KR20160108917A

KR20160108917A - 산삼배양근 오일을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물

Info

Publication number: KR20160108917A
Application number: KR1020150032347A
Authority: KR
Inventors: 최종완; 정민석; 박창민; 윤해원
Original assignee: 주식회사 한국화장품제조
Priority date: 2015-03-09
Filing date: 2015-03-09
Publication date: 2016-09-21
Also published as: CN105943414A; KR101836354B1; CN105943414B

Abstract

본 발명은 산삼배양근 오일을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물 및 이의 제조방법에 관한 것이다. 본 발명의 화장료 조성물은 천연재료를 이용함으로써 얻을 수 있는 보습 효과뿐만 아니라 산삼배양근 오일을 사용함에 따른 항염효과를 가져, 피부 자극이 없으면서 보습, 항염 및 주름개선 효과가 우수한 것이 특징이다.

Description

산삼배양근 오일을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물 {COSMETIC COMPOSITION COMPRISING OIL OF CULTURED ROOT OF WILD GINSENG}

본 발명은 산삼배양근 오일을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물 및 이의 제조방법에 관한 것이다.

최근 화장품 산업이 발전함으로써 피부에 유용한 천연물질에 대한 관심도 함께 높아짐에 따라 피부 보습 또는 피부 염증의 완화 목적으로 여러 가지의 물질들이 개발되고 있다. 자세한 내용을 살펴보면 피부 보습효과에 도움을 주는 물질로는 동식물성 추출물, 콜라겐 등의 천연고분자, 아미노산, 비타민 등의 피부세포활성제 또는 글리세린, 1,3-부틸렌글리콜 등의 보습제 등이 많이 사용되고 있고 (대한민국 공개특허 제2012-0058798호), 피부 각질층의 구성 성분인 NMF(천연보습성분) 성분들 및 세포 간지질 성분 및 가장 일반적이며 효과가 큰 다가 알코올 등이 있다. 이러한 피부 보습에 도움을 주는 물질들은 화장료 조성물에 적용 시에는 장기사용에 따른 피부에서의 안전성 확보 등의 문제점으로 인하여 그 사용이 제한되어 왔다. 피부 보습 기능의 결핍은 피부노화의 원인이 된다. 피부노화의 원인은 크게 내인성 노화와 외인성 노화, 두가지로 나뉜다. 내인성 노화는 나이가 들면서 생체시계에 맞춰 피부세포에 관여하는 유전인자의 작용으로 피부재생 속도 및 콜라겐 합성이 점점 느려지면서 노화가 진행되는 것이다. 외인성 노화는 자외선에 피부노출, 공해, 활성산소 및 기타 스트레스 등 외부적 요인에 의해 노화가 발생하는 경우이다. 피부 노화가 진행되면 피부의 진피조직이 약해지고 피부 세포 결합도가 현저하게 떨어지며 피부 탄력에 관여하는 콜라겐과 엘라스틴의 양이 급격하게 줄어들고 점차 얼굴의 형태가 변하고 피부 건성도도 매우 심해져서 피부가 거칠어지고 주름도 깊어진다. 다른 한 부분에서의 화장품은 아토피 가려움증과 같은 피부 염증반응을 완화 시키는데 도움을 주는 목적으로 사용된다. 이처럼 염증 완화 목적으로 이용되고 있는 물질로는 비스테로이드계로 플루페나믹산(flufenamic acid), 이부프로펜(ibuprofen), 벤지다민(benzydamine), 인도메타신(indomethacin)등이 있고, 스테로이드계로는 프레드니솔론(prednisolone), 덱사메타손(dexamethasone) 등이 있으며, 알란토인, 아즈렌, ε-아미노키프론산, 하이드로코티존, 감초산 및 그 유도체(β-글리칠레친산, 글리칠레친산 유도체) 등이 항염증에 효과가 있는 것으로 알려져 있다. 최근 밝혀진 바에 의하면, 체내에서의 염증반응의 진행은 COX(cyclooxygenase) 효소 활성과 관련된 것으로 알려져 있다. COX 효소는 생체 내에 존재하는 프로스타그란딘(prostaglandin)의 생합성에 관련하는 주 효소로서 1형(COX-1)과 2형(COX-2)의 두가지 형태로 존재한다는 것으로 알려져 있다. COX-1은 위장관이나 혈소판과 같은 조직에 일정하게 존재하며, 정상적인 항상성을 유지하는데 관여하는 반면, COX-2는 염증이나 기타 면역 반응 시 세포분열인자(mitogen)나 사이토카인(cytokines)류에 의해 세포 내에서 일시적이고 빠르게 발현되는 효소이다. 또 하나의 강력한 염증 매개물인 나이트릭 옥사이드(Nitric oxide, NO)는 NO 합성효소(synthetase, NOS)에 의해 L-알지닌으로부터 생성되며, UV와 같은 외부 스트레스나 엔도톡신 또는 사이토카인과 같은 물질에 의해 많은 종류의 세포에서 생성된다. 이와 같은 염증 자극들은 세포 내의 유도성 NOS(induction, iNOS)의 발현을 증가시키고, 이를 통하여 세포내에서 NO 생성을 유도하여, 대식 세포를 활성화시킴으로써 염증 반응을 일으킬 수 있다. 이에 따라, 최근 효과적인 염증 완화를 위하여, NO의 생성을 억제할 수 있는 물질에 대한 연구가 진행되고 있으나, 이러한 연구에 의해 개발된 항염 물질의 경우 COX-2 효소를 억제할 뿐만 아니라 COX-1 효소도 억제함으로써 위장관 장애와 같은 부작용을 나타내는 것으로 알려져 있다.

천연 유래 생리 활성 물질을 화장료에 도입한 피부 보습 및 피부 염증 완화용 화장료의 개발이 활발해지고 있지만 대부분 그 효능이 미비하거나, 사용에 따른 위험성이 있는 등의 문제점을 가지고 있다. 그러므로 피부 보습, 항염에 대한 뛰어난 효능을 가지면서 위험성이 적은 물질의 개발이 필요하다.

대한민국 공개특허 제2012-0058798호

상기 종래기술의 문제점을 해결하고자, 본 발명은 천연 유래 생리 활성물질을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물 및 이의 제조방법을 제공하는 것을 목적으로 한다.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 산삼배양근 오일을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물을 제공한다.

본 발명의 일 구현예는 화장료 조성물이 피부 보습용, 항염용 또는 주름개선용인 것일 수 있다.

다른 일 구현예는 화장료 조성물이 산삼배양근 오일을 0.1 내지 100 mg/ml의 농도로 포함하는 것일 수 있다.

또 다른 일 구현예는 화장료 조성물은 유연 화장수(스킨), 영양 화장수(밀크로션), 영양크림, 마사지크림, 에센스, 젤상 크림, 팩, 영양유액, 페이스 파우더, 볼연지, 아이섀도우, 마스카라, 스킨 커버, 립스틱, 립글로스 또는 파운데이션의 제형인 것일 수 있다.

또한, 본 발명은 산삼배양근 또는 산삼배양근박을 용매에 첨가하여 숙성시킨 후 상기 용매를 제거하여 산삼배양근 오일을 제조하는 단계를 포함하는 화장료 조성물의 제조방법을 제공한다.

일 구현예는 화장료 조성물이 피부 보습용, 항염용 또는 주름개선용인 것일 수 있다.

다른 일 구현예는 용매가 물, 탄소수 1 내지 4의 알코올, 1,3-부틸렌글리콜, 아세톤, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트, 헥산 또는 클로로포름인 것일 수 있다.

또한, 본 발명은 상기 화장료 조성물을 피부에 도포하는 단계를 포함하는 화장방법을 제공한다.

본 발명의 화장료 조성물은 천연재료를 이용함으로써 얻을 수 있는 보습 효과뿐만 아니라 산삼배양근 오일을 사용함에 따른 항염효과를 가져, 피부 자극이 없으면서 보습 및 항염 효과가 우수한 것이 특징이다.

또한, 본 발명의 화장료 조성물은 콜라겐 생성효과를 가져, 주름개선효과도 우수하다.

본 발명자들은 화장품 조성물 중 피부 자극이 없고 사포닌(saponin) 등 유효한 생리 활성 성분을 함유하고 있어 피부 보습, 항염 및 주름개선 효과가 우수할 것이라 생각되는 물질로 산삼 배양근을 선정하였다. 일반적으로 사포닌이 풍부한 것으로는 인삼이나 홍삼이 잘 알려져 있지만 인삼류의 작물은 그 재배기간이 길면서 연작이 힘들어 원활한 물질 수급이 힘들다는 문제점이 있다. 산삼 배양근은 짧은 배양 기간과 비교적 간단한 생산 공정으로 인해 연중 생산이 가능하며 배양 중 엘리시터(Elicitor) 처리에 의해 사포닌 함량도 조절 가능한 것으로 알려져 훌륭한 천연 물질로 여겨진다. 이러한 천연 산삼의 배양근을 인공적으로 유도, 증식하여 산삼배양근으로부터 추출한 오일이 보습, 항염 및 주름개선 효과가 우수하다는 것을 밝혀내고 이를 함유한 화장료 조성물을 개발하였다.

이하, 본 발명을 상세히 설명한다.

본 발명은 산삼배양근 오일을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물을 제공한다.

상기 화장료 조성물은 천연 산삼의 배양근을 인공적으로 유도, 증식하여 산삼배양근으로부터 추출한 오일을 포함함에 따라 피부 보습용, 항염용 또는 주름개선용인 것이 특징이다.

상기 산삼배양근 오일은 산삼배양근 또는 산삼배양근박으로부터 유래된 것일 수 있으며, 산삼배양근 오일의 농도는 0.1 내지 100 mg/ml일 수 있다. 상기 산삼배양근 오일은 다양한 성분을 포함하는데, 주성분으로 유지, 식물성스테롤, 인지질 및 폴리아세틸렌 등을 포함하며, 구체적으로는 산삼배양근 오일을 기준으로 하여 70 내지 90중량부의 유지, 0.1 내지 15중량부의 식물성스테롤, 0.1 내지 10중량부의 인지질 및 0.1 내지 5중량부의 폴리아세틸렌을 포함할 수 있다.

상기 화장료 조성물은 다양한 제형으로 사용될 수 있는데, 바람직하게는 유연 화장수(스킨), 영양 화장수(밀크로션), 영양크림, 마사지크림, 에센스, 젤상 크림, 팩, 영양유액, 페이스 파우더, 볼연지, 아시섀도우, 마스카라, 스킨커버, 립스틱, 립글로스 또는 파운데이션의 제형으로 사용될 수 있다.

또한, 본 발명은 산삼배양근 또는 산삼배양근박을 용매에 첨가하여 숙성시킨 후 상기 용매를 제거하여 산삼배양근 오일을 제조하는 단계를 포함하는, 화장료 조성물의 제조방법을 제공한다.

상기 산삼배양근 또는 산삼배양근박을 용매에 첨가하여 숙성시킨 후 상기 용매를 제거하기 전에 산삼배양근 또는 산삼배양근박을 건조시키는 과정을 추가로 포함할 수 있으며, 여과한 다음 오염 예방 및 장기 보관을 위해 1회 이상의 여과하는 단계를 더 포함할 수 있다.

상기 산삼배양근 또는 산삼배양근박을 용매에 첨가하여 숙성시킨 후 상기 용매를 제거하는 단계는 산삼배양근 또는 산삼배양근박을 저온 또는 실온조건에서 용매에 침지시켜 일정기간 보관하거나 가열함에 따라 산삼배양근 오일을 추출할 수 있으며, 상기 추출은 특별히 한정되지 않으나 초음파 추출, 이산화탄소 초임계 추출 등의 방법으로 수행되는 것이 바람직하다.

상기 용매는 물, 탄소수 1 내지 4의 알코올, 1,3-부틸렌글리콜, 아세톤, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트, 헥산 또는 클로로포름일 수 있으며, 바람직하게는 헥산 또는 에틸아세테이트 일 수 있다.

본 발명의 바람직한 일 구현예에 따르면, 본 발명의 산삼배양근 오일은 약 1 ㎏ 내외의 산삼배양근 또는 산삼배양근박에 용매 1 ℓ 내지 20 ℓ를 첨가하여 1 내지 35℃, 바람직하게는 24 내지 35℃에서 10분 내지 24시간, 바람직하게는 2시간 내지 24시간 동안 추출할 수 있다. 상기 수득한 추출물을 식힌 후 여과하고, 추가로 감압 농축하여 용매를 제거할 수 있다. 필요에 따라서는 상기 숙성한 추출물은 식힌 후 여과하여 실온에서 보관할 수 있다.

또한, 본 발명은 상기 화장료 조성물을 피부에 도포하는 단계를 포함하는 화장 방법을 제공한다.

이하, 본 발명을 실시예를 이용하여 더욱 상세하게 설명한다. 그러나 하기 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것으로서, 본 발명은 하기 실시예에 의해 한정되지 않고 다양하게 수정 및 변경될 수 있다.

제조예 1

건조시킨 조직 배양 산삼배양근 1㎏에 헥산 20 ℓ를 가한 다음 상온에서 24시간동안 충분히 숙성시킨 후 여과지(일본 ToyoroshiKaisha, Ltd.에서 시판되는 5C, 185㎜)로 여과시켜 얻은 여액을, 감압 농축하여 헥산을 제거한 다음 실온에서 24시간동안 충분히 숙성 시킨 후 여과지(일본 ToyoroshiKaisha, Ltd.에서 시판되는 5C, 185㎜)로 여과시켜 산삼배양근 오일을 얻었다.

제조예 2

건조시킨 조직 배양 산삼배양근박(산삼배양근을 물이나 용매 등으로 추출 시 1차적인 추출과정을 거치고 남은 산삼배양근의 찌꺼기) 1㎏에 헥산 20 ℓ를 가한 다음 상온에서 24시간동안 충분히 숙성시킨 후 여과지(일본 ToyoroshiKaisha, Ltd.에서 시판되는 5C, 185㎜)로 여과시켜 얻은 여액을, 감압 농축하여 헥산을 제거한 다음 실온에서 24시간동안 충분히 숙성 시킨 후 여과지(일본 ToyoroshiKaisha, Ltd.에서 시판되는 5C, 185㎜)로 여과시켜 산삼배양근 오일을 얻었다.

제조예 3

건조시킨 조직 산삼배양근 1㎏에 에틸아세테이트 20 ℓ를 가한 다음 상온에서 24시간동안 충분히 숙성시킨 후 여과지(일본 ToyoroshiKaisha, Ltd.에서 시판되는 5C, 185㎜)로 여과시켜 얻은 여액을, 감압 농축하여 에틸아세테이트을 제거한 다음 실온에서 24시간동안 충분히 숙성 시킨 후 여과지(일본 ToyoroshiKaisha, Ltd.에서 시판되는 5C, 185㎜)로 여과시켜 산삼배양근박 오일을 얻었다.

제조예 4

건조시킨 조직 산삼배양근박 1㎏에 에틸아세테이트 20 ℓ를 가한 다음 상온에서 24시간동안 충분히 숙성시킨 후 여과지(일본 ToyoroshiKaisha, Ltd.에서 시판되는 5C, 185㎜)로 여과시켜 얻은 여액을, 감압 농축하여 에틸아세테이트을 제거한 다음 실온에서 24시간동안 충분히 숙성 시킨 후 여과지(일본 ToyoroshiKai sha, Ltd.에서 시판되는 5C, 185㎜)로 여과시켜 산삼배양근박 오일을 얻었다.

실험예 1. 산삼배양근오일의 보습효과의 측정

본 발명에 따른 화장료의 보습 효과를 조사하기 위해 피부의 수분함량 측정을 실시하였다. 상기 제조예 1 내지 4의 오일을 함유한 제형과 함유하지 않은 제형을 하기 표 1의 조성과 같이 제조한 후, 20~50세의 여성 20명을 대상으로 도포 전 및 후의 피부의 수분함량을 하기와 같이 측정하였다. 피부의 수분함량은 피부표면의 수분함량을 피부정전부하용량 계측법으로 측정하는 장비인 피부 수분량 측정기(Corneometer CM 825, Courage & Khazaka, Germany)를 이용하여 측정하였다. 시험 시작 1시간 전부터 실내에서 대기한 지원자의 상박부에 각각의 샘플을 2.0 ㎎/㎠ 의 농도로 균일하게 도포하고, 시료를 도포하지 않은 다른쪽 상박부를 대조군으로 하였다. 도포직전 및 도포직후의 피부수분함량을 측정하였으며, 이후 1시간, 3시간, 5시간 경과 시의 피부수분함량을 각각 측정하여 하기 표 2에 나타내었다. 하기 표 2에 나타낸 바와 같이 실시예 1 내지 4의 경우 도포부위의 측정값이 높게 나타나 보습 효과가 우수하다는 것을 알 수 있었다.

성 분 명	성 분 함 량 (중 량%)
성 분 명	실시예1	실시예2	실시예3	실시예4	비교예1
산삼배양근오일	제조예1 2.00	제조예2 2.00	제조예3 2.00	제조예4 2.00	-
플로필렌글리콜	5.00	5.00	5.00	5.00	5.00
글리세린	5.00	5.00	5.00	5.00	5.00
트리에탄올아민	0.50	0.50	0.50	0.50	0.50
토코페릴 아세테이트	1.00	1.00	1.00	1.00	1.00
유동파라핀	5.00	5.00	5.00	5.00	5.00
스쿠알란	5.00	5.00	5.00	5.00	5.00
마카다미아너트 오일	15.00	15.00	15.00	15.00	15.00
폴리솔베이트 60	1.00	1.00	1.00	1.00	1.00
솔비탄세스퀴 올레이트	1.00	1.00	1.00	1.00	1.00
카르복실비닐 폴리머	0.20	0.20	0.20	0.20	0.20
방부제	0.20	0.20	0.20	0.20	0.20
향료	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1
정제수	잔량	잔량	잔량	잔량	잔량
계	100	100	100	100	100

구 분	시간 (hr)	결 과
구 분	시간 (hr)	Corneometric value (도포부위)	Corneometric value (비도포부위)
실시예 1	0	81	81
	1	117	82
	3	108	80
	5	90	79
실시예 2	0	82	82
	1	110	80
	3	105	79
	5	86	80
실시예 3	0	80	79
	1	120	82
	3	110	80
	5	93	80
실시예 4	0	80	82
	1	114	79
	3	106	80
	5	92	81
비교예1	0	81	79
	1	96	80
	3	90	81
	5	80	79

실험예 2. 산삼배양근오일의 항염효과의 측정

베타-헥소사미니다아제(β-hexosaminidase)의 방출량을 통해 상기 표 1의 실시예 1 내지 4 및 비교예 1의 스킨 제형에 대한 세포 내 염증 억제 효과를 평가하였다. 37℃, 5% CO₂ 조건의 세포 배양기 (ELITE II, Revco, USA)에서 배양한 ATCC(America Type Culture Collect, USA)로부터 구입한 human fibroblast cell line인 CCD-1064SK (CRL-2076), mouse macrophage cell line인 RAW 264.7 (TIB-71) 및 rat mast cell line인 RBL-2H3 (CRL-2256)을 사용하였다. CCD-1064SK, RAW 264.7과 RBL-2H3의 배양 배지로는 각각 IMDM (iscove's modified dulbecco's medium), DMEM (dulbecco's modified eagle's medium)과 MEM (minimum essential medium)을 Gibco (USA)로부터 구입하여 사용하였고, 각각의 배지에 FBS (fetal bovine serum, Gibco, USA) (CCD-1064SK, RAW 264.7은 FBS 10%, RBL-2H3는 FBS 15%를 배지에 첨가)와 antibiotic-antimycotic solution (Giboco, USA) 1%를 첨가하여 배양한 후, DNP-HSA (10 μg/ml)로 처리하여 1 시간 동안 반응시키고 ice bath에서 10 분 동안 방치한 후 반응을 종결시켰다. 상층액 20 μl를 96 well plate에 옮기고 substrate buffer (4-p-Nitrophenyl-N-acetyl-b-D-glucosaminide 1 mM, sodium citrate 0.05 M, pH 4.5) 80 μl를 넣고 37℃에서 30 분 배양시킨 다음 각 well당 stop solution 200 μl를 첨가하여 반응을 종결시킨 후 405 nm에서 흡광도를 측정하였다. 베타-헥소사미니다아제(β-hexosaminidase)의 방출량 측정 결과, 하기 표 3에 나타낸 바와 같이 실시예 1 내지 4의 경우 베타-헥소사미니다아제(β-hexosaminidase)의 방출량이 감소되어 염증 반응 억제에 효과적임을 알 수 있었다.

구분	실시예1	실시예2	실시예3	실시예4	비교예1
β-hexosaminidase 방출량	82%	86%	75%	80%	100%

실험예 3. 세포독성 실험

3.1 세포독성 실험용 세포 배양

ATCC(America Type Culture Collect, USA)로부터 구입한 human fibroblast cell line인 CCD-1064SK (CRL-2076), mouse macrophage cell line인 RAW 264.7 (TIB-71) 및 rat mast cell line인 RBL-2H3 (CRL-2256)을 사용하였다. CCD-1064SK, RAW 264.7과 RBL-2H3의 배양 배지로는 각각 IMDM (iscove's modified dulbecco's medium), DMEM (dulbecco's modified eagle's medium)과 MEM (minimum essential medium)을 Gibco (USA)로부터 구입하여 사용하였고, 각각의 배지에 FBS (fetal bovine serum, Gibco, USA)(CCD-1064SK, RAW 264.7은 FBS 10%, RBL-2H3는 FBS 15%를 배지에 첨가)와 antibiotic-antimycotic solution (Giboco, USA) 1%를 첨가하여 세포배양에 사용하였다. 사용한 모든 세포는 37℃, 5% CO₂ 조건의 세포 배양기 (ELITE II, Revco, USA)에서 배양하였다.

3.2 산삼배양근오일의 세포독성 시험

세포 독성을 측정하기 위하여 문헌에 기재된 MTT(thiazolyl blue tetrazolium bromide, Sigma, USA) 방법(J. Immunol. Methods, 141(1), 15 (1991))을 이용하여 하기와 같이 진행하였다. MTT 방법은 세포 증식이나 독성 측정에 사용되는 방법으로, 살아있는 세포의 미토콘드리아에서 숙신산 탈수소효소(succinate dehydrogenase)에 의해 황색 수용성 염인 MTT가 불수용성인 자주색의 MTT formazan으로 환원되는 원리를 이용한 방법이다. 상기 세포배양 방법으로 배양한 CCK-1064SK fibroblast를 1×10⁵cells/well의 밀도로 24 well plate(Nunc,USA)에 접종하여 1일 배양한 후 serum-free IMDM으로 교체하고, 상기 제조예 1 내지 4에서 제조된 오일을 농도별로 첨가하여 24시간 배양하였다. 2.5 mg/ml의 농도로 제조한 MTT 용액을 0.1ml/well로 첨가하여 37℃에서 4시간 반응 후 MTT 용액을 제거하고, DMSO(dimethylsufoxid)를 0.5 ml/well로 첨가하였다. 실온에서 MTT formazan을 녹인 후, 570nm에서 흡광도를 측정하고 음성대조군과 흡광도 차이를 비교하여 그 결과를 하기 표 4에 나타내었다. 하기 표 4에 나타낸 바와 같이 제조예 1 내지 4의 산삼배양근오일은 피부세포인 CCK-1064SK 세포생존률이 높게 나타나 세포독성이 거의 없음을 확인하였다.

구 분	농 도 (mg/ml)	세포생존률 (% of control)
Control	-	100.00±2.78
제조예1	0.1	97.84±3.16
	0.5	98.78±3.32
	1.0	99.14±2.69
제조예2	0.1	98.69±2.07
	0.5	97.25±2.16
	1.0	100.32±1.77
제조예3	0.1	96.15±3.12
	0.5	100.48±1.38
	1.0	96.06±1.29
제조예4	0.1	97.52±2.48
	0.5	99.67±1.33
	1.0	101.47±3.06

다음은 피부보습 및 염증 완화 피부 보호 화장료 조성물의 처방을 설명하고자 한다.

본 발명의 산삼배양근오일을 함유한 화장료 조성물의 처방을 예시하고 있으나, 본 발명의 화장료 조성물의 처방은 이에 제한되는 것은 아니다.

실험예 4. 산삼배양근오일의 콜라겐 생합성 측정

피부 주름의 발생 원인 중 하나로 피부교원질 즉 콜라겐의 결핍을 들고 있으며, 콜라겐은 피부 진피를 구성하는주요 단백질로서 피부 구조와 탄력을 유지하는 역할을 하고 있다. 콜라겐은 나이가 들면서 생성의 감소를 보이며 분해도 증가되어 피부 진피층의 함몰을 유도하여 피부의 주름을 생성하는 것으로 알려져 있는데, 주름개선 효과를 위해 콜라겐 생합성을 측정하였다.

4.1 콜라겐 생합성량 측정

본 발명에 따른 화장료의 주름개선 효과를 조사하기 위해 섬유아세포를 이용한 콜라겐 생합성 촉진 시험(Sircol^TM Soluble Collagen Assay Kit)을 실시하였다.

배양한 사람섬유아세포를 12웰 세포 배양접시에 1×10⁵ 세포/웰이 되도록 5% FBS를 포함하는 배지에 분주하여 24시간 배양하고, 2% FBS를 포함하는 배지에 산삼배양근 오일을 각각 처리 농도 별로 희석하여 세포에 처리하고 48시간 배양하여 하기 실험에 사용하였다. 상기 섬유아세포(fibroblast)에서 실제적으로 콜라겐의 합성이 증가되었음을 확인하기 위하여 Biocolor 사의 콜라겐 분석 키트(Soluble Collagen Assay kit)를 구입하여 제품 매뉴얼의 실험 방법에 따라 콜라겐 양을 측정하였다. 콜라겐 분석 키트는 세포를 배양 하는 동안 배양 배지로 분비된 콜라겐과 염색시약의 결합에 의한 방법으로 확인 할 수 있는 정량방법이다. 상세하게는, 배양 상등액 100㎕에 염색 시약(dye reagent, 피크릭산에 Sirius red reagent이 포함된 용액) 1㎖을 첨가하고 30분간 반응시켰다(콜라겐 생성량에 따라 시험 시 배양액을 농축하거나 배양 상등액을 200㎕까지 염색 시약 1㎖와 반응시킬 수 있다.) 씨리어스 레드(Sirius red)는 음이온계 색소로서 콜라겐에 특이적으로 결합한다. 30분간 반응시킨 후 반응액을 12,000×g 이상에서 10분간 원심분리하여 콜라겐-색소 결합체를 침전시켰다. 침전물에 알칼리 시약 1.0㎖을 첨가하여 실온에서 5분 동안 용해시켰다. 상기 용액의 흡광도를 흡수분광광도계(UVmax, Molecular Device, USA)를 이용하여 540㎚에서 측정하여 하기 표 5에 나타내었으며, 이를 비시험군의 흡광도 비교하여 콜라겐 생합성 촉진 효과를 평가하였다.

시료	O.D. Mean ± S.D. (% of 대조군)
검액농도(mg/ml)	대조군	0.1	0.5	1.0
제조예1	0.514±0.022 (100)	0.5397±0.018 (105)	0.5860±0.023 (114)	0.6219±0.020 (121)
제조예2	0.514±0.022 (100)	0.5212±0.021 (101)	0.5647±0.022 (110)	0.5987±0.025 (116)
제조예3	0.514±0.022 (100)	0.5528±0.024 (108)	0.5994±0.017 (117)	0.6382±0.015 (124)
제조예4	0.514±0.022 (100)	0.5236±0.017 (102)	0.5720±0.011 (111)	0.6011±0.026 (117)

처방예 1

산삼배양근오일을 함유한 화장료 조성물 중 유연화장수(스킨)의 처방예는 다음 표 6과 같다.

성 분 명	성 분 함 량 (중량%)
산삼배양근오일	2.00
1,3-부틸렌 글리콜	2.00
글리세린	3.00
올레일알코올	2.00
폴리솔베이트20	1.00
에탄올	6.00
방부제	0.20
향료	0.10
정제수	잔량
계	100

처방예 2

산삼배양근오일을 함유한 화장료 조성물 중 영양화장수(밀크로션)의 처방예는 다음 표 7과 같다.

성 분 명	성 분 함 량 (중량%)
산삼배양근오일	2.00
1,3-부틸렌 글리콜	4.00
글리세린	3.00
올레일알코올	0.50
폴리솔베이트20	1.00
방부제	0.20
향료	0.10
정제수	잔량
계	100

처방예 3

산삼배양근오일을 함유한 화장료 조성물 중 영양크림의 처방예는 다음 표 8과 같다.

성 분 명	성 분 함 량 (중량%)
산삼배양근오일	2.00
플로필렌글리콜	5.00
글리세린	5.00
트리에탄올아민	0.50
토코페릴 아세테이트	1.00
유동파라핀	5.00
스쿠알란	5.00
마카다미아너트 오일	15.00
폴리솔베이트 60	1.00
솔비탄세스퀴 올레이트	1.00
카르복실비닐 폴리머	0.20
방부제	0.20
향료	0.10
정제수	잔량
계	100

처방예 4

산삼배양근오일을 함유한 화장료 조성물 중 마사지크림의 처방예는 다음 표 9와 같다.

성 분 명	성 분 함 량 (중량%)
산삼배양근오일	2.00
바세린	5.00
유동파라핀	30.0
밀납	3.00
폴리솔베이트 60	1.00
솔비탄세스퀴올레이트	1.00
플로필렌글리콜	5.00
글리세린	5.00
방부제	0.20
향료	0.10
정제수	잔량
계	100

처방예 5

산삼배양근오일을 함유한 화장료 조성물 중 에센스의 처방예는 다음 표 10과 같다.

성 분 명	성 분 함 량 (중량%)
산삼배양근오일	2.00
1.3-부틸렌글리콜	2.00
글리세린	5.00
트리에탄올아민	0.27
카르복시비닐폴리머	0.20
잔탄검	0.10
방부제	0.20
향료	0.10
정제수	잔량
계	100

처방예 6

산삼배양근오일을 함유한 화장료 조성물 중 젤상 크림의 처방예는 다음 표 11과 같다.

성 분 명	성 분 함 량 (중량%)
산삼배양근오일	2.00
프로필렌글리콜	20.00
카보머	20.00
폴리솔베이트60	0.50
방부제	0.20
향료	0.10
정제수	잔량
계	100

처방예 7

산삼배양근오일을 함유한 화장료 조성물 중 팩의 처방예는 다음 표 12와 같다.

성 분 명	성 분 함 량 (중량%)
산삼배양근오일	2.00
1.3-부틸렌글리콜	5.00
폴리비닐알콜	12.00
폴리비닐피롤리돈	2.00
에탄올	8.00
폴리비닐아세테이트	1.00
방부제	0.20
향료	0.10
정제수	잔량
계	100

처방예 8

산삼배양근오일을 함유한 화장료 조성물 중 영양유액의 처방예는 다음 표 13과 같다.

처방예 9

산삼배양근오일을 함유한 화장료 조성물 중 페이스 파우더의 처방예는 다음 표 14와 같다.

성 분 명	성 분 함 량 (중량%)
산삼배양근오일	2.00
세리사이트	10.00
옥시염화비스무스	15.00
마이카	10.00
페닐트리메치콘	5.00
색소	1.50
방부제	0.20
향료	0.10
탈크	잔량
계	100

처방예 10

산삼배양근오일을 함유한 화장료 조성물 중 볼연지의 처방예는 다음 표 15와 같다.

성 분 명	성 분 함 량 (중량%)
산삼배양근오일	2.00
마이카	15.00
옥시염화비스무스	5.00
이산화 티탄	5.00
페닐트리메치콘	5.00
색소	8.00
방부제	0.20
향료	0.10
세리사이트	잔량
계	100

처방예 11

산삼배양근오일을 함유한 화장료 조성물 중 아이섀도우의 처방예는 다음 표 16과 같다.

성 분 명	성 분 함 량 (중량%)
산삼배양근오일	2.00
세리사이트	10.00
옥시염화비스무스	10.00
이산화 티탄	5.00
페닐트리메치콘	5.00
색소 및 펄	10.00
방부제	0.20
향료	0.10
마이카	잔량
계	100

처방예 12

산삼배양근오일을 함유한 화장료 조성물 중 마스카라의 처방예는 다음 표 17와 같다.

성 분 명	성 분 함 량 (중량%)
산삼배양근오일	2.00
이소도데칸	25.00
트리메칠실록시실리케이트	10.00
비즈왁스	5.00
카나우바왁스	5.00
디스테아디모늄헥토라이트	3.00
소르비탄이소스테아레이트	3.00
산화철	10.00
디소듐이디티에이	0.05
마그네슘설페이트	1.00
방부제	0.20
정제수	잔량
계	100

처방예 13

산삼배양근오일을 함유한 화장료 조성물 중 스킨 커버의 처방예는 다음 표 18와 같다.

성 분 명	성 분 함 량 (중량%)
산삼배양근오일	2.00
스쿠알란	15.00
디이소스테아릴말레이트	10.00
파라핀 납	2.00
카나우바 납	3.00
이산화 티탄	10.00
나이론 파우더	5.00
마이카	5.00
색소	1.00
방부제	0.20
향료	0.10
파라핀	잔량
계	100

처방예 14

산삼배양근오일을 함유한 화장료 조성물 중 립스틱의 처방예는 다음 표 19와 같다.

성 분 명	성 분 함 량 (중량%)
산삼배양근오일	2.00
라놀린오일	15.00
올레일알콜	10.00
칸데릴라 납	8.00
카나우바 납	3.00
색소 및 펄	10.00
방부제	0.20
향료	0.20
디이소스테아릴말레이트	잔량
계	100

처방예 15

산삼배양근오일을 함유한 화장료 조성물 중 립글로스의 처방예는 다음 표 20와 같다.

성 분 명	성 분 함 량 (중량%)
산삼배양근오일	2.00
폴리부텐	35.50
라놀린오일	15.00
올레일알콜	10.00
밀 납	5.00
색소 및 펄	10.00
방부제	0.20
향료	0.20
디이소스테아릴말레이트	잔량
계	100

처방예 16

산삼배양근오일을 함유한 화장료 조성물 중 파운데이션의 처방예는 다음 표 21와 같다.

성 분 명	성 분 함 량 (중량%)
산삼배양근오일	2.00
사이클로펜타실록산	25.00
벤토나이트	3.00
피이지-10디메치콘	3.00
카나우바왁스	5.00
씨12-15알킬벤조에이트	20.00
산화철	3.00
티타늄디옥사이드	5.00
소듐클로라이드	2.00
방부제	0.20
향료	0.10
정제수	잔량
계	100

Claims

산삼배양근 오일을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물.
제1항에 있어서,
상기 화장료 조성물은 피부 보습용, 항염용 또는 주름개선용인 것을 특징으로 하는, 화장료 조성물.
제1항에 있어서,
상기 화장료 조성물은 산삼배양근 오일을 0.1 내지 100 mg/ml의 농도로 포함하는 것을 특징으로 하는, 화장료 조성물.
제1항에 있어서,
상기 화장료 조성물은 유연 화장수(스킨), 영양 화장수(밀크로션), 영양크림, 마사지크림, 에센스, 젤상 크림, 팩, 영양유액, 페이스 파우더, 볼연지, 아이섀도우, 마스카라, 스킨 커버, 립스틱, 립글로스 또는 파운데이션의 제형인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
산삼배양근 또는 산삼배양근박을 용매에 첨가하여 숙성시킨 후 상기 용매를 제거하여 산삼배양근 오일을 제조하는 단계를 포함하는, 화장료 조성물의 제조방법.
제5항에 있어서,
상기 화장료 조성물은 피부 보습용, 항염용 또는 주름개선용인 것을 특징으로 하는, 화장료 조성물의 제조방법.
제5항에 있어서,
상기 용매는 물, 탄소수 1 내지 4의 알코올, 1,3-부틸렌글리콜, 아세톤, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트, 헥산 또는 클로로포름인 것을 특징으로 하는, 화장료 조성물의 제조방법.
제1항 내지 제4항 중 어느 한 항의 화장료 조성물을 피부에 도포하는 단계를 포함하는, 화장 방법.