CN105418569A - 一种利用环糊精水溶液提取大豆异黄酮的方法 - Google Patents

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CN105418569A CN201510918405.8A CN201510918405A CN105418569A CN 105418569 A CN105418569 A CN 105418569A CN 201510918405 A CN201510918405 A CN 201510918405A CN 105418569 A CN105418569 A CN 105418569A
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Abstract

本发明公开了一种利用环糊精水溶液提取大豆异黄酮的方法，包括：步骤一：称取待实验干燥豆粕1.5g～2.0g，将待实验干燥豆粕研磨至80目～100目豆粕粗品；步骤二：将豆粕粗品加入到环糊精水溶液中浸泡2～4h；步骤三：将豆粕粗品和环糊精水溶液的混合液加热提取0.5h～2.5h，加热提取温度50℃～90℃，提取结束后，述豆粕粗品和环糊精混合液自然冷却至室温；步骤四：计算出大豆异黄酮的转移提取率。本发明通过利用羟丙基β-环糊精与大豆异黄酮的包合作用，使豆粕中的大豆异黄酮能够高效提取，同时，也利用了羟丙基β-环糊精具有溶血性低，安全性高，增加难溶性药物稳定性等特点，使羟丙基β-环糊精能够高效可靠的用于本发明中。

Description

一种利用环糊精水溶液提取大豆异黄酮的方法
技术领域
本发明涉及药物提取工艺研究领域，具体涉及一种利用环糊精水溶液提取大豆异黄酮的方法。
背景技术
环糊精是直链淀粉在由芽孢杆菌产生的环糊精葡萄糖基转移酶作用下生成的一系列环状低聚糖的总称，通常含有6～12个D-吡喃葡萄糖单元。其中研究得较多并且具有重要实际意义的是含有6、7、8个葡萄糖单元的分子，分别称为alpha-、beta-和gama-环糊精。根据X-线晶体衍射、红外光谱和核磁共振波谱分析的结果，确定构成环糊精分子的每个D(+)-吡喃葡萄糖都是椅式构象，各葡萄糖单元均以1，4-糖苷键结合成环，由于连接葡萄糖单元的糖苷键不能自由旋转，环糊精不是圆筒状分子而是略呈锥形的圆环，尤以β-环糊精最为常用，β-环糊精结构成环状中空筒状，环筒外部是亲水性的表面，内部的非极性基团形成一个具有一定尺寸的疏水空腔，当β-环糊精上每个葡萄糖残基的2-，3-，6-位羟基中的氢原子被羟丙基取代时，形成了羟丙基β-环糊精，羟丙基β-环糊精在医药领域的主要应用体现在(1)增加难溶性药物的水溶性；(2)增加药物稳定性、提高药物生物利用度；(3)降低药物的毒副作用；同时，羟丙基-β-环糊精可用于口服药物、注射剂、粘膜给药系统(包括鼻粘膜、直肠、角膜等)、透皮吸收给药系统、亲脂性靶向药物的载体，还可用做蛋白质的保护剂和稳定剂。
大豆异黄酮是存在于大豆中的生物活性成分，是一种具有多种重要生理活性的天然营养因子，是纯天然的植物雌激，近年来的研究表明，大豆异黄酮具有防治绝经期综合症、癌症、骨质疏松症、心血管疾病和早老性痴呆症，以及美容、延缓衰老等多方面的生理作用，对于高雌激素水平者，表现为抗激素活性，可防治乳腺、子宫内膜、结肠、前列腺、肺、皮肤等癌细胞的生长和白血病，及其它心血管疾病。大豆提取物作为营养补充食品使用，此外，大豆异黄酮还显著的降低了乳腺癌的发病率，但大豆异黄酮的资源十分有限，在含量较高的大豆荚中也仅含0.1％～0.5％，而豆粕作为大豆油生产工业的副产品，常常只用作畜禽饲料，其中的大豆异黄酮没有得到很好的开发应用，这些豆粕除少部分用于发酵酱油、生产大豆浓缩蛋白或分离蛋白外，绝大多数被用作饲料，大豆中含有的生理活性物质大豆异黄酮留在豆粕中未被利用。
普通大豆异黄酮难溶于水，在现有技术中，多是以醇提法对豆粕中的大豆异黄酮进行提取分离，例如专利号为201010489101.0的专利，其解决了大豆异黄酮分离的问题，但是提取上依旧采取的是醇提法，并且提取的过程较繁琐；由于其溶解性极差，也就限制了其在食品药品中的添加与使用，同时在进入人体后在人体的吸收利用度也不能达到预期的效果，所以在水溶液中对大豆异黄酮的提取就需要探索一套科学地提取大豆异黄酮的工艺，有利于充分利用豆粕资源的同时，也提高其在水溶液中的溶解度及稳定性，为进一步开发和研究大豆异黄酮生理功能奠定基础。
发明内容
本发明设计开发了一种利用环糊精水溶液提取大豆异黄酮的方法，目的是解决大豆异黄酮在水溶液条件下提取过程中能源浪费，操作不便，提取效率低等问题，通过利用羟丙基β-环糊精与大豆异黄酮的包合作用，使水溶液下的豆粕中的大豆异黄酮能够高效提取，同时，也利用了羟丙基β-环糊精具有溶血性低，安全性高，增加难溶性药物稳定性等特点，使羟丙基β-环糊精能够高效可靠的用于本发明中。
本发明提供的技术方案为：
一种利用环糊精水溶液提取大豆异黄酮的方法，包括如下步骤：
步骤一：称取待实验干燥豆粕1.5～2.0g，将待实验干燥豆粕研磨至80目～100目豆粕粗品；
步骤二：将所述豆粕粗品加入到环糊精水溶液中浸泡2～4h；其中，环糊精的质量占所述豆粕粗品质量的5％～20％，所述豆粕粗品的质量与水溶液的体积的料液比为1∶50～1∶100；
步骤三：将所述豆粕粗品和所述环糊精水溶液的混合液加热提取0.5h～2.5h，加热提取温度50℃～90℃，提取结束后，述豆粕粗品和所述环糊精混合液自然冷却至室温；
步骤四：计算出大豆异黄酮的转移提取率。
优选的是，所述豆粕为脱脂豆粕。
优选的是，所述环糊精为羟丙基β-环糊精。
优选的是，所述步骤一中，所述豆粕粗品质量为0.5g。
优选的是，所述步骤二中，所述环糊精的质量占所述豆粕粗品质量的10％～17.5％。
优选的是，所述步骤二中，所述豆粕粗品的质量与所述水溶液的体积的料液比为1∶75。
优选的是，所述步骤二中，所述混合液加热提取1～2h。
优选的是，所述步骤三中，所述提取温度60℃～80℃。
优选的是，所述步骤三中，在所述豆粕粗品和所述环糊精水溶液的混合液回流状态下进行提取。
优选的是，所述步骤四中，计算大豆异黄酮的转移提取率的方法为：提取转移率其中，c为提取液中大豆异黄酮浓度；V为提取液体积；m为提取时称得的豆粕实际质量；w为豆粕中大豆异黄酮含量。
本发明所述的有益效果：
1、羟丙基β-环糊精能够有效增加大豆异黄酮在水中的溶解度，有效提高其稳定性，从而有效的提高水溶液下大豆异黄酮从豆粕中的转移提取率；
2、实验简单，操作方便，只需水提取即可，节约能耗，没有污染物的产生。
具体实施方式
下面对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。
本发明提供一种利用环糊精水溶液提取大豆异黄酮的方法，包括如下步骤：
步骤一：将待实验豆粕进行脱脂处理，首先粗略称取待实验脱脂豆粕1.5g～2.0g数份，将待实验豆粕研磨至100目豆粕粗品，再分别取等质量的豆粕粗品样品；
步骤二：将称好的豆粕粗品加入到环糊精水溶液中浸泡2h～4h；其中，环糊精的质量占豆粕粗品质量量的5％～20％，豆粕粗品的质量与水溶液的体积的料液比为1∶50～1∶100，g/mL；
步骤三：将豆粕粗品和环糊精水溶液的混合液置于到圆底烧瓶中进行加热提取实验，加热提取温度为50℃～90℃，提取时间为0.5～2.5h；其中，当温度达到实验温度开始计时，实验完成后提取液趁热过滤，自然冷却至室温，量取提取液的体积；
步骤四：移取1mL提取液置于10mL容量瓶中，以纯甲醇稀释定容，超声30min，稀释液离心(12000rpm，10min)后取上清液过滤(0.22μm)，续滤液进样分析，计算出大豆异黄酮浓度；其中，通过公式提取转移率计算提取转移率，c为提取液中大豆异黄酮浓度，mg/mL；V为提取液体积，mL；m为提取时称得的豆粕实际质量，g；w为豆粕中大豆异黄酮含量，mg/g。
在另一种实施例中，环糊精为羟丙基β-环糊精，由于羟丙基β-环糊精在医药领域的具有以下几种优势：(1)增加难溶性药物的水溶性；(2)增加药物稳定性、提高药物生物利用度；(3)降低药物的毒副作用；同时，羟丙基-β-环糊精可用于口服药物、注射剂、粘膜给药系统(包括鼻粘膜、直肠、角膜等)、透皮吸收给药系统、亲脂性靶向药物的载体，还可用做蛋白质的保护剂和稳定剂，所以，在进行本发明实验时，选择羟丙基β-环糊精作为一种优选，进行药材有效成分的提取。
在另一种实施例中，实验步骤一中，作为一种优选，将研磨后的豆粕粗品质量选择为0.5g，在实验室的条件下，合理的选择0.5g作为实验室的提取质量，能够合理的去选择后续的实验条件。
在另一种实施例中，实验步骤一中，羟丙基β-环糊精的质量占待实验豆粕质量的10％～17.5％。
在另一种实施例中，实验步骤二中，研磨后的豆粕粗品质量与加入水溶液的体积比(料液比)为1∶75，g/mL。
在另一种实施例中，实验步骤二中，作为一种优选，进行提取实验的实验时间选择为1h～2h。
在另一种实施例中，步骤三中，升温至60℃～80℃进行提取，作为一种优选，还进行了回流提取实验，使提取温度达到溶液回流状态，此时提取时间的计算以冷凝管中有回流液体滴下时开始计时。
在本发明中，首先通过对料液比、提取方法、提取时间、提取温度、羟丙基β-环糊精用量等进行单因素考察，进一步设计正交实验对羟丙基β-环糊精辅助性提取大豆异黄酮工艺进行研究，总结利用羟丙基β-环糊精对大豆异黄酮的选择性提取规律以及各因素对其选择提取的影响。
实施例1
1、色谱条件
色谱柱：CenturysilC18AQ+(4.6mm×150mm，5μm，Agilent)；流动相：乙腈(含0.35％三氟乙酸)(A)-水溶液(含0.35％三氟乙酸)(B)，梯度洗脱程序见下表1；流速：0.5ml/min；柱温：50℃；波长：254nm；分析时间：5min；进样量5μL。
表1梯度洗脱表
2、供试品的制备
将待实验豆粕进行脱脂处理，然后称取脱脂后豆粕样品(研磨至100目)0.5g，精密称定，精密加入75％乙醇溶液25mL，称定重量，加热到70℃，提取2h，放冷，再称定重量，补足失重，摇匀，静置，上清液用微孔滤膜过滤，精密量取续滤液1mL至10mL容量瓶中以60％乙醇定容，即为供试品溶液，备用。
3、方法学考察
(1)线性关系和检测限
称取大豆异黄酮对照品适量，置于10mL容量瓶中，以甲醇定容，得浓度为2.62μg/mL的对照品储备液，吸取对照品容液适量混合成对照品溶液，逐级稀释成一系列不同浓度的对照品溶液，进样测定峰面积；以对照品浓度(c)对峰面积(A)为纵坐标进行线性回归分析，得各成分的线性回归方程、线性范围和相关系数，得到大豆异黄酮的回归方程为y＝37684.58x-4283.25，相关系数r＝0.9999，线性范围0.524-2.62，μg·mL-1。
(2)精密度
配制大豆异黄酮与测定样品响应相近的混标溶液，按“1”项下色谱条件进样6针测定峰面积，计算精密度。如表2所示，结果表明大豆异黄酮的RSD值小于1.00％，表明仪器精密度良好。
表2精密度实验结果(n＝6)
(3)重复性实验
按“2”项下方法平行制备6份供试品溶液，按“1”项下色谱条件进样测定峰面积，计算RSD值，计算结果见表3，RSD值小于1.00％，表明实验重复性良好。
表3重复性实验结果(n＝6)
(4)加样回收率实验
将待实验豆粕进行脱脂处理，然后称取脱脂后豆粕粗品(研磨至100目)和羟丙基β-环糊精饱和水溶液(25℃)，浸泡2h，升温至70℃，进行2h提取实验，实验结束后，提取液趁热过滤后，冷却至室温量取提取液的体积；移取1mL置于10mL容量瓶中，以纯甲醇稀释，超声30min，稀释液离心(12000rpm，10min)后取上清液过滤(0.22μm)，续滤液分别进样分析；测得样品含量后，量取提取液0.5mL置于10mL容量瓶中，加入适量对照品溶液，以纯甲醇稀释，超声30min，稀释液离心(12000rpm，10min)后取上清液过滤(0.22μm)，续滤液分别进样分析测定加样回收率，结果见表4。
表4加样回收率实验结果
4、豆粕中大豆异黄酮的含量测定
(1)供试品中的大豆异黄酮含量测定
将待实验豆粕进行脱脂处理，然后称取脱脂后豆粕样品(研磨至100目)0.5g，精密称定，精密加入75％乙醇溶液25mL，称定重量，升温至70℃，进行2h提取实验，放冷，再称定重量，补足失重，摇匀，静置，上清液用微孔滤膜过滤，精密量取续滤液1mL至10mL容量瓶中以60％乙醇定容，测定大豆异黄酮的含量为0.625mg·g-1；
同时，以下进行单因素考察及正交实验时，提取转移率的计算方法为提取转移率其中，c为提取液中大豆异黄酮浓度，mg·mL-1；V为提取液体积，mL；m为提取时称得的豆粕实际质量，g；w为豆粕中大豆异黄酮含量，mg·g-1。
(2)料液比
将待实验豆粕进行脱脂处理，然后分别准备0.5g豆粕粗品(研磨至100目)及羟丙基β-环糊精饱和水溶液(25℃)各3份，分别加入料液比(豆粕的质量与水溶液体积的比值，g/mL)为50倍、75倍、100倍的水溶液，浸泡2h，升温至70℃，进行2h提取实验，实验结束后，提取液趁热过滤后，冷却至室温量取提取液的体积；移取1mL置于10mL容量瓶中，以纯甲醇稀释定容，超声30min，稀释液离心(12000rpm，10min)后取上清液过滤(0.22μm)，续滤液进样分析；计算提取转移率(如表5所示)，从表中可以看出大豆异黄酮的提取转移率随料液比的增加而增加，但综合考虑经济性及后处理等因素，进行其他单因素考察时选取75倍料液比。
表5料液测定结果
(3)提取时间考察
将待实验豆粕进行脱脂处理，然后分别准备0.5g豆粕粗品(研磨至100目)及羟丙基β-环糊精饱和水溶液(25℃)各5份，料液比为1∶75，浸泡2h后，升温至70℃，分别进行0.5h、1h、1.5h、2h、2.5h提取，实验结束后，提取液趁热过滤后，冷却至室温量取提取液的体积；移取1mL置于10mL容量瓶中，以纯甲醇稀释定容，超声30min，稀释液离心(12000rpm，10min)后取上清液过滤(0.22μm)，续滤液进样分析；计算各成分提取转移率(如表7所示)，通过表6的数据可以观察到提取时间在2小时，具有较好的转移提取率，但大豆异黄酮提取转移率随时间的变化趋势并不明显，在1h～2.5h变化范围内还需要进一步通过正交实验综合评价，但综合考虑经济性及时效性等因素，进行其他单因素考察时选取加热提取时间为2h。
表6提取时间考察结果
(4)提取温度
将待实验豆粕进行脱脂处理，然后分别准备0.5g豆粕粗品(研磨至100目)及羟丙基β-环糊精饱和水溶液(25℃)各5份，料液比为1∶75，浸泡2h后，分为升温至50℃、60℃、70℃、80℃、90℃进行提取实验，实验结束后，提取液趁热过滤后，冷却至室温量取提取液的体积；移取1mL提取液置于10mL容量瓶中，以纯甲醇稀释定容，超声30min，稀释液离心(12000rpm，10min)后取上清液过滤(0.22μm)，续滤液进样分析；计算各成分提取转移率(如表7所示)，从表中可见大豆异黄酮提取转移率在60℃～90℃的范围内变化并不明显，但是提取温度从50℃上升至60℃有比较明显的提高，但综合考虑经济性及时效性等因素，进行其他单因素考察时选取提取温度为70℃。
表7颗粒大小测定结果
(5)羟丙基β-环糊精用量
将待实验豆粕进行脱脂处理，然后分别准备0.5g豆粕粗品(研磨至100目)及按表8所示“羟丙基β-环糊精加入量与药材质量比/％”的羟丙基β-环糊精各7份，按如下表8中所示“羟丙基β-环糊精加入量与药材质量比/％”分别加入不同质量的羟丙基β-环糊精，料液比为1∶75，浸泡2h，升温至70℃，进行2h提取实验，实验结束后，提取液趁热过滤后，冷却至室温量取提取液的体积；移取1mL提取液置于10mL容量瓶中，以纯甲醇稀释定容，超声30min，稀释液离心(12000rpm，10min)后取上清液过滤(0.22μm)，续滤液进样分析，计算大豆异黄酮提取转移率(如表8所示)，从表中可以看出羟丙基β-环糊精加入量与药材质量比在20％时，提取转移率较高。
表8羟丙基β-环糊精用量考察结果
实施例2
如表9所示，在本实施例中，通过实施例1中对从豆粕中提取大豆异黄酮的单因素考察的实验，设计了四因素三水平正交实验，选取羟丙基β-环糊精用量、提取时间、提取温度以及料液比四个因素，每个因素选取三个水平，进行正交设计实验，具体实验操作如下：
步骤一：首先将待实验豆粕进行脱脂处理，然后粗略称取待实验豆粕1.5g，将待实验豆粕研磨至100目豆粕粗品，取等质量的豆粕粗品样品9份；
步骤二：将进一步研磨的豆粕粗品加入到羟丙基β-环糊精水溶液中浸泡2h；其中，按表9所示的“羟丙基β-环糊精加入量与豆粕质量比，％”分别加入羟丙基β-环糊精，按表9所示的“料液比”分别加入水溶液；
步骤三：将进一步研磨至100目的豆粕粗品和羟丙基β-环糊精水溶液的混合液置于到圆底烧瓶中进行提取实验，升温至50℃～90℃，提取时间为1.5h～2.5h；其中，温度取值按表9所示的“提取温度”进行升温，提取时间取值按表9所示的“提取时间”进行提取，实验完成后提取液趁热过滤，自然冷却至室温，量取提取液的体积；
步骤四：移取1mL提取液置于10mL容量瓶中，以纯甲醇稀释定容，超声30min，稀释液离心(12000rpm，10min)后取上清液过滤(0.22μm)，续滤液进样分析，计算出大豆异黄酮浓度；其中，通过公式提取转移率计算提取转移率，c为提取液中大豆异黄酮浓度，mg·mL-1；V为提取液体积，mL；m为提取时称得的豆粕实际质量，g；w为豆粕中大豆异黄酮含量，mg·g-1。
表9L9(34)正交实验设计表
通过表9结果表明，综合考虑4个因素，4个因素对大豆异黄酮提取转移率的影响主次顺序依次是A＞B＞C＞D，即对大豆异黄酮的提取转移率影响因素最大的为羟丙基β-环糊精加入量与豆粕质量比，其次为提取温度，同时，确定最佳工艺组合为A382C1D2，即采用羟丙基β-环糊精加入量占复方药材总量20％，所用的料液比为1∶75，升温至70℃，进行提取1.5小时实验，能够得到较高的提取转移率。
实施例3
将待实验豆粕进行脱脂处理，然后粗略称取豆粕1.5g，研磨至100目的颗粒，再精确称取100目豆粕0.5g置于圆底烧瓶中，再精确称取羟丙基β-环糊精0.1g同样置于圆底烧瓶中，向圆底烧瓶中加入水溶液37.5mL，浸泡2h后升温至回流，当冷凝管中有回流溶剂滴下时开始计时，回流提取1.5h，实验结束后，提取液趁热过滤后，冷却至室温量取提取液的体积；移取1mL提取液置于10mL容量瓶中，以纯甲醇稀释定容，超声30min，稀释液离心(12000rpm，10min)后取上清液过滤(0.22μm)，续滤液进样分析，计算大豆异黄酮提取转移率为67.52％。
通过实施例3可以看出，升温至体系回流，对大豆异黄酮的转移提取率反而有不利的影响，所以，在进行实验的过程中，不宜将体系的温度升温至回流状态。
实施例4
将待实验豆粕进行脱脂处理，然后粗略称取豆粕1.5g，研磨至100目的颗粒，再精确称取100目豆粕0.5g置于圆底烧瓶中，再精确称取羟丙基β-环糊精0.1g同样置于圆底烧瓶中，向圆底烧瓶中加入水溶液37.5mL，浸泡4h后升温至75℃提取1.5h，实验结束后，提取液趁热过滤后，冷却至室温量取提取液的体积；移取1mL提取液置于10mL容量瓶中，以纯甲醇稀释定容，超声30min，稀释液离心(12000rpm，10min)后取上清液过滤(0.22μm)，续滤液进样分析，计算大豆异黄酮提取转移率为74.89％。
通过实施例4可以看出，浸泡时间的调节对本实验方法对提取转移率的提高没有显著效果。
实施例5
将待实验豆粕进行脱脂处理，然后粗略称取豆粕1.5g，研磨至80目的颗粒，再精确称取100目豆粕0.5g置于圆底烧瓶中，再精确称取羟丙基β-环糊精0.1g同样置于圆底烧瓶中，向圆底烧瓶中加入水溶液37.5mL，浸泡2h后升温至75℃提取1.5h，实验结束后，提取液趁热过滤后，冷却至室温量取提取液的体积；移取1mL提取液置于10mL容量瓶中，以纯甲醇稀释定容，超声30min，稀释液离心(12000rpm，10min)后取上清液过滤(0.22μm)，续滤液进样分析，计算大豆异黄酮提取转移率为70.89％。
通过实施例5可以看出，研磨颗粒对本实验方法对提取转移率的提高会有一定的影响，将豆粕研磨至100目的大豆异黄酮提取转移率要略高于将豆粕研磨至80目的大豆异黄酮提取转移率。
在对比例实验中，选择最佳工艺组合进行对比实验：
对比例1
将待实验豆粕进行脱脂处理，然后粗略称取豆粕1.5g，研磨至100目的颗粒，再精确称取100目豆粕0.5g置于圆底烧瓶中，向圆底烧瓶中加入水溶液37.5mL，浸泡2h后，升温至70℃提取1.5h，实验结束后，提取液趁热过滤后，冷却至室温量取提取液的体积；移取1mL提取液置于10mL容量瓶中，以纯甲醇稀释定容，超声30min，稀释液离心(12000rpm，10min)后取上清液过滤(0.22μm)，续滤液进样分析，计算大豆异黄酮提取转移率为11.17％。
通过对比例1可以对比出通过加入羟丙基β-环糊精并且进行提取实验的方式，能够显著提高在水溶液中豆粕中的大豆异黄酮的提取转移效率。
对比例2
将待实验豆粕进行脱脂处理，然后粗略称取豆粕1.5g，研磨至100目的颗粒，再精确称取100目豆粕0.5g置于圆底烧瓶中，再精确称取β-环糊精0.1g同样置于圆底烧瓶中，向圆底烧瓶中加入水溶液37.5mL，浸泡4h后升温至75℃提取1.5h，实验结束后，提取液趁热过滤后，冷却至室温量取提取液的体积；移取1mL提取液置于10mL容量瓶中，以纯甲醇稀释定容，超声30min，稀释液离心(12000rpm，10min)后取上清液过滤(0.22μm)，续滤液进样分析，计算大豆异黄酮提取转移率为61.89％。
在对比例2中采用β-环糊精进行辅助提取，通过对比例2的大豆异黄酮转移提取率可以看出，在选取最佳工艺的条件下，利用β-环糊精辅助提取大豆异黄酮的转移提取率要低于利用羟丙基β-环糊精的转移提取率。
尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用，它完全可以被适用于各种适合本发明的领域，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实现另外的修改，因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限于特定的细节和这里示出与描述的图例。

Claims (10)

1.一种利用环糊精水溶液提取大豆异黄酮的方法，其特征在于，包括如下步骤：
步骤一：称取待实验干燥豆粕1.5～2.0g，将待实验干燥豆粕研磨至80目～100目豆粕粗品；
步骤二：将所述豆粕粗品加入到环糊精水溶液中浸泡2～4h；其中，环糊精的质量占所述豆粕粗品质量的5％～20％，所述豆粕粗品的质量与水溶液的体积的料液比为1∶50～1∶100；
步骤三：将所述豆粕粗品和所述环糊精水溶液的混合液加热提取0.5h～2.5h，加热提取温度50℃～90℃，提取结束后，述豆粕粗品和所述环糊精混合液自然冷却至室温；
步骤四：计算出大豆异黄酮的转移提取率。
2.如权利要求1所述的利用环糊精水溶液提取大豆异黄酮的方法，其特征在于，所述豆粕为脱脂豆粕。
3.如权利要求1或2所述的利用环糊精水溶液提取大豆异黄酮的方法，其特征在于，所述环糊精为羟丙基β-环糊精。
4.如权利要求3所述的利用环糊精水溶液提取大豆异黄酮的方法，其特征在于，所述步骤一中，所述豆粕粗品质量为0.5g。
5.如权利要求4所述的利用环糊精水溶液提取大豆异黄酮的方法，其特征在于，所述步骤二中，所述环糊精的质量占所述豆粕粗品质量的10％～17.5％。
6.如权利要求4所述的利用环糊精水溶液提取大豆异黄酮的方法，其特征在于，所述步骤二中，所述豆粕粗品的质量与所述水溶液的体积的料液比为1∶75。
7.如权利要求4所述的利用环糊精水溶液提取大豆异黄酮的方法，其特征在于，所述步骤二中，所述混合液加热提取1～2h。
8.如权利要求5所述的利用环糊精水溶液提取大豆异黄酮的方法，其特征在于，所述步骤三中，所述提取温度60℃～80℃。
9.如权利要求5所述的利用环糊精水溶液提取大豆异黄酮的方法，其特征在于，所述步骤三中，在所述豆粕粗品和所述环糊精水溶液的混合液回流状态下进行提取。
10.如权利要求1、2、4-9中任一项所述的利用环糊精水溶液提取大豆异黄酮的方法，其特征在于，所述步骤四中，计算大豆异黄酮的转移提取率的方法为：其中，c为提取液中大豆异黄酮浓度；V为提取液体积；m为提取时称得的豆粕实际质量；w为豆粕中大豆异黄酮含量。
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