KR20180020798A - 혈중요산감소를 위한 섬쑥부쟁이 추출물과 비타민을 포함하는 조성물 - Google Patents
혈중요산감소를 위한 섬쑥부쟁이 추출물과 비타민을 포함하는 조성물Info
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Abstract
본 발명은 섬쑥부쟁이 추출물 및 비타민 B6의 혼합물을 유효성분으로 함유하는 혈중 요소 농도 저하용 조성물, 또는 통풍 또는 고요산혈증의 예방, 개선 및/또는 치료용 약학/식품 조성물, 및 이를 이용하는 통풍 또는 고요산혈증의 예방 및/또는 치료 방법에 관한 것이다
Description
본 발명은 섬쑥부쟁이 추출물 및 비타민 B6를 혼합하여 사용하는 경우 혈중요산 농도 저하 효과가 현저하여 이를 유효성분으로 포함하는 혈중 요소 농도 저하용 조성물, 및 통풍 또는 고요산혈증의 예방, 개선, 또는 치료용 조성물 및 이를 제조하는 방법에 관한 것이다.
통풍은 예로부터 너무 잘 먹어서 생기는 병이라 하여 "황제병" 또는 "귀족병"이라 불리기도 하는데 혈중의 요산이 증가할수록 그 발병 가능성이 높다고 알려져 있다. 통풍 진료인원의 연령별 점유율을 살펴보면 2011년을 기준으로 50대가 25.6%로 가장 많은 점유율을 차지하고 있으며 40대가 22.6%, 60대가 17.9%의 순의 점유율을 보인다. 40~50대가 약 48.2%로 통풍 진료인원의 2명 중 1명은 40~50대의 중년층인 것으로 나타났다.
통풍질환을 성별로 분석해 본 결과 남성 진료인원은 2007년 146,050명에서 2011년 218,875명으로 약 7만 2천명이 증가(49.9%)하였으며, 여성 진료인원은 2007년 17,117명에서 2011년 21,763명으로 약 4천명이 증가(27.1%)한 것으로 나타났다. 성별 비율은 남성 진료인원이 전체 환자의 90% 이상을 차지하는 추세이며, 연평균 증가율도 남성이 약 4.5% 더 높은 것으로 나타났다. 통풍이 주로 남성에게 발생하는 이유는 남성은 신장에서 요산 제거능력이 나이가 들수록 감소하는데 반하여 여성은 폐경이전까지 여성호르몬의 영향으로 요산제거 능력이 유지되기 때문으로 알려져 있다.
서구화된 식생활로 인하여 요산의 섭취량이 증가되고, 또한 요산이 제대로 분해되지 못하고 체내에 축적되어 고요산혈증(Hyperuricemia) 질환을 유발하게 되는데, 고요산혈증은 알콜이나 육류의 내장, 해산물 섭취가 증가하면서 그 발생빈도가 증가하고 있으며, 고혈압, 고지혈증, 암, 당뇨병 및 비만 등으로 확대될 가능성이 있어 사전에 예방할 수 있는 식품의 섭취가 필요하다. 현재 이러한 통풍이나 혈중 요산을 감소시킬 수 있는 기능성을 가진 건강기능식품은 부재한 상황이다.
정상 혈중 요산 농도는 여자는 6 mg/dL, 남자는 6.8 mg/dL 이하이지만 혈중 요산 농도가 일시적으로 정상보다 높다고 해서 통풍이 곧 발병하는 것은 아니다. 요산 농도가 6mg/dL 이하에서는 통풍이 발생하지 않고 9.6 mg/dL 이상에서는 반드시 발생하지만 그 사이 농도에서는 사람에 따라 증상이 나타나는 농도가 다르며, 혈중 요산 농도가 높을수록 요산 결정체가 더 쉽게 형성되어 여러 조직에 침착하게 되고 이런 상태가 10 내지 20년간 지속된 후 여러 유발 인자에 의해서 실질적인 통풍 증상을 일으키게 되므로 일단 통풍 증상이 발생했다는 것은 과거 수년 전부터 혈중 요산 농도가 높은 고요산혈증(Hyperuricemia)이었음을 의미한다.
모든 세포의 핵에는 유전 정보를 가지고 있는 핵산이 존재하고, 핵산은 퓨린(Purine)과 피리미딘(Pyrimidine)으로 구성되어 있다. 퓨린 분해 경로를 살펴보면 사람이나 침팬지에서는 요산(uric acid)로 배설되는데, 이노신이 이노신 포스포릴레이즈(inosine phosphorylase)에 의해 하이포잔틴(hypoxanthine)이 형성되며 이후로 잔틴과 요산의 형성은 잔틴 산화효소(xanthine oxidase)에 의해 이루어진다. 요산은 주로 신장에서 요소의 형태로 배설됨에 따라 일정량을 유지해 가지만 너무 지나치게 많으면 결정화 되어 관절과 같은 몸의 조직에 쌓이게 된다. xanthine oxidase의 기능장애 또는 용혈성질환, 적혈구 증가, 과음, 비만, 운동과다 등에 의해 요산이 비정상적으로 많아지게 되는 경우나 신장 기능 이상, 요붕증, 고혈압, 납중독, 부갑상선기능항진, 갑상선 기능 저하 등에 의해 신장에서 요산 배설에 문제가 생기는 경우가 이에 해당된다.
통풍은 관절의 염증에 관여하며 다른 관절 질환과 달리 면역시스템이 아닌 주로 인체 대사에 관여한다. 일반적으로 퓨린을 고농도로 함유하고 있는 식품으로는 장기육(Organ Meats), 저장육(Cured Meats), 해산물, 오래된 치즈 그리고 적포도주 및 맥주 등이 있으며 이들은 통풍의 위험을 현저하게 증가시킨다.
방향성 식용식물자원 중 하나인 섬쑥부쟁이의 어린순은 부지갱이나물이라고도 불리며, 향이 진한 것이 특징이다. 울릉도의 섬쑥부쟁이는 육지에서 나는 쑥부쟁이보다 잎이 더 크고, 성장속도가 빠르기 때문에 생산량이 많아 오래 전부터 나물로 식용하였다. 부지갱이나물은 튀겨서 먹기도 하며 국에 넣어 식용하기도 하고 묵나물로 저장하면서 이용되기도 한다. 다른 쑥부쟁이류와 마찬가지로 약간 쓰고 떫은 맛이 나지만, 예로부터 칼슘과 철분이 풍부하여 시금치 대용으로도 사용되었다. 섬쑥부쟁이의 일반성분으로는 수분 5.72%, 단백질 29.0%, 지방 3.5%, 조섬유 5.82%로 국내산 산채류 중 섬쑥부쟁이의 단백질 함량이 가장 높은 것으로 보고되었다.
섬쑥부쟁이의 전초는 기침, 이뇨, 천식에 대한 약리작용을 가지고 있다고 알려져 있다. 또한, 감기의 열을 내리고 편도선염의 거담제 역할을 하는 약용식물로 사용되어 왔다. 아직까지 섬쑥부쟁이에 관한 연구는 거의 수행되지 않았지만, 일부 향미성분, 항산화 효과 및 약리작용 관련 성분에 관한 연구들이 보고되어 있다.
섬쑥부쟁이의 성숙이 완료된 식물은 식용으로 사용되지 않아 폐기되거나 일부 동물사료로 이용되고 있는데, 이를 활용하여 혈중 요산의 감소기능을 가진 건강기능식품으로 개발된다면 농가 소득 증대와 고부가가치 창출이 가능할 것으로 예상된다.
본 발명은 섬쑥부쟁이 추출물에 비타민 B6를 적용하여 혈중 요산 농도 저하효과가 향상된 조성물에 관한 것으로서, 종래 대비 잔틴산화효소 저해 효과가 향상된 섬쑥부쟁이 추출물 및 비타민 B6를 포함하는 조성물을 통풍 또는 고요산혈증의 예방 또는 치료용 약학 조성물 또는 건강기능식품에 적용하여 효과적으로 사용하는 것을 목적으로 한다.
상기에서 언급된 기술적 과제를 해결하고자 본 발명을 완성하였으며, 이하 본 발명을 설명한다.
본 발명의 일 예는 섬쑥부쟁이 추출물 및 비타민 B6를 포함하는 혈중 요산 농도 저하용 조성물 및 이를 제조하는 방법에 관한 것이다.
본 발명의 또 다른 일 예는 섬쑥부쟁이 추출물 및 비타민 B6를 포함하는 통풍 또는 고요산혈증의 예방, 치료 또는 개선용 약학 조성물 또는 건강기능식품에 관한 것이다.
또한 본 발명의 일 예는 섬쑥부쟁이 추출물 및 비타민 B6를 포함하는 조성물을 포함하는 통풍 또는 고요산혈증의 예방 및/또는 치료를 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계를 포함하는 통풍 또는 고요산혈증 예방 및/또는 치료 방법을 제공한다.
본 발명의 섬쑥부쟁이 추출물 및 비타민 B6를 포함하는 조성물은 각각의 추출물이 단독으로 존재하는 경우보다 현저하게 향상된 잔틴산화효소 저해 효과가 있어 효과적으로 혈중 요산 농도를 저하시켜 통풍 및 고요산혈증의 예방 또는 치료제로서 사용될 수 있다. 또한, 본 발명에서는 상기와 같은 섬쑥부쟁이 추출물과 비타민 B6와의 혼합에 의한 약리학적 활성 시너지 효과가 가장 크게 나타나는 최적의 조합 비율을 제시한다.
이하, 본 발명을 더욱 자세히 설명하고자 한다.
본 발명의 일 예는 섬쑥부쟁이 추출물 및 비타민 B6를 포함하는 혈중 요산 농도 저하용 조성물에 관한 것이다.
울릉도의 대표적인 자생식물인 섬쑥부쟁이(Aster glehni)는 다년생 식물로 국화과 개미취속에 속하며 모양은 취나물과 비슷하게 생겼다. 줄기는 1m 정도의 높이로 자라며 온몸에 짧은 털이 붙어있어 껄껄한 촉감을 가진다, 잎은 어긋나게 자라며 잎 꼭지가 있다. 잎은 버들잎 모양 또는 넓은 버들잎 모양으로 밑 부분은 좁으며 끝이 날카롭고 변두리에 성긴 톱니가 있으며 잔털이 성기게 있다. 섬쑥부쟁이는 8월에서 9월에 걸쳐 하얀색의 꽃을 피우며, 밑부분의 잎은 꽃이 필 때 쓰러진다.
본 발명에 사용되는 섬쑥부쟁이 추출물은 섬쑥부쟁이의 전초, 잎, 줄기, 꽃, 뿌리로 이루어진 군에서 선택된 1 이상의 부위에서 추출된 것일 수 있으며, 바람직하게는 섬쑥부쟁이의 잎에서 추출된 것일 수 있다. 섬쑥부쟁이의 잎을 추출하는 경우 다른 부위로부터 유래된 섬쑥부쟁이 추출물 대비 잔틴산화효소 저해 효능이 더욱 우수한 것을 확인하였다. 상기 섬쑥부쟁이의 채취 시기는 지역이나 기후에 따라 상이하지만, 다른 시기에 채취된 섬쑥부쟁이 대비 가을철, 예를 들어 9월, 10월 및/또는 11월에 수확된 섬쑥부쟁이가 잔틴산화효소 저해 효능이 뛰어나다.
본 명세서에서 정의되는 '추출물'은 섬쑥부쟁이의 조추출물 또는 상기 조추출물의 특정 용매 가용 추출물 또는 분획물을 의미하는 것으로, 용액, 농축물 또는 분말상태일 수 있다.
본 명세서에서 정의되는 섬쑥부쟁이 추출물은 섬쑥부쟁이를, 물, 탄소수 1 내지 4의 직쇄 또는 분지형 알코올, 유기 용매 및 이들의 혼합용매로 이루어진 군에서 선택된 1 이상의 용매로 추출하여 얻어진 조추출물, 또는 상기 조추출물에 물, 탄소수 1 내지 4의 직쇄 또는 분지형 알코올, 유기 용매 및 이들의 혼합용매로 이루어진 군에서 선택된 1 이상의 용매를 가하여 얻어진 용매 가용 추출물일 수 있다.
바람직한 구체예에 있어서, 섬쑥부쟁이 추출물 제조에 사용되는 용매는 물(열수), 또는 20 내지 90 v/v%, 바람직하게는 30 내지 80 v/v%, 더욱 바람직하게는 40 내지 80 v/v%, 보다 바람직하게는 60 내지 80 v/v%의 탄소수 1 내지 4개의 직쇄 또는 분지형 알코올 수용액, 바람직하게는 메탄올 수용액, 에탄올 수용액 및 부탄올 수용액으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상일 수 있다. 또한 상기 유기 용매는 디클로로메탄, 디에틸에터, 클로로포름 및 에틸 아세테이트로 이루어진 군에서 선택된 1 이상인 것, 바람직하게는 디클로로메탄 및/또는 에틸아세테이트일 수 있으나, 이에 한정되지 않는다. 예를 들어 본 발명에 사용되는 추출 용매는 60 내지 80 v/v% 에탄올 수용액일 수 있다.
상기 섬쑥부쟁이 추출물은 3,5-DCQA(3,5-dicaffeoylquinic acid)를 포함하는 것을 특징으로 하며, 3,5-DCQA는 지표물질인 동시에 유효물질로서 작용할 수 있다.
본 발명자들은 섬쑥부쟁이 추출물에 비타민, 특히 비타민 B6를 더욱 포함하여 섬쑥부쟁이 추출물 또는 비타민 B6를 각각 단독으로 포함하는 경우에 비하여 잔틴산화효소 활성을 더욱 상승적으로 저해하는 효과가 있어, 혈중 요산 농도를 효과적으로 감소시킬 수 있음을 확인하였다.
상기 섬쑥부쟁이 추출물 및 비타민 B6의 혼합에 따른 혈중 요소 농도 감소에 따른 통풍 또는 고요산혈증의 예방, 치료 또는 개선의 상승효과를 최대화하기 위하여, 상기 혼합 조성물 내의 섬쑥부쟁이 추출물 및 비타민 B6의 함량비는 고형분 중량 기준으로 1:1010, 1:108, 1:107, 2:107, 5:107, 1:106, 2:105, 5:105, 1:105, 1:104, 1:102, 2:102, 5:102, 1:10, 2:10, 4:10, 5:10, 6:10, 8:10, 1:1, 1.2:1, 1.4:1, 1.6:1. 1.8:1, 2:1, 1:0.5, 1: 1 및 1:10- 1으로 이루어진 군에서 선택된 2개 값을 조합한 함량비 범위, 예를 들어 1:1010 내지 1: 10-1 또는 1:108 내지 1:1, 또는 2:10 내지 1.4:1의 함량비 범위로 혼합된 것이 좋다. 본 발명에서 사용되는 용어 '고형분'은 추출물 제조에 사용된 용매를 제거한 상태를 의미한다.
상기 조성물 내에 섬쑥부쟁이 추출물과 비타민 B6의 혼합에 따른 상승 효과는 섬쑥부쟁이 추출물 및 비타민 B6의 농도비는 1:1010, 1:108, 1:107, 2:107, 5:107, 1:106, 2:105, 5:105, 1:105, 1:104, 1:102, 2:102, 5:102, 1:10, 2:10, 4:10, 5:10, 6:10, 8:10, 1:1, 1.2:1, 1.4:1, 1.6:1. 1.8:1, 2:1, 1:0.5, 1: 1 및 1:10- 1으로 이루어진 군에서 선택된 2개 값을 조합한 농도비 범위, 예를 들어 1:1010 내지 1: 10-1 또는 1:108 내지 1:1, 또는 2:10 내지 1.4:1의 농도비 범위로 혼합된 것을 포함한다. 상기 범위의 섬쑥부쟁이 추출물 및 비타민 B6의 농도비에서 각각을 단독으로 사용하는 것 대비 잔틴산화효소의 저해 효과가 월등이 우수한 것을 확인하였다.
본 발명의 또 다른 예로서, 섬쑥부쟁이 추출물 및 비타민 B6를 포함하는 혈중 요산 농도 저하용 조성물의 제조방법을 포함한다.
상기 조성물에 관한 내용은 섬쑥부쟁이 추출물 및 비타민 B6를 포함하는 조성물의 제조방법에 동일하게 적용될 수 있다.
구체적으로 상기 제조방법은 1) 섬쑥부쟁이의 전초, 잎, 줄기, 꽃, 뿌리로 이루어진 군에서 선택된 1 이상의 부위를 수확하는 단계; 2) 상기 수확된 섬쑥부쟁이를 물, 탄소수 1 내지 4의 직쇄 또는 분지형 알코올, 유기 용매 및 이들의 혼합용매로 이루어진 군에서 선택된 1 이상의 용매로 추출하는 단계; 및 3) 상기 추출된 용매추출물에 비타민 B6를 추가하여 혼합하는 단계를 포함할 수 있다.
상기 1) 섬쑥부쟁이를 수확하는 단계에서 사용되는 섬쑥부쟁이는 세척하는 단계, 절단하는 단계 또는 여과하는 단계를 추가로 포함하여 처리될 수 있으며, 잘게 절단하거나 이를 분말화하여 사용하거나, 분말을 냉동 건조시킨 후 사용할 수 있다.
상기 2) 섬쑥부쟁이를 용매로 추출하는 단계에서는 통상적으로 사용되는 모든 추출 방법을 사용할 수 있으며, 예컨대, 냉침 추출, 열수추출, 초음파 추출, 환류 추출 또는 냉각 추출, 바람직하게는 환류 추출일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 상기 추출 단계는 1 이상 반복하여 수행될 수 있으며, 2차 이상으로 추출된 추출물 및 각 추출 후 얻어진 여과액을 혼합하여 추출하여 추출효율을 높일 수 있다.
또한 상기 추출 단계에서 얻어진 추출물을 약 2 내지 10배, 바람직하게는 약 3 내지 7배의 부피의 물로 현탁시킨 후 물, 탄소수 1 내지 4의 직쇄 또는 분지형 알코올, 유기 용매 및 이들의 혼합용매로 이루어진 군에서 선택된 1 이상의 용매를 가하여 용매 가용층을 추출한 후 감압 농축하여 용매 가용 추출물을 제조하는 방법을 추가로 포함하여 불필요한 단백질, 다당류 및 지방산 등의 불순물을 정제할 수 있다.
상기 추출물을 여과 또는 농축하는 단계를 추가로 포함할 수 있다. 농축 단계에 의해 제조되는 농축물은 의약품 원료로 사용하기에 적합하도록 잔존하는 용매의 함량을 조절하기 위하여 농축물 총량의 약 10 내지 30배, 바람직하게는 15 내지 25배, 보다 바람직하게는 약 20 중량배의 물로 1 내지 5회, 바람직하게는 2 내지 3회 공비 농축하고 재차 동량의 물을 가하여 균질하게 현탁시킨 후 살균 및/또는 동결건조시킴으로써 분말상태의 섬쑥부쟁이 추출물로서 제조될 수 있다.
상기 3) 비타민 B6를 추가로 혼합하는 단계에서 사용되는 비타민 B6는 통상적으로 사용하는 혼합방법으로 혼합하여 사용할 수 있다.
또 다른 예로서, 본 발명은 섬쑥부쟁이 추출물 및 비타민 B6를 포함하는 통풍 또는 고요산혈증의 예방 또는 치료용 약학 조성물 또는 통풍 또는 고요산혈증의 예방 또는 개선용 식품 조성물에 관한 것이다.
상기 조성물에 관한 사항은 약학 조성물 또는 식품 조성물에 동일하게 적용될 수 있다.
상기 섬쑥부쟁이 추출물 및 비타민 B6는 혈중 요산 농도 강하 효과가 있어 통풍 또는 고요산혈증의 예방, 치료 또는 개선을 위한 활성성분으로서 포함될 수 있으며, 상기 통풍은 예를 들어 통풍성 관절염, 통풍성 신질환 및 통풍성 신결석증으로 이루어진 군에서 선택된 1 이상을 포함하나, 본 발명의 통풍 질환이 이에 의해 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 조성물은 상기 추출물 이외에 약제학적으로 적합하고 생리학적으로 허용되는 담체, 부형제 및 희석제 등의 보조제를 추가로 함유하는 것일 수 있다.
본 발명의 조성물을 인간에게 적용하는 구체예에 있어서, 본 발명의 조성물은 단독으로 투여될 수 있으나, 일반적으로 투여방식과 표준 약제학적 관행(standard phamaceutical practice)을 고려하여 선택된 약제학적 담체와 혼합되어 투여될 수 있다. 예를 들면, 본 발명의 조성물은 전분 또는 락토오즈를 함유하는 정제 형태로, 또는 단독 또는 부형제를 함유하는 캡슐 형태로, 또는 맛을 내거나 색을 띄게 하는 화학 약품을 함유하는 엘릭시르 또는 현탁제 형태로 경구, 구강내 또는 혀밑 투여될 수 있다. 이러한 액체 제제는 현탁제(예를 들면, 메틸셀룰로오즈, 위텝솔(witepsol)과 같은 반합성 글리세라이드 또는 행인유(apricot kernel oil)와 PEG-6 에스테르의 혼합물 또는 PEG-8과 카프릴릭/카프릭 글리세라이드의 혼합물과 같은 글리세라이드 혼합물)와 같은 약제학적으로 허용 가능한 첨가제와 함께 제형화될 수 있다.
본 발명에 따른 조성물은 인간을 포함하는 포유동물에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여 방식은 통상적으로 사용되는 모든 방식일 수 있으며, 예컨대, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하, 자궁내 경막 또는 뇌혈관내 (intracerebroventricular) 주사에 의해 투여될 수 있다. 본 발명의 조성물은 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 경피제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태의 비경구 제형 등으로 제형화하여 사용될 수 있다.
상기 섬쑥부쟁이 추출물 및 비타민 B6를 포함하는 식품 조성물은 통풍 또는고요산혈증의 예방 또는 개선용 건강 기능 식품일 수 있으며, 상기 건강 기능성 식품은 각종 식품, 음료, 식품 첨가제 등일 수 있다.
상기 건강 기능성 식품에 함유된 유효성분으로서의 추출물의 함량은 식품의 형태, 소망하는 용도 등에 따라 적절하게 특별한 제한이 없으며, 예컨대, 건강 음료 조성물은 100㎖를 기준으로 0.1 내지 5g, 바람직하게는 0.2 내지 4g의 범위로, 또는 4g, 또는 2g으로 가할 수 있다.
본 발명의 또 다른 예는 섬쑥부쟁이 추출물 및 비타민 B6를 포함하는 조성물을 치료적 유효량으로 투여하는 단계를 포함하는 통풍 또는 고요산혈증을 예방 또는 치료하는 방법을 제공한다. 상기 조성물은 환자에게 투여될 수 있으며, 예를 들어 통풍 또는 고요산혈증의 예방 및/또는 치료를 필요로 하는 모든 포유류, 바람직하게는 인간일 수 있다.
상기 치료적 유효량은 소망하는 치료 효과를 얻기 위하여 정해진 투여양으로, 환자의 나이, 몸무게, 성별, 투여형태, 건강상태 및 질환정도에 따라 달라질 수 있으며, 의사 또는 약사의 판단에 따라 달라질 수 있으며, 예컨대, 1일 투여량은 유효성분 함량을 기준으로 0.5 내지 500㎎/kg, 바람직하게는 1 내지 300㎎/kg 일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 상기 투여량은 1일 1회 투여 또는 1일 수회 분할투여도 가능하다. 상기한 투여량은 평균적인 경우를 예시한 것으로서 개인적인 차이에 따라 그 투여량이 높거나 낮을 수 있다. 본 발명의 혼합 추출물 함유 조성물의 1일 투여량이 상기 투여 용량 미만이면 유의성 있는 효과를 얻을 수 없으며, 그 이상을 초과하는 경우 비경제적일 뿐만 아니라 상용량의 범위를 벗어나므로 바람직하지 않은 부작용이 나타날 우려가 발생할 수 있으므로, 상기 범위로 하는 것이 좋다.
본 발명은 섬쑥부쟁이 추출물 및 비타민 B6를 모두 포함하는 조성물을 제공하여 각각을 단독 사용하는 것에 비해 현저하게 상승된 요소 농도 감소 효과가 있어 통풍 또는 고요산혈증의 예방, 개선, 또는 치료에 적용 가능한 약학 조성물 또는 식품 조성물에 유용하게 사용될 수 있다.
또한, 종래 폐기되거나 동물 사료 등을 사용되는 섬쑥부쟁이를 이용할 수 있어 농가 소득 증대 및 고부가가치 창출을 기대할 수 있다.
도 1a 및 도 1b는 섬쑥부쟁이의 지표물질인 3,5-DCQA 및 대조군인 알로퓨리놀의 잔틴산화효소 저해 효능을 확인한 결과이다.
도 2a 및 도 2b는 추출 부위를 달리한 섬쑥부쟁이 추출물 및 대조군인 알로퓨리놀의 잔틴산화효소 저해 효능을 확인한 결과이다.
도 3a 및 도 3b는 각각 봄철 및 가을철에 수확한 섬쑥부쟁이를 추출 용매를 달리하여 추출한 추출물의 잔틴산화효소 저해 효능을 확인한 결과이다.
도 4a 내지 도 4i는 각각 비타민 B6, 비타민 B9, 비타민 C, 비타민 B1, 비타민 B3, 비타민 B12, 콜라겐, MSM, 타우린 시료를 처리하는 경우 잔틴산화효소 저해 효능을 확인한 결과이다.
도 5는 섬쑥부쟁이 추출물의 농도(로그값으로 표시) 및 비타민 B9의 농도를달리하여 처리한 경우 잔틴산화효소 저해 효능을 확인한 결과이다.
도 6는 섬쑥부쟁이 추출물의 농도(로그값으로 표시) 및 비타민 B6의 농도를 달리하여 처리한 경우 잔틴산화효소 저해 효능을 확인한 결과이다.
도 7a는 섬쑥부쟁이의 저농도 범위에서 비타민 B6를 처리한 경우 잔틴산화효소 효능을 확인한 결과이고, 도 7b는 상기 도 7a의 결과 중 비타민 B6를 1000ug/ml로 처리한 결과만을 분리하여 나타낸 것이다.
도 2a 및 도 2b는 추출 부위를 달리한 섬쑥부쟁이 추출물 및 대조군인 알로퓨리놀의 잔틴산화효소 저해 효능을 확인한 결과이다.
도 3a 및 도 3b는 각각 봄철 및 가을철에 수확한 섬쑥부쟁이를 추출 용매를 달리하여 추출한 추출물의 잔틴산화효소 저해 효능을 확인한 결과이다.
도 4a 내지 도 4i는 각각 비타민 B6, 비타민 B9, 비타민 C, 비타민 B1, 비타민 B3, 비타민 B12, 콜라겐, MSM, 타우린 시료를 처리하는 경우 잔틴산화효소 저해 효능을 확인한 결과이다.
도 5는 섬쑥부쟁이 추출물의 농도(로그값으로 표시) 및 비타민 B9의 농도를달리하여 처리한 경우 잔틴산화효소 저해 효능을 확인한 결과이다.
도 6는 섬쑥부쟁이 추출물의 농도(로그값으로 표시) 및 비타민 B6의 농도를 달리하여 처리한 경우 잔틴산화효소 저해 효능을 확인한 결과이다.
도 7a는 섬쑥부쟁이의 저농도 범위에서 비타민 B6를 처리한 경우 잔틴산화효소 효능을 확인한 결과이고, 도 7b는 상기 도 7a의 결과 중 비타민 B6를 1000ug/ml로 처리한 결과만을 분리하여 나타낸 것이다.
이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명이 하기 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.
실시예
1.
섬쑥부쟁이
추출물 제조
섬쑥부쟁이(바이오랜드) 를 물로 세척한 후, 건조된 섬쑥부쟁이 2kg을 25 L의 용매와 혼합하여 80℃에서 4시간동안 1차 추출한 뒤, 20L의 용매와 혼합하여 80℃에서 2시간 동안 2차 추출하여 조추출물을 얻었다. 용매 추출물을 퍼라이트 250g과 혼합한 후 필터프레스 여과한 후 감압 농축하고 95℃에서 1시간 동안 살균한 후 동결건조하여 섬쑥부쟁이 추출물을 제조하였다.
실시예
2.
잔틴산화효소
저해 효능 평가
잔틴산화효소(xanthine oxidase)는 잔틴 (xanthine)을 기질로 사용하여 최종산물로 요산을 형성하므로 잔틴산화효소의 저해 정도를 통해 섬쑥부쟁이의 혈중 요산 감소 효과를 측정하였다.
상기 잔틴산화효소 저해 효능은 호기성 조건 하에서 Noro et al. (1983)에 기재된 방법을 참고하였으며, 0.1M potassium phosphate buffer (pH 7.5), 0.002 U/mL xanthine oxidase (Sigma Chemical Co., EC 1.2.3.2)와 용매에 용해한 다양한 농도의 시료(예, 비타민 B6, 실시예 4)를 혼합하여 25℃ 에서 10분 동안 활성화 하였다. 이 후, 반응물에 0.12mM xanthine(Sigma Chemical Co.)을 가하여 반응을 개시하여, 25℃에서 30분 동안 배양하였다. 1N HCl을 첨가하여 반응을 종결시키고, 295 nm에서 흡광도를 측정하였다. 잔틴산화효소 저해 효능은 % inhibition으로 평가하였고, IC50 값은 잔틴산화효소 억제 활성이 50%일 때의 시료 농도로 나타내었다.
실시예
3.
섬쑥부쟁이의
유효물질 확인
상기 실시예 2의 방법으로 섬쑥부쟁이의 지표물질인 3,5-dicaffeoylquinic acid (3,5-DCQA)의 잔틴산화효소 저해 효능을 확인하였다.
그 결과를 도 1a 및 도 1b에 나타내었으며 대조군인 allopurinol(Sigma Chemical Co.)의 IC50값이 29.76 ± 4.18 uM로 측정될 때, 3,5-DCQA의 IC50값은 187.54 uM로 확인하였다. 이를 통해 3,5-DCQA가 지표물질이면서 유효물질인 것으로 판단하였다.
실시예
4.
섬쑥부쟁이의
추출 부위에 따른
잔틴산화효소
저해 효능
섬쑥부쟁이(바이오랜드)를 잎, 줄기, 꽃으로 구분하여 70%의 에탄올을 포함하는 에탄올 수용액을 추출 용매로 사용하여, 실시예 2의 방법으로 추출물을 제조한 후 각각의 잔틴산화효소 저해 정도를 확인하였다.
그 결과를 도 2a 및 도 2b에 나타내었으며, 대조군인 allopurinol(Sigma Chemical Co.)의 IC50값이 29.76 ± 4.18 uM로 측정될 때, 잎 추출물의 경우 IC50값이 644.73 ± 6.94 ug/ml로 나타내는데 반해 줄기와 꽃은 3276.68 ± 893.5 ug/ml, 3239.59 ± 2310.98 ug/ml로 저해효능이 없을 뿐 아니라 불안정한 양상을 보여, 잎에서 가장 우수한 잔틴산화효소 저해효능이 나타나는 것으로 확인하였다.
실시예
5.
섬쑥부쟁이의
추출 용매 및 채집 시기에 따른
잔틴산화효소
저해 효능
봄철(4월) 수확한 섬쑥부쟁이(바이오랜드)와 가을철(10월) 수확한 섬쑥부쟁이(바이오랜드)를 열수 또는 50% 및 70%의 에탄올을 각각 포함하는 에탄올 수용액을 추출 용매로 사용하여 실시예 2의 방법으로 잔틴산화효소 저해 효능을 비교하였다.
그 결과를 도 3a 및 도 3b에 나타내었으며, 50% 또는 70% 에탄올 수용액을 사용하는 경우 각 추출 단계에서의 수율을 아래 표 1에 나타내었다.
| 공정 | 50% 에탄올 수용액 수율(%, 고형분 기준) | 70% 에탄올 수용액 수율(%, 고형분 기준) |
| 원료 투입 | 100 | 100 |
| 1차 추출 | 29 | 25 |
| 2차 추출 | 6 | 4 |
| 여과 | 32 | 30 |
| 농축 | 30 | 27 |
| 살균 | - | - |
| 건조 | 30 | 27 |
봄철 수확한 섬쑥부쟁이에서는 추출 용매와 상관 없이 저해 효능이 나타나지 않은 반면 가을에 수확한 섬쑥부쟁이에서는 추출 용매와 상관 없이 저해 효능이 나타났다. 특히 추출 용매에 따른 효과 차이를 나타냈는데 열수 추출물에서의 IC50값은 815.73 ± 4.6 ug/ml, 50% 에탄올 수용액 추출물에서는 958.27 ± 29.44 ug/ml로 불안정한 저해 효능을 보이는데 비해 70% 에탄올 수용액 추출물에서는 518.06 ± 2.27 ug/ml로 농도의존적 저해 효능을 나타냈다. 따라서, 가을철에 수확한 섬쑥부쟁이가 잔틴산화효소 저해효능이 뛰어나며, 특히 70% 에탄올 수용액을 추출 용매로 사용하는 경우 혈중 요산 감소에 효과적인 것으로 판단되었다.
실시예
6. 추가 배합 시료 종류에 따른
잔틴산화효소
저해 효능
실시예 2의 방법으로 섬쑥부쟁이의 추출물을 포함하지 않고 추가적으로 배합되는 시료 종류에 따른 잔틴산화효소 억제 활성을 측정하였다. 배합되는 시료는 비타민 B1(DSM), 비타민 B2(DSM), 비타민 B3(DSM), 비타민 B5(DSM), 비타민 B6(Sigma Chemical), 비타민 B9(DSM), 비타민 B12(DSM), 비타민 C(DSM), 산화아연(DSM), 황산동(DSM), 황산망간(DSM), 콜라겐(DSM), MSM(이즈웨이), 및 타우린(DSM)을 사용하였다.
상기 실험 결과, 비타민 B2, 비타민 B5, 산화아연, 황산동, 황산망간은 실험에서 사용한 100mM potassium phosphate buffer와 침전반응을 일으켜서 실험을 진행할 수 없었다.
도 4a 내지 도 4i에 나타난 바와 같이 비타민 B1, 비타민 B3, 비타민 B12, 콜라겐, MSM, 타우린은 잔틴산화효소 저해 효과가 없는 것으로 확인되었다. 반면 비타민 B6와 비타민 B9, 비타민 C에서는 잔틴산화효소 저해 효능이 확인되었다. 구체적인 IC50값은 비타민 B6는 1128.76 ug/ml, 비타민 B9 6.42 ug/ml, 비타민 C 0.44 ug/ml로 비타민 B9과 비타민 C에서 뛰어난 잔틴산화효소 저해 효능이 있음을 알 수 있었다.
실시예
7.
섬쑥부쟁이
추출물 및 비타민 B9 조합에 따른
잔틴산화효소
저해 효능
실시예 6에서 잔틴산화효소 저해 효능이 있는 것으로 확인된 비타민 B9 를 섬쑥부쟁이 추출물과 같이 처리했을 때의 잔틴산화효소 저해 효과를 확인하였다.
섬쑥부쟁이 추출물은 200, 400, 600, 800, 1000, 1200 및 1400 ug/ml의 최종 농도로 사용하였으며, 혼합하여 사용한 비타민 B9는 IC50값에 근접한 5 ug/ml, 높은 저해율을 나타내는 고농도인 30 ug/ml 그리고 이 사이의 값인 15 ug/ml의 최종 농도로 처리한 후 잔틴산화효소 저해 효능을 평가하였다.
그 결과를 아래 표 2 및 도 5에 나타내었으며, 섬쑥부쟁이 추출물에 비타민 B9를 처리하는 경우 잔틴산화효소 저해 효능이 증가되었으나 단순한 두 시료의 합산된 값에 불과한 것을 알 수 있었다.
| 섬쑥부쟁이 추출물(AG-D006) 및 비타민B9 | IC50 (ug/ml) |
| AG-D006 | 892.07 |
| AG-D006 + 비타민 B9 5 ug/ml | 645.77 |
| AG-D006 + 비타민 B9 15 ug/ml | 417.29 |
| AG-D006 + 비타민 B9 30 ug/ml | 289.21 |
실시예
8.
섬쑥부쟁이
추출물 및 비타민 B6 조합에 따른
잔틴산화효소
저해 효능
실시예 6에서 잔틴산화효소 저해 효능이 있는 것으로 확인된 비타민 B6를 섬쑥부쟁이 추출물과 같이 처리했을 때의 잔틴산화효소 저해 효과를 확인하였다.
200, 400, 600, 800, 1000, 1200, 및 1400 ug/ml의 농도(최종 농도)의 섬쑥부쟁이 추출물에 비타민 B6를 1, 10, 100 및 1000 ug/ml (최종 농도)를 처리하였다.
그 결과를 섬쑥부쟁이 추출물만 처리한 후 잔틴산화효소 저해 효능과 비교하여 도 6에 나타내었다. 섬쑥부쟁이 추출물에 비타민 B6를 처리한 경우 급격한 저해 효능이 나타남을 확인할 수 있었으며 특히 섬쑥부쟁이 추출물만을 처리한 경우 거의 저해 효능이 나타나지 않았던 200 ug/ml에서도 비타민 B6와 같이 처리했을 때 약 100% 저해되며, 비타민 B6를 1000ug/ml로 처리한 경우에만 섬쑥부쟁이 추출물 및 비타민 B6의 시너지 효과가 있음을 확인하였다. 상기 결과로 섬쑥부쟁이 추출물 및 비타민 B6 조합에 의한 잔틴산화효소 저해에 대한 상승효과가 있는 것을 확인하였다.
또한 섬쑥부쟁이를 저농도 범위에서 사용하는 경우의 잔틴산화효소 저해 효능을 확인하기 위하여 섬쑥부쟁이를 0.001, 0.01, 0.1, 1, 10 및 100 ug/ml (최종 농도), 비타민 B6를 1, 10, 100 및 1000 ug/ml(최종 농도)로 함께 처리한 경우의 잔틴산화효소 효능을 확인하였다.
그 결과를 도 7a 및 도 7b에 나타내었으며, 비타민 B6를 1, 10 또는 100ug/ml의 농도로 사용하는 경우 저해 반응이 거의 없었던 반면, 비타민 B6를 1000 ug/ml으로 사용하는 경우 저 농도의 섬쑥부쟁이에서도 상승 효과가 있음을 확인하였다.
Claims (11)
- 섬쑥부쟁이 추출물 및 비타민 B6를 포함하는 혈중 요산 농도 저하용 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 섬쑥부쟁이 추출물은 섬쑥부쟁이의 전초, 잎, 줄기, 꽃 및 뿌리로 이루어진 군에서 선택된 1 이상의 부위에서 추출된 것인, 조성물.
- 제2항에 있어서, 상기 섬쑥부쟁이 추출물은 섬쑥부쟁이 잎에서 추출된 것을 특징으로 하는, 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 섬쑥부쟁이 추출물은 물, 탄소수 1 내지 4의 직쇄 또는 분지형 알코올, 유기 용매 및 이들의 혼합 용매로 이루어진 군에서 선택된 1 이상의 용매로 추출된 것인, 조성물.
- 제4항에 있어서, 상기 유기 용매는 디클로로메탄, 디에틸에터, 클로로포름 및 에틸 아세테이트로 이루어진 군에서 선택된 1 이상인 것인, 조성물.
- 제4항에 있어서, 상기 용매가 30 내지 80 v/v% 에탄올 수용액인 것인, 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 섬쑥부쟁이 추출물 및 비타민 B6는 1:1010 내지 1: 10-1 의 농도비로 포함되는 것인, 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 섬쑥부쟁이 추출물은 3,5-DCQA를 포함하는 것을 특징으로 하는, 조성물.
- 섬쑥부쟁이 추출물 및 비타민 B6를 포함하는 통풍 또는 고요산혈증의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
- 제9항에 있어서, 상기 통풍은 통풍성 관절염, 통풍성 신질환 및 통풍성 신결석증으로 이루어진 군에서 선택된 1 이상인 것인, 약학 조성물.
- 섬쑥부쟁이 추출물 및 비타민 B6를 포함하는 통풍 또는 고요산혈증의 예방 또는 개선용 건강기능식품.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020160105739A KR20180020798A (ko) | 2016-08-19 | 2016-08-19 | 혈중요산감소를 위한 섬쑥부쟁이 추출물과 비타민을 포함하는 조성물 |
Applications Claiming Priority (1)
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Publications (1)
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| KR20180020798A true KR20180020798A (ko) | 2018-02-28 |
Family
ID=61401405
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
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| KR1020160105739A KR20180020798A (ko) | 2016-08-19 | 2016-08-19 | 혈중요산감소를 위한 섬쑥부쟁이 추출물과 비타민을 포함하는 조성물 |
Country Status (1)
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| KR (1) | KR20180020798A (ko) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2020091440A1 (ko) * | 2018-10-31 | 2020-05-07 | 고려대학교 산학협력단 | 3,5-디카페오일퀴닉산을 유효성분으로 함유하는 피부장벽 손상 개선용 및/또는 피부 염증 완화용 조성물 |
| KR20210125969A (ko) * | 2020-01-14 | 2021-10-19 | 계명대학교 산학협력단 | 섬쑥부쟁이 추출물을 포함하는 간 보호용 조성물 |
-
2016
- 2016-08-19 KR KR1020160105739A patent/KR20180020798A/ko active IP Right Grant
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