KR20150102539A - 수용성 은행잎 추출물 및 이의 제조방법 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 난/불용성 물질인 은행잎 추출물과 사이클로덱스트린(Cyclodextrin)을 물에 용해하는 단계; 상기 용해액의 pH를 산성으로 조정하여 침전물을 생성시키는 단계; 은행잎 추출물을 사이클로덱스트린에 포접하는 단계; 상기 포접액을 냉각 및 정치시켜 2차적으로 침전물을 생성하여 제거하는 단계를 포함하는 수용성 은행잎 추출물 제조방법에 관한 것이다.
본 발명에 따르면, 본 발명의 제조방법으로 제조된 수용성 은행잎 추출물을 제조하는 경우, 제조공정을 단순화하는 동시에 플라보놀 배당체의 손실 없이 열 및 pH에 안정하고 은행잎의 쓴맛을 완화 시키며 산성조건에서 침전물이 발생되지 않는 수용성 은행잎 추출물을 제조할 수 있다.
본 발명에 따르면, 본 발명의 제조방법으로 제조된 수용성 은행잎 추출물을 제조하는 경우, 제조공정을 단순화하는 동시에 플라보놀 배당체의 손실 없이 열 및 pH에 안정하고 은행잎의 쓴맛을 완화 시키며 산성조건에서 침전물이 발생되지 않는 수용성 은행잎 추출물을 제조할 수 있다.
Description
본 발명은 액상 용해 시 침전물이 발생 되지 않는 수용성 은행잎 추출물 및 이의 제조방법에 관한 것으로, 더욱 구체적으로 난/불용성 물질인 은행잎 추출물과 사이클로덱스트린(Cyclodextrin)을 물에 용해하는 단계; 상기 용해액의 pH를 산성으로 조정하여 침전물을 생성시키는 단계; 은행잎 추출물을 사이클로덱스트린에 포접하는 단계; 상기 포접액을 냉각 및 정치시켜 2차적으로 침전물을 생성하여 제거하는 단계를 포함하는 수용성 은행잎 추출물 제조방법에 관한 것이다.
은행잎(Ginkgo biloba)은 여러 가지 다양한 효능이 있지만 그 중에서도 가장 널리 알려져 있는 것으로 기억력 개선 및 혈액순환을 좋게 하는 효능이 있다. 플라보놀 배당체는 은행잎 추출물의 주성분으로서 퀘르세틴(Quercetin), 켐페롤(kaempferol), 이소람네틴(Isorhamnetin)으로 구성되어 있다. 은행잎 추출물은 난/불용성 물질인 특성상 물에 용해가 되지 않기 때문에 음료 제형으로 사용하기가 어렵다. 이러한 난/불용성 성분을 수용화하기 위해 수용성 매체인 사이클로덱스트린과의 포접화합물을 형성하는 방법을 통하여 수용성 은행잎 추출물을 제조할 수 있다. 그러나 단순하게 포접화합물의 형태로만 전환시켜 제조를 할 경우 수용성 은행잎 추출물을 물에 용해한 후 경시변화를 관찰하게 되면 시간이 경과함에 따라 소량의 침전물이 지속적으로 발생하게 되고, 더욱이 pH가 3 ~ 5 정도의 산성 조건에서는 다량의 침전물이 발생하게 된다. 따라서 본 발명에서는 액상제조 시 pH 3 ~ 5의 산성조건에서도 침전물이 발생 되지 않는 수용성 은행잎 추출물을 제조하기 위해 은행잎 추출물과 사이클로덱스트린과의 포접액을 제조 시 pH를 산성으로 조정하여 포접화합물 이외의 침전물들을 제거하는 방법을 개발하게 되었다.
사이클로덱스트린(cyclodextrin)은 6 ~ 8개의 글루코오스(glucose) 분자가 고리모양의 α-1,4 결합의 형태로 이루어진 비환원성 말토올리고당(maltooligosaccharide)으로, 환상형의 도우넛 구조로 이루어져 있고, 2번과 3번의 탄소에 결합된 수산화기(-OH)가 수소결합을 함으로써 내부는 소수성의 성질을 띠고 반대로 극성이 높은 수산화기에 의해 외부는 친수성의 성질을 갖는데, 이런 성질로 인해 사이클로덱스트린은 소수성 물질과 포접화합물을 형성하여 소수성 물질의 용해도를 증가시키고, 불안정한 물질의 안정성을 높일 수 있다. 또한, 맛과 향을 나타내는 유기 분자의 일부분 내지 전체를 공동 내에 포접함으로써 고미나 이취를 제거하는 데 사용할 수 있다(Pro. Biochem., 39, pp.1033-1046, 2003; Chem. Rev.,98, pp.1743-1753, 1998; J. Inclusion Phenomena and Macrocyclic Chem., 36, pp.355-370, 2000).
일반적으로 사용되고 있는 사이클로덱스트린은 알파 사이클로덱스트린, 베타 및 감마형의 복합체로서 전분을 함유한 배지에 사이클로덱스트린 트랜스 글리코시다아제(cyclodextrin trans glycosidase)라는 효소의 작용으로 생성되며, 쥐에게 경구 투여 시에 LD50값이 10g/kg이상의 높은 수치인 것으로 보고되어 있으며, 위장관에서는 단지 미량만이 흡수되기 때문에 독성이 거의 없는 안정성이 확보된 물질이다. 이 중 베타-사이클로덱스트린은 일반적으로 의약품 및 식품 분야에 가장 널리 사용되는 물질로 그 안전성 등이 인정되어 미국약전(USP)에 수재 되어있는 물질로 랫트와 마우스에 경구 투여 시 LD50값이 각각 12, 12.5g/kg 이상으로 안전한 물질이다.
은행잎 추출물을 가용화 하는 선행연구는‘난/불용성 지용성 물질을 가용화 하는 다중 라멜라 액정의 제조방법’(한국공개특허 10-2013-0119587)에서 은행잎추출물을 포함한 천연추출물류와 그 밖의 난/불용성 지용성 물질을 가용화하는 방법이 연구되었는데 난/불용성 물질을 유기용매에 첨가한 혼합액과 계면활성제와 점증제를 정제수에 첨가한 2가지 혼합물을 서로 혼합한 후 수용액 상에 유화시켜 다중 라멜라 액정구조를 형성시켜 난/불용성 물질을 액정구조 안에 봉입한다는 공정이다. 이 제조방법에 따르면 난/불용성 물질과 수용성 물질을 액상에서 혼합하여 제조한다는 것인데 혼합 이후 유기용매를 제거해야 하는 공정이 포함되게 되고 계면활성제 및 점증제 등의 첨가물 등의 원료비용이 발생하게 된다. 또한 이 제조방법을 통하여 직접적으로 은행잎 추출물을 가용화하여 제품을 제조한 것은 아니다.
이에, 본 발명자들은 상기 종래기술들의 문제점들을 극복하기 위하여 예의 연구노력한 결과, 난/불용성 물질인 은행잎 추출물과 사이클로덱스트린(Cyclodextrin)을 물에 용해하는 단계; 상기 용해액의 pH를 산성으로 조정하여 침전물을 생성시키는 단계; 은행잎 추출물을 사이클로덱스트린에 포접하는 단계; 상기 포접액을 냉각 및 정치시켜 2차적으로 침전물을 생성하여 제거하는 단계로 수용성 은행잎 추출물을 제조하는 경우, 제조공정을 단순화하는 동시에 플라보놀 배당체의 손실 없이 열 및 pH에 안정하고 은행잎의 쓴맛을 완화 시키며 침전물이 발생 되지 않는 수용성 은행잎 추출물을 제조할 수 있음을 확인하고, 본 발명을 완성하게 되었다.
(특허문헌 1) KR10-2013-0119587 A
따라서, 본 발명의 주된 목적은 제조공정을 단순화하는 동시에 플라보놀 배당체의 손실 없이 열 및 pH에 안정하고 은행잎의 쓴맛을 완화 시키며 침전물이 발생 되지 않는 수용성 은행잎 추출물 및 이의 제조방법을 제공하는 데 있다.
본 발명의 다른 목적은 상기 액상 용해 시 침전물이 발생 되지 않는 수용성 은행잎 추출물 및 이의 제조방법을 이용한 수용성 은행잎 추출물을 함유하는 건강기능식품을 제공하는데 있다.
본 발명의 한 양태에 따르면, 본 발명은 난/불용성 물질인 은행잎 추출물과 사이클로덱스트린(Cyclodextrin)을 물에 용해하는 단계; 상기 용해액의 pH를 산성으로 조정하여 침전물을 생성시키는 단계; 은행잎 추출물을 사이클로덱스트린에 포접하는 단계; 상기 포접액을 냉각 및 정치시켜 2차적으로 침전물을 생성하여 제거하는 단계를 포함하는 수용성 은행잎 추출물 제조방법을 제공한다.
은행잎(Ginkgo biloba)은 quercetin, kaempferol, isorhamnetin의 세 가지 플라보놀 배당체가 존재하고, ginkolide A와B 등에 의해 혈행 및 기억력 개선의 효능을 가지고 있다. 하지만, 은행잎추출물이 난/불용성 물질이라는 특성상 물에 용해가 되지 않기 때문에 음료 제형으로 사용하기가 어려우며, 이러한 난/불용성 물질을 수용화하기 위해 흔히 사용되는 수용성 매체인 사이클로덱스트린를 사용하여 포접화합물을 형성하는 방법으로 제조될 수 있다. 그러나 상기와 같은 방법의 경우, 시간이 경과함에 따라 소량의 침전물이 지속적으로 발생하게 되고, 더욱이 pH가 3 내지 5 정도의 산성조건에서는 다량의 침전물이 발생하는 문제점이 나타나게 되므로 사이클로덱스트린을 이용하여 포접화합물을 형성하는 방법을 통해 음료 제형에 적용하는 것은 한계가 있었다. 이에, 본 발명자들은 액상 제조 시 난/불용성 물질을 사이클로덱스트린에 포접하기 전, pH를 산성 조건으로 조정하여 포접화합물 형성하여 미리 생성되는 침전물을 제거할 경우, 열 및 pH에 안정하여 침전물이 발생 되지 않으며, 또한 플라보놀 배당체 손실이 없는 수용성 은행잎 추출물을 제조할 수 있음을 확인하고 본 발명을 완성하게 되었다.
본 발명에 있어서, 상기 수용성 은행잎 추출물 제조방법은 1) 은행잎 추출물과 사이클로덱스트린을 물에 용해하는 제 1단계; 2) 상기 용해액의 pH를 2.5~3.5로 조정하여 침전물을 생성시키는 2단계; 3) 은행잎 추출물을 사이클로덱스트린에 포접하는 제 3단계; 4) 상기 포접액을 냉각 및 정치하여 2차적으로 침전물을 생성시키는 제 4단계; 5) 포접되지 않고 침전된 잔사를 제거하기 위해 여과하는 제 5단계; 및 6) 포접물을 건조하는 제 6단계를 포함하는 수용성 은행잎 추출물 제조방법을 제공한다.
본 발명에 있어서, 상기 제 2단계에서 진행하는 pH 조정을 은행잎 추출물과 베타-사이클로덱스트린 용해 후 처리할 수도 있고, 제 4단계에서 포접 후 냉각 시에 pH를 조정할 수 있는 것을 특징으로 한다. 상기 2단계 또는 4단계에 중 어느 단계에서도 pH조정을 할 수 있으며, 그에 따른 효과로는 동일하다.
본 발명에 따르면, 포접 활성을 높이기 위해서 계면활성제를 상기혼합액 고형분 중량 대비 0.1 내지 20%(w/w), 보다 바람직하게는 3 내지 5%(w/w)첨가하는 것이 가능하다. 계면활성제는 레시틴, 설탕에스테르, 포스포리피드, 소르비탄 지방산 에스테르, 폴리글리세린 에스테르, tween 계열 등 다양한 종류도 사용이 가능하다. 계면활성제의 첨가는 액상인 것은 그대로 투입하고, 고체인 것은 수용화 한 다음 첨가하는 것이 바람직하다.
본 발명에 있어서, 상기 난/불용성 물질은 은행잎 추출물 이외에 밀크씨슬추출물, 바나바추출물, 홍경천추출물, 울금추출물, 이소플라본, 카테킨, 홍삼농축액, 코엔자임 큐텐으로 구성된 군에서 선택된 천연추출물류 또는 폴리페놀류를 더 포함하는 것을 특징으로 한다.
본 발명에 따르면, 상기 난/불용성 물질은 물에 용해되지 않아 수용성 음료 제형에는 사용이 불가능하였으나, 본 발명의 제조방법으로 제조 시 수용성 음료 제형에 사용이 용이하다.
본 발명에 있어서, 상기 사이클로덱스트린은 베타-사이클로덱스트린, 감마-사이클로덱스트린, 또는 알파-사이클로덱스트린의 단독 또는 그 혼합물인 것을 특징으로 한다.
베타-사이클로덱스트린은 지용성 및 난/불용성 성분과 안정적인 포접화합물을 형성하여 용해도를 증가시키는데 뛰어나고 감마-사이클로덱스트린은 쓴맛을 제거시키는데 효과가 있으므로 이 두 가지 성분을 혼합하여 사용하는 것이 단일 성분을 사용하였을 때보다 더 효율적이다.
본 발명에 있어서, 상기 제 1단계에서 은행잎 추출물과 베타-사이클로덱스트린의 용해농도는 1 ~ 30중량%, 바람직하게는 1 ~ 10중량%인 것을 특징으로 한다. 베타-사이클로덱스트린의 용해도가 60℃에서 약 10%이고 온도가 올라가면서 용해도는 90℃에서 40%까지 되는데 다음 단계에서 저온으로 보관하는 경우가 있기 때문에 용해농도를 상기 범위보다 더 높일 경우 베타-사이클로덱스트린의 용해도에 의한 침전물이 발생할 수 있다.
본 발명에 있어서, 상기 제 1단계에서 은행잎 추출물과 사이클로덱스트린을 용해할 때 온도조건은 50 ~ 95℃, 교반시간은 1 ~ 5시간, 교반속도는 100 ~ 500rpm 인 것을 특징으로 한다. 상기 포접 조건을 벗어날 경우, pH에 의한 침전물을 발생시킬 때 침전물에 플라보놀배당체의 함량이 높게 나타날 수 있다.
본 발명에 있어서, 상기 제 2단계에서 pH 조정을 위한 물질로는 종래에 사용되어진 어떠한 유기산 또는 무기산이 사용될 수 있으며, 바람직하게는 구연산, 산, 젖산, 주석산, 사과산, 개미산으로 구성된 군으로부터 선택되는 하나 이상의 유기산 또는 무기산인 것을 특징으로 한다.
본 발명에 따르면, pH 조정을 위해 상기 물질을 첨가하는 단계를 통해 pH를 조정하였으며, pH는 2 ~ 5, 바람직하게는 2.5 ~ 3.5인 것이 바람직하다. 상기와 같은 산을 첨가하여 pH를 낮추게 되면 포접물 이외의 침전물들이 발생 및 침전되면서 이후 진행될 여과공정이 용이하게 때문에 수용성 은행잎 추출물 제조공정을 단순화할 수 있다.
본 발명에 있어서, 상기 제 3단계에서 은행잎 추출물을 사이클로덱스트린에 포접하는 온도조건은 50 ~ 95℃, 교반시간은 1 ~ 5시간, 교반속도는 100 ~ 500rpm 인 것을 특징으로 한다. 상기 포접 조건을 벗어날 경우, pH에 의한 침전물을 발생시킬 때 침전물에 플라보놀배당체가 침전되어 주요성분이 제거될 수 있다.
본 발명에 있어서, 상기 제 4단계에서 정치 시 온도는 4 ~ 30℃, 정치시간은 10 ~ 15시간 인 것을 특징으로 한다. pH에 의한 침전물 형성 시 더 잘 되게 하기 위해 최대 30℃ 이하의 온도에서 진행해야 침전물을 최대한으로 제거할 수 있다. 정치온도가 높게 되면 침전물의 형성이 완전히 되지 않아서 최종 제형의 용해 시 침전물이 발생 될 가능성이 있고 온도가 너무 낮게 되면 수율이 낮아질 수 있다.
본 발명에 있어서, 상기 제 4단계에서 포접되지 않은 잔사를 제거하기 위해 규조토를 액량 대비 1 ~ 5중량%, 바람직하게는 2 ~ 3중량% 첨가하는 것을 특징으로 한다. 규조토의 함량이 1% 미만일 경우 수용화 되지 않은 은행잎 추출물의 제거가 용이하지 않아서 여과액이 탁할 수 있다. 이럴 경우 수용성 은행잎 추출물의 용해도에 영향을 미쳐서 맑게 용해되지 않을 수 있고, 5% 이상일 경우 여과성은 좋아지지만 규조토량에 따라서 수율이 떨어져서 제조 수율 및 플라보놀 배당체의 회수율에 영향을 미치게 된다. 하지만 5%에서 현격히 차이가 나는 것은 아니다.
본 발명에 있어서, 상기 제 4단계에서 발생시킨 침전물에 플라보놀 배당체의 함량이 0.001 ~ 0.1% 인 것을 특징으로 한다.
본 발명에 있어서, 상기 플라보놀 배당체의 회수율이 90 ~ 98%인 것을 특징으로 한다.
본 발명의 실험예에 따르면, 본 발명의 방법으로 제조된 수용성 은행잎 추출물의 경우 플라보놀 배당체의 회수율이 95% 이상이고 추출물을 상수에 용해하였을 때 침전물이 발생 되지 않았다. 이러한 결과로 볼 때, 본 발명의 방법으로 만들어진 수용성 은행잎 추출물은 포접 후 플라보놀 배당체의 손실이 없이 침전물 발생이 없는 수용성 은행잎 추출물을 제조하는데 유용하다는 것을 알 수 있다(실험예 1 및 표 1 참조).
본 발명의 다른 양태에 따르면, 본 발명은 제1항 또는 제2항의 방법에 의해 제조된 수용성 은행잎 추출물의 플라보놀 배당체 함량이 40 ~ 60mg/g 인 것을 특징으로 한다.
본 발명에 있어서, 상기 수용성 은행잎 추출물은 고미가 감소된 것을 특징으로 한다.
본 발명의 실험예에 따르면, 본 발명의 수용성 은행잎 추출물의 경우 대조군에 비해 쓴맛의 개선효과를 확인할 수 있었다. 실시예 4의 경우 고미가 가장 감소된 결과를 나타내는데, 이는 쓴맛을 제거하는 효과가 있는 감마-사이클로덱스트린을 사용하였기 때문이라고 할 수 있다. 이러한 결과로 볼 때, 본 발명의 제조방법으로 제조된 수용성 은행잎 추출물의 경우 고미가 감소 되어 건강기능식품으로 제조 시 유용하게 사용될 수 있음을 알 수 있다(실험예 4 및 표 2 참조).
본 발명의 다른 양태에 따르면, 수용성 은행잎 추출물을 함유하는 건강기능식품을 제공한다.
본 발명의 실험예에 따르면, 본 발명의 제조방법으로 제조된 수용성 은행잎 추출물의 경우 열 안정성(도 2) 및 pH 안정성(도 3), 고미 감소 효과(표 2) 및 우수한 용해도(도 4)를 나타내었다. 이러한 결과로 볼 때, 본 발명의 제조방법으로 제조된 수용성 은행잎 추출물을 건강기능식품의 유효성분으로 함유하는 경우, 은행잎 추출물의 쓴맛이 감소 되고, 액상제형화시에 침전물이 형성되지 않고 투명성을 높여 품질이 향상된 건강기능식품을 제공할 수 있다는 것을 알 수 있다.
본 발명에 있어서, 상기 추출물은 음료, 환, 정제, 캡슐제, 산제(ppwer, 散劑), 과립, 액상, 편상, 페이스트상, 시럽, 겔, 젤리, 바 중에서 선택된 어느 하나에 포함되는 것을 특징으로 한다.
본 발명의 건강기능식품 조성물에서 수용성 은행잎 추출물을 첨가할 수 있는 식품으로는 각종 식품류, 예를 들어 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 건강보조 식품류 등이 있으며, 환제, 분말, 과립, 침제, 정제, 캡슐 또는 음료인 형태로 사용할 수 있다.
발명의 추출물을 식품 첨가물로 사용할 경우에는 이를 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 추출물 이외에 다른 성분은 제형에 따라 당업자가 적의 하게 선택하여 배합할 수 있으며, 유효 성분은 1종 또는 2종 이상을 혼합하여 사용할 수 있다. 혼합양은 사용 목적(예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다.
이때 식품 또는 음료 중의 상기 수용성 은행잎 추출물의 양은 일반적으로 본 발명의 식품 조성물의 경우 전체 식품 중량의 0.0001 내지 20 중량%로 가할 수 있으며, 건강음료 조성물의 경우 100㎖을 기준으로 0.0001 내지 20 중량%를 가할 수 있다.
본 발명에서 정의되는 식품보조첨가제는 당업계에서 통상적으로 사용되는 식품첨가제, 예를 들어 향미제, 풍미제, 착색제, 충진제, 안정화제 등을 포함한다.
본 발명의 제조방법으로 수용성 은행잎 추출물을 제조하는 경우 공정을 단순화할 수 있으며, 플라보놀 배당체의 손실 없이 수용성 은행잎 추출물을 제조할 수 있다. 또한 상기 방법을 통해 제조된 수용성 은행잎 추출물의 경우 고미가 감소되고 열 및 pH에 안정하며 침전물이 발생하지 않으므로 건강기능식품의 액상제형화시에 유용하게 이용될 수 있다.
도 1은 수용성 은행잎 추출물의 제조공정의 모식도이다.
도 2는 수용성 은행잎 추출물을 열처리 시에 플라보놀 배당체의 안정성을 나타낸 결과이다.
도 3은 수용성 은행잎 추출물을 pH별로 처리 시에 플라보놀 배당체의 안정성을 나타낸 결과이다.
도 4는 수용성 은행잎 추출물을 1%, 2%, 3%로 용해 시 90일 경과 후의 안정성을 나타낸 결과이다.
도 2는 수용성 은행잎 추출물을 열처리 시에 플라보놀 배당체의 안정성을 나타낸 결과이다.
도 3은 수용성 은행잎 추출물을 pH별로 처리 시에 플라보놀 배당체의 안정성을 나타낸 결과이다.
도 4는 수용성 은행잎 추출물을 1%, 2%, 3%로 용해 시 90일 경과 후의 안정성을 나타낸 결과이다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하기로 한다. 이들 실시예는 단지 본 발명을 예시하기 위한 것이므로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지는 않는다.
비교예
1 :
pH
조정하지 않은 수용성 은행잎 추출물의 제조
은행잎을 분쇄 후 주정(물, 주정 혼합물 포함)으로 추출하고 정제, 농축, 여과, 건조한 은행잎 추출물 200g과 베타-사이클로덱스트린(CAVAMAXⓡ W7, Wacker, Germany) 800g에 상수 5L를 첨가하여 90℃에서 1시간 100rpm으로 교반하여 용해하였다. 용해액에 규조토(IMERYS, France)를 500g 첨가하여 압착여과 한 후 분무 건조하여 811g을 얻었다.
실시예
1 : 수용성 은행잎 추출물의 제조(구연산)
은행잎을 분쇄 후 주정(물, 주정 혼합물 포함)으로 추출하고 정제, 농축, 여과, 건조한 은행잎 추출물 200g과 베타-사이클로덱스트린(CAVAMAXⓡ W7, Wacker, Germany) 750g에 상수 20L를 첨가하여 90℃에서 1시간 100rpm으로 교반하여 용해하였다. 은행잎과 베타-사이클로덱스트린 용해액에 구연산 50g을 첨가한 후 90℃에서 1시간 동안 100rpm으로 교반하였다. 용해액을 7 ~ 8℃에서 12시간 동안 정치하였다. 정치한 용해액에 규조토(IMERYS, France)를 500g 첨가하여 압착여과 하였다. 40 ~ 50℃에서 당도 15%로 농축(PAL-3, ATAGO)하고 분무 건조하여 848g을 얻었다.
실시예
2 : 수용성 은행잎 추출물의 제조 (초산)
은행잎을 분쇄 후 주정(물, 주정 혼합물 포함)으로 추출하고 정제, 농축, 여과, 건조한 은행잎 추출물 200g과 베타-사이클로덱스트린(CAVAMAXⓡ W7, Wacker, Germany) 750g에 상수 20L를 첨가하여 90℃에서 1시간 100rpm으로 교반하여 용해하였다. 은행잎과 베타-사이클로덱스트린 용해액에 초산 50g을 첨가한 후 90℃에서 1시간 동안 100rpm으로 교반하였다. 용해액을 7 ~ 8℃에서 12시간 동안 정치하였다. 정치한 용해액에 규조토(IMERYS, France)를 500g 첨가하여 압착여과 하였다. 40 ~ 50℃에서 당도 15%로 농축(PAL-3, ATAGO)하고 분무 건조하여 835g을 얻었다.
실시예
3 : 수용성 은행잎 추출물의 제조(젖산)
은행잎을 분쇄 후 주정(물, 주정 혼합물 포함)으로 추출하고 정제, 농축, 여과, 건조한 은행잎 추출물 200g과 베타-사이클로덱스트린(CAVAMAXⓡ W7, Wacker, Germany) 750g에 상수 20L를 첨가하여 90℃에서 1시간 100rpm으로 교반하여 용해하였다. 은행잎과 베타-사이클로덱스트린 용해액에 젖산 50g을 첨가한 후 90℃에서 1시간 동안 100rpm으로 교반하였다. 용해액을 7 ~ 8℃에서 12시간 동안 정치하였다. 정치한 용해액에 규조토(IMERYS, France)를 500g 첨가하여 압착여과 하였다. 40 ~ 50℃에서 당도 15%로 농축(PAL-3, ATAGO)하고 분무 건조하여 840g을 얻었다.
실시예
4 : 수용성 은행잎 추출물의 제조(감마-
사이클로덱스트린
)
은행잎을 분쇄 후 주정(물, 주정 혼합물 포함)으로 추출하고 정제, 농축, 여과, 건조한 은행잎 추출물 200g과 베타-사이클로덱스트린(CAVAMAXⓡ W7, Wacker, Germany) 600g, 감마-사이클로덱스트린(CAVAMAXⓡ W8, Wacker, Germany) 150g에 상수 20L를 첨가하여 90℃에서 1시간 100rpm으로 교반하여 용해하였다. 은행잎과 베타-사이클로덱스트린 용해액에 구연산 50g을 첨가한 후 90℃에서 1시간 동안 100rpm으로 교반하였다. 용해액을 냉각하여 7 ~ 8℃에서 12시간 동안 정치하였다. 정치한 용해액에 규조토(IMERYS, France)를 500g 첨가하여 압착여과 하였다. 40 ~ 50℃에서 당도 15%로 농축(PAL-3, ATAGO)하고 분무 건조하여 810g을 얻었다.
실시예
5 : 수용성 은행잎 추출물의 제조(알파-
사이클로덱스트린
)
은행잎을 분쇄 후 주정(물, 주정 혼합물 포함)으로 추출하고 정제, 농축, 여과, 건조한 은행잎 추출물 200g과 베타-사이클로덱스트린(CAVAMAXⓡ W7, Wacker, Germany) 600g, 알파-사이클로덱스트린(CAVAMAXⓡ W6, Wacker, Germany) 150g에 상수 20L를 첨가하여 90℃에서 1시간 100rpm으로 교반하여 용해하였다. 은행잎과 베타-사이클로덱스트린 용해액에 구연산 50g을 첨가한 후 90℃에서 1시간 동안 100rpm으로 교반하였다. 용해액을 냉각하여 7 ~ 8℃에서 12시간 동안 정치하였다. 정치한 용해액에 규조토(IMERYS, France)를 500g 첨가하여 압착여과 하였다. 40 ~ 50℃에서 당도 15%로 농축(PAL-3, ATAGO)하고 분무 건조하여 805g을 얻었다.
실험예
1 :
플라보놀
배당체의 함량분석
실시예 1 내지 5에서 제조한 수용성 은행잎 추출물의 유효성분인 플라보놀 배당체의 함량을 측정하기 위해 고성능액체크로마토그래피(Alliance, Waters, USA)를 사용하여 그 함량을 측정하였고, 컬럼은 Capcell Pak C18(25cm * 4.5mm, 5um, Shiseido, Japan)를 사용하였으며, 검출 스펙트럼은 UV 370nm를 사용하여 측정하였다. 이동상 A는 메탄올을 사용하였고, 이동상 B는 0.85% 인산을 함유한 증류수를 사용하였다. 시간에 따른 이동상의 조건은 0 ~ 4분에 이동상 A를 30%, 30 ~ 32분에 이동상 A를 95%, 32.1 ~ 40분에 이동상 A를 30%로 변경하여 분석하였고, 유속은 1ml/min로 하였다. 표준품으로는 Quercetin, kaempferol, isorhamnetin (sigma, St-Louis, Mo, USA)를 1mg/ml의 농도로 메탄올에 녹여 스톡(stock)용액으로 하여 혼합하여 검량선용 표준용액으로 사용하여 검량선을 작성하여 플라보놀 배당체(퀘르세틴, 켐페롤, 이소람네틴의 합)의 함량을 측정하였다. 그 결과는 표 1에 나타내었다.
실험군 | 제조량(g) | 플라보놀 배당체 함량(mg/g) |
플라보놀 배당체 회수율(%) |
은행잎 추출물 | 249.31 | ||
비교예 1 | 811 | 44.11 | 88.5 |
실시예 1 | 848 | 47.78 | 95.8 |
실시예 2 | 835 | 47.62 | 95.5 |
실시예 3 | 852 | 47.45 | 95.2 |
실시예 4 | 810 | 47.98 | 96.2 |
실시예 5 | 805 | 47.43 | 95.1 |
그 결과, 상기 표 1에 나타낸 바와 같이, 수용성 은행잎 추출물의 플라보놀 배당체의 함량은 40 ~ 50 mg/g(w/w)로 측정되었으며 95(%) 이상으로 높은 회수율을 보였다.
실험예
2 : 수용성 은행잎 추출물의 열 안정성
실시예 1에서 제조한 수용성 은행잎 추출물 1g을 상수 100mL에 용해하였다. Autoclave(모델, 제조사, 국가) 90℃에서 1, 2, 4, 6시간 열처리하여 플라보놀 배당체를 분석하여 열안정성을 확인하였다. 대조군은 열처리 전 플라보놀 배당체 100%로 한 후 상대적인 함량으로 환산하였다. 그 결과 6시간 후에 약 97.5%로 약 2.5%정도 분해된 것을 확인하였다(도 2).
실험예
3 : 수용성 은행잎 추출물의
pH
안정성
실시예 1에서 제조한 수용성 은행잎 추출물 1g을 상수 100mL에 용해하였다. 0.1N NaOH로 pH를 4와 5로 조정하였다. pH 조정 전 수용성 은행잎 추출물 용해액의 pH는 3.2이다. pH 처리 전을 대조군으로 플라보놀 배당체를 100%로 한 후 상대적인 함량으로 환산하였다. 그 결과 7일 차에 모든 pH에서 플라보놀 배당체의 함량을 측정하였을 때 94% 이상의 함량을 유지하였다(도 3).
실험예
4 : 수용성 은행잎 추출물의 관능평가
은행잎 추출물과 수용성 은행잎 추출물을 각각 1 w/v%의 농도로 상수에 용해한 후 후 쓴맛의 차이를 측정하였다. 향기, 맛, 색, 조직감에 잘 훈련된 15명의 관능검사 요원을 대상으로 대조군(은행잎 추출물)의 맛을 기준으로, 대조군을 10의 수치로 정하고, 9단계 평점법(매우 좋다: 1점, 매우 나쁘다: 9점)으로 상대 평가하여 이를 평균치 또는 평균치± 표준편차로 나타내었고, 3회 이상 반복 분석하여, 던칸의 다중범위 검증법(Duncan's multiple range test)으로 그 유의성을 검증하였다. 그 결과는 표 2에 나타내었다.
시험군 | 쓴 맛 |
대조군 | 10 |
실시예 1 | 5.1 ± 0.48 |
실시예 2 | 4.9 ± 0.48 |
실시예 3 | 4.3 ± 0.48 |
실시예 4 | 1.8 ± 0.48 |
실시예 5 | 5.2 ± 0.48 |
그 결과, 상기 표 2에 나타난 바와 같이, 대조군과 비교하여 수용성은행잎 추출물의 함량에 비례하여 쓴맛의 개선효과를 확인할 수 있었다.
실험예
5 : 수용성 은행잎 추출물의 용해도
실시예 1을 1%, 2%, 3%로 용해 상수에 용해한 후 95℃에서 5분간 살균한 채로 상온에서 30일간 경시변화를 측정하였다. 그 결과, 30일 경과 후에도 육안상으로 침전물이 형성되지 않는 것을 확인하였다(도 4).
Claims (17)
- 난/불용성 물질인 은행잎 추출물과 사이클로덱스트린(Cyclodextrin)을 물에 용해하는 단계; 상기 용해액의 pH를 산성으로 조정하여 침전물을 생성시키는 단계; 은행잎 추출물을 사이클로덱스트린에 포접하는 단계; 상기 포접액을 냉각 및 정치시켜 2차적으로 침전물을 생성하여 제거하는 단계를 포함하는 수용성 은행잎 추출물 제조방법.
- 제 1항에 있어서, 다음 단계들을 포함하는 것을 특징으로 하는 수용성 은행잎 추출물 제조방법:
1) 은행잎 추출물과 사이클로덱스트린을 물에 용해하는 제 1단계;
2) 상기 용해액의 pH를 2.5~3.5로 조정하여 침전물을 생성시키는 2단계;
3) 은행잎 추출물을 사이클로덱스트린에 포접하는 제 3단계;
4) 상기 포접액을 냉각 및 정치하여 2차적으로 침전물을 생성시키는 제 4단계;
5) 포접되지 않고 침전된 잔사를 제거하기 위해 여과하는 제 5단계; 및
6) 포접물을 건조하는 제 6단계.
- 제 1항에 있어서, 상기 2)단계에 pH 조절은 상기 4)단계에서 냉각 시에도 조정할 수 있는 것을 특징으로 하는 수용성 은행잎 추출물 제조방법.
- 제 1항에 있어서, 난/불용성 물질은 은행잎추출물 이외에 밀크씨슬추출물, 바나바추출물, 홍경천추출물, 울금추출물, 이소플라본, 카테킨, 홍삼농축액, 코엔자임 큐텐으로 구성된 군에서 선택된 천연추출물류 또는 폴리페놀류를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 수용성 은행잎 추출물 제조방법.
- 제 2항에 있어서, 사이클로덱스트린은 베타-사이클로덱스트린, 감마-사이클로덱스트린, 또는 알파-사이클로덱스트린의 단독 또는 그 혼합물인 것을 특징으로 하는 수용성 은행잎 추출물 제조방법.
- 제 2항에 있어서, 상기 제 1단계에서 은행잎 추출물과 베타-사이클로덱스트린의 용해농도는 1 ~ 30 중량%인 것을 특징으로 하는 수용성 은행잎 추출물 제조방법.
- 제 2항에 있어서, 상기 제 1단계에서 은행잎 추출물과 사이클로덱스트린을 용해할 때 온도조건은 50 ~ 95℃, 교반시간은 1 ~ 5시간, 교반속도는 100 ~ 500rpm 인 것을 특징으로 하는 수용성 은행잎 추출물 제조방법.
- 제 2항에 있어서, 상기 제 2단계에서 pH 조정을 위한 물질로는 구연산, 산, 젖산, 주석산, 사과산, 개미산으로 구성된 군으로부터 선택되는 하나 이상의 유기산 또는 무기산인 것을 특징으로 하는 수용성 은행잎 추출물 제조방법.
- 본 발명에 있어서, 상기 제 3단계에서 은행잎 추출물을 사이클로덱스트린에 포접하는 온도조건은 50 ~ 95℃, 교반시간은 1 ~ 5시간, 교반속도는 100 ~ 500rpm 인 것을 특징으로 하는 수용성 은행잎 추출물 제조방법.
- 제 2항에 있어서, 상기 제 4단계에서 정치 시 온도는 4 ~ 30℃, 정치시간은 10 ~ 15시간 인 것을 특징으로 하는 수용성 은행잎 제조방법.
- 제 2항에 있어서, 상기 제 4단계에서 침전물을 제거하기 위해 규조토를 액량대비 1 ~ 5중량% 첨가하는 것을 특징으로 하는 수용성 은행잎 추출물 제조방법.
- 제 2항에 있어서, 상기 제 4단계에서 발생시킨 침전물에 플라보놀배당체의 함량이 0.001 ~ 0.1% 인 것을 특징으로 하는 수용성 은행잎 추출물 제조방법.
- 제 2항에 있어서, 플라보놀 배당체의 회수율이 90 ~ 98%인 것을 특징으로 하는 수용성 은행잎 추출물 제조방법.
- 제1항 또는 제3항의 방법에 의해 제조된 수용성 은행잎 추출물의 플라보놀 배당체 함량이 40 ~ 60mg/g인 수용성 은행잎 추출물.
- 제 14항에 있어서, 상기 수용성 은행잎 추출물은 고미가 감소된 것을 특징으로 하는 수용성 은행잎 추출물.
- 제 14항에 따른 수용성 은행잎 추출물을 함유하는 건강기능식품.
- 제 16항에 있어서, 상기 추출물은 음료, 환(丸), 정제(tablet), 캡슐제(capsule), 산제(ppwer, 散劑) 중에서 선택된 어느 하나에 포함되는 것을 특징으로 하는 건강기능식품.
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