KR20150103503A

KR20150103503A - 피부세포 증식효능이 있는 스핑고리포좀 화장료 조성물

Info

Publication number: KR20150103503A
Application number: KR1020140025027A
Authority: KR
Inventors: 최면; 이재용; 김윤규; 박명례
Original assignee: 김윤규; 강원대학교산학협력단
Priority date: 2014-03-03
Filing date: 2014-03-03
Publication date: 2015-09-11
Also published as: KR102147764B1

Abstract

본 발명은 각종 생리활성성분을 함유하는 스핑고 리포좀 화장료 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 인간줄기세포배양액이나 유산균발효추출물을 활성물질로 함유함으로써 피부세포 증식 효능이 우수한 스핑고 리포좀 화장료 조성물에 관한 것이다.

Description

피부세포 증식효능이 있는 스핑고리포좀 화장료 조성물{Spingoliposome cosmetic composition with effect of proliferation of skin cells}

본 발명은 각종 생리활성성분을 함유하는 스핑고리포좀 화장료 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 인간줄기세포배양액이나 유산균발효추출물을 활성물질로 함유함으로써 피부 세포 증식 효능이 우수한 스핑고리포좀 화장료 조성물에 관한 것이다.

줄기세포{stem cell}는 발달단계 초기인 배반포기 배의 내부 세포덩어리부터 유래한 배아줄기세포{embryonic stem cells}와 성인 몸의 각 조직에 들어있는 성체줄기세포{adult stem cell}로 나누어지며, 줄기세포 배양액에는 섬유아세포성장인자{fibroblast growth factor ; FGF}와 같은 피부세포 성장 및 재생을 촉진하는 성분이 있는 것으로 알려져 있다{대한민국특허 제10-1032271호}.

발효는 각종 유해성분을 분해시켜 안전성을 높이고, 소화물 생성 등으로 유효성분 및 흡수율을 증가시키는 것으로 알려져 있는데, 특히 유산균 발효물의 경우 피부보습, 미백효과를 주는 비타민 B1, B2, 판토텐산, B6, 엽산, 탄수화물, 아미노산 및 각종 미네랄이 풍부하며, 발효과정 중에 만들어 지는 당화효소, 프로테아제 등과 같은 각종 천연효소는 유효물질 생성 및 흡수를 높여주어 항산화, 항노화, 미백, 피부보습 등의 효능이 있는 것으로 알려져 있다.

이러한 유효성분이 피부 세포로 잘 전달되는 것이 중요한데, 화장료의 경우, 소수성 성분과 친수성 성분을 계면활성제 이용하여 가용화나 유화시켜 만드는 것이 일반적이다. 특정 생리활성물질을 피부 세포로 전달효율을 높이기 위해 기술개발이 필요한 실정이다.

이에 본 발명자들은 피부 세포 증식 효능이 뛰어난 화장료를 제조하기 위해 연구하던 중, 유산균 발효시 이소플라본, 사포닌과 같은 유효성분을 함유하는 황기, 콩 등을 첨가하여 제조한 발효추출물이 피부 세포 증식효능이 높은 것을 발견하였고, 이 유산균 발효 추출물이나 인간줄기세포 배양액을 세포막 성분인 스핑고신(spingosine)을 주성분으로 사용하여 스핑고리포좀으로 제조한 화장료 조성물이 인간 피부세포 증식에 우수한 효능이 있는 것을 발견하고 본 발명을 완성하게 되었다.

따라서 본 발명의 목적은 인체 피부세포 증식효능이 있는 스핑고리포좀 화장료 조성물을 제공하는 것이다.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명에서는 황기{Hawanggi}나 콩을 첨가하여 유산균으로 발효시킨 추출물이나 인간 줄기세포 배양액을 유효성분으로 함유하는 스핑고리포좀 화장료 조성물을 제공한다.

본 발명에 의한 화장료 조성물은 황기나 콩을 첨가하여 유산균으로 발효시킨 추출물이나 인간 줄기세포 배양액을 유효성분으로 함유하는 스핑고리포좀 조성물로써 높은 피부 세포 증식 효능을 나타낸다.

도 1은 황기 추출물 함량별 유산균 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 스핑고 리포좀 조성물이 인간 피부섬유아세포{fibroblast}의 증식에 미치는 영향을 조사했을 때에 세포수 증가를 보여주는 그래프이다.
도 2는 유산균 종류별로 발효시킨 유산균 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 스핑고리포좀 조성물이 인간 피부섬유아세포의 증식에 미치는 영향을 조사했을 때에 세포수 증가를 보여주는 그래프이다.

이하, 본 발명을 상세히 설명하면 하기와 같다.

본 발명에서는 1) 인간줄기세포 배양액이나 유산균 발효 추출물을 유효성분으로 준비하는 단계; 및 2) 유효성분을 포함하는 스핑고 리포좀을 만드는 단계를 거쳐 피부세포인 섬유아세포{fibroblast cell} 증식효능을 확인하였다.

상기 1) 단계에서, 유효성분으로 인간줄기세포 배양액의 경우, 인간 배아줄기세포나 성체 줄기세포를 배양한 액을 사용한다.

상기 1) 단계에서, 유효성분으로 유산균 발효 추출물의 경우, 황기나 콩을 첨가하여 유산균으로 발효시켜 추출하여 사용한다. 유산균의 경우 락토바실러스 비피덤{Lactobacillus bifidum}을 비롯한 락토바실러스계 유산균이나 스트렙토코커스 더모필러스{Streptococcus thermopilus}를 비롯한 스트렙토코커스계 유산균 그룹에서 선택된 1종 단독으로 또는 2종 이상 혼합물로 사용할 수 있다. 유산균 발효는 우유, 포도당, 이스트추출물{yeast extract}을 함유하는 배지를 기본배지로 하여 황기나 콩은 정제수, 에탄올 중 1종 또는 2종 혼합하여 추출한 추출물을 1%내지 99% 사이를 첨가하여 사용하며, 바람직하게는 25%내지 75% 사이를 첨가하여 사용하며, 가장 바람직하게는 50%내지 75%사이를 첨가하여 사용한다. 황기나 콩의 추출온도는 10℃ 내지 121℃사이가 바람직하며, 15분 내지 24시간 사이 동안 추출할 수 있다. 기본 배지에 황기나 콩 추출물 첨가하여 유산균을 접종하여 4℃ 내지 40℃ 사이에서 충분한 발효가 일어날 수 있도록 1일에서 1년 사이 정도, 바람직하게는 2일간 발효시킨다. 발효액을 추출하는 용매로는 정제수, 1,3-부틸렌글리콜{1,3- butylene glycol}, 에탄올, 글리세린으로 이루어진 그룹에서 선택된 1종을 단독으로 또는 2종 이상 혼합하여 사용할 수 있으며, 추출온도는 10℃ 내지 121℃ 사이가 바람직하며, 15분 내지 24시간 사이 동안 추출할 수 있다.

상기 2) 단계에서, 스핑고신{spingosine}, 레시틴, 글리세린을 혼합한다. 이들의 중량비는 순서대로 각각 1~10 : 1~10 :1~10 이며, 가장 바람직하게는 5: 3: 2이다. 혼합물은 70℃ 내지 80℃사이에서 20분 내지 30분 사이 동안 가열하며 교반한다. 교반하여 준비된 혼합물에 상기 1) 단계에서 준비된 인간줄기세포배양액이나 유산균 발효추출물을 10% 내지 99% 사이로 첨가하여 제조한다.

이하, 본 발명은 비한정적인 실시예를 통해 상세히 설명한다.

(실시예1) 황기추출물의 제조

제천산 황기 1kg을 정제수로 세척한 후, 10배의 정제수를 첨가하여 121℃에서 15분간 가열한다. 상온에 방치시켜 온도를 40℃이하로 낮추고 종이 여과지를 사용하여 감압 여과하여 여과지를 통과한 황기추출물을 제조하였다.

(실시예2) 황기 추출물을 첨가한 유산균 발효 추출물 제조

발효에 사용된 유산균은 A, B, C 그룹으로 진행하였다. 유산균 A 그룹은 스트렙토코커스 더모필러스{Streptococcus thermopilus}, 락토바실러스 불가리쿠스{Lactobacillus bulgaricus}, 락토바실러스 페르멘텀{Lactobacillus fermentum}의 3종류가 포함되며, 유산균 B 그룹은 락토바실러스 비피덤{Lactobacillus bifidum}을 사용하였고, 유산균 C 그룹은 락토바실러스 아시도필러스{Lactobacillus acidophilus}, 락토바실러스 카세이{Lactobacillus casei}, 락토바실러스 글란타럼{Lactobacillus plantarum}, 락토바실러스 불가리쿠스{Lactobacillus bulgaricus}, 스트렙토코커스 더모필러스{Streptococcus thermopilus} 5가지를 혼합하여 사용하였다. 유유 20%, 포도당 2%, 이스트추출물 {yeast extract} 0.3%를 기본 배지로 하여 상기 실시예 1에서 준비한 황기추출물을 25%, 50%, 75%로 각각 첨가하여 나머지를 정제수로 100%가 되도록 맞추어 준비한 배지에 상기 유산균 A, B, C 그룹 유산균을 0.1%씩 접종하여 36℃에서 48시간 동안 발효시켰다. 발효액에 동일한 비율의 정제수를 첨가하여 종이 여과지를 사용하여 감압 여과하여 여과지를 통과한 유산균 발효 추출물 제조하였다.

(실시예3) 유산균 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 스핑고 리포좀 제조

피토스핑고신{phytospingosine} 50g, 레시틴 30g, 글리세린 20g을 혼합하여 75℃ 에서 25분 동안 가열하며 교반한다. 교반하여 준비된 혼합물을 상기 실시예 2에서 준비된 유산균 발효 추출물 900g에 200rpm 속도로 20분간 교반하며 첨가하고 제조하였다.

(실시예4) 인간줄기세포 배양액을 유효성분으로 포함하는 스핑고 리포좀 제조

상기 실시예3 에서 유산균 발효 추출물 대신 인간줄기세포 배양액 900g을 상기 실시예 3과 같은 방법으로 사용하여 제조하였다.

(실시예5) 유산균 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 스핑고 리포좀 조성물이 인간 피부섬유아세포의 증식에 미치는 영향

피부의 진피층에 존재하여 콜라겐을 형성하는 인간 피부섬유아세포를 8% FBS가 첨가된 DMEM(Gibco) 유지 배양액으로 배양한 다음, 96웰 플레이트에 10000개씩 넣어주고 여기에 실시예 3에서 제조한 스핑고 리포좀 조성물을 첨가하여 72시간 동안 배양하였다. 각 웰에 EZ-Cytox(Enhanced cell viability assay kit) 용액을 10μl씩 첨가하고 1시간 후 450nm에서 흡광도를 측정하였다.

도 1는 황기 추출물 함량별 유산균 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 스핑고 리포좀 조성물이 인간 피부섬유아세포의 증식에 미치는 영향을 조사한 결과로써, 황기 추출물 첨가량이 25%내지 75% 사이에서 모두 양성대조군으로 사용한 아스코르빈산 보다 30%이상 높은 세포수 증가를 보여주는 그래프이다.

도 2는 유산균 종류별로 발효시킨 유산균 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 스핑고 리포좀 조성물이 인간 피부섬유아세포의 증식에 미치는 영향을 조사한 결과로써, 모두 양성대조군으로 사용한 아스코르빈산 보다 30%이상 높은 세포수 증가를 보여주었고 특히 B 그룹인 락토바실러스 비피덤{Lactobacillus bifidum}으로 발효시킨 유산균 발효 추출을 유효성분으로 포함하는 스핑고 리포좀 조성물이 가장 높은 세포수 증가를 보여주는 그래프이다.

(실시예6) 인간줄기세포 배양액을 유효성분으로 포함하는 스핑고 리포좀 함유 크림 제형 화장료 제조

정제수 26.46g, 인간 줄기세포 배양액 함유 스핑고 리포좀 10g, 사이클로펜타실록산 1g, 피이지/피피지-18/18디메치콘 1g, 부틸렌글라이콜 1g, 나이아신아마이드 5g, 디페닐실록시페닐트리메치콘 1g, 디메치콘/비닐디메치콘크로스폴리머 1g, 디메치콘 1g, 소듐클로라이드 1g, 세필피이지/피피지-10/1디메치콘 1g, 아세틸헥사펩타이드-8 1g, 인삼캘러스배양추출물 1g, 황금캘러스배양액 1g, 배초향캘러스배양액 1g, 장뇌삼추출물 1g, 하이드롤라이즈드태반추출물 1g, 접시꽃뿌리추출물 1g, 알로에베라잎추출물 1g, 알에이치-폴리펩나이드-7 1g, 에스에이치-올리고펩타이드- 1 1g, 카퍼트리펩타이드-1 1g, 에스에이치-폴리펩타이드-2 1g, 올리고펩타이드-28 1g, 올리고펩타이드-29 1g, 올리고펩타이드-30 1g, 올리고펩타이드-31 1g, 에스에이치-데카펩타이드-7 1g, 에스에이치-데카펩타이드 1g, 에스에이치-올리고펩타이드 -9 1g, 에스에이치-펜타펩타이드-19 1g, 옥타펩타이드-7 1g, 데카펩타이드-6 1g, 프로폴리스추출물 1g, 아사이야자추출물 1g, 락토바실러스/콩발효추출물 1g, 화이트윌로우껍질추출물 1g, 육계추출물 1g, 오레가노잎추출물 1g, 편백나무잎추출물 1g, 황금추출물 1g, 마치현추출물 1g, 알라닌 1g, 글라이신 1g, 알지닌 1g, 세린 1g, 류신 1g, 이소류신 1g, 디포타슘글리시리제이트 1g, 알로에베라잎즙가루 1g, 아데노신 0.04g, 병풀추출물 1g, 팔각회향추출물 1g, 토코페릴아세테이트 1g, 소르비탄세스퀴올리에이트 1g, 카프릴릴글라이콜 1g, 1,2-헥산디올 1g, 디소듐이디티에이 1g, 소듐하이알루로네이트 1g, 알란토인 1g, 향료 0.5g으로 혼합하여 제조하였다.

Claims

인간 줄기세포배양액이나 유산균발효추출물을 90% 함유하며, 스핑고신{spingosine} 5%, 레시틴 3%, 글리세린 2% 중량%로 하는 스핑고 리포좀 화장료 조성물의 제조방법.
제1항에 있어서, 유산균발효 추출물은 황기나 콩 추출물을 25% 내지 75% 사이로 첨가하여 유산균으로 발효시킨 조성물.
제1항에 있어서, 스핑고 리포좀 화장료 조성물을 0.1 내지 50% 중량%의 양을 함유하는 것을 특징으로 하는 주름개선용 화장료 조성물
제 1항에 있어서, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 왁스 또는 스프레이의 제형을 갖는 것을 특징으로 하는 주름개선용 화장료 조성물.