KR101958975B1 - 해조류 복합추출물 및 식물 복합추출물을 유효성분으로 함유하는 지방간 질환의 개선, 예방 또는 치료용 조성물 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 해조류 복합추출물 및 식물 복합추출물을 유효성분으로 함유하는 지방간 질환의 개선, 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것으로 감태 추출물, 우뭇가사리 추출물, 톳 추출물, 모자반 추출물 및 돌미역 추출물을 포함하는 해조류 복합추출물; 및 황칠 추출물과 녹차 추출물을 포함하는 식물 복합추출물;을 포함하는 혼합물을 유효성분으로 함유함으로써, 알코올 의존성 지방간 질환을 개선, 예방 또는 치료할 수 있다. 또한, 독성이 없으므로 식품의 형태로 섭취할 수 있다.
Description
본 발명은 지방간 질환을 개선, 예방 또는 치료할 수 있도록 해조류 복합추출물 및 식물 복합추출물을 유효성분으로 함유하는 조성물에 관한 것이다.
숙취는 술을 마신 후에 나타나는 두통, 설사, 식욕부진, 오심, 구토, 오한, 식은땀을 뜻하며, 객관적인 증상으로는 인식, 운동능력 저하, 혈액학적 변화 및 호르몬의 변화를 일컫는다. 숙취의 원인은 탈수, 알코올 및 알코올 대사물(아세트알데히드, 포름알데히드, 아세톤 등)의 독성, 흡수 장애에 의한 영양소 결핍(혈당, 비타민, 무기질 결핍)으로 알려져 있다. 숙취 정도는 유전에 따른 개인의 편차, 환경상태(영양 상태, 운동 상태, 탈수 정도, 건강 상태)에 따라 정도의 차이가 매우 심하다.
숙취를 해소하기 위하여 예로부터 콩나물국, 북어국 등이 많이 이용되어 왔다. 특히 콩나물뿌리에는 알코올탈수소효소의 작용을 도와 알코올 분해를 촉진함으로써 간을 보호한다고 알려져 있는 아스파라긴산이 풍부하게 함유되어 있으며, 초기 숙취해소 음료는 아스파라긴산을 주원료로 내세워 제조 판매되었다. 현재, 자리, 황기, 연꽃씨, 쌀 배아, 키토산, 오리나무, 마가목 추출물 등 다양한 소재를 이용한 숙취해소용 음료들이 시판되고 있다.
알코올은 체내에 저장되지 못하기 때문에 대사가 되어야 하는데, 이 과정은 대부분 간에서 이루어지며, 이러한 대사는 간에 존재하는 알코올분해효소들에 의해 이루어진다. 알코올은 이러한 효소들에 의해 아세트알데히드란 물질을 거쳐 분해되는데, 이 아세트알데히드는 독성이 있어 간세포에 손상을 주게 된다. 그리고 알코올의 대사 결과, 지방산이 많이 만들어져 간에 지방이 축적되는데 이를 '알코올성 지방간'이라고 한다.
상기 알코올성 지방간은 특히 만성간질환으로 진행하는 경우가 많은데, 알코올성 간염이 10-35%에서, 간경변증이 8-20%에서 발생한다고 한다.
지방간은 간에서 지방대사의 장애로 인해 중성지방이 간에 축적되는 상태이며, 원인으로서는 과도한 음주 및 비만 등을 들 수 있다. 간에서 축적된 지질이 차지하는 무게 비중이 5%이상일 때 지방간으로 정의된다. 대부분 축적되는 지질의 종류는 중성지방(triglyceride)이다. 알코올성 지방간은 여러 가지 인자에 의해서 발병되는 것으로 알려져 있다. 첫째는 알코올이 대사되는 과정에서 발생되는 과량의 수소(NADH)가 원인이 되어 간 내에서 지방산의 산화 감소, 지방산 농도 증가 등에 의해 중성지방이 축적되는 것이다(N. Engl. J. Med., 288, 356, 1973). 둘째는 알코올대사 중에 생성되는 유해한 중간생성 물질인 아세트알데히드가 세포내의 단백질과 결합하여 단백질의 간 외로 배출 통로를 차단하고, 또한 지질과산화를 유도하여 세포막을 손상시켜 지단백질의 간 외로의 배출을 차단함으로서 간 내의 중성지방이 축적되는 것이다. 이러한 알코올성 지방간의 발병은 상기에서 기술된 요소들이 복합적으로 연관되어 나타나는 현상이다. 알코올 섭취에 의해서 간 내의 지방축적은 간질환(간염, 간경화, 간암)으로의 이행에 있어 아주 중요한 초기 증상으로 인정되고 있다. 알코올성 지방간을 억제할 수 있는 물질로는 글루타치온(glutathione), 2-메캅토프로피오일글리신(2-mecaptopropioylglycine), 3-아미노-1,2,4-트리아졸(3-amino-1,2,4-triazole), N,N'-디페닐-p-페닐렌디아민(N,N'-diphenyl-pphenylenediamine) 등의 항산화활성이 있는 물질과(J. Path., 126, 11, 1978), S-아데노실-L-메치오닌(Sadenosyl-L-Methionine), 베타인(betaine) 등 인지질 및 글루타치온 합성 촉진 물질(Alcohol, 13, 483, 1996), L-글리신(L-glycine)(Gastroenterology, 110, 1536, 1996), L-시스테인(L-cysteine)(Biochem. Pharmacol., 32, 321, 1983) 등 알코올대사를 촉진하는 물질 등이 알려져 있다.
또한, 생약 추출물 또는 인공제제 원료를 이용한 숙취해소용 식품이나 의약품이 개발되어 유통되고 있으나, 이들은 약효가 다소 인정되기는 해도 만족할만한 수준에 미치지 못하므로 부작용이 없으면서 효과가 충분히 인정되는 새로운 지방간 개선, 예방 또는 치료가 가능한 물질의 개발이 요구되고 있다.
본 발명의 목적은 해조류 복합추출물 및 식물 복합추출물을 유효성분으로 함유하여 지방간 질환을 예방 또는 치료할 수 있는 약학 조성물을 제공하는데 있다.
또한, 본 발명의 다른 목적은 해조류 복합추출물 및 식물 복합추출물을 유효성분으로 함유하여 지방간 질환을 개선 또는 예방할 수 있는 식품 조성물을 제공하는데 있다.
상기한 목적을 달성하기 위한 본 발명의 지방간 질환을 예방 또는 치료할 수 있는 약학 조성물은 감태 추출물, 우뭇가사리 추출물, 톳 추출물, 모자반 추출물 및 돌미역 추출물을 포함하는 해조류 복합추출물; 및
황칠 추출물 및 녹차 추출물을 포함하는 식물 복합추출물;을 포함하는 혼합물을 유효성분으로 함유할 수 있다.
상기 해조류 복합추출물은 감태 추출물 25 내지 40 중량%, 우뭇가사리 추출물 1 내지 10 중량%, 톳 추출물 25 내지 40 중량%, 모자반 추출물 25 내지 35 중량% 및 돌미역 추출물 1 내지 10 중량%를 포함할 수 있다.
상기 식물 복합추출물은 황칠 추출물과 녹차 추출물은 1 : 0.7-1.3의 중량비로 혼합될 수 있다.
상기 해조류 복합추출물과 식물 복합추출물은 1 : 5 내지 90의 중량비로 혼합될 수 있다.
상기 감태 추출물, 우뭇가사리 추출물, 톳 추출물, 모자반 추출물, 돌미역 추출물, 황칠 추출물 및 녹차 추출물은 물, 탄소수 1 내지 4의 저급알코올 또는 이들의 혼합용매로 추출된 것일 수 있다.
상기 지방간 질환은 알코올 의존성 지방간 또는 알코올 의존성 간염일 수 있다.
또한, 상기한 다른 목적을 달성하기 위한 본 발명의 지방간 질환을 개선 또는 예방할 수 있는 식품 조성물은 감태 추출물, 우뭇가사리 추출물, 톳 추출물, 모자반 추출물 및 돌미역 추출물을 포함하는 해조류 복합추출물; 및
황칠 추출물 및 녹차 추출물을 포함하는 식물 복합추출물;을 포함하는 혼합물을 유효성분으로 함유할 수 있다.
본 발명의 지방간 질환의 개선, 예방 또는 치료용 조성물은 알콜성 지방간으로 인한 병리학적 소견을 완화시킬 수 있으므로 알코올성 지방간 질환의 예방 또는 치료에 현저한 효과가 있다.
또한, 본 발명은 천연물질인 해조류 복합추출물 및 식물 복합추출물을 유효성분으로 포함하여 부작용이 없으며 저렴하므로 알코올성 지방간 질환에 장기적으로 사용할 수 있다.
도 1은 본 발명의 정상군, 음성 대조군, 투여군(실시예 7_액상, 실시예 7_고상)에 대한 총 지질량을 나타낸 그래프이다.
도 2는 본 발명의 정상군, 음성 대조군, 투여군(실시예 7_액상, 실시예 7_고상)에 대한 간 조직 중 중성지방량을 나타낸 그래프이다.
도 3은 본 발명의 정상군, 음성 대조군, 투여군(실시예 7_액상, 실시예 7_고상)에 대한 간 조직의 무게를 나타낸 그래프이다.
도 4는 본 발명의 정상군, 음성 대조군, 투여군(실시예 7_액상, 실시예 7_고상)에 대한 간 인덱스를 나타낸 그래프이다.
도 5는 본 발명의 정상군, 음성 대조군, 투여군(실시예 7_액상, 실시예 7_고상)의 간 조직을 H&E 염색한 후 촬영한 사진이다.
도 6은 본 발명의 정상군, 음성 대조군, 투여군(실시예 7_액상, 실시예 7_고상)에 대한 총 콜레스테롤, 저밀도지단백 콜레스테롤(LDL-C) 및 고밀도지단백 콜레스테롤(HDL-C)을 나타낸 그래프이다.
도 7은 본 발명의 정상군, 음성 대조군, 투여군(실시예 7_액상, 실시예 7_고상)에 대한 AST(aspartate aminotransferase)을 나타낸 그래프이다.
도 8은 본 발명의 정상군, 음성 대조군, 투여군(실시예 7_액상, 실시예 7_고상)에 대한 ALT(alanine aminotransferase)을 나타낸 그래프이다.
도 9는 본 발명의 정상군, 음성 대조군, 투여군(실시예 7_액상, 실시예 7_고상)에 대한 ALP(alkaline phosphatease)을 나타낸 그래프이다.
도 2는 본 발명의 정상군, 음성 대조군, 투여군(실시예 7_액상, 실시예 7_고상)에 대한 간 조직 중 중성지방량을 나타낸 그래프이다.
도 3은 본 발명의 정상군, 음성 대조군, 투여군(실시예 7_액상, 실시예 7_고상)에 대한 간 조직의 무게를 나타낸 그래프이다.
도 4는 본 발명의 정상군, 음성 대조군, 투여군(실시예 7_액상, 실시예 7_고상)에 대한 간 인덱스를 나타낸 그래프이다.
도 5는 본 발명의 정상군, 음성 대조군, 투여군(실시예 7_액상, 실시예 7_고상)의 간 조직을 H&E 염색한 후 촬영한 사진이다.
도 6은 본 발명의 정상군, 음성 대조군, 투여군(실시예 7_액상, 실시예 7_고상)에 대한 총 콜레스테롤, 저밀도지단백 콜레스테롤(LDL-C) 및 고밀도지단백 콜레스테롤(HDL-C)을 나타낸 그래프이다.
도 7은 본 발명의 정상군, 음성 대조군, 투여군(실시예 7_액상, 실시예 7_고상)에 대한 AST(aspartate aminotransferase)을 나타낸 그래프이다.
도 8은 본 발명의 정상군, 음성 대조군, 투여군(실시예 7_액상, 실시예 7_고상)에 대한 ALT(alanine aminotransferase)을 나타낸 그래프이다.
도 9는 본 발명의 정상군, 음성 대조군, 투여군(실시예 7_액상, 실시예 7_고상)에 대한 ALP(alkaline phosphatease)을 나타낸 그래프이다.
본 발명은 지방간 질환을 개선, 예방 또는 치료할 수 있도록 해조류 복합추출물 및 식물 복합추출물을 유효성분으로 함유하는 조성물에 관한 것이다.
이하, 본 발명을 상세하게 설명한다.
본 발명의 지방간 질환을 개선, 예방 또는 치료할 수 있는 조성물은 해조류 복합추출물 및 식물 복합추출물을 유효성분으로 함유한다.
상기 해조류 복합추출물은 감태 추출물, 우뭇가사리 추출물, 톳 추출물, 모자반 추출물 및 돌미역 추출물을 포함하며; 상기 식물 복합추출물은 황칠 추출물 및 녹차 추출물을 포함한다.
상기 감태(Ecklonia cava)는 갈조식물 다시마목 미역과의 해조류로, 한국, 일본 등지에 분포한다. 상기 감태는 후코이단과 플로로탄닌 성분을 함유하고 있으며, 상기 성분들은 항산화, 항암, 항염, 노화억제 및 고혈압억제 등에 우수한 것으로 알려져 있다.
상기 감태는 추출물 형태로서 25 내지 40 중량%, 바람직하게는 30 내지 35 중량%로 사용된다. 감태 추출물의 함량이 상기 범위를 벗어난 경우에는 지방간 질환에 대한 효능이 저하될 수 있다.
또한, 상기 우뭇가사리(Gelidium amansii)는 우뭇가사리과에 속하는 홍조류로서, 단백질 4.2%, 지방 0.2%, 탄수화물 18.5%, 섬유질 3.0%, 무기질 3.8%를 함유한다. 상기 우뭇가사리는 식용, 약용, 연구용, 공업용 등의 용도로 다양하게 활용되고 있으며, 식용 첨가물로서 영양적으로 많은 양의 탄수화물을 지니고 있고, 철분과 칼슘을 상당량 함유하고 있으며, 비타민A가 특히 많다.
상기 우뭇가사리는 추출물 형태로서 1 내지 10 중량%, 바람직하게는 2 내지 5 중량%로 사용된다. 우뭇가사리 추출물의 함량이 상기 범위를 벗어난 경우에는 지방간 질환에 대한 효능이 저하될 수 있다.
또한, 상기 톳(Hizikia fusiforme)은 모자반과에 속하는 갈조류로, 뿌리는 나뭇가지 모양이고 줄기는 원주형이며 잎은 베 짜는 북 또는 방망이 모양이고 곁가지는 엽액에 붙어서 난다. 우리나라의 중부 이남에 분포하고 특히 제주도와 서남해안에서 많이 생산되며, 칼슘, 요오드, 철 등의 무기염류가 많이 포함되어 있다.
상기 톳은 추출물 형태로서 25 내지 40 중량%, 바람직하게는 30 내지 35 중량%로 사용된다. 톳 추출물의 함량이 상기 범위를 벗어난 경우에는 지방간 질환에 대한 효능이 저하될 수 있다.
또한, 상기 모자반(Sargassum fulvellum)은 모자반과에 속하는 갈조류의 하나로, 연안에 나며 녹갈색으로 톳과 비슷한 모양을 하고 있다. 일반성분은 단백질 1.85%, 지방 0.2%, 탄수화물 5.2%, 섬유 1.5%, 무기질 5.1%이며, 이중 칼슘의 함량이 많다.
상기 모자반은 추출물 형태로서 25 내지 35 중량%, 바람직하게는 30 내지 35 중량%로 사용된다. 모자반 추출물의 함량이 상기 범위를 벗어난 경우에는 지방간 질환에 대한 효능이 저하될 수 있다.
또한, 상기 돌미역은 다시마목(Laminariales) 미역과(Alariaceae)에 속하는 1년생 대형 조류로서 울릉도 청정해역 해안가 바위에서 자연 생산되며, 풍부한 단백질, 비타민, 미네랄, 칼슘, 요오드 등의 영양소가 다양하게 함유되어 있다.
상기 돌미역은 추출물 형태로서 1 내지 10 중량%, 바람직하게는 2 내지 5 중량%로 사용된다. 돌미역 추출물의 함량이 상기 범위를 벗어난 경우에는 지방간 질환에 대한 효능이 저하될 수 있다.
상기 감태, 우뭇가사리, 톳, 모자반 및 돌미역은 각각 추출용매와 1 : 5 내지 25, 바람직하게는 1 : 8 내지 15의 중량비로 혼합하여 80 내지 110 ℃에서 추출함으로써 추출물을 제조한다. 상기 감태, 우뭇가사리, 톳, 모자반 및 돌미역 각각과 추출용매의 중량비가 상기 범위를 벗어나는 경우에는 추출물에 유효성분이 적은 양으로 추출될 수 있다. 또한, 추출온도가 상기 하한치 미만인 경우에는 유효성분이 추출되지 않을 수 있으며, 상기 상한치 초과인 경우에는 유효성분이 적은 양으로 추출될 수 있다.
상기 추출물을 추출하는 추출용매로는 지방간 질환의 개선, 예방 또는 치료에 바람직하게 작용할 수 있도록 물, 탄소수 1 내지 4의 저급알코올, 또는 이들의 혼합용매를 사용할 수 있다. 상기 혼합용매로는 특별히 한정하는 것은 아니지만, 바람직하게는 20 내지 80 부피%의 메탄올, 에탄올, 부탄올 또는 프로판올 수용액, 더욱 바람직하게는 60 내지 80 부피%의 에탄올 수용액으로 추출된 추출물을 들 수 있다.
또한, 상기 황칠(Dendropanax morbifera LEV.)은 두릅나무과에 속하는 난대성 상록교목으로, 우리나라의 남부 해안 지역과 제주도에서 자생하며, 겨울에도 낙엽이 지지 않는 수종으로 수피에 상처를 주면 황색의 수지액이 나오는데 이것을 황칠이라고 한다. 황칠 안에 들어 있는 정유의 주성분은 세스퀴테르펜(sesqui-terpene)이며, 그밖에 알코올, 에스테르 등이 함유되어 있다. 또한, 황칠나무는 번열 제거, 술 해독, 안질 및 황달 치료, 나병에 효과가 있으며 인체에 무해하다는 기록도 전해지고 있다 (이시진, 본초강목, 중국문광도서, 1590).
상기 황칠은 추출물 형태로서 40 내지 60 중량%로 사용된다. 황칠 추출물의 함량이 상기 범위를 벗어난 경우에는 지방간 질환에 대한 효능이 저하될 수 있다.
또한, 상기 녹차(Camellia sinensis O.Kuntge)는 경남, 전남의 남해안지역의 비교적 따뜻한 곳에서 자라는 여러해살이 상록교목으로, 잎은 단단하고 약간 두꺼우며 표면에 광택이 있다. 콜레스테롤과 혈당을 낮추는 효과가 있으며, 항산화작용을 한다.
상기 녹차는 추출물 형태로서 40 내지 60 중량%로 사용된다. 녹차 추출물의 함량이 상기 범위를 벗어난 경우에는 지방간 질환에 대한 효능이 저하될 수 있다.
바람직하게, 상기 황칠 추출물과 녹차 추출물은 1 : 0.7-1.3의 중량비로 혼합되는데, 상기 황칠 추출물을 기준으로 녹차 추출물의 함량이 상기 하한치 미만인 경우에는 효능이 저하될 수 있으며, 상기 상한치 초과인 경우에는 관능성이 저하될 수 있다.
상기 황칠 및 녹차는 각각 상기 해조류 복합추출물을 추출하는 방법과 동일한 방법으로 추출될 수 있다.
본 발명의 해조류 복합추출물과 식물 복합추출물은 1 : 5 내지 90의 중량비, 바람직하게는 1 : 11 내지 80의 중량비로 혼합된다. 해조류 복합추출물을 기준으로 식물 복합추출물의 함량이 상기 하한치 미만인 경우에는 지방간 질환에 대한 개선, 예방 또는 치료 효과가 저하될 수 있으며, 상기 상한치 초과인 경우에는 텁텁하고 관능성이 저하될 수 있다.
본 명세서에서 감태, 우뭇가사리, 톳, 모자반, 돌미역, 황칠 및 녹차를 언급하면서 사용되는 용어 '추출물'은 추출용매를 처리하여 얻은 조추출물뿐만 아니라 추출물의 가공물도 포함한다. 예를 들어, 본 발명의 추출물은 감압 증류 및 동결 건조 또는 분무 건조 등과 같은 추가적인 과정에 의해 분말 상태로 제조될 수 있다.
또한, 본 발명의 해조류 복합추출물 및 식물 복합추출물이 혼합된 추출물은 광의로는 해조류 복합추출물 및 식물 복합추출물이 혼합된 혼합물을 동물에게 투여할 수 있도록 제형화된 해조류 복합추출물 및 식물 복합추출물이 혼합된 혼합물의 가공물, 예컨대, 해조류 복합추출물 및 식물 복합추출물이 혼합된 혼합물 분말도 포함하는 의미를 갖는다. 비록 본 발명에서 해조류 복합추출물 및 식물 복합추출물이 혼합된 혼합물의 추출물로 실험을 진행하긴 하였으나, 해조류 복합추출물 및 식물 복합추출물이 혼합된 혼합물의 가공물과 같은 형태로도 목적하는 효과를 달성할 수 있음은 당업자라면 예상 가능할 것이다.
한편, 본 명세서에서 용어 '유효성분으로 함유하는'이란 해조류 복합추출물 및 식물 복합추출물이 혼합된 추출물의 효능 또는 활성을 달성하는 데 충분한 양을 포함하는 것을 의미한다. 일예로, 상기 해조류 복합추출물 및 식물 복합추출물이 혼합된 추출물은 10 내지 1500 ㎍/㎖, 바람직하게는 100 내지 1000 ㎍/㎖의 농도로 사용된다. 해조류 복합추출물 및 식물 복합추출물이 혼합된 추출물은 천연물로서 과량 투여하여도 인체에 부작용이 없으므로 본 발명의 조성물 내에 포함되는 해조류 복합추출물 및 식물 복합추출물이 혼합된 추출물의 양적 상한은 당업자가 적절한 범위 내에서 선택하여 실시할 수 있다.
본 발명의 약제학적 조성물은 상기 유효 성분 이외에 약제학적으로 적합하고 생리학적으로 허용되는 보조제를 사용하여 제조될 수 있으며, 상기 보조제로는 부형제, 붕해제, 감미제, 결합제, 피복제, 팽창제, 윤활제, 활택제 또는 향미제 등을 사용할 수 있다.
상기 약제학적 조성물은 투여를 위해서 상기 기재한 유효 성분 이외에 추가로 약제학적으로 허용 가능한 담체를 1종 이상 포함하여 약제학적 조성물로 바람직하게 제제화할 수 있다.
상기 약제학적 조성물의 제제 형태는 과립제, 산제, 정제, 피복정, 캡슐제, 좌제, 액제, 시럽, 즙, 현탁제, 유제, 점적제 또는 주사 가능한 액제 등이 될 수 있다. 예를 들어, 정제 또는 캡슐제의 형태로의 제제화를 위해, 유효 성분은 에탄올, 글리세롤, 물 등과 같은 경구, 무독성의 약제학적으로 허용 가능한 불활성 담체와 결합될 수 있다. 또한, 원하거나 필요한 경우, 적합한 결합제, 윤활제, 붕해제 및 발색제 또한 혼합물로 포함될 수 있다. 적합한 결합제는 이에 제한되는 것은 아니나, 녹말, 젤라틴, 글루코스 또는 베타-락토오스와 같은 천연 당, 옥수수 감미제, 아카시아, 트래커캔스 또는 소듐올레이트와 같은 천연 및 합성 검, 소듐 스테아레이트, 마그네슘 스테아레이트, 소듐 벤조에이트, 소듐 아세테이트, 소듐 클로라이드 등을 포함한다. 붕해제는 이에 제한되는 것은 아니나, 녹말, 메틸 셀룰로스, 아가, 벤토니트, 잔탄 검 등을 포함한다.
액상 용액으로 제제화되는 조성물에 있어서 허용 가능한 약제학적 담체로는, 멸균 및 생체에 적합한 것으로서, 식염수, 멸균수, 링거액, 완충 식염수, 알부민 주사용액, 덱스트로즈 용액, 말토 덱스트린 용액, 글리세롤, 에탄올 및 이들 성분 중 1 성분 이상을 혼합하여 사용할 수 있으며, 필요에 따라 항산화제, 완충액, 정균제 등 다른 통상의 첨가제를 첨가할 수 있다. 또한 희석제, 분산제, 계면활성제, 결합제 및 윤활제를 부가적으로 첨가하여 수용액, 현탁액, 유탁액 등과 같은 주사용 제형, 환약, 캡슐, 과립 또는 정제로 제제화할 수 있다.
더 나아가 해당분야의 적절한 방법으로 Remington's Pharmaceutical Science, Mack Publishing Company, Easton PA에 개시되어 있는 방법을 이용하여 각 질환에 따라 또는 성분에 따라 바람직하게 제제화할 수 있다.
본 발명의 약제학적 조성물은 경구 또는 비경구로 투여할 수 있고, 비경구 투여인 경우에는 정맥내 주입, 피하 주입, 근육 주입, 복강 주입, 경피 투여 등으로 투여할 수 있으며, 바람직하게는 경구 투여이다.
본 발명의 약제학적 조성물의 적합한 투여량은 제제화 방법, 투여 방식, 환자의 연령, 체중, 성, 병적 상태, 음식, 투여 시간, 투여 경로, 배설 속도 및 반응 감응성과 같은 요인들에 의해 다양하며, 보통으로 숙련된 의사는 소망하는 치료 또는 예방에 효과적인 투여량을 용이하게 결정 및 처방할 수 있다. 본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 본 발명의 약제학적 조성물의 1일 투여량은 0.001-10 g/㎏이다.
본 발명의 약제학적 조성물은 약제학적으로 허용되는 담체 및/또는 부형제를 이용하여 제제화함으로써 단위 용량 형태로 제조되거나 또는 다용량 용기 내에 내입시켜 제조될 수 있다. 이때 제형은 오일 또는 수성 매질중의 용액, 현탁액 또는 유화액 형태이거나 엑스제, 분말제, 과립제, 정제 또는 캅셀제 형태일 수도 있으며, 분산제 또는 안정화제를 추가적으로 포함할 수 있다.
또한, 본 발명은 해조류 복합추출물 및 식물 복합추출물이 혼합된 추출물을 유효성분으로 함유하는 지방간 질환의 개선, 예방 또는 치료용 식품 조성물을 제공한다.
본 발명에 따른 식품 조성물은 상기 약제학적 조성물과 동일한 방식으로 제제화되어 기능성 식품으로 이용하거나, 각종 식품에 첨가할 수 있다. 본 발명의 조성물을 첨가할 수 있는 식품으로는 예를 들어, 음료류, 알코올 음료류, 과자류, 다이어트바, 유제품, 육류, 초코렛, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류, 비타민 복합제, 건강보조식품류 등이 있다.
본 발명의 식품 조성물은 유효성분으로서 해조류 복합추출물 및 식물 복합추출물이 혼합된 추출물뿐만 아니라, 식품 제조 시에 통상적으로 첨가되는 성분을 포함할 수 있으며, 예를 들어, 단백질, 탄수화물, 지방, 영양소, 조미제 및 향미제를 포함한다. 상술한 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스, 올리고당 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 사이클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 향미제로서 천연 향미제 [타우마틴, 스테비아 추출물 (예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등]) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 사용할 수 있다. 예컨대, 본 발명의 식품 조성물이 드링크제와 음료류로 제조되는 경우에는 본 발명의 해조류 복합추출물 및 식물 복합추출물이 혼합된 추출물 이외에 구연산, 액상과당, 설탕, 포도당, 초산, 사과산, 과즙, 및 각종 식물 추출액 등을 추가로 포함시킬 수 있다.
본 발명은 상기 해조류 복합추출물 및 식물 복합추출물이 혼합된 추출물을 유효성분으로 포함하는 지방간 질환의 개선, 예방 또는 치료용 식품 조성물을 포함하는 건강기능식품을 제공한다. 건강기능식품이란, 해조류 복합추출물 및 식물 복합추출물이 혼합된 추출물을 음료, 차류, 향신료, 껌, 과자류 등의 식품소재에 첨가하거나, 캡슐화, 분말화, 현탁액 등으로 제조한 식품으로, 이를 섭취할 경우 건강상 특정한 효과를 가져오는 것을 의미하나, 일반 약품과는 달리 식품을 원료로 하여 약품의 장기 복용시 발생할 수 있는 부작용 등이 없는 장점이 있다. 이와 같이 하여 얻어지는 본 발명의 건강기능식품은, 일상적으로 섭취하는 것이 가능하기 때문에 매우 유용하다. 이와 같은 건강기능식품에 있어서의 해조류 복합추출물 및 식물 복합추출물이 혼합된 추출물의 첨가량은, 대상인 건강기능식품의 종류에 따라 달라 일률적으로 규정할 수 없지만, 식품 본래의 맛을 손상시키지 않는 범위에서 첨가하면 되며, 대상 식품에 대하여 통상 0.01 내지 50 중량%, 바람직하기로는 0.1 내지 20 중량%의 범위이다. 또한, 환제, 과립제, 정제 또는 캡슐제 형태의 건강기능식품의 경우에는 통상 0.1 내지 100 중량% 바람직하기로는 0.5 내지 80 중량%의 범위에서 첨가하면 된다. 한 구체예에서, 본 발명의 건강기능식품은 환제, 정제, 캡슐제 또는 음료의 형태일 수 있다.
또한, 본 발명은 지방간 질환의 개선, 예방 또는 치료용 의약 또는 식품의 제조를 위한 해조류 복합추출물 및 식물 복합추출물이 혼합된 추출물의 용도를 제공한다. 상기한 바와 같이 해조류 복합추출물 및 식물 복합추출물이 혼합된 추출물은 지방간 질환의 개선, 예방 또는 치료를 위한 용도로 이용될 수 있다.
또한, 본 발명은 포유동물에게 유효량의 해조류 복합추출물 및 식물 복합추출물이 혼합된 추출물을 투여하는 것을 포함하는 지방간 질환의 개선, 예방 또는 치료 방법을 제공한다.
여기에서 사용된 용어 "포유동물"은 치료, 관찰 또는 실험의 대상인 포유동물을 말하며, 바람직하게는 인간을 말한다.
여기에서 사용된 용어 "유효량"은 연구자, 수의사, 의사 또는 기타 임상의에 의해 생각되는 조직계, 동물 또는 인간에서 생물학적 또는 의학적 반응을 유도하는 유효 성분 또는 약학적 조성물의 양을 의미하는 것으로, 이는 해당 질환 또는 장애의 증상의 완화를 유도하는 양을 포함한다. 본 발명의 유효 성분에 대한 유효량 및 투여횟수는 원하는 효과에 따라 변화될 수 있다. 그러므로, 투여될 최적의 투여량은 당업자에 의해 쉽게 결정될 수 있으며, 질환의 종류, 질환의 중증도, 조성물에 함유된 유효성분 및 다른 성분의 함량, 제형의 종류, 및 환자의 연령, 체중, 일반 건강 상태, 성별 및 식이, 투여 시간, 투여 경로 및 조성물의 분비율, 치료기간, 동시 사용되는 약물을 비롯한 다양한 인자에 따라 조절될 수 있다. 본 발명의 예방, 치료 또는 개선 방법에 있어서, 성인의 경우, 해조류 복합추출물 및 식물 복합추출물이 혼합된 추출물을 1일 1회 내지 수회 투여시, 0.001 g/kg 내지 10 g/kg의 용량으로 투여하는 것이 바람직하다.
본 발명의 치료방법에서 해조류 복합추출물 및 식물 복합추출물이 혼합된 추출물을 유효 성분으로 포함하는 조성물은 경구, 직장, 정맥내, 동맥내, 복강내, 근육내, 흉골내, 경피, 국소, 안구내 또는 피내 경로를 통해 통상적인 방식으로 투여할 수 있다.
이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 바람직한 실시예를 제시하나, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐 본 발명의 범주 및 기술사상 범위 내에서 다양한 변경 및 수정이 가능함은 당업자에게 있어서 명백한 것이며, 이러한 변형 및 수정이 첨부된 특허청구범위에 속하는 것도 당연한 것이다.
실시예 1 내지 20. 해조류 복합추출물+식물 복합추출물
감태 추출물, 우뭇가사리 추출물, 톳 추출물, 모자반 추출물, 돌미역 추출물을 포함하는 해조류 복합추출물;과 황칠 추출물 및 녹차 추출물을 포함하는 식물 복합추출물;을 포함하는 조성물을 하기 표 1의 제조 비율에 따라 제조하였다. 이때 식물 복합추출물은 황칠 추출물과 녹차 추출물을 50 중량%씩 동일한 양으로 첨가하였다.
구분 | 해조류 복합추출물 (중량%) | 식물 복합추출물:해조류 복합추출물 (중량비) | ||||
감태 추출물 | 우뭇가사리 추출물 | 톳 추출물 | 모자반 추출물 | 돌미역 추출물 | ||
실시예 1 | 28 | 8 | 28 | 28 | 8 | 6:1 |
실시예 2 | 30 | 5 | 30 | 30 | 5 | 6:1 |
실시예 3 | 35 | 2 | 31 | 30 | 2 | 6:1 |
실시예 4 | 37 | 1 | 31 | 30 | 1 | 6:1 |
실시예 5 | 28 | 8 | 28 | 28 | 8 | 11:1 |
실시예 6 | 30 | 5 | 30 | 30 | 5 | 11:1 |
실시예 7 | 36 | 2 | 31 | 30 | 2 | 11:1 |
실시예 8 | 37 | 1 | 31 | 30 | 1 | 11:1 |
실시예 9 | 28 | 8 | 28 | 28 | 8 | 67:1 |
실시예 10 | 30 | 5 | 30 | 30 | 5 | 67:1 |
실시예 11 | 35 | 2 | 31 | 30 | 2 | 67:1 |
실시예 12 | 37 | 1 | 31 | 30 | 1 | 67:1 |
실시예 13 | 28 | 8 | 28 | 28 | 8 | 80:1 |
실시예 14 | 30 | 5 | 30 | 30 | 5 | 80:1 |
실시예 15 | 35 | 2 | 31 | 30 | 2 | 80:1 |
실시예 16 | 37 | 1 | 31 | 30 | 1 | 80:1 |
실시예 17 | 28 | 8 | 28 | 28 | 8 | 85:1 |
실시예 18 | 30 | 5 | 30 | 30 | 5 | 85:1 |
실시예 19 | 35 | 2 | 31 | 30 | 2 | 85:1 |
실시예 20 | 37 | 1 | 31 | 30 | 1 | 85:1 |
<시험예>
시험예 1. 항산화 측정
상기 실시예 1 내지 20에 따라 제조된 조성물에 대한 DPPH 자유 라디칼 소거능 측정을 통해 항산화 효과를 평가함으로써 유효성분의 배합비율을 선정하였다.
에탄올에 용해시킨 0.2 mM DPPH(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) 용액 950 ㎖에 상기 실시예 1 내지 20의 조성물을 각각 DMSO(dimethylsulfoxide)에 100 ㎕/㎖로 희석한 용액 50 ㎕를 가한 후 실온에서 30분간 incubation 후 517 ㎚에서 흡광도를 측정하였다. 항산화 활성은 하기 [수학식 1]로 계산하였다.
[수학식 1]
항산화 활성(%) = {1-(시료 첨가군 흡광도/시료 무첨가군 흡광도)}X100 (%)
구분 | 항산화 활성(%) |
실시예 1 | 61.2 |
실시예 2 | 62.7 |
실시예 3 | 63.1 |
실시예 4 | 37.0 |
실시예 5 | 68.9 |
실시예 6 | 78.8 |
실시예 7 | 80.2 |
실시예 8 | 70.3 |
실시예 9 | 67.5 |
실시예 10 | 81.1 |
실시예 11 | 82.3 |
실시예 12 | 65.1 |
실시예 13 | 68.4 |
실시예 14 | 80.5 |
실시예 15 | 81.6 |
실시예 16 | 70.0 |
실시예 17 | 61.4 |
실시예 18 | 66.5 |
실시예 19 | 63.1 |
실시예 20 | 61.7 |
위 표 2에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 실시예 6, 7, 10, 11, 14 및 15의 조성물은 항산화 활성이 대략 80% 내외로 우수하며, 그외 조성물의 경우에는 이에 비해 낮은 항산화 활성을 보이는 것을 확인하였다.
또한, 식물 복합추출물:해조류 복합추출물의 혼합비율이 6:1 또는 85:1일 경우 항산화 활성이 낮은 것을 확인하였다.
시험예 2. 동물실험
본 시험은 수컷 SD rat(알코올성 지방간 시험에 사용되는 종)에게 4주간 알코올이 포함된 식이를 공급하여 알코올성 지방간을 유도하며 시험물질인 실시예 7의 조성물을 액상 또는 고상 형태로 경구투여 한 후, 간 조직 내 지질 및 중성지방을 측정하여 지방간 개선 효과를 평가하고자 실시하였다.
200~230 g의 Sprague-Dawley 랫트(오리엔트바이오, Korea, 숫컷)를 실험에 사용하였다. 폴리카보네이트제 케이지(280W X 420D X 180H mm)에서 사육되었으며, 충분한 사료와 물이 공급되며 적절한 인공조도로 12시간의 낮, 밤을 조절하였다(am 7:00부터 낮). 그리고 일정한 온도(20~24 ℃) 및 습도(40~60%)를 유지시켜 주었다. 바뀐 환경에 적응하도록 일주일간 살펴보며 수면주기를 유지하고, 이상행동을 확인하였다.
실험을 위해 정상군을 제외한 나머지 군의 랫트에 식이로 Dyets사의 Lieber DeCarlie Et-OH와 Control liquid diet를 사용하여 시험동물이 알코올을 섭취할 수 있도록 액상으로 조제하여 급이하였다. 상기 Lieber DeCarlie Et-OH 식이에는 알코올이 6.7% 포함되어 있으며, Control liquid diet를 섭취한 그룹과 같은 열량을 섭취하도록 설계하였다.
정상군에는 Control liquid diet를 1일 1회 60 ml로 식이하고, 음성대조군 및 투여군에는 Lieber DeCarlie Et-OH를 1일 1회 60 ml로 식이하였다.
실험동물은 체중변화가 일정하고 건강한 동물만을 선별하여 임의 배치법에 의해 Control liquid diet+생리식염수를 투여한 정상군, Lieber DeCarlie Et-OH+생리식염수 음성 대조군, Lieber DeCarlie Et-OH+실시예 7의 추출물을 액상으로 200 mg/kg 투여한 시료 투여군, Lieber DeCarlie Et-OH+실시예 7의 추출물을 고상으로 200 mg/kg으로 투여한 시료 투여군으로 나누었으며 실험군마다 6마리씩 사용하였다.
이때 시험물질을 일회용 주사기를 이용하여 투여 개시일부터 1일 1회, 4주 동안 총 28회 위 내에 강제 투여하였다.
실시예 7의 추출물은 액상으로 200 mg/kg 및 고상으로 200 mg/kg를 식염수에 녹여 4 ml/kg 경구 투여하였다.
-4개 군의 마우스-
정상군: Control liquid diet식이 및 생리식염수 4주 투여 6마리
음성 대조군: Lieber DeCarlie Et-OH 식이 및 생리식염수 4주 투여 6마리
실시예 7(액상): Lieber DeCarlie Et-OH 식이 및 실시예 7의 추출물(액상) 4주 투여 6마리
실시예 7(고상): Lieber DeCarlie Et-OH 식이 및 실시예 7의 추출물(고상) 4주 투여 6마리
효능평가
시험물질 투여 마지막 날 시험동물을 12시간 이상 절식시킨 후 마취하여 복대정맥에서 채혈한 다음 혈액을 3,000 rpm에서 15분 동안 원심분리하여 혈청을 분리하였다. 분리한 혈청은 -20 ℃에서 보관하여 시험에 사용하였으며, 간조직은 분리하여 무게를 측정(XT220A, Precisa, Switzerland)하고 간조직 일부는 액체질소에 얼려 총 지질 및 중성지방 분석에 사용하였다. 나머지 간조직은 10% 중성 포르말린을 처리하여 H&E staining에 사용하였으며, 혈액중 ALP, TC, HDL-C, LDL-C, AST 및 ALT의 양은 혈액생화학분석기(Hitachi, Japan)을 사용하여 측정하였다.
2-1. 간 조직 중 총 지질량 측정
얼린 간조직을 세절하여 차가운 1.15% KCl 완충액에 넣고 균질기로 10% 균질액을 제조한 후 4 ℃에서 2,000 rpm으로 10분간 원심분리하여 상층액을 분리하였다. 시험관에 상층액 0.1 ml와 황산 2 ml를 섞어 끓는 물에 10분간 가온한 후 시험관을 얼음에서 5분간 냉각한 다음 0.1 ml를 취하였다. Phospho-vanillin 시약(Sigma-Aldrich, MO, USA) 5 ml를 첨가하고 37 ℃ 워터배쓰에서 15분간 반응시킨 후 Cuvette에 2 ml를 취해 540 nm에서 흡광도를 측정하였다.
올리브 오일(Sigma-Aldrich)을 스탠다드로 사용하여 스탠다드 그래프를 그리 고 식을 도출하여 간조직 내 지질의 양을 정량하였다.
도 1은 본 발명의 정상군, 음성 대조군, 투여군(실시예 7_액상, 실시예 7_고상)에 대한 총 지질량을 나타낸 그래프이다.
도 1에 나타낸 바와 같이, 정상군 간조직의 총 지질량은 평균 15.3 mg/g liver이며, 음성 대조군 간조직의 총 지질량은 평균 36.4 mg/g liver로 정상군에 비하여 통계적으로 유의하게 증가하였다. 이는 Lieber DeCarlie Et-OH 식이에 의하여 지방간이 잘 유도된 것을 의미한다.
또한, 실시예 7(액상)군 간조직의 총 지질량은 평균 24.4 mg/g liver이며, 실시예 7(고상) 간조직의 총 지질량은 평균 23.8 mg/g liver로서, 음성 대조군에 비하여 통계학적으로 유의하게 감소하였다.
2-2. 간 조직 중 중성지방 측정
간조직 100 mg을 세절하여 microfuge 튜브에 넣고 무게를 기록한 후 350 ㎕의 ethanolic KOH를 첨가하여 55 ℃에서 12시간 방치한 다음 조직이 모두 잘릴 때까지 voltexing하였다. 1 ml의 50% 에탄올을 첨가하고 5분간 원심분리 후 상층액을 새 튜브에 옮겨 담은 다음 50% 에탄올을 1.2 ml 첨가하여 voltexing하였다. 0.2 ml를 새 튜브에 옮겨 담은 후 215 ㎕의 1 M MgCl2를 첨가하여 10분간 아이스에 방치한 후 원심분리하고 상층액을 새 튜브에 옮겨 담았다. Free glycerol reagent(Sigma-Aldrich)를 이용하여 매뉴얼에 따라 시험하고 glycerol standard solution(Sigma-Aldrich)을 사용하여 정량하였다.
도 2는 본 발명의 정상군, 음성 대조군, 투여군(실시예 7_액상, 실시예 7_고상)에 대한 간 조직 중 중성지방량을 나타낸 그래프이다.
도 2에 나타낸 바와 같이, 정상군 간조직의 중성지방량은 평균 12.4 mg/g liver이며, 음성 대조군 간조직의 중성지방량은 평균 27.8 mg/g liver로 정상군에 비하여 통계적으로 유의하게 증가하였다. 이는 Lieber DeCarlie Et-OH 식이에 의하여 지방간이 잘 유도된 것을 의미한다.
또한, 실시예 7(액상)군 간조직의 중성지방량은 평균 22.2 mg/g liver로서 음성 대조군에 비하여 감소하였으나 통계학적으로 유의한 차이가 나타나지 않았다.
또한, 실시예 7(고상) 간조직의 중성지방량은 평균 18.6 mg/g liver로서 음성 대조군에 비하여 통계학적으로 유의하게 감소하였다.
2-3. 간 무게
상기 기재된 방법으로 간의 무게를 측정하였다.
도 3은 본 발명의 정상군, 음성 대조군, 투여군(실시예 7_액상, 실시예 7_고상)에 대한 간 조직의 무게를 나타낸 그래프이다.
도 3에 나타낸 바와 같이, 정상군 간 무게는 7.02 g이며, 음성 대조군 간 무게는 8.27 g로 정상군에 비하여 통계적으로 유의하게 증가하였다.
또한, 실시예 7(액상)군 간 무게는 8.28 g으로 음성 대조군과 차이를 보이지 않았으며, 실시예 7(고상) 간 무게는 7.69 g으로서 음성 대조군에 비하여 감소하였으나 통계학적으로 유의한 차이가 나타나지 않았다.
2-4. 간 인덱스(Liver index, LI)
도 4는 본 발명의 정상군, 음성 대조군, 투여군(실시예 7_액상, 실시예 7_고상)에 대한 간 인덱스를 나타낸 그래프이다.
도 4에 나타낸 바와 같이, 정상군 간 인덱스는 평균 2.71% g이며, 음성 대조군 간 인덱스는 평균 3.20%로 정상군에 비하여 통계적으로 유의하게 증가하였다.
또한, 실시예 7(액상)군 간 인덱스는 평균 3.19%로 음성 대조군과 차이를 보이지 않았으며, 실시예 7(고상) 간 인덱스는 평균 2.95%로서 음성 대조군에 비하여 통계학적으로 유의하게 감소하였다.
2-5. 조직병리학적 검사
H&E 염색을 수행하여 조직병리학적 검사를 수행하였으며, 상기 H&E 염색은 중성 포르말린에 고정한 간 조직을 파라핀 포매하여 5 ㎛의 두께로 박절한 후 조직슬라이드를 제작하여 Hematoxylin & Eosin 염색하였다. 사진 촬영하고 간 조직 내 지방 정도 및 본포를 분석하였다.
도 5는 본 발명의 정상군, 음성 대조군, 투여군(실시예 7_액상, 실시예 7_고상)의 간 조직을 H&E 염색한 후 촬영한 사진이다.
도 5에 나타낸 바와 같이, 정상군은 조직병리학적 소견이 관찰되지 않았으며, 음성 대조군은 간 조직내 지방 방울이 다량 산재해 있는 것으로 확인되었다.
또한, 실시예 7(액상)군 및 실시예 7(고상) 모두에서 간 조직내 지방 방울의 수 및 크기가 감소한 것을 확인하였다.
2-6. 혈액 중 콜레스테롤 측정
상기 기재된 방법으로 혈중 콜레스테롤을 측정하였다.
도 6은 본 발명의 정상군, 음성 대조군, 투여군(실시예 7_액상, 실시예 7_고상)에 대한 총 콜레스테롤, 저밀도지단백 콜레스테롤(LDL-C) 및 고밀도지단백 콜레스테롤(HDL-C)을 나타낸 그래프이다.
도 6에 나타낸 바와 같이, 정상군의 혈액 중 총 콜레스테롤(T-CHO)은 평균 71.4 mg/dL이며, 음성 대조군의 혈액 중 총 콜레스테롤(T-CHO)은 평균 89.1 mg/dL로 정상군에 비하여 통계적으로 유의하게 증가하였다.
또한, 실시예 7(액상)군의 혈액 중 총 콜레스테롤(T-CHO)은 평균 75.8 mg/dL, 실시예 7(고상)의 혈액 중 총 콜레스테롤(T-CHO)은 평균 75.1 mg/dL로서 음성 대조군에 비하여 감소하였으나 통계학적으로 유의한 차이가 나타나지 않았다.
한편, 정상군의 혈액 중 저밀도지단백 콜레스테롤(LDL-C)은 평균 51.2 mg/dL이며, 음성 대조군의 혈액 중 저밀도지단백 콜레스테롤(LDL-C)은 평균 60.2 mg/dL로 정상군에 비하여 통계적으로 유의하게 증가하였다.
또한, 실시예 7(액상)군의 혈액 중 저밀도지단백 콜레스테롤(LDL-C)은 평균 52.8 mg/dL, 실시예 7(고상)의 혈액 중 저밀도지단백 콜레스테롤(LDL-C)은 평균 52.6 mg/dL로서 음성 대조군에 비하여 감소하였다.
한편, 정상군의 혈액 중 고밀도지단백 콜레스테롤(HDL-C)은 평균 55.2 mg/dL이며, 음성 대조군의 혈액 중 고밀도지단백 콜레스테롤(HDL-C)은 평균 67.3 mg/dL로 정상군에 비하여 통계적으로 유의하게 증가하였다.
또한, 실시예 7(액상)군의 혈액 중 고밀도지단백 콜레스테롤(HDL-C)은 평균 56.3 mg/dL로 음성 대조군에 비하여 통계학적으로 유의하게 감소하였다.
또한, 실시예 7(고상)의 혈액 중 고밀도지단백 콜레스테롤(HDL-C)은 평균 57.6 mg/dL로서 음성 대조군에 비하여 감소하였으나 통계학적으로 유의한 차이가 나타나지 않았다.
2-7. 혈액 중 간염 지표
상기 기재된 방법으로 혈액 중 간염 지표를 측정하였다.
도 7은 본 발명의 정상군, 음성 대조군, 투여군(실시예 7_액상, 실시예 7_고상)에 대한 AST(aspartate aminotransferase)을 나타낸 그래프이며; 도 8은 본 발명의 정상군, 음성 대조군, 투여군(실시예 7_액상, 실시예 7_고상)에 대한 ALT(alanine aminotransferase)을 나타낸 그래프이고; 도 9는 본 발명의 정상군, 음성 대조군, 투여군(실시예 7_액상, 실시예 7_고상)에 대한 ALP(alkaline phosphatease)을 나타낸 그래프이다.
상기 AST는 초기 간염에 증가되며, ALT는 만성 간염에서 증가되는 효소이고, ALP는 간조직 내 담관에 존재하는 효소로 담즙배설 장애에서 증가된다.
도 7에 나타낸 바와 같이, 정상군의 혈액 중 AST는 평균 141.6 IU/L이며, 음성 대조군의 혈액 중 AST는 평균 153.0 IU/L로 정상군에 비하여 통계학적으로 유의한 차이가 나타나지 않았다.
또한, 실시예 7(액상)군의 혈액 중 AST는 평균 144.2 IU/L로서 음성 대조군에 비하여 감소하였으나 통계학적으로 유의한 차이가 나타나지 않았다.
또한, 실시예 7(고상)의 혈액 중 AST는 평균 115.5 IU/L로서 음성 대조군에 비하여 통계학적으로 유의하게 감소하였다.
도 8에 나타낸 바와 같이, 정상군의 혈액 중 ALT는 평균 31.4 IU/L이며, 음성 대조군의 혈액 중 ALT는 평균 56.1 IU/L로 정상군에 비하여 통계학적으로 유의하게 증가하였다.
또한, 실시예 7(액상)군의 혈액 중 ALT 및 실시예 7(고상)의 혈액 중 ALT는 각각 평균 51.3 IU/L 및 54.4 IU/L로서 음성 대조군과 통계학적으로 유의한 차이가 나타나지 않았다.
도 9에 나타낸 바와 같이, 정상군의 혈액 중 ALP는 평균 464.8 IU/L이며, 음성 대조군의 혈액 중 ALP는 평균 473.2 IU/L로 정상군에 비하여 통계학적으로 유의한 차이가 나타나지 않았다.
또한, 실시예 7(액상)군의 혈액 중 ALP 및 실시예 7(고상)의 혈액 중 ALP는 각각 평균 450.8 IU/L 및 480.2 IU/L로서 음성 대조군과 통계학적으로 유의한 차이가 나타나지 않았다. 이러한 결과로, 4주간의 알코올 식이 투여로 유발된 지방간에서는 담즙배성 장애까지는 병증이 진행되지 않은 것을 확인하였다.
2-8. 체중 측정
정상군의 체중은 투여개시일부터 투여 28일까지 평균 213.8-258.7 g의 변동을 나타내었으며, 음성 대조군의 체중은 평균 212.3-263.8 g의 변동을 나타내어 정상군에 비하여 통계학적으로 유의한 차이가 나타나지 않았다.
또한, 실시예 7(액상)군의 체중 및 실시예 7(고상)의 체중은 각각 평균 212.7-261.5 g 및 212.9-260.7 g으로서 음성 대조군과 통계학적으로 유의한 차이가 나타나지 않았다.
결론적으로, 수컷 SD rat에 알코올성 지방간을 유도하여 시험물질을 투여한 결과, 액상 및 고상 모두 간 조직 내 지방 및 중성지방의 함량을 감소시켜 알코올성 지방간 개선에 효과가 있는 것을 확인하였다. 특히, 고상의 시험물질이 액상의 시험물질에 비하야 효능이 우수한 것을 확인하였다.
하기에 본 발명의 분말을 함유하는 조성물의 제제예를 설명하나, 본 발명은 이를 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.
제제예 1. 산제의 제조
실시예 7에서 얻은 추출물 분말 500 mg
유당 100 mg
탈크 10 mg
상기의 성분들을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조한다.
제제예 2. 정제의 제조
실시예 7에서 얻은 추출물 분말 300 mg
옥수수전분 100 mg
유당 100 mg
스테아린산 마그네슘 2 mg
상기의 성분들을 혼합한 후 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조한다.
제제예 3. 캅셀제의 제조
실시예 7에서 얻은 추출물 분말 200 mg
결정성 셀룰로오스 3 mg
락토오스 14.8 mg
마그네슘 스테아레이트 0.2 mg
통상의 캡슐제 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합하고 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조한다.
제제예 4. 주사제의 제조
실시예 7에서 얻은 추출물 분말 600 mg
만니톨 180 mg
주사용 멸균 증류수 2974 mg
Na2HPO4,12H2O 26 mg
통상의 주사제의 제조방법에 따라 1 앰플 당 상기의 성분 함량으로 제조한다.
제제예 5. 액제의 제조
실시예 7에서 얻은 추출물 분말 4 g
이성화당 10 g
만니톨 5 g
정제수 적량
통상의 액제의 제조방법에 따라 정제수에 각각의 성분을 가하여 용해시키고 레몬향을 적량 가한 다음 상기의 성분을 혼합한 다음 정제수를 가하여 전체를 정제수를 가하여 전체 100g으로 조절한 후 갈색병에 충진하여 멸균시켜 액제를 제조한다.
제제예 6. 과립제의 제조
실시예 7에서 얻은 추출물 분말 1,000 mg
비타민 혼합물 적량
비타민 A 아세테이트 70 ㎍
비타민 E 1.0 mg
비타민 B1 0.13 mg
비타민 B2 0.15 mg
비타민 B6 0.5 mg
비타민 B12 0.2 ㎍
비타민 C 10 mg
비오틴 10 ㎍
니코틴산아미드 1.7 mg
엽산 50 ㎍
판토텐산 칼슘 0.5 mg
무기질 혼합물 적량
황산제1철 1.75 mg
산화아연 0.82 mg
탄산마그네슘 25.3 mg
제1인산칼륨 15 mg
제2인산칼슘 55 mg
구연산칼륨 90 mg
탄산칼슘 100 mg
염화마그네슘 24.8 mg
상기의 비타민 및 미네랄 혼합물의 조성비는 비교적 과립제에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하며, 통상의 과립제 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 과립을 제조하고, 통상의 방법에 따라 건강기능식품 조성물 제조에 사용할 수 있다.
제제예 7. 기능성 음료의 제조
실시예 7에서 얻은 추출물 분말 1,000 mg
구연산 1,000 mg
올리고당 100 g
매실농축액 2 g
타우린 1 g
정제수를 가하여 전체 900 mL
통상의 건강음료 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 약 1 시간 동안 85 ℃에서 교반 가열한 후, 만들어진 용액을 여과하여 멸균된 2 L 용기에 취득하여 밀봉 멸균한 뒤 냉장 보관한 다음 본 발명의 기능성 음료 조성물 제조에 사용한다.
상기 조성비는 비교적 기호음료에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 수요계층, 수요국가, 사용용도 등 지역적, 민족적 기호도에 따라서 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하다.
Claims (7)
- 감태 추출물, 우뭇가사리 추출물, 톳 추출물, 모자반 추출물 및 돌미역 추출물을 포함하는 해조류 복합추출물; 및
황칠 추출물 및 녹차 추출물을 포함하는 식물 복합추출물;을 포함하는 혼합물을 유효성분으로 함유하는 지방간 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물. - 제1항에 있어서, 상기 해조류 복합추출물은 감태 추출물 25 내지 40 중량%, 우뭇가사리 추출물 1 내지 10 중량%, 톳 추출물 25 내지 40 중량%, 모자반 추출물 25 내지 35 중량% 및 돌미역 추출물 1 내지 10 중량%를 포함하는 것을 특징으로 하는 지방간 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 식물 복합추출물은 황칠 추출물과 녹차 추출물은 1 : 0.7-1.3의 중량비로 혼합되는 것을 특징으로 하는 지방간 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 해조류 복합추출물과 식물 복합추출물은 1 : 5 내지 90의 중량비로 혼합되는 것을 특징으로 하는 지방간 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 해조류 복합추출물은 물, 탄소수 1 내지 4의 저급알코올 또는 이들의 혼합용매로 추출된 감태 추출물, 우뭇가사리 추출물, 톳 추출물, 모자반 추출물, 돌미역 추출물을 포함하며; 상기 식물 복합추출물은 물, 탄소수 1 내지 4의 저급알코올 또는 이들의 혼합용매로 추출된 황칠 추출물 및 녹차 추출물을 포함;하는 것을 특징으로 하는 지방간 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 지방간 질환은 알코올 의존성 지방간 또는 알코올 의존성 간염인 것을 특징으로 하는 지방간 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
- 감태 추출물, 우뭇가사리 추출물, 톳 추출물, 모자반 추출물 및 돌미역 추출물을 포함하는 해조류 복합추출물; 및
황칠 추출물 및 녹차 추출물을 포함하는 식물 복합추출물;을 포함하는 혼합물을 유효성분으로 함유하는 지방간 질환의 개선 또는 예방용 식품 조성물.
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