KR20140011367A

KR20140011367A - 파브리 병을 치료하기 위한 투여 요법

Info

Publication number: KR20140011367A
Application number: KR1020137026394A
Authority: KR
Inventors: 더글라스 스튜어트 그린; 케네쓰 조셉 발렌자노
Original assignee: 아미쿠스 세라퓨틱스, 인코포레이티드
Priority date: 2011-03-11
Filing date: 2012-03-08
Publication date: 2014-01-28
Also published as: EA201301018A1; JP2021098697A; CA2829947C; TWI624258B; SG10201604757RA; TW201740945A; EP2683382B1; AU2018201637A1; EP2683382A2; CN103974619B; EP3698792A1; JP2020033360A; TW201634048A; ES2807502T3; MX2013010446A; AU2016204445A1; AU2012229330A1; JP2023093448A; AU2016204445B2; CA2829947A1

Abstract

본 개시 기술 주제는 파브리 병을 치료하기 위하여 효소 보충 요법 및 1-데옥시갈락토노지리마이신의 사용을 위한 투여 요법 및 투여 스케줄을 제공한다. 본 개시된 기술 주제는 추가로 파브리 병을 치료하기 위하여 미갈라스텟 하이드로클로라이드와 아갈시다제의 사용을 위한 투여 요법 및 투여 스케줄을 제공한다.

Description

파브리 병을 치료하기 위한 투여 요법{DOSING REGIMENS FOR THE TREATMENT OF FABRY DISEASE}

관련 출원에 대한 상호-참조

본 출원은 2011년 3월 11일 출원된 미국 가출원 제61/451,798호; 2011년 12월 20일 출원된 제61/578,201호 및 2012년 2월 7일 출원된 제61/596,165호에 대한 우선권을 주장하며, 이들의 개시는 참조로서 그 전체가 본 명세서에 포함된다.

본 출원은 파브리 병(Fabry disease)의 치료를 위한 효소 보충 요법 및 1-데옥시갈락토노지리마이신의 사용에 대한 투여 요법 및 투여 스케줄을 제공한다.

파브리 질병은 α-Gal A 유전자(GLA)에서의 돌연변이의 결과로서 리소좀 효소 α-갈락토시다제 A(α-Gal A)의 결핍(deficiency)으로 야기되는 글리코스핀고리피드 대사의 점진적인, X-연관 선천성 이상(error)이다. X-연관 질환임에도 불구하고, 여성은 다양한 정도의 임상적 징후를 발현할 수 있다. 파브리 병은 남성 4000 명 중 1 명 내지 전체 인구 117,000 명 중 1 명으로 추산되는 발병률을 갖는 희귀병이다. 더구나, 전형적인 징후 및 증상이 나타나지 않으므로, 낮은 진단율(under-diagnosed)일 수 있는 파브리 병의 후발성 표현형의 변이체가 있다. 파브리 병에 대한 상기, 및 새로운 스크리닝의 연구는 파브리 병의 실질적인 발병률이 현재 측정된 것보다 더 높을 수 있다는 것을 제시한다.

상기 병의 임상적 징후는 잔류 α-Gal A 수준과 관련될 수 있다. 치료되지 않으면, 파브리 병 환자의 수명은 감소되고, 신장, 심장 및/또는 중추 신경계에 영향을 끼치는 혈관 질병 때문에, 보통 30 대 또는 40 대에 사망한다. 효소 결핍은 신체 전체에 걸친 혈관 내피 및 내장 조직에서의 기질, 글로보트리아소일세라미드(GL-3)의 세포내 축적을 일으킨다. 글리코스핀고리피드 침적에 기인한 신장 기능의 점진적인 열화 및 고질소혈증의 발병은 보통 20 대 내지 40 대에 발생하지만, 10 대와 같이 초기에 발생할 수 있다. 신장 손상은 반접합성(남성) 및 이형접합성(여성) 환자 모두에서 발견된다.

심장 병은 대부분의 남성 및 많은 여성에서 발병한다. 초기 심장병 발견은 좌측 심실 확장, 심장 판막 침습(valvular involvement) 및 전도 이상을 포함한다. 승모판 폐쇄 부전증은 전형적으로 아동기 또는 청년기에 존재하는 가장 빈번한 심장판막 손상이다. 뇌혈관의 징후는 주로 다초점 소혈관 침습으로부터 생성되고, 혈전증, 일과성 뇌허혈증, 기저 동맥 허혈 및 대동맥 질환, 발작, 편측 마비, 편무감각증, 실어증, 미로 질환(labyrinthine), 또는 뇌출혈을 포함할 수 있다. 뇌혈관 증상 발병의 평균 연령은 33.8 세이다. 인격 변화 및 정신병적 행동은 연령이 증가함에 따라 나타날 수 있다.

파브리 병에 대해 현재 승인된 치료는 효소 보충 요법("ERT")이다. 현재 두 개의 α-Gal A 제품이 파브리 병의 치료에 이용 가능하다: 아갈시다제 알파(Replagal® Shire Human Genetic Therapies) 및 아갈시다제 베타(Fabrazyme®; Genzyme Corproration). 이들 두 개의 ERT 형태의 의도는 정맥내 투여되는 효소의 재조합 형태로 환자의 부적절한 α-Gal A 활성을 보상하는 것이다. ERT가 많은 세팅에서 효과적이지만, 그 처리 또한 제한된다. ERT는 뇌졸증의 위험을 감소시키는 것으로 나타나지 않았고, 심장 근육은 느리게 반응하며, 신장의 일부 세포 유형에서 GL-3 제거가 제한된다. 일부 환자에서는 ERT에 대한 면역 반응이 일어난다.

1-데옥시갈락토노지린마이신 및 그의 염, 1-데옥시갈락토노지리마이신 하이드로클로라이드(미국에 채택 명칭(USAN)인 미갈라스텟 하이드로클로라이드으로도 알려짐)가 효소에 선택적으로 결합하여 돌연변이체 α-Gal A에 대한 약리학적 샤프론(chaperone)으로서 작용하여, 그의 안정성을 증가시키고 효소가 올바른 3 차원 모양으로 접히는 것을 도와준다. 이러한 α-Gal A의 안정화는 세포의 품질 관리 메커니즘이 올바르게 접힌 효소를 인식하는 것을 가능하게 하여, 리소좀으로의 효소의 수송이 증가되어, 리소좀이 그의 의도된 생물학적 기능인 GL-3의 대사를 수행하는 것을 가능하게 한다. ER로부터 리소좀으로의 α-Gal A의 적절한 수송을 회복시킨 결과로서, 미갈라스텟 하이드로클로라이드는 또한 ER에서 잘못 접힌 단백질의 축적을 감소시키며, 이는 세포에서의 스트레스 및 파브리 병에서 기여 인자 일 수 있는 일부 염증-유사 반응을 경감시킬 수 있다. 미갈라스텟 하이드로클로라이드의 임상 연구뿐만 아니라 다수의 생체외 및 생체 내 임상 전 연구가 수행되었다. 미갈라스텟 하이드로클로라이드는 세포 내 α-Gal A 단백질의 양을 증가시키고 리소좀으로의 돌연변이 효소 수송을 향상시키는 것으로 나타났다.

본 발명은 파브리 병의 치료를 위해 1-데옥시갈락토노지리마이신 및 효소 보충 요법을 사용하기 위한 투여 요법 및 투여 스케줄을 제공한다. 특정 실시형태에서, 본 출원은 파브리 병을 치료하기 위해 미갈라스텟 하이드로클로라이드 및 아갈시다제(예를 들어, 아갈시다제 알파 또는 아갈시다제 베타)의 사용을 위한 투여 요법 및 투여 스케줄을 제공한다

한 실시형태에서, 방법은 필요로 하는 환자에게 약 50 mg 내지 약 600 mg의 1-데옥시갈락토노지리마이신, 및 유효량의 α-Gal A 효소 보충 요법을 투여하는 것을 포함한다. 1-데옥시칼락토노지리마이신을 α-Gal A 효소 보충 요법의 전, 후, 또는 그와 동시에 투여할 수 있다. 한 실시형태에서, 1-데옥시갈락토노지리마이신 투여 전 약 0.5 내지 약 4 시간 전에 시작하여 1-데옥시갈락토노지리마이신의 투여 후 약 0.5 내지 약 4 시간 후에 종료하는 기간 동안 환자는 금식한다. 추가의 실시형태에서, 1-데옥시갈락토노지리마이신 투여 전 적어도 2 시간 및 1-데옥시갈락토노지리마이신의 투여 후 적어도 약 2 시간 동안 환자는 금식한다.

또 다른 실시형태에서, 1-데옥시갈락토노지리마이신을 α-Gal A 효소 보충 요법의 투여와 동시에 투여 전 약 4 시간 사이에 투여된다(T=-4 시간부터 T=0 시간까지). 추가의 실시형태에서, 1-데옥시갈락토노지리마이신은 α-Gal A 효소 보충 요법의 투여 약 2 시간 전에 투여된다.

특별한 실시형태에서, 1-데옥시갈락토노지리마이신은 미갈라스텟 하이드로클로라이드이다. 한 실시형태에서, α-Gal A 효소 치료 요법은 아갈시다제 알파 또는 아갈시다제 베타이다.

한 실시형태에서, 1-데옥시갈락토노지리마이신은 α-Gal A 효소 보충 요법에 대해 보조제로서 투여된다. 또 다른 실시형태에서, 1-데옥시갈락토노지리마이신과 α-Gal A 효소 보충 요법은 조합 요법으로서 투여된다.

특별한 실시형태에서, 상기 기술된 방법에 따라 투여되는 1-데옥시갈락토노지리마이신의 양은 약 150 mg 내지 약 450 mg이다. 한 실시형태에서, 투여되는 1-데옥시갈락토노지리마이신의 양은 150 mg, 300 mg 및 450 mg으로부터 선택된다.

특별한 실시형태에서, 1-데옥시갈락토노지리마이신은 α-Gal A 효소 보충 요법의 투여 바로 직전 또는 동시에 투여된다. 대체 실시형태에서, 1-데옥시갈락토노지리마이신의 제2 투여량은 α-Gal A 효소 보충 요법의 투여와 그 후 4 시간 사이에 투여된다.

특정 실시형태에서, 1-데옥시갈라토노지리마이신은 α-Gal 효소 보충 요법을 또한 받는 환자에 1 내지 4 주 마다 투여된다. 추가 실시형태에서, 1-데옥시갈라토노지리마이신은 α-Gal A 효소 보충 요법을 또한 받는 환자에게 12 일 내지 16 일 마다 투여된다. 추가 실시형태에서, 1-데옥시갈락토노지리마이신은 α-Gal A 효소 보충 요법을 또한 받는 환자에게 14 일 마다 투여된다. 특정한 실시형태에서, α-Gal A 효소 보충 요법은 조합 또는 보조 요법으로서 1-데옥시갈라토노지리마이신을 또한 투여 받는 환자에게 14 일 마다 투여된다.

본 출원은 파브리 병의 치료에 사용하기 위한 1-데옥시갈락토노지리마이신을 또한 제공하고, 여기에서, 치료는 필요로 하는 인간 환자에 약 50 mg 내지 약 600 mg의 1-데옥시갈락토노지리마이신 및 유효량의 α-Gal A 효소 보충 요법을 투여하는 것을 포함한다.

본 출원은 또한 파브리 병의 치료을 위한 약제의 제조에서 1-데옥시갈락토노지리마이신의 용도를 제공하고, 여기에서, 치료는 필요로 하는 인간 환자에게 약 50 mg 내지 약 600 mg의 1-데옥시갈락토노지리마이신 및 유효량의 α-Gal A 효소 보충 요법을 투여하는 것을 포함한다.

본 출원은 또한 환자의 파브리 병을 치료를 위한 키트를 제공하며, 키트는 약 50 mg 내지 약 600 mg의 1-데옥시갈라토노지리마이신 및 유효량의 α-Gal A 효소 보충 요법을 포함한다. 특정한 실시형태에서, 키트 안의 1-데옥시갈락토노지리마이신의 양은 150 mg, 300 mg 및 약 450 mg으로 부터 선택된다.

도 1은 0.5 mg/kg 또는 1.0 mg/kg 아갈시다제 베타 단독(기간 1) 또는 150 mg의 미갈라스텟(기간 2)과 조합으로 기간 1 및 2 동안 처리되는 환자를 위한 혈장 α-Gal A 활성 혼합물을 보여준다.
도 2는 미갈라스텟과 병용-투여에 이은 모든 환자에서의 혈장 α-Gal A 활성 AUC 증가를 보여준다.
도 3은 0.5 mg/kg 또는 1.0 mg/kg의 아갈시다제 베타와 150 mg의 미갈라스텟의 병용-투여시 혈장 α-Gal A 활성의 증가를 보여주는 각 샘플링 시간에 대한 부분적인 AUC를 보여준다.
도4a 및 4b는 0.5 mg/kg의 아갈시다제 베타와 150 mg의 미갈라스텟의 병용-투여에 이은 두 명의 환자에서의 피부 α-Gal A 활성의 증가를 보여준다.
도 5a 및 5b는 0.5 mg/kg 아갈시다제 베타와 150 mg의 미갈라스텟의 병용-투여에 이은 두 명의 환자에서의 피부 α-Gal A 활성의 증가를 보여준다. 도 5a는 기간 2 동안 40 분 더 길게 ERT를 주입 받은 환자에서의 0.5 mg/kg의 아갈시다제 베타 및 150 mg의 미갈라스텟의 병용-투여에 이은 피부 α-Gal A 활성의 증가를 보여준다.
도 6a 및 6b는 1.0 mg/kg의 아갈시다제 베타와 150 mg의 미갈라스텟의 병용-투여에 이은 두 명의 환자에서의 피부 α-Gal A 활성의 증가를 보여준다.
도 7a 및 7b는 0.5 mg/kg의 아갈시다제 베타와 150 mg의 미갈라스텟의 병용-투여에 이은 두 명의 환자에서의 PBMC α-Gal A 활성의 증가를 보여준다.
도 8a 및 8b는 0.5 mg/kg의 아갈시다제 베타와 150 mg의 미갈라스텟의 병용-투여에 이은 두 명의 환자에서의 PBMC α-Gal A 활성의 증가를 보여준다.
도 9a 및 9b는 1.0 mg/kg의 아갈시다제 베타와 150 mg의 미갈라스텟의 병용-투여에 이은 두 명의 환자에서의 PBMC α-Gal A 활성의 증가를 보여준다
도 10은 0.5 mg/kg 또는 1.0 mg/kg 아갈시다제 베타와 150 mg의 미갈라스텟의 병용-투여에 이은 혈장, 피부 및 PBMC에서의 α-Gal A 활성의 증가를 요약하는 표를 보여준다
도 11은 실시예 2 및 3의 각 연구 환자의 유전자 형을 보여준다.
도 12는 혈장 AUC α-Gal A 활성 대 1.0 mg/kg 아갈시다제 베타 처리, 및1.0 mg/kg 아갈시다제 베타와 150 mg의 미갈라스텟 HCl의 조합물로의 처리를 보여준다(평균치와 표준 편차가 삽입됨).
도 13은 혈장 AUC α-Gal A 활성 대 0.5 mg/kg 아갈시다제 베타 처리, 및 0.5 mg/kg 아갈시다제 베타와 150 mg의 미갈라스텟 HCl의 조합물로의 처리를 보여준다(평균치와 표준 편차가 삽입됨).
도 14는 아갈시다제 베타 단독 또는 150 mg 미갈라스텟 HCl과의 조합물로 처리 후 2 일째 피부 α-Gal A 활성을 보여준다(아갈시다제 베타 단독에서 기준선을 뺀 비와 함께).
도 15는 아갈시다제 베타 단독 또는 150 mg 미갈라스텟 HCl과의 조합물로 처리 후 7 일째 피부 α-Gal A 활성을 보여준다(아갈시다제 베타 단독으로 부터 기준선을 뺀 비와 함께).

본 출원은 파브리 병의 치료를 위한 1-데옥시갈락토노지리마이신 및 아갈시다제의 사용을 위한 투여 요법 및 투여 스케줄을 제공한다.

정의

"파브리 병"은 종래의 파브리 병, 후발성 파브리 병, 및 α-갈락토시다제 A(α-Gal A)를 인코딩하는 유전자에서의 돌연변이를 갖는 반접합성 여성을 가리킨다. 여기에서 사용된, 용어 "파브리 병"은 추가로 환자가 정상 보다 낮은 내생적 α-Gal A 활성을 나타내는 임의의 증상을 포함한다.

용어 "AUC" 시간이 경과됨에 따라 소정의 약물에 대한 신체의 총 노출을 평가하는 수학적 계산을 나타낸다. 투여 후, 혈중의 농도를 플로팅하는 그래프에서, 약물 농도 변수는 y축에 있고, 시간은 X-축에 있다. 약물 농도 곡선과 지정된 시간 간격에 대한 X-축 사이의 면적이 AUC이다. AUC는 투여 스케줄에 대한 가이드로서 및 신체에서의 상이한 약물들의 유용성을 비교하기 위하여 사용된다.

용어 "Cmax"는 투여 후 달성된 최대 혈장 농도를 나타낸다.

용어 "치료적으로 유효 투여량(dose)" 및 "유효량"은 유익한 치료 반응을 초래하기에 충분한 특정한 약제학적 화합물 또는 조성물의 양을 가리킨다. 유익한 치료 반응은 사용자(예를 들어, 임상의)가 상기한 증상 및 대리 임상 마커를 포함하는, 치료에 유효한 반응으로 인식할 임의의 반응일 수 있다. 따라서, 치료 반응은 일반적으로 질병 또는 질환, 예를 들어 파브리 병에 대해 본 기술 분야에 알려진 것과 같은, 질병 또는 질환, 예를 들어 파브리 병의 하나 이상의 증상을 개선할 것이다.

파브리 병에 대한 대리 마커(surrogate marker)에서 개선의 비-제한적인 예는 세포(예를 들어, 섬유아세포) 및 조직에서의 α-Gal 수준 또는 활성의 증가; 조직학을 이용한 신장 간질성 모세혈관 생체 검사(kidney interstitial capillary biopsies)에서의 변화에 의해 측정된 GL-3 축적의 감소; 소변 GL-3 수준의 감소; 신장 기능(사구체 여과율(GFR) 및 24-시간 요소 단백질을 포함하는)의 평가; 호모시스테인 및 혈관 세포 접착 분자-1(VCAM-1)의 감소된 혈장 농도; 심근 세포 및 심장 판막 섬유 세포에서의 감소된 GL-3 축적; 심장 비대(특히 좌측 심실의)의 감소, 심장 판막 부전증 및 부정맥의 개선; 단백뇨의 개선; CTH, 락토실세라마이드, 세라마이드와 같은 지질의 감소된 소변 농도 및 글루코실세라미드 및 스핀고미엘린의 감소된 소변 농도(Fuller et al., Clinical Chemistry, 2005; 51:688-694); 사구체 상피 세포에서의 적층 봉입체(laminated inclusion bodies)(Zebra bodies)의 결여; 신장 기능에서의 개선; 발한 감소의 완화; 각화 혈관증의 결여; 및 고 빈도 감음 신경성 청력 손실, 점진적 청력 손실, 돌발성 난청, 또는 이명과 같은 청력 이상의 개선을 포함한다. 신경학적 증상에서의 개선은 일과성 뇌허혈증(TIA) 또는 뇌졸증의 예방; 및 말단지각 이상증(말단에서의 화끈거림(burning) 또는 따끔거림)으로 그 자체로 나타나는 신경변증 통증의 개선을 포함한다.

어구 "약제학적으로 허용되는"은 생리적으로 견딜 수 있고 인간에게 투여되었을 때 부적합한 반응을 전형적으로 생성하지 않는 분자체(molecular entity) 및 조성물을 가리킨다. 바람직하게는, 여기에서 사용된 바, 용어 "약제학적으로 허용되는"은 동물, 및 보다 구체적으로 인간에게 사용하기 위하여 연방 또는 주 정부의 규제 기관에 의해 승인된 것 또는 미국 약전 또는 일반적으로 인정된 다른 약전에 열거된 것을 의미한다. 용어 ?柴?는 화합물과 함께 투여되는 희석제, 보조제, 부형제 또는 비히클을 가리킨다. 이러한 약제학적 담체는 물 및 오일과 같은 멸균 액일 수 있다. 물 또는 수용액, 생리식염수 및 수성 덱스트로즈 및 글리세롤 용액이, 바람직하게는, 특히 주사액을 위한, 담체로서 이용된다. 적절한 약제학적 담체는, 전체가 참조로서 본 명세서에 포함되는 문헌["Remington's Pharmaceutical Sciences" by E.W. Martin, 18^th Edition] 또는 다른 판에 기술되어 있다.

"1-데옥시갈락토노지리마이신" (DGJ)은 (2R,3S,4R,5S)-2-(하이드록시메틸)피페리딘-3,4,5-트리올을 가리킨다. 여기에서 사용된 바, 전체를 통해 "1-데옥시갈락토노지리마이신" 또는 "DGJ" 대한 언급은 유리 염기 및 그의 임의의 약제학적으로 허용되는 염 형태 모두를 포함한다. DGJ의 하이드로클로라이드 염은 미갈라스텟 하이드로클로라이드로 알려져 있다.

용어 "보조제" 또는 "보조 치료(adjuvant therapy)"는 효능, 안전성을 증가시키기 위한, 또는 1 차 물질의 성능, 치료, 또는 과정을 용이하게 하거나 또는 향상시키기 위한 임의의 추가의 물질, 처리 또는 과정을 가리킨다.

용어 "조합 치료"는 개별적으로 수행될 때 각 치료의 효과에 비교하여 결과가 향상되는 임의의 치료를 가리킨다. 조합 치료에서의 개별 치료들은 동시에 또는 연속적으로 투여될 수 있다.

향상은 단독으로 수행되었을 때 치료들에 의해 달성된 결과에 비해서 유리한 결과를 초래할 수 있는 다양한 치료의 효과에서의 임의의 개선을 포함할 수 있다. 향상된 효과 및 향상된 효과의 측정을 다음과 같은 다양한 파라미터에 의해 측정될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다: 시간적 파라미터(예를 들어, 치료의 길이, 회복 시간, 치료의 장기간 효과 또는 치료의 가역성); 생물학적 파라미터(예를 들어, 세포 수, 세포 부피, 세포 조성물, 조직 부피, 조직 크기, 조직 조성물); 공간적 파라미터(예를 들어, 조직 강도, 조직 크기 또는 조직 접근성) 및 생리학적 파라미터(예를 들어, 신체 윤곽, 통증, 불편함, 회복 시간 또는 가시적 표지). 향상된 효과(enhanced effect)는 상승적인 향상을 포함할 수 있고, 이때, 향상된 효과는, 단독으로 수행되었을 때 각 치료의 부가(additive) 효과들 보다 크다. 향상된 효과는, 부가적인 향상을 포함할 수 있고, 이때 향상된 효과는, 단독으로 수행되었을 때 각 치료의 부가 효과와 실질적으로 동등하다. 향상된 효과는 상승적 효과 보다 작을 수 있다고, 이때, 향상된 효과는, 단독으로 수행되었을 때 각 치료의 부가 효과 보다 작지만 단독으로 수행되었을 때 각 치료의 효과 보다 여전히 더 양호하다.

용어 "약" 및 "대략"은 일반적으로 측정의 성질 또는 정밀도를 고려하여, 측정된 양에 대한 허용 가능한 정도의 오차를 의미한다. 전형적으로, 예시적인 오차 정도는 소정의 값 또는 범위의 값의 20 퍼센트(%) 이내, 바람직하게는 10% 이내, 및 보다 바람직하게는 5% 이내이다. 달리는, 특히 생물학적 시스템에서, 용어 "약" 및 "대략"은 소정의 값의 일정 크기 자릿수 이내, 바람직하게는 5 배 이내, 보다 바람직하게는 2 배 이내의 값을 의미할 수 있다. 본 명세서에서 주어진 수적 양은 달리 언급 되지 않는다면 근사치이다.

제형화 및 투여

1-데옥시갈락토노지리마이신은 유리 염기로서 또는 1-데옥시갈락토노지리마이신 하이드로클로라이드(별칭, 미갈라스텟 하이드로클로라이드)를 포함하는 약제학적으로 허용되는 염 형태로 투여될 수 있다. 이는 예를 들어 정제, 캡슐, 또는 액체 형태의 경구적으로, 또는 주사용 멸균 수용액을 포함하는 임의의 투여 경로에 적절한 형태로 투여될 수 있다. 이는 즉각적인-, 지연된-, 변형된-, 서스테인드(sustained)-, 펄스(pulsed-) 또는 조절된-방출 적용을 위해, 임의로 방향제 및 착색제와 함께, 정제, 캡슐, 오불(ovules), 엘릭서르, 용액 또는 현탁액, 겔, 시럽, 구강 청결제, 또는 사용 전에 물 또는 다른 적당한 비히클과 구성을 하기 위한 건조 분말 형태로 경구적으로 투여될 수 있다. 정제, 캡슐, 로젠지, 캔디, 환약, 볼러스(boluses), 분말, 페이스트, 과립, 불릿(bullets), 또는 예비혼합 제제와 같은 고체 조성물이 또한 사용될 수 있다. 경구 사용용 고체 및 액체 조성물은 본 기술 분야에 잘 알려진 방법에 따라 제조될 수 있다. 이러한 조성물은 또한 고체 또는 액체 형태일 수 있는 하나 이상의 약제학적으로 허용되는 담체 및 부형제를 함유할 수 있다. 화합물이 경구 투여용으로 제형화될 때, 정제 또는 캡슐은 결합제(예를 들어, 예비젤라틴화 전분, 폴리비닐피롤리돈 또는 하이드록시프로필메틸셀룰로즈); 충전제(예를 들어, 락토즈, 미세결정성 셀룰로즈 또는 인산 수소 칼슘); 윤활제(예를 들어, 마그네슘 스테아레이트, 활석 또는 실리카); 붕해제(감자 전분 또는 나트륨 전분 글리콜레이트); 또는 습윤제(예를 들어, 나트륨 라우릴 설페이트)와 같은 약제학적으로 허용가능한 부형제와 함께 통상적인 수단에 의해 제조될 수 있다. 정제는 본 기술 분야에 잘 알려진 방법에 의해 코팅될 수 있다.

약제학적으로 허용가능한 부형제는 또한 미세결정성 셀룰로즈, 락토즈, 나트륨 시트레이트, 칼슘 카보네이트, 이염기성 인산 칼슘 및 글리신, 붕해제, 예를 들어 전분(바람직하게는 옥수수, 감자 또는 타피오카 전분), 나트륨 전분 글리콜레이트, 크로스카멜로즈 나트륨 및 특정한 복합 실리케이트, 및 과립화 결합제, 예를 들어 폴리비닐피롤리딘, 하이드록시프로필 에틸셀룰로즈(HPMC), 하이드록시프로필 셀룰로즈(HPC), 슈크로즈, 젤라틴, 및 아카시아를 포함하지만, 이에 제한되는 것은 아니다. 추가적으로, 윤활제, 예를 들어, 마그네슘 스테아레이트, 스테아르 산, 글리세릴 베헤네이트 및 활석이 포함될 수 있다.

특정한 실시형태에서, 미갈라스텟 하이드로클로라이드는 백색의 경질 젤라틴 캡슐 안에서 마그네슘 스테아레이트 및 예비젤라틴화 전분과 제형화된다. 또 다른 실시형태에서, 고체 투약(dosage) 형태는 약 75 내지 80%의 미갈라스텟 하이드로클로라이드, 약 0.1 내지 2%의 마그네슘 스테아레이트 및 약 20 내지 25%의 예비젤라틴화 전분을 포함한다. 또 다른 특정 실시형태에서, 캡슐은 약 76.5%의 미갈라스텟 하이드로클로라이드, 약 0.5%의 마그네슘 스테아레이트 및 약 23%의 예비젤라틴화 전분을 포함한다.

효소 보충 요법

파브리 병에 대해 현재 승인된 치료는 효소 보충 요법이다. 두 개의 제품이 현재 파브리 병의 치료를 위해 이용 가능하다: 세계적으로 판매되는, 아갈시다제 알파(Replagal® Shire Human Genetic Therapies) 및 아갈시다제 베타(Fabrazyme®; Genzyme Corporation). 이들 두 개의 ERT 형태는 정맥 내 투여되는, 효소의 재조합 형태로 환자의 부적절한 α-Gal A 활성을 보상하고자 한다. ERT는 신장 및 특정의 다른 세포 유형의 모세혈관 내피에 GR-3 침전을 감소시키는 것으로 나타났다. ERT는 많은 세팅에서 효과적이지만, 그 치료는 또한 제한을 받는다. ERT는 뇌졸증의 위험을 감소시키는 것으로 나타나지 않았고, 심장 근육은 느리게 반응하며, 신장의 일부 세포 유형으로부터 GL-3 제거가 제한된다. 일부 환자에서는 ERT에 대한 면역 반응이 일어난다.

아갈시다제 알파의 권장되는 투여량은 정맥 내 주입에서와 같이 2 주 마다 주입되는 0.2 mg/kg 체중이다. 10-주 연구는 아갈시다제 알파의 약물 동역학 및 약역학을 평가하기 위하여 ERT를 투여 받은 적이 없는 성인 남성 파브리 환자에 대하여 수행되었다. 아갈시다제 알파의 0.1 내지 0.4 mg/kg 범위 투여량의 투여 후 평균 반감기는 투여량과 반감기, 제거 또는 분포의 부피 사이에서 유의한 관계없이 56 내지 76 분이었다. AUC는 이 투여량 범위에 걸쳐 투여량에 대하여 선형으로 비례했다. 혈장 GL-3 수준은 모든 투여량 그룹에서 대략 50% 감소되었다; 감소는 투여량 및 투여 빈도에 독립적이었다. 18 명 환자 중 2 명이 연구 동안 IgG 양성이 되었다. 연구 동안 어떤 IgE 항체도 임의의 환자에서 검출되지 않았다.

아갈시다제 베타의 권장되는 투여량은 정맥 내 주입으로서 2 주 마다 주입되는 1mg/kg 체중이다. 파브리 병에 대해 미국에서 승인된 유일한 ERT인 아갈시다제 베타의 제조자는 약품의 공급중단(drug shortage)을 발표했다. 그 결과, 아갈시다제 베타는 현재 배급제로 되어 있고, 환자는 전형적으로 효소의 감소된 투여량 및/또는 연장된 투여 간격(즉, 투여 사이에 2 주 보다 길게)으로 투여 받는다. 아갈시다제 베타는, 노출(AUC) 값이 증가하고, 제거가 투여 증가와 불균형으로 감소하면서 비-선형 약물 동역학을 나타낸다. AUC 값은 투여량이 0.3 mg/kg으로부터 1 mg/kg로 및 1 mg/kg으로부터 3 mg/kg으로 각각 증가되었을 때 대략 6 배 및 8 배 증가되었다. 0.3 mg/kg 내지 3 mg/kg 범위의 투여 후 성인 환자에서 아갈시다제 베타의 제거 반감기는 투여량 의존적이었으며 45 내지 100 분의 범위였다.

아갈시다제 베타에 대한 IgG 항체는 임상 연구에서 아갈시다제로 처리된 79%의 성인 환자 및 69%의 소아과 환자에서 생성되었다; IgG 항체가 생성된 환자 다수는 노출하고 첫 3개월 안에 IgG 항체가 생성되었다. 남성, 특히 낮은 잔류 α-Gal A 수준을 갖는 남성은 보다 높은 잔류 수준을 갖는 남성, 또는 여성에서 IgG 항체를 생성시킬 가능성이 높았다. 소아과 환자의 IgG 혈청 전환은 아갈시다제의 연장된 반감기와 관련이 있었다. 그러나, 성인 환자에서, 동일한 아갈시다제 약물 동역학 프로파일이 한 번의 시도에서 혈청 전환 전 및 후에 관찰되었다; 또 다른 시도에서, 최대 아갈시다제 농도 및 AUC 값은 가장 높은 역가(titers)의 IgG를 갖는 환자에서 기준값의 26% 까지 감소되었다. 아갈시다제에 대한 IgG 항체의 존재는 효소의 활성을 감소시키는 것으로 보고되었다.

미갈라스텟 하이드로클로라이드는 생체외 및 생체내에서 야생형 α-Gal A를 안정화시킨다. 미갈라스텟 하이드로클로라이드의 rhα-Gal A에의 결합은 열 변성 및 활성에 의해 측정된 바 중성 pH에서 rhα-Gal A의 안정화에 유의적인 시간 - 및 농도 - 의존성 증가를 초래했다는 것이 생체외에서 나타났다. 중성 pH 버퍼에서, rhα-Gal A는 대략 3 시간의 반감기로 활성에서 손실을 나타냈다; 미갈라스텟 하이드로클로라이드와 공-인큐베이션(co-incubation)은 rhα-Gal A 활성의 손실에 대한 반감기를 대략 40 시간까지 증가시켰다.

래트에서, 3 mg/kg의 미갈라스텟 하이드로클로라이드의 경구 투여 후 30 분 후 10 mg/kg 아갈시다제 베타의 주입은 rhα-Gal A의 혈장 반감기에서의 2.6 배 증가 및 60 분 및 240 분에서 각각 혈장 α-Gal A 수준에서 2.5 배 및 1.5 배 증가를 초래했다. GLA 결핍 마우스에서, rhα-Gal A의 주입 30 분 전 및 2 시간 후 미갈라스텟 하이드로클로라이드의 30, 100 또는 300 mg/kg 투여량의 경구 투여는 rhα-Gal A 단독 투여 비교해서 조직 α-Gal A 수준에서의 투여량-의존성 증가 및 피부, 심장, 신장, 및 혈장에서 GL-3 수준에서의 투여량-의존성 감소를 초래했다.

미갈라스텟 하이드로클로라이드는 생체외 및 생체내에서 아갈시다제 알파를 안정화시키는 것으로 나타났다. 아갈시다제 알파의 물리적 안정성에 대한 미갈라스텟 하이드로클로라이드의 효과를 생체외 열 변성 분석으로 평가하였다. 이 분석을 사용하는 경우, 아갈시다제 알파는 pH 7.4에서 대략 51℃의 융점(Tm)을 보였다. 그러나, 10 ? 미갈라스텟 하이드로클로라이드가 변성 반응에 포함될 때, 아갈시다제 알파의 Tm은 실질적으로 59℃ 까지 증가되었다. 리소좀 효소에 대해 예상되는 바와 같이, 아갈시다제 알파는 낮은 pH에서 보다 안정하였고(pH 5.2에서 58℃의 Tm), 10 ? 미갈라스텟 하이드로클로라이드의 존재하에서 열 변성에 추가의 내성을 나타냈다(68℃의 Tm). 이들 데이터는 미갈라스텟 하이드로클로라이드의 결합이 아갈시다제 알파에 대해 높은 수준의 물리적 안정성을 부여한다는 것을 나타낸다.

수컷 스프레이그-돌리 래트의 혈액으로부터의 아갈락시다제 알파의 제거율에 대한 미갈라스텟 하이드로클로라이드의 효과가 또한 조사되었다. 동물에 비히클(물) 또는 1, 3, 10, 또는 30 mg/kg의 미갈라스텟 하이드로클로라이드를 단일 경구 위관으로 투여하고, 30 분 후 볼러스 꼬리 정맥 주입을 통해 0.2 mg/kg 아갈시다제 알파를 정맥 내 투여하였다. 혈액을 시간의 함수로서 수집하고, α-Gal A 활성을 혈장에서 측정하였다. 미갈라스텟 하이드로클로라이드의 부재시, α-Gal A 활성은 빠르게 감소했다; 미갈라스텟 하이드로클로라이드의 예비-투여는, 각각 3 mg/kg 및 30 mg/kg 미갈라스텟 하이드로클로라이드의 투여 후, 아갈시다제 알파(α-Gal A 활성에 의해 측정된 바)의 반감기에서 대략 2 배 및 3 배의 투여량-의존성 증가를 초래했고, 각각 60 분 및 240 분에서 혈장 α-Gal A 수준에서 대략 2.5 배 및 1.5 배 증가가 있었다. 생체외 및 생체내에서 아갈시다제 알파에 대한 미갈라스텟 하이드로클로라이드의 효과는 아갈시다제 베타에 대한 미갈라스텟 하이드로클로라이드의 경우에 관찰된 것과 유사하다.

GLA 결핍 마우스에서의 예비 연구를 수행하여 병용-투여된 미갈라스텟 하이드로클로라이드와 Fabrazyme® 안정성을 평가하였다. 1 mg/kg의 투여량으로 일 주일에 한 번 정맥 내 투여된 Fabrazyme®과 조합하여 미갈라스텟 하이드로클로라이드를 3 및 30 mg/kg의 투여량으로 4 주 동안 1 주일에 세 번 투여하였다. 잔존, 임상적 조건 또는 혈액학 및 미갈라스텟 하이드로크로라이드와 Fabrazyme®이 병용-투여된 수컷 GLA-부족 마우스에서 관찰된, 임상적 화학 파라미터에서 어떤 직접적인 약물-관련 변화는 없는 것으로 보였다.

실시예

실시예 1: 미갈라스텟 하이드로클로라이드 및 아갈시다제를 이용한 파브리병의 치료를 위한 투여 요법

본 연구의 일 목적은 파브리 병을 앓는 환자에서 미갈라스텟 하이드로클로라이드 및 아갈시다제를 병용-투여하는 것을 포함하는 투여 요법의 안정성, 효과, 및 약물 동역학을 평가하는 것이다.

본 연구의 또 다른 목적은 α-Gal A의 분포에 대한 미갈라스텟 하이드로크로라이드의 150 mg 및 450 mg 투여량의 효과를 평가하는 것이다. 이는 α-Gal A 수준 및 단백질 수준을 측정하여 투여 후 24 시간 및 7 일에 아갈시다제 단독 및 미갈라스텟 하이드로클로라이드와 조합하여 아갈시다제를 투여 후 피부에서의 아갈시다제의 분포를 측정하여 평가할 것이다.

평가될 다른 측정은 다음과 같다:

·각 아갈시다제 투여 전 및 14 일 후의 소변 GL-3 분비;

·투여 후 24 시간 및 7 일에서 아갈시다제 단독 및 미갈라스텟 하이드로클로라이드와 조합한 아갈시다제를 투여 후 피부에서의 GL-3;

·아갈시다제 주입 개시 전 및 투여 후 2, 4, 및 24 시간 및 7 일 및 14 일에서 측정된 WBC α-Gal 효소 수준;

·아갈시다제 주입 개시 전의 항체 역가(IgG);

·아갈시다제의 각 투여 전 및 각 아갈시다제 투여 후 14일에서 혈장 글로보트리아오실스핀고신 (lyso-GB3) 농도 및 lyso-GB3의 소변 분비.

α-Gal A 효소 수준의 모든 혈장, WBC 및 피부 측정은 Con A 포획과 함께 또는 없이 수행되고, 단백질 수준의 측정은 웨스턴 블랏에 의한다.

연구 설계. 이는 미갈라스텟 하이드로클로라이드 및 아갈시다제의 병용-투여의 안정성 및 효과를 평가하기 위하여 상(Phase) 2 임상, 두 단계, 공개 실험 연구이다. 연구는 연구 시작 전 적어도 한 달에 한 번 안정한 투여량(0.3 내지 1.0 mg/kg)의 아갈시다제 베타(Fabrazyme®) 또는 투여량(≥0.2 mg/kg)의 아갈시다제 알파(Replagal®)를 투여 받은 18 세 내지 65 세의 남성 환자에서 수행될 것이다. 대략 18 명의 환자가 등록될 것이다.

이 공개 실험(open-label)은 두 단계로 구성될 것이다. 단계 1은 아갈시다제의 약물 동역학 및 안전성에 대한 150 mg 미갈라스텟 하이드로클로라이드의 효과 및 150 mg의 미갈라스텟 하이드로클로라이드의 약물 동역학 및 안전성에 대한 아갈시다제의 효과를 평가하기 위하여 스크리닝 및 세-기간 연구로 구성될 것이다. 단계 2는 아갈시다제의 약물 동역학 및 안전성에 대한 450 mg의 미갈라스텟 하이드로클로라이드의 효과를 평가하기 위하여 스크리닝 및 두-기간 연구로 구성될 것이다. 단계 2에서, 450 mg 투여량의 미갈라스텟 하이드로클로라이드의 약물동역학 및 안정성에 대한 아갈시다제의 효과를 평가하지 않을 것이다. 미갈라스텟 하이드로클로라이드의 혈장 노출은 적당한 미갈라스텟 하이드로클로라이드 혈장 농도의 달성을 단지 확인하기 위하여 미갈라스텟 하이드로클로라이드가 아갈시다제와 함께 투여될 때 특성화될 것이다.

각 환자는 하기 기술된 순서로 다음 처리들의 각각을 받을 것이다. 단계 1은 하기 기간으로 구성될 것이다:

기간 1: 정맥 내 주입으로서 아갈시다제 단독;

기간 2: 아갈시다제 정맥 내 주입 개시 두 시간 전 150 mg 경구 투여량의 미갈로스텟 하이드로클로라이드;

기간 3: 150 mg 경구 투여량의 미갈라스텟 하이드로클로라이드.

기간 1 및 2에서 투여되는 아갈시다제의 투여량은 동일할 것이다. 아갈시다제 알파는 40 분 정맥 내 주입으로 투여되고, 아갈시다제 베타는 2 시간 정맥 내 주입으로 투여될 것이다.

기간 1 동안, 다음 예정된 아갈시다제 주입 전에, 환자들은 다음 평가를 받을 것이다: 이상 반응 평가(adverse event assessment), 공존하는 약제, 신체 검사, 체중, 활력 징후, 12-리드(lead) ECG, 임상 실험실 시험(혈청 화학, 혈액학 및 소변 분석), 피부 생검(α-Gal A 효소 수준 측정을 위한 펀치 생검; 충분한 샘플이 이용 가능하다면, 피부 GL-3가 또한 측정될 것이다).

1 일째 아침, 소변을 소변 GL-3 및 lyso-GB3 측정을 위해 수집할 것이고, 주입 펌프를 사용한 주입으로 소정의 환자의 현 아갈시다제 투여량이 투여된다. 약물 동역학 및 약역학 분석을 위한 혈액 샘플이 아갈시다제 주입 개시 바로 전 및 아갈시다제 주입 개시 후 24 시간에 걸쳐 수집될 것이다. 혈장 및 WBC α-Gal A 효소 수준, 혈장 lyso-GB3 및 혈장 항체 역가가 아갈시다제 베타에 대한 표 2 및 아갈시다제 알파에 대한 표 4에 요약된 시간들에서 수집된 혈액 샘플로부터 측정될 것이다. 12-리드 ECG는 주입 후 혈액 샘플 수집 바로 직후 아갈시다제 주입 종료 시에 수행될 것이다.

2 일째, 펀치 피부 생검을 전날 주입 개시 24시간 후 수집할 것이고, 이로부터 α-Gal A 효소 수준을 측정할 것이다; 충분한 샘플이 이용 가능한 경우, 피부 GL-3를 또한 측정할 것이다. 마지막 약물 동역학 샘플의 수집 후, 다음 평가를 수행할 것이다: 이상 반응 평가, 공존하는 약제, 신체 검사, 체중, 활력 징후, 및 임상 실험실 시험(혈청 화학, 혈액학 및 소변 분석).

7 일째, 환자는 다음 평가를 받을 것이다: 신체 검사, 활력 징후, 공존하는 약제 및 이상 반응 평가. 피부 생검을 수집할 것이고, 이로부터 α-Gal A 효소 수준을 측정할 것이다; 충분한 샘플이 이용 가능한 경우, 피부 GL-3가 또한 측정될 것이다. WBC α-Gal A 및 혈장 효소 수준 측정용 혈액 샘플이 또한 수집될 것이다. 14일째, 소변 GL-3 및 lyso-GB3 분비 측정용 소변 샘플을 수집할 것이다. WBC α-Gal A 및 혈장 효소 수준 측정용 혈액 샘플이 또한 수집되어 활력 징후를 평가할 것이다.

기간 2 동안, 다음 예정된 아갈시다제 주입 전, 환자는 다음 평가를 받을것이다: 이상 반응 평가, 공존하는 약제, 신체 검사, 체중, 활력 징후, 12-리드 ECG, 임상 실험실 시험(혈청 화학, 혈액학 및 소변 분석).

1 일째 아침, 소변을 소변 GL-3 및 lyso-GB3 측정을 위해 수집할 것이고, 예정된 아갈시다제 주입 2 시간 전 150 mg의 미갈라스텟 하이드로크로라이드 경구 투여량을 투여할 것이다. 미갈라스텟 하이드로클로라이드 투입 전 적어도 2 시간 및 투여 후 2 시간 동안 환자는 금식할 것이다. 기간 2 에서, 각 환자는 주입 펌프를 사용한 주입으로 기간 1에서 투여 받은 동일한 아갈시다제 투여량을 투여 받을 것이다. 아갈시다제 주입은 미갈라스텟 하이드로클로라이드 투여량의 투여 2 시간 후 개시될 것이다.

약물 동역학 및 약역학 분석을 위한 혈액 샘플을 미갈라스텟 하이드로클로라이드 투여 전 및 미갈라스텟 하이드로클로라이드 투여 1 시간 후에 수집할 것이다. 추가의 혈액 샘플을 아갈시다제 주입 개시 직전 및 아갈시다제 주입 개시 후 24 시간에 걸쳐 수집할 것이다. 혈장 및 WBC α-Gal A 효소 수준, 혈장 lyso-GB3 및 혈장 항체 역가를 아갈시다제 베타 경우 표 2에 그리고 아갈시다제 알파 경우 표 4에 요약된 시간들에서 수집된 혈액 샘플로부터 측정할 것이다. 12-리드 ECG는 주입 후 혈액 샘플의 수집 후 즉시, 아갈시다제 주입 종료 시에 수행될 것이다.

2 일째, 펀치 피부 생검을 전날의 주입 개시 24 시간 후 수집할 것이고, 이로부터 α-Gal A 효소 수준을 결정할 것이고; 충분한 샘플이 이용 가능한 경우, 피부 GL-3를 또한 결정할 것이다. 마지막 약물 동역학 샘플의 수집 후, 다음 평가를 수행할 것이다: 이상 반응 평가, 공존하는 약제, 신체 검사, 체중, 활력 징후, 및 임상 실험실 시험(혈청 화학, 혈액학, 및 소변 분석).

7 일째, 환자는 다음 평가를 받을 것이다: 신체 검사, 활력 징후, 공존하는 약제, 이상 반응 평가. 피부 생검이 수집될 것이고, 이로부터 α-Gal 효소 수준이 측정될 것이다; 충분한 샘플이 이용 가능한 경우, 또한 피부 GL-3가 측정될 것이다. WBC α-Gal A 및 혈장 효소 수준 측정용 혈액 샘플이 또한 수집될 것이다.

14 일째, 소변 GL-3 및 lyso-GB3 분비의 측정을 위한 소변 샘플이 수집될것이다. WBC α-Gal A 및 혈장 효소 수준 측정용 혈액 샘플을 또한 수집할 것이고 활력 징후를 평가할 것이다.

기간 2 후 모든 평가를 완결한 후, 환자는 기간 3을 시작한다. 모든 환자는 통상의 투여 스케줄을 따라 1일째 다음 아갈시다제 주입을 받을 것이다. 6일째, 모든 환자는 다음 평가를 받을 것이다: 이상 반응 평가, 공존하는 약제, 신체 검사, 체중, 활력 징후, 12-리드 ECG, 및 임상 실험실 시험(혈청 화학, 혈액학, 및 소변 분석).

7 일째, 150 mg 경구 투여량의 미갈라스텟 하이드로클로라이드를 투여받을 것이다. 환자는 미갈라스텟 하이드로클로라이드 투여 전 적어도 2 시간 및 투여 후 2 시간 동안 금식할 것이다. 투여 전 및 미갈라스텟 하이드로클로라이드 투여 후 24 시간에 걸쳐 혈액 샘플을 수집할 것이다. 미갈라스텟 하이드로클로라이드 농도를 모든 혈장 샘플에서 측정할 것이다(샘플 수집 시간에 대해 아갈시다제 베타에 대해서는 표 2 및 아갈시다제 알파를 투여 받는 환자에 대해서는 표 4 참조).

8 일째, 마지막 약물 동역학 샘플의 수집 후, 다음 평가를 수행할 것이다: 이상 반응 평가, 공존하는 약제, 신체 검사, 활력 징후 및 임상 실험실 시험(혈청 화학, 혈액학, 및 소변 분석).

기간 3 동안 추적 검사는 기간 3의 28 일 후 전화 접촉에 의할 것이다. 다음 평가가 수행될 것이다: 공존하는 약제 및 이상 반응.

단계 2 동안, 각 환자는 하기 기술된 순서로 다음 처리 각각을 받는다:

기간 1: 주입으로서 아갈시다제 단독;

기간 2: 아갈시다제 정맥 내 주입 개시 2 시간 전 450 mg 경구 투여량의 미갈라스텟 하이드로클로라이드.

기간 1 및 2에서 투여되는 아갈시다제의 투여량은 동일할 것이다. 아갈시다제 알파는 40 분 정맥 내 주입으로 투여될 것이고, 아갈시다제 베타는 2 시간 정맥 내 주입으로서 투여될 것이다.

기간 1 동안 모든 적법성 기준을 만족시키는 환자는, 다음 예정된 아갈시다제 주입 전에, 다음 평가를 받을 것이다: 이상 반응 평가, 공존하는 약제, 신체 검사, 체중, 활력 징후, 12-리드 ECG, 임상 실험실 시험(혈청 화학, 혈액학 및 소변 분석), 피부 생검(α-Gal A 효소 수준을 측정하기 위한 펀치 생검; 충분한 샘플이 이용 가능한 경우, 피부 GL-3가 또한 측정될 것이다).

1 일째 아침, 소변 GL-3 및 lyso-GB3 측정을 위해 소변을 수집할 것이고, 주입 펌프를 사용한 주입으로 주어진 환자의 현재 아갈시다제 투여량을 투여받을 것이다. 약물 동역학 및 약역학 분석을 위한 혈액 샘플이 아갈시다제 주입 개시 바로 직전 및 아갈시다제 주입의 개시 후 24 시간에 걸쳐 수집될 것이다. 혈장 및 WBC α-Gal A 효소 수준, 혈장 lyso-GB3 및 혈장 항체 역가는 아갈시다제 베타에 대해서는 표 3에 및 아갈시다제 알파에 대해서는 표 5에 요약된 시간들에 수집된 혈액 샘플로부터 측정될 것이다. 12-리드 ECG는 아갈시다제 주입 종료시에, 주입 후 혈액 샘플의 수집 바로 직후 수행할 것이다.

2 일째, 전날 주입 개시 24 시간 후 펀치 피부 생검을 수집할 것이고, 이로부터 α-Gal A 효소 수준을 측정할 것이다; 충분한 샘플이 이용 가능한 경우, 피부 GL-3이 또한 측정될 것이다. 마지막 약물 동역학 샘플의 수집 후, 다음 평가를 수행될 것이다: 이상 반응 평가, 공존하는 약제, 신체 검사, 체중, 활력 징후 및 임상 실험실 시험(혈청 화학, 혈액학, 및 소변 분석).

7 일째, 환자들은 다음 평가를 받을 것이다: 활력 징후, 공존하는 약제 및 이상 반응 평가. 피부 생검은 수집될 것이고, 이로부터 α-Gal A 효소 수준이 측정될 것이다; 적당한 샘플이 이용 가능한 경우, 피부 GL-3가 또한 측정될 것이다. WBC α-Gal A 및 혈장 효소 수준 측정용 혈액 샘플을 또한 수집할 것이다.

14 일째, 소변 GL-3 및 lyso-GB3 분비의 결정을 위한 소변 샘플이 수집될것이다. WBC α-Gal A 및 혈장 효소 수준 측정을 위한 혈액 샘플이 또한 수집될 것이고 활력 징후가 평가될 것이다.

기간 2 동안, 다음 예정된 아갈시다제 주입 전, 환자들은 다음 평가를 받을 것이다: 이상 반응 평가, 공존하는 약제, 신체 검사, 체중, 활력 징후, 12-리드 ECG, 임상 실험실 시험(혈청 화학, 혈액학 및 소변 분석).

1 일째 아침, 소변 GL-3 및 lyso-GB3 측정을 위해 소변이 수집될 것이고, 예정된 아갈시다제 주입 2 시간 전 450 mg 경구 투여량의 미갈스텟 하이드로클로라이드를 투여할 것이다. 환자들은 미갈라스텟 하이드로클로라이드 투여 전 적어도 2 시간 동안 및 투여 후 2 시간 동안 금식할 것이다. 기간 2에서, 각 환자는 주입 펌프를 사용한 주입으로 기간 1에서 투여된 것과 동일한 아갈시다제 투여량을 투여 받을 것이다. 아갈시다제 주입은 미갈라스텟 하이드로클로라이드 투여량을 투여하고 2 시간 후 개시될 것이다.

약물 동역학 및 약역학 분석을 위한 혈액 샘플이 미갈라스텟 하이드로클로라이드 투여 전 및 미갈라스텟 하이드로클로라이드 투여 1 시간 후 수집될 것이다. 추가의 혈액 샘플이 아갈시다제 주입 개시 바로 직전 및 아갈시다제 주입 개시 후 24 시간에 걸쳐 수집될 것이다. 혈장 및 WBC α-Gal A 효소 수준, 혈장 lyso-GB3 및 혈장 항체 역가가 아갈시다제 베타에 대해서는 표 3에 및 아갈시다제 알파에 대해서는 표 5에 요약한 시간에 수집된 혈액 샘플로부터 측정될 것이다. 12-리드 ECG는 아갈시다제 주입 종료시에, 주입-후 혈액 샘플의 수집 직후 수행될 것이다.

2 일째, 펀치 피부 생검은 전날 주입 개시 24 시간 후 수집될 것이고, 이로부터 α-Gal A 효소 수준이 측정될 것이다; 충분한 샘플이 이용 가능한 경우, 피부 GL-3가 또한 측정될 것이다. 마지막 약물 동역학 샘플의 수집 후, 다음 평가가 수행될 것이다: 이상 반응 평가, 공존하는 약제, 신체 검사, 체중, 활력 징후, 및 임상적 실험실 시험(혈청 화학, 혈액학, 및 소변 분석).

7 일째, 환자는 다음 평가를 받을 것이다: 활력 징후, 공존하는 약제, 및 이상 반응 평가. 피부 생검은 수집될 것이고, 이로부터 α-Gal A 효소 수준이 결정될 것이다. WBC α-Gal A 및 혈장 수준 측정용 혈액 샘플이 또한 수집될 것이다.

14 일째, 소변 GL-3 및 lyso-GB3 분비의 측정을 위한 소변 수집이 수행될것이다. WBC α-Gal A 및 혈장 효소 수준 측정용 혈액 샘플이 또한 수집될 것이고 활력 징후가 평가될 것이다.

추적 검사는 기간 2 이후 28 일 일 것이다. 다음 평가가 수행될 것이다: 공존하는 약제 및 이상 반응.

평가 및 샘플 수집 스케줄 . 표 1은 단계 1 및 2에 대한 평가 스케줄을 보여준다. Fabrazyme®과 미갈라스텟 하이드로클로라이드의 병용-투여에 대한 샘플 수집 시간 및 분석이 표 2 및 3에 나타난다. Replagal®와 미갈라스텟 하이드로클로라이드의 병용-투여에 대한 샘플 수집 시간 및 분석이 표 4 및 5에 나타난다.

평가 스케줄 (단계 1 및 2)

활성	스크리닝	기간 1 및 2 (단계 1 및 2)					기간 3 (오직 단계 1)				추적 검사 (단계 1 및 2)
활성	28일 이내의 등록	-1일	1일	2일	7일	14일	1일	6일	7일	8일	전화 연락
사전 동의	X
병력 및 통계 데이터	X
신체검사	X	X		X	X			X		X
ECG(12-리드)	X	X	X					X	X
활력 징후⁶	X	X	X	X	X	X		X	X	X
혈액학	X	X		X				X		X
소변 분석	X	X		X				X		X
혈청 화학	X	X		X				X		X
공존하는 약제의 기록	X	X	X	X	X	X		X	X	X	X
eGFR	X
소변 GL-3/LysoGB3		X				X
검사 절차		X						X
약물 투여량			X¹				X²		X³
PK 혈액 샘플링⁴			X	X	X	X			X	X
피부 생검⁴		X⁵		X	X
WBC 수집⁴			X	X	X	X
항체 역가⁴			X
이상 반응		X	X	X	X	X		X	X	X	X

¹투여된 약물: 아갈시다제(기간 1 및 2), 미갈라스텟 HCl(기간 2)

²Fabrazyme® 또는 Replagal®의 외래환자 투여

³투여된 약물: 미갈라스텟 HCl

⁴샘플 수집 시간 및 분석은 Fabrazyme®(아갈시다제 베타)에 대해서는 표 2 및 표 3 그리고 Replagal®(아갈시다제 알파)에 대해서는 표 4 및 표 5에 요약되었다.

⁵기간 1 만

⁶활력 징후는 온도, 혈압, 심박수 및 호흡을 포함한다.

* 충분한 샘플이 이용가능 한 경우, 피부 GL-3은 또한 측정될 것이다.

미갈라스텟 HCl 및 rh α- Gal A의 약물 동역학 . 혈액 샘플 내의 미갈라스텟 HCl의 농도는 승인된 LC-MS/MS 분석법을 통하여 혈장내에서 측정될 것이다. 혈장 내의 α-Gal A 수준은 Con A이 있는 4-MUG 및 Con A이 없는 4-MUG를 사용하여 효소 활성을 측정하는 승인된 분석법에 의해 결정될 것이다. α-Gal A 단백질 수준은 항-인간 Gal A 항체를 사용한 웨스턴 블랏에 의해 측정될 것이다.

피부의 α- Gal A 효소 수준 . α-Gal A 효소 수준은 피부 생검 샘플에서 검사될 것이다. 피부 생검은 "펀치" 기구를 사용하여 수행될 것이다. 하나의 조각(piece)이 각 방문마다 제거될 것이다. 피부의 α-Gal A 수준은 Con A이 있는 4-MUG 및 Con A이 없는 4-MUG를 사용하여 효소 활성을 측정하는 승인된 분석법에 의해 측정될 것이다. α-Gal A 단백질 수준은 항-인간 Gal A 항체를 사용한 웨스턴 블랏에 의해 측정될 것이다.

WBC α- Gal A 수준 . WBC의 α-Gal A 수준은 Con A가 있는 4-MUG 및 Con A가 없는 4-MUG를 사용한 효소 활성을 측정하는 승인된 분석법에 의해 혈액 샘플에서 결정될 것이다. α-Gal A 단백질 수준은 항-인간 Gal A 항체를 사용한 웨스턴 블랏에 의해 측정될 것이다.

혈장 Lyso - GB3 . 혈장 lyso-GB3의 측정은 ERT 단독 및 ERT와 미갈라스텟 하이드로클로라이드의 병용-투여를 받는 환자의 데이터를 얻기 위해 탐색적 기준(exploratory basis)으로 수행될 것이다. lyso-GB3의 농도는 승인된 분석법을 사용하여 혈장에서 측정될 것이다.

소변 GL -3 및 Lyso - GB3 . 아침 첫 번째 배뇨(void urine) 샘플은 기간 1 및 2의 1 일째 및 14 일째에 소변 GL-3 및 lyso-GB3 분비물의 분석을 위해 각각의 환자에서 수집될 것이다. 환자는 1일째 및 14일째의 아침에 소변을 수집한다. 소변 GL-3 및 소변 Lyso-GB3은 소변 크레아티닌 농도의 함수로서 표현될 것이다.

항체 역가 . 혈액 샘플은 수집될 것이고 IgG 항체 역가는 각각의 혈액 샘플에서 측정될 것이다.

안전성 파라미터 . 안전성 파라미터는 신체 검사 소견의 변화, 활력 징후, 시간에 걸친 ECG의 변화, 임상 실험실 및 이상 반응의 검토에 의해 평가될 것이다.

활력 징후, 체중 및 신장 . 체온 및 호흡은 스크리닝 및 검사(check-in)에서 측정될 것 이다. 안전성을 모니터하기 위해, 체온, 호흡, 앉았을 때 혈압 및 심박수는 투여 전 및 2일째, 7일째 및 14일째에, 아갈시다제(기간 1) 또는 미갈라스텟 하이드로클로라이드(기간 2 및 3)의 투여한 다음 대략 1, 2, 3, 4 및 6 시간 후에 측정될 것이다. 활력 징후 모니터링 시간과 채혈(blood draw)이 동시에 일어나는 경우, 채혈이 우선되고, 활력 징후는 그에 따라 조정될 것이다.

ECG 모니터링 . ECG 모니터링은 표준 12-리드 ECG와 함께 수행될 것이다.

임상 실험실 테스트 . 임상 실험실 테스트(혈액학, 혈청 화학) 및 소변 분석을 위한 혈액 샘플은 매 방문마다 수집될 것이고, 중앙 실험실에서 분석될 것이다. 혈액학 시험은 차이가 있는 총 헤모글로빈, 헤마토크릿, 적혈구, 혈소판 및 백혈구 수치를 포함한다.

·응고(스크리닝만)은 INR 및 aPTT를 포함한다.

·혈청 화학은 AST, ALT, 알카리성 포스페이트, 총 빌리루빈, 크레아티닌, 요소, 글루코오스, 칼슘, 나트륨, 칼륨, 마그네슘, 총 단백질, 알부민, 바이카보네이트, LDH, 혈액 요소성 질소(blood urea nitrogen), 클로라이드, 및 포스페이트의 측정을 포함한다. 혈청 크레아티닌의 측정은 동위원소 희석 질량분석법(IDMS) 참조 방법으로 조정된 시약을 사용하여 수행될 것이다.

·소변 분석은 색, 모양, 비중, pH, 단백질, 글루코오스, 케톤, 혈액, 백혈구 에스테라제, 나이트라이트, 빌리루빈, 우로빌리노겐 및 침전물의 현미경관찰법(microscopy)을 포함한다.

약물 동역학 파라미터 . AUC₀ _-t, AUC_infinity, C_max, t_max, k_el 및 반감기의 비-구획된 약물 동역학 파라미터는 혈장 미갈라스텟 하이드로클로라이드 농도 및 α-Gal A 효소 수준으로부터 계산될 것이다. 약물 동역학 파라미터는 기술 통계치(descriptive statistic)를 사용하여 치료에 따라 요약될 것이다. 각각의 화합물 단독 대 각각의 조합된 화합물의 AUC₀ _-t, AUC_infinity 비는 계산될 것이다. 아갈시다제 알파 및 베타를 투여받은 이들 환자에 대한 약물 동역학 및 약역학 데이터는 별도로 분석될 것이다.

통계 분석 . 기술 통계치(N, 평균, 표준 편차, 및 변동 계수, 표준 오차, 중앙값, 최소 및 최대 계수)는 적절하게 제공될 것이다. 병용-투여된 화합물에 대한 화합물의 효과는 다음과 같은 개별적인(환자에 따른) AUC 및 C_max 비의 계산에 의해 평가될 것이다:

AUC 및 C_max 비는 개별적 비 및 평균에 대한 90% 신뢰 구간의 평균으로 표현될 것이다. 아갈시다제 알파 및 베타를 투여받은 이들 환자에 대한 약물 동역학 및 약역학 데이터는 별도로 분석될 것이다. 결과는 적절하게, 표 및 그래프 형태로 표시될 것이다. 연구 약품(study medication)을 투여받고 신뢰할 수 있는 약물 동역학 파라미터를 생성할 정도의 데이터를 갖는 모든 환자는 안전성 및 약물 동역학 분석에 포함될 것이다.

실시예 2: 미갈라스텟 하이드로클로라이드 및 아갈시다제를 사용하여 파브리 병의 치료를 위한 투여 요법

미갈라스텟 HCl은 효소의 안정성 및 적당한 접힘을 증가시키는 α-갈락토시다제 A(α-Gal A)에 대한 약리학적 샤프론이다. 미갈라스텟은 혈액의 pH/온도 조건에서 효소를 안정화시킴으로서 α-Gal A 비활성화를 방지하여 작용할 수 있다. 본 연구의 목적은 파브리 병을 앓는 환자에서 아갈시다제의 안전성 및 혈장 약물 동역학과 관련하여, 아갈시다제 투여 2 시간 전에 투여되는 150 mg 및 450 mg 미갈라스텟의 효과를 특성화하는 것이었다. 이 연구의 목적은 또한 파브리 병을 앓는 환자에서 아갈시다제의 혈장, 피부, 및 PBMC 약물 동역학과 관련하여, 150 mg 및 450 mg의 미갈라스텟의 효과를 특성화하는 것; 미갈라스텟의 혈장 역동학과 관련하여 혈장 아갈시다제의 효과를 특성화하는 것; 아갈시다제 주입 전 및 주입 14 일 후에 소변 GL-3 및 혈장 및 소변 lyso-GB3를 평가하는 것; 및 아갈시다제 주입 전에 항체 역가를 평가하는 것이었다.

방법 . 연구는 실시예 1에 기술된 방법에 따라서 수행되었다. 상세하게는, 이것은 공개 실험, 단일 투여(single dose), 비임의화되고, 고정된-시퀀스인, 2-단계 연구였다. 단계 1은 3 개의 기간을 포함하였다:

(1) 아갈시다제 베타 0.5 mg/kg 또는 1.0 mg/kg(약 2 시간 동안 주입) 또는 아갈시다제 알파 0.2 mg/kg(약 40 분 동안 주입) 효소 보충 단독요법(ERT);

(2) ERT + 150 mg 미갈라스텟 경구 정제 (단일 투여량) 병용-투여, ERT 2 시간 전에 투여된 미갈라스텟; 및

(3) 150 mg 마갈라스텟 단독요법.

단계 2는 단계 1(즉, 기간(1) 및 (2))과 동일한 시퀀스의 2 개의 기간을 포함하였지만, 기간 2(즉, 450 mg 미갈라스텟)에서 병용-투여된 3x150 mg 미갈라스텟 경구 정제를 포함한다. 단계 2는 다음의 2 개의 기간을 포함한다:

(1) 아갈시다제 베타 0.5 mg/kg 또는 1.0 mg/kg(약 2 시간 동안 주입) 또는 아갈시다제 알파 0.2 mg/kg(약 40 분 동안 주입) 효소 보충 단독요법(ERT); 및

(2) ERT + 450 mg 미갈라스텟 경구 정제 병용-투여. 미갈라스텟은 ERT 2 시간 전에 투여되었다.

치료 기간은 최소 14 일의 세척 기간(washout period)에 의해 구분되었다.

α-Gal A는 생체내 기질 GL-3의 분해 초기 단계를 촉진시킨다. α-Gal A는 또한 동일한 α-결합을 갖는 다른 기질, 예를 들어 인공의 저-분자량 형광 기질인 4-MUG에 작용한다. 4-MUG에 대한 α-Gal A 활성은 미갈라스텟을 분리하기 위해 단계 희석법에 따라 혈장, 피부, 및 PBMC 샘플로부터 생체외에서 측정되었다.

단계 1, 기간 1 및 2로부터의 혈장, 피부, 및 PBMC α-갈락토시다제 A 활성을 갖는 6 명의 환자를 평가하였다. 4 명의 환자는 기간 1 동안에 0.5 mg/kg 아갈시다제 베타 ERT를 투여받았고, 2 명의 환자는 1.0 mg/kg 아갈시다제 베타 ERT를 투여받았고, 기간 2 동안에 동일한 투여량의 ERT 개시 2 시간 전에 150 mg 미갈라스텟의 병용-투여를 받았다. 주입 지속 시간은 하나의 예외를 제외하고 두 기간 동안 2 시간이었다: 0.5 mg/kg 아갈시다제 베타를 받는 1 명의 환자는 불균형하게(unblanced) 주입 받았고, 이때 환자는 기간 2에서는 2 시간 40 분 동안 주입 받았지만, 기간 1에서는 2 시간 동안만 주입 받았다.

결과:

미갈라스텟의 병용-투여에 따라 혈장 α- Gal A 활성의 증가

ERT 단독 투여(기간 1)와 관련하여 미갈라스텟의 병용-투여(기간 2)에 대해, 혈장α-Gal A 활성 AUC(곡선 아래 영역)에서의 다음의 평균 증가가 관찰되었다:

0.5 mg/kg 아갈시다제 베타 주입의 경우 평균 증가:

·0.5 mg/kg 아갈시다제 베타의 경우 3.0 배 (N=4)

■ 개별 환자 증가: 2.0, 2.2, 3.4, 및 4.2 배

■ 불균형하게 주입 기간을 갖는 2.0 배 환자를 제외한 평균 증가: 3.3 배

1.0 mg/kg 아갈시다제 베타 주입의 경우 평균 증가:

·1.0 mg/kg 아갈시다제 베타의 경우 1.9 배 (N=2)

■ 개별 환자 증가: 1.6 및 2.2 배

기간 1 및 2 동안 6 명의 환자의 혈장 α-Gal A 활성 조성물은 도 1에 나타난다. 미갈라스텟의 병용-투여 후에 모든 환자들에서의 혈장 α-Gal A 활성 AUC 증가는 도 2에 나타난다. 도 3은 0.5 mg/kg 또는 1.0 mg/kg의 아갈시다제 베타와 150 mg의 미갈라스텟의 병용-투여시 혈장 α-Gal A 활성의 증가를 보여주는 각 샘플링 시간에 대한 부분적인 AUC를 보여준다.

미갈라스텟 사용시 피부 α- Gal -A 활성의 증가

ERT 단독 투여(기간 1)와 관련하여 미갈라스텟의 병용-투여(기간 2)동안, 피부α-Gal A 활성에서 다음의 평균 증가가 관찰된다:

0.5 mg/kg 아갈시다제 베타 주입의 경우 평균 증가:

·2 일째에 0.5 mg/kg 아갈시다제 베타의 경우 2.6 배 (N=3, 1 명의 환자는 샘플을 손실하였다)

■ 개별 환자 증가: 2.8, 3.9, 및 1.1 배

■ 7 일째에 기간 1로부터 피부 활성의 변화 없음

1.0 mg/kg 아갈시다제 베타 주입의 경우 평균 증가:

·2 일과 7 일째 각각에 1.0 mg/kg 아갈시다제 베타의 경우 1.9 및 1.5 배 (N=2)

■ 개별 환자 증가: 2 일째에 1.6 및 2.1 배 및 7 일째에 1.7 및 1.2 배

0.5 mg/kg 또는 1.0 mg/kg의 아갈시다제 베타와 150 mg의 미갈라스텟의 병용-투여 후에 피부 α-Gal A 활성의 증가는 도 4 내지 6에 나타난다. 도 5a는 기간 2 동안 다른 환자에 비해 40 분 더 길게 ERT 주입을 받는 환자에서 0.5 mg/kg의 아갈시다제 베타와 150 mg의 미갈라스텟의 병용-투여 후에 피부 α-Gal A 활성의 증가를 보여준다.

미갈라스텟 사용시 PBMC α- Gal -A 활성의 증가

ERT 단독(기간 1)과 관련하여 미갈라스텟의 병용-투여(기간 2)동안, PBMCα-Gal A 활성에서 다음의 평균 증가가 관찰된다:

0.5 mg/kg 아갈시다제 베타 주입의 경우 평균 증가:

·2 일째, 7 일째 및 14 일째 각각에 0.5 mg/kg 아갈시다제 베타의 경우 2.3, 2.0, 및 2.2 배 (N=4)

■ 개별 환자 증가 범위: 2 일째, 7 일째 및 14 일째 각각에 1.4-3.1, 1.4-2.3, 및 1.7-2.8 배

■ 7 일째에 기간 1로부터 피부 활성의 변화 없음

1.0 mg/kg 아갈시다제 베타 주입의 경우 평균 증가:

·2 일째, 7 일째 및 14 일째 각각에 1.0 mg/kg 아갈시다제 베타의 경우 1.8, 4.8 및 3.5 배 (N=2)

■ 개별 환자 증가: 2 일째, 7 일째 및 14 일째 각각에 1.1 및 2.5, 3.6 및 6.0, 및 1.7 및 5.4 배

0.5 mg/kg 또는 1.0 mg/kg의 아갈시다제 베타와 150 mg의 미갈라스텟의 병용-투여 후에 PBMC α-Gal A 활성의 증가는 도 7 내지 9에 나타난다.

결론 :

0.5 mg/kg 및 1.0 mg/kg 아갈시다제 베타와 150 mg 미갈라스텟의 상호작용은 다음에 대해 α-Gal A 활성의 증가를 초래한다:

모든 환자의 혈장 α-Gal A AUC (N=6)

2 일째의 모든 환자의 피부 α-Gal A (N=5), 그러나 7 일째에 5 명 중 오직 3 명의 환자

2 일째, 7 일째, 및 14 일째에 모든 환자의 PBMC α-Gal A (N=6)

0.5 mg/kg 또는 1.0 mg/kg 아갈시다제 베타와 150 mg 미갈라스텟의 상호작용은 아갈시다제 베타 단독 투여에 대하여 2 내지 4 배에서 α-갈락시다제 A 활성 AUC의 증가, 2 일째 피부 α-갈락시다제 A 활성에서 1.1 내지 3.9 배 증가, 및 PBMC α-갈락시다제 A 활성에서 2 일, 7 일, 및 14 일째의 1.1 내지 6.0 배 증가를 초래하였다. 7 일째에, 4 명의 환자는 병용-투여 후에 피부의α-갈락시다제 A 활성이 증가했다.

150 mg 미갈라스텟의 투여는 혈장, 피부 및 PBMC의 투여 최대 24 시간 후에 아갈시다제 베타의 전부 투여(1.0 mg/kg)보다 양호하게 아갈시다제 베타의 절반-투여(0.5 mg/kg)의 효소 활성이 양호하게 증가했다; 그러나, 피부 및 PBMC에 투여 7 일 및 14 일 후에는 그 반대였다(1.0 mg/kg > 0.5 mg/kg). 결과에 대해 요약된 표는 도 10에 보여진다.

아갈시다제 베타 단독 투여에 대해, 모든 환자는 모든 시점에서 기준선에 대하여 PBMC α-Gal A 활성이 증가했지만, 2 명의 환자는 0.5 mg/kg 주입 후에 기준선에 대하여 2일째에 피부 α-Gal A 활성이 감소했다.

실시예 3: 미갈라스텟 하이드로클로라이드 및 아갈시다제를 사용하는 파브리 병의 치료를 위한 투여 요법

다음의 실시예는 실시예 2에 기술된 연구의 최신 정보(update)이다. 본 실시예는 총 7 명의 환자에 대한 추가 환자를 포함한다.

본 실시예의 목적은 파브리 병으로 진단된 남성에 ERT(아갈시다제)와 병용-투여된 미갈라스텟 HCl의 2회 투여(150 mg 및 450 mg)의 안전성 및 PK를 평가하는 것이다.

방법 이것은 진행(ongoing), 공개 실험, 비임의화되고, 2-단계, 고정된-시퀀스인 연구이다. 단계 1은 3 개의 기간을 포함한다.

·기간 1: ERT 단독 투여의 Ⅳ 주입

·기간 2: ERT의 Ⅳ 주입(기간 1과 동일한 투여) 2 시간 전에 경구 투여된 미갈라스텟 HCl(150 mg)

·기간 3: 미갈라스텟 HCl 150 mg 단독의 경구 투여.

적합한 환자: 파브리 병을 앓는, 18 내지 65 세 남성.

포함 기준:

·18 내지 35의 체질량지수(BMI).

·투여 적어도 한 달 전에 개시된 아갈시다제 치료.

·스크리닝시 측정된 크레아티닌 제거 (CLcr) ≥ 50 mL/min.

배제 기준:

·스크리닝 전 3 개월 내에 기록된 일과성 뇌허혈증, 허혈성 뇌졸중, 불안정한 심근경색증.

·임상적으로 유의적인 불안정한 심장병.

·이미노슈가(예를들어, 미글루스타트(miglustat), 미글리톨(miglitol))에 민감하거나 공존하는 치료.

환자는 하나의 주입에서 아갈시다제 베타 단독의 현재 투여량 및 치료요법을 받고(약 2 시간 동안 0.5 또는 1.0 mg/kg), 다음 주입에서 아갈시다제 베타를 투여하기 두 시간 전에 미갈라스텟 HCl 150 mg을 경구 투여 받는다.

현재 7 명의 환자 중 5 명은 2 주 마다 0.5 mg/kg을 투여받고 7 명의 환자 중 2 명은 4 주 마다 1.0 mg/kg의 투여량을 투여받는다.

단계 2에서, 미갈라스텟 HCl의 450 mg 투여가 연구될 것이다.

단계 1 및 2는 아갈시다제 알파의 ERT 주입(약 40 분 동안 0.2 mg/kg)을 특정 환자에게 반복할 것이다.

샘플:

일련의 혈액 샘플은 각 기간의 혈장 α-Gal A 활성 및 단백질 수준에 대해 투여 24 시간 후에 취했다. 말초 혈액 단핵세포(PBMCs)에서 α-Gal A 활성에 대한 혈액 샘플은 예비 투여(predose)시 및 각 기간의 1, 2, 7 및 14 일째에 취했다. 피부 α-Gal A 활성에 대한 펀치 생검은 예비 투여기간 1 및 기간 1 및 2 동안 2 일째 및 7 일째에 취했다. 혈장 α-Gal A 활성 PK 파라미터는 C_max, T_max, AUC₀ _-t, AUC₀ _-inf, 및 t_½을 포함한다. 약물 동역학 파라미터는 표준 비-구획 절차(WINNONLIN 버전 5.0 또는 그 이상)을 사용하여 계산된다.

혈장 피부 및 PBMC 용해물에서 α-Gal A 활성은 4-메틸움벨리페릴-α-D-갈락토피라노시드(4-MUG)를 사용한 형광 효소 분석에 의해 측정되었다. 4 MUG에 대한 α-Gal A 활성은 미갈라스텟을 분리하기 위한 단계 희석법에 따라 생체 외에서 측정되었다.

α-Gal A 단백질의 웨스턴 블랏 분석은 항-인간 α-Gal A 항체를 사용한 혈장 샘플에서 수행되었다. rhα-Gal A(아갈시다제) 표준 곡선은 각 샘플에서 α-Gal 단백질의 적당한 농도를 계산하기 위해 실행되었다.

안전성 파라미터는 이상 반응(AEs), 활력 징후, 임상 실험실 테스트(혈액학, 혈청 화학, 및 소변 분석), 심전도(ECGs), 신체 검사, 및 공존하는 약품의 용도를 포함한다.

결과 : 예비 결과는 단계 1, 기간 1 및 2에서 이용할 수 있다.

환자 배치 및 통계: 단계 1, 기간 1 및 2로부터 혈장, 피부 및 PBMC α-Gal A 활성을 갖는 7 명의 환자가 평가되었다.

·7 명의 환자 모두는 기간 1 동안 아갈시다제 베타를 단독으로 투여받았다; 모든 환자는 기간 2 동안 아갈시다제 베타의 개시 2 시간 전에 150 mg의 미갈라스텟 HCl을 병용-투여받았다.

·2 명의 환자(환자 A 및 B라고 함)는 2 시간 동안 아갈시다제 베타 1.0 mg/kg의 Ⅳ 주입을 받았다.

·5 명의 환자(환자 C, D, E, F, 및 G라고 함)는 한 명을 제외하고 두 시간 동안 아갈시다제 베타 0.5 mg/kg의 Ⅳ 주입을 받는다: 환자 E는 기간 2 동안에 2시간 40 분 동안 주입 받았지만, 기간 1 동안에 2 시간 동안 주입 받았다.

·모든 환자는 파브리 병을 앓는 44 내지 61 세, 20.9 내지 29.1 kg/㎡ 범위의 체질량 지수(BMI) 및 54 내지 88 mL/min 범위의 측정된 CLcr을 갖는 남성이다. 각 환자에 대한 유전자형은 도 11에 표시된다.

안전성:

지금까지, 12 개의 이상 반응(AEs)이 보고되었고, 그 중 하나는 심각하였다. 심각한 AE는 투여 전, 검사를 위한 방문 후 발생한 일과성 뇌허혈증(TIA)이었고, 경중도에 있어서 중증이었고, 입원이 필요하였고, 조사자는 연구 약물과 관련없는 것으로 간주하였다. TIA는 후유증없이 해결되었다. 다른 모든 AE는 심각하지 않았고, 모두 연구 약물과 관련 없는 간주되었고, 대부분 치료없이 해결되었다. 3 명의 상이한 환자에서 3 개의 AE는 진행중이다: 심방 조기 수축, 심방 조동, 및 하지 부종, 모두 연구 약물과 관련이 없었다.

혈장 α-Gal A 활성:

α-Gal A 활성의 혈장 AUC(곡선 아래 영역) 대 1.0 mg/kg 아갈시다제 베타 단독의 처리, 및 150 mg 미갈라스텟 HCl과 조합한 1.0 mg/kg 아갈시다제 베타의 처리(평균치와 표준 편차가 삽입됨)의 활성-시간 프로파일은 환자 A 및 B에 대해 도 12에 나타난다. 1.0 mg/kg 아갈시다제 베타와 150 mg 미갈라스텟 HCl의 조합물로의 처리는 1.0 mg/kg 아갈시다제 베타 단독요법의 처리와 비교하여, 환자 A 및 B 각각에 대해 α-Gal A 활성에서 2.2 및 1.6 배 증가를 초래하였다.

α-Gal A 활성의 혈장 AUC(곡선 아래 영역) 대 0.5 mg/kg 아갈시다제 베타 단독의 처리, 및 150 mg 미갈라스텟 HCl과 조합한 0.5 mg/kg 아갈시다제 베타의 처리(평균치와 표준 편차가 삽입됨)의 활성-시간 프로파일은 환자 C 내지 G에 대해 도 13에 나타난다. 0.5 mg/kg 아갈시다제 베타와 150 mg 미갈라스텟 HCl의 조합물로의 처리는 0.5 mg/kg 아갈시다제 베타 단독요법의 처리와 비교하여, α-Gal A 활성에서 2.0 내지 4.2 배 증가를 초래하였다.

혈장 α-Gal A 활성은 하나의 예외를 제외하고 효소 보충 요법(ERT) 단독 투여에 대하여 병용-투여되는 대부분의 환자의 모든 시점에서 증가하였다. 환자 E는 주입 단계 동안 효소 활성의 상대적 감소를 일으키는 기간 2 동안 40 분 더 길게 불균형하게 주입되었다. 그러나, 환자 E의 모든 시점 후반 피크 활성은 ERT 단독 투여에 비해 증가하였다. 추가로, Eng et al., Am. J. Hum. Genet. 68:711-722 (2001)와 일치하게, 노출은 α-Gal A 활성에 대해 비-선형 방식으로 증가했다.

ERT 단독 투여(기간 1)와 관련하여 미갈라스텟 HCl의 병용-투여(기간 2)동안, 모든 환자는 도 12 및 13에 나타난 바와 같이 혈장 α-Gal A 활성 AUC가 증가했다. 혈장 α-Gal A 활성 AUC의 평균 증가는 0.5 mg/kg 아갈시다제 베타의 경우 3.0 배였다. 불균형 주입 기간을 갖는 2.0 배 환자를 제외하면, 평균 증가는 3.2 배였다. 혈장 α-Gal A 활성 AUC의 평균 증가는 1.0 mg/kg 아갈시다제 베타의 경우 1.9 배였다.

피부 α-Gal A 활성

도 14는 150 mg 미갈라스텟 HCl와 조합한 0.5 mg/kg 또는 1.0 mg/kg 아갈시다제 베타로 환자를 처리하는 것은 효소 단독요법 치료와 비교하여 2 일째의 피부 샘플에서 α-Gal A 활성을 증가시키는 것을 나타낸다. 도 15는 단독요법 및 아갈시다제 베타와 150 mg 미갈라스텟 HCl를 결합한 치료 후에 7 일째에 피부 샘플에서 α-Gal A 활성을 나타낸다. 피부 α-Gal A 활성에서 다음의 평균 증가가 관찰되었다:2 일째 및 7 일째 각각에, 0.5 mg/kg 아갈시다제 베타(N=5)의 경우 2.6 배 및 1.4 배, 및 2 일째 및 7 일째 각각에, 1.0 mg/kg 아갈시다제 베타(N=2)의 경우 1.9 및 1.5 배.

PMBC α-Gal A 활성

PBMC α-Gal A 활성에서 다음의 평균 증가는 관찰되었다: 2, 7, 및 14 일째 각각에, 0.5 mg/kg 아갈시다제 베타(N=5)의 경우 2.4, 1.9 및 2.1 배, 및 2, 7, 및 14 일째 각각에, 1.0 mg/kg 아갈시다제 베타(N=2)의 경우 1.8, 4.8 및 3.5 배.

웨스턴 블랏 분석

7 명의 환자 중 5 명에 대해 기간 2(병용-투여)/기간 1(ERT 단독 투여) AUC 비의 웨스턴 블랏 분석에 의해 혈장 α-Gal A 단백질에서 어떤 변화도 관찰되지 않았다. 그러나, 2 명의 환자(0.5 mg/kg 아갈시다제 베타를 투여받는 환자 C 및 1.0 mg/kg 아갈시다제 베타를 투여받는 환자 G)는 ERT 단독 투여(데이터 나타내지 않음)에 대하여 병용-투여에 따른 단백질 양이 20% 증가한다.

결론

150 mg 미갈라스텟과 0.5 mg/kg 및 1.0 mg/kg 아갈시다제 베타의 상호작용은 혈장, 피부, 및 PBMCs에서 α-Gal A 활성 증가를 초래한다. 150 mg 미갈라스텟 HCl과 아갈시다제 베타의 병용-투여는 일반적으로 안전하고 내성이 뛰어나다.

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본 출원은 본 명세서에서 기술된 특정 실시형태에 의해 범위가 제한되지 않는다. 사실, 본 명세서에서 기술된 것 이외에도 출원의 다양한 변형이 상기한 설명 및 수반된 도면으로부터 당업자에게 명백할 것이다. 이러한 변형은 첨부된 청구항의 범위 내에 포함된다.

모든 값은 근사치이고, 설명을 위해 제공되는 것으로 추가로 이해된다.

특허, 특허 출원, 공보, 제품 설명, 및 프로토콜은 이 출원을 통해 인용되었고, 이것의 개시는 모든 목적을 위하여 참조로서 그 전체로 본 명세서에 포함된다.

Claims

환자의 파브리 병을 치료하는 방법으로서, 필요로 하는 환자에게 약 50 mg 내지 약 600 mg의 1-데옥시갈락토노지리마이신 및 유효량의 α-Gal A 효소 보충 요법을 투여하는 것을 포함하는 방법.
제1항에 있어서,
상기 투여된 1-데옥시갈락토노지리마이신의 양이 약 150 mg 내지 약 450 mg인, 방법.
제1항에 있어서,
상기 투여된 1-데옥시갈락토노지리마이신의 양이 약 150 mg, 약 300 mg 및 약 450 mg으로부터 선택되는, 방법.
제1항에 있어서,
상기 환자는 1-데옥시갈락토노지리마이신 투여 전 약 0.5 내지 약 4 시간 전에 시작하여 1-데옥시갈락토노지리마이신의 투여 후 약 0.5 내지 약 4 시간 후 종료하는 기간 동안 금식하는, 방법.
제4항에 있어서,
상기 환자는 1-데옥시갈락토노지리마이신 투여 전 적어도 약 2 시간 및 1-데옥시갈락토노지리마이신 투여 후 적어도 약 2 시간 동안 금식하는, 방법.
제1항에 있어서,
상기 1-데옥시갈락토노지리마이신이 α-Gal A 효소 보충 요법의 투여와 동시에 또는 약 4 시간 전에 투여되는, 방법.
제6항에 있어서,
상기 1-데옥시갈락토노지리마이신이 α-Gal A 효소 보충 요법의 투여 약 2 시간 전에 투여되는, 방법.
제1항에 있어서,
상기 1-데옥시갈락토노지리마이신이 미갈라스텟 하이드로클로라이드인, 방법.
제1항에 있어서,
상기 α-Gal 효소 보충 요법이 아갈시다제 알파 및 아갈시다제 베타로부터 선택되는, 방법.
제1항에 있어서,
상기 1-데옥시갈락토노지리마이신이 상기 α-Gal A 효소 보충 요법에 대한 보조제로 투여되는, 방법.
제1항에 있어서,
상기 1-데옥시갈락토노지리마이신과 α-Gal A 효소 보충 요법이 조합 치료로서 투여되는, 방법.
제6항에 있어서,
1-데옥시갈락토노지리마이신의 제2 투여가 α-Gal A 효소 보충 요법의 투여와 투여 후 약 4 시간 사이에 투여되는, 방법.
제7항에 있어서,
상기 1-데옥시갈락토노지리마이신과 α-Gal A 효소 보충 요법이 1 내지 4 주 마다 투여되는, 방법.
제13항에 있어서,
상기 1-데옥시갈락토노지리마이신과 α-Gal A 효소 보충 요법이 2 주 마다 투여되는, 방법.
환자의 파브리 병을 치료하기 위한 키트로서, 약 50 mg 내지 약 600 mg의 1-데옥시갈락토노지리마이신 및 유효량의 α-Gal A 효소 보충 요법을 포함하는 키트.
제15항에 있어서,
상기 1-데옥시갈락토노지리마이신의 양이 약 150 mg, 약 300 mg 및 약 450 mg으로부터 선택되는, 키트.