유전적 장애가 또한 치료될 수 있으며, 마르팡 증후군 (MFS) 및 불완전 골생성 (OI)이 포함되나 이에 제한되지는 않는다.
하기 실시예에서 본 발명이 추가적으로 예시될 것이다. 그러나, 이들 실시예는 오로지 예시 목적을 위한 것이며, 어떠한 방식으로도 본 발명의 범주를 제한하는데 사용되어서는 안되는 것으로 이해되어야 한다.
물질 & 방법
생산 & 정제
일시적
CHO
발현
여러 TβRII-ECD 융합 변이체 (예컨대 T2m-Fc 및 T22d35-Fc)는 각각 중쇄 Fc 영역으로 구성되었으며, 그의 N-말단에 신호 서열인 MDWTWRILFLVAAATGTHA (서열식별번호: 11)를 포함하였다. 합성으로 구축물용 DNA 코딩 영역을 제조하고 (바이오베이직 인크.(Biobasic Inc.) 또는 진스크립트 유에스에이 인크.(Genescript USA Inc.)), pTT5 포유동물 발현 플라스미드 벡터 (Durocher et al., 2002)의 HindIII (5' 단부) 및 BamH1 (3' 단부) 부위로 클로닝하였다. IgG 중쇄에 융합된 중쇄 T2m 또는 T22d35 (각각 T2m-Hc 및 T22d35-HC) 구축물을 사용한 중국 햄스터 난소 (CHO) 세포의 일시적 형질감염에 의해 융합 단백질을 생산하였다. 간단하게 말하자면, 4 mM 글루타민 및 0.1% 콜리포르(Kolliphor) p-188 (시그마(Sigma))을 함유하는 프리스타일(FreeStyle) F17 배지 (인비트로겐(Invitrogen))에서 CHO-3E7 세포의 각각 2.5 L 및 4.6 L 배양물에 T2m-HC 또는 T22d35-HC 플라스미드 DNA를 형질감염시키고, 37℃로 유지하였다. 형질감염 조건은 하기였다: DNA (80% 플라스미드 구축물, 15% AKT 플라스미드, 5% GFP 플라스미드):PEI프로 (비 1:2.5): PEI(폴리에틸렌이민)프로 (폴리플러스(Polyplus)) (비 = 1:2.5). 형질감염 24시간 후, 10% 트립톤 N1 공급물 (테크니사이언스 인크.(TekniScience Inc.)) 및 0.5 mM 발프로산 (VPA, 시그마)을 첨가하고, 융합 단백질의 생산 및 분비를 촉진하기 위하여 온도를 32℃로 변경한 다음, 형질감염 후 15일 동안 유지한 후, 세포를 수확하였다. 최종 수확 시 세포 생존율은 89.6%이었다.
안정한 풀
CHO
발현
다양한 Fc-융합된 TβRII-ECD 단백질을 코딩하는 표적 유전자를 발현하는 벡터로 세포를 형질감염시키는 것에 의해 CHOBRI / rcTA 세포 풀을 생성시켰다. 형질감염 다음날, 세포를 250 rpm으로 5분 동안 원심분리하고, 0.5 x 106 세포/mL의 밀도로 선택 배지 (50 μM의 메티오닌 술폭시민이 보충된 파워CHO2 배지)에 접종하였다. 0.5x106 세포/mL의 접종물을 사용하여 14 내지 18일 동안 2-3일마다 선택 배지를 교체하였다. 상기 기재된 바와 같은 세덱스 이노바티(Cedex Innovati)의 자동 세포 계수기인 세덱스 분석기를 사용하여 세포 수 및 생존율을 측정하였다. 세포 생존율이 95% 초과에 도달하였을 때, 125 또는 250 mL 에를렌마이어 플라스크에서 0.2x106 세포/mL로 풀을 접종하였다. 유가식 배양을 위하여, 상기 기재된 바와 같이 CHOBRI / rcTA 세포 풀을 접종하였다. 접종후 제3일에 세포 밀도가 3.5 내지 4.5x106 세포/mL에 도달하였을 때, 2 μg/mL의 큐메이트를 첨가하는 것에 의해 재조합 단백질의 발현을 유도하였다. MSX 농도를 125 μM로 조정하고, F12.7 공급물 (어빈 사이언티픽(Irvine Scientific))를 첨가한 후, 이어서 온도를 32℃로 변경하였다. 2-3일마다, 배양물에 5% (v:v) F12.7를 공급하고, 재조합 단백질 (pA-HPLC) 및 글루코스 (비트로스(VITROS) 350, 오르소클리니칼 다이아그노스틱스(Orthoclinical Diagnostics), 미국) 농도 측정을 위하여 샘플을 수집하였다. 17 mM의 최소 농도를 유지하기 위하여, 글루코스를 첨가하였다.
정제
CHO 세포로부터의 수확 상청액을 여과하고 (0.2 μm), 단백질 A 맵셀렉트 슈어(MabSelect Sure) 칼럼 (지이 헬스케어(GE Healthcare)) 상에 로딩하였다. 2 칼럼 부피의 PBS를 사용하여 칼럼을 세척하고, 3 칼럼 부피의 0.1 M 소듐 시트레이트 pH 3.6을 사용하여 단백질을 용리하였다. 산출을 최대화하기 위하여, 유통물을 단백질 A 칼럼 상에 리로딩하고, 상기 기재된 바와 같이 용리하였다. 1 M 트리스를 사용하여 용리된 분획을 중화하고, 융합 단백질을 함유하는 것들을 풀링한 후, 이어서 제제화 완충제 (Ca2 +가 없으며 Mg2 +가 없는 DPBS) 중에서 평형화된 하이-로드 슈퍼덱스(Hi-load Superdex) S200 26/60 크기 배제 크로마토그래피 (SEC) 칼럼 (지이 헬스케어) 상에 로딩하였다. 1 칼럼 부피의 제제화 완충제를 사용하여 단백질을 용리하고, 연속 분획으로 수집한 후, 280 nm에서 UV 흡광도에 의해 검출하였다. 다음에, 융합 단백질을 함유하는 주요 피크 SEC 분획을 풀링하고, 농축시켰다. 환원성 및 비-환원성 조건 하에서 (사이프로 루비(SYPRO Ruby) 염색) UPLC-SEC 및 SDS-PAGE (4-15% 폴리아크릴아미드)에 의해 풀링된 분획 중 Prot-A 및 SEC 정제된 융합 단백질의 완전성을 추가적으로 분석하였다. UPLC-SEC의 경우, 워터스 액퀴티(Waters Acquity) UPLC H-클래스 바이오-시스템을 사용하여, DPBS (하이클론(Hyclone), Ca2 + 생략, Mg2 + 생략) 중 2-10 μg의 단백질을 워터스(Waters) BEH200 SEC 칼럼 (1.7 μm, 4.6 X 150 mm) 상에 주사하고, 실온에서 0.4 mL/분의 유량 하에 8.5분 동안 해상하였다. 280 nm에서 단백질 피크를 검출하였다 (액퀴티 PDA 검출기).
세포주
ATCC (Cat# CCL-185, 시더레인(Cedarlane), 온타리오주 벌링턴)로부터 인간 A549 비소세포 폐암 세포를 구매하였다. 5% 소 태아 혈청 (FBS)이 보충된 둘베코 변형 이글 배지 (DMEM)에서 세포를 배양하였다. 케라패스트(Kerafast) (Cat# ENH204, 매사추세츠주 보스턴)로부터 MC-38 마우스 결장 선암종 세포를 구매하고, 2 mM L-글루타민 및 10% 소 태아 혈청이 보충된 둘베코 변형 MEM에서 배양하였다. 세포주 둘 다를 5% CO2가 보충된 가습 분위기 하에서 37℃로 유지하였다.
TGF
-β 유도 A549 세포 IL-11 방출 검정
인간 A549 폐암 세포를 96-웰 플레이트에 접종하였다 (5x103 세포/웰). 다음날, 완전 배지 중 10 pM TGF-β를 TGF-β 트랩 융합 단백질의 연속 희석 부재 또는 존재 하에, 세포에 첨가하기 전에 RT에서 30분 동안 인큐베이션하였다. 인큐베이션 (37℃, 5% CO2, 가습 분위기) 21시간 후, 컨디셔닝된 배지를 수확하고, 2 μg/mL의 바이오티닐화된 마우스 항-인간 IL-11 항체 (MAB618, 알앤디 시스템즈(R&D Systems), 미네소타주 미네아폴리스)로 코팅된 MSD 스트렙타비딘 골드(Streptavidin Gold) 플레이트 (메소 스케일 다이아그노스틱스(Meso Scale Diagnostics), 메릴랜드주 게이더스버그)에 첨가하였다. 18시간 (4℃) 후, 0.02% 트윈(Tween) 20을 함유하는 PBS를 사용하여 플레이트를 세척한 다음, 2 μg/mL의 술포-태그부착된 염소 항-인간 IL-11 항체 (AF-218-NA, 알앤디 시스템즈, 미네소타주 미네아폴리스)를 첨가하고, RT로 1시간 동안 플레이트를 인큐베이션하였다. 최종 세척 후, 메소 퀵플렉스(MESO QuickPlex) SQ120 기계 (메소 스케일 다이아그노스틱스, 메릴랜드주 게이더스버그)에서 판독하였다. IL-11 판독치는 TGF-β 단독으로 치료되는 대조군 세포와 비교한 % IL-11 방출로 표현하였다. IC50을 계산하는데 그래프패드 프리즘 (4-PL 알고리즘 ((log (억제제) vs. 반응 - 변수 기울기 (4 파라미터))을 사용하였다 (필요할 경우, 자동 이상치 옵션을 사용하였음).
동계 마우스 결장암 MC-38 피하 마우스 모델에서의
생체내
평가
찰스 리버 래보러토리즈(Charles River Laboratories) (매사추세츠주 윌밍턴)로부터 암컷 C57BL/6-엘리트(Elite) 마우스 (5-7주령)를 구매하였다. 13마리의 C57BL/6 마우스에 제0일에, 3x105 MC-38 세포를 우측 옆구리에 피하로 주사하였다. 종양이 50-100 mm3의 부피에 도달하였을 때 (제5일), 동물들을 2개 코호트로 분할하고, 치료를 개시하였다:
치료 개시 15일 후까지 디지털 캘리퍼를 사용하여 주당 2회 종양을 측정하였다. 이전에 기재된 변형 타원 공식 (Tvol = π/6x(길이 x 너비 x 너비)) (Tomayko et al., 1986)을 사용하여 이러한 측정으로부터 종양 부피를 계산하였다.
결과 & 논의
융합 구축물 설계
해당 TGF-β 트랩을 생성시키기 위하여, TβRII-ECD 단일체 (T2m으로 지명)를 또 다른 그와 같은 단일체에 융합시킴으로써, 엑토도메인 이중체 (T22d35로 지명)를 형성시키고, 그를 인간 (h)IgG2 Fc 영역 및 인간 IgG1 Fc 영역의 중쇄 N-말단에 커플링하였다. 도 1은 T2m 및 T22d35의 개략도 (도 1A) 및 아미노산 서열 (도 1B)을 제시한다. T2m-Fc (도 2B) 및 T22d35-Fc 변이체 (도 2C) 융합체를 생성시키기 위해 여러 링커 변이체 (도 2E)를 사용하여 이러한 모듈을 IgG Fc 영역의 중쇄 N-말단에 융합시켰다 (도 2A). 이들 융합체의 서열을 도 2D에 제시되어 있다. 또한, Fc 도메인 힌지 영역의 시스테인 잔기 수, 상이한 IgG 이소타입 (인간 IgG1 대 IgG2), 및 T22d35와 Fc 도메인 N-말단 사이의 링커로서의 가변 길이 및 특성을 갖는 서열을 조사하는 T22d35-Fc의 변이체를 설계하였다 (도 2E, 2F & 2G). 이러한 변이체는 T22d35-Fc 설계의 기능적 및 제조성 속성을 조사하여 궁극적으로 그를 최적화하는 것을 목표로 한다.
발현 및 정제
일시적
CHO
물질의 정제
각 융합 단백질 구축물을 CHO-3E7 세포에서 일시적으로 발현한 후 (표 1 참조), 컨디셔닝된 배지를 수확하고, 단백질 A 친화성 칼럼 후 이어서 정제용 크기 배제 크로마토그래피 (SEC)를 사용하여 정제하였다. T2m-Fc (도 3A) 및 T22d35-Fc (도 4A)의 SEC 용리 프로파일은 이러한 융합 단백질이 상대적으로 순수하며 응집물이 없음을 제시하였다. 분획 6-11 (T2m-Fc) 및 7-10 (T22d35-Fc)을 풀링하고, 5.6 mg/mL (T2m-Fc) 및 6.03 mg/mL (T22d35-Fc)로 농축시켰다. 최종 수율은 T2m-Fc 및 T22d35-Fc에 대하여 각각 267 mg 및 168 mg이었다. 최종 산물 (SEC 풀링 분획을 나타냄)은 UPLC-SEC에서 > 99% 순수한 것으로 제시되었다 (도 3B & 4B). SDS-PAGE 평가 (도 3C & 4C, 사이프로 루비 염색)는 환원성 조건 하에서는 ~60 kDa 및 ~90 kDa의 T2m-Fc 및 T22d35-Fc 밴드를 제시한 반면, 비-환원성 조건 하에서는 각각 완전히 조립되고 고도로 순수한 T2m-Fc 및 T22d35-Fc 융합 단백질을 나타내는 대략 90 kDa 및 150 kDa의 밴드가 검출될 수 있었다. 생산 및 정제 세부사항에 대한 개관은 표 1에서 찾아볼 수 있다. 종합하면, 이러한 결과는 T2m-Fc 및 T22d35-Fc 융합 단백질의 우수한 제조성을 입증하고 있다.
표 1: T2m-Fc 및 T22d35-Fc 융합 단백질의 생산 (일시적 풀) 및 정제 세부사항.
안정한
CHO
풀 물질의 정제
해당 발현 수준 및 해당 생물물리학적 특성의 일부를 비교하기 위하여, CHOBRI/rcTA 세포에서 N- 및 C-말단 Fc-융합된 T22d35 변이체를 안정하게 발현하였다. 각 변이체의 코딩 영역을 포유동물 세포 발현 플라스미드에 결찰시키고, 형질감염 후, 각 변이체를 안정하게 발현한 보강된 세포 풀을 선택하였다. 변이체들 사이의 주요 차이는 Fc 도메인으로부터 T22d35 이중체를 분리하는 링커 영역을 구성하는 아미노산 서열에서 찾아볼 수 있는 반면 (N-말단 융합체의 경우), C-말단 Fc-융합체의 경우에 각 변이체들 사이의 차이가 단백질의 극한 아미노-말단에 존재한다 (표 2).
표 2: N- 및 C-말단 Fc-융합된 T22d35 융합체의 링커 영역에서의 아미노산 변이에 대한 설명 (진함: 천연 링커 서열; 이탤릭: 인공 링커 서열). 각 변이 중 쌍형성된 시스테인 잔기는 밑줄표시됨.
단백질 A 친화성에 의해, 그리고 용리 완충제로서 100 mM 시트레이트 (pH 3.6)를 사용하여 융합 단백질을 정제하였다. 용리된 융합 단백질 샘플을 1 M HEPES로 중화한 다음, 제바(Zeba) 회전 칼럼을 사용한 DPBS로의 완충제 교환에 적용하는 동시에 (표 3), SDS-PAGE에 의해 정제된 융합 단백질들 중 여러개의 완전성을 평가하였다 (도 5). 각 변이체의 정제는 유사하였다. 많은 특성이 변이체들 간에 매우 유사하였지만, 부적정한 폴딩의 지표인 응집 가능성은 약간의 차이를 나타내었다. 단백질 응집은 감소된 입체형태 안정성의 지표일 수 있으며, 감소된 활성, 효능 또는 효력으로 이어질 수 있다. 크기-배제 크로마토그래피-고성능 액체 크로마토그래피 (SEC-HPLC)를 사용하여 각 N- 및 C-말단 Fc-융합된 변이체의 순도를 측정하였다. 이와 같은 방법은 무손상 단량체성 종의 백분율은 물론 응집물 및/또는 분해 산물과 같은 불순물 존재의 정밀한 측정을 가능하게 한다. 도 6에 제시된 바와 같이, N-말단 Fc 융합체로서 발현되는 T22d35 변이체와 C-말단 융합체로서 발현되는 것들 사이에서는 현저한 차이가 관찰될 수 있다. 구체적으로, 무손상 단량체의 백분율 (도 6A)은 5종의 N-말단 융합 변이체 (서열식별번호: 10, 서열식별번호: 14, 서열식별번호: 17, 서열식별번호: 20, 서열식별번호: 23) 모두에서 대략 99%이었던 반면, 3종의 C-말단 융합체 (서열식별번호: 26, 서열식별번호: 27, 서열식별번호: 28)에서는 이것이 현저하게 더 낮았다. 무손상 단량체 백분율의 이와 같은 유의한 감소는 C-말단 Fc-융합체 모두에서 관찰되는 증가된 더 높은 분자량 응집체의 축적 (도 6B)은 물론, C-말단 Fc 융합체 3종 중 2종에서의 증가된 더 낮은 분자량 단편 (도 6C)에 기인한다. 또한, 개별 500 mL 생산의 역가 평가, 및 N-말단 Fc-융합된 및 C-말단 Fc-융합된 T22d35 생산의 평균 역가는 N-말단 Fc-융합된 T22d35 변이체가 C-말단 융합체에 비해 더 높은 수율로 생산될 수 있음을 나타낸다 (표 4). 종합하면, 이러한 결과들은 이뮤노글로불린의 Fc 부분과 같은 잔기의 N-말단에서 T22d35 이중체를 발현하는데 유의한 예상치 못한 이점이 존재한다는 것을 제시한다. 종합하면, 이러한 데이터는 N-말단 Fc-융합된 T22d35 단백질의 증진된 제조성을 입증하고 있다.
표 3: 안정한 풀 물질 500 mL 정제 후의 T22d35 변이체의 단백질 수율 개관.
표 4: 개별 N-및 C-말단 Fc-융합된 T22d35 융합체의 역가 비교
기능적 시험관내 평가
도 7 A/B/C에 제시된 바와 같이, A549 세포 IL-11 방출 검정을 사용하여 T2m-Fc 및 T22d35-Fc 융합 단백질 대 비-Fc-융합된 T22d35 단일 쇄 이중체 트랩의 TGF-β 중화 효력을 비교하였다. 이와 같은 데이터는 각각 TGF-β1 및 TGF-β3에 대하여 0.003348 및 0.003908 nM의 계산된 IC50을 가짐으로써 (표 5), 모든 TGF-β 이소타입에 있어서 T22d35-Fc의 효력이 T2m-Fc 및 비-Fc-융합된 T22d35 단일 쇄 트랩의 것에 비해 탁월하다는 것을 제시한다. 이러한 값은 T22d35 (각각 TGF-β1 및 TGF-β3에 대하여 IC50 = 3.253 및 0.9491 nM)에 비해 적어도 970-배 및 적어도 240-배 더 우수하며 T2m-Fc (각각 TGF-β1 및 TGF-β3에 대하여 IC50 = 2.059 및 0.0943 nM)에 비해 615-배 및 24-배 더 우수한 효력을 입증하고 있다. 또한, T22d35-Fc는 TGF-β1 및 -β3에 비해서는 훨씬 더 적은 정도이기는 하지만, TGF-β2를 중화한다. 반면, T2m-Fc 또는 T22d35 단일 쇄 트랩 모두에서는 TGF-β2 중화가 관찰되지 않는다. T22d35-Fc 트랩의 중화 효력은 TGF-β1 및 -β3에 대하여 유사하지만, T2m-Fc 변이체는 TGF-β1에 비해 TGF-β3에 대하여 ~22-배 더 높은 중화 효력을 나타낸다는 것에 유의해야 한다 (각각 2.059 nM 및 0.0943 nM). 추가적인 N-말단 Fc-융합된 T22d35 융합체 [T22d35-Fc-IgG2-v2 (CC), T22d35-Fc-IgG1-v1 (CC), T22d35-Fc-IgG1-v2 (SCC), 및 T22d35-Fc-IgG1-v3 (GSL-CC)]의 평가 (도 8, 표 6)는 이들 융합체 모두가 T22d35-Fc의 효력과 매우 유사하였던 필적하는 TGF-β1 중화 효력을 나타낸다는 것을 제시하였다. T22d35-Fc-IgG1-v1 (CC) 변이체의 추가적인 평가 (도 9)는 T22d35-Fc 변이체와 마찬가지로, TGF-β1 및 -β3에 대한 그의 중화 효력이 매우 유사한 (각각 IC50 = 0.003327 nM 및 0.003251 nM) 반면, 이와 같은 효력이 TGF-β2에 대해서는 (IC50 = 17.33 nM) 훨씬 더 낮다는 것을 확증하였다.
표 5: 그래프패드 프리즘에서 가용한 4-PL 알고리즘 ((log (억제제) vs. 반응 - 변수 기울기 (4 파라미터))을 사용한 도 5에 제시된 곡선의 통계 평가 개관.
표 6: 그래프패드 프리즘에서 가용한 4-PL 알고리즘 ((log (억제제) vs. 반응 - 변수 기울기 (4 파라미터))을 사용한 도 7에 제시된 곡선의 통계 평가 개관.
기능적 생체내 평가
동계 MC-38 마우스 결장 암종 모델을 사용하여 생체 내에서 T22d35-Fc 융합 단백질 (서열식별번호: 10)을 평가하였다 (도 9). T22d35-Fc 융합체를 사용하여 치료된 동물에서의 종양 성장을 대조군 IgG (CTL IgG)를 사용하여 치료된 동물에서의 종양 성장과 비교하였다. 도 9에 제시된 바와 같이, 치료후 제11일까지는 종양 성장에 있어서의 유의한 차이가 관찰되지 않았으나, 제15일에 CTL IgG와 비교 시 T22d35-Fc를 사용하여 치료된 동물의 종양 부피에서 종양 성장의 유의한 감소가 관찰될 수 있었다 (이원 ANOVA). 이와 같은 데이터는 T22d35-Fc의 투여가 CTL IgG를 사용하여 치료된 군에 비해 MC-38 종양 성장의 유의한 억제를 야기하였다는 것을 제시하며, 이는 생체 내에서의 TGF-β의 차단이 이와 같은 결장직장암의 동계 모델에서 종양의 성장을 무산시킬 수 있다는 것을 시사한다.
참고문헌
본 출원 전반에 걸쳐 언급되는 모든 특허, 특허 출원 및 공개를 하기에 열거한다.
SEQUENCE LISTING
<110> National Research Council of Canada
Lenferink, Anne E.G.
Zwaagstra, John C.
Sulea, Traian
O'Connor-McCourt, Maureen D
<120> TGF-B-Receptor Ectodomain Fusion Molecules and Uses Thereof
<130> 2017-074-03
<140> PCT/IB2018/051320
<141> 2018-03-01
<150> US 62/465,969
<151> 2017-03-02
<150> US 62/468,586
<151> 2017-03-08
<160> 33
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 136
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> T RII-ECD including the structure domain and its natural linkers
(also termed T2m)
<400> 1
Ile Pro Pro His Val Gln Lys Ser Val Asn Asn Asp Met Ile Val Thr
1 5 10 15
Asp Asn Asn Gly Ala Val Lys Phe Pro Gln Leu Cys Lys Phe Cys Asp
20 25 30
Val Arg Phe Ser Thr Cys Asp Asn Gln Lys Ser Cys Met Ser Asn Cys
35 40 45
Ser Ile Thr Ser Ile Cys Glu Lys Pro Gln Glu Val Cys Val Ala Val
50 55 60
Trp Arg Lys Asn Asp Glu Asn Ile Thr Leu Glu Thr Val Cys His Asp
65 70 75 80
Pro Lys Leu Pro Tyr His Asp Phe Ile Leu Glu Asp Ala Ala Ser Pro
85 90 95
Lys Cys Ile Met Lys Glu Lys Lys Lys Pro Gly Glu Thr Phe Phe Met
100 105 110
Cys Ser Cys Ser Ser Asp Glu Cys Asn Asp Asn Ile Ile Phe Ser Glu
115 120 125
Glu Tyr Asn Thr Ser Asn Pro Asp
130 135
<210> 2
<211> 126
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> T RII-ECD structured domain with its natural N-terminal linker
<400> 2
Ile Pro Pro His Val Gln Lys Ser Val Asn Asn Asp Met Ile Val Thr
1 5 10 15
Asp Asn Asn Gly Ala Val Lys Phe Pro Gln Leu Cys Lys Phe Cys Asp
20 25 30
Val Arg Phe Ser Thr Cys Asp Asn Gln Lys Ser Cys Met Ser Asn Cys
35 40 45
Ser Ile Thr Ser Ile Cys Glu Lys Pro Gln Glu Val Cys Val Ala Val
50 55 60
Trp Arg Lys Asn Asp Glu Asn Ile Thr Leu Glu Thr Val Cys His Asp
65 70 75 80
Pro Lys Leu Pro Tyr His Asp Phe Ile Leu Glu Asp Ala Ala Ser Pro
85 90 95
Lys Cys Ile Met Lys Glu Lys Lys Lys Pro Gly Glu Thr Phe Phe Met
100 105 110
Cys Ser Cys Ser Ser Asp Glu Cys Asn Asp Asn Ile Ile Phe
115 120 125
<210> 3
<211> 111
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> T RII-ECD structured domain with its with natural C-terminal
linker
<400> 3
Gln Leu Cys Lys Phe Cys Asp Val Arg Phe Ser Thr Cys Asp Asn Gln
1 5 10 15
Lys Ser Cys Met Ser Asn Cys Ser Ile Thr Ser Ile Cys Glu Lys Pro
20 25 30
Gln Glu Val Cys Val Ala Val Trp Arg Lys Asn Asp Glu Asn Ile Thr
35 40 45
Leu Glu Thr Val Cys His Asp Pro Lys Leu Pro Tyr His Asp Phe Ile
50 55 60
Leu Glu Asp Ala Ala Ser Pro Lys Cys Ile Met Lys Glu Lys Lys Lys
65 70 75 80
Pro Gly Glu Thr Phe Phe Met Cys Ser Cys Ser Ser Asp Glu Cys Asn
85 90 95
Asp Asn Ile Ile Phe Ser Glu Glu Tyr Asn Thr Ser Asn Pro Asp
100 105 110
<210> 4
<211> 101
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> T RII-ECD structured domain
<400> 4
Gln Leu Cys Lys Phe Cys Asp Val Arg Phe Ser Thr Cys Asp Asn Gln
1 5 10 15
Lys Ser Cys Met Ser Asn Cys Ser Ile Thr Ser Ile Cys Glu Lys Pro
20 25 30
Gln Glu Val Cys Val Ala Val Trp Arg Lys Asn Asp Glu Asn Ile Thr
35 40 45
Leu Glu Thr Val Cys His Asp Pro Lys Leu Pro Tyr His Asp Phe Ile
50 55 60
Leu Glu Asp Ala Ala Ser Pro Lys Cys Ile Met Lys Glu Lys Lys Lys
65 70 75 80
Pro Gly Glu Thr Phe Phe Met Cys Ser Cys Ser Ser Asp Glu Cys Asn
85 90 95
Asp Asn Ile Ile Phe
100
<210> 5
<211> 272
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> T RII-ECD- T RII-ECD fused dimer including structured domains and
natural linkers (also termed T22d35)
<400> 5
Ile Pro Pro His Val Gln Lys Ser Val Asn Asn Asp Met Ile Val Thr
1 5 10 15
Asp Asn Asn Gly Ala Val Lys Phe Pro Gln Leu Cys Lys Phe Cys Asp
20 25 30
Val Arg Phe Ser Thr Cys Asp Asn Gln Lys Ser Cys Met Ser Asn Cys
35 40 45
Ser Ile Thr Ser Ile Cys Glu Lys Pro Gln Glu Val Cys Val Ala Val
50 55 60
Trp Arg Lys Asn Asp Glu Asn Ile Thr Leu Glu Thr Val Cys His Asp
65 70 75 80
Pro Lys Leu Pro Tyr His Asp Phe Ile Leu Glu Asp Ala Ala Ser Pro
85 90 95
Lys Cys Ile Met Lys Glu Lys Lys Lys Pro Gly Glu Thr Phe Phe Met
100 105 110
Cys Ser Cys Ser Ser Asp Glu Cys Asn Asp Asn Ile Ile Phe Ser Glu
115 120 125
Glu Tyr Asn Thr Ser Asn Pro Asp Ile Pro Pro His Val Gln Lys Ser
130 135 140
Val Asn Asn Asp Met Ile Val Thr Asp Asn Asn Gly Ala Val Lys Phe
145 150 155 160
Pro Gln Leu Cys Lys Phe Cys Asp Val Arg Phe Ser Thr Cys Asp Asn
165 170 175
Gln Lys Ser Cys Met Ser Asn Cys Ser Ile Thr Ser Ile Cys Glu Lys
180 185 190
Pro Gln Glu Val Cys Val Ala Val Trp Arg Lys Asn Asp Glu Asn Ile
195 200 205
Thr Leu Glu Thr Val Cys His Asp Pro Lys Leu Pro Tyr His Asp Phe
210 215 220
Ile Leu Glu Asp Ala Ala Ser Pro Lys Cys Ile Met Lys Glu Lys Lys
225 230 235 240
Lys Pro Gly Glu Thr Phe Phe Met Cys Ser Cys Ser Ser Asp Glu Cys
245 250 255
Asn Asp Asn Ile Ile Phe Ser Glu Glu Tyr Asn Thr Ser Asn Pro Asp
260 265 270
<210> 6
<211> 34
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> T RII-ECD natural linker
<400> 6
Ser Glu Glu Tyr Asn Thr Ser Asn Pro Asp Ile Pro Pro His Val Gln
1 5 10 15
Lys Ser Val Asn Asn Asp Met Ile Val Thr Asp Asn Asn Gly Ala Val
20 25 30
Lys Phe
<210> 7
<211> 24
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> T RII-ECD N-terminal natural linker
<400> 7
Ile Pro Pro His Val Gln Lys Ser Val Asn Asn Asp Met Ile Val Thr
1 5 10 15
Asp Asn Asn Gly Ala Val Lys Phe
20
<210> 8
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> T RII-ECD C-terminal natural linker
<400> 8
Ser Glu Glu Tyr Asn Thr Ser Asn Pro Asp
1 5 10
<210> 9
<211> 363
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> T2m-Fc fusion of T2m with the hIgG2Fc(CCCC) Fc region
<400> 9
Ile Pro Pro His Val Gln Lys Ser Val Asn Asn Asp Met Ile Val Thr
1 5 10 15
Asp Asn Asn Gly Ala Val Lys Phe Pro Gln Leu Cys Lys Phe Cys Asp
20 25 30
Val Arg Phe Ser Thr Cys Asp Asn Gln Lys Ser Cys Met Ser Asn Cys
35 40 45
Ser Ile Thr Ser Ile Cys Glu Lys Pro Gln Glu Val Cys Val Ala Val
50 55 60
Trp Arg Lys Asn Asp Glu Asn Ile Thr Leu Glu Thr Val Cys His Asp
65 70 75 80
Pro Lys Leu Pro Tyr His Asp Phe Ile Leu Glu Asp Ala Ala Ser Pro
85 90 95
Lys Cys Ile Met Lys Glu Lys Lys Lys Pro Gly Glu Thr Phe Phe Met
100 105 110
Cys Ser Cys Ser Ser Asp Glu Cys Asn Asp Asn Ile Ile Phe Ser Glu
115 120 125
Glu Tyr Asn Thr Ser Asn Pro Asp Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys
130 135 140
Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe
145 150 155 160
Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val
165 170 175
Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe
180 185 190
Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro
195 200 205
Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr
210 215 220
Val Val His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val
225 230 235 240
Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr
245 250 255
Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg
260 265 270
Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly
275 280 285
Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ser Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro
290 295 300
Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser
305 310 315 320
Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln
325 330 335
Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
340 345 350
Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
355 360
<210> 10
<211> 499
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> T22d35-Fc fusion of T22d35 with the hIgG2Fc(CCCC) Fc region
<400> 10
Ile Pro Pro His Val Gln Lys Ser Val Asn Asn Asp Met Ile Val Thr
1 5 10 15
Asp Asn Asn Gly Ala Val Lys Phe Pro Gln Leu Cys Lys Phe Cys Asp
20 25 30
Val Arg Phe Ser Thr Cys Asp Asn Gln Lys Ser Cys Met Ser Asn Cys
35 40 45
Ser Ile Thr Ser Ile Cys Glu Lys Pro Gln Glu Val Cys Val Ala Val
50 55 60
Trp Arg Lys Asn Asp Glu Asn Ile Thr Leu Glu Thr Val Cys His Asp
65 70 75 80
Pro Lys Leu Pro Tyr His Asp Phe Ile Leu Glu Asp Ala Ala Ser Pro
85 90 95
Lys Cys Ile Met Lys Glu Lys Lys Lys Pro Gly Glu Thr Phe Phe Met
100 105 110
Cys Ser Cys Ser Ser Asp Glu Cys Asn Asp Asn Ile Ile Phe Ser Glu
115 120 125
Glu Tyr Asn Thr Ser Asn Pro Asp Ile Pro Pro His Val Gln Lys Ser
130 135 140
Val Asn Asn Asp Met Ile Val Thr Asp Asn Asn Gly Ala Val Lys Phe
145 150 155 160
Pro Gln Leu Cys Lys Phe Cys Asp Val Arg Phe Ser Thr Cys Asp Asn
165 170 175
Gln Lys Ser Cys Met Ser Asn Cys Ser Ile Thr Ser Ile Cys Glu Lys
180 185 190
Pro Gln Glu Val Cys Val Ala Val Trp Arg Lys Asn Asp Glu Asn Ile
195 200 205
Thr Leu Glu Thr Val Cys His Asp Pro Lys Leu Pro Tyr His Asp Phe
210 215 220
Ile Leu Glu Asp Ala Ala Ser Pro Lys Cys Ile Met Lys Glu Lys Lys
225 230 235 240
Lys Pro Gly Glu Thr Phe Phe Met Cys Ser Cys Ser Ser Asp Glu Cys
245 250 255
Asn Asp Asn Ile Ile Phe Ser Glu Glu Tyr Asn Thr Ser Asn Pro Asp
260 265 270
Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val
275 280 285
Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu
290 295 300
Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser
305 310 315 320
His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu
325 330 335
Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr
340 345 350
Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp Leu Asn
355 360 365
Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala Pro
370 375 380
Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln
385 390 395 400
Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val
405 410 415
Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ser Val
420 425 430
Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro
435 440 445
Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr
450 455 460
Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val
465 470 475 480
Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu
485 490 495
Ser Pro Gly
<210> 11
<211> 19
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> signal peptide
<400> 11
Met Asp Trp Thr Trp Arg Ile Leu Phe Leu Val Ala Ala Ala Thr Gly
1 5 10 15
Thr His Ala
<210> 12
<211> 227
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> hIgG2Fc(CCCC) Fc region variant
<400> 12
Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val
1 5 10 15
Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu
20 25 30
Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser
35 40 45
His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu
50 55 60
Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr
65 70 75 80
Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp Leu Asn
85 90 95
Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala Pro
100 105 110
Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln
115 120 125
Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val
130 135 140
Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ser Val
145 150 155 160
Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro
165 170 175
Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr
180 185 190
Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val
195 200 205
Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu
210 215 220
Ser Pro Gly
225
<210> 13
<211> 25
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> T22d35-Fc natural linker with the hIgG2Fc(CCCC) hinge region
<400> 13
Ser Glu Glu Tyr Asn Thr Ser Asn Pro Asp Glu Arg Lys Cys Cys Val
1 5 10 15
Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro
20 25
<210> 14
<211> 496
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> T22d35-Fc-IgG1-v1(CC) fusion of T22d35 with the hIgG1Fc(CC) Fc
region
<400> 14
Ile Pro Pro His Val Gln Lys Ser Val Asn Asn Asp Met Ile Val Thr
1 5 10 15
Asp Asn Asn Gly Ala Val Lys Phe Pro Gln Leu Cys Lys Phe Cys Asp
20 25 30
Val Arg Phe Ser Thr Cys Asp Asn Gln Lys Ser Cys Met Ser Asn Cys
35 40 45
Ser Ile Thr Ser Ile Cys Glu Lys Pro Gln Glu Val Cys Val Ala Val
50 55 60
Trp Arg Lys Asn Asp Glu Asn Ile Thr Leu Glu Thr Val Cys His Asp
65 70 75 80
Pro Lys Leu Pro Tyr His Asp Phe Ile Leu Glu Asp Ala Ala Ser Pro
85 90 95
Lys Cys Ile Met Lys Glu Lys Lys Lys Pro Gly Glu Thr Phe Phe Met
100 105 110
Cys Ser Cys Ser Ser Asp Glu Cys Asn Asp Asn Ile Ile Phe Ser Glu
115 120 125
Glu Tyr Asn Thr Ser Asn Pro Asp Ile Pro Pro His Val Gln Lys Ser
130 135 140
Val Asn Asn Asp Met Ile Val Thr Asp Asn Asn Gly Ala Val Lys Phe
145 150 155 160
Pro Gln Leu Cys Lys Phe Cys Asp Val Arg Phe Ser Thr Cys Asp Asn
165 170 175
Gln Lys Ser Cys Met Ser Asn Cys Ser Ile Thr Ser Ile Cys Glu Lys
180 185 190
Pro Gln Glu Val Cys Val Ala Val Trp Arg Lys Asn Asp Glu Asn Ile
195 200 205
Thr Leu Glu Thr Val Cys His Asp Pro Lys Leu Pro Tyr His Asp Phe
210 215 220
Ile Leu Glu Asp Ala Ala Ser Pro Lys Cys Ile Met Lys Glu Lys Lys
225 230 235 240
Lys Pro Gly Glu Thr Phe Phe Met Cys Ser Cys Ser Ser Asp Glu Cys
245 250 255
Asn Asp Asn Ile Ile Phe Ser Glu Glu Tyr Asn Thr Ser Asn Pro Asp
260 265 270
Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro
275 280 285
Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser
290 295 300
Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp
305 310 315 320
Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn
325 330 335
Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val
340 345 350
Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu
355 360 365
Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys
370 375 380
Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr
385 390 395 400
Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr
405 410 415
Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu
420 425 430
Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu
435 440 445
Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys
450 455 460
Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu
465 470 475 480
Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
485 490 495
<210> 15
<211> 224
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> hIgG1Fc(CC) Fc region variant
<400> 15
Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro
1 5 10 15
Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser
20 25 30
Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp
35 40 45
Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn
50 55 60
Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val
65 70 75 80
Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu
85 90 95
Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys
100 105 110
Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr
115 120 125
Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr
130 135 140
Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu
145 150 155 160
Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu
165 170 175
Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys
180 185 190
Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu
195 200 205
Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
210 215 220
<210> 16
<211> 21
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> T22d35-Fc-IgG1-v1(CC) natural linker with the hIgG1Fc(CC) hinge
region
<400> 16
Ser Glu Glu Tyr Asn Thr Ser Asn Pro Asp Thr His Thr Cys Pro Pro
1 5 10 15
Cys Pro Ala Pro Glu
20
<210> 17
<211> 504
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> T22d35-Fc-IgG1-v2(SCC) fusion of T22d35 with the hIgG1Fc(SCC) Fc
region
<400> 17
Ile Pro Pro His Val Gln Lys Ser Val Asn Asn Asp Met Ile Val Thr
1 5 10 15
Asp Asn Asn Gly Ala Val Lys Phe Pro Gln Leu Cys Lys Phe Cys Asp
20 25 30
Val Arg Phe Ser Thr Cys Asp Asn Gln Lys Ser Cys Met Ser Asn Cys
35 40 45
Ser Ile Thr Ser Ile Cys Glu Lys Pro Gln Glu Val Cys Val Ala Val
50 55 60
Trp Arg Lys Asn Asp Glu Asn Ile Thr Leu Glu Thr Val Cys His Asp
65 70 75 80
Pro Lys Leu Pro Tyr His Asp Phe Ile Leu Glu Asp Ala Ala Ser Pro
85 90 95
Lys Cys Ile Met Lys Glu Lys Lys Lys Pro Gly Glu Thr Phe Phe Met
100 105 110
Cys Ser Cys Ser Ser Asp Glu Cys Asn Asp Asn Ile Ile Phe Ser Glu
115 120 125
Glu Tyr Asn Thr Ser Asn Pro Asp Ile Pro Pro His Val Gln Lys Ser
130 135 140
Val Asn Asn Asp Met Ile Val Thr Asp Asn Asn Gly Ala Val Lys Phe
145 150 155 160
Pro Gln Leu Cys Lys Phe Cys Asp Val Arg Phe Ser Thr Cys Asp Asn
165 170 175
Gln Lys Ser Cys Met Ser Asn Cys Ser Ile Thr Ser Ile Cys Glu Lys
180 185 190
Pro Gln Glu Val Cys Val Ala Val Trp Arg Lys Asn Asp Glu Asn Ile
195 200 205
Thr Leu Glu Thr Val Cys His Asp Pro Lys Leu Pro Tyr His Asp Phe
210 215 220
Ile Leu Glu Asp Ala Ala Ser Pro Lys Cys Ile Met Lys Glu Lys Lys
225 230 235 240
Lys Pro Gly Glu Thr Phe Phe Met Cys Ser Cys Ser Ser Asp Glu Cys
245 250 255
Asn Asp Asn Ile Ile Phe Ser Glu Glu Tyr Asn Thr Ser Asn Pro Asp
260 265 270
Val Glu Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro
275 280 285
Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys
290 295 300
Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val
305 310 315 320
Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr
325 330 335
Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu
340 345 350
Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His
355 360 365
Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys
370 375 380
Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln
385 390 395 400
Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu
405 410 415
Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro
420 425 430
Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn
435 440 445
Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu
450 455 460
Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val
465 470 475 480
Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln
485 490 495
Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
500
<210> 18
<211> 232
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> hIgG1Fc(SCC) Fc region variant
<400> 18
Val Glu Pro Lys Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro
1 5 10 15
Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys
20 25 30
Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val
35 40 45
Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr
50 55 60
Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu
65 70 75 80
Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His
85 90 95
Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys
100 105 110
Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln
115 120 125
Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu
130 135 140
Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro
145 150 155 160
Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn
165 170 175
Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu
180 185 190
Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val
195 200 205
Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln
210 215 220
Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
225 230
<210> 19
<211> 29
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> T22d35-Fc-IgG1-v2(SCC) natural linker with the hIgG1Fc(SCC) hinge
region
<400> 19
Ser Glu Glu Tyr Asn Thr Ser Asn Pro Asp Val Glu Pro Lys Ser Ser
1 5 10 15
Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu
20 25
<210> 20
<211> 507
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> T22d35-Fc-IgG1-v3(GSL-CC) fusion of T22d35 with the hIgG1Fc(CC)
Fc region and including an artificial GS linker
<400> 20
Ile Pro Pro His Val Gln Lys Ser Val Asn Asn Asp Met Ile Val Thr
1 5 10 15
Asp Asn Asn Gly Ala Val Lys Phe Pro Gln Leu Cys Lys Phe Cys Asp
20 25 30
Val Arg Phe Ser Thr Cys Asp Asn Gln Lys Ser Cys Met Ser Asn Cys
35 40 45
Ser Ile Thr Ser Ile Cys Glu Lys Pro Gln Glu Val Cys Val Ala Val
50 55 60
Trp Arg Lys Asn Asp Glu Asn Ile Thr Leu Glu Thr Val Cys His Asp
65 70 75 80
Pro Lys Leu Pro Tyr His Asp Phe Ile Leu Glu Asp Ala Ala Ser Pro
85 90 95
Lys Cys Ile Met Lys Glu Lys Lys Lys Pro Gly Glu Thr Phe Phe Met
100 105 110
Cys Ser Cys Ser Ser Asp Glu Cys Asn Asp Asn Ile Ile Phe Ser Glu
115 120 125
Glu Tyr Asn Thr Ser Asn Pro Asp Ile Pro Pro His Val Gln Lys Ser
130 135 140
Val Asn Asn Asp Met Ile Val Thr Asp Asn Asn Gly Ala Val Lys Phe
145 150 155 160
Pro Gln Leu Cys Lys Phe Cys Asp Val Arg Phe Ser Thr Cys Asp Asn
165 170 175
Gln Lys Ser Cys Met Ser Asn Cys Ser Ile Thr Ser Ile Cys Glu Lys
180 185 190
Pro Gln Glu Val Cys Val Ala Val Trp Arg Lys Asn Asp Glu Asn Ile
195 200 205
Thr Leu Glu Thr Val Cys His Asp Pro Lys Leu Pro Tyr His Asp Phe
210 215 220
Ile Leu Glu Asp Ala Ala Ser Pro Lys Cys Ile Met Lys Glu Lys Lys
225 230 235 240
Lys Pro Gly Glu Thr Phe Phe Met Cys Ser Cys Ser Ser Asp Glu Cys
245 250 255
Asn Asp Asn Ile Ile Phe Ser Glu Glu Tyr Asn Thr Ser Asn Pro Asp
260 265 270
Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Thr His Thr Cys Pro
275 280 285
Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe
290 295 300
Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val
305 310 315 320
Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe
325 330 335
Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro
340 345 350
Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr
355 360 365
Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val
370 375 380
Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala
385 390 395 400
Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg
405 410 415
Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly
420 425 430
Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro
435 440 445
Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser
450 455 460
Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln
465 470 475 480
Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His
485 490 495
Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
500 505
<210> 21
<211> 11
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> Artificial GS linker of the T22d35-Fc-IgG1-v3(GSL-CC) fusion
<400> 21
gggsgggsgg g 11
<210> 22
<211> 32
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> T22d35-Fc-IgG1-v3(GSL-CC) linker including natural and artificial
sequences and hIgG1Fc(CC) hinge region
<400> 22
Ser Glu Glu Tyr Asn Thr Ser Asn Pro Asp Gly Gly Gly Ser Gly Gly
1 5 10 15
Gly Ser Gly Gly Gly Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu
20 25 30
<210> 23
<211> 494
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> T22d35-Fc-IgG2-v2(CC) fusion of T22d35 with the hIgG2Fc(CC) Fc
region
<400> 23
Ile Pro Pro His Val Gln Lys Ser Val Asn Asn Asp Met Ile Val Thr
1 5 10 15
Asp Asn Asn Gly Ala Val Lys Phe Pro Gln Leu Cys Lys Phe Cys Asp
20 25 30
Val Arg Phe Ser Thr Cys Asp Asn Gln Lys Ser Cys Met Ser Asn Cys
35 40 45
Ser Ile Thr Ser Ile Cys Glu Lys Pro Gln Glu Val Cys Val Ala Val
50 55 60
Trp Arg Lys Asn Asp Glu Asn Ile Thr Leu Glu Thr Val Cys His Asp
65 70 75 80
Pro Lys Leu Pro Tyr His Asp Phe Ile Leu Glu Asp Ala Ala Ser Pro
85 90 95
Lys Cys Ile Met Lys Glu Lys Lys Lys Pro Gly Glu Thr Phe Phe Met
100 105 110
Cys Ser Cys Ser Ser Asp Glu Cys Asn Asp Asn Ile Ile Phe Ser Glu
115 120 125
Glu Tyr Asn Thr Ser Asn Pro Asp Ile Pro Pro His Val Gln Lys Ser
130 135 140
Val Asn Asn Asp Met Ile Val Thr Asp Asn Asn Gly Ala Val Lys Phe
145 150 155 160
Pro Gln Leu Cys Lys Phe Cys Asp Val Arg Phe Ser Thr Cys Asp Asn
165 170 175
Gln Lys Ser Cys Met Ser Asn Cys Ser Ile Thr Ser Ile Cys Glu Lys
180 185 190
Pro Gln Glu Val Cys Val Ala Val Trp Arg Lys Asn Asp Glu Asn Ile
195 200 205
Thr Leu Glu Thr Val Cys His Asp Pro Lys Leu Pro Tyr His Asp Phe
210 215 220
Ile Leu Glu Asp Ala Ala Ser Pro Lys Cys Ile Met Lys Glu Lys Lys
225 230 235 240
Lys Pro Gly Glu Thr Phe Phe Met Cys Ser Cys Ser Ser Asp Glu Cys
245 250 255
Asn Asp Asn Ile Ile Phe Ser Glu Glu Tyr Asn Thr Ser Asn Pro Asp
260 265 270
Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val
275 280 285
Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr
290 295 300
Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu
305 310 315 320
Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys
325 330 335
Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Val Val Ser
340 345 350
Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys
355 360 365
Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile
370 375 380
Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro
385 390 395 400
Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu
405 410 415
Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ser Val Glu Trp Glu Ser Asn
420 425 430
Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser
435 440 445
Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg
450 455 460
Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu
465 470 475 480
His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
485 490
<210> 24
<211> 222
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> hIgG2Fc(CC) Fc region variant
<400> 24
Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val
1 5 10 15
Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr
20 25 30
Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu
35 40 45
Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys
50 55 60
Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Val Val Ser
65 70 75 80
Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys
85 90 95
Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile
100 105 110
Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro
115 120 125
Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu
130 135 140
Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ser Val Glu Trp Glu Ser Asn
145 150 155 160
Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser
165 170 175
Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg
180 185 190
Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu
195 200 205
His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
210 215 220
<210> 25
<211> 20
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> T22d35-Fc-IgG2-v2(CC) natural linker with the hIgG2Fc(CC) hinge
region
<400> 25
Ser Glu Glu Tyr Asn Thr Ser Asn Pro Asp Val Glu Cys Pro Pro Cys
1 5 10 15
Pro Ala Pro Pro
20
<210> 26
<211> 492
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> hIgG1Fc?K(C)-T22d35
<400> 26
Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu
1 5 10 15
Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu
20 25 30
Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys
35 40 45
Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys
50 55 60
Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu
65 70 75 80
Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys
85 90 95
Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys
100 105 110
Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser
115 120 125
Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys
130 135 140
Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln
145 150 155 160
Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly
165 170 175
Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln
180 185 190
Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn
195 200 205
His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Ile Pro Pro His
210 215 220
Val Gln Lys Ser Val Asn Asn Asp Met Ile Val Thr Asp Asn Asn Gly
225 230 235 240
Ala Val Lys Phe Pro Gln Leu Cys Lys Phe Cys Asp Val Arg Phe Ser
245 250 255
Thr Cys Asp Asn Gln Lys Ser Cys Met Ser Asn Cys Ser Ile Thr Ser
260 265 270
Ile Cys Glu Lys Pro Gln Glu Val Cys Val Ala Val Trp Arg Lys Asn
275 280 285
Asp Glu Asn Ile Thr Leu Glu Thr Val Cys His Asp Pro Lys Leu Pro
290 295 300
Tyr His Asp Phe Ile Leu Glu Asp Ala Ala Ser Pro Lys Cys Ile Met
305 310 315 320
Lys Glu Lys Lys Lys Pro Gly Glu Thr Phe Phe Met Cys Ser Cys Ser
325 330 335
Ser Asp Glu Cys Asn Asp Asn Ile Ile Phe Ser Glu Glu Tyr Asn Thr
340 345 350
Ser Asn Pro Asp Ile Pro Pro His Val Gln Lys Ser Val Asn Asn Asp
355 360 365
Met Ile Val Thr Asp Asn Asn Gly Ala Val Lys Phe Pro Gln Leu Cys
370 375 380
Lys Phe Cys Asp Val Arg Phe Ser Thr Cys Asp Asn Gln Lys Ser Cys
385 390 395 400
Met Ser Asn Cys Ser Ile Thr Ser Ile Cys Glu Lys Pro Gln Glu Val
405 410 415
Cys Val Ala Val Trp Arg Lys Asn Asp Glu Asn Ile Thr Leu Glu Thr
420 425 430
Val Cys His Asp Pro Lys Leu Pro Tyr His Asp Phe Ile Leu Glu Asp
435 440 445
Ala Ala Ser Pro Lys Cys Ile Met Lys Glu Lys Lys Lys Pro Gly Glu
450 455 460
Thr Phe Phe Met Cys Ser Cys Ser Ser Asp Glu Cys Asn Asp Asn Ile
465 470 475 480
Ile Phe Ser Glu Glu Tyr Asn Thr Ser Asn Pro Asp
485 490
<210> 27
<211> 498
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> hIgG1Fc?K(CC)-T22d35
<400> 27
Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly
1 5 10 15
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
20 25 30
Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His
35 40 45
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
50 55 60
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr
65 70 75 80
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
85 90 95
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
100 105 110
Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val
115 120 125
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser
130 135 140
Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu
145 150 155 160
Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro
165 170 175
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val
180 185 190
Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met
195 200 205
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
210 215 220
Pro Gly Ile Pro Pro His Val Gln Lys Ser Val Asn Asn Asp Met Ile
225 230 235 240
Val Thr Asp Asn Asn Gly Ala Val Lys Phe Pro Gln Leu Cys Lys Phe
245 250 255
Cys Asp Val Arg Phe Ser Thr Cys Asp Asn Gln Lys Ser Cys Met Ser
260 265 270
Asn Cys Ser Ile Thr Ser Ile Cys Glu Lys Pro Gln Glu Val Cys Val
275 280 285
Ala Val Trp Arg Lys Asn Asp Glu Asn Ile Thr Leu Glu Thr Val Cys
290 295 300
His Asp Pro Lys Leu Pro Tyr His Asp Phe Ile Leu Glu Asp Ala Ala
305 310 315 320
Ser Pro Lys Cys Ile Met Lys Glu Lys Lys Lys Pro Gly Glu Thr Phe
325 330 335
Phe Met Cys Ser Cys Ser Ser Asp Glu Cys Asn Asp Asn Ile Ile Phe
340 345 350
Ser Glu Glu Tyr Asn Thr Ser Asn Pro Asp Ile Pro Pro His Val Gln
355 360 365
Lys Ser Val Asn Asn Asp Met Ile Val Thr Asp Asn Asn Gly Ala Val
370 375 380
Lys Phe Pro Gln Leu Cys Lys Phe Cys Asp Val Arg Phe Ser Thr Cys
385 390 395 400
Asp Asn Gln Lys Ser Cys Met Ser Asn Cys Ser Ile Thr Ser Ile Cys
405 410 415
Glu Lys Pro Gln Glu Val Cys Val Ala Val Trp Arg Lys Asn Asp Glu
420 425 430
Asn Ile Thr Leu Glu Thr Val Cys His Asp Pro Lys Leu Pro Tyr His
435 440 445
Asp Phe Ile Leu Glu Asp Ala Ala Ser Pro Lys Cys Ile Met Lys Glu
450 455 460
Lys Lys Lys Pro Gly Glu Thr Phe Phe Met Cys Ser Cys Ser Ser Asp
465 470 475 480
Glu Cys Asn Asp Asn Ile Ile Phe Ser Glu Glu Tyr Asn Thr Ser Asn
485 490 495
Pro Asp
<210> 28
<211> 494
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> hIgG2Fc?K(CC)-T22d35
<400> 28
Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val
1 5 10 15
Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr
20 25 30
Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu
35 40 45
Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys
50 55 60
Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Val Val Ser
65 70 75 80
Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys
85 90 95
Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile
100 105 110
Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro
115 120 125
Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu
130 135 140
Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ser Val Glu Trp Glu Ser Asn
145 150 155 160
Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser
165 170 175
Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg
180 185 190
Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu
195 200 205
His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Ile Pro
210 215 220
Pro His Val Gln Lys Ser Val Asn Asn Asp Met Ile Val Thr Asp Asn
225 230 235 240
Asn Gly Ala Val Lys Phe Pro Gln Leu Cys Lys Phe Cys Asp Val Arg
245 250 255
Phe Ser Thr Cys Asp Asn Gln Lys Ser Cys Met Ser Asn Cys Ser Ile
260 265 270
Thr Ser Ile Cys Glu Lys Pro Gln Glu Val Cys Val Ala Val Trp Arg
275 280 285
Lys Asn Asp Glu Asn Ile Thr Leu Glu Thr Val Cys His Asp Pro Lys
290 295 300
Leu Pro Tyr His Asp Phe Ile Leu Glu Asp Ala Ala Ser Pro Lys Cys
305 310 315 320
Ile Met Lys Glu Lys Lys Lys Pro Gly Glu Thr Phe Phe Met Cys Ser
325 330 335
Cys Ser Ser Asp Glu Cys Asn Asp Asn Ile Ile Phe Ser Glu Glu Tyr
340 345 350
Asn Thr Ser Asn Pro Asp Ile Pro Pro His Val Gln Lys Ser Val Asn
355 360 365
Asn Asp Met Ile Val Thr Asp Asn Asn Gly Ala Val Lys Phe Pro Gln
370 375 380
Leu Cys Lys Phe Cys Asp Val Arg Phe Ser Thr Cys Asp Asn Gln Lys
385 390 395 400
Ser Cys Met Ser Asn Cys Ser Ile Thr Ser Ile Cys Glu Lys Pro Gln
405 410 415
Glu Val Cys Val Ala Val Trp Arg Lys Asn Asp Glu Asn Ile Thr Leu
420 425 430
Glu Thr Val Cys His Asp Pro Lys Leu Pro Tyr His Asp Phe Ile Leu
435 440 445
Glu Asp Ala Ala Ser Pro Lys Cys Ile Met Lys Glu Lys Lys Lys Pro
450 455 460
Gly Glu Thr Phe Phe Met Cys Ser Cys Ser Ser Asp Glu Cys Asn Asp
465 470 475 480
Asn Ile Ile Phe Ser Glu Glu Tyr Asn Thr Ser Asn Pro Asp
485 490
<210> 29
<211> 1560
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
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aatcactata cacagaaatc tctgtctctg tcacccggct gatga 1545
Claims (31)
- 형질전환 성장 인자 베타 (TGF-β) 이소타입의 효과를 억제하는데 유용한 폴리펩티드 구축물로서,
제1 TGF-β 수용체 엑토도메인 (TβR-ECD)을 포함하는 제1 영역, 및
항체 중쇄의 제2 불변 도메인 (CH2) 및/또는 제3 불변 도메인 (CH3)을 포함하는 제2 영역
을 포함하며;
여기서 제2 영역의 N-말단은 제1 영역의 C-말단에 연결되고;
여기서 구축물은 제1 TβR-ECD에 탠덤 방식으로 연결된 제2 TβR-ECD를 추가로 포함하는 것인
폴리펩티드 구축물. - 제1항에 있어서, 상기 폴리펩티드 구축물이 단일 TβR-ECD를 갖는 대응부 구축물에 비해 적어도 20-배, 100-배, 200-배, 300-배, 400-배, 500-배 또는 600-배 더 큰 효력으로 TGF-β 활성을 억제하는 것인 폴리펩티드 구축물.
- 제1항에 있어서, 상기 폴리펩티드 구축물이 비-Fc 융합된 TβR-ECD 이중체에 비해 적어도 100-배, 200-배, 300-배, 400-배, 500-배, 600-배, 700-배, 800-배 또는 900-배 더 큰 효력으로 TGFβ 활성을 억제하는 것인 폴리펩티드 구축물.
- 제1항에 있어서, 상기 제2 영역이 항체 중쇄의 Fc 영역을 포함하는 것인 폴리펩티드 구축물.
- 제1항에 있어서, 상기 TβR-ECD가 TGF-β 유형 II 수용체 엑토도메인 (TβRII-ECD)을 포함하는 것인 폴리펩티드 구축물.
- 제1항에 있어서, 제1 TβR-ECD 및 제2 TβR-ECD가 동일한 TGF-β 이소타입에 결합하는 것인 폴리펩티드 구축물.
- 제6항에 있어서, 제1 TβR-ECD 및 제2 TβR-ECD 각각이 TGF-β1 및 TGF-β3 둘 다에 결합하는 것인 폴리펩티드 구축물.
- 제1항에 있어서, 제1 TβR-ECD 및 제2 TβR-ECD가 동일한 아미노산 서열을 포함하는 것인 폴리펩티드 구축물.
- 제1항에 있어서, TβR-ECD가 서열식별번호: 1의 아미노산 서열을 포함하는 것인 폴리펩티드 구축물.
- 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 제2 영역이 IgG 항체 중쇄의 CH2 및 CH3 도메인을 포함하는 것인 폴리펩티드 구축물.
- 제10항에 있어서, IgG 항체가 IgG1 또는 IgG2 항체인 폴리펩티드 구축물.
- 제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, 제2 영역이 구축물의 또 다른 구축물과의 가교결합을 위한 시스테인 잔기를 포함하는 힌지 영역을 포함하는 것인 폴리펩티드 구축물.
- 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 제2 영역이 서열식별번호: 12, 서열식별번호: 15, 서열식별번호: 18, 서열식별번호: 24 및 그와 실질적으로 동일한 서열로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 폴리펩티드 구축물.
- 제1항에 있어서, 서열식별번호: 10, 서열식별번호: 14, 서열식별번호: 17, 서열식별번호: 20, 서열식별번호: 23 및 그와 실질적으로 동일한 서열로 이루어진 군으로부터 선택되는 폴리펩티드 구축물.
- 제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 있어서, 구축물이 적어도 하나의 디술피드 가교에 의해 각 항체 불변 도메인들 사이에서 연결된 제1 및 제2 폴리펩티드 구축물을 포함하는 이량체성 폴리펩티드인 폴리펩티드 구축물.
- 제13항에 있어서, 이량체성 폴리펩티드가 하기를 포함하는 것인 폴리펩티드 구축물:
제1 및 제2 영역을 포함하는 제1 단일 쇄 폴리펩티드; 및
여기서 제2 영역은 항체 중쇄의 제2 불변 도메인 (CH2) 및 제3 불변 도메인 (CH3), 및 해당 항체의 중쇄 가변 영역을 포함하고;
여기서 제1 영역은 2개의 TβRII-ECD를 포함하고;
여기서 제2 영역의 N-말단은 제1 영역의 C-말단에 연결됨;
상기 제1 단일 쇄 폴리펩티드의 폴리펩티드를 포함하는 제2 단일 쇄 폴리펩티드. - 제1항 내지 제16항 중 어느 한 항의 임의의 폴리펩티드 구축물을 코딩하는 핵산 분자.
- 제17항의 핵산 분자를 포함하는 벡터.
- 선택되는 발현 숙주에 의해 분비가능한 형태의 제1항 내지 제16항 중 어느 한 항의 임의의 폴리펩티드를 코딩하는 핵산 서열.
- 제19항에 있어서, 핵산이 서열식별번호: 10, 서열식별번호: 14, 서열식별번호: 17, 서열식별번호: 20, 서열식별번호: 23의 서열 및 그와 실질적으로 동일한 서열을 갖는 단백질을 코딩하는 것인 핵산 서열.
- 제20항에 있어서, 핵산이 서열식별번호: 29, 서열식별번호: 30, 서열식별번호: 31, 서열식별번호: 32 및 서열식별번호: 33으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 핵산 서열.
- 제1항 내지 제16항 중 어느 한 항의 폴리펩티드 구축물 및 제약상 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제를 포함하는 조성물.
- 제17항의 핵산 분자 또는 제18항의 벡터를 포함하는 트랜스제닉 세포 숙주.
- 제23항에 있어서, 제1 폴리펩티드 구축물과 동일한 제2 폴리펩티드 구축물을 코딩하는 제2 핵산 분자 또는 제2 벡터를 추가로 포함하는 트랜스제닉 세포 숙주.
- 숙주를 배양하는 것, 및 상기 숙주의 성장에 의해 컨디셔닝된 배지로부터 제13항에 따른 이량체성 폴리펩티드 구축물을 회수하는 것을 포함하는, 이량체성 폴리펩티드를 생산하는 방법.
- 의학적 병태, 질환 또는 장애의 치료를 위한 제1항 내지 제16항 중 어느 한 항에 따른 폴리펩티드 구축물의 용도.
- 제26항에 있어서, 의학적 병태, 질환 또는 장애가 암, 안구 질환, 섬유성 질환, 또는 결합 조직의 유전적 장애를 포함하는 것인 용도.
- 서열식별번호: 14를 포함하는 폴리펩티드 구축물.
- 제28항에 있어서, 동종이량체로서의 폴리펩티드 구축물.
- 제28항의 폴리펩티드를 포함하는 제약 조성물.
- 암의 치료를 위한 제28항에 따른 폴리펩티드의 용도.
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| KR20190129896A (ko) | 2017-03-02 | 2019-11-20 | 내셔날 리서치 카운실 오브 캐나다 | Tgf-β-수용체 엑토도메인 융합 분자 및 그의 용도 |
| KR102635723B1 (ko) | 2017-05-04 | 2024-02-08 | 악셀레론 파마 인코포레이티드 | Tgf-베타 수용체 유형 ii 융합 단백질 및 이의 용도 |
| PE20220279A1 (es) | 2019-01-30 | 2022-02-25 | Scholar Rock Inc | Inhibidores especificos del complejo de ltbp de tgf beta y usos de los mismos |
| CN113645990A (zh) * | 2019-04-10 | 2021-11-12 | 肯塔基大学研究基金会 | 改良的前列腺凋亡反应-4(par-4)多肽及其生产和使用方法 |
| AU2021205433A1 (en) | 2020-01-11 | 2022-08-18 | Scholar Rock, Inc. | Tgfß inhibitors and use thereof |
| EP4087659A2 (en) | 2020-01-11 | 2022-11-16 | Scholar Rock, Inc. | Tgf-beta inhibitors and use thereof |
| JP2023514324A (ja) | 2020-02-19 | 2023-04-05 | ナミ セラピューティクス， インコーポレイテッド | がんの処置において有用なＴＦＧβアンタゴニストプロドラッグを含有する製剤化および／または共製剤化リポソーム組成物ならびにその方法 |
| CN115956085A (zh) * | 2020-06-12 | 2023-04-11 | 百时美施贵宝公司转化生长因子β有限公司 | 转化生长因子β(TGFβ)结合剂及其用途 |
| WO2022204581A2 (en) | 2021-03-26 | 2022-09-29 | Scholar Rock, Inc. | Tgf-beta inhibitors and use thereof |
| EP4348260A2 (en) | 2021-06-03 | 2024-04-10 | Scholar Rock, Inc. | Tgf-beta inhibitors and therapeutic use thereof |
| AU2022300351A1 (en) * | 2021-06-24 | 2023-12-14 | Bristol-Myers Squibb Company | Transforming growth factor-beta ligand traps for the treatment of disease |
| WO2023141724A1 (en) | 2022-01-28 | 2023-08-03 | 35Pharma Inc. | Activin receptor type iib variants and uses thereof |
Family Cites Families (41)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE69332026T2 (de) | 1992-10-29 | 2002-10-31 | Celtrix Pharma | Typ ii tgf-beta-bindendes rezeptorfragment als therapeutisches mittel |
| EP0711303B2 (en) | 1993-07-30 | 2009-06-10 | Affymax, Inc. | Biotinylation of proteins |
| US6277375B1 (en) | 1997-03-03 | 2001-08-21 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Immunoglobulin-like domains with increased half-lives |
| ES2289778T3 (es) | 1997-04-18 | 2008-02-01 | Biogen Idec Ma Inc. | Proteinas de fusion de la region constante de la inmunoglobulina/receptor tgf-beta tipo ii. |
| AU4572899A (en) | 1998-06-16 | 2000-01-05 | Biogen, Inc. | Variant type ii tgf-beta receptor fusion proteins and methods |
| AU5943201A (en) | 2000-05-03 | 2001-11-12 | Amgen Inc | Modified peptides as therapeutic agents |
| EP1452601A1 (en) | 2003-02-28 | 2004-09-01 | Roche Diagnostics GmbH | Enhanced expression of fusion polypeptides with a biotinylation tag |
| WO2005028517A2 (en) | 2003-05-09 | 2005-03-31 | The General Hospital Corporation | SOLUBLE TGF-β TYPE III RECEPTOR FUSION PROTEINS |
| ES2687786T3 (es) | 2004-04-21 | 2018-10-29 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | Conjugados para administración ósea y procedimiento de uso de estos para dirigir proteínas al hueso |
| US7795389B2 (en) | 2004-09-28 | 2010-09-14 | The Board Of Regents Of The University Of Texas System | Antagonizing TGF-beta activity with various ectodomains TGF-beta receptors used in combination or as fusion proteins |
| JP5063366B2 (ja) | 2005-02-16 | 2012-10-31 | ザ ジェネラル ホスピタル コーポレイション | ヘプシジンによる鉄代謝を制御するためのＴＧＦ−βスーパーファミリーの化合物の調節因子の使用 |
| AU2007272995B2 (en) | 2006-07-10 | 2013-02-07 | Biogen Idec Ma Inc. | Compositions and methods for inhibiting growth of smad4-deficient cancers |
| EP2578684B1 (en) | 2007-03-19 | 2016-02-24 | National Research Council Of Canada | Antagonists of ligands and uses thereof |
| WO2008157367A1 (en) | 2007-06-15 | 2008-12-24 | Genzyme Corporation | Fusion proteins containing two tgf-beta binding domains of tgf-beta type ii receptor |
| WO2010031168A1 (en) | 2008-09-17 | 2010-03-25 | National Research Council Of Canada | HETERO-MULTIVALENT BINDING AGENTS FOR MEMBERS OF THE TGFβ SUPERFAMILY |
| CN102203258A (zh) | 2008-07-02 | 2011-09-28 | 新兴产品开发西雅图有限公司 | TGF-β拮抗剂多靶点结合蛋白 |
| US8952130B2 (en) | 2009-02-24 | 2015-02-10 | The Salk Institute For Biological Studies | Designer ligands of TGF-β superfamily |
| AU2010270979B2 (en) | 2009-06-22 | 2015-04-23 | Medimmune, Llc | Engineered Fc regions for site-specific conjugation |
| RU2413769C1 (ru) | 2009-12-24 | 2011-03-10 | Учреждение Российской академии наук Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН | РЕКОМБИНАНТНАЯ ПЛАЗМИДНАЯ ДНК pET-32a, КОДИРУЮЩАЯ ГЕН ЛИГАНД-СВЯЗЫВАЮЩЕГО ДОМЕНА РЕЦЕПТОРА II ТИПА ТРАНСФОРМИРУЮЩЕГО ФАКТОРА РОСТА-β ЧЕЛОВЕКА (TβRII), ШТАММ БАКТЕРИЙ Escherichia coli - ПРОДУЦЕНТ СЛИТНОГО БЕЛКА ТИОРЕДОКСИН/TβRII И СПОСОБ РЕНАТУРАЦИИ И ОЧИСТКИ ЦЕЛЕВОГО БЕЛКА TβRII |
| DK2542590T4 (da) | 2010-03-05 | 2020-07-13 | Univ Johns Hopkins | Sammensætninger og fremgangsmåde til målrettede immunomodulatoriske antistof-fer og fusionproteiner |
| WO2012071649A1 (en) | 2010-11-29 | 2012-06-07 | National Research Council Of Canada | Covalently dimerized bivalent binding agents |
| SI2697257T1 (sl) | 2011-04-13 | 2017-02-28 | Bristol-Myers Squibb Company | FC fuzijski proteini, ki vsebujejo nove linkerje ali razmestitve |
| CN102850458B (zh) | 2011-06-28 | 2014-10-01 | 华博生物医药技术（上海）有限公司 | 新型重组双功能融合蛋白及其制法和用途 |
| WO2013078286A1 (en) | 2011-11-22 | 2013-05-30 | Cornell University | Methods for stimulating hematopoietic recovery by inhibiting tgf beta signaling |
| CN104334573A (zh) | 2012-04-30 | 2015-02-04 | 比奥孔有限公司 | 靶向/免疫调节性融合蛋白及其制造方法 |
| PL2970512T3 (pl) | 2013-03-12 | 2019-03-29 | Biocon Limited | Immunomodulujące białka fuzyjne i sposoby ich otrzymywania |
| CN105658672A (zh) | 2013-08-22 | 2016-06-08 | 阿塞勒隆制药公司 | TGF-β受体II型变体及其用途 |
| CN105934249A (zh) | 2013-11-21 | 2016-09-07 | 布里格姆及妇女医院股份有限公司 | 用于治疗肺高压的组合物和方法 |
| PE20210168A1 (es) | 2014-02-10 | 2021-01-28 | Merck Patent Gmbh | INHIBICION DIRIGIDA DEL FACTOR DE CRECIMIENTO TRANSFORMADOR ß (TGFß) |
| CN114470207B (zh) | 2014-08-01 | 2023-09-19 | 布里格姆及妇女医院股份有限公司 | 与肺动脉高压的治疗有关的组合物和方法 |
| JP6631865B2 (ja) | 2014-08-11 | 2020-01-15 | 日本化薬株式会社 | ＴＧＦβ阻害機能を持つキメラタンパク質 |
| US20200231652A1 (en) | 2015-08-31 | 2020-07-23 | National Research Council Of Canada | Tgf-b-receptor ectodomain fusion molecules and uses thereof |
| KR20190129896A (ko) | 2017-03-02 | 2019-11-20 | 내셔날 리서치 카운실 오브 캐나다 | Tgf-β-수용체 엑토도메인 융합 분자 및 그의 용도 |
| KR102635723B1 (ko) | 2017-05-04 | 2024-02-08 | 악셀레론 파마 인코포레이티드 | Tgf-베타 수용체 유형 ii 융합 단백질 및 이의 용도 |
| CN111867612A (zh) | 2018-03-26 | 2020-10-30 | 阿尔托生物科学有限责任公司 | 抗PDL1、IL-15和TGF-β受体组合分子 |
| SG11202010423VA (en) | 2018-05-04 | 2020-11-27 | Merck Patent Gmbh | COMBINED INHIBITION OF PD-1/PD-L1, TGFß AND DNA-PK FOR THE TREATMENT OF CANCER |
| CN113301961A (zh) | 2018-11-01 | 2021-08-24 | 默克专利有限公司 | 给予抗tim-3抗体的方法 |
| WO2020146345A1 (en) | 2019-01-07 | 2020-07-16 | Children's Medical Center Corporation | Methods of treating cancer using lsd1 inhibitors and/or tgf-beta inhibitors in combination with immunotherapy |
| WO2021123996A1 (en) | 2019-12-20 | 2021-06-24 | Novartis Ag | Uses of anti-tgf-beta antibodies and checkpoint inhibitors for the treatment of proliferative diseases |
| CN115956085A (zh) | 2020-06-12 | 2023-04-11 | 百时美施贵宝公司转化生长因子β有限公司 | 转化生长因子β(TGFβ)结合剂及其用途 |
| AU2022300351A1 (en) | 2021-06-24 | 2023-12-14 | Bristol-Myers Squibb Company | Transforming growth factor-beta ligand traps for the treatment of disease |
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