KR20180037058A - 국부 지방을 감소시키기 위해 사용되는 제약 조성물 및 그의 용도 - Google Patents

국부 지방을 감소시키기 위해 사용되는 제약 조성물 및 그의 용도 Download PDF

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칼리웨이 바이오파마슈티칼스 코., 엘티디.
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Abstract

본 발명은 제약상 허용되는 수용액, 계면활성제로 만들어진 약물-함유 미셀, 및 상기 약물-함유 미셀 내에 캡슐화된 레스베라트롤을 포함하는, 국부 지방을 감소시키기 위한 제약 조성물을 제공한다. 이와 같이 국부 지방을 감소시키기 위한 제약 조성물은 투여 부위에서의 지방을 감소시킬 수 있고, 높은 안정성, 높은 지방 조직 생체 이용률, 적은 부작용, 및 지속적인 방출의 이점을 갖고 있다.

Description

국부 지방을 감소시키기 위해 사용되는 제약 조성물 및 그의 용도
본 발명은 국부 지방을 감소시키기 위한 제약 조성물에 관한 것이고, 구체적으로는 약물-함유 미셀 및 이러한 미셀 내에 캡슐화된 레스베라트롤을 포함하는 제약 조성물에 관한 것이며, 이러한 제약 조성물은 국부 지방 감소를 위한 것이다.
최근 몇 년 동안 점점 더 많은 사람들이 자신의 아름다움에 대한 견해를 바꾸고 개인의 건강과 몸매에 대한 기준을 높여왔다. 그 결과, 사람들은 체중 감소에 관해서 뿐만 아니라 국부 지방을 감소시키거나 또는 몸매의 윤곽을 형성하는데에 더 집중하여 보다 건강해지고 몸매가 더 좋아진다. 더욱이, 통상적인 체중 감소 요법은 식이 요법을 통해서든지 아니면 운동을 통해서든지 간에 특이적 위치에서의 지방을 감소시킬 수 없다. 현재, 특이적 위치 (예컨대, 허리, 복부, 다리, 팔, 턱, 및 얼굴 등)에서의 국부 지방을 감소시키고자 하는 경우에 이용가능한 유일한 기술은 지방 흡입술이다.
현재, 지방 흡입술은 국부 지방을 감소시키기 위한 가장 보편적인 기술이다. 그러나, 지방 흡입술은 신경, 혈관 및 다른 조직에 심각한 손상을 입힌다. 지방 흡입술로 인해 또한, 감염의 위험, 심한 출혈, 장기간 마취, 및 예기치 않은 생명을 위협하는 병태, 예컨대 지방 색전증 및 마취에 대한 알레르기 반응이 야기된다. 또한, 심각한 타박상과 부어 오름, 심한 통증을 경험하는 것이 일반적이고, 수술 후 회복에는 3 내지 6개월이 걸릴 수 있으며 지방 흡입술 부위가 고르지 않을 수도 있다. 따라서, 통계적 분석에 따르면, 많은 사람이 국부 피하 지방의 축적 또는 신체 곡선을 개선하기 위하여 지방 흡입술을 고려하긴 하였지만, 이들 중 40% 미만이 실제로 지방 흡입술을 시행하였다. 이는 신체 곡선을 개선하거나 또는 국부 지방을 감소시키고자 하는 고객이 지방 흡입술의 부작용, 지방 흡입술 후의 통증, 또는 지방 흡입술의 위험에 따른 문제점으로 인해 단념한다는 것을 보여준다.
일부 비-수술적인 국부 지방 감소 제약 조성물 또는 장비가 부분적으로 이러한 부작용을 낮출 수 있지만, 통상적으로 효과적이지 않고, 다른 부작용, 예컨대 주변 정상 세포의 괴사, 주변 조직의 염증 및 예리한 통증을 야기시킨다. 부가적으로, 그들의 투여 부위는 제한된다. 따라서, 부작용이 적고, 안전성 프로파일이 더 양호하며, 회복 기간이 더 짧은 효과적인 국부 지방 감소 제약 조성물에 대한 시장 수요가 상당하다.
고객과 의사에게 상당히 높은 수요가 있는 경우, 현재 기술의 한계를 뛰어 넘는 국부 지방 감소 제약 조성물을 개발하는 것이 긴급한 관심사이다.
선행 기술의 결함을 고려하면, 본 발명은 국부 지방을 감소시키기 위한 제약 조성물을 제공한다. 이러한 제약 조성물은 계면활성제로 만들어진 약물-함유 미셀, 및 상기 약물-함유 미셀 내에 캡슐화된 레스베라트롤을 포함한다. 국부 지방을 감소시키기 위한 제약 조성물은 투여 부위에서의 지방을 감소시킬 수 있고, 높은 안정성, 높은 지방 조직 생체 이용률, 적은 부작용, 및 지속적인 방출의 이점을 갖고 있다.
본 발명은 투여 부위에서의 지방세포의 아폽토시스를 증진시킴으로써, 그러한 투여 부위에서의 국부 지방 감소의 목표를 달성할 수 있다. 본 발명은 주변 세포의 괴사 및 염증 반응과 같은 부작용과 유해 반응을 포함한, 선행 기술의 문제점을 현저하게 개선시키고, 국부 지방 감소에 대한 본 발명의 효능은 국부 지방 감소를 위한 다른 비-수술적 제약 조성물에 비해 상당히 탁월하다. 본 발명은 수술에 대한 필요 또는 장비의 도움 없이, 직접 주사, 피하 이식, 이식형 주입, 또는 피부 흡수 방식, 예를 들어 크림 또는 패치 적용에 의해 피하 지방 감소를 필요로 하는 부위에 투여하는데 적합하다. 바람직하게는, 이는 투여 부위에서의 국부 피하 지방층에 피하 주사된다. 바람직하게는, 본 발명에서의 제약 조성물의 주사용 제형은 주사용 분말, 또는 주사용 용액을 위한 분말을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 본 발명에서의 "국부 지방"은 허리, 복부, 다리, 팔, 턱, 및 얼굴 등에서의 지방을 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
본 발명에서, 용어 "레스베라트롤"은 자연 식물로부터 추출된 레스베라트롤 또는 상업적으로 이용가능한 레스베라트롤을 지칭한다. 바람직하게는, 레스베라트롤의 순도는 90% 내지 100%이다.
본 발명에서, 용어 "녹차 추출물"은 임의의 추출 방법을 이용하여 임의의 용매에 의해 추출된 녹차 성분 혼합물, 상업적으로 이용가능한 녹차 추출물, 적어도 45% (wt%)의 에피갈로카테킨 갈레이트 (EGCG)를 수반하는 임의의 혼합물, 또는 상업적으로 이용가능한 에피갈로카테킨 갈레이트 (EGCG)를 지칭한다.
본 발명에서, 용어 "미셀"은 계면활성제에 의해 형성된 미세구조를 지칭하며, 여기서 각각의 계면활성제는 친수성 말단 및 소수성 (친유성) 말단을 가지며, 이들 계면활성제는 친수성 말단이 외측을 향하고 소수성 (친유성) 말단이 내측을 향하여 미세구조를 형성하는 방식으로 배열된다. 바람직하게는, 미세구조는 구형 구조, 회전 타원형 구조, 또는 다른 미세구조적 구조이다.
본 발명에서, 용어 "약물-함유 미셀"은 레스베라트롤을 함유하는 미셀을 지칭하며; 즉, 용어 "약물-함유 미셀"은 레스베라트롤을 캡슐화하거나 또는 이를 함유하는 미셀을 지칭한다.
본 발명에서, 용어 "제2 친유성 약물-함유 미셀"은 레스베라트롤을 제외한 임의의 친유성 약물을 함유하는 미셀을 지칭한다. 즉, 용어 "제2 친유성 약물-함유 미셀"은 다른 친유성 약물을 캡슐화하거나 또는 이를 함유하는 미셀을 지칭한다.
여기서 용어 "다른 친유성 약물"은 쿠르쿠민, 퀘르세틴, 푸에라린; 및 레스베라트롤을 제외한 다른 친유성 약물 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물을 지칭하거나; 또는, 용어 "다른 친유성 약물"은 레스베라트롤 이외의 친유성 약물을 지칭한다.
본 발명에서, 용어 "친수성 약물"은 녹차 추출물, 에피갈로카테킨 갈레이트, 에피카테킨, 에피카테킨 갈레이트, 에피갈로카테킨, 갈로카테킨 갈레이트, 갈로카테킨, 카테킨 갈레이트, 카테킨, 에피갈로카테킨 갈레이트 (EGCG), 카페인, 카르니틴, L-카르니틴, 시네프린, 클로로겐산, 및 다른 친수성 약물 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물을 지칭한다.
본 발명에서, 본원에 사용된 바와 같은 용어 "침전을 수반하지 않은 상태"는 육안으로 (즉, 인공 기기의 도움을 받지 않고서) 침전을 관찰할 수 없는 상태를 지칭한다.
본 발명은
제약상 허용되는 수용액 내에 고르게 분포되어 있는 약물-함유 미셀; 및
상기 약물-함유 미셀 내에 캡슐화된 레스베라트롤
을 포함하는, 국부 지방을 감소시키기 위한 제약 조성물을 제공한다.
바람직한 실시양태에서, 약물-함유 미셀은 제약상 허용되는 계면활성제에 의해 형성된 미세구조이고, 상기 계면활성제의 친수성-친유성 균형 값 (HLB 값)은 10 초과이다.
바람직한 실시양태에서, 약물-함유 미셀의 직경은 3 내지 250 nm이다.
바람직한 실시양태에서, 약물-함유 미셀의 직경은 5 내지 50 nm이다.
바람직한 실시양태에서, 제약 조성물은 제약상 허용되는 수용액을 추가로 포함하고, 약물-함유 미셀은 상기 제약상 허용되는 수용액 내에 고르게 분포되어 있다. 제약상 허용되는 수용액은 주사용수, 주사용 수용액, 또는 생리 식염수이다.
바람직한 실시양태에서, 계면활성제는 비-이온성 계면활성제이다.
바람직한 실시양태에서, 비-이온성 계면활성제는 폴리소르베이트 80 (트윈 80), 2-히드록시에틸 12-히드록시옥타데카노에이트 (솔루톨 HS 15), 폴리옥시에틸렌 피마자 오일 유도체, 및 다른 비-이온성 계면활성제 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직한 실시양태에서, 폴리옥시에틸렌 피마자 오일 유도체는 콜리포르 ELP (크레모포르 ELP로도 공지되어 있음), 크레모포르 RH 40, 및 다른 폴리옥시에틸렌 피마자 오일 유도체 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직한 실시양태에서, 레스베라트롤 대 계면활성제의 중량비는 1:4 내지 1:500이다.
바람직한 실시양태에서, 레스베라트롤 대 계면활성제의 중량비는 1:5 내지 1:200이다.
바람직한 실시양태에서, 레스베라트롤 대 계면활성제의 중량비는 1:8 내지 1:80이다.
바람직한 실시양태에서, 제약 조성물은 25℃ ± 2℃, 상대 습도 60% ± 5%, 및 직사 광선의 부재하에서 가속 안정성 시험을 수행할 때 적어도 24시간 동안 침전을 수반하지 않은 상태로 유지된다.
바람직한 실시양태에서, 제약 조성물은 25℃ ± 2℃, 상대 습도 60% ± 5%, 및 직사 광선의 부재하에서 가속 안정성 시험을 수행할 때 적어도 6개월 동안 침전을 수반하지 않은 상태로 유지된다.
바람직한 실시양태에서, 제약 조성물 중의 레스베라트롤의 농도는 0.2 내지 166.7 mg/mL이다.
바람직한 실시양태에서, 제약 조성물 중의 레스베라트롤의 농도는 2.5 내지 60 mg/mL이다.
바람직한 실시양태에서, 제약 조성물은 녹차 추출물을 추가로 포함하고, 이러한 녹차 추출물은 제약상 허용되는 수용액에 용해되며; 여기서 녹차 추출물은 제1 녹차 추출물 성분을 포함하며, 여기서 상기 제1 녹차 추출물 성분은 에피갈로카테킨 갈레이트 (EGCG)이다.
바람직한 실시양태에서, 제약 조성물 중의 에피갈로카테킨 갈레이트 (EGCG)의 농도는 0.25 내지 300 mg/mL이다.
바람직한 실시양태에서, 제약 조성물 중의 에피갈로카테킨 갈레이트 (EGCG)의 농도는 1 내지 200 mg/ mL이다.
바람직한 실시양태에서, 에피갈로카테킨 갈레이트 (EGCG)의 함량은 총 녹차 추출물 100 중량%를 기준으로 하여 45 내지 100 중량% (wt%)이다.
바람직한 실시양태에서, 레스베라트롤 대 녹차 추출물의 중량비는 30:1 내지 1:30이다.
바람직한 실시양태에서, 레스베라트롤 대 녹차 추출물의 중량비는 20:1 내지 1:20이다.
바람직한 실시양태에서, 레스베라트롤 대 녹차 추출물의 중량비는 10:1 내지 1:10이다.
바람직한 실시양태에서, 계면활성제의 양은 레스베라트롤과 녹차 추출물의 총량의 1 중량부를 기준으로 하여 0.24 내지 70 중량부이거나; 또는 레스베라트롤과 녹차 추출물의 총 중량 대 계면활성제의 중량비는 4:1 내지 1:70이다.
바람직한 실시양태에서, 제약 조성물은 제약상 허용되는 수용액 및 제2 친유성 약물-함유 미셀을 추가로 포함하며, 여기서 제2 친유성 약물-함유 미셀은 제약상 허용되는 수용액 내에 고르게 분포되어 있다.
바람직한 실시양태에서, 제2 친유성 약물-함유 미셀은 제2 계면활성제에 의해 형성된 또 다른 미세구조이고, 다른 친유성 약물 (또는 제2 친유성 약물)은 상기 제2 친유성 약물-함유 미셀 내에 캡슐화된다.
바람직한 실시양태에서, 제2 계면활성제의 친수성-친유성 균형 값 (HLB 값)은 10 초과이다.
바람직한 실시양태에서, 제2 계면활성제는 비-이온성 계면활성제이다.
바람직한 실시양태에서, 비-이온성 계면활성제는 폴리소르베이트 80 (트윈 80), 2-히드록시에틸 12-히드록시옥타데카노에이트 (솔루톨 HS 15), 폴리옥시에틸렌 피마자 오일 유도체, 및 다른 비-이온성 계면활성제 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직한 실시양태에서, 폴리옥시에틸렌 피마자 오일 유도체는 크레모포르 ELP, 크레모포르 RH 40, 및 다른 폴리옥시에틸렌 피마자 오일 유도체 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직한 실시양태에서, 친유성 약물은 퀘르세틴, 시네프린, 푸에라린, 쿠르쿠민; 및 레스베라트롤을 제외한 다른 친유성 약물 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직한 실시양태에서, 레스베라트롤 대 제2 친유성 약물의 중량비는 30:1 내지 1:20이다.
바람직한 실시양태에서, 레스베라트롤 대 제2 친유성 약물의 중량비는 20:1 내지 1:15이다.
바람직한 실시양태에서, 레스베라트롤 대 제2 친유성 약물의 중량비는 15:1 내지 1:10이다.
바람직한 실시양태에서, 제약 조성물은 제약상 허용되는 수용액 및 친수성 약물을 추가로 포함한다.
바람직한 실시양태에서, 친수성 약물은 녹차 추출물, 에피갈로카테킨 갈레이트, 에피카테킨, 에피카테킨 갈레이트, 에피갈로카테킨, 갈로카테킨 갈레이트, 갈로카테킨, 카테킨 갈레이트, 카테킨, 에피갈로카테킨 갈레이트 (EGCG), 카페인, 카르니틴, L-카르니틴, 시네프린, 클로로겐산, 및 다른 친수성 약물 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직한 실시양태에서, 레스베라트롤 대 친수성 약물의 중량비는 20:1 내지 1:30이다.
바람직한 실시양태에서, 레스베라트롤 대 친수성 약물의 중량비는 15:1 내지 1:20이다.
바람직한 실시양태에서, 레스베라트롤 대 친수성 약물의 중량비는 10:1 내지 1:15이다.
바람직한 실시양태에서, 친수성 약물은 갈로카테킨 갈레이트이고, 제약 조성물 중의 갈로카테킨 갈레이트의 농도는 0.25 내지 300 mg/mL이다.
바람직한 실시양태에서, 친수성 약물은 갈로카테킨 갈레이트이고, 제약 조성물 중의 갈로카테킨 갈레이트의 농도는 1 내지 200 mg/mL이다.
바람직한 실시양태에서, 친수성 약물은 녹차 추출물이고, 레스베라트롤 대 녹차 추출물의 중량비는 30:1 내지 1:30이다.
바람직한 실시양태에서, 친수성 약물은 녹차 추출물이고, 레스베라트롤 대 녹차 추출물의 중량비는 20:1 내지 1:20이다.
바람직한 실시양태에서, 친수성 약물은 녹차 추출물이고, 레스베라트롤 대 녹차 추출물의 중량비는 10:1 내지 1:10이다.
바람직한 실시양태에서, 제약 조성물은 약물의 용해도를 증강시키기 위한 공용매를 추가로 포함한다.
바람직한 실시양태에서, 공용매는 폴리에틸렌 글리콜, 프로필렌 글리콜, 에탄올, 및 다른 공용매 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직한 실시양태에서, 폴리에틸렌 글리콜은 PEG 200, PEG 400, PEG 600, 및 다른 폴리에틸렌 글리콜 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직한 실시양태에서, 제약 조성물은 약물 또는 미셀의 침강 속도를 감소시키기 위한 현탁제를 추가로 포함한다.
바람직한 실시양태에서, 현탁제는 소듐 알기네이트, 글리세롤, 카르복시메틸셀룰로스 소듐, 만니톨, 및 다른 현탁제 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직한 실시양태에서, 제약 조성물은 제약 조성물의 안정성과 약물의 용해도를 증강시키기 위한 오일 상 부형제를 추가로 포함한다.
바람직한 실시양태에서, 오일 상 부형제는 불포화 지방산, 글리세롤, 트리글리세리드, 및 다른 오일 상 부형제 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직한 실시양태에서, 불포화 지방산은 올레산, 피마자 오일, 참깨 오일, 목화씨 오일, 대두 오일, 홍화, 옥수수 오일, 및 다른 불포화 지방산 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직한 실시양태에서, 트리글리세리드는 중간 쇄 트리글리세리드, 및 다른 트리글리세리드 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직한 실시양태에서, 제약상 허용되는 수용액은 국부 마취제를 포함한다.
바람직한 실시양태에서, 국부 마취제는 아미드, 파라-아미노벤조산 에스테르, 및 아미노 에테르 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직한 실시양태에서, 아미드는 디부카인, 리도카인, 메피바카인 HCl, 부피바신 HCl, 피로카인 HCl, 프릴로카인 HCl, 디감마카인, 및 옥세타제인 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직한 실시양태에서, 파라-아미노벤조산 에스테르는 부타카인, 디메토카인, 및 투토카인 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직한 실시양태에서, 아미노 에테르는 퀴니소카인과 프라모카인 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직한 실시양태에서, 제약상 허용되는 수용액은 항산화제를 포함한다.
바람직한 실시양태에서, 항산화제는 베타-카로텐, 루테인, 리코펜, 빌리루빈, 비타민 A, 비타민 C (아스코르브산), 비타민 E, 요산, 산화질산, 니트록시드, 피루베이트, 카탈라제, 슈퍼옥시드 디스무타제, 글루타티온 페록시다제, N-아세틸 시스테인, 및 나린게닌 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
본 발명은
제약상 허용되는 수용액,
제약상 허용되는 수용액 내에 고르게 분포되어 있는 약물-함유 미셀, 및
상기 약물-함유 미셀 내에 캡슐화된 레스베라트롤
을 포함하는, 국부 피하 지방의 양을 감소시키기 위한 피하 지방층 주사용 제형 또는 피하 주사용 제형이며,
여기서 상기 약물-함유 미셀은 제약상 허용되는 계면활성제에 의해 형성된 미세구조이고, 제약상 허용되는 계면활성제의 친수성-친유성 균형 값 (HLB 값)은 10 초과인 제형을 추가로 제공한다.
바람직한 실시양태에서, 상기 국부 피하 지방의 양은 투여 부위에서의 피하 지방의 양이다.
바람직한 실시양태에서, 약물-함유 미셀의 직경은 3 내지 250 nm이다.
바람직한 실시양태에서, 약물-함유 미셀의 직경은 5 내지 50 nm이다.
바람직한 실시양태에서, 제약상 허용되는 수용액은 주사용수, 주사용 수용액, 또는 생리 식염수이다.
바람직한 실시양태에서, 계면활성제는 비-이온성 계면활성제이다.
바람직한 실시양태에서, 비-이온성 계면활성제는 폴리소르베이트 80 (트윈 80), 2-히드록시에틸 12-히드록시옥타데카노에이트 (솔루톨 HS 15), 폴리옥시에틸렌 피마자 오일 유도체, 및 다른 비-이온성 계면활성제 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직한 실시양태에서, 폴리옥시에틸렌 피마자 오일 유도체는 크레모포르 ELP, 크레모포르 RH 40, 및 다른 폴리옥시에틸렌 피마자 오일 유도체 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직한 실시양태에서, 레스베라트롤 대 계면활성제의 중량비는 1:4 내지 1:500이다.
바람직한 실시양태에서, 레스베라트롤 대 계면활성제의 중량비는 1:5 내지 1:200이다.
바람직한 실시양태에서, 레스베라트롤 대 계면활성제의 중량비는 1:8 내지 1:80이다.
바람직한 실시양태에서, 피하 지방층 주사용 제형 또는 피하 주사용 제형 중의 레스베라트롤의 농도는 0.2 내지 166.7 mg/mL이다.
바람직한 실시양태에서, 피하 지방층 주사용 제형 또는 피하 주사용 제형 중의 레스베라트롤의 농도는 2.5 내지 60 mg/mL이다.
바람직한 실시양태에서, 피하 지방층 주사용 제형 또는 피하 주사용 제형은 녹차 추출물을 추가로 포함하고, 이러한 녹차 추출물은 제약상 허용되는 수용액에 용해되며; 여기서 녹차 추출물은 제1 녹차 추출물 성분을 포함하며, 여기서 제1 녹차 추출물 성분은 에피갈로카테킨 갈레이트 (EGCG)이다.
바람직한 실시양태에서, 피하 지방층 주사용 제형 또는 피하 주사용 제형 중의 에피갈로카테킨 갈레이트 (EGCG)의 농도는 0.25 내지 300 mg/mL이다.
바람직한 실시양태에서, 피하 지방층 주사용 제형 또는 피하 주사용 제형 중의 에피갈로카테킨 갈레이트 (EGCG)의 농도는 1 내지 200 mg/mL이다.
바람직한 실시양태에서, 에피갈로카테킨 갈레이트 (EGCG)의 함량은 총 녹차 추출물 100 중량%를 기준으로 하여 45 내지 100 중량% (wt%)이다.
바람직한 실시양태에서, 레스베라트롤 대 녹차 추출물의 중량비는 30:1 내지 1:30이다.
바람직한 실시양태에서, 레스베라트롤 대 녹차 추출물의 중량비는 20:1 내지 1:20이다.
바람직한 실시양태에서, 레스베라트롤 대 녹차 추출물의 중량비는 10:1 내지 1:10이다.
바람직한 실시양태에서, 계면활성제의 양은 레스베라트롤과 녹차 추출물의 총량의 1 중량부를 기준으로 하여 0.24 내지 70 중량부이거나; 또는 레스베라트롤과 녹차 추출물의 총 중량 대 계면활성제의 중량비는 4:1 내지 1:70이다.
바람직한 실시양태에서, 투여 부위에 주사될 투여되는 투여량은 0.2 내지 20 mg/cm2이다.
바람직한 실시양태에서, 투여 부위에 주사될 투여되는 투여량은 0.4 내지 12 mg/cm2이다.
바람직한 실시양태에서, 투여 부위에 투여되는 투여량은 0.2 내지 40 mg/kg이다.
바람직한 실시양태에서, 투여 부위에 투여되는 투여량은 0.4 내지 20 mg/kg이다.
바람직한 실시양태에서, 투여 빈도는 격일마다 내지 30일마다 1 내지 12회이다.
바람직한 실시양태에서, 투여 빈도는 격일마다 내지 21일마다 1 내지 8회이다.
바람직한 실시양태에서, 피하 지방층 주사용 제형 또는 피하 주사용 제형은 제2 친유성 약물-함유 미셀을 추가로 포함하고, 제2 친유성 약물-함유 미셀은 제약상 허용되는 수용액 내에 고르게 분포되어 있다.
바람직한 실시양태에서, 제2 친유성 약물-함유 미셀은 또 다른 계면활성제에 의해 형성된 미세구조이고, 다른 친유성 약물은 상기 제2 친유성 약물-함유 미셀 내에 캡슐화된다.
바람직한 실시양태에서, 다른 계면활성제의 친수성-친유성 균형 값 (HLB 값)은 10 초과이다.
바람직한 실시양태에서, 다른 계면활성제는 비-이온성 계면활성제이다.
바람직한 실시양태에서, 비-이온성 계면활성제는 폴리소르베이트 80 (트윈 80), 2-히드록시에틸 12-히드록시옥타데카노에이트 (솔루톨 HS 15), 폴리옥시에틸렌 피마자 오일 유도체, 및 다른 비-이온성 계면활성제 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직한 실시양태에서, 폴리옥시에틸렌 피마자 오일 유도체는 크레모포르 ELP, 크레모포르 RH 40, 및 다른 폴리옥시에틸렌 피마자 오일 유도체 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직하게는, 친유성 약물은 쿠르쿠민, 퀘르세틴, 푸에라린; 및 레스베라트롤을 제외한 다른 친유성 약물 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직한 실시양태에서, 제약상 허용되는 수용액은 친수성 약물을 추가로 포함한다.
바람직한 실시양태에서, 친수성 약물은 녹차 추출물, 에피갈로카테킨 갈레이트, 에피카테킨, 에피카테킨 갈레이트, 에피갈로카테킨, 갈로카테킨 갈레이트, 갈로카테킨, 카테킨 갈레이트, 카테킨, 에피갈로카테킨 갈레이트 (EGCG), 카페인, 카르니틴, L-카르니틴, 시네프린, 클로로겐산, 및 다른 친수성 약물 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직한 실시양태에서, 제약상 허용되는 수용액은 국부 마취제를 포함한다.
바람직한 실시양태에서, 국부 마취제는 아미드, 파라-아미노벤조산 에스테르, 아미노 에테르 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직한 실시양태에서, 아미드는 디부카인, 리도카인, 메피바카인 HCl, 부피바신 HCl, 피로카인 HCl, 프릴로카인 HCl, 디감마카인, 및 옥세타제인 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직한 실시양태에서, 파라-아미노벤조산 에스테르는 부타카인, 디메토카인, 및 투토카인 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직한 실시양태에서, 아미노 에테르는 퀴니소카인과 프라모카인 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직한 실시양태에서, 제약상 허용되는 수용액은 항산화제를 포함한다.
바람직한 실시양태에서, 항산화제는 베타-카로텐, 루테인, 리코펜, 빌리루빈, 비타민 A, 비타민 C (아스코르브산), 비타민 E, 요산, 산화질산, 니트록시드, 피루베이트, 카탈라제, 슈퍼옥시드 디스무타제, 글루타티온 페록시다제, N-아세틸 시스테인, 및 나린게닌 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
본 발명은 대상체의 국부 부위에 제약 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 이러한 대상체의 국부 피하 지방의 양을 감소시키는 방법을 제공하며, 여기서 제약 조성물은
약물-함유 미셀; 및
상기 약물-함유 미셀 내에 캡슐화된 레스베라트롤
을 포함하며, 여기서 약물-함유 미셀은 제약상 허용되는 계면활성제에 의해 형성된 미세구조이고, 계면활성제의 친수성-친유성 균형 값 (HLB 값)은 10 초과이다.
바람직한 실시양태에서, 약물-함유 미셀의 직경은 3 내지 250 nm이다.
바람직한 실시양태에서, 약물-함유 미셀의 직경은 5 내지 50 nm이다.
바람직한 실시양태에서, 계면활성제는 비-이온성 계면활성제이다.
바람직한 실시양태에서, 비-이온성 계면활성제는 폴리소르베이트 80 (트윈 80), 2-히드록시에틸 12-히드록시옥타데카노에이트 (솔루톨 HS 15), 폴리옥시에틸렌 피마자 오일 유도체, 및 다른 비-이온성 계면활성제 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직한 실시양태에서, 폴리옥시에틸렌 피마자 오일 유도체는 크레모포르 ELP, 크레모포르 RH 40, 및 다른 폴리옥시에틸렌 피마자 오일 유도체 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직한 실시양태에서, 레스베라트롤 대 계면활성제의 중량비는 1:4 내지 1:500이다.
바람직한 실시양태에서, 레스베라트롤 대 계면활성제의 중량비는 1:5 내지 1:200이다.
바람직한 실시양태에서, 레스베라트롤 대 계면활성제의 중량비는 1:8 내지 1:80이다.
바람직한 실시양태에서, 제약 조성물 중의 레스베라트롤의 농도는 0.2 내지 166.7 mg/mL이다.
바람직한 실시양태에서, 제약 조성물 중의 레스베라트롤의 농도는 2.5 내지 60 mg/mL이다.
바람직한 실시양태에서, 제약 조성물은 제약상 허용되는 수용액 및 제2 친유성 약물-함유 미셀을 추가로 포함하며, 여기서 제2 친유성 약물-함유 미셀은 제약상 허용되는 수용액 내에 고르게 분포되어 있고; 제2 친유성 약물-함유 미셀은 제2 비-이온성 계면활성제에 의해 형성된 또 다른 미세구조이고, 제2 친유성 약물은 상기 제2 친유성 약물-함유 미셀 내에 캡슐화된다.
바람직한 실시양태에서, 제2 비-이온성 계면활성제의 친수성-친유성 균형 값 (HLB 값)은 10 초과이다.
바람직한 실시양태에서, 제2 비-이온성 계면활성제는 폴리소르베이트 80 (트윈 80), 2-히드록시에틸 12-히드록시옥타데카노에이트 (솔루톨 HS 15), 폴리옥시에틸렌 피마자 오일 유도체, 및 다른 비-이온성 계면활성제 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직한 실시양태에서, 제2 비-이온성 계면활성제는 크레모포르 ELP, 크레모포르 RH 40, 및 다른 폴리옥시에틸렌 피마자 오일 유도체 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직한 실시양태에서, 제2 친유성 약물은 퀘르세틴, 시네프린, 푸에라린, 쿠르쿠미노이드, 쿠르쿠민; 및 레스베라트롤을 제외한 다른 친유성 약물 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직한 실시양태에서, 레스베라트롤 대 제2 친유성 약물의 중량비는 30:1 내지 1:20이다.
바람직한 실시양태에서, 레스베라트롤 대 제2 친유성 약물의 중량비는 20:1 내지 1:15이다.
바람직한 실시양태에서, 레스베라트롤 대 제2 친유성 약물의 중량비는 15:1 내지 1:10이다.
바람직한 실시양태에서, 제약 조성물은 제약상 허용되는 수용액 및 친수성 약물을 추가로 포함한다.
바람직한 실시양태에서, 친수성 약물은 녹차 추출물, 에피갈로카테킨 갈레이트, 에피카테킨, 에피카테킨 갈레이트, 에피갈로카테킨, 갈로카테킨 갈레이트, 갈로카테킨, 카테킨 갈레이트, 카테킨, 에피갈로카테킨 갈레이트 (EGCG), 카페인, 카르니틴, L-카르니틴, 시네프린, 클로로겐산, 및 다른 친수성 약물 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직한 실시양태에서, 레스베라트롤 대 친수성 약물의 중량비는 20:1 내지 1:30이다.
바람직한 실시양태에서, 레스베라트롤 대 친수성 약물의 중량비는 15:1 내지 1:20이다.
바람직한 실시양태에서, 레스베라트롤 대 친수성 약물의 중량비는 10:1 내지 1:15이다.
바람직한 실시양태에서, 친수성 약물은 갈로카테킨 갈레이트이고, 제약 조성물 중의 갈로카테킨 갈레이트의 농도는 0.25 내지 300 mg/mL이다.
바람직한 실시양태에서, 친수성 약물은 갈로카테킨 갈레이트이고, 제약 조성물 중의 갈로카테킨 갈레이트의 농도는 1 내지 200 mg/mL이다.
바람직한 실시양태에서, 친수성 약물은 녹차 추출물이고, 레스베라트롤 대 녹차 추출물의 중량비는 30:1 내지 1:30이다.
바람직한 실시양태에서, 친수성 약물은 녹차 추출물이고, 레스베라트롤 대 녹차 추출물의 중량비는 20:1 내지 1:20이다.
바람직한 실시양태에서, 친수성 약물은 녹차 추출물이고, 레스베라트롤 대 녹차 추출물의 중량비는 10:1 내지 1:10이다.
바람직한 실시양태에서, 계면활성제의 양은 레스베라트롤과 녹차 추출물의 총량의 1 중량부를 기준으로 하여 0.24 내지 70 중량부이거나; 또는 레스베라트롤과 녹차 추출물의 총 중량 대 계면활성제의 중량비는 4:1 내지 1:70이다.
바람직한 실시양태에서, 국부 부위에 주사될 제약 조성물의 투여되는 투여량은 0.2 내지 20 mg/cm2이다.
바람직한 실시양태에서, 국부 부위에 주사될 제약 조성물의 투여되는 투여량은 0.4 내지 12 mg/cm2이다.
바람직한 실시양태에서, 국부 부위에 투여될 제약 조성물의 투여되는 투여량은 0.2 내지 40 mg/kg이다.
바람직한 실시양태에서, 국부 부위에 투여될 제약 조성물의 투여되는 투여량은 0.4 내지 20 mg/kg이다.
바람직한 실시양태에서, 제약 조성물의 투여 빈도는 격일마다 내지 30일마다 1 내지 12회이다.
바람직한 실시양태에서, 제약 조성물의 투여 빈도는 격일마다 내지 21일마다 1 내지 8회이다.
바람직한 실시양태에서, 대상체는 동물 또는 인간이다.
바람직한 실시양태에서, 상기 단계는 대상체의 국부 부위에 제약 조성물을 주사 또는 적용하는 것이다.
바람직한 실시양태에서, 제약 조성물은 공용매, 현탁제, 및 오일 상 부형제 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물을 추가로 포함한다.
바람직한 실시양태에서, 미세구조는 비-이온성 계면활성제; 및 오일 상 부형제 및/또는 공용매에 의해 공동-형성된다.
본 발명은 대상체의 국부 피하 지방의 양을 감소시키기 위한 약물 또는 피하 주사 제형을 제조하는데 있어서의 제약 조성물의 용도를 제공하며; 이러한 제약 조성물은
약물-함유 미셀; 및
상기 약물-함유 미셀 내에 캡슐화된 레스베라트롤
을 포함하며, 여기서 약물-함유 미셀은 제약상 허용되는 비-이온성 계면활성제에 의해 형성된 미세구조이고, 비-이온성 계면활성제의 친수성-친유성 균형 값 (HLB 값)은 10 초과이다.
바람직한 실시양태에서, 약물-함유 미셀의 직경은 3 내지 250 nm이다.
바람직한 실시양태에서, 약물-함유 미셀의 직경은 5 내지 50 nm이다.
바람직한 실시양태에서, 비-이온성 계면활성제는 폴리소르베이트 80 (트윈 80), 2-히드록시에틸 12-히드록시옥타데카노에이트 (솔루톨 HS 15), 폴리옥시에틸렌 피마자 오일 유도체, 및 다른 비-이온성 계면활성제 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직한 실시양태에서, 폴리옥시에틸렌 피마자 오일 유도체는 크레모포르 ELP, 크레모포르 RH 40, 및 다른 폴리옥시에틸렌 피마자 오일 유도체 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직한 실시양태에서, 레스베라트롤 대 비-이온성 계면활성제의 중량비는 1:4 내지 1:500이다.
바람직한 실시양태에서, 제약 조성물 중의 레스베라트롤의 농도는 0.2 내지 166.7 mg/mL이다.
바람직한 실시양태에서, 제약 조성물은 제약상 허용되는 수용액 및 제2 친유성 약물-함유 미셀을 추가로 포함하며, 여기서 상기 제2 친유성 약물-함유 미셀은 제약상 허용되는 수용액 내에 고르게 분포되어 있고; 제2 친유성 약물-함유 미셀은 제2 비-이온성 계면활성제에 의해 형성된 또 다른 미세구조이고, 제2 친유성 약물은 상기 제2 친유성 약물-함유 미셀 내에 캡슐화된다.
바람직한 실시양태에서, 제2 비-이온성 계면활성제의 친수성-친유성 균형 값 (HLB 값)은 10 초과이다.
바람직한 실시양태에서, 제2 비-이온성 계면활성제는 폴리소르베이트 80 (트윈 80), 2-히드록시에틸 12-히드록시옥타데카노에이트 (솔루톨 HS 15), 폴리옥시에틸렌 피마자 오일 유도체, 및 다른 비-이온성 계면활성제 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직한 실시양태에서, 제2 비-이온성 계면활성제는 크레모포르 ELP, 크레모포르 RH 40, 및 다른 폴리옥시에틸렌 피마자 오일 유도체 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직한 실시양태에서, 제2 친유성 약물은 퀘르세틴, 시네프린, 푸에라린, 쿠르쿠미노이드; 및 레스베라트롤을 제외한 다른 친유성 약물 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직한 실시양태에서, 레스베라트롤 대 제2 친유성 약물의 중량비는 30:1 내지 1:20이다.
바람직한 실시양태에서, 제약 조성물은 제약상 허용되는 수용액 및 친수성 약물을 추가로 포함한다.
바람직한 실시양태에서, 친수성 약물은 녹차 추출물, 에피갈로카테킨 갈레이트, 에피카테킨, 에피카테킨 갈레이트, 에피갈로카테킨, 갈로카테킨 갈레이트, 갈로카테킨, 카테킨 갈레이트, 카테킨, 에피갈로카테킨 갈레이트 (EGCG), 카페인, 카르니틴, L-카르니틴, 시네프린, 클로로겐산, 및 다른 친수성 약물 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직한 실시양태에서, 레스베라트롤 대 친수성 약물의 중량비는 20:1 내지 1:30이다.
바람직한 실시양태에서, 친수성 약물은 갈로카테킨 갈레이트이고, 피하 지방층 주사용 제형 또는 피하 주사용 제형을 위한 제약 조성물 중의 갈로카테킨 갈레이트의 농도는 0.25 내지 300 mg/mL이다.
바람직한 실시양태에서, 친수성 약물은 녹차 추출물이고, 레스베라트롤 대 녹차 추출물의 중량비는 30:1 내지 1:30이다.
바람직한 실시양태에서, 계면활성제의 양은 레스베라트롤과 녹차 추출물의 총량의 1 중량부를 기준으로 하여 0.24 내지 70 중량부이거나; 또는 레스베라트롤과 녹차 추출물의 총 중량 대 계면활성제의 중량비는 4:1 내지 1:70이다.
바람직한 실시양태에서, 약물 또는 피하 주사 제형은 치료 유효량의 제약 조성물을 포함한다.
바람직한 실시양태에서, 치료 유효량은 국부 부위 1 cm2 당 제약 조성물 0.2 내지 20 mg을 투여하는 것이다.
바람직한 실시양태에서, 치료 유효량은 체중 kg 당 제약 조성물 0.2 내지 40 mg을 투여하는 것이다.
바람직한 실시양태에서, 약물 또는 피하 주사 제형의 투여 빈도는 격일마다 내지 30일마다 1 내지 12회이다.
바람직한 실시양태에서, 대상체는 동물 또는 인간이다.
바람직한 실시양태에서, 상기 단계는 약물 또는 피하 주사 제형을 대상체의 국부 부위에 주사하거나; 또는 약물을 대상체의 국부 부위에 적용하는 것이다.
바람직한 실시양태에서, 제약 조성물은 공용매, 현탁제, 및 오일 상 부형제 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물을 추가로 포함한다.
바람직한 실시양태에서, 미세구조는 비-이온성 계면활성제; 및 오일 상 부형제 및/또는 공용매에 의해 공동-형성된다.
도 1a: 래트의 피하 지방의 양에 대한 피하 주사용 비-미셀 레스베라트롤 용액 및 피하 주사용 비-미셀 녹차 추출물 용액의 효과를 보여주는 막대 그래프.
도 1b: 래트의 상대적 중량 증가에 대한 피하 주사용 비-미셀 레스베라트롤 용액 및 피하 주사용 비-미셀 녹차 추출물 용액의 효과를 보여주는 막대 그래프.
도 2a: 래트의 국부 피하 지방의 양에 대한, 상이한 부형제를 이용하여 제조된 레스베라트롤 피하 주사 제형의 효과를 보여주는 막대 그래프.
도 2b: 래트의 상대적 중량 증가에 대한, 상이한 부형제를 이용하여 제조된 레스베라트롤 피하 주사 제형의 효과를 보여주는 막대 그래프.
도 3: 래트의 피하 지방의 양에 대한 레스베라트롤 제약 조성물의 효과를 보여주는 막대 그래프.
도 4a: 래트의 피하 지방의 양에 대한 레스베라트롤 복합체 제약 조성물의 효과를 보여주는 막대 그래프.
도 4b: 래트의 상대적 중량 증가에 대한 레스베라트롤 복합체 제약 조성물의 효과를 보여주는 막대 그래프.
도 5: 성숙한 지방세포의 아폽토시스에 대한 레스베라트롤-다른 친유성 약물 복합체 제약 조성물의 효과.
도 6: 성숙한 지방세포의 아폽토시스에 대한 레스베라트롤-다른 친수성 약물 복합체 제약 조성물의 효과.
레스베라트롤은 적포도, 호장근 또는 적포도주의 껍질에서 흔히 발견되는 폴리페놀이다. 레스베라트롤은 수용액에서의 용해도가 낮고, 신체 내에서 글루쿠로니드 대사 산물과 황산염 대사 산물로 신속하게 대사되기 쉽고, 소변과 대변을 통해 신속하게 배출되며, 생체 이용률이 극히 불량하기 때문에, 레스베라트롤-기반 제약 조성물을 개발하는 것은 어느 정도의 어려움에 직면해 있다. 본 발명자는 또한, 이러한 제약 조성물을 개발하는 초기 단계에서 상기 장애물에 직면하였다.
실험 1: 래트의 피하 지방 및 체중에 대한 레스베라트롤 피하 주사 및 녹차 추출물 피하 주사의 효과
피하 주사용 녹차 추출물 용액의 제조: 주사용수 및 녹차 추출물을 이용하여 5 mg/mL 녹차 추출물 수용액을 제조하였다. 이러한 녹차 추출물 수용액을 0.2 μm 필터 내로 여과시켜, 본 실험에서 피하 주사용 5 mg/mL 녹차 추출물 용액을 수득하였다. 피하 주사용 녹차 추출물 용액은 4℃ 하의 암실에서 저장해야 한다.
피하 주사용 레스베라트롤 용액의 제조: 주사용 비-친수성 약물 제형에 대하여 선행 기술에서 흔히 사용되고 있는 부형제인 폴리소르베이트 80 (트윈 80); 에탄올, 주사용수, 및 레스베라트롤을 이용하여 5 mg/mL 레스베라트롤 용액을 제조하였다. 상세한 제조 방법은 하기와 같다: 0.5 g의 레스베라트롤을 적절한 양의 에탄올과 혼합하였다. 레스베라트롤을 완전히 용해시킨 후, 0.1 g의 폴리소르베이트 80 (트윈 80)을 부가하여 폴리소르베이트 80 (트윈 80)을 완전히 용해시켰고; 이 용액을 2 내지 4시간 동안 진공 건조시켜 에탄올을 휘발시켰으며; 일단 에탄올이 완전히 휘발되면, 주사용수를 부가함으로써 총 용적이 100 mL가 되도록 조정하였고; 상기 용액을 잘 교반시키며 0.2 μm 필터 내로 여과시켜, 본 실험에서 피하 주사용 5 mg/mL 레스베라트롤 용액을 수득하였다. 피하 주사용 레스베라트롤 용액은 4℃ 하의 암실에서 저장해야 한다.
7주령의 수컷 스프라그 돌리 래트를 본 실험에 사용하였다. 먼저, 18마리의 래트에게 고지방식 (상표명 리서치 다이어츠, 인크.(Research Diets, Inc.); 카탈로그 번호 D12492)을 공급하여 각각의 래트의 체중이 330±10 g으로 될 때까지 피하 지방의 축적을 유도시켰다. 래트를 3개 군, 즉 고지방식 대조군, 레스베라트롤 군, 및 녹차 추출물 군으로 나누어 각각의 군에 6마리씩 무작위로 배정하였으며, 이들 군 간에는 체중 상의 통계적 차이가 없었다. 각각의 래트의 체중을 기록하고, 이를 "실험 전 체중"으로서 정의하였다. 이어서, 약물을 하기와 같이 투여하였다:
피하 주사용 5 mg/mL 레스베라트롤 용액을 레스베라트롤 군 내의 래트의 하부 서혜 피하 지방층에 주사하였다. 각각의 주사된 투여량은 체중 킬로그램당 8 mg의 레스베라트롤 (8 mg/kg)이었으며; 즉, 피하 주사용의 전술된 5 mg/mL 레스베라트롤 용액 1.6 mL를 체중 킬로그램당 주사하였다. 피하 주사용 5 mg/mL 녹차 추출물 용액을 녹차 추출물 군 내의 래트의 하부 서혜 피하 지방층에 주사하였다. 각각의 주사된 투여량은 체중 킬로그램당 8 mg의 녹차 추출물 (8 mg/kg)이었으며; 즉, 피하 주사용의 전술된 5 mg/mL 녹차 추출물 용액 1.6 mL를 체중 킬로그램당 주사하였다. 고지방식 대조군 내의 래트에게 상기 기재된 바와 동일한 방식으로 동일한 용적의 주사용수를 주사하였다.
전술된 주사 부위는 래트의 하부 서혜 지방 패드였다. 양측 주사를 실험 제1일, 제3일, 및 제5일에 1일 1회 주사 부위에 고르게 수행하였다. 본 실험의 전체 기간 동안 래트에게 고지방식을 공급하였다. 그들의 체중 변화를 매일 기록하였고, 물과 음식 소모를 매주 기록하였다. 래트를 제20일에 금식시켰고 제21일에 CO2에 의해 안락사시켰다.
각각의 래트의 체중을 기록하고, 이를 "실험 후 체중"으로서 정의하였다. 각각의 래트의 "총 체중 증가"는 그의 "실험 후 체중"으로부터 "실험 전 체중"을 공제함으로써 수득하였다. "상대적 중량 증가"는 각각의 군의 총 체중 증가를 고지방식 대조군의 총 체중 증가로 나눔으로써 수득하였다.
래트의 양측 서혜 지방 패드를 해부하고 칭량하며, 각각의 군의 하부 서혜 지방의 양을 계산하였다. 그 데이터는 평균 ± SD로서 제시되었고, 일방향 ANOVA에 의해 분석되었다. 통계적 분석 결과는 부호 또는 문자로서 제시되었다. 상이한 부호 또는 문자는 통계적 차이를 표시하고 (p<0.05), 동일한 부호 또는 문자는 통계적 차이가 없음을 표시한다 (p>0.05).
도 1a 및 1b를 참조할 수 있다. 도 1a는 래트의 하부 서혜 피하 지방의 상대적 중량에 대한 피하 주사용 비-미셀 레스베라트롤 용액 및 피하 주사용 비-미셀 녹차 추출물 용액의 효과를 보여주는 막대 그래프이다. 도 1b는 래트의 상대적 중량 증가에 대한 피하 주사용 비-미셀 레스베라트롤 용액 및 피하 주사용 비-미셀 녹차 추출물 용액의 효과를 보여주는 막대 그래프이다. 여기서 하부 서혜 지방의 상기 양은 양측 하부 서혜 지방의 총량이다.
도 1a에서의 결과는 약물을 전달하기 위해 3회 피하 주사한 후, 고지방식 대조군과 비교해서, 레스베라트롤 군 또는 녹차 추출물 군 내의 래트의 주사 부위에서의 국부 지방 상의 유의적 감소가 없었다는 것을 보여주었다 (p>0.05). 이는 용해된 레스베라트롤 또는 녹차 추출물을 피하 지방층에 직접 주사하는 것이 주사 부위에서의 국부 지방을 감소시킬 수 없다는 것을 표시한다.
도 1b에서의 결과는, 약물을 전달하기 위해 3회 피하 주사한 후, 고지방식 대조군과 비교해서, 레스베라트롤 군 또는 녹차 추출물 군 내의 래트의 체중 상의 유의적 감소가 없었다는 것을 보여주었다 (p>0.05). 이는 용해된 레스베라트롤 또는 녹차 추출물을 피하 지방층에 직접 주사하는 것이 체중을 감소시킬 수 없다는 것을 표시한다.
여기서 녹차 추출물은 물에 매우 높은 용해도를 갖는 성분이며, 이전 연구들은 녹차 추출물이 세포 기반 실험에서 지방세포 아폽토시스를 증진시킨다는 것을 보여주었다. 그러나, 용해된 녹차 추출물을 피하 지방층에 직접 주사하는 것이 놀랍게도, 국부 피하 지방을 감소시킬 수 없을 뿐만 아니라 체중도 감소시킬 수 없다. 이러한 실험 결과, 용해된 레스베라트롤 또는 녹차 추출물을 피하 지방층에 직접 주사하는 것이 국부 지방 및 체중을 감소시킬 수 없는 것으로 입증되었다. 이러한 문제를 극복하기 위하여, 본 발명자는 본 발명에서 레스베라트롤-함유 제약 조성물을 개발하기 위한 추가의 연구를 수행하였다.
실험 2: 래트의 피하 지방 및 체중에 대한 상이한 종류의 레스베라트롤 피하 주사 제형의 효과
레스베라트롤 생리 식염수 용액, 레스베라트롤 PEG 용액, 및 레스베라트롤 ELP 용액을 하기와 같이 제조하였다:
레스베라트롤 생리 식염수 용액의 제조:
500 mg의 레스베라트롤을 적절한 양의 주사용 생리 식염수와 혼합하여 총 용적이 100 mL가 되도록 하였다. 이 용액을 잘 교반시켜 레스베라트롤을 완전히 용해시켜 레스베라트롤 생리 식염수 용액을 수득하였다. 상기 레스베라트롤 생리 식염수 용액 중의 레스베라트롤의 농도는 5 mg/mL였다.
레스베라트롤 PEG 용액의 제조:
15 g의 폴리에틸렌 글리콜 400 (PEG 400으로서 약칭됨) 및 15 g의 글리세롤을 적절한 양의 주사용 생리 식염수와 혼합하여 총 용적이 100 mL가 되도록 하였다. 이 용액을 잘 교반시켜 PEG 400 및 글리세롤을 완전히 용해시켜 PEG-글리세롤 혼합물을 수득하였다. 450 mg의 레스베라트롤을 적절한 양의 PEG-글리세롤 혼합물과 혼합하여 총 용적이 90 mL가 되도록 하였다. 이 용액을 잘 교반시켜 레스베라트롤을 완전히 용해시켜 레스베라트롤 PEG 용액을 수득하였다. 상기 레스베라트롤 PEG 용액 중의 레스베라트롤의 농도는 5 mg/mL였다.
레스베라트롤 ELP 용액의 제조:
500 mg의 레스베라트롤을 100 내지 160 mL의 디클로로메탄과 혼합하고, 레스베라트롤이 완전히 용해될 때까지 실온에서 150 내지 500 rpm 하에 교반시켰다. 20 g의 콜리포르 ELP (크레모포르 ELP로도 공지되어 있음; ELP로서 약칭됨)를 상기 용액에 부가하고, 100 내지 300 rpm 하에 잘 교반시켜 디클로로메탄을 휘발시켰다. 일단 디클로로메탄이 완전히 휘발되면, 주사용 생리 식염수를 서서히 부가하여 총 용적이 100 mL가 되도록 하고, 이 용액을 잘 교반시켜 레스베라트롤 ELP 용액을 수득하였다. 상기 레스베라트롤 ELP 용액에서, 레스베라트롤의 농도는 5 mg/mL였고, ELP의 농도는 대략 20% (wt%)였으며, 레스베라트롤 대 ELP의 중량비는 1:40이었다.
6주령의 수컷 스프라그 돌리 래트를 본 실험에 사용하였다. 먼저, 20마리의 래트에게 고지방식 (리서치 다이어츠, 인크.; Cat #D12492)을 공급하여 피하 지방의 축적을 유도시켰다. 각각의 래트의 체중이 330±10 g으로 될 때까지 공급을 지속하였고, 래트를 4개 군, 즉 대조군, 생리 식염수 군, PEG 군, 및 ELP 군으로 나누어 각각의 군에 5마리씩 무작위로 배정하였으며, 이들 군 간에는 체중 상의 통계적 차이가 없었다. 각각의 래트의 체중을 기록하고, 이를 "실험 전 체중"으로서 정의하였다. 이어서, 약물을 하기와 같이 투여하였다:
레스베라트롤 생리 식염수, 레스베라트롤 PEG 용액, 및 레스베라트롤 ELP 용액을 생리 식염수 군, PEG 군, 및 ELP 군 각각 내의 래트의 하부 서혜 피하 지방 패드에 주사하였다. 각각의 주사된 투여량은 체중 킬로그램당 4 mL (4 mL/kg)이므로, 각각의 주사된 투여량은 체중 킬로그램당 20 mg의 레스베라트롤 (20 mg/kg; 4 mL/kg x 5 mg/mL = 20 mg/kg)이었다. 대조군 내의 래트에게는 상기 기재된 바와 동일한 방식으로 동일한 용적의 생리 식염수를 주사하였다.
상기 언급된 주사 부위는 래트의 하부 서혜 지방 패드였다. 양측 주사를 실험 제1일, 제2일, 제3일, 및 제4일에 1일 1회 고르게 투여하였다. 본 실험의 전체 기간 동안 래트에게 고지방식을 공급하였다. 그들의 체중 변화를 매일 기록하였고, 음식과 물 소모를 매주 기록하였다. 실험은 14일 동안 지속되었고, 제15일에 CO2에 의해 래트를 안락사시켰다.
각각의 래트의 체중을 기록하고, 이를 "실험 후 체중"으로서 정의하였다. 각각의 래트의 "총 체중 증가"는 그의 "실험 후 체중"으로부터 "실험 전 체중"을 공제함으로써 수득하였다. "상대적 중량 증가"는 각각의 군의 총 체중 증가를 대조군의 총 체중 증가로 나눔으로써 수득하였다.
래트의 양측 하부 서혜 피하 지방 패드를 해부하고 칭량하며, 양측 하부 서혜 피하 지방 패드의 중량을 합하여 하부 서혜 피하 지방의 양을 계산하였다. 각각의 군의 하부 서혜 피하 지방의 양을 대조군의 하부 서혜 피하 지방의 양으로 나누어 "하부 서혜 피하 지방의 상대적 중량"을 수득하였다.
그 데이터는 평균 ± SD로서 제시되었고, 일방향 ANOVA에 의해 분석되었다. 통계적 결과는 부호 또는 문자로서 나타내었다. 상이한 부호 또는 문자는 통계적 차이를 표시하고 (p<0.05), 동일한 부호 또는 문자는 통계적 차이가 없음을 표시하였다 (p>0.05).
도 2a 및 도 2b를 참조할 수 있다. 도 2a는 래트의 국부 피하 지방의 양에 대한, 상이한 부형제를 이용하여 제조된 레스베라트롤 피하 주사 제형의 효과를 보여주는 막대 그래프이다. 도 2b는 래트의 상대적 중량 증가에 대한, 상이한 부형제를 이용하여 제조된 레스베라트롤 피하 주사 제형의 효과를 보여주는 막대 그래프이다.
도 2a에 도시된 바와 같이, 대조군 내의 래트의 하부 서혜 피하 지방의 상대적 중량은 100±27.6%였고, 생리 식염수 군 내의 래트의 하부 서혜 피하 지방의 상대적 중량은 108.2±24.7%였으며, PEG 군 내의 래트의 하부 서혜 피하 지방의 상대적 중량은 114.0±4.4%였고, ELP 군 내의 래트의 하부 서혜 피하 지방의 상대적 중량은 72.5±0.0%였다. 생리 식염수 군과 대조군 간의 하부 서혜 피하 지방의 상대적 중량 상의 유의적 차이는 없었으며, 이는 레스베라트롤을 투여 부위의 피하 지방층에 직접 주사하는 것이 그러한 투여 부위에서의 지방 (국부 지방)을 감소시킬 수 없다는 것을 암시한다. PEG 군과 대조군 간의 하부 서혜 피하 지방의 상대적 중량 상의 유의적 차이는 없었지만; ELP 군의 하부 서혜 피하 지방의 상대적 중량은 대조군의 것과 유의적으로 상이하였으며 (p<0.05), ELP 군 내의 래트의 하부 서혜 피하 지방의 상대적 중량은 27.5%만큼 감소되었다.
도 2b에 도시된 바와 같이, 대조군 내의 래트의 상대적 중량 증가는 100.0±30.8%였고, 생리 식염수 군 내의 래트의 상대적 중량 증가는 128.3±16.9%였으며, PEG 군 내의 래트의 상대적 중량 증가는 120.8±18.2%였고, ELP 군 내의 래트의 상대적 중량 증가는 101.3±22.0%였다. 4개 군 간의 유의적 차이가 없었다 (p>0.05).
상기 실험은 레스베라트롤을 투여 부위의 피하 지방층에 직접 주사하는 것이 그러한 투여 부위에서의 지방 (국부 지방)을 감소시킬 수 없을 뿐만 아니라 체중을 감소시킬 수 없다는 것을 입증시켜 주었다. 부형제 PEG (흔히 사용되는 공용매)를 포함하는 레스베라트롤 조성물을 투여 부위의 피하 지방층에 직접 주사하는 것은 그러한 투여 부위에서의 지방 (국부 지방)을 감소시킬 수 없을 뿐만 아니라 체중을 감소시킬 수 없지만; 비-이온성 계면활성제 ELP를 포함하는 레스베라트롤 조성물을 투여 부위의 피하 지방층에 주사하는 것은 그러한 투여 부위에서의 지방 (국부 지방)을 유의적으로 감소시킬 수 있다. 따라서, 투여 부위에서의 지방 (국부 지방) 및 체중을 감소시키기 위해서는 레스베라트롤 혼합물이 비-이온성 계면활성제를 포함해야만 하는지를 추가로 조사하는 것이 필요하다.
추가의 분석 결과, 전술된 레스베라트롤 PEG 용액에는 미셀이 없었지만, 레스베라트롤 ELP 용액에는 미셀이 있었고, 레스베라트롤이 ELP에 의해 형성된 미셀 내에 캡슐화되었다는 사실이 밝혀졌다. 따라서, 국부 지방을 감소시키고 체중을 감소시키는데에 대한 미셀의 효과를 추가로 조사하는 것이 필요하다.
실험 3: 래트의 피하 지방의 양 및 체중에 대한, 미셀을 포함하는 레스베라트롤 단독 조성물 피하 주사 제형의 효과
레스베라트롤 ELP 부분 미셀 제형, 레스베라트롤 HS-15 부분 미셀 제형, 레스베라트롤 ELP 미셀 제형, 및 레스베라트롤 HS-15 미셀 제형을 하기와 같이 제조하였다:
레스베라트롤 ELP 부분 미셀 제형의 제조: 20 g의 콜리포르 ELP (크레모포르 ELP로도 공지되어 있음; ELP로서 약칭됨)를 적절한 양의 주사용 생리 식염수와 혼합하여 총 중량이 100 g이 되도록 하였다. 이 용액을 잘 교반시켜 콜리포르 ELP (크레모포르 ELP로도 공지되어 있음)를 완전히 용해시켜 20% ELP 용액을 수득하였다. 400 mg의 레스베라트롤을 적절한 양의 20% ELP 용액과 혼합하여 총 중량이 80 g이 되도록 하였다. 이 용액을 잘 교반시켜 레스베라트롤을 완전히 용해시켜 레스베라트롤 ELP 부분 미셀 제형을 수득하였다. 상기 레스베라트롤 ELP 부분 미셀 제형에서, 레스베라트롤의 농도는 대략 5 mg/mL였고, ELP의 농도는 대략 20% (wt%)였으며, 레스베라트롤 대 ELP의 중량비는 대략 1:40이었다.
레스베라트롤 HS-15 부분 미셀 제형의 제조: 20 g의 콜리포르 HS-15 (HS-15로서 약칭됨)를 적절한 양의 주사용 생리 식염수와 혼합하여 총 중량이 100 g이 되도록 하였다. 이 용액을 잘 교반시켜 HS-15를 완전히 용해시켜 20% HS-15 용액을 수득하였다. 400 mg의 레스베라트롤을 적절한 양의 상기 20% HS-15 용액과 혼합하여 총 중량이 80 g이 되도록 하였다. 이 용액을 잘 교반시켜 레스베라트롤을 완전히 용해시켜 레스베라트롤 HS-15 부분 미셀 제형을 수득하였다. 상기 레스베라트롤 HS-15 부분 미셀 제형에서, 레스베라트롤의 농도는 대략 5 mg/mL였고, HS-15의 농도는 대략 20% (wt%)였으며, 레스베라트롤 대 HS-15의 중량비는 대략 1:40이었다.
레스베라트롤 ELP 미셀 제형의 제조: 실험 2에서 레스베라트롤 ELP 용액의 제조 방법과 동일하다.
레스베라트롤 HS-15 미셀 제형의 제조: 500 mg의 레스베라트롤을 80 내지 140 mL의 디클로로메탄과 혼합하고, 레스베라트롤이 완전히 용해될 때까지 실온에서 150 내지 500 rpm 하에 교반시켰다. 20 g의 콜리포르 HS-15 (HS-15로서 약칭됨)를 부가하고, 100 내지 300 rpm 하에 교반시켜 디클로로메탄을 휘발시켰다. 일단 디클로로메탄이 완전히 휘발되면, 주사용 생리 식염수를 서서히 부가하여 총 중량이 100 g이 되도록 하였다. 이 용액을 잘 교반시켜 약물-함유 미셀을 형성하여 레스베라트롤 HS-15 미셀 제형을 수득하였다. 상기 레스베라트롤 HS-15 미셀 제형에서, 레스베라트롤의 농도는 대략 5 mg/g이었고, HS-15의 농도는 대략 20% (wt%)였으며, 레스베라트롤 대 HS-15의 중량비는 대략 1:40이었다.
레스베라트롤 ELP 부분 미셀 제형, 레스베라트롤 HS-15 부분 미셀 제형, 레스베라트롤 ELP 미셀 제형, 및 레스베라트롤 HS-15 미셀 제형을 입자 크기 분석기에 의해 분석하여 미셀이 그 안에 존재하였는지를 결정하였고, 미셀의 직경을 측정하였다.
그 결과는 레스베라트롤 ELP 부분 미셀 제형과 레스베라트롤 HS-15 부분 미셀 제형 둘 다가 다량의 침전물을 가지며 더 적은 수의 약물-함유 미셀을 가진 것으로 나타났다. 그러나, 레스베라트롤 ELP 미셀 제형 및 레스베라트롤 HS-15 미셀 제형은 분리되지 않고 청정하였고, 더 많은 수의 약물-함유 미셀을 가졌다.
그 결과는 레스베라트롤 ELP 부분 미셀 제형과 레스베라트롤 HS-15 부분 미셀 제형 둘 다가 다량의 침전물을 갖고 있었지만, 그들의 상등액은 여전히 미셀을 함유하였다는 것을 표시하였다. 따라서, 레스베라트롤 ELP 부분 미셀 제형, 레스베라트롤 HS-15 부분 미셀 제형, 레스베라트롤 ELP 미셀 제형, 및 레스베라트롤 HS-15 미셀 제형 모두가 본 발명의 제약 조성물이다.
6주령의 수컷 스프라그 돌리 래트를 본 실험에 사용하였다. 먼저, 20마리의 래트에게 고지방식 (리서치 다이어츠, 인크.; Cat #D12492)을 공급하여 피하 지방의 축적을 유도시켰다. 각각의 래트의 체중이 330±10 g으로 될 때까지 공급을 지속하였고, 래트를 5개 군, 즉 대조군, ELP 부분 미셀 군, HS-15 부분 미셀 군, ELP 미셀 군, 및 HS-15 미셀 군으로 나누어 각각의 군에 4마리씩 무작위로 배정하였으며, 이들 군 간에는 체중 상의 통계적 차이가 없었다. 각각의 래트의 체중을 기록하고, 이를 "실험 전 체중"으로서 정의하였다. 이어서, 약물을 하기와 같이 투여하였다:
레스베라트롤 ELP 부분 미셀 제형, 레스베라트롤 HS-15 부분 미셀 제형, 레스베라트롤 ELP 미셀 제형, 및 레스베라트롤 HS-15 미셀 제형을 각각 잘 혼합하고 (상기 부분 미셀 제형 중의 침전물을 고르게 현탁시키기 위함), 이를 상기 ELP 부분 미셀 군, HS-15 부분 미셀 군, ELP 미셀 군, 및 HS-15 미셀 군 내의 래트 각각의 하부 서혜 피하 지방층 내로 주사하였다. 각각의 주사된 투여량은 체중 킬로그램당 4 mL (4 mL/kg)이므로, 각각의 주사된 투여량은 체중 킬로그램당 20 mg의 레스베라트롤 (20 mg/kg; 계산은 하기와 같다: 4 mL/kg x 5 mg/mL = 20 mg/kg)이었다. 대조군 내의 래트에게는 상기 기재된 바와 동일한 방식으로 동일한 용적의 생리 식염수를 주사하였다.
상기 언급된 주사 부위는 래트의 하부 서혜 지방 패드였다. 양측 주사를 실험 제1일, 제2일, 제3일, 제4일, 제5일, 및 제6일에 1일 1회 고르게 투여하였다. 본 실험의 전체 기간 동안 래트에게 고지방식을 공급하였다. 그들의 체중 변화를 매일 기록하였고, 음식과 물 소모를 매주 기록하였다. 실험은 14일 동안 지속되었고, 제15일에 CO2에 의해 래트를 안락사시켰다.
각각의 래트의 체중을 기록하고, 이를 "실험 후 체중"으로서 정의하였다. 각각의 래트의 "총 체중 증가"는 그의 "실험 후 체중"으로부터 "실험 전 체중"을 공제함으로써 수득하였다. "상대적 중량 증가"는 각각의 군의 총 체중 증가를 대조군의 총 체중 증가로 나눔으로써 수득하였다.
래트의 양측 하부 서혜 피하 지방 패드를 해부하고 칭량하며, 양측 하부 서혜 피하 지방 패드의 중량을 합하여 하부 서혜 피하 지방의 양을 계산하였다. 각각의 군의 하부 서혜 피하 지방의 양을 대조군의 하부 서혜 피하 지방의 양으로 나누어 "하부 서혜 피하 지방의 상대적 중량"을 수득하였다.
그 데이터는 평균 ± SD로서 제시되었고, 일방향 ANOVA에 의해 분석되었다. 통계적 결과는 부호 또는 문자로서 나타내었다. 상이한 부호 또는 문자는 통계적 차이를 표시하였고 (p<0.05), 동일한 부호 또는 문자는 통계적 차이가 없음을 표시하였다 (p>0.05).
상기 제형 제조 방법과 입자 크기 분석 결과에 근거하면, 레스베라트롤 ELP 부분 미셀 제형 중의 ELP의 농도와 레스베라트롤의 농도는 레스베라트롤 ELP 미셀 제형과 동일하였지만, 약물-함유 미셀의 수 만이 상이하였다. 따라서, 레스베라트롤 ELP 부분 미셀 제형과 비교해서, 레스베라트롤 ELP 미셀 제형이 투여 부위에서의 국부 지방을 유의적으로 감소시킬 수 있는 경우, 이는 레스베라트롤 조성물이 투여 부위에서의 국부 지방을 유의적으로 감소시키는데 있어서 약물-함유 미셀의 형성이 결정적인 요인이라는 것을 표시하고; 레스베라트롤 ELP 미셀 제형이 체중을 유의적으로 감소시킬 수 있는 경우, 이는 레스베라트롤 조성물이 체중을 유의적으로 감소시키는데 있어서 약물-함유 미셀의 형성이 결정적인 요인이라는 것을 표시한다.
유사하게는, 레스베라트롤 HS-15 부분 미셀 제형 중의 HS-15의 농도와 레스베라트롤의 농도는 레스베라트롤 HS-15 미셀 제형과 동일하였지만, 약물-함유 미셀의 수 만이 상이하였다. 따라서, 레스베라트롤 HS-15 부분 미셀 제형과 비교해서, 레스베라트롤 HS-15 미셀 제형이 투여 부위에서의 국부 지방을 유의적으로 감소시킬 수 있는 경우, 이는 레스베라트롤 조성물이 투여 부위에서의 국부 지방을 유의적으로 감소시키는데 있어서 약물-함유 미셀의 형성이 결정적인 요인이라는 것을 표시하고; 레스베라트롤 HS-15 미셀 제형이 체중을 유의적으로 감소시킬 수 있는 경우, 이는 레스베라트롤 조성물이 체중을 유의적으로 감소시키는데 있어서 약물-함유 미셀의 형성이 결정적인 요인이라는 것을 표시한다.
그 결과는 레스베라트롤 ELP 부분 미셀 제형 또는 레스베라트롤 HS-15 부분 미셀 제형을 투여 부위의 피하 지방층에 주사하는 것이 투여 부위에서의 지방 (국부 지방)을 감소시킬 수 있다는 것을 보여주었다. 다른 한편으로는, 레스베라트롤 ELP 미셀 제형 또는 레스베라트롤 HS-15 미셀 제형을 투여 부위의 피하 지방층에 주사하는 것이 또한, 투여 부위에서의 지방 (국부 지방)을 감소시킬 수 있다. 상기 4개의 제형 중에서, 레스베라트롤 ELP 미셀 제형이 국부 지방을 감소시키는데 있어서 가장 우수한 효과를 나타내었다.
레스베라트롤 ELP 부분 미셀 제형과 비교해서, 레스베라트롤 ELP 미셀 제형은 국부 지방을 유의적으로 감소시킬 수 있다. 레스베라트롤 HS-15 부분 미셀 제형과 비교해서, 레스베라트롤 HS-15 미셀 제형은 국부 지방을 유의적으로 감소시킬 수 있다.
그 결과는 레스베라트롤 조성물이 투여 부위에서의 국부 지방을 유의적으로 감소시키는데 있어서 미셀의 형성이 결정적인 요인이고, 폴리옥시에틸렌 피마자 오일 유도체 (예컨대 ELP)에 의해 형성된 약물-함유 미셀이 국부 지방을 감소시키는데 있어서 가장 우수한 효과를 나타낸다는 것을 표시하였다.
그 결과는 레스베라트롤 ELP 부분 미셀 제형 또는 레스베라트롤 HS-15 부분 미셀 제형을 투여 부위의 피하 지방층에 주사하는 것이 체중을 감소시킬 수 있다는 것을 보여주었다. 다른 한편으로는, 레스베라트롤 ELP 미셀 제형 또는 레스베라트롤 HS-15 미셀 제형을 투여 부위의 피하 지방층에 주사하는 것이 또한, 체중을 감소시킬 수 있다. 상기 4개의 제형 중에서, 레스베라트롤 ELP 미셀 제형이 체중을 감소시키는데 있어서 가장 우수한 효과를 나타내었다.
본 실험은 레스베라트롤 조성물이 체중을 유의적으로 감소시키는데 있어서 미셀의 형성이 결정적인 요인이고, 폴리옥시에틸렌 피마자 오일 유도체 (예컨대 ELP)에 의해 형성된 약물-함유 미셀이 체중을 감소시키는데 있어서 가장 우수한 효과를 나타낸다는 것을 표시하였다.
실험 4: 국부 지방을 감소시키기 위한 제약 조성물의 제조
본 실험은 레스베라트롤을 수반한 제1 제약 조성물을 제조하였고, 레스베라트롤과 녹차 추출물을 수반한 제2 제약 조성물을 제조하였다.
제1 제약 조성물의 제조는 하기와 같다:
(a) 제1 중량의 레스베라트롤을 용매와 혼합하고, 레스베라트롤이 완전히 용해될 때까지 실온에서 200 내지 500 rpm 하에 교반시키는 단계;
(b) 제2 중량의 제약상 허용되는 계면활성제를 부가하고, 100 내지 300 rpm 하에 잘 교반시켜 용매를 휘발시키는 단계로서, 여기서 상기 계면활성제의 친수성-친유성 균형 값 (HLB 값)은 10 초과인 단계;
(c) 일단 용매가 완전히 휘발되면, 제3 중량의 제약상 허용되는 수용액을 서서히 부가하고 잘 교반시켜 약물-함유 미셀을 수득하는 단계; 및
(d) 0.2 μm 필터 내로 여과시키고, 이와 같이 여과된, 약물-함유 미셀을 포함하는 용액을 암실 및 냉장 하에 저장하는 단계;
여기서 단계 (c)에서, 약물-함유 미셀은 상기 계면활성제에 의해 형성된 미세구조이고, 레스베라트롤은 상기 약물-함유 미셀 내에 캡슐화된다.
바람직하게는, 제3 중량은 0 g 이상이다.
바람직하게는, 단계 (a)에서, 용매의 비점은 순수한 물의 비점보다 더 낮다.
바람직하게는, 단계 (a)에서, 용매는 친수성 용매이다.
바람직하게는, 친수성 용매는 메탄올, 에탄올, 아세톤, 및 다른 친수성 용매 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직하게는, 단계 (a)에서의 용매는 친유성 용매이다.
바람직하게는, 친유성 용매는 에테르, 벤젠, 클로로포름, 에틸 아세테이트, 디클로로메탄, 헥산, 및 다른 친유성 용매 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직하게는, 단계 (b)에서, 계면활성제는 비-이온성 계면활성제이다.
바람직하게는, 비-이온성 계면활성제는 폴리소르베이트 80 (트윈 80), 2-히드록시에틸 12-히드록시옥타데카노에이트 (솔루톨 HS 15), 폴리옥시에틸렌 피마자 오일 유도체, 및 다른 비-이온성 계면활성제 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직하게는, 폴리옥시에틸렌 피마자 오일 유도체는 크레모포르 ELP, 크레모포르 RH 40, 및 다른 폴리옥시에틸렌 피마자 오일 유도체 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직하게는, 단계 (a) 및 (b)에서, 제1 중량의 레스베라트롤과 제2 중량의 계면활성제의 중량비는 1:4 내지 1:500이다.
바람직하게는, 단계 (a) 및 (c)에서, 제1 중량의 레스베라트롤과 제3 중량의 제약상 허용되는 수용액의 중량비는 1:400 내지 3:50이다.
바람직하게는, 단계 (c)에서, 제약상 허용되는 수용액은 주사용수, 주사용 수용액, 또는 생리 식염수이다.
바람직하게는, 단계 (c)에서, 제약상 허용되는 용액은 국부 마취제를 포함한다.
바람직하게는, 국부 마취제는 아미드, 파라-아미노벤조산 에스테르, 및 아미노 에테르 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직하게는, 아미드는 디부카인, 리도카인, 메피바카인 HCl, 부피바신 HCl, 피로카인 HCl, 프릴로카인 HCl, 디감마카인, 및 옥세타제인 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직하게는, 파라-아미노벤조산 에스테르는 부타카인, 디메토카인, 및 투토카인 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직하게는, 아미노 에테르는 퀴니소카인과 프라모카인 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직하게는, 단계 (c)에서, 제약상 허용되는 수용액은 항산화제를 포함한다.
바람직하게는, 항산화제는 베타-카로텐, 루테인, 리코펜, 빌리루빈, 비타민 A, 비타민 C (아스코르브산), 비타민 E, 요산, 산화질산, 니트록시드, 피루베이트, 카탈라제, 슈퍼옥시드 디스무타제, 글루타티온 페록시다제, N-아세틸 시스테인, 및 나린게닌 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
제2 제약 조성물의 제조는 하기와 같다:
(a1) 제4 중량의 레스베라트롤을 용매와 혼합하고, 레스베라트롤이 완전히 용해될 때까지 실온에서 200 내지 500 rpm 하에 교반시키는 단계;
(b1) 제5 중량의 제약상 허용되는 계면활성제를 부가하고, 100 내지 300 rpm 하에 잘 교반시켜 용매를 휘발시키는 단계로서, 여기서 상기 계면활성제의 친수성-친유성 균형 값 (HLB 값)은 10 초과인 단계;
(c1) 일단 용매가 완전히 휘발되면, 제6 중량의 제1 제약상 허용되는 수용액을 서서히 부가하고 100 내지 300 rpm 하에 잘 교반시켜 약물-함유 미셀을 형성하는 단계; 및
(d1) 0.2 μm 필터 내로 여과시키고, 이와 같이 여과된, 약물-함유 미셀을 포함하는 용액을 암실 및 냉장 하에 저장하는 단계;
여기서 제1 제약상 허용되는 수용액은 제7 중량의 녹차 추출물을 포함하고; 이러한 녹차 추출물은 제1 녹차 추출물 성분을 포함하며, 상기 제1 녹차 추출물 성분은 에피갈로카테킨 갈레이트이다.
바람직하게는, 단계 (a1)에서, 용매의 비점은 순수한 물의 비점보다 더 낮다.
바람직하게는, 단계 (a1)에서, 용매는 친수성 용매이다.
바람직하게는, 친수성 용매는 메탄올, 에탄올, 아세톤, 및 다른 친수성 용매 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직하게는, 단계 (a1)에서의 용매는 친유성 용매이다.
바람직하게는, 친유성 용매는 에테르, 벤젠, 클로로포름, 에틸 아세테이트, 디클로로메탄, 헥산, 및 다른 친유성 용매 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직하게는, 단계 (b1)에서, 계면활성제는 비-이온성 계면활성제이다.
바람직하게는, 비-이온성 계면활성제는 폴리소르베이트 80 (트윈 80), 2-히드록시에틸 12-히드록시옥타데카노에이트 (솔루톨 HS 15), 폴리옥시에틸렌 피마자 오일 유도체, 및 다른 비-이온성 계면활성제 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직하게는, 폴리옥시에틸렌 피마자 오일 유도체는 크레모포르 ELP, 크레모포르 RH 40, 및 다른 폴리옥시에틸렌 피마자 오일 유도체 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직하게는, 단계 (c1)와 (d1) 사이에, 하기 단계를 추가로 포함한다:
(c11) 제8 중량의 제2 제약상 허용되는 수용액을 부가하고, 제2 제약상 허용되는 수용액이 완전히 용해될 때까지 잘 혼합하는 단계.
바람직하게는, 녹차 추출물은 제1 제약상 허용되는 수용액에 용해되고, 약물-함유 미셀은 상기 계면활성제에 의해 형성된 미세구조인데, 여기서 레스베라트롤은 상기 약물-함유 미셀 내에 캡슐화된다.
바람직하게는, 제1 제약상 허용되는 수용액에 용해된 녹차 추출물 중에서, 에피갈로카테킨 갈레이트의 함량은 총 녹차 추출물 100 중량%를 기준으로 하여 45 내지 100 중량%이다.
바람직하게는, 단계 (a1) 및 (c1)에서, 제4 중량의 레스베라트롤과 제7 중량의 녹차 추출물의 중량비는 30:1 내지 1:30이다.
바람직하게는, 단계 (a1) 내지 (c1)에서, 제5 중량의 계면활성제의 양은 제4 중량의 레스베라트롤과 제7 중량의 녹차 추출물의 총량의 1 중량부를 기준으로 하여 0.24 내지 70 중량부이거나; 또는 레스베라트롤과 녹차 추출물의 총 중량 대 계면활성제의 중량비는 4:1 내지 1:70이다.
바람직하게는, 단계 (a1), (c1), 및 (c11)에서, 제6 중량의 제1 제약상 허용되는 수용액과 제8 중량의 제2 제약상 허용되는 수용액의 총량은 제4 중량의 레스베라트롤과 제7 중량의 녹차 추출물의 총량의 1 중량부를 기준으로 하여 16 내지 400 중량부이거나; 또는 제4 중량과 제7 중량의 합 대 제6 중량과 제8 중량의 합의 비는 1:400 내지 3:50이다.
제1 제약상 허용되는 수용액과 제2 제약상 허용되는 수용액의 총량은 레스베라트롤과 녹차 추출물의 총량의 1 중량부를 기준으로 하여 10 내지 1000 중량부이거나; 또는 레스베라트롤과 녹차 추출물의 총 중량 대 제1 제약상 허용되는 수용액과 제2 제약상 허용되는 용액의 총 중량의 비는 1:1000 내지 1:10이다.
바람직하게는, 단계 (c1) 및 (c11)에서, 제1 제약상 허용되는 수용액 및 제2 제약상 허용되는 수용액은 주사용수, 주사용 수용액, 또는 생리 식염수이다.
바람직하게는, 단계 (c1)에서, 제1 제약상 허용되는 수용액은 국부 마취제를 포함한다.
바람직하게는, 국부 마취제는 아미드, 파라-아미노벤조산 에스테르, 및 아미노 에테르 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직하게는, 아미드는 디부카인, 리도카인, 메피바카인 HCl, 부피바신 HCl, 피로카인 HCl, 프릴로카인 HCl, 디감마카인, 및 옥세타제인 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직하게는, 파라-아미노벤조산 에스테르는 부타카인, 디메토카인, 및 투토카인 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직하게는, 아미노 에테르는 퀴니소카인과 프라모카인 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직하게는, 단계 (c1)에서, 제1 제약상 허용되는 수용액은 항산화제를 포함한다.
바람직하게는, 항산화제는 베타-카로텐, 루테인, 리코펜, 빌리루빈, 비타민 A, 비타민 C (아스코르브산), 비타민 E, 요산, 산화질산, 니트록시드, 피루베이트, 카탈라제, 슈퍼옥시드 디스무타제, 글루타티온 페록시다제, N-아세틸 시스테인, 및 나린게닌 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
본 실험은 레스베라트롤 및 친수성 약물을 수반한 제3 제약 조성물을 제조하였고, 레스베라트롤 및 다른 친유성 약물을 수반한 제4 제약 조성물 및 제5 제약 조성물을 제조하였다.
제3 제약 조성물의 제조는 하기와 같다:
(a2) 레스베라트롤을 용매와 혼합하고, 레스베라트롤이 완전히 용해될 때까지 실온에서 200 내지 500 rpm 하에 교반시키는 단계;
(b2) 제약상 허용되는 계면활성제를 부가하고, 100 내지 300 rpm 하에 잘 교반시켜 용매를 휘발시키는 단계로서, 여기서 상기 계면활성제의 친수성-친유성 균형 값 (HLB 값)은 10 초과인 단계;
(c2) 일단 용매가 완전히 휘발되면, 제1 제약상 허용되는 수용액을 서서히 부가하고 100 내지 300 rpm 하에 잘 교반시켜 약물-함유 미셀을 형성하는 단계; 및
(d2) 0.2 μm 필터 내로 여과시키고, 이와 같이 여과된, 약물-함유 미셀을 포함하는 용액을 암실 및 냉장 하에 저장하는 단계;
여기서 제1 제약상 허용되는 수용액은 친수성 약물을 포함한다.
바람직하게는, 제1 제약상 허용되는 수용액은 국부 마취제를 포함한다.
바람직하게는, 국부 마취제는 아미드, 파라-아미노벤조산 에스테르, 및 아미노 에테르 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직하게는, 아미드는 디부카인, 리도카인, 메피바카인 HCl, 부피바신 HCl, 피로카인 HCl, 프릴로카인 HCl, 디감마카인, 및 옥세타제인 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직하게는, 파라-아미노벤조산 에스테르는 부타카인, 디메토카인, 및 투토카인 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직하게는, 아미노 에테르는 퀴니소카인과 프라모카인 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직하게는, 제1 제약상 허용되는 수용액은 항산화제를 포함한다.
바람직하게는, 항산화제는 베타-카로텐, 루테인, 리코펜, 빌리루빈, 비타민 A, 비타민 C (아스코르브산), 비타민 E, 요산, 산화질산, 니트록시드, 피루베이트, 카탈라제, 슈퍼옥시드 디스무타제, 글루타티온 페록시다제, N-아세틸 시스테인, 및 나린게닌 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직하게는, 단계 (a2)에서, 용매의 비점은 순수한 물의 비점보다 더 낮다.
바람직하게는, 단계 (a2)에서, 용매는 친수성 용매이다.
바람직하게는, 친수성 용매는 메탄올, 에탄올, 아세톤, 및 다른 친수성 용매 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직하게는, 단계 (a2)에서의 용매는 친유성 용매이다.
바람직하게는, 친유성 용매는 에테르, 벤젠, 클로로포름, 에틸 아세테이트, 디클로로메탄, 헥산, 및 다른 친유성 용매 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직하게는, 단계 (b2)에서, 계면활성제는 비-이온성 계면활성제이다.
바람직하게는, 비-이온성 계면활성제는 폴리소르베이트 80 (트윈 80), 2-히드록시에틸 12-히드록시옥타데카노에이트 (솔루톨 HS 15), 폴리옥시에틸렌 피마자 오일 유도체, 및 다른 비-이온성 계면활성제 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직하게는, 폴리옥시에틸렌 피마자 오일 유도체는 크레모포르 ELP, 크레모포르 RH 40, 및 다른 폴리옥시에틸렌 피마자 오일 유도체 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직하게는, 단계 (c2)와 (d2) 사이에, 하기 단계를 추가로 포함한다:
(c21) 제2 제약상 허용되는 수용액을 부가하고, 제2 제약상 허용되는 수용액이 완전히 용해될 때까지 잘 교반시키는 단계.
바람직하게는, 친수성 약물은 제1 제약상 허용되는 수용액에 용해되고, 약물-함유 미셀은 상기 계면활성제에 의해 형성된 미세구조이고, 레스베라트롤은 상기 약물-함유 미셀 내에 캡슐화된다.
바람직하게는, 제1 제약상 허용되는 수용액 중의 친수성 약물은 녹차 추출물, 에피갈로카테킨 갈레이트, 에피카테킨, 에피카테킨 갈레이트, 에피갈로카테킨, 갈로카테킨 갈레이트, 갈로카테킨, 카테킨 갈레이트, 카테킨, 에피갈로카테킨 갈레이트 (EGCG), 카페인, 카르니틴, L-카르니틴, 시네프린, 클로로겐산, 및 다른 친수성 약물 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직하게는, 단계 (a2) 및 (c2)에서, 레스베라트롤 대 친수성 약물의 중량비는 30:1 내지 1:30이다.
바람직하게는, 단계 (a2) 내지 (c2)에서, 계면활성제의 양은 레스베라트롤과 친수성 약물의 총량의 1 중량부를 기준으로 하여 0.24 내지 70 중량부이거나; 또는 레스베라트롤과 친수성 약물의 총 중량 대 계면활성제의 중량비는 4:1 내지 1:70이다.
바람직하게는, 단계 (a2), (c2), 및 (c21)에서, 레스베라트롤과 친수성 약물의 총 중량을 중량 단위로서 사용하면, 제1 제약상 허용되는 수용액과 제2 제약상 허용되는 수용액의 총량은 레스베라트롤과 친수성 약물의 총량의 1 중량부를 기준으로 하여 16 내지 400 중량부이거나; 또는 제4 중량과 제7 중량의 합 대 제6 중량과 제8 중량의 합의 비는 1:400 내지 3:50이다.
바람직하게는, 단계 (c2) 및 (c21)에서, 제1 제약상 허용되는 수용액 및 제2 제약상 허용되는 수용액은 주사용수, 주사용 수용액, 또는 생리 식염수이다.
제4 제약 조성물의 제조는 하기와 같다:
(A) 약물-함유 미셀 서브어셈블리를 제조하기 위한, 약물-함유 미셀 서브어셈블리의 제조 단계;
(B) 제2 친유성 약물-함유 미셀 서브어셈블리를 제조하기 위한, 제2 친유성 약물-함유 미셀 서브어셈블리의 제조 단계; 및
(C) 약물-함유 미셀 서브어셈블리를 제2 친유성 약물-함유 미셀 서브어셈블리와 혼합하여 제4 제약 조성물을 제조하는 단계;
여기서 약물-함유 미셀 서브어셈블리를 제조하는 단계 (A)는 하기 단계 (a3) 내지 (d3)를 포함한다:
(a3) 레스베라트롤을 제1 용매와 혼합하고, 레스베라트롤이 완전히 용해될 때까지 실온에서 200 내지 500 rpm 하에 교반시키는 단계;
(b3) 제1 제약상 허용되는 계면활성제를 부가하고, 100 내지 300 rpm 하에 잘 교반시켜 제1 용매를 휘발시키는 단계로서, 여기서 제1 계면활성제의 친수성-친유성 균형 값 (HLB 값)은 10 초과인 단계;
(c3) 일단 제1 용매가 완전히 휘발되면, 제약상 허용되는 수용액을 서서히 부가하고 잘 교반시켜 약물-함유 미셀을 형성하는 단계; 및
(d3) 0.2 μm 필터 내로 여과시키고, 이와 같이 여과된 용액이 약물-함유 미셀을 포함하는 약물-함유 미셀 서브어셈블리인 단계;
부가적으로, 제2 친유성 약물-함유 미셀 서브어셈블리를 제조하는 단계 (B)는 하기 단계 (a4) 내지 (d4)를 포함한다:
(a4) 또 다른 친유성 약물을 제2 용매와 혼합하고, 다른 친유성 약물이 완전히 용해될 때까지 실온에서 200 내지 500 rpm 하에 교반시키는 단계;
(b4) 제2 제약상 허용되는 계면활성제를 부가하고, 100 내지 300 rpm 하에 잘 교반시켜 제2 용매를 휘발시키는 단계로서, 여기서 제2 계면활성제의 친수성-친유성 균형 값 (HLB 값)은 10 초과인 단계;
(c4) 일단 제2 용매가 완전히 휘발되면, 제약상 허용되는 수용액을 서서히 부가하고 잘 교반시켜 제2 친유성 약물-함유 미셀을 형성하는 단계; 및
(d4) 0.2 μm 필터 내로 여과시키고, 이와 같이 여과된 용액이 제2 친유성 약물-함유 미셀을 포함하는 제2 친유성 약물-함유 미셀 서브어셈블리인 단계.
여기서 단계 (c3)에서, 약물-함유 미셀은 제1 계면활성제에 의해 형성된 미세구조이고, 레스베라트롤은 상기 약물-함유 미셀 내에 캡슐화된다. 단계 (c4)에서, 제2 친유성 약물-함유 미셀은 제2 계면활성제에 의해 형성된 미세구조이고, 다른 친유성 약물은 상기 제2 친유성 약물-함유 미셀 내에 캡슐화된다.
바람직하게는, 친유성 약물은 쿠르쿠민, 퀘르세틴, 푸에라린; 및 레스베라트롤을 제외한 다른 친유성 약물 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직하게는, 단계 (a3) 및/또는 (a4)에서, 제1 용매 및/또는 제2 용매의 비점(들)은 순수한 물의 비점보다 더 낮다.
바람직하게는, 단계 (a3) 및/또는 (a4)에서, 제1 용매 및/또는 제2 용매는 친수성 용매(들)이다.
바람직하게는, 친수성 용매는 메탄올, 에탄올, 아세톤, 및 다른 친수성 용매 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직하게는, 단계 (a3) 및/또는 (a4)에서의 제1 용매 및/또는 제2 용매는 친유성 용매(들)이다.
바람직하게는, 친유성 용매는 에테르, 벤젠, 클로로포름, 에틸 아세테이트, 디클로로메탄, 헥산, 및 다른 친유성 용매 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직하게는, 단계 (b3) 및/또는 (b4)에서, 제1 계면활성제 및/또는 제2 계면활성제는 비-이온성 계면활성제(들)이다.
바람직하게는, 비-이온성 계면활성제는 폴리소르베이트 80 (트윈 80), 2-히드록시에틸 12-히드록시옥타데카노에이트 (솔루톨 HS 15), 폴리옥시에틸렌 피마자 오일 유도체, 및 다른 비-이온성 계면활성제 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직하게는, 폴리옥시에틸렌 피마자 오일 유도체는 크레모포르 ELP, 크레모포르 RH 40, 및 다른 폴리옥시에틸렌 피마자 오일 유도체 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직하게는, 단계 (a3) 및 (b3)에서, 레스베라트롤 대 제1 계면활성제의 중량비는 1:4 내지 1:500이다.
바람직하게는, 단계 (a4) 및 (b4)에서, 다른 친유성 약물 대 제2 계면활성제의 중량비는 1:4 내지 1:500이다.
바람직하게는, 단계 (a3) 및 (c3)에서, 레스베라트롤 대 제약상 허용되는 수용액의 중량비는 1:400 내지 3:50이다.
바람직하게는, 단계 (a4) 및 (c4)에서, 다른 친유성 약물 대 제약상 허용되는 수용액의 중량비는 1:400 내지 3:50이다.
바람직하게는, 단계 (c3) 및/또는 (c4)에서, 제약상 허용되는 수용액은 주사용수, 주사용 수용액, 또는 생리 식염수이다.
바람직하게는, 단계 (c3) 및/또는 (c4)에서, 제약상 허용되는 수용액은 국부 마취제를 포함한다.
바람직하게는, 국부 마취제는 아미드, 파라-아미노벤조산 에스테르, 및 아미노 에테르 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직하게는, 아미드는 디부카인, 리도카인, 메피바카인 HCl, 부피바신 HCl, 피로카인 HCl, 프릴로카인 HCl, 디감마카인, 및 옥세타제인 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직하게는, 파라-아미노벤조산 에스테르는 부타카인, 디메토카인, 및 투토카인 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직하게는, 아미노 에테르는 퀴니소카인과 프라모카인 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
바람직하게는, 단계 (c3) 및/또는 (c4)에서, 제약상 허용되는 수용액은 항산화제를 포함한다.
바람직하게는, 항산화제는 베타-카로텐, 루테인, 리코펜, 빌리루빈, 비타민 A, 비타민 C (아스코르브산), 비타민 E, 요산, 산화질산, 니트록시드, 피루베이트, 카탈라제, 슈퍼옥시드 디스무타제, 글루타티온 페록시다제, N-아세틸 시스테인, 및 나린게닌 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물이다.
제5 제약 조성물의 제조는 하기와 같다:
(a5) 레스베라트롤 및 또 다른 친유성 약물을 용매와 혼합하고, 레스베라트롤이 완전히 용해될 때까지 실온에서 200 내지 500 rpm 하에 교반시키는 단계;
(b5) 제약상 허용되는 계면활성제를 부가하고, 100 내지 300 rpm 하에 잘 교반시켜 용매를 휘발시키는 단계로서, 여기서 상기 계면활성제의 친수성-친유성 균형 값 (HLB 값)은 10 초과인 단계;
(c5) 일단 용매가 완전히 휘발되면, 제약상 허용되는 수용액을 서서히 부가하고 잘 교반시켜 약물-함유 미셀 및 제2 친유성 약물-함유 미셀을 형성하는 단계; 및
(d5) 0.2 μm 필터 내로 여과시키고, 이와 같이 여과된, 약물-함유 미셀 및 제2 친유성 약물-함유 미셀을 포함하는 용액을 암실 및 냉장 하에 저장하는 단계.
제5 제약 조성물에 사용된 용매, 계면활성제, 제약상 허용되는 수용액, 및 다른 친유성 약물의 유형과 범위는 제4 제약 조성물에 사용된 것과 동일하다. 부가적으로, 제5 제약 조성물에 사용된 성분들의 상대적 비의 범위는 또한, 제4 제약 조성물에 사용된 것과 동일하다.
바람직하게는, 제약상 허용되는 수용액은 국부 마취제 및/또는 항산화제를 포함한다.
바람직하게는, 제5 제약 조성물에 사용된 국부 마취제 및/또는 항산화제의 유형과 범위는 제4 제약 조성물에 사용된 것과 동일하다.
실험 5: 제약 조성물의 품질의 결정
실험 5-1: 조성물 분석
제약 조성물을 적어도 20분 동안 정치시켜 둔다. 이러한 조성물이 층으로 분리되지 않는 경우에는, 이를 입자 분석기에 의해 추가로 분석한다.
입자 크기 분석기에 의해 제약 조성물이 미셀을 포함하는 지를 결정한다. 입자 분석기에 의해 분석된 후, 제약 조성물의 입자 직경이 250 nm보다 작고 PDI 값이 0.4 미만인 경우, 육안으로 관찰하였을 때 제약 조성물의 용액은 청정하고 투명한 것으로 여겨지며, 제약 조성물의 용액을 레이저로 비출 때 광선이 관찰될 수 있으며, 이는 제약 조성물이 미셀을 포함한다는 것을 표시한다.
미셀이 제약 조성물에 존재하는 경우, 이와 같이 제조된 조성물은 본 발명에서 국부 지방을 감소시키기 위한 제약 조성물이다.
정치시켜 둔 후에 제약 조성물이 층으로 분리되지 않고 미셀이 존재하는 경우, 이와 같이 제조된 제약 조성물은 본 발명에서 국부 지방을 감소시키기 위한 바람직한 제약 조성물이다.
실험 5-2: 입자 직경의 분포를 분석함으로써 제약 조성물의 안정성을 결정함
입자 크기 분석기 (맬번(Malvern)으로부터 구입함)를 사용하여 입자 직경의 분포 및 다분산 지수 (PDI)를 결정한다. PDI가 0.4 미만인 경우, 이는 제약 조성물의 안정성이 우수하다는 것, 즉 제약 조성물 중의 미셀이 안정적으로 존재할 수 있다는 것을 표시한다.
실험 5-3: 가속 안정성 시험에 의한 제약 조성물의 안정성의 결정
본 발명에서의 제약 조성물의 저장 조건은 2 내지 8℃이다. 제약 조성물의 안정성을 시험하기 위하여, 본 발명자는 제약 조성물을 비교적 고온 및 비교적 높은 습도 (온도 25℃±2℃, 상대 습도 60%±5%)의 환경하에 놓아두고, 제약 조성물 중의 미셀이 비교적 고온의 조건에서 얼마나 오랫동안 안정적으로 존재할 수 있는지를 관찰하여, 2 내지 8℃에서의 제약 조성물의 저장 수명을 추정할 수 있다.
제약 조성물이 25℃의 조건에서 n 개월의 저장 수명을 갖는 경우, 5℃의 조건에서의 제약 조성물의 저장 수명은 n 개월의 2((25-5)/10)배이다. 즉, 5℃의 조건에서의 제약 조성물의 저장 수명은 n 개월의 22배, 즉 4배이다.
예를 들어, 25℃의 조건에서의 제약 조성물의 저장 수명이 6개월인 경우, 5℃의 조건에서의 제약 조성물의 저장 수명은 24개월이다 (6개월 x 4배 = 24개월).
바람직하게는, 제약 조성물은 25℃±2℃의 온도, 60%±5%의 상대 습도의 조건, 및 직사 광선의 부재하에서 가속 안정성 시험을 수행할 때 적어도 24시간 동안 침전을 수반하지 않은 상태로 유지된다.
바람직하게는, 제약 조성물은 25℃±2℃의 온도, 60%±5%의 상대 습도의 조건, 및 직사 광선의 부재하에서 가속 안정성 시험을 수행할 때 적어도 6개월 동안 침전을 수반하지 않은 상태로 유지된다.
바람직하게는, 제약 조성물은 2 내지 8℃의 온도의 조건에서 적어도 24개월 동안 침전을 수반하지 않은 상태로 유지된다.
실험 6: 상이한 비-이온성 계면활성제에 의해 형성된 약물-함유 미셀의 최대 약물 부하
약물-함유 미셀의 최대 약물 부하는 주사 용적에 직접적으로 영향을 미치기 때문에, 이는 단일 투여에서 국부 피하 지방층 (예를 들어, 얼굴의 피하 지방층)에 의해 허용되어야 하는 약물 용적, 부작용 및 부담에 상당한 영향을 미친다. 따라서, 본 실험은 상이한 비-이온성 계면활성제에 의해 형성된 약물-함유 미셀의 최대 약물 부하를 조사하여, 어느 비-이온성 계면활성제가 본 발명에서의 제약 조성물을 제조하는데 있어서 가장 우수한 부형제인지를 결정한다.
본 실험을 위하여 4개의 비-이온성 계면활성제를 선택하였다. 4개의 비-이온성 계면활성제는 콜리포르 ELP (크레모포르 ELP로도 공지되어 있음; ELP로서 약칭됨), 콜리포르 HS-15 (HS-15), 크레모포르 RH 40 (RH 40으로서 약칭됨), 및 폴리소르베이트 80 (트윈 80으로도 공지되어 있음)이다.
본 실험에는 4개 군, 즉 ELP 군, HS-15 군, RH40 군, 및 트윈 80 군이 있다.
실험 단계:
(a') 2.0 g (제1 중량의 한 예)의 레스베라트롤을 300 내지 500 mL의 디클로로메탄과 혼합하고, 레스베라트롤이 완전히 용해될 때까지 실온에서 150 내지 500 rpm 하에 교반시키는 단계;
(b') 18.0 g (제2 중량의 한 예)의 상기 언급된 비-이온성 계면활성제 중 하나를 상기 용액에 부가하고, 100 내지 300 rpm 하에 잘 교반시켜 디클로로메탄을 휘발시키는 단계; 및
(c') 용매를 완전히 휘발시킨 후에 총 20 g의 조성물을 수득하고; 2 g의 조성물을 칭량하여 덜어내며; 8 g (제3 중량의 한 예)의 주사용 생리 식염수를 부가하고 잘 교반시켜 시험될 조성물을 수득하는 단계. 시험될 조성물 중의 레스베라트롤의 농도는 20 mg/g이었고, 비-이온성 계면활성제의 농도는 18%였다.
ELP 군, HS-15 군, RH40 군, 및 트윈 80 군으로부터 시험될 조성물을 적어도 20분 동안 정치시켜 두어 분리가 일어나는지를 관찰하였다. 분리가 일어나는 경우, 이는 레스베라트롤의 농도가 너무 높아, I기 조성물 내의 미셀이 파열된다는 것을 표시한다. 즉, 비-이온성 계면활성제는 20 mg/g만큼 다량의 레스베라트롤을 포함하는 본 발명의 제약 조성물을 제조하는데에 사용될 수 없다.
각각의 부형제 (ELP, HS-15, RH40, 및 트윈 80)가 독성인지의 여부를 평가하고, 상이한 국가의 약전에 의해 설정된 주사될 부형제의 최대 허용되는 한계치에 근거하여 각각의 부형제에 의해 형성된 약물-함유 미셀의 최대 약물 부하를 계산한다.
ELP의 최대 약물 부하를 결정하기 위하여, 본 발명자는 실험 7을 추가로 수행하였고, ELP의 최대 약물 부하가 166.7 mg/g 이상인 것으로 결정하였다. (레스베라트롤 대 ELP의 비가 1:5이기 때문에, 제조된 제약 조성물은 166.7 mg/g의 레스베라트롤을 함유함.)
상기 결과는 ELP가 본 발명에서의 제약 조성물을 제조하는데 있어서 가장 우수한 부형제라는 것을 표시하였다. ELP를 이용하여 제조된 제약 조성물에서는 레스베라트롤의 농도가 166.7 mg/g에 도달할 수 있다.
실험 7: 콜리포르 ELP (ELP)를 이용한 제약 조성물의 제조
ELP를 이용하여 본 발명에서 제약 조성물을 제조하는 경우에 레스베라트롤과 콜리포르 ELP (ELP) 간의 적절한 비와 최대 약물 부하 둘 다를 결정하기 위하여, 레스베라트롤과 콜리포르 ELP (크레모포르 ELP로도 공지되어 있음; ELP로서 약칭됨) 간의 다양한 비를 본 실험에 사용하여 본 발명에서 일련의 제약 조성물을 제조하였고, 그의 안정성 분석을 수행하였다.
본 실험에는 9개 군, 즉 제1 군 내지 제9 군이 있다. 각각의 군에서의 제약 조성물의 제조 방법은 실험 6에서의 실험 절차와 대략 동일하였다. 유일한 차이는 레스베라트롤의 중량 (단계 (a')에서의 제1 중량), ELP의 중량 (단계 (b')에서의 제2 중량), 및 주사용 생리 식염수의 중량 (단계 (c')에서의 제3 중량)이었다. 본 실험에서, 레스베라트롤의 중량 (제1 중량), ELP의 중량 (제2 중량), 및 주사용 생리 식염수의 중량 (제3 중량) 모두를 부가하는 가이드라인이 표 1에 제시되었다.
본 실험에서, 제1 군 내지 제9 군에서의 레스베라트롤 대 ELP의 비 (중량비)는 각각 1:1, 1:2.5, 1:5, 1:8, 1:10, 1:40, 1:80, 1:200, 1:500이었고, 제1 군 내지 제9 군에서 제조된 제약 조성물 중의 레스베라트롤의 최종 농도는 각각 1000 mg/g, 285.71 mg/g, 166.7 mg/g, 60 mg/g, 30 mg/g, 7.5 mg/g, 3.75 mg/g, 0.5 mg/g, 및 0.2 mg/g이었다. 즉, 제1 내지 제9 군에서의 제약 조성물의 제조, 단계 (a')에서의 레스베라트롤 대 단계 (b')에서의 ELP의 중량비 (제1 중량 대 제2 중량의 비)는 각각 1:1, 1:2.5, 1:5, 1:8, 1:10, 1:40, 1:80, 1:200, 1:500이었고, 단계 (c')에서 제3 중량의 주사용 생리 식염수를 부가한 후, 제조된 제약 조성물 중의 레스베라트롤의 최종 농도는 각각 1000 mg/g, 285.71 mg/g, 166.7 mg/g, 60 mg/g, 30 mg/g, 7.5 mg/g, 3.75 mg/g, 0.5 mg/g, 및 0.2 mg/g이었다. 여기서 약물의 최종 농도가 mg/g으로서 제시된 경우, 이는 제약 조성물 그램당 레스베라트롤의 밀리그램의 수를 표시한다.
입자 크기 분석기를 활용하여, 미셀이 제약 조성물에 존재하였는지를 결정하였고, 미셀의 입자 직경을 측정하였다.
제약 조성물의 안정성을 평가하기 위하여, 입자 직경의 분포 및 다분산 지수 (PDI)를 입자 크기 분석기에 의해 측정하였다. 미셀 중의 레스베라트롤 함량을 고성능 액체 크로마토그래피 (HPLC; 예를 들어, HPLC-UV)에 의해 분석하였고, 이를 "초기 약물 함량"으로서 정의하였다.
제약 조성물을 고온 저장 조건 (25±2℃)에서 3개월 동안 저장한 경우에 분리가 일어났는지를 관찰하기 위하여 제약 조성물을 대상으로 하여 가속 안정성 시험을 수행하였다. 미셀 중의 약물 함량을 고성능 액체 크로마토그래피 (HPLC; 예를 들어, HPLC-UV)에 의해 결정하였고, 이를 "가속 안정성 시험 후 약물 함량"으로서 정의하였다. "약물 함량의 백분율"은 "가속 안정성 시험 후 약물 함량"을 "초기 약물 함량"으로 나눔으로써 계산되었다. 약물 함량의 백분율이 95% 이상인 경우, 이는 제약 조성물의 안정성이 탁월하다는 것을 표시한다.
표 1. ELP를 이용하여 제약 조성물을 제조하기 위한 샘플 제조 차트
Figure pct00001
표 2를 참조할 수 있다. 표 2는 제약 조성물의 안정성 분석 결과이다. 표 2에 제시된 바와 같이, 레스베라트롤 대 ELP의 중량비가 1:5 내지 1:500인 경우, 미셀은 상이한 제약 조성물에 존재하고, 미셀의 측정된 입자 직경은 10 내지 250 nm였다. 따라서, 레스베라트롤 대 ELP의 중량비가 1:5 내지 1:500인 제약 조성물 모두가 본 발명에서 국부 지방을 감소시키기 위한 제약 조성물이다.
안정성의 관점에서, 레스베라트롤 대 ELP의 비가 1:5 내지 1:500인 경우, PDI는 0.4 미만이었다. 따라서, 보다 우수한 안정성을 나타내는, 본 발명에서 국부 지방을 감소시키기 위한 제약 조성물을 제조하기 위해서는, 레스베라트롤의 중량으로서 정의된 1 중량 단위를 기준으로 하여, ELP의 중량이 5 중량 단위 이상이어야 한다. 바람직하게는, 레스베라트롤의 중량으로서 정의된 1 중량 단위를 기준으로 하여, ELP의 중량은 5 내지 500 중량 단위이다. 바람직하게는, 레스베라트롤의 중량으로서 정의된 1 중량 단위를 기준으로 하여, ELP의 중량은 10 내지 80 중량 단위이다. 바람직하게는, 레스베라트롤의 중량으로서 정의된 1 중량 단위를 기준으로 하여, ELP의 중량은 8 내지 80 중량 단위이다.
표 2. 제약 조성물의 안정성 분석 결과
Figure pct00002
상기 표에서, 블랭크 셀은 함량이 분석되지 않았다는 것을 표시한다.
표 2에서의 데이터에 근거하여, 제3 및 제5 내지 제 7군에서의 제약 조성물을 25℃에서 3개월 동안 저장한 경우, 모든 군에서의 레스베라트롤 함량의 백분율은 95% 초과였고, 초기 약물 함량과 비교해서 유의적인 감소 경향은 없었다. 이러한 결과는 상기 제약 조성물이 탁월한 안정성을 갖고 있으며, 가속 안정성 시험의 경험적인 상식에 근거하여, 상기 제약 조성물을 적어도 24개월 동안 2 내지 8℃에서 냉장 저장할 수 있다는 것을 표시한다.
실험 8: 국부 지방 감소 및 중량 감소에 대한, 크레모포르 ELP를 이용하여 제조된 제약 조성물의 효과
실시예 1: 크레모포르 ELP 및 레스베라트롤을 이용한 레스베라트롤 제약 조성물의 제조
(a') 0.4 g (제1 중량의 한 예)의 레스베라트롤을 20 내지 70 mL의 에탄올과 혼합하고, 레스베라트롤이 완전히 용해될 때까지 200 내지 500 rpm 하에 교반시키는 단계;
(b') 4 g (제2 중량의 한 예)의 크레모포르 ELP를 부가하고, 100 내지 300 rpm 하에 잘 교반시켜 에탄올을 휘발시키는 단계;
(c') 일단 에탄올이 완전히 휘발되면, 생리 식염수의 중량이 80 g (제3 중량의 한 예)에 도달할 때까지 주사용 생리 식염수를 서서히 부가하며, 잘 교반시켜 약물-함유 미셀을 형성하는 단계; 및
(d') 0.2 μm 필터 내로 여과시키고 (이와 같이 여과된 용액은 약물-함유 미셀을 포함하는 레스베라트롤 제약 조성물임), 암실 및 냉장 하에 저장하는 단계.
이러한 특별한 실시양태에서, 주사용 생리 식염수의 밀도는 1 g/mL이다. 따라서, 80 g의 주사용 생리 식염수의 용적은 80 mL이다. 따라서, 레스베라트롤 제약 조성물 중의 레스베라트롤의 농도는 대략 5 mg/mL이다 (0.4 g ÷ 80 mL = 0.005 g/mL = 5 mg/mL).
이러한 특별한 실시양태에서, 제1 중량의 레스베라트롤 대 제2 중량의 크레모포르 ELP (계면활성제)의 중량비는 0.4:4이다. 즉, 그 중량비는 1:10이다.
이러한 특별한 실시양태에서, 제1 중량의 레스베라트롤 대 제3 중량의 주사용 생리 식염수의 중량비는 0.4:80이다. 즉, 그 중량비는 1:200이다.
실시예 2: 콜리포르 ELP, 레스베라트롤, 및 녹차 추출물을 이용한 레스베라트롤 복합체 제약 조성물의 제조
(a1') 0.36 g (제4 중량의 한 예)의 레스베라트롤을 20 내지 70 mL의 에탄올과 혼합하고, 레스베라트롤이 완전히 용해될 때까지 실온에서 200 내지 500 rpm 하에 교반시키는 단계;
(b1') 4 g (제5 중량의 한 예)의 크레모포르 ELP를 부가하고, 100 내지 300 rpm 하에 잘 교반시켜 에탄올을 휘발시키는 단계;
(c1') 일단 에탄올이 완전히 휘발되면, 제6 중량의 제1 주사용 생리 식염수를 서서히 부가하고, 100 내지 300 rpm 하에 잘 교반시켜 약물-함유 미셀을 형성하는 단계로서, 여기서 제1 주사용 생리 식염수는 0.04 g (제7 중량의 한 예)의 녹차 추출물을 포함하였고, 녹차 추출물 중의 성분은 에피갈로카테킨 갈레이트를 포함하였던 것인 단계;
(c11') 제8 중량의 제2 주사용 생리 식염수를 부가하여, 주사용 생리 식염수의 총 용적이 80 mL가 되도록 하고 (즉, 제6 중량의 제1 주사용 생리 식염수와 제8 중량의 제2 주사용 생리 식염수의 총 용적은 80 mL였음), 잘 교반시켜 제2 주사용 생리 식염수를 완전히 용해시키는 단계;
(d1') 0.2 μm 필터 내로 여과시키고 (이와 같이 여과된, 약물-함유 미셀을 포함하는 용액은 레스베라트롤 복합체 제약 조성물임), 암실 및 냉장 하에 저장하는 단계.
이러한 특별한 실시양태에서, 레스베라트롤 복합체 제약 조성물 중의 레스베라트롤-녹차 추출물의 농도는 5 mg/mL이다 ((0.36 g + 0.04 g) ÷ 80 mL = 0.4 g ÷ 80 mL = 0.005 g/mL = 5 mg/mL).
이러한 특별한 실시양태에서, 녹차 추출물의 총 중량 (0.04 g)을 기준으로 하여, 녹차 추출물 중의 에피갈로카테킨 갈레이트의 함량은 95%이다.
이러한 특별한 실시양태에서, 제4 중량의 레스베라트롤 대 제7 중량의 녹차 추출물의 중량비는 0.36:0.04이다. 즉, 그 중량비는 9:1이다.
이러한 특별한 실시양태에서, 제4 중량의 레스베라트롤과 제7 중량의 녹차 추출물의 총 중량 (0.36 g + 0.04 g = 0.4 g)으로서 정의된 중량 단위를 기준으로 하여, 제5 중량의 계면활성제의 중량은 10 중량 단위이다 (4 g ÷ 0.4 g = 10).
이러한 특별한 실시양태에서, 주사용 생리 식염수의 밀도는 1 g/mL이다. 따라서, 이러한 특별한 실시양태를 사용하면, 한 예로서, 제6 중량의 제1 주사용 생리 식염수와 제8 중량의 제2 주사용 생리 식염수의 총 용적은 80 mL이고, 주사용 생리 식염수의 총 중량은 80 g이다.
따라서, 제4 중량의 레스베라트롤과 제7 중량의 녹차 추출물의 총 중량 (0.36 g + 0.04 g = 0.4 g)으로서 정의된 중량 단위를 기준으로 하여, 제6 중량의 제1 주사용 생리 식염수와 제8 중량의 제2 주사용 생리 식염수의 총 중량 (80 g)은 200 중량 단위이다 (80 g ÷ 0.4 g = 200).
실시예 3: 레스베라트롤 제약 조성물의 지방 감소 효능
6주령의 수컷 스프라그 돌리 래트를 본 실험에 사용하였다. 먼저, 15마리의 래트에게 고지방식을 공급하여 피하 지방의 축적을 유도시켰다. 각각의 래트의 체중이 330±10 g으로 될 때까지 공급을 지속하였다. 래트를 3개 군, 즉 고지방식 대조군, 저 투여량 레스베라트롤 군, 및 고 투여량 레스베라트롤 군으로 나누어 각각의 군에 5마리씩 무작위로 배정하였으며, 이들 군 간에는 체중 상의 통계적 차이가 없었다.
실시예 1에서 제조된 5 mg/mL 레스베라트롤 제약 조성물을 저 투여량 레스베라트롤 군 내의 래트의 하부 서혜 피하 지방층에 주사하였다. 각각의 주사된 투여량은 체중 킬로그램당 10 mg의 레스베라트롤 (10 mg/kg)이었으며; 즉, 실시예 1에서 제조된 5 mg/mL 레스베라트롤 제약 조성물 2 mL를 체중 킬로그램당 주사하였다. 실시예 1에서 제조된 5 mg/mL 레스베라트롤 제약 조성물을 고 투여량 레스베라트롤 군 내의 래트의 하부 서혜 피하 지방층에 주사하였다. 각각의 주사된 투여량은 체중 킬로그램당 20 mg의 레스베라트롤 (20 mg/kg)이었으며; 즉, 실시예 1에서 제조된 5 mg/mL 레스베라트롤 제약 조성물 4 mL를 체중 킬로그램당 주사하였다. 고지방식 대조군 내의 래트에게는 상기 기재된 바와 동일한 방식으로 동일한 용적의 주사용 생리 식염수를 주사하였다.
전술된 주사 부위는 래트의 하부 서혜 지방 패드였다. 양측 주사를 실험 제1일, 제2일, 제3일, 및 제4일에 1일 1회 주사 부위에 고르게 수행하였다. 본 실험의 전체 기간 동안 래트에게 고지방식을 공급하였다. 그들의 체중 변화를 매일 기록하였고, 물과 음식 소모를 매주 기록하였다. 래트를 제14일에 금식시켰고 제15일에 CO2에 의해 안락사시켰다.
래트의 양측 서혜 지방 패드를 해부하고 칭량하며, 각각의 군의 하부 서혜 지방의 양을 계산하였다. 그 데이터는 평균 ± SD로서 제시되었고, 일방향 ANOVA에 의해 분석되었다. 통계적 분석 결과는 부호 또는 문자로서 제시되었다. 상이한 부호 또는 문자는 통계적 차이를 표시하고 (p<0.05), 동일한 부호 또는 문자는 통계적 차이가 없음을 표시한다 (p>0.05).
도 3 및 표 3을 참조할 수 있다. 도 3은 래트의 피하 지방의 양에 대한 레스베라트롤 제약 조성물의 효과를 보여주는 막대 그래프이다. 표 3은 레스베라트롤 제약 조성물에 의해 유발된 래트에서의 피하 지방 감소의 정도를 나타낸다. 여기서 하부 서혜 피하 지방의 양은 양측 하부 서혜 지방 패드의 총 중량이다.
실험 결과는 고지방식 대조군과 비교해서, 저 투여량 레스베라트롤 군 (여기서 투여량은 10 mg/kg임) 내의 래트의 하부 서혜 피하 지방의 양이 감소 경향을 나타냈고, 국부 지방이 5.6%만큼 감소되었으며 (p<0.05); 고 투여량 레스베라트롤 군 (여기서 투여량은 20 mg/kg임) 내의 래트의 하부 서혜 피하 지방의 양이 고지방식 대조군 내의 래트의 하부 서혜 피하 지방의 양으로부터 유의적으로 감소되었고, 국부 지방이 18.1%만큼 감소된 것으로 입증되었다.
표 3. 레스베라트롤 제약 조성물에 의해 유발된 래트에서의 피하 지방 감소의 정도
Figure pct00003
본 발명자의 경험에 근거하면, 래트에게 투여될 적합한 투여 빈도가 4회이면, 인간에게 투여될 적합한 투여 빈도는 1 내지 12회이다. 바람직하게는, 인간에게 투여될 투여 빈도는 격일마다 내지 30일마다 1 내지 12회이다. 바람직하게는, 인간에게 투여될 투여 빈도는 격일마다 내지 30일마다 1 내지 6회이다.
본 발명자의 경험에 근거하면, 래트에게 투여될 적합한 투여량이 10 mg/kg 내지 20 mg/kg이면, 인간에게 투여될 적합한 투여량은 0.2 내지 40 mg/kg이다.
바람직하게는, 인간에게 투여될 주사된 투여량은 0.4 내지 20 mg/kg이다.
바람직하게는, 인간에게 주사될 투여되는 투여량은 0.2 내지 20 mg/cm2이다.
바람직하게는, 인간에게 주사될 투여되는 투여량은 0.4 내지 12 mg/cm2이다.
실시예 4: 레스베라트롤 복합체 제약 조성물의 지방 및 중량 감소 효능
녹차 추출물 조성물의 제조: 녹차 추출물을 주사용 생리 식염수에 용해시킴으로써 5 mg/mL 녹차 추출물 조성물을 제조하였다.
6주령의 수컷 스프라그 돌리 래트를 본 실험에 사용하였다. 먼저, 20마리의 래트에게 고지방식을 공급하여 피하 지방의 축적을 유도시켰다. 각각의 래트의 체중이 330±10 g으로 될 때까지 공급을 지속하였다. 래트를 4개 군, 즉 고지방식 대조군, 녹차 추출물 군, 레스베라트롤 군, 및 레스베라트롤-녹차 추출물 복합체 군으로 나누어 각각의 군에 5마리씩 무작위로 배정하였으며, 이들 군 간에는 체중 상의 통계적 차이가 없었다. 각각의 래트의 체중을 기록하고, 이를 "실험 전 체중"으로서 정의하였다. 이어서, 약물을 하기와 같이 투여하였다:
본 실시예에서 제조된 5 mg/mL 녹차 추출물 조성물을 녹차 추출물 군 내의 래트의 하부 서혜 피하 지방층에 주사하였다. 각각의 주사된 투여량은 체중 킬로그램당 10 mg의 녹차 추출물 (10 mg/kg)이었으며; 즉, 본 실시예에서 제조된 5 mg/mL 녹차 추출물 조성물 2 mL를 체중 킬로그램당 주사하였다. 실시예 1에서 제조된 5 mg/mL 레스베라트롤 제약 조성물을 레스베라트롤 군 내의 래트의 하부 서혜 피하 지방층에 주사하였다. 각각의 주사된 투여량은 체중 킬로그램당 10 mg의 레스베라트롤 (10 mg/kg)이었으며; 즉, 실시예 1에서 제조된 5 mg/mL 레스베라트롤 제약 조성물 2 mL를 체중 킬로그램당 주사하였다. 실시예 2에서 제조된 5 mg/mL 레스베라트롤 복합체 제약 조성물을 레스베라트롤-녹차 추출물 복합체 군 내의 래트의 하부 서혜 피하 지방층에 주사하였다. 각각의 주사된 투여량은 체중 킬로그램당 10 mg의 레스베라트롤-녹차 추출물 (10 mg/kg)이었으며; 즉, 실시예 2에서 제조된 5 mg/mL 레스베라트롤 복합체 제약 조성물 2 mL를 체중 킬로그램당 주사하였다. 고지방식 대조군 내의 래트에게는 상기 기재된 바와 동일한 방식으로 동일한 용적의 주사용 생리 식염수를 주사하였다.
전술된 주사 부위는 래트의 하부 서혜 지방 패드였다. 양측 주사를 실험 제1일, 제2일, 제3일, 및 제4일에 1일 1회 주사 부위에 고르게 수행하였다. 본 실험의 전체 기간 동안 래트에게 고지방식을 공급하였다. 그들의 체중 변화를 매일 기록하였고, 물과 음식 소모를 매주 기록하였다. 래트를 제14일에 금식시켰고 제15일에 CO2에 의해 안락사시켰다.
각각의 래트의 체중을 기록하고, 이를 "실험 후 체중"으로서 정의하였다. 각각의 래트의 "총 체중 증가"는 그의 "실험 후 체중"으로부터 "실험 전 체중"을 공제함으로써 수득하였다. "상대적 중량 증가"는 각각의 군의 총 체중 증가를 고지방식 대조군의 총 체중 증가로 나눔으로써 수득하였다.
래트의 양측 서혜 지방 패드를 해부하고 칭량하며, 각각의 군의 하부 서혜 지방의 양을 계산하였다. 그 데이터는 평균 ± SD로서 제시되었고, 일방향 ANOVA에 의해 분석되었다. 통계적 분석 결과는 부호 또는 문자로서 제시되었다. 상이한 부호 또는 문자는 통계적 차이를 표시하고 (p<0.05), 동일한 부호 또는 문자는 통계적 차이가 없음을 표시한다 (p>0.05).
각각의 군 내의 래트에게 투여될 각각의 투여량이 10 mg/kg이기 때문에, 레스베라트롤-녹차 추출물 복합체 군에서 나타난 국부 지방을 감소시키는 효능은 레스베라트롤 군에서 나타난 효능과 녹차 추출물 군에서 나타난 효능 사이여야 한다. 레스베라트롤-녹차 추출물 복합체 군에서 나타난 국부 지방을 감소시키는 효능이 레스베라트롤 군에서 나타난 효능 및 녹차 추출물 군에서 나타난 효능보다 더 우수한 경우, 이는 레스베라트롤-녹차 추출물 제약 조성물 중의 레스베라트롤과 녹차 추출물이 국부 지방 감소 효능에 있어서 상승 효과를 나타낸다는 것을 표시한다.
도 4a 및 표 4를 참조할 수 있다. 도 4a는 래트의 피하 지방의 양에 대한 레스베라트롤 복합체 제약 조성물의 효과를 보여주는 막대 그래프이다. 표 4는 레스베라트롤 복합체 제약 조성물에 의해 유발된 래트에서의 피하 지방 감소의 정도를 나타낸다. 여기서 하부 서혜 피하 지방의 양은 양측 하부 서혜 지방 패드의 총 중량이다.
도 4a에서 입증된 실험 결과는 고지방식 대조군과 비교해서, 녹차 추출물 군 (여기서 투여량은 체중 킬로그램당 10 mg의 녹차 추출물임) 내의 래트의 주사 부위에서의 피하 지방이 감소되지 않았다는 것을 보여준다. 레스베라트롤 군 내의 래트의 주사 부위에서의 피하 지방의 양이, 고지방식 대조군과 비교해서 통계적 차이에 도달하지 못하였지만, 감소 경향을 나타냈으며, 국부 지방은 5.6%만큼 감소되었다 (여기서 투여량은 체중 킬로그램당 10 mg의 레스베라트롤임). 레스베라트롤-녹차 추출물 복합체 군 내의 래트의 주사 부위에서의 피하 지방의 양은 유의적으로 감소되었고 (p<0.05), 국부 지방은 18.9%만큼 감소되었다 (여기서 투여량은 체중 킬로그램당 10 mg의 레스베라트롤-녹차 추출물임). 즉, 레스베라트롤 복합체 제약 조성물은 국부 지방을 감소시키는데 있어서 유의적으로 탁월한 효능을 나타냈고, 그 효능은 레스베라트롤 제약 조성물의 것의 3.4배였다.
본 실시예는 본 발명에서의 레스베라트롤-녹차 추출물 복합체 제약 조성물이 동일한 투여량 하에 레스베라트롤 단독 제약 조성물보다 더 우수한 국부 지방 감소 효능을 나타낸다는 것을 입증시켜 주었다.
레스베라트롤 군, 녹차 추출물 군, 및 레스베라트롤-녹차 추출물 복합체 군 내의 래트들 간의 국부 지방 감소 효능를 비교한 결과, 레스베라트롤-녹차 추출물 복합체 제약 조성물 중의 레스베라트롤과 녹차 추출물이 국부 지방 감소 효능에 있어서 상승 효과를 나타내는 것으로 입증되었다.
표 4. 레스베라트롤 복합체 제약 조성물에 의해 유발된 래트에서의 피하 지방 감소의 정도
Figure pct00004
도 4b 및 표 5를 참조할 수 있다. 도 4b는 래트의 상대적 중량 증가에 대한 레스베라트롤 복합체 제약 조성물의 효과를 보여주는 막대 그래프이다. 표 5는 레스베라트롤 복합체 제약 조성물에 의해 유발된 래트에서의 중량 감소의 정도를 나타낸다.
도 4b에서 입증된 실험 결과는 고지방식 대조군과 비교해서, 녹차 추출물 군 (여기서 투여량은 체중 킬로그램당 10 mg의 녹차 추출물임) 내의 래트의 상대적 중량 증가가 감소되지 않았다는 것을 보여준다. 레스베라트롤 군 내의 래트의 상대적 중량 증가가, 고지방식 대조군과 비교해서 통계적 차이에 도달하지 못하였지만, 감소 경향을 나타냈으며, 래트의 상대적 중량 증가는 7.4%만큼 감소되었다 (여기서 투여량은 체중 킬로그램당 10 mg의 레스베라트롤임). 고지방식 대조군과 비교해서, 레스베라트롤-녹차 추출물 복합체 군 내의 래트의 상대적 중량 증가는 15.9%만큼 감소되었는데 (여기서 투여량은 체중 킬로그램당 10 mg의 레스베라트롤-녹차 추출물 복합체 제약 조성물임), 그것이 유의적 차이에 도달하지 못하였지만, 레스베라트롤-녹차 추출물 복합체 군의 효과는 레스베라트롤 군의 효과보다 더 우수하였다. 본 발명자의 경험에 근거하면, 본 발명에 따라서 제조된 레스베라트롤 단독 제약 조성물 및 레스베라트롤-녹차 추출물 복합체 군은 투여량 또는 투여 빈도를 증가시킴으로써 유의적 중량 감소 효능을 달성할 수 있다.
표 5. 레스베라트롤 복합체 제약 조성물에 의해 유발된 래트에서의 중량 감소의 정도
Figure pct00005
실험 9: 지방분해에 대한 레스베라트롤 및 다른 친유성 약물에 의해 형성된 복합체 제약 조성물의 효과
레스베라트롤, 및 레스베라트롤을 제외한 다른 친유성 약물을 본 실험에 사용하여 복합체 제약 조성물을 제조하여, 성숙한 지방세포에 대한 다양한 친유성 복합체 제약 조성물의 지방분해 효능을 평가하였다.
본 실험에서는, 다양한 친유성 복합체 제약 조성물을 제조하기 위해 푸에라린 및 퀘르세틴을 선택하였다.
실험 9-1: 세포독성 시험
50 ppm의 레스베라트롤, 푸에라린, 또는 퀘르세틴이 지방세포 이외의 세포에 대해 독성을 갖는지를 MTT 검정에 의해 결정한다. 약물이 무독성인 것으로 여겨지는 경우에만, 지방분해 시험이 진행될 것이다.
실험 결과는 50 ppm의 레스베라트롤, 푸에라린, 및 퀘르세틴이 지방세포 이외의 래트 체세포에 대해 세포독성이 아니므로, 이러한 투여량은 일반 체세포에 영향을 미치지 않을 것이란 사실을 보여주었다.
실험 9-2: 성숙한 지방세포에 대한 지방분해 효능
DMSO 대조군 세포 배양 배지, 레스베라트롤 세포 배양 배지, 푸에라린 세포 배양 배지, 퀘르세틴 세포 배양 배지, 레스베라트롤-푸에라린 복합체 세포 배양 배지, 및 레스베라트롤-퀘르세틴 복합체 세포 배양 배지를 하기와 같이 제조하였다:
DMSO 대조군 세포 배양 배지: DMSO를 적절한 양의 멸균수와 혼합하여 0.5% DMSO 용액을 수득하였다. 0.5% DMSO 용액을 세포 배양 배지 (제품명: 둘베코 변형 이글 배지(Dulbecco's Modified Eagle Medium); 깁코(Gibco)로부터 구입함)와 혼합하여 DMSO 대조군 세포 배양 배지를 제조하였으며, 여기서 0.5% DMSO 용액과 세포 배양 배지 간의 용적 비는 1:1000이다.
레스베라트롤 세포 배양 배지: 레스베라트롤을 적절한 양의 0.5% DMSO 용액과 혼합하여 레스베라트롤 용액을 수득하였다. 이 레스베라트롤 용액을 세포 배양 배지 (제품명: 둘베코 변형 이글 배지; 깁코로부터 구입함)와 혼합하여, 50 ppm의 레스베라트롤을 함유하는 레스베라트롤 세포 배양 배지를 제조하였으며, 여기서 레스베라트롤 용액과 세포 배양 배지 간의 용적 비는 1:1000이다.
푸에라린 세포 배양 배지: 푸에라린 (시그마-알드리치로부터 구입함)을 적절한 양의 0.5% DMSO 용액과 혼합하여 푸에라린 용액을 수득하였다. 이 푸에라린 용액을 세포 배양 배지와 혼합하여, 50 ppm의 푸에라린을 함유하는 푸에라린 세포 배양 배지를 제조하였으며, 여기서 푸에라린 용액과 세포 배양 배지 간의 용적 비는 1:1000이다.
퀘르세틴 세포 배양 배지: 퀘르세틴 (시그마-알드리치로부터 구입함)을 적절한 양의 0.5% DMSO 용액과 혼합하여 퀘르세틴 용액을 수득하였다. 이 퀘르세틴 용액을 세포 배양 배지와 혼합하여, 50 ppm의 퀘르세틴을 함유하는 퀘르세틴 세포 배양 배지를 제조하였으며, 여기서 퀘르세틴 용액과 세포 배양 배지 간의 용적 비는 1:1000이다.
레스베라트롤-푸에라린 복합체 세포 배양 배지: 레스베라트롤 및 푸에라린을 적절한 양의 0.5% DMSO 용액과 혼합하여 레스베라트롤-푸에라린 복합체 용액을 수득하였다. 여기서 레스베라트롤과 푸에라린 간의 중량비는 2:3이었다. 레스베라트롤-푸에라린 복합체 용액을 세포 배양 배지와 혼합하여, 50 ppm의 레스베라트롤-푸에라린 복합체 약물을 함유하는 레스베라트롤-푸에라린 복합체 세포 배양 배지를 제조하였으며, 여기서 레스베라트롤의 농도는 20 ppm이었고, 푸에라린의 농도는 30 ppm이었으며, 레스베라트롤-푸에라린 복합체 용액과 세포 배양 배지 간의 용적비는 1:1000이었다.
레스베라트롤-퀘르세틴 복합체 세포 배양 배지: 레스베라트롤 및 퀘르세틴을 적절한 양의 0.5% DMSO 용액과 혼합하여 레스베라트롤-퀘르세틴 복합체 용액을 수득하였다. 여기서 레스베라트롤과 퀘르세틴 간의 중량비는 2:3이었다. 레스베라트롤- 퀘르세틴 복합체 용액을 세포 배양 배지와 혼합하여, 50 ppm의 레스베라트롤-퀘르세틴 복합체 약물을 함유하는 레스베라트롤-퀘르세틴 복합체 세포 배양 배지를 제조하였으며, 여기서 레스베라트롤의 농도는 20 ppm이었고, 퀘르세틴의 농도는 30 ppm이었으며, 레스베라트롤-퀘르세틴 복합체 용액과 세포 배양 배지 간의 용적비는 1:1000이었다.
성숙한 지방세포에 대한 지방분해 효능을 결정하기 위한 실험 절차:
지방세포 전구체 3T3-L1 세포 (식품 산업 연구 개발 연구소 (Food Industry Research and Development Institute; 타이완)로부터 구입함; BCRC로서 약칭됨)를 12-웰 플레이트에 시딩하여, 각각의 웰이 1x105개 세포를 함유하도록 하였다. 배양 2일 후, 상기 세포를 분화 유도 배지 (DMI 배지; 이는 0.5 μM의 IBMX (시그마-알드리치로부터 구입함), 0.1 μM의 덱사메타손 (시그마-알드리치로부터 구입함), 및 5 μg/ml의 인슐린 (휴물린 알.(Humulin R.)로부터 구입함)을 함유함)에서 2일 더 배양하였다. 이어서, 상기 세포를 5 μg/ml의 인슐린을 함유하는 배지에서 6일 동안 배양하였다. 일단 세포 형태가 스핀들 모양에서 구형으로 변화되고 많은 지질 비말이 세포에 축적되면, 이는 세포가 성숙한 지방세포로 분화되었다는 것을 표시한다.
성숙한 지방세포를 6개 군, 즉 DMSO 대조군, 레스베라트롤 군, 푸에라린 군, 퀘르세틴 군, 레스베라트롤-푸에라린 복합체 군, 및 레스베라트롤-퀘르세틴 복합체 군으로 나누었다.
DMSO 대조군, 레스베라트롤 군, 푸에라린 군, 퀘르세틴 군, 레스베라트롤-푸에라린 복합체 군, 및 레스베라트롤-퀘르세틴 복합체 군 내의 성숙한 지방세포를 각각, 24시간 동안 DMSO 대조군 세포 배양 배지, 레스베라트롤 세포 배양 배지, 푸에라린 세포 배양 배지, 퀘르세틴 세포 배양 배지, 레스베라트롤-푸에라린 복합체 세포 배양 배지, 및 레스베라트롤-퀘르세틴 복합체 세포 배양 배지에서 배양하였다.
애넥신 V 단백질 (이바이오사이언스(eBioscience)로부터 구입함) 및 프로피디움 아이오다이드 (PI; 이바이오사이언스로부터 구입함)를 일정 기간 동안 각각의 군 내의 세포와 혼합한 다음, 각각의 군 내에서 애넥신 V 단백질 및 PI에 의해 표지된 세포의 백분율을 유동 세포계수법에 의해 분석하여, 아폽토시스를 진행하고 있는 성숙한 지방세포의 백분율을 평가하였다. 여기서 성숙한 지방세포가 애넥신 V 단백질과 PI 둘 다에 의해 표지되는 경우, 이는 상기 세포가 아폽토시스를 진행하고 있다는 것을 표시하며; 더 많은 성숙한 지방세포가 아폽토시스를 진행하고 있는 경우, 이는 투여된 약물의 지방분해 효능이 더 우수하다는 것을 표시하고, 또한 지방분해가 아폽토시스를 통해 매개되지만, 괴사에 의해서는 그렇지 않다는 것을 표시한다.
그 데이터는 평균 ± SD로서 제시되었고, 일방향 ANOVA에 의해 분석되었다. 통계적 결과는 부호 또는 문자로서 나타내었다. 상이한 부호 또는 문자는 통계적 차이를 표시하고 (p<0.05), 동일한 부호 또는 문자는 통계적 차이가 없음을 표시한다 (p>0.05).
각각의 군에서 처리된 약물의 총량이 50 ppm이기 때문에, 레스베라트롤-푸에라린 복합체 군의 아폽토시스 효능은 레스베라트롤 군의 효능과 푸에라린 군의 효능 사이여야 한다. 레스베라트롤-푸에라린 복합체 군의 아폽토시스 효능이 레스베라트롤 군의 효능 및 푸에라린 군의 효능보다 더 우수한 경우, 이는 레스베라트롤-푸에라린 복합체 제약 조성물 중의 레스베라트롤과 푸에라린이 지방분해 효능에 있어서 상승 효과를 나타낸다는 것을 표시한다. 유사하게는, 레스베라트롤-퀘르세틴 복합체 군의 아폽토시스 효능은 레스베라트롤 군의 효능과 퀘르세틴 군의 효능 사이여야 한다. 레스베라트롤-퀘르세틴 복합체 군의 아폽토시스 효능이 레스베라트롤 군의 효능 및 퀘르세틴 군의 효능보다 더 우수한 경우, 이는 레스베라트롤-퀘르세틴 복합체 제약 조성물 중의 레스베라트롤과 퀘르세틴이 지방분해 효능에 있어서 상승 효과를 나타낸다는 것을 표시한다.
도 5를 참조할 수 있다. 도 5는 성숙한 지방세포의 아폽토시스에 대한 레스베라트롤-다른 친유성 약물 복합체 제약 조성물의 효과를 보여주는 막대 그래프이다.
도 5에서의 결과는 DMSO 대조군 내에서의 아폽토시스 세포의 백분율이 4.9±2.5%였고, 레스베라트롤 군 내에서의 아폽토시스 세포의 백분율이 19.1±1.1%였으며, 푸에라린 군 내에서의 아폽토시스 세포의 백분율이 7.2±3.7%였고, 퀘르세틴 군 내에서의 아폽토시스 세포의 백분율이 5.9±2.6%였으며, 레스베라트롤-푸에라린 복합체 군 내에서의 아폽토시스 세포의 백분율이 50.6±3.8%였고, 레스베라트롤-퀘르세틴 복합체 군 내에서의 아폽토시스 세포의 백분율이 12.1±2.7%였다는 것을 보여주었다.
레스베라트롤 군, 푸에라린 군, 및 레스베라트롤-푸에라린 복합체 군의 아폽토시스 효능들을 비교한 결과, 레스베라트롤-푸에라린 복합체 제약 조성물 중의 레스베라트롤과 푸에라린이 지방분해 효능에 있어서 상승 효과를 나타내는 것으로 입증되었다.
따라서, 레스베라트롤과 다양한 친유성 약물에 의해 형성된 복합체 제약 조성물 모두는 지방분해를 달성할 수 있고, 지방분해 효능에 있어서 레스베라트롤과 다양한 친유성 약물 간에는 상승 효과가 있다. 따라서, 본 발명은 레스베라트롤과 다양한 친유성 약물을 사용하여 약물-함유 미셀 및 제2 친유성 약물-함유 미셀을 제조하고, 레스베라트롤-다른 친유성 약물 복합체 제약 조성물을 추가로 제조하며, 이는 국부 지방분해 및 중량 감소를 위해 사용될 수 있는 제약 조성물이다.
실험 10: 지방분해에 대한, 레스베라트롤과 친수성 약물에 의해 형성된 복합체 제약 조성물의 효과
녹차 추출물 이외의 친수성 약물; 및 레스베라트롤을 본 실험에 사용하여 복합체 제약 조성물을 제조하여, 성숙한 지방세포에 대한 다양한 레스베라트롤-친수성 약물 복합체 제약 조성물의 지방분해 효능을 평가하였다.
본 실험은 카페인 및 L-카르니틴을 사용하여 다양한 레스베라트롤-친수성 약물 복합체 제약 조성물을 제조한다.
실험 10-1: 세포독성 시험
50 ppm의 카페인 및 L-카르니틴이 지방세포 이외의 세포에 대해 독성을 갖는지를 MTT 검정에 의해 결정한다. 약물이 무독성인 것으로 여겨지는 경우에만, 지방분해 시험이 진행될 것이다.
실험 결과는 50 ppm의 카페인 및 L-카르니틴이 지방세포 이외의 래트 체세포에 대해 세포독성이 아니므로, 이러한 투여량은 일반 체세포에 영향을 미치지 않을 것이란 사실을 보여주었다.
실험 10-2: 성숙한 지방세포에 대한 지방분해 효능
멸균수 대조군 세포 배양 배지, 레스베라트롤 세포 배양 배지, 카페인 세포 배양 배지, L-카르니틴 세포 배양 배지, 레스베라트롤-카페인 복합체 세포 배양 배지, 및 레스베라트롤-L-카르니틴 복합체 세포 배양 배지를 하기와 같이 제조하였다:
멸균수 대조군 세포 배양 배지: 멸균수를 세포 배양 배지와 혼합하여 멸균수 대조군 세포 배양 배지를 제조하였으며, 여기서 멸균수와 세포 배양 배지 간의 용적비는 1:1000이다.
레스베라트롤 세포 배양 배지: 실험 9-2에서의 레스베라트롤 세포 배양 배지의 제조와 동일한 방법이다.
카페인 세포 배양 배지: 카페인 (시그마-알드리치로부터 구입함)을 적절한 양의 멸균수와 혼합하여 카페인 용액을 수득하였다. 카페인 용액을 세포 배양 배지와 혼합하여, 50 ppm의 카페인을 함유하는 카페인 세포 배양 배지를 제조하였으며, 여기서 카페인 용액과 세포 배양 배지 간의 용적비는 1:1000이다.
L-카르니틴 세포 배양 배지: L-카르니틴 (시그마-알드리치로부터 구입함)을 적절한 양의 멸균수와 혼합하여 L-카르니틴 용액을 수득하였다. L-카르니틴 용액을 세포 배양 배지와 혼합하여, 50 ppm의 L-카르니틴을 함유하는 L-카르니틴 세포 배양 배지를 제조하였으며, 여기서 L-카르니틴 용액과 세포 배양 배지 간의 용적비는 1:1000이다.
레스베라트롤-카페인 복합체 세포 배양 배지: 레스베라트롤, 카페인 및 적절한 양의 멸균수를 혼합하여 레스베라트롤-카페인 복합체 용액을 수득하였다. 여기서 레스베라트롤과 카페인 간의 중량비는 2:3이었다. 레스베라트롤-카페인 복합체 용액을 세포 배양 배지와 혼합하여, 50 ppm의 레스베라트롤-카페인 복합체 약물을 함유하는 레스베라트롤-카페인 복합체 세포 배양 배지를 제조하였으며, 여기서 레스베라트롤의 농도는 20 ppm이었고, 카페인의 농도는 30 ppm이었으며, 레스베라트롤-카페인 복합체 용액과 세포 배양 배지 간의 용적비는 1:1000이었다.
레스베라트롤-L-카르니틴 복합체 세포 배양 배지: 레스베라트롤, L-카르니틴 및 적절한 양의 멸균수를 혼합하여 레스베라트롤-L-카르니틴 복합체 용액을 수득하였다. 여기서 레스베라트롤과 L-카르니틴 간의 중량비는 2:3이었다. 레스베라트롤-L-카르니틴 복합체 용액을 세포 배양 배지와 혼합하여, 50 ppm의 레스베라트롤-L-카르니틴 복합체 약물을 함유하는 레스베라트롤-L-카르니틴 복합체 세포 배양 배지를 제조하였으며, 여기서 레스베라트롤의 농도는 20 ppm이었고, L-카르니틴의 농도는 30 ppm이었으며, 레스베라트롤-L-카르니틴 복합체 용액과 세포 배양 배지 간의 용적비는 1:1000이었다.
성숙한 지방세포의 제조는 실험 9-2에서와 동일한 방법이다.
성숙한 지방세포를 6개 군, 즉 멸균수 대조군, 레스베라트롤 군, 카페인 군, L-카르니틴 군, 레스베라트롤-카페인 복합체 군, 및 레스베라트롤-L-카르니틴 복합체 군으로 나누었다.
멸균수 대조군, 레스베라트롤 군, 카페인 군, L-카르니틴 군, 레스베라트롤-카페인 복합체 군, 및 레스베라트롤-L-카르니틴 복합체 군 내의 성숙한 지방세포를 각각 24시간 동안 멸균수 대조군 세포 배양 배지, 레스베라트롤 세포 배양 배지, 카페인 세포 배양 배지, L-카르니틴 세포 배양 배지, 레스베라트롤-카페인 복합체 세포 배양 배지, 및 레스베라트롤-L-카르니틴 복합체 세포 배양 배지에서 배양하였다.
애넥신 V 단백질 (이바이오사이언스로부터 구입함) 및 프로피디움 아이오다이드 (PI; 이바이오사이언스로부터 구입함)를 일정 기간 동안 각각의 군 내의 세포와 혼합한 다음, 각각의 군 내에서 애넥신 V 단백질 및 PI에 의해 표지된 세포의 백분율을 유동 세포계수법에 의해 분석하여, 아폽토시스를 진행하고 있는 성숙한 지방세포의 백분율을 평가하였다. 여기서 성숙한 지방세포가 애넥신 V 단백질과 PI 둘 다에 의해 표지되는 경우, 이는 상기 세포가 아폽토시스를 진행하고 있다는 것을 표시하며; 더 많은 성숙한 지방세포가 아폽토시스를 진행하고 있는 경우, 이는 투여된 약물의 지방분해 효능이 더 우수하다는 것을 표시하고, 또한 지방분해가 아폽토시스를 통해 매개되지만, 괴사에 의해서는 그렇지 않다는 것을 표시한다.
각각의 군에서 처리된 약물의 총량이 50 ppm이고, 그의 레스베라트롤의 비가 40%이며, 그의 카페인의 비가 60%이기 때문에, 레스베라트롤-카페인 복합체 군의 아폽토시스 효능은 레스베라트롤 군의 효능과 카페인 군의 효능의 평균에 근접해야 한다. 레스베라트롤-카페인 복합체 군의 아폽토시스 효능이 레스베라트롤 군의 효능과 카페인 군의 효능의 평균보다 더 우수한 경우, 이는 레스베라트롤-카페인 복합체 제약 조성물 중의 레스베라트롤과 카페인이 지방분해 효능에 있어서 상승 효과를 나타낸다는 것을 표시한다. 유사하게는, 각각의 군에서 처리된 약물의 총량이 50 ppm이고, 그의 레스베라트롤의 비가 40%이며, 그의 L-카르니틴의 비가 60%이기 때문에, 레스베라트롤-L-카르니틴 복합체 군의 아폽토시스 효능은 레스베라트롤 군의 효능과 L-카르니틴 군의 효능의 평균에 근접해야 한다. 레스베라트롤-L-카르니틴 복합체 군의 아폽토시스 효능이 레스베라트롤 군의 효능과 L-카르니틴 군의 효능의 평균보다 더 우수한 경우, 이는 레스베라트롤-L-카르니틴 복합체 제약 조성물 중의 레스베라트롤과 L-카르니틴이 지방분해 효능에 있어서 상승 효과를 나타낸다는 것을 표시한다.
도 6을 참조할 수 있다. 도 6은 성숙한 지방세포의 아폽토시스에 대한 레스베라트롤-다른 친수성 약물 복합체 제약 조성물의 효과를 보여준다.
도 6에서의 결과는 멸균수 대조군 내에서의 아폽토시스 세포의 백분율이 9.6±1.5%였고, 레스베라트롤 군 내에서의 아폽토시스 세포의 백분율이 19.0±1.1%였으며, 카페인 군 내에서의 아폽토시스 세포의 백분율이 6.9±1.1%였고, L-카르니틴 군 내에서의 아폽토시스 세포의 백분율이 5.2±1.2%였으며, 레스베라트롤-카페인 복합체 군 내에서의 아폽토시스 세포의 백분율이 43.1±4.5%였고, 레스베라트롤-L-카르니틴 복합체 군 내에서의 아폽토시스 세포의 백분율이 19.3±0.5%였다는 것을 보여주었다.
레스베라트롤 군, 카페인 군, 및 레스베라트롤-카페인 복합체 군의 아폽토시스 효능들을 비교한 결과, 레스베라트롤-카페인 복합체 제약 조성물 중의 레스베라트롤과 카페인이 지방분해 효능에 있어서 상승 효과를 나타내는 것으로 입증되었다.
레스베라트롤 군, L-카르니틴 군, 및 레스베라트롤-L-카르니틴 복합체 군의 아폽토시스 효능들을 비교한 결과, 레스베라트롤-L-카르니틴 복합체 제약 조성물 중의 레스베라트롤과 L-카르니틴이 지방분해 효능에 있어서 상승 효과를 나타내는 것으로 입증되었다.
따라서, 레스베라트롤과 다양한 친수성 약물에 의해 형성된 복합체 제약 조성물 모두는 지방분해를 달성할 수 있고, 지방분해 효능에 있어서 레스베라트롤과 다양한 친수성 약물 간에는 상승 효과가 있다. 따라서, 본 발명은 레스베라트롤과 다양한 친수성 약물을 사용하여, 약물-함유 미셀을 포함하는 레스베라트롤-친수성 약물 복합체 제약 조성물을 제조하며, 이는 국부 지방분해 및 중량 감소를 위해 사용될 수 있는 제약 조성물이다.
본 발명에서의 실시예에 의해 입증된 바와 같이, 본 발명에서의 제1 제약 조성물, 제2 제약 조성물, 제3 제약 조성물, 제4 제약 조성물, 제5 제약 조성물, 및 다른 제약 조성물은 모두 국부 지방을 감소시킬 수 있다. 따라서, 본 발명에서의 제1 제약 조성물, 제2 제약 조성물, 제3 제약 조성물, 제4 제약 조성물, 제5 제약 조성물, 및 다른 제약 조성물을 사용하여 피하 이식형 장치, 피하 이식제, 이식된 주입용 용액, 연고 (또는 연고제), 또는 패치를 제조할 수 있으며, 이는 피하 이식, 이식형 주입, 또는 피부 흡수 방식, 예컨대 연고 (또는 연고제)를 도포하거나 또는 패치를 착용함으로써 투여될 수 있다.
바람직하게는, 본 발명에서의 제1 제약 조성물, 제2 제약 조성물, 제3 제약 조성물, 제4 제약 조성물, 제5 제약 조성물, 및 다른 제약 조성물은 피하 지방층 주사에 의해 투여 부위에서의 국부 지방을 감소시킬 수 있다. 따라서, 본 발명에서의 제1 제약 조성물, 제2 제약 조성물, 제3 제약 조성물, 제4 제약 조성물, 제5 제약 조성물, 및 다른 제약 조성물을 사용하여, 국부 지방을 감소시키기 위한 피하 지방층 주사용 제형 또는 피하 주사용 제형을 제조할 수 있다.
전술한 설명은 본 발명의 바람직한 실시양태에 불과하며, 본 발명의 특허 출원의 범위를 제한하고자 하는 것은 아니다. 따라서, 본원에 개시된 요지로부터 벗어나지 않는 어떠한 변경 또는 변형도 본 발명의 특허 출원의 범위 내에 포함되어야 한다.

Claims (43)

  1. 약물-함유 미셀; 및
    상기 약물-함유 미셀 내에 캡슐화된 레스베라트롤
    을 포함하는, 국부 지방을 감소시키기 위한 제약 조성물이며;
    여기서 약물-함유 미셀은 제약상 허용되는 폴리옥시에틸렌 피마자 오일 유도체에 의해 형성된 미세구조이고, 폴리옥시에틸렌 피마자 오일 유도체의 친수성-친유성 균형 값 (HLB 값)은 10 초과인 제약 조성물.
  2. 제1항에 있어서, 약물-함유 미셀의 직경이 3 내지 250 nm인 제약 조성물.
  3. 제1항에 있어서, 폴리옥시에틸렌 피마자 오일 유도체가 크레모포르 ELP, 크레모포르 RH 40, 및 다른 폴리옥시에틸렌 피마자 오일 유도체 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물인 제약 조성물.
  4. 제1항에 있어서, 레스베라트롤 대 계면활성제의 중량비가 1:4 내지 1:500인 제약 조성물.
  5. 제4항에 있어서, 레스베라트롤 대 계면활성제의 중량비가 1:5 내지 1:80인 제약 조성물.
  6. 제1항에 있어서, 제약 조성물 중의 레스베라트롤의 농도가 0.2 내지 166.7 mg/mL인 제약 조성물.
  7. 제6항에 있어서, 제약 조성물 중의 레스베라트롤의 농도가 2.5 내지 60 mg/mL인 제약 조성물.
  8. 제1항에 있어서, 제약 조성물이 제약상 허용되는 수용액을 추가로 포함하는 것인 제약 조성물.
  9. 제1항 또는 제8항에 있어서, 제약 조성물이 제2 친유성 약물-함유 미셀을 추가로 포함하며; 제2 친유성 약물-함유 미셀이 제2 폴리옥시에틸렌 피마자 오일 유도체에 의해 형성된 또 다른 미세구조이고, 제2 친유성 약물이 상기 제2 친유성 약물-함유 미셀 내에 캡슐화된 것인 제약 조성물.
  10. 제9항에 있어서, 제2 폴리옥시에틸렌 피마자 오일 유도체가 크레모포르 ELP, 크레모포르 RH 40, 및 다른 폴리옥시에틸렌 피마자 오일 유도체 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물인 제약 조성물.
  11. 제9항에 있어서, 제2 친유성 약물이 퀘르세틴, 시네프린, 푸에라린, 쿠르쿠민; 및 레스베라트롤을 제외한 다른 친유성 약물 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물인 제약 조성물.
  12. 제11항에 있어서, 레스베라트롤 대 제2 친유성 약물의 중량비가 30:1 내지 1:20인 제약 조성물.
  13. 제1항 또는 제8항에 있어서, 제약 조성물이 친수성 약물을 추가로 포함하는 것인 제약 조성물.
  14. 제13항에 있어서, 친수성 약물이 녹차 추출물, 에피갈로카테킨 갈레이트, 에피카테킨, 에피카테킨 갈레이트, 에피갈로카테킨, 갈로카테킨 갈레이트, 갈로카테킨, 카테킨 갈레이트, 카테킨, 에피갈로카테킨 갈레이트 (EGCG), 카페인, 카르니틴, L-카르니틴, 시네프린, 클로로겐산, 및 다른 친수성 약물 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물인 제약 조성물.
  15. 제14항에 있어서, 레스베라트롤 대 친수성 약물의 중량비가 20:1 내지 1:30인 제약 조성물.
  16. 제14항에 있어서, 친수성 약물이 에피갈로카테킨 갈레이트이고, 제약 조성물 중의 에피갈로카테킨 갈레이트의 농도가 0.25 내지 300 mg/mL인 제약 조성물.
  17. 제14항에 있어서, 친수성 약물이 녹차 추출물이고, 레스베라트롤 대 녹차 추출물의 중량비가 30:1 내지 1:30인 제약 조성물.
  18. 대상체의 국부 부위에 제약 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 상기 대상체의 국부 피하 지방을 감소시키는 방법이며, 여기서 제약 조성물은
    약물-함유 미셀; 및
    상기 약물-함유 미셀 내에 캡슐화된 레스베라트롤
    을 포함하며, 여기서 약물-함유 미셀은 제약상 허용되는 비-이온성 계면활성제에 의해 형성된 미세구조이고, 비-이온성 계면활성제의 친수성-친유성 균형 값 (HLB 값)은 10 초과인 방법.
  19. 제18항에 있어서, 약물-함유 미셀의 직경이 3 내지 250 nm인 방법.
  20. 제18항에 있어서, 비-이온성 계면활성제가 폴리소르베이트 80 (트윈 80), 2-히드록시에틸 12-히드록시옥타데카노에이트 (솔루톨 HS 15), 폴리옥시에틸렌 피마자 오일 유도체, 및 다른 비-이온성 계면활성제 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물인 방법.
  21. 제20항에 있어서, 폴리옥시에틸렌 피마자 오일 유도체가 크레모포르 ELP, 크레모포르 RH 40, 및 다른 폴리옥시에틸렌 피마자 오일 유도체 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물인 방법.
  22. 제18항에 있어서, 레스베라트롤 대 비-이온성 계면활성제의 중량비가 1:4 내지 1:500인 방법.
  23. 제18항에 있어서, 제약 조성물 중의 레스베라트롤의 농도가 0.2 내지 166.7 mg/mL인 방법.
  24. 제18항에 있어서, 제약 조성물이 제약상 허용되는 수용액을 추가로 포함하는 것인 방법.
  25. 제18항 또는 제24항에 있어서, 제약 조성물이 제2 친유성 약물-함유 미셀을 추가로 포함하며; 여기서 제2 친유성 약물-함유 미셀이 제2 비-이온성 계면활성제에 의해 형성된 또 다른 미세구조이고, 제2 친유성 약물이 상기 제2 친유성 약물-함유 미셀 내에 캡슐화된 것인 방법.
  26. 제25항에 있어서, 제2 비-이온성 계면활성제의 친수성-친유성 균형 값 (HLB 값)이 10 초과인 방법.
  27. 제26항에 있어서, 제2 비-이온성 계면활성제가 폴리소르베이트 80 (트윈 80), 2-히드록시에틸 12-히드록시옥타데카노에이트 (솔루톨 HS 15), 폴리옥시에틸렌 피마자 오일 유도체, 및 다른 비-이온성 계면활성제 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물인 방법.
  28. 제27항에 있어서, 제2 비-이온성 계면활성제가 크레모포르 ELP, 크레모포르 RH 40, 및 다른 폴리옥시에틸렌 피마자 오일 유도체 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물인 방법.
  29. 제25항에 있어서, 제2 친유성 약물이 퀘르세틴, 시네프린, 푸에라린, 쿠르쿠미노이드; 및 레스베라트롤을 제외한 다른 친유성 약물 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물인 방법.
  30. 제29항에 있어서, 레스베라트롤 대 제2 친유성 약물의 중량비가 30:1 내지 1:20인 방법.
  31. 제18항 또는 제24항에 있어서, 제약 조성물이 친수성 약물을 추가로 포함하는 것인 방법.
  32. 제31항에 있어서, 친수성 약물이 녹차 추출물, 에피갈로카테킨 갈레이트, 에피카테킨, 에피카테킨 갈레이트, 에피갈로카테킨, 갈로카테킨 갈레이트, 갈로카테킨, 카테킨 갈레이트, 카테킨, 에피갈로카테킨 갈레이트 (EGCG), 카페인, 카르니틴, L-카르니틴, 시네프린, 클로로겐산, 및 다른 친수성 약물 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물인 방법.
  33. 제32항에 있어서, 레스베라트롤 대 친수성 약물의 중량비가 20:1 내지 1:30인 방법.
  34. 제32항에 있어서, 친수성 약물이 에피갈로카테킨 갈레이트이고, 제약 조성물 중의 에피갈로카테킨 갈레이트의 농도가 0.25 내지 300 mg/mL인 방법.
  35. 제32항에 있어서, 친수성 약물이 녹차 추출물이고, 레스베라트롤 대 녹차 추출물의 중량비가 30:1 내지 1:30인 방법.
  36. 제35항에 있어서, 계면활성제의 양이 레스베라트롤과 녹차 추출물의 총량의 1 중량부를 기준으로 하여 0.24 내지 70 중량부이거나; 또는 레스베라트롤과 녹차 추출물의 총 중량 대 계면활성제의 중량비가 4:1 내지 1:70인 방법.
  37. 제18항에 있어서, 국부 부위에 주사될 제약 조성물의 투여되는 투여량이 0.2 내지 20 mg/cm2인 방법.
  38. 제18항에 있어서, 국부 부위에 투여될 제약 조성물의 투여량이 0.2 내지 40 mg/kg인 방법.
  39. 제18항에 있어서, 제약 조성물의 투여 빈도가 격일마다 내지 30일마다 1 내지 12회인 방법.
  40. 제18항에 있어서, 대상체가 동물 또는 인간인 방법.
  41. 제18항에 있어서, 단계가 대상체의 국부 부위에 제약 조성물을 주사 또는 적용하는 것인 방법.
  42. 제18항에 있어서, 제약 조성물이 공용매, 현탁제, 및 오일 상 부형제 중 적어도 하나, 또는 그의 조합물을 추가로 포함하는 것인 방법.
  43. 제42항에 있어서, 미세구조가 비-이온성 계면활성제; 및 오일 상 부형제 및 공용매 중 적어도 하나에 의해 공동-형성된 것인 방법.
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Families Citing this family (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US10537548B2 (en) 2014-08-28 2020-01-21 Caliway Biopharmaceuticals Co., Ltd. Composition and medical product for reducing body weight and body fat, and use of said product
MX2018002462A (es) * 2015-08-28 2018-06-19 Caliway Biopharmaceuticals Co Ltd Una composicion farmaceutica para reducir la grasa localizada y sus usos.
US11318110B2 (en) 2015-08-28 2022-05-03 Caliway Biopharmaceuticals Co., Ltd. Pharmaceutical composition for reducing local fat and uses thereof
EP3505168A1 (en) 2016-08-26 2019-07-03 Caliway Biopharmaceuticals Co., Ltd. Subcutaneous injection for reducing body weight and application thereof
EP3541815A4 (en) 2016-11-18 2020-07-15 Pacira Pharmaceuticals, Inc. ZINC MELXICAM COMPLEX MICROPARTICLE MULTIVESICULAR LIPOSOME FORMULATIONS AND METHODS OF MAKING THE SAME
KR20190134671A (ko) * 2017-03-28 2019-12-04 칼리웨이 바이오파마슈티칼스 코., 엘티디. 체중을 감소시키고 체지방을 감소시키기 위한 조성물 및 그의 제약 생성물 및 적용
WO2020194344A1 (en) 2019-03-24 2020-10-01 Patel Naishadhkumar Ramubhai Formulation to enhance the bioavailibity and stability of curcuminoids and/or its derivatives thereof
CN110934827B (zh) * 2019-11-08 2021-03-19 江西中医药大学 一种口服葛根素混合胶束制剂、制备方法及应用
CN113730650B (zh) * 2021-10-13 2022-11-01 哈尔滨泽润医疗机构管理有限公司 一种碳水溶酶组合物及其制备方法和应用
WO2023192259A1 (en) * 2022-03-28 2023-10-05 Board Of Supervisors Of Louisiana State University And Agricultural And Mechanical College Synergy for increasing insulin sensitivity
US20230372378A1 (en) * 2022-05-16 2023-11-23 Caliway Biopharmaceuticals Co., Ltd. Compositions and methods for alleviating conditions caused by abnormal subcutaneous deposit of adipose tissue or fat

Family Cites Families (76)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6048736A (en) * 1998-04-29 2000-04-11 Kosak; Kenneth M. Cyclodextrin polymers for carrying and releasing drugs
ES2433678T3 (es) * 1999-03-03 2013-12-12 Eli Lilly & Company Formulaciones farmacéuticas de equinocandina que contienen tensioactivos formadores de micelas
DE60031921T2 (de) * 1999-08-16 2007-09-20 Dsm Ip Assets B.V. Verfahren zu Herstellung von Epigallocatechin Gallate
US6475530B1 (en) 2000-05-31 2002-11-05 Eric H. Kuhrts Methods and compositions for producing weight loss
US6383482B1 (en) * 2000-08-24 2002-05-07 Vitacost.Com, Inc. Weight loss composition containing green tea, hydroxycitric acid, 5-hydroxytryptophan, glucomannan, picolinate and lactobacillus
US20040071799A1 (en) 2001-02-12 2004-04-15 Xiurong Xu Herbal compositions and methods for effecting weight loss in humans
JP4179494B2 (ja) 2001-10-23 2008-11-12 株式会社カネカ ペルオキシソーム増殖剤応答性受容体リガンド剤
US20040146539A1 (en) 2003-01-24 2004-07-29 Gupta Shyam K. Topical Nutraceutical Compositions with Selective Body Slimming and Tone Firming Antiaging Benefits
US20060121158A1 (en) 2003-06-04 2006-06-08 Mario Ferruzzi Weight management beverage
CN100539988C (zh) * 2003-06-27 2009-09-16 株式会社太平洋 含有生理活性成分的自聚集聚合物纳米颗粒和含有该纳米颗粒的外用搽剂
CA2548671C (en) 2003-12-29 2015-02-24 President And Fellows Of Harvard College Compositions for treating or preventing obesity and insulin resistance disorders
US20050232974A1 (en) * 2004-04-19 2005-10-20 Gore Makarand P System and a method for pharmaceutical dosage preparation using jettable microemulsions
US20050267221A1 (en) * 2004-05-14 2005-12-01 Research Development Foundation Use of curcumin and analogues thereof as inhibitors of ACC2
CN100486567C (zh) * 2004-08-12 2009-05-13 山东绿叶天然药物研究开发有限公司 姜黄素乳剂及其制备方法
WO2006074278A2 (en) 2005-01-05 2006-07-13 Mitsunori Ono Compositions for treating diabetes or obesity
WO2006082068A1 (de) 2005-02-04 2006-08-10 Peter Heger Verwendung einer hydroxystilben-haltigen wirkstoffkombination zur prävention und/oder behandlung von krankheiten
ITFI20050031A1 (it) 2005-02-21 2006-08-22 Stefan Coccoloni Una composizione farmaceutica atta a prevenire l'invecchiamento e l'insorgere di malattie vascolari,neoplastiche,cutanee e dell'apparato pilifero
AU2006270165B2 (en) 2005-07-14 2010-03-11 Neothetics, Inc. Sustained release enhanced lipolytic formulation for regional adipose tissue treatment
JP2007063137A (ja) 2005-08-29 2007-03-15 Daicho Kikaku:Kk 抗肥満薬
WO2007041276A2 (en) 2005-09-29 2007-04-12 New Chapter, Inc. Methods for modulating apoptosis, cellgrowth, and protein expression with herbal compositions
JP2007131603A (ja) 2005-11-14 2007-05-31 Kaneka Corp Ｌ−カルニチン合成系酵素遺伝子の転写促進用組成物
CN100367951C (zh) * 2005-12-16 2008-02-13 石药集团恩必普药业有限公司 丁苯酞静脉乳剂及其应用
WO2007103435A2 (en) * 2006-03-06 2007-09-13 The Regents Of The University Of California Bioavailable curcuminoid formulations for treating alzheimer's disease and other age-related disorders
WO2007112996A2 (en) 2006-03-31 2007-10-11 Dsm Ip Assets B.V. Novel use of compounds and combinations of compunds for improving the physical appearance
US7977319B1 (en) 2006-04-03 2011-07-12 Scott David Levine Ultra-high fiber supplement and method of reducing weight, cardiovascular risks and ingested toxins
WO2007113008A2 (en) * 2006-04-04 2007-10-11 Dsm Ip Assets B.V. Opaque container comprising food or pharmaceutical products or herbal(s)
CN101095665A (zh) 2006-06-27 2008-01-02 中国科学院上海生命科学研究院 Sirt1在预防、控制或治疗肥胖中的用途
US7923026B2 (en) * 2006-10-20 2011-04-12 Solvay Pharmaceuticals B.V. Embedded micellar nanoparticles
JP2008133272A (ja) * 2006-10-31 2008-06-12 Ito En Ltd Ｃｐｔ活性亢進剤及び飲食物
KR101069502B1 (ko) * 2006-10-31 2011-09-30 (주)아모레퍼시픽 비만 및 당뇨병 개선용 경구용 조성물
CN101310718A (zh) * 2007-05-23 2008-11-26 中国科学院上海生命科学研究院 减肥降血脂的含儿茶素的组合物及其用途
CN102357226B (zh) 2007-08-07 2013-07-10 北京北大维信生物科技有限公司 中草药姜黄的醇提取物在制备具有脂肪酶活性抑制作用的药物中的应用
WO2009066303A2 (en) 2007-11-22 2009-05-28 Ganga Raju Gokaraju New synergistic phytochemical composition for the treatment of obesity
EP2249806A2 (en) * 2008-01-08 2010-11-17 Sirtris Pharmaceuticals, Inc. Resveratrol formulations
JP5564490B2 (ja) 2008-04-18 2014-07-30 リアタ ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド 抗炎症性ファルマコアを含む化合物および使用法
EP2429481A4 (en) * 2008-06-25 2014-08-13 Elc Man Llc METHOD AND COMPOSITIONS FOR IMPROVING THE APPEARANCE OF SKIN AND BODY
WO2010048114A1 (en) 2008-10-22 2010-04-29 Metaproteomics, Llc Novel mitochondrial uncoupling methods and compositions for enhancing adipocyte thermogenesis
US8496974B2 (en) * 2008-11-25 2013-07-30 Oy Granula Ab Ltd Method for preparing a composition comprising a compound mixture and a carrier agent
CN102264348A (zh) * 2008-11-26 2011-11-30 脂蛋白技术有限公司 生物活性提高的白藜芦醇制剂
MA33220B1 (fr) * 2009-03-20 2012-04-02 Bioxtract S A Composition pharmaceutique a proprietes anti-inflammatoires
CN101874763A (zh) * 2009-04-29 2010-11-03 上海家化联合股份有限公司 一种白藜芦醇柔性脂质体及其制备方法
KR20100124519A (ko) * 2009-05-19 2010-11-29 (주)아모레퍼시픽 녹차 추출물을 함유하는 조성물
CN101632655B (zh) 2009-08-04 2011-12-07 南京大渊美容保健有限公司 延缓衰老的白藜芦醇和生物类黄酮营养组合物
JP5594819B2 (ja) 2009-12-22 2014-09-24 キリンホールディングス株式会社 脂質代謝改善用組成物
CN104771364B (zh) * 2010-03-10 2018-05-25 艾伯维巴哈马有限公司 固体组合物
US8835509B2 (en) 2010-05-31 2014-09-16 Arbro Pharmaceuticals Ltd. Self emulsifying drug delivery system for a curcuminoid based composition
WO2012003515A2 (en) * 2010-07-02 2012-01-05 Eric Hauser Kuhrts Stable fatty acid-containing formulations
JP6043283B2 (ja) 2010-07-02 2016-12-14 ヘリックス バイオメディックス, インコーポレイテッドHelix Biomedix, Inc. セルライト等の皮膚状態を治療するためのｎ−アシルアミノ酸誘導体
KR101640258B1 (ko) * 2010-07-05 2016-07-15 주식회사 엘지생활건강 적포도 추출물, 녹차 추출물, 대두 추출물 및 ｌ－카르니틴을 유효성분으로 함유하는 항비만 조성물
US20130143869A1 (en) 2010-07-16 2013-06-06 Merz Pharma Gmbh & Co. Kgaa Use of a cationic amphiphilic drug for the preparation of a formulation for the reduction of subcutaneous adipose tissue
US20120088829A1 (en) * 2010-09-29 2012-04-12 MyCell Holdings Limited Formulations of Ubiquinol and Resveratrol Esters
CN102106816A (zh) * 2010-12-16 2011-06-29 天津迈迪瑞康生物医药科技有限公司 一种白藜芦醇纳米制剂及其制备方法
US8815310B2 (en) 2011-01-10 2014-08-26 Morteza Naghavi Compositions for boosting metabolism, assisting weight loss, and promoting cardiovascular health
CN102512404B (zh) 2011-11-18 2014-05-07 上海交通大学 一种姜黄素类化合物肺靶向制剂及其制备方法与应用
EP2799081A4 (en) 2011-12-27 2015-06-24 Tokiwa Phytochemical Co Ltd SIRTUIN ACTIVATOR
US20140348926A1 (en) * 2012-01-19 2014-11-27 Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem Ltd. Formulation and method for increasing oral bioavailability of drugs
US8496979B1 (en) 2012-02-02 2013-07-30 Reliv International, Inc. Caffeine-free dietary supplements for increasing energy and methods of administering the same
CN104125848A (zh) 2012-02-29 2014-10-29 雅芳产品公司 Cpt-1调节剂的用途及其组合物
US8652518B2 (en) 2012-04-15 2014-02-18 Jahahreeh Finley Compositions and methods for the prevention and treatment of diseases or conditions associated with oxidative stress, inflammation, and metabolic dysregulation
WO2014025672A1 (en) 2012-08-04 2014-02-13 Eric Hauser Kuhrts Water-soluble lipophilic natural compound formulations
WO2014028607A1 (en) * 2012-08-14 2014-02-20 Abbott Laboratories Low glycemic index nutritional compositions for preserving muscle mass and improving body composition in diabetics
US9211298B2 (en) 2012-11-16 2015-12-15 Song Gao Compositions containing enriched natural crocin and/or crocetin, and their therapeutic or nutraceutical uses
DE202012012130U1 (de) * 2012-12-19 2014-03-21 Aquanova Ag Curcuminsolubilisat
WO2014138426A2 (en) * 2013-03-07 2014-09-12 Topokine Therapeutics, Inc. Methods and compositions for reducing body fat and adipocytes
CN103285401A (zh) * 2013-05-27 2013-09-11 沈阳药科大学 一种能提高难溶性药物溶解性和生物利用度的组合物
US9458086B1 (en) * 2013-07-03 2016-10-04 University Of South Florida (A Florida Non-Profit Corporation) Compositions and methods for adipocyte modulation
WO2015072602A1 (ko) 2013-11-15 2015-05-21 (주)다미화학 난용성 물질의 수용액 가용화 조성물 및 이를 이용한 난용성 물질의 수용액 가용방법
US20160287533A1 (en) * 2013-11-27 2016-10-06 Research Foundation Of The City University Of New York Activity Enhancing Curcumin Compositions and Methods of Use
TW201540294A (zh) * 2014-04-25 2015-11-01 Caliway Biomedical Co Ltd 用於抑制脂肪細胞、降低體脂肪、減少體重或促進脂肪代謝之植物萃取組成物及其醫藥組合物與用途
CN103989659B (zh) * 2014-05-26 2016-09-07 重庆医科大学 姜黄素纳米结构脂质载体及其制备方法
AU2015309351B2 (en) 2014-08-28 2019-01-03 Caliway Biopharmaceuticals Co., Ltd. Composition and medicinal product for reducing body weight and body fat, and use of said product
US10226503B2 (en) 2014-08-28 2019-03-12 Caliway Biopharmaceuticals Co., Ltd. Plant extract composition for reducing topical fat and promoting weight loss as well as applications thereof
JP6473505B2 (ja) * 2014-08-28 2019-02-20 カリウェイ バイオファーマシューティカルズ カンパニー リミテッド 局所の脂肪と体重の減少に用いられる組成物およびその医薬品と使用
US11318110B2 (en) 2015-08-28 2022-05-03 Caliway Biopharmaceuticals Co., Ltd. Pharmaceutical composition for reducing local fat and uses thereof
MX2018002462A (es) 2015-08-28 2018-06-19 Caliway Biopharmaceuticals Co Ltd Una composicion farmaceutica para reducir la grasa localizada y sus usos.
EP3505168A1 (en) 2016-08-26 2019-07-03 Caliway Biopharmaceuticals Co., Ltd. Subcutaneous injection for reducing body weight and application thereof

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