KR20180097580A - 폴리에테르 블록 공중합체의 정제 방법 - Google Patents

폴리에테르 블록 공중합체의 정제 방법 Download PDF

Info

Publication number
KR20180097580A
KR20180097580A KR1020187017747A KR20187017747A KR20180097580A KR 20180097580 A KR20180097580 A KR 20180097580A KR 1020187017747 A KR1020187017747 A KR 1020187017747A KR 20187017747 A KR20187017747 A KR 20187017747A KR 20180097580 A KR20180097580 A KR 20180097580A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
process according
block copolymer
solvent
packing material
silica
Prior art date
Application number
KR1020187017747A
Other languages
English (en)
Inventor
고메스 페드로 사
바스티안 브람 피테르 스탈
펠리키타스 구트
나이젤 에이 랭글리
Original Assignee
바스프 에스이
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 바스프 에스이 filed Critical 바스프 에스이
Publication of KR20180097580A publication Critical patent/KR20180097580A/ko

Links

Images

Classifications

    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
    • B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
    • B01D15/26—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism
    • B01D15/34—Size selective separation, e.g. size exclusion chromatography, gel filtration, permeation
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
    • B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
    • B01D15/10—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by constructional or operational features
    • B01D15/18—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by constructional or operational features relating to flow patterns
    • B01D15/1807—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by constructional or operational features relating to flow patterns using counter-currents, e.g. fluidised beds
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
    • B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
    • B01D15/10—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by constructional or operational features
    • B01D15/18—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by constructional or operational features relating to flow patterns
    • B01D15/1814—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by constructional or operational features relating to flow patterns recycling of the fraction to be distributed
    • B01D15/1821—Simulated moving beds
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
    • B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
    • B01D15/10—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by constructional or operational features
    • B01D15/18—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by constructional or operational features relating to flow patterns
    • B01D15/1892—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by constructional or operational features relating to flow patterns the sorbent material moving as a whole, e.g. continuous annular chromatography, true moving beds
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
    • C08G65/00—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule
    • C08G65/02—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule from cyclic ethers by opening of the heterocyclic ring
    • C08G65/04—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule from cyclic ethers by opening of the heterocyclic ring from cyclic ethers only
    • C08G65/06—Cyclic ethers having no atoms other than carbon and hydrogen outside the ring
    • C08G65/08—Saturated oxiranes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
    • C08G65/00—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule
    • C08G65/02—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule from cyclic ethers by opening of the heterocyclic ring
    • C08G65/04—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule from cyclic ethers by opening of the heterocyclic ring from cyclic ethers only
    • C08G65/06—Cyclic ethers having no atoms other than carbon and hydrogen outside the ring
    • C08G65/14—Unsaturated oxiranes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
    • C08G65/00—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule
    • C08G65/02—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule from cyclic ethers by opening of the heterocyclic ring
    • C08G65/30—Post-polymerisation treatment, e.g. recovery, purification, drying
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08L—COMPOSITIONS OF MACROMOLECULAR COMPOUNDS
    • C08L71/00—Compositions of polyethers obtained by reactions forming an ether link in the main chain; Compositions of derivatives of such polymers
    • C08L71/02—Polyalkylene oxides
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
    • B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
    • B01D15/10—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by constructional or operational features
    • B01D15/18—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by constructional or operational features relating to flow patterns
    • B01D15/1864—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by constructional or operational features relating to flow patterns using two or more columns
    • B01D15/1871—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by constructional or operational features relating to flow patterns using two or more columns placed in series
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
    • C08G2650/00—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule
    • C08G2650/28—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule characterised by the polymer type
    • C08G2650/58—Ethylene oxide or propylene oxide copolymers, e.g. pluronics

Abstract

역류 이동층으로서 작동하는 순차적 멀티-컬럼 크기 배제 크로마토그래피 장치를 사용하는, 폴리옥시에틸렌 및 폴리옥시프로필렌 모이어티 포함 폴리에테르 블록 공중합체의 정제 방법으로서, 방법 사이클은 단계를 포함한다.

Description

폴리에테르 블록 공중합체의 정제 방법
본 출원은 2015년 12월 22일 출원된 EP 출원 번호 EP15201912.1 의 우선권을 주장하고, 이의 전체 내용은 본원에 참조로 포함된다.
본 발명은 역류의 유사 (simulated) 또는 실제 이동층 모드에서 작동하는 순차적 멀티-컬럼 크기 배제 크로마토그래피 장치를 사용하는, 폴리옥시에틸렌 및 폴리옥시프로필렌 모이어티를 포함하는 폴리에테르 블록 공중합체의 정제 방법에 관한 것이다.
폴록사머 (에틸렌 옥시드/ 프로필렌 옥시드 트리블록 공중합체) 는 약학적 분야에서 오랫동안 사용되어 왔다. 이의 분자량 및 에틸렌 옥시드 대 프로필렌 옥시드의 비에 따라, 중합체가 국소, 경구 또는 비경구 적용에서 부형제로서 이의 겔 형성 또는 가용화 특성을 위해 사용된다.
수년 전부터, 겸상 적혈구 빈혈의 치료를 위한 활성 성분으로서 정제된 폴록사머 188 의 사용이 기재되었다. 저분자량 (LMW) 불순물은 특정 신장 독성과 관련이 있고, 이의 제거에 관한 여러 방법이 공개되었다. US 5,990,241 은 불순물의 제거를 위한 선택 방법으로서 겔 크로마토그래피를 언급한다.
또한, 폴록사머 188 은 단일클론 항체의 제조에서 현탁 세포 배양물의 전단 보호제로서 사용된다. 상기 포유류 세포는 폴록사머 품질의 변화에 대해 매우 민감하다. 특정 배치 (batch) 의 실패에 대한 근본적인 원인은 아직 완전히 이해되지 않았지만, 감소된 수준의 불순물을 갖는 정제된 중합체가 개선된 성능을 나타낼 것이라는 가설이 있다.
정제된 폴록사머는 승인된 의약품에서 혈관내 폐색 겔로서 사용된다. 이러한 적용을 위해, 예를 들어 US 5,800,711 또는 US 6,761,824 에 개시된 바와 같이, 저분자량 불순물이 추출에 의해 제거되어 체온에 대해 온도 반응성 (thermos-responsive) 인 폴록사머의 겔 포인트를 이동시킨다.
폴록사머 정제는, 특히 예를 들어 US 6448371 에 기재된 바에 따라 반응/가수분해와 같은 상이한 기법에 의해 다루어졌다.
알려진 다른 방법은 흡착 및 이온 교환 기반 방법이다.
흡착 및/또는 이온 교환 방법 (크로마토그래피 포함) 에 관해, 문헌에서 예를 들어 하기와 같은 일부 참조가 확인될 수 있다: 수 중 4 wt% 폴록사머 188 은 고정층 수지 (Amberlite MB-1, DOW Chemical) 로 패킹된 크로마토그래피 컬럼 및 실리카층으로 패킹된 추가 컬럼을 통과함으로써 정제되었다. 흡착제 재생 또는 회수 수준은 보고되지 않았지만, 상당히 낮다고 예상되기 때문에 전체 방법 비용에 유의한 영향을 미친다. XAD-4 (Dow Chemical) 에서의 흡착 및 LMW 불순물 추출 (6000 psi 및 40℃ 에서 Super Critical CO2 에 의해), 그러나 제 2 유기 용매 (메탄올) 의 사용에 의해 XAD 매트릭스로부터 추출된 경우, 표적 MW 화합물의 비용의 유의한 손실 (80% 미만 회수) 및 표적 LMW 불순물의 단지 80% 제거 (표적 불순물의 불완전한 고갈) 이 달성됨 (참조: [Drugs R D (2014) 14:73-83]).
또한, 분취용 배치 크로마토그래피 방법이 US 5523492 에 기재된 바와 같이 폴록사머의 정제를 위해 다루어졌다. 그러나, 매우 희석된 조건 (정제 생성물 1 kg 당 1500 L 초과의 용매), 및 낮은 생산성 (일일 고정상 1 kg 당 0.1 kg 미만의 처리 생성물) 이 상기 기법과 관련되기 때문에, 우리가 아는 바, 상기 접근법에 대한 상업적 적용이 보고되지 않았다는 증거가 지지된다.
따라서, 이러한 정제 접근법 중 어떠한 것도 합리적인 생성물 회수, 생산율 및 희석율 하에서 고순도 생성물로의 현재 폴록사머 등급의 다소 경제적인 정제를 허용할 수 있는 정제 전략을 제공하지 않는다.
크로마토그래피는 고정상 (흡착제 또는 패킹 물질) 에 대한, 이동상 (용매, 용출액 또는 탈착제 (desorbent)) 중 희석된 주어진 성분 (용질) 의 친화성이 분리 및 정제 목적을 위해 사용되는 방법이다. 상기 친화성이 용질의 크기 (주로 분자 크기) 와 직접 연관이 있는 경우, 용어 크기 배제 크로마토그래피 (SEC) 가 사용되고, 즉 분자 크기 차이를 기반으로 하는 분리가 사용된다. 추가로, 용어 겔 투과 크로마토그래피 (GPC) 중 겔 여과 크로마토그래피 (GFC) 는 또한 각각 물 또는 유기 기반 용매의 사용과 관련하여 주로 적용된다.
SEC 방법은 가장 다양한 분야에서 분석 (LC-액체 크로마토그래피, GC-기체 크로마토그래피, HPLC-고압 고성능 액체 크로마토그래피 또는 uPLC-초압력 액체 크로마토그래피) 을 위해, 분취용 또는 방법 규모 목적을 위해 광범위하게 사용되어 왔다.
분석 목적을 위해, SEC 방법은 대부분 HPLC 장비 공급사로부터 입수가능한 증가된 수의 이동상 및 고정상 조합을 요구할 수 있다. 이는 하기와 같은 사실에 기인한다:
i) 사용될 크로마토그래피 용매의 독성, 또는 복잡성에 대해 주요한 제한이 존재하지 않음 (산, 염기, 완충액 또는 염 등과 같은 개질제를 포함하는 여러 용매 혼합물로 확장될 수 있음);
ii) 표적 물질에 대한 용해도에 대한 제한이 거의 존재하지 않음 (방법이 미량 - 매우 희석된 - 조건 하에서 수행되기 때문에).
실제로, 분석 SEC HPLC 방법은 전통적 분석 컬럼 (고효율 그러나 고압 작동을 위해 직경이 5-10 ㎛ 인 작은 입자 크기) 및 다소 독성이고/이거나 복잡한 유기 용매 및 염의 혼합물 (특히 THF 또는 DHF 와 LiBr 염) 을 사용하여, 중합체, 특히 폴록사머의 분자량 분포를 특징화하기 위해 자주 사용되었다 (US 특허 5691387 또는 Agilent 적용 방법).
그러나, 분취용 또는 방법 규모 적용에서, 실행가능한 이동상의 범위 및 이용가능한 대량의 고정상의 개수가 주어진 분리 또는 정제 문제의 성공 가능성을 현저히 감소시키기 때문에, 중합체 분리를 위한 다소 경쟁적인 SEC 적용의 개발은 꽤 어려운 것으로 간주될 수 있다.
상업적 적용을 위해, 표적 화합물의 SEC 분리 또는 정제는 분석 목적을 위해 통상적으로 주입된 다소 적은 양에 비해 보다 더 큰 규모로 작동되어야 한다. 분취용 또는 방법 규모 SEC 방법은 정제 물질을 제조하기 위한 목적으로 작동되며, 이러한 방식으로, 생산성 (일일 고정상 1 kg 당 처리된 종의 kg) 또는 희석 인자 (생성물 1 kg 를 정제하기 위해 필요한 용매의 리터) 와 같은 성능 인자가 상기 최적의 이동상 및 고정상 조합의 정의에서 매우 중요하다. 유닛은 특정 생산성 최대화 (특정한 유닛 크기 또는 실행 시간 및 고정상 인벤토리를 최소화함으로써 방법 비용을 감소시킴), 및 표적 화합물 희석을 위한 용매 감소 (용매 인벤토리 및 재순환 작업을 감소시킴으로써 방법 비용을 감소시킴) 에 요구되는 오버로드 조건 (고농축 - 낮은 피드 희석 인자) 하에서 작동되어야 한다.
또한, 점도는 방법 흐름의 유체역학에 영향을 주고, 특히 이에 관해, 용매 점도 차이에 대한 샘플 (정제될 피드 혼합물) 이 주요 관련 인자이다. 주입 플러그의 점도가 이동상보다 큰 (또는 작은) 경우, 일종의 핑거 (finger) 가 전방으로 전파되는 대신에 컬럼을 따라 상기 플러그의 뒤 (또는 앞) 에서부터 전개된다. 용매 점도 차이 10% 샘플은 "점성 핑거링 (viscous fingering)" 으로 알려진 현상을 야기하기에 충분히 클 수 있다. 상기 거동의 발생은 분리 성능에 대한 치명적인 영향을 가져 분리 실패를 야기할 수 있다.
큰 크기 중합체, 특히 폴록사머의 고유 특성 중 하나는 대부분의 전통적 크로마토그래피 용매 (물 또는 유기 기반 용매) 에서 이의 혼합물이 상기 용액 점도를 현저히 증가시킨다는 것이다.
본원에서 청구된 발명에 의해 해결되어야 할 과제는 선행 기술의 단점을 회피하는 폴록사머의 분취용 정제에 적합한 효과적인 연속적 방법을 제공하는 것이었다. 특히, 4-5 wt% 범위의 양으로 존재하는 LMW 중합체 불순물의 제거 문제는 비용 효율적인 방식으로 해결되어야 했다. 또한, 1 wt% 미만의 양으로 존재하는 알데히드 또는 중합체성 아세탈과 같은 기타 불순물이 제거되어야 했다. 또한, 고분자량 (HMW 임) 불순물의 제거가 달성되어야 할 과제이다.
상기 문제는 역류 이동층 모드로 작동하는 순차적 멀티-컬럼 크기 배제 크로마토그래피 장치를 사용하는, 폴리옥시에틸렌 및 폴리옥시프로필렌 모이어티 포함 폴리에테르 블록 공중합체의 정제 방법에 의해 해결되었으며, 방법 사이클은 하기 단계를 포함한다:
(A) 피드 용기에 용출액에 용해된 블록 공중합체를 포함하는 피드 혼합물을 제공하는 단계,
(B) 순차적으로 함께 연결된 다수의 크로마토그래피 컬럼 (각 컬럼은 층을 포함함) 을 포함하는 장치 내에 피드 혼합물을 도입함으로써, 피드 혼합물을 크로마토그래피 분리에 적용하는 단계,
(C) 분리 후, 정제된 표적 블록 공중합체가 풍부한 제 1 용출액 부분 및 정제된 표적 블록 공중합체가 고갈된 제 2 용출액 부분을 수집하는 단계,
(D) 제 1 용출액 부분으로부터 정제된 블록 공중합체를 수집하는 단계, 및
(E) 고갈된 용출액을 회수하고, 용매 회수 영역으로부터의 고갈된 용출액을 방법으로 재순환시키는 단계.
"층" 은 크기 배제 패킹 물질을 포함하는 상을 의미한다. 바람직하게는, 층은 고정상이다.
이동층은 유사 또는 실제 이동층일 수 있다. 바람직하게는, 이동층은 유사 이동층이다.
청구된 본 발명에 있어서, 폴리옥시에틸렌 및 폴리옥시프로필렌 모이어티 포함 폴리에테르 블록 공중합체는 폴리에틸렌 옥시드-블록-폴리프로필렌 옥시드 공중합체 또는 폴리에틸렌 옥시드-폴리프로필렌 옥시드 랜덤 공중합체일 수 있다.
트리블록 (PEO-PPO-PEO)-공중합체 (폴록사머, Pluronic®, Kolliphor® P, Synperonic® 로 시판됨) 는 다양한 블록 크기, 각각의 폴리옥시에틸렌 및 폴리옥시프로필렌 모이어티의 비 및 분자량을 갖는다. 조성 및 분자량에 따라, 폴록사머는 실온 (25℃) 에서 액체 또는 고체 및 수용성, 수 중 부분 가용성 또는 수불용성일 수 있다. 다양한 등급의 포괄적인 개요가 [Alexandris P. et al: Physicochem. Eng.Aspects 96 (1995) 1-46] 에 포함되어 있다. 폴록사머는 상기 블록 공중합체에 대한 INN-명칭이다. 일반식은 HO-[(CH2)2-O-]a-[(CH2)3-O-]b-[(CH2)2-O-]a-H (식 중, a= 2-130, b= 15-67) 이다. 각각의 폴록사머는 수에 의해 특징화된다. 처음 두 수에 100 을 곱한 것은 폴리옥시프로필렌 모이어티의 평균 분자량을 나타내고, 마지막 수에 10 을 곱한 것은 폴리옥시에틸렌 모이어티의 평균 분자량이다. 전형적인 예는 폴록사머 124, 188, 237, 338, 407 이다.
인버스 (inverse) 폴록사머 (또한 메록사폴 (meroxapol) 로 알려진 PPO-PEO-PPO 트리블록 공중합체) 가 Pluronic® RPE 로 시판된다.
폴록사민 및 리버스 (reverse) 폴록사민은 동일한 폴리에틸렌 옥시드 및 폴리프로필렌 옥시드의 순차적 순서를 갖는다는 점에서 폴록사머 및 메록사폴과 유사하지만, 이들은 에틸렌 디아민 개시제로부터 제조되기 때문에 4 개의 알킬렌 옥시드 사슬을 갖는다.
Pluradot® 폴리에틸렌 옥시드-폴리프로필렌 옥시드 블록 공중합체는 3관능성 개시제로 개시되기 때문에 3 개의 사슬을 갖는다.
본 발명에 속한 기타 폴리에테르 블록 공중합체는 폴리에틸렌 옥시드 및 폴리부틸렌 옥시드로 구성된 블록 및 랜덤 공중합체이고, 이들은 PEO-PBO 디블록 공중합체 또는 PEO-PBO-PEO 트리블록 공중합체 (또한 Butronics® 로 알려짐) 일 수 있다.
상기 언급된 블록 중합체에 대한 전반적인 개요가 [Schmolka, I., Journal of the American Oil Chemists' Society, Vol 54 (3) 1977] 에 제시되어 있다.
바람직한 폴리에테르 블록 공중합체는 트리-블록 공중합체, 특히 폴록사머 P188 및 P407 이다.
유사 또는 실제 이동층 장치 및 각각의 장비에서 순차적 멀티-컬럼 크기 배제 크로마토그래피의 방법은 선행 기술, 예컨대 US 2,985,589, US 3,696,107, US 3,706,812 또는 "Sa Gomes and Rodrigues (2012) Chemical Engineering & Technology Special Issue: Preparative Chromatography and Downstream Processing Volume 35, 17-34" 에 기재되어 있고, 이의 전체가 본원에 참조 인용된다.
바람직한 구현예에서, 장치는 일련의 고정층 컬럼을 포함하고, 각각의 컬럼은 주입구- 및 유출구 장치가 장착되어 있고, 여기서 고체 상은 고정된 기준에 정지해 있는데, 유체 이동상 및 고정상 사이의 상대적인 이동이 때때로 컬럼에 대해 및 컬럼으로부터 (유체 흐름의 방향으로) 주입구 및 유출구 유체 스트림을 스위칭함으로써 유발된다. 따라서, 일종의 역류 이동이 유체에 대해 생성되고, 이러한 기술을 "유사 이동층" (SMB, simulated moving bed) 으로 지칭한다.
통상적인 도식이 도 1 에 도시되어 있다.
유체 유속이 대략 일정한 (주입구 -피드 및 용출액- 및 유출구 -추출물 및 라피네이트- 스트림에 의해 제한됨, 도 1) SMB 유닛의 일부로서 "섹션 " 의 정의에 의해, A - SEC 컬럼에 덜 보유된 표적 분자, 및, B - SEC 컬럼에 더 보유된 표적 분자를 고려하여, 상이한 역할을 하는 4 개의 상이한 섹션을 확인할 수 있다:
섹션 I : 흡착제의 재생 (고체로부터 B, 및 여전히 존재하는 경우, A 의 탈착);
섹션 II: A 의 탈착 및 B 의 흡착 (이에 따라 A 로 오염되지 않고 B 가 풍부한 추출물);
섹션 III: B 의 흡착 및 A 의 탈착 (이에 따라 B 로 오염되지 않고 A 가 풍부한 라피네이트);
섹션 IV: 용출액의 재생 (유체로부터 A, 및 여전히 존재하는 경우, B 의 흡착).
관련된 비통상적 SMB 작동 모드, 예컨대 특히 개선된-SMB, 순차적-SMB, Varicol®, Powerfeed, Modicon, MCSGP, Outlet Swing 스트림-OSS, JO 또는 슈도 SMB 의 이점 및 유사성은 알려져 있고, 예를 들어 "Sa Gomes and Rodrigues (2012) Chemical Engineering & Technology Special Issue: Preparative Chromatography and Downstream Processing Volume 35, 17-34" 에 구체화된 바와 같이, 당업자에 의해 전형적인 SMB 결과로부터 유래될 수 있다.
크기 배제 크로마토그래피를 수행하기 위한 해당 장비는 시판되고, US 7,141,172 에 기재된 바와 같이, 상이한 펌프, 밸브 및 배치 및 컬럼 (고정 위치) 하 또는 실제 이동층 (AMB, CSEP, ISEP 장치) 으로 작동하는, 분리 방법의 특정한 요구에 따라 당업자에 의해 조정될 수 있다.
본 발명의 목적을 위해, 하기 용어가 사용될 수 있다:
SEC 컬럼에 덜 보유된 표적 분자가 풍부한 용출액 부분을 또한 "라피네이트" 로 지칭한다.
SEC 컬럼에 더 보유된 표적 분자가 고갈된 용출액 부분을 또한 "추출물" 로 지칭한다.
표적 분자 ("표적물") 는 정제될 블록 공중합체 또는 제거될 특정한 불순물일 수 있다. 따라서, 청구된 본 발명에 관한 특정한 방법 도식에 따라, 블록 공중합체가 풍부한 제 1 용출액 부분은 라피네이트 또는 추출물 (하기에 추가로 상세하게 설명된 바와 같음) 일 수 있다.
본 발명의 목적을 위해, 순수한 용출액 스트림을 또한 "용매 스트림" 으로 지칭한다.
용출액은 유기 용매 또는 물 또는 이의 혼합물일 수 있다.
한 바람직한 구현예에 있어서, 용출액은 유기 용매 또는 유기 용매의 혼합물이다. 적합한 유기 용출액은 저급 알코올, 예컨대 메탄올, 에탄올, 이소프로판올, 부탄올, 상기 저급 알코올의 아세테이트 또는 프로피오네이트, 예를 들어 메틸 아세테이트 또는 에틸 아세테이트; 케톤, 예컨대 아세톤, 부타논, 이소프로필 메틸케톤; 아세탈 또는 케탈; 에테르, 예컨대 디에틸 에테르, 디이소프로필 에테르, tert-부틸 메틸 에테르, 테트라히드로푸란 또는 디옥산; 알칸, 예컨대 펜탄, 헥산, 헵탄, 시클로헥산, 시클로헵탄; 방향족 탄화수소, 예컨대 벤젠, 톨루엔 또는 자일렌; 할로겐화 탄화수소, 예컨대 디클로로메탄, 클로로포름, 클로로벤젠; 불소화 저급 알칸; 포름아미드 또는 디메틸포름아미드; 아세토니트릴 또는 이의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택된다.
특히 바람직한 구현예에 있어서, 용출액은 메탄올 또는 메탄올과 물 또는 기타 유기 용매, 특히 아세토니트릴 및/또는 아세톤의 혼합물이다.
단계 (A) 는 용출액에 블록 공중합체를 포함하는 피드 혼합물을 제공한다. 블록 공중합체의 농도는 바람직하게는 5 내지 50 중량%, 보다 바람직하게는 20 내지 40 중량% 범위이다. 상한은 용출액에 주어진 생성물의 용해도에 의존한다. 피드 용출액 조성 (유기 또는 물 기반 용매 비) 은 용매 구배 작동을 허용하기 위해 크로마토그래피 유닛에 공급된 용출액 스트림과 상이할 수 있다.
크로마토그래피 분리 장치에 도입되는 피드 혼합물을 또한 "피드 스트림" 으로 지칭한다.
단계 (B) 는 순차적으로 함께 연결된 다수의 크로마토그래피 컬럼 (각 컬럼은 고정상을 포함함) 을 포함하는 SMB 장치 내에 피드 혼합물을 도입함으로써, 피드 혼합물을 크로마토그래피 분리에 적용하는 단계를 포함한다.
각각의 장치에서 사용된 컬럼의 수는 특히 제한되지 않는다. 당업자는 정제될 물질의 양에 따라 적절한 수의 컬럼을 쉽게 결정할 수 있을 수 있다. 컬럼의 수는 전형적으로 2 개 이상, 바람직하게는 4 개 이상, 예를 들어 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10 개 컬럼이다. 바람직한 구현예에서, 5 또는 6 개의 컬럼, 보다 바람직하게는 6 개의 컬럼이다. 또 다른 바람직한 구현예에서, 컬럼의 수는 7 또는 8 개의 컬럼, 보다 바람직하게는 8 개의 컬럼이다. 전형적으로 25 개 이하의 컬럼, 바람직하게는 20 개 이하의 컬럼, 보다 바람직하게는 15 개 이하의 컬럼이 존재한다. 특히 바람직한 구현예에서, 컬럼의 수는 섹션 당 2 개의 컬럼이고, 섹션은 유속이 대략 일정하고 주입구 및 유출구 노드 (node) 에 의해 규정되는 유닛의 일부이다.
컬럼의 치수는 특히 제한되지 않고, 일부 정도 특정한 분리 방법을 위해 선택된 정제될 피드 혼합물의 부피, 고정상 입자 크기 및 유속에 의존할 것이다.
당업자는 적절히 사이징된 컬럼을 쉽게 결정할 수 있을 것이다. 각각의 컬럼의 내부 직경 ("ID") 은 전형적으로 10 내지 5000 mm, 바람직하게는 10 내지 1200 mm, 바람직하게는 10 내지 500 mm 이다. 각각의 컬럼의 길이는 전형적으로 50 mm 내지 2000 mm, 바람직하게는 75 내지 500 mm 이다.
컬럼에 대한 유속은 일련의 컬럼에 걸친 최대 압력 강하에 의해 제한되고, 컬럼 치수 및 고정상의 입자 크기에 의존할 것이다. 당업자는 각각의 컬럼 치수에 요구되는 유속을 용이하게 확립하여 효율적인 분리 방법을 보장할 수 있을 것이다. 보다 큰 직경 컬럼은 전형적으로 컬럼을 통한 선형 흐름을 유지하기 위해 보다 높은 유속을 요구할 것이다 ([Sa Gomes and Rodrigues (2012) Chemical Engineering & Technology Special Issue: Preparative Chromatography and Downstream Processing, Volume 35, 17-34] 참조).
고정상은 크기 배제 크로마토그래피 패킹 물질을 포함한다.
본 발명의 한 구현예에 있어서, 고정상은 패킹 물질로서 무기 흡착제, 예컨대 카본, 제올라이트, 알루미나, 실리카 기반 물질 (무기 또는 유기 분자를 갖거나 이로 코팅되고, 표준 또는 표준 또는 리버스 상에서 작동함) 을 포함한다.
한 바람직한 구현예에 있어서, 고정층은 무기 흡착제로서 실리카 기반 물질, 보다 바람직하게는 실리카 디올을 포함한다. 실리카 디올은 입자의 표면을 디올 기로 커버하기 위한 1,2-디히드록시프로판으로 개질된 실리카 입자이다. 상기 실리카 디올 물질은 대량으로, 상이한 포어 및 입자 크기로 시판된다.
한 구현예에 있어서, 고정층은 패킹 물질로서 유기 흡착제를 포함한다.
한 구현예에 있어서, 고정층은 패킹 물질로서 탄수화물 (소프트겔), 아가로오스 또는 아크릴아미드와 가교결합된 탄수화물, 또는 가교결합된 유기 중합체 (수지 또는 이온 교환 물질) 또는 메타크릴 수지로 이루어진 군으로부터 선택되는 유기 흡착제를 포함한다.
고정층 물질의 입자 치수는 통상적으로 하기 추가로 정의된 바와 같이 SMB 유닛이 고성능/저성능 (고효율/저효율 또는 고압/저압) 유닛으로 작동하는지 여부에 따라 가변적이다.
SMB 분리의 압력 수준은 0.05 MPa 내지 15 MPa (0.01 MPa 내지 15 MPa 유닛에 걸친 압력 강하) 의 넓은 범위에 걸쳐 가변적일 수 있다.
SMB 분리는 고압 방법 또는 저압 방법으로서 작동할 수 있다.
한 구현예에 있어서, SMB 분리는 저압 방법으로서 작동한다. 저압 SMB 크기 배제 크로마토그래피는 통상적으로 큰 유닛에서 수행된다. 생산성은 < 0.1 kg - 1 kg 생성물/kg흡착제/일 범위이다. 분리 방법은 0.05 내지 0.5 MPa 또는 0.01 MPa 내지 15 MPa 유닛에 걸친 압력 강하의 범위의, 유닛에 걸친 압력 강하 값에서 작동할 수 있다.
또 다른 구현예에 있어서, 분리는 고압 방법으로서 수행된다. 고압 / 고압 SMB 크기 배제 크로마토그래피는 통상적으로 보다 작은 유닛에서 수행된다. 생산성은 전형적으로 1 - 10 kg 생성물/kg흡착제/일 범위이다. 분리 방법은 바람직하게는 > 0.5 MPa 내지 10 MPa 범위의 상한까지의 고압에서 수행된다.
고압 유닛은 5 내지 50 μm 범위의 평균 입자 크기를 갖는 패킹 물질을 사용하여 작동한다. 저압 유닛은 50 μm 초과 내지 1000 μm 이하, 바람직하게는 200 내지 500 μm, 특히 바람직하게는 250 - 350 μm 의 보다 큰 입자 크기로 작동한다.
또한, 패킹 물질은 포어 크기가 다양할 수 있다. 평균 포어 크기는 1 내지 100 nm, 바람직하게는 2 내지 50 nm, 특히 바람직하게는 5 내지 20 nm 범위에서 선택될 수 있다.
특히 바람직한 구현예에 있어서, 고정상은 안정한 체류 시간이 도달될 때까지 메탄올로의 플러싱에 의해 전처리된다. 안정한 체류 시간은 특정 피크의 체류 시간, 또는 상대적 체류 시간 (불순물 피크에 대한 표적 피크의 비) 이 적어도 24 시간 동안의 분리 실행 중 변하지 않는다는 것을 의미한다.
전형적으로, 컬럼의 온도는 결정 또는 미립자의 형성이 관찰될 수 있는 보다 낮은 수준으로부터 용질 또는 용매의 증발까지로 제한된다. 한 구현예에 있어서, 방법은 20 내지 25℃ 의 일정한 실온에서 수행된다.
임의로, 방법은 30 내지 65℃ 범위의 보다 높은 온도에서 수행될 수 있다. 부가적으로, 상이한 온도로 장치의 일부를 가열 또는 공급함으로써, 온도 구배를 적용할 수 있다.
본 발명의 한 구현예에 있어서, 제 1 용출액 부분 및 분리 사이클 후 회수된 제 2 용출액 부분은 서로 독립적으로 농축 단계에 적용될 수 있다.
블록 공중합체가 풍부한 제 1 용출액 부분 및/또는 블록 공중합체가 고갈된 제 2 용출액 부분의 농축 단계는 증발, 건조 또는 증류에 의해 수행될 수 있다.
또 다른 구현예에 있어서, 블록 공중합체가 풍부한 제 1 용출액 부분 및 블록 공중합체가 고갈된 제 2 용출액 부분의 농축 단계는 액체 추출, 멤브레인, 결정화, 흡착 또는 기타 용매 회수 기법에 의해 수행된다.
상이한 용출액 부분은 서로 독립적으로 상이한 방법에 의해 처리될 수 있고, 이는 상이한 용출액 스트림에 상이한 방법이 사용될 수 있음을 의미한다.
본 발명의 방법은 임의로 피드 및/또는 용매 스트림의 예비 여과를 포함한다.
이러한 예비 여과는 흡착 여과층, 흡착 컬럼, 플래시 크로마토그래피 또는 배치식 흡착을 사용하여, 용매 또는 피드를 흡착성 물질과 함께 교반한 후 여과함으로써 수행될 수 있다. 여과층은 실리카, 알루미나, 분자체, 활성화 카본, 중합체성 흡착제, 이온 교환물질 또는 기타 흡착제를 포함할 수 있다. 바람직한 물질은 분쇄 실리카이다.
예비 여과 단계는 고정상에 강하게 흡착되어 SMB 분리 거동을 손상 또는 변경할 수 있는 피드의 마이너 불순물, 또는 용매 사이클에 축적되는 기타 사이드 불순물, 또는 심지어 불완전 용매 회수 절차 이전의 폐 물질을 제거하기 위해 사용될 수 있다.
한 구현예에 있어서, 본 발명의 방법은 분리 크로마토그래피 사이클 이전에, 피드 용기 및 크로마토그래피 장치 사이에 위치한, 염 또는 촉매 흔적 또는 이의 혼합물의 제거를 위한 실리카 또는 알루미나 또는 분자체 또는 활성화 카본 또는 중합체성 흡착제, 예컨대 양이온 또는 음이온 교환 수지의 고정 여과층을 통해 피드 혼합물을 통과시키는 제 1 여과 단계를 포함한다.
또 다른 구현예에 있어서, 본 발명의 방법은 분리 크로마토그래피 사이클 이후에, 용출액 재순환 영역에 위치한, 실리카 또는 알루미나 또는 분자체 또는 활성화 카본 또는 중합체성 흡착제, 예컨대 양이온 또는 음이온 교환 수지의 여과층을 통해 고갈된 용출액을 통과시키는 제 2 여과 단계를 포함한다.
바람직한 구현예에 있어서, 여과층은 여과 단계 이전에 용매로 전처리된다. 용매는 물 또는 유기 용매일 수 있고, 바람직하게는 유기 용매가 용출액으로 사용될 수 있다. 여과층은 하나 초과의 단계로 전처리 (예를 들어 물에 의한 제 1 전처리, 이후 용출액 용매에 의한 제 2 전처리) 될 수 있다.
또 다른 구현예에 있어서, 본 발명의 방법은 표적 블록 공중합체가 풍부한 제 1 용출액 부분을 제 2 유사 또는 실제 이동층 분리 방법 사이클에 적용하는 단계를 포함한다. 정제 단계의 순서에 따라, 표적 블록 공중합체가 풍부한 제 1 용출액은 라피네이트 또는 추출물일 수 있다. 제 1 사이클에서 저분자량 불순물이 제거된 다음 제 2 사이클이 후속하는 경우, 정제된 블록 공중합체의 제거는 제 1 분리 사이클 후 추출에서 이루어질 것이다. 고분자량 불순물, 정제된 블록 공중합체가 제 1 사이클에서 제거되는 경우, 표적 블록 중합체는 라피네이트에 존재할 것이다.
또 다른 구현예에 있어서, 방법은 제 1 및 제 2 방법 사이클 사이에 하나 이상의 용출액 농축 단계를 포함한다.
본 발명은 하기 도면에 의해 추가로 예시된다.
도 1 은 전체 사이클에 대해 컬럼 배열 nj=[1 2 2 1] 의 6 컬럼 SMB 유닛을 도시하고 (0 내지 6 ts, ts 는 포트 스위칭 시간임); (a) 제 1 스위치 전까지; (b) 제 1 스위치에서 제 2 스위치; 용출액 = 탈착제 또는 용매; 추출물 및 라피네이트 (주요 화합물이 더 보유됨 및 덜 보유된 스트림) 각각이 수집된다.
유체 유속이 대략 일정한 (주입구 -피드 및 용출액- 및 유출구 -추출물 및 라피네이트- 스트림에 의해 제한됨, 도 3) SMB 유닛의 일부로서 "섹션 " 의 정의에 의해, A - SEC 컬럼에 덜 보유된 표적 분자, 및, B - SEC 컬럼에 더 보유된 표적 분자를 고려하여, 상이한 역할을 하는 4 개의 상이한 섹션을 확인할 수 있다:
섹션 I: 흡착제의 재생 (고체로부터 B, 및 여전히 존재하는 경우, A 의 탈착);
섹션 II: A 의 탈착 및 B 의 흡착 (이에 따라 A 로 오염되지 않고 B 가 풍부한 추출물);
섹션 III: B 의 흡착 및 A 의 탈착 (이에 따라 B 로 오염되지 않고 A 가 풍부한 라피네이트);
섹션 IV: 용출액의 재생 (유체로부터 A, 및 여전히 존재하는 경우, B 의 흡착).
SMB 유닛의 작동 중 특정 순간에 주입구 유출구 포트의 위치가 도 1a 에 의해 나타나는 경우, 일정 시간 (스위칭 시간, t s ) 후, 모든 주입 및 회수 지점은 도 1b 에 도달하는 유체 흐름의 방향으로 한 컬럼 이동한다. 모든 스트림의 초기 위치가 다시 도달 (reencounter) 할 때까지 각각의 스위칭 시간 후 동시 발생적 (synchronously) 으로 동일한 절차가 계속될 것이다. 이 경우, 1 사이클이 완료된다.
도 2 는 정제된 표적 생성물이 라피네이트 스트림으로부터 수집되는, 용매 회수와 폴록사머의 정제를 위한 1-단계 SMB 유닛의 셋업을 도시한다.
피드 폴록사머 스트림 1 ; 피드 용기 2 ; SMB 유닛에 대한 피드 3 ; SMB 유닛 4 ;
추출 스트림 5 ; 추출물 용매 회수 1 6a ; 추출물 용매 회수 2 6b ; 폐기물 스트림 7 ; 라피네이트 스트림 8 ; 라피네이트 용매 회수 1 9a ; 라피네이트 용매 회수 2 9b ; 용매 회수 스트림 9c ; 정제 생성물 스트림 10 ; 용매 용기 11 ; 피드 용기에 대한 용매 스트림 12a ; SMB 에 대한 용매 스트림 12b ; 용매 메이크업 A .
도 3 은 상이한 두 유형의 불순물을 제거하기 위한 2-단계 SMB 유닛의 2 가지 상이한 셋업을 도시한다. 도 3 은 둘 이상의 SMB 단계가 수반된 경우, 다운스트림에 추가의 희석 단계를 회피하기 위해 각각의 SMB 분리 단계 후 용매를 회수하는 구현예를 다룬다. 대안적으로, 제 1 SMB 단계 (SMB1) 유출구 중 하나 (생성물과 관심의 대상인 것) 를 제 2 SMB 단계 (SMB2) 에 직접 공급함으로써, 중간 용매 회수 단계 (심지어 그 사이에서 부분적 임의의 용매 회수 없이) 가 회피될 수 있다. 일부 경우에, 용이한 용매 회수 시스템 (단지 단일 용매 회수 단계가 상업적으로 관심 있는 분리를 충족하기에 충분한 경우) 의 경우, 용매 회수 중 하나 (추출 용매 회수 1 또는 2 및 라피네이트와 유사) 는 회피될 수 있거나, 중간, 폐기물 또는 생성물 스트림에 상당한 양의 용매가 유지된다.
도. 3A 는 제 1 단계에서, LMW 불순물이 제거된 다음, 추출물로부터 정제 표적 생성물의 회수 및 HMW 불순물의 제거가 수행되는 유닛이다.
피드 폴록사머 스트림 1 ; 피드 용기 2 ; SMB 유닛에 대한 피드 3 ; SMB 1 유닛 4 ;
추출 1 스트림 5 ; 추출 1 용매 회수 1 6a ; 추출 1 용매 회수 2 6b ; 폐기물 1 스트림 7 ; 라피네이트 1 스트림 8 ; 라피네이트 1 용매 회수 1 9a ; 라피네이트 1 용매 회수 2 9b ; 용매 회수 1 스트림 9c ; 용매 용기 1 11 ; 피드 용기에 대한 용매 스트림 12a ; SMB 1 에 대한 용매 스트림 12b ; 중간 (intermediate) 용기 13 ; SMB 2 유닛 14 ; 추출 2 스트림 15 ; 추출 2 용매 회수 1 16a ; 추출 2 용매 회수 2 16b ; 정제 생성물 스트림 17 ; 라피네이트 2 스트림 18 ; 라피네이트 2 용매 회수 1 19a ; 라피네이트 2 용매 회수 2 19b ; 용매 회수 2 스트림 19c ; 용매 용기 2 20 ; SMB 2 유닛에 대한 용매 스트림 21 ; 폐기물 2 스트림 22 ; 용매 메이크업 1 A1 ; 용매 메이크업 2 A2 .
도. 3B 는 제 1 단계에서, HMW 불순물이 제거된 다음, 라피네이트 스트림으로부터 LMW 불순물의 제거 및 정제 표적 생성물의 회수가 수행되는 유닛이다.
피드 폴록사머 스트림 1 ; 피드 용기 2 ; SMB 유닛에 대한 피드 3 ; SMB 1 유닛 4 ;
추출 스트림 5 ; 추출 1 용매 회수 1 6a ; 추출 1 용매 회수 2 6b ; 폐기물 1 스트림 22 ; 라피네이트 1 스트림 8 ; 라피네이트 1 용매 회수 1 9a ; 라피네이트 1 용매 회수 2 9b ; 용매 회수 1 스트림 9c ; 용매 용기 1 11 ; 피드 용기에 대한 용매 스트림 12a ; SMB 1 에 대한 용매 스트림 12b ; 중간 용기 23 ; SMB 2 유닛 24 ; 추출 2 스트림 25 ; 추출 2 용매 회수 1 26a ; 추출 2 용매 회수 2 26b ; 폐기물 2 스트림 27 ; 라피네이트 2 스트림 28 ; 라피네이트 2 용매 회수 1 29a ; 라피네이트 2 용매 회수 2 29b ; 용매 회수 2 스트림 29c ; 정제 생성물 스트림 30 ; 용매 용기 2 31 ; SMB 2 유닛에 대한 용매 스트림 32 ; 용매 메이크업 A1 ; 용매 메이크업 2 A3 .
도 4: 실시예 1 의 피드 크로마토그램 (P188 로부터의 LMW 제거); 주입 = 메탄올 중 0.05 ml 의 0.5 wt% 폴록사머 188; A - 고분자량; B - 표적 분자량 중합체; 및 C 표적 저분자량 불순물
도 5: 실시예 1 의 라피네이트 크로마토그램 (P188 로부터의 LMW 제거); 주입 = 고리형 일정 상태에서 완전한 8 회 스위치 사이클에 걸쳐 0.05 ml 의 10 배 희석 (wt. 비) 의 SMB 라피네이트; A - 고분자량; B - 표적 분자량 중합체; 및 C 표적 저분자량 불순물
도 6: 실시예 1 의 추출물 크로마토그램 (P188 로부터의 LMW 제거); 주입 = 고리형 일정 상태에서 완전한 8 회 스위치 사이클에 걸쳐 0.5 ml 의 SMB 추출물; A - 고분자량; B - 표적 분자량 중합체; 및 C 표적 저분자량 불순물
도 7 : 실시예 2a 의 피드 크로마토그램 (P188 로부터의 HMW 제거); 주입 = 0.05 ml 의 피드; A - 고분자량; B - 표적 분자량 중합체; 및 C 표적 저분자량 불순물
도 8 : 실시예 2a 의 라피네이트 크로마토그램 (P188 로부터의 HMW 제거); 주입 = 고리형 일정 상태에서 완전한 8 회 스위치 사이클에 걸쳐 0.05 ml 의 SMB 라피네이트; A - 고분자량; B - 표적 분자량 중합체; 및 C 표적 저분자량 불순물
도 9: 실시예 2a 의 추출물 크로마토그램 (P188 로부터의 HMW 제거); 주입 = 고리형 일정 상태에서 완전한 8 회 스위치 사이클에 걸쳐 0.05 ml 의 SMB 추출물; A - 고분자량; B - 표적 분자량 중합체; 및 C 표적 저분자량 불순물
도 10: 실시예 3 의 피드 크로마토그램 (P407 로부터의 LMW 제거); 주입 = 메탄올 중 0.5 wt% 의 0.05 ml 의 피드; A - 고분자량; B - 표적 분자량 중합체; 및 C 표적 저분자량 불순물
도 11: 실시예 3 의 라피네이트 크로마토그램 (P407 로부터의 LMW 제거); 주입 = 고리형 일정 상태에서 10 배 (wt. 비) 희석된 0.05 ml 의 SMB 라피네이트; A - 고분자량; B - 표적 분자량 중합체; 및 C 표적 저분자량 불순물.
도 12: 실시예 3 의 추출물 크로마토그램 (P407 로부터의 LMW 제거); 주입 = 고리형 일정 상태에서 10 배 (wt. 비) 희석된 0.05 ml 의 SMB 추출물; A - 고분자량; B - 표적 분자량 중합체; 및 C 표적 저분자량 불순물.
도 4 내지 12 에서, x-축의 단위는 "분" 이고, y-축의 단위는 mAu (RI 반응) 이다.
본 발명은 하기 구현예에 의해 특징화된다:
구현예 1 은 역류 이동층으로서 작동하는 순차적 멀티-컬럼 크기 배제 크로마토그래피 장치를 사용하는, 폴리옥시에틸렌 및 폴리옥시프로필렌 모이어티 포함 폴리에테르 블록 공중합체의 정제 방법으로서, 방법 사이클이 하기 단계를 포함하는 방법을 나타낸다: (A) 피드 용기에 용출액에 용해된 블록 공중합체를 포함하는 피드 혼합물을 제공하는 단계, (B) 순차적으로 함께 연결된 다수의 크로마토그래피 컬럼 (각 컬럼은 층을 포함함) 을 포함하는 장치 내에 피드 혼합물을 도입함으로써, 피드 혼합물을 크로마토그래피 분리에 적용하는 단계, (C) 분리 후, 정제된 표적 블록 공중합체가 풍부한 제 1 용출액 부분 및 정제된 표적 블록 공중합체가 고갈된 제 2 용출액 부분을 수집하는 단계, (D) 제 1 용출액 부분으로부터 정제된 블록 공중합체를 수집하는 단계, 및 (E) 고갈된 용출액의 회수 및 용매 회수 영역으로부터 고갈된 용출액의 방법으로의 재순환 단계.
구현예 2 는 역류 이동층이 유사 또는 실제 이동층으로서 작동하는 구현예 1 에 따른 방법을 나타낸다.
구현예 3 은 층이 크기 배제 크로마토그래피 패킹 물질을 포함하는 상인 구현예 1 또는 2 에 따른 방법을 나타낸다.
구현예 4 는 용출액이 유기 용매 또는 물 또는 이의 혼합물인 구현예 1 내지 3 중 어느 하나에 따른 방법을 나타낸다.
구현예 5 는 용출액이 유기 용매 또는 유기 용매의 혼합물인 구현예 1 내지 4 중 어느 하나에 따른 방법을 나타낸다.
구현예 6 은 용출액이 메탄올인 구현예 1 내지 5 중 어느 하나에 따른 방법을 나타낸다.
구현예 7 은 크기 배제 크로마토그래피 패킹 물질을 포함하는 층이 고정층인 구현예 1 내지 6 중 어느 하나에 따른 방법을 나타낸다.
구현예 8 은 고정층이 패킹 물질로서 무기 카본, 제올라이트, 알루미나 또는 실리카 기반 흡착제를 포함하는 구현예 1 내지 7 중 어느 하나에 따른 방법을 나타낸다.
구현예 9 는 고정층이 무기 흡착제 패킹 물질로서 디올로 개질된 실리카를 포함하는 구현예 1 내지 8 중 어느 하나에 따른 방법을 나타낸다.
구현예 10 은 고정층이 무기 흡착제 패킹 물질로서 1,2-디히드록시프로판으로 개질된 실리카를 포함하는 9 에 따른 방법을 나타낸다.
구현예 11 은 디올로 개질된 실리카로 이루어진 고정층이 안정한 체류 시간이 달성될 때까지 메탄올로 전처리되는 구현예 8 내지 10 중 어느 하나에 따른 방법을 나타낸다.
구현예 12 는 24 시간 동안의 분리 실행 중 특정 피크의 체류 시간 또는 상대적 체류 시간이 변하지 않는 구현예 11 에 따른 방법을 나타낸다.
구현예 13 은 층이 패킹 물질로서 포어 크기가 1-100 nm 인 크로마토그래피 흡착제를 포함하는 고정층인 구현예 1 내지 12 중 어느 하나에 따른 방법을 나타낸다.
구현예 14 는 고정층이 패킹 물질로서 포어 크기가 1-100 nm 인 실리카 물질인 무기 흡착제를 포함하는 구현예 8 내지 13 중 어느 하나에 따른 방법을 나타낸다.
구현예 15 는 고정층이 패킹 물질로서 평균 입자 크기 분포가 5-1000 μm 인 실리카 물질인 무기 흡착제를 포함하는 구현예 8 내지 13 중 어느 하나에 따른 방법을 나타낸다.
구현예 16 은 고정층이 패킹 물질로서 평균 입자 크기가 5-20 μm 인 실리카 물질인 무기 흡착제를 포함하는 구현예 8 내지 15 중 어느 하나에 따른 방법을 나타낸다.
구현예 17 은 고정층이 패킹 물질로서 유기 또는 유기 기반 흡착제를 포함하는 구현예 1 내지 7, 15 또는 16 중 어느 하나에 따른 방법을 나타낸다.
구현예 18 은 고정층이 패킹 물질로서 탄수화물, 아가로오스 또는 아크릴아미드와 가교결합된 탄수화물 또는 가교결합된 유기 중합체로 이루어진 군으로부터 선택되는 유기 흡착제를 포함하는 구현예 1 내지 7 중 어느 하나에 따른 방법을 나타낸다.
구현예 19 는 크로마토그래피 분리가 0.01 내지 15 MPa 범위의 압력에서 수행되는 구현예 1 내지 18 중 어느 하나에 따른 방법을 나타낸다.
구현예 20 은 크로마토그래피 분리가 0.05 내지 0.5 MPa 범위의 압력에서 수행되는 구현예 1 내지 15 중 어느 하나에 따른 방법을 나타낸다.
구현예 21 은 크로마토그래피 분리가 0.05 내지 0.5 MPa 범위의 압력에서 수행되고, 패킹 물질의 평균 입자 크기가 50 μm 내지 1000 μm 범위인 구현예 20 에 따른 방법을 나타낸다.
구현예 22 는 크로마토그래피 분리가 > 0.5 MPa 내지 10 MPa 범위의 압력에서 수행되는 구현예 1 내지 19 중 어느 하나에 따른 방법을 나타낸다.
구현예 23 은 크로마토그래피 분리가 > 0.5 MPa 내지 10 MPa 범위의 압력에서 수행되고, 패킹 물질의 평균 입자 크기가 5 내지 50 μm 범위인 구현예 22 에 따른 방법을 나타낸다.
구현예 24 는 크로마토그래피 분리가 20 내지 25℃ 에서 수행되는 구현예 1 내지 23 중 어느 하나에 따른 방법을 나타낸다.
구현예 25 는 크로마토그래피 분리가 26 내지 65℃ 범위의 승온에서 수행되는 구현예 1 내지 20 중 어느 하나에 따른 방법을 나타낸다.
구현예 26 은 제 1 용출액 부분 및 제 2 용출액 부분이 서로 독립적으로 농축 단계에 적용되는 구현예 1 내지 25 중 어느 하나에 따른 방법을 나타낸다.
구현예 27 은 블록 공중합체가 풍부한 제 1 용출액 부분 및 블록 공중합체가 고갈된 제 2 용출액 부분의 농축 단계가 증발, 건조 또는 증류에 의해 수행되는 구현예 1 내지 26 중 어느 하나에 따른 방법을 나타낸다.
구현예 28 은 블록 공중합체가 풍부한 제 1 용출액 부분 및 블록 공중합체가 고갈된 제 2 용출액 부분의 농축 단계가 액체 추출, 멤브레인, 결정화, 흡착 또는 기타 용매 회수 기법에 의해 수행되는 구현예 1 내지 27 중 어느 하나에 따른 방법을 나타낸다.
구현예 29 는 분리 크로마토그래피 이전에 실리카 또는 알루미나 또는 분자체 또는 활성화 카본 또는 중합체성 흡착제 또는 이온 교환물질 또는 이의 혼합물의 여과층에 피드 혼합물을 통과시키는 제 1 여과 단계를 포함하는 구현예 1 내지 28 중 어느 하나에 따른 방법을 나타낸다.
구현예 30 은 분리 크로마토그래피 이후에 용출액 재순환 영역에 위치하는 실리카 또는 알루미나 또는 분자체 또는 활성화 카본 또는 중합체성 흡착제 또는 이온 교환물질 또는 이의 혼합물의 여과층에 고갈된 용출액을 통과시키는 제 2 여과 단계를 포함하는 구현예 1 내지 29 중 어느 하나에 따른 방법을 나타낸다.
구현예 31 은 표적 블록 공중합체가 풍부한 제 1 용출액 부분을 제 2 유사 이동층 분리 방법 사이클에 적용하는 단계를 포함하는 구현예 1 내지 30 중 어느 하나에 따른 방법을 나타낸다.
구현예 32 는 제 1 및 제 2 방법 사이클 사이에 하나 이상의 용출액 농축 단계를 포함하는 구현예 1 내지 31 중 어느 하나에 따른 방법을 나타낸다.
구현예 33 은 폴리옥시에틸렌 및 폴리옥시프로필렌 모이어티를 포함하는 폴리에테르 블록 공중합체가 폴록사머 188 또는 폴록사머 407 인 구현예 1 내지 32 중 어느 하나에 따른 방법을 나타낸다.
구현예 34 는 용출액 중 블록 공중합체의 용액을 포함하는 피드 혼합물 및 블록 공중합체의 농도가 바람직하게는 5 내지 50 중량%, 보다 바람직하게는 20 내지 40 중량% 범위인 구현예 1 내지 33 중 어느 하나에 따른 방법을 나타낸다.
실시예
임의의 하기 실시예에 따라 수득된 모든 샘플을 하기 조건 하 HPLC 에 의해 분석하였다:
주입 = 0.05 ml 의, 고리형 일정 상태에서 SMB 샘플 이동상 = 메탄올; 유속 = 0.5 ml/min; 고정상 = YMC (JP) 실리카 디올 12 nm, 5 μm (ID=0.8 cm × Lc=30.0 cm); 검출 = RI 굴절률; 실온.
"n.d.": 미검출
실시예 1 - 폴록사머 188 로부터 LMW 불순물의 SMB 제거
랩 규모 SMB 유닛 (Semba Bio sciences, USA 사제 Octave 100) 을 YMC (JP) 실리카 디올 12 nm, 20 μm (ID 2 cm × Lc 10 cm) 로 패킹된 8 개의 컬럼과 조합하고 섹션 당 2 개의 컬럼을 배치하였다 (주입구/유출구 노드로 규정된 섹션: 섹션 I - 용매 및 추출물 노드 사이; 섹션 II - 추출물 및 피드 노드 사이; 섹션 III - 피드 및 라피네이트 노드 사이; 및, 섹션 IV - 라피네이트 및 용매 노드 사이). HPLC 등급 메탄올 (Sigma Aldrich) 을 용매로 사용하고 실온 (23-25℃) 에서 작동시켰다.
하기 작동 파라미터를 SMB 및 유닛에서 설정하고, 시스템은 추출물 및 라피네이트 스트림 모두의 전체 사이클 순도가 2 개의 비연속적 사이클에 걸쳐 변하지 않는 경우 결정되는 고리형 일정 상태까지 작동하였다.
t스위치 = 152 초 (포트 동시 발생적 시프트)
Q피드 = 메탄올 중 25 wt% 의 폴록사머 188 에서 0.7 ml/min (피드 스트림)
Q라피네이트 = 4.7 ml/min (생성물 스트림)
Q추출물 = 7.4 ml/min (폐기물 스트림)
Q용출액 = 10.8 ml/min 의 순수 메탄올 (용매 스트림)
GPC HPLC 방법에 의해 수득된 결과를 표 1 에 기재하고, 피드, 라피네이트 (생성물) 및 추출물 (폐기물) 스트림 크로마토그램을 도 4-6 에 기재한다.
표 1 - 무용매 기반에서 SMB 정제 단계 후 폴록사머 188 의 HPLC 영역 백분율 순도. A - 고분자량; B - 표적 분자량 중합체; 및 C 표적 저분자량 불순물.
Figure pct00001
* 메탄올 중 전체 생성물/폐기물 중량
표 1 에 따른 데이터는 폴록사머 188 로부터의 LMW 불순물 (C) 의 전체 함량이 초기 생성물 등급 (피드) 으로부터 제거되어, 라피네이트에서 고순도 생성물 (HPLC 영역에 의해 98.9% 초과) (대략 85% 표적 생성물 회수) 을 산출한다는 것을 나타낸다.
높은 피드 농도의 결과로서, 또한 높은 생성물 농도가 수득되었다 (3.7 wt% 초과).
실시예 2 - 폴록사머 188 로부터 (SMB 중 라피네이트로부터) HMW 불순물의 SMB 제거
실시예 1 에 언급된 것과 동일한 컬럼을 갖는 동일한 SMB 유닛을 사용하여, 실시예 1 에 보고된 것과 동일한 품질의 라피네이트 스트림으로부터 HMW 불순물 제거를 시험하였다 (도 7). 하기 작동 파라미터를 SMB 및 유닛에서 설정하고, 시스템을 추출물 및 라피네이트 스트림 모두의 전체 사이클 순도가 2 개의 비연속적 사이클에 걸쳐 변하지 않는 경우 결정된 고리형 일정 상태까지 작동하였다.
t스위치 = 130 초 (포트 동시 발생적 시프트)
Q피드 = 0.7 ml/min (피드 스트림, 실시예 1 로부터의 라피네이트와 유사함)
Q라피네이트 = 5.7 ml/min (생성물 스트림)
Q추출물 = 7.4 ml/min (폐기물 스트림)
Q용출액 = 9.8 ml/min 의 순수 메탄올 (용매 스트림)
압력
GPC HPLC 방법에 의해 수득된 결과를 표 2 에 기재하고, 피드, 라피네이트 (폐기물) 및 추출물 (생성물) 스트림 크로마토그램을 도 7-9 에 기재한다.
표 2 - 무용매 기반에서 SMB 정제 단계 후 정제된 폴록사머 (실시예 1 로부터의 라피네이트) 의 HPLC 영역 백분율 순도. A - 고분자량; B - 표적 분자량 중합체; 및 C 표적 저분자량 불순물.
Figure pct00002
* 메탄올 중 전체 생성물/폐기물 중량
표 2 에 따른 데이터는 사전 정제된 폴록사머 188 로부터의 HMW 불순물의 전체 함량이 제거되어, 추출물에서 고순도 생성물 (HPLC 영역에 의해 대략 100%) 대략 80% 표적 생성물 회수) 을 산출한다는 것을 나타낸다.
실시예 3 - 폴록사머 407 로부터 LMW 불순물의 SMB 제거
실시예 1 에 언급된 것과 동일한 SMB 유닛 (그러나 이번에는 개방 루프 SMB 모드 (도 1 의 섹션 IV 없음) 에서 6 개의 컬럼 (섹션 당 2 개의 컬럼 - 2:2:2) 만 이용하여 작동시킴) 을 사용하여 폴록사머 407 로부터 LMW 불순물을 제거하였다. 하기 작동 파라미터를 SMB 및 유닛에서 설정하고, 시스템을 추출물 및 라피네이트 스트림 모두의 전체 사이클 순도가 2 개의 비연속적 사이클에 걸쳐 변하지 않는 경우 결정된 고리형 일정 상태까지 작동하였다.
t스위치 = 150 초 (포트 동시 발생적 시프트)
Q피드 = 0.7 ml/min (피드 스트림, 실시예 1 로부터의 라피네이트와 유사함)
Q라피네이트 = 8.9 ml/min (생성물 스트림 - 개방 루프 SMB)
Q추출물 = 8.3 ml/min (폐기물 스트림)
Q용출액 = 16.5 ml/min 의 순수 메탄올 (용매 스트림)
GPC HPLC 방법에 의해 수득된 결과를 표 3 에 기재하고, 피드, 라피네이트 (생성물) 및 추출물 (폐기물) 스트림 크로마토그램을 도 10-12 에 기재한다.
표 3 - 무용매 기반에서 SMB 정제 단계 후 폴록사머 407 의 HPLC 영역 백분율 순도. A - 고분자량; B - 표적 분자량 중합체; 및 C 표적 저분자량 불순물.
Figure pct00003
* 메탄올 중 전체 생성물/폐기물 중량
표 3 에 따른 데이터는 폴록사머 407 로부터 LMW 불순물의 전체 함량이 제거되어, 추출물에서 고순도 생성물 (HPLC 영역에 의해 대략 99%) (대략 90% 표적 생성물 회수) 을 산출한다는 것을 나타낸다.
실시예 4:
개방 루프 SMB 및 가열된 용매 및 시스템에서 폴록사머 188 (40 wt%) 로부터 LMW 불순물의 SMB 제거
실시예 1 에 언급된 것과 동일한 SMB 유닛을 개방 루프 SMB 모드 (도 1 의 섹션 IV 없음) 에서 단지 6 개의 컬럼 (섹션 당 2 개의 컬럼 - 2:2:2) 만 이용하여 작동시키고, 35℃ 에서 용매를 공급하고 대략 30℃ 에서 유닛을 작동시켜 전체 점도를 감소시키고, 이를 사용하여 메탄올 중 40 wt% 의 피드 용액에서 폴록사머 188 로부터 LMW 불순물을 제거하였다.
하기 작동 파라미터를 SMB 및 유닛에서 설정하고, 시스템을 추출물 및 라피네이트 스트림 모두의 전체 사이클 순도가 2 개의 비연속적 사이클에 걸쳐 변하지 않는 경우 결정된 고리형 일정 상태까지 작동하였다.
t스위치 = 158 초 (포트 동시 발생적 시프트)
Q피드 = 0.7 ml/min (피드 스트림, 메탄올 중 40 wt% 의 폴록사머 188)
Q라피네이트 = 8.9 ml/min (생성물 스트림 - 개방 루프 SMB)
Q추출물 = 7.3 ml/min (폐기물 스트림)
Q용출액 = 35℃ 에서 15.5 ml/min 의 순수 메탄올 (용매 스트림)
표 4 - 무용매 기반에서 SMB 정제 단계 후 폴록사머 188 의 HPLC 영역 백분율 순도. A - 고분자량; B - 표적 분자량 중합체; 및 C 표적 저분자량 불순물.
Figure pct00004
* 메탄올 중 전체 생성물/폐기물 중량
표 4 에 따른 데이터는 최대 작동 압력의 한계가 달성 (1.86 MPa) 된 경우, 40 wt% 만큼 높은 피드 중합체 농도를 갖는 용액으로부터의 P188 로부터 LMW 불순물의 대부분 전체 함량이 제거되었음을 나타낸다.
절차는 하기 성능 파라미터를 특징으로 하였다: 생산성 = 일일 고정상 1 kg 당 2.2 kg 의 처리 생성물;
- 희석 = 처리 생성물 1 kg 당 130 L 의 용매;
- 회수 = 70-80%
실시예 5 - 사전 여과 및 용매 회수 단계를 사용하는 폴록사머 188 로부터 LMW 및 HMW 불순물의 SMB 제거
a) 사전 여과
하기 절차를 적용하여 메탄올 중 25 wt% P188 의 피드 혼합물을 처리하였다:
사전 여과 1: +/- 40 ml 층 부피 (0.22 m x 0.015 m 패킹, LcxID) 양이온 교환 수지 Amberlite FPC 22 H - 유속 약 0.25 ml/min; 10 배 층 부피의 증류수 다음 10 층 부피의 메탄올로 사전 세척;
사전 여과 2 : +/- 40 ml 패킹된 층 (0.22 m x 0.015 m) 의 표준 상 실리카 - Grace DAVISIL® LC150A 40-63 μm, - 유속 약 3 ml/min - 이 층은 약 500-600 ml 의 폴록사머 용액을 처리할 때만 사용됨; 10 배 층 부피의 메탄올로 층 사전 세척.
b) SMB LMW 컷 (25 wt% 피드)
사전 여과층을 세척한 후, 처리될 용액을 공급하고, 첫번째 층 부피를 폐기하였다 (층 내부의 용매의 희석을 회피하기 위해). 유출구 용액을 25 wt% 로 유지한다 (또는 주입구에서와 동일하게).
이후, 이러한 처리된 용액을 실시예 1 에 기재된 SMB 에 공급하고, 하기 작동 파라미터를 설정하고, 48 시간에 걸쳐 시스템을 연속적으로 작동하였다.
t스위치 = 152 초 (포트 동시 발생적 시프트)
Q피드 = 메탄올 중 25 wt% 의 폴록사머 188 에서 0.7 ml/min (피드 스트림)
Q라피네이트 = 4.2 ml/min (생성물 스트림)
Q추출물 = 7.3 ml/min (폐기물 스트림)
Q용출액 = 10.8 ml/min 의 순수 메탄올 (35℃ 에서 공급된 용매)
GPC HPLC 방법에 의해 수득된 결과를 표 5 에 기재한다.
표 5 - 무용매 기반에서 양이온 교환, 실리카 및 SMB 정제 단계 후 폴록사머 188 의 HPLC 영역 백분율 순도. A - 고분자량; B - 표적 분자량 중합체; 및 C 표적 저분자량 불순물.
Figure pct00005
* 메탄올 중 전체 생성물/폐기물 중량
시스템은 총 48 시간 실행 동안 안정적인 것으로 입증되었다. 절차는 하기 성능 파라미터를 특징으로 한다:
- 생산성 = 일일 고정상 1 kg 당 1.3 kg 의 처리 생성물;
- 희석 = 1 kg 의 처리된 생성물 당 98 l 의 용매;
- 회수 = 82.5 wt%
c) 용매 증발 또는 SMB LMW 컷 라피네이트
회전 농축기에서, 90℃ 의 최대 온도 미만에서 약 57 wt% 의 무수 고체 (정제된 P188) 의 농도 이하로 LMW 라피네이트 컷으로부터 용매를 증발시켰다.
증발 후, 농축 생성물을 이전 기재된 GPC 방법을 사용하여 시험하였고 (HPLC 펄스 주입), 표 5 에 따른 생성물 및 부분 용매 증발 후 수득된 것 사이의 차이점은 발견되지 않았다.
d) 사전 여과
단계 c) 로부터의 용액을 25 wt% 혼합물로 희석하고, 컬러 프로파일로 인해, 하기와 같이 실리카 층을 통과시켰다.
사전 여과 2 : +/- 40 ml 패킹된 층 (0.22 m x 0.015 m 패킹) 의 표준 상 실리카 - Grace DAVISIL® LC150A 40-63 μm - 유속 약 3 ml/min - 이 층은 약 500-600 ml 의 폴록사머 용액을 처리할 때만 사용됨; 10 배 층 부피의 메탄올로 층 사전 세척.
e) SMB HMW 컷 (25 wt% 피드)
이후, 단계 d) 로부터 수집된 용액을 단계 b) 에 기재된 SMB 에 공급하고, 하기 작동 파라미터를 설정하고, 24 시간에 걸쳐 시스템을 연속적으로 작동하였다.
t스위치 = 130 초 (포트 동시 발생적 시프트)
Q피드 = 메탄올 중 25 wt% 의 정제된 188 에서 0.6 ml/min (잔류 LMW)
Q라피네이트 = 3.0 ml/min (생성물 스트림)
Q추출물 = 7.4 ml/min (폐기물 스트림)
Q용출액 = 9.8 ml/min 의 순수 메탄올 (35℃ 에서 공급된 용매)
GPC HPLC 방법에 의해 수득된 결과를 표 6 에 기재한다.
표 6 - 무용매 기반에서 양이온 교환, 실리카 및 SMB 정제 단계 후 폴록사머 188 의 HPLC 영역 백분율 순도. A - 고분자량; B - 표적 분자량 중합체; 및 C 표적 저분자량 불순물.
Figure pct00006
* 메탄올 중 전체 생성물/폐기물 중량
시스템은 총 24 시간 실행 동안 안정적인 것으로 입증되었다. 절차는 하기 성능 파라미터를 특징으로 하였다:
- 생산성 = 일일 고정상 1 kg 당 1.3 kg 의 처리 생성물;
- 희석 = 처리 생성물 1 kg 당 93 L 의 용매;
- 회수 = 88.1%
최종 생성물에서 염은 발견되지 않았다.

Claims (29)

  1. 역류 이동층으로서 작동하는 순차적 멀티-컬럼 크기 배제 크로마토그래피 장치를 사용하는, 폴리옥시에틸렌 및 폴리옥시프로필렌 모이어티 포함 폴리에테르 블록 공중합체의 정제 방법으로서, 방법 사이클이 하기 단계를 포함하는 정제 방법:
    (A) 용출액에 용해된 블록 공중합체를 포함하는 피드 혼합물을 피드 용기에 제공하는 단계,
    (B) 순차적으로 함께 연결된 다수의 크로마토그래피 컬럼을 포함하는 장치 내에 피드 혼합물을 도입함으로써, 피드 혼합물을 크로마토그래피 분리하는 단계로서, 각 컬럼은 고정층을 포함하는, 피드 혼합물을 크로마토그래피 분리하는 단계.
    (C) 분리 후, 정제된 표적 블록 공중합체가 풍부한 제 1 용출액 부분 및 정제된 표적 블록 공중합체가 고갈된 제 2 용출액 부분을 수집하는 단계,
    (D) 제 1 용출액 부분으로부터 정제된 블록 공중합체를 수집하는 단계, 및
    (E) 고갈된 용출액을 회수하고, 용매 회수 영역으로부터의 고갈된 용출액을 방법으로 재순환시키는 단계.
  2. 제 1 항에 있어서, 역류 이동층이 유사 (simulated) 또는 실제 이동층으로서 작동하는 정제 방법.
  3. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 용출액이 유기 용매 또는 물 또는 이의 혼합물인 정제 방법.
  4. 제 1 항 내지 제 3 항 중 어느 한 항에 있어서, 용출액이 유기 용매 또는 유기 용매의 혼합물인 정제 방법.
  5. 제 1 항 내지 제 4 항 중 어느 한 항에 있어서, 용출액이 메탄올인 정제 방법.
  6. 제 1 항 내지 제 5 항 중 어느 한 항에 있어서, 고정층이 크기 배제 크로마토그래피 패킹 물질을 포함하는 정제 방법.
  7. 제 1 항 내지 제 6 항 중 어느 한 항에 있어서, 고정층이 패킹 물질로서 무기 카본, 제올라이트, 알루미나 또는 실리카 기반 흡착제를 포함하는 정제 방법.
  8. 제 1 항 내지 제 7 항 중 어느 한 항에 있어서, 고정층이 패킹 물질로서 디올로 개질된 실리카로 이루어진 군으로부터 선택되는 무기 흡착제를 포함하는 정제 방법.
  9. 제 1 항 내지 제 8 항 중 어느 한 항에 있어서, 디올로 개질된 실리카로 이루어진 고정층이 안정한 체류 시간이 달성될 때까지 메탄올로 전처리되는 정제 방법.
  10. 제 1 항 내지 제 9 항 중 어느 한 항에 있어서, 고정층이 패킹 물질로서 포어 크기가 1-100 nm 인 실리카 물질인 무기 흡착제를 포함하는 정제 방법.
  11. 제 1 항 내지 제 10 항 중 어느 한 항에 있어서, 고정층이 패킹 물질로서 평균 입자 크기 분포가 5-1000 μm 인 실리카 물질인 무기 흡착제를 포함하는 정제 방법.
  12. 제 1 항 내지 제 10 항 중 어느 한 항에 있어서, 고정층이 패킹 물질로서 포어 크기가 5-20 nm 인 실리카 물질인 무기 흡착제를 포함하는 정제 방법.
  13. 제 1 항 내지 제 6 항 중 어느 한 항에 있어서, 고정층이 패킹 물질로서 유기 또는 유기 기반 흡착제를 포함하는 정제 방법.
  14. 제 1 항 내지 제 6 항 중 어느 한 항에 있어서, 고정층이 패킹 물질로서 탄수화물, 아가로오스 또는 아크릴아미드와 가교결합된 탄수화물, 또는 가교결합된 유기 중합체로 이루어진 군으로부터 선택되는 유기 흡착제를 포함하는 정제 방법.
  15. 제 1 항 내지 제 14 항 중 어느 한 항에 있어서, 크로마토그래피 분리가 0.01 내지 15 MPa 범위의 압력에서 수행되는 정제 방법.
  16. 제 1 항 내지 제 15 항 중 어느 한 항에 있어서, 크로마토그래피 분리가 0.05 내지 0.5 MPa 범위의 압력에서 수행되는 정제 방법.
  17. 제 16 항에 있어서, 크로마토그래피 분리가 0.05 내지 0.5 MPa 범위의 압력에서 수행되고, 패킹 물질의 평균 입자 크기가 50 μm 내지 1000 μm 범위인 정제 방법.
  18. 제 1 항 내지 제 15 항 중 어느 한 항에 있어서, 크로마토그래피 분리가 > 0.5 MPa 내지 10 MPa 범위의 압력에서 수행되는 정제 방법.
  19. 제 18 항에 있어서, 크로마토그래피 분리가 > 0.5 MPa 내지 10 MPa 범위의 압력에서 수행되고, 패킹 물질의 평균 입자 크기가 5 내지 50 μm 범위인 정제 방법.
  20. 제 1 항 내지 제 19 항 중 어느 한 항에 있어서, 크로마토그래피 분리가 20 내지 25℃ 에서 수행되는 정제 방법.
  21. 제 1 항 내지 제 20 항 중 어느 한 항에 있어서, 크로마토그래피 분리가 26 내지 65℃ 범위의 승온에서 수행되는 정제 방법.
  22. 제 1 항 내지 제 21 항 중 어느 한 항에 있어서, 제 1 용출액 부분 및 제 2 용출액 부분이 서로 독립적으로 농축 단계에 적용되는 정제 방법.
  23. 제 1 항 내지 제 22 항 중 어느 한 항에 있어서, 블록 공중합체가 풍부한 제 1 용출액 부분 및 블록 공중합체가 고갈된 제 2 용출액 부분의 농축 단계가 증발, 건조 또는 증류에 의해 수행되는 정제 방법.
  24. 제 1 항 내지 제 22 항 중 어느 한 항에 있어서, 블록 공중합체가 풍부한 제 1 용출액 부분 및 블록 공중합체가 고갈된 제 2 용출액 부분의 농축 단계가 액체 추출, 멤브레인, 결정화, 흡착 또는 기타 용매 회수 기법에 의해 수행되는 정제 방법.
  25. 제 1 항 내지 제 24 항 중 어느 한 항에 있어서, 분리 크로마토그래피 이전에, 실리카 또는 알루미나 또는 분자체 또는 활성화 카본 또는 중합체성 흡착제 또는 이온 교환물질 또는 이의 혼합물의 여과층에 피드 혼합물을 통과시키는 제 1 여과 단계를 포함하는 정제 방법.
  26. 제 1 항 내지 제 25 항 중 어느 한 항에 있어서, 분리 크로마토그래피 이후에, 용출액 재순환 영역에 위치하는, 실리카 또는 알루미나 또는 분자체 또는 활성화 카본 또는 중합체성 흡착제 또는 이온 교환물질 또는 이의 혼합물의 여과층에 고갈된 용출액을 통과시키는 제 2 여과 단계를 포함하는 정제 방법.
  27. 제 1 항 내지 제 26 항 중 어느 한 항에 있어서, 표적 블록 공중합체가 풍부한 제 1 용출액 부분을 제 2 유사 이동층 분리 방법 사이클에 적용하는 단계를 포함하는 정제 방법.
  28. 제 1 항 내지 제 25 항 중 어느 한 항에 있어서, 제 1 및 제 2 방법 사이클 사이에 하나 이상의 용출액 농축 단계를 포함하는 정제 방법.
  29. 제 1 항 내지 제 28 항 중 어느 한 항에 있어서, 폴리옥시에틸렌 및 폴리옥시프로필렌 모이어티 포함 폴리에테르 블록 공중합체가 폴록사머 (poloxamer) 188 또는 폴록사머 407 인 정제 방법.
KR1020187017747A 2015-12-22 2016-12-12 폴리에테르 블록 공중합체의 정제 방법 KR20180097580A (ko)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP15201912 2015-12-22
EP15201912.1 2015-12-22
PCT/EP2016/080542 WO2017108457A1 (en) 2015-12-22 2016-12-12 A process for purification of polyether block copolymers

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20180097580A true KR20180097580A (ko) 2018-08-31

Family

ID=55229474

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020187017747A KR20180097580A (ko) 2015-12-22 2016-12-12 폴리에테르 블록 공중합체의 정제 방법

Country Status (7)

Country Link
US (1) US20180353875A1 (ko)
EP (1) EP3394152B1 (ko)
JP (1) JP6900378B2 (ko)
KR (1) KR20180097580A (ko)
CN (1) CN108473673B (ko)
BR (1) BR112018012678B1 (ko)
WO (1) WO2017108457A1 (ko)

Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP7140515B2 (ja) * 2018-03-08 2022-09-21 任天堂株式会社 情報処理装置、情報処理システム、情報処理プログラムおよび情報処理方法
JP2022504265A (ja) 2018-10-02 2022-01-13 フリークエンシー セラピューティクス インコーポレイテッド 耳治療薬に関する医薬組成物及び方法
US11324718B2 (en) * 2018-10-09 2022-05-10 Sartorius Chromatography Equipment Method for purifying cannabinoids
BR112021015342A2 (pt) * 2019-02-07 2021-10-05 Dow Global Technologies Llc Processos para recuperar monômeros e solvente presentes em uma corrente residual, para produzir um poliol copolimérico e para separar acrilonitrila da água, e, poliol copolimérico
US20230058189A1 (en) 2019-02-08 2023-02-23 Frequency Therapeutics, Inc. Quinolin-4-one and 4(1h)-cinnolinone compounds and methods of using same
CN114712895B (zh) * 2022-03-08 2023-04-28 江南大学 提高模拟移动床产率的带额外色谱柱的双部分丢弃方法
EP4286026A1 (en) * 2022-05-31 2023-12-06 Basf Se Method for separating an aprotic polar solvent from a mixture comprising water, the aprotic polar solvent and at least one inorganic salt

Family Cites Families (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2985589A (en) 1957-05-22 1961-05-23 Universal Oil Prod Co Continuous sorption process employing fixed bed of sorbent and moving inlets and outlets
US3706812A (en) 1970-12-07 1972-12-19 Universal Oil Prod Co Fluid-solid contacting apparatus
US3696107A (en) 1971-05-27 1972-10-03 Richard W Neuzil Improved hydrocarbon separation process
EP0576612B1 (en) 1991-03-19 1999-12-01 Cytrx Corporation Polyoxypropylene/polyoxyethylene copolymers with improved biological activity
JP3118876B2 (ja) * 1991-07-09 2000-12-18 富士電機株式会社 磁気記録媒体用液体潤滑剤及びその製造方法並びに磁気記録媒体
US5800711A (en) 1996-10-18 1998-09-01 Mdv Technologies, Inc. Process for the fractionation of polyoxyalkylene block copolymers
DE19858892A1 (de) * 1998-12-19 2000-06-21 Merck Patent Gmbh Kontinuierliches Verfahren zur Trennung von Stoffen nach Molekülgröße
SE9902364D0 (sv) 1999-06-21 1999-06-21 Astra Ab New process
US6761824B2 (en) 2000-08-17 2004-07-13 Reeve Lorraine E Process for the fractionation of polymers
WO2003026772A2 (en) 2001-09-27 2003-04-03 Purdue Research Foundation Versatile simulated moving bed systems
KR101343040B1 (ko) * 2010-12-28 2013-12-18 주식회사 삼양바이오팜 정제된 폴록사머 및 그의 정제방법
GB201111591D0 (en) * 2011-07-06 2011-08-24 Equateq Ltd Further new process

Also Published As

Publication number Publication date
JP6900378B2 (ja) 2021-07-07
CN108473673A (zh) 2018-08-31
WO2017108457A1 (en) 2017-06-29
EP3394152B1 (en) 2019-09-25
BR112018012678A2 (pt) 2018-12-04
CN108473673B (zh) 2020-12-01
US20180353875A1 (en) 2018-12-13
JP2019502801A (ja) 2019-01-31
BR112018012678B1 (pt) 2022-03-08
EP3394152A1 (en) 2018-10-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR20180097580A (ko) 폴리에테르 블록 공중합체의 정제 방법
CN105001309B (zh) 一种达巴万星的分离纯化方法
JP2002527773A (ja) 置換クロマトグラフィー法
US8722932B2 (en) Method for separating a mixture comprising three components by simulated moving bed chromatography
EP3029021A1 (en) Method for separating fat-soluble material by simulated moving bed chromatography, and device for same
JP2010158624A (ja) 多孔質吸着膜、及び当該多孔質吸着膜を用いたたんぱく質の精製方法
Li et al. Thioether bridged cationic cyclodextrin stationary phases: Effect of spacer length, selector concentration and rim functionalities on the enantioseparation
JP7261943B2 (ja) カンナビジバリンとカンナビゲロールを同時に分離する方法
JP2011051909A (ja) レバウディオサイドａの精製方法
CN104284982A (zh) 提纯琥珀酸
CN108218681B (zh) 一种辅酶q10的纯化方法
CN109705176A (zh) 一种猪神经节苷脂的分离纯化方法
CN114988979B (zh) 一种宏量分离制备高纯度番茄红素的方法
CN105418631B (zh) 一种用高效液相色谱分离纯化奈马菌素的方法
CN101723927B (zh) 一种儿茶素单体egcg工厂化生产分离纯化方法
Ventura Chiral preparative supercritical fluid chromatography
CN101372506B (zh) 一种纯化制备爱啡肽的新工艺
US10974168B2 (en) Materials and methods for the selective recovery of monovalent products from aqueous solutions using continuous ion exchange
CN105037451B (zh) 一种超滤处理黄霉素发酵液的方法
JP2000159694A (ja) 光学異性体の分離方法
CN109535178A (zh) 一种子囊霉素的深度纯化方法
CN118055797A (zh) 纯化方法及其用途
CN108250217A (zh) 一种制备免疫抑制剂西罗莫司的方法
Grill et al. Preparative Separation of Enantiomers
WO2023052126A1 (en) Purification method and uses thereof

Legal Events

Date Code Title Description
E902 Notification of reason for refusal